NL192138C - Inrichting en werkwijze voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen. - Google Patents

Inrichting en werkwijze voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen. Download PDF

Info

Publication number
NL192138C
NL192138C NL8203946A NL8203946A NL192138C NL 192138 C NL192138 C NL 192138C NL 8203946 A NL8203946 A NL 8203946A NL 8203946 A NL8203946 A NL 8203946A NL 192138 C NL192138 C NL 192138C
Authority
NL
Netherlands
Prior art keywords
zone
antibodies
antigens
enzyme
antigen
Prior art date
Application number
NL8203946A
Other languages
English (en)
Other versions
NL192138B (nl
NL8203946A (nl
Original Assignee
Liotta Lance A
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Liotta Lance A filed Critical Liotta Lance A
Publication of NL8203946A publication Critical patent/NL8203946A/nl
Publication of NL192138B publication Critical patent/NL192138B/nl
Application granted granted Critical
Publication of NL192138C publication Critical patent/NL192138C/nl

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/525—Multi-layer analytical elements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/805—Test papers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/97—Test strip or test slide
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y10S436/81—Tube, bottle, or dipstick
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/815—Test for named compound or class of compounds
    • Y10S436/817—Steroids or hormones
    • Y10S436/818—Human chorionic gonadotropin
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/82—Hepatitis associated antigens and antibodies

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

1 192138
Inrichting en werkwijze voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen
De uitvinding heeft betrekking op een inrichting voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen met daarin: 5 een matrix; een eerste zone in de matrix met (a) aan de matrix gebonden en daardoor geïmmobiliseerde antigenen en (b) met enzym verbonden antilichamen die immunologisch met deze antigenen kunnen reageren, welke antilichamen zo in de eerste zone zijn ondergebracht, dat zij uit de eerste zone bij een reactie met door deze zone passerende antigenen uit deze eerste zone worden verwijderd, maar niet uit deze eerste zone 10 worden verwijderd bij afwezigheid van dit soort antigenen; alsmede een tweede, van de eerste zone verwijderde, zone met daarin een materiaal dat met de genoemde met enzym verbonden antilichamen kan reageren onder vorming van een kleurreactie die de aanwezigheid van de genoemde antilichamen aangeeft.
De uitvinding heeft tevens betrekking op een inrichting voor het aantonen van de aanwezigheid van 15 antilichamen met daarin: een matrix; een eerste zone in de matrix met (a) aan de matrix gebonden en daardoor geïmmobiliseerde antilichamen en (b) met enzym verbonden antigenen die immunologisch met deze antilichamen kunnen reageren, welke antigenen zo in de eerste zone zijn ondergebracht, dat zij uit de eerste zone bij een reactie met door deze 20 zone passerende antilichamen uit deze eerste zone worden verwijderd maar niet uit deze eerste zone worden verwijderd bij afwezigheid van dit soort antilichamen; alsmede een tweede, van de eerste zone verwijderde, zone met daarin een materiaal dat met de genoemde met enzym verbonden antigenen kan reageren onder vorming van een kleurreactie die de aanwezigheid van de genoemde antigenen aangeeft.
25 Immunologische diagnostische proeven worden uitgebreid toegepast voor het aantonen van antigenen, hormonen, infectieuze organismen en serum-antilichamen in lichaamsvloeistoffen. Immunoproeven vallen gewoonlijk binnen twee categorieën. Ten eerste: antilichaam-antigeen neerslagproeven, zoals radiale immunodiffusie, hemagglutinatie en beklede latexdeeltjes-agglutinatie; ten tweede gemerkt reagens-proeven, zoals radio-immunoproeven en enzym-immunoproeven.
30 De neerslagproeven hebben het voordeel dat ze met de hand en in weggooimaterialen kunnen worden uitgevoerd en zonder instrument kunnen worden afgelezen. Het aflezen van een immunoproef van het precipitatietype wordt gewoonlijk uitgedrukt als de een aan- of aanwezigheid van een agglutinatiereactie bij elk van een reeks bekende verdunningen van het proefmonster of het concurrerend antigeen. Het nadeel van de proeven van het neerslagtype is dat ze aanmerkelijk minder gevoelig zijn dan de gemerkte 35 reagens-proeven, veel tijd kosten in verband met incubatietrappen en gevoeliger zijn voor subjectieve fouten bij de visuele beoordeling van een neerslagreactie.
Gemerkt reagens-immunoproeven zijn kwantitatief en zeer gevoelig, maar hebben niettemin ook diverse nadelen. Bij radio-immunoproeven gebruikt men radioactieve merkstoffen en dus is een afleesinstrument voor gammastraling nodig. De radioactieve merkstoffen hebben een korte houdbaarheid, zijn gevaarlijk voor 40 de laborant en onderhevig aan beperkingen voortvloeiend uit de wetgeving. Enzym-gebonden immunoproeven (ELISA) maken gebruik van reagentia, die gemerkt zijn met een enzym. Dit enzym wordt aangetoond door zijn reactie met een substraat, waardoor een product ontstaat dat gemakkelijk kan worden gemeten (bijvoorbeeld vorming van een kleur). Bij ELISA gebruikt men geen radioactieve materialen en gewoonlijk reagentia met een lange houdbaarheid. Bij een ELISA-proef is een referentiereagens gebonden aan een 45 vaste drager, bijvoorbeeld de bodem van een plastic uitholling. De te onderzoeken vloeistof wordt gemengd met het enzymhoudende reagens en reageert met het gebonden referentiereagens. Door een aantal verdunnings-, incubatie- en wastrappen (vaak niet minder dan veertien), worden gebonden en vrij reagens gescheiden en wordt een kleurvormende reactie op gang gebracht. De intensiteit van de gevormde kleur bij verschillende serieverdunningen levert een kwantitatieve maat. De standaard ELISA proef kost vier tot 50 twaalf uren. Het belangrijkste bezwaar van ELISA proeven is het grote aantal verdunnings-, incubatie- en wastrappen, die veel tijd kosten en fouten kunnen veroorzaken.
Uit de Europese octrooiaanvrage no. 0.013.156 van Kodak is een immuno-assay bekend waarbij gelabelde antigenen en antilichamen in deeltjeslagen worden gebracht. De essentie van deze aanvrage is gelegen in thermisch stabiele organische polymeerdeeltjes die door een tweede organisch polymeer aan 55 een kleefmiddel zijn gebonden tot een driedimensionale roosterstructuur. Deze driedimensionale rooster-structuur fungeert als een poreuze laag waarop de antigeen-antilichaam reactie plaatsvindt. Volgens deze aanvrage wordt de hoeveelheid gelabeld antigeen gemeten die competitief geremd wordt.
192138 2
De inrichting volgens de uitvinding wordt gebruikt om de moeilijkheden met ELISA proeven te overwinnen. Specifiek resulteert de toepassing hiervan in een verbeterde ELISA proef en wel zonder verdunnings-of wastrappen en met slechts een korte incubatieperiode. Het proefmateriaai heeft de voim van een droge gelaagde proefstrook die een kleurreactie geeft bij direct contact met de te onderzoeken vloeistof. De strook 5 voert automatisch de benodigde verdunningstrappen uit voor de hoeveelheidskeuze en scheidt gebonden antilichaam van vrij antilichaam. De kleurreactie kan visueel of met een instrument zoals een spectrofotome-ter worden afgelezen. Bovendien kan de inrichting volgens de uitvinding worden geproduceerd in een strookvorm en worden gebruikt als een dompelstrook of stokje voor een snelle aantoning van een antigeen, bijvoorbeeld een geneesmiddel of hormoon in urine. Een voorbeeld van een specifieke toepassing is het 10 snelle aantonen van een geneesmiddeloverdosis of een thuis uit te voeren zwangerschapsproef.
De uitvinding betreft een inrichting zoals hierboven reeds beschreven.
Op deze wijze biedt de uitvinding een unieke methode voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen in een biologische vloeistof waarbij men deze vloeistof in contact brengt met een inrichting van het hiervoor beschreven type, waarbij men de genoemde vloeistof door de genoemde inrichting laat lopen 15 en de aan- of afwezigheid van een kleurverandering in de tweede zone waarneemt ter bepaling van de aan-of afwezigheid van het gezochte antigeen in de betreffende vloeistof.
In de tekening geeft:
Figuur 1 schematisch een inrichting 10 volgens de uitvinding weer, die bestaat uit drie verschillende 20 lagen: 12,14 en 16. De lagen 12 en 14 vormen de eerste zone 18. De laag 16 de tweede zone 20.
Inrichting 10 is aangebracht op een drager 22. Laag 12 is vervaardigd uit een poreus materiaal waarin oplosbare met een enzym verbonden antilichamen 24 zijn gedispergeerd. Laag 14 is eveneens vervaardigd uit een poreus materiaal en bevat daarin gebonden antigenen 26. Laag 16 is eveneens vervaardigd uit een poreus materiaal en bevat een gebonden kleurvormend reagens 17, te weten een materiaal dat met het 25 enzym uit laag 12 tot een kleurreactie reageert.
Figuur 2 geeft schematisch de werkwijze volgens de uitvinding weer, waarbij de inrichting van figuur 1 wordt toegepast. Daarbij wordt een vloeistof 28 op het oppervlak 30 van laag 12 aangebracht. Wanneer de vloeistof door de matrix diffundeert komt vrij antigeen 32 in contact met enzym-antilichaamcombinaties 24 en combineert daarmee. Na een korte incubatieperiode diffunderen de met een enzym verbonden anti-30 lichamen met verzadigde herkenningsplaatsen vrijelijk door de eerste zone 18 en naar de tweede zone 20 (of laag 16), waar het enzym onder een kleurvormende reactie reageert tot een duidelijke kleur die de aanwezigheid van antigeen in de toegepaste vloeistof aangeeft.
Figuur 3 is een schematische weergave van de werkwijze volgens de uitvinding onder toepassing van een inrichting volgens figuur 1 en geeft weer wat gebeurt wanneer de te onderzoeken vloeistof geen 35 antigeen bevat. Dan wordt een vloeistof 34 aangebracht op het oppervlak 30 van laag 12. Wanneer de vloeistof door laag 12 van de matrix diffundeert, worden de enzym-antilichamen 24 gesolubiliseerd en naar laag 14 overgebracht, waar ze zich hechten aan en combineren met daaraan gebonden antigenen 26. De enzym-antilichaamcombinaties bereiken in dit geval dus niet het kleurvormend reagens 17 in laag 16 (of tweede zone 20) waardoor geen kleurwisseling wordt waargenomen. Dit geeft natuurlijk aan, dat in de 40 vloeistof 34 geen antigenen aanwezig waren.
Figuur 4 geeft een andere uitvoeringsvorm van de uitvinding weer waarbij de inrichting of matrix 11 in twee verschillende lagen 36 en 38 is uitgevoerd. In dit geval is laag 36 de eerste zone 40 met daarin gebonden referentie-antigeen 44 dat is gecombineerd met een met een enzym verbonden antilichaam 46. De laag 38 is de tweede zone 42 en bevat kleurvormend reagens 17.
45
Als weergegeven in figuur 5 zal indien de te onderzoeken vloeistof 48 voldoende vrij antigeen 50 bevat om te concurreren met het gebonden antigeen 44 het met een enzymverbonden antilichaammateriaal worden verplaatst en naar beneden diffunderen naar zone 42, waardoor een kleurreactie 52 optreedt. Omgekeerd vindt als weergegeven in figuur 6 wanneer vloeistof 54 geen antigeen bevat ook geen concurrentie plaats 50 en diffundeert ook geen enzym-antilichaamcombinatie naar de tweede zone 42, waardoor ook geen kleur optreedt.
De uitvinding is gebaseerd op het principe van de concurrentie tussen gebonden en vrije antigenen voor een gefixeerd aantal herkenningsplaatsen op een met enzym gemerkt antilichaam. Het is een verbeterde methode voor het uitvoeren van een proef van het ELISA type. De proefreagentia worden geïmpregneerd in 55 een proefstrook met een aantal zones. Het te onderzoeken vloeistofmonster laat men passief diffunderen in deze proefstrook. Gebonden en vrije antigenen worden automatisch tijdens deze diffusie gescheiden. Deze scheiding komt tot stand doordat de referentie-antigenen in de vaste fase in een eerste zone zijn geïmmobi- 3 192138 liseerd, die gescheiden is van een tweede zone met daarin enzymsubstraat. Oplosbaar met een enzym verbonden antilichaam met herkenningsplaatsen.laat men mengen met het te onderzoeken monsteren vervolgens door de lagen diffunderen. De oplosbare antigenen in het proefmonster concurreren met het geïmmobiliseerde referentie-antigeen voor een binding aan de enzym-antilichaamcombinatie. Daardoor is de 5 hoeveelheid enzym-antilichaamcombinatie die uiteindelijk de tweede zone met het substraat bereikt, afhankelijk van de concentratie van het te onderzoeken antigeen in het monster. Het substraat in de strook reageert met het enzym tot een kleurreactie. Om een kwantitatieve schatting mogelijk te maken is de strook verdeeld in een aantal gescheiden regionen, die elk een verschillende hoeveelheid geïmmobiliseerd referentie-antigeen bevatten. De plaats van de kleuring op de strook is daarom afhankelijk van de concen-10 tratie van het antigeen in het proefmonster.
Als eerder gezegd omvat de onderhavige inrichting een eerste zone met daarin gebonden antigeen en specifiek met een enzym verbonden antilichaam en een tweede zone met daarin een kleurvormend reagens of substraat. De met een enzym verbonden antilichaam zijn ondergebracht in de eerste zone en wel aldus dat ze in staat zijn bij een reactie met ongebonden antigeen over te gaan naar de tweede zone, maar niet 15 worden verwijderd uit de eerste zone bij afwezigheid van dergelijke antigenen.
Volgens de voorkeursuitvoeringsvorm van de uitvinding is de inrichting een geheel van drie poreuze matrixlagen (zie figuur 1). De eerste poreuze laag is geïmpregneerd met een specifiek antilichaam, verbonden met een enzym. De tweede poreuze laag bevat geïmmobiliseerd (gebonden) referentie-antigeen. Het antigeen is van een type dat specifiek wordt herkend door het antilichaam in de eerste poreuze laag.
20 De derde laag bevat een kleurvormend substraat dat met enzym verbonden aan het antilichaam reageert.
De werking van deze inrichting is als volgt (zie figuren 2 en 3).
Het vloeistofmonster met daarin het te onderzoeken antigeen wordt in contact gebracht met de eerste laag. Het vrije antigeen in het te onderzoeken monster diffundeert in de tweede laag en vervolgens in de derde laag. Het vrije antigeen in het monster concurreert met het geïmmobiliseerde gebonden referentie-25 antigeen in de tweede laag bij het combineren met het met een enzym verbonden antilichaam. Indien het met enzym verbonden antilichaam met vrij antigeen combineert, zal dit vrijelijk diffunderen naar de derde laag en daar een kleurreactie produceren. Indien het vloeistofmonster geen antigeen bevat, zal al het met enzym verbonden antilichaam vrije bindingsplaatsen bevatten en zich hechten aan het geïmmobiliseerde antigeen in de tweede laag. Het met enzym verbonden antilichaam dat zich hecht aan het geïmmobiliseerde 30 antigeen in de tweede laag diffundeert niet naar de derde laag, waardoor geen kleurreactie optreedt. Het verschil in de hoeveelheid substraat dat wordt ontleed (en de intensiteit van de verkregen kleur) is evenredig met de hoeveelheid antigeen in het proefmonster. Voor een gegeven hoeveelheid met enzym gemerkt antilichaam in de eerste laag wordt de gevoeligheid van de inrichting bepaald door de hoeveelheid referentie-antigeen in de tweede laag. Karakteristiek bevat een proefinrichting een reeks sandwich-35 samenstellingen, elk met een verschillende hoeveelheid referentie-antigeen. De reeks referentie- antigeenconcentraties moet tevoren zodanig zijn bepaald dat zij een traject aan gevoeligheid overspannen, die het geheel geschikt maakt om de te onderzoeken oplossing te meten. Er wordt de nadruk op gelegd, dat in de ELISA proefstrook een positieve kleurreactie de aanwezigheid van te onderzoeken antigeen aangeeft.
De materialen die worden gebruikt voor het vervaardigen van de onderhavige inrichting zijn bekend. In 40 de praktijk is het evenwel gewenst geblekèn de zones of lagen van een voorkeursinrichting uit onderling verweven vezels te maken, bijvoorbeeld van nitrocellulose of diazobenzyloximethyl (DBM) papier. Nitrocellu-losepapier bindt proteïnen direct en is bruikbaar gebleken voor het immobiliseren van antigenen. DMB matrix bindt DNA, RNA en eiwitten via covalente bindingen met de diazonium-groep. Bovendien kan een poreus gel, zoals polyacrylamide, agarose of collageen worden gebruikt. Het antigeen kan binnen de poriën 45 van het gel zijn opgesloten of aan het gel zijn verknoopt via aminogroepen van de liganden en de carboxylgroepen op de matrix. Ook kunnen deeltjes of korrels met een gebonden ligande opgesloten in een cellulose of plastic vezelmatrix worden gebruikt. Een bevredigend voorbeeld vormen polyacrylamidekorrels met een diameter van 5-10 micron met antigeen op het oppervlak daarvan gebonden via een peptidebin-ding. Deze korrels zijn vervat in een cellulose filtermatrix met een poriegrootte van 1-2 micron.
50 Passende substraten of kleurvormende reagentia zijn in de techniek bekend. In dit verband wordt een reeks verschillende typen gezuiverde enzymen gewooniijk als merk gebruikt voor immuno-reagentia zoals ELISA. Deze omvatten mierikswortel-peroxidase, alkalische fosfatase en β-galactosidase. De uitvinding is evenwel niet beperkt tot de toepassing van deze enzymen als merk voor het antilichaam of antigeen. Het gebruikte enzym voor het merken van het antilichaam kan een kleur produceren in de tweede zone van de 55 proefinrichting door direct of indirect te reageren met het kleurvormend middel. Zo reageren bijvoorbeeld bekende substraten zoals diaminobenzidine of p-nitrofenylfosfaat met mierikswortel-peroxidase bij aanwezigheid van waterstofperoxide waarbij een bruine of zwarte kleur wordt gevormd. Bij een uitvoeringsvorm van 192138 4 de uitvinding wordt waterstofperoxidase exogeen tijdens de toepassing van de inrichting toegevoegd. Ook kan de gelyofiliseerde kleurvormende zone gebonden glucose-oxidase bevatten en de eerste zone glucose. Bij toepassing van een dergelijke inrichting diffundeert de glucose in de eerste zone naar de tweede zone en doet daar waterstofperoxide ontstaan door een reactie met de glucose-oxidase.
5 Het enzym dat met het antilichaam is verbonden kan ook een kleur produceren in de tweede zone langs indirecte weg, bijvoorbeeld door deze zone permeabel te maken. Een voorbeeld van deze methode die voor de uitvinding geschikt is gebleken, is de toepassing van sterk gezuiverde collagenase als enzym dat verbonden is met het antilichaam. Dit enzym breekt collageen af in kleine peptidestukken. Voor het aantonen van het collagenasemerk worden twee reagentia die gecombineerd een kleur geven, gescheiden 10 door een collageenmatrix-scheidingslaag. De aanwezigheid van het met collagenase gemerkt antilichaam wordt aangetoond doordat de collagenase de collageen-scheidingslaag afbreekt en het mogelijk maakt dat de gescheiden reagentia met elkaar mengen en daarbij een kleur vormen. Een dergelijke collagenase kan worden verkregen uit Clostridium histolyticum, gezuiverd op een op zichzelf bekende wijze. Een passende collageenmatrix wordt gevormd door mndercollageen van het type I in een drievoudige helix(natieve) of 15 gedenatureerde (gelatine) vorm.
Hieronder volgen enige specifieke voorbeelden die de uitvinding nader toelichten.
Voorbeeld I
20 Proef: Drielaagsuitvoering van de uitvinding voor het aantonen van zwangerschap Gebruikte materialen: a) antigeen: menselijk choriongonadotrofine (hCG)
- b) antilichaam: konijnenantiserum jegens menselijk hCG
c) aan antilichaam gehecht enzym: mierikswortelperoxidase 25 d) kleurvormend enzymsubstraat: diaminobenzidine e) matrixmateriaal voor de poreuze lagen: nitrocellulose.
Wijze van handelen
Trap 1. Vervaardiging van de laag met kleurvormend reagens: nitrocellulosematrixlagen met een dikte 30 van 0,2 mm werden in stroken van 2 cm breedte en 10 cm lengte gesneden. Deze stroken werden 30 minuten geïmpregneerd in een oplossing van 0,1 mg/cm3 diaminobenzidine in gedestilleerd water. De stroken werden vervolgens bevroren door ze te bedekken met droogijskorrels. De bevroren stroken werden vervolgens gelyofiliseerd in een gebruikelijke lyofilisator.
Trap 2. Vervaardiging van de antigeen-houdende laag: antigeen werd gesolubiliseerd in met fosfaat 35 gebufferde fysiologische zoutoplossing in een concentratie van 5,0 I.E./cm3 en bereid als een serie-verdunning: 1:1, 1:2,1:4, 1:8, 1:16,1:32,1:64 en 1:100.
Acht groepen nitrocellulose-stroken werden elk geïmpregneerd in een verschillende oplossing van de antigeen-oplossing en wel gedurende 30 minuten bij 4°C. Alle stroken werden vervolgens geïmpregneerd in een oplossing van 1% runderserum-albumine in met fosfaat gebufferde fysiologische zoutoplossing en wel 40 gedurende 2 uren bij 4°C om alle vrije eiwitbindende plaatsen op de nitrocellulose te verzadigen (Proc. Natl. Acad. Sci. 76 4350-4 (1979). De lagen werden vervolgens gelyofiliseerd als boven weergegeven.
Trap 3. Vervaardiging van de laag met een enzym verbonden antilichaam; peroxidase-enzym werd met een antilichaam volgens de standaard perjodaat-methode van Wilson en Nakane (W. Knapp et al: Immunofluorescens en Related Techniques, Elsevier Co., Amsterdam (1978), biz. 215-225) geconjugeerd. 45 Na zuivering van het conjugaat volgens standaardmethoden werd dit verdund met PBS tot een concentratie van 1 mg/cm3. De concentratie aan met enzym verbonden antilichaam dat men in de laag wenste te impregneren, werd bepaald door verdunning van de met enzym verbonden antilichaam-oplossing tot een druppeltje van 20 microliter aangebracht op het oppervlak van de nitrocelluloselaag met geïmmobiliseerd antigeen in een verdunning van 1:32 een volledige binding gaf van al het antilichaam aan het geïmmobili-50 seerde antigeen (bereiden van een standaard-verdunningskromme). Deze constructie was met enzym veibonden antilichaam werd geïmpregneerd in de stroken cellulose-papiermateriaal en gelyofiliseerd als beschreven in trap 1.
Trap 4. Vervaardiging van een drie-laags geheel: vierkantjes van 1 cm van elke gelyofiliseerde laag werden uit de stroken gesneden. De vaste drager was een strook transparant polycarbonaat van 10 cm x 55 1 cm x 0,1 mm. Acht vierkantjes nitrocellulose met het kleurvormend substraat werden op de kunststof-drager geplakt met een cement op basis van latex. Bovenop deze vierkantjes werden de antigeen-houdende lagen geplakt onder toepassing van een latexcement aan de randen. De acht verschillende antigeen- 5 192138 concentraties werden daarbij gebruikt. Tenslotte werden op de antigeenlagen de met enzym verbonden antilichamen geplakt.
Trap 5. Om de proef uit te voeren werd 50 microliter te onderzoeken oplossing op het oppervlak van de bovenlaag aangebracht. De proefoplossing bestond uit standaard-antigeen in met fosfaat gebufferde fysio-5 logische zoutoplossing met pH 7,4 en daarin 0,1% waterstofperoxide. De gevoeligheid van de proef bedroeg 0,3 I.E. aan hCG die een kleurreactie gaf bij de 1:32 verdunning van het geïmmobiliseerde antigeen.
Resultaten
De ELISA proefstrook die op de boven weergegeven wijze was vervaardigd werd qua gevoeligheid 10 vergeleken met een standaard hemagglutinatie-reactie. Het proefmonster was samengevoegde menselijke urine van zes patiënten die tevoren zwanger waren gebleken.
Verdunning urinemonster Geschatte ELISA-strook Gebruikelijke 15 hoeveelheid hCG hemagglutinatie aangetoond 1:1 2,5 IE (+) {+) 1:2 1,2 IE (+) (+) 20 1:4 0,6 IE (+) (-) 1:8 0,3 IE (+) (-) 1:16 0,01 IE (-) (-) 25 De gevoeligheid van de ELISA strook is dus duidelijk groter dan die van de gebruikelijke hemagglutinatie-reactie.
Voorbeeld II
Proef: (a) Om de tijdsduur van de kleurvorming bij diverse concentraties met enzym verbonden antilichaam 30 geïmpregneerd in de eerste laag van de drielaags-uitvoering te bepalen.
(b) Om het gemak aan te tonen van de werkwijze bij het aantonen van menselijk hepatitis B antigeen (HBA).
Wijze van werken
De proefstrook werd geconstrueerd op de in voorbeeld I beschreven wijze. De eerste laag bevatte een 35 gelyofiiiseerde cellulosematrix die geïmpregneerd was met de volgende verdunningen aan het peroxidase geconjugeerd anti-HBA: 1/2, 1/5, 1/50, 1/225, 1/625, 1/3125. Bij experiment a) bevatte de tweede laag geen antigeen. Bij experiment b) bevatte de tweede laag gebonden HBA in een concentratie bij 500 mg per cm2. De derde laag bevatte DAB substraat, en was vervaardigd als in voorbeeld I voor het aantonen van hCG.
40 Resultaten
Experiment a)
Het proefmonster bestond uit normaal menselijk serum 1/10 verdund in een met fosfaat gebufferde fysiologische zoutoplossing met daarin 0,1% waterstofperoxide.
45
Kleurreactie
Verdunning tijd: 10 sec. 30 sec. 1 min.
50 1/2 diep BN-ZW id. id.
1/5 diep BN-ZW id. id.
1/50 BN-ZW id. id.
1/225 BN donker BN id.
1/625 licht BN BN donker BN
55 1/3125 geen kleur zeer licht BN licht BN
BN = bruin, ZW = zwart.

Claims (10)

192138 6 De optimale concentratie aan het enzym verbonden antilichaam bedraagt 1/625 wanneer de tweede laag 500 ng HBA per cm2 bevat. Het gemak bij het ontdekken van HBA wordt gedemonstreerd door de aanwezigheid van concurrentie van het vrije antigeen jegens het gebonden antigeen bij 1/625. 5 Experiment (b). 1 Bepaling van de optimum maximale concentratie aan het enzym verbonden antilichaam in de eerste laag die volledig wordt gebonden met het referentie-antigeen in de tweede laag wanneer het proefmonster geen antigeen bevat. 10 -:-- Verdunning van het enzym geconjugeerd Kleurreactie na 1 minuut anti-HBA in de eerste laag 1/5 BN 15 1/50 licht BN 1/225 zeer licht BN 1/625 geen kleur (volledige binding door referentie-antigeen) 1/3125 geen kleur ^ Experiment (b).2 Een verdunning 1 /625 (zie tabel (b)1 boven) aan conjugaat werd gekozen voor het aantonen van HBA in een hoeveelheid van 100 ng/cm3. „ Proefmonster Kleurreactie 25 30 seconden 1 minuut HBA aanwezig lichtbruin bruin HBA afwezig geen kleur geen kleur 30 De techniek van de uitvinding is evengoed toepasbaar op het aantonen van antilichamen als antigenen. De rollen van antigeen en antilichaam kunnen gemakkelijk worden omgekeerd. Voor het aantonen van antilichamen wordt antigeen gemerkt met enzym en het referentie-antilichaam in de eerste zone geïmmobiliseerd. Het met enzym gemerkte antigeen bindt zich aan het geïmmobiliseerde antilichaam in de eerste zone 35 bij afwezigheid van concurrerend antilichaam in het proefmonster en diffundeert dan niet naar de tweede zone waarbij een kleur zou worden gevormd. Indien wel antilichaam in het proefmonster aanwezig zijn, concurreren deze met de geïmmobiliseerde referentie-antilichamen. In dit geval geeft een positieve kleurreactie de aanwezigheid van antilichamen in het proefmonster aan. Wanneer de uitvinding geschikt wordt gemaakt voor het aantonen van antilichamen, wordt een inrichting 40 toegepast met een eerste zone met daarin met enzym verbonden antigenen en antilichamen die immunologisch met deze antigenen kunnen reageren, welke antigenen zo in de eerste zone zijn ondergebracht dat ze uit de eerste zone worden verwijderd bij een reactie met passerende antilichamen, maar niet uit deze eerste zone worden verwijderd bij afwezigheid van dit soort antilichamen; en met een tweede zone met daarin een materiaal dat direct of indirect met de met enzym verbonden antigenen kunnen reageren onder een 45 kleurvormende reactie, die dan de aanwezigheid van antigenen aangeeft.
1. Inrichting voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen met daarin: een matrix; een eerste zone in de matrix met (a) aan de matrix gebonden en daardoor geïmmobiliseerde antigenen en (b) met enzym verbonden antilichamen die immunologisch met deze antigenen kunnen reageren, welke antilichamen zo in de eerste zone zijn ondergebracht, dat zij uit de eerste zone bij een reactie met 55 door deze zone passerende antigenen uit deze eerste zone worden verwijderd maar niet uit deze eerste zone worden verwijderd bij afwezigheid van dit soort antigenen; alsmede een tweede, van de eerste zone verwijderde, zone met daarin een materiaal dat met de genoemde met 7 192138 enzym verbonden antilichamen kan reageren onder vorming van een kleurreactie die de aanwezigheid van de genoemde antilichamen aangeeft.
2. Inrichting volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de eerste en de tweede zone naast elkaar zijn ondergebracht.
3. Inrichting volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de eerste zone uit ten minste twee afzonderlijke lagen bestaat waarbij een van deze lagen met enzym verbonden antilichamen bevat en een andere laag specifieke antigenen bevat die in deze laag zijn gebonden en geïmmobiliseerd.
4. Inrichting volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de eerste zone is vervaardigd uit nitrocellulose.
5. Inrichting volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de eerste zone is vervaardigd uit een poreus 10 polymeer gel.
6. Inrichting volgens conclusie 5, met het kenmerk, dat de poreuze gel ten minste een materiaal is uit de groep van polyacrylamide, agarose en collageen gels.
7. Inrichting volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de eerste zone is vervaardigd uit deeltjes met daarin geïmmobiliseerd antigeen of antilichaam dat in een vezelachtige matrix is opgesloten.
8. Inrichting volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de tweede zone uit nitrocellulose is vervaardigd.
9. Inrichting volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de eerste en/of de tweede zone is vervaardigd uit het vezelmateriaal diazobenzyloxymethyl papier.
10. Inrichting voor het aantonen van de aanwezigheid van antilichamen met daarin: een matrix; 20 een eerste zone in de matrix met (a) aan de matrix gebonden en daardoor geïmmobiliseerde antilichamen en (b) met enzym verbonden antigenen die immunologisch met deze antilichamen kunnen reageren, welke antigenen zo in de eerste zone zijn ondergebracht, dat zij uit de eerste zone bij een reactie met door deze zone passerende antilichamen uit deze eerste zone worden verwijderd maar niet uit deze eerste zone worden verwijderd bij afwezigheid van dit soort antilichamen; alsmede 25 een tweede, van de eerste zone verwijderde, zone met daarin een materiaal dat met de genoemde met enzym verbonden antigenen kan reageren onder vorming van een kleurreactie die de aanwezigheid van de genoemde antigenen aangeeft. Hierbij 2 bladen tekening
NL8203946A 1981-10-13 1982-10-12 Inrichting en werkwijze voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen. NL192138C (nl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US31080181 1981-10-13
US06/310,801 US4446232A (en) 1981-10-13 1981-10-13 Enzyme immunoassay with two-zoned device having bound antigens

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NL8203946A NL8203946A (nl) 1983-05-02
NL192138B NL192138B (nl) 1996-10-01
NL192138C true NL192138C (nl) 1997-02-04

Family

ID=23204169

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NL8203946A NL192138C (nl) 1981-10-13 1982-10-12 Inrichting en werkwijze voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen.

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4446232A (nl)
JP (2) JPS5876763A (nl)
BE (1) BE894662A (nl)
CA (1) CA1200483A (nl)
DE (1) DE3237046A1 (nl)
DK (1) DK159407C (nl)
FR (1) FR2514511B1 (nl)
GB (1) GB2111676B (nl)
GR (1) GR76996B (nl)
IE (1) IE53533B1 (nl)
IT (1) IT1149089B (nl)
LU (1) LU84402A1 (nl)
NL (1) NL192138C (nl)
SE (1) SE462606B (nl)

Families Citing this family (211)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5622871A (en) * 1987-04-27 1997-04-22 Unilever Patent Holdings B.V. Capillary immunoassay and device therefor comprising mobilizable particulate labelled reagents
US4446232A (en) * 1981-10-13 1984-05-01 Liotta Lance A Enzyme immunoassay with two-zoned device having bound antigens
US4604348A (en) * 1981-11-19 1986-08-05 New York Blood Center, Inc. Composition for use in immunoassays
US5073484A (en) * 1982-03-09 1991-12-17 Bio-Metric Systems, Inc. Quantitative analysis apparatus and method
GB8305197D0 (en) * 1983-02-24 1983-03-30 Amersham Int Plc Assay methods
JPS59170768A (ja) * 1983-03-17 1984-09-27 Fuji Photo Film Co Ltd 非アイソト−プアツセイ用多層分析要素およびそれを用いるアツセイ方法
US4549655A (en) * 1983-12-05 1985-10-29 E. I. Du Pont De Nemours And Company Container for a layered chemical analysis system
CA1261743A (en) * 1984-07-23 1989-09-26 Shai Inbar Biological diagnostic assay product, and process utilizing labeled fab fragments
US4617265A (en) * 1984-09-19 1986-10-14 Board Of Regents, University Of Texas System Colony blot assay for enterotoxigenic bacteria
US4826759A (en) * 1984-10-04 1989-05-02 Bio-Metric Systems, Inc. Field assay for ligands
DE3445816C1 (de) 1984-12-15 1986-06-12 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Flaechenfoermiges diagnostisches Mittel
US4764459A (en) * 1984-12-28 1988-08-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for determining anti-bodies against herpes simplex virus (HSV) types 1 and 2 in human sera
IT1200382B (it) * 1985-02-08 1989-01-18 Boehringer Biochemia Srl Sistema di rilevazione e/o dosaggio di parametri clinici per via immuno enzimatica
US4740468A (en) * 1985-02-14 1988-04-26 Syntex (U.S.A.) Inc. Concentrating immunochemical test device and method
US4859583A (en) * 1985-02-25 1989-08-22 Amoco Corporation Chemiluminescent immunochemical technique for low molecular weight antigens
US5879881A (en) * 1985-04-04 1999-03-09 Hybritech, Incorporated Solid phase system for use in ligand-receptor assays
US4824784A (en) * 1985-04-08 1989-04-25 Hygeia Sciences, Incorporated Chromogenic solution for immunoassay
WO1986006170A1 (en) * 1985-04-10 1986-10-23 Immunicon Corporation Direct homogeneous assay
US4746631A (en) * 1985-05-09 1988-05-24 Ultra Diagnostics Corporation Immunoassay method, device, and test kit
US4803170A (en) * 1985-05-09 1989-02-07 Ultra Diagnostics Corporation Competitive immunoassay method, device and test kit
US4931385A (en) * 1985-06-24 1990-06-05 Hygeia Sciences, Incorporated Enzyme immunoassays and immunologic reagents
US4774177A (en) * 1985-07-15 1988-09-27 Vet-Test Partners Immunoassay method for detection of antibodies and antigens
US4806311A (en) * 1985-08-28 1989-02-21 Miles Inc. Multizone analytical element having labeled reagent concentration zone
US4806312A (en) * 1985-08-28 1989-02-21 Miles Inc. Multizone analytical element having detectable signal concentrating zone
TW203120B (nl) * 1985-10-04 1993-04-01 Abbott Lab
US4868106A (en) * 1985-10-17 1989-09-19 Konishiroku Photo Industry Co., Ltd. Analytical element and method for determining a component in a test sample
US5500350A (en) * 1985-10-30 1996-03-19 Celltech Limited Binding assay device
GB8526741D0 (en) * 1985-10-30 1985-12-04 Boots Celltech Diagnostics Binding assay device
EP0248892A1 (en) * 1985-12-10 1987-12-16 Murex Corporation Particle-bound binding component immunoassay
US5501949A (en) * 1985-12-10 1996-03-26 Murex Diagnostics Corporation Particle bound binding component immunoassay
US5236826A (en) * 1985-12-10 1993-08-17 Murex Corporation Immunoassay for the detection or quantitation of an analyte
US4868108A (en) * 1985-12-12 1989-09-19 Hygeia Sciences, Incorporated Multiple-antibody detection of antigen
JPH0814582B2 (ja) * 1986-02-20 1996-02-14 富士写真フイルム株式会社 免疫反応物定量用多層分析要素
JPH0750114B2 (ja) * 1986-03-17 1995-05-31 富士写真フイルム株式会社 免疫分析器具を用いる分析方法
US4937188A (en) * 1986-04-15 1990-06-26 Northeastern University Enzyme activity amplification method for increasing assay sensitivity
US5190864A (en) * 1986-04-15 1993-03-02 Northeastern University Enzyme amplification by using free enzyme to release enzyme from an immobilized enzyme material
US4801726A (en) * 1986-04-15 1989-01-31 Northeastern University Repetitive hit-and-run immunoassay and stable support-analyte conjugates; applied to T-2 toxin
US4837145A (en) * 1986-06-09 1989-06-06 Liotta Lance A Layered immunoassay using antibodies bound to transport particles to determine the presence of an antigen
CA1289872C (en) * 1986-06-18 1991-10-01 David L. Woodrum Reversible immobilization of assay reagents in a multizone test device
CA1289876C (en) * 1986-07-15 1991-10-01 Richard R. Anderson Solid phase system incorporating tetrazolium salts for use in ligand-receptor assays
US20010023075A1 (en) * 1992-04-03 2001-09-20 Siu-Yin Wong A immunodiagnositc device having a dessicant incorporated therein
US5763262A (en) * 1986-09-18 1998-06-09 Quidel Corporation Immunodiagnostic device
DE3640318A1 (de) * 1986-11-26 1988-06-09 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren und testtraeger zur bestimmung eines analyten
US4822747A (en) * 1986-12-09 1989-04-18 Miles Inc. Polyacrylamide gel particles having hapten moieties bound thereto as immunoassay reagent
GB8629740D0 (en) * 1986-12-12 1987-01-21 Iq Bio Ltd Immunoassay
ES2004066A6 (es) * 1987-01-21 1988-12-01 Euro Fassel Aktiebolag Metodo para analisis cualitativo y-o cuantitativo de antigenos,anticuerpos yno microorganismos u otras celulas y su correspondiente equipo
AU592174B2 (en) * 1987-02-17 1990-01-04 Genesis Labs, Inc. Immunoassay test strip
AU586552B2 (en) * 1987-02-25 1989-07-13 Genesis Labs, Inc. Dry test strip for devices using oxygen demanding detection system
AU590071B2 (en) * 1987-02-25 1989-10-26 Genesis Labs, Inc. Dry test strips having a red blood cell exclusion layer preventing interference by red blood cells in analyte detection visualization
USRE38430E1 (en) * 1987-03-27 2004-02-17 Becton, Dickinson And Company Solid phase chromatographic immunoassay
CA1303983C (en) * 1987-03-27 1992-06-23 Robert W. Rosenstein Solid phase assay
US4857453A (en) * 1987-04-07 1989-08-15 Syntex (U.S.A.) Inc. Immunoassay device
US4956275A (en) * 1987-04-14 1990-09-11 Molecular Devices Corporation Migratory detection immunoassay
EP1248112A3 (en) * 1987-04-27 2004-08-25 Inverness Medical Switzerland GmbH Immunochromatographic specific binding assay device
US4855240A (en) * 1987-05-13 1989-08-08 Becton Dickinson And Company Solid phase assay employing capillary flow
US5238847A (en) * 1987-05-20 1993-08-24 Boehringer Mannheim Gmbh Test kit and process for the determination of an analyte in a pasty sample
DE3716891A1 (de) * 1987-05-20 1988-12-15 Boehringer Mannheim Gmbh Testkit zur bestimmung eines analyten im stuhl
US4883764A (en) * 1987-07-20 1989-11-28 Kloepfer Mary A Blood test strip
IT1223295B (it) * 1987-08-14 1990-09-19 Boehringer Biochemia Srl Dispositivo e metodo immunodiagnostico
FR2621393B1 (fr) * 1987-10-05 1991-12-13 Toledano Jacques Dispositif de detection immunoenzymatique de substances a partir d'une goutte de sang ou de liquide provenant d'un quelconque milieu biologique
DE3740471A1 (de) * 1987-11-28 1989-06-08 Boehringer Mannheim Gmbh Testtraeger zur analyse einer probenfluessigkeit und verfahren zu seiner herstellung
WO1989005978A1 (en) * 1987-12-14 1989-06-29 Liotta Lance A Layered immunoassay device containing fluid flow barrier
US4870007A (en) * 1987-12-18 1989-09-26 Eastman Kodak Company Immobilized biotinylated receptor in test device, kit and method for determining a ligand
EP0323605B1 (en) * 1987-12-21 1994-01-26 Abbott Laboratories Chromatographic binding assay devices and methods
WO1989006791A1 (en) * 1988-01-21 1989-07-27 Boehringer Mannheim Corporation Apparatus for determining an analyte and method therefor
WO1989006792A1 (en) * 1988-01-21 1989-07-27 Boehringer Mannheim Corporation Method and apparatus for analyte determination
EP0432155A4 (en) * 1988-02-16 1991-08-21 Boehringer Mannheim Corporation Analytical element which avoids premature reaction
USH1664H (en) * 1988-03-09 1997-07-01 Fuji Photo Film Co., Ltd. Analytical element for immunoassay and method for its preparation
FR2630827B1 (fr) * 1988-04-28 1994-06-03 Oris Ind Dispositif et procede pour la determination qualitative et quantitative rapide de la presence d'un ligand reactif dans un fluide
DE3814370A1 (de) * 1988-04-28 1989-11-09 Boehringer Mannheim Gmbh Testtraeger fuer die analyse einer probenfluessigkeit, verfahren zur durchfuehrung einer solchen analyse und herstellungsverfahren
US5013669A (en) * 1988-06-01 1991-05-07 Smithkline Diagnostics, Inc. Mass producible biologically active solid phase devices
US4981785A (en) * 1988-06-06 1991-01-01 Ventrex Laboratories, Inc. Apparatus and method for performing immunoassays
EP0345460B1 (en) * 1988-06-09 1995-09-06 Abbott Laboratories Method and device employing covalently immobilized colored dyes
US5094962A (en) * 1988-06-13 1992-03-10 Eastman Kodak Company Microporous article having a stabilized specific binding reagent, a method for its use and a diagnostic test kit
AU2684488A (en) 1988-06-27 1990-01-04 Carter-Wallace, Inc. Test device and method for colored particle immunoassay
FR2634891B1 (fr) * 1988-08-01 1994-05-06 Biotrol Laboratoires Procede et dispositif pour la determination qualitative et/ou quantitative d'un ligand dans un fluide
US5030555A (en) * 1988-09-12 1991-07-09 University Of Florida Membrane-strip reagent serodiagnostic apparatus and method
US5102788A (en) * 1988-11-21 1992-04-07 Hygeia Sciences, Inc. Immunoassay including lyophilized reactant mixture
DE3842702A1 (de) * 1988-12-19 1990-06-21 Boehringer Mannheim Gmbh Testtraeger zur analytischen untersuchung einer probenfluessigkeit mit hilfe einer spezifischen bindungsreaktion zweier bioaffiner bindungspartner und entsprechendes testverfahren
US5939272A (en) * 1989-01-10 1999-08-17 Biosite Diagnostics Incorporated Non-competitive threshold ligand-receptor assays
US5028535A (en) * 1989-01-10 1991-07-02 Biosite Diagnostics, Inc. Threshold ligand-receptor assay
US5200317A (en) * 1989-02-02 1993-04-06 Abbott Laboratories Method and device for quantitative chromatography
US5045480A (en) * 1989-02-09 1991-09-03 Miles Inc. Gel particles having hapten moieties bound thereto as immunoassay reagent
US6352862B1 (en) * 1989-02-17 2002-03-05 Unilever Patent Holdings B.V. Analytical test device for imuno assays and methods of using same
US5766933A (en) * 1989-04-26 1998-06-16 Diagnostic Products Corporation Method and element for measuring analytes in biological fluids using immobilized binder--analyte labeled complex
DE3941150A1 (de) * 1989-12-13 1991-06-20 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur bestimmung eines analyten
US5252496A (en) 1989-12-18 1993-10-12 Princeton Biomeditech Corporation Carbon black immunochemical label
EP0513209A4 (en) * 1990-01-26 1993-08-25 Us Commerce A method for quantitatively measuring collagenase
US5922615A (en) 1990-03-12 1999-07-13 Biosite Diagnostics Incorporated Assay devices comprising a porous capture membrane in fluid-withdrawing contact with a nonabsorbent capillary network
US5468622A (en) * 1990-04-03 1995-11-21 Immunomatrix, Inc. Salt stabilization of antibody-enzyme conjugates heat-dried into paper
DE4013004C2 (de) * 1990-04-24 1993-10-21 Elvira Schecklies Verfahren zur quantitativen Bestimmung von niedermolekularen organischen Substanzen
US5212060A (en) * 1990-04-27 1993-05-18 Genesis Labs, Inc. Dry test strip comprising a dextran barrier for excluding erythrocytes
US5139934A (en) * 1990-05-25 1992-08-18 Becton, Dickinson And Company Substrate composition and method for solid phase urease immunoassay
DE69119312T2 (de) * 1990-07-18 1997-01-16 Abbott Lab Analyt-Austauschreagenz zur Verwendung in spezifischen Bindungstests, -vorrichtungen und -sätzen
US5166051A (en) * 1990-08-08 1992-11-24 Genesis Labs, Inc. Membranes, membrane overlays for exclusion of erythrocytes, and method for immunoassay of whole blood analytes
US5200321A (en) * 1990-09-07 1993-04-06 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Microassay on a card
AU658374B2 (en) * 1990-09-14 1995-04-13 Biosite Diagnostics Incorporated Antibodies to complexes of ligand receptors and ligands and their utility in ligand-receptor assays
US5143852A (en) * 1990-09-14 1992-09-01 Biosite Diagnostics, Inc. Antibodies to ligand analogues and their utility in ligand-receptor assays
FR2667943B1 (fr) * 1990-10-11 1994-05-13 Jacques Toledano Dispositif et procede pour la determination qualitative et quantitative rapide d'un ligand dans un fluide.
US5166054A (en) * 1991-01-02 1992-11-24 Becton, Dickinson And Company Method for immunoassay using lactoperoxidase, starch and iodine
CA2065719A1 (en) 1991-04-30 1992-10-31 John B. Findlay Nucleic acid amplification and detection methods using rapid polymerase chain reaction cycle
US5607863A (en) * 1991-05-29 1997-03-04 Smithkline Diagnostics, Inc. Barrier-controlled assay device
US5869345A (en) * 1991-05-29 1999-02-09 Smithkline Diagnostics, Inc. Opposable-element assay device employing conductive barrier
US6168956B1 (en) 1991-05-29 2001-01-02 Beckman Coulter, Inc. Multiple component chromatographic assay device
US5468648A (en) * 1991-05-29 1995-11-21 Smithkline Diagnostics, Inc. Interrupted-flow assay device
US5877028A (en) 1991-05-29 1999-03-02 Smithkline Diagnostics, Inc. Immunochromatographic assay device
US5998220A (en) 1991-05-29 1999-12-07 Beckman Coulter, Inc. Opposable-element assay devices, kits, and methods employing them
DE4121493A1 (de) * 1991-06-28 1993-01-07 Draegerwerk Ag Analysevorrichtung zur quantitativen, immunologischen bestimmung von schadstoffen
DE69219686T2 (de) * 1991-07-29 1997-09-11 Mochida Pharm Co Ltd Verfahren und Vorrichtung zur Verwendung in spezifischen Bindungstests
DE4216696C2 (de) * 1992-04-10 1995-01-26 Deutsche Aerospace Verfahren und Vorrichtung zur Empfindlichkeits- und Selektivitätssteigerung bei Immuno-Assays, Molekül-Rezeptor-, DNA-komplementär-DNA- und Gast-Wirtsmolekül-Wechselwirkungs-Assays
DE4217474A1 (de) * 1992-05-27 1993-12-02 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren und Mittel zur Bestimmung eines Analyts
FR2702841B1 (fr) * 1993-03-19 1996-01-26 Toledano Jacques Dispositif et procédé immunologique peptide-anti-peptide.
US5837546A (en) * 1993-08-24 1998-11-17 Metrika, Inc. Electronic assay device and method
FR2709349B1 (fr) 1993-08-25 1995-10-27 Stago Diagnostica Procédé d'identification d'une substance immunologique au moyen d'un système multimembranaire.
US5512448A (en) * 1994-04-28 1996-04-30 Yamazaki; Hiroshi Stabilization of peroxidase conjugates in solution
US5589344A (en) 1994-06-15 1996-12-31 Johnson & Johnson Clinical Diagnostics, Inc. Test kit and method for competitive specific binding assay
US6653066B1 (en) 1994-06-17 2003-11-25 Trinity Biotech Device and method for detecting polyvalent substances
US6686170B1 (en) 1994-08-17 2004-02-03 Abbott Laboratories Assay devices with mobile control reagents
US5597532A (en) * 1994-10-20 1997-01-28 Connolly; James Apparatus for determining substances contained in a body fluid
US5780239A (en) * 1994-11-23 1998-07-14 Carter; Jesse M. Method for the determination of cast in urine
US5569608A (en) * 1995-01-30 1996-10-29 Bayer Corporation Quantitative detection of analytes on immunochromatographic strips
US5739041A (en) * 1995-05-02 1998-04-14 Carter Wallace, Inc. Diagnostic detection device
US6319676B1 (en) 1995-05-02 2001-11-20 Carter Wallace, Inc. Diagnostic detection device and method
WO1997001759A1 (fr) * 1995-06-28 1997-01-16 Popbb Snc Dispositif de test immunologique perfectionne
US5741714A (en) * 1995-07-18 1998-04-21 Immunivest Corporation Detection of bound analyte by magnetic partitioning and masking
US7635597B2 (en) 1995-08-09 2009-12-22 Bayer Healthcare Llc Dry reagent particle assay and device having multiple test zones and method therefor
US5660990A (en) * 1995-08-18 1997-08-26 Immunivest Corporation Surface immobilization of magnetically collected materials
DE19540541A1 (de) * 1995-10-31 1997-05-07 Human Ges Fuer Biochemica Und Testvorrichtung und Testverfahren
DE19703314A1 (de) * 1996-02-09 1997-08-14 Degussa Verfahren zur Herstellung von (S)-Cyanhydrinen
US5968839A (en) * 1996-05-13 1999-10-19 Metrika, Inc. Method and device producing a predetermined distribution of detectable change in assays
US5942407A (en) * 1996-06-25 1999-08-24 Immunomatrix, Inc. Light-emitting immunoassay
US5945345A (en) * 1996-08-27 1999-08-31 Metrika, Inc. Device for preventing assay interference using silver or lead to remove the interferant
US6001658A (en) * 1996-09-13 1999-12-14 Diagnostic Chemicals Limited Test strip apparatus and method for determining presence of analyte in a fluid sample
US5879951A (en) * 1997-01-29 1999-03-09 Smithkline Diagnostics, Inc. Opposable-element assay device employing unidirectional flow
US20050101032A1 (en) * 1997-02-10 2005-05-12 Metrika, Inc. Assay device, composition, and method of optimizing assay sensitivity
US5939252A (en) * 1997-05-09 1999-08-17 Lennon; Donald J. Detachable-element assay device
US5895765A (en) * 1997-06-30 1999-04-20 Bayer Corporation Method for the detection of an analyte by immunochromatography
US6436721B1 (en) 1997-07-25 2002-08-20 Bayer Corporation Device and method for obtaining clinically significant analyte ratios
US6824985B1 (en) * 1997-09-09 2004-11-30 Bayer Corporation Formulation for reducing urea effect for immunochromatography assays using urine samples
US6066446A (en) * 1997-12-19 2000-05-23 Nen Life Science Products, Inc. Assay member and method for its manufacture
US5972595A (en) * 1997-12-19 1999-10-26 Nen Life Science Products, Inc. Enzyme assay using a solid phase substrate
US8062908B2 (en) * 1999-03-29 2011-11-22 Orasure Technologies, Inc. Device for collection and assay of oral fluids
US6303081B1 (en) 1998-03-30 2001-10-16 Orasure Technologies, Inc. Device for collection and assay of oral fluids
ES2264580T3 (es) * 1998-03-30 2007-01-01 Orasure Technologies, Inc. Dispositivo de recoleccion para el analisis en una sola etapa de fluidos orales.
US20060019404A1 (en) * 1998-05-06 2006-01-26 Blatt Joel M Quantitative assay with extended dynamic range
US7799521B2 (en) * 1998-06-24 2010-09-21 Chen & Chen, Llc Thermal cycling
US6780617B2 (en) 2000-12-29 2004-08-24 Chen & Chen, Llc Sample processing device and method
JP3395673B2 (ja) 1998-11-18 2003-04-14 株式会社豊田中央研究所 微小酸素電極を利用した特異的結合対測定方法
US6171295B1 (en) * 1999-01-20 2001-01-09 Scimed Life Systems, Inc. Intravascular catheter with composite reinforcement
US7577469B1 (en) * 1999-03-11 2009-08-18 Jack L. Aronowitz Noninvasive transdermal systems for detecting an analyte in a biological fluid and methods
DE10003734A1 (de) * 2000-01-28 2001-08-02 Bosch Gmbh Robert Detektionsverfahren und -vorrichtung
US6998273B1 (en) 2000-02-09 2006-02-14 A-Fem Medical Corporation Collection device for lateral flow chromatography
US6365417B1 (en) 2000-02-09 2002-04-02 A-Fem Medical Corporation Collection device for lateral flow chromatography
EP1281089A1 (en) * 2000-02-23 2003-02-05 Besst-Test APS METHOD FOR CORRELATING BLOOD COAGULATION ACTIVITY WITH MARKERS IN BODY FLUIDS, e.g. URINE
US6699722B2 (en) 2000-04-14 2004-03-02 A-Fem Medical Corporation Positive detection lateral-flow apparatus and method for small and large analytes
RU2278612C2 (ru) * 2000-07-14 2006-06-27 Лайфскен, Инк. Иммуносенсор
US8124348B2 (en) 2000-08-23 2012-02-28 Jonathan Zmuda Oral fluid rapid assay for hepatitis C virus (HCV) antibodies using non-antibody labeling of IgA molecules recognizing HCV peptide epitopes
US6584781B2 (en) 2000-09-05 2003-07-01 Enersea Transport, Llc Methods and apparatus for compressed gas
US7087389B2 (en) * 2001-02-09 2006-08-08 Council Of Scientific & Industrial Research Highly cost-effective analytical device for performing immunoassays with ultra high sensitivity
DE10108680A1 (de) * 2001-02-23 2002-09-26 Biognostic Ag Affinitätsassay zur schnellen Untersuchung biologischer Materialien
US20050266499A1 (en) * 2001-04-25 2005-12-01 Rockeby Biomed Corporation, Ltd. Method and apparatus for testing for presence or absence of select biological substances
AT5044U1 (de) * 2001-05-10 2002-02-25 Medsystems Diagnostics Gmbh Quantitativer einschritt immuntest in lyophilisierter form
US7531362B2 (en) 2001-06-07 2009-05-12 Medmira Inc. Rapid diagnostic assay
US7300633B2 (en) 2001-07-25 2007-11-27 Oakville Hong Kong Company Limited Specimen collection container
US7270959B2 (en) 2001-07-25 2007-09-18 Oakville Hong Kong Company Limited Specimen collection container
WO2003022435A2 (en) 2001-09-11 2003-03-20 Iquum, Inc. Sample vessels
US20030124618A1 (en) * 2001-12-04 2003-07-03 Lattec I/S Device for analysing analyte compounds and use hereof
US7459127B2 (en) * 2002-02-26 2008-12-02 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Method and apparatus for precise transfer and manipulation of fluids by centrifugal and/or capillary forces
US20030180814A1 (en) * 2002-03-21 2003-09-25 Alastair Hodges Direct immunosensor assay
US20060134713A1 (en) * 2002-03-21 2006-06-22 Lifescan, Inc. Biosensor apparatus and methods of use
JP3637392B2 (ja) * 2002-04-08 2005-04-13 独立行政法人産業技術総合研究所 燃料電池
US20030232401A1 (en) * 2002-06-12 2003-12-18 Pugia Michael J. Bacterial test method by glycated label binding
US7108993B2 (en) * 2002-07-19 2006-09-19 Bayer Healthcare Llc Use of dual conjugated labels in the elimination of serum interference in immunochromatographic assays
US20040038197A1 (en) * 2002-08-22 2004-02-26 Usda Ars Ott Extraction and concentration method
US20040092036A1 (en) * 2002-09-11 2004-05-13 Lattec I/S Device for analysing analyte compounds and use hereof
US7093166B2 (en) * 2002-10-08 2006-08-15 Dell Products L.P. Method and apparatus for testing physical memory in an information handling system under conventional operating systems
US7125711B2 (en) * 2002-12-19 2006-10-24 Bayer Healthcare Llc Method and apparatus for splitting of specimens into multiple channels of a microfluidic device
US7094354B2 (en) * 2002-12-19 2006-08-22 Bayer Healthcare Llc Method and apparatus for separation of particles in a microfluidic device
AU2003293562A1 (en) * 2002-12-26 2004-07-22 Meso Scale Technologies, Llc Methods, compositions and kits for biomarker extraction
US7560272B2 (en) 2003-01-04 2009-07-14 Inverness Medical Switzerland Gmbh Specimen collection and assay container
US7718421B2 (en) 2003-02-05 2010-05-18 Iquum, Inc. Sample processing
US8101429B2 (en) * 2003-06-03 2012-01-24 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Native analyte as a reference in lateral flow assays
US20040265171A1 (en) * 2003-06-27 2004-12-30 Pugia Michael J. Method for uniform application of fluid into a reactive reagent area
US20040265172A1 (en) * 2003-06-27 2004-12-30 Pugia Michael J. Method and apparatus for entry and storage of specimens into a microfluidic device
US20080257754A1 (en) * 2003-06-27 2008-10-23 Pugia Michael J Method and apparatus for entry of specimens into a microfluidic device
US7347617B2 (en) * 2003-08-19 2008-03-25 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Mixing in microfluidic devices
US7517495B2 (en) 2003-08-25 2009-04-14 Inverness Medical Switzerland Gmbh Biological specimen collection and analysis system
US7943395B2 (en) * 2003-11-21 2011-05-17 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Extension of the dynamic detection range of assay devices
US7150995B2 (en) * 2004-01-16 2006-12-19 Metrika, Inc. Methods and systems for point of care bodily fluid analysis
US20050227370A1 (en) * 2004-03-08 2005-10-13 Ramel Urs A Body fluid analyte meter & cartridge system for performing combined general chemical and specific binding assays
US7319032B2 (en) * 2004-04-22 2008-01-15 Medtox Non-sugar sweeteners for use in test devices
DE102006058374A1 (de) * 2006-12-08 2008-07-03 Biosensor Gmbh Analyseverfahren und portables Analysegerät
WO2010011460A1 (en) * 2008-07-22 2010-01-28 Siemens Healthcare Diagnostic Inc. Disease specific diagnostic aid
US8012770B2 (en) 2009-07-31 2011-09-06 Invisible Sentinel, Inc. Device for detection of antigens and uses thereof
CN102612555A (zh) 2009-10-09 2012-07-25 因威瑟堡善迪诺有限公司 用于检测抗原的装置及其应用
US9588111B2 (en) * 2009-11-24 2017-03-07 Ingibio, Ltd. Membrane biosensor having multi-hole film attached thereto and method for measuring immunological reaction or enzymatic reaction using the same
US8956859B1 (en) 2010-08-13 2015-02-17 Aviex Technologies Llc Compositions and methods for determining successful immunization by one or more vaccines
EP3608021A3 (en) 2011-01-27 2020-04-22 Invisible Sentinel, Inc. Analyte detection devices, multiplex and tabletop devices for detection of analytes, and uses thereof
WO2013088429A1 (en) * 2011-12-13 2013-06-20 Kieran Gerard Walshe A homogeneous competitive lateral flow assay
US8293487B1 (en) * 2012-01-06 2012-10-23 Jiandi Zhang Zestern, a simple, fast, specific and quantifiable improvement of immunodetection process
CN104919055B (zh) 2012-03-09 2018-06-19 因威瑟堡善迪诺有限公司 用单一信号检测多种分析物的方法和组合物
US20130280696A1 (en) 2012-04-23 2013-10-24 Elliott Millenson Devices and methods for detecting analyte in bodily fluid
US9528941B2 (en) 2012-08-08 2016-12-27 Scanadu Incorporated Method and apparatus for determining analyte concentration by quantifying and interpreting color information captured in a continuous or periodic manner
CN104969068B (zh) 2012-08-08 2019-06-18 思勘度股份有限公司 用于在自动校准环境中执行及量化由特定浓度的生物分析物诱发的色彩改变的方法及设备
US9285323B2 (en) 2012-08-08 2016-03-15 Scanadu Incorporated Quantifying color changes of chemical test pads induced concentrations of biological analytes under different lighting conditions
CN114891855A (zh) * 2013-12-06 2022-08-12 哈佛大学校长及研究员协会 基于纸的合成基因网络
EP3180596A4 (en) 2014-08-15 2018-09-26 Scanadu Incorporated Precision luxmeter methods for digital cameras to quantify colors in uncontrolled lighting environments
US9927443B2 (en) 2015-04-10 2018-03-27 Conquerab Inc. Risk assessment for therapeutic drugs
WO2017079653A2 (en) 2015-11-06 2017-05-11 Vetica Labs, Inc. Methods of detecting inflammatory markers and treating inflammatory conditions in companion animals
US9903866B2 (en) 2016-04-05 2018-02-27 Conquerab Inc. Portable devices for detection of antibodies against therapeutic drugs
WO2020241871A1 (ja) * 2019-05-30 2020-12-03 国立大学法人北海道大学 物質検出装置

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL154600B (nl) * 1971-02-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen.
US3654090A (en) * 1968-09-24 1972-04-04 Organon Method for the determination of antigens and antibodies
US3723064A (en) * 1971-07-26 1973-03-27 L Liotta Method and device for determining the concentration of a material in a liquid
FI49086C (fi) * 1973-01-25 1975-03-10 Matti Antero Reunanen Radioimmunologinen määritysmenetelmä.
US3926732A (en) * 1973-02-16 1975-12-16 Alfa Laval Ab Method for assaying catalase in milk and other liquids
US3992158A (en) * 1973-08-16 1976-11-16 Eastman Kodak Company Integral analytical element
US4039652A (en) * 1973-10-11 1977-08-02 Miles Laboratories, Inc. Column method of immunoassay employing an immobilized binding partner
SE388694B (sv) * 1975-01-27 1976-10-11 Kabi Ab Sett att pavisa ett antigen exv i prov av kroppvetskor, med utnyttjande av till porost berarmaterial bundna eller adsorberande antikroppar
CA1054034A (en) * 1975-06-20 1979-05-08 Barbara J. Bruschi Multilayer analytical element
US4042335A (en) * 1975-07-23 1977-08-16 Eastman Kodak Company Integral element for analysis of liquids
US4016043A (en) * 1975-09-04 1977-04-05 Akzona Incorporated Enzymatic immunological method for the determination of antigens and antibodies
US4059407A (en) * 1976-04-14 1977-11-22 Becton, Dickinson And Company Disposable chemical indicators
US4094647A (en) * 1976-07-02 1978-06-13 Thyroid Diagnostics, Inc. Test device
JPS5344622A (en) * 1976-09-30 1978-04-21 Mochida Pharm Co Ltd Immunologically measuring method
US4200690A (en) * 1976-12-16 1980-04-29 Millipore Corporation Immunoassay with membrane immobilized antibody
CA1095819A (en) * 1977-01-14 1981-02-17 Eastman Kodak Company Element for analysis of liquids
US4277560A (en) * 1978-10-24 1981-07-07 Technicon Instruments Corporation Enzyme immunoassays using immobilized reagents in a flowing stream
JPH0142041Y2 (nl) * 1978-12-11 1989-12-11
US4258001A (en) * 1978-12-27 1981-03-24 Eastman Kodak Company Element, structure and method for the analysis or transport of liquids
US4181501A (en) * 1979-03-26 1980-01-01 General Electric Company Method and apparatus for measuring antibody levels
US4264560A (en) * 1979-12-26 1981-04-28 Samuel Natelson Clinical analytical system
JPS5767860A (en) * 1980-10-15 1982-04-24 Fuji Photo Film Co Ltd Material for multilayer analysis
US4446232A (en) * 1981-10-13 1984-05-01 Liotta Lance A Enzyme immunoassay with two-zoned device having bound antigens

Also Published As

Publication number Publication date
IE53533B1 (en) 1988-12-07
DK159407B (da) 1990-10-08
FR2514511A1 (fr) 1983-04-15
DE3237046A1 (de) 1983-04-21
GR76996B (nl) 1984-09-04
IT1149089B (it) 1986-12-03
JPH0464062A (ja) 1992-02-28
DK159407C (da) 1991-04-02
LU84402A1 (fr) 1983-06-13
GB2111676A (en) 1983-07-06
IT8249171A0 (it) 1982-09-27
CA1200483A (en) 1986-02-11
JPH0416745B2 (nl) 1992-03-25
BE894662A (nl) 1983-04-11
SE8205751L (sv) 1983-04-14
FR2514511B1 (fr) 1986-02-21
IE822464L (en) 1983-04-13
JPS5876763A (ja) 1983-05-09
DE3237046C2 (nl) 1988-08-04
DK451982A (da) 1983-04-14
US4446232A (en) 1984-05-01
SE8205751D0 (sv) 1982-10-08
NL192138B (nl) 1996-10-01
NL8203946A (nl) 1983-05-02
GB2111676B (en) 1985-08-21
SE462606B (sv) 1990-07-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NL192138C (nl) Inrichting en werkwijze voor het aantonen van de aanwezigheid van antigenen.
JP3034999B2 (ja) 補足的な視覚シグナルイムノアッセイ
EP0143574B1 (en) Assay method and kit for whole blood samples
JPH0278934A (ja) 液体試料の成分を分析測定するためのテスト担体
IT9067625A1 (it) Dispositivo e materiali per immunoanalisi.
US6531323B1 (en) Agglutination assay method and element in a dry system
JP2576910B2 (ja) 免疫分析要素および免疫分析方法
FR2890173A1 (fr) Dispositif de determination d'un analyte dans un echantillon liquide par un test sandwich et un test de competition
EP0564494A1 (en) TEST PROCEDURE AND REAGENT SET THEREFOR.
JPS63142267A (ja) 試料からの分析物を測定する方法および試験担体
EP0579250B1 (en) Homogeneous immunoassay, enzyme-labelled antibody and element
WO1989005978A1 (en) Layered immunoassay device containing fluid flow barrier
US5266460A (en) Method of preparing immunological analytical element
JPS63210664A (ja) 酸素要求検出系を用いる装置のための乾燥試験片及び被検流体中の分析成分の検出方法
EP0253581B1 (en) Analytical element having water-soluble polymers and determinations using same
JPH04318462A (ja) 固相生物学的特異反応測定法およびそのための器具
US5603898A (en) Dry-type analytical element for immunoassay
JP2002214236A (ja) 血中抗原検出方法及び装置
JPH09502799A (ja) マルチメンブランシステムを用いる免疫物質の固定方法
JP2616805B2 (ja) 乾式免疫分析要素
USH1664H (en) Analytical element for immunoassay and method for its preparation
JPH10282103A (ja) 免疫分析要素および免疫分析方法
JPH0283448A (ja) 免疫測定方法
JPH10300751A (ja) 免疫分析要素
JPH01229968A (ja) 乾式免疫分析要素

Legal Events

Date Code Title Description
A85 Still pending on 85-01-01
BA A request for search or an international-type search has been filed
BB A search report has been drawn up
BC A request for examination has been filed
V4 Discontinued because of reaching the maximum lifetime of a patent

Free format text: 20021012