NO326902B1 - Fremgangsmate for fremstilling av lipider inneholdende dokosaheksaensyre og/eller dokosapentaensyre, lipidekstrakt, preparat av strukturelle lipider, naeringssupplerende mat, samt anvendelser derav i naeringsmidler, formler, fôr mv. - Google Patents

Fremgangsmate for fremstilling av lipider inneholdende dokosaheksaensyre og/eller dokosapentaensyre, lipidekstrakt, preparat av strukturelle lipider, naeringssupplerende mat, samt anvendelser derav i naeringsmidler, formler, fôr mv. Download PDF

Info

Publication number
NO326902B1
NO326902B1 NO20063977A NO20063977A NO326902B1 NO 326902 B1 NO326902 B1 NO 326902B1 NO 20063977 A NO20063977 A NO 20063977A NO 20063977 A NO20063977 A NO 20063977A NO 326902 B1 NO326902 B1 NO 326902B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
lipids
acid
lipid extract
dha
fatty acids
Prior art date
Application number
NO20063977A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20063977L (no
Inventor
Satohiro Tanaka
Toshiaki Yaguchi
Sakayu Shimizu
Tsutomu Sogo
Shigeaki Fujikawa
Original Assignee
Suntory Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Publication of NO20063977L publication Critical patent/NO20063977L/no
Application filed by Suntory Ltd filed Critical Suntory Ltd
Publication of NO326902B1 publication Critical patent/NO326902B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C12P7/6434—Docosahexenoic acids [DHA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils
    • A23D9/007—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils characterised by ingredients other than fatty acid triglycerides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/158—Fatty acids; Fats; Products containing oils or fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A23L33/12—Fatty acids or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C1/00—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids
    • C11C1/02—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils
    • C11C1/04—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils by hydrolysis
    • C11C1/045—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils by hydrolysis using enzymes or microorganisms, living or dead
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
    • C12N1/125—Unicellular algae isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145—Fungal isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/89—Algae ; Processes using algae

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Det er beskrevet en fremgangsmåte til å fremstille lipider som inneholder docosaheksaensyre (DHA) og/eller docosapentaensyre (DPA). Fremgangsmåten inkluderer trinnene å dyrke i et medium en mikroorganisme som hører til slekten Ulkenia som har evnen til å produsere DHA og/eller DPA og gjenvinne lipidene fra kulturen. Fremgangsmåten kan ytterligere inkludere trinnet å separere DHA og/eller DPA fra lipidene.

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte for fremstilling av lipider som inneholder docosaheksaensyre (heretter også kalt «DHA») og /eller docosapentaensyre (heretter også referert til som «DPA») ved å dyrke en mikroorganisme, så vel som en fremgangsmåte for fremstilling av DHA og/eller DPA fra lipidene.
DHA finnes i olje fra fisk som tilhører gruppen «blue fish». Spesielt finnes DHA i oljen fra sardiner eller tunfisk, der DHA finnes i en mengde på ca. 20%.
På grunn av oppdagelsen av at fiskemateriale som inneholder en høy konsentrasjon av DHA og som orbitalt fett hos tunfisk, eller på grunn av fremskritt i teknologien til å produsere høyrensede fettsyrer, har nylig store anstrengelser blitt gjort for å belyse de fysiologiske funksjoner til DHA og å studere dets praktiske anvendelser. Det er blitt klart at de fysiologiske funksjonene til DHA inkluderer virkningen å senke kolesterol, en antikoagulerende virkning og en karcinostatisk virkning. I forbindelse med det metabolske system i hjernen er det også blitt klart at DHA er effektivt forbedrer hukommelse og læring, forhindrer senil demens og til å behandle Alzheimers sykdom. I tillegg er det blitt vist at DHA er en essensiell fettsyre for vekst av fiskeyngel. Med bakgrunn i de årsakene som er nevnt ovenfor blir DHA brukt i forskjellige matvarer, forblandinger og agn.
DPA er også kjent for å finnes i fiskeolje, skjønt innholdet er meget lavt. De fleste av de fysiologiske funksjoner til DPA er fremdeles ukjent. Den eneste kjente funksjon for DPA er dens nytte som en bærer for å transportere farmasøytiske midler inn i hjernen [japansk patentpublikasjon (Kokai) nr. 61-204136 (1986)]. Det er imidlertid forventet at DPA kan spille en fysiologisk rolle i dyrekroppen siden det er kjent at DPA økes som en kompensasjon for mangel på DHA i en dyrekropp [Homayon et al., J. Neurochem., 51:45 (1988); Hamm et al., Biochem. J., 245:907
(1987); ogRebhung et al., Biosci. Biotech. Biochem.; 58:314 (1994)].
Hvis man har til hensikt å oppnå DHA og/eller DPA fra fiskeolje, er det flere ulemper, f.eks. det lave innholdet av de ønskede fettsyrer, den manglende evne til å opprettholde en stabil kilde for fiskeolje på grunn av migrasjon av fisk, eller den ubehagelige lukt som fiskeolje har. I tillegg er det vanskelig å oppnå lipider med sikker kvalitet, siden fiskeolje i tillegg inneholder umettede fettsyrer så som arachidonsyre (ARA) og eicosapentaensyre (EPA), som gjør lipidene utsatt for oksidering.
Ved siden av fiskeolje er lipider akkumulert i dyrkede celler fra en mikroorganisme som har evnen til å produsere DHA og/eller DPA vurdert til å være en kilde for DHA og/eller DPA. For eksempel er følgende mikroorganismer kjent for å produsere DHA og/eller DPA: Vibrio marinus ATCC 15381, en bakterie isolert fra dype hav; Vibrio bacteria isolert fra tarmene til en dyphavsfisk; flagellatfungi, så som Traustochytrium aureum ATCC 34304, Traustochytrium sp. ATCC 28211, ATCC 20890 og ATCC 20891, Schizochytrium sp. ATCC 20888 og ATCC 20889
(US-patent nr. 5,340,742), Thraustochytrium SR21 -stamme (Nippon Nogei Kaguku Kaishi, vol. 69, ekstra utgave, 5.juli 1995) og Japonochytrium sp. ATCC 28207 [japansk patentpublikasjon (Kokai) nr. 1-199588 (1989)]; mikroalger så som Cyclotella cryptica, Crypthecodinium cohnii [japansk patentpublikasjon (Kohyo) nr. 5-503425 (1993)], og Emiliania sp. [japansk patentpublikasjon (Kokai) nr. 5-308978 (1993)].
Videre beskriver US-patent nr. 5,340 742 en fremgangsmåte for å dyrke Traustochytrium og Schizochytrium ved anvendelse av ikke-kloridsalter for fremstilling av en biomasse med omega-3-fettsyrer.
US patent nr. 5,397,591 beskriver en formel og babymat som inneholder docosaheksaensyre oppnådd fra dinoflagellater.
Ved å bruke en av de ovenfor nevnte mikroorganismer er det imidlertid flere problemer, f.eks. et lavt utbytte av DHA og/eller DPA, et krav til en forlenget dyrkningsperiode for å oppnå en tilstrekkelig mengde av DHA og/eller DPA, eller et krav til et spesifikt medium eller dyrkingsbetingelser for produksjonen. Når en alge så som Emiliania sp. blir brukt for produksjon, kan det oppnås et høyt utbytte av DHA skjønt det kan være en ulempe at dyrkningstrinnene er kompliserte på grunn av lyskravene for dyrking. Følgelig er en slik prosess ikke egnet for industriell produksjon.
Den foreliggende oppfinnelse som således er beskrevet heri muliggjør fordelen ved å tilveiebringe en prosess som kan produsere DHA og/eller DPA såvel som lipidene som inneholder DHA og/eller DPA ved å bruke et billig og kommersielt medium og enkle produksjonstrinn, i en kort periode og med høyt utbytte.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en fremgangsmåte for å fremstille lipider som inneholder DHA og/eller DPA som omfatter å dyrke i et medium en mikroorganisme som tilhører slekten Ulkenia, som har evnen til å produsere DHA og/eller DPA, og gjenvinne lipidene fra kulturen.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også en fremgangsmåte for å fremstille DHA og/eller DPA som omfatter å dyrke i et medium en mikroorganisme som tilhører slekten Ulkenia, som har evnen til å produsere DHA og/eller DPA, og gjenvinne lipidene fra kulturen og å separere DHA og/eller DPA fra lipidene.
En fremgangsmåte for å fremstille lipider som inneholder docosaheksaensyre og docosapentaensyre i henhold til foreliggende oppfinnelse omfatter å dyrke i et medium en mikroorganisme som tilhører slekten Ulkenia, som har evnen til å produsere lipider som inneholder docosaheksaensyre og docosapentaensyre, og å gjenvinne nevnte lipider fra en kultur.
En fremgangsmåte for å fremstille docosaheksaensyre i henhold til foreliggende oppfinnelse omfatter å dyrke i et medium en mikroorganisme som tilhører slekten Ulkenia som har evnen til å produsere lipider som inneholder docosaheksaensyre, og gjenvinne nevnte lipider fra kulturen, og å separere nevnte docosaheksaensyre fra nevnte lipider.
En fremgangsmåte for å fremstille docosapentaensyre i henhold til foreliggende oppfinnelse omfatter å dyrke i et medium en mikroorganisme som tilhører slekten Ulkenia som har evnen til å produsere lipider som inneholder docosapentaensyre, og gjenvinne nevnte lipider fra kulturen og å separere nevnte docosapentaensyre fra nevnte lipider.
I følge en utførelsesform av den foreliggende oppfinnelse fremstilles strukturerte lipider som inneholder docosaheksaensyre og/eller docosapentaensyre ved å dyrke i et medium en mikroorganisme tilhørende slekten Ulkenia, som har evnen til å produsere nevnte lipider, og gjenvinne nevnte lipider fra en kultur, og ytterligere behandle nevnte lipider med en fungal lipase for å konvertere fettsyrene i posisjon 1 og 3 til C8-i2-kjedefettsyrer.<* >1 følge en annen utførelsesform av oppfinnelsen tilveiebringes et lipidekstrakt som kan oppnås fra en mikroorganisme tilhørende slekten Ulkenia i følge den foreliggende fremgangsmåte, hvori lipidekstraktet omfatter nøytrale lipider som inneholder 30-38 % palmitinsyre, 40-48 % docosaheksaensyre, 8-13 % docosapentaensyre, 0-1 % eicosapentaensyre, 0-0,6 % arakidonsyre og 10-20 % andre fettsyrer, basert på vekten av alle fettsyrene.
I følge en annen utførelsesform omfatter lipidekstraktet lipider som omfatter docosaheksaensyre og/eller docosapentaensyre, hvor nevnte lipidekstrakt omfatter nøytrale lipider som inneholder triacylglyceroler som består av bare flerumettede fettsyrer.
I følge ytterligere en annen utførelsesform inneholder lipidene i lipidekstraktet minst 85 vekt %, fortrinnsvis 90 vekt % triacylglyceroler.
I følge enda en annen utførelsesform tilveiebringes et lipidekstrakt som kan oppnås fra en mikroorganisme tilhørende slekten Ulkenia ved en fremgangsmåte i følge oppfinnelsen, hvori nevnte ekstrakt inneholder lipider som omfatter docosaheksaensyre og/eller docosapentaensyre, hvor nevnte lipidekstrakt omfatter nøytrale lipider som inneholder ca. 20 % triacylglyceroler som inneholder bare flerumettede fettsyrer.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også et preparat av strukturelle lipider som kan oppnås ved å behandle lipidekstrakt i henhold til oppfinnelsen med en fungal lipase for å konvertere fettsyrene i posisjoner 1 og 3 til Cs-^kjedefettsyrer.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer næringssupplerende mat. Det tilveiebringes i følge oppfinnelsen også anvendelse av en formel som inneholder lipidekstraktet i følge oppfinnelsen som er egnet for å mate spedbarn, en formel som er egnet for å mate umodne spedbarn, barnemat, mat for ventende eller diende mødre, anvendelse av et lipidekstrakt til geriatrisk mat, anvendelse av et lipidekstrakt som dyrefor, tilsetningsmiddel til for for dyr, og agn for mikroorganismer hvor agnet inneholder lipidene oppnådd ved en av de ovenfor nevnte prosesser.
I følge en utførelsesform av oppfinnelsen kan strukturelle lipider, der de strukturelle lipidene er mettede lipider, anvendes som en næringssupplerende mattilsetning. I følge nevnte utførelsesform anvendes nevnte mattilsetning i et matprodukt som gis til en ventende eller diende mor, en baby, et umodent spedbarn, et spedbarn eller en geriatrisk person. Nevnte mattilsetning kan også i følge andre utførelsesformer anvendes som et enteralt middel for å fremme ernæringen eller som et dyrefor.
Endelig i følge en utførelsesform av den foreliggende oppfinnelse kan mikroorganismen tilhørende slekten Ulkenia anvendes etter tørking eller sterilisering som et dyrefor.
En fremgangsmåte for å fremstille et strukturelt lipid som inneholder docosaheksaensyre og docosapentaensyre i henhold til foreliggende oppfinnelse omfatter å dyrke i et medium en mikroorganisme som tilhører slekten Ulkenia som har evnen til å produsere lipider som inneholder docosaheksaensyre og docosapentaensyre, gjenvinne nevnte lipider fra en kultur, og behandle nevnte lipider med sopplipase for å konvertere fettsyrer i stillinger 1 og 3 til midtkjede (C: 8-12, se «SEIKAGAKUJITEN» (andre utgave) pp. 834, TOKYO KAGAKUDOJIN
(1990)) fettsyrer.
Fig. 1 er et væskekromatogram av triacylglyceroler i nøytrallipid oppnådd ved foreliggende oppfinnelse.
Foreliggende oppfinnelse er beskrevet i mer detalj nedenfor. Som brukt heri betyr betegnelsene «docosaheksaensyre» eller «DHA» (n-3) serier av docosaheksaensyre. Som brukt heri betyr betegnelsen «docosapentaensyre» eller «DPA» (n-3) serier og/eller (n-6) serier av docosapentaensyre. Betegnelsene «fett», «lipider» og «olje» er brukt heri med samme betydning.
Enhver mikroorganisme som hører til slekten Ulkenia kan benyttes i prosessen i henhold til foreliggende oppfinnelse, så lenge de har evnen til å produsere DHA og/eller DPA. For eksempel kan Ulkenia sp. SAM 2180- og SAM 2179-stammer isolert fra sjøvann av foreliggende oppfinnere brukes. Blant disse stammer produseres SAM 2179 både DHA og DPA i større grad. Denne stamme ble deponert med the National Institute of Bioscience and Human-Technology, Agency of Industrial Science and Technology (adresse: 1-3, Higashi 1 chome Tsukuba-shi, Ibaraki-ken 305, Japan) den 23.juli 1996 og gitt aksesjonsnummeret FERM BP-5601.
De mykologiske egenskaper til Ulkenia sp. SAM 2179- og SAM 2180-stammer er som følger: Når disse mikroorganismer blir dyrket i et KMV flytende medium
(Fuller, M. and A. Jaworski eds.; Zoosporic Fungi in Teaching and Reseach VII + 303 pp., 1987. Southeastern Publishing Corporation, Athens) ved 20°C i mørke, ble kuleformet eller ovale celler observert. Biflagellate zoosporer ble også observert. Et nettverk av ektoplasmatiske filamenter ble imidlertid ikke observert. Følgelig ble disse mikroorganismer klassifisert som sopper tilhørende Traustochytriales med referanse til «Icons of the Japanese Water Mould with Precise Explanation» av Yosio Kobayasi og Kazuko Konno (publisert privat av forfatterne på egen bekostning, side 169, 1986). Videre dannet disse mikroorganismer rhizoider, manglet apofyser og dannet amøbelignende celler i KMW flytende medium. Derfor ble de identifisert som sopp som tilhører slekten Ulkenia og de to isolatene ble designert som Ulkenia sp. SAM 2179 og SAM 2180.
Mikroorganismen som hører til slekten Ulkenia brukt i fremgangsmåten i henhold til foreliggende oppfinnelse er ikke begrenset til en villtypestamme, men inkluderer også en mutant eller en rekombinant stamme. Således faller anvendelse av en mutant eller en rekombinant stamme konstruert til effektivt å produsere DHA og/eller DPA innenfor foreliggende oppfinnelses område. Slike mutanter eller rekombinante stammer inkluderer mikroorganismer konstruert for å inneholde en høyere prosentandel av DHA og/eller DPA i lipider, en høyere total mengde av lipider eller begge deler, sammenlignet med prosentandelen eller mengden produsert av den originale villtypestamme, ved å bruke de samme substrater. Villtypestammen i henhold til den foreliggende oppfinnelse inneholder minst 25% DHA og/eller 5% DPA, fortrinnsvis 40-48% DHA og/eller 8-13% DPA i lipidene. Videre inneholder villtypestammen i henhold til den foreliggende oppfinnelse minst 3 g av DHA og/eller 0,5 g DPA, fortrinnsvis 5 g av DHA og/eller 1 g av DPA pr. liter medium. I tillegg er det vurdert mikroorganismer konstruert for å produsere en sammenlignbar mengde av DHA og/eller DPA med en tilsvarende villtypestamme som effektivt utnytter substratene med en overlegen kostnadsyteevne.
Mikroorganismer i henhold til foreliggende oppfinnelse blir dyrket ved å inokkulere et flytende eller fast medium med en prekultur av mikroorganismene. Mediet kan eller kan ikke inneholde naturlig eller kunstig sjøvann.
Enhver konvensjonell benyttet karbonkilde inkludert f.eks., men ikke begrenset til, karbohydrater så som glukose, fruktose, xylose, sakkarose, maltose, oppløselig stivelse, fukose, glukosamin og dekstran, såvel som oleinsyre, fett så som soyabønne, olje, glutaminsyre, molasse, glycerol, mannitol og natriumacetat kan anvendes som karbonkilde som skal settes til mediet.
Naturlige nitrogenkilder så som pepton, gjærekstrakt, maltekstrakt, kjøttekstrakt, casaminosyre og «corn steep liquor», soyabønnekake, organiske nitrogenkilder så som natriumglutamat og urea, og uorganiske nitrogenkilder så som ammoniumacetat, ammoniumsulfat, ammoniumklorid og ammoniumnitrat kan anvendes som nitrogenkilde.
Videre kan det tilsettes fosfater så som kaliumfosfat og kaliumdihydrogenfosfat, uorganiske salter så som ammoniumsulfat, natriumsulfat, magnesiumsulfat, jernsulfat, kobbersulfat, magnesiumklorid og kalsiumklorid og vitaminer kan tilsettes som mikroernæring dersom nødvendig.
Mengden av disse komponentene i mediet er ikke spesifikt definert så lenge konsentrasjonene av komponentene ikke har skadelig virkning på veksten av mikroorganismene. Generelt kan karbonkildene tilsettes i en konsentrasjon fra 20-180 g pr. liter medium, og nitrogenkildene kan tilsettes i en konsentrasjon fra 0,6 g til 6 g pr. liter medium. Fortrinnsvis økes mengden av nitrogenkilde i overensstemmelse med økningen av mengden av karbonkilden.
Etter fremstilling av mediet blir pH-verdien justert til området mellom 3,0 og 8,0, fortrinnsvis mellom 3,5 og 5,0, mer fortrinnsvis mellom 3,5 og 4,5, ved å bruke en egnet syre eller base og deretter blir mediet sterilisert ved autoklavering eller lignende. Dyrking av mikroorganismen blir vanligvis utført i 2-7 dager, fortrinnsvis 2-5 dager, ved 10-35°C, fortrinnsvis 17-30°C, enten med lufting/risting, med risting, eller i en stasjonær kultur.
Videre kan forløpere til DHA og/eller DPA settes til mediet for å akselerere produksjonen av DHA og/eller DPA. For eksempel blir hydrokarboner så som tetradekan, heksadekan og oktadekan, fettsyrer så som oleinsyre, linoleinsyre og a-linoleinsyre, eller salter (f.eks. natrium- eller kalium-salter) eller estere derav brukt som forløpere. Videre kan det tilsettes fett som inneholder disse fettsyrer som en bestanddel (f.eks. olivenolje, soyabønneolje, bomullsfrøolje eller palmeolje). Disse komponenter kan brukes alene eller i kombinasjon med hverandre.
Karbonkilder, nitrogenkilder, forløpere eller lignende kan tilsettes mediet før eller under dyrkingen. Tilsetting av disse komponentene kan utføres én gang, gjentatte ganger eller kontinuerlig.
For å gjenvinne lipider som inneholder DHA og/eller DPA i et egnet utbytte for praktisk anvendelse, er det fordelaktig å bruke et flytende medium og å dyrke med lufting/risting. En konvensjonell ristementor eller en boblekolonnefermentor kan anvendes.
Ved å dyrke som beskrevet ovenfor blir det fremstilt lipider som inneholder DHA og/eller DPA som akkumuleres i celler. Når et flytende medium anvendes kan lipidene som inneholder DHA og/eller DPA gjenvinnes fra en kultur, eller en sterilisert kultur, under dyrkingsperioden, fra en kultur, eller en sterilisert kultur ved avslutning av dyrkingen eller fra dyrkede celler eller tørkede celler, oppsamlet fra enhver av de ovenfor nevnte kulturer. Som brukt heri inkluderer betegnelsen «kultur» dyrkede celler, tørkede, dyrkede celler og prosesserte dyrkede celler så vel som vekstsuppe som inneholder celler og kultursupernatant.
DHA og/eller DPA kan isoleres fra lipider som inneholder DHA og/eller DPA gjenvunnet fra dyrkede celler, som følger: Etter dyrking blir cellene oppsamlet fra kulturen ved konvensjonelle faste/flytende separasjonsanordninger, så som sentrifugering og filtrering. Cellene blir i utstrakt grad vasket med vann, og blir fortrinnsvis deretter tørket. Tørking av cellene kan utføres ved frysetørking, lufttørking eller lignende. Tørkede celler blir deretter ødelagt f.eks. ved hjelp av dyno-mill eller ultrasonikering, og lipidene blir ekstrahert fra cellene med et organisk oppløsningsmiddel, fortrinnsvis under nitrogenstrøm. Organisk oppløsningsmiddel så som eter, heksan, metanol, etanol, kloroform, diklormetan eller petroleumeter kan anvendes. Alternativ ekstraksjon med metanol og petroleumeter eller ekstraksjon med et blandet oppløsningsmiddelsystem som kloroform/ metanol/vann kan også anvendes. En høy konsentrasjon av lipider som inneholder DHA og/eller DPA blir oppnådd ved inndamping av det organiske oppløsningsmiddel fra ekstraktet under redusert trykk.
Alternativt kan ekstrahering utføres med våte celler. I dette tilfelle kan et oppløsningsmiddel som er kompatibelt med vann så som metanol og etanol, eller blandet oppløsningsmiddel kompatibelt med vann som består av alkohol(er) og vann og/eller andre oppløsningsmidler anvendes. De andre fremgangsmåtene er beskrevet ovenfor.
Mengden av DHA i de oppnådde lipider som beskrevet ovenfor er minst 3 g pr. liter kultur, fortrinnsvis 5 g pr. liter kultur. Mengden av DPA i lipidene er minst 0,7 g pr. liter kultur, fortrinnsvis 1,0 g pr. liter kultur.
I lipidene oppnådd som beskrevet ovenfor er DHA og/eller DPA tilstede i form av nøytrale lipider (f.eks. triacylglycerol) eller polare lipider (f.eks. fosfatidylcholin, fosfatidyletanolamin eller fosfatidylinositol). Rensing av triacylglyceroler som inneholder DHA og/eller DPA fra lipider som inneholder DHA og/eller DPA gjenvunnet fra en kultur blir utført ved å bruke en konvensjonell metode så som avkjøling/separering eller kolonnekromatografi.
Typisk er innholdet av nøytrallipider i lipider i henhold til foreliggende oppfinnelse meget høyt (mer enn 90% av totallipidene). Den representative sammensetning av fettsyrer i nøytrallipidene er som følger. Palmitinsyre: 30-38%; (n-3) DHA: 40-48%; (n-6) DPA: 8-13%; (n-3) EP A: 0-1%; ARA: 0-0,6%; andre fettsyrer: 10-20%.
Nøytrallipidene fra lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse inneholder minst 85% triacylglyceroler, fortrinnsvis minst 90% triacylglyceroler. Mengden av diacylglyceroler eller monoacylglyceroler i nøytrallipidene er meget lav. Fri sterol og/eller sterolester er også inneholdt i en mengde på 1-3%. Typisk er følgende molekylarter funnet i triacylglycerolene: 16:0-16:0-22:5, 16:0-16:0-22:6, 16:0-22:5-22:6, 16:0-22:6-22:6, 22:5-22:6-22:6, og 22:6-22:6-22:6, hvori f.eks. «16:0» betyr en fettsyre som har «16» karbonatomer og ingen («0») dobbeltbindinger. Det er av interesse at de triacylglyceroler som bare består av polyumettede fettsyrer eksisterer i lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse.
Separering av DHA og/eller DPA fra lipider som inneholder DHA og/eller DPA kan utføres ved å hydrolysere lipidene, og deretter konsentrere og separere de resulterende blandede fettsyrene eller blandede fettsyreestere fremstilt derfra, ved å bruke en konvensjonell fremgangsmåte så som ureatilsetning, avkjøling-separasjon eller kolonnekromatografi.
DHA og/eller DPA såvel som lipidene som inneholder DHA og/eller DPA oppnådd som beskrevet ovenfor kan settes til forskjellige matvarer, næringsblandinger eller agn for å motvirke en mangel på DHA og/eller DPA. Eksempler på slike matvarer inkluderer f.eks. næringssupplementerende matvarer, formler egnet for å mate barn eller umodne barn, helsemat, funksjonelle matvarer (så som et enteralt middel for å fremme ernæring, spedbarnsmat, mat for ventende eller diende mødre og geriatriske matvarer). For inkluderer for for tamdyr, så som griser og kuer, for til tamfugl, så som høns, kjæledeggefor for hunder, katter og lignende og for til fiskeoppdrett. Agn inkluderer f.eks. de for mikroorganismer (såkalt zooplankton) som er gitt som agn for oppdrett av fisk og skalldyr.
Særlig for for og agn er det fordelaktig og økonomisk å bruke en kultur av mikroorganisme i henhold til foreliggende oppfinnelse, celler oppsamlet fra kulturen eller en rest av cellene etter gjenvinning av lipidene. For eksempel kan mikroorganismeceller som fremstiller DHA og/eller DPA direkte brukes til å mate fiskeyngel (unge fisker) istedenfor direkte å mate dem gjennom zooplankton og lignende. Disse materialer kan anvendes etter tørking eller sterilisering hvis nødvendig.
Lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse kan brukes til å produsere fjærfeegg anriket med DHA og/eller DPA, som er oppnådd ved å mate fjærfe for eggsamling (fortrinnsvis høns) med for som inneholder lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse. Eggeplommeolje anriket med DHA og/eller DPA kan også fremstilles ved å ekstrahere olje fra slike fjærfeegg eller eggeplomme derfra ved å bruke en konvensjonell metode. Formler egnet for mating av spedbarn eller umodne spedbarn, spedbarnsmat, mat for ventende og diende mødre som inneholder slik eggeplommeolje er også vurdert.
Anstrengelser er blitt gjort i lang tid for å lage en sammensetning av melkepulver for spedbarn som er lik den til human melk. Særlig er det viktig å gjøre sammensetningene av hovedingrediensene i human melk (dvs. protein, fett og sukker) i melkepulver lik den til human melk. Med hensyn på lipider har det vært et problem at det konvensjonelle melkepulver mangler polyumettede fettsyrer, som inneholdes i human melk. Flere rapporter på sammensetning av umettede fettsyrer i human melk er blitt publisert (for polyumettede fettsyrer i American, European og African mother's milk, se INFORM, 6(8):940-946 (1995); for polyumettede fettsyrer i Japanese mother's milk, se JJPEN, 13(9):765-772 (1991)).
Nylig ble det demonstrert at ARA og DHA, hvorav begge inneholdes i human melk, er effektiv for vekst av spedbarn («Advances in Polyunsaturated Fatty Acid Research»), Elsevier Science Publishers, pp. 261-264 (1993)). Viktigheten av ARA og DHA i økning av høyden og utvikling av hjernen ble også rapportert. (Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 90:1073-1077 (1993); Lancet, 344:1319-1322 (1994)).
Derfor er det en økende interesse for å tilsette ARA og DHA til modifisert melk. Modifisert melk som inneholder fiskeolje som en DHA-kilde er nå på markedet. Fiskeolje inneholder også EP A, som neppe er tilstede i human melk, og som er blitt rapportert å gi uheldig virkning på vekst av umodne spedbarn («Advances in Polyunsaturated Fatty Acid Research»), Elsevier Science Publishers, pp. 261-264
(1993)). Lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse er egnet som et additiv til modifisert melk, siden innholdet av EPA er ekstremt lavt. Lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse kan like godt settes til barnemat.
Lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse kan settes til mat, så som
ernæringssupplementerende mat, geriatrisk mat eller helsemat, for tilførsel av DHA og/eller DPA eller for opprettholdelse av helsen. Matsammensetningene kan være i form av fast eller flytende føde, eller føde som inneholder oljer. Innholdet av lipider i maten er fortrinnsvis mellom 0,001 og 50 vekt %, avhengig av typen av mat som lipidene settes til.
Eksempler på matvarer som inneholder oljer inkluderer naturlige matvarer som i seg selv inneholder oljer (så som kjøtt, fisk eller nøtter), matvarer hvor lipidene er tilsatt under koking (så som suppe), matvarer hvor lipidene ble brukt som oppvarmingsmedium (så som smultringer), fet mat (så som smør), bearbeidet mat hvor lipidene er tilsatt under bearbeidingen (så som kaker), eller mat hvor lipidene er sprayet eller påført ved avslutning av prosessen (så som harde kjekser). Lipidene (eller separert DHA og/eller DPA) i henhold til foreliggende oppfinnelse kan også tilsettes til landbruksmat, gjæringsmat, buskapsmat, sjømat, eller drikke, som ikke inneholder fett.
Alternativt kan lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse også settes til funksjonelle matvarer som utviser den fysiologiske aktivitet til DHA og/eller DPA for gjenoppretting av en nedsatt funksjon i kroppen eller for å forhindre at den blir nedsatt. Den funksjonelle mat i henhold til foreliggende oppfinnelse kan være i form av en legemiddelformulering eller en bearbeidet form (så som et enteralt middel for å promotere ernæring, pulver, granuler, pastiller, oppløsning for internt bruk, suspensjon, emulsjon, sirup og lignende) i hvilke lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse blir kombinert med protein, sakkarid, lipid, sporelementer, vitamin, emulgerende middel eller parfyme.
Videre kan lipidene i henhold til foreliggende oppfinnelse anvendes som en tilsetning til et kosmetisk eller vaskemiddel, eller som et utgangsmateriale for å fremstille et derivat derav for å brukes som et legemiddel. Heretter vil den foreliggende oppfinnelse beskrives spesifikt ved hjelp av eksempler. Oppfinnelsen er imidlertid ikke begrenset til eksemplene.
(Eksempel 1)
Fremstilling av lipider ved å bruke mikroor<g>anismer som hører til slekten Ulkenia ( 1)
Ulkenia sp. SAM 2180- og SAM 2179-stammer ble dyrket i et gjæringskar (krukkegjærer) med et volum på 5 liter som inneholder 3 liter medium som har følgende sammensetning under følgende dyrkingsbetingelser.
(1) Medium sammensetning
(2) Dyrkingsbetingelser:
Etter dyrking ble celler oppsamlet ved sentrifugering og frysetørking, og deretter ble mengden (vekt) av celler pr. liter medium målt. Destruksjon av cellene og
ekstraksjon av lipidene ble deretter utført ved å tilsette en blanding av kloroform/ metanol (2:1, vol/vol) til de tørkede celler som et forhold av 100 vektvolumer av celler og homogenisering av blandingen i nærvær av glasskuler. Etter vasking av ekstraktet i henhold til Folch-metoden, ble oppløsningsmidlet inndampet for å oppnå rensede lipider, og vekten av lipidene ble deretter målt.
For å estimere fettsyresammensetningen av de resulterende rensede lipider, ble fettsyremetylestere fremstilt ved å oppløse en porsjon av lipidene i en blandet oppløsning av en lik mengde metanoloppløsning som inneholder 10% HC1 og diklormetan, og varmebehandling av blandingen ved 60°C i 2 timer. Esterne ble deretter utsatt for gasskromatografi for å analysere fettsyresammensetningen. Separasjonsbetingelsene for gassvæskekromatografi var som følger.
3) Separasjonsbetingelser
1) Kolonne: kapillærkolonne TC-70 (GL Science Co., Ltd), indre
diameter 0,25 mm x lengde 30 m
2) Gjennomstrømingshastighet: 0,8 ml/min, 100 kPa (kolonne-hodetrykk)
3) Bærergass: nitrogengass
4) Kolonnetemperatur: økende modus, 170-220°C (4°C/min)
5) Deteksjon: FID
Resultatene er vist i de følgende tabeller 1 og 2.
(Eksempel 2)
Fremstilling av lipider ved å bruke mikroorganismer som tilhører slekten
Ulkenia ( 2 )
Ulkenia sp. SAM 2179-stamme ble dyrket i et gjæringskar på 5 liter (krukkegjærer) som inneholder 3 liter medium som har følgende sammensetning under de følgende dyrkingbetingel ser.
(1) Medium sammensetning
(2) Dyrkingsbetingelser
Etter dyrking ble cellene oppsamlet ved sentrifugering og frysetørket, deretter ble mengden (ved vekt) av cellene pr. liter medium målt. Destruksjon av cellene og ekstraksjon av lipidene ble deretter utført ved å tilsette en blanding av kloroform/ metanol (2:1, vol/vol) til de tørkede celler i et forhold på 100 vektvolum av cellene og homogenisering av blandingen i nærvær av glasskuler. Etter vasking av ekstraktet i henhold til
Folch-metoden, ble oppløsningsmidlet inndampet for å oppnå rensede lipider, og vekten av lipidene ble deretter målt.
For å estimere fettsyresammensetningen i de resulterende rensede lipider, ble fettsyremetylestere fremstilt ved å oppløse en del av lipidene i en blandet oppløsning av en lik mengde av metanoloppløsning som inneholder 10% HC1 og diklormetan, og varmebehandling av blandingen ved 60°C i 2 timer. Esterne ble deretter utsatt for gasskromatografi for å analysere fettsyresammensetningen. Separasjonsbetingelsene for gassvæskekromatografi var som beskrevet i eksempel 1.
Resultatene er vist i følgende tabeller 3 og 4.
(Eksempel 3)
Analyse av lipider fra Ulkenia sp. SAM 2179
Nøytrallipider og polare lipider ble separert fra lipidene oppnådd i eksempel 1 ved konvensjonell væske/væske-adskillelsesteknikk ved å bruke heksan og 90% metanol. 0,92 g av nøytrallipider og 0,05 g av polare lipider ble oppnådd fra 1 g av lipidene. De resulterende nøytrale lipider og polare lipider ble analysert ved å bruke tynnlagskromatografi. Fargeutvikling ble oppnådd ved å bruke svovelsyre, deretter ble identiteten av de resulterende flekker konfirmert ved å sammenligne deres Rf-verdier med de til standardlipider.
Mer enn 90% av nøytrallipidene var triacylglyceroler. De polare lipider besto av fosfatidylcholin (60-80%), fosfatidyletanolamin (5-20%) og fosfatidylinositol (2-8%).
Triacylglyceroler i nøytrallipidene ble videre analysert ved å adskille molekylære enheter på væskekromatografi (kolonne: ODS-kolonne; mobil fase: aceton/ acetonitril (3:2); deteksjon: differensielt refraktometer) (se fig. 1). De resulterende topper ble isolert og etter hydrolyse konvertert til metylestere. Fettsyrerestene ble bestemt ved å bruke gass-væske-kromatografi.
De fem hovedtoppene ble identifisert som vist i tabell 5. Triacylglyceroler var sammensatt av 12,8% 1,2,3-tri-docosaheksaenoyl-triacylglycerol og 8,0% 1-docosapentaenoyl-2,3-di-docosaheksaenoyl-triacylglycerol. Omkring 20% av de totale triacylglyceroler var sammensatt av tri-polyumettede fettsyrer.
(Eksempel 4)
Bestemmelse av bindingsseter for fettsyrerester i triacylglyceroler
Bindingssetet til fettsyrerester i triacylglyceroler oppnådd i eksempel 3 ble oppnådd som følger. Triacylglycerolene oppnådd i eksempel 3 (molekylenheter: 16:0-16:0-22:6) ble tørket, og behandlet med lipase (fra Rhizopus japonicus) spesifikt for posisjon 1,3. Fettsyreresten ble identifisert ved å bruke GC/MS etter at de resulterende 2-monoacylglyceroler ble trimetylsilylert. Lipasebehandling ble utført i 2 ml 50 mM acetatbuffer (pH 5,5) med 1000 enheter lipase ved 35°C i 30 minutter. Reaksjonsproduktene ble ekstrahert med eter og trimetylsilylert ved å bruke kommersielt tilgjengelig trimetylsilylerende middel.
En fragmenttopp som tilsvarer molekylvekten til monoacylglyceroler til hvilke 22:6 er festet ble observert, noe som angir at triacylglycerolene er 16:0-22:6-16:0 til hvilke fettsyrerester på 22:6 er festet i posisjon 2 i glycerolryggraden.
(Eksempel 5)
Fremstilling av modifisert melk som inneholder DHA og DPA
Modifisert melk som inneholder DHA og DPA ble fremstilt ved å tilsette 0,44 g av lipidene i eksempel 1, som inneholder 46,2 % DHA og 10,6 % DPA, til 100 g pulverisert melk.
Sammensetningen av DHA og DPA i den resulterende melk var 0,80 % og 0,19 % av de totale fettsyrer, som var lik den i human melk.
(Eksempel 6)
Fremstilling av strukturelle lipider som inneholder DHA og DPA
50 ml lipaseoppløsning (5600 U/ml, lipase spesifikk for posisjon 1,3 fra Rhizopus
delemar) ble blandet med 2,5 g CaCC«3 som en immobiliserende bærer. Enzymet ble immobilisert og utfelt ved å tilsette 40 ml aceton til blandingen og det immobiliserte enzym ble deretter tørket. Den spesifikke aktivitet til det resulterende immobiliserte enzym var 9,3 U/mg. 120 mg av det immobiliserte enzym ble blandet med 1 g
DHA- og DPA-holdige lipider oppnådd fra SAM2180 i eksempel 1, 2 g caprylsyre og 60 mg vann ved risting ved 30°C i 8 timer. Triacylglyceroler ble deretter gjenvunnet fra reaksjonsblandingen ved å bruke en konvensjonell fremgangsmåte og fettsyresammensetningen til triacylglycerolet ble bestemt. Resultatene er vist i tabell 6.
Mer enn 30% triacylglyceroler har polyumettede fettsyrer i SN2-posisjonen hos glycerolene. Således er disse lipidene egnet for å fremstille strukturelle lipider som inneholder midtkjedefettsyrer i SN1- og SN3-posisjonen i glyceroler og polyumettede fettsyrer i SN2-posisjonen i glyceroler.
INDUSTRIELL ANVENDBARHET
Lipider som inneholder en stor mengde av DHA og/eller DPA og en lav mengde EPA kan oppnås ved fremgangsmåten i henhold til foreliggende oppfinnelse. DHA og/eller DPA kan også oppnås ved videre å separere det fra lipidene.
Lipidene som inneholder DHA og/eller DPA, det separerte DHA og det separerte DPA i henhold til oppfinnelsen er nyttig som tilsetning til matvarer, til for, agn, legemidler og lignende. For for eller agn kan celler som inneholder DHA og/eller DPA i henhold til foreliggende oppfinnelse anvendes. Fjærfeegg eller fjærfe-eggeplomme anriket med DHA og/eller DPA kan fremstilles ved å fore fjærfe med forene i henhold til foreliggende oppfinnelse.

Claims (18)

1. Fremgangsmåte for å fremstille lipider som inneholder docosaheksaensyre og/eller docosapentaensyre, karakterisert ved at den omfatter: å dyrke i et medium en mikroorganisme tilhørende slekten Ulkenia, som har evnen til å produsere lipider som inneholder docosaheksaensyre og/eller docosapentaensyre, og å gjenvinne nevnte lipider fra en kultur.
2. Fremgangsmåte for fremstilling av docosaheksaensyre eller docosapentaensyre, karakterisert ved at den omfatter fremgangsmåten i følge krav 1, og ytterligere omfatter å separere nevnte docosaheksaensyre og/eller docosapentaensyre fra nevnte lipider.
3. Fremgangsmåte for å fremstille strukturerte lipider som inneholder docosaheksaensyre og/eller docosapentaensyre, karakterisert ved at den omfatter fremgangsmåten i følge krav 1, og som ytterligere omfatter å behandle nevnte lipider med en fungal lipase for å konvertere fettsyrene i posisjoner 1 og 3 til Cs-12 kjede fettsyrer.
4. Lipidekstrakt som kan oppnås fra en mikroorganisme tilhørende slekten Ulkenia ved en fremgangsmåte i følge krav 1, karakterisert ved at det omfatter nøytrale lipider som inneholder 30-38 % palmitinsyre, 40-48 % docosaheksaensyre, 8-13 % docosapentaensyre, 0-1 % eicosapentaensyre, 0-0,6 % arakidonsyre og 10-20 % andre fettsyrer, basert på vekten av alle fettsyrene.
5. Lipidekstrakt i følge krav 4, karakterisert ved at det omfatter lipider som omfatter docosaheksaensyre og/eller docosapentaensyre, hvor nevnte lipidekstrakt omfatter nøytrale lipider som inneholder triacylglyceroler som består av bare flerumettede fettsyrer.
6. Lipidekstrakt i følge krav 4 eller krav 5, karakterisert ved at de nøytrale lipidene inneholder minst 85 vekt %, fortrinnsvis 90 vekt % triacylglyceroler.
7. Lipidekstrakt som kan oppnås fra en mikroorganisme tilhørende slekten Ulkenia ved en fremgangsmåte i følge krav 1, karakterisert ved at det inneholder lipider som omfatter docosaheksaensyre og/eller docosapentaensyre, hvor nevnte lipidekstrakt omfatter nøytrale lipider som inneholder ca. 20 % triacylglyceroler som inneholder bare flerumettede fettsyrer.
8. Preparat av strukturelle lipider, karakterisert ved at det kan oppnås ved å behandle lipidekstrakt i følge ethvert av kravene 4-7 med en fungal lipase for å konvertere fettsyrene i posisjoner 1 og 3 til C8-i2kjedefettsyre.
9. Næringssupplerende mat, karakterisert ved at det inneholder lipidekstraktet i følge ethvert av kravene 4-7.
10. Anvendelse av en formel som inneholder lipidekstraktet i følge ethvert av kravene 4-7, til å mate spedbarn, umodne spedbarn eller babyer.
11. Anvendelse av et lipidekstraktet i følge ethvert av kravene 4-7 til geriatrisk mat, enteralt ekstrakt for å forbedre ernæring, eller mat for ventende eller diende mødre.
12. Anvendelse av lipidekstraktet i følge ethvert av kravene 4-7, som dyrefor, en dyrefortilsetning, eller agn for zooplankton til for.
13. Anvendelse av lipidekstraktet i følge ethvert av kravene 4-7 som en næringssupplerende mattilsetning.
14. Anvendelse av et preparat av strukturelle lipider i følge krav 8, hvori de strukturelle lipidene er mettede lipider, som en næringssupplerende mattilsetning.
15. Anvendelse i følge krav 13 eller 14, hvori mattilsetningen er inkludert i et matprodukt for å gis til en ventende eller diende mor, en baby, et umodent spedbarn, et spedbarn eller en geriatrisk person.
16. Anvendelse i følge ethvert av kravene 13-15 som et enteralt middel for å fremme ernæringen.
17. Anvendelse i følge ethvert av kravene 13-15 som et dyrefor.
18. Anvendelse i følge krav 17, hvori mikroorganismen tilhørende slekten Ulkenia anvendes etter tørking eller sterilisering.
NO20063977A 1996-07-23 2006-09-05 Fremgangsmate for fremstilling av lipider inneholdende dokosaheksaensyre og/eller dokosapentaensyre, lipidekstrakt, preparat av strukturelle lipider, naeringssupplerende mat, samt anvendelser derav i naeringsmidler, formler, fôr mv. NO326902B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP19351696 1996-07-23
PCT/JP1997/001946 WO1998003671A1 (en) 1996-07-23 1997-06-06 Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20063977L NO20063977L (no) 1999-03-18
NO326902B1 true NO326902B1 (no) 2009-03-16

Family

ID=16309374

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19990270A NO323173B1 (no) 1996-07-23 1999-01-21 Fremgangsmate til a fremstille DHA og DPA og lipider som inneholder DHA og DPA, ved a dyrke en mikroorganisme Ulkenia.
NO20063977A NO326902B1 (no) 1996-07-23 2006-09-05 Fremgangsmate for fremstilling av lipider inneholdende dokosaheksaensyre og/eller dokosapentaensyre, lipidekstrakt, preparat av strukturelle lipider, naeringssupplerende mat, samt anvendelser derav i naeringsmidler, formler, fôr mv.

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19990270A NO323173B1 (no) 1996-07-23 1999-01-21 Fremgangsmate til a fremstille DHA og DPA og lipider som inneholder DHA og DPA, ved a dyrke en mikroorganisme Ulkenia.

Country Status (24)

Country Link
US (2) US6509178B1 (no)
EP (3) EP0935667B1 (no)
JP (2) JP3343358B2 (no)
AT (2) ATE347607T1 (no)
AU (1) AU723553C (no)
BR (1) BR9710394A (no)
CA (1) CA2261231C (no)
CZ (2) CZ300277B6 (no)
DE (2) DE69739894D1 (no)
DK (2) DK0935667T3 (no)
EE (1) EE04063B1 (no)
ES (2) ES2362476T3 (no)
HU (1) HU229062B1 (no)
ID (1) ID17466A (no)
IL (2) IL128166A (no)
LT (1) LT4550B (no)
LV (1) LV12329B (no)
NO (2) NO323173B1 (no)
PL (1) PL193818B1 (no)
PT (2) PT1785492E (no)
RU (1) RU2226216C2 (no)
SI (1) SI0935667T1 (no)
TR (1) TR199900130T2 (no)
WO (1) WO1998003671A1 (no)

Families Citing this family (100)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5340742A (en) * 1988-09-07 1994-08-23 Omegatech Inc. Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids
US20060094089A1 (en) * 1988-09-07 2006-05-04 Martek Biosciences Corporation Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids
EP0935667B1 (en) * 1996-07-23 2006-12-06 Nagase Chemtex Corporation Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid
JP2001512029A (ja) * 1997-08-01 2001-08-21 マーテック・バイオサイエンスィズ・コーポレーション Ｄｈａ含有栄養組成物およびそれらの製造方法
JP4283351B2 (ja) * 1998-08-27 2009-06-24 サントリー酒類株式会社 新規な油脂組成物の製造方法および用途
KR100504324B1 (ko) * 1999-03-04 2005-07-28 산토리 가부시키가이샤 도코사펜타엔산 함유물질의 이용
MX350779B (es) 2000-01-19 2017-09-18 Dsm Ip Assets B V * Procedimiento de extraccion sin solvente.
AU2008229885B2 (en) * 2000-01-19 2011-11-17 Dsm Ip Assets B.V. Solventless extraction process
EP1251744B2 (en) * 2000-01-28 2015-08-26 DSM IP Assets B.V. Enhanced production of lipids containing polyenoic fatty acids by high density cultures of eukaryotic microbes in fermentors
DE60020271T2 (de) * 2000-03-29 2006-03-23 Council Of Scientific And Industrial Research Verfahren zur erhöhung von mehrfachungesättigten fettsäuren in thraustochytriden
US6410282B1 (en) * 2000-03-30 2002-06-25 Council Of Scientific And Industrial Research Method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid fungi
EP1178118A1 (en) 2000-08-02 2002-02-06 Dsm N.V. Isolation of microbial oils
EP1322752B2 (en) 2000-09-28 2015-02-11 Bioriginal Food & Science Corp. Fad4, fad5, fad5-2, and fad6, fatty acid desaturase family members and uses thereof
CA2469647C (en) 2001-12-12 2011-02-15 Daniel G. Dueppen Extraction and winterization of lipids from oilseed and microbial sources
JP3840459B2 (ja) * 2003-03-20 2006-11-01 裕司 島田 グリセリドおよびその製造方法
US8921422B2 (en) * 2003-10-01 2014-12-30 The Iams Company Methods and kits for enhancing ability to learn in a puppy or kitten
KR101180594B1 (ko) * 2003-10-02 2012-09-06 마텍 바이오싸이언스스 코포레이션 변형량의 염소 및 칼륨을 사용하는 미세조류 중에 고농도디에치에이의 생산
DE10352838A1 (de) * 2003-11-10 2005-07-07 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Kultivierung von Mikroorganismen der Gattung Thraustochytriales unter Verwendung eines optimierten Niedrigsalzmediums
DE10352837A1 (de) * 2003-11-10 2005-07-07 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Prozess zur Kultivierung von Mikroorganismen der Gattung Thraustochytriales
EP1537871A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-08 Aventis Pharma S.A. Enoxaparin for the treatment of cancer
DE102004017369A1 (de) 2004-04-08 2005-11-03 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Screeningverfahren zur Identifizierung von PUFA-PKS in Proben
DE102004022015A1 (de) * 2004-05-03 2005-12-01 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Fischfutter für Aquafarmen auf Basis fermentativ gewonnener mehrfach ungesättigter Fettsäuren
US7588931B2 (en) * 2004-11-04 2009-09-15 E. I. Du Pont De Nemours And Company High arachidonic acid producing strains of Yarrowia lipolytica
DE102004062141A1 (de) * 2004-12-23 2006-07-06 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Herstellung eines Rohöls aus Gemischen von Mikroorganismen und Pflanzen, das so hergestellte Öl sowie die spezifischen Verwendungen des so hergestellten und gegebenenfalls zusätzlich raffinierten Öls
DE102005003624A1 (de) * 2005-01-26 2006-07-27 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Herstellung und Anwendung eines antioxidativ wirksamen Extraktes aus Crypthecodinium sp.
DE102005003625A1 (de) * 2005-01-26 2006-07-27 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Herstellung einer DHA-haltigen Fettsäure-Zusammensetzung
PL1888081T3 (pl) * 2005-05-23 2017-07-31 Massachusetts Institute Of Technology Kompozycje zawierające PUFA i sposoby ich zastosowania
PL2447356T3 (pl) 2005-06-07 2016-10-31 Mikroorganizmy eukariotyczne do wytwarzania lipidów i przeciwutleniaczy
CN103211807A (zh) * 2005-07-08 2013-07-24 Dsmip资产公司 用于治疗痴呆和前痴呆相关病症的多不饱和脂肪酸
WO2007035870A2 (en) * 2005-09-20 2007-03-29 Prolacta Bioscience, Inc. A method for testing milk
DE102005054577A1 (de) 2005-11-16 2007-05-24 Cognis Ip Management Gmbh Verwendung von Estern ungesättigter, physiologisch aktiver Fettsäuren als Nährmedien für Zellkulturen
ES2277557B1 (es) * 2005-12-21 2008-07-01 Proyecto Empresarial Brudy, S.L. Utilizacion de acido docosahexaenoico para el tratamiento del daño celular oxidativo.
US9265745B2 (en) 2005-12-21 2016-02-23 Brudy Technology S.L. Use of DHA, EPA or DHA-derived EPA for treating a pathology associated with cellular oxidative damage
EP1973406B1 (en) 2005-12-28 2014-03-12 Advanced Bionutrition Corporation A delivery vehicle for probiotic bacteria comprising a dry matrix of polysaccharides, saccharides and polyols in a glass form
US8968721B2 (en) 2005-12-28 2015-03-03 Advanced Bionutrition Corporation Delivery vehicle for probiotic bacteria comprising a dry matrix of polysaccharides, saccharides and polyols in a glass form and methods of making same
BRPI0710665A2 (pt) * 2006-04-03 2011-08-16 Advanced Bionutrition Corp formulações de ração contendo ácido docosa-hexaenóico
GB2437909A (en) * 2006-05-12 2007-11-14 Advanced Bionutrition Inc Animal feed comprising docosahexaenois acid from a microbial source
EP1886680A1 (en) * 2006-05-23 2008-02-13 Nestec S.A. Maternal supplement
CN101981201A (zh) * 2006-08-01 2011-02-23 加拿大海洋营养食品有限公司 产油微生物及改良这些微生物的方法
JP2010502189A (ja) * 2006-08-29 2010-01-28 マーテック バイオサイエンシーズ コーポレーション 乳幼児用調合乳におけるＤＰＡ（ｎ−６）油の使用
KR100684642B1 (ko) * 2006-09-14 2007-02-22 주식회사 일신웰스 어유 유래 글리세라이드 유지 조성물 및 이의 제조방법
WO2008049512A1 (en) * 2006-10-27 2008-05-02 Lonza Ag Production of omega-3 fatty acids in microflora of thraustochytriales using modified media
CA2673120C (en) 2006-12-18 2012-08-07 Advanced Bionutrition Corporation A dry food product containing live probiotic
US20080234377A1 (en) * 2007-03-23 2008-09-25 Martek Biosciences Corporation Polyunsaturated fatty acids for treatment of dementia and pre-dementia-related conditions
AU2008269989B2 (en) * 2007-06-29 2014-02-27 Dsm Ip Assets B.V. Production and purification of esters of polyunsaturated fatty acids
EP2071019A1 (en) 2007-12-15 2009-06-17 Lonza AG Method for the cultivation of microoranisms of the order thraustochytriales
EP2105506A1 (de) 2008-03-26 2009-09-30 Lonza Ag Verfahren zur Herstellung PUFAs enthaltender Öle unter Verwendung von Mikroorganismen der Ordnung Labyrinthulomycota
EP2145942A1 (de) * 2008-07-15 2010-01-20 Lonza Ltd. Verfahren zur Isolierung von Ölen aus Zellen und Biomasse
US20100077654A1 (en) * 2008-09-23 2010-04-01 LiveFuels, Inc. Systems and methods for producing biofuels from algae
CA2754952C (en) * 2009-03-19 2018-11-06 Martek Biosciences Corporation Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
US8207363B2 (en) 2009-03-19 2012-06-26 Martek Biosciences Corporation Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
ES2908047T3 (es) 2009-03-27 2022-04-27 Intervet Int Bv Vacunas en micropartículas para la vacunación oral o nasal y el refuerzo de animales incluidos los peces
US8753851B2 (en) 2009-04-17 2014-06-17 LiveFuels, Inc. Systems and methods for culturing algae with bivalves
NZ597053A (en) 2009-05-26 2014-02-28 Advanced Bionutrition Corp Stable dry powder composition comprising biologically active microorganisms and/or bioactive materials and methods of making
WO2010147955A1 (en) * 2009-06-16 2010-12-23 LiveFuels, Inc. Systems and methods for harvesting algae
CA2787344C (en) 2010-01-19 2018-03-20 Dsm Ip Assets B.V. Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
EP2529004B1 (en) 2010-01-28 2017-06-07 Advanced Bionutrition Corporation Dry glassy composition comprising a bioactive material
US9504750B2 (en) 2010-01-28 2016-11-29 Advanced Bionutrition Corporation Stabilizing composition for biological materials
WO2011133610A1 (en) 2010-04-22 2011-10-27 E. I. Du Pont De Nemours And Company Method for obtaining polyunsaturated fatty acid-containing compositions from microbial biomass
EP2576801B1 (en) 2010-06-01 2019-10-02 DSM IP Assets B.V. Extraction of lipid from cells and products therefrom
US20120204802A1 (en) 2010-08-11 2012-08-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Sustainable aquaculture feeding strategy
US20120040076A1 (en) 2010-08-11 2012-02-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Aquaculture feed compositions
US20120207912A1 (en) 2010-08-11 2012-08-16 E.I. Du Pont De Nemours And Company Aquaculture meat products
RU2573324C2 (ru) 2010-08-13 2016-01-20 Эдванст Байоньютришн Корпорейшн Стабилизирующая композиция для сухого хранения биологических материалов (варианты)
KR101115357B1 (ko) 2010-09-03 2012-03-06 대상 주식회사 습식 상태의 미세조류로부터 조오일을 추출하는 방법
US8973531B2 (en) * 2010-12-09 2015-03-10 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Automated continuous zooplankton culture system
US9487716B2 (en) 2011-05-06 2016-11-08 LiveFuels, Inc. Sourcing phosphorus and other nutrients from the ocean via ocean thermal energy conversion systems
US9222112B2 (en) 2011-07-21 2015-12-29 Dsm Ip Assets B.V. Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
WO2014074770A2 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Heliae Development, Llc Balanced mixotrophy methods
WO2014074772A1 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Heliae Development, Llc Mixotrophic, phototrophic, and heterotrophic combination methods and systems
WO2014096024A1 (de) * 2012-12-19 2014-06-26 Lonza Ltd Verfahren zur herstellung einer lipid-reichen zusammensetzung aus mikroorganismen
CN105189740B (zh) 2013-03-13 2019-01-15 帝斯曼营养品股份公司 工程化微生物
FR3005860B1 (fr) * 2013-05-21 2016-01-22 Oreal Compositions comprenant de l'huile d'ulkenia et leurs utilisations pour ameliorer et/ou renforcer la fonction barriere
FR3007652B1 (fr) * 2013-06-28 2015-07-17 Oreal Composition comprenant de l'acide docosahexaenoique et du pentaerythrityl tetra-di-t-butyl hydroxyhydrocinnamate
RU2537252C1 (ru) * 2013-06-29 2014-12-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук Способ получения докозагексаеновой кислоты
EP2826384A1 (de) 2013-07-16 2015-01-21 Evonik Industries AG Verfahren zur Trocknung von Biomasse
AR098890A1 (es) 2013-12-20 2016-06-22 Dsm Ip Assets Bv Proceso para obtener aceite microbiano a partir de células microbianas
NZ721409A (en) 2013-12-20 2022-10-28 Dsm Ip Assets Bv Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
US11124736B2 (en) 2013-12-20 2021-09-21 Dsm Ip Assets B.V. Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
AR098896A1 (es) 2013-12-20 2016-06-22 Dsm Ip Assets Bv Proceso para obtener aceite microbiano a partir de células microbianas
EP3083974A1 (en) 2013-12-20 2016-10-26 DSM Nutritional Products AG Methods of recovering oil from microorganisms
KR102435269B1 (ko) 2013-12-20 2022-08-22 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. 미생물 세포로부터의 미생물 오일의 수득 방법
BR112016014262B1 (pt) 2013-12-20 2022-04-05 MARA Renewables Corporation Método para recuperar lipídeos de uma população de micro-organismos
CZ307271B6 (cs) * 2014-08-26 2018-05-09 Vysoká škola chemicko - technologická v Praze Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky
WO2016050552A1 (de) 2014-10-02 2016-04-07 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur herstellung einer pufas enthaltenden biomasse mit hoher zellstabilität
CA2958439C (en) 2014-10-02 2022-09-20 Evonik Industries Ag Feedstuff of high abrasion resistance and good stability in water, containing pufas
CN106793803B (zh) 2014-10-02 2021-03-09 赢创运营有限公司 通过挤压含pufa的生物质来制备含pufa的饲料的方法
ES2900848T3 (es) 2014-10-02 2022-03-18 Evonik Operations Gmbh Procedimiento para la producción de un pienso
AR104042A1 (es) 2015-03-26 2017-06-21 Mara Renewables Corp Producción de alta densidad de biomasa y aceite utilizando glicerol en bruto
KR102676949B1 (ko) 2015-07-13 2024-06-19 마라 리뉴어블즈 코퍼레이션 크실로오스의 미세조류 대사를 강화시키는 방법
WO2017019273A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Advanced Bionutrition Corporation Stable dry probiotic compositions for special dietary uses
WO2017094804A1 (ja) * 2015-12-01 2017-06-08 日本水産株式会社 ドコサヘキサエン酸含有油及びその製造方法
US10851395B2 (en) 2016-06-10 2020-12-01 MARA Renewables Corporation Method of making lipids with improved cold flow properties
JP6938163B2 (ja) * 2017-02-06 2021-09-22 長瀬産業株式会社 脂質組成物、その用途及びその製造方法
NL2019436B1 (en) 2017-08-23 2019-03-07 Newtricious Bv Composition comprising a xantophyll and an omega-3 fatty acid and method of use thereof
JP7013416B2 (ja) * 2018-06-21 2022-01-31 マルハニチロ株式会社 腎機能維持及び保護剤、並びに、その効果評価方法
GB2590868A (en) * 2018-06-21 2021-07-07 Maruha Nichiro Corp Kidney function maintenance and protection agent, and method for evaluating effect thereof
FR3085962B1 (fr) 2018-09-14 2021-06-18 Fermentalg Procede d'extracton d'une huile riche en pufa
US20220096416A1 (en) * 2019-02-01 2022-03-31 Mars, Incorporated Feline food composition
WO2023140321A1 (ja) * 2022-01-20 2023-07-27 ホロバイオ株式会社 新規生物育種技術

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US161864A (en) * 1875-04-13 Improvement in methods of killing vermin
US539759A (en) * 1895-05-21 Laroy s
JPH075484B2 (ja) 1985-03-06 1995-01-25 帝人株式会社 血液脳関門通過性医薬品組成物
AU2122688A (en) 1987-07-20 1989-02-13 Maricultura, Incorporated Microorganism production of omega-3 (n-3) lipids
JP2582622B2 (ja) 1987-10-27 1997-02-19 日東化学工業株式会社 糸状菌による高度不飽和脂肪酸の製造法
US5340742A (en) 1988-09-07 1994-08-23 Omegatech Inc. Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids
US5130242A (en) 1988-09-07 1992-07-14 Phycotech, Inc. Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids
US5407957A (en) 1990-02-13 1995-04-18 Martek Corporation Production of docosahexaenoic acid by dinoflagellates
JPH05308978A (ja) 1992-05-11 1993-11-22 Onoda Cement Co Ltd 藻類によるドコサヘキサエン酸の製造方法
WO1996033263A1 (fr) * 1995-04-17 1996-10-24 JAPAN, represented by DIRECTOR-GENERAL OF AGENCY OF INDUSTRIAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Nouveaux micro-organismes capables de produire des acides gras hautement insatures et procede de production d'acides gras hautement insatures utilisant ces micro-organismes
JPH0930962A (ja) * 1995-07-21 1997-02-04 Nisshin Oil Mills Ltd:The 医療用油脂含有組成物
EP0935667B1 (en) 1996-07-23 2006-12-06 Nagase Chemtex Corporation Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid

Also Published As

Publication number Publication date
IL128166A (en) 2011-06-30
LV12329B (lv) 2000-02-20
ES2362476T3 (es) 2011-07-06
NO323173B1 (no) 2007-01-15
CA2261231A1 (en) 1998-01-29
EE04063B1 (et) 2003-06-16
CA2261231C (en) 2012-11-27
HUP9903703A2 (hu) 2000-03-28
HUP9903703A3 (en) 2001-09-28
TR199900130T2 (xx) 1999-04-21
EP0935667A1 (en) 1999-08-18
NO20063977L (no) 1999-03-18
IL128166A0 (en) 1999-11-30
IL187179A0 (en) 2008-02-09
EP1785492A3 (en) 2007-06-27
ATE469244T1 (de) 2010-06-15
ID17466A (id) 1998-01-08
RU2226216C2 (ru) 2004-03-27
ATE347607T1 (de) 2006-12-15
SI0935667T1 (sl) 2007-10-31
US7514244B2 (en) 2009-04-07
JP3538418B2 (ja) 2004-06-14
AU2979897A (en) 1998-02-10
ES2281913T3 (es) 2007-10-01
US6509178B1 (en) 2003-01-21
EP2213750A1 (en) 2010-08-04
WO1998003671A1 (en) 1998-01-29
DE69737063T2 (de) 2007-07-19
JP2000513575A (ja) 2000-10-17
JP3343358B2 (ja) 2002-11-11
DK1785492T3 (da) 2010-07-26
PL331326A1 (en) 1999-07-05
LV12329A (lv) 1999-08-20
DE69739894D1 (de) 2010-07-08
CZ300277B6 (cs) 2009-04-08
US20030161864A1 (en) 2003-08-28
DE69737063D1 (de) 2007-01-18
HU229062B1 (hu) 2013-07-29
NO990270D0 (no) 1999-01-21
EP1785492B1 (en) 2010-05-26
EP0935667B1 (en) 2006-12-06
DK0935667T3 (da) 2007-04-10
JP2002345452A (ja) 2002-12-03
LT99005A (en) 1999-06-25
NO990270L (no) 1999-03-18
EP1785492A2 (en) 2007-05-16
PL193818B1 (pl) 2007-03-30
PT935667E (pt) 2007-02-28
CZ299658B6 (cs) 2008-10-08
AU723553C (en) 2005-04-14
EE9900026A (et) 1999-08-16
LT4550B (lt) 1999-10-25
PT1785492E (pt) 2010-07-06
BR9710394A (pt) 2000-01-11
AU723553B2 (en) 2000-08-31
CZ19999A3 (cs) 1999-07-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6509178B1 (en) Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid with ulkenia
JP4127860B2 (ja) 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法
US6582941B1 (en) Microorganisms capable of producing highly unsaturated fatty acids and process for producing highly unsaturated fatty acids by using the microorganisms
CN1089561C (zh) 高度不饱和脂肪酸含量高的家禽蛋,其制造方法及其用途
JP4283351B2 (ja) 新規な油脂組成物の製造方法および用途

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees