JPH0750114B2 - 免疫分析器具を用いる分析方法 - Google Patents
免疫分析器具を用いる分析方法Info
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- JPH0750114B2 JPH0750114B2 JP61058764A JP5876486A JPH0750114B2 JP H0750114 B2 JPH0750114 B2 JP H0750114B2 JP 61058764 A JP61058764 A JP 61058764A JP 5876486 A JP5876486 A JP 5876486A JP H0750114 B2 JPH0750114 B2 JP H0750114B2
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Description
［産業上の利用分野］ 本発明は抗原抗体反応を利用する免疫分析（イムノアッ
セイ）用の乾式分析器具を用いる免疫分析方法に関する
もので、更に詳しくは、抗体（又は抗原）とラベル抗原
（又はラベル抗体）とからなる免疫分析試薬のうち、前
者を担体に固定して水不溶出性にしたマトリックスを後
者と担体に保持させて水溶出可能にしたマトリックスと
の２者を組合せた免疫分析用器具と、更にこれにマーカ
ー測定用乾式分析要素（分析エレメント）を加えた免疫
分析用乾式分析器具を併用する乾式の免疫分析方法であ
る。 ［従来技術とその問題点］ 体液中の薬物、内分泌成分（ホルモン、ペプチド等）、
蛋白その他のアナライト（被検成分、又は分析対象成
分）を抗原担体反応（免疫反応）を利用して測定するイ
ムノアッセイ法は、次の文献に見られるように周知のこ
とである。 イムノアッセイ手法全般について： 宮井 潔：「ぶんせき」1985,79−88 日本臨床病理学会編：「臨床病理臨時増刊特集」第53号
（1983） 酵素イムノアッセイについて： D.Monroe:Anal.Chem.56,920A−931A（1984） 石川英治ら：「酵素免疫測定法」第２版（医学書院、19
82年発行） 蛍光イムノアッセイについて： 渡辺冨久子ら：「検査と技術」９,583−587（1981） I.Hemmilae:Clin.Chem.,31,359−370（1985） 血中薬物濃度測定について： 上能伊久雄：「ファルマシア」21,126−132（1985） これらの諸イムノアッセイ法のうち、本発明の器具と方
法を特に有効に利用できるのは、酵素又は蛍光体等をマ
ーカーとして標識したラベル抗原やラベル抗体などのラ
ベル体を利用する競合法・不均一系のイムノアッセイ法
である。この方法は定量性能は良好な定量法であるが、
操作はすべて湿式（すなわち水溶液を用いる分析方法）
であり、かつ定量反応の途中で生成する抗原抗体反応の
結合体（バウンド,Bと略す）とフリーのラベル体（Ｆと
略す）とを分離する操作（B/F分離と略す）が必要で、
操作の煩雑さが欠点である。 競合法・均一系のイムノアッセイ法についても、不均一
系と同様に本発明の器具と方法に応用すれば、容易にか
つ確実にこれをドライ化することができることは勿論で
あり、非競合法、逐次飽和法なども本発明の器具と方法
に適宜応用することが可能である。 定量試薬をドライの形（乾式分析要素）で供給すること
は公知である。例えば生化学検査試薬組成物を含有する
錠剤や生化学検査試薬組成物を含浸含有させた濾紙の形
態を乾式分析要素が例えば次の特許明細書に記載されて
いる。 特公昭31−8850、特開昭48−84963、特開昭58−62561、
特開昭59−97056、DE 3 048 799A しかしこれらは分析に必要な試薬組成物を単にドライ形
にして、使用時、試薬成分全部が水中に容易に容出する
ようにしたものに過ぎず、イムノアッセイに利用しても
B/F分離操作を省略することはできない。イムノアッセ
イにおいて、B/F分離操作をなくすために必要な試薬成
分のうち、主として抗体をビーズ、試験管内壁、マイク
ロカプセル内等に固定した、いわゆる固相法イムノアッ
セイも例えば次の文献に記載されていて公知である。 宮井 潔：「臨床検査」22,1219−1229（1978） 上能伊久雄ら：「ファルマシア」21,126−132（1985） 米田ら：「臨床検査：機器・試薬」８,1283−1289（198
5） E.P.Halpern et al:Clin.Chem.,25,1561−1563（1979） G.Samuel et al:Clin.Chem.,25,168−170（1983） しかし、これらの方法は、抗原と抗体のうちいずれか一
方を固定してB/F分離操作をなくしたものに過ぎず、他
の試薬成分は水溶液として供給し、かつマーカーの測定
操作も湿式法によるもので、簡単な方法とは云い難い。 又Clin.Chem.,31,910−911（1985）記載の、血清中の、
薬物検査用のドライ多層エンザイムイムノアッセイエレ
メントは、エレメント（分析要素）の層中に抗体を固定
し、ラベル抗原は抗原と共に試験管から水溶液として供
給する方式で、この分析エレメントは薬物ごとにそれに
対応する抗体を組み込む構造のために、薬物ごとに異な
るエレメントをつくることが必要で、エレメントの種類
が多数であるのが欠点である。 ［発明の目的］ 本発明の目的は、煩雑な手順を要する競分法・不均一系
ノムノアッセイ法を改良し、試薬の調製と秤量操作、B/
F分離操作等が不要な簡便・ドライ（乾式）操作によっ
て、試料中の抗原物質（又は抗体物質）を分析すること
ができるイムノアッセイ用器具を用いるイムノアッセイ
法を提供することにある。 ［発明の構成］ 本発明の免疫分析方法は、 （１）分析操作時に水又は抗原を含む水性液体試料と
接触したときに抗体が離脱し溶解しないように担体に固
定されて乾燥された抗体固定マトリックス、 水又は抗原を含む水性液体試料と接触したときにラベル
抗原が離脱し溶解するように担体に保持され乾燥された
ラベル抗原保持マトリックス の２者を有する免疫分析器具を用い、 前記抗体固定マトリックスと前記ラベル抗原保持マト
リックスとをアナライト抗原を含む水性液体試料に浸漬
して前記ラベル抗原保持マトリックスから前記ラベル抗
原を離脱させ、 水性液体試料に含まれる抗原と前記ラベル抗原とを前
記抗体固定マトリックスの前記固定抗体に競合結合反応
させ、 水不透過性透明支持体、親水性ポリマーバインダーを
含有する層及び多孔性展開層をこの順に有する多層分析
要素であって、前記液体試料中に残存するラベル抗原の
量をラベルをマーカーとして光学的に測定することがで
きる試薬組成物を前記親水性ポリマーバインダーを含有
する層又は要素内に設けられる他の層に含む乾式分析要
素の前記展開層の上に前記結合反応後の前記液体試料の
少なくとも一部を供給し、 ついで透明支持体側から前記多層分析要素内の光学濃
度を反射測光するプロセスを含む比色法により前記ラベ
ル抗原のラベルをマーカーとして、前記液体試料中に残
存する結合反応しなかったラベル抗原の量を測定するこ
とにより、 水性液体試料中のアナライト抗原含有量を定量する方
法、 並びに、 （２）分析操作時に水又は抗体を含む水性液体試料と
接触したときに抗原が離脱し溶解しないように担体に固
定されて乾燥された抗原固定マトリックス、 水又は抗体を含む水性液体試料と接触したときにラベル
抗体が離脱し溶解するように担体に保持され乾燥された
ラベル抗体保持マトリックス、 の２者を有する免疫分析器具を用い、 前記抗体固定マトリックスと前記ラベル抗体保持マト
リックスとをアナライト抗体を含む水性液体試料に浸漬
して前記ラベル抗体保持マトリックスから前記ラベル抗
体を離脱させ、 水性液体試料に含まれる抗体と前記ラベル抗体とを前
記抗原固定マトリックスの前記固定抗原に競合結合反応
させ 水不透過性透明支持体、親水性ポリマーバインダーを
含有する層及び多孔性展開層をこの順に有する多層分析
要素であって、前記液体試料中に残存するラベル抗体の
量をラベルをマーカーとして光学的に測定することがで
きる試薬組成物を前記親水性ポリマーバインダーを含有
する層又は要素内に設けられる他の層に含む乾式分析要
素の前記展開層の上に前記結合反応後の前記液体試料の
少なくとも一部を供給し、 ついで透明支持体側から前記多層分析要素内の光学濃
度を反射測光するプロセスを含む比色法により前記ラベ
ル抗体のラベルをマーカーとして、前記液体試料中に残
存する結合反応しなかったラベル抗体の量を測定するこ
とにより、 水性液体試料中のアナライト抗体含有量を定量する方
法、である。 本発明の分析方法に用いる免疫分析器具は、抗体固定マ
トリックスとラベル抗原保持マトリックスとの２者を組
合せたドライの免疫試薬組成物含有分析器具（又は成形
物）、又は前記分析器具にマーカー測定用のドライ分析
要素（エレメント）を加えたものからなる分析器具であ
る。ドライとは実質的な乾式（免疫試薬組成物が実質的
に乾燥状態で分析器具中に含有されている形態）から見
かけ上の乾式（免疫試薬組成物は半乾燥状態又は水溶
液、濃縮水溶液状態で分析器具中に含有されている形態
で、分析操作に免疫分析試薬組成物含有水溶液は用いな
い）までの範囲を含む。ドライの分析操作では液体を扱
うのは分析器具への水性液体試料の点着又はスポッティ
ングだけである。 抗体固定マトリックスは、分析操作時に抗体が水性液体
試料中の諸成分とは容易に接触することができるが、抗
体自身は水性液体試料中に離脱、溶出することがないよ
う担体に固定されていたものである。このマトリックス
は、抗体と抗原及びラベル抗原の３者間の競合的な結合
反応が行われる場合であり、かつ結合物（Ｂ）を水に溶
出しないよう固持する機能を持つもので、結果的に、結
合物は抗体マトリックス上にのみ存在し、未反応のフリ
ーのラベル抗原は水中に存在することとなり、巧まずし
てB/F分離操作を必要としない方法になるものである。 ラベル抗原保持マトリックスは、ラベル抗原を担体に一
時的に保持しているだけで、水につけた時ラベル抗原が
速やかに水中に溶媒することができるものである。この
ようなマトリックスは、従来のテストストリップの製法
に準じて製造することができるので、湿式法シングルバ
イヤル方式の試薬に較べ容積、精度、素材、工程等の諸
観点で有利であることは勿論である。上記のマトリック
スは抗体を担体に固定し、ラベル抗原を担体に保持させ
た組合わせであるが、逆に抗原を固定しラベル抗体を保
持した組合せでもよい（以後の説明ではこの逆の組合せ
は省略するが、当然これを含む）。 本発明で用いる免疫試薬の抗原、抗体とは一般的なもの
から、低分子化合物（ハプテン）、レセプター、補体、
ウィルス、その他までを含む広義の抗原様物質と抗体様
物質を意味し、相互に特異の親和結合性がある組合せの
ものを意味する。ラベル抗原、ラベル抗体とは、抗原抗
体反応後に未反応の残余の抗原や抗体の量を測定するの
に好都合なよう、抗原や抗体に直接に又は間接にマーカ
ー（標識物）をラベル（標識）したものである。マーカ
ーとしては、酵素、補酵素、蛍光物質、色素等公知のマ
ーカーから適宜に選択して用いることができる。これら
のラベル体は、ラベルされていない抗原や抗体と同様、
相手になる抗体や抗原と特異親和性を保有しているもの
である。 ラベルをマーカーとして測定する乾式分析要素（乾式分
析エレメントとも称される。以下ではマーカー分析要素
ということがある。）とはラベル体中のラベル物質をマ
ーカーとしてラベル体の量を測定することができる分析
要素で、例えばB.Walter:Anal.Chem.,55,498A−514A（1
983）;J.N.Eikenberry:Clin.Chem.,29,1247（1983）に
記載のように、マーカーの定量に必要な試薬組成物が含
浸含有された濾紙又はテストストリップ、又は試薬組成
物が層内に配合された多層分析要素を意味する。これら
の分析要素はラベル体水溶液をその上に付着（点着又は
スポッティング）させるだけで、その要素内部で分析反
応が進行し、マーカーの量を測定できるものである。抗
原にかかわりなく、ラベル体のマーカーを共通化すれ
ば、１種類の分析要素だけで、多くの抗原を定量するこ
とができるので、測定機も簡易化することができる。 本発明の器具を用いて水性液体試料中の抗原を測定する
ためには、水性液体試料用希釈液の一定量を試験管に取
り、その中に抗体固定マトリックス片とラベル抗原保持
溶出マトリックス片とを入れ、一定時間撹拌しインキュ
ベーションする。次に試験管中の液体部分の一定量をマ
ーカー分析要素の上に点着する。分析要素での発色光学
濃度は水性液体試料中の抗原量と相関するので、その光
学濃度を測定して比色法の原理で水性液体試料中の抗原
量を知ることができる。この方法は試験管中の液体部
分、すなわち抗原抗体反応（免疫反応）後に、反応に与
らなかった残余、即ちフリーのラベル抗原のマーカーを
測定して抗原を定量する方法であるが、逆に抗体固定マ
トリックス上の、抗原抗体反応結合物中のアーカーを指
標にして抗原を定量することも勿論可能である。かくの
如く、本発明の免疫分析器具を用いれば分析操作者は試
薬溶液の調製、秤量、B/F分離等の煩雑な操作なしに免
疫分析が遂行でき、更にドライのマーカー分析要素を併
用すれば比色定量までも湿式法を用いることなく、水性
液体試料中の抗原や抗体を簡易かつドライ法で定量する
ことができる。 ［発明の構成の詳細な説明］ 本発明の分析方法に用いる免疫分析器具において、抗体
を担体に固定したドライマトリックスは、担体として粒
状、球状、平面状のプラスチック、ガラス、繊維、ゲル
状物等、分析上有害な成分を含むかあるいは有害な成分
を放出するもの以外は広く利用できるが、天然繊維又は
合成ポリマー繊維からの抄造濾紙、不織布、微粒子包含
微多孔性シート、バインダ表面をもつポリマーフィル
ム、メンブランフィルタ等の微多孔性シート状物で比表
面積の大きいものが好ましい。抗体をこれらの担体に固
定する方法は公知の方法によることができる。例えば濾
紙に抗体を固定するには、特開昭57−200862明細書に記
載の如くBrCNで活性化した濾紙を用いる方法によること
ができる。この濾紙は切断して、１回分の抗体固定濾紙
片とする。あるいは適当な大きさの濾紙片をあらかじめ
用意しその上に定量１回分の抗体やラベル抗原液を別々
の紙片に、又は１枚の紙片に重複しないよう滴下し乾燥
する方法もある。このようなシートの製造や保存は生化
学検査要素として公知のテストストリップと同様にして
行うことができるので大変有利である。 次に、ラベル抗原を保持・溶出するマトリックスも、前
記抗体固定マトリックスに準じた形態を採ることができ
る。。但しラベル抗原が容易にマトリックスから溶出す
るよう、ラベル抗原を濾紙に保持させるときに、例え
ば、易水溶液性バインダーであるゼラチンやポリ−Ｎ−
ビニルピロリドンのような親水性ポリマーバインダーと
ラベル抗原を含有する水溶液中に濾紙を浸漬した後これ
を引上げ、凍結乾燥、低温乾燥等の公知の乾燥方法のう
ちの適当な乾燥方法によって乾燥シートとなし、切断し
てシート片となす。このようにして調製されたラベル抗
原含有シートは水に接触したとき、分析時間内にラベル
抗原が容易に水に溶出するものである。 この抗体固定マトリックスとラベル抗原保持マトリック
スに用いる免疫試薬組成物は、アナライト抗原別に、個
々に選択して用いることが必要である。本発明の免疫分
析器具を用いる免疫分析方法では２つのマトリックスを
水性液体試料に同時に接触させる方が、分析操作を簡便
にする。そのために次の如きストリップの例がある。第
１図の如く、抗体固定マトリックス11と、ラベル抗原保
持マトリックス12とを支持体13の上に並置したストリッ
プ10、第２図の如く、抗体固定マトリックス21とラベル
抗原保持マトリックス22とが支持体23の上に積層された
ストリップ20（この態様では分析操作時まで抗体とラベ
ル抗原の両試薬成分が接触することがないようドライシ
ートの形で積層される）、第３図の如く、抗体固定マト
リックス31と、ラベル抗原保持マトリックス32とを支持
体33の両面に配置固定したストリップ30、第４図の如
く、支持体43に直接に部分的に抗体を含浸固定した抗体
固定マトリックス領域41と、ラベル抗原を含浸保持させ
たラベル抗原保持マトリックス領域42とを有する含浸ス
トリップ40（この態様では製造時両試薬成分が混合する
ことがないよう水不浸透性のバリヤバンド（バリヤ領域
帯）44をあらかじめ設けた多孔体を用いるのが好まし
い）等が例挙される。これらのストリップは握り部分を
つけてハンドリングし易したことが特徴であるが、握り
部分をなくして単なるシート型や直方体型にして、試験
管中又は水性液体試料中に投入する形態にすることもで
きる。このような形態も含めてストリップ（試薬ストリ
ップ、テストストリップ）という。又別の形態として、
抗体はビーズや試験管内壁に固定し、ラベル抗原は濾紙
に保持されたシート片とする形式も可能であり、又逆の
形式にすることもできる。 次に、フリーのラベル抗原を測定するための、ドライの
マーカー分析要素の例として、たとえばマーカーがグル
コースオキシダーゼ酵素（GOD）である場合はGOD活性を
測定することができるよう、試薬組成物としてグルコー
ス（基質）、ペルオキシダーゼ、テトラメチルベンジジ
ンロイコ色素（ロイコ色素のかわりに、４−アミノアン
チピリン又はその誘導体等の色原体と2,7−ジヒドロキ
シナフタレン、3,5−ジクロロ−２−ヒドロキシベンゼ
ンスルホン酸等ナフトール誘導体又はフェノール等のカ
プラーとの組合せを用いることもできる）、pHバッファ
ー等のGOD活性測定用呈色試薬組成物をストリップ又は
多層分析要素に含有させたものを用いることができる。
第５図右に示したものは多層分析要素であるマーカー分
析要素50で、その構成は、上から順に、前記の試薬組成
物を含有する試薬展開層56、吸水層（兼検出層）54、水
不透過性透明支持体52が一体に積層されており、分析に
当っては、抗原抗体反応後の残余ラベル抗原含有液70を
展開層に点着し、ラベル抗原の量に相関して生成した色
素の光学濃度は透明支持体側52から反射測光により測定
する。 マーカー分析用多層分析要素は、特開昭55−164356、特
開昭57−66359、特開昭60−222769、特開昭57−14825
0、特開昭57−125847、特公昭53−21677、米国特許3 99
2 158、特開昭55−90859、特開昭61−4959等に記載の水
不透過性透明支持体の上に、ゼラチンに代表される親水
性ポリマーバインダー中に呈色（発色）試薬組成物が分
散含有されている呈色（発色）試薬層と多孔性展開層の
少なくとも２層がこの順に積層一体化されている一体型
多層分析要素、特開昭59−12095、特開昭60−222769、
特開昭60−222760、特開昭61−41967、等に記載の水不
透過性透明支持体の上にゼラチン又はポリビニルアルコ
ール等の親水性ポリマーバインダーを主成分とする吸水
層と呈色（発色）試薬組成物が分散又は含浸され含有さ
れている多孔性の試薬展開層の少なくとも２層がこの順
に積層一体化されている一体型多層分析要素、特開昭59
−12095、特開昭60−222769、特開昭60−222760、特開
昭61−41967、特公昭58−18628等に記載の水不透過性透
明支持体の上にゼラチンを主成分とする検出層、ポリマ
ー媒染剤を主成分とする検出層又は媒染剤又はポリマー
媒染剤がゼラチン、ポリビニルアルコール等の親水性ポ
リマーバインダーの中に含有されている検出層と呈色
（発色）試薬組成物が分散又は含浸され含有されている
多孔性の試薬展開層の少なくとも２層がこの順に積層一
体化されている一体型多層分析等と同様の構成を有する
乾式分析要素である。マーカー分析用乾式分析要素はこ
れらの諸特許明細書に記載の方法に従って調製すること
ができる。 ラベル体のマーカー酵素としては、アルカリホスファタ
ーゼ（ALP），グルコース−６−ホスフェートデヒドロ
ゲナーゼ（G6PDH）、ガラクトースオキシダーゼ等を用
いるときはそれぞれの酵素をを定量できる試薬組成物を
含有する分析要素を用いる。基質として蛍光基質を用い
る場合には、J.L.Giegel et al.:Clin.Chem.,28,1894−
1898（1982）等に記載の公知の方法による蛍光測定法に
よることもできる。 本発明の分析器具を用いる水性液体試料中の抗原分析の
具体例として、血清中のテオフィリン濃度の分析例を示
す。この場合テオフィリンが抗原に相当する。
セイ）用の乾式分析器具を用いる免疫分析方法に関する
もので、更に詳しくは、抗体（又は抗原）とラベル抗原
（又はラベル抗体）とからなる免疫分析試薬のうち、前
者を担体に固定して水不溶出性にしたマトリックスを後
者と担体に保持させて水溶出可能にしたマトリックスと
の２者を組合せた免疫分析用器具と、更にこれにマーカ
ー測定用乾式分析要素（分析エレメント）を加えた免疫
分析用乾式分析器具を併用する乾式の免疫分析方法であ
る。 ［従来技術とその問題点］ 体液中の薬物、内分泌成分（ホルモン、ペプチド等）、
蛋白その他のアナライト（被検成分、又は分析対象成
分）を抗原担体反応（免疫反応）を利用して測定するイ
ムノアッセイ法は、次の文献に見られるように周知のこ
とである。 イムノアッセイ手法全般について： 宮井 潔：「ぶんせき」1985,79−88 日本臨床病理学会編：「臨床病理臨時増刊特集」第53号
（1983） 酵素イムノアッセイについて： D.Monroe:Anal.Chem.56,920A−931A（1984） 石川英治ら：「酵素免疫測定法」第２版（医学書院、19
82年発行） 蛍光イムノアッセイについて： 渡辺冨久子ら：「検査と技術」９,583−587（1981） I.Hemmilae:Clin.Chem.,31,359−370（1985） 血中薬物濃度測定について： 上能伊久雄：「ファルマシア」21,126−132（1985） これらの諸イムノアッセイ法のうち、本発明の器具と方
法を特に有効に利用できるのは、酵素又は蛍光体等をマ
ーカーとして標識したラベル抗原やラベル抗体などのラ
ベル体を利用する競合法・不均一系のイムノアッセイ法
である。この方法は定量性能は良好な定量法であるが、
操作はすべて湿式（すなわち水溶液を用いる分析方法）
であり、かつ定量反応の途中で生成する抗原抗体反応の
結合体（バウンド,Bと略す）とフリーのラベル体（Ｆと
略す）とを分離する操作（B/F分離と略す）が必要で、
操作の煩雑さが欠点である。 競合法・均一系のイムノアッセイ法についても、不均一
系と同様に本発明の器具と方法に応用すれば、容易にか
つ確実にこれをドライ化することができることは勿論で
あり、非競合法、逐次飽和法なども本発明の器具と方法
に適宜応用することが可能である。 定量試薬をドライの形（乾式分析要素）で供給すること
は公知である。例えば生化学検査試薬組成物を含有する
錠剤や生化学検査試薬組成物を含浸含有させた濾紙の形
態を乾式分析要素が例えば次の特許明細書に記載されて
いる。 特公昭31−8850、特開昭48−84963、特開昭58−62561、
特開昭59−97056、DE 3 048 799A しかしこれらは分析に必要な試薬組成物を単にドライ形
にして、使用時、試薬成分全部が水中に容易に容出する
ようにしたものに過ぎず、イムノアッセイに利用しても
B/F分離操作を省略することはできない。イムノアッセ
イにおいて、B/F分離操作をなくすために必要な試薬成
分のうち、主として抗体をビーズ、試験管内壁、マイク
ロカプセル内等に固定した、いわゆる固相法イムノアッ
セイも例えば次の文献に記載されていて公知である。 宮井 潔：「臨床検査」22,1219−1229（1978） 上能伊久雄ら：「ファルマシア」21,126−132（1985） 米田ら：「臨床検査：機器・試薬」８,1283−1289（198
5） E.P.Halpern et al:Clin.Chem.,25,1561−1563（1979） G.Samuel et al:Clin.Chem.,25,168−170（1983） しかし、これらの方法は、抗原と抗体のうちいずれか一
方を固定してB/F分離操作をなくしたものに過ぎず、他
の試薬成分は水溶液として供給し、かつマーカーの測定
操作も湿式法によるもので、簡単な方法とは云い難い。 又Clin.Chem.,31,910−911（1985）記載の、血清中の、
薬物検査用のドライ多層エンザイムイムノアッセイエレ
メントは、エレメント（分析要素）の層中に抗体を固定
し、ラベル抗原は抗原と共に試験管から水溶液として供
給する方式で、この分析エレメントは薬物ごとにそれに
対応する抗体を組み込む構造のために、薬物ごとに異な
るエレメントをつくることが必要で、エレメントの種類
が多数であるのが欠点である。 ［発明の目的］ 本発明の目的は、煩雑な手順を要する競分法・不均一系
ノムノアッセイ法を改良し、試薬の調製と秤量操作、B/
F分離操作等が不要な簡便・ドライ（乾式）操作によっ
て、試料中の抗原物質（又は抗体物質）を分析すること
ができるイムノアッセイ用器具を用いるイムノアッセイ
法を提供することにある。 ［発明の構成］ 本発明の免疫分析方法は、 （１）分析操作時に水又は抗原を含む水性液体試料と
接触したときに抗体が離脱し溶解しないように担体に固
定されて乾燥された抗体固定マトリックス、 水又は抗原を含む水性液体試料と接触したときにラベル
抗原が離脱し溶解するように担体に保持され乾燥された
ラベル抗原保持マトリックス の２者を有する免疫分析器具を用い、 前記抗体固定マトリックスと前記ラベル抗原保持マト
リックスとをアナライト抗原を含む水性液体試料に浸漬
して前記ラベル抗原保持マトリックスから前記ラベル抗
原を離脱させ、 水性液体試料に含まれる抗原と前記ラベル抗原とを前
記抗体固定マトリックスの前記固定抗体に競合結合反応
させ、 水不透過性透明支持体、親水性ポリマーバインダーを
含有する層及び多孔性展開層をこの順に有する多層分析
要素であって、前記液体試料中に残存するラベル抗原の
量をラベルをマーカーとして光学的に測定することがで
きる試薬組成物を前記親水性ポリマーバインダーを含有
する層又は要素内に設けられる他の層に含む乾式分析要
素の前記展開層の上に前記結合反応後の前記液体試料の
少なくとも一部を供給し、 ついで透明支持体側から前記多層分析要素内の光学濃
度を反射測光するプロセスを含む比色法により前記ラベ
ル抗原のラベルをマーカーとして、前記液体試料中に残
存する結合反応しなかったラベル抗原の量を測定するこ
とにより、 水性液体試料中のアナライト抗原含有量を定量する方
法、 並びに、 （２）分析操作時に水又は抗体を含む水性液体試料と
接触したときに抗原が離脱し溶解しないように担体に固
定されて乾燥された抗原固定マトリックス、 水又は抗体を含む水性液体試料と接触したときにラベル
抗体が離脱し溶解するように担体に保持され乾燥された
ラベル抗体保持マトリックス、 の２者を有する免疫分析器具を用い、 前記抗体固定マトリックスと前記ラベル抗体保持マト
リックスとをアナライト抗体を含む水性液体試料に浸漬
して前記ラベル抗体保持マトリックスから前記ラベル抗
体を離脱させ、 水性液体試料に含まれる抗体と前記ラベル抗体とを前
記抗原固定マトリックスの前記固定抗原に競合結合反応
させ 水不透過性透明支持体、親水性ポリマーバインダーを
含有する層及び多孔性展開層をこの順に有する多層分析
要素であって、前記液体試料中に残存するラベル抗体の
量をラベルをマーカーとして光学的に測定することがで
きる試薬組成物を前記親水性ポリマーバインダーを含有
する層又は要素内に設けられる他の層に含む乾式分析要
素の前記展開層の上に前記結合反応後の前記液体試料の
少なくとも一部を供給し、 ついで透明支持体側から前記多層分析要素内の光学濃
度を反射測光するプロセスを含む比色法により前記ラベ
ル抗体のラベルをマーカーとして、前記液体試料中に残
存する結合反応しなかったラベル抗体の量を測定するこ
とにより、 水性液体試料中のアナライト抗体含有量を定量する方
法、である。 本発明の分析方法に用いる免疫分析器具は、抗体固定マ
トリックスとラベル抗原保持マトリックスとの２者を組
合せたドライの免疫試薬組成物含有分析器具（又は成形
物）、又は前記分析器具にマーカー測定用のドライ分析
要素（エレメント）を加えたものからなる分析器具であ
る。ドライとは実質的な乾式（免疫試薬組成物が実質的
に乾燥状態で分析器具中に含有されている形態）から見
かけ上の乾式（免疫試薬組成物は半乾燥状態又は水溶
液、濃縮水溶液状態で分析器具中に含有されている形態
で、分析操作に免疫分析試薬組成物含有水溶液は用いな
い）までの範囲を含む。ドライの分析操作では液体を扱
うのは分析器具への水性液体試料の点着又はスポッティ
ングだけである。 抗体固定マトリックスは、分析操作時に抗体が水性液体
試料中の諸成分とは容易に接触することができるが、抗
体自身は水性液体試料中に離脱、溶出することがないよ
う担体に固定されていたものである。このマトリックス
は、抗体と抗原及びラベル抗原の３者間の競合的な結合
反応が行われる場合であり、かつ結合物（Ｂ）を水に溶
出しないよう固持する機能を持つもので、結果的に、結
合物は抗体マトリックス上にのみ存在し、未反応のフリ
ーのラベル抗原は水中に存在することとなり、巧まずし
てB/F分離操作を必要としない方法になるものである。 ラベル抗原保持マトリックスは、ラベル抗原を担体に一
時的に保持しているだけで、水につけた時ラベル抗原が
速やかに水中に溶媒することができるものである。この
ようなマトリックスは、従来のテストストリップの製法
に準じて製造することができるので、湿式法シングルバ
イヤル方式の試薬に較べ容積、精度、素材、工程等の諸
観点で有利であることは勿論である。上記のマトリック
スは抗体を担体に固定し、ラベル抗原を担体に保持させ
た組合わせであるが、逆に抗原を固定しラベル抗体を保
持した組合せでもよい（以後の説明ではこの逆の組合せ
は省略するが、当然これを含む）。 本発明で用いる免疫試薬の抗原、抗体とは一般的なもの
から、低分子化合物（ハプテン）、レセプター、補体、
ウィルス、その他までを含む広義の抗原様物質と抗体様
物質を意味し、相互に特異の親和結合性がある組合せの
ものを意味する。ラベル抗原、ラベル抗体とは、抗原抗
体反応後に未反応の残余の抗原や抗体の量を測定するの
に好都合なよう、抗原や抗体に直接に又は間接にマーカ
ー（標識物）をラベル（標識）したものである。マーカ
ーとしては、酵素、補酵素、蛍光物質、色素等公知のマ
ーカーから適宜に選択して用いることができる。これら
のラベル体は、ラベルされていない抗原や抗体と同様、
相手になる抗体や抗原と特異親和性を保有しているもの
である。 ラベルをマーカーとして測定する乾式分析要素（乾式分
析エレメントとも称される。以下ではマーカー分析要素
ということがある。）とはラベル体中のラベル物質をマ
ーカーとしてラベル体の量を測定することができる分析
要素で、例えばB.Walter:Anal.Chem.,55,498A−514A（1
983）;J.N.Eikenberry:Clin.Chem.,29,1247（1983）に
記載のように、マーカーの定量に必要な試薬組成物が含
浸含有された濾紙又はテストストリップ、又は試薬組成
物が層内に配合された多層分析要素を意味する。これら
の分析要素はラベル体水溶液をその上に付着（点着又は
スポッティング）させるだけで、その要素内部で分析反
応が進行し、マーカーの量を測定できるものである。抗
原にかかわりなく、ラベル体のマーカーを共通化すれ
ば、１種類の分析要素だけで、多くの抗原を定量するこ
とができるので、測定機も簡易化することができる。 本発明の器具を用いて水性液体試料中の抗原を測定する
ためには、水性液体試料用希釈液の一定量を試験管に取
り、その中に抗体固定マトリックス片とラベル抗原保持
溶出マトリックス片とを入れ、一定時間撹拌しインキュ
ベーションする。次に試験管中の液体部分の一定量をマ
ーカー分析要素の上に点着する。分析要素での発色光学
濃度は水性液体試料中の抗原量と相関するので、その光
学濃度を測定して比色法の原理で水性液体試料中の抗原
量を知ることができる。この方法は試験管中の液体部
分、すなわち抗原抗体反応（免疫反応）後に、反応に与
らなかった残余、即ちフリーのラベル抗原のマーカーを
測定して抗原を定量する方法であるが、逆に抗体固定マ
トリックス上の、抗原抗体反応結合物中のアーカーを指
標にして抗原を定量することも勿論可能である。かくの
如く、本発明の免疫分析器具を用いれば分析操作者は試
薬溶液の調製、秤量、B/F分離等の煩雑な操作なしに免
疫分析が遂行でき、更にドライのマーカー分析要素を併
用すれば比色定量までも湿式法を用いることなく、水性
液体試料中の抗原や抗体を簡易かつドライ法で定量する
ことができる。 ［発明の構成の詳細な説明］ 本発明の分析方法に用いる免疫分析器具において、抗体
を担体に固定したドライマトリックスは、担体として粒
状、球状、平面状のプラスチック、ガラス、繊維、ゲル
状物等、分析上有害な成分を含むかあるいは有害な成分
を放出するもの以外は広く利用できるが、天然繊維又は
合成ポリマー繊維からの抄造濾紙、不織布、微粒子包含
微多孔性シート、バインダ表面をもつポリマーフィル
ム、メンブランフィルタ等の微多孔性シート状物で比表
面積の大きいものが好ましい。抗体をこれらの担体に固
定する方法は公知の方法によることができる。例えば濾
紙に抗体を固定するには、特開昭57−200862明細書に記
載の如くBrCNで活性化した濾紙を用いる方法によること
ができる。この濾紙は切断して、１回分の抗体固定濾紙
片とする。あるいは適当な大きさの濾紙片をあらかじめ
用意しその上に定量１回分の抗体やラベル抗原液を別々
の紙片に、又は１枚の紙片に重複しないよう滴下し乾燥
する方法もある。このようなシートの製造や保存は生化
学検査要素として公知のテストストリップと同様にして
行うことができるので大変有利である。 次に、ラベル抗原を保持・溶出するマトリックスも、前
記抗体固定マトリックスに準じた形態を採ることができ
る。。但しラベル抗原が容易にマトリックスから溶出す
るよう、ラベル抗原を濾紙に保持させるときに、例え
ば、易水溶液性バインダーであるゼラチンやポリ−Ｎ−
ビニルピロリドンのような親水性ポリマーバインダーと
ラベル抗原を含有する水溶液中に濾紙を浸漬した後これ
を引上げ、凍結乾燥、低温乾燥等の公知の乾燥方法のう
ちの適当な乾燥方法によって乾燥シートとなし、切断し
てシート片となす。このようにして調製されたラベル抗
原含有シートは水に接触したとき、分析時間内にラベル
抗原が容易に水に溶出するものである。 この抗体固定マトリックスとラベル抗原保持マトリック
スに用いる免疫試薬組成物は、アナライト抗原別に、個
々に選択して用いることが必要である。本発明の免疫分
析器具を用いる免疫分析方法では２つのマトリックスを
水性液体試料に同時に接触させる方が、分析操作を簡便
にする。そのために次の如きストリップの例がある。第
１図の如く、抗体固定マトリックス11と、ラベル抗原保
持マトリックス12とを支持体13の上に並置したストリッ
プ10、第２図の如く、抗体固定マトリックス21とラベル
抗原保持マトリックス22とが支持体23の上に積層された
ストリップ20（この態様では分析操作時まで抗体とラベ
ル抗原の両試薬成分が接触することがないようドライシ
ートの形で積層される）、第３図の如く、抗体固定マト
リックス31と、ラベル抗原保持マトリックス32とを支持
体33の両面に配置固定したストリップ30、第４図の如
く、支持体43に直接に部分的に抗体を含浸固定した抗体
固定マトリックス領域41と、ラベル抗原を含浸保持させ
たラベル抗原保持マトリックス領域42とを有する含浸ス
トリップ40（この態様では製造時両試薬成分が混合する
ことがないよう水不浸透性のバリヤバンド（バリヤ領域
帯）44をあらかじめ設けた多孔体を用いるのが好まし
い）等が例挙される。これらのストリップは握り部分を
つけてハンドリングし易したことが特徴であるが、握り
部分をなくして単なるシート型や直方体型にして、試験
管中又は水性液体試料中に投入する形態にすることもで
きる。このような形態も含めてストリップ（試薬ストリ
ップ、テストストリップ）という。又別の形態として、
抗体はビーズや試験管内壁に固定し、ラベル抗原は濾紙
に保持されたシート片とする形式も可能であり、又逆の
形式にすることもできる。 次に、フリーのラベル抗原を測定するための、ドライの
マーカー分析要素の例として、たとえばマーカーがグル
コースオキシダーゼ酵素（GOD）である場合はGOD活性を
測定することができるよう、試薬組成物としてグルコー
ス（基質）、ペルオキシダーゼ、テトラメチルベンジジ
ンロイコ色素（ロイコ色素のかわりに、４−アミノアン
チピリン又はその誘導体等の色原体と2,7−ジヒドロキ
シナフタレン、3,5−ジクロロ−２−ヒドロキシベンゼ
ンスルホン酸等ナフトール誘導体又はフェノール等のカ
プラーとの組合せを用いることもできる）、pHバッファ
ー等のGOD活性測定用呈色試薬組成物をストリップ又は
多層分析要素に含有させたものを用いることができる。
第５図右に示したものは多層分析要素であるマーカー分
析要素50で、その構成は、上から順に、前記の試薬組成
物を含有する試薬展開層56、吸水層（兼検出層）54、水
不透過性透明支持体52が一体に積層されており、分析に
当っては、抗原抗体反応後の残余ラベル抗原含有液70を
展開層に点着し、ラベル抗原の量に相関して生成した色
素の光学濃度は透明支持体側52から反射測光により測定
する。 マーカー分析用多層分析要素は、特開昭55−164356、特
開昭57−66359、特開昭60−222769、特開昭57−14825
0、特開昭57−125847、特公昭53−21677、米国特許3 99
2 158、特開昭55−90859、特開昭61−4959等に記載の水
不透過性透明支持体の上に、ゼラチンに代表される親水
性ポリマーバインダー中に呈色（発色）試薬組成物が分
散含有されている呈色（発色）試薬層と多孔性展開層の
少なくとも２層がこの順に積層一体化されている一体型
多層分析要素、特開昭59−12095、特開昭60−222769、
特開昭60−222760、特開昭61−41967、等に記載の水不
透過性透明支持体の上にゼラチン又はポリビニルアルコ
ール等の親水性ポリマーバインダーを主成分とする吸水
層と呈色（発色）試薬組成物が分散又は含浸され含有さ
れている多孔性の試薬展開層の少なくとも２層がこの順
に積層一体化されている一体型多層分析要素、特開昭59
−12095、特開昭60−222769、特開昭60−222760、特開
昭61−41967、特公昭58−18628等に記載の水不透過性透
明支持体の上にゼラチンを主成分とする検出層、ポリマ
ー媒染剤を主成分とする検出層又は媒染剤又はポリマー
媒染剤がゼラチン、ポリビニルアルコール等の親水性ポ
リマーバインダーの中に含有されている検出層と呈色
（発色）試薬組成物が分散又は含浸され含有されている
多孔性の試薬展開層の少なくとも２層がこの順に積層一
体化されている一体型多層分析等と同様の構成を有する
乾式分析要素である。マーカー分析用乾式分析要素はこ
れらの諸特許明細書に記載の方法に従って調製すること
ができる。 ラベル体のマーカー酵素としては、アルカリホスファタ
ーゼ（ALP），グルコース−６−ホスフェートデヒドロ
ゲナーゼ（G6PDH）、ガラクトースオキシダーゼ等を用
いるときはそれぞれの酵素をを定量できる試薬組成物を
含有する分析要素を用いる。基質として蛍光基質を用い
る場合には、J.L.Giegel et al.:Clin.Chem.,28,1894−
1898（1982）等に記載の公知の方法による蛍光測定法に
よることもできる。 本発明の分析器具を用いる水性液体試料中の抗原分析の
具体例として、血清中のテオフィリン濃度の分析例を示
す。この場合テオフィリンが抗原に相当する。
【試薬及び免疫分析器具】第１図に示すテオフィリン抗
体を固定したシート一片11とGODラベルテオフィリンを
保持したシート片12とを短冊状支持体13の上に接着した
テストストリップ（試薬ストリップ）型の分析器具10、
及び第５図右に示したGOD測定のため多層分析要素であ
るマーカー分析要素50。
体を固定したシート一片11とGODラベルテオフィリンを
保持したシート片12とを短冊状支持体13の上に接着した
テストストリップ（試薬ストリップ）型の分析器具10、
及び第５図右に示したGOD測定のため多層分析要素であ
るマーカー分析要素50。
【分析方法】第５図の如く、試験管60中の希釈血清1ml
中に試薬ストリップ11を浸漬し、５分インキュベーショ
ン撹拌を行う。試験管中の液体部分から10μの液体70
を秤取しGOD測定用多層分析要素50の試薬展開層56の上
に点着し、要素中の発色光学濃度を支持体52側からレー
ト法（反応速度法）又は終点法で反射測光する。検量線
からテオフィリン濃度を計算する。 本発明の分析器具を用いる水性液体試料中の抗原の分析
方法は、薬物に限らずホルモン、蛋白質など広範囲の種
類のアナライト抗原に利用することができる。１回分の
定量に用いる試薬量すなわち抗体量、ラベル抗原量は測
定すべき水性液体試料中の抗原量の範囲から抗原別に実
験によって決定することができる。又水性液体試料の希
釈率はアナライト抗原の含有量範囲に応じて決めること
ができる。 ［発明の効果］ 本発明のイムノアッセイ用免疫分析器具を用いる抗原
（又は抗体）の定量方法は、水性液体試料中の抗原又は
抗体を定量するために競合法・不均一系のイムノアッセ
イを利用するときに特に有効である。従来の免疫分析用
試薬組成物含有水溶液を用いる湿式のイムノアッセイ法
に較べ、 試薬液の調製、秤量不要、 免疫反応においてB/F分離操作不要、 分析操作が一貫してドライ操作で簡易、 アナライト抗原（又は抗体）の含有量によって水性液
体試料の希釈率を調節することにより微量のアナライト
抗原（又は抗体）を定量することができる。 ラベル抗体（又はラベル抗原）のラベル（標識物質）
を各アナライト抗原（又は各アナライト抗体）について
共通化すれば、ラベル抗体（又はラベル抗原）測定用の
マーカー分析要素は１種類でよく、製造、測定機、測定
操作のいずれも容易でコストも安価である、 本発明の分析方法に用いる分析器具としてテストスト
リップ型の免疫分析器具を用いるの態様においては製
造、保存、取り扱い、測定操作が容易で、分析装置の構
成等が簡単で、分析器具の製造コストも安い、等 の効果がある。
中に試薬ストリップ11を浸漬し、５分インキュベーショ
ン撹拌を行う。試験管中の液体部分から10μの液体70
を秤取しGOD測定用多層分析要素50の試薬展開層56の上
に点着し、要素中の発色光学濃度を支持体52側からレー
ト法（反応速度法）又は終点法で反射測光する。検量線
からテオフィリン濃度を計算する。 本発明の分析器具を用いる水性液体試料中の抗原の分析
方法は、薬物に限らずホルモン、蛋白質など広範囲の種
類のアナライト抗原に利用することができる。１回分の
定量に用いる試薬量すなわち抗体量、ラベル抗原量は測
定すべき水性液体試料中の抗原量の範囲から抗原別に実
験によって決定することができる。又水性液体試料の希
釈率はアナライト抗原の含有量範囲に応じて決めること
ができる。 ［発明の効果］ 本発明のイムノアッセイ用免疫分析器具を用いる抗原
（又は抗体）の定量方法は、水性液体試料中の抗原又は
抗体を定量するために競合法・不均一系のイムノアッセ
イを利用するときに特に有効である。従来の免疫分析用
試薬組成物含有水溶液を用いる湿式のイムノアッセイ法
に較べ、 試薬液の調製、秤量不要、 免疫反応においてB/F分離操作不要、 分析操作が一貫してドライ操作で簡易、 アナライト抗原（又は抗体）の含有量によって水性液
体試料の希釈率を調節することにより微量のアナライト
抗原（又は抗体）を定量することができる。 ラベル抗体（又はラベル抗原）のラベル（標識物質）
を各アナライト抗原（又は各アナライト抗体）について
共通化すれば、ラベル抗体（又はラベル抗原）測定用の
マーカー分析要素は１種類でよく、製造、測定機、測定
操作のいずれも容易でコストも安価である、 本発明の分析方法に用いる分析器具としてテストスト
リップ型の免疫分析器具を用いるの態様においては製
造、保存、取り扱い、測定操作が容易で、分析装置の構
成等が簡単で、分析器具の製造コストも安い、等 の効果がある。
第１図〜第４図は本発明の免疫分析器具の実施態様例
で、４タイプのテストストリップ（試薬ストリップ）型
の免疫分析器具を示す模式図である。抗体固定マトリッ
スとラベル抗原保持マトリックスとの支持体上における
載置関係を模式的に示してある。 第５図は本発明の免疫分析器具とマーカー分析用一体型
多層分析要素を用いる抗原分析方法の１具体的手順を例
示する模式図である。 10,20,30,40……試薬ストリップ型の免疫分析器具 11,21,31,41……抗体固定マトリックス 12,22,32,42……ラベル抗原保持マトリックス 13,23,33,43……支持体 44……バリヤバンド（バリヤ領域帯） 50……マーカー分析用一体型多層分析要素 52……水不透過性透明支持体 54……吸水層（又は検出層） 56……試薬展開層 60……試験管 70……フリーのラベル抗原液滴 Ｓ……発色光学濃度測定用光の投射方向 Ｍ……発色光学濃度測定方向，及び測光機構（図示せ
ず）
で、４タイプのテストストリップ（試薬ストリップ）型
の免疫分析器具を示す模式図である。抗体固定マトリッ
スとラベル抗原保持マトリックスとの支持体上における
載置関係を模式的に示してある。 第５図は本発明の免疫分析器具とマーカー分析用一体型
多層分析要素を用いる抗原分析方法の１具体的手順を例
示する模式図である。 10,20,30,40……試薬ストリップ型の免疫分析器具 11,21,31,41……抗体固定マトリックス 12,22,32,42……ラベル抗原保持マトリックス 13,23,33,43……支持体 44……バリヤバンド（バリヤ領域帯） 50……マーカー分析用一体型多層分析要素 52……水不透過性透明支持体 54……吸水層（又は検出層） 56……試薬展開層 60……試験管 70……フリーのラベル抗原液滴 Ｓ……発色光学濃度測定用光の投射方向 Ｍ……発色光学濃度測定方向，及び測光機構（図示せ
ず）
Claims (2)
- 【請求項１】分析操作時に水又は抗原を含む水性液体
試料と接触したときに抗体が離脱せずかつ溶解しないよ
うに担体に固定されて乾燥された抗体固定マトリック
ス、水又は抗原を含む水性液体試料と接触したときにラ
ベル抗原が離脱し溶解するように担体に保持され乾燥さ
れたラベル抗原保持マトリックス の２者を有する免疫分析器具を用い、 前記抗体固定マトリックスと前記ラベル抗原保持マト
リックスとをアナライト抗原を含む水性液体試料に浸漬
して前記ラベル抗原保持マトリックスから前記ラベル抗
原を離脱させ、 水性液体試料に含まれる抗原と前記ラベル抗原とを前
記抗体固定マトリックスの前記固定抗体に競合結合反応
させ 水不透過性透明支持体、親水性ポリマーバインダーを
含有する層及び多孔性展開層をこの順に有する多層分析
要素であって、前記液体試料中に残存するラベル抗原の
量をラベルをマーカーとして光学的に測定することがで
きる試薬組成物を前記親水性ポリマーバインダーを含有
する層又は要素内に設けられる他の層に含む乾式分析要
素の前記展開層の上に前記結合反応後の前記液体試料の
少なくとも一部を供給し、 ついで透明支持体側から前記多層分析要素内の光学濃
度を反射測光するプロセスを含む比色法により前記ラベ
ル抗原のラベルをマーカーとして、前記液体試料中に残
存する結合反応しなかったラベル抗原の量を測定するこ
とにより、 水性液体試料中のアナライト抗原含有量を定量する方
法。 - 【請求項２】分析操作時に水又は抗体を含む水性液体
試料と接触したときに抗原が離脱せずかつ溶解しないよ
うに担体に固定されて乾燥された抗原固定マトリック
ス、水又は抗体を含む水性液体試料と接触したときにラ
ベル抗体が離脱し溶解するように担体に保持され乾燥さ
れたラベル抗体保持マトリックス、 の２者を有する免疫分析器具を用い、 前記抗体固定マトリックスと前記ラベル抗体保持マト
リックスとをアナライト抗体を含む水性液体試料に浸漬
して前記ラベル抗体保持マトリックスから前記ラベル抗
体を離脱させ、 水性液体試料に含まれる抗体と前記ラベル抗体とを前
記抗原固定マトリックスの前記固定抗原に競合結合反応
させ、 水不透過性透明支持体、親水性ポリマーバインダーを
含有する層及び多孔性展開層をこの順に有する多層分析
要素であって、前記液体試料中に残存するラベル抗体の
量をラベルをマーカーとして光学的に測定することがで
きる試薬組成物を前記親水性ポリマーバインダーを含有
する層又は要素内に設けられる他の層に含む乾式分析要
素の前記展開層の上に前記結合反応後の前記液体試料の
少なくとも一部を供給し、 ついで透明支持体側から前記多層分析要素内の光学濃
度を反射測光するプロセスを含む比色法により前記ラベ
ル抗体のラベルをマーカーとして、前記液体試料中に残
存する結合反応しなかったラベル抗体の量を測定するこ
とにより、 水性液体試料中のアナライト抗体含有量を定量する方
法。
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| JP61058764A JPH0750114B2 (ja) | 1986-03-17 | 1986-03-17 | 免疫分析器具を用いる分析方法 |
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