KR20210069641A - IL-12 이종이량체 Fc-융합 단백질 - Google Patents
IL-12 이종이량체 Fc-융합 단백질 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20210069641A KR20210069641A KR1020217009578A KR20217009578A KR20210069641A KR 20210069641 A KR20210069641 A KR 20210069641A KR 1020217009578 A KR1020217009578 A KR 1020217009578A KR 20217009578 A KR20217009578 A KR 20217009578A KR 20210069641 A KR20210069641 A KR 20210069641A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- seq
- xxx
- subunit
- domain
- fusion protein
- Prior art date
Links
- 108091006020 Fc-tagged proteins Proteins 0.000 title claims abstract description 287
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 title claims abstract description 66
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 title claims abstract description 66
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 155
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 17
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 14
- 102220427257 c.295A>G Human genes 0.000 claims description 907
- 102220497101 5-hydroxytryptamine receptor 3B_E59Q_mutation Human genes 0.000 claims description 341
- 102200016928 c.100G>A Human genes 0.000 claims description 157
- 102220636114 Zinc finger and BTB domain-containing protein 34_E45R_mutation Human genes 0.000 claims description 139
- 102220146061 rs758345818 Human genes 0.000 claims description 111
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 101
- 102220141180 rs138690324 Human genes 0.000 claims description 101
- 102200040232 rs672601337 Human genes 0.000 claims description 101
- 102220538874 SUMO-conjugating enzyme UBC9_N85Q_mutation Human genes 0.000 claims description 100
- 102220583989 Solute carrier family 22 member 3_N71Q_mutation Human genes 0.000 claims description 100
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 100
- 102220366446 c.94G>C Human genes 0.000 claims description 81
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 claims description 79
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 64
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 64
- 102220633124 Mu-type opioid receptor_D55Q_mutation Human genes 0.000 claims description 63
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 62
- 102100020790 Interleukin-12 receptor subunit beta-1 Human genes 0.000 claims description 53
- 101710103841 Interleukin-12 receptor subunit beta-1 Proteins 0.000 claims description 53
- 102100020792 Interleukin-12 receptor subunit beta-2 Human genes 0.000 claims description 53
- 101710103840 Interleukin-12 receptor subunit beta-2 Proteins 0.000 claims description 53
- 102220277192 rs1223476490 Human genes 0.000 claims description 50
- 102220342246 rs1555417328 Human genes 0.000 claims description 50
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 49
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 46
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 46
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 46
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 46
- 102220536254 Keratin-associated protein 10-2_D34K_mutation Human genes 0.000 claims description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 33
- 102220476361 Mis18-binding protein 1_E32K_mutation Human genes 0.000 claims description 27
- 102200074432 rs104894779 Human genes 0.000 claims description 27
- 102200009417 rs121908117 Human genes 0.000 claims description 27
- 102220175027 rs141998504 Human genes 0.000 claims description 27
- 102200060693 rs142232675 Human genes 0.000 claims description 27
- 102220201061 rs780136497 Human genes 0.000 claims description 27
- 102220022307 rs80357066 Human genes 0.000 claims description 27
- 102000004560 Interleukin-12 Receptors Human genes 0.000 claims description 26
- 108010017515 Interleukin-12 Receptors Proteins 0.000 claims description 26
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 26
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 26
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 26
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 26
- 102220504672 Activin receptor type-1B_L75A_mutation Human genes 0.000 claims description 25
- 102220543358 Glucagon-like peptide 1 receptor_L89A_mutation Human genes 0.000 claims description 25
- 102220480707 Metabotropic glutamate receptor 3_F96A_mutation Human genes 0.000 claims description 25
- 102220609894 Vasoactive intestinal polypeptide receptor 1_D55K_mutation Human genes 0.000 claims description 25
- 102200038988 rs17313469 Human genes 0.000 claims description 25
- 102200025035 rs786203989 Human genes 0.000 claims description 25
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 24
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 23
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 23
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 claims description 21
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 claims description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 20
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 13
- 102100028344 Mis18-binding protein 1 Human genes 0.000 claims description 12
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 claims description 12
- 239000004311 natamycin Substances 0.000 claims description 12
- 239000004306 orthophenyl phenol Substances 0.000 claims description 12
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 12
- 239000004173 sunset yellow FCF Substances 0.000 claims description 12
- 239000001648 tannin Substances 0.000 claims description 12
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 11
- 239000004214 Fast Green FCF Substances 0.000 claims description 11
- -1 K158 Substances 0.000 claims description 11
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 claims description 11
- 239000001654 beetroot red Substances 0.000 claims description 11
- 239000004108 vegetable carbon Substances 0.000 claims description 11
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 10
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims description 10
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 10
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims description 4
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 claims description 2
- 102200034161 rs2305659 Human genes 0.000 claims 664
- 102220171385 rs143973840 Human genes 0.000 claims 95
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims 36
- 102200044418 rs1114167491 Human genes 0.000 claims 19
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims 7
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims 4
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 claims 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 claims 3
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 claims 2
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 claims 2
- 229960003852 atezolizumab Drugs 0.000 claims 2
- 229950002916 avelumab Drugs 0.000 claims 2
- 229950009791 durvalumab Drugs 0.000 claims 2
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 claims 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 2
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 claims 2
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 claims 2
- 229950010773 pidilizumab Drugs 0.000 claims 2
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims 1
- 230000005746 immune checkpoint blockade Effects 0.000 abstract 1
- 102220350264 c.175G>A Human genes 0.000 description 283
- 102220565496 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL3_Q56E_mutation Human genes 0.000 description 44
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 38
- 102220315609 rs1553628365 Human genes 0.000 description 8
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 7
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 206010050513 Metastatic renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/5434—IL-12
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
- A61K38/208—IL-12
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
- A61K47/6813—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin the drug being a peptidic cytokine, e.g. an interleukin or interferon
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
본 발명은 신규한 IL-12 Fc 융합 단백질, 이의 제조 방법 및 이의 사용 방법을 제공한다. IL-12 Fc 융합 단백질은 암의 치료에 유용하며, 체크포인트 차단과 조합으로 사용될 수 있다.
Description
관련 출원의 교차 참조
본 출원은 2018년 10월 3일자 출원된 미국 가출원 제62/740,813호, 2019년 2월 25일자 출원된 미국 가출원 제62/810,038호 및 2019년 5월 15일자 출원된 미국 가출원 제62/848,512호를 우선권 주장하며, 상기 문헌들은 모두 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다.
T세포가 효과적인 항종양 반응을 일으키기 위해서는, 다음 3가지가 일어나야 한다. T세포는 먼저 종양 환경에서 MHC에 의해 제시되는 항원성 종양 펩타이드와 결합해야 한다. 두 번째는, 공동자극 분자가 T세포와 결합해야 한다. 세 번째는, T세포는 분화 및 확장을 가능하게 하는 IFNγ와 같은 공동자극 사이토카인을 생성하기 위해, IL-12 및 IL-2와 같은 사이토카인에 의해 유도되어야 한다. 사이토카인 유도의 부재 하에서 종양 펩타이드만 단독으로 인식하면, T세포는 무력하게 되어, 내성이 생기게 된다. 따라서, 암 면역요법에서 매우 유망한 접근법은 사이토카인 기반 치료이다. 사실, IL-2는 전이성 신세포암종 및 악성 흑색종을 앓고 있는 환자에서의 사용이 승인되었다. 하지만, 현재 인간에서 재조합 IL-12의 승인된 용도는 없다.
재조합 IL-12는 면역계를 활성화시키는 광범위한 효과로 인해 유망한 사이토카인 기반 치료이다. 하지만, IL-12는 독성으로 인해 지금까지 인간 임상 시험에서 난관에 직면해 있다. 다른 사이토카인과 마찬가지로, IL-12의 짧은 반감기는 빈번한 볼루스 주사를 필요로 한다.
또한, IL-12는 생물학적으로 활성인 IL-12 이종이량체를 형성하기 위해 공유결합으로 연결된 α-사슬(p35 서브유닛; IL-12p35)과 β-사슬(p40 서브유닛; IL-12p40)로 구성된다. IL-12는, T세포에서 IL-12 수용체 β1(IL-12Rβ1)과 IL-12 수용체 β2(IL-12Rβ2)로 구성된 이량체 IL-12 수용체 복합체에 결합하여 IFNγ 분비를 유도하는 방식으로, 결합을 통해 이의 세포 신호전달 기능을 발휘한다. 하지만, IL-12p40 서브유닛은 IL-12 수용체에의 결합에 대해 경쟁하여 IL-12 활성을 길항하는 것으로 보고되어 있는 동종이량체로도 존재할 수 있다.
본 발명은 신규한 IL-12-Fc 융합 단백질뿐 아니라, 역가가 감소된 신규한 IL-12 변이체를 제공하여 IL-12의 짧은 반감기를 문제를 해결한다.
하나의 양태에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질로서, a) 변이형 IL-12p40 서브유닛 도메인과 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 융합 단백질(여기서, 상기 IL-12p40 서브유닛 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 N-말단에 공유결합으로 부착됨); 및 b) IL-12p35 서브유닛 도메인과 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 융합 단백질(여기서, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인은 상기 Fc 도메인의 N-말단에 공유결합으로 부착됨)을 포함하며; 여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 변이형 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열과 적어도 90% 동일성을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 변이형 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 변이형 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 변이형 IL-12p40 서브유닛 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되고/되거나, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 Fc 도메인에 부착되는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 하기 a) 및 b)를 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다:
a) i) 서열번호 47(XenP27201 사슬 1), ii) 서열번호 85(XenD24752), iii) 서열번호 86(XenD24753), iv) 서열번호 87(XenD24754), v) 서열번호 88(XenD24755), vi) 서열번호 89(XenD24756), vii) 서열번호 90(XenD24757), viii) 서열번호 91(XenD24758), ix) 서열번호 92(XenD24759), x) 서열번호 93(XenD24760), xi) 서열번호 94(XenD24761), xii) 서열번호 95(XenD24762), xiii) 서열번호 96(XenD24763), xiv) 서열번호 97(XenD24764), xv) 서열번호 98(XenD24765), xvi) 서열번호 99(XenD24766), xvii) 서열번호 100(XenD24767), xviii) 서열번호 101(XenD24768), xix) 서열번호 102(XenD24769), xx) 서열번호 103(XenD24770), xxi) 서열번호 104(XenD24771), xxii) 서열번호 105(XenD24772), xxiii) 서열번호 106(XenD24773), xxiv) 서열번호 107(XenD24774), xxv) 서열번호 108(XenD24775), xxvi) 서열번호 109(XenD24776), xxvii) 서열번호 110(XenD24777), xxviii) 서열번호 111(XenD24778), xxix) 서열번호 112(XenD24792), xxx) 서열번호 215(XenD25922), xxxi) 서열번호 216(XenD25923), xxxii) 서열번호 217(XenD25924), xxxiii) 서열번호 218(XenD25925), xxxiv) 서열번호 219(XenD25926), xxxv) 서열번호 220(XenD25927), xxxvi) 서열번호 221(XenD25928), xxxvii) 서열번호 222(XenD25929), xxxviii) 서열번호 223(XenD25930), xxxix) 서열번호 224(XenD25931), xl) 서열번호 XXX(XenD26411), xli) 서열번호 XXX(XenD26412), xlii) 서열번호 XXX(XenD26413), xliii) 서열번호 XXX(XenD26414), xliv) 서열번호 XXX(XenD26415), xlv) 서열번호 XXX(XenD26416), xlvi) 서열번호 XXX(XenD26417), xlvii) 서열번호 XXX(XenD26418), xlviii) 서열번호 XXX(XenD27070), xlix) 서열번호 XXX(XenD27071), l) 서열번호 XXX(XenD27072), li) 서열번호 XXX(XenD27073), lii) 서열번호 XXX(XenD27074), liii) 서열번호 XXX(XenD27075), liv) 서열번호 XXX(XenD27076), lv) 서열번호 XXX(XenD27077), lvi) 서열번호 XXX(XenD27078), lvii) 서열번호 XXX(XenD28173), lviii) 서열번호 XXX(XenD24876), lix) 서열번호 XXX(XenD27162), lx) 서열번호 XXX(XenD27163), lxi) 서열번호 XXX(XenD27164), lxii) 서열번호 XXX(XenD27165) lxiii) 서열번호 XXX(XenP31582 사슬 1), lxiv) 서열번호 XXX(XenP31583 사슬 1), lxv) 서열번호 XXX(XenP31584 사슬 1), lxvi) 서열번호 XXX(XenP32187 사슬 1), lxvii) 서열번호 XXX(XenP32188 사슬 1), lxviii) 서열번호 XXX(XenP32189, 사슬 1), lxix) 서열번호 XXX(XenP32190 사슬 1), lxx) 서열번호 XXX(XenP32191 사슬 1), lxxi) 서열번호 XXX(XenP32991 사슬 1), lxxii) 서열번호 XXX(XenP32992 사슬 1), lxxiii) 서열번호 XXX(XenP32993 사슬 1), lxxiv) 서열번호 XXX(XenP32994 사슬 1), lxxv) 서열번호 XXX(XenP32995 사슬 1), lxxvi) 서열번호 XXX(XenP32996 사슬 1), lxxvi) 서열번호 XXX(XenP32997 사슬 1), lxxvii) 서열번호 XXX(XenP32998 사슬 1), lxxvii) 서열번호 XXX(XenP32999 사슬 1), lxxviii) 서열번호 XXX(XenP33000 사슬 1), lxxix) 서열번호 XXX(XenP33001 사슬 1), lxxx) 서열번호 XXX(XenP33002 사슬 1), lxxxi) 서열번호 XXX(XenP33003 사슬 1), lxxxii) 서열번호 XXX(XenP33004 사슬 1), lxxxiii) 서열번호 XXX(XenP33005 사슬 1), lxxxiv) 서열번호 XXX(XenP33006 사슬 1), lxxxv) 서열번호 XXX(XenP33007 사슬 1), lxxxvi) 서열번호 XXX(XenP33008 사슬 1), lxxxvii) 서열번호 XXX(XenP33008 사슬 1), lxxxviii) 서열번호 XXX(XenP33009 사슬 1), lxxxix) 서열번호 XXX(XenP33010 사슬 1) 및 xc) 서열번호 XXX(XenP33011 사슬 1)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제1 융합 단백질; 및
b) i) 서열번호 48(XenP27201 사슬 2), ii) 서열번호 126(XenD24779), iii) 서열번호 127(XenD24780), iv) 서열번호 128(XenD24781), v) 서열번호 129(XenD24782), vi) 서열번호 130(XenD24783), vii) 서열번호 131(XenD24784), viii) 서열번호 132(XenD24785), ix) 서열번호 133(XenD24786), x) 서열번호 134(XenD24787), xi) 서열번호 135(XenD24788), xii) 서열번호 136(XenD24789), xiii) 서열번호 137(XenD24790), xiv) 서열번호 138(XenD24791), xv) 서열번호 236(XenD25911), xvi) 서열번호 237(XenD25912), xvii) 서열번호 238(XenD25913), xviii) 서열번호 239(XenD25914), xix) 서열번호 240(XenD25915), xx) 서열번호 241(XenD25916), xxi) 서열번호 242(XenD25917), xxii) 서열번호 243(XenD25918), xxiii) 서열번호 244(XenD25919), xxiv) 서열번호 245(XenD25920), xxv) 서열번호 246(XenD25921), xxvi) 서열번호 XXX(XenD26427), xxvii) 서열번호 XXX(XenD26428), xxviii) 서열번호 XXX(XenD27089), xxix) 서열번호 XXX(XenD27090), xxx) 서열번호 XXX(XenD27091), xxxi) 서열번호 XXX(XenD27092), xxxii) 서열번호 XXX(XenD27093), xxxiii) 서열번호 XXX(XenD27094), xxxix) 서열번호 XXX(XenD24877), xl) 서열번호 XXX(XenD27166), xli) 서열번호 XXX(XenP31582 사슬 2), xlii) 서열번호 XXX(XenP31583 사슬 2), xliii) 서열번호 XXX(XenP31584 사슬 2), xliv) 서열번호 XXX(XenP32187 사슬 2), xlv) 서열번호 XXX(XenP32188 사슬 2), xlvi) 서열번호 XXX(XenP32189, 사슬 2), xlvii) 서열번호 XXX(XenP32190 사슬 2), xlviii) 서열번호 XXX(XenP32191 사슬 2), xlix) 서열번호 XXX(XenP32991 사슬 2), l) 서열번호 XXX(XenP32992 사슬 2), li) 서열번호 XXX(XenP32993 사슬 2), lii) 서열번호 XXX(XenP32994 사슬 2), liii) 서열번호 XXX(XenP32995 사슬 2), liv) 서열번호 XXX(XenP32996 사슬 2), lv) 서열번호 XXX(XenP32997 사슬 2), lvi) 서열번호 XXX(XenP32998 사슬 2), lvii) 서열번호 XXX(XenP32999 사슬 2), lviii) 서열번호 XXX(XenP33000 사슬 2), lix) 서열번호 XXX(XenP33001 사슬 2), lx) 서열번호 XXX(XenP33002 사슬 2), lxi) 서열번호 XXX(XenP33003 사슬 2), lxii) 서열번호 XXX(XenP33004 사슬 2), lxiii) 서열번호 XXX(XenP33005 사슬 2), lxiv) 서열번호 XXX(XenP33006 사슬 2), lxv) 서열번호 XXX(XenP33007 사슬 2), lxvi) 서열번호 XXX(XenP33008 사슬 2), lxvii) 서열번호 XXX(XenP33008 사슬 2), lxviii) 서열번호 XXX(XenP33009 사슬 2), lxix) 서열번호 XXX(XenP33010 사슬 2) 및 lxx) 서열번호 XXX(XenP33011 사슬 2)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제2 융합 단백질.
일부 구현예에서, 본 발명은 XENP27201, XENP28820, XENP28821, XENP28822, XENP28823, XENP28824, XENP28825, XENP28826, XENP28827, XENP28828, XENP28829, XENP28830, XENP28831, XENP28832, XENP28833, XENP28834, XENP28835, XENP28836, XENP28837, XENP28838, XENP28839, XENP28840, XENP28841, XENP28842, XENP28843, XENP28844, XENP28845, XENP28846, XENP28847, XENP28848, XENP28849, XENP28850, XENP28851, XENP28852, XENP29949, XENP29950, XENP29951, XENP29952, XENP30597, XENP30598, XENP30599, XENP30600, XENP30601, XENP30602, XENP30603, XENP30604, XENP30605, XENP30606, XENP30307, XENP30308, XENP30609, XENP31250, XENP31251, XENP31252, XENP31253, XENP31254, XENP31255, XENP31256, XENP31257, XENP31258, XENP31259, XENP31260, XENP31261, XENP31262, XENP31263, XENP31264, XENP31265, XENP31286, XENP31142, XENP31143, XENP31144, XENP31145, XENP31146, XENP31582, XENP31583, XENP31584, XENP32186, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190, XENP32191, XENP32991, XENP32992, XENP32993, XENP32994, XENP32995, XENP32996, XENP32997, XENP32998, XENP32999, XENP33000, XENP33001, XENP33002, XENP33003, XENP33004, XENP33005, XENP33006, XENP33007, XENP33008, XENP33008, XENP33009, XENP33010 및 XENP33011로 이루어지는 군에서 선택되는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 XENP31251, XENP31254, XENP31258, XENP32186, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190 및 XENP32191로 이루어지는 군에서 선택되는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 N103Q, N113Q, N200Q 및 N281Q로 이루어지는 군에서 선택되는 IL-12p40 서브유닛에 대한 하나 이상의 변형을 추가로 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질로서, a) 제1 단백질 도메인과 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 C-말단에 공유결합으로 부착됨); 및 b) 제2 단백질 도메인과 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 융합 단백질(여기서, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 Fc 도메인의 C-말단에 공유결합으로 부착됨)을 포함하며, 여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드(bridging disulfide)를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 Fc 도메인에 부착되는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 a) 서열번호 49(XENP27202 사슬 1)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제1 융합 단백질; 및 b) 서열번호 50(XENP27202 사슬 2)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제2 융합 단백질을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 XENP27202인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질로서, a) 제1 단백질 도메인, 제2 단백질 도메인 및 제1 Fc 도메인을 포함하는 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제2 단백질 도메인에 공유결합으로 부착되고, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 N-말단에 공유결합으로 부착됨); 및 b) 제2 Fc 도메인을 포함하며, 여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 단백질 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, Q256, K158, C252, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 a) 서열번호 51(XENP27203 사슬 1)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 융합 단백질; 및 b) 서열번호 52(XENP27203 사슬 2)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제2 Fc 도메인을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 XENP27203인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 XENP31290인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질로서, a) 제1 단백질 도메인, 제2 단백질 도메인 및 제1 Fc 도메인을 포함하는 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제2 단백질 도메인에 공유결합으로 부착되고, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 N-말단에 공유결합으로 부착됨); 및 b) 제2 Fc 도메인을 포함하며, 여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 단백질 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열) 및/또는 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 a) 서열번호 53(XENP27204 사슬 1)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 융합 단백질; 및 b) 서열번호 54(XENP27204 사슬 2)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제2 Fc 도메인을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 XENP27204인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질로서, a) 제1 단백질 도메인, 제2 단백질 도메인 및 제1 Fc 도메인을 포함하는 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 C-말단에 부착되고, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 제1 단백질 도메인에 공유결합으로 부착됨); 및 b) 제2 Fc 도메인을 포함하며, 여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 단백질 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질로서, a) 제1 단백질 도메인, 제2 단백질 도메인 및 제1 Fc 도메인을 포함하는 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 C-말단에 부착되고, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 제1 단백질 도메인에 공유결합으로 부착됨); 및 b) 제2 Fc 도메인을 포함하며, 여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 단백질 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 a) IL-12p40 서브유닛; 및 b) IL-12p35 서브유닛을 포함하는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 도메인 링커를 사용하여 상기 IL-12p35 서브유닛에 공유결합으로 부착되는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 이종이량체 복합체를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 이종이량체 복합체를 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 복합체를 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 복합체를 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 복합체를 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 이종이량체 복합체가 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 이종이량체 복합체를 정제하는 방법으로서, a) 이종이량체 복합체를 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 이종이량체 복합체를 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, Q256, C252, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 변이형 IL-12p40 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 변이형 IL-12p40 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 변이형 IL-12p40 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 변이형 IL-12p40 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 변이형 IL-12p40 서브유닛을 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 변이형 IL-12p40 서브유닛을 인코딩하는 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 변이형 IL-12p40 서브유닛을 인코딩하는 상기 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 변이형 IL-12p40 서브유닛을 제조하는 방법으로서, 제H8항에 따른 숙주세포를 상기 변이형 IL-12p40 서브유닛이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 변이형 IL-12p35 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 변이형 IL-12p35 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 변이형 IL-12p35 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 아미노산 치환 N71D/N85D/N195D를 갖는 변이형 IL-12p35 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 변이형 IL-12p35 서브유닛을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 변이형 IL-12p35 서브유닛을 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 변이형 IL-12p35 서브유닛을 인코딩하는 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 변이형 IL-12p35 서브유닛을 인코딩하는 상기 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 변이형 IL-12p35 서브유닛을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 변이형 IL-12p35 서브유닛이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 이종이량체 단백질로서, a) 제1 Fc 도메인에 공유결합으로 부착된 IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는 제1 융합 단백질; 및 b) 제2 Fc 도메인에 공유결합으로 부착된 IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는 제2 융합 단백질을 포함하며, 여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; 및 T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛 도메인이 상기 제1 Fc 도메인의 N-말단에 부착되고, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인이 상기 제2 Fc 도메인의 N-말단에 부착되는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛 도메인이 상기 제1 Fc 도메인의 C-말단에 부착되고, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인이 상기 제2 Fc 도메인의 C-말단에 부착되는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Il-12p40 서브유닛 도메인이 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되고, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인이 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 Fc 도메인에 부착되는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 IgG1 힌지-CH2-CH3을 포함하는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛 도메인-도메인 링커-힌지-CH2-CH3을 포함하고, 상기 제2 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p35 서브유닛 도메인-도메인 링커-힌지-CH2-CH3을 포함하는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, 힌지-CH2-CH3-도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하고, 상기 제2 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, 힌지-CH2-CH3-도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 서열을 갖는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 서열을 갖는 이종이량체 단백질을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 이종이량체 단백질로서, a) 제1 Fc 도메인; 및 b) 융합 단백질을 포함하며, 여기서 상기 융합 단백질은 i) 제2 Fc 도메인; ii) IL-12p40 서브유닛 도메인; 및 iii) IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하고, 여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; 및 T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트를 갖는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛 도메인-도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-도메인 링커-힌지-CH2-CH3을 포함하는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p35 서브유닛 도메인-도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-도메인 링커-힌지-CH2-CH3을 포함하는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, 힌지-CH2-CH3-도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, 힌지-CH2-CH3-도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 서열을 갖는 이종이량체 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 서열을 갖는 이종이량체 단백질을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛 도메인-선택적 제1 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-선택적 제2 도메인 링커-Fc 도메인을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 도메인 링커와 상기 제2 도메인 링커가 동일한 아미노산 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 XX(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)와 서열번호 XX(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 XX(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)와 서열번호 XX(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이 각각 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252S, Q256, K158, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31289인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31291인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p35 서브유닛 도메인-선택적 제1 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-선택적 제2 도메인 링커-Fc 도메인을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 도메인 링커와 상기 제2 도메인 링커가 동일한 아미노산 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이 각각 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252S, Q256, K158, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31289인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31291인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-선택적 제1 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-선택적 제2 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 도메인 링커와 상기 제2 도메인 링커가 동일한 아미노산 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이 각각 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252S, Q256, K158, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31289인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31291인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-선택적 제1 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-선택적 제2 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 도메인 링커와 상기 제2 도메인 링커가 동일한 아미노산 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이 각각 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252S, Q256, K158, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31289인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31291인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛 도메인-제1 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-제2 도메인 링커-Fc 도메인을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 도메인 링커와 상기 제2 도메인 링커가 동일한 아미노산 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이 각각 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252S, Q256, K158, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31289인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31291인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p35 서브유닛 도메인-제1 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-제2 도메인 링커-Fc 도메인을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 도메인 링커와 상기 제2 도메인 링커가 동일한 아미노산 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이 각각 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252S, Q256, K158, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31289인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31291인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-제1 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-제2 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 도메인 링커와 상기 제2 도메인 링커가 동일한 아미노산 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이 각각 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252S, Q256, K158, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31289인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31291인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-제1 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-제2 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 도메인 링커와 상기 제2 도메인 링커가 동일한 아미노산 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 Fc 도메인이 각각 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252S, Q256, K158, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31289인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31291인 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포를 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법으로서, 숙주세포를 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서, a) 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계; b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및 c) 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법으로서, 치료적 유효량의 이전 청구항 중 어느 하나에 따른 이종이량체 또는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 치료적 유효량의 체크포인트 차단 항체를 투여하는 것을 추가로 포함하는, 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 추가의 구현예에서, 본 발명은 상기 체크포인트 차단 항체가 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, 항-TIM3 항체, 항-TIGIT 항체, 항-LAG3 항체 및 항-CTLA-4 항체에서 선택되는, 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 추가의 구현예에서, 본 발명은 상기 항-PD-1 항체가 니볼루맙(nivolumab), 펨브롤리주맙(pembrolizumab) 또는 피딜리주맙(pidilizumab)인, 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 추가의 구현예에서, 본 발명은 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙(atezolizumab), 아벨루맙(avelumab) 또는 두르발루맙(durvalumab)인, 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 추가의 구현예에서, 본 발명은 상기 환자가 투여 후 림프구의 증가를 나타내는, 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 추가의 구현예에서, 본 발명은 상기 환자가 투여 후 말초 CD8+ T세포의 증가를 나타내는, 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12 Fc 융합 단백질이 치료 전 체크포인트 발현을 증가시키기 위해 체크포인트 저해제 전에 투여되는, 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12 Fc 융합 단백질이 치료 전 체크포인트 발현을 증가시키기 위해 체크포인트 저해제 전에 투여되는, 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 T세포 확장을 필요로 하는 환자에서 T세포 확장을 유도하는 방법으로서, 치료적 유효량의 이전 청구항 중 어느 하나에 따른 이종이량체 또는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하는 T세포 확장을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 추가의 구현예에서, 본 발명은 치료적 유효량의 체크포인트 차단 항체를 투여하는 것을 추가로 포함하는, T세포 확장을 필요로 하는 환자에서 T세포 확장을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 추가의 구현예에서, 본 발명은 상기 체크포인트 차단 항체가 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, 항-TIM3 항체, 항-TIGIT 항체, 항-LAG3 항체 및 항-CTLA-4 항체에서 선택되는, T세포 확장을 필요로 하는 환자에서 T세포 확장을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 추가의 구현예에서, 본 발명은 상기 항-PD-1 항체가 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 피딜리주맙인, T세포 확장을 필요로 하는 환자에서 T세포 확장을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 다른 추가의 구현예에서, 본 발명은 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙, 아벨루맙 또는 두르발루맙인, T세포 확장을 필요로 하는 환자에서 T세포 확장을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 추가의 구현예에서, 본 발명은 상기 T세포 확장이 T세포의 적어도 2배 증가인, T세포 확장을 필요로 하는 환자에서 T세포 확장을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12 Fc 융합 단백질이 치료 전 체크포인트 발현을 증가시키기 위해 체크포인트 저해제 전에 투여되는, T세포 확장을 필요로 하는 환자에서 T세포 확장을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 상기 IL-12 Fc 융합 단백질이 치료 전 체크포인트 발현을 증가시키기 위해 체크포인트 저해제 전에 투여되는, T세포 확장을 필요로 하는 환자에서 T세포 확장을 유도하는 방법을 제공한다.
하나의 양태에서, 본 발명은 IL-12p40 서브유닛을 제공한다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 IL-12p35 서브유닛을 제공한다. 추가의 양태에서, 본 발명은 a) IL-12p40 서브유닛; 및 b) IL-12p35 서브유닛을 포함하는 이종이량체 복합체를 제공한다.
도 1a 및 도 1b는, IL-12 및 이의 수용체의 서열을 도시한 것이다.
도 2a 내지 도 2e는, 유용한 Fc 이종이량체화 변이체 세트(비대칭 변이체 및 pI 변이체를 포함함)의 쌍을 도시한 것이다. 상응하는 "단량체 2"가 없는 변이체는 단량체 중 어느 하나에 단독으로 사용될 수 있는 pI 변이체이다.
도 3은, 등입체성(isosteric) 변이체 항체 불변 영역 및 이의 각각의 치환의 목록을 도시한 것이다. pI_(-)는 보다 낮은 pI를 갖는 변이체를 나타내고, pI_(+)는 보다 높은 pI를 갖는 변이체를 나타낸다. 이는 본 발명의 다른 이종이량체화 변이체(및 또한 본원에 개괄된 바와 같은 다른 변이체 유형)와 선택적으로 및 독립적으로 조합될 수 있다.
도 4는, FcγR 결합을 절제하는 유용한 절제 변이체(때때로 "녹아웃(knock out)" 또는 "KO" 변이체로 지칭됨)를 도시한 것이다. 일반적으로, 절제 변이체는 두 가지 단량체 모두에서 발견되지만, 일부 경우에 하나의 단량체에만 존재할 수도 있다.
도 5는, 본 발명의 "비(非)사이토카인" 구성요소의 특히 유용한 구현예를 보여준다.
도 6은, 다수의 예시적인 도메인 링커를 도시한 것이다. 일부 구현예에서, 이러한 링커는 IL-12p35 서브유닛, IL-12p40 서브유닛 또는 단일 사슬 IL-12 복합체를 Fc 영역의 N-말단에 연결하는 데 사용된다. 일부 구현예에서, 이러한 링커는 단일 사슬 IL-12 복합체에서 IL-12p35 서브유닛을 IL-12p40 서브유닛에 융합시키는 데 사용된다. scIL-12 복합체가 IL-12p40의 N-말단에 연결된 IL-12p35 또는 IL-12p35의 N-말단에 연결된 IL-12p40을 포함할 수 있다는 점에 유의하는 것이 중요하다. 또한, 본원에 기재된 바와 같은 일부 경우에, Fc 도메인의 힌지 부분은 도메인 링커로서 작용하며, 이는 또한 이러한 링커 중 임의의 것과 조합될 수 있다.
도 7a 내지 도 7e는, 사이토카인 서열(예를 들어, IL-12p35 서브유닛, IL-12p40 서브유닛 또는 scIL-12 복합체)을 갖지 않는, 인간 IgG1을 기반으로 하는 몇 가지 유용한 IL-12-Fc 융합 백본의 서열을 보여준다. 백본 1은 인간 IgG1(356E/358M 알로타입(allotype))을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 2는 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 3은 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K : L368E/K370S 비대칭 변이체, L368E/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 4는 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, D401K : K360E/Q362E/T411E 비대칭 변이체, K360E/Q362E/T411E 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 5는 인간 IgG1(356D/358L 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 6은 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체뿐 아니라, 양쪽 사슬 상의 N297A 변이체를 포함한다. 백본 7은, 돌연변이가 N297S인 것을 제외하고는, 백본 6과 동일하다. 백본 6 및 7의 대안적인 형식은 양쪽 사슬 상의 절제 변이체 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K를 제외시킬 수 있다. 백본 8은 인간 IgG4를 기반으로 하며, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 S228P(EU 넘버링, 이는 Kabat에서 S241P임) 변이체(이는 당업계에 공지된 바와 같이 Fab 아암(arm) 교환을 제거함)를 포함한다. 백본 9는 인간 IgG2를 기반으로 하며, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체 및 L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체를 포함한다. 백본 10은 인간 IgG2를 기반으로 하며, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 S267K 변이체를 포함한다. 백본 11은, M428L/N434S Xtend 돌연변이를 포함하는 것을 제외하고는, 백본 1과 동일하다. 백본 12는 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 동일한 사슬 상의 C220S 및 양쪽 동일한 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 13은 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, S364K/E357Q 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 P217R/P229R/N276K pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다.
당업자가 이해하고 하기에 개괄되는 바와 같이, 이러한 서열은 도 8에 개략적으로 도시된 바와 같이, 비제한적으로 IL-12-heteroFc, heteroFc-IL-12 및 scIL-12-Fc를 포함하는, 본원에 개괄된 임의의 IL-12-Fc 융합체 형식과 함께 사용될 수 있다. heteroFc-IL-12 융합체의 경우, 백본은 K447의 결실을 추가로 포함할 수 있다는 점에 유의해야 한다. 또한, 임의의 IL-12p35 및/또는 IL-12p40 변이체는 임의의 조합으로 이러한 도 7의 백본에 혼입될 수 있다.
이러한 각각의 백본 내에는, (본원에 정의된 바와 같이) 인용된 서열과 90%, 95%, 98% 및 99% 동일하고/하거나 (당업자가 이해하는 바와 같이, 도면의 "모(parent)" 서열과 비교하여) 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개의 추가 아미노산 치환을 함유하는(모 인간 IgG1(또는 백본에 따라, IgG2 또는 IgG4)과 비교하여 이미 다수의 아미노산 변형을 함유하는) 서열이 포함되어 있다. 즉, 인용된 백본은 이러한 도면의 백본 내에 함유된 비대칭 변이체, pI 변이체 및 절제 변이체에 더하여, 추가의 아미노산 변형(일반적으로 아미노산 치환)을 함유할 수 있다.
도 8a 내지 도 8f는, 본 발명의 IL-12-Fc 융합 단백질에 대한 예시적인 형식을 도시한 것이다. N-말단 IL-12 이종이량체 Fc 융합체 또는 "IL-12-heteroFc"(도 8a) 형식은 이종이량체 Fc의 한쪽의 N-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p40 서브유닛, 및 이종이량체 Fc의 다른 쪽의 N-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p35 서브유닛을 포함한다. IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛은 도메인 링커에 의해 각각의 Fc 사슬에 연결될 수 있다. C-말단 IL-12 이종이량체 Fc 융합체 또는 "heteroFc-IL-12"(도 8b) 형식은 이종이량체 Fc의 한쪽의 C-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p40 서브유닛, 및 이종이량체 Fc의 다른 쪽의 C-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p35 서브유닛을 포함한다. IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛은 도메인 링커에 의해 각각의 Fc 사슬에 연결될 수 있다. N-말단 단일 사슬 IL-12-Fc 융합체 또는 "scIL-12-Fc"(도 8c 및 도 8d) 형식은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 이종이량체 Fc의 한쪽의 N-말단에 재조합적으로 융합된 단일 사슬 IL-12 복합체(또는 "scIL-12 복합체")를 포함하고, 이때 분자의 다른 쪽은 "Fc 단독" 또는 "빈 Fc" 이종이량체 Fc이다. C-말단 단일 사슬 IL-12-Fc 융합체 또는 "scIL-12-Fc"(도 8e 및 도 8f) 형식은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 이종이량체 Fc의 한쪽의 C-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 포함하고, 이때 분자의 다른 쪽은 "Fc 단독" 또는 "빈 Fc" 이종이량체 Fc이다. scIL-12 복합체는, 선택적으로, 하지만 일반적으로 도메인 링커를 통해, IL-12p40의 N-말단에 연결된 IL-12p35 또는 IL-12p35의 N-말단에 연결된 IL-12p40을 포함할 수 있다. scIL-12 복합체에서 2개의 서브유닛의 순서는 다음과 같이 지정될 수 있다: "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결됨).
도 9는, 야생형 IL-12p40 및 야생형 IL-12p35 서열을 함유하는 "IL-12-heteroFc" 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP27201의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 10은, 야생형 IL-12p40 및 야생형 IL-12p35 서열을 함유하는 "heteroFc-IL-12" 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP27202의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 11은, 야생형 IL-12p40 및 야생형 IL-12p35 서열을 함유하는 "scIL-12-Fc" 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP27203 및 XENP27204의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 12a 및 도 12b는, XENP27201의 정제 파트 2를 예시하는 크로마토그램(단백질 A 크로마토그래피 후 음이온 교환 크로마토그래피)(도 12a), 및 다각 광산란과 결합된 분석용 크기 배제 크로마토그래피(aSEC-MALS)(도 12b), 및 분석용 음이온 교환 크로마토그래피(분석용 AIEX)(도 12c)에 의해 결정된 바와 같은 피크 A와 비교하여, 도 12a에 도시된 바와 같은 음이온 교환 분리에서 단리된 피크 B의 순도 및 균질성을 도시한 것이다. 도 12b는 또한 다각 광산란에 의해 결정된 피크에서 단백질 종의 분자량을 도시한 것이다.
도 13a 내지 도 13c는, XENP27203의 정제 파트 2를 예시하는 크로마토그램(단백질 A 크로마토그래피 후 음이온 교환 크로마토그래피)(도 13a), 및 다각 광산란과 결합된 분석용 크기 배제 크로마토그래피(SEC-MALS)(도 13b), 및 분석용 음이온 교환 크로마토그래피(도 13c)에 의해 결정된 바와 같은 피크 A와 비교하여, 도 13a에 도시된 바와 같은 음이온 교환 분리에서 단리된 피크 B의 순도 및 균질성을 도시한 것이다. 도 13b는 또한 다각 광산란에 의해 결정된 피크에서 단백질 종의 분자량을 도시한 것이다.
도 14a 및 도 14b는, 2가 IL-12p40-Fc 융합체(도 14a) 및 2가 IL-12p35-Fc 융합체(도 14b)에 대한 그림 도식을 도시한 것이다. 각각의 융합체는 동종이량체 Fc의 N-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p40 또는 IL-12p35 서브유닛을 포함한다. 상기 서브유닛은 Fc 영역의 각각의 C-말단과 N-말단 사이에 도메인 링커를 가질 수 있다.
도 15는, 야생형 IL-12p40 및 야생형 IL-12p35 서열을 함유하는, 2가 IL-12p40-Fc 융합체인 XENP27560 및 2가 IL-12p35-Fc 융합체인 XENP27561(도 14에 도시된 그림 도식)의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 16a 내지 도 16d는, 활성화된 PBMC를 표시된 시험 물품과 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA-CD25hi T세포(도 16a), CD8+CD45RA-CD25hi T세포(도 16b), γδ T세포(도 16c) 및 NK세포(도 16d)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 17은, IL-12p40과 IL-12 수용체의 결합에 기여하는 것으로 예측되는 IL-12p40(IL-12p40 성숙형 서열을 기반으로 함) 상의 잔기를 도시한 것이다.
도 18은, MOE에서 QuaSAR 패키지를 사용하여 ASA 점수(물 분자에 대한 반지름 1.4 Å 및 각 원자에 대한 다면체 표현을 사용하여 계산된 물 접근 가능 표면)가 적어도 19인 것으로 식별된, IL-12p40(IL-12p40 성숙형 서열을 기반으로 함) 상의 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴 및 글루타민 잔기를 도시한 것이다.
도 19는, IL-23 수용체(수탁번호 5MZV를 갖는 PDB에 증착된 결정 구조를 기반으로 함)와 접촉할 것으로 예측된 IL-12p40(IL-12p40 성숙형 서열을 기반으로 함) 상의 잔기뿐 아니라, 예측된 접촉 유형(들)을 도시한 것이다. "D"는, 근접성을 기반으로 예측된 접촉을 나타낸다. "H"는, 잠재적인 수소 결합을 기반으로 예측된 접촉을 나타낸다. "I"는, 잠재적인 염 브릿지를 기반으로 예측된 접촉을 나타낸다. "A"는, 잠재적인 아렌 결합을 기반으로 예측된 접촉을 나타낸다.
도 20a 내지 도 20i는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키고/시키거나 추정되는 글리코실화 부위를 제거하기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 21a 내지 도 21j는, Fc 융합 파트너를 갖는 예시적인 IL-12p40 변이체의 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도메인 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있고, IL-12p40 변이체는 이탤릭체로 표시되어 있다.
도 22는, MOE에서 QuaSAR 패키지를 사용하여 ASA 점수(물 분자에 대한 반지름 1.4 Å 및 각 원자에 대한 다면체 표현을 사용하여 계산된 물 접근 가능 표면)가 적어도 103인 것으로 식별된, IL-12p35(IL-12p35 성숙형 서열을 기반으로 함) 상의 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴 및 글루타민 잔기를 도시한 것이다.
도 23a 내지 도 23c는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키고/시키거나 추정되는 글리코실화 부위를 제거하기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p35 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 24a 내지 도 24d는, Fc 융합 파트너를 갖는 예시적인 IL-12p35 변이체의 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도메인 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있고, IL-12p35 변이체는 이탤릭체로 표시되어 있다.
도 25a 내지 도 25q는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키거나 추정되는 글리코실화 부위를 제거하기 위한 관점에서 설계된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 26a 및 26b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 26a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 26b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 27a 및 27b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 27a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 27b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 28은, IL-12p40 또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체로서의 (STAT4 인산화에 대한) EC50, 및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 EC50의 배수 감소를 도시한 것이다. 27201-1 및 27201-2는 XENP27201에 대해 2개의 별도로 제조된 배치를 나타낸다.
도 29a 및 도 29b는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 30a 내지 도 30d는, Fc 융합 파트너를 갖는 예시적인 IL-12p40 변이체의 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도메인 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있고, IL-12p40 변이체는 이탤릭체로 표시되어 있다.
도 31a 및 도 31b는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p35 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 32a 내지 도 32c는, Fc 융합 파트너를 갖는 예시적인 IL-12p35 변이체의 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도메인 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있고, IL-12p35 변이체는 이탤릭체로 표시되어 있다.
도 33a 내지 도 33p는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 34a 및 34b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 34a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 34b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 35a 및 35b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 35a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 35b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 36은, IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체의 (STAT4 인산화에 대한) EC50, 및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 EC50의 배수 감소를 도시한 것이다. 데이터는, IL-12p40 서브유닛에 E59K 치환만을 포함하는 IL-12-Fc 융합체에 의해 역가가 최대 12배 감소되었음을 보여준다.
도 37a 및 도 37b는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 38은, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p35 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 39a 내지 도 39i는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 40a 및 40b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 40a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 40b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 41은, IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체의 (STAT4 인산화에 대한) EC50, 및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 EC50의 배수 감소를 도시한 것이다. 데이터는, 역가가 최대 100배 감소되었음을 보여준다.
도 42a 및 도 42b는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 43은, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p35 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 44a 내지 도 44k는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 45a 내지 도 45c는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계되고, 반감기를 연장시키기 위해 Xtend Fc(M428L/N434S)를 이용하여 추가로 조작된, 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다. 이러한 서열은 예시적인 목적으로 제공된 것이며, 다른 도면에 도시된 임의의 서열이 또한 반감기를 연장시키기 위해 Xtend Fc(M428L/N434S)를 포함할 수 있다는 점에 유의해야 한다.
도 46a 내지 46d는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 46a), CD4+CD45RA-CD25+ T세포(도 46b), CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 46c) 및 CD8+CD45RA-CD25+ T세포(도 46d) 에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 47은, IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체의 (STAT4 인산화에 대한) EC50, 및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 EC50의 배수 감소를 도시한 것이다.
도 48a 내지 도 48d는, 본 발명의 2가 IL-12-Fc 융합 단백질에 대한 예시적인 형식을 도시한 것이다. 2가 N-말단 단일 사슬(도 48a 및 도 48b) 형식은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 N-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함한다. 2가 C-말단 단일 사슬(도 48c 및 도 48d) 형식은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 C-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함한다. scIL-12 복합체는, 선택적으로 도메인 링커를 통해, IL-12p40의 N-말단에 연결된 IL-12p35 또는 IL-12p35에 N-말단의 연결된 IL-12p40을 포함할 수 있다. scIL-12 복합체에서 2개의 서브유닛의 순서는 다음과 같이 지정될 수 있다: "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결됨).
도 49는, (scIL-12(p40/p35))2-Fc 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP31289 및 XENP31291의 서열을 도시한 것이다. XENP31289는 야생형 IL-12p40 서브유닛 및 야생형 IL-12p35 서브유닛을 함유한다. XENP31291은 IL-12p40(E59K/K99E) 변이체 및 야생형 IL-12p35 서브유닛을 함유한다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 50은, IL-12p40(E59K/K99E) 변이체 및 야생형 IL-12p35 서브유닛을 함유하는, scIL-12(p40/p35)-Fc 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP31290의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 51a 내지 51d는, 활성화된 PBMC를, WT IL-12p40 서브유닛 또는 변이형 IL-12p40(E59K/K99E) 서브유닛을 갖는 scIL-12(p40/p35)-Fc 및 (scIL-12(p40/p35))2-Fc 형식의 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 51a), CD4+CD45RA-CD25+ T세포(도 51b), CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 51c) 및 CD8+CD45RA-CD25+ T세포(도 51d) 에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다. 데이터는, 변이형 IL-12p40(E59K/K99E) 서브유닛을 포함하는 scIL-12(p40/p35)-Fc 및 (scIL-12(p40/p35))2-Fc 융합체 형식의 IL-12-Fc 융합체가, WT IL-12p40 서브유닛을 포함하는 IL-12-Fc 융합체에 비해 역가가 감소되었음을 보여준다.
도 52는, WT IL-12p40 서브유닛 또는 변이형 IL-12p40(E59K/K99E) 서브유닛을 갖는 scIL-12(p40/p35)-Fc 및 (scIL-12(p40/p35))2-Fc 형식의 IL-12-Fc 융합체의 (STAT4 인산화에 대한) EC50을 도시한 것이다.
도 53은, 니볼루맙 및 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 갖는 IgG1 백본을 기반으로 하는 항-PD-1 mAb인 XENP16432의 서열을 도시한 것이다.
도 54a 내지 도 54d는, PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb) 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)가 투여된 pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의, 11일차(도 54a), 13일차(도 54b), 15일차(도 54c) 및 시간 경과에 따른(도 54d) (캘리퍼 측정으로 측정 시) 종양 부피의 변화를 도시한 것이다. XENP29952는 종양 부피 변화로 나타난 바와 같이 11일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰다(독립표본 t검정을 사용하여 기준선 보정된 데이터에서 수행된 통계).
도 55a 내지 도 55f는, PBMC 이식 및 PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb) 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)의 1차 투여 후 14일차에, pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 CD45 세포 수(도 55a), CD3+ T세포 수(도 55b), CD4+ T세포 수(도 55c), CD8+ T세포 수(도 55d), NK세포 수(도 55e) 및 CD4+ T세포 대 CD8+ T세포 비(도 55f)를 도시한 것이다. XENP29952는, PBS 대조군 및 XENP16432에 의한 체크포인트 차단과 비교하여, 14일차까지, CD45+ 세포, CD3+ T세포, CD4+ T세포, CD8+ T세포 및 NK세포의 확장을 유의하게 증강시켰다(독립표본 t검정을 사용하여 로그 변환된 데이터에서 수행된 통계).
도 56a 내지 도 56d는, PBMC 이식 및 PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb) 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)의 1차 투여 후, pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의, 7일차(도 56a) 및 14일차(도 56b)의 혈청 IFNγ 농도, 및 7일차(도 56c) 및 14일차(도 56d)의 혈청 CD25 농도를 도시한 것이다. XENP29952는, XENP16432에 의한 체크포인트 차단과 비교하여, 7일차까지 IFNγ 및 CD25의 분비를 유의하게 증강시켰다(독립표본 t검정을 사용하여 로그 변환된 데이터에서 수행된 통계).
도 57a 내지 도 57i는, PBS, 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)이 0.3 mg/kg 내지 0.03 mg/kg으로 투여된 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의, 3일차(도 57a), 6일차(도 57b), 10일차(도 57c), 13일차(도 57d), 17일차(도 57e), 20일차(도 57f), 24일차(도 57g) 및 27일차(도 57h)뿐 아니라, 시간 경과에 따른(도 57i) (GVHD의 지표로서) 체중의 변화를 도시한 것이다. 특히, IL-12-Fc 융합체 시험 물품은 시험관내 역가와 상관관계가 있는 GVHD를 다양한 정도로 유도하였다. 또한, 데이터는 시험 물품에 대한 용량 반응을 보여준다(즉, 0.3 mg/kg 대 0.03 mg/kg에 의해 증강된 GVHD).
도 58a 내지 도 58c는, PBMC 이식, 및 PBS, 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)이 0.3 mg/kg 내지 0.03 mg/kg으로 투여된 후 7일차(도 58a), 10일차(도 58b) 및 14일차(도 58c)에서, huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 (활성화의 지표로서) CD8+ T세포에서의 PD-1 발현을 도시한 것이다. 특히, IL-12-Fc 융합체 시험 물품은 시험관내 역가와 상관관계가 있는 CD8+ T세포 활성화를 다양한 정도로 유도하였다. 또한, 데이터는 시험 물품에 대한 용량 반응을 보여준다(즉, 0.3 mg/kg 대 0.03 mg/kg에 의해 증강된 CD8+ T세포 활성화).
도 59a 내지 도 59c는, PBMC 이식, 및 PBS, 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)이 0.3 mg/kg 내지 0.03 mg/kg으로 투여된 후 7일차(도 59a), 10일차(도 59b) 및 14일차(도 59c)에서, huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 (활성화의 지표로서) CD4+ T세포에서의 PD-1 발현을 도시한 것이다. 특히, IL-12-Fc 융합체 시험 물품은 시험관내 역가와 상관관계가 있는 CD4+ T세포 활성화를 다양한 정도로 유도하였다. 또한, 데이터는 시험 물품에 대한 용량 반응을 보여준다(즉, 0.3 mg/kg 대 0.03 mg/kg에 의해 증강된 CD4+ T세포 활성화).
도 60a 내지 도 60d는, PBMC 이식, 및 PBS, 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)이 0.3 mg/kg 내지 0.03 mg/kg으로 투여된 후 7일차(도 60a), 10일차(도 60b), 14일차(도 60c) 및 31일차(도 60d)에서, huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 IFNγ의 혈청 농도를 도시한 것이다. 특히, IL-12-Fc 융합체 시험 물품은 시험관내 역가와 상관관계가 있는 IFNγ 분비를 다양한 수준으로 유도하였다. 또한, 데이터는 시험 물품에 대한 용량 반응을 보여준다(즉, 0.3 mg/kg 대 0.03 mg/kg에 의해 유도된 증강된 IFNγ 분비).
도 61a 내지 도 61k는, 활성화된 PBMC(제1 공여체; 공여체 1 유래)를 재조합 인간 IL-12인, XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)과 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA-CD25+ T세포(도 61a), CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 61b), CD4+CD45RA+CD25- T세포(도 61c), CD4+CD45RA-CD25- T세포(도 61d), CD8+CD45RA-CD25+ T세포(도 61e), CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 61f), CD8+CD45RA+CD25- T세포(도 61g), CD8+CD45RA-CD25- T세포(도 61h), Treg(도 61i), γδ T세포(도 61j) 및 CD56+ NK세포(도 61k)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다. 데이터는, 가장 강력한 변이체로서의 XENP29952, 가장 덜 강력한 변이체로서의 XENP31254 및 XENP31258, 및 그 사이에 속하는 XENP30597 및 XENP31251의 역가 단계를 보여준다. 특히, 생체내에서 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합 변이체에 의해 유도된 GVHD 및 T세포 활성화의 정도는, 시험관내 역가와 상관관계가 있었다.
도 62a 내지 도 62d는, PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb), XENP31258, XENP31251, 또는 XENP31251과 XENP16432의 조합이 투여된 pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의, 14일차(도 62a), 16일차(도 62b) 및 21일차(도 62c)뿐 아니라, 시간 경과에 따른(도 62d) (캘리퍼 측정으로 측정 시) 종양 부피의 변화를 도시한 것이다. XENP31258은 PBS로의 처리와 비교하여 14일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰고, XENP31251(단독 또는 XENP16432와 조합으로)은 16일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰으며; XENP16432와 조합된 XENP31251은 XENP16432 단독으로의 처리와 비교하여 21일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰다(맨-휘트니(Mann-Whitney) 검정을 사용하여 기준선 보정된 데이터에서 수행된 통계).
도 63a 내지 도 63f는, PBMC 이식 및 PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb), XENP31258, XENP31251, 또는 XENP31251과 XENP16432의 조합의 1차 투여 후 14일차에, pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 CD45 세포 수(도 63a), CD3+ T세포 수(도 63b), CD4+ T세포 수(도 63c), CD8+ T세포 수(도 63d), NK세포 수(도 63e) 및 CD8+ T세포 대 CD4+ T세포 비(도 63f)를 도시한 것이다. 특히, 데이터는, XENP16432와 조합된 XENP31251로의 처리가 XENP31251 또는 XENP16432 단독과 비교하여 림프구 확장을 유의하게 증강시켰음을 보여주며, 이는 IL-12-Fc 융합체가 체크포인트 차단과 생산적으로 조합됨을 나타낸다.
도 64a 내지 도 64c는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계되고, 반감기를 연장시키기 위해 Xtend Fc(M428L/N434S)를 이용하여 추가로 조작된, 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다. 이러한 서열은 예시적인 목적으로 제공된 것이며, 다른 도면에 도시된 임의의 서열이 또한 반감기를 연장시키기 위해 Xtend Fc(M428L/N434S)를 포함할 수 있다는 점에 유의해야 한다.
도 65a 내지 도 65c는, (발현 및 친화성/역가 변이체에 더하여) 유리 시스테인을 제거하기 위한 관점에서 C252S로 조작된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다.
도 66a 내지 도 66q는, (발현 및 친화성/역가 변이체에 더하여) 유리 시스테인을 제거하기 위한 관점에서 IL-12p40 서브유닛에서 C252S로 조작된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 67a 내지 도 67d는, 활성화된 PBMC를, 유리 시스테인을 제거하기 위한 추가의 조작 유무 하의 IL-12p40 변이체를 포함하는 IL-12-Fc와 함께 인큐베이션한 후, CD8+CD45RA-CD25+ T세포(도 67a), CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 67b), CD4+CD45RA-CD25+ T세포(도 67c), CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 67d) 및 NK세포(도 67e)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다. 데이터는, IL-12p40 서브유닛에 C252S를 포함하는 변이체의 대부분이 C252S 변형이 없는 변이체와 비교하여 약간 개선되었지만 유사한 역가를 나타냈음을 보여준다.
도 2a 내지 도 2e는, 유용한 Fc 이종이량체화 변이체 세트(비대칭 변이체 및 pI 변이체를 포함함)의 쌍을 도시한 것이다. 상응하는 "단량체 2"가 없는 변이체는 단량체 중 어느 하나에 단독으로 사용될 수 있는 pI 변이체이다.
도 3은, 등입체성(isosteric) 변이체 항체 불변 영역 및 이의 각각의 치환의 목록을 도시한 것이다. pI_(-)는 보다 낮은 pI를 갖는 변이체를 나타내고, pI_(+)는 보다 높은 pI를 갖는 변이체를 나타낸다. 이는 본 발명의 다른 이종이량체화 변이체(및 또한 본원에 개괄된 바와 같은 다른 변이체 유형)와 선택적으로 및 독립적으로 조합될 수 있다.
도 4는, FcγR 결합을 절제하는 유용한 절제 변이체(때때로 "녹아웃(knock out)" 또는 "KO" 변이체로 지칭됨)를 도시한 것이다. 일반적으로, 절제 변이체는 두 가지 단량체 모두에서 발견되지만, 일부 경우에 하나의 단량체에만 존재할 수도 있다.
도 5는, 본 발명의 "비(非)사이토카인" 구성요소의 특히 유용한 구현예를 보여준다.
도 6은, 다수의 예시적인 도메인 링커를 도시한 것이다. 일부 구현예에서, 이러한 링커는 IL-12p35 서브유닛, IL-12p40 서브유닛 또는 단일 사슬 IL-12 복합체를 Fc 영역의 N-말단에 연결하는 데 사용된다. 일부 구현예에서, 이러한 링커는 단일 사슬 IL-12 복합체에서 IL-12p35 서브유닛을 IL-12p40 서브유닛에 융합시키는 데 사용된다. scIL-12 복합체가 IL-12p40의 N-말단에 연결된 IL-12p35 또는 IL-12p35의 N-말단에 연결된 IL-12p40을 포함할 수 있다는 점에 유의하는 것이 중요하다. 또한, 본원에 기재된 바와 같은 일부 경우에, Fc 도메인의 힌지 부분은 도메인 링커로서 작용하며, 이는 또한 이러한 링커 중 임의의 것과 조합될 수 있다.
도 7a 내지 도 7e는, 사이토카인 서열(예를 들어, IL-12p35 서브유닛, IL-12p40 서브유닛 또는 scIL-12 복합체)을 갖지 않는, 인간 IgG1을 기반으로 하는 몇 가지 유용한 IL-12-Fc 융합 백본의 서열을 보여준다. 백본 1은 인간 IgG1(356E/358M 알로타입(allotype))을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 2는 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 3은 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K : L368E/K370S 비대칭 변이체, L368E/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 4는 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, D401K : K360E/Q362E/T411E 비대칭 변이체, K360E/Q362E/T411E 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 5는 인간 IgG1(356D/358L 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 6은 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체뿐 아니라, 양쪽 사슬 상의 N297A 변이체를 포함한다. 백본 7은, 돌연변이가 N297S인 것을 제외하고는, 백본 6과 동일하다. 백본 6 및 7의 대안적인 형식은 양쪽 사슬 상의 절제 변이체 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K를 제외시킬 수 있다. 백본 8은 인간 IgG4를 기반으로 하며, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 S228P(EU 넘버링, 이는 Kabat에서 S241P임) 변이체(이는 당업계에 공지된 바와 같이 Fab 아암(arm) 교환을 제거함)를 포함한다. 백본 9는 인간 IgG2를 기반으로 하며, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체 및 L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체를 포함한다. 백본 10은 인간 IgG2를 기반으로 하며, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, L368D/K370S 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 Q295E/N384D/Q418E/N421D pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 S267K 변이체를 포함한다. 백본 11은, M428L/N434S Xtend 돌연변이를 포함하는 것을 제외하고는, 백본 1과 동일하다. 백본 12는 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 동일한 사슬 상의 C220S 및 양쪽 동일한 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다. 백본 13은 인간 IgG1(356E/358M 알로타입)을 기반으로 하며, 양쪽 사슬 상의 C220S, S364K/E357Q : L368D/K370S 비대칭 변이체, S364K/E357Q 비대칭 변이체를 갖는 사슬 상의 P217R/P229R/N276K pI 변이체 및 양쪽 사슬 상의 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 포함한다.
당업자가 이해하고 하기에 개괄되는 바와 같이, 이러한 서열은 도 8에 개략적으로 도시된 바와 같이, 비제한적으로 IL-12-heteroFc, heteroFc-IL-12 및 scIL-12-Fc를 포함하는, 본원에 개괄된 임의의 IL-12-Fc 융합체 형식과 함께 사용될 수 있다. heteroFc-IL-12 융합체의 경우, 백본은 K447의 결실을 추가로 포함할 수 있다는 점에 유의해야 한다. 또한, 임의의 IL-12p35 및/또는 IL-12p40 변이체는 임의의 조합으로 이러한 도 7의 백본에 혼입될 수 있다.
이러한 각각의 백본 내에는, (본원에 정의된 바와 같이) 인용된 서열과 90%, 95%, 98% 및 99% 동일하고/하거나 (당업자가 이해하는 바와 같이, 도면의 "모(parent)" 서열과 비교하여) 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개의 추가 아미노산 치환을 함유하는(모 인간 IgG1(또는 백본에 따라, IgG2 또는 IgG4)과 비교하여 이미 다수의 아미노산 변형을 함유하는) 서열이 포함되어 있다. 즉, 인용된 백본은 이러한 도면의 백본 내에 함유된 비대칭 변이체, pI 변이체 및 절제 변이체에 더하여, 추가의 아미노산 변형(일반적으로 아미노산 치환)을 함유할 수 있다.
도 8a 내지 도 8f는, 본 발명의 IL-12-Fc 융합 단백질에 대한 예시적인 형식을 도시한 것이다. N-말단 IL-12 이종이량체 Fc 융합체 또는 "IL-12-heteroFc"(도 8a) 형식은 이종이량체 Fc의 한쪽의 N-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p40 서브유닛, 및 이종이량체 Fc의 다른 쪽의 N-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p35 서브유닛을 포함한다. IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛은 도메인 링커에 의해 각각의 Fc 사슬에 연결될 수 있다. C-말단 IL-12 이종이량체 Fc 융합체 또는 "heteroFc-IL-12"(도 8b) 형식은 이종이량체 Fc의 한쪽의 C-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p40 서브유닛, 및 이종이량체 Fc의 다른 쪽의 C-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p35 서브유닛을 포함한다. IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛은 도메인 링커에 의해 각각의 Fc 사슬에 연결될 수 있다. N-말단 단일 사슬 IL-12-Fc 융합체 또는 "scIL-12-Fc"(도 8c 및 도 8d) 형식은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 이종이량체 Fc의 한쪽의 N-말단에 재조합적으로 융합된 단일 사슬 IL-12 복합체(또는 "scIL-12 복합체")를 포함하고, 이때 분자의 다른 쪽은 "Fc 단독" 또는 "빈 Fc" 이종이량체 Fc이다. C-말단 단일 사슬 IL-12-Fc 융합체 또는 "scIL-12-Fc"(도 8e 및 도 8f) 형식은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 이종이량체 Fc의 한쪽의 C-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 포함하고, 이때 분자의 다른 쪽은 "Fc 단독" 또는 "빈 Fc" 이종이량체 Fc이다. scIL-12 복합체는, 선택적으로, 하지만 일반적으로 도메인 링커를 통해, IL-12p40의 N-말단에 연결된 IL-12p35 또는 IL-12p35의 N-말단에 연결된 IL-12p40을 포함할 수 있다. scIL-12 복합체에서 2개의 서브유닛의 순서는 다음과 같이 지정될 수 있다: "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결됨).
도 9는, 야생형 IL-12p40 및 야생형 IL-12p35 서열을 함유하는 "IL-12-heteroFc" 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP27201의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 10은, 야생형 IL-12p40 및 야생형 IL-12p35 서열을 함유하는 "heteroFc-IL-12" 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP27202의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 11은, 야생형 IL-12p40 및 야생형 IL-12p35 서열을 함유하는 "scIL-12-Fc" 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP27203 및 XENP27204의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 12a 및 도 12b는, XENP27201의 정제 파트 2를 예시하는 크로마토그램(단백질 A 크로마토그래피 후 음이온 교환 크로마토그래피)(도 12a), 및 다각 광산란과 결합된 분석용 크기 배제 크로마토그래피(aSEC-MALS)(도 12b), 및 분석용 음이온 교환 크로마토그래피(분석용 AIEX)(도 12c)에 의해 결정된 바와 같은 피크 A와 비교하여, 도 12a에 도시된 바와 같은 음이온 교환 분리에서 단리된 피크 B의 순도 및 균질성을 도시한 것이다. 도 12b는 또한 다각 광산란에 의해 결정된 피크에서 단백질 종의 분자량을 도시한 것이다.
도 13a 내지 도 13c는, XENP27203의 정제 파트 2를 예시하는 크로마토그램(단백질 A 크로마토그래피 후 음이온 교환 크로마토그래피)(도 13a), 및 다각 광산란과 결합된 분석용 크기 배제 크로마토그래피(SEC-MALS)(도 13b), 및 분석용 음이온 교환 크로마토그래피(도 13c)에 의해 결정된 바와 같은 피크 A와 비교하여, 도 13a에 도시된 바와 같은 음이온 교환 분리에서 단리된 피크 B의 순도 및 균질성을 도시한 것이다. 도 13b는 또한 다각 광산란에 의해 결정된 피크에서 단백질 종의 분자량을 도시한 것이다.
도 14a 및 도 14b는, 2가 IL-12p40-Fc 융합체(도 14a) 및 2가 IL-12p35-Fc 융합체(도 14b)에 대한 그림 도식을 도시한 것이다. 각각의 융합체는 동종이량체 Fc의 N-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p40 또는 IL-12p35 서브유닛을 포함한다. 상기 서브유닛은 Fc 영역의 각각의 C-말단과 N-말단 사이에 도메인 링커를 가질 수 있다.
도 15는, 야생형 IL-12p40 및 야생형 IL-12p35 서열을 함유하는, 2가 IL-12p40-Fc 융합체인 XENP27560 및 2가 IL-12p35-Fc 융합체인 XENP27561(도 14에 도시된 그림 도식)의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 16a 내지 도 16d는, 활성화된 PBMC를 표시된 시험 물품과 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA-CD25hi T세포(도 16a), CD8+CD45RA-CD25hi T세포(도 16b), γδ T세포(도 16c) 및 NK세포(도 16d)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 17은, IL-12p40과 IL-12 수용체의 결합에 기여하는 것으로 예측되는 IL-12p40(IL-12p40 성숙형 서열을 기반으로 함) 상의 잔기를 도시한 것이다.
도 18은, MOE에서 QuaSAR 패키지를 사용하여 ASA 점수(물 분자에 대한 반지름 1.4 Å 및 각 원자에 대한 다면체 표현을 사용하여 계산된 물 접근 가능 표면)가 적어도 19인 것으로 식별된, IL-12p40(IL-12p40 성숙형 서열을 기반으로 함) 상의 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴 및 글루타민 잔기를 도시한 것이다.
도 19는, IL-23 수용체(수탁번호 5MZV를 갖는 PDB에 증착된 결정 구조를 기반으로 함)와 접촉할 것으로 예측된 IL-12p40(IL-12p40 성숙형 서열을 기반으로 함) 상의 잔기뿐 아니라, 예측된 접촉 유형(들)을 도시한 것이다. "D"는, 근접성을 기반으로 예측된 접촉을 나타낸다. "H"는, 잠재적인 수소 결합을 기반으로 예측된 접촉을 나타낸다. "I"는, 잠재적인 염 브릿지를 기반으로 예측된 접촉을 나타낸다. "A"는, 잠재적인 아렌 결합을 기반으로 예측된 접촉을 나타낸다.
도 20a 내지 도 20i는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키고/시키거나 추정되는 글리코실화 부위를 제거하기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 21a 내지 도 21j는, Fc 융합 파트너를 갖는 예시적인 IL-12p40 변이체의 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도메인 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있고, IL-12p40 변이체는 이탤릭체로 표시되어 있다.
도 22는, MOE에서 QuaSAR 패키지를 사용하여 ASA 점수(물 분자에 대한 반지름 1.4 Å 및 각 원자에 대한 다면체 표현을 사용하여 계산된 물 접근 가능 표면)가 적어도 103인 것으로 식별된, IL-12p35(IL-12p35 성숙형 서열을 기반으로 함) 상의 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴 및 글루타민 잔기를 도시한 것이다.
도 23a 내지 도 23c는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키고/시키거나 추정되는 글리코실화 부위를 제거하기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p35 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 24a 내지 도 24d는, Fc 융합 파트너를 갖는 예시적인 IL-12p35 변이체의 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도메인 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있고, IL-12p35 변이체는 이탤릭체로 표시되어 있다.
도 25a 내지 도 25q는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키거나 추정되는 글리코실화 부위를 제거하기 위한 관점에서 설계된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 26a 및 26b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 26a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 26b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 27a 및 27b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 27a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 27b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 28은, IL-12p40 또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체로서의 (STAT4 인산화에 대한) EC50, 및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 EC50의 배수 감소를 도시한 것이다. 27201-1 및 27201-2는 XENP27201에 대해 2개의 별도로 제조된 배치를 나타낸다.
도 29a 및 도 29b는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 30a 내지 도 30d는, Fc 융합 파트너를 갖는 예시적인 IL-12p40 변이체의 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도메인 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있고, IL-12p40 변이체는 이탤릭체로 표시되어 있다.
도 31a 및 도 31b는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p35 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 32a 내지 도 32c는, Fc 융합 파트너를 갖는 예시적인 IL-12p35 변이체의 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도메인 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있고, IL-12p35 변이체는 이탤릭체로 표시되어 있다.
도 33a 내지 도 33p는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 34a 및 34b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 34a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 34b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 35a 및 35b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 35a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 35b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 36은, IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체의 (STAT4 인산화에 대한) EC50, 및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 EC50의 배수 감소를 도시한 것이다. 데이터는, IL-12p40 서브유닛에 E59K 치환만을 포함하는 IL-12-Fc 융합체에 의해 역가가 최대 12배 감소되었음을 보여준다.
도 37a 및 도 37b는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 38은, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p35 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 39a 내지 도 39i는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 40a 및 40b는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 40a) 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 40b)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 41은, IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체의 (STAT4 인산화에 대한) EC50, 및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 EC50의 배수 감소를 도시한 것이다. 데이터는, 역가가 최대 100배 감소되었음을 보여준다.
도 42a 및 도 42b는, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 43은, IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체 복합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 IL-12p35 변이체의 서열을 도시한 것이다. 변형된 아미노산은 밑줄이 그어져 있고, 볼드체로 표시되어 있다.
도 44a 내지 도 44k는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 45a 내지 도 45c는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계되고, 반감기를 연장시키기 위해 Xtend Fc(M428L/N434S)를 이용하여 추가로 조작된, 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다. 이러한 서열은 예시적인 목적으로 제공된 것이며, 다른 도면에 도시된 임의의 서열이 또한 반감기를 연장시키기 위해 Xtend Fc(M428L/N434S)를 포함할 수 있다는 점에 유의해야 한다.
도 46a 내지 46d는, 활성화된 PBMC를, 친화성 및 역가를 감소시키기 위한 목적으로 조작된 IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 46a), CD4+CD45RA-CD25+ T세포(도 46b), CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 46c) 및 CD8+CD45RA-CD25+ T세포(도 46d) 에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다.
도 47은, IL-12p40 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12-Fc 융합체의 (STAT4 인산화에 대한) EC50, 및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 EC50의 배수 감소를 도시한 것이다.
도 48a 내지 도 48d는, 본 발명의 2가 IL-12-Fc 융합 단백질에 대한 예시적인 형식을 도시한 것이다. 2가 N-말단 단일 사슬(도 48a 및 도 48b) 형식은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 N-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함한다. 2가 C-말단 단일 사슬(도 48c 및 도 48d) 형식은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 C-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함한다. scIL-12 복합체는, 선택적으로 도메인 링커를 통해, IL-12p40의 N-말단에 연결된 IL-12p35 또는 IL-12p35에 N-말단의 연결된 IL-12p40을 포함할 수 있다. scIL-12 복합체에서 2개의 서브유닛의 순서는 다음과 같이 지정될 수 있다: "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결됨).
도 49는, (scIL-12(p40/p35))2-Fc 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP31289 및 XENP31291의 서열을 도시한 것이다. XENP31289는 야생형 IL-12p40 서브유닛 및 야생형 IL-12p35 서브유닛을 함유한다. XENP31291은 IL-12p40(E59K/K99E) 변이체 및 야생형 IL-12p35 서브유닛을 함유한다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 50은, IL-12p40(E59K/K99E) 변이체 및 야생형 IL-12p35 서브유닛을 함유하는, scIL-12(p40/p35)-Fc 형식의 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질인 XENP31290의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 51a 내지 51d는, 활성화된 PBMC를, WT IL-12p40 서브유닛 또는 변이형 IL-12p40(E59K/K99E) 서브유닛을 갖는 scIL-12(p40/p35)-Fc 및 (scIL-12(p40/p35))2-Fc 형식의 IL-12-Fc 융합체와 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 51a), CD4+CD45RA-CD25+ T세포(도 51b), CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 51c) 및 CD8+CD45RA-CD25+ T세포(도 51d) 에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다. 데이터는, 변이형 IL-12p40(E59K/K99E) 서브유닛을 포함하는 scIL-12(p40/p35)-Fc 및 (scIL-12(p40/p35))2-Fc 융합체 형식의 IL-12-Fc 융합체가, WT IL-12p40 서브유닛을 포함하는 IL-12-Fc 융합체에 비해 역가가 감소되었음을 보여준다.
도 52는, WT IL-12p40 서브유닛 또는 변이형 IL-12p40(E59K/K99E) 서브유닛을 갖는 scIL-12(p40/p35)-Fc 및 (scIL-12(p40/p35))2-Fc 형식의 IL-12-Fc 융합체의 (STAT4 인산화에 대한) EC50을 도시한 것이다.
도 53은, 니볼루맙 및 E233P/L234V/L235A/G236del/S267K 절제 변이체를 갖는 IgG1 백본을 기반으로 하는 항-PD-1 mAb인 XENP16432의 서열을 도시한 것이다.
도 54a 내지 도 54d는, PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb) 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)가 투여된 pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의, 11일차(도 54a), 13일차(도 54b), 15일차(도 54c) 및 시간 경과에 따른(도 54d) (캘리퍼 측정으로 측정 시) 종양 부피의 변화를 도시한 것이다. XENP29952는 종양 부피 변화로 나타난 바와 같이 11일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰다(독립표본 t검정을 사용하여 기준선 보정된 데이터에서 수행된 통계).
도 55a 내지 도 55f는, PBMC 이식 및 PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb) 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)의 1차 투여 후 14일차에, pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 CD45 세포 수(도 55a), CD3+ T세포 수(도 55b), CD4+ T세포 수(도 55c), CD8+ T세포 수(도 55d), NK세포 수(도 55e) 및 CD4+ T세포 대 CD8+ T세포 비(도 55f)를 도시한 것이다. XENP29952는, PBS 대조군 및 XENP16432에 의한 체크포인트 차단과 비교하여, 14일차까지, CD45+ 세포, CD3+ T세포, CD4+ T세포, CD8+ T세포 및 NK세포의 확장을 유의하게 증강시켰다(독립표본 t검정을 사용하여 로그 변환된 데이터에서 수행된 통계).
도 56a 내지 도 56d는, PBMC 이식 및 PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb) 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)의 1차 투여 후, pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의, 7일차(도 56a) 및 14일차(도 56b)의 혈청 IFNγ 농도, 및 7일차(도 56c) 및 14일차(도 56d)의 혈청 CD25 농도를 도시한 것이다. XENP29952는, XENP16432에 의한 체크포인트 차단과 비교하여, 7일차까지 IFNγ 및 CD25의 분비를 유의하게 증강시켰다(독립표본 t검정을 사용하여 로그 변환된 데이터에서 수행된 통계).
도 57a 내지 도 57i는, PBS, 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)이 0.3 mg/kg 내지 0.03 mg/kg으로 투여된 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의, 3일차(도 57a), 6일차(도 57b), 10일차(도 57c), 13일차(도 57d), 17일차(도 57e), 20일차(도 57f), 24일차(도 57g) 및 27일차(도 57h)뿐 아니라, 시간 경과에 따른(도 57i) (GVHD의 지표로서) 체중의 변화를 도시한 것이다. 특히, IL-12-Fc 융합체 시험 물품은 시험관내 역가와 상관관계가 있는 GVHD를 다양한 정도로 유도하였다. 또한, 데이터는 시험 물품에 대한 용량 반응을 보여준다(즉, 0.3 mg/kg 대 0.03 mg/kg에 의해 증강된 GVHD).
도 58a 내지 도 58c는, PBMC 이식, 및 PBS, 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)이 0.3 mg/kg 내지 0.03 mg/kg으로 투여된 후 7일차(도 58a), 10일차(도 58b) 및 14일차(도 58c)에서, huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 (활성화의 지표로서) CD8+ T세포에서의 PD-1 발현을 도시한 것이다. 특히, IL-12-Fc 융합체 시험 물품은 시험관내 역가와 상관관계가 있는 CD8+ T세포 활성화를 다양한 정도로 유도하였다. 또한, 데이터는 시험 물품에 대한 용량 반응을 보여준다(즉, 0.3 mg/kg 대 0.03 mg/kg에 의해 증강된 CD8+ T세포 활성화).
도 59a 내지 도 59c는, PBMC 이식, 및 PBS, 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)이 0.3 mg/kg 내지 0.03 mg/kg으로 투여된 후 7일차(도 59a), 10일차(도 59b) 및 14일차(도 59c)에서, huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 (활성화의 지표로서) CD4+ T세포에서의 PD-1 발현을 도시한 것이다. 특히, IL-12-Fc 융합체 시험 물품은 시험관내 역가와 상관관계가 있는 CD4+ T세포 활성화를 다양한 정도로 유도하였다. 또한, 데이터는 시험 물품에 대한 용량 반응을 보여준다(즉, 0.3 mg/kg 대 0.03 mg/kg에 의해 증강된 CD4+ T세포 활성화).
도 60a 내지 도 60d는, PBMC 이식, 및 PBS, 또는 XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)이 0.3 mg/kg 내지 0.03 mg/kg으로 투여된 후 7일차(도 60a), 10일차(도 60b), 14일차(도 60c) 및 31일차(도 60d)에서, huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 IFNγ의 혈청 농도를 도시한 것이다. 특히, IL-12-Fc 융합체 시험 물품은 시험관내 역가와 상관관계가 있는 IFNγ 분비를 다양한 수준으로 유도하였다. 또한, 데이터는 시험 물품에 대한 용량 반응을 보여준다(즉, 0.3 mg/kg 대 0.03 mg/kg에 의해 유도된 증강된 IFNγ 분비).
도 61a 내지 도 61k는, 활성화된 PBMC(제1 공여체; 공여체 1 유래)를 재조합 인간 IL-12인, XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체)과 함께 인큐베이션한 후, CD4+CD45RA-CD25+ T세포(도 61a), CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 61b), CD4+CD45RA+CD25- T세포(도 61c), CD4+CD45RA-CD25- T세포(도 61d), CD8+CD45RA-CD25+ T세포(도 61e), CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 61f), CD8+CD45RA+CD25- T세포(도 61g), CD8+CD45RA-CD25- T세포(도 61h), Treg(도 61i), γδ T세포(도 61j) 및 CD56+ NK세포(도 61k)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다. 데이터는, 가장 강력한 변이체로서의 XENP29952, 가장 덜 강력한 변이체로서의 XENP31254 및 XENP31258, 및 그 사이에 속하는 XENP30597 및 XENP31251의 역가 단계를 보여준다. 특히, 생체내에서 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합 변이체에 의해 유도된 GVHD 및 T세포 활성화의 정도는, 시험관내 역가와 상관관계가 있었다.
도 62a 내지 도 62d는, PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb), XENP31258, XENP31251, 또는 XENP31251과 XENP16432의 조합이 투여된 pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의, 14일차(도 62a), 16일차(도 62b) 및 21일차(도 62c)뿐 아니라, 시간 경과에 따른(도 62d) (캘리퍼 측정으로 측정 시) 종양 부피의 변화를 도시한 것이다. XENP31258은 PBS로의 처리와 비교하여 14일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰고, XENP31251(단독 또는 XENP16432와 조합으로)은 16일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰으며; XENP16432와 조합된 XENP31251은 XENP16432 단독으로의 처리와 비교하여 21일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰다(맨-휘트니(Mann-Whitney) 검정을 사용하여 기준선 보정된 데이터에서 수행된 통계).
도 63a 내지 도 63f는, PBMC 이식 및 PBS, XENP16432(2가 항-PD-1 mAb), XENP31258, XENP31251, 또는 XENP31251과 XENP16432의 조합의 1차 투여 후 14일차에, pp65-MCF7 및 huPBMC 이식된 NSG 마우스에서의 CD45 세포 수(도 63a), CD3+ T세포 수(도 63b), CD4+ T세포 수(도 63c), CD8+ T세포 수(도 63d), NK세포 수(도 63e) 및 CD8+ T세포 대 CD4+ T세포 비(도 63f)를 도시한 것이다. 특히, 데이터는, XENP16432와 조합된 XENP31251로의 처리가 XENP31251 또는 XENP16432 단독과 비교하여 림프구 확장을 유의하게 증강시켰음을 보여주며, 이는 IL-12-Fc 융합체가 체크포인트 차단과 생산적으로 조합됨을 나타낸다.
도 64a 내지 도 64c는, IL-12 수용체에 대한 IL-12-Fc 융합체의 친화성을 감소시키기 위한 관점에서 설계되고, 반감기를 연장시키기 위해 Xtend Fc(M428L/N434S)를 이용하여 추가로 조작된, 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다. 이러한 서열은 예시적인 목적으로 제공된 것이며, 다른 도면에 도시된 임의의 서열이 또한 반감기를 연장시키기 위해 Xtend Fc(M428L/N434S)를 포함할 수 있다는 점에 유의해야 한다.
도 65a 내지 도 65c는, (발현 및 친화성/역가 변이체에 더하여) 유리 시스테인을 제거하기 위한 관점에서 C252S로 조작된 예시적인 IL-12p40 변이체의 서열을 도시한 것이다.
도 66a 내지 도 66q는, (발현 및 친화성/역가 변이체에 더하여) 유리 시스테인을 제거하기 위한 관점에서 IL-12p40 서브유닛에서 C252S로 조작된 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합체의 서열을 도시한 것이다. 링커에는 이중 밑줄이 그어져 있으며(당업자가 이해하는 바와 같이, 다른 링커로 대체될 수 있으며, 이 중 일부는 도 6에 도시되어 있음), 슬래시(/)는 IL-12p35, IL-12p40, 링커 및 Fc 영역 사이의 경계(들)를 나타낸다.
도 67a 내지 도 67d는, 활성화된 PBMC를, 유리 시스테인을 제거하기 위한 추가의 조작 유무 하의 IL-12p40 변이체를 포함하는 IL-12-Fc와 함께 인큐베이션한 후, CD8+CD45RA-CD25+ T세포(도 67a), CD8+CD45RA+CD25+ T세포(도 67b), CD4+CD45RA-CD25+ T세포(도 67c), CD4+CD45RA+CD25+ T세포(도 67d) 및 NK세포(도 67e)에서의 STAT4 인산화를 도시한 것이다. 데이터는, IL-12p40 서브유닛에 C252S를 포함하는 변이체의 대부분이 C252S 변형이 없는 변이체와 비교하여 약간 개선되었지만 유사한 역가를 나타냈음을 보여준다.
I. 개요
본 발명은 IL-12 서브유닛과 Fc 도메인을 함유하는 신규한 이종이량체 융합 단백질 구조체에 관한 것이다. 상기 언급된 바와 같이, IL-12는 생물학적으로 활성인 IL-12 이종이량체를 형성하기 위해 공유결합으로 연결된 α-사슬(p35 서브유닛; IL-12p35)과 β-사슬(p40 서브유닛; IL-12p40)로 구성된다. IL-12는, T세포에서 IL-12 수용체 β1(IL-12Rβ1)과 IL-12 수용체 β2(IL-12Rβ2)로 구성된 이량체 IL-12 수용체 복합체에 결합하여 IFNγ 분비를 유도하는 방식으로, 결합을 통해 이의 세포 신호전달 기능을 발휘한다. 하지만, IL-12p40 서브유닛은 IL-12 수용체에의 결합에 대해 경쟁하여 IL-12 활성을 길항하는 것으로 보고되어 있는 동종이량체로도 존재할 수 있다. 따라서, 본 발명은 IL-12-Fc 융합 단백질뿐 아니라, 역가가 감소된 신규한 IL-12 변이체를 제공하여, IL-12의 짧은 반감기 및 길항성 IL12p40 동종이량체의 형성 가능성 문제를 해결한다. 일반적으로 도 8에 제시된 바와 같이, 본 발명의 이종이량체 융합 단백질은 다양한 입체형태를 취할 수 있다.
본 출원은 2018년 10월 3일자 출원된 제62/740,813호 및 2019년 5월 15일자 출원된 제62/828,512호, 보다 구체적으로 제62/740,813호의 도 17, 및 제62/828,512호의 도 62a 내지 도 62k 및 도 63a 내지 도 63d뿐 아니라, 도면 범례 및 해당 명세서 내 이러한 도면의 설명을 참조로서 인용한다.
II. 정의
본 출원을 보다 완벽하게 이해할 수 있도록 하기 위해, 몇 가지 정의가 하기에 제시된다. 이러한 정의는 문법적 등가물을 포함하는 것으로 의도된다.
본원에서 "절제"란, 결합 및/또는 활성의 감소 또는 제거를 의미한다. 따라서, 예를 들어, "FcγR 결합의 절제"는 Fc 영역 아미노산 변이체가 특정 변이체를 함유하지 않는 Fc 영역에 비해 50% 미만의 출발 결합을 갖는 것을 의미하며, 여기서 70-80-90-95-98% 미만의 결합 손실이 바람직하고, 일반적으로 상기 결합은 Biacore 검정에서 검출 가능한 결합 수준 미만이다. 특히, FcγR 결합의 절제에 사용되는 것은 도 4에 제시된 것들이다. 하지만, 달리 언급되지 않는 한, 본 발명의 Fc 단량체는 FcRn에 대한 결합을 유지한다.
본원에 사용된 "ADCC" 또는 "항체 의존적 세포 매개 세포독성"이란, FcγR을 발현하는 비(非)특이적 세포독성 세포가 표적세포 상의 결합된 항체를 인식하고, 이어서 표적세포의 용해를 유발하는 세포 매개 반응을 의미한다. ADCC는 FcγRIIIa에 대한 결합과 상관관계가 있고, FcγRIIIa에 대한 결합 증가는 ADCC 활성을 증가시킨다. 본원에 논의된 바와 같이, 본 발명의 다수의 구현예는 ADCC 활성을 완전히 제거한다.
본원에서 "변형"이란, 폴리펩타이드 서열에서의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실, 또는 단백질에 화학적으로 연결된 모이어티로의 변경을 의미한다. 예를 들어, 변형은 단백질에 부착된 변경된 탄수화물 또는 PEG 구조일 수 있다. 본원에서 "아미노산 변형"이란, 폴리펩타이드 서열에서의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실을 의미한다. 명확성을 위해, 달리 언급되지 않는 한, 아미노산 변형은 항상 DNA에 의해 코딩된 아미노산, 예를 들어 DNA 및 RNA에 코돈을 갖는 20개의 아미노산에 대한 것이다.
본원에서 "아미노산 치환" 또는 "치환"이란, 모 폴리펩타이드 서열에서 특정 위치의 아미노산을 상이한 아미노산으로 대체하는 것을 의미한다. 특히, 일부 구현예에서, 치환은 특정 위치에서 자연적으로 발생하지 않는(유기체 내에서 또는 임의의 유기체에서 자연적으로 발생하지 않는) 아미노산에 대한 것이다. 예를 들어, 치환 E272Y 또는 272Y는 변이체 폴리펩타이드, 이러한 경우 272번 위치의 글루탐산이 티로신으로 대체된 Fc 변이체를 나타낸다. 명확성을 위해, 핵산 코딩 서열은 변경하지만, 출발 아미노산은 변경하지 않도록 조작된 단백질(예를 들어, CGG(아르기닌을 인코딩함)를 CGA(여전히 아르기닌을 인코딩함)와 교환하여 숙주 유기체 발현 수준을 증가시킴)은 "아미노산 치환"이 아니며; 즉, 동일한 단백질을 인코딩하는 새로운 유전자의 생성에도 불구하고, 단백질이 시작된 특정 위치에서 동일한 아미노산을 갖는 경우, 이는 아미노산 치환이 아니다.
본원에 사용된 "아미노산 삽입" 또는 "삽입"이란, 모 폴리펩타이드 서열의 특정 위치에 아미노산 잔기 또는 서열을 부가하는 것을 의미한다. 예를 들어, -233E는 233번 위치 이후와 234번 위치 이전에 글루탐산의 삽입을 나타낸다. 또한, -233ADE 또는 A233ADE는 233번 위치 이후 및 234번 위치 이전에 AlaAspGlu의 삽입을 나타낸다.
본원에 사용된 "아미노산 결실" 또는 "결실"이란, 모 폴리펩타이드 서열의 특정 위치에서 아미노산 잔기 또는 서열을 제거하는 것을 의미한다. 예를 들어, E233, E233#, E233() 또는 E233del은 233번 위치에 있는 글루탐산의 결실을 나타낸다. 또한, EDA233- 또는 EDA233#은 233번 위치에서 시작하는 GluAspAla 서열의 결실을 나타낸다.
본원에 사용된 "변이체 단백질", "단백질 변이체" 또는 "변이체"란, 적어도 하나의 변형에 의해 모 단백질과 다른 단백질을 의미한다. 단백질 변이체는 단백질 자체, 단백질을 포함하는 조성물, 이를 인코딩하는 아미노산 서열, 또는 이를 인코딩하는 DNA 서열을 나타낼 수 있다. 바람직하게는, 단백질 변이체는 모 단백질과 비교하여 적어도 하나의 아미노산 변형, 예를 들어 모 단백질과 비교하여 약 1 내지 약 70개의 아미노산 변형, 바람직하게는 약 1개 내지 약 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 이러한 변형은 부가, 결실 또는 치환일 수 있다. 하기에 기재되는 바와 같이, 일부 구현예에서, 모 폴리펩타이드, 예를 들어 Fc 모 폴리펩타이드는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4의 Fc 영역과 같은, 인간 야생형 서열이다. 본원의 단백질 변이체 서열은 바람직하게는 모 단백질 서열과 적어도 약 80%의 동일성, 가장 바람직하게는 적어도 약 90%의 동일성, 더욱 바람직하게는 적어도 약 95-98-99%의 동일성을 보유할 것이다.
본원에 사용된 "단백질"이란, 적어도 2개의 공유결합으로 부착된 아미노산을 의미하며, 이에는 단백질, 폴리펩타이드, 올리고펩타이드 및 펩타이드가 포함된다. 생물학적 기능성 유닛(unit)이 둘 이상의 단백질을 포함하는 경우, 각각의 단백질은 "단량체" 또는 "서브유닛(subunit)" 또는 "도메인"으로 지칭될 수 있으며; 생물학적 기능성 분자는 "복합체"로 지칭될 수 있다.
본원에 사용된 "단백질"이란, 적어도 2개의 공유결합으로 부착된 아미노산을 의미하며, 이에는 단백질, 폴리펩타이드, 올리고펩타이드 및 펩타이드가 포함된다. 생물학적 기능성 분자 또는 복합체가 둘 이상의 단백질을 포함하는 경우, 각각의 단백질은 "단량체" 또는 "서브유닛" 또는 "도메인"으로 지칭될 수 있으며; 생물학적 기능성 분자는 "복합체"로 지칭될 수 있다. 일부 구현예에서, 기능성 복합체의 둘 이상의 단백질은 비공유결합으로 부착되어 있다. 일부 구현예에서, "단량체"라는 용어는, 단백질(들)의 하나 이상의 구성요소, 단편 또는 서브유닛을 포함하며, 이러한 구성요소, 단편 또는 서브유닛이 공유결합으로 부착되어 있는 폴리펩타이드 또는 단백질을 나타낸다.
본원에 사용된 "잔기"란, 단백질 및 이의 관련 아미노산 정체의 위치를 의미한다. 예를 들어, 297번 아스파라긴(Asn297 또는 N297로도 지칭됨)은 인간 항체 IgG1에서 297번 위치의 잔기이다.
본원에 사용된 "IgG 서브클래스 변형" 또는 "아이소타입(isotype) 변형"이란, 하나의 IgG 아이소타입의 하나의 아미노산을 상이한 정렬된 IgG 아이소타입의 상응하는 아미노산으로 전환시키는 아미노산 변형을 의미한다. 예를 들어, EU 296번 위치에 IgG1은 티로신을 포함하고 IgG2는 페닐알라닌을 포함하기 때문에, IgG2에서의 F296Y 치환은 IgG 서브클래스 변형으로 간주된다.
각 IgG 사슬의 카르복시 말단 부분은 주로 효과기 기능을 담당하는 불변 영역을 정의한다. Kabat 등은 중쇄 및 경쇄의 가변 영역의 수많은 1차 서열을 수집하였다. 서열의 보존 정도를 기반으로, 이들은 개별 1차 서열을 CDR 및 프레임워크로 분류하고, 이의 목록을 작성하였다(문헌[SEQUENCES OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, 5th edition, NIH publication, No. 91-3242, E.A. Kabat et al.](이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨) 참조). 본 명세서 전반에 걸쳐, Kabat 넘버링 시스템은 일반적으로 가변 도메인에서의 잔기(대략, 경쇄 가변 영역의 1번 내지 107번 잔기 및 중쇄 가변 영역의 1번 내지 113번 잔기)를 언급할 때 사용되고, EU 넘버링 시스템은 Fc 영역의 경우에 사용된다(예를 들어, 상기 Kabat 등의 문헌(1991) 참조).
면역글로불린의 IgG 서브클래스에는, 중쇄에 몇몇 면역글로불린 도메인이 존재한다. 본원에서 "면역글로불린(Ig) 도메인"이란, 별개의 3차 구조를 갖는 면역글로불린의 영역을 의미한다. 본 발명에서 관심있는 것은 불변 중쇄(CH) 도메인 및 힌지 도메인을 포함하는 중쇄 도메인이다. IgG 항체의 맥락에서, IgG 아이소타입은 각각 3개의 CH 영역을 갖는다. 따라서, IgG의 맥락에서 "CH" 도메인은 다음과 같다: "CH1"은 Kabat에서와 같이 EU 인덱스에 따라 118번 내지 215번 위치를 나타낸다. "힌지"는 Kabat에서와 같이 EU 인덱스에 따라 216번 내지 230번 위치를 나타낸다. "CH2"는 Kabat에서와 같이 EU 인덱스에 따라 231번 내지 340번 위치를 나타내고, "CH3"은 Kabat에서와 같이 EU 인덱스에 따라 341번 내지 447번 위치를 나타낸다. 표 1에 제시된 바와 같이, 중쇄 도메인의 정확한 넘버링 및 배치는 상이한 넘버링 시스템들 간에 상이할 수 있다. 본원에 제시되고 하기에 기재되는 바와 같이, pI 변이체는 하기 논의되는 힌지 영역뿐 아니라 하나 이상의 CH 영역에 있을 수 있다.
중쇄의 또 다른 유형의 Ig 도메인은 힌지 영역이다. 본원에서 "힌지" 또는 "힌지 영역" 또는 "항체 힌지 영역" 또는 "면역글로불린 힌지 영역"이란, 항체의 제1 중쇄 불변 도메인과 제2 중쇄 불변 도메인 사이에 아미노산을 포함하는 가요성 폴리펩타이드를 의미한다. 구조적으로, IgG CH1 도메인은 EU 215번 위치에서 종결되고, IgG CH2 도메인은 EU 231번 잔기 위치에서 시작된다. 따라서, IgG의 경우, 항체 힌지는 본원에서 216번(IgG1에서 E216) 내지 230번(IgG1에서 P230) 위치를 포함하도록 정의되며, 여기서 넘버링은 Kabat에서와 같이 EU 인덱스에 따른다. 일부 구현예에서, 예를 들어 Fc 영역의 맥락에서, 일반적으로 216번 내지 230번 위치를 나타내는 힌지가 포함된다. 본원에 언급된 바와 같이, pI 변이체는 또한 힌지 영역에서 만들어질 수 있다.
본원에 사용된 "비(非)자연 발생 변형"이란, 아이소타입이 아닌 아미노산 변형을 의미한다. 예를 들어, IgG 중 어느 것도 434번 위치에 세린을 포함하지 않기 때문에, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4(또는 이들의 혼성체)에서의 434S 치환은 비자연 발생 변형으로 간주된다.
본원에 사용된 "아미노산" 및 "아미노산 정체"란, DNA 및 RNA에 의해 코딩되는 20개의 자연 발생 아미노산 중 하나를 의미한다.
본원에 사용된 "효과기 기능"이란, 항체 Fc 영역과 Fc 수용체 또는 리간드의 상호작용으로부터 유도된 생화학적 사건을 의미한다. 효과기 기능에는, 비제한적으로, ADCC, ADCP 및 CDC가 포함된다.
본원에 사용된 "IgG Fc 리간드" 또는 "Fc 리간드"란, IgG 항체의 Fc 영역에 결합하여 Fc/Fc 리간드 복합체를 형성하는 임의의 유기체로부터의 분자, 바람직하게는 폴리펩타이드를 의미한다. Fc 리간드에는, 비제한적으로, FcγRI, FcγRII, FcγRIII, FcRn, C1q, C3, 만난 결합 렉틴, 만노오스 수용체, 포도상구균 단백질 A, 연쇄상구균 단백질 G 및 바이러스 FcγR이 포함된다. Fc 리간드는 또한 FcγR과 상동성인 Fc 수용체의 패밀리인 Fc 수용체 상동체(FcRH)를 포함한다(문헌[Davis et al., 2002, Immunological Reviews 190:123-136](이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)). Fc 리간드는 Fc에 결합하는 발견되지 않은 분자를 포함할 수 있다. 특정 IgG Fc 리간드는 FcRn 및 Fc 감마 수용체이다.
본원에 사용된 "Fc 감마 수용체", "FcγR" 또는 "Fc감마R"이란, IgG 항체 Fc 영역에 결합하고 FcγR 유전자에 의해 인코딩되는 단백질 패밀리의 임의의 구성원을 의미한다. 인간에서, 이러한 패밀리에는, 비제한적으로, 동형(isoform) FcγRIa, FcγRIb 및 FcγRIc를 포함하는 FcγRI(CD64); 동형 FcγRIIa(알로타입 H131 및 R131을 포함함), FcγRIIb(FcγRIIb-1 및 FcγRIIb-2를 포함함) 및 FcγRIIc를 포함하는 FcγRII(CD32); 및 동형 FcγRIIIa(알로타입 V158 및 F158을 포함함) 및 FcγRIIIb(알로타입 FcγRIIb-NA1 및 FcγRIIb-NA2를 포함함)를 포함하는 FcγRIII(CD16)(문헌[Jefferis et al., 2002, Immunol Lett 82:57-65](이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)), 및 임의의 발견되지 않은 인간 FcγR 또는 FcγR 동형 또는 알로타입이 포함된다. FcγR은, 비제한적으로, 인간, 마우스, 래트, 토끼 및 원숭이를 포함하는 임의의 유기체로부터 유래될 수 있다. 마우스 FcγR에는, 비제한적으로, FcγRI(CD64), FcγRII(CD32), FcγRIII(CD16) 및 FcγRIII-2(CD16-2), 및 임의의 발견되지 않은 마우스 FcγR 또는 FcγR 동형 또는 알로타입이 포함된다.
본원에 사용된 "FcRn" 또는 "신생아 Fc 수용체"란, IgG 항체 Fc 영역에 결합하고 적어도 부분적으로 FcRn 유전자에 의해 인코딩되는 단백질을 의미한다. FcRn은, 비제한적으로, 인간, 마우스, 래트, 토끼 및 원숭이를 포함하는 임의의 유기체로부터 유래될 수 있다. 당업계에 공지된 바와 같이, 기능성 FcRn 단백질은 종종 중쇄 및 경쇄로 지칭되는 2개의 폴리펩타이드를 포함한다. 경쇄는 베타-2-마이크로글로불린(β2-마이크로글로불린)이고, 중쇄는 FcRn 유전자에 의해 인코딩된다. 본원에 달리 언급되지 않는 한, FcRn 또는 FcRn 단백질은 FcRn 중쇄와 β2-마이크로글로불린의 복합체를 나타낸다. 다양한 Fc 변이체는 FcRn에 대한 결합을 증가시키고, 일부 경우에 혈청 반감기를 증가시키는 데 사용될 수 있다. 일반적으로, 달리 언급되지 않는 한, 본 발명의 Fc 단량체는 FcRn에 대한 결합을 유지한다(하기 언급되는 바와 같이, FcRn에 대한 결합을 증가시키는 아미노산 변이체를 포함할 수 있음).
본원에 사용된 "모 폴리펩타이드"란, 변이체를 생성하기 위해 후속으로 변형되는 출발 폴리펩타이드를 의미한다. 모 폴리펩타이드는 자연 발생 폴리펩타이드, 또는 자연 발생 폴리펩타이드의 변이체 또는 조작된 버전일 수 있다. 모 폴리펩타이드는 폴리펩타이드 자체, 모 폴리펩타이드를 포함하는 조성물, 또는 이를 인코딩하는 아미노산 서열을 나타낼 수 있다.
본원에 사용된 "Fc" 또는 "Fc 영역" 또는 "Fc 도메인"이란, 항체의 불변 영역을 포함하는, 일부 경우에는 제1 불변 영역 면역글로불린 도메인(예를 들어, CH1)의 전부 또는 이의 일부를 제외한, 일부 경우에는 선택적으로 힌지의 전부 또는 일부를 포함하는 폴리펩타이드를 의미한다. IgG의 경우, Fc 도메인은 면역글로불린 도메인 CH2 및 CH3(Cγ2 및 Cγ3), 및 선택적으로 CH1(Cγ1)과 CH2(Cγ2) 사이의 힌지 영역의 전부 또는 일부를 포함한다. 따라서, 일부 경우에, Fc 도메인은, N-말단에서 C-말단으로, CH2-CH3 및 힌지-CH2-CH3을 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 도메인은 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4에서 유래된 것이며, 여기서 IgG1 힌지-CH2-CH3 및 IgG4 힌지-CH2-CH3이 특히 다수의 구현예에서 사용된다. 또한, 인간 IgG1 Fc 도메인의 경우, 흔히 힌지는 C220S 아미노산 치환을 포함한다. 나아가, 인간 IgG4 Fc 도메인의 경우, 흔히 힌지는 S228P 아미노산 치환을 포함한다. Fc 영역의 경계는 달라질 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 통상적으로 이의 카르복실 말단에 잔기 E216, C226 또는 A231을 포함하는 것으로 정의되며, 여기서 넘버링은 Kabat에서와 같이 EU 인덱스에 따른다. 일부 구현예에서, 하기에 보다 충분히 기재되어 있는 바와 같이, 예를 들어 하나 이상의 FcγR 또는 FcRn에 대한 결합을 변경시키기 위해 Fc 영역에 대한 아미노산 변형이 이루어진다.
당업자가 이해하는 바와 같이, 중쇄 불변 영역 도메인의 정확한 넘버링 및 배치는 상이한 넘버링 시스템들 간에 상이할 수 있다. EU 및 Kabat에 따른 중쇄 불변 영역 넘버링의 유용한 비교는 문헌[Edelman et al., 1969, Proc Natl Acad Sci USA 63:78-85], 및 문헌[Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., United States Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda](이들은 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)을 참조한다.
본원에 사용된 "Fc 변이체" 또는 "변이형 Fc"는, Fc 도메인에 아미노산 변형을 포함하는 단백질을 의미한다. 이러한 변형은 부가, 결실 또는 치환일 수 있다. 본 발명의 Fc 변이체는 이를 구성하는 아미노산 변형에 따라 정의된다. 따라서, 예를 들어 N434S 또는 434S는 모 Fc 폴리펩타이드와 비교하여 434번 위치에 세린에 대한 치환을 갖는 Fc 변이체이며, 여기서 넘버링은 EU 인덱스에 따른다. 마찬가지로, M428L/N434S는 모 Fc 폴리펩타이드와 비교하여 치환 M428L 및 N434S를 갖는 Fc 변이체로 정의된다. WT 아미노산의 정체가 명시되지 않을 수 있으며, 이러한 경우 상기 언급된 변이체는 428L/434S로 지칭된다. 치환이 제공되는 순서는 임의적이며, 즉, 예를 들어 428L/434S는 434S/428L 등과 동일한 Fc 변이체라는 점에 주목해야 한다. 항체, 또는 이의 유도체 및 단편과 관련하여 본 발명에서 논의된 모든 위치에 대하여, 달리 언급되지 않는 한, 아미노산 위치 넘버링은 EU 인덱스에 따른다. EU 인덱스, 또는 Kabat 또는 EU 넘버링 체계에서와 같은 EU 인덱스는 EU 항체의 넘버링을 나타낸다(문헌[Edelman et al., 1969, Proc Natl Acad Sci USA 63:78-85](이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)). 이러한 변형은 부가, 결실 또는 치환일 수 있다.
본원에 사용된 "융합 단백질"이란, 적어도 2개의 단백질 또는 단백질 도메인의 공유결합형 결합을 의미한다. 융합 단백질은 인공 서열, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 도메인 링커, 변이형 Fc 도메인, 변이형 IL-12p40 서브유닛 도메인, 변이형 IL-12p35 서브유닛 도메인 등을 포함할 수 있다. 본원에서 "Fc 융합 단백질" 또는 "면역부착소(immunoadhesin)"란, 일반적으로 하나 이상의 상이한 단백질 도메인에 (선택적으로 본원에 기재된 바와 같은 도메인 링커를 통해) 연결된 Fc 영역을 포함하는 단백질을 의미한다. 따라서, "IL-12 Fc 융합체"는 본원에 기재된 바와 같은 IL-12p40 서브유닛, IL12p35 서브유닛 및/또는 단일 사슬 IL-12 복합체(scIL-12)에 (선택적으로, 하지만 통상적으로 도메인 링커를 통해) 연결된 Fc 영역을 포함한다. 일부 경우에서, 2개의 Fc 융합 단백질은 동종이량체 Fc 융합 단백질 또는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 형성할 수 있으며, 여기서 일부 경우에는 후자가 바람직하다. 일부 경우에, 이종이량체 Fc 융합 단백질 중 하나의 단량체는 Fc 도메인 단독(예를 들어, "빈 Fc 도메인")을 포함하고, 다른 하나의 단량체는 변이형 Fc 도메인과, 본원에 개괄된 바와 같은 1개 또는 2개의 IL-12 서브유닛 도메인을 포함하는 Fc 융합체이다.
본원에 사용된 "위치"란, 단백질 서열 내 위치를 의미한다. 위치는 순차적으로, 또는 확립된 형식, 예를 들어 항체 넘버링에 대한 EU 인덱스에 따라 넘버링될 수 있다.
본 발명의 이종이량체 단백질의 단량체의 맥락에서 "가닥 배열(strandedness)"이란, "일치"하는 DNA의 2개의 가닥과 유사하게, 이종이량체화 변이체가 이종이량체를 형성하기 위해 "일치"하는 능력을 보존, 생성 및/또는 증강시키도록 각각의 단량체에 혼입됨을 의미한다. 예를 들어, 일부 pI 변이체가 단량체 A로 조작되는 경우(예를 들어, pI를 더 높게 만드는 경우), 또한 이용될 수 있는 "전하 쌍"인 입체 변이체는 pI 변이체를 방해하지 않으며, 예를 들어 pI를 더 높게 만드는 전하 변이체는 두 가지 기능을 모두 보존하기 위해 동일한 "가닥" 또는 "단량체"에 배치된다. 유사하게는, 하기에 보다 충분히 개괄되는 바와 같이 세트의 쌍으로 된 "비대칭" 변이체의 경우, 당업자는, pI 분리가 비대칭체의 pI를 사용하여 최대화되도록, 한 쌍의 세트를 혼입시키는 어떠한 가닥 또는 단량체가 들어갈 것인지를 결정하는 데 pI를 고려할 것이다.
본원에서 "야생형 또는 WT"란, 대립유전자 변이를 포함하는, 자연에서 발견되는 아미노산 서열 또는 뉴클레오타이드 서열을 의미한다. WT 단백질은 의도적으로 변형되지 않은 아미노산 서열 또는 뉴클레오타이드 서열을 갖는다.
본 발명의 이종이량체 단백질은 일반적으로 단리되거나 재조합된다. 본원에 개시된 다양한 폴리펩타이드를 기재하는 데 사용될 때 "단리된"은, 발현된 세포 또는 세포 배양물로부터 식별되고, 분리 및/또는 회수된 폴리펩타이드를 의미한다. 통상적으로, 단리된 폴리펩타이드는 적어도 하나의 정제 단계에 의해 제조될 것이다. "단리된 단백질"은 숙주세포 단백질과 같은 세포 배양물로부터의 다른 단백질이 실질적으로 없는 단백질을 나타낸다. "재조합"은 외인성 숙주세포에서 재조합 핵산 기법을 이용하여 단백질이 생성되는 것을 의미한다.
단백질 서열에 대한 "아미노산 서열 동일성 백분율(%)"은 서열을 정렬하고, 필요한 경우 갭을 도입하여 최대 서열 동일성%를 달성하고, 임의의 보존적 치환을 서열 동일성의 일부로서 간주하지 않은 후, 특정(모) 서열의 아미노산 잔기와 동일한 후보 서열 내 아미노산 잔기의 백분율(%)로 정의된다. 아미노산 서열 동일성%를 결정하기 위한 정렬은, 예를 들어 BLAST, BLAST-2, ALIGN 또는 Megalign(DNASTAR) 소프트웨어와 같은 공개적으로 이용 가능한 컴퓨터 소프트웨어를 사용하여 당업계의 기술에 속하는 다양한 방식으로 달성될 수 있다. 당업자는, 비교되는 서열의 전체 길이에 대하여 최대 정렬을 달성하는 데 필요한 임의의 알고리즘을 포함하여, 정렬 측정을 위한 적절한 매개변수를 결정할 수 있다. 하나의 특정한 프로그램은 미국 특허출원공개 제20160244525호의 단락 [0279] 내지 [0280]에 개괄된 ALIGN-2 프로그램이며, 상기 문헌은 본원에 참조로서 인용된다.
본 발명의 아미노산 서열("발명 서열")과 모 아미노산 서열 사이의 동일성 정도는, 2개 서열의 정렬에서 정확한 매칭의 수를, "발명 서열"의 길이 또는 모 서열의 길이(어느 것이든 가장 짧은 쪽)로 나눈 값으로 계산된다. 결과는 동일성%로 표현된다.
일부 구현예에서, 2개 이상의 아미노산 서열은 적어도 50%, 60%, 70%, 80% 또는 90% 동일하다. 일부 구현예에서, 2개 이상의 아미노산 서열은 적어도 95%, 97%, 98%, 99% 또는 심지어 100% 동일하다.
본원에서 "IL-12p40 서브유닛 도메인"은, β-사슬(p40 서브유닛; IL-12p40)을 의미한다. 본원에 논의된 바와 같이, IL-12p40 서브유닛 도메인은 하기에 보다 상세하게 논의되는 바와 같은(예를 들어, 도 20, 도 23 및 도 29 참조), 야생형 인간 서열(예를 들어, 도 1의 서열번호 XX) 또는 이의 변이체일 수 있다.
본원에서 "IL-12p35 서브유닛 도메인"은, α-사슬(p35 서브유닛; IL-12p35)을 의미한다. 본원에 논의된 바와 같이, IL-12p35 서브유닛 도메인은 하기에 보다 상세하게 논의되는 바와 같은(예를 들어, 도 20, 도 23 및 도 29 참조), 야생형 인간 서열(예를 들어, 도 1의 서열번호 XX) 또는 이의 변이체일 수 있다.
본 발명의 IL-12 서브유닛 도메인은, 함께 회합될 때, IL-12 수용체 β1과 IL-12 수용체 β2를 포함하는 이량체 IL-12 수용체 복합체에 특이적으로 결합한다. 특이적 결합의 강도 또는 친화성은 상호작용의 해리 상수(KD)로 표현될 수 있으며, 여기서 더 작은 KD는 더 높은 친화성을 나타내고, 더 큰 KD는 더 낮은 친화성을 나타낸다. 결합 특성은 Biacore 및 Octet 방법론을 포함하는, 생물층 간섭계 및 표면 플라즈몬 공명 기반 방법과 같은 당업계에 널리 공지된 방법에 의해 결정될 수 있다. 하나의 이러한 방법은 항원 결합 부위/항원 또는 수용체/리간드 복합체 회합 및 해리의 속도를 측정하는 것을 수반하며, 여기서 속도는 복합체 파트너의 농도, 상호작용의 친화성, 및 양쪽 방향에서 속도에 동일하게 영향을 미치는 기하학적 매개변수에 따라 달라진다. 따라서, 회합 속도(ka) 및 해리 속도(kd)가 모두 결정될 수 있으며, kd/ka의 비는 해리 상수 KD와 동일하며(예를 들어, 문헌[Nature 361:186-187 (1993)] 및 문헌[Davies et al. (1990) Annual Rev Biochem 59:439-473] 참조), 상기 문헌들은 모두 그 안의 방법에 대해 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다.
특정 분자에 대한 특이적 결합은, 예를 들어 리간드(이러한 경우, 일반적으로 수용체)에 대하여 적어도 약 10-4 M, 적어도 약 10-5 M, 적어도 약 10-6 M, 적어도 약 10-7 M, 적어도 약 10-8 M, 적어도 약 10-9 M, 대안적으로 적어도 약 10-10 M, 적어도 약 10-11 M, 적어도 약 10-12 M 또는 그 이상의 KD를 갖는 분자에 의해 나타날 수 있다. 전형적으로, 수용체에 특이적으로 결합하는 분자는 대조군 분자에 비해 수용체에 대하여 20배, 50배, 100배, 500배, 1000배, 5,000배, 10,000배 또는 그 이상의 KD를 가질 것이다.
또한, 특정 분자에 대한 특이적 결합은, 예를 들어 분자가 대조군에 비해 수용체에 대하여 적어도 20배, 50배, 100배, 500배, 1000배, 5,000배, 10,000배 또는 그 이상의 리간드 또는 수용체에 대한 ka 또는 해리 속도를 갖는 것으로 나타날 수 있다.
본원에서 "융합된" 또는 "공유결합으로 연결된"이란, 구성요소(예를 들어, IL-12 서브유닛 및 Fc 도메인)가 직접 또는 본원에 개괄된 도메인 링커를 통해 간접적으로 펩타이드 결합에 의해 연결되어 있다는 것을 의미한다.
본원에 사용된 "단일 사슬"이라는 용어는, 펩타이드 결합에 의해 선형으로 연결된 아미노산 도메인을 포함하는 분자를 나타낸다. 특정 구현예에서, 생물학적 기능성 IL-12는 단일 사슬 IL-12 복합체 또는 "scIL-12"이며, 즉, IL-12p35 서브유닛 및 IL-12p40 서브유닛은 융합되어 단일 펩타이드 사슬을 형성한다. 특정한 이러한 구현예에서, IL-12p35 서브유닛의 C-말단은 IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결된다("scIL-12(p35/p40)"로 지정됨). 또 다른 특정한 이러한 구현예에서, IL-12p40 서브유닛의 C-말단은 IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결된다("scIL-12(p40/p35)"로 지정됨). 또한, 이러한 복합체가 Fc 도메인에 추가로 융합되는 경우, 이들은 여전히 "단일 사슬"이다. 이러한 단일 사슬 구조체는, p35 및 p40 서브유닛이 동일한 아미노산 사슬에 존재하는 경우, 여전히 2개의 아미노산 사슬(예를 들어, 도 8c 및 도 8d에 제시되어 있음, scIL-12(p35/p40) 구성요소 및 "빈 아암" Fc 구성요소)을 함유하는 이종이량체 복합체의 일부라는 점에 유의해야 한다. 즉, 이종이량체 복합체를 구성하는 2개의 단일 사슬이 존재한다.
본 발명의 융합 단백질은 도 8에 도시된 바와 같은 이종이량체 형식뿐 아니라, 도 14 및 도 48에 도시된 바와 같은 동종이량체 형식을 포함하여, 다양한 형식을 취할 수 있다.
III. 이종이량체 Fc 융합 단백질
일부 양태에서, 본 발명은 일반적으로 하나 이상의 상이한 IL-12 단백질 도메인에 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 연결된 Fc 영역을 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질에 관한 것이다. 이러한 이종이량체 융합 단백질은, 일반적으로 도 8에 도시된 바와 같이, 다수의 상이한 형식을 취할 수 있다. 하나의 양태에서, 이종이량체 Fc 융합 단백질은, IL-12Rβ1/β2의 IL-12 수용체 복합체에 결합하기 위해 함께 존재하도록 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛을 상이한 배향으로 포함하는 IL-12 이종이량체 Fc 융합 단백질이다. Fc 도메인은 IgG Fc 도메인, 예를 들어 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 Fc 도메인에서 유도될 수 있으며, 특히 IgG1 및 IgG4 Fc 도메인이 본 발명에서 사용된다. 본원에 기재된 IgG1 Fc 도메인은, 종종, 항상은 아니지만, 이펙터 기능을 절제하는 절제 변이체와 함께 사용될 수 있다. 유사하게, 낮은 이펙터 기능을 목적으로 하는 경우, IgG4 Fc 도메인이 사용될 수 있다.
본원에 기재되고 당업계에 공지된 바와 같이, 본 발명의 이종이량체 단백질은 상이한 도메인을 포함하며, 이는 중첩될 수도 있다. 이러한 도메인에는, 비제한적으로, Fc 도메인, CH2 도메인, CH3 도메인 및 힌지 도메인, IL-12p40 서브유닛 도메인 및 Il-12p35 서브유닛 도메인이 포함된다. 본원에 기재된 바와 같이, 이러한 도메인은, 일반적으로 도 8에 개괄된 바와 같이, 상이한 형식으로 함께 연결된다.
본원의 일부 구현예에서, 단백질 단편, 예를 들어 IL-12p40 또는 IL-12p35가 Fc 도메인에 부착되는 경우, Fc 도메인의 힌지의 전부 또는 일부에 부착되는 것은 단백질 단편의 C-말단이며; 예를 들어 이는 일반적으로 IgG1 힌지의 시작 부분인 EPKS 서열에 부착된다. 본원의 다른 구현예에서, 단백질 단편, 예를 들어 IL-12p40 또는 IL-12p35가 Fc 도메인에 부착되는 경우, 이는 CH3 도메인의 C-말단에 부착되는 단백질 단편의 N-말단이다.
Fc 도메인 단백질의 본원에 개괄된 일부 구조체 및 서열에서, IL-12p40 또는 IL-12p35 단백질 단편의 C-말단은 도메인 링커의 N-말단에 부착되고, 이의 C-말단은 불변 Fc 도메인의 N-말단에 부착에 부착되지만(IL-12p40 또는 IL-12p35 단백질 단편-링커-Fc 도메인-C), 이는 전환될 수 있다(N-Fc 도메인-링커-IL-12p40 또는 IL-12p35 단백질 단편-C). 본원에 개괄된 다른 구조체 및 서열에서, 제1 단백질 단편의 C-말단은 선택적으로 도메인 링커를 통해 제2 단백질 단편의 N-말단에 부착되고, 제2 단백질 단편의 C-말단은 선택적으로 도메인 링커를 통해 불변 Fc 도메인의 N-말단에 부착된다. 또 다른 구조체에서, 제1 단백질 단편의 N-말단은 선택적으로 도메인 링커를 통해 제2 단백질 단편의 C-말단에 부착되고, 제2 단백질 단편의 N-말단은 선택적으로 도메인 링커를 통해 불변 Fc 도메인의 C-말단에 부착된다. 본원에 개괄된 또 다른 구조체 및 서열에서, 제1 단백질 단편 또는 제2 단백질 단편에 부착되지 않은 불변 Fc 도메인이 제공된다. 이종이량체 Fc 융합 단백질은 본원에 기재된 예시적인 단량체 Fc 도메인 단백질 중 2종 이상을 함유할 수 있다.
따라서, 일부 구현예에서, 본 발명은 자가 조립되어 이종이량체 융합 Fc 도메인 폴리펩타이드를 형성하는, 2개의 상이한 중쇄 변이형 Fc 서열의 사용에 의존하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다. 하나의 구현예에서, 이종이량체 Fc 융합 단백질은 pI 조작과 같이 이종이량체를 생성하도록 조작될 수 있는 적어도 2개의 불변 도메인을 포함한다. 사용될 수 있는 다른 Fc 도메인은 pI 조작된 본 발명의 CH1, CH2, CH3 및 힌지 도메인 중 하나 이상을 함유하는 단편을 포함한다. 특히, 도 8a 내지 8f에 도시된 형식은 이종이량체 Fc 융합 단백질이며, 이는 단백질이 이종이량체 Fc 도메인 및 적어도 하나의 단백질 단편(예를 들어, 1개, 2개 또는 그 이상의 단백질 단편)으로 자가 조립되는 2개의 회합된 Fc 서열을 갖는다는 것을 의미한다. 일부 경우에, 제1 단백질 단편은 제1 Fc 서열에 연결되고, 제2 단백질 단편은 제2 Fc 서열에 연결된다. 일부 경우에, 이종이량체 Fc 융합 단백질은 제1 Fc 서열에 연결되는 제2 단백질 단편에 연결된 제1 단백질 단편, 및 제1 단백질 단편 또는 제2 단백질 단편에 연결되지 않은 제2 Fc 서열을 포함한다.
본 발명은 하나 이상의 결합 파트너, 리간드 또는 수용체에 대한 결합을 가능하게 하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공하는 신규한 구조체에 관한 것이다. 이종이량체 Fc 융합 구조체는 항체의 중쇄의 2개 Fc 도메인, 예를 들어 "이량체"로 조립되는 2개의 "단량체"의 자가 조립 특성을 기반으로 한다. 이종이량체 Fc 융합체는 하기에 보다 충분히 논의되는 바와 같이 각각의 단량체의 아미노산 서열을 변경함으로써 만들어진다. 따라서, 본 발명은 일반적으로 결합 파트너(들), 리간드(들) 또는 수용체(들)를 몇 가지 방식으로 공동 결합시킬 수 있는 이종이량체 Fc 융합 단백질의 생성에 관한 것으로, 이는 이종이량체의 형성을 촉진시키고/시키거나 동종이량체에 비해 이종이량체의 용이한 정제를 가능하게 하도록 각각의 사슬에서 상이한 불변 영역의 아미노산 변이체에 의존한다. 본 발명의 이종이량체를 생성하는 데 사용될 수 있는 다수의 메커니즘이 존재한다. 또한, 당업자가 이해하는 바와 같이, 이러한 메커니즘은 높은 이종이량체화를 보장하도록 조합될 수 있다. 따라서, 이종이량체의 생성을 유도하는 아미노산 변이체는 "이종이량체화 변이체"로 지칭된다. 하기에 논의되는 바와 같이, 이종이량체화 변이체는 입체 변이체(예를 들어, 하기에 기재되는 "놉 앤 홀(knobs and holes)" 또는 "비대칭" 변이체, 및 하기에 기재되는 "전하 쌍" 변이체), 및 "pI 변이체"를 포함할 수 있으며, 이는 이종이량체로부터 동종이량체의 정제를 가능하게 한다. 일반적으로 WO2014/145806(이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)에 기재되고, 구체적으로 "이종이량체화 변이체"에 대하여 하기에 논의되는 바와 같이, 이종이량체화에 유용한 메커니즘은 "놉 앤 홀"("KIH"; 때때로 본원에서 "비대칭" 변이체(WO2014/145806의 논의 참조)), WO2014/145806에 기재된 바와 같은 "정전기 스티어링(electrostatic steering)" 또는 "전하 쌍", WO2014/145806에 기재된 바와 같은 pI 변이체, 및 WO2014/145806 및 하기에 개괄되는 바와 같은 일반적인 추가의 Fc 변이체를 포함한다.
본 발명에서, 이종이량체 단백질 및 항체의 용이한 정제를 이끌어 낼 수 있는 몇 가지 기본 메커니즘이 존재하며; 그 중 하나는 pI 변이체의 사용에 의존하여, 각각의 단량체, 및 후속으로 각각의 이량체 종이 상이한 pI를 갖도록 함으로써 A-A, A-B 및 B-B 이량체 단백질의 등전위 정제를 가능하게 하는 것이다. 대안적으로, 일부 형식은 또한 크기를 기준으로 한 분리를 가능하게 한다. 하기에 추가로 개괄되는 바와 같이, 또한 동종이량체에 비해 이종이량체의 형성을 "비대칭화"시킬 수 있다. 따라서, 입체 이종이량체화 변이체와, pI 또는 전하 쌍 변이체의 조합이 특히 본 발명에서 사용된다.
일반적으로, 본 발명의 특정한 용도의 구현예는, 2개 단량체와 각각의 이량체 종 사이의 pI 차이를 증가시키는 pI 변이체와 결합된, 동종이량체화 형성에 비해 이종이량체화 형성을 유리하게 하는 비대칭 변이체를 포함하는 변이체 세트에 의존한다.
또한, 하기에 보다 충분히 개괄되는 바와 같이, 이종이량체 Fc 융합 단백질의 형식에 따라, pI 변이체가 단량체의 불변 도메인 및/또는 Fc 도메인 내에 포함될 수 있거나, 도메인 링커가 사용될 수 있다. 즉, 본 발명은 한쪽 또는 양쪽 단량체 상에 있는 pI 변이체, 및/또는 하전된 도메인 링커를 제공한다. 또한, 대안적인 기능을 위한 추가의 아미노산 조작은 또한 Fc 변이체, FcRn 변이체 및 KO 변이체와 같은 pI 변경을 부여할 수 있다.
이종이량체 단백질의 정제를 가능하게 하는 분리 메커니즘으로서 pI를 이용하는 본 발명에서, 아미노산 변이체는 단량체 폴리펩타이드 중 하나 또는 둘 모두에 도입될 수 있으며; 즉, 하나의 단량체(본원에서 간단히 "단량체 A"로 지칭됨)의 pI가 단량체 B로부터 멀어지게 조작될 수 있거나, 단량체 A의 pI는 증가하고 단량체 B의 pI는 감소하도록 단량체 A 및 단량체 B 둘 모두가 변경될 수 있다. 논의된 바와 같이, 한쪽 또는 양쪽 단량체의 pI 변경은, 하전된 잔기를 제거 또는 부가하거나(예를 들어, 중성 아미노산이 양 또는 음으로 하전된 아미노산 잔기로, 예를 들어 글루타민에서 글루탐산으로 대체됨), 양 또는 음으로 하전된 잔기를 반대 전하로 변경하거나(예를 들어, 아스파르트산에서 리신으로), 또는 하전된 잔기를 중성 잔기로 변경하는(예를 들어, 전하 손실, 리신에서 세린으로) 방식으로 수행될 수 있다. 다수의 이러한 변이체들이 도면에 도시되어 있다.
따라서, 본 발명의 이러한 구현예는 이종이량체가 동종이량체로부터 분리될 수 있도록 적어도 하나의 단량체에서 pI를 충분히 변경하는 것을 제공한다. 당업자가 이해하고 하기에 추가로 논의되는 바와 같이, 이는 "야생형" 중쇄 불변 영역과 이의 pI를 증가 또는 감소시키도록 조작된 변이체 영역을 사용하거나(야생형 A : B+ 또는 야생형 A : B-), 하나의 영역을 증가시키고 다른 하나의 영역을 감소시키는(A+ : B- 또는 A- : B+) 방식으로 수행될 수 있다.
따라서, 일반적으로, 본 발명의 일부 구현예의 구성요소는 아미노산 치환("pI 변이체" 또는 "pI 치환체")을 단량체 중 하나 또는 둘 모두에 혼입시킴으로써 이량체 단백질의 단량체 중 적어도 하나(둘 모두가 아닌 경우)의 등전점(pI: isoelectric point)을 변경시키는 불변 영역의 아미노산 변이체이다. 2개의 동종이량체로부터 이종이량체를 분리시키는 것은, 2개의 단량체의 pI가 0.2, 0.3, 0.4, 0.5 또는 그 이상으로 0.1 pH 단위만큼 차이가 나는 경우에 달성될 수 있으며, 이들은 모두 본 발명에 사용된다.
당업자가 이해하는 바와 같이, 양호한 분리를 얻기 위해 각각의 또는 양쪽 단량체(들)에 포함되는 pI 변이체의 수는 부분적으로 구성요소의 출발 pI에 따라 달라질 것이다. 즉, 조작하고자 하는 단량체 또는 이의 "방향"(예를 들어, 더 양으로 또는 더 음으로)을 결정하기 위해, Fc 도메인의 서열, 및 일부 경우에 Fc 도메인에 연결된 단백질 도메인(들)이 계산되고, 이로부터 결정이 이루어진다. 당업계에 공지된 바와 같이, 상이한 Fc 도메인 및/또는 단백질 도메인은 본 발명에서 채용되는 상이한 출발 pI를 가질 것이다. 일반적으로, 본원에 개괄된 바와 같이, pI는 각각의 단량체의 총 pI 차이가 적어도 약 0.1 로그가 되도록 조작되며, 이러한 차이는 본원에 개괄된 바와 같이 0.2 내지 0.5가 바람직하다.
나아가, 당업자가 이해하고 본원에 개괄된 바와 같이, 일부 구현예에서, 이종이량체는 크기를 기준으로 동종이량체로부터 분리될 수 있다. 도면에 제시된 바와 같이, 예를 들어 몇 가지 형식은 크기를 기준으로 이종이량체와 동종이량체의 분리를 가능하게 한다.
Fc 도메인(들)의 불변 영역(들)을 사용하여 이종이량체화를 달성하기 위해 pI 변이체가 사용되는 경우, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 설계하고 정제하는 보다 모듈식인 접근법이 제공된다. 따라서, 일부 구현예에서, 이종이량체화 변이체(비대칭 이종이량체화 변이체 및 정제 이종이량체화 변이체를 포함함)는 조작되어야 한다. 또한, 일부 구현예에서, pI 변이체에서 기인한 면역원성의 가능성은, pI가 유의한 면역원성의 도입없이 변경되도록 상이한 IgG 아이소타입으로부터의 pI 변이체를 이입함으로써 유의하게 감소된다. 따라서, 해결하고자 하는 추가적인 문제는 높은 인간 서열의 함량을 갖는 낮은 pI 불변 도메인의 규명, 예를 들어 임의의 특정한 위치에서의 비(非)인간 잔기의 최소화 또는 회피이다.
이러한 pI 조작으로 발생할 수 있는 부수적 이점은 또한 혈청 반감기의 연장 및 FcRn 결합의 증가이다. 즉, 미국 특허출원 USSN 제13/194,904호(이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)에 기재된 바와 같이, 항체 불변 도메인(항체 및 Fc 융합체에서 발견되는 것들 포함)의 pI를 낮추면, 생체내에서 더 긴 혈청 보유를 유도할 수 있다. 혈청 반감기 증가를 위한 이러한 pI 변이체는 또한 정제를 위한 pI 변경을 가능하게 한다.
또한, 이종이량체화 변이체의 pI 변이체는, 동종이량체가 존재하는 경우 제거, 최소화 및 구별하는 능력이 중요하기 때문에, Fc 융합 단백질의 분석 및 품질 관리 과정에 추가적인 이점을 제공한다는 점에 주목해야 한다. 유사하게, 이종이량체 Fc 융합 단백질 생산의 재현성을 신뢰성 있게 시험하는 능력이 중요하다.
A. 이종이량체화 변이체
본 발명은 다양한 형식의 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 이종이량체 단백질을 제공하며, 이는 동종이량체로부터의 이종이량체의 형성 및/또는 정제를 가능하기 위해 이종이량체 변이체를 이용한다. 이종이량체 융합 구조체는 2개의 Fc 도메인, 예를 들어 "이량체"로 조립되는 2개의 "단량체"의 자가 조립 특성을 기반으로 한다.
다수의 적합한 이종이량체화 비대칭 변이체 세트의 쌍이 존재한다. 이러한 변이체는 "세트"의 "쌍"으로 이루어진다. 즉, 한 세트의 쌍은 제1 단량체에 혼입되고, 다른 한 세트의 쌍은 제2 단량체에 혼입된다. 이러한 세트가 반드시 하나의 단량체 상의 잔기와 다른 하나의 단량체 상의 잔기 사이에서 일대일 대응을 갖는 "놉 인 홀(knob in hole)" 변이체로서 거동할 필요가 없다는 점에 주목해야 하며; 즉, 이러한 세트의 쌍은 이종이량체 형성을 유리하게 하고 동종이량체 형성을 불리하게 하는 2개의 단량체 사이의 인터페이스를 형성함으로써, 생물학적 조건 하에 자발적으로 형성되는 이종이량체의 백분율이 예상되는 50%(25%의 동종이량체 A/A: 50%의 이종이량체 A/B: 25%의 동종이량체 B/B)가 아니라 90%를 초과하는 것을 가능하게 한다.
B. 입체 변이체
일부 구현예에서, 이종이량체의 형성은 입체 변이체의 부가에 의해 가능해질 수 있다. 즉, 각각의 중쇄에서 아미노산을 변경시키면, 상이한 중쇄는 동일한 Fc 아미노산 서열을 갖는 동종이량체를 형성하기보다 이종이량체 구조를 형성하기 위해 회합할 가능성이 높다. 적합한 입체 변이체는 미국 특허출원 USSN 제15/141,350호의 도 29 및 도 2에 포함되어 있으며, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다.
하나의 메커니즘은 일반적으로 당업계에서 이종이량체 형성을 선호하고 동종이량체 형성을 선호하지 않는 입체적 영향을 생성하는 아미노산 조작을 나타내는, "놉 앤 홀"로 지칭되며, 이는 미국 특허출원 USSN 제61/596,846호, 문헌[Ridgway et al., Protein Engineering 9(7):617 (1996)]; 문헌[Atwell et al., J. Mol. Biol. 1997 270:26]; 미국 특허 제8,216,805호(이들은 모두 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)에 기재되어 있다. 도면은 "놉 앤 홀"에 의존하는 다수의 "단량체 A - 단량체 B" 쌍을 식별한다. 또한, 문헌[Merchant et al., Nature Biotech. 16:677 (1998)]에 기재된 바와 같이, 이러한 "놉 앤 홀" 돌연변이는 다이설파이드 결합과 조합되어 형성을 이종이량체화로 편향되게 할 수 있다.
이종이량체의 생성에 사용되는 추가의 메커니즘은 때때로 문헌[Gunasekaran et al., J. Biol. Chem. 285(25):19637 (2010)](이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)에 기재된 바와 같이 "정전기 스티어링"으로 지칭된다. 이는 때때로 본원에서 "전하 쌍"으로 지칭된다. 이러한 구현예에서, 정전기는 형성을 이종이량체화로 편향되게 하는 데 사용된다. 당업자가 이해하는 바와 같이, 이는 또한 pI, 및 이에 따른 정제에 영향을 미칠 수 있기 때문에, 일부 경우에 이는 또한 pI 변이체로 간주될 수 있다. 하지만, 이는 이종이량체화를 강제하기 위해 생성되었고 정제 도구로서 사용되지 않았기 때문에, 이들은 "입체 변이체"로 분류된다. 이에는, 비제한적으로, D221R/P228R/K409R과 쌍을 이루는 D221E/P228E/L368E(예를 들어, 이들은 "단량체" 상응 세트임) 및 C220R/E224R/P228R/K409R과 쌍을 이루는 C220E/P228E/368E가 포함된다.
추가의 단량체 A 및 단량체 B는 본원에 개괄된 pI 변이체 또는 미국 특허 US 2012/0149876호의 도 37에 제시된 다른 입체 변이체와 같은 다른 변이체와, 선택적으로 및 독립적으로 임의의 양으로, 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 개괄된 입체 변이체는 선택적으로 및 독립적으로 임의의 pI 변이체(또는 Fc 변이체, FcRn 변이체 등과 같은 다른 변이체)와 함께 한쪽 또는 양쪽 단량체에 혼입될 수 있으며, 이는 독립적으로 및 선택적으로 본 발명의 단백질에 포함되거나 이로부터 배제될 수 있다.
적합한 비대칭 변이체의 목록은 도 2에 제시되어 있다. 특히, 다수의 구현예에서, 비제한적으로, S364K/E357Q: L368D/K370S; L368D/K370S: S364K; L368E/K370S: S364K; T411T/E360E/Q362E: D401K; L368D/K370S: S364K/E357L; K370S: S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V: T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C: T366W/S354C)를 포함하는 세트의 쌍이 사용된다. 명명법에 관하여, 쌍 "S364K/E357Q: L368D/K370S"는 하나의 단량체가 이중 변이체 세트 S364K/E357Q를 갖고, 다른 하나의 단량체가 이중 변이체 세트 L368D/K370S를 갖는 것을 의미하며, 상기와 같이 이러한 쌍의 "가닥 배열"은 출발 pI에 따라 달라진다.
C. 이종이량체를 위한 pI(등전점) 변이체
일반적으로, 당업자가 이해하는 바와 같이, 단백질의 pI를 증가시키는(염기성 변경) pI 변이체 및 단백질의 pI를 감소시키는(산성 변경) pI 변이체의 두 가지 일반적인 범주가 존재한다. 본원에 기재된 바와 같이, 이러한 변이체의 모든 조합이 사용될 수 있으며, 하나의 단량체는 야생형, 또는 야생형과 유의하게 상이한 pI를 나타내지 않는 변이체일 수 있고, 다른 하나의 단량체는 더 염기성이거나 더 산성일 수 있다. 대안적으로, 각각의 단량체는 하나가 더 염기성으로 하나가 더 산성으로 변경될 수 있다.
pI 변이체의 바람직한 조합은 미국 특허출원 USSN 제15/141,350호의 도 30에 제시되어 있으며, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다. 본원에 개괄되고 도면에 제시된 바와 같이, 이러한 변경은 IgG1과 관련하여 표시되어 있지만, 모든 아이소타입뿐 아니라 아이소타입 혼성체도 이러한 방식으로 변경될 수 있다. 중쇄 불변 도메인이 IgG2 내지 IgG4 유래인 경우, R133E 및 R133Q가 또한 사용될 수 있다.
하나의 구현예에서, pI 변이체의 바람직한 조합은, Fc 단량체 중 하나가 CH1 도메인을 포함하는 경우, 208D/295E/384D/418E/421D 변이체(인간 IgG1과 비교할 때 N208D/Q295E/N384D/Q418E/N421D)를 포함하는 하나의 단량체를 갖는다. 일부 경우에, 제2 단량체는 (GKPGS)4를 포함하는 양으로 하전된 도메인 링커를 포함한다. 일부 경우에, 제1 단량체는 208번 위치를 포함하는 CH1 도메인을 포함한다. 따라서, CH1 도메인을 포함하지 않는 구조체에서(예를 들어, 하나의 도메인 상의 CH1 도메인을 이용하지 않는 이종이량체 Fc 융합 단백질의 경우), 바람직한 음성 pI 변이형 Fc 세트는 295E/384D/418E/421D 변이체(인간 IgG1과 비교할 때 Q295E/N384D/Q418E/N421D)를 포함한다.
일부 구현예에서, 돌연변이는 216번, 217번, 218번, 219번, 220번, 221번, 222번, 223번, 224번, 225번, 226번, 227번, 228번, 229번 및 230번의 위치를 포함하는 Fc 도메인의 힌지에서 만들어진다. 따라서, pI 돌연변이, 및 특히 치환은 216번 내지 230번의 위치 중 하나 이상에서 만들어질 수 있으며, 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 돌연변이가 본 발명에 사용된다. 다시 말하면, 모든 가능한 조합이, 단독으로 또는 다른 도메인의 다른 pI 변이체와 함께, 고려된다.
힌지 도메인의 pI를 저하시키는 데 사용되는 특정한 치환에는, 비제한적으로, 221번 위치에서의 결실, 222번 위치에서의 비(非)천연 발린 또는 트레오닌, 223번 위치에서의 결실, 224번 위치에서의 비천연 글루탐산, 225번 위치에서의 결실, 235번 위치에서의 결실, 및 236번 위치에서의 결실 또는 비천연 알라닌이 포함된다. 일부 경우에, 힌지 도메인에는 pI 치환만이 일어나고, 다른 것들의 경우에는, 이러한 치환(들)이 다른 도메인의 다른 pI 변이체에 임의의 조합으로 부가된다.
일부 구현예에서, 돌연변이는 233번, 234번, 235번, 236번, 274번, 296번, 300번, 309번, 320번, 322번, 326번, 327번, 334번 및 339번의 위치를 포함하는 CH2 영역에서 만들어 질 수 있다. IgG2 백본에서 (327A와 함께) 효과기 기능을 증가시키기 위해 233번 내지 236번에서 변경이 이루어질 수 있다는 점에 주목해야 한다. 다시 말하면, 이러한 14가지 위치의 모든 가능한 조합이 이루어질 수 있으며; 예를 들어 pI 항체는 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개의 CH2 pI 치환을 가질 수 있다.
CH2 도메인의 pI를 저하시키는 데 사용되는 특정한 치환에는, 비제한적으로, 274번 위치에서의 비천연 글루타민 또는 글루탐산, 296번 위치에서의 비천연 페닐알라닌, 300번 위치에서의 비천연 페닐알라닌, 309번 위치에서의 비천연 발린, 320번 위치에서의 비천연 글루탐산, 322번 위치에서의 비천연 글루탐산, 326번 위치에서의 비천연 글루탐산, 327번 위치에서의 비천연 글리신, 334번 위치에서의 비천연 글루탐산, 339번 위치에서의 비천연 트레오닌, 및 CH2 내 및 다른 도메인과의 모든 가능한 조합이 포함된다.
이러한 구현예에서, 돌연변이는 독립적으로 및 선택적으로 355번, 359번, 362번, 384번, 389번, 392번, 397번, 418번, 419번, 444번 및 447번 위치에서 선택될 수 있다. CH3 도메인의 pI를 저하시키는 데 사용되는 특정한 치환에는, 비제한적으로, 355번 위치에서의 비천연 글루타민 또는 글루탐산, 384번 위치에서의 비천연 세린, 392번 위치에서의 비천연 아스파라긴 또는 글루탐산, 397번 위치에서의 비천연 메티오닌, 419번 위치에서의 비천연 글루탐산, 359번 위치에서의 비천연 글루탐산, 362번 위치에서의 비천연 글루탐산, 389번 위치에서의 비천연 글루탐산, 418번 위치에서의 비천연 글루탐산, 444번 위치에서의 비천연 글루탐산, 및 447번 위치에서의 결실 또는 비천연 아스파르트산이 포함된다.
D. 아이소타입 변이체
또한, 본 발명의 다수의 구현예는 특정 위치에서 하나의 IgG 아이소타입으로부터 또 다른 IgG 아이소타입으로의 pI 아미노산의 "이입"에 의존하기 때문에, 원치 않는 면역원성이 변이체에 도입될 가능성이 감소되거나 제거된다. 다수의 이러한 것들이 미국 특허출원공개 제2014/0370013호의 도 21에 제시되어 있으며, 상기 문헌은 본원에 참조로서 인용된다. 즉, IgG1은 높은 효과기 기능을 포함하는 다양한 이유에서 치료용 항체를 위한 통상의 아이소타입이다. 하지만, IgG1의 중쇄 불변 영역은 IgG2보다 높은 pI를 갖는다(8.10 대 7.31). 특정 위치의 IgG2 잔기를 IgG1 골격에 도입하면, 생성된 단량체의 pI는 저하되고(또는 증가되고), 추가로 더 긴 혈청 반감기를 나타낸다. 예를 들어, IgG1은 137번 위치에서 글리신(pI 5.97)을 갖고, IgG2는 글루탐산(pI 3.22)을 가지며, 글루탐산을 이입하는 것은 생성되는 단백질의 pI에 영향을 미칠 것이다. 하기에 기재되는 바와 같이, 다수의 아미노산 치환은 일반적으로 변이형 Fc 융합 단백질의 pI에 유의한 영향을 미치는 데 필요하다. 하지만, 하기에 논의되는 바와 같이, IgG2 분자의 변경도 혈청 반감기를 증가시킬 수 있다는 점에 주목해야 한다.
다른 구현예에서, 비(非)아이소타입 아미노산 변경은 하기에 추가로 기재되는 바와 같이, (예를 들어, 더 높은 pI 아미노산을 더 낮은 pI 아미노산으로 변경시킴으로써) 생성되는 단백질의 전반적인 전하 상태를 감소시키거나, 안정성을 위해 구조의 조정을 가능하게 하도록 이루어진다.
또한, 중쇄 불변 도메인과 경쇄 불변 도메인 둘 모두를 pI 조작하면, 이종이량체 각각의 단량체에서 유의한 변화를 확인할 수 있다. 본원에 논의된 바와 같이, 2개의 단량체의 pI를 적어도 0.5만큼 차이나게 하면, 이온 교환 크로마토그래피, 등전점 전기영동 또는 등전점에 민감한 다른 방법에 의한 분리를 가능하게 할 수 있다.
E. pI 계산
각각의 단량체의 pI는 변이체 중쇄 불변 도메인의 pI와, 변이체 중쇄 불변 도메인 및 융합 파트너를 포함하는 전체 단량체의 pI에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 일부 구현예에서, pI의 변화는 미국 특허출원공개 제2014/0370013호의 도 19에서의 도표를 사용하여, 변이체 중쇄 불변 도메인을 기준으로 계산된다. 본원에 논의된 바와 같이, 어떤 단량체를 조작할 것인지는 일반적으로 각각의 단량체의 고유의 pI에 의해 결정된다.
F. 생체내 결합에서 더 양호한 FcRn을 또한 부여하는 pI 변이체
pI 변이체가 단량체의 pI를 감소시키는 경우, 이들은 생체내 혈청 보유를 개선시키는 추가의 이점을 가질 수 있다.
아직 연구 중이지만, Fc 영역은 엔도솜에서 pH 6에서 FcRn에 결합하여 Fc를 격리시키기 때문에, 생체내에서 더 긴 반감기를 갖는 것으로 여겨진다(문헌[Ghetie and Ward, 1997 Immunol Today. 18(12): 592-598](이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)). 이어서, 엔도솜 구획은 Fc를 세포 표면으로 재순환시킨다. 이러한 구획이 세포외 공간으로 개방되면, 약 7.4의 더 높은 pH는 Fc가 다시 혈액으로 방출되도록 유도한다. Dall' Acqua 등은, 마우스에서, pH 6 및 pH 7.4에서 FcRn 결합이 증가된 Fc 돌연변이체가 실제로 감소된 혈청 농도 및 야생형 Fc와 동일한 반감기를 갖는다는 것을 보여주었다(문헌[Dall' Acqua et al. 2002, J. Immunol. 169:5171-5180](이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)). pH 7.4에서 FcRn에 대한 Fc의 친화성 증가는 Fc가 다시 혈액으로 방출되는 것을 막는 것으로 여겨진다. 따라서, 생체내 Fc의 반감기를 증가시키는 Fc 돌연변이는 더 높은 pH에서 여전히 Fc의 방출을 허용하면서 더 낮은 pH에서 FcRn 결합을 이상적으로 증가시킬 것이다. 아미노산 히스티딘은 6.0 내지 7.4의 pH 범위에서 이의 전하 상태를 변화시킨다. 따라서, Fc/FcRn 복합체의 중요한 위치에서 His 잔기를 발견하는 것은 놀라운 일이 아니다.
미국 특허출원 USSN 제12/341,769호(이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)에 구체적으로 개시된 바와 같은, FcRn 수용체에 대한 결합 증가 및 혈청 반감기 증가에 사용되는 다수의 Fc 치환이 존재하며, 이에는, 비제한적으로, 434A, 428L, 308F, 259I, 428L/434S, 259I/308F, 436I/428L, 436I, 434S, 252Y/428L, 252Y/434S, 428L/434S, 436V/428L 및 259I/308F/428L이 포함된다.
G. 추가적인 기능을 위한 추가의 Fc 변이체
pI 아미노산 변이체에 더하여, 비제한적으로, 하나 이상의 FcγR에 대한 결합 변경, FcRn에 대한 결합 변경 등을 포함하는 다양한 이유로 이루어질 수 있는 다수의 유용한 Fc 아미노산 변형이 존재한다.
따라서, 본 발명의 단백질은 pI 변이체 및 입체 변이체를 포함하는 본원에 개괄된 이종이량체화 변이체를 비롯한 아미노산 변형을 포함할 수 있다. 각각의 변이체 세트는 독립적으로 및 선택적으로 임의의 특정한 이종이량체 단백질에 포함되거나 이로부터 배제될 수 있다.
H. FcγR 변이체
따라서, 하나 이상의 Fcγ 수용체에 대한 결합을 변경하기 위해 이루어질 수 있는 다수의 유용한 Fc 치환이 존재한다. 결합을 증가시킬뿐 아니라 결합을 감소시키는 치환이 유용할 수 있다. 예를 들어, FcγRIIIa에 대한 결합 증가는 ADCC(항체 의존적 세포 매개 세포독성; FcγR을 발현하는 비특이적 세포독성 세포가 표적세포 상의 결합된 항체를 인식하고, 이어서 표적세포의 용해를 유발하는 세포 매개 반응)의 증가를 유도하는 것으로 공지되어 있다. 유사하게, FcγRIIb(억제 수용체)에 대한 결합 감소는 일부 상황에서 마찬가지로 유익할 수 있다. 본 발명에 사용되는 아미노산 치환에는, 미국 특허출원 USSN 제11/124,620호(특히 도 41), 제11/174,287호, 제11/396,495호, 제11/538,406호(이들은 모두 그 전문이, 구체적으로 그 안에 개시된 변이체에 대한 것이 본원에 명백하게 참조로서 인용됨)에 기재된 것들이 포함된다. 본원에 사용되는 특정한 변이체에는, 비제한적으로, 236A, 239D, 239E, 332E, 332D, 239D/332E, 267D, 267E, 328F, 267E/328F, 236A/332E, 239D/332E/330Y, 239D, 332E/330L, 243A, 243L, 264A, 264V 및 299T가 포함된다.
또한, FcγRIIc에 대한 친화성을 증가시키는 아미노산 치환도 본원에 개괄된 Fc 도메인 변이체에 포함될 수 있다. 예를 들어, 미국 특허출원 USSN 제11/124,620호 및 제14/578,305호에 기재된 치환이 유용하다.
I. 절제 변이체
유사하게, 기능성 변이체의 또는 다른 범주는 "FcγR 절제 변이체" 또는 "Fc 녹아웃(FcKO 또는 KO) 변이체"이다. 이러한 구현예에서, 일부 치료적 적용을 위해, Fcγ 수용체(예를 들어, FcγR1, FcγRIIa, FcγRIIb, FcγRIIIa 등) 중 하나 이상 또는 전부에 대한 Fc 도메인의 정상적인 결합을 감소시키거나 제거하여, 추가적인 작용 메커니즘을 회피하는 것이 바람직하다. 즉, 예를 들어, 다수의 구현예에서, 특히 면역조절 단백질의 사용에 있어서, 하나의 Fc 도메인이 하나 이상의 Fcγ 수용체 절제 변이체를 포함하도록 ADCC 활성을 제거하거나 유의하게 감소시키기 위해 FcγRIIIa 결합을 절제하는 것이 바람직하다. 이러한 절제 변이체는 미국 특허출원 USSN 제15/141,350호(이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)의 도 31에 도시되어 있고, 이들 각각은 독립적으로 및 선택적으로 포함되거나 배제될 수 있으며, 여기서 바람직한 양태는 EU 인덱스에 따라 G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236del/S239K, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K, E233P/L234V/L235A/G236del/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/A327G 및 E233P/L234V/L235A/G236del로 이루어지는 군에서 선택되는 절제 변이체를 이용하는 것이다. 본원에 언급된 절제 변이체는 FcγR 결합을 절제하지만, 일반적으로 FcRn 결합은 절제하지 않는다는 점에 주목해야 한다.
J. 이종이량체 변이체와 Fc 변이체의 조합
당업자가 이해하는 바와 같이, 모든 언급된 이종이량체화 변이체(비대칭 변이체 및/또는 pI 변이체를 포함함)는, 이들이 "가닥 배열" 또는 "단량체 분할"을 유지하는 한, 선택적으로 및 독립적으로 임의의 방식으로 조합될 수 있다. 또한, 모든 이러한 변이체는 임의의 이종이량체화 형식으로 조합될 수 있다.
pI 변이체의 경우에, 특히 사용되는 구현예가 도면에 도시되어 있지만, 정제를 용이하게 하기 위해 2개의 단량체 사이의 pI 차이를 변경하는 기본 규칙에 따라 다른 조합이 생성될 수 있다.
또한, 임의의 이종이량체화 변이체, 비대칭 변이체 및 pI 변이체는 또한 일반적으로 본원에 개괄된 바와 같이 Fc 절제 변이체, Fc 변이체, FcRn 변이체와 독립적으로 및 선택적으로 조합될 수 있다.
또한, 단량체 Fc 도메인은 C220S/S267K/L368D/K370S 또는 C220S/S267K/S364K/E357Q를 포함하는 아미노산 치환 세트를 포함할 수 있다.
또한, 이종이량체 Fc 융합 단백질은 비대칭 변이체(예를 들어, 미국 특허출원 USSN 제15/141,350호의 도 1a 내지 도 1c에 제시된 바와 같은 아미노산 치환 세트, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨)(특히 유용한 비대칭 변이체는 S364K/E357Q : L368D/K370S; L368D/K370S : S364K; L368E/K370S : S364K; T411T/E360E/Q362E : D401K; L368D/K370S : S364K/E357L; K370S : S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V : T366W 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택됨), 선택적으로 절제 변이체, 선택적으로 하전된 도메인 링커 및 선택적으로 pI 변이체를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, Fc 도메인은, EU 인덱스에 따라, 236R, S239D, S239E, F243L, M252Y, V259I, S267D, S267E, S67K, S298A, V308F, L328F, L328R, 330L, I332D, I332E, M428L, N434A, N434S, 236R/L328R, S239D/I332E, 236R/L328F, V259I/V308F, S267E/L328F, M428L/N43S, Y436I/M428L, N436V/M428L, V436I/N434S, Y436V/N434S, S239D/I332E/330L, M252Y/S54T/T256E, V259I/V308F/M428L, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에서 사용되는 비대칭 및 pI 변이체의 특정한 조합은 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)이며, 여기서 하나의 단량체는 Q295E/N384D/Q418E/N481D를 포함하고, 다른 하나는 양으로 하전된 도메인 링커이다. 당업계에서 이해되는 바와 같이, "놉 인 홀" 변이체는 pI를 변경시키지 않기 때문에, 어느 단량체에도 사용될 수 있다.
IV. 동종이량체 Fc 융합 단백질
일부 양태에서, 본 발명은 일반적으로 하나 이상의 상이한 단백질 도메인에 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 연결된 Fc 영역을 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질에 관한 것이다. 이러한 형식은 일반적으로 도 14 및 도 48에 제시되어 있다. 하나의 양태에서, 동종이량체 Fc 융합 단백질은, IL-12Rβ1/β2의 IL-12 수용체 복합체에 결합하기 위해 함께 존재하도록 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛을 상이한 배향으로 포함하는 IL-12 동종이량체 Fc 융합 단백질이다. Fc 도메인은 IgG Fc 도메인, 예를 들어 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 Fc 도메인에서 유도될 수 있으며, 특히 IgG1 및 IgG4 Fc 도메인이 본 발명에서 사용된다. 본원에 기재된 IgG1 Fc 도메인은, 종종, 항상은 아니지만, 이펙터 기능을 절제하는 절제 변이체와 함께 사용될 수 있다. 유사하게, 낮은 이펙터 기능을 목적으로 하는 경우, IgG4 Fc 도메인이 사용될 수 있다.
하나의 양태에서, 동종이량체 Fc 융합 단백질은, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛-선택적 링커-IL-12p35 서브유닛-선택적 링커-Fc 도메인을 포함하는 제1 단량체 및 제2 단량체를 포함한다. 일부 구현예에서, 동종이량체 Fc 융합 단백질은, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛-링커-IL-12p35 서브유닛-링커-Fc 도메인을 포함하는 제1 단량체 및 제2 단량체를 포함한다. 일 구현예의 예는 도 48a에 제시되어 있다.
또 다른 양태에서, 동종이량체 Fc 융합 단백질은, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p35 서브유닛-선택적 링커-IL-12p40 서브유닛-선택적 링커-Fc 도메인을 포함하는 제1 단량체 및 제2 단량체를 포함한다. 일부 구현예에서, 동종이량체 Fc 융합 단백질은, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p35 서브유닛-링커-IL-12p40 서브유닛-링커-Fc 도메인을 포함하는 제1 단량체 및 제2 단량체를 포함한다. 일 구현예의 예는 도 48b에 제시되어 있다.
또 다른 양태에서, 동종이량체 Fc 융합 단백질은, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-선택적 링커-IL-12p40 서브유닛-선택적 링커-IL-12p35 서브유닛을 포함하는 제1 단량체 및 제2 단량체를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질은, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-링커-IL-12p40 서브유닛-링커-IL-12p35 서브유닛을 포함한다. 일 구현예의 예는 도 48c에 제시되어 있다.
또 다른 양태에서, 동종이량체 Fc 융합 단백질은, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-선택적 링커-IL-12p35 서브유닛-선택적 링커-IL-12p40 서브유닛을 포함하는 제1 단량체 및 제2 단량체를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질은, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-링커-IL-12p35 서브유닛-링커-IL-12p40 서브유닛을 포함한다. 일 구현예의 예는 도 48d에 제시되어 있다.
일부 구현예에서, 2가 IL-12p40-Fc 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p40 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p40 도메인 단백질; ii) 선택적 제2 도메인 링커; iii) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 2가 IL-12p35-Fc 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p35 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p35 도메인 단백질; ii) 선택적 제2 도메인 링커; iii) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, (scIL-12(p40/p35))2-Fc 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p40 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p35 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 도메인 링커; v) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p40 도메인 단백질; ii) 선택적 제3 도메인 링커; iii) IL-12p35 도메인 단백질; iv) 선택적 제4 도메인 링커; v) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, (scIL-12(p35/p40))2-Fc 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p35 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p40 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 도메인 링커; v) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p35 도메인 단백질; ii) 선택적 제3 도메인 링커; iii) IL-12p40 도메인 단백질; iv) 선택적 제4 도메인 링커; v) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, Fc-(scIL-12(p40/p35))2 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p40 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 도메인 링커; v) IL-12p35 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) N-말단에서 C-말단으로, i) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p40 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 도메인 링커; v) IL-12p35 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, Fc-(scIL-12(p35/p40))2 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p35 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 도메인 링커; v) IL-12p40 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) N-말단에서 C-말단으로, i) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p35 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 도메인 링커; v) IL-12p40 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 제1 도메인 링커와 제2 도메인 링커는 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 도메인 링커와 제2 도메인 링커는 상이한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, Fc 변이체는 본원에 제공된 바와 같은 하나 이상의 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 변이체는 특정한 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인의 동종이량체화를 촉진시키는 변형은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트이다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인은 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함한다.
이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 단백질 도메인에는, 비제한적으로, 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E가 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p35 단백질 도메인에는 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D가 포함된다.
이러한 형식에서, 유용한 구현예에는, 비제한적으로, 도 14a 및 도 14b, 및 도 15에 제시된 것들이 포함된다.
동종이량체 Fc 융합 단백질의 잠재적인 구현예는, 이종이량체가 아닌 동종이량체를 제조하기 위한 목적으로 적절하게, 상기 "이종이량체 Fc 융합 단백질"이라는 제목의 섹션에 기재된 방법 및 조성물을 사용할 수 있다. 동종이량체 Fc 융합 단백질의 잠재적인 구현예는 본원에 기재된 방법 및 조성물의 임의의 조합을 사용할 수 있다.
V. 인터루킨 12
본 발명은 인터루킨 12의 생물학적 기능성 형태에 관한 것이다. IL-12p40 변이체 및/또는 IL-12p35 변이체를 포함하는 IL-12 이종이량체 Fc 단백질은, p40/p35 이종이량체 및 p40 동종이량체를 포함하는 야생형 IL-12와 비교하여 IL-12 수용체에 대한 결합 친화성이 감소 또는 저하되었다. 본 발명의 IL-12 이종이량체 Fc 단백질은 야생형 IL-12에 비해 역가가 감소 또는 저하되었다. IL-12 이종이량체 Fc 단백질은 혈청 반감기가 연장 또는 증가되었다. IL-12 이종이량체 Fc 단백질은 독성 가능성이 감소 또는 저하되었다. 본 발명의 IL-12 이종이량체 Fc 단백질은, 비제한적으로, T세포 및 NK세포와 같은 면역세포에서 STAT4 인산화를 유도하는 역가가 감소 또는 저하되었다. IL-12p40 변이체는 잠재적인 N-글리코실화 부위를 제거하는 아미노산 변형(예를 들어, 치환, 부가 및 결실)을 포함한다. IL-12p35 변이체는 잠재적인 N-글리코실화 부위를 제거하는 아미노산 변형(예를 들어, 치환, 부가 및 결실)을 포함한다. 일부 구현예에서, 본 발명의 IL-12 이종이량체 Fc 단백질은 야생형 IL-12에 비해 글리코실화가 감소/저하되었다. 일부 구현예에서, 본 발명의 IL-12 이종이량체 Fc 단백질의 글리코실화 상태는 야생형 IL-12 단백질과 상이하다. 본 발명의 IL-12 이종이량체 Fc 단백질은 야생형 IL-12에 비해 개선된 약동학을 제공한다. 또한, 이러한 IL-12 이종이량체 Fc 단백질은 치료적으로 효과적이며, 예컨대 야생형 IL-12에 비해 개선된 치료 지수를 갖는다. 본 발명의 IL-12 이종이량체 Fc 단백질은 T세포 활성화를 촉진/유도할 수 있다. 일부 구현예에서, 환자에게의 IL-12 이종이량체 Fc 단백질 중 어느 하나의 투여는 환자에서 T세포 활성화를 유도한다. 일부 예에서, 투여는 환자에서 IFN-감마 분비를 유도한다. 일부 경우에, IL-12 이종이량체 Fc 단백질의 투여는 환자에서 림프구 확장을 유도한다. IL-12 이종이량체 Fc 단백질은 고형종양 암 또는 액상종양 암과 같은 암을 치료하는 데 유용하다. 일부 구현예에서, 환자에게의 IL-12 이종이량체 Fc 단백질 중 어느 하나의 투여, 및 일부 경우에, 체크포인트 차단제와 조합으로의 투여는, 종양 크기를 감소시킨다.
상기 언급된 바와 같이, 인터루킨 12 또는 "IL-12"의 생물학적 기능성 형태는, IL-12p35 서브유닛(IL-12 서브유닛 알파)과 IL-12p40 서브유닛(IL-12 서브유닛 베타)으로 구성된 이종이량체이며, 이는 본원에서 "IL-12 이종이량체 복합체"로 지정된다. 이러한 복합체는 2가지 상이한 형식으로 사용될 수 있다. 도 8a 및 도 8b에 제시된 바와 같이, IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛은 서로 공유결합으로 부착되는 것이 아니라, 각각 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인에 공유결합으로 부착되어, 이종이량체로 조립된다. 대안적으로, IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛은, 일반적으로 도 8c 내지 도 8f에 제시된 바와 같이, 선택적으로 (본원에 기재된 바와 같은) 도메인 링커를 사용하여 공유결합으로 부착될 수 있으며, 이는 본원에서 단일 사슬 IL-12 복합체 또는 "scIL-12"로 지정된다. scIL-12 복합체에서 2개의 서브유닛의 순서는 다음과 같이 지정될 수 있다: "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결됨).
일부 구현예에서, 인간 IL-12p35 단백질은 NCBI 기준 서열번호 NP_000873.2 또는 서열번호 1(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)에 기재된 아미노산 서열을 갖는다. 일부 경우에, 인간 IL-12p35의 코딩 서열은 NCBI 기준 서열번호 NM_000882.3에 기재되어 있다. 본원에 개괄된 Fc 융합 이종이량체 단백질의 예시적인 IL-12p35 단백질은 서열번호 2(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)의 아미노산 서열 또는 서열번호 1의 23번 내지 219번의 아미노산을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, IL-12p35 단백질은 서열번호 2와 적어도 90%, 예를 들어 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상의 동일성을 갖는다. 상기 Fc 융합 단백질의 IL-12p35 단백질은 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개 또는 9개의 아미노산 돌연변이를 가질 수 있다.
일부 구현예에서, 인간 IL-12p40 단백질은 NCBI 기준 서열번호 NP_002178.3 또는 서열번호 3(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)에 기재된 아미노산 서열을 갖는다. 일부 경우에, 인간 IL-12p40의 코딩 서열은 NCBI 기준 서열번호 NM_002187.3에 기재되어 있다. 본원에 개괄된 Fc 융합 단백질의 예시적인 IL-12p40 단백질은 서열번호 4(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)의 아미노산 서열 또는 서열번호 3의 23번 내지 328번의 아미노산을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, IL-12p40 단백질은 서열번호 4와 적어도 90%, 예를 들어 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상의 동일성을 갖는다. 상기 Fc 융합 단백질의 IL-12p40 단백질은 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개 또는 9개의 아미노산 돌연변이를 가질 수 있다.
본 발명은 또한 변이형 IL-12p40 서브유닛 및 변이형 IL-12p35 서브유닛을 제공한다. 이러한 변이체는 생물학적 기능성 IL-12 복합체 및 본원에 기재된 임의의 IL-12-Fc 융합체의 일부로서 사용된다.
A. 발현 변이체
예비 사항으로서, 본 발명의 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛은 또한 이질성을 감소시키도록 설계된 잠재적인 N-글리코실화 부위를 제거하는 변이체를 포함한다.
아미노산 변형이 도입될 수 있는 IL-12p40 상의 이러한 잠재적 N-글리코실화 부위에는, N103, N113, N200 및 N281(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열에 따라 번호 매겨짐)이 포함된다. 이러한 부위 중 하나 이상에서의 예시적인 변형은 N103D, N103Q, N113D, N113Q, N200D, N200Q, N281D 및 N281Q로 이루어지는 군에서 선택될 수 있다. IL-12p40 발현 변이체는 이러한 부위에서 하나 이상의 변형을 포함할 수 있다. 따라서, 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N113D/N200D/N281D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N113D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N200D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N281D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113D/N200D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113D/N281D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N200D/N281D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N113D/N200D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N113D/N281D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N/103D/N200D/N281D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113D/N200D/N281D를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N113Q를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N200Q를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N281Q를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113Q/N200Q를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113Q/N281Q를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N113Q/N200Q를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N113Q/N281Q를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N200Q/N281Q를 포함한다. 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113Q/N200Q/N281Q를 포함한다. 이러한 변형은 단독으로, 또는 친화성 변이체와 같은 임의의 다른 IL-12p40 변이체와 조합으로 사용될 수 있다.
아미노산 변형이 도입될 수 있는 IL-12p35 상의 이러한 잠재적 N-글리코실화 부위는 N71, N85 및 N195(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열에 따라 번호 매겨짐)로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 부위이다. 이러한 부위에서의 예시적인 변형에는, N71D, N71Q, N85D, N85Q, N195D 및 N195Q가 포함된다. IL-12p35 변이체는 이러한 부위에서 하나 이상의 변형을 포함할 수 있다. 따라서, 하나의 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N71D/N85D/N195D를 포함한다. 이러한 변형은 단독으로, 또는 친화성 변이체와 같은 임의의 다른 IL-12p35 변이체와 조합으로 사용될 수 있다.
IL-12p40 서브유닛은 252번 위치(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열에 따라 번호 매겨짐)에 유리 시스테인을 가지며, 이는 다른 유리 시스테인과 결합하여 적어도 이질성을 유도하고 면역원성을 악화시킬 수 있다. 따라서, 예를 들어 C252S 변형을 도입하여(다른 치환이 사용될 수도 있음) 유리 시스테인이 제거되도록 IL-12p40 변이체를 조작하였다. C252의 변형(예를 들어, C252S)은 단독으로, 또는 친화성 또는 발현 변이체와 같은 임의의 다른 IL-12p40 변이체와 조합으로 사용될 수 있다. 유리 시스테인을 제거하기 위한 C252에서의 변형을 포함하는 예시적인 IL-12p40 변이체는 도 65에 도시되어 있다. 추가의 변이형 IL-12p40 서브유닛을 이용하여 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질을 생성하였으며, 이에 대한 서열은 도 66에 도시되어 있고, 이는 일반적으로 실시예 1B에 기재된 바와 같이 제조하였다. 이러한 변형은 단독으로, 또는 친화성 변이체와 같은 임의의 다른 IL-12p40 변이체와 조합으로 사용될 수 있다.
B. 친화성 및 역가 변이체
본 발명은 IL-12 수용체에 대한 결합 친화성이 변경된, 즉, 감소 또는 증가된 생물학적 기능성 IL-12를 형성하는 IL-12p40 변이체 및 IL-12p35 변이체를 제공한다. 일부 경우에, 변이형 IL-12p40 서브유닛은 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 결합 친화성이 변경, 즉, 감소 또는 증가되었다. 일부 경우에, 변이형 IL-12p35는 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 결합 친화성이 변경, 즉, 감소 또는 증가되었다. 본 발명은 또한 야생형 IL-12p40 및 IL-12p35와 비교하여 역가가 변경된, 즉, 감소 또는 증가된 생물학적 기능성 IL-12를 형성하는 IL-12p40 변이체 및 IL-12p35 변이체를 제공한다.
아미노산 변형이 도입될 수 있는 IL-12p40 상의 적합한 부위는, E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열에 따라 번호 매겨짐)로 이루어지는 군에서 선택된다. 이러한 부위에서의 예시적인 변형은 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택될 수 있다. IL-12p40 친화성 변이체는 이러한 부위 중 하나 이상에서의 변형을 포함할 수 있다. 따라서, 하나의 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N113D/N200D/N281D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 Q42E/E45Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E45Q/Q56E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 Q42E/E59Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 Q56E/E59Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 Q42E/E45Q/Q56E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E45Q/Q56E/E59Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E32Q/E59Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 D34N/E59K를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 D34N/E59K/K99E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 D34K/E59K/K99E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E32Q/D34N/E59K/K99E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E32K/D34N/E59K/K99E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 D34N/E59Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59Q/E187Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 S43E/E59Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 S43K/E49Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59Q/K163E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59Q/K99E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59Q/K258E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59Q/K260E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 D18K/E59K/K99E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99Y를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59Y/K99Y를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59Y/K99E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E45K/E59K/K99E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/Q144E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/Q144K를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/R159E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 D18K/E59K/K99E/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 DI8K/E59K/K99E/C252S를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 D18K/E59K/K99E/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99Y/C252S를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/C252S를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N113D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N200D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N281D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113D/N200D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113D/N281D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N200D/N281D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N113D/N200D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N113D/N281D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103D/N200D/N281D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113D/N200D/N281D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N113Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N200Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N281Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113Q/N200Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113Q/N281Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N200Q/N281Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N113Q/N200Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N113Q/N281Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N200Q/N281Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N113Q/N200Q/N281Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 N103Q/N113Q/N200Q/N281Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p40 변이체는 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E를 포함한다.
또한, 이러한 변형은 단독으로, 또는 발현 변이체와 같은 임의의 다른 IL-12p40 변이체와 조합으로 사용될 수 있다.
IL-12p40 서브유닛은 252번 위치(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열에 따라 번호 매겨짐)에 유리 시스테인을 가지며, 이는 다른 유리 시스테인과 결합하여 적어도 이질성을 유도하고 면역원성을 악화시킬 수 있다. 따라서, 예를 들어 C252S 변형을 도입하여(다른 치환이 사용될 수도 있음) 유리 시스테인이 제거되도록 IL-12p40 변이체를 조작하였다. C252의 변형(예를 들어, C252S)은 단독으로, 또는 친화성 또는 발현 변이체와 같은 임의의 다른 IL-12p40 변이체와 조합으로 사용될 수 있다. 유리 시스테인을 제거하기 위한 C252에서의 변형을 포함하는 예시적인 IL-12p40 변이체는 도 65에 도시되어 있다. 추가의 변이형 IL-12p40 서브유닛을 이용하여 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질을 생성하였으며, 이에 대한 서열은 도 66에 도시되어 있고, 이는 일반적으로 실시예 1B에 기재된 바와 같이 제조하였다. 또한, 이러한 변형은 단독으로, 또는 발현 변이체와 같은 임의의 다른 IL-12p40 변이체와 조합으로 사용될 수 있다.
아미노산 변형이 도입될 수 있는 IL-12p35 상의 적합한 부위는, Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, F96, M97, L89, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193 및 A196(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열에 따라 번호 매겨짐)로 이루어지는 군에서 선택된다. 예시적인 변형은 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택될 수 있다. IL-12p35 친화성 변이체는 이러한 부위 중 하나 이상에서의 변형을 포함할 수 있다. 따라서, 하나의 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N71D/N85D/N195D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N151D/E153Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N151D/D165N를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 Q130E/N151D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N151D/K158E를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 E79Q/N151D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 D55Q/N151D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N136D/N151D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N21D/N151D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 E143Q/N151D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N71Q/N85Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N71Q/N195Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N85Q/N195Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N71Q/N85Q/N195Q를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N71D/N85D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N71D/N195D를 포함한다. 또 다른 구현예에서, IL-12p35 변이체는 N85D/N195D를 포함한다.
또한, 이러한 변형은 단독으로, 또는 발현 변이체와 같은 임의의 다른 IL-12p35 변이체와 조합으로 사용될 수 있다.
생물학적 기능성 IL-12 이종이량체 복합체는 야생형 IL-12p40 서브유닛과 야생형 IL-12p35 서브유닛, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 야생형 IL-12p35 서브유닛, 야생형 IL-12p40 서브유닛과 변이형 IL-12p35 서브유닛, 또는 변이형 IL-12p40 서브유닛과 변이형 IL-12p35 서브유닛을 포함할 수 있다.
생물학적 기능성 IL-12 2가 동종이량체 복합체는 야생형 IL-12p40 서브유닛과 야생형 IL-12p35 서브유닛, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 야생형 IL-12p35 서브유닛, 야생형 IL-12p40 서브유닛과 변이형 IL-12p35 서브유닛, 또는 변이형 IL-12p40 서브유닛과 변이형 IL-12p35 서브유닛을 포함할 수 있다.
VI. 도메인 링커
일부 구현예에서, IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛은 링커를 통해 함께 부착된다. 선택적으로, 서브유닛은 링커를 통해 부착되지 않는다. 다른 구현예에서, IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛은 비공유결합으로 부착된다. 일부 구현예에서, IL-12p35 서브유닛은 링커를 통해 Fc 도메인에 부착된다. 특정 구현예에서, IL-12p35 서브유닛은 직접적으로, 예컨대 링커 없이 Fc 도메인에 부착된다. 다른 구현예에서, IL-12p40 서브유닛은 링커를 통해 Fc 도메인에 부착된다. 다른 구현예에서, IL-12p40 서브유닛은 직접 Fc 도메인에 부착된다. 일부 경우에, IL-12p35 서브유닛 또는 IL-12p40 서브유닛을 Fc 도메인에 부착시키는 데 링커가 사용되지 않는다.
일부 구현예에서, 링커는 본원에 개괄된 바와 같이 임의의 2개의 도메인을 함께 연결하는 데 사용되는 "도메인 링커"이다. 임의의 적합한 링커가 사용될 수 있지만, 다수의 구현예는, 예를 들어 (GS)n, (GSGGS)n, (GGGGS)n 및 (GGGS)n(여기서 n은 적어도 0의 정수(일반적으로 0에서 1, 2, 3, 4 내지 5까지)임)을 포함하는 글리신-세린 중합체뿐 아니라, 각 도메인이 이의 생물학적 기능을 유지하도록 충분한 길이 및 가요성을 갖는 2개의 도메인의 재조합 부착을 가능하게 하는 임의의 펩타이드 서열을 이용한다. 특정 예에서, 유용한 링커는 (GGGGS)0, (GGGGS)1 또는 (GGGGS)2를 포함한다. 예시적인 도메인 링커는 도 6에 도시되어 있다. 일부 경우에, 하기에 개괄되는 바와 같이 "가닥 배열"에 주목하면, 본원에 논의된 바와 같은 하전된 도메인 링커가 사용될 수 있다.
또한, Fc 융합체 내 Gly-Ser 링커에서 세린이 O-글리코실화에 적용될 수 있다고 이전에 보고되었다. 따라서, (Fc 융합체의 맥락에서) 이질성을 감소시키기 위한 최종 접근법은, 지금까지 사용된 Gly-Ser 링커를 Gly-Ala 링커로 대체하는 것이다.
VII. 본 발명의 유용한 형식
도 8a 내지 도 8f에 도시된 바와 같이, 본 발명의 이종이량체 융합 단백질의 다수의 유용한 형식이 존재한다. 일반적으로, 본 발명의 이종이량체 융합 단백질은 두 가지 기능성 구성요소인 IL-12 이종이량체 구성요소 및 Fc 구성요소를 가지며, 둘 모두 본원에 개괄된 바와 같이 상이한 형태를 취할 수 있고, 둘 모두 임의의 입체형태로 다른 하나의 구성요소와 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛은 선택적으로 도메인 링커를 이용하여 공유결합으로 연결되며, 이는 본원에서 단일 사슬 IL-12 복합체 또는 "scIL-12"로 지칭된다. scIL-12는, 선택적으로 도메인 링커를 통해, IL-12p40의 N-말단에 연결된 IL-12p35 또는 IL-12p35에 N-말단의 연결된 IL-12p40을 포함할 수 있다. scIL-12 복합체에서 2개의 서브유닛의 순서는 다음과 같이 지정될 수 있다: "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p340 서브유닛의 N-말단에 연결됨).
일부 구현예에서, IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛은 서로 공유결합으로 연결되는 것이 아니라, 각각 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인에 공유결합으로 부착되어, 이종이량체로 조립된다.
제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, a) L368D/K370S 및 S364K; b) L368D/K370S 및 S364K/E357L; c) L368D/K370S 및 S364K/E357Q; d) S267K/L368D/K370S; e) T411E/K360E/Q362E 및 D401K; f) L368E/K370S 및 S364K; g) K370S 및 S364K/E357Q; 및 h) T366S/L368A/Y407V 및 T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트를 가질 수 있다.
일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다.
선택적으로, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다.
선택적으로, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은 반감기 연장을 위한 428L/434S 변이체를 갖는다.
A. IL-12-heteroFc 형식
하나의 구현예에서, 본 발명은 N-말단 IL-12 이종이량체 Fc 융합체 또는 "IL-12-heteroFc" 형식을 제공한다. 이러한 구현예에서, 도 8a에 제시된 바와 같이, 이종이량체 융합 단백질은 2개의 단량체를 포함한다. 제1 단량체는 (N-말단에서 C-말단으로) IL-12p40-선택적 도메인 링커-Fc를 포함한다. 제2 단량체는 (N-말단에서 C-말단으로) IL-12p35-선택적 도메인 링커-Fc를 포함한다.
IL-12-heteroFc 형식에서, 바람직한 구현예는 비대칭 변이체 쌍 S364K/E357Q : L368D/K370S를 이용한다.
IL-12-heteroFc 형식에서, 바람직한 구현예는 도 9에 제시되어 있다(사슬 1 사슬 2를 포함하는 XENP27201).
일부 구현예에서, IL-12-heteroFc 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p40 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p35 도메인 단백질; ii) 선택적 제2 도메인 링커; iii) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, Fc 변이체는 본원에 제공된 바와 같은 하나 이상의 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 변이체는 특정한 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트이다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인은 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함한다.
이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 단백질 도메인에는, 비제한적으로, 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E가 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p35 단백질 도메인에는 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D가 포함된다.
이러한 형식에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛의 유용한 조합에는, 비제한적으로, IL-12p40(E59K/K99Y) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99E/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99Y/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), 및 IL-12p40(E59K/K99E/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2)가 포함된다.
이러한 형식에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛의 유용한 조합에는, 비제한적으로, 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)를 포함하는 IL-12p35와, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q, E299Q, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E를 포함하는 하나 이상의 치환을 포함하는 변이형 IL-12p40의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 유용한 조합에는, 비제한적으로, 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)를 포함하는 IL-12p40과, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D, N195Q, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D를 포함하는 IL-12p35의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 유용한 조합에는, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q, E299Q, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 IL-12p40 변이체와; N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D, N195Q, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환을 포함하는 IL-12p35 변이체의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, 유용한 구현예에는, 비제한적으로, 변이형 IL-12p40 서브유닛 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되고/되거나, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 Fc 도메인에 부착되는 것이 포함된다.
이러한 형식에서, 유용한 구현예에는, 비제한적으로, XENP31251, XENP31254, XENP31258, XENP32186, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190 및 XENP32191이 포함된다. 추가의 구현예에서, XENP31251, XENP31254, XENP31258, XENP32186, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190 및 XENP32191은 추가의 당사슬조작(glycoengineering)을 포함한다.
이러한 형식에서, 유용한 구현예에는, 비제한적으로, 도 44a 내지 도 44k, 및 도 66a 내지 도 66q에 제시된 것들이 포함된다.
B. heteroFc-IL-12 형식
또 다른 구현예에서, 본 발명은 C-말단 IL-12 이종이량체 Fc 융합체 또는 "heteroFc-IL-12" 형식을 제공한다. 이러한 구현예에서, 도 8b에 제시된 바와 같이, 이종이량체 융합 단백질은 2개의 단량체를 포함한다. 제1 단량체는 (N-말단에서 C-말단으로) Fc-선택적 도메인 링커-IL-12p40을 포함한다. 제2 단량체는 (N-말단에서 C-말단으로) Fc-선택적 도메인 링커-IL-12p35를 포함한다.
HeteroFc-IL-12 형식에서, 바람직한 구현예는 비대칭 변이체 쌍 S364K/E357Q : L368D/K370S를 이용한다.
IL-12-heteroFc 형식에서, 바람직한 구현예는 도 10에 제시되어 있다(사슬 1 사슬 2를 포함하는 XENP27202).
일부 구현예에서, heteroFc-IL-12 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p40 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) N-말단에서 C-말단으로, i) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질; ii) 선택적 제2 도메인 링커; iii) IL-12p35 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, Fc 변이체는 본원에 제공된 바와 같은 하나 이상의 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 변이체는 특정한 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트이다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인은 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함한다.
이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 단백질 도메인에는, 비제한적으로, 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E가 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p35 단백질 도메인에는 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D가 포함된다.
이러한 형식에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛의 유용한 조합에는, 비제한적으로, IL-12p40(E59K/K99Y) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99E/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99Y/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), 및 IL-12p40(E59K/K99E/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2)가 포함된다.
이러한 형식에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛의 유용한 조합에는, 비제한적으로, 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)를 포함하는 IL-12p35와, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q, E299Q, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E를 포함하는 하나 이상의 치환을 포함하는 변이형 IL-12p40의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 유용한 조합에는, 비제한적으로, 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)를 포함하는 IL-12p40과, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D, N195Q, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D를 포함하는 IL-12p35의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 유용한 조합에는, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q, E299Q, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 IL-12p40 변이체와; N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D, N195Q, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환을 포함하는 IL-12p35 변이체의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, 유용한 구현예에는, 비제한적으로, 도 10에 제시된 것들이 포함된다.
C. scIL-12-Fc 형식
추가의 구현예에서, 본 발명은 N-말단 단일 사슬 IL-12-Fc 융합체 또는 "scIL-12-Fc" 형식을 제공한다. 이러한 구현예에서, 도 8c 및 도 8d에 제시된 바와 같이, 이종이량체 융합 단백질은 2개의 단량체를 포함한다. 제1 단량체는 (N-말단에서 C-말단으로) scIL-12-선택적 도메인 링커-Fc를 포함한다. 제2 단량체는 힌지-CH2-CH3의 전부 또는 일부를 포함하는 "빈" Fc를 포함한다. scIL-12는 "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결됨)일 수 있다.
scIL-12-Fc 형식에서, 바람직한 구현예는 비대칭 변이체 쌍 S364K/E357Q : L368D/K370S를 이용한다.
scIL-12-Fc 형식에서, 바람직한 구현예는 XENP24203(사슬 1 및 사슬 2 포함) 및 XENP24204(사슬 1 및 사슬 2 포함)로서 도 11에 제시되어 있다.
scIL-12-Fc 형식에서, 바람직한 구현예는 XENP31290(사슬 1 및 사슬 2 포함)으로서 도 50에 제시되어 있다.
일부 구현예에서, scIL-12-Fc 형식은 2가 IL-12-Fc 융합체이다. 일부 구현예에서, 2가 IL-12-Fc 융합체 형식(도 48a 및 도 48b)은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 N-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함한다.
일부 구현예에서, scIL-12-Fc 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p40 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p35 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 링커; v) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, scIL-12-Fc 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) IL-12p35 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p40 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 링커; v) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, Fc 변이체는 본원에 제공된 바와 같은 하나 이상의 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 변이체는 특정한 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트이다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인은 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함한다.
이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 단백질 도메인에는, 비제한적으로, 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E가 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p35 단백질 도메인에는 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D가 포함된다.
이러한 형식에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛의 유용한 조합에는, 비제한적으로, IL-12p40(E59K/K99Y) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99E/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99Y/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), 및 IL-12p40(E59K/K99E/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2)가 포함된다.
이러한 형식에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛의 유용한 조합에는, 비제한적으로, 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)를 포함하는 IL-12p35와, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q, E299Q, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E를 포함하는 하나 이상의 치환을 포함하는 변이형 IL-12p40의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 유용한 조합에는, 비제한적으로, 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)를 포함하는 IL-12p40과, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D, N195Q, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D를 포함하는 IL-12p35의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 유용한 조합에는, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q, E299Q, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 IL-12p40 변이체와; N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D, N195Q, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환을 포함하는 IL-12p35 변이체의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, 유용한 구현예에는, 비제한적으로, 도 11에 제시된 것들이 포함된다.
D. Fc-scIL-12 형식
추가의 구현예에서, 본 발명은 C-말단 단일 사슬 IL-12-Fc 융합체 또는 "Fc-scIL-12" 형식을 제공한다. 이러한 구현예에서, 도 8e 및 도 8f에 제시된 바와 같이, 이종이량체 융합 단백질은 2개의 단량체를 포함한다. 제1 단량체는 (N-말단에서 C-말단으로) Fc-선택적 링커-scIL-12를 포함한다. 제2 단량체는 힌지-CH2-CH3의 전부 또는 일부를 포함하는 "빈" Fc를 포함한다. 상기와 같이, scIL-12는 "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결됨)일 수 있다.
Fc-scIL-12 형식에서, 바람직한 구현예는 비대칭 변이체 쌍 S364K/E357Q : L368D/K370S를 이용한다.
일부 구현예에서, scIL-12-Fc 형식은 2가 IL-12-Fc 융합체이다. 일부 구현예에서, 2가 IL-12-Fc 융합체 형식(도 48c 및 도 48d)은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 C-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함한다.
일부 구현예에서, scIL-12-Fc 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p40 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 도메인 링커; v) IL-12p35 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, scIL-12-Fc 형식은, a) N-말단에서 C-말단으로, i) 제1 변이형 Fc 도메인 단백질; ii) 선택적 제1 도메인 링커; iii) IL-12p35 도메인 단백질; iv) 선택적 제2 도메인 링커; v) IL-12p40 도메인 단백질을 포함하는 제1 단량체; 및 b) 제2 변이형 Fc 도메인 단백질을 포함하는 제2 단량체를 포함하는 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, Fc 변이체는 본원에 제공된 바와 같은 하나 이상의 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 변이체는 특정한 비대칭, pI 및 절제 변이체를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트이다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인은 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함한다.
이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 단백질 도메인에는, 비제한적으로, 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p40 변이체에는, 비제한적으로, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E가 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p35 단백질 도메인에는 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q가 포함된다. 이러한 형식에서, 유용한 IL-12p35 변이체에는, 비제한적으로, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D가 포함된다.
이러한 형식에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛의 유용한 조합에는, 비제한적으로, IL-12p40(E59K/K99Y) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99E/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99Y/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2), IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E) 및 IL-12p35(서열번호 2), 및 IL-12p40(E59K/K99E/C252S) 및 IL-12p35(서열번호 2)가 포함된다.
이러한 형식에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛의 유용한 조합에는, 비제한적으로, 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)를 포함하는 IL-12p35와, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q, E299Q, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E를 포함하는 하나 이상의 치환을 포함하는 변이형 IL-12p40의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 유용한 조합에는, 비제한적으로, 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)를 포함하는 IL-12p40과, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D, N195Q, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D를 포함하는 IL-12p35의 조합이 포함된다.
이러한 형식에서, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 유용한 조합에는, 비제한적으로, E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q, E299Q, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 IL-12p40 변이체와; N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D, N195Q, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환을 포함하는 IL-12p35 변이체의 조합이 포함된다.
VIII. 본 발명의 유용한 구현예
당업자가 이해하고 하기에 보다 충분히 논의되는 바와 같이, 본 발명의 이종이량체 융합 단백질은 일반적으로 도 8a 내지 도 8f에 도시된 바와 같이 매우 다양한 입체형태를 취할 수 있다. 예시적인 융합 단백질의 아미노산 서열은 도 9 내지 도 11에 제시되어 있다.
본원에 개괄된 다수의 구현예는 일반적으로 제1 Fc 도메인의 N-말단에 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 공유결합으로 부착된 IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는 제1 단량체(제1 융합 단백질), 및 제2 Fc 도메인의 N-말단에 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 공유결합으로 부착된 IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는 제2 단량체(제2 융합 단백질)를 포함하는 형식에 의존한다. 이러한 형식의 예시적인 구현예에는, 비제한적으로, XENP27201이 포함된다. 추가의 구현예에서, 제1 단량체는 i) 서열번호 XX(XENP27201 사슬 1), ii) 서열번호 XX(XenD24752), iii) 서열번호 XX(XenD24753), iv) 서열번호 XX(XenD24754), v) 서열번호 XX(XenD24755), vi) 서열번호 XX(XenD24756), vii) 서열번호 XX(XenD24757), viii) 서열번호 XX(XenD24758), ix) 서열번호 XX(XenD24759), x) 서열번호 XX(XenD24760), xi) 서열번호 XX(XenD24761), xii) 서열번호 XX(XenD24762), xiii) 서열번호 XX(XenD24763), xiv) 서열번호 XX(XenD24764), xv) 서열번호 XX(XenD24765), xvi) 서열번호 XX(XenD24766), xvii) 서열번호 XX(XenD24767), xviii) 서열번호 XX(XenD24768), xix) 서열번호 XX(XenD24769), xx) 서열번호 XX(XenD24770), xxi) 서열번호 XX(XenD24771), xxii) 서열번호 XX(XenD24772), xxiii) 서열번호 XX(XenD24773), xxiv) 서열번호 XX(XenD24774), xxv) 서열번호 XX(XenD24775), xxvi) 서열번호 XX(XenD24776), xxvii) 서열번호 XX(XenD24777), xxviii) 서열번호 XX(XenD24778), xxix) 서열번호 XX(XenD24792), xxx) 서열번호 XX(XenD25922), xxxi) 서열번호 XX(XenD25923), xxxii) 서열번호 XX(XenD25924), xxxiii) 서열번호 XX(XenD25925), xxxiv) 서열번호 XX(XenD25926), xxxv) 서열번호 XX(XenD25927), xxxvi) 서열번호 XX(XenD25928), xxxvii) 서열번호 XX(XenD25929), xxxviii) 서열번호 XX(XenD25930) 및 xxxix) 서열번호 XX(XenD25931)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고; 제2 단량체는 i) 서열번호 XX(XENP27201 사슬 2), ii) 서열번호 XX(XenD24779), iii) 서열번호 XX(XenD24780), iv) 서열번호 XX(XenD24781), v) 서열번호 XX(XenD24782), vi) 서열번호 XX(XenD24783), vii) 서열번호 XX(XenD24784), viii) 서열번호 XX(XenD24785), ix) 서열번호 XX(XenD24786), x) 서열번호 XX(XenD24787), xi) 서열번호 XX(XenD24788), xii) 서열번호 XX(XenD24789), xiii) 서열번호 XX(XenD24790), xiv) 서열번호 XX(XenD24791), xv) 서열번호 XX(XenD25911), xvi) 서열번호 XX(XenD25912), xvii) 서열번호 XX(XenD25913), xviii) 서열번호 XX(XenD25914), xix) 서열번호 XX(XenD25915), xx) 서열번호 XX(XenD25916), xxi) 서열번호 XX(XenD25917), xxii) 서열번호 XX(XenD25918), xxiii) 서열번호 XX(XenD25919), xxiv) 서열번호 XX(XenD25920) 및 xxv) 서열번호 XX(XenD25921)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는다. 특정한 이러한 구현예에는, 비제한적으로, XENP27201, XENP28820, XENP28821, XENP28822, XENP28823, XENP28824, XENP28825, XENP28826, XENP28827, XENP28828, XENP28829, XENP28830, XENP28831, XENP28832, XENP28833, XENP28834, XENP28835, XENP28836, XENP28837, XENP28838, XENP28839, XENP28840, XENP28841, XENP28842, XENP28843, XENP28844, XENP28845, XENP28846, XENP28847, XENP28848, XENP28849, XENP28850, XENP28851, XENP28852, XENP29949, XENP29950, XENP29951, XENP29952, XENP30597, XENP30598, XENP30599, XENP30600, XENP30601, XENP30602, XENP30603, XENP30604, XENP30605, XENP30606, XENP30307, XENP30308, XENP30609, XENP31250, XENP31251, XENP31252, XENP31253, XENP31254, XENP31255, XENP31256, XENP31257, XENP31258, XENP31259, XENP31260, XENP31261, XENP31262, XENP31263, XENP31264, XENP31265, XENP31286, XENP31142, XENP31143, XENP31144, XENP31145, XENP31146, XENP31582, XENP31583, XENP31584, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190, XENP32191, XENP32991, XENP32992, XENP32993, XENP32994, XENP32995, XENP32996, XENP32997, XENP32998, XENP32999, XENP33000, XENP33001, XENP33002, XENP33003, XENP33004, XENP33005, XENP33006, XENP33007, XENP33008, XENP33008, XENP33009, XENP33010 및 XENP33011이 포함된다. 이종이량체 Fc 융합 단백질의 유용한 구현예는 제1 Fc 도메인의 C-말단에 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 공유결합으로 부착된 IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는 제1 단량체(제1 융합 단백질), 및 제2 Fc 도메인의 C-말단에 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 공유결합으로 부착된 IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는 제2 단량체(제2 융합 단백질)를 포함한다. 이러한 형식의 예시적인 구현예에는, 비제한적으로, XENP27202가 포함된다.
이종이량체 Fc 융합 단백질의 또 다른 유용한 구현예는 제1 Fc 도메인의 N-말단에 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 공유결합으로 부착된 단일 사슬 IL-12 복합체("scIL-12")를 포함하는 제1 단량체(제1 융합 단백질), 및 제2 Fc 도메인(예를 들어, 빈 Fc 도메인)을 포함한다. scIL-12는 "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결됨)일 수 있다. 이러한 형식의 예시적인 구현예에는, 비제한적으로, XENP27203 및 XENP27204가 포함된다.
이종이량체 Fc 융합 단백질의 추가의 유용한 구현예는 제1 Fc 도메인의 C-말단에 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 공유결합으로 부착된 단일 사슬 IL-12 복합체("scIL-12")를 포함하는 제1 단량체(제1 융합 단백질), 및 제2 Fc 도메인(예를 들어, 빈 Fc 도메인)을 포함한다. scIL-12는 "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 (도메인 링커 존재 유무 하에서) IL-12p40 서브유닛의 N-말단에 연결됨)일 수 있다.
본원에 개괄된 임의의 이종이량체 Fc 융합 단백질의 경우, 제1 단량체, 제2 단량체 및/또는 scIL-12에 사용되는 선택적 도메인 링커는 동일하거나 상이할 수 있다. 또한, 이종이량체 단백질의 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인은 상이한 아미노산 서열을 가질 수 있다.
본 발명의 Fc 도메인은 IgG Fc 도메인, 예를 들어 IgG1 Fc 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인과 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트를 포함한다. 일부 경우에, 본원에 개괄된 임의의 이종이량체 Fc 융합 형식의 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 제1 Fc 도메인 및/또는 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는다.
추가의 이종이량체화 또는 동종이량체화 변이체는 독립적으로 및 선택적으로 포함될 수 있으며, 도면에 개괄된 변이체에서 선택될 수 있다. 이러한 조성물은 절제 변이체, pI 변이체, 하전된 변이체, 아이소타입 변이체 등을 추가로 포함할 수 있다.
A. IL-12p40 변이체
일부 구현예에서, IL-12p40 서브유닛은 변이형 IL-12p40 서브유닛이다. 일부 특정한 이러한 구현예에서, IL-12p40 서브유닛은 이질성이 감소된 변이형 IL-12p40 서브유닛이다. 다른 특정한 이러한 구현예에서, IL-12p40 서브유닛은 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된, 즉, 감소되거나 증가된 변이형 IL-12p40 서브유닛이다. 일부 구현예에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛은 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는다. (인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열에 따라 번호 매겨짐).
일부 구현예에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛은 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는다. 일부 구현예에서, 변이형 IL-12p40 서브유닛은 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는다.
일부 구현예에서, IL-12p40 변이체는 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는다.
B. IL-12p35 변이체
일부 구현예에서, IL-12p35 서브유닛은 변이형 IL-12p35 서브유닛이다. 일부 특정한 이러한 구현예에서, IL-12p35 서브유닛은 이질성이 감소된 변이형 IL-12p35 서브유닛이다. 다른 특정한 이러한 구현예에서, IL-12p35 서브유닛은 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된, 즉, 감소되거나 증가된 변이형 IL-12p35 서브유닛이다. 일부 구현예에서, 변이형 IL-12p35 서브유닛은 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는다. (인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열에 따라 번호 매겨짐). 일부 구현예에서, 변이형 IL-12p35 서브유닛은 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는다.일부 구현예에서, 변이형 IL-12p35 서브유닛은 아미노산 치환 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D를 갖는다. 일부 구현예에서, 변이형 IL-12p35 서브유닛은 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX IL-12p35(D55Q), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는다.
C. 추가 옵션
일부 구현예에서, scIL-12-Fc 형식은 2가 IL-12-Fc 융합체이다. 일부 구현예에서, 2가 IL-12-Fc 융합체 형식(도 48a 및 도 48b)은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 N-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함한다. 일부 구현예에서, 2가 IL-12-Fc 융합체 형식(도 48c 및 도 48d)은 (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 C-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함한다. 예에는, 비제한적으로, XENP31289 및 XENP31291(도 49)이 포함된다.
일부 구현예에서, IL-12 Fc 융합 단백질은 반감기를 연장시키기 위해 M428L 및 N434S를 포함하는 치환에 의해 추가로 조작된다. 일부 구현예에서, IL-12 Fc 융합 단백질은 반감기를 연장시키기 위해 M428L/N434S를 포함하는 치환에 의해 추가로 조작된다. 본원에 열거된 임의의 IL-12 Fc 융합체는 반감기를 연장시키기 위해 조작될 수 있다. 예에는, 비제한적으로, XENP31582, XENP31583 및 XENP31584(도 65)가 포함된다.
일부 구현예에서, 이종이량체 Fc 융합 단백질의 예에는, XENP27201, XENP28820, XENP28821, XENP28822, XENP28823, XENP28824, XENP28825, XENP28826, XENP28827, XENP28828, XENP28829, XENP28830, XENP28831, XENP28832, XENP28833, XENP28834, XENP28835, XENP28836, XENP28837, XENP28838, XENP28839, XENP28840, XENP28841, XENP28842, XENP28843, XENP28844, XENP28845, XENP28846, XENP28847, XENP28848, XENP28849, XENP28850, XENP28851, XENP28852, XENP29949, XENP29950, XENP29951, XENP29952, XENP30597, XENP30598, XENP30599, XENP30600, XENP30601, XENP30602, XENP30603, XENP30604, XENP30605, XENP30606, XENP30307, XENP30308, XENP30609, XENP31250, XENP31251, XENP31252, XENP31253, XENP31254, XENP31255, XENP31256, XENP31257, XENP31258, XENP31259, XENP31260, XENP31261, XENP31262, XENP31263, XENP31264, XENP31265, XENP31286, XENP31142, XENP31143, XENP31144, XENP31145, XENP31146, XENP31582, XENP31583, XENP31584, XENP32186, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190, XENP32191, XENP32991, XENP32992, XENP32993, XENP32994, XENP32995, XENP32996, XENP32997, XENP32998, XENP32999, XENP33000, XENP33001, XENP33002, XENP33003, XENP33004, XENP33005, XENP33006, XENP33007, XENP33008, XENP33008, XENP33009, XENP33010 및 XENP33011이 포함된다.
일부 구현예에서, 이종이량체 Fc 융합 단백질의 예는, i) 서열번호 47(XENP27201 사슬 1), ii) 서열번호 85(XenD24752), iii) 서열번호 86(XenD24753), iv) 서열번호 87(XenD24754), v) 서열번호 88(XenD24755), vi) 서열번호 89(XenD24756), vii) 서열번호 90(XenD24757), viii) 서열번호 91(XenD24758), ix) 서열번호 92(XenD24759), x) 서열번호 93(XenD24760), xi) 서열번호 94(XenD24761), xii) 서열번호 95(XenD24762), xiii) 서열번호 96(XenD24763), xiv) 서열번호 97(XenD24764), xv) 서열번호 98(XenD24765), xvi) 서열번호 99(XenD24766), xvii) 서열번호 100(XenD24767), xviii) 서열번호 101(XenD24768), xix) 서열번호 102(XenD24769), xx) 서열번호 103(XenD24770), xxi) 서열번호 104(XenD24771), xxii) 서열번호 105(XenD24772), xxiii) 서열번호 106(XenD24773), xxiv) 서열번호 107(XenD24774), xxv) 서열번호 108(XenD24775), xxvi) 서열번호 109(XenD24776), xxvii) 서열번호 110(XenD24777), xxviii) 서열번호 111(XenD24778), xxix) 서열번호 112(XenD24792), xxx) 서열번호 215(XenD25922), xxxi) 서열번호 216(XenD25923), xxxii) 서열번호 217(XenD25924), xxxiii) 서열번호 218(XenD25925), xxxiv) 서열번호 219(XenD25926), xxxv) 서열번호 220(XenD25927), xxxvi) 서열번호 221(XenD25928), xxxvii) 서열번호 222(XenD25929), xxxviii) 서열번호 223(XenD25930), xxxix) 서열번호 224(XenD25931), xl) 서열번호 XXX(XenD26411), xli) 서열번호 XXX(XenD26412), xlii) 서열번호 XXX(XenD26413), xliii) 서열번호 XXX(XenD26414), xliv) 서열번호 XXX(XenD26415), xlv) 서열번호 XXX(XenD26416), xlvi) 서열번호 XXX(XenD26417), xlvii) 서열번호 XXX(XenD26418), xlviii) 서열번호 XXX(XenD27070), xlix) 서열번호 XXX(XenD27071), l) 서열번호 XXX(XenD27072), li) 서열번호 XXX(XenD27073), lii) 서열번호 XXX(XenD27074), liii) 서열번호 XXX(XenD27075), liv) 서열번호 XXX(XenD27076), lv) 서열번호 XXX(XenD27077)lvi) 서열번호 XXX(XenD27078), lvii) 서열번호 XXX(XenD28173), lviii) 서열번호 XXX(XenD24876), lix) 서열번호 XXX(XenD27162), lx) 서열번호 XXX(XenD27163), lxi) 서열번호 XXX(XenD27164), lxii) 서열번호 XXX(XenD27165)lxiii) 서열번호 XXX(XENP31582 사슬 1), lxiv) 서열번호 XXX(XENP31583 사슬 1), lxv) 서열번호 XXX(XENP31584 사슬 1), lxvi) 서열번호 XXX(XENP32187 사슬 1), lxvii) 서열번호 XXX(XENP32188 사슬 1), lxviii) 서열번호 XXX(XENP32189, 사슬 1), lxix) 서열번호 XXX(XENP32190 사슬 1), lxx) 서열번호 XXX(XENP32191 사슬 1), lxxi) 서열번호 XXX(XENP32991 사슬 1), lxxii) 서열번호 XXX(XENP32992 사슬 1), lxxiii) 서열번호 XXX(XENP32993 사슬 1), lxxiv) 서열번호 XXX(XENP32994 사슬 1), lxxv) 서열번호 XXX(XENP32995 사슬 1), lxxvi) 서열번호 XXX(XENP32996 사슬 1), lxxvi) 서열번호 XXX(XENP32997 사슬 1), lxxvii) 서열번호 XXX(XENP32998 사슬 1), lxxvii) 서열번호 XXX(XENP32999 사슬 1), lxxviii) 서열번호 XXX(XENP33000 사슬 1), lxxix) 서열번호 XXX(XENP33001 사슬 1), lxxx) 서열번호 XXX(XENP33002 사슬 1), lxxxi) 서열번호 XXX(XENP33003 사슬 1), lxxxii) 서열번호 XXX(XENP33004 사슬 1), lxxxiii) 서열번호 XXX(XENP33005 사슬 1), lxxxiv) 서열번호 XXX(XENP33006 사슬 1), lxxxv) 서열번호 XXX(XENP33007 사슬 1), lxxxvi) 서열번호 XXX(XENP33008 사슬 1), lxxxvii) 서열번호 XXX(XENP33008 사슬 1), lxxxviii) 서열번호 XXX(XENP33009 사슬 1), lxxxix) 서열번호 XXX(XENP33010 사슬 1) 및 xc) 서열번호 XXX(XENP33011 사슬 1)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 제1 융합 단백질; 및 i) 서열번호 48(XENP27201 사슬 2),ii) 서열번호 126(XenD24779), iii) 서열번호 127(XenD24780), iv) 서열번호 128(XenD24781), v) 서열번호 129(XenD24782), vi) 서열번호 130(XenD24783), vii) 서열번호 131(XenD24784), viii) 서열번호 132(XenD24785), ix) 서열번호 133(XenD24786), x) 서열번호 134(XenD24787), xi) 서열번호 135(XenD24788), xii) 서열번호 136(XenD24789), xiii) 서열번호 137(XenD24790), xiv) 서열번호 138(XenD24791), xv) 서열번호 236(XenD25911), xvi) 서열번호 237(XenD25912), xvii) 서열번호 238(XenD25913), xviii) 서열번호 239(XenD25914), xix) 서열번호 240(XenD25915), xx) 서열번호 241(XenD25916), xxi) 서열번호 242(XenD25917), xxii) 서열번호 243(XenD25918), xxiii) 서열번호 244(XenD25919), xxiv) 서열번호 245(XenD25920), xxv) 서열번호 246(XenD25921), xxvi) 서열번호 XXX(XenD26427), xxvii) 서열번호 XXX(XenD26428), xxviii) 서열번호 XXX(XenD27089), xxix) 서열번호 XXX(XenD27090), xxx) 서열번호 XXX(XenD27091), xxxi) 서열번호 XXX(XenD27092), xxxii) 서열번호 XXX(XenD27093), xxxiii) 서열번호 XXX(XenD27094), xxxix) 서열번호 XXX(XenD24877), xl) 서열번호 XXX(XenD27166), xli) 서열번호 XXX(XENP31582 사슬 2), xlii) 서열번호 XXX(XENP31583 사슬 2), xliii) 서열번호 XXX(XENP31584 사슬 2), xliv) 서열번호 XXX(XENP32187 사슬 2), xlv) 서열번호 XXX(XENP32188 사슬 2), xlvi) 서열번호 XXX(XENP32189, 사슬 2), xlvii) 서열번호 XXX(XENP32190 사슬 2), xlviii) 서열번호 XXX(XENP32191 사슬 2), xlix) 서열번호 XXX(XENP32991 사슬 2), l) 서열번호 XXX(XENP32992 사슬 2), li) 서열번호 XXX(XENP32993 사슬 2), lii) 서열번호 XXX(XENP32994 사슬 2), liii) 서열번호 XXX(XENP32995 사슬 2), liv) 서열번호 XXX(XENP32996 사슬 2), lv) 서열번호 XXX(XENP32997 사슬 2), lvi) 서열번호 XXX(XENP32998 사슬 2), lvii) 서열번호 XXX(XENP32999 사슬 2), lviii) 서열번호 XXX(XENP33000 사슬 2), lix) 서열번호 XXX(XENP33001 사슬 2), lx) 서열번호 XXX(XENP33002 사슬 2), lxi) 서열번호 XXX(XENP33003 사슬 2), lxii) 서열번호 XXX(XENP33004 사슬 2), lxiii) 서열번호 XXX(XENP33005 사슬 2), lxiv) 서열번호 XXX(XENP33006 사슬 2), lxv) 서열번호 XXX(XENP33007 사슬 2), lxvi) 서열번호 XXX(XENP33008 사슬 2), lxvii) 서열번호 XXX(XENP33008 사슬 2), lxviii) 서열번호 XXX(XENP33009 사슬 2), lxix) 서열번호 XXX(XENP33010 사슬 2) 및 lxx) 서열번호 XXX(XENP33011 사슬 2)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제2 융합 단백질을 포함한다.
바람직한 구현예에는, XENP31251, XENP31254, XENP31258, XENP32186, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190 및 XENP32191이 포함된다. 추가의 구현예에서, XENP31251, XENP31254, XENP31258, XENP32186, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190 및 XENP32191은 추가의 당사슬조작을 포함한다.
IX. 본 발명의 핵산
본 발명은 또한 본 발명의 이종이량체 Fc 융합 단백질, IL-12 서브유닛 및 IL-12 이종이량체 복합체를 인코딩하는 핵산 조성물(또는 단량체 Fc 도메인 단백질의 경우, 이를 인코딩하는 핵산)을 제공한다.
당업자가 이해하는 바와 같이, 상기 핵산 조성물은 이종이량체 단백질의 형식에 따라 달라질 것이다. 따라서, 예를 들어 상기 형식이 3개의 아미노산 서열을 필요로 하는 경우, 3개의 핵산 서열은 발현을 위해 하나 이상의 발현 벡터에 혼입될 수 있다. 일부 형식의 경우 유사하게, 2개의 핵산만이 필요하며; 다시 말하면, 이들은 1개 또는 2개의 발현 벡터에 도입될 수 있다.
당업계에 공지된 바와 같이, 본 발명의 구성요소를 인코딩하는 핵산은 당업계에 공지된 바와 같이, 및 본 발명의 이종이량체 Fc 융합 단백질을 생산하는 데 사용되는 숙주세포에 따라 발현 벡터에 혼입될 수 있다. 일반적으로, 상기 핵산은 임의의 수의 조절 요소(프로모터, 복제 기점, 선택 가능한 마커, 리보솜 결합 부위, 유도제 등)에 작동 가능하게 연결된다. 발현 벡터는 염색체외 벡터 또는 통합 벡터일 수 있다.
이어서, 본 발명의 핵산 및/또는 발현 벡터는 포유류 세포, 박테리아 세포, 효모 세포, 곤충 세포 및/또는 진균 세포를 포함하는 당업계에 널리 공지된 바와 같은 임의의 수의 상이한 유형의 숙주세포로 형질전환되며, 여기서 포유류 세포(예를 들어, CHO 세포)가 다수의 구현예에서 사용된다.
일부 구현예에서, 형식에 따라 적용 가능한 각각의 단량체를 인코딩하는 핵산은, 일반적으로 상이하거나 동일한 프로모터 제어 하에서 단일 발현 벡터 내에 각각 함유되어 있다. 본 발명의 특정 용도의 구현예에서, 이들 2개 또는 3개의 핵산은 각각 상이한 발현 벡터에 함유되어 있다.
본 발명의 이종이량체 Fc 융합 단백질은 당업계에 공지된 바와 같이 발현 벡터(들)를 포함하는 숙주세포를 배양함으로써 제조된다. 생산되면, 이온 교환 크로마토그래피 단계를 포함하는 통상적인 융합 단백질 또는 항체 정제 단계가 수행된다. 본원에 논의된 바와 같이, 2개의 단량체의 pI를 적어도 0.5만큼 차이나게 하면, 이온 교환 크로마토그래피, 등전점 전기영동 또는 등전점에 민감한 다른 방법에 의한 분리를 가능하게 할 수 있다. 즉, pI 치환의 포함은 각각의 단량체가 상이한 pI를 갖고 이종이량체가 또한 별개의 pI를 갖도록 각각의 단량체의 등전점(pI)을 변경시킴으로써, 이종이량체의 등전위 정제(예를 들어 음이온 교환 크로마토그래피, 양이온 교환 크로마토그래피)를 용이하게 한다. 이러한 치환은 또한 정제 후 임의의 오염된 동종이량체의 측정 및 모니터링을 돕는다(예를 들어 IEF 겔, cIEF 및 분석용 IEX 컬럼).
X. IL-12 이종이량체 면역조절 Fc 융합 단백질의 생물학적 및 생화학적 기능
일반적으로, 본 발명의 Fc 융합 단백질이 암을 앓고 있는 환자에게 투여되고, 본원에 기재되는 바와 같은 다수의 방법으로 효능이 평가된다. 따라서, 암 부하, 종양의 크기, 전이의 존재 또는 정도의 평가 등과 같은 효능의 표준 검정이 수행될 수 있으나, 면역종양학 치료는 또한 면역 상태 평가에 기초하여 평가될 수 있다. 이는 시험관내 검정 및 생체내 검정을 포함하는 다수의 방식으로 수행될 수 있다. 예를 들어, 종양 부하, 크기, 침윤성, LN 침범, 전이 등과 같은 "전형적인" 측정과 함께 면역 상태의 변화(예를 들어, ipi 치료 후 ICOS+ CD4+ T세포의 존재)가 평가될 수 있다. 따라서, 다음 중 임의의 것 또는 전부가 평가될 수 있다: CD4+ T세포 활성화 또는 증식, CD8+ T(CTL) 세포 활성화 또는 증식, CD8+ T세포 매개 세포독성 활성 및/또는 CTL 매개 세포 고갈, NK세포 활성 및 NK 매개 세포 고갈에 대한 PVRIG의 저해 효과; Treg 세포 분화 및 증식, 및 Treg 또는 골수 유래 억제자 세포(MDSC) 매개 면역억제 또는 면역 내성에 대한 PVRIG의 강화 효과; 및/또는 면역세포에 의한 전염증성 사이토카인 생산, 예를 들어 T세포 또는 다른 면역세포에 의한 IL-2, IFN-γ 또는 TNF-α 생산에 대한 PVRIG의 효과.
일부 구현예에서, 치료의 평가는, 예를 들어 CFSE 희석 방법, 면역 효과기 세포의 Ki67 세포내 염색 및 3H-티미딘 혼입 방법을 사용하여 면역세포 증식을 평가하는 방식으로 수행된다.
일부 구현예에서, 치료의 평가는 CD25, CD69, CD137, ICOS, PD1, GITR, OX40 중 하나 이상을 포함하는 활성화 관련 마커의 단백질 수준 증가 또는 유전자 발현 증가, 및 CD107A의 표면 발현에 의해 측정되는 세포 탈과립화를 평가하는 방식으로 수행된다.
일반적으로, 유전자 발현 검정은 당업계에 공지된 바와 같이 수행된다.
일반적으로, 단백질 발현 측정은 또한 당업계에 공지된 바와 같이 유사하게 수행된다.
일부 구현예에서, 치료의 평가는 효소 활성(프로테아제 활성 포함), 세포막 투과성, 세포 부착성, ATP 생산, 조효소 생산 및 뉴클레오타이드 흡수 활성과 같은 다수의 세포 매개변수의 추정을 통한 표적세포 생존력 검출에 의해 측정된 세포독성 활성을 평가하는 방식으로 수행된다. 이러한 검정의 특정 예에는, 비제한적으로, 트립판 블루(Trypan Blue) 또는 PI 염색, 51Cr 또는 35S 방출 방법, LDH 활성, MTT 및/또는 WST 검정, 칼세인(Calcein)-AM 검정, 발광 기반의 검정 등이 포함된다.
일부 구현예에서, 치료의 평가는 사이토카인 생산에 의해 측정되는 T세포의 활성을 평가하는 방식으로 수행되며, 여기서 측정은 널리 공지된 기술을 사용하여, 비제한적으로, IFNγ, TNFα, GM-CSF, IL2, IL6, IL4, IL5, IL10, IL13을 포함하는 사이토카인을 사용하여 배양 상청액에서 세포내 측정으로 수행된다.
따라서, 치료의 평가는 다음 중 하나 이상을 평가하는 검정을 사용하여 수행될 수 있다: (i) 면역 반응의 증가, (ii) αβT세포 및/또는 γδT세포의 활성화 증가, (iii) 세포독성 T세포 활성의 증가, (iv) NK세포 및/또는 NKT세포 활성의 증가, (v) αβT세포 및/또는 γδT세포 억제의 완화, (vi) 전염증성 사이토카인 분비의 증가, (vii) IL-2 분비의 증가, (viii) 인터페론-γ 생산의 증가, (ix) Th1 반응의 증가, (x) Th2 반응의 감소, (xi) 조절 T세포(Treg)의 세포 수 및/또는 적어도 하나의 조절 T세포(Treg)의 활성의 감소 또는 제거.
A. 효능 및 역가 측정을 위한 검정
일부 구현예에서, T세포 활성화는 당업계에 공지된 바와 같은 혼합 림프구 반응(MLR: Mixed Lymphocyte Reaction) 검정을 사용하여 평가된다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 상이한 인자의 인산화 또는 탈인산화에 의해, 또는 다른 번역 후 변형을 측정함으로써 측정되는 면역 반응의 증가 또는 감소를 측정한다. IL-12는 STAT4의 인산화를 통해 IFNγ 발현 및 분비를 매개한다(Morinobu 등의 문헌(2002)). 따라서, 바람직한 구현예에서, 신호전달 경로 검정은 STAT4의 인산화에 의해 나타나는 면역 반응의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 예를 들어 CD137, CD107a, PD1 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, αβT세포 및/또는 γδT세포 활성화의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 암세포와 같은 표적세포의 직접 사멸에 의해, 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 예를 들어 CD137, CD107a, PD1 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, 세포독성 T세포 활성의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 암세포와 같은 표적세포의 직접 사멸에 의해, 사이토카인 분비에 의해, 또는 예를 들어 CD107a 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, NK세포 및/또는 NKT세포 활성의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 예를 들어 CD137, CD107a, PD1 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, αβT세포 및/또는 γδT세포 억제의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 ELISA에 의해, Luminex에 의해, 멀티플렉스(multiplex) 비드 기반 방법에 의해, 세포내 염색 및 FACS 분석에 의해, 또는 Alispot 등에 의해 측정되는, 전염증성 사이토카인 분비의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 ELISA에 의해, Luminex에 의해, 멀티플렉스 비드 기반 방법에 의해, 세포내 염색 및 FACS 분석에 의해, 또는 Alispot 등에 의해 측정되는, IL-2 분비의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 ELISA에 의해, Luminex에 의해, 멀티플렉스 비드 기반 방법에 의해, 세포내 염색 및 FACS 분석에 의해, 또는 Alispot 등에 의해 측정되는, 인터페론-γ 생산의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해 또는 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, Th1 반응의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해 또는 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, Th2 반응의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 유세포분석에 의해 또는 IHC에 의해 측정되는, 조절 T세포(Treg)의 세포 수 및/또는 적어도 하나의 조절 T세포(Treg)의 활성의 증가 또는 감소를 측정한다. 반응의 감소는 면역자극 활성을 나타낸다. 적절한 감소는 하기에 개괄되는 증가의 경우와 동일하다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 유세포분석에 의해 또는 IHC에 의해 측정되는, M2 대식세포 수의 증가 또는 감소를 측정한다. 반응의 감소는 면역자극 활성을 나타낸다. 적절한 감소는 하기에 개괄되는 증가의 경우와 동일하다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해 또는 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, M2 대식세포 친종양형성 활성의 증가 또는 감소를 측정한다. 반응의 감소는 면역자극 활성을 나타낸다. 적절한 감소는 하기에 개괄되는 증가의 경우와 동일하다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 유세포분석에 의해 또는 IHC에 의해 측정되는, N2 호중구 수의 증가 또는 감소를 측정한다. 반응의 감소는 면역자극 활성을 나타낸다. 적절한 감소는 하기에 개괄되는 증가의 경우와 동일하다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해 또는 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, N2 호중구 친종양형성 활성의 증가 또는 감소를 측정한다. 반응의 감소는 면역자극 활성을 나타낸다. 적절한 감소는 하기에 개괄되는 증가의 경우와 동일하다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 예를 들어 CD137, CD107a, PD1 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, T세포 활성화 저해의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 암세포와 같은 표적세포의 직접 사멸에 의해, 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 예를 들어 CD137, CD107a, PD1 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, CTL 활성화 저해의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, αβT세포 및/또는 γδT세포 고갈의 증가 또는 감소를 측정한다. 반응의 감소는 면역자극 활성을 나타낸다. 적절한 감소는 하기에 개괄되는 증가의 경우와 동일하다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 예를 들어 CD137, CD107a, PD1 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, αβT세포 및/또는 γδT세포 반응의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 예시적인 CD45RA, CCR7 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, 항원 특이적 기억 반응 자극의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 MTT, Cr 방출, 칼세인 AM과 같은 세포독성 검정에 의해, 또는 예를 들어 CFSE 희석 또는 프로피듐 요오다이드 염색 등과 같은 유세포분석 기반의 검정에 의해 측정되는, 암세포의 세포자멸사 또는 용해의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 MTT, Cr 방출, 칼세인 AM과 같은 세포독성 검정에 의해, 또는 예를 들어 CFSE 희석 또는 프로피듐 요오다이드 염색 등과 같은 유세포분석 기반 검정에 의해 측정되는, 암세포에 대한 세포독성 또는 세포증식억제 효과 자극의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 MTT, Cr 방출, 칼세인 AM과 같은 세포독성 검정에 의해, 또는 예를 들어 CFSE 희석 또는 프로피듐 요오다이드 염색 등과 같은 유세포분석 기반 검정에 의해 측정되는, 암세포 직접 사멸의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정되는, Th17 활성의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, 신호전달 경로 검정은, 예를 들어 MTT, Cr 방출, 칼세인 AM과 같은 세포독성 검정에 의해, 또는 예를 들어 CFSE 희석 또는 프로피듐 요오다이드 염색 등과 같은 유세포분석 기반 검정에 의해 측정되는, 보체 의존적 세포독성 및/또는 항체 의존적 세포 매개 세포독성 유도의 증가 또는 감소를 측정한다. 활성의 증가는 면역자극 활성을 나타낸다. 활성의 적절한 증가는 하기에 개괄되어 있다.
하나의 구현예에서, T세포 활성화는, 예를 들어 암세포와 같은 표적세포의 직접 사멸에 의해, 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 예를 들어 CD137, CD107a, PD1 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정된다. T세포의 경우, 증식, 세포 표면 마커(예를 들어, CD25, CD69, CD137, PD1)의 활성화, 세포독성(표적세포 사멸 능력) 및 사이토카인(예를 들어, IL-2, IL-4, IL-6, IFNγ, TNF-a, IL-10, IL-17A) 생산의 증가는, 면역 조절을 나타낼 수 있으며, 이는 암세포의 증강된 사멸과 일치할 수 있다.
하나의 구현예에서, NK세포 활성화는, 예를 들어 암세포와 같은 표적세포의 직접 사멸에 의해, 사이토카인 분비에 의해, 또는 예를 들어CD107a 등과 같은 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정된다. NK 세포의 경우, 증식, 세포독성(표적세포 사멸 능력, 및 CD107a, 그랜자임 및 퍼포린 발현의 증가), 사이토카인(예를 들어, IFNγ 및 TNF) 생산, 및 세포 표면 수용체(예를 들어, CD25) 발현의 증가는, 면역 조절을 나타낼 수 있으며, 이는 암세포의 증강된 사멸과 일치할 수 있다.
하나의 구현예에서, γδ T세포 활성화는, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해, 증식에 의해, 또는 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정된다.
하나의 구현예에서, Th1 세포 활성화는, 예를 들어 사이토카인 분비에 의해 또는 활성화 마커의 발현 변화에 의해 측정된다.
적절한 활성 또는 반응의 증가(또는, 상기 개괄된 바와 같이 적절한 경우, 감소)는 참조 샘플 또는 대조군 샘플, 예를 들어 본 발명의 IL-12 이종이량체 융합 단백질을 함유하지 않는 시험 샘플에서의 신호에 비해 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 또는 98% 내지 99%의 증가이다. 유사하게, 참조 샘플 또는 대조군 샘플과 비교하여 적어도 1배, 2배, 3배, 4배 또는 5배의 증가는 효능을 나타낸다.
XI. 병용요법
일부 양태에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질은 또 다른 치료제와 병용투여된다. 본원에 사용된 "병용" 투여는, 두 가지(또는 그 이상) 상이한 치료가 대상이 장애를 앓고 있는 동안 대상에게 전달되며, 예를 들어 두 가지 이상의 치료가 대상이 장애로 진단된 후부터 장애가 치유 또는 제거되거나 다른 이유로 치료가 중단되기 전까지 전달되는 것을 의미한다. 일부 구현예에서, 하나의 치료의 전달은 두 번째 치료의 전달이 시작될 때 여전히 일어나고 있기 때문에, 투여의 측면에서 중복이 존재한다. 이는 때때로 본원에서 "동시" 또는 "동반 전달"로 지칭된다. 다른 구현예에서, 하나의 치료의 전달은 다른 치료의 전달이 시작되기 전에 종결된다. 두 경우의 일부 구현예에서, 치료는 병용투여로 인해 더 효과적이다. 예를 들어, 두 번째 치료가 더 효과적이며, 예를 들어 두 번째 치료를 덜 받으면 동등한 효과가 나타나거나, 또는 두 번째 치료는 첫 번째 치료의 부재 하에서 두 번째 치료가 투여되는 경우에 나타나는 것보다 더 큰 정도로 증상을 감소시키거나, 또는 유사한 상황이 첫 번째 치료를 이용한 경우에 나타난다. 일부 구현예에서, 전달은, 증상 또는 장애와 관련된 다른 매개변수의 감소가 다른 치료의 부재 하에서 전달되는 하나의 치료를 이용한 경우에 관찰되는 것보다 더 크도록 이루어진다. 두 가지 치료의 효과는 부분적으로 부가적이거나, 완전히 부가적이거나 또는 부가적인 것보다 클 수 있다. 전달은, 첫 번째 치료의 효과가 두 번째 치료가 전달될 때 여전히 검출 가능하도록 이루어질 수 있다.
본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 XENP 서열)과 적어도 하나의 추가 치료제는, 동일하거나 별개의 조성물로 동시에, 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 순차적 투여의 경우, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 XENP 서열)이 먼저 투여되고, 추가의 작용제가 두 번째로 투여될 수 있거나, 또는 투여 순서가 역전될 수 있다.
본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 XENP 서열) 및/또는 다른 치료제, 치료 절차 또는 치료 방식은, 장애의 활동 기간 동안, 또는 질환의 관해 또는 덜 활동적인 기간 동안 투여될 수 있다. 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 XENP 서열)은 다른 치료 이전에, 다른 치료와 동시에, 치료 후에 또는 장애의 관해 동안 투여될 수 있다.
A. 체크포인트 차단 항체
일부 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질은, 비제한적으로, PD-1 저해제, TIM3 저해제, CTLA4 저해제, PD-L1 저해제, TIGIT 저해제, LAG3 저해제 또는 이들의 조합과 같은 체크포인트 차단 항체를 포함하는 다른 치료제와 조합된다.
1. 항-PD-1 항체
일부 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질은 항-PD-1 항체와 조합으로 암을 앓고 있는 대상에게 투여될 수 있다. 일부 경우에, 항-PD-1 항체에는 XENP16432(2가 항-PD-1 mAb, 이식된 인간 T세포를 억제하여 항종양 활성을 증강시키는 체크포인트 저해제; 도 53에 도시된 서열)가 포함된다.
일부 구현예에서, 본 발명의 IL-12-Fc 융합 단백질은 Keytruda® 또는 Optivo®와 병용투여된다.
예시적인 비제한적인 항-PD-1 항체 분자는, "PD-1에 대한 항체 분자 및 이의 용도(Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof)"라는 명칭으로 2015년 7월 30일자 공개된 US 2015/0210769에 개시되어 있으며, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다.
하나의 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 BAP049-Clone-A, BAP049-Clone-B, BAP049-Clone-C, BAP049-Clone-D 또는 BAP049-Clone-E의 아미노산 서열; 또는 US 2015/0210769의 표 1에 기재된 아미노산 서열 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 것과 실질적으로 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열을 포함하는, 적어도 1개 또는 2개의 중쇄 가변 도메인(선택적으로 불변 영역을 포함함), 적어도 1개 또는 2개의 경쇄 가변 도메인(선택적으로 불변 영역을 포함함) 또는 둘 모두를 포함한다. 항-PD-1 항체 분자는, 선택적으로, US 2015/0210769의 표 4에 제시된 바와 같은 중쇄, 경쇄 또는 둘 모두로부터의 리더(leader) 서열; 또는 이와 실질적으로 동일한 서열을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 본원에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clone-A, BAP049-Clone-B, BAP049-Clone-C, BAP049-Clone-D 또는 BAP049-Clone-E 중 임의의 것에서 선택되는 항체; 표 1에 기재된 아미노산 서열 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 것과 실질적으로 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역으로부터 적어도 1개, 2개 또는 3개의 상보성 결정 영역(CDR: complementarity determining region)을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 US 2015/0210769의 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개 또는 3개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 US 2015/0210769의 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개 또는 3개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다. 특정 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 경쇄 CDR에서의 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3에서의 하나 이상의 치환을 포함한다. 하나의 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 경쇄 가변 영역의 102번 위치에서의 경쇄 CDR3의 치환, 예를 들어 표 1에 따른 경쇄 가변 영역의 102번 위치에서 시스테인의 티로신, 또는 시스테인의 세린 잔기로의 치환을 포함한다(예를 들어, 쥣과 또는 키메라의 변형되지 않은 서열의 경우 서열번호 16 또는 24; 또는 변형된 서열의 경우 서열번호 34, 42, 46, 54, 58, 62, 66, 70, 74 또는 78 중 임의의 것).
또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 US 2015/0210769의 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
하나의 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 하기를 포함한다:
(a) 서열번호 4의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 5의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH); 및 서열번호 13의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 14의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 33의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)(이들은 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시되어 있음);
(b) 서열번호 1의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 2의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열번호 10의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 11의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 32의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL(이들은 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시되어 있음);
(c) 서열번호 224의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 5의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열번호 13의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 14의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 33의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL(이들은 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시되어 있음); 또는
(d) 서열번호 224의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 2의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열번호 10의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 11의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 32의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL(이들은 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시되어 있음).
또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 (i) 서열번호 1, 서열번호 4 또는 서열번호 224의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 2 또는 서열번호 5의 VHCDR2 아미노산 서열, 및 서열번호 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH); 및 (ii) 서열번호 10 또는 서열번호 13의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 11 또는 서열번호 14의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열번호 32 또는 서열번호 33의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)(이들은 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시되어 있음)을 포함한다.
다른 구현예에서, PD-1 저해제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 피딜리주맙에서 선택되는 항-PD-1 항체이다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙이다. 니볼루맙의 대체 명칭에는, MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538 또는 BMS-936558이 포함된다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙(CAS 등록 번호: 946414-94-4)이다. 니볼루맙은 PD1을 특이적으로 차단하는 전장 인간 IgG4 단클론 항체이다. PD1에 특이적으로 결합하는 니볼루맙(클론 5C4) 및 다른 인간 단클론 항체는 US 8,008,449 및 WO2006/121168에 개시되어 있다. 하나의 구현예에서, PD-1 저해제는 본원에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는 니볼루맙이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙이다. 펨브롤리주맙(람브롤리주맙(lambrolizumab), MK-3475, MK03475, SCH-900475 또는 KEYTRUDA®(Merck)로도 지칭됨)은 PD-1에 결합하는 인간화 IgG4 단클론 항체이다. 펨브롤리주맙 및 다른 인간화 항-PD-1 항체는 문헌[Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134―44], US 8,354,509 및 WO2009/114335에 개시되어 있다.
하나의 구현예에서, PD-1 저해제는, 예를 들어 US 8,354,509 및 WO 2009/114335에 개시되어 있으며, 여기에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는 펨브롤리주맙이다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 피딜리주맙이다. 피딜리주맙(CT-011; Cure Tech)은 PD1에 결합하는 인간화 IgG1k 단클론 항체이다. 피딜리주맙 및 다른 인간화 항-PD-1 단클론 항체는 US 8,747,847 및 WO2009/101611에 개시되어 있다.
다른 항-PD1 항체에는, 특히 예를 들어 US 8,609,089, US 2010028330 및/또는 US 20120114649에 개시된 항-PD1 항체인 AMP 514(Amplimmune)가 포함된다.
일부 구현예에서, PD-1 저해제는 불변 영역(예를 들어 면역글로불린 서열의 Fc 영역)에 융합된 면역부착소(예를 들어, PD-L1 또는 PD-L2의 세포외 또는 PD-1 결합 부분을 포함하는 면역부착소)이다. 일부 구현예에서, PD-1 저해제는 AMP-224(B7-DCIg; Amplimmune; 예를 들어 WO2010/027827 및 WO2011/066342에 개시됨)이며, 이는 PD-1과 B7-H1 사이의 상호작용을 차단하는 PD-L2 Fc 융합 가용성 수용체이다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 본 발명의 IL-12 Fc 융합 단백질과 조합으로 사용될 수 있다. 비제한적으로, 현재 FDA에서 승인된 두 가지 항체인 펨브롤리주맙 및 니볼리주맙(nivolizumab); 및, 비제한적으로, 티스렐리주맙(tislelizumab), Sym021, REGN2810(Rengeneron에서 개발됨), JNJ-63723283(J and J에서 개발됨), SHR-1210, 피딜리주맙, AMP-224, MEDIo680, PDR001 및 CT-001을 포함하는 현재 임상 시험 중인 것들뿐 아니라, 문헌[Liu et al., J. Hemat. & Oncol. (2017)10:136]에 개괄된 것들(상기 문헌의 항체는 명백하게 본원에 참조로서 인용됨)을 포함하는 몇 가지 항-PD-1 항체가 존재한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질은 PD-1 저해제(예를 들어, 항-PD-1 항체)와 조합으로 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 XENP 서열)은 항-PD-1 항체와 병용투여된다.
2. 항-TIM3 항체
일부 구현예에서, 본 발명의 IL-12-Fc 융합 단백질은 항-TIM3 항체와 병용투여된다.
일부 구현예에서, 본 발명의 IL-12-Fc 융합 단백질은 LY3321367(Eli Lilly and Company), MBG453(Novartis Pharmaceuticals) 및 TSR-022(Tesaro, Inc.)와 병용투여된다.
예시적인 비제한적인 항-TIM-3 항체 분자는, "TIM-3에 대한 항체 분자 및 이의 용도(Antibody Molecules to TIM-3 and Uses Thereof)"라는 명칭으로 2015년 8월 6일자 공개된 US 2015/0218274에 개시되어 있으며, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다.
하나의 구현예에서, 항-TIM-3 항체 분자는 ABTIM3, ABTIM3-hum01, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-hum10, ABTIM3-hum11, ABTIM3-hum12, ABTIM3-hum13, ABTIM3-hum14, ABTIM3-hum15, ABTIM3-hum16, ABTIM3-hum17, ABTIM3-hum18, ABTIM3-hum19, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3-hum23의 아미노산 서열; 또는 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 기재된 아미노산 서열; 또는 표 1 내지 4의 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 것과 실질적으로 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열을 포함하는, 적어도 1개 또는 2개의 중쇄 가변 도메인(선택적으로 불변 영역을 포함함), 적어도 1개 또는 2개의 경쇄 가변 도메인(선택적으로 불변 영역을 포함함) 또는 둘 모두를 포함한다. 항-TIM-3 항체 분자는, 선택적으로, US 2015/0218274에 제시된 바와 같은 중쇄, 경쇄 또는 둘 모두로부터의 리더 서열; 또는 이와 실질적으로 동일한 서열을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-TIM-3 항체 분자는 본원에 기재된 항체, 예를 들어 ABTIM3, ABTIM3-hum01, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-hum10, ABTIM3-hum11, ABTIM3-hum12, ABTIM3-hum13, ABTIM3-hum14, ABTIM3-hum15, ABTIM3-hum16, ABTIM3-hum17, ABTIM3-hum18, ABTIM3-hum19, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3-hum23 중 임의의 것에서 선택되는 항체; 또는 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 기재된 아미노산 서열; 또는 표 1 내지 4의 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 것과 실질적으로 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개 또는 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-TIM-3 항체 분자는 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 제시된 바와 같은 아미노산 서열 또는 표 1 내지 표 4에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개 또는 3개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1 내지 표 4에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1 내지 표 4에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
또 다른 구현예에서, 항-TIM-3 항체 분자는 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 제시된 바와 같은 아미노산 서열 또는 표 1 내지 표 4에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개 또는 3개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1 내지 표 4에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1 내지 표 4에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다. 특정 구현예에서, 항-TIM-3 항체 분자는 경쇄 CDR에서의 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3에서의 하나 이상의 치환을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-TIM-3 항체 분자는 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1 내지 4에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1 내지 표 4에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1 내지 표 4에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
하나의 구현예에서, 항-TIM-3 항체 분자는 하기를 포함한다:
(a) 서열번호 9의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 10의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH); 및 서열번호 12의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 13의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 14의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)(이들은 각각 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 개시되어 있음);
(b) 서열번호 3의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 4의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열번호 6의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 7의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 8의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL(이들은 각각 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 개시되어 있음);
(c) 서열번호 9의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 25의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열번호 12의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 13의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 14의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL(이들은 각각 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 개시되어 있음);
(d) 서열번호 3의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 24의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열번호 6의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 7의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 8의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL(이들은 각각 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 개시되어 있음);
(e) 서열번호 9의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 31의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열번호 12의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 13의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 14의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL(이들은 각각 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 개시되어 있음); 또는
(f) 서열번호 3의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 30의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열번호 6의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 7의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 8의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL(이들은 각각 US 2015/0218274의 표 1 내지 표 4에 개시되어 있음).
예시적인 항-TIM-3 항체는 미국 특허 제8,552,156호, WO 2011/155607, EP 2581113 및 미국 특허출원공개 제2014/044728호에 개시되어 있다.
일부 구현예에서, 항-TIM-3 항체는 본 발명의 IL-12 Fc 융합 단백질과 조합으로 사용될 수 있다. 비제한적으로, MBG453 및 TSR-022를 포함하는, 임상 개발 중에 있는 몇 가지 TIM-3 항체가 존재한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질은 TIM-3 저해제(예를 들어, 항-TIM3 항체)와 조합으로 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 XENP 서열)은 항-TIM3 항체와 병용투여된다.
3. 항-CTLA4 항체
예시적인 항-CTLA4 항체에는, 트레멜리무맙(tremelimumab)(IgG2 단클론 항체, Pfizer에서 입수 가능함, 이전에 티실리무맙(ticilimumab)으로 공지됨, CP-675,206); 및 이필리무맙(CTLA-4 항체, MDX-010으로도 공지됨, CAS No. 477202-00-9)이 포함된다. 다른 예시적인 항-CTLA-4 항체는, 예를 들어 미국 특허 제5,811,097호에 개시되어 있다.
하나의 구현예에서, 항-CTLA4 항체는, 예를 들어 US 5,811,097, US 7,605,238, WO00/32231 및 WO97/20574에 개시되어 있고, 본원에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는 이필리무맙이다.
하나의 구현예에서, 항-CTLA4 항체는, 예를 들어 US 6,682,736 및 WO00/37504에 개시되어 있고, 본원에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는 트레멜리무맙이다.
일부 구현예에서, 항-CTLA-4 항체는 본 발명의 IL-12-Fc 융합 단백질과 조합으로 사용될 수 있다. 따라서, 본원에 개괄된 병용요법에 사용하기에 적합한 항-CTLA-4 항체에는, 비제한적으로, 최근 FDA에서 승인된 항체인 이필리무맙, 및 CP-675,206 및 AGEN-1884를 포함하여 개발 중에 있는 몇 가지 항체가 더 포함된다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질은 CTLA-4 저해제(예를 들어, 항-CTLA-4 항체)와 조합으로 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 XENP 서열)은 항-CTLA-4 항체와 병용투여된다.
4. 항-PD-L1 항체
예시적인 비제한적인 항-PD-L1 항체 분자는, "PD-L1에 대한 항체 분자 및 이의 용도(Antibody Molecules to PD-L1 and Uses Thereof)"라는 명칭으로 2016년 4월 21일자 공개된 US 2016/0108123에 개시되어 있으며, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다.
하나의 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-hum10, BAP058-hum11, BAP058-hum12, BAP058-hum13, BAP058-hum14, BAP058-hum15, BAP058-hum16, BAP058-hum17, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N 또는 BAP058-Clone-O 중 임의의 아미노산 서열; 또는 US 2016/0108123의 표 1에 기재된 아미노산 서열 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 것과 실질적으로 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열을 포함하는, 적어도 1개 또는 2개의 중쇄 가변 도메인(선택적으로 불변 영역을 포함함), 적어도 1개 또는 2개의 경쇄 가변 도메인(선택적으로 불변 영역을 포함함) 또는 둘 모두를 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 본원에 기재된 항체, 예를 들어 BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-hum10, BAP058-hum11, BAP058-hum12, BAP058-hum13, BAP058-hum14, BAP058-hum15, BAP058-hum16, BAP058-hum17, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N 또는 BAP058-Clone-O 중 임의의 것에서 선택되는 항체; US 2016/0108123의 표 1에 기재된 아미노산 서열 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 것과 실질적으로 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역으로부터 적어도 1개, 2개 또는 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 US 2016/0108123의 표 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개 또는 3개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
또 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 US 2016/0108123의 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개 또는 3개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다. 특정 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 경쇄 CDR에서의 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3에서의 하나 이상의 치환을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 US 2016/0108123의 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
하나의 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 하기를 포함한다:
(i) 서열번호 1, 서열번호 4 또는 서열번호 195의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 2의 VHCDR2 아미노산 서열, 및 서열번호 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH)(이들은 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시되어 있음); 및
(ii) 서열번호 9의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 10의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 11의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)(이들은 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시되어 있음).
또 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 하기를 포함한다:
(i) 서열번호 1, 서열번호 4 또는 서열번호 195의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 5의 VHCDR2 아미노산 서열, 및 서열번호 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH)(이들은 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시되어 있음); 및
(ii) 서열번호 12의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 13의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 14의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)(이들은 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시되어 있음).
하나의 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 서열번호 1의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 서열번호 4의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 서열번호 195의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다(이들은 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시되어 있음).
일부 구현예에서, PD-L1의 저해제는 항체 분자이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1의 저해제는 YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718C, MDX-1105, 아테졸리주맙, 두르발루맙, 아벨루맙 또는 BMS936559에서 선택된다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙이다. 아테졸리주맙(MPDL3280A 및 Atezo®(Roche)로도 지칭됨)은 PD-L1에 결합하는 단클론 항체이다. 아테졸리주맙 및 다른 인간화 항-PD-L1 항체는 US 8,217,149에 개시되어 있으며, 여기에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 아벨루맙이다. 아벨루맙(A09-246-2(Merck Serono)로도 지칭됨)은 PD-L1에 결합하는 단클론 항체이다. 아벨루맙 및 다른 인간화 항-PD-L1 항체는 US 9,324,298 및 WO2013/079174에 개시되어 있으며, 여기에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 두르발루맙이다. 두르발루맙(MEDI4736(AstraZeneca)로도 지칭됨)은 PD-L1에 결합하는 단클론 항체이다. 두르발루맙 및 다른 인간화 항-PD-L1 항체는 US 8,779,108에 개시되어 있으며, 여기에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 BMS-936559이다. BMS-936559(MDX-1105(BMS)로도 지칭됨)는 PD-L1에 결합하는 단클론 항체이다. BMS-936559 및 다른 인간화 항-PD-L1 항체는 US 7,943,743 및 WO2007005874에 개시되어 있으며, 여기에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 본 발명의 IL-12-Fc 융합 단백질과 조합으로 사용될 수 있다. 현재 FDA에서 승인된 3가지 항체인 아테졸리주맙, 아벨루맙, 두르발루맙, 및 비제한적으로, LY33000054 및 CS1001을 포함하는 현재 임상 중인 것들뿐 아니라, 문헌[Liu et al., J. Hemat. & Oncol. (2017)10:136]에 개괄된 것들(상기 문헌의 항체는 명백하게 본원에 참조로서 인용됨)을 포함하는 몇 가지 항-PD-L1 항체가 존재한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질 단백질은 PD-L1 또는 PD-L2 저해제(예를 들어, 항-PD-L1 항체)와 조합으로 사용될 수 있다.
5. 항-TIGIT 항체
일부 구현예에서, 항-TIGIT 항체는 OMP-313M32이다. OMP-313M32(OncoMed Pharmaceuticals)는 TIGIT에 결합하는 단클론 항체이다. OMP-313M32 및 다른 인간화 항-TIGIT 항체는 US20160376365 및 WO2016191643에 개시되어 있으며, 여기에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는다.
일부 구현예에서, 항-TIGIT 항체는 BMS-986207이다. BMS-986207(ONO-4686(Bristol-Myers Squibb)로도 지칭됨)은 TIGIT에 결합하는 단클론 항체이다. BMS-986207 및 다른 인간화 항-TIGIT 항체는 US20160176963 및 WO2016106302에 개시되어 있으며, 여기에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는다.
일부 구현예에서, 항-TIGIT 항체는 MTIG7192이다. MTIG7192(Genentech)는 TIGIT에 결합하는 단클론 항체이다. MTIG7192 및 다른 인간화 항-TIGIT 항체는 US2017088613, WO2017053748 및 WO2016011264에 개시되어 있으며, 여기에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는다.
일부 구현예에서, 항-TIGIT 항체는 본 발명의 IL-12-Fc 융합 단백질과 조합으로 사용될 수 있다. BMS-986207, OMP-313M32 및 MTIG7192A를 포함하여, 임상 개발 중에 있는 몇 가지 TIGIT 항체가 존재한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질은 TIGIT 저해제(예를 들어, 항-TIGIT 항체)와 조합으로 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 XENP 서열)은 항-TIGIT 항체와 병용투여된다.
6. 항-LAG3 항체
예시적인 비제한적인 항-LAG-3 항체 분자는, "LAG-3에 대한 항체 분자 및 이의 용도(Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof)"라는 명칭으로 2015년 9월 17일자 공개된 US 2015/0259420에 개시되어 있으며, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다.
하나의 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser)(예를 들어, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser 또는 BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clone-F, BAP050-Clone-G, BAP050-Clone-H, BAP050-Clone-I 또는 BAP050-Clone-J 중 임의의 아미노산 서열; 또는 US 2015/0259420의 표 1에 기재된 아미노산 서열 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 것과 실질적으로 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열을 포함하는, 적어도 1개 또는 2개의 중쇄 가변 도메인(선택적으로 불변 영역을 포함함), 적어도 1개 또는 2개의 경쇄 가변 도메인(선택적으로 불변 영역을 포함함) 또는 둘 모두를 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 본원에 기재된 항체, 예를 들어 BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser)(예를 들어, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser 또는 BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clone-F, BAP050-Clone-G, BAP050-Clone-H, BAP050-Clone-I 또는 BAP050-Clone-J 중 임의의 것에서 선택되는 항체; US 2015/0259420의 표 1에 기재된 아미노산 서열 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 것과 실질적으로 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역으로부터 적어도 1개, 2개 또는 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 US 2015/0259420의 표 1에 제시된 바와 같은 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개 또는 3개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
또 다른 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 US 2015/0259420의 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개 또는 3개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다. 특정 구현예에서, 항-PD-L1 항체 분자는 경쇄 CDR에서의 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3에서의 하나 이상의 치환을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 US 2015/0259420의 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 CDR(또는 총칭하여 모든 CDR)을 포함한다. 하나의 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 총칭하여 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열 또는 표 1에 제시된 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 비교하여, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 또는 그 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
하나의 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 하기를 포함한다:
(i) 서열번호 1, 서열번호 4 또는 서열번호 286의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 2의 VHCDR2 아미노산 서열, 및 서열번호 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH)(이들은 각각 US 2015/0259420의 표 1에 개시되어 있음); 및
(ii) 서열번호 10의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 11의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 12의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)(이들은 각각 US 2015/0259420의 표 1에 개시되어 있음).
또 다른 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 하기를 포함한다:
(i) 서열번호 1, 서열번호 4 또는 서열번호 286의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 5의 VHCDR2 아미노산 서열, 및 서열번호 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH)(이들은 각각 US 2015/0259420의 표 1에 개시되어 있음); 및
(ii) 서열번호 13의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 14의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열번호 15의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)(이들은 각각 US 2015/0259420의 표 1에 개시되어 있음).
하나의 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 서열번호 1의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 서열번호 4의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 항-LAG-3 항체 분자는 서열번호 286의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다(이들은 각각 US 2015/0259420의 표 1에 개시되어 있음).
일부 구현예에서, 항-LAG-3 항체는 BMS-986016이다. BMS-986016(BMS986016(Bristol-Myers Squibb)로도 지칭됨)은 LAG-3에 결합하는 단클론 항체이다. BMS-986016 및 다른 인간화 항-LAG-3 항체는 US 2011/0150892, WO2010/019570 및 WO2014/008218에 개시되어 있다.
일부 구현예에서, 항-LAG3 항체는 LAG525이다. LAG525(IMP701(Novartis)로도 지칭됨)는 LAG3에 결합하는 단클론 항체이다. LAG525 및 다른 인간화 항-LAG3 항체는 US 9,244,059 및 WO2008132601에 개시되어 있으며, 본원에 개시된 서열(또는 이와 실질적으로 동일하거나 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열과 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 이상 동일한 서열)을 갖는다.
다른 예시적인 항-LAG3 항체는, 예를 들어 US2011150892 및 US2018066054에 개시되어 있다.
일부 구현예에서, 항-LAG-3 항체는 본 발명의 IL-12-Fc 융합 단백질과 조합으로 사용될 수 있다. REGN3767(Regeneron), BMS-986016(Bristol-Myers Squibb), MK-4280(Merck), LAG525(Novartis) 및 TSR-033(Tesaro)을 포함하여 임상 개발 중인 몇 가지 항-LAG-3 항체가 존재한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질은 LAG3 저해제(예를 들어, 항-LAG3 항체)와 조합으로 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 IL-12-Fc 융합 단백질(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 XENP 서열)은 항-LAG3 항체와 병용투여된다.
XII. 치료
일단 제조되면, 본 발명의 조성물은 일반적으로 본 발명의 이종이량체 Fc 융합 단백질의 결합으로 T세포 활성화를 촉진시키는 방식으로(예를 들어, T세포가 더 이상 억제되지 않음) 암을 치료함으로써 다수의 종양학 적용에서 사용된다.
따라서, 본 발명의 이종이량체 조성물은 이러한 암의 치료에 사용된다.
A. 생체내 투여를 위한 융합 단백질 조성물
본 발명에 따라 사용되는 융합 단백질의 제형은 동결건조된 제형 또는 수용액의 형태로, 목적하는 정도의 순도를 갖는 융합 단백질과 선택적인 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 안정화제를 혼합하는 방식으로(일반적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. [1980]]에 개괄된 바와 같음) 저장을 위해 제조된다.
B. 투여 방식
본 발명의 융합 단백질 및 화학요법제는 볼루스로서의 정맥내 투여 또는 일정 기간에 걸친 연속 주입과 같은 공지된 방법에 따라 대상에게 투여된다.
B. 치료 방식
본 발명의 방법에서, 요법은 질환 또는 병태에 대하여 긍정적인 치료 반응을 제공하기 위해 사용된다. "긍정적인 치료 반응"은 질환 또는 병태의 개선, 및/또는 질환 또는 병태와 관련된 증상의 개선을 의미한다. 예를 들어, 긍정적인 치료 반응은 질환에서 다음 개선 중 하나 이상을 나타낼 수 있다: (1) 신생물 세포 수의 감소; (2) 신생물 세포 사멸의 증가; (3) 신생물 세포 생존의 저해; (5) 종양 성장의 저해(예를 들어, 어느 정도의 지연, 바람직하게는 중단); (6) 환자 생존율의 증가; 및 (7) 질환 또는 병태와 관련된 하나 이상의 증상의 어느 정도 경감.
임의의 주어진 질환 또는 병태에서 긍정적인 치료 반응은 해당 질환 또는 병태에 대하여 특정한 표준화된 반응 기준에 따라 결정될 수 있다. 종양 반응은 자기 공명 영상화(MRI) 스캔, x-선 촬영 영상화, 전산화 단층촬영(CT) 스캔, 뼈 스캔 영상화, 내시경검사, 및 골수 흡인(BMA) 및 순환하는 종양 세포의 계수를 포함하는 종양 생검 샘플링과 같은 스크리닝 기법을 사용하여, 종양 형태(즉, 전체적인 종양 부담, 종양 크기 등)의 변화로 평가될 수 있다.
이러한 긍정적인 치료 반응에 더하여, 요법을 받는 대상은 질환과 관련된 증상의 유익한 개선 효과를 경험할 수 있다.
본 발명에 따른 치료는 사용된 약제의 "치료적 유효량"을 포함한다. "치료적 유효량"은 목적하는 치료 결과를 달성하는 데 필요한 투여량으로 필요한 기간 동안 효과적인 양을 나타낸다.
치료적 유효량은 개체의 질환 상태, 연령, 성별 및 체중, 및 개체에서 목적하는 반응을 이끌어내는 약제의 능력과 같은 요인에 따라 달라질 수 있다. 치료적 유효량은 또한 치료적으로 유익한 효과가 단백질 또는 단백질 부분의 임의의 독성 또는 유해한 효과를 능가하는 양이다.
종양 치료를 위한 "치료적 유효량"은 또한 질환의 진행을 안정화시키는 능력으로 측정될 수 있다. 암을 저해하는 화합물의 능력은 인간 종양에서의 효능을 예측하는 동물 모델 시스템에서 평가될 수 있다.
대안적으로, 조성물의 이러한 특성은 숙련된 의사에게 공지된 시험관내 검정에 의해 세포 성장을 저해하거나 세포자멸사를 유도하는 화합물의 능력을 조사함으로써 평가될 수 있다. 치료적 유효량의 치료용 화합물은 종양 크기를 감소시키거나, 다르게는 대상의 증상을 개선시킬 수 있다. 당업자는 대상의 크기, 대상의 증상의 중증도, 및 선택된 특정 조성물 또는 투여 경로와 같은 이러한 요인을 기반으로 이러한 양을 결정할 수 있을 것이다.
투여 방식은 최적의 목적하는 반응(예를 들어, 치료 반응)을 제공하도록 조정된다. 예를 들어, 단일 볼루스가 투여될 수 있으며, 여러 번으로 분할된 용량이 시간에 걸쳐 투여될 수 있거나, 또는 치료 상황의 긴급성에 의해 지시된 바와 같이 용량이 비례적으로 감소되거나 증가될 수 있다. 비경구 조성물은 투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 단위 투여 형태로 제형화될 수 있다. 본원에 사용된 단위 투여 형태는 치료하고자 하는 대상을 위한 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 구분된 단위를 나타내며; 각각의 단위는 필요한 약학적 담체와 함께 목적하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 선결된 양의 활성 화합물을 함유한다.
본 발명의 단위 투여 형태에 대한 사양은 (a) 활성 화합물의 고유한 특성 및 달성하고자 하는 특정 치료 효과, 및 (b) 개체의 감수성 치료를 위해 이러한 활성 화합물을 컴파운딩하는 기술에 내재된 한계에 의해 결정되고, 이에 직접적으로 의존한다.
본 발명에 사용되는 이종이량체 단백질에 대한 효율적인 투여량 및 투여 방식은 치료하고자 하는 질환 또는 병태에 따라 달라지며, 당업자에 의해 결정될 수 있다.
본 발명에 사용되는 이종이량체 단백질의 치료적 유효량의 예시적인 비제한적인 범위는 약 0.1 mg/kg 내지 100 mg/kg이다.
모든 인용된 참고문헌은 그 전문이 명백하게 본원에 참조로서 인용된다.
본 발명의 특정 구현예가 예시의 목적으로 상기 기재되었지만, 당업자는 본 발명이 첨부된 청구범위에 기재된 바에서 벗어나지 않는 한 세부 사항에 대한 다수의 변형이 이루어질 수 있다는 것을 이해할 것이다.
실시예
하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위해 제공된다. 이러한 실시예는 본 발명을 임의의 특정한 적용 또는 작동 이론으로 제한하고자 하는 것이 아니다. 본 발명에서 논의된 모든 불변 영역 위치에 있어서, 넘버링은 Kabat에서와 같이 EU 인덱스에 따른다(문헌[Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., United States Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda], 이는 그 전문이 본원에 참조로서 인용됨). 항체 분야의 당업자는 이러한 협약이 면역글로불린 서열의 특정 영역에서의 비(非)순차적인 넘버링으로 이루어지며, 이는 면역글로불린 패밀리의 보존된 위치에 대한 정규화된 참조를 가능하게 한다는 점을 이해할 것이다. 따라서, EU 인덱스에 의해 정의된 임의의 주어진 면역글로불린의 위치는 반드시 이의 순차적 서열에 상응하지 않을 것이다.
일반적인 및 특정한 과학적 기법은 미국 특허출원공개 제2015/0307629호, 제2014/0288275호 및 WO2014/145806에 개괄되어 있으며, 이들은 모두 그 전문이, 특히 여기에 개괄된 기법이 명백하게 참조로서 인용된다.
실시예 1: IL-12-Fc 융합 단백질
다른 사이토카인과 마찬가지로, IL-12는 짧은 반감기를 가지며, 짧은 반감기를 극복하기 위한 고용량 치료는 전신 독성을 초래한다. 또한, 항종양 효과는 IL-12에 의한 IFNγ 생산의 지속적인 유도를 필요로 한다고 보고되어 있다(Gollob, JA 등의 문헌(2000)). 나아가, 단량체 또는 동종이량체로서의 IL-12p40 서브유닛은, 수용체에의 결합에 대해 경쟁하여 IL-12 활성을 길항하는 것으로 보고되어 있기 때문에(Gillessen, S 등의 문헌(1995)); IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛을 사전 복합체화시키는 것이 유리하다. 이러한 두 가지 주의사항을 해결하기 위해, 본 발명자들은 FcRn 매개 재순환을 통한 순환을 증강시키고, IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛을 사전 복합체화시키기 위해, IL-12 이종이량체를 Fc 융합 단백질(본원에서 IL-12-Fc 융합체로 통칭함)로 조작하였다.
1A: 다양한 형식의 IL-12-Fc 융합체 조작
본 발명자들은 이종이량체 Fc의 한쪽의 N-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p40 서브유닛, 및 이종이량체 Fc의 다른 쪽의 N-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p35 서브유닛을 포함하는 N-말단 IL-12 이종이량체 Fc 융합체 또는 "IL-12-heteroFc" 형식(도 8a)을 생성하였다. IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛은 도메인 링커에 의해 각각의 Fc 사슬에 연결될 수 있다. 이러한 형식의 예시적인 단백질은 XENP27201이며, 이의 서열은 도 9에 도시되어 있다.
본 발명자들은 또한 이종이량체 Fc의 한쪽의 C-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p40 서브유닛, 및 이종이량체 Fc의 다른 쪽의 C-말단에 재조합적으로 융합된 IL-12p35 서브유닛을 포함하는 C-말단 IL-12 이종이량체 Fc 융합체 또는 "heteroFc-IL-12" 형식(도 8b)을 생성하였다. IL-12p30 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛은 도메인 링커에 의해 각각의 Fc 사슬에 연결될 수 있다. 이러한 형식의 예시적인 단백질은 XENP27202이며, 이의 서열은 도 10에 도시되어 있다.
본 발명자들은 나아가 이종이량체 Fc의 한쪽의 N-말단에 재조합적으로 융합된 단일 사슬 IL-12 복합체(또는 "scIL-12 복합체")를 포함하고, 이때 분자의 다른 쪽은 "Fc 단독" 또는 "빈 Fc" 이종이량체 Fc인 N-말단 단일 사슬 IL-12-Fc 융합체 또는 "scIL-12-Fc" 형식(도 8c 및 도 8d)을 생성하였다. scIL-12 복합체는, 선택적으로 도메인 링커를 통해, IL-12p40의 N-말단에 연결된 IL-12p35 또는 IL-12p35에 N-말단의 연결된 IL-12p40을 포함할 수 있다. scIL-12 복합체에서 2개의 서브유닛의 순서는 본원에서 다음과 같이 지정된다: "scIL-12(p40/p35)"(여기서, IL-12p40 서브유닛은 IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨), 또는 "scIL-12(p35/p40)"(여기서, IL-12p35는 IL-12p35 서브유닛의 N-말단에 연결됨). scIL-12-Fc 형식의 예시적인 단백질에는 XENP27203 및 XENP27204가 포함되며, 이들의 서열은 도 11에 도시되어 있다.
사용을 위해 고려되는 추가의 IL-12-Fc 형식에 대한 그림 도식이 도 8에 도시되어 있다.
1B: 예시적인 IL-12-Fc 융합체의 제조 및 물리적 특징분석
1B(a): IL-12-heteroFc
IL-12p35 서브유닛과 IL-12p40 서브유닛을 코딩하는 플라스미드를 표준 유전자 합성으로 구축한 후, Fc 융합 파트너(예를 들어, 도 7에 도시된 바와 같은 불변 영역)를 함유하는 pTT5 발현 벡터에 서브클로닝하였다. 단백질을 HEK293E 세포에서 일시적 트랜스펙션으로 생산하고, 단백질 A 크로마토그래피(정제 파트 1), 이어서 음이온 교환 크로마토그래피(정제 파트 2)를 포함하는 2단계 정제 공정으로 정제하였다. 예시적인 IL-12-heteroFc XENP27201에 대한 정제 파트 2를 도시한 크로마토그램은 도 12a에 도시되어 있다. 크로마토그램은 2개의 피크(피크 A 및 피크 B)의 분리를 보여주며, 이는 일반적으로 하기 기재되는 바와 같이 동일성, 순도 및 균질성에 대해 다각 광산란과 결합된 분석용 크기 배제 크로마토그래피(aSEC-MALS) 및 분석용 음이온 교환 크로마토그래피(분석용 AIEX)에 의해 추가로 특징분석된 것이었다.
XENP27201에 대한 정제 파트 2에서 분리된 피크 A와 피크 B를 aSEC-MALS를 사용하여 분석하여 구성 단백질 종을 추론하였다. 분석은 Agilent 1200 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 시스템에서 수행하였다. 샘플을 이동상으로 1 x PBS(pH 7.4)를 사용하여 1.0 mL/분으로 4℃에서 25분 동안 Superdex™ 200 10/300 GL 컬럼(GE Healthcare Life Sciences)에 주입하였고, UV 검출 파장은 280 nM였다. MALS는 Optilab® T-rEX 굴절률 검출기가 장착된 miniDAWN® TREOS®(Wyatt Technology, Santa Barbara, Cali.)에서 수행하였다. 분석은 Agilent OpenLab 크로마토그래피 데이터 시스템(CDS) ChemStation 에디션 AIC 버전 C.01.07 및 ASTRA 버전 6.1.7.15를 사용하여 수행하였다. 피크 A 및 피크 B에 대한 aSEC 분리 프로파일을 도시한 크로마토그램은 MALS로 측정된 구성 종의 MW와 함께 도 12b에 도시되어 있다. 프로파일에 따르면, 피크 A는 분자량이 약 299 kD 및 약 140 kD인 종을 포함하지만, 피크 B는 주로 분자량이 약 118 kD의 종을 포함하며, 이는 글리칸이 기여하는 추가 질량을 고려하여 계산된 XENP27201의 분자량(아미노산 서열 기준) 110.4 kDa과 일치한다.
피크 B의 순도 및 균질성을 추가로 평가하기 위해, 정제 파트 2의 피크를 또한 분석용 AIEX를 사용하여 분석하였다. 분석은 Agilent 1200 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 시스템에서 수행하였다. 샘플을 20 mM Tris(pH 8.5) 완충액 중 0-40% NaCl 구배를 사용하여 1.0 mL/분으로 Proteomix SAX-NP5 5 μM 비(非)다공성 컬럼(Sepax Technologies, Inc., Newark, Del.)에 주입하였고, UV 검출 파장은 280 nM였다. 분석은 Agilent OpenLAB CDS ChemStation 에디션 AIC 버전 C.01.07을 사용하여 수행하였다. 피크 A 및 피크 B의 분석용 AIEX 분리를 도시한 크로마토그램은 도 12c에 도시되어 있다. 피크 B에 대한 분석용 AIEX 분리 프로파일은, 피크 B에 대한 aSEC 분리 프로파일과 일치하는, 피크 B에서의 종의 순도 및 균질성을 보여준다. 여기서부터, XENP27201은 도 12a에 도시된 바와 같은 정제 파트 2에서 분리된 피크 B를 나타낸다.
1B(b): scIL-12(p40/p35)-Fc
링커를 통해 IL-12p35에 재조합적으로 융합된 IL-12p40을 코딩하는 플라스미드를 표준 유전자 합성으로 구축한 후, Fc 융합 파트너(예를 들어, 도 7에 도시된 바와 같은 불변 영역)를 함유하는 pTT5 발현 벡터에 서브클로닝하였다. 단백질을 HEK293E 세포에서 일시적 트랜스펙션으로 생산하고, 단백질 A 크로마토그래피(정제 파트 1) 및 음이온 교환 크로마토그래피(정제 파트 2)를 포함하는 2단계 정제 공정으로 정제하였다.
예시적인 scIL-12(p40/p35)-Fc 융합체 XENP27203에 대한 정제 파트 2를 도시한 크로마토그램은 도 13a에 도시되어 있다. 상기와 같이, 크로마토그램은 2개의 피크의 분리를 보여주며, 이는 실시예 1B(a)에 기재된 바와 같이 동일성, 순도 및 균질성에 대해 aSEC-MALS 및 분석용 AIEX로 추가로 특징분석된 것으로, 이에 대한 크로마토그램은 도 13b 및 도 13c에 도시되어 있다.
XENP27203의 정제 파트 2에서 분리된 피크 A 및 피크 B에 대한 aSEC 분리 프로파일에 따르면, 피크 A는 분자량이 약 396 kD, 약 188 kD 및 약 118 kD인 종을 포함하지만, 피크 B는 주로 분자량이 약 118 kD의 종을 포함하며, 이는 글리칸이 기여하는 추가 질량을 고려하여 계산된 XENP27203의 분자량(아미노산 서열 기준) 111.3 kDa과 일치한다. 피크 B의 순도 및 균질성을 추가로 조사하기 위해, 피크를 또한 실시예 1B(a)에 기재된 바와 같은 분석용 AIEX를 사용하여 분석하였다. 피크 B에 대한 분석용 AIEX 분리 프로파일(도 13c)은, 피크 B에 대한 aSEC 분리 프로파일과 일치하는, 피크 B에서의 종의 순도 및 균질성을 보여준다. 여기서부터, XENP27203은 도 13a에 도시된 바와 같은 음이온 교환에서 분리된 피크 B를 나타낸다.
1C: STAT4 인산화의 유도에서 IL-12-Fc 융합체의 시험관내 활성
사이토카인이 이의 수용체에 결합한 후, 사이토카인 수용체와 연관된 야누스 키나아제(JAK: Janus kinase)는 STAT 단백질을 인산화시킨 후, 핵으로 이동하여 추가의 다운스트림 과정을 조절한다. 특히, IL-12는 STAT4의 인산화를 통해 IFNγ 발현 및 분비를 매개한다(Morinobu 등의 문헌(2002)). 따라서, 다양한 림프구 집단에서 STAT4 인산화를 유도하는 상기 기재된 IL-12-heteroFc(XENP27201) 및 scIL-12(p40/p35)-Fc(XENP27203)의 능력을 조사하였다. 2가 IL-12p35-Fc 융합체 및 IL-12p40-Fc 융합체(이에 대한 그림 도식 및 서열은 도 14 및 도 15에 도시되어 있음)뿐 아니라, 재조합 IL-12를 대조군으로 사용하였다.
신선한 PBMC를 플레이트 결합된 항-CD3(100 ng/ml)과 함께 3일 동안 인큐베이션하여 활성화시켰다. 활성화 후, PBMC를 표시된 농도로의 표시된 시험 물품과 함께 37℃에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, PBMC를 먼저 항-CD3-BUV395(UCHT1), 항-CD4-BV605(RPA-T4), 항-CD8-AF700(SK1), 항-CD14-APC/Fire750(M5E2), 항-CD20-PerCP/5.5(2H7), 항-CD25-BV421(M-A251) 및 항-CD56-PE 항체로 염색하였다. 첫 번째 염색 후, 세포를 PerFix EXPOSE(Beckman Coulter, Indianapolis, Ind.)를 사용하여 투과성으로 만들었다. 투과성으로 만든 후, 세포를 항-CD45RA-BV510(HI100), 항-FoxP3-AF488(259D) 및 항-pSTAT4-AF647(38/p-Stat4) 항체로 염색하였다. 두 번째 염색 후, 다양한 림프구 집단에서의 STAT4 인산화를 조사하기 위해 세포를 유세포분석으로 분석하였다. IL-12 수용체를 통한 IL-12-Fc 융합체에 의한 신호전달을 나타내는, 다양한 림프구 집단에서의 pSTAT4 MFI를 도시한 데이터는, 도 16에 도시되어 있다.
데이터는, XENP27201 및 XENP27203이 모두 재조합 IL-12에 의해 유도된 것과 유사한 수준으로 다양한 림프구 집단에서 STAT4 인산화를 유도하는 데 활성이었으나, 2가 IL-12p40-Fc(XENP27560) 및 2가 IL-12p35-Fc(XENP27561) 융합체는 불활성이었음을 보여준다. 특히, 2개의 IL-12-Fc 융합체 형식은 유사한 역가를 나타냈다. 추가로, XENP27560 및 XENP27561과 비교하여 STAT4 인산화를 유도하는 정제된 IL-12-Fc 융합 단백질의 능력은, XENP27201 및 XENP27203(실시예 1B에 기재됨) 둘 모두에 대한 정제 파트 2에서 분리된 피크 B가 완전한 IL-12 이종이량체를 포함하는 활성 종으로 이루어져 있음을 확인시켜 준다.
실시예 2: 역가 감소를 위해 조작된 IL-12 변이체
반감기를 추가로 연장시키고 독성 가능성을 감소시키기 위해, 본 발명자들은 IL-12 수용체에 대한 결합 친화성이 감소된 IL-12 변이체를 조작하였는데, 이것이 항원 싱크(antigen sink)를 감소시키고 역가를 감소시킬 수 있을 것이라고 추론하였기 때문이다.
2A(a): IL-12p40 변이체 조작
본 발명자들은 먼저 친화성 조절 치환을 도입하기 위한 IL-12p40 상의 잠재적 부위로서 W15, P17, D18, A19, P20, G21, M23, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Y66 및 K84(도 17에 도시된 잔기)를 식별하였다.
두 번째 전략으로, MOE 소프트웨어에서 QuaSAR 패키지를 사용하여, 본 발명자들은 IL-12p40 결정 구조(PDB 코드 3HMX)에서 (물 분자에 대해 반지름 1.4 Å 및 각 원자에 대해 다면체 표현을 사용하여 계산된 물 접근 가능 표면적에 따라) 고도로 노출된 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴 및 글루타민 잔기를 식별하여, 이러한 잔기가 IL-12p40과 IL-12 수용체 사이의 결합에 기여할 수 있다고 추론하였다. 특히, 본 발명자들은, 면역원성 가능성을 최소화하기 위한 목적으로, 등입체성 치환(즉, Asn 및 Asp; 및 Gln 및 Glu)을 포함시킬 수 있는 잔기에 초점을 맞추었다. 따라서, 본 발명자들은 ASA 점수가 적어도 19인 E3, D7, E12, D14, D18, E22, D29, E32, E33, D41, Q42, E45, Q56, E59, D62, Q65, E73, E86, D93, D97, E100, N103, E110, D129, D142, Q144, E156, D161, N162, E166, E170, Q172, D174, E187, N200, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, Q256, E262, D265, D270, N281, Q289 및 E299를 식별하였다(잔기 및 ASA 점수는 도 18에 도시되어 있음).
상기 기재된 바와 같이, p40 서브유닛은 IL-12 및 IL-23에 의해 공유된다. Bloch 등의 문헌(2018)은, IL-23R 및 Nb22E11과의 복합체에서 IL-23에 대한 결정 구조를 보고하였다. 세 번째 전략으로서, 본 발명자들은, IL-23R과 접촉하는 IL-12p40 서브유닛 상의 잔기가 IL-12 수용체 복합체에서 유사한 수용체 IL-12Rβ2를 결합하는 데 관여할 수 있다고 추론하였다. 따라서, Bloch 등에 의해 보고된 결정 구조(PDB 코드 5MZV)를 사용하고 MOE 소프트웨어로 모델링하여, 본 발명자들은 IL-12Rβ2와 잠재적으로 접촉하는 IL-12p40 상의 잔기로서 D87, G88, I89, W90, K104 및 F106을 식별하였다(잔기 및 예상 접촉 유형은 도 19에 도시되어 있음).
최종적으로, 본 발명이 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛 사이의 자연적인 상호작용을 방해하지 않는다는 것을 입증하기 위해, 본 발명자들은 Luo 등의 문헌(2010)에 보고된 결정 구조를 기반으로, IL-12p35와 잠재적으로 접촉하는 다음과 같은 IL-12p40 상의 잔기를 식별하였다: K102, Y114, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, S204, F206, R208, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, D290, R291, Y292 및 Y293.
상기의 관점에서, 본 발명자들은 IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체의 친화성을 감소시키기 위한 목적으로, 등입체성 치환이 도입될 수 있는 잔기에서, 특히 상기 기재된 바와 같은 다수의 IL-12p40 변이체를 설계하였다. 단백질 균질성에 대한 글리코실화의 영향을 조사하기 위해, p40에서 잠재적인 N-글리코실화 부위를 제거하기 위한 치환을 또한 설계하였다. 예시적인 변이체에 대한 서열은 도 20에 도시되어 있다. IL-12p40 변이체를 코딩하는 플라스미드를 표준 유전자 합성으로 구축한 후, Fc 융합 파트너(예를 들어, 도 7에 도시된 바와 같은 불변 영역)를 함유하는 pTT5 발현 벡터에 서브클로닝하였으며, 이에 대한 상응하는 아미노산 서열은 도 21에 도시되어 있다.
2A(b): IL-12p35 변이체 조작
상기 기재된 두 번째 전략과 마찬가지로, 본 발명자들은 MOE 소프트웨어에서 QuaSAR 패키지를 사용하여, IL-12p35 결정 구조(PDB code 3HMX)에서 고도로 노출된 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴 및 글루타민 잔기를 식별하여, 이러한 잔기가 IL-12 이종이량체 복합체와 IL-12 수용체 사이의 결합에 기여할 수 있다고 추론하였다. 다시, 본 발명자들은, 면역원성 가능성을 최소화하기 위해 등입체성 치환을 포함시킬 수 있는 잔기에 초점을 맞추었다. 본 발명자들은 ASA 점수가 적어도 103인 Q35, E38, E46, D55, E67, N71, N76, N85, Q135, Q146, N151, E153, E162 및 E163을 식별하였다(잔기 및 ASA 점수는 도 22에 도시되어 있음).
상기와 같이, 본 발명이 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p354 서브유닛 사이의 자연적인 상호작용을 방해하지 않는다는 것을 입증하기 위해, 본 발명자들은 Luo 등의 문헌(2010)에 보고된 결정 구조를 기반으로, IL-12p40과 잠재적으로 접촉하는 다음과 같은 IL-12p35 상의 잔기를 식별하였다: Q20, S44, E45, E46, H49, K54, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, S73, C74, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193 및 A196.
상기의 관점에서, 본 발명자들은 IL-12 수용체에 대한 IL-12 이종이량체의 친화성을 감소시키기 위한 목적으로, 등입체성 치환을 갖는 다수의 IL-12p35 변이체를 설계하였다. 단백질 균질성에 대한 글리코실화의 영향을 조사하기 위해, p35에서 잠재적인 N-글리코실화 부위를 제거하기 위한 치환을 또한 설계하였다. 예시적인 변이체에 대한 서열은 도 23에 도시되어 있다. IL-12p35 변이체를 코딩하는 플라스미드를 표준 유전자 합성으로 구축한 후, Fc 융합 파트너(예를 들어, 도 7에 도시된 바와 같은 불변 영역)를 함유하는 pTT5 발현 벡터에 서브클로닝하였으며, 이에 대한 상응하는 아미노산 서열은 도 24에 도시되어 있다.
2A(c): 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체의 스크리닝
역가를 감소시키기 위해 IL-12 수용체에 대한 친화성이 감소된 IL-12-Fc 융합체를 생성하기 위한 관점에서, 상기 기재된 변이형 IL-12 서브유닛을 갖는 예시적인 변이형 IL-12-Fc 융합 단백질을 설계하였으며, 이에 대한 서열은 도 25에 도시되어 있다. 본 발명자들은 일반적으로 실시예 1B에 기재된 바와 같이 IL-12-Fc 융합체를 제조 및 정제하고; pSTAT4 검정으로 이의 활성을 조사하였다.
인간 PBMC를 100 ng/ml 항-CD3(OKT3)으로 2일 동안 활성화시켰다. 이어서, 활성화된 PBMC를 표시된 시험 물품과 함께 37℃에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 세포를 PerFix EXPOSE 키트(Beckman Coulter, Indianapolis, Ind.)를 사용하여 항-CD3-BUV395(UCHT1), 항-CD4-BV605(RPAT4), 항-CD8-AF700(SK1), 항-CD25-BV510(M-A251), 항-CD45RA-BV421(HI100), 항-CD56-PE(N901), 항-FoxP3-AF488(259D) 및 항-pSTAT4-AF647(38/p-Stat4)로 염색하고, 유세포분석으로 분석하였다.
IL-12p35 변이체 또는 IL-12p40 변이체를 갖는 IL-12-Fc 융합체에 의한 CD4+CD45RA+CD25+ T세포 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포에서의 STAT4 인산화의 유도를 나타내는 데이터는, 각각 도 26 및 도 27에 도시되어 있다. 도 28은, 다양한 변이형 IL-12-Fc 융합체의 EC50 및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 EC50의 배수 감소를 도시한 것이다. 데이터는, 변이형 IL-12p40 서브유닛 또는 IL-12p30 서브유닛을 포함하는 IL-12-Fc 융합체의 대부분이 STAT4 인산화 유도에서 감소된 역가를 나타냈음을 보여준다. 특히, IL-12p40 서브유닛에서 E59Q 및 E235Q 치환, 및 IL-12p35 치환에서 E153Q 및 N151D 치환은, 개별적으로 변이형 IL-12-Fc 융합체에 대해 2배 초과로 감소된 역가를 제공할 수 있었다. 또한, E59Q를 포함하는 IL-12p40 이중 및 삼중 돌연변이체는 최대 6.5배의 역가 감소를 제공하였다.
놀랍게도, IL-12p40(D87N) 또는 IL-12p40(E262Q)을 포함하는 두 가지 변이형 IL-12-Fc 융합체는 역가 증가를 나타냈다. 본 발명자들은 항원 싱크를 감소시키고, 이에 따라 IL-12-Fc 융합체의 반감기를 증가시키기 위한 목적으로 역가를 감소시키는 것에 관심을 두었지만, 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체는 다른 맥락에서도 사용될 수 있다.
2B: IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 조작(라운드 2)
IL-12 수용체에 대한 친화성을 감소시키고 생물학적 활성 IL-12 복합체의 역가를 감소시키기 위한 목적으로, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체를 추가로 조작하기 위해, 본 발명자들은 확장된 기준을 사용하여 실시예 2A에 기재된 전략을 재적용하였다. 예를 들어, 본 발명자들은 치환을 도입할 IL-12p40 잔기와 IL-12p35 잔기를 식별하기 위해 실시예 2A에 정의된 것보다 낮은 ASA 점수 임계값을 사용하였다. 본 발명자들은 또한 추가의 아미노산 잔기를 포함시키기 위해 기준을 확장시켰으며, 이때 치환의 도입이 IL-12p35, IL-12p40 및/또는 IL-12 복합체와 IL-12 수용체의 상호작용을 방해할 가능성이 더 높은 리신과 같은 보다 큰 잔기에 특히 초점을 두었다.
유사하게, 본 발명자들은 비(非)등입체성 치환을 도입하였으며, 이때 IL-12p35, IL-12p40 및/또는 IL-12 복합체와 IL-12 수용체의 상호작용을 방해하기 위해 리신과 같은 보다 큰 잔기에 특히 초점을 두었다. 이러한 접근법을 사용하여, 본 발명자들은 치환을 조작하는 데 적합한 잔기로서 IL-12p40 서브유닛에서 D34, K99, K163, K258 및 K260; 및 IL-12p35 서브유닛에서 N21, E79, Q130, N136, E143, K158 및 D165를 추가로 식별하였다. 또한, 본 발명자들은 역가 감소에 가장 크게 기여하였던 실시예 2에서 식별된 치환을 포함하는 추가의 조합 변이체를 생성하였다.
상기를 고려하여, 본 발명자들은 추가의 IL-12p40 변이체 및 IL-12p35 변이체를 설계하였으며, 이에 대한 예시적인 서열은 각각 도 29 및 도 31에 도시되어 있다. 상기와 같이, IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체를 코딩하는 플라스미드를 표준 유전자 합성으로 구축한 후, Fc 융합 파트너를 함유하는 pTT5 발현 벡터에 서브클로닝하였으며, 이에 대한 상응하는 아미노산 서열은 도 30 및 도 32에 도시되어 있다. 추가의 변이형 IL-12 서브유닛을 이용하여 IL-12-Fc 융합 단백질을 생성하였으며, 이에 대한 서열은 도 33에 도시되어 있고, 이는 일반적으로 실시예 1B에 기재된 바와 같이 제조하였다.
추가의 변이형 IL-12-Fc 융합체의 활성을 일반적으로 상기 기재된 바와 같은 pSTAT4 검정으로 조사하였다. 특히, 인간 PBMC를 100 ng/ml 항-CD3(OKT3)으로 2일 동안 활성화시켰다. 이어서, 활성화된 PBMC를 표시된 시험 물품과 함께 37℃에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 세포를 항-CD3-BUV395(UCHT1), 항-CD4-BV605(RPAT4), 항-CD8-AF700(SK1), 항-CD25-BV510(M-A251), 항-CD45RA-BV421(HI100) 및 항-CD56-PE(N901)로 염색하였다. 다음으로, 세포를 PerFix EXPOSE(Beckman Coulter, Indianopolis, Ind.)를 사용하여 투과성으로 만들었다. 투과성으로 만든 후, 세포를 항-FoxP3-AF488(259D) 및 항-pSTAT4-AF647(38/p-Stat4) 항체로 염색하고, 유세포분석으로 분석하였다. CD4+CD45RA+CD25+ T세포 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포에서의 pSTAT4 MFI를 도시한 데이터는 도 34 및 도 35에 도시되어 있으며, EC50(및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 배수 감소)을 도시한 데이터는 도 36에 제시되어 있다. 데이터는, 변이형 IL-12p40 서브유닛 및/또는 IL-12p30 서브유닛을 포함하는 IL-12-Fc 융합체의 대부분이 STAT4 인산화 유도에서 감소된 역가를 나타냈음을 보여준다.
2C: IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 조작(라운드 3)
실시예 2B에서, 본 발명자들은, IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-Fc 융합체 XENP29952가 약 12배 감소를 가능하게 했던 반면, IL-12p40(E59Q)을 포함하는 IL-12-Fc 융합체 XENP28825는 단지 약 2배의 역가 감소를 나타냈음을 발견하였다. 또한, 본 발명자들은, IL-12p40 서브유닛에 E59Q를 포함하는 몇 가지 이중 돌연변이체(예를 들어, XENP29953, XENP29954 및 XENP29959)가 3.5배 초과의 역가 감소를 나타냈다는 점에 주목하였다. 나아가, 본 발명자들은, IL-12p35(N151D)를 포함하는 XENP28846은 역가를 증가시킬 수 있었지만, IL-12p35(D55Q/N151D)는 사실상 역가를 약 2배 감소시킬 수 있었다는 점에 주목하였으며, 이는 IL-12p35 서브유닛에서 D55의 변형이 역가 감소에 크게 기여함을 나타낸다. 따라서, IL-12-Fc 융합체의 역가를 추가로 감소시키기 위해, 본 발명자들은 역가 감소에 가장 크게 기여하였던 실시예 2B의 치환을 포함하는 추가의 조합 변이체를 생성하였다. 실시예 2B에서와 같이, 본 발명자들은 비등입체성 치환을 추가로 포함시켰으며, 이때 리신과 같은 보다 큰 잔기에 특히 초점을 두었다.
상기를 고려하여, 본 발명자들은 추가의 IL-12p40 변이체 및 IL-12p35 변이체를 설계하였으며, 이에 대한 예시적인 서열은 각각 도 37 및 도 38에 도시되어 있다. 추가의 변이형 IL-12 서브유닛을 이용하여 IL-12-Fc 융합 단백질을 생성하였으며, 이에 대한 서열은 도 39에 도시되어 있고, 이는 일반적으로 실시예 1B에 기재된 바와 같이 제조하였다. 추가의 변이형 IL-12-Fc 융합체의 활성을 일반적으로 상기 기재된 바와 같은 pSTAT4 검정으로 조사하였다. CD4+CD45RA+CD25+ T세포 및 CD8+CD45RA+CD25+ T세포에서의 pSTAT4 MFI를 도시한 데이터는 도 40에 도시되어 있으며, EC50(및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 배수 감소)을 도시한 데이터는 도 41에 제시되어 있다. 데이터는, 변이형 IL-12p40 서브유닛 및/또는 IL-12p30 서브유닛을 포함하는 신규한 IL-12-Fc 융합체가 모두 STAT4 인산화 유도에서 실질적으로 감소된 역가를 나타냈음을 보여준다. 특히, XENP30607 및 XENP30608은 XENP27201과 비교하여 약 100배의 역가 감소를 나타냈다.
2D: IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체의 조작(라운드 4)
본 발명자들은 역가 변화에 기여하는 실시예 2에서 확인된 추가의 변이체를 포함시키고, 비등입체성 치환을 추가로 사용하여 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛을 추가로 조작하였으며, 이때 IL-12p35, IL-12p40 및/또는 IL-12 복합체와 IL-12 수용체의 상호작용을 방해하기 위해 리신 및 티로신과 같은 보다 큰 잔기에 특히 초점을 두었다.
또한, 본 발명자들은 변형을 도입할 IL-12p40 서브유닛과 IL-12p35 서브유닛의 추가 잔기를 식별하기 위해 표면 노출을 기반으로 MOE 소프트웨어에서 추가의 구조 분석을 수행하였다. 본 발명자들은 IL-12p40 서브유닛에서 잔기 R159 및 K264; 및 IL-12p35 서브유닛에서 잔기 L75, L89, F96, M97, L124, M125 및 I171을 추가로 식별하였다. 본 발명자들은 상기 기재된 접근법 및 알라닌 치환(알라닌 스캐닝 돌연변이유발 기술과 함께)을 사용하여, 이러한 추가로 식별된 잔기에서 변형의 영향을 예비 조사하였다.
상기를 고려하여, 본 발명자들은 IL-12p40 변이체와 IL-12p35 변이체를 추가로 설계하였으며, 이에 대한 예시적인 서열은 각각 도 42 및 도 43에 도시되어 있다. 추가의 변이형 IL-12 서브유닛을 이용하여 IL-12-Fc 융합 단백질을 생성하였으며, 이에 대한 서열은 도 44에 도시되어 있고, 이는 일반적으로 실시예 1B에 기재된 바와 같이 제조하였다.
추가의 변이형 IL-12-Fc 융합체의 활성을 일반적으로 상기 기재된 바와 같은 pSTAT4 검정으로 조사하였다. CD4+CD45RA+CD25+ T세포, CD4+CD45RA-CD25+ T세포, CD8+CD45RA+CD25+ T세포 CD8+CD45RA-CD25+ T세포에서의 pSTAT4 MFI를 도시한 데이터는 도 46에 도시되어 있으며, EC50(및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 배수 감소)을 도시한 데이터는 도 47에 제시되어 있다. 데이터는, 변이형 IL-12p40 서브유닛 및/또는 IL-12p35 서브유닛을 포함하는 신규한 IL-12-Fc 융합체가 모두 STAT4 인산화 유도에서 실질적으로 감소된 역가를 나타냈음을 보여준다.
실시예 3: 2가 IL-12-Fc 융합체
본 발명자들은 또한 2가 IL-12-Fc 융합체를 고안하였다. 하나의 이러한 형식은, (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 N-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함하는 N-말단 2가 IL-12-Fc 융합체 형식(도 48a 및 도 48b)이다. 또 다른 이러한 형식은, (선택적으로 도메인 링커를 통해) 동종이량체 Fc 사슬의 C-말단에 재조합적으로 융합된 scIL-12 복합체를 각각 포함하는 2개의 동일한 단량체를 포함하는 2가 C-말단 IL-12-Fc 융합체 형식(도 48c 및 도 48d)이다.
실시예 4: 대안적인 IL-12-Fc 융합체 형식의 역가가 감소된 IL-12 변이체
본 발명자들은 또한 추가의 IL-12-Fc 융합체 형식의 맥락에서 IL-12 변이체를 조사하였다. scIL-12(p40/p35)-Fc 및 (scIL-12(p40/p35))2-Fc 형식의 융합체를 WT IL-12p40 서브유닛 또는 변이형 IL-12p40(E59K/K99E) 서브유닛을 이용하여 생성하고, 일반적으로 실시예 1B에 기재된 바와 같이 제조하였다(이에 대한 서열은 도 49 및 도 50에 도시되어 있음).
IL-12-Fc 융합체의 활성을 일반적으로 상기 기재된 바와 같은 pSTAT4 검정으로 조사하였다. 특히, 인간 PBMC를 100 ng/ml 항-CD3(OKT3)으로 37℃에서 2일 동안 활성화시켰다. 이어서, 활성화된 PBMC를 표시된 시험 물품과 함께 37℃에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 세포를 항-CD3-BUV395(UCHT1), 항-CD4-BV605(RPAT4), 항-CD8-AF700(SK1), 항-CD25-BV711(M-A251), 항-CD45RA-BV421(HI100) 및 항-CD56-PE(N901)로 염색하였다. 다음으로, 세포를 PerFix EXPOSE(Beckman Coulter, Indianopolis, Ind.)를 사용하여 투과성으로 만들었다. 투과성으로 만든 후, 세포를 항-FoxP3-V450(259D) 및 항-pSTAT4-AF647(38/p-Stat4) 항체로 염색하고, 유세포분석으로 분석하였다. CD4+CD45RA+CD25+ T세포, CD4+CD45RA-CD25+ T세포, CD8+CD45RA+CD25+ T세포 CD8+CD45RA-CD25+ T세포에서의 pSTAT4 MFI를 도시한 데이터는 도 51에 도시되어 있으며, EC50(및 WT IL-12-Fc XENP27201과 비교한 배수 감소)을 도시한 데이터는 도 52에 제시되어 있다. 데이터는, 다양한 형식의 IL-12-Fc 융합체가 매우 유사한 역가를 나타냈으며, 변이형 IL-12p40(E59K/K99E) 서브유닛을 포함하는 scIL-12(p40/p35)-Fc 및 (scIL-12(p40/p35))2-Fc 융합체의 IL-12-Fc 융합체가 변이형 IL-12p40(E59K/K99E) 서브유닛을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 IL-12-Fc 융합체와 매우 유사한 역가를 나타냈음을 보여준다.
실시예 5: IL-12-Fc 융합체는 생체내 T세포의 동종이형 항종양 효과를 증강시킴
다음으로, 본 발명자들은 본 발명의 IL-12-Fc 융합체의 생체내 항종양 효과를 조사하였다. -15일차에 NOD SCID 감마(NSG) 마우스 오른쪽 옆구리에 3 x 106개의 pp-65 발현 MCF-7 세포를 피내로 이식하였다. 0일차에, 마우스에게 1.5 x 106개의 인간 PBMC를 복강내로 이식하였다. 이어서, 마우스(n = 15)를 변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체인 XENP29952 0.03 mg/kg으로 0일, 7일, 14일 및 21일차에 처리하였다. 사용된 대조군(n = 10)은 PBS 및 XENP16432(2가 항-PD-1 mAb, 이식된 인간 T세포를 억제하여 항종양 활성을 증강시키는 체크포인트 저해제; 도 53에 도시된 서열)였다. 종양 부피를 캘리퍼 측정으로 모니터링하고, 이에 대한 데이터를 도 54(첫 번째 투여 후 일수)에 제시하였다. 7일, 14일 및 21일차에 혈액 및 혈청을 채취하고, 인간 림프구 확장을 조사하기 위해 유세포분석(이에 대한 데이터는 도 55에 도시되어 있음)으로 분석하고, 혈청 사이토카인 농도에 대해 U-PLEX Biomarker Group 1 Human Assays(Meso Scale, Rockville, Md.)(이에 대한 데이터는 도 56에 도시되어 있음)로 분석하였다.
데이터는, IL-12-heteroFc 융합체 XENP29952가 PBS 대조군 및 XENP16432에 의한 체크포인트 차단과 비교하여, 14일차에, CD45+ 세포, CD3+ T세포, CD4+ T세포, CD8+ T세포 및 NK세포의 확장을 유의하게 증강시켰음(독립표본 t검정을 사용하여 로그 변환된 데이터에 대해 수행된 통계)을 보여준다. 특히, XENP29952는 종양 부피 변화로 나타난 바와 같이 11일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰다(독립표본 t검정을 사용하여 보정된 데이터를 기반으로 수행된 통계). 나아가, XENP29952는, XENP16432에 의한 체크포인트 차단과 비교하여, 7일차까지 IFNγ 및 CD25의 분비를 유의하게 증강시켰다(독립표본 t검정을 사용하여 로그 변환된 데이터에 대해 수행된 통계).
항종양 활성에 더하여, 이식된 인간 PBMC는 마우스 세포에 대한 자가면역 반응 및 후속으로 이식편대숙주병(GVHD: graft-versus-host disease)을 발달시켰다. 따라서, XENP29952로 처리된 모든 동물이 19일차까지 죽었는데, 이는 인간 림프구의 유의하게 증강된 확장에 의해 악화된 GVHD에 굴복했기 때문일 가능성이 높다는 점에 유의해야 한다. 이는, 약동학의 개선뿐 아니라 치료 지수의 개선에 있어서도 역가가 감소된 IL-12 변이체의 중요성을 강조한다.
실시예 6: IL-12-Fc 융합체는 시험관내 역가와 상관관계가 있는 생체내 조절된 활성을 나타냄
실시예 5에서 XENP29952로 처리된 모든 동물이 GVHD로 인해 죽었기 때문에, 본 발명자들은 GVHD 연구에서 역가가 감소된 IL-12 변이체로 조작된 IL-12-Fc 융합체의 생체내 활성을 조사하였다.
NSG 마우스에게 -1일차에 IV-OSP를 통해 10 x 106개의 인간 PBMC를 이식하고, 0일, 7일, 14일 및 21일차에 복강내로 다음 시험 물품을 0.3 mg/kg 내지 0.03 mg/kg으로 투여하였다: XENP29952(변이형 IL-12p40(E59K)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP30597(변이형 IL-12p40(E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31254(변이형 IL-12p40(D18K/E59K/K99E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체), XENP31251(변이형 IL-12p40(E59K/K99Y)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체) 또는 XENP31258(변이형 IL-12p40(E59K/K99E/K264E)을 포함하는 IL-12-heteroFc 형식의 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체). GVHD의 지표로서 체중을 주 2회 평가하였으며, 이에 대한 데이터는 (초기 체중과 비교한) 체중 변화로서 도 57에 도시되어 있다. 또한, PD-1 발현 수준으로 표시되는 다양한 T세포 집단의 활성화를 조사하기 위해 7일, 10일, 14일 및 31일차에 혈액을 채취하고(이에 대한 데이터는 도 58 및 도 59에 도시되어 있음), 사이토카인 분비를 조사하기 위해 혈청을 채취하였다(이에 대한 데이터는 도 60에 도시되어 있음). 특히, 데이터는 시험 물품에 대한 용량 반응을 보여준다(즉, 0.03 mg/kg 용량과 비교하여 0.3 mg/kg 용량에 의해 증강된 GVHD, T세포 활성화 및 IFNγ 분비).
놀라운 점은, 시험관내 CD4+ T세포에서의 STAT4 인산화 유도에 있어서 가장 약한 변이체 중 하나로 보이는 XENP31251(도 46a 및 도 46b 참조)이, GVHD의 보다 강력한 유도제 중 하나였다는 점이다. 따라서, 본 발명자들은 2개의 개별 PBMC 공여체를 사용하여 일반적으로 상기 기재된 바와 같은 STAT4 인산화 검정에서 동일한 예시적인 역가가 감소된 IL-12-Fc의 시험관내 활성을 재조사하였다. 인간 PBMC를 1 μg/ml 항-CD3(OKT3)으로 37℃에서 2일 동안 활성화시켰다. 이어서, 활성화된 PBMC를 표시된 시험 물품과 함께 37℃에서 15분 동안 인큐베이션하였다.
이어서, 세포를 항-CD3-BUV395(UCHT1), 항-CD4-BV605(RPAT4), 항-CD8-AF700(SK1), 항-CD25-BV510(M-A251), 항-CD45-BV785, 항-CD45RA-BV421(HI100), 항-CD16-PE(B73) 및 항-CD56-PE(N901)로 염색하였다. 다음으로, 세포를 PerFix EXPOSE(Beckman Coulter, Indianapolis, Ind.)를 사용하여 투과성으로 만들었다. 투과성으로 만든 후, 세포를 항-FoxP3-AF488(259D) 및 항-pSTAT4-AF647(38/p-Stat4) 항체로 염색하고, 유세포분석으로 분석하였다. 2개의 공여체로부터의 PBMC에서 다양한 림프구 집단에 대한 STAT4 인산화의 유도는 도 61에 도시되어 있다(두 번째 공여체에 대한 데이터는 제시되어 있지 않지만 62/848,512의 도 62가 참조로서 포함됨). 두 가지 공여체 및 다양한 림프구 집단에 걸친 데이터는, 가장 강력한 변이체로서의 XENP29952, 가장 덜 강력한 변이체로서의 XENP31254 및 XENP31258, 및 그 사이에 속하는 XENP30597 및 XENP31251의 역가 단계를 보여준다. 특히, 생체내에서 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합 변이체에 의해 유도된 GVHD 및 T세포 활성화 및 IFNγ 분비의 정도는, 시험관내 역가와 상관관계가 있었다. 예를 들어, 0.03 mg/kg 용량에서, XENP29952는 모든 역가가 감소된 IL-12-Fc 융합체보다 큰 GVHD, T세포 활성화 및 IFNγ 분비를 유도하였지만, XENP31254와 XENP31258은 가장 낮은 GVHD, T세포 활성화 및 IFNγ 분비를 유도하였다.
실시예 7: IL-12-Fc 융합체는 항종양 활성을 갖고, 체크포인트 차단과 생산적으로 조합됨
다음으로, 본 발명자들은 추가의 IL-12-Fc 융합체들을 조합한 생체내 항종양 효과뿐 아니라, IL-12-Fc 융합체와 체크포인트 차단을 조합한 효과를 조사하였다. -15일차에 NSG 마우스 오른쪽 옆구리에 3 x 106개의 pp-65 발현 MCF-7 세포를 피내로 이식하였다. 0일차에, 마우스에게 5 x 106개의 인간 PBMC를 복강내로 이식하였다. 이어서, 마우스를 0.1 mg/kg XENP31251 단독 또는3.0 mg/kg 항-PD-1 mAb XENP16432와 조합으로 0일, 7일, 14일 및 21일차에 처리하였다. 사용된 대조군은 PBS, 3.0 mg/kg XENP16432 단독 및 XENP31258이었다. 종양 부피를 캘리퍼 측정으로 모니터링하고, 이에 대한 데이터를 도 62(첫 번째 투여 후 일수)에 제시하였다. 7일, 14일 및 21일차에 혈액을 채취하고, 인간 림프구 확장을 조사하기 위해 유세포분석으로 분석하였으며, 14일 동안의 이에 대한 데이터는 도 63에 도시되어 있다.
데이터에 따르면, XENP31258은 14일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰고, XENP31251(단독 또는 XENP16432와 조합으로)은 PBS로의 처리와 비교하여 16일차까지 (종양 부피 변화로 표시되는 바와 같이) 항종양 활성을 유의하게 증강시켰다(맨-휘트니(Mann-Whitney) 검정을 사용하여 기준선 보정된 데이터에서 수행된 통계). 특히, 데이터는, XENP16432와 조합된 XENP31251이 XENP16432 단독으로의 처리와 비교하여 21일차까지 항종양 활성을 유의하게 증강시켰고; XENP16432와 조합된 XENP31251로의 처리가 XENP31251 또는 XENP16432 단독과 비교하여 림프구 확장을 유의하게 증강시켰음을 보여주며, 이는 IL-12-Fc 융합체가 체크포인트 차단과 생산적으로 조합됨을 나타낸다.
실시예 8: IL-12p40 서브유닛에서 유리 시스테인의 제거
IL-12p40 서브유닛은 252번 위치(도 1에 도시된 바와 같은 인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열에 따라 번호 매겨짐)에 유리 시스테인을 가지며, 이는 다른 유리 시스테인과 결합하여 적어도 이질성을 유도하고 면역원성을 악화시킬 수 있다. 따라서, 예를 들어 C252S 변형을 도입하여(다른 치환이 사용될 수도 있음) 유리 시스테인이 제거되도록 IL-12p40 변이체를 조작하였다. C252의 변형(예를 들어, C252S)은 단독으로, 또는 친화성 또는 발현 변이체와 같은 임의의 다른 IL-12p40 변이체와 조합으로 사용될 수 있다. 유리 시스테인을 제거하기 위한 C252에서의 변형을 포함하는 예시적인 IL-12p40 변이체는 도 65에 도시되어 있다. 추가의 변이형 IL-12p40 서브유닛을 이용하여 예시적인 IL-12-Fc 융합 단백질을 생성하였으며, 이에 대한 서열은 도 66에 도시되어 있고, 이는 일반적으로 실시예 1B에 기재된 바와 같이 제조하였다.
유리 시스테인의 제거가 어떠한 활성 변화도 일으키지 않았음을 확인하기 위해, 유리 시스테인이 제거되도록 조작된 IL-12p40 변이체의 활성을 일반적으로 상기 기재된 바와 같은 pSTAT4 검정으로 조사하였다. 활성화된 PBMC를 표시된 시험 물품과 함께 인큐베이션하고, 다양한 집단에서의 pSTAT4 MFI를 평가하였으며, 이에 대한 데이터는 도 67에 도시되어 있다. 데이터는, C252S 변형을 포함하는 변이체가 C252S 변형을 포함하지 않는 대응 변이체와 유사한 활성을 나타냈음을 보여준다. 특히, C252S 돌연변이 존재 유무로 조작된 버전에 대해 시험된 4개의 변이체 중 3개(즉, D18K/E59K/K99E; D18K/E59K/K99E/K264E; 및 E59K/K99E)의 경우, C252S 돌연변이가 IL-12-Fc 융합체의 역가를 약간 감소시키는 것으로 나타났다.
상기 기재된 실시예는 당업자에게 본 발명의 조성물, 시스템 및 방법의 구현예를 만들고 사용하는 방법의 완전한 개시 및 설명을 제시하기 위해 제공되는 것으로, 본 발명자들이 이들의 발명이라고 간주하는 것의 범위를 제한하고자 하는 것이 아니다. 당업자에게 명백한 본 발명을 수행하기 위한 상기 기재된 방식의 변형은 다음의 청구범위의 범위 내에 속하는 것으로 의도된다. 본 명세서에 언급된 모든 특허 및 간행물은 본 발명이 속하는 당업자의 기술 수준을 나타낸다. 본 개시내용에 인용된 모든 참고문헌은 각각의 참고문헌의 전문이 개별적으로 참조로서 인용되는 바와 동일한 정도로 참조로서 인용된다.
모든 표제 및 섹션 명칭은 명확성 및 참고 목적으로만 사용되며, 어떠한 방식으로든 제한하는 것으로 간주되어서는 안 된다. 예를 들어, 당업자는 본원에 기재된 본 발명의 사상 및 범위에 따라 적절한 경우 상이한 표제 및 섹션으로부터의 다양한 양태를 조합하는 유용성을 이해할 것이다.
본원에 인용된 모든 참고문헌은 각각의 개별적인 간행물 또는 특허 또는 특허 출원이 모든 목적을 위하여 그 전문이 본원에 참조로서 인용되도록 구체적으로 및 개별적으로 지시된 바와 동일한 정도로 모든 목적을 위하여 그 전문이 본원에 참조로서 인용된다.
당업자에게 명백한 바와 같이, 본 출원의 사상 및 범위에서 벗어나지 않는 한 본 출원에 대한 다수의 변형 및 변화가 이루어질 수 있다. 본원에 기재된 특정한 구현예 및 실시예는 단지 예로서 제공되며, 본 출원은 청구범위에 의해 자격이 부여되는 등가물의 전체 범위와 함께 첨부된 청구범위에 의해서만 제한되어야 한다.
<110> XENCOR, INC.
<120> IL-12 HETERODIMERIC FC-FUSION PROTEINS
<130> 067461-5225-WO
<140> PCT/US19/54570
<141> 2019-10-03
<150> 62/848,512
<151> 2019-05-15
<150> 62/810,038
<151> 2019-02-25
<150> 62/740,813
<151> 2018-10-03
<160> 467
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 219
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Met Cys Pro Ala Arg Ser Leu Leu Leu Val Ala Thr Leu Val Leu Leu
1 5 10 15
Asp His Leu Ser Leu Ala Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro
20 25 30
Gly Met Phe Pro Cys Leu His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val
35 40 45
Ser Asn Met Leu Gln Lys Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys
50 55 60
Thr Ser Glu Glu Ile Asp His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser
65 70 75 80
Thr Val Glu Ala Cys Leu Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys
85 90 95
Leu Asn Ser Arg Glu Thr Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala
100 105 110
Ser Arg Lys Thr Ser Phe Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr
115 120 125
Glu Asp Leu Lys Met Tyr Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys
130 135 140
Leu Leu Met Asp Pro Lys Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu
145 150 155 160
Ala Val Ile Asp Glu Leu Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr
165 170 175
Val Pro Gln Lys Ser Ser Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys
180 185 190
Ile Lys Leu Cys Ile Leu Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr
195 200 205
Ile Asp Arg Val Met Ser Tyr Leu Asn Ala Ser
210 215
<210> 2
<211> 197
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 3
<211> 328
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 3
Met Cys His Gln Gln Leu Val Ile Ser Trp Phe Ser Leu Val Phe Leu
1 5 10 15
Ala Ser Pro Leu Val Ala Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val
20 25 30
Val Glu Leu Asp Trp Tyr Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu
35 40 45
Thr Cys Asp Thr Pro Glu Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln
50 55 60
Ser Ser Glu Val Leu Gly Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys
65 70 75 80
Glu Phe Gly Asp Ala Gly Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val
85 90 95
Leu Ser His Ser Leu Leu Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp
100 105 110
Ser Thr Asp Ile Leu Lys Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe
115 120 125
Leu Arg Cys Glu Ala Lys Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp
130 135 140
Leu Thr Thr Ile Ser Thr Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg
145 150 155 160
Gly Ser Ser Asp Pro Gln Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser
165 170 175
Ala Glu Arg Val Arg Gly Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu
180 185 190
Cys Gln Glu Asp Ser Ala Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile
195 200 205
Glu Val Met Val Asp Ala Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr
210 215 220
Ser Ser Phe Phe Ile Arg Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn
225 230 235 240
Leu Gln Leu Lys Pro Leu Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp
245 250 255
Glu Tyr Pro Asp Thr Trp Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr
260 265 270
Phe Cys Val Gln Val Gln Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg
275 280 285
Val Phe Thr Asp Lys Thr Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala
290 295 300
Ser Ile Ser Val Arg Ala Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser
305 310 315 320
Glu Trp Ala Ser Val Pro Cys Ser
325
<210> 4
<211> 306
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 4
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 5
<211> 662
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 5
Met Glu Pro Leu Val Thr Trp Val Val Pro Leu Leu Phe Leu Phe Leu
1 5 10 15
Leu Ser Arg Gln Gly Ala Ala Cys Arg Thr Ser Glu Cys Cys Phe Gln
20 25 30
Asp Pro Pro Tyr Pro Asp Ala Asp Ser Gly Ser Ala Ser Gly Pro Arg
35 40 45
Asp Leu Arg Cys Tyr Arg Ile Ser Ser Asp Arg Tyr Glu Cys Ser Trp
50 55 60
Gln Tyr Glu Gly Pro Thr Ala Gly Val Ser His Phe Leu Arg Cys Cys
65 70 75 80
Leu Ser Ser Gly Arg Cys Cys Tyr Phe Ala Ala Gly Ser Ala Thr Arg
85 90 95
Leu Gln Phe Ser Asp Gln Ala Gly Val Ser Val Leu Tyr Thr Val Thr
100 105 110
Leu Trp Val Glu Ser Trp Ala Arg Asn Gln Thr Glu Lys Ser Pro Glu
115 120 125
Val Thr Leu Gln Leu Tyr Asn Ser Val Lys Tyr Glu Pro Pro Leu Gly
130 135 140
Asp Ile Lys Val Ser Lys Leu Ala Gly Gln Leu Arg Met Glu Trp Glu
145 150 155 160
Thr Pro Asp Asn Gln Val Gly Ala Glu Val Gln Phe Arg His Arg Thr
165 170 175
Pro Ser Ser Pro Trp Lys Leu Gly Asp Cys Gly Pro Gln Asp Asp Asp
180 185 190
Thr Glu Ser Cys Leu Cys Pro Leu Glu Met Asn Val Ala Gln Glu Phe
195 200 205
Gln Leu Arg Arg Arg Gln Leu Gly Ser Gln Gly Ser Ser Trp Ser Lys
210 215 220
Trp Ser Ser Pro Val Cys Val Pro Pro Glu Asn Pro Pro Gln Pro Gln
225 230 235 240
Val Arg Phe Ser Val Glu Gln Leu Gly Gln Asp Gly Arg Arg Arg Leu
245 250 255
Thr Leu Lys Glu Gln Pro Thr Gln Leu Glu Leu Pro Glu Gly Cys Gln
260 265 270
Gly Leu Ala Pro Gly Thr Glu Val Thr Tyr Arg Leu Gln Leu His Met
275 280 285
Leu Ser Cys Pro Cys Lys Ala Lys Ala Thr Arg Thr Leu His Leu Gly
290 295 300
Lys Met Pro Tyr Leu Ser Gly Ala Ala Tyr Asn Val Ala Val Ile Ser
305 310 315 320
Ser Asn Gln Phe Gly Pro Gly Leu Asn Gln Thr Trp His Ile Pro Ala
325 330 335
Asp Thr His Thr Glu Pro Val Ala Leu Asn Ile Ser Val Gly Thr Asn
340 345 350
Gly Thr Thr Met Tyr Trp Pro Ala Arg Ala Gln Ser Met Thr Tyr Cys
355 360 365
Ile Glu Trp Gln Pro Val Gly Gln Asp Gly Gly Leu Ala Thr Cys Ser
370 375 380
Leu Thr Ala Pro Gln Asp Pro Asp Pro Ala Gly Met Ala Thr Tyr Ser
385 390 395 400
Trp Ser Arg Glu Ser Gly Ala Met Gly Gln Glu Lys Cys Tyr Tyr Ile
405 410 415
Thr Ile Phe Ala Ser Ala His Pro Glu Lys Leu Thr Leu Trp Ser Thr
420 425 430
Val Leu Ser Thr Tyr His Phe Gly Gly Asn Ala Ser Ala Ala Gly Thr
435 440 445
Pro His His Val Ser Val Lys Asn His Ser Leu Asp Ser Val Ser Val
450 455 460
Asp Trp Ala Pro Ser Leu Leu Ser Thr Cys Pro Gly Val Leu Lys Glu
465 470 475 480
Tyr Val Val Arg Cys Arg Asp Glu Asp Ser Lys Gln Val Ser Glu His
485 490 495
Pro Val Gln Pro Thr Glu Thr Gln Val Thr Leu Ser Gly Leu Arg Ala
500 505 510
Gly Val Ala Tyr Thr Val Gln Val Arg Ala Asp Thr Ala Trp Leu Arg
515 520 525
Gly Val Trp Ser Gln Pro Gln Arg Phe Ser Ile Glu Val Gln Val Ser
530 535 540
Asp Trp Leu Ile Phe Phe Ala Ser Leu Gly Ser Phe Leu Ser Ile Leu
545 550 555 560
Leu Val Gly Val Leu Gly Tyr Leu Gly Leu Asn Arg Ala Ala Arg His
565 570 575
Leu Cys Pro Pro Leu Pro Thr Pro Cys Ala Ser Ser Ala Ile Glu Phe
580 585 590
Pro Gly Gly Lys Glu Thr Trp Gln Trp Ile Asn Pro Val Asp Phe Gln
595 600 605
Glu Glu Ala Ser Leu Gln Glu Ala Leu Val Val Glu Met Ser Trp Asp
610 615 620
Lys Gly Glu Arg Thr Glu Pro Leu Glu Lys Thr Glu Leu Pro Glu Gly
625 630 635 640
Ala Pro Glu Leu Ala Leu Asp Thr Glu Leu Ser Leu Glu Asp Gly Asp
645 650 655
Arg Cys Lys Ala Lys Met
660
<210> 6
<211> 522
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 6
Cys Arg Thr Ser Glu Cys Cys Phe Gln Asp Pro Pro Tyr Pro Asp Ala
1 5 10 15
Asp Ser Gly Ser Ala Ser Gly Pro Arg Asp Leu Arg Cys Tyr Arg Ile
20 25 30
Ser Ser Asp Arg Tyr Glu Cys Ser Trp Gln Tyr Glu Gly Pro Thr Ala
35 40 45
Gly Val Ser His Phe Leu Arg Cys Cys Leu Ser Ser Gly Arg Cys Cys
50 55 60
Tyr Phe Ala Ala Gly Ser Ala Thr Arg Leu Gln Phe Ser Asp Gln Ala
65 70 75 80
Gly Val Ser Val Leu Tyr Thr Val Thr Leu Trp Val Glu Ser Trp Ala
85 90 95
Arg Asn Gln Thr Glu Lys Ser Pro Glu Val Thr Leu Gln Leu Tyr Asn
100 105 110
Ser Val Lys Tyr Glu Pro Pro Leu Gly Asp Ile Lys Val Ser Lys Leu
115 120 125
Ala Gly Gln Leu Arg Met Glu Trp Glu Thr Pro Asp Asn Gln Val Gly
130 135 140
Ala Glu Val Gln Phe Arg His Arg Thr Pro Ser Ser Pro Trp Lys Leu
145 150 155 160
Gly Asp Cys Gly Pro Gln Asp Asp Asp Thr Glu Ser Cys Leu Cys Pro
165 170 175
Leu Glu Met Asn Val Ala Gln Glu Phe Gln Leu Arg Arg Arg Gln Leu
180 185 190
Gly Ser Gln Gly Ser Ser Trp Ser Lys Trp Ser Ser Pro Val Cys Val
195 200 205
Pro Pro Glu Asn Pro Pro Gln Pro Gln Val Arg Phe Ser Val Glu Gln
210 215 220
Leu Gly Gln Asp Gly Arg Arg Arg Leu Thr Leu Lys Glu Gln Pro Thr
225 230 235 240
Gln Leu Glu Leu Pro Glu Gly Cys Gln Gly Leu Ala Pro Gly Thr Glu
245 250 255
Val Thr Tyr Arg Leu Gln Leu His Met Leu Ser Cys Pro Cys Lys Ala
260 265 270
Lys Ala Thr Arg Thr Leu His Leu Gly Lys Met Pro Tyr Leu Ser Gly
275 280 285
Ala Ala Tyr Asn Val Ala Val Ile Ser Ser Asn Gln Phe Gly Pro Gly
290 295 300
Leu Asn Gln Thr Trp His Ile Pro Ala Asp Thr His Thr Glu Pro Val
305 310 315 320
Ala Leu Asn Ile Ser Val Gly Thr Asn Gly Thr Thr Met Tyr Trp Pro
325 330 335
Ala Arg Ala Gln Ser Met Thr Tyr Cys Ile Glu Trp Gln Pro Val Gly
340 345 350
Gln Asp Gly Gly Leu Ala Thr Cys Ser Leu Thr Ala Pro Gln Asp Pro
355 360 365
Asp Pro Ala Gly Met Ala Thr Tyr Ser Trp Ser Arg Glu Ser Gly Ala
370 375 380
Met Gly Gln Glu Lys Cys Tyr Tyr Ile Thr Ile Phe Ala Ser Ala His
385 390 395 400
Pro Glu Lys Leu Thr Leu Trp Ser Thr Val Leu Ser Thr Tyr His Phe
405 410 415
Gly Gly Asn Ala Ser Ala Ala Gly Thr Pro His His Val Ser Val Lys
420 425 430
Asn His Ser Leu Asp Ser Val Ser Val Asp Trp Ala Pro Ser Leu Leu
435 440 445
Ser Thr Cys Pro Gly Val Leu Lys Glu Tyr Val Val Arg Cys Arg Asp
450 455 460
Glu Asp Ser Lys Gln Val Ser Glu His Pro Val Gln Pro Thr Glu Thr
465 470 475 480
Gln Val Thr Leu Ser Gly Leu Arg Ala Gly Val Ala Tyr Thr Val Gln
485 490 495
Val Arg Ala Asp Thr Ala Trp Leu Arg Gly Val Trp Ser Gln Pro Gln
500 505 510
Arg Phe Ser Ile Glu Val Gln Val Ser Asp
515 520
<210> 7
<211> 862
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 7
Met Ala His Thr Phe Arg Gly Cys Ser Leu Ala Phe Met Phe Ile Ile
1 5 10 15
Thr Trp Leu Leu Ile Lys Ala Lys Ile Asp Ala Cys Lys Arg Gly Asp
20 25 30
Val Thr Val Lys Pro Ser His Val Ile Leu Leu Gly Ser Thr Val Asn
35 40 45
Ile Thr Cys Ser Leu Lys Pro Arg Gln Gly Cys Phe His Tyr Ser Arg
50 55 60
Arg Asn Lys Leu Ile Leu Tyr Lys Phe Asp Arg Arg Ile Asn Phe His
65 70 75 80
His Gly His Ser Leu Asn Ser Gln Val Thr Gly Leu Pro Leu Gly Thr
85 90 95
Thr Leu Phe Val Cys Lys Leu Ala Cys Ile Asn Ser Asp Glu Ile Gln
100 105 110
Ile Cys Gly Ala Glu Ile Phe Val Gly Val Ala Pro Glu Gln Pro Gln
115 120 125
Asn Leu Ser Cys Ile Gln Lys Gly Glu Gln Gly Thr Val Ala Cys Thr
130 135 140
Trp Glu Arg Gly Arg Asp Thr His Leu Tyr Thr Glu Tyr Thr Leu Gln
145 150 155 160
Leu Ser Gly Pro Lys Asn Leu Thr Trp Gln Lys Gln Cys Lys Asp Ile
165 170 175
Tyr Cys Asp Tyr Leu Asp Phe Gly Ile Asn Leu Thr Pro Glu Ser Pro
180 185 190
Glu Ser Asn Phe Thr Ala Lys Val Thr Ala Val Asn Ser Leu Gly Ser
195 200 205
Ser Ser Ser Leu Pro Ser Thr Phe Thr Phe Leu Asp Ile Val Arg Pro
210 215 220
Leu Pro Pro Trp Asp Ile Arg Ile Lys Phe Gln Lys Ala Ser Val Ser
225 230 235 240
Arg Cys Thr Leu Tyr Trp Arg Asp Glu Gly Leu Val Leu Leu Asn Arg
245 250 255
Leu Arg Tyr Arg Pro Ser Asn Ser Arg Leu Trp Asn Met Val Asn Val
260 265 270
Thr Lys Ala Lys Gly Arg His Asp Leu Leu Asp Leu Lys Pro Phe Thr
275 280 285
Glu Tyr Glu Phe Gln Ile Ser Ser Lys Leu His Leu Tyr Lys Gly Ser
290 295 300
Trp Ser Asp Trp Ser Glu Ser Leu Arg Ala Gln Thr Pro Glu Glu Glu
305 310 315 320
Pro Thr Gly Met Leu Asp Val Trp Tyr Met Lys Arg His Ile Asp Tyr
325 330 335
Ser Arg Gln Gln Ile Ser Leu Phe Trp Lys Asn Leu Ser Val Ser Glu
340 345 350
Ala Arg Gly Lys Ile Leu His Tyr Gln Val Thr Leu Gln Glu Leu Thr
355 360 365
Gly Gly Lys Ala Met Thr Gln Asn Ile Thr Gly His Thr Ser Trp Thr
370 375 380
Thr Val Ile Pro Arg Thr Gly Asn Trp Ala Val Ala Val Ser Ala Ala
385 390 395 400
Asn Ser Lys Gly Ser Ser Leu Pro Thr Arg Ile Asn Ile Met Asn Leu
405 410 415
Cys Glu Ala Gly Leu Leu Ala Pro Arg Gln Val Ser Ala Asn Ser Glu
420 425 430
Gly Met Asp Asn Ile Leu Val Thr Trp Gln Pro Pro Arg Lys Asp Pro
435 440 445
Ser Ala Val Gln Glu Tyr Val Val Glu Trp Arg Glu Leu His Pro Gly
450 455 460
Gly Asp Thr Gln Val Pro Leu Asn Trp Leu Arg Ser Arg Pro Tyr Asn
465 470 475 480
Val Ser Ala Leu Ile Ser Glu Asn Ile Lys Ser Tyr Ile Cys Tyr Glu
485 490 495
Ile Arg Val Tyr Ala Leu Ser Gly Asp Gln Gly Gly Cys Ser Ser Ile
500 505 510
Leu Gly Asn Ser Lys His Lys Ala Pro Leu Ser Gly Pro His Ile Asn
515 520 525
Ala Ile Thr Glu Glu Lys Gly Ser Ile Leu Ile Ser Trp Asn Ser Ile
530 535 540
Pro Val Gln Glu Gln Met Gly Cys Leu Leu His Tyr Arg Ile Tyr Trp
545 550 555 560
Lys Glu Arg Asp Ser Asn Ser Gln Pro Gln Leu Cys Glu Ile Pro Tyr
565 570 575
Arg Val Ser Gln Asn Ser His Pro Ile Asn Ser Leu Gln Pro Arg Val
580 585 590
Thr Tyr Val Leu Trp Met Thr Ala Leu Thr Ala Ala Gly Glu Ser Ser
595 600 605
His Gly Asn Glu Arg Glu Phe Cys Leu Gln Gly Lys Ala Asn Trp Met
610 615 620
Ala Phe Val Ala Pro Ser Ile Cys Ile Ala Ile Ile Met Val Gly Ile
625 630 635 640
Phe Ser Thr His Tyr Phe Gln Gln Lys Val Phe Val Leu Leu Ala Ala
645 650 655
Leu Arg Pro Gln Trp Cys Ser Arg Glu Ile Pro Asp Pro Ala Asn Ser
660 665 670
Thr Cys Ala Lys Lys Tyr Pro Ile Ala Glu Glu Lys Thr Gln Leu Pro
675 680 685
Leu Asp Arg Leu Leu Ile Asp Trp Pro Thr Pro Glu Asp Pro Glu Pro
690 695 700
Leu Val Ile Ser Glu Val Leu His Gln Val Thr Pro Val Phe Arg His
705 710 715 720
Pro Pro Cys Ser Asn Trp Pro Gln Arg Glu Lys Gly Ile Gln Gly His
725 730 735
Gln Ala Ser Glu Lys Asp Met Met His Ser Ala Ser Ser Pro Pro Pro
740 745 750
Pro Arg Ala Leu Gln Ala Glu Ser Arg Gln Leu Val Asp Leu Tyr Lys
755 760 765
Val Leu Glu Ser Arg Gly Ser Asp Pro Lys Pro Glu Asn Pro Ala Cys
770 775 780
Pro Trp Thr Val Leu Pro Ala Gly Asp Leu Pro Thr His Asp Gly Tyr
785 790 795 800
Leu Pro Ser Asn Ile Asp Asp Leu Pro Ser His Glu Ala Pro Leu Ala
805 810 815
Asp Ser Leu Glu Glu Leu Glu Pro Gln His Ile Ser Leu Ser Val Phe
820 825 830
Pro Ser Ser Ser Leu His Pro Leu Thr Phe Ser Cys Gly Asp Lys Leu
835 840 845
Thr Leu Asp Gln Leu Lys Met Arg Cys Asp Ser Leu Met Leu
850 855 860
<210> 8
<211> 599
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 8
Lys Ile Asp Ala Cys Lys Arg Gly Asp Val Thr Val Lys Pro Ser His
1 5 10 15
Val Ile Leu Leu Gly Ser Thr Val Asn Ile Thr Cys Ser Leu Lys Pro
20 25 30
Arg Gln Gly Cys Phe His Tyr Ser Arg Arg Asn Lys Leu Ile Leu Tyr
35 40 45
Lys Phe Asp Arg Arg Ile Asn Phe His His Gly His Ser Leu Asn Ser
50 55 60
Gln Val Thr Gly Leu Pro Leu Gly Thr Thr Leu Phe Val Cys Lys Leu
65 70 75 80
Ala Cys Ile Asn Ser Asp Glu Ile Gln Ile Cys Gly Ala Glu Ile Phe
85 90 95
Val Gly Val Ala Pro Glu Gln Pro Gln Asn Leu Ser Cys Ile Gln Lys
100 105 110
Gly Glu Gln Gly Thr Val Ala Cys Thr Trp Glu Arg Gly Arg Asp Thr
115 120 125
His Leu Tyr Thr Glu Tyr Thr Leu Gln Leu Ser Gly Pro Lys Asn Leu
130 135 140
Thr Trp Gln Lys Gln Cys Lys Asp Ile Tyr Cys Asp Tyr Leu Asp Phe
145 150 155 160
Gly Ile Asn Leu Thr Pro Glu Ser Pro Glu Ser Asn Phe Thr Ala Lys
165 170 175
Val Thr Ala Val Asn Ser Leu Gly Ser Ser Ser Ser Leu Pro Ser Thr
180 185 190
Phe Thr Phe Leu Asp Ile Val Arg Pro Leu Pro Pro Trp Asp Ile Arg
195 200 205
Ile Lys Phe Gln Lys Ala Ser Val Ser Arg Cys Thr Leu Tyr Trp Arg
210 215 220
Asp Glu Gly Leu Val Leu Leu Asn Arg Leu Arg Tyr Arg Pro Ser Asn
225 230 235 240
Ser Arg Leu Trp Asn Met Val Asn Val Thr Lys Ala Lys Gly Arg His
245 250 255
Asp Leu Leu Asp Leu Lys Pro Phe Thr Glu Tyr Glu Phe Gln Ile Ser
260 265 270
Ser Lys Leu His Leu Tyr Lys Gly Ser Trp Ser Asp Trp Ser Glu Ser
275 280 285
Leu Arg Ala Gln Thr Pro Glu Glu Glu Pro Thr Gly Met Leu Asp Val
290 295 300
Trp Tyr Met Lys Arg His Ile Asp Tyr Ser Arg Gln Gln Ile Ser Leu
305 310 315 320
Phe Trp Lys Asn Leu Ser Val Ser Glu Ala Arg Gly Lys Ile Leu His
325 330 335
Tyr Gln Val Thr Leu Gln Glu Leu Thr Gly Gly Lys Ala Met Thr Gln
340 345 350
Asn Ile Thr Gly His Thr Ser Trp Thr Thr Val Ile Pro Arg Thr Gly
355 360 365
Asn Trp Ala Val Ala Val Ser Ala Ala Asn Ser Lys Gly Ser Ser Leu
370 375 380
Pro Thr Arg Ile Asn Ile Met Asn Leu Cys Glu Ala Gly Leu Leu Ala
385 390 395 400
Pro Arg Gln Val Ser Ala Asn Ser Glu Gly Met Asp Asn Ile Leu Val
405 410 415
Thr Trp Gln Pro Pro Arg Lys Asp Pro Ser Ala Val Gln Glu Tyr Val
420 425 430
Val Glu Trp Arg Glu Leu His Pro Gly Gly Asp Thr Gln Val Pro Leu
435 440 445
Asn Trp Leu Arg Ser Arg Pro Tyr Asn Val Ser Ala Leu Ile Ser Glu
450 455 460
Asn Ile Lys Ser Tyr Ile Cys Tyr Glu Ile Arg Val Tyr Ala Leu Ser
465 470 475 480
Gly Asp Gln Gly Gly Cys Ser Ser Ile Leu Gly Asn Ser Lys His Lys
485 490 495
Ala Pro Leu Ser Gly Pro His Ile Asn Ala Ile Thr Glu Glu Lys Gly
500 505 510
Ser Ile Leu Ile Ser Trp Asn Ser Ile Pro Val Gln Glu Gln Met Gly
515 520 525
Cys Leu Leu His Tyr Arg Ile Tyr Trp Lys Glu Arg Asp Ser Asn Ser
530 535 540
Gln Pro Gln Leu Cys Glu Ile Pro Tyr Arg Val Ser Gln Asn Ser His
545 550 555 560
Pro Ile Asn Ser Leu Gln Pro Arg Val Thr Tyr Val Leu Trp Met Thr
565 570 575
Ala Leu Thr Ala Ala Gly Glu Ser Ser His Gly Asn Glu Arg Glu Phe
580 585 590
Cys Leu Gln Gly Lys Ala Asn
595
<210> 9
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 9
Gly Gly Gly Gly Ser
1 5
<210> 10
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 10
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 11
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 11
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 12
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 12
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser
20
<210> 13
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 13
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
20 25
<210> 14
<211> 30
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide
<400> 14
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
20 25 30
<210> 15
<211> 35
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide
<400> 15
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
20 25 30
Gly Gly Ser
35
<210> 16
<211> 30
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide
<400> 16
Asp Pro Ala Leu Val His Gln Arg Pro Ala Pro Pro Gly Gly Gly Gly
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
20 25 30
<210> 17
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 17
Gly Lys Pro Gly Ser
1 5
<210> 18
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 18
Gly Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly
1 5 10 15
Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser
20 25
<210> 19
<211> 30
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide
<400> 19
Gly Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly
1 5 10 15
Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser
20 25 30
<210> 20
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 20
Gly Gly Gly Glu Ser
1 5
<210> 21
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 1 monomer 1
<400> 21
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 22
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 1 monomer 2
<400> 22
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 23
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 2 monomer 1
<400> 23
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 24
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone monomer 2
<400> 24
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 25
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 3 monomer 1
<400> 25
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 26
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 3 monomer 2
<400> 26
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Glu Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 27
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 4 monomer 1
<400> 27
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Lys Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 28
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 4 monomer 2
<400> 28
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Glu
130 135 140
Asn Glu Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Glu Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 29
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 5 monomer 1
<400> 29
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Gln Leu Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 30
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 5 monomer 2
<400> 30
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 31
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 6 monomer 1
<400> 31
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 32
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 6 monomer 2
<400> 32
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 33
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 7 monomer 1
<400> 33
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Ser Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 34
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 7 monomer 2
<400> 34
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Ser Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 35
<211> 229
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 8 monomer 1
<400> 35
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe
1 5 10 15
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
20 25 30
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
35 40 45
Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
50 55 60
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser
65 70 75 80
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
85 90 95
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser
100 105 110
Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
115 120 125
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Gln Met Thr Lys Asn Gln
130 135 140
Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
145 150 155 160
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
165 170 175
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu
180 185 190
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
195 200 205
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Gly Lys
225
<210> 36
<211> 229
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 8 monomer 2
<400> 36
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe
1 5 10 15
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
20 25 30
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
35 40 45
Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
50 55 60
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Phe Asn Ser
65 70 75 80
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
85 90 95
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser
100 105 110
Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
115 120 125
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
130 135 140
Val Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
145 150 155 160
Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
165 170 175
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu
180 185 190
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Glu Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser
195 200 205
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Gly Lys
225
<210> 37
<211> 228
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 9 monomer 1
<400> 37
Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val
1 5 10 15
Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
20 25 30
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
35 40 45
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
50 55 60
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
65 70 75 80
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn
85 90 95
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro
100 105 110
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
115 120 125
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn Gln Val
130 135 140
Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
145 150 155 160
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
165 170 175
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
180 185 190
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
195 200 205
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
210 215 220
Ser Pro Gly Lys
225
<210> 38
<211> 228
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 9 monomer 2
<400> 38
Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val
1 5 10 15
Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
20 25 30
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
35 40 45
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
50 55 60
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Phe Asn Ser Thr
65 70 75 80
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn
85 90 95
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro
100 105 110
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
115 120 125
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
130 135 140
Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
145 150 155 160
Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
165 170 175
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
180 185 190
Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val
195 200 205
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
210 215 220
Ser Pro Gly Lys
225
<210> 39
<211> 228
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 10 monomer 1
<400> 39
Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val
1 5 10 15
Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
20 25 30
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys
35 40 45
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
50 55 60
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
65 70 75 80
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn
85 90 95
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro
100 105 110
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
115 120 125
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn Gln Val
130 135 140
Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
145 150 155 160
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
165 170 175
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
180 185 190
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
195 200 205
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
210 215 220
Ser Pro Gly Lys
225
<210> 40
<211> 228
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 10 monomer 2
<400> 40
Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val
1 5 10 15
Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
20 25 30
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys
35 40 45
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
50 55 60
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Phe Asn Ser Thr
65 70 75 80
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn
85 90 95
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro
100 105 110
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
115 120 125
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
130 135 140
Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
145 150 155 160
Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
165 170 175
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
180 185 190
Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val
195 200 205
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
210 215 220
Ser Pro Gly Lys
225
<210> 41
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 11 monomer 1
<400> 41
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 42
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 11 monomer 2
<400> 42
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 43
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 12 monomer 1
<400> 43
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 44
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 12 monomer 2
<400> 44
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 45
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 13 monomer 1
<400> 45
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 46
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Backbone 13 monomer 2
<400> 46
Glu Arg Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Arg Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Lys Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 47
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_
pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 47
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 48
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP27201 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_
C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 48
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 49
<211> 546
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP27202 Chain 1 - empty-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric
_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_(GGGGS)2_human_IL12p40
<400> 49
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
225 230 235 240
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
245 250 255
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
260 265 270
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
275 280 285
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
290 295 300
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
305 310 315 320
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
325 330 335
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
340 345 350
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
355 360 365
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
370 375 380
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
385 390 395 400
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
405 410 415
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
420 425 430
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
435 440 445
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
450 455 460
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
465 470 475 480
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
485 490 495
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
500 505 510
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
515 520 525
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
530 535 540
Cys Ser
545
<210> 50
<211> 437
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP27202 Chain 2 - human_IL12p40-empty-Fc(216)_IgG1_
C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q_(GGGGS)2_human_IL12p35
<400> 50
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
225 230 235 240
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
245 250 255
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
260 265 270
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
275 280 285
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
290 295 300
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
305 310 315 320
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
325 330 335
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
340 345 350
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
355 360 365
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
370 375 380
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
385 390 395 400
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
405 410 415
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
420 425 430
Tyr Leu Asn Ala Ser
435
<210> 51
<211> 769
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 - human_IL12p40_(GGGGS)5-human_IL12p35_(GGGGS)2
_(single-Chain)_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/
PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 51
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
305 310 315 320
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Arg Asn Leu Pro Val
325 330 335
Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu His His Ser Gln Asn
340 345 350
Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys Ala Arg Gln Thr Leu
355 360 365
Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp His Glu Asp Ile Thr
370 375 380
Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu Pro Leu Glu Leu Thr
385 390 395 400
Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr Ser Phe Ile Thr Asn
405 410 415
Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe Met Met Ala Leu Cys
420 425 430
Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr Gln Val Glu Phe Lys
435 440 445
Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys Arg Gln Ile Phe Leu
450 455 460
Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu Met Gln Ala Leu Asn
465 470 475 480
Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser Leu Glu Glu Pro Asp
485 490 495
Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu Leu His Ala Phe Arg
500 505 510
Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser Tyr Leu Asn Ala Ser
515 520 525
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser Ser Asp
530 535 540
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro
545 550 555 560
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
565 570 575
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His Glu Asp
580 585 590
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
595 600 605
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
610 615 620
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
625 630 635 640
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
645 650 655
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
660 665 670
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
675 680 685
Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
690 695 700
Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
705 710 715 720
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
725 730 735
Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
740 745 750
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
755 760 765
Lys
<210> 52
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP27203 Chain 2 - empty-Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K
/S364K/E357Q
<400> 52
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 53
<211> 769
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP27204 Chain 1 - human_IL12p35_(GGGGS)5-human_IL12p40
_(GGGGS)2_(single-Chain)_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric
_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 53
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
195 200 205
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Trp
210 215 220
Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr Pro Asp
225 230 235 240
Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu Glu Asp
245 250 255
Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly Ser Gly
260 265 270
Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly Gln Tyr
275 280 285
Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu Leu Leu
290 295 300
His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys Asp Gln
305 310 315 320
Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys Asn Tyr
325 330 335
Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr Asp Leu
340 345 350
Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln Gly Val
355 360 365
Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly Asp Asn
370 375 380
Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala Cys Pro
385 390 395 400
Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala Val His
405 410 415
Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg Asp Ile
420 425 430
Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu Lys Asn
435 440 445
Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp Ser Thr
450 455 460
Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln Gly Lys
465 470 475 480
Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr Ser Ala
485 490 495
Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala Gln Asp
500 505 510
Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro Cys Ser
515 520 525
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser Ser Asp
530 535 540
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro
545 550 555 560
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
565 570 575
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His Glu Asp
580 585 590
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
595 600 605
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
610 615 620
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
625 630 635 640
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
645 650 655
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
660 665 670
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
675 680 685
Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
690 695 700
Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
705 710 715 720
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
725 730 735
Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
740 745 750
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
755 760 765
Lys
<210> 54
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP27204 Chain 2 - empty-Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/
S364K/E357Q
<400> 54
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 55
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP27560 human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_
Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_homodimer
<400> 55
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 56
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP27561 human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/
S364K/E357Q_homodimer
<400> 56
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 57
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103D)
<400> 57
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 58
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N113D)
<400> 58
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 59
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N200D)
<400> 59
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 60
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N281D)
<400> 60
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 61
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)
<400> 61
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 62
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(Q42E)
<400> 62
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 63
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E45Q)
<400> 63
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 64
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(Q56E)
<400> 64
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 65
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59Q)
<400> 65
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 66
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(D62N)
<400> 66
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asn Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 67
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(Q42E/E45Q)
<400> 67
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 68
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E45Q/Q56E)
<400> 68
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 69
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(Q42E/E59Q)
<400> 69
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 70
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(Q56E/E59Q)
<400> 70
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 71
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)
<400> 71
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 72
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)
<400> 72
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 73
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(D161N)
<400> 73
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asn Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 74
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E73Q)
<400> 74
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Gln Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 75
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(Q144E)
<400> 75
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Glu
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 76
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E262Q)
<400> 76
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Gln Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 77
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E100Q)
<400> 77
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Gln Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 78
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(D18N)
<400> 78
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asn Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 79
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E33Q)
<400> 79
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Gln Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 80
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(Q229E)
<400> 80
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Glu Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 81
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E235Q)
<400> 81
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Gln Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 82
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(Q256N)
<400> 82
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Asn
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 83
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E299Q)
<400> 83
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Gln Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 84
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(D87N)
<400> 84
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asn Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 85
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24752 human_IL12p40_N103D_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1
_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 85
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 86
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24753 human_IL12p40_N113D_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI
(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 86
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 87
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24754 human_IL12p40_N200D_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI
(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 87
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 88
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24755 human_IL12p40_N281D_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI
(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 88
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 89
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24756 human_IL12p40_N103D/N113D/N200D/N281D_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 89
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 90
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24757 human_IL12p40_Q42E_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 90
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 91
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24758 human_IL12p40_E45Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 91
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 92
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24759 human_IL12p40_Q56E_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 92
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 93
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD24760) - human_IL12p40(E59Q)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 93
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 94
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24761 human_IL12p40_D62N_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 94
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asn Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 95
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24762 human_IL12p40_Q42E/E45Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI
(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 95
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 96
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24763 human_IL12p40_E45Q/Q56E_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI
(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 96
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 97
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24764 human_IL12p40_Q42E/E59Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI
(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 97
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 98
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD24765) - human_IL12p40(Q56E/E59Q)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 98
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 99
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24766 human_IL12p40_Q42E/E45Q/Q56E_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_
pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 99
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 100
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24767 human_IL12p40_E45Q/Q56E/E59Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1
_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 100
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 101
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24768 human_IL12p40_D161N_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI
(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 101
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asn Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 102
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24769 human_IL12p40_E73Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(
-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 102
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Gln Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 103
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24770 human_IL12p40_Q144E_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 103
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Glu
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 104
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24771 human_IL12p40_E262Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 104
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Gln Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 105
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24772 human_IL12p40_E100Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 105
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Gln Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 106
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24773 human_IL12p40_D18N_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 106
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asn Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 107
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24774 human_IL12p40_E33Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 107
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Gln Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 108
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24775 human_IL12p40_Q229E_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 108
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Glu Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 109
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24776 human_IL12p40_E235Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 109
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Gln Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 110
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24777 human_IL12p40_Q256E_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 110
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Glu
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 111
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24778 human_IL12p40_E299Q_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 111
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Gln Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 112
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24792 human_IL12p40_D87N_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-
)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S_pTT5
<400> 112
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asn Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 113
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N71D)
<400> 113
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asp Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 114
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N85D)
<400> 114
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asp Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 115
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N195D)
<400> 115
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asp Ala Ser
195
<210> 116
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N71D/N85D/N195D)
<400> 116
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asp Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asp Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asp Ala Ser
195
<210> 117
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(E153Q)
<400> 117
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Gln Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 118
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(E38Q)
<400> 118
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Gln Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 119
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N151D)
<400> 119
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 120
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(Q135E)
<400> 120
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Glu Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 121
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(Q35D)
<400> 121
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Asp Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 122
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(Q146E)
<400> 122
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Glu Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 123
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N76D)
<400> 123
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asp Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 124
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(E162Q)
<400> 124
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Gln Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 125
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(E163Q)
<400> 125
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Gln Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 126
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24779 human_IL12p35_N71D_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA
_/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 126
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asp Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 127
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24780 human_IL12p35_N85D_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_
/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 127
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asp Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 128
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24781 human_IL12p35_N195D_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_
/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 128
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asp Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 129
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24782 human_IL12p35_N71D/N85D/N195D_(GGGGS)2_Fc(216)_
IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 129
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asp Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asp Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asp Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 130
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24783 human_IL12p35_E153Q_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA
_/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 130
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Gln Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 131
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24784 human_IL12p35_E38Q_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_
/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 131
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Gln Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 132
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD24785) - human_IL12p35(N151D)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 132
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 133
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24786 human_IL12p35_Q135E_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/
PVA_/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 133
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Glu Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 134
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24787 human_IL12p35_Q35D_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_
/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 134
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Asp Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 135
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24788 human_IL12p35_Q146E_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA
_/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 135
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Glu Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 136
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24789 human_IL12p35_N76D_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_
/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 136
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asp Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 137
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24790 human_IL12p35_E162Q_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_
/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 137
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Gln Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 138
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XenD24791 human_IL12p35_E163Q_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA
_/S267K/S364K/E357Q_pTT5
<400> 138
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Gln Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 139
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28820 Chain 1 (XenD24756) - human_IL12p40_N103D/N113D/
N200D/N281D_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_
C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 139
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 140
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28820 Chain 2 (XenD24782) - human_IL12p35_N71D/N85D/N195D
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 140
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asp Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asp Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asp Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 141
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28821 Chain 1 (XenD24792) - human_IL12p40_D87N_(GGGGS)
2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/ K370S
<400> 141
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asn Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 142
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28821 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 142
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 143
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28822 Chain 1 (XenD24757) - human_IL12p40_Q42E_(GGGGS)
2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/ K370S
<400> 143
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 144
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28822 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 144
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 145
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28823 Chain 1 (XenD24758) - human_IL12p40_E45Q_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 145
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 146
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28823 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 146
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 147
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28824 Chain 1 (XenD24759) - human_IL12p40_Q56E_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 147
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 148
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28824 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 148
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 149
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28825 Chain 1 (XenD24760) - human_IL12p40_E59Q_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 149
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 150
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28825 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 150
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 151
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28826 Chain 1 (XenD24761) - human_IL12p40_D62N_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 151
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asn Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 152
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28826 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 152
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 153
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28827 Chain 1 (XenD24762) - human_IL12p40_Q42E/E45Q_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 153
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 154
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28827 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 154
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 155
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28828 Chain 1 (XenD24763) - human_IL12p40_E45Q/Q56E_(GGGGS)
2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 155
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 156
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28828 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 156
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 157
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28829 Chain 1 (XenD24764) - human_IL12p40_Q42E/E59Q_(GGGGS)
2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 157
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 158
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28829 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 158
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 159
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28830 Chain 1 (XenD24765) - human_IL12p40_Q56E/E59Q_(GGGGS)
2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 159
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 160
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28830 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 160
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 161
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28831 Chain 1 (XenD24766) - human_IL12p40_Q42E/E45Q/Q56E_
(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K
/L368D/K370S
<400> 161
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Glu Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 162
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28831 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 162
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 163
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28832 Chain 1 (XenD24767) - human_IL12p40_E45Q/Q56E/E59Q
_(GGGGS)2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 163
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Gln Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Glu Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 164
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28832 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 164
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 165
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28833 Chain 1 (XenD24768) - human_IL12p40_D161N_(GGGGS)
2-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D /K370S
<400> 165
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asn Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 166
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28833 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 166
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 167
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28834 Chain 1 (XenD24769) - human_IL12p40_E73Q_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D /K370S
<400> 167
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Gln Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 168
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28834 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 168
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 169
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28835 Chain 1 (XenD24770) - human_IL12p40_Q144E_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 169
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Glu
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 170
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28835 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 170
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 171
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28836 Chain 1 (XenD24771) - human_IL12p40_E262Q_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 171
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Gln Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 172
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28836 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 172
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 173
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28837 Chain 1 (XenD24772) - human_IL12p40_E100Q_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 173
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Gln Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 174
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28837 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 174
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 175
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28838 Chain 1 (XenD24773) - human_IL12p40_D18N_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D /K370S
<400> 175
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asn Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 176
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28838 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 176
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 177
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28839 Chain 1 (XenD24774) - human_IL12p40_E33Q_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D /K370S
<400> 177
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Gln Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 178
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28839 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 178
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 179
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28840 Chain 1 (XenD24775) - human_IL12p40_Q229E_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 179
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Glu Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 180
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28840 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 180
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 181
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28841 Chain 1 (XenD24776) - human_IL12p40_E235Q_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 181
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Gln Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 182
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28841 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 182
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 183
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28842 Chain 1 (XenD24777) - human_IL12p40_Q256E_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 183
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Glu
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 184
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28842 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 184
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 185
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28843 Chain 1 (XenD24778) - human_IL12p40_E299Q_(GGGGS)2
-Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 185
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Gln Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 186
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28843 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 186
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 187
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28844 Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 187
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 188
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28844 Chain 2 (XenD24783) - human_IL12p35_E153Q_(GGGGS)2
_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 188
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Gln Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 189
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28845 Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 189
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 190
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28845 Chain 2 (XenD24784) - human_IL12p35_E38Q_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 190
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Gln Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 191
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28846 Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 191
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 192
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28846 Chain 2 (XenD24785) - human_IL12p35_N151D_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 192
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 193
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28847 Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 193
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 194
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28847 Chain 2 (XenD24786) - human_IL12p35_Q135E_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 194
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Glu Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 195
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28848 Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 195
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 196
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28848 Chain 2 (XenD24787) - human_IL12p35_Q35D_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 196
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Asp Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 197
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28849 Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 197
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 198
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28849 Chain 2 (XenD24788) - human_IL12p35_Q146E_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 198
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Glu Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 199
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28850 Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 199
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 200
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28850 Chain 2 (XenD24789) - human_IL12p35_N76D_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 200
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asp Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 201
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28851 Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 201
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 202
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28851 Chain 2 (XenD24790) - human_IL12p35_E162Q_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 202
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Gln Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 203
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28852 Chain 1 (XenD22914) - human_IL12p40_(GGGGS)2-Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 203
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 204
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP28852 Chain 2 (XenD24791) - human_IL12p35_E163Q_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 204
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Gln Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 205
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59K)
<400> 205
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 206
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E32Q/E59Q)
<400> 206
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Gln
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 207
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(D34N/E59Q)
<400> 207
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 208
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59Q/E187Q)
<400> 208
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Gln Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 209
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(S43E/E59Q)
<400> 209
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Glu Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 210
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(S43K/E59Q)
<400> 210
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Lys Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 211
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59Q/K163E)
<400> 211
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Glu Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 212
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59Q/K99E)
<400> 212
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 213
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59Q/K258E)
<400> 213
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Glu Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 214
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59Q/K260E)
<400> 214
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Glu Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 215
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25922) - human_IL12p40(E59K)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 215
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 216
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25923) - human_IL12p40(E32Q/E59Q)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 216
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Gln
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 217
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25924) - human_IL12p40(D34N/E59Q)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 217
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 218
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25925) - human_IL12p40(E59Q/E187Q)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 218
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Gln Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 219
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25926) - human_IL12p40(S43E/E59Q)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 219
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Glu Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 220
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25927) - human_IL12p40(S43K/E59Q)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 220
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Lys Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 221
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25928) - human_IL12p40(E59Q/K163E)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 221
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Glu Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 222
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25929) - human_IL12p40(E59Q/K99E)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 222
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 223
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25930) - human_IL12p40(E59Q/K258E)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 223
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Glu Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 224
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD25931) - human_IL12p40(E59Q/K260E)_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 224
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Gln Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Glu Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 225
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(N151D/E153Q)
<400> 225
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Gln Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 226
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(E153K)
<400> 226
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Lys Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 227
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(N151K)
<400> 227
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Lys Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 228
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(N151D/D165N)
<400> 228
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asn Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 229
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(Q130E/N151D)
<400> 229
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Glu Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 230
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(N151D/K158E)
<400> 230
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Glu Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 231
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(E79Q/N151D)
<400> 231
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Gln Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 232
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(D55Q/N151D)
<400> 232
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Gln Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 233
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(N136D/N151D)
<400> 233
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asp Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 234
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(N21D/N151D)
<400> 234
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asp Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 235
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(E143Q/N151D)
<400> 235
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Gln Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 236
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25911) - human_IL12p35(N151D/E153Q)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 236
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Gln Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 237
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25912) - human_IL12p35(E153K)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 237
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Lys Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 238
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25913) - human_IL12p35(N151K)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 238
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Lys Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 239
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25914) - human_IL12p35(N151D/D165N)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 239
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asn Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 240
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25915) - human_IL12p35(Q130E/N151D)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 240
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Glu Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 241
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25916) - human_IL12p35(N151D/K158E)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 241
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Glu Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 242
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25917) - human_IL12p35(E79Q/N151D)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 242
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Gln Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 243
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25918) - human_IL12p35(D55Q/N151D)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 243
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Gln Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 244
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25919) - human_IL12p35(N136D/N151D)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 244
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asp Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 245
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25920) - human_IL12p35(N21D/N151D)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 245
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asp Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 246
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD25921) - human_IL12p35(E143Q/N151D)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 246
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Gln Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asp Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 247
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 247
Gly Gly Gly Gly Ala
1 5
<210> 248
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 248
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala
1 5 10
<210> 249
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 249
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala
1 5 10 15
<210> 250
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 250
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ala
20
<210> 251
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 251
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala
20 25
<210> 252
<211> 30
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide
<400> 252
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala
20 25 30
<210> 253
<211> 35
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide
<400> 253
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly
20 25 30
Gly Gly Ala
35
<210> 254
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103D/N113D)
<400> 254
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 255
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103D/N200D)
<400> 255
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 256
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103D/N281D)
<400> 256
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 257
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N113D/N200D)
<400> 257
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 258
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N113D/N281D)
<400> 258
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 259
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N200D/N281D)
<400> 259
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 260
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103D/N113D/N200D)
<400> 260
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 261
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103D/N113D/N281D)
<400> 261
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 262
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103D/N200D/N281D)
<400> 262
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asp Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 263
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N113D/N200D/N281D)
<400> 263
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asp Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asp Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asp Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 264
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103Q)
<400> 264
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 265
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N113Q)
<400> 265
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 266
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N200Q)
<400> 266
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 267
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N281Q)
<400> 267
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 268
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103Q/N113Q)
<400> 268
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 269
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103Q/N200Q)
<400> 269
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 270
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103Q/N281Q)
<400> 270
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 271
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N113Q/N200Q)
<400> 271
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 272
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N113Q/N281Q)
<400> 272
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 273
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N200Q/N281Q)
<400> 273
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 274
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)
<400> 274
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 275
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)
<400> 275
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 276
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)
<400> 276
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 277
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)
<400> 277
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 278
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)
<400> 278
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 279
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N71Q)
<400> 279
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Gln Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 280
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N85Q)
<400> 280
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Gln Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 281
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N195Q)
<400> 281
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Gln Ala Ser
195
<210> 282
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N71Q/N85Q)
<400> 282
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Gln Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Gln Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 283
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N71Q/N195Q)
<400> 283
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Gln Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Gln Ala Ser
195
<210> 284
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N85Q/N195Q)
<400> 284
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Gln Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Gln Ala Ser
195
<210> 285
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)
<400> 285
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Gln Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Gln Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Gln Ala Ser
195
<210> 286
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N71D/N85D)
<400> 286
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asp Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asp Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 287
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N71D/N195D)
<400> 287
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asp Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asp Ala Ser
195
<210> 288
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p35(N85D/N195D)
<400> 288
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asp Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asp Ala Ser
195
<210> 289
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33008 Chain 2 - human_IL12p35(N71Q/N85Q)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 289
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Gln Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Gln Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 290
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33009 Chain 2 - human_IL12p35(N71Q/N195Q)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 290
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Gln Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Gln Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 291
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD26411) - human_IL12p40_E59K/K99E_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 291
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 292
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30598 Chain 1 (XenD26412) - human_IL12p40_D34N/E59K_(GGGGS)2
_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 292
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 293
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30599 Chain 1 (XenD26413) - human_IL12p40_D34N/E59K/K99E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 293
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 294
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30600 Chain 1 (XenD26414) - human_IL12p40_D34K/E59K/K99E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 294
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Lys Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 295
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD26415) - human_IL12p40_E32Q/D34N/E59K/K99E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 295
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Gln
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 296
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD26416) - human_IL12p40_E32Q/D34K/E59K/K99E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 296
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Gln
20 25 30
Glu Lys Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 297
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD26417) - human_IL12p40_E32K/D34N/E59K/K99E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 297
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Lys
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 298
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 1 (XenD26418) - human_IL12p40_E32K/D34K/E59K/K99E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K
/L368D/K370S
<400> 298
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Lys
20 25 30
Glu Lys Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 299
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD26427) - human_IL12p35_D55Q_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 299
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Gln Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 300
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30609 Chain 2 (XenD26428) - human_IL12p35_D55K_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 300
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Lys Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 301
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31250 Chain 1 (XenD27070) - human_IL12p40(E59Y/K99E)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 301
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Tyr Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 302
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31251 Chain 1 (XenD27071) - human_IL12p40(E59K/K99Y)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K
/L368D/K370S
<400> 302
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Tyr Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 303
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31252 Chain 1 (XenD27072) - human_IL12p40(E59Y/K99Y)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K
/L368D/K370S
<400> 303
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Tyr Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Tyr Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 304
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31253 Chain 1 (XenD27073) - human_IL12p40(E45K/E59K/K99E)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 304
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Lys Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 305
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31254 Chain 1 (XenD27074) - human_IL12p40(D18K/E59K/K99E)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 305
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Lys Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 306
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31255 Chain 1 (XenD27075) - human_IL12p40(E59K/K99E/Q144E)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 306
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Glu
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 307
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31256 Chain 1 (XenD27076) - human_IL12p40(E59K/K99E/Q144K)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D
/K370S
<400> 307
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Lys
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 308
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31257 Chain 1 (XenD27077) - human_IL12p40(E59K/K99E/R159E)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 308
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Glu Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 309
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31258 Chain 1 (XenD27078) - human_IL12p40(E59K/K99E/K264E)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/
L368D/K370S
<400> 309
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 310
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31259 Chain 2 (XenD27088) - human_IL12p35(F96A)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 310
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Ala
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 311
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31260 Chain 2 (XenD27089) - human_IL12p35(M97A)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 311
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Ala Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 312
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31261 Chain 2 (XenD27090) - human_IL12p35(L89A)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 312
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Ala Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 313
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31262 Chain 2 (XenD27091) - human_IL12p35(L124A)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 313
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Ala Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 314
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31263 Chain 2 (XenD27092) - human_IL12p35(M125A)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 314
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Ala Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 315
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31264 Chain 2 (XenD27093) - human_IL12p35(L57A)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 315
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Ala Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 316
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31265 Chain 2 (XenD27094) - human_IL12p35(I171A)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 316
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ala Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 317
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32186 Chain 1 (XenD28173) - human_IL12p40(D18K/E59K/K99E
/K264E)_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_
/S267K/L368D/K370S
<400> 317
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Lys Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 318
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31142 Chain 1 (XenD24876) - human_IL12p40_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
/M428L/N434S
<400> 318
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Leu
515 520 525
His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 319
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD24877) - human_IL12p35_(GGGGS)2_IgG1_PVA
_/S267K/S364K/E357Q/M428L/N434S
<400> 319
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 320
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31143 Chain 1 (XenD27162) - human_IL12p40_E32Q/D34N/E59K/
K99E_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_
/S267K/L368D/K370S/M428L/N434S
<400> 320
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Gln
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Leu
515 520 525
His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 321
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31144 Chain 1 (XenD27163) - human_IL12p40_E32K/D34N/E59K/
K99E_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S/M428L/N434S
<400> 321
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Lys
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Leu
515 520 525
His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 322
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Chain 2 (XenD27166) - human_IL12p35_D55Q_(GGGGS)2_IgG1_PVA
_/S267K/S364K/E357Q/M428L/N434S
<400> 322
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Gln Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 323
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31145 Chain 1 (XenD27164) - human_IL12p40_E32K/D34K/E59K
/K99E_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/
PVA_/S267K/L368D/K370S/M428L/N434S
<400> 323
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Lys
20 25 30
Glu Lys Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Leu
515 520 525
His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 324
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31146 Chain 1 (XenD27165) - human_IL12p40_E59K/K99E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA
_/S267K/L368D/K370S/M428L/N434S
<400> 324
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Leu
515 520 525
His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 325
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59K/K99E)
<400> 325
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 326
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(D34N/E59K)
<400> 326
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 327
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(D34N/E59K/K99E)
<400> 327
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 328
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(D34K/E59K/K99E)
<400> 328
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Lys Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 329
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)
<400> 329
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Gln
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 330
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E32Q/D34K/E59K/K99E)
<400> 330
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Gln
20 25 30
Glu Lys Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 331
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)
<400> 331
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Lys
20 25 30
Glu Asn Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 332
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E32K/D34K/E59K/K99E)
<400> 332
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Lys
20 25 30
Glu Lys Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 333
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(D55Q)
<400> 333
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Gln Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 334
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(D55K)
<400> 334
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Lys Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 335
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59Y/K99E)
<400> 335
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Tyr Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 336
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59K/K99Y)
<400> 336
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Tyr Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 337
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59Y/K99Y)
<400> 337
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Tyr Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Tyr Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 338
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E45K/E59K/K99E)
<400> 338
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Lys Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 339
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(D18K/E59K/K99E)
<400> 339
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Lys Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 340
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59K/K99E/Q144E)
<400> 340
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Glu
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 341
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59K/K99E/Q144K)
<400> 341
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Lys
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 342
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59K/K99E/R159E)
<400> 342
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Glu Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 343
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(E59K/K99E/K264E)
<400> 343
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 344
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)
<400> 344
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Lys Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 345
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(F96A)
<400> 345
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Ala
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 346
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(M97A)
<400> 346
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Ala Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 347
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(L89A)
<400> 347
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Ala Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 348
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(L124A)
<400> 348
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Ala Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 349
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(M125A)
<400> 349
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Ala Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 350
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(L75A)
<400> 350
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Ala Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 351
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL12p35(I171A)
<400> 351
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ala Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser
195
<210> 352
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33010 Chain 2 - human_IL12p35(N85Q/N195Q)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 352
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Gln Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Gln Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 353
<211> 769
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31291 human_IL12p40(E59K/K99E)_(GGGGS)5-human_IL12p35_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K
/L368D/K370S
<400> 353
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
305 310 315 320
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Arg Asn Leu Pro Val
325 330 335
Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu His His Ser Gln Asn
340 345 350
Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys Ala Arg Gln Thr Leu
355 360 365
Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp His Glu Asp Ile Thr
370 375 380
Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu Pro Leu Glu Leu Thr
385 390 395 400
Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr Ser Phe Ile Thr Asn
405 410 415
Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe Met Met Ala Leu Cys
420 425 430
Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr Gln Val Glu Phe Lys
435 440 445
Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys Arg Gln Ile Phe Leu
450 455 460
Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu Met Gln Ala Leu Asn
465 470 475 480
Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser Leu Glu Glu Pro Asp
485 490 495
Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu Leu His Ala Phe Arg
500 505 510
Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser Tyr Leu Asn Ala Ser
515 520 525
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser Ser Asp
530 535 540
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro
545 550 555 560
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
565 570 575
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His Glu Asp
580 585 590
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
595 600 605
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
610 615 620
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
625 630 635 640
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
645 650 655
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
660 665 670
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
675 680 685
Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
690 695 700
Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
705 710 715 720
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
725 730 735
Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
740 745 750
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
755 760 765
Lys
<210> 354
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33011 Chain 2 - human_IL12p35(N71Q/N85Q/N195Q)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 354
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Gln Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Gln Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Gln Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 355
<211> 442
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP016432 Nivolumab_H0L0_IgG1_PVA_/S267K Heavy Chain
<400> 355
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly Ile Thr Phe Ser Asn Ser
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser
115 120 125
Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp
130 135 140
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr
145 150 155 160
Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr
165 170 175
Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln
180 185 190
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
195 200 205
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
210 215 220
Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
225 230 235 240
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
245 250 255
Val Val Val Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
260 265 270
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
275 280 285
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
290 295 300
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
305 310 315 320
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
325 330 335
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
340 345 350
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
355 360 365
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
370 375 380
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
385 390 395 400
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
405 410 415
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
420 425 430
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440
<210> 356
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP016432 Nivolumab_H0L0_IgG1_PVA_/S267K Light Chain
<400> 356
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Trp Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 357
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31582 Chain 1 - human_IL12p40(D18K/E59K/K99E)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_
/S267K/L368D/K370S/M428L/N434S
<400> 357
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Lys Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Leu
515 520 525
His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 358
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31583 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99Y)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/
K370S/M428L/N434S
<400> 358
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Tyr Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Leu
515 520 525
His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 359
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31584 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/K264E)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_
/S267K/L368D/K370S/M428L/N434S
<400> 359
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Leu
515 520 525
His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 360
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(C252S)
<400> 360
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Glu Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 361
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S)
<400> 361
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Lys Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 362
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)
<400> 362
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Lys Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 363
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)
<400> 363
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Tyr Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 364
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)
<400> 364
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 365
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/C252S)
<400> 365
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 366
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)
<400> 366
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 367
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)
<400> 367
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 368
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)
<400> 368
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 369
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)
<400> 369
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 370
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)
<400> 370
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 371
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)
<400> 371
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 372
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)
<400> 372
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 373
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)
<400> 373
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 374
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(IL12p40_E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)
<400> 374
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 375
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)
<400> 375
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 376
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)
<400> 376
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 377
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)
<400> 377
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 378
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)
<400> 378
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 379
<211> 306
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)
<400> 379
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser
305
<210> 380
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32187 Chain 1 - human_IL12p40(D18K/E59K/K99E/C252S)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 380
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Lys Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 381
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32188 Chain 1 - human_IL12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K
/L368D/K370S
<400> 381
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Lys Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 382
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32189 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99Y/C252S)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA
_/S267K/L368D/K370S
<400> 382
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Tyr Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 383
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33011 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 383
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 384
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32191 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/C252S)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA
_/S267K/L368D/K370S
<400> 384
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 385
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32991 IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E_(GGGGS)2
_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 385
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 386
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32992 IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E_(GGGGS)2
_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 386
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 387
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32993 IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 387
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 388
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32994 IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 388
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 389
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32995 IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 389
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 390
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32996 IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 390
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 391
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32997 IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 391
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 392
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32998 IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 392
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 393
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32999 IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 393
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 394
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33000 IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 394
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 395
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33001 IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S
/K264E_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S
/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 395
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 396
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33002 IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/
K264E_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/
PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 396
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 397
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33003 IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/
K264E_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/
PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 397
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 398
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33004 IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S
/K264E_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/
PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 398
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Gln Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Gln Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Gln Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Gln Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 399
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33005 Chain 2 - human_IL12p35(N71Q)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 399
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Gln Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 400
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33006 Chain 2 - human_IL12p35(N85Q)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 400
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Gln Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 401
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33007 Chain 2 - human_IL12p35(N195Q)_(GGGGS)2_Fc
(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 401
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Gln Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 402
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32187 Chain 2 - IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 402
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 403
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32188 Chain 2 - IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 403
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 404
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32189 Chain 2 - IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 404
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 405
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32190 Chain 2 - IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 405
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 406
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32191 Chain 2 - IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 406
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 407
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32991 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 407
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 408
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32992 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 408
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 409
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32993 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 409
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 410
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32994 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 410
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 411
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32995 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 411
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 412
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32996 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 412
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 413
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32997 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 413
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 414
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32998 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 414
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 415
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32999 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 415
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 416
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33000 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 416
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 417
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33001 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 417
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 418
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33002 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 418
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 419
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33003 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 419
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 420
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33004 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 420
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 421
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31582 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q/M428L/N434S
<400> 421
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 422
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31583 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q/M428L/N434S
<400> 422
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 423
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31584 Chain 2 - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1
_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q/M428L/N434S
<400> 423
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 424
<211> 769
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31290 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E)_(GGGGS)5-human_
IL12p35_(GGGGS)2_(single-chain)_Fc(216)_IgG1_pI(-)_
Isosteric_A_C220S/PVA_/S267K/L368D/K370S
<400> 424
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
305 310 315 320
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Arg Asn Leu Pro Val
325 330 335
Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu His His Ser Gln Asn
340 345 350
Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys Ala Arg Gln Thr Leu
355 360 365
Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp His Glu Asp Ile Thr
370 375 380
Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu Pro Leu Glu Leu Thr
385 390 395 400
Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr Ser Phe Ile Thr Asn
405 410 415
Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe Met Met Ala Leu Cys
420 425 430
Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr Gln Val Glu Phe Lys
435 440 445
Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys Arg Gln Ile Phe Leu
450 455 460
Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu Met Gln Ala Leu Asn
465 470 475 480
Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser Leu Glu Glu Pro Asp
485 490 495
Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu Leu His Ala Phe Arg
500 505 510
Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser Tyr Leu Asn Ala Ser
515 520 525
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser Ser Asp
530 535 540
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro
545 550 555 560
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
565 570 575
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His Glu Asp
580 585 590
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
595 600 605
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
610 615 620
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
625 630 635 640
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
645 650 655
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
660 665 670
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
675 680 685
Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
690 695 700
Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
705 710 715 720
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
725 730 735
Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
740 745 750
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
755 760 765
Lys
<210> 425
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32190 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)_
(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 425
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 426
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33005 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 426
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 427
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33006 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 427
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 428
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33007 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 428
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 429
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33008 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 429
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 430
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33009 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 430
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 431
<211> 547
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP33010 Chain 1 - human_IL12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)
_(GGGGS)2_Fc(216)_IgG1_pI(-)_Isosteric_A_C220S/PVA_/
S267K/L368D/K370S
<400> 431
Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr
1 5 10 15
Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu
20 25 30
Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln Ser Ser Glu Val Leu Gly
35 40 45
Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys Lys Phe Gly Asp Ala Gly
50 55 60
Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu
65 70 75 80
Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp Ser Thr Asp Ile Leu Lys
85 90 95
Asp Gln Glu Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys
100 105 110
Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp Leu Thr Thr Ile Ser Thr
115 120 125
Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg Gly Ser Ser Asp Pro Gln
130 135 140
Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly
145 150 155 160
Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gln Glu Asp Ser Ala
165 170 175
Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile Glu Val Met Val Asp Ala
180 185 190
Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe Ile Arg
195 200 205
Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln Leu Lys Pro Leu
210 215 220
Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro Asp Thr Trp
225 230 235 240
Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Ser Val Gln Val Gln
245 250 255
Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Glu Asp Arg Val Phe Thr Asp Lys Thr
260 265 270
Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala Ser Ile Ser Val Arg Ala
275 280 285
Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser Glu Trp Ala Ser Val Pro
290 295 300
Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser
305 310 315 320
Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala
325 330 335
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
340 345 350
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Lys His
355 360 365
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
370 375 380
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Glu Tyr Asn Ser Thr Tyr
385 390 395 400
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
405 410 415
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
420 425 430
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
435 440 445
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
450 455 460
Leu Thr Cys Asp Val Ser Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
465 470 475 480
Trp Glu Ser Asp Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
485 490 495
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
500 505 510
Asp Lys Ser Arg Trp Glu Gln Gly Asp Val Phe Ser Cys Ser Val Met
515 520 525
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Lys
545
<210> 432
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(20)
<223> This sequence may encompass 0-5 "Gly Gly Gly Ser" repeating units
<400> 432
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser
20
<210> 433
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29952 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 433
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 434
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29953 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 434
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 435
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29954 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 435
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 436
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29955 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 436
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 437
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29956 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 437
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 438
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29957 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 438
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 439
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29958 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 439
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 440
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29959 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 440
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 441
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29960 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 441
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 442
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP29961 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 442
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 443
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30597 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 443
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 444
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30598 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 444
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 445
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30599 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 445
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 446
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30600 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 446
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 447
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30601 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 447
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 448
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30602 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 448
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 449
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30603 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 449
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 450
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP30604 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 450
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 451
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31250 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 451
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 452
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31251 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 452
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 453
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31252 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 453
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 454
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31253 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 454
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 455
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31254 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 455
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 456
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31255 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 456
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 457
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31255 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 457
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 458
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31256 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 458
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 459
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31257 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 459
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 460
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31258 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 460
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 461
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP32186 Chain 2 (XenD22915) - human_IL12p35_(GGGGS)2_Fc(216)
_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K/E357Q
<400> 461
Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro Gly Met Phe Pro Cys Leu
1 5 10 15
His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gln Lys
20 25 30
Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu Ile Asp
35 40 45
His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser Thr Val Glu Ala Cys Leu
50 55 60
Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr
65 70 75 80
Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala Ser Arg Lys Thr Ser Phe
85 90 95
Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys Met Tyr
100 105 110
Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys
115 120 125
Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu Ala Val Ile Asp Glu Leu
130 135 140
Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr Val Pro Gln Lys Ser Ser
145 150 155 160
Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys Ile Lys Leu Cys Ile Leu
165 170 175
Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr Ile Asp Arg Val Met Ser
180 185 190
Tyr Leu Asn Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
195 200 205
Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
225 230 235 240
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
245 250 255
Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
260 265 270
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
275 280 285
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
290 295 300
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
325 330 335
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys Asn
340 345 350
Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
370 375 380
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
385 390 395 400
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
405 410 415
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
420 425 430
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435
<210> 462
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 462
Gly Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly
1 5 10 15
Lys Pro Gly Ser
20
<210> 463
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(10)
<223> This sequence may encompass 0-5 "Gly Ser" repeating units
<400> 463
Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser
1 5 10
<210> 464
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(25)
<223> This sequence may encompass 0-5 "Gly Ser Gly Gly Ser" repeating
units
<400> 464
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser
20 25
<210> 465
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(25)
<223> This sequence may encompass 0-5 "Gly Gly Gly Gly Ser" repeating
units
<400> 465
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
20 25
<210> 466
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide
<400> 466
Glu Pro Lys Ser
1
<210> 467
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XENP31290 Chain 2 - empty-Fc(216)_IgG1_C220S/PVA_/S267K/S364K
/E357Q
<400> 467
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Gln Met Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Lys Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
Claims (238)
- 이종이량체 Fc 융합 단백질로서,
a) 변이형 IL-12p40 서브유닛 도메인과 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 융합 단백질(여기서, 상기 IL-12p40 서브유닛 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 N-말단에 공유결합으로 부착됨); 및
b) IL-12p35 서브유닛 도메인과 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 융합 단백질(여기서, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인은 상기 Fc 도메인의 N-말단에 공유결합으로 부착됨)을 포함하며,
여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제1항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 E59K, E59Q, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 변이형 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열과 적어도 90% 동일성을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제4항 및 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 변이형 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제6항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 변이형 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제6항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 변이형 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 변이형 IL-12p40 서브유닛 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되고/되거나, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 Fc 도메인에 부착되는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
a) i) 서열번호 47(XenP27201 사슬 1), ii) 서열번호 85(XenD24752), iii) 서열번호 86(XenD24753), iv) 서열번호 87(XenD24754), v) 서열번호 88(XenD24755), vi) 서열번호 89(XenD24756), vii) 서열번호 90(XenD24757), viii) 서열번호 91(XenD24758), ix) 서열번호 92(XenD24759), x) 서열번호 93(XenD24760), xi) 서열번호 94(XenD24761), xii) 서열번호 95(XenD24762), xiii) 서열번호 96(XenD24763), xiv) 서열번호 97(XenD24764), xv) 서열번호 98(XenD24765), xvi) 서열번호 99(XenD24766), xvii) 서열번호 100(XenD24767), xviii) 서열번호 101(XenD24768), xix) 서열번호 102(XenD24769), xx) 서열번호 103(XenD24770), xxi) 서열번호 104(XenD24771), xxii) 서열번호 105(XenD24772), xxiii) 서열번호 106(XenD24773), xxiv) 서열번호 107(XenD24774), xxv) 서열번호 108(XenD24775), xxvi) 서열번호 109(XenD24776), xxvii) 서열번호 110(XenD24777), xxviii) 서열번호 111(XenD24778), xxix) 서열번호 112(XenD24792), xxx) 서열번호 215(XenD25922), xxxi) 서열번호 216(XenD25923), xxxii) 서열번호 217(XenD25924), xxxiii) 서열번호 218(XenD25925), xxxiv) 서열번호 219(XenD25926), xxxv) 서열번호 220(XenD25927), xxxvi) 서열번호 221(XenD25928), xxxvii) 서열번호 222(XenD25929), xxxviii) 서열번호 223(XenD25930), xxxix) 서열번호 224(XenD25931), xl) 서열번호 XXX(XenD26411), xli) 서열번호 XXX(XenD26412), xlii) 서열번호 XXX(XenD26413), xliii) 서열번호 XXX(XenD26414), xliv) 서열번호 XXX(XenD26415), xlv) 서열번호 XXX(XenD26416), xlvi) 서열번호 XXX(XenD26417), xlvii) 서열번호 XXX(XenD26418), xlviii) 서열번호 XXX(XenD27070), xlix) 서열번호 XXX(XenD27071), l) 서열번호 XXX(XenD27072), li) 서열번호 XXX(XenD27073), lii) 서열번호 XXX(XenD27074), liii) 서열번호 XXX(XenD27075), liv) 서열번호 XXX(XenD27076), lv) 서열번호 XXX(XenD27077), lvi) 서열번호 XXX(XenD27078), lvii) 서열번호 XXX(XenD28173), lviii) 서열번호 XXX(XenD24876), lix) 서열번호 XXX(XenD27162), lx) 서열번호 XXX(XenD27163), lxi) 서열번호 XXX(XenD27164), lxii) 서열번호 XXX(XenD27165) lxiii) 서열번호 XXX(XenP31582 사슬 1), lxiv) 서열번호 XXX(XenP31583 사슬 1), lxv) 서열번호 XXX(XenP31584 사슬 1), lxvi) 서열번호 XXX(XenP32187 사슬 1), lxvii) 서열번호 XXX(XenP32188 사슬 1), lxviii) 서열번호 XXX(XenP32189, 사슬 1), lxix) 서열번호 XXX(XenP32190 사슬 1), lxx) 서열번호 XXX(XenP32191 사슬 1), lxxi) 서열번호 XXX(XenP32991 사슬 1), lxxii) 서열번호 XXX(XenP32992 사슬 1), lxxiii) 서열번호 XXX(XenP32993 사슬 1), lxxiv) 서열번호 XXX(XenP32994 사슬 1), lxxv) 서열번호 XXX(XenP32995 사슬 1), lxxvi) 서열번호 XXX(XenP32996 사슬 1), lxxvi) 서열번호 XXX(XenP32997 사슬 1), lxxvii) 서열번호 XXX(XenP32998 사슬 1), lxxvii) 서열번호 XXX(XenP32999 사슬 1), lxxviii) 서열번호 XXX(XenP33000 사슬 1), lxxix) 서열번호 XXX(XenP33001 사슬 1), lxxx) 서열번호 XXX(XenP33002 사슬 1), lxxxi) 서열번호 XXX(XenP33003 사슬 1), lxxxii) 서열번호 XXX(XenP33004 사슬 1), lxxxiii) 서열번호 XXX(XenP33005 사슬 1), lxxxiv) 서열번호 XXX(XenP33006 사슬 1), lxxxv) 서열번호 XXX(XenP33007 사슬 1), lxxxvi) 서열번호 XXX(XenP33008 사슬 1), lxxxvii) 서열번호 XXX(XenP33008 사슬 1), lxxxviii) 서열번호 XXX(XenP33009 사슬 1), lxxxix) 서열번호 XXX(XenP33010 사슬 1) 및 xc) 서열번호 XXX(XenP33011 사슬 1)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제1 융합 단백질; 및
b) i) 서열번호 48(XenP27201 사슬 2), ii) 서열번호 126(XenD24779), iii) 서열번호 127(XenD24780), iv) 서열번호 128(XenD24781), v) 서열번호 129(XenD24782), vi) 서열번호 130(XenD24783), vii) 서열번호 131(XenD24784), viii) 서열번호 132(XenD24785), ix) 서열번호 133(XenD24786), x) 서열번호 134(XenD24787), xi) 서열번호 135(XenD24788), xii) 서열번호 136(XenD24789), xiii) 서열번호 137(XenD24790), xiv) 서열번호 138(XenD24791), xv) 서열번호 236(XenD25911), xvi) 서열번호 237(XenD25912), xvii) 서열번호 238(XenD25913), xviii) 서열번호 239(XenD25914), xix) 서열번호 240(XenD25915), xx) 서열번호 241(XenD25916), xxi) 서열번호 242(XenD25917), xxii) 서열번호 243(XenD25918), xxiii) 서열번호 244(XenD25919), xxiv) 서열번호 245(XenD25920), xxv) 서열번호 246(XenD25921), xxvi) 서열번호 XXX(XenD26427), xxvii) 서열번호 XXX(XenD26428), xxviii) 서열번호 XXX(XenD27089), xxix) 서열번호 XXX(XenD27090), xxx) 서열번호 XXX(XenD27091), xxxi) 서열번호 XXX(XenD27092), xxxii) 서열번호 XXX(XenD27093), xxxiii) 서열번호 XXX(XenD27094), xxxix) 서열번호 XXX(XenD24877), xl) 서열번호 XXX(XenD27166), xli) 서열번호 XXX(XenP31582 사슬 2), xlii) 서열번호 XXX(XenP31583 사슬 2), xliii) 서열번호 XXX(XenP31584 사슬 2), xliv) 서열번호 XXX(XenP32187 사슬 2), xlv) 서열번호 XXX(XenP32188 사슬 2), xlvi) 서열번호 XXX(XenP32189, 사슬 2), xlvii) 서열번호 XXX(XenP32190 사슬 2), xlviii) 서열번호 XXX(XenP32191 사슬 2), xlix) 서열번호 XXX(XenP32991 사슬 2), l) 서열번호 XXX(XenP32992 사슬 2), li) 서열번호 XXX(XenP32993 사슬 2), lii) 서열번호 XXX(XenP32994 사슬 2), liii) 서열번호 XXX(XenP32995 사슬 2), liv) 서열번호 XXX(XenP32996 사슬 2), lv) 서열번호 XXX(XenP32997 사슬 2), lvi) 서열번호 XXX(XenP32998 사슬 2), lvii) 서열번호 XXX(XenP32999 사슬 2), lviii) 서열번호 XXX(XenP33000 사슬 2), lix) 서열번호 XXX(XenP33001 사슬 2), lx) 서열번호 XXX(XenP33002 사슬 2), lxi) 서열번호 XXX(XenP33003 사슬 2), lxii) 서열번호 XXX(XenP33004 사슬 2), lxiii) 서열번호 XXX(XenP33005 사슬 2), lxiv) 서열번호 XXX(XenP33006 사슬 2), lxv) 서열번호 XXX(XenP33007 사슬 2), lxvi) 서열번호 XXX(XenP33008 사슬 2), lxvii) 서열번호 XXX(XenP33008 사슬 2), lxviii) 서열번호 XXX(XenP33009 사슬 2), lxix) 서열번호 XXX(XenP33010 사슬 2) 및 lxx) 서열번호 XXX(XenP33011 사슬 2)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제2 융합 단백질을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, XENP27201, XENP28820, XENP28821, XENP28822, XENP28823, XENP28824, XENP28825, XENP28826, XENP28827, XENP28828, XENP28829, XENP28830, XENP28831, XENP28832, XENP28833, XENP28834, XENP28835, XENP28836, XENP28837, XENP28838, XENP28839, XENP28840, XENP28841, XENP28842, XENP28843, XENP28844, XENP28845, XENP28846, XENP28847, XENP28848, XENP28849, XENP28850, XENP28851, XENP28852, XENP29949, XENP29950, XENP29951, XENP29952, XENP30597, XENP30598, XENP30599, XENP30600, XENP30601, XENP30602, XENP30603, XENP30604, XENP30605, XENP30606, XENP30307, XENP30308, XENP30609, XENP31250, XENP31251, XENP31252, XENP31253, XENP31254, XENP31255, XENP31256, XENP31257, XENP31258, XENP31259, XENP31260, XENP31261, XENP31262, XENP31263, XENP31264, XENP31265, XENP31286, XENP31142, XENP31143, XENP31144, XENP31145, XENP31146, XENP31582, XENP31583, XENP31584, XENP32186, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190, XENP32191, XENP32991, XENP32992, XENP32993, XENP32994, XENP32995, XENP32996, XENP32997, XENP32998, XENP32999, XENP33000, XENP33001, XENP33002, XENP33003, XENP33004, XENP33005, XENP33006, XENP33007, XENP33008, XENP33008, XENP33009, XENP33010 및 XENP33011로 이루어지는 군에서 선택되는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, XENP31251, XENP31254, XENP31258, XENP32186, XENP32187, XENP32188, XENP32189, XENP32190 및 XENP32191로 이루어지는 군에서 선택되는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제17항 또는 제18항에 있어서, N103Q, N113Q, N200Q 및 N281Q로 이루어지는 군에서 선택되는 IL-12p40 서브유닛에 대한 하나 이상의 변형을 추가로 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한, 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물.
- 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산.
- 제21항의 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제22항에 따른 숙주세포를 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법.
- 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서,
a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계;
b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및
c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법. - 이종이량체 Fc 융합 단백질로서,
a) 제1 단백질 도메인과 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 C-말단에 공유결합으로 부착됨); 및
b) 제2 단백질 도메인과 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 융합 단백질(여기서, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 Fc 도메인의 C-말단에 공유결합으로 부착됨)을 포함하며,
여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제25항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드(bridging disulfide)를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 또는 제26항에 있어서, 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 Fc 도메인에 부착되는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제25항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D, N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
청구항 40
제25항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제25항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서,
a) 서열번호 49(XENP27202 사슬 1)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제1 융합 단백질; 및
b) 서열번호 50(XENP27202 사슬 2)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제2 융합 단백질을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제25항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, XENP27202인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한, 제25항 내지 제42항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물.
- 제25항 내지 제42항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산.
- 제44항의 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제45항에 따른 숙주세포를 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법.
- 제25항 내지 제42항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서,
a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계;
b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및
c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법. - 이종이량체 Fc 융합 단백질로서,
a) 제1 단백질 도메인, 제2 단백질 도메인 및 제1 Fc 도메인을 포함하는 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제2 단백질 도메인에 공유결합으로 부착되고, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 N-말단에 공유결합으로 부착됨); 및
b) 제2 Fc 도메인을 포함하며,
여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제48항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 또는 제49항에 있어서, 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 단백질 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, Q256, K158, C252, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D, N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제63항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서,
a) 서열번호 51(XENP27203 사슬 1)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 융합 단백질; 및
b) 서열번호 52(XENP27203 사슬 2)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제2 Fc 도메인을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제48항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, XENP27203인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제48항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, XENP31290인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한, 제48항 내지 제66항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물.
- 제48항 내지 제67항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산.
- 제69항의 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제70항에 따른 숙주세포를 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법.
- 제48항 내지 제67항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서,
a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계;
b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및
c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법. - 이종이량체 Fc 융합 단백질로서,
a) 제1 단백질 도메인, 제2 단백질 도메인 및 제1 Fc 도메인을 포함하는 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제2 단백질 도메인에 공유결합으로 부착되고, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 N-말단에 공유결합으로 부착됨); 및
b) 제2 Fc 도메인을 포함하며,
여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제73항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 또는 제74항에 있어서, 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 단백질 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열) 및/또는 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제87항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제88항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제73항 내지 제89항 중 어느 한 항에 있어서,
a) 서열번호 53(XENP27204 사슬 1)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 융합 단백질; 및
b) 서열번호 54(XENP27204 사슬 2)의 폴리펩타이드 서열을 갖는 상기 제2 Fc 도메인을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제73항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, XENP27204인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한, 제73항 내지 제91항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물.
- 제73항 내지 제91항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산.
- 제93항의 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제94항에 따른 숙주세포를 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법.
- 제73항 내지 제91항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서,
a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계;
b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및
c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법. - 이종이량체 Fc 융합 단백질로서,
a) 제1 단백질 도메인, 제2 단백질 도메인 및 제1 Fc 도메인을 포함하는 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 C-말단에 부착되고, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 제1 단백질 도메인에 공유결합으로 부착됨); 및
b) 제2 Fc 도메인을 포함하며,
여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제97항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 또는 제98항에 있어서, 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 단백질 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제99항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제100항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제102항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제104항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제106항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제1081항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제110항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제97항 내지 제112항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한, 제97항 내지 제113항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물.
- 제97항 내지 제113항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산.
- 제115항의 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제116항에 따른 숙주세포를 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법.
- 제97항 내지 제113항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서,
a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계;
b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및
c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법. - 이종이량체 Fc 융합 단백질로서,
a) 제1 단백질 도메인, 제2 단백질 도메인 및 제1 Fc 도메인을 포함하는 융합 단백질(여기서, 상기 제1 단백질 도메인은 상기 제1 Fc 도메인의 C-말단에 부착되고, 상기 제2 단백질 도메인은 상기 제1 단백질 도메인에 공유결합으로 부착됨); 및
b) 제2 Fc 도메인을 포함하며,
여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 변형을 포함하고, 상기 제1 단백질 도메인은 IL-12p35 서브유닛을 포함하고, 상기 제2 단백질 도메인은 IL-12p40 서브유닛을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질. - 제119항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q 및 T366S/L368A/Y407V : T366W(선택적으로 브릿징 다이설파이드를 포함함, T366S/L368A/Y407V/Y349C : T366W/S354C)로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 또는 제120항에 있어서, 상기 제1 단백질 도메인이 제1 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 단백질 도메인에 부착되고/되거나, 상기 제2 단백질 도메인이 제2 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제122항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인 및/또는 상기 제2 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제123항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제124항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제125항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제126항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제127항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제128항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제130항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제132항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제119항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한, 제119항 내지 제134항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물.
- 제119항 내지 제134항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산.
- 제136항의 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제137항에 따른 숙주세포를 이종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법.
- 제119항 내지 제134항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서,
a) 이종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계;
b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및
c) 상기 이종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법. - 이종이량체 복합체로서,
a) IL-12p40 서브유닛; 및
b) IL-12p35 서브유닛을 포함하는, 이종이량체 복합체. - 제140항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 도메인 링커를 사용하여 상기 IL-12p35 서브유닛에 공유결합으로 부착되는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 또는 제141항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고/갖거나, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제142항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제143항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제144항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제145항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252, Q256, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제146항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제147항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제149항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제150항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 이종이량체 복합체.
- 제140항 내지 제152항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 이종이량체 복합체.
- 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한, 제140항 내지 제153항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 복합체를 포함하는 조성물.
- 제140항 내지 제153항 중 어느 한 항에 따른 이종이량체 복합체를 인코딩하는 1종 이상의 핵산.
- 제155항의 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제156항에 따른 숙주세포를 이종이량체 복합체가 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 이종이량체 복합체를 제조하는 방법.
- IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛.
- 제1항에 따른 변이형 IL-12p40 서브유닛으로서, E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, Q256, C252, K258, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 변이형 IL-12p40 서브유닛.
- 제158항 또는 제159항에 있어서, D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 변이형 IL-12p40 서브유닛.
- 제158항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 변이형 IL-12p40 서브유닛.
- 제158항 내지 제161항 중 어느 한 항에 있어서, i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 변이형 IL-12p40 서브유닛.
- 제158항 내지 제162항 중 어느 한 항에 따른 변이형 IL-12p40 서브유닛을 포함하는 조성물.
- 제158항 내지 제162항 중 어느 한 항에 따른 변이형 IL-12p40 서브유닛을 인코딩하는 핵산.
- 제164항의 상기 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제165항에 따른 숙주세포를 변이형 IL-12p40 서브유닛이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 변이형 IL-12p40 서브유닛을 제조하는 방법.
- IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛.
- 제167항에 있어서, Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 변이형 IL-12p35 서브유닛.
- 제167항 또는 제168항에 있어서, N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 변이형 IL-12p35 서브유닛.
- 제167항 내지 제169항 중 어느 한 항에 있어서, N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 변이형 IL-12p35 서브유닛.
- 제167항 내지 제170항 중 어느 한 항에 있어서, 아미노산 치환 N71D/N85D/N195D를 갖는, 변이형 IL-12p35 서브유닛.
- 제167항 내지 제171항 중 어느 한 항에 있어서, i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 변이형 IL-12p35 서브유닛.
- 제167항 내지 제172항 중 어느 한 항에 따른 변이형 IL-12p35 서브유닛을 포함하는 조성물.
- 제167항 내지 제172항 중 어느 한 항에 따른 변이형 IL-12p35 서브유닛을 인코딩하는 핵산.
- 제174항의 상기 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제175항에 따른 숙주세포를 변이형 IL-12p35 서브유닛이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 변이형 IL-12p35 서브유닛을 제조하는 방법.
- 이종이량체 단백질로서,
a) 제1 Fc 도메인에 공유결합으로 부착된 IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는 제1 융합 단백질; 및
b) 제2 Fc 도메인에 공유결합으로 부착된 IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는 제2 융합 단백질을 포함하며,
여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; 및 T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 단백질. - 제177항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛 도메인이 상기 제1 Fc 도메인의 N-말단에 부착되고, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인이 상기 제2 Fc 도메인의 N-말단에 부착되는, 이종이량체 단백질.
- 제177항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛 도메인이 상기 제1 Fc 도메인의 C-말단에 부착되고, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인이 상기 제2 Fc 도메인의 C-말단에 부착되는, 이종이량체 단백질.
- 제177항 내지 제179항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Il-12p40 서브유닛 도메인이 도메인 링커를 사용하여 상기 제1 Fc 도메인에 부착되고, 상기 IL-12p35 서브유닛 도메인이 도메인 링커를 사용하여 상기 제2 Fc 도메인에 부착되는, 이종이량체 단백질.
- 제177항 내지 제180항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 IgG1 힌지-CH2-CH3을 포함하는, 이종이량체 단백질.
- 제177항에 있어서, 상기 제1 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛 도메인-도메인 링커-힌지-CH2-CH3을 포함하고, 상기 제2 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p35 서브유닛 도메인-도메인 링커-힌지-CH2-CH3을 포함하는, 이종이량체 단백질.
- 제177항에 있어서, 상기 제1 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, 힌지-CH2-CH3-도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하고, 상기 제2 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, 힌지-CH2-CH3-도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는, 이종이량체 단백질.
- 이종이량체 단백질로서,
a) 제1 Fc 도메인; 및
b) 융합 단백질을 포함하고, 여기서 상기 융합 단백질은
i) 제2 Fc 도메인;
ii) IL-12p40 서브유닛 도메인; 및
iii) IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하며,
여기서 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인은, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S 및 S364K; L368D/K370S 및 S364K/E357L; L368D/K370S 및 S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E 및 D401K; L368E/K370S 및 S364K; K370S 및 S364K/E357Q; T366S/L368A/Y407V 및 T366W; 및 T366S/L368A/Y407V/Y349C 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트를 갖는, 이종이량체 단백질. - 제184항에 있어서, 상기 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛 도메인-도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-도메인 링커-힌지-CH2-CH3을 포함하는, 이종이량체 단백질.
- 제184항에 있어서, 상기 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p35 서브유닛 도메인-도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-도메인 링커-힌지-CH2-CH3을 포함하는, 이종이량체 단백질.
- 제184항에 있어서, 상기 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, 힌지-CH2-CH3-도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는, 이종이량체 단백질.
- 제184항에 있어서, 상기 융합 단백질이, N-말단에서 C-말단으로, 힌지-CH2-CH3-도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는, 이종이량체 단백질.
- 제177항 내지 제188항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 서열을 갖는, 이종이량체 단백질.
- 제177항 내지 제188항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 서열을 갖는, 이종이량체 단백질.
- 제177항 내지 제190항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛 도메인-선택적 제1 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-선택적 제2 도메인 링커-Fc 도메인을 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, IL-12p35 서브유닛 도메인-선택적 제1 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-선택적 제2 도메인 링커-Fc 도메인을 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-선택적 제1 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-선택적 제2 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-선택적 제1 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-선택적 제2 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p40 서브유닛 도메인-제1 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-제2 도메인 링커-Fc 도메인을 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, IL-12p35 서브유닛 도메인-제1 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-제2 도메인 링커-Fc 도메인을 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-제1 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인-제2 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인을 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제1 단량체와 제2 단량체를 포함하는 동종이량체 Fc 융합 단백질로서, 상기 제1 단량체와 제2 단량체가 각각, N-말단에서 C-말단으로, Fc 도메인-제1 도메인 링커-IL-12p35 서브유닛 도메인-제2 도메인 링커-IL-12p40 서브유닛 도메인을 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제199항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Fc 도메인의 이종이량체화를 촉진시키는 상기 변형이, EU 넘버링에 따라, L368D/K370S; S364K; S364K/E357L; S364K/E357Q; T411E/K360E/Q362E; D401K; T366S/L368A/Y407V; T366W; T366S/L368A/Y407V/Y349C; 및 T366W/S354C로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환 세트인, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제200항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 도메인 링커와 상기 제2 도메인 링커가 동일한 아미노산 서열을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제201항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, Q295E/N384D/Q418E/N421D를 포함하는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제202항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Fc 도메인이, EU 넘버링에 따라, G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K, E233P/L234V/L235A/G236_/S239K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_/S267K/A327G, E233P/L234V/L235A/G236_ 및 E233P/L234V/L235A/G236_/S267K로 이루어지는 군에서 선택되는 추가의 아미노산 치환 세트를 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제203항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 서열번호 3(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 전구체 서열)과 서열번호 4(인간 IL-12 서브유닛 베타(IL-12p40) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖고, 상기 IL-12p35 서브유닛이 서열번호 1(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 전구체 서열)과 서열번호 2(인간 IL-12 서브유닛 알파(IL-12p35) 성숙형 서열)로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제204항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Fc 도메인이 각각 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제205항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나 상기 IL-12p35 서브유닛이 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제206항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p40 서브유닛이고/이거나; 상기 IL-12p35 서브유닛이 IL-12 수용체 서브유닛 베타-1(IL-12Rβ1), IL-12 수용체 서브유닛 베타-2(IL-12Rβ2) 및/또는 IL-12 수용체 복합체에 대한 친화성이 변경된 변이형 IL-12p35 서브유닛인, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제207항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 E3, D7, E12, D14, W15, P17, D18, A19, P20, G21, E22, M23, D29, E32, E33, D34, L40, D41, Q42, S43, E45, L47, T54, I55, Q56, K58, E59, F60, G61, D62, Q65, Y66, E73, K84, E86, D87, G88, I89, W90, D93, D97, K99, E100, K102, N103, K104, F106, E110, N113, Y114, D129, D142, Q144, E156, R159, D161, N162, K163, D166, D170, Q172, D174, A176, C177, P178, A179, A180, E181, S183, P185, E187, N200, S204, F206, R208, D209, D214, N218, Q220, N226, Q229, E231, E235, T242, P243, S245, Y246, F247, S248, C252S, Q256, K158, K260, E262, K264, D265, D270, N281, Q289, D290, R291, Y292, Y293 및 E299로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제208항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 D18N, D18K, E32Q, E33Q, D34N, D34K, Q42E, S43E, S43K, E45Q, Q56E, E59Q, E59K, D62N, E73Q, D87N, K99E, K99Y, E100Q, N103D, N103Q, N113D, N113Q, Q144E, D161N, R159E, K163E, E187Q, N200D, N200Q, N218Q, Q229E, E235Q, C252S, Q256N, K258E, K260E, E262Q, K264E, N281D, N281Q 및 E299Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제209항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 N103D/N113D/N200D/N281D, Q42E/E45Q, E45Q/Q56E, Q42E/E59Q, Q56E/E59Q, Q42E/E45Q/Q56E, E45Q/Q56E/E59Q, E32Q/E59Q, D34N/E59K, D34N/E59K/K99E, D34K/E59K/K99E, E32Q/D34N/E59K/K99E, E32K/D34N/E59K/K99E, D34N/E59Q, E59Q/E187Q, S43E/E59Q, S43K/E49Q, E59Q/K163E, E59Q/K99E, E59Q/K258E, E59Q/K260E, E59K/K99E, D18K/E59K/K99E, E59K/K99E/K264E, E59K/K99Y, E59Y/K99Y, E59Y/K99E, E45K/E59K/K99E, E59K/K99E/Q144E, E59K/K99E/Q144K, E59K/K99E/R159E, E59K/K99E/K264E, D18K/E59K/K99E/K264E, DI8K/E59K/K99E/C252S, D18K/E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99Y/C252S, E59K/K99E/C252S/K264E, E59K/K99E/C252S, N103D/N113D, N103D/N200D, N103D/N281D, N113D/N200D, N113D/N281D, N200D/N281D, N103D/N113D/N200D, N103D/N113D/N281D, N103D/N200D/N281D, N113D/N200D/N281D, N103Q/N113Q, N103Q/N200Q, N103Q/N281Q, N113Q/N200Q, N113Q/N281Q, N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q, N103Q/N113Q/N281Q, N103Q/N200Q/N281Q, N113Q/N200Q/N281Q, N103Q/N113Q/N200Q/N281Q, E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E, E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E 및 E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제210항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p40 서브유닛이 i) 서열번호 57(IL-12p40(N103D)), ii) 서열번호 58(IL-12p40(N113D)), iii) 서열번호 59(IL-12p40(N200D)), iv) 서열번호 60(IL-12p40(N281D)), v) 서열번호 61(IL-12p40(N103D/N113D/N200D/N281D)), vi) 서열번호 62(IL-12p40(Q42E)), vii) 서열번호 63(IL-12p40(E45Q)), viii) 서열번호 64(IL-12p40(Q56E)), ix) 서열번호 65(IL-12p40(E59Q)), x) 서열번호 66(IL-12p40(D62N)), xi) 서열번호 67(IL-12p40(Q42E/E45Q)), xii) 서열번호 68(IL-12p40(E45Q/Q56E)), xiii) 서열번호 69(IL-12p40(Q42E/E59Q)), xiv) 서열번호 70(IL-12p40(Q56E/E59Q)), xv) 서열번호 71(IL-12p40(Q42E/E45Q/Q56E)), xvi) 서열번호 72(IL-12p40(E45Q/Q56E/E59Q)), xvii) 서열번호 73(IL-12p40(D161N)), xviii) 서열번호 74(IL-12p40(E73Q)), xix) 서열번호 75(IL-12p40(Q144E)), xx) 서열번호 76(IL-12p40(E262Q)), xxi) 서열번호 77(IL-12p40(E100Q)), xxii) 서열번호 78(IL-12p40(D18N)), xxiii) 서열번호 79(IL-12p40(E33Q)), xxiv) 서열번호 80(IL-12p40(Q229E)), xxv) 서열번호 81(IL-12p40(E235Q)), xxvi) 서열번호 82(IL-12p40(Q256N)), xxvii) 서열번호 83(IL-12p40(E299Q)), xxviii) 서열번호 84(IL-12p40(D87N)), xxix) IL-12p40(E32Q), xxx) IL-12p40(D34N), xxxi) IL-12p40(S43E), xxxii) IL-12p40(S43K), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), xxxiv) 서열번호 205(IL-12p40(E59K)), xxxv) IL-12p40(K99E), xxxvi) IL-12p40(K163E), xxxvii) IL-12p40(E187Q), xxxviii) IL-12p40(K258E), xxxix) IL-12p40(K260E), xl) 서열번호 206(IL-12p40(E32Q/E59Q)), xli) 서열번호 207(IL-12p40(D34N/E59Q)), xlii) 서열번호 208(IL-12p40(E59Q/E187Q)), xliii) 서열번호 209(IL-12p40(S43E/E59Q)), xliv) 서열번호 210(IL-12p40(S43K/E49Q)), xlv) 서열번호 211(IL-12p40(E59Q/K163E)), xlvi) 서열번호 212(IL-12p40(E59Q/K99E)), xlvii) 서열번호 213(IL-12p40(E59Q/K258E)), xlviii) 서열번호 214(IL-12p40(E59Q/K260E)), xlix) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K)), l) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E)), li) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E)), lii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), liii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y)), liv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99E)), lv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E45K/E59K/K99E)), lvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144E)), lvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/Q144K)), lviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/R159E)), lix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/K264E)), lx) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/K264E)), lxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(C252S)), lxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(DI8K/E59K/K99E/C252S)), lxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D18K/E59K/K99E/C252S/K264E)), lxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99Y/C252S)), lxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S/K264E)), lxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/C252S)), lxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D)), lxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D)), lxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N281D)), lxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D)), lxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N281D)), lxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200D/N281D)), lxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p50(N103D/N113D/N200D)), lxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N113D/N281D)), lxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103D/N200D/N281D)), lxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113D/N200D/N281D)), lxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q)), lxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q)), lxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q)), lxxx) 서열번호 XXX(IL-12p40(N281Q)), lxxxi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q)), lxxxii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q)), lxxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N281Q)), lxxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q)), lxxxv) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N281Q)), lxxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(N200Q/N281Q)), lxxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q)), lxxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N281Q)), lxxxix) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N200Q/N281Q)), xc) 서열번호 XXX(IL-12p40(N113Q/N200Q/N281Q)), xci) 서열번호 XXX(IL-12p40(N103Q/N113Q/N200Q/N281Q)), xcii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34N/E59K/K99E)), xciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(D34K/E59K/K99E)), xciv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32Q/D34N/E59K/K99E)), xcv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E32K/D34N/E59K/K99E)), xcvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59Y/K99Y)), xcvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/C252S/K264E)), xcviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/C252S/K264E)), xcix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/C252S/K264E)), c) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N281Q/C252S/K264E)), ci) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/C252S/K264E)), cii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/C252S/K264E)), ciii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N281Q/C252S/K264E)), civ) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cv) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N281Q/C252S/K264E)), cvi) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N200Q/N281Q/C252S/K264E)), cvii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N113Q/N200Q/C252S/K264E)), cviii) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N103Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E)) 및 cix) 서열번호 XXX(IL-12p40(E59K/K99E/N113Q/N200Q/N281Q/C252S/K264E))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제211항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 Q20, N21, Q35, E38, S44, E45, E46, H49, K54, D55, T59, V60, E61, C63, L64, P65, E67, L68, N71, S73, C74, L75, N76, E79, N85, L89, F96, M97, L124, M125, Q130, Q135, N136, E143, Q146, N151, E153, K158, E162, E163, D165, I171, R181, I182, R183, V185, T186, D188, R189, V190, S192, Y193, N195 및 A196으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 잔기에서 하나 이상의 아미노산 변형을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제212항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N21D, Q35D, E38Q, D55Q, D55K, N71D, N71Q, L75A, N76D, E79Q, N85D, N85Q, L89A, F96A, M97A, L124A, M125A, Q130E, Q135E, N136D, E143Q, Q146E, N151D, N151K, E153K, E153Q, K158E, E162Q, E163Q, D165N, I171A, N195D 및 N195Q로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제213항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 N71D/N85D/N195D, N151D/E153Q, N151D/D165N, Q130E/N151D, N151D/K158E, E79Q/N151D, D55Q/N151D, N136D/N151D, N21D/N151D, E143Q/N151D, N71Q/N85Q, N71Q/N195Q, N85Q/N195Q, N71Q/N85Q/N195Q, N71D/N85D, N71D/N195D 및 N85D/N195D로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 치환을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 내지 제214항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-12p35 서브유닛이 i) 서열번호 113(IL-12p35(N71D)), ii) 서열번호 114(IL-12p35(N85D)), iii) 서열번호 115(IL-12p35(N195D)), iv) 서열번호 116(IL-12p35(N71D/N85D/N195D)), v) 서열번호 117(IL-12p35(E153Q)), vi) 서열번호 118(IL-12p35(E38Q)), vii) 서열번호 119(IL-12p35(N151D)), viii) 서열번호 120(IL-12p35(Q135E)), ix) 서열번호 121(IL-12p35(Q35D)), x) 서열번호 122(IL-12p35(Q146E)), xi) 서열번호 123(IL-12p35(N76D)), xii) 서열번호 124(IL-12p35(E162Q)), xiii) 서열번호 125(IL-12p35(E163Q)), xiv) IL-12p35(N21D), xv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)), xvi) IL-12p35(E79Q), xvii) IL-12p35(Q130E), xviii) IL-12p35(N136D), xix) IL-12p35(E143Q), xx) 서열번호 227(IL-12p35(N151K)), xxi) 서열번호 226(IL-12p35(E153K)), xxii) IL-12p35(K158E), xxiii) IL-12p35(D165N), xxiv) 서열번호 225(IL-12p35(N151D/E153Q)), xxv) 서열번호 228(IL-12p35(N151D/D165N)), xxvi) 서열번호 229(IL-12p35(Q130E/N151D)), xxvii) 서열번호 230(IL-12p35(N151D/K158E)), xxviii) 서열번호 231(IL-12p35(E79Q/N151D)), xxix) 서열번호 232(IL-12p35(D55Q/N151D)), xxx) 서열번호 233(IL-12p35(N136D/N151D)), xxxi) 서열번호 234(IL-12p35(N21D/N151D)), xxxii) 서열번호 235(IL-12p35(E143Q/N151D)), xxxiii) 서열번호 XXX(IL-12p35(F96A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(M97A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(L89A)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(L124A)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(M125A)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(L75A)), xxxiv) 서열번호 XXX(IL-12p35(I171A)), xxxv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q)), xxxvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q)), xxxvii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N195Q)), xxxviii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q)), xxxix) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N195Q)), xl) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85Q/N195Q), xli) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71Q/N85Q/N195Q)), xlii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N85D)), xliii) 서열번호 XXX(IL-12p35(N71D/N195D), xliv) 서열번호 XXX(IL-12p35(N85D/N195D)), xlv) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55Q)) 및 xlvi) 서열번호 XXX(IL-12p35(D55K))로 이루어지는 군에서 선택되는 폴리펩타이드 서열을 갖는, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 또는 제196항에 있어서, 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31289인, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 제192항 또는 제196항에 있어서, 상기 제1 단량체와 상기 제2 단량체가 XENP31291인, 동종이량체 Fc 융합 단백질.
- 대상에서 암을 치료하는 데 사용하기 위한, 제192항 내지 제217항 중 어느 한 항에 따른 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물.
- 제192항 내지 제217항 중 어느 한 항에 따른 동종이량체 Fc 융합 단백질을 인코딩하는 1종 이상의 핵산.
- 제219항의 상기 1종 이상의 핵산을 포함하는 숙주세포.
- 제220항에 따른 숙주세포를 동종이량체 Fc 융합 단백질이 생산되는 조건 하에서 배양하는 것을 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질을 제조하는 방법.
- 제192항 내지 제217항 중 어느 한 항에 따른 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법으로서,
a) 동종이량체 Fc 융합 단백질을 포함하는 조성물을 제공하는 단계;
b) 상기 조성물을 이온 교환 컬럼에 로딩하는 단계; 및
c) 상기 동종이량체 Fc 융합 단백질을 함유하는 분획을 수집하는 단계를 포함하는, 동종이량체 Fc 융합 단백질을 정제하는 방법. - 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법으로서, 치료적 유효량의 제1항 내지 제19항, 제25항 내지 제42항, 제48항 내지 제67항, 제73항 내지 제91항, 제97항 내지 제113항, 제119항 내지 제134항 및 제192항 내지 제217항 중 어느 한 항의 이종이량체 또는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 암을 치료하는 방법.
- 제223항에 있어서, 치료적 유효량의 체크포인트 차단 항체를 투여하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
- 제224항에 있어서, 상기 체크포인트 차단 항체가 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, 항-TIM3 항체, 항-TIGIT 항체, 항-LAG3 항체 및 항-CTLA-4 항체에서 선택되는, 방법.
- 제225항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 니볼루맙(nivolumab), 펨브롤리주맙(pembrolizumab) 또는 피딜리주맙(pidilizumab)인, 방법.
- 제225항에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙(atezolizumab), 아벨루맙(avelumab) 또는 두르발루맙(durvalumab)인, 방법.
- 제223항 내지 제227항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 투여 후 림프구의 증가를 나타내는, 방법.
- 제223항 내지 제228항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 투여 후 말초 CD8+ T세포의 증가를 나타내는, 방법.
- T세포 확장을 필요로 하는 환자에서 T세포 확장을 유도하는 방법으로서, 치료적 유효량의 제1항 내지 제19항, 제25항 내지 제42항, 제48항 내지 제67항, 제73항 내지 제91항, 제97항 내지 제113항, 제119항 내지 제134항 및 제192항 내지 제217항 중 어느 한 항의 이종이량체 또는 동종이량체 Fc 융합 단백질을 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하는, T세포 확장을 유도하는 방법.
- 제230항에 있어서, 치료적 유효량의 체크포인트 차단 항체를 투여하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
- 제231항에 있어서, 상기 체크포인트 차단 항체가 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, 항-TIM3 항체, 항-TIGIT 항체, 항-LAG3 항체 및 항-CTLA-4 항체에서 선택되는, 방법.
- 제232항에 있어서, 상기 항-PD-1 항체가 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 피딜리주맙인, 방법.
- 제232항에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체가 아테졸리주맙, 아벨루맙 또는 두르발루맙인, 방법.
- 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 T세포 확장이 T세포의 적어도 2배 증가인, 방법.
- 제224항 내지 제229항 및 제230항 내지 제235항 중 어느 한 항에 있어서, IL-12 Fc 융합 단백질이 치료 전 체크포인트 발현을 증가시키기 위해 체크포인트 저해제 전에 투여되는, 방법.
- 제226항, 제228항, 제229항, 제233항 및 제235항 중 어느 한 항에 있어서, IL-12 Fc 융합 단백질이 치료 전 체크포인트 발현을 증가시키기 위해 체크포인트 저해제 전에 투여되는, 방법.
- 제119항 내지 제124항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 Fc 도메인과 상기 제2 Fc 도메인이 아미노산 치환 M428L/N424S를 추가로 포함하는, 이종이량체 Fc 융합 단백질.
Applications Claiming Priority (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201862740813P | 2018-10-03 | 2018-10-03 | |
| US62/740,813 | 2018-10-03 | ||
| US201962810038P | 2019-02-25 | 2019-02-25 | |
| US62/810,038 | 2019-02-25 | ||
| US201962848512P | 2019-05-15 | 2019-05-15 | |
| US62/848,512 | 2019-05-15 | ||
| PCT/US2019/054570 WO2020072821A2 (en) | 2018-10-03 | 2019-10-03 | Il-12 heterodimeric fc-fusion proteins |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20210069641A true KR20210069641A (ko) | 2021-06-11 |
Family
ID=68425252
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020217009578A KR20210069641A (ko) | 2018-10-03 | 2019-10-03 | IL-12 이종이량체 Fc-융합 단백질 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US11358999B2 (ko) |
| EP (1) | EP3861016A2 (ko) |
| JP (1) | JP2022503959A (ko) |
| KR (1) | KR20210069641A (ko) |
| CN (1) | CN113195523A (ko) |
| AU (1) | AU2019355971A1 (ko) |
| CA (1) | CA3115096A1 (ko) |
| IL (1) | IL281962A (ko) |
| MA (1) | MA53822A (ko) |
| MX (1) | MX2021003765A (ko) |
| SG (1) | SG11202103192RA (ko) |
| WO (1) | WO2020072821A2 (ko) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018097307A1 (ja) | 2016-11-28 | 2018-05-31 | 中外製薬株式会社 | 抗原結合ドメインおよび運搬部分を含むポリペプチド |
| EP3856764A4 (en) | 2018-09-27 | 2022-11-02 | Xilio Development, Inc. | MASKED CYTOKINE POLYPEPTIDES |
| WO2020072821A2 (en) * | 2018-10-03 | 2020-04-09 | Xencor, Inc. | Il-12 heterodimeric fc-fusion proteins |
| WO2021067863A2 (en) | 2019-10-03 | 2021-04-08 | Xencor, Inc. | Targeted il-12 heterodimeric fc-fusion proteins |
| US20230399371A1 (en) * | 2020-10-29 | 2023-12-14 | Proviva Therapeutics (Hong Kong) Limited | Il-12 compositions and methods of use thereof |
| CA3232071A1 (en) * | 2021-09-29 | 2023-04-06 | Ryan BLACKLER | Modified interleukin p40 subunit proteins and methods of use thereof |
| WO2023070056A2 (en) * | 2021-10-20 | 2023-04-27 | Synthekine, Inc. | Heterodimeric fc cytokines and uses thereof |
| WO2023133540A1 (en) * | 2022-01-07 | 2023-07-13 | Lyell Immunopharma, Inc. | Il-12 affinity variants |
| WO2023242769A1 (en) * | 2022-06-17 | 2023-12-21 | Pfizer Inc. | Il-12 variants, anti-pd1 antibodies, fusion proteins, and uses thereof |
| WO2023246840A1 (en) * | 2022-06-22 | 2023-12-28 | Wuhan Houxian Biopharmaceutical Co. Ltd. | Combination of il-12 and ox40l for cancer immunotherapy |
| WO2024006563A1 (en) | 2022-07-01 | 2024-01-04 | Sutro Biopharma, Inc. | Il-12 mutants with reduced toxicity, compositions thereof and methods of using the same |
| CN116162171A (zh) * | 2022-10-13 | 2023-05-26 | 深圳市百士通科技开发有限公司 | 抗体突变方法在治疗性抗体药物中的应用 |
| WO2024086739A1 (en) | 2022-10-20 | 2024-04-25 | Synthekine, Inc. | Methods and compositions of il12 muteins and il2 muteins |
Family Cites Families (400)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3773919A (en) | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
| CU22545A1 (es) | 1994-11-18 | 1999-03-31 | Centro Inmunologia Molecular | Obtención de un anticuerpo quimérico y humanizado contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico para uso diagnóstico y terapéutico |
| US4179337A (en) | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
| US4169888A (en) | 1977-10-17 | 1979-10-02 | The Upjohn Company | Composition of matter and process |
| US4307016A (en) | 1978-03-24 | 1981-12-22 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Demethyl maytansinoids |
| US4256746A (en) | 1978-11-14 | 1981-03-17 | Takeda Chemical Industries | Dechloromaytansinoids, their pharmaceutical compositions and method of use |
| JPS55102583A (en) | 1979-01-31 | 1980-08-05 | Takeda Chem Ind Ltd | 20-acyloxy-20-demethylmaytansinoid compound |
| JPS55162791A (en) | 1979-06-05 | 1980-12-18 | Takeda Chem Ind Ltd | Antibiotic c-15003pnd and its preparation |
| JPS6023084B2 (ja) | 1979-07-11 | 1985-06-05 | 味の素株式会社 | 代用血液 |
| JPS5645483A (en) | 1979-09-19 | 1981-04-25 | Takeda Chem Ind Ltd | C-15003phm and its preparation |
| JPS5645485A (en) | 1979-09-21 | 1981-04-25 | Takeda Chem Ind Ltd | Production of c-15003pnd |
| EP0028683A1 (en) | 1979-09-21 | 1981-05-20 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Antibiotic C-15003 PHO and production thereof |
| US4364935A (en) | 1979-12-04 | 1982-12-21 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Monoclonal antibody to a human prothymocyte antigen and methods of preparing same |
| WO1982001188A1 (en) | 1980-10-08 | 1982-04-15 | Takeda Chemical Industries Ltd | 4,5-deoxymaytansinoide compounds and process for preparing same |
| US4450254A (en) | 1980-11-03 | 1984-05-22 | Standard Oil Company | Impact improvement of high nitrile resins |
| US4315929A (en) | 1981-01-27 | 1982-02-16 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Method of controlling the European corn borer with trewiasine |
| US4313946A (en) | 1981-01-27 | 1982-02-02 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Chemotherapeutically active maytansinoids from Trewia nudiflora |
| JPS57192389A (en) | 1981-05-20 | 1982-11-26 | Takeda Chem Ind Ltd | Novel maytansinoid |
| US4640835A (en) | 1981-10-30 | 1987-02-03 | Nippon Chemiphar Company, Ltd. | Plasminogen activator derivatives |
| US4496689A (en) | 1983-12-27 | 1985-01-29 | Miles Laboratories, Inc. | Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer |
| US4943533A (en) | 1984-03-01 | 1990-07-24 | The Regents Of The University Of California | Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
| US4970198A (en) | 1985-10-17 | 1990-11-13 | American Cyanamid Company | Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex) |
| EP0206448B1 (en) | 1985-06-19 | 1990-11-14 | Ajinomoto Co., Inc. | Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide) |
| WO1987005330A1 (en) | 1986-03-07 | 1987-09-11 | Michel Louis Eugene Bergh | Method for enhancing glycoprotein stability |
| JPH0684377B1 (ko) | 1986-04-17 | 1994-10-26 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | |
| US4791192A (en) | 1986-06-26 | 1988-12-13 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Chemically modified protein with polyethyleneglycol |
| US4880935A (en) | 1986-07-11 | 1989-11-14 | Icrf (Patents) Limited | Heterobifunctional linking agents derived from N-succinimido-dithio-alpha methyl-methylene-benzoates |
| IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
| US5606040A (en) | 1987-10-30 | 1997-02-25 | American Cyanamid Company | Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group |
| US5770701A (en) | 1987-10-30 | 1998-06-23 | American Cyanamid Company | Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents |
| US5053394A (en) | 1988-09-21 | 1991-10-01 | American Cyanamid Company | Targeted forms of methyltrithio antitumor agents |
| JP3040121B2 (ja) | 1988-01-12 | 2000-05-08 | ジェネンテク，インコーポレイテッド | 増殖因子レセプターの機能を阻害することにより腫瘍細胞を処置する方法 |
| IL89220A (en) | 1988-02-11 | 1994-02-27 | Bristol Myers Squibb Co | Immunoconjugates of anthracycline, their production and pharmaceutical preparations containing them |
| US5084468A (en) | 1988-08-11 | 1992-01-28 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Dc-88a derivatives |
| JP2598116B2 (ja) | 1988-12-28 | 1997-04-09 | 協和醗酵工業株式会社 | 新規物質ｄｃ１１３ |
| US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
| US5187186A (en) | 1989-07-03 | 1993-02-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Pyrroloindole derivatives |
| JP2510335B2 (ja) | 1989-07-03 | 1996-06-26 | 協和醗酵工業株式会社 | Ｄｃ―８８ａ誘導体 |
| US5208020A (en) | 1989-10-25 | 1993-05-04 | Immunogen Inc. | Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use |
| CA2026147C (en) | 1989-10-25 | 2006-02-07 | Ravi J. Chari | Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use |
| US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
| EP0530225A4 (en) | 1990-05-07 | 1993-09-22 | Scripps Clinic And Research Foundation | Intermediates in the formation of the calicheamicin and esperamicin oligosaccharides |
| US5968509A (en) | 1990-10-05 | 1999-10-19 | Btp International Limited | Antibodies with binding affinity for the CD3 antigen |
| ES2204890T3 (es) | 1991-03-06 | 2004-05-01 | Merck Patent Gmbh | Anticuerpos monoclonales humanizados. |
| JP4124480B2 (ja) | 1991-06-14 | 2008-07-23 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 免疫グロブリン変異体 |
| WO1994004679A1 (en) | 1991-06-14 | 1994-03-03 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
| US5264586A (en) | 1991-07-17 | 1993-11-23 | The Scripps Research Institute | Analogs of calicheamicin gamma1I, method of making and using the same |
| US5622929A (en) | 1992-01-23 | 1997-04-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Thioether conjugates |
| GB9206422D0 (en) | 1992-03-24 | 1992-05-06 | Bolt Sarah L | Antibody preparation |
| CA2076465C (en) | 1992-03-25 | 2002-11-26 | Ravi V. J. Chari | Cell binding agent conjugates of analogues and derivatives of cc-1065 |
| ZA932522B (en) | 1992-04-10 | 1993-12-20 | Res Dev Foundation | Immunotoxins directed against c-erbB-2(HER/neu) related surface antigens |
| US6329507B1 (en) | 1992-08-21 | 2001-12-11 | The Dow Chemical Company | Dimer and multimer forms of single chain polypeptides |
| US5736137A (en) | 1992-11-13 | 1998-04-07 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma |
| US5635483A (en) | 1992-12-03 | 1997-06-03 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides |
| US5837242A (en) | 1992-12-04 | 1998-11-17 | Medical Research Council | Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use |
| JP3312357B2 (ja) | 1992-12-11 | 2002-08-05 | ザ ダウ ケミカル カンパニー | 多価の一本鎖抗体 |
| US5780588A (en) | 1993-01-26 | 1998-07-14 | Arizona Board Of Regents | Elucidation and synthesis of selected pentapeptides |
| US6214345B1 (en) | 1993-05-14 | 2001-04-10 | Bristol-Myers Squibb Co. | Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates |
| CA2125763C (en) | 1993-07-02 | 2007-08-28 | Maurice Kent Gately | P40 homodimer of interleukin-12 |
| CA2173150C (en) | 1993-10-01 | 2004-11-30 | Kyoichi Sakakibara | Novel peptide derivatives |
| GB9401182D0 (en) | 1994-01-21 | 1994-03-16 | Inst Of Cancer The Research | Antibodies to EGF receptor and their antitumour effect |
| KR100350260B1 (ko) | 1994-04-22 | 2003-01-06 | 교와 핫꼬 고교 가부시끼가이샤 | 피롤로인돌유도체 |
| JPH07309761A (ja) | 1994-05-20 | 1995-11-28 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | デュオカルマイシン誘導体の安定化法 |
| US5773001A (en) | 1994-06-03 | 1998-06-30 | American Cyanamid Company | Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis |
| US5945311A (en) | 1994-06-03 | 1999-08-31 | GSF--Forschungszentrumfur Umweltund Gesundheit | Method for producing heterologous bi-specific antibodies |
| US5550246A (en) | 1994-09-07 | 1996-08-27 | The Scripps Research Institute | Calicheamicin mimics |
| US5541087A (en) | 1994-09-14 | 1996-07-30 | Fuji Immunopharmaceuticals Corporation | Expression and export technology of proteins as immunofusins |
| US5663149A (en) | 1994-12-13 | 1997-09-02 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Human cancer inhibitory pentapeptide heterocyclic and halophenyl amides |
| AU695129B2 (en) * | 1995-02-06 | 1998-08-06 | Genetics Institute, Llc | Formulations for IL-12 |
| US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
| US5714586A (en) | 1995-06-07 | 1998-02-03 | American Cyanamid Company | Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
| US5712374A (en) | 1995-06-07 | 1998-01-27 | American Cyanamid Company | Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
| CA2222231A1 (en) | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Imclone Systems Incorporated | Antibody and antibody fragments for inhibiting the growth of tumors |
| US5811097A (en) | 1995-07-25 | 1998-09-22 | The Regents Of The University Of California | Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling |
| US7696338B2 (en) | 1995-10-30 | 2010-04-13 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Immunotoxin fusion proteins and means for expression thereof |
| EP0871490B1 (en) | 1995-12-22 | 2003-03-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Branched hydrazone linkers |
| CA2288600C (en) | 1997-05-02 | 2010-06-01 | Genentech, Inc. | A method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
| US6235883B1 (en) | 1997-05-05 | 2001-05-22 | Abgenix, Inc. | Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
| ES2221717T3 (es) * | 1997-12-08 | 2005-01-01 | Emd Lexigen Research Center Corp. | Proteinas de fusion heterodimeras utiles para inmunoterapia dirigida e inmunoestimulacion general. |
| WO1999037791A1 (en) | 1998-01-23 | 1999-07-29 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie | Multipurpose antibody derivatives |
| DK2180007T4 (da) | 1998-04-20 | 2017-11-27 | Roche Glycart Ag | Glycosyleringsteknik for antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellecytotoxicitet |
| BRPI9909860B8 (pt) | 1998-04-21 | 2021-05-25 | Amgen Res Munich Gmbh | polipeptídeo multifuncional de cadeia simples, polinucleotídeo, vetor, célula procariótica, de levedura ou unicelular, composição, usos de polipeptídeo e polinucleotídeo e métodos para preparo do referido polipeptídeo e para identificação de ativadores ou inibidores de ativação ou estimulação das células t |
| US6455677B1 (en) | 1998-04-30 | 2002-09-24 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | FAPα-specific antibody with improved producibility |
| US7074405B1 (en) | 1998-06-22 | 2006-07-11 | Immunomedics, Inc. | Use of bi-specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy |
| GB9815909D0 (en) | 1998-07-21 | 1998-09-16 | Btg Int Ltd | Antibody preparation |
| EP1137436B1 (en) | 1998-12-03 | 2008-06-04 | The Regents Of The University Of California | Stimulation of T-cells against self antigens using CTLA-4 blocking agents |
| US6682736B1 (en) | 1998-12-23 | 2004-01-27 | Abgenix, Inc. | Human monoclonal antibodies to CTLA-4 |
| RS51309B (sr) | 1998-12-23 | 2010-12-31 | Pfizer Inc. | Humana monoklonalna antitela za ctla-4 |
| US6723538B2 (en) | 1999-03-11 | 2004-04-20 | Micromet Ag | Bispecific antibody and chemokine receptor constructs |
| PT1176195E (pt) | 1999-04-09 | 2013-07-18 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | Processo para controlar a actividade de uma molécula funcional sob o ponto de vista imunológico |
| US6939545B2 (en) | 1999-04-28 | 2005-09-06 | Genetics Institute, Llc | Composition and method for treating inflammatory disorders |
| SK782002A3 (en) | 1999-07-21 | 2003-08-05 | Lexigen Pharm Corp | FC fusion proteins for enhancing the immunogenicity of protein and peptide antigens |
| AU778611B2 (en) | 1999-08-09 | 2004-12-16 | Merck Patent Gmbh | Multiple cytokine-antibody complexes |
| US7605238B2 (en) | 1999-08-24 | 2009-10-20 | Medarex, Inc. | Human CTLA-4 antibodies and their uses |
| US7303749B1 (en) | 1999-10-01 | 2007-12-04 | Immunogen Inc. | Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents |
| EP2289549A3 (en) | 1999-10-01 | 2011-06-15 | Immunogen, Inc. | Immunoconjugates for treating cancer |
| AU7950400A (en) | 1999-10-19 | 2001-04-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. | Process for producing polypeptide |
| US6716410B1 (en) | 1999-10-26 | 2004-04-06 | The Regents Of The University Of California | Reagents and methods for diagnosing, imaging and treating atherosclerotic disease |
| ATE336514T1 (de) | 2000-02-11 | 2006-09-15 | Merck Patent Gmbh | Steigerung der zirkulierenden halbwertzeit von auf antikörpern basierenden fusionsproteinen |
| AU2001239857B9 (en) | 2000-02-25 | 2006-07-27 | Duke University | Anti-EGFRvIII SCFVS with improved cytotoxicity and yield, immunotoxins based thereon, and methods of use thereof |
| AU3958101A (en) | 2000-03-15 | 2001-09-24 | Univ Pohang | Genes of il-12p40 subunit mutated for improving the activity of il-12 and use thereof for dna vaccine adjuvant |
| US20010035606A1 (en) | 2000-03-28 | 2001-11-01 | Schoen Alan H. | Set of blocks for packing a cube |
| WO2001083525A2 (en) | 2000-05-03 | 2001-11-08 | Amgen Inc. | Modified peptides, comprising an fc domain, as therapeutic agents |
| EP1278851B1 (en) | 2000-05-19 | 2006-01-18 | Scancell Limited | Humanised antibodies to the epidermal growth factor receptor |
| US20020103345A1 (en) | 2000-05-24 | 2002-08-01 | Zhenping Zhu | Bispecific immunoglobulin-like antigen binding proteins and method of production |
| JP5390055B2 (ja) | 2000-06-29 | 2014-01-15 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 免疫サイトカインの取り込み増強剤との併用治療による抗体−サイトカイン融合タンパク質媒介免疫応答の増強 |
| CN1461344A (zh) | 2000-07-25 | 2003-12-10 | 免疫医疗公司 | 多价靶结合蛋白 |
| US6333410B1 (en) | 2000-08-18 | 2001-12-25 | Immunogen, Inc. | Process for the preparation and purification of thiol-containing maytansinoids |
| DE10043437A1 (de) | 2000-09-04 | 2002-03-28 | Horst Lindhofer | Verwendung von trifunktionellen bispezifischen und trispezifischen Antikörpern zur Behandlung von malignem Aszites |
| EP1333032A4 (en) | 2000-10-06 | 2005-03-16 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | METHOD FOR PURIFYING ANTIBODIES |
| EP3263702A1 (en) | 2000-10-06 | 2018-01-03 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Cells producing antibody compositions |
| US20030133939A1 (en) | 2001-01-17 | 2003-07-17 | Genecraft, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
| WO2002062850A2 (en) | 2001-02-02 | 2002-08-15 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid antibodies and uses thereof |
| PL362324A1 (en) | 2001-02-19 | 2004-10-18 | Merck Patent Gmbh | Artificial fusion proteins with reduced immunogenicity |
| ES2393733T3 (es) | 2001-03-07 | 2012-12-27 | Merck Patent Gmbh | Tecnología de expresión para proteínas que contienen una fracción de anticuerpo de isotipo híbrido |
| EP1243276A1 (en) | 2001-03-23 | 2002-09-25 | Franciscus Marinus Hendrikus De Groot | Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs |
| JP2005500018A (ja) | 2001-04-02 | 2005-01-06 | アイデック ファーマスーティカルズ コーポレイション | ＧｎＴＩＩＩと同時発現する組換え抗体 |
| US6884869B2 (en) | 2001-04-30 | 2005-04-26 | Seattle Genetics, Inc. | Pentapeptide compounds and uses related thereto |
| US6441163B1 (en) | 2001-05-31 | 2002-08-27 | Immunogen, Inc. | Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents |
| IL154183A0 (en) | 2001-05-31 | 2003-07-31 | Medarex Inc | Cytotoxins, prodrugs, linkers and stabilizers useful therefor |
| CN1966525A (zh) | 2001-06-13 | 2007-05-23 | 根马布股份公司 | 表皮生长因子受体(egfr)的人单克隆抗体 |
| JP2005518336A (ja) | 2001-06-26 | 2005-06-23 | イムクローン システムズ インコーポレイティド | Ｖｅｇｆ受容体に結合する二重特異性抗体 |
| KR100988949B1 (ko) | 2001-10-25 | 2010-10-20 | 제넨테크, 인크. | 당단백질 조성물 |
| US20080219974A1 (en) | 2002-03-01 | 2008-09-11 | Bernett Matthew J | Optimized antibodies that target hm1.24 |
| US8188231B2 (en) | 2002-09-27 | 2012-05-29 | Xencor, Inc. | Optimized FC variants |
| US7332580B2 (en) | 2002-04-05 | 2008-02-19 | The Regents Of The University Of California | Bispecific single chain Fv antibody molecules and methods of use thereof |
| JP4563171B2 (ja) | 2002-05-24 | 2010-10-13 | シェーリング コーポレイション | 中和ヒト抗ｉｇｆｒ抗体 |
| WO2005056606A2 (en) | 2003-12-03 | 2005-06-23 | Xencor, Inc | Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor |
| ES2556641T3 (es) | 2002-07-31 | 2016-01-19 | Seattle Genetics, Inc. | Conjugados de fármacos y su uso para tratar cáncer, una enfermedad autoinmune o una enfermedad infecciosa |
| US8946387B2 (en) | 2002-08-14 | 2015-02-03 | Macrogenics, Inc. | FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof |
| US20060235208A1 (en) | 2002-09-27 | 2006-10-19 | Xencor, Inc. | Fc variants with optimized properties |
| US7820166B2 (en) | 2002-10-11 | 2010-10-26 | Micromet Ag | Potent T cell modulating molecules |
| EP1418184A1 (en) | 2002-11-08 | 2004-05-12 | Cell Center Cologne GmbH | Recombinant fusion protein consisting of the p40 and p35 subunits of IL-12 and a ScFv and use thereof |
| US7705045B2 (en) | 2002-11-14 | 2010-04-27 | Syntarga, B.V. | Prodrugs built as multiple self-elimination-release spacers |
| KR20050086628A (ko) | 2002-11-15 | 2005-08-30 | 젠맵 에이/에스 | Ｃｄ25에 대한 인간 모노클로날 항체 |
| ES2367430T3 (es) | 2002-12-23 | 2011-11-03 | Wyeth Llc | Anticuerpos contra pd-1 y sus usos. |
| US8084582B2 (en) | 2003-03-03 | 2011-12-27 | Xencor, Inc. | Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants |
| US7610156B2 (en) | 2003-03-31 | 2009-10-27 | Xencor, Inc. | Methods for rational pegylation of proteins |
| US7276497B2 (en) | 2003-05-20 | 2007-10-02 | Immunogen Inc. | Cytotoxic agents comprising new maytansinoids |
| SI1651162T1 (sl) | 2003-05-20 | 2016-02-29 | Immunogen, Inc. | Izboljšani citotoksični agenti, ki vsebujejo nove majtanzinoide |
| CA2522586C (en) | 2003-05-31 | 2017-02-21 | Micromet Ag | Pharmaceutical compositions comprising bispecific anti-cd3, anti-cd19 antibody constructs for the treatment of b-cell related disorders |
| JP5010281B2 (ja) | 2003-05-31 | 2012-08-29 | マイクロメット アクツィエン ゲゼルシャフト | Ｅｐｃａｍに対する二重特異性抗体を含む薬学的組成物 |
| US7888134B2 (en) | 2003-06-05 | 2011-02-15 | Oakland University | Immunosensors: scFv-linker design for surface immobilization |
| US20060134105A1 (en) | 2004-10-21 | 2006-06-22 | Xencor, Inc. | IgG immunoglobulin variants with optimized effector function |
| US20150071948A1 (en) | 2003-09-26 | 2015-03-12 | Gregory Alan Lazar | Novel immunoglobulin variants |
| US20050176028A1 (en) | 2003-10-16 | 2005-08-11 | Robert Hofmeister | Deimmunized binding molecules to CD3 |
| KR101438983B1 (ko) | 2003-11-06 | 2014-09-05 | 시애틀 지네틱스, 인크. | 리간드에 접합될 수 있는 모노메틸발린 화합물 |
| JP2007512846A (ja) | 2003-12-04 | 2007-05-24 | ゼンコー・インコーポレイテッド | 増加した宿主ストリング含有量を有する変異体タンパク質の生成方法およびその組成物 |
| PL1718677T3 (pl) | 2003-12-19 | 2012-09-28 | Genentech Inc | Jednowartościowe fragmenty przeciwciała stosowane jako środki lecznicze |
| US7235641B2 (en) | 2003-12-22 | 2007-06-26 | Micromet Ag | Bispecific antibodies |
| US7691962B2 (en) | 2004-05-19 | 2010-04-06 | Medarex, Inc. | Chemical linkers and conjugates thereof |
| US7517903B2 (en) | 2004-05-19 | 2009-04-14 | Medarex, Inc. | Cytotoxic compounds and conjugates |
| SG10201606980VA (en) | 2004-06-03 | 2016-10-28 | Novimmune Sa | Anti-cd3 antibodies and methods of use thereof |
| WO2006004910A2 (en) | 2004-06-28 | 2006-01-12 | Transtarget Inc. | Improved bispecific antibodies |
| EP1786918A4 (en) | 2004-07-17 | 2009-02-11 | Imclone Systems Inc | NEW BISPECIFIC ANTIBODY TETRAVALENT |
| CN101052653A (zh) | 2004-09-02 | 2007-10-10 | 健泰科生物技术公司 | 抗FcγRⅡB受体抗体及其用途 |
| PL1791565T3 (pl) | 2004-09-23 | 2016-10-31 | Modyfikowane cysteiną przeciwciała i koniugaty | |
| EP1797127B1 (en) | 2004-09-24 | 2017-06-14 | Amgen Inc. | Modified fc molecules |
| US8367805B2 (en) | 2004-11-12 | 2013-02-05 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
| US8546543B2 (en) | 2004-11-12 | 2013-10-01 | Xencor, Inc. | Fc variants that extend antibody half-life |
| US8066989B2 (en) | 2004-11-30 | 2011-11-29 | Trion Pharma Gmbh | Method of treating tumor growth and metastasis by using trifunctional antibodies to reduce the risk for GvHD in allogeneic antitumor cell therapy |
| EP1752471B9 (en) | 2005-01-05 | 2009-04-15 | f-star Biotechnologische Forschungs- und Entwicklungsges.m.b.H. | Synthetic immunoglobulin domains with binding properties engineered in regions of the molecule different from the complementarity determining regions |
| US8716451B2 (en) | 2005-01-12 | 2014-05-06 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd | Stabilized human IgG2 and IgG3 antibodies |
| ES2592271T3 (es) | 2005-03-31 | 2016-11-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Métodos de producción de polipéptidos mediante la regulación de la asociación de los polipéptidos |
| US7714016B2 (en) | 2005-04-08 | 2010-05-11 | Medarex, Inc. | Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates |
| US9284375B2 (en) | 2005-04-15 | 2016-03-15 | Macrogenics, Inc. | Covalent diabodies and uses thereof |
| ES2427646T5 (es) | 2005-05-09 | 2017-08-22 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Anticuerpos monoclonales humanos contra muerte programada 1 (PD1) y métodos para el tratamiento del cáncer mediante el uso de anticuerpos anti-PD-1 solos o combinados con otros agentes inmunoterapéuticos |
| MX2007015942A (es) | 2005-07-01 | 2008-03-07 | Medarex Inc | Anticuerpos monoclonales humanos para ligandos 1 (pd-l1) de muerte programada. |
| US8481697B2 (en) | 2005-07-01 | 2013-07-09 | Dako Denmark A/S | Nucleic acid base pairs |
| JP2009500344A (ja) | 2005-07-01 | 2009-01-08 | メディミューン，エルエルシー | マルチドメインタンパク質治療薬を製造するための統合的手法 |
| BRPI0614183A2 (pt) | 2005-07-25 | 2011-03-15 | Trubion Pharmaceuticals Inc | uso de dose única de moléculas de ligação especìficas para cd20 |
| PT2298815E (pt) | 2005-07-25 | 2015-07-16 | Emergent Product Dev Seattle | Moléculas de ligaçao especificas para cd37 e especificas para cd20 |
| EP1909846B1 (en) | 2005-08-05 | 2018-12-26 | Syntarga B.V. | Triazole-containing releasable linkers, conjugates comprising the same and processes for their preparation |
| US7612181B2 (en) | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
| AU2006291005A1 (en) | 2005-09-12 | 2007-03-22 | Novimmune S.A. | Anti-CD3 antibody formulations |
| WO2007041635A2 (en) | 2005-10-03 | 2007-04-12 | Xencor, Inc. | Fc variants with optimized fc receptor binding properties |
| AU2006301492B2 (en) | 2005-10-11 | 2011-06-09 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Compositions comprising cross-species-specific antibodies and uses thereof |
| CA2625619A1 (en) | 2005-10-14 | 2007-04-26 | Medimmune, Inc. | Cell display of antibody libraries |
| WO2007047829A2 (en) | 2005-10-19 | 2007-04-26 | Laboratoires Serono S.A. | Novel heterodimeric proteins and uses thereof |
| EP1777294A1 (en) | 2005-10-20 | 2007-04-25 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | IL-15Ralpha sushi domain as a selective and potent enhancer of IL-15 action through IL-15Rbeta/gamma, and hyperagonist (IL15Ralpha sushi -IL15) fusion proteins |
| TW200732350A (en) | 2005-10-21 | 2007-09-01 | Amgen Inc | Methods for generating monovalent IgG |
| WO2007059404A2 (en) | 2005-11-10 | 2007-05-24 | Medarex, Inc. | Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates |
| CA2627446A1 (en) | 2005-11-21 | 2007-05-31 | Laboratoires Serono S.A. | Compositions and methods of producing hybrid antigen binding molecules and uses thereof |
| EP1981532A4 (en) | 2005-12-21 | 2010-06-30 | Medimmune Llc | EPHA2 MOLECULES AND USES THEREOF |
| JP5175214B2 (ja) | 2005-12-30 | 2013-04-03 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 改良された安定性を有するインターロイキン−１２ｐ４０変種 |
| BRPI0707106B1 (pt) | 2006-01-13 | 2022-06-07 | The Government Of The United States, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, National Institutes Of Health | Polinucleotídeo interleucina-15, vetor de expressão, e, composição farmacêutica |
| US7833754B2 (en) | 2006-01-13 | 2010-11-16 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | IL-12 for expression in mammalian cell |
| MX2008009956A (es) | 2006-02-02 | 2008-12-12 | Syntarga Bv | Analogos de cc-1065 solubles en agua y sus conjugados. |
| EP1820513A1 (en) | 2006-02-15 | 2007-08-22 | Trion Pharma Gmbh | Destruction of tumor cells expressing low to medium levels of tumor associated target antigens by trifunctional bispecific antibodies |
| EP1829895A1 (en) | 2006-03-03 | 2007-09-05 | f-star Biotechnologische Forschungs- und Entwicklungsges.m.b.H. | Bispecific molecule binding TLR9 and CD32 and comprising a T cell epitope for treatment of allergies |
| JP5374359B2 (ja) | 2006-03-17 | 2013-12-25 | バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド | 安定化されたポリペプチド化合物 |
| AR060070A1 (es) | 2006-03-24 | 2008-05-21 | Merck Patent Gmbh | Dominios proteicos heterodimericos obtenidos por ingenieria |
| EP4342995A3 (en) | 2006-03-31 | 2024-05-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
| EP4218801A3 (en) | 2006-03-31 | 2023-08-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody modification method for purifying bispecific antibody |
| EP2007423A2 (en) | 2006-04-05 | 2008-12-31 | Pfizer Products Incorporated | Ctla4 antibody combination therapy |
| WO2007147901A1 (en) | 2006-06-22 | 2007-12-27 | Novo Nordisk A/S | Production of bispecific antibodies |
| AT503902B1 (de) | 2006-07-05 | 2008-06-15 | F Star Biotech Forsch & Entw | Verfahren zur manipulation von immunglobulinen |
| AT503861B1 (de) | 2006-07-05 | 2008-06-15 | F Star Biotech Forsch & Entw | Verfahren zur manipulation von t-zell-rezeptoren |
| AT503889B1 (de) | 2006-07-05 | 2011-12-15 | Star Biotechnologische Forschungs Und Entwicklungsges M B H F | Multivalente immunglobuline |
| JP5473603B2 (ja) | 2006-10-02 | 2014-04-16 | シー レーン バイオテクノロジーズ， エルエルシー | 多様な合成ペプチドおよびポリペプチドライブラリーの設計および構築 |
| KR101540822B1 (ko) | 2007-03-27 | 2015-07-30 | 씨 레인 바이오테크놀로지스, 엘엘씨 | 항체 대용물 경쇄 서열을 포함하는 구축물 및 라이브러리 |
| EP1975178A1 (en) | 2007-03-30 | 2008-10-01 | f-star Biotechnologische Forschungs- und Entwicklungsges.m.b.H. | Transcytotic modular antibody |
| EP2155788B1 (en) | 2007-04-03 | 2012-06-27 | Micromet AG | Cross-species-specific bispecific binders |
| AU2008234020B2 (en) | 2007-04-03 | 2013-02-07 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Cross-species-specific CD3-epsilon binding domain |
| WO2008124858A2 (en) | 2007-04-11 | 2008-10-23 | F-Star Biotechnologische Forschungs- Und Entwicklungsges. M.B.H. | Targeted receptor |
| US9244059B2 (en) | 2007-04-30 | 2016-01-26 | Immutep Parc Club Orsay | Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease |
| EP1987839A1 (en) | 2007-04-30 | 2008-11-05 | I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale | Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease |
| EP2150618B1 (en) | 2007-05-04 | 2017-10-11 | University Health Network | Il-12 immunotherapy for cancer |
| CN101802197A (zh) | 2007-05-14 | 2010-08-11 | 比奥根艾迪克Ma公司 | 单链FC（ScFc）区、包含其的结合多肽及与其相关的方法 |
| CA2693053C (en) | 2007-05-30 | 2021-01-05 | Xencor, Inc. | Methods and compositions for inhibiting cd32b expressing cells |
| EP4119579A1 (en) | 2007-05-31 | 2023-01-18 | Genmab A/S | Stable igg4 antibodies |
| BRPI0812562A2 (pt) | 2007-06-12 | 2019-09-24 | Trubion Pharmaceuticals Inc | composições terapêuticas anti-cd20 e métodos |
| RS53072B (en) | 2007-06-18 | 2014-04-30 | Merck Sharp & Dohme B.V. | HUMAN RECEPTOR ANTIBODIES PROGRAMMED DEATH PD-1 |
| ES2627223T3 (es) | 2007-06-26 | 2017-07-27 | F-Star Biotechnologische Forschungs- Und Entwicklungsges.M.B.H | Presentación de agentes de unión |
| EP2187971A2 (en) | 2007-08-01 | 2010-05-26 | The Government of the United States of America as represented by the Secretary of the Department of Health and Human Services | A fold-back diabody diphtheria toxin immunotoxin and methods of use |
| WO2009017394A1 (en) | 2007-08-01 | 2009-02-05 | Syntarga B.V. | Substituted cc-1065 analogs and their conjugates |
| US20090130105A1 (en) | 2007-08-28 | 2009-05-21 | Biogen Idec Ma Inc. | Compositions that bind multiple epitopes of igf-1r |
| EP2033657A1 (de) | 2007-09-04 | 2009-03-11 | Trion Pharma Gmbh | Intraoperative trifunktionale Antikörper-Applikation zur Prophylaxe intraperitonealer Tumorzelldissemination |
| CA2698809C (en) | 2007-09-14 | 2023-10-17 | Amgen Inc. | Homogeneous antibody populations |
| AR068563A1 (es) | 2007-09-26 | 2009-11-18 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Region constante de anticuerpo mutante |
| WO2009041643A1 (ja) | 2007-09-26 | 2009-04-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cdrのアミノ酸置換により抗体の等電点を改変する方法 |
| US8629246B2 (en) | 2007-09-26 | 2014-01-14 | Ucb Pharma S.A. | Dual specificity antibody fusions |
| EP3825329A1 (en) | 2007-12-26 | 2021-05-26 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to fcrn |
| EP2235064B1 (en) | 2008-01-07 | 2015-11-25 | Amgen Inc. | Method for making antibody fc-heterodimeric molecules using electrostatic steering effects |
| PT2242773T (pt) | 2008-02-11 | 2017-09-15 | Cure Tech Ltd | Anticorpos monoclonais para o tratamento de tumores |
| WO2009106096A1 (en) | 2008-02-27 | 2009-09-03 | Fresenius Biotech Gmbh | Treatment of resistant tumors with trifunctional antibodies |
| EP2262837A4 (en) | 2008-03-12 | 2011-04-06 | Merck Sharp & Dohme | PD-1 BINDING PROTEINS |
| CA2719924C (en) | 2008-04-11 | 2017-10-03 | Philip Tan | Cd37 immunotherapeutic and combination with bifunctional chemotherapeutic thereof |
| US8314213B2 (en) | 2008-04-18 | 2012-11-20 | Xencor, Inc. | Human equivalent monoclonal antibodies engineered from nonhuman variable regions |
| CA2975228C (en) | 2008-05-02 | 2020-07-21 | Seattle Genetics, Inc. | Methods and compositions for making antibodies and antibody derivatives with reduced core fucosylation |
| WO2009149189A2 (en) | 2008-06-03 | 2009-12-10 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
| AR072999A1 (es) | 2008-08-11 | 2010-10-06 | Medarex Inc | Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos |
| EP2328919A2 (en) | 2008-08-25 | 2011-06-08 | Amplimmune, Inc. | Pd-i antagonists and methods for treating infectious disease |
| WO2010027423A2 (en) | 2008-08-25 | 2010-03-11 | Amplimmune, Inc. | Compositions of pd-1 antagonists and methods of use |
| WO2010028796A1 (en) | 2008-09-10 | 2010-03-18 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Trispecific hexavalent antibodies |
| EP2853545B8 (en) | 2008-09-17 | 2023-04-05 | Xencor, Inc. | Antibody specific for IgE |
| US20170247470A9 (en) | 2008-09-17 | 2017-08-31 | Xencor, Inc. | Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies |
| AU2009296297A1 (en) | 2008-09-26 | 2010-04-01 | Roche Glycart Ag | Bispecific anti-EGFR/anti-IGF-1R antibodies |
| EP2352765B1 (en) | 2008-10-01 | 2018-01-03 | Amgen Research (Munich) GmbH | Cross-species-specific single domain bispecific single chain antibody |
| PT2356153T (pt) | 2008-10-01 | 2016-07-15 | Amgen Res (Munich) Gmbh | Anticorpo biespecífico, de cadeia única, amepxcd3, específico interespécies |
| DK2352763T4 (da) | 2008-10-01 | 2022-10-17 | Amgen Res Munich Gmbh | Bispecifikke enkeltkædede antistoffer med specificitet for højmolekylære målantigener |
| BRPI0919840B1 (pt) | 2008-10-01 | 2023-02-28 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Molécula de anticorpo de cadeia única biespecífica, seu uso, e composição farmacêutica que a compreende |
| US20110217302A1 (en) | 2008-10-10 | 2011-09-08 | Emergent Product Development Seattle, Llc | TCR Complex Immunotherapeutics |
| PT2344478T (pt) | 2008-11-03 | 2017-11-28 | Syntarga Bv | Análogos de cc-1065 e seus conjugados |
| HUE034832T2 (hu) | 2008-12-09 | 2021-12-28 | Hoffmann La Roche | Anti-PD-L1 antitestek és alkalmazásuk T-sejt-funkció fokozására |
| MX2011007833A (es) | 2009-01-23 | 2011-10-06 | Biogen Idec Inc | Polipeptidos fc estabilizados con funcion efectora reducida y metodos de uso. |
| RU2011140498A (ru) | 2009-03-06 | 2013-04-20 | Дженентек, Инк. | Препарат антител |
| EP2233500A1 (en) | 2009-03-20 | 2010-09-29 | LFB Biotechnologies | Optimized Fc variants |
| JP5501439B2 (ja) | 2009-04-02 | 2014-05-21 | ロシュ グリクアート アクチェンゲゼルシャフト | 完全長抗体と単鎖Ｆａｂフラグメントとを含む多重特異的抗体 |
| JP5616428B2 (ja) | 2009-04-07 | 2014-10-29 | ロシュ グリクアート アクチェンゲゼルシャフト | 三価の二重特異性抗体 |
| BRPI1014449A2 (pt) | 2009-04-07 | 2017-06-27 | Roche Glycart Ag | anticorpos biespecíficos anti-erbb-2/ anti-c-met. |
| MX2011010166A (es) | 2009-04-07 | 2011-10-11 | Roche Glycart Ag | Anticuerpos biespecificos anti-erbb-3/anti-c-met. |
| EP2241576A1 (en) | 2009-04-17 | 2010-10-20 | Trion Pharma Gmbh | Use of trifunctional bispecific antibodies for the treatment of tumors associated with CD133+/EpCAM+ cancer stem cells |
| EP2435473B1 (en) | 2009-05-27 | 2013-10-02 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Tri- or tetraspecific antibodies |
| RU2522002C2 (ru) | 2009-06-26 | 2014-07-10 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Легковыделяемые биспецифические антитела с природным иммуноглобулиновым форматом |
| BRPI1015916A2 (pt) | 2009-06-26 | 2015-09-01 | Sea Lane Biotechnologies Llc | Molécula de ácido nucleico, vetor de expressão, célula hospedeira, bem como método para expressão de um construto de cadeia leve substituta (slc) ou de um polipeptídeo de slc |
| EP2451840B1 (en) | 2009-07-08 | 2018-12-26 | Amgen Inc. | Design of stable and aggregation free antibody fc molecules through ch3 domain interface engineering |
| US9493578B2 (en) | 2009-09-02 | 2016-11-15 | Xencor, Inc. | Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens |
| DE102009045006A1 (de) | 2009-09-25 | 2011-04-14 | Technische Universität Dresden | Anti-CD33 Antikörper und ihre Anwendung zum Immunotargeting bei der Behandlung von CD33-assoziierten Erkrankungen |
| RS54655B2 (sr) | 2009-10-27 | 2021-04-29 | Amgen Res Munich Gmbh | Dozni režim za primenu cd19xcd3 bispecifičnog antitela |
| WO2011063348A1 (en) | 2009-11-23 | 2011-05-26 | Amgen Inc. | Monomeric antibody fc |
| ES2646863T3 (es) | 2009-11-24 | 2017-12-18 | Medimmune Limited | Agentes de unión específica contra B7-H1 |
| US20130017199A1 (en) | 2009-11-24 | 2013-01-17 | AMPLIMMUNE ,Inc. a corporation | Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2 |
| KR101791430B1 (ko) | 2009-11-30 | 2017-10-30 | 얀센 바이오테크 인코포레이티드 | 이펙터 기능이 제거된 항체 Ｆｃ 돌연변이체 |
| ES2777901T3 (es) | 2009-12-25 | 2020-08-06 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Método de modificación de polipéptidos para purificar multímeros polipeptídicos |
| AU2010343057B2 (en) | 2009-12-29 | 2017-02-23 | Aptevo Research And Development Llc | Heterodimer binding proteins and uses thereof |
| US20130129723A1 (en) | 2009-12-29 | 2013-05-23 | Emergent Product Development Seattle, Llc | Heterodimer Binding Proteins and Uses Thereof |
| IN2012DN06560A (ko) | 2009-12-30 | 2015-10-23 | Vitag Holdings Llc | |
| US20110189178A1 (en) | 2010-02-04 | 2011-08-04 | Xencor, Inc. | Immunoprotection of Therapeutic Moieties Using Enhanced Fc Regions |
| MX341925B (es) | 2010-03-29 | 2016-09-07 | Zymeworks Inc | Anticuerpos con funcion efectora suprimida o mejorada. |
| TWI653333B (zh) | 2010-04-01 | 2019-03-11 | 安進研究（慕尼黑）有限責任公司 | 跨物種專一性之ＰＳＭＡｘＣＤ３雙專一性單鏈抗體 |
| KR101930964B1 (ko) | 2010-04-20 | 2018-12-19 | 젠맵 에이/에스 | 이종이량체 항체 ｆｃ-함유 단백질 및 그의 생산 방법 |
| RU2624027C2 (ru) | 2010-04-23 | 2017-06-30 | Дженентек, Инк. | Получение гетеромультимерных белков |
| WO2011143545A1 (en) | 2010-05-14 | 2011-11-17 | Rinat Neuroscience Corporation | Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them |
| WO2011154453A1 (en) | 2010-06-09 | 2011-12-15 | Genmab A/S | Antibodies against human cd38 |
| EP3363499A1 (en) | 2010-06-11 | 2018-08-22 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Anti-tim-3 antibody |
| US9163087B2 (en) | 2010-06-18 | 2015-10-20 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Bi-specific antibodies against TIM-3 and PD-1 for immunotherapy in chronic immune conditions |
| WO2012016227A2 (en) | 2010-07-29 | 2012-02-02 | Xencor, Inc. | Antibodies with modified isoelectric points |
| AU2011286024B2 (en) | 2010-08-02 | 2014-08-07 | Macrogenics, Inc. | Covalent diabodies and uses thereof |
| WO2012025530A1 (en) | 2010-08-24 | 2012-03-01 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific antibodies comprising a disulfide stabilized - fv fragment |
| WO2012032080A1 (en) | 2010-09-07 | 2012-03-15 | F-Star Biotechnologische Forschungs- Und Entwicklungsges.M.B.H | Stabilised human fc |
| BR112013011811A2 (pt) | 2010-11-05 | 2023-02-23 | Zymeworks Inc | Modelo de anticorpo heterodimérico estável com mutações no domínio fc |
| SG190174A1 (en) | 2010-11-10 | 2013-07-31 | Amgen Res Munich Gmbh | Prevention of adverse effects caused by cd3 specific binding domains |
| CN103282385A (zh) | 2010-11-12 | 2013-09-04 | 美国洛克菲勒大学 | 用于hiv治疗的融合蛋白 |
| HUE029139T2 (hu) | 2011-02-10 | 2017-02-28 | Roche Glycart Ag | Mutáns interleukin-2 polipeptidek |
| WO2012116453A1 (en) | 2011-03-03 | 2012-09-07 | Zymeworks Inc. | Multivalent heteromultimer scaffold design and constructs |
| CA2829628A1 (en) | 2011-03-11 | 2012-09-20 | Amgen Inc. | Method of correlated mutational analysis to improve therapeutic antibodies |
| JP5972915B2 (ja) | 2011-03-16 | 2016-08-17 | アムジエン・インコーポレーテツド | Ｆｃ変異体 |
| EP2688909A2 (en) | 2011-03-25 | 2014-01-29 | Glenmark Pharmaceuticals S.A. | Hetero-dimeric immunoglobulins |
| TWI743461B (zh) | 2011-03-28 | 2021-10-21 | 法商賽諾菲公司 | 具有交叉結合區定向之雙重可變區類抗體結合蛋白 |
| EP3590965A1 (en) | 2011-03-29 | 2020-01-08 | Roche Glycart AG | Antibody fc variants |
| WO2012146394A1 (en) | 2011-04-28 | 2012-11-01 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Dosage regimen for administering a cd19xcd3 bispecific antibody to patients at risk for potential adverse effects |
| EA201892619A1 (ru) | 2011-04-29 | 2019-04-30 | Роше Гликарт Аг | Иммуноконъюгаты, содержащие мутантные полипептиды интерлейкина-2 |
| BR122016016837A2 (pt) | 2011-05-21 | 2019-08-27 | Macrogenics Inc | moléculas de ligação a cd3; anticorpos de ligação a cd3; composições farmacêuticas; e usos da molécula de ligação a cd3 |
| EP2714732A4 (en) | 2011-05-25 | 2014-12-10 | Merck Sharp & Dohme | PROCESS FOR PREPARING FC-CONTAINING POLYPEPTIDES WITH IMPROVED PROPERTIES |
| WO2013006544A1 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Medimmune, Llc | Methods for making multimeric polypeptides |
| CA2842860A1 (en) | 2011-07-28 | 2013-01-31 | Sea Lane Biotechnologies, Llc | Sur-binding proteins |
| WO2013022855A1 (en) | 2011-08-05 | 2013-02-14 | Xencor, Inc. | Antibodies with modified isoelectric points and immunofiltering |
| LT2748201T (lt) | 2011-08-23 | 2018-02-26 | Roche Glycart Ag | Dvigubai specifinė t ląsteles aktyvinantį antigeną surišanti molekulė |
| CN103857700A (zh) | 2011-08-26 | 2014-06-11 | 梅里麦克制药股份有限公司 | 串联fc双特异性抗体 |
| EP2762493B1 (en) | 2011-09-30 | 2021-06-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule promoting disappearance of antigens having plurality of biological activities |
| US10851178B2 (en) | 2011-10-10 | 2020-12-01 | Xencor, Inc. | Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications |
| EP2766392B1 (en) | 2011-10-10 | 2019-07-17 | Xencor, Inc. | A method for purifying antibodies |
| CA2850575C (en) | 2011-10-11 | 2020-12-15 | Universitat Zurich Prorektorat Mnw | Combination medicament comprising il-12 and an agent for blockade of t-cell inhibitory molecules for tumour therapy |
| RU2652886C2 (ru) | 2011-10-20 | 2018-05-03 | ИЭсБиЭйТЕК-Э НОВАРТИС КОМПАНИ ЭлЭлСи | Стабильные антитела, связывающиеся с несколькими антигенами |
| ES2732712T3 (es) | 2011-10-31 | 2019-11-25 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molécula de unión a antígeno que tiene una conjugación regulada entre la cadena pesada y la cadena ligera |
| RS62689B1 (sr) | 2011-11-04 | 2021-12-31 | Zymeworks Inc | Dizajn stabilnog heterodimernog antitela sa mutacijama u fc domenu |
| JP6138813B2 (ja) | 2011-11-28 | 2017-05-31 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングＭｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ | 抗ｐｄ−ｌ１抗体及びその使用 |
| KR102101819B1 (ko) | 2011-12-12 | 2020-04-21 | 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 | 개선된 il-12 유전적 컨스트럭트 및 백신을 포함하는 조성물, 면역치료제 및 이를 이용하는 방법 |
| WO2013096828A1 (en) | 2011-12-22 | 2013-06-27 | Sea Lane Biotechnologies, Llc | Surrogate binding proteins |
| MX370668B (es) | 2012-02-24 | 2019-12-19 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molécula de unión al antígeno para promover la pérdida de antígeno a través de fc gamma riib. |
| KR102382304B1 (ko) | 2012-04-20 | 2022-04-04 | 메뤼스 엔.페. | Ig-유사 분자의 제조방법 및 제조수단 |
| MY174248A (en) | 2012-04-30 | 2020-04-01 | Biocon Ltd | Targeted/immunomodulatory fusion proteins and methods for making same |
| EP2857419B1 (en) | 2012-05-30 | 2021-01-13 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule for eliminating aggregated antigens |
| WO2014004586A1 (en) | 2012-06-25 | 2014-01-03 | Zymeworks Inc. | Process and methods for efficient manufacturing of highly pure asymmetric antibodies in mammalian cells |
| UY34887A (es) | 2012-07-02 | 2013-12-31 | Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware | Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos |
| US20140154253A1 (en) | 2012-07-13 | 2014-06-05 | Zymeworks Inc. | Bispecific Asymmetric Heterodimers Comprising Anti-CD3 Constructs |
| CA2878587A1 (en) | 2012-07-23 | 2014-01-30 | Zymeworks Inc. | Immunoglobulin constructs comprising selective pairing of the light and heavy chains |
| JOP20200236A1 (ar) | 2012-09-21 | 2017-06-16 | Regeneron Pharma | الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها |
| WO2014056783A1 (en) | 2012-10-08 | 2014-04-17 | Roche Glycart Ag | Fc-free antibodies comprising two fab-fragments and methods of use |
| JP6571527B2 (ja) | 2012-11-21 | 2019-09-04 | ウーハン ワイゼットワイ バイオファルマ カンパニー リミテッドＷｕｈａｎ Ｙｚｙ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ Ｃｏ．， Ｌｔｄ． | 二重特異性抗体 |
| WO2014100490A1 (en) | 2012-12-19 | 2014-06-26 | Adimab, Llc | Multivalent antibody analogs, and methods of their preparation and use |
| US10131710B2 (en) | 2013-01-14 | 2018-11-20 | Xencor, Inc. | Optimized antibody variable regions |
| US10487155B2 (en) | 2013-01-14 | 2019-11-26 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| US9605084B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-03-28 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| US10968276B2 (en) | 2013-03-12 | 2021-04-06 | Xencor, Inc. | Optimized anti-CD3 variable regions |
| US9701759B2 (en) | 2013-01-14 | 2017-07-11 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| EP2943511B1 (en) | 2013-01-14 | 2019-08-07 | Xencor, Inc. | Novel heterodimeric proteins |
| WO2014113510A1 (en) | 2013-01-15 | 2014-07-24 | Xencor, Inc. | Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies |
| AU2014249243C1 (en) | 2013-03-13 | 2019-08-08 | Imaginab, Inc. | Antigen binding constructs to CD8 |
| ES2885696T3 (es) | 2013-03-15 | 2021-12-15 | Xencor Inc | Proteínas heterodiméricas |
| US10106624B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-10-23 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| WO2014145907A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Xencor, Inc. | Targeting t cells with heterodimeric proteins |
| US10858417B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-12-08 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| US10519242B2 (en) | 2013-03-15 | 2019-12-31 | Xencor, Inc. | Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins |
| JP6329343B2 (ja) | 2013-06-13 | 2018-05-23 | 任天堂株式会社 | 画像処理システム、画像処理装置、画像処理プログラム、および画像処理方法 |
| WO2014209804A1 (en) | 2013-06-24 | 2014-12-31 | Biomed Valley Discoveries, Inc. | Bispecific antibodies |
| GB201311487D0 (en) | 2013-06-27 | 2013-08-14 | Alligator Bioscience Ab | Bispecific molecules |
| EP3030575B1 (en) | 2013-08-08 | 2018-07-11 | Cytune Pharma | Il-15 and il-15r-alpha sushi domain based modulokines |
| EP2839842A1 (en) | 2013-08-23 | 2015-02-25 | MacroGenics, Inc. | Bi-specific monovalent diabodies that are capable of binding CD123 and CD3 and uses thereof |
| CN105873953A (zh) | 2013-11-04 | 2016-08-17 | 格兰马克药品股份有限公司 | 重靶向t细胞的异源二聚免疫球蛋白的产生 |
| PE20210107A1 (es) | 2013-12-17 | 2021-01-19 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-cd3 y metodos de uso |
| KR20160099092A (ko) | 2013-12-17 | 2016-08-19 | 제넨테크, 인크. | Ox40 결합 효능제 및 pd-1 축 결합 길항제를 포함하는 조합 요법 |
| CA2933881A1 (en) | 2013-12-17 | 2015-06-25 | Genentech, Inc. | Methods of treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and an anti-cd20 antibody |
| EP3083666A4 (en) | 2013-12-18 | 2017-09-20 | Intrexon Corporation | Single chain il-12 nucleic acids, polypeptids, and uses thereof |
| BR112016015140A2 (pt) | 2013-12-30 | 2018-01-23 | Epimab Biotherapeutics Inc. | imunoglobulina com fabs in-tandem e usos das mesmas |
| MX2016008631A (es) | 2014-01-08 | 2016-12-20 | Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd | Proteina heterodimérica il-5 y usos de la misma. |
| JOP20200094A1 (ar) | 2014-01-24 | 2017-06-16 | Dana Farber Cancer Inst Inc | جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها |
| JOP20200096A1 (ar) | 2014-01-31 | 2017-06-16 | Children’S Medical Center Corp | جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها |
| CN106103484B (zh) | 2014-03-14 | 2021-08-20 | 诺华股份有限公司 | 针对lag-3的抗体分子及其用途 |
| TWI754319B (zh) | 2014-03-19 | 2022-02-01 | 美商再生元醫藥公司 | 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物 |
| JP6775422B2 (ja) | 2014-03-28 | 2020-10-28 | ゼンコー・インコーポレイテッドＸｅｎｃｏｒ、 Ｉｎｃ． | Ｃｄ３８及びｃｄ３に結合する二重特異性抗体 |
| JP7348708B2 (ja) | 2014-04-30 | 2023-09-21 | プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ | 組み合わせワクチン装置および癌細胞を殺滅する方法 |
| SG10201913324PA (en) | 2014-05-29 | 2020-03-30 | Macrogenics Inc | Tri-specific binding molecules and methods of use thereof |
| KR20170023081A (ko) | 2014-07-16 | 2017-03-02 | 제넨테크, 인크. | Tigit 억제제 및 항암제를 사용한 암 치료 방법 |
| WO2016014984A1 (en) | 2014-07-24 | 2016-01-28 | Xencor, Inc. | Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies |
| CN107108744B (zh) | 2014-08-19 | 2020-09-25 | 诺华股份有限公司 | 抗cd123嵌合抗原受体(car)用于癌症治疗 |
| JO3663B1 (ar) | 2014-08-19 | 2020-08-27 | Merck Sharp & Dohme | الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين |
| SG11201702295UA (en) | 2014-09-22 | 2017-04-27 | Intrexon Corp | Improved therapeutic control of heterodimeric and single chain forms of interleukin-12 |
| UY36351A (es) | 2014-10-14 | 2016-06-01 | Novartis Ag | Moléculas de anticuerpo que se unen a pd-l1 y usos de las mismas |
| RU2017119185A (ru) | 2014-11-05 | 2018-12-05 | Дженентек, Инк. | Антитела против fgfr2/3 и способы их применения |
| CA2966566C (en) | 2014-11-20 | 2024-03-19 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Combination therapy of t cell activating bispecific antigen binding molecules cd3 and folate receptor 1 (folr1) and pd-1 axis binding antagonists |
| US10259887B2 (en) | 2014-11-26 | 2019-04-16 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens |
| US20160176969A1 (en) | 2014-11-26 | 2016-06-23 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies including binding to cd8 |
| MA41019A (fr) | 2014-11-26 | 2021-05-05 | Xencor Inc | Anticorps hétérodimériques se liant aux antigènes cd3 et cd38 |
| EP3223845B1 (en) | 2014-11-26 | 2021-05-19 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd20 |
| EP3237449A2 (en) | 2014-12-22 | 2017-11-01 | Xencor, Inc. | Trispecific antibodies |
| MA40662B1 (fr) | 2014-12-23 | 2020-12-31 | Bristol Myers Squibb Co | Anticorps contre tigit |
| SG10202003171TA (en) | 2015-01-08 | 2020-05-28 | BioNTech SE | Agonistic tnf receptor binding agents |
| BR112017015136A2 (pt) | 2015-01-14 | 2018-01-30 | Compass Therapeutics Llc | polipeptídeo de construto de ligação ao antígeno imunomodulador multiespecífico, construto de ligação ao antígeno imunomodulador multiespecífico, conjugado, composição farmacêutica, método para tratar um indivíduo com câncer, método para inibir ou reduzir o crescimento de câncer, composição, célula, método de fazer um polipeptídeo de construto de ligação ao antígeno imunomodulador multiespecífico, vetor ou conjunto de vetores e kit |
| MA41414A (fr) | 2015-01-28 | 2017-12-05 | Centre Nat Rech Scient | Protéines de liaison agonistes d' icos |
| US10227411B2 (en) | 2015-03-05 | 2019-03-12 | Xencor, Inc. | Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions |
| EP4059514A1 (en) | 2015-05-08 | 2022-09-21 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind cd3 and tumor antigens |
| TWI715587B (zh) | 2015-05-28 | 2021-01-11 | 美商安可美德藥物股份有限公司 | Ｔｉｇｉｔ結合劑和彼之用途 |
| DK3328419T3 (da) | 2015-07-30 | 2021-10-11 | Macrogenics Inc | Pd-1-bindingsmolekyler og fremgangsmåder til anvendelse deraf |
| CN106520778A (zh) | 2015-09-09 | 2017-03-22 | 北京锤特生物科技有限公司 | 改造的白介素12及其在制备治疗肿瘤的药物中的用途 |
| RU2732591C2 (ru) | 2015-09-25 | 2020-09-21 | Дженентек, Инк. | Анти-tigit антитела и способы применения |
| WO2017062953A1 (en) | 2015-10-10 | 2017-04-13 | Intrexon Corporation | Improved therapeutic control of proteolytically sensitive, destabilized forms of interleukin-12 |
| CA3007030A1 (en) | 2015-12-07 | 2017-06-15 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind cd3 and psma |
| HUE063377T2 (hu) | 2015-12-22 | 2024-01-28 | Regeneron Pharma | Anti-PD-1 antitestek és bispecifikus anti-CD20/anti-CD3 antitestek kombinációja a rák kezelésére |
| US10344067B2 (en) | 2016-02-25 | 2019-07-09 | Deutsches Krebsforschungszentrum | RNA viruses expressing IL-12 for immunovirotherapy |
| EP3464370A1 (en) | 2016-06-01 | 2019-04-10 | Xencor, Inc. | Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3 for use in the treatment of lymphoma |
| WO2017210443A1 (en) | 2016-06-01 | 2017-12-07 | Xencor, Inc. | Bispecific antibodies that bind cd123 and cd3 |
| EP3252078A1 (en) | 2016-06-02 | 2017-12-06 | F. Hoffmann-La Roche AG | Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer |
| MX2018014950A (es) | 2016-06-07 | 2019-04-25 | Macrogenics Inc | Terapia de combinacion. |
| RU2022104399A (ru) | 2016-06-14 | 2022-05-05 | Ксенкор, Инк. | Биспецифические антитела-ингибиторы контрольных точек |
| WO2018030806A1 (ko) | 2016-08-10 | 2018-02-15 | 아주대학교산학협력단 | 항체 중쇄불변부위 이종이중체에 융합된 사이토카인 및 이를 포함하는 약제학적 조성물 |
| CA3033475A1 (en) * | 2016-08-10 | 2018-02-15 | Ajou University Industry-Academic Cooperation Foundation | Heterodimeric fc-fused cytokine and pharmaceutical composition comprising the same |
| EP3503918B1 (en) | 2016-08-29 | 2020-09-30 | Psioxus Therapeutics Limited | Adenovirus armed with bispecific t cell engager (bite) |
| US10793632B2 (en) | 2016-08-30 | 2020-10-06 | Xencor, Inc. | Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors |
| EP3523323A4 (en) | 2016-10-07 | 2020-06-17 | Board of Regents, The University of Texas System | T-CELLS WITH EXPRESSION OF MEMBRANE-ANCHORED IL-12 FOR THE TREATMENT OF CANCER |
| KR102649972B1 (ko) | 2016-10-14 | 2024-03-22 | 젠코어 인코포레이티드 | IL15/IL15Rα 이종이량체 Fc-융합 단백질 |
| EP3625246A1 (en) | 2017-05-18 | 2020-03-25 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding tethered interleukin-12 (il12) polypeptides and uses thereof |
| CA3067603A1 (en) | 2017-06-30 | 2019-01-03 | Xencor, Inc. | Targeted heterodimeric fc fusion proteins containing il-15/il-15ra and antigen binding domains |
| US20210061911A1 (en) | 2017-09-07 | 2021-03-04 | Macrogenics, Inc. | Dosing Regiments of Bi-Specific CD123 x CD3 Diabodies in the Treatment of Hematologic Malignancies |
| US10981992B2 (en) | 2017-11-08 | 2021-04-20 | Xencor, Inc. | Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors |
| AU2018366199A1 (en) | 2017-11-08 | 2020-05-28 | Xencor, Inc. | Bispecific and monospecific antibodies using novel anti-PD-1 sequences |
| WO2019129053A1 (zh) | 2017-12-26 | 2019-07-04 | 南京金斯瑞生物科技有限公司 | 以抗体Fc区为骨架的融合蛋白二聚体及其应用 |
| WO2020072821A2 (en) | 2018-10-03 | 2020-04-09 | Xencor, Inc. | Il-12 heterodimeric fc-fusion proteins |
| MX2021004711A (es) | 2018-10-23 | 2021-07-02 | Dragonfly Therapeutics Inc | Proteinas heterodimericas fusionadas con fragmento cristalizable (fc). |
-
2019
- 2019-10-03 WO PCT/US2019/054570 patent/WO2020072821A2/en active Application Filing
- 2019-10-03 US US16/592,656 patent/US11358999B2/en active Active
- 2019-10-03 SG SG11202103192RA patent/SG11202103192RA/en unknown
- 2019-10-03 MA MA053822A patent/MA53822A/fr unknown
- 2019-10-03 MX MX2021003765A patent/MX2021003765A/es unknown
- 2019-10-03 CA CA3115096A patent/CA3115096A1/en active Pending
- 2019-10-03 CN CN201980075579.9A patent/CN113195523A/zh active Pending
- 2019-10-03 KR KR1020217009578A patent/KR20210069641A/ko unknown
- 2019-10-03 AU AU2019355971A patent/AU2019355971A1/en active Pending
- 2019-10-03 JP JP2021517799A patent/JP2022503959A/ja active Pending
- 2019-10-03 EP EP19797407.4A patent/EP3861016A2/en active Pending
-
2021
- 2021-04-01 IL IL281962A patent/IL281962A/en unknown
-
2022
- 2022-04-11 US US17/718,087 patent/US20220396605A1/en active Pending
- 2022-08-11 US US17/886,103 patent/US11655277B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20230027540A1 (en) | 2023-01-26 |
| IL281962A (en) | 2021-05-31 |
| US11358999B2 (en) | 2022-06-14 |
| WO2020072821A9 (en) | 2020-05-22 |
| US20220396605A1 (en) | 2022-12-15 |
| US11655277B2 (en) | 2023-05-23 |
| SG11202103192RA (en) | 2021-04-29 |
| EP3861016A2 (en) | 2021-08-11 |
| WO2020072821A3 (en) | 2020-06-18 |
| MA53822A (fr) | 2021-08-11 |
| AU2019355971A1 (en) | 2021-05-06 |
| CN113195523A (zh) | 2021-07-30 |
| US20200216509A1 (en) | 2020-07-09 |
| WO2020072821A2 (en) | 2020-04-09 |
| MX2021003765A (es) | 2021-07-15 |
| JP2022503959A (ja) | 2022-01-12 |
| CA3115096A1 (en) | 2020-04-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11655277B2 (en) | IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins | |
| KR102562519B1 (ko) | IL-15/IL-15Rα FC-융합 단백질 및 PD-1 항체 단편을 포함하는 이중특이성 이종이량체 융합 단백질 | |
| US11524991B2 (en) | PD-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15Ra Fc-fusion proteins and PD-1 antigen binding domains and uses thereof | |
| US11851466B2 (en) | Targeted IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins | |
| JP7366056B2 (ja) | ＩＬ－１５／ＩＬ－１５ＲＡ Ｆｃ融合タンパク質およびＬＡＧ－３抗原結合ドメインを含む、ＬＡＧ－３を標的とするヘテロ二量体融合タンパク質 | |
| KR20210091710A (ko) | PD-1 표적화 IL-15/IL-15Rα Fc 융합 단백질 및 병용요법에서의 이의 용도 | |
| US20230331813A1 (en) | TIM-3 TARGETED HETERODIMERIC FUSION PROTEINS CONTAINING IL-15/IL-15RA Fc-FUSION PROTEINS AND TIM-3 ANTIGEN BINDING DOMAINS | |
| US11932675B2 (en) | PD-1 targeted IL-15/IL-15Rα Fc fusion proteins with improved properties | |
| RU2819097C2 (ru) | Il-12 гетеродимерные слитые белки fc | |
| US20240166705A1 (en) | Il18-fc fusion proteins | |
| CN116583298A (zh) | 具有改善的特性的PD-1靶向IL-15/IL-15RαFC融合蛋白 |