LT4550B - Dokozaheksaeno rūgšties ir dokozapentaeno rūgšties gavimo būdas - Google Patents

Dokozaheksaeno rūgšties ir dokozapentaeno rūgšties gavimo būdas Download PDF

Info

Publication number
LT4550B
LT4550B LT99-005A LT99005A LT4550B LT 4550 B LT4550 B LT 4550B LT 99005 A LT99005 A LT 99005A LT 4550 B LT4550 B LT 4550B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
lipids
acid
dpr
culture
ulkenia
Prior art date
Application number
LT99-005A
Other languages
English (en)
Other versions
LT99005A (lt
Inventor
Satohiro Tanaka
Toshiaki Yaguchi
Sakayu Shimizu
Tsutomu Sogo
Shigeaki Fujikawa
Original Assignee
Nagase Biochemicals, Ltd
Suntory Limited
Nagase & Co, Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nagase Biochemicals, Ltd, Suntory Limited, Nagase & Co, Ltd filed Critical Nagase Biochemicals, Ltd
Publication of LT99005A publication Critical patent/LT99005A/lt
Publication of LT4550B publication Critical patent/LT4550B/lt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C12P7/6434—Docosahexenoic acids [DHA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS OR COOKING OILS
    • A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings or cooking oils
    • A23D9/007—Other edible oils or fats, e.g. shortenings or cooking oils characterised by ingredients other than fatty acid triglycerides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/158—Fatty acids; Fats; Products containing oils or fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A23L33/12—Fatty acids or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C1/00—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids
    • C11C1/02—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils
    • C11C1/04—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils by hydrolysis
    • C11C1/045—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils by hydrolysis using enzymes or microorganisms, living or dead
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
    • C12N1/125—Unicellular algae isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145—Fungi isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/89—Algae ; Processes using algae

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Išradime aprašomas lipidų, turinčių dokozaheksaeno (toliau vadiname ją “DHR”) ir/arba dokozapentaeno (toliau vadiname ją “DPR”) rūgštis, gavimo būdas, kultivuojant mikroorganizmą, o taip pat DHR ir/arba DPR gavimo būdas iš lipidų. Išradime taip pat yra aprašomas mikroorganizmas, priklausantis genus Ulkenia ir turintis savybę sintezuoti lipidus.
Technikos lygis
DHR yra žuvų taukuose, pagamintuose iš žuvų, priklausančių mėlynųjų žuvų grupei. Ypatingai daug DHR yra sardinių ir tunų žuvų taukuose, kuriuose DHR yra apie 20 %.
Pastaruoju metu dėl žuvų audinių, turinčių aukštą DHR koncentraciją, 35 tokių kaip tuno akiduobių riebalas, atradimo arba dėl technologinio progreso, gaminant labai išvalytas riebiąsias rūgštis, intensyviai norima paaiškinti DHR fiziologines funkcijas ir ištirti jos praktinį panaudojimą. DHR fiziologinės funkcijos apima cholesterolio kiekio mažinimą, antikoaguliacinį ir karcinostatinį poveikius. Ryšium su metaboline smegenų sistema, DHR gerina atmintį, mokymosi procesą, stabdo seniūnę demenciją ir gydo Alcheimerio ligą. Priedo įrodyta, kad DHR yra vertinga riebioji rūgštis, stimuliojantį mailiaus augimą. Dėl aukščiau išvardintų savybių DHR yra naudojama įvairiame maiste, pašaruose ir masale.
DPR įeina į žuvų taukų sudėtį, nors jos kiekis yra labai mažas. Dauguma
DPR fiziologinių funkcijų iki šiol yra nežinomos. Vienintelė žinoma DPR fiziologinė funkcija yra jos gebėjimas pernešti farmacinius agentus į smegenis [Japanese Patent Publication (Kokai) No. 61- 204136 (1986 )]. Bet yra tikimasi, kad DPR gali veikti fiziologinius procesus gyvūno kūne, nes yra žinoma, kad
DPR kompensuoja DHR trūkumą gyvūno kūne [Homayou et ai., J. Neurochem., 51:45 (1988); Hamm et ak, Biochem. J., 245:907 (1987); ir Rebhung et ak, Biosci. Biotech. Biochem., 58:314 (1994)].
Yra keletas nepatogumų, išskiriant DHR ir/arba DPR iš žuvų taukų, pavyzdžiui, mažas norimų riebiųjų rūgščių kiekis, taip pat neįmanoma palaikyti pastovaus žuvų taukų šaltinio dėl žuvų migracijos arba dėl blogo kvapo, kuris būdingas žuvų taukams. Be to, yra sunku išskirti geros kokybės lipidus, nes žuvų taukai turi kitų riebiųjų rūgščių priemaišų, tokių kaip arachidono (ARR) ir eikozapentaeno (EPR) rūgštys, kurios oksiduoja lipidus.
Be žuvų taukų, lipidai kaupiasi mikroorganizmo, turinčio savybę sintezuoti DHR ir/arba DPR, kultivuotose ląstelėse ir laikomo DHR ir/arba DPR šaltiniu. Pavyzdžiui, yra žinomi šie mikroorganizmai, sintezuojantys DHR ir/arba DPR : Vibrio marinus ATCC 15381, tai yra bakterija, išskirta iš giliųjų vandenų; Vibrio bakterija, išskirta iš giliavandenių žuvų žarnų; flagellate grybeliai, tokie kaip Thraustochytrium aureum 34304, Thraustochvtrium sp.
ATCC 28211, ATCC 20890 ir ATCC 20891, Schizochytrium sp., ATCC 20888 ir ATCC 20889 (U S patentas Nr. 5340742 ), Traustochytrium SR21 kamienas (Nippon Nogei Kagaku Kaishi, vol. 69, extra edition. July 5, 1995 ), ir Japonochytrium sp. ATCC 28207 [Japanese Patent Publication (Kokai) Nr. 1199588 (1989)]; mikroskopiniai jūros dumbliai, tokie kaip Cvclotella cryptica,
2.5 Crypthecodinium cohnii [Japanese Patent Publication (Kohyo) Nr. 5-503425 (1993)], ir Emiliania sp. [Japanese Patent Publication (Kokai) Nr. 5-308978 (1993)].
Naudojant bet kurį iš aukščiau išvardintų mikroorganizmų, iškyla keletas problemų, pavyzdžiui, maža DHR ir/arba DPR išeiga, nes, norint gauti pakankamą DHR ir/arba DPR kiekį, reikalingi prailgintas kultivavimo periodas, specifinės maitinamosios terpės naudojimas arba specialios kultivavimo sąlygos. Kai sintezei yra naudojami jūros dumbliai, tokie kaip Emiliania sp., DHR gali būti gauta su gera išeiga, nors gali iškilti ir sunkumų, nes kultivavimą apsunkina šviesa, kuri yra būtina šiam procesui. Tai reiškia, kad šis procesas yra nepatogus pramoniniam naudojimui.
Siame išradime aprašoma galimybė sintezuoti DHR ir/arba DPR, o taip pat lipidus, turinčius DHR. ir/arba DPR, naudojant nebrangią ir patogią maitinamąją terpę ir paprastus gamybos būdus, per trumpą laiką ir su gera išeiga.
Siame išradime taip pat aprašoma lipidų, turinčių DHR ir/arba DPR, gamyba kultivuojant maitinamojoje terpėje mikroorganizmą, priklausantį genus Ulkenia, turintį savybę sintezuoti DHR ir/arba DPR ir išskirti lipidus iš kultūros.
Išradime taip pat aprašomas DHR ir/arba DPR gamybos būdas kultivuojant maitinamojoje terpėje mikroorganizmą, priklausantį genus Ulkenia, turintį savybę sintezuoti DHR ir/arba DPR, išskiriant lipidus iš kultūros ir atskiriant DHR ir/arba DPR nuo lipidų.
IŠRADIMO ESMĖ
Pagal šį išradimą lipidų, turinčių savo sudėtyje dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį, gavimo būdas susideda iš mikroorganizmo, priklausančio genus Ulkenia ir turinčio savybę produkuoti lipidus, turinčius dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį, kultivavimo terpėje ir šių lipidų išskyrimo iš kultūros.
Pagal šį išradimą dokozaheksaeno rūgšties gavimo būdas susideda iš mikroorganizmo, priklausančio genus Ulkenia ir turinčio savybę produkuoti lipidus, turinčius dokozaheksaeno rūgštį, kultivavimo terpėje, šių lipidų išskyrimo iš kultūros, ir minėtos dokozaheksaeno rūgšties atskyrimo nuo minėtų lipidų.
Pagal šį išradimą dokozapentaeno rūgšties gavimo būdas susideda iš mikroorganizmo, priklausančio genus Ulkenia ir turinčio savybę produkuoti lipidus, turinčius dokozapentaeno rūgštį, kultivavimo terpėje, šių lipidų išskyrimo iŠ kultūros, ir minėtos dokozapentaeno rūgšties atskyrimo nuo minėtų lipidų.
Išradime aprašomos mikroorganizmo, priklausančio genus Ulkenia, turinčio lipidų, kurių sudėtyje yra dokozaheksaeno rūgšties ir/arba dokozapentaeno rūgšties, ląstelės.
Išradime aprašomas Ulkenia sp. SAM 2179 kamienas, kuris turi savybę sintezuoti lipidus, turinčius dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį.
Išradimas aprašo maistą su maistingaisiais priedais, kompoziciją, tinkamą kūdikių mitybai, kompoziciją, tinkamą neišnešiotų kūdikių mitybai, vaikų maistą, nėščių ir besilaukiančių moterų maistą, senyvo amžiaus žmonių maistą, enterinį agentą, skirtą maitinimui skatinti, gyvulių pašarą, gyvulių pašaro priedą, ir masalą skirtą mikroorganizmų mitybai, turinčių lipidų, gautų pagal bet kurį iš aukščiau minėtų būdų.
Pagal šį išradimą struktūrizuotų peptidų, turinčių dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį, gavimo būdas susideda iš mikroorganizmo, priklausančio genus Ulkenia ir turinčio savybę produkuoti lipidus, turinčius dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį, kultivavimo terpėje, šių lipidų išskyrimo iš kultūros, šių lipidų apdorojimo grybeline lipaze tam, kad paverstų riebiąsias rūgštis 1 ir 3 padėtyse, į vidutinio ilgio grandinės riebiąsias rūgštis (C:
8-12, žiūr. “SEIKAGAKUJITEN” (second editiion) pp. 834, ΤΟΚΥΟ KAGAKUDOJIN (1990)).
TRUMPAS FIGŪRŲ APRAŠYMAS
Fig. 1 pavaizduota triacilglicerolių skysčių chromatograma neutraliame lipide, sintezuotame naudojant šiame išradime aprašytą gavimo būdą.
IŠRADIMO ĮGYVENDINIMO BŪDAS
Šis išradimas smulkiau yra aprašomas žemiau. Kaip čia naudojamas terminas “dokozaheksaeno rūgštis” arba “DHR” yra priskiriamas prie dokozaheksaeno rūgšties (n-3) serijos. Kaip čia naudojamas terminas “dokozapentaeno rūgštis” arba “DPR” priskiriamas prie dokozapentaeno rūgšties (n-3) ir/arba (n-6) serijų. Terminai “riebalai”, “lipidai” ir “aliejai” yra naudojami tomis pačiomis reikšmėmis.
Bet kurie mikroorganizmai, priklausantys genus Ulkenia, gali būti naudojami šiame išradime gaminant DHR ir/arba DPR tol, kol jie galės sintezuoti DHR ir/arba DPR. Pavyzdžiui, gali būti naudojami Ulkenia sp. S AM 2180 ir SAM 2179 kamienai, išskirti šio išradimo autorių iš jūros vandenų. Tarp šių kamienų SAM 2179 turi savybę sintezuoti abi rūgštis, DHR ir DPR, žymiai didesniais kiekiais. Šitas kamienas buvo deponuotas Nacionaliniame Biologijos ir Žmogaus Technologijos Institute, Pramonės Mokslo ir Technologijos Agentūroje (adresas: 1-3, Higashi 1 chome Tsukuba-shi Ibaraki-ken 305, JAPAN), 23 liepos, 1996 metais, gaunant inventarinį numerį FERM BP-5601.
Ulkenia sp. SAM 2179 ir SAM 2180 kamienų mikologinės charakteristikos yra šios. Kai šie mikroorganizmai buvo kultivuojami skystoje KMV maitinamojoje terpėje (Fuller. M. and A. Jaworski eds. ; Zoosporic Fungi in Teaching & Research VII, 303 pp., 1987. Southern Publishing Corporation, Athens) 20°C temperatūroje ir tamsoje, buvo pastebėtos rutulio formos arba apvalios ląstelės, taip pat buvo matomos dvižiuželinės zoosporos. Tačiau ektoplazminis filamentų tinklas nebuvo matomas. Tokiu būdu, šie mikroorganizmai buvo suklasifikuoti kaip grybeliai ir priskirti prie Thraustochytriales, remiantis “Icons of the Japanese Water Mould with Precise Explanation” autorių Yosio. Kobayasi ir Kazuko Konno (autorių išleista asmeniškai jų lėšomis, p. 169, 1986). Be to, šitie mikroorganizmai sudarė rizoidus, trūkstant apofizių, ir sudarė į amebas panašios formos ląsteles KMV skystoje terpėje. Todėl jie (mikroorganizmai) buvo identifikuoti kaip grybeliai ir priskirti prie genus Ulkenia, o du išskirti buvo pažymėti kaip Ulkenia sp. SAM 2179 ir SAM 2180, atitinkamai.
Mikroorganizmas, priskirtas genus Ulkenia, kuris panaudojamas šio išradimo būde, nėra apribotas tik laukinio-tipo kamienu, bet taip pat gali apimti ir mutantus arba rekombinantinius kamienus. Tokiu būdu, mutantinių arba rekombinantinių kamienų panaudojimas, norint gauti pakankamą kiekį DHR ir/arba DPR, yra išradimo sferos ribose. Tokios mutantinės arba rekombinantinės gentys apima mikroorganizmus, turinčius didesnę DHR ir/arba DPR procentinę koncentraciją lipiduose, didesnį bendrą lipidų kiekį arba jų abiejų (ir lipidų, ir rūgščių kiekį), palyginant procentinę koncentraciją DHR ir/arba DPR arba lipidų kiekį, kurie gaminami originalaus laukinio tipo kamieno, naudojant tuos pačius substratus. Pagal šį laukinio tipo kamienas, turi ne mažiau kaip 25 % DHR ir/arba 5 % DPR, pageidautina 40-48 % DHR ir/arba 8-13 % DPR lipiduose. Be to, laukinio tipo kamienas, pagal šį išradimą, turi mažiau 3 g DHR ir/arba 0,5 g DPR, pageidautina 5 g DHR ir/arba lg DPR viename maitinamosios terpės litre. Be to, yra aprašomi mikroorganizmai, skirti sintezuoti palyginamąjį kiekį DHR ir/arba DPR, su atitinkamu laukinio tipo kamienu ir ypač naudojant substratus, su didžiausiomis gamybos išlaidomis, yra taip pat aprašomi.
Mikroorganizmai, pagal šį išradimą, yra kultivuojami inokuliuojant skystą arba kietą maitinamąją terpę su mikroorganizmų pradine kultūra. Maitinamoji terpė gali turėti arba neturėti natūralaus arba dirbtinio jūros vandens.
Bet koks anglies šaltinis, įskaitant, pavyzdžiui, bet neapribojant, tokių kaip gliukozė, fruktozė, ksilozė, sacharozė, maltozė, tirpstantis krakmolas, fukozė, gliukozaminas ir dekstranas, taip pat oleino rūgštis, riebalai, tokie kaip sojos pupelių aliejus, glutaminino rūgštis, melasa, glicerolis, manitolis ir natrio acetatas, gali būti naudojami kaip anglies šaltinis ir dedami į maitinamąją terpę.
Natūralūs azoto šaltiniai, tokie kaip peptonas, mielių ekstraktas, salyklo ekstraktas, mėsos ekstraktas, kasamino rūgštis ir kukurūzų ekstraktas, išdžiovintos sojos pupelės, organiniai azoto šaltiniai, tokie kaip natrio glutamatas ir karbamidas ir neorganiniai azoto šaltiniai, tokie kaip amonio acetatas, amonio sulfatas, amonio chloridas ir amonio nitratas gali būti naudojami kaip azoto šaltinis.
Be to, fosfatai, tokie kaip kalio fosfatas ir kalio dihidrofosfatas, neorganinės druskos, tokios kaip amonio sulfatas, natrio sulfatas, magnio sulfatas, geležies sulfatas, vario sulfatas, magnio chloridas, kalcio chloridas ir vitaminai reikalui esant gali būti pridėti kaip mikroelementai.
Sitų komponentų kiekis maitinamojoje terpėje nėra specialiai nustatytas, jis turi būti toks, kad komponentų koncentracijos nepradėtų žalingai veikti mikroorganizmų augimą. Bendrai, anglies šaltiniai gali būti pridedami nuo 20 iki 180 g viename maitinamosios terpės litre koncentracijos ir azoto šaltiniai gali būti pridėti nuo 0,6 iki 6 g viename maitinamosios terpės litre koncentracijos.Pageidautina, kad azoto šaltinio kiekis didėtų, atitinkamai augant anglies šaltinio kiekiui.
Po to, kai yra paruošta maitinamoji terpė, jos pH yra palaikomas tarp 3,0 ir 8,0, geriau tarp 3,5 ir 5,0, o idealiausiai tarp 3,5 ir 4,5, naudojant tinkamą rūgštį arba šarmą, po to terpė sterilizuojama autoklave arba panašiai. Mikroorganizmo kultivavimas dažniausiai trunka nuo 2 iki 7 dienų, geriau, nuo 2 iki 5 dienų, nuo 10 iki 35°C, bet optimaliausiai nuo 17 iki 30°C, taip pat naudojami aeracija-maišymas, plakimas arba stacionarinė kultūra.
Be to, DHR ir/arba DPR pirmtakai gali būti pridėti į maitinamąją terpę, norint pagreitinti DHR ir/arba DPR sintezę. Pavyzdžiui, angliavandeniliai, tokie kaip tetradekanas, heksadekanas ir oktadekanas, riebiosios rūgštys, tokios kaip oleino rūgštis, linolo rūgštis ir α-linoleno rūgštis, arba druskos, pavyzdžiui, natrio arba kalio druskos arba jų esteriai naudojami kaip pirmtakai.Taip pat, gali būti pridedami riebalai, turintys šitų riebiųjų rūgščių, kaip sudedamąją dalį (pavyzdžiui, alyvų aliejus, sojų pupų aliejus, medvilnės aliejus arba palmių aliejus). Šitie komponentai gali būti naudojami atskirai arba kombinuojant juos vieną su kitu.
Anglies šaltiniai, azoto šaltiniai, pirmtakai arba panašios medžiagos gali būti dedami į maitinamąją terpę prieš arba kultivavimo metu. Šie komponentai gali būti dedami vieną kartą, pakartotinai arba dedami pastoviai.
Išskiriant praktiniam naudojimui pakankamą kiekį lipidų, turinčių DHR ir/arba DPR, geriausia yra naudoti skystą maitinamąją terpę ir kultivuoti su aeracija-maišymu. Gali būti naudojami tradicinis fermentatorius maišytuvas arba fermentatoriaus barbatavimo kolonėlė.
Kultivuojant, kaip buvo aprašyta aukščiau, lipidai, turintys DHR ir/arba DPR, gaunami ir kaupiami ląstelėse. Kai yra naudojama skysta maitinamoji terpė, lipidai, turintys DHR ir/arba DPR, gali būti išskirti iš kultūros arba iš sterilizuotos kultūros, kultivavimo metu iš kultūros arba kultivavimo pabaigoje sterilizuojant kultūrą, arba iš kultivuotų ląstelių, arba iš išdžiovintų ląstelių, pasirenkant bet kurią iš aukščiau aprašytų kultūrų. Į aukščiau panaudotą terminą “kultūra”, įeina kultivuotos ląstelės, išdžiovintos kultivuotos ląstelės ir apdorotos kultivuotos ląstelės; taip pat mėsos buljono ląstelių kultūra ir supematanto kultūra.
DHR ir/arba DPR gali būti atskirtos nuo lipidų, turinčių DHR ir/arba DPR išskirtų iš kultivuotų ląstelių, kaip išvardinta. Po kultivavimo ląstelės surenkamos iš kultūros bendrai priimtu kietos/skystos separacijos būdu, tokiu kaip centrifugavimas ir filtravimas. Ląstelės yra intensyviai plaunamos vandeniu ir geriausiai, kai jos paskui būtų išdžiovinamos. Ląstelių džiovinimui gali būti panaudoti džiovinimas šalčiu, oru arba panašiai. Išdžiovintos ląstelės paskui suardomos, pavyzdžiui, naudojant presą arba ultragarsinį būdą ir lipidai išskiriami iš ląstelių, naudojant organinį tirpiklį, pageidautina, azoto aplinkoje. Gali būti naudojami organiniai tirpikliai, tokie kaip eteris, heksanas, metanolis, etanolis, chloroformas, dichlormetanas arba petrol eteris. Kintama eksrakcija metanoliu ir petrol eteriu arba ekstrakcija sumaišytų tirpiklių sistema, sudaryta iš chloroformo/metanolio/vandens, taip pat gali būti naudojama. Aukšta lipidų koncentracija, turinčiu DHR ir/arba DPR, gaunama išgarinus organinį tirpiklį iš ekstrakto sumažintame slėgyje.
... v
Alternatyviai, gali būti atliekama šlapių ląstelių ekstrakcija. Šiuo atveju tirpiklis, toks kaip metanolis ir etanolis, suderintas su vandeniu, arba sumaišytas tirpiklis, sudarytas iš alkoholio (alkoholių) ir vandens ir/arba gali būti naudojami kiti tirpikliai, suderinti su vandeniu. Kiti veiksmai atliekami taip, kaip buvo aprašyta aukščiau.
DHR kiekis lipiduose, gautos kaip buvo aprašyta aukščiau, siekia mažiausiai 3 g viename kultūros litre, geriausiai, 5 g viename kultūros litre.
DPR kiekis lipiduose yra mažiausiai 0,7 g viename kultūros litre, optimaliausiai
1,0 g viename kultūros litre.
Lipiduose, pagamintuose kaip buvo aprašyta aukščiau, DHR ir/arba DPR yra pateikiama neutralių lipidų (pavyzdžiui, triacilglicerolio) arba polinių lipidų (pavyzdžiui, fosfatidilcholino, fosfatidiletanolamino arba fosfatidilinozitolio) formoje. Triacilglicerolių, turinčių DHR ir/arba DPR, valymas nuo lipidų, turinčių DHR ir/arba DPR, išskirtų iš kultūros, atliekamas standartiniais metodais, tokiais kaip aušinamoji separacija arba kolonėlių chromatografija.
Tipiška, kad neutralių lipidų kiekis šio išradimo lipiduose, kurie yra aprašomi mūsų išradime, yra labai aukštas (daugiau negu 90 % visų lipidų kiekio). Riebiųjų rūgščių neutraliuose lipiduose sudėties pavyzdys yra kaip išvardinta palmitino rūgštis : 30-38 % ; (n-3) DHR : 40-48 %; (n-6) DPR : 8-13 %; (n-3) EPR : 0-1 %; ARR : 0-0,6 %; kitos riebiosios rūgštys : 10-20 %.
Neutralūs lipidai, iš visų šio išradimo lipidų turi ne mažiau kaip 85 % triacilglicerolių, optimalus kiekis yra ne mažiau kaip 90 % triacilglicerolių. Diacilglicerolių ir monoacilglicerolių kiekis neutraliuose lipiduose yra labai žemas. Laisvo sterolio ir/arba sterolio esterio kiekis taip pat gaunamas 1-3 %. Šios tipiškos molekulinės rūšys yra randamos triacilgliceroliuose :
: 0-16 :0-22: 5, 16 : 0-16 : 0-22 : 6, 16 : 0-22 : 5-22 : 6, : 0-22 : 6-22 : 6, 22 : 5-22 : 6-22 : 6 ir 22 : 6-22 : 6-22 : 6, kur pavyzdžiui, “16 : 0” reiškia riebiąją rūgštį, turinčią “ 16 “ anglies atomų ir neturinčią (“0”) dvigubų jungčių. Įdomu tai, kad lipiduose, aprašytuose mūsų išradime, triacilgliceroliai sudaryti tik iš polineprisotintų riebiųjų rūgščių.
DHR ir/arba DPR atskiriami nuo lipidų, turinčių DHR ir/arba DPR, hidrolizuojant lipidus, vėliau koncentruojant ir atskiriant gautas sumaišytas riebiąsias rūgštis arba sumaišytus riebiųjų rūgščių esterius, pagamintus standartiniais metodais, tokiais, kaip karbamido pridėjimas, aušinamoji separacija arba kolonėlių chromatografija.
DHR ir/arba DPR, taip pat lipidai, turintys DHR ir/arba DPR, pagaminti kaip buvo aprašyta aukščiau, gali būti dedami į įvairų maistą, pašarus arba masalą, siekiant padidinti DHR ir/arba DPR stoką. Tokių maistų pavyzdžiai apima pavyzdžiui, maistiniai priedai, kurių sudėtis yra tinkama maitinant vaikus arba neišnešiotus kūdikius, sveikas maistas, funkcinis maistas (toks kaip enterinis faktorius virškinimui skatinti), kūdikių maistas, nėščiųjų arba maitinančių moterų maistas ir senyvo amžiaus žmonių maistas. Pašarai apima naminių gyvulių, tokių kaip kiaulės ir karvės maistą, naminių paukščių, tokių kaip vištos maistą ir maistą šunims, katėms ir panašiai, maistą žuvų augimui. Masalas apima, pavyzdžiui, tokius mikroorganizmus (taip vadinamus zooplanktonus), kurie yra duodami kaip masalas kultivuojant žuvis ir moliuskus.
Pašarams ir masalui yra naudingiau ir ekonomiškiau naudoti išradime aprašytą mikroorganizmo kultūrą, ląsteles, išskirtas iš kultūros, arba ląstelių liekanas po lipidų išskyrimo. Pavyzdžiui, mikroorganizmų ląstelės, kurios gamina DHR ir/arba DPR gali būti tiesiogiai panaudotos mailiaus (žuvies jaunikliai) maitinimui, vietoj netiesioginio jų maitinimo zooplanktonu arba panašiai. Šitos medžiagos, gali būti panaudotos reikalui esant po išdžiovinimo arba sterilizacijos.
Šiame išradime aprašyti lipidai gali būti naudojami DHR ir/arba DPR trūkumo korekcijai, pavyzdžiui, naminių paukščių kiaušiniuose, jaučiamas šitų rūgščių trūkumas, todėl tinka lesinti naminius paukščius, geriausiai lesinti viščiukus, skirtus kiaušinių perėjimui, maistu, turinčiu lipidų, aprašytų mūsų išradime. Kiaušinio trynio aliejus, kuris yra praturtintas DHR ir/arba DPR, irgi gali būti gaminamas, ekstrahuojant aliejų iš tokių naminių paukščių kiaušinių arba iš kiaušinio trynio, naudojant bendrai priimtą metodą. Sudėtis, į kurios įeina kiaušinio trynio aliejus tinka vaikams, neišnešiotiems kūdikiams, kūdikiams, nėščiosioms ir maitinančioms moterims.
Ilgai buvo mėginama pagaminti miltelių pavidalo pieno kompoziciją vaikams, kuris savo sudėtimi būtų panašus į moters pieną. Ypač yra svarbu, kad moters pieno pagrindiniai ingredientai (tai yra proteinai, riebalai ir cukrus) būtų tokie pat kaip ir miltelių pavidalo pieno ingredientai. Tai yra labai problematiška būtent dėl lipidų, nes paprastame miltelių pavidalo piene nepakanka polineprisotintų riebiųjų rūgščių, kurių pakankamai yra moters piene. Keletas pranešimų apie polineprisotintas riebiąsias rūgštis moters piene buvo paskelbti (polineprisotintos riebiosios rūgštys Amerikos, Europos ir Afrikos moterų piene, žiūrėk INFORM 6(8):940-946 (1995); polineprisotintos riebiosios rūgštys Japonų moterų piene, žiūrėk JJPEN, 13 (9): 765-772 (1991)).
Pastaruoju metu buvo akivaizdžiai įrodyta, kad ARR ir DHR, abi įeina į moters pieno sudėtį ir yra efektyvios vaikų augimui (“Advances in Polyunsaturated Fatty Acid Research”, Elsevier Science Publishers, pp. 261-264 (1993)). ARR ir DHR svarba ūgio didėjimui ir smegenų išsivystymui taip pat buvo aprašytos (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90 : 1073-1077 (1993); Lancet, 344:1319-1322 (1994)).
Todėl yra padidėjęs dėmesys DHR ir ARR pridėjimui į modifikuotą pieną. Modifikuotu pienu, turinčiu žuvų taukų, kaip DHR šaltinį, jau prekiaujama. Žuvų taukai taip pat turi EPR, kuri vargu ar yra moters piene ir kuri, kaip buvo paskelbta, neigiamai veikia nepakankamai išsivysčiusių kūdikių augimą “Advances in Polyunsaturated Fatty Acid Research”, Elsevier Science Publishers, pp. 261-264 (1993)). Išradime aprašyti lipidai yra tinkami kaip modifikuoto pieno priedai, nes EPR kiekis juose yra ypač mažas, taip pat jie gali būti dedami į vaikišką maistą.
Išradime aprašyti lipidai gali būti dedami į maistą, tokį maistą su maistingaisiais priedais, senyvo amžiaus žmonių maistą arba sveiką maistą, kai norima koreguoti DHR ir/arba DPR trūkumą arba pagerinti sviekatą. Maisto kompozicija gali būti skystos, kietos formos arba aliejinė. Geriausia, kai lipidų kiekis maiste yra nuo 0,001 iki 50 % masės, priklausomai nuo maisto rūšies, į kurį įdedami lipidai.
Maisto, turinčio aliejų pavyzdys apima natūralų maistą (tokį kaip mėsa, žuvis arba riešutai), maistą, į kurį lipidai įdedami gaminant (tokį kaip sriuba), maistą, kuriame lipidai naudojami kaip virimo aplinka (tokį kaip spurgos), riebų maistą (tokį kaip sviestas), perdirbtą maistą, į kurį lipidai įdedami gaminimo metu (tokį kaip sausainiai), maistą, į kurį lipidai yra įpurškiami arba naudojami paskutiniame gaminimo etape (tokį kaip traškučiai). Išradime aprašyti lipidai (arba išskirtos DHR ir/arba DPR) taip pat gali būti įdedami į agrokultūrinį maistą, fermentinį maistą, naminių gyvulių pašarus, jūros maistą arba gėrimą, kurie neturi riebalų.
Alternatyviai, išradime aprašyti lipidai taip pat gali būti dedami į funkcinį maistą, kuris parodo fiziologinį DHR ir/arba DPR veikimą, skirtą susilpnėjusių kūno funkcijų atnaujinimui arba fiziologinio aktyvumo susilpnėjimui išvengti. Funkcinis maistas, apie kurį kalbama išradime, gali būti medikamento arba perdirbtos formos (tokios kaip enterinis agentas maitinimui skatinti, milteliai, granulės, tabletės, tirpalas vidiniam naudojimui, suspensija, emulsija, sirupas arba panašiai), kuriose išradime aprašyti lipidai kombinuojami su proteinais, sacharidais, lipidais, retaisiais elementais, vitaminais, emulsikliais arba kvapiosiomis medžiagomis.
Be to, išradime aprašyti lipidai gali būti naudojami kaip priedas kosmetikoje arba kaip priemonė plovimui, kaip pradinė medžiaga gaminant jų darinius, kurie gali būti naudojami kaip medikamentas.
Toliau išradimas bus aprašytas pavyzdžiais, bet išradimas neapribotas vien tik jais.
Pavyzdys
Lipidu gavimo būdas, naudojant mikroorganizmus, priklausančius genus
Ulkenia (1)
Ulkenia sp. SAM 2180 ir SAM 2179 kamienai buvo kultivuojami 5 litrų ( 1 ) tūrio fermentatoriuje (fermentatorius ąsočio formos), talpinančio 3 L maitinamosios terpės, esant tam tikroms kultūros sąlygoms, kurios sudėtis yra tokia:
(1) Maitinamosios terpės sudėtis
1) Gliukozė ( g/1 ): 60
2) Kalio fosfatas ( g/1): 3
3) Amonio sulfatas ( g/1): 2
4) Vandeninis kukurūzų tirpalas ( g/1): 0,7
5) 50% dirbtinio jūros vandens (1): 1
6)pH: 4,0
(2) Kultūros sąlygos
1) Kultivavimo temrepatūra ( °C ): 28
2) Aeracijos kiekis ( VVM): 0,5
3) Maišymo dažnis ( apsisukimų per minutę ): 300
4) pH reguliavimas: palaikomas pH 4 su 10 % ( g/l ) natrio hidroksido ir 1M sieros rūgšties.
Po kultivavimo ląstelės surenkamos centrifuguojant ir išdžiovinamos šaltyje, po to išmatuojamas ląstelių kiekis (pagal masę) viename maitinamosios terpės litre. Po to buvo atliekama ląstelių destrukcija ir lipidų ekstrakcija, pridedant chloroformo/metanolio mišinio (tūrių santykyje 2:1) į išdžiovintas ląsteles, santykiu 100 ląstelių tūrių pagal ląstelių masę ir homogenizuojant mišinį, naudojant stikliarusą. Po ekstrakto praplovimo pagal Folch’o metodą, tirpiklis buvo išgarintas, kad gautume išvalytus lipidus, ir po to buvo išmatuota lipidų masė.
Norint įvertinti riebiųjų rūgščių sudėtį po lipidų išvalymo, buvo pagaminti riebiųjų rūgščių metilo esteriai, ištirpinus dalį lipidų sumaišytame tirpale, kuris sudarytas iš lygaus kiekio metanolio tirpalo, turinčio 10 % HCl ir dichlormetano, šildant 60°C dvi valandas. Esteriai buvo veikiami dujine chromotografija, norint išanalizuoti riebiosios rūgšties sudėtį. Dujinės - skysčių chromotografijos atskyrimo sąlygos buvo tokios:
(3) Atskyrimo sąlygos
1) Kolonėlė: kapiliarinė kolonėlė TC-70 (GL Science Co., LTD.), vidinis diametras 0,25 mm x ilgis 30 m
2) Tekėjimo gretis: 0,8 ml/min, 100 kPa (kolonėlės galvutės slėgis)
3) Dujos-nešiklis: azoto dujos
4) Kolonėlės temperatūra: kilimo būdas, 170-220°C ( 4°C/min )
5) Registacija: FID
Duomenys pateikiami 1 ir 2 lentelėse
LENTELĖ
Kamienas Kultivavimo laikas (dienos) Išdžiovintų ląstelių masė (g)*l Bendras lipidų kiekis (g )*i Lipidų procentinis kiekis ( masės % ) *2 DHR kiekis (g)*l DPR kiekis (g)*l
SAM2180 3 23,2 14,1 61 4,0 0,9
S AM 2179 J 19,5 11,9 61 5,5 1,3
*1) Masė viename maitinamosios terpės litre *2) Procentas, lyginant su išdžiovintomis ląstelėmis
LENTELĖ
Kamienas 14 : 0 15 : 0 16 : 0 17 : 0 18 : 0 20:4 (ARR) 20 : 5 (EPR) 22 : 5 (DPR) 22 : 6 (DHR)
SAM 2180 2,7 2,4 55,0 1,0 1,4 • 0,2 6,7 28,7
SAM 2179 2,4 0,9 37,2 0,3 0,8 0,4 0,6 10,6 46,2
Pavyzdys
Lipidų gavimo būdas, naudojant mikroorganizmus priklausančius genus
Ulkenia (2)
Lipidų gavimo būdas, naudojant mikroorganizmus, priklausančius Ulkenia sp. S AM 2179 kamienui, buvo kultivuojama 5 1 tūrio fermentatoriuje (fermentatorius kaip ąsotis), talpinančio 3 L maitinamosios terpės, turinčios šią sudėtį, tokiomis kultūros sąlygomis.
1) Maitinamosios terpės sudėtis
1) Gliukozė ( g/1): 60
2) Kalio fosfatas ( g/1): 3
30 3) Amonio sulfatas ( g/1): 2
4) Magnio chloridas ( g/1): 1,3
5) natrio sulfatas ( g/1): 1
6) Kalcio chloridas ( g/1): 0,3
7) Vandeninis kukurūzų tirpalas ( g/1): 0,7
35 8) pH: 2) Kultūros sąlygos 4,0
1) Kultivavimo temperatūra ( °C ): 28
2) Aeracijų kiekis ( VVM ): 0,5
40 3) Maišymo dažnis ( apsisukimų per minutę ): 300
4) pH reguliavimas: palaikomas pH 4 su 10 % ( g/1 ) natrio
hidroksido ir 1 M sieros rūgšties.
Po kultivavimo ląstelės surenkamos centrifuguojant ir išdžiovinamos šaltyje, buvo pasvertas ląstelių kiekis (pagal masę) viename maitinamosios terpės litre. Po to atliekama ląstelių destrukcija ir lipidų ekstrakcija, pridėjus chloroformo/metanolio mišinio (tūrių santykiu 2.T) į išdžiovintas ląsteles santykiu 100 ląstelių tūrių pagal ląstelių svorį ir homogenizuojant mišinį, . 10 naudojant stikliarusą. Po ekstrakto praplovimo pagal Folch’o metodą, tirpiklis buvo išgarintas, kad gautume išvalytus lipidus, ir paskui buvo išmatuota lipidų masė.
Norint įvertinti riebiųjų rūščių sudėtį po lipidų išvalymo, buvo pagaminti riebiųjų rūgščių metilo esteriai, ištirpinus dalį lipidų sumaišytame tirpale, kuris sudarytas iš lygaus kiekio metanolio tirpalo, turinčio 10 % HCI ir dichlormetano, šildant 60°C temperatūroje dvi valandas. Esteriai buvo veikiami dujine chromotografija, norint išanalizuoti riebiosios rūgšties sudėtį. Dujinės skysčių chromotografijos atskyrimo sąlygos buvo tokios, kaip aprašyta pirmame pavyzdyje.
Duomenys pateikti 3 ir 4 lentelėse.
LENTELĖ
Kamienas Kultivavimo laikas (dienos) Išdžiovintų ląstelių masė (g)*l Bendras lipidų kiekis (g )* i Lipidų Procentinis Kiekis ( masė % ) *2 DHR kiekis (g)*l DPR kiekis (g)*l
SAM 2179 3 21,5 12,0 56 5,5 1,5
*1) Masė viename maitinamosios terpės litre *2) Procentas, lyginant su išdžiovintomis ląstelėmis
4 LENTELĖ
Kamienas 14 : 0 15 :0 16 : 0 17 : 0 18 : 0 20:4 (ARR) 20 : 5 (EPR) 22 : 5 (DPR) 22 : 6 (DHR)
SAM 2179 2,0 1,5 34,3 0,5 0,9 0,7 0,7 12,4 45,8
Pavyzdys
Lipidu, priklausančiu Ulkenia sp. S AM 2179. analizė
Neutralūs ir poliniai lipidai buvo atskirti nuo lipidų, gautų pirmame pavyzdyje, naudojant bendrai priimtą skystis-skystis padalinimo metodą, naudojant atitinkamą heksaną ir 90 % metanolį. 0,92 g neutralių lipidų ir 0,05 g polinių lipidų buvo pagaminta iš 1 g lipidų. Neutralių ir polinių lipidų rezultatai buvo analizuojami, naudojant plonasluoksnę chromatografiją. Spalvinis tyrimas buvo padarytas, naudojant sieros rūgštį. Gautų dėmių identifikacija buvo patvirtinta, lyginant jų Rf reikšmes su standartiniais lipidais.
Daugiau negu 90 % neutralių lipidų buvo triacilgliceroliai. Poliniai lipidai sudaryti iš fosfatidilcholino (60-80 %), fosfatidiletanolamino (5-20 %) ir fosfatidilinozitolio (2-8 %).
Triacilgliceroliai neutraliuose lipiduose buvo toliau analizuojami, atskiriant molekulines rūšis, naudojant skysčių chromotagrafiją (kolonėlė; ODS kolonėlė; mobili fazė; acetonas/acetonitrilas (3:2); registracija: diferencinis refraktometras) (žiūrėk 1 lentelę). Gautos viršūnės buvo izoliuotos ir po hidrolizės paverstos metilo esteriais. Riebiųjų rūgščių likučiai buvo nustatyti, naudojant dujinę-skysčių chromatografiją .
Penkios pagrindinės viršūnės buvo nustatytos, kaip parodyta 5 lentelėje. Triacilgliceroliai buvo sudaryti iš 12,8 % 1,2,3-tri-dokozaheksaenoliotriacilglicerolio ir 8,0 % l-dokozapentaenolio-2,3-di-dokozaheksaenoliotriacilglicerolio. Apie 20 % visų triacilglicerolių buvo sudaryti iš tripolineprisotintų riebiųjų rūgščių.
LENTELĖ
Viršūnė Molekulių rūšys Santykis (%)
1 22 6-22 6-22 6 12,8
2 22 5-22 6-22 6 8,0
3 16 0-22 6-22 6 18,3
4 16 0-22 5-22 6 8,1
5 16 0-16 0-22 6 10,8
Pavyzdys
Riebiųjų rūgščių liekanų nustatymas priklausomai nuo jų padėčių triacilgliceroliuose
Riebiųjų rūgščių liekanų padėčių priklausomybė triacilgliceroliuose aprašyta trečiame pavyzdyje, buvo analizuojama tokiu būdu. Triacilgliceroliai, aprašyti trečiame pavyzdyje (molekulių rūšys; 16 : 0-16 : 0-22 ; 6), buvo išdžiovinti ir apdoroti lipaze (iš Rhizopus japonicus), kuri yra specifinė padėčiai 1,3. Riebiųjų rūgščių liekanos buvo nustatytos naudojant GC/MS ir po 2monoacilglicerolių gavimo buvo trimetilsililinti. Apdorojimas lipaze buvo įvykdytas 2-se ml 50 mM acetato buferio (pH 5,5 ) su 1000 vienetų lipazės 35°C 30 minučių. Reakcijos produktai buvo ekstrahuoti eteriu ir trimetilsililinti, naudojant komerciškai prieinamą trimetilsililinimo agentą.
Fragmento viršūnė, atitinkanti molekulinę triacilglicerolių masę, prie kurios 22 : 6 yra prijungtas, tai parodė, kad triacilgliceroliai yra 16 : 0-22 :6-16 : 0, prie kurių riebiosios rūgšties 22 : 6 liekanos buvo prijungtos 2-je glicerolio grandinių padėtyje.
Pavyzdys
Modifikuoto pieno, turinčio DHR ir/arba DPR, gamyba
Modifikuotas pienas, turintis DHR ir/arba DPR, buvo pagamintas pridėjus 0,44 g lipidų, iš 1 pavyzdžio, kuriame yra 46,2 % DHR ir 10,6 % DPR, į 100 g pieno miltelių.
DHR ir DPR sudėtis galutiniame produkte buvo 0,80 % ir 0,19 % nuo visų riebiųjų rūgščių, atitinkamai, šita sudėtis buvo panaši į moters pieną.
Pavyzdys
Struktūrizuotu lipidu, turinčių DHR ir DPR, gavimas ml lipazės tirpalo (5,600 v/ml, lipazė specifinė padėčiai 1,3 iš Rhizopus delemar) buvo sumaišyta su 2,-5 g kalcio karbonato, jį naudojant kaip imobilizavimo nešiklį. Fermentas buvo imobilizuotas ir precipituotas pridėjus į mišinį 40 ml acetono ir po to imobilizuotas fermentas buvo išdžiovintas. Specifinis gauto imobilizuoto fermento aktyvumas buvo 9,3 v/mg. 120 mg imobilizuoto fermento buvo. sumaišyta su 1 g DHR ir DPR turinčių lipidų, pagamintų iš S AM 2180, 1 pavyzdys, 2 g kaprono rūgšties ir 60 mg vandens, kratant 30°C 8 valandas. Paskui triacilgliceroliai buvo išskirti iš reakcijos mišinio, naudojant bendrai priimtą metodą ir buvo nustatyta riebiųjų rūgščių, įeinančių į triacilglicerolius, sudėtis. Duomenys pateikti 6 lentelėje.
LENTELĖ
8:0 14:0 15:0 16:0 17:0 18:0 20:4 (ARR) 20:5 (EPR) 22:5 (DPR) 22:6 (DHR)
Be apdorojimo 0,0 2,7 2,4 55,0 1,0 1,4 0,0 0,2 6,7 28,7
Po apdorojimo lipaze 36,2 1,8 1,2 17,6 1,0 1,8 0,0 0,2 7,3 30,4
Daugiau negu 30 % triacilglicerolių turėjo polineprisotintas riebiąsias rūgštis glicerolių SN 2 padėtyje. Taigi, šitie lipidai yra tinkami struktūrizuotų lipidų, kurie turi vidutinio ilgio grandinės riebiąsias rūgštis glicerolių SN 1 ir SN 3 padėtyse ir polineprisotintas riebiąsias rūgštis glicerolių SN 2 padėtyje, gamybai.
PRAMONINIS PRITAIKOMUMAS
Lipidai, turintys didelį kiekį DHR ir/arba DPR ir mažą EPR kiekį, gali būti gaunami panaudojus išradime aprašytą gavimo būdą. DHR ir/arba DPR taip pat gali būti pagamintos toliau jas išskiriant iš lipidų.
Išradime aprašyti lipidai, turintys DHR ir/arba DPR, išskirta DHR ir išskirta DPR, naudojami kaip priedas maistui, pašarams, masalui, vaistams ir panašiai. Pašarams arba masalui gali būti panaudotos ląstelės, turinčios DHR ir/arba DPR, kurios buvo aprašytos išradime. Naminių paukščių kiaušiniai arba naminių paukščių kiaušinio trynys gali būti praturtinti DHR ir/arba DPR, šeriant naminius paukščius išradime aprašytais pašarais.
IŠRADIMO APIBRĖŽTIS

Claims (16)

  1. IŠRADIMO APIBRĖŽTIS
    1. Lipidų, turinčių dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį, gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad maitinamojoje terpėje kultivuoja mikroorganizmą, priklausantį genus Ulkenia, turintį savybę sintezuoti lipidus, turinčius dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį, ir išskiria minėtus lipidus iš kultūros.
  2. 2. Dokozaheksaeno rūgšties gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad maitinamojoje terpėje kultivuoja mikroorganizmą, priklausantį genus Ulkenia, turintį savybę sintezuoti lipidus, turinčius dokozaheksaeno rūgštį, išskiria minėtus lipidus iš kultūros, ir atskiria minėtą dokozaheksaeno rūgštį nuo minėtų lipidų.
  3. 3. Dokozapentaeno rūgšties gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad maitinamojoje terpėje kultivuoja mikroorganizmą, priklausantį genus Ulkenia, turintį savybę sintezuoti lipidus, turinčius dokozapentaeno rūgštį, išskiria minėtus lipidus iš kultūros, ir atskiria minėtą dokozapentaeno rūgštį nuo minėtų lipidų.
  4. 4. Mikroorganizmo, priklausančio genus Ulkenia, turinčio lipidų į kuriuos įeina dokozaheksaeno rūgštis ir dokozapentaeno rūgštis, ląstelės.
  5. 5. Ulkenia sp. SAM 2179 kamienas (FERM BP-5601), turintis savybę sintezuoti lipidus, turinčius dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį.
  6. 6. Maistas su maistingaisiais priedais, besiskiriantis tuo, kad jame yra lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1 -3 punktų.
  7. 7. Kompozicija, tinkama kūdikių mitybai, besiskirianti tuo, kad joje yra lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1-3 punktų.
  8. 8. Kompozicija, tinkama neišnešiotų kūdikių mitybai, besiskirianti tuo, kad joje yra lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1-3 punktų.
  9. 9. Vaikų maistas, besiskiriantis tuo, kad jame yra lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1 -3 punktų.
  10. 10. Senyvo amžiaus žmonių maistas, besiskiriantis tuo, kad jame yra lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1 -3 punktų.
  11. 11. Enterinis agentas, skirtas maitinimui skatinti, besiskiriantis tuo, kad jame yra lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1-3 punktų.
  12. 12. Gyvulių pašaras, besiskiriantis tuo, kad jame yra lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1-3 punktų.
  13. 13. Pašarų priedas gyvuliams šerti, besiskiriantis tuo, kad jis turi lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1-3 punktų.
  14. 14. Masalas, skirtas mikroorganizmų maitinimui, besiskiriantis tuo, kad jame yra lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1-3 punktų.
  15. 15. Maistas, skirtas nėščiųjų ir maitinančiųjų moterų mitybai, b e s i s k i r i antis tuo, kad jame yra lipidų, gautų būdu pagal bet kurį iš 1-3 punktų.
  16. 16. Struktūrizuotų lipidų, turinčių dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį, gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad maitinamojoje terpėje kultivuoja mikroorganizmą, priklausantį genus Ulkenia. turintį savybę sintezuoti lipidus, turinčius dokozaheksaeno rūgštį ir dokozapentaeno rūgštį, išskiria minėtus lipidus iš kultūros, ir apdoroja minėtus lipidus grybelio lipaze, paverčiant riebiąsias rūgštis 1 ir 3 padėtyse į vidutinio ilgio grandinės riebiąsias rūgštis.
LT99-005A 1996-07-23 1999-01-18 Dokozaheksaeno rūgšties ir dokozapentaeno rūgšties gavimo būdas LT4550B (lt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP19351696 1996-07-23

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LT99005A LT99005A (lt) 1999-06-25
LT4550B true LT4550B (lt) 1999-10-25

Family

ID=16309374

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LT99-005A LT4550B (lt) 1996-07-23 1999-01-18 Dokozaheksaeno rūgšties ir dokozapentaeno rūgšties gavimo būdas

Country Status (24)

Country Link
US (2) US6509178B1 (lt)
EP (3) EP1785492B1 (lt)
JP (2) JP3343358B2 (lt)
AT (2) ATE347607T1 (lt)
AU (1) AU723553C (lt)
BR (1) BR9710394A (lt)
CA (1) CA2261231C (lt)
CZ (2) CZ300277B6 (lt)
DE (2) DE69737063T2 (lt)
DK (2) DK0935667T3 (lt)
EE (1) EE04063B1 (lt)
ES (2) ES2362476T3 (lt)
HU (1) HU229062B1 (lt)
ID (1) ID17466A (lt)
IL (2) IL128166A (lt)
LT (1) LT4550B (lt)
LV (1) LV12329B (lt)
NO (2) NO323173B1 (lt)
PL (1) PL193818B1 (lt)
PT (2) PT1785492E (lt)
RU (1) RU2226216C2 (lt)
SI (1) SI0935667T1 (lt)
TR (1) TR199900130T2 (lt)
WO (1) WO1998003671A1 (lt)

Families Citing this family (104)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5340742A (en) * 1988-09-07 1994-08-23 Omegatech Inc. Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids
US20060094089A1 (en) * 1988-09-07 2006-05-04 Martek Biosciences Corporation Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids
US6509178B1 (en) * 1996-07-23 2003-01-21 Suntory Ltd. Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid with ulkenia
DE69831674T2 (de) * 1997-08-01 2006-06-22 Martek Biosciences Corp. Dha-enthaltende naehrzusammensetzungen und verfahren zu deren herstellung
JP4283351B2 (ja) * 1998-08-27 2009-06-24 サントリー酒類株式会社 新規な油脂組成物の製造方法および用途
DK1166652T4 (en) 1999-03-04 2016-10-24 Suntory Holdings Ltd The use of material containing 4, 7, 10, 13, 16-docosapentaenoic acid
AU2008229885B2 (en) * 2000-01-19 2011-11-17 Dsm Ip Assets B.V. Solventless extraction process
KR101429238B1 (ko) * 2000-01-19 2014-08-12 마텍 바이오싸이언스스 코포레이션 무용매 추출 방법
KR101293135B1 (ko) 2000-01-28 2013-09-12 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. 발효기 내에서 진핵 미생물의 고밀도 배양에 의한 고도불포화 지방산을 함유하는 지질의 증진된 생산 방법
AU5562900A (en) * 2000-03-29 2001-10-08 Council Of Scientific And Industrial Research A method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrids
US6410282B1 (en) * 2000-03-30 2002-06-25 Council Of Scientific And Industrial Research Method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid fungi
EP1178118A1 (en) 2000-08-02 2002-02-06 Dsm N.V. Isolation of microbial oils
EP1911837B1 (en) 2000-09-28 2011-05-25 Bioriginal Food & Science Corp. FAD5-2 fatty acid desaturase family member and uses thereof
WO2003049832A1 (en) 2001-12-12 2003-06-19 Martek Biosciences Boulder Corp. Extraction and winterization of lipids from oilseed and microbial sources
AU2003240187A1 (en) * 2002-06-17 2003-12-31 Medestea Research And Production S.R.L. A process for preparing long chain saturated or unsaturated oxygenated compounds
JP3840459B2 (ja) * 2003-03-20 2006-11-01 裕司 島田 グリセリドおよびその製造方法
US8921422B2 (en) * 2003-10-01 2014-12-30 The Iams Company Methods and kits for enhancing ability to learn in a puppy or kitten
DK1702073T3 (da) 2003-10-02 2014-04-07 Dsm Ip Assets Bv Produktion af høje niveauer af dha i mikroalger ved anvendelse af modificerede mængder af chlorid og kalium
DE10352838A1 (de) * 2003-11-10 2005-07-07 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Kultivierung von Mikroorganismen der Gattung Thraustochytriales unter Verwendung eines optimierten Niedrigsalzmediums
DE10352837A1 (de) * 2003-11-10 2005-07-07 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Prozess zur Kultivierung von Mikroorganismen der Gattung Thraustochytriales
EP1537871A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-08 Aventis Pharma S.A. Enoxaparin for the treatment of cancer
DE102004017369A1 (de) 2004-04-08 2005-11-03 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Screeningverfahren zur Identifizierung von PUFA-PKS in Proben
DE102004022015A1 (de) * 2004-05-03 2005-12-01 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Fischfutter für Aquafarmen auf Basis fermentativ gewonnener mehrfach ungesättigter Fettsäuren
US7588931B2 (en) * 2004-11-04 2009-09-15 E. I. Du Pont De Nemours And Company High arachidonic acid producing strains of Yarrowia lipolytica
DE102004062141A1 (de) * 2004-12-23 2006-07-06 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Herstellung eines Rohöls aus Gemischen von Mikroorganismen und Pflanzen, das so hergestellte Öl sowie die spezifischen Verwendungen des so hergestellten und gegebenenfalls zusätzlich raffinierten Öls
DE102005003624A1 (de) * 2005-01-26 2006-07-27 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Herstellung und Anwendung eines antioxidativ wirksamen Extraktes aus Crypthecodinium sp.
DE102005003625A1 (de) * 2005-01-26 2006-07-27 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Herstellung einer DHA-haltigen Fettsäure-Zusammensetzung
HUE031206T2 (en) * 2005-05-23 2017-06-28 Massachusetts Inst Technology Formulations and methods of application containing PUFA
ES2576986T3 (es) 2005-06-07 2016-07-12 Dsm Nutritional Products Ag Microorganismos eucariotas para la producción de lípidos y antioxidantes
CN103211807A (zh) * 2005-07-08 2013-07-24 Dsmip资产公司 用于治疗痴呆和前痴呆相关病症的多不饱和脂肪酸
CA2623483A1 (en) * 2005-09-20 2007-03-29 Prolacta Bioscience, Inc. A method for testing milk
DE102005054577A1 (de) 2005-11-16 2007-05-24 Cognis Ip Management Gmbh Verwendung von Estern ungesättigter, physiologisch aktiver Fettsäuren als Nährmedien für Zellkulturen
NZ569676A (en) 2005-12-21 2012-03-30 Brudy Technology S L Use of DHA, EPA or DHA-derived EPA for treating a pathology associated with cellular oxidative damage
ES2277557B1 (es) 2005-12-21 2008-07-01 Proyecto Empresarial Brudy, S.L. Utilizacion de acido docosahexaenoico para el tratamiento del daño celular oxidativo.
US8968721B2 (en) 2005-12-28 2015-03-03 Advanced Bionutrition Corporation Delivery vehicle for probiotic bacteria comprising a dry matrix of polysaccharides, saccharides and polyols in a glass form and methods of making same
JP5214464B2 (ja) 2005-12-28 2013-06-19 アドバンスド バイオニュートリション コーポレーション 多糖類、糖類およびポリオール類の乾燥マトリックスを含む、ガラス形態の、プロバイオティクス細菌用送達媒体およびその製造方法
CN101460141A (zh) * 2006-04-03 2009-06-17 先进生物营养公司 包含二十二碳六烯酸的饲料制剂
GB2437909A (en) * 2006-05-12 2007-11-14 Advanced Bionutrition Inc Animal feed comprising docosahexaenois acid from a microbial source
EP1886680A1 (en) * 2006-05-23 2008-02-13 Nestec S.A. Maternal supplement
JP5531324B2 (ja) * 2006-08-01 2014-06-25 ディーエスエム ニュートリショナル プロダクツ アーゲー 油生産微生物およびその改変方法
KR20090045929A (ko) * 2006-08-29 2009-05-08 마텍 바이오싸이언스스 코포레이션 유아용 조제유에서 ＤＰＡ(ｎ-6) 오일의 용도
KR100684642B1 (ko) * 2006-09-14 2007-02-22 주식회사 일신웰스 어유 유래 글리세라이드 유지 조성물 및 이의 제조방법
US20100086979A1 (en) * 2006-10-27 2010-04-08 Thomas Kiy Production of omega-3 fatty acids in microflora of thraustochytriales using modified media
CA2673120C (en) 2006-12-18 2012-08-07 Advanced Bionutrition Corporation A dry food product containing live probiotic
US20080234377A1 (en) * 2007-03-23 2008-09-25 Martek Biosciences Corporation Polyunsaturated fatty acids for treatment of dementia and pre-dementia-related conditions
US20090023808A1 (en) * 2007-06-29 2009-01-22 Martek Biosciences Corporation Production and Purification of Esters of Polyunsaturated Fatty Acids
EP2071019A1 (en) 2007-12-15 2009-06-17 Lonza AG Method for the cultivation of microoranisms of the order thraustochytriales
EP2105506A1 (de) 2008-03-26 2009-09-30 Lonza Ag Verfahren zur Herstellung PUFAs enthaltender Öle unter Verwendung von Mikroorganismen der Ordnung Labyrinthulomycota
EP2145942A1 (de) * 2008-07-15 2010-01-20 Lonza Ltd. Verfahren zur Isolierung von Ölen aus Zellen und Biomasse
US20100077654A1 (en) * 2008-09-23 2010-04-01 LiveFuels, Inc. Systems and methods for producing biofuels from algae
NZ595599A (en) 2009-03-19 2013-12-20 Dsm Ip Assets Bv Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
US8207363B2 (en) 2009-03-19 2012-06-26 Martek Biosciences Corporation Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
ES2908047T3 (es) 2009-03-27 2022-04-27 Intervet Int Bv Vacunas en micropartículas para la vacunación oral o nasal y el refuerzo de animales incluidos los peces
US8753851B2 (en) 2009-04-17 2014-06-17 LiveFuels, Inc. Systems and methods for culturing algae with bivalves
AU2010254235B2 (en) 2009-05-26 2015-04-02 Advanced Bionutrition Corporation Stable dry powder composition comprising biologically active microorganisms and/or bioactive materials and methods of making
WO2010147955A1 (en) * 2009-06-16 2010-12-23 LiveFuels, Inc. Systems and methods for harvesting algae
WO2011090493A1 (en) 2010-01-19 2011-07-28 Martek Biosciences Corporation Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
US9504750B2 (en) 2010-01-28 2016-11-29 Advanced Bionutrition Corporation Stabilizing composition for biological materials
US8834951B2 (en) 2010-01-28 2014-09-16 Advanced Bionutrition Corporation Dry glassy composition comprising a bioactive material
WO2011133610A1 (en) 2010-04-22 2011-10-27 E. I. Du Pont De Nemours And Company Method for obtaining polyunsaturated fatty acid-containing compositions from microbial biomass
KR101961958B1 (ko) 2010-06-01 2019-03-25 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. 세포로부터의 지질의 추출 및 이로부터의 생성물
WO2012021686A1 (en) 2010-08-11 2012-02-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Improved aquaculture meat products
AU2011289384A1 (en) 2010-08-11 2013-01-24 E. I. Du Pont De Nemours And Company A sustainable aquaculture feeding strategy
US20120040076A1 (en) 2010-08-11 2012-02-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Aquaculture feed compositions
CN103140145B (zh) 2010-08-13 2014-08-20 高级生物营养公司 用于生物材料的干的贮存稳定用组合物
KR101115357B1 (ko) 2010-09-03 2012-03-06 대상 주식회사 습식 상태의 미세조류로부터 조오일을 추출하는 방법
US8973531B2 (en) * 2010-12-09 2015-03-10 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Automated continuous zooplankton culture system
US9487716B2 (en) 2011-05-06 2016-11-08 LiveFuels, Inc. Sourcing phosphorus and other nutrients from the ocean via ocean thermal energy conversion systems
EP2734197A4 (en) 2011-07-21 2014-12-17 Dsm Ip Assets Bv FATTY ACID COMPOSITIONS
WO2014074770A2 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Heliae Development, Llc Balanced mixotrophy methods
WO2014074772A1 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Heliae Development, Llc Mixotrophic, phototrophic, and heterotrophic combination methods and systems
WO2014096024A1 (de) * 2012-12-19 2014-06-26 Lonza Ltd Verfahren zur herstellung einer lipid-reichen zusammensetzung aus mikroorganismen
WO2014141098A1 (en) 2013-03-13 2014-09-18 Dsm Nutritional Products Ag Engineering microorganisms
FR3005860B1 (fr) * 2013-05-21 2016-01-22 Oreal Compositions comprenant de l'huile d'ulkenia et leurs utilisations pour ameliorer et/ou renforcer la fonction barriere
FR3007652B1 (fr) * 2013-06-28 2015-07-17 Oreal Composition comprenant de l'acide docosahexaenoique et du pentaerythrityl tetra-di-t-butyl hydroxyhydrocinnamate
RU2537252C1 (ru) * 2013-06-29 2014-12-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук Способ получения докозагексаеновой кислоты
EP2826384A1 (de) 2013-07-16 2015-01-21 Evonik Industries AG Verfahren zur Trocknung von Biomasse
CA2933995C (en) 2013-12-20 2023-02-28 Dsm Nutritional Products Ag Methods of recovering oil from microorganisms
US11124736B2 (en) 2013-12-20 2021-09-21 Dsm Ip Assets B.V. Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
TWI646189B (zh) 2013-12-20 2019-01-01 荷蘭商Ｄｓｍ智慧財產有限公司 用於從微生物細胞獲得微生物油之方法（五）
EP3082793B1 (en) 2013-12-20 2020-04-15 DSM IP Assets B.V. Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
AR098893A1 (es) 2013-12-20 2016-06-22 Dsm Ip Assets Bv Proceso para obtener aceite microbiano a partir de células microbianas
EP3082792A4 (en) 2013-12-20 2017-08-16 DSM IP Assets B.V. Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
CN115109804A (zh) 2013-12-20 2022-09-27 玛拉可再生能源公司 从微生物中回收油的方法
CZ307271B6 (cs) * 2014-08-26 2018-05-09 Vysoká škola chemicko - technologická v Praze Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky
WO2016050556A1 (de) 2014-10-02 2016-04-07 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur anzucht von tieren
WO2016050554A1 (de) 2014-10-02 2016-04-07 Evonik Degussa Gmbh Pufas enthaltendes futtermittel mit hoher abriebfestigkeit und hoher wasserstabilität
CN118813731A (zh) 2014-10-02 2024-10-22 赢创运营有限公司 用于制备具有高细胞稳定性的含pufa生物质的方法
ES2873094T3 (es) 2014-10-02 2021-11-03 Evonik Operations Gmbh Procedimiento para la producción de un pienso que contiene PUFAs mediante extrusión de una biomasa que contiene PUFAs de tipo Labyrinthulomycetes
AR104042A1 (es) 2015-03-26 2017-06-21 Mara Renewables Corp Producción de alta densidad de biomasa y aceite utilizando glicerol en bruto
HK1254383A1 (zh) 2015-07-13 2019-07-19 MARA Renewables Corporation 增强木糖的微藻代谢
US12558395B2 (en) 2015-07-29 2026-02-24 Advanced Bionutrition Corp. Stable dry probiotic compositions for special dietary uses
KR102685914B1 (ko) 2015-07-29 2024-07-16 어드밴스드 바이오뉴트리션 코프. 특수 식이 용도를 위한 안정한 프로바이오틱 건조 조성물
WO2017094804A1 (ja) * 2015-12-01 2017-06-08 日本水産株式会社 ドコサヘキサエン酸含有油及びその製造方法
US10851395B2 (en) 2016-06-10 2020-12-01 MARA Renewables Corporation Method of making lipids with improved cold flow properties
AU2017380721B2 (en) 2016-12-22 2021-04-01 MARA Renewables Corporation Methods for producing biomass rich in DHA, palmitic acid and protein using a eukaryotic microorganism
JP6938163B2 (ja) * 2017-02-06 2021-09-22 長瀬産業株式会社 脂質組成物、その用途及びその製造方法
NL2019436B1 (en) 2017-08-23 2019-03-07 Newtricious Bv Composition comprising a xantophyll and an omega-3 fatty acid and method of use thereof
JP7013416B2 (ja) * 2018-06-21 2022-01-31 マルハニチロ株式会社 腎機能維持及び保護剤、並びに、その効果評価方法
WO2019244140A1 (ja) * 2018-06-21 2019-12-26 マルハニチロ株式会社 腎機能維持及び保護剤、並びに、その効果評価方法
FR3085962B1 (fr) 2018-09-14 2021-06-18 Fermentalg Procede d'extracton d'une huile riche en pufa
CN113873896B (zh) * 2019-02-01 2025-02-14 马斯公司 猫科动物食品组合物
US12359230B2 (en) 2020-04-03 2025-07-15 MARA Renewables Corporation Microbial oils with high levels of omega-3 fatty acids
US20250249047A1 (en) * 2022-01-20 2025-08-07 Holo Bio Co., Ltd. Novel organism breeding technique

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61204136A (ja) 1985-03-06 1986-09-10 Teijin Ltd 血液脳関門通過性医薬品組成物
JPH01199588A (ja) 1987-10-27 1989-08-10 Nitto Chem Ind Co Ltd 糸状菌による高度不飽和脂肪酸の製造法
JPH05503425A (ja) 1990-02-13 1993-06-10 マーテック・バイオサイエンスィズ・コーポレイション ドコサヘキサエン酸含有油の製造法
JPH05308978A (ja) 1992-05-11 1993-11-22 Onoda Cement Co Ltd 藻類によるドコサヘキサエン酸の製造方法
US5340742A (en) 1988-09-07 1994-08-23 Omegatech Inc. Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US161864A (en) * 1875-04-13 Improvement in methods of killing vermin
US539759A (en) * 1895-05-21 Laroy s
US4670285A (en) * 1982-08-06 1987-06-02 The University Of Toronto Innovations Foundation Infant formula
WO1989000606A1 (en) 1987-07-20 1989-01-26 Maricultura, Incorporated Microorganism production of omega-3 (n-3) lipids
US5130242A (en) 1988-09-07 1992-07-14 Phycotech, Inc. Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids
EP0823475B1 (en) * 1995-04-17 2009-06-17 National Institute of Advanced Industrial Science and Technology Novel microorganisms capable of producing highly unsaturated fatty acids and process for producing highly unsaturated fatty acids by using the microorganisms
JPH0930962A (ja) * 1995-07-21 1997-02-04 Nisshin Oil Mills Ltd:The 医療用油脂含有組成物
US6509178B1 (en) 1996-07-23 2003-01-21 Suntory Ltd. Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid with ulkenia

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61204136A (ja) 1985-03-06 1986-09-10 Teijin Ltd 血液脳関門通過性医薬品組成物
JPH01199588A (ja) 1987-10-27 1989-08-10 Nitto Chem Ind Co Ltd 糸状菌による高度不飽和脂肪酸の製造法
US5340742A (en) 1988-09-07 1994-08-23 Omegatech Inc. Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids
JPH05503425A (ja) 1990-02-13 1993-06-10 マーテック・バイオサイエンスィズ・コーポレイション ドコサヘキサエン酸含有油の製造法
JPH05308978A (ja) 1992-05-11 1993-11-22 Onoda Cement Co Ltd 藻類によるドコサヘキサエン酸の製造方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
C.I LANTING, M HUISMAN, E.R BOERSMA, B.C.L TO: "Neurological differences between 9-year-old children fed breast-milk or formula-milk as babies", THE LANCET, 1994, pages 1319 - 1322
FELIX REBHUNG: "Effects of Palm Oil Diet on 4,7, 10,13, 16-Docosapentaenoic Acid Content of Blood Plasma, Red Cells, and Liver and Muscle Lipids in Rats", BIOSCI. BIOTECH. BIOCHEM., 1994, pages 314, XP000435776
HOMAYOUN P., DURAND G., PASCAL G., BOURRE J.M: "Alteration in fatty acid composition of adult rat brain capillaries and choroid plexus induced by a diet deficient in (n-3) fatty acids. Slow recovery after substitution with a nondeficient diet", J. NEUROCHEM., 1988, pages 45
M W HAMM, V CHAN, G WOLF: "Liver microsomal membrane fluidity and lipid characteristics in vitamin A-deficient rats", BIOCHEMICAL JOURNAL, 1987, pages 907
SUSAN E. CARLSON ET AL.: "Arachidonic acid status correlates with first year growth in preterm infants", PROC. NATL. ACAD. SCI. USA, 1993, pages 1073 - 1077, XP055271887, DOI: doi:10.1073/pnas.90.3.1073
YOSIO KOBAYASI, KAZUKO KONNO: "Icons of the Jepanese Water Mould with Precise Explanation", pages: 169

Also Published As

Publication number Publication date
DK1785492T3 (da) 2010-07-26
JP3538418B2 (ja) 2004-06-14
WO1998003671A1 (en) 1998-01-29
SI0935667T1 (sl) 2007-10-31
NO990270L (no) 1999-03-18
ES2362476T3 (es) 2011-07-06
PL331326A1 (en) 1999-07-05
NO990270D0 (no) 1999-01-21
DE69737063D1 (de) 2007-01-18
CZ299658B6 (cs) 2008-10-08
US20030161864A1 (en) 2003-08-28
DE69739894D1 (de) 2010-07-08
EP1785492A3 (en) 2007-06-27
TR199900130T2 (xx) 1999-04-21
DK0935667T3 (da) 2007-04-10
JP2002345452A (ja) 2002-12-03
EP0935667A1 (en) 1999-08-18
HU229062B1 (hu) 2013-07-29
PL193818B1 (pl) 2007-03-30
CZ300277B6 (cs) 2009-04-08
NO323173B1 (no) 2007-01-15
AU2979897A (en) 1998-02-10
HUP9903703A3 (en) 2001-09-28
BR9710394A (pt) 2000-01-11
JP3343358B2 (ja) 2002-11-11
CZ19999A3 (cs) 1999-07-14
ATE347607T1 (de) 2006-12-15
PT1785492E (pt) 2010-07-06
CA2261231C (en) 2012-11-27
IL187179A0 (en) 2008-02-09
US6509178B1 (en) 2003-01-21
HUP9903703A2 (hu) 2000-03-28
JP2000513575A (ja) 2000-10-17
ID17466A (id) 1998-01-08
EP1785492A2 (en) 2007-05-16
US7514244B2 (en) 2009-04-07
EE04063B1 (et) 2003-06-16
LV12329A (lv) 1999-08-20
EP1785492B1 (en) 2010-05-26
IL128166A0 (en) 1999-11-30
AU723553B2 (en) 2000-08-31
PT935667E (pt) 2007-02-28
IL128166A (en) 2011-06-30
EP2213750A1 (en) 2010-08-04
NO326902B1 (no) 2009-03-16
LT99005A (lt) 1999-06-25
RU2226216C2 (ru) 2004-03-27
ES2281913T3 (es) 2007-10-01
CA2261231A1 (en) 1998-01-29
EE9900026A (et) 1999-08-16
LV12329B (lv) 2000-02-20
NO20063977L (no) 1999-03-18
EP0935667B1 (en) 2006-12-06
AU723553C (en) 2005-04-14
DE69737063T2 (de) 2007-07-19
ATE469244T1 (de) 2010-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
LT4550B (lt) Dokozaheksaeno rūgšties ir dokozapentaeno rūgšties gavimo būdas
JP3985035B2 (ja) （ｎ−６）系ドコサペンタエン酸含有油脂ならびに該油脂の製造方法および用途
CA2275060C (en) Novel triglyceride and composition comprising the same
US6582941B1 (en) Microorganisms capable of producing highly unsaturated fatty acids and process for producing highly unsaturated fatty acids by using the microorganisms
JP4127860B2 (ja) 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法
DK0957173T4 (en) Process for preparing fat or oil containing unsaturated fatty acid
EP0775449B1 (en) Fowl eggs with high content of highly unsaturated fatty acids, process for producing the same, and use thereof
JPWO1998039468A1 (ja) 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法
JP4283351B2 (ja) 新規な油脂組成物の製造方法および用途
JPH0930963A (ja) 医療用油脂含有組成物
JPH0975000A (ja) 母子栄養用油脂含有飲食物
JPH0975001A (ja) 油脂含有飲食物
JPH0913077A (ja) 臓器蓄積性の高い油脂

Legal Events

Date Code Title Description
PD9A Change of patent owner

Owner name: NAGASE CHEMTEX CORPORATION, JP

Effective date: 20020325

Owner name: SUNTORY LIMITED, JP

Effective date: 20020325

Owner name: NAGASE AND CO, LTD, JP

Effective date: 20020325

MM9A Lapsed patents

Effective date: 20150606