CZ307271B6 - Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky - Google Patents
Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky Download PDFInfo
- Publication number
- CZ307271B6 CZ307271B6 CZ2014-576A CZ2014576A CZ307271B6 CZ 307271 B6 CZ307271 B6 CZ 307271B6 CZ 2014576 A CZ2014576 A CZ 2014576A CZ 307271 B6 CZ307271 B6 CZ 307271B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- demineralization
- milk whey
- saline solution
- waste
- medium
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Způsob kultivace mikroorganismů roduspočívá v tom, že je jako součásti kultivačního média využito odpadního solného roztoku z procesu demineralizace sladké mléčné syrovátky. Růst modelových mikroorganismůPA968 a. AN4 byl na slaném odpadním médiu srovnatelný s růstem na komplexním médiu. Předložený vynález proto poskytuje nový a hospodárný způsob kultivace mikroorganismů rodu.
Description
Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales a využití odpadního solného roztoku z demineralizace sladké mléčné syrovátky jakožto součásti kultivačního média k účelu produkce biomasy. Získaná biomasa je vhodná jako aditivum do krmiv hospodářských zvířat, doplněk stravy nebo jiné použití ve farmacii a kosmetice.
Dosavadní stav techniky
Mikroorganismy rodu Thraustochytriales (zástupci řádu Thraustochitriace) jsou saprofýtické druhy vyskytující se ve slaných vodách na povrchu řas, organickém detritu či cévnatých rostlinách. Mezi typické zástupce tohoto řádu patří: Aplanochytrium, Botryochytrium Japanochytrium, Schizochytrium, Sicyoidochytrium, Parietichytrium, Oblongichytrium, Ulkenia, Thraustochytrium. Z biotechnologického hlediska jsou to zajímavé druhy, jelikož dokáží ve své biomase efektivně akumulovat lipidovou frakci, ve které velkou část tvoří polynenasycené mastné kyseliny (PUFAs = polyunsaturated fatty acids) a zejména omega-3 mastné kyseliny, což jsou esenciální složky v lidské výživě (Lewis T.E., Nicholas P.D., McMeekin T.A. (1999) The biotechnological potential of Traustochytrids. Marině Biotechnology 1: 580-587).
Nejdůležitějšími omega-3 mastnými kyselinami jsou eikosapentaenová kyselina (EPA) a dokosahexaenová kyselina (DHA). Klinické a epidemiologické testy přidělily těmto kyselinám léčebný význam. Pozitivní vliv mají především na kardiovaskulární systém, centrální nervový systém a imunitu (Kris-Etherton P.M., Hecker K.D., Binkoski A.E. (2004) Polyunsaturated fatty acids and cardiovascular health. Nutr. Rev. 62:414-426).
Pro biotechnologii nejvíce zajímavé druhy jsou: Japanochytrium, Schizochytrium a Ulkenia, protože obvykle necelou polovinu lipidové frakce tvoří DHA (CZ/EP 1 685 255 T3).
Typická média (např. ATCC 790 By+ médium) pro kultivaci zástupců rodu Thraustochytriales jsou založena na mořské vodě, popř. směsi specifických minerálních látek napodobujících složení mořské vody, zdroji uhlíku (především glukóza nebo glycerol) a zdroji dusíku a vitamínů (především kvasničný extrakt, pepton nebo kukuřičný výluh). Například CZ/EP 1 685 255 T3 popisuje kultivaci mikroorganismu Ulkenia spec, kmen SAM 2179 v médiu skládajícím se z glukózy, kukuřičného výluhu, KH2PO4, Na2SO4, MgCb, CaCl2, (NH4)2SO4 a CaCO3.
Odpadní solný roztok se získává demineralizací sladké mléčné syrovátky elektrodialýzou přímo v mlékárnách. Např. mlékárna s ročním zpracováním mléka v objemu 100 000 m3 produkuje tohoto odpadního roztoku denně 30 až 60 m3, přičemž momentálně neexistuje žádný způsob jeho využití. Tato technologie odsolování syrovátky se ve světě uplatňuje v desítkách mlékáren a řádově se tohoto roztoku vyprodukují tisíce m3 denně.
Podstata vynálezu
Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales v kultivačním médiu, tvořeném směsí specifických minerálních látek napodobujících složení mořské vody a zdroji uhlíku, spočívá v tom, že součásti kultivačního média je odpadní solný roztok z procesu demineralizace sladké mléčné syrovátky.
- 1 CZ 307271 B6
Odpadní solný roztok z procesu demineralizace sladké mléčné syrovátky může tvořit 50 až 95 % obj. kultivačního média. S výhodou může být obohacen zdrojem uhlíku, nejčastěji glycerolem nebo glukózou. Popřípadě zdrojem dusíku a dalších růst podporujících látek, nejčastěji kvasničným extraktem, peptonem nebo kukuřičným výluhem.
Biomasu mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales připravenou podle vynálezu lze použít přímo, nebo po extrakci nenasycených mastných kyselin, pro přípravu nutraceutik, krmných aditiv, farmaceutik či kosmetik.
Růst modelových mikroorganismů Schizochytrium limacinum PA968 a Japanochytriům sp. AN4 byl na slaném odpadním médiu srovnatelný s růstem na komplexním médiu. Předložený vynález proto poskytuje nový a hospodárný způsob kultivace mikroorganismů rodu Thraustochytriales.
Vynález je založen na nahrazení mořské vody a částečném nahrazení směsi specifických minerálních látek a zdroje dusíku odpadním solným roztokem (OSR) pocházejícím z demineralizace sladké mléčné syrovátky jakožto součásti kultivačního média mikroorganismů rodu Thraustochytriales. Typické složení odpadního solného roztoku je uvedeno v tab. 1. Roztok OSR je nutné pro kultivaci mikroorganismů rodu Thraustochytriales neutralizovat (úpravu pH z přibližně 4,3 na 7 lze provést pomocí adekvátního množství NaOH) a lze jej sterilovat pomocí membránové filtrace, nebo tepelně. Sterilní filtrace se jeví jako výhodnější pro zachování většího množství zdrojů uhlíku i organických látek v médiu. Po neutralizaci a sterilaci dochází v OSR k vysrážení části rozpuštěných látek (vzniklá sraženina se odstraní filtrací) a do sraženiny přechází veškerá laktóza, a cca 90 % hmotn. P, 95 % hmotn. Ca, 60 % hmotn. Na, 50 % hmotn. Mg a 40 % hmotn. Cl.
Tab. 1 Chemické složení odpadního solného roztoku z demineralizace syrovátky (OSR).
| Název | Hodnota | Jednotka |
| Sušina | 16,8 | g-kg-1 |
| Popel | 11,3 | g-kg-1 |
| NKjeldahl | 0,2 | g-kg-1 |
| Laktosa | 3,0 | g-kg-1 |
| Cl | 2,67 | g-kg-1 |
| P | 0,64 | g-kg-1 |
| SO4 2' | 0,38 | g-kg-1 |
| Ca | 0,79 | g-kg-1 |
| Mg | 0,15 | g-kg-1 |
| K | 3,32 | g-kg-1 |
| Na | 3,32 | g-kg-1 |
| NO3’ | 1,8 | g-kg-1 |
| bsk5 | 3,06 | g-kg-1 |
| CHSKcr | 5,63 | g-kg-1 |
| Kondukti vita | 15,0 | mS.cm'1 |
Objasnění výkresů
Obr. 1 znázorňuje průběh fermentace Schizochytrium limacinum PA968 v médiu obsahujícím solný roztok z demineralizace syrovátky (OSR) s opakovaným přídavkem amoniaku.
Příklady uskutečnění vynálezu
Jako modelové mikroorganismy rodu Thraustochytriales sloužily Schizochytrium limacinum PA968 a Japonochytrium sp. AN4.
Příklad 1 Porovnání růstu Schizochytrium limacinum PA968 v různých médiích
Z Petriho misky byly buňky Schizochytrium limacinum PA968 asepticky převedeny do: 1) 100 ml sterilního komplexního média (KM) a 2) 100 ml sterilního slaného odpadního média (SOM).
KM (pH 7) obsahovalo: glycerol (30 g.F1), kvasničný extrakt (10 g.l1), chlorid sodný (18 g.F1), mikroelementy (v mg Γ1: 40 FeNa-EDTA, 88 CaCl2, 0,83 H3BO3, 0,95 CuSO4.5H2O, 3,3 MnCl2.4H2O, 0,17 (NH4)6Mo7O24.4H2O, 2,7 ZnSO4.7H2O, 0,6 CoSO4.7H2O, a 0,014 NH4VO3) a destilovanou vodu.
SOM (pH 7) se skládalo jen z glycerolu (30 g.F1) rozpuštěném v tepelně ošetřeném OSR. Kultury v Erlenmeyerových baňkách byly umístěny do třepačky (130 rpm) při 23 °C po dobu 340 h. Časový průběh růstu Schizochytrium limacinum PA968 kultivované v KM a SOM je uveden v tab. 2.
Tab. 2 Změna koncentrace suché biomasy během růstu Schizochytrium limacinum PA968 na komplexním médiu (KM) a slaném odpadním médiu (SOM),
Doba kultivace (h)
Koncentrace biomasy (g.l'1)
KM SOM
| 0 | 0,8 | 0,6 |
| 16 | 1,8 | 1,6 |
| 50 | 3,3 | 2,9 |
| 116 | 6,1 | 5,1 |
| 164 | 7,9 | 7,0 |
| 191 | 9,0 | 8,5 |
| 240 | 10,7 | 11,0 |
| 287 | 11,7 | 12,5 |
| 341 | 11,8 | 12,3 |
Příklad 2 Porovnání růstu Japonochytrium sp. AN4 v různých mediích
Z Petriho misky byly buňky Japonochytrium sp. AN4 asepticky převedeny do: 1) 100 ml sterilního komplexního média (KM) a 2) 100 ml sterilního slaného odpadního média (SOM). KM (pH 7) obsahovalo: glycerol (20 g.F1), kvasničný extrakt (10 g.F1), chlorid sodný (18 g.F1), mikroelementy (v mg Γ1: 40 FeNa-EDTA, 88 CaCl2, 0,83 H3BO3, 0,95 CuSO4.5H2O, 3,3 MnCl2.4H2O, 0,17 (NH4)6Mo7O24.4H2O, 2,7 ZnSO4.7H2O, 0,6 CoSO4.7H2O a 0,014 NEL4VO3) a destilovanou vodu.
SOM (pH 7) se skládalo jen z glycerolu (20 g.l1) rozpuštěném v tepelně ošetřeném OSR. Kultury v Erlenmeyerových baňkách byly umístěny do třepačky (130 rpm), při 23 °C po dobu 120 h probíhala kultivace inokula. Následně byla inokula asepticky převedena do bioreaktorů Multifors (pracovní objem 1 litr).
-3 CZ 307271 B6
Komplexní médium (KM) v bioreaktoru obsahovalo: glycerol (40 g.l '), kvasničný extrakt (20 g.T1), chlorid sodný (18 g.l-1), mikroelementy (v mg Γ1: 40 FeNa-EDTA. 88 CaCl2, 0,83 H3BO3, 0,95 CuSO4.5H2O, 3,3 MnCl2.4H2O, 0,17 (NH4)6Mo7O24.4H2O, 2,7 ZnSO4.7H2O, 0,6 CoSO4.7H2O a 0,014 NH4VO3) a destilovanou vodu.
Slané odpadní médium (SOM) v bioreaktoru obsahovalo: glycerol (40 g.F1), kvasničný extrakt (20 g.l-1) a tepelně ošetřený OSR.
Dvě paralelní fermentace při konstantních parametrech: pH (7,0), rychlost otáček míchání (180 min-1), teplota (23 °C), vzdušnění (0,2 m3.h-i.) trvaly 103 hodin. Časový průběh růstu Japonochytrium sp. AN4 v KM a SOM je uveden v tab. 3.
Tab. 3 Změna koncentrace suché biomasy během růstu
Japonochytrium sp. AN4 na komplexním médiu (KM) a slaném odpadním médiu (SOM).___________________
| Doba kultivace (h) | Koncentrace KM | biomasy (g.l’1) SOM |
| 0 | 1,4 | 1,5 |
| 27 | 8,1 | 7,4 |
| 43 | 17,3 | 15,1 |
| 67 | 23,1 | 22,0 |
| 86 | 26,0 | 24,4 |
| 103 | 25,7 | 25,1 |
Příklad 3 Kultivace Schizochytrium limacinum PA968 v médiu obsahujícím odpadní solný roztok (OSR) z demineralizace syrovátky s opakovaným přídavkem amoniaku
Z Petriho misky byly buňky Schizochytrium limacinum PA968 převedeny do 400 ml sterilního inokulačního slaného odpadního média (SOM), které obsahovalo: glycerol (20 g.F1), kvasničný extrakt (10 g.F1) a tepelně ošetřený OSR. Buněčná suspenze v Erlenmeyerových baňkách byla umístěna do třepačky (130 rpm) při 23 °C po dobu 120 h. Následně bylo inokulum asepticky převedeno do bioreaktoru Labfors (celkový objem 2,7 1). Počáteční složení SOM v bioreaktoru bylo: glycerol (90 g.F1), kvasničný extrakt (10 g.F1), amoniak (10 g.F1) a tepelně ošetřený OSR. Procesní podmínky fermentace: pracovní objem (2 I), inokulace (20 % obj.), pH (7,0), teplota (23 °C), vzdušnění (0,18 m3.h-1), míchání (100 min-1), koeficient přestupu kyslíku (kLa = 72 h-1). Amoniak byl v průběhu kultivace přidán ve dvou dávkách (vždy 5 g.l-1). Průběh fermentace Schizochytrium limacinum PA968 v médiu obsahujícím solný roztok z demineralizace syrovátky (OSR) s opakovaným přídavkem amoniaku je znázorněn na obr. 1 a dosažené výsledky fermentace v tab. 4.
-4CZ 307271 B6
Tab. 4 Dosažené výsledky fermentace a složení suché biomasy Schizochytrium limacinum PA968
| Parametr | Hodnota |
| Konc. suché biomasy | 40,4 g.P1 |
| CMKa v biomase | 19,6 % hmotn. |
| CMKa v médiu | 7,9 g.l'1 |
| Podíl DHA v CMKa | 48,5 % hmotn. |
| Koncentrace DHA v médiu | 3,8 g.l-1 |
| Produktivita biomasy | 4,51 g.l’1.den’1 |
| Produktivita DHA | 424 mg.Γ1.den’1 |
a celkové množství mastných kyselin
Průmyslová využitelnost
Vynález je využitelný v biotechnologickém průmyslu. Způsob výroby podle vynálezu je možno realizovat s využitím stávajících průmyslových fermentačních kapacit. Vyrobená biomasa mikroorganismů rodu Thraustochytriales představuje cennou surovinu pro řadu žádaných produktů v oblasti potravinářského a farmaceutického průmyslu, v kosmetice, jako součást potravinových doplňků, krmiv, nenasycených omega-3 mastných kyselin a dalších produktů.
Claims (4)
1. Způsob kultivace biomasy mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales v kultivačním médiu, tvořeném směsí specifických minerálních látek napodobujících složení mořské vody a zdroji uhlíku, se vyznačuje tím, že součást kultivačního média tvoří odpadní solný roztok z procesu demineralizace sladké mléčné syrovátky.
2. Způsob podle nároku 1, se vyznačuje tím, že odpadní solný roztok z procesu demineralizace sladké mléčné syrovátky tvoří 50 až 95 % obj. kultivačního média.
3. Způsob podle nároků 1 a 2, se vyznačuje tím, že v odpadním solném roztoku z procesu demineralizace sladké mléčné syrovátky se rozpustí zdroj uhlíku, nejčastěji glycerol nebo glukóza.
4. Způsob podle nároků 1 až 3, se vyznačuje tím, že v odpadním solném roztoku z procesu demineralizace sladké mléčné syrovátky se rozpustí zdroj dusíku a dalších růst podporujících látek, nejčastěji kvasničný extrakt, pepton nebo kukuřičný výluh.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2014-576A CZ307271B6 (cs) | 2014-08-26 | 2014-08-26 | Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky |
| EP15181615.4A EP2990474B1 (en) | 2014-08-26 | 2015-08-19 | A method of cultivation of sea protist biomass, in particular of microorganisms of the genus thraustochytriales |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2014-576A CZ307271B6 (cs) | 2014-08-26 | 2014-08-26 | Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2014576A3 CZ2014576A3 (cs) | 2016-03-09 |
| CZ307271B6 true CZ307271B6 (cs) | 2018-05-09 |
Family
ID=54010877
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2014-576A CZ307271B6 (cs) | 2014-08-26 | 2014-08-26 | Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP2990474B1 (cs) |
| CZ (1) | CZ307271B6 (cs) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6429162B1 (ja) * | 2017-12-28 | 2018-11-28 | リファインホールディングス株式会社 | ラビリンチュラ類の培養方法 |
| CN108085258A (zh) * | 2018-01-03 | 2018-05-29 | 山东华维藻业有限公司 | 一种利用提溴卤水在倾斜跑道池中养殖杜氏盐藻的方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004083442A2 (en) * | 2003-03-21 | 2004-09-30 | Council Of Scientific And Industrial Research | A method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid protists |
| US20070141686A1 (en) * | 2003-11-10 | 2007-06-21 | Markus Luy | Process for cultivating microoraganisms of the genus thraustochytriales |
| EP2213750A1 (en) * | 1996-07-23 | 2010-08-04 | Nagase ChemteX Corporation | Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20060094089A1 (en) * | 1988-09-07 | 2006-05-04 | Martek Biosciences Corporation | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US5246842A (en) * | 1991-10-30 | 1993-09-21 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Production of eicosapentaenoic acid from filamentous fungi utilizing lactose as a primary carbon source |
| AU2011276341A1 (en) * | 2010-07-06 | 2013-01-24 | Phycal, Inc | Biosecure genetically modified algae |
-
2014
- 2014-08-26 CZ CZ2014-576A patent/CZ307271B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-08-19 EP EP15181615.4A patent/EP2990474B1/en not_active Not-in-force
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2213750A1 (en) * | 1996-07-23 | 2010-08-04 | Nagase ChemteX Corporation | Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid |
| WO2004083442A2 (en) * | 2003-03-21 | 2004-09-30 | Council Of Scientific And Industrial Research | A method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid protists |
| US20070141686A1 (en) * | 2003-11-10 | 2007-06-21 | Markus Luy | Process for cultivating microoraganisms of the genus thraustochytriales |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Ahmed Abd El Razak, Alan C. Ward, Jarka Glassey: Screening of Marine Bacterial Producers of Polyunsaturated Fatty Acids and Optimisation of Production, February 2014, Microbial Ecology 67, 454-464 * |
| Bonnet J. L.; Bogaerts P.; Bohatier J.: Biological treatment of whey by Tetrahymena pyriformis and impact study on laboratory-scale wastewater lagoon process 1999 Chemosphere 38, 2979 – 2993 * |
| O'Brien D. J.; Kurantz M. J.; Kwoczak R.: Production of eicosapentaenoic acid by the filamentous fungus Pythium irregulare 1993 Applied Microbiology and Biotechnology 40, 211 – 214 * |
| Stinson E. E.; Kwoczak R.; Kurantz M. J.: Effect of cultural conditions on production of eicosapentaenoic acid by Pythium irregulare 1991 Journal of Industrial Microbiology 8, 171 – 178 * |
| Wessinger E. W.; O'Brien D. J.; Kurantz M. J.: Identification of fungi for sweet whey permeate utilization and eicosapentaenoic acid production 1990 Journal of Industrial Microbiology 6, 1991 – 197 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2990474B1 (en) | 2017-06-07 |
| EP2990474A1 (en) | 2016-03-02 |
| CZ2014576A3 (cs) | 2016-03-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2021218000B2 (en) | Semi-continuous culture methods | |
| US20240060112A1 (en) | Repeated fed-batch culture methods | |
| CZ307271B6 (cs) | Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky | |
| KR20170020373A (ko) | 미생물에서 오일 생산 방법 | |
| CN110564622B (zh) | 一种提高球等鞭金藻培养密度的方法 | |
| CA2980679C (en) | High density production of biomass and oil using crude glycerol |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20200826 |