CN1070574A - 低分子量植物组合物 - Google Patents

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Abstract

一种低分子量植物组合物。该组合物含有用远 红外线，例如利用含有陶瓷的容器加热，并随后用酿 造细菌，如“Koji”真菌、消化酶、蛋白质水解酶或得到 所述酶或所述蛋白质水解酶的前体酿造过的奶蓟种 子。

Description

本发明涉及具有消炎作用的低分子量植物组合物。
奶蓟（Milk  Thistle）（日本名：Santorisoh;学名：Silybum  marianum，silybinin）是一种加拿大、美国南部、以及欧洲北部荒野中的野生植物，其种子是一种在其表面具有象牙状光泽的实心的，长的和细长棒状的种子。有关奶蓟种子的常规研究已报导：（1）含有大量类黄酮;（2）由动物试验结果表明，它具有有效的解毒活性并具有保护肝的作用;（3）也由动物试验结果表明，它促进肝脏RNA（核糖核酸）的合成;等等，但从未报导过有关其消炎作用。
另一方面，K.Niwa的日本专利申请公开号63-79834“抗氧化剂组合物”（相应的美国专利No.5009891）提供了一种组合物，该组合物通过用远红外线加热植物种子，如稻谷、小麦、大豆、赤豆、脂麻种子和“hatomugi”（珍珠大麦），或它们的胚芽，然后将它们经受酿造处理，并添加用相同方法由植物得到的植物油而获得，并且表明，这样得到的该组合物具有一种抑制活性氧（O-O-）的活性（抗氧化剂活性），但是，这一组合物除抗氧化剂活性外，几乎没有显示出消炎作用。
本发明人进行了有关对其施加了如下所述专门处理的奶蓟种子和未处理过的奶蓟种子对人体白血细胞作用的试验，并在实际中给炎症病人口服这些奶蓟种子，已发现，处理后的奶蓟种子显示出显著的消炎作用，从而完成了本发明。
本发明的一个目的是提供一种由奶蓟种子制得的消炎剂。
本发明的另一个目的是提供一种由奶蓟种子制得的食品添加剂。
本发明的低分子量植物组合物可以按照如下方法通过处理奶蓟种子得到。
首先，用远红外线将奶蓟种子加热。更确切地是，利用一种容器，如在其内表面涂复辐射远红外线，较佳的是辐射波长4-14μm的远红外线，即所谓升高线的陶瓷的皿和坩埚，或一种容器，如辐射远红外线的陶土与含金属氧化物的石料、砂砾、砂子等混合制得的陶器，将奶蓟种子加热。
加热较佳是在温度接近100℃但不超过100℃进行，同时缓慢搅拌种子以使得不造成烧焦。附带地说，用于加热的远红外线源不仅限于上述容器，如皿、坩埚和陶器，而且可以使用任选的材料，只要该材料可辐射远红外线（较佳是波长约4-14μm的升高线），如铂电磁波纤维。加热时间取决于所用远红外线源的种类以及远红外线的强度，尽管通常为约半小时至约2小时。除常规的加热外，只要所使用的是辐射远红外线的容器，可以应用汽蒸。
其次，将加热后的种子经受酿造。更确切地说，酿造是通过使用酿造细菌，如“Koji”真菌（Aspergillus  oryzae）在温度27-35℃进行3-7天。
对酿造而言，除酿造细菌外可以利用如（1）具有酿造活性的物质，例如成熟的番木瓜果、凤梨果汁、无花果皮、葡萄皮、青竹皮，（2）消化酶如淀粉糖化酶、胰酶，（3）由微生物得到的蛋白质水解酶，如蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶，以及（4）得到上述消化酶或蛋白质水解酶的前体。
当使用本发明的低分子量植物组合物作为消炎剂时，将经受上述远红外线加热处理和酿造处理的物料研成粉末，或通过常规公知的方法制成颗粒、片剂或胶囊并以合适的剂量口服。可以以9-27克/天的范围使用本发明的组合物作为消炎剂。
还有，上述粉末可以添加入各种食品和饮料中以提供给它们作为保健食品。
在奶蓟种子中，低分子量消炎物质，如类黄酮、胡萝卜素、儿茶素、多酚、维生素E和维生素C以互相聚合状态，换言之以非活性状态存在。因此，甚至当不经任何处理口服奶蓟种子时，不能得到任何显著的消炎作用。
这就是，通过远红外线加热处理，而后酿造处理以切割该非活性类聚合物的分子链，以活化该低分子量的消炎物质。
然而，甚至当对其它含有消炎物质，如类黄酮的植物种子进行远红外线加热处理和酿造处理时，未显示出显著的消炎作用。对于这一事实可以认为是，在奶蓟种子中，除类黄酮等外，显示极优良消炎作用的低分子量物质是以非活性状态存在，并且通过施加远红外线加热处理和酿造处理而被活化。
实施例
以下详细描述奶蓟种子的消炎作用。
实施例1
-对人体白血细胞试验-
由健康人的外周血液中收集白血细胞（嗜中性细胞和淋巴细胞）并盛入试管中，向其中加入未处理过的奶蓟种子或施用本发明处理的种子。然后就5个测点检测其作用，该5个测点被认为是炎症的促进因素，即（1）嗜中性细胞中钙离子浓度，（2）嗜中性细胞的迁移能力，（3）嗜中性细胞的吞噬能力，（4）通过嗜中性细胞制备活性氧（O-O-），和（5）淋巴细胞对植物凝血素（PHA）的反应性（致癌现象）。
试验方法
（1）嗜中性细胞中钙离子浓度
收集外周静脉血液并通过使用Ficoll Hypaque分离和得到嗜中性细胞和淋巴细胞。在2ml含有0.1mM（毫摩尔）氧化钙的KRP中悬浮107细胞/ml的嗜中性细胞，向其中添加0.1μM Fura-2 A/M并在37℃将该混合物缓慢振荡30分钟。然后将该混合物用KRP洗涤两次，向其中添加15μl 10-6M fMLP并用荧光分光光度计F-4000（商品名，Hitachi Ltd）。测定钙离子浓度。
（2）嗜中性细胞的迁移能力
将2.5ml添加有10%失活的牛犊血清的RPMI和2.5ml 2.4%琼脂溶液混合制得琼脂平面。然后在由中心至外端8mm的间隔中形成直径3mm的三个孔穴。在中心孔穴中，放置10μl悬浮有106细胞/ml的嗜中性细胞的RPMI1640溶液;在中间孔穴中，放置10μl PRMI1640溶液作为对照，在外端孔穴中，放置10μl10-6M fMLP作为迁移刺激剂。接着，在这之后使琼脂平面在37℃保持2小时，测量中心孔穴中向外端孔穴移动的嗜中性细胞距离，它代表嗜中性细胞的迁移能力。
（3）嗜中性细胞的吞噬能力
收集0.1ml受人体血清调理的石蜡油并添加0.9ml在其中已加有2×107嗜中性细胞的KRP溶液，使该混合物在37℃下保持5分钟。然后向该混合物添加冰冷的KRP以使反应停止，并充份洗涤嗜中性细胞表面3次以除去粘附在嗜中性细胞表面的石蜡油。随后，用氯仿/甲醇（1∶2）的混合物萃取被嗜中性细胞吞噬的石蜡油滴并用分光光度计（吸收率：525nm）测定。
（4）由嗜中性细胞产生活性氧（O-O-）
在2ml含有5mM葡萄糖和1mg/ml白明胶的KRP溶液中，悬浮106嗜中性细胞，使该混合物在37℃下保持5分钟。然后，向其中添加0.1mM亚铁细胞色素C和1mg/ml调理过的酵母聚糖并使该混合物在37℃下放置5分钟。然后收集0.1ml上清液，并将此加入2ml 100mM含有0.1mM EDTA的磷酸钾溶液（PH7.8）中，通过具有2种波长的分光光度计（吸收率：550nm）测定还原细胞色素C的活性氧还原程度以计算活性氧的量。
（5）淋巴细胞对植物凝血素的反应性（致癌现象）
向2ml含有20%失活牛犊血清和2×105用丝裂霉素处理过的单核细胞的RPMI1640溶液中悬浮3×106淋巴细胞。然后向其中加入10μg/mlPHA，并使该混合物在37℃下保持3天。在反应完成前24小时，添加2Ci/mM[3H]，并测量在最后24小时内被淋巴细胞夺取的[3H]的量。
试验
分别将已按本发明施加了远红外线加热和酿造处理的奶蓟种子和未处理的奶蓟种子粉化，并用超声波将各为1.6mg/ml的上述种子进行声波处理，然后将它们加入5种炎症因素，即嗜中性细胞的钙离子浓度、迁移能力、吞噬能力和产生活性氧以及淋巴细胞对PHA的反应性的测量体系中，然后检测对测量值的作用。
此外，将1.6mg/ml日本专利公开申请号63-79834中所公开的抗氧化剂组合物，以及名为10-4M的市售消炎剂Rideron（Shionogi Seiyaku出售的促肾上腺皮质激素，倍他米松）、Pontal（Sankyo出售的甲灭酸）、Voltaren（Ciba-Geigy公司出售的二氯苯胺苯乙酸钠）和Brufen（Kaken Seiyaku出售的异丁苯丙酸）加入上述5种炎症因系的测量系统中作为比较药物，并且也检测对测量值的作用。
试验结果示于表1。
表1：奶蓟和其它药物对白血细胞的作用
嗜中性细胞  淋巴细胞
钙离子浓度  迁移能力  吞噬能力  活性氢产生  PHA致癌
奶蓟(加
热和酿  47.5(%)  50.6(%)  41.6(%)  51.8(%)  47.7(%)
造过的)
奶蓟(未处  72.3  76.1  69.1  74.8  70.2
理过的)
抗氧化剂  89.5  91.5  92.1  60.4  90.4
组合物
Rinderon  52.9  54.9  59.4  68.7  54.4
Pontal  82.5  86.0  85.4  82.8  82.2
Voltaren  84.9  86.8  86.3  86.9  84.6
Brufen  87.1  87.7  87.9  89.0  88.1
对照(*)  100.0  100.0  100.0  100.0  100.0
(618nm) (16.8mm) (0.031OD) (1.94nm (33.456×10
/106细胞/分钟 CPM)
每一行的数字分别表示以对照（＊）值计的百分值。对照（＊）表示当未添加药物时的炎症因素值。对照（＊）行中空格的数字表示炎症因素的真实值。
由表1清楚地可见，在比较药物中，抗氧化剂组合物显著地降低有效炎症因素之一的活性氧（O-O-），但基本上对其它四种炎症因素没有作用。还有，除Rinderon外，市售消炎剂仅对五种炎症因素中的某些略有抑制作用。
另一方面，可以理解到，用远红外线加热并酿造过的奶蓟种子显示出有效的消炎作用，并比Rinderon更有效地抑制和降低5种炎症因素，Rinderon是一种促肾上腺皮质激素，并以具有副作用而闻名。
未处理过的奶蓟种子也显著地抑制和降低5种炎症因素，但其程度与施加远红外加热和酿造处理过的种子相比较弱。
实施例2
给总共39个所谓难治疗疾病人的病例，包括10例慢性风湿性关节炎病人，8例进行性全身硬化病或皮肌炎病病人，6例全身红斑狼疮，6例Crohn′s病、5例Behcet′s病、和4例溃疡性结肠炎（这些病人对使用抗氧剂组合物，日本专利申请公开号64-85919所公开的易于吸收的原药、促肾上腺皮质激素剂等的治疗有抵抗力）以9g/天（每天三次）口服已施加远红外线加热和酿造处理的奶蓟种子粉末，以及以9g/天（每天三次）口服未处理过的奶蓟种子粉末，每四周判断其作用，得到示于表2的结果。
Figure 921104626_IMG2
“无变化”是指与使用促肾上腺皮质激素有相同效果，与使用该激素比较既未观察到改进，也未观察到恶化。
“无效”是指疾病比使用肾上腺皮质激素的情况恶化。
“有效率”表示总病例中显著有效、有效和略为有效的百分比。
由表2清楚可见，用远红外线加热和酿造过的奶蓟对66-83%口服它的难治疗疾病病人有效。
结果，许多使用拐棍或步行机行走的慢性风湿性关节炎病人可以自己行走。在四名由胸X-P观察证实具有肺硬化的晚期进行性全身硬化病或皮肌炎病并显著呼吸困难的病人中，呼吸困难有改善并在所有病例中通过胸X-P观察证实了消失。
还有，在总共7例已进行多次肠管手术的Crohn′s病人、Bechcet′s病人（肠管型）和溃疡性结肠炎病人中，5例已变得不必进行肠管手术，并在以后继续好转。
另一方面，未处理过的奶蓟种子的效果基本上与市售的消炎剂相同（除了促肾上腺皮质激素剂外）并低于促肾上腺皮质激素剂。远低于那些用远红外线加热并酿造过的种子，特别是未处理过的奶蓟种子对任何对促肾上腺皮质激素剂或抗氧化剂组合物有抵抗力的病例无效。
实施例3
给总共61病例上述难治疗疾病的新病人（29例慢性风湿性关节炎、10例进行性全身硬化病或皮肌炎病、8例全身红斑狼疮、6例Crohn′s病、6例Bchcet′s病（肠管型）和2例溃疡性结肠炎）以9g/天（每天分别给药3次）口服用远红外线加热和酿造过的奶蓟种子粉末，以9g/天（每天分别给药3次）口服未处理过的奶蓟种子粉末，以9g/天（每天分别给药3次）口服抗氧化剂组合物。口服Rinderon（0.5mg×3片剂/天），Pontal（250mg×4片剂/天），Voltaren（25mg×3片剂/天），以及Brufen（200mg×6片剂/天），每4周判断其效果，从而得到示于表3的结果。
在本实施例中，不是给全部病人每4周连续服用所有药剂。此外，仅在一部份病例中，给相同疾病的全部病人口服相同的药物。还有，在一部份病例中服用某些药物4周，此后服用其它药物4周。
由表3清楚可见，用远红外线加热并酿造过的奶蓟种子大多显示出显著有效和有效，促肾上腺激素（Rinderon）跟随其后。其它药物显示出基本上与市售消炎剂相同的效果。
实施例4
给总共56例普通炎症病人（16例腰痛、10例肌痛、9例肩强直、10例擦伤和11例冷体质）以实施例3中相同剂量口服相同药物4周，判断其效果。结果示于表4。
表4：奶蓟和市售消炎剂对普通炎症病人的效果
由表4清楚可见，结果基本上与上述实施例3相同，但用远红外线加热和酿造过的奶蓟种子和其它药物之间的差别没有实施例3明显。
由实施例1的结果清楚可见，施用过远红外加热和酿造处理的奶蓟种子与未处理的种子比较，对作为白血细胞炎症因素的嗜中性细胞钙离子浓度、迁移能力、吞噬能力和活性氧的产生、以及淋巴细胞对PHA的反应性之中的每一种都显著地是有抑制性的。
还有，在对上述有关炎症因素的有关抑制作用方面，本发明的组合物比日本专利申请公开号63-79834中所公开的抗氧化剂组合物或市售消炎剂的效果远为优良。
由实施例2、3和4中有关结果清楚可见，用远红外线加热和酿造过的奶蓟种子不仅对普通炎症疾病，如腰痛、肌痛、肩强直、擦伤和冷体质，而且还对慢性风湿性关节炎显示出显著的效果。
还有，它对难治疗疾病，即为日本Health和Welfare部所指定的特殊疾病，如进行性全身硬化病、皮肌炎、全身红斑狼疮、Crohn′s病、Behcet′s病和溃疡性结肠炎显示出显著效果。此外，它特别对甚至使用以副作用闻名的促肾上腺皮质激素也不能收到任何效果的病例显示出显著效果，以致它作为消炎剂是划时代的，而且其使用价值极为巨大。

Claims (10)

1、一种低分子量植物组合物，该组合物含有经受用远红外线加热并随后酿造处理的奶蓟种子。
2、权利要求1的低分子量植物组合物，其中加热处理是通过使用波长为4-14μm的远红外线进行的。
3、权利要求1的低分子量植物组合物，其中加热处理是在含有陶瓷的容器中进行。
4、权利要求1的低子分量植物组合物，其中加热处理是在温度不超过100℃时进行。
5、权利要求1的低分子量植物组合物，其中酿造处理是通过酿造细菌、消化酶、蛋白质水解酶或得到所述酶或所述蛋白质水解酶的前体进行的。
6、权利要求5的低分子量植物组合物，其中酿造细菌是“koji”真菌、
7、权利要求1的低分子量植物组合物，其中该组合物是一种消炎剂。
8、权利要求7的低分子量植物组合物，其中药剂的形式是粉末、颗粒、片剂或胶囊。
9、权利要求1的低分子量植物组合物，其中该组合物是一种食品添加剂。
10、制备低分子量植物组合物的方法，该方法包括：
用远红外线将奶蓟种子加热并将该种子酿造。
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