KR920009420B1 - 고체상 분석장치 및 이를 이용하는 방법 - Google Patents

고체상 분석장치 및 이를 이용하는 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR920009420B1
KR920009420B1 KR1019890003817A KR890003817A KR920009420B1 KR 920009420 B1 KR920009420 B1 KR 920009420B1 KR 1019890003817 A KR1019890003817 A KR 1019890003817A KR 890003817 A KR890003817 A KR 890003817A KR 920009420 B1 KR920009420 B1 KR 920009420B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
analyte
sample
positive control
matrix
control region
Prior art date
Application number
KR1019890003817A
Other languages
English (en)
Other versions
KR890015016A (ko
Inventor
이. 브라운 3세 윌리암
엠. 클리멘스 존
이. 새포드 사라
Original Assignee
애보트 래보러토리스
폴 이. 로지
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 애보트 래보러토리스, 폴 이. 로지 filed Critical 애보트 래보러토리스
Publication of KR890015016A publication Critical patent/KR890015016A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR920009420B1 publication Critical patent/KR920009420B1/ko

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/521—Single-layer analytical elements
    • G01N33/523—Single-layer analytical elements the element being adapted for a specific analyte
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/528—Atypical element structures, e.g. gloves, rods, tampons, toilet paper
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56911—Bacteria
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/576—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis
    • G01N33/5761—Hepatitis B
    • G01N33/5764—Hepatitis B surface antigen
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
    • G01N33/76—Human chorionic gonadotropin including luteinising hormone, follicle stimulating hormone, thyroid stimulating hormone or their receptors
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/805—Test papers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/81—Packaged device or kit
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y10S436/808—Automated or kit

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

내용 없음.

Description

고체상 분석장치 및 이를 이용하는 방법
제1도는 본 발명에 따른 분석장치의 부분 횡단면의 측면도이다.
제2도는 제1도의 장치의 상단 평면도이다.
제3a, 3b 및 3c도는 제1도의 장치의 특히 바람직한 양태의 상단 평면도이다.
제4a, 4b 및 4c도는 제1도 장치의 다른 양태의 상단 평면도이다.
제5도는 장치의 본체로부터 분리되는 예비-필터를 보여주는 제1도의 장치의 투시도이다.
제6a, 6b 및 6c도는 크로마토그래피 장치의 특히 바람직한 양태의 상단 평면도이다.
제7a, 7b 및 7c도는 크로마토그래피 장치의 다른 양태의 상단 평면도이다.
본 발명은 대체로 단일 반응 부위 상의 절차적 대조 및 분석물 결합 영역의 사용을 통한 다수의 판독가능한 결과를 갖는 분석장치에 관한 것이다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 결합 분석의 수행에 유용한 신규 장치 및 개선된 분석장치에 관한 것이다. 본 발명의 개념은 형청, 혈장, 전혈, 뇨, 척수, 양수, 점액 등과 같은 체액 및 생체 생성물의 효소 면역분석 수행에 특히 유리하다.
유체 또는 다른 물질중에 존재할 수 있는 관심상의 물질 또는 임상적으로 중요한 물질의 존재 및/또는 농도를 측정하기 위한 분석에 각종 분석방법 및 장치가 통상적으로 사용된다. 이러한 임상적으로 중요한 또는 관심을 끄는 물질은 통상적으로＂분석물＂이란 용어를 사용하며, 예를 들어 항체, 항원 및 ＂리간드(ligand)＂로 통칭되는 광범위한 범주의 물질이 포함될 수 있다. 특히 인체의 질환 또는 다른 상태의 진단 및 치료에 대해서, 체액중의 임상적으로 중요한 어떤 분석물의 존재 또는 그 양을, 적시에 정확하게 측정하는 것은 병리학적 신체질환을 치료 및 조절하거나 임신과 같은 생리학적 상태의 신속하고 정확한 진단을 위한 건강관리 전문가들의 능력에 중요한 영향을 미칠 수 있다.
인체의 각종 질환 및 상태의 진단에 점차 많이 적용되고 있는 한가지 분석 방법론은 결합분석, 특히 효소 면역분석(EIA)으로 공지된 유형의 결합 분석이다. EIA 기술은 유기체에 대해 병원성 또는 외인성인 물질(즉, 항원)의 유기체 내에의 존재에 대한 반응으로 항체가 생성되는, 고등한 유기체의 면역 시스템의 기작을 이용한 것이다. 하나 이상의 항체가 특별한 항원에 대한 반응으로 생성되는 그 항원과 반응할 수 있고, 이에 의해 고도로 특이적인 반응기작이 이루어져, 이를 시험관내에서 유리하게 이용하여 그 특정한 항원을 측정할 수 있다.
통상적인 EIA 방법에는, 분석중인 샘플 체액중 분석물, 예를 들어 뇨, 전혈 또는 혈청 중의 항원 또는 항체를 검출하는, 액체 시약을 사용하는 일련의 습식(wet) 화학 단계가 포함된다. EIA 방법의 한 유형에서는, 샘플중 분석물이 처음에는 샘플에 도입된 상응하는 항원 또는 항체 시약에 결합된다. 그 다음, 또 다른 항원 또는 항체가 도입된다. 그러나, 이 제2항원 또는 항체는 크로모겐 또는 염료와 같은 추가의 적당한 지시시약과 반응시 또는 이의 존재하에서, 발색과 같은 검출가능한 반응을 일으킬 수 있는 효소 또는 다른 물질로 표지시키거나 이와 결합시킨 것이다. 이렇게 나타난 검출가능한 반응은 원래의 샘플중 항원 또는 항체의 존재 또는 존재량을 표시 또는 측정하는 것으로서, 시각적으로 또는 기구적으로 판독 및 해석될 수 있다.
고체상 EIA 방법은 일반적으로 안정성, 사용의 용이성, 특이성 및 민감성의 이유로 지금까지 사용된 방사능 면역분석(RIA)와 같은 액체 시약 결합 분석 기술 및 다른 통상적인 습식 화학방법에 비해 항체 및 항원 분석에 바람직한 것으로 생각된다. 또한, 예를 들어 분광광도계를 사용하여 발색을 기구적으로 판독할 수 있는 특징으로 해서, 많은 고체상 EIA 기술이 광범위하게 사용되게 되었다.
따라서, 통상적인 고체상 EIA ＂샌드위치＂분석법의 한가지 유형에서, 우선 대상이 되는 항체 또는 항원을 함유하는 것으로 예상되는 시험 샘플을 지지체 표면상에 항원 또는 항체를 고정시키거나 지지체와 화학적으로 결합시켜, 지지체의 표면상에 항원 또는 항체를 보유하기 위하여 항원 또는 항체와 결합할 수 있는 단백질 또는 다른 물질로 미리 피복시킨 거의 불활성인 고체 플라스틱 또는 유리 비드(bead) 또는 다른 지지물질과 접촉시킨다. 일반적으로 효소와 접합(화학적으로 결합)되는 제2항원 또는 항체를 가하면 제2종이 지지체상의 이에 상응하는 항체 또는 항원과 결합된다. 비결합된 물질을 제거하기 위한 1회 이상의 세척단계 후, 지시 물질, 예를 들어 효소의 존재하에서 반응성인 크로모겐 물질을 가하면 효소의 존재에 대한 감수성으로 인해 검출가능한 색 반응이 나타난다. 색 반응의 형성, 이의 강도등은 시각적으로 또는 기구적으로 측정할 수 있고 샘플중에 존재하는 항원 또는 항체의 양과 상관관계가 있다.
이러한 분석 기술, 및 이러한 분석에 필요한 면역학적 반응 및 변화를 수행하기 위한 고체상 비드 또는 다른 유형의 지지체의 용도는 잘 알려져 있지만 결점이 없진 않았다. 예를 들어, 분석을 수행하고 사용된 액체 시약을 담기 위한 정교한 기구의 필요성 때문에, 특히 개개 샘플의 저용적 시험의 경우, 상당한 노동력 및 장비의 비용이 요구된다. 더우기, 이러한 분석과 관련된 통상적으로 피복된 고체 지지체 및 다른 기구를 특정 분석을 위해 사용된 모든 물질을 특별하게 디자인하여 예비측정된 감수성 및 특이성 요건을 충족시키도록 제조하기가 때때로 어렵기 때문에 이러한 분석의 정확성 및 재현성은 종종 최적치 미만일 수 있다. 따라서, 유리하게는 EIA 방법에 사용할 수 있고, 성가시고 많은 습식 화학 단계 또는 복잡한 기구의 필요없이, 상술한 바와 같은 통상적인 방법에 비해 빠르고 민감하며 재현성이 높은 결과를 얻을 수 있는, 비교적 간단하고 사용이 용이하며 비교적 값이 싼 고체상 물질 및 분석장치에 대한 필요성이 대두된다.
본 발명은 직접적으로는 상기 필요성을 제거하고, 한편으로, 시험샘플중 분석물의 존재 또는 양을 측정하는 결합 분석 수행에 유용한 신규장치 및 이 장치를 이용한 분석법을 제공한다. 또 다른 한편으로는, 본 발명은 선행기술의 장치 및 분석방법보다 매우 유리한 개선된 고체상 분석장치 및 이 장치를 이용한 결합분석을 제공한다. 또는 본 발명은 고체상 분석장치와 함께 사용하기 위한, 독특한 장치상(on-board) 절차적 대조표준을 제공한다.
본 발명의 개선된 장치는 결합분석을 수행하기 위한 반응 부위를 함유함을 특징으로 한다. 한편으로 유동(flow- through)분석장치는 제1샘플-접촉 표면 및 제1표면 반대쪽에 제2표면을 가진다. 거의 평면인 층은, 결합분석의 수행에 이 장치를 사용하는 경우, 제1 표면과 접촉하는 샘플의 적어도 일부가 거의 평면인 층을 통과하여 제2표면까지 도달하도록 장치내에 배치한다. 바람직하게는, 본 발명의 분석장치는 거의 평면인 층의 제1표면에 대해, 이 장치를 사용하는 경우, 샘플 유체가 제1표면과 접촉하기 전에 여과 수단을 통과하도록 하는 관계로 배치된 여과 수단을 추가로 포함함을 특징으로 한다. 본 발명의 장치는(거의 평면인 층을 통과하는 유체를 흡수하기 위한)흡수 수단을 포함하는 것이 더욱 바람직하다.
본 발명의 개념은 시험샘플중 다양한 분석물의 미지의 존재 또는 농도를 측정하기 위한 결합분석의 수행에서 뿐 아니라 고체상, 분석장치를 위한 장치상 대조표준을 제공하는데 유리하다. 하기에 상세히 설명하는 것과 같이, 본 발명에 따른 바람직한 고체상 분석장치는, 시각적 분석 시스템에서 시험결과를 명백하게 해석할 수 있도록 하는 음성 결과를 나타내기 위한 가시적 양성 대조 영역과 같은 분석 대조 표준을 가지고 있다. 또한, 예를 들어, 본 발명의 개념을 이용한 바람직한 절차적 대조 장치는 본 발명의 물질을 포함할 수 있고, 이 물질은 섬유의 다공성 매트릭스내에 분석중인 시험샘플중 분석물에 대해 검출가능한 반응을 나타낼 수 있는 물질을 가진다.
본 발명에 따라, 본 발명의 물질 및 장치를 이용한, 결합분석을 수행하는 개선된 방법이 제공된다. 한가지 이러한 바람직한 방법에 있어서, 분석물, 예를 들어 항원 또는 항체를 함유하는 샘플은, 물질상에 반환되고 고정된 고체 입자를 포함할 수 있는 다공성 물질로 제조된 반응 표면과 접촉시킨다. 반응 부위에 접촉시키는 방법은 다수의 수단으로 가능하며, 바람직하게는 반응 부위가 유동장치의 다공성 물질상에 위치하는 경우 단일 점적에 의한 방법을 사용하거나 반응 부위가 크로마토그래피 스트립(strip)상에 존재하는 경우 크로마토그래피 유동에 의한 방법을 사용할 수 있다. 분석물은 물질내에 보유된 입자 상의 시약에 결합되고, 이어서 반응 표면은 물질내에 보유된 시약에 의해 결합된 분석물을 결합될 수 있는 제2의 ＂표지된＂시약과 접촉하게 된다. 다르게는, 제2시약이 비표지된 항체일 수 있어, 계속하여 항체에 대한 직접적인 표지된 물질 또는 시약을 첨가할 수 있다(증폭 또는 간접 면역분석). 그 다음, 비결합된 물질을 예를 들어 세척에 의해 제거하고, 그 장치를, 제2시약의 ＂표지＂의 존재하에 샘플중 분석물의 존재 및/또는 양을 나타내는 검출가능한 반응을 나타내는 지시물질과 접촉시킨다.
이러한 검출가능한 반응은 시각적으로 또는 기구적으로 판독할 수 있고, 유리하게는 색 반응일 수 있으며, 가장 바람직하게는, 특히 분석에서 각기 양성 또는 음성 결과만이 필요하거나 요구되는 경우, 분석의 결과를 나타내는 ＂+＂ 또는 ＂-＂ 표시의 가시적 외관 형태일 수 있다. 다르게는, 검출가능한 반응을 시각적으로 또는 기구적으로 판독함으로써 정량적 또는 반-정량적 결과를 얻을 수 있다.
본 발명의 신규한 판독가능한 반응 및 본 발명으로 제조된 장치는, 비록 많은 유형의 분석에 적용가능할지라도, 상술한 바와 같이 체액의 비색계측정 또는 다른 EIA를 수행하는 통상적인 고체상 면역분석 기술을 개선시킨 것으로 면역분석에 사용하는 경우 특히 유리하다. 더우기, 본 발명에 따라 제조된 장치는 선행기술에 비해 비교적 사용이 용이하고, 적은 절차적 단계 및 덜 복잡한 분석기술을 요구하며, 미지 샘플의 시험에 대한 신속한 정량적, 반-정량적 또는 정상적 결과를 제공한다. 물질 및 장치는 추가로 예를 들어 이러한 분석의 정확성 및 신빙성을 평가하기 위한, 대조표준으로서의 유리한 사용을 위한 적합하다. 더우기, 제조하는 동안 본 발명의 장치들은 비교적 쉽게 만들 수 있다. 본 발명의 이러한 장치를 이용하는 분석은 또한 다양한 수준의 분석물에 대해 매우 민감한 것으로 밝혀졌다. 상기의 장점 뿐 아니라 다른 장점들도 본원에 설명된 발명의 상세한 설명으로부터 명확해질 것이다.
본 발명의 개념은 각종 유형의 결합분석에 적용가능하다. 항원 및 항체 분석물에 대한 이러한 몇가지 유형의 분석예의 도식적 표현은 다음과 같을 수 있다. 그러나, 당해 기술의 숙련가들이 본 발명의 개념을 적용시킬 수 있는, 항원 또는 항체 이외의 분석물을 포함한 많은 다른 유형의 분석을 고안할 수 있다고 생각할 수 있다.
1. 직접 분석
A.항원(Ag) 분석
Figure kpo00001
Ab는 Ab2와 동일하거나 상이할 수 있고 각종 모노클로날 항체 또는 폴리클로날 항체로 이루어질 수 있다.
상기 반응 도표를 사용하여 본 발명에 따라 측정 가능한 항원 분석물의 예에는 스트렙(strep)-A, 베타-hCG 및 B형 간염 표면 항원(HBsAg)이 포함되지만 이에 한정되지는 않는다.
B. 항체(Ab)분석
Figure kpo00002
분석물 예(이에 한정되지 않음) : a - HTLV - III ; a - HBc - IgM ; a - Rubella
Figure kpo00003
분석물 예 : a - HAV - IgM
2. 간접 분석
항원 분석
Figure kpo00004
이것은 표지가 분석물에 대해 직접적이지 않은 분석 그룹이다. 이 양태에 있어서, 항-Ab는 일반적으로 Ab에 대해 직접적일 수 있거나 Ab에 포함된 하나 이상의 작용그룹에 대해 적접적일 수 있다.
또한, 어떤 경우에는 하기와 같이 고체상 위에 직접적으로 분석물을 포착하는 것이 바람직하다:
Figure kpo00005
3. 경쟁적 분석
항체 분석
Figure kpo00006
분석 도식 3에서, 샘플 및 표지는 고체상의 항원에 대해 직접적이다. 결합된 표지의 양은 샘플중 항체의 양을 반영한다.
도면중 제1 및 2도에 관하여, 본 발명의 분석 장치의 양태는 일반적으로 (10)으로 나타낸다(Abbott Laboratories에서 시판, North Chicago, Illinois, 상표 TESTPACK). 장치(10)에는 거의 평면이고, 통상원형인, 원반형 반응 매트릭스(12)가 포함된다. 매트릭스(12)는 분석중인 샘플중 분석물의 존재 또는 양을 측정하기 위하여, 이러한 분석의 수행에 장치(10)을 사용하는 경우 매트릭스(12) 안에서 분석 결합에 필요한 많은 화학적 반응 및 변화가 일어나도록 장치(10)내에 배치한다. 매트릭스(12)는 샘플-접촉 표면(반응부위)(12a) 및 이의 반대쪽 표면(12b)을 가지며; 매트릭스(12)의 바람직한 구성은 하기 실시예에서 좀더 상세히 설명된다.
장치(10)은 내부에 매트릭스(12)가 배치된 지지체(14)를 포함한다. 지지체(14)는 플라스틱, 금속 또는 다른 경질 또는 반-경질 물질과 같은 적당한 물질로 제조할 수 있다. 지지체(14)용 물질로 특히 바람직한 것은＂ABS＂로 공지된 시판되는 플라스틱이고 몬산토 캄파니로부터 구입할 수 있다(Monsanto Company, St. Louis, Missouri). 보여준 바람직한 양태에 있어서, 지지체(14)는 매트릭스(12)를 완전히 둘러싸고 이를 위한 지지체 및 홀더(holder)로서 작용한다. 이러한 작용을 수행하기 위하여, 지지체(14)는 매트릭스(12)를 지지하고 단단하게 유지시키기 위한 대체로 원형인 플랜지(flange)(16)을 가진다. 제1 및 제3a도에서 보듯이, 분석 수행에 사용된 유체 샘플 및 시약을 수용하기 위한 유체 챔버(chamber)(17)는 플랜지(16)의 외벽 표면(16a)에 의해 형성된 측벽 및 매트릭스(12)의 샘플-접촉 표면(반응 부위)(12a)에 의해 형성된 기저벽에 의해 장치(10)내에 한정된다.
추가로 장치(10)은 나타낸 바와 같이 분석장치를 사용하는 동안 유체를 흡수하기 지지체(14)내에 배치된 흡수 수단(20)을 포함한다. 장치(10)의 흡수 수단(20)은 한 층 이상의 물질을 포함할 수 있고, 사용될 경우, 보는 바와 같이 차단 물질(18)과, 또는 반응 매트릭스(12)와 물리적으로 접촉된다. 이러한 특히 유리한 특징은 장치(10)을 사용하여 분석을 수행하는 동안 경우에 따라, 분석과정 동안 반응 매트릭스(12)로부터의 과량의 유체의 통과 후, 과량의 유체가 쉽게 흡수되도록 한다. 흡수 수단(20)은 사실상 수분 또는 유체-보유 물질, 예를 들어 제임스 리버 (James River)사가 시판하는 ＂105 포인트＂ 또는 ＂50 포인트＂라는 것일 수 있고, 특히 바람직하게는 상기한 각각의 층 하나 이상의 조합일 수 있다.
장치(10)의 또다른 양상으로는, 차단 수단이 고체상 분석장치 내에서의 유체 흐름을 제한하기 위해 제공된다. 이것은 특히 반응표면으로부터 흡수제 수단 또는 층까지 유체의 흐름을 허용하면서 흡수체 층에서 반응 매트릭스로의 유체의 역류를 막아주기 위한, 투과성 반응표면 또는 매트릭스, 또는 필터층 및 장치에 사용된 유체를 흡수하기 위한 흡수제 층을 가진 고체상 분석장치에 사용되는 경우 특히 유리하다.
제1도에서와 같이, 차단 수단은 매트릭스(12)하에서 및 지지체(14)내에서 연장되는 차단물질(18)층을 포함한다. 차단물질(18)은 매트릭스(12)의 표면(12b)과 접촉되어 있고, 이 장치를 사용하는 경우 매트릭스(12)를 통과하여 표면(12b)를 거쳐 층(18)까지 이동되는 유체가 표면(12b)과 재접촉되지 않도록 제한하는 작용을 한다. 유체 제한층으로 층(18)을 이용하는 것이 매트릭스(12)에서의 ＂배면＂ 간섭을 예방 또는 제거하기 위하여 본 발명 장치에 가장 바람직하지만, 이 특징은 매트릭스(12)의 기본적 작용 또는 개념에 필수적 또는 결정적인 것은 아니고, 일반적으로 경우에 따라 장치에서 제거할 수도 있는 것이다. 제거하는 경우, 장치는 일반적으로 분석을 만족할만하게 수행하지만, 아마도 감수성은 덜하다(검출가능한 반응 감소).
층(18)은 유체 또는 수분이 제한적이고 거의 한 방향으로 유동할 수 있는 적당한 물질을 포함할 수 있다. 이러한 목적을 위하여 특히 적당한 물질의 예는 에틸 비스퀸 코포레이션(Ethyl Visqueen Corp., Baton Rouge, Louisiana)에서 ＂X-6057＂(1.0mil) 및 ＂X-6108＂(1.25mil)로서 제조되어 시판되는 폴리에틸렌 위브(weave) 물질뿐 아니라 미합중국 특허 제3,929,135호 및 제4,342,314호에 기술된 물질등이다.
하기 설명되는 바와 같이 시험 샘플중에 분석물이 존재함을 나타내는 발색과 같은 육안 판독가능한 반응이 나타나도록 하는 장치(10)의 능력 이외에, 검출가능한 반응, 예를 들어 분석이 수행되는 경우 그 안에서 일어나는 화학적 및 생물학적 반응 및 변화의 결과로서 매트릭스(12)에 의해 생성되는 가시광선의 반사율, 또는 형광의 강도에 상응하는 검출가능한 반응을 기구적으로 측정할 수 있다.
따라서 장치(10)으로부터의 검출가능한 반응은 예를 들어, 통상적인 분광광도계로 측정할 수 있다. 예를 들어, 특정 분석 동안의 반응 및 변화에 의해 나타나는 매트릭스(12)의 검출가능한 반응이 그 안에서 발색이 일어나고 발색의 증가가 분석중인 시험샘플중 특정 분석물치의 증가를 나타내는 것이라면, 매트릭스(12)로부터 분광광도계에 반사된 광도가 감소되는 것은 샘플중 분석물치의 중가에 상응하는 것이 된다. 이러한 결과에 해석은 주로 통상적인 전자공학을 사용하여 분광광도계의 검출기에 의해 나타난 아날로그 신호를 디지탈 정보로 전환하는 방법과 같은, 당해 기술의 숙련가에게는 이미 공지된 방법으로 수행할 수 있다. 이러한 전자공학은 또한 당해기술의 숙련가들에게 잘 알려져 있고 시험샘플중 분석물의 존재 및/또는 양에 상응하는 또는 상관관계가 있는 디지탈 정보로부터 사람이 판독가능한 신호를 발생시킬 수 있다.
제1, 2 및 5도에 대해 보다 상세히 살펴보면, 본 발명의 분석장치(10)는 추가의 반응부위 또는 반응 매트릭스(12)의 표면(12a)에 걸쳐 위치하는 여과수단(22)를 포함할 수 있다. 여과수단(22)은 보유 고리(22a)에 의해 지지체(14)에 가압-부착시키고 바람직하게는 손잡이 부분(22c)가 있는 탈착가능한 부분(22b)를 가진다. 여과수단(22)는 추가로, 예를 들어 플라스틱이 둘러싸고 있는 유리 또는 셀룰로즈 필터막과 같은 적당한 다공성, 섬유성 물질(22d)로 구성되어 있고; 특히 바람직한 것은 단일 또는 조합형의 ＂LydairTMGrade 254＂(Lydall) 및 ＂Gf/F＂ 또는 ＂GF/D＂ (Whatman 제품)이다. 장치(10)를 분석수행을 위해 사용하는 경우, 수단(22)은 여러 가지 기능을 수행할 수 있다. 수행되는 분석의 유형 및 시험샘플의 특징에 따라, 수단(22)는 샘플을 보유하거나, 샘플 또는 시약을 반응 매트릭스(12)까지 서서히 통과시키는 저장기로서; 분석에 사용되는 시약, 예를 들어 동결건조된 시약을 보유하는 비히클로서; 및 샘플중 외인성 유교(articulate)물질을 제거하기 위한, 또는 예를 들어 혈장은 통과시키면서 전혈 샘플로부터 혈구를 분리시키고 잡아 두기 위한 예비필터로서 작용할 수 있다. 또한, 제5도에서와 같이 여과수단(22)가 적어도 부분적으로 장치(10)에서 탈착가능하면(바람직하지만 본 발명에 필수적인 것은 아니다), 장치(10)을 사용하여 분석을 수행하는 동안 필터수단(22)의 탈착가능한 부분(22b)을, 경우에 따라, 그 안에 보유할 수 있는 물질을 제거하기 위하여 또는 시약을 첨가하기 위해 반응 매트릭스(12)를 노출시키기 위하여 또는 검출가능한 반응을 판독하기 위하여 분석중 한 단계 동안 제거할 수 있다. 이 경우에 필터수단 (22)의 막 부분은 이의 탈착가능 부분(22b)의 일체 부분이다.
본 발명에 따라 본 발명의 분석 장치 및 방법에 유용한 물질은 다공성 섬유매트릭스를 포함함을 특징으로 한다. ＂다공성＂이란 매트릭스가, 유체가 흘러들어가 쉽게 통과할 수 있는 물질로 이루어진 것을 의미한다. 본 발명의 물질에 있어서, 다공성의 특성은 적당한 원료, 예를 들어, 유리, 셀룰로즈, 플라스틱 나일론 또는 당해 기술의 숙련가에게 공지된 다른 섬유성 물질의 선택에 의해 간단히 달성될 수 있다.
예를 들어, 사용하기에 특히 바람직한 물질은 공칭두께가 일반적으로 0.032인치인 ＂Whatman GF/D＂ 유리섬유 필터이다. 이러한 물질의 두께는 중요하지 않으나, 주로 분석되는 샘플(및 분석물)의 특성, 예를 들어 분석물을 충분히 결합시키기에 충분한 시간 동안 충분한 샘플을 보유할 필요성 및 유동성 같은 것을 기준으로 하여, 통상적인 숙련가들에게 선택의 문제가 될 것이다.
또한, 섬유성 물질은 물질의 섬유상에 보유되며, 고정된, 평균직경이 약 0.1 내지 약 10마이크론 이상, 더욱 바람직하게는 약 0.1 내지 약 5마이크론인, 다수의 거의 구형인 고체 입자를 가지는 것이 바람직하다. ＂보유되며 고정된＂이란, 일단 물질의 섬유상에 있는 입자는 그 물질 안의 어느 위치로든(즉,다른 섬유로) 사실상 움직일 수 없거나, 이를 파괴하지 않고는 그 물질로부터 완전히 제거할 수 없는 것을 의미한다. 입자가 이렇게 보유되며 고정된 기작은 공지되지 않았지만 섬유 및 입자사이, 및/ 또는 입자들 사이의 물리적 표면 인력에 기인될 수 있다. 입자는 본 기술의 숙련가들에 의해 ＂미세입자＂로서 일반적으로 공지된 적합한 유형의 물질로부터 선택될 수 있고; 이러한 입자는 전형적으로 예를 들어, 폴리스티렌, 폴리메틸아크릴레이트, 폴리프로필렌, 라텍스, 폴리테트라플루오로에틸렌, 폴리아크릴로니트릴, 폴리카보네이트 또는 유사한 물질로 이루어져 있다. 본 발명에 사용하기 위해 어떤 유형의 미세입자를 선택하던지간에, 입자를 구성하는 물질(들)이 입자의 표면에 시험샘플중 분석물, 예를 들어 항체 또는 항원, 또는 이의 조합물과 반응할 수 있는 입자를 잡아둘 수 있거나 자체가 입자의 표면에 분석물을 잡아둘 수 있어야 한다는 것이 중요하다. 또한, 입자의 크기는 중요하지 않지만, 입자의 평균직경이 거의 상술된 범위내에 있는 한(입자의 평균직경이 섬유성 매트릭스의 평균 기공크기보다 작은 것이 바람직하지만), 상기한 특성을 갖는 유형의 입자는 어느 것이라도 사용하기 적당하다.
본 발명에 의해 제공된 물질 및 분석장치는 유리하게는 아주 다양한 달리 공지된 분석기술 및 방법에 사용될 수 있고 본원에 상세히 설명된 특정한 면역분석 기술에의 적용에 한정되지는 않는다고 생각된다. 따라서, 이것들은 소위 ＂경쟁적 결합＂분석 또는 유사한 결합 분석 방법에 사용될 수 있고, 또한 면역분석은 아니지만 본 발명의 장치의 물질 또는 반응 매트릭스내 입자상에 이러한 분석에 사용되는 적어도 하나의 시약을 처음에 보유함으로써 수행될 수 있는, 글루코즈, 요산등과 같은 분석물에 대한 전형적인 효소분석과 같은 다른 분석법에 사용될 수 있다. 본 발명이 유리하게는 각종 유형의 분석방법의 다양한 용도에 유익하게 적용될 수 있고 따라서 본원에 설명된 분석 및 방법의 구체적 사항에 한정되는 것이 아니라는 것은 당해 분석 기술의 숙련가들에게는 아주 명백할 것이다.
그러나, 이 발명의 원리에 따라 제조된 신규한 물질 및 분석장치는 특히 유리하게는 효소 면역분석, 특히 소위 ＂샌드위치＂효소 면역분석 및 간접 효소 면역분석에 사용될 수 있다. 이러한 분석은 비교적 정교하고, 시간을 소모하며 비싼 장비 및 물질을 필요로 하는 선행기술의 전형적인 ＂비드＂ 또는 다른 분석보다 상당히 간단한 방법으로 본 발명의 물질 및 장치를 사용하여 수행할 수 있다. 이러한 분석은 또는 놀랄만한 감수성이 있는 것으로 밝혀졌다. 본 발명의 물질을 이용하는 최근의 바람직한 ＂샌드위치＂ 면역분석 방법에 대한 일반화된 예는 하기와 같다 :
단계 a) 이미 설명한 바와 같은 반응 매트릭스를 형성하는, 물질내 입자 상에의 항체 또는 항원의 보유; 단계 b) 매트릭스에 측정되는 항원 또는 항체를 함유하는 시험샘플의 적용; 단계 c) 단계 b)의 항원 또는 항체에 효소-결합된 항체 또는 항원의 적용; 단계 d) 결합되지 않은 물질을 제거하기 위한 세척; 및 단계 e) 단계 c)의 결합체의 효소 부분 존재하에 반응 매트릭스중 검출가능한 색 또는 다른 반응을 일으키는 지시제 물질의 적용.
본 발명의 장치를 사용하여 이러한 ＂샌드위치＂ 분석방법을 유리하게 수행할 수 있는 방법에 대한 좀더 상세한 논의는 하기 실시예에 주어진다.
본 발명에 따라, 검출가능한 반응은 분석장치의 다공성 물질 또는 반응 매트릭스상의 반응 표면 또는 부위에서 발생된; 반응은 분석중인 샘플중 분석물의 존재 및/ 또는 양을 나타내는 것이다. 본 발명의 바람직한 태양으로, 이러한 검출가능한 반응은, 이미 설명된 것과 같은 일련의 분석단계에 따라 발색될 수 있거나, 분석기술에 공지된 많은 반응일 수 있고 유사한 목적을 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 나타난 반응은 형광중 하나일 수 있으나 단, 본 기술의 숙련가들에게 널리 공지된 바와 같이, 분석에 적합한 시약이 사용되어야 한다. 반응은 또한 화학발광, 또는 기구를 사용하여 시각적으로 또는 여러 가지 공지된 기구에 의해 검출가능한 많은 방사선 에너지 반응(예를 들어, 방사선 방출)일 수 있다. 따라서, 특히 본 발명의 물질 및 장치의 사용에 있어서, 많은 상이한 형태의 검출가능한 반응이 가능하고 바람직하지만 발명의 개념이 이에 한정되는 것은 아니라고 생각된다.
＂장치상＂ 절차적 대조영역은(시험 샘플중 대상 분석물의 존재 여부에 관계없이, 유효한 분석결과를 나타내는 검출가능한 반응을 보이는) 양성 대조표준,(분석결과가 유효하지 않은 경우만 검출가능한 반응의 변화를 나타내는) 음성 대조표준, 및 샘플 분석물에 상응하는 검출가능한 반응을 단일 분석 장치 반응부위에 동시에 나타내도록 고체상 분석장치상에 제공된다. 본 발명에 따라 사용하기 위한 전형적인 분석장치는 상기한 하나 이상의 층을 가진 유동 분석 장치, 하나의 또는 모든 시약이 장치와 소통하는 단일 스트림(strip) 또는 다른 다공성 물질의 별도 대역에 함유되어 있는 크로마토그래피 분석장치용 시험 스트립(예를 들어, 페이퍼) 또는 박층 크로마토그래피 분석장치용 시험 스트림(예를 들어, 니트로 셀룰로즈)이 포함된다.
등용적의 시험샘플 및 분석 시약을 절차적 대조 및 시험영역과 동시에 접촉하여 위치시킴으로써 당해 기술에서 일반적으로 시행되는 것과 같은 별도의 대조시험의 필요성을 피할 수 있다. 반응 부위에 샘플 및 시약을 적용하는 방법은 사용된 특정 장치에 적당한 방법이면 된다. 예를 들어, 장치가 유동 분석 장치인 경우, 샘플 및 시약은 적가하는 방식으로 또는 정확한 용적 샘플 및 시약이 반응부위에 접촉되도록 절차적 대조 및 시험영역에 붓는 식으로 적용시킬 수 있다. 장치가 크로마토그래피 분석장치 또는 시험 스트립인 경우, 샘플 및 시약은 스트립에 적용시켜 절차적 대조 및 시험영역을 포함하는 반응 부위를 통과하여 흐르도록 할 수 있다. 사용된 특정 장치와 무관하게, 절차적 대조(음성 대조 및 양성 대조) 및 분석물 결합영역을 포함하는 반응부위에 시약 및 샘플의 적용에 의해 동시에 접촉된다.
본 발명의 절차적 대조 표준 또는 판독가능한 결과는 복수의 또는 다수의 반응결과를 동시에 나타낼 수 있는 반응 부위를 가진 분석장치와 함께 사용될 수 있다는 것은 본 기술의 숙련가에게는 명확해진다. 이러한 다른 유형의 반응 표면에는 예를 들어 피복되거나 피복되지 않은 섬유매트릭스, 필터, 페이퍼 또는 막, 비교적 평탄한 고체 표면등이 포함된다.
제3a-c, 4a-c, 6a-d 및 7a-c도에 대해서, 장치상 음성 및 양성 대조영역(30) 및 (32)는 각기 바람직하게는 분석장치(10) 또는 (11)의 반응표면 또는 매트릭스 (12)상의 반응부위에 제공된다. 장치(10)은 제1도에 묘사된 것과 같은 유동 장치이고 장치(11)은 크로마토그래피 스트립이다. 음성 및 양성 대조영역은 정량적으로는 음성 및 양성 분석 참조 대조 표준으로서 작용하거나 정성적으로는 분석수행에 사용된 방법 및 시약의 유효성을 나타내는 절차적 대조표준으로서 작용할 수 있다. 본원에 사용되는 바와 같이, ＂대조＂라는 용어에는 정략적 및 정성적 양태가 둘다 포함된다. 음성 대조영역(30)은, 본원에 설명된 것과 같이, 결합분석의 수행에 있어서 장치(10) 또는 (11)의 일반적인 사용동안 효소 표지 또는 다른 신호 반응물질을 보유하게 될 물질이 없는 매트릭스(12)의 대조영역(30)을 유지시킴으로써 형성된다.
양성 대조영역(32)는 시험샘플중 대상 분석물의 존재 여부에 무관하게, 매트릭스의 대조영역(32)내에 효소 표지 또는 다른 신호 반응물질과 결합할 수 있는 물질을 제공함으로써 형성된다. 상술한 바와 같이 특히 바람직한 반응 매트릭스와 관련되어 사용된 바와 같이, 양성 대조영역(32)는 대조영역(32)내의 미세입자를 분석물로 피복시키거나 결합분석을 수행하는 동안 영역(32)내에서 효소 표지를 결합시키거나 유지시킬 수 있는 다른 물질로 피복시켜 형성시킬 수 있다. 또한, 하나 이상의 분석물 결합영역(들)(34)은 매트릭스(12)의 영역(34)내의 미세입자를 예를 들어 항원 또는 항체와 같은, 분석물과 반응을 할 수 있는 물질로 피복시킴으로써 본원에 설명한 특히 바람직한 반응 매트릭스 물질내에 형성시킬 수 있다.
양성대조 영역(32) 및 분석을 결합영역(들)(34)은 결합분석의 수행에 있어서 장치(10) 또는 (11)을 용이하게 사용할 수 있는 형태로 제공될 수 있다. 그러나, 최근에는 양성 대조영역이 양성 시험결과의 발생시 분석물 결합영역과 상호작용하여 사용자에게 공지된 의미를 가진 제1의 표시 기호를 형성하고 양성 대조영역이 음성 시험결과의 발생시 단독으로 작용하여 제1의 표시 기호와의 상이한 사용자에게 공지된 의미를 가진 제2의 표시 기호를 형성하는, 상호작용하는 형태로 양성 대조영역 및 분석물 결합영역을 제공하는 것이 바람직하다.
상호 작용하는 양성 대조 및 분석물 결합영역은 제3a-c 및 6a-c도의 특히 바람직한 양태에서 가장 잘 나타나 있으며, 여기에서 양성 대조영역(32)은 직사각형 바(bar) 또는 ＂-＂기호의 모양으로 형성되는 반면, 분석물 결합영역(34)는 양성 대조영역(32)의 양쪽에 이의 수직방향으로 직사각형 바 형태로 형성된다. 따라서 제3a-c 및 6a-c도의 장치를 사용하는데 있어서, 장치(10)의 올바른 사용으로 얻어진 양성 시험 결과는, 제3c도에서와 같이 양성 대조영역(32) 및 분석물 결합영역 (34)에 ＂+＂기호의 모양으로 검출가능한 반응을 발생시켜 사용자에게 ＂+＂또는 양성 시험결과를 알려준다. 장치의 적합한 사용으로부터 수득된 음성 시험결과는, 제3b 및 6b도에서와 같이 양성 대조영역(32)에 ＂-＂기호의 모양으로 검출가능한 반응을 발생시켜 사용자에게 ＂-＂또는 음성 시험결과를 알려준다. 결합분석이 부적합하게 수행되거나, 분석에 사용된 시약이 부적합하게 작용하는 경우는, 제3a 및 6a도에서와 같이, 양성 대조영역(32) 또는 분석물 결합영역(34) 중 어디에서도 검출가능한 반응이 나타나지 않으며, 이는 유효하지 않은 시험결과를 나타낸다. 또한, 분석 수행에서 세척단계를 적합하게 수행하지 못함으로써 발생하거나 비특이적 결합에 의해 발생할 수 있는 것과 같은, 음성 대조영역(30)에서의 검출반응은 유효하지 못한 시험결과를 나타내는 것일 수도 있다. 제3a-c 및 6a-c도의 형태는, 시험결과의 양성(+) 또는 음성(-) 특징, 및 분석의 유효성에 대해 명백한 기호 형태로 사용자에게 즉각적인 정보를 제공하기 때문에 특히 바람직하다.
다르게는, 절차 대조영역 및 분석을 결합영역은 경우에 따라 다른 형태로 제공될 수 있다. 제4a-c 및 7a-c도의 대체 양태에서, 양성 대조영역(32) 및 분석물 결합영역(34)는 보는 바와 같이, 점의 모양으로 형성된다. 따라서, 양성 시험결과는 제4c 및 7c도에서와 같이 두 개의 점-형태의 검출가능한 반응영역에 의해 나타나고, 음성 시험결과는 제4b 및 7b도에서와 같이 양성 대조영역(32)에서만 검출가능한 반응의 존재에 의해 나타나고, 유효하지 않은 시험결과는 제4a 및 7a도에서 보여주는 바와 같이 검출가능한 반응이 나타나지 않음으로써 알 수 있다. 음성 대조영역(30), 양성 대조영역(32) 및 분석물 결합영역(들)(34)에 대한, 예를 들어, 다른 기호, 수 등과 같은 다른 대등한 형태는 당해기술의 숙련가에게 쉽게 명확해진다.
[실시예]
하기 실시예는 본 발명의 신규한 물질을 제조하고 사용하는 바람직한 방법, 및 이 물질을 이용한 분석장치 뿐만 아니라, 이것을 이용한 분석방법을 설명한다. 제조된 분석장치는 실질적으로 제1 및 2도를 참조로 본원에 설명되고 보여준 장치의 전체 형태 및 외형을 가지며 하기 방법을 사용하여 본 발명에 따라 제조하고 분석에 이용한다. 그러나, 실시예는 단지 설명을 위한 것이지 결코 본 발명의 범위에 제한을 두려는 것이 아니고, 본 발명의 범위는 첨부된 특허청구 범위에 의해서만 한정된다.
달리 지시가 없는 한, 본원에 표현된 모든 퍼센테이지는 중량에 의한 것이다.
[실시예 1]
항체-피복된 미세입자의 제조
100μ1의 카복실레이트-개질된 미세입자 (2.5% 고체; 평균직경, 0.45마이크론; Ployscience and Seragen에서 시판)를 메틸 에틸 설포네이트(MES) 완충액 1ml(5mM, pH 4.75) 및 항체 용액(베타-hCG)75μl(2mg/ml)에 가한다. 용액을 교반시킨 후 1-에틸-3(3-디메틸-아미노프로필)카보디이미드 HC1(EDAC) 100ml(10ml H2O당 2mg)에 가한다. 용액을 2 내지 8℃에서 밤새 교반시킨 후 미세입자를 원심분리하고 0.1% 트윈-20 용액으로 2회 세척하고 ＂PBS＂ 인산염 완충 염수(0.01M KH2PO4; 0.15M NaC1; pH 7.2)에 재현탁하여 0.125% 용액을 수득한다. PBS에 재현탁시킨 후, 입자를 다음 단계에 계속해서 사용하기 위하여 2 내지 8℃에서 저장한다.
[실시예 2]
고체상 반응 매트릭스의 제조
실시예 1로부터의 항체-피복된 미세입자 50μl를 와트만 GF/D 유리 필터의 중앙에 적가하고; 돼지의 혈청 100μl를 가한 후 필터 및 미세입자를 실온에서 습도 챔버중에 30분 동안 배양한다. 이 시간 후, 이제 미세입자를 함유하게 된 필터를 PBS 완충액 300μl로 3회 세척한다. 필터를 하기 면역분석 실시예에 사용할 때까지 습도 챔버에 저장한다. 미세입자를 주사 전자현미경으로 관찰한 결과 필터 물질의 유리섬유 상에 비가역적으로 포착되거나 결합된 것으로 나타났다.
상기 실시예에 설명된 기술이외에, 항체(또는 항원)는 여러 가지 방법, 예를 들어 흡착 또는 여러 화학적 활성제의 사용에 의해 입자에 결합시킬 수 있다는 것도 주목할만 하다. 또한, 입자를 예를 들어 동물의 혈청을 가한 후 섬유성 매트릭스에 가할 수 있으며, 이러한 혈청의 사용은 그리 중요한 것은 아니다. 따라서, 매트릭스에 입자를 가하는 순서 및 매트릭스내에 포함되기 전 또는 후 이의 처리는 본 발명에 그리 중요하지 않다. 더구나, 피복된 섬유성 물질, 예를 들어 폴리스티렌-피복된 유리는 본원에 구체적으로 설명된 유리 필터 매트릭스 물질 대신 사용할 수 있고 본 발명의 장점이 또한 이에 의해 실현될 수도 있다.
[실시예 3]
면역분석 원안(베타-hCG의 측정)
이미 설명한 바와 같은 항체-피복된 미세입자를 함유하는 유리 섬유 물질을 거의 원형인 ＂디스크＂가 되게 절단하고, 반응 매트릭스를 형성하는 디스크를 압지 물질과 접촉하게 놓아 분석에 사용된 용액으로부터의 과량의 유체가 흡수되도록 한다. 그 후에 베타-hCG를 0,50 및 100mIU1ml 함유하는(표 1 하기 참조) 사람의 뇨(약 280μl) 시험샘플 5방울을, 각 매트릭스위에 위치한 예비필터를 통과시킨 후에, 각 매트릭스에 가한다. 항체-효소 결합체(표 1, 하기 참조) 3방울을 예비필터를 통해 각 매트릭스에 가하고 각 매트릭스에 약 2분 동안 실온에서 배양한다. 다음 예비 필터를 제거하고 세정제 세척용액 1.0 ml를 각 매트릭스에 가하여 과량의 항체-효소 결합체를 제거한다. 그 다음, 크로모겐 지시제(표 1, 하기 참조) 1방울을 각 매트릭스에 가하고, 2분 후 각 매트릭스를 시각적으로 점검하여 발색을 확인한다. 베타-hCG를 함유하는 시험 샘플에서 발색이 관찰되며 발색과 상관관계가 있는 광의 흡광도는 통상적인 분광광도계를 사용하여 기구적으로 측정한다. 그 결과는 하기 표에 설명된다.
[표 1]
베타- hCG에 대한 자료 : 양고추냉이 퍼옥시다제(HRPO) 항체-효소 결합체/ 3,3',5,5'-테트라메틸 벤지딘(TMB) 크로모겐(650nm에서 2분 후의 흡광도)
Figure kpo00007
[표 2]
베타-hCG에 대한 자료 : 알칼리성 포스포타제 항체-효소 결합체/브로모-클로로 인돌 포스페이트 니트로-블루 테트라졸리음 크로모겐(650nm에서 2분 후의 흡광도)
Figure kpo00008
상기 항체-효소 결합체는 일반적으로 하기 문헌에 따라 제조한다 : HRPO; Nakane, P.K. and Kawaoi, A., The Journal of histochemisstry and Cytochem istry. 22(12) 1084-1091(1974); 알칼리성 포스파타제 : Boehringer Manheim GmbH에서 시판, 글루타릭 디알데하이드 방법으로 약간 개질시켜 제조.
12명의 비임산부 및 6명의 임신이 확인된 여자로 부터의 뇨 샘플은 상기 설명한 바와 같이, HRPO-항체효소 결합체를 사용하여 시험하고 사실상 실시예 3 에서 설명한 방법을 사용한다. 비임산부 환자로부터의 12개 샘플은 반응 매트릭스에서 볼 수 있는 색을 나타내지 않는다. 즉, 모든 흡광도가 0.050이하로서 이 역치이하에서는 어떤 색도 쉽게 시각화될 수 없다. 6명의 임산부 환자 모두로부터의 샘플은 시험시 볼수 있는 색을 나타낸다.
[실시예 4]
베타-hCG절차적 대조표준의 제조
표면에 베타-hCG에 대한 항체가 결합된 미세입자(상술한 바와 같은, 0.125% 고체) 1.0ml를 베타-hCG 용액(1.0mg/ml) 14.0μl와 반응시킨다. 용액을 3시간 동안 실온에서 교반시킨 후 필요할 때까지 2 내지 8℃에서 저장한다. 입자의 추가 세척은 필요하지 않다.
표면에 베타-hCG가 결합된 상기 방법의 대조미세입자 50ml를 여러 가지 농도로 희석시키고 항체-피복된 미세입자를 적용시키는 것(상기 설명)과 같은 방법으로 상기 설명한 유리 섬유 필터 물질에 적용시킨다. 각 희석액의 활성은 2방울의 (약 100μl) HRPO-항체 효소 결합체를 가하여 5분 동안 배양시키고, 1.0ml이 세정제 세척용액으로 세척한 후 TMB용액 1방울(약50μl)을 가하여 발색시켜 확인한다. 각 대조표준의 흡광도는 하기 표에서 설명되는 바와 같이, 통상적인 분광광도계를 사용하여 측정한다.
[표 3]
Figure kpo00009
1 : 32희석에서 절차 대조의 흡광도는 100mIU/ml 베타-hCG표준의 흡광도와 동일한 것으로 밝혀졌다.
[실시예 5]
세균학적 시험- 이종성 박테리아
스트렙 A항원에 대한 분석 및 하기 표에 작성된 각종 유기체에 대한 항원의 분석은 상술한 바와 같은 본 발명의 장치를 사용하여 수행한다. 분석의 원안은 하기와 같이 요약할 수 있다 :
1. 예비-제조된 박테리아 면봉(swab) 샘플(공지된 기술로 제조)을 용액에 넣고 장치의 반응 매트릭스상의 필터 어셈블리상에 피펫팅한다. 샘플이 필터를 통과하도록 한다.
2. 항체-효소 결합체 2방울(약100μl)을 가하고 필터를 통과시킨다.
3. 필터를 제거한 후 매트릭스를 PBS완충액 10 내지 12방울(약 500μl)으로 세척한다.
4. TMB 1 방울(약50μl)을 가하고 실온에서 약 2분 배양 후 매트릭스내에서의 발색을 판독한다.
하기 표에 작성된 미생물 항원을 함유하는 샘플에 대해 이미 기술한 것과 같이 수행된 분석의 결과로서 매트릭스로부터 반사된 650nm광선의 흡광도를 통상적인 반사율 기구를 사용하여 측정한다.
[표 4]
Figure kpo00010
a 미생물은 시험당 106CFU농도에서 분석한다.
b 650nm에서의 흡광도
[실시예 6]
고체상 평가; 본 발명에 따른 여러 가지 반응 매트릭스 물질의 사용
농도 0 및 250mIU/ml의 베타-hCG-함유 뇨 샘플을 본 발명에 따라, 여러 가지 섬유성 매트릭스 물질에 포함시킨 미세입자를 사용하여 상기한 바와 같이(실시예 3) 분석한다. 하기 표에 열거되는 물질은 상이한 기공 크기 및 유속을 가진다. 또한 입자를 첨가하기 전에 와트만 GF/D물질을 예비처리한다. HRPO결합체를 사용한다. 각 분석에 있어서, 분석의 성공을 나타내는 발색을 육안 관찰하며 흡광도 판독은 650nm에서 수행한다. 그 결과는 하기 표에 수록한다.
[표 5]
Figure kpo00011
* 마이크론
** 10cm헤드에서 초/100ml
*** 슐라이허 및 슈넬(Schleicher and Schnell)
상기 데이타는 각종 원료 섬유성 물질이 본 발명의 신규한 물질 및 장치의 반응 매트릭스에 사용될 수 있다는 것을 나타낸다. 이러한 대체 원료물질은 경우에 따라(예를 들어, 유속) 물질의 특징을 다소 변화시키기 위하여 단백질 혈청 또는(친수성 또는 소수성) 폴리스티렌으로 예비처리한 후 사용할 수 있다.
[실시예 7]
입자크기의 효과
크기가 0.19 내지 약 3.0마이크론(평균직경) 범위인 입자를 매트릭스 물질(와트만 GF/D)의 샘플에 가한다. 샘플당 항체의 양은 약3.0μg에서 유지시키고 0 및 100mIU/ml 베타-hCG-함유 뇨 샘플을 알칼리성 포스파타제 결합체를 사용하여 상기한 바와 같이 분석한다. 흡광도는 650nm에서 측정한다. 그 결과는 표 6에 주어진다.
[표 6]
Figure kpo00012
상기 결과는 직경이 0.19 내지 약 3.0마이크론 범위의 크기인 입자가 특히 유효하고 바람직하다는 것을 보여준다. 그러나, 약 0.1 내지 약 5마이크론 범위내의 입자가 본 발명에 사용하기에 적합하다. 또한, GF/D 필터 물질의 기공 크기는 약 2.7마이크론이기 때문에, 자료는 섬유성 매트릭스 물질의 평균 기공 크기보다 훨씬 작거나, 큰 입자를 사용할 수 있다는 것을 보여준다.
[실시예 8]
베타-hCG의 신속한 분석
신속하고 절차적으로 간단한 베타-hCG 분석은 이미 제1 및 제2도를 참조로 하여 보여주고 설명한 바와 같이, 본 발명에 따라 제조된 분석 장치를 사용하여 수행한다. 이 분석 원안은 하기와 같다. 환자 뇨 표본 5방울을 의약용 점적기 (dropper)로부터 운반 피펫을 사용하여 장치의 반응 매트릭스 위의 필터 중앙에 적용시킨다. 매트릭스를 통해 표본이 흡수되도록 한다(약 10초). 항체-효소 결합체(알칼리성 포스파타제) 3방울을 가하고 반응 매트릭스를 실온에서 60초 동안 배양한다. 그 다음 필터를 제거하여 버리고 트윈 및 트리톤 완충용액과 합한 시트레이트 /NaC1 세척 용액 약 1ml를 가하고 매트릭스를 통해 흘러보낸다. 크로모겐성 효소 기질(브로모-클로로 인돌 포스페이트 니트로-블루 테트라졸리음) 3방울을 가한 후, 매트릭스내에서 꼬박 2분 동안 색이 형성되게 한다. 그 다음, 세척용액 1.0ml를 다시 가하고 그 결과를 육안 판독한다. 시각적으로-검출가능한 양성표시(+)의 출현은 표본이 높은 수준(약 50mIU/ml이상)의 베타-hCG를 함유한다는 것을 가리킨다. 상기 방법을 사용하여 수행된 이러한 높은 수준의 베타 -hCG를 함유하지 않은 샘플은 매트릭스에 음성표시(-)를 나타낸다.
실시예 8에서와 거의 유사한 원안을 이용하여 수행하지만 양성(+) 또는 음성(-)표시를 나타내지 않는 시험은 시약의 부적합한 첨가를 가리키거나, 시약의 변질을 가리킨다.
다음은 고체상과 함께 샘플의 비특이적 반응성(간섭율)을 측정하기 위한 절차적 대조 영역을 포함시킨 본 발명에 따른 분석장치 제조의 일반적인 실시예이다.
본 발명의 물질을 이용한 반응 매트릭스는 실질적으로 상기한 바와 같이 제조될 수 있고, 입자를 전체적 형태가 사실상 십자형선이 되도록 물질에 포함시킨다. 십자형의 수직축은 표면에 분석물-결합물질을 가진 입자로 형성될 수 있는 반면 십자형의 수평축은 효소 표지와 결합할 수 있는 물질(즉, 표지에 결합되거나 부착될 수 있는 항체)로 형성될 수 있다. 따라서, 이러한 반응 매트릭스를(상기한 바와 같은)분석에 사용하는 경우, 예를 들어 베타-hCG에 대해, 분석물이 검출이 불가능한 수준으로 샘플에 존재하는 경우, 단지 매트릭스의 ＂절차적 대조 영역＂만이 검출가능한 반응을 나타낸다. 즉, 십자형의 수평축(＂-＂표시)이 색을 형성하거나, 음성 결과를 나타내는 다른 반응을 나타낸다. 그러나, 분석물이 검출가능한 수준으로 존재하는 경우, 분석물은 표지에 따라 수평 및 수직축에 있는 입자에 결합하여 양축에 검출가능한 반응(＂+＂표시)을 형성한다.
다르게는, 반응이 나타난 매트릭스의 영역이 ＂점＂, 원형, 숫자 등과 같은 형태를 가질 수 있다. 따라서, 미세입자를 목적에 따라 다양한 방식으로, 상기한 바와 같이, 분무하거나, 다르게는 매트릭스의 물질내에 분산시켜 그 안에 포함시킬 수 있다. 상기 대조는 본 발명의 바람직한 매트릭스 물질과 연결시켜 사용되는 것으로 본 실시예에서 설명한 바 있지만, 장치상(on-board) 대조는 유사하게는 상기한 바와 같이 다른 고체상 분석장치와 연결시켜 사용할 수 있다. 이러한 절차적 대조표준을 지금까지 기술한 물질 및 장치내로 및 다른 유형의 매트릭스 물질을 사용하는 고체상 분석 장치내로 포함시키는 것의 장점에는 a) 대조표준이 각 분석 수행을 위한 물질의 유효성의 척도를 제공하고; b) 각 분석의 경우의 대조표준은 특히＂+＂ 및 ＂- ＂표시와 같은 특정한 방식이 사용되는 경우, 결과의 비교 해석을 가능하게 하며; c)각 분석장치 내에 대조표준을 포함시키는 것은 분석의 유효성 판단을 간소화시켜 사용자들이 분석결과를 더 확신하게 된다는 것이 포함된다.
본원에 상세히 설명한 바와 같이 본 발명의 구체적이고 바람직한 양태에 있어서, 특허청구범위에 주어진 본 발명의 정의 및 범위를 벗어나지 않는 한 여러 가지 변경 및 변화가 가능하다고 생각된다.

Claims (8)

  1. 유체샘플과 접촉하는 부위인 반응부위 및 모세관 현상 또는 위킹(wicking)에 의해 샘플을 반응 부위까지 운반하는 수단을 갖은 다공성 기질과 결과를 검출하기 위한 표지 수단을 포함하는, 결합분석에서 유체샘플 중의 분석물의 존재 또는 양을 측정하는데 유용한 크로마토그래피 시험장치에 있어서, 반응 부위가, 샘플 중의 분석물의 존재와 무관하게 표지용의 고정된 결합 시약을 함유하는 양성 대조 영역(32), 분석물용의 고정된 결합 시약을 함유하는 분석물 결합 영역(34) 및 음성 대조 영역(30)을 포함하고, 여기에서 양성 대조 영역(32) 및 분석물 결합 영역(34)은 표지의 존재하에서 함께 샘플중의 분석물의 존재하에 양성 결과를 나타내는 공지된 제1기호를 형성하도록 하는 형태를 가지고, 양성 대조 영역(32)은 표지의 존재하에서 단독으로 샘플 중의 분석물의 존재와는 무관하게 음성결과를 나타내는 공지된 제2기호를 형성하도록 하는 형태를 가짐을 특징으로 하는 크로마토그래피 시험장치(11).
  2. 제1항에 있어서, 음성 대조 영역(30)이 양성 대조 영역(32) 및 분석물 결합 영역(34)을 직접 둘러싸며 표지를 보유하는 시약을 함유하지 않는 크로마토그래피 장치(11).
  3. 제1항에 있어서, 양성 대조 영역(32)이 음성 결과를 나타내는 제2기호로서 마이너스 표시를 형성하기 위해 직사각형 바(bar) 형태를 갖는 크로마토그래피 장치(11).
  4. 제3항에 있어서, 분석물 결합 영역(34)이 양성 대조 바(bar)(32)의 양쪽에, 양성 대조 바에 대해 사실상 직각 방향으로 동일 직선상에 배향된 두 개의 직사각형 반토막 바 형태를 갖는 크로마토그래피 장치(11).
  5. 제4항에 있어서, 동일 직선 상의 두 개의 반토막 바가 이의 중간 지점 가까이에서 양성 대조 바(32)와 교차되어 양성 결과를 나타내는 제1기호로서 플러스(+)표시를 형성하는 크로마토그래피 장치(11).
  6. 제1항에 있어서, 표지가 항-분석물 항체 및 검출가능한 부분의 결합체를 함유함을 특징으로 하는 크로마토그래피 장치(11).
  7. 제6항에 있어서, 표지에 대한 고정된 결합 시약이 고정화된 항체-분석을 복합체이고, 분석물은 결합체가 결합하는 최소한 하나의 잔여 결정 요소를 가짐을 특징으로 하는 크로마토그래피 장치(11).
  8. 제1항에 있어서, 양성 대조 영역(32), 음성 대조 영역(30) 및 분석을 결합 영역(34)이 장치를 통해 이동된 샘플액과 거의 동시에 접촉하는 크로마토그래피 시험장치(11).
KR1019890003817A 1988-03-28 1989-03-27 고체상 분석장치 및 이를 이용하는 방법 KR920009420B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US173979 1988-03-28
US07/173,979 US4916056A (en) 1986-02-18 1988-03-28 Solid-phase analytical device and method for using same
US173,979 1993-12-28

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR890015016A KR890015016A (ko) 1989-10-28
KR920009420B1 true KR920009420B1 (ko) 1992-10-16

Family

ID=22634314

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019890003817A KR920009420B1 (ko) 1988-03-28 1989-03-27 고체상 분석장치 및 이를 이용하는 방법

Country Status (9)

Country Link
US (1) US4916056A (ko)
EP (1) EP0335244B1 (ko)
JP (1) JP2818191B2 (ko)
KR (1) KR920009420B1 (ko)
AT (1) ATE116443T1 (ko)
AU (1) AU618586B2 (ko)
CA (1) CA1332807C (ko)
DE (1) DE68920176T2 (ko)
ES (1) ES2068844T3 (ko)

Families Citing this family (152)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5622871A (en) 1987-04-27 1997-04-22 Unilever Patent Holdings B.V. Capillary immunoassay and device therefor comprising mobilizable particulate labelled reagents
US6060237A (en) * 1985-02-26 2000-05-09 Biostar, Inc. Devices and methods for optical detection of nucleic acid hybridization
TW203120B (ko) * 1985-10-04 1993-04-01 Abbott Lab
US5160701A (en) * 1986-02-18 1992-11-03 Abbott Laboratories Solid-phase analytical device and method for using same
US5250412A (en) * 1987-03-23 1993-10-05 Diamedix Corporation Swab device and method for collecting and analyzing a sample
DE3856421T2 (de) 1987-04-27 2000-12-14 Unilever Nv Spezifische Bindungstestverfahren
US5120643A (en) * 1987-07-13 1992-06-09 Abbott Laboratories Process for immunochromatography with colloidal particles
US5073344A (en) * 1987-07-17 1991-12-17 Porex Technologies Corp. Diagnostic system employing a unitary substrate to immobilize microspheres
EP0304000A1 (de) * 1987-08-19 1989-02-22 Flemming Gmbh Vorrichtung zur Ermittlung eines Antigens oder Antikörpers in einer flüssigen Probe
DE3740471A1 (de) * 1987-11-28 1989-06-08 Boehringer Mannheim Gmbh Testtraeger zur analyse einer probenfluessigkeit und verfahren zu seiner herstellung
CA1339723C (en) * 1988-01-19 1998-03-17 Philip Mcmahon Immunoassay with multiple test spots
AU2684488A (en) * 1988-06-27 1990-01-04 Carter-Wallace, Inc. Test device and method for colored particle immunoassay
IT1227293B (it) * 1988-10-06 1991-04-05 Boehringer Biochemia Srl Dispositivo e metodo per la diagnosi di gravidanza
JPH02176466A (ja) * 1988-12-27 1990-07-09 Mochida Pharmaceut Co Ltd 液性試料中の特定物質の測定方法および測定器具
CA2008304C (en) * 1989-01-31 2001-03-27 Craig S. Hill Assay for bone alkaline phosphatase
US6352862B1 (en) 1989-02-17 2002-03-05 Unilever Patent Holdings B.V. Analytical test device for imuno assays and methods of using same
GB2233090B (en) * 1989-04-19 1992-03-25 Pall Corp Multilayered diagnostic device and method
US5100620A (en) * 1989-05-15 1992-03-31 Miles, Inc. Capillary tube/gap reagent format
ES2070264T3 (es) * 1989-06-05 1995-06-01 Janssen Pharmaceutica Nv Un analisis en fase solida para uso con un revelador fisico.
US5185127A (en) * 1989-09-21 1993-02-09 Becton, Dickinson And Company Test device including flow control means
US5075078A (en) * 1989-10-05 1991-12-24 Abbott Laboratories Self-performing immunochromatographic device
GB2241329B (en) * 1990-01-10 1994-02-09 Princeton Biomeditech Corp No wash immunoassay
KR910014705A (ko) * 1990-01-10 1991-08-31 원본미기재 세척이 필요없은 딥스틱(Dipstick) 형태의 이뮤노어세이(Immunoasssay)장치
KR910014706A (ko) * 1990-01-10 1991-08-31 원본미기재 세척이 필요없는 개량된 이뮤노어세이(immunoassay)장치
CA2032114A1 (en) * 1990-01-22 1991-07-23 Brian A. Snyder Antibody composition for actinobacillus actinomycetemcomitans and its use in diagnostics
CA2028681A1 (en) * 1990-01-22 1991-07-23 Brian A. Snyder Differentiation of microorganisms associated with periodontal diseases, article and kit useful therein
CA2032959A1 (en) * 1990-01-22 1991-07-23 Brian A. Snyder Article, test kit and sandwich assay for the detection of bacteroides intermedius, bacteroides gingivalis or actinobacillus actinomycetemcomotams
CA2032112A1 (en) * 1990-01-22 1991-07-23 Brian Anthony Snyder Screening assay for microorganisms associated with periodontal diseases, article and kit useful therein
US5212061A (en) * 1990-01-22 1993-05-18 Eastman Kodak Company Direct binding assay for the determination of a bacteroids organism
US5104619A (en) * 1990-01-24 1992-04-14 Gds Technology, Inc. Disposable diagnostic system
JP3070764B2 (ja) * 1990-03-12 2000-07-31 バイオサイト・ダイアグノスティックス・インコーポレイテッド 生物学的検定装置及びそれを用いた検定方法
DE4012216A1 (de) * 1990-04-14 1991-10-17 Boehringer Mannheim Gmbh Testtraeger fuer die analyse von fluessigkeiten
CA2035595A1 (en) * 1990-04-12 1991-10-13 Carol A. Miller Immunoassay test device with thread control element
US5132085A (en) * 1991-02-28 1992-07-21 Eastman Kodak Company Test device with novel control symbolism
US5266497A (en) * 1990-08-31 1993-11-30 Japan Synthetic Rubber Co., Ltd. Immunochromatographic assay with improved colored latex
US5200321A (en) * 1990-09-07 1993-04-06 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Microassay on a card
US5726064A (en) * 1990-11-22 1998-03-10 Applied Research Systems Ars Holding Nv Method of assay having calibration within the assay
US5294698A (en) * 1990-12-06 1994-03-15 Bomalaski John S Human phospholipase activating protein and methods for diagnosis of rheumatoid arthritis
GB9026538D0 (en) * 1990-12-06 1991-01-23 Knight Scient Ltd Filtration arrangement
DE69132843T2 (de) * 1990-12-06 2002-09-12 Affymetrix Inc N D Ges D Staat Identifizierung von Nukleinsäuren in Proben
US5389338A (en) * 1991-01-06 1995-02-14 Orgenics Ltd. Apparatus for dry chemical analysis of fluids
JP3108115B2 (ja) * 1991-03-28 2000-11-13 ロート製薬株式会社 イムノクロマトグラフ法による物質検出法
US5256543A (en) * 1991-05-10 1993-10-26 Sangstat Medical Corporation HLA typing
US5607863A (en) * 1991-05-29 1997-03-04 Smithkline Diagnostics, Inc. Barrier-controlled assay device
US5468648A (en) * 1991-05-29 1995-11-21 Smithkline Diagnostics, Inc. Interrupted-flow assay device
US6168956B1 (en) 1991-05-29 2001-01-02 Beckman Coulter, Inc. Multiple component chromatographic assay device
US5877028A (en) 1991-05-29 1999-03-02 Smithkline Diagnostics, Inc. Immunochromatographic assay device
US5998220A (en) 1991-05-29 1999-12-07 Beckman Coulter, Inc. Opposable-element assay devices, kits, and methods employing them
US5869345A (en) * 1991-05-29 1999-02-09 Smithkline Diagnostics, Inc. Opposable-element assay device employing conductive barrier
US5686315A (en) * 1991-06-14 1997-11-11 Quidel Corporation Assay device for one step detection of analyte
WO1993018398A1 (en) * 1992-03-10 1993-09-16 Quidel Corporation Red blood cell separation means for specific binding assays
US5268146A (en) * 1992-03-25 1993-12-07 Litmus Concepts, Inc. Fast response test panel
US6905882B2 (en) * 1992-05-21 2005-06-14 Biosite, Inc. Diagnostic devices and apparatus for the controlled movement of reagents without membranes
US6767510B1 (en) 1992-05-21 2004-07-27 Biosite, Inc. Diagnostic devices and apparatus for the controlled movement of reagents without membranes
US6156270A (en) 1992-05-21 2000-12-05 Biosite Diagnostics, Inc. Diagnostic devices and apparatus for the controlled movement of reagents without membranes
US7524456B1 (en) 1992-05-21 2009-04-28 Biosite Incorporated Diagnostic devices for the controlled movement of reagents without membranes
US5395754A (en) * 1992-07-31 1995-03-07 Hybritech Incorporated Membrane-based immunoassay method
EP0583980A1 (en) * 1992-08-20 1994-02-23 Eli Lilly And Company Method for generating monoclonal antibodies from rabbits
US6093546A (en) * 1992-09-03 2000-07-25 Roche Diagnostics Process for preparing test elements
US5356782A (en) * 1992-09-03 1994-10-18 Boehringer Mannheim Corporation Analytical test apparatus with on board negative and positive control
US5354692A (en) * 1992-09-08 1994-10-11 Pacific Biotech, Inc. Analyte detection device including a hydrophobic barrier for improved fluid flow
AU675251B2 (en) * 1993-01-04 1997-01-30 Becton Dickinson & Company Flow-through hybridization assay for oligonucleotide sequences
JP3299330B2 (ja) * 1993-03-18 2002-07-08 持田製薬株式会社 簡易測定装置および方法
US5500375A (en) * 1993-04-13 1996-03-19 Serex, Inc. Integrated packaging-holder device for immunochromatographic assays in flow-through or dipstick formats
US6893816B1 (en) * 1993-10-28 2005-05-17 Houston Advanced Research Center Microfabricated, flowthrough porous apparatus for discrete detection of binding reactions
US20010051350A1 (en) * 1995-05-02 2001-12-13 Albert Nazareth Diagnostic detection device and method
IL113920A (en) * 1995-05-30 1999-09-22 Avraham Reinhartz Apparatus and method for detection of analytes in a sample
JP2000500568A (ja) * 1995-11-17 2000-01-18 ユニバーサル ヘルスウォッチ、インコーポレーテッド 分析対象物の検出に用いる化学発光分析方法及び分析装置
US6750031B1 (en) 1996-01-11 2004-06-15 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Displacement assay on a porous membrane
US5770086A (en) * 1996-01-25 1998-06-23 Eureka| Science Corp. Methods and apparatus using hydrogels
AU2050297A (en) * 1996-02-23 1997-09-10 Universal Health-Watch, Inc. Chromatographic strip having detection and control zones oriented parallel to the direction of flow
US5660790A (en) * 1996-08-13 1997-08-26 Litmus Concepts, Inc. PH and amine test elements
US5879951A (en) 1997-01-29 1999-03-09 Smithkline Diagnostics, Inc. Opposable-element assay device employing unidirectional flow
US6057165A (en) * 1997-02-07 2000-05-02 Becton, Dickinson And Company Quality control procedure for membrane flow-through diagnostic assay devices
US6103536A (en) 1997-05-02 2000-08-15 Silver Lake Research Corporation Internally referenced competitive assays
US5939252A (en) 1997-05-09 1999-08-17 Lennon; Donald J. Detachable-element assay device
US6258548B1 (en) 1997-06-05 2001-07-10 A-Fem Medical Corporation Single or multiple analyte semi-quantitative/quantitative rapid diagnostic lateral flow test system for large molecules
DE19731465A1 (de) * 1997-07-22 1999-01-28 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von Kontrollflächen zur Detektion von Störproben in einem Nachweisverfahren
SE9704935D0 (sv) 1997-12-30 1997-12-30 Pharmacia & Upjohn Diag Ab Analysmetod med partiklar
US6394952B1 (en) 1998-02-03 2002-05-28 Adeza Biomedical Corporation Point of care diagnostic systems
US6267722B1 (en) 1998-02-03 2001-07-31 Adeza Biomedical Corporation Point of care diagnostic systems
USD434153S (en) * 1998-04-20 2000-11-21 Adeza Biomedical Corporation Point of care analyte detector system
USD432244S (en) * 1998-04-20 2000-10-17 Adeza Biomedical Corporation Device for encasing an assay test strip
US6355419B1 (en) 1998-04-27 2002-03-12 Hyseq, Inc. Preparation of pools of nucleic acids based on representation in a sample
US6140136A (en) * 1998-09-18 2000-10-31 Syntron Bioresearch, Inc. Analytical test device and method of use
US6372514B1 (en) 1998-09-18 2002-04-16 Syntron Bioresearch, Inc. Even fluid front for liquid sample on test strip device
US6490030B1 (en) 1999-01-18 2002-12-03 Verification Technologies, Inc. Portable product authentication device
US6261523B1 (en) 1999-04-27 2001-07-17 Agilent Technologies Inc. Adjustable volume sealed chemical-solution-confinement vessel
US6306665B1 (en) 1999-10-13 2001-10-23 A-Fem Medical Corporation Covalent bonding of molecules to an activated solid phase material
US6512580B1 (en) 1999-10-27 2003-01-28 Verification Technologies, Inc. Method and apparatus for portable product authentication
WO2001071341A1 (fr) * 2000-03-24 2001-09-27 Arkray, Inc. Dispositif auxiliaire d'introduction d'echantillons
US6653147B2 (en) * 2000-03-31 2003-11-25 Neogen Corporation Apparatus and method for chemiluminescent assays
US6699722B2 (en) 2000-04-14 2004-03-02 A-Fem Medical Corporation Positive detection lateral-flow apparatus and method for small and large analytes
US20030104492A1 (en) * 2000-12-15 2003-06-05 Albert Chu Flow-through membrane assays for carbohydrates using labeled lectins
US7531362B2 (en) * 2001-06-07 2009-05-12 Medmira Inc. Rapid diagnostic assay
US6855561B2 (en) * 2001-09-10 2005-02-15 Quidel Corporation Method for adding an apparent non-signal line to a lateral flow assay
CA2460073A1 (en) * 2001-09-17 2003-03-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Embossed test strip system
US7098041B2 (en) 2001-12-11 2006-08-29 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Methods to view and analyze the results from diffraction-based diagnostics
US7102752B2 (en) * 2001-12-11 2006-09-05 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Systems to view and analyze the results from diffraction-based diagnostics
ATE358274T1 (de) * 2001-12-12 2007-04-15 Proteome Systems Intellectual Diagnostisches testverfahren
US8367013B2 (en) * 2001-12-24 2013-02-05 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Reading device, method, and system for conducting lateral flow assays
US20030119203A1 (en) * 2001-12-24 2003-06-26 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Lateral flow assay devices and methods for conducting assays
US7432105B2 (en) * 2002-08-27 2008-10-07 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Self-calibration system for a magnetic binding assay
US7314763B2 (en) * 2002-08-27 2008-01-01 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Fluidics-based assay devices
US7285424B2 (en) * 2002-08-27 2007-10-23 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Membrane-based assay devices
US7781172B2 (en) * 2003-11-21 2010-08-24 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Method for extending the dynamic detection range of assay devices
US20040106190A1 (en) * 2002-12-03 2004-06-03 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Flow-through assay devices
EP1567671A1 (en) * 2002-12-04 2005-08-31 PamGene B.V. Method for probe hybridisation of immobilized genomic dna
US20040121334A1 (en) * 2002-12-19 2004-06-24 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Self-calibrated flow-through assay devices
US7247500B2 (en) * 2002-12-19 2007-07-24 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Reduction of the hook effect in membrane-based assay devices
US20040197819A1 (en) * 2003-04-03 2004-10-07 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Assay devices that utilize hollow particles
US7851209B2 (en) * 2003-04-03 2010-12-14 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Reduction of the hook effect in assay devices
WO2005029068A2 (en) * 2003-09-19 2005-03-31 Quidel Corporation Iconic colorimetric test device with reduced susceptibility to false positive and false negative readings
US7713748B2 (en) * 2003-11-21 2010-05-11 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Method of reducing the sensitivity of assay devices
US7943395B2 (en) * 2003-11-21 2011-05-17 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Extension of the dynamic detection range of assay devices
US20050112703A1 (en) 2003-11-21 2005-05-26 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Membrane-based lateral flow assay devices that utilize phosphorescent detection
US7943089B2 (en) * 2003-12-19 2011-05-17 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Laminated assay devices
US20050136550A1 (en) * 2003-12-19 2005-06-23 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Flow control of electrochemical-based assay devices
JP4672263B2 (ja) * 2004-01-27 2011-04-20 デンカ生研株式会社 簡便な検出法、検出装置及び検出キットとその製法
US20060062688A1 (en) * 2004-02-03 2006-03-23 Polymer Technology Systems, Inc. Bodily fluid analysis system
US7625721B2 (en) * 2004-02-03 2009-12-01 Polymer Technology Systems, Inc. Non-precipitating bodily fluid analysis system
US8465696B2 (en) * 2004-02-03 2013-06-18 Polymer Technology Systems, Inc. Dry test strip with controlled flow and method of manufacturing same
WO2005095967A1 (en) * 2004-03-23 2005-10-13 Quidel Corporation Hybrid phase lateral flow assay
US8128871B2 (en) 2005-04-22 2012-03-06 Alverix, Inc. Lateral flow assay systems and methods
DE102004023402A1 (de) * 2004-05-12 2005-12-08 Roche Diagnostics Gmbh Verfahren zur Erhöhung des dynamischen Messbereichs von auf spezifischen Bindereaktionen basierenden, insbesondere immunologischen Testelementen
GB0412949D0 (en) * 2004-06-10 2004-07-14 Inverness Medical Switzerland Improvements in or relating to lateral flow assay devices
US7521226B2 (en) 2004-06-30 2009-04-21 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. One-step enzymatic and amine detection technique
US20060062690A1 (en) * 2004-08-17 2006-03-23 Polymer Technology Systems, Inc. Apparatus and method of manufacturing bodily fluid test strip
GB2420850A (en) 2004-12-03 2006-06-07 Orion Diagnostica Oy Particle based binding assay
US7704753B2 (en) * 2005-03-03 2010-04-27 Inverness Medical Switzerland Gmbh Devices and methods for analyte assays with built-in result reporting using recognizable symbols
US10041941B2 (en) 2005-04-22 2018-08-07 Alverix, Inc. Assay test strips with multiple labels and reading same
EP1891447B1 (en) * 2005-05-23 2011-07-06 Phadia AB Two step lateral flow assay methods and devices
US7871568B2 (en) * 2006-01-23 2011-01-18 Quidel Corporation Rapid test apparatus
US7794656B2 (en) * 2006-01-23 2010-09-14 Quidel Corporation Device for handling and analysis of a biological sample
CN102680680B (zh) * 2006-04-12 2015-03-18 艾博生物医药(杭州)有限公司 在控制区域上含有非蛋白捕获物质的检测装置
CN101021531B (zh) * 2006-04-12 2012-11-28 艾博生物医药(杭州)有限公司 在控制区域上含有非蛋白捕获物质的检测装置
US20080057528A1 (en) * 2006-08-30 2008-03-06 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Detection of hydrogen peroxide released by enzyme-catalyzed oxidation of an analyte
US7569396B1 (en) 2006-09-08 2009-08-04 Purplecow Llc Caffeine detection using internally referenced competitive assays
US7749775B2 (en) * 2006-10-03 2010-07-06 Jonathan Scott Maher Immunoassay test device and method of use
US8012761B2 (en) * 2006-12-14 2011-09-06 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Detection of formaldehyde in urine samples
US7846383B2 (en) * 2006-12-15 2010-12-07 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Lateral flow assay device and absorbent article containing same
US7919331B2 (en) * 2006-12-21 2011-04-05 Silver Lake Research Corporation Chromatographic test strips for one or more analytes
JP5066498B2 (ja) * 2008-09-19 2012-11-07 富士フイルム株式会社 アッセイ方法
DE102010032718A1 (de) * 2010-07-23 2012-01-26 Christoph Gienapp Testgerät
US8956859B1 (en) 2010-08-13 2015-02-17 Aviex Technologies Llc Compositions and methods for determining successful immunization by one or more vaccines
US8828329B2 (en) 2010-10-01 2014-09-09 Church & Dwight, Co., Inc. Electronic analyte assaying device
CA2846247A1 (en) 2011-09-16 2013-03-21 Credo Biomedical Pte Ltd Molecular diagnostic assay device and method of use
US9927443B2 (en) 2015-04-10 2018-03-27 Conquerab Inc. Risk assessment for therapeutic drugs
US20160313307A1 (en) * 2015-04-23 2016-10-27 Ted Titmus Diagnostic test strip for oral samples and method of use therefore
US9903866B2 (en) 2016-04-05 2018-02-27 Conquerab Inc. Portable devices for detection of antibodies against therapeutic drugs
MX2019001016A (es) * 2016-07-25 2019-07-04 Gentian As Dispositivo de ensayo y metodo para la evaluacion de celulas sanguineas.
CN112005116A (zh) * 2018-02-02 2020-11-27 日本化学药品株式会社 生化反应用基体以及分析装置

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3260413A (en) * 1964-08-31 1966-07-12 Scientific Industries Automatic chemical analyzer
US3992096A (en) * 1975-08-04 1976-11-16 Minnesota Mining And Manufacturing Company Detecting system
US4059407A (en) * 1976-04-14 1977-11-22 Becton, Dickinson And Company Disposable chemical indicators
US4219335A (en) * 1978-09-18 1980-08-26 E. I. Du Pont De Nemours And Company Immunochemical testing using tagged reagents
US4540659A (en) * 1981-04-17 1985-09-10 Syva Company Simultaneous calibration heterogeneous immunoassay
US4533629A (en) * 1981-04-17 1985-08-06 Syva Company Simultaneous calibration heterogeneous immunoassay
US4340564A (en) * 1980-07-21 1982-07-20 Daryl Laboratories, Inc. Immunoadsorptive surface coating for solid-phase immunosubstrate and solid-phase immunosubstrate
DE3029579C2 (de) * 1980-08-05 1985-12-12 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und Mittel zur Abtrennung von Plasma oder Serum aus Vollblut
US4472353A (en) * 1980-08-07 1984-09-18 Gerald Moore Gas detector badge
US4366241A (en) * 1980-08-07 1982-12-28 Syva Company Concentrating zone method in heterogeneous immunoassays
US4496654A (en) * 1983-04-08 1985-01-29 Quidel Detection of HCG with solid phase support having avidin coating
US4558013A (en) * 1983-04-08 1985-12-10 Mast Immunosystems, Ltd. Calibrated reaction measurement system
US4541987A (en) * 1983-09-29 1985-09-17 Helena Laboratories Corporation Test pad for detecting occult blood
US4632901A (en) * 1984-05-11 1986-12-30 Hybritech Incorporated Method and apparatus for immunoassays
US4740468A (en) * 1985-02-14 1988-04-26 Syntex (U.S.A.) Inc. Concentrating immunochemical test device and method
US4649121A (en) * 1985-02-26 1987-03-10 Miles Laboratories, Inc. Viability test device
CA1272127A (en) * 1985-04-04 1990-07-31 Hybritech Incorporated Solid phase system for use in ligand-receptor assays
TW203120B (ko) * 1985-10-04 1993-04-01 Abbott Lab
EP0264036B1 (en) * 1986-10-16 1993-06-30 Abbott Laboratories Analytical device and method for detecting chlamydia trachomatis and neisseria gonorrhoeae
DE3787078T2 (de) * 1986-11-24 1993-12-09 Abbott Lab Proberichtwirkung für analytisches Festphasengerät.
US4748042A (en) * 1987-03-31 1988-05-31 V-Tech, Inc. Method and apparatus for imprinting membranes with patterns of antibody
EP0299359A3 (en) * 1987-07-16 1990-09-26 Abbott Laboratories Reagent delivery system for use in solid-phase analytical devices

Also Published As

Publication number Publication date
US4916056A (en) 1990-04-10
EP0335244B1 (en) 1994-12-28
AU3156489A (en) 1989-09-28
CA1332807C (en) 1994-11-01
DE68920176T2 (de) 1995-05-11
DE68920176D1 (de) 1995-02-09
AU618586B2 (en) 1992-01-02
ES2068844T3 (es) 1995-05-01
KR890015016A (ko) 1989-10-28
JP2818191B2 (ja) 1998-10-30
JPH01299464A (ja) 1989-12-04
ATE116443T1 (de) 1995-01-15
EP0335244A3 (en) 1990-05-30
EP0335244A2 (en) 1989-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR920009420B1 (ko) 고체상 분석장치 및 이를 이용하는 방법
US5149622A (en) Solid phase analytical device and method for using same
US5160701A (en) Solid-phase analytical device and method for using same
US5145789A (en) Device and method for pregnancy detection
US4818677A (en) Membrane assay using focused sample application
US5824268A (en) Rapid self-contained assay format
US7312028B2 (en) Highly cost-effective analytical device for performing immunoassays with ultra high sensitivity
US5789154A (en) Liposome-enhanced immunoassay and test device
US4948726A (en) Enzyme immunoassay based on membrane separation of antigen-antibody complexes
US5989840A (en) Estimation of active infection by heliobacter pylori
US5250412A (en) Swab device and method for collecting and analyzing a sample
JPH06105255B2 (ja) 固相ウレアーゼイムノアッセイのための基質組成物及び方法
JPH07104354B2 (ja) クラミジア・トラコマティスおよびネイセリア・ゴノリアエを検出するための分析装置および分析方法
WO1998054563A1 (en) Estimation of active infection by helicobacter pylori
US5166054A (en) Method for immunoassay using lactoperoxidase, starch and iodine
JP2001228151A (ja) 免疫クロマトグラフィー装置
JP3713178B2 (ja) 梅毒抗体検出用免疫分析装置
WO1999061892A1 (en) Estimation of active infection by helicobacter pylori
KR910001313B1 (ko) 면역 분석 방법 및 장치
Durst et al. Immunoassay devices for extra-laboratory measurements of toxic chemicals based on capillary migration and liposome amplification
WO1992018869A1 (en) Colorfast reference device for immunoassays

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
G160 Decision to publish patent application
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 19950929

Year of fee payment: 4

LAPS Lapse due to unpaid annual fee