KR20150133215A - Pd-1/pd-l1 및 cd80(b7-1)/pd-l1 단백질/단백질 상호작용의 마크로시클릭 억제제 - Google Patents

Pd-1/pd-l1 및 cd80(b7-1)/pd-l1 단백질/단백질 상호작용의 마크로시클릭 억제제 Download PDF

Info

Publication number
KR20150133215A
KR20150133215A KR1020157028438A KR20157028438A KR20150133215A KR 20150133215 A KR20150133215 A KR 20150133215A KR 1020157028438 A KR1020157028438 A KR 1020157028438A KR 20157028438 A KR20157028438 A KR 20157028438A KR 20150133215 A KR20150133215 A KR 20150133215A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
methyl
ring
alkyl
group
Prior art date
Application number
KR1020157028438A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102229512B1 (ko
Inventor
마이클 매튜 밀러
클라우디오 마펠리
마틴 패트릭 앨런
마이클 에스. 보우셔
케니쓰 엠. 보이
에릭 피. 길리스
데이비드 알. 랭글리
에릭 멀
모드 에이. 푸아리에
니쉬트 상비
리-창 쑨
대니얼 제이. 테니
갑-선 양
줄리앙 주
패트릭 씨. 리드
폴 마이클 스콜라
Original Assignee
브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 filed Critical 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Publication of KR20150133215A publication Critical patent/KR20150133215A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102229512B1 publication Critical patent/KR102229512B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/50—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link
    • C07K7/54—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring
    • C07K7/56—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring the cyclisation not occurring through 2,4-diamino-butanoic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G01N2333/70532—B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/02—Screening involving studying the effect of compounds C on the interaction between interacting molecules A and B (e.g. A = enzyme and B = substrate for A, or A = receptor and B = ligand for the receptor)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/26—Infectious diseases, e.g. generalised sepsis
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)

Abstract

본 개시내용은 PD-1/PD-L1 및 PD-L1/CD80 단백질/단백질 상호작용을 억제하며, 따라서 암 및 감염성 질환을 비롯한 다양한 질환의 개선에 유용한 신규 마크로시클릭 펩티드를 제공한다.

Description

PD-1/PD-L1 및 CD80(B7-1)/PD-L1 단백질/단백질 상호작용의 마크로시클릭 억제제 {MACROCYCLIC INHIBITORS OF THE PD-1/PD-L1 AND CD80(B7-1)/PD-L1 PROTEIN/PROTEIN INTERACTIONS}
본원은 2014년 3월 10일에 출원된 미국 특허 가출원 14/201977, 2013년 12월 19일에 출원된 미국 특허 가출원 61/918184, 및 2013년 3월 15일에 출원된 미국 특허 가출원 61/794589의 우선권 이익을 주장하며, 이는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
본 개시내용은 PD-1/PD-L1 및 CD80/PD-L1 단백질/단백질 상호작용을 억제하며, 따라서 암 및 감염성 질환을 비롯한 다양한 질환의 개선에 유용한 신규 마크로시클릭 펩티드를 제공한다.
단백질 프로그램화된 사멸 1 (PD-1)은 CD28, CTLA-4, ICOS 및 BTLA를 또한 포함하는 CD28 수용체 패밀리의 억제 구성원이다. PD-1은 활성화된 B 세포, T 세포 및 골수 세포 상에서 발현된다 (Agata et al., supra; Okazaki et al., Curr. Opin. Immunol., 14:779-782 (2002); Bennett et al., J. Immunol., 170:711-718 (2003)).
PD-1 단백질은 Ig 유전자 슈퍼패밀리의 일부인 55 kDa 유형 I 막횡단 단백질이다 (Agata et al., Int. Immunol., 8:765-772 (1996)). PD-1은 막 근위 면역수용체 티로신 억제 모티프 (ITIM) 및 막 원위 티로신-기반 스위치 모티프 (ITSM)를 함유한다 (Thomas, M.L., J. Exp. Med., 181:1953-1956 (1995); Vivier, E. et al., Immunol. Today, 18:286-291 (1997)). CTLA-4와 구조적으로 유사하지만, PD-1에는 CD80 CD86 (B7-2) 결합에 중요한 MYPPY 모티프가 결여되어 있다. PD-1에 대한 2개의 리간드, PD-L1 (B7-H1) 및 PD-L2 (b7-DC)가 확인되어 있다. PD-1을 발현하는 T 세포의 활성화는 PD-L1 또는 PD-L2를 발현하는 세포와의 상호작용 시 하향조절되는 것으로 밝혀졌다 (Freeman et al., J. Exp. Med., 192:1027-1034 (2000); Latchman et al., Nat. Immunol., 2:261-268 (2001); Carter et al., Eur. J. Immunol., 32:634-643 (2002)). PD-L1 및 PD-L2 둘 다는 PD-1에 결합하는 B7 단백질 패밀리 구성원이지만, 다른 CD28 패밀리 구성원에는 결합하지 않는다. PD-L1 리간드는 다양한 인간 암에서 풍부하다 (Dong et al., Nat. Med., 8:787-789 (2002)). PD-1 및 PD-L1 사이의 상호작용은 종양 침윤 림프구에서의 감소, T-세포 수용체 매개 증식에서의 감소, 및 암성 세포에 의한 면역 회피를 야기한다 (Dong et al., J. Mol. Med., 81:281-287 (2003); Blank et al., Cancer Immunol. Immunother., 54:307-314 (2005); Konishi et al., Clin. Cancer Res., 10:5094-5100 (2004)). 면역 억제는 PD-1과 PD-L1의 국부 상호작용을 억제함으로써 역전시킬 수 있고, 그 효과는 PD-1과 PD-L2의 상호작용이 또한 차단되는 경우에 부가된다 (Iwai et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 99:12293-12297 (2002); Brown et al., J. Immunol., 170:1257-1266 (2003)).
PD-L1은 또한 CD80과 상호작용하는 것으로 밝혀졌다 (Butte, M.J. et al., Immunity, 27:111-122 (2007)). 발현 면역 세포 상에서의 PD-L1/CD80 상호작용은 억제성인 것으로 밝혀졌다. 이러한 상호작용의 차단은 이러한 억제 상호작용을 없애는 것으로 밝혀졌다 (Paterson, A.M. et al., J. Immunol., 187:1097-1105 (2011); Yang, J. et al., J. Immunol.,187(3):1113-1119 (Aug 1 2011)).
PD-1 발현 T 세포를 그의 리간드를 발현하는 세포와 접촉시킨 경우에, 증식, 시토카인 분비, 및 세포독성을 비롯하여 항원 자극에 반응하여 기능적 활성이 감소된다. PD-1/PD-L1 또는 PD-L2 상호작용은 감염 또는 종양의 해소 동안, 또는 자가 관용성의 발생 동안 면역 반응을 하향 조절한다 (Keir, M.E. et al., Annu. Rev. Immunol., 26:Epub (2008)). 종양 질환 또는 만성 감염 동안 발생하는 것과 같은 만성 항원 자극은 상승된 수준의 PD-1을 발현하고 만성 항원에 대한 활성에 대해 기능장애를 갖는 T 세포를 생성한다 (문헌 [Kim et al., Curr. Opin. Imm. (2010)]에서 검토됨). 이는 "T 세포 탈진"으로 불린다. B 세포도 또한 PD-1/PD-리간드 억제 및 "탈진"을 디스플레이한다.
PD-L1에 대한 항체를 사용한 PD-1/PD-L1 라이게이션의 차단은 많은 시스템 내에서 T 세포 활성화를 회복시키고 증대시키는 것으로 밝혀졌다. 진행성 암을 갖는 환자는 PD-L1에 대한 모노클로날 항체에 의한 요법에 이익을 얻는다 (Brahmer et al., New Engl. J. Med. (2012)). 종양 및 만성 감염의 전임상 동물 모델은 모노클로날 항체에 의한 PD-1/PD-L1 경로의 차단이 면역 반응을 증진시킬 수 있고, 종양 거부 또는 감염의 제어를 발생시킬 수 있음을 보여주었다. PD-1/PD-L1 차단을 통한 항종양 면역요법은 수많은 조직학적으로 별개의 종양에 대한 치료 면역 반응을 증대시킬 수 있다 (Dong, H. et al., "B7-H1 pathway and its role in the evasion of tumor immunity", J. Mol. Med., 81(5):281-287 (2003); Dong, H. et al., "Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis: a potential mechanism of immune evasion", Nat. Med., 8(8):793-800 (2002)).
PD-1/PD-L1 상호작용의 간섭은 만성 염증을 갖는 시스템 내에서 증진된 T 세포 활성을 유발한다. PD-L1의 차단은 만성 림프구 맥락수막염 바이러스 감염을 갖는 마우스에서 바이러스 클리어런스가 개선되게 하고 면역을 회복시켰다 (Barber, D.L. et al., "Restoring function in exhausted CD8 T cells during chronic viral infection", Nature, 439(7077):682-687 (2006)). HIV-1로 감염시킨 인간화 마우스는 바이러스혈증에 대한 증진된 보호 및 CD4+ T 세포의 바이러스 고갈을 나타낸다 (Palmer et al., J. Immunol. (2013)). PD-L1에 대한 모노클로날 항체를 통한 PD-1/PD-L1의 차단은 HIV 환자로부터 T 세포에 대한 시험관내 항원-특이적 기능성을 회복시킬 수 있다 (Day, Nature (2006); Petrovas, J. Exp. Med. (2006); Trautman, Nature Med. (2006); D'Souza, J. Immunol. (2007); Zhang, Blood (2007); Kaufmann, Nature Imm. (2007); Kasu, J. Immunol. (2010); Porichis, Blood (2011)), HCV patients (Golden-Mason, J. Virol. (2007); Jeung, J. Leuk. Biol. (2007); Urbani, J. Hepatol. (2008); Nakamoto, PLoS Path. (2009); Nakamoto, Gastroenterology (2008)) and HBV patients (Boni, J. Virol. (2007); Fisicaro, Gastro. (2010); Fisicaro et al., Gastroenterology (2012); Boni et al., Gastro. (2012); Penna et al., J. Hep. (2012); Raziorrough, Hepatology (2009); Liang, World J. Gastro. (2010); Zhang, Gastro. (2008)).
PD-L1/CD80 상호작용의 차단은 또한 면역을 자극하는 것으로 밝혀졌다 (Yang, J. et al., J. Immunol., 187(3):1113-1119 (Aug 1 2011)). PD-L1/CD80 상호작용의 차단으로부터 발생한 면역 자극은 추가로 PD-1/PD-L1 또는 PD-1/PD-L2 상호작용의 차단과의 조합을 통해 증진되는 것으로 밝혀졌다.
면역 세포 표현형에서의 변경은 패혈성 쇼크에서 중요한 인자인 것으로 가정된다 (Hotchkiss et al., Nat. Rev. Immunol. (2013)). 이는 증가된 수준의 PD-1 및 PD-L1을 포함한다 (Guignant, et al., Crit. Care (2011)). 증가된 수준의 PD-1 및 PD-L1을 갖는 패혈성 쇼크 환자로부터의 세포는 증가된 수준의 T 세포 아폽토시스를 나타낸다. PD-L1에 대해 지시된 항체는 면역 세포 아폽토시스의 수준을 감소시킬 수 있다 (Zhang et al., Crit. Care (2011)). 추가로, PD-1 발현이 결여된 마우스는 야생형 마우스에 비해 패혈성 쇼크 증상에 대해 더 저항성이다 (Yang, J. et al., J. Immunol., 187(3):1113-1119 (Aug 1 2011)). 연구는 항체를 사용한 PD-L1의 상호작용의 차단이 부적절한 면역 반응을 억제할 수 있고, 질환 징후를 개선시킬 수 있음을 밝혀내었다.
만성 항원에 대한 면역 반응을 증진시키는 것에 더하여, PD-1/PD-L1 경로의 차단은 또한 만성 감염 관련 치료 백신을 비롯한 백신접종에 대한 반응을 증진시키는 것으로 밝혀졌다 (Ha, S.J. et al., "Enhancing therapeutic vaccination by blocking PD-1-mediated inhibitory signals during chronic infection", J. Exp. Med., 205(3):543-555 (2008); Finnefrock, A.C. et al., "PD-1 blockade in rhesus macaques: impact on chronic infection and prophylactic vaccination", J. Immunol., 182(2):980-987 (2009); Song, M.-Y. et al., "Enhancement of vaccine-induced primary and memory CD8+ t-cell responses by soluble PD-1", J. Immunother., 34(3):297-306 (2011)).
본원에 기재된 분자는 생화학적 및 세포-기반 실험 시스템 둘 다에서, PD-L1과 PD-1의 상호작용을 차단하는 능력을 입증하였다. 이들 결과는 치료 백신을 비롯하여, 암 또는 만성 감염에서 면역을 증진시키기 위한 치료적 투여를 위한 잠재력과 일치한다.
본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드는 PD-L1과 PD-1 및 CD80의 상호작용을 억제할 수 있다. 이들 화합물은 PD-L1에 대한 높은 효과적인 결합, PD-L1과 PD-1 또는 CD80의 상호작용의 차단을 입증하였고, 증진된 T 세포 기능적 활성을 촉진할 수 있으며, 따라서 이는 이들 화합물이 비경구, 경구, 폐, 비강, 협측 및 지속 방출 제제를 위한 후보가 되게 한다.
한 실시양태에서, 본 개시내용은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
<화학식 I>
Figure pct00001
상기 식에서,
A는 결합,
Figure pct00002
로부터 선택되고;
여기서,
Figure pct00003
는 카르보닐 기에 대한 부착 지점을 나타내고,
Figure pct00004
는 질소 원자에 대한 부착 지점을 나타내고;
n은 0 또는 1이고;
R14 및 R15는 독립적으로 수소 및 메틸로부터 선택되고;
R16은 수소, -CHR17C(O)NH2, -CHR17C(O)NHCHR18C(O)NH2 및 -CHR17C(O)NHCHR18C(O)NHCH2C(O)NH2로부터 선택되고; 여기서 R17은 수소 및 -CH2OH로부터 선택되고, 여기서 R18은 수소 및 메틸로부터 선택되고;
Rc, Rf, Rh, Ri, Rm 및 Rn은 수소이고;
Ra, Re, Rj 및 Rk는 각각 독립적으로 수소 및 메틸로부터 선택되고;
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12 및 R13은 독립적으로 천연 아미노산 측쇄 및 비천연 아미노산 측쇄로부터 선택되거나 또는 하기 기재된 바와 같이 상응하는 이웃자리 R 기와 함께 고리를 형성하고;
Re 및 Rk는 각각 상응하는 이웃자리 R 기 및 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성할 수 있고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
Rb는 메틸이거나, 또는 Rb 및 R2는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
Rd는 수소 또는 메틸이거나, 또는 Rd 및 R4는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성할 수 있고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 히드록시 및 페닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
Rg는 수소 또는 메틸이거나, 또는 Rg 및 R7은 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성할 수 있고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 할로 기로 임의로 치환된 벤질, 벤질옥시, 시아노, 시클로헥실, 메틸, 할로, 히드록시, 메톡시 기로 임의로 치환된 이소퀴놀리닐옥시, 할로 기로 임의로 치환된 퀴놀리닐옥시 및 테트라졸릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 피롤리딘 및 피페리딘 고리는 시클로헥실, 페닐, 또는 인돌 기에 임의로 융합되고;
Rl은 메틸이거나, 또는 Rl 및 R12는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘 및 피롤리딘으로부터 선택된 고리를 형성하고, 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환된다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 A가
Figure pct00005
인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 A가
Figure pct00006
이고;
Rd가 메틸이거나, 또는 Rd 및 R4가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 히드록시 및 페닐로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
Rg가 메틸이거나, 또는 Rg 및 R7이 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 할로 기로 임의로 치환된 벤질, 벤질옥시, 시아노, 시클로헥실, 메틸, 할로, 히드록시, 메톡시 기로 임의로 치환된 이소퀴놀리닐옥시, 할로 기로 임의로 치환된 퀴놀리닐옥시 및 테트라졸릴로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 피롤리딘 및 피페리딘 고리가 시클로헥실, 페닐, 또는 인돌 기에 임의로 융합되고;
Rk가 메틸이거나, 또는 Rk 및 R11이 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환된 것인
화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 A가
Figure pct00007
이고;
Rd 및 R4가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
Rg 및 R7이 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 피롤리딘 고리를 형성하고, 여기서 상기 고리가 아미노, 할로 기로 임의로 치환된 벤질, 벤질옥시, 시아노, 시클로헥실, 메틸, 할로, 히드록시, 메톡시 기로 임의로 치환된 이소퀴놀리닐옥시, 할로 기로 임의로 치환된 퀴놀리닐옥시 및 테트라졸릴로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 피롤리딘 및 피페리딘 고리가 시클로헥실, 페닐, 또는 인돌 기에 임의로 융합되고;
Rk가 메틸인
화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 A가
Figure pct00008
이고;
Rd 및 R4가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
Rg 및 R7이 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 피롤리딘 고리를 형성하고, 여기서 상기 고리가 아미노, 할로 기로 임의로 치환된 벤질, 벤질옥시, 시아노, 시클로헥실, 메틸, 할로, 히드록시, 메톡시 기로 임의로 치환된 이소퀴놀리닐옥시, 할로 기로 임의로 치환된 퀴놀리닐옥시 및 테트라졸릴로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 피롤리딘 및 피페리딘 고리가 시클로헥실, 페닐, 또는 인돌 기에 임의로 융합되고;
Rk가 메틸이고;
R8이
아자인돌릴C1-C3알킬, 벤조티아졸릴C1-C3알킬, 벤조티에닐C1-C3알킬, 벤질옥시C1-C3알킬, 디페닐메틸, 푸라닐C1-C3알킬, 이미다졸릴C1-C3알킬, 나프틸C1-C3알킬, 피리디닐C1-C3알킬, 티아졸릴C1-C3알킬, 티에닐C1-C3알킬; 및
인돌릴 부분이 C1-C3알킬, 시아노, 할로 및 히드록시로부터 선택된 1개의 기로 임의로 치환된 인돌릴C1-C3알킬로부터 선택된 것인
화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 A가
Figure pct00009
이고;
Rd 및 R4가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
Rg 및 R7이 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 피롤리딘 고리를 형성하고, 여기서 상기 고리가 아미노, 할로 기로 임의로 치환된 벤질, 벤질옥시, 시아노, 시클로헥실, 메틸, 할로, 히드록시, 메톡시 기로 임의로 치환된 이소퀴놀리닐옥시, 할로 기로 임의로 치환된 퀴놀리닐옥시 및 테트라졸릴로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 피롤리딘 및 피페리딘 고리가 시클로헥실, 페닐, 또는 인돌 기에 임의로 융합되고;
Rk가 메틸이고;
R8이 C1-C3알킬, 할로, 히드록시 또는 시아노로부터 선택된 1개의 기로 임의로 치환된 3-인돌릴C1-C3알킬인
화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
<화학식 II>
Figure pct00010
상기 식에서,
A는 결합,
Figure pct00011
로부터 선택되고;
여기서,
Figure pct00012
는 카르보닐 기에 대한 부착 지점을 나타내고,
Figure pct00013
는 질소 원자에 대한 부착 지점을 나타내고;
n은 0 또는 1이고;
R14 및 R15는 독립적으로 수소 및 메틸로부터 선택되고;
R16은 수소, -CHR17C(O)NH2, -CHR17C(O)NHCHR18C(O)NH2 및 -CHR17C(O)NHCHR18C(O)NHCH2C(O)NH2로부터 선택되고; 여기서 R17은 수소 및 -CH2OH로부터 선택되고, 여기서 R18은 수소 및 메틸로부터 선택되고;
Ra, Rf, Rj, Rk, Rl 및 Rm은 수소이고;
Rb 및 Rc는 메틸이고;
Rg는 수소 및 메틸로부터 선택되고;
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11 및 R12는 독립적으로 천연 아미노산 측쇄 및 비천연 아미노산 측쇄로부터 선택되거나 또는 하기 기재된 바와 같이 상응하는 이웃자리 R 기와 함께 고리를 형성하고;
Rd는 수소 및 메틸로부터 선택되거나, 또는 Rd 및 R4는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
Re는 수소 및 메틸로부터 선택되거나, 또는 Re 및 R5는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
Rh는 수소 및 메틸로부터 선택되거나, 또는 Rh 및 R8은 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
Ri는 수소 및 메틸로부터 선택되거나, 또는, Ri 및 R9는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환된다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 A가
Figure pct00014
인 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 A가
Figure pct00015
이고;
Rd가 메틸이거나, 또는 Rd 및 R4가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
Rg가 메틸이고;
Ri가 메틸이거나, 또는 Ri 및 R9가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환된 것인
화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 A가
Figure pct00016
이고;
Rd가 메틸이거나, 또는 Rd 및 R4가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
Rg가 메틸이고;
Ri가 메틸이거나, 또는 Ri 및 R9가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
R7이 플루오로 기로 임의로 치환된 페닐C1-C3알킬인
화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 면역 반응의 증진, 자극 및/또는 증가를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 적어도 1종의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 면역 반응을 증진, 자극 및/또는 증가시키는 방법을 제공한다. 또 다른 실시양태에서, 상기 방법은 추가의 작용제를 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드 또는 펩티드들 전에, 그 후에 또는 그와 동시에 투여하는 것을 추가로 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 추가의 작용제는 항미생물제, 항바이러스제, 세포독성제 및/또는 면역 반응 조절제이다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 암 세포의 성장, 증식 또는 전이의 억제를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 1종 이상의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 암 세포의 성장, 증식 또는 전이를 억제하는 방법을 제공한다. 또 다른 실시양태에서, 암은 흑색종, 신세포 암종, 편평 비소세포 폐암 (NSCLC), 비-편평 NSCLC, 결장직장암, 거세-저항성 전립선암, 난소암, 위암, 간세포성 암종, 췌장 암종, 두경부의 편평 세포 암종, 식도, 위장관 및 유방의 암종, 및 혈액 악성종양으로부터 선택된다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 감염성 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 적어도 1종의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 감염성 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 실시양태에서, 감염성 질환은 바이러스에 의해 유발된다. 또 다른 실시양태에서, 바이러스는 HIV, A형 간염, B형 간염, C형 간염, 포진 바이러스 및 인플루엔자로부터 선택된다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 패혈성 쇼크의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 1종 이상의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 패혈성 쇼크를 치료하는 방법을 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에게 치료 유효량의 적어도 1종의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 PD-L1과 PD-1 및/또는 CD80의 상호작용을 차단하는 방법을 제공한다.
R 측쇄가 메틸로 치환된 고리의 부분인 화학식 I 및 II의 화합물에서, 메틸 기는 마크로시클릭 모 구조의 부분인 탄소를 비롯하여, 고리 내 임의의 치환가능한 탄소 원자 상에 위치할 수 있는 것으로 이해된다.
화학식 I의 화합물에서, 바람직한 R1 측쇄는 페닐알라닌, 티로신, 3-티엔-2-일, 4-메틸페닐알라닌, 4-클로로페닐알라닌, 3-메톡시페닐알라닌, 이소트립토판, 3-메틸페닐알라닌, 1-나프틸알라닌, 3,4-디플루오로페닐알라닌, 4-플루오로페닐알라닌, 3,4-디메톡시페닐알라닌, 3,4-디클로로페닐알라닌, 4-디플루오로메틸페닐알라닌, 2-메틸페닐알라닌, 2-나프틸알라닌, 트립토판, 4-피리디닐, 4-브로모페닐알라닌, 3-피리디닐, 4-트리플루오로메틸페닐알라닌, 4-카르복시페닐알라닌, 4-메톡시페닐알라닌, 비페닐알라닌 및 3-클로로페닐알라닌; 및 2,4-디아미노부탄이다.
R2가 고리의 부분이 아닌 것인 화학식 I의 화합물에서, 바람직한 R2 측쇄는 알라닌, 세린 및 글리신이다.
화학식 I의 화합물에서, 바람직한 R3 측쇄는 아스파라긴, 아스파르트산, 글루탐산, 글루타민, 세린, 오르니틴, 리신, 히스티딘, 트레오닌, 류신, 알라닌, 2,3-디아미노프로판 및 2,4-디아미노부탄이다.
R4가 고리의 부분이 아닌 것인 화학식 I의 화합물에서, 바람직한 R4 측쇄는 발린, 알라닌, 이소류신 및 글리신이다.
화학식 I의 화합물에서, 바람직한 R5 측쇄는 히스티딘, 아스파라긴, 2,3-디아미노프로판, 세린, 글리신, 2,4-디아미노부탄, 트레오닌, 알라닌, 리신, 아스파르트산, 알라닌 및 3-티아졸릴알라닌이다.
화학식 I의 화합물에서, 바람직한 R6 측쇄는 류신, 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산, 글루타민, 세린, 리신, 3-시클로헥산, 트레오닌, 오르니틴, 2,4-디아미노부탄, 알라닌, 아르기닌 및 오르니틴 (COCH3)이다.
R7이 고리의 부분이 아닌 것인 화학식 I의 화합물에서, 바람직한 R7 측쇄는 글리신, 2,4-디아미노부탄, 세린, 리신, 아르기닌, 오르니틴, 히스티딘, 아스파라긴, 글루타민, 알라닌 및 2,4-디아미노부탄 (C(O)시클로부탄)이다.
화학식 I의 화합물에서 바람직한 R8 측쇄는 트립토판 및 1,2-벤즈이소티아졸리닐알라닌이다.
화학식 I의 화합물에서 바람직한 R9 측쇄는 세린, 히스티딘, 리신, 오르니틴, 2,4-디부틸아민, 트레오닌, 리신, 글리신, 글루탐산, 발린, 2,3-디아미노프로판, 아르기닌, 아스파르트산 및 티로신이다.
화학식 I의 화합물에서 바람직한 R10 측쇄는 트립토판, 벤즈이소티아졸릴알라닌, 1-나프틸알라닌, 5-플루오로트립토판, 메티오닌, 7-메틸트립토판, 5-클로로트립토판 및 -메틸트립토판이다.
화학식 I의 화합물에서 바람직한 R11 측쇄는 노르류신, 류신, 아스파라긴, 페닐알라닌, 메티오닌, 에톡시메탄, 알라닌, 트립토판, 이소류신, 페닐프로판, 글루탐산, 헥산 및 헵탄이다.
R12가 고리의 부분이 아닌 것인 화학식 I의 화합물에서, 바람직한 R12 측쇄는 노르류신, 알라닌, 에톡시메탄, 메티오닌, 세린, 페닐알라닌, 메톡시에탄, 류신, 트립토판, 이소류신, 글루탐산, 헥산, 헵탄 및 글리신이다.
화학식 I의 화합물에서 바람직한 R13 측쇄는 아르기닌, 오르니틴, 알라닌, 2,4-디아미노부탄, 2,3-디아미노프로판, 류신, 아스파르트산, 글루탐산, 세린, 리신, 트레오닌, 시클로프로필메탄, 글리신, 발린, 이소류신, 히스티딘 및 2-아미노부탄이다.
화학식 II의 화합물에서 바람직한 R1 측쇄는 페닐알라닌, 3-메톡시페닐알라닌, 2-플루오로페닐알라닌, 3-플루오로페닐알라닌, 4-플루오로페닐알라닌, 3,4-디플루오로페닐알라닌, 3,5-디플루오로페닐알라닌, 3,4,5-트리플루오로페닐알라닌, 3-플루오로,4-클로로페닐알라닌, 3-클로로,4-플루오로페닐알라닌, 3-클로로페닐알라닌, 4-클로로페닐알라닌, 3,4-디클로로페닐알라닌, 3,5-디클로로페닐알라닌, 3,5-디클로로,4-플루오로페닐알라닌, 3-클로로,4,5-디플루오로페닐알라닌, 4-브로모페닐알라닌, 4-니트로페닐알라닌, 3-트리플루오로메틸페닐알라닌, 4-트리플루오로메틸페닐알라닌 및 3-피리딜알라닌이다.
화학식 II의 화합물에서, 바람직한 R2 측쇄는 페닐알라닌, 알라닌, 히스티딘, 티로신, 트립토판, 글루탐산, 1-나프틸알라닌, 2-나프틸알라닌, 2-벤조티아졸릴알라닌, 3-피리디닐알라닌 및 4-피리디닐알라닌이다.
화학식 II의 화합물에서, 바람직한 R3 측쇄는 노르류신, 알라닌, 티로신, 글루탐산, 류신 및 이소류신이다.
R4가 고리의 부분이 아닌 것인 화학식 II의 화합물에서, 바람직한 R4 측쇄는 글리신 및 알라닌이다.
R5가 고리의 부분이 아닌 것인 화학식 II의 화합물에서, 바람직한 R5 측쇄는 아스파르트산, 글루탐산, 아르기닌, 리신, 아스파라긴, 세린, 2,4-디아미노부탄, 2,3-디아미노프로판 및 2-아미노부탄이다.
화학식 II의 화합물에서 바람직한 R6 측쇄는 발린, 류신, 이소류신, N-메틸트레오닌 및 시클로헥실메탄이다.
화학식 II의 화합물에서 바람직한 R7 측쇄는 페닐알라닌 및 3-플루오로페닐알라닌이다.
R8이 고리의 부분이 아닌 것인 화학식 II의 화합물에서, 바람직한 R8 측쇄는 티로신, 3-아이오도티로신, 류신, 아르기닌, 글루탐산, 글루타민, 펜타플루오로페닐알라닌, 4-아미노페닐알라닌, 4-아미노메틸페닐알라닌, 3,4-디메톡시페닐알라닌, 트립토판, 5-클로로트립토판, 5-히드록시트립토판, 이소트립토판, 리신, 오르니틴 및 2,3-디아미노프로판이다.
화학식 II의 화합물에서 바람직한 R10 측쇄는 트립토판, 5-클로로트립토판, 7-아자트립토판, 이소트립토판, 3-벤조티아졸릴알라닌 및 1-나프틸알라닌이다.
화학식 II의 화합물에서 바람직한 R11 측쇄는 티로신, 4-플루오로페닐알라닌, 4-아미노메틸페닐알라닌, 4-아미노페닐알라닌 및 3,4-디히드록시페닐알라닌이다.
화학식 II의 화합물에서 바람직한 R12 측쇄는 류신, 티로신, 아르기닌, 리신, 오르니틴, 글루탐산, 페닐알라닌, 4-메틸페닐알라닌, 4-클로로페닐알라닌, 4-아미노메틸페닐알라닌, 노르류신, 시클로헥실알라닌, 2,4-디아미노부탄 및 2,3-디아미노프로판이다.
화학식 II의 화합물에서, R4 및 R9가 고리의 부분인 경우에 바람직한 입체화학은 D-이성질체의 입체화학이고, R5 및 R8이 고리의 부분인 경우에 바람직한 입체화학은 L 이성질체의 입체화학이다.
본원에 기재된 대상의 한 실시양태는 하기 화학식 Ia의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00017
상기 식에서,
A는 Xaa1 및 Xaa14 사이의 유기 또는 펩티드성 링커이며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 제공하고;
Xaa1은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 알킬 또는 헤테로아릴 알킬 아미노산이고;
Xaa2는 자연 또는 비자연 발생 알킬 또는 N-메틸화 알킬 아미노산이고;
Xaa3은 자연 또는 비자연 발생 친수성 또는 알킬 또는 극성 아미노산이고;
Xaa4는 자연 또는 비자연 발생 아미노산, 알킬 아미노산 또는 N-메틸화 알킬 아미노산이고;
Xaa5는 자연 또는 비자연 발생 헤테로방향족 아미노산 또는 양으로 하전된 아미노산 또는 알킬 아미노산이고;
Xaa6은 자연 또는 비자연 발생 친수성 또는 소수성 또는 양으로 또는 음으로 하전된 아미노산이고;
Xaa7은 자연 또는 비자연 발생 N-메틸화 또는 비-N-메틸화 친수성 또는 소수성 또는 양으로 또는 음으로 하전된 아미노산이고;
Xaa8은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬 아미노산이고;
Xaa9는 자연 또는 비자연 발생 친수성 또는 소수성 또는 양으로 또는 음으로 하전된 아미노산이고;
Xaa10은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬 또는 알킬 또는 헤테로알킬 아미노산이고;
Xaa11은 자연 또는 비자연 발생 N-메틸화 또는 비-N-메틸화 알킬 또는 헤테로알킬 또는 방향족 또는 헤테로방향족 아미노산이고;
Xaa12는 자연 또는 비자연 발생 N-메틸화 또는 비-N-메틸화 알킬 또는 헤테로알킬 또는 방향족 또는 헤테로방향족 아미노산이고;
Xaa13은 자연 또는 비자연 발생 친수성 또는 소수성 또는 양으로 또는 음으로 하전된 아미노산이고;
Xaa14는 적절하게 활성화되어 링커 A의 한 말단과 반응하여 시클릭 펩티드를 생성할 수 있는 관능기를 보유하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa15는 자연 또는 비자연 발생 아미노산, 또는 태그가 이어지는 스페이서, 또는 가용화 또는 PK-증진 요소가 이어지는 스페이서이다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 대상은 하기 화학식 Ib의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00018
상기 식에서,
A는 잔기 Xaa14 상에 존재하는 술프히드릴 기와 반응하여 공유 티오에테르 결합을 형성하며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 생성할 수 있는 친전자성 모이어티, 예컨대 마이클 수용자 또는 클로로- 또는 브로모아세틸 기이고; 여기서 이러한 티오에테르 결합은 상응하는 부분입체이성질체 술폭시드로 산화되거나 산화되지 않을 수 있고;
여기서 A는 임의로 존재할 수 있고; 여기서 A가 존재하는 경우에, 이는 Xaa14의 측쇄 상의 카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 측쇄 락탐 시클릭 펩티드에 N-말단을 제공하는데 사용될 수 있는, Gly 또는 유리 아민을 갖는 다른 스페이서일 수 있고; 여기서 A가 존재하지 않는 경우에, Xaa1 잔기의 N-말단 아미노 기는 Xaa14의 측쇄 상의 카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 측쇄 락탐 시클릭 펩티드에 N-말단을 제공하는데 사용될 수 있고;
여기서 A가 존재하는 경우에, 이는 Xaa15의 C-말단 α-카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 헤드-투-테일(head-to-tail) 시클릭 펩티드를 제공하는데 사용될 수 있는, Gly 또는 유리 아민을 갖는 다른 스페이서일 수 있고; 여기서 A가 존재하지 않는 경우에, Xaa1 아미노산의 N-말단 아미노 기는 Xaa15의 C-말단 α-카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 헤드-투-테일 시클릭 펩티드를 제공하는데 사용될 수 있고;
Xaa1은 L-Phe, L-Ala, L-Trp, L-Tyr, L-Phe(4-OMe), L-Phe(4-F), L-Phe(4-Cl), L-Phe(4-Br), L-Phe(4-Me), L-Phe(4-CF3), L-Phe(4-t-Bu), L-Phe(펜타-F), L-1-Nal, L-2-Nal, L-Bip, L-mPhe, L-Tic, L-3-Pya, L-4-Pya, L-Tza, L-3-Tha를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa2는 L-Ala, L-mAla, mGly, L-mVal로 이루어진 군으로부터 선택된 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa3은 Gly, L-Asn 및 L-Ala로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa4는 L-Pro, L-Ala, L-α-Me-Pro, L-Pro(4R-OH), L-Pro(4R-OBzl), L-Pro(4R-NH2), L-Pro(3R-Ph), L-Pro(4S-Ph), L-Pro(5R-Ph), L-Azt, L-Pip, L-Oic, L-2,3-메타노-Pro, L-3,4-메타노-Pro, L-Val, L-Leu, L-Ile, L-mAla, L-mVal, L-mLeu, L-Tza를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa5는 L-His, L-Ala, L-Tza, L-Arg, L-Lys, L-Orn, L-Dab 및 L-Dap로 이루어진 군으로부터 선택된 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa6은 L-Leu, L-Ala, L-Arg, L-His, L-Glu 및 L-Asp를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa7은 mGly, Gly, L-mAla, D-mAla, L-Pro, L-Ser, L-mSer, L-Dab, L-Arg 및 L-His를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa8은 L-Trp, L-Phe, L-Tyr, L-His, L-Phe(펜타-F), L-Tza, L-Bzt, L-1-Nal, L-2-Nal, L-2-Pya, L-3-Pya, L-4-Pya이고;
Xaa9는 L-Ser, L-Ala, L-Arg 및 D-Asn을 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa10은 L-Trp, L-Ala, L-Met, L-Nle, L-Leu 및 L-Ile, L-Phe, L-Tyr, L-His, L-Phe(펜타-F), L-Tza, L-Bzt, L-1-Nal, L-2-Nal, L-2-Pya, L-3-Pya, L-4-Pya로 이루어진 군으로부터 선택된 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa11은 L-mNle, L-Nle, L-mAla, L-Ala, L-Phe, L-mPhe 및 L-mLeu, L-Ser, D-Nle 및 L-Pro를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa12는 L-mNle, L-Nle, L-mAla, L-Ala, L-Phe, L-mPhe, L-mLeu 및 L-Pro를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa13은 L-Arg, L-Ala, L-Leu, L-Lys, L-Asp, L-Glu, L-His를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa14는 L-Cys, D-Cys, Asp, Glu, Gly, L-호모-Cys, D-homo-Cys, L-Pen, D-Pen, L-mCys 및 D-mCys로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa15는 Gly, 또는 적어도 2개의 에틸렌 글리콜 유닛으로 구성된 PEG 스페이서가 이어지는 Gly, 또는 적어도 2개의 에틸렌 글리콜 유닛으로 구성된 PEG 스페이서에 이어서 비오틴과 같은 태그가 이어지는 Gly, 또는 스페이서에 이어서 PK-증진 요소가 이어지는 Gly이고;
여기서 Xaa15는 임의로 존재하고, 여기서 상기 아미노산의 C-말단 카르보닐 탄소는 히드록실 기에 부착되어 카르복실산을 형성하거나, 또는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (NH2), 알킬 카르복스아미드 (NHR1), 또는 디알킬카르복스아미드 (NR1R2)를 형성하고;
여기서 각각의 R1 및 R2는 알킬 또는 아릴알킬 기이고;
여기서 Xaa15가 존재하지 않는 경우에, Xaa14의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (NH2), 알킬 카르복스아미드 (NHR1), 또는 디알킬카르복스아미드 (NR1R2)를 형성하고;
여기서 각각의 R1 및 R2는 알킬 또는 아릴알킬 기이다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 대상은 하기 화학식 Ic의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00019
상기 식에서,
A는 잔기 Xaa14 상에 존재하는 술프히드릴 기와 반응하여 공유 티오에테르 결합을 형성하며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 생성할 수 있는 친전자성 모이어티, 예컨대 마이클 수용자 또는 클로로- 또는 브로모아세틸 기이고; 여기서 이러한 티오에테르 결합은 상응하는 부분입체이성질체 술폭시드로 산화되거나 산화되지 않을 수 있고;
여기서 A는 임의로 존재할 수 있고; 여기서 A가 존재하는 경우에, 이는 Xaa14의 측쇄 상의 카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 측쇄 락탐 시클릭 펩티드에 N-말단을 제공하는데 사용될 수 있는, Gly 또는 유리 아민을 갖는 다른 스페이서일 수 있고; 여기서 A가 존재하지 않는 경우에, Xaa1 잔기의 N-말단 아미노 기는 Xaa14의 측쇄 상의 카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 측쇄 락탐 시클릭 펩티드에 N-말단을 제공하는데 사용될 수 있고;
여기서 A가 존재하는 경우에, 이는 Xaa15의 C-말단 α-카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 헤드-투-테일 시클릭 펩티드를 제공하는데 사용될 수 있는, Gly 또는 유리 아민을 갖는 다른 스페이서일 수 있고; 여기서 A가 존재하지 않는 경우에, Xaa1 아미노산의 N-말단 아미노 기는 Xaa15의 C-말단 α-카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 헤드-투-테일 시클릭 펩티드를 제공하는데 사용될 수 있고;
Xaa1은 L-Phe, L-Ala, L-Trp, L-Tyr, L-Phe(4-OMe), L-Phe(4-F), L-Phe(4-Cl), L-Phe(4-Br), L-Phe(4-Me), L-Phe(4-CF3), L-Phe(4-t-Bu), L-Phe(펜타-F), L-1-Nal, L-2-Nal, L-Bip, L-mPhe, L-Tic, L-3-Pya, L-4-Pya, L-Tza, L-3-Tha를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa2는 L-Ala, L-mAla, mGly, L-mVal로 이루어진 군으로부터 선택된 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa3은 Gly, L-Asn 및 L-Ala로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa4는 L-Pro, L-Ala, L-α-Me-Pro, L-Pro(4R-OH), L-Pro(4R-NH2), L-Pro(4S-Ph), L-Azt, L-Pip 및 L-Oic를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa5는 L-His 및 L-Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa6은 L-Leu, L-Ala, L-Arg 및 L-Asp를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa7은 mGly, Gly, L-mAla, D-mAla, L-Pro, L-Ser, L-mSer, L-Dab, L-Arg 및 L-His를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa9는 L-Ser, L-Ala, L-Arg 및 D-Asn을 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa10은 L-Trp, L-Ala, L-Met, L-Leu 및 L-Ile로 이루어진 군으로부터 선택된 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa11은 L-mNle, L-Nle, L-mAla, L-Ala, L-Phe, L-mPhe 및 L-mLeu, L-Ser 및 D-Nle를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa12는 L-mNle, L-Nle, L-mAla 및 L-Ala를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa13은 L-Arg, L-Ala 및 L-Leu을 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa14는 L-Cys, D-Cys, Asp, Glu 및 Gly로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa15는 Gly, 또는 적어도 2개의 에틸렌 글리콜 유닛으로 구성된 PEG 스페이서가 이어지는 Gly, 또는 적어도 2개의 에틸렌 글리콜 유닛으로 구성된 PEG 스페이서에 이어서 비오틴과 같은 태그가 이어지는 Gly이고;
여기서 Xaa15는 임의로 존재하고, 여기서 상기 아미노산의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (NH2), 알킬 카르복스아미드 (NHR1), 또는 디알킬카르복스아미드 (NR1R2)를 형성하고;
여기서 각각의 R1 및 R2는 알킬 또는 아릴알킬 기이고;
여기서 Xaa15가 존재하지 않는 경우에, Xaa14의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (NH2), 알킬 카르복스아미드 (NHR1), 또는 디알킬카르복스아미드 (NR1R2)를 형성하고;
여기서 각각의 R1 및 R2는 알킬 또는 아릴알킬 기이다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 대상은 하기 화학식 IIa의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00020
상기 식에서,
A는 Xaa1 및 Xaa13 사이의 유기 또는 펩티드성 링커이며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 제공하고;
Xaa1은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 알킬 또는 헤테로아릴 알킬 아미노산이고;
Xaa2는 자연 또는 비자연 발생 알킬 또는 방향족 N-메틸화 아미노산이고;
Xaa3은 자연 또는 비자연 발생 소수성 N-메틸화 아미노산이고;
Xaa4는 자연 또는 비자연 발생 소수성 N-메틸화 아미노산이고;
Xaa5는 자연 또는 비자연 발생 알킬 아미노산 또는 양으로 또는 음으로 하전된 아미노산이고;
Xaa6은 자연 또는 비자연 발생 소수성 아미노산이고;
Xaa7은 자연 또는 비자연 발생 N-메틸화 또는 비-N-메틸화 방향족 또는 헤테로방향족 또는 알킬 또는 헤테로아릴알킬 아미노산이고;
Xaa8은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬 아미노산 또는 알킬 아미노산이고;
Xaa9는 자연 또는 비자연 발생 N-메틸화 또는 비-N-메틸화 방향족 또는 헤테로방향족 또는 알킬 또는 헤테로아릴알킬 아미노산이고;
Xaa10은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬 또는 알킬 또는 헤테로알킬 아미노산이고;
Xaa11은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬 또는 알킬 또는 헤테로알킬 아미노산이고;
Xaa12는 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬 또는 알킬 또는 헤테로알킬 아미노산이고;
Xaa13은 적절하게 활성화되어 링커 A의 한 말단과 반응하여 시클릭 펩티드를 생성할 수 있는 관능기를 보유하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa14는 자연 또는 비자연 발생 아미노산 또는 스페이서, 또는 태그가 이어지는 스페이서, 또는 가용화 또는 PK-증진 요소가 이어지는 스페이서이다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 대상은 하기 화학식 IIb의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00021
상기 식에서,
A는 잔기 Xaa13 상에 존재하는 술프히드릴 기와 반응하여 공유 티오에테르 결합을 형성하며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 생성할 수 있는 친전자성 모이어티, 예컨대 마이클 수용자 또는 클로로- 또는 브로모아세틸 기이고; 여기서 이러한 티오에테르 결합은 상응하는 부분입체이성질체 술폭시드로 산화되거나 산화되지 않을 수 있고;
여기서 A는 임의로 존재할 수 있고; 여기서 A가 존재하는 경우에, 이는 Xaa13의 측쇄 상의 카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 측쇄 락탐 시클릭 펩티드에 N-말단을 제공하는데 사용될 수 있는, Gly 또는 유리 아미노 말단을 갖는 다른 스페이서일 수 있고; 여기서 A가 존재하지 않는 경우에, Xaa1 잔기의 N-말단 아미노 기는 Xaa13의 측쇄 상의 카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 측쇄 락탐 시클릭 펩티드에 N-말단을 제공하는데 사용될 수 있고;
여기서 A가 존재하는 경우에, 이는 Xaa14의 C-말단 α-카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 헤드-투-테일 시클릭 펩티드를 제공하는데 사용될 수 있는, Gly 또는 유리 아미노 말단을 갖는 다른 스페이서일 수 있고; 여기서 A가 존재하지 않는 경우에, Xaa1 아미노산의 N-말단 아미노 기는 Xaa14의 C-말단 α-카르복실 기와의 아미드 결합 형성을 통해 펩티드를 고리화하며 그에 의해 헤드-투-테일 시클릭 펩티드를 제공하는데 사용될 수 있고;
Xaa1은 Phe 및 Ala를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa2는 mPhe 및 mAla를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa3은 mNle 및 mAla를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa4는 mGly, Gly 및 mAla를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa5는 Asp 및 Ala를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa6은 Val (바람직함) 및 Ala를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa7은 mPhe 및 Phe를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa8은 Tyr 및 Ala로 이루어진 군으로부터 선택된 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa9는 mGly, mAla 및 Gly를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa11은 Tyr 및 Ala를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa12는 Leu 및 Ala를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa13은 L-Cys, D-Cys, Asp, Glu 및 Gly를 포함하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa14는 Gly, 또는 적어도 2개의 에틸렌 글리콜 유닛으로 구성된 PEG 스페이서가 이어지는 Gly, 또는 적어도 2개의 에틸렌 글리콜 유닛으로 구성된 PEG 스페이서에 이어서 비오틴과 같은 태그가 이어지는 Gly이고;
여기서 Xaa14는 임의로 존재하고, 여기서 상기 아미노산의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (NH2), 알킬 카르복스아미드 (NHR1), 또는 디알킬카르복스아미드 (NR1R2)를 형성하고;
여기서 각각의 R1 및 R2는 알킬 또는 아릴알킬 기이고;
여기서 Xaa14가 존재하지 않는 경우에, Xaa13의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (NH2), 알킬 카르복스아미드 (NHR1), 또는 디알킬카르복스아미드 (NR1R2)를 형성하고;
여기서 각각의 R1 및 R2는 알킬 또는 아릴알킬 기이다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 대상은 하기 화학식 IIIa의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00022
상기 식에서,
A는 Xaa1 및 Xaa12 사이의 유기 또는 펩티드성 링커이며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 제공하고;
Xaa1은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 알킬 또는 헤테로아릴 알킬 아미노산이고;
Xaa2는 자연 또는 비자연 발생 알킬 또는 방향족 또는 하전된 아미노산이고;
Xaa3은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 알킬 또는 헤테로아릴 알킬 아미노산이고;
Xaa4는 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 알킬 또는 헤테로아릴알킬 아미노산이고;
Xaa5는 자연 또는 비자연 발생 알킬 또는 헤테로알킬 또는 방향족 또는 헤테로방향족 또는 헤테로아릴알킬 아미노산이고;
Xaa6은 자연 또는 비자연 발생 헤테로방향족 또는 양으로 하전된 아미노산이고;
Xaa7은 자연 또는 비자연 발생 극성 또는 하전된 아미노산이고;
Xaa8은 자연 또는 비자연 발생 양으로 하전된 아미노산이고;
Xaa9는 자연 또는 비자연 발생 알킬 또는 헤테로알킬 또는 방향족 또는 헤테로방향족 또는 헤테로아릴알킬 아미노산이고;
Xaa10은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬 또는 알킬 또는 헤테로알킬 아미노산이고;
Xaa11은 자연 또는 비자연 발생 방향족 또는 헤테로방향족 또는 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬 또는 헤테로알킬 또는 양으로 하전된 아미노산이고;
Xaa12는 적절하게 활성화되어 링커 A의 한 말단과 반응하여 시클릭 펩티드를 생성할 수 있는 관능기를 보유하는 자연 또는 비자연 발생 아미노산이고;
Xaa13은 자연 또는 비자연 발생 아미노산 또는 스페이서, 또는 태그가 이어지는 스페이서, 또는 가용화 또는 PK-증진 요소가 이어지는 스페이서이다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 대상은 하기 화학식 IIIb의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00023
상기 식에서,
A는 Cys12의 술프히드릴 기와 반응하여 공유 티오에테르 결합을 형성하며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 생성할 수 있는 친전자성 모이어티, 예컨대 마이클 수용자 또는 클로로- 또는 브로모아세틸 기이고; 여기서 이러한 티오에테르 결합은 상응하는 부분입체이성질체 술폭시드로 산화되거나 산화되지 않을 수 있고;
Xaa1은 Phe 및 D-Phe로부터 선택되고;
Xaa2는 Leu, Arg 및 Phe로부터 선택되고;
Xaa3은 Ile, Leu 및 Phe로부터 선택되고;
Xaa4는 Val, Tyr 및 Phe로부터 선택되고;
Xaa5는 Ile 및 Val로부터 선택되고;
Xaa6은 Arg 및 His로부터 선택되고;
Xaa8은 Arg로부터 선택되고;
Xaa9는 Val, Leu, Tyr 및 Phe로부터 선택되고;
Xaa11은 Arg 및 Tyr로부터 선택되고;
Xaa13은 Gly, 또는 적어도 2개의 에틸렌 글리콜 유닛으로 구성된 PEG 스페이서가 이어지는 Gly이고,
여기서 Xaa13은 임의로 존재하고, 여기서 상기 아미노산의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (NH2), 알킬 카르복스아미드 (NHR1), 또는 디알킬카르복스아미드 (NR1R2)를 형성하고;
여기서 각각의 R1 및 R2는 알킬 또는 아릴알킬 기이고;
여기서 Xaa13이 존재하지 않는 경우에, Cys12의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (NH2), 알킬 카르복스아미드 (NHR1), 또는 디알킬카르복스아미드 (NR1R2)를 형성하고;
여기서 각각의 R1 및 R2는 알킬 또는 아릴알킬 기이다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 대상은 하기 화학식 Id의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00024
상기 식에서,
A는 잔기 Xaa14 상에 존재하는 술프히드릴 기와 반응하여 공유 티오에테르 결합을 형성하며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 제공할 수 있는 N-말단 Xaa1 잔기의 α-아민에 부착된 클로로아세틸 기이고; 여기서 이러한 티오에테르 결합은 상응하는 부분입체이성질체 술폭시드로 산화되거나 산화되지 않을 수 있고;
여기서,
Xaa1은 L-Phe, L-Trp, L-Tyr, L-Phe(4-OMe), L-Phe(4-F), L-Phe(4-Cl), L-Phe(4-Br), L-Phe(4-Me), L-Phe(4-CF3), L-1-Nal, L-2-Nal, L-Bip, L-3-Pya, L-4-Pya, L-3-Tha로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa2는 L-Ala, L-mAla, mGly로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa3은 L-Ala 및 L-Asn으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa4는 L-Pro, L-Ala, L-α-Me-Pro, L-Pro(4-OH), L-Pro(4-NH2), L-Pro(4S-Ph), L-Azt, L-Pip 및 L-Oic로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa5는 L-Ala, L-His 및 L-Leu로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa6은 L-Ala, L-Arg, L-Asp, L-His 및 L-Leu로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa7은 mGly, Gly, L-mAla, D-mAla, L-Pro, L-Ser, L-mSer, L-Dab, L-Arg 및 L-His로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa9는 L-Ala, L-Arg 및 L-Ser로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa10은 L-Trp, L-Met 및 L-Bzt로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa11은 L-Nle, L-mNle, L-mAla, L-Phe, L-mPhe 및 L-mLeu 및 L-mSer로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa12는 L-mNle 및 L-mAla로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa13은 L-Ala, L-Arg 및 L-Leu로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa14는 L-Cys 및 D-Cys로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa15는 Gly, 또는 12개의 에틸렌 글리콜 유닛으로 구성된 PEG 스페이서가 이어지는 Gly이고;
여기서 Xaa15는 임의로 존재하고, 여기서 상기 아미노산의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (CONH2)를 형성하고;
여기서 Xaa15가 존재하지 않는 경우에, Xaa14의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (CONH2)를 형성한다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 대상은 하기 화학식 IIc의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00025
상기 식에서,
A는 Cys13 잔기 상에 존재하는 술프히드릴 기와 반응하여 공유 티오에테르 결합을 형성하며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 생성할 수 있는 N-말단 Xaa1 잔기의 α-아민에 부착된 클로로아세틸 기이고; 여기서 이러한 티오에테르 결합은 상응하는 부분입체이성질체 술폭시드로 산화되거나 산화되지 않을 수 있고;
여기서,
Xaa2는 L-mAla 및 L-mPhe로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa3은 L-mAla 및 L-mNle로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa4는 Gly, mGly 및 L-mAla로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa5는 L-Ala 및 L-Asp로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa6은 L-Ala 및 L-Val로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa7은 L-Phe 및 L-mPhe로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa8은 L-Ala 및 L-Tyr로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa9는 Gly, mGly 및 L-mAla로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa12는 L-Leu 및 L-Ala로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Xaa14는 Gly, 또는 12개의 에틸렌 글리콜 유닛으로 구성된 PEG 스페이서가 이어지는 Gly이고;
여기서 Xaa14 또는 PEG 스페이서가 이어지는 Xaa14의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (CONH2)를 형성한다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 대상은 하기 화학식 IIIc의 서열을 포함하는 폴리펩티드에 관한 것이다.
Figure pct00026
상기 식에서,
A는 L-Cys12 잔기 상에 존재하는 술프히드릴 기와 반응하여 공유 티오에테르 결합을 형성하며 그에 의해 마크로시클릭 펩티드를 생성할 수 있는 N-말단 L-Phe 잔기의 α-아민에 부착된 클로로아세틸 기이고;
여기서,
Xaa2는 L-Leu, L-Arg 및 L-Phe로부터 선택되고;
Xaa3은 L-Ile 및 L-Phe로부터 선택되고;
Xaa4는 L-Phe, L-Tyr 및 L-Val로부터 선택되고;
Xaa5는 L-Ile 및 L-Val로부터 선택되고;
Xaa9는 L-Leu, L-Phe, L-Tyr 및 L-Val로부터 선택되고;
여기서 Gly13의 C-말단 카르보닐 탄소는 질소에 부착되어 카르복스아미드 (CONH2)를 형성한다.
본 개시내용은 또한 화학식 I에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 Ia에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 Ib에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 Ic에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 Id에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 II에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 IIa에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 IIb에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 IIc에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 III에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 IIIa에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 IIIb에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 IIIc에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 IV에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 V에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 VI에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화학식 VII에 제공된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 화합물 번호 1, 2, 3, 4, 71 및 99로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 본원에 기재된 서열로부터 선택된 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 과다증식성 장애 및/또는 바이러스성 장애를 개선시키고/거나 치료하기 위한 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드를 사용하는 방법에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 대상체에게 본원에 기재된 펩티드로부터 선택된 서열을 포함하는 1종 이상의 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 면역 반응을 조절하는 방법에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 대상체에게 본원에 기재된 서열로부터 선택된 서열을 포함하는 1종 이상의 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 면역 반응을 증진, 자극 또는 증가시키는 방법에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 대상체에게 치료 유효량의 본원에 기재된 펩티드로부터 선택된 서열을 포함하는 1종 이상의 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 세포의 성장의 면역계 억제를 촉진하는 방법에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 대상체에게 치료 유효량의 본원에 기재된 펩티드로부터 선택된 서열을 포함하는 1종 이상의 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 감염성 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 개시내용은 또한 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드로부터 선택된 서열을 또 다른 작용제, 예컨대 항미생물 요법, 항바이러스 요법, 추가의 면역조절 요법, 백신, 또는 암 화학요법제와 함께 포함하는 조합물에 관한 것이다.
도 1 - 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1과 결합하는 능력을 측정하는데 사용된 균질 시간-분해 형광 포맷 (HTRF) 검정으로 포맷된 PD-1/PD-L1 생화학적 결합 검정의 개략도를 제공한다.
도 2 - 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1과 결합하는 능력을 측정하는데 사용된 HTRF에 대한 PD-1/PD-L1 대조 항체 용량-반응 곡선을 제공한다.
도 3 - 본 개시내용의 대표적인 마크로시클릭 펩티드에 대한 PD-1/PD-L1 HTRF 용량-반응 곡선을 제공한다.
도 4 - HTRF 선택성 패널. 제시된 바와 같이, 데이터는 마크로시클릭 펩티드가 PD-1 및 CD80에 대한 PD-L1 결합을 간섭하고 있기 때문에 PD-L1에 결합되어 있지만, 펩티드가 PD-1/PD-L2 또는 CD80/CTLA4 상호작용은 차단하지 않으므로 그의 결합은 선택적임을 입증한다.
도 5 - 본 개시내용의 선택적 마크로시클릭 펩티드의 세포 결합 검정. 제시된 바와 같이, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 재조합 PD-L1-Ig의 Jurkat-PD-1 세포에 대한 결합을 차단하고, 또한 재조합 PD-1-Ig의 L2987 (내인성 PD-L1 발현을 갖는 선암종 세포주) 또는 LK35.2-hPD-L1 (hPD-L1을 과다발현하는 마우스 B 세포주. 항-PD-L1 항체는 브리스톨-마이어스 스큅 캄파니(Bristol-Myers Squibb Company)에 의해 개발된 내부 항체임)에 대한 결합을 차단한다.
도 6 - 대조 항체의 세포 결합 검정. 제시된 바와 같이, 대조 항체 (항-PD-1 및 항-PD-L1)는 재조합 PD-1-Ig (피코에리트린, PE, 표지됨)의 LK35.2-hPD-L1 세포에 대한 결합을 차단한다.
도 7 - 본 개시내용의 선택적 마크로시클릭 펩티드의 세포 결합 검정. 제시된 바와 같이, 마크로시클릭 펩티드는 재조합 PD-1-Ig (PE 표지됨)의 LK35.2-hPD-L1 세포에 대한 결합을 차단한다.
도 8 - 비오티닐화 화합물 번호 71 / PD-L1 결합 검정. 제시된 바와 같이, 화합물 번호 99, 2, 및 1 마크로시클릭 펩티드는 HTRF 검정 시, 비오티닐화 화합물 번호 71 펩티드의 PD-L1에 대한 결합을 차단할 수 있다. 이들 결과는 이들 펩티드가 동일한 결합 부위에 결합함을 시사한다.
도 9 - 비오티닐화 화합물 번호 71 / PD-L1 결합 검정 - 항-PD-L1 항체. 제시된 바와 같이, 항-PD-L1 모노클로날 항체는 HTRF 검정 시, 비오티닐화 화합물 번호 71의 PD-L1에 대한 결합을 차단할 수 있다. 이들 결과는 이들 펩티드가 항-PD-L1 모노클로날 항체와 동일한 결합 부위에 결합함을 시사한다.
도 10a-c - 항-PD-L1 항체 및 펩티드 둘 다는 CMV-특이적 T 세포에 의한 IFNγ 분비를 용량-의존성 방식으로 촉진한다. 가장 강건한 반응은 PD-L1에 대해 지시된 항체 (MDX-1105) (항-PD-1 Ab#1, EC50 0.6nM; 도 10a)에 의해 생성되었고, 이어서 화합물 번호 71 (EC50 300nM; 도 10b), 화합물 번호 1 (EC50 400nM), 화합물 번호 2 (EC50 400nM), 및 화합물 번호 99 (EC50 >10,000nM)였다. MDX-1105 및 화합물 번호 71, 화합물 번호 1, 화합물 번호 2, 및 화합물 번호 99에 대한 수치상 EC50 결과를 도 10c에 제공한다. 이들 결과는 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드 억제제의 PD-L1 결합이 지속 항원에 대한 이전 노출로부터 생성된 기억 T 세포 집단에서의 IFNγ 방출을 증진시킬 수 있음을 시사한다.
도 11 - 항-PD-L1 항체 및 마크로시클릭 펩티드 둘 다는 HIV-특이적 T 세포에 의한 IFNγ 분비를 용량-의존성 방식으로 촉진한다. 중복 웰로부터 웰당 평균 IFNγ 스팟 형성 세포 (SFC)를 계산하고, 미자극 웰 (< 25 SFC) 내에 존재하는 임의의 배경을 차감하였다. 데이터는 또한 DMSO 대조군 치료 대비 배수 증가로 나타내어진다. 항-PD-L1 항체 및 펩티드 둘 다는 6종의 HIV-Gag 항원 풀의 적어도 1종에 대해 반응하는 HIV-특이적 T 세포에 의한 IFNγ 분비를 증진시킨다. 이들 결과는 펩티드 억제제에 의한 PD-L1 결합이 항-PD-L1 항체와 유사하게, 진행 중인 만성 바이러스 감염에 대해 반응하는 T 세포 집단으로부터의 IFNγ 방출을 증진시킬 수 있음을 제시한다.
본 개시내용에 따르면, 본 발명자들은 PD-L1에 특이적으로 결합하고 PD-L1과 PD-1 및 CD80의 상호작용을 억제할 수 있는 펩티드를 발견하였다. 이들 마크로시클릭 펩티드는 시험관내 면역조절 효능을 나타내었고, 이는 이들이 암 및 감염성 질환을 비롯한 다양한 질환의 치료를 위한 치료 후보가 되게 한다.
용어 "특이적 결합" 또는 "특이적으로 결합한다"는 단백질 및 결합 분자, 예컨대 화합물 또는 리간드 사이의 상호작용을 지칭한다. 상호작용은 결합 분자에 의해 인식되는 단백질의 특정한 구조 (즉, 효소 결합 부위, 항원 결정기 또는 에피토프)의 존재에 의존한다. 예를 들어, 화합물이 단백질 결합 부위 "A"에 대해 특이적 결합을 갖는 경우에, 결합 부위 A를 포함하는 단백질을 함유하는 반응물 중 화합물 및 단백질 결합 부위 A에 특이적으로 결합하는 표지된 펩티드의 존재는 단백질에 결합되는 표지된 펩티드의 양을 감소시킬 것이다. 대조적으로, 단백질에 대한 화합물의 비특이적 결합은 단백질로부터 표지된 펩티드의 농도-의존성 변위를 발생시키지 않는다.
다른 실시양태는 하기 구조를 포함하는 폴리펩티드를 포함한다:
<화학식 IV>
Figure pct00027
또는
<화학식 V>
Figure pct00028
또는
<화학식 VI>
Figure pct00029
또는
<화학식 VII>
Figure pct00030
또 다른 실시양태는 화학식 Ia, Ib, Ic, IIa, IIb, IIIa, IIIb, IV, V, VI 또는 VII의 폴리펩티드, 또는 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드 중 적어도 1종을 포함하는 펩티드를 포함하는 제약 조성물이다.
또 다른 실시양태는 화학식 Ia, Ib, Ic, IIa, IIb, IIIa, IIIb, IV, V, VI 또는 VII의 폴리펩티드 또는 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드, 및 항미생물제, 항바이러스제, 항암제, 항당뇨병제, 항비만제, 항고혈압제, 항아테롬성동맥경화제 및 지질 강하제로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1종의 치료제를 포함하는 제약 조합물에 관한 것이다.
또 다른 실시양태는 화학식 Ia, Ib, Ic, IIa, IIb, IIIa, IIIb, IV, V, VI 또는 VII의 폴리펩티드 또는 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드와 본원에 개시된 또 다른 작용제의 제약 조합물에 관한 것이다.
또 다른 실시양태는 암 및/또는 바이러스 장애의 진행 또는 발병의 치료 또는 지연을 필요로 하는 포유동물 종에게 치료 유효량의 화학식 Ia, Ib, Ic, IIa, IIb, IIIa, IIIb, IV, V, VI 또는 VII의 폴리펩티드 또는 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 암 및/또는 바이러스 장애의 진행 또는 발병을 치료 또는 지연시키는 방법에 관한 것이다.
본 개시내용은 본 화합물에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함하는 것으로 의도된다. 동위원소는 동일한 원자 번호를 갖지만 상이한 질량수를 갖는 원자를 포함한다. 일반적 예로서 제한 없이, 수소의 동위원소는 중수소 및 삼중수소를 포함한다. 탄소의 동위원소는 13C 및 14C를 포함한다. 동위원소-표지된 본 발명의 화합물은 일반적으로 통상의 기술자에게 공지된 통상의 기술에 의해 또는 본원에 기재된 것과 유사한 방법에 의해, 달리 사용되는 비-표지된 시약 대신 적절한 동위원소-표지된 시약을 사용하여 제조될 수 있다. 이러한 화합물은 다양한 잠재적 용도, 예를 들어 생물학적 활성을 결정하는데 있어서 표준물 및 시약으로서의 용도를 가질 수 있다. 안정한 동위원소의 경우에, 이러한 화합물은 생물학적, 약리학적 또는 약동학적 특성을 유리하게 변형시키는 잠재력을 가질 수 있다.
본원에 기재된 대상의 추가의 측면은 리간드 결합 검정의 개발을 위한 또는 생체내 흡착, 대사, 분포, 수용체 결합 또는 점유, 또는 화합물 배치를 모니터링하기 위한 방사성표지된 리간드로서의 개시된 펩티드의 용도이다. 예를 들어, 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드는 방사성 동위원소 125I를 사용하여 제조될 수 있고, 생성된 방사성표지된 펩티드는 결합 검정을 개발하거나 또는 대사 연구를 위해 사용될 수 있다. 대안적으로, 동일한 목적상, 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드는 통상의 기술자에게 공지된 방법을 사용하여 촉매 삼중수소화에 의해 방사성표지된 형태로 전환될 수 있다.
본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 또한, 통상의 기술자에게 공지된 방법을 사용하여 방사성 추적자를 첨가함으로써 PET 영상화제로서 사용될 수 있다.
바람직한 펩티드는 본원에 제공된 마크로시클릭 펩티드 중 적어도 1종을 포함하고, 이들 펩티드는 제약 조성물 및 조합물에 포함될 수 있다.
본원에 제공된 정의는, 특정 경우에 달리 제한되지 않는 한, 제한 없이, 본 명세서 전반에 사용된 용어에 적용된다.
아미노산 및 펩티드 화학의 통상의 기술자는 아미노산이 하기 일반 구조에 의해 나타내어지는 화합물을 포함한다는 것을 알고 있다.
Figure pct00031
여기서 R 및 R'는 본원에 논의된 바와 같다.
달리 나타내지 않는 한, 본원에서 단독으로 또는 또 다른 기의 부분으로서 사용된 용어 "아미노산"은, 제한 없이, "α" 탄소로 지칭되는 동일한 탄소에 연결된 아미노 기 및 카르복실 기를 포함하며, 여기서 R 및/또는 R'는 수소를 비롯한 천연 또는 비천연 측쇄일 수 있다. "α" 탄소에서의 절대 "S" 배위는 통상적으로 "L" 또는 "천연" 배위로 지칭된다. "R" 및 "R'"(프라임) 치환기가 둘 다 수소로 동일한 경우에, 아미노산은 글리신이고 키랄이 아니다.
본원에 사용된 용어 "자연 발생 아미노산 측쇄"는 통상적으로 S-배위 (즉, L-아미노산)에서의 임의의 자연 발생 아미노산 (즉 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 류신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 및 발린)의 측쇄를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "비자연 발생 아미노산 측쇄"는 통상적으로 R-배위 (즉, D-아미노산)에서의 임의의 자연 발생 아미노산의 측쇄 또는 하기로부터 선택된 R- 또는 S-배위 (즉, 각각 D- 또는 L-아미노산)에서의 자연 발생 아미노산 측쇄 이외의 기를 지칭한다:
C2-C7알케닐, C1-C3알콕시C1-C3알킬, C1-C6알콕시카르보닐C1-C3알킬, C1-C7알킬, C1-C3알킬술파닐C1-C3알킬, 아미도C1-C3알킬, 아미노C1-C3알킬, 아자인돌릴C1-C3알킬, 벤조티아졸릴C1-C3알킬, 벤조티에닐C1-C3알킬, 벤질옥시C1-C3알킬, 카르복시C1-C3알킬, C3-C6시클로알킬C1-C3알킬, 디페닐메틸, 푸라닐C1-C3알킬, 이미다졸릴C1-C3알킬, 나프틸C1-C3알킬, 피리디닐C1-C3알킬, 티아졸릴C1-C3알킬, 티에닐C1-C3알킬;
비페닐이 메틸 기로 임의로 치환된 비페닐C1-C3알킬;
인돌릴 부분이 C1-C3알킬, 카르복시C1-C3알킬, 할로, 히드록시 및 페닐로부터 선택된 1개의 기로 임의로 치환되고, 여기서 페닐이 C1-C3알콕시, C1-C3알킬 및 할로로부터 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 기에 의해 추가로 임의로 치환된 것인 인돌릴C1-C3알킬;
Ra 및 Rb가 독립적으로 수소, C2-C4알케닐옥시카르보닐, C1-C3알킬, C1-C3알킬카르보닐, C3-C6시클로알킬카르보닐, 푸라닐카르보닐 및 페닐카르보닐로부터 선택된 NRaRb(C1-C7알킬) (알킬 링커가 1개 초과의 탄소를 함유하는 경우에, 추가의 NRaRb 기가 쇄 상에 존재할 수 있음);
Rc 및 Rd가 독립적으로 수소, C1-C3알킬 및 트리페닐메틸로부터 선택된 NRcRd카르보닐C1-C3알킬;
페닐 부분이 C1-C4알콕시, C1-C4알킬, C1-C3알킬술포닐아미노, 아미도, 아미노, 아미노C1-C3알킬, 아미노술포닐, 카르복시, 시아노, 할로, 할로C1-C3알킬, 히드록시, -NC(NH2)2, 니트로 및 -OP(O)(OH)2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 4 또는 5개의 기로 임의로 치환된 페닐C1-C3알킬; 및
페닐이 C1-C3알킬 기로 임의로 치환된 페녹시C1-C3알킬.
본원에 사용된 용어 "C2-C4알케닐"은 적어도 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 2 내지 4개의 탄소 원자의 직쇄 또는 분지쇄 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C2-C7알케닐"은 적어도 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 2 내지 7개의 탄소 원자의 직쇄 또는 분지쇄 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C2-C4알케닐옥시"는 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C2-C4알케닐 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C3알콕시"는 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C3알킬 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C4알콕시"는 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C4알킬 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C6알콕시"는 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C6알킬 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C3알콕시C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C3알콕시 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C6알콕시카르보닐"은 카르보닐 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C6알콕시 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C6알콕시카르보닐C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C6알콕시카르보닐 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C3알킬"은 1 내지 3개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소로부터 유래된 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C4알킬"은 1 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소로부터 유래된 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C6알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소로부터 유래된 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C3알킬카르보닐"은 카르보닐 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C3알킬 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C3알킬술파닐"은 황 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C3알킬 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C3알킬술파닐C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C3알킬술파닐 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C3알킬술포닐"은 술포닐 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C3알킬 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C1-C3알킬술포닐아미노"는 아미노 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C1-C3알킬술포닐 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아미도"는 -C(O)NH2를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아미도C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 아미도 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아미노"는 -NH2를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아미노C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 아미노 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아미노술포닐"은 술포닐 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 아미노 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아자인돌릴C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자에 부착된 아자인돌릴 기를 지칭한다. 아자인돌릴 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "벤조티아졸릴C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자에 부착된 벤조티아졸릴 기를 지칭한다. 벤조티아졸릴 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "벤조티에닐C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자에 부착된 벤조티에닐 기를 지칭한다. 벤조티에닐 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "벤질옥시"는 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 벤질 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "벤질옥시C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 벤질옥시 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "비페닐C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 비페닐 기를 지칭한다. 비페닐 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다
본원에 사용된 용어 "카르보닐"은 -C(O)-를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "카르복시"는 -CO2H를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "카르복시C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 카르복시 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "시아노"는 -CN을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C3-C6시클로알킬"은 3 내지 6개의 탄소 원자 및 0개의 헤테로원자를 갖는 포화 모노시클릭, 탄화수소 고리계를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C3-C6시클로알킬C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C3-C6시클로알킬 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "C3-C6시클로알킬카르보닐"은 카르보닐 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 C3-C6 시클로알킬 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "푸라닐C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 푸라닐 기를 지칭한다. 푸라닐 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "푸라닐카르보닐"은 카르보닐 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 푸라닐 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "할로" 및 "할로겐"은 F, Cl, Br, 또는 I를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "할로C1-C3알킬"은 1, 2 또는 3개의 할로겐 원자로 치환된 C1-C3알킬 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "할로메틸"은 1, 2 또는 3개의 할로겐 원자로 치환된 메틸 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "히드록시"는 -OH를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "이미다졸릴C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 이미다졸릴 기를 지칭한다. 이미다졸릴 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "인돌릴C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 인돌릴 기를 지칭한다. 인돌릴 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "나프틸C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 나프틸 기를 지칭한다. 나프틸 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "니트로"는 -NO2를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "NRaRb"는 질소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 2개의 기, Ra 및 Rb를 지칭한다. Ra 및 Rb는 독립적으로 수소, C2-C4알케닐옥시카르보닐, C1-C3알킬카르보닐, C3-C6시클로알킬카르보닐, 푸라닐카르보닐 및 페닐카르보닐로부터 선택된다.
본원에 사용된 용어 "NRaRb(C1-C3)알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 NRaRb 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "NRcRd"는 질소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 2개의 기, Rc 및 Rd를 지칭한다. Rc 및 Rd는 독립적으로 수소, C1-C3알킬 및 트리페닐메틸로부터 선택된다.
본원에 사용된 용어 "NRcRd카르보닐"은 카르보닐 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 NRcRd 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "NRcRd카르보닐C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 NRcRd카르보닐 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "페녹시"는 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 페닐 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "페녹시C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 페녹시 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "페닐C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 페닐 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "페닐카르보닐"은 카르보닐 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 페닐 기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "피리디닐C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 피리디닐 기를 지칭한다. 피리디닐 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "술파닐"은 -S-를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "술포닐"은 -SO2-를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "티아졸릴C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 티아졸릴 기를 지칭한다. 티아졸릴 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "티에닐C1-C3알킬"은 C1-C3알킬 기를 통해 모 분자 모이어티에 부착된 티에닐 기를 지칭한다. 티에닐 기는 기 내 임의의 치환가능한 원자를 통해 알킬 모이어티에 부착될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "치료하는"은 (i) 질환, 장애 및/또는 상태에 대한 소인이 있을 수 있지만 아직 이를 갖는 것으로 진단되지 않은 환자에서 질환, 장애 또는 상태가 발생하는 것을 예방하는 것; (ii) 질환, 장애 또는 상태를 억제하는 것, 즉 그의 발생을 저지하는 것; 및 (iii) 질환, 장애 또는 상태를 완화하는 것, 즉 질환, 장애 및/또는 상태, 및/또는 질환, 장애 및/또는 상태와 연관된 증상의 퇴행을 유발하는 것을 지칭한다.
달리 나타내지 않는 한, 본원에서 단독으로 또는 또 다른 기의 부분으로서 사용된 용어 "알킬"은, 제한 없이, 노르말 쇄 내에 1 내지 40개의 탄소, 바람직하게는 1 내지 20개의 탄소, 보다 바람직하게는 1 내지 8개의 탄소를 함유하는 직쇄 및 분지쇄 탄화수소, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, t-부틸, 이소부틸, 펜틸, 헥실, 이소헥실, 헵틸, 4,4-디메틸펜틸, 옥틸, 2,2,4-트리메틸펜틸, 노닐, 데실, 운데실, 도데실, 그의 다양한 분지쇄 이성질체 등을 포함한다. 또한, 본원에 정의된 바와 같은 알킬 기는 임의로, 임의의 이용가능한 탄소 원자 상에서, 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 히드록시, 아릴알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 알콕시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로아릴알킬옥시, 알카노일, 할로, 히드록실, 티오, 니트로, 시아노, 카르복실, 카르보닐 (
Figure pct00032
), 카르복스아미도, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 아미도, 알킬아미노, 아릴아미도, 헤테로아릴아미도, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 포스폰산, 포스핀산, 술폰산, 술폰아미도, 할로아릴, CF3, OCF2, OCF3, 아릴옥시, 헤테로아릴, 시클로알킬알콕시알킬, 시클로헤테로알킬 등과 같으나 이에 제한되지는 않는 이러한 쇄에 통상적으로 부착되는 1개 이상의 관능기로 치환되어 알킬 기, 예컨대 트리플루오로 메틸, 3-히드록시헥실, 2-카르복시프로필, 2-플루오로에틸, 카르복시메틸, 시아노부틸 등을 형성할 수 있다.
달리 나타내지 않는 한, 본원에서 단독으로 또는 또 다른 기의 부분으로서 사용된 용어 "시클로알킬"은, 제한 없이, 고리를 형성하는 총 3 내지 20개의 탄소, 바람직하게는 각각의 고리를 형성하는 4 내지 7개의 탄소를 함유하는 모노시클릭 알킬, 비시클릭 알킬 및 트리시클릭 알킬을 비롯한, 첨부되거나 융합된, 1 내지 3개의 고리를 함유하는 포화 또는 부분 불포화 (1 또는 2개의 이중 결함 함유) 시클릭 탄화수소 기를 포함하며; 이는 아릴에 대해 기재된 바와 같이 1개의 방향족 고리에 융합될 수 있고, 이는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸, 시클로데실, 시클로도데실, 시클로헥세닐,
Figure pct00033
을 포함하며, 임의의 이러한 기는 임의로, 임의의 이용가능한 탄소 원자를 통해, 수소, 할로, 할로알킬, 알킬, 할로알킬, 알콕시, 할로알콕시, 알케닐, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 알키닐, 시클로알킬알킬, 플루오레닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알킬알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시, 아릴옥시알킬, 아릴알콕시, 아릴티오, 아릴아조, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴알케닐, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 히드록시, 니트로, 옥소, 시아노, 카르복실, 카르보닐 (
Figure pct00034
), 카르복스아미도, 아미노, 아미노가 1 또는 2개의 치환기 (정의에서 언급된 알킬, 아릴 또는 임의의 다른 아릴 화합물임)를 포함하는 치환된 아미노, 아미도, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 포스폰산, 포스핀산, 술폰산, 술폰아미도, 티올, 알킬티오, 아릴티오, 헤테로아릴티오, 아릴티오알킬, 알콕시아릴티오, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 아릴아미노카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아릴술피닐, 아릴술피닐알킬, 아릴술포닐아미노 또는 아릴술폰아미노카르보닐 또는 상기 제시된 바와 같은 임의의 알킬 치환기로부터 선택된 1개 이상의 기로 치환될 수 있다.
본원에서 단독으로 또는 또 다른 기의 부분으로서 사용된 용어 "아릴"은, 제한 없이, 고리 부분에서 6 내지 10개의 탄소를 함유하는 모노시클릭 및 비시클릭 방향족 기를 지칭하고 (예컨대 페닐 또는 나프틸), 임의로 "아릴"에 융합된 1 내지 3개의 추가의 고리를 포함할 수 있고 (예컨대 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 고리), 임의로 임의의 이용가능한 탄소 원자를 통해 수소, 알킬, 할로, 할로알킬, 알콕시, 할로알콕시, 알케닐, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 알키닐, 시클로알킬알킬, 플루오레닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알킬알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시, 아릴옥시알킬, 아릴알콕시, 아릴티오, 아릴아조, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴알케닐, 헤테로아릴옥시, 헤테로아릴알킬옥시, 헤테로아릴알킬옥시알킬, 히드록시, 니트로, 옥소, 시아노, 아미노, 아미노가 1 또는 2개의 치환기 (알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 헤테로아릴 또는 아릴 또는 정의에서 언급된 임의의 다른 아릴 화합물임)를 포함하는 치환된 아미노, 티올, 알킬티오, 아릴티오, 헤테로아릴티오, 아릴티오알킬, 알콕시아릴티오, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 시클로알킬아미노카르보닐, 아릴아미노카르보닐, 헤테로아릴아미노카르보닐, 헤테로아릴알킬아미노카르보닐 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아릴술피닐, 아릴술피닐알킬, 아릴술포닐아미노 또는 아릴술폰아미노카르보닐 또는 상기 제시된 바와 같은 임의의 알킬 치환기로부터 선택된 1개 이상의 기로 치환될 수 있다.
본원에서 단독으로 또는 또 다른 기의 부분으로서 사용된 용어 "아릴알킬"은, 제한 없이, 아릴 치환기, 예컨대 벤질, 페네틸 또는 나프틸프로필을 갖는 상기 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭하며, 여기서 상기 아릴 및/또는 알킬 기는 임의로 상기 정의된 바와 같이 치환될 수 있다.
본원에서 단독으로 또는 또 다른 기의 일부로서 사용된 용어 ""알콕시", "아릴옥시", "헤테로아릴옥시", "아릴알킬옥시" 또는 "헤테로아릴알킬옥시"는, 제한 없이, 산소 원자를 통해 연결된 상기 정의된 바와 같은 알킬 또는 아릴 기를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로시클로", "헤테로사이클", "헤테로시클릴" 또는 "헤테로시클릭"은, 제한 없이, 포화 또는 불포화될 수 있고, 탄소 원자, 및 질소, 황, 산소 및/또는 SO 또는 SO2 기로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자로 이루어진, 비치환 또는 치환된 안정한 4-, 5-, 6-, 또는 7-원 모노시클릭 고리계를 나타내며, 여기서 질소 및 황 헤테로원자는 임의로 산화될 수 있고, 질소 헤테로원자는 임의로 4급화될 수 있다. 헤테로시클릭 고리는 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에 부착되어 안정한 구조를 생성할 수 있다. 이러한 헤테로시클릭 기의 예는 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로티오페닐 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 옥소피롤리디닐, 옥소피페라지닐, 옥소피페리디닐 및 옥사디아졸릴을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 임의로 헤테로시클로 기는 1개 이상의 관능기, 예컨대 "알킬" 또는 "아릴"에 대해 기재된 관능기로 치환될 수 있다.
본원에서 단독으로 또는 또 다른 기의 부분으로서 사용된 용어 "헤테로시클로알킬"은, 제한 없이, 헤테로시클로 치환기를 갖는 상기 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭하며, 여기서 상기 "헤테로시클로" 및/또는 알킬 기는 임의로 상기 정의된 바와 같이 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "헤테로아릴"은, 제한 없이, 질소, 황, 산소 및/또는 SO 또는 SO2 기로부터 선택된 1개 이상의 헤테로원자를 함유하는 5-, 6- 또는 7-원 방향족 헤테로시클릭 고리를 지칭한다. 이러한 고리는 또 다른 아릴 또는 헤테로아릴 고리에 융합될 수 있고, 가능한 N-옥시드를 포함하며; 이러한 헤테로아릴 고리의 예는 푸란, 피롤, 티오펜, 피리딘, 피리미딘, 피라진, 피리다진, 이속사졸, 옥사졸, 이미다졸 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 임의로 헤테로아릴 기는, "알킬" 또는 "아릴"에 대해 기재된 바와 같이, 이러한 쇄에 통상적으로 부착되는 1개 이상의 관능기로 치환될 수 있다.
본원에서 단독으로 또는 또 다른 기의 부분으로서 사용된 용어 "헤테로아릴알킬"은, 제한 없이, 헤테로아릴 치환기를 갖는 상기 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭하며, 여기서 상기 헤테로아릴 및/또는 알킬 기는 임의로 상기 정의된 바와 같이 치환될 수 있다.
PD-1/PD-L1 억제제의 "억제 농도"는 본 개시내용의 검정에서 스크리닝되는 화합물이 PD-1과 PD-L1의 상호작용을 측정가능한 백분율로 억제하는 농도를 의미하는 것으로 의도된다. "억제 농도" 값의 예는 IC50 내지 IC90의 범위이고, 바람직하게는, PD-1/PD-L1 결합 활성에서의 각각 50%, 60%, 70%, 80% 또는 90% 감소를 나타내는 IC50, IC60, IC70, IC80, 또는 IC90이다. 보다 바람직하게는, "억제 농도"는 IC50 값으로서 측정된다. IC50에 대한 또 다른 명칭은 반수-최대 억제 농도인 것으로 이해된다.
마크로시클릭 펩티드의 PD-L1에 대한 결합은, 예를 들어 균질 시간-분해 형광 (HTRF), 표면 플라즈몬 공명 (SPR), 등온 적정 열량측정 (ITC), 핵 자기 공명 분광분석법 (NMR) 등과 같은 방법에 의해 측정될 수 있다. 또한, 마크로시클릭 펩티드의 세포 표면 상에서 발현된 PD-L1에 대한 결합은 본원에 기재된 바와 같이 세포 결합 검정에서 측정될 수 있다.
본원에 기재된 치료제의 투여는, 제한 없이, 치료 유효량의 치료제의 투여를 포함한다. 본원에 사용된 용어 "치료 유효량"은, 제한 없이, 본원에 기재된 PD-1/PD-L1 결합 억제제의 조성물의 투여에 의해 치료가능한 상태를 치료 또는 예방하기 위한 치료제의 양을 지칭한다. 그러한 양은 검출가능한 치료 또는 예방 또는 개선 효과를 나타내는데 충분한 양이다. 효과는, 예를 들어 제한 없이, 본원에 열거된 상태의 치료 또는 예방을 포함할 수 있다. 대상체에 대한 정확한 유효량은 대상체의 크기 및 건강, 치료할 상태의 속성 및 정도, 치료 의사의 권고, 및 투여를 위해 선택된 치료제 또는 치료제의 조합물에 의존할 것이다. 따라서, 미리 정확한 유효량을 구체화하는 것은 유용하지 않다.
본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 HTRF 검정 뿐만 아니라 세포 결합 검정 둘 다에서 PD-L1에 대해 강력한 결합 활성을 나타낸다. 또한, 마크로시클릭 펩티드는 CMV 회상 및 HIV 엘리스팟 검정에서 생물학적 활성을 또한 나타내어, 암과 같은 과다증식성 장애 및 HIV를 비롯한 바이러스 적응증을 개선 및/또는 치료하는데 있어서 그의 유용성을 나타낸다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드를 사용하여 대상체에서 종양 세포의 성장을 억제하는 방법에 관한 것이다. 본원에 증명된 바와 같이, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 PD-L1에 결합할 수 있고, PD-L1 및 PD-1 사이의 상호작용을 교란시킬 수 있고, PD-1과의 상호작용을 차단하는 것으로 공지되어 있는 항-PD-1 모노클로날 항체와 PD-L1의 결합에 대해 경쟁할 수 있고, CMV-특이적 T 세포 IFNγ 분비를 증진시킬 수 있고, HIV-특이적 T 세포 IFNg 분비를 증진시킬 수 있다. 그 결과, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 면역 반응을 변형하거나, 암 또는 감염성 질환과 같은 질환을 치료하거나, 보호적 자가면역 반응을 자극하거나, 또는 항원-특이적 면역 반응을 자극하는데 (예를 들어, PD-L1 차단 펩티드와 관심 항원의 공투여에 의함) 유용하다.
본 개시내용을 보다 용이하게 이해할 수 있도록, 특정 용어를 먼저 정의한다. 추가의 정의는 상세한 설명 전반에 걸쳐 기재되어 있다.
용어 "프로그램화된 사멸 리간드 1", "프로그램화된 세포 사멸 리간드 1", "단백질 PD-L1", "PD-L1", "PDL1", "PDCDL1", "hPD-L1", "hPD-LI", "CD274" 및 "B7-H1"은 상호교환가능하게 사용되고, 인간 PD-L1의 변이체, 이소형, 종 상동체, 및 PD-L1과 적어도 하나의 공통 에피토프를 갖는 유사체를 포함한다. 완전한 PD-L1 서열은 진뱅크(GENBANK)® 수탁 번호 NP_054862 하에 찾아볼 수 있다.
용어 "프로그램화된 사멸 1", "프로그램화된 세포 사멸 1", "단백질 PD-1", "PD-1", "PD1", "PDCD1", "hPD-1" 및 "hPD-I"는 상호교환가능하게 사용되고, 인간 PD-1의 변이체, 이소형, 종 상동체, 및 PD-1과 적어도 하나의 공통 에피토프를 갖는 유사체를 포함한다. 완전한 PD-1 서열은 진뱅크® 수탁 번호 U64863 하에 찾아볼 수 있다.
용어 "세포독성 T 림프구-연관 항원-4", "CTLA-4", "CTLA4", "CTLA-4 항원" 및 "CD152" (예를 들어, 문헌 [Murata, Am. J. Pathol., 155:453-460 (1999)] 참조)는 상호교환가능하게 사용되고, 인간 CTLA-4의 변이체, 이소형, 종 상동체, 및 CTLA-4와 적어도 하나의 공통 에피토프를 갖는 유사체를 포함한다 (예를 들어, 문헌 [Balzano, Int. J. Cancer Suppl., 7:28-32 (1992)] 참조). 완전한 CTLA-4 핵산 서열은 진뱅크® 수탁 번호 L15006 하에 찾아볼 수 있다.
용어 "면역 반응"은 병원체가 침입한 인간 신체, 병원체에 감염된 세포 또는 조직, 암성 세포, 또는 자가면역 또는 병리학적 염증의 경우에 정상 인간 세포 또는 조직에 대한 선택적 손상, 그의 파괴 또는 그로부터의 제거를 야기하는, 예를 들어 림프구, 항원 제시 세포, 식세포, 과립구, 및 상기 세포 또는 간에 의해 생산되는 가용성 거대분자 (마크로시클릭 펩티드, 시토카인 및 보체 포함)의 작용을 지칭한다.
"신호 전달 경로"는 세포의 한 부분에서 세포의 또 다른 부분으로 신호를 전달하는 역할을 하는 다양한 신호 전달 분자 사이의 생화학적 관계를 지칭한다. 본원에 사용된 어구 "세포 표면 수용체"는 예를 들어 신호를 수용하고 이러한 신호를 세포의 형질 막을 가로질러 전달할 수 있는 분자 및 분자의 복합체를 포함한다. 본 개시내용의 "세포 표면 수용체"의 예는 PD-1 수용체이다.
용어 "마크로시클릭 펩티드 유도체"는 본원에 개시된 마크로시클릭 펩티드의 임의의 변형된 형태, 예를 들어 돌연변이, 이소형, 변경된 링커 백본을 갖는 펩티드, 항체 및/또는 또 다른 작용제와의 접합체 등을 지칭한다.
본원에 사용된 "인간 PD-L1에 특이적으로 결합하는" 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 인간 PD-L1에 약 200 nM 미만, 약 150 nM 미만, 약 100 nM 미만, 약 80 nM 미만, 약 60 nM 미만, 약 40 nM 미만, 약 20 nM 미만, 약 15 nM 미만, 약 10 nM 미만, 약 5 nM 미만, 약 1 nM 미만, 또는 그 미만의 IC50으로 결합하는 마크로시클릭 펩티드를 지칭하는 것으로 의도된다. 이와 관련하여, 용어 "약"은 언급된 양보다 ± 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 nM 초과 또는 미만 사이의 어느 것을 의미하는 것으로 해석되어야 한다.
용어 "치료" 또는 "요법"은 상태 (예를 들어, 질환), 상태의 증상을 치유, 해소, 완화, 경감, 변경, 해결, 호전, 개선시키거나 그에 영향을 미칠 목적으로, 또는 질환의 증상, 합병증, 생화학적 징후의 발병을 예방 또는 지연시킬 목적으로, 또는 질환, 상태, 또는 장애의 추가의 발생을 통계적으로 유의한 방식으로 달리 정지시키거나 억제할 목적으로 활성제를 투여하는 것을 지칭한다.
본원에 사용된 "유해 사례" (AE)는 의학적 치료의 사용과 연관된 임의의 불리하고 일반적으로 의도되지 않는, 심지어 바람직하지 않은, 징후 (비정상적 실험실 발견 포함), 증상 또는 질환이다. 예를 들어, 유해 사례는 치료에 반응하여 면역계의 활성화 또는 면역계 세포 (예를 들어, T 세포)의 확장과 연관될 수 있다. 의학적 치료는 하나 이상의 연관 AE를 가질 수 있고, 각각의 AE는 동일하거나 상이한 수준의 중증도를 가질 수 있다. "유해 사례를 변경"시킬 수 있는 방법에 대한 언급은 상이한 치료 요법의 사용과 연관된 하나 이상의 AE의 발생률 및/또는 중증도를 감소시키는 치료 요법을 의미한다.
본원에 사용된 "과다증식성 질환"은 세포 성장이 정상 수준을 초과하여 증가된 상태를 지칭한다. 예를 들어, 과다증식성 질환 또는 장애는 악성 질환 (예를 들어, 식도암, 결장암, 담도암) 및 비악성 질환 (예를 들어, 아테롬성동맥경화증, 양성 증식증 및 양성 전립선 비대)을 포함한다.
본원에 사용된 "약" 또는 "본질적으로 포함하는"은 통상의 기술자에 의한 결정 시, 특정한 값에 대해 허용되는 오차 범위 내를 의미하고, 이는 부분적으로 값이 어떻게 측정 또는 결정되는지에 따라, 즉 측정 시스템의 한계에 의존할 것이다. 예를 들어, "약" 또는 "본질적으로 포함하는"은 관련 기술분야에서의 실시마다 1 또는 1 초과의 표준 편차 내를 의미할 수 있다. 대안적으로, "약" 또는 "본질적으로 포함하는"은 20% 이하의 범위를 의미할 수 있다. 또한, 특히 생물학적 시스템 또는 공정과 관련하여, 상기 용어는 값의 한 자릿수 이하 또는 5-배 이하를 의미할 수 있다. 특정한 값이 본원 및 청구범위에 제공되는 경우에, 달리 언급되지 않는 한, "약" 또는 "본질적으로 포함하는"의 의미는 그러한 특정한 값에 대한 허용 오차 범위 내에 있는 것으로 추정되어야 한다.
본원에 기재된 임의의 농도 범위, 백분율 범위, 비 범위 또는 정수 범위는 달리 나타내지 않는 한, 언급된 범위 내의 임의의 정수 값, 및 적절한 경우에, 그의 분획 (예컨대 정수의 1/10 및 1/100)을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
경쟁 검정
본 개시내용은 또한 참조 항-PD-L1 항체 (MDX-1105)의 결합과 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 및 적어도 약 100% 경쟁할 수 있는 마크로시클릭 펩티드에 관한 것이다. 이러한 마크로시클릭 펩티드는, PD-L1에 특이적으로 결합하는 것을 단서로 돌연변이체, 보존적 치환, 기능적 치환, 및 결실 형태를 비롯하여, 본원에 개시된 1종 이상의 마크로시클릭 펩티드와 구조적 상동성을 공유할 수 있다. 예를 들어, 마크로시클릭 펩티드가 참조 항-PD-L1 항체와 동일한 영역의 PD-L1에 실질적으로 결합하는 경우에, 마크로시클릭 펩티드는 항-PD-L1 모노클로날 항체가 결합하는 PD-L1 에피토프와 적어도 중첩되는 PD-L1의 에피토프에 결합할 것이다. 중첩 영역은 1개의 아미노산 잔기에서 수백개의 아미노산 잔기의 범위일 수 있다. 마크로시클릭 펩티드는 이어서 항-PD-L1 모노클로날 항체의 PD-L1에 대한 결합과 경쟁하고/거나 그러한 결합을 차단하며, 그에 의해 항-PD-L1 모노클로날 항체의 PD-L1에 대한 결합을 경쟁 검정에서 바람직하게는 적어도 약 50%만큼 감소시킬 것이다. (도 9 참조).
경쟁 검정 목적을 위한 참조 항체로서 사용될 수 있는 항-PD-L1 항체는 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 하기 대표적인 항-PD-L1 항체를 사용할 수 있다: MDX-1105 (BMS); L01X-C (세로노(Serono)), L1X3 (세로노), MSB-0010718C (세로노), 및 PD-L1 프로바디 (사이톰X(CytomX)), 및 공동-소유 WO 2007/005874에 개시된 PD-L1 항체.
경쟁 검정 목적을 위한 참조 항체로서 사용될 수 있는 항-PD-1 항체는 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 하기 대표적인 항-PD-1 항체를 사용할 수 있다: 니볼루맙 (BMS); 공동-소유 미국 특허 번호 8,008,449 (BMS)에 각각 개시된 17D8, 2D3, 4H1, 4A11, 7D3 및 5F4, MK-3475 (머크(Merck), 미국 특허 번호 8,168,757에 개시됨), 및 미국 특허 번호 7,488,802에 개시된 항체.
변이체 마크로시클릭 펩티드
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드의 아미노산 서열과 상동성인 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 마크로시클릭 펩티드는 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드의 목적하는 기능적 및/또는 생물학적 특성을 보유한다.
예를 들어, 본 개시내용은 본원에 기재된 화합물로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 80% 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드 또는 그의 항원-결합 부분을 제공하며; 마크로시클릭 펩티드는 하기 특성 중 하나 이상을 나타낸다:
(a) 마크로시클릭 펩티드는 인간 PD-L1에 200 nM 이하의 IC50으로 결합함;
(b) 마크로시클릭 펩티드는 인간 CD28, CTLA-4 또는 ICOS에는 실질적으로 결합하지 않음;
(c) 마크로시클릭 펩티드는 CMV-특이적 T 세포 IFNγ 분비를 증가시킴;
(d) 마크로시클릭 펩티드는 HIV-특이적 T 세포 IFNγ 분비를 증가시킴;
(e) 마크로시클릭 펩티드는 인간 PD-1 및 하기: 시노몰구스 원숭이 PD-1; 우드척 PD-1 및/또는 마우스 PD-1 중 하나 이상에 결합함;
(f) 마크로시클릭 펩티드는 PD-L1 및/또는 PD-L2의 PD-1에 대한 결합을 억제함;
(g) 마크로시클릭 펩티드는 니볼루맙 (BMS-936558, MDX-1106)을 비롯한 항-PD-1 모노클로날 항체의 결합과 경쟁할 수 있음;
(h) 마크로시클릭 펩티드는 세포 검정 및/또는 생체내 검정에서 종양 세포 성장을 억제함; 및/또는
(i) 마크로시클릭 펩티드는 세포 검정 및/또는 생체내 검정에서 HIV를 억제함.
다른 실시양태에서, 마크로시클릭 펩티드 아미노산 서열은 상기 기재된 서열과 약 80%, 약 85%, 약 86%, 약 87%, 약 88%, 약 89%, 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 상동성일 수 있다. 이와 관련하여, 용어 "약"은 언급된 양보다 1, 2, 3, 4, 또는 5 퍼센트 초과 또는 미만 사이의 어느 것을 의미하는 것으로 해석될 것이다. 상기 기재된 서열에 대해 높은 동일성 (즉, 80% 이상)의 서열을 갖는 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 화학적 합성 동안 서열을 돌연변이시킨 다음, 예를 들어 본원에 기재된 기능적 검정을 사용하여 변경된 마크로시클릭 펩티드를 보유 기능 (즉, 상기 (a) 내지 (i)에 기재된 기능)에 대해 시험함으로써 수득할 수 있다. 변이체 마크로시클릭 펩티드 아미노산 서열의 생물학적 및/또는 기능적 활성은 변이체가 기반으로 하는 참조 마크로시클릭 펩티드보다 적어도 약 1x, 2x, 3x, 4x, 5x, 6x,7x, 8x, 9x, 또는 10x 초과일 수 있다. 이와 관련하여, 용어 "약"은 언급된 양보다 0.1x, 0.2x, 0.3x, 0.4x, 0.5x, 0.6x, 0.7x, 0.8x, 또는 0.9x 초과 또는 미만 사이의 어느 것을 의미하는 것으로 해석될 것이다.
본원에 사용된 2개의 아미노산 서열 사이의 퍼센트 상동성은 2개의 서열 사이의 퍼센트 동일성과 동등하다. 2개의 서열 사이의 퍼센트 동일성은 2개의 서열의 최적 정렬을 위해 도입될 필요가 있는 갭의 수 및 각각의 갭의 길이를 고려한, 서열이 공유하는 동일한 위치의 수에 관한 함수이다 (즉, % 상동성 = 동일한 위치의 # / 위치의 총 # x 100). 2개의 서열 사이의 서열 비교 및 퍼센트 동일성의 결정은 하기 비제한적 예에서 기재된 바와 같이 수학적 알고리즘을 사용하여 달성될 수 있다.
2개의 아미노산 서열 사이의 퍼센트 동일성은 ALIGN 프로그램 (버전 2.0)에 통합된 문헌 [Meyers E. et al., (Comput. Appl. Biosci., 4:11-17 (1988))]의 알고리즘을 사용하여 PAM120 가중치 잔기표, 갭 길이 패널티 12 및 갭 패널티 4를 사용하여 결정될 수 있다. 또한, 2개의 아미노산 서열 사이의 퍼센트 동일성은 GCG® 소프트웨어 패키지 (www.gcg.com에서 이용가능) 내 GAP 프로그램에 통합된 문헌 [Needleman et al. (J. Mol. Biol., 48:444-453 (1970))] 알고리즘을 사용하여 블로섬(Blossum) 62 매트릭스 또는 PAM250 매트릭스, 및 갭 가중치 16, 14, 12, 10, 8, 6, 또는 4, 및 길이 가중치 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6을 사용하여 결정될 수 있다.
보존적 변형을 갖는 마크로시클릭 펩티드
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드의 아미노산 서열과 상동성인 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 마크로시클릭 펩티드는 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드의 목적하는 기능적 및/또는 생물학적 특성을 보유한다.
예를 들어, 본 개시내용은 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 마크로시클릭 펩티드 또는 그의 항원-결합 부분을 제공하며, 여기서 하나 이상의 아미노산은 보존적 아미노산으로 치환되고; 마크로시클릭 펩티드는 하기 특성 중 하나 이상을 나타낸다:
(a) 마크로시클릭 펩티드는 인간 PD-L1에 200 nM 이하의 IC50으로 결합함;
(b) 마크로시클릭 펩티드는 인간 CD28, CTLA-4 또는 ICOS에는 실질적으로 결합하지 않음;
(c) 마크로시클릭 펩티드는 CMV-특이적 T 세포 IFNγ 분비를 증가시킴;
(d) 마크로시클릭 펩티드는 HIV-특이적 T 세포 IFNγ 분비를 증가시킴;
(e) 마크로시클릭 펩티드는 인간 PD-L1 및 하기: 시노몰구스 원숭이 PD-L1; 우드척 PD-L1 및/또는 마우스 PD-L1 중 하나 이상에 결합함;
(f) 마크로시클릭 펩티드는 PD-L1 및/또는 PD-L2의 PD-1에 대한 결합을 억제함;
(g) 마크로시클릭 펩티드는 니볼루맙 (BMS-936558, MDX-1106)을 비롯한 항-PD-1 모노클로날 항체의 결합과 경쟁할 수 있음;
(h) 마크로시클릭 펩티드는 세포 검정 및/또는 생체내 검정에서 종양 세포 성장을 억제함; 및/또는
(i) 마크로시클릭 펩티드는 세포 검정 및/또는 생체내 검정에서 HIV를 억제함.
본원에 사용된 용어 "보존적 서열 변형"은 아미노산 서열을 함유하는 마크로시클릭 펩티드의 결합 특성에 유의하게 영향을 미치거나 변경시키지 않는 아미노산 변형을 지칭하는 것으로 의도된다. 이러한 보존적 변형은 아미노산 치환, 부가 및 결실을 포함한다. 변형은 관련 기술분야에 공지된 표준 기술에 의해, 예컨대 화학적 합성 동안 펩티드 아미다이트의 치환, 부위-지정 돌연변이유발 및 PCR-매개 돌연변이유발에 의해 본 개시내용의 항체에 도입될 수 있다. 보존적 아미노산 치환은 아미노산 잔기가 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체되는 것이다. 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 패밀리는 관련 기술분야에 정의되어 있다. 이들 패밀리는 염기성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 리신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 아스파르트산, 글루탐산), 비하전 극성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인, 트립토판), 비극성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌), 베타-분지형 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 트레오닌, 발린, 이소류신), 및 방향족 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)을 포함한다. 따라서, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드의 항원 결합 영역 내의 1개 이상의 아미노산 잔기가 동일한 측쇄 패밀리로부터의 다른 아미노산 잔기로 대체될 수 있고, 변경된 항체는 본원에 기재된 기능적 검정을 사용하여 보유 기능 (즉, 상기 (a) 내지 (i)에 기재된 기능)에 대해 시험될 수 있다. 보존적 아미노산 치환은 또한 본원에 개시된 하나 이상의 비자연 발생 아미노산으로부터 선택될 수 있다.
제약 조성물
본 개시내용은 추가로, 서열이 C-말단 및/또는 N-말단으로부터 하나 이상의 아미노산 결실을 포함하는 것인 본원에 기재된 폴리펩티드에 관한 것이다.
바람직한 실시양태에서, 하기 N-말단 화합물 번호 99 결실 폴리펩티드: 화합물 번호 99의 X1-X13, X2-X13, X3-X13, X4-X13, X5-X13, X6-X13, X7-X13, X8-X13, X9-X13, X10-X13, X11-X13, 및/또는 X12-X13은 본 개시내용에 포괄되며, 여기서 각각의 X는 본원에 약술된 바와 같은 각각의 펩티드에 대해 표시된 위치에서의 아미노산을 나타낸다. 본 개시내용은 또한 본원의 다른 곳에 기재된 연결 화학을 사용한 이들 결실 돌연변이체의 시클릭 형태를 포괄한다.
바람직한 실시양태에서, 하기 C-말단 화합물 번호 99 결실 폴리펩티드: 화합물 번호 99의 X1-X13, X1-X12, X1-X11, X1-X10, X1-X9, X1-X8, X1-X7, X1-X6, X1-X5, X1-X4 및/또는 X1-X3은 본 개시내용에 포괄되며, 여기서 각각의 X는 본원에 약술된 바와 같은 각각의 펩티드에 대해 표시된 위치에서의 아미노산을 나타낸다. 본 개시내용은 또한 본원의 다른 곳에 기재된 연결 화학을 사용한 이들 결실 돌연변이체의 시클릭 형태를 포괄한다.
바람직한 실시양태에서, 하기 N-말단 화합물 번호 1 결실 폴리펩티드: 화합물 번호 1의 X1-X15, X2-X15, X3-X15, X4-X15, X5-X15, X6-X15, X7-X15, X8-X15, X9-X15, X10-X15, X11-X15, 및/또는 X12-X15는 본 개시내용에 포괄되며, 여기서 각각의 X는 본원에 약술된 바와 같은 각각의 펩티드에 대해 표시된 위치에서의 아미노산을 나타낸다. 본 개시내용은 또한 본원의 다른 곳에 기재된 연결 화학을 사용한 이들 결실 돌연변이체의 시클릭 형태를 포괄한다.
바람직한 실시양태에서, 하기 C-말단 화합물 번호 1 결실 폴리펩티드: 화합물 번호 1의 X1-X15, X1-X14, X1-X13, X1-X12, X1-X11, X1-X10, X1-X9, X1-X8, X1-X7, X1-X6, X1-X5, X1-X4 및/또는 X1-X3은 본 개시내용에 포괄되며, 여기서 각각의 X는 본원에 약술된 바와 같은 각각의 펩티드에 대해 표시된 위치에서의 아미노산을 나타낸다. 본 개시내용은 또한 본원의 다른 곳에 기재된 연결 화학을 사용한 이들 결실 돌연변이체의 시클릭 형태를 포괄한다.
바람직한 실시양태에서, 하기 N-말단 화합물 번호 71 결실 폴리펩티드: 화합물 번호 71의 X1-X14, X2-X14, X3-X14, X4-X14, X5-X14, X6-X14, X7-X14, X8-X14, X9-X14, X10-X14, X11-X14, 및/또는 X12-X14는 본 개시내용에 포괄되며, 여기서 각각의 X는 본원에 약술된 바와 같은 각각의 펩티드에 대해 표시된 위치에서의 아미노산을 나타낸다. 본 개시내용은 또한 본원의 다른 곳에 기재된 연결 화학을 사용한 이들 결실 돌연변이체의 시클릭 형태를 포괄한다.
바람직한 실시양태에서, 하기 C-말단 화합물 번호 71 결실 폴리펩티드: 화합물 번호 71의 X1-X14, X1-X13, X1-X12, X1-X11, X1-X10, X1-X9, X1-X8, X1-X7, X1-X6, X1-X5, X1-X4 및/또는 X1-X3은 본 개시내용에 포괄되며, 여기서 각각의 X는 본원에 약술된 바와 같은 각각의 펩티드에 대해 표시된 위치에서의 아미노산을 나타낸다. 본 개시내용은 또한 본원의 다른 곳에 기재된 연결 화학을 사용한 이들 결실 돌연변이체의 시클릭 형태를 포괄한다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 제약상 허용되는 담체와 함께 제제화된, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드 또는 그의 항원-결합 부분(들) 중 하나 또는 그의 조합을 함유하는 조성물, 예를 들어 제약 조성물을 제공한다. 이러한 조성물은 본 개시내용의 (예를 들어, 2종 이상의 상이한) 마크로시클릭 펩티드, 또는 면역접합체 또는 이중특이적 분자 중 하나 또는 그의 조합을 포함할 수 있다. 예를 들어, 본 개시내용의 제약 조성물은 표적 항원 상의 상이한 에피토프에 결합하거나 또는 보체 활성을 갖는 마크로시클릭 펩티드 (또는 면역접합체 또는 이중특이체)의 조합을 포함할 수 있다.
본 개시내용의 제약 조성물은 또한 조합 요법으로, 즉 다른 작용제와 조합되어 투여될 수 있다. 예를 들어, 조합 요법은 적어도 1종의 다른 항염증 또는 면역억제제와 조합된 마크로시클릭 펩티드를 포함할 수 있다. 조합 요법에 사용될 수 있는 치료제의 예는 하기 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드의 사용에 대한 섹션에서 보다 상세하게 기재되어 있다.
본원에 사용된 "제약상 허용되는 담체"는 생리학상 상용성인 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅제, 항박테리아제 및 항진균제, 등장화제 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 바람직하게는, 담체는 정맥내, 근육내, 피하, 비경구, 척수 또는 표피 투여 (예를 들어, 주사 또는 주입에 의함)에 적합하다. 투여 경로에 의존하여, 활성 화합물, 즉 마크로시클릭 펩티드, 면역접합체, 또는 이중특이적 분자는 화합물을 불활성화시킬 수 있는 산 및 다른 천연 조건의 작용으로부터 화합물을 보호하는 물질로 코팅될 수 있다.
본 개시내용의 제약 화합물은 하나 이상의 제약상 허용되는 염을 포함할 수 있다. "제약상 허용되는 염"은 모 화합물의 목적하는 생물학적 활성을 보유하고 임의의 목적하지 않는 독성학적 효과는 제공하지 않는 염을 지칭한다 (예를 들어, 문헌 [Berge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977)] 참조). 이러한 염의 예는 산 부가염 및 염기 부가염을 포함한다. 산 부가염은 비독성 무기 산, 예컨대 염산, 질산, 인산, 황산, 브로민화수소산, 아이오딘화수소산, 아인산 등으로부터 유래된 것 뿐만 아니라 비독성 유기 산, 예컨대 지방족 모노- 및 디카르복실산, 페닐-치환된 알칸산, 히드록시 알칸산, 방향족 산, 지방족 및 방향족 술폰산 등으로부터 유래된 것을 포함한다. 염기 부가염은 알칼리 토금속, 예컨대 나트륨, 칼륨, 마그네슘, 칼슘 등으로부터 유래된 것 뿐만 아니라 비독성 유기 아민, 예컨대 N,N'-디벤질에틸렌디아민, N-메틸글루카민, 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 프로카인 등으로부터 유래된 것을 포함한다.
본 개시내용의 제약 조성물은 또한 제약상 허용되는 항산화제를 포함할 수 있다. 제약상 허용되는 항산화제의 예는 (1) 수용성 항산화제, 예컨대 아스코르브산, 시스테인 히드로클로라이드, 중황산나트륨, 메타중아황산나트륨, 아황산나트륨 등; (2) 유용성 항산화제, 예컨대 아스코르빌 팔미테이트, 부틸화 히드록시아니솔 (BHA), 부틸화 히드록시톨루엔 (BHT), 레시틴, 프로필 갈레이트, 알파-토코페롤 등; 및 (3) 금속 킬레이트화제, 예컨대 시트르산, 에틸렌디아민 테트라아세트산 (EDTA), 소르비톨, 타르타르산, 인산 등을 포함한다.
본 개시내용의 제약 조성물에 사용될 수 있는 적합한 수성 및 비수성 담체의 예는 물, 에탄올, 폴리올 (예컨대 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 등), 및 그의 적합한 혼합물, 식물성 오일, 예컨대 올리브 오일, 및 주사가능한 유기 에스테르, 예컨대 에틸 올레에이트를 포함한다. 적절한 유동성은, 예를 들어 코팅 물질, 예컨대 레시틴의 사용에 의해, 분산액의 경우에는 요구되는 입자 크기의 유지에 의해, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.
이들 조성물은 또한 아주반트, 예컨대 보존제, 습윤제, 유화제 및 분산제를 함유할 수 있다. 미생물 존재의 방지는 상기 문헌의 멸균 절차, 및 다양한 항박테리아제 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀 소르브산 등의 포함 둘 다에 의해 보장될 수 있다. 등장화제, 예컨대 당, 염화나트륨 등을 조성물에 포함시키는 것이 또한 바람직할 수 있다. 또한, 주사가능한 제약 형태의 지속 흡수는 흡수를 지연시키는 작용제, 예컨대 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴을 포함시키는 것에 의해 이루어질 수 있다.
제약상 허용되는 담체는 멸균 주사가능한 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 수용액 또는 분산액 및 멸균 분말을 포함한다. 제약 활성 물질을 위한 이러한 매질 및 작용제의 용도는 관련 기술분야에 공지되어 있다. 임의의 통상의 매질 또는 작용제가 활성 화합물과 비상용성이 아닌 한, 본 개시내용의 제약 조성물에서의 그의 용도가 고려된다. 보충 활성 화합물이 또한 조성물에 혼입될 수 있다.
치료 조성물은 전형적으로 멸균되고 제조 및 저장 조건 하에 안정해야 한다. 조성물은 용액, 마이크로에멀젼, 리포솜, 또는 높은 약물 농도에 적합한 다른 정렬된 구조로서 제제화될 수 있다. 담체는, 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 및 그의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유동성은, 예를 들어 코팅제, 예컨대 레시틴의 사용에 의해, 분산액의 경우에는 요구되는 입자 크기의 유지에 의해, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다. 대부분의 경우에 등장화제, 예를 들어 당, 폴리알콜, 예컨대 만니톨, 소르비톨, 또는 염화나트륨을 조성물 내에 포함시키는 것이 바람직할 것이다. 주사가능한 조성물의 지속 흡수는 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 조성물에 포함시킴으로써 이루어질 수 있다.
멸균 주사가능한 용액은 필요량의 활성 화합물을 상기 열거된 성분 중 하나 또는 그의 조합과 함께 적절한 용매 중에 혼입시킨 후에, 필요에 따라 멸균 마이크로여과하여 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산액은 활성 화합물을 기본 분산 매질 및 상기 열거된 것으로부터의 필요한 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클 내에 혼입시켜 제조한다. 멸균 주사가능한 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에 바람직한 제조 방법은 진공 건조 및 냉동-건조 (동결건조)로, 이는 활성 성분 플러스 이전에 멸균-여과된 그의 용액으로부터의 임의의 추가의 목적하는 성분의 분말을 생성한다.
단일 투여 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료될 대상체, 및 특정한 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 단일 투여 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 일반적으로 치료 효과를 나타내는 조성물의 양일 것이다. 일반적으로, 100 퍼센트 중에서, 이러한 양은 제약상 허용되는 담체와 조합된 활성 성분의 약 0.01 퍼센트 내지 약 99 퍼센트, 바람직하게는 활성 성분의 약 0.1 퍼센트 내지 약 70 퍼센트, 가장 바람직하게는 약 1 퍼센트 내지 약 30 퍼센트의 범위일 것이다.
투여 요법은 최적의 목적하는 반응 (예를 들어, 치료 반응)을 제공하도록 조정된다. 예를 들어, 단일 볼루스가 투여될 수 있거나, 여러 분할 용량이 시간의 경과에 따라 투여될 수 있거나, 또는 치료 상황의 위급성에 의해 지시되는 바와 같이 용량이 비례적으로 감소되거나 또는 증가될 수 있다. 비경구 조성물은 투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 투여 단위 형태로 제제화하는 것이 특히 유리하다. 본원에 사용된 바와 같은 투여 단위 형태는 치료할 대상체에 대한 단위 투여량으로서 적합화된 물리적 이산 단위를 지칭하고; 각각의 단위는 필요한 제약 담체와 함께 목적하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 미리 결정된 양의 활성 화합물을 함유한다. 본 개시내용의 투여 단위 형태에 대한 세부사항은 (a) 활성 화합물의 고유 특성 및 달성하고자 하는 특정한 치료 효과, 및 (b) 개체에서의 감수성 처리를 위한 이러한 활성 화합물을 배합하는 관련 기술분야에서의 내재적 제한에 의해 영향을 받으며 그에 직접적으로 의존한다.
마크로시클릭 펩티드의 투여의 경우에, 투여량은 약 0.0001 내지 100 mg/kg, 및 보다 통상적으로 0.01 내지 5 mg/kg 숙주 체중의 범위이다. 예를 들어, 투여량은 0.3 mg/kg 체중, 1 mg/kg 체중, 3 mg/kg 체중, 5 mg/kg 체중 또는 10 mg/kg 체중 또는 1-10 mg/kg의 범위 내일 수 있다. 예시적인 치료 요법은 1일에 1회, 1주에 2회, 1주에 3회, 매주, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 1개월 1회, 3개월마다 1회, 또는 3 내지 6개월마다 1회 투여를 수반한다. 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드에 대한 바람직한 투여 요법은 정맥내 투여를 통한 1 mg/kg 체중 또는 3 mg/kg 체중을 포함하며, 항체는 하기 투여 스케줄 중 하나를 사용하여 주어진다: (i) 6회의 투여량 동안 4주마다, 이어서 3개월마다; (ii) 3주마다; (iii) 3 mg/kg 체중으로 1회에 이어서 1 mg/kg 체중으로 3주마다.
일부 방법에서, 상이한 결합 특이성을 갖는 2종 이상의 마크로시클릭 펩티드가 동시에 투여되고, 이러한 경우에 투여되는 각각의 화합물의 투여량은 지시된 범위 내에 속한다. 화합물은 통상적으로 여러 번 투여된다. 단일 투여량 사이의 간격은, 예를 들어 매주, 매월, 3개월마다 또는 매년일 수 있다. 또한, 환자에서 표적 항원에 대한 마크로시클릭 펩티드의 혈액 수준을 측정함으로써 지시되는 바와 같이 간격이 불규칙적일 수 있다. 일부 방법에서 투여량은 약 1-1000 .mu.g/ml, 일부 방법에서는 약 25-300 .mu.g/ml의 혈장 항체 농도가 달성되도록 조정된다.
대안적으로, 덜 빈번한 투여가 요구되는 경우에 마크로시클릭 펩티드는 지속 방출 제제로서 투여될 수 있다. 투여량 및 빈도는 환자에서의 마크로시클릭 펩티드의 반감기에 따라 달라진다. 투여량 및 투여 빈도는 치료가 예방적인지 또는 치료적인지에 따라 달라질 수 있다. 예방적 적용에서, 상대적으로 낮은 투여량이 상대적으로 덜 빈번한 간격으로 장기간에 걸쳐 투여된다. 일부 환자는 그의 여생 동안 계속 치료를 받는다. 치료적 적용에서, 질환의 진행이 감소되거나 종결될 때까지, 바람직하게는 환자가 질환 증상의 부분적 또는 완전한 개선을 나타낼 때까지 상대적으로 짧은 간격으로의 상대적으로 높은 투여량이 때때로 요구된다. 그 후, 환자에게 예방 요법이 투여될 수 있다.
본 개시내용의 제약 조성물 중 활성 성분의 실제 투여량 수준은 환자에게 독성이지 않으면서, 특정한 환자, 조성물 및 투여 방식에 대해 목적하는 치료 반응을 달성하는데 효과적인 활성 성분의 양을 수득하도록 달라질 수 있다. 선택된 투여량 수준은 사용된 본 개시내용의 특정한 조성물, 또는 그의 에스테르, 염 또는 아미드의 활성, 투여 경로, 투여 시간, 사용되는 특정한 화합물의 배출 속도, 치료의 지속기간, 사용된 특정한 조성물과 조합되어 사용되는 다른 약물, 화합물 및/또는 물질, 치료되는 환자의 연령, 성별, 체중, 상태, 전반적 건강 및 이전 병력, 및 의학 분야에 널리 공지되어 있는 기타 인자를 비롯한 다양한 약동학적 인자에 의존할 것이다.
본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드의 "치료 유효 투여량"은 바람직하게는 질환 증상 중증도의 감소, 질환 증상이 없는 기간의 빈도 및 지속기간의 증가, 또는 질환 고통으로 인한 장애 또는 불능의 예방을 생성한다. 예를 들어, 종양의 치료를 위해, "치료 유효 투여량"은 바람직하게는 비치료 대상체에 비해 세포 성장 또는 종양 성장을 적어도 약 20%, 보다 바람직하게는 적어도 약 40%, 보다 더 바람직하게는 적어도 약 60%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 약 80% 억제한다. 종양 성장 및/또는 HIV를 억제하는 화합물의 능력은 인간 종양에서의 효능 또는 바이러스 효능을 예측하는 동물 모델 시스템에서 평가될 수 있다. 대안적으로, 조성물의 이러한 특성은 숙련된 진료의에게 공지된 검정에 의해 시험관내에서 이러한 억제를 억제하는 화합물의 능력을 검사함으로써 평가될 수 있다. 치료 화합물의 치료 유효량은 대상체에서 종양 크기를 감소시키거나, 바이러스 로드를 감소시키거나, 또는 달리 증상을 개선시킬 수 있다. 통상의 기술자는 대상체의 크기, 대상체의 증상의 중증도, 및 선택된 특정한 조성물 또는 투여 경로와 같은 인자에 기초하여 이러한 양을 결정할 수 있을 것이다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 바와 같은 마크로시클릭 펩티드 및 항-CTLA-4 항체를 포함하는 부분들의 제약 키트를 제공한다. 키트는 또한 과다증식성 질환 (예컨대 본원에 기재된 바와 같은 암) 및/또는 항바이러스 질환의 치료에 사용하기 위한 지침을 추가로 포함할 수 있다.
본 개시내용의 조성물은 관련 기술분야에 공지된 다양한 방법 중 하나 이상을 사용하여 하나 이상의 투여 경로를 통해 투여될 수 있다. 통상의 기술자가 인식할 바와 같이, 투여 경로 및/또는 방식은 목적하는 결과에 따라 달라질 것이다. 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드에 대한 바람직한 투여 경로는 정맥내, 근육내, 피내, 복강내, 피하, 척수 또는 다른 비경구 투여 경로, 예를 들어 주사 또는 주입에 의하는 것을 포함한다. 본원에 사용된 어구 "비경구 투여"는 통상적으로 주사에 의한, 경장 및 국소 투여 이외의 투여 방식을 의미하고, 제한 없이, 정맥내, 근육내, 동맥내, 척수강내, 피막내, 안와내, 심장내, 피내, 복강내, 경기관, 피하, 표피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내, 경막외 및 흉골내 주사 및 주입을 포함한다.
대안적으로, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 비-비경구 경로, 예컨대 국소, 표피 또는 점막 투여 경로를 통해, 예를 들어 비강내로, 경구로, 질로, 직장으로, 설하로 또는 국소로 투여될 수 있다.
활성 화합물은 이식물, 경피 패치, 및 마이크로캡슐화 전달 시스템을 비롯하여 제어 방출 제제와 같은, 신속 방출에 대해 화합물을 보호할 담체와 함께 제조될 수 있다. 생분해성, 생체적합성 중합체, 예컨대 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 이러한 제제의 제조를 위한 많은 방법이 특허를 받았거나 또는 일반적으로 통상의 기술자에게 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Robinson, J.R., ed., Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, Marcel Dekker, Inc., New York (1978)]을 참조한다.
치료 조성물은 관련 기술분야에 공지된 의료 장치로 투여될 수 있다. 예를 들어, 바람직한 실시양태에서, 본 개시내용의 치료 조성물은 무바늘 피하 주사 장치, 예컨대 미국 특허 번호 5,399,163, 5,383,851, 5,312,335, 5,064,413, 4,941,880, 4,790,824, 또는 4,596,556에 개시된 장치에 의해 투여될 수 있다. 본 개시내용에 유용한 널리 공지된 이식물 및 모듈의 예는 하기를 포함한다: 의약을 제어된 속도로 분배하기 위한 이식가능한 미세주입 펌프를 개시하는 미국 특허 번호 4,487,603; 피부를 통해 의약을 투여하기 위한 치료 장치를 개시하는 미국 특허 번호 4,486,194; 정확한 주입 속도로 의약을 전달하기 위한 의약 주입 펌프를 개시하는 미국 특허 번호 4,447,233; 연속 약물 전달을 위한 가변 유동 이식가능한 주입 장치를 개시하는 미국 특허 번호 4,447,224; 다중-챔버 구획을 갖는 삼투성 약물 전달 시스템을 개시하는 미국 특허 번호 4,439,196; 및 삼투성 약물 전달 시스템을 개시하는 미국 특허 번호 4,475,196. 이들 특허는 본원에 참조로 포함된다. 많은 다른 이러한 이식물, 전달 시스템 및 모듈이 통상의 기술자에게 공지되어 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 생체내 적절한 분포를 보장하도록 제제화될 수 있다. 예를 들어, 혈액-뇌 장벽 (BBB)은 많은 고도로 친수성인 화합물을 배제시킨다. 본 개시내용의 치료 화합물이 (원하는 경우에) BBB를 횡단하도록 보장하기 위해, 이를 예를 들어 리포솜 내에 제제화할 수 있다. 리포솜을 제조하는 방법에 대해서는, 예를 들어 미국 특허 번호 4,522,811, 5,374,548, 및 5,399,331을 참조한다. 리포솜은 특정 세포 또는 기관 내로 선택적으로 수송되어 표적화 약물 전달을 증진시키는 하나 이상의 모이어티를 포함할 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Ranade, V.V., J. Clin. Pharmacol., 29:685 (1989)] 참조). 예시적인 표적화 모이어티는 폴레이트 또는 비오틴 (예를 들어, 로우(Low) 등의 미국 특허 번호 5,416,016 참조); 만노시드 (Umezawa et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 153:1038 (1988)); 마크로시클릭 펩티드 (Bloeman, P.G. et al., FEBS Lett., 357:140 (1995); Owais, M. et al., Antimicrob. Agents Chemother., 39:180 (1995)); 계면활성제 단백질 A 수용체 (Briscoe et al., Am. J. Physiol., 1233:134 (1995)); p120 (Schreier et al., J. Biol. Chem., 269:9090 (1994))을 포함하고; 또한 [Keinanen, K. et al., FEBS Lett., 346:123 (1994); Killion, J.J. et al., Immunomethods 4:273 (1994)]을 참조한다.
본 개시내용의 용도 및 방법
본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드, 조성물 및 방법은, 예를 들어 PD-L1의 검출, 또는 PD-L1의 차단에 의한 면역 반응의 증진을 수반하는 수많은 시험관내 및 생체내 유용성을 갖는다. 예를 들어, 이들 분자는 배양물 중, 시험관내 또는 생체외 세포, 또는 인간 대상체, 예를 들어 생체내 투여되어 다양한 상황에서 면역을 증진시킬 수 있다. 따라서, 한 측면에서, 본 개시내용은 대상체에서 면역 반응이 변형되도록 대상체에게 본 개시내용의 항체, 또는 그의 항원-결합 부분을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 면역 반응을 변형시키는 방법을 제공한다. 바람직하게는, 반응은 증진되거나, 자극되거나, 또는 상향조절된다. 다른 측면에서, 마크로시클릭 펩티드는 항-시노, 항-마우스, 및/또는 항-우드척 결합 및 치료 활성을 가질 수 있다.
본원에 사용된 용어 "대상체"는 인간 및 비-인간 동물을 포함하는 것으로 의도된다. 비-인간 동물은 모든 척추동물, 예를 들어 포유동물 및 비-포유동물, 예컨대 비-인간 영장류, 양, 개, 고양이, 소, 말, 닭, 우드척, 양서류 및 파충류를 포함하지만, 포유동물, 예컨대 비-인간 영장류, 양, 개, 고양이, 소 및 말이 바람직하다. 바람직한 대상체는 면역 반응의 증진을 필요로 하는 인간 환자를 포함한다. 상기 방법은 T-세포 매개 면역 반응을 증대시킴으로써 치료할 수 있는 장애를 갖는 인간 환자를 치료하는 데 특히 적합하다. 특정한 실시양태에서, 상기 방법은 생체내 암 세포의 치료에 특히 적합하다. 면역의 항원-특이적 증진을 달성하기 위해, 마크로시클릭 펩티드는 관심 항원과 함께 투여될 수 있다. PD-L1에 대한 마크로시클릭 펩티드를 다른 작용제와 함께 투여하는 경우에, 2가지는 어느 하나의 순서로 또는 동시에 투여될 수 있다.
본 개시내용은 추가로, 샘플 및 대조 샘플을 인간, 우드척, 시노 및/또는 마우스 PD-L1에 특이적으로 결합하는 참조 모노클로날 항체 또는 그의 항원-결합 부분과, 항체 또는 그의 단편과 인간, 우드척, 시노 및/또는 마우스 PD-L1 사이에 복합체의 형성을 허용하는 조건 하에 접촉시키는 것을 포함하는, 샘플에서 인간, 우드척, 시노 및/또는 마우스 PD-L1 항원의 존재를 검출하거나 또는 인간, 우드척, 시노 및/또는 마우스 PD-L1 항원의 양을 측정하는 방법을 제공한다. 이어서, 복합체의 형성이 검출되고, 여기서 대조 샘플과 비교하여 샘플 사이에 복합체 형성의 차이는 샘플 내 인간, 우드척, 시노 및/또는 마우스 PD-L1 항원의 존재를 나타낸다.
CD28, ICOS 및 CTLA-4와 비교하여 PD-L1에 대한 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드의 특이적 결합을 고려하면, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 세포의 표면 상의 PD-L1 발현을 특이적으로 검출하는데 사용될 수 있고, 또한 면역친화성 정제를 통해 PD-L1을 정제하는데 사용될 수 있다.
암
마크로시클릭 펩티드에 의한 PD-1의 차단은 환자에서 암성 세포에 대한 면역 반응을 증진시킬 수 있다. PD-1에 대한 리간드인 PD-L1은 정상 인간 세포에서는 발현되지 않지만, 다양한 인간 암에서 풍부하다 (Dong et al., Nat. Med., 8:787-789 (2002)). PD-1 및 PD-L1 사이의 상호작용은 종양 침윤 림프구에서의 감소, T-세포 수용체 매개 증식에서의 감소, 및 암성 세포에 의한 면역 회피를 초래한다 (Dong et al., J. Mol. Med., 81:281-287 (2003); Blank et al., Cancer Immunol. Immunother., 54:307-314 (2005); Konishi et al., Clin. Cancer Res., 10:5094-5100 (2004)). PD-L1에 대한 PD-1의 국부 상호작용을 억제함으로써 면역 억제가 역전될 수 있고, 이러한 효과는 PD-L2에 대한 PD-1의 상호작용이 또한 차단되는 경우에 부가적이다 (Iwai et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 99:12293-12297 (2002); Brown et al., J. Immunol., 170:1257-1266 (2003)). 이전 연구는 T-세포 증식이 PD-L1에 대한 PD-1의 상호작용을 억제함으로써 회복될 수 있음을 제시하였지만, PD-1/PD-L1 상호작용을 차단하는 것에 의한 생체내 암 종양 성장에 대한 직접적인 효과에 대한 보고서는 존재하지 않았다. 한 측면에서, 본 개시내용은 암성 종양의 성장이 억제되도록, 마크로시클릭 펩티드를 사용한 대상체의 생체내 치료에 관한 것이다. 마크로시클릭 펩티드는 암성 종양의 성장을 억제하기 위해 단독으로 사용될 수 있다. 대안적으로, 마크로시클릭 펩티드는 하기 기재되는 바와 같이 다른 면역원성 작용제, 표준 암 치료, 또는 다른 마크로시클릭 펩티드와 함께 사용될 수 있다.
따라서, 한 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에게 치료 유효량의 마크로시클릭 펩티드 또는 그의 항원-결합 부분을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 세포의 성장을 억제하는 방법을 제공한다.
그의 성장이 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드를 사용하여 억제될 수 있는 바람직한 암은 전형적으로 면역요법에 반응성인 암을 포함한다. 치료를 위해 바람직한 암의 비제한적 예는 흑색종 (예를 들어, 전이성 악성 흑색종), 신세포 암종 (예를 들어, 투명 세포 암종), 전립선암 (예를 들어, 호르몬 불응성 전립선 선암종 및 거세-저항성 전립선암), 유방암, 결장직장암 및 폐암 (예를 들어, 편평 및 비-편평 비소세포 폐암)을 포함한다. 추가로, 본 개시내용은 그의 성장이 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드를 사용하여 억제될 수 있는 불응성 또는 재발성 악성종양을 포함한다.
본 개시내용의 방법을 사용하여 치료될 수 있는 다른 암의 예는 골암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부 또는 안내 악성 흑색종, 자궁암, 난소암, 결장암, 직장암, 항문부암, 위/위장암, 고환암, 자궁암, 난관 암종, 자궁내막 암종, 자궁경부 암종, 질 암종, 외음부 암종, 호지킨병, 비-호지킨 림프종, 식도암, 소장암, 내분비계암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연부 조직 육종, 요도암, 음경암, 만성 또는 급성 백혈병, 예컨대 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 급성 림프모구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 소아 고형 종양, 림프구성 림프종, 방광암, 신장암 또는 요관암, 신우 암종, 중추 신경계 (CNS)의 신생물, 원발성 CNS 림프종, 종양 혈관신생, 척수축 종양, 뇌간 신경교종, 뇌하수체 선종, 카포시 육종, 표피양암, 편평세포암, T-세포 림프종, 석면에 의해 유발된 것을 비롯한 환경적으로 유발된 암, 및 상기 암의 조합을 포함한다. 본 개시내용은 또한 전이성 암, 특히 PD-L1을 발현하는 전이성 암의 치료에 유용하다 (Iwai et al., Int. Immunol., 17:133-144 (2005)).
임의로, PD-L1에 대한 마크로시클릭 펩티드는 면역원성 작용제, 예컨대 암성 세포, 정제된 종양 항원 (재조합 단백질, 펩티드 및 탄수화물 분자 포함), 세포, 및 면역 자극 시토카인을 코딩하는 유전자로 형질감염된 세포와 조합될 수 있다 (He et al., J. Immunol., 173:4919-4928 (2004)). 사용될 수 있는 종양 백신의 비제한적 예는 흑색종 항원의 펩티드, 예컨대 gp100, MAGE 항원, Trp-2, MART1 및/또는 티로시나제의 펩티드, 또는 시토카인 GM-CSF를 발현하도록 형질감염된 종양 세포를 포함한다 (하기에 추가로 논의됨).
인간에서, 일부 종양, 예컨대 흑색종은 면역원성인 것으로 밝혀졌다. PD-L1 차단에 의해 T 세포 활성화의 역치를 상승시키는 것에 의해, 본 발명자들은 숙주에서 종양 반응을 활성화할 것을 예상할 수 있는 것으로 기대된다.
PD-L1 차단은 백신접종 프로토콜과 조합될 때 가장 유효할 가능성이 있다. 종양에 대한 백신접종을 위한 많은 실험 전략이 고안되어 있다 (문헌 [Rosenberg, S., Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62 (2000); Logothetis, C., ASCO Educational Book Spring: 300-302 (2000); Khayat, D., ASCO Educational Book Spring: 414-428 (2000); Foon, K., ASCO Educational Book Spring: 730-738 (2000)] 참조; 또한 문헌 [Restifo, N. et al., Cancer Vaccines, Chapter 61, pp. 3023-3043, in DeVita, V. et al., eds., Cancer: Principles and Practice of Oncology, Fifth Edition (1997)] 참조). 이들 전략 중 하나에서, 백신은 자가 또는 동종 종양 세포를 사용하여 제조된다. 이들 세포 백신은 GM-CSF를 발현하도록 종양 세포가 형질도입될 때 가장 유효한 것으로 밝혀졌다. GM-CSF는 종양 백신접종을 위한 항원 제시의 강력한 활성화제로 밝혀졌다 (Dranoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 3539-3543 (1993)).
다양한 종양에서 유전자 발현 및 대규모 유전자 발현 패턴의 연구를 통해 소위 종양 특이적 항원에 대한 정의를 확립하였다 (Rosenberg, S.A., Immunity, 10:281-287 (1999)). 많은 경우에, 이들 종양 특이적 항원은 종양 및 종양이 발생한 세포에서 발현되는 분화 항원, 예를 들어 멜라닌세포 항원 gp100, MAGE 항원, 및 Trp-2이다. 보다 중요하게는, 많은 이들 항원은 숙주에서 발견되는 종양 특이적 T 세포의 표적인 것으로 제시될 수 있다. PD-L1 차단을 종양에서 발현되는 재조합 단백질 및/또는 펩티드의 수집과 함께 사용하여 이들 단백질에 대한 면역 반응을 생성시킬 수 있다. 이들 단백질은 자기 항원으로서 면역계에 의해 정상적으로 인식되고, 따라서 이들에 대해 관용성이다. 종양 항원은 또한, 염색체의 텔로미어의 합성에 필요하고 85% 초과의 인간 암에서 및 단지 제한된 수의 체세포 조직에서 발현되는 단백질 텔로머라제를 포함할 수 있다 (Kim, N. et al., Science, 266:2011-2013 (1994)). (이들 체세포 조직은 다양한 수단에 의해 면역 공격으로부터 보호될 수 있다). 또한, 종양 항원은 단백질 서열을 변경하거나 또는 2개의 비관련 서열 사이의 융합 단백질 (즉, 필라델피아(Philadelphia) 염색체 내의 bcr-abl), 또는 B 세포 종양으로부터의 이디오타입을 생성시키는 체세포 돌연변이 때문에 암 세포에서 발현되는 "신생-항원"일 수 있다.
다른 종양 백신은 인간 암에 관련된 바이러스, 예컨대 인간 유두종 바이러스 (HPV), 간염 바이러스 (HBV 및 HCV) 및 카포시 포진 육종 바이러스 (KHSV)로부터의 단백질을 포함할 수 있다. PD-L1 차단과 함께 사용될 수 있는 또 다른 형태의 종양 특이적 항원은 종양 조직 자체로부터 단리된 정제된 열 쇼크 단백질 (HSP)이다. 이러한 열 쇼크 단백질은 종양 세포로부터의 단백질의 단편을 함유하고, 이들 HSP는 종양 면역을 유도하기 위한 항원 제시 세포로의 전달에 매우 효율적이다 (Suot, R. et al., Science, 269:1585-1588 (1995); Tamura, Y. et al., Science, 278:117-120 (1997)).
수지상 세포 (DC)는 항원-특이적 반응을 촉발하는데 사용될 수 있는 강력한 항원 제시 세포이다. DC는 생체외 생산되고, 다양한 단백질 및 펩티드 항원 뿐만 아니라 종양 세포 추출물로 로딩될 수 있다 (Nestle, F. et al., Nat. Med., 4:328-332 (1998)). 또한, DC는 이들 종양 항원을 또한 발현시키기 위해 유전적 수단에 의해 형질도입될 수 있다. 또한, DC는 면역화를 위해 종양 세포에 직접 융합된다 (Kugler, A. et al., Nat. Med., 6:332-336 (2000)). 백신접종 방법으로서, DC 면역화는 보다 강력한 항종양 반응을 활성화하기 위해 PD-L1 차단과 효과적으로 조합될 수 있다.
PD-L1 차단은 또한 표준 암 치료와 조합될 수 있다. PD-L1 차단은 화학요법과 효과적으로 조합될 수 있다. 이 경우에, 투여되는 화학요법 시약의 투여량을 감소시키는 것이 가능할 수 있다 (Mokyr, M. et al., Cancer Res., 58:5301-5304 (1998)). 이러한 조합의 예는 흑색종의 치료를 위한 데카르바진과 조합된 마크로시클릭 펩티드이다. 이러한 조합의 또 다른 예는 흑색종의 치료를 위한 인터류킨-2 (IL-2)와 조합된 마크로시클릭 펩티드이다. PD-L1 차단과 화학요법의 조합 사용을 뒷받침하는 과학적 근거는 대부분의 화학요법 화합물의 세포독성 작용의 결과인 세포 사멸이 항원 제시 경로에서 종양 항원의 수준을 증가시켜야 한다는 것이다. 세포 사멸을 통한 PD-L1 차단과 상승작용을 유발할 수 있는 다른 조합 요법은 방사선요법, 수술 및 호르몬 박탈이다. 각각의 이들 프로토콜은 숙주에서 종양 항원의 공급원을 생성한다. 또한, 혈관신생 억제제가 PD-L1 차단과 조합될 수 있다. 혈관신생의 억제는 종양 항원을 숙주 항원 제시 경로 내로 공급할 수 있는 종양 세포 사멸로 이어진다.
PD-L1 차단 마크로시클릭 펩티드는 또한 Fc 알파 또는 Fc 감마 수용체-발현 이펙터 세포를 종양 세포로 표적화하는 이중특이적 마크로시클릭 펩티드와 조합되어 사용될 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 번호 5,922,845 및 5,837,243 참조). 이중특이적 마크로시클릭 펩티드는 2개의 개별 항원을 표적화하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 항-Fc 수용체/항 종양 항원 (예를 들어, Her-2/neu) 이중특이적 마크로시클릭 펩티드가 대식세포를 종양 부위에 대해 표적화하기 위해 사용되어 왔다. 이러한 표적화는 종양 특이적 반응을 보다 효과적으로 활성화시킬 수 있다. 이들 반응의 T 세포 아암은 PD-L1 차단의 사용에 의해 증대될 것이다. 대안적으로, 항원은 종양 항원 및 수지상 세포 특이적 세포 표면 마커에 결합하는 이중특이적 마크로시클릭 펩티드의 사용에 의해 DC에 직접 전달될 수 있다.
종양은 매우 다양한 메카니즘에 의해 숙주 면역 감시를 피한다. 많은 이들 메카니즘은 종양에 의해 발현되고 면역억제성인 단백질의 불활성화에 의해 극복될 수 있다. 이는 특히, TGF-베타 (Kehrl, J. et al., J. Exp. Med., 163:1037-1050 (1986)), IL-10 (Howard, M. et al., Immunology Today, 13:198-200 (1992)), 및 Fas 리간드 (Hahne, M. et al., Science, 274:1363-1365 (1996))를 포함한다. 각각의 이들 엔티티에 대한 마크로시클릭 펩티드는 면역억제제의 효과를 상쇄하고 숙주에 의한 종양 면역 반응을 유리하게 하기 위해 항-PD-L1과 조합되어 사용될 수 있다.
숙주 면역 반응성을 활성화하기 위해 사용될 수 있는 다른 마크로시클릭 펩티드는 항-PD-L1과 조합되어 사용될 수 있다. 이는 DC 기능 및 항원 제시를 활성화하는 수지상 세포의 표면 상의 분자를 포함한다. 항-CD40 마크로시클릭 펩티드는 T 세포 헬퍼 활성을 효과적으로 대체할 수 있고 (Ridge, J. et al., Nature, 393:474-478 (1998)), PD-1 항체와 함께 사용될 수 있다 (Ito, N. et al., Immunobiology, 201(5):527-540 (2000)). 마크로시클릭 펩티드를 T 세포 공동자극 분자, 예컨대 CTLA-4 (예를 들어, 미국 특허 번호 5,811,097), OX-40 (Weinberg, A. et al., Immunol., 164:2160-2169 (2000)), 4-1BB (Melero, I. et al., Nat. Med., 3:682-685 (1997), 및 ICOS (Hutloff, A. et al., Nature, 397:262-266 (1999))에 대해 활성화하는 것은 또한 증가된 수준의 T 세포 활성화를 제공할 수 있다.
골수 이식은 조혈계 기원의 다양한 종양의 치료를 위해 현재 사용되고 있다. 이식편 대 숙주 질환은 이러한 치료의 결과이지만, 이식편 대 종양 반응으로부터 치료 이익을 획득할 수 있다. 공여자 생착 종양 특이적 T 세포의 유효성을 증가시키기 위해 PD-L1 차단이 사용될 수 있다.
또한, 항원 특이적 T 세포의 생체외 활성화 및 확장 및 종양에 대한 항원-특이적 T 세포를 자극하기 위한 이들 세포의 수용자 내로의 입양 전달을 수반하는 몇몇 실험적 치료 프로토콜이 존재한다 (Greenberg, R. et al., Science, 285:546-551 (1999)). 또한, 이들 방법은 감염원, 예컨대 CMV에 대한 T 세포 반응을 활성화하는데 사용될 수 있다. 마크로시클릭 펩티드의 존재 하에서의 생체외 활성화는 입양 전달된 T 세포의 빈도 및 활성을 증가시키는 것으로 예상될 수 있다.
감염성 질환
본 개시내용의 다른 방법은 특정한 독소 또는 병원체에 노출된 환자를 치료하는데 사용된다. 따라서, 본 개시내용의 또 다른 측면은 대상체가 감염성 질환에 대해 치료되도록, 대상체에게 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드 또는 그의 항원-결합 부분을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 감염성 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 바람직하게는, 항체는 인간 항-인간 PD-L1 마크로시클릭 펩티드 (예컨대 본원에 기재된 임의의 마크로시클릭 펩티드)이다. 추가로 또는 대안적으로, 항체는 키메라 또는 인간화 항체일 수 있다.
상기 논의된 바와 같은 종양에 대한 그의 적용과 유사하게, 항체 매개된 PD-L1 차단은 병원체, 독소 및 자기-항원에 대한 면역 반응을 자극하기 위해 단독으로 또는 아주반트로서 백신과 조합되어 사용될 수 있다. 이러한 치료 접근법이 특히 유용할 수 있는 병원체의 예는 현재 효과적인 백신이 없는 병원체, 또는 통상의 백신이 덜 완전하게 효과적인 병원체를 포함한다. 이는, HIV, 간염 (A, B, 및 C), 인플루엔자, 포진, 지아르디아, 말라리아 (Butler, N.S. et al., Nature Immunology, 13:188-195 (2012); Hafalla, J.C.R., et al., PLOS Pathogens (February 2, 2012)), 리슈마니아(Leishmania), 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas Aeruginosa)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. PD-L1 차단은 감염 과정에 걸쳐 변경된 항원을 제시하는 HIV와 같은 작용제에 의해 확립된 감염에 대해 특히 유용하다. 이들 신규한 에피토프는 항-인간 PD-L1 투여 시 외래물질로서 인식되고, 따라서 PD-L1을 통한 음성 신호에 의해 약화되지 않는 강한 T 세포 반응을 유발한다.
본 개시내용의 방법에 의해 치료가능한 감염을 유발하는 병원성 바이러스의 일부 예는 HIV, 간염 (A, B 또는 C), 포진 바이러스 (예를 들어, VZV, HSV-1, HAV-6, HSV-II, 및 CMV, 엡스타인 바르(Epstein Barr) 바이러스), 아데노바이러스, 인플루엔자 바이러스, 플라비바이러스, 에코바이러스, 리노바이러스, 콕사키 바이러스, 코로나바이러스, 호흡기 세포융합 바이러스, 멈프스 바이러스, 로타바이러스, 홍역 바이러스, 풍진 바이러스, 파르보바이러스, 백시니아 바이러스, HTLV 바이러스, 뎅기 바이러스, 유두종바이러스, 연속종 바이러스, 폴리오바이러스, 광견병 바이러스, JC 바이러스 및 아르보바이러스 뇌염 바이러스를 포함한다.
본 개시내용의 방법에 의해 치료가능한 감염을 유발하는 병원성 박테리아의 일부 예는 클라미디아(chlamydia), 리케치아 박테리아(rickettsial bacteria), 미코박테리아(mycobacteria), 스타필로코카이(staphylococci), 스트렙토코카이(streptococci), 뉴모노코카이(pneumonococci), 메닝고코카이(meningococci) 및 코노코카이(conococci), 클레브시엘라(klebsiella), 프로테우스(proteus), 세라티아(serratia), 슈도모나스(pseudomonas), 레지오넬라(legionella), 디프테리아(diphtheria), 살모넬라(salmonella), 바실리(bacilli), 콜레라(cholera), 파상풍, 보툴리눔독소증, 탄저병, 흑사병, 렙토스피라증 및 라임병 박테리아를 포함한다.
본 개시내용의 방법에 의해 치료가능한 감염을 유발하는 병원성 진균의 일부 예는 칸디다(Candida) (알비칸스(albicans), 크루세이(krusei), 글라브라타(glabrata), 트로피칼리스(tropicalis) 등), 크립토코쿠스 네오프르만스(Cryptococcus neoformans), 아스페르길루스(Aspergillus) (푸미가투스(fumigatus), 니거(niger) 등), 뮤코랄레스(Mucorales) 속 (뮤코르(mucor), 압시디아(absidia), 리조푸스(rhizophus)), 스포로트릭스 쉔키이(Sporothrix schenkii), 블라스토미세스 더마티티디스(Blastomyces dermatitidis), 파라콕시디오이데스 브라실리엔시스(Paracoccidioides brasiliensis), 콕시디오이데스 임미티스(Coccidioides immitis) 및 히스토플라스마 캅술라툼(Histoplasma capsulatum)을 포함한다.
본 개시내용의 방법에 의해 치료가능한 감염을 유발하는 병원성 기생충의 일부 예는 엔트아메바 히스톨리티카(Entamoeba histolytica), 발란티디움 콜라이(Balantidium coli), 네글레리아포울레리(Naegleriafowleri), 아칸트아메바(Acanthamoeba) 종, 지아르디아 람비아(Giardia lambia), 크립토스포리디움(Cryptosporidium) 종, 뉴모시스티스 카리니이(Pneumocystis carinii), 플라스모디움 비박스(Plasmodium vivax), 바베시아 미크로티(Babesia microti), 트리파노소마 브루세이(Trypanosoma brucei), 트리파노소마 크루지(Trypanosoma cruzi), 리슈마니아 도노바니(Leishmania donovani), 톡소플라스마 곤디(Toxoplasma gondi), 및 니포스트롱길루스 브라실리엔시스(Nippostrongylus brasiliensis)를 포함한다.
상기 모든 방법에서, PD-L1 차단은 다른 형태의 면역요법, 예컨대 시토카인 치료 (예를 들어, 인터페론, VEGF 활성 또는 VEGF-수용체를 표적화하는 작용제, GM-CSF, G-CSF, IL-2), 또는 종양 항원의 증진된 제시를 제공하는 이중특이적 항체 요법 (예를 들어, 문헌 [Holliger, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993); Poljak, Structure, 2:1121-1123 (1994)] 참조)과 조합될 수 있다.
자가면역 반응
마크로시클릭 펩티드는 자가면역 반응을 유발하고 및 증폭할 수 있다. 실제로, 종양 세포 및 펩티드 백신을 사용한 항-종양 반응의 유도는 많은 항-종양 반응이 항-자기 반응성 (항-CTLA-4+GM-CSF-변형된 B 16 흑색종에서 관찰된 탈색소, [van Elsas et al., 상기 문헌]; Trp-2 백신접종 마우스에서의 탈색소 (Overwijk, W. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96:2982-2987 (1999)); TRAMP 종양 세포 백신 (Hurwitz, A., 상기 문헌 (2000)), 흑색종 펩티드 항원 백신접종에 의해 유발된 자가면역 전립선염 및 인간 임상 시험에서 관찰된 백반증 (Rosenberg, S.A. et al., J. Immunother. Emphasis Tumor Immunol., 19(1):81-84 (1996)))을 수반하는 것으로 밝혀졌다.
따라서, 질환 치료를 위해 이들 자기 단백질에 대한 면역 반응을 효과적으로 생성하도록 백신접종 프로토콜을 고안하기 위해 항-PD-L1 차단을 다양한 자기 단백질과 함께 사용하는 것을 고려하는 것이 가능하다. 예를 들어, 알츠하이머병은 뇌에서 아밀로이드 침착물 내에 A.베타. 펩티드의 부적절한 축적을 수반하고; 아밀로이드에 대한 항체 반응은 이들 아밀로이드 침착물을 제거할 수 있다 (Schenk et al., Nature, 400:173-177 (1999)).
알레르기 및 천식의 치료를 위한 IgE, 및 류마티스 관절염을 위한 TNF.알파와 같은 다른 자기 단백질이 또한 표적으로서 사용될 수 있다. 마지막으로, 다양한 호르몬에 대한 항체 반응이 본원에 개시된 마크로사이클의 사용에 의해 유도될 수 있다. 생식 호르몬에 대한 중화 항체 반응은 피임을 위해 사용될 수 있다. 특정한 종양의 성장을 위해 요구되는 호르몬 및 다른 가용성 인자에 대한 중화 항체 반응이 또한 가능한 백신접종 표적으로서 고려될 수 있다.
항-PD-L1 마크로사이클의 사용에 대한 상기 기재된 바와 유사한 방법은 알츠하이머병에서의 A.베타.를 비롯한 아밀로이드 침착물, 시토카인, 예컨대 TNF.알파, 및 IgE와 같은 다른 자기-항원의 부적절한 축적을 갖는 환자를 치료하기 위해 치료적 자가면역 반응의 유도를 위해 사용될 수 있다.
백신
마크로시클릭 펩티드는 관심 항원 (예를 들어, 백신)과 항-PD-1 마크로사이클의 공투여에 의해 항원-특이적 면역 반응을 자극하기 위해 사용될 수 있다. 따라서, 또 다른 측면에서, 본 개시내용은 대상체에서 항원에 대한 면역 반응이 증진되도록, 대상체에게 (i) 항원; 및 (ii) 항-PD-1 마크로사이클 또는 그의 항원-결합 부분을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 항원에 대한 면역 반응을 증진시키는 방법을 제공한다. 항원은, 예를 들어 종양 항원, 바이러스 항원, 박테리아 항원 또는 병원체로부터의 항원일 수 있다. 이러한 항원의 비제한적인 예는 상기 섹션에서 논의된 것, 예컨대 상기 논의된 종양 항원 (또는 종양 백신), 또는 바이러스, 박테리아 또는 상기 기재된 다른 병원체로부터의 항원을 포함한다.
본 개시내용의 조성물 (예를 들어, 마크로시클릭 펩티드, 다중특이적 및 이중특이적 분자, 및 면역접합체)을 생체내 및 시험관내 투여하는 적합한 경로는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있고, 통상의 기술자에 의해 선택될 수 있다. 예를 들어, 조성물은 주사에 의해 (예를 들어, 정맥내 또는 피하) 투여될 수 있다. 사용된 분자의 적합한 투여량은 대상체의 연령 및 체중 및 조성물의 농도 및/또는 제제에 의존할 것이다.
이전에 기재된 바와 같이, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 1종 이상의 다른 치료제, 예를 들어 세포독성제, 방사성독성제 또는 면역억제제와 공-투여될 수 있다. 펩티드는 작용제에 연결될 수 있거나 (면역복합체로서), 작용제와 개별 투여될 수 있다. 후자의 경우에 (개별 투여), 펩티드는 작용제의 전에, 후에 또는 그와 공동으로 투여될 수 있거나, 또는 다른 공지된 요법, 예를 들어 항암 요법, 예를 들어 방사선과 공-투여될 수 있다. 이러한 치료제는 특히, 그 자체로는 환자에게 독성 또는 준독성인 수준에서만 효과적인 항신생물제, 예컨대 독소루비신 (아드리아마이신), 시스플라틴 블레오마이신 술페이트, 카르무스틴, 클로람부실, 데카르바진, 및 시클로포스파미드 히드록시우레아를 포함한다. 시스플라틴은 4주마다 1회 100 mg/용량으로 정맥내로 투여되고, 아드리아마이신은 21일마다 1회 60-75 mg/ml 용량으로 정맥내로 투여된다. 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드 또는 그의 항원 결합 단편과 화학요법제의 공-투여는 인간 종양 세포에 대해 세포독성 효과를 생성하는 상이한 메카니즘을 통해 작동하는 2가지 항암제를 제공한다. 이러한 공-투여는 펩티드에 비반응성이 되게 할 약물에 대한 저항성의 발생 또는 종양 세포의 항원성에서의 변화로 인한 문제점을 해결할 수 있다.
본 개시내용의 조성물 (예를 들어, 마크로시클릭 펩티드, 이중특이적 또는 다중특이적 분자, 또는 면역접합체) 및 사용 지침서를 포함하는 키트가 또한 본 개시내용의 범위에 포함된다. 키트는 적어도 1종의 추가의 시약, 또는 1종 이상의 추가의 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드 (예를 들어, 마크로사이클과 구분되는 PD-L1 항원 내의 에피토프에 결합하는 상보적 활성을 갖는 인간 항체)를 추가로 함유할 수 있다. 키트는 전형적으로 키트의 내용물의 의도되는 용도를 지시하는 라벨을 포함한다. 용어 라벨은 키트 상에 또는 키트와 함께 제공되거나, 또는 달리 키트에 동반되는 임의의 문서 또는 기록물을 포함한다.
조합 요법
본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드와 또 다른 PD-L1 길항제 및/또는 CTLA-4 길항제의 조합물은 PD-L1 및 CTLA-4의 차단에 의한 과다증식성 질환에 대한 면역 반응의 증진을 위해 유용하다. 예를 들어, 이들 분자는 배양물 중, 시험관내 또는 생체외 세포에, 또는 인간 대상체, 예를 들어 생체내 투여되어 다양한 상황에서 면역을 증진시킬 수 있다. 따라서, 한 측면에서, 본 개시내용은 대상체에서 면역 반응이 변형되도록 대상체에게 본 개시내용의 항체 조합물, 또는 그의 항원-결합 부분의 조합물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 면역 반응을 변형시키는 방법을 제공한다. 바람직하게는, 반응은 증진되거나, 자극되거나, 또는 상향조절된다. 또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드 및 치료 용량 미만의 항-CTLA-4 항체를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 면역자극 치료제에 의한 과다증식성 질환의 치료와 연관된 유해 사례를 변경시키는 방법을 제공한다.
마크로시클릭 펩티드에 의한 PD-L1 및 CTLA-4의 차단은 환자에서 암성 세포에 대한 면역 반응을 증진시킬 수 있다. 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드를 사용하여 성장을 억제시킬 수 있는 암은, 면역요법에 전형적으로 반응성인 암을 포함한다. 본 개시내용의 조합 요법에 의한 치료를 위한 암의 대표적인 예는 흑색종 (예를 들어, 전이성 악성 흑색종), 신암, 전립선암, 유방암, 결장암 및 폐암을 포함한다. 본 개시내용의 방법을 사용하여 치료될 수 있는 다른 암의 예는 골암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부 또는 안내 악성 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 항문부암, 위암, 고환암, 자궁암, 난관 암종, 자궁내막 암종, 자궁경부 암종, 질 암종, 외음부 암종, 호지킨병, 비-호지킨 림프종, 식도암, 소장암, 내분비계암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연부 조직 육종, 요도암, 음경암, 만성 또는 급성 백혈병, 예컨대 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 급성 림프모구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 소아 고형 종양, 림프구성 림프종, 방광암, 신장암 또는 요관암, 신우 암종, 중추 신경계 (CNS)의 신생물, 원발성 CNS 림프종, 종양 혈관신생, 척수축 종양, 뇌간 신경교종, 뇌하수체 선종, 카포시 육종, 표피양암, 편평세포암, T-세포 림프종, 석면에 의해 유발된 것을 비롯한 환경적으로 유발된 암, 및 상기 암의 조합을 포함한다. 본 개시내용은 또한 전이성 암의 치료에 유용하다.
특정 실시양태에서, 본원에 논의된 적어도 1종의 마크로시클릭 펩티드를 함유하는 치료제의 조합은 제약상 허용되는 담체 중의 단일 조성물로서 공동으로 투여될 수 있거나, 또는 개별 조성물로서 공동으로 투여될 수 있고 여기서 각각의 작용제는 순차적으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 항-CTLA-4 항체 및 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 항-CTLA-4가 첫번째로 투여되고 마크로시클릭 펩티드가 두번째로 투여되거나, 또는 마크로시클릭 펩티드가 첫번째로 투여되고 항-CTLA-4가 두번째로 투여되는 것과 같이, 순차적으로 투여될 수 있다. 또한, 하나 초과 용량의 조합 요법이 순차적으로 투여되는 경우에, 순차적 투여의 순서는 각각의 투여 시점에서 역전되거나 동일한 순서로 유지될 수 있거나, 순차적 투여가 공동 투여, 또는 그의 임의의 조합과 조합될 수 있다. 예를 들어, 조합물 항-CTLA-4 항체 및 마크로시클릭 펩티드의 제1 투여는 공동일 수 있고, 제2 투여는 항-CTLA-4 첫번째 및 마크로시클릭 펩티드 두번째로 순차적일 수 있고, 제3 투여는 마크로시클릭 펩티드 첫번째 및 항-CTLA-4 두번째 등으로 순차적일 수 있다. 또 다른 대표적인 투여 계획은 마크로시클릭 펩티드 첫번째 및 항-CTLA-4 두번째로 순차적인 제1 투여를 수반할 수 있고, 후속 투여는 공동일 수 있다.
임의로, 마크로시클릭 펩티드 및 항-CTLA-4 작용제의 조합은 면역원성 작용제, 예컨대 암성 세포, 정제된 종양 항원 (재조합 단백질, 펩티드 및 탄수화물 분자 포함), 세포, 및 면역 자극 시토카인을 코딩하는 유전자로 형질감염된 세포와 추가로 조합될 수 있다 (He et al., J. Immunol., 173:4919-4928 (2004)). 사용될 수 있는 종양 백신의 비제한적 예는 흑색종 항원의 펩티드, 예컨대 gp100, MAGE 항원, Trp-2, MART1 및/또는 티로시나제의 펩티드, 또는 시토카인 GM-CSF를 발현하도록 형질감염된 종양 세포를 포함한다 (하기에 추가로 논의됨).
조합 PD-L1 마크로시클릭 펩티드 및 CTLA-4 차단은 백신접종 프로토콜과 추가로 조합될 수 있다. 종양에 대한 백신접종을 위한 많은 실험 전략이 고안되어 있다 (문헌 [Rosenberg, S., Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62 (2000); Logothetis, C., ASCO Educational Book Spring: 300-302 (2000); Khayat, D., ASCO Educational Book Spring: 414-428 (2000); Foon, K., ASCO Educational Book Spring: 730-738 (2000)] 참조; 또한 문헌 [Restifo et al., Cancer Vaccines, Chapter 61, pp. 3023-3043 in DeVita et al., eds., Cancer: Principles and Practice of Oncology, Fifth Edition (1997)] 참조). 이들 전략 중 하나에서, 백신은 자가 또는 동종 종양 세포를 사용하여 제조된다. 이들 세포 백신은 GM-CSF를 발현하도록 종양 세포가 형질도입될 때 가장 유효한 것으로 밝혀졌다. GM-CSF는 종양 백신접종을 위한 항원 제시의 강력한 활성화제로 밝혀졌다 (Dranoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:3539-3543 (1993)).
다양한 종양에서 유전자 발현 및 대규모 유전자 발현 패턴의 연구를 통해 소위 종양 특이적 항원에 대한 정의를 확립하였다 (Rosenberg, Immunity, 10:281-287 (1999)). 많은 경우에, 이들 종양 특이적 항원은 종양 및 종양이 발생한 세포에서 발현되는 분화 항원, 예를 들어 멜라닌세포 항원 gp100, MAGE 항원, 및 Trp-2이다. 보다 중요하게는, 많은 이들 항원은 숙주에서 발견되는 종양 특이적 T 세포의 표적인 것으로 제시될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 항체 조성물을 사용한 조합 PD-L1 마크로시클릭 펩티드 및 CTLA-4 차단을 종양에서 발현되는 재조합 단백질 및/또는 펩티드의 수집과 함께 사용하여 이들 단백질에 대한 면역 반응을 생성시킬 수 있다. 이들 단백질은 자기-항원으로서 면역계에 의해 정상적으로 인식되고, 따라서 이들에 대해 관용성이다. 종양 항원은 또한, 염색체의 텔로미어의 합성에 필요하고 85% 초과의 인간 암에서 및 단지 제한된 수의 체세포 조직에서 발현되는 단백질 텔로머라제를 포함할 수 있다 (Kim et al., Science, 266:2011-2013 (1994)). (이들 체세포 조직은 다양한 수단에 의해 면역 공격으로부터 보호될 수 있다). 또한, 종양 항원은 단백질 서열을 변경하거나 또는 2개의 비관련 서열 사이의 융합 단백질 (즉, 필라델피아 염색체 내의 bcr-abl), 또는 B 세포 종양으로부터의 이디오타입을 생성시키는 체세포 돌연변이 때문에 암 세포에서 발현되는 "신생-항원"일 수 있다.
다른 종양 백신은 인간 암에 관련된 바이러스, 예컨대 인간 유두종 바이러스 (HPV), 간염 바이러스 (HBV 및 HCV) 및 카포시 포진 육종 바이러스 (KHSV)로부터의 단백질을 포함할 수 있다. PD-L1 마크로시클릭 펩티드 차단과 함께 사용될 수 있는 또 다른 형태의 종양 특이적 항원은 종양 조직 자체로부터 단리된 정제된 열 쇼크 단백질 (HSP)이다. 이들 열 쇼크 단백질은 종양 세포로부터의 단백질의 단편을 함유하고, 이들 HSP는 종양 면역을 유도하기 위한 항원 제시 세포로의 전달에 매우 효율적이다 (Suot, R. et al., Science, 269:1585-1588 (1995); Tamura, et al., Science, 278:117-120 (1997)).
수지상 세포 (DC)는 항원-특이적 반응을 촉발하는데 사용될 수 있는 강력한 항원 제시 세포이다. DC는 생체외 생산되고, 다양한 단백질 및 펩티드 항원 뿐만 아니라 종양 세포 추출물로 로딩될 수 있다 (Nestle et al., Nat. Med., 4:328-332 (1998)). 또한, DC는 이들 종양 항원을 또한 발현시키기 위해 유전적 수단에 의해 형질도입될 수 있다. 또한, DC는 면역화를 위해 종양 세포에 직접 융합된다 (Kugler et al., Nat. Med., 6:332-336 (2000)). 백신접종 방법으로서, DC 면역화는 보다 강력한 항종양 반응을 활성화하기 위해 조합 항-PD-L1 마크로시클릭 펩티드 및 CTLA-4 차단과 효과적으로 추가로 조합될 수 있다.
조합 항-PD-L1 마크로시클릭 펩티드 및 CTLA-4 차단은 또한 표준 암 치료와 추가로 조합될 수 있다. 예를 들어, 조합 마크로시클릭 펩티드 및 CTLA-4 차단은 화학요법과 효과적으로 조합될 수 있다. 이 경우에, 마크로시클릭 펩티드 및 항-CTLA-4 작용제의 조합물에 의해 관찰되는 바와 같이, 본 개시내용의 조합물과 함께 투여되는 다른 화학요법 시약의 용량을 감소시키는 것이 가능할 수 있다 (Mokyr et al., Cancer Res., 58:5301-5304 (1998)). 이러한 조합물의 예는 흑색종의 치료를 위한 데카르바진과 추가로 조합된 마크로시클릭 펩티드 및 항-CTLA-4 작용제의 조합물이다. 또 다른 예는 흑색종의 치료를 위한 인터류킨-2 (IL-2)와 추가로 조합된 마크로시클릭 펩티드 및 항-CTLA-4 작용제의 조합물이다. PD-L1 마크로시클릭 펩티드 및 CTLA-4 차단과 화학요법의 조합 사용을 뒷받침하는 과학적 근거는 대부분의 화학요법 화합물의 세포독성 작용의 결과인 세포 사멸이 항원 제시 경로에서 종양 항원의 수준을 증가시켜야 한다는 것이다. 세포 사멸을 통한 조합 항-PD-L1 마크로시클릭 펩티드 및 CTLA-4 차단과 상승작용을 유발할 수 있는 다른 조합 요법은 방사선요법, 수술 또는 호르몬 박탈을 포함한다. 각각의 이들 프로토콜은 숙주에서 종양 항원의 공급원을 생성한다. 또한, 혈관신생 억제제가 조합 PD-L1 및 CTLA-4 차단과 조합될 수 있다. 혈관신생의 억제는, 또한 숙주 항원 제시 경로 내로 공급되는 종양 항원의 공급원일 수 있는, 종양 세포 사멸로 이어진다.
PD-L1 및 CTLA-4 차단제의 조합은 또한 Fc.알파. 또는 Fc.감마. 수용체-발현 이펙터 세포를 종양 세포로 표적화하는 이중특이적 마크로시클릭 펩티드와 조합되어 사용될 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 번호 5,922,845 및 5,837,243 참조). 이중특이적 마크로시클릭 펩티드는 2개의 개별 항원을 표적화하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 항-Fc 수용체/항 종양 항원 (예를 들어, Her-2/neu) 이중특이적 마크로시클릭 펩티드가 대식세포를 종양 부위에 대해 표적화하기 위해 사용되어 왔다. 이러한 표적화는 종양 특이적 반응을 보다 효과적으로 활성화시킬 수 있다. 이들 반응의 T 세포 아암은 조합 PD-1 및 CTLA-4 차단의 사용에 의해 증대될 것이다. 대안적으로, 항원은 종양 항원 및 수지상 세포 특이적 세포 표면 마커에 결합하는 이중특이적 마크로시클릭 펩티드의 사용에 의해 DC에 직접 전달될 수 있다.
또 다른 예에서, 마크로시클릭 펩티드 및 항-CTLA-4 작용제의 조합은 항신생물성 마크로시클릭 작용제, 예컨대 리툭산(RITUXAN)® (리툭시맙), 헤르셉틴(HERCEPTIN)® (트라스투주맙), 벡사르(BEXXAR)® (토시투모맙), 제발린(ZEVALIN)® (이브리투모맙), 캄파트(CAMPATH)® (알렘투주맙), 림포사이드(Lymphocide) (에프라투주맙), 아바스틴(AVASTIN)® (베바시주맙) 및 타르세바(TARCEVA)® (에를로티닙) 등과 함께 사용될 수 있다. 예로서 이론에 얽매이는 것을 원하지 않으면서, 항암 항체 또는 독소에 접합된 항암 항체에 의한 치료는 암 세포 사멸 (예를 들어, 종양 세포)로 이어질 수 있고, 이는 CTLA-4 또는 PD-L1에 의해 매개되는 면역 반응을 강화시킬 것이다. 예시적 실시양태에서, 과다증식성 질환 (예를 들어, 암 종양)의 치료는 마크로시클릭 펩티드 및 항-CTLA-4 작용제와 공동으로 또는 순차적으로 또는 그의 임의의 조합으로 조합된 항암 항체를 포함할 수 있고, 이는 숙주에 의한 항종양 면역 반응을 강화시킬 수 있다.
종양은 매우 다양한 메카니즘에 의해 숙주 면역 감시를 피한다. 많은 이들 메카니즘은 종양에 의해 발현되고 면역억제성인 단백질의 불활성화에 의해 극복될 수 있다. 이는 특히, TGF-.베타. (Kehrl, J. et al., J. Exp. Med., 163:1037-1050 (1986)), IL-10 (Howard, M. et al., Immunology Today, 13:198-200 (1992)), 및 Fas 리간드 (Hahne, M. et al., Science, 274:1363-1365 (1996))를 포함한다. 또 다른 예에서, 각각의 이들 엔티티에 대한 항체는 면역억제제의 효과를 상쇄하고 숙주에 의한 항종양 면역 반응을 유리하게 하기 위해 마크로시클릭 펩티드 및 항-CTLA-4 조합과 추가로 조합될 수 있다.
숙주 면역 반응성을 활성화하기 위해 사용될 수 있는 다른 작용제는 추가로 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드와 조합되어 사용될 수 있다. 이는 DC 기능 및 항원 제시를 활성화하는 수지상 세포의 표면 상의 분자를 포함한다. 항-CD40 마크로시클릭 펩티드는 T 세포 헬퍼 활성을 효과적으로 대체할 수 있고 (Ridge, J. et al., Nature, 393:474-478 (1998)), 단독의 또는 항-CTLA-4 조합과 조합된 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드와 함께 사용될 수 있다 (Ito, N. et al., Immunobiology, 201(5):527-540 (2000)). 마크로시클릭 펩티드를 T 세포 공동자극 분자, 예컨대 OX-40 (Weinberg, A. et al., Immunol., 164:2160-2169 (2000)), 4-1BB (Melero, I. et al., Nat. Med., 3:682-685 (1997), 및 ICOS (Hutloff, A. et al., Nature, 397:262-266 (1999))에 대해 활성화하는 것은 또한 증가된 수준의 T 세포 활성화를 제공할 수 있다.
골수 이식은 조혈계 기원의 다양한 종양의 치료를 위해 현재 사용되고 있다. 이식편 대 숙주 질환은 이러한 치료의 결과이지만, 이식편 대 종양 반응으로부터 치료 이익을 획득할 수 있다. 공여자 생착 종양 특이적 T 세포의 유효성을 증가시키기 위해 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드가 단독으로 또는 CTLA-4 차단과 조합되어 사용될 수 있다.
또한, 항원 특이적 T 세포의 생체외 활성화 및 확장 및 종양에 대한 항원-특이적 T 세포를 자극하기 위한 이들 세포의 수용자 내로의 입양 전달을 수반하는 몇몇 실험적 치료 프로토콜이 존재한다 (Greenberg, R. et al., Science, 285:546-551 (1999)). 또한, 이들 방법은 감염원, 예컨대 CMV에 대한 T 세포 반응을 활성화하는데 사용될 수 있다. 단독으로의 또는 항-CTLA-4 길항제와 조합된 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드의 존재 하에서의 생체외 활성화는 입양 전달된 T 세포의 빈도 및 활성을 증가시키는 것으로 예상될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드를 치료 용량 미만의 항-CTLA-4 항체와 조합하여 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 면역자극제에 의한 과다증식성 질환의 치료와 연관된 유해 사례를 변경시키는 방법을 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용의 방법은 비흡수성 스테로이드를 환자에게 투여함으로써 면역자극 치료 항체-유발된 결장염 또는 설사의 발생률을 감소시키는 방법을 제공한다. 면역자극 치료 항체를 제공받을 임의의 환자가 이러한 치료에 의해 유발되는 결장염 또는 설사 발생 위험이 있기 때문에, 이러한 전체 환자 집단은 본 개시내용의 방법에 따른 요법에 적합하다. 스테로이드는 염증성 장 질환 (IBD)을 치료하고 IBD의 악화를 예방하기 위해 투여되었지만, IBD로 진단되지 않은 환자에서 IBD를 예방하기 (그의 발생률을 감소시키기) 위해 사용되지는 않는다. 스테로이드, 심지어 비흡수성 스테로이드는 그와 연관된 유의한 부작용으로 인해 예방적 용도로 사용되지 않는다.
추가 실시양태에서, 단독으로의 또는 CTLA-4 차단과 조합된 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 임의의 비흡수성 스테로이드의 사용과 추가로 조합될 수 있다. 본원에 사용된 "비흡수성 스테로이드"는 광범위한 일차 통과 대사를 나타내어, 간에서 대사 후에 스테로이드의 생체이용률이 낮은, 즉 약 20% 미만인 글루코코르티코이드이다. 본 개시내용의 한 실시양태에서, 비흡수성 스테로이드는 부데소니드이다. 부데소니드는 국부-작용 글루코코르티코스테로이드이고, 이것은 경구 투여 후에 주로 간에 의해 광범위하게 대사된다. 엔토코르트(ENTOCORT)® EC (아스트라-제네카(Astra-Zeneca))는 회장으로 및 결장 전체로의 약물 전달을 최적화하기 위해 개발된 부데소니드의 pH- 및 시간-의존성 경구 제제이다. 엔토코르트® EC는 회장 및/또는 상행 결장을 수반하는 경도 내지 중등도 크론병의 치료를 위해 미국에서 승인받았다. 크론병의 치료를 위한 엔토코르트® EC의 통상의 경구 투여량은 6 내지 9 mg/일이다. 엔토코르트® EC는 장에서 방출된 후, 장 점막에서 흡수되고 유지된다. 일단 장 점막 표적 조직을 통과하면, 엔토코르트® EC는 간에서 시토크롬 P450 시스템에 의해 무시가능한 글루코코르티코이드 활성을 갖는 대사물로 광범위하게 대사된다. 따라서, 생체이용률은 낮다 (약 10%). 부데소니드의 낮은 생체이용률은 덜 광범위한 일차 통과 대사를 갖는 다른 글루코코르티코이드에 비해 개선된 치료 비를 생성한다. 부데소니드는 전신-작용 코르티코스테로이드보다 덜한 시상하부-뇌하수체 억제를 비롯하여 보다 적은 부작용을 야기한다. 그러나, 엔토코르트® EC의 만성 투여는 과다부신피질호르몬증 및 부신 억제와 같은 전신 글루코코르티코이드 효과를 야기할 수 있다. 문헌 [Physicians' Desk Reference Supplement, 58th Edition, 608-610 (2004)]을 참조한다.
추가 실시양태에서, 비흡수성 스테로이드와 함께 PD-L1 및 CTLA-4 차단의 조합 (즉, 면역자극 치료적 마크로시클릭 펩티드 항-PD-L1 및 항-CTLA-4)은 살리실레이트와 추가로 조합될 수 있다. 살리실레이트는, 예를 들어 술파살라진 (아줄피딘(AZULFIDINE)®, 파마시아 & 업존(Pharmacia & Upjohn)); 올살라진 (디펜툼(DIPENTUM)®, 파마시아 & 업존); 발살라지드 (콜라잘(COLAZAL)®, 살릭스 파마슈티칼스, 인크.(Salix Pharmaceuticals, Inc.)); 및 메살라민 (아사콜(ASACOL)®, 프록터 & 갬블 파마슈티칼스(Procter & Gamble Pharmaceuticals); 펜타사(PENTASA)®, 쉬어 US(Shire US); 카나사(CANASA)®, 악스칸 스칸디팜, 인크.(Axcan Scandipharm, Inc.); 로와사(ROWASA)®, 솔베이(Solvay))와 같은 5-ASA 작용제를 포함한다.
투여량 및 제제화
화학식 I의 적합한 펩티드, 또는 보다 구체적으로 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드는 화합물 단독으로서 또는 제약 제제의 형태로 허용되는 담체와 혼합되어 당뇨병 및 다른 관련 질환을 치료하기 위해 환자에게 투여될 수 있다. 당뇨병을 치료하는 통상의 기술자는 이러한 치료를 필요로 하는 인간을 비롯한 포유동물에 대한 화합물의 투여량 및 투여 경로를 용이하게 결정할 수 있다. 투여 경로는 경구, 경구내, 직장, 경피, 협측, 비강내, 폐, 피하, 근육내, 피내, 설하, 결장내, 안구내, 정맥내, 또는 장 투여를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 화합물은 허용되는 제약 실무를 기반으로 한 투여 경로에 따라 제제화된다 (Fingl et al., in The Pharmacological Basis of Therapeutics, Chapter 1, p. 1 (1975); Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Co., Easton, PA (1990)).
본원에 기재된 제약상 허용되는 펩티드 조성물은 다중 투여 형태, 예컨대 정제, 캡슐 (각각 지속 방출 또는 지연 방출 제제를 포함함), 환제, 분말, 과립, 엘릭시르, 계내 겔, 마이크로구체, 결정질 복합체, 리포솜, 마이크로-에멀젼, 팅크제, 현탁액, 시럽, 에어로졸 스프레이 및 에멀젼으로 투여될 수 있다. 본원에 기재된 조성물은 또한, 모두 제약 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있는 투여 형태를 사용하여, 경구, 정맥내 (볼루스 또는 주입), 복강내, 피하, 경피로 또는 근육내 형태로 투여될 수 있다. 조성물은 단독으로 투여될 수 있지만, 일반적으로 선택된 투여 경로 및 표준 제약 실무를 기준으로 선택된 제약 담체와 함께 투여될 것이다.
본원에 기재된 조성물에 대한 투여 요법은, 물론, 공지된 인자, 예컨대 특정한 작용제의 약역학적 특징, 및 그의 투여 방식 및 경로; 수용자의 종, 연령, 성별, 건강, 의학적 상태 및 체중; 증상의 속성 및 정도; 공동 치료의 종류; 치료 빈도; 투여 경로, 환자의 신장 및 간 기능, 및 목적하는 효과에 따라 달라질 것이다. 의사 또는 수의사는 질환 상태의 진행을 예방, 상쇄 또는 정지시키는데 필요한 약물의 유효량을 결정하고 처방할 수 있다.
일반적 지침에 따라, 활성 성분의 1일 경구 투여량은 표시된 효과를 위해 사용되는 경우에, 약 0.001 내지 1000 mg/kg 체중, 바람직하게는 1일에 약 0.01 내지 100 mg/kg 체중, 및 가장 바람직하게는 약 0.6 내지 20 mg/kg/일의 범위일 것이다. 정맥내로의 활성 성분의 1일 투여량은 표시된 효과를 위해 사용되는 경우에 일정한 속도의 주입 동안 분당 Kg 체중당 0.001ng 내지 100.0 ng의 범위일 것이다. 이러한 일정한 정맥내 주입은 바람직하게는 분당 Kg 체중당 0.01 ng 내지 50 ng의 속도에서, 가장 바람직하게는 분당 Kg 체중당 0.01 ng 내지 10.0 mg의 속도에서 투여될 수 있다. 본원에 기재된 조성물은 단일 1일 용량으로 투여될 수 있거나, 또는 총 1일 투여량이 1일에 2, 3, 또는 4회의 분할 용량으로 투여될 수 있다. 본원에 기재된 조성물은 또한 목적하는 바에 따라 일/주/개월의 기간에 걸쳐 약물의 지속 방출을 가능하게 할 데포 제제에 의해 투여될 수 있다.
본원에 기재된 조성물은 비강내 형태로 적합한 비강내 비히클의 국소 사용을 통해, 또는 경피 피부 패치를 사용한 경피 경로를 통해 투여될 수 있다. 경피 전달 시스템의 형태로 투여되는 경우에, 투여량 투여는 물론 투여 요법 전반에 걸쳐 간헐적이기보다는 연속적일 것이다.
조성물은 전형적으로, 의도된 투여 형태, 즉 경구 정제, 캡슐, 엘릭시르, 추진제의 존재 또는 부재 하에 생성된 에어로졸 스프레이 및 시럽에 대해 적합하게 선택되고 통상의 제약 실무에 부합하는, 적합한 제약 희석제, 부형제 또는 담체 (본원에서 제약 담체로서 총칭됨)와의 혼합물로 투여된다.
예를 들어, 정제 또는 캡슐 형태로의 경구 투여를 위해, 활성 약물 성분은 경구, 비-독성, 제약상 허용되는 불활성 담체, 예컨대 이에 제한되지는 않는 락토스, 전분, 수크로스, 글루코스, 메틸 셀룰로스, 스테아르산마그네슘, 인산이칼슘, 황산칼슘, 만니톨 및 소르비톨과 조합될 수 있고; 액체 형태로의 경구 투여를 위해, 경구 약물 성분은 임의의 경구, 비-독성, 제약상 허용되는 불활성 담체, 예컨대 이에 제한되지는 않는 에탄올, 글리세롤, 및 물과 조합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우에, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 착색제가 또한 혼합물에 혼입될 수 있다. 적합한 결합제는 전분, 젤라틴, 천연 당, 예컨대 이에 제한되지는 않는 글루코스 또는 베타-락토스, 옥수수 감미제, 천연 및 합성 검, 예컨대 아카시아, 트라가칸트 또는 알긴산나트륨, 카르복시메틸셀룰로스, 폴리에틸렌 글리콜 및 왁스를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 이들 투여 형태에 사용되는 윤활제는 올레산나트륨, 스테아르산나트륨, 스테아르산마그네슘, 벤조산나트륨, 아세트산나트륨 및 염화나트륨을 포함한다. 붕해제는 전분, 메틸 셀룰로스, 한천, 벤토나이트 및 크산탄 검을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 기재된 조성물은 또한 혼합 미셀 또는 리포솜 전달 시스템, 예컨대 소형 단층 소포, 대형 단층 소포 및 다층 소포 형태로 투여될 수 있다. 리포솜은 다양한 인지질, 예컨대 콜레스테롤, 스테아릴아민 또는 포스파티딜콜린으로부터 형성될 수 있다. 투과 증진제가 약물 흡수를 증진시키기 위해 첨가될 수 있다.
전구약물이 제약의 수많은 바람직한 특성 (즉, 용해도, 생체이용률, 제조성 등)을 증진시키는 것으로 공지되어 있기 때문에, 본원에 기재된 화합물은 전구약물 형태로 전달될 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 대상은 본원에 청구된 화합물의 전구약물, 그의 전달 방법, 및 그를 함유하는 조성물을 포괄하는 것으로 의도된다.
본원에 기재된 조성물은 또한 표적화가능한 약물 담체로서 가용성 중합체와 커플링될 수 있다. 이러한 중합체는 폴리비닐-피롤리돈, 피란 공중합체, 폴리히드록시프로필-메타크릴아미드-페놀, 폴리히드록시에틸아스파르트아미드페놀, 또는 팔미토일 잔기로 치환된 폴리에틸렌옥시드-폴리리신을 포함할 수 있다. 또한, 본원에 기재된 조성물은 약물의 제어 방출을 달성하는데 유용한 생분해성 중합체 부류, 예를 들어 폴리락트산, 폴리글리콜산, 폴리락트산과 폴리글리콜산의 공중합체, 폴리엡실론 카프로락톤, 폴리히드록시 부티르산, 폴리오르토에스테르, 폴리아세탈, 폴리디히드로피란, 폴리시아노아실레이트, 및 히드로겔의 가교 또는 양친매성 블록 공중합체와 조합될 수 있다.
투여에 적합한 투여 형태 (제약 조성물)는 투여 단위당 약 0.01 밀리그램 내지 약 500 밀리그램의 활성 성분을 함유할 수 있다. 이러한 제약 조성물에서, 활성 성분은 통상적으로 조성물의 총 중량을 기준으로 약 0.5-95 중량%의 양으로 존재할 것이다.
젤라틴 캡슐은 활성 성분 및 분말화 담체, 예컨대 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 스테아르산마그네슘, 및 스테아르산을 함유할 수 있다. 유사한 희석제를 사용하여 압축 정제를 제조할 수 있다. 정제 및 캡슐 둘 다를 지속 방출 제품으로서 제조하여, 시간 기간에 걸친 의약의 연속 방출을 제공할 수 있다. 압축 정제는, 임의의 불쾌한 맛을 차폐하고 대기로부터 정제를 보호하기 위해 당 코팅 또는 필름 코팅될 수 있거나, 또는 위장관에서의 선택적인 붕해를 위해 장용 코팅될 수 있다.
경구 투여용 액체 투여 형태는 환자 순응도를 증가시키기 위해 착색제 및 향미제를 함유할 수 있다.
일반적으로, 물, 적합한 오일, 염수, 수성 덱스트로스 (글루코스) 및 관련 당 용액, 및 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜이 비경구 용액에 적합한 담체이다. 비경구 투여용 용액은 바람직하게는 활성 성분의 수용성 염, 적합한 안정화제, 및 필요한 경우에, 완충 물질을 함유한다. 단독의 또는 조합된 항산화제, 예컨대 중아황산나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산은 적합한 안정화제이다. 시트르산 및 그의 염 및 나트륨 EDTA가 또한 사용된다. 또한, 비경구 용액은 보존제, 예컨대 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올을 함유할 수 있다.
적합한 제약 담체는 이 분야에서 표준 참조 문헌인 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Edition, Mack Publishing Company (1995)]에 기재되어 있다
본원에 기재된 화합물의 투여를 위한 대표적인 유용한 제약 투여 형태는 다음과 같이 예시될 수 있다:
캡슐
다수의 단위 캡슐은 표준 2-피스 경질 젤라틴 캡슐을 분말화 활성 성분 100 밀리그램, 락토스 150 밀리그램, 셀룰로스 50 밀리그램 및 스테아르산마그네슘 6 밀리그램으로 충전시킴으로써 제조될 수 있다.
연질 젤라틴 캡슐
소화성 오일, 예컨대 대두 오일, 목화씨 오일 또는 올리브 오일 중에서 활성 성분의 혼합물을 제조하고, 정변위 펌프에 의해 이를 젤라틴에 주입하여 100 밀리그램의 활성 성분을 함유하는 연질 젤라틴 캡슐을 형성할 수 있다. 캡슐은 세척 및 건조되어야 한다.
정제
정제는 통상의 절차에 의해, 투여 단위가 예를 들어 활성 성분 100 밀리그램, 콜로이드성 이산화규소 0.2 밀리그램, 스테아르산마그네슘 5 밀리그램, 미세결정질 셀룰로스 275 밀리그램, 전분 11 밀리그램 및 락토스 98.8 밀리그램이도록 제조될 수 있다. 적절한 코팅을 적용하여 식미성을 증가시키거나 흡수를 지연시킬 수 있다.
주사제
본원에 기재된 펩티드 조성물의 주사가능한 제제는 규제 기관에 의해 승인된 것과 같은 부형제의 사용을 필요로 할 수 있거나 그렇지 않을 수 있다. 이들 부형제는, 용매 및 공-용매, 가용화제, 유화제 또는 증점제, 킬레이트화제, 항산화제 및 환원제, 항미생물 보존제, 완충제 및 pH 조절제, 벌킹제, 보호제, 및 장성 조정제 및 특수 첨가제를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 주사가능한 제제는 멸균, 발열원 무함유이어야 하고, 용액의 경우에, 미립자 물질 무함유이어야 한다.
주사에 의한 투여에 적합한 비경구 조성물은 예를 들어, 1.5 중량%의 활성 성분을, 공-용매 또는 다른 부형제를 함유할 수 있거나 그렇지 않을 수 있는 제약상 허용되는 완충제 중에서 교반함으로써 제조될 수 있다. 용액은 염화나트륨에 의해 등장성이 되어야 하고 멸균되어야 한다.
현탁액
수성 현탁액은 경구 및/또는 비경구 투여를 위해, 예를 들어 각각 5 mL가 미분된 활성 성분 100 mg, 소듐 카르복시메틸 셀룰로스 20 mg, 벤조산나트륨 5 mg, 소르비톨 용액, U.S.P. 1.0 g, 및 바닐린 또는 다른 식미성 향미제 0.025 mL를 함유하도록 제조될 수 있다.
생분해성 마이크로입자
주사에 의한 투여에 적합한 지속-방출 비경구 조성물은, 예를 들어 적합한 생분해성 중합체를 용매에 용해시키고, 중합체 용액에 활성제를 첨가하여 혼입시키고, 매트릭스로부터 용매를 제거하며, 그에 의해 활성제가 매트릭스 전반에 분포된 중합체 매트릭스를 형성함으로써 제조될 수 있다.
펩티드 합성
본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 생성될 수 있고, 예컨대 이는 화학적으로, 무세포 시스템에서 재조합적으로, 세포 내에서 재조합적으로 합성될 수 있거나, 또는 생물학적 공급원으로부터 단리될 수 있다. 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드의 화학적 합성은 단계적 고체 상 합성, 펩티드 단편의 입체형태적으로-보조되는 재-라이게이션을 통한 반합성, 클로닝 또는 합성 펩티드 절편의 효소적 라이게이션, 및 화학적 라이게이션을 비롯한 다양한 업계 인식 방법을 사용하여 수행될 수 있다. 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드 및 그의 유사체를 합성하는 바람직한 방법은 문헌 [Chan, W.C. et al., eds., Fmoc Solid Phase Synthesis, Oxford University Press, Oxford (2000); Barany, G. et al., The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 2: "Special Methods in Peptide Synthesis, Part A", pp. 3-284, Gross, E. et al., eds., Academic Press, New York (1980); 및 in Stewart, J.M. et al., Solid-Phase Peptide Synthesis, 2nd Edition, Pierce Chemical Co., Rockford, IL (1984)]에 기재된 것과 같은 다양한 고체-상 기술을 사용한 화학적 합성이다. 바람직한 전략은 아미노산 측쇄의 일시적 보호를 위한 tert-부틸 기와 조합된, α-아미노 기의 일시적 보호를 위한 Fmoc (9-플루오레닐메틸 메틸-옥시카르보닐) 기를 기반으로 한다 (예를 들어, 문헌 [Atherton, E. et al., "The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Group", in The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 9: "Special Methods in Peptide Synthesis, Part C", pp. 1-38, Undenfriend, S. et al., eds., Academic Press, San Diego (1987)] 참조).
펩티드는 불용성 중합체 지지체 ("수지"로도 지칭됨) 상에서 펩티드의 C-말단으로부터 시작하여 단계적 방식으로 합성될 수 있다. 합성은 아미드 또는 에스테르 연결의 형성을 통해 펩티드의 C-말단 아미노산을 수지에 첨부하는 것에 의해 개시된다. 이는 각각 C-말단 아미드 또는 카르복실산으로서 생성되는 펩티드의 결과적인 방출을 가능하게 한다.
합성에 사용되는 C-말단 아미노산 및 모든 다른 아미노산은 그의 α-아미노 기, 및 α-아미노 보호기가 합성 동안 선택적으로 제거될 수 있도록 차별적으로 보호된 측쇄 관능기 (존재하는 경우에)를 가질 것이 요구된다. 아미노산의 커플링은 활성 에스테르로서의 그의 카르복실 기의 활성화, 및 수지에 첨부된 N-말단 아미노산의 차단되지 않은 α-아미노 기와의 그의 반응에 의해 수행된다. 전체 펩티드 서열이 어셈블리될 때까지, α-아미노 기 탈보호 및 커플링 순서는 반복된다. 이어서, 펩티드는 통상적으로 부반응을 제한하는 적절한 스캐빈저의 존재 하에 측쇄 관능기의 병행 탈보호와 함께 수지로부터 방출된다. 생성된 펩티드는 최종적으로 역상 HPLC에 의해 정제된다.
최종 펩티드에 대한 전구체로서 요구되는 펩티딜-수지의 합성은 상업적으로 입수가능한 가교 폴리스티렌 중합체 수지 (노바바이오켐(Novabiochem), 캘리포니아주 샌디에고; 어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems), 캘리포니아주 포스터 시티)를 사용한다. 바람직한 고체 지지체는, C-말단 카르복스아미드의 경우에 4-(2',4'-디메톡시페닐-Fmoc-아미노메틸)-페녹시아세틸-p-메틸 벤즈히드릴아민 수지 (링크(Rink) 아미드 MBHA 수지); 9-Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시-메리필드 수지 (시에버(Sieber) 아미드 수지); 4-(9-Fmoc)아미노메틸-3,5-디메톡시페녹시)발레릴-아미노메틸-메리필드 수지 (PAL 수지)이다. 제1 및 후속 아미노산의 커플링은 각각 DIC/HOBt, HBTU/HOBt, BOP, PyBOP, 또는 DIC/6-Cl-HOBt, HCTU, DIC/HOAt 또는 HATU로부터 생성된 HOBt, 6-Cl-HOBt 또는 HOAt 활성 에스테르를 사용하여 달성될 수 있다. 바람직한 고체 지지체는, 보호된 펩티드 단편의 경우에 2-클로로트리틸 클로라이드 수지 및 9-Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시-메리필드 수지 (시에버 아미드 수지)이다. 2-클로로트리틸 클로라이드 수지 상에의 제1 아미노산의 로딩은 Fmoc-보호된 아미노산을 수지와 디클로로메탄 및 DIEA 중에서 반응시킴으로써 최적으로 달성된다. 필요한 경우에, 소량의 DMF를 첨가하여 아미노산의 용해를 용이하게 할 수 있다.
본원에 기재된 펩티드 유사체의 합성은 단일 또는 다중-채널 펩티드 합성기, 예컨대 CEM 리버티(CEM Liberty) 마이크로웨이브 합성기, 또는 프로테인 테크놀로지스, 인크.(Protein Technologies, Inc.) 프렐류드(Prelude) (6 채널) 또는 심포니(Symphony) (12 채널) 합성기를 사용함으로써 수행될 수 있다.
유용한 Fmoc 아미노산 유도체는 하기 제시되어 있다.
고체 상 합성에 사용된 직교 보호된 아미노산의 예
Figure pct00035
그의 각각의 펩티드에 대한 펩티딜-수지 전구체는 임의의 표준 절차를 사용하여 절단되고 탈보호될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [King, D.S. et al., Int. J. Peptide Protein Res., 36:255-266 (1990)] 참조). 목적하는 방법은 물, 및 스캐빈저로서 TIS의 존재 하에 TFA를 사용한다. 전형적으로, 펩티딜-수지는 TFA/물/TIS (94:3:3, v:v:v; 1 mL/100 mg 펩티딜 수지) 중에서 2-6시간 동안 실온에서 교반된다. 이어서 소비된 수지를 여과하고, TFA 용액을 감압 하에 농축 또는 건조시킨다. 생성된 조 펩티드를 침전시키고 Et2O로 세척하거나, 또는 정제용 HPLC에 의한 정제를 위해 DMSO 또는 50% 수성 아세트산에 바로 재용해시킨다.
목적하는 순도를 갖는 펩티드는 예를 들어 워터스(Waters) 모델 4000 또는 시마즈(Shimadzu) 모델 LC-8A 액체 크로마토그래피 상에서 정제용 HPLC를 사용하여 정제하는 것에 의해 수득될 수 있다. 조 펩티드 용액을 YMC S5 ODS (20 x 100 mm) 칼럼에 주사하고, 둘 다 0.1% TFA로 완충된 물중 MeCN의 선형 구배로 14-20 mL/분의 유량을 사용하여 220 nm에서 UV 흡광도에 의해 용출액을 모니터링하면서 용리시킨다. 정제된 펩티드의 구조는 전자-스프레이 MS 분석에 의해 확인될 수 있다.
본원에 언급된 비자연 발생 아미노산의 목록은 하기 제공되어 있다.
Figure pct00036
Figure pct00037
하기 약어가 본원의 실시예 및 그 밖의 곳에서 사용된다:
Ph = 페닐
Bn = 벤질
i-Bu = 이소-부틸
i-Pr = 이소-프로필
Me = 메틸
Et = 에틸
Pr = n-프로필
Bu = n-부틸
t-Bu = tert-부틸
Trt = 트리틸
TMS = 트리메틸실릴
TIS = 트리이소프로필실란
Et2O = 디에틸 에테르
HOAc 또는 AcOH = 아세트산
MeCN 또는 AcCN = 아세토니트릴
DMF = N,N-디메틸포름아미드
EtOAc = 에틸 아세테이트
THF = 테트라히드로푸란
TFA = 트리플루오로아세트산
TFE = α,α,α-트리플루오로에탄올
Et2NH = 디에틸아민
NMM = N-메틸모르폴린
NMP = N-메틸피롤리돈
DCM = 디클로로메탄
TEA = 트리에틸아민
min. = 분
h 또는 hr = 시간
L = 리터
mL 또는 ml = 밀리리터
μL = 마이크로리터
g = 그램
mg = 밀리그램
mol = 몰
mmol = 밀리몰
meq = 밀리당량
rt 또는 RT = 실온
sat 또는 sat'd = 포화
aq. = 수성
mp = 융점
BOP 시약 = 벤조트리아졸-1-일옥시-트리스-디메틸아미노-포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (카스트로 시약)
PyBOP 시약 = 벤조트리아졸-1-일옥시-트리피롤리디노 포스포늄 헥사플루오로포스페이트
HBTU = 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
HATU = O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
HCTU = 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
T3P = 2,4,6-트리프로필-1,3,5,2,4,6-트리옥사트리포스포리난-2,4,6-트리옥시드
DMAP = 4-(디메틸아미노)피리딘
DIEA = 디이소프로필에틸아민
Fmoc 또는 FMOC = 플루오레닐메틸옥시카르보닐
Boc 또는 BOC = tert-부틸옥시카르보닐
HOBT 또는 HOBT·H2O = 1-히드록시벤조트리아졸 수화물
Cl-HOBt = 6-클로로-벤조트리아졸
HOAT = 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸
HPLC = 고성능 액체 크로마토그래피
LC/MS = 고성능 액체 크로마토그래피/질량 분광측정법
MS 또는 Mass Spec = 질량 분광측정법
NMR = 핵 자기 공명
Sc 또는 SC = 피하
IP 또는 ip = 복강내
실시예
실시예 1 - 고체 상 펩티드 합성 및 펩티드의 고리화
언급된 경우에, 전체적으로 또는 부분적으로, 본 실시예에 기재된 절차를 사용하여 표 1, 2, 3, 4 및 5에 제시된 마크로시클릭 펩티드를 합성하였다.
Figure pct00038
Figure pct00039
Figure pct00040
Figure pct00041
Figure pct00042
고체-상 펩티드 합성 및 마크로고리화를 위한 일반적 프로토콜. 심포니 펩티드 합성기(Symphony Peptide Synthesizer) (프로테인 테크놀로지 인크.), 애리조나주 투산), 프렐류드 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지 인크., 애리조나주 투산), 또는 리버티 (CEM 매튜스(CEM Matthews), 노스캐롤라이나주), 시버 아미드(Sieber Amide) 수지 (0.71 mmol/g, 0.100 mmol, 141 mg)를 DMF (7 mL x 4분)로 팽윤시키고, 30초마다 N2의 완만한 스트림과 혼합하였다. 용매를 배출하고, 하기 방법을 사용하여 제1 아미노산을 커플링시켰다: Fmoc 기를, 수지를 DMF 중 20% 피페리딘의 용액 (세척당 5 mL 및 2.5분)으로 2회 세척하고, 30초마다 N2의 완만한 스트림과 혼합함으로써 수지-지지된 빌딩 블록으로부터 제거하였다. 수지를 DMF (세척당 5-8 mL 및 1.5분)로 3회 세척하였다. 이어서, 2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)아세트산 (DMF 중 0.2 M 용액, 0.5 mmol)에 이어서 커플링 활성화제 (즉, HATU (켐-임펙스 인터내셔널(Chem-Impex Int'l), DMF 중 0.4M 용액, 1.25 mL, 0.5 mmol)) 및 염기 (즉, N-메틸 모르폴린 (알드리치(Aldrich), DMF 중 0.8 M, 1.25 mL, 1 mmol))를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소의 완만한 스트림에 의해 1시간 동안 교반하였다. 시약을 반응 용기로부터 배출하고, 수지를 DMF (5 mL x 1.5분)로 3회 세척하였다. 리버티 CEM에 대한 전형적 시약은 다음과 같음을 주지하여야 한다: 커플링 활성화제로서 HCTU (DMF 중 0.45 M), 염기로서 DIEA (NMP 중 2 M), 및 탈보호 용액으로서 0.1 M HOBt와 함께 DMF 중 5% 피페라진.
이어서, 생성된 수지-지지된 Fmoc-보호된 디펩티드를 순차적으로 탈보호하고, 반복 방식으로 제3 아미노산 등과 커플링시켜 목적하는 수지-지지된 생성물을 수득하였다.
LCMS 분석을 펩티드 분취물 상에서 수행하였으며, 이는 수지로부터 절단하였다 (분석 양은 TFA/TIS (96:4) 용액 (0.2 mL)으로 실온에서 처리하였음). 목적 선형 서열의 확인 후, Fmoc 기를, 수지를 DMF 중 20% 피페리딘의 용액 (세척당 5 mL 및 2.5분)으로 2회 세척하고 슬러리를 볼텍싱하여 N-말단으로부터 제거하였다. 수지를 DMF (2 x 5 mL)로 세척하였다. 펩티드-수지에 연속적으로 2-클로로아세트산 (0.6 mmol, 57 mg), DMF (5.26 mL), 및 DIC (0.6 mmol, 93 μL)를 첨가하였다. 새로운 슬러리를 1-2일 동안 볼텍싱하였으며, 그 시점에 펩티드-수지를 DMF (1 x 5 mL x 1분) 및 DCM (3 x DCM x 1분)으로 세척하였다.
펩티드를 TFA/TIS (96:4) 용액 (10 mL)으로 1시간 동안 처리하여 수지로부터 탈보호하고 절단하였다. 수지를 여과에 의해 제거하고, 절단 칵테일 (2 x 1 mL)로 세척하고, 합한 여과물을 Et2O (10-15 mL)에 첨가하고, 용액을 0℃에서 칠링하여 펩티드를 용액으로부터 침전해 내었다. 슬러리를 원심분리하여 고체를 펠릿화시키고, 상청액을 경사분리하였다. 새로운 Et2O (25 mL)를 첨가하고, 과정을 3회 반복하여 고체를 세척하였다. 습윤 고체에 0.1 M NH4HCO3/아세토니트릴 (1/1 내지 3/1 (v/v), pH = 8.6)의 용액 또는 100 mM NaH2PO4 중 6 M 구아니딘 HCl (pH = 8.4)을 첨가하였다. 용액을 1-2일 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터링하였다. 반응 용액을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 생성물을 수득하였다.
일반적 분석 프로토콜 및 합성 방법 ±
± 하기 분석 프로토콜 및 합성 방법을 실시예 1 내지 4000에서 사용하였다.
분석 데이터:
질량 분광측정법: "ESI-MS(+)"는 양이온 모드로 수행된 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-MS(-)"는 음이온 모드로 수행된 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-HRMS(+)"는 양이온 모드로 수행된 고해상도 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-HRMS(-)"는 음이온 모드로 수행된 고해상도 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미한다. 검출된 질량은 "m/z" 단위 지정에 따라 보고된다. 1000 초과의 정확한 질량을 갖는 화합물은 종종 이중-하전 또는 삼중-하전 이온으로서 검출된다.
분석 LCMS 조건 A:
칼럼: BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B:0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 50℃; 구배: 2분에 걸쳐 2% B에서 98% B, 이어서 98% B에서 0.5분 유지; 유량: 0.8 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 LCMS 조건 B:
칼럼: BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 50℃; 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.75-분 유지; 유량: 1.11 mL/분.
분석 LCMS 조건 C:
칼럼: BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 0.2% 포름산 및 0.01% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.2% 포름산 및 0.01% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 50℃; 구배: 2분에 걸쳐 2% B에서 80% B, 0.1분에 걸쳐 80% B에서 98% B, 이어서 98% B에서 0.5분 유지; 유량: 0.8 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 LCMS 조건 D:
칼럼: 워터스 액퀴티(Waters Acquity) UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 10 mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10 mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 50℃; 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.75-분 유지; 유량: 1.11 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 LCMS 조건 E:
칼럼: 워터스 액퀴티 UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 50℃; 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.75-분 유지; 유량: 1.11 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 LCMS 조건 F:
칼럼: 워터스 엑스브리지(Waters XBridge) C18, 2.1 x 50 mm; 이동상 A: 10 mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10 mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 35℃; 구배: 4분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 1-분 유지; 유량: 4 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 LCMS 조건 G:
피니간(Finnigan) LTQ 질량 분광계; 칼럼: 페노메넥스(PHENOMENEX)® 쥬피터(Jupiter) C4, 1 x 50 mm; 이동상 A: 물 중 1% 포름산; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산; 온도: 30℃; 구배: 1% B, 1분 유지; 3분에 걸쳐 1-95% B, 이어서 95% B에서 3-분 유지; 유량: 0.15 mL/분.
분석 HPLC 조건 A:
칼럼: YMC 팩 ODS-AQ 3μm 150x4.6mm 이동상 A: 0.1% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 60℃; 구배: 25분에 걸쳐 35% B에서 80% B; 유량: 1 mL/분; 검출: 217 nm에서 UV.
분석 HPLC 조건 B:
칼럼: YMC 팩 ODS-AQ 3μm 150x4.6mm 이동상 A: 0.1% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 60℃; 구배: 25분에 걸쳐 25% B에서 75% B; 유량: 1 mL/분; 검출: 217 nm에서 UV.
분석 HPLC 조건 C:
칼럼: YMC 팩 ODS-AQ 3μm 150x4.6mm 이동상 A: 0.1% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 60℃; 구배: 25분에 걸쳐 20% B에서 70% B; 유량: 1 mL/분; 검출: 217 nm에서 UV.
분석 HPLC 조건 D:
칼럼: YMC 팩 ODS-AQ 3μm 150x4.6mm 이동상 A: 0.1% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 60℃; 구배: 25분에 걸쳐 15% B에서 65% B; 유량: 1 mL/분; 검출: 217 nm에서 UV.
분석 HPLC 조건 E:
칼럼: YMC 팩 ODS-AQ 3μm 150x4.6mm 이동상 A: 0.1% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 60℃; 구배: 20분에 걸쳐 25% B에서 60% B; 유량: 1.25 mL/분; 검출: 217 nm에서 UV.
분석 HPLC 조건 F:
칼럼: YMC 팩 ODS-AQ 3μm 150x4.6mm 이동상 A: 0.1% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 60℃; 구배: 20분에 걸쳐 25% B에서 65% B; 유량: 1.25 mL/분; 검출: 217 nm에서 UV.
분석 HPLC 조건 G:
칼럼: 선파이어(SunFire) C18 3.5μm, 3.0x150mm; 이동상 A: 0.05% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 50℃; 구배: 12분에 걸쳐 10-100% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 1 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 HPLC 조건 H:
칼럼: 엑스브리지 페닐(XBridge Phenyl) 3.5x150μm, 이동상 A: 0.05% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 50℃; 구배: 12분에 걸쳐 10-100% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 1 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 HPLC 조건 I:
칼럼: 페노메넥스® 루나(Luna) 5μ C18(2) 150 x 4.6 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 물, 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 아세토니트릴, 구배 20분에 걸쳐 5-100% B, 이어서 100% B에서 5분 유지; 유량 1mL/분, 검출: 220에서 UV.
분석 HPLC 조건 J:
칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 150 x 4.6 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 물, 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 아세토니트릴, 구배 20분에 걸쳐 10-100% B, 이어서 100% B에서 5분 유지; 유량 1mL/분, 검출: 220에서 UV.
일반적 절차:
프렐류드 방법 A:
모든 조작을 프렐류드 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 언급되지 않는 한 하단 프릿이 장착된 10 또는 45 mL 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. 튜브를 튜브의 상단 및 하단 둘 다를 통해 프렐류드 펩티드 합성기에 연결하였다. DMF 및 DCM을 튜브의 상단을 통해 첨가할 수 있었으며, 이를 튜브의 측면으로 동등하게 세척해 내었다. 나머지 시약을 튜브의 하단을 통해 첨가하고, 프릿을 통해 통과시켜 수지를 접촉시켰다. 모든 용액을 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 교반"은 하단 프릿을 통한 N2 기체의 짧은 펄스를 기재하며; 펄스는 대략 5초 동안 지속되고, 30초마다 발생한다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. DMF = 디메틸포름아미드; DIC = N,N'-디이소프로필카르보디이미드; HOAt = 1-히드록시 7-아자벤조트리아졸; 시버 = Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시, 여기서 "3-일옥시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 시버 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.71 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드(Merrifield) 중합체 (폴리스티렌)이다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct00043
"프렐류드 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 시버-메리필드 수지의 대략 140 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "단일-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 Fmoc-N-메틸 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "2급 아민-커플링 절차"를 사용하였다. 펩티드의 N-말단에 대한 클로로아세틸 기의 커플링은 하기 상세화된 "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차" 또는 "클로로아세트산 커플링 절차"에 의해 기재되어 있다.
수지-팽윤 절차:
40 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 메리필드:시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (5.0 mL) 및 DCM (5.0 mL)을 첨가하고, 이 때 혼합물을 반응 용기의 하단으로부터의 N2 버블링과 함께 10분 동안 주기적으로 교반한 후에 용매를 배출하였다.
단일-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 및 HOAt (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량)에 이어서 DIC의 용액 (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 60분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
2급 아민-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 및 HOAt (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 5 당량)에 이어서 DIC의 용액 (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 5 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 300분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 DMF 중 DIPEA (4.0 mmol, 0.699 mL, 40 당량), 및 클로로아세틸 클로라이드 (2.0 mmol, 0.160 mL, 20 당량)의 용액 3.0 mL를 첨가하였다. 혼합물을 12 내지 18시간 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DCM (4.0 mL)을 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 배출하였다.
프렐류드 방법 B:
모든 조작을 프렐류드 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 하단 프릿이 장착된 10 또는 45 mL 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. DMF 및 DCM을 튜브의 상단을 첨가할 수 있었으며, 이를 튜브의 측면으로 동등하게 세척해 내었다. 나머지 시약을 튜브의 하단을 통해 첨가하고, 프릿을 통해 통과시켜 수지를 접촉시켰다. 모든 용액을 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 교반"은 하단 프릿을 통한 N2 기체의 짧은 펄스를 기재하며; 펄스는 대략 5초 동안 지속되고, 30초마다 발생한다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. DMF = 디메틸포름아미드; HCTU = 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄; DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 시버 = Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시, 여기서 "3-일옥시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 시버 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.71 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct00044
"프렐류드 방법 B"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 시버-메리필드 수지의 대략 140 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "단일-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "2급 아민-커플링 절차"를 사용하였다. 펩티드의 N-말단에 대한 클로로아세틸 기의 커플링은 하기 상세화된 "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차" 또는 "클로로아세트산 커플링 절차"에 의해 기재되어 있다.
수지-팽윤 절차:
40 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 메리필드:시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다 (팽윤시켰다): 반응 용기에 DMF (5.0 mL) 및 DCM (5.0 mL)을 첨가하고, 이 때 혼합물을 반응 용기의 하단으로부터의 N2 버블링과 함께 10분 동안 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다.
단일-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량)에 이어서 HCTU (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 2.5 mL, 20 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
이중-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량)에 이어서 HCTU (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 2.5 mL, 20 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 용기의 상단을 통해 DMF (4.0 mL)로 연속적으로 3회 세척하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량)에 이어서 HCTU (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 2.5 mL, 20 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
2급 아민-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 10 당량)에 이어서 HCTU (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 10 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.5 mL, 12 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 DMF 중 DIPEA (4.0 mmol, 0.699 mL, 40 당량), 및 클로로아세틸 클로라이드 (2.0 mmol, 0.160 mL, 20 당량)의 용액 3.0 mL를 첨가하였다. 혼합물을 12 내지 18시간 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, CH2Cl2 (2.0 mL)를 용기의 상단에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다.
클로로아세트산 커플링 절차 B:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 DMF (2.0 mL), 클로로아세트산 (1.2 mmol, 113 mg, 12 당량), 및 N,N'-디이소프로필카르보디이미드 (1.2 mmol, 0.187 mL, 12 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 12 내지 18시간 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, CH2Cl2 (2.0 mL)를 용기의 상단에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다.
프렐류드 방법 C:
모든 조작을 프렐류드 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 언급되지 않는 한 하단 프릿이 장착된 10 또는 45 mL 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. 튜브를 튜브의 상단 및 하단 둘 다를 통해 프렐류드 펩티드 합성기에 연결하였다. DMF 및 DCM을 튜브의 상단을 통해 첨가할 수 있었으며, 이를 튜브의 측면으로 동등하게 세척해 내었다. 나머지 시약을 튜브의 하단을 통해 첨가하고, 프릿을 통해 통과시켜 수지를 접촉시켰다. 모든 용액을 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 교반"은 하단 프릿을 통한 N2 기체의 짧은 펄스를 기재하며; 펄스는 대략 5초 동안 지속되고, 30초마다 발생한다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. HATU 용액은 제조 5일 이내에 사용하였다. DMF = 디메틸포름아미드; HCTU = 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄; HATU = 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 시버 = Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시, 여기서 "3-일옥시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 시버 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.71 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct00045
"프렐류드 방법 C"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 시버-메리필드 수지의 대략 140 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "단일-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "2급 아민-커플링 절차"를 사용하였다. 수지의 최종 세척은 하기 기재된 "최종 세척 절차"를 사용하였다.
수지-팽윤 절차:
40 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 메리필드:시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다 (팽윤시켰다): 반응 용기에 DMF (5.0 mL) 및 DCM (5.0 mL)을 첨가하고, 이 때 혼합물을 반응 용기의 하단으로부터의 N2 버블링과 함께 10분 동안 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다.
단일-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 2.5 mL, 20 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 60분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
2급 아민-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 1.5 mL, 12 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 300분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 1.5 mL, 12 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 300분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
통상의 아미노산-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 0.5 내지 2.5 mL, 1 내지 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 0.5 내지 2.5 mL, 1 내지 5 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 0.5 내지 1.5 mL, 4 내지 12 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 60분 내지 600분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
최종 세척 절차:
수지를 하기와 같이 연속적으로 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DCM (4.0 mL)을 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
클로로아세트산 커플링 절차:
수동 단계 주목. 이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5분 동안 진탕시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 DMF (2.0 mL), 클로로아세트산 (1.2 mmol, 113 mg, 12 당량), 및 N,N'-디이소프로필카르보디이미드 (1.2 mmol, 0.187 mL, 12 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 12 내지 18시간 동안 진탕시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 교반한 후에 용액을 프릿를 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, CH2Cl2 (4.0 mL)를 용기의 상단에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다.
프렐류드 방법 D:
모든 조작을 프렐류드 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 언급되지 않는 한 하단 프릿이 장착된 10 또는 45 mL 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. 튜브를 튜브의 상단 및 하단 둘 다를 통해 프렐류드 펩티드 합성기에 연결하였다. DMF 및 DCM을 튜브의 상단을 통해 첨가할 수 있었으며, 이를 튜브의 측면으로 동등하게 세척해 내었다. 나머지 시약을 튜브의 하단을 통해 첨가하고, 프릿을 통해 통과시켜 수지를 접촉시켰다. 모든 용액을 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 교반"은 하단 프릿을 통한 N2 기체의 짧은 펄스를 기재하며; 펄스는 대략 5초 동안 지속되고, 30초마다 발생한다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. HATU 용액은 제조 5일 이내에 사용하였다. DMF = 디메틸포름아미드; HCTU = 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄; HATU = 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 시버 = Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시, 여기서 "3-일옥시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 시버 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.71 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct00046
"프렐류드 방법 D"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 시버-메리필드 수지의 대략 140 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "단일-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "2급 아민-커플링 절차"를 사용하였다. 수지의 최종 세척은 하기 기재된 "최종 세척 절차"를 사용하였다.
수지-팽윤 절차:
40 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 메리필드:시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다 (팽윤시켰다): 반응 용기에 DMF (5.0 mL) 및 DCM (5.0 mL)을 첨가하고, 이 때 혼합물을 반응 용기의 하단으로부터의 N2 버블링과 함께 10분 동안 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다.
단일-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 2.5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 2.5 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 0.75 mL, 5 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
2급 아민-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 2.5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 2.5 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 0.75 mL, 5 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 2.5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 2.5 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 0.75 mL, 5 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
최종 세척 절차:
수지를 하기와 같이 연속적으로 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DCM (4.0 mL)을 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
클로로아세트산 커플링 절차:
수동 단계 주목. 이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5분 동안 진탕시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 DMF (2.0 mL), 클로로아세트산 (1.2 mmol, 113 mg, 12 당량), 및 N,N'-디이소프로필카르보디이미드 (1.2 mmol, 0.187 mL, 12 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 12 내지 18시간 동안 진탕시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, CH2Cl2 (4.0 mL)를 용기의 상단에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다.
CEM 방법 A:
모든 조작을 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 (CEM 코포레이션(CEM Corporation)) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 언급되지 않는 한 CEM 디스커버리 마이크로웨이브 유닛에 하단 프릿이 장착된 30 또는 125 mL 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. 튜브를 튜브의 하단 및 상단 둘 다를 통해 CEM 리버티 합성기에 연결하였다. DMF 및 DCM을 튜브의 상단 및 하단을 통해 첨가할 수 있었으며, 이를 튜브의 측면으로 동등하게 세척해 내었다. 모든 용액을 상단으로부터 수지를 옮기는 것을 제외하고는 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 버블링"은 하단 프릿을 통해 N2 기체의 짧은 버블링을 기재한다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. HATU 용액은 제조 5일 이내에 사용하였다. DMF = 디메틸포름아미드; HCTU = 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄; HATU = 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 시버 = Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시, 여기서 "3-일옥시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 시버 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.71 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 다른 통상의 수지 예컨대 링크, 클로로트리틸(ChloroTrityl), 또는 다른 산 감수성 링커를 합성에 사용할 수 있으며, 시버 아미드 수지가 달리 언급되지 않는 한 구체적 실시예에서 사용된다. 괄호 안에 제시된 측쇄 보호기를 갖는 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있다.
Figure pct00047
"CEM 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 시버-메리필드 수지의 대략 140 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "단일-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "2급 아민-커플링 절차"를 사용하였다. 펩티드의 N-말단에 대한 클로로아세틸 기의 커플링은 상기 상세화된 "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차" 또는 "클로로아세트산 커플링 절차"에 의해 기재된다.
수지-팽윤 절차:
50 mL 폴리프로필렌 원추형 튜브에 메리필드:시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하였다. 이어서, DMF (7 mL)를 튜브에 첨가한 다음, DCM (7 mL)을 첨가하였다. 이어서, 수지를 용기의 상단으로부터 반응 용기로 옮겼다. 절차를 추가로 2회 반복하였다. DMF (7 mL)를 첨가한 다음, DCM (7 mL)을 첨가하였다. 수지를 15분 동안 반응 용기의 하단으로부터의 N2 버블링과 함께 팽윤되도록 한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다.
표준 커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), HATU (DMF 중 0.5M, 1.0 mL, 5 당량), 및 DIPEA (NMP 중 2M, 0.5 mL, 10 당량)를 첨가하였다. 혼합물을, Fmoc-Cys(Trt)-OH 및 Fmoc-His(Trt)-OH를 50℃에서 커플링시키는 것을 제외하고는, 모든 아미노산에 대해 75℃에서 5분 동안 N2 버블링시킴으로써 혼합하고, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2분 동안 주기적으로 버블링시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척에 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
이중-커플 커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), HATU (DMF 중 0.5M, 1.0 mL, 5 당량), 및 DIPEA (NMP 중 2M, 0.5 mL, 10 당량)를 첨가하였다. 혼합물을, Fmoc-Cys(Trt)-OH 및 Fmoc-His(Trt)-OH를 50℃에서 커플링시키는 것을 제외하고는, 모든 아미노산에 대해 75℃에서 5분 동안 N2 버블링시킴으로써 혼합하고, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), HATU (DMF 중 0.5M, 1.0 mL, 5 당량), 및 DIPEA (NMP 중 2M, 0.5 mL, 10 당량)를 첨가하였다. 혼합물을, Fmoc-Cys(Trt)-OH 및 Fmoc-His(Trt)-OH를 50℃에서 커플링시키는 것을 제외하고는, 모든 아미노산에 대해 75℃에서 5분 동안 N2 버블링시킴으로써 혼합하고, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2분 동안 주기적으로 버블링시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척에 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
2급 아민 커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 DMF (7 mL) 중 5% 피페라진 및 0.1 M HOBt의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 75℃에서 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 배출하였다. 이 절차를 1회 더 반복하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), HCTU (DMF 중 0.5M, 1.0 mL, 5 당량), 및 DIPEA (NMP 중 2M, 0.5 mL, 10 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 모든 아미노산에 대해 75℃에서 5분 동안 (Fmoc-Cys(Trt)-OH 및 Fmoc-His(Trt)-OH에 대해 50℃)에 이어서 가열 없이 6시간 동안 N2 버블링에 의해 혼합하였다. 배출 후, 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2분 동안 주기적으로 버블링시킨 다음, 용액을 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척에 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
통상의 아미노산-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 HATU (2.5 당량 내지 10 당량)를 함유하는 아미노산 용액 (1.25 mL 내지 5 mL, 2.5 당량 내지 10 당량), 및 최종적으로 DIPEA (NMP 중 2M, 0.5 mL 내지 1 mL, 20 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃ 내지 75℃에서 5분 내지 2시간 동안 N2 버블링에 의해 혼합한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2분 동안 주기적으로 버블링시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척에 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
심포니 방법 A:
모든 조작을 심포니 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 달리 언급되지 않는 한 하단 프릿이 장착된 심포니 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. 튜브를 튜브의 하단 및 상단 둘 다를 통해 심포니 펩티드 합성기에 연결하였다. 모든 용매, DMF, DCM, 아미노산 및 시약을 튜브의 하단을 통해 첨가하고, 프릿을 통해 통과시켜 수지를 접촉시켰다. 모든 용액을 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 교반"은 하단 프릿을 통한 N2 기체의 짧은 펄스를 기재하고; 펄스는 대략 5초 동안 지속되고, 15초마다 발생한다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. HATU 용액은 제조 5일 이내에 사용하였다. DMF = 디메틸포름아미드; HCTU = 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄; HATU = 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; NMM= n-메틸 모르폴린; DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 시버 = Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시, 여기서 "3-일옥시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 시버 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.71 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 다른 통상의 산 감수성 수지, 예컨대 링크 또는 관능화 클로로 트리틸 수지가 또한 합성에 사용될 수 있다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct00048
"심포니 방법 A"의 절차는 0.050 mmol 규모 상에서 수행되는 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 시버-메리필드 수지의 대략 70 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.050 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "표준-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 "이중-커플링"을 사용하고, 통상의 아미노산을 하기 기재된 아미노산 "블랭크 커플링"의 수동 블랭크 부가를 통해 커플링하였다.
팽윤 절차:
심포니 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 메리필드:시버 수지 (70 mg, 0.050 mmol)를 첨가하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다 (팽윤시켰다): 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 10분 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 용기의 하단을 통해 첨가된 DMF (6.25 mL)로 세척하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 30초 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
표준-커플링 절차:
수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 30초 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 용기의 하단을 통해 첨가된 DMF (6.25 mL)로 세척하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
2급 아민-커플링 절차:
수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 30초 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 300분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 용기의 하단을 통해 첨가된 DMF (6.25 mL)로 세척하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 300분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
통상의 아미노산-커플링 절차:
수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 30초 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 합성을 심포니 소프트웨어에 의해 중단하여 반응 용기에 통상의 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)을 수동으로 첨가한 다음, 자동화를 재시작하고: HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 300분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 Ac2O/DIPEA/DMF (v/v/v 1:1:3 2.5 mL)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
심포니 방법 B:
모든 조작을 심포니 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 달리 언급되지 않는 한 하단 프릿이 장착된 심포니 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. 튜브를 튜브의 하단 및 상단 둘 다를 통해 심포니 펩티드 합성기에 연결하였다. 모든 용매, DMF, DCM, 아미노산 및 시약을 튜브의 하단을 통해 첨가하고, 프릿을 통해 통과시켜 수지를 접촉시켰다. 모든 용액을 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 교반"은 하단 프릿을 통한 N2 기체의 짧은 펄스를 기재하고; 펄스는 대략 5초 동안 지속되고, 15초마다 발생한다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. HATU 용액은 제조 5일 이내에 사용하였다. DMF = 디메틸포름아미드; HCTU = 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄; HATU = 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; NMM= n-메틸 모르폴린; DIEA 또는 DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 시버 = Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시, 여기서 "3-일옥시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 시버 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.71 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 다른 통상의 산 감수성 수지, 예컨대 링크 또는 관능화 클로로 트리틸 수지가 또한 합성에 사용될 수 있다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct00049
"심포니 방법 B"의 절차는 0.050 mmol 규모 상에서 수행되는 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 시버-메리필드 수지의 대략 70 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.050 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "표준-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 "2급 아민-커플링 절차 B"를 사용하고, 통상의 아미노산을 하기 기재된 아미노산 "통상의 아미노산-커플링 절차"의 수동 블랭크 첨가를 통해 커플링하고, 클로로아세틸 무수물을 하기 기재된 "최종 캡핑 절차"를 사용하여 서열의 최종 위치에 첨가하였다.
팽윤 절차:
심포니 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 메리필드:시버 수지 (70 mg, 0.050 mmol)를 첨가하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다 (팽윤시켰다): 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 10분 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 용기의 하단을 통해 첨가된 DMF (6.25 mL)로 세척하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 30초 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
표준-커플링 절차:
수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 30초 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 Ac2O/DIPEA/DMF (v/v/v 1:1:3 2.5 mL)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
2급 아민-커플링 절차:
수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 30초 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 용기의 하단을 통해 첨가된 DMF (6.25 mL)로 세척하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 Ac2O/DIPEA/DMF (v/v/v 1:1:3 2.5 mL)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
통상의 아미노산-커플링 절차:
수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 30초 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 시스템을 통상의 아미노산의 반응 용기에의 수동 첨가 (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량)를 위해 시스템에 의해 중단시킨 다음, 자동화를 재시작하여 반응 용기에 HATU (DMF 중 0.2M, 1.25 mL, 5 당량), 및 최종적으로 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 Ac2O/DIPEA/DMF (v/v/v 1:1:3 2.5 mL)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
최종 캡핑 절차:
수지를 하기와 같이 3회 세척하였다: 반응 용기에 DMF (2.5 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 30초 동안 반응 용기의 하단으로부터 N2 버블링과 함께 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가한 다음, 클로로아세트산 무수물 (DMF 중 0.4M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 용기의 하단을 통해 첨가된 DMF (6.25 mL)로 세척하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 NMM (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가한 다음, 클로로아세트산 무수물 (DMF 중 0.4M, 1.25 mL, 10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 6회 세척하였다: DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 Ac2O/DIPEA/DMF (v/v/v 1:1:3 2.5 mL)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.5 mL)를 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DCM (2.5 mL)을 용기의 하단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 이어서, 생성된 수지를 10분 동안 질소의 스트림으로 건조시켰다.
전반적 탈보호 방법 A:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "전반적 탈보호 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. "탈보호 용액"을 트리플루오로아세트산:물:트리이소프로필실란:디티오트레이톨 (92.5:2.5:2.5:2.5 v:v:v:w)을 사용하여 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 프릿이 장착된 25 mL 시린지로 옮겼다. 시린지에 "탈보호 용액" (5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 85분 동안 진탕기에서 혼합하였다. 용액을 여과하고, 농축시키고, 디에틸 에테르 (30 mL)로 희석하였다. 침전된 고체를 3분 동안 원심분리하였다. 상청액 용액을 경사분리하고, 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 재현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 고진공 하에 건조시켰다. 조 펩티드를 백색 내지 회백색 고체로서 수득하였다.
전반적 탈보호 방법 B:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "전반적 탈보호 방법 B"의 절차는 0.04 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.04 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. "탈보호 용액"을 트리플루오로아세트산:트리이소프로필실란 (96:4; v:v)을 사용하여 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 프릿이 장착된 10 mL 시린지로 옮겼다. 시린지에 "탈보호 용액" (2.0-3.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 또는 1.5시간 동안 진탕기에서 혼합하였다. 용액을 여과하고, 탈보호 용액 (0.5 mL)으로 세척하고, 농축시키고, 디에틸 에테르 (30 mL)로 희석하였다. 침전된 고체를 3분 동안 원심분리하였다. 상청액 용액을 경사분리하고, 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 재현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 고진공 하에 건조시켰다. 조 펩티드를 백색 내지 회백색 고체로서 수득하였다.
전반적 탈보호 방법 C:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "전반적 탈보호 방법 C"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. "탈보호 용액"을 트리플루오로아세트산:트리이소프로필실란:디티오트레이톨 (95:2.5:2.5 v:v:w)을 사용하여 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 바이오-라드(Bio-Rad) 튜브로 옮겼다. 바이오-라드 튜브에 "탈보호 용액" (4.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 60분 동안 진탕기에서 혼합하였다. 용액을 여과하고, 디에틸 에테르 (30 mL)로 희석하였다. 침전된 고체를 3분 동안 원심분리하였다. 상청액 용액을 경사분리하고, 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 재현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 고진공 하에 건조시켰다. 조 펩티드를 백색 내지 회백색 고체로서 수득하였다.
전반적 탈보호 방법 D:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "전반적 탈보호 방법 D"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. "탈보호 용액"을 트리플루오로아세트산:트리이소프로필실란:디티오트레이톨 (94:3:3 v:v:w)을 사용하여 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 프릿이 장착된 25 mL 시린지로 옮겼다. 시린지에 "탈보호 용액" (5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 진탕기에서 혼합하였다. 용액을 여과하고, 디에틸 에테르 (30 mL)로 희석하였다. 침전된 고체를 3분 동안 원심분리하였다. 상청액 용액을 경사분리하고, 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 재현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 고진공 하에 건조시켰다. 조 펩티드를 백색 내지 회백색 고체로서 수득하였다.
전반적 탈보호 방법 E:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "전반적 탈보호 방법 E"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 Fmoc Gly-ClTrt 링커의 양에 의해 결정된다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. "탈보호 용액"을 트리플루오로아세트산:트리이소프로필실란:디티오트레이톨 (95:2.5:2.5 v:v:w)을 사용하여 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 바이오-라드 튜브로 옮겼다. 바이오-라드 튜브에 "탈보호 용액" (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 진탕기에서 혼합하였다. 용액을 여과하고, 원심분리 튜브에 수집하였다. 바이오-라드 튜브에 "탈보호 용액" (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 진탕기에서 혼합하였다. 용액을 여과하고, 원심분리 튜브에 수집하였다. 바이오-라드 튜브에 "탈보호 용액" (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 진탕기에서 혼합하였다. 용액을 여과하고, 원심분리 튜브에 수집하였다. 원심분리 튜브 중 용액을 60분 동안 정치하였다. 이어서, 수집된 용액을 디에틸 에테르 (30 mL)로 희석하고, 침전물이 형성되었다. 침전된 고체를 3분 동안 원심분리하였다. 상청액 용액을 경사분리하고, 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 재현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 고진공 하에 건조시켰다. 조 펩티드를 백색 내지 회백색 고체로서 수득하였다.
전반적 탈보호 방법 F:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "전반적 탈보호 방법 F"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 링크 링커의 양에 의해 결정된다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. "탈보호 용액"을 트리플루오로아세트산:트리이소프로필실란:디티오트레이톨 (95:2.5:2.5 v:v:w)을 사용하여 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 6 ml 바이오-라드 튜브로 옮겼다. 바이오-라드에 "탈보호 용액" (4.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 90분 동안 진탕기에서 혼합하였다. 용액을 여과하고, 디에틸 에테르 (30 mL) 중에서 희석하였다. 침전된 고체를 3분 동안 원심분리하였다. 상청액 용액을 경사분리하고, 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 재현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 경사분리하고, 나머지 고체를 고진공 하에 건조시켰다. 조 펩티드를 백색 내지 회백색 고체로서 수득하였다.
고리화 방법 A
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "고리화 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 펩티드를 생성하기 위해 사용된 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 절차에 사용된 펩티드의 양의 직접 결정을 기초로 하지 않는다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 조 펩티드 고체를 아세토니트릴:수성 8M 구아니딘/50mM 트리스 (1:3) (pH 8.6) (7 mL:18 mL 또는 유사한 비율)의 용액 중에 용해시키고, 이어서 용액을, 필요한 경우에, 수성 NaOH (1.0M)를 사용하여 pH = 8.5-9.0으로 조정하였다. 이어서, 용액을 12 내지 18시간 동안 진탕기를 사용하여 혼합하였다. 반응 용액을 농축시킨 다음, 잔류물을 아세토니트릴:물 중에 용해시켰다. 이 용액을 역상 HPLC 정제로 처리하여 목적 시클릭 펩티드를 수득하였다.
고리화 방법 C:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "고리화 방법 C"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 펩티드를 생성하기 위해 사용된 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 절차에 사용된 펩티드의 양의 직접 결정을 기초로 하지 않는다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 조 펩티드 고체를 아세토니트릴:수성 0.1M 중탄산암모늄 완충액 (11 mL:24 mL 또는 유사한 비율)의 용액 중에 용해시키고, 이어서 용액을 수성 NaOH (1.0M)를 사용하여 pH = 8.5-9.0으로 조심스럽게 조정하였다. 이어서, 용액을 12 내지 18시간 동안 진탕기를 사용하여 혼합하였다. 반응 용액을 농축시킨 다음, 잔류물을 아세토니트릴:물 중에 용해시켰다. 이 용액을 역상 HPLC 정제로 처리하여 목적 시클릭 펩티드를 수득하였다.
고리화 방법 D:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "고리화 방법 D"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 펩티드를 생성하기 위해 사용된 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 절차에 사용된 펩티드의 양의 직접 결정을 기초로 하지 않는다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 조 펩티드 고체를 아세토니트릴:수성 0.1M 중탄산암모늄 완충액 (11 mL:24 mL)의 용액 중에 용해시키고, 이어서 용액을 수성 NaOH (1.0M)를 사용하여 pH = 8.5-9.0으로 조심스럽게 조정하였다. 이어서, 용액을 12 내지 18시간 동안 교반 하에 혼합하였다. 반응 용액을 농축시킨 다음, 잔류물을 아세토니트릴:물 중에 용해시켰다. 이 용액을 역상 HPLC 정제로 처리하여 목적 시클릭 펩티드를 수득하였다.
고리화 방법 E:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "고리화 방법 E"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 펩티드를 생성하기 위해 사용된 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 절차에 사용된 펩티드의 양의 직접 결정을 기초로 하지 않는다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 조 펩티드 고체를 수성 6M 구아니딘 HCl 완충액의 용액 (15 mL) 중에 용해시키고, 이어서 용액을 교반 하에 12 내지 18시간 동안 혼합하였다. 반응 용액을 농축시키고, DMSO 15 mL를 잔류물에 첨가하여 슬러리를 수득하였으며, 이를 여과하였다. 이 여과된 용액을 역상 HPLC 정제로 처리하여 목적 시클릭 펩티드를 수득하였다.
수동 커플링 절차 A:
이전 단계로부터의 수지가 들은 바이오-라드 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 주기적으로 진탕시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 진탕시킨 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 전형적 아미노산 (1.2-10 당량) (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량)에 이어서 전형적 HATU (1.210 당량) (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), 및 최종적으로 전형적 DIPEA (2.4- 20 당량) (DMF 중 0.8M, 1.25 mL, 10 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 60분 내지 18시간 동안 진탕시킨 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 진탕시킨 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다.
수지 상 N-메틸화 방법 A. (Turner, R.A. et al., Org. Lett., 15(19):5012-5015 (2013)):
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "수지 상 N-메틸화 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 펩티드를 생성하기 위해 사용된 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 절차에 사용된 펩티드의 양의 직접 결정을 기초로 하지 않는다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다.
수지를 25 mL 프릿화 시린지로 옮겼다. 수지에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 진탕시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 DMF (4.0 mL)로 3회 세척하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 4.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 진탕시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 연속적으로 DMF (4.0 mL)로 3회 및 DCM (4.0 mL)으로 3회 세척하였다. 수지를 DMF (2.0 mL) 및 에틸 트리플루오로아세테이트 (0.119 ml, 1.00 mmol), 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔 (0.181 ml, 1.20 mmol) 중에 현탁시켰다. 혼합물을 진탕기에 60분 동안 두었다. 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 연속적으로 DMF (4.0 mL)로 3회 및 DCM (4.0 mL)으로 3회 세척하였다.
수지를 건조 THF (2.0 mL)로 3회 세척하여 임의의 잔류수를 제거하였다. 오븐 건조된 4.0 mL 바이알에 건조 4 Å 분자체 (20 mg) 상의 THF (1.0 mL) 및 트리페닐포스핀 (131 mg, 0.500 mmol)을 첨가하였다. 용액을 수지로 옮기고, 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.097 mL, 0.5 mmol)를 천천히 첨가하였다. 수지를 15분 동안 교반하였다. 용액을 프릿을 통해 배출하고, 수지를 건조 THF (2.0 mL)로 3회 세척하여 임의의 잔류수를 제거하였다. 오븐 건조된 4.0 mL 바이알에 건조 4 Å 분자체 (20 mg) 상의 THF (1.0 mL), 트리페닐포스핀 (131 mg, 0.500 mmol)을 첨가하였다. 용액을 수지로 옮기고, 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.097 mL, 0.5 mmol)를 천천히 첨가하였다. 수지를 15분 동안 교반하였다. 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 연속적으로 DMF (4.0 mL)로 3회 및 DCM (4.0 mL)으로 3회 세척하였다. 수지를 에탄올 (1.0 mL) 및 THF (1.0 mL) 중에 현탁시키고, 수소화붕소나트륨 (37.8 mg, 1.000 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 배출하였다. 수지를 연속적으로 DMF (4.0 mL)로 3회 및 DCM (4.0 mL)으로 3회 세척하였다.
마이크로절단 A:
수지의 소량의 < 10 mg 샘플에 실온에서 진탕 하에 2 방울의 TIS 및 트리플루오로아세트산 1 mL를 첨가하였다. 1시간 후, 소량의 분취물을 제거하고, 0.5 mL 아세토니트릴로 희석하고, 여과하고, LC-MS에 의해 분석하였다.
본원에 개시된 특정한 펩티드를 위한 합성 프로토콜이 하기 실시예에 제공된다.
실시예 2 내지 71은 화학식 Ia 내지 Id 마크로시클릭 펩티드를 위한 합성 반응식을 제공한다.
실시예 72 내지 88은 화학식 IIa 내지 IIc 마크로시클릭 펩티드를 위한 합성 반응식을 제공한다.
실시예 100 내지 116은 화학식 IIIa 내지 IIIc 마크로시클릭 펩티드를 위한 합성 반응식을 제공한다.
실시예 116 내지 119은 화학식 I 및 II의 C-말단 PEG화 마크로시클릭 펩티드를 위한 합성 반응식을 제공한다.
실시예 2 - 화합물 번호 1의 합성
Figure pct00050
40 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하고, 반응 용기를 프렐류드 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Arg(Pbf)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp(Boc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Ser(tBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp(Boc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Leu-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-His(Trt) -OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Pro-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Asn(Trt) -OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Ala-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Phe-OH를 사용하고;
"클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A"에 따르고;
"전반적 탈보호 방법 A"에 따르고;
"고리화 방법 A"에 따른다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® C18 루나, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 20-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.30분; ESI-MS(+) m/z 926.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 A: 체류 시간 = 11.16분.
실시예 3 - 화합물 번호 2의 합성
Figure pct00051
실시예 3을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® C18 루나, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 55분에 걸쳐 20-75% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.19분; ESI-MS(+) m/z 959.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 B: 체류 시간 = 14.49분.
실시예 4 - 화합물 번호 3의 합성
Figure pct00052
실시예 4를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 10-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.1 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.21분; ESI-MS(+) m/z 970.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 B: 체류 시간 = 19.91분.
실시예 5 - 화합물 번호 4의 합성
Figure pct00053
실시예 5를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열함; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 10-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.1 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.28분; ESI-MS(+) m/z 948.3 (M+2H).
분석 HPLC 조건 C: 체류 시간 = 19.03분.
실시예 6 - 화합물 번호 5의 합성
Figure pct00054
40 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하고, 반응 용기를 프렐류드 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르고;
Fmoc-N-메틸 아미노산의 커플링을 위해 및 2급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차"에 따르고;
"프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A"에 따르고;
"전반적 탈보호 방법 C"에 따르고;
"고리화 방법 C"에 따른다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의해 98%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.412분; ESI-MS(+) m/z 888.75 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.539분; ESI-MS(+) m/z 888.50 (M+2H).
실시예 7 - 화합물 번호 6의 합성
Figure pct00055
실시예 7을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 10-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.20분; ESI-MS(+) m/z 920.3 (M+2H).
분석 HPLC 조건 C: 체류 시간 = 15.66분.
실시예 8 - 화합물 번호 7의 합성
Figure pct00056
실시예 8을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 10-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.5 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.24분; ESI-MS(+) m/z 920.2 (M+2H).
분석 HPLC 조건 C: 체류 시간 = 16.39분.
실시예 9 - 화합물 번호 8의 합성
Figure pct00057
실시예 9를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 10-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.27분; ESI-MS(+) m/z 905.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 C: 체류 시간 = 17.18분.
실시예 10 - 화합물 번호 9의 합성
Figure pct00058
실시예 10을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 10-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.26분; ESI-MS(+) m/z 914.3 (M+2H).
분석 HPLC 조건 C: 체류 시간 = 16.98분.
실시예 11 - 화합물 번호 10의 합성
Figure pct00059
실시예 11을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 10-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.9 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 894.2 (M+2H).
분석 HPLC 조건 D: 체류 시간 = 23.00분.
실시예 12 - 화합물 번호 11의 합성
Figure pct00060
실시예 12를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® C18 루나, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 45분에 걸쳐 25-75% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.6 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 G: ESI-MS(+) m/z 905.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 14.68분.
실시예 13 - 화합물 번호 12의 합성
Figure pct00061
실시예 13을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 25-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.0 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 G: 체류 시간 = 4.06분; ESI-MS(+) m/z 919.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 13.71분.
실시예 14 - 화합물 번호 13의 합성
Figure pct00062
실시예 14를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의해 95%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.683분; ESI-MS(+) m/z 933.70 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.750분; ESI-MS(+) m/z 933.95 (M+2H).
실시예 15 - 화합물 번호 14의 합성
Figure pct00063
실시예 15를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의해 98%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.566분; ESI-MS(+) m/z 933.95 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.630분; ESI-MS(+) m/z 934.00 (M+2H).
실시예 16 - 화합물 번호 15의 합성
Figure pct00064
실시예 16을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "CEM 방법 A: N-메틸 아미노산에 대한 커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 25-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.0 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.15분; ESI-MS(+) m/z 869.6 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 10.49분.
실시예 17 - 화합물 번호 16의 합성
Figure pct00065
실시예 17을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "CEM 방법 A: N-메틸 아미노산에 대한 커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 25-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 G: 체류 시간 = 3.76분; ESI-MS(+) m/z 919.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 14.69분.
실시예 18 - 화합물 번호 17의 합성
Figure pct00066
실시예 18을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "CEM 방법 A: N-메틸 아미노산에 대한 커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 25-65% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.5 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 G: 체류 시간 = 3.60분; ESI-MS(+) m/z 869.3 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 11.75분.
실시예 19 - 화합물 번호 18의 합성
Figure pct00067
40 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하고, 반응 용기를 프렐류드 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"프렐류드 방법 B: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
1급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 이중-커플링 절차"에 따르고;
2급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 2급 아민 커플링 절차"에 따르고;
"프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A"에 따르고;
"전반적 탈보호 방법 B"에 따르고;
"고리화 방법 C"에 따른다.
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 45분에 걸쳐 25-75% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 G: 체류 시간 = 3.53분; ESI-MS(+) m/z 919.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 15.29분.
실시예 20 - 화합물 번호 19의 합성
Figure pct00068
실시예 20을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의해 97%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.434분; ESI-MS(+) m/z 906.30 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.483분; ESI-MS(+) m/z 905.70 (M+2H).
실시예 21 - 화합물 번호 20의 합성
Figure pct00069
실시예 21을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 19의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 B: 수지-팽윤 절차", 1급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 이중-커플링 절차"; 2급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 2급 아민 커플링 절차"; "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 45분에 걸쳐 25-65% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.3 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 G: 체류 시간 = 3.84분; ESI-MS(+) m/z 919.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 16.82분.
실시예 22 - 화합물 번호 21의 합성
Figure pct00070
실시예 22를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 19의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 B: 수지-팽윤 절차", 1급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 이중-커플링 절차"; 2급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 2급 아민 커플링 절차"; "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 45분에 걸쳐 25-50% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.5 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 G: 체류 시간 = 3.89분; ESI-MS(+) m/z 905.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 13.23분.
실시예 23 - 화합물 번호 22의 합성
Figure pct00071
실시예 23을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 19의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 B: 수지-팽윤 절차", 1급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 이중-커플링 절차"; 2급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 2급 아민 커플링 절차"; "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 45분에 걸쳐 25-70% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 G: 체류 시간 = 3.91분; ESI-MS(+) m/z 884.5 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 13.23분.
실시예 24 - 화합물 번호 23의 합성
Figure pct00072
실시예 24를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의해 98%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.505분; ESI-MS(+) m/z 926.70 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.537분; ESI-MS(+) m/z 926.80 (M+2H).
실시예 25 - 화합물 번호 24의 합성
Figure pct00073
실시예 25를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 60% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의해 100%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.676분; ESI-MS(+) m/z 898.20 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.749분; ESI-MS(+) m/z 898.45 (M+2H).
실시예 26 - 화합물 번호 25의 합성
Figure pct00074
실시예 26을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-Trp(Boc)-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 946.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 946.4 (M+2H).
실시예 27 - 화합물 번호 26의 합성
Figure pct00075
실시예 27을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-2-Nal-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z 951.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
실시예 28 - 화합물 번호 27의 합성
Figure pct00076
실시예 28을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-1-Nal-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.8%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.83분; ESI-MS(+) m/z 1903.7 (M+H), 952.3 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.9분.
실시예 29 - 화합물 번호 28의 합성
Figure pct00077
실시예 29를, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-Bip-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.91분; ESI-MS(+) m/z 964.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z 964.9 (M+2H).
실시예 30 - 화합물 번호 29의 합성
Figure pct00078
실시예 30을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-1-Tiq-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.81분; ESI-MS(+) m/z 933.2 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.85분.
실시예 31 - 화합물 번호 30의 합성
Figure pct00079
실시예 31을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-Tyr(tBu)-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 60% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 934.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 934.8 (M+2H).
실시예 32 - 화합물 번호 31의 합성
Figure pct00080
실시예 32를, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-4-메톡시-Phe-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.6%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.78분; ESI-MS(+) m/z 942.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.27분.
실시예 33 - 화합물 번호 32의 합성
Figure pct00081
실시예 33을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-4-플루오로-Phe-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.85 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.8%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.78분; ESI-MS(+) m/z 936.6 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.58분.
실시예 34 - 화합물 번호 33의 합성
Figure pct00082
실시예 34를, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-4-클로로-Phe-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 944.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 943.6 (M+2H).
실시예 35 - 화합물 번호 34의 합성
Figure pct00083
실시예 35를, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-4-브로모-Phe-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.7%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.83분; ESI-MS(+) m/z 966.3 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.99분.
실시예 36 - 화합물 번호 35의 합성
Figure pct00084
실시예 36을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-4-트리플루오로메틸-Phe-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.824분; ESI-MS(+) m/z 960.90 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 960.4 (M+2H).
실시예 37 - 화합물 번호 36의 합성
Figure pct00085
실시예 37을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-4-메틸-Phe-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.847분; ESI-MS(+) m/z 933.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.742분; ESI-MS(+) m/z 933.9 (M+2H).
실시예 38 - 화합물 번호 37의 합성
Figure pct00086
실시예 38을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-4-t-부틸-Phe-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 2.003분; ESI-MS(+) m/z 954.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.786분; ESI-MS(+) m/z 954.6 (M+2H).
실시예 39 - 화합물 번호 38의 합성
Figure pct00087
실시예 39를, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-3-Pyr-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 10-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 927.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.13분; ESI-MS(+) m/z 927.4 (M+2H).
실시예 40 - 화합물 번호 39의 합성
Figure pct00088
실시예 40을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-4-Pyr-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 10-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.448분; ESI-MS(+) m/z 927.55 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.121분; ESI-MS(+) m/z 927.65 (M+2H).
실시예 41 - 화합물 번호 40의 합성
Figure pct00089
실시예 41을, 중간체 수지 I로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-3-티에닐 알라닌-OH를 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.649분; ESI-MS(+) m/z 1858.8 (M+1), 929.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.589분; ESI-MS(+) m/z 929.9 (M+2H).
실시예 42 - 화합물 번호 41의 합성
Figure pct00090
실시예 42를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.79분; ESI-MS(+) m/z 941.2 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.45분.
실시예 43 - 화합물 번호 42의 합성
Figure pct00091
실시예 43을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.553분; ESI-MS(+) m/z 926.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.356분; ESI-MS(+) m/z 926.7 (M+2H).
실시예 44 - 화합물 번호 43의 합성
Figure pct00092
실시예 44를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.2%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.76분; ESI-MS(+) m/z 898.6 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 12.91분.
실시예 45 - 화합물 번호 44의 합성
Figure pct00093
실시예 45를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의한 98%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.547분; ESI-MS(+) m/z 934.65 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.732분; ESI-MS(+) m/z 933.95 (M+2H).
실시예 46 - 화합물 번호 45의 합성
Figure pct00094
실시예 46을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의한 95%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.710분; ESI-MS(+) m/z 954.20 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.966분; ESI-MS(+) m/z 954.20 (M+2H).
실시예 47 - 화합물 번호 46의 합성
Figure pct00095
실시예 47을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의한 96%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.851분; ESI-MS(+) m/z 964.95 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.957분; ESI-MS(+) m/z 964.75 (M+2H).
실시예 48 - 화합물 번호 47의 합성
Figure pct00096
실시예 48을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의한 98%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.486분; ESI-MS(+) m/z 934.95 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.636분; ESI-MS(+) m/z 935.00 (M+2H).
실시예 49 - 화합물 번호 48의 합성
Figure pct00097
실시예 49를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 65% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.290분; ESI-MS(+) m/z 934.45 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.567분; ESI-MS(+) m/z 934.55 (M+2H).
실시예 50 - 화합물 번호 49의 합성
Figure pct00098
실시예 50을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 60% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.623분; ESI-MS(+) m/z 933.95 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.841분; ESI-MS(+) m/z 933.95 (M+2H).
실시예 51 - 화합물 번호 50의 합성
Figure pct00099
실시예 51을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 C" 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 LCMS 조건 B 및 D"에 의한 97%였다.
분석 LCMS 조건 B: 체류 시간 = 1.476분; ESI-MS(+) m/z 920.00 (M+2H).
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.670분; ESI-MS(+) m/z 919.95 (M+2H).
실시예 52 - 화합물 번호 51의 합성
Figure pct00100
실시예 52를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.5%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.80분; ESI-MS(+) m/z 928.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.38분.
실시예 53 - 화합물 번호 52의 합성
Figure pct00101
실시예 53을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.390분; ESI-MS(+) m/z 941.35 (M+2H), 1881.85 (M+H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.355분; ESI-MS(+) m/z 941.50 (M+2H).
실시예 54 - 화합물 번호 53의 합성
Figure pct00102
실시예 54를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.682분; ESI-MS(+) m/z 959.85 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.607분; ESI-MS(+) m/z 959.85 (M+2H).
실시예 55 - 화합물 번호 54의 합성
Figure pct00103
실시예 55를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.398분; ESI-MS(+) m/z 969.45 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.360분; ESI-MS(+) m/z 969.75 (M+2H).
실시예 56 - 화합물 번호 55의 합성
Figure pct00104
실시예 56을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 940.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 940.2 (M+2H).
실시예 57 - 화합물 번호 56의 합성
Figure pct00105
실시예 57을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.714분; ESI-MS(+) m/z 1882.85 (M+1), 941.90 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.532분; ESI-MS(+) m/z 941.90 (M+2).
실시예 58 - 화합물 번호 57의 합성
Figure pct00106
실시예 58을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.68 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.4%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.714분; ESI-MS(+) m/z 1868.85 (M+1), 934.85 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.526분; ESI-MS(+) m/z 934.65 (M+2).
실시예 59 - 화합물 번호 58의 합성
Figure pct00107
실시예 59를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.45 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.454분; ESI-MS(+) m/z 1879.90 (M+1), 940.55 (M+2).
실시예 60 - 화합물 번호 59의 합성
Figure pct00108
실시예 60을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94.4%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.452분; ESI-MS(+) m/z 947.60 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.257분; ESI-MS(+) m/z 947.65 (M+2).
실시예 61 - 화합물 번호 60의 합성
Figure pct00109
실시예 61을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92.5%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.800분; ESI-MS(+) m/z 1751.85 (M+1), 876.35 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.620분; ESI-MS(+) m/z 876.35 (M+2).
실시예 62 - 화합물 번호 61의 합성
Figure pct00110
실시예 62를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.616분; ESI-MS(+) m/z 899.40 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.558분; ESI-MS(+) m/z 899.35 (M+2H).
실시예 63 - 화합물 번호 62의 합성
Figure pct00111
실시예 63을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.575분; ESI-MS(+) m/z 1779.90 (M+1), 890.30 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 889.9 (M+2H).
실시예 64 - 화합물 번호 63의 합성
Figure pct00112
실시예 64를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 890.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 890.3 (M+2H).
실시예 65 - 화합물 번호 64의 합성
Figure pct00113
실시예 65를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96.4%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.847분; ESI-MS(+) m/z 935.70 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.658분; ESI-MS(+) m/z 935.60 (M+2).
실시예 66 - 화합물 번호 65의 합성
Figure pct00114
실시예 66을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.44 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.605분; ESI-MS(+) m/z 926.95 (M+2).
실시예 67 - 화합물 번호 66의 합성
Figure pct00115
실시예 67을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.41 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.3%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.388분; ESI-MS(+) m/z 914.35 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.228분; ESI-MS(+) m/z 914.30 (M+2).
실시예 68 - 화합물 번호 67의 합성
Figure pct00116
실시예 68을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간=1.659분; ESI-MS(+) m/z 1886.80 (M+1), 943.90 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간=1.449분; ESI-MS(+) m/z 943.90 (M+2).
실시예 69 - 화합물 번호 68의 합성
Figure pct00117
실시예 69를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간=1.402분; ESI-MS(+) m/z 1812.80 (M+1), 906.80 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간=1.216분; ESI-MS(+) m/z 906.80 (M+2).
실시예 70 - 화합물 번호 69의 합성
Figure pct00118
실시예 70을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간=1.590분; ESI-MS(+) m/z 1872.85 (M+1), 936.90 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간=1.377분; ESI-MS(+) m/z 936.65 (M+2).
실시예 71 - 화합물 번호 70의 합성
Figure pct00119
실시예 71을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 3-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.9%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.80분; ESI-MS(+) m/z 920.1 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.01분.
Figure pct00120
Figure pct00121
실시예 72 - 화합물 번호 71의 합성
Figure pct00122
40 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하고, 반응 용기를 프렐류드 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Leu-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Tyr(tBu)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp(Boc)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Sar-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차"에 따르며, 10시간 동안 10 당량의 Fmoc-Tyr(tBu)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Phe-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Val-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Asp(OtBu)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Sar-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Phe-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Phe-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A"에 따르고;
"전반적 탈보호 방법 B"에 따르고;
"고리화 방법 C"에 따른다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 A 중 25-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 28.6 mg이었고, 30분에 걸쳐 A 중 35%에서 95% B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.451분; ESI-MS(+) m/z 899.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 898.4313 (M+2H); 실측치: 898.4294.
실시예 73 - 화합물 번호 72의 합성
Figure pct00123
실시예 73을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.85분; ESI-MS(+) m/z 860.96 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 14.696분.
실시예 74 - 화합물 번호 73의 합성
Figure pct00124
실시예 74를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.87분; ESI-MS(+) m/z 861.1 (M+2).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 14.82분.
실시예 75 - 화합물 번호 74의 합성
Figure pct00125
실시예 75를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.98분; ESI-MS(+) m/z 1783.2 (M+1).
실시예 76 - 화합물 번호 75의 합성
Figure pct00126
실시예 76을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.6%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.83분; ESI-MS(+) m/z 1754.7 (M+H), 878.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 14.44분.
실시예 77 - 화합물 번호 76의 합성
Figure pct00127
실시예 77을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.610분; ESI-MS(+) m/z 1782.75 (M+1), 891.60 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.775분; ESI-MS(+) m/z 892.10 (M+2).
실시예 78 - 화합물 번호 77의 합성
Figure pct00128
실시예 78을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 E". Fmoc-N-Me-Ala-OH를 제11 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.7%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.94분; ESI-MS(+) m/z 1811.1 (M+H), 906.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 16.38분.
실시예 79 - 화합물 번호 78의 합성
Figure pct00129
실시예 79를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간=1.591분; ESI-MS(+) m/z 1782.80 (M+1), 891.85 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간=1.634분; ESI-MS(+) m/z 891.60 (M+2).
실시예 80 - 화합물 번호 79의 합성
Figure pct00130
실시예 80을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.7%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.94분; ESI-MS(+) m/z 1753.8 (M+H), 877.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 16.19분.
실시예 81 - 화합물 번호 80의 합성
Figure pct00131
실시예 81을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 10-1000% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.86분; ESI-MS(+) m/z 1769.0 (M+H), 884.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 14.89분.
실시예 82 - 화합물 번호 81의 합성
Figure pct00132
실시예 82를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 20분에 걸쳐 물 중 10 내지 100% 아세토니트릴의 구배, 개질제로서의 0.1% TFA를 사용하여 30 x 100 C18 칼럼 상에서 4 x 2 mL 분사. 생성물의 수율은 4.0 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.85분; ESI-MS(+) m/z 861.0 (M+2).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 14.249분.
실시예 83 - 화합물 번호 82의 합성
Figure pct00133
실시예 83을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.587분; ESI-MS(+) m/z 1782.75 (M+1), 891.65 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.750분; ESI-MS(+) m/z 891.70 (M+2).
실시예 84 - 화합물 번호 83의 합성
Figure pct00134
실시예 84를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 20분에 걸쳐 물 중 10 내지 100% 아세토니트릴의 구배, 개질제로서의 0.1% TFA를 사용하여 30 x 100 C18 칼럼 상에서 4 x 2 mL 분사. 생성물의 수율은 1.04 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.91분; ESI-MS(+) m/z 852.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 16.012분.
실시예 85 - 화합물 번호 84의 합성
Figure pct00135
실시예 85를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 20분에 걸쳐 물 중 10 내지 100% 아세토니트릴의 구배, 개질제로서의 0.1% TFA를 사용하여 30 x 100 C18 칼럼 상에서 4 x 2 mL 분사. 생성물의 수율은 1.01 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.93분; ESI-MS(+) m/z 906.3 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 16.484분.
실시예 86 - 화합물 번호 85의 합성
Figure pct00136
실시예 86을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.611분; ESI-MS(+) m/z 1782.70 (M+1), 891.80 (M+2).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.783분; ESI-MS(+) m/z 891.95 (M+2).
실시예 87 - 화합물 번호 86의 합성
Figure pct00137
실시예 87을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 20분에 걸쳐 물 중 10 내지 100% 아세토니트릴의 구배, 개질제로서의 0.1% TFA를 사용하여 30 x 100 C18 칼럼 상에서 4 x 2 mL 분사. 생성물의 수율은 1.53 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.92분; ESI-MS(+) m/z 852.3 (M+2).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 16.044분.
실시예 88 - 화합물 번호 87의 합성
Figure pct00138
실시예 88을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 E".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 20분에 걸쳐 물 중 10 내지 100% 아세토니트릴의 구배, 개질제로서의 0.1% TFA를 사용하여 30 x 100 C18 칼럼 상에서 4 x 2 mL 분사. 생성물의 수율은 1 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 =0.88분; ESI-MS(+) m/z 877.1 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 15.511분.
Figure pct00139
Figure pct00140
실시예 89 - 화합물 번호 88의 합성
화합물 번호 1의 술폭시드 부분입체이성질체 혼합물
Figure pct00141
실시예 89 [화합물 번호 88]을 하기 절차를 사용하여 실시예 2의 마크로시클릭 펩티드의 산화에 의해 제조하였다: 50 mM NH4HCO4/아세토니트릴 (1:1) 1 mL 중 실시예 2 (1.6 mg)의 마크로시클릭 펩티드의 용액에 아세토니트릴 중 m-클로로퍼벤조산 (0.9 당량)의 1 mg/mL 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물 실온에서 18시간 동안 교반하였다.
조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® C18 루나, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 55분에 걸쳐 A 중 20-75% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.91 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.16분; ESI-MS(+) m/z 935.4 (M+2H).
분석 HPLC 조건 A: 부분적으로 분해된 부분입체이성질체에 대한 체류 시간 = 9.19분 및 9.41분.
실시예 90. 화합물 번호 89 및 90의 합성
[화합물 번호 71의 술폭시드]
Figure pct00142
실시예 90 (화합물 번호 89 및 90)의 화합물의 합성을 하기 절차를 사용하여 실시예 71의 마크로시클릭 펩티드의 산화에 의해 수행하였다: 50 mM NH4HCO4/아세토니트릴 (1:1) 1 mL 중 실시예 71 (1.4 mg)의 펩티드의 용액에 m-클로로퍼벤조산 (m-CPBA)의 아세토니트릴 중 1 mg/mL 용액 (0.9 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다.
조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® C18 루나, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: AcCN 중 0.1% TFA; 구배: 55분에 걸쳐 20-75% B; 유량: 15 mL/분. 2종의 이성질체 생성물을 이성질체 A (화합물 번호 89) 및 이성질체 B (화합물 번호 90)로 분리하였다. 이들을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조로 건조시켰다.
보다 빨리 용리하는 이성질체 A (화합물 번호 89)의 수율은 0.49 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 907.4 (M+2H).
분석 HPLC 조건 G: 체류 시간 = 12.72분.
보다 천천히 용리하는 이성질체 B (화합물 번호 90)의 수율은 0.49 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 907.4 (M+2H).
분석 HPLC 조건 G: 체류 시간 = 13.61분.
실시예 92 - 화합물 번호 91의 합성
Figure pct00143
실시예 92를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차". Fmoc-Asp(O-2-PhiPr)-OH를 Asp14 잔기의 직교 보호로서 사용하였다. 마지막 Fmoc 제거 후, 펩티딜-수지를 5분 동안 DCM/TIS/TFA (96:3:1; v:v:v) (4 mL)로 4회 처리함으로써 이를 고체 지지체로부터 절단하였다. 이 단계는 또한 Asp14 잔기로부터 2-페닐이소프로필 에스테르를 제거하였다. 보호된 펩티드 (70.4 mg)를 1 당량의 T3P (50% EtOAc) 및 (1:1) 아세토니트릴/DCM (20 mL) 중 2 당량의 DIEA를 사용하여 고리화시켰다. 반응을 18시간 동안 진행되도록 하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 생성된 고체를 (50:46:4) TFA/DCM/TIS (4 mL)으로 1.5시간 동안 실온에서 처리하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 에테르 (20 mL)를 첨가하고, 0℃로 15분 동안 냉각시켜 고체를 수득하였으며, 이를 에테르로 세척하고, 건조시켜 조 생성물 27 mg을 수득하였다. 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조를 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.7 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.97분; ESI-MS(+) m/z 904.3 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 10.11분.
실시예 93 - 화합물 번호 92의 합성
Figure pct00144
실시예 93을, Fmoc-Glu(O-2-PhiPr)-OH를 위치 14에서 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 92의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다. 고체 지지체로부터의 보호된 펩티드의 유리 후, 생성된 보호된 펩티드의 T3P-매개된 고리화 및 TFA-매개된 측쇄 탈보호로 조 생성물 (28 mg)을 수득하였으며, 이를 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 75분에 걸쳐 25-75% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조를 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.3 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.5%였다.
분석 LCMS 조건 G: 체류 시간 = 3.88분; ESI-MS(+) m/z 911.08 (M+2H).
분석 HPLC 조건 H: 체류 시간 = 12.04분.
실시예 94 - 화합물 번호 93의 합성
Figure pct00145
실시예 94를, 추가의 Fmoc-Gly-OH를 N-말단에서 커플링시키는 것을 제외하고는, 실시예 92의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다. 고체 지지체로부터의 유리, 생성된 보호된 펩티드의 T3P-매개된 고리화 및 TFA-매개된 측쇄 탈보호 후, 조 생성물 (25 mg)을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조를 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.0 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.00분; ESI-MS(+) m/z 932.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 11.07분.
실시예 95 - 화합물 번호 94의 합성
Figure pct00146
실시예 95를, 추가의 Fmoc-Gly-OH를 N-말단에서 커플링시키는 것을 제외하고는, 실시예 93의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다. 고체 지지체로부터의 유리, 생성된 보호된 펩티드의 T3P-매개된 고리화 및 TFA-매개된 측쇄 탈보호 후, 조 생성물 (25 mg)을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조를 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.8 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 G: 체류 시간 = 4.27분; ESI-MS(+) m/z 939.5 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 13.76분.
실시예 96 - 화합물 번호 95의 합성
Figure pct00147
실시예 96을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차". Fmoc-Asp(O-2-PhiPr)-OH를 Asp13 잔기의 직교 보호로서 사용하였다. 마지막 Fmoc 제거 후, 펩티딜-수지를 1분 동안 DCM/TIS/TFA (96:3:1; v:v:v) (5 mL)로 5회 처리함으로써 이를 고체 지지체로부터 절단하였다. 이 단계는 또한 Asp13 잔기로부터 2-페닐이소프로필 에스테르를 제거하였다. 여과물을 1.5 mL 피리딘이 들은 플라스크에 수집하였다. 이어서, 여과물을 물 (3 x 5mL)로 추출하였다. 유기 상을 건조시켜 오일을 수득하였으며, 이를 이어서 MeCN/물 (1:2)로부터 동결건조시켜 고체 생성물 (100 mg)을 수득하였다. 생성물 (34 mg, 0.017 mmol)의 부분을 1 당량의 HATU 및 2 당량의 (1:9) DMF/DCM (17 mL) 중 DIEA를 사용하여 고리화시켰다. 반응을 18시간 동안 진행되도록 하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 생성된 고체를 (95:5) TFA/TIS (6 mL)로 5분 동안 실온에서 처리하였다. 추가의 에테르 (20 mL)를 첨가하여 고체를 수득하였으며, 이를 에테르로 세척하고, 건조시켰다. 조 생성물을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® C18 루나, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 30-95% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조를 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.9 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 904.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 G: 체류 시간 = 13.54분.
실시예 97 - 화합물 번호 96의 합성
Figure pct00148
실시예 97을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차". Fmoc-Glu(O-2-PhiPr)-OH를 Glu13 잔기의 직교 보호로서 사용하였다. 마지막 Fmoc 제거 후, 펩티딜-수지를 1분 동안 DCM/TIS/TFA (96:3:1; v:v:v) (5 mL)로 5회 처리함으로써 이를 고체 지지체로부터 절단하였다. 이 단계는 또한 Glu13 잔기로부터 2-페닐이소프로필 에스테르를 제거하였다. 여과물을 1.5 mL 피리딘이 들은 플라스크에 수집한 다음, 물 (3 x 5mL)로 추출하였다. 유기 상을 증발시켜 오일을 수득하였으며, 이를 이어서 MeCN/물 (1:2)로부터 동결건조시켜 고체 생성물 (36 mg)을 수득하였다. 펩티드를 5분 동안 TFA/TIS/물 (96:2:2:)을 사용하여 탈보호한 다음, 에테르 중에서 침전시키고, 에테르로 세척하고, 건조시켰다. 보호된 펩티드 (32 mg, 0.015 mmol)를 1 당량의 HATU 및 2 당량의 DMF (30 mL) 중 DIEA를 사용하여 고리화시켰다. 반응을 18시간 동안 진행되도록 하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 물로 침전시키고, 세척하고, 건조시켰다. 생성된 고체를 (48:48:4) TFA/DCM/TIS (3 mL)로 5분 동안 실온에서 처리하였다. 추가의 에테르 (20 mL)를 첨가하여 고체를 수득하였으며, 이를 에테르로 세척하고, 건조시켜 고체 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자, 60℃로 가열; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조를 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 911.9 (M+2H).
분석 HPLC 조건 I: 체류 시간 = 12.50분.
실시예 98 - 화합물 번호 97의 합성
Figure pct00149
실시예 98을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차". Fmoc-Asp(O-2-PhiPr)-OH를 Asp13 잔기의 직교 보호로서 사용하였다. 마지막 Fmoc 제거 후, 펩티딜-수지를 1분 동안 DCM/TIS/TFA (96:3:1; v:v:v) (5 mL)로 5회 처리함으로써 이를 고체 지지체로부터 절단하였다. 이 단계는 또한 Asp13 잔기로부터 2-페닐이소프로필 에스테르를 제거하였다. 여과물을 1.5 mL 피리딘이 들은 플라스크에 수집하였다. 이어서, 여과물을 물 (3 x 5mL)로 추출하였다. 유기 상을 건조시켜 오일을 수득하였으며, 이를 이어서 MeN/물 (1:2)로부터 동결건조시켜 고체 생성물 (97 mg)을 수득하였다. 생성물 (35 mg, 0.017 mmol)의 부분을 1 당량의 HATU 및 2 당량의 (1:9) DMF/아세토니트릴 (17 mL) 중 DIEA를 사용하여 고리화시켰다. 반응을 18시간 동안 진행되도록 하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 아세토니트릴 (1 mL) 중에 재용해시킨 다음, 물 (2 mL)로 침전시켰다. 수집된 펩티드를 DCM 중에 재용해시키고, 물 (2 x 5mL)로 추출하였다. 이어서, 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 건조시켜 보호된 펩티드 97 mg을 수득하였다. 이를 (95:5) TFA/TIS (6 mL)로 5분 동안 실온에서 처리하였다. 추가의 에테르 (20 mL)를 첨가하여 고체를 수득하였으며, 이를 에테르로 세척하고, 건조시켰다. 조 생성물을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® C18 루나, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 30-95% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조를 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.0 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 82%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 876.2 (M+2H).
분석 HPLC 조건 G: 체류 시간 = 14.01분.
실시예 99 - 화합물 번호 98의 합성
Figure pct00150
실시예 99를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 6의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민 커플링 절차". 합성을 H-Gly-2-Cl-트리틸 수지 (노바바이오켐(Novabiochem), 0.6 mmol/g)로부터 출발하였다. 마지막 Fmoc 제거 후, 펩티딜-수지를 1분 동안 DCM/TIS/TFA (96:3:1; v:v:v) (5 mL)로 5회 처리함으로써 이를 고체 지지체로부터 절단하였다. 여과물을 1.5 mL 피리딘이 들은 플라스크에 수집하였다. 이어서, 여과물을 물 (3 x 5mL)로 추출하였다. 유기 상을 증발시켜 오일을 수득하였으며, 이를 이어서 MeCN/물 (1:2)로부터 동결건조시켜 고체 생성물 (221 mg)을 수득하였다. 생성물 (10 mg, 0.005 mmol)의 부분을 1 당량의 HATU 및 2 당량의 (1:9) DMF/DCM (17 mL) 중 DIEA를 사용하여 고리화시켰다. 반응을 18시간 동안 진행되도록 하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 아세토니트릴 (1 mL) 중에 재용해시킨 다음, 물 (2 mL)로 침전시켰다. 수집된 펩티드를 DCM 중에 재용해시키고, 물 (2 x 5mL)로 추출하였다. 이어서, 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 건조시켜 보호된 펩티드 17 mg을 수득하였다. 이를 (95:5) TFA/TIS (6 mL)로 5분 동안 실온에서 처리하였다. 에테르 (20 mL)를 첨가하고, 10분 동안 0℃로 냉각시켜 고체를 수득하였으며, 이를 에테르로 세척하고, 건조시켰다. 조 생성물을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® C18 루나, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 30-95% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조를 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.81 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 819.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 G: 체류 시간 = 16.15분.
Figure pct00151
Figure pct00152
실시예 100 - 화합물 번호 99의 합성
Figure pct00153
실시예 100을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 19의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 B: 수지-팽윤 절차", 1급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 이중-커플링 절차"; 2급 아민 N-말단에 대한 커플링을 위해 "프렐류드 방법 B: 2급 아민 커플링 절차"; "프렐류드 방법 A": 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 A" 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.90분; ESI-MS(+) m/z 817.6 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 9.21분.
실시예 101 - 화합물 번호 100의 합성
Figure pct00154
실시예 101을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 15-55% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.0 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.82분; ESI-MS(+) m/z 839.1 (M+2H).
분석 HPLC 조건 E: 체류 시간 = 10.22분.
실시예 102 - 화합물 번호 101의 합성
Figure pct00155
실시예 102를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.0 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.93분; ESI-MS(+) m/z 834.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 9.57분.
실시예 103 - 화합물 번호 102의 합성
Figure pct00156
실시예 103을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.7 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.05분; ESI-MS(+) m/z 834.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 12.03분.
실시예 104 - 화합물 번호 103의 합성
Figure pct00157
실시예 104를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.9 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.94분; ESI-MS(+) m/z 817.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 9.61분.
실시예 105 - 화합물 번호 104의 합성
Figure pct00158
실시예 105를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.96분; ESI-MS(+) m/z 834.6 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 10.20분.
실시예 106 - 화합물 번호 105의 합성
Figure pct00159
실시예 106을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.5 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.93분; ESI-MS(+) m/z 849.6 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 9.43분.
실시예 107 - 화합물 번호 106의 합성
Figure pct00160
실시예 107을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.8 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.00분; ESI-MS(+) m/z 841.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 10.80분.
실시예 108 - 화합물 번호 107의 합성
Figure pct00161
실시예 108을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.8 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.90분; ESI-MS(+) m/z 810.6 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 8.70분.
실시예 109 - 화합물 번호 108의 합성
Figure pct00162
실시예 109를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.3 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.89분; ESI-MS(+) m/z 808.1 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 8.65분.
실시예 110 - 화합물 번호 109의 합성
Figure pct00163
실시예 110을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 30-80% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.3 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.18분; ESI-MS(+) m/z 796.3 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 9.00분.
실시예 111 - 화합물 번호 110의 합성
Figure pct00164
실시예 111을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.96분; ESI-MS(+) m/z 824.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 9.98분.
실시예 112 - 화합물 번호 111의 합성
Figure pct00165
실시예 112를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.98분; ESI-MS(+) m/z 841.5 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 10.49분.
실시예 113 - 화합물 번호 112의 합성
Figure pct00166
실시예 113을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.95분; ESI-MS(+) m/z 849.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 9.72분.
실시예 114 - 화합물 번호 113의 합성
Figure pct00167
실시예 114를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.2 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.02분; ESI-MS(+) m/z 821.1 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 11.30분.
실시예 115 - 화합물 번호 114의 합성
Figure pct00168
실시예 115를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.5 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.06분; ESI-MS(+) m/z 788.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 11.88분.
실시예 116 - 화합물 번호 115의 합성
Figure pct00169
실시예 116을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 20-60% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.95분; ESI-MS(+) m/z 834.5 (M+2H).
분석 HPLC 조건 F: 체류 시간 = 10.01분.
Figure pct00170
실시예 117 - 화합물 번호 116의 합성
Figure pct00171
실시예 117을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 E", 및 "고리화 방법 C". 출발 수지는 Fmoc-PEG12-시버 아미드 수지 (0.05 mmol)였으며, 이는 하기 절차에 따라 O-(N-Fmoc-2-아미노에틸)-O'-(2-카르복시에틸)-운데카에틸렌글리콜을 시버 아미드 수지에 수동으로 커플링시킴으로써 제조하였다: 시버 아미드 수지 (0.60 mmol, 0.846 g, 0.71 mmol/g)를 DCM (8 mL)로 5분 동안 및 DMF (8 mL)로 5분 동안 세척하였다. 수지를 5분 동안 DMF (8 mL) 중 5% 피페라진으로 2회 처리한 다음, 메탄올 (8 mL)로 1회 및 DMF (8 mL)로 6회 세척하였다. DMF (4 mL) 중 O-(N-Fmoc-2-아미노에틸)-O'-(2-카르복시에틸)-운데카에틸렌글리콜 (0.715 g, 0.851 mmol)의 용액에 DMF 중 0.45 M HCTU (1.8 ml, 0.810 mmol) 및 NMP 중 2 M DIEA (0.85 ml, 1.70 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 교반하고, 수지에 첨가하였다. 반응을 18시간 동안 진행되도록 하였다. 수지를 DMF (8 mL)로 3회 및 DCM 세척액 (8 mL)으로 3회 세척하였다. 건조 수지의 분취물 상에서의 Fmoc 결정은 0.26 mmol/g의 치환을 제공하였다. 이를 사용하여 필요한 규모에 따라, 0.05 또는 0.1 mmol에 상응하는 출발 수지의 양을 결정하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 20-80% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.2 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 1226.6 (M+2H).
분석 HPLC 조건 B: 체류 시간 = 16.08분.
실시예 118 - 화합물 번호 117의 합성
Figure pct00172
실시예 118을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 E", 및 "고리화 방법 C". 출발 수지는 실시예 117에 기재된 바와 같이 제조된 Fmoc-PEG12-시버 아미드 수지 (0.05 mmol)였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 25-50% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.2 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91.4%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.22분; ESI-MS(+) m/z 1260.1 (M+2H).
분석 HPLC 조건 B: 체류 시간 = 14.75분.
실시예 119 - 화합물 번호 118의 합성
Figure pct00173
실시예 119를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 2의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 단일-커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 C". 출발 수지는 실시예 117에 기재된 바와 같이 제조된 Fmoc-PEG12-시버 아미드 수지 (0.05 mmol)였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: YMC ODS-AQ, 20 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: MeCN 중 0.1% TFA; 구배: 60분에 걸쳐 20-90% B; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.3 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 1198.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 K: 체류 시간 = 14.22분.
통상의 아미노산
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(시클로부탄카르복스아미도) 프로판산
Figure pct00174
시클로부탄카르보닐 클로라이드 (72.7 mg, 0.613 mmol) 및 NaOH (0.735 mL, 0.735 mmol)를 0℃에서 THF (1.5mL) 및 NaOH (1N, 0.8mL) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-아미노프로판산 (200mg, 0.613 mmol)의 교반 용액에 동시에 적하하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반되도록 하였으며, 이 때 LC-MS는 목적 생성물 피크를 나타내었다. 반응 용액을 1N HCl을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (60 mL x1)로 추출하였다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (이스코, 실리카 겔, 12 g 칼럼; 유량 30 mL/분, 100% DCM에서 20% MeOH/DCM)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발에 의해 건조시켜 표제 화합물 (156 mg, 61%)을 수득하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.94분; ESI-MS(+) m/z 409.1 (M+H).
Figure pct00175
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(시클로펜탄카르복스아미도) 프로판산
Figure pct00176
시클로펜탄카르보닐 클로라이드 (81 mg, 0.613 mmol) 및 NaOH (0.735 mL, 0.735 mmol)를 0℃에서 THF(1.5 mL) 및 NaOH (1N, 0.8 mL) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-아미노프로판산 (200mg, 0.613 mmol)의 교반 용액에 동시에 적하하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반되도록 하였으며, 이 때 LC-MS는 목적 생성물 피크를 나타내었다. 반응 용액을 1N HCl을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (60 mL x 1)로 추출하였다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (이스코, 실리카 겔, 12 g 칼럼; 유량 30 mL/분, 100% DCM에서 20% MeOH/DCM)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발에 의해 건조시켜 표제 화합물 (142 mg, 54%)을 수득하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간= 0.99분; ESI-MS(+) m/z 423.1 (M+H).
Figure pct00177
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-벤즈아미도프로판산
Figure pct00178
벤조일 클로라이드 (86 mg, 0.613 mmol) 및 NaOH (0.735 mL, 0.735 mmol)를 0℃에서 THF (1.5 mL) 및 NaOH (1N, 0.8 mL) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-아미노프로판산 (200 mg, 0.613 mmol)의 교반 용액에 동시에 적하하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반되도록 하였으며, 이 때 LC-MS는 목적 생성물 피크를 나타내었다. 반응 용액을 1N HCl을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (60 mL x 1)로 추출하였다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (이스코, 실리카 겔, 12 g 칼럼; 유량 30 mL/분, 100% DCM에서 20% MeOH/DCM)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발에 의해 건조시켜 표제 화합물 (149 mg, 52%)을 수득하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.96분; ESI-MS(+) m/z 431.0 (M+H).
Figure pct00179
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-(시클로부탄카르복스아미도) 부탄산
Figure pct00180
시클로부탄카르보닐 클로라이드 (69.7 mg, 0.588 mmol) 및 NaOH (0.705 mL, 0.705 mmol)를 0℃에서 THF(1.5 mL) 및 NaOH (1N, 0.7 mL) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-아미노부탄산 (200 mg, 0.588 mmol)의 교반 용액에 동시에 적하하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반되도록 하였으며, 이 때 LC-MS는 목적 생성물 피크를 나타내었다. 반응 용액을 1N HCl을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (60 mL x 1)로 추출하였다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (이스코, 실리카 겔, 12 g 칼럼; 유량 30 mL/분, 100% DCM에서 20% MeOH/DCM)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발에 의해 건조시켜 표제 화합물 (92.6 mg, 37%)을 수득하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간= 0.94분; ESI-MS(+) m/z 423.1 (M+H).
Figure pct00181
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-(시클로펜탄카르복스아미도) 부탄산
Figure pct00182
시클로펜탄카르보닐 클로라이드 (78 mg, 0.588 mmol) 및 NaOH (0.705 mL, 0.705 mmol)를 0℃에서 THF(1.5 mL) 및 NaOH (1N, 0.7 mL) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-아미노부탄산 (200 mg, 0.588 mmol)의 교반 용액에 동시에 적하하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반되도록 하였으며, 이 때 LC-MS는 목적 생성물 피크를 나타내었다. 반응 용액을 1N HCl을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (60 mL x 1)로 추출하였다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (이스코, 실리카 겔, 12 g 칼럼; 유량 30 mL/분, 100% DCM에서 20% MeOH/DCM)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발에 의해 건조시켜 표제 화합물 (84.1mg, 33%)을 수득하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간= 0.98분; ESI-MS(+) m/z 437.1 (M+H).
Figure pct00183
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-(시클로헥산카르복스아미도) 부탄산
Figure pct00184
시클로헥산카르보닐 클로라이드 (86 mg, 0.588 mmol) 및 NaOH (0.705 mL, 0.705 mmol)를 0℃에서 THF(1.5 mL) 및 NaOH (1N, 0.7 mL) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-아미노부탄산 (200 mg, 0.588 mmol)의 교반 용액에 동시에 적하하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반되도록 하였으며, 이 때 LC-MS는 목적 생성물 피크를 나타내었다. 반응 용액을 1N HCl을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (60 mL x 1)로 추출하였다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (이스코, 실리카 겔, 12 g 칼럼; 유량 30 mL/분, 100% DCM에서 20% MeOH/DCM)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발에 의해 건조시켜 표제 화합물 (201 mg, 70%)을 수득하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.01분; ESI-MS(+) m/z 451.2 (M+H).
Figure pct00185
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-벤즈아미도부탄산
Figure pct00186
벤조일 클로라이드 (83 mg, 0.588 mmol) 및 NaOH (0.705 mL, 0.705 mmol)를 0℃에서 THF (1.5 mL) 및 NaOH (1N, 0.7 mL) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-아미노부탄산 (200 mg, 0.588 mmol)의 교반 용액에 동시에 적하하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반되도록 하였으며, 이 때 LC-MS는 목적 생성물 피크를 나타내었다. 반응 용액을 1N HCl을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (60 mL x 1)로 추출하였다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (이스코, 실리카 겔, 12 g 칼럼; 유량 30 mL/분, 100% DCM에서 20% MeOH/DCM)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발에 의해 건조시켜 표제 화합물 (160 mg, 57%)을 수득하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.97분; ESI-MS(+) m/z 445.1 (M+H).
Figure pct00187
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-(푸란-2-카르복스아미도)부탄산
Figure pct00188
푸란-2-카르보닐 클로라이드 (77 mg, 0.588 mmol) 및 NaOH (0.705 mL, 0.705 mmol)를 0℃에서 THF (1.5 mL) 및 NaOH (1N, 0.7 mL) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-아미노부탄산 (200 mg, 0.588 mmol)의 교반 용액에 동시에 적하하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반되도록 하였으며, 이 때 LC-MS는 목적 생성물 피크를 나타내었다. 반응 용액을 1N HCl을 사용하여 산성화시키고, EtOAc (60 mL x 1)로 추출하였다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (이스코, 실리카 겔, 12 g 칼럼; 유량 30 mL/분, 100% DCM에서 20% MeOH/DCM)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발에 의해 건조시켜 표제 화합물 (107 mg, 41%)을 수득하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.92분; ESI-MS(+) m/z 435.0 (M+H).
Figure pct00189
실시예 1001-3000에 대한 중간체 수지
중간체 수지 A의 제조.
Figure pct00190
125 mL 반응기에 시버 수지 (1410 mg, 1 mmol)를 첨가하고, 용기를 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Arg(PBF)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, 30분 동안 2.5 당량의 Fmoc-Trp-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Ser(tBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp-OH를 사용하였다.
생성된 수지를 100 mL 폴리프로필렌 튜브로 옮기고, DCM (40 mL x 3)으로 세척하였다. 최종적으로, 수지를 진공 하에 건조시키고, 합성을 위한 중간체로서 사용하였다.
마이크로절단 A에 따랐다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.89분, ESI-MS(+) m/z 1271.2 (M+H).
중간체 수지 B의 제조.
Figure pct00191
125 mL 반응기에 시버 수지 (1410 mg, 1 mmol)를 첨가하고, 용기를 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Arg(PBF)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp(Boc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Ser(tBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Sar-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Leu-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-His(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Pro-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Asn(tBu)-OH를 사용하였다.
생성된 수지를 프릿이 장착된 100 mL 폴리프로필렌 튜브로 옮기고, DCM (40 mL x 3)으로 세척하였다. 최종적으로, 수지를 진공 하에 건조시키고, 합성을 위한 중간체로서 사용하였다.
마이크로절단 A에 따랐다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.0분, ESI-MS(+) m/z 966.6 (M+2H + 1CO2).
중간체 수지 C의 제조.
Figure pct00192
125 mL 반응기에 링크 아미드 수지 (1640 mg, 1 mmol)를 첨가하고, 용기를 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Dap(Boc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Bzt-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Dab(Boc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Hyp(tBu)-OH를 사용하고;
생성된 수지를 프릿이 장착된 100 mL 폴리프로필렌 튜브로 옮기고, DCM (40 mL x 3)으로 세척하였다. 최종적으로, 수지를 진공 하에 건조시키고, 합성을 위한 중간체로서 사용하였다.
마이크로절단 A에 따랐다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.81분, ESI-MS(+) m/z 672.2 (M+2H).
중간체 수지 D의 제조.
Figure pct00193
125 mL 반응기에 링크 수지 (1640 mg, 1 mmol)를 첨가하고, 용기를 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Orn(Boc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Bzt-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Dab(Boc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Hyp(tBu)-OH를 사용하였다.
생성된 수지를 프릿이 장착된 100 mL 폴리프로필렌 튜브로 옮기고, DCM (40 mL x 3)으로 세척하였다. 최종적으로, 수지를 진공 하에 건조시키고, 합성을 위한 중간체로서 사용하였다.
마이크로절단 A에 따랐다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.77분, ESI-MS(+) m/z 708.2 (M+2H + 1CO2).
중간체 수지 E의 제조.
Figure pct00194
45 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하고, 반응 용기를 프렐류드 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Orn(Boc)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-NMeNle-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-MeNleOH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp(Boc)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Ser(tBu)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp(Boc)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Hyp(tBu)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Leu-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-His(Boc)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Pro-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Asn(tBu)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차"에 따랐다.
생성된 수지를 프릿이 장착된 6 mL 바이오-라드 튜브로 옮기고, DCM (4 mL x 3)으로 세척하였다. 최종적으로, 수지를 진공 하에 건조시키고, 합성을 위한 중간체로서 사용하였다. 조 물질을 분석 없이 합성을 위한 중간체로서 사용하였다.
중간체 수지 F의 제조.
Figure pct00195
125 mL 반응기에 링크 수지 (1640 mg, 1 mmol)를 첨가하고, 용기를 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Arg(PBF)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Bzt-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Ser(tBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Pro-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Leu-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-His(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Pro-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Asn(tBu)-OH를 사용하였다.
생성된 수지를 프릿이 장착된 100 mL 폴리프로필렌 튜브로 옮기고, DCM (40 mL x 3)으로 세척하였다. 최종적으로, 수지를 진공 하에 건조시키고, 합성을 위한 중간체로서 사용하였다.
마이크로절단 A에 따랐다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.83분, ESI-MS(+) m/z 945.7 (M+2H).
중간체 수지 G의 제조.
Figure pct00196
45 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하고, 반응 용기를 프렐류드 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Orn(Boc)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-NMeNle-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차"에 따르며, Fmoc-MeNleOH를 사용하고;
"프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차"에 따랐다.
생성된 수지를 프릿이 장착된 바이오-라드 튜브로 옮기고, DCM (4 mL x 3)으로 세척하였다.
마이크로절단 A를 수행하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.91분, ESI-MS(+) m/z 810.5 (M+H).
중간체 수지 H의 제조.
Figure pct00197
125 mL 반응기에 링크 수지 (1640 mg, 1 mmol)를 첨가하고, 용기를 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Orn(Alloc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Bzt-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Dab(Alloc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp(Boc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Hyp(tBu)-OH를 사용하였다.
생성된 수지를 프릿이 장착된 100 mL 폴리프로필렌 튜브로 옮기고, DCM (40 mL x 3)으로 세척하였다. 최종적으로, 수지를 진공 하에 건조시키고, 합성을 위한 중간체로서 사용하였다.
실시예 1001의 제조
Figure pct00198
실시예 1001을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 841.20 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 841.20 (M+2H).
실시예 1002의 제조
Figure pct00199
실시예 1002를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 89%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.94분; ESI-MS(+) m/z 932.50 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 932.60 (M+2H).
실시예 1003의 제조
Figure pct00200
실시예 1003을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 =1.59분; ESI-MS(+) m/z 943.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 =1.54분; ESI-MS(+) m/z 944.0 (M+2H).
실시예 1004의 제조
Figure pct00201
실시예 1004를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.33분; ESI-MS(+) m/z 902.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.20분; ESI-MS(+) m/z 902.0 (M+2H).
실시예 1005의 제조
Figure pct00202
실시예 1005를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 911.85 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 911.6 (M+2H).
실시예 1006의 제조
Figure pct00203
실시예 1006을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 943.90 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 944.25 (M+2H).
실시예 1007의 제조
Figure pct00204
실시예 1007을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z 946.10 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 945.15 (M+2H).
실시예 1009의 제조
Figure pct00205
실시예 1009를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 =1.77분; ESI-MS(+) m/z 932.40 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 =1.68분; ESI-MS(+) m/z 932.20 (M+2H).
실시예 1010의 제조
Figure pct00206
실시예 1010을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 911.25 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 910.60 (M+2H).
실시예 1011의 제조
Figure pct00207
실시예 1011을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(시클로부탄카르복스아미도)프로판산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 65% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 947.65 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 947.35 (M+2H).
실시예 1012의 제조
Figure pct00208
실시예 1012를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 11의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(시클로펜탄카르복스아미도)프로판산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 954.30 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 954.20 (M+2H).
실시예 1013의 제조
Figure pct00209
실시예 1013을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-벤즈아미도프로판산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 35-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 958.75 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 958.35 (M+2H).
실시예 1014의 제조
Figure pct00210
실시예 1014를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 0-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 956.30 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간= 1.57분; ESI-MS(+) m/z 956.30 (M+2H).
실시예 1015의 제조
Figure pct00211
실시예 1015를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-70% B, 이어서 70% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z 948.45 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 948.40 (M+2H).
실시예 1016의 제조
Figure pct00212
실시예 1016을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 948.20 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 948.15 (M+2H).
실시예 1017의 제조
Figure pct00213
실시예 1017을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(시클로헥산카르복스아미도)프로판산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 =1.45분; ESI-MS(+) m/z 961.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 961.6 (M+2H).
실시예 1018의 제조
Figure pct00214
실시예 1018을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 941.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 942.0 (M+2H).
실시예 1019의 제조
Figure pct00215
실시예 1019를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-(시클로부탄카르복스아미도)부탄산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 982.50 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 982.25 (M+2H).
실시예 1020의 제조
Figure pct00216
실시예 1020을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-(시클로펜탄카르복스아미도)부탄산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 89%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z 989.30 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 989.45 (M+2H).
실시예 1021의 제조
Figure pct00217
실시예 1021을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-(시클로헥산카르복스아미도)부탄산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 996.75 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 996.75 (M+2H).
실시예 1022의 제조
Figure pct00218
실시예 1022를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-벤즈아미도부탄산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 =1.82분; ESI-MS(+) m/z 993.35 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 =1.71분; ESI-MS(+) m/z 993.45 (M+2H).
실시예 1023의 제조
Figure pct00219
실시예 1023을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-(푸란-2-카르복스아미도)부탄산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 =1.76분; ESI-MS(+) m/z 988.75 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 =1.68분; ESI-MS(+) m/z 988.75 (M+2H).
실시예 1024의 제조
Figure pct00220
실시예 1024를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 =1.87분; ESI-MS(+) m/z 961.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 =1.78분; ESI-MS(+) m/z 961.3 (M+2H).
실시예 1025의 제조
Figure pct00221
실시예 1025를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 944.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 944.1 (M+2H).
실시예 1026의 제조
Figure pct00222
실시예 1026을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z 944.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 944.6 (M+2H).
실시예 1028의 제조
Figure pct00223
실시예 1028을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.91분; ESI-MS(+) m/z 945.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z 945.6 (M+2H).
실시예 1029의 제조
Figure pct00224
실시예 1029를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 946.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 946.5 (M+2H).
실시예 1030의 제조
Figure pct00225
실시예 1030을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.95분; ESI-MS(+) m/z 953.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.91분; ESI-MS(+) m/z 952.9 (M+2H).
실시예 1031의 제조
Figure pct00226
실시예 1031을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 934.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 934.2 (M+2H).
실시예 1032의 제조
Figure pct00227
실시예 1032를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 953.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 954.5 (M+2H).
실시예 1033의 제조
Figure pct00228
실시예 1033을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(시클로부탄카르복스아미도)프로판산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 50% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 926.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.29분; ESI-MS(+) m/z 926.2 (M+2H).
실시예 1034의 제조
Figure pct00229
실시예 1034를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-4-(시클로부탄카르복스아미도)부탄산을 "통상의 아미노산-커플링 절차"에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 933.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.30분; ESI-MS(+) m/z 933.3 (M+2H).
실시예 1035의 제조
Figure pct00230
실시예 1035를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 965.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 964.6 (M+2H).
실시예 1036의 제조
Figure pct00231
실시예 1036을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 974.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 974.8 (M+2H).
실시예 1037의 제조
Figure pct00232
실시예 1037을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 964.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 964.0 (M+2H).
실시예 1038의 제조
Figure pct00233
실시예 1038을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 927.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z 927.3 (M+2H).
실시예 1039의 제조
Figure pct00234
실시예 1039를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 936.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 935.8 (M+2H).
실시예 1040의 제조
Figure pct00235
실시예 1040을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 913.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 912.9 (M+2H).
실시예 1041의 제조
Figure pct00236
실시예 1041을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 942.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 942.7 (M+2H).
실시예 1042의 제조
Figure pct00237
실시예 1042를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 935.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 935.3 (M+2H).
실시예 1043의 제조
Figure pct00238
실시예 1043을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 악시아 C18, 30 x 250; 이동상 A: 0.1%TFA 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.9분; ESI-MS(+) m/z 953.1 (M+2H).
분석 HPLC 조건 I: 체류 시간 = 14.98분.
실시예 1044의 제조
Figure pct00239
실시예 1044를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 973.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 973.3 (M+2H).
실시예 1045의 제조
Figure pct00240
실시예 1045를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 60% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 964.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 964.8 (M+2H).
실시예 1046의 제조
Figure pct00241
실시예 1046을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 964.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 963.8 (M+2H).
실시예 1047의 제조
Figure pct00242
실시예 1047을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 악시아 C18, 30 x 250; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.94분; ESI-MS(+) m/z 967.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 I: 체류 시간 = 15.58분.
실시예 1048의 제조
Figure pct00243
실시예 1048을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 974.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 974.8 (M+2H).
실시예 1049의 제조
Figure pct00244
실시예 1049를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 60% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 914.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 913.8 (M+2H).
실시예 1050의 제조
Figure pct00245
실시예 1050을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 60% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 952.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
실시예 1051의 제조
Figure pct00246
실시예 1051을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.5 mg이고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 943.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 943.5 (M+2H).
실시예 1052의 제조
Figure pct00247
실시예 1052를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 2 정제용 HPLC 주입에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 30 x 100; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물을 최소량의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 1.1 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.8분, ESI-MS(+) m/z 956.9 (M+H).
분석 HPLC 조건 G: 체류 시간 = 7.8분.
분석 HPLC 조건 H: 체류 시간 = 9.35분.
실시예 1053의 제조
Figure pct00248
실시예 1053을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 2 정제용 HPLC 주입에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 30 x 100; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 0.5 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.78분; ESI-MS(+) m/z 899.0 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 12.74분.
실시예 1054의 제조
Figure pct00249
실시예 1054를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 2 정제용 HPLC 주입에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 30 x 100; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 4.7 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.81분; ESI-MS(+) m/z 935.4 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.48분.
실시예 1055의 제조
Figure pct00250
실시예 1055를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 2 정제용 HPLC 주입에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 30 x 100; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 1.6 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.81분; ESI-MS(+) m/z 906.2 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.54분.
실시예 1056의 제조
Figure pct00251
실시예 1056을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 2 정제용 HPLC 주입에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 30 x 100; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 3.6 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.2%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.78분; ESI-MS(+) m/z 963.1 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 12.33분.
실시예 1057의 제조
Figure pct00252
실시예 1057을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 2 정제용 HPLC 주입에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 30 x 100; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 8.7 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.5%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.71분; ESI-MS(+) m/z 899.1 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 11.76분.
실시예 1058의 제조
Figure pct00253
실시예 1058을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 981.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 981.7 (M+2H).
실시예 1059의 제조
Figure pct00254
실시예 1059를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 915.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 915.4 (M+2H).
실시예 1060의 제조
Figure pct00255
실시예 1060을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 901.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 901.3 (M+2H).
실시예 1061의 제조
실시예 1061을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 919.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 919.0 (M+2H).
실시예 1062의 제조
Figure pct00257
실시예 1062를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1%트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 908.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 908.8 (M+2H).
실시예 1063의 제조
Figure pct00258
실시예 1063을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 915.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 915.8 (M+2H).
실시예 1064의 제조
Figure pct00259
실시예 1064를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 916.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 916.2 (M+2H).
실시예 1065의 제조
Figure pct00260
실시예 1065를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 927.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 927.2 (M+2H).
실시예 1066의 제조
Figure pct00261
실시예 1066을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 0-100% B, 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.9 mg이었고, LC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.78분; ESI-MS(+) m/z 890.5 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.4분.
실시예 1067의 제조
Figure pct00262
실시예 1067을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 0-100% B, 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.6 mg이었고, LC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.93분; ESI-MS(+) m/z 935.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 14.92분.
실시예 1068의 제조
Figure pct00263
실시예 1068을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼; 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 0-1000% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분, 2 2 ml 분사. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.3 mg이었고, 분석 조건 J를 사용하는 LC에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.79분; ESI-MS(+) m/z 952.4 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 12.99분.
실시예 1069의 제조
Figure pct00264
실시예 1069를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼; 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 1000 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분, 2 2 ml 분사. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.7 mg이었고, 3 LC 분석 방법을 사용하는 LC에 의한 그의 추정된 순도는 95.5%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.81분; ESI-MS(+) m/z 947.5 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.13분.
분석 HPLC 조건 G: 체류 시간 = 9.14분.
분석 HPLC 조건 H: 체류 시간 = 10.76분.
실시예 1070의 제조
Figure pct00265
실시예 1070을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼; 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분, 2 2 ml 분사. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6 mg이었고, LC에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.82분; ESI-MS(+) m/z 940.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.0분.
실시예 1071의 제조
Figure pct00266
실시예 1071을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm, 5-μm 입자; 개질제로서의 0.1% TFA 함유 물 중 0 내지 100% 아세토니트릴, 30분에 걸침. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.5 mg이었고, LC에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.88분; ESI-MS(+) m/z 905.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 14.83분.
실시예 1072의 제조
Figure pct00267
실시예 1072를 중간체 수지 B로 출발하여, "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다.
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm, 5-μm 입자; 개질제로서의 0.1% TFA 함유 물 중 0 내지 100% 아세토니트릴, 30분에 걸침. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.3 mg이었고, LC에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.7분; ESI-MS(+) m/z 922.9 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 11.36분.
실시예 1073의 제조
Figure pct00268
실시예 1073을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm, 5-μm 입자; 개질제로서의 0.1% TFA 함유 물 중 0 내지 100% 아세토니트릴, 30분에 걸침. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3 mg이었고, LC에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.71분; ESI-MS(+) m/z 902.7 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 11.15분.
실시예 1074의 제조
Figure pct00269
실시예 1074를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm, 5-μm 입자; 개질제로서의 0.1% TFA 함유 물 중 0 내지 100% 아세토니트릴, 30분에 걸침. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.8 mg이었고, LC에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.84분; ESI-MS(+) m/z 955.8 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.34분.
실시예 1075의 제조
Figure pct00270
실시예 1075를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 정제용 LC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼 페노메넥스® 루나 C18, 30 x 100 mm, 5-μm 입자; 개질제로서의 0.1% TFA 함유 물 중 0 내지 100% 아세토니트릴, 30분에 걸침. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.8 mg이었고, LC에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 0.8분; ESI-MS(+) m/z 948.9 (M+2H).
분석 HPLC 조건 J: 체류 시간 = 13.34분.
실시예 1076의 제조
Figure pct00271
실시예 1076을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 Fmoc-Gly-O-클로로트리틸 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 927.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 927.4 (M+2H).
실시예 1077의 제조
Figure pct00272
실시예 1077을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 922.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 922.3 (M+2H).
실시예 1078의 제조
Figure pct00273
실시예 1078을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 89%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 933.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 933.7 (M+2H).
실시예 1080의 제조
Figure pct00274
실시예 1080을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3,4-디메톡시페닐)프로판산을 제8 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 937.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 937.5 (M+2H).
실시예 1081의 제조
Figure pct00275
실시예 1081을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 905.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 905.5 (M+2H).
실시예 1082의 제조
Figure pct00276
실시예 1082를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 926.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 926.3 (M+2H).
실시예 1083의 제조
Figure pct00277
실시예 1083을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (R)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-메틸-3-(트리틸티오)부탄산을 제2 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20- 70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.91 mg이고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 941.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 940.9 (M+2H).
실시예 1084의 제조
Figure pct00278
실시예 1084를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 930.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 930.8 (M+2H).
실시예 1085의 제조
Figure pct00279
실시예 1085를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3-메톡시페닐)프로판산을 제8 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13 mg이고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 922.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 922.5 (M+2H).
실시예 1086의 제조
Figure pct00280
실시예 1086을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3-메틸페닐)프로판산을 제8 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 914.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 914.5 (M+2H).
실시예 1087의 제조
Figure pct00281
실시예 1087을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 948.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 947.9 (M+2H).
실시예 1088의 제조
Figure pct00282
실시예 1088을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 A로부터 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 902.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z 902.0 (M+2H).
실시예 1089의 제조
Figure pct00283
실시예 1089를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 A로부터 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 934.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 934.3 (M+2H).
실시예 1090의 제조
Figure pct00284
실시예 1090을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 A로부터 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 956.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 955.9 (M+2H).
실시예 1091의 제조
Figure pct00285
실시예 1091을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 A로부터 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 60% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 930.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 930.7 (M+2H).
실시예 1092의 제조
Figure pct00286
실시예 1092를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 927.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 927.3 (M+2H).
실시예 1093의 제조
Figure pct00287
실시예 1093을, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(4-술파모일페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 966.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 966.2 (M+2H).
실시예 1094의 제조
Figure pct00288
실시예 1094를, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-4-일)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 946.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 946.6 (M+2H).
실시예 1095의 제조
Figure pct00289
실시예 1095를, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(4-(tert-부톡시카르보닐)페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 949.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 949.2 (M+2H).
실시예 1096의 제조
Figure pct00290
실시예 1096을, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(티아졸-4-일)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 930.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 930.7 (M+2H).
실시예 1097의 제조
Figure pct00291
실시예 1097을, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(m-톨릴)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 934.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 934.1 (M+2H).
실시예 1098의 제조
Figure pct00292
실시예 1098을, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(3-메톡시페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 942.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 942.1 (M+2H).
실시예 1099의 제조
Figure pct00293
실시예 1099를, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(푸란-2-일)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 922.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 922.2 (M+2H).
실시예 1100의 제조
Figure pct00294
실시예 1100을, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(4-(메틸술폰아미도)페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 973.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 973.5 (M+2H).
실시예 1101의 제조
Figure pct00295
실시예 1101을, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(2-클로로페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 945.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 944.2 (M+2H).
실시예 1102의 제조
Figure pct00296
실시예 1102를, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(3-클로로페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 944.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 944.4 (M+2H).
실시예 1103의 제조
Figure pct00297
실시예 1103을, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(3,4-디클로로페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 961.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 961.3 (M+2H).
실시예 1104의 제조
Figure pct00298
실시예 1104를, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(3,4-디플루오로페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 945.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 945.2 (M+2H).
실시예 1105의 제조
Figure pct00299
실시예 1105를, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(3,4-디메톡시페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 956.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 956.9 (M+2H).
실시예 1106의 제조
Figure pct00300
실시예 1106을, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(o-톨릴)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 934.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 934.0 (M+2H).
실시예 1107의 제조
Figure pct00301
실시예 1107을, 중간체 수지 B로 출발하여 "수동 커플링 절차 A", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D"를 사용하여 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(3-(트리플루오로메틸)페닐)프로판산을 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 961.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 961.0 (M+2H).
실시예 1108의 제조
Figure pct00302
실시예 1108을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-N-Me-Ala-OH를 제4 아미노산 커플링 단계에 사용하고, (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-5-페닐펜탄산을 제5 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mm 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 930.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 930.0 (M+2H).
실시예 1110의 제조
Figure pct00303
실시예 1110을, 하기 일반적 절차로 구성된, 중간체 수지 A로 출발하여 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". 2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-2-메틸프로판산을 중간체 수지 A에 대한 제1 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 934.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 933.9 (M+2H).
실시예 1112의 제조
Figure pct00304
실시예 1112를 하기 일반적 절차로 구성된, 중간체 수지 A로 출발하여 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4,4-디플루오로피롤리딘-2-카르복실산을 제4 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 944.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 944.9 (M+2H).
실시예 1113의 제조
Figure pct00305
실시예 1113을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 922.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 922.4(M+2H).
실시예 1114의 제조
Figure pct00306
실시예 1114를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 930.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 930.2 (M+2H).
실시예 1115의 제조
Figure pct00307
실시예 1115를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 964.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 964.4 (M+2H).
실시예 1116의 제조
Figure pct00308
실시예 1116을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 926.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 926.2 (M+2H).
실시예 1117의 제조
Figure pct00309
실시예 1117을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.86분; ESI-MS(+) m/z 957.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 956.8 (M+2H).
실시예 1118의 제조
Figure pct00310
실시예 1118을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 939.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 938.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 938.4553 (M+2H); 실측치: 938.4529 (M+2H).
실시예 1119의 제조
Figure pct00311
실시예 1119를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 955.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 955.6 (M+2H).
실시예 1120의 제조
Figure pct00312
실시예 1120을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 967.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 968.2 (M+2H).
실시예 1121의 제조
Figure pct00313
실시예 1121을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 906.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 906.2 (M+2H).
실시예 1122의 제조
Figure pct00314
실시예 1122를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 948.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 948.8 (M+2H).
실시예 1123의 제조
Figure pct00315
실시예 1123을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 935.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 935.3 (M+2H).
실시예 1124의 제조
Figure pct00316
실시예 1124를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 2.03분; ESI-MS(+) m/z 966.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.99분; ESI-MS(+) m/z 965.9 (M+2H).
실시예 1125의 제조
Figure pct00317
실시예 1125를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.97분; ESI-MS(+) m/z 974.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.90분; ESI-MS(+) m/z 973.4 (M+2H).
실시예 1126의 제조
Figure pct00318
실시예 1126을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 965.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 966.3 (M+2H).
실시예 1127의 제조
Figure pct00319
실시예 1127을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 939.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.6분; ESI-MS(+) m/z 938.9 (M+2H).
실시예 1128의 제조
Figure pct00320
실시예 1128을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 947.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 947.1 (M+2H).
실시예 1129의 제조
Figure pct00321
실시예 1129를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 956.7 (M+2H).
실시예 1130의 제조
Figure pct00322
실시예 1130을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-(D/L)-Trp(Me)-OH를 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 955.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 955.4 (M+2H).
실시예 1131의 제조
Figure pct00323
실시예 1131을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 928.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 928.1 (M+2H).
실시예 1132의 제조
Figure pct00324
실시예 1132를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 921.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 921.2 (M+2H).
실시예 1133의 제조
Figure pct00325
실시예 1133을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 969.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 969.8 (M+2H).
실시예 1134의 제조
Figure pct00326
실시예 1134를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 962.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 962.4 (M+2H).
실시예 1135의 제조
Figure pct00327
실시예 1135를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 955.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 955.5 (M+2H).
실시예 1136의 제조
Figure pct00328
실시예 1136을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 954.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 953.8 (M+2H).
실시예 1137의 제조
Figure pct00329
실시예 1137을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 954.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 953.8 (M+2H).
실시예 1138의 제조
Figure pct00330
실시예 1138을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 888.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 888.2 (M+2H).
실시예 1139의 제조
Figure pct00331
실시예 1139를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 917.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 917.8 (M+2H).
실시예 1140의 제조
Figure pct00332
실시예 1140을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 30.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 914.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 914.6 (M+2H).
실시예 1141의 제조
Figure pct00333
실시예 1141을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 939.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 940.4 (M+2H).
실시예 1142의 제조
Figure pct00334
실시예 1142를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 7-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 923.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 923.3 (M+2H).
실시예 1143의 제조
Figure pct00335
실시예 1143을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 908.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 909.3 (M+2H).
실시예 1144의 제조
Figure pct00336
실시예 1144를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 G로부터 출발하여 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(7-메틸-1H-인돌-3-일)프로판산을 중간체 수지 G에 대한 제1 커플링에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 955.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 955.0 (M+2H).
실시예 1145의 제조
Figure pct00337
실시예 1145를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 909.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.4분; ESI-MS(+) m/z 909.5 (M+2H).
실시예 1146의 제조
Figure pct00338
실시예 1146을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 쉴드 rp18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-55% B, 이어서 55% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 922.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 922.8 (M+2H).
실시예 1147의 제조
Figure pct00339
실시예 1147을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 931.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 931.1 (M+2H).
실시예 1148의 제조
Figure pct00340
실시예 1148을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 962.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 961.8 (M+2H).
실시예 1149의 제조
Figure pct00341
실시예 1149를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 55.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z 915.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 916.0 (M+2H).
실시예 1150의 제조
Figure pct00342
실시예 1150을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 47.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.33분; ESI-MS(+) m/z 901.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z 900.7 (M+2H).
실시예 1151의 제조
Figure pct00343
실시예 1151을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 53.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 908.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.30분; ESI-MS(+) m/z 908.4 (M+2H).
실시예 1152의 제조
Figure pct00344
실시예 1152를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 28.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 894.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 894.1 (M+2H).
실시예 1153의 제조
Figure pct00345
실시예 1153을 Fmoc-Gly-O-클로로트리틸 수지로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 E", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.9 mg이고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 922.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 923.3 (M+2H).
실시예 1154의 제조
Figure pct00346
실시예 1154를, Fmoc-Gly-O-클로로트리틸 수지로 출발하여, 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 E", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 914.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 914.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 913.9560 (M+2H); 실측치: 913.9529 (M+2H).
실시예 1155의 제조
Figure pct00347
실시예 1155를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.4분; ESI-MS(+) m/z 923.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 923.9 (M+2H).
실시예 1156의 제조
Figure pct00348
실시예 1156을 실시예 1140 (29 mg, 0.016 mmol)을 DMF (2 mL) 중 HATU (7.24 mg, 0.019 mmol)의 미리 제조된 용액, 및 DIEA (6.93 μl, 0.040 mmol)로 처리함으로써 제조하였다. 밤새 실온에서 교반하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 935.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 935.2 (M+2H).
실시예 1157의 제조
Figure pct00349
실시예 1157을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 941.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 941.4 (M+2H).
실시예 1158의 제조
Figure pct00350
실시예 1158을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 895.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 895.8 (M+2H).
실시예 1159의 제조
Figure pct00351
실시예 1159를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 964.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 964.0 (M+2H).
실시예 1160의 제조
Figure pct00352
실시예 1160을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 938.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 938.5 (M+2H).
실시예 1161의 제조
Figure pct00353
실시예 1161을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 903.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 904.0 (M+2H).
실시예 1162의 제조
Figure pct00354
실시예 1162를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 912.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 911.7 (M+2H).
실시예 1163의 제조
Figure pct00355
실시예 1163을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 904.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 904.3 (M+2H).
실시예 1164의 제조
Figure pct00356
실시예 1164를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 912.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 912.5 (M+2H).
실시예 1165의 제조
Figure pct00357
실시예 1165를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 쉴드 RP18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 913.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 913.7 (M+2H).
실시예 1166의 제조
Figure pct00358
실시예 1166을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 쉴드 RP18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 956.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 956.4 (M+2H).
실시예 1167의 제조
Figure pct00359
실시예 1167을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.4분; ESI-MS(+) m/z 955.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 955.3 (M+2H).
실시예 1168의 제조
Figure pct00360
실시예 1168을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 921.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 921.2 (M+2H).
실시예 1169의 제조
Figure pct00361
실시예 1169를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 쉴드 RP18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 921.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 921.5 (M+2H).
실시예 1170의 제조
Figure pct00362
실시예 1170을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 889.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 888.7 (M+2H).
실시예 1171의 제조
Figure pct00363
실시예 1171을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 895.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 895.7 (M+2H).
실시예 1172의 제조
Figure pct00364
실시예 1172를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 867.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 867.0 (M+2H).
실시예 1173의 제조
Figure pct00365
실시예 1173을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 40.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 940.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z 941.0 (M+2H).
실시예 1174의 제조
Figure pct00366
실시예 1174를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 37.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 958.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 959.2 (M+2H).
실시예 1175의 제조
Figure pct00367
실시예 1175를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 963.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 963.6 (M+2H).
실시예 1176의 제조
Figure pct00368
실시예 1176을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 934.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z 933.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 933.4614 (M+2H); 실측치: 933.4596 (M+2H).
실시예 1177의 제조
Figure pct00369
실시예 1177을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 948.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 947.7 (M+2H).
실시예 1178의 제조
Figure pct00370
실시예 1178을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 921.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z 921.0 (M+2H).
실시예 1179의 제조
Figure pct00371
실시예 1179를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지를 사용하여 제조하였다: "프렐류드 방법 D: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 D: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 D: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-61% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 921.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 921.6 (M+2H).
실시예 1180의 제조
Figure pct00372
실시예 1180을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 C로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 910.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 910.1 (M+2H).
실시예 1181의 제조
Figure pct00373
실시예 1181을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 30.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z 931.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.28분; ESI-MS(+) m/z 932.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 931.4236 (M+2H); 실측치: 931.4212 (M+2H).
실시예 1182의 제조
Figure pct00374
실시예 1182를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 932.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 932.5 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 931.9395 (M+2H); 실측치: 931.9369 (M+2H).
실시예 1183의 제조
Figure pct00375
실시예 1183을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 932.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 932.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 932.4315 (M+2H); 실측치: 932.4284 (M+2H).
실시예 1184의 제조
Figure pct00376
실시예 1184를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 926.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 926.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 925.4236 (M+2H); 실측치: 925.4208 (M+2H).
실시예 1185의 제조
Figure pct00377
실시예 1185를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 932.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 932.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 931.9395 (M+2H); 실측치: 931.9371 (M+2H).
실시예 1186의 제조
Figure pct00378
실시예 1186을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 925.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 925.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 924.9316 (M+2H); 실측치: 924.9286 (M+2H).
실시예 1187의 제조
Figure pct00379
실시예 1187을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 5-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 29.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.27분; ESI-MS(+) m/z 937.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.29분; ESI-MS(+) m/z 938.0 (M+2H).
실시예 1188의 제조
Figure pct00380
실시예 1188을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 E로부터 제조하였다: "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D". (2S,4S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-((tert-부톡시카르보닐)아미노) 피롤리딘-2-카르복실산을 중간체 수지 E 상에의 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 0-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 27.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.21분; ESI-MS(+) m/z 948.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.18분; ESI-MS(+) m/z 948.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 947.9747 (M+2H); 실측치: 947.9706 (M+2H).
실시예 1189의 제조
Figure pct00381
실시예 1189를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 B로부터 제조하였다: "심포니 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-N-Me-Glu(tBu)-OH를 중간체 수지 B 상에의 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.33분; ESI-MS(+) m/z 963.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 963.6 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 963.4776 (M+2H); 실측치: 963.4749 (M+2H).
실시예 1190의 제조
Figure pct00382
실시예 1190을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 F로부터 제조하였다: "심포니 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-N-Me-Asp(tBu)-OH를 중간체 수지 F 상에의 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 978.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 978.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 977.9582 (M+2H); 실측치: 977.9561 (M+2H).
실시예 1191의 제조
Figure pct00383
실시예 1191을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 F로부터 제조하였다: "심포니 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D". Fmoc-N-Me-Glu(tBu)-OH를 중간체 수지 F 상에의 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 985.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 985.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 984.9660 (M+2H); 실측치: 984.9631(M+2H).
실시예 1192의 제조
Figure pct00384
실시예 1192를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 E로부터 제조하였다: "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D". (2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-((tert-부톡시카르보닐)아미노) 피롤리딘-2-카르복실산을 중간체 수지 E 상에의 제1 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 0-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 29.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.14분; ESI-MS(+) m/z 948.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.19분; ESI-MS(+) m/z 948.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 947.9747 (M+2H); 실측치: 947.9710 (M+2H).
실시예 1193의 제조
Figure pct00385
실시예 1193을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 0-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 938.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.28분; ESI-MS(+) m/z 938.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 938.4315 (M+2H); 실측치: 938.4283 (M+2H).
실시예 1194의 제조
Figure pct00386
실시예 1194를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 924.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 924.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 923.9602 (M+2H); 실측치: 923.9567 (M+2H).
실시예 1195의 제조
Figure pct00387
실시예 1195를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 D로부터 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 932.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 931.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 931.4475 (M+2H); 실측치: 931.4443 (M+2H).
실시예 1196의 제조
Figure pct00388
실시예 1196을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 22-72% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 947.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 947.3 (M+2H).
실시예 1197의 제조
Figure pct00389
실시예 1197을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 C: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 C: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 C: 최종 세척 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 22-72% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 957.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 958.1 (M+2H).
실시예 1198의 제조
Figure pct00390
실시예 1198을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 913.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 913.1 (M+2H).
실시예 1199의 제조
Figure pct00391
실시예 1199를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 887.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 887.8 (M+2H).
실시예 1200의 제조
실시예 1200을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z 914.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 914.4 (M+2H).
실시예 1201의 제조
Figure pct00393
실시예 1201을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 984.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.30분; ESI-MS(+) m/z 983.8 (M+2H).
실시예 1202의 제조
Figure pct00394
실시예 1202를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 921.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 921.4 (M+2H).
실시예 1203의 제조
Figure pct00395
실시예 1203을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 992.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 991.8 (M+2H).
실시예 1204의 제조
Figure pct00396
실시예 1204를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 A: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 A: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 A: 2급 아민-커플링 절차 B", "통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 B", "전반적 탈보호 방법 C", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 897.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 896.7 (M+2H).
실시예 1205의 제조
Figure pct00397
실시예 1205를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 920.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 920.2 (M+2H).
실시예 1206의 제조
Figure pct00398
실시예 1206을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 905.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 905.4 (M+2H).
실시예 1207의 제조
Figure pct00399
실시예 1207을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 913.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 913.5 (M+2H).
실시예 1208의 제조
Figure pct00400
실시예 1208을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 900.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 900.1 (M+2H).
실시예 1209의 제조
Figure pct00401
실시예 1209를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 900.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 900.7 (M+2H).
실시예 1210의 제조
Figure pct00402
실시예 1210을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 893.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 893.6 (M+2H).
실시예 1211의 제조
Figure pct00403
실시예 1211을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.33분; ESI-MS(+) m/z 899.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 899.6 (M+2H).
실시예 1212의 제조
Figure pct00404
실시예 1212를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 5-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 901.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.25분; ESI-MS(+) m/z 901.4 (M+2H).
실시예 1213의 제조
Figure pct00405
실시예 1213을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.33분; ESI-MS(+) m/z 907.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.23분; ESI-MS(+) m/z 907.9 (M+2H).
실시예 1214의 제조
Figure pct00406
실시예 1214를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.33분; ESI-MS(+) m/z 922.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.22분; ESI-MS(+) m/z 922.7 (M+2H).
실시예 1215의 제조
Figure pct00407
실시예 1215를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 926.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 926.2 (M+2H).
실시예 1216의 제조
Figure pct00408
실시예 1216을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z 948.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.23분; ESI-MS(+) m/z 948.0 (M+2H).
실시예 1217의 제조
Figure pct00409
실시예 1217을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 977.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 976.7 (M+2H).
실시예 1218의 제조
Figure pct00410
실시예 1218을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 969.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 969.7 (M+2H).
실시예 1219의 제조
Figure pct00411
실시예 1219를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 956.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 956.7 (M+2H).
실시예 1220의 제조
Figure pct00412
실시예 1220을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 5-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z 948.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.21분; ESI-MS(+) m/z 948.7 (M+2H).
실시예 1221의 제조
Figure pct00413
실시예 1221을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 0-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 0-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 0.94분; ESI-MS(+) m/z 922.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 0.97분; ESI-MS(+) m/z 921.5 (M+2H).
실시예 1222의 제조
Figure pct00414
실시예 1222를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 C로부터 출발하여 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 917.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 918.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 917.4080 (M+2H); 실측치: 917.4042 (M+2H).
실시예 1223의 제조
Figure pct00415
실시예 1223을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 C로부터 출발하여 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 918.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 918.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 917.9238 (M+2H); 실측치: 917.9207 (M+2H).
실시예 1224의 제조
Figure pct00416
실시예 1224를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 C로부터 출발하여 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 911.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 911.5 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 911.4080 (M+2H); 실측치: 911.4052 (M+2H).
실시예 1225의 제조
Figure pct00417
실시예 1225를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 C로부터 출발하여 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 917.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 917.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 917.4318 (M+2H); 실측치: 917.4290 (M+2H).
실시예 1226의 제조
Figure pct00418
실시예 1226을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 C로부터 출발하여 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 911.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 911.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 910.9160 (M+2H); 실측치: 910.9128 (M+2H).
실시예 1227의 제조
Figure pct00419
실시예 1227을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 F로부터 출발하여 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 970.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 970.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 969.9607 (M+2H); 실측치: 969.9592 (M+2H).
실시예 1228의 제조
Figure pct00420
실시예 1228을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 C로부터 출발하여 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 924.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z 924.6 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 923.9238 (M+2H); 실측치: 923.9242 (M+2H).
실시예 1229의 제조
Figure pct00421
실시예 1229를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 Fmoc-Gly-클로르트리틸 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 E", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 907.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 907.2 (M+2H).
실시예 1230의 제조
Figure pct00422
실시예 1230을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 중간체 수지 H로부터 출발하여 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 1041.4 (M+2H).
실시예 1231의 제조
Figure pct00423
실시예 1231을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 886.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 886.0 (M+2H).
실시예 1232의 제조
Figure pct00424
실시예 1232를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 914.6 (M+2H).
실시예 1233의 제조
Figure pct00425
실시예 1233을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 944.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 944.0 (M+2H).
실시예 1234의 제조
Figure pct00426
실시예 1234를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 956.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 956.0 (M+2H).
실시예 1235의 제조
Figure pct00427
실시예 1235를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 923.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 923.2 (M+2H).
실시예 1236의 제조
Figure pct00428
실시예 1236을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 82%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 943.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 943.8 (M+2H).
실시예 1237의 제조
Figure pct00429
실시예 1237을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 977.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 977.0 (M+2H).
실시예 1238의 제조
Figure pct00430
실시예 1238을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 Gly-클로르트리틸 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 E", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 88%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 921.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 921.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 920.9638 (M+2H); 실측치: 920.9628 (M+2H).
실시예 1239의 제조
Figure pct00431
실시예 1239를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 1의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 링크 수지 상에서 제조하였다: "심포니 방법 B: 수지-팽윤 절차", "심포니 방법 B: 표준-커플링 절차", "심포니 방법 B: 2급 아민-커플링 절차", "심포니 방법 B: 최종 캡핑 절차", "전반적 탈보호 방법 F", 및 "고리화 방법 D".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 885.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 885.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 885.4270 (M+2H); 실측치: 885.4269 (M+2H).
분석 데이터:
질량 분광측정법: "ESI-MS(+)"는 양이온 모드로 수행된 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-MS(-)"는 음이온 모드로 수행된 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-HRMS(+)"는 양이온 모드로 수행된 고해상도 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-HRMS(-)"는 음이온 모드로 수행된 고해상도 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미한다. 검출된 질량은 "m/z" 단위 지정에 따라 보고된다. 1000 초과의 정확한 질량을 갖는 화합물은 종종 이중-하전 또는 삼중-하전 이온으로 검출되었다.
분석 LCMS 조건 A:
칼럼: BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 50℃; 구배: 2분에 걸쳐 2% B에서 98% B, 이어서 98% B에서 0.5분 유지; 유량: 0.8 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 LCMS 조건 C:
칼럼: BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 0.2% 포름산 및 0.01% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.2% 포름산 및 0.01% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 50℃; 구배: 2분에 걸쳐 2% B에서 80% B, 0.1분에 걸쳐 80% B에서 98% B, 이어서 98% B에서 0.5분 유지; 유량: 0.8 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 LCMS 조건 D:
칼럼: 워터스 액퀴티 UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 10 mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10 mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 50℃; 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.75-분 유지; 유량: 1.11 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 LCMS 조건 E:
칼럼: 워터스 액퀴티 UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 50℃; 구배: 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.75-분 유지; 유량: 1.11 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 LCMS 조건 F:
칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 2.1 x 50 mm; 이동상 A: 10 mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10 mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 35℃; 구배: 4분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 1-분 유지; 유량: 4 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 HPLC 조건 B:
칼럼: YMC 팩 ODS-AQ 3μm 150x4.6mm 이동상 A: 0.1% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.1% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 40℃; 구배: 10 내지 40분에 걸쳐 10% B에서 100% B; 유량: 1 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
일반적 절차:
프렐류드 방법 A:
모든 조작을 프렐류드 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 언급되지 않는 한 하단 프릿이 장착된 10 또는 45 mL 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. 튜브를 튜브의 상단 및 하단 둘 다를 통해 프렐류드 펩티드 합성기에 연결하였다. DMF 및 DCM을 튜브의 상단을 통해 첨가할 수 있었으며, 이를 튜브의 측면으로 동등하게 세척해 내었다. 나머지 시약을 튜브의 하단을 통해 첨가하고, 프릿을 통해 통과시켜 수지를 접촉시켰다. 모든 용액을 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 교반"은 하단 프릿을 통한 N2 기체의 짧은 펄스를 기재하며; 펄스는 대략 5초 동안 지속되고, 30초마다 발생한다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. HATU 용액은 제조 5일 이내에 사용하였다. DMF = 디메틸포름아미드; HCTU = 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄; HATU = 1-[비스(디메틸아미노) 메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 시버 = Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시, 여기서 "3-일옥시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 시버 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.71 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct00432
"프렐류드 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 시버-메리필드 수지의 대략 140 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "단일-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "2급 아민-커플링 절차"를 사용하였다. 펩티드의 N-말단에 대한 클로로아세틸 기의 커플링은 하기 상세화된 "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차" 또는 "클로로아세트산 커플링 절차"에 의해 기재되어 있다.
수지-팽윤 절차:
40 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 메리필드:시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다 (팽윤시켰다): 반응 용기에 DMF (5.0 mL) 및 DCM (5.0 mL)을 첨가하고, 이 때 혼합물을 반응 용기의 하단으로부터의 N2 버블링과 함께 10분 동안 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다.
단일-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 60초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 5.0 mL, 10 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 2.5 mL, 20 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 60분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
2급 아민-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 1.5 mL, 12 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 300분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
통상의 아미노산-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 0.5 내지 2.5 mL, 1 내지 5 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 0.5 내지 2.5 mL, 1 내지 5 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 0.5 내지 1.5 mL, 4 내지 12 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 60분 내지 600분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 DMF 중 DIPEA (4.0 mmol, 0.699 mL, 40 당량), 및 클로로아세틸 클로라이드 (2.0 mmol, 0.160 mL, 20 당량)의 용액 3.0 mL를 첨가하였다. 혼합물을 12 내지 18시간 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, CH2Cl2 (2.0 mL)를 용기의 상단에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다.
클로로아세트산 커플링 절차 A:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 5회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 DMF (2.0 mL), 클로로아세트산 (1.2 mmol, 113 mg, 12 당량), 및 N,N'-디이소프로필카르보디이미드 (1.2 mmol, 0.187 mL, 12 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 12 내지 18시간 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (4.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, CH2Cl2 (2.0 mL)를 용기의 상단에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다.
CEM 방법 A:
모든 조작을 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 (CEM 코포레이션, 노스캐롤라이나주 매튜스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 언급되지 않는 한 CEM 디스커버리 마이크로웨이브 유닛에 하단 프릿이 장착된 30 또는 125 mL 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. 튜브를 튜브의 하단 및 상단 둘 다를 통해 CEM 리버티 합성기에 연결하였다. DMF 및 DCM을 튜브의 상단 및 하단을 통해 첨가할 수 있었으며, 이를 튜브의 측면으로 동등하게 세척해 내었다. 모든 용액을 상단으로부터 수지를 옮기는 것을 제외하고는 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 버블링"은 하단 프릿을 통해 N2 기체의 짧은 버블링을 기재한다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. HATU 용액은 제조 5일 이내에 사용하였다. DMF = 디메틸포름아미드; HCTU = 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄; HATU = 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 시버 = Fmoc-아미노-크산텐-3-일옥시, 여기서 "3-일옥시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 시버 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.71 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct00433
"CEM 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 시버-메리필드 수지의 대략 140 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "단일-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "2급 아민-커플링 절차"를 사용하였다. 펩티드의 N-말단에 대한 클로로아세틸 기의 커플링은 상기 상세화된 "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차" 또는 "클로로아세트산 커플링 절차"에 의해 기재된다.
수지-팽윤 절차:
50 mL 폴리프로필렌 원추형 튜브에 메리필드:시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하였다. 이어서, DMF (7 mL)를 튜브에 첨가한 다음, DCM (7 mL)을 첨가하였다. 이어서, 수지를 용기의 상단으로부터 반응 용기로 옮겼다. 절차를 추가로 2회 반복하였다. DMF (7 mL)를 첨가한 다음, DCM (7 mL)을 첨가하였다. 수지를 15분 동안 반응 용기의 하단으로부터의 N2 버블링과 함께 팽윤되도록 한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다.
표준 커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), HATU (DMF 중 0.5M, 1.0 mL, 5 당량), 및 DIPEA (NMP 중 2M, 0.5 mL, 10 당량)를 첨가하였다. 혼합물을, Fmoc-Cys(Trt)-OH 및 Fmoc-His(Trt)-OH를 50℃에서 커플링시키는 것을 제외하고는, 모든 아미노산에 대해 75℃에서 5분 동안 N2 버블링시킴으로써 혼합하고, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2분 동안 주기적으로 버블링시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척에 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
이중-커플 커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), HATU (DMF 중 0.5M, 1.0 mL, 5 당량), 및 DIPEA (NMP 중 2M, 0.5 mL, 10 당량)를 첨가하였다. 혼합물을, Fmoc-Cys(Trt)-OH 및 Fmoc-His(Trt)-OH를 50℃에서 커플링시키는 것을 제외하고는, 모든 아미노산에 대해 75℃에서 5분 동안 N2 버블링시킴으로써 혼합하고, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 2.5 mL, 5 당량), HATU (DMF 중 0.5M, 1.0 mL, 5 당량), 및 DIPEA (NMP 중 2M, 0.5 mL, 10 당량)를 첨가하였다. 혼합물을, Fmoc-Cys(Trt)-OH 및 Fmoc-His(Trt)-OH를 50℃에서 커플링시키는 것을 제외하고는, 모든 아미노산에 대해 75℃에서 5분 동안 N2 버블링시킴으로써 혼합하고, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2분 동안 주기적으로 버블링시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척에 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
통상의 아미노산-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF의 용액 (20:80 v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 HATU (2.5 당량 내지 10 당량)를 함유하는 아미노산 용액 (1.25 mL 내지 5 mL, 2.5 당량 내지 10 당량), 및 최종적으로 DIPEA (NMP 중 2M, 0.5 mL 내지 1 mL, 10 당량 내지 20 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃ 내지 75℃에서 5분 내지 2시간 동안 N2 버블링에 의해 혼합한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척, 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 반응 용기에 아세트산 무수물:DIEA:DMF의 용액 (10:1:89 v/v/v, 5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2분 동안 주기적으로 버블링시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척에 이어서 하단으로부터 DMF (7 mL) 세척 및 최종적으로 상단으로부터 DMF (7 mL) 세척. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
수지 상 N-메틸화 방법 A (Turner, R.A. et al., Org. Lett., 15(19):5012-5015 (2013)):
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "수지 상 N-메틸화 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 펩티드를 생성하기 위해 사용된 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 절차에 사용된 펩티드의 양의 직접 결정을 기초로 하지 않는다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다.
수지를 25 mL 프릿화 시린지로 옮겼다. 수지에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 5.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 진탕시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 DMF (4.0 mL)로 3회 세척하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 4.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 진탕시킨 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 연속적으로 DMF (4.0 mL)로 3회 및 DCM (4.0 mL)으로 3회 세척하였다. 수지를 DMF (2.0 mL) 및 에틸 트리플루오로아세테이트 (0.119 ml, 1.00 mmol), 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔 (0.181 ml, 1.20 mmol) 중에 현탁시켰다. 혼합물을 진탕기에 60분 동안 두었다. 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 연속적으로 DMF (4.0 mL)로 3회 및 DCM (4.0 mL)으로 3회 세척하였다.
수지를 건조 THF (2.0 mL)로 3회 세척하여 임의의 잔류수를 제거하였다. 오븐 건조된 4.0 mL 바이알에 THF (1.0 mL) 및 건조 4 Å 분자체 (20 mg) 상의 트리페닐포스핀 (131 mg, 0.500 mmol)을 첨가하였다. 용액을 수지로 옮기고, 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.097 mL, 0.5 mmol)를 천천히 첨가하였다. 수지를 15분 동안 교반하였다. 용액을 프릿을 통해 배출하고, 수지를 건조 THF (2.0 mL)로 3회 세척하여 임의의 잔류수를 제거하였다. 오븐 건조된 4.0 mL 바이알에 THF (1.0 mL), 건조 4 Å 분자체 (20 mg) 상의 트리페닐포스핀 (131 mg, 0.500 mmol)을 첨가하였다. 용액을 수지로 옮기고, 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.097 mL, 0.5 mmol)를 천천히 첨가하였다. 수지를 15분 동안 교반하였다. 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 연속적으로 DMF (4.0 mL)로 3회 및 DCM (4.0 mL)으로 3회 세척하였다. 수지를 에탄올 (1.0 mL) 및 THF (1.0 mL) 중에 현탁시키고, 수소화붕소나트륨 (37.8 mg, 1.000 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 배출하였다. 수지를 연속적으로 DMF (4.0 mL)로 3회 및 DCM (4.0 mL)으로 3회 세척하였다.
전반적 탈보호 방법 B:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "전반적 탈보호 방법 B"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. "탈보호 용액"을 트리플루오로아세트산:트리이소프로필실란:디티오트레이톨 (94:3:3 v:v:w)을 사용하여 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 25 mL 프릿화 시린지로 옮기고, 이에 "탈보호 용액" (5.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 용액을 여과하고, 여과물을 디에틸 에테르 (30 mL)에 적하하였다. 침전된 고체를 3분 동안 원심분리하였다. 상청액 용액을 경사분리하고, 고체를 디에틸 에테르 (25 mL) 중에 재현탁시켰다. 현탁액을 3분 동안 원심분리하였다. 절차를 1회 더 반복하고, 나머지 고체를 고진공 하에 건조시켜 백색 내지 회백색 고체를 수득하였다.
고리화 방법 C:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "고리화 방법 C"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 펩티드를 생성하기 위해 사용된 수지에 결합된 시버 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 절차에 사용된 펩티드의 양의 직접 결정을 기초로 하지 않는다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 조 펩티드 고체를 아세토니트릴:수성 0.1M 중탄산암모늄 완충액 (11 mL:24 mL 또는 유사한 비율)의 용액 중에 용해시키고, 이어서 용액을 수성 NaOH (1.0M)를 사용하여 pH = 8.5-9.0으로 조심스럽게 조정하였다. 이어서, 용액을 12 내지 18시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축시킨 다음, 잔류물을 아세토니트릴:물 중에 용해시켰다. 이 용액을 역상 HPLC 정제로 처리하여 목적 시클릭 펩티드를 수득하였다.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(메틸)아미노)-3-(나프탈렌-1-일)프로판산의 제조
(Freidinger, R.M. et al., J. Org. Chem., 48(1):77-81 (1983))
반응식:
Figure pct00434
단계 1:
톨루엔 (50 ml) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(나프탈렌-1-일)프로판산 (1.00 g, 2.286 mmol)의 현탁액에 파라포름알데히드 (0.500 g, 16.65 mmol) 및 p-톨루엔술폰산 1수화물 (0.435 g, 2.286 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 딘-스타크 트랩을 사용하여 공비 물 제거하면서 환류 하에 16시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc 20 mL로 희석하였다. 유기 상을 포화 NaHCO3의 수용액 2 x 50 mL로 세척한 다음, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고 농축시킨 후, 무색 오일을 수득하였다. 실리카 겔 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 30% EtOAc/헥산을 사용하면서 정제함으로써 목적 생성물을 무색 오일로서 수득하였다. (S)-(9H-플루오렌-9-일)메틸 4-(나프탈렌-1-일메틸)-5-옥소옥사졸리딘-3-카르복실레이트 0.750 g (73%).
Figure pct00435
단계 2:
DCM (8.0 ml) 중 (S)-(9H-플루오렌-9-일)메틸 4-(나프탈렌-1-일메틸)-5-옥소옥사졸리딘-3-카르복실레이트 (0.750 g, 1.669 mmol)의 용액에 트리플루오로아세트산 (8.0 mL, 104 mmol)에 이어서 트리에틸실란 (0.799 ml, 5.01 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 회전증발기 상에서 건조시켰다. 조 오일을 DCM 15.0 mL 중에 용해시키고, 회전증발기 상에서 2회 증발시켰다. 조 생성물을 회백색 검으로서 수득하고, 용리액으로서 디클로로메탄 및 메탄올을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적 생성물, (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(메틸)아미노)-3-(나프탈렌-1-일)프로판산을 무색 검 (0.692 g, 46%)으로서 수득하였다.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4-플루오로페닐) 프로판산
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
반응식:
Figure pct00436
단계 1:
N2로 퍼징된 테플론 캡이 있는 오븐 건조된 8 mL 바이알에 아연 분진 (298 mg, 4.56 mmol), DMF (1.5 mL), 및 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물에 (R)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-아이오도프로파노에이트 (500 mg, 1.519 mmol)에 이어서 즉시 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. 이어서, Pd2(dba)3 (69.6 mg, 0.076 mmol), 2-디시클로헥실포스피노-2'6-디메톡시비페닐 (62.4 mg, 0.152 mmol) 및 4-브로모-2-클로로-1-플루오로벤젠 (477 mg, 2.279 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반되도록 하였다. 조 혼합물을 EtOAc 30 mL로 희석하고, DMF를 4개의 수성 세척액으로 제거하였다. 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축시키고, 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 100% 헥산에서 30% EtOAc/헥산을 사용하면서 정제하였다. 목적 생성물을 연황색 오일, (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4-플루오로페닐)프로파노에이트 (0.174 g, 35%)로서 수득하였다.
Figure pct00437
단계 2:
THF (1967 μl)/H2O (656 μl) 중 (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4-플루오로페닐)프로파노에이트 (174 mg, 0.524 mmol)의 용액에 LiOH (37.7 mg, 1.573 mmol)를 첨가하고, 반응물을 2시간 동안 교반되도록 하였다. THF를 회전증발기에 의해 제거한 후에 용액을 EtOAc (10 mL)로 희석하고, 수성 상을 1N 수성 HCl 용액을 사용하여 pH 3으로 산성화시켰다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 분획을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고 농축시킨 후, 조 생성물, (S)-2-((tert-부톡시카르보닐) 아미노)-3-(3-클로로-4-플루오로페닐)프로판산을 황색 검 (0.183 mg, 99%)으로서 수득하였다.
단계 3:
(S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4-플루오로페닐)프로판산 (183.0 mg, 0.576 mmol)을 디옥산 중 4M 염산 (1440 μl, 5.76 mmol) 용액에 실온에서 2시간 동안 현탁시켰다. 용매를 증발시킨 후, 조 생성물을 빙조를 사용하여 0℃로 냉각시킨 후에 MeCN (288 μl) 및 Na2CO3의 2.0M 수용액 (288 μl, 0.576 mmol) 중에 용해시켰다. (9H-플루오렌-9-일)메틸 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 카르보네이트 (194 mg, 0.576 mmol)를 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 30분 동안 교반되도록 하였다. 혼합물을 EtOAc 5.0 mL로 희석하고, 수성 상을 몇 방울의 수성 1N HCl 용액으로 중화시켰다. 유기 용매를 증발시킨 다음, 조 생성물을 포화 수성 NH4Cl 용액과 EtOAc 사이에 분배하였다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 분획을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고 농축시킨 후, 황색 결정질 고체를 수득하였다. 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 100% 헥산에서 30% EtOAc/헥산을 사용하면서 정제하여 목적 생성물을 백색 결정질 고체로서 수득하였다. 실리카 겔 상에서의 제2 정제를 용리액으로서 100% DCM에서 20% MeOH/DCM을 사용하여 수행하였다. 목적 생성물, (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4-플루오로페닐)프로판산을 백색 고체 (0.111 g, 44%)로서 수득하였다.
Figure pct00438
(R)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(메틸)아미노)-5-(tert-부톡시)-5-옥소펜탄산
(Ley, S.V. et al., Tetrahedron, 48(6):1145-1174 (1992))
반응식:
Figure pct00439
단계 1:
(R)-2-아미노-5-(tert-부톡시)-5-옥소펜탄산 (1.00 g, 4.92 mmol)을 THF (18.45 ml) / 물 (6.15 ml) 중에 현탁시키고, 빙조를 사용하여 0℃로 냉각시켰다. 차가운 슬러리에 벤질 클로로포르메이트 (0.773 mL, 5.41 mmol)를 천천히 첨가하고, 반응 혼합물을 2.5시간 동안 교반되도록 하였다. 슬러리를 EtOAc 50 mL로 희석한 다음, 수성 1N HCl 용액을 사용하여 pH 3으로 산성화시켰다. 조 생성물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 투명한 오일로서 수득하고, 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 처리하면서 용리액으로서 100% 헥산에서 100% 에틸 아세테이트를 사용하였다. 생성물, (R)-2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-5-(tert-부톡시)-5-옥소펜탄산을 무색 오일 (1.41 g, 71%)로서 수득하였다.
Figure pct00440
단계 2:
0℃에서 THF (12.66 ml) 중 (R)-2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-5-(tert-부톡시)-5-옥소펜탄산 (1.41 g, 4.18 mmol) 및 MeI (2.091 mL, 33.4 mmol)의 용액에, NaH (0.501 g, 12.54 mmol)를 천천히 첨가하고, 현탁액을 24시간 동안 실온으로 가온하면서 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후에 EtOAc 10 mL를 물 5 mL과 함께 첨가하여 과량의 NaH를 켄칭하였다. 조 생성물을 포화 NaHCO3 수용액과 Et2O 사이에 분배하였다. 2개의 상을 분리하고, 유기 상을 포화 NaHCO3 용액으로 세척하고, 둘 다의 수성 추출물을 합하였다. 수용액을 6N HCl 수용액을 사용하여 pH 3이 되도록 하였다. 수성 상을 EtOAc로 추출하고, 유기 추출물을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고 농축시킨 후, (R)-2-(((벤질옥시) 카르보닐)(메틸)아미노)-5-(tert-부톡시)-5-옥소펜탄산을 황색 오일, 1.4 g (78%)으로서 수득하였다. LCMS는 목적 생성물의 m/z, (M+Na)+ 374를 나타내었다.
단계 3:
MeOH (18.79 ml) 중 (R)-2-(((벤질옥시)카르보닐)(메틸)아미노)-5-(tert-부톡시)-5-옥소펜탄산 (1.40 g, 3.98 mmol)의 용액에 10% Pd/C (0.424 g, 0.398 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 수소 분위기 하에 두었다. 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반되도록 하였다. 촉매를 셀라이트® 상에서의 여과에 의해 제거하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 백색 고체를 수득하였다. 조 물질을 아세토니트릴 (9.40 ml), 물 (9.40 ml) 및 TEA (1.111 mL, 7.97 mmol) 중에 용해시켰다. 용액을 빙조를 사용하여 0℃로 냉각시키고, FMOC-OSU (1.344 g, 3.98 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 실온으로 가온하면서 교반되도록 하였다. 조 생성물을 200 mL EtOAc로 희석하고, 1N HCl 수용액 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고 농축시킨 후, 투명한 오일을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 100% 헥산에서 100% EtOAc를 사용하면서 정제하였다. (R)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(메틸)아미노)-5-(tert-부톡시)-5-옥소펜탄산을 무색 오일 (0.481 g, 28%)로서 수득하였다.
Figure pct00441
단계 1:
L-페닐알라닌 벤질 에스테르 히드로클로라이드 (2 g, 6.85 mmol), Z-Phe-OH (2.257 g, 7.54 mmol), DIPEA (2.99 mL, 17.14 mmol) 및 DCM (100 mL)의 용액을 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (1.120 g, 8.23 mmol) 및 EDC (1.577 g, 8.23 mmol)로 처리하고, 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 (2 x 100 mL), 1 M HCl (2 x 50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 (S)-벤질 2-((S)-2-(((벤질옥시)카르보닐) 아미노)-3-페닐프로판아미도)-3-페닐프로파노에이트 (3.2 g, 5.96 mmol, 87% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00442
단계 2 (Schroeder, G.M. et al., Tetrahedron Lett., 51:1404-1406 (2010)):
압력 바이알에 N2 하에 THF (9.32 mL) 중 (S)-벤질 2-((S)-2-(((벤질옥시)카르보닐) 아미노)-3-페닐프로판아미도)-3-페닐프로파노에이트 (1.0 g, 1.864 mmol) 및 디페닐-2-피리딜포스핀 (3.17 g, 7.45 mmol)을 채웠다. 용액을 N2로 퍼징한 후에 DIAD (1.449 mL, 7.45 mmol)를 적가하였다. 반응물을 5분 동안 교반되도록 한 다음, 디페닐포스포릴 아지드 (1.606 mL, 7.45 mmol)를 30분에 걸쳐 적가하였다. 첨가가 완결되고 질소 형성이 더 이상 없게 된 후에, 밀봉된 튜브를 닫고, 반응을 4시간 동안 55℃에서 교반되도록 하였다.
반응물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (200 ml)에 붓고, 차가운 1N HCl (100 mL), 포화 NaHCO3 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 오렌지색 오일을 수득하였다. 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 100% 헥산에서 헥산 중 60% 에틸 아세테이트를 사용하면서 정제하여 저순도로 (S)-벤질 2-(5-((S)-1-(((벤질옥시) 카르보닐)아미노)-2-페닐에틸)-1H-테트라졸-1-일)-3-페닐프로파노에이트 660 mg을 수득하였다. 하기 조건을 사용한 정제용 HPLC에 의한 제2 정제: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 100A 250x21.2mm 악시아(Axia) 패킹 (10-100mg) #520551-2. 이동상 A: 물 중 0.1 TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 50-80% B, 이어서 10-분 구배 95% B; 유량: 15 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. (S)-벤질 2-(5-((S)-1-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-2-페닐에틸)-1H-테트라졸-1-일)-3-페닐프로파노에이트를 60.0 mg 수율로 베이지색 흡습성 고체로서 LC/MS 분석에 의한 70% 순도로 수득하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 562.5 (M+H).
단계 3:
MeOH (534 μl) 중 (S)-벤질 2-(5-((S)-1-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-2-페닐에틸)-1H-테트라졸-1-일)-3-페닐프로파노에이트 (60 mg, 0.107 mmol)의 용액을 2시간 동안 라텍스 풍선으로부터의 수소를 사용하여 10% Pd/C (22.74 mg, 0.021 mmol) 상에서 수소화시켰다.
촉매를 여과에 의해 제거하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 백색 점착성 고체를 수득하였다. 생성물을 MeCN (2 mL) 및 물 (2 mL) 및 Et3N (100 μL) 중에 용해시키고, FMOC-OSU (36.0 mg, 0.107 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반하였다.
반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 1 M HCl (2 x 20 mL) 및 염수 (20 mL)로 세척하고, 건조 (황산나트륨)시키고, 감압 하에 농축시켜 (S)-2-(5-((S)-1-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-2-페닐에틸)-1H-테트라졸-1-일)-3-페닐프로판산 (42 mg, 0.075 mmol, 70.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. 생성물은 LC/MS 분석에 의해 64% 순도였다. 분석 조건 A: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 560.5 (M+H).
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(3,5-디클로로페닐)프로판산
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
반응식:
Figure pct00443
단계 1:
N2로 퍼징된 테플론 캡이 있는 오븐 건조된 8 mL 바이알에 아연 분진 (298 mg, 4.56 mmol), DMF (1.5 mL), 및 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물에 (R)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-아이오도프로파노에이트 (500 mg, 1.519 mmol)에 이어서 즉시 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. Pd2(dba)3 (69.6 mg, 0.076 mmol), 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디메톡시비페닐 (62.4 mg, 0.152 mmol), 1,3-디클로로-5-아이오도벤젠 (622 mg, 2.279 mmol) 및 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 조 혼합물을 EtOAc (30 mL)로 희석하고, DMF를 4개의 수성 세척액으로 제거하였다. 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축시키고, 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 100% 헥산에서 30% EtOAc/헥산을 사용하면서 정제하였다. 목적 생성물을 연황색 오일, (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(3,5-디클로로페닐)프로파노에이트, 0.160 g 수율로서 LCMS 분석에 의한 77% 순도로 수득하였다. 분석 LCMS 조건 F: 체류 시간 = 2.84분; ESI-MS(+) m/z 348.1 (M+H).
단계 2:
THF (2 mL)/H2O (0.667 mL) 중 (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(3,5-디클로로페닐)프로파노에이트 (160 mg, 0.459 mmol)의 용액에 LiOH (33.0 mg, 1.378 mmol)를 첨가하고, 반응물을 2시간 동안 교반되도록 하였다. THF를 증발시킨 후에 용액을 EtOAc (10 mL)로 희석하고, 수성 상을 1N 수성 HCl 용액을 사용하여 pH 3으로 산성화시켰다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 분획을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고 농축시킨 후, 조 생성물을 황색 검으로서 수득하였다. 고체를 직접 단계 3에 사용하였다.
단계 3:
이전 단계로부터의 고체에 디옥산 중 4M HCl (1.149 mL, 4.59 mmol)을 첨가하고, 용액을 2시간 동안 교반되도록 하였다. 용매를 증발시킨 후, 조 생성물을 0℃로 냉각시키고, 5% 수성 Na2CO3/AcCN (2:1) (30 mL) 중에 용해시켰다. (9H-플루오렌-9-일)메틸 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 카르보네이트 (170 mg, 0.505 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반되도록 하였다. 혼합물을 EtOAc 15.0 mL로 희석하고, 수성 상을 몇 방울의 수성 1N HCl 용액으로 중화시켰다. 유기 용매를 증발시킨 다음, 조 생성물을 포화 수성 NH4Cl 용액과 EtOAc 사이에 분배하였다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 LCMS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250, 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 35-100% B, 이어서 100% B에서 10-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(3,5-디클로로페닐)프로판산의 수율을 50 mg; 순도, 분석에 의해 87%. LCMS 조건 A: rt = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 478.0 (M+Na)+.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4,5-디플루오로페닐)프로판산
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
반응식:
Figure pct00444
단계 1:
N2로 퍼징된 테플론 캡이 있는 오븐 건조된 8 mL 바이알에 아연 분진 (298 mg, 4.56 mmol), DMF (1.5 mL), 및 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물에 (R)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-아이오도프로파노에이트 (500 mg, 1.519 mmol)에 이어서 즉시 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. Pd2(dba)3 (69.6 mg, 0.076 mmol), 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디메톡시비페닐 (62.4 mg, 0.152 mmol), 5-bomo-1클로로-2,3-디플루오로벤젠 (518 mg, 2.279 mmol) 및 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 조 혼합물을 EtOAc 30 mL로 희석하고, DMF를 4개의 수성 세척액으로 제거하였다. 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축시키고, 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 100% 헥산에서 30% EtOAc/헥산을 사용하면서 정제하였다. 목적 생성물을 연황색 오일, (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4,5-디플루오로페닐)프로파노에이트, 0.165 g으로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 사용하였다.
단계 2:
THF (2ml)/H2O (0.667 ml) 중 (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4,5-디플루오로페닐)프로파노에이트 (165 mg, 0.472 mmol)의 용액에 LiOH (33.9 mg, 1.415 mmol)를 첨가하고, 반응물을 2시간 동안 교반되도록 하였다. THF를 제거한 후, 용액을 EtOAc (10 mL)로 희석하였다. 수성 상을 1N 수성 HCl 용액을 사용하여 pH 3으로 산성화시켰다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 분획을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고 농축시킨 후, 조 생성물을 황색 검으로서 수득하였으며, 이를 직접 단계 3에 사용하였다.
단계 3:
고체에 디옥산 중 4M HCl (1.179 mL, 4.72 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 교반되도록 하였다. 용매를 증발시킨 후, 조 생성물을 0℃로 냉각시키고, 5% 수성 Na2CO3/ACN (2:1) (30 mL) 중에 용해시켰다. (9H-플루오렌-9-일)메틸 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 카르보네이트 (175 mg, 0.519 mmol)를 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반되도록 하였다. 혼합물을 EtOAc 15.0 mL로 희석하고, 수성 상을 몇 방울의 수성 1N HCl로 중화시켰다. 유기 용매를 증발시킨 다음, 조 생성물을 포화 수성 NH4Cl 용액과 EtOAc 사이에 분배하였다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 이어서, 수득된 생성물을 정제용 LCMS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250, 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 35-100% B, 이어서 100% B에서 10-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켜 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4,5-디플루오로페닐)프로판산 62 mg을 수득하였다.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3,5-디클로로-4-플루오로페닐)프로판산
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
반응식:
Figure pct00445
단계 1:
N2로 퍼징된 테플론 캡이 있는 오븐 건조된 8 mL 바이알에 아연 분진 (298 mg, 4.56 mmol), DMF (1.5 mL), 및 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물에 (R)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-아이오도프로파노에이트 (500 mg, 1.519 mmol)에 이어서 즉시 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. Pd2(dba)3 (69.6 mg, 0.076 mmol), 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디메톡시비페닐 (62.4 mg, 0.152 mmol), 5-브로모-1,3-디클로로-2-플루오로벤젠 (556 mg, 2.279 mmol) 및 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 조 혼합물을 EtOAc 30 mL로 희석하고, DMF를 4개의 수성 세척액을 사용하여 제거하였다. 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축시키고, 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 100% 헥산에서 30% EtOAc/헥산을 사용하면서 정제하였다. 목적 생성물을 연황색 오일, (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(3,5-디클로로-4-플루오로페닐)프로파노에이트, 0.102 g로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 2:
THF (2ml)/H2O (0.667 ml) 중 (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(3,5-디클로로-4-플루오로페닐)프로파노에이트 (102 mg, 0.279 mmol)의 용액에 LiOH (20.01 mg, 0.836 mmol)를 첨가하고, 반응물을 2시간 동안 교반하였다. THF를 제거하고, 용액을 EtOAc (10 mL)로 희석하였다. 수성 상을 1N 수성 HCl을 사용하여 pH 3으로 산성화시켰다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고 농축시킨 후, 조 생성물을 황색 검으로서 수득하였으며, 이를 단계 3에 직접 사용하였다.
단계 3:
단계 2로부터의 생성물에 디옥산 중 4M HCl (0.696 mL, 2.79 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 교반되도록 하였다. 용매를 증발시킨 후, 조 생성물을 0℃로 냉각시키고, 5% 수성 Na2CO3/MeCN (2:1) (30 mL) 중에 용해시켰다. (9H-플루오렌-9-일)메틸 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 카르보네이트 (103 mg, 0.306 mmol)를 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc 15.0 mL로 희석하고, 수성 상을 몇 방울의 수성 1N HCl로 중화시켰다. 유기 용매를 증발시킨 다음, 조 생성물을 포화 수성 NH4Cl 용액과 EtOAc 사이에 분배하였다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시킨 다음, 정제용 LCMS에 의해 하기 조건을 이용하여 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 35-100% B, 이어서 100% B에서 10-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켜 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3,5-디클로로-4-플루오로페닐)프로판산 36 mg을 수득하였다.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)프로판산
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
반응식:
Figure pct00446
단계 1:
N2로 퍼징된 테플론 캡이 있는 오븐 건조된 8 mL 바이알에 아연 분진 (298 mg, 4.56 mmol), DMF (1.5 mL), 및 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물에 (R)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-아이오도프로파노에이트 (500 mg, 1.519 mmol)에 이어서 즉시 아이오딘 (57.8 mg, 0.228 mmol)을 첨가하였다. Pd2(dba)3 (69.6 mg, 0.076 mmol), 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디메톡시비페닐 (62.4 mg, 0.152 mmol), 1-클로로-2-플루오로-4-아이오도벤젠 (584 mg, 2.279 mmol), 및 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 조 혼합물을 EtOAc 30 mL로 희석하고, DMF를 4개의 수성 세척액을 사용하여 제거하였다. 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 100% 헥산에서 30% EtOAc/헥산을 사용하면서 정제하였다. 목적 생성물을 연황색 오일, (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)프로파노에이트, 0.220g; 순도, LCMS 분석에 의한 93%로서 수득하였다. 분석 LCMS 조건 F: rt = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 332.2 (M+H).
단계 2:
THF (2 mL)/물 (0.667 mL) 중 (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)프로파노에이트 (220mg, 0.663 mmol)의 용액에 LiOH (47.6 mg, 1.989 mmol)를 첨가하고, 반응물을 2시간 동안 교반되도록 하였다. THF를 제거하고, 용액을 EtOAc (10 mL)로 희석하였다. 수성 상을 1N 수성 HCl을 사용하여 pH 3으로 산성화시켰다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고 농축시킨 후, 조 생성물을 황색 검으로서 수득하였으며, 이를 단계 3에 직접 사용하였다.
단계 3:
단계 2로부터의 고체에 디옥산 중 4M HCl (1.658 mL, 6.63 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 조 생성물을 0℃로 냉각시키고, 5% 수성 Na2CO3/AcCN (2:1) (30 mL) 중에 용해시켰다. (9H-플루오렌-9-일)메틸 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일) 카르보네이트 (246 mg, 0.729 mmol)를 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc 15.0 mL로 희석하고, 수성 상을 몇 방울의 수성 1N HCl로 중화시켰다. 유기 용매를 증발시킨 다음, 조 생성물을 포화 수성 NH4Cl 용액과 EtOAc 사이에 분배하였다. 조 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시킨 다음, 하기 조건을 사용하여 정제용 LCMS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250, 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 35-100% B, 이어서 100% B에서 10-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켜 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)프로판산 30 mg을 수득하였다. 분석 LCMS 조건 A: rt = 1.65분, 85% 순도; ESI-MS(+) m/z 462.0 (M+Na).
실시예 3052의 제조
Figure pct00447
실시예 3052를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250, 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 A 중 25-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸쳐 구배 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 825.2 (M+2H).
실시예 3053의 제조
Figure pct00448
실시예 3053을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 A 중 25-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 15 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸쳐 A 중 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 92%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 818.2 (M+2H).
실시예 3054의 제조
Figure pct00449
실시예 3054를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 A 중 25-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 21 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸쳐 A 중 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 842.2 (M+2H).
실시예 3055의 제조
Figure pct00450
실시예 3055를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 A 중 25-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 19 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸쳐 A 중 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 92%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 760.6 (M+2H).
실시예 3056의 제조
Figure pct00451
실시예 3056을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 25-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 2종의 이성질체 (이성질체 3056-A 및 이성질체 3056-B)를 수득하였다. 생성물 이성질체 3056-A 및 이성질체 3056-B의 수율은 각각 3.6 mg 및 5.7 mg였고, 60℃에서 30분에 걸친 A 중 20%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 조건 B"에 의한 그의 추정된 순도는 각각 83% 및 96%였다.
분석 LCMS 조건 A: 이성질체 3056-A, 체류 시간 = 1.21분; ESI-MS(+) m/z 894.2 (M+2H); 이성질체 3056-B, 1.31분; ESI-MS(+) m/z 894.2 (M+2H).
실시예 3057의 제조
Figure pct00452
실시예 3057을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250, 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 A 중 20-85% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.3 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸쳐 60℃에서 A 중 20%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 91%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.23분; ESI-MS(+) m/z 894.1 (M+2H).
실시예 3058의 제조
Figure pct00453
실시예 3058을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250, 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 A 중 20-85% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 2종의 이성질체 (이성질체 3058-A 및 이성질체 3058-B)를 수득하였다. 생성물 이성질체 3058-A 및 이성질체 3058-B의 수율은 각각 4.3 mg 및 7.6 mg이었고, 60℃에서 30분에 걸친 A 중 20%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 그의 추정된 순도는 각각 93% 및 92%였다.
분석 LCMS 조건 A: 이성질체 3058-A, 체류 시간 = 0.99분; ESI-MS(+) m/z 889.1 (M+2H); 이성질체 3058-B, 1.10분; ESI-MS(+) m/z 889.1 (M+2H).
실시예 3059의 제조
Figure pct00454
실시예 3059를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 A 중 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켜 9.2 mg의 생성물을 96% 순도로 수득하였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.573분; ESI-MS(+) m/z 1811.80 (M+H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.711분; ESI-MS(+) m/z 906.80 (M+2H), 1811.80 (M+H).
실시예 3060의 제조
Figure pct00455
실시예 3060을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 A 중 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 2종의 이성질체 (이성질체 3060-A 및 이성질체 3060-B)를 수득하였다. 생성물 이성질체 3060-A 및 이성질체 3060-B의 수율은 각각 5.5 mg 및 1.7 mg이었고, "분석 조건 D 및 E"에 의한 그의 추정된 순도는 각각 95% 및 86%였다.
분석 조건 D: 이성질체 3060-A: 체류 시간 = 1.455분; ESI-MS(+) m/z 923.65 (M+2H).
분석 조건 D: 이성질체 3060-B: 체류 시간 = 1.570분; ESI-MS(+) m/z 923.60 (M+2H).
분석 조건 E: 이성질체 3060-A: 체류 시간 = 1.549분; ESI-MS(+) m/z 923.45 (M+2H).
분석 조건 E: 이성질체 3060-B: 체류 시간 = 1.666분; ESI-MS(+) m/z 923.70 (M+2H).
실시예 3061의 제조
Figure pct00456
실시예 3061을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켜 3.2mg을 98% 순도로 수득하였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.573분; ESI-MS(+) m/z 1811.80 (M+H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.711분; ESI-MS(+) m/z 906.80 (M+2H), 1811.80 (M+H).
실시예 3062의 제조
Figure pct00457
실시예 3062를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켜 5.7mg을 95% 순도로 수득하였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.698분; ESI-MS(+) m/z 1813.70 (M+H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.853분; ESI-MS(+) m/z 1813.65 (M+H).
실시예 3063의 제조
Figure pct00458
실시예 3063을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.439분; ESI-MS(+) m/z 1825.90 (M+H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.490분; ESI-MS(+) m/z 1825.85 (M+H).
실시예 3064의 제조
Figure pct00459
실시예 3064를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.31 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.468분; ESI-MS(+) m/z 1777.95 (M+H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.671분; ESI-MS(+) m/z 1778.80 (M+H).
실시예 3065의 제조
Figure pct00460
실시예 3065를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 30-80% B, 이어서 80% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.1 mg이었고, 30분에 걸친 35%에서 75% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 그의 추정된 순도는 96% 순도를 제공하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 907.2 (M+2H).
실시예 3066의 제조
Figure pct00461
실시예 3066을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 70% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.5 mg이었고, 30분에 걸친 35%에서 70% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 HPLC 조건 B"에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 947.1 (M+2H).
실시예 3067의 제조
Figure pct00462
실시예 3067을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 70% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.8 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 916.5 (M+2H).
실시예 3068의 제조
Figure pct00463
실시예 3068을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 30-90% B, 이어서 90% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.8 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 912.3 (M+2H).
실시예 3069의 제조
Figure pct00464
실시예 3069를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 30-90% B, 이어서 90% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.1 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 35%에서 95% 완충액 B를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 912.3 (M+2H).
실시예 3070의 제조
Figure pct00465
실시예 3070을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 30-90% B, 이어서 90% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.9 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 925.5 (M+2H).
실시예 3071의 제조
Figure pct00466
실시예 3071을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 30-90% B, 이어서 90% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.3 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 899.3 (M+2H).
실시예 3072의 제조
Figure pct00467
실시예 3072를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 30-90% B, 이어서 90% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.5 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 870.7 (M+2H).
실시예 3073의 제조
Figure pct00468
실시예 3073을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 35-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.9 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 98%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 943.9 (M+2H).
실시예 3074의 제조
Figure pct00469
실시예 3074를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 30-90% B, 이어서 90% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.8 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 30%에서 90% 완충액 B의 구배를 사용하는 "분석 HPLC 조건 B"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 915.9 (M+2H).
실시예 3075의 제조
Figure pct00470
실시예 3075를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 60분에 걸쳐 30-90% B, 이어서 90% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.5 mg이었고, 30분에 걸친 30%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 그의 추정된 순도는 97% 순도를 제공하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 926.3 (M+2H).
실시예 3076의 제조
Figure pct00471
실시예 3076을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 60분에 걸쳐 35-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.9 mg이었고, 30분에 걸친 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 그의 추정된 순도는 99% 순도를 제공하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 900.3 (M+2H).
실시예 3077의 제조
Figure pct00472
실시예 3077을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 60분에 걸쳐 35-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.3 mg이었고, 30분에 걸친 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 그의 추정된 순도는 99% 순도를 제공하였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 900.3 (M+2H).
실시예 3078의 제조
Figure pct00473
50 mL 폴리프로필렌 튜브에 시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하고, 튜브를 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Leu-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Tyr(tBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Trp(Boc)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Sar-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Tyr(tBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Phe-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차"에 따르며, 75℃에서 2시간 동안 10 당량의 Fmoc-Val-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Asp(OtBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Sar-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차"에 따르며, 10분 동안 5 당량의 Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차"에 따르며, 10분 동안 5 당량의 Fmoc-[N-Me]Phe-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차"에 따르며, 10분 동안 5 당량의 Fmoc-Phe(펜타-F)-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A"에 따르고;
"전반적 탈보호 방법 B"에 따르고;
"고리화 방법 C"에 따랐다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 30- 70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 944.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.98분; ESI-MS(+) m/z 944.3 (M+2H).
실시예 3079의 제조
Figure pct00474
실시예 3079를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 936.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.09분; ESI-MS(+) m/z 935.8 (M+2H).
실시예 3080의 제조
Figure pct00475
실시예 3080을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.71 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.90분; ESI-MS(+) m/z 935.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.11분; ESI-MS(+) m/z 936.0 (M+2H).
실시예 3081의 제조
Figure pct00476
실시예 3081을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 938.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.92분; ESI-MS(+) m/z 938.9 (M+2H).
실시예 3082의 제조
Figure pct00477
실시예 3082를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 906.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 906.2 (M+2H).
실시예 3083의 제조
Figure pct00478
실시예 3083을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 882.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 881.7 (M+2H).
실시예 3086의 제조
Figure pct00479
실시예 3086을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 916.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 916.5 (M+2H).
실시예 3087의 제조
Figure pct00480
실시예 3087을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS 250 x 20mm 칼럼; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 55분에 걸쳐 30-90% B, 이어서 90% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 펩티드는 매우 깨끗하지 않았으며, 따라서 하기 조건을 사용하는 또 다른 정제용 HPLC를 수행하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS 250 x 20mm 칼럼; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 80% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.5 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 35%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 97%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 913.5 (M+2H).
실시예 3088의 제조
Figure pct00481
실시예 3088을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS 250 x 20mm 칼럼; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 55분에 걸쳐 30-90% B, 이어서 90% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 펩티드는 매우 깨끗하지 않았으며, 따라서 하기 조건을 사용하는 또 다른 정제용 HPLC를 수행하였다: 칼럼: YMC AQ-ODS 250 x 20mm 칼럼; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 80% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 2종의 이성질체 (이성질체 3088-A 및 이성질체 3088-B)를 수득하였다. 생성물 이성질체 3088-A 및 이성질체 3088-B의 수율은 각각 1.1 mg 및 0.81 mg이었고, 30분에 걸친 35%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 그의 추정된 순도는 이성질체 3088-A 및 이성질체 3088-B에 대해 각각 99% 및 93% 순도를 제공하였다. LC/MS는 LCMS "분석 조건 A"를 사용하여 생성물을 확인하였다.
이성질체 3088-A: 분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 918.7 (M+2H).
이성질체 3088-B: 분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 918.8 (M+2H).
실시예 3089의 제조
Figure pct00482
실시예 3089를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 914.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 914.2 (M+2H).
실시예 3090의 제조
Figure pct00483
실시예 3090을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.11 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 918.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 918.9 (M+2H).
실시예 3091의 제조
Figure pct00484
실시예 3091을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 894.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 893.9 (M+2H).
실시예 3092의 제조
Figure pct00485
실시예 3092를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 902.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 902.6 (M+2H).
실시예 3093의 제조
Figure pct00486
실시예 3093을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 60% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 933.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.94분; ESI-MS(+) m/z 933.4 (M+2H).
실시예 3094의 제조
Figure pct00487
실시예 3094를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 906.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 906.8 (M+2H).
실시예 3095의 제조
Figure pct00488
실시예 3095를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 914.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 914.1 (M+2H).
실시예 3096의 제조
Figure pct00489
실시예 3096을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 919.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.93분; ESI-MS(+) m/z 919.0 (M+2H).
실시예 3097의 제조
Figure pct00490
실시예 3097을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 898.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z 898.9 (M+2H).
실시예 3098의 제조
Figure pct00491
실시예 3098을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 934.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.91분; ESI-MS(+) m/z 932.8 (M+2H).
실시예 3099의 제조
Figure pct00492
실시예 3099를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 908.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.03분; ESI-MS(+) m/z 908.0 (M+2H).
실시예 3100의 제조
Figure pct00493
실시예 3100을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 925.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.09분; ESI-MS(+) m/z 925.6 (M+2H).
실시예 3101의 제조
Figure pct00494
실시예 3101을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 893.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 893.8 (M+2H).
실시예 3102의 제조
Figure pct00495
실시예 3102를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 928.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 928.6 (M+2H).
실시예 3103의 제조
Figure pct00496
실시예 3103을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 918.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 918.1 (M+2H).
실시예 3104의 제조
Figure pct00497
실시예 3104를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 916.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 916.0 (M+2H).
실시예 3105의 제조
Figure pct00498
실시예 3105를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 906.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 905.6 (M+2H).
실시예 3106의 제조
Figure pct00499
실시예 3106을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 933.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.93분; ESI-MS(+) m/z 932.9 (M+2H).
실시예 3107의 제조
Figure pct00500
실시예 3107을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 922.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 922.8 (M+2H).
실시예 3109의 제조
Figure pct00501
실시예 3109를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 927.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.03분; ESI-MS(+) m/z 927.9 (M+2H).
실시예 3110의 제조
Figure pct00502
실시예 3110을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 35-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 910.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.93분; ESI-MS(+) m/z 910.8 (M+2H).
실시예 3111의 제조
Figure pct00503
실시예 3111을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 88%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 962.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.94분; ESI-MS(+) m/z 962.2 (M+2H).
실시예 3112의 제조
Figure pct00504
실시예 3112를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 35-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 977.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.97분; ESI-MS(+) m/z 978.1 (M+2H).
실시예 3113의 제조
Figure pct00505
실시예 3113을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 977.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 977.7 (M+2H).
실시예 3114의 제조
Figure pct00506
실시예 3114를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 924.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.99분; ESI-MS(+) m/z 925.4 (M+2H).
실시예 3115의 제조
Figure pct00507
실시예 3115를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 924.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.02분; ESI-MS(+) m/z 924.6 (M+2H).
실시예 3116의 제조
Figure pct00508
실시예 3116을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 916.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.95분; ESI-MS(+) m/z 916.3 (M+2H).
실시예 3117의 제조
Figure pct00509
실시예 3117을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 916.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.93분; ESI-MS(+) m/z 916.7 (M+2H).
실시예 3118의 제조
Figure pct00510
실시예 3118을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 931.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.91분; ESI-MS(+) m/z 931.3 (M+2H).
실시예 3119의 제조
Figure pct00511
실시예 3119를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z 931.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.94분; ESI-MS(+) m/z 931.3 (M+2H).
실시예 3120의 제조
Figure pct00512
실시예 3120을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 923.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 923.1 (M+2H).
실시예 3121의 제조
Figure pct00513
실시예 3121을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 922.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 923.0 (M+2H).
실시예 3122의 제조
Figure pct00514
실시예 3122를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 922.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 922.6 (M+2H).
실시예 3123의 제조
Figure pct00515
실시예 3123을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 914.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 914.4 (M+2H).
실시예 3124의 제조
Figure pct00516
실시예 3124를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 914.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 914.3 (M+2H).
실시예 3125의 제조
Figure pct00517
실시예 3125를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 908.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 907.8 (M+2H).
실시예 3130의 제조
Figure pct00518
실시예 3130을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 917.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.86분; ESI-MS(+) m/z 916.5 (M+2H).
실시예 3131의 제조
Figure pct00519
실시예 3131을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 908.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z 909.3 (M+2H).
실시예 3132의 제조
Figure pct00520
실시예 3132를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 65% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 909.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 909.7 (M+2H).
실시예 3133의 제조
Figure pct00521
실시예 3133을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 898.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 898.8 (M+2H).
실시예 3134의 제조
Figure pct00522
실시예 3134를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 898.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 898.8 (M+2H).
실시예 3135의 제조
Figure pct00523
실시예 3135를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 55% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 898.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 898.8 (M+2H).
실시예 3136의 제조
Figure pct00524
실시예 3136을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 898.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 899.0 (M+2H).
실시예 3138의 제조
Figure pct00525
실시예 3138을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 924.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.03분; ESI-MS(+) m/z 924.8 (M+2H).
실시예 3139의 제조
Figure pct00526
실시예 3139를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 898.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 898.3 (M+2H).
실시예 3140의 제조
Figure pct00527
실시예 3140을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 898.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 898.2 (M+2H).
실시예 3141의 제조
Figure pct00528
실시예 3141을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 914.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z 913.7 (M+2H).
실시예 3142의 제조
Figure pct00529
실시예 3142를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 87%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 899.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 899.0 (M+2H).
실시예 3143의 제조
Figure pct00530
실시예 3143을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 25-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.3 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸쳐 구배 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 96%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 916.9 (M+2H).
실시예 3144의 제조
Figure pct00531
실시예 3144를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 25-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.1 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸쳐 구배 35%에서 95% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 95%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 925.8 (M+2H).
실시예 3145의 제조
Figure pct00532
실시예 3145를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 909.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 908.6 (M+2H).
실시예 3146의 제조
Figure pct00533
실시예 3146을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.90분; ESI-MS(+) m/z 883.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 883.8 (M+2H).
실시예 3147의 제조
Figure pct00534
실시예 3147을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 906.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 907.2 (M+2H).
실시예 3148의 제조
Figure pct00535
실시예 3148을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 918.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 918.4 (M+2H).
실시예 3149의 제조
Figure pct00536
실시예 3149를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 905.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 905.8 (M+2H).
실시예 3150의 제조
Figure pct00537
실시예 3150을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 913.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 913.9 (M+2H).
실시예 3151의 제조
Figure pct00538
실시예 3151을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 페닐, 19 x 150 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 5-55% B, 이어서 100% B에서 10-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 927.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 927.3 (M+2H).
실시예 3152의 제조
Figure pct00539
실시예 3152를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93% 순도였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 884.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 884.3 (M+2H).
실시예 3153의 제조
Figure pct00540
실시예 3153을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95% 순도였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 891.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 891.4 (M+2H).
실시예 3154의 제조
Figure pct00541
실시예 3154를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94% 순도였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 922.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 923.1 (M+2H).
실시예 3155의 제조
Figure pct00542
실시예 3155를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98% 순도였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 900.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 899.7 (M+2H).
실시예 3156의 제조
Figure pct00543
실시예 3156을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99% 순도였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 893.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 892.8 (M+2H).
실시예 3157의 제조
Figure pct00544
실시예 3157을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94% 순도였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 906.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 907.1 (M+2H).
실시예 3158의 제조
Figure pct00545
실시예 3158을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93% 순도였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 919.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.97분; ESI-MS(+) m/z 919.2 (M+2H).
실시예 3159의 제조
Figure pct00546
실시예 3159를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97% 순도였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 926.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.09분; ESI-MS(+) m/z 926.1 (M+2H).
실시예 3160의 제조
Figure pct00547
실시예 3160을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차" 및 "통상의 아미노산-커플링 절차".
상기 펩티딜-수지 (0.033mmol)를 N2로 퍼징하고, 마이크로웨이브 반응기용 15mL 원추형 바이알 (교반기가 구비됨)에 넣었다. 이어서, 5mL 1,2-디클로로에탄 중에 용해시킨 호베이다-그럽스 2 세대 촉매 0.033mmol을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 120℃에서 1시간 동안 마이크로웨이브에서 가열하였다. 반응이 수행된 후, 수지를 여과하고, 필터가 장착된 시린지에서 DMF 2x5mL에 이어서 DCM 3x5mL로 세척하였다. 전반적 탈보호 및 고리화를 위한 절차를 실시예 3078 "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C"에서 수행된 바와 같이 반복하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 35-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.77 mg이었고, 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 35%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 86%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 888.9 (M+2H).
실시예 3161의 제조
Figure pct00548
실시예 3161을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 885.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 885.3 (M+2H).
실시예 3162의 제조
Figure pct00549
실시예 3162를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 892.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 892.3 (M+2H).
실시예 3163의 제조
Figure pct00550
실시예 3163을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 899.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 899.5 (M+2H).
실시예 3164의 제조
Figure pct00551
실시예 3164를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 906.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 906.4 (M+2H).
실시예 3165의 제조
Figure pct00552
실시예 3165를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 910.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 910.9 (M+2H).
실시예 3166의 제조
Figure pct00553
실시예 3166을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 901.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.03분; ESI-MS(+) m/z 900.9 (M+2H).
실시예 3167의 제조
Figure pct00554
실시예 3167을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.93분; ESI-MS(+) m/z 900.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.14분; ESI-MS(+) m/z 900.8 (M+2H).
실시예 3168의 제조
Figure pct00555
실시예 3168을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 907.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 907.2 (M+2H).
실시예 3171의 제조
Figure pct00556
실시예 3171을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 881.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 881.9 (M+2H).
실시예 3172의 제조
Figure pct00557
실시예 3172를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 891.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 891.1 (M+2H).
실시예 3173의 제조
Figure pct00558
실시예 3173을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 35-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 2.26분; ESI-MS(+) m/z 903.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.25분; ESI-MS(+) m/z 903.2 (M+2H).
실시예 3174의 제조
Figure pct00559
실시예 3174를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.94분; ESI-MS(+) m/z 911.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.94분; ESI-MS(+) m/z 911.2 (M+2H).
실시예 3175의 제조
Figure pct00560
실시예 3175를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 910.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 910.8 (M+2H).
실시예 3176의 제조
Figure pct00561
실시예 3176을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 879.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 878.8 (M+2H).
실시예 3177의 제조
Figure pct00562
실시예 3177을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 10-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 887.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 886.6 (M+2H).
실시예 3178의 제조
Figure pct00563
실시예 3178을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 887.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 886.2 (M+2H).
실시예 3179의 제조
Figure pct00564
실시예 3179를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐) 아미노)-3-(3,5-디클로로페닐)프로판산을 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 933.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.97분; ESI-MS(+) m/z 933.6 (M+2H).
실시예 3180의 제조
Figure pct00565
실시예 3180을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)프로판산을 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 924.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.91분; ESI-MS(+) m/z 925.3 (M+2H).
실시예 3181의 제조
Figure pct00566
실시예 3181을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 925.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 925.7 (M+2H).
실시예 3182의 제조
Figure pct00567
실시예 3182를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 982.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 982.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 982.4330 (M+2H); 실측치: 982.4307 (M+2H).
실시예 3183의 제조
Figure pct00568
실시예 3183을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 960.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 960.2 (M+2H).
실시예 3184의 제조
Figure pct00569
실시예 3184를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 925.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.95분; ESI-MS(+) m/z 926.0 (M+2H).
실시예 3185의 제조
Figure pct00570
실시예 3185를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3,5-디클로로-4-플루오로페닐)프로판산을 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 6-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 942.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.96분; ESI-MS(+) m/z 942.2 (M+2H).
실시예 3186의 제조
Figure pct00571
실시예 3186을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4,5-디플루오로페닐)프로판산을 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 35-85% B, 이어서 85% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.3 mg이었고, 그의 추정된 순도는 20분에 걸친 30%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 933.9 (M+2H).
실시예 3187의 제조
Figure pct00572
실시예 3187을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.4 mg이고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 907.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 907.5 (M+2H).
실시예 3188의 제조
Figure pct00573
실시예 3188을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7 mg이고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 900.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 900.6 (M+2H).
실시예 3189의 제조
Figure pct00574
실시예 3189를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.6 mg이고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 893.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 893.2 (M+2H).
실시예 3190의 제조
Figure pct00575
실시예 3190을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.8 mg이고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 914.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 914.4 (M+2H).
실시예 3191의 제조
Figure pct00576
실시예 3191을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 893.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 893.6 (M+2H).
실시예 3192의 제조
Figure pct00577
실시예 3192를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-75% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 943.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 943.2 (M+2H).
실시예 3193의 제조
Figure pct00578
실시예 3193을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-75% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.90분; ESI-MS(+) m/z 950.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 950.4 (M+2H).
실시예 3194의 제조
Figure pct00579
실시예 3194를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.99분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
실시예 3195의 제조
Figure pct00580
실시예 3195를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 951.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 951.2 (M+2H).
실시예 3196의 제조
Figure pct00581
실시예 3196을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.86분; ESI-MS(+) m/z 965.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 965.3 (M+2H).
실시예 3197의 제조
Figure pct00582
실시예 3197을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 981.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 981.4 (M+2H).
실시예 3198의 제조
Figure pct00583
실시예 3198을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 965.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 965.5 (M+2H).
실시예 3199의 제조
Figure pct00584
실시예 3199를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-75% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 951.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
실시예 3200의 제조
Figure pct00585
실시예 3200을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 944.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 944.6 (M+2H).
실시예 3201의 제조
Figure pct00586
실시예 3201을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.90분; ESI-MS(+) m/z 958.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 958.5 (M+2H).
실시예 3202의 제조
Figure pct00587
실시예 3202를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 966.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 966.1 (M+2H).
실시예 3203의 제조
Figure pct00588
실시예 3203을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 959.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 959.3 (M+2H).
실시예 3204의 제조
Figure pct00589
실시예 3204를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 918.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 918.1 (M+2H).
실시예 3205의 제조
Figure pct00590
실시예 3205를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 25-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 918.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 918.5 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 917.9173 (M+2H); 실측치: 917.9147 (M+2H).
실시예 3206의 제조
Figure pct00591
실시예 3206을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C". Fmoc-N-Me-Phe(3-F)-OH의 제8 커플링을 "수지 상 N-메틸화 방법 A" 절차를 사용하여 수행하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 907.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 908.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 907.4266 (M+2H); 실측치: 907.4237 (M+2H).
실시예 3207의 제조
Figure pct00592
실시예 3207을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 15-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 867.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 867.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 866.4394 (M+2H); 실측치: 866.4367 (M+2H).
실시예 3208의 제조
Figure pct00593
실시예 3208을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 40-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 2종의 이성질체 (이성질체 3208-A 및 이성질체 3208-B)를 수득하였다. 생성물 이성질체 3208-A 및 이성질체 3208-B의 수율은 각각 1.68 mg 및 1.47 mg이었고, 그의 추정된 순도는 각각 25분에 걸친 35%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 97% 및 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.43분; 이성질체 3208-A에 대한 ESI-MS(+) m/z 954.7 (M+2H) 및 1.50분; 이성질체 3208-B에 대한 ESI-MS(+) m/z 954.3 (M+2H).
이성질체 3208-A에 대한 ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 953.9473 (M+2H); 실측치: 953.9456 (M+2H).
실시예 3209의 제조
Figure pct00594
실시예 3209를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3078의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준-커플링 절차", "통상의 아미노산-커플링 절차", "CEM 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 20x250 5μ 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 구배: 50분에 걸쳐 40-95% B, 이어서 95% B에서 5-분 유지; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 2종의 이성질체 (이성질체 3209-A 및 이성질체 3209-B)를 수득하였다. 생성물 이성질체 3209-A 및 이성질체 3209-B의 수율은 각각 2.35 mg 및 3.2 mg이었고, 그의 추정된 순도는 각각 25분에 걸친 35%에서 85% 완충액 B의 구배를 사용하는 HPLC "분석 조건 B"에 의한 96% 및 99%였다.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; 이성질체 3209-A에 대한 ESI-MS(+) m/z 981.7 (M+2H) 및 1.54분; 이성질체 3209-B에 대한 ESI-MS(+) m/z 981.4 (M+2H).
이성질체 3209-A 에 대한 ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 980.9332 (M+2H); 실측치: 980.9318 (M+2H).
실시예 3500의 제조
Figure pct00595
실시예 3500을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-55% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 23.2 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 100%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 1855.5 (M+H).
실시예 3501의 제조
Figure pct00596
실시예 3501을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-55% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 22.3 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 97.6%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 1838.7 (M+H).
실시예 3502의 제조
Figure pct00597
실시예 3502를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-55% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 33.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 96.6%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 1811.7 (M+H).
실시예 3503의 제조
Figure pct00598
실시예 3503을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-55% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 19.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 96.6%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 1861.9 (M+H).
실시예 3504의 제조
Figure pct00599
실시예 3504를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-55% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 13.6 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 98.9%였다: 칼럼: 페노메넥스® 쥬피터 5μ C18 300A 150x4.6mm (575289-17); 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 30분에 걸쳐 30-95% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 1798.6 (M+H).
실시예 3505의 제조
Figure pct00600
실시예 3505를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-55% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 18.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 97.2%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 1748.0 (M+H).
실시예 3506의 제조
Figure pct00601
실시예 3506을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 3.4 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 99.6%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 1790.9 (M+H).
실시예 3507의 제조
Figure pct00602
실시예 3507을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 45분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 14.3 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 100%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 1764.0 (M+H).
실시예 3508의 제조
Figure pct00603
실시예 3508을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 8.7 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 93%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 1841.1 (M+H).
실시예 3509의 제조
Figure pct00604
실시예 3509를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 45분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 9.5 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 98.6%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 1813.8 (M+H).
실시예 3510의 제조
Figure pct00605
실시예 3510을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 7.1 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 99.6%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.29분; ESI-MS(+) m/z 941.9 (M+2H).
실시예 3511의 제조
Figure pct00606
실시예 3511을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 5.0 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 83%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 952.4 (M+2H).
실시예 3512의 제조
Figure pct00607
실시예 3512를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 45분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 29.7 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-80%를 사용하여 99.2%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 1869.9 (M+H).
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 935.3 (M+2H).
실시예 3513의 제조
Figure pct00608
실시예 3513을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 7.1 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-80%를 사용하여 87%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.27분; ESI-MS(+) m/z 894.2 (M+2H).
실시예 3514의 제조
Figure pct00609
실시예 3514를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 5.0 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-80%를 사용하여 90%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z 905.8 (M+2H).
실시예 3515의 제조
Figure pct00610
실시예 3515를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 5.6 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 904.8 (M+2H).
실시예 3516의 제조
Figure pct00611
실시예 3516을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 1.8 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 89%였다: 칼럼: 페노메넥스® 키네텍스 2.6μ C18(2) 2.1 x 50mm Ser. #515561-57; 이동상 A: 5% 메탄올/물 중 0.025% 아세트산암모늄; 이동상 B: 아세토니트릴/물 (4:1); 구배: 20분에 걸쳐 30-95% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 60℃.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 1812.1 (M+H).
실시예 3517의 제조
Figure pct00612
실시예 3517을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C". 사전로딩된 Fmoc-Gly-트리틸 수지를 시버 수지 대신에 사용하였다.
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 5.6 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 30-80%를 사용하여 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 899.8 (M+2H).
실시예 3518의 제조
Figure pct00613
실시예 3518을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 2.8 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 82%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 1772.7 (M+H).
실시예 3519의 제조
Figure pct00614
실시예 3519를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 15.7 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 30분에 걸친 일반적 "분석 조건 B" 35-95%를 사용하여 96%였다.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 1847.4 (M+H).
실시예 3520의 제조
Figure pct00615
실시예 3520을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 907.9 (M+2H).
실시예 3522의 제조
Figure pct00616
실시예 3522를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93.5%였다.
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 937.8 (M+2H).
실시예 3523의 제조
Figure pct00617
실시예 3523을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.5%였다.
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 906.4 (M+2H).
실시예 3524의 제조
Figure pct00618
실시예 3524를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 905.4 (M+2H).
실시예 3525의 제조
Figure pct00619
실시예 3525를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96.4%였다.
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.92분; ESI-MS(+) m/z 899.0 (M+2H).
실시예 3526의 제조
Figure pct00620
실시예 3526을 하기 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다.
50 mL 폴리프로필렌 튜브에 시버 수지 (140 mg, 0.100 mmol)를 첨가하고, 튜브를 CEM 리버티 마이크로웨이브 펩티드 합성기 상에 두었다. 이어서, 하기 절차를 순차적으로 수행하였다:
"CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따르고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Gly-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Cys(Trt)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Leu-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Tyr(tBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc- Tyr(tBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Sar-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Tyr(tBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-[N-Me]Phe-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차"를 75℃에서 2시간 동안 10 당량의 Fmoc-Val-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Asp(OtBu)-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, Fmoc-Sar-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차"에 따르며, 10분 동안 5 당량의 Fmoc-[N-Me]Nle-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차"에 따르며, 10분 동안 5 당량의 Fmoc-[N-Me]Phe-OH를 사용하고;
"CEM 방법 A: 표준 커플링 절차"에 따르며, 10분 동안 5 당량의 Fmoc-Phe-OH를 사용하고;
"프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A"에 따르고, "전반적 탈보호 방법 B"에 따르고, "고리화 방법 C"에 따랐다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.8%였다.
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 887.5 (M+2H).
실시예 3527의 제조
Figure pct00621
실시예 3527을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 928.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 928.2 (M+2H).
실시예 3528의 제조
Figure pct00622
실시예 3528을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 906.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.95분; ESI-MS(+) m/z 906.0 (M+2H).
실시예 3529의 제조
Figure pct00623
실시예 3529를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 906.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.96분; ESI-MS(+) m/z 906.0 (M+2H).
실시예 3531의 제조
Figure pct00624
실시예 3531을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.7%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 911.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 911.4 (M+2H).
실시예 3532의 제조
Figure pct00625
실시예 3532를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.7%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 921.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 920.9 (M+2H).
실시예 3533의 제조
Figure pct00626
실시예 3533을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.41 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 920.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 920.7 (M+2H).
실시예 3534의 제조
Figure pct00627
실시예 3534를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.72 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 890.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.94분; ESI-MS(+) m/z 890.5 (M+2H).
실시예 3535의 제조
Figure pct00628
실시예 3535를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.81 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.3%였다.
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.03분; ESI-MS(+) m/z 916.1 (M+2H).
실시예 3536의 제조
Figure pct00629
실시예 3536을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.61 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94.2%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 930.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 930.2 (M+2H).
실시예 3537의 제조
Figure pct00630
실시예 3537을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.81 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91.1%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 915.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z 915.8 (M+2H).
실시예 3538의 제조
Figure pct00631
실시예 3538을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.91 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.8%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 916.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.05분; ESI-MS(+) m/z 915.9 (M+2H).
실시예 3539의 제조
Figure pct00632
실시예 3539를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.52 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91.2%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 910.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.90분; ESI-MS(+) m/z 910.4 (M+2H).
실시예 3540의 제조
Figure pct00633
실시예 3540을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.52 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93.2%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 890.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.95분; ESI-MS(+) m/z 890.8 (M+2H).
실시예 3541의 제조
Figure pct00634
실시예 3541을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.41 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91.7%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 921.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 921.2 (M+2H).
실시예 3542의 제조
Figure pct00635
실시예 3542를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93.2%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 903.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 903.1 (M+2H).
실시예 3543의 제조
Figure pct00636
실시예 3543을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.71 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 923.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.95분; ESI-MS(+) m/z 923.0 (M+2H).
실시예 3544의 제조
Figure pct00637
실시예 3544를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.9%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 896.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 896.3 (M+2H).
실시예 3545의 제조
Figure pct00638
실시예 3545를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96.5%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 917.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.01분; ESI-MS(+) m/z 917.4 (M+2H).
실시예 3546의 제조
Figure pct00639
실시예 3546을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.4%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 896.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.92분; ESI-MS(+) m/z 897.2 (M+2H).
실시예 3547의 제조
Figure pct00640
실시예 3547을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.5%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 928.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.12분; ESI-MS(+) m/z 928.9 (M+2H).
실시예 3548의 제조
Figure pct00641
실시예 3548을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.1%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 894.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 894.2 (M+2H).
실시예 3549의 제조
Figure pct00642
실시예 3549를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.41 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.2%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 913.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.99분; ESI-MS(+) m/z 913.6 (M+2H).
실시예 3550의 제조
Figure pct00643
실시예 3550을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.72 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.6%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 913.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.95분; ESI-MS(+) m/z 913.5 (M+2H).
실시예 3551의 제조
Figure pct00644
실시예 3551을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.82 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93.7%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 905.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 905.9 (M+2H).
실시예 3552의 제조
Figure pct00645
실시예 3552를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.61 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.2%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 920.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 920.8 (M+2H).
실시예 3553의 제조
Figure pct00646
실시예 3553을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.22 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.7%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 906.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 905.7 (M+2H).
실시예 3555의 제조
Figure pct00647
실시예 3555를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.82 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93.2%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 892.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 892.6 (M+2H).
실시예 3556의 제조
Figure pct00648
실시예 3556을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.02 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 892.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 892.1 (M+2H).
실시예 3557의 제조
Figure pct00649
실시예 3557을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 5.3 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 83%였다: 칼럼: 페노메넥스® 키네텍스 2.6μ C18(2) 2.1 x 50mm Ser. #515561-57; 이동상 A: 5% 메탄올/물 중 0.025% 아세트산암모늄; 이동상 B: 아세토니트릴/물 (4:1); 구배: 20분에 걸쳐 25-75% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 60℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 907.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 1815.0 (M+H).
실시예 3558의 제조
Figure pct00650
실시예 3558을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 1.8 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 96%였다: 칼럼: 페노메넥스® 키네텍스 2.6μ C18(2) 2.1 x 50mm Ser. #515561-57; 이동상 A: 5% 메탄올/물 중 0.025% 아세트산암모늄; 이동상 B: 아세토니트릴/물 (4:1); 구배: 20분에 걸쳐 25-75% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 60℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 919.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 1837.1 (M+H).
실시예 3559의 제조
Figure pct00651
실시예 3559를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 이중-커플 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 3.5 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 89%였다: 칼럼: 페노메넥스® 키네텍스 2.6μ C18(2) 2.1 x 50mm Ser. #515561-57; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 25-55% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 60℃.
분석 LCMS 조건 A: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 919.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 1837.1 (M+H).
실시예 3560의 제조
Figure pct00652
실시예 3560을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.72 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 912.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.01분; ESI-MS(+) m/z 912.2 (M+2H).
실시예 3561의 제조
Figure pct00653
실시예 3561을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 890.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 890.7 (M+2H).
실시예 3562의 제조
Figure pct00654
실시예 3562를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94.9%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 911.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 912.0 (M+2H).
실시예 3563의 제조
Figure pct00655
실시예 3563을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.9%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 899.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 898.8 (M+2H).
실시예 3564의 제조
Figure pct00656
실시예 3564를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.4%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 898.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 898.8 (M+2H).
실시예 3565의 제조
Figure pct00657
실시예 3565를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.8%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 890.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 891.2 (M+2H).
실시예 3566의 제조
Figure pct00658
실시예 3566을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.56 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 906.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.92분; ESI-MS(+) m/z 906.2 (M+2H).
실시예 3567의 제조
Figure pct00659
실시예 3567을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(3-클로로-4-플루오로페닐)프로판산을 사용하였다.
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 35분에 걸쳐 40-85% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 9.82 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 98.8%였다: 칼럼: 페노메넥스® 키네텍스 2.6μ C18(2) 2.1 x 50mm Ser. #515561-57; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 25-55% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 40℃.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 1849.9 (M+H).
실시예 3568의 제조
Figure pct00660
실시예 3568을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 35분에 걸쳐 40-85% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 8.08 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 98.8%였다: 칼럼: 페노메넥스® 키네텍스 2.6μ C18(2) 2.1 x 50mm Ser. #515561-57; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 20분에 걸쳐 25-55% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 40℃.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 1815.0 (M+H).
실시예 3569의 제조
Figure pct00661
실시예 3569를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z 916.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.86분; ESI-MS(+) m/z 917.3 (M+2H).
실시예 3570의 제조
Figure pct00662
실시예 3570을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 27.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 900.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 900.8 (M+2H).
실시예 3571의 제조
Figure pct00663
실시예 3571을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 900.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 900.9 (M+2H).
실시예 3572의 제조
Figure pct00664
실시예 3572를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.01 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90.8%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 919.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.90분; ESI-MS(+) m/z 918.9 (M+2H).
실시예 3573의 제조
Figure pct00665
실시예 3573을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.71 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92.4%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 919.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.96분; ESI-MS(+) m/z 919.3 (M+2H).
실시예 3574의 제조
Figure pct00666
실시예 3574를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 16.8 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 94.1%였다: 칼럼: 페노메넥스® 키네텍스 2.6μ C18(2) 2.1 x 50mm Ser. #515561-57; 이동상 A: 5% 메탄올/물 중 0.025% 아세트산암모늄; 이동상 B: 아세토니트릴/물 (4:1); 구배: 20분에 걸쳐 25-55% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 60℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 925.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 1848.5 (M+H).
실시예 3575의 제조
Figure pct00667
실시예 3575를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결 건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 19.7 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 조건 B"를 사용하여 94.1%였다; 구배: 30분에 걸쳐 30-75% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 60℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 920.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 1839.3 (M+H).
실시예 3576의 제조
Figure pct00668
실시예 3576을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.70 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 919.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 919.8 (M+2H).
실시예 3577의 제조
Figure pct00669
실시예 3577을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.92 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91.3%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 905.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z 904.8 (M+2H).
실시예 3578의 제조
Figure pct00670
실시예 3578을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.21 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 919.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 919.0 (M+2H).
실시예 3579의 제조
실시예 3579를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.52 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99.1%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 906.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z 907.3 (M+2H).
실시예 3580의 제조
Figure pct00672
실시예 3580을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.81 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96.1%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z 919.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 2.06분; ESI-MS(+) m/z 919.4 (M+2H).
실시예 3581의 제조
Figure pct00673
실시예 3581을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 28.22 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94.4%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 901.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.85분; ESI-MS(+) m/z 901.3 (M+2H).
실시예 3582의 제조
Figure pct00674
실시예 3582를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96.8%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 904.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 904.8 (M+2H).
실시예 3583의 제조
Figure pct00675
실시예 3583을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.60 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.8%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 919.8 (M+2H).
실시예 3584의 제조
Figure pct00676
실시예 3584를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 50분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 3.06 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 95.4%였다: 칼럼: 페노메넥스® 키네텍스 2.6μ C18(2) 2.1 x 50mm Ser. #515561-57; 이동상 A: 5% 메탄올/물 중 0.025% 아세트산암모늄; 이동상 B: 아세토니트릴/물 (4:1); 구배: 20분에 걸쳐 25-55% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 60℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 919.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 1837.1 (M+H).
실시예 3585의 제조
Figure pct00677
실시예 3585를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 85% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 2종의 이성질체 생성물을 단리시켰다: 이성질체 A 및 B.
이성질체 A의 수율은 1.70 mg, 및 HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 100.0%였다: 칼럼: 페노메넥스® 쥬피터 5μ C18 150 x 4.6mm 300A.; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA: 15분에 걸쳐 30-60% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 40℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 923.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 1845.1 (M+H).
이성질체 B의 수율은 2.18 mg, 및 HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 92.8%였다: 칼럼: 페노메넥스® 쥬피터 5μ C18 150 x 4.6mm 300A.; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA: 15분에 걸쳐 35-60% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 40℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 923.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 1847.9 (M+H).
실시예 3586의 제조
Figure pct00678
실시예 3586을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 4.79 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 96.6%였다: 칼럼: 페노메넥스® 쥬피터 5μ C18 150 x 4.6mm 300A.; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA: 15분에 걸쳐 35-60% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 40℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 916.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 1832.9 (M+H).
실시예 3588의 제조
Figure pct00679
실시예 3588을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 95% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 3.19 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 91.9%였다: 칼럼: 페노메넥스® 쥬피터 5μ C18 150 x 4.6mm 300A.; 이동상 A: 5% 메탄올/물 중 0.025% 아세트산암모늄; 이동상 B: 아세토니트릴/물 (4:1): 15분에 걸쳐 30-60% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 40℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 920.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 1838.3 (M+H).
실시예 3589의 제조
Figure pct00680
실시예 3589를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.31 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.3%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 974.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 973.7 (M+2H).
실시예 3590의 제조
Figure pct00681
실시예 3590을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.60 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.7%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 967.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.92분; ESI-MS(+) m/z 966.7 (M+2H).
실시예 3591의 제조
Figure pct00682
실시예 3591을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.21 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 973.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 973.9 (M+2H).
실시예 3592의 제조
Figure pct00683
실시예 3592를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.40 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93.2%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 966.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.92분; ESI-MS(+) m/z 966.9 (M+2H).
실시예 3593의 제조
Figure pct00684
실시예 3593을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.80 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 962.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 962.2 (M+2H).
실시예 3594의 제조
Figure pct00685
실시예 3594를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 85% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 2.08 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 조건 B"를 사용하여 89.3%였다; 15분에 걸쳐 30-60% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 40℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.29분; ESI-MS(+) m/z 1925.6 (M+H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z 1924.4 (M+H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 962.4605 (M+2H); 실측치: 962.45821 (M+2H).
실시예 3595의 제조
Figure pct00686
실시예 3595를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 85% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 3.39 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 조건 B"를 사용하여 100%였다; 15분에 걸쳐 35-75% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM, 오븐: 40℃.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 1925.4 (M(-Trt)+H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 1927.6 (M(-Trt)+H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 1083.5153 (M+2H); 실측치: 1083.51169 (M+2H).
실시예 3596의 제조
Figure pct00687
실시예 3596을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 정제용 HPLC에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 85% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 2.52 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 90.6%였다: 칼럼: 페노메넥스® 쥬피터 5μ C18 150 x 4.6mm 300A.; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA: 25분에 걸쳐 35-60% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 1978.3 (M+H).
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 1979.4 (M+H).
실시예 3597의 제조
Figure pct00688
실시예 3597을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 2종의 이성질체 생성물을 단리시켰다.
이성질체 A의 수율은 3.40 mg, 및 LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.9%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 920.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 920.4 (M+2H).
이성질체 B의 수율은 4.50 mg, 및 LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.4%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 920.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 920.2 (M+2H).
실시예 3598의 제조
Figure pct00689
실시예 3598을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.45 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.7%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 944.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 943.7 (M+2H).
실시예 3599의 제조
Figure pct00690
실시예 3599를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.01 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92.7%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
실시예 3600의 제조
Figure pct00691
실시예 3600을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.40 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.4%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 921.2 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 920.6 (M+2H).
실시예 3601의 제조
Figure pct00692
실시예 3601을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.30 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 920.8 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 920.9 (M+2H).
실시예 3602의 제조
Figure pct00693
실시예 3602를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 35분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 85% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 0.99 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 96%였다: 칼럼: YMC 팩 ODS-AQ 3 μm 150 x; 이동상 A: 0.025 아세트산암모늄/아세토니트릴 (8:2); 이동상 B: 0.025% 아세트산암모늄/아세토니트릴 (2:8): 15분에 걸쳐 30-60% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM. 오븐 40℃.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 1783.0 (M+H).
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.27분; ESI-MS(+) m/z 1783.8 (M+H).
실시예 3603의 제조
Figure pct00694
실시예 3603을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", Fmoc-2-Nal-OH의 N-메틸화에 대해 "수지 상 N-메틸화 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 85% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 0.89 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 "분석 조건 C"를 사용하여 100%였다: 15분에 걸쳐 30-60% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM. 오븐 40℃.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 1845.8 (M+H).
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.33분; ESI-MS(+) m/z 1847.5 (M+H).
실시예 3604의 제조
Figure pct00695
실시예 3604를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 페노메넥스® 루나 5μ C18(2) 250 x 21.2 악시아, 100A Ser. #520221-1; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA; 구배: 40분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 85% B까지의 5-분 구배; 유량: 15 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물을 최소의 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 무정형 고체를 수득하였다. 생성물의 수율은 1.10 mg이었고, HPLC 분석에 의한 그의 추정된 순도는 하기 조건을 사용하여 96%였다: 칼럼: 페노메넥스® 쥬피터 5μ C18 150 x 4.6mm 300A.; 이동상 A: 물 중 0.1% TFA; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% TFA: 25분에 걸쳐 35-60% B; 유량: 1 mL/분. 검출 UV: 217 nM. 오븐 40℃.
분석 LCMS 조건 C: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 1839.9 (M+H).
실시예 3605의 제조
Figure pct00696
실시예 3605를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.50 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93.8%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 950.5 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 950.5 (M+2H).
실시예 3606의 제조
Figure pct00697
실시예 3606을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.07 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92.5%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 967.4 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z 967.5 (M+2H).
실시예 3607의 제조
Figure pct00698
실시예 3607을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96.2%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 943.3 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 943.2 (M+2H).
실시예 3608의 제조
Figure pct00699
실시예 3608을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 1.49 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91.1%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 950.6 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 950.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 950.4230 (M+2H); 실측치: 950.4200 (M+2H).
실시예 3609의 제조
Figure pct00700
실시예 3609를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.39 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91.5%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 934.1 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.86분; ESI-MS(+) m/z 934.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 933.4146 (M+2H); 실측치: 933.4126 (M+2H).
실시예 3610의 제조
Figure pct00701
실시예 3610을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.79 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 892.0 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 892.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 891.9267 (M+2H); 실측치: 891.9229 (M+2H).
실시예 3611의 제조
Figure pct00702
실시예 3611을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 3026의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "CEM 방법 A: 수지-팽윤 절차", "CEM 방법 A: 표준 커플링 절차", "CEM 방법 A: 통상의 아미노산-커플링 절차", "클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.53 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100.0%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 929.7 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 929.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 929.4447 (M+2H); 실측치: 929.4428 (M+2H).
실시예 3613의 제조
Figure pct00703
실시예 3613을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 72의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 2급 아민-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세트산 커플링 절차 A", "전반적 탈보호 방법 B", 및 "고리화 방법 C".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18 300, 19 x 250 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 25분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.93 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.5%였다.
분석 LCMS 조건 D: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 966.9 (M+2H).
분석 LCMS 조건 E: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 966.8 (M+2H).
분석 데이터:
질량 분광측정법: "ESI-MS(+)"는 양이온 모드로 수행된 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-MS(-)"는 음이온 모드로 수행된 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-HRMS(+)"는 양이온 모드로 수행된 고해상도 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-HRMS(-)"는 음이온 모드로 수행된 고해상도 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미한다. 검출된 질량은 "m/z" 단위 지정에 따라 보고된다. 1000 초과의 정확한 질량을 갖는 화합물은 종종 이중-하전 또는 삼중-하전 이온으로 검출되었다.
분석 조건 A:
칼럼: 워터스 BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 10 mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10 mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 50℃; 구배: 0%B, 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.5-분 유지; 유량: 1 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 조건 B:
칼럼: 워터스 BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 10 mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올:물; 이동상 B: 10 mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올:물; 온도: 50℃; 구배: 0%B, 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.5-분 유지; 유량: 0.5 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 조건 C:
칼럼: 워터스 액퀴티® BEH C18 2.1 x 50 mm 1.7 μm 입자; 이동상 A: 0.05% TFA 함유 물; 이동상 B: 0.05% TFA 함유 아세토니트릴; 온도: 40℃; 구배: 0%B, 1.5분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.5-분 유지; 유량: 0.8 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
일반적 절차:
프렐류드 방법 A:
모든 조작을 프렐류드 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차는 달리 언급되지 않는 한 하단 프릿이 장착된 10 mL 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였으며; 여기서 반응의 규모는 0.100 mmol을 초과하였고, 하단 프릿이 장착된 40 mL 폴리프로필렌 튜브를 사용하였다. 튜브를 튜브의 하단 및 상단 둘 다를 통해 프렐류드 펩티드 합성기에 연결하였다. DMF 및 DCM을 튜브의 상단을 통해 첨가할 수 있었으며, 이를 튜브의 측면으로 동등하게 세척해 내었다. 나머지 시약을 튜브의 하단을 통해 첨가하고, 프릿을 통해 통과시켜 수지를 접촉시켰다. 모든 용액을 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 교반"은 하단 프릿을 통한 N2 기체의 짧은 펄스를 기재하며; 펄스는 대략 5초 동안 지속되고, 30초마다 발생한다. DMF 중 클로로아세틸 클로라이드 용액은 제조 24시간 이내에 사용하였다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. HATU 용액은 제조 5일 이내에 사용하였다. DMF = 디메틸포름아미드; HATU = 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 링크 = (2,4-디메톡시페닐)(4-알콕시페닐)메탄아민, 여기서 "4-알콕시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 링크 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.56 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct00704
"프렐류드 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 링크 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 링크-메리필드 수지의 대략 178 mg에 해당한다. 모든 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "단일-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "이중-커플링 절차"를 사용하였다. 펩티드의 N-말단에 대한 클로로아세틸클로라이드의 커플링은 하기 상세화된 "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차"에 의해 기재되어 있다.
수지-팽윤 절차:
10 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 메리필드:링크 수지 (178 mg, 0.100 mmol)를 첨가하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다 (팽윤시켰다): 반응 용기에 DMF (2.0 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다.
단일-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 0.5 mL, 4 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물 (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
이중-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 0.5 mL, 4 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.8M, 0.5 mL, 4 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물 (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 용기의 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 DIPEA (DMF 중 0.8M, 3.0 mL, 24 당량)에 이어서 클로로아세틸 클로라이드 (DMF 중 0.8M, 1.65 mL, 13.2 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, CH2Cl2 (2.0 mL)를 용기의 상단에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 N2 스트림 하에 15분 동안 두었다.
심포니 방법 A:
이러한 컬렉션의 절차는 언급된 바를 제외하고는 "프렐류드 방법 A"의 것과 동일하다. 모든 절차에 대해 심포니 X 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스)를 프렐류드 펩티드 합성기 대신에 사용하고, 모든 시약을 반응 용기의 상단을 통해 첨가하였다.
수지-팽윤 절차:
이 절차는 "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차"와 동일하다.
단일-커플링 절차:
이 절차는 DIPEA 용액의 농도가 0.4M이고 이 용액의 1.0 mL를 반응에 전달한 것을 제외하고는 "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"와 동일하다.
이중-커플링 절차:
이 절차는 DIPEA 용액의 농도가 0.4M이고 이 용액의 1.0 mL를 반응에 전달한 것을 제외하고는 "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차"와 동일하다.
클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차:
이 절차를 "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차"와 동일하다.
전반적 탈보호 방법 A:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "전반적 탈보호 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 링크 링커의 양에 의해 결정된다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. "탈보호 용액"을 40 mL 유리 바이알에서 트리플루오로아세트산 (22 mL), 페놀 (1.325 g), 물 (1.25 mL) 및 트리이소프로필실란 (0.5 mL)을 합함으로써 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 4 mL 유리 바이알에 옮겼다. 바이알에 "탈보호 용액" (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 진탕기에서 격렬히 혼합하였다 (1분 동안 1000 RPM, 이어서 1-2시간 동안 500 RPM). 혼합물을 0.2 μ 시린지 필터를 통해 여과하고, 고체를 "탈보호 용액" (1.0 mL) 또는 TFA (1.0 mL)로 추출하였다. 합한 여과물이 들은 24 mL 시험관에 Et2O (15 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 격렬히 혼합하고, 이 때 상당한 양의 백색 고체가 침전하였다. 혼합물을 5분 동안 원심분리한 다음, 용액을 고체로부터 경사분리하고, 버렸다. 고체를 Et2O (20 mL) 중에 현탁시킨 다음; 혼합물을 5분 동안 원심분리하고; 용액을 고체로부터 경사분리하고, 버렸다. 최종 시간 동안, 고체를 Et2O (20 mL) 중에 현탁시키고; 혼합물을 5분 동안 원심분리하고; 용액을 고체로부터 경사분리하고, 버려 조 펩티드를 백색 내지 회백색 고체로서 수득하였다.
고리화 방법 A:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "고리화 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 펩티드를 생성하기 위해 사용된 수지에 결합된 링크 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 절차에 사용된 펩티드의 양의 직접 결정을 기초로 하지 않는다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 조 펩티드 고체를 MeCN:수성 0.1M NH4OAc (30mL:30mL) 중에 용해시킨 다음, 용액을 수성 NaOH (1.0M)를 사용하여 pH = 8.5-9.0으로 조심스럽게 조정하였다. 이어서, 용액을 12 내지 18시간 동안 교반하지 않고 정치되도록 하였다. 반응 용액을 농축시킨 다음, 잔류물을 DMSO:MeOH 중에 용해시켰다. 이 용액을 역상 HPLC 정제로 처리하여 목적 시클릭 펩티드를 수득하였다.
고리화 방법 B:
모든 조작을 달리 언급되지 않는 한 수동으로 수행하였다. "고리화 방법 B"의 절차는 0.100 mmol 규모 상에서 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 펩티드를 생성하기 위해 사용된 수지에 결합된 링크 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 절차에 사용된 펩티드의 양의 직접 결정을 기초로 하지 않는다. 절차는 기재된 부피를 규모의 배수로 조정함으로써 0.100 mmol 넘는 규모로 규모화될 수 있다. 조 펩티드 고체를 MeCN:수성 0.1M NH4OAc (1:1) 중에 18-22 mL의 총 부피로 용해시킨 다음, 용액을 수성 NaOH (1.0M)를 사용하여 pH = 8.5-9.0으로 조심스럽게 조정하였다. 이어서, 용액을 12 내지 18시간 동안 교반하지 않고 정치되도록 하였다. 반응 용액을 농축시킨 다음, 잔류물을 DMSO:MeOH 중에 용해시켰다. 이 용액을 역상 HPLC 정제로 처리하여 목적 시클릭 펩티드를 수득하였다.
일반적 합성 순서 A:
"일반적 합성 순서 A"는 본원에 기재된 시클릭 펩티드를 수득하기 위해 사용된 절차의 일반적 순서를 기재한다. 이 일반적 절차의 목적을 위해, "심포니 방법 A"의 절차는 "프렐류드 방법 A"의 것과 상호교환가능하다. 10 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 링크-메리필드 수지 (178 mg, 0.100 mmol)를 첨가하고, 반응 용기를 프렐류드 펩티드 합성기 상에 두었다. "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차"에 따랐다. 이어서, 아미노산 커플링의 시리즈를 수지-결합된 펩티드의 N-말단이 1급 아민인 경우에 "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차" 또는 수지-결합된 펩티드의 N-말단이 2급 아민인 경우에 "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차"에 따라 프렐류드 상에서 수행하였다. "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차"에 따르고; 이어서 "전반적 탈보호 방법 A"에 따르고; 이어서 "고리화 방법 A"에 따랐다.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)([13C ]메틸)아미노) 헥산산의 제조
반응식:
Figure pct00705
단계 1:
파라포름알데히드(13C 표지됨) (500 mg, 16.65 mmol), (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)헥산산 (4527 mg, 12.81 mmol), 및 p-톨루엔술폰산 (221 mg, 1.281 mmol)을 함유하는 혼합물을 톨루엔 (100 mL) 중에서 2시간 동안 환류하였다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨 용액에 이어서 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 단계 1로부터의 생성물 (4.694 g, 12.81 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. 수율은 100%인 것으로 추측되었다. ESI-MS(+) m/z = 389.2 (M+Na).
단계 2:
단계 1로부터의 생성물 (4.694 g, 12.83 mmol)의 전체를 CHCl3 (40 mL) 중에 용해시키고, 이 용액에 트리에틸실란 (10.24 mL, 64.1 mmol)에 이어서 TFA (10 mL, 130 mmol)를 첨가하였다. 용액을 N2의 정압 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 제거하여 점착성 오일을 수득하였다. 오일을 EtOAc 중에 용해시킨 다음, 포화 중탄산나트륨 (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 상 계면에서의 고체를 수성 상과 함께 수집하였다. 수성 상을 수성 HCl을 사용하여 pH 4-5로 조정하였다. 백색 고체가 pH 조정 종점 근처에서 침전하였다. 혼합물을 EtOAc (200 mL)로 추출하고, 유기 상을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 순수한 생성물 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(([13C]메틸)아미노)헥산산 (3 g, 8.14 mmol, 63.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00706
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)([13C]메틸)아미노) 프로판산의 제조
반응식:
Figure pct00707
단계 1:
파라포름알데히드(C13 표지됨) (250 mg, 8.33 mmol), (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)프로판산 (1994 mg, 6.40 mmol), 및 p-톨루엔 술폰산 (110 mg, 0.640 mmol)을 함유하는 혼합물을 톨루엔 (50 mL) 중에서 2시간 동안 환류하였다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨 용액에 이어서 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 단계 1로부터의 생성물 (2.08 g, 6.41 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. 수율은 100%인 것으로 추측되었다. ESI-MS(+) m/z = 348.1 (M+Na).
단계 2:
단계 1로부터의 생성물 (2.08 g, 6.41 mmol)의 전체를 CHCl3 (20 mL) 중에 용해시키고, 이 용액에 트리에틸실란 (5.12 mL, 32.1 mmol)에 이어서 TFA (4.94 mL, 64.1 mmol)를 첨가하였다. 용액을 N2의 정압 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 제거하여 점착성 오일을 수득하였다. 오일을 EtOAc 중에 용해시킨 다음, 포화 중탄산나트륨 (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 상 계면에서의 고체를 수성 상과 함께 수집하였다. 수성 상을 수성 HCl을 사용하여 pH 4-5로 조정하였다. 백색 고체가 pH 조정 종점 근처에서 침전하였다. 혼합물을 EtOAc (200 mL)로 추출하고, 유기 상을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 순수한 생성물 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)([13C]메틸)아미노)프로판산 (1 g, 3.06 mmol, 47.8% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00708
(2S,5S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-5-히드록시피페리딘-2-카르복실산의 제조
반응식:
Figure pct00709
단계 1:
TFA (5 mL, 64.9 mmol)을 DCM (5 mL) 중 (2S,5S)-디-tert-부틸 5-히드록시피페리딘-1,2-디카르복실레이트 (1 g, 3.32 mmol)의 용액에 실온에서 첨가하고, 용액을 1시간 동안 교반하였으며, 이 때 LCMS 분석은 완전한 전환 (Boc의 제거)을 나타내었다. 용액을 진공 하에 농축시킨 다음, 잔류물을 수성 진한 HCl 3 mL로 처리하였다. 용액을 5분 동안 교반하였으며, 이 때 LCMS 분석은 완전한 전환 (tBu의 제거)을 나타내었다. 용액을 진공 하에 농축시켜 (2S,5S)-5-히드록시피페리딘-2-카르복실산, HCl (0.6 g)을 오일로서 수득하였다. 수율은 100%인 것으로 추측되었다. ESI-MS(+) m/z = 146.2 (M+H).
단계 2:
1,4-디옥산 (4 mL) 및 물 (16 mL) 중 (2S,5S)-5-히드록시피페리딘-2-카르복실산, HCl (.603 g, 3.32 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (1.835 g, 13.28 mmol)에 이어서 (9H-플루오렌-9-일)메틸 카르보노클로리데이트 (0.859 g, 3.32 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 다음, 물 (10ml)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 디에틸 에테르 (2x15 ml)로 추출하였다. 수성 상을 수성 HCl (1M)을 사용하여 pH 2-3으로 산성화시키고, DCM (3x20ml)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물 (2S,5S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-5-히드록시피페리딘-2-카르복실산(800 mg, 65.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00710
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(4-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)옥시)-3-브로모페닐)프로판산의 제조
반응식:
Figure pct00711
단계 1:
교반용 막대가 구비된 250 mL 둥근 바닥 플라스크에 아세트산 (50 mL) 및 AcOH 중 브로민화수소산 (27 mL, 149 mmol)에 이어서 (S)-2-아미노-3-(4-히드록시페닐)프로판산 (13.47 g, 74.3 mmol)을 첨가하였다. 교반 용액에 AcOH (20 mL) 중 브로민 (4.14 mL, 80 mmol)을 3시간에 걸쳐 첨가 깔때기를 통해 적가하였다. 용액을 실온에서 교반하였다. 9 일 후, 교반을 멈추고, 혼합물을 여과하였다 (반응 시간은 최적화되지 않음). 필터 케이크를 AcOH (100 mL)에 이어서 Et2O (150 mL)로 세척하였다. 단리된 회백색 고체를 진공 하에 건조시켜 생성물 (S)-2-아미노-3-(3-브로모-4-히드록시페닐)프로판산, 히드로브로마이드 (23.9 g, 85% 수율)를 연황색 분말로서 수득하였다.
Figure pct00712
단계 2:
1,4-디옥산 (12 mL) 및 물 (48 mL) 중 (S)-2-아미노-3-(3-브로모-4-히드록시페닐)프로판산, 히드로브로마이드 (3 g, 8.80 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (4.86 g, 35.2 mmol)에 이어서 (9H-플루오렌-9-일)메틸 카르보노클로리데이트 (2.276 g, 8.80 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 다음, 물 (50 mL)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 디에틸 에테르 (2x15 ml)로 추출하였다. 수성 상을 수성 HCl (1M)을 사용하여 pH 2-3으로 산성화시키고, DCM (3x20ml)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (120 g 칼럼, 30-90% EtOAc:헥산, 20 칼럼 부피)에 의해 정제하여 생성물 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(4-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)옥시)-3-브로모페닐)프로판산(3.42g, 55.2% 수율)을 담황색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00713
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-1H-인돌-3-일)프로판산의 제조
반응식:
Figure pct00714
단계 1:
DMF (40 mL) 중 (S)-메틸 2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트 (4 g, 12.56 mmol) 및 탄산세슘 (4.50 g, 13.82 mmol)의 0℃ 용액에 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (2.015 mL, 13.82 mmol)를 첨가하고, 빙조로부터 제거하여 실온으로 가온되도록 하고, 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 1:1 빙수:1N HCl에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 수집하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (80g 칼럼, 0-50% EtOAc:헥산, 20 CV에 걸침)에 의해 정제하여 생성물 (S)-메틸 3-(1-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-1H-인돌-3-일)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로파노에이트 (4.69 g, 86% 수율)를 수득하였다.
Figure pct00715
단계 2:
수산화리튬 1수화물 (0.455 g, 10.84 mmol)을 디옥산 (50 mL) 및 물 (16.67 mL) 중 (S)-메틸 3-(1-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-1H-인돌-3-일)-2-((tert-부톡시카르보닐) 아미노)프로파노에이트 (4.69 g, 10.84 mmol)의 용액에 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 1M HCl로 중화시키고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 수집하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피 (120 g 칼럼, 0-50% EtOAc:헥산, 20 CV에 걸침)에 의해 정제하여 생성물 (S)-3-(1-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-1H-인돌-3-일)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)프로판산 (3.54g, 78% 수율)을 수득하였다.
Figure pct00716
단계 3:
HCl (디옥산 중 4M, 10 ml, 40.0 mmol)을 N2 분위기 하에 빙조에서 냉각시켰다. (S)-3-(1-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-1H-인돌-3-일)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노) 프로판산 (1 g, 2.390 mmol)을 HCl 용액에 첨가하였다. 빙조를 제거하고, 반응물을 30분 동안 교반하였다. 용액을 농축시켜 (조 온도 = RT) 생성물 (S)-2-아미노-3-(1-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-1H-인돌-3-일)프로판산, HCl (848 mg, 100% 수율)을 점착성 오일로서 수득하였다. ESI-MS(+) m/z = 319.2 (M+Na).
단계 4:
1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (20 mL) 중 (S)-2-아미노-3-(1-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-1H-인돌-3-일)프로판산, HCl (848 mg, 2.390 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (1321 mg, 9.56 mmol)에 이어서 (9H-플루오렌-9-일)메틸 카르보노클로리데이트 (618 mg, 2.390 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하고, 물 (10ml)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 디에틸 에테르 (2x15 ml)로 추출하였다. 수성 상을 수성 HCl (1M)을 사용하여 pH 2-3으로 산성화시키고, DCM (3x20ml)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC(0.1% TFA 완충액 함유 10-100% CH3CN:물)에 의해 정제하여 생성물 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-1H-인돌-3-일)프로판산 (405 mg, 0.749 mmol, 31.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00717
(2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-((6-메톡시이소퀴놀린-1-일)옥시)피롤리딘-2-카르복실산의 제조
반응식:
Figure pct00718
단계 1:
1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (20 mL) 중 (2S,4R)-4-((6-메톡시이소퀴놀린-1-일)옥시)피롤리딘-2-카르복실산, HCl (750 mg, 2.309 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (1277 mg, 9.24 mmol)에 이어서 (9H-플루오렌-9-일)메틸 카르보노클로리데이트 (597 mg, 2.309 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하고, 물 (10ml)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 수성 HCl (1M)을 사용하여 pH 2-3으로 산성화시키고, DCM (3x20ml)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (40 g 칼럼, DCM 중 MeOH 0-10%, 20 CV에 걸침)에 의해 정제하여 생성물 (2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-((6-메톡시이소퀴놀린-1-일)옥시)피롤리딘-2-카르복실산을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00719
(2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-((3-브로모퀴놀린-2-일)옥시)피롤리딘-2-카르복실산의 제조
반응식:
Figure pct00720
단계 1:
TFA (5.0 ml, 65 mmol)을 DCM (5 mL) 중 (2S,4R)-4-((3-브로모퀴놀린-2-일)옥시)-1-(tert-부톡시카르보닐)피롤리딘-2-카르복실산 (300 mg, 0.686 mmol)의 용액에 첨가하고, LCMS 분석이 전환이 완결되었음을 나타낼 때까지 실온에서 교반하였다. 용액을 농축시켜 생성물 (2S,4R)-4-((3-브로모퀴놀린-2-일)옥시) 피롤리딘-2-카르복실산, TFA (310 mg)를 점착성 오일로서 수득하였다. 수율은 100%인 것으로 추측되었다. ESI-MS(+) m/z = 337 (M+H).
단계 2:
1,4-디옥산 (3 mL) 및 물 (12 mL) 중 (2S,4R)-4-((3-브로모퀴놀린-2-일)옥시)피롤리딘-2-카르복실산, TFA (310 mg, 0.687 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (380 mg, 2.75 mmol)에 이어서 (9H-플루오렌-9-일)메틸 카르보노클로리데이트 (178 mg, 0.687 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하고, 물 (10ml)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 디에틸 에테르 (2x15 ml)로 추출하였다. 수성 상을 수성 HCl (1M)을 사용하여 pH 2-3으로 산성화시키고, DCM (3x20ml)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC (10-100% CH3CN:물, 0.1% TFA 완충액)에 의해 정제하여 생성물 (2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-((3-브로모퀴놀린-2-일)옥시)피롤리딘-2-카르복실산 (250 mg, 65% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00721
(2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-(벤질옥시) 피롤리딘-2-카르복실산의 제조
반응식:
Figure pct00722
단계 1:
TFA (5 ml, 64.9 mmol)을 DCM (5 mL) 중 (2S,4R)-4-(벤질옥시)-1-(tert-부톡시카르보닐)피롤리딘-2-카르복실산 (500 mg, 1.556 mmol)의 용액에 첨가하고 LCMS 분석이 전환이 완결되었음을 나타낼 때까지 실온에서 교반하였다. 용액을 농축시켜 생성물을 수득하였다. 수율은 100%인 것으로 추측되었다. ESI-MS(+) m/z = 222(M+H).
단계 2:
1,4-디옥산 (4 mL) 및 물 (16 mL) 중 (2S,4R)-4-(벤질옥시)피롤리딘-2-카르복실산, TFA (522 mg, 1.557 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (861 mg, 6.23 mmol)에 이어서 (9H-플루오렌-9-일)메틸 카르보노클로리데이트 (403 mg, 1.557 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하고, 물 (10ml)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 디에틸 에테르 (2x15 ml)로 추출하였다. 수성 상을 수성 HCl (1M)을 사용하여 pH 2-3으로 산성화시키고, DCM (3x20ml)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC (10-100%CH3CN:물 0.1%TFA 완충액)에 의해 정제하여 순수한 생성물 (2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-(벤질옥시)피롤리딘-2-카르복실산(430mg, 62.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00723
(S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-(tert-부톡시카르보닐) 피페라진-2-카르복실산의 제조
반응식:
Figure pct00724
단계 1:
1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (20 mL) 중 (S)-4-(tert-부톡시카르보닐)피페라진-2-카르복실산 (500 mg, 2.171 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (1200 mg, 8.69 mmol)에 이어서 (9H-플루오렌-9-일)메틸 카르보노클로리데이트 (562 mg, 2.171 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 다음, 물 (10ml)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 디에틸 에테르 (2x15 ml)로 추출하였다. 수성 상을 수성 HCl (1M)을 사용하여 pH 2-3으로 산성화시키고, DCM (3x20ml)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC (0.1%TFA 완충액 함유 10-100% CH3CN:물)에 의해 정제하여 생성물 (S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-(tert-부톡시카르보닐)피페라진-2-카르복실산 (294mg, 30% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00725
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(메틸)아미노)-3-(m-톨릴옥시)프로판산의 제조
반응식:
Figure pct00726
단계 1:
교반용 막대가 구비된 둥근 바닥 플라스크에 (S)-메틸 3-히드록시-2-(트리틸아미노)프로파노에이트 (10.0 g, 27.7 mmol), 트리페닐포스핀 (7.98 g, 30.4 mmol) 및 톨루엔 (100 mL)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 30분 동안 교반한 다음, 용액에 m-크레졸 (3.78 mL, 36.0 mmol) 및 디이소프로필아조디카르복실레이트 ("DIAD", 5.92 mL, 30.4 mmol)를 첨가하였다. 용액을 18시간 동안 교반하면서 80℃에서 가열하였다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 농축시키고, 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산:EtOAc)로 처리하여 (S)-메틸 3-(m-톨릴옥시)-2-(트리틸아미노)프로파노에이트, 8.28 g (66%)을 수득하였다.
Figure pct00727
단계 2:
교반용 막대가 장착되고 MeOH (30 mL) 및 THF (30 mL) 중 (S)-메틸 3-(m-톨릴옥시)-2-(트리틸아미노)프로파노에이트 (8.28 g, 18.34 mmol)가 채워진 둥근 바닥 플라스크에 물 중 수산화리튬 (55.0 mmol, 27.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 2N HCl로 중화시켰다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 유기 상을 단리시키고, 염수로 세척하고; MgSO4 상에서 건조시키고; 여과한 다음; 진공 하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 (S)-3-(m-톨릴옥시)-2-(트리틸아미노) 프로판산, 1.47 g (18%)을 수득하였다.
Figure pct00728
단계 3:
교반용 막대가 장착되고 0℃로 냉각된 (S)-3-(m-톨릴옥시)-2-(트리틸아미노)프로판산 (1.47 g, 3.36 mmol)이 채워진 둥근 바닥 플라스크에 트리플루오로아세트산 (6.0 ml, 78 mmol)을 첨가하였다. 용액을 1시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 제거한 다음, 잔류물을 MeOH (5 mL) 중에 용해시키고, 다시 진공 하에 농축시켰다. 생성된 조 (S)-2-아미노-3-(m-톨릴옥시)프로판산 TFA 염을 단계 4에 직접 사용하였다.
단계 4:
교반용 막대가 장착되고 단계 3에서 수득한 (S)-2-아미노-3-(m-톨릴옥시)프로판산 TFA 염의 전체 (3.36 mmol로 추정됨)가 채워된 둥근 바닥 플라스크에 1,4-디옥산 (4 mL) 및 물 (16 mL)에 이어서 K2CO3 (1.17 g, 8.49 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 혼합물에 (9H-플루오렌-9-일)메틸 카르보노클로리데이트 (549 mg, 2.12 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 18시간 동안 교반하면서 실온으로 가온되도록 하였다. 혼합물을 물 (10 mL)로 희석한 다음, 디에틸 에테르 (2 x 15 mL)로 세척하였다. 수성 상을 수성 HCl (1M)을 사용하여 pH 2-3으로 산성화시킨 다음, CH2Cl2 (3 x 20ml)로 추출하였다. 합한 CH2Cl2 용액을 MgSO4 상에서 건조시키고; 여과한 다음; 진공 하에 농축시켜 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(m-톨릴옥시)프로판산을 백색 고체, 430 mg (2 단계에 걸쳐 31%)으로서 수득하였다.
단계 5:
딘-스타크 셋업을 사용하여, 파라포름알데히드 (340 mg, 11.34 mmol), (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(m-톨릴옥시)프로판산 (789 mg, 1.890 mmol), 및 p-톨루엔술폰산 (32.5 mg, 0.189 mmol)을 함유하는 혼합물을 톨루엔 (15 mL) 중에서 2시간 동안 환류하였다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨 용액에 이어서 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 생성물 (S)-(9H-플루오렌-9-일)메틸 5-옥소-4-((m-톨릴옥시) 메틸)옥사졸리딘-3-카르복실레이트 (812 mg, 1.891 mmol, 100% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. ESI-MS(+) m/z = 430 (M+H).
단계 6:
(S)-(9H-플루오렌-9-일)메틸 5-옥소-4-((m-톨릴옥시)메틸)옥사졸리딘-3-카르복실레이트 (825 mg, 1.921 mmol)를 CHCl3 (10 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸실란 (1.534 ml, 9.60 mmol)에 이어서 TFA (10 ml, 130 mmol)를 첨가하고, N2의 정압 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 점착성 오일이 남을 때까지 회전증발기 상에서 증발시켰다. 오일을 EtOAc 중에 용해시킨 다음, 포화 중탄산나트륨 (10ml x2)으로 추출하였다. 탈보호된 생성물인 것으로 보이는 중간 층이 수성 층과 유기 층 사이에 존재하였다. 수성 층 및 중간 층을 분리하고, 수집한 다음, pH 4-5일 때까지 산성화시켰다. 용액은 산성이 되면 침전물을 형성하였다. EtOAc (200ml)를 사용하여 침전물을 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 수집하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 순수한 생성물 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(메틸)아미노)-3-(m-톨릴옥시)프로판산 (506 mg, 1.173 mmol, 61.0% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI-MS(+) m/z = 454 (M+Na).
실시예 5001의 제조
Figure pct00729
실시예 5001을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 32.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 933.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.93분; ESI-MS(+) m/z 933.8 (M+2H).
실시예 5002의 제조
Figure pct00730
실시예 5002를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 4-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 926.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 617.6 (M+2H).
실시예 5003의 제조
Figure pct00731
실시예 5003을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 40분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 942.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 942.7 (M+2H).
실시예 5004의 제조
Figure pct00732
실시예 5004를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 40.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 940.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 941.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 940.9398 (M+2H); 실측치: 940.9378 (M+2H).
실시예 5005의 제조
Figure pct00733
실시예 5005를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(m-톨릴옥시)프로판산을 제4 아미노산 커플링 단계에 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 971.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.94분; ESI-MS(+) m/z 971.2 (M+2H).
실시예 5006의 제조
Figure pct00734
실시예 5006을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 42.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 898.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.97분; ESI-MS(+) m/z 898.9 (M+2H).
실시예 5007의 제조
Figure pct00735
실시예 5007을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 44.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.97분; ESI-MS(+) m/z 892.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.02분; ESI-MS(+) m/z 892.0 (M+2H).
실시예 5008의 제조
Figure pct00736
실시예 5008을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 15분에 걸쳐 70-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 30.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z 933.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.00분; ESI-MS(+) m/z 933.4 (M+2H).
실시예 5009의 제조
Figure pct00737
실시예 5009를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 911.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.69분; ESI-MS(+) m/z 911.9 (M+2H).
실시예 5010의 제조
Figure pct00738
실시예 5010을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 31.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 920.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 919.8 (M+2H).
실시예 5011의 제조
Figure pct00739
실시예 5011을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 911.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.45분; ESI-MS(+) m/z 911.4 (M+2H).
실시예 5012의 제조
Figure pct00740
실시예 5012를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 935.8 (M+2H).
실시예 5013의 제조
Figure pct00741
실시예 5013을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.79분; ESI-MS(+) m/z 916.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.94분; ESI-MS(+) m/z 917.5 (M+2H).
실시예 5014의 제조
Figure pct00742
실시예 5014를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 905.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 905.5 (M+2H).
실시예 5015의 제조
Figure pct00743
실시예 5015를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z 876.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.99분; ESI-MS(+) m/z 877.0 (M+2H).
실시예 5016의 제조
Figure pct00744
실시예 5016을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.91분; ESI-MS(+) m/z 898.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.98분; ESI-MS(+) m/z 898.5 (M+2H).
실시예 5017의 제조
Figure pct00745
실시예 5017을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.97분; ESI-MS(+) m/z 905.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.01분; ESI-MS(+) m/z 905.3 (M+2H).
실시예 5018의 제조
Figure pct00746
실시예 5018을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.95분; ESI-MS(+) m/z 904.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.00분; ESI-MS(+) m/z 905.0 (M+2H).
실시예 5019의 제조
Figure pct00747
실시예 5019를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 36.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 912.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.92분; ESI-MS(+) m/z 913.0 (M+2H).
실시예 5020의 제조
Figure pct00748
실시예 5020을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 36.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.88분; ESI-MS(+) m/z 919.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.90분; ESI-MS(+) m/z 920.0 (M+2H).
실시예 5021의 제조
Figure pct00749
실시예 5021을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.14분; ESI-MS(+) m/z 899.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.93분; ESI-MS(+) m/z 899.8 (M+2H).
실시예 5022의 제조
Figure pct00750
실시예 5022를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 950.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(+) m/z 950.2 (M+2H).
실시예 5023의 제조
Figure pct00751
실시예 5023을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 957.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(+) m/z 957.2 (M+2H).
실시예 5024의 제조
Figure pct00752
실시예 5024를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 27.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.07분; ESI-MS(+) m/z 963.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.61분; ESI-MS(+) m/z 963.3 (M+2H).
실시예 5025의 제조
Figure pct00753
실시예 5025를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 36.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(+) m/z 957.2 (M+2H).
실시예 5026의 제조
Figure pct00754
실시예 5026을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 20-mM 아세트산암모늄 함유 물 ; 이동상 B: 20-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올:물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 896.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 895.9 (M+2H).
실시예 5027의 제조
Figure pct00755
실시예 5027을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 898.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.57분; ESI-MS(+) m/z 898.5 (M+2H).
실시예 5028의 제조
Figure pct00756
실시예 5028을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 37.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 941.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.52분; ESI-MS(+) m/z 941.9 (M+2H).
실시예 5029의 제조
Figure pct00757
실시예 5029를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 935.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.54분; ESI-MS(+) m/z 935.9 (M+2H).
실시예 5030의 제조
Figure pct00758
실시예 5030을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 40분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 905.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.89분; ESI-MS(+) m/z 905.5 (M+2H).
실시예 5031의 제조
Figure pct00759
실시예 5031을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 935.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.57분; ESI-MS(+) m/z 935.5 (M+2H).
실시예 5032의 제조
Figure pct00760
실시예 5032를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 27.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 934.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(-) m/z 932.0 (M-2H).
실시예 5033의 제조
Figure pct00761
실시예 5033을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.93분; ESI-MS(+) m/z 948.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.97분; ESI-MS(+) m/z 949.1 (M+2H).
실시예 5034의 제조
Figure pct00762
실시예 5034를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 32.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 943.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.50분; ESI-MS(+) m/z 943.1 (M+2H).
실시예 5035의 제조
Figure pct00763
실시예 5035를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 919.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.61분; ESI-MS(+) m/z 919.5 (M+2H).
실시예 5036의 제조
Figure pct00764
실시예 5036을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 927.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 927.6 (M+2H).
실시예 5037의 제조
Figure pct00765
실시예 5037을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 928.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(+) m/z 927.9 (M+2H).
실시예 5038의 제조
Figure pct00766
실시예 5038을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 927.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 927.0 (M+2H).
실시예 5039의 제조
Figure pct00767
실시예 5039를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 928.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z 928.0 (M+2H).
실시예 5040의 제조
Figure pct00768
실시예 5040을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 901.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 901.7 (M+2H).
실시예 5041의 제조
Figure pct00769
실시예 5041을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 935.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(+) m/z 935.5 (M+2H).
실시예 5042의 제조
Figure pct00770
실시예 5042를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 910.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(+) m/z 910.1 (M+2H).
실시예 5043의 제조
Figure pct00771
실시예 5043을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 32.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 942.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.50분; ESI-MS(+) m/z 942.1 (M+2H).
실시예 5044의 제조
Figure pct00772
실시예 5044를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 916.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.52분; ESI-MS(+) m/z 916.4 (M+2H).
실시예 5045의 제조
Figure pct00773
실시예 5045를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 55-95% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 936.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(+) m/z 936.4 (M+2H).
실시예 5046의 제조
Figure pct00774
실시예 5046을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 20-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 942.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.50분; ESI-MS(+) m/z 942.9 (M+2H).
실시예 5047의 제조
Figure pct00775
실시예 5047을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 30-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 921.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 921.4 (M+2H).
실시예 5048의 제조
Figure pct00776
실시예 5048을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 895.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 895.7 (M+2H).
실시예 5049의 제조
Figure pct00777
실시예 5049를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 895.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(+) m/z 896.2 (M+2H).
실시예 5050의 제조
Figure pct00778
실시예 5050을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 40분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 921.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 921.8 (M+2H).
실시예 5051의 제조
Figure pct00779
실시예 5051을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.93분; ESI-MS(+) m/z 957.5 (M+2H).
실시예 5052의 제조
Figure pct00780
실시예 5052를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 978.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(-) m/z 977.3 (M-2H).
실시예 5053의 제조
Figure pct00781
실시예 5053을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 936.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.73분; ESI-MS(+) m/z 936.5 (M+2H).
실시예 5054의 제조
Figure pct00782
실시예 5054를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 944.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.72분; ESI-MS(+) m/z 944.4 (M+2H).
실시예 5055의 제조
Figure pct00783
실시예 5055를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 950.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.69분; ESI-MS(-) m/z 949.2 (M-2H).
실시예 5056의 제조
Figure pct00784
실시예 5056을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 950.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 950.9 (M+2H).
실시예 5057의 제조
Figure pct00785
실시예 5057을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 5-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 944.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 944.8 (M+2H).
실시예 5058의 제조
Figure pct00786
실시예 5058을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
실시예 5059의 제조
Figure pct00787
실시예 5059를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 902.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z 902.3 (M+2H).
실시예 5060의 제조
Figure pct00788
실시예 5060을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 37.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 910.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 910.2 (M+2H).
실시예 5061의 제조
Figure pct00789
실시예 5061을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 903.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(-) m/z 901.6 (M-2H).
실시예 5062의 제조
Figure pct00790
실시예 5062를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 929.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(-) m/z 926.8 (M-2H).
실시예 5063의 제조
Figure pct00791
실시예 5063을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 37.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 895.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(-) m/z 893.8 (M-2H).
실시예 5064의 제조
Figure pct00792
실시예 5064를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 935.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.57분; ESI-MS(-) m/z 933.2 (M-2H).
실시예 5065의 제조
Figure pct00793
실시예 5065를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 949.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.75분; ESI-MS(+) m/z 949.3 (M+2H).
실시예 5066의 제조
Figure pct00794
실시예 5066을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 33.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 949.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.72분; ESI-MS(+) m/z 949.8 (M+2H).
실시예 5067의 제조
Figure pct00795
실시예 5067을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 923.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.74분; ESI-MS(+) m/z 923.7 (M+2H).
실시예 5068의 제조
Figure pct00796
실시예 5068을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 하기 변형을 사용하여 제조하였다: "고리화 방법 B"를 "고리화 방법 A" 대신에 사용하고, 규모는 0.600 mmol이었으며, 따라서 모든 시약 분량을 조정하였고, 수지는 수지 상에 사전-로딩된 Fmoc-Gly를 갖는 2-클로로트리틸 수지였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 5-분 유지. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 956.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z 956.8 (M+2H).
실시예 5069의 제조
Figure pct00797
실시예 5069를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하고, 0.300 mmol 규모 상에서 수행하였으며, 그에 따라 모든 시약 분량을 조정하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 40분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 112.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 971.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 971.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 970.4798 (M+2H); 실측치: 970.4764 (M+2H).
실시예 5070의 제조
Figure pct00798
실시예 5070을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 909.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z 909.1 (M+2H).
실시예 5071의 제조
Figure pct00799
실시예 5071을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 917.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.72분; ESI-MS(+) m/z 917.2 (M+2H).
실시예 5072의 제조
Figure pct00800
실시예 5072를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 915.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.72분; ESI-MS(+) m/z 915.1 (M+2H).
실시예 5073의 제조
Figure pct00801
실시예 5073을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 915.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.73분; ESI-MS(+) m/z 915.9 (M+2H).
실시예 5074의 제조
Figure pct00802
실시예 5074를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 924.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.76분; ESI-MS(+) m/z 923.8 (M+2H).
실시예 5075의 제조
Figure pct00803
실시예 5075를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.60분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.74분; ESI-MS(+) m/z 941.8 (M+2H); ESI-MS(-) m/z 940.3 (M-2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 941.4589 (M+2H); 실측치: 941.4568 (M+2H).
실시예 5076의 제조
Figure pct00804
실시예 5076을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 949.1 (M+2H); ESI-MS(-) m/z 947.7 (M-2H).
실시예 5077의 제조
Figure pct00805
실시예 5077을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.76분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.90분; ESI-MS(-) m/z 960.3 (M-2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 961.4745 (M+2H); 실측치: 961.4715 (M+2H).
실시예 5078의 제조
Figure pct00806
실시예 5078을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 927.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 927.4432 (M+2H); 실측치: 927.4402 (M+2H).
실시예 5079의 제조
Figure pct00807
실시예 5079를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분.
분석 조건 C: 체류 시간 = 1.024분; ESI-MS(+) m/z 935.35 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 933.4614 (M+2H); 실측치: 933.4583 (M+2H).
실시예 5080의 제조
Figure pct00808
실시예 5080을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.64분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 941.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 940.4692 (M+2H); 실측치: 940.4675 (M+2H).
실시예 5081의 제조
Figure pct00809
실시예 5081을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.56분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.71분.
분석 조건 C: 체류 시간 = 0.997분; ESI-MS(+) m/z 941.5 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 940.4511 (M+2H); 실측치: 940.4484 (M+2H).
실시예 5082의 제조
Figure pct00810
실시예 5082를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.71분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z 928.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 928.4818 (M+2H); 실측치: 928.4794 (M+2H).
실시예 5083의 제조
Figure pct00811
실시예 5083을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.74분.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 915.4740 (M+2H) 실측치: 915.4709 (M+2H).
실시예 5084의 제조
Figure pct00812
실시예 5084를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.71분; ESI-MS(-) m/z 1855.3 (M-H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 928.4511 (M+2H); 실측치: 928.4483 (M+2H).
실시예 5085의 제조
Figure pct00813
실시예 5085를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 30.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 939.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 939.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 938.4585 (M+2H); 실측치: 938.4562 (M+2H).
실시예 5086의 제조
Figure pct00814
실시예 5086을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 44.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 963.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.53분; ESI-MS(-) m/z 961.8 (M-2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 962.9856 (M+2H); 실측치: 962.9827 (M+2H).
실시예 5087의 제조
Figure pct00815
실시예 5087을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 28.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 914.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(-) m/z 912.7 (M-2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 913.9378 (M+2H); 실측치: 913.9353 (M+2H).
실시예 5088의 제조
Figure pct00816
실시예 5088을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 30.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 939.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 939.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 938.4585 (M+2H); 실측치: 938.4562 (M+2H).
실시예 5089의 제조
Figure pct00817
실시예 5089를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 962.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.70분; ESI-MS(+) m/z 962.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 962.0085 (M+2H); 실측치: 962.0052 (M+2H).
실시예 5090의 제조
Figure pct00818
실시예 5090을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 5-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 942.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.80분; ESI-MS(+) m/z 942.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 941.4771 (M+2H); 실측치: 941.4739 (M+2H).
실시예 5091의 제조
Figure pct00819
실시예 5091을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 934.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 934.4692 (M+2H); 실측치: 934.4662 (M+2H).
실시예 5092의 제조
Figure pct00820
실시예 5092를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 28.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 957.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 956.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 955.9778 (M+2H); 실측치: 955.9749 (M+2H).
실시예 5093의 제조
Figure pct00821
실시예 5093을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 29.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 929.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 929.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 928.9494 (M+2H); 실측치: 928.4476 (M+2H).
실시예 5094의 제조
Figure pct00822
실시예 5094를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 949.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.61분; ESI-MS(+) m/z 949.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 948.4905 (M+2H); 실측치: 948.4872 (M+2H).
실시예 5095의 제조
Figure pct00823
실시예 5095를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 963.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.73분; ESI-MS(+) m/z 963.4 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 962.5005 (M+2H); 실측치: 962.4969 (M+2H).
실시예 5096의 제조
Figure pct00824
실시예 5096을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 48.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 964.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.67분; ESI-MS(+) m/z 964.4 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 963.4720 (M+2H); 실측치: 963.4685 (M+2H).
실시예 5097의 제조
Figure pct00825
실시예 5097을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 31.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 928.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.70분; ESI-MS(+) m/z 928.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 927.9534 (M+2H); 실측치: 927.9498 (M+2H).
실시예 5098의 제조
Figure pct00826
실시예 5098을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 31.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 950.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 950.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 949.9483 (M+2H); 실측치: 949.9460 (M+2H).
실시예 5099의 제조
Figure pct00827
실시예 5099를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 5-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.424분; ESI-MS(+) m/z 971.00 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 970.4616 (M+2H); 실측치: 970.4595 (M+2H).
실시예 5100의 제조
Figure pct00828
실시예 5100을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 5-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 5-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.67분; ESI-MS(+) m/z 971.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 969.9878 (M+2H); 실측치: 969.9850 (M+2H).
실시예 5101의 제조
Figure pct00829
실시예 5101을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 929.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.67분; ESI-MS(+) m/z 929.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 928.4329 (M+2H); 실측치: 928.4301 (M+2H).
실시예 5102의 제조
Figure pct00830
실시예 5102를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 29.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 964.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.53분; ESI-MS(+) m/z 964.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 963.4776 (M+2H); 실측치: 963.4740 (M+2H).
실시예 5103의 제조
Figure pct00831
실시예 5103을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.35분; ESI-MS(+) m/z 942.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.53분; ESI-MS(+) m/z 943.2 (M+2H).
실시예 5104의 제조
Figure pct00832
실시예 5104를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 935.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(+) m/z 935.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 934.9669 (M+2H); 실측치: 934.9637 (M+2H).
실시예 5105의 제조
Figure pct00833
실시예 5105를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 956.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 957.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 956.4698 (M+2H); 실측치: 956.4670 (M+2H).
실시예 5106의 제조
Figure pct00834
실시예 5106을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 970.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.99분; ESI-MS(+) m/z 970.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 969.9696 (M+2H); 실측치: 969.9662 (M+2H).
실시예 5107의 제조
Figure pct00835
실시예 5107을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 941.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.86분; ESI-MS(+) m/z 941.4 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 940.9794 (M+2H); 실측치: 940.9762 (M+2H).
실시예 5108의 제조
Figure pct00836
실시예 5108을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 32.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 922.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 922.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 921.9352 (M+2H); 실측치: 921.9318 (M+2H).
실시예 5109의 제조
Figure pct00837
실시예 5109를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 927.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.80분; ESI-MS(+) m/z 927.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 926.4536 (M+2H); 실측치: 926.4504 (M+2H).
실시예 5110의 제조
Figure pct00838
실시예 5110을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 5-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 984.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z 984.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 984.0091 (M+2H); 실측치: 984.0061 (M+2H).
실시예 5111의 제조
Figure pct00839
실시예 5111을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 33.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.28분; ESI-MS(+) m/z 943.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.49분; ESI-MS(+) m/z 943.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 942.9405 (M+2H); 실측치: 942.9380 (M+2H).
실시예 5112의 제조
Figure pct00840
실시예 5112를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 964.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z 964.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 963.4720 (M+2H); 실측치: 963.4688 (M+2H).
실시예 5113의 제조
Figure pct00841
실시예 5113을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 964.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 964.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 963.4476 (M+2H); 실측치: 963.4742 (M+2H).
실시예 5114의 제조
Figure pct00842
실시예 5114를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 943.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 943.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 942.4461 (M+2H); 실측치: 942.4485 (M+2H).
실시예 5115의 제조
Figure pct00843
실시예 5115를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-95% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 916.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.82분; ESI-MS(+) m/z 917.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 916.4454 (M+2H); 실측치: 916.4431 (M+2H).
실시예 5116의 제조
Figure pct00844
실시예 5116을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 881.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(-) m/z 880.5 (M-2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 882.4267 (M+2H); 실측치: 882.4241 (M+2H).
실시예 5117의 제조
Figure pct00845
실시예 5117을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 883.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(-) m/z 881.8 (M-2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 883.3982 (M+2H); 실측치: 883.3956 (M+2H).
실시예 5118의 제조
Figure pct00846
실시예 5118을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 896.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.67분; ESI-MS(-) m/z 894.2 (M-2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 895.9322 (M+2H); 실측치: 895.9297 (M+2H).
실시예 5119의 제조
Figure pct00847
실시예 5119를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 897.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 897.6 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 896.9193 (M+2H); 실측치: 896.9218 (M+2H).
실시예 5120의 제조
Figure pct00848
실시예 5120을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 950.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(+) m/z 950.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 949.4563 (M+2H); 실측치: 949.4537 (M+2H).
실시예 5121의 제조
Figure pct00849
실시예 5121을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 929.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.72분; ESI-MS(+) m/z 928.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 928.4329 (M+2H); 실측치: 928.4301 (M+2H).
실시예 5122의 제조
Figure pct00850
실시예 5122를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 906.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.85분; ESI-MS(+) m/z 906.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 905.9403 (M+2H); 실측치: 905.9375 (M+2H).
실시예 5123의 제조
Figure pct00851
실시예 5123을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 29.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 950.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 950.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 949.4620 (M+2H); 실측치: 949.4589 (M+2H).
실시예 5124의 제조
Figure pct00852
실시예 5124를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 970.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 971.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 970.4854 (M+2H); 실측치: 970.4820 (M+2H).
실시예 5125의 제조
Figure pct00853
실시예 5125를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 40.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 914.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.69분; ESI-MS(+) m/z 914.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 913.4276 (M+2H); 실측치: 913.4242 (M+2H).
실시예 5126의 제조
Figure pct00854
실시예 5126을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 950.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.53분; ESI-MS(+) m/z 950.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 949.4381 (M+2H); 실측치: 949.4355 (M+2H).
실시예 5127의 제조
Figure pct00855
실시예 5127을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 902.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.82분; ESI-MS(+) m/z 902.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 901.4402 (M+2H); 실측치: 901.4375 (M+2H).
실시예 5128의 제조
Figure pct00856
실시예 5128을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 904.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.73분; ESI-MS(+) m/z 904.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 903.4194 (M+2H); 실측치: 903.4167 (M+2H).
실시예 5129의 제조
Figure pct00857
실시예 5129를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 917.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(+) m/z 917.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 916.4511 (M+2H); 실측치: 916.4482 (M+2H).
실시예 5130의 제조
Figure pct00858
실시예 5130을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 932.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 932.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 931.4563 (M+2H); 실측치: 931.4534 (M+2H).
실시예 5131의 제조
Figure pct00859
실시예 5131을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 37.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 931.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.57분; ESI-MS(+) m/z 931.6 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 930.9643 (M+2H); 실측치: 930.9617 (M+2H).
실시예 5132의 제조
Figure pct00860
실시예 5132를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 44.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 950.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.52분; ESI-MS(+) m/z 950.4 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 949.4620 (M+2H); 실측치: 949.4587 (M+2H).
실시예 5133의 제조
Figure pct00861
실시예 5133을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 32.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 922.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 922.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 921.9352 (M+2H); 실측치: 921.9318 (M+2H).
실시예 5134의 제조
Figure pct00862
실시예 5134를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 943.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.54분; ESI-MS(+) m/z 943.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 942.4541 (M+2H); 실측치: 942.4513 (M+2H).
실시예 5135의 제조
Figure pct00863
실시예 5135를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 869.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 870.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 869.4007 (M+2H); 실측치: 869.3986 (M+2H).
실시예 5137의 제조
Figure pct00864
실시예 5137을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하고, 0.300 mmol 규모 상에서 제조하였으며, 여기서 시약 양을 적절하게 규모화하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 102.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 964.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z 964.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 963.4720 (M+2H); 실측치: 963.4687 (M+2H).
실시예 5138의 제조
Figure pct00865
실시예 5138을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하고, 0.300 mmol 규모 상에서 제조하였으며, 여기서 시약 양을 그에 따라 규모화하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 57.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 971.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z 971.2 (M+2H).
실시예 5139의 제조
Figure pct00866
실시예 5139를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하고, 0.300 mmol 규모 상에서 제조하였으며, 여기서 시약 양을 그에 따라 규모화하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 27.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 950.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 950.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 949.4563 (M+2H); 실측치: 949.4541 (M+2H).
실시예 5140의 제조
Figure pct00867
실시예 5140을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 36.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z 901.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.51분; ESI-MS(+) m/z 902.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 901.4822 (M+2H); 실측치: 901.4800 (M+2H).
실시예 5141의 제조
Figure pct00868
실시예 5141을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 33.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 935.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(+) m/z 935.5 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 934.9487 (M+2H); 실측치: 934.9471 (M+2H).
실시예 5142의 제조
Figure pct00869
실시예 5142를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.31분; ESI-MS(+) m/z 935.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.49분; ESI-MS(+) m/z 935.6 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 934.9487 (M+2H); 실측치: 934.9467 (M+2H).
실시예 5143의 제조
Figure pct00870
실시예 5143을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z 935.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.53분; ESI-MS(+) m/z 935.4 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 934.9487 (M+2H); 실측치: 934.9464 (M+2H).
실시예 5144의 제조
Figure pct00871
실시예 5144를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 952.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.57분; ESI-MS(+) m/z 952.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 951.9409 (M+2H); 실측치: 951.9385 (M+2H).
실시예 5145의 제조
Figure pct00872
실시예 5145를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 935.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(-) m/z 934.2 (M-2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 935.4407 (M+2H); 실측치: 935.4385 (M+2H).
실시예 5146의 제조
Figure pct00873
실시예 5146을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 0.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.33분; ESI-MS(+) m/z 935.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.53분; ESI-MS(-) m/z 933.2 (M-2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 934.9487 (M+2H); 실측치: 934.9464 (M+2H).
실시예 5147의 제조
Figure pct00874
실시예 5147을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 33.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 952.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 952.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 951.9409 (M+2H); 실측치: 951.9377 (M+2H).
실시예 6001의 제조
Figure pct00875
실시예 6001을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 5.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.778분; ESI-MS(+) m/z 955.25 (M+2H).
실시예 6002의 제조
Figure pct00876
실시예 6002를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 978.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 977.8 (M+2H).
실시예 6003의 제조
Figure pct00877
실시예 6003을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 32.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 948.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 948.1 (M+2H).
실시예 6004의 제조
Figure pct00878
실시예 6004를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 33.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 934.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 934.0 (M+2H).
실시예 6005의 제조
Figure pct00879
실시예 6005를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 37.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 920.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.82분; ESI-MS(+) m/z 920.5 (M+2H).
실시예 6006의 제조
Figure pct00880
실시예 6006을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 934.8 (M+2H).
실시예 6007의 제조
Figure pct00881
실시예 6007을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 919.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.76분; ESI-MS(+) m/z 919.4 (M+2H).
실시예 6008의 제조
Figure pct00882
실시예 6008을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.93분; ESI-MS(+) m/z 938.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.99분; ESI-MS(+) m/z 938.6 (M+2H).
실시예 6009의 제조
Figure pct00883
실시예 6009를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 963.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.97분; ESI-MS(+) m/z 963.0 (M+2H).
실시예 6010의 제조
Figure pct00884
실시예 6010을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 913.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 913.4 (M+2H).
실시예 6011의 제조
Figure pct00885
실시예 6011을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 926.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.87분; ESI-MS(+) m/z 926.5 (M+2H).
실시예 6012의 제조
Figure pct00886
실시예 6012를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 937.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.90분; ESI-MS(+) m/z 937.4 (M+2H).
실시예 6013의 제조
Figure pct00887
실시예 6013을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.96분; ESI-MS(+) m/z 258.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.08분; ESI-MS(-) m/z 956.5 (M-2H).
실시예 6014의 제조
Figure pct00888
실시예 6014를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 55-95% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z 951.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.85분; ESI-MS(+) m/z 951.4 (M+2H).
실시예 6015의 제조
Figure pct00889
실시예 6015를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 937.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.75분; ESI-MS(+) m/z 937.5 (M+2H).
실시예 6016의 제조
Figure pct00890
실시예 6016을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.97분; ESI-MS(+) m/z 958.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.03분; ESI-MS(+) m/z 958.4 (M+2H).
실시예 6017의 제조
Figure pct00891
실시예 6017을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 984.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(-) m/z 983.1 (M-2H).
실시예 6018의 제조
Figure pct00892
실시예 6018을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 976.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z 976.7 (M+2H).
실시예 6019의 제조
Figure pct00893
실시예 6019를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 60-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 990.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 991.2 (M+2H).
실시예 6020의 제조
Figure pct00894
실시예 6020을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 32.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 1004.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 1004.6 (M+2H).
실시예 6021의 제조
Figure pct00895
실시예 6021을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 28.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 929.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 930.4 (M+2H).
실시예 6022의 제조
Figure pct00896
실시예 6022를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 55-95% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 960.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 960.9 (M+2H).
실시예 6023의 제조
Figure pct00897
실시예 6023을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.61분; ESI-MS(+) m/z 946.8 (M+2H).
실시예 6024의 제조
Figure pct00898
실시예 6024를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 913.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.61분; ESI-MS(-) m/z 911.9 (M-2H).
실시예 6025의 제조
Figure pct00899
실시예 6025를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 934.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 934.4 (M+2H).
실시예 6026의 제조
Figure pct00900
실시예 6026을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(-) m/z 940.9 (M-2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(-) m/z 940.7 (M-2H).
실시예 6027의 제조
Figure pct00901
실시예 6027을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 941.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.72분; ESI-MS(+) m/z 941.3 (M+2H).
실시예 6028의 제조
Figure pct00902
실시예 6028을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 939.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.73분; ESI-MS(-) m/z 937.8 (M-2H).
실시예 6029의 제조
Figure pct00903
실시예 6029를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(메틸)아미노)-3-(m-톨릴옥시) 프로판산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 947.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.82분; ESI-MS(+) m/z 947.8 (M+2H).
실시예 6030의 제조
Figure pct00904
실시예 6030을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(메틸)아미노)-3-(m-톨릴옥시) 프로판산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 942.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 942.7 (M+2H).
실시예 6031의 제조
Figure pct00905
실시예 6031을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(메틸)아미노)-3-(m-톨릴옥시) 프로판산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 942.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.70분; ESI-MS(+) m/z 943.2 (M+2H).
실시예 6032의 제조
Figure pct00906
실시예 6032를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 937.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.57분; ESI-MS(+) m/z 936.9 (M+2H).
실시예 6033의 제조
Figure pct00907
실시예 6033을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 944.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.53분; ESI-MS(+) m/z 944.4 (M+2H).
실시예 6034의 제조
Figure pct00908
실시예 6034를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 30-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 943.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(-) m/z 941.8 (M-2H).
실시예 6035의 제조
Figure pct00909
실시예 6035를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)([13C]메틸)아미노)프로판산 및 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(([13C]메틸)아미노)헥산산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 958.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(-) m/z 955.7 (M-2H).
실시예 6036의 제조
Figure pct00910
실시예 6036을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(4-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)옥시)-3-브로모페닐)프로판산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 974.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 973.6 (M+2H).
실시예 6037의 제조
Figure pct00911
실시예 6037을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(([13C]메틸)아미노)헥산산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 957.4 (M+2H).
실시예 6038의 제조
Figure pct00912
실시예 6038을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)(([13C]메틸)아미노)헥산산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 957.4 (M+2H).
실시예 6039의 제조
Figure pct00913
실시예 6039를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)([13C]메틸)아미노)프로판산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
실시예 6040의 제조
Figure pct00914
실시예 6040을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.64분.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.75분.
실시예 6041의 제조
Figure pct00915
실시예 6041을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 922.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.96분; ESI-MS(+) m/z 922.9 (M+2H).
실시예 6042의 제조
Figure pct00916
실시예 6042를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (2S,5S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-5-히드록시피페리딘-2-카르복실산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 922.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.78분; ESI-MS(+) m/z 922.8 (M+2H).
실시예 6043의 제조
Figure pct00917
실시예 6043을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(4-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)옥시)-3-브로모페닐)프로판산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 953.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.71분; ESI-MS(-) m/z 950.6 (M-2H).
실시예 6044의 제조
Figure pct00918
실시예 6044를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(4-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)옥시)-3-브로모페닐)프로판산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 958.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.50분; ESI-MS(-) m/z 957.7 (M-2H).
실시예 6045의 제조
Figure pct00919
실시예 6045를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(4-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)옥시)-3-브로모페닐)프로판산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 0-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 938.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.50분; ESI-MS(-) m/z 935.5 (M-2H).
실시예 6046의 제조
Figure pct00920
실시예 6046을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-1H-인돌-3-일)프로판산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 944.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.82분; ESI-MS(+) m/z 944.3 (M+2H).
실시예 6047의 제조
Figure pct00921
실시예 6047을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-(벤질옥시)피롤리딘-2-카르복실산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 29.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z 960.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.94분; ESI-MS(+) m/z 960.3 (M+2H).
실시예 6048의 제조
Figure pct00922
실시예 6048을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-((6-메톡시이소퀴놀린-1-일)옥시)피롤리딘-2-카르복실산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z 993.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.98분; ESI-MS(+) m/z 994.2 (M+2H).
실시예 6049의 제조
Figure pct00923
실시예 6049를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-((3-브로모퀴놀린-2-일)옥시)피롤리딘-2-카르복실산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.96분; ESI-MS(+) m/z 1018.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.07분; ESI-MS(+) m/z 1018.1 (M+2H).
실시예 6050의 제조
Figure pct00924
실시예 6050을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 아미노산 (S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-(tert-부톡시카르보닐)피페라진-2-카르복실산을 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-95% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 914.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z 915.0 (M+2H).
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-페닐-1H-인돌-3-일)프로판산의 제조
Figure pct00925
실온에서 N2 하에 150 mL 재사용가능한 밀봉된 둥근 바닥 플라스크에 들은 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산 (500 mg, 1.172 mmol) 및 테트라플루오로붕산은 (I) (456 mg, 2.345 mmol)의 혼합물에 DMF (3 mL) 중 아이오도벤젠 (478 mg, 2.345 mmol)의 혼합물에 이어서 DMF (3 mL) 중 트리플루오로아세트산 (0.090 mL, 1.172 mmol)의 혼합물에 이어서 DMF (4 mL) 중 디아세톡시팔라듐 (13.16 mg, 0.059 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 플라스크를 단단히 마개를 막고, 오일 조에서 17시간 동안 95℃에서 교반하였다. 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석하고, 여과하였다. 여과물을 증발시키고, 잔류물을 MeOH 중에 용해시키고, 시마즈-VP 정제용 역상 HPLC에 의해 하기 분리 방법을 이용하여 정제하였다: 용매 A = 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA, 용매 B = 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA, 출발 %B = 50, 최종 %B = 100, 구배 시간 = 10분, 정지 시간 = 12분, 유량 = 30 mL/분, 칼럼: 선파이어 정제용 C18 19 x 100 5μm, (220 nm에서 UV 검출). 체류 시간 = 8.513분에서의 합한 목적 분획을 증발시켜 생성물 (247 mg)의 회백색 고체를 수득하였다.
Figure pct00926
인돌 C2에 있는 페닐 고리의 위치는 페닐 양성자 H11/H15와 인돌 탄소 C2 사이의 C-H 긴-범위 상관관계의 관찰에 의해 제시되었다. 광회전 [α]20 D -9.83° (1.75 mg/mL, MeOH). LCMS(ES+) m/z = 503.1 (M+H), 체류 시간 = 2.250분. LCMS를 220 nm에서의 UV 검출기가 장착된 시마즈-VP 기기 및 워터스 마이크로매스®를 사용하여 수행하였다. HPLC 방법: 용매 A = 10% MeOH90% H2O0.1% TFA, 용매 B = 90% MeOH10%H2O0.1% TFA, 출발 %B = 0, 최종 %B = 100, 구배 시간 = 2분, 3분에서의 정지 시간, 유량 = 1 ml/분, 칼럼: 페노메넥스®-루나, 2.0 x 30mm, 3μm.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-플루오로페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산의 제조
Figure pct00927
실온에서 N2 하에 150 mL 재사용가능한 밀봉된 둥근 바닥 플라스크에 들은 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산 (1 g, 2.345 mmol) 및 테트라플루오로붕산은 (I) (0.913 g, 4.69 mmol)의 혼합물에 DMF (5 mL) 중 1-플루오로-4-아이오도벤젠 (1.041 g, 4.69 mmol)의 혼합물에 이어서 DMF (5 mL) 중 트리플루오로아세트산 (0.181 mL, 2.345 mmol)의 혼합물에 이어서 DMF (5 mL) 중 디아세톡시팔라듐 (0.026 g, 0.117 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 또 다른 DMF 5 mL를 반응 혼합물에 첨가하였다. 플라스크를 단단히 마개를 막고, 반응 혼합물을 오일 조에서 18시간 동안 95℃에서 교반하였다. 혼합물을 300 mL EtOAc로 희석하고, 여과하고, 여과물을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하였다. 유기 용액을 증발시켰다. 잔류물을 MeOH 중에 용해시키고, 시마즈-VP 정제용 역상 HPLC에 의해 하기 분리 방법을 이용하여 정제하였다: 용매 A = 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA, 용매 B = 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA, 출발 %B = 50, 최종 %B = 100, 구배 시간 = 10분, 정지 시간 = 12분, 유량 = 30 mL/분, 칼럼: 선파이어 정제용 C18 19 x 100 5μm, (220 nm에서 UV 검출). 체류 시간 = 8.679분에서의 합한 목적 분획을 증발시켜 생성물 (586.8mg)의 회백색 고체를 수득하였다.
Figure pct00928
[α]20 D -10.07° (1.35 mg/mL, 용매). LCMS(ES+) m/z = 521.0 (M+H), 체류 시간 = 2.262분. LCMS를 220 nm에서의 UV 검출기가 장착된 시마즈-VP 기기 및 워터스 마이크로매스®를 사용하여 수행하였다. HPLC 방법: 용매 A = 10% MeOH90% H2O0.1% TFA, 용매 B = 90% MeOH10%H2O0.1% TFA, 출발 %B = 0, 최종 %B = 100, 구배 시간 = 2분, 3분에서의 정지 시간, 유량 = 1 ml/분, 칼럼: 페노메넥스®-루나, 2.0 x 30mm, 3μm.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(3-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산의 제조
Figure pct00929
150 mL 밀봉된 둥근 바닥 플라스크에 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산 (1 g, 2.345 mmol), 테트라플루오로붕산은 (I) (0.913 g, 4.69 mmol), DMF (20mL), 3-아이오도아니솔 (1.098 g, 4.69 mmol), 2,2,2-트리플루오로아세트산 (0.181 mL, 2.345 mmol) 및 디아세톡시팔라듐 (0.026 g, 0.117 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 플러싱/탈기하였다. 플라스크를 단단히 마개를 막고, 혼합물을 18시간 동안 95℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(300mL)로 희석하고, 여과하고, 여과물을 염수 (2x100mL)로 세척하였다. 유기 용액을 증발시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (바이오타지® 실리카 겔 칼럼 25m, EtOAc/헥산 = 0에서 100%까지)에 의해 정제하여 생성물 (560mg, 42%)을 담갈색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00930
LCMS 체류 시간 = 1.862분, m/z = 533 (M+H), 95.0% 순도. LCMS 데이터를 하기 세트의 조건을 사용하여 시마즈 분석용 LC/마이크로매스® 플랫폼 LC (ESI+) 상에서 220nm에서 수득하였다: 페노메넥스® 루나 3μm C18, 2 x 50 mm 칼럼, 0-100%B (B = 90% HPLC 등급 아세토니트릴/ 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 물), (A = 90% HPLC 등급 물 / 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 아세토니트릴)의 구배 사용, 2분 내, 이어서 유량 1 mL/분에서 1분 유지.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산의 제조
Figure pct00931
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산 (1.12g, 85%)을 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(3-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산에 대해 기재된 절차를 사용하여 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산 및 1-아이오도-4-메톡시벤젠으로부터 수득하였다.
Figure pct00932
LCMS 체류 시간 = 1.810분, m/z = 533 (M+H), 97.3% 순도. LCMS 데이터를 하기 세트의 조건을 사용하여 시마즈 분석용 LC/마이크로매스® 플랫폼 LC (ESI+) 상에서 220nm에서 수득하였다: 페노메넥스® 루나 3μm C18, 2 x 50 mm 칼럼, 0-100%B (B = 90% HPLC 등급 아세토니트릴/ 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 물), (A = 90% HPLC 등급 물 / 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 아세토니트릴)의 구배 사용, 2분 내, 이어서 유량 1 mL/분에서 1분 유지.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-에톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산의 제조
Figure pct00933
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-에톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산 (1.11 g, 66%)을 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시) 카르보닐)아미노)-3-(2-(3-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산에 대해 기재된 절차를 사용하여 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산 및 1-아이오도-4-에톡시벤젠으로부터 수득하였다.
Figure pct00934
LCMS 체류 시간 = 1.898분, m/z 547 = (M+H), 98.2% 순도. LCMS 데이터를 하기 세트의 조건을 사용하여 시마즈 분석용 LC/마이크로매스® 플랫폼 LC (ESI+) 상에서 220nm에서 수득하였다: 페노메넥스® 루나 3μm C18, 2 x 50 mm 칼럼, 0-100%B (B = 90% HPLC 등급 아세토니트릴/ 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 물), (A = 90% HPLC 등급 물 / 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 아세토니트릴)의 구배 사용, 2분 내, 이어서 유량 1 mL/분에서 1분 유지.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-프로폭시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산의 제조
Figure pct00935
단계 1: 1-아이오도-4-프로폭시벤젠
DMF (30 mL) 중 4-아이오도페놀 (3 g, 13.64 mmol), 1-브로모프로판 (1.845 g, 15.00 mmol), 및 탄산나트륨 (7.54 g, 54.5 mmol)의 현탁액을 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (250mL)로 희석하고, EtOAc (3x75mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 0.5M NaOH (2x50mL), 및 물 (2X50mL)로 세척한 다음, MgSO4 상에서 건조시켰다. 용매를 제거하였다. 조 생성물 (3.11g)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00936
단계 2:
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-프로폭시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산 (830mg, 57%)을 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시) 카르보닐)아미노)-3-(2-(3-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산에 기재된 절차를 사용하여 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산 및 1-아이오도-4-프로폭시벤젠으로부터 수득하였다.
Figure pct00937
LCMS 체류 시간 = 1.952분, m/z = 561 (M+H), 99.1% 순도. LCMS 데이터를 하기 세트의 조건을 사용하여 시마즈 분석용 LC/마이크로매스® 플랫폼 LC (ESI+) 상에서 220nm에서 수득하였다: 페노메넥스® 루나 3μm C18, 2 x 50 mm 칼럼, 0-100%B (B = 90% HPLC 등급 아세토니트릴/ 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 물), (A = 90% HPLC 등급 물 / 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 아세토니트릴)의 구배 사용, 2분 내, 이어서 유량 1 mL/분에서 1분 유지.
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(3-프로폭시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산의 제조
Figure pct00938
단계 1:
아이오도-3-프로폭시벤젠 (3.53g, 98%)을 1-아이오도-4-프로폭시벤젠에 대해 기재된 절차를 사용하여 3-아이오도페놀 및 1-브로모프로판으로부터 수득하였다.
Figure pct00939
단계 2:
(S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(3-프로폭시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산 (1.25g, 83%)을 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시) 카르보닐)아미노)-3-(2-(3-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산에 대해 기재된 절차를 사용하여 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1H-인돌-3-일)프로판산 및 1-아이오도-3-프로폭시벤젠으로부터 수득하였다.
Figure pct00940
LCMS 체류 시간 = 1.972분, m/z = 561 (M+H), 99.0% 순도. LCMS 데이터를 하기 세트의 조건을 사용하여 시마즈 분석용 LC/마이크로매스® 플랫폼 LC (ESI+) 상에서 220nm에서 수득하였다: 페노메넥스® 루나 3μm C18, 2 x 50 mm 칼럼, 구배 0-100%B (B = 90% HPLC 등급 아세토니트릴/ 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 물), (A = 90% HPLC 등급 물 / 0.1% 트리플루오로아세트산/ 10% HPLC 등급 아세토니트릴), 2분 내, 이어서 유량 1 mL/분에서 1분 유지.
실시예 7001의 제조
Figure pct00941
실시예 7001을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-페닐-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z = 986.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z = 986.4 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 1969.9894, 실측치: 1969.9865 (M+H); 계산치: 985.4983, 실측치: 985.4964 (M+2H); 계산치: 657.3347, 실측치: 657.3327 (M+3H).
실시예 7002의 제조
Figure pct00942
실시예 7002를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-플루오로페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 55-95% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z = 977.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z = 977.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 976.9856, 실측치: 976.9838 (M+2H).
실시예 7003의 제조
Figure pct00943
실시예 7003을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(3-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z = 983.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z = 983.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 982.9956, 실측치: 982.9936 (M+2H).
실시예 7004의 제조
Figure pct00944
실시예 7004를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 7001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(3-프로폭시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.1mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z = 996.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.70분; ESI-MS(+) m/z = 997.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 997.0113, 실측치: 997.0088 (M+2H).
실시예 7005의 제조
Figure pct00945
실시예 7005를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-프로폭시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 31.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z = 996.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.74분; ESI-MS(+) m/z = 997.5 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 997.0113, 실측치: 997.0086 (M+2H).
실시예 7006의 제조
Figure pct00946
실시예 7006을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z = 983.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.74분; ESI-MS(+) m/z = 983.6 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 982.9956, 실측치: 982.9930 (M+2H).
실시예 7007의 제조
Figure pct00947
실시예 7007을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.7mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 990.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.69분; ESI-MS(+) m/z 990.6 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 990.0035, 실측치: 990.0008 (M+2H).
실시예 7008의 제조
Figure pct00948
실시예 7008을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.5mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z = 975.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z = 975.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 974.9982, 실측치: 974.9949 (M+2H).
실시예 7009의 제조
Figure pct00949
실시예 7009를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-에톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.9mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 990.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 990.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 990.0035, 실측치: 990.0014 (M+2H).
실시예 7010의 제조
Figure pct00950
실시예 7010을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-에톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.9mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z = 997.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z = 997.4 (M+2H).
실시예 7011의 제조
Figure pct00951
실시예 7011을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A". (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(2-(4-에톡시페닐)-1H-인돌-3-일)프로판산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.9mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 982.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.82분; ESI-MS(+) m/z 982.6 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 982.0060, 실측치: 982.0035 (M+2H).
실시예 7012의 제조
Figure pct00952
실시예 7012를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차". "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"를 사용하여 마지막 아미노산 커플링 단계로서 아크릴산으로 Tyr1의 아미노 말단을 캡핑하였다. 이어서, 수득한 수지 결합된 펩티드를 하기 기재된 바와 같은 "폐환 올레핀 복분해 (RCM) 반응"에 이어서 "전반적 탈보호 방법 A"로 처리하였다.
폐환 올레핀 복분해 (RCM) 반응: 수지 결합된 펩티드 (0.044mmol)를 마이크로웨이브 반응기용 20mL 원추형 바이알에 첨가하였다. 호베이다-그럽스 2 세대 촉매 ((1,3-비스-(2,4,6-트리메틸페닐)-2-이미다졸리디닐리덴) 디클로로(o-이소프로폭시페닐메틸렌)루테늄) (27.5mg, 0.033mmol) 및 1,2,-디클로로에탄(10mL)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 마이크로웨이브 반응기에서 1시간 동안 120℃에서 가열하였다. 반응이 수행된 후, 수지를 여과하고, DMF (2X5mL)에 이어서 DCM (3X5mL)으로 세척한 다음, 건조시켰다. 조 물질을 "전반적 탈보호 방법 A"를 사용하여 탈보호하였다.
조 생성물을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.9mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z = 938.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(+) m/z = 938.3 (M+2H).
실시예 7013의 제조
Figure pct00953
실시예 7013을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차". "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차"를 사용하여 마지막 아미노산 커플링 단계로서 아크릴산으로 Tyr1의 아미노 말단을 캡핑하였다. 이어서, 수득한 수지 결합된 펩티드를 하기 기재된 바와 같은 "폐환 올레핀 복분해 (RCM) 반응"에 이어서 "전반적 탈보호 방법 A"로 처리하였다.
폐환 올레핀 복분해 (RCM) 반응: 수지 결합된 펩티드 (0.262mmol)를 6 배치로 나누었다. 각각의 배치 (0.044mmol)를 마이크로웨이브 반응기용 20mL 원추형 바이알에 첨가하였다. 호베이다-그럽스 2 세대 촉매 (27.5mg, 0.033mmol) 및 1,2,-디클로로에탄(10mL)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 마이크로웨이브 반응기에서 1시간 동안 120℃에서 가열하였다. 반응이 수행된 후, 수지를 여과하고, DMF (2X5mL)에 이어서 DCM (3X5mL)으로 세척한 다음, 건조시켰다. 6 배치를 합하고, 조 물질을 "전반적 탈보호 방법 A"를 사용하여 탈보호하였다.
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.1mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z = 920.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.61분; ESI-MS(+) m/z = 920.9 (M+2H).
실시예 7014 내지 7064를 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차". 실시예 7014 내지 7064의 제조에 사용된 "전반적 탈보호 방법 A" 및 "고리화 방법 A"를 하기에 기재된 바와 같이 변형하였다. 전반적 탈보호 방법 A: "전반적 탈보호 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 링크 링커의 양에 의해 결정된다. "탈보호 용액"을 40 mL 유리 병에서 트리플루오로아세트산 (22 mL), 페놀 (1.325 g), 물 (1.25 mL) 및 트리이소프로필실란 (0.5 mL)을 합함으로써 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 4 mL 유리 바이알에 옮겼다. 바이알에 "탈보호 용액" (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 오비탈 진탕기 (2시간 동안 175RPM) 상에서 혼합하였다. 혼합물을 깔때기를 통해 여과하고, 고체를 추가의 "탈보호 용액" (1.0 mL)으로 세척하고, 40 mL 스크류 마개 바이알에 수집하였다. 합한 여과물에 Et2O (15 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 격렬히 혼합하였으며, 이 때 상당한 양의 백색 고체가 침전하였다. 혼합물을 3분 동안 2000 RPM에서 원심분리하고, 용액을 고체로부터 경사분리하고, 버렸다. 과정을 x3 반복한 다음, 고체를 벤치 상에 정치시키고 1-2시간 동안 공기 건조되도록 한 후에 조 펩티드를 회백색 고체로서 수득하였다. 고리화 방법 A: "고리화 방법 A"의 절차는 0.100 mmol 규모로 수행되는 실험을 기재한다. 조 펩티드 고체를 MeCN:수성 0.1M NH4OAc (15mL:15mL) 중에 용해시킨 다음, 용액을 수성 NaOH (1.0M)를 사용하여 pH = 9.0으로 조심스럽게 조정하였다. 바이알을 마개를 막고, 용액을 밤새 (~18시간) 175RPM로 오비탈 진탕기 상에서 혼합하였다. 반응 용액을 농축시킨 다음, 잔류물을 MeOH 중에 용해시켰다. 이 용액을 역상 HPLC 정제로 처리하여 목적 시클릭 펩티드를 수득하였다.
실시예 7014의 제조
Figure pct00954
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 33.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.87분; ESI-MS(+) m/z = 923.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z = 923.7 (M+2H).
실시예 7015의 제조
Figure pct00955
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 40.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z = 955.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.06분; ESI-MS(+) m/z = 954.4 (M+2H).
실시예 7016의 제조
Figure pct00956
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 40-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 42.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z = 949.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.96분; ESI-MS(+) m/z = 949.4 (M+2H).
실시예 7017의 제조
Figure pct00957
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 39.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.75분; ESI-MS(+) m/z = 955.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.94분; ESI-MS(+) m/z = 955.6 (M+2H).
실시예 7018의 제조
Figure pct00958
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z = 954.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.94분; ESI-MS(+) m/z = 954.8 (M+2H).
실시예 7019의 제조
Figure pct00959
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.6%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z = 931.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z = 931.7 (M+2H).
실시예 7020의 제조
Figure pct00960
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z = 910.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.78분; ESI-MS(+) m/z = 910.7 (M+2H).
실시예 7021의 제조
Figure pct00961
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 44.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z = 910.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.78분; ESI-MS(+) m/z = 910.7 (M+2H).
실시예 7022의 제조
Figure pct00962
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z = 898.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.82분; ESI-MS(+) m/z = 898.3 (M+2H).
실시예 7023의 제조
Figure pct00963
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 55-95% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 20-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물 ; 이동상 B: 20-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 40분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 80%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z = 916.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.92분; ESI-MS(+) m/z = 916.7 (M+2H).
실시예 7024의 제조
Figure pct00964
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 33.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z = 948.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(+) m/z = 948.9 (M+2H).
실시예 7025의 제조
Figure pct00965
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95.4%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z = 948.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.70분; ESI-MS(+) m/z = 948.9 (M+2H).
실시예 7026의 제조
Figure pct00966
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z = 961.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z = 961.7 (M+2H), 972.6 (M+H+Na).
실시예 7027의 제조
Figure pct00967
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 31.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z = 961.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z = 961.9 (M+2H).
실시예 7028의 제조
Figure pct00968
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z = 961.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z = 961.7 (M+2H).
실시예 7029의 제조
Figure pct00969
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 53.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.7%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z = 948.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z = 948.7 (M+2H).
실시예 7030의 제조
Figure pct00970
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97.8%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.05분; ESI-MS(+) m/z = 956.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.11분; ESI-MS(+) m/z = 956.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 955.9709, 실측치: 955.9667 (M+2H).
실시예 7031의 제조
Figure pct00971
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 91.4%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z = 952.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z = 952.1 (M+2H), 971.7 (M+MeCN+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 951.4614, 실측치: 951.4591 (M+2H).
실시예 7032의 제조
Figure pct00972
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 20-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올:물; 이동상 B: 20-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올:물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.8%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z = 951.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z = 951.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 951.4614, 실측치: 951.4587 (M+2H).
실시예 7033의 제조
Figure pct00973
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 20-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올:물; 이동상 B: 20-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올:물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98.5%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.05분; ESI-MS(+) m/z = 952.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.11분; ESI-MS(+) m/z = 951.5 (M+2H), 972.0 (M+MeCN+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 951.4614, 실측치: 951.4590 (M+2H).
실시예 7034의 제조
Figure pct00974
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 38.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(+) m/z = 955.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.02분; ESI-MS(+) m/z = 955.7 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 955.9709, 실측치: 955.9679 (M+2H).
실시예 7035의 제조
Figure pct00975
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 37.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.02분; ESI-MS(+) m/z = 928.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.04분; ESI-MS(+) m/z = 928.7 (M+2H), 940.6 (M+H+Na).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 928.9851, 실측치: 928.9822 (M+2H).
실시예 7036의 제조
Figure pct00976
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 36.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.21분; ESI-MS(+) m/z = 950.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.17분; ESI-MS(+) m/z = 950.5 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 950.0085, 실측치: 950.0054 (M+2H).
실시예 7037의 제조
Figure pct00977
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z = 934.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.76분; ESI-MS(+) m/z = 935.2 (M+2H), 945.7 (M+H +Na).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 934.4749, 실측치: 934.4719 (M+2H).
실시예 7038의 제조
Figure pct00978
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 40.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z = 934.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.76분; ESI-MS(+) m/z = 934.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 934.4749, 실측치: 934.4719 (M+2H).
실시예 7039의 제조
Figure pct00979
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z = 937.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.93분; ESI-MS(+) m/z = 937.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 936.9825, 실측치: 936.9799 (M+2H).
실시예 7040의 제조
Figure pct00980
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z = 951.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z = 951.7 (M+2H), 963.8 (M+H+Na).
실시예 7041의 제조
Figure pct00981
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z = 944.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.45분; ESI-MS(+) m/z = 944.1 (M+2H).
실시예 7042의 제조
Figure pct00982
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 5-40% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z = 937.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.84분; ESI-MS(+) m/z = 937.1 (M+2H).
실시예 7043의 제조
Figure pct00983
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 60-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.78분; ESI-MS(+) m/z = 940.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.01분; ESI-MS(+) m/z = 940.7 (M+2H).
실시예 7044의 제조
Figure pct00984
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.08 분; ESI-MS(+) m/z = 939.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.08분; ESI-MS(+) m/z = 939.3 (M+2H).
실시예 7045의 제조
Figure pct00985
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.18분; ESI-MS(+) m/z = 976.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.13분; ESI-MS(+) m/z = 976.7 (M+2H).
실시예 7046의 제조
Figure pct00986
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.80분; ESI-MS(+) m/z = 960.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.75분; ESI-MS(+) m/z = 960.8 (M+2H).
실시예 7047의 제조
Figure pct00987
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.84분; ESI-MS(+) m/z = 957.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.54분; ESI-MS(+) m/z = 957.9 (M+2H).
실시예 7048의 제조
Figure pct00988
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 55.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.90분; ESI-MS(+) m/z = 931.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2. 분; ESI-MS(+) m/z = 931.7 (M+2H).
실시예 7049의 제조
Figure pct00989
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z = 976.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.40분; ESI-MS(+) m/z = 976.8 (M+2H).
실시예 7050의 제조
Figure pct00990
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z = 969.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.44분; ESI-MS(+) m/z = 969.8 (M+2H).
실시예 7051의 제조
Figure pct00991
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z = 966.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.00분; ESI-MS(+) m/z = 966.3 (M+2H).
실시예 7052의 제조
Figure pct00992
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.95분; ESI-MS(+) m/z = 982.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.13분; ESI-MS(+) m/z = 982.2 (M+2H).
실시예 7053의 제조
Figure pct00993
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z = 962.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.43분; ESI-MS(+) m/z = 962.2 (M+2H).
실시예 7054의 제조
Figure pct00994
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 2.04분; ESI-MS(+) m/z = 965.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.04분; ESI-MS(+) m/z = 965.4 (M+2H).
실시예 7055의 제조
Figure pct00995
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 100% B에서 20 mL/분; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z = 930.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z = 930.2 (M+2H).
실시예 7056의 제조
Figure pct00996
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 100% B에서 20 mL/분; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.93분; ESI-MS(+) m/z = 982.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.07분; ESI-MS(+) m/z = 982.2 (M+2H).
실시예 7057의 제조
Figure pct00997
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.90분; ESI-MS(+) m/z = 955.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.90분; ESI-MS(+) m/z = 955.1 (M+2H).
실시예 7058의 제조
Figure pct00998
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 100% B에서 20 mL/분; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1. 분; ESI-MS(+) m/z = 960.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.78분; ESI-MS(+) m/z = 960.8 (M+2H).
실시예 7059의 제조
Figure pct00999
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 100% B에서 20 mL/분; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z = 955.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z = 955.9 (M+2H).
실시예 7060의 제조
Figure pct01000
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.82분; ESI-MS(+) m/z = 963.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.97분; ESI-MS(+) m/z = 963.3 (M+2H).
실시예 7061의 제조
Figure pct01001
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.83분; ESI-MS(+) m/z = 966.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.04분; ESI-MS(+) m/z = 966.2 (M+2H).
실시예 7062의 제조
Figure pct01002
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 36.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.89분; ESI-MS(+) m/z = 983.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.11분; ESI-MS(+) m/z = 982.2 (M+2H).
실시예 7063의 제조
Figure pct01003
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.92분; ESI-MS(+) m/z = 957.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.15분; ESI-MS(+) m/z = 957.3 (M+2H).
실시예 7064의 제조
Figure pct01004
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 30-70% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분.
물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 5μm, 19 x 200 mm, 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 0-40% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
생성물의 수율은 7.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z = 951.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.40분; ESI-MS(+) m/z = 951.2 (M+2H), 634.5 (M+3H).
시리즈 9000
모든 9000 시리즈 실시예를 상기 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다.
실시예 9001의 제조
Figure pct01005
실시예 9001의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 964.8(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z 964.8(M+2H).
실시예 9002의 제조
Figure pct01006
실시예 9002의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.92분; ESI-MS(+) m/z 956.6(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.91분; ESI-MS(+) m/z 956.6(M+2H).
실시예 9003의 제조
Figure pct01007
실시예 9003의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 957.5(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.40분; ESI-MS(+) m/z 957.6(M+2H).
실시예 9004의 제조
Figure pct01008
실시예 9004의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.38분; ESI-MS(+) m/z 957.5(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.38분; ESI-MS(+) m/z 957.5(M+2H).
실시예 9005의 제조
Figure pct01009
실시예 9005의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 950.1(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.45분; ESI-MS(+) m/z 949.9(M+2H).
실시예 9006의 제조
Figure pct01010
실시예 9006의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 964.9(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.40분; ESI-MS(+) m/z 965.1(M+2H).
실시예 9007의 제조
Figure pct01011
실시예 9007의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 965.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.40분; ESI-MS(+) m/z 965.5 (M+2H).
실시예 9008의 제조
Figure pct01012
실시예 9008의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.67분; ESI-MS(+) m/z 957.2 (M+2H).
실시예 9009의 제조
Figure pct01013
실시예 9009의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 957.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(+) m/z 957.5 (M+2H).
실시예 9010의 제조
Figure pct01014
실시예 9010의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 32.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 949.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.46분; ESI-MS(+) m/z 950.2 (M+2H).
실시예 9011의 제조
Figure pct01015
실시예 9011의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 956.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.53분; ESI-MS(+) m/z 956.3 (M+2H).
실시예 9012의 제조
Figure pct01016
실시예 9012의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 972.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.75분; ESI-MS(+) m/z 972.8 (M+2H).
실시예 9013의 제조
Figure pct01017
실시예 9013의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 964.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.49분; ESI-MS(+) m/z 964.0 (M+2H).
실시예 9014의 제조
Figure pct01018
실시예 9014의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 955.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(+) m/z 955.3 (M+2H).
실시예 9015의 제조
Figure pct01019
실시예 9015의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.70분; ESI-MS(+) m/z 963.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.84분; ESI-MS(+) m/z 963.8 (M+2H).
실시예 9016의 제조
Figure pct01020
실시예 9016의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 963.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.86분; ESI-MS(+) m/z 963.8 (M+2H).
실시예 9017의 제조
Figure pct01021
실시예 9017의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 955.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(+) m/z 954.9 (M+2H).
실시예 9018의 제조
Figure pct01022
실시예의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 963.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 963.8 (M+2H).
실시예 9019의 제조
Figure pct01023
실시예 9019의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 954.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 955.4 (M+2H).
실시예 9020의 제조
Figure pct01024
실시예 9020의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 154. 분; ESI-MS(+) m/z 969.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.74분; ESI-MS(+) m/z 970.0 (M+2H).
실시예 9021의 제조
Figure pct01025
실시예 9021의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 963.4 (M+2H).
실시예 9022의 제조
Figure pct01026
실시예 9022의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 965.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z 965.8 (M+2H).
실시예 9023의 제조
Figure pct01027
실시예 9023의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 973.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.73분; ESI-MS(+) m/z 973.9 (M+2H).
실시예 9024의 제조
Figure pct01028
실시예 9024의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 29.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.40분; ESI-MS(+) m/z 965.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.52분; ESI-MS(+) m/z 965.3 (M+2H).
실시예 9025의 제조
Figure pct01029
실시예 9025의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 973.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 973.7 (M+2H).
실시예 9026의 제조
Figure pct01030
실시예 9026의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 20분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z 965.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.47분; ESI-MS(+) m/z 965.7 (M+2H).
실시예 9027의 제조
Figure pct01031
실시예 9027의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 922.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.92분; ESI-MS(+) m/z 922.3 (M+2H).
실시예 9028의 제조
Figure pct01032
실시예 9028의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 930.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.90분; ESI-MS(+) m/z 930.3 (M+2H).
실시예 9029의 제조
Figure pct01033
실시예 9029의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 921.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 921.8 (M+2H).
실시예 9030의 제조
Figure pct01034
실시예 9030의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 957.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(+) m/z 957.4 (M+2H).
실시예 9031의 제조
Figure pct01035
실시예 9031의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 971.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 971.4 (M+2H).
실시예 9032의 제조
Figure pct01036
실시예 9032의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.27분; ESI-MS(+) m/z 935.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.32분; ESI-MS(+) m/z 934.9 (M+2H).
실시예 9033의 제조
Figure pct01037
실시예 9033의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 952.1(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.48분; ESI-MS(+) m/z 952.3 (M+2H).
실시예 9034의 제조
Figure pct01038
실시예 9034의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.23분; ESI-MS(+) m/z 943.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.24분; ESI-MS(+) m/z 943.3 (M+2H).
실시예 9035의 제조
Figure pct01039
실시예 9035의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 965.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z 964.9 (M+2H).
실시예 9036의 제조
Figure pct01040
실시예 9036의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.39. 분; ESI-MS(+) m/z 964.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.52분; ESI-MS(+) m/z 964.3 (M+2H).
실시예 9037의 제조
Figure pct01041
실시예 9037의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 5-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 963.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.61분; ESI-MS(+) m/z 963.3 (M+2H).
실시예 9038의 제조
Figure pct01042
실시예 9038의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 956.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.61분; ESI-MS(+) m/z 956.3 (M+2H).
실시예 9039의 제조
Figure pct01043
실시예 9039의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 40분에 걸쳐 55-95% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 973.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.71분; ESI-MS(+) m/z 973.0 (M+2H).
실시예 9040의 제조
Figure pct01044
실시예 9040의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 957.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.78분; ESI-MS(+) m/z 957.7 (M+2H).
실시예 9041의 제조
Figure pct01045
실시예 9041의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 949.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.54분; ESI-MS(+) m/z 949.3 (M+2H).
실시예 9042의 제조
Figure pct01046
실시예 9042의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 965.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.76분; ESI-MS(+) m/z 965.8 (M+2H).
실시예 9043의 제조
Figure pct01047
실시예 9043의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 958.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.51분; ESI-MS(+) m/z 958.0 (M+2H).
실시예 9044의 제조
Figure pct01048
실시예 9044의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 40분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 943.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(+) m/z 943.5 (M+2H).
실시예 9045의 제조
Figure pct01049
실시예 9045의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 965.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.71분; ESI-MS(+) m/z 965.4 (M+2H).
실시예 9046의 제조
Figure pct01050
실시예 9046의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 17.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 957.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.49분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
실시예 9047의 제조
Figure pct01051
실시예 9047의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 955.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z 955.3 (M+2H).
실시예 9048의 제조
Figure pct01052
실시예 9048의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 55-95% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 971.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.81분; ESI-MS(+) m/z 971.4 (M+2H).
실시예 9049의 제조
Figure pct01053
실시예 9049의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 963.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 963.3 (M+2H).
실시예 9050의 제조
Figure pct01054
실시예 9050의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 958.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 958.7 (M+2H).
실시예 9051의 제조
Figure pct01055
실시예 9051의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 950.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(+) m/z 950.6 (M+2H).
실시예 9052의 제조
Figure pct01056
실시예 9052의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올:물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 963.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 963.7 (M+2H).
실시예 9053의 제조
Figure pct01057
실시예 9053의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴:물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 935.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.63분; ESI-MS(+) m/z 935.3 (M+2H).
실시예 9054의 제조
Figure pct01058
실시예 9054의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.37분; ESI-MS(+) m/z 927.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.39분; ESI-MS(+) m/z 927.2 (M+2H).
실시예 9055의 제조
Figure pct01059
실시예 9055의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.34분; ESI-MS(+) m/z 934.9(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.36분; ESI-MS(+) m/z 934.9 (M+2H).
실시예 9056의 제조
Figure pct01060
실시예 9056의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 943.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(+) m/z 943.7 (M+2H).
실시예 9057의 제조
Figure pct01061
실시예 9057의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.30분; ESI-MS(+) m/z 934.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.33분; ESI-MS(+) m/z 934.8 (M+2H).
실시예 9058의 제조
Figure pct01062
실시예 9058의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.49분; ESI-MS(+) m/z 943.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z 943.7 (M+2H).
실시예 9059의 제조
Figure pct01063
실시예 9059의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 36.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 936.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.54분; ESI-MS(+) m/z 936.3 (M+2H).
실시예 9060의 제조
Figure pct01064
실시예 9060의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.73분; ESI-MS(+) m/z 944.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.91분; ESI-MS(+) m/z 944.9 (M+2H).
실시예 9061의 제조
Figure pct01065
실시예 9061의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 944.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.65분; ESI-MS(+) m/z 944.7 (M+2H).
실시예 9062의 제조
Figure pct01066
실시예 9062의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 20-mM 아세트산암모늄 함유 물; 이동상 B: 20-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올:물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 9.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 953.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.88분; ESI-MS(+) m/z 952.9 (M+2H).
실시예 9063의 제조
Figure pct01067
실시예 9063의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 948.5(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 948.8 (M+2H).
실시예 9064의 제조
Figure pct01068
실시예 9064의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 956.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.81분; ESI-MS(+) m/z 957.3 (M+2H).
실시예 9065의 제조
Figure pct01069
실시예 9065의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 956.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z 956.8 (M+2H).
실시예 9066의 제조
Figure pct01070
실시예 9066의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 964.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.78분; ESI-MS(+) m/z 965.2 (M+2H).
실시예 9067의 제조
Figure pct01071
실시예 9067의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 29.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 934.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.57분; ESI-MS(+) m/z 934.4 (M+2H).
실시예 9068의 제조
Figure pct01072
실시예 9068의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 943.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.84분; ESI-MS(+) m/z 943.7 (M+2H).
실시예 9069의 제조
Figure pct01073
실시예 9069의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 943.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 943.3 (M+2H).
실시예 9070의 제조
Figure pct01074
실시예 9070의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.85분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
실시예 9071의 제조
Figure pct01075
실시예 9071의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-100% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.91분; ESI-MS(+) m/z 939.8 (M+2H).
실시예 9072의 제조
Figure pct01076
실시예 9072의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 405-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.72분; ESI-MS(+) m/z 931.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.93분; ESI-MS(+) m/z 931.8 (M+2H).
실시예 9073의 제조
Figure pct01077
실시예 9073의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 922.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.74분; ESI-MS(+) m/z 922.9 (M+2H).
실시예 9074의 제조
Figure pct01078
실시예 9074의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 931.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.98분; ESI-MS(+) m/z 930.9 (M+2H).
실시예 9075의 제조
Figure pct01079
실시예 9075의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.61분; ESI-MS(+) m/z 954.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.18분; ESI-MS(+) m/z 954.5 (M+2H).
실시예 9076의 제조
Figure pct01080
실시예 9076의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 44.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 958.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.11분; ESI-MS(+) m/z 958.5 (M+2H).
실시예 9077의 제조
Figure pct01081
실시예 9077의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 30.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 950.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.92분; ESI-MS(+) m/z 950.0(M+2H).
실시예 9078의 제조
Figure pct01082
실시예 9078의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 39.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 966.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.09분; ESI-MS(+) m/z 966.4 (M+2H).
실시예 9079의 제조
Figure pct01083
실시예 9079의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 957.9(M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.89분; ESI-MS(+) m/z 958.0 (M+2H).
실시예 9080의 제조
Figure pct01084
실시예 9080의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 945.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.97분; ESI-MS(+) m/z 945.8 (M+2H).
실시예 9081의 제조
Figure pct01085
실시예 9081의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 931.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.60분; ESI-MS(+) m/z 931.7 (M+2H).
실시예 9082의 제조
Figure pct01086
실시예 9082의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 939.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.82분; ESI-MS(+) m/z 939.8 (M+2H).
실시예 9083의 제조
Figure pct01087
실시예 9083의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.46분; ESI-MS(+) m/z 939.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 939.7 (M+2H).
실시예 9084의 제조
Figure pct01088
실시예 9084의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 948.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 948.1 (M+2H).
실시예 9085의 제조
Figure pct01089
실시예 9085의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 90%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.55분; ESI-MS(+) m/z 889.1 (M+2H)+.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.70분; ESI-MS(+) m/z 889.1 (M+2H)+.
실시예 9086의 제조
Figure pct01090
실시예 9086의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 897.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.90분; ESI-MS(+) m/z 897.6 (M+2H).
실시예 9087의 제조
Figure pct01091
실시예 9087의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 897.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 897.0 (M+2H).
실시예 9088의 제조
Figure pct01092
실시예 9088의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 905.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.88분; ESI-MS(+) m/z 905.2 (M+2H).
실시예 9089의 제조
Figure pct01093
실시예 9089의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 92%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 931.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(+) m/z 931.7 (M+2H).
실시예 9090의 제조
Figure pct01094
실시예 9090의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 28.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 940.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.75분; ESI-MS(+) m/z 940.3 (M+2H).
실시예 9091의 제조
Figure pct01095
실시예 9091의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 939.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.51분; ESI-MS(+) m/z 939.7 (M+2H).
실시예 9092의 제조
Figure pct01096
실시예 9092의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 948.1 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.69분; ESI-MS(+) m/z 948.2 (M+2H).
실시예 9093의 제조
Figure pct01097
실시예 9093의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 22.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 889.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 889.0 (M+2H).
실시예 9094의 제조
Figure pct01098
실시예 9094의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 897.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.84분; ESI-MS(+) m/z 897.6 (M+2H).
실시예 9095의 제조
Figure pct01099
실시예 9095의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 19.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.43분; ESI-MS(+) m/z 896.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 896.8 (M+2H).
실시예 9096의 제조
Figure pct01100
실시예 9096의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 27.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 905.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 905.5 (M+2H).
실시예 9097의 제조
Figure pct01101
실시예 9097의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 931.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z 931.8 (M+2H).
실시예 9098의 제조
Figure pct01102
실시예 9098의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 940.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 940.6 (M+2H).
실시예 9099의 제조
Figure pct01103
실시예 9099의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 11.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1. 분; ESI-MS(+) m/z 940.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2. 분; ESI-MS(+) m/z 940.3 (M+2H).
실시예 9100의 제조
Figure pct01104
실시예 9100의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 940.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 940.2 (M+2H).
실시예 9105의 제조
Figure pct01105
실시예 9105의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 16.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 944.0 (M+2H)+.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.50분; ESI-MS(+) m/z 944.2 (M+2H)+.
실시예 9106의 제조
Figure pct01106
실시예 9106의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 952.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.70분; ESI-MS(+) m/z 952.6 (M+2H).
실시예 9107의 제조
Figure pct01107
실시예 9107의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 4.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.41분; ESI-MS(+) m/z 952.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.49분; ESI-MS(+) m/z 952.3 (M+2H).
실시예 9108의 제조
Figure pct01108
실시예 9108의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 960.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 960.3 (M+2H).
실시예 9109의 제조
Figure pct01109
실시예 9109의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 12.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.39분; ESI-MS(+) m/z 943.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.44분; ESI-MS(+) m/z 944.1 (M+2H).
실시예 9110의 제조
Figure pct01110
실시예 9110의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 35분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 7.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 902.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.46분; ESI-MS(+) m/z 902.1 (M+2H).
실시예 9111의 제조
Figure pct01111
실시예 9111의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 8.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.59분; ESI-MS(+) m/z 910.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 910.3 (M+2H).
실시예 9112의 제조
Figure pct01112
실시예 9112의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 952.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 952.5 (M+2H).
실시예 9113의 제조
Figure pct01113
실시예 9113의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 93%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.32분; ESI-MS(+) m/z 951.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.39분; ESI-MS(+) m/z 952.1 (M+2H).
실시예 9114의 제조
Figure pct01114
실시예 9114의 조 물질을 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건을 사용하면서 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 40분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 쉴드 RP18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 35-75% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 6.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 960.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.56분; ESI-MS(+) m/z 960.6 (M+2H).
실시예 10001의 제조
Figure pct01115
실시예 10001을 하기 일반적 절차로 구성된, 실시예 5001의 제조에 대해 기재된 일반적 합성 순서에 따라 제조하였다: "프렐류드 방법 A: 수지-팽윤 절차", "프렐류드 방법 A: 단일-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 이중-커플링 절차", "프렐류드 방법 A: 클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차", "전반적 탈보호 방법 A", 및 "고리화 방법 A".
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 20분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 4-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.81분; ESI-MS(+) m/z 892.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 3.01분; ESI-MS(+) m/z 892.6 (M+2H).
(2S,3S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)부탄산의 제조
반응식:
Figure pct01116
단계 1:
(E)-3-(1H-인돌-3-일)아크릴산 (4.2 g, 22.44 mmol), (Boc)2O (10.42 ml, 44.9 mmol), 및 Et3N (7.82 ml, 56.1 mmol)을 THF (112 ml) 중에서 교반한 다음, DMAP (0.137 g, 1.122 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 중탄산나트륨으로 켄칭하고, 10분 동안 격렬히 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 1 N HCl로 산성화시켰다. 유기 층을 수집하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 (E)-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)아크릴산을 수득하였으며, 이를 단계 2에 직접 사용하였다.
단계 2:
-78℃에서 THF (400 mL) 중 (E)-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)아크릴산 (7.14 g, 24.85 mmol)의 용액에 Et3N (10.39 ml, 74.6 mmol) 및 피발로일 클로라이드 (6.12 ml, 49.7 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 15분 동안 교반한 다음, 1.5시간 동안 0℃로 가온하였다. 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, 이에 n-부틸리튬 (헥산 중 1.6 M)(14 mL, 22.4 mmol)을 첨가한 다음, THF (200 mL) 중 (R)-4-페닐-2-옥사졸리디논 [n-부틸리튬 (헥산 중 1.6 M)(31 ml, 49.7 mmol)을 (R)-4-페닐옥사졸리딘-2-온 (8.11 g, 49.7 mmol)의 용액에 첨가함으로써 제조됨]의 리튬 염을 -78℃에서 캐뉼라를 통해 첨가하였다. 반응물을 -78℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 NH4Cl 수용액으로 켄칭하였다. 유기부를 진공 하에 제거하고, 수층을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 수집하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 10-20% EtOAc/헥산의 구배를 사용하면서 정제하였다. 생성물 분획을 수집하고, 용매를 진공 하에 제거하여 ((R,E)-tert-부틸 3-(3-옥소-3-(2-옥소-4-페닐옥사졸리딘-3-일)프로프-1-엔-1-일)-1H-인돌-1-카르복실레이트, 7.12 g (66%)을 수득하였다. ESI-MS(+) m/z 433.4 (M+1).
단계 3:
-4℃에서 THF (30 mL) 중 브로민화구리 (I) 메틸술피드 착물 (5.08 g, 24.70 mmol) 및 디메틸술피드 (15 mL)의 혼합물에 메틸마그네슘 브로마이드 (디에틸에테르 중 3 M) (5.49 ml, 16.46 mmol)를 첨가하였다. 10분 동안 교반한 후, THF (70 mL) 중 (R,E)-tert-부틸 3-(3-옥소-3-(2-옥소-4-페닐옥사졸리딘-3-일)프로프-1-엔-1-일)-1H-인돌-1-카르복실레이트 (7.12 g, 16.46 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 -4℃에서 1시간 동안 및 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, THF (120 mL) 중 NBS (5.86 g, 32.9 mmol)를 캐뉼라를 통해 반응물에 첨가하였다. 반응물을 -78℃에서 1시간 동안에 이어서 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 0.5 N NaHSO4: 염수 (1:1, 200 mL)로 켄칭하였다. 유기 층을 분리하고, 0.5 N Na2S2O3 (2 x 100 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 NH4Cl에 이어서 염수로 세척하였다. 유기 층을 수집하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 10-20% EtOAc/헥산을 사용하면서 정제하였다. 생성물 분획을 수집하고, 용매를 진공 하에 제거하여 tert-부틸 3-((2S,3R)-3-브로모-4-옥소-4-((R)-2-옥소-4-페닐옥사졸리딘-3-일)부탄-2-일)-1H-인돌-1-카르복실레이트, 4.0 g (46%)을 수득하였다.
Figure pct01117
단계 4:
tert-부틸 3-((2S,3R)-3-브로모-4-옥소-4-((R)-2-옥소-4-페닐옥사졸리딘-3-일)부탄-2-일)-1H-인돌-1-카르복실레이트 (4 g, 7.58 mmol)를 DMSO (50.6 ml) 중에 용해시킨 다음, NaN3 (1.972 g, 30.3 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 EtOAc 및 물로 희석하였다. 유기 층을 수집하고, 물에 이어서 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 15-20% EtOAc/헥산의 구배를 사용하면서 정제하였다. 생성물 분획을 수집하고, 용매를 진공 하에 제거하여 tert-부틸 3-((2S,3S)-3-아지도-4-옥소-4-((R)-2-옥소-4-페닐옥사졸리딘-3-일)부탄-2-일)-1H-인돌-1-카르복실레이트, 3.4 g (91%)을 수득하였다.
Figure pct01118
단계 5:
0℃에서 물 (29 mL) 및 THF (86 mL) 중 tert-부틸 3-((2S,3S)-3-아지도-4-옥소-4-((R)-2-옥소-4-페닐옥사졸리딘-3-일)부탄-2-일)-1H-인돌-1-카르복실레이트 (3.38 g, 6.90 mmol)의 혼합물에 과산화수소 (4.67 ml, 45.7 mmol)에 이어서 수산화리튬 (0.331 g, 13.81 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 40 mL 물 중 Na2SO3 (7 g)으로 켄칭하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거한 다음, 반응물을 EtOAc 및 물로 희석하였다. pH을 2로 조정하였다. 유기 상을 수집하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 Et2O로 연화처리하여 고체를 수득하였으며, 이를 여과에 의해 수집하고, 건조시켜 (2S,3S)-2-아지도-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)부탄산, 2.38 g (100%)을 수득하였다.
Figure pct01119
단계 6:
탄소 상 10% Pd (1.19 g, 1.118 mmol)를 플라스크에 N2 (g)의 블랭킷 하에 두었다. 촉매를 MeOH (5 mL)로 습윤화시켰다. 플라스크에 MeOH (69.1 ml) 중 용액으로서 (2S,3S)-2-아지도-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)부탄산 (2.38 g, 6.91 mmol)을 첨가하였다. 플라스크를 배기시킨 다음, H2 (g)로 채웠다. 반응물을 2시간 동안 교반하였다. 플라스크를 배기시키고, N2 (g) 2X로 퍼징하였다. 반응물을 셀라이트®를 통해 여과하고, 필터 케이크를 MeOH로 세척하였다. 유기부를 진공 하에 농축시켜 (2S,3S)-2-아미노-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)부탄산을 수득하였으며, 이를 단계 7에 그대로 사용하였다. ESI-MS(+) m/z 319.4 (M+H).
단계 7:
(2S,3S)-2-아미노-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)부탄산 (2197 mg, 6.9 mmol)을 물 (35 mL) 및 THF (100 mL)의 혼합물 중에 용해시켰다. 중탄산나트륨 (2174 mg, 25.9 mmol) 및 (9H-플루오렌-9-일)메틸 2,5-디옥소피롤리딘-1-카르복실레이트 (4434 mg, 13.80 mmol)를 용액에 첨가하고, 반응물을 16시간 동안 교반하였다. 포화 염화암모늄 용액 (200 mL)을 반응물에 첨가한 다음, 용매를 진공 하에 제거하였다. 나머지 수성 층을 EtOAc로 추출하였다. 이어서, 유기 층을 수집하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 물질을 역상 바이오타지® C-18 칼럼에 의해 20-80% ACN/0.1% TFA 개질제 함유 물의 구배를 사용하면서 20분에 걸쳐 정제하였다. 생성물 분획을 수집하고, 물로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물에 이어서 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 (2S,3S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)부탄산, 500 mg (13%)을 수득하였다.
Figure pct01120
실시예 10501의 제조
Figure pct01121
실시예 10501을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 15분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 31.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.60분; ESI-MS(+) m/z 950.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z 950.5 (M+2H).
실시예 10502의 제조
Figure pct01122
실시예 10502를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 944.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z 944.0 (M+2H).
실시예 10503의 제조
Figure pct01123
실시예 10503을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 44.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.47분; ESI-MS(+) m/z 937.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.61분; ESI-MS(+) m/z 937.0 (M+2H).
실시예 10504의 제조
Figure pct01124
실시예 10504를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 49.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.45분; ESI-MS(+) m/z 930.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z 930.4 (M+2H).
실시예 10505의 제조
Figure pct01125
실시예 10505를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 951.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.64분; ESI-MS(+) m/z 951.3 (M+2H).
실시예 10506의 제조
Figure pct01126
실시예 10506을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.53분; ESI-MS(+) m/z 930.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 930.4 (M+2H).
실시예 10507의 제조
Figure pct01127
실시예 10507을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 13.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.50분; ESI-MS(+) m/z 944.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 943.7 (M+2H).
실시예 10508의 제조
Figure pct01128
실시예 10508을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 워터스 엑스브리지 c-18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 50-90% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 40분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 2.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 79%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 937.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.68분; ESI-MS(+) m/z 937.3 (M+2H).
실시예 10509의 제조
Figure pct01129
실시예 10509를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 929.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.82분; ESI-MS(+) m/z 929.8 (M+2H).
실시예 10510의 제조
Figure pct01130
실시예 10510을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 922.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.83분; ESI-MS(+) m/z 922.8 (M+2H).
실시예 10511의 제조
Figure pct01131
실시예 10511을 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 915.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.84분; ESI-MS(+) m/z 915.8 (M+2H).
실시예 10512의 제조
Figure pct01132
실시예 10512를 "일반적 합성 순서 A"에 따라 제조하였다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 40분에 걸쳐 10-50% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 25.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 908.4 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.81분; ESI-MS(+) m/z 908.4 (M+2H).
실시예 10513의 제조
Figure pct01133
실시예 10513을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. (2S,3S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)부탄산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 10.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 954.4950 (M+2H); 실측치: 954.4874 (M+2H).
실시예 10514의 제조
Figure pct01134
실시예 10514를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. (2S,3S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)부탄산을 제6 아미노산 커플링 단계에 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 14.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.52분; ESI-MS(+) m/z 962.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.58분; ESI-MS(+) m/z 962.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 962.4880 (M+2H); 실측치: 962.4851 (M+2H).
실시예 10515의 제조
Figure pct01135
실시예 10515를 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. (2S,3S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-(1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-인돌-3-일)부탄산을 제8 아미노산 커플링 단계에 사용하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 15.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(+) m/z 963.0 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 962.4880 (M+2H); 실측치: 962.4844 (M+2H).
실시예 10516의 제조
Figure pct01136
실시예 10516을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.58분; ESI-MS(+) m/z 976.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z 976.4 (M+2H).
실시예 10517의 제조
Figure pct01137
실시예 10517을 "일반적 합성 순서 A"에 따르지만 "고리화 방법 A" 대신에 "고리화 방법 B"를 사용하여 제조하였다. 조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.57분; ESI-MS(+) m/z 983.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.77분; ESI-MS(+) m/z 983.8 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 983.0012 (M+2H); 실측치: 982.9986 (M+2H).
분석 데이터:
질량 분광측정법: "ESI-MS(+)"는 양이온 모드로 수행된 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-MS(-)"는 음이온 모드로 수행된 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-HRMS(+)"는 양이온 모드로 수행된 고해상도 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미하고; "ESI-HRMS(-)"는 음이온 모드로 수행된 고해상도 전기분무 이온화 질량 분광측정법을 의미한다. 검출된 질량은 "m/z" 단위 지정에 따라 보고된다. 1000 초과의 정확한 질량을 갖는 화합물은 종종 이중-하전 또는 삼중-하전 이온으로 검출되었다.
분석 조건 A:
칼럼: 워터스 BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 10 mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴:물; 이동상 B: 10 mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴:물; 온도: 50℃; 구배: 0%B, 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.5-분 유지; 유량: 1 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
분석 조건 B:
칼럼: 워터스 BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm 입자; 이동상 A: 10 mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올:물; 이동상 B: 10 mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올:물; 온도: 50℃; 구배: 0%B, 3분에 걸쳐 0-100% B, 이어서 100% B에서 0.5-분 유지; 유량: 0.5 mL/분; 검출: 220 nm에서 UV.
실시예 13001-14008에 대한 일반적 절차:
모든 조작을 심포니-X 펩티드 합성기 (프로테인 테크놀로지스) 상에서 자동화 하에 수행하였다. 모든 절차를 달리 언급되지 않는 한 하단 프릿이 장착된 10 mL 폴리프로필렌 튜브에서 수행하였다. 튜브를 튜브의 하단 및 상단 둘 다를 통해 프렐류드 펩티드 합성기에 연결하였다. DMF 및 DCM을 튜브의 상단을 통해 첨가할 수 있었으며, 이를 튜브의 측면으로 동등하게 세척해 내었다. 나머지 시약을 튜브의 하단을 통해 첨가하고, 프릿을 통해 통과시켜 수지를 접촉시켰다. 모든 용액을 튜브의 하단을 통해 제거하였다. "주기적 교반"은 하단 프릿을 통한 N2 기체의 짧은 펄스를 기재하며; 펄스는 대략 5초 동안 지속되고, 30초마다 발생한다. DMF 중 클로로아세틸 클로라이드 용액은 제조 24시간 이내에 사용하였다. 아미노산 용액은 일반적으로 제조로부터 3주 이후에는 사용하지 않았다. HATU 용액은 제조 5일 이내에 사용하였다. DMF = 디메틸포름아미드; HATU = 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; DIPEA = 디이소프로필에틸아민; 링크 = (2,4-디메톡시페닐)(4-알콕시페닐)메탄아민, 여기서 "4-알콕시"는 폴리스티렌 수지에 대한 연결의 위치 및 유형을 기재한다. 사용되는 수지는 링크 링커 (질소에서 Fmoc-보호됨); 100-200 메쉬, 1% DVB, 0.56 mmol/g 로딩을 갖는 메리필드 중합체 (폴리스티렌)이다. 사용되는 통상의 아미노산은 하기에 열거되어 있으며, 측쇄 보호기는 괄호 안에 제시되어 있다.
Figure pct01138
절차는 0.100 mmol 규모로 수행된 실험을 기재하며, 여기서 규모는 수지에 결합된 링크 링커의 양에 의해 결정된다. 이 규모는 상기 기재된 링크-메리필드 수지의 대략 178 mg에 해당한다. 아미노산 커플링 전에, 모든 펩티드 합성 순서를 "수지-팽윤 절차"로서 하기 기재된 수지-팽윤 절차로 시작하였다. 1급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "단일-커플링 절차"를 사용하였다. 2급 아민 N-말단에 대한 아미노산의 커플링은 하기 기재된 "이중-커플링 절차"를 사용하였다. 펩티드의 N-말단에 대한 클로로아세틸클로라이드의 커플링은 하기 상세화된 "클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차"에 의해 기재되어 있다.
수지-팽윤 절차:
10 mL 폴리프로필렌 고체-상 반응 용기에 메리필드:링크 수지 (178 mg, 0.100 mmol)를 첨가하였다. 수지를 하기와 같이 3회 세척하였다 (팽윤시켰다): 반응 용기에 DMF (2.0 mL)를 첨가하고, 이 때 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 후에 용매를 프릿을 통해 배출하였다.
단일-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 (하단 프릿을 통해서는 않음) 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.4M, 1.0 mL, 4 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 (하단 프릿을 통해서는 않음) 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물 (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 (하단 프릿을 통해서는 않음) 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
이중-커플링 절차:
이전 단계로부터의 수지가 들은 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 피페리딘:DMF (20:80 v/v, 2.0 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 6회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 (하단 프릿을 통해서는 않음) 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.4M, 1.0 mL, 4 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 (하단 프릿을 통해서는 않음) 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아미노산 (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량)에 이어서 HATU (DMF 중 0.2M, 1.0 mL, 2 당량), 및 최종적으로 DIPEA (DMF 중 0.4M, 1.0 mL, 4 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 주기적으로 교반한 다음, 반응 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 2회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 (하단 프릿을 통해서는 않음) 첨가하고, 생성된 혼합물을 30초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 반응 용기에 아세트산 무수물 (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 (하단 프릿을 통해서는 않음) 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 직접 후속 단계에 사용하였다.
클로로아세틸 클로라이드 커플링 절차:
반응 용기에 DIPEA (DMF 중 0.4M, 3.0 mL, 24 당량)에 이어서 클로로아세틸 클로라이드 (DMF 중 0.8M, 1.5 mL, 13.2 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 주기적으로 교반한 다음, 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 3회 세척하였다: 각 세척에 대해, DMF (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 (하단 프릿을 통해서는 않음) 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 수지를 하기와 같이 연속적으로 4회 세척하였다: 각 세척에 대해, CH2Cl2 (2.0 mL)를 용기의 상단을 통해 (하단 프릿을 통해서는 않음) 첨가하고, 생성된 혼합물을 90초 동안 주기적으로 교반한 후에 용액을 프릿을 통해 배출하였다. 생성된 수지를 N2 스트림 하에 15분 동안 두었으며, 이 때 수지는 경질이 되었으며 용이하게 취급되었다.
전반적 탈보호 절차:
"탈보호 용액"을 40 mL 유리 바이알에서 트리플루오로아세트산 (22 mL), 페놀 (1.325 g), 물 (1.25 mL) 및 트리이소프로필실란 (0.5 mL)을 합함으로써 제조하였다. 수지를 반응 용기로부터 제거하고, 4 mL 유리 바이알에 옮겼다. 바이알에 "탈보호 용액" (2.0 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 진탕기에서 격렬히 혼합하였다 (1분 동안 1000 RPM, 이어서 1.5시간 동안 500 RPM). 혼합물을 0.2 μ 시린지 필터를 통해 18X150 mm 시험관으로 여과하고, 고체를 "탈보호 용액" (1.0 mL)의 제2 부분으로 추출하였다. 18X150 mm 시험관 내 합한 여과물을 Et2O (15 mL)로 희석하였으며, 이 때 상당한 양의 백색 고체가 침전하였다. 혼합물을 2분 동안 원심분리한 다음, 용액을 경사분리하였다. 고체를 Et2O (20 mL) 중에 현탁시키고; 혼합물을 5분 동안 원심분리하고; 용액을 경사분리하였다. 최종 시간 동안, 고체를 Et2O (20 mL) 중에 현탁시키고; 혼합물을 5분 동안 원심분리하고; 용액을 경사분리하였다.
고리화 절차:
고체를 20 mL MeCN:수성 0.1M NH4OAc (1:1) 중에 용해시키고, 용액을 수성 NaOH (1.0M)를 사용하여 pH = 8.5-9.0으로 조심스럽게 조정하였다. 이어서, 용액을 밤새 (대략 18시간) 정치되도록 하였다 (교반은 필요하지 않음). 1 mL DMSO를 첨가하고, 반응 용액을 온화한 가열 하에 밤새 스피드백® 원심분리 증발기에서 농축시켰다. MeOH 대략 1 mL를 잔류물에 첨가하고, 생성된 용액을 개별적 실시예에 기재된 방법에 의해 정제하였다.
(2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-페닐피롤리딘-2-카르복실산의 제조
반응식:
Figure pct01139
단계 1:
CH2Cl2 (20.59 ml) 중 (2S,4R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-페닐피롤리딘-2-카르복실산 (1.20 g, 4.12 mmol)의 용액에 TFA (4.13 ml, 53.5 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 교반하였다. LC/MS에 의한 분석이 반응이 완결된 것으로 나타내면, 휘발성 물질을 진공 하에 제거하고, 톨루엔 (10 mL)을 첨가하고, 휘발성 물질을 다시 제거하였다.
단계 2:
단계 1로부터의 잔류물을 1 M 수성 Na2CO3 (24.71 ml, 24.71 mmol)에 녹이고, 용해도를 위해 ~5 mL THF를 첨가하였다. 이어서, FMOC-OSU (1.667 g, 4.94 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 에테르로 2회 추출하였다 (버림). pH를 1 M HCl의 첨가를 사용하여 ~2로 조정하고, 생성된 현탁액을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 EtOAc 추출물을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 (2S,4R)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)-4-페닐피롤리딘-2-카르복실산을 추가 화학을 위해 그대로 사용하였다.
실시예 13001의 제조
Figure pct01140
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01141
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 32.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.42분; ESI-MS(+) m/z 943.7 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.62분; ESI-MS(+) m/z 943.7 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 942.9543 (M+2H); 실측치: 942.9517 (M+2H).
실시예 13002의 제조
Figure pct01142
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01143
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 26.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.44분; ESI-MS(+) m/z 929.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 929.8 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 928.9331 (M+2H); 실측치: 928.9306 (M+2H).
실시예 13003의 제조
Figure pct01144
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01145
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 39.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 910.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.59분; ESI-MS(+) m/z 910.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 909.9616 (M+2H); 실측치: 909.9587 (M+2H).
실시예 13004의 제조
Figure pct01146
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01147
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 3.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.36분; ESI-MS(+) m/z 968.2 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.55분; ESI-MS(+) m/z 968.3 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 967.9652 (M+2H); 실측치: 967.9616 (M+2H).
실시예 13005의 제조
Figure pct01148
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01149
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.8 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 939.6 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.75분; ESI-MS(+) m/z 939.6 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 938.9820 (M+2H); 실측치: 938.9804 (M+2H).
실시예 13006의 제조
Figure pct01150
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01151
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 10-45% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 물질을 추가로 정제용 LC/MS에 의해 하기 조건으로 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 28.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.51분; ESI-MS(+) m/z 1001.1 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.67분; ESI-MS(+) m/z 1001.1 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 1000.4980 (M+2H); 실측치: 1000.4955 (M+2H).
실시예 13007의 제조
Figure pct01152
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01153
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 34.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.62분; ESI-MS(+) m/z 979.3 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.86분; ESI-MS(+) m/z 979.7 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 978.9825 (M+2H); 실측치: 978.9810 (M+2H).
실시예 13008의 제조
Figure pct01154
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01155
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 31.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 95%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 965.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.90분; ESI-MS(+) m/z 965.7 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 964.9613 (M+2H); 실측치: 964.9582 (M+2H).
실시예 13009의 제조
Figure pct01156
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01157
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 25-65% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.67분; ESI-MS(+) m/z 946.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.78분; ESI-MS(+) m/z 946.5 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 945.9898 (M+2H); 실측치: 945.9875 (M+2H).
실시예 13010의 제조
Figure pct01158
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01159
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 33.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.56분; ESI-MS(+) m/z 1008.3 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.75분; ESI-MS(+) m/z 1008.3 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 1007.5058 (M+2H); 실측치: 1007.5027 (M+2H).
실시예 13011의 제조
Figure pct01160
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 41.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.63분; ESI-MS(+) m/z 988.6 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.84분; ESI-MS(+) m/z 988.7 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 987.9778 (M+2H); 실측치: 987.9758 (M+2H).
실시예 13012의 제조
Figure pct01162
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01163
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.5 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.68분; ESI-MS(+) m/z 974.8 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.90분; ESI-MS(+) m/z 974.4 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 973.9565 (M+2H); 실측치: 973.9538 (M+2H).
실시예 13013의 제조
Figure pct01164
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01165
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 97%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.69분; ESI-MS(+) m/z 955.5 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.78분; ESI-MS(+) m/z 955.8 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 954.9851 (M+2H); 실측치: 954.9819 (M+2H).
실시예 13014의 제조
Figure pct01166
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01167
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 18.1 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 100%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.54분; ESI-MS(+) m/z 1017.3 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.76분; ESI-MS(+) m/z 1016.9 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 1016.5011 (M+2H); 실측치: 1016.4991 (M+2H).
실시예 14001의 제조
Figure pct01168
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01169
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.9 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.64분; ESI-MS(+) m/z 940.2 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 939.6 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 938.9820 (M+2H); 실측치: 938.9799 (M+2H).
실시예 14002의 제조
Figure pct01170
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01171
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 51.0 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.48분; ESI-MS(+) m/z 1000.8 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.71분; ESI-MS(+) m/z 1001.2 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 1000.4980 (M+2H); 실측치: 1000.4958 (M+2H).
실시예 14003의 제조
Figure pct01172
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01173
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 15-55% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 23.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 96%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.66분; ESI-MS(+) m/z 954.6 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.79분; ESI-MS(+) m/z 954.3 (M+2H).
실시예 14004의 제조
Figure pct01174
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01175
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 40-80% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 35.6 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 94%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.65분; ESI-MS(+) m/z 1015.7 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.66분; ESI-MS(+) m/z 1016.2 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 1015.5033 (M+2H); 실측치: 1015.5008 (M+2H).
실시예 14005의 제조
Figure pct01176
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01177
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 24.4 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.76분; ESI-MS(+) m/z 975.0 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.87분; ESI-MS(+) m/z 975.1 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 974.9982 (M+2H); 실측치: 974.9954 (M+2H).
실시예 14006의 제조
Figure pct01178
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01179
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 29.2 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.71분; ESI-MS(+) m/z 961.3 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.99분; ESI-MS(+) m/z 961.4 (M+2H).
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 960.9769 (M+2H); 실측치: 960.9749 (M+2H).
실시예 14007의 제조
Figure pct01180
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01181
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 아세토니트릴: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 아세토니트릴: 물; 구배: 30분에 걸쳐 20-60% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 20.3 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 98%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.77분; ESI-MS(+) m/z 942.8 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.91분; ESI-MS(+) m/z 942.8 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
실시예 14008의 제조
Figure pct01182
다음의 펩티드를 상기 절차에 따라 합성하였다. 밑줄친 단계는 이중-커플링 절차를 이용하였다.
Figure pct01183
상기 절차에 따른 탈보호 및 고리화 후, 화합물을 하기와 같이 정제하였다:
조 물질을 하기 조건을 사용하면서 정제용 LC/MS에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 10-mM 아세트산암모늄 함유 5:95 메탄올: 물; 이동상 B: 10-mM 아세트산암모늄 함유 95:5 메탄올: 물; 구배: 30분에 걸쳐 45-85% B, 이어서 100% B에서 5-분 유지; 유량: 20 mL/분. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다. 생성물의 수율은 21.7 mg이었고, LCMS 분석에 의한 그의 추정된 순도는 99%였다.
분석 조건 A: 체류 시간 = 1.74분; ESI-MS(+) m/z 1003.9 (M+2H).
분석 조건 B: 체류 시간 = 2.74분; ESI-MS(+) m/z 1004.2 (M+2H), 가장 풍부한 이온.
ESI-HRMS(+) m/z: 계산치: 1003.5215 (M+2H); 실측치: 1003.5189 (M+2H).
실시예 120 - 균질 시간-분해 형광 (HTRF) 결합 검정을 사용한, PD-1의 PD-L1에 대한 결합을 경쟁하는 마크로시클릭 펩티드의 능력을 시험하는 방법
PD-1/PD-L1 균질 시간-분해 형광 (HTRF) 결합 검정을 사용하여 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1에 결합하는 능력을 조사하였다. 본 검정의 개략도를 도 1에 제공한다.
방법
가용성 PD-1의 가용성 PD-L1에 대한 결합의 균질 시간-분해 형광 (HTRF) 검정. 가용성 PD-1 및 가용성 PD-L1은 막횡단-관통 영역이 제거되고 이종 서열, 특히 인간 이뮤노글로불린 G 서열 (Ig)의 Fc 부분 또는 헥사히스티딘 에피토프 태그 (His)에 융합된 카르복실-말단 절단을 갖는 단백질을 지칭한다. 모든 결합 연구는 0.1% (w/v) 소 혈청 알부민 및 0.05% (v/v) 트윈-20으로 보충된 dPBS로 이루어진 HTRF 검정 완충제 중에서 수행하였다. PD-1-Ig/PD-L1-His 결합 검정을 위해, 억제제를 4 μl의 검정 완충제 중에서 PD-L1-His (10 nM 최종)와 15분 동안 예비인큐베이션한 다음, 1 μl의 검정 완충제 중의 PD-1-Ig (20 nM 최종)를 첨가하고, 15분 동안 추가로 인큐베이션하였다. 인간, 시노몰구스, 마카크 또는 마우스로부터의 PD-L1 융합 단백질을 사용하였다. HTRF 검출은 유로퓸 크립테이트-표지된 항-Ig 모노클로날 항체 (1 nM 최종) 및 알로피코시아닌 (APC) 표지된 항-His 모노클로날 항체 (20 nM 최종)를 사용하여 달성하였다. 항체를 HTRF 검출 완충제 중에 희석시키고, 5 μl를 결합 반응물의 상단에 분배하였다. 반응이 30분 동안 평형이 되도록 하고, 엔비전(EnVision) 형광계를 사용하여 신호 (665nm/620nm 비)를 수득하였다. PD-1-Ig/PD-L2-His (각각 20 및 5 nM), CD80-His/PD-L1-Ig (각각 100 및 10 nM) 및 CD80-His/CTLA4-Ig (각각 10 및 5 nM) 사이에 추가의 결합 검정을 확립하였다. 비오티닐화 화합물 번호 71 및 인간 PD-L1-His 사이의 경쟁 연구를 다음과 같이 수행하였다. 마크로시클릭 펩티드 억제제를 4 μl의 검정 완충제 중에서 PD-L1-His (10 nM 최종)와 60분 동안 예비인큐베이션한 다음, 1 μl의 검정 완충제 중의 비오티닐화 화합물 번호 71 (0.5 nM 최종)을 첨가하였다. 결합이 30분 동안 평형이 되도록 한 다음 5 μl의 HTRF 완충제 중 유로퓸 크립테이트 표지된 스트렙타비딘 (2.5 pM 최종) 및 APC-표지된 항-His (20 nM 최종)를 첨가하였다. 반응이 30분 동안 평형이 되도록 하고, 엔비전 형광계를 사용하여 신호 (665nm/620nm 비)를 수득하였다.
재조합 단백질. C-말단 인간 Ig 에피토프 태그 [hPD-1 (25-167)-3S-IG]를 갖는 카르복실-절단된 인간 PD-1 (아미노산 25-167) 및 C-말단 His 에피토프 태그 [hPD-L1(19-239)-담배 잎맥 반점형성 바이러스 프로테아제 절단 부위 (TVMV)-His]를 갖는 인간 PD-L1 (아미노산 18-239)을 HEK293T 세포 내에서 발현시키고, rProteinA 친화성 크로마토그래피 및 크기 배제 크로마토그래피에 의해 순차적으로 정제하였다. 인간 PD-L2-His (시노 바이올로지칼스(Sino Biologicals)), CD80-His (시노 바이올로지칼스), CTLA4-Ig (RnD 시스템스(RnD Systems))는 모두 상업적 공급원을 통해 획득하였다.
재조합 인간 PD-1-Ig의 서열
Figure pct01184
재조합 인간 PD-L1-TVMV-His (PD-L1-His)의 서열
Figure pct01185
결과를 하기 표 6에 제시한다. 제시된 바와 같이, 본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드는 PD-L1-TVMV-His (PD-L1-His)에 대한 PD-1-Ig 결합 활성의 강력한 억제를 나타내었다.
<표 6>
Figure pct01186
실시예 121 - 균질 시간-분해 형광 (HTRF) 결합 검정을 사용한, 화합물 번호 99 변이체 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1에 결합하는 능력을 시험하는 방법
구조 활성 관계를 확립하기 위해, 본 개시내용의 화합물 번호 99 펩티드의 변이체 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1-His에 대한 PD-1-Ig 결합을 억제하는 능력을 조사하였다.
HTRF 실험은 본질적으로 상기 문헌에 개략된 바와 같이 수행하였다. 변이체 마크로시클릭 펩티드를 본원에 개략된 바와 같이 생성하였다.
결과를 하기 표 7에 제시한다. 다른 표로부터의 각각의 모 마크로시클릭 펩티드에 대한 결과를 비교를 위해 이 표에 포함시켰다. 제시된 바와 같이, 본 개시내용의 변이체 마크로시클릭 펩티드는 PD-L1에 대한 PD-1-Ig 결합의 강력한 억제를 나타내었고, 활성이 변이에 대해 감수성이고 저항성인 영역이 확인되었다.
<표 7> 화합물 번호 99 변이체 마크로시클릭 펩티드
Figure pct01187
실시예 122 - 균질 시간-분해 형광 (HTRF) 결합 검정을 사용한, 화합물 번호 1 변이체 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1에 대한 PD-1 결합을 억제하는 능력을 시험하는 방법
구조 활성 관계를 확립하기 위해, 본 개시내용의 화합물 번호 1의 변이체 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1에 대한 PD-1의 결합을 억제하는 능력을 조사하였다.
HTRF 실험은 본질적으로 상기 문헌에 개략된 바와 같이 수행하였다. 변이체 마크로시클릭 펩티드를 본원에 개략된 바와 같이 생성하였다.
결과를 하기 표 8에 제시한다. 다른 표로부터의 각각의 모 마크로시클릭 펩티드에 대한 결과를 비교를 위해 이 표에 포함시켰다. 제시된 바와 같이, 본 개시내용의 변이체 마크로시클릭 펩티드는 PD-L1에 대한 PD-1 결합의 강력한 억제를 나타내었고, 변이에 대해 감수성이고 저항성인 영역이 확인되었다.
<표 8> 화합물 번호 1 변이체 마크로시클릭 펩티드
Figure pct01188
Figure pct01189
Figure pct01190
실시예 123 - 균질 시간-분해 형광 (HTRF) 결합 검정을 사용한, 화합물 번호 71 변이체 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1에 대한 PD-1 결합을 억제하는 능력을 시험하는 방법
구조 활성 관계를 확립하기 위해, 본 개시내용의 화합물 번호 71의 변이체 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1에 대한 PD-1의 결합을 억제하는 능력을 조사하였다.
HTRF 실험은 본질적으로 상기 문헌에 개략된 바와 같이 수행하였다. 변이체 마크로시클릭 펩티드를 본원에 개략된 바와 같이 생성하였다.
결과를 하기 표 9에 제시한다. 다른 표로부터의 각각의 모 마크로시클릭 펩티드에 대한 결과를 비교를 위해 이 표에 포함시켰다. 제시된 바와 같이, 본 개시내용의 변이체 마크로시클릭 펩티드는 PD-L1에 대한 PD-1 결합의 강력한 억제를 나타내었고, 변이에 대해 감수성이고 저항성인 영역이 확인되었다.
<표 9>
Figure pct01191
실시예 124 - 균질 시간-분해 형광 (HTRF) 결합 검정을 사용한, 화합물 번호 116 변이체 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1에 결합하는 능력을 시험하는 방법
구조 활성 관계를 확립하기 위해, 본 개시내용의 화합물 번호 116의 변이체 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1에 결합하는 능력을 조사하였다.
HTRF 실험은 상기 문헌에 개략된 바와 같이 수행하였다. 변이체 마크로시클릭 펩티드를 본원에 개략된 바와 같이 생성하였다.
결과를 하기 표 10에 제시한다. 다른 표로부터의 각각의 모 마크로시클릭 펩티드에 대한 결과를 비교를 위해 이 표에 포함시켰다. 제시된 바와 같이, 본 개시내용의 변이체 마크로시클릭 펩티드는 PD-L1에 대한 강력한 결합 활성을 나타내었고, 변이에 대해 감수성이고 저항성인 영역이 확인되었다.
<표 10> 화합물 번호 116 변이체 마크로시클릭 펩티드
Figure pct01192
실시예 125 - 시노메갈로바이러스 (CMV)-특이적 T 세포 기능 검정에서 마크로시클릭 펩티드가 인터페론 감마 (IFNγ) 분비를 촉진하는 능력을 시험하는 방법
본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드가 CMV-특이적 T 세포에 의한 IFNγ 분비를 용량-의존성 방식으로 촉진하는 능력을 조사하였다.
방법
CMV-특이적 T 세포 기능 검정. CMV에 대해 혈청반응양성인 공여자로부터의 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC, 아스타르테 바이올로직스(Astarte Biologics), 워싱턴주 레드먼드)를 편평-바닥 조직 배양물 (TC)-처리된 96-웰 플레이트에서, 증가하는 농도의 항-PD-L1 항체 또는 표시된 마크로시클릭 펩티드의 존재 또는 부재 하의 0.5μg/mL CMV+ 세포 용해물 (마이크로빅스 바이오시스템즈(Microbix Biosystems), 온타리오주 미시사우가)의 존재 하에 2.5 x 105개 세포/웰로 배양하였다. 10% 열-불활성화 소 태아 혈청 (FBS, 시그마(Sigma), 미주리주 세인트 루이스)으로 보충된 AIM-V 배지 (라이프 테크놀로지스(Life Technologies), 뉴욕주 그랜드 아일랜드)를 총 부피 200μL/웰로 3중으로 사용하였다. 세포를 37℃, 5% CO2에서 4일 동안 배양하고, 그 시점에 배양 상청액을 수거하여 ELISA (OptEIA hIFNγ ELISA 키트, BD 바이오사이언시스(BD Biosciences), 캘리포니아주 산호세)에 의해 분비된 IFNγ를 결정하였다.
도 10a-c에 제시된 바와 같이, 항-PD-L1 항체 및 펩티드는 둘 다 CMV-특이적 T 세포에 의한 IFNγ 분비를 용량-의존성 방식으로 촉진하는 것으로 나타났다. 가장 강건한 반응은 PD-L1에 대해 지시된 항체 (MDX-1105, EC50 0.6nM)에 의해 생성되었고, 다음으로 화합물 번호 71 (EC50 300nM), 화합물 번호 1 (EC50 400nM), 화합물 번호 2 (EC50 400nM), 및 화합물 번호 99 (EC50 >10,000 nM)였다. 이들 결과는 마크로시클릭 펩티드 억제제에 의한 PD-L1 결합이 지속 항원에 대한 이전 노출로부터 생성된 기억 T 세포 집단에서의 IFNγ 방출을 증진시킬 수 있음을 나타낸다.
실시예 126 - HIV-특이적 T 세포 기능 검정에서 마크로시클릭 펩티드가 IFNγ 분비를 촉진하는 능력을 시험하는 방법
본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드가 HIV-특이적 T 세포에 의한 IFNγ 분비를 용량-의존성 방식으로 촉진하는 능력을 조사하였다.
방법
HIV-특이적 T 세포 기능 검정. 만성 감염 단계의 바이러스혈증 HIV+ 공여자로부터 유래된 인간 PBMC (바이오리클레메이션 엘엘씨(Bioreclamation LLC), 뉴욕주 웨스트베리)를 TC-처리된 48-웰 플레이트에서 2.0 x 106개 세포/웰로 배양하였다. 세포를 각각 20개의 중첩 펩티드 (11개의 잔기에 의한 15-량체 중첩)의 6개의 풀로 이루어진 HIV-Gag (캡시드, Gag = 기-특이적 항원) 펩티드 라이브러리 (프로이뮨(ProImmune), 플로리다주 사라소타)로 자극하였다. 배양물의 최종 농도는 펩티드당 2μg/mL였다. HIV-Gag 항원 자극을 +/- 항-PD-L1 항체 (0.1μM 최종) 또는 펩티드 화합물 번호 71 (7.5μM 최종)로 수행하였다. 10% 열-불활성화 FBS (시그마, 미주리주 세인트 루이스) 및 10 U/ml rIL-2 (페프로테크(Peprotech), 뉴저지주 록키 힐)로 보충된 RPMI 배지 (라이프 테크놀로지스, 뉴욕주 그랜드 아일랜드)를 총 부피 1mL/웰로 사용하였다. 세포를 37℃, 5% CO2에서 6일 동안 배양하고, 그 시점에 배양물을 세척하고, 항-IFNγ 코팅된 엘리스팟(ELISpot) 플레이트 (hIFNγ엘리스팟 프로 키트, 맵테크(Mabtech), 오하이오주 마리몬트)에서 18시간 동안 37℃, 5% CO2에서 재-자극하였다. 재-자극을 위해, 시험관내 확장된 세포를 총 부피 100μL/웰의 rIL-2 결여 RPMI 배지에서 2.0 x 105개 세포/웰로 배양하였다. HIV-Gag 항원 및 항-PD-L1 억제제의 최종 농도는 상기 언급된 바와 같았다. 엘리스팟 플레이트를 5일 동안 공기-건조시키고, 이뮤노스팟 S6 플루오로스팟(ImmunoSpot S6 Fluorospot) 분석기 (C.T.L., 오하이오주 셰이커 하이츠)를 사용하여 판독하였다.
도 2에 제시된 바와 같이, 항-PD-L1 항체 및 펩티드는 둘 다 HIV-특이적 T 세포에 의한 IFNγ 분비를 용량-의존성 방식으로 촉진하는 것으로 밝혀졌다. 웰당 평균 IFNγ 스팟 형성 세포 (SFC)를 중복 웰로부터 계산하고, 비자극 웰에 존재하는 임의의 배경 (< 25 SFC)을 차감하였다. 데이터를 또한 DMSO 대조군 처리에 비한 배수 증가로 나타낸다. 항-PD-L1 항체 및 펩티드는 둘 다 6개의 HIV-Gag 항원 풀 중 적어도 1개에 반응하여 HIV-특이적 T 세포에 의한 IFNγ 분비를 증진시킨다. 이들 결과는 펩티드 억제제에 의한 PD-L1 결합이 항-PD-L1 항체와 유사하게, 진행 중인 만성 바이러스 감염에 반응하여 T 세포 집단으로부터의 IFNγ 방출을 증진시킬 수 있음을 나타낸다.
실시예 127 - 세포 결합 검정에서 마크로시클릭 펩티드가 PD-L1에 결합하는 능력을 시험하는 방법
본 개시내용의 마크로시클릭 펩티드가 Jurkat, 마우스 B 세포주 (LK35.2) 및 인간 폐 선암종 세포주 (L2987)에 결합하는 능력을 조사하였다.
방법
Jurkat-PD-1 세포 결합 검정. 피코에리트린 (PE)을 인간 PD-L1-Ig의 Ig 에피토프 태그에 공유적으로 연결시키고, 형광-표지된 PD-L1-Ig를 인간 PD-1을 과다-발현하는 Jurkat 세포주 (Jurkat-PD-1)와의 결합 연구에 사용하였다. 간략하게, 재조합 PD-L1-Ig (10 nM 최종)를 2% 소 태아 혈청으로 보충된 30 μl 부피의 RPMI 중에서 억제제와 15분 동안 예비인큐베이션하였다. 1x105개의 Jurkat-PD-1 세포를 2% 소 태아 혈청으로 보충된 20 μl RPMI 중의 PD-L1-Ig 및 억제제의 상단에 분배하고, 1시간 동안 실온에서 결합이 일어나게 하였다. 세포를 dPBS 중에서 3x 세척하였다. 세포를 200 μl의 dPBS 중에 재현탁시키고, 유동 세포측정법에 의해 결합을 측정하였다.
LK35.2-hPD-L1 세포 결합 검정. 피코에리트린 (PE)을 인간 PD-1-Ig의 Ig 에피토프 태그에 공유적으로 연결시키고, 형광-표지된 PD-1-Ig를 인간 PD-L1을 안정적으로 과다-발현하는 마우스 B 세포주 (LK35.2) (LK35.2-hPD-L1)와의 결합 연구에 사용하였다. 간략하게, 1x105 LK35.2-hPD-L1 세포를 2% 소 태아 혈청으로 보충된 30 μl 부피의 RPMI 중에서 억제제와 15분 동안 예비인큐베이션하였다. 2% 소 태아 혈청으로 보충된 RPMI 중에 희석된 20 μl의 PE-표지된 PD-1-Ig (2 nM 최종)를 세포 및 억제제의 상단에 분배하고, 1시간 동안 실온에서 결합이 일어나게 하였다. 세포를 dPBS 중에서 3x 세척하였다. 세포를 200 μl의 dPBS 중에 재현탁시키고, 유동 세포측정법에 의해 결합을 측정하였다.
L2987 셀로믹스(Cellomics) 세포 결합 검정. 피코에리트린 (PE)을 인간 PD-1-Ig의 Ig 에피토프 태그에 공유적으로 연결시키고, 형광-표지된 PD-1-Ig를 PD-L1을 자연적으로 발현하는 인간 폐 선암종 세포주 (L2987)와의 결합 연구에 사용하였다. 간략하게, 12,000개의 L2987 세포를 5% 소 태아 혈청으로 보충된 50 μl의 DMEM 중의 투명한 96 흑색, 투명-바닥 플레이트에 시딩하였다. 다음날, 억제제를 혈청-무함유 DMEM 중에 희석시키고, 25 μl를 세포의 상단에 분배하였다. 15분 인큐베이션 후에, sPD-1-Ig (30 nM 최종)를 25 μl의 혈청-무함유 DMEM 중의 세포 및 억제제의 상단에 분배하였다. 샘플을 1시간 동안 37℃에서 인큐베이션한 다음, dPBS 중에서 2회 세척하고, 4% 파라포름알데히드로 30분 동안 고정시켰다. 샘플을 dPBS 중에서 2x 추가로 세척하였다. 훽스트(Hoechst) (최종 1 μg/ml)를 최종 세척에 첨가하여 핵을 염색하였다. 셀로믹스 어레이스캔(Cellomics ARRAYSCAN)®을 사용하여 플레이트를 프로세싱하였다.
결과를 도 2 내지 9에 제시한다. 제시된 바와 같이, 본 개시내용의 대표적인 마크로시클릭 펩티드는 시험된 각각의 Jurkat, 마우스 B 세포주 (LK35.2), 및 인간 폐 선암종 세포주 (L2987)에 결합할 수 있었다. 또한, PD-L1 마크로시클릭 펩티드는 서로, 뿐만 아니라 내부적으로 개발된 항-PD-L1 모노클로날 항체와 PD-L1의 동일한 결합 부위에 결합하는 것으로 보였다.
화합물 번호 99, 화합물 번호 1, 및 화합물 번호 71 시리즈의 펩티드에 대한 추가의 세포 결합 검정 결과를 각각 하기 표 11 내지 13에 제시한다.
<표 11> 화합물 번호 99 시리즈의 펩티드에 대한 세포 결합 데이터
Figure pct01193
<표 12> 화합물 번호 1 시리즈의 펩티드에 대한 세포 결합 데이터
Figure pct01194
Figure pct01195
<표 13> 화합물 번호 71 시리즈의 펩티드에 대한 세포 결합 데이터
Figure pct01196
실시예 128
방법
LK35.2-hPD-L1 세포 결합 고-함량 스크리닝 검정. 피코에리트린 (PE)을 인간 PD-1-Ig의 Ig 에피토프 태그에 공유적으로 연결시키고, 형광-표지된 PD-1-Ig를 인간 PD-L1을 안정적으로 과다-발현하는 마우스 B 세포주 (LK35.2) (LK35.2-hPD-L1)와의 결합 연구에 사용하였다. 간략하게, 3x103개의 LK35.2-hPD-L1 세포를 10% 소 태아 혈청으로 보충된 20 μl RPMI 중의 384 웰 플레이트에 시딩하고, 밤새 배양하였다. 125 nl의 화합물을 세포에 첨가하고 이어서 10% 소 태아 혈청으로 보충된 RPMI 중에 희석된 5 μl의 PE-표지된 PD-1-Ig (1 nM 최종)를 첨가한 다음, 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 세포를 100 μl dPBS 중에서 3x 세척한 다음, 10 μg/ml 훽스트 33342를 함유하는 dPBS 중의 4% 파라포름알데히드 30 μl로 실온에서 30분 동안 고정시켰다. 세포를 100 μl의 dPBS 중에서 3x 세척한 다음, 15 μl의 dPBS를 최종 첨가하였다. 데이터를 수집하고, 셀 인사이트(Cell Insight) NXT 고 함량 이미저 및 회합 소프트웨어를 사용하여 프로세싱하였다.
293T-hPD-L1 세포 결합 고-함량 스크리닝 검정. 피코에리트린 (PE)을 인간 PD-1-Ig의 Ig 에피토프 태그에 공유적으로 연결시키고, 형광-표지된 PD-1-Ig를 인간 PD-L1을 안정적으로 과다-발현하는 인간 배아 신장 세포주 (293T) (293T-hPD-L1)와의 결합 연구에 사용하였다. 간략하게, 2x103개의 293T-hPD-L1 세포를 10% 소 태아 혈청으로 보충된 20 μl DMEM 중의 384 웰 플레이트에 시딩하고, 밤새 배양하였다. 125 nl의 화합물을 세포에 첨가하고, 이어서 10% 소 태아 혈청으로 보충된 DMEM 중에 희석된 5 μl의 PE-표지된 PD-1-Ig (0.5 nM 최종)를 첨가한 다음, 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 세포를 100 μl dPBS 중에서 3x 세척한 다음, 10 μg/ml 훽스트 33342를 함유하는 dPBS 중 4% 파라포름알데히드 30 μl로 실온에서 30분 동안 고정시켰다. 세포를 100 μl의 dPBS 중에서 3x 세척한 다음, 15 μl의 dPBS를 최종 첨가하였다. 데이터를 수집하고, 셀 인사이트 NXT 고 함량 이미저 및 회합 소프트웨어를 사용하여 프로세싱하였다.
<표 14>
실시예 1001-10517에 대한 생물학적 데이터
Figure pct01197
Figure pct01198
Figure pct01199
Figure pct01200
Figure pct01201
Figure pct01202
Figure pct01203
Figure pct01204
Figure pct01205
Figure pct01206
Figure pct01207
Figure pct01208
Figure pct01209
Figure pct01210
Figure pct01211
Figure pct01212
Figure pct01213
Figure pct01214
Figure pct01215
Figure pct01216
Figure pct01217
Figure pct01218
Figure pct01219
Figure pct01220
Figure pct01221
Figure pct01222
Figure pct01223
Figure pct01224
본원에 기재되고 청구되는 대상의 수많은 변형 및 변경은 상기 교시의 관점에서 가능하다. 따라서, 첨부된 청구범위의 범위 내에서, 청구범위에 언급된 대상은 본원에 구체적으로 기재된 것과 달리 실시될 수 있는 것으로 이해된다.
본 개시내용은 본 개시내용의 개별 측면의 단일 예시로서 의도되는 본원에 개시된 실시양태에 의해 그 범위가 제한되지 않으며, 기능적으로 등가인 임의의 것은 본 개시내용의 범위 내에 포함된다. 본원에 기재된 것에 더하여 본 개시내용의 모델 및 방법에 대한 다양한 변형은 상기 기재 및 교시로부터 통상의 기술자에게 명백하게 될 것이고, 유사하게 본 개시내용의 범위 내에 속하는 것으로 의도된다. 이러한 변형 또는 다른 실시양태는 본 개시내용의 실제 범위 및 취지에서 벗어나지 않고 실시될 수 있다.
본원에 언급된 각각의 문헌 (특허, 특허 출원, 학술지 논문, 요약서, 실험 지침서, 서적, 진뱅크® 수탁 번호, 스위스-프롯(SWISS-PROT)® 수탁 번호, 또는 다른 공개물 포함)의 전체 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 또한, 여기에 제출된 서열 목록의 하드 카피 및 그의 상응하는 컴퓨터 판독가능한 형태도 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
SEQUENCE LISTING <110> Bristol-Myers Squibb Company <120> MACROCYCLIC INHIBITORS OF THE PD-1/PD-L1 AND CD80 (B7-1)/PD-L1 PROTEIN/PROTEIN INTERACTIONS <130> 12166WOPCT <150> US 61/794589 <151> 2013-03-15 <150> US 61/918184 <151> 2013-12-19 <150> US 14/201,977 <151> 2014-03-10 <160> 2 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 384 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala 1 5 10 15 Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe 20 25 30 Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro 35 40 45 Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro Glu Asp Arg Ser Gln 50 55 60 Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln Leu Pro Asn Gly Arg 65 70 75 80 Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg Asn Asp Ser Gly Thr 85 90 95 Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys Ala Gln Ile Lys Glu 100 105 110 Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro 115 120 125 Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Gly 130 135 140 Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Arg Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr 145 150 155 160 His Thr Ser Pro Pro Ser Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Ser Ser 165 170 175 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 180 185 190 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 195 200 205 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 210 215 220 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 225 230 235 240 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 245 250 255 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 260 265 270 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 275 280 285 Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 290 295 300 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 305 310 315 320 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 325 330 335 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 340 345 350 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 355 360 365 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 370 375 380 <210> 2 <211> 237 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr Gly Ser 1 5 10 15 Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu Asp Leu 20 25 30 Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile Ile Gln 35 40 45 Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser Tyr Arg 50 55 60 Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn Ala Ala 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr Arg Cys 85 90 95 Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val Lys Val 100 105 110 Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val Asp Pro 115 120 125 Val Thr Ser Glu His Glu Leu Thr Cys Gln Ala Glu Gly Tyr Pro Lys 130 135 140 Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser Ser Asp His Gln Val Leu Ser Gly Lys 145 150 155 160 Thr Thr Thr Thr Asn Ser Lys Arg Glu Glu Lys Leu Phe Asn Val Thr 165 170 175 Ser Thr Leu Arg Ile Asn Thr Thr Thr Asn Glu Ile Phe Tyr Cys Thr 180 185 190 Phe Arg Arg Leu Asp Pro Glu Glu Asn His Thr Ala Glu Leu Val Ile 195 200 205 Pro Glu Leu Pro Leu Ala His Pro Pro Asn Glu Arg Thr Gly Ser Ser 210 215 220 Glu Thr Val Arg Phe Gln Gly His His His His His His 225 230 235

Claims (23)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    <화학식 I>
    Figure pct01225

    상기 식에서,
    A는 결합,
    Figure pct01226

    로부터 선택되고;
    여기서,
    Figure pct01227
    는 카르보닐 기에 대한 부착 지점을 나타내고,
    Figure pct01228
    는 질소 원자에 대한 부착 지점을 나타내고;
    n은 0 또는 1이고;
    R14 및 R15는 독립적으로 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    R16은 수소, -CHR17C(O)NH2, -CHR17C(O)NHCHR18C(O)NH2 및 -CHR17C(O)NHCHR18C(O)NHCH2C(O)NH2로부터 선택되고; 여기서 R17은 수소 및 -CH2OH로부터 선택되고, 여기서 R18은 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    Rc, Rf, Rh, Ri, Rm 및 Rn은 수소이고;
    Ra, Re, Rj 및 Rk는 각각 독립적으로 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12 및 R13은 독립적으로 천연 아미노산 측쇄 및 비천연 아미노산 측쇄로부터 선택되거나 또는 하기 기재된 바와 같이 상응하는 이웃자리 R 기와 함께 고리를 형성하고;
    Re 및 Rk는 각각 상응하는 이웃자리 R 기 및 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성할 수 있고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
    Rb는 메틸이거나, 또는 Rb 및 R2는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
    Rd는 수소 또는 메틸이거나, 또는 Rd 및 R4는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성할 수 있고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 히드록시 및 페닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
    Rg는 수소 또는 메틸이거나, 또는 Rg 및 R7은 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성할 수 있고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 할로 기로 임의로 치환된 벤질, 벤질옥시, 시아노, 시클로헥실, 메틸, 할로, 히드록시, 메톡시 기로 임의로 치환된 이소퀴놀리닐옥시, 할로 기로 임의로 치환된 퀴놀리닐옥시 및 테트라졸릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 피롤리딘 및 피페리딘 고리는 시클로헥실, 페닐, 또는 인돌 기에 임의로 융합되고;
    Rl은 메틸이거나, 또는 Rl 및 R12는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘 및 피롤리딘으로부터 선택된 고리를 형성하고, 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환된다.
  2. 제1항에 있어서, A가
    Figure pct01229

    인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  3. 제2항에 있어서,
    Rd가 메틸이거나, 또는 Rd 및 R4가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 히드록시 및 페닐로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
    Rg가 메틸이거나, 또는 Rg 및 R7이 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 할로 기로 임의로 치환된 벤질, 벤질옥시, 시아노, 시클로헥실, 메틸, 할로, 히드록시, 메톡시 기로 임의로 치환된 이소퀴놀리닐옥시, 할로 기로 임의로 치환된 퀴놀리닐옥시 및 테트라졸릴로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 피롤리딘 및 피페리딘 고리가 시클로헥실, 페닐, 또는 인돌 기에 임의로 융합되고;
    Rk가 메틸이거나, 또는 Rk 및 R11이 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환된 것인
    화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  4. 제3항에 있어서,
    Rd 및 R4가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
    Rg 및 R7이 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 피롤리딘 고리를 형성하고, 여기서 상기 고리가 아미노, 할로 기로 임의로 치환된 벤질, 벤질옥시, 시아노, 시클로헥실, 메틸, 할로, 히드록시, 메톡시 기로 임의로 치환된 이소퀴놀리닐옥시, 할로 기로 임의로 치환된 퀴놀리닐옥시 및 테트라졸릴로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 피롤리딘 및 피페리딘 고리가 시클로헥실, 페닐, 또는 인돌 기에 임의로 융합되고;
    Rk가 메틸인
    화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  5. 제4항에 있어서, R8이
    아자인돌릴C1-C3알킬, 벤조티아졸릴C1-C3알킬, 벤조티에닐C1-C3알킬, 벤질옥시C1-C3알킬, 디페닐메틸, 푸라닐C1-C3알킬, 이미다졸릴C1-C3알킬, 나프틸C1-C3알킬, 피리디닐C1-C3알킬, 티아졸릴C1-C3알킬, 티에닐C1-C3알킬; 및
    인돌릴 부분이 C1-C3알킬, 시아노, 할로 및 히드록시로부터 선택된 1개의 기로 임의로 치환된 인돌릴C1-C3알킬
    로부터 선택된 것인 화합물 또는 그의 치료상 허용되는 염.
  6. 제5항에 있어서, R8이 C1-C3알킬, 할로, 히드록시 또는 시아노로부터 선택된 1개의 기로 임의로 치환된 3-인돌릴C1-C3알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  7. 화합물 1, 화합물 2, 화합물 3, 화합물 4, 화합물 5, 화합물 6, 화합물 7, 화합물 8, 화합물 9, 화합물 10, 화합물 11, 화합물 12, 화합물 13, 화합물 14, 화합물 15, 화합물 16, 화합물 17, 화합물 18, 화합물 19, 화합물 20, 화합물 21, 화합물 22, 화합물 23, 화합물 24, 화합물 25, 화합물 26, 화합물 27, 화합물 28, 화합물 29, 화합물 30, 화합물 31, 화합물 32, 화합물 33, 화합물 34, 화합물 35, 화합물 36, 화합물 37, 화합물 38, 화합물 39, 화합물 40, 화합물 41, 화합물 42, 화합물 43, 화합물 44, 화합물 52, 화합물 53, 화합물 54, 화합물 55, 화합물 56, 화합물 57, 화합물 58, 화합물 59, 화합물 60, 화합물 61, 화합물 62, 화합물 63, 화합물 64, 화합물 65, 화합물 66, 화합물 67, 화합물 68, 화합물 69, 화합물 70, 화합물 88, 화합물 91, 화합물 92, 화합물 93, 화합물 94, 실시예 1002, 실시예 1003, 실시예 1004, 실시예 1005, 실시예 1006, 실시예 1007, 실시예 1008, 실시예 1009, 실시예 1010, 실시예 1011, 실시예 1012, 실시예 1013, 실시예 1014, 실시예 1015, 실시예 1016, 실시예 1017, 실시예 1018, 실시예 1019, 실시예 1020, 실시예 1021, 실시예 1022, 실시예 1023, 실시예 1024, 실시예 1025, 실시예 1026, 실시예 1027, 실시예 1028, 실시예 1029, 실시예 1030, 실시예 1031, 실시예 1032, 실시예 1033, 실시예 1034, 실시예 1035, 실시예 1036, 실시예 1037, 실시예 1038, 실시예 1039, 실시예 1040, 실시예 1041, 실시예 1042, 실시예 1043, 실시예 1044, 실시예 1045, 실시예 1046, 실시예 1047, 실시예 1048, 실시예 1049, 실시예 1050, 실시예 1051, 실시예 1052, 실시예 1053, 실시예 1054, 실시예 1055, 실시예 1056, 실시예 1057, 실시예 1058, 실시예 1059, 실시예 1060, 실시예 1061, 실시예 1062, 실시예 1063, 실시예 1064, 실시예 1065, 실시예 1066, 실시예 1067, 실시예 1068, 실시예 1069, 실시예 1070, 실시예 1071, 실시예 1072, 실시예 1073, 실시예 1074, 실시예 1075, 실시예 1076, 실시예 1077, 실시예 1078, 실시예 1079, 실시예 1080, 실시예 1081, 실시예 1082, 실시예 1083, 실시예 1084, 실시예 1085, 실시예 1086, 실시예 1087, 실시예 1088, 실시예 1089, 실시예 1090, 실시예 1091, 실시예 1092, 실시예 1093, 실시예 1094, 실시예 1095, 실시예 1096, 실시예 1097, 실시예 1098, 실시예 1099, 실시예 1100, 실시예 1101, 실시예 1102, 실시예 1103, 실시예 1104, 실시예 1105, 실시예 1106, 실시예 1107, 실시예 1108, 실시예 1110, 실시예 1112, 실시예 1113, 실시예 1114, 실시예 1115, 실시예 1116, 실시예 1117, 실시예 1118, 실시예 1119, 실시예 1120, 실시예 1121, 실시예 1122, 실시예 1123, 실시예 1124, 실시예 1125, 실시예 1126, 실시예 1127, 실시예 1128, 실시예 1129, 실시예 1130, 실시예 1131, 실시예 1132, 실시예 1133, 실시예 1134, 실시예 1135, 실시예 1136, 실시예 1137, 실시예 1138, 실시예 1139, 실시예 1140, 실시예 1141, 실시예 1142, 실시예 1143, 실시예 1144, 실시예 1145, 실시예 1146, 실시예 1147, 실시예 1148, 실시예 1149, 실시예 1150, 실시예 1151, 실시예 1152, 실시예 1153, 실시예 1154, 실시예 1155, 실시예 1156, 실시예 1157, 실시예 1158, 실시예 1159, 실시예 1160, 실시예 1161, 실시예 1162, 실시예 1163, 실시예 1164, 실시예 1165, 실시예 1166, 실시예 1167, 실시예 1168, 실시예 1169, 실시예 1170, 실시예 1171, 실시예 1172, 실시예 1173, 실시예 1174, 실시예 1175, 실시예 1176, 실시예 1177, 실시예 1178, 실시예 1179, 실시예 1180, 실시예 1181, 실시예 1182, 실시예 1183, 실시예 1184, 실시예 1185, 실시예 1186, 실시예 1187, 실시예 1188, 실시예 1189, 실시예 1190, 실시예 1191, 실시예 1192, 실시예 1193, 실시예 1194, 실시예 1195, 실시예 1196, 실시예 1197, 실시예 1198, 실시예 1199, 실시예 1200, 실시예 1201, 실시예 1202, 실시예 1203, 실시예 1204, 실시예 1205, 실시예 1206, 실시예 1207, 실시예 1208, 실시예 1209, 실시예 1210, 실시예 1211, 실시예 1212, 실시예 1213, 실시예 1214, 실시예 1215, 실시예 1216, 실시예 1217, 실시예 1218, 실시예 1219, 실시예 1220, 실시예 1221, 실시예 1222, 실시예 1223, 실시예 1224, 실시예 1225, 실시예 1226, 실시예 1227, 실시예 1228, 실시예 1229, 실시예 1230, 실시예 1231, 실시예 1232, 실시예 1233, 실시예 1234, 실시예 1235, 실시예 1236, 실시예 1237, 실시예 1238, 실시예 1239, 실시예 3301, 실시예 3302, 실시예 3303, 실시예 3304, 실시예 3305, 실시예 3306, 실시예 3307, 실시예 3308, 실시예 3309, 실시예 3310, 실시예 3311, 실시예 7001, 실시예 7002, 실시예 7003, 실시예 7004, 실시예 7005, 실시예 7006, 실시예 7007, 실시예 7008, 실시예 7009, 실시예 7010, 실시예 7011, 실시예 7012, 실시예 7013, 실시예 7014, 실시예 7015, 실시예 7016, 실시예 7017, 실시예 7018, 실시예 7019, 실시예 7020, 실시예 7021, 실시예 7022, 실시예 7023, 실시예 7024, 실시예 7025, 실시예 7026, 실시예 7027, 실시예 7028, 실시예 7029, 실시예 7030, 실시예 7031, 실시예 7032, 실시예 7033, 실시예 7034, 실시예 7035, 실시예 7036, 실시예 7037, 실시예 7038, 실시예 7039, 실시예 7040, 실시예 7041, 실시예 7042, 실시예 7043, 실시예 7044, 실시예 7045, 실시예 7046, 실시예 7047, 실시예 7048, 실시예 7049, 실시예 7050, 실시예 7051, 실시예 7052, 실시예 7053, 실시예 7054, 실시예 7055, 실시예 7056, 실시예 7057, 실시예 7058, 실시예 7059, 실시예 7060, 실시예 7061, 실시예 7062, 실시예 7063, 실시예 7064, 실시예 9001, 실시예 9002, 실시예 9003, 실시예 9004, 실시예 9005, 실시예 9006, 실시예 9007, 실시예 9008, 실시예 9009, 실시예 9010, 실시예 9011, 실시예 9012, 실시예 9013, 실시예 9014, 실시예 9015, 실시예 9016, 실시예 9017, 실시예 9018, 실시예 9019, 실시예 9020, 실시예 9021, 실시예 9022, 실시예 9023, 실시예 9024, 실시예 9025, 실시예 9026, 실시예 9027, 실시예 9028, 실시예 9029, 실시예 9030, 실시예 9031, 실시예 9032, 실시예 9033, 실시예 9034, 실시예 9035, 실시예 9036, 실시예 9037, 실시예 9038, 실시예 9039, 실시예 9040, 실시예 9041, 실시예 9042, 실시예 9043, 실시예 9044, 실시예 9045, 실시예 9046, 실시예 9047, 실시예 9048, 실시예 9049, 실시예 9050, 실시예 9051, 실시예 9052, 실시예 9053, 실시예 9054, 실시예 9055, 실시예 9056, 실시예 9057, 실시예 9058, 실시예 9059, 실시예 9060, 실시예 9061, 실시예 9062, 실시예 9063, 실시예 9064, 실시예 9065, 실시예 9066, 실시예 9067, 실시예 9068, 실시예 9069, 실시예 9070, 실시예 9071, 실시예 9072, 실시예 9073, 실시예 9074, 실시예 9075, 실시예 9076, 실시예 9077, 실시예 9078, 실시예 9079, 실시예 9080, 실시예 9081, 실시예 9082, 실시예 9083, 실시예 9084, 실시예 9085, 실시예 9086, 실시예 9087, 실시예 9088, 실시예 9089, 실시예 9090, 실시예 9091, 실시예 9092, 실시예 9093, 실시예 9094, 실시예 9095, 실시예 9096, 실시예 9097, 실시예 9098, 실시예 9099, 실시예 9100, 실시예 9105, 실시예 9106, 실시예 9107, 실시예 9108, 실시예 9109, 실시예 9110, 실시예 9111, 실시예 9112, 실시예 9113, 실시예 9114, 실시예 10001, 실시예 10501, 실시예 10502, 실시예 10503, 실시예 10504, 실시예 10505, 실시예 10506, 실시예 10507, 실시예 10508, 실시예 10509, 실시예 10510, 실시예 10511, 실시예 10512, 실시예 10513, 실시예 10514, 실시예 10515, 실시예 10516, 실시예 10517, 실시예 13001, 실시예 13002, 실시예 13003, 실시예 13004, 실시예 13005, 실시예 13006, 실시예 13007, 실시예 13008, 실시예 13009, 실시예 13010, 실시예 13011, 실시예 13012, 실시예 13013, 실시예 13014, 실시예 14001, 실시예 14002, 실시예 14003, 실시예 14004, 실시예 14005, 실시예 14006, 실시예 14007, 및 실시예 14008
    로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  8. 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    <화학식 II>
    Figure pct01230

    상기 식에서,
    A는 결합,
    Figure pct01231

    로부터 선택되고,
    여기서,
    Figure pct01232
    는 카르보닐 기에 대한 부착 지점을 나타내고,
    Figure pct01233
    는 질소 원자에 대한 부착 지점을 나타내고;
    n은 0 또는 1이고;
    R14 및 R15는 독립적으로 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    R16은 수소, -CHR17C(O)NH2, -CHR17C(O)NHCHR18C(O)NH2 및 -CHR17C(O)NHCHR18C(O)NHCH2C(O)NH2로부터 선택되고; 여기서 R17은 수소 및 -CH2OH로부터 선택되고, 여기서 R18은 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    Ra, Rf, Rj, Rk, Rl 및 Rm은 수소이고;
    Rb 및 Rc는 메틸이고;
    Rg는 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11 및 R12는 독립적으로 천연 아미노산 측쇄 및 비천연 아미노산 측쇄로부터 선택되거나 또는 하기 기재된 바와 같이 상응하는 이웃자리 R 기와 함께 고리를 형성하고;
    Rd는 수소 및 메틸로부터 선택되거나, 또는 Rd 및 R4는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
    Re는 수소 및 메틸로부터 선택되거나, 또는 Re 및 R5는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
    Rh는 수소 및 메틸로부터 선택되거나, 또는 Rh 및 R8은 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환되고;
    Ri는 수소 및 메틸로부터 선택되거나, 또는, Ri 및 R9는 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리는 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 기로 임의로 치환된다.
  9. 제8항에 있어서, A가
    Figure pct01234

    인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  10. 제9항에 있어서,
    Rd가 메틸이거나, 또는 Rd 및 R4가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고;
    Rg가 메틸이고;
    Ri가 메틸이거나, 또는 Ri 및 R9가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로티아졸로부터 선택된 고리를 형성하고; 여기서 각각의 고리가 아미노, 시아노, 메틸, 할로, 할로메틸 및 히드록시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환된 것인
    화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  11. 제10항에 있어서, R7이 플루오로 기로 임의로 치환된 페닐C1-C3알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  12. 화합물 71, 화합물 72, 화합물 73, 화합물 74, 화합물 75, 화합물 76, 화합물 77, 화합물 78, 화합물 79, 화합물 80, 화합물 81, 화합물 82, 화합물 83, 화합물 84, 화합물 85, 화합물 86, 화합물 87, 화합물 89, 화합물 90, 화합물 95, 화합물 96, 화합물 97, 화합물 98, 화합물 1001, 실시예 3052, 실시예 3053, 실시예 3054, 실시예 3055, 실시예 3056-A, 실시예 3056-B, 실시예 3057, 실시예 3058-A, 실시예 3058-B, 실시예 3059, 실시예 3060-A, 실시예 3060-B, 실시예 3061, 실시예 3062, 실시예 3063, 실시예 3064, 실시예 3065, 실시예 3066, 실시예 3067, 실시예 3068, 실시예 3069, 실시예 3070, 실시예 3071, 실시예 3072, 실시예 3073, 실시예 3074, 실시예 3075, 실시예 3076, 실시예 3077, 실시예 3078, 실시예 3079, 실시예 3080, 실시예 3081, 실시예 3082, 실시예 3083, 실시예 3086, 실시예 3087, 실시예 3088, 실시예 3089, 실시예 3090, 실시예 3091, 실시예 3092, 실시예 3093, 실시예 3094, 실시예 3095, 실시예 3096, 실시예 3097, 실시예 3098, 실시예 3099, 실시예 3100, 실시예 3101, 실시예 3102, 실시예 3103, 실시예 3104, 실시예 3105, 실시예 3106, 실시예 3107, 실시예 3109, 실시예 3110, 실시예 3111, 실시예 3112, 실시예 3113, 실시예 3114, 실시예 3115, 실시예 3116, 실시예 3117, 실시예 3118, 실시예 3119, 실시예 3120, 실시예 3121, 실시예 3122, 실시예 3123, 실시예 3124, 실시예 3125, 실시예 3130, 실시예 3131, 실시예 3132, 실시예 3133, 실시예 3134, 실시예 3135, 실시예 3136, 실시예 3138, 실시예 3139, 실시예 3140, 실시예 3141, 실시예 3142, 실시예 3143, 실시예 3144, 실시예 3145, 실시예 3146, 실시예 3147, 실시예 3148, 실시예 3149, 실시예 3150, 실시예 3151, 실시예 3152, 실시예 3153, 실시예 3154, 실시예 3155, 실시예 3156, 실시예 3157, 실시예 3158, 실시예 3159, 실시예 3160, 실시예 3161, 실시예 3162, 실시예 3163, 실시예 3164, 실시예 3165, 실시예 3166, 실시예 3167, 실시예 3168, 실시예 3171, 실시예 3172, 실시예 3173, 실시예 3174, 실시예 3175, 실시예 3176, 실시예 3177, 실시예 3178, 실시예 3179, 실시예 3180, 실시예 3181, 실시예 3182, 실시예 3183, 실시예 3184, 실시예 3185, 실시예 3186, 실시예 3187, 실시예 3188, 실시예 3189, 실시예 3190, 실시예 3191, 실시예 3192, 실시예 3193, 실시예 3194, 실시예 3195, 실시예 3196, 실시예 3197, 실시예 3198, 실시예 3199, 실시예 3200, 실시예 3201, 실시예 3202, 실시예 3203, 실시예 3204, 실시예 3205, 실시예 3206, 실시예 3207, 실시예 3208-A, 실시예 3208-B, 실시예 3209, 실시예 3500, 실시예 3501, 실시예 3502, 실시예 3503, 실시예 3504, 실시예 3505, 실시예 3506, 실시예 3507, 실시예 3508, 실시예 3509, 실시예 3510, 실시예 3511, 실시예 3512, 실시예 3513, 실시예 3514, 실시예 3515, 실시예 3516, 실시예 3517, 실시예 3518, 실시예 3519, 실시예 3520, 실시예 3522, 실시예 3523, 실시예 3524, 실시예 3525, 실시예 3526, 실시예 3527, 실시예 3528, 실시예 3529, 실시예 3531, 실시예 3532, 실시예 3533, 실시예 3534, 실시예 3535, 실시예 3536, 실시예 3537, 실시예 3538, 실시예 3539, 실시예 3540, 실시예 3541, 실시예 3542, 실시예 3543, 실시예 3544, 실시예 3545, 실시예 3546, 실시예 3547, 실시예 3548, 실시예 3549, 실시예 3550, 실시예 3551, 실시예 3552, 실시예 3553, 실시예 3555, 실시예 3556, 실시예 3557, 실시예 3558, 실시예 3559, 실시예 3560, 실시예 3561, 실시예 3562, 실시예 3563, 실시예 3564, 실시예 3565, 실시예 3566, 실시예 3567, 실시예 3568, 실시예 3569, 실시예 3570, 실시예 3571, 실시예 3572, 실시예 3573, 실시예 3574, 실시예 3575, 실시예 3576, 실시예 3577, 실시예 3578, 실시예 3579, 실시예 3580, 실시예 3581, 실시예 3582, 실시예 3583, 실시예 3584, 실시예 3585, 실시예 3586, 실시예 3588, 실시예 3589, 실시예 3590, 실시예 3591, 실시예 3592, 실시예 3593, 실시예 3594, 실시예 3595, 실시예 3596, 실시예 3597, 실시예 3598, 실시예 3599, 실시예 3600, 실시예 3601, 실시예 3602, 실시예 3603, 실시예 3604, 실시예 3605, 실시예 3606, 실시예 3607, 실시예 3608, 실시예 3609, 실시예 3610, 실시예 3611, 실시예 3613, 실시예 5001, 실시예 5002, 실시예 5003, 실시예 5004, 실시예 5005, 실시예 5006, 실시예 5007, 실시예 5008, 실시예 5009, 실시예 5010, 실시예 5011, 실시예 5012, 실시예 5013, 실시예 5014, 실시예 5015, 실시예 5016, 실시예 5017, 실시예 5018, 실시예 5019, 실시예 5020, 실시예 5021, 실시예 5022, 실시예 5023, 실시예 5024, 실시예 5025, 실시예 5026, 실시예 5027, 실시예 5028, 실시예 5029, 실시예 5030, 실시예 5031, 실시예 5032, 실시예 5033, 실시예 5034, 실시예 5035, 실시예 5036, 실시예 5037, 실시예 5038, 실시예 5039, 실시예 5040, 실시예 5041, 실시예 5042, 실시예 5043, 실시예 5044, 실시예 5045, 실시예 5046, 실시예 5047, 실시예 5048, 실시예 5049, 실시예 5050, 실시예 5051, 실시예 5052, 실시예 5053, 실시예 5054, 실시예 5055, 실시예 5056, 실시예 5057, 실시예 5058, 실시예 5059, 실시예 5060, 실시예 5061, 실시예 5062, 실시예 5063, 실시예 5064, 실시예 5065, 실시예 5066, 실시예 5067, 실시예 5068, 실시예 5069, 실시예 5070, 실시예 5071, 실시예 5072, 실시예 5073, 실시예 5074, 실시예 5075, 실시예 5076, 실시예 5077, 실시예 5078, 실시예 5079, 실시예 5080, 실시예 5081, 실시예 5082, 실시예 5083, 실시예 5084, 실시예 5085, 실시예 5086, 실시예 5087, 실시예 5088, 실시예 5089, 실시예 5090, 실시예 5091, 실시예 5092, 실시예 5093, 실시예 5094, 실시예 5095, 실시예 5096, 실시예 5097, 실시예 5098, 실시예 5099, 실시예 5100, 실시예 5101, 실시예 5102, 실시예 5103, 실시예 5104, 실시예 5105, 실시예 5106, 실시예 5107, 실시예 5108, 실시예 5109, 실시예 5110, 실시예 5111, 실시예 5112, 실시예 5113, 실시예 5114, 실시예 5115, 실시예 5116, 실시예 5117, 실시예 5118, 실시예 5119, 실시예 5120, 실시예 5121, 실시예 5122, 실시예 5123, 실시예 5124, 실시예 5125, 실시예 5126, 실시예 5127, 실시예 5128, 실시예 5129, 실시예 5130, 실시예 5131, 실시예 5132, 실시예 5133, 실시예 5134, 실시예 5135, 실시예 5137, 실시예 5138, 실시예 5139, 실시예 5141, 실시예 5142, 실시예 5143, 실시예 5144, 실시예 5145, 실시예 5146, 실시예 5147, 실시예 5140, 실시예 6001, 실시예 6002, 실시예 6003, 실시예 6004, 실시예 6005, 실시예 6006, 실시예 6007, 실시예 6008, 실시예 6009, 실시예 6010, 실시예 6011, 실시예 6012, 실시예 6013, 실시예 6014, 실시예 6015, 실시예 6016, 실시예 6017, 실시예 6018, 실시예 6019, 실시예 6020, 실시예 6021, 실시예 6022, 실시예 6023, 실시예 6024, 실시예 6025, 실시예 6026, 실시예 6027, 실시예 6028, 실시예 6029, 실시예 6030, 실시예 6031, 실시예 6032, 실시예 6033, 실시예 6034, 실시예 6035, 실시예 6036, 실시예 6037, 실시예 6038, 실시예 6039, 실시예 6040, 실시예 6041, 실시예 6042, 실시예 6043, 실시예 6044, 실시예 6045, 실시예 6046, 실시예 6047, 실시예 6048, 실시예 6049, 및 실시예 6050
    으로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  13. 화합물 99, 화합물 100, 화합물 101, 화합물 102, 화합물 103, 화합물 104, 화합물 105, 화합물 106, 화합물 107, 화합물 108, 화합물 109, 화합물 110, 화합물 111, 화합물 112, 화합물 113, 화합물 114, 화합물 115, 화합물 116, 화합물 117, 및 화합물 118
    로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  14. 면역 반응의 증진, 자극 및/또는 증가를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 적어도 1종의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 면역 반응을 증진, 자극 및/또는 증가시키는 방법.
  15. 제13항에 있어서, 추가의 작용제를 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드 또는 펩티드들 전에, 그 후에 또는 그와 동시에 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  16. 제15항에 있어서, 추가의 작용제가 항미생물제, 항바이러스제, 세포독성제 및/또는 면역 반응 조절제인 방법.
  17. 암 세포의 성장, 증식 또는 전이의 억제를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 1종 이상의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 암 세포의 성장, 증식 또는 전이를 억제하는 방법.
  18. 제17항에 있어서, 암이 흑색종, 신세포 암종, 편평 비소세포 폐암 (NSCLC), 비-편평 NSCLC, 결장직장암, 거세-저항성 전립선암, 난소암, 위암, 간세포성 암종, 췌장 암종, 두경부의 편평 세포 암종, 식도, 위장관 및 유방의 암종, 및 혈액 악성종양으로부터 선택된 것인 방법.
  19. 감염성 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 적어도 1종의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 감염성 질환을 치료하는 방법.
  20. 제19항에 있어서, 감염성 질환이 바이러스에 의해 유발된 것인 방법.
  21. 제20항에 있어서, 바이러스가 HIV, A형 간염, B형 간염, C형 간염, 포진 바이러스 및 인플루엔자로부터 선택된 것인 방법.
  22. 패혈성 쇼크의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 1종 이상의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 패혈성 쇼크를 치료하는 방법.
  23. 대상체에게 치료 유효량의 적어도 1종의 본원에 기재된 마크로시클릭 펩티드를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 PD-L1과 PD-1 및/또는 CD80의 상호작용을 차단하는 방법.
KR1020157028438A 2013-03-15 2014-03-13 Pd-1/pd-l1 및 cd80(b7-1)/pd-l1 단백질/단백질 상호작용의 마크로시클릭 억제제 KR102229512B1 (ko)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361794589P 2013-03-15 2013-03-15
US61/794,589 2013-03-15
US201361918184P 2013-12-19 2013-12-19
US61/918,184 2013-12-19
US14/201,977 US9308236B2 (en) 2013-03-15 2014-03-10 Macrocyclic inhibitors of the PD-1/PD-L1 and CD80(B7-1)/PD-L1 protein/protein interactions
US14/201,977 2014-03-10
PCT/US2014/026138 WO2014151634A1 (en) 2013-03-15 2014-03-13 Macrocyclic inhibitors of the pd-1/pd-l1 and cd80(b7-1)/pd-l1 protein/protein interactions

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20150133215A true KR20150133215A (ko) 2015-11-27
KR102229512B1 KR102229512B1 (ko) 2021-03-18

Family

ID=50877649

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020157028438A KR102229512B1 (ko) 2013-03-15 2014-03-13 Pd-1/pd-l1 및 cd80(b7-1)/pd-l1 단백질/단백질 상호작용의 마크로시클릭 억제제

Country Status (33)

Country Link
US (4) US9308236B2 (ko)
EP (2) EP2970390B1 (ko)
JP (1) JP6387082B2 (ko)
KR (1) KR102229512B1 (ko)
CN (1) CN105209479B (ko)
AU (1) AU2014233675B2 (ko)
BR (1) BR112015021410A2 (ko)
CA (1) CA2905453C (ko)
CL (1) CL2015002709A1 (ko)
CY (1) CY1122571T1 (ko)
DK (1) DK2970390T3 (ko)
EA (1) EA030195B1 (ko)
ES (1) ES2762580T3 (ko)
HK (1) HK1219957A1 (ko)
HR (1) HRP20192337T1 (ko)
HU (1) HUE048327T2 (ko)
IL (1) IL241324B (ko)
LT (1) LT2970390T (ko)
MX (1) MX2015011731A (ko)
MY (1) MY176746A (ko)
NZ (1) NZ630535A (ko)
PE (1) PE20151671A1 (ko)
PH (1) PH12015502027A1 (ko)
PL (1) PL2970390T3 (ko)
PT (1) PT2970390T (ko)
RS (1) RS59760B1 (ko)
SG (1) SG11201506917YA (ko)
SI (1) SI2970390T1 (ko)
TN (1) TN2015000418A1 (ko)
TW (1) TWI646112B (ko)
UY (1) UY35448A (ko)
WO (1) WO2014151634A1 (ko)
ZA (1) ZA201506793B (ko)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20170064548A (ko) * 2014-10-10 2017-06-09 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제
KR20170087518A (ko) * 2014-12-18 2017-07-28 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제
KR20170098872A (ko) * 2014-12-19 2017-08-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제
KR20180118724A (ko) * 2016-03-04 2018-10-31 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제
KR20180132775A (ko) * 2016-04-05 2018-12-12 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Pd-1/pd-l1 및 cd80/pd-l1 단백질/단백질 상호작용의 마크로시클릭 억제제
KR20190075118A (ko) * 2016-11-07 2019-06-28 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제

Families Citing this family (215)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ718622A (en) 2010-03-30 2018-03-23 Verseon Corp Multisubstituted aromatic compounds as inhibitors of thrombin
WO2013019906A1 (en) 2011-08-01 2013-02-07 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and mek inhibitors
AU2013355054B2 (en) 2012-12-07 2017-08-24 Chemocentryx, Inc. Diazole lactams
WO2014110574A1 (en) 2013-01-14 2014-07-17 Incyte Corporation Bicyclic aromatic carboxamide compounds useful as pim kinase inhibitors
ME03780B (me) 2013-01-15 2021-04-20 Incyte Holdings Corp Jedinjenja tiazolkarboksamida i piridinkarboksamida korisna kao inhibitori pim kinaze
US9308236B2 (en) 2013-03-15 2016-04-12 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic inhibitors of the PD-1/PD-L1 and CD80(B7-1)/PD-L1 protein/protein interactions
CN105658653A (zh) 2013-08-23 2016-06-08 因赛特公司 可用作pim激酶抑制剂的呋喃并-和噻吩并-吡啶甲酰胺化合物
US9822124B2 (en) 2014-07-14 2017-11-21 Incyte Corporation Bicyclic heteroaromatic carboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
US9580418B2 (en) 2014-07-14 2017-02-28 Incyte Corporation Bicyclic aromatic carboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
EP3169361B1 (en) 2014-07-15 2019-06-19 F.Hoffmann-La Roche Ag Compositions for treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and mek inhibitors
CN106999536B (zh) * 2014-09-11 2020-11-27 百时美施贵宝公司 Pd-1/pd-l1及cd80(b7-1)/pd-l1蛋白质/蛋白质相互作用的大环抑制剂
WO2016057898A1 (en) 2014-10-10 2016-04-14 Idera Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cancer using tlr9 agonist with checkpoint inhibitors
US9856292B2 (en) * 2014-11-14 2018-01-02 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US20160222060A1 (en) * 2015-02-04 2016-08-04 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US9809625B2 (en) * 2015-03-18 2017-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
IL310108A (en) 2015-05-06 2024-03-01 Snipr Tech Ltd Changing bacterial populations and microbiota adaptation
US9540347B2 (en) 2015-05-29 2017-01-10 Incyte Corporation Pyridineamine compounds useful as Pim kinase inhibitors
AR105967A1 (es) 2015-09-09 2017-11-29 Incyte Corp Sales de un inhibidor de pim quinasa
MA44909A (fr) 2015-09-15 2018-07-25 Acerta Pharma Bv Association thérapeutique d'un inhibiteur du cd19 et d'un inhibiteur de la btk
WO2017059251A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 Incyte Corporation Heterocyclic compounds useful as pim kinase inhibitors
ES2928164T3 (es) 2015-10-19 2022-11-15 Incyte Corp Compuestos heterocíclicos como inmunomoduladores
US10273281B2 (en) 2015-11-02 2019-04-30 Five Prime Therapeutics, Inc. CD80 extracellular domain polypeptides and their use in cancer treatment
WO2017079202A1 (en) 2015-11-02 2017-05-11 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of cd40 activation and immune checkpoint blockade
US20190038713A1 (en) 2015-11-07 2019-02-07 Multivir Inc. Compositions comprising tumor suppressor gene therapy and immune checkpoint blockade for the treatment of cancer
CA3005727A1 (en) 2015-11-19 2017-05-26 Incyte Corporation Substituted 2-methylbiphenyl-3-yl heterocyclic compounds and pharmaceutical compositions thereof useful as immunomodulators
PE20230731A1 (es) 2015-12-22 2023-05-03 Incyte Corp Compuestos heterociclicos como inmunomoduladores
ES2839408T3 (es) 2016-01-13 2021-07-05 Acerta Pharma Bv Combinaciones terapéuticas de un antifolato y un inhibidor de BTK
KR102413037B1 (ko) 2016-03-15 2022-06-23 메르사나 테라퓨틱스, 인코포레이티드 Napi2b 표적화된 항체-약물 접합체 및 이의 사용 방법
US11046782B2 (en) 2016-03-30 2021-06-29 Musc Foundation For Research Development Methods for treatment and diagnosis of cancer by targeting glycoprotein A repetitions predominant (GARP) and for providing effective immunotherapy alone or in combination
JP2019510832A (ja) 2016-04-07 2019-04-18 ケモセントリクス，インコーポレーテッド Ｐｄ−１阻害剤又はｐｄ−ｌ１阻害剤と組み合わせてｃｃｒ１アンタゴニストを投与することによる腫瘍負荷の低減
JP7131773B2 (ja) 2016-04-29 2022-09-06 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム ホルモン受容体に関連する転写活性の標的尺度
AR108396A1 (es) 2016-05-06 2018-08-15 Incyte Corp Compuestos heterocíclicos como inmunomoduladores
TWI794171B (zh) 2016-05-11 2023-03-01 美商滬亞生物國際有限公司 Ｈｄａｃ抑制劑與ｐｄ-ｌ１抑制劑之組合治療
TWI808055B (zh) 2016-05-11 2023-07-11 美商滬亞生物國際有限公司 Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療
AU2017268291B2 (en) * 2016-05-19 2022-09-29 Bristol-Myers Squibb Company PET-imaging immunomodulators
ES2905980T3 (es) 2016-05-26 2022-04-12 Incyte Corp Compuestos heterocíclicos como inmunomoduladores
GB201609811D0 (en) 2016-06-05 2016-07-20 Snipr Technologies Ltd Methods, cells, systems, arrays, RNA and kits
PE20190731A1 (es) 2016-06-20 2019-05-23 Incyte Corp Compuestos heterociclicos como inmunomoduladores
CN109803651B (zh) 2016-06-27 2022-05-31 凯莫森特里克斯股份有限公司 免疫调节剂化合物
MX2019000252A (es) 2016-06-30 2019-10-09 Oncorus Inc Administracion viral oncolitica pseudotipada de polipeptidos terapeuticos.
ES2930092T3 (es) 2016-07-14 2022-12-07 Incyte Corp Compuestos heterocíclicos como inmunomoduladores
MA46045A (fr) 2016-08-29 2021-04-28 Incyte Corp Composés hétérocycliques utilisés comme immunomodulateurs
CN109689679A (zh) * 2016-09-13 2019-04-26 第一三共株式会社 血小板反应蛋白1结合肽
WO2018055080A1 (en) 2016-09-22 2018-03-29 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for reprograming immune environment in a subject in need thereof
CN116196425A (zh) 2016-09-27 2023-06-02 得克萨斯系统大学评议会 通过调节微生物组来增强免疫检查点阻断疗法的方法
US11447550B2 (en) * 2016-10-04 2022-09-20 The Curators Of The University Of Missouri Peptides for molecular detection of PD-L1
CN116672456A (zh) 2016-10-12 2023-09-01 得克萨斯州大学系统董事会 用于tusc2免疫治疗的方法和组合物
BR112019007450A2 (pt) 2016-10-14 2020-07-07 Precision Biosciences, Inc. meganucleases modificadas específicas para sequências de reconhecimento no genoma do vírus da hepatite b
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
EP3538112A4 (en) 2016-11-09 2020-09-02 Musc Foundation for Research Development CD38-NAD + REGULATED METABOLIC AXIS IN ANTITUMOR IMMUNOTHERAPY
US11135307B2 (en) 2016-11-23 2021-10-05 Mersana Therapeutics, Inc. Peptide-containing linkers for antibody-drug conjugates
CA3045466A1 (en) 2016-12-01 2018-06-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Radiolabeled anti-pd-l1 antibodies for immuno-pet imaging
EP3551226A1 (en) 2016-12-12 2019-10-16 MultiVir Inc. Methods and compositions comprising viral gene therapy and an immune checkpoint inhibitor for treatment and prevention of cancer and infectious diseases
MY197635A (en) 2016-12-22 2023-06-29 Incyte Corp Benzooxazole derivatives as immunomodulators
BR112019012957A2 (pt) 2016-12-22 2019-11-26 Incyte Corp derivados de tetra-hidroimidazo[4,5-c]piridina como indutores de internalização de pd-l1
EP3558989B1 (en) 2016-12-22 2021-04-14 Incyte Corporation Triazolo[1,5-a]pyridine derivatives as immunomodulators
ES2899402T3 (es) 2016-12-22 2022-03-11 Incyte Corp Derivados de piridina como inmunomoduladores
CA3048229A1 (en) 2016-12-23 2018-06-28 The Johns Hopkins University Tumor and immune cell imaging based on pd-l1 expression
US11584733B2 (en) 2017-01-09 2023-02-21 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
WO2018129533A1 (en) 2017-01-09 2018-07-12 Shuttle Pharmaceuticals, Llc Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
US11693007B2 (en) 2017-02-24 2023-07-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Assay for detection of early stage pancreatic cancer
TW201834697A (zh) 2017-02-28 2018-10-01 美商梅爾莎納醫療公司 Her2標靶抗體－藥物結合物之組合療法
KR20190139216A (ko) 2017-04-28 2019-12-17 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. Cd80 세포외 도메인 폴리펩티드를 이용한 치료 방법
CN117624307A (zh) 2017-05-12 2024-03-01 中外制药株式会社 用于制备环状有机化合物的方法
US11858974B2 (en) 2017-05-22 2024-01-02 Resq Biotech Macrocyclic modulators of disease associated protein misfolding and aggregation
WO2018237153A1 (en) * 2017-06-23 2018-12-27 Bristol-Myers Squibb Company IMMUNOMODULATORS ACTING AS PD-1 ANTAGONISTS
WO2019020593A1 (en) 2017-07-25 2019-01-31 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) METHODS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS FOR MODULATION OF MONOCYTOPOISIS
KR102647257B1 (ko) 2017-07-28 2024-03-13 케모센트릭스, 인크. 면역조절제 화합물
US10392405B2 (en) * 2017-08-08 2019-08-27 Chemocentryx, Inc. Macrocyclic immunomodulators
SG11202002119QA (en) 2017-09-25 2020-04-29 Chemocentryx Inc Combination therapy using a chemokine receptor 2 (ccr2) antagonist and a pd-1/pd-l1 inhibitor
EP3692053A1 (en) * 2017-10-03 2020-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
EP3717021A1 (en) 2017-11-27 2020-10-07 Mersana Therapeutics, Inc. Pyrrolobenzodiazepine antibody conjugates
US10596161B2 (en) 2017-12-08 2020-03-24 Incyte Corporation Low dose combination therapy for treatment of myeloproliferative neoplasms
US11203610B2 (en) 2017-12-20 2021-12-21 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2′3′ cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
WO2019123340A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
WO2019126691A1 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Mersana Therapeutics, Inc. Pyrrolobenzodiazepine antibody conjugates
EP3731850A4 (en) 2017-12-29 2021-12-01 Oncorus, Inc. ONCOLYTIC VIRUS DELIVERY OF THERAPEUTIC POLYPEPTIDES
US20190269664A1 (en) 2018-01-08 2019-09-05 Chemocentryx, Inc. Methods of treating solid tumors with ccr2 antagonists
WO2019136368A2 (en) 2018-01-08 2019-07-11 Chemocentryx, Inc. Methods of treating solid tumors with ccr2 antagonists
CA3087565A1 (en) 2018-01-09 2019-07-18 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
CN108409830B (zh) * 2018-02-05 2021-04-23 郑州大学 一种人pd-1蛋白胞外段亲和环肽c8及其应用
WO2019165043A2 (en) 2018-02-22 2019-08-29 Chemocentryx, Inc. Indane-amines as pd-l1 antagonists
CN111788204B (zh) 2018-02-26 2023-05-05 吉利德科学公司 作为hbv复制抑制剂的取代吡咯嗪化合物
WO2020036635A2 (en) 2018-03-19 2020-02-20 Multivir Inc. Methods and compositions comprising tumor suppressor gene therapy and cd122/cd132 agonists for the treatment of cancer
EP4085923A1 (en) 2018-03-25 2022-11-09 SNIPR Biome ApS. Treating and preventing microbial infections
US10760075B2 (en) 2018-04-30 2020-09-01 Snipr Biome Aps Treating and preventing microbial infections
US20210361655A1 (en) 2018-03-27 2021-11-25 Board Of Regents, The University Of Texas System Compounds with anti-tumor activity against cancer cells bearing her2 exon 19 mutations
US10870691B2 (en) 2018-04-05 2020-12-22 Gilead Sciences, Inc. Antibodies and fragments thereof that bind hepatitis B virus protein X
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
CA3093888A1 (en) 2018-04-06 2019-10-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotides
US11142750B2 (en) 2018-04-12 2021-10-12 Precision Biosciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the Hepatitis B virus genome
TW202014193A (zh) 2018-05-03 2020-04-16 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 包含碳環核苷酸之2’3’－環二核苷酸
CN112752756A (zh) 2018-05-11 2021-05-04 因赛特公司 作为PD-L1免疫调节剂的四氢-咪唑并[4,5-c]吡啶衍生物
US20210253614A1 (en) 2018-05-31 2021-08-19 Peloton Therapeutics, Inc. Compositions and methods for inhibiting cd73
AU2019277632A1 (en) 2018-05-31 2020-12-24 National Cancer Center Japan Biomarker for judging efficacy of immune checkpoint inhibitor
WO2020028097A1 (en) 2018-08-01 2020-02-06 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of (r)-11-(methoxymethyl)-12-(3-methoxypropoxy)-3,3-dimethyl-8-0x0-2,3,8,13b-tetrahydro-1h-pyrido[2,1-a]pyrrolo[1,2-c] phthalazine-7-c arboxylic acid
TW202031273A (zh) 2018-08-31 2020-09-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 抗ｐｄ－１抗體難治療性之非小細胞肺癌（ｎｓｃｌｃ）病患的治療
US20220177587A1 (en) 2018-09-19 2022-06-09 Alpine Immune Sciences, Inc. Methods and uses of variant cd80 fusion proteins and related constructs
TW202028457A (zh) 2018-09-20 2020-08-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 來自經冷凍保存之腫瘤樣本之腫瘤浸潤性淋巴細胞（ｔｉｌ）之擴增
TW202028212A (zh) 2018-10-11 2020-08-01 日商小野藥品工業股份有限公司 Ｓｔｉｎｇ促效化合物
EP3873534A1 (en) 2018-10-29 2021-09-08 Mersana Therapeutics, Inc. Cysteine engineered antibody-drug conjugates with peptide-containing linkers
CN111548408B (zh) * 2018-10-30 2021-08-03 德琪(浙江)医药科技有限公司 一种改进的能与pd-1特异性结合的肿瘤抑制肽及其用途
CA3116347A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds having hpk1 inhibitory activity
LT3873903T (lt) 2018-10-31 2024-05-10 Gilead Sciences, Inc. Pakeistieji 6-azabenzimidazolo junginiai, kaip hpk1 inhibitoriai
WO2020102375A1 (en) 2018-11-14 2020-05-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Intralesional administration of pd-1 inhibitors for treating skin cancer
WO2020106621A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Board Of Regents, The University Of Texas System A modular, polycistronic vector for car and tcr transduction
WO2020113029A2 (en) 2018-11-28 2020-06-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Multiplex genome editing of immune cells to enhance functionality and resistance to suppressive environment
KR20210096648A (ko) 2018-11-29 2021-08-05 보드 오브 리전츠, 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 자연 살해 세포의 생체외 확장을 위한 방법 및 이의 용도
JP2022517324A (ja) 2019-01-03 2022-03-08 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル 癌を患っている被験者における、ｃｄ８陽性ｔ細胞依存性免疫応答を増強させるための方法及び医薬組成物
WO2020150275A1 (en) * 2019-01-14 2020-07-23 New York University Cyclic peptide dimers
MA55084A (fr) 2019-02-28 2022-01-05 Regeneron Pharma Administration d'inhibiteurs de pd-1 pour le traitement du cancer de la peau
SG11202109003QA (en) 2019-03-06 2021-09-29 Regeneron Pharma Il-4/il-13 pathway inhibitors for enhanced efficacy in treating cancer
JP7350872B2 (ja) 2019-03-07 2023-09-26 インスティチュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー エーエスシーアール，ヴイ．ヴイ．アイ． ３’３’－環状ジヌクレオチドおよびそのプロドラッグ
WO2020178768A1 (en) 2019-03-07 2020-09-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
WO2020178769A1 (en) 2019-03-07 2020-09-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
JP2022526960A (ja) 2019-03-28 2022-05-27 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 腫瘍を処置する方法
WO2020198672A1 (en) 2019-03-28 2020-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
JP2022529139A (ja) 2019-04-02 2022-06-17 イミュネチューン・ベー・フェー 免疫刺激組成物及びその使用
TWI751516B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TW202212339A (zh) 2019-04-17 2022-04-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
EP3966315A1 (en) 2019-05-09 2022-03-16 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Methods for the production of hepatocytes
CN111909240B (zh) * 2019-05-10 2023-10-24 中国药科大学 一种pd-1/pd-l1多肽类抑制剂及其医药用途
US10945981B2 (en) 2019-05-17 2021-03-16 Cancer Prevention Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating familial adenomatous polyposis
KR20220010535A (ko) 2019-05-21 2022-01-25 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제
WO2020237025A1 (en) 2019-05-23 2020-11-26 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
EP3977132A1 (en) 2019-05-30 2022-04-06 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and combination therapy
US20220363760A1 (en) 2019-05-30 2022-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signature for suitability to immuno-oncology therapy
EP3976832A1 (en) 2019-05-30 2022-04-06 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject suitable for an immuno-oncology (i-o) therapy
US20220305135A1 (en) 2019-06-03 2022-09-29 The University Of Chicago Methods and compositions for treating cancer with cancer-targeted adjuvants
CA3144535A1 (en) 2019-06-03 2020-12-10 The University Of Chicago Methods and compositions for treating cancer with collagen binding drug carriers
WO2021007386A1 (en) 2019-07-10 2021-01-14 Chemocentryx, Inc. Indanes as pd-l1 inhibitors
WO2021025554A1 (en) 2019-08-02 2021-02-11 Stichting Het Nederlands Kanker Instituut-Antoni van Leeuwenhoek Ziekenhuis Combination comprising an activator of the glucocorticoid receptor and an inhibitor of ifg-1 signaling for carcinoma treatment
MX2022001434A (es) 2019-08-05 2022-02-22 Ono Pharmaceutical Co Biomarcadores para determinar la eficacia de los inhibidores de puntos de control inmunitarios.
US11753406B2 (en) 2019-08-09 2023-09-12 Incyte Corporation Salts of a PD-1/PD-L1 inhibitor
US20210047425A1 (en) 2019-08-12 2021-02-18 Purinomia Biotech, Inc. Methods and compositions for promoting and potentiating t-cell mediated immune responses through adcc targeting of cd39 expressing cells
WO2021034804A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations of tenofovir alafenamide
CN114450028A (zh) 2019-09-22 2022-05-06 百时美施贵宝公司 Lag-3拮抗剂治疗的定量空间剖析
AR120109A1 (es) 2019-09-30 2022-02-02 Incyte Corp Compuestos de pirido[3,2-d]pirimidina como inmunomoduladores
CN117843811A (zh) 2019-09-30 2024-04-09 吉利德科学公司 Hbv疫苗和治疗hbv的方法
US20220280499A1 (en) 2019-10-21 2022-09-08 Stichting Het Nederlands Kanker Instituue-Antoni van Leeuwenhoek Ziekenhuis Novel drug combinations for treatment of a carcinoma
WO2021087056A1 (en) 2019-10-30 2021-05-06 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
WO2021087458A2 (en) 2019-11-02 2021-05-06 Board Of Regents, The University Of Texas System Targeting nonsense-mediated decay to activate p53 pathway for the treatment of cancer
CN115942973A (zh) 2019-11-08 2023-04-07 百时美施贵宝公司 用于黑色素瘤的lag-3拮抗剂疗法
PE20230407A1 (es) 2019-11-11 2023-03-07 Incyte Corp Sales y formas cristalinas de un inhibidor de pd-1/pd-l1
EP4061818B1 (en) * 2019-11-19 2023-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides as pd-l1 inhibitors and immunomodulators for the treatment of cancer and infectious diseases
WO2021113644A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Multivir Inc. Combinations comprising a cd8+ t cell enhancer, an immune checkpoint inhibitor and radiotherapy for targeted and abscopal effects for the treatment of cancer
WO2021113765A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Precision Biosciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the hepatitis b virus genome
US20230105212A1 (en) 2020-01-03 2023-04-06 Shanghai Hansoh Biomedical Co., Ltd. Biphenyl derivative inhibitor, preparation method therefor and use thereof
KR20220122751A (ko) * 2020-01-06 2022-09-02 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 암 및 감염성 질환의 치료를 위한 pd-l1 억제제 및 면역조정제로서의 마크로시클릭 펩티드
BR112022012918A2 (pt) 2020-01-07 2022-09-06 Univ Texas Variantes de enzima de exaustão de metiltioadenosina/adenosina humana melhorada para terapia do câncer
CA3168337A1 (en) 2020-02-17 2021-08-26 Marie-Andree Forget Methods for expansion of tumor infiltrating lymphocytes and use thereof
US20230183292A1 (en) 2020-03-16 2023-06-15 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
TW202200161A (zh) 2020-03-20 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 4’-c-經取代-2-鹵基-2’-去氧腺苷核苷之前藥及其製造與使用方法
US20230151059A1 (en) * 2020-03-30 2023-05-18 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
EP4134134A4 (en) 2020-04-10 2023-12-27 ONO Pharmaceutical Co., Ltd. STING AGONIST COMPOUND
WO2021206158A1 (ja) 2020-04-10 2021-10-14 小野薬品工業株式会社 がん治療方法
MX2022013065A (es) 2020-04-22 2022-12-08 Iovance Biotherapeutics Inc Sistemas y metodos para coordinar la manufactura de celulas para inmunoterapia especifica de acuerdo al paciente.
EP4143344A1 (en) 2020-04-27 2023-03-08 Agendia N.V. Treatment of her2 negative, mammaprint high risk 2 breast cancer
JP2023524813A (ja) * 2020-05-08 2023-06-13 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 免疫調節剤
US20230212256A1 (en) 2020-05-21 2023-07-06 Board Of Regents, The University Of Texas System T cell receptors with vgll1 specificity and uses thereof
CN111574592B (zh) * 2020-05-25 2023-01-31 中国药科大学 一类具有拮抗pd-1/pd-l1相互作用的环肽类化合物及其应用
JP7240512B2 (ja) 2020-05-26 2023-03-15 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Ｐｄ－１阻害剤を投与することにより子宮頸がんを処置する方法
CN113754736A (zh) * 2020-06-02 2021-12-07 南京礼威生物医药有限公司 含酰肼结构的pd-l1环肽抑制剂
WO2021247836A1 (en) 2020-06-03 2021-12-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for targeting shp-2 to overcome resistance
CA3168743A1 (en) 2020-08-26 2022-03-03 Matthew G. Fury Methods of treating cancer by administering a pd-1 inhibitor
MX2023002332A (es) 2020-08-28 2023-03-21 Bristol Myers Squibb Co Terapia con antagonistas del gen 3 de activacion de linfocitos (lag-3) para carcinoma hepatocelular.
US20230303700A1 (en) 2020-08-31 2023-09-28 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and immunotherapy
CN116194142A (zh) 2020-09-03 2023-05-30 瑞泽恩制药公司 通过施用pd-1抑制剂治疗癌症疼痛的方法
US20230381112A1 (en) 2020-09-22 2023-11-30 Vaccitech North America, Inc. Compositions and Methods of Manufacturing Amphiphilic Block Copolymers that Form Nanoparticles in Situ
WO2022072797A1 (en) * 2020-10-02 2022-04-07 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptide boronate immunomodulators
JP2023546020A (ja) * 2020-10-08 2023-11-01 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 新規二量体免疫調節剤
CN116323640A (zh) * 2020-10-09 2023-06-23 百时美施贵宝公司 大环免疫调节剂
EP4228701A1 (en) 2020-10-19 2023-08-23 Vaccitech North America, Inc. Star polymer drug conjugates
EP4232019A1 (en) 2020-10-23 2023-08-30 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for lung cancer
KR20230098279A (ko) 2020-10-28 2023-07-03 이케나 온콜로지, 인코포레이티드 Pdx 억제제 또는 독소루비신과 ahr 억제제의 조합
WO2022099075A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Incyte Corporation Crystalline form of a pd-1/pd-l1 inhibitor
MX2023005362A (es) 2020-11-06 2023-06-22 Incyte Corp Proceso para hacer un inhibidor de proteina de muerte programada 1 (pd-1)/ligando de muerte programada 1 (pd-l1) y sales y formas cristalinas del mismo.
US11780836B2 (en) 2020-11-06 2023-10-10 Incyte Corporation Process of preparing a PD-1/PD-L1 inhibitor
IL302728A (en) 2020-11-13 2023-07-01 Catamaran Bio Inc Genetically modified natural killer cells and methods of using them
US20220162288A1 (en) 2020-11-25 2022-05-26 Catamaran Bio, Inc. Cellular therapeutics engineered with signal modulators and methods of use thereof
WO2022114957A1 (en) 2020-11-26 2022-06-02 Stichting Het Nederlands Kanker Instituut-Antoni van Leeuwenhoek Ziekenhuis Personalized tumor markers
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
CN117529338A (zh) 2021-01-19 2024-02-06 威廉马歇莱思大学 多肽的骨特异性递送
KR20230159590A (ko) 2021-03-23 2023-11-21 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. Pd-1 억제제를 투여함에 의한 면역억제 또는 면역손상된 환자에서 암을 치료하는 방법
CN117157306A (zh) 2021-03-24 2023-12-01 百时美施贵宝公司 免疫调节剂
BR112023019847A2 (pt) 2021-03-29 2023-11-07 Juno Therapeutics Inc Métodos para dosagem e tratamento com uma combinação de uma terapia com inibidor de ponto de verificação e uma terapia com célula t car
JP2024518558A (ja) 2021-05-13 2024-05-01 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ＴＬＲ８調節化合物と抗ＨＢＶ ｓｉＲＮＡ治療薬との組合せ
WO2022261161A1 (en) * 2021-06-09 2022-12-15 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic peptide immunomodulators
TW202315637A (zh) 2021-06-11 2023-04-16 美商基利科學股份有限公司 Mcl-1抑制劑與抗癌劑之組合
US11931424B2 (en) 2021-06-11 2024-03-19 Gilead Sciences, Inc. Combination MCL-1 inhibitors with anti-body drug conjugates
WO2022271684A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3220923A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
AU2022298639A1 (en) 2021-06-23 2023-12-07 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
KR20240005901A (ko) 2021-06-23 2024-01-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 디아실글리세롤 키나제 조절 화합물
EP4370530A1 (en) * 2021-07-12 2024-05-22 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic immunomodulators
KR20240038991A (ko) 2021-07-19 2024-03-26 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 암을 치료하기 위한 체크포인트 저해제 및 종양용해 바이러스의 조합
KR20240035843A (ko) * 2021-07-19 2024-03-18 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 마크로시클릭 면역조정제
AU2022324040A1 (en) 2021-08-04 2024-02-22 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Lat activating chimeric antigen receptor t cells and methods of use thereof
AU2022340700A1 (en) * 2021-09-03 2024-04-18 BCN Biosciences L.L.C. Methods of treatment using bcn057, bcn077 and analogs
CN113827599A (zh) * 2021-09-23 2021-12-24 天津国际生物医药联合研究院 去甲泽拉木醛在抗登革病毒感染中的潜在应用
CA3234457A1 (en) 2021-10-05 2023-04-13 Cytovia Therapeutics, Llc Natural killer cells and methods of use thereof
TW202330612A (zh) 2021-10-20 2023-08-01 日商武田藥品工業股份有限公司 靶向ｂｃｍａ之組合物及其使用方法
WO2023076880A1 (en) 2021-10-25 2023-05-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Foxo1-targeted therapy for the treatment of cancer
AU2022375806A1 (en) 2021-10-29 2023-12-14 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
WO2023102507A1 (en) * 2021-12-03 2023-06-08 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic immunomodulators
WO2023122945A1 (zh) * 2021-12-28 2023-07-06 知和(山东)大药厂有限公司 环状多肽化合物及其用途
WO2023147371A1 (en) 2022-01-26 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
WO2023159102A1 (en) 2022-02-17 2023-08-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combinations of checkpoint inhibitors and oncolytic virus for treating cancer
WO2023178324A1 (en) 2022-03-17 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Pharmaceutical compositions comprising salts of salcaprozate and nicotinamide for improving oral bioavailability
WO2023196964A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Machine learning identification, classification, and quantification of tertiary lymphoid structures
WO2023201369A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Iovance Biotherapeutics, Inc. Til expansion processes using specific cytokine combinations and/or akti treatment
WO2023211972A1 (en) 2022-04-28 2023-11-02 Medical University Of South Carolina Chimeric antigen receptor modified regulatory t cells for treating cancer
WO2023224487A1 (en) 2022-05-19 2023-11-23 Agendia N.V. Prediction of response to immune therapy in breast cancer patients
WO2024028794A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Temple Therapeutics BV Methods for treating endometrial and ovarian hyperproliferative disorders

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000026353A1 (en) * 1998-10-29 2000-05-11 Angstrom Pharmaceuticals, Inc. Cyclic peptide ligands that target urokinase plasminogen activator receptor, their pharmaceutical compositions and use
WO2012033154A1 (ja) * 2010-09-09 2012-03-15 国立大学法人 東京大学 N-メチルアミノ酸およびその他の特殊アミノ酸を含む特殊ペプチド化合物ライブラリーの翻訳構築と活性種探索法
WO2012074130A1 (ja) * 2010-12-03 2012-06-07 国立大学法人東京大学 ペプチドライブラリーの製造方法、ペプチドライブラリー、及びスクリーニング方法

Family Cites Families (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4475196A (en) 1981-03-06 1984-10-02 Zor Clair G Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system
US4447233A (en) 1981-04-10 1984-05-08 Parker-Hannifin Corporation Medication infusion pump
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
US4486194A (en) 1983-06-08 1984-12-04 James Ferrara Therapeutic device for administering medicaments through the skin
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
US5374548A (en) 1986-05-02 1994-12-20 Genentech, Inc. Methods and compositions for the attachment of proteins to liposomes using a glycophospholipid anchor
MX9203291A (es) 1985-06-26 1992-08-01 Liposome Co Inc Metodo para acoplamiento de liposomas.
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US5108921A (en) 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US6410690B1 (en) 1995-06-07 2002-06-25 Medarex, Inc. Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies
US5869451A (en) 1995-06-07 1999-02-09 Glaxo Group Limited Peptides and compounds that bind to a receptor
US5811097A (en) 1995-07-25 1998-09-22 The Regents Of The University Of California Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling
US5922845A (en) 1996-07-11 1999-07-13 Medarex, Inc. Therapeutic multispecific compounds comprised of anti-Fcα receptor antibodies
US5942492A (en) * 1996-11-12 1999-08-24 Angstrom Pharmaceuticals, Inc. Cyclic peptides that bind to urokinase-type plasminogen activator receptor
MXPA05006828A (es) 2002-12-23 2005-09-08 Wyeth Corp Anticuerpos contra pd-1, y sus usos.
SI2161336T1 (sl) 2005-05-09 2013-11-29 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Humana monoklonska protitelesa za programirano smrt 1 (PD-1) in postopki za zdravljenje raka ob uporabi anti-PD-1 protiteles samih ali v kombinaciji z drugimi imunoterapevtiki
BRPI0613361A2 (pt) 2005-07-01 2011-01-04 Medarex Inc anticorpo monoclonal humano isolado, composição, imunoconjugado, molécula biespecìfica, molécula de ácido nucleico isolada, vetor de expressão, célula hospedeira, camundongo transgênico, método para modular uma resposta imune num indivìduo, método para inibir crescimento de células tumorais num indivìduo, método para tratar uma doença infecciosa num indivìduo, método para aumentar uma resposta imune a um antìgeno num indivìduo, método para tratar ou prevenir uma doença inflamatória num indivìduo e método para preparar o anticorpo anti-pd-l1
EP2990411B1 (en) 2007-03-26 2017-05-03 The University of Tokyo Process for synthesizing cyclic peptide compound
US8168757B2 (en) 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins
US20110223188A1 (en) 2008-08-25 2011-09-15 Solomon Langermann Targeted costimulatory polypeptides and methods of use to treat cancer
US8907053B2 (en) 2010-06-25 2014-12-09 Aurigene Discovery Technologies Limited Immunosuppression modulating compounds
CN103732238A (zh) 2011-06-08 2014-04-16 奥瑞基尼探索技术有限公司 用于免疫调节的治疗性化合物
RU2014143443A (ru) 2012-03-29 2016-05-20 Ориджин Дискавери Текнолоджиз Лимитед Иммуномодулирующие циклические соединения
JP2013253842A (ja) 2012-06-06 2013-12-19 Univ Of Tokyo ｐＨ依存的に標的分子に結合するペプチドのスクリーニング方法
IN2014KN02752A (ko) 2012-06-06 2015-05-08 Polyphor Ag
EP4356960A2 (en) 2013-03-15 2024-04-24 F. Hoffmann-La Roche AG Biomarkers and methods of treating pd-1 and pd-l1 related conditions
US9308236B2 (en) 2013-03-15 2016-04-12 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic inhibitors of the PD-1/PD-L1 and CD80(B7-1)/PD-L1 protein/protein interactions
PL3041468T3 (pl) 2013-09-06 2018-12-31 Aurigene Discovery Technologies Limited Pierścieniowe związki peptydomimetyczne jako immunomodulatory
WO2015044900A1 (en) 2013-09-27 2015-04-02 Aurigene Discovery Technologies Limited Therapeutic immunomodulating compounds
CN106999536B (zh) 2014-09-11 2020-11-27 百时美施贵宝公司 Pd-1/pd-l1及cd80(b7-1)/pd-l1蛋白质/蛋白质相互作用的大环抑制剂

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000026353A1 (en) * 1998-10-29 2000-05-11 Angstrom Pharmaceuticals, Inc. Cyclic peptide ligands that target urokinase plasminogen activator receptor, their pharmaceutical compositions and use
WO2012033154A1 (ja) * 2010-09-09 2012-03-15 国立大学法人 東京大学 N-メチルアミノ酸およびその他の特殊アミノ酸を含む特殊ペプチド化合物ライブラリーの翻訳構築と活性種探索法
WO2012074130A1 (ja) * 2010-12-03 2012-06-07 国立大学法人東京大学 ペプチドライブラリーの製造方法、ペプチドライブラリー、及びスクリーニング方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ACS Chemical Biology, Vol. 7, pp. 607-613(2012.01.24.) *
Molecular Medicine Reports, Vol. 6, pp. 553-557(2012.06.27.) *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20170064548A (ko) * 2014-10-10 2017-06-09 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제
KR20170087518A (ko) * 2014-12-18 2017-07-28 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제
KR20170098872A (ko) * 2014-12-19 2017-08-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제
KR20180118724A (ko) * 2016-03-04 2018-10-31 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제
KR20180132775A (ko) * 2016-04-05 2018-12-12 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Pd-1/pd-l1 및 cd80/pd-l1 단백질/단백질 상호작용의 마크로시클릭 억제제
KR20190075118A (ko) * 2016-11-07 2019-06-28 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역조정제

Also Published As

Publication number Publication date
TW201502141A (zh) 2015-01-16
ES2762580T3 (es) 2020-05-25
US9308236B2 (en) 2016-04-12
US20160158349A1 (en) 2016-06-09
IL241324A0 (en) 2015-11-30
TN2015000418A1 (en) 2017-01-03
TWI646112B (zh) 2019-01-01
HUE048327T2 (hu) 2020-07-28
PH12015502027A1 (en) 2016-02-15
MY176746A (en) 2020-08-21
EP2970390B1 (en) 2019-11-06
SI2970390T1 (sl) 2019-12-31
US20170369530A1 (en) 2017-12-28
JP6387082B2 (ja) 2018-09-05
BR112015021410A2 (pt) 2017-10-10
IL241324B (en) 2020-05-31
SG11201506917YA (en) 2015-09-29
AU2014233675B2 (en) 2018-06-28
KR102229512B1 (ko) 2021-03-18
ZA201506793B (en) 2018-11-28
WO2014151634A1 (en) 2014-09-25
UY35448A (es) 2014-09-30
US20160340391A1 (en) 2016-11-24
JP2016519062A (ja) 2016-06-30
PL2970390T3 (pl) 2020-06-01
US9879046B2 (en) 2018-01-30
CA2905453C (en) 2021-10-12
NZ630535A (en) 2017-04-28
RS59760B1 (sr) 2020-02-28
US9850283B2 (en) 2017-12-26
EA030195B1 (ru) 2018-07-31
DK2970390T3 (da) 2020-02-10
US20140294898A1 (en) 2014-10-02
PT2970390T (pt) 2019-12-30
CN105209479A (zh) 2015-12-30
EP2970390A1 (en) 2016-01-20
EP3626732A1 (en) 2020-03-25
CL2015002709A1 (es) 2016-03-28
HRP20192337T1 (hr) 2020-03-20
CA2905453A1 (en) 2014-09-25
PE20151671A1 (es) 2015-11-12
CN105209479B (zh) 2019-11-26
MX2015011731A (es) 2015-12-07
AU2014233675A1 (en) 2015-11-05
LT2970390T (lt) 2020-01-27
EA201591822A1 (ru) 2016-01-29
HK1219957A1 (zh) 2017-04-21
CY1122571T1 (el) 2021-01-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9879046B2 (en) Macrocyclic inhibitors of the PD-1/PD-L1 and CD80(B7-1)/PD-L1 protein/protein interactions
US10450347B2 (en) Immunomodulators
KR102330652B1 (ko) Pd-1/pd-l1 및 cd80 (b7-1)/pd-li 단백질/단백질 상호작용의 마크로시클릭 억제제
KR102409246B1 (ko) 면역조정제
JP6718439B2 (ja) 免疫修飾因子
KR102590776B1 (ko) 면역조정제
KR20170128489A (ko) 면역조정제
KR20180132775A (ko) Pd-1/pd-l1 및 cd80/pd-l1 단백질/단백질 상호작용의 마크로시클릭 억제제
KR20170087518A (ko) 면역조정제

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right