CN1026064C - 活性氧抑制组合物的制造方法 - Google Patents

Abstract

公开了一种抑制体内活性氧的组合物制造方法。该方法包括：在温和条件下将含有低分子活性氧抑制物质的植物种子和/或胚芽进行煎焙，然后用微生物使之发酵，从而使上述低分子的活性氧抑制物游离出来，再添加由煎焙植物得到的油。或者在上述组合物中再添加维生素C、维生素C衍生物或含有它们的植物体。

Description

本发明涉及对多种疾病的预防、治疗以及在保健方面具有显著效果的活性氧抑制组合物的制造方法。

近年来，对各种感染性疾病开发了有效的预防和治疗方法并已实用，人的平均寿命也随之提高。而另一方面，以动脉硬化、脑中风、心肌梗塞、癌、糖尿病等成人病为首，以及恶性风湿性关节炎、白塞氏、（Behccts）病、克隆氏病（节段性回肠炎）、溃疡性结肠炎等难治性疾病和由合成化学物质引起的疾病等，在保健方面作为重大问题日益受到重视。

这些疾病的病因虽各不相同，但作为对人体造成直接危害的作用机制，已知是用于各种外来刺激在人体内生成过剩的活性氧和过氧化脂质（以下将两者合并称之为“活性氧等”）参与了组织的破坏并引起发病。

为了消除这种过剩的活性氧以保护人体组织不受破坏，在人体内存在有称为超氧化物歧化酶（SOD）的酶、这种酶能消除活性氧而使人不产生疾病以保持健康。

然而，近来已证明，在成人，特别是到了40岁以上时，由于上述SOD的逐渐减少以致引起成人病，另外，因为慢性或急性刺激以及化学物质刺激产生过剩的活性氧时，也会导致SOD的不足，最终引起上述各种疾病，因此这种SOD的存在引起医学界的普通重视。

对于由SOD不足引起的疾病，认为可通过给予SOD加以治疗或积极地补充易缺乏的SOD以图预防疾病的方法解决。

上述方法是将脂质体化的SOD以医药、特别是以注射药的形式给予病人。在欧美及日本，认为这种方法对以白塞氏病，恶性风湿性关节炎，川崎病、溃疡性结肠炎、克隆氏病等难治性疾病为首的以及脑中风、心肌梗塞、糖尿病等成人病的治疗和癌症的预防有显著效果。

但是这种SOD制剂，在医学上确认具有药效的形式仅是注射药，作为内服药的效果尚未得到证明。

这是因为，SOD对胃液来说是不稳定的物质，而且其分子量在30000以上，以原形状态不能被消化道直接吸收。

另外，SOD在存在的四种活性氧中仅限于对过氧化物起作用。上述SOD制剂目前只有注射剂是有效的，不言而喻，内服药对医生和患者来说在使用上更为方便，特别是用于长期治疗和预防、保健等目的时，内服药是最理想的简便的剂形。

不作为医药而是作为保健食品摄取时，当然要 以经口摄取为前提了，目前正渴望探索适于口服的具有活性氧抑制效果的物质。

特开昭60-110269号公报中公布了植物系营养剂的制造方法，该方法是将绿茶混入糙米粉及大豆粉中，再向其中添加少量酵母菌，并用由芝麻油和大豆油组成的混合油提取有效成分。

根据上述公报，该植物系营养剂中含有SOD，对上述各疾病中的疾病应能有效。

但是，即使假定该植物系营养剂中含有SOD，正如上所述，这种SOD是不能由消化道吸收的，而且即使吸收了，也仅对活性氧中的过氧化物有效，且反而有使HO增加的缺点。

事实上，上述植物系营养剂的活性氧抑制作用极其微弱，仍未超出单纯营养剂的范围。

本发明的目的是提供一种药品的制造方法，这种药品对活性氧具有显著的抑制作用，并对因体内过剩的活性氧引起的各种疾病有显著的治疗和预防效果。

本发明的另一目的是提供一种有效于美容和保健的保健食品制造方法。

根据以下详细说明和附加的权利要求就能了解本发明之上述及其他目的，以及许多效益和新特征。

以下说明本发明的活性氧抑制组合物的制造方法。

即，本发明方法是将植物种子和/或其胚芽煎焙之后添加微生物使其发酵，在其中添加由煎焙植物得到的油，从而制得活性氧抑制组合物。

本发明还提供一种方法，即将植物种子和/或其胚芽煎焙后添加微生物使其发酵，在其中添加由煎焙植物得到的油之后，再添加维生素C，维生素C衍生物或含有这些物质的植物体，从而得到活性氧抑制组合物。

一般说来，植物种子和谷类、特别是在大豆、芝麻、糠、薏米等的胚芽中存在有黄酮类、多酚类、鞣酸、维生素E、维生素B₂等低分子的活性氧抑制物质，这些物质相互之间或与其它成分进行化学结合，生成分子化合物，或通过附着及包孕等形式形成复杂的复合体及高分子化合物，因此上述植物种子和谷类及其胚芽以其原有状态摄取，其活性氧抑制作用极小，无论如何是不能用于疾病的治疗和预防的。

如果将这些植物种子和谷类及其胚芽放在温和条件下加热煎焙，含在其中的活性氧抑制物质，一部分将从将复合体中游离出来成为原来的低分子单体，或一部分接受化学变化生成活性官能团而活性化，其结果是活性氧的抑制作用比煎焙前格外得到加强。

反之，用强高温加热，使植物种子和谷类及胚芽变焦，含在其中的活性氧抑制物质将失去活性而活性降低。

因此必须特别注意煎焙时的加热方法，加热温度或加热时间等。

在此处，本发明中所说的“煎焙”，是指为使活性化而在适当条件下给予的必要加热，适当条件是以不使植物种子和谷类及胚芽发焦为度，它根据对象植物的种类和加热条件而有所不同，不能一概而论，加热温度为50～150℃。通常以50～100℃为合适。

为实施这种煎焙，必须反复地均匀加热，以保证植物种子和谷类及其胚芽粒子的内层和外层之间极小的温度差、为此，可采用远红外线加热，恒温槽均匀加热、和流动床加热等方法，但并不限于这些方法。

远红外线加热方法，可采用远红外线灯的方法，或用石料、砂子、砖、瓷器、瓦器或陶瓷等能发出远红外线的材料进行间接加热的方法。特别是后者容易实施，有利生产。

能用于本发明的植物种子和谷类可列举出米、小麦、大麦、大豆、玉米、薏米，小豆、豌豆等，只要具有较强的活性氧抑制作用就可以，并不限于上述这些物质。

作为胚芽，只要是上面列出的植物种子的胚芽就行，但以米糠和小麦胚芽为最佳。

植物种子和胚芽混合使用时，胚芽的使用量为植物种子和胚芽总量的5（重量）%以上，最好为10（重量）%以上。

煎焙之后，在这些植物的种子和谷类及其胚芽中加微生物使之发酵。

发酵所需要的时间一般以2～3天左右为宜。

此处说的“发酵”是指广义上的发酵，意指中微生物引起有机物的分解，并不是仅仅指代谢物变成单纯的化合物的情况。

例如，包括由

霉和酵母等引起的缓和的分解 是很理想的。因为在该发酵过程中，由于中含的蛋白酶等的酶的作用，上述低分子的活性氧抑制物质将进一步大量游离生成，使其作用得以强化。除

霉、酵母外，还可用含酶和发酵微生物的天然物，如成熟的菠萝、木瓜等的果汁、葡萄皮、无花果皮等。

本发明中，在上述煎焙及发酵工序之后，向其中添加由煎焙植物得到的植物油。

由于添加这种植物油，维生素E等的活性氧抑制物质被增强，其作用更加被强化。

根据情况，有时可把溶解在该植物油中的部分和不溶部分加以分离。以便按不同的疾病分别使用。

作为植物油的原料，可列举出芝麻，大豆，棉籽，玉米，番红花，夜来香，米糠，菜籽，橄榄等食或药用物质，当然也不仅限于这些。上述物质中以芝麻最为合适。

在本发明中还提供了一种制法，该方法是在用上述制法（煎焙+发酵+添加煎焙植物油）制得的组合物中添加维生素C、维生素C衍生物或含有这些的植物。

维生素C或其衍生物是具有强还原性的物质，其本身就有活性氧抑制作用，同时还具有抑制

等的自身破坏作用，从而使上述组合物稳定化，使游离生成的维生素E、多酚类、黄酮类、鞣酸、维生素B₂等低分子物质的活性氧抑制作用更加强化，这样，通过他们的相乘效果，对活性氧的抑制作用进一步有所增强。

作为维生素C衍生物，可例举出维生素C钠等的盐类、维生素C棕榈酸等的酯类等。

作为含有维生素C或其衍生物的植物体，可利用大麦和萝卜的嫩叶和根、柠檬和柚子的籽、绿茶、菠菜等各种植物等，但并不限于这些植物。

这些植物体可以用其原物粉碎后加入，也可以绞成汁后加入，还可以干燥过的形式加入，总之只要含维生素C就行。此时，这些成分的添加顺序可以是任意的。

用本发明方法制得的组合物中根据需要还可以添加各种维生素类，人体所需要的金属类或碘等化学成分等、以及辅助的医药和在保健方面有效的成分，还可任意添加调味料、香料、着色剂、界面活性剂，赋形剂等制剂方面所需要的成分。

用本发明方法制得的组合物除对动脉硬化、脑中风、心肌梗塞、糖尿病、恶性间接风湿病，白塞氏病、克隆氏病、溃疡性结肠炎、雷诺氏病等成人病和难治性疾病有效之外，还可以作为各种公害病、老年斑、雀斑、疣、烧伤、外伤、瘢痕疙瘩、疲劳、酒醉、便秘等的治疗及预防药物、并且是癌症的预防药物，此外，它又是美容和维持健康的有效的理想保健食品。

用本发明制得的组合物的最大优点是对4种活性氧，即O^- ₂，H₂O₂₁，OH，及¹O₂都起作用，因此比SOD（sueroxide disumutase，超氧化物歧化酶）效果更好。

上述组合物对胃酸不但稳定，而且反而因胃酸而低分子化，使活性氧抑制作用增大（丹羽等：inflammation，vol.10.Nol，1986），因此能以内服的方式作为治疗、预防及保健之用。

对烧伤、一般外伤的伤口或皮肤病、可以直接贴敷在患部进行治疗。

以下叙述实施例以及由它制得的组合物的活性氧抑制效果，但本发明并不受他们的限制。

首先按以下步骤配制各种试料。

试料1A：

将100g糠放入陶瓷容器，在约70℃下缓慢加热不使其烤焦，然后粉碎，并添加20mg市售的

在35℃下使它发酵48小时。

试料B：

改用小麦胚芽代替米糠，其它处理均与试料1相同。

试料1C：

改用小麦代替米糠，其他处理均与试料1A相同。

试料1D：

将100g大豆放入铁制深锅中，与500g砂子一起在80℃下缓慢加热搅拌，不要炒焦，然后与砂子分离、粉碎，添加30mg市售

并在35℃下使之发酵（

化）48小时。

试料1E：

改用薏苡代替米糠，其他处理均与试料1A相同。

试料1F：

将芝麻放入厚砂锅中，在60℃下加热，不使它烤焦，然后磨碎。

试料2A：

将试料1F压榨取油。

试料2B：

改用煎焙过的大豆代替芝麻，其他处理均与试料2A相同。

试料3A：

茶叶末

试料3B：

柚子汁

试料3C：

大豆嫩叶经低温干燥后的粉末

试料3D：

合成维生素C

实施例及效果如下。

将制得之组合物的活性氧抑制效果与比较例及其效果一起示于表1。（表1见文后）

下面表2示出上述表1记载的实施例1，4，7，9及对比例2，4，分别进行临床试验的结果。（表2见文后）

表1中所示之活性氧抑制效果的测定例是根据丹羽等人的上述论文（inflammation，vol    10，No1    1986）第80～81页记载的方法得出，具体如下所述。

将本发明之组合物试料，经超声波处理，以1.6mg/ml的治疗量（生体换算浓度）加到作为活性氧测定溶液的活性氧发生系中性白细胞黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶）中，然后测定活性氧，并与未添加本发明组合物时的活性氧值相比较。

上述治疗量是指1日常用内服量（在本发明中为10g）被生体吸收时，假定在血液中存在有本发明组合物的浓度。

4种活性氧的测定方法如下所述。

O^- ₂采用的是用贝克曼（Beckman）分光光度计以550nm的波长测定O还原细胞色素铁C（ferricytochrome c）的还原量，再换算成O^- ₂的方法;H₂O₂是根据因过氧化物酶（Peroxidase）的存在，导致能发出东莨菪内酯（scopotein）的萤光减少，用过氧化物酶和东莨菪内酯，以株式会社日立制作所制造的萤光分光光度计370nm的激振波，460nm的辐射波测定东莨菪内酯的萤光减少度。

关于OH的测定，采用的是应用α-酮-甲硫醇-丁酸（KMB）和OH反应。产生乙烯气体的原理，用株式会社日立制作所制造的气体色谱仪定量乙烯气体，然后再换算成OH的方法。

关于化学萤光（chemi-luminesescence）（¹O₂），是在不加氨基苯二铣-肼且严密遮光的情况下，用液体闪烁计数器测定。

表1

No    组成    活性    氧    抑制    效果

O^- ₂H₂O₂OH¹O₂

1    1A∶2A＝90∶10（重量比，以下相同）    28    24    23    25

2    1A∶2B＝90∶10    26    22    22    21

实    3    1B∶2A＝90∶10    30    28    25    27

4    1A∶2A∶3A＝30∶10∶10    46    48    41    44

施    5    1A∶1C∶2A∶3B＝15∶65∶10∶10    51    50    47    50

6    1A∶1C∶2A∶3B＝40∶40∶10∶10    60    62    61    63

例    7    1A∶1B∶1C∶1D∶1E∶1F∶2A∶3A＝13∶13∶13∶13∶13∶7∶12∶16      75    72  77

8    将No7的2A改为2B    68    65    66    67

-续-表1

No    组成    活性    氧    抑制    效果

O    HO    OH    O

实    9    在100份No7组合物中添加10份3B，    85    80    88    87

施    10    将No7的3A改为3C    77    75    72    74

例    11    将No7的3A改为3D

1    用实施例No1同样的组成，不进行加热发酵    6    5    6    4

对    2    用实施例No7同样的组成，不进行加热发酵    8    8    6    6

比    3    用实施例No7同样的组成，不用远红外线加热，表面烤焦    3    2      4

例    4    用实施例No7同样的组成，2A不进行煎焙而制得的油    7    8    7    9

注（1）：活性氧抑制效果的数值、试管中的活性氧下降率%测定方法另作说明。

注（2）：¹O₂采用了化学萤光（Chemilumineseenee）测定值。

表2

病名    风湿性关节炎    霉诺氏病    老年斑雀斑    酒醉

1日给药量    15g    9g    9g    12g

给药时间    3个月    4个月    1个月    1次

实1    2/6    2/6    1/6    3/6

施4    3/6    2/5    1/6    3/6

7    11/18    4/6    6/18    13/22

例9    16/22    6/8    6/15    14/20

对2    0/8    0/5    0/6    0/4

例4    0/8    0/6    0/4    1/5

注：表中的数字表示有效数/病例数。

Claims (8)

1、活性氧抑制组合物的制造方法，其特征是：

(a)选自米糠，小麦胚芽，小麦，大豆，薏米，芝麻的植物种子或其胚芽，或上述物质混合物采用可产生远红外线的手段于50-150℃温度范围内煎焙，其中煎焙时间是以不使其烤焦为止，然后

(b)加 并在室温下使其发酵2-3日而进一步使低分子量氧抑制化合物游离出来，之后

(c)添加于50-150℃温度范围内采用可产生远红外线的手段煎焙过的芝麻所得油，而煎焙时间是以不使其烤焦为止。

2、权利要求1记载的活性氧抑制组合物的制造方法，其特征是胚芽的比例为植物种子和胚芽总量的5（重量）%以上。

3、权利要求1记载的活性氧抑制组合物的制造方法，其特征是在陶瓷材料构成的容器内进行煎焙。

4、权利要求1记载的活性氧抑制组合物的制造方法，其特征是用远红外线灯进行煎焙。

5、活性氧抑制组合物制造方法，其特征是选自米糠，小麦胚芽，小麦，大豆，薏米，芝麻的植物种子或其胚芽，或上述物质混合物采用可产生远红外线的手段煎焙后，加

使其在室温下发酸2-3日，然后于50-150℃温度范围内煎焙过的芝麻而得油，而煎焙时间是以不使其烤焦为止，然后再添加维生素C，维生素C衍生物或含有这些物质的植物。

6、权利要求5记载的活性氧抑制组合物的制造方法，其特征是胚芽的比例为植物种子和胚芽总量的5（重量）%以上。

7、权利要求5记载的活性氧抑制组合物的制造方法，其特征是在陶瓷构成的容器内进行煎焙。

8、权利要求5记载的活性氧抑制组合物的制造方法，其特征是用远红外线灯进行煎焙。