ES2873094T3 - Procedimiento para la producción de un pienso que contiene PUFAs mediante extrusión de una biomasa que contiene PUFAs de tipo Labyrinthulomycetes - Google Patents
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Abstract
Procedimiento para la producción de un pienso que contiene PUFAs, caracterizado por que se extruye una biomasa que contiene PUFAs del taxón Labyrinthulomycetes, que presenta un contenido en sulfato, referido a la masa anhidra, de 25 a 60 g/kg, con otros componentes del pienso en el caso de un aporte de energía de 12-28 Wh/kg, debiéndose entender por masa anhidra un producto con una humedad residual de menos de 5 % en peso, y determinándose el contenido en sulfato de la biomasa a través del contenido en azufre en la biomasa, y este a su vez según la norma DIN EN ISO 11885.
Description
DESCRIPCIÓN
Procedimiento para la producción de un pienso que contiene PUFAs mediante extrusión de una biomasa que contiene PUFAs de tipo Labyrinthulomycetes
La presente invención se refiere a un procedimiento para la producción de un pienso que contiene ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) mediante extrusión de una biomasa que contiene PUFAs.
En el estado de la técnica se describen ya procedimientos para la producción de biomasa que contiene PUFAs (ácidos grasos poliinsaturados). El documento WO2014/122092 describe productos de extrusión que contienen biomasa de Thraustochytriales que contiene PUFAs. El contenido en sulfato de la biomasa se sitúa por debajo de 25g/kg. El documento WO94/08467 describe el cultivo de Schizochytrium ATCC n° 20888 bajo diferentes contenidos de Na2SO4 en el medio. La biomasa se puede elaborar para dar un producto de extrusión. La elaboración posterior de la correspondiente biomasa junto con otras sustancias constitutivas de piensos se puede efectuar, a modo de ejemplo, mediante extrusión. A este respecto, la biomasa que contiene PUFAs se emplea como fuente alternativa de PUFAs, ya que el aceite de pescado, el modo clásico que se emplea como fuente de PUFAs, ya no se encuentra disponible en medida suficiente debido a la sobreexplotación pesquera.
La tarea de la presente invención era poner a disposición un pienso que contuviera PUFAs, en especial ácidos grasos omega-3, que presentara una capacidad de carga con aceite especialmente elevada. Posteriormente, piensos revestidos con aceite han demostrado ser piensos especialmente apropiados en especial en la acuicultura.
Anteriormente se determinó que, en el caso de empleo de aceite de pescado para la producción del pienso, en la realización de la extrusión es necesario un aporte de energía muy elevado para obtener un producto con una capacidad de carga con aceite deseada. En el caso de empleo de aceite de pescado como fuente de ácidos grasos omega-3, en primer lugar, se efectúa la extrusión de los demás componentes del pienso, y el producto de extrusión obtenido de este modo se carga a continuación con aceite de pescado, así como otros componentes de aceite en caso dado.
Sorprendentemente, según la invención, ahora se determinó que, en el caso de empleo de una biomasa que contiene PUFAs, en especial ácidos grasos omega-3 según la reivindicación 1, en lugar de aceite de pescado es suficiente un aporte de energía mucho menor para obtener un producto de extrusión con la capacidad de carga con aceite deseada. En este caso ha demostrado ser suficiente un aporte de energía de 28 Wh/kg para la obtención de las propiedades de producto deseadas, siendo ventajoso un aporte de energía de 12-28 Wh/kg. Un aporte de energía especialmente reducido, como máximo de 22 Wh/kg, en especial 18-22 Wh/kg, es suficiente en especial si para la producción del pienso se emplea una biomasa que contiene PUFAs según la reivindicación 1, que se obtuvo mediante cultivo a una concentración de sulfato tal que en la biomasa resultante se presenta un contenido en sulfato de 25 a 60 g/kg, en especial 25 a 50, 25 a 40 o 25 a 35 g/kg, respecto a la biomasa anhidra. Por lo tanto, un primer objeto de la presente invención es un procedimiento para la producción de un pienso que contiene PUFAs, caracterizado por que se extruye una biomasa que contiene PUFAs del taxón Labyrinthulomycetes, que presenta un contenido en sulfato, referido a la masa anhidra, de 25 a 60 g/kg, con otros componentes del pienso en el caso de un aporte de energía de 12-28 Wh/kg, debiéndose entender por masa anhidra un producto con una humedad residual de menos de 5 % en peso, y determinándose el contenido en sulfato de la biomasa a través del contenido en azufre en la biomasa, y este a su vez según la norma DIN EN ISO 11885. A este respecto, la extrusión se efectúa preferentemente con un aporte de energía de 14-26, en especial 16-24, de modo especialmente preferente 18-22 Wh/kg. El contenido en sulfato de la biomasa asciende preferentemente a 25 hasta 50, en especial 25 a 40, de modo especialmente preferente 25 a 35 g/kg, debiéndose entender por masa anhidra un producto con una humedad residual de menos de 5 % en peso, y determinándose el contenido en sulfato de la biomasa a través del contenido en azufre en la biomasa, y este a su vez según la norma DIN EN ISO 11885.
A este respecto, en el procedimiento de extrusión se emplea una extrusora de husillo o de doble husillo. El procedimiento de extrusión se realiza preferentemente a una temperatura de 80-220°C, en especial 80-130°C, una presión de 10-40 bar y una velocidad de circulación de eje de 100-1000 rpm, en especial 300-700 rpm. El tiempo de permanencia de la mezcla introducida asciende preferentemente a 5-30 segundos, en especial 10-20 segundos. El producto de extrusión generado tiene preferentemente un diámetro de 1 a 14 mm, preferentemente 2 a 12 mm, en especial 2 a 6 mm, y también presenta preferentemente una longitud de 1 a 14 mm, preferentemente 2 a 12 mm, en especial 2 a 6 mm. La longitud del producto de extrusión se ajusta mediante empleo de una herramienta de corte durante la extrusión. La longitud del producto de extrusión se selecciona preferentemente de modo que
corresponda aproximadamente al diámetro del producto de extrusión. El diámetro del producto de extrusión se determina mediante selección del diámetro de tamizado.
La capacidad de carga con aceite está en relación directa con la expansión del producto de extrusión durante el proceso de extrusión. Cuanto más fuerte es la expansión en la extrusión, tanto mayor es la capacidad de carga con aceite del producto de extrusión obtenido.
La capacidad de carga con aceite de un producto de extrusión según la invención asciende preferentemente al menos a 0,25 g de aceite por g de producto de extrusión, de modo especialmente preferente al menos 0,3 g de aceite por g de producto de extrusión, en especial al menos 0,35 g de aceite por g de producto de extrusión. Por lo tanto, otro objeto de la presente invención es asimismo un producto de extrusión de pienso que contiene PUFAs, que contiene una biomasa que contiene PUFAs del taxón Labyrinthulomycetes, caracterizado por que la biomasa presenta un contenido en sulfato, referido a la masa anhidra, de 25 a 60 g/kg, y por que el producto de extrusión presenta una capacidad de carga con aceite de al menos 0,25 g de aceite por g de producto de extrusión, en especial al menos 0,275 o 0,30 g de aceite por g de producto de extrusión, preferentemente al menos 0,325 o 0,35 g de aceite por g de producto de extrusión, debiéndose entender por masa anhidra un producto con una humedad residual de menos de 5 % en peso, y determinándose el contenido en sulfato de la biomasa a través del contenido en azufre en la biomasa, y este a su vez según la norma DIN EN ISO 11885.
De este modo, mediante agotamiento de la capacidad de carga con aceite se pueden realizar productos de extrusión de al menos 25 % en peso o al menos 27,5 % en peso, en especial al menos 30 % en peso o al menos 32,5 % en peso, sobre todo también aquellos con un contenido en grasa total de más de 35 % en peso.
El producto de extrusión según la invención presenta preferentemente una densidad aparente de 400-500 g/l. En caso dado, el procedimiento de extrusión puede comprender un paso de compactación y/o compresión.
Antes de la realización del procedimiento de extrusión se mezclan los componentes entre sí, de modo preferente íntimamente. Esto se efectúa de modo preferente en un tambor que está equipado con palas. En este paso de mezcla, en una forma de realización preferente se efectúa una inyección de vapor de agua, en especial para provocar el hinchamiento del almidón contenido preferentemente. A este respecto, la inyección de vapor de agua se realiza preferentemente a una presión de 1 a 5 bar, de modo especialmente preferente a una presión de 2 a 4 bar.
Las demás sustancias constitutivas de productos alimenticios o piensos se trituran preferentemente -s i es necesario- antes del mezclado con la biomasa de algas, para asegurar que en el paso de mezclado se obtenga una mezcla homogénea. El triturado de las demás sustancias constitutivas de productos alimenticios o piensos se puede efectuar, a modo de ejemplo, bajo empleo de un molino de martillos.
En una forma de realización preferente según la invención, al procedimiento de extrusión sigue la carga del producto de extrusión obtenido con aceite. A tal efecto, en primer lugar, se seca el producto de extrusión preferentemente a un contenido en humedad como máximo de 5 % en peso. Según la invención, la carga del producto de extrusión con aceite se puede efectuar, a modo de ejemplo, mediante introducción del producto de extrusión en aceite o pulverización del producto de extrusión con aceite, pero preferentemente se efectúa mediante revestimiento en vacío según la invención.
La producción de las biomasas que contienen PUFAs empleables según la invención se describe detalladamente en el estado de la técnica. En el caso de las células empleadas se trata de células del taxón Labyrinthulomycetes, que producen ya PUFAs (ácidos grasos poliinsaturados) de manera natural. En este caso, la producción se puede efectuar por vía autótrofa, mixótrofa o heterótrofa.
En el caso de la biomasa del taxón Labyrinthulomycetes (Labyrinthulea, laberintúlidos, redes mucilaginosas) se trata preferentemente de aquella de la familia de Thraustochytriaceae. Pertenecen a la familia de Thraustochytriaceae las especies Althomia, Aplanochytrium, Elnia, Japonochytrium, Schizochytrium, Thraustochytrium, Aurantiochytrium, Oblongichytrium y Ulkenia. De modo especialmente preferente, en el caso de la biomasa se trata de una las especies Thraustochytrium, Schizochytrium, Aurantiochytrium u Oblongichytrium, sobre todo de una de la especie Aurantiochytrium.
Según la invención, dentro de la especie Aurantiochytrium es preferente la especie Aurantiochytrium limacinum (antes también llamada Schizochytrium limacinum). De modo muy especialmente preferente, según la invención se emplea la cepa Aurantiochytrium limacinum SR21.
En el caso del ácido graso poliinsaturado (PUFA), según la invención se trata preferentemente de un ácido graso altamente insaturado (HUFA).
Las células contenidas en la biomasa se distinguen preferentemente por que presentan un contenido en PUFA de al menos 20 % en peso, preferentemente al menos 30 % en peso, en especial al menos 35 % en peso, referido respectivamente a la masa anhidra celular.
A este respecto, en una forma de realización preferente, una gran parte de lípidos se presenta en forma de triglicéridos, presentándose en forma de triglicéridos preferentemente al menos 50 % en peso, en especial al menos 75 % en peso, y en una forma de realización especialmente preferente al menos 90 % en peso de lípidos contenidos en la célula.
Según la invención, se entiende por ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) ácidos grasos que presentan al menos dos, en especial al menos tres dobles enlaces C-C. Según la invención, entre los PUFAs son preferentes ácidos grasos altamente insaturados (HUFAs). Según la invención, se entiende por HUFAs ácidos grasos que presentan al menos cuatro dobles enlaces C-C.
Los PUFAs se pueden presentar en forma libre o en forma enlazada en la célula. Son ejemplos de la presencia en forma enlazada fosfolípidos y ésteres de PUFAs, en especial monoacil-, diacil- y triacilglicéridos. En una forma de realización preferente, una gran parte de los PUFAs se presenta en forma de triglicéridos, presentándose en forma de triglicéridos preferentemente al menos 50 % en peso, en especial al menos 75 % en peso, y en una forma de realización especialmente preferente al menos 90 % en peso de PUFAs contenidos en la célula.
Los PUFAs preferentes representan ácidos grasos omega-3 y ácidos grasos omega-6, siendo especialmente preferentes ácidos grasos omega-3. A este respecto, representan ácidos grasos omega-3 preferentes el ácido eicosapentaenoico (EPA, 20:5w-3), en especial el ácido (5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-eicosa-5,8,11,14,17-pentaenoico y el ácido docosahexaenoico (DHA, 22:6w-3), en especial el ácido (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoico, siendo especialmente preferente el ácido docosahexaenoico.
La biomasa de algas que contiene PUFAs constituye preferentemente 2 a 24 % en peso, en especial 4 a 22 % en peso, preferentemente 9 a 20 % en peso, sobre todo 11 a 18 % del producto de extrusión, o bien de la composición empleada para la producción del producto de extrusión.
Las otras sustancias nutrientes o constitutivas de piensos se seleccionan a partir de componentes que contienen proteínas, que contienen hidratos de carbono, que contienen ácido nucleico y solubles en lípidos, así como, en caso dado, otros componentes grasos, y además a partir de otros aditivos como minerales, vitaminas, pigmentos y aminoácidos. Asimismo, además de sustancias nutrientes también pueden estar contenidas sustancias estructurantes, por ejemplo, para mejorar la textura o la apariencia del pienso. Además, a modo de ejemplo también se pueden emplear agentes aglutinantes para influir sobre la consistencia del pienso. Un componente empleado preferentemente, que representa tanto una sustancia nutriente como también una sustancia estructurante, es almidón.
En un procedimiento de extrusión especialmente preferente según la invención se emplea una composición que presenta las siguientes propiedades:
a) un contenido en proteína total de 33 a 67 % en peso, preferentemente 39 a 61 % en peso, en especial 44 a 55 % en peso,
b) un contenido en grasa total de 5 a 25 % en peso, preferentemente 8 a 22 % en peso, en especial 10 a 20 % en peso, sobre todo 12 a 18 % en peso;
c) un contenido en almidón total como máximo de 25 % en peso, en especial como máximo de 20 % en peso, preferentemente 6 a 17 % en peso, de modo especialmente preferente 8 a 14 % en peso; d) un contenido en biomasa de Labyrinthulomycetes, en especial biomasa de Thraustochytriaceae, de 2 a 24 % en peso, preferentemente 4 a 22 % en peso, en especial 9 a 20 % en peso, sobre todo 11 a 18 % en peso;
e) preferentemente un contenido en ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) de 0,8 a 8 % en peso, preferentemente 1,2 a 6 % en peso, en especial 1,4 a 5 % en peso, sobre todo 1,5 a 4 % en peso; f) preferentemente un contenido en ácidos grasos omega-3 de 0,8 a 8 % en peso, preferentemente 1,2 a 6 % en peso, en especial 1,4 a 5 % en peso, sobre todo 1,5 a 4 % en peso;
g) preferentemente un contenido en DHA de 0,1 a 4,0 % en peso, preferentemente 0,25 a 3,0 % en peso, en especial 0,5 a 2,8 % en peso, sobre todo 0,8 a 2,5 % en peso, en especial 1,0 a 2,0 % en peso. En una forma de realización preferente, el producto de extrusión obtenido se reviste a continuación con aceite, en especial aceite vegetal, preferentemente en una cantidad de 3 a 18 % en peso, en especial 5 a 15 % en peso, de modo especialmente preferente 7 a 13 % en peso, respecto al producto final.
De este modo se obtiene correspondientemente un producto de extrusión revestido con aceite, que presenta preferentemente las siguientes propiedades:
a) un contenido en proteína total de 30 a 60 % en peso, preferentemente 35 a 55 % en peso, en especial 40 a 50 % en peso;
b) un contenido en grasa total de 15 a 35 % en peso, preferentemente 18 a 32 % en peso, en especial 20 a 30 % en peso, sobre todo 22 a 28 % en peso;
c) un contenido en almidón total como máximo de 25 % en peso, en especial como máximo de 20 % en peso, preferentemente 5 a 15 % en peso, de modo especialmente preferente 7 a 13 % en peso; d) un contenido en biomasa de Labyrinthulea, en especial biomasa de Thraustochytriaceae, de 2 a 22 % en peso, preferentemente 4 a 20 % en peso, en especial 8 a 18 % en peso, sobre todo 10 a 16 % en peso; e) un contenido en ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) de 2 a 12 % en peso, preferentemente 3 a 10 % en peso, en especial 4 a 9 % en peso, sobre todo 5 a 8 % en peso;
f) un contenido en ácidos grasos omega-3 de 1 a 6 % en peso, preferentemente 1,5 a 5 % en peso, en especial 2 a 4,5 % en peso, sobre todo 2,5 a 4 % en peso;
g) un contenido en DHA de 0,5 a 3 % en peso, preferentemente 0,8 a 2,5 % en peso, en especial 1 a 2,5 % en peso, sobre todo 1,2 a 2,2 % en peso, en especial 1,2 a 2,0 % en peso.
Un producto de extrusión revestido con aceite obtenido según la invención presenta sobre todo todas las siguientes propiedades:
a) un contenido en proteína total de 30 a 60 % en peso, preferentemente 35 a 55 % en peso, en especial 40 a 50 % en peso;
b) un contenido en grasa total de 15 a 35 % en peso, preferentemente 18 a 32 % en peso, en especial 20 a 30 % en peso, sobre todo 22 a 28 % en peso;
c) un contenido en almidón total como máximo de 25 % en peso, en especial como máximo de 20 % en peso, preferentemente 5 a 15 % en peso, de modo especialmente preferente 7 a 13 % en peso; d) un contenido en biomasa de Aurantiochytrien, en especial biomasa de Aurantiochytrium limacinum, sobre todo biomasa de Aurantiochytrium limacinum SR21 según la invención, en especial una biomasa de Labyrinthulea, de 2 a 22 % en peso, preferentemente 4 a 20 % en peso, en especial 8 a 18 % en peso, sobre todo 10 a 16 % en peso;
e) un contenido en ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) de 2 a 12 % en peso, preferentemente 3 a 10 % en peso, en especial 4 a 9 % en peso, sobre todo 5 a 8 % en peso;
f) un contenido en ácidos grasos omega-3 de 1 a 6 % en peso, preferentemente 1,5 a 5 % en peso, en especial 2 a 4,5 % en peso, sobre todo 2,5 a 4 % en peso;
g) un contenido en DHA de 0,5 a 3 % en peso, preferentemente 0,8 a 2,5 % en peso, en especial 1 a 2,5 % en peso, sobre todo 1,2 a 2,2 % en peso, en especial 1,2 a 2,0 % en peso.
Según la invención, además de la biomasa a emplear según la invención, como componentes grasos se pueden emplear grasas, en especial aceites, de origen animal como también aquellos de origen vegetal. Según la invención, como componentes grasos entran en consideración en especial aceites vegetales, a modo de ejemplo aceite de habas de soja, aceite de semillas de colza, aceite de semillas de girasol, aceite de semillas de lino o aceite de palma, así como mezclas de estos. Además, en caso dado también se puede emplear aceite de pescado como componente graso en cantidades reducidas.
Un producto de extrusión revestido con aceite según la invención contiene preferentemente aceites vegetales en una cantidad de 3 a 18 % en peso, en especial 5 a 15 % en peso, sobre todo 7 a 13 % en peso. a este respecto, como se ha descrito anteriormente, el aceite vegetal se puede aplicar posteriormente sobre el producto de extrusión, en especial mediante revestimiento en vacío.
Según la invención, como componente que contiene proteínas se pueden emplear, a modo de ejemplo, proteína de soja, proteína de guisante, gluten de trigo o gluten de maíz, así como mezclas de estos.
A modo de ejemplo, como componente que contiene proteínas, que contiene adicionalmente grasas, se pueden emplear harina de pescado, harina de krill, harina de mejillón, harina de calamar o cáscaras de gamba. En lo sucesivo estas se reúnen bajo el concepto “harina marina”. En una forma de realización preferente, un pienso según la invención comprende harina marina, preferentemente harina de pescado, en una cantidad de 3 a 18 % en peso, en especial 5 a 15 % en peso, sobre todo 7 a 13 % en peso.
Como componente que contiene hidratos de carbono se pueden emplear, a modo de ejemplo, harina de trigo, harina de girasol o harina de soja, así como mezclas de estas.
Además de la capacidad de carga con aceite, un producto de extrusión según la invención también se distingue preferentemente por presentar una capacidad de abrasión muy elevada. Preferentemente, esta asciende al menos a 91 %, en especial al menos 92 o 93 %, de modo especialmente preferente al menos 94 %.
Según la invención, la determinación de la resistencia a la abrasión se efectúa del siguiente modo: el producto de extrusión desecado (con 4 mm de diámetro y 4 mm de longitud) se expuso a una carga mecánica bajo empleo de Holmen Pellet-Tester NHP100 (Borregaard Lignotech, Hull, UK). Antes de la realización del ensayo se tamizaron las muestras para eliminar partículas finas adheridas posiblemente. A continuación, se introdujeron las muestras elaboradas (100 g) en el Pellet-Tester bajo empleo de un tamiz filtrante de 2,5 mm. A continuación se transportaron los pellets con velocidad de aire elevada (aproximadamente 70 mbar) durante 30 segundos a través de un tubito con codos de tubo de ángulo recto. Los parámetros de ensayo se predeterminan según el aparato. A continuación se determinó la abrasión mediante pesada. La resistencia a la abrasión se indicó como PDI (Pellet Durabitily Index), definido como la cantidad de muestra que permanece en el tamiz filtrante en porcentaje tras realización del ensayo. Se realizó el ensayo respectivamente con tres muestras y a continuación se calculó el valor medio.
El producto de extrusión cargado con aceite se distingue preferentemente por que presenta una estabilidad en agua muy elevada. Esta asciende preferentemente al menos a 96 %, en especial al menos 97 %, de modo especialmente preferente al menos 98 %.
La estabilidad en agua se realizó con las muestras cargadas con aceite. El método se realizó esencialmente como se describe por Baeverfjord et al. (2006; Aquaculture 261,1335-1345) con pequeñas modificaciones. Se introdujeron muestras de 10 g de producto de extrusión (con una longitud y un diámetro de 4 mm respectivamente) en cestitas de infusión metálicas (Inox, Alemania) con un diámetro de 6,5 mm y una anchura de malla de 0,3 mm. A continuación, se introdujeron las cestitas de infusión en una cubeta de plástico con agua, de modo que las muestras se cubrieron con agua completamente. A continuación, se expuso la cubeta durante 30 minutos a una agitación vibratoria de 30 unidades de vibración por minuto bajo empleo del agitador multiorbital PSU-201 (Biosan, Lettland). Después se secaron las muestras cuidadosamente con papel secante y a continuación se pesaron antes y después de haberse sometido a un secado en horno a una temperatura de 105°C durante 24 horas. La estabilidad en agua se calculó como la diferencia del peso anhidro de la muestra antes y después de la incubación en agua y se indicó en porcentaje del peso anhidro de la muestra empleada antes de la incubación con agua. En el caso del producto alimenticio o pienso se trata preferentemente de un medio para el empleo en la acuicultura o de un alimento o pienso para empleo en la cría de aves, la cría de cerdos o la cría de reses. En el caso del pienso se puede tratar también de un pienso que se emplea para cultivar pequeños organismos, que se emplean en la acuicultura como pienso. En el caso de estos pequeños organismos se puede tratar, a modo de ejemplo, de nemátodos, crustáceos o rotíferos. El pienso se presenta preferentemente en forma de copos, en forma de bolas o en forma de comprimidos. Un pienso obtenible mediante extrusión tiene preferentemente un contenido en humedad de menos de 5 % en peso, de modo especialmente preferente de 0,2 a 4 % en peso.
El pienso para empleo en la acuicultura se emplea preferentemente para criar peces de aleta y crustáceos, que sirven preferentemente para la alimentación de personas. Entre estos cuentan en especial carpas, tilapias, bagres, atunes, salmones, truchas, baramundis, besugos, percas, bacalaos, langostinos, langostas, cigalas, gambas y cangrejos. De modo especialmente preferente, en el caso de los animales cultivados se trata de salmones. A este respecto, representan tipos de salmón preferentes el salmón del Atlántico, el salmón rojo, el salmón masu, el salmón real, el salmón keta, el salmón plateado, el salmón del Danubio, el salmón del Pacífico y el salmón rosado. Alternativamente, también se puede tratar de un pienso que sirve para la cría de peces que se elaboran a continuación para dar harina de pescado o aceite de pescado. A este respecto, en el caso de los peces se trata preferentemente de arenques, abadejos, menhaden, anchoas, capelanes o bacalaos. La harina de pescado o el aceite de pescado obtenido de este modo se puede emplear a su vez en la acuicultura para el cultivo de pescados comestibles, o bien crustáceos.
La acuicultura se puede efectuar en estanques, tanques, piscinas, o también en áreas limitadas en el mar o en lagos, a este respecto en especial en jaulas o rediles. El cultivo puede servir para criar el pescado comestible preparado, pero también se puede emplear para criar peces jóvenes, que se liberan a continuación para aumentar las existencias de peces salvajes.
En el caso de cría de salmón, en primer lugar, se efectúa preferentemente el cultivo hasta salmón joven en tanques de agua dulce o corrientes de agua artificiales, y a continuación la cría ulterior en el mar en jaulas o rediles flotantes, que están anclados preferentemente en bahías o fiordos.
Correspondientemente, otro objeto de la presente invención es también un procedimiento para la cría de animales, en especial peces de aleta o crustáceos, preferentemente salmones, en el que se emplea un pienso según la invención. Además, es otro objeto de la presente invención un animal, en especial un pez de aleta o un marisco, que es obtenible mediante tal procedimiento según la invención.
En el estado de la técnica se describen detalladamente procedimientos para la producción de biomasa, en especial de aquella biomasa que comprende lípidos, en especial células que contienen PUFAs, en especial de la
especie Thraustochytriales. Por regla general, la producción se efectúa de modo que se cultivan células en un termentador en presencia de una fuente de carbono y una fuente de nitrógeno. A este respecto se pueden obtener densidades de biomasa de más de 100 gramos por litro y tasas de producción de más de 0,5 gramo de lípido por litro por hora. El procedimiento se realiza preferentemente como el denominado procedimiento Fed-Batch, es decir, las fuentes de carbono y nitrógeno se alimentan incrementalmente durante la fermentación. La producción de lípidos se puede inducir una vez alcanzada la biomasa deseada mediante diferentes medidas, a modo de ejemplo mediante limitación de la fuente de nitrógeno, de la fuente de carbono o del contenido en oxígeno, o combinaciones de estas.
La fermentación de las células se efectúa preferentemente en un medio con baja salinidad, en especial para impedir la corrosión. Esto se puede conseguir empleándose sales sódicas exentas de cloro en lugar de cloruro sódico, como por ejemplo sulfato sódico, carbonato sódico, hidrogenocarbonato sódico o cenizas de sosa, como fuente de sodio. En la fermentación se emplea preferentemente cloro en cantidades de menos de 3 g/l, en especial menos de 500 mg/l, de modo especialmente preferente menos de 100 mg/l.
Como fuente de carbono entran en consideración fuentes de carbono tanto alcohólicas como también no alcohólicas. Son ejemplos de fuentes de carbono alcohólicas metanol, etanol e isopropanol. Son ejemplos de fuentes de carbono no alcohólicas fructosa, glucosa, sacarosa, melazas, almidón y sirope de maíz.
Como fuente de nitrógeno entran en consideración fuentes de nitrógeno tanto inorgánicas como también orgánicas. Son ejemplos de fuentes de nitrógeno inorgánicas nitratos y sales amónicas, en especial sulfato amónico e hidróxido amónico. Son ejemplos de fuentes de nitrógeno orgánicas aminoácidos, en especial glutamato, y urea.
Adicionalmente, también se pueden añadir al medio de fermentación compuestos de fósforo orgánicos y/o sustancias estimulantes del crecimiento conocidas, como por ejemplo extracto de levadura o agua de remojo de maíz, para influir positivamente sobre la fermentación.
Según la invención, la cantidad de sulfato añadido durante la fermentación se selecciona de modo que en la biomasa resultante se ajuste un contenido en sulfato de 25 a 60 g/kg, en especial 25 a 50, 25 a 40 o 25 a 35 g/kg. El ajuste del contenido en sulfato en la biomasa resultante se puede efectuar de diferentes maneras según la invención.
A modo de ejemplo, en un denominado procedimiento Batch, ya al comienzo se puede disponer completamente la cantidad de sulfato necesaria. La cantidad de sulfato requerido se puede calcular fácilmente, ya que las células empleadas para la formación de la biomasa asimilan casi completamente el sulfato.
En el caso de aplicación de un denominado procedimiento Fed-Batch, la cantidad de sulfato requerido se puede dosificar alternativamente en el transcurso de la fermentación, o se puede disponer correspondientemente una parte de sulfato y dosificar el resto en el transcurso de la fermentación.
En especial si en el transcurso de la fermentación se evidencia que la cantidad de biomasa producida supera el valor calculado originalmente, mediante dosificación posterior de sulfato se puede asegurar que la biomasa resultante contenga la cantidad preferente de sulfato.
Como sal de sulfato se emplea preferentemente sulfato sódico, sulfato amónico o sulfato de magnesio, así como mezclas de estos.
Durante la fermentación, el contenido en cloruro, respecto al medio de fermentación líquido incluyendo la biomasa contenida, siempre se sitúa preferentemente por debajo de 3 g/kg, en especial por debajo de 1 g/kg, de modo especialmente preferente por debajo de 400 mg/kg.
Además de sulfatos y cloruros, empleados en caso dado, en la fermentación también se pueden emplear otras sales en caso dado, en especial seleccionadas a partir de carbonato sódico, hidrogenocarbonato sódico, cenizas de sosa o compuestos de fósforo inorgánicos.
En tanto se empleen otras sales, estas se emplean preferentemente en una cantidad tal que cada una se presenta respectivamente en una cantidad siempre menor que 10 g/kg, en especial menor que 5 g/kg, de modo especialmente preferente menor que 3 g/kg en el medio de fermentación durante la fermentación, en relación con el medio de fermentación líquido incluyendo la biomasa contenida.
El contenido en sal total en el medio de fermentación incluyendo la biomasa contenida se sitúa preferentemente por debajo de 35 g/kg, en especial por debajo de 30 g/kg en el transcurso de la fermentación total. De modo
especialmente preferente, el contenido en sal total durante la fermentación total se sitúa entre 10 y 35 g/kg, en especial entre 12 y 30 g/kg, en relación con el medio de fermentación líquido incluyendo la biomasa contenida. Según la invención, el contenido en sulfato en el medio de fermentación incluyendo la biomasa contenida se sitúa siempre preferentemente entre 5 y 16 g/kg en el transcurso de la fermentación total.
Según la invención, se entiende por “contenido en sulfato” el contenido total en sulfato, es decir, el contenido en sulfato libre y enlazado, en especial enlazado orgánicamente. Se debe partir de que la mayor parte del sulfato contenido en la biomasa se presenta como componente de exopolisacáridos que participan en la formación de la pared celular de microorganismos.
Según la invención, la determinación del contenido en sulfato se efectúa mediante determinación del contenido en sulfato de la biomasa obtenida, ya que la mayor parte de azufre contenido en la biomasa se puede atribuir al sulfato contenido. El azufre que se puede atribuir a otras fuentes se debe despreciar debido a la cantidad de sulfato contenido. Por consiguiente, a partir de la cantidad de azufre determinado se puede determinar sin más la cantidad de sulfato contenido.
A este respecto, el contenido en azufre de la biomasa se determina mediante análisis elemental según la norma DIN EN ISO 11885. Para el análisis del contenido en azufre de la biomasa se disgregan alícuotas de muestra correspondientes antes del análisis, preferentemente con ácido nítrico y peróxido de hidrógeno, a 240°C bajo presión, para asegurar la libre accesibilidad del azufre contenido.
Por lo tanto, según la invención, para la producción del pienso se emplea preferentemente una biomasa que contiene PUFAs, que se distingue por que en esta se puede identificar un contenido en azufre de 8 a 20 g/kg, referido a la masa anhidra, mediante análisis elemental según la norma DIN EN ISO 11885. A este respecto, el contenido en azufre en la biomasa asciende preferentemente a 8 hasta 17 g/kg, en especial 8 a 14 g/kg, de modo especialmente preferente 8 a 12 g/kg, referido respectivamente a la masa anhidra.
El contenido en fósforo de las biomasas empleadas preferentemente según la invención, en relación con la masa anhidra, asciende de modo preferente a 1 hasta 6 g/kg, en especial 2 a 5 g/kg. Asimismo, el contenido en fósforo se determina preferentemente mediante análisis elemental según la norma DIN EN ISO 11885.
La fermentación de las células se efectúa preferentemente a un valor de pH de 3 a 11, en especial 4 a 10, así como preferentemente a una temperatura de al menos 20°C, en especial 20 a 40°C, de modo especialmente preferente al menos 30°C. Un procedimiento de fermentación típico dura hasta aproximadamente 100 horas. Según la invención, las células se fermentan preferentemente hasta una densidad de biomasa de al menos 50, 60 o 70 g/l, en especial al menos 80 o 90 g/l, de modo especialmente preferente 100 g/l. A este respecto, los datos se refieren al contenido en biomasa anhidra en relación con el volumen total del caldo de fermentación una vez concluida la fermentación. El contenido en biomasa anhidra se determina mediante filtración de la biomasa a partir del caldo de fermentación, subsiguiente lavado con agua, a continuación, secado completo -a modo de ejemplo en el microondas- y finalmente determinación del peso anhidro.
Una vez concluida la fermentación se efectúa la cosecha de la biomasa. Tras la cosecha de las células, o en caso dado también poco después de la cosecha de las células, se efectúa preferentemente una pasteurización de las células para matar las células y desactivar enzimas que podrían favorecer la degradación de lípidos. La pasteurización se efectúa preferentemente mediante calentamiento de la biomasa a una temperatura de 50 a 121 °C durante un tiempo de 5 a 60 minutos.
Asimismo, tras la cosecha de la biomasa, o en caso dado también poco antes de la cosecha de la biomasa, se efectúa preferentemente la adición de antioxidantes para proteger el material reutilizable ante degradación oxidativa. A este respecto, representan antioxidantes preferentes BHT, BHA, TBHA, etoxiquina, beta-caroteno, vitamina E y vitamina C. En tanto se emplee, el antioxidante se añade preferentemente en una cantidad de 0,01 a 2 % en peso.
En caso dado, antes del verdadero secado se separa ya una parte del medio de fermentación de la biomasa y se aumenta la proporción de producto sólido de este modo. Esto se puede efectuar en especial mediante centrifugado, flotación, filtración, en especial ultra- o microfiltración, decantación y/o evaporación de disolvente. A este respecto, la evaporación de disolvente se efectúa preferentemente bajo empleo de un evaporador de rotación, un evaporador de capa fina o evaporador molecular por gravedad en un proceso de una etapa o de varias etapas. Alternativamente, a modo de ejemplo también entra en consideración la ósmosis inversa para la concentración del caldo de fermentación.
En este primer paso opcional, pero realizado preferentemente, se efectúa de modo preferente una concentración del caldo de fermentación a un contenido en producto sólido de al menos 10 o 15 % en peso, preferentemente de al menos 20 o 25 % en peso, en especial 10 a 50 o 15 a 45 % en peso, de modo especialmente preferente 15 a 40 % en peso o 20 a 40 % en peso.
Es decir, la biomasa a secar en un procedimiento según la invención se presenta preferentemente en forma de una suspensión con la proporción de producto sólido indicada anteriormente, tratándose preferentemente de un caldo de fermentación o un caldo de fermentación concentrado en el caso de la suspensión.
Tras la concentración opcional del caldo de fermentación, ahora se efectúa el secado de la biomasa según la invención, preferentemente mediante secado por pulverización, en especial secado por pulverización en tobera, granulación por pulverización, granulación en lecho turbulento, en especial granulación en lecho fluidizado, o en un secador de tambor.
Alternativamente, la biomasa también se puede someter al paso de secado directamente tras la cosecha sin concentración previa, en especial si el caldo de fermentación obtenido presenta ya un contenido en producto sólido elevado, de modo preferente como se indica anteriormente.
Mediante el secado de la biomasa, esta se seca preferentemente a una humedad residual como máximo de 10 % en peso, en especial 0 a 10 % en peso, de modo especialmente preferente como máximo 8 % en peso, en especial 0,5 a 8 % en peso, sobre todo como máximo 6 o 5 % en peso, en especial 0,5 a 6 o 0,5 a 5 % en peso. Según la invención, correspondientemente, se debe entender por “masa anhidra” de modo preferente un producto que presente un contenido en humedad de menos de 10 % en peso, en especial menos de 5 % en peso.
Mediante el secado se obtiene preferentemente un producto suelto, finamente dividido o de grano grueso, preferentemente granulado. En caso dado, a partir del granulado obtenido se puede obtener un producto con el tamaño de grano deseado mediante tamizado o separación de polvo.
Siempre que se obtenga un polvo suelto finamente dividido, este se puede transformar, en caso dado mediante procedimientos de compactación o granulación apropiados, en un producto de grano grueso, convenientemente suelto, almacenable y sensiblemente no pulverulento.
En esta granulación o compactación subsiguiente se pueden utilizar, en caso dado, adyuvantes orgánicos o inorgánicos habituales, o bien soportes como almidón, gelatina, derivados de celulosa o sustancias similares, que se emplean habitualmente en la elaboración de productos alimenticios o piensos como agente aglutinante, gelificante o espesante.
Según la invención, se debe entender por “suelto” un polvo que puede fluir sin impedimento a partir de una serie de recipientes de derrame de vidrio con orificios de salida de diferente tamaño a partir del recipiente con el orificio de 5 milímetros (Klein: Seifen, Ole, Fette, Wachse 94, 12 (1968)).
Según la invención, se debe entender por “finamente dividido” un polvo con una proporción predominante (> 50 %) de un tamaño de grano de 20 a 100 micrómetros de diámetro.
Según la invención, se debe entender por “grano grueso” un polvo con una proporción predominante (> 50 %) de un tamaño de grano de 100 a 2500 micrómetros de diámetro.
Según la invención, se debe entender por “no pulverulento” un polvo que contiene únicamente proporciones reducidas (< 10 %, preferentemente < 5 %) de tamaños de grano por debajo de 100 micrómetros.
Según la invención, la determinación de tamaños de grano, o bien partícula, se efectúa preferentemente mediante métodos de espectrometría de difracción láser. Los métodos a aplicar se describen en el libro de texto "TeilchengróBenmessung in der Laborpraxis" de R.H. Müller y R. Schuhmann, Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft Stuttgart (1996), así como en el libro de texto "Introduction to Particle Technology" de M. Rhodes, editorial Wiley & Sons (1998). En tanto sean aplicables diferentes métodos, preferentemente se aplica el método aplicable citado en primer lugar del libro de texto de R.H. Müller y R. Schuhmann para la medición del tamaño de partícula.
Los productos obtenidos mediante procedimientos de secado poseen preferentemente una proporción de al menos 80 % en peso, en especial al menos 90 % en peso, de modo especialmente preferente al menos 95 % en peso de partículas con un tamaño de grano de 100 a 3500 micrómetros, preferentemente 100 a 3000 micrómetros, sobre todo 100 a 2500 micrómetros.
Ejemplos de realización
Ejemplo 1: producción de la biomasa mediante fermentación de Aurantiochytrium limacinum SR21 en medios con contenido en sulfato elevado y subsiguiente secado de la biomasa
El cultivo de las células se efectuó durante aproximadamente 75 horas en un procedimiento de alimentación bajo empleo de un fermentador de acero con un volumen de fermentador de 2 litros, con una masa inicial total de 712 g y una masa final total obtenida de 1,3-1,5 kg. Durante el procedimiento se dosificó una disolución de glucosa (570 g/kg de glucosa) ("procedimiento Fed-Batch")
La composición de los medios iniciales era la siguiente:
Medio 1: 20 g/kg de glucosa; 4 g/kg de extracto de levadura; 16 g/kg de sulfato sodico; 2 g/kg de sulfato amónico; 2,46 g/kg de sulfato de magnesio (heptahidrato); 0,45 g/kg de cloruro potásico; 4,5 g/kg de dihidrogenofosfato potásico; 0,1 g/kg de tiamina (HCl); 5 g/kg de disolución de oligoelementos.
La composición de la disolución de oligoelementos era la siguiente: 35 g/kg de ácido clorhídrico (37%); 1,86 g/kg de cloruro de manganeso (tetrahidrato); 1,82 g/kg de sulfato de zinc (heptahidrato); 0,818 g/kg de EDTA sódico; 0,29 g/kg de ácido bórico; 0,24 g/kg de molibdato sódico (dihidrato); 4,58 g/kg de cloruro de calcio (dihidrato); 17,33 g/kg de sulfato de hierro (heptahidrato); 0,15 g/kg de cloruro de cobre (dihidrato).
El cultivo se efectuó bajo las siguientes condiciones: temperatura de cultivo 28°C; tasa de ventilación 0,5 vvm, velocidad de agitación 600-1950 rpm, control del valor de pH en la fase de crecimiento a 4,5 con ayuda de agua amoniacal (25 % v/v). La fermentación se efectuó hasta una densidad de biomasa de 116 g/l.
Tras el cultivo se calentaron los caldos de fermentación durante 20 minutos a 60°C para suprimir una actividad ulterior de las células.
A continuación, se efectuó un secado de la biomasa en dos etapas: en primer lugar, se concentró el caldo de fermentación mediante evaporación a una masa anhidra de aproximadamente 20 % en peso. A continuación, se efectuó el secado por pulverización del caldo de fermentación concentrado bajo empleo de un Production Minor™ Spray Dryer (GEA NIRO) a una temperatura de entrada del aire de secado de 340°C. Mediante secado por pulverización se obtuvo de este modo un polvo con una masa anhidra de más de 95 % en peso.
Para la determinación del contenido en sulfato de la biomasa obtenida se determinó el contenido en azufre de la biomasa según la norma DIN ISO 11885. A tal efecto se disgregó una alícuota de biomasa en primer lugar con ácido nítrico y peróxido de hidrógeno a 240°C bajo presión. El contenido en azufre determinado se situaba en 11 g/kg de biomasa, lo que corresponde a un contenido en sulfato de 33 g/kg de biomasa.
Ejemplo 6: producción de un pienso mediante extrusión
Se produjeron las mezclas de piensos representadas en la Tabla 1. Además de la biomasa a emplear según la invención conforme al Ejemplo 1 se analizaron como comparación otras dos biomasas de Labyrinthulea disponibles en el mercado, así como aceite de pescado, como fuentes de ácidos grasos omega-3 aún habituales momentáneamente.
La producción de mezclas de piensos se efectuó respectivamente mediante mezclado de los componentes -con excepción de los aceites- bajo empleo de un mezclador de hélice doble (modelo 500L, TGC Extrusion, Francia). A continuación, se trituraron las mezclas obtenidas de este modo a tamaños de partícula por debajo de 250 gm bajo empleo de un molino de martillos (modelo SH1, Hosokawa-Alpine, Alemania).
Tabla 1: composiciones de pienso empleadas en la extrusión (datos en % en peso)
Para la extrusión se emplearon respectivamente 140 kg por pienso. La extrusión se realizó por medio de una extrusora de doble husillo (CLEXTrAl BC45) con un diámetro de husillo de 55,5 mm y una tasa de flujo máxima de 90-100 kg/h. Se extruyeron pellets con un tamaño de 4,0 mm. A tal efecto se equipó la extrusora con un cutter de alta velocidad, para transformar el producto en el tamaño de pellet previsto.
Ahora se analizaron diversos parámetros de extrusión para descubrir bajo qué condiciones de extrusión se puede obtener una capacidad de carga con aceite óptima del producto de extrusión obtenido. A este respecto se ha evidenciado sorprendentemente que se puede obtener una capacidad de carga con aceite óptima con un aporte de energía muy reducido. A este respecto, el aporte de energía era claramente menor que en el caso de empleo de aceite de pescado. Además, el aporte de energía óptimo en una biomasa con alto contenido en sulfato, a emplear preferentemente según la invención, era de nuevo claramente menor que en biomasas de Thraustochytriales comerciales. Los resultados se representan en la Tabla 2.
Tabla 2: aportes de energía para la producción de pellets con la capacidad de carga con aceite deseada
A este respecto, en el caso de la magnitud “SME” se trata de la energía mecánica específica. Esta se calcula de la siguiente manera:
con
U: tensión de trabajo del motor (en el presente caso 460 V)
I: intensidad de corriente del motor (A)
cos O: potencia teórica del motor de la extrusora (en el presente caso 0,95)
Test SS: velocidad de test (rpm) de los husillos rotativos
Max SS: velocidad máxima (267 rpm) de los husillos rotativos
Qs: tasa de flujo de entrada de la papilla de alimentación (kg/h)
Tras la extrusión se secó el producto de extrusión en un secador de lecho fluidizado vibratorio (modelo DR100, TGC Extrusion, Francia).
Finalmente, tras el enfriamiento del producto de extrusión se efectuó un revestimiento con aceite mediante revestimiento en vacío (Vakuumbeschichter PG-10VCLAB, Dinnisen, Países Bajos). A este respecto que se puede aplicar más de 0,35 g de aceite sobre 1 g de producto de extrusión.
Ejemplo 3: determinación de la resistencia a la abrasión y la estabilidad en agua
La resistencia a la abrasión se determinó de la siguiente manera: antes de la carga con aceite se expuso el producto de extrusión desecado a una carga mecánica bajo empleo de Holmen Pellet-Tester (Borregaard Lignotech, Hull, UK). Antes de la realización del ensayo se tamizaron las muestras para eliminar partículas finas adheridas posiblemente. A continuación, se introdujeron las muestras elaboradas (100 g) en el Pellet-Tester bajo empleo de un tamiz filtrante de 2,5 mm. A continuación se transportaron los pellets con velocidad de aire elevada durante 30 segundos a través de un tubito, que presentaba codos de tubo de ángulo recto. A continuación se determinó la abrasión mediante pesada. La resistencia a la abrasión se indicó como PDI (Pellet Durabitily Index), definido como la cantidad de muestra que permanece en el tamiz filtrante en porcentaje. Se realizó el ensayo respectivamente con tres muestras y a continuación se calculó el valor medio.
La estabilidad en agua se realizó con las muestras cargadas con aceite. El método se realizó esencialmente como se describe por Baeverfjord et al. (2006; Aquaculture 261,1335-1345) con pequeñas modificaciones. Se introdujeron muestras de 10 g en cestitas de infusión metálicas con una anchura de malla de 0,3 mm. A continuación, se introdujeron las cestitas de infusión en una cubeta de plástico con agua, de modo que las muestras se cubrieron con agua completamente. A continuación, se expuso la cubeta durante 30 minutos a una agitación vibratoria de 30 unidades de vibración por minuto. Después se secaron las muestras cuidadosamente con papel secante y a continuación se pesaron antes y después de haberse sometido a un secado en horno a una temperatura de 105°C durante 24 horas. La estabilidad en agua se calculó como la diferencia del peso anhidro de la muestra antes y después de la incubación en agua y se indicó en porcentaje del peso anhidro de la muestra empleada antes de la incubación con agua.
Los resultados se representan en la siguiente Tabla 3.
Se puede identificar que un pienso según la invención presenta una resistencia a la abrasión y una estabilidad en agua claramente más elevada que piensos que contienen una biomasa de Labyrinthulea disponible en el mercado o aceite de pescado como fuente de ácidos grasos omega-3.
Claims (13)
1. - Procedimiento para la producción de un pienso que contiene PUFAs, caracterizado por que se extruye una biomasa que contiene PUFAs del taxón Labyrinthulomycetes, que presenta un contenido en sulfato, referido a la masa anhidra, de 25 a 60 g/kg, con otros componentes del pienso en el caso de un aporte de energía de 12-28 Wh/kg, debiéndose entender por masa anhidra un producto con una humedad residual de menos de 5 % en peso, y determinándose el contenido en sulfato de la biomasa a través del contenido en azufre en la biomasa, y este a su vez según la norma DIN EN ISO 11885.
2. - Procedimiento según la reivindicación 1, caracterizado por que la extrusión se efectúa preferentemente con un aporte de energía de 14-26, en especial 16-24, de modo especialmente preferente 18-22 Wh/kg.
3. - Procedimiento según la reivindicación 1 o 2, caracterizado por que, en el caso de la biomasa que contiene PUFAs del taxón Labyrinthulomycetes, se trata preferentemente de aquella de la familia de Thraustochytriaceae, de modo especialmente preferente de las especies Thraustochytrium, Schizochytrium, Aurantiochytrium, Oblongichytrium o Ulkenia, sobre todo de una de la especie Aurantiochytrium.
4. - Procedimiento según la reivindicación 3, caracterizado por que, en el caso de la biomasa que contiene PUFAs, se trata de una de las especies Aurantiochytrium limacinum, en especial de la cepa Aurantiochytrium limacinum SR21.
5. - Procedimiento según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado por que la biomasa presenta un contenido en sulfato, referido a la masa anhidra, de 25 a 50 g/kg, preferentemente 25 a 40, sobre todo 25 a 35 g/kg.
6. - Procedimiento según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado por que la composición empleada en la extrusión presenta las siguientes propiedades:
a) un contenido en proteína total de 33 a 67 % en peso, preferentemente 39 a 61 % en peso, en especial 44 a 55 % en peso;
b) un contenido en grasa total de 5 a 25 % en peso, preferentemente 8 a 22 % en peso, en especial 10 a 20 % en peso, sobre todo 12 a 18 % en peso;
c) un contenido en almidón total como máximo de 25 % en peso, en especial como máximo de 20 % en peso, preferentemente 6 a 17 % en peso, de modo especialmente preferente 8 a 14 % en peso;
d) un contenido en biomasa de Labyrinthulomycetes, en especial biomasa de Thraustochytriaceae, de 2 a 24 % en peso, preferentemente 4 a 22 % en peso, en especial 9 a 20 % en peso, sobre todo 11 a 18 % en peso;
e) preferentemente un contenido en ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) de 0,8 a 8 % en peso, preferentemente 1,2 a 6 % en peso, en especial 1,4 a 5 % en peso, sobre todo 1,5 a 4 % en peso; f) preferentemente un contenido en ácidos grasos omega-3 de 0,8 a 8 % en peso, preferentemente 1,2 a 6 % en peso, en especial 1,4 a 5 % en peso, sobre todo 1,5 a 4 % en peso;
g) preferentemente un contenido en DHA de 0,1 a 4,0 % en peso, preferentemente 0,25 a 3,0 % en peso, en especial 0,5 a 2,8 % en peso, sobre todo 0,8 a 2,5 % en peso, en especial 1,0 a 2,0 % en peso.
7. - Procedimiento según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado por que, tras la extrusión y, en caso dado, secado del producto de extrusión, se efectúa un revestimiento del producto de extrusión con aceite, en especial aceite vegetal, preferentemente en una cantidad de 3 a 17 % en peso, en especial 5 a 15 % en peso.
8. - Producto de extrusión de pienso que contiene PUFAs, que comprende una biomasa que contiene PUFAs del taxón Labyrinthulomycetes, caracterizado por que la biomasa presenta un contenido en sulfato, referido a la masa anhidra, de 25 a 60 g/kg, y por que el producto de extrusión presenta una capacidad de carga con aceite de al menos 0,25 g de aceite por g de producto de extrusión, preferentemente al menos 0,30 g de aceite por g de producto de extrusión, de modo especialmente preferente al menos 0,35 g de aceite por g de producto de extrusión, debiéndose entender por masa anhidra un producto con una humedad residual de menos de 5 % en peso, y determinándose el contenido en sulfato de la biomasa a través del contenido en azufre en la biomasa, y este a su vez según la norma DIN EN ISO 11885.
9. - Producto de extrusión de pienso según la reivindicación precedente, caracterizado por que, en el caso de la biomasa que contiene PUFAs del taxón Labyrinthulomycetes, se trata de una biomasa de la familia de Thraustochytriaceae, de modo especialmente preferente de las especies Thraustochytrium, Schizochytrium, Aurantiochytrium, Oblongichytrium o Ulkenia, sobre todo de una de la especie Aurantiochytrium.
10. - Producto de extrusión de pienso según la reivindicación precedente, caracterizado por que, en el caso de la biomasa, se trata de una de las especies Aurantiochytrium limacinum, en especial de la cepa Aurantiochytrium limacinum SR21.
11. - Producto de extrusión de pienso según la reivindicación precedente, caracterizado por que la biomasa presenta un contenido en sulfato, referido a la masa anhidra, de 25-50 g/kg, preferentemente 25 a 40, sobre todo 25 a 35 g/kg.
12. - Producto de extrusión de pienso que contiene PUFAs según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado por que presenta las siguientes propiedades:
a) un contenido en proteína total de 30 a 60 % en peso, preferentemente 35 a 55 % en peso, en especial 40 a 50 % en peso;
b) un contenido en grasa total de 15 a 35 % en peso, preferentemente 18 a 32 % en peso, en especial 20 a 30 % en peso, sobre todo 22 a 28 % en peso;
c) un contenido en almidón total como máximo de 25 % en peso, en especial como máximo de 20 % en peso, preferentemente 5 a 15 % en peso, de modo especialmente preferente 7 a 13 % en peso;
d) un contenido en biomasa de Labyrinthulomycetes, preferentemente en biomasa de Thraustochytriaceae, de 2 a 22 % en peso, preferentemente 4 a 20 % en peso, en especial 8 a 18 % en peso, sobre todo 10 a 16 % en peso;
e) preferentemente un contenido en ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) de 2 a 12 % en peso, preferentemente 3 a 10 % en peso, en especial 4 a 9 % en peso, sobre todo 5 a 8 % en peso;
f) preferentemente un contenido en ácidos grasos omega-3 de 1 a 6 % en peso, preferentemente 1,5 a 5 % en peso, en especial 2 a 4,5 % en peso, sobre todo 2,5 a 4 % en peso;
g) preferentemente un contenido en DHA de 0,5 a 3 % en peso, preferentemente 0,8 a 2,5 % en peso, en especial 1 a 2,5 % en peso, sobre todo 1,2 a 2,2 % en peso, en especial 1,2 a 2,0 % en peso.
13. - Procedimiento para la cría de animales, en especial peces, en el que se emplea un producto de extrusión de pienso según una de las reivindicaciones precedentes.
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