JP6387082B2 - Ｐｄ−１／ｐｄ−ｌ１およびｃｄ８０（ｂ７−１）／ｐｄ−ｌ１タンパク質／タンパク質相互作用の大環状阻害剤 - Google Patents

Ｐｄ−１／ｐｄ−ｌ１およびｃｄ８０（ｂ７−１）／ｐｄ−ｌ１タンパク質／タンパク質相互作用の大環状阻害剤 Download PDF

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Description

本出願は、２０１４年３月１０日出願の米国特許出願番号１４／２０１９７７、２０１３年１２月１９日出願の米国仮特許出願番号６１／９１８１８４および２０１３年３月１５日出願の米国仮特許出願番号６１／７９４５８９に基づく優先権を主張し、これらは引用によりその全体を本明細書に包含させる。
本発明は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１およびＣＤ８０／ＰＤ−Ｌ１タンパク質／タンパク質相互作用を阻害し、それゆえに、癌および感染症を含む種々の疾患の改善に有用である、新規大環状ペプチドを提供する。
タンパク質プログラム細胞死１(ＰＤ−１)は、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ−４、ＩＣＯＳおよびＢＴＬＡも含む受容体のＣＤ２８ファミリーの阻害性メンバーである。ＰＤ−１は活性化Ｂ細胞、Ｔ細胞および骨髄球性細胞上に発現される(Agata et al., supra; Okazaki et al., Curr. Opin. Immunol., 14:779-782 (2002); Bennett et al., J. Immunol., 170:711-718 (2003))。
ＰＤ−１タンパク質は、Ｉｇ遺伝子スーパーファミリーの一部である５５kDa Ｉ型膜貫通型タンパク質である(Agata et al., Int. Immunol., 8:765-772 (1996))。ＰＤ−１は、膜近位免疫受容体チロシン阻害モチーフ(ＩＴＩＭ)および膜遠位チロシンベーススイッチモチーフ(ＩＴＳＭ)(Thomas, M.L., J. Exp. Med., 181:1953-1956 (1995); Vivier, E. et al., Immunol. Today, 18:286-291 (1997))を含む。ＰＤ−１は、ＣＴＬＡ−４と構造は類似するが、ＣＤ８０ ＣＤ８６(Ｂ７−２)結合に重要なＭＹＰＰＹモチーフを欠く。ＰＤ−１に対する２個のリガンドであるＰＤ−Ｌ１(Ｂ７−Ｈ１)およびＰＤ−Ｌ２(ｂ７−ＤＣ)が同定されている。ＰＤ−１を発現するＴ細胞の活性化は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２を発現する細胞との相互作用により下方制御されることが示されている(Freeman et al., J. Exp. Med., 192:1027-1034 (2000); Latchman et al., Nat. Immunol., 2:261-268 (2001); Carter et al., Eur. J. Immunol., 32:634-643 (2002))。ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２のいずれも、ＰＤ−１に結合するＢ７タンパク質ファミリーメンバーであるが、他のＣＤ２８ファミリーメンバーとは結合しない。ＰＤ−Ｌ１リガンドは多様なヒト癌で豊富である(Dong et al., Nat. Med., 8:787-789 (2002))。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の相互作用は、腫瘍浸潤性リンパ球の減少、Ｔ細胞受容体仲介増殖の減少および癌細胞による免疫回避の減少をもたらす(Dong et al., J. Mol. Med., 81:281-287 (2003); Blank et al., Cancer Immunol. Immunother., 54:307-314 (2005); Konishi et al., Clin. Cancer Res., 10:5094-5100 (2004))。免疫抑制は、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の局所相互作用の阻害により逆転でき、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ２の相互作用が同様に遮断されたとき、この効果は相加的である(Iwai et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 99:12293-12297 (2002); Brown et al., J. Immunol., 170:1257-1266 (2003))。
ＰＤ−Ｌ１はまたＣＤ８０と相互作用することが示されている(Butte, M.J. et al., Immunity, 27:111-122 (2007))。発現する免疫細胞上でのＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８０相互作用は、阻害的であることが示されている。この相互作用の阻止は、この阻害相互作用を抑止することが示されている(Paterson, A.M. et al., J. Immunol., 187:1097-1105 (2011); Yang, J. et al., J. Immunol.,187(3):1113-1119 (Aug 1 2011))。
ＰＤ−１発現Ｔ細胞が、そのリガンドを発現する細胞と接触したとき、増殖、サイトカイン分泌および細胞毒性を含む抗原性刺激に対する応答における機能活性が減少する。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２相互作用は、感染または腫瘍の回復中または自己耐容性の発達中の免疫応答を下方制御する(Keir, M.E. et al., Annu. Rev. Immunol., 26:Epub (2008))。腫瘍疾患または慢性感染の間に起こるような慢性抗原刺激は、高レベルのＰＤ−１を発現し、慢性抗原に対する活性に関して機能障害性であるＴ細胞を生じる(Kim et al., Curr. Opin. Imm. (2010)にレビュー)。これは、“Ｔ細胞消耗”と呼ばれる。Ｂ細胞もＰＤ−１／ＰＤ−リガンド抑制および“消耗”を示す。
ＰＤ−Ｌ１に対する抗体を使用したＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１ライゲーションの遮断は、多くの系におけるＴ細胞活性化を回復させ、増強させることが示されている。進行型癌を有する患者は、ＰＤ−Ｌ１に対するモノクローナル抗体での処置により利益を受ける(Brahmer et al., New Engl. J. Med. (2012))。腫瘍および慢性感染の前臨床的動物モデルは、モノクローナル抗体によるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路の遮断が免疫応答を増強でき、腫瘍拒絶または感染の抑制にいたることが示されている。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１遮断による抗腫瘍免疫治療は、多くの組織学的に異なる腫瘍に対する治療的免疫応答を増強できる(Dong, H. et al., “B7-H1 pathway and its role in the evasion of tumor immunity”, J. Mol. Med., 81(5):281-287 (2003); Dong, H. et al., “Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis: a potential mechanism of immune evasion”, Nat. Med., 8(8):793-800 (2002))。
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の妨害は、慢性感染を有する系におけるＴ細胞活性を増強できる。ＰＤ−Ｌ１の遮断は、慢性リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス感染マウスにおけるウイルスクリアランス改善および免疫回復をもたらす(Barber, D.L. et al., “Restoring function in exhausted CD8 T cells during chronic viral infection”, Nature, 439(7077):682-687 (2006))。ＨＩＶ−１に感染したヒト化マウスは、ウイルス血症に対する保護の増強およびＣＤ４＋Ｔ細胞のウイルス枯渇を示す(Palmer et al., J. Immunol. (2013))。ＰＤ−Ｌ１に対するモノクローナル抗体によるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１遮断は、ＨＩＶ患者(Day, Nature (2006); Petrovas, J. Exp. Med. (2006); Trautman, Nature Med. (2006); D'Souza, J. Immunol. (2007); Zhang, Blood (2007); Kaufmann, Nature Imm. (2007); Kasu, J. Immunol. (2010); Porichis, Blood (2011))、ＨＣＶ患者(Golden-Mason, J. Virol. (2007); Jeung, J. Leuk. Biol. (2007); Urbani, J. Hepatol. (2008); Nakamoto, PLoS Path. (2009); Nakamoto, Gastroenterology (2008))およびＨＢＶ患者(Boni, J. Virol. (2007); Fisicaro, Gastro. (2010); Fisicaro et al., Gastroenterology (2012); Boni et al., Gastro. (2012); Penna et al., J. Hep. (2012); Raziorrough, Hepatology (2009); Liang, World J. Gastro. (2010); Zhang, Gastro. (2008))からのＴ細胞に対するインビトロ抗原特異的機能性を回復できる。
ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８０相互作用の遮断は、免疫を刺激することが示されている(Yang, J. et al., J. Immunol., 187(3):1113-1119 (Aug 1 2011))。ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８０相互作用の遮断により生じる免疫刺激は、さらなるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ２相互作用の遮断との組み合わせにより増強することが示されている。
免疫細胞表現型の変更は、敗血症性ショックにおける重要な因子であるとの仮説がある(Hotchkiss et al., Nat. Rev. Immunol. (2013))。これらは、ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１のレベル増加を含む(Guignant, et al., Crit. Care (2011))。ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１レベルが上昇した敗血症性ショック患者からの細胞は、Ｔ細胞アポトーシスのレベル増加を示す。ＰＤ−Ｌ１に対する抗体は免疫細胞アポトーシスのレベルを低減できる(Zhang et al., Crit. Care (2011))。さらに、ＰＤ−１発現を欠くマウスは、野生型マウスよりも敗血症性ショック症状に対して抵抗性である(Yang, J. et al., J. Immunol., 187(3):1113-1119 (Aug 1 2011))。抗体を使用したＰＤ−Ｌ１の相互作用の遮断が、不適切な免疫応答の抑制および疾患徴候の回復をできることが研究により示されている。
慢性抗原に対する増強した免疫学的応答に加えて、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路遮断はまた慢性感染の状況における治療的ワクチン接種を含むワクチン接種に対する応答の増強も示す(Ha, S.J. et al., “Enhancing therapeutic vaccination by blocking PD-1-mediated inhibitory signals during chronic infection”, J. Exp. Med., 205(3):543-555 (2008); Finnefrock, A.C. et al., “PD-1 blockade in rhesus macaques: impact on chronic infection and prophylactic vaccination”, J. Immunol., 182(2):980-987 (2009); Song, M.-Y. et al., “Enhancement of vaccine-induced primary and memory CD8+ t-cell responses by soluble PD-1”, J. Immunother., 34(3):297-306 (2011))。
ここに記戴する分子は、生化学的実験系および細胞実験系の両者で、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１の相互作用を遮断する能力を示す。これらの結果は、治療的ワクチンを含む、癌または慢性感染における免疫を増強するための治療的投与の可能性と一致する。
ここに記戴する大環状ペプチドは、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１とのおよびＣＤ８０との相互作用を阻害できる。これらの化合物は、高度に効果的なＰＤ−Ｌ１への結合、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１またはＣＤ８０のいずれかとの相互作用の遮断を示し、強化されたＴ細胞機能的活性の促進が可能であり、それゆえに、これらは、非経腸製剤、経口製剤、肺製剤、経鼻製剤、バッカル製剤および徐放製剤の候補となる。
一つの態様において、本発明は式(Ｉ)
〔式中、
Ａは結合、
から選択され；
ここで、
はカルボニル基への結合点を示し、
は窒素原子への結合点を示し；
ｎは０または１であり；
Ｒ１４およびＲ１５は独立して水素およびメチルから選択され；
Ｒ１６は水素、−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨＲ１８Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨＲ１８Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２から選択され；ここで、Ｒ１７は水素および−ＣＨ２ＯＨから選択され、Ｒ１８は水素およびメチルから選択され；
Ｒｃ、Ｒｆ、Ｒｈ、Ｒｉ、ＲｍおよびＲｎは水素であり；
Ｒａ、Ｒｅ、ＲｊおよびＲｋは各々独立して水素およびメチルから選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ１３は、独立して天然アミノ酸側鎖および非天然アミノ酸側鎖から選択されまたは下記のとおり対応する隣接Ｒ基と環を形成し；
ＲｅおよびＲｋは、各々対応する隣接Ｒ基およびそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成でき；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
Ｒｂはメチルであるか、またはＲｂおよびＲ２は、それらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
Ｒｄは水素またはメチルであるか、またはＲｄとＲ４はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成でき；ここで、各環は、場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
Ｒｇは水素またはメチルであるか、またはＲｇとＲ７はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成でき；ここで、書く環は、場合によりアミノ、場合によりハロ基で置換されていてよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、場合によりメトキシ基で置換されていてよいイソキノリニルオキシ、場合によりハロ基で置換されていてよいキノリニルオキシおよびテトラゾリルから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；そしてピロリジン環およびピペリジン環は場合によりシクロヘキシル基、フェニル基またはインドール基と縮合していてよく；
Ｒｌはメチルであるか、またはＲｌおよびＲ１２は、それらが結合している原子と一体となって、アゼチジンおよびピロリジンから選択される環を形成し、ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよい。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、ここでＡは
である。
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、ここでＡは
であり；
Ｒｄはメチルであるか、またはＲｄとＲ４はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから独立して選択される１〜２個の基で置換されていてよく；
Ｒｇはメチルであるか、またはＲｇとＲ７はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、場合によりハロ基で置換されていてよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、場合によりメトキシ基で置換されていてよいイソキノリニルオキシ、場合によりハロ基で置換されていてよいキノリニルオキシおよびテトラゾリルから独立して選択される１〜２個の基で置換されていてよく；そしてピロリジン環およびピペリジン環は場合によりシクロヘキシル基、フェニル基またはインドール基と縮合していてよく；
Ｒｋはメチルであるか、またはＲｋとＲ１１はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜２個の基で置換されていてよい。
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、ここでＡは
であり；
ＲｄとＲ４はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜２個の基で置換されていてよく；
ＲｇとＲ７はそれらが結合している原子と一体となってピロリジン環を形成し、ここで、該環は場合によりアミノ、場合によりハロ基で置換されていてよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、場合によりメトキシ基で置換されていてよいイソキノリニルオキシ、場合によりハロ基で置換されていてよいキノリニルオキシおよびテトラゾリルから独立して選択される１〜２個の基で置換されていてよく；そしてピロリジン環およびピペリジン環は場合によりシクロヘキシル基、フェニル基またはインドール基と縮合していてよく；
Ｒｋはメチルである。
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、ここでＡは
であり；
ＲｄとＲ４はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜２個の基で置換されていてよく；
ＲｇとＲ７はそれらが結合している原子と一体となってピロリジン環を形成し、ここで、該環は場合によりアミノ、場合によりハロ基で置換されていてよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、場合によりメトキシ基で置換されていてよいイソキノリニルオキシ、場合によりハロ基で置換されていてよいキノリニルオキシおよびテトラゾリルから独立して選択される１〜２個の基で置換されていてよく；そしてピロリジン環およびピペリジン環は場合によりシクロヘキシル基、フェニル基またはインドール基と縮合していてよく；
Ｒｋはメチルであり；
Ｒ８は
アザインドリルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンゾチアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンゾチエニルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンジルオキシＣ１−Ｃ３アルキル、ジフェニルメチル、フラニルＣ１−Ｃ３アルキル、イミダゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、ナフチルＣ１−Ｃ３アルキル、ピリジニルＣ１−Ｃ３アルキル、チアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、チエニルＣ１−Ｃ３アルキル；および
インドリルＣ１−Ｃ３アルキル(ここで、インドリル部分は場合によりＣ１−Ｃ３アルキル、シアノ、ハロおよびヒドロキシから選択される１個の基で置換されていてよい)
から選択される。
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、ここでＡは
であり；
ＲｄとＲ４はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜２個の基で置換されていてよく；
ＲｇとＲ７はそれらが結合している原子と一体となってピロリジン環を形成し、ここで、該環は場合によりアミノ、場合によりハロ基で置換されていてよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、場合によりメトキシ基で置換されていてよいイソキノリニルオキシ、場合によりハロ基で置換されていてよいキノリニルオキシおよびテトラゾリルから独立して選択される１〜２個の基で置換されていてよく；そしてピロリジン環およびピペリジン環は場合によりシクロヘキシル基、フェニル基またはインドール基と縮合していてよく；
Ｒｋはメチルであり；
Ｒ８は場合によりＣ１−Ｃ３アルキル、ハロ、ヒドロキシまたはシアノから選択される１個の基で置換されていてよい３−インドリルＣ１−Ｃ３アルキルである。
他の態様において、本発明は、式(II)
〔式中、
Ａは結合、
から選択され；
ここで、
はカルボニル基への結合点を示し、
は窒素原子への結合点を示し；
ｎは０または１であり；
Ｒ１４およびＲ１５は独立して水素およびメチルから選択され；
Ｒ１６は水素、−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨＲ１８Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨＲ１８Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２から選択され；
ここで、Ｒ１７は水素および−ＣＨ２ＯＨから選択され、Ｒ１８は水素およびメチルから選択され；
Ｒａ、Ｒｆ、Ｒｊ、Ｒｋ、ＲｌおよびＲｍは水素であり；
ＲｂおよびＲｃはメチルであり；
Ｒｇは水素およびメチルから選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、独立して天然アミノ酸側鎖および非天然アミノ酸側鎖から選択されまたは下記のとおり対応する隣接Ｒ基と環を形成し；
Ｒｄは水素およびメチルから選択されるか、またはＲｄとＲ４はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
Ｒｅは水素およびメチルから選択されるか、またはＲｅとＲ５はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
Ｒｈは水素およびメチルから選択されるか、またはＲｈとＲ８はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
Ｒｉは水素およびメチルから選択されるか、またはＲｉおよびＲ９は、それらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環となり；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよい。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
他の態様において、本発明は式(II)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、ここで、Ａは
である。
他の態様において、本発明は式(II)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、ここで、Ａは
であり；
Ｒｄはメチルであるか、またはＲｄとＲ４はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環となり；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよく；
Ｒｇはメチルであり；
Ｒｉはメチルであるか、またはＲｉとＲ９はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよい。
他の態様において、本発明は式(II)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、ここで、Ａは
であり；
Ｒｄはメチルであるか、またはＲｄとＲ４はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環となり；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよく；
Ｒｇはメチルであり；
Ｒｉはメチルであるか、またはＲｉとＲ９はそれらが結合している原子と一体となって、アゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよく；
Ｒ７は場合によりフルオロ基で置換されていてよいフェニルＣ１−Ｃ３アルキルである。
他の態様において、本発明は、処置を必要とする対象における免疫応答を増強、刺激および／または上昇させる方法を提供し、該方法は、該対象にここに記戴する少なくとも１個の大環状ペプチドの治療有効量を投与することを含む。他の態様において、本方法は、ここに記戴する１個または複数個の大環状ペプチドの前に、後にまたは同時にさらなる薬剤を投与することを含む。他の態様において、さらなる薬剤は抗菌剤、抗ウイルス剤、細胞毒性剤および／または免疫応答修飾剤である。
他の態様において、本発明は、処置を必要とする対象における癌細胞の成長、増殖または転移を阻害する方法を提供し、該方法は、該対象にここに記戴する少なくとも１個の大環状ペプチドの治療有効量を投与することを含む。他の態様において、癌は黒色腫、腎細胞癌、扁平上皮非小細胞性肺癌(ＮＳＣＬＣ)、非扁平上皮ＮＳＣＬＣ、結腸直腸癌、去勢抵抗性前立腺癌、卵巣癌、胃癌、肝細胞癌、膵臓癌、頭頸部の扁平上皮細胞癌、食道、消化管および乳房の癌および造血器腫瘍から選択される。
他の態様において、本発明は、処置を必要とする対象における感染性疾患の処置方法を提供し、該方法は、該対象にここに記戴する少なくとも１個の大環状ペプチドの治療有効量を投与することを含む。他の態様において、感染性疾患はウイルスが原因である。他の態様において、ウイルスはＨＩＶ、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ヘルペスウイルスおよびインフルエンザから選択される。
他の態様において、本発明は、処置を必要とする対象における敗血症性ショックの処置方法を提供し、該方法は、該対象にここに記戴する少なくとも１個の大環状ペプチドの治療有効量を投与することを含む。
他の態様において、本発明は、対象におけるＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１および／またはＣＤ８０の相互作用の遮断方法を提供し、該方法は、該対象にここに記戴する少なくとも１個の大環状ペプチドの治療有効量を投与することを含む。
式(Ｉ)および(II)の化合物において、Ｒ側鎖がメチルで置換された環の一部であるとき、該メチル基は、大環状親構造の一部である炭素を含む、環中の任意の置換可能な炭素原子上にあり得ると理解される。
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ１側鎖はフェニルアラニン、チロシン、３−チエン−２−イル、４−メチルフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、３−メトキシフェニルアラニン、イソトリプトファン、３−メチルフェニルアラニン、１−ナフチルアラニン、３,４−ジフルオロフェニルアラニン、４−フルオロフェニルアラニン、３,４−ジメトキシフェニルアラニン、３,４−ジクロロフェニルアラニン、４−ジフルオロメチルフェニルアラニン、２−メチルフェニルアラニン、２−ナフチルアラニン、トリプトファン、４−ピリジニル、４−ブロモフェニルアラニン、３−ピリジニル、４−トリフルオロメチルフェニルアラニン、４−カルボキシフェニルアラニン、４−メトキシフェニルアラニン、ビフェニルアラニンおよび３−クロロフェニルアラニンおよび２,４−ジアミノブタンである。
式(Ｉ)の化合物において、Ｒ２が環の一部ではないとき、好ましいＲ２側鎖はアラニン、セリンおよびグリシンである。
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ３側鎖はアスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、セリン、オルニチン、リシン、ヒスチジン、スレオニン、ロイシン、アラニン、２,３−ジアミノプロパンおよび２,４−ジアミノブタンである。
式(Ｉ)の化合物において、Ｒ４が環の一部ではないとき、好ましいＲ４側鎖はバリン、アラニン、イソロイシンおよびグリシンである。
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ５側鎖はヒスチジン、アスパラギン、２,３−ジアミノプロパン、セリン、グリシン、２,４−ジアミノブタン、スレオニン、アラニン、リシン、アスパラギン酸、アラニンおよび３−チアゾリルアラニンである。
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ６側鎖はロイシン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、リシン、３−シクロヘキサン、スレオニン、オルニチン、２,４−ジアミノブタン、アラニン、アルギニンおよびオルニチン(ＣＯＣＨ３)である。
式(Ｉ)の化合物において、Ｒ７が環の一部ではないとき、好ましいＲ７側鎖はグリシン、２,４−ジアミノブタン、セリン、リシン、アルギニン、オルニチン、ヒスチジン、アスパラギン、グルタミン、アラニンおよび２,４−ジアミノブタン(Ｃ(Ｏ)シクロブタン)である。
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ８側鎖はトリプトファンおよび１,２−ベンズイソチアゾリニルアラニンである。
式(Ｉ)の化合物において好ましいＲ９側鎖はセリン、ヒスチジン、リシン、オルニチン、２,４−ジブチルアミン、スレオニン、リシン、グリシン、グルタミン酸、バリン、２,３−ジアミノプロパン、アルギニン、アスパラギン酸およびチロシンである。
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ１０側鎖はトリプトファン、ベンズイソチアゾリルアラニン、１−ナフチルアラニン、５−フルオロトリプトファン、メチオニン、７−メチルトリプトファン、５−クロロトリプトファンおよび−メチルトリプトファンである。
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ１１側鎖はノルロイシン、ロイシン、アスパラギン、フェニルアラニン、メチオニン、エトキシメタン、アラニン、トリプトファン、イソロイシン、フェニルプロパン、グルタミン酸、ヘキサンおよびヘプタンである。
式(Ｉ)の化合物において、Ｒ１２が環の一部ではないとき、好ましいＲ１２側鎖はノルロイシン、アラニン、エトキシメタン、メチオニン、セリン、フェニルアラニン、メトキシエタン、ロイシン、トリプトファン、イソロイシン、グルタミン酸、ヘキサン、ヘプタンおよびグリシンである。
式(Ｉ)の化合物において、好ましいＲ１３側鎖はアルギニン、オルニチン、アラニン、２,４−ジアミノブタン、２,３−ジアミノプロパン、ロイシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、リシン、スレオニン、シクロプロピルメタン、グリシン、バリン、イソロイシン、ヒスチジンおよび２−アミノブタンである。
式(II)の化合物において、好ましいＲ１側鎖はフェニルアラニン、３−メトキシフェニルアラニン、２−フルオロフェニルアラニン、３−フルオロフェニルアラニン、４−フルオロフェニルアラニン、３,４−ジフルオロフェニルアラニン、３,５−ジフルオロフェニルアラニン、３,４,５−トリフルオロフェニルアラニン、３−フルオロ,４−クロロフェニルアラニン、３−クロロ,４−フルオロフェニルアラニン、３−クロロフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、３,４−ジクロロフェニルアラニン、３,５−ジクロロフェニルアラニン、３,５−ジクロロ,４−フルオロフェニルアラニン、３−クロロ,４,５−ジフルオロフェニルアラニン、４−ブロモフェニルアラニン、４−ニトロフェニルアラニン、３−トリフルオロメチルフェニルアラニン、４−トリフルオロメチルフェニルアラニンおよび３−ピリジルアラニンである。
式(II)の化合物において、好ましいＲ２側鎖はフェニルアラニン、アラニン、ヒスチジン、チロシン、トリプトファン、グルタミン酸、１−ナフチルアラニン、２−ナフチルアラニン、２−ベンゾチアゾリルアラニン、３−ピリジニルアラニンおよび４−ピリジニルアラニンである。
式(II)の化合物において、好ましいＲ３側鎖はノルロイシン、アラニン、チロシン、グルタミン酸、ロイシンおよびイソロイシンである。
式(II)の化合物において、Ｒ４が環の一部ではないとき、好ましいＲ４側鎖はグリシンおよびアラニンである。
式(II)の化合物において、Ｒ５が環の一部ではないとき、好ましいＲ５側鎖はアスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニン、リシン、アスパラギン、セリン、２,４−ジアミノブタン、２,３−ジアミノプロパンおよび２−アミノブタンである。
式(II)の化合物において、好ましいＲ６側鎖はバリン、ロイシン、イソロイシン、Ｎ−メチルスレオニンおよびシクロヘキシルメタンである。
式(II)の化合物において、好ましいＲ７側鎖はフェニルアラニンおよび３−フルオロフェニルアラニンである。
式(II)の化合物において、Ｒ８が環の一部ではないとき、好ましいＲ８側鎖はチロシン、３−ヨードチロシン、ロイシン、アルギニン、グルタミン酸、グルタミン、ペンタフルオロフェニルアラニン、４−アミノフェニルアラニン、４−アミノメチルフェニルアラニン、３,４−ジメトキシフェニルアラニン、トリプトファン、５−クロロトリプトファン、５−ヒドロキシトリプトファン、イソトリプトファン、リシン、オルニチンおよび２,３−ジアミノプロパンである。
式(II)の化合物において、好ましいＲ１０側鎖はトリプトファン、５−クロロトリプトファン、７−アザトリプトファン、イソトリプトファン、３−ベンゾチアゾリルアラニンおよび１−ナフチルアラニンである。
式(II)の化合物において、好ましいＲ１１側鎖はチロシン、４−フルオロフェニルアラニン、４−アミノメチルフェニルアラニン、４−アミノフェニルアラニンおよび３,４−ジヒドロキシフェニルアラニンである。
式(II)の化合物において、好ましいＲ１２側鎖はロイシン、チロシン、アルギニン、リシン、オルニチン、グルタミン酸、フェニルアラニン、４−メチルフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、４−アミノメチルフェニルアラニン、ノルロイシン、シクロヘキシルアラニン、２,４−ジアミノブタンおよび２,３−ジアミノプロパンである。
式(II)の化合物において、Ｒ４およびＲ９が環の一部であるとき、好ましい立体化学はＤ異性体のものであり、Ｒ５およびＲ８が環の一部であるとき、好ましい立体化学はＬ異性体のものである。
ここに記戴する主題の一つの態様は、式Ｉ(ａ)
〔式中、
ＡはＸａａ１とＸａａ１４の間の有機またはペプチド性リンカーであり、それにより大環状ペプチドを提供し；
Ｘａａ１は天然型または非天然型芳香族またはヘテロ芳香族またはアルキルまたはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ２は天然型または非天然型アルキルまたはＮ−メチル化アルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ３は天然型または非天然型親水性またはアルキルまたは極性アミノ酸であり；
Ｘａａ４は天然型または非天然型アミノ酸、アルキルアミノ酸またはＮ−メチル化アルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ５は天然型または非天然型ヘテロ芳香族アミノ酸または正荷電アミノ酸またはアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ６は天然型または非天然型親水性または疎水性または正または負荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ７は天然型または非天然型Ｎ−メチル化または非Ｎ−メチル化親水性または疎水性または正または負荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ８は天然型または非天然型芳香族またはヘテロ芳香族またはアリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ９は天然型または非天然型親水性または疎水性または正または負荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ１０は天然型または非天然型芳香族もしくはヘテロ芳香族またはアリールアルキルもしくはヘテロアリールアルキルまたはアルキルもしくはヘテロアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ１１は天然型または非天然型Ｎ−メチル化または非Ｎ−メチル化アルキルまたはヘテロアルキルまたは芳香族またはヘテロ芳香族アミノ酸であり；
Ｘａａ１２は天然型または非天然型Ｎ−メチル化または非Ｎ−メチル化アルキルまたはヘテロアルキルまたは芳香族またはヘテロ芳香族アミノ酸であり；
Ｘａａ１３は天然型または非天然型親水性または疎水性または正または負荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ１４はリンカーＡの一端と反応して環状ペプチドを生じるために適当に活性化できる官能基を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１５は天然型または非天然型アミノ酸またはタグが続くスペーサーまたは可溶化もしくはＰＫ増強配列が続くスペーサーである。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
他の態様において、ここに記戴する主題の一つの態様は、式Ｉ(ｂ)
〔式中、
Ａは共有結合性チオエーテル結合を形成するために残基Ｘａａ１４上に存在するスルフヒドリル基と反応できるマイケルアクセプターまたはクロロアセチル基もしくはブロモアセチル基のような求電子部分であり、それにより大環状ペプチドを生じ；ここで、このようなチオエーテル結合は対応するジアステレオ異性スルホキシド類に酸化されていてもされていなくてもよく；
ここで、Ａは所望により存在してよく；そしてＡが存在するならば、Ｘａａ１４の側鎖上のカルボキシル基とのアミド結合形成を介してペプチドを環化するのに使用できる遊離アミンを有するＧｌｙまたは他のスペーサーであってよく、それにより側鎖ラクタム環状ペプチドにＮ末端を提供し；そしてＡが存在しないならば、Ｘａａ１残基のＮ末端アミノ基を、Ｘａａ１４の側鎖上のカルボキシル基を介するペプチドの環化に使用でき、それにより側鎖ラクタム環状ペプチドにＮ末端を提供し；
そしてＡが存在するならば、Ｘａａ１５のＣ末端α−カルボキシル基とのアミド結合形成を介してペプチドを環化するのに使用できるＧｌｙまたは遊離アミンを有する他のスペーサーであってよく、それによりヘッドトゥーテール環状ペプチドを提供し；そしてＡが存在しないならば、Ｘａａ１アミノ酸のＮ末端アミノ基をＸａａ１５のＣ末端α−カルボキシル基とのアミド結合形成を介するペプチドの環化に使用でき、それによりヘッドトゥーテール環状ペプチドを提供し；
Ｘａａ１はＬ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｔｒｐ、Ｌ−Ｔｙｒ、Ｌ−Ｐｈｅ(４−ＯＭｅ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｆ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｃｌ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｂｒ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｍｅ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−ＣＦ３)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−ｔ−Ｂｕ)、Ｌ−Ｐｈｅ(ペンタ−Ｆ)、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｌ−Ｂｉｐ、Ｌ−ｍＰｈｅ、Ｌ−Ｔｉｃ、Ｌ−３−Ｐｙａ、Ｌ−４−Ｐｙａ、Ｌ−Ｔｚａ、Ｌ−３−Ｔｈａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ２はＬ−Ａｌａ、Ｌ−ｍＡｌａ、ｍＧｌｙ、Ｌ−ｍＶａｌからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ３はＧｌｙ、Ｌ−ＡｓｎおよびＬ−Ａｌａからなる群から選択され；
Ｘａａ４はＬ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−α−Ｍｅ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ｐｒｏ(４Ｒ−ＯＨ)、Ｌ−Ｐｒｏ(４Ｒ−ＯＢｚｌ)、Ｌ−Ｐｒｏ(４Ｒ−ＮＨ２)、Ｌ−Ｐｒｏ(３Ｒ−Ｐｈ)、Ｌ−Ｐｒｏ(４Ｓ−Ｐｈ)、Ｌ−Ｐｒｏ(５Ｒ−Ｐｈ)、Ｌ−Ａｚｔ、Ｌ−Ｐｉｐ、Ｌ−Ｏｉｃ、Ｌ−２,３−メタノ−Ｐｒｏ、Ｌ−３,４−メタノ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ｖａｌ、Ｌ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｌ−ｍＡｌａ、Ｌ−ｍＶａｌ、Ｌ−ｍＬｅｕ、Ｌ−Ｔｚａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ５はＬ−Ｈｉｓ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｔｚａ、Ｌ−Ａｒｇ、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｌ−Ｏｒｎ、Ｌ−ＤａｂおよびＬ−Ｄａｐからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ６はＬ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ａｒｇ、Ｌ−Ｈｉｓ、Ｌ−ＧｌｕおよびＬ−Ａｓｐを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ７はｍＧｌｙ、Ｇｌｙ、Ｌ−ｍＡｌａ、Ｄ−ｍＡｌａ、Ｌ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｍＳｅｒ、Ｌ−Ｄａｂ、Ｌ−ＡｒｇおよびＬ−Ｈｉｓを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ８はＬ−Ｔｒｐ、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｔｙｒ、Ｌ−Ｈｉｓ、Ｌ−Ｐｈｅ(ペンタ−Ｆ)、Ｌ−Ｔｚａ、Ｌ−Ｂｚｔ、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｐｙａ、Ｌ−３−Ｐｙａ、Ｌ−４−Ｐｙａであり；
Ｘａａ９はＬ−Ｓｅｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−ＡｒｇおよびＤ−Ａｓｎを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１０はＬ−Ｔｒｐ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｍｅｔ、Ｌ−Ｎｌｅ、Ｌ−ＬｅｕおよびＬ−Ｉｌｅ、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｔｙｒ、Ｌ−Ｈｉｓ、Ｌ−Ｐｈｅ(ペンタ−Ｆ)、Ｌ−Ｔｚａ、Ｌ−Ｂｚｔ、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｐｙａ、Ｌ−３−Ｐｙａ、Ｌ−４−Ｐｙａからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１１はＬ−ｍＮｌｅ、Ｌ−Ｎｌｅ、Ｌ−ｍＡｌａ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−ｍＰｈｅおよびＬ−ｍＬｅｕ、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｄ−ＮｌｅおよびＬ−Ｐｒｏを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１２はＬ−ｍＮｌｅ、Ｌ−Ｎｌｅ、Ｌ−ｍＡｌａ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−ｍＰｈｅ、Ｌ−ｍＬｅｕおよびＬ−Ｐｒｏを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１３はＬ−Ａｒｇ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｌ−Ａｓｐ、Ｌ−Ｇｌｕ、Ｌ−Ｈｉｓを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１４はＬ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｌ−ホモ−Ｃｙｓ、Ｄ−ホモ−Ｃｙｓ、Ｌ−Ｐｅｎ、Ｄ−Ｐｅｎ、Ｌ−ｍＣｙｓおよびＤ−ｍＣｙｓからなる群から選択され；
Ｘａａ１５はＧｌｙまたは少なくとも２個のエチレングリコール単位を含むＰＥＧスペーサーが続くＧｌｙまたはビオチンのようなタグが続く少なくとも２個のエチレングリコール単位を含むＰＥＧスペーサーが続くＧｌｙまたはＰＫ増強配列が続くスペーサーが続くＧｌｙであり；
ここでＸａａ１５は場合により存在してよく、ここで、該アミノ酸のＣ末端カルボニル炭素はヒドロキシル基に結合してカルボン酸を形成するか窒素に結合してカルボキサミド(ＮＨ２)、アルキルカルボキサミド(ＮＨＲ１)またはジアルキルカルボキサミド(ＮＲ１Ｒ２)を形成し；
ここで、Ｒ１およびＲ２の各々はアルキル基またはアリールアルキル基であり；
ここで、Ｘａａ１５が存在しないならば、Ｘａａ１４のＣ末端カルボニル炭素が窒素に結合してカルボキサミド(ＮＨ２)、アルキルカルボキサミド(ＮＨＲ１)またはジアルキルカルボキサミド(ＮＲ１Ｒ２)を形成し；
ここで、Ｒ１およびＲ２の各々はアルキル基またはアリールアルキル基である。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
他の態様において、ここに記戴する主題の一つの態様は、式Ｉ(ｃ)
〔式中、
Ａは共有結合性チオエーテル結合を形成し、それにより大環状ペプチドを生じるために残基Ｘａａ１４上に存在するスルフヒドリル基と反応できるマイケルアクセプターまたはクロロアセチル基もしくはブロモアセチル基のような求電子部分であり；ここで、このようなチオエーテル結合は対応するジアステレオ異性スルホキシド類に酸化されていてもされていなくてもよく；
ここで、Ａは所望により存在してよく；そしてＡが存在するならば、Ｘａａ１４の側鎖上のカルボキシル基とのアミド結合形成を介してペプチドを環化するのに使用できる遊離アミンを有するＧｌｙまたは他のスペーサーであってよく、それにより側鎖ラクタム環状ペプチドにＮ末端を提供し；そしてＡが存在しないならば、Ｘａａ１残基のＮ末端アミノ基を、Ｘａａ１４の側鎖上のカルボキシル基を介するペプチドの環化に使用でき、それにより側鎖ラクタム環状ペプチドにＮ末端を提供し；
そしてＡが存在するならば、Ｘａａ１５のＣ末端α−カルボキシル基とのアミド結合形成を介するペプチドの環化に使用できる遊離アミンを有するＧｌｙまたは他のスペーサーであってよく、それによりヘッドトゥーテール環状ペプチドを提供し；そしてＡが存在しないならば、Ｘａａ１アミノ酸のＮ末端アミノ基をＸａａ１５のＣ末端α−カルボキシル基とのアミド結合形成を介するペプチドの環化に使用でき、それによりヘッドトゥーテール環状ペプチドを提供し；
Ｘａａ１はＬ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｔｒｐ、Ｌ−Ｔｙｒ、Ｌ−Ｐｈｅ(４−ＯＭｅ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｆ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｃｌ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｂｒ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｍｅ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−ＣＦ３)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−ｔ−Ｂｕ)、Ｌ−Ｐｈｅ(ペンタ−Ｆ)、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｌ−Ｂｉｐ、Ｌ−ｍＰｈｅ、Ｌ−Ｔｉｃ、Ｌ−３−Ｐｙａ、Ｌ−４−Ｐｙａ、Ｌ−Ｔｚａ、Ｌ−３−Ｔｈａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ２はＬ−Ａｌａ、Ｌ−ｍＡｌａ、ｍＧｌｙ、Ｌ−ｍＶａｌからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ３はＧｌｙ、Ｌ−ＡｓｎおよびＬ−Ａｌａからなる群から選択され；
Ｘａａ４はＬ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−α−Ｍｅ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ｐｒｏ(４Ｒ−ＯＨ)、Ｌ−Ｐｒｏ(４Ｒ−ＮＨ２)、Ｌ−Ｐｒｏ(４Ｓ−Ｐｈ)、Ｌ−Ａｚｔ、Ｌ−ＰｉｐおよびＬ−Ｏｉｃを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ５はＬ−ＨｉｓおよびＬ−Ａｌａからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ６はＬ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−ＡｒｇおよびＬ−Ａｓｐを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ７はｍＧｌｙ、Ｇｌｙ、Ｌ−ｍＡｌａ、Ｄ−ｍＡｌａ、Ｌ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｍＳｅｒ、Ｌ−Ｄａｂ、Ｌ−ＡｒｇおよびＬ−Ｈｉｓを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ９はＬ−Ｓｅｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−ＡｒｇおよびＤ−Ａｓｎを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１０はＬ−Ｔｒｐ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｍｅｔ、Ｌ−ＬｅｕおよびＬ−Ｉｌｅからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１１はＬ−ｍＮｌｅ、Ｌ−Ｎｌｅ、Ｌ−ｍＡｌａ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−ｍＰｈｅおよびＬ−ｍＬｅｕ、Ｌ−ＳｅｒおよびＤ−Ｎｌｅであり；
Ｘａａ１２はＬ−ｍＮｌｅ、Ｌ−Ｎｌｅ、Ｌ−ｍＡｌａおよびＬ−Ａｌａ；を含む天然に存在を含む天然型または非天然型アミノ酸でありするまたは非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１３はＬ−Ａｒｇ、Ｌ−ＡｌａおよびＬ−Ｌｅｕを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１４はＬ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｃｙｓ、Ａｓｐ、ＧｌｕおよびＧｌｙからなる群から選択され；
Ｘａａ１５はＧｌｙまたは少なくとも２個のエチレングリコール単位を含むＰＥＧスペーサーが続くＧｌｙまたはビオチンのようなタグが続く少なくとも２個のエチレングリコール単位を含むＰＥＧスペーサーが続くＧｌｙであり；
ここでＸａａ１５は場合により存在してよく、ここで、該アミノ酸のＣ末端カルボニル炭素が窒素に結合してカルボキサミド(ＮＨ２)、アルキルカルボキサミド(ＮＨＲ１)またはジアルキルカルボキサミド(ＮＲ１Ｒ２)を形成し；
ここで、Ｒ１およびＲ２の各々はアルキル基またはアリールアルキル基であり；
ここで、Ｘａａ１５が存在しないならば、Ｘａａ１４のＣ末端カルボニル炭素が窒素に結合してカルボキサミド(ＮＨ２)、アルキルカルボキサミド(ＮＨＲ１)またはジアルキルカルボキサミド(ＮＲ１Ｒ２)を形成し；
ここで、Ｒ１およびＲ２の各々はアルキル基またはアリールアルキル基である。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
他の態様において、ここに記戴する主題の一つの態様は、式II(ａ)
〔式中、
ＡはＸａａ１とＸａａ１３の間の有機またはペプチド性リンカーであり、それにより大環状ペプチドを提供し；
Ｘａａ１は天然型または非天然型芳香族またはヘテロ芳香族またはアルキルまたはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ２は天然型または非天然型アルキルまたは芳香族Ｎ−メチル化アミノ酸であり；
Ｘａａ３は天然型または非天然型疎水性Ｎ−メチル化アミノ酸であり；
Ｘａａ４は天然型または非天然型疎水性Ｎ−メチル化アミノ酸であり；
Ｘａａ５は天然型または非天然型アルキルアミノ酸または正または負荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ６は天然型または非天然型疎水性アミノ酸であり；
Ｘａａ７は天然型または非天然型Ｎ−メチル化または非Ｎ−メチル化芳香族またはヘテロ芳香族またはアルキルまたはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ８は天然型または非天然型芳香族またはヘテロ芳香族またはアリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルアミノ酸またはアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ９は天然型または非天然型Ｎ−メチル化または非Ｎ−メチル化芳香族またはヘテロ芳香族またはアルキルまたはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ１０は天然型または非天然型芳香族もしくはヘテロ芳香族またはアリールアルキルもしくはヘテロアリールアルキルまたはアルキルもしくはヘテロアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ１１は天然型または非天然型芳香族もしくはヘテロ芳香族またはアリールアルキルもしくはヘテロアリールアルキルまたはアルキルもしくはヘテロアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ１２は天然型または非天然型芳香族もしくはヘテロ芳香族またはアリールアルキルもしくはヘテロアリールアルキルまたはアルキルもしくはヘテロアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ１３はリンカーＡの一端と反応して環状ペプチドを生じるために適当に活性化できる官能基を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１４は天然型または非天然型アミノ酸またはスペーサーまたはタグが続くスペーサーまたは可溶化もしくはＰＫ増強配列が続くスペーサーである。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
他の態様において、ここに記戴する主題の一つの態様は、式II(ｂ)
〔式中、
Ａは共有結合性チオエーテル結合を形成するために残基Ｘａａ１３上に存在するスルフヒドリル基と反応できるマイケルアクセプターまたはクロロアセチル基もしくはブロモアセチル基のような求電子部分であり、それにより大環状ペプチドを生じ；ここで、このようなチオエーテル結合は対応するジアステレオ異性スルホキシド類に酸化されていてもされていなくてもよく；
ここで、Ａは所望により存在してよく；そしてＡが存在するならば、Ｘａａ１３の側鎖上のカルボキシル基とのアミド結合形成を介してペプチドを環化するのに使用できる遊離アミノ末端を有するＧｌｙまたは他のスペーサーであってよく、それにより側鎖ラクタム環状ペプチドにＮ末端を提供し；そしてＡが存在しないならば、Ｘａａ１残基のＮ末端アミノ基はＸａａ１３の側鎖上のカルボキシル基とのアミド結合形成を介するペプチドの環化に使用でき、それにより側鎖ラクタム環状ペプチドにＮ末端を提供し；
そしてＡが存在するならば、Ｘａａ１４のＣ末端α−カルボキシル基とのアミド結合形成を介してペプチドを環化するのに使用できるＧｌｙまたは他のスペーサーであってよく、それによりヘッドトゥーテール環状ペプチドを提供し；そしてＡが存在しないならば、Ｘａａ１アミノ酸のＮ末端アミノ基はＸａａ１４のＣ末端α−カルボキシル基とのアミド結合形成を介してペプチドを環化するのに使用でき、それによりヘッドトゥーテール環状ペプチドを提供し；
Ｘａａ１はＰｈｅおよびＡｌａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ２はｍＰｈｅおよびｍＡｌａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ３はｍＮｌｅおよびｍＡｌａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ４はｍＧｌｙ、ＧｌｙおよびｍＡｌａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ５はＡｓｐおよびＡｌａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ６はＶａｌ(好ましい)およびＡｌａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ７はｍＰｈｅおよびＰｈｅを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ８はＴｙｒおよびＡｌａからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ９はｍＧｌｙ、ｍＡｌａおよびＧｌｙを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１１はＴｙｒおよびＡｌａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１２はＬｅｕおよびＡｌａを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１３はＬ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｃｙｓ、Ａｓｐ、ＧｌｕおよびＧｌｙを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１４はＧｌｙまたは少なくとも２個のエチレングリコール単位を含むＰＥＧスペーサーが続くＧｌｙまたはビオチンのようなタグが続く少なくとも２個のエチレングリコール単位を含むＰＥＧスペーサーが続くＧｌｙであり、
ここでＸａａ１４は場合により存在してよく、ここで、該アミノ酸のＣ末端カルボニル炭素が窒素に結合してカルボキサミド(ＮＨ２)、アルキルカルボキサミド(ＮＨＲ１)またはジアルキルカルボキサミド(ＮＲ１Ｒ２)を形成し；
ここで、Ｒ１およびＲ２の各々はアルキル基またはアリールアルキル基であり；
ここで、Ｘａａ１４が存在しないならば、Ｘａａ１３のＣ末端カルボニル炭素が窒素に結合してカルボキサミド(ＮＨ２)、アルキルカルボキサミド(ＮＨＲ１)またはジアルキルカルボキサミド(ＮＲ１Ｒ２)を形成し；
ここで、Ｒ１およびＲ２の各々はアルキル基またはアリールアルキル基である。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
他の態様において、ここに記戴する主題の一つの態様は、式III(ａ)
〔式中、
ＡはＸａａ１とＸａａ１２の間の有機またはペプチド性リンカーであり、それにより大環状ペプチドを提供し；
Ｘａａ１は天然型または非天然型芳香族またはヘテロ芳香族またはアルキルまたはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ２は天然型または非天然型アルキルまたは芳香族または荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ３は天然型または非天然型芳香族またはヘテロ芳香族またはアルキルまたはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ４は天然型または非天然型芳香族またはヘテロ芳香族またはアルキルまたはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ５は天然型または非天然型アルキルもしくはヘテロアルキルまたは芳香族もしくはヘテロ芳香族またはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ６は天然型または非天然型ヘテロ芳香族または正荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ７は天然型または非天然型極性または荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ８は天然型または非天然型正荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ９は天然型または非天然型アルキルもしくはヘテロアルキルまたは芳香族もしくはヘテロ芳香族またはヘテロアリールアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ１０は天然型または非天然型芳香族もしくはヘテロ芳香族またはアリールアルキルもしくはヘテロアリールアルキルまたはアルキルもしくはヘテロアルキルアミノ酸であり；
Ｘａａ１１は天然型または非天然型芳香族またはヘテロ芳香族またはアリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルまたはヘテロアルキルまたは正荷電アミノ酸であり；
Ｘａａ１２はリンカーＡの一端と反応して環状ペプチドを生じるために適当に活性化できる官能基を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘａａ１３は天然型または非天然型アミノ酸またはスペーサーまたはタグが続くスペーサーまたは可溶化もしくはＰＫ増強配列が続くスペーサーである。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
他の態様において、ここに記戴する主題の一つの態様は、式III(ｂ)
〔式中、
Ａは共有結合性チオエーテル結合を形成するためにＣｙｓ１２のスルフヒドリル基と反応できるマイケルアクセプターまたはクロロアセチル基もしくはブロモアセチル基のような求電子部分であり、それにより大環状ペプチドを生じ；ここで、このようなチオエーテル結合は対応するジアステレオ異性スルホキシド類に酸化されていてもされていなくてもよく；
Ｘａａ１はＰｈｅおよびＤ−Ｐｈｅから選択され；
Ｘａａ２はＬｅｕ、ＡｒｇおよびＰｈｅから選択され；
Ｘａａ３はＩｌｅ、ＬｅｕおよびＰｈｅから選択され；
Ｘａａ４はＶａｌ、ＴｙｒおよびＰｈｅから選択され；
Ｘａａ５はＩｌｅおよびＶａｌから選択され；
Ｘａａ６はＡｒｇおよびＨｉｓから選択され；
Ｘａａ８はＡｒｇから選択され；
Ｘａａ９はＶａｌ、Ｌｅｕ、ＴｙｒおよびＰｈｅから選択され；
Ｘａａ１１はＡｒｇおよびＴｙｒから選択され；
Ｘａａ１３はＧｌｙまたは少なくとも２個のエチレングリコール単位を含むＰＥＧスペーサーが続くＧｌｙであり、
ここでＸａａ１３は場合により存在してよく、ここで、該アミノ酸のＣ末端カルボニル炭素が窒素に結合してカルボキサミド(ＮＨ２)、アルキルカルボキサミド(ＮＨＲ１)またはジアルキルカルボキサミド(ＮＲ１Ｒ２)を形成し；
ここで、Ｒ１およびＲ２の各々はアルキル基またはアリールアルキル基であり；
ここで、Ｘａａ１３が存在しないならば、Ｃｙｓ１２のＣ末端カルボニル炭素が窒素に結合してカルボキサミド(ＮＨ２)、アルキルカルボキサミド(ＮＨＲ１)またはジアルキルカルボキサミド(ＮＲ１Ｒ２)を形成し；
ここで、Ｒ１およびＲ２の各々はアルキル基またはアリールアルキル基である。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
他の態様において、ここに記戴する主題の一つの態様は、式Ｉ(ｄ)
〔式中、
Ａは共有結合性チオエーテル結合を形成するために残基Ｘａａ１４上に存在するスルフヒドリル基と反応できるＮ末端Ｘａａ１残基のα−アミンに結合するクロロアセチル基であり、それにより大環状ペプチドを提供し；ここで、このようなチオエーテル結合は対応するジアステレオ異性スルホキシド類に酸化されていてもされていなくてもよく、
そして
Ｘａａ１はＬ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｔｒｐ、Ｌ−Ｔｙｒ、Ｌ−Ｐｈｅ(４−ＯＭｅ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｆ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｃｌ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｂｒ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−Ｍｅ)、Ｌ−Ｐｈｅ(４−ＣＦ３)、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｌ−Ｂｉｐ、Ｌ−３−Ｐｙａ、Ｌ−４−Ｐｙａ、Ｌ−３−Ｔｈａからなる群から選択され；
Ｘａａ２はＬ−Ａｌａ、Ｌ−ｍＡｌａ、ｍＧｌｙからなる群から選択され；
Ｘａａ３はＬ−ＡｌａおよびＬ−Ａｓｎからなる群から選択され；
Ｘａａ４はＬ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−α−Ｍｅ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ｐｒｏ(４−ＯＨ)、Ｌ−Ｐｒｏ(４−ＮＨ２)、Ｌ−Ｐｒｏ(４Ｓ−Ｐｈ)、Ｌ−Ａｚｔ、Ｌ−ＰｉｐおよびＬ−Ｏｉｃからなる群から選択され；
Ｘａａ５はＬ−Ａｌａ、Ｌ−ＨｉｓおよびＬ−Ｌｅｕからなる群から選択され；
Ｘａａ６はＬ−Ａｌａ、Ｌ−Ａｒｇ、Ｌ−Ａｓｐ、Ｌ−ＨｉｓおよびＬ−Ｌｅｕからなる群から選択され；
Ｘａａ７はｍＧｌｙ、Ｇｌｙ、Ｌ−ｍＡｌａ、Ｄ−ｍＡｌａ、Ｌ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｍＳｅｒ、Ｌ−Ｄａｂ、Ｌ−ＡｒｇおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択され；
Ｘａａ９はＬ−Ａｌａ、Ｌ−ＡｒｇおよびＬ−Ｓｅｒからなる群から選択され；
Ｘａａ１０はＬ−Ｔｒｐ、Ｌ−ＭｅｔおよびＬ−Ｂｚｔからなる群から選択され；
Ｘａａ１１はＬ−Ｎｌｅ、Ｌ−ｍＮｌｅ、Ｌ−ｍＡｌａ、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−ｍＰｈｅおよびＬ−ｍＬｅｕおよびＬ−ｍＳｅｒからなる群から選択され；
Ｘａａ１２はＬ−ｍＮｌｅおよびＬ−ｍＡｌａからなる群から選択され；
Ｘａａ１３はＬ−Ａｌａ、Ｌ−ＡｒｇおよびＬ−Ｌｅｕからなる群から選択され；
Ｘａａ１４はＬ−ＣｙｓおよびＤ−Ｃｙｓからなる群から選択され；
Ｘａａ１５はＧｌｙまたは１２個のエチレングリコール単位からなるＰＥＧスペーサーが続くＧｌｙであり；
ここでＸａａ１５は場合により存在してよく、ここで、該アミノ酸のＣ末端カルボニル炭素は窒素に結合してカルボキサミド(ＣＯＮＨ２)を形成し；
ここで、Ｘａａ１５が存在しないならば、Ｘａａ１４のＣ末端カルボニル炭素は窒素に結合してカルボキサミド(ＣＯＮＨ２)を形成する。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
他の態様において、ここに記戴する主題の一つの態様は、式II(ｃ)
〔式中、
Ａは共有結合性チオエーテル結合を形成するためにＣｙｓ１３残基上に存在するスルフヒドリル基と反応できるＮ末端Ｘａａ１残基のα−アミンに結合するクロロアセチル基であり、それにより大環状ペプチドを提供し；ここで、このようなチオエーテル結合は対応するジアステレオ異性スルホキシド類に酸化されていてもされていなくてもよく、
そして
Ｘａａ２はＬ−ｍＡｌａおよびＬ−ｍＰｈｅからなる群から選択され；
Ｘａａ３はＬ−ｍＡｌａおよびＬ−ｍＮｌｅからなる群から選択され；
Ｘａａ４はＧｌｙ、ｍＧｌｙおよびＬ−ｍＡｌａからなる群から選択され；
Ｘａａ５はＬ−ＡｌａおよびＬ−Ａｓｐからなる群から選択され；
Ｘａａ６はＬ−ＡｌａおよびＬ−Ｖａｌからなる群から選択され；
Ｘａａ７はＬ−ＰｈｅおよびＬ−ｍＰｈｅからなる群から選択され；
Ｘａａ８はＬ−ＡｌａおよびＬ−Ｔｙｒからなる群から選択され；
Ｘａａ９はＧｌｙ、ｍＧｌｙおよびＬ−ｍＡｌａからなる群から選択され；
Ｘａａ１２はＬ−ＬｅｕおよびＬ−Ａｌａからなる群から選択され；
Ｘａａ１４はＧｌｙまたは１２個のエチレングリコール単位からなるＰＥＧスペーサーが続くＧｌｙであり、
ここでＸａａ１４のＣ末端カルボニル炭素またはＰＥＧスペーサーが続くＸａａ１４は窒素に結合してカルボキサミド(ＣＯＮＨ２)を形成する。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
他の態様において、ここに記戴する主題の一つの態様は、式III(ｃ)
〔式中、
Ａは共有結合性チオエーテル結合を形成するためにＬ−Ｃｙｓ１２残基上に存在するスルフヒドリル基と反応できるＮ末端Ｌ−Ｐｈｅ残基のα−アミンに結合するクロロアセチル基であり、それにより大環状ペプチドを提供し；
そして
Ｘａａ２はＬ−Ｌｅｕ、Ｌ−ＡｒｇおよびＬ−Ｐｈｅから選択され；
Ｘａａ３はＬ−ＩｌｅおよびＬ−Ｐｈｅから選択され；
Ｘａａ４はＬ−Ｐｈｅ、Ｌ−ＴｙｒおよびＬ−Ｖａｌから選択され；
Ｘａａ５はＬ−ＩｌｅおよびＬ−Ｖａｌから選択され；
Ｘａａ９はＬ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−ＴｙｒおよびＬ−Ｖａｌから選択され；
ここでＧｌｙ１３のＣ末端カルボニル炭素は窒素に結合してカルボキサミド(ＣＯＮＨ２)を形成する。〕
の配列を有するポリペプチドに関する。
本発明は式Ｉまたに提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式Ｉ(ａ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式Ｉ(ｂ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式Ｉ(ｃ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式Ｉ(ｄ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式IIに提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式II(ａ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式II(ｂ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式II(ｃ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式IIIに提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式III(ａ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式III(ｂ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式III(ｃ)に提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式IVに提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式Ｖに提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式VIに提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明は式VIIに提供される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明はまた化合物番号１、２、３、４、７１および９９からなる群から選択される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明はまたここに記戴するものから選択される配列を含む、大環状ペプチドに関する。
本発明はまた過増殖性障害および／またはウイルス障害の回復および／または処置のための本発明の大環状ペプチドの使用方法に関する。
本発明はまたここに記戴するペプチドから選択される配列を含む１個以上の大環状ペプチドを対象に投与することを含む、対象における免疫応答の調節方法に関する。
本発明はまたここに記戴するものから選択される配列を含む１個以上の大環状ペプチドを対象に投与することを含む、対象における免疫応答を増強、刺激または上昇する方法に関する。
本発明はまた対象にここに記戴するペプチドから選択される配列を含む１個以上の大環状ペプチドの治療有効量を対象に投与することを含む、腫瘍細胞増殖の免疫系による阻害を促進する方法を提供する。
本発明はまた対象にここに記戴するペプチドから選択される配列を含む１個以上の大環状ペプチドの治療有効量を対象に投与することを含む、対象における感染性疾患の処置方法も提供する。
本発明はまたここに記戴する大環状ペプチドから選択される配列と、抗微生物治療、抗ウイルス治療、さらなる免疫調節治療、ワクチンまたは癌化学療法剤のような他の薬剤との組み合わせに関する。
大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１に結合する能力を測定するために利用した均一時間分解蛍光測定形式(ＨＴＲＦ)アッセイとして形式化したＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１生化学的結合アッセイの略図を示す。
大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１に結合する能力を測定するために利用したＨＴＲＦのＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１対照抗体用量応答曲線を示す。
本発明の代表的な大環状ペプチドのＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１ ＨＴＲＦ用量応答曲線を示す。
ＨＴＲＦ選択性パネル。示すとおり、データは、大環状ペプチドは、ＰＤ−１およびＣＤ８０へのＰＤ−Ｌ１の結合を妨害することからＰＤ−Ｌ１に結合するが、その結合は、該ペプチドがＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ２またはＣＤ８０／ＣＴＬＡ４相互作用を遮断しないことから選択的であること示す。
選抜した本発明の大環状ペプチドの細胞結合アッセイ。示すとおり、本発明の大環状ペプチドは、組み換えＰＤ−Ｌ１−ＩｇのＪｕｒｋａｔ−ＰＤ−１細胞への結合を阻止し、組み換えＰＤ−１−ＩｇのＬ２９８７(内在性ＰＤ−Ｌ１発現を有する腺癌細胞株)またはＬＫ３５.２−ｈＰＤ−Ｌ１(ｈＰＤ−Ｌ１を過発現するマウスＢ細胞株。抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、Bristol-Myers Squibb Companyが開発した内部の抗体である)のいずれかへの結合を遮断する。
対照抗体の細胞結合アッセイ。示すとおり対照抗体(抗ＰＤ−１および抗ＰＤ−Ｌ１)は、組み換えＰＤ−１−Ｉｇ(フィコエリトリン、ＰＥ、標識)のＬＫ３５.２−ｈＰＤ−Ｌ１細胞への結合を遮断する。
選抜した本発明の大環状ペプチドの細胞結合アッセイ。示すとおり、大環状ペプチドは、組み換えＰＤ−１−Ｉｇ(ＰＥ標識)のＬＫ３５.２−ｈＰＤ−Ｌ１細胞への結合を遮断する。
ビオチニル化化合物番号７１／ＰＤ−Ｌ１結合アッセイ。示すとおり、化合物番号９９、２および１大環状ペプチドは、ＨＴＲＦアッセイを使用してビオチニル化化合物番号７１ペプチドのＰＤ−Ｌ１への結合を遮断できる。これらの結果は、これらのペプチドが同一結合部位に結合することを示唆する。
ビオチニル化化合物番号７１／ＰＤ−Ｌ１結合アッセイ−抗ＰＤ−Ｌ１抗体。示すとおり、抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体は、ＨＴＲＦアッセイを使用してビオチニル化化合物番号７１のＰＤ−Ｌ１への結合を遮断できる。これらの結果は、これらのペプチドが抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体と同一結合部位に結合することを示唆する。
抗ＰＤ−Ｌ１抗体およびペプチドは、いずれも用量依存的にＣＭＶ特異的Ｔ細胞によるＩＦＮγ分泌を促進する。最も強い応答は、ＰＤ−Ｌ１に対する抗体(ＭＤＸ−１１０５)(抗ＰＤ−１ Ａｂ＃１、ＥＣ５０ ０.６nM；図１０Ａ)により生じ、続いて化合物番号７１(ＥＣ５０ ３００nM；図１０Ｂ)、化合物番号１(ＥＣ５０ ４００nM)、化合物番号２(ＥＣ５０ ４００nM)および化合物番号９９(ＥＣ５０＞１０,０００nM)であった。ＭＤＸ−１１０５および化合物番号７１、化合物番号１、化合物番号２および化合物番号９９のＥＣ５０結果の数値は、図１０Ｃに示す。これらの結果は、本発明の大環状ペプチド阻害剤のＰＤ−Ｌ１結合が、先の永続性抗原暴露により産生される記憶Ｔ細胞集団におけるＩＦＮγ放出を増強できることを示唆する。
抗ＰＤ−Ｌ１抗体および大環状ペプチドは、いずれも用量依存的にＨＩＶ特異的Ｔ細胞によるＩＦＮγ分泌を促進する。ウェルあたりの平均ＩＦＮγスポット形成細胞(ＳＦＣ)を２個のウェルから計算し、非刺激ウェルに存在する何らかのバックグラウンド(＜２５ＳＦＣ)を減じた。データをまたＤＭＳＯ対照処理を超える増加倍率として示す。抗ＰＤ−Ｌ１抗体およびペプチドのいずれも、６種のＨＩＶ−Ｇａｇ抗原プールの少なくとも１種に応答して、ＨＩＶ特異的Ｔ細胞によるＩＦＮγ分泌を促進する。これらの結果は、ペプチド阻害剤とのＰＤ−Ｌ１結合は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体と同様現在慢性ウイルス感染であるＴ細胞集団からのＩＦＮγ放出を増強できる。
本開示に従い、我々は、ＰＤ−Ｌ１と特異的に結合し、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１とのおよびＣＤ８０との相互作用を阻害できるペプチドを発見した。これらの大環状ペプチドは、インビトロ免疫調節効力を有し、癌および感染症を含む種々の疾患の処置のための治療剤候補となる。
用語“特異的結合”または“特異的な結合”は、タンパク質と、化合物またはリガンドのような結合分子の間の相互作用をいう。相互作用は、結合分子により認識されるタンパク質の特定の構造(すなわち、酵素結合部位、抗原決定基またはエピトープ)の存在に依存する。例えば、化合物がタンパク質結合部位“Ａ”に特異的結合を示すならば、結合部位Ａを含むタンパク質およびタンパク質結合部位Ａに特異的結合する標識ペプチドを含む反応中の化合物の存在は、標識ペプチドがタンパク質に結合する量を減少させる。対照的に、化合物のタンパク質への非特異的結合は、標識ペプチドのタンパク質からの濃度依存的置換をもたらさない。
他の態様は、次の構造を有するポリペプチドを含む。
または
または
または
他の態様は、式Ｉ(ａ)、Ｉ(ｂ)、Ｉ(ｃ)、II(ａ)、II(ｂ)、III(ａ)、III(ｂ)、IV、Ｖ、VIまたはVIIのポリペプチドまたはここに記戴する大環状ペプチドの少なくとも１個を含むペプチドを含む医薬組成物である。
他の態様は、式Ｉ(ａ)、Ｉ(ｂ)、Ｉ(ｃ)、II(ａ)、II(ｂ)、III(ａ)、III(ｂ)、IV、Ｖ、VIまたはVIIのポリペプチドまたはここに記戴する大環状ペプチドおよび抗菌剤、抗ウイルス剤、抗癌剤、抗糖尿病剤、抗肥満剤、抗高血圧剤、抗アテローム硬化性剤および脂質低下剤からなる群から選択される少なくとも１種の治療剤を含む、医薬組み合わせに関する。
他の態様は、式Ｉ(ａ)、Ｉ(ｂ)、Ｉ(ｃ)、II(ａ)、II(ｂ)、III(ａ)、III(ｂ)、IV、Ｖ、VIまたはVIIのポリペプチドまたはここに記戴する大環状ペプチドと、ここに開示する他の薬剤の医薬組み合わせに関する。
他の態様は、処置を必要とする哺乳動物に式Ｉ(ａ)、Ｉ(ｂ)、Ｉ(ｃ)、II(ａ)、II(ｂ)、III(ａ)、III(ｂ)、IV、Ｖ、VIまたはVIIのポリペプチドまたはここに記戴する大環状ペプチドの治療有効量を投与することを含む、癌および／またはウイルス学障害の処置または進行もしくは発症遅延のための方法に関する。
本発明は、本化合物に存在する原子の全ての同位体を含むことを意図する。同位体は、同じ原子番号を有するが、質量数が異なる原子を含む。一般的な例として、限定する意図はなく、水素の同位体は重水素およびトリチウムを含む。炭素の同位体は１３Ｃおよび１４Ｃを含む。同位体標識した本発明の化合物は、一般に当業者に知られる慣用の技術によりまたはここに記戴するものに順ずる方法により、他に用いた非標識反応材に代えて、適当な同位体標識した反応材を用いることにより製造できる。このような化合物は、例えば標準および生物学的活性を測定するための試薬として、多様な用途の可能性を有し得る。安定な同位体の場合、このような化合物は、生物学的、薬理学的または薬物動態特性を好ましく修飾する可能性を有し得る。
ここに記戴する主題の他の面は、リガンド結合アッセイの開発のためのまたはインビボ吸着、代謝、分布、受容体結合または占有または化合物処分のモニタリングのための、放射性標識リガンドとしての開示したペプチドの使用である。例えば、ここに記戴する大環状ペプチドを放射性同位体１２５Ｉを使用して製造してよく、得られた放射性標識ペプチドを結合アッセイの開発または代謝試験に使用してよい。代替的におよび同じ目的で、ここに記戴する大環状ペプチドを、当業者に知られ理方法を使用した触媒的トリチウム標識により放射性標識形態に変換し得る。
本発明の大環状ペプチドはまた当業者に知られる方法を使用した放射性トレーサーの付加によりＰＥＴ造影剤として使用できる。
好ましいペプチドは、ここに提供する大環状ペプチドの少なくとも１個を含み、これらのペプチドは医薬組成物および組み合わせに包含され得る。
ここに提供する定義は、限定しないが、他に具体的な状況で限定がない限り、本明細書をとおしてその用語が使用されている限り、適用される。
アミノ酸およびペプチド化学の当業者は、アミノ酸が、次の一般構造により表される化合物を含むこと認識する。
(式中、ＲおよびＲ'はここに記戴するとおりである)。
特に断らない限り、単独でまたは他の基の一部としてここで使用する用語“アミノ酸”は、“α”炭素と呼ばれる同じ炭素に結合したアミノ基およびカルボキシル基を含むが、これらに限定されず、ここで、Ｒおよび／またはＲ'は、水素を含み天然または非天然側鎖であり得る。“α”炭素における絶対“Ｓ”配置は一般に“Ｌ”または“天然”配置と呼ばれる。“Ｒ”および“Ｒ'”(主要)置換基が水素であるとき、アミノ酸はグリシンであり、キラルではない。
ここで使用する用語“天然型アミノ酸側鎖”は、通常Ｓ配置(すなわち、Ｌ−アミノ酸)である天然型アミノ酸(すなわち、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリン)のいずれかの側鎖をいう。
ここで使用する用語“非天然型アミノ酸側鎖”は、通常Ｒ配置(すなわち、Ｄ−アミノ酸)の天然型アミノ酸のいずれかの側鎖または次のものから選択されるＲまたはＳ配置(すなわち、それぞれＤ−またはＬ−アミノ酸)の天然型アミノ酸側鎖以外の基を意味する：
Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニルＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルファニルＣ１−Ｃ３アルキル、アミドＣ１−Ｃ３アルキル、アミノＣ１−Ｃ３アルキル、アザインドリルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンゾチアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンゾチエニルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンジルオキシＣ１−Ｃ３アルキル、カルボキシＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルＣ１−Ｃ３アルキル、ジフェニルメチル、フラニルＣ１−Ｃ３アルキル、イミダゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、ナフチルＣ１−Ｃ３アルキル、ピリジニルＣ１−Ｃ３アルキル、チアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、チエニルＣ１−Ｃ３アルキル；
ビフェニルＣ１−Ｃ３アルキル(ここで、ビフェニルは場合によりメチル基で置換されていてよい)；
インドリルＣ１−Ｃ３アルキル(ここで、インドリル部分は場合によりＣ１−Ｃ３アルキル、カルボキシＣ１−Ｃ３アルキル、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから選択される１個の基で置換されていてよく、該フェニルはさらに場合によりＣ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびハロから独立して選択される１個、２個または３個の基で置換されていてよい)；
ＮＲａＲｂ(Ｃ１−Ｃ７アルキル)(ここで、ＲａおよびＲｂは独立して水素、Ｃ２−Ｃ４アルケニルオキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルカルボニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルカルボニル、フラニルカルボニルおよびフェニルカルボニルから選択される。アルキルリンカーが１個を超える炭素を含むならば、さらなるＮＲａＲｂ基が鎖上にあり得る)；
ＮＲｃＲｄカルボニルＣ１−Ｃ３アルキル(ここで、ＲｃおよびＲｄは独立して水素、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびトリフェニルメチルから選択される)；
フェニルＣ１−Ｃ３アルキル(ここで、フェニル部分はＣ場合により１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルアミノ、アミド、アミノ、アミノＣ１−Ｃ３アルキル、アミノスルホニル、カルボキシ、シアノ、ハロ、ハロＣ１−Ｃ３アルキル、ヒドロキシ、−ＮＣ(ＮＨ２)２、ニトロおよび−ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２から独立して選択される１個、２個、３個、４個または５個の基で置換されていてよい)；および
フェノキシＣ１−Ｃ３アルキル(ここで、フェニルは場合によりＣ１−Ｃ３アルキル基で置換されていてよい)。
ここで使用する用語“Ｃ２−Ｃ４アルケニル”は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む、２〜４個の炭素原子の直鎖または分枝鎖基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ２−Ｃ７アルケニル”は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む、２〜７個の炭素原子の直鎖または分枝鎖基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ２−Ｃ４アルケニルオキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ２−Ｃ４アルケニル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルコキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ４アルコキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ４アルキル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ６アルコキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ６アルキル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルコキシＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキル”は、１〜３個の炭素原子からなる、直鎖または分枝鎖飽和炭化水素に由来する基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ４アルキル”は、１〜４個の炭素原子からなる、直鎖または分枝鎖飽和炭化水素に由来する基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ６アルキル”は、１〜６個の炭素原子からなる、直鎖または分枝鎖飽和炭化水素に由来する基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルスルファニル”は、硫黄原子を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルスルファニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルファニル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニル”は、スルホニル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルアミノ”は、アミノ基を介して親分子部分に結合する、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニル基をいう。
ここで使用する用語“アミド”は、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２をいう。
ここで使用する用語“アミドＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、アミド基をいう。
ここで使用する用語“アミノ”は、−ＮＨ２をいう。
ここで使用する用語“アミノＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、アミノ基をいう。
ここで使用する用語“アミノスルホニル”は、スルホニル基を介して親分子部分に結合する、アミノ基をいう。
ここで使用する用語“アザインドリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、アザインドリル基をいう。アザインドリル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“ベンゾチアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ベンゾチアゾリル基をいう。ベンゾチアゾリル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“ベンゾチエニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ベンゾチエニル基をいう。ベンゾチエニル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“ベンジルオキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、ベンジル基をいう。
ここで使用する用語“ベンジルオキシＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ベンジルオキシ基をいう。
ここで使用する用語“ビフェニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ビフェニル基をいう。ビフェニル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“カルボニル”は、−Ｃ(Ｏ)−をいう。
ここで使用する用語“カルボキシ”は、−ＣＯ２Ｈをいう。
ここで使用する用語“カルボキシＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、カルボキシ基をいう。
ここで使用する用語“シアノ”は、−ＣＮをいう。
ここで使用する用語“Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル”は、３〜６個の炭素原子および０個のヘテロ原子を有する、飽和単環式、炭化水素環系をいう。
ここで使用する用語“Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル基をいう。
ここで使用する用語“Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル基をいう。
ここで使用する用語“フラニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、フラニル基をいう。フラニル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“フラニルカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、フラニル基をいう。
ここで使用する用語“ハロ”および“ハロゲン”は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩをいう。
ここで使用する用語“ハロＣ１−Ｃ３アルキル”は、１個、２個または３個のハロゲン原子で置換されたＣ１−Ｃ３アルキル基をいう。
ここで使用する用語“ハロメチル”は、１個、２個または３個のハロゲン原子で置換されたメチル基をいう。
ここで使用する用語“ヒドロキシ”は、−ＯＨをいう。
ここで使用する用語“イミダゾリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、イミダゾリル基をいう。イミダゾリル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“インドリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、インドリル基をいう。インドリル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“ナフチルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ナフチル基をいう。ナフチル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“ニトロ”は、−ＮＯ２をいう。
ここで使用する用語“ＮＲａＲｂ”は、窒素原子を介して親分子部分に結合する、２個の基ＲａおよびＲｂをいう。ＲａおよびＲｂは独立して水素、Ｃ２−Ｃ４アルケニルオキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ３アルキルカルボニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルカルボニル、フラニルカルボニルおよびフェニルカルボニルから選択される。
ここで使用する用語“ＮＲａＲｂ(Ｃ１−Ｃ３)アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ＮＲａＲｂ基をいう。
ここで使用する用語“ＮＲｃＲｄ”は、窒素原子を介して親分子部分に結合する２個の基ＲｃおよびＲｄをいう。ＲｃおよびＲｄは独立して水素、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびトリフェニルメチルから選択される。
ここで使用する用語“ＮＲｃＲｄカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、ＮＲｃＲｄ基をいう。
ここで使用する用語“ＮＲｃＲｄカルボニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ＮＲｃＲｄカルボニル基をいう。
ここで使用する用語“フェノキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合する、フェニル基をいう。
ここで使用する用語“フェノキシＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、フェノキシ基をいう。
ここで使用する用語“フェニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、フェニル基をいう。
ここで使用する用語“フェニルカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子部分に結合する、フェニル基をいう。
ここで使用する用語“ピリジニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、ピリジニル基をいう。ピリジニル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“スルファニル”は、−Ｓ−をいう。
ここで使用する用語“スルホニル”は、−ＳＯ２−をいう。
ここで使用する用語“チアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、チアゾリル基をいう。チアゾリル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
ここで使用する用語“チエニルＣ１−Ｃ３アルキル”は、Ｃ１−Ｃ３アルキル基を介して親分子部分に結合する、チエニル基をいう。チエニル基は、該基の任意の置換可能な原子を介してアルキル部分に結合できる。
用語“処置”は、(ｉ)疾患、障害および／または状態の素因があるが、まだそれを有していると診断されていない患者における該疾患、障害または状態の発症を予防する；(ii)疾患、障害または状態を阻止する、すなわち、その発症を停止させる；および(iii)疾患、障害または状態を軽減する、すなわち、疾患、障害および／または状態および／または疾患、障害および／または状態に伴う症状の回復を起こすことを含む。
特に断らない限り、単独でまたは他の基の一部としてここで用いる用語“アルキル”は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４,４−ジメチルペンチル、オクチル、２,２,４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、その種々の分枝鎖異性体などのような、通常の鎖に１〜４０個の炭素、好ましくは１〜２０個の炭素、より好ましくは１〜８個の炭素を含む、直鎖および分枝鎖炭化水素の両者を含むが、これらに限定されない。さらに、ここに定義するアルキル基は、トリフルオロメチル、３−ヒドロキシヘキシル、２−カルボキシプロピル、２−フルオロエチル、カルボキシメチル、シアノブチルなどのようなアルキル基を形成するために、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、ヒドロキシ、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アルコキシ、アリールアルキルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、アルカノイル、ハロ、ヒドロキシル、チオ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、カルボニル(＝Ｏ)、カルボキサミド、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミド、アルキルアミノ、アリールアミド、ヘテロアリールアミド、アジド、グアニジノ、アミジノ、ホスホン、ホスフィン、スルホン、スルホンアミド、ハロアリール、ＣＦ３、ＯＣＦ２、ＯＣＦ３、アリールオキシ、ヘテロアリール、シクロアルキルアルコキシアルキル、シクロヘテロアルキルなどのような、しかしこれらに限定されない、このような鎖に一般的に結合する１個以上の官能基で、任意の利用可能な炭素原子を置換されていてよい。
特に断らない限り、単独でまたは他の基の一部としてここで用いる用語“シクロアルキル”は、環を形成する計３〜２０個の炭素、好ましくは各環を形成する４〜７個の炭素を含む、単環式アルキル、二環式アルキルおよび三環式アルキルを含む、結合または縮合した、１〜３個の環を含む飽和または一部不飽和(１個または２個の二重結合を含む)環状炭化水素基を含むが、これらに限定されない；これは、アリールについて記戴する１個の芳香環と縮合してよく、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロデシル、シクロドデシル、シクロヘキセニル、
を含み、このいずれの基も、場合により水素、ハロ、ハロアルキル、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルケニル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アルキニル、シクロアルキルアルキル、フルオレニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールオキシ、アリールオキシアルキル、アリールアルコキシ、アリールチオ、アリールアゾ、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヒドロキシ、ニトロ、オキソ、シアノ、カルボキシル、カルボニル(＝Ｏ)、カルボキサミド、アミノ、アミノが１個または２個の置換基を含む置換アミノ(置換基はアルキル、アリールまたは定義に記戴した他のアリール化合物のいずれかである)、アミド、アジド、グアニジノ、アミジノ、ホスホン、ホスフィン、スルホン、スルホンアミド、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、アリールチオアルキル、アルコキシアリールチオ、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アリールスルフィニル、アリールスルフィニルアルキル、アリールスルホニルアミノまたはアリールスルホンアミノカルボニルまたは上記したアルキル置換基のいずれかから選択される１個以上の基で、任意の利用可能な炭素原子を置換されていてよい。
単独でまたは他の基の一部としてここで用いる用語“アリール”は、環部分に６〜１０個の炭素を含む単環式および二環式芳香族基(例えばフェニルまたはナフチル)をいうが、これらに限定されず、場合により、“アリール”に縮合した１〜３個のさらなる環(例えばアリール環、シクロアルキル環、ヘテロアリール環またはヘテロシクロアルキル環)を有してよく、場合により水素、アルキル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルケニル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アルキニル、シクロアルキルアルキル、フルオレニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールオキシ、アリールオキシアルキル、アリールアルコキシ、アリールチオ、アリールアゾ、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシアルキル、ヒドロキシ、ニトロ、オキソ、シアノ、アミノ、アミノが１個または２個の置換基を含む置換アミノ(置換基はアルキル、アリールまたは定義に記戴した他のアリール化合物のいずれかである)、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、アリールチオアルキル、アルコキシアリールチオ、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルキルアミノカルボニル、シクロアルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、ヘテロアリールアミノカルボニル、ヘテロアリールアルキルアミノカルボニルアルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アリールスルフィニル、アリールスルフィニルアルキル、アリールスルホニルアミノまたはアリールスルホンアミノカルボニルまたは上記したアルキル置換基のいずれかからなる群から選択される１個以上の基で、利用可能な炭素原子を置換されていてよい。
単独でまたは他の基の一部としてここで使用する用語“アリールアルキル”は、ベンジル、フェネチルまたはナフチルプロピルのようなアリール置換基を有するアルキル基をいうが、これらに限定されず、ここで、該アリールおよび／またはアルキル基は、上に定義したように場合により置換されていてよい。
単独でまたは他の基の一部としてここで使用する用語“アルコキシ”、“アリールオキシ”、“ヘテロアリールオキシ”、“アリールアルキルオキシ”または“ヘテロアリールアルキルオキシ”は、酸素原子を介して結合した、上に定義するアルキル基またはアリール基を含むが、これらに限定されない。
ここで使用する用語“ヘテロシクロ”、“ヘテロ環”、“ヘテロシクリル”または“ヘテロ環式”は、飽和または不飽和であり得る、炭素原子および窒素、硫黄、酸素および／またはＳＯまたはＳＯ２基から選択される１〜４個のヘテロ原子からなる非置換または置換の安定な４員、５員、６員または７員単環式環系をいうが、これらに限定されず、ここで、窒素および硫黄ヘテロ原子は場合により酸化されていてよく、窒素ヘテロ原子は場合により四級化されていてよい。ヘテロ環式環は、安定な構造の形成に至る任意のヘテロ原子または炭素原子で結合してよてい。このようなヘテロ環式基の例は、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニルピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキソピロリジニル、オキソピペラジニル、オキソピペリジニルおよびオキサジアゾリルを含むが、これらに限定されない。場合により、ヘテロシクロ基は、“アルキル”または“アリール”について記戴したように、１個以上の官能基で置換されていてよい。
単独でまたは他の基の一部としてここで使用する用語“ヘテロシクロアルキル”は、ヘテロシクロアルキル置換基を有する上に定義したアルキル基であるが、これに限定されず、ここで、該“ヘテロシクロ”および／またはアルキル基は、上に定義したように場合により置換されていてよい。
ここで使用する用語“ヘテロアリール”は、窒素、硫黄、酸素および／またはＳＯまたはＳＯ２基から選択される１個以上のヘテロ原子を含む５員、６員または７員芳香族ヘテロ環式環をいうが、これらに限定されない。このような環は、他のアリール環またはヘテロアリール環と縮合してよく、Ｎ−オキシドを含む可能性があり、このようなヘテロアリール基の例は、フラン、ピロール、チオフェン、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、ピリダジン、イソキサゾール、オキサゾール、イミダゾールなどを含むが、これらに限定されない。場合により、ヘテロアリール基は、“アルキル”または“アリール”について記戴したような、このような鎖に一般に結合する１個以上の官能基で置換されていてよい。
単独でまたは他の基の一部としてここで使用する用語“ヘテロアリールアルキル”は、 ヘテロアリール置換基を有する上に定義したアルキル基をいうが、これらに限定されず、ここで、該ヘテロアリールおよび／またはアルキル基は、上に定義したように場合により置換されていてよい。
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の“阻害濃度”は、本明細書のアッセイでスクリーニングした化合物が、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の相互作用を測定可能なパーセンテージで阻害する濃度を意味することを意図する。“阻害濃度”値の例は、ＩＣ５０〜ＩＣ９０の範囲であり、好ましくは、ＩＣ５０、ＩＣ６０、ＩＣ７０、ＩＣ８０またはＩＣ９０であり、これは、それぞれＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１結合活性の５０％、６０％、７０％、８０％または９０％減少を意味する。より好ましくは、“阻害濃度”はＩＣ５０値として測定する。ＩＣ５０の他の呼称が最大半量阻害濃度であることは理解される。
大環状ペプチドのＰＤ−Ｌ１への結合は、例えば、均一時間分解蛍光測定(ＨＴＲＦ)、表面プラズモン共鳴法(ＳＰＲ)、等温滴定熱量測定(ＩＴＣ)、核磁気共鳴スペクトロスコピー(ＮＭＲ)などにより測定できる。さらに、大環状ペプチドの細胞表面上に発現するＰＤ−Ｌ１への結合は、ここに記戴するとおり細胞結合アッセイで測定できる。
ここに記戴する治療剤の投与は、治療有効量の治療剤の投与を含むが、これに限定されない。ここで使用する用語“治療有効量”は、ここに記戴するＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１結合阻害剤の組成物の投与により処置可能な状態の処置または予防のための治療剤の量をいうが、これに限定されない。この量は、検出可能な治療的または予防的または寛解性効果を示すのに十分な量である。効果は、例として、限定しないが、ここに挙げる状態の処置または予防を含み得る。対象に対する厳密な有効量は、対象の体格および健康状態、処置すべき状態の性質および程度、処置医の推奨および投与に選択した治療剤または治療剤組み合わせによる。それゆえに、正確な有効量を前もって特定するのは有用ではない。
本発明の大環状ペプチドは、ＨＴＲＦアッセイならびに細胞結合アッセイの両者で、ＰＤ−Ｌ１に強力な結合活性を示す。さらに、大環状ペプチドはまたＣＭＶリコールおよびＨＩＶエリスポットアッセイにおいても生物学的活性を示し、癌のような過増殖性障害およびＨＩＶを含むウイルス学適応症の回復および／または処置におけるその有用性が示される。
他の面において、本発明は、本発明の大環状ペプチドを使用する対象における腫瘍細胞阻止方法にも関する。ここで示されるとおり、本発明の大環状ペプチドはＰＤ−Ｌ１と結合し、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１の相互作用を妨害し、ＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１との相互作用を阻止することが知られる抗ＰＤ−１モノクローナル抗体の結合と競合し、ＣＭＶ特異的Ｔ細胞ＩＦＮγ分泌を増強し、ＨＩＶ特異的Ｔ細胞ＩＦＮγ分泌を増強することができる。その結果、本発明の大環状ペプチドは免疫応答の修飾、癌または感染性疾患のような疾患の処置、保護的自己免疫応答の刺激または抗原特異的免疫応答の刺激(例えば、ＰＤ−Ｌ１遮断ペプチドと目的の抗原の共投与による)に有用である。
本発明がより容易に理解され得るために、ある用語を最初に定義する。さらなる定義は、詳細な記戴をとおして示される。
用語“プログラム死リガンド１”、“プログラム細胞死リガンド１”、“タンパク質ＰＤ−Ｌ１”、“ＰＤ−Ｌ１”、“ＰＤＬ１”、“ＰＤＣＤＬ１”、“ｈＰＤ−Ｌ１”、“ｈＰＤ−ＬＩ”、“ＣＤ２７４”および“Ｂ７−Ｈ１”は相互交換可能に使用し、ＰＤ−Ｌ１と少なくとも１個の共通するエピトープを有する異型、アイソフォーム、ヒトＰＤ−Ｌ１の種ホモログおよびアナログを含む。完全ＰＤ−Ｌ１配列は、GENBANK(登録商標)Accession No. NP_054862に見ることができる。
用語“プログラム死１”、“プログラム細胞死１”、“タンパク質ＰＤ−１”、“ＰＤ−１”、“ＰＤ１”、“ＰＤＣＤ１”、“ｈＰＤ−１”および“ｈＰＤ−Ｉ”は相互交換可能に使用し、ＰＤ−１と少なくとも１個の共通するエピトープを有する異型、アイソフォーム、ヒトＰＤ−１の種ホモログおよびアナログを含む。完全ＰＤ−１配列はGENBANK(登録商標)Accession No. U64863に見ることができる。
用語“細胞毒性Ｔリンパ球関連抗原−４”、“ＣＴＬＡ−４”、“ＣＴＬＡ４”、“ＣＴＬＡ−４抗原”および“ＣＤ１５２”(例えば、Murata, Am. J. Pathol., 155:453-460 (1999)参照)は相互交換可能に使用し、ＣＴＬＡ−４と少なくとも１個の共通するエピトープを有する異型、アイソフォーム、ヒトＣＴＬＡ−４の種ホモログおよびアナログを含む(例えば、Balzano, Int. J. Cancer Suppl., 7:28-32 (1992)参照)。完全ＣＴＬＡ−４核酸配列はGENBANK(登録商標)Accession No. L15006に見ることができる。
用語“免疫応答”は、例えば、侵入した病原体、病原体に感染した細胞または組織、癌細胞の選択的損傷、破壊または体内からの除去または自己免疫または病理学的炎症の場合、正常ヒト細胞または組織に至る、リンパ球、抗原提示細胞、食細胞、顆粒球および上記細胞または肝臓で産生される可溶性巨大分子(大環状ペプチド、サイトカインおよび補体)の作用をいう。
“シグナル伝達経路”は、細胞のある部分から細胞の他の部分へのシグナルの伝達において役割を有する、多様なシグナル伝達分子間の生化学的相関をいう。ここで使用する用語“細胞表面受容体”は、例えば、シグナルの受容およびこのようなシグナルの細胞原形質膜を超える伝達が可能な分子および分子の複合体を含む。本発明の“細胞表面受容体”の例はＰＤ−１受容体である。
用語“大環状ペプチド誘導体”は、ここに開示する大環状ペプチドのあらゆる修飾された形態、例えば、変異物、アイソフォーム、改変されたリンカー主鎖を有するペプチド、抗体および／または他剤とのコンジュゲートなどをいう。
ここで使用する“ヒトＰＤ−Ｌ１と特異的に結合する”本発明の大環状ペプチドは、約２００nM未満、約１５０nM未満、約１００nM未満、約８０nM未満、約６０nM未満、約４０nM未満、約２０nM未満、約１５nM未満、約１０nM未満、約５nM未満、約１nM未満またはそれ未満のＩＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１と結合する大環状ペプチドをいう。この文脈で、用語“約”は、表示されている数値から１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０nMの何れかを増減した数値範囲を意味すると解釈すべきである。
用語“処置”または“治療”は、統計学的に有意な方法で、状態(例えば、疾患)、状態の症状を治療、治癒、軽減、軽減、変更、矯正、回復、改善または作用する、疾患の症状、合併症、生化学的兆候の発生を予防または遅延するまたは他の点で疾患、状態または障害のさらなる進行を停止させる目的で活性剤を投与することをいう。
ここで使用する“有害事象”(ＡＥ)は、医学的処置と関係する、あらゆる好ましくないおよび一般に意図されない、望ましくなくさえある、徴候(検査所見の異常を含む)、症状または疾患である。例えば、有害事象は、処置に応答した免疫系の活性化または免疫系細胞(例えば、Ｔ細胞)の増大と関係し得る。医学的処置は、一つ以上のＡＥと関係することがあり、各ＡＥの重症度は同一または異なり得る。“有害事象を変える”ことができる方法の言及は、異なる処置レジメの使用と関係する、１つ以上のＡＥの発生率および／または重症度を減少する処置レジメを意味する。
ここで使用する“過増殖性疾患”は、細胞増殖が正常レベルを超えて増加した状態をいう。例えば、過増殖性疾患または障害は、悪性疾患(例えば、食道癌、結腸癌、胆道癌)および非悪性疾患(例えば、アテローム性動脈硬化症、良性過形成および良性前立腺肥大)を含む。
ここで使用する“約”または“を本質的に含む”なる用語は、当業者により測定される特定の値に対する許容される誤差範囲内を意味し、一部どのように値を測定または決定したが、すなわち、測定系の限度に依存する。例えば、“約”または“を本質的に含む”は、当分野の経験に従い、１以内または１を超える標準偏差を意味し得る。あるいは、“約”または“を本質的に含む”は、２０％までの範囲を意味し得る。さらに、特に生物学的系または過程に関して、本用語は１桁までの振幅または５倍までの値を意味し得る。特定の値を本明細書および特許請求の範囲に記戴するとき、特に断らない限り、その特定の値についての許容される誤差範囲内であるとして、“約”または“を本質的に含む”の意味を考慮すべきである。
ここに記戴する、あらゆる濃度範囲、パーセンテージ範囲、比率範囲または整数範囲は、特に断らない限り、列挙した範囲内のあらゆる整数の値と、適当なとき、その分数(例えば整数の１／１０および１／１００)を含むと理解すべきである。
競合アッセイ
本発明はまた少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％および少なくとも約１００％まで、参照抗ＰＤ−Ｌ１抗体(ＭＤＸ−１１０５)の結合と競合できる大環状ペプチドに関する。このような大環状ペプチドは、ＰＤ−Ｌ１と特異的に結合する限り、変異体、保存的置換、機能的置換および欠失形態を含み、１個以上のここに開示する大環状ペプチドと構造相同性であり得る。例えば、大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１の参照抗ＰＤ−Ｌ１抗体と同じ領域に実質的に結合するならば、大環状ペプチドは、抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体が結合するＰＤ−Ｌ１エピトープと少なくとも重複するＰＤ−Ｌ１のエピトープと結合するはずである。重複領域は、アミノ酸残基から数百アミノ酸残基の範囲であり得る。そうであれば、大環状ペプチドは、抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体のＰＤ−Ｌ１への結合と競合および／または遮断し、それにより抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体のＰＤ−Ｌ１への結合を、競合アッセイにおいて好ましくは少なくとも約５０％減少させるはずである(図９参照)。
競合アッセイ目的で参照抗体として使用し得る抗ＰＤ−Ｌ１抗体は当分野で知られる。例えば、次の代表的抗ＰＤ−Ｌ１抗体を使用し得る。MDX-1105(BMS); L01X-C(Serono)、L1X3(Serono)、MSB-0010718C(Serono)およびPD-L1 Probody(CytomX)および共用ＷＯ２００７／００５８７４に開示のＰＤ−Ｌ１抗体。
競合アッセイ目的で参照抗体として使用し得る抗ＰＤ−１抗体は当分野で知られる。例えば、次の代表的抗ＰＤ−１抗体を使用し得る：ニボルマブ(BMS)；各々共用米国特許番号８,００８,４４９(BMS)に開示する１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、４Ａ１１、７Ｄ３および５Ｆ４、MK-3475(Merck、米国特許番号８,１６８,７５７に開示)および米国特許番号７,４８８,８０２に開示の抗体。
異型大環状ペプチド
さらに他の態様において、本発明の大環状ペプチドは、ここに記戴する大環状ペプチドのアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を含み、大環状ペプチドは本発明の大環状ペプチドの所望の機能的および／または生物学的特性を保持する。
例えば、本発明は、ここに記戴する化合物から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む、大環状ペプチドまたはその抗原結合部分を提供し、かつ大環状ペプチドは次の特性の一つ以上を示す。
(ａ)大環状ペプチドはヒトＰＤ−Ｌ１と２００nM以下のＩＣ５０で結合する；
(ｂ)大環状ペプチドはヒトＣＤ２８、ＣＴＬＡ−４またはＩＣＯＳと実質的に結合しない；
(ｃ)大環状ペプチドはＣＭＶ特異的Ｔ細胞ＩＦＮγ分泌を増加する；
(ｄ)大環状ペプチドはＨＩＶ特異的Ｔ細胞ＩＦＮγ分泌を増加する；
(ｅ)大環状ペプチドはヒトＰＤ−１および次の１個以上と結合する：カニクイザルＰＤ−１；マーモットＰＤ−１および／またはマウスＰＤ−１；
(ｆ)大環状ペプチドはＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害する；
(ｇ)大環状ペプチドはニボルマブ(BMS-936558、MDX-1106)を含む抗ＰＤ−１モノクローナル抗体の結合と競合できる；
(ｈ)大環状ペプチドは細胞アッセイおよび／またはインビボアッセイで腫瘍細胞増殖を阻害する；および／または
(ｉ)大環状ペプチドは細胞アッセイおよび／またはインビボアッセイでＨＩＶを阻害する。
他の態様において、大環状ペプチドアミノ酸配列は、上に示す配列と約８０％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％相同であり得る。この文脈で、用語“約”は、上記数値に１、２、３、４または５パーセントを加えまたは減じて得られる数値の間の何れかの数値を意味すると解釈されるべきである。上に示す配列と高い同一性(すなわち、８０％以上)の配列を有する本発明の大環状ペプチドは、化学合成中の配列の変異と、例えば、その後の改変した大環状ペプチドについて、ここに記戴する機能的アッセイを使用した機能の保持の試験(すなわち、上の(ａ)〜(ｉ)に示した機能)により得られる。異型大環状ペプチドアミノ酸配列の生物学的および／または機能的活性は、異型の元となる対照大環状ペプチドの少なくとも約１ｘ、２ｘ、３ｘ、４ｘ、５ｘ、６ｘ、７ｘ、８ｘ、９ｘまたは１０ｘを超える。この文脈で、用語“約”は、記戴する数値に０.１ｘ、０.２ｘ、０.３ｘ、０.４ｘ、０.５ｘ、０.６ｘ、０.７ｘ、０.８ｘまたは０.９ｘを加えまたは減じて得られる数値の何れかを意味すると解釈されるである。
ここで使用する２個のアミノ酸配列の間の相同性パーセントは、２個の配列の間の同一性パーセントと同じである。２個の配列の間の同一性パーセントは、２個の配列の最適アラインメントのために導入する必要があるギャップの数および各ギャップの長さを考慮に入れた配列(すなわち、％相同性＝同一位置の数／総位置の数×１００)が共有する同一位置の数の関数である。配列の比較および２個の配列の間の同一性パーセントの決定は、下の非限定的例に記戴するとおり、数値計算用アルゴリズムを使用して達成できる。
２個のアミノ酸配列の間の同一性パーセントは、ＡＬＩＧＮプログラム(version 2.0)に組み込まれているMeyers E. et al.(Comput. Appl. Biosci., 4:11-17 (1988)のアルゴリズムを使用して、ＰＡＭ１２０加重残基表、ギャップ長ペナルティ１２およびギャップペナルティ４を使用して決定できる。さらに、２個のアミノ酸配列の間の同一性パーセントは、ＧＣＧ(登録商標)ソフトウエアパッケージ(www.gcg.comで入手可能)におけるＧＡＰプログラムに取り込まれているNeedleman et al. (J. Mol. Biol., 48:444-453 (1970))アルゴリズムを使用して、Blossum 62マトリクスまたはPAM250マトリクスおよびギャップ加重１６、１４、１２、１０、８、６または４および長さ加重１、２、３、４、５または６を使用して達成できる。
保存的修飾を有する大環状ペプチド
さらに他の態様において、本発明の大環状ペプチドは、ここに記戴する大環状ペプチドのアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を含み、大環状ペプチドは本発明の大環状ペプチドの所望の機能的および／または生物学的特性を保持する。
例えば、本発明は、１個以上のアミノ酸が保存的アミノ酸で置換されている、ここに記戴する大環状ペプチドから選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％相同であるアミノ酸配列を含む大環状ペプチドまたはその抗原結合部分を提供し、大環状ペプチドは次の特性の一つ以上を示す。
(ａ)大環状ペプチドはヒトＰＤ−Ｌ１と２００nM以下のＩＣ５０で結合する
(ｂ)大環状ペプチドはヒトＣＤ２８、ＣＴＬＡ−４またはＩＣＯＳと実質的に結合しない；
(ｃ)大環状ペプチドはＣＭＶ特異的Ｔ細胞ＩＦＮγ分泌を増加する；
(ｄ)大環状ペプチドはＨＩＶ特異的Ｔ細胞ＩＦＮγ分泌を増加する；
(ｅ)大環状ペプチドはヒトＰＤ−Ｌ１および１個以上の次のものと結合する：カニクイザルＰＤ−Ｌ１；マーモットＰＤ−Ｌ１および／またはマウスＰＤ−Ｌ１；
(ｆ)大環状ペプチドはＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害する；
(ｇ)大環状ペプチドはニボルマブ(BMS-936558、MDX-1106)を含む抗ＰＤ−１モノクローナル抗体の結合と競合できる；
(ｈ)大環状ペプチドは細胞アッセイおよび／またはインビボアッセイで腫瘍細胞増殖を阻害する；および／または
(ｉ)大環状ペプチドは細胞アッセイおよび／またはインビボアッセイでＨＩＶを阻害する。
ここで使用する用語“保存的配列修飾”は、アミノ酸配列を含む大環状ペプチドの結合特徴に顕著な影響を与えないまたは変更しない、アミノ酸修飾をいうことを意図する。このような保存的修飾はアミノ酸置換、付加および欠失を含む。修飾は、化学合成、部位特異的変異誘発およびＰＣＲ介在突然変異誘発の間に、ペプチドアミダイトの置換のような、当分野で知られる標準法により本発明の抗体に導入できる。保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基を、類似の側鎖を有するアミノ酸残基に置き換えるものである。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは文献において定義されている。これらのファミリーは、塩基性側鎖(例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン)、酸性側鎖(例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸)、無電荷極性側鎖(例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン)、非極性側鎖(例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン)、ベータ分枝側鎖(例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン)および芳香族側鎖(例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン)を有するアミノ酸である。それゆえに、本発明の大環状ペプチドの抗原結合領域内の１個以上のアミノ酸残基を、同じ側鎖ファミリー内の１個以上の他のアミノ酸残基と置換し、改変した抗体を、ここに記戴する機能的アッセイを使用した機能の保持の試験(すなわち、上の(ａ)〜(ｉ)に示した機能)を行うことにより得られる。保存的アミノ酸置換はまたここに開示する１個以上の非天然型アミノ酸から選択し得る。
医薬組成物
本発明は、さらにＣ末端および／またはＮ末端のいずれかに１個以上のアミノ酸欠失を含む配列である、ここに記戴するポリペプチドに関する。
好ましい態様において、次のＮ末端化合物番号９９欠失ポリペプチド、すなわち化合物番号９９のＸ１−Ｘ１３、Ｘ２−Ｘ１３、Ｘ３−Ｘ１３、Ｘ４−Ｘ１３、Ｘ５−Ｘ１３、Ｘ６−Ｘ１３、Ｘ７−Ｘ１３、Ｘ８−Ｘ１３、Ｘ９−Ｘ１３、Ｘ１０−Ｘ１３、Ｘ１１−Ｘ１３および／またはＸ１２−Ｘ１３が本開示に包含される。ここで、各Ｘは、ここに略記する各ペプチドについて表示された位置におけるアミノ酸を表す。本発明はまた、本明細書の他の箇所に記戴する結合化学を使用して示した、これらの欠失変異体の環状形態も包含する。
好ましい態様において、次のＣ末端化合物番号９９欠失ポリペプチド、すなわち化合物番号９９のＸ１−Ｘ１３、Ｘ１−Ｘ１２、Ｘ１−Ｘ１１、Ｘ１−Ｘ１０、Ｘ１−Ｘ９、Ｘ１−Ｘ８、Ｘ１−Ｘ７、Ｘ１−Ｘ６、Ｘ１−Ｘ５、Ｘ１−Ｘ４および／またはＸ１−Ｘ３が本開示に包含される。ここで、各Ｘは、ここに略記する各ペプチドについて表示された位置におけるアミノ酸を表す。本発明はまた、本明細書の他の箇所に記戴する結合化学を使用して示した、これらの欠失変異体の環状形態も包含する。
好ましい態様において、次のＮ末端化合物番号１欠失ポリペプチド、すなわち化合物番号１のＸ１−Ｘ１５、Ｘ２−Ｘ１５、Ｘ３−Ｘ１５、Ｘ４−Ｘ１５、Ｘ５−Ｘ１５、Ｘ６−Ｘ１５、Ｘ７−Ｘ１５、Ｘ８−Ｘ１５、Ｘ９−Ｘ１５、Ｘ１０−Ｘ１５、Ｘ１１−Ｘ１５および／またはＸ１２−Ｘ１５が本開示に包含される。ここで、各Ｘは、ここに略記する各ペプチドについて表示された位置おけるアミノ酸を表す。本発明はまた、本明細書の他の箇所に記戴する結合化学を使用を使用して示した、これらの欠失変異体の環状形態も包含する。
好ましい態様において、次のＣ末端化合物番号１欠失ポリペプチド、すなわち化合物番号１のＸ１−Ｘ１５、Ｘ１−Ｘ１４、Ｘ１−Ｘ１３、Ｘ１−Ｘ１２、Ｘ１−Ｘ１１、Ｘ１−Ｘ１０、Ｘ１−Ｘ９、Ｘ１−Ｘ８、Ｘ１−Ｘ７、Ｘ１−Ｘ６、Ｘ１−Ｘ５、Ｘ１−Ｘ４および／またはＸ１−Ｘ３が本開示に包含される。ここで、各Ｘは、ここに略記する各ペプチドについて表示された位置おけるアミノ酸を表す。本発明はまた、本明細書の他の箇所に記戴する結合化学を使用して示した、これらの欠失変異体の環状形態も包含する。
好ましい態様において、次のＮ末端化合物番号７１欠失ポリペプチド、すなわち化合物番号７１のＸ１−Ｘ１４、Ｘ２−Ｘ１４、Ｘ３−Ｘ１４、Ｘ４−Ｘ１４、Ｘ５−Ｘ１４、Ｘ６−Ｘ１４、Ｘ７−Ｘ１４、Ｘ８−Ｘ１４、Ｘ９−Ｘ１４、Ｘ１０−Ｘ１４、Ｘ１１−Ｘ１４および／またはＸ１２−Ｘ１４が本開示に包含される。ここで、各Ｘは、ここに略記する各ペプチドについて表示された位置におけるアミノ酸を表わす。本発明はまた、本明細書の他の箇所に記戴する結合化学を使用して示した、これらの欠失変異体の環状形態も包含する。
好ましい態様において、次のＣ末端化合物番号７１欠失ポリペプチド、すなわち化合物番号７１のＸ１−Ｘ１４、Ｘ１−Ｘ１３、Ｘ１−Ｘ１２、Ｘ１−Ｘ１１、Ｘ１−Ｘ１０、Ｘ１−Ｘ９、Ｘ１−Ｘ８、Ｘ１−Ｘ７、Ｘ１−Ｘ６、Ｘ１−Ｘ５、Ｘ１−Ｘ４および／またはＸ１−Ｘ３が本開示に包含される。ここで、各Ｘは、ここに略記する各ペプチドについて表示された位置におけるアミノ酸を表す。本発明はまた、本明細書の他の箇所に記戴する結合化学を使用して示した、これらの欠失変異体の環状形態も包含する。
他の面において、本発明は、薬学的に許容される担体と製剤された、本発明の１個または複数の大環状ペプチドまたはその抗原結合部分を組み合わせで含み、薬学的に許容される担体と共に製剤された組成物、例えば、医薬組成物を提供する。このような組成物は、本発明の１個または２個以上の異なる大環状ペプチドまたは免疫コンジュゲートまたは二重特異性分子を含み得る。例えば、本発明の医薬組成物は、標的抗原上の異なるエピトープに結合し、または相補的活性を有する大環状ペプチド(または免疫コンジュゲートまたは二重特異性物)の組み合わせを含み得る。
本発明の医薬組成物はまた治療と組み合わせて、すなわち、他剤と組み合わせて投与し得る。例えば、組み合わせ治療は、少なくとも１種の他の抗炎症剤または免疫抑制剤と組み合わせた大環状ペプチドを含み得る。組み合わせ治療で使用できる治療剤の例は、本発明の大環状ペプチドの使用についての章にさらに詳述する。
ここで使用する“薬学的に許容される担体”は、生理学的に適合性である任意かつ全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗細菌および抗真菌剤、等張および吸収遅延剤などを含む。好ましくは、担体は、静脈内、筋肉内、皮下、非経腸、脊髄または上皮投与に適する(例えば、注射または点滴による)。投与経路によって、活性化合物、すなわち、大環状ペプチド、免疫複合体または二重特異性分子を、化合物を不活性化し得る酸および他の自然条件の作用から化合物を保護するための物質でコーティングし得る。
本発明の医薬化合物は、１個以上の薬学的に許容される塩を含み得る。“薬学的に許容される塩”は、親化合物の所望の生物学的活性を保持し、望まない中毒学的効果に関与しない塩をいう(例えば、Berge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977)参照)。このような塩の例は、酸付加塩および塩基付加塩を含む。酸付加塩は、非毒性無機酸、例えば塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸など、ならびに非毒性有機酸、例えば脂肪族モノおよびジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、芳香族酸、脂肪族および芳香族スルホン酸など由来のものを含む。塩基付加塩は、アルカリ土類金属、例えばナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなど、ならびに非毒性有機アミン、例えばＮ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、プロカインなど由来のものを含む。
本発明の医薬組成物はまた薬学的に許容される抗酸化剤を含み得る。薬学的に許容される抗酸化剤の例は、(１)水可溶性抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど；(２)油可溶性抗酸化剤、例えばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール(ＢＨＡ)、ブチル化ヒドロキシトルエン(ＢＨＴ)、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロールなど；および(３)金属キレート剤、例えばクエン酸、エチレンジアミンテトラ酢酸(ＥＤＴＡ)、ソルビトール、酒石酸、リン酸などを含む。
本発明の医薬組成物で用い得る適切な水性および非水性担体の例は、水、エタノール、ポリオール(例えばグリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど)およびこれらの適当な混合物、植物油、例えばオリーブ油および注射可能有機エステル、例えばオレイン酸エチルを含む。適切な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティング物質の使用により、分散の場合必要な粒子径の維持によりおよび界面活性剤の使用により維持できる。
これらの組成物は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のようなアジュバントを含み得る。微生物の存在の予防は上記滅菌工程および種々の抗細菌および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などの導入の両者により確実にし得る。等張剤、例えば糖、塩化ナトリウムなどを組成物にいれることも望ましい。さらに、注射可能医薬形態の長期吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンのような吸収を遅延させる薬剤を入れることにより達成し得る。
薬学的に許容される担体は、無菌水溶液または分散および無菌注射可能溶液または分散の即時調製のための無菌粉末を含む。薬学的に活性物質のためのこのような媒体および薬剤の使用は当分野で知られる。何らかの慣用の媒体または薬剤が活性化合物と不適合でない限り、本発明の医薬組成物におけるその使用が意図される。補足の活性化合物も組成物に包含させ得る。
治療的組成物は、典型的に無菌であり、製造および保存条件下安定でなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、リポソームまたは抗薬物濃度に適する他の整然とした構造として製剤できる。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール(例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールなど)およびこれらの適当な混合物を含む、溶媒または分散媒体であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティング物質の使用により、分散の場合必要な粒子径の維持によりおよび界面活性剤の使用により維持できる。多くの場合、等張剤、例えば、糖、ポリアルコール、例えばマンニトール、ソルビトールまたは塩化ナトリウムを組成物に添加するのが好ましい。注射可能組成物の長期吸収は、モノステアリン酸塩およびゼラチンのような吸収を遅延させる薬剤を入れることにより達成し得る。
無菌注射可能溶液は、必要量の活性化合物を、上に列挙した成分の１個または組み合わせを有する適当な溶媒に取り込み、必要に応じて、その後殺菌微量濾過することにより製造できる。一般に、分散は、活性化合物を、基本的分散媒体および上に列挙したものからの必要な他の成分を含む無菌媒体に取り込むことにより製造できる。無菌注射可能溶液の調製用の無菌粉末の場合、好ましい製造方法は、活性成分と先に無菌濾過した溶液からのさらなる所望の成分の粉末を産生する、真空乾燥およびフリーズドライ(凍結乾燥)である。
一投与量形態を製造するために担体物質と組み合わせ得る活性成分の量は、処置対象および特定の投与方法による。一投与量形態を製造するために担体物質と組み合わせ得る活性成分の量は、一般に治療的効果を生じる組成物の量である。一般に、１００パーセント中、この量は薬学的に許容される担体との組み合わせ中、活性成分約０.０１パーセント〜約９９パーセントの範囲であり、好ましくは約０.１パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは約１パーセント〜約３０パーセントの活性成分である。
投与レジメンは最適な所望の応答(例えば、治療的応答)をもたらすよう調節する。例えば、単回ボーラスを投与してよく、数回分割量を経時的に投与してよくまたは投与量を治療的状況の緊急事態により示されるとおり、比例的に減少または増加してよい。投与の容易さおよび投与量の均一さのために、投与量単位で非経腸組成物を製剤することが特に遊離である。ここで使用する投与量単位形態は、処置対象への単位投与に適する物理的に分かれた単位をいい、各単位は、必要な医薬担体と共に、所望の治療的効果を生じるよう計算された予定量の活性化合物を含む。本発明の投与量単位形態の明細は、(ａ)活性化合物の独特な特徴および達成すべき特定の治療的効果および(ｂ)個々の感受性の処置のためのこのような活性化合物の配合の分野に内在性の限度により指示され、直接依存する。
大環状ペプチドの投与のために、投与量は宿主体重あたり約０.０００１〜１００mg／kg、より一般的には０.０１〜５mg／kgの範囲である。例えば投与量は０.３mg／kg体重、１mg／kg体重、３mg／kg体重、５mg／kg体重または１０mg／kg体重であるかまたは１〜１０mg／kgの範囲である。処置レジメの例は、１日１回、週に２回、週に３回、毎週、２週毎、３週毎、４週毎、月１回、３ヶ月に１回または３〜６ヶ月毎に１回の投与を必要とする。本発明の大環状ペプチドのための好ましい投与レジメンは、静脈内投与による１mg／kg体重または３mg／kg体重を含み、抗体は次の投与スケジュールのいずれか一つを使用して与える。(ｉ)４週毎を６回投与、その後３ヶ月毎；(ii)３週毎；(iii)３mg／kg体重を１回、その後３週間毎に１mg／kg体重。
ある方法において、異なる結合特異性を有する２個以上の大環状ペプチドを同時に投与し、この場合投与する化合物の投与量は記戴した範囲内に入る。化合物は、通常複数の機会に投与する。一回投与の間の間隔は、例えば、毎週、毎月、３ヶ月毎または毎年であり得る。間隔は、患者における標的抗原に対する大環状ペプチドの血中濃度の測定により示されるとおり、不規則でもあり得る。ある方法において、投与量を調節して、約１〜１０００μg／ml、ある方法において約２５〜３００μg／mlの血漿抗体濃度を達成する。
あるいは、大環状ペプチドを徐放製剤として投与でき、この場合必要な投与頻度が少ない。投与量および頻度は、患者における大環状ペプチドの半減期による。投与量および投与頻度は、処置が予防的であるか治療的であるかにより変わり得る。予防適用において、長期間にわたり、比較的低投与量を比較的頻度の少ない間隔で投与する。患者が処置を死ぬまで受けることがある。治療的適用において、相対的に短い間隔での相対的高投与量が、疾患の進行が減少するまたは終わるまで、好ましくは患者が疾患症状の部分的または完全改善を示すまで、必要であることがある。その後、患者に予防レジメで投与し得る。
本発明の医薬組成物における活性成分の実際の投与量は、患者に対して毒性ではなく、特定の患者、組成物および投与方法について所望の治療的応答を達成するのに有効である活性成分を得るために変わり得る。選択した投与量は、用いる特定の本発明の組成物またはそのエステル、塩またはアミドの活性、投与経路、投与の時間、用いる特定の化合物の排泄率、処置期間、用いる特定の組成物と組み合わせて使用する他の薬物、化合物および／または物質、処置する患者の年齢、性別、体重、状態、一般的健康状態および先の病歴および医学分野で周知の同等な因子を含む、多様な薬物動態因子による。
本発明の大環状ペプチドの“治療有効量”は、好ましくは疾患症状の重症度低下、無疾患症状期間の頻度および期間の延長または疾患苦痛による機能障害または身体障害の予防をもたらす。例えば、腫瘍の処置のために、“治療有効量”は、好ましくは細胞増殖または腫瘍増殖を、非処置対象に対して少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約４０％、さらに好ましくは少なくとも約６０％、なお好ましくは少なくとも約８０％阻害する。化合物が腫瘍増殖および／またはＨＩＶを阻害する能力は、ヒト腫瘍における有効性またはウイルス有効性の予測である動物モデル系で評価できる。あるいは、組成物のこの特性を、当業者に知られるインビトロ阻止アッセイにより、化合物の阻止能力を試験することにより評価できる。治療的化合物の治療有効量は、対象における腫瘍サイズの縮小、ウイルス負荷の低下、その他諸症状の改善をもたらす。当業者は、対象の体格、対象の症状の重症度および選択した特定の組成物または投与経路のような因子により、このような量を決定できる。
他の面において、本発明は、ここに記戴する大環状ペプチドおよび抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、医薬キット・オブ・パーツを提供する。キットはまた過増殖性疾患(例えばここに記戴する癌)および／または抗ウイルス疾患の処置における使用のための指示書もさらに含み得る。
本発明の組成物は、当分野で知られる多様な方法の一つ以上を使用して、一つ以上の経路により投与できる。当業者には認識されるとおり、投与経路および／または方法は所望の結果により変わる。本発明の大環状ペプチドのための好ましい投与経路は、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、皮下、脊髄または他の非経腸投与経路、例えば注射または点滴を含む。ここで使用する用語“非経腸投与”は、経腸および局所投与以外の、通常注射による投与方法を意味し、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、関節内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、クモ膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内注射および点滴を含むが、これらに限定されない。
あるいは、本発明の大環状ペプチドは、非非経腸経路より、例えば局所に、上皮または粘膜投与経路により、例えば、鼻腔内、経口、膣、直腸、舌下または局所的に投与できる。
活性化合物は、インプラント、経皮パッチおよびマイクロカプセル化送達系を含む、制御放出製剤のような、急速な放出から化合物を保護する担体と製剤できる。エチレンビニルアセテート、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸のような生分解性、生体適合性ポリマーを使用できる。このような製剤の製造のための多くの方法が特許されており、または一般に当業者に知られる。例えば、Robinson, J.R., ed., Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, Marcel Dekker, Inc., New York (1978)を参照のこと。
治療的組成物を、当分野で知られる医学的デバイスで投与し得る。例えば、好ましい態様において、本発明の治療的組成物を、無針皮下注射器、例えば、米国特許番号５,３９９,１６３、５,３８３,８５１、５,３１２,３３５、５,０６４,４１３、４,９４１,８８０、４,７９０,８２４または４,５９６,５５６に開示されているデバイスで投与できる。本発明に有用な周知のインプラントおよびモジュールは、制御された速度で薬剤を分配するためのインプラント可能微量注入ポンプを開示する米国特許番号４,４８７,６０３；皮膚を介する薬物の投与のための治療的デバイスを開示する米国特許番号４,４８６,１９４；正確な注入速度で薬剤を送達するための薬剤注入ポンプを開示する米国特許番号４,４４７,２３３；連続薬物送達のための可変流速インプラント可能注入装置を開示する米国特許番号４,４４７,２２４；多チャンバー成分を有する浸透性薬物送達系を開示する米国特許番号４,４３９,１９６；および浸透性薬物送達系を開示する米国特許番号４,４７５,１９６を含む。これらの特許は、引用により本明細書に包含させる。多くの他のこのようなインプラント、送達系およびモジュールは当業者に知られる。
ある態様において、本発明の大環状ペプチドは、インビボでの適切な分布を確実にするために製剤できる。例えば、血液脳関門(ＢＢＢ)は、多くの高度に親水性の化合物を排除する。本発明の治療的化合物がＢＢＢを通過することを確実にするために(望むならば)、例えば、リポソームに製剤できる。リポソームの製造方法に関しては、例えば、米国特許番号４,５２２,８１１、５,３７４,５４８および５,３９９,３３１を参照のこと。リポソームは、特異的細胞または臓器へ選択的に輸送される１個以上の部分を含むことができ、それにより標的化薬物送達を増強する(例えば、Ranade, V.V., J. Clin. Pharmacol., 29:685 (1989)参照)。標的化部分の例は、葉酸またはビオチン(例えば、Low et al.の米国特許番号５,４１６,０１６参照)；マンノシド(Umezawa et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 153:1038 (1988))；大環状ペプチド(Bloeman, P.G. et al., FEBS Lett., 357:140 (1995); Owais, M. et al., Antimicrob. Agents Chemother., 39:180 (1995))；界面活性剤タンパク質Ａ受容体(Briscoe et al., Am. J. Physiol., 1233:134 (1995))；ｐ１２０(Schreier et al., J. Biol. Chem., 269:9090 (1994))を含み、Keinanen, K. et al., FEBS Lett., 346:123 (1994); Killion, J.J. et al., Immunomethods 4:273 (1994)も参照のこと。
本発明の使用および方法
本発明の大環状ペプチド、組成物および方法は、例えば、ＰＤ−Ｌ１検出またはＰＤ−Ｌ１遮断による免疫応答を含む、多くのインビトロおよびインビボ有用性を有する。例えば、これらの分子を、培養細胞に、インビトロまたはエクスビボでまたはヒト対象に、例えば、インビボで投与し、多様な状況での免疫を増強する。したがって、一つの面において、本発明は、本発明の抗体またはその抗原結合部分を、対象における免疫応答が修飾されるように対象に投与することを含む、対象における免疫応答を修飾する方法を提供する。好ましくは、応答は、増強、刺激または上方制御される。他の点において、大環状ペプチドは抗カニクイザル、抗マウスおよび／または抗マーモット結合および治療活性を有し得る。
ここで使用する用語“対象”はヒトおよび非ヒト動物を含むことを意図する。非ヒト動物は全ての脊椎動物、例えば、哺乳動物および非哺乳動物、例えば非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ニワトリ、マーモット、両生類および爬虫類を含むが、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシおよびウマのような哺乳動物が好ましい。好ましい対象は、免疫応答の増強が必要であるヒト患者を含む。本方法は特にＴ細胞仲介免疫応答の増強により処置できる障害を有するヒト患者の処置に適する。具体的態様において、本方法は特にインビボでの癌細胞の処置に適する。免疫の抗原特異的増強を達成するために、大環状ペプチドを目的の抗原と共に投与できる。ＰＤ−Ｌ１に対する大環状ペプチドを他の薬剤と共に投与するとき、２剤をいずれの順序で投与しても同時に投与してもよい。
本発明は、さらに、サンプルおよび対照サンプルと、ヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１に特異的に結合する参照モノクローナル抗体またはその抗原結合部分を、抗体またはその一部とヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１の複合体を形成させる条件下で接触させることを含む、サンプルにおけるヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１抗原の存在を検出するまたはヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１抗原の量を測定する方法を提供する。複合体の形成をその後測定し、対照サンプルと比較して異なるサンプルの複合体形成は、サンプルにおけるヒト、マーモット、カニクイザルおよび／またはマウスＰＤ−Ｌ１抗原の指標である。
本発明の大環状ペプチドのＣＤ２８、ＩＣＯＳおよびＣＴＬＡ−４と比較したＰＤ−Ｌ１への特異的結合を考慮して、本発明の大環状ペプチドは、細胞表面上のＰＤ−Ｌ１発現の特異的検出に使用でき、さらに免疫親和性精製によるＰＤ−Ｌ１の精製に使用できる。
癌
大環状ペプチドによるＰＤ−１の遮断は、患者における癌細胞に対する免疫応答を増強できる。ＰＤ−１に対するリガンドであるＰＤ−Ｌ１は正常ヒト細胞では発現されないが、多様なヒト癌に豊富である(Dong et al., Nat. Med., 8:787-789 (2002))。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の相互作用は腫瘍浸潤性リンパ球減少、Ｔ細胞受容体仲介増殖減少および癌細胞の免疫回避をもたらす(Dong et al., J. Mol. Med., 81:281-287 (2003); Blank et al., Cancer Immunol. Immunother., 54:307-314 (2005); Konishi et al., Clin. Cancer Res., 10:5094-5100 (2004))。免疫抑制は、免疫抑制は、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の局所相互作用の阻害により逆転でき、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ２の相互作用が同様に遮断されたとき、この効果は相加的である(Iwai et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 99:12293-12297 (2002); Brown et al., J. Immunol., 170:1257-1266 (2003))。先の研究では、Ｔ細胞増殖がＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１への相互作用の阻害により回復できることが示されているが、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の遮断によるインビボ癌腫瘍増殖に対する直接の効果についての報告はない。一つの面において、本発明は、癌性腫瘍の増殖が阻害されるように大環状ペプチドを使用する、インビボでの対象の処置に関する。大環状ペプチドを、癌性腫瘍増殖阻害のために単独で使用し得る。あるいは、大環状ペプチドを、下に記戴するとおり、他の免疫原性剤、標準的癌処置または他の大環状ペプチドと組み合わせて使用し得る。
したがって、一つの態様において本発明は、対象に大環状ペプチドまたはその抗原結合部分の治療有効量を投与することを含む、対象における腫瘍細胞増殖の阻害方法を提供する。
本発明の大環状ペプチドを使用して癌の増殖を阻害し得る好ましい癌は、典型的に免疫治療に応答性の癌を含む。処置のための好ましい癌の非限定的例は、黒色腫(例えば、転移悪性黒色腫)、腎細胞癌(例えば、明細胞癌)、前立腺癌(例えば、ホルモン難治性前立腺腺癌および去勢抵抗性前立腺癌)、乳癌、結腸直腸癌および肺癌(例えば、扁平上皮および非扁平上皮非小細胞性肺癌)を含む。さらに、本発明は、本発明の大環状ペプチドを使用して増殖を阻害し得る難治性または反復性悪性腫瘍を含む。
本発明の方法で処置し得る他の癌の例は、骨の癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部の癌、皮膚または眼内悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、肛門部の癌、胃／胃体癌、精巣癌、子宮癌、卵管の癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣の癌、外陰の癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道の癌、小腸の癌、内分泌系の癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎の癌、軟組織の肉腫、尿道の肉腫、陰茎の肉腫、急性骨髄球性白血病、慢性骨髄球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病を含む慢性または急性白血病、小児の固形腫瘍、リンパ性リンパ腫、膀胱癌、腎臓または輸尿管の癌、腎盂癌、中枢神経系(ＣＮＳ)の新生物、一次ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管形成、脊髄軸椎腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮細胞癌、Ｔ細胞リンパ腫、アスベストにより誘発されるものを含む環境により誘発される癌および該癌の組み合わせを含む。本発明はまた転移癌、特にＰＤ−Ｌ１を発現する転移癌の処置にも有用である(Iwai et al., Int. Immunol., 17:133-144 (2005))。
所望により、ＰＤ−Ｌ１に対する大環状ペプチドを免疫原性剤、例えば、癌細胞、精製腫瘍抗原(組み換えタンパク質、ペプチドおよび炭水化物分子を含む)、細胞および免疫刺激サイトカインをコードする遺伝子でトランスフェクトした細胞と組み合わせて投与し得る(He et al., J. Immunol., 173:4919-4928 (2004))。使用できる腫瘍ワクチンの非限定的例は、黒色腫抗原のペプチド、例えばｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原、Ｔｒｐ−２、ＭＡＲＴ１および／またはチロシナーゼのペプチドまたはサイトカインＧＭ−ＣＳＦを発言するようにトランスフェクトした腫瘍細胞(さらに下に開示)を含む。
ヒトにおいて、黒色腫のようなある腫瘍は免疫原性であることが示されている。ＰＤ−Ｌ１遮断によりＴ細胞活性化の閾値を上げることにより、宿主における腫瘍応答が期待できると仮説立てられる。
ＰＤ−Ｌ１遮断は、ワクチン接種プロトコルと組み合わせたとき、最も有効である可能性がある。腫瘍に対するワクチン接種のための多くの実験的戦略が考案されている(Rosenberg, S., Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62 (2000); Logothetis, C., ASCO Educational Book Spring: 300-302 (2000); Khayat, D., ASCO Educational Book Spring: 414-428 (2000); Foon, K., ASCO Educational Book Spring: 730-738 (2000); see also Restifo, N. et al., Cancer Vaccines, Chapter 61, pp. 3023-3043, in DeVita, V. et al., eds., Cancer: Principles and Practice of Oncology, Fifth Edition (1997)参照)。これらの戦略の一つにおいて、ワクチンを、自己または同種腫瘍細胞を使用して製造する。これらの細胞性ワクチンは、腫瘍細胞がＧＭ−ＣＳＦを発現するように形質導入されたとき、最も有効であることが示されている。ＧＭ−ＣＳＦは、腫瘍ワクチン接種のための抗原提示の強力なアクティベーターであることが示されている(Dranoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 3539-3543 (1993))。
種々の腫瘍における遺伝子発現および大規模遺伝子発現パターンの研究により、いわゆる腫瘍特異的抗原の定義が導かれている(Rosenberg, S.A., Immunity, 10:281-287 (1999))。多くの場合、これらの腫瘍特異的抗原は、腫瘍および腫瘍が生じた細胞に発現される分化抗原、例えばメラニン形成細胞抗原ｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原およびＴｒｐ−２である。より重要なことに、これらの抗原の多くは、宿主に見られる腫瘍特異的Ｔ細胞の標的であり得ることが示されている。ＰＤ−Ｌ１遮断をこれらのタンパク質に対する免疫応答を発生させるために、腫瘍において発現されている組み換えタンパク質および／またはペプチドのコレクションと共に使用し得る。これらのタンパク質は、通常自己抗原として免疫系により監視され、それゆえに、それらに耐容性である。腫瘍抗原はまたタンパク質テロメラーゼも含んでよく、これは染色体のテロメアの合成に必要であり、８５％を超えるヒト癌で発現され、体性組織ではわずかな限られた数である(Kim, N. et al., Science, 266:2011-2013 (1994))。(これらの体性組織は、種々の手段により免疫攻撃から保護され得る)。腫瘍抗原は、タンパク質配列を変異させるまたは２個の非関連配列の融合タンパク質を創製する(すなわち、フィラデルフィア染色体におけるｂｃｒ−ａｂｌ)またはＢ細胞腫瘍からのイディオタイプである体性変異ために、癌細胞で発現される“新抗原”でもあり得る。
他の腫瘍ワクチンは、ヒトパピローマウイルス(ＨＰＶ)、肝炎ウイルス(ＨＢＶおよびＨＣＶ)およびカポジヘルペス肉腫ウイルス(ＫＨＳＶ)のようなヒト癌と関係するウイルスからのタンパク質を含み得る。ＰＤ−Ｌ１遮断と共に使用し得る腫瘍特異的抗原の他の形態は、腫瘍組織それ自体から単離した精製熱ショックタンパク質(ＨＳＰ)である。これらの熱ショックタンパク質は腫瘍細胞からのタンパク質フラグメントを含み、これらのＨＳＰは腫瘍免疫の誘発のための抗原提示細胞の送達に高度に効率的である(Suot, R. et al., Science, 269:1585-1588 (1995); Tamura, Y. et al., Science, 278:117-120 (1997))。
樹状細胞(ＤＣ)は、主要抗原特異的応答に使用できる強力な抗原提示細胞である。ＤＣはエクスビボで酸性でき、種々のタンパク質およびペプチド抗原ならびに腫瘍細胞抽出物を積載できる(Nestle, F. et al., Nat. Med., 4:328-332 (1998))。ＤＣはまたこれらの腫瘍抗原を同様に発現するために遺伝的手段によっても形質導入され得る。ＤＣはまた免疫化の目的で腫瘍細胞と直接融合されている(Kugler, A. et al., Nat. Med., 6:332-336 (2000))。ワクチン接種の方法として、ＤＣ免疫化はより強力な抗腫瘍応答を活性化するために、ＰＤ−Ｌ１遮断と効果的に組み合わせ得る。
ＰＤ−Ｌ１遮断はまた標準的癌処置とも組み合わせ得る。ＰＤ−Ｌ１遮断は化学療法レジメと効果的に組み合わせ得る。これらの場合、投与する化学療法剤の量を減らすことが可能であり得る(Mokyr, M. et al., Cancer Res., 58:5301-5304 (1998))。このような組み合わせの例は、黒色腫の処置のためにダカルバジンと組み合わせた大環状ペプチドである。このような組み合わせの他の例は、黒色腫の処置のためにインターロイキン−２(ＩＬ−２)と組み合わせた大環状ペプチドである。ＰＤ−Ｌ１遮断および化学療法の組み合わせ使用の後ろにある科学的原理は、ほとんどの化学療法化合物の細胞毒性活性の結果である細胞死が、抗原提示経路における腫瘍抗原のレベルの増加をもたらすからである。細胞死によりＰＤ−Ｌ１遮断と相乗作用し得る他の組み合わせ治療は、放射線、手術およびホルモン欠乏である。これらのプロトコルのいずれも、宿主における腫瘍抗原の供給源を創製する。血管形成阻害剤もまたＰＤ−Ｌ１遮断と組み合わせ得る。血管形成阻害は、宿主抗原提示経路に腫瘍抗原を供給し得る腫瘍細胞死を生じる。
ＰＤ−Ｌ１遮断大環状ペプチドはまた、ＦｃアルファまたはＦｃガンマ受容体発現エフェクター細胞を腫瘍細胞を標的とさせる二重特異性大環状ペプチドと組み合わせても使用できる(例えば、米国特許番号５,９２２,８４５および５,８３７,２４３参照)。二重特異性大環状ペプチドを使用して、２個の別々の抗原を標的とし得る。例えば抗Ｆｃ受容体／抗腫瘍抗原(例えば、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ)二重特異性大環状ペプチドは、マクロファージを腫瘍の部位に標的化させるのに使用されている。このターゲティングは、腫瘍特異的応答をさらに効果的に活性化し得る。これらの応答のＴ細胞アームは、ＰＤ−Ｌ１遮断の使用により増強される。あるいは、抗原を、腫瘍抗原および樹状細胞特異的細胞表面マーカーに結合する二重特異性大環状ペプチドの使用により、ＤＣに直接送達させ得る。
腫瘍は、多種多様な機構により宿主免疫監視を逃れる。これらの機構の多くは腫瘍により発現され、免疫抑制性であるタンパク質の不活性化により克服され得る。これらはとりわけＴＧＦ−ベータ(Kehrl, J. et al., J. Exp. Med., 163:1037-1050 (1986))、ＩＬ−１０(Howard, M. et al., Immunology Today, 13:198-200 (1992))およびＦａｓリガンド(Hahne, M. et al., Science, 274:1363-1365 (1996))を含む。これらの物の各々に対する大環状ペプチドを、免疫抑制性因子の効果に打ち勝ち、宿主による腫瘍免疫応答を支持するために、抗ＰＤ−Ｌ１と組み合わせて使用し得る。
宿主免疫応答性を活性化するために使用し得る他の大環状ペプチドを抗ＰＤ−Ｌ１と組み合わせて使用できる。これらは、ＤＣ機能および抗原提示を活性化する樹状細胞の表面上の分子を含む。抗ＣＤ４０大環状ペプチドは、Ｔ細胞ヘルパー活性を効果的に代理でき(Ridge, J. et al., Nature, 393:474-478 (1998))、ＰＤ−１抗体と組み合わせて使用できる(Ito, N. et al., Immunobiology, 201(5):527-540 (2000))。ＣＴＬＡ−４(例えば、米国特許番号５,８１１,０９７)、ＯＸ−４０(Weinberg, A. et al., Immunol., 164:2160-2169 (2000))、４−１ＢＢ(Melero, I. et al., Nat. Med., 3:682-685 (1997)およびＩＣＯＳ(Hutloff, A. et al., Nature, 397:262-266 (1999))のようなＴ細胞同時刺激分子に対する大環状ペプチドの活性化は、Ｔ細胞活性化のレベル増加のために提供され得る。
骨髄移植は、造血起源の多様な腫瘍の処置のために現在使用されている。移植片対宿主病はこの処置の結果であるが、治療的利点が移植変対腫瘍応答により得られ得る。ＰＤ−Ｌ１遮断は、ドナー生着腫瘍特異的Ｔ細胞の有効性を増加させるために使用できる。
抗原特異的Ｔ細胞のエクスビボ活性化および増大ならびに抗原特異的Ｔ細胞を腫瘍に向けさせるためのレシピエントへのこれらの細胞の養子移植が関与するいくつかの実験的処置プロトコルがある(Greenberg, R. et al., Science, 285:546-551 (1999))。これらの方法は、ＣＭＶのような感染因子に対するＴ細胞応答の活性化にも使用し得る。大環状ペプチド存在下のエクスビボ活性化は、養子移入されたＴ細胞の頻度および活性を高めることが期待され得る。
感染症
本発明の他の方法は、特定の毒素または病原体に曝されている患者の処置に使用される。したがって、本発明の他の面は、対象の感染性疾患が処置されるように、対象に本発明の大環状ペプチドまたはその抗原結合部分を投与することを含む、対象における感染性疾患の処置方法を提供する。好ましくは、抗体はヒト抗ヒトＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドである(例えばここに記戴する大環状ペプチドのいずれか)。さらにまたはあるいは、抗体はキメラまたはヒト化抗体であり得る。
上に記戴した腫瘍への適用に類似して、抗体仲介ＰＤ−Ｌ１遮断を、病原体、毒素および自己抗原に対する免疫応答を刺激するために、単独でまたはアジュバントとして、ワクチンと組み合わせて使用できる。この治療手段が特に有用であり得る病原体の例は、現在有効なワクチンがない病原体または慣用のワクチンが完全に効果的とはいえない病原体を含む。これらは、ＨＩＶ、肝炎(Ａ型、Ｂ型およびＣ型)、インフルエンザ、ヘルペス、ジアルジア属、マラリア(Butler, N.S. et al., Nature Immunology, 13:188-195 (2012); Hafalla, J.C.R., et al., PLOS Pathogens (February 2, 2012))、リーシュマニア、黄色ブドウ球菌、緑膿菌を含むが、これらに限定されない。ＰＤ−Ｌ１遮断は、感染の間に変更された抗原を提示する、ＨＩＶのような因子による確立された感染に対して特に有効である。これらの新規エピトープは、抗ヒトＰＤ−Ｌ１投与の投与時に外来物として認識され、それゆえに、ＰＤ−Ｌ１を介する負のシグナルにより削がれない強いＴ細胞応答を誘発する。
本発明の方法により処置可能な感染の原因となる病原性ウイルスのいくつかの例は、ＨＩＶ、肝炎(Ａ、ＢまたはＣ)、ヘルペスウイルス(例えば、ＶＺＶ、ＨＳＶ−１、ＨＡＶ−６、ＨＳＶ−IIおよびＣＭＶ、エプスタイン・バーウイルス)、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、呼吸器多核体ウイルス、ムンプスウイルス、ロタウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、ＨＴＬＶウイルス、デングウイルス、パピローマウイルス、軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＪＣウイルスおよびアルボウイルス脳炎ウイルスを含む。
本発明の方法により処置可能な感染の原因となる病原性細菌のいくつかの例は、クラミジア属、リケッチア性細菌、マイコバクテリア、ブドウ球菌、連鎖球菌、肺炎球菌、髄膜炎菌および淋菌、クレブシエラ、プロテウス、セラチア、シュードモナス、レジオネラ、ジフテリア、サルモネラ、桿菌、コレラ、テタヌス、ボツリヌス、炭疽、ペスト、レプトスピラ症およびライム病細菌を含む。
本発明の方法により処置可能な感染の原因となる病原性真菌の例は、カンジダ属(アルビカンズ、クルゼイ、グラブラタ、トロピカリシスなど)、クリプトコッカス・ネオフォルマンス、アスペルギルス属(フミガーツス、ニガーなど)、ケカビ目(無コール属、アブシディア属、クモノスカビ属)、スポロトリックス・シェンキイ、ブラストミセス・デルマチチジス、南アメリカ分芽菌、コクシジオイデス・イミチスおよびヒストプラズマ・カプスラーツムを含む。
本発明の方法により処置可能な感染の原因となる病原性寄生虫の例は、赤痢アメーバ、大腸バランチジウム、フォーラーネグレリア、アカントアメーバ属、ランブル鞭毛虫、クリプトスポリジウム属、ニューモシスチス・カリニ、三日熱マラリア原虫、ネズミバベシア、ブルセイトリパノソーマ、クルーズトリパノソーマ、ドノバンリーシュマニア、トキソプラズマ原虫およびブラジル鉤虫を含む。
上記方法の全てにおいて、ＰＤ−Ｌ１遮断を、腫瘍抗原の強化された提示のために提供されるサイトカイン処置(例えば、インターフェロン、ＶＥＧＦ活性またはＶＥＧＦ−受容体を標的とする薬剤、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＩＬ−２)または二重特異性抗体治療のような他の形態の免疫治療と組み合わせ得る(例えば、Holliger, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993); Poljak, Structure, 2:1121-1123 (1994)参照)。
自己免疫性反応
大環状ペプチドは自己免疫応答を誘発および増幅する。実際、腫瘍細胞およびペプチドワクチンを使用した抗腫瘍応答の誘発は、多くの抗腫瘍応答が抗自己反応性を含むことを明らかにする(van Elsas et al., supraにおける抗ＣＴＬＡ−４＋ＧＭ−ＣＳＦ修飾Ｂ１６黒色腫で観察される色素脱失；Ｔｒｐ−２ワクチン接種マウスにおける色素脱失(Overwijk, W. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96:2982-2987 (1999))；ＴＲＡＭＰ腫瘍細胞ワクチンにより誘発される自己免疫性前立腺炎(Hurwitz, A., supra (2000))、ヒト臨床試験において見られる黒色腫ペプチド抗原ワクチン接種および白斑症(Rosenberg, S.A. et al., J. Immunother. Emphasis Tumor Immunol., 19(1):81-84 (1996))。
それゆえに、疾患処置のために、種々の自己タンパク質を、これらの自己タンパク質に対する免疫応答を効果的に生じさせるためのワクチン接種プロトコルを考案するために、抗ＰＤ−Ｌ１遮断と組み合わせて使用することを考慮することが可能である。例えば、アルツハイマー病は脳内のアミロイド沈着物へのＡβペプチドの不適切な蓄積が原因であり、アミロイドに対する抗体応答がこれらのアミロイド沈着物を浄化できる(Schenk et al., Nature, 400:173-177 (1999))。
他の自己タンパク質はまたアレルギーおよび喘息の処置のためのＩｇＥおよびリウマチ性関節炎のためのＴＮＦアルファのような標的としても使用し得る。最後に、種々のホルモンに対する抗体応答は、ここに開示する大環状分子の使用により誘発され得る。生殖性ホルモンの抗体応答中和を避妊のために使用し得る。ホルモンおよび特定の腫瘍の増殖に必要である他の可溶性因子に対する抗体応答の中和はまた可能性のあるワクチン接種標的として考慮し得る。
抗ＰＤ−Ｌ１大環状分子の使用について上に記戴したのに類似する方法を、アルツハイマー病におけるＡβを含むアミロイド沈着物、ＴＮＦアルファおよびＩｇＥのようなサイトカインのような他の自己抗原の不適切な沈着を有する患者の治療的自己免疫応答誘発のために使用できる。
ワクチン
大環状ペプチドを、抗ＰＤ−１大環状分子と目的の抗原(例えば、ワクチン)の共投与により抗原特異的免疫応答を刺激するために使用し得る。したがって、他の面において、本発明は、対象における抗原に対する免疫応答を増強する方法であって、対象に(ｉ)抗原；および(ii)対象における抗原に対する免疫応答が増強されるような抗ＰＤ−１大環状分子またはその抗原結合部分を投与することを含む、方法が提供される。抗原は、例えば、腫瘍抗原、ウイルス抗原、細菌抗原または病原体からの抗原であり得る。このような抗原の非限定的例は、上記の腫瘍抗原(または腫瘍ワクチン)または上記のウイルス、細菌または他の病原体からの抗原を含む。
インビボおよびインビトロで本発明の組成物(例えば、大環状ペプチド、多特異性および二重特異性分子およびイムノコンジュゲート)を投与するための適切な経路は当分野で周知であり、当業者が選択できる。例えば、組成物は注射(例えば、静脈内または皮下)により投与できる。使用する分子の適切な投与量は対象の年齢および体重および組成物の濃度および／または製剤による。
先に記戴するとおり本発明の大環状ペプチドを１種以上の他の治療剤、例えば、細胞毒性剤、射性毒性薬物または免疫抑制剤と共投与し得る。ペプチドを薬剤に連結でき(免疫複合体として)または別々に薬剤から投与できる。後者(別々の投与)の場合、ペプチドを他の既知治療、例えば、抗癌治療、例えば、放射線の前に、後にまたは同時に投与してもよく、または共投与してよい。このような治療剤は、とりわけ、抗新生物剤、例えばドキソルビシン(アドリアマイシン)、シスプラチンブレオマイシンスルフェート、カルムスチン、クロラムブシル、ダカルバジンおよびシクロホスファミドヒドロキシ尿素を含み、これらは、それら自体、患者に毒性であるまたは毒性以下である濃度でしか有効ではない。シスプラチンは４週毎に１００mg／投与で静脈内投与し、アドリアマイシンは２１日毎に６０〜７５mg／ml投与量で静脈内投与する。本発明の大環状ペプチドまたはその抗原結合フラグメントと化学療法剤の共投与は、ヒト腫瘍細胞に対する細胞毒性効果を生じる異なる作用機序で働く２種の抗癌剤を提供する。このような共投与は、ペプチドに対して非反応性とし得る薬剤に対する耐性の発生または腫瘍細胞の抗原性の変化による問題を解決し得る。
また本発明の範囲内に包含されるのは、本発明の組成物(例えば、大環状ペプチド、二重特異性または多特異性分子または免疫コンジュゲート)および使用のための指示を含むキットである。キットは、さらに少なくとも１種のさらなる薬または１以上のさらなる本発明の大環状ペプチド(例えば、大環状分子と異なるＰＤ−Ｌ１抗原におけるエピトープと結合する相補的活性を有するヒト抗体)を含み得る。キットは、典型的にキットの中身の意図される使用を示すラベルを含む。用語ラベルは、キット上にまたはキットと共に提供されるまたは他の方法でキットに付随するあらゆる書面または記録媒体を含む。
組み合わせ治療
本発明の大環状ペプチドと他のＰＤ−Ｌ１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストの組み合わせは、ＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４の遮断により過増殖性疾患に対する免疫応答の増強に有用である。例えば、これらの分子を、培養中の細胞にインビトロまたはエクスビボでまたはヒト対象に、例えば、インビボで投与して、多様な状況における免疫を増強する。したがって、一つの面において、本発明は、本発明の抗体組み合わせまたはその抗原結合部分の組み合わせを、対象における免疫応答が修飾されるように対象に投与することを含む、対象における免疫応答を修飾する方法を提供する。好ましくは、応答は、増強、刺激または上方制御される。他の態様において、本発明は、対象に本発明の大環状ペプチドおよび抗ＣＴＬＡ−４抗体の治療以下の投与量を投与することを含む、免疫刺激性治療剤での過増殖性疾患の処置と関係する有害事象を変える方法を提供する。
大環状ペプチドによるＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４の遮断は、患者における癌細胞に対する免疫応答を増強できる。本発明の大環状ペプチドを使用して増殖を阻害し得る癌は、典型的に免疫治療に応答性の癌を含む。本発明の組み合わせ治療での処置のための癌の代表例は黒色腫(例えば、転移悪性黒色腫)、腎臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸癌および肺癌を含む。本発明の方法で処置し得る他の癌の例は、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚または眼内悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣癌、外陰癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道癌、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、急性骨髄球性白血病、慢性骨髄球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病を含む慢性または急性白血病、小児固形腫瘍、リンパ性リンパ腫、膀胱癌、腎臓または輸尿管癌、腎盂癌、中枢神経系(ＣＮＳ)新生物、一次ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管形成、脊髄軸椎腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮細胞癌、Ｔ細胞リンパ腫、アスベストにより誘発されるものを含む環境により誘発される癌およびこれらの癌の複合癌を含む。本発明はまた転移癌の処置に有用である。
ある態様において、ここに開示する大環状ペプチドの少なくとも１個を含む治療剤の組み合わせを、薬学的に許容される担体中の単組成物として同時にまたは各薬剤を連続的に投与する別々の組成物として一緒に投与し得る。例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体および本発明の大環状ペプチドを、抗ＣＴＬＡ−４を最初に投与し、大環状ペプチドを２番目に投与する、または大環状ペプチドを最初に投与し、抗ＣＴＬＡ−４に投与するように逐次的に投与できる。さらに、１投与量を超える組み合わせ治療を逐次的に投与するならば、逐次投与の順番は各投与時に逆転しても同じ順番でもよく、逐次投与を同時投与またはその任意の組み合わせと組み合わせてもよい。例えば、組み合わせ抗ＣＴＬＡ−４抗体および大環状ペプチドの最初の投与は同時であってよく、２回目の投与はＣＴＬＡ−４が最初で大環状ペプチドが２番目の逐次であってよく、３回目の投与は大環状ペプチドが最初で抗ＣＴＬＡ−４が２回目であってよいなど。他の代表的投与スキームは、大環状ペプチドが最初で抗ＣＴＬＡ−４が２回目である最初の投与を含んでよく、その後の投与は同時であり得る。
所望により、大環状ペプチドと抗ＣＴＬＡ−４剤の組み合わせを、さらに免疫原性剤、例えば、癌細胞、精製腫瘍抗原(組み換えタンパク質、ペプチドおよび炭水化物分子を含む)、細胞および免疫刺激サイトカインをコードする遺伝子でトランスフェクトした細胞と組み合わせて投与し得る(He et al., J. Immunol., 173:4919-4928 (2004))。使用できる腫瘍ワクチンの非限定的例は、黒色腫抗原のペプチド、例えばｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原、Ｔｒｐ−２、ＭＡＲＴ１および／またはチロシナーゼのペプチドまたはサイトカインＧＭ−ＣＳＦを発言するようにトランスフェクトした腫瘍細胞(さらに下に開示)を含む。
組み合わせたＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドとＣＴＬＡ−４遮断は、さらにワクチン接種プロトコルと組み合わせ得る。腫瘍に対するワクチン接種のための多くの実験的戦略が考案されている(Rosenberg, S., Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62 (2000); Logothetis, C., ASCO Educational Book Spring: 300-302 (2000); Khayat, D., ASCO Educational Book Spring: 414-428 (2000); Foon, K., ASCO Educational Book Spring: 730-738 (2000); see also Restifo et al., Cancer Vaccines, Chapter 61, pp. 3023-3043 in DeVita et al., eds., Cancer: Principles and Practice of Oncology, Fifth Edition (1997)参照)。これらの戦略の一つにおいて、ワクチンを、自己または同種腫瘍細胞を使用して製造する。性ワクチンは、腫瘍細胞がＧＭ−ＣＳＦを発現するように形質導入されたとき、最も有効であることが示されている。ＧＭ−ＣＳＦは、腫瘍ワクチン接種のための抗原提示の強力なアクティベーターであることが示されている(Dranoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:3539-3543 (1993))。
種々の腫瘍における遺伝子発現および大規模遺伝子発現パターンの研究により、いわゆる腫瘍特異的抗原の定義が導かれている(Rosenberg, Immunity, 10:281-287 (1999))。多くの場合、これらの腫瘍特異的抗原は、腫瘍および腫瘍が生じた細胞に発現される分化抗原、例えばメラニン形成細胞抗原ｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原およびＴｒｐ−２である。より重要なことに、これらの抗原の多くは、宿主に見られる腫瘍特異的Ｔ細胞の標的であり得ることが示されている。ある態様において、ここに記戴する抗体組成物を使用する組み合わせたＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドとＣＴＬＡ−４遮断をこれらのタンパク質に対する免疫応答を発生させるために、腫瘍において発現されている組み換えタンパク質および／またはペプチドのコレクションと共に使用し得る。これらのタンパク質は、通常自己抗原として免疫系により監視され、それゆえに、それらに耐容性である。腫瘍抗原はまたタンパク質テロメラーゼも含んでよく、これは染色体のテロメアの合成に必要であり、８５％を超えるヒト癌で発現され、体性組織ではわずかな限られた数である(Kim et al., Science, 266:2011-2013 (1994))。(これらの体性組織は、種々の手段により免疫攻撃から保護され得る)。腫瘍抗原は、タンパク質配列を変異させるまたは２個の非関連配列の融合タンパク質を創製する(すなわち、フィラデルフィア染色体におけるｂｃｒ−ａｂｌ)またはＢ細胞腫瘍からのイディオタイプである体性変異ために、癌細胞で発現される“新抗原”でもあり得る。
他の腫瘍ワクチンは、ヒトパピローマウイルス(ＨＰＶ)、肝炎ウイルス(ＨＢＶおよびＨＣＶ)およびカポジヘルペス肉腫ウイルス(ＫＨＳＶ)のようなヒト癌と関係するウイルスからのタンパク質を含み得る。ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチド遮断と組み合わせて使用し得る腫瘍特異的抗原の他の形態は、腫瘍組織それ自体から単離した精製熱ショックタンパク質(ＨＳＰ)である。これらの熱ショックタンパク質は腫瘍細胞からのタンパク質フラグメントを含み、これらのＨＳＰは腫瘍免疫の誘発のための抗原提示細胞の送達に高度に効率的である(Suot et al., Science, 269:1585-1588 (1995); Tamura et al., Science, 278:117-120 (1997))。
樹状細胞(ＤＣ)は、主要抗原特異的応答に使用できる強力な抗原提示細胞である。ＤＣはエクスビボで産生でき、種々のタンパク質およびペプチド抗原ならびに腫瘍細胞抽出物を積載できる(Nestle et al., Nat. Med., 4:328-332 (1998))。ＤＣはまたこれらの腫瘍抗原を同様に発現するために遺伝的手段によっても形質導入され得る。ＤＣはまた免疫化の目的で腫瘍細胞と直接融合されている(Kugler et al., Nat. Med., 6:332-336 (2000))。ワクチン接種の方法として、ＤＣ免疫化は、強力な抗腫瘍応答を活性化するために、組み合わせた抗ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドとＣＴＬＡ−４遮断と効果的に組み合わせ得る。
組み合わせた抗ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドとＣＴＬＡ−４遮断はまたさらに標準的癌処置とも組み合わせ得る。例えば、組み合わせ大環状ペプチドおよびＣＴＬＡ−４遮断は化学療法レジメと効果的に組み合わせ得る。これらの場合、大環状ペプチドおよび抗ＣＴＬＡ−４剤の組み合わせで見られるとおり、本発明の組み合わせと共に投与する他の化学療法剤の量を減らすことが可能であり得る(Mokyr et al., Cancer Res., 58:5301-5304 (1998))。このような組み合わせの例は、黒色腫の処置のためにダカルバジンとさらに組み合わせた大環状ペプチドと抗ＣＴＬＡ−４剤の組み合わせである。他の例は、黒色腫の処置のためにインターロイキン−２(ＩＬ−２)とさらに組み合わせた大環状ペプチドと抗ＣＴＬＡ−４剤の組み合わせである。ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドおよびＣＴＬＡ−４遮断と化学療法の組み合わせ使用の後ろにある科学的原理は、ほとんどの化学療法化合物の細胞毒性活性の結果である細胞死が、抗原提示経路における腫瘍抗原のレベルの増加をもたらすからである。細胞死により組み合わせた抗ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドとＣＴＬＡ−４遮断と相乗作用し得る他の組み合わせ治療は、放射線、手術およびホルモン欠乏である。これらのプロトコルのいずれも、宿主における腫瘍抗原の供給源を創製する。血管形成阻害剤もまた組み合わせたＰＤ−Ｌ１とＣＴＬＡ−４遮断と組み合わせ得る。血管形成阻害は、宿主抗原提示経路に腫瘍抗原を供給し得る腫瘍細胞死を生じる。
ＰＤ−Ｌ１とＣＴＬＡ−４遮断剤の組み合わせはまた、ＦｃアルファまたはＦｃガンマ受容体発現エフェクター細胞を腫瘍細胞を標的とさせる二重特異性大環状ペプチドと組み合わせても使用できる(例えば、米国特許番号５,９２２,８４５および５,８３７,２４３参照)。二重特異性大環状ペプチドを使用して、２個の別々の抗原を標的とし得る。例えば抗Ｆｃ受容体／抗腫瘍抗原(例えば、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ)二重特異性大環状ペプチドは、マクロファージを腫瘍の部位に標的化させるのに使用されている。このターゲティングは、腫瘍特異的応答をさらに効果的に活性化し得る。これらの応答のＴ細胞アームは、組み合わせたＰＤ−１とＣＴＬＡ−４遮断の使用により増強される。あるいは、抗原を、腫瘍抗原および樹状細胞特異的細胞表面マーカーに結合する二重特異性大環状ペプチドの使用により、ＤＣに直接送達させ得る。
他の例において、大環状ペプチドと抗ＣＴＬＡ−４剤の組み合わせを、抗新生物大環状財、例えばリツキサン(登録商標)(リツキシマブ)、ハーセプチン(登録商標)(トラスツマブ)、ベキサール(登録商標)(トシツモマブ)、ゼヴァリン(登録商標)(イブリツモマブ)、キャンパス(登録商標)(アレムツズマブ)、Lymphocide(エプラツズマブ)、アバスチン(登録商標)(ベバシズマブ)およびタルセバ(登録商標)(エルロチニブ)などと組み合わせ得る。例として、理論に縛られることを望まないが、抗癌抗体または毒素とコンジュゲートした抗癌抗体での処置は癌細胞死(例えば、腫瘍細胞)を起こし得て、これは、ＣＴＬＡ−４またはＰＤ−Ｌ１が介在する免疫応答を増強する。例示的態様において、過増殖性疾患(例えば、癌腫瘍)の処置は、大環状ペプチドおよび抗ＣＴＬＡ−４剤と同時または逐次的またはその任意の組み合わせで組み合わせた抗癌抗体を含み、これは、宿主による抗腫瘍免疫応答を増強し得る。
腫瘍は、多種多様な機構により宿主免疫監視を逃れる。これらの機構の多くは腫瘍により発現され、免疫抑制性であるタンパク質の不活性化により克服され得る。これらはとりわけＴＧＦ−ベータ(Kehrl, J. et al., J. Exp. Med., 163:1037-1050 (1986))、ＩＬ−１０(Howard, M. et al., Immunology Today, 13:198-200 (1992))およびＦａｓリガンド(Hahne, M. et al., Science, 274:1363-1365 (1996))を含む。多くの例において、これらの物の各々に対する抗体を、免疫抑制性因子の効果に打ち勝ち、宿主による腫瘍免疫応答を支持するために、大環状ペプチドおよび抗ＣＴＬＡ−４組み合わせとさらに組み合わせ得る。
宿主免疫応答性を活性化するために使用し得る他の薬剤を本発明の大環状ペプチドと組み合わせて使用できる。これらは、ＤＣ機能および抗原提示を活性化する樹状細胞の表面上の分子を含む。抗ＣＤ４０大環状ペプチドは、Ｔ細胞ヘルパー活性を効果的に代理でき(Ridge, J. et al., Nature, 393:474-478 (1998))、または本発明の大環状ペプチド単独抗ＣＴＬＡ−４組み合わせと組み合わせて使用できる(Ito, N. et al., Immunobiology, 201(5):527-540 (2000))。ＣＴＬＡ−４(例えば、米国特許番号５,８１１,０９７)、ＯＸ−４０(Weinberg, A. et al., Immunol., 164:2160-2169 (2000))、４−１ＢＢ(Melero, I. et al., Nat. Med., 3:682-685 (1997)およびＩＣＯＳ(Hutloff, A. et al., Nature, 397:262-266 (1999))のようなＴ細胞同時刺激分子に対する大環状ペプチドの活性化は、Ｔ細胞活性化のレベル増加のために提供され得る。
骨髄移植は、造血起源の多様な腫瘍の処置のために現在使用されている。移植片対宿主病はこの処置の結果であるが、治療的利点が移植変対腫瘍応答により得られ得る。本発明の大環状ペプチドは、単独でまたはＣＴＬＡ−４遮断と組み合わせて、ドナー生着腫瘍特異的Ｔ細胞の有効性を増加させるために使用できる。
抗原特異的Ｔ細胞のエクスビボ活性化および増大ならびに抗原特異的Ｔ細胞を腫瘍に向けさせるためのレシピエントへのこれらの細胞の養子移植が関与するいくつかの実験的処置プロトコルがある(Greenberg, R. et al., Science, 285:546-551 (1999))。これらの方法は、ＣＭＶのような感染因子に対するＴ細胞応答の活性化にも使用し得る。本発明の大環状ペプチド単独または抗ＣＴＬＡ−４アンタゴニストとの組み合わせの存在下のエクスビボ活性化は、養子移入されたＴ細胞の頻度および活性を高めることが期待され得る。
ある態様において、本発明は、対象に本発明の大環状ペプチドを抗ＣＴＬＡ−４抗体の治療以下の投与量と組み合わせて投与することを含む、免疫刺激剤での過増殖性疾患の処置と関係する有害事象を変更する方法を提供する。例えば、本発明の方法は、患者に非吸収性ステロイドを投与することにより、免疫刺激性治療的抗体誘発大腸炎または下痢の発生率を減少させる方法を提供する。免疫刺激性治療的抗体を受けているあらゆる患者が、このような処置により誘発される大腸炎または下痢のリスクがあるため、この全患者集団が、本発明の方法に従う治療に適する。ステロイド類は炎症性腸疾患(ＩＢＤ)の処置およびＩＢＤの悪化予防に投与されているが、ＩＢＤと診断されていない患者におけるＩＢＤの予防(発生率の減少)には使用されていない。非吸収性ステロイド類であってさえ、ステロイド類と関係する相当な副作用が、予防使用を防止する。
さらなる態様において、本発明の大環状ペプチドは、単独でまたはＣＴＬＡ−４遮断と組み合わせて、非吸収性ステロイドのいずれかの使用とさらに組み合わせ得る。ここで使用する“非吸収性ステロイド”は、肝臓での代謝後、ステロイドのバイオアベイラビリティが低い、すなわち、約２０％未満であるように、相当な初回通過代謝を示すグルココルチコイドである。本発明の一つの態様において、非吸収性ステロイドはブデソニドである。ブデソニドは局所作用性グルココルチコステロイドであり、経口投与後、主に肝臓により相当退社される。エントコート(登録商標)ＥＣ(Astra-Zeneca)は、回腸および結腸全体への薬物送達を最適化するよう開発されたブデソニドのｐＨおよび時間依存型経口製剤である。エントコート(登録商標)ＥＣは、回腸および／または上行結腸が関与する軽度から中程度クローン病の処置について米国で承認されている。クローン病処置のためのエントコート(登録商標)ＥＣの通常の経口投与量は６〜９mg／日である。エントコート(登録商標)ＥＣは吸収される前に腸で吸収され、腸粘膜に保持される。腸粘膜標的組織を通過したら、エントコート(登録商標)ＥＣは肝臓のチトクロムＰ４５０系で、無視できるグルココルチコイド活性の代謝物まで相当代謝される。それゆえに、バイオアベイラビリティは低い(約１０％)。ブデソニドの低バイオアベイラビリティは、初回通過代謝の程度が低い他のグルココルチコイドと比較して治療比が改善されている。ブデソニドは、その結果全身作用性コルチコステロイドよりも少ない視床下部−下垂体抑制を含み、副作用が少ない。しかしながら、エントコート(登録商標)ＥＣの慢性投与は、副腎皮質ホルモン過剰症および副腎抑制のような全身性グルココルチコイド効果を生じ得る。Physicians' Desk Reference Supplement, 58th Edition, 608-610 (2004)参照。
さらなる態様において、組み合わせたＰＤ−Ｌ１とＣＴＬＡ−４遮断(すなわち、免疫刺激性治療的大環状ペプチド抗ＰＤ−Ｌ１および抗ＣＴＬＡ−４)と非吸収性ステロイドの組み合わせを、さらにサリチレートと組み合わせ得る。サリチレートは、５−ＡＳＡ剤例えばスルファサラジン(アザルフィジン(登録商標)、Pharmacia & Upjohn)；オルサラジン(DIPENTUM(登録商標)、Pharmacia & Upjohn)；バルサラジド(COLAZAL(登録商標)、Salix Pharmaceuticals, Inc.)；およびメサラミン(アサコール(登録商標)、Procter & Gamble Pharmaceuticals；ペンタサ(登録商標)、Shire US；CANASA(登録商標)、Axcan Scandipharm, Inc.；ROWASA(登録商標)、Solvay)を含む。
投与量および製剤
適切な式Ｉのペプチドまたはより具体的にここに記戴する大環状ペプチドを、化合物単独でおよびまたは許容される担体との混合物で医薬製剤の形態で糖尿病および他の関連疾患の処置のために患者に投与できる。糖尿病処置の当業者は、このような処置を必要とするヒトを含む哺乳動物への化合物の投与量および投与経路を容易に決定できる。投与経路は経口、口腔内、直腸、経皮、バッカル、鼻腔内、肺、皮下、筋肉内、皮内、舌下、結腸内、眼内、静脈内または腸管投与を含むが、これらに限定されない。化合物を、受け入れ可能な調剤行為に基づき、投与経路に従って製剤する(Fingl et al., in The Pharmacological Basis of Therapeutics, Chapter 1, p. 1 (1975); Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Co., Easton, PA (1990))。
ここに記戴する薬学的に許容されるペプチド組成物を、錠剤、カプセル剤(この各々は徐放性または持効性製剤を含む)、丸剤、粉末剤、顆粒剤、エリキシル剤、インサイチュゲル剤、マイクロスフェア剤、結晶複合体、リポソーム剤、マイクロエマルジョン剤、チンキ剤、懸濁液剤、シロップ剤、エアロゾルスプレー剤およびエマルジョン剤のような多種の投与形態で投与できる。ここに記戴する組成物はまた経口、静脈内(ボーラスまたは点滴)、腹腔内、皮下、経皮または筋肉内形態でも投与でき、全て医薬分野で当業者に周知の投与形態を使用する。組成物は単独で投与してよいが、一般に選択した投与経路および標準的薬務に基づき選択した医薬担体と共に投与する。
ここに記戴する組成物の投与レジメンは、当然、特定の薬剤の薬力学的特徴およびその投与方法および投与経路；受け手の種、年齢、性別、健康状態、医学的状態および体重；症状の性質および程度；同時処置の種類；処置頻度；投与経路、患者の腎臓および肝臓機能および望む効果により変わる。医師または獣医師は、疾患状態の予防、対抗または進行停止に必要な薬物の有効量を決定し、処方できる。
一般的な指標として、活性成分の１日経口投与量は、指示した効果のために使用するとき、１日あたり約０.００１〜１０００mg／kg体重、好ましくは約０.０１〜１００mg／kg体重、最も好ましくは約０.６〜２０mg／kg／日の範囲である。静脈内で、活性成分の１日投与量は、指示した効果のために使用するとき、一定速度点滴の間０.００１ng〜１００.０ng／分／Kg体重の範囲である。このような定速静脈内点滴は、好ましくは０.０１ng〜５０ng／分／Kg体重で、最も好ましくは０.０１ng〜１０.０mg／分／Kg体重で投与できる。ここに記戴する組成物を、単回１日投与投与してよく、または総１日投与量を１日２回、３回または４回に分けて投与してよい。ここに記戴する組成物はまた、所望により日／週／月の期間にわたり薬物の徐放を可能にするデポー製剤で投与できる。
ここに記戴する組成物は、適切な鼻腔内媒体を使用して局所使用で鼻腔内形態でまたは経皮皮膚パッチを使用して経皮経路で投与できる。経皮送達系の形で投与するとき、投与量投与は、当然、投与レジメンの期間中、間欠性ではなく連続的である。
組成物は、典型的に、経口錠剤、カプセル、エリキシル、噴射剤を用いてまたは用いずに製造したエアロゾルスプレーおよびシロップである意図する投与形態を参酌し、慣用の薬務に一致して適切に選択した適切な医薬希釈剤、添加物または担体(ここでは集合的に医薬担体と呼ぶ)との混合物で、投与する。
例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与において、活性薬物成分を、ラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、マンニトールおよびソルビトールのような、しかし、これらに限定されない、経口の、非毒性の薬学的に許容される不活性担体と組み合わせることができ、液体経口での経口投与のために、経口薬物成分を、エタノール、グリセロールおよび水のような、しかしこれらに限定されない、あらゆる経口の非毒性、薬学的に許容される不活性担体と組み合わせることができる。さらに、望むときまたは必要であるとき、適切な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色剤も混合物に取り込んでよい。適切な結合剤は、デンプン、ゼラチン、グルコースまたはベータ−ラクトースのような、しかしこれらに限定されない天然糖、トウモロコシ甘味剤、アカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウムのような天然および合成ガム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールおよび蝋を含むが、これらに限定されない。これらの投与形態で使用される滑沢剤はオレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウムおよび塩化ナトリウムを含む。崩壊剤は、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイトおよびキサンタンゴムを含むが、これらに限定されない。
ここに記戴する組成物はまた混合ミセルまたはリポソーム送達系、例えば小単層リポソーム、大単層リポソームおよび多層リポソームの形で投与できる。リポソームはコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンのような多様なリン脂質から製造できる。浸透エンハンサーを薬物吸収を増強するために添加してよい。
プロドラッグが医薬の多くの望ましい品質を高めることが知られているため(すなわち、溶解度、バイオアベイラビリティ、製造など)、ここに記戴する化合物をプロドラッグ形態で送達し得る。それゆえに、ここに記戴する主題は、現在請求する化合物のプロドラッグ、その送達方法およびそれを含む組成物を包含することを意図する。
ここに記戴する組成物はまた標的化可能薬物担体として可溶性ポリマーとも結合できる。このようなポリマーは、ポリビニル−ピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピル−メタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノールまたはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリシンを含み得るさらに、ここに記戴する組成物を、薬物の制御放出を達成するために有用な生分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸のコポリマー、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアシレートおよびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーと組み合わせ得る。
投与に適する投与形態(医薬組成物)は、投与量単位あたり約０.０１mg〜約５００mgの活性成分を含む。これらの医薬組成物において、活性成分は、通常組成物の総重量に基づき約０.５〜９５重量％の量で存在し得る。
ゼラチンカプセルは活性成分および粉末担体、例えばラクトース、デンプン、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸を含み得る。類似の希釈剤を使用して圧縮錠剤を製造できる。錠剤およびカプセルのいずれも、長期間にわたる薬剤の連続的放出を提供するために徐放製品として製造できる。圧縮錠剤を、何らかの不快な味をマスクし、雰囲気から錠剤を保護しするために糖コーティングまたはフィルムコーティングしてもまたは消化管での選択的崩壊のために腸溶性コーティングしてもよい。
経口投与用液体投与形態は、患者による許容性を高めるために着色剤および風味剤を含み得る。
一般に、水、適切な油、食塩水、水性デキストロース(グルコース)および関連糖溶液およびプロピレングリコールまたはポリエチレングリコールのようなグリコールが、非経腸溶液のための適切な担体である。非経腸投与のための溶液は、好ましくは活性成分の水可溶性塩、適切な安定化剤および必要であれば、緩衝物質を含む。重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムまたはアスコルビン酸のような抗酸化剤は単独でまたは組み合わせで、適切な安定化剤となる。また、クエン酸およびその塩およびナトリウムＥＤＴＡも使用される。さらに、非経腸溶液は、塩化ベンザルコニウム、メチル−またはプロピル−パラベンおよびクロロブタノールのような防腐剤を含み得る。
適切な医薬担体は、この分野の標準的参考書であるRemington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Edition, Mack Publishing Company (1995)に記戴されている。
ここに記戴する化合物の投与のための代表的な有用な医薬投与形態は次のとおり説明できる。
カプセル
多数の単位カプセルを、１００mgの粉末活性成分、１５０mgのラクトース、５０mgのセルロースおよび６mgのステアリン酸マグネシウムを標準的２ピース硬ゼラチンカプセルに充填することにより製造できる。
軟ゼラチンカプセル
ダイズ油、綿実油またはオリーブ油のような消化可能油中の活性成分の混合物を製造し、ゼラチンに陽圧式排出ポンプで充填して、１００mgの活性成分を含む軟ゼラチンカプセルを製造する。カプセルは洗浄および乾燥すべきである。
錠剤
錠剤を、投与量単位が、例えば１００mgの活性成分、０.２mgのコロイド状二酸化ケイ素、５mgのステアリン酸マグネシウム、２７５mgの微結晶セルロース、１１mgのデンプンおよび９８.８mgのラクトースであるように、慣用の方法で製し得る。嗜好性を高めるためにまたは吸収を遅延するために適当なコーティングを施してよい。
注射剤
ここに記戴するペプチド組成物の注射可能製剤は、規制機関により承認されているような添加物の使用を必要とするかまたは必要としない可能性がある。これらの添加物は、溶媒および共溶媒、可溶化、乳化または濃化剤、キレート剤、抗酸化剤および還元剤、抗微生物防腐剤、緩衝液およびｐＨ調節剤、充填剤、保護剤および張性調節剤および特殊な添加物を含むが、これらに限定されない。注射可能製剤は無菌、無発熱物質、溶液の場合、無粒状物質でなければならない。
注射による投与に適する非経腸組成物は、例えば、１.５重量％の活性成分を、共溶媒または他の添加物を含んでも含まなくてもよい薬学的に許容される緩衝液と撹拌することにより製造し得る。溶液は塩化ナトリウムで等張化し、滅菌しなければならない。
懸濁液
水性懸濁液を、例えば、各々５mLが１００mgの微粉化活性成分、２０mgのナトリウムカルボキシメチルセルロース、５mgの安息香酸ナトリウム、１.０ｇのソルビトール溶液、Ｕ.Ｓ.Ｐ.および０.０２５mLのバニリンまたは他ののみやすい風味剤を含むように、経口および／または非経腸投与用に製造できる。
生分解性微粒子
注射による投与に適する徐放性非経腸組成物は、例えば、適切な生分解性ポリマーを溶媒に溶解し、ポリマー溶液に入れるべき活性剤を添加し、溶媒をマトリクスから除去し、それによりマトリクス中に活性剤が分散したポリマーのマトリクスを形成させることにより、製造し得る。
ペプチド合成
本発明の大環状ペプチドを、化学的に、無細胞系で組み換え的に、細胞内で組み換え的に合成できるまたは生物学的源から単離できるように、当分野で知られる方法で製造できる。本発明の大環状ペプチドの化学合成は、段階的固相合成、配座的に支援される再ライゲーションを経るペプチドフラグメントの半合成、クローン化または合成ペプチドセグメントの酵素ライゲーションおよび化学ライゲーションを含む、多様な当該技術分野において承認されている方法を使用して合成できる。ここに記戴する大環状ペプチドおよびそのアナログの好ましい合成方法は、Chan, W.C. et al., eds., Fmoc Solid Phase Synthesis, Oxford University Press, Oxford (2000); Barany, G. et al., The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 2: “Special Methods in Peptide Synthesis, Part A”, pp. 3-284, Gross, E. et al., eds., Academic Press, New York (1980)；およびStewart, J.M. et al., Solid-Phase Peptide Synthesis, 2nd Edition, Pierce Chemical Co., Rockford, IL (1984)に記戴されているような、種々の固相技術を使用する化学合成である。好ましいストラテジーは、α−アミノ基の一時的保護のためのＦｍｏｃ(９−フルオレニルメチルメチル−オキシカルボニル)基と、アミノ酸側鎖の一時的保護のためのｔｅｒｔ−ブチル基の組み合わせである(例えばtherton, E. et al., “The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Group”, in The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 9: "Special Methods in Peptide Synthesis, Part C", pp. 1-38, Undenfriend, S. et al., eds., Academic Press, San Diego (1987))。
ペプチドは、不溶性ポリマー支持体(“樹脂”とも呼ぶ)上の段階的方法で、ペプチドのＣ末端から開始して合成できる。合成は、ペプチドのＣ末端アミノ酸のアミドまたはエステル結合の形成による樹脂への結合から開始する。これは、得られたペプチドのＣ末端アミドまたはカルボン酸としての最終段階での遊離を可能にする。
Ｃ末端アミノ酸および合成に使用する全ての他のアミノ酸は、α−アミノ保護基が合成中に選択的に除去されるように、異なって保護されたα−アミノ基および側鎖官能性(存在するならば)を有することを必要とする。アミノ酸のカップリングを、活性エステルとしてのそのカルボキシル基の活性化および樹脂に結合したＮ末端アミノ酸の非遮断α−アミノ基との反応により実施する。α−アミノ基脱保護およびカップリングの順番を、完全ペプチド配列が集合されるまで続ける。次いで、通常副反応を制限するために適当なスカベンジャーの存在下で、ペプチドを樹脂から遊離し、同時に側鎖官能性の脱保護を行う。得られたペプチドを最終的に逆相ＨＰＬＣで精製する。
最終ペプチドの前駆体としてのペプチジル−樹脂の合成は、市販の架橋ポリスチレンポリマー樹脂(Novabiochem, San Diego, CA; Applied Biosystems, Foster City, CA)を利用する。好ましい固体支持体は、Ｃ末端カルボキサミドのための４−(２',４'−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチル)−フェノキシアセチル−ｐ−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（ＲｉｎｋアミドＭＢＨＡ樹脂)；９−Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ−メリフィールド樹脂(Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂)；４−(９−Ｆｍｏｃ)アミノメチル−３,５−ジメトキシフェノキシ)バレリル−アミノメチル−メリフィールド樹脂(ＰＡＬ樹脂)である。第一のおよび続くアミノ酸のカップリングは、ＨＯＢｔ、それぞれＤＩＣ／ＨＯＢｔ、ＨＢＴＵ／ＨＯＢｔ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰからまたはＤＩＣ／６−Ｃｌ−ＨＯＢｔ、ＨＣＴＵ、ＤＩＣ／ＨＯＡｔまたはＨＡＴＵから製造した６−Ｃｌ−ＨＯＢｔまたはＨＯＡｔ活性エステルを使用して達成できる。好ましい固体支持体は保護ペプチドフラグメントの２−クロロトリチルクロライド樹脂および９−Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ−メリフィールド樹脂(Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂)である。第一アミノ酸の２−クロロトリチルクロライド樹脂への充填は、Ｆｍｏｃ保護アミノ酸と樹脂のジクロロメタンおよびＤＩＥＡ中の反応により最良に達成される。必要であれば、アミノ酸の溶解を促進するために少量のＤＭＦを添加してよい。
ここに記戴するペプチドアナログの合成は、単または多チャネルペプチドシンセサイザー、例えばCEM Liberty MicrowaveシンセサイザーまたはProtein Technologies, Inc.のＰｒｅｌｕｄｅ(６チャネル)またはＳｙｍｐｈｏｎｙ(１２チャンネル)シンセサイザーを使用して実施できる。
有用なＦｍｏｃアミノ酸誘導体を下に示す。
固相合成で使用する保護アミノ酸
各ペプチドのためのペプチジル−樹脂前駆体を、任意の標準法を使用して、開裂および脱保護し得る(例えば、King, D.S. et al., Int. J. Peptide Protein Res., 36:255-266 (1990)参照)。記載する方法は、水およびスカベンジャーとしてのＴＩＳ存在下のＴＦＡの使用である。典型的に、ペプチジル−樹脂をＴＦＡ／水／ＴＩＳ(９４：３：３、ｖ：ｖ：ｖ；１mL／１００mgのペプチジル樹脂)中、２〜６時間、室温で撹拌する。消費した樹脂を濾取し、ＴＦＡ溶液を濃縮または減圧下乾燥する。得られた粗製ペプチドは沈殿し、Ｅｔ２Ｏで洗浄するかまたは直接分取ＨＰＬＣでの精製のためにＤＭＳＯまたは５０％酢酸水溶液に再溶解する。
所望の純度のペプチドを、例えば、Watersモデル4000またはShimadzuモデルLC-8A液体クロマトグラフでの分取ＨＰＬＣを使用して精製する。粗製ペプチドの溶液をYMC S5 ODS(２０×１００mm)カラムに充填し、いずれも０.１％ＴＦＡで緩衝化したＭｅＣＮの水溶液の直線勾配で、１４〜２０mL／分の流速を使用し、２２０nmでのＵＶ吸光度により流出液をモニタリングしながら溶出する。精製ペプチドの構造をエレクトロスプレーＭＳ分析で確認できる。
本明細書に記載する非天然型アミノ酸の表を下に示す。
次の略語を実施例および本明細書の全体で使用する。
Ｐｈ＝フェニル
Ｂｎ＝ベンジル
ｉ−Ｂｕ＝イソ−ブチル
ｉ−Ｐｒ＝イソ−プロピル
Ｍｅ＝メチル
Ｅｔ＝エチル
Ｐｒ＝ｎ−プロピル
Ｂｕ＝ｎ−ブチル
ｔ−Ｂｕ＝ｔｅｒｔ−ブチル
Ｔｒｔ＝トリチル
ＴＭＳ＝トリメチルシリル
ＴＩＳ＝トリイソプロピルシラン
Ｅｔ２Ｏ＝ジエチルエーテル
ＨＯＡｃまたはＡｃＯＨ＝酢酸
ＭｅＣＮまたはＡｃＣＮ＝アセトニトリル
ＤＭＦ＝Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＦＥ＝α,α,α−トリフルオロエタノール
Ｅｔ２ＮＨ＝ジエチルアミン
ＮＭＭ＝Ｎ−メチルモルホリン
ＮＭＰ＝Ｎ−メチルピロリドン
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
ＴＥＡ＝トリエチルアミン
min.＝分
ｈまたはｈｒ＝時間
Ｌ＝リットル
mLまたはml＝ミリリットル
μL＝マイクロリットル
ｇ＝グラム
mg＝ミリグラム
mol＝モル濃度
mmol＝ミリモル濃度
meq＝ミリ当量
ＲｔまたはＲＴ＝室温
satまたはsat'd＝飽和
aq.＝水性
mp＝融点
ＢＯＰ試薬＝ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス−ジメチルアミノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(カストロ試薬)
ＰｙＢＯＰ試薬＝ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ＝２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＡＴＵ＝Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
Ｔ３Ｐ＝２,４,６−トリプロピル−１,３,５,２,４,６−トリオキサトリホスホリナン−２,４,６−トリオキシド
ＤＭＡＰ＝４−(ジメチルアミノ)ピリジン
ＤＩＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＦｍｏｃまたはＦＭＯＣ＝フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＢｏｃまたはＢＯＣ＝ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＨＯＢＴまたはＨＯＢＴ・Ｈ２Ｏ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物
Ｃｌ−ＨＯＢｔ＝６−クロロ−ベンゾトリアゾール
ＨＯＡＴ＝１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー
ＬＣ／ＭＳ＝高速液体クロマトグラフィー／マススペクトロメトリー
ＭＳまたはMass Spec＝マススペクトロメトリー
ＮＭＲ＝核磁気共鳴
ＳｃまたはＳＣ＝皮下
ＩＰまたはｉｐ＝腹腔内
実施例１ − 固相ペプチド合成およびペプチドの環化
本実施例に記戴されている方法を、全体としてまたは記戴しているときは一部を使用して、表１、２、３、４および５に示す大環状ペプチドを合成した。
スキーム１ − チオエーテル環化ペプチドに使用した一般的合成方法(実施例２〜８８)
固相ペプチド合成および大環状化のための一般的プロトコル。Ｓｙｍｐｈｏｎｙペプチドシンセサイザー(Protein Technology Inc. Tucson, AZ)、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザー(Protein Technology Inc. Tucson, AZ)またはＬｉｂｅｒｔｙ(CEM Matthews, NC)、Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂(０.７１mmol／ｇ、０.１００mmol、１４１mg)をＤＭＦ(７mL×４分)で膨潤させ、３０秒毎にＮ２の穏やかな気流で混合した。溶媒を排出し、第一アミノ酸とのカップリングに次の方法を使用した。Ｆｍｏｃ基を、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液(５mLおよび２.５分／洗浄)で樹脂を２回洗浄し、３０秒毎にＮ２の穏やかな気流で混合した。樹脂をＤＭＦで３回洗浄した(５〜８mLおよび１.５分／洗浄)。２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)酢酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ溶液、０.５mmol)を添加し、その後アクティベーター(すなわち、ＨＡＴＵ(Chem-Impex Int'l、ＤＭＦ中０.４Ｍ溶液、１.２５mL、０.５mmol))および塩基(すなわち、Ｎ−メチルモルホリン(Aldrich、ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１mmol))とカップリングさせた。反応混合物を窒素の穏やかな気流により１時間撹拌した。試薬を反応容器から排出し、樹脂を３回ＤＭＦ(５mL×１.５分)で洗浄した。Ｌｉｂｅｒｔｙ ＣＥＭのための典型的試薬は次のとおりであったことを記す。カップリングアクティベーターとしてのＨＣＴＵ(ＤＭＦ中０.４５Ｍ)、塩基としてのＤＩＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ)および脱保護溶液として５％ピペラジンのＤＭＦ溶液と０.１Ｍ ＨＯＢｔ。
得られた樹脂支持Ｆｍｏｃ保護ジペプチドを逐次的に脱保護し、反復性形式で第三のアミノ酸などと課プリングして、所望の所望の樹脂支持生成物を得た。
ＬＣＭＳ分析をペプチドの一定量で実施し、これは樹脂(分析量をＴＦＡ／ＴＩＳ(９６：４)溶液(０.２mL)で室温で処理した)から開裂させた。所望の直線状配列確認後、Ｆｍｏｃ基を、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液(５mLおよび２.５分／洗浄)で樹脂を２回洗浄し、スラリーをボルテックス処理することによりＮ末端から離した。樹脂をＤＭＦ(２×５mL)で洗浄した。ペプチド−樹脂に連続的に２−クロロ酢酸(０.６mmol、５７mg)、ＤＭＦ(５.２６mL)およびＤＩＣ(０.６mmol、９３μL)を添加した。新スラリーを１〜２日間ボルテックス処理し、その時点でペプチド−樹脂をＤＭＦ(１×５mL×１分)およびＤＣＭ(３×ＤＣＭ×１分)で洗浄した。
ペプチドを脱保護し、ＴＦＡ／ＴＩＳ(９６：４)溶液(１０mL)で１時間の処理により樹脂から開裂した。樹脂を濾過により除去し、開裂カクテル(２×１mL)で洗浄し、合わせた濾駅をＥｔ２Ｏ(１０〜１５mL)に添加し、ペプチドを溶液から析出させるために、溶液を０℃に冷却した。スラリーを遠心して、固体をペレット化し、上清廃棄した。新鮮Ｅｔ２Ｏ(２５mL)を添加し、この工程を３回固体の洗浄まで繰り返した。湿固体に０.１Ｍ ＮＨ４ＨＣＯ３／アセトニトリル溶液(１／１〜３／１(ｖ／ｖ)、ｐＨ＝８.６)または６Ｍ グアニジンＨＣｌの１００mM ＮａＨ２ＰＯ４溶液(ｐＨ＝８.４)を添加した。溶液を１〜２日間撹拌し、ＬＣＭＳでモニターした。反応溶液を分取ＨＰＬＣで精製して、所望の生成物を得た。
一般的分析的プロトコルおよび合成方法±
±次の分析プロトコルおよび合成方法を実施例１〜４０００に使用した。
分析データ：
マススペクトロメトリー：“ＥＳＩ−ＭＳ(＋)”は、陽イオンモードで実施するエレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＭＳ(−)”は、陰イオンモードで実施するエレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)”は、陽イオンモードで実施する高解像度エレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(−)”は、陰イオンモードで実施する高解像度エレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す。検出した質量を、“ｍ／ｚ”単位指定に従い示す。１０００より大きい正確な質量の化合物は、二重荷電または三重荷電イオンとしてしばしば検出された。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：
カラム：ＢＥＨ Ｃ１８、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；温度：５０℃；勾配：２％Ｂ〜９８％Ｂを２分かけて、次いで９８％Ｂに０.５分維持；流速：０.８mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：
カラム：ＢＥＨ Ｃ１８、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；温度：５０℃；勾配：０〜１００％Ｂを３分かけて、次いで１００％Ｂに０.７５分維持；流速：１.１１mL／分。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：
カラム：ＢＥＨ Ｃ１８、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：水と０.２％ギ酸および０.０１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.２％ギ酸および０.０１％ＴＦＡ；温度：５０℃；勾配：２％Ｂ〜８０％Ｂを２分で、８０％Ｂ〜９８％Ｂを０.１分かけて、次いで９８％Ｂに０.５分維持；流速：０.８mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；温度：５０℃；勾配：０〜１００％Ｂを３分かけて、次いで１００％Ｂに０.７５分維持；流速：１.１１mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；温度：５０℃；勾配：０〜１００％Ｂを３分かけて、次いで１００％Ｂに０.７５分維持；流速：１.１１mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｆ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、２.１×５０mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；温度：３５℃；勾配：０〜１００％Ｂを４分かけて、次いで１００％Ｂに１分維持；流速：４mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：
Ｆｉｎｎｉｇａｎ ＬＴＱＭａｓｓスペクトロメーター；カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｊｕｐｉｔｅｒ Ｃ４、１×５０mm；移動相Ａ：１％ギ酸の水溶液；移動相Ｂ：０.１％ギ酸のアセトニトリル溶液；温度：３０℃；勾配：１％Ｂ、１分維持；１〜９５％Ｂを３分かけて、次いで９５％Ｂに３分維持；流速：０.１５mL／分。
分析的ＨＰＬＣ条件Ａ：
カラム：ＹＭＣ Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＡＱ ３μm １５０×４.６mm 移動相Ａ：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.１％ＴＦＡ；温度：６０℃；勾配：３５％Ｂ〜８０％Ｂを２５分かけて；流速：１mL／分；検出：２１７nmのＵＶ。
分析的ＨＰＬＣ条件Ｂ：
カラム：ＹＭＣ Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＡＱ ３μm １５０×４.６mm 移動相Ａ：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.１％ＴＦＡ；温度：６０℃；勾配：２５％Ｂ〜７５％Ｂを２５分かけて；流速：１mL／分；検出：２１７nmのＵＶ。
分析的ＨＰＬＣ条件Ｃ：
カラム：ＹＭＣ Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＡＱ ３μm １５０×４.６mm 移動相Ａ：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.１％ＴＦＡ；温度：６０℃；勾配：２０％Ｂ〜７０％Ｂを２５分かけて；流速：１mL／分；検出：２１７nmのＵＶ。
分析的ＨＰＬＣ条件Ｄ：
カラム：ＹＭＣ Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＡＱ ３μm １５０×４.６mm 移動相Ａ：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.１％ＴＦＡ；温度：６０℃；勾配：１５％Ｂ〜６５％Ｂを２５分かけて；流速：１mL／分；検出：２１７nmのＵＶ。
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：
カラム：ＹＭＣ Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＡＱ ３μm １５０×４.６mm 移動相Ａ：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.１％ＴＦＡ；温度：６０℃；勾配：２５％Ｂ〜６０％Ｂを２０分かけて；流速：１.２５mL／分；検出：２１７nmのＵＶ。
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：
カラム：ＹＭＣ Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＡＱ ３μm １５０×４.６mm 移動相Ａ：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.１％ＴＦＡ；温度：６０℃；勾配：２５％Ｂ〜６５％Ｂを２０分かけて；流速：１.２５mL／分；検出：２１７nmのＵＶ。
分析的ＨＰＬＣ条件Ｇ：
カラム：ＳｕｎＦｉｒｅ Ｃ１８ ３.５μm、３.０ｘ１５０mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％トリフルオロ酢酸；温度：５０℃；勾配：１０〜１００％Ｂを１２分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：１mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析的ＨＰＬＣ条件Ｈ：
カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｐｈｅｎｙｌ ３.５ｘ１５０μm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％トリフルオロ酢酸；温度：５０℃；勾配：１０〜１００％Ｂを１２分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：１mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析的ＨＰＬＣ条件Ｉ：
カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) １５０×４.６mm；移動相Ａ：水と０.１％トリフルオロ酢酸、移動相Ｂ：アセトニトリルと０.１％トリフルオロ酢酸、勾配５〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速１mL／分、検出：２２０nmのＵＶ。
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：
カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) １５０×４.６mm；移動相Ａ：水と０.１％トリフルオロ酢酸、移動相Ｂ：アセトニトリルと０.１％トリフルオロ酢酸、勾配１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速１mL／分、検出：２２０nmのＵＶ。
一般的方法：
Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：
全ての操作をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、底フリットに接続した１０mLまたは４５mLポリプロピレンチューブで行った。チューブをチューブの底部と上部の両方からＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに接続した。ＤＭＦおよびＤＣＭをチューブの上部から添加でき、同様にチューブの下部から洗い出す。残りの反応材をチューブの下部から添加し、フリットを通して上げて、樹脂と接触させる。全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的撹拌”は底フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味し、該パルスは約５秒続き、３０秒毎に生じる。アミノ酸溶液は、一般に製造から３週間を超えては使用しなかった。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＤＩＣ＝Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド；ＨＯＡｔ＝１−ヒドロキシ７−アザベンゾトリアゾール；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで、“３−イルオキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用する樹脂はＳｉｅｂｅｒリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１mmol／ｇ荷重である。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は、約１４０mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、下に“樹脂膨潤方法”として記戴する樹脂膨潤から開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“単カップリング方法”を使用した。Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチルアミノ酸のカップリングおよび二級アミンＮ末端へのカップリングは下記“二級アミンカップリング方法”を使用した。クロロアセチル基のペプチドのＮ末端へのカップリングは下の“クロロアセチルクロライドカップリング方法”または“クロロ酢酸カップリング方法”により詳述する。
樹脂膨潤方法：
４０mLポリプロピレン固相反応容器にメリフィールド：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加した。樹脂を、次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(５.０mL)およびＤＣＭ(５.０mL)を添加し、混合物を反応容器の底からのＮ２バブリングにより１０分周期的撹拌し、その後溶媒を排出した。
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を６０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸およびＨＯＡｔ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)の溶液、次いでＤＩＣ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)を添加した。混合物を６０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
二級アミンカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を６０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸およびＨＯＡｔ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、５当量)の溶液、次いでＤＩＣ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、５当量)を添加した。混合物を３００分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
クロロアセチルクロライドカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に３.０mLのＤＩＰＥＡ(４.０mmol、０.６９９mL、４０当量)およびクロロアセチルクロライド(２.０mmol、０.１６０mL、２０当量)のＤＭＦ溶液を添加した。混合物を１２〜１８時間周期的撹拌し、次いで溶液を排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液を排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＣＭ(４.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液を排出した。
Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：
全ての操作をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)の自動化の下に行った。全ての方法を底フリットに接続した１０mLまたは４５mLポリプロピレンチューブで行った。ＤＭＦおよびＤＣＭをチューブの上部から添加でき、同様にチューブの下部から洗い出す。残りの反応材をチューブの下部から添加し、フリットを通して上げて、樹脂と接触させる。全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的撹拌”は底フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味し、該パルスは約５秒続き、３０秒毎に生じる。アミノ酸溶液は、一般に製造から３週間を超えては使用しなかった。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで“３−イルオキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用する樹脂はＳｉｅｂｅｒリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１mmol／ｇ荷重。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ”の方法は０.１００mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は、約１４０mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、下に“樹脂膨潤方法”として記戴する樹脂膨潤から開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“単カップリング方法”を使用した。アミノ酸の二級アミンＮ末端へのカップリングは下記“二級アミンカップリング方法”を使用した。クロロアセチル基のペプチドのＮ末端へのカップリングは下の“クロロアセチルクロライドカップリング方法”または“クロロ酢酸カップリング方法”により詳述する。
樹脂膨潤方法：
４０mLポリプロピレン固相反応容器にメリフィールド：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加した。樹脂を次のとおり３回洗浄(膨潤)した反応容器にＤＭＦ(５.０mL)およびＤＣＭ(５.０mL)を添加し、混合物を反応容器の底からのＮ２バブリングにより１０分周期的撹拌し、その後溶媒をフリットから排出した。
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を６０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)、次いでＨＣＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、２.５mL、２０当量)を添加した。混合物を３０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
二重カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を６０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)、次いでＨＣＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、２.５mL、２０当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を容器上部からのＤＭＦ(４.０mL)で３回連続的に洗浄し、得られた混合物を６０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)、次いでＨＣＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、２.５mL、２０当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
二級アミンカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、１０当量)、次いでＨＣＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、１０当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.５mL、１２当量)を添加した。混合物を１２時間周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に３.０mLのＤＩＰＥＡ(４.０mmol、０.６９９mL、４０当量)およびクロロアセチルクロライド(２.０mmol、０.１６０mL、２０当量)のＤＭＦ溶液を添加した。混合物を１２〜１８時間周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。
クロロ酢酸カップリング方法Ｂ：
先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＤＭＦ(２.０mL)、クロロ酢酸(１.２mmol、１１３mg、１２当量)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(１.２mmol、０.１８７mL、１２当量)を添加した。混合物を１２〜１８時間周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。
Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：
全ての操作をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、底フリットに接続した１０mLまたは４５mLポリプロピレンチューブで行った。チューブをチューブの底部と上部の両方からＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに接続した。ＤＭＦおよびＤＣＭをチューブの上部から添加でき、同様にチューブの下部から洗い出す。残りの反応材をチューブの下部から添加し、フリットを通して上げて、樹脂と接触させる。全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的撹拌”は底フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味し、該パルスは約５秒続き、３０秒毎に生じる。アミノ酸溶液は、一般に製造から３週間を超えては使用しなかった。ＨＡＴＵ溶液は製造後５日以内に使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで、“３−イルオキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用する樹脂はＳｉｅｂｅｒリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１mmol／ｇ荷重。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ”の方法は０.１００mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は、約１４０mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、下に“樹脂膨潤方法”として記戴する樹脂膨潤から開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“単カップリング方法”を使用した。アミノ酸の二級アミンＮ末端へのカップリングは下記“二級アミンカップリング方法”を使用した。樹脂の最後の洗浄は、下記“最終洗浄方法”を使用した。
樹脂膨潤方法：
４０mLポリプロピレン固相反応容器にメリフィールド：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加した。樹脂を次のとおり３回洗浄(膨潤)した反応容器にＤＭＦ(５.０mL)およびＤＣＭ(５.０mL)を添加し、混合物を反応容器の底からのＮ２バブリングにより１０分周期的撹拌し、その後溶媒をフリットから排出した。
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を６０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、２.５mL、２０当量)を添加した。混合物を６０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
二級アミンカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、５当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.５mL、１２当量)を添加した。混合物を３００分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、５当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.５mL、１２当量)を添加した。混合物を３００分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
カスタムアミノ酸カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、０.５〜２.５mL、１〜５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、０.５〜２.５mL、１〜５当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、０.５〜１.５mL、４〜１２当量)を添加した。混合物を６０分〜６００分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
最終洗浄方法：
樹脂を次のとおり連続的に２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＣＭ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
クロロ酢酸カップリング方法：
記戴手動工程。先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を室温で５分振盪し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＤＭＦ(２.０mL)、クロロ酢酸(１.２mmol、１１３mg、１２当量)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(１.２mmol、０.１８７mL、１２当量)を添加した。混合物を室温で１２〜１８時間振盪し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＣＨ２Ｃｌ２(４.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。
Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：
全ての操作をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、底フリットに接続した１０mLまたは４５mLポリプロピレンチューブで行った。チューブをチューブの底部と上部の両方からＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに接続した。ＤＭＦおよびＤＣＭをチューブの上部から添加でき、同様にチューブの下部から洗い出す。残りの反応材をチューブの下部から添加し、フリットを通して上げて、樹脂と接触させる。全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的撹拌”は底フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味し、該パルスは約５秒続き、３０秒毎に生じる。アミノ酸溶液は、一般に製造から３週間を超えては使用しなかった。ＨＡＴＵ溶液は製造後５日以内に使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで、“３−イルオキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用する樹脂はＳｉｅｂｅｒリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１mmol／ｇ荷重。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ”の方法は０.１００mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は、約１４０mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、下に“樹脂膨潤方法”として記戴する樹脂膨潤から開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“単カップリング方法”を使用した。アミノ酸の二級アミンＮ末端へのカップリングは下記“二級アミンカップリング方法”を使用した。樹脂の最後の洗浄は、下記“最終洗浄方法”を使用した。
樹脂膨潤方法：
４０mLポリプロピレン固相反応容器にメリフィールド：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加した。樹脂を次のとおり３回洗浄(膨潤)した反応容器にＤＭＦ(５.０mL)およびＤＣＭ(５.０mL)を添加し、混合物を反応容器の底からのＮ２バブリングにより１０分周期的撹拌し、その後溶媒をフリットから排出した。
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を６０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、２.５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、２.５当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、０.７５mL、５当量)を添加した。混合物を３０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
二級アミンカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、２.５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、２.５当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、０.７５mL、５当量)を添加した。混合物を３０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、２.５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、２.５当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、０.７５mL、５当量)を添加した。混合物を３０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
最終洗浄方法：
樹脂を次のとおり連続的に２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＣＭ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
クロロ酢酸カップリング方法：
記戴手動工程。先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を室温で５分振盪し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＤＭＦ(２.０mL)、クロロ酢酸(１.２mmol、１１３mg、１２当量)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(１.２mmol、０.１８７mL、１２当量)を添加した。混合物を室温で１２〜１８時間振盪し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＣＨ２Ｃｌ２(４.０mL)を容器の上部に添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。
ＣＥＭ方法Ａ：
全ての操作をＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザー(CEM Corporation)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、ＣＥＭ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙマイクロ波ユニットに底フリットで接続した３０mLまたは１２５mLポリプロピレンチューブで行った。チューブをチューブの底部と上部の両方からＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙシンセサイザーに接続した。ＤＭＦおよびＤＣＭをチューブの上部および底から添加でき、同様にチューブの下部から洗い出す。樹脂を上部から移す間以外、全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的バブリング”は、フリットの底からのＮ２ガスの短いバブリングを意味する。アミノ酸溶液は、一般に製造から３週間を超えては使用しなかった。ＨＡＴＵ溶液は製造後５日以内に使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで、“３−イルオキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用する樹脂はＳｉｅｂｅｒリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１mmol／ｇ荷重。Ｒｉｎｋのような他の一般的樹脂、クロロトリチルまたは他の酸感受性リンカーを合成に用いることができ、特に断らない限り具体的実施例でＳｅｉｂｅｒアミド樹脂を使用する。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｏｒｎ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“ＣＥＭ方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は、約１４０mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、下に“樹脂膨潤方法”として記戴する樹脂膨潤から開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“単カップリング方法”を使用した。アミノ酸の二級アミンＮ末端へのカップリングは下記“二級アミンカップリング方法”を使用した。クロロアセチル基のペプチドのＮ末端へのカップリングは上の“クロロアセチルクロライドカップリング方法”または“クロロ酢酸カップリング方法”に詳述する。
樹脂膨潤方法：
５０mLポリプロピレン円錐チューブに、メリフィールド：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加した。次いでＤＭＦ(７mL)、その後ＤＣＭ(７mL)をチューブに添加した。樹脂を反応容器から容器の上部に移した。本方法をさらに２回繰り返す。ＤＭＦ(７mL)、その後ＤＣＭ(７mL)を添加した。樹脂を反応容器の底部からのＮ２バブリングにより１５分膨潤させ、溶媒をフリットから排出した。
標準的カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ,２.５mL、５当量)、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.５Ｍ、１.０mL、５当量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ、０.５mL、１０当量)を添加した。混合物を５０℃でカップリングするＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ以外の全アミノ酸について、５分、７５℃でＮ２バブリングにより混合し、反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を２分、６５℃で周期的にバブリングし、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
ダブルカップルカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ,２.５mL、５当量)、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.５Ｍ、１.０mL、５当量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ、０.５mL、１０当量)を添加した。混合物を５０℃でカップリングするＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ以外の全アミノ酸について、５分、７５℃でＮ２バブリングにより混合し、反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ,２.５mL、５当量)、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.５Ｍ、１.０mL、５当量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ、０.５mL、１０当量)を添加した。混合物を５０℃でカップリングするＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ以外の全アミノ酸について、５分、７５℃でＮ２バブリングにより混合し、反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を２分、６５℃で周期的にバブリングし、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
二級アミンカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に５％ピペラジンおよび０.１Ｍ ＨＯＢｔのＤＭＦ(７mL)溶液を添加した。混合物を３分、７５℃で周期的撹拌し、次いで溶液を排出した。この方法をさらに１回繰り返した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ,２.５mL、５当量)、ＨＣＴＵ(ＤＭＦ中０.５Ｍ、１.０mL、５当量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ、０.５mL、１０当量)を添加した。混合物を全アミノ酸について５分、７５℃(Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨについては５０℃)でＮ２バブリングにより混合し、その後６時間加熱しなかった。排出後、樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を２分、６５℃で周期的にバブリングし、次いで溶液を排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
カスタムアミノ酸カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。反応容器にＨＡＴＵ(２.５当量〜１０当量)を含むアミノ酸溶液(１.２５mL〜５mL、２.５当量〜１０当量)および最後にＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ、０.５mL〜１mL、２０当量)を添加した。混合物を５分〜２時間、２５℃〜７５℃、Ｎ２バブリングで混合し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を２分、６５℃で周期的にバブリングし、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出し、その後ＤＭＦ(７mL)を下部から洗い出し、最後にＤＭＦ(７mL)を上部から洗い出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：
全ての操作をＳｙｍｐｈｏｎｙペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、底フリットを備えたＳｙｍｐｈｏｎｙポリプロピレンチューブで行った。チューブをチューブの底部と上部の両方からＳｙｍｐｈｏｎｙペプチドシンセサイザーに接続した。全ての溶媒、ＤＭＦ、ＤＣＭ、アミノ酸および反応材をチューブの底から添加し、フリットを通して上げて、樹脂と接触させる。全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的撹拌”は底フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味し、該パルスは約５秒続き、１５秒毎に生じる。アミノ酸溶液は、一般に製造から３週間を超えては使用しなかった。ＨＡＴＵ溶液は製造後５日以内に使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＮＭＭ＝ｎ−メチルモルホリン；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで、“３−イルオキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用する樹脂はＳｉｅｂｅｒリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１mmol／ｇ荷重。Ｒｉｎｋまたは官能化クロロトリチル樹脂のような他の一般的酸感受性樹脂も合成に使用できる。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ”の方法は０.０５０mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は約７０mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.０５０mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、“膨潤方法”として下に記戴する樹脂膨潤方法で開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“標準的カップリング方法”を使用した。アミノ酸の二級アミンＮ末端へのカップリングは下記“二重カップリング”を使用し、カスタムアミノ酸を、下記アミノ酸“ブランクカップリング”の手動ブランク付加によりカップリングする。
膨潤方法：
Ｓｙｍｐｈｏｎｙポリプロピレン固相反応容器にメリフィールド：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(７０mg、０.０５０mmol)を添加した。樹脂を次のとおり３回洗浄(膨潤)した反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合合物を反応容器の底からのＮ２バブリングにより１０分周期的撹拌し、その後溶媒をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.５mL)を添加した。混合物を２.５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を容器の下部から添加したで洗浄し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合物を反応容器下部からのＮ２バブリングにより３０秒周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
標準的カップリング方法：
樹脂を次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合物を反応容器下部からのＮ２バブリングにより３０秒周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.５mL)を添加した。混合物を２.５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(６.２５mL)を容器の下部から添加して洗浄し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
二級アミンカップリング方法：
樹脂を次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合物を反応容器下部からのＮ２バブリングにより３０秒周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.５mL)を添加した。混合物を２.５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を３００分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(６.２５mL)を容器の下部から添加して洗浄し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を３００分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
カスタムアミノ酸カップリング方法：
樹脂を次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合物を反応容器下部からのＮ２バブリングにより３０秒周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.５mL)を添加した。混合物を２.５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。合成をＳｙｍｐｈｏｎｙソフトウェアで停止させ、反応容器に手動でカスタムアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)を添加し、次いで自動化を再開し、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を３００分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を、次のとおり、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出して６回洗浄した。反応容器にＡｃ２Ｏ／ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ(ｖ／ｖ／ｖ １：１：３ ２.５mL)を添加し、混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：
全ての操作をＳｙｍｐｈｏｎｙペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、底フリットを備えたＳｙｍｐｈｏｎｙポリプロピレンチューブで行った。チューブをチューブの底部と上部の両方からＳｙｍｐｈｏｎｙペプチドシンセサイザーに接続した。全ての溶媒、ＤＭＦ、ＤＣＭ、アミノ酸および反応材をチューブの底から添加し、フリットを通して上げて、樹脂と接触させる。全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的撹拌”は底フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味し、該パルスは約５秒続き、１５秒毎に生じる。アミノ酸溶液は、一般に製造から３週間を超えては使用しなかった。ＨＡＴＵ溶液は製造後５日以内に使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＮＭＭ＝ｎ−メチルモルホリン；ＤＩＥＡまたはＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで、“３−イルオキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用する樹脂はＳｉｅｂｅｒリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１mmol／ｇ荷重。Ｒｉｎｋまたは官能化クロロトリチル樹脂のような他の一般的酸感受性樹脂も合成に使用できる。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ”の方法は０.０５０mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は約７０mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.０５０mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、“膨潤方法”として下に記戴する樹脂膨潤方法で開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“標準的カップリング方法”を使用した。アミノ酸の二級アミンＮ末端へのカップリングは“二級アミンカップリング方法Ｂ”を使用し、カスタムアミノ酸を下記アミノ酸“カスタムアミノ酸カップリング方法”の手動ブランク付加によりカップリングし、クロロアセチル無水物を下記“最終キャッピング方法”の配列を使用して最終位置に付加する。
膨潤方法：
Ｓｙｍｐｈｏｎｙポリプロピレン固相反応容器にメリフィールド：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(７０mg、０.０５０mmol)を添加した。樹脂を次のとおり３回洗浄(膨潤)した反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合合物を反応容器の底からのＮ２バブリングにより１０分周期的撹拌し、その後溶媒をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.５mL)を添加した。混合物を２.５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を容器の下部から添加したで洗浄し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合物を反応容器下部からのＮ２バブリングにより３０秒周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
標準的カップリング方法：
樹脂を次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合物を反応容器下部からのＮ２バブリングにより３０秒周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.５mL)を添加した。混合物を２.５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＡｃ２Ｏ／ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ(ｖ／ｖ／ｖ １：１：３ ２.５mL)を添加し、混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
二級アミンカップリング方法：
樹脂を次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合物を反応容器下部からのＮ２バブリングにより３０秒周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.５mL)を添加した。混合物を２.５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(６.２５mL)を容器の下部から添加して洗浄し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＡｃ２Ｏ／ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ(ｖ／ｖ／ｖ １：１：３ ２.５mL)を添加し、混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
カスタムアミノ酸カップリング方法：
樹脂を次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合物を反応容器下部からのＮ２バブリングにより３０秒周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.５mL)を添加した。混合物を２.５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。システムをカスタムアミノ酸の反応容器への手動添加のためのシステムにより停止させ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)、次いで自動化を再開して、反応容器にＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.２５mL、５当量)および最後にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＡｃ２Ｏ／ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ(ｖ／ｖ／ｖ １：１：３ ２.５mL)を添加し、混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
最終キャッピング方法：
樹脂を次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(２.５mL)を添加し、混合物を反応容器下部からのＮ２バブリングにより３０秒周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.５mL)を添加した。混合物を２.５分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加し、その後クロロ酢酸無水物(ＤＭＦ中０.４Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(６.２５mL)を容器の下部から添加して洗浄し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＮＭＭ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加し、その後クロロ酢酸無水物(ＤＭＦ中０.４Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回洗浄した。ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＡｃ２Ｏ／ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ(ｖ／ｖ／ｖ １：１：３ ２.５mL)を添加し、混合物を１０分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＣＭ(２.５mL)を容器の下部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を、窒素流で１０分乾燥した。
包括的脱保護方法Ａ：
全ての操作を、特に断らない限り手動で行った。“包括的脱保護方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。“脱保護溶液”はトリフルオロ酢酸：水：トリイソプロピルシラン：ジチオスレイトール(９２.５：２.５：２.５：２.５ｖ：ｖ：ｖ：ｗ)を使用して調製した。樹脂を反応容器から除き、フリットを備えた２５mLシリンジに移した。シリンジに“脱保護溶液”(５.０mL)を添加した。混合物をシェーカーで８５分混合した。溶液を濾過し、濃縮し、ジエチルエーテル(３０mL)で希釈した。沈殿した固体を３分遠心分離した。上清溶液を傾捨し、固体をジエチルエーテル(２５mL)に再懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体をジエチルエーテル(２５mL)に懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体を高減圧下に乾燥した。粗製ペプチドを白色〜灰白色固体として得た。
包括的脱保護方法Ｂ：
全ての操作を、特に断らない限り手動で行った。“包括的脱保護方法Ｂ”の方法は０.０４mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.０４mmol規模を超えて拡大できる。“脱保護溶液”はトリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン(９６：４；ｖ：ｖ)を使用して調製した。樹脂を反応容器から除き、フリットを備えた１０mLシリンジに移した。シリンジに“脱保護溶液”(２.０〜３.０mL)を添加した。混合物をシェーカーで１時間または１.５時間混合した。溶液を濾過し、脱保護溶液(０.５mL)で洗浄し、濃縮し、ジエチルエーテル(３０mL)で希釈した。沈殿した固体を３分遠心分離した。上清溶液を傾捨し、固体をジエチルエーテル(２５mL)に再懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体をジエチルエーテル(２５mL)に懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体を高減圧下に乾燥した。粗製ペプチドを白色〜灰白色固体として得た。
包括的脱保護方法Ｃ：
全ての操作を、断らない限り、手動で行った。“包括的脱保護方法Ｃ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。“脱保護溶液”はトリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：ジチオスレイトール(９５：２.５：２.５ｖ：ｖ：ｗ)を使用して調製した。樹脂を反応容器から除き、Ｂｉｏ−Ｒａｄチューブに移した。Ｂｉｏ−Ｒａｄチューブに“脱保護溶液”(４.０mL)を添加した。混合物をシェーカーで６０分混合した。溶液を濾過し、ジエチルエーテル(３０mL)で希釈した。沈殿した固体を３分遠心分離した。上清溶液を傾捨し、固体をジエチルエーテル(２５mL)に再懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体をジエチルエーテル(２５mL)に懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体を高減圧下に乾燥した。粗製ペプチドを白色〜灰白色固体として得た。
包括的脱保護方法Ｄ：
全ての操作を、特に断らない限り手動で行った。“包括的脱保護方法Ｂ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。“脱保護溶液”はトリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：ジチオスレイトール(９４：３：３ｖ：ｖ：ｗ)を使用して調製した。樹脂を反応容器から除き、フリットを備えた２５mLシリンジに移した。シリンジに“脱保護溶液”(５.０mL)を添加した。混合物をシェーカーで５分混合した。溶液を濾過し、ジエチルエーテル(３０mL)で希釈した。沈殿した固体を３分遠心分離した。上清溶液を傾捨し、固体をジエチルエーテル(２５mL)に再懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体をジエチルエーテル(２５mL)に懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体を高減圧下に乾燥した。粗製ペプチドを白色〜灰白色固体として得た。
包括的脱保護方法Ｅ：
全ての操作を、断らない限り、手動で行った。“包括的脱保護方法Ｅ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＦｍｏｃ Ｇｌｙ−ＣｌＴｒｔリンカーの量により決定する。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。“脱保護溶液”はトリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：ジチオスレイトール(９５：２.５：２.５ｖ：ｖ：ｗ)を使用して調製した。樹脂を反応容器から除き、Ｂｉｏ−Ｒａｄチューブに移した。Ｂｉｏ−Ｒａｄチューブに“脱保護溶液”(２.０mL)を添加した。混合物をシェーカーで３分混合した。溶液を濾過し、遠沈管に回収した。Ｂｉｏ−Ｒａｄチューブに“脱保護溶液”(２.０mL)を添加した。混合物をシェーカーで３分混合した。溶液を濾過し、遠沈管に回収した。Ｂｉｏ−Ｒａｄチューブに“脱保護溶液”(２.０mL)を添加した。混合物をシェーカーで３分混合した。溶液を濾過し、遠沈管に回収した。遠沈管中の溶液を６０分静置した。回収した溶液をジエチルエーテル(３０mL)で希釈し、沈殿が形成した。沈殿した固体を３分遠心分離した。上清溶液を傾捨し、固体をジエチルエーテル(２５mL)に再懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体をジエチルエーテル(２５mL)に懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体を高減圧下に乾燥した。粗製ペプチドを白色〜灰白色固体として得た。
包括的脱保護方法Ｆ：
全ての操作を、断らない限り、手動で行った。“包括的脱保護方法Ｆ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＲｉｎｋリンカーの量により決定する。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。“脱保護溶液”はトリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：ジチオスレイトール(９５：２.５：２.５ｖ：ｖ：ｗ)を使用して調製した。樹脂を反応容器から除き、６ml Ｂｉｏ−Ｒａｄチューブに移した。Ｂｉｏ−Ｒａｄに“脱保護溶液”(４.０mL)を添加した。混合物ををシェーカーで９０分混合した。溶液を濾過し、ジエチルエーテル(３０mL)で希釈した。沈殿した固体を３分遠心分離した。上清溶液を傾捨し、固体をジエチルエーテル(２５mL)に再懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体をジエチルエーテル(２５mL)に懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。上清を傾捨し、残った固体を高減圧下に乾燥した。粗製ペプチドを白色〜灰白色固体として得た。
環化方法Ａ
全ての操作を、特に断らない限り手動で行った“環化方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模はペプチドの製造に使用した樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は方法において使用するペプチドの量の直接の決定には基づかない。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。粗製ペプチド固体をアセトニトリル：水性８Ｍグアニジン／５０mM ＴＲＩＳ(１：３)(ｐＨ８.６)(７mL：１８mLまたは類似の比)の溶液に溶解し、溶液を、必要であればＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を使用してｐＨ＝８.５〜９.０に調節した。溶液をシェーカーを使用して１２〜１８時間混合した。反応溶液を濃縮し、残渣をアセトニトリル：水に溶解した。この溶液を逆相ＨＰＬＣ精製に付して、所望の環状ペプチドを得た。
環化方法Ｃ：
全ての操作を、断らない限り、手動で行った。“環化方法Ｃ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模はペプチドの製造に使用した樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は方法において使用するペプチドの量の直接の決定には基づかない。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。粗製ペプチド固体をアセトニトリル：０.１Ｍ重炭酸アンモニウム水性緩衝液(１１mL：２４mLまたは類似の比)の溶液に溶解し、溶液をＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を使用して、注意深くｐＨ＝８.５〜９.０に調節した。溶液をシェーカーを使用して１２〜１８時間混合した。反応溶液を濃縮し、残渣をアセトニトリル：水に溶解した。この溶液を逆相ＨＰＬＣ精製に付して、所望の環状ペプチドを得た。
環化方法Ｄ：
全ての操作を、断らない限り、手動で行った。“環化方法Ｄ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模はペプチドの製造に使用した樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は方法において使用するペプチドの量の直接の決定には基づかない。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。粗製ペプチド固体をアセトニトリル：０.１Ｍ重炭酸アンモニウム水性緩衝液(１１mL：２４mL)の溶液に溶解し、溶液をＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を使用して、注意深くｐＨ＝８.５〜９.０に調節した。溶液を１２〜１８時間撹拌して混合した。反応溶液を濃縮し、残渣をアセトニトリル：水に溶解した。この溶液を逆相ＨＰＬＣ精製に付して、所望の環状ペプチドを得た。
環化方法Ｅ：
全ての操作を、断らない限り、手動で行った。“環化方法Ｅ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模はペプチドの製造に使用した樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は方法において使用するペプチドの量の直接の決定には基づかない。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。粗製ペプチド固体を６ＭグアニジンＨＣｌ水性緩衝液(１５mL)に溶解し、溶液を１２〜１８時間撹拌して混合した。反応溶液を濃縮し、１５mLのＤＭＳＯを残渣に添加してスラリーを得て、これを濾過した。この濾過した溶液を逆相ＨＰＬＣ精製に付して、所望の環状ペプチドを得た。
手動カップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を含むＢｉｏ−Ｒａｄ反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を５分周期的振盪し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を６０秒振盪し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(１.２〜１０当量)(典型的にＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(１.２１０当量)(典型的にＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、５当量)および最後にＤＩＰＥＡ(２.４〜２０当量)(典型的にＤＭＦ中０.８Ｍ、１.２５mL、１０当量)を添加した。混合物を６０分〜１８時間振盪し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を６０秒振盪し、溶液をフリットから排出した。
Ｎ−メチル化樹脂上方法Ａ。(Turner, R.A. et al., Org. Lett., 15(19):5012-5015 (2013))：
全ての操作を、断らない限り、手動で行った。“Ｎ−メチル化樹脂上方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模はペプチドの製造に使用した樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は方法において使用するペプチドの量の直接の決定には基づかない。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。
樹脂を２５mLフリットシリンジに移した。樹脂にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分振盪し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回洗浄した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、４.０mL)を添加した。混合物を３分振盪し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回およびＤＣＭ(４.０mL)で３回連続的に洗浄した。樹脂をＤＭＦ(２.０mL)に懸濁し、トリフルオロ酢酸エチル(０.１１９ml、１.００mmol)、１,８−ジアザビシクロ[５.４.０]ウンデク−７−エン(０.１８１ml、１.２０mmol)を添加した。混合物をシェーカーに６０分乗せた。溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回およびＤＣＭ(４.０mL)で３回連続的に洗浄した。
樹脂を乾燥ＴＨＦ(２.０mL)で３回洗浄して、残存している水を除去した。オーブン乾燥４.０mLバイアルに乾燥４Åモレキュラー・シーブ(２０mg)上ＴＨＦ(１.０mL)およびトリフェニルホスフィン(１３１mg、０.５００mmol)を添加した。溶液を樹脂に移し、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(０.０９７mL、０.５mmol)をゆっくり添加した。樹脂を１５分撹拌した。溶液をフリットから排出し、樹脂を乾燥ＴＨＦ(２.０mL)で３回洗浄して、残存している水を除去した。オーブン乾燥４.０mLバイアルに乾燥４Åモレキュラー・シーブ(２０mg)上ＴＨＦ(１.０mL)、トリフェニルホスフィン(１３１mg、０.５００mmol)を添加した。溶液を樹脂に移し、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(０.０９７mL、０.５mmol)をゆっくり添加した。樹脂を１５分撹拌した。溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回およびＤＣＭ(４.０mL)で３回連続的に洗浄した。樹脂をエタノール(１.０mL)およびＴＨＦ(１.０mL)に懸濁し、水素化ホウ素ナトリウム(３７.８mg、１.０００mmol)を添加した。混合物を３０分撹拌し、排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回およびＤＣＭ(４.０mL)で３回連続的に洗浄した。
マイクロ開裂Ａ：
樹脂の少量＜１０mgサンプルに２滴のＴＩＳおよび１mLのトリフルオロ酢酸を添加し、ｒｔで振盪する。１時間後、少量を取り、０.５mLアセトニトリルで希釈し、濾過し、ＬＣ−ＭＳで分析する。
ここに記戴する具体的ペプチドのための合成プロトコルは、以下に示す実施例に記載されている。
実施例２〜７１は、式Ｉ(ａ)〜Ｉ(ｄ)の大環状ペプチドのための合成スキームを提供する。
実施例７２〜８８は、式II(ａ)〜II(ｃ)の大環状ペプチドのための合成スキームを提供する。
実施例１００〜１１６は、式III(ａ)〜III(ｃ)の大環状ペプチドのための合成スキームを提供する。
実施例１１６〜１１９は、式ＩおよびIIのＣ末端ペグ化大環状ペプチドの合成スキームを提供する。
実施例２ − 化合物番号１の製造
４０mLポリプロピレン固相反応容器にＳｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加し、反応容器をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて従った；
“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”に従った；
“包括的脱保護方法Ａ”に従った；
“環化方法Ａ”に従った。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｃ１８ Ｌｕｎａ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２０〜７０％Ｂを５０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１６mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ａ：保持時間＝１１.１６分。
実施例３ − 化合物番号２の製造
実施例３を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｃ１８ Ｌｕｎａ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２０〜７５％Ｂを５５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１８mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.１９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５９.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｂ：保持時間＝１４.４９分
実施例４ − 化合物番号３の製造
実施例４を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：１０〜７０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は８.１mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.２１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７０.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｂ：保持時間＝１９.９１分
実施例５ − 化合物番号４の製造
実施例５を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：１０〜７０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は２.１mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｃ：保持時間＝１９.０３分
実施例６ − 化合物番号５の製造
４０mLポリプロピレン固相反応容器にＳｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加し、反応容器をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”は、Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチルアミノ酸のカップリングおよび二級アミンＮ末端のカップリングに従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”に従った；
“包括的脱保護方法Ｃ”に従った；
“環化方法Ｃ”に従った。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.８mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.４１２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８８.７５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８８.５０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７ − 化合物番号６の製造
実施例７を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：１０〜７０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は２４mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.２０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｃ：保持時間＝１５.６６分
実施例８ − 化合物番号７の製造
実施例８を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：１０〜７０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１１.５mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.２４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｃ：保持時間＝１６.３９分
実施例９ − 化合物番号８の製造
実施例９を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：１０〜７０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１２mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.２７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｃ：保持時間＝１７.１８分
実施例１０ − 化合物番号９の製造
実施例１０を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：１０〜７０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１６mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.２６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｃ：保持時間＝１６.９８分
実施例１１ − 化合物番号１０の製造
実施例１１を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：１０〜７０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は３.９mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｄ：保持時間＝２３.００分
実施例１２ − 化合物番号１１の製造
実施例１２を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｃ１８ Ｌｕｎａ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２５〜７５％Ｂ ｏｖｅｒ ４５分；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は３.６mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１４.６８分
実施例１３ − 化合物番号１２の製造
実施例１３を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２５〜７０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は３.０mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：保持時間＝４.０６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１３.７１分
実施例１４ − 化合物番号１３の製造
実施例１４を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.１mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.６８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.７０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１５ − 化合物番号１４の製造
実施例１５を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.３mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.５６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.００(Ｍ＋２Ｈ)
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実施例１６ − 化合物番号１５の製造
実施例１６を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：Ｎ−メチルアミノ酸へのカップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２５〜６０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は７.０mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.１５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６９.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１０.４９分
実施例１７ − 化合物番号１６の製造
実施例１７を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：Ｎ−メチルアミノ酸へのカップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２５〜６０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は８.４mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：保持時間＝３.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１４.６９分
実施例１８ − 化合物番号１７の製造
実施例１８を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：Ｎ−メチルアミノ酸へのカップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２５〜６５％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１０.５mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：保持時間＝３.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝１１.７５分
実施例１９ − 化合物番号１８の製造
４０mLポリプロピレン固相反応容器にＳｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加し、反応容器をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに置いた。その後、次の方法を連続的に実施した。
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”に従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二重カップリング方法”を一級アミンＮ末端へのカップリングに従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”を二級アミンＮ末端へのカップリングに従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”に従った；
“包括的脱保護方法Ｂ”に従った；
“環化方法Ｃ”に従った。
粗製の物質を次の条件を用いて分取ＨＰＬＣにより精製したカラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２５〜７５％Ｂを４５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１５mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：保持時間＝３.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝１５.２９分
実施例２０ − 化合物番号１９の製造
実施例２０を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.６mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.４３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.３０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.７０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例２１ − 化合物番号２０の製造
実施例２１を、次の一般的方法からなる実施例１９の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、一級アミンＮ末端へのカップリングのための“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二重カップリング方法”；二級アミンＮ末端へのカップリングのための“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”；“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を用いて分取ＨＰＬＣにより精製したカラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２５〜６５％Ｂを４５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は２１.３mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：保持時間＝３.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１６.８２分
実施例２２ − 化合物番号２１の製造
実施例２２を、次の一般的方法からなる実施例１９の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、一級アミンＮ末端へのカップリングのための“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二重カップリング方法”；二級アミンＮ末端へのカップリングのための“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”；“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を用いて分取ＨＰＬＣにより精製したカラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２５〜５０％Ｂを４５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は７.５mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：保持時間＝３.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１３.２３分
実施例２３ − 化合物番号２２の製造
実施例２３を、次の一般的方法からなる実施例１９の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、一級アミンＮ末端へのカップリングのための“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二重カップリング方法”；二級アミンＮ末端へのカップリングのための“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”；“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を用いて分取ＨＰＬＣにより精製したカラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２５〜７０％Ｂを４５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は２５mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：保持時間＝３.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８４.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１３.２３分
実施例２４ − 化合物番号２３の製造
実施例２４を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.８mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.５０５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.７０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.８０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例２５ − 化合物番号２４の製造
実施例２５を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで６０％Ｂを５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.９mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.６７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.２０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.４５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例２６ − 化合物番号２５の製造
実施例２６を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例２７ − 化合物番号２６の製造
実施例２７を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−２−Ｎａｌ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例２８ − 化合物番号２７の製造
実施例２８を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−１−Ｎａｌ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １９０３.７(Ｍ＋Ｈ)、９５２.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.９分
実施例２９ − 化合物番号２８の製造
実施例２９を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−Ｂｉｐ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０ − 化合物番号２９の製造
実施例３０を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−１−Ｔｉｑ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.８５分
実施例３１ − 化合物番号３０の製造
実施例３１を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで６０％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２ − 化合物番号３１の製造
実施例３２を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−４−メトキシ−Ｐｈｅ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.２７分
実施例３３ − 化合物番号３２の製造
実施例３３を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−４−フルオロ−Ｐｈｅ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.８５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.５８分
実施例３４ − 化合物番号３３の製造
実施例３４を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−４−クロロ−Ｐｈｅ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５ − 化合物番号３４の製造
実施例３５を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−４−ブロモ−Ｐｈｅ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.９９分
実施例３６ − 化合物番号３５の製造
実施例３６を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−４−トリフルオロメチル−Ｐｈｅ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８２４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.９０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３７ − 化合物番号３６の製造
実施例３７を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−４−メチル−Ｐｈｅ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３８ − 化合物番号３７の製造
実施例３８を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−４−ｔ−ブチル−Ｐｈｅ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝２.００３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３９ − 化合物番号３８の製造
実施例３９を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−３−Ｐｙｒ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質をさらに次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.１３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例４０ − 化合物番号３９の製造
実施例４０を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−４−Ｐｙｒ−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質をさらに次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.５５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.１２１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.６５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例４１ − 化合物番号４０の製造
実施例４１を、中間体樹脂Ｉから出発して、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−３−チエニルアラニン−ＯＨ第一アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８５８.８(Ｍ＋１)、９２９.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例４２ − 化合物番号４１の製造
実施例４２を、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.４５分
実施例４３ − 化合物番号４２の製造
実施例４３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例４４ − 化合物番号４３の製造
実施例４４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１２.９１分
実施例４５ − 化合物番号４４の製造
実施例４５を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.９mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.５４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.６５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例４６ − 化合物番号４５の製造
実施例４６を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.５mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.７１０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.２０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.２０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例４７ − 化合物番号４６の製造
実施例４７を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.４mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.８５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.９５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.７５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例４８ − 化合物番号４７の製造
実施例４８を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.５mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.４８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.９５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.００(Ｍ＋２Ｈ)
実施例４９ − 化合物番号４８の製造
実施例４９を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.７mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.２９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.４５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.５５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０ − 化合物番号４９の製造
実施例５０を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで６０％Ｂを５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.７mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.６２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１ − 化合物番号５０の製造
実施例５１を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.８mgであり、“分析的ＬＣＭＳ条件ＢおよびＤ”によりＬＣＭＳ分析で推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｂ：保持時間＝１.４７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.００(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.９５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５２ − 化合物番号５１の製造
実施例５２を、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.３８分
実施例５３ − 化合物番号５２の製造
実施例５３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.３５(Ｍ＋２Ｈ)、１８８１.８５(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.５０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５４ − 化合物番号５３の製造
実施例５４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５９.８５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６０７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５９.８５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５５ − 化合物番号５４の製造
実施例５５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６９.４５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６９.７５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５６ − 化合物番号５５の製造
実施例５６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５７ − 化合物番号５６の製造
実施例５７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８８２.８５(Ｍ＋１)、９４１.９０(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.９０(Ｍ＋２)
実施例５８ − 化合物番号５７の製造
実施例５８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.６８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８６８.８５(Ｍ＋１)、９３４.８５(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５２６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.６５(Ｍ＋２)
実施例５９ − 化合物番号５８の製造
実施例５９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.４５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８７９.９０(Ｍ＋１)、９４０.５５(Ｍ＋２)
実施例６０ − 化合物番号５９の製造
実施例６０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.６０(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.６５(Ｍ＋２)
実施例６１ − 化合物番号６０の製造
実施例６１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８００分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７５１.８５(Ｍ＋１)、８７６.３５(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６２０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８７６.３５(Ｍ＋２)
実施例６２ − 化合物番号６１の製造
実施例６２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.４０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.３５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６３ − 化合物番号６２の製造
実施例６３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７７９.９０(Ｍ＋１)、８９０.３０(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８９.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６４ − 化合物番号６３の製造
実施例６４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６５ − 化合物番号６４の製造
実施例６５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.７０(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.６０(Ｍ＋２)
実施例６６ − 化合物番号６５の製造
実施例６６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.４４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６０５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.９５(Ｍ＋２)
実施例６７ − 化合物番号６６の製造
実施例６７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.４１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.３５(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.３０(Ｍ＋２)
実施例６８ − 化合物番号６７の製造
実施例６８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８８６.８０(Ｍ＋１)、９４３.９０(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.９０(Ｍ＋２)
実施例６９ − 化合物番号６８の製造
実施例６９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
本物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜５０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４０２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１２.８０(Ｍ＋１)、９０６.８０(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２１６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.８０(Ｍ＋２)
実施例７０ − 化合物番号６９の製造
実施例７０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８７２.８５(Ｍ＋１)、９３６.９０(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.６５(Ｍ＋２)
実施例７１ − 化合物番号７０の製造
実施例７１を、実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに３分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.０１分
実施例７２ − 化合物番号７１の製造
４０mLポリプロピレン固相反応容器にＳｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加し、反応容器をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに置いた。その後、次の方法を連続的に実施した。
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを１０当量で１０時間使用して従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”に従った；
“包括的脱保護方法Ｂ”に従った；
“環化方法Ｃ”に従った。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０ｘ２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：Ａ中２５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥させた。生成物の収量は２８.６mgであり、分かけてＡ中３５％〜９５％Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：８９８.４３１３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：８９８.４２９４
実施例７３ − 化合物番号７２の製造
実施例７３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｅ”。
粗製の物質を次の条件に従い、分取ＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６０.９６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１４.６９６分
実施例７４ − 化合物番号７３の製造
実施例７４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｅ”。
ｐ２１５
粗製の物質を次の条件に従い、分取ＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６１.１(Ｍ＋２)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１４.８２分
実施例７５ − 化合物番号７４の製造
実施例７５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
ｐ２１６
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７８３.２(Ｍ＋１)。
実施例７６ − 化合物番号７の製造
実施例７６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｅ”。
粗製の物質を次の条件に従い、分取ＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７５４.７(Ｍ＋Ｈ)、８７８.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１４.４４分
実施例７７ − 化合物番号７６の製造
実施例７７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７８２.７５(Ｍ＋１)、８９１.６０(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.１０(Ｍ＋２)
実施例７８ − 化合物番号７７の製造
実施例７８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｅ”。Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−ＯＨを１１番目のカップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件に従い、分取ＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１１.１(Ｍ＋Ｈ)、９０６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１６.３８分
実施例７９ − 化合物番号７８の製造
実施例７９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
本物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂで０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７８２.８０(Ｍ＋１)、８９１.８５(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９１.６０(Ｍ＋２)
実施例８０ − 化合物番号７９の製造
実施例８０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｅ”。
粗製の物質を次の条件に従い、分取ＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７５３.８(Ｍ＋Ｈ)、８７７.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１６.１９分
実施例８１ − 化合物番号８０の製造
実施例８１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｅ”。
粗製の物質を次の条件に従い、分取ＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７６９.０(Ｍ＋Ｈ)、８８４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１４.８９分
実施例８２ − 化合物番号８１の製造
実施例８２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｅ”。
粗製の物質を次の条件を用いて分取ＨＰＬＣにより精製した。３０×１００ Ｃ１８カラムに、２０分にわたるモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡを含む１０〜１００％アセトニトリルの水溶液の勾配で４×２mL注入。生成物の収量は４.０mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６１.０(Ｍ＋２)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１４.２４９分
実施例８３ − 化合物番号８２の製造
実施例８３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７８２.７５(Ｍ＋１)、８９１.６５(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９１.７０(Ｍ＋２)
実施例８４ − 化合物番号８３の製造
実施例８４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｅ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。３０×１００ Ｃ１８カラムに、２０分にわたるモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡを含む１０〜１００％アセトニトリルの水溶液の勾配で４×２mL注入。生成物の収量は１.０４mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８５２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１６.０１２分
実施例８５ − 化合物番号８４の製造
実施例８５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｅ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。３０×１００ Ｃ１８カラムに、２０分にわたるモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡを含む１０〜１００％アセトニトリルの水溶液の勾配で４×２mL注入。生成物の収量は１.０１mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１６.４８４分
実施例８６ − 化合物番号８５の製造
実施例８６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７８２.７０(Ｍ＋１)、８９１.８０(Ｍ＋２)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９１.９５(Ｍ＋２)
実施例８７ − 化合物番号８６の製造
実施例８７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｅ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。３０×１００ Ｃ１８カラムに、２０分にわたるモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡを含む１０〜１００％アセトニトリルの水溶液の勾配で４×２mL注入。生成物の収量は１.５３mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８５２.３(Ｍ＋２)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１６.０４４分
実施例８８ − 化合物番号８７の製造
実施例８８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｅ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。３０×１００ Ｃ１８カラムに、２０分にわたるモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡを含む１０〜１００％アセトニトリルの水溶液の勾配で４×２mL注入。生成物の収量は１mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８７７.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１５.５１１分
実施例８９ − 化合物番号８８の製造
化合物番号１のスルホキシドジアステレオマー混合物
実施例８９[化合物番号８８]を、次の方法による実施例２の大環状ペプチドの酸化により製造した。実施例２の大環状ペプチド(１.６mg)の１mLの５０mM ＮＨ４ＨＣＯ４／アセトニトリル(１：１)溶液に、アセトニトリル中１mg／mL溶液のｍ−クロロ過安息香酸(０.９当量)を添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。
粗製の生成物を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｃ１８ Ｌｕｎａ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：Ａ中２０〜７５％Ｂを５５分かけて：流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は０.９１mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.１６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ａ：一部分解したジアステレオマーで保持時間＝９.１９分および９.４１分
実施例９０：化合物番号８９および９０の製造
[化合物番号７１のスルホキシド]
実施例９０の化合物(化合物番号８９および９０)の合成を、次の方法を使用する実施例７１の大環状ペプチドの酸化により実施した。実施例７１のペプチド(１.４mg)の１mLの５０mM ＮＨ４ＨＣＯ４／アセトニトリル(１：１)溶液に、アセトニトリル中１mg／mL溶液のｍ−クロロ過安息香酸(ｍ−ＣＰＢＡ)(０.９当量)を添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。
粗製の生成物を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｃ１８ Ｌｕｎａ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＡｃＣＮ溶液；勾配：２０〜７５％Ｂを５５分かけて：流速：１５mL／分。２個の異性体生成物、異性体Ａ(化合物番号８９)および異性体Ｂ(化合物番号９０)が分離された。それらを含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。
速く溶出する異性体Ａ(化合物番号８９)の収量は０.４９mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｇ：保持時間＝１２.７２分
遅く溶出する異性体Ｂ(化合物番号９０)の収量は０.４９mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｇ：保持時間＝１３.６１分
実施例９２ − 化合物番号９１の製造
実施例９２を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”。Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(Ｏ−２−ＰｈｉＰｒ)−ＯＨをＡｓｐ１４残基のオルトゴナル保護として使用した。最後のＦｍｏｃ除去後、ペプチジル樹脂を、ＤＣＭ／ＴＩＳ／ＴＦＡ(９６：３：１；ｖ：ｖ：ｖ)(４mL)で５分、４回処理することにより固体支持体から開裂した。この工程はまたＡｓｐ１４残基から２−フェニルイソプロピルエステルを除去した。保護ペプチド(７０.４mg)を、１当量のＴ３Ｐ(５０％ＥｔＯＡｃ)および２当量のＤＩＥＡを(１：１)アセトニトリル／ＤＣＭ(２０mL)中で使用して環化した。反応を１８時間進行させた。溶媒を減圧下除去し、得られた固体を(５０：４６：４)ＴＦＡ／ＤＣＭ／ＴＩＳ(４mL)で１.５時間、ｒｔで処理した。反応混合物を減圧下濃縮した。エーテル(２０mL)の添加および０℃で１５分の冷却により固体が生じ、これをエーテルで洗浄し、乾燥して、２７mgの粗製生成物を得た。粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１.７mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１０.１１分
実施例９３ − 化合物番号９２の製造
実施例９３を、１４位にＦｍｏｃ−Ｇｌｕ(Ｏ−２−ＰｈｉＰｒ)−ＯＨを使用した以外、実施例９２の一般的方法からなる方法で製造した。固体支持体からの保護ペプチド遊離後、得られた保護ペプチドのＴ３Ｐ仲介環化およびＴＦＡ仲介側鎖脱保護により、粗製の生成物(２８mg)を得て、これを次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：２５〜７５％Ｂを７５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は６.３mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９７.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：保持時間＝３.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.０８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｈ：保持時間＝１２.０４分
実施例９４ − 化合物番号９３の製造
実施例９４を、さらなるＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨをＮ末端にカップリングさせた以外、実施例９２の製造について記戴した一般的方法に従い製造した。固体支持体から遊離後、得られた保護ペプチドのＴ３Ｐ仲介環化およびＴＦＡ仲介側鎖脱保護により、粗製の生成物(２５mg)を得て、これを次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１.０mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.００分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１１.０７分
実施例９５ − 化合物番号９４の製造
実施例９５を、さらなるＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨをＮ末端にカップリングさせた以外、実施例９３の製造について記戴した一般的方法に従い製造した。固体支持体から遊離後、得られた保護ペプチドのＴ３Ｐ仲介環化およびＴＦＡ仲介側鎖脱保護により、粗製の生成物(２５mg)を得て、これを次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は３.８mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｇ：保持時間＝４.２７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１３.７６分
実施例９６ − 化合物番号９５の製造
実施例９６を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”。Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(Ｏ−２−ＰｈｉＰｒ)−ＯＨをＡｓｐ１３残基のオルトゴナル保護として使用した。最後のＦｍｏｃ除去後、ペプチジル樹脂を、ＤＣＭ／ＴＩＳ／ＴＦＡ(９６：３：１；ｖ：ｖ：ｖ)(５mL)で１分、５回処理することにより固体支持体から開裂した。この工程はまたＡｓｐ１３残基から２−フェニルイソプロピルエステルを除去した。濾液を１.５mLピリジンを含むフラスコに集めた。濾液を水(３×５mL)で抽出した。有機層を乾燥して油状物を得て、これをＭｅＣＮ／水(１：２)から凍結乾燥して、固体生成物(１００mg)を得た。生成物の一部(３４mg、０.０１７mmol)を、(１：９)ＤＭＦ／ＤＣＭ(１７mL)中１当量のＨＡＴＵおよび２当量のＤＩＥＡを使用して環化した。反応を１８時間進行させた。溶媒を減圧下除去し、得られた固体を(９５：５)ＴＦＡ／ＴＩＳ(６mL)で５分、ｒｔで処理した。エーテル(２０mL)の添加により固体が生じ、これをエーテルで洗浄し、乾燥した。粗製の生成物を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｃ１８ Ｌｕｎａ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３０〜９５％Ｂを５０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１.９mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｇ：保持時間＝１３.５４分
実施例９７ − 化合物番号９６の製造
実施例９７を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”。Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ(Ｏ−２−ＰｈｉＰｒ)−ＯＨをＧｌｕ１３残基のオルトゴナル保護として使用した。最後のＦｍｏｃ除去後、ペプチジル樹脂を、ＤＣＭ／ＴＩＳ／ＴＦＡ(９６：３：１；ｖ：ｖ：ｖ)(５mL)で１分、５回処理することにより固体支持体から開裂した。この工程はまたＧｌｕ１３残基から２−フェニルイソプロピルエステルを除去した。濾液を１.５mLピリジンを含むフラスコに集め、水(３×５mL)で抽出した。有機層を蒸発して油状物を得て、これをＭｅＣＮ／水(１：２)から凍結乾燥して、固体生成物(３６mg)。ペプチドをペプチドをＴＦＡ／ＴＩＳ／水(９６：２：２：)を５分使用して脱保護し、エーテルで沈殿させ、エーテルで洗浄し、乾燥した。保護ペプチド(３２mg、０.０１５mmol)をＤＭＦ(３０mL)中１当量のＨＡＴＵおよび２当量のＤＩＥＡを使用して環化した。反応を１８時間進行させた。溶媒を減圧下除去し、残渣を水で沈殿させ、洗浄し、乾燥した。得られた固体(４８：４８：４)ＴＦＡ／ＤＣＭ／ＴＩＳ(３mL)で５分、室温で処理した。エーテル(２０mL)の添加により固体が生じ、これをエーテルで洗浄し、乾燥して、固体生成物を得た。粗製の生成物を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子、６０℃に加熱；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は０.４mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｉ：保持時間＝１２.５０分
実施例９８ − 化合物番号９７の製造
実施例９８を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”。Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(Ｏ−２−ＰｈｉＰｒ)−ＯＨをのオルトゴナル保護として使用したＡｓｐ１３残基。最後のＦｍｏｃ除去後、ペプチジル樹脂を、ＤＣＭ／ＴＩＳ／ＴＦＡ(９６：３：１；ｖ：ｖ：ｖ)(５mL)で１分、５回処理することにより固体支持体から開裂した。この工程はまたＡｓｐ１３残基から２−フェニルイソプロピルエステルを除去した。濾液を１.５mLピリジンを含むフラスコに集めた。濾液を水(３×５mL)で抽出した。有機層を乾燥して油状物を得て、これをＭｅＮ／水(１：２)から凍結乾燥して、固体生成物(９７mg)を得た。生成物の一部(３５mg、０.０１７mmol)を、(１：９)ＤＭＦ／アセトニトリル(１７mL)中で１当量のＨＡＴＵおよび２当量のＤＩＥＡを使用して環化した。１８時間反応を進行させた。溶媒を減圧下除去し、残渣をアセトニトリル(１mL)に再溶解し、水(２mL)で沈殿させた。回収したペプチドをＤＣＭに再溶解し、水(２×５mL)で抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥して、９７mgの保護ペプチドを得た。これを(９５：５)ＴＦＡ／ＴＩＳ(６mL)で５分、ｒｔで処理した。エーテル(２０mL)の添加により固体が生じ、これをエーテルで洗浄し、乾燥した。粗製の生成物を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｃ１８ Ｌｕｎａ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３０〜９５％Ｂを５０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は１.０mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は８２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８７６.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｇ：保持時間＝１４.０１分
実施例９９ − 化合物番号９８の製造
実施例９９を、次の一般的方法からなる実施例６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”。合成をＨ−Ｇｌｙ−２−Ｃｌ−トリチル樹脂(Novabiochem、０.６mmole／ｇ)から開始した。最後のＦｍｏｃ除去後、ペプチジル樹脂を、ＤＣＭ／ＴＩＳ／ＴＦＡ(９６：３：１；ｖ：ｖ：ｖ)(５mL)で１分、５回処理することにより固体支持体から開裂した。濾液を１.５mLピリジンを含むフラスコに集めた。濾液を水(３×５mL)で抽出した。有機層を蒸発して油状物を得て、これをＭｅＣＮ／水(１：２)から凍結乾燥して、固体生成物(２２１mg)。生成物の一部(１０mg、０.００５mmol)を、(１：９)ＤＭＦ／ＤＣＭ(１７mL)中１当量のＨＡＴＵおよび２当量のＤＩＥＡを使用して環化した。１８時間反応を進行させた。溶媒を減圧下除去し、残渣をアセトニトリル(１mL)に再溶解し、水(２mL)で沈殿させた。回収したペプチドをＤＣＭに再溶解し、水(２×５mL)で抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥して、１７mgの保護ペプチド。これを(９５：５)ＴＦＡ／ＴＩＳ(６mL)で５分、室温で処理した。エーテル(２０mL)を添加し、０℃で１０分冷却し、固体を得て、これをエーテルで洗浄し、乾燥した。粗製の生成物を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｃ１８ Ｌｕｎａ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３０〜９５％Ｂを５０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥で乾燥した。生成物の収量は０.８１mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８１９.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｇ：保持時間＝１６.１５分
実施例１００ − 化合物番号９９の製造
実施例１００を、次の一般的方法からなる実施例１９の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、一級アミンＮ末端へのカップリングのための“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二重カップリング方法”；二級アミンＮ末端へのカップリングのための“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”；“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は６.４mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８１７.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝９.２１分
実施例１０１ − 化合物番号１００の製造
実施例１０１を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：１５〜５５％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は６.０mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８３９.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｅ：保持時間＝１０.２２分
実施例１０２ − 化合物番号１０１の製造
実施例１０２を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は６.０mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８３４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝９.５７分
実施例１０３ − 化合物番号１０２の製造
実施例１０３を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は４.７mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.０５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８３４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝１２.０３分
実施例１０４ − 化合物番号１０３の製造
実施例１０４を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は４.９mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８１７.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝９.６１分
実施例１０５ − 化合物番号１０４の製造
実施例１０５を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は８.４mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８３４.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝１０.２０分
実施例１０６ − 化合物番号１０５の製造
実施例１０６を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は７.５mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８４９.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝９.４３分
実施例１０７ − 化合物番号１０６の製造
実施例１０７を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は６.８mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.００分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８４１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝１０.８０分
実施例１０８ − 化合物番号１０７の製造
実施例１０８を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は８.８mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８１０.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝８.７０分
実施例１０９ − 化合物番号１０８の製造
実施例１０９を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は６.３mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８０８.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝８.６５分
実施例１１０ − 化合物番号１０９の製造
実施例１１０を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：３０〜８０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は６.３mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.１８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ７９６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝９.００分
実施例１１１ − 化合物番号１１０の製造
実施例１１１を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は３.４mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８２４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝９.９８分
実施例１１２ − 化合物番号１１１の製造
実施例１１２を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は１３mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８４１.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝１０.４９分
実施例１１３ − 化合物番号１１２の製造
実施例１１３を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は５.４mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８４９.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝９.７２分
実施例１１４ − 化合物番号１１３の製造
実施例１１４を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は２.２mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.０２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８２１.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝１１.３０分
実施例１１５ − 化合物番号１１４の製造
実施例１１５を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は１２.５mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.０６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ７８８.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝１１.８８分
実施例１１６ − 化合物番号１１５の製造
実施例１１６を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜６０％Ｂを４０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は８.４mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８３４.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｆ：保持時間＝１０.０１分
実施例１１７ − 化合物番号１１６の製造
実施例１１７を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｅ”および“環化方法Ｃ”。出発樹脂はＦｍｏｃ−ＰＥＧ１２−Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂(０.０５mmol)であり、これは次の方法に従いＯ−(Ｎ−Ｆｍｏｃ−２−アミノエチル)−Ｏ'−(２−カルボキシエチル)−ウンデカエチレングリコールをＳｉｅｂｅｒアミド樹脂に手動カップリングして製造した。Ｓｅｉｂｅｒアミド樹脂(０.６０mmol、０.８４６ｇ、０.７１mmole／ｇ)をＤＣＭ(８mL)で５分およびＤＭＦ(８mL)で５分洗浄した。樹脂を５％ピペラジンのＤＭＦ溶液(８mL)で５分処理し、メタノール(８mL)で１回およびＤＭＦ(８mL)で６回洗浄した。Ｏ−(Ｎ−Ｆｍｏｃ−２−アミノエチル)−Ｏ'−(２−カルボキシエチル)−ウンデカエチレングリコール(０.７１５ｇ、０.８５１mmol)のＤＭＦ(４mL)に、０.４５Ｍ ＨＣＴＵのＤＭＦ溶液(１.８ml、０.８１０mmol)および２Ｍ ＤＩＥＡのＮＭＰ溶液(０.８５ml、１.７０mmol)を添加した。得られた溶液を撹拌し、樹脂に添加した。１８時間反応を進行させた。樹脂をＤＭＦ(８mL)で３回およびＤＣＭ洗浄(８mL)で３回洗浄した。乾燥樹脂上のＦｍｏｃ決定により、０.２６mmol／ｇの置換を得た。これを、必要な規模に応じて、０.０５mmolまたは０.１mmol当量の出発樹脂の量の決定に使用した。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜８０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は６.２mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １２２６.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｂ：保持時間＝１６.０８分
実施例１１８ − 化合物番号１１７の製造
実施例１１８を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｅ”および“環化方法Ｃ”。出発樹脂は実施例１１７に記戴のとおり製造したＦｍｏｃ−ＰＥＧ１２−Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂(０.０５mmol)であった。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２５〜５０％Ｂを５０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は３.２mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９１.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.２２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １２６０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｂ：保持時間＝１４.７５分
実施例１１９ − 化合物番号１１８の製造
実施例１１９を、次の一般的方法からなる実施例２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：単カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：二重カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｃ”。出発樹脂は実施例１１７に記戴のとおり製造したＦｍｏｃ−ＰＥＧ１２−Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂(０.０５mmol)であった。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、２０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液；勾配：２０〜９０％Ｂを６０分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥により乾燥した。生成物の収量は５.３mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １１９８.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｋ：保持時間＝１４.２２分
カスタムアミノ酸
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(シクロブタンカルボキサミド)プロパン酸
シクロブタンカルボニルクロライド(７２.７mg、０.６１３mmol)およびＮａＯＨ(０.７３５mL、０.７３５mmol)を、撹拌中の(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−アミノプロパン酸(２００mg、０.６１３mmol)のＴＨＦ(１.５mL)およびＮａＯＨ(１Ｎ、０.８mL)溶液に０℃で同時に滴下した。反応混合物をｒｔで１時間撹拌し、その時点でＬＣ−ＭＳは所望の生成物ピークを示した。反応溶液を１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ(６０mL×１)で抽出した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、シリカゲル、１２ｇカラム；流速３０mL／分、１００％ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ)で精製した。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥して、表題化合物を得た(１５６mg、６１％)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４０９.１(Ｍ＋Ｈ)
1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ 7.80 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.67 (br s, 2H), 7.44 - 7.35 (m, 2H), 7.35 - 7.27 (m, 2H), 4.37 - 4.31 (m, 2H), 4.23 (s, 1H), 3.55 - 3.48 (m, 1H), 3.14 (s, 2H), 2.31 - 2.08 (m, 7H)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(シクロペンタンカルボキサミド)プロパン酸
シクロペンタンカルボニルクロライド(８１mg、０.６１３mmol)およびＮａＯＨ(０.７３５mL、０.７３５mmol)を、撹拌中の(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−アミノプロパン酸(２００mg、０.６１３mmol)のＴＨＦ(１.５mL)およびＮａＯＨ(１Ｎ、０.８mL)溶液に０℃で同時に滴下した。反応混合物をｒｔで１時間撹拌し、その時点でＬＣ−ＭＳは所望の生成物ピークを示した。反応溶液を１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ(６０mL×１)で抽出した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、シリカゲル、１２ｇカラム；流速３０mL／分、１００％ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ)で精製した。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥して、表題化合物を得た(１４２mg、５４％)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４２３.１(Ｍ＋Ｈ)
1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ 7.80 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.67 (t, J=6.4 Hz, 2H), 7.44 - 7.37 (m, 2H), 7.35 - 7.27 (m, 2H), 4.38 - 4.31 (m, 2H), 4.27 - 4.19 (m, 1H), 3.69 - 3.47 (m, 2H), 2.61 (s, 1H), 1.88 - 1.53 (m, 9H)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−ベンズアミドプロパン酸
塩化ベンゾイル(８６mg、０.６１３mmol)およびＮａＯＨ(０.７３５mL、０.７３５mmol)を、撹拌中の(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−アミノプロパン酸(２００mg、０.６１３mmol)のＴＨＦ(１.５mL)およびＮａＯＨ(１Ｎ、０.８mL)溶液に０℃で同時に滴下した。反応混合物をｒｔで１時間撹拌し、その時点でＬＣ−ＭＳは所望の生成物ピークを示した。反応溶液を１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ(６０mL×１)で抽出した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、シリカゲル、１２ｇカラム；流速３０mL／分、１００％ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ)で精製した。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥して、表題化合物を得た(１４９mg、５２％)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４３１.０(Ｍ＋Ｈ)
1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ 7.84 - 7.75 (m, 4H), 7.64 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.52 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 7.37 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.31 - 7.22 (m, 2H), 4.54 - 4.47 (m, 1H), 4.33 (dd, J=7.0, 3.3 Hz, 2H), 4.24 - 4.17 (m, 1H), 3.89 - 3.73 (m, 2H)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(シクロブタンカルボキサミド)ブタン酸
シクロブタンカルボニルクロライド(６９.７mg、０.５８８mmol)およびＮａＯＨ(０.７０５mL、０.７０５mmol)を、撹拌中の(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アミノブタン酸(２００mg、０.５８８mmol)のＴＨＦ(１.５mL)およびＮａＯＨ(１Ｎ、０.７mL)溶液に、０℃で同時に滴下した。反応混合物をｒｔで１時間撹拌し、その時点でＬＣ−ＭＳは所望の生成物ピークを示した。反応溶液を１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ(６０mL×１)で抽出した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、シリカゲル、１２ｇカラム；流速３０mL／分、１００％ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ)で精製した。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥して、表題化合物を得た(９２.６mg、３７％)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４２３.１(Ｍ＋Ｈ)
1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ 7.80 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.72 - 7.65 (m, 2H), 7.43 - 7.36 (m, 2H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 4.41 - 4.32 (m, 2H), 4.28 - 4.15 (m, 2H), 3.20 (d, J=7.0 Hz, 1H), 3.08 (s, 1H), 2.31 - 2.04 (m, 6H), 1.97 (d, J=9.9 Hz, 1H), 1.84 (d, J=7.3 Hz, 2H)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(シクロペンタンカルボキサミド)ブタン酸
シクロペンタンカルボニルクロライド(７８mg、０.５８８mmol)およびＮａＯＨ(０.７０５mL、０.７０５mmol)を、撹拌中の(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アミノブタン酸(２００mg、０.５８８mmol)のＴＨＦ(１.５mL)およびＮａＯＨ(１Ｎ、０.７mL)溶液に、０℃で同時に滴下した。反応混合物をｒｔで１時間撹拌し、その時点でＬＣ−ＭＳは所望の生成物ピークを示した。反応溶液を１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ(６０mL×１)で抽出した。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、シリカゲル、１２ｇカラム；流速３０mL／分、１００％ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ)で精製した。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥して、表題化合物を得た(８４.１mg、３３％)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４３７.１(Ｍ＋Ｈ)
1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ 7.79 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.72 - 7.64 (m, 2H), 7.42 - 7.35 (m, 2H), 7.34 - 7.26 (m, 2H), 4.41 - 4.30 (m, 2H), 4.26 - 4.14 (m, 2H), 3.24 - 3.13 (m, 1H), 2.59 (t, J=7.8 Hz, 1H), 2.05 (s, 1H), 1.91 - 1.62 (m, 8H), 1.64 - 1.50 (m, 2H)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(シクロヘキサンカルボキサミド)ブタン酸
シクロヘキサンカルボニルクロライド(８６mg、０.５８８mmol)およびＮａＯＨ(０.７０５mL、０.７０５mmol)を、撹拌中の(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アミノブタン酸(２００mg、０.５８８mmol)のＴＨＦ(１.５mL)およびＮａＯＨ(１Ｎ、０.７mL)溶液に、０℃で同時に滴下した。反応混合物をｒｔで１時間撹拌し、その時点でＬＣ−ＭＳは所望の生成物ピークを示した。反応溶液を１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ(６０mL×１)で抽出した。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、シリカゲル、１２ｇカラム；流速３０mL／分、１００％ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ)で精製した。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥して、表題化合物を得た(２０１mg、７０％)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４５１.２(Ｍ＋Ｈ)
1H NMR (400MHz, メタノール-d4):δ 7.79 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.73 - 7.65 (m, 2H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.34 - 7.26 (m, 2H), 4.42 - 4.30 (m, 2H), 4.27 - 4.15 (m, 2H), 3.18 (d, J=7.3 Hz, 1H), 2.15 (s, 1H), 2.10 - 2.01 (m, 1H), 1.89 - 1.72 (m, 5H), 1.68 (d, J=10.3 Hz, 1H), 1.49 - 1.17 (m, 6H)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−ベンズアミドブタン酸
塩化ベンゾイル(８３mg、０.５８８mmol)およびＮａＯＨ(０.７０５mL、０.７０５mmol)を、撹拌中の(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アミノブタン酸(２００mg、０.５８８mmol)のＴＨＦ(１.５mL)およびＮａＯＨ(１Ｎ、０.７mL)溶液に、０℃で同時に滴下した。反応混合物をｒｔで１時間撹拌し、その時点でＬＣ−ＭＳは所望の生成物ピークを示した。反応溶液を１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ(６０mL×１)で抽出した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、シリカゲル、１２ｇカラム；流速３０mL／分、１００％ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ)で精製した。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥して、表題化合物を得た(１６０mg、５７％)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４４５.１(Ｍ＋Ｈ)
1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ 7.82 (t, J=8.6 Hz, 4H), 7.74 - 7.67 (m, 2H), 7.56 - 7.50 (m, 1H), 7.49 - 7.42 (m, 2H), 7.42 - 7.36 (m, 2H), 7.35 - 7.26 (m, 2H), 4.39 (dd, J=7.0, 2.0 Hz, 2H), 4.32 - 4.21 (m, 2H), 3.62 - 3.52 (m, 1H), 3.45 - 3.35 (m, 1H), 2.20 (d, J=5.1 Hz, 1H), 1.99 (d, J=8.1 Hz, 1H)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(フラン−２−カルボキサミド)ブタン酸
フラン−２−カルボニルクロライド(７７mg、０.５８８mmol)およびＮａＯＨ(０.７０５mL、０.７０５mmol)を、撹拌中の(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−アミノブタン酸(２００mg、０.５８８mmol)のＴＨＦ(１.５mL)およびＮａＯＨ(１Ｎ、０.７mL)溶液に、０℃で同時に滴下した。反応混合物をｒｔで１時間撹拌し、その時点でＬＣ−ＭＳは所望の生成物ピークを示した。反応溶液を１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ(６０mL×１)で抽出した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、シリカゲル、１２ｇカラム；流速３０mL／分、１００％ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ)で精製した。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥して、表題化合物を得た(１０７mg、４１％)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４３５.０(Ｍ＋Ｈ)
1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ 7.80 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.73 - 7.66 (m, 2H), 7.63 (s, 1H), 7.44 - 7.35 (m, 2H), 7.34 - 7.26 (m, 2H), 7.09 (d, J=3.3 Hz, 1H), 6.56 (dd, J=3.4, 1.7 Hz, 1H), 4.41 - 4.35 (m, 2H), 4.28 - 4.19 (m, 2H), 3.51 (dd, J=13.8, 7.4 Hz, 1H), 3.43 - 3.34 (m, 1H), 2.24 - 2.12 (m, 1H), 1.94 (d, J=7.3 Hz, 1H)
実施例１００１〜３０００のための中間体樹脂
中間体樹脂Ａの製造
１２５mL反応容器にＳｉｅｂｅｒ樹脂(１４１０mg、１mmol)を入れ、容器をＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｒｇ(ＰＢＦ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨを２.５当量で３０分使用して用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨを用いて従った。
得られた樹脂を１００mLポリプロピレンチューブに移し、ＤＣＭ(４０mL×３)で洗浄した。最後に、樹脂を減圧下に乾燥させ、そのまま合成用中間体として使用した。
マイクロ開裂Ａに従った。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８９分、ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １２７１.２(Ｍ＋Ｈ)
中間体樹脂Ｂの製造
１２５mL反応容器にＳｉｅｂｅｒ樹脂(１４１０mg、１mmol)を入れ、容器をＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｒｇ(ＰＢＦ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｓｎ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った。
得られた樹脂をフリットを備えた１００mLポリプロピレンチューブに移し、ＤＣＭ(４０mL×３)で洗浄した。最後に、樹脂を減圧下に乾燥させ、そのまま合成用中間体として使用した。
マイクロ開裂Ａに従った。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.０分、ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.６ (Ｍ＋２Ｈ＋１ＣＯ２)。
中間体樹脂Ｃの製造
１２５mL反応容器に、Ｒｉｎｋアミド樹脂(１６４０mg、１mmol)を添加し、容器をＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
得られた樹脂をフリットを備えた１００mLポリプロピレンチューブに移し、ＤＣＭ(４０mL×３)で洗浄した。最後に、樹脂を減圧下に乾燥させ、そのまま合成用中間体として使用した。
マイクロ開裂Ａに従った。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８１分、ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ６７２.２(Ｍ＋２Ｈ)
中間体樹脂Ｄの製造
１２５mL反応容器に、Ｒｉｎｋ樹脂(１６４０mg、１mmol)を添加し、容器をＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｏｒｎ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った。
得られた樹脂をフリットを備えた１００mLポリプロピレンチューブに移し、ＤＣＭ(４０mL×３)で洗浄した。最後に、樹脂を減圧下に乾燥させ、そのまま合成用中間体として使用した。
マイクロ開裂Ａに従った。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７７分、ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ７０８.２ (Ｍ＋２Ｈ＋１ＣＯ２)。
中間体樹脂Ｅの製造
４５mLポリプロピレン固相反応容器に、Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加し、反応容器をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”に従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｏｒｎ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−ＮＭｅＮｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−ＭｅＮｌｅＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｓｎ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”に従った。
得られた樹脂を、フリットを備えた６mL Ｂｉｏ−Ｒａｄチューブに移し、ＤＣＭ(４mL×３)で洗浄した。最後に、樹脂を減圧下に乾燥させ、そのまま合成用中間体として使用した。粗製の物質を分析せずに合成用中間体として使用した。
中間体樹脂Ｆの製造
１２５mL反応容器に、Ｒｉｎｋ樹脂(１６４０mg、１mmol)を入れ、容器をＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｒｇ(ＰＢＦ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｓｎ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った。
得られた樹脂をフリットを備えた１００mLポリプロピレンチューブに移し、ＤＣＭ(４０mL×３)で洗浄した。最後に、樹脂を減圧下に乾燥させ、そのまま合成用中間体として使用した。
マイクロ開裂Ａに従った。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８３分、ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４５.７(Ｍ＋２Ｈ)
中間体樹脂Ｇの製造
４５mLポリプロピレン固相反応容器に、Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加し、反応容器をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”に従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｏｒｎ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”にＦｍｏｃ−ＮＭｅＮｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”にＦｍｏｃ−ＭｅＮｌｅＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”に従った。
得られた樹脂を、フリットを備えたＢｉｏ−Ｒａｄチューブに移し、ＤＣＭ(４mL×３)で洗浄した。
マイクロ開裂Ａを実施した。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９１分、ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８１０.５(Ｍ＋Ｈ)
中間体樹脂Ｈの製造
１２５mL反応容器に、Ｒｉｎｋ樹脂(１６４０mg、１mmol)を添加し、容器をＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザーに装着した。その後、次の方法を連続的に実施した。
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｏｒｎ(Ａｌｌｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｄａｂ(Ａｌｌｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った。
得られた樹脂をフリットを備えた１００mLポリプロピレンチューブに移し、ＤＣＭ(４０mL×３)で洗浄した。最後に、樹脂を減圧下に乾燥させ、そのまま合成用中間体として使用した。
実施例１００１の製造
実施例１００１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８４１.２０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８４１.２０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１００２の製造
実施例１００２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は８９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.５０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.６０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１００３の製造
実施例１００３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１００４の製造
実施例１００４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１００５の製造
実施例１００５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.８５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１００６の製造
実施例１００６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.９０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.２５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１００７の製造
実施例１００７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.１０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４５.１５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１００９の製造
実施例１００９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.４０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.２０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１０の製造
実施例１０１０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.２５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.６０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１１の製造
実施例１０１１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(シクロブタンカルボキサミド)プロパン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.６５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.３５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１２の製造
実施例１０１２を、以外、の製造について記戴した一般的方法に従い製造した実施例１１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(シクロペンタンカルボキサミド)プロパン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.３０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.２０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１３の製造
実施例１０１３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−ベンズアミドプロパン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜８０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.７５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.３５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１４の製造
実施例１０１４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：０〜５０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.３０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.３０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１５の製造
実施例１０１５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで７０％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.４５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.４０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１６の製造
実施例１０１６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.２０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.１５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１７の製造
実施例１０１７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(シクロヘキサンカルボキサミド)プロパン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１８の製造
実施例１０１８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０１９の製造
実施例１０１９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(シクロブタンカルボキサミド)ブタン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８２.５０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８２.２５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０２０の製造
実施例１０２０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(シクロペンタンカルボキサミド)ブタン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は８９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８９.３０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８９.４５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０２１の製造
実施例１０２１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(シクロヘキサンカルボキサミド)ブタン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９６.７５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９６.７５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０２２の製造
実施例１０２２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−ベンズアミドブタン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９３.３５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９３.４５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０２３の製造
実施例１０２３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(フラン−２−カルボキサミド)ブタン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８８.７５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８８.７５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０２４の製造
実施例１０２４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０２５の製造
実施例１０２５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０２６の製造
実施例１０２６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０２８の製造
実施例１０２８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４５.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０２９の製造
実施例１０２９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３０の製造
実施例１０３０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３１の製造
実施例１０３１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜５０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３２の製造
実施例１０３２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５３.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３３の製造
実施例１０３３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(シクロブタンカルボキサミド)プロパン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを２５分かけて、次いで５０％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３４の製造
実施例１０３４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−４−(シクロブタンカルボキサミド)ブタン酸を“カスタムアミノ酸カップリング方法”で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３５の製造
実施例１０３５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３６の製造
実施例１０３６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３７の製造
実施例１０３７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３８の製造
実施例１０３８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０３９の製造
実施例１０３９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０４０の製造
実施例１０４０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０４１の製造
実施例１０４１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０４２の製造
実施例１０４２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０４３の製造
実施例１０４３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ａｘｉａ Ｃ１８、３０×２５０；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％ＴＦＡ；勾配：１０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５３.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｉ：保持時間＝１４.９８分
実施例１０４４の製造
実施例１０４４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０４５の製造
実施例１０４５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで６０％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０４６の製造
実施例１０４６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０４７の製造
実施例１０４７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ａｘｉａ Ｃ１８、３０×２５０；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６７.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｉ：保持時間＝１５.５８分
実施例１０４８の製造
実施例１０４８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７４.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０４９の製造
実施例１０４９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで６０％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５０の製造
実施例１０５０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで６０％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５１の製造
実施例１０５１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.５mg であり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５２の製造
実施例１０５２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる２分取ＨＰＬＣ注入により精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ３０×１００；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：０〜１００％Ｂを２０分、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物を最少量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１.１mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８分、ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.９(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｇ：保持時間＝７.８分
分析的ＨＰＬＣ条件Ｈ：保持時間＝９.３５分
実施例１０５３の製造
実施例１０５３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる２分取ＨＰＬＣ注入により精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ３０×１００；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：０〜１００％Ｂを２０分、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物を最少量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は０.５mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１２.７４分
実施例１０５４の製造
実施例１０５４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる２分取ＨＰＬＣ注入により精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ３０×１００；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：０〜１００％Ｂを２０分、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物を最少量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は４.７mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.４８分
実施例１０５５の製造
実施例１０５５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる２分取ＨＰＬＣ注入により精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ３０×１００；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：０〜１００％Ｂを２０分、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物を最少量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１.６mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.５４分
実施例１０５６の製造
実施例１０５６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる２分取ＨＰＬＣ注入により精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ３０×１００；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：０〜１００％Ｂを２０分、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物を最少量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は３.６mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１２.３３分
実施例１０５７の製造
実施例１０５７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる２分取ＨＰＬＣ注入により精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ３０×１００；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：０〜１００％Ｂを２０分、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物を最少量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は８.７mgであり、ＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１１.７６分
実施例１０５８の製造
実施例１０５８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５９の製造
実施例１０５９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０６０の製造
実施例１０６０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０６１の製造
実施例１０６１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０６２の製造
実施例１０６２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０６３の製造
実施例１０６３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０６４の製造
実施例１０６４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０６５の製造
実施例１０６５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０６６の製造
実施例１０６６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：０〜１００％Ｂを３０分かけて；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.９mgであり、ＬＣ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.４分
実施例１０６７の製造
実施例１０６７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：０〜１００％Ｂを３０分かけて；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.６mgであり、ＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１４.９２分
実施例１０６８の製造
実施例１０６８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる分取ＬＣで精製した。カラム；ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分、２回２ml注入。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.３mgであり、ＬＣにより分析条件Ｊを使用して推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１２.９９分
実施例１０６９の製造
実施例１０６９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる分取ＬＣで精製した。カラム；ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１０００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分、２回２ml注入。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.７mgであり、３種のＬＣ分析法を使用して推定される純度は９５.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.１３分
分析的ＨＰＬＣ条件Ｇ：保持時間＝９.１４分
分析的ＨＰＬＣ条件Ｈ：保持時間＝１０.７６分
実施例１０７０の製造
実施例１０７０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる分取ＬＣで精製した。カラム；ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分、２回２ml注入。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６mgであり、ＬＣにより推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.０分
実施例１０７１の製造
実施例１０７１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を使用して分取ＬＣで精製した。：カラムＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm、５μm粒子；０〜１００％アセトニトリルの水溶液とモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡ、３０分かけて。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.５mgであり、ＬＣにより推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１４.８３分
実施例１０７２の製造
実施例１０７２を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。
粗製の物質を、次の条件を用いる分取ＬＣで精製した。カラムＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm、５μm粒子；０〜１００％アセトニトリルの水溶液とモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡ、３０分かけて。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.３mgであり、ＬＣにより推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１１.３６分
実施例１０７３の製造
実施例１０７３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる分取ＬＣで精製した。カラムＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm、５μm粒子；０〜１００％アセトニトリルの水溶液とモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡ、３０分かけて。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３mgであり、ＬＣにより推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１１.１５分
実施例１０７４の製造
実施例１０７４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる分取ＬＣで精製した。カラムＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm、５μm粒子；０〜１００％アセトニトリルの水溶液とモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡ、３０分かけて。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.８mgであり、ＬＣにより推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.３４分
実施例１０７５の製造
実施例１０７５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を、次の条件を用いる分取ＬＣで精製した。カラムＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ Ｃ１８、３０×１００mm、５μm粒子；０〜１００％アセトニトリルの水溶液とモディファイヤーとしての０.１％ＴＦＡ、３０分かけて。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.８mgであり、ＬＣにより推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝０.８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＨＰＬＣ条件Ｊ：保持時間＝１３.３４分
実施例１０７６の製造
実施例１０７６を、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏ−ｃｌトリチル樹脂上、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０７７の製造
実施例１０７７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０７８の製造
実施例１０７８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は８９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８０の製造
実施例１０８０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,４−ジメトキシフェニル)プロパン酸を８番目のアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８１の製造
実施例１０８１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８２の製造
実施例１０８２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８３の製造
実施例１０８３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｒ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−メチル−３−(トリチルチオ)ブタン酸を二番目のアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.９１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８４の製造
実施例１０８４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８５の製造
実施例１０８５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−メトキシフェニル)プロパン酸を８番目のアミノ酸カップリング工程において使用する。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８６の製造
実施例１０８６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−メチルフェニル)プロパン酸を８番目のアミノ酸カップリング工程において使用する。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８７の製造
実施例１０８７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８８の製造
実施例１０８８を、中間体樹脂Ａから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０８９の製造
実施例１０８９を、中間体樹脂Ａから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９０の製造
実施例１０９０を、中間体樹脂Ａから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９１の製造
実施例１０９１を、中間体樹脂Ａから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで６０％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９２の製造
実施例１０９２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９３の製造
実施例１０９３を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−スルファモイルフェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９４の製造
実施例１０９４を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−４−イル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９５の製造
実施例１０９５を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)フェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９６の製造
実施例１０９６を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(チアゾール−４−イル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９７の製造
実施例１０９７を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(ｍ−トリル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９８の製造
実施例１０９８を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−メトキシフェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０９９の製造
実施例１０９９を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(フラン−２−イル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１００の製造
実施例１１００を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−(メチルスルホンアミド)フェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１０１の製造
実施例１１０１を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−クロロフェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１０２の製造
実施例１１０２を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−クロロフェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１０３の製造
実施例１１０３を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,４−ジクロロフェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１０４の製造
実施例１１０４を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,４−ジフルオロフェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４５.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４５.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１０５の製造
実施例１１０５を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,４−ジメトキシフェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１０６の製造
実施例１１０６を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(ｏ−トリル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１０７の製造
実施例１１０７を、“手動カップリング方法Ａ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”を使用して、中間体樹脂Ｂから出発して製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−(トリフルオロメチル)フェニル)プロパン酸をアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１０８の製造
実施例１１０８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−ＯＨを第四のアミノ酸カップリング工程において使用し、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−５−フェニルペンタン酸を第五のアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mm 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１１０の製造
実施例１１１０を、次のものからなる中間体樹脂Ａから出発して製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−メチルプロパン酸を、中間体樹脂Ａへの最初のカップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１１２の製造
実施例１１１２を、次のものからなる中間体樹脂Ａから出発して製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４,４−ジフルオロピロリジン−２−カルボン酸を、第四のカップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１１３の製造
実施例１１１３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.４(Ｍ＋２Ｈ)。
実施例１１１４の製造
実施例１１１４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１１５の製造
実施例１１１５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１１６の製造
実施例１１１６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１１７の製造
実施例１１１７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１１８の製造
実施例１１１８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３８.４５５３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３８.４５２９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１１９の製造
実施例１１１９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２０の製造
実施例１１２０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６７.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６８.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２１の製造
実施例１１２１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２２の製造
実施例１１２２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２３の製造
実施例１１２３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２４の製造
実施例１１２４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝２.０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２５の製造
実施例１１２５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７４.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２６の製造
実施例１１２６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２７の製造
実施例１１２７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２８の製造
実施例１１２８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１２９の製造
実施例１１２９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３０の製造
実施例１１３０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−(Ｄ／Ｌ)−Ｔｒｐ(Ｍｅ)−ＯＨをアミノ酸カップリング工程における第六アミノ酸として使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３１の製造
実施例１１３１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３２の製造
実施例１１３２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３３の製造
実施例１１３３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６９.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３４の製造
実施例１１３４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いて分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３５の製造
実施例１１３５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３６の製造
実施例１１３６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３７の製造
実施例１１３７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３８の製造
実施例１１３８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８８.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８８.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１３９の製造
実施例１１３９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４０の製造
実施例１１４０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３０.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４１の製造
実施例１１４１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４２の製造
実施例１１４２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに７分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４３の製造
実施例１１４３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０９.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４４の製造
実施例１１４４を、中間体樹脂Ｇから出発して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を、中間体樹脂Ｇへの最初のカップリングで使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４５の製造
実施例１１４５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０９.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４６の製造
実施例１１４６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｓｈｉｅｌｄ ｒｐ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５５％Ｂを２５分で、次いで５５％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４７の製造
実施例１１４７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４８の製造
実施例１１４８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜７０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１４９の製造
実施例１１４９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.０(Ｍ＋２Ｈ)。
実施例１１５０の製造
実施例１１５０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４７.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１５１の製造
実施例１１５１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１５２の製造
実施例１１５２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２８.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１５３の製造
実施例１１５３を、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏ−クロロトリチル樹脂から出発して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｅ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１５４の製造
実施例１１５４を、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏ−クロロトリチル樹脂から出発して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｅ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１３.９５６０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１３.９５２９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１５５の製造
実施例１１５５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１５６の製造
実施例１１５６を、実施例１１４０(２９mg、０.０１６mmolをＤＭＦ(２mL)およびＤＩＥＡ(６.９３μl、０.０４０mmol)中のＨＡＴＵ(７.２４mg、０.０１９mmol)の予め製造した溶液で処理することにより製造した。ＲＴで一夜撹拌した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１５７の製造
実施例１１５７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１５８の製造
実施例１１５８を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９５.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１５９の製造
実施例１１５９を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６０の製造
実施例１１６０を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６１の製造
実施例１１６１を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６２の製造
実施例１１６２を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６３の製造
実施例１１６３を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６４の製造
実施例１１６４を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６５の製造
実施例１１６５を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｓｈｉｅｌｄ ＲＰ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６６の製造
実施例１１６６を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｓｈｉｅｌｄ ＲＰ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６７の製造
実施例１１６７を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６８の製造
実施例１１６８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１６９の製造
実施例１１６９を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｓｈｉｅｌｄ ＲＰ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７０の製造
実施例１１７０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８８.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７１の製造
実施例１１７１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９５.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７２の製造
実施例１１７２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６７.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６７.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７３の製造
実施例１１７３を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４０.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７４の製造
実施例１１７４を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３７.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５９.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７５の製造
実施例１１７５を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７６の製造
実施例１１７６を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３３.４６１４(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３３.４５９６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７７の製造
実施例１１７７を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７８の製造
実施例１１７８を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１７９の製造
実施例１１７９を、Ｒｉｎｋ樹脂を使用して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｄ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６１％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８０の製造
実施例１１８０を、中間体樹脂Ｃから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８１の製造
実施例１１８１を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３０.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.０(Ｍ＋２Ｈ)。
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３１.４２３６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３１.４２１２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８２の製造
実施例１１８２を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.５(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３１.９３９５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３１.９３６９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８３の製造
実施例１１８３を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３２.４３１５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３２.４２８４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８４の製造
実施例１１８４を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２５.４２３６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２５.４２０８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８５の製造
実施例１１８５を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３１.９３９５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３１.９３７１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８６の製造
実施例１１８６を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２４.９３１６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２４.９２８６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８７の製造
実施例１１８７を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２９.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.２７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８８の製造
実施例１１８８を、中間体樹脂Ｅから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。(２Ｓ,４Ｓ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)ピロリジン−２−カルボン酸を、中間体樹脂Ｅへの最初のアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：０〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２７.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.２１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.１８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４７.９７４７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４７.９７０６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１８９の製造
実施例１１８９を、中間体樹脂Ｂから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｕ(ｔＢｕ)−ＯＨを、中間体樹脂Ｂへの最初のアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.６(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６３.４７７６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６３.４７４９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９０の製造
実施例１１９０を、中間体樹脂Ｆから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｓｐ(ｔＢｕ)−ＯＨを、中間体樹脂Ｆへの最初のアミノ酸カップリング工程において使用した
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７８.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９７７.９５８２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９７７.９５６１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９１の製造
実施例１１９１を、中間体樹脂Ｆから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｕ(ｔＢｕ)−ＯＨを、中間体樹脂Ｆへの最初のアミノ酸カップリング工程において使用した
ｐ４７４
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８５.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８５.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９８４.９６６０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９８４.９６３１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９２の製造
実施例１１９２を、中間体樹脂Ｅから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)ピロリジン−２−カルボン酸を、中間体樹脂Ｅへの最初のアミノ酸カップリング工程において使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：０〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２９.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.１４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.１９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４７.９７４７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４７.９７１０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９３の製造
実施例１１９３を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：０〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３８.４３１５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３８.４２８３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９４の製造
実施例１１９４を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２３.９６０２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２３.９５６７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９５の製造
実施例１１９５を、中間体樹脂Ｄから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３１.４４７５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３１.４４４３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９６の製造
実施例１１９６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２２〜７２％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９７の製造
実施例１１９７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ｃ：最終洗浄方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２２〜７２％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９８の製造
実施例１１９８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１１９９の製造
実施例１１９９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８７.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８７.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２００の製造
実施例１２００を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０１の製造
実施例１２０１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０２の製造
実施例１２０２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０３の製造
実施例１２０３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９２.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９１.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０４の製造
実施例１２０４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：二級アミンカップリング方法Ｂ”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ｂ”、“包括的脱保護方法Ｃ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５−７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０５の製造
実施例１２０５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０６の製造
実施例１２０６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０７の製造
実施例１２０７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０８の製造
実施例１２０８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０９の製造
実施例１２０９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１０の製造
実施例１２１０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１１の製造
実施例１２１１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１２の製造
実施例１２１２を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１３の製造
実施例１２１３を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１４の製造
実施例１２１４を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１５の製造
実施例１２１５を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心性蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１６の製造
実施例１２１６を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１７の製造
実施例１２１７を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７７.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１８の製造
実施例１２１８を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜５５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６９.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６９.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２１９の製造
実施例１２１９を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２０の製造
実施例１２２０を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：５〜５０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.２１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２１の製造
実施例１２２１を、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：０〜５０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：０〜４５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝０.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝０.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２２の製造
実施例１２２２を、中間体樹脂Ｃから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.０(Ｍ＋２Ｈ)。
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１７.４０８０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１７.４０４２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２３の製造
実施例１２２３を、中間体樹脂Ｃから出発して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１７.９２３８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１７.９２０７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２４の製造
実施例１２２４を、中間体樹脂Ｃから出発して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.５(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１１.４０８０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１１.４０５２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２５の製造
実施例１２２５を、中間体樹脂Ｃから出発して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１７.４３１８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１７.４２９０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２６の製造
実施例１２２６を、中間体樹脂Ｃから出発して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１０.９１６０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１０.９１２８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２７の製造
実施例１２２７を、中間体樹脂Ｆから出発して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７０.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６９.９６０７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６９.９５９２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２８の製造
実施例１２２８を、中間体樹脂Ｃから、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.６(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２３.９２３８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２３.９２４２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２２９の製造
実施例１２２９を、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−クロルトリチル樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｅ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２３０の製造
実施例１２３０を、中間体樹脂Ｈから出発して、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １０４１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２３１の製造
実施例１２３１を、Ｒｉｎｋ樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８６.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８６.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２３２の製造
実施例１２３２を、Ｒｉｎｋ樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２３３の製造
実施例１２３３を、Ｒｉｎｋ樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２３４の製造
実施例１２３４を、Ｒｉｎｋ樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜１００％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.０(Ｍ＋２Ｈ)。
実施例１２３５の製造
実施例１２３５を、Ｒｉｎｋ樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２３６の製造
実施例１２３６を、Ｒｉｎｋ樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は８２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２３７の製造
実施例１２３７を、Ｒｉｎｋ樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７７.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７７.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２３８の製造
実施例１２３８を、Ｇｌｙ−クロルトリチル樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｅ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は８８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２０.９６３８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２０.９６２８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２３９の製造
実施例１２３９を、Ｒｉｎｋ樹脂上で、次の一般的方法からなる実施例１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：樹脂膨潤方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：標準的カップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：二級アミンカップリング方法”、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ｂ：最終キャッピング方法”、“包括的脱保護方法Ｆ”および“環化方法Ｄ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分で、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８５.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：８８５.４２７０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：８８５.４２６９(Ｍ＋２Ｈ)
分析データ：
マススペクトロメトリー：“ＥＳＩ−ＭＳ(＋)”は、陽イオンモードで実施するエレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＭＳ(−)は、陰イオンモードで実施するエレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)”は、陽イオンモードで実施する高解像度エレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(−)”は、陰イオンモードで実施する高解像度エレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す。検出した質量を、“ｍ／ｚ”単位指定に従い示す。１０００より大きい正確な質量の化合物は、二重荷電または三重荷電イオンとしてしばしば検出された。
ＬＣＭＳ条件Ａ：
カラム：ＢＥＨ Ｃ１８、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；温度：５０℃；勾配：２％Ｂ〜９８％Ｂを２分で、次いで９８％Ｂに０.５分維持；流速：０.８mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
ＬＣＭＳ条件Ｃ：
カラム：ＢＥＨ Ｃ１８、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：水と０.２％ギ酸および０.０１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.２％ギ酸および０.０１％ＴＦＡ；温度：５０℃；勾配：２％Ｂ〜８０％Ｂを２分で、８０％Ｂ〜９８％Ｂを０.１分で、次いで９８％Ｂに０.５分維持；流速：０.８mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
ＬＣＭＳ条件Ｄ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；温度：５０℃；勾配：０〜１００％Ｂを３分で、次いで０.７１００％Ｂに５分維持；流速：１.１１mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
ＬＣＭＳ条件Ｅ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；温度：５０℃；勾配：０〜１００％Ｂを３分で、次いで１００％Ｂに０.７５分維持；流速：１.１１mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
ＬＣＭＳ条件Ｆ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、２.１×５０mm；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；温度：３５℃；勾配：０〜１００％Ｂを４分で、次いで１００％Ｂに１分維持；流速：４mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
ＨＰＬＣ条件Ｂ：
カラム：ＹＭＣ Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＡＱ ３μm １５０ｘ４.６mm 移動相Ａ：水と０.１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.１％ＴＦＡ；温度：４０℃；勾配：１０％Ｂ〜１００％Ｂを１０〜４０分で；流速：１mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
一般的方法：
Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：
全ての操作をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、底フリットを備えた１０mLまたは４５mLポリプロピレンチューブで行った。チューブをチューブの底部と上部の両方からＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに接続した。ＤＭＦおよびＤＣＭをチューブの上部から添加でき、これはチューブの底の側面から等しく洗い落とす。残りの反応材をチューブの下部から添加し、フリットを通して上げて、樹脂と接触させる。全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的撹拌”は底フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味し、該パルスは約５秒続き、３０秒毎に生じる。アミノ酸溶液は、一般に製造後３週間を超えて使用しなかった。ＨＡＴＵ溶液は製造後５日以内に使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで、“３−イルオキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用した樹脂はＳｉｅｂｅｒリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１mmol／ｇ荷重である。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は、約１４０mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、下に“樹脂膨潤方法”として記戴する樹脂膨潤から開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“単カップリング方法”を使用した。二級アミンＮ末端へのカップリングは下記“二級アミンカップリング方法”を使用した。クロロアセチル基のペプチドのＮ末端へのカップリングは下の“クロロアセチルクロライドカップリング方法”または“クロロ酢酸カップリング方法”により詳述する。
樹脂膨潤方法：
４０mLポリプロピレン固相反応容器にメリフィールド：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加した。樹脂を、次のとおり３回洗浄した。反応容器にＤＭＦ(５.０mL)およびＤＣＭ(５.０mL)を添加し、混合物を反応容器の底からのＮ２バブリングにより１０分周期的撹拌し、その後溶媒を排出した。
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を６０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に、アミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、５.０mL、１０当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、２.５mL、２０当量)を添加した。混合物を６０分間周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
二級アミンカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、２.５mL、５当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.５mL、１２当量)を添加した。混合物を３００分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
カスタムアミノ酸カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、０.５〜２.５mL、１〜５当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、０.５〜２.５mL、１〜５当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、０.５〜１.５mL、４〜１２当量)を添加した。混合物を６０分〜６００分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、工程ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。Ｔｏ ｔｈｅ反応容器ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に３.０mLのＤＩＰＥＡ(４.０mmol、０.６９９mL、４０当量)およびクロロアセチルクロライド(２.０mmol、０.１６０mL、２０当量)のＤＭＦ溶液を添加した。混合物を１２〜１８時間周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。
クロロ酢酸カップリング方法Ａ：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、工程ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり５回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＤＭＦ(２.０mL)、クロロ酢酸(１.２mmol、１１３mg、１２当量)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(１.２mmol、０.１８７mL、１２当量)。混合物を１２〜１８時間周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(４.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。
ＣＥＭ方法Ａ：
全ての操作をＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザー(CEM Corporation, Matthews, NC)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、ＣＥＭ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙマイクロ波ユニットに底フリットで接続した３０mLまたは１２５mLポリプロピレンチューブで行った。チューブをチューブの底部と上部の両方からＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙシンセサイザーに接続した。ＤＭＦおよびＤＣＭの上部および底から添加でき、これはチューブの底の側面から等しく洗い落とす。樹脂を上部から移す間以外、全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的バブリング”は、フリットの底からのＮ２ガスの短いバブリングを意味する。アミノ酸溶液は、一般に製造後３週間を超えて使用しなかった。ＨＡＴＵ溶液は製造後５日以内に使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＣＴＵ＝２−(６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｓｉｅｂｅｒ＝Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ、ここで、“３−イルオキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用した樹脂はＳｉｅｂｅｒリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を備えたメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.７１mmol／ｇ荷重であった。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“ＣＥＭ方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は、約１４０mgの上記Ｓｉｅｂｅｒ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、下に“樹脂膨潤方法”として記戴する樹脂膨潤から開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“単カップリング方法”を使用した。二級アミンＮ末端へのカップリングは下記“二級アミンカップリング方法”を使用した。クロロアセチル基のペプチドのＮ末端へのカップリングは上の“クロロアセチルクロライドカップリング方法”または“クロロ酢酸カップリング方法”に詳述する。
樹脂膨潤方法：
５０mLポリプロピレン円錐チューブに、メリフィールド：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加した。次いでＤＭＦ(７mL)、その後ＤＣＭ(７mL)をチューブに添加した。樹脂を反応容器から容器の上部に移した。本方法をさらに２回繰り返す。ＤＭＦ(７mL)、その後ＤＣＭ(７mL)を添加した。樹脂反応容器の底部からのＮ２バブリングにより１５分膨潤させ、溶媒をフリットから排出した。
標準的カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ,２.５mL、５当量)、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.５Ｍ、１.０mL、５当量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ、０.５mL、１０当量)を添加した。混合物を５０℃でカップリングするＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ以外の全アミノ酸について、５分、７５℃でＮ２バブリングにより混合し、反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を、２分、６５℃で周期的にバブリングし、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
ダブルカップルカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ,２.５mL、５当量)、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.５Ｍ、１.０mL、５当量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ、０.５mL、１０当量)を添加した。混合物を５０℃でカップリングするＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ以外の全アミノ酸について、５分、７５℃でＮ２バブリングにより混合し、反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ,２.５mL、５当量)、ＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.５Ｍ、１.０mL、５当量)およびＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ、０.５mL、１０当量)を添加した。混合物を５０℃でカップリングするＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ以外の全アミノ酸について、５分、７５℃でＮ２バブリングにより混合し、反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を、２分、６５℃で周期的にバブリングし、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
カスタムアミノ酸カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。反応容器にＨＡＴＵ(２.５当量〜１０当量)を含むアミノ酸溶液(１.２５mL〜５mL、２.５当量〜１０当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＮＭＰ中２Ｍ、０.５mL〜１mL、１０〜２０当量)を添加した。混合物を、Ｎ２バブリングにより５分〜２時間、２５℃〜７５℃で撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。反応容器に酢酸無水物：ＤＩＥＡ：ＤＭＦ(１０：１：８９ｖ／ｖ／ｖ、５.０mL)の溶液を添加した。混合物を、２分、６５℃で周期的にバブリングし、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。ＤＭＦ(７mL)洗液を上部から、続いてＤＭＦ(７mL)洗液を下部から、最後にＤＭＦ(７mL)洗液を上部から添加した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
Ｎ−メチル化樹脂上方法Ａ(Turner, R.A. et al., Org. Lett., 15(19):5012-5015 (2013))：
全ての操作を、断らない限り手動で行った。“Ｎ−メチル化樹脂上方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模はペプチドの製造に使用した樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は方法において使用するペプチドの量の直接の決定には基づかない。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。
樹脂を２５mLフリットシリンジに移した。樹脂にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、５.０mL)を添加した。混合物を３分振盪し、溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回洗浄した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、４.０mL)を添加した。混合物を３分振盪し、溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回およびＤＣＭ(４.０mL)で３回連続的に洗浄した。樹脂をＤＭＦ(２.０mL)に懸濁し、トリフルオロ酢酸エチル(０.１１９ml、１.００mmol)、１,８−ジアザビシクロ[５.４.０]ウンデク−７−エン(０.１８１ml、１.２０mmol)を添加した。混合物をシェーカー上に６０分乗せた。溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回およびＤＣＭ(４.０mL)で３回連続的に洗浄した。
樹脂を乾燥ＴＨＦ(２.０mL)で３回洗浄して、残存している水を除去した。オーブン乾燥４.０mLバイアルにオーブン乾燥４.０mLバイアルに乾燥４Åモレキュラー・シーブ(２０mg)上ＴＨＦ(１.０mL)およびトリフェニルホスフィン(１３１mg、０.５００mmol)を添加した。溶液を樹脂に移し、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(０.０９７mL、０.５mmol)をゆっくり添加した。樹脂を１５分撹拌した。溶液をフリットから排出し、樹脂を乾燥ＴＨＦ(２.０mL)で３回洗浄して、残存している水を除去した。オーブン乾燥４.０mLバイアルに４Åモレキュラー・シーブ(２０mg)上ＴＨＦ(１.０mL)、トリフェニルホスフィン(１３１mg、０.５００mmol)を添加した。溶液を樹脂に移し、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(０.０９７mL、０.５mmol)をゆっくり添加した。樹脂を１５分撹拌した。溶液をフリットから排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回およびＤＣＭ(４.０mL)で３回連続的に洗浄した。樹脂をエタノール(１.０mL)に懸濁し、ＴＨＦ(１.０mL)および水素化ホウ素ナトリウム(３７.８mg、１.０００mmol)を添加した。混合物を３０分撹拌し、排出した。樹脂をＤＭＦ(４.０mL)で３回およびＤＣＭ(４.０mL)で３回連続的に洗浄した。
包括的脱保護方法Ｂ：
全ての操作を、断らない限り手動で行った。“包括的脱保護方法Ｂ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。“脱保護溶液”はトリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：：ジチオスレイトール(９４：３：３ｖ：ｖ：ｗ)を使用して調製した。樹脂を反応容器から除き、２５mLフリットシリンジに移し、そこに“脱保護溶液”(５.０mL)を添加した。混合物を５分撹拌した。溶液を濾過し、濾液をジエチルエーテル(３０mL)に滴下した。沈殿した固体を３分遠心分離した。上清溶液を傾捨し、固体をジエチルエーテル(２５mL)に再懸濁した。懸濁液を３分遠心分離した。本方法をさらに１回繰り返し、残存固体を高減圧下に乾燥して、白色〜灰白色固体を得た。
環化方法Ｃ：
全ての操作を、断らない限り手動で行った。“環化方法Ｃ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模はペプチドの製造に使用した樹脂に結合するＳｉｅｂｅｒリンカーの量により決定する。この規模は方法において使用するペプチドの量の直接の決定には基づかない。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。粗製ペプチド固体をアセトニトリル：０.１Ｍ重炭酸アンモニウム水性緩衝液(１１mL：２４mLまたは類似の比)に溶解し、溶液を、ＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を使用して、注意深くｐＨ＝８.５〜９.０に調節した。溶液を１２〜１８時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、残渣をアセトニトリル：水に溶解した。この溶液を逆相ＨＰＬＣ精製に付して、所望の環状ペプチドを得た。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−３−(ナフタレン−１−イル)プロパン酸の製造
(Freidinger, R.M. et al., J. Org. Chem., 48(1):77-81 (1983))
スキーム：
工程１：
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(ナフタレン−１−イル)プロパン酸(１.００ｇ、２.２８６mmol)のトルエン(５０ml)懸濁液に、パラホルムアルデヒド(０.５００ｇ、１６.６５mmol)およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物(０.４３５ｇ、２.２８６mmol)を添加した。反応混合物を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップを使用して水を共沸的に除去しながら１６時間加熱還流した。反応物を室温に冷却し、２０mLのＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を２×５０mLの飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮後、無色油状物を得た。３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムシリカゲルクロマトグラフィーでの精製により、所望の生成物を無色油状物として得た。(Ｓ)−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル４−(ナフタレン−１−イルメチル)−５−オキソオキサゾリジン−３−カルボキシレート；０.７５０ｇ(７３％)。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.88 (d, J=7.5 Hz, 3H), 7.82 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.68 - 7.51 (m, 2H), 7.49 - 7.21 (m, 8H), 5.18 (d, J=4.0 Hz, 1H), 4.40(br. s., 4H), 3.31 (br. s., 4H)
工程２：
(Ｓ)−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル４−(ナフタレン−１−イルメチル)−５−オキソオキサゾリジン−３−カルボキシレート(０.７５０ｇ、１.６６９mmol)のＤＣＭ(８.０ml)溶液に、トリフルオロ酢酸(８.０mL、１０４mmol)、続いてトリエチルシラン(０.７９９ml、５.０１mmol)を添加した。反応混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を回転蒸発により乾燥した。粗製油状物を１５.０mLのＤＣＭに溶解し、回転蒸発により２回蒸発した。粗製生成物を灰白色ガム状物として得て、溶離剤としてジクロロメタンおよびメタノールを使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。所望の生成物である(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−３−(ナフタレン−１−イル)プロパン酸を無色ガム状物として得た(０.６９２ｇ、４６％)。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)プロパン酸
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
スキーム：
工程１：
Ｎ２を通気したテフロンキャップを備えたオーブン乾燥した８mLバイアルに、亜鉛末(２９８mg、４.５６mmol)、ＤＭＦ(１.５mL)およびヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)を添加した。この混合物に(Ｒ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−ヨードプロパノエート(５００mg、１.５１９mmol)、そして直ぐにヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)を添加した。Ｐｄ２(ｄｂａ)３(６９.６mg、０.０７６mmol)、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２'６−ジメトキシビフェニル(６２.４mg、０.１５２mmol)および４−ブロモ−２−クロロ−１−フルオロベンゼン(４７７mg、２.２７９mmol)を添加し、反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。粗製混合物を３０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、ＤＭＦを４回の水性洗浄により除去した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液を濾過し、濃縮し、粗製生成物を１００％ヘキサン〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。所望の生成物である(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)プロパノエート(０.１７４ｇ、３５％)を淡黄色油状物として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.27 (s, 1H), 7.17 (dd, J=6.9, 1.4 Hz, 1H), 7.11 - 6.93 (m, 1H), 5.03 (d, J=6.8 Hz, 1H), 4.55 (d, J=6.4 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.19 - 3.04 (m, 1H), 2.98 (dd, J=13.9, 5.9 Hz, 1H), 1.49 - 1.37 (m, 10H)
工程２：
(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)プロパノエート(１７４mg、０.５２４mmol)のＴＨＦ(１９６７μl)／Ｈ２Ｏ(６５６μl)溶液にＬｉＯＨ(３７.７mg、１.５７３mmol)を添加し、反応物を２時間撹拌した。ＴＨＦを回転蒸発により除去し、溶液をＥｔＯＡｃ(１０mL)で希釈し、水層を１Ｎ ＨＣｌ水溶液を使用してｐＨ３に酸性化した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機フラクションを合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮後、粗製生成物である(Ｓ)−２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)プロパン酸を黄色ガム状物として得た(０.１８３mg、９９％)。
工程３：
(Ｓ)−２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)プロパン酸(１８３.０mg、０.５７６mmol)を、ジオキサン中４Ｍ塩酸(１４４０μl、５.７６mmol)溶液に、室温で２時間懸濁した。溶媒蒸発後、粗製生成物を氷浴を使用して０℃に冷却し、ＭｅＣＮ(２８８μl)および２.０Ｍ Ｎａ２ＣＯ３水溶液(２８８μl、０.５７６mmol)に溶解した。(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)カーボネート(１９４mg、０.５７６mmol)を溶液に添加し、反応混合物を３０分撹拌した。混合物を５.０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、水層を数滴の１Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和した。有機溶媒を蒸発し、粗製生成物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液およびＥｔＯＡｃに分配した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機フラクションを合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮後、黄色結晶固体を得た。１００％ヘキサン〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、所望の生成物を白色結晶固体として得た。溶離剤として１００％ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用して、シリカゲルでの２回目の精製を行った。所望の生成物、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)プロパン酸を白色固体として得た(０.１１１ｇ、４４％)。1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ 7.79 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.60(t, J=6.8 Hz, 2H), 7.47 - 7.23 (m, 5H), 7.25 - 7.14 (m, 1H), 7.13 (d, J=9.0 Hz, 1H), 4.52 - 4.11 (m, 4H), 3.19 (dd, J=14.3, 4.6 Hz, 1H), 2.92 (dd, J=13.9, 9.7 Hz, 1H)
(Ｒ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸
(Ley, S.V. et al., Tetrahedron, 48(6):1145-1174 (1992))
スキーム：
工程１：
(Ｒ)−２−アミノ−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸(１.００ｇ、４.９２mmol)をＴＨＦ(１８.４５ml)／水(６.１５ml)に懸濁し、氷浴を使用して０℃に冷却した。冷却したスラリーにクロロギ酸ベンジル(０.７７３mL、５.４１mmol)をゆっくり添加し、反応混合物を２.５時間撹拌した。スラリーを５０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液を使用してｐＨ３に酸性化した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗製生成物を透明油状物として得て、溶離剤として１００％ヘキサン〜１００％酢酸エチルを使用するシリカゲルクロマトグラフィーに付した。生成物である(Ｒ)−２−(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸を、無色油状物として得た(１.４１ｇ、７１％)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.44 - 7.29 (m, 5H), 5.53 (d, J=7.5 Hz, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.41 (d, J=5.1 Hz, 1H), 2.56 - 2.30(m, 2H), 2.21 (dd, J=13.5, 6.5 Hz, 1H), 2.06 - 1.88 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)
工程２：
(Ｒ)−２−(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸(１.４１ｇ、４.１８mmol)およびＭｅＩ(２.０９１mL、３３.４mmol)のＴＨＦ(１２.６６ml)溶液に、０℃でＮａＨ(０.５０１ｇ、１２.５４mmol)をゆっくり添加し、懸濁液を室温まで温めながら２４時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、１０mLのＥｔＯＡｃを５mLの水と共に添加して、過剰のＮａＨを消費させた。粗製生成物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液およびＥｔ２Ｏに分配した。二層を分離し、有機層を飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、両者の水性抽出物を合わせた。水溶液を６Ｎ ＨＣｌ水溶液を使用してｐＨ３にした。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮後、(Ｒ)−２−(((ベンジルオキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸を黄色油状物として得た(１.４ｇ(７８％))。ＬＣＭＳは所望の生成物のｍ／ｚ、(Ｍ＋Ｎａ)＋ ３７４を示した。
工程３：
(Ｒ)−２−(((ベンジルオキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸(１.４０ｇ、３.９８mmol)のＭｅＯＨ(１８.７９ml)溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.４２４ｇ、０.３９８mmol)を添加し、反応混合物を水素雰囲気下に置いた。反応物を室温で１８時間撹拌した。触媒をセライト(登録商標)での濾過により除去し、濾液を減圧下濃縮して、白色固体を得た。粗製の物質をアセトニトリル(９.４０ml)、水(９.４０ml)およびＴＥＡ(１.１１１mL、７.９７mmol)に溶解した。溶液を氷浴を使用して０℃に冷却し、ＦＭＯＣ−ＯＳＵ(１.３４４ｇ、３.９８mmol)を添加した。反応混合物を室温に温めながら１８時間撹拌した。粗製生成物を２００mL ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液および塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮後、透明油状物を得て、これを１００％ヘキサン〜１００％ＥｔＯＡｃを使用するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。(Ｒ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−５−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−５−オキソペンタン酸を無色油状物として得た(０.４８１ｇ、２８％)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.81 - 7.68 (m, 2H), 7.63 - 7.49 (m, 2H), 7.43 - 7.21 (m, 4H), 5.95 (br. s., 3H), 4.76 (dd, J=10.7, 4.5 Hz, 1H), 4.60 - 4.48 (m, 1H), 4.47 - 4.32 (m, 2H), 4.29 - 4.10(m, 1H), 2.87 (s, 3H), 2.43 - 1.82 (m, 4H), 1.51 - 1.36 (m, 9H)
工程１：
Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル塩酸塩(２ｇ、６.８５mmol)、Ｚ−Ｐｈｅ−ＯＨ(２.２５７ｇ、７.５４mmol)、ＤＩＰＥＡ(２.９９mL、１７.１４mmol)およびＤＣＭ(１００mL)の溶液を、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール(１.１２０ｇ、８.２３mmol)およびＥＤＣ(１.５７７ｇ、８.２３mmol)で処理し、ｒｔで１５時間撹拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ３(２×１００mL)、１Ｍ ＨＣｌ(２×５０mL)および塩水(５０mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮して、(Ｓ)−ベンジル２−((Ｓ)−２−(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)−３−フェニルプロパンアミド)−３−フェニルプロパノエート(３.２ｇ、５.９６mmol、８７％収率)を白色固体として得た。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.42 - 7.11 (m, 21H), 4.96 (d, J=2.0 Hz, 4H), 4.63 - 4.45 (m, 1H), 4.06 - 3.91 (m, 2H), 3.34 - 2.96 (m, 3H), 2.85 (br. s., 4H)
工程２(Schroeder, G.M. et al., Tetrahedron Lett., 51:1404-1406 (2010))：
耐圧バイアルに(Ｓ)−ベンジル２−((Ｓ)−２−(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)−３−フェニルプロパンアミド)−３−フェニルプロパノエート(１.０ｇ、１.８６４mmol)およびジフェニル−２−ピリジルホスフィン(３.１７ｇ、７.４５mmol)のＴＨＦ(９.３２mL)溶液をＮ２下に仕込んだ。溶液をＮ２で通気し、ＤＩＡＤ(１.４４９mL、７.４５mmol)を滴下した。反応物を５分撹拌した。ジフェニルホスホリルアジド(１.６０６mL、７.４５mmol)を３０分かけて敵かした。添加が完了し、もはや窒素が産生されなくなったら、封管を閉じ、反応物を５５℃で４時間撹拌する。
反応物をｒｔに冷却し、酢酸エチル(２００ml)に注ぎ、冷１Ｎ ＨＣｌ(１００mL)、飽和ＮａＨＣＯ３(１００mL)および塩水(１００mL)で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、橙色油状物を得た。溶離剤として１００％ヘキサン〜６０％酢酸エチルを使用するシリカゲルクロマトグラフィーでの精製により、低純度の６６０mgの(Ｓ)−ベンジル２−(５−((Ｓ)−１−(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)−２−フェニルエチル)−１Ｈ−テトラゾール−１−イル)−３−フェニルプロパノエートを得た。分取ＨＰＬＣによる２回目の精製を次の条件を使用して行った。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) １００Ａ ２５０ｘ２１.２mm Ａｘｉａ包装(１０〜１００mg) ＃５２０５５１−２。移動相Ａ：０.１ ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：５０〜８０％Ｂを２０分で、次いで１０分９５％Ｂまで勾配；流速：１５mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。(Ｓ)−ベンジル２−(５−((Ｓ)−１−(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)−２−フェニルエチル)−１Ｈ−テトラゾール−１−イル)−３−フェニルプロパノエートを、６０.０mg収量で、ＬＣ／ＭＳ分析により７０％純度で、ベージュ色吸湿性固体として得た。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ５６２.５(Ｍ＋Ｈ)
工程３：
(Ｓ)−ベンジル２−(５−((Ｓ)−１−(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)−２−フェニルエチル)−１Ｈ−テトラゾール−１−イル)−３−フェニルプロパノエート(６０mg、０.１０７mmol)のＭｅＯＨ(５３４μl)溶液を、１０％Ｐｄ／Ｃ(２２.７４mg、０.０２１mmol)上で、ラテックスバルーンからの水素を使用して２時間水素化した。
触媒を濾過により除去し、濾液を減圧下濃縮して、白色ガム状固体を得た。生成物をＭｅＣＮ(２mL)および水(２mL)およびＥｔ３Ｎ(１００μL)に溶解し、ＦＭＯＣ−ＯＳＵ(３６.０mg、０.１０７mmol)で処理した。混合物をｒｔで１５時間撹拌した。
反応混合物をＥｔＯＡｃ(５０mL)で希釈し、１Ｍ ＨＣｌ(２×２０mL)および塩水(２０mL)で洗浄し、乾燥し(硫酸ナトリウム)、減圧下濃縮して、(Ｓ)−２−(５−((Ｓ)−１−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−２−フェニルエチル)−１Ｈ−テトラゾール−１−イル)−３−フェニルプロパン酸(４２mg、０.０７５mmol、７０.３％収率)を黄色固体として得た。生成物はＬＣ／ＭＳ分析によると６４％純粋である。分析条件Ａ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ５６０.５(Ｍ＋Ｈ)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロフェニル)プロパン酸
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
スキーム：
工程１：
Ｎ２を通気したテフロンキャップを備えたオーブン乾燥した８mLバイアルに、亜鉛末(２９８mg、４.５６mmol)、ＤＭＦ(１.５mL)およびヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)を添加した。この混合物に(Ｒ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−ヨードプロパノエート(５００mg、１.５１９mmol)、そして直ぐにヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)を添加した。Ｐｄ２(ｄｂａ)３(６９.６mg、０.０７６mmol)、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２',６'−ジメトキシビフェニル(６２.４mg、０.１５２mmol)、１,３−ジクロロ−５−ヨードベンゼン(６２２mg、２.２７９mmol)を添加し、反応混合物をｒｔで１６時間撹拌した。粗製混合物をＥｔＯＡｃ(３０mL)で希釈し、ＤＭＦを４回の水性洗浄で除去した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液を濾過し、濃縮し、粗製物を１００％ヘキサン〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。所望の生成物である(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロフェニル)プロパノエートを淡黄色油状物として得て、０.１６０ｇ収量で、ＬＣＭＳ分析によると７７％純度であった。分析ＬＣＭＳ条件Ｆ：保持時間＝２.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ３４８.１(Ｍ＋Ｈ)
工程２：
(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロフェニル)プロパノエート(１６０mg、０.４５９mmol)のＴＨＦ(２mL)／Ｈ２Ｏ(０.６６７mL)溶液に、ＬｉＯＨ(３３.０mg、１.３７８mmol)を添加し、反応物を２時間撹拌した。ＴＨＦを蒸発し、溶液をＥｔＯＡｃ(１０mL)で希釈し、水層を１Ｎ ＨＣｌ水溶液を使用してｐＨ３に酸性化した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機フラクションを合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮後、粗製生成物を黄色ガム状物として得た。固体を直接工程３で使用した。
工程３：
先の工程からの固体にジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ(１.１４９mL、４.５９mmol)を添加し、溶液を２時間撹拌した。溶媒蒸発後、粗製生成物を０℃に冷却し、５％Ｎａ２ＣＯ３水溶液／ＡｃＣＮ(２：１)(３０mL)に溶解した。(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)カーボネート(１７０mg、０.５０５mmol)を添加し、反応混合物を１６時間撹拌した。混合物を１５.０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、水層を数滴の１Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和した。有機溶媒を蒸発し、粗製生成物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液およびＥｔＯＡｃに分配した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥したおよび濃縮した。粗製生成物を次の条件を使用する分取ＬＣＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０ｘ２５０、５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：３５〜１００％Ｂを５０分で、次いで１００％Ｂに１０分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロフェニル)プロパン酸の収量は５０mgであり；純度は分析ＬＣＭＳ条件Ａで８７％であり：ｒｔ＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４７８.０(Ｍ＋Ｎａ)＋であった。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４,５−ジフルオロフェニル)プロパン酸
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
スキーム：
工程１：
Ｎ２を通気したテフロンキャップを備えたオーブン乾燥した８mLバイアルに、亜鉛末(２９８mg、４.５６mmol)、ＤＭＦ(１.５mL)およびヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)を添加した。この混合物に(Ｒ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−ヨードプロパノエート(５００mg、１.５１９mmol)、そして直ぐにヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)。Ｐｄ２(ｄｂａ)３(６９.６mg、０.０７６mmol)、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２',６'−ジメトキシビフェニル(６２.４mg、０.１５２mmol)、５−ブロモ−１−クロロ−２,３−ジフルオロベンゼン(５１８mg、２.２７９mmol)を添加し、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。粗製混合物を３０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、ＤＭＦを４回の水性洗浄で除去した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液を濾過し、濃縮し、粗製物を１００％ヘキサン〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。所望の生成物、(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４,５−ジフルオロフェニル)プロパノエート、０.１６５ｇを淡黄色油状物として得て、これを直接次工程で使用した。
工程２：
(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４,５−ジフルオロフェニル)プロパノエート(１６５mg、０.４７２mmol)のＴＨＦ(２ml)／Ｈ２Ｏ(０.６６７ml)溶液に、ＬｉＯＨ(３３.９mg、１.４１５mmol)を添加し、反応物を２時間撹拌した。ＴＨＦを除去し、溶液をＥｔＯＡｃ(１０mL)に希釈した。水層を１Ｎ ＨＣｌ水溶液を使用してｐＨ３に酸性化した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機フラクションを合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮後、粗製生成物を黄色ガム状物として得て、これを直接工程３で使用した。
工程３：
固体に ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ(１.１７９mL、４.７２mmol)を添加し、反応混合物を２時間撹拌した。溶媒蒸発後、粗製生成物を０℃に冷却し、５％Ｎａ２ＣＯ３水溶液／ＡＣＮ(２：１)(３０mL)に溶解した。(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)カーボネート(１７５mg、０.５１９mmol)を溶液に添加し、反応混合物を１６時間撹拌した。混合物を１５.０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、水層を数滴の１Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和した。有機溶媒を蒸発し、粗製生成物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液およびＥｔＯＡｃに分配した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥したおよび濃縮した。得られた生成物を次の条件を使用する分取ＬＣＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０ｘ２５０、５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：３５〜１００％Ｂを５０分で、次いで１００％Ｂに１０分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥して、６２mgの(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４,５−ジフルオロフェニル)プロパン酸を得た。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロ−４−フルオロフェニル)プロパン酸
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
スキーム：
工程１：
Ｎ２を通気したテフロンキャップを備えたオーブン乾燥した８mLバイアルに、亜鉛末(２９８mg、４.５６mmol)、ＤＭＦ(１.５mL)およびヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)を添加した。この混合物に(Ｒ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−ヨードプロパノエート(５００mg、１.５１９mmol)、そして直ぐにヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)を添加した。Ｐｄ２(ｄｂａ)３(６９.６mg、０.０７６mmol)、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２',６'−ジメトキシビフェニル(６２.４mg、０.１５２mmol)、５−ブロモ−１,３−ジクロロ−２−フルオロベンゼン(５５６mg、２.２７９mmol)および反応混合物をｒｔで１６時間撹拌した。粗製混合物を３０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、ＤＭＦを４回の水性洗浄を使用して除去した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液を濾過し、濃縮し、粗製生成物を１００％ヘキサン〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。所望の生成物、(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロ−４−フルオロフェニル)プロパノエート、０.１０２ｇを淡黄色油状物として得て、これを直接次工程で使用した。
工程２：
(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロ−４−フルオロフェニル)プロパノエート(１０２mg、０.２７９mmol)のＴＨＦ(２ml)／Ｈ２Ｏ(０.６６７ml)溶液にＬｉＯＨ(２０.０１mg、０.８３６mmol)を添加し、反応物を２時間撹拌した。ＴＨＦを除去し、溶液をＥｔＯＡｃ(１０mL)に希釈した。水層を１Ｎ ＨＣｌ水溶液を使用してｐＨ３に酸性化した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮後、粗製生成物を黄色ガム状物として得て、工程３で直接使用した。
工程３：
工程２からの生成物に、ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ(０.６９６mL、２.７９mmol)を添加し、反応混合物を２時間撹拌した。溶媒蒸発後、粗製生成物を０℃に冷却し、５％Ｎａ２ＣＯ３水溶液／ＭｅＣＮ(２：１)(３０mL)に溶解した。(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)カーボネート(１０３mg、０.３０６mmol)を溶液に添加し、反応混合物を１６時間撹拌した。混合物を１５.０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、水層を数滴の１Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和した。有機溶媒を蒸発し、粗製生成物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液およびＥｔＯＡｃに分配した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、次の条件を使用する分取ＬＣＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：３５〜１００％Ｂを５０分かけて、次いで１００％Ｂに１０分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥して、３６mgの(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロ−４−フルオロフェニル)プロパン酸を得た。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−クロロ−３−フルオロフェニル)プロパン酸
(Ross, A.J. et al., J. Org. Chem., 75:245-248 (2010))
スキーム：
工程１：
Ｎ２を通気したテフロンキャップを備えたオーブン乾燥した８mLバイアルに、亜鉛末(２９８mg、４.５６mmol)、ＤＭＦ(１.５mL)およびヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)を添加した。この混合物に(Ｒ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−ヨードプロパノエート(５００mg、１.５１９mmol)、そして直ぐにヨウ素(５７.８mg、０.２２８mmol)を添加した。Ｐｄ２(ｄｂａ)３(６９.６mg、０.０７６mmol)、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２',６'−ジメトキシビフェニル(６２.４mg、０.１５２mmol)、１−クロロ−２−フルオロ−４−ヨードベンゼン(５８４mg、２.２７９mmol)を添加し、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。粗製混合物を３０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、ＤＭＦを４回の水性洗浄を使用して除去した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、粗製生成物を１００％ヘキサン〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。所望の生成物、(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(４−クロロ−３−フルオロフェニル)プロパノエート、０.２２０ｇを淡黄色油状物として得た；ＬＣＭＳ分析によると純度９３％。分析ＬＣＭＳ条件Ｆ：ｒｔ＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ３３２.２(Ｍ＋Ｈ)
工程２：
(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(４−クロロ−３−フルオロフェニル)プロパノエート(２２０mg、０.６６３mmol)のＴＨＦ(２mL)／水(０.６６７mL)溶液に、ＬｉＯＨ(４７.６mg、１.９８９mmol)を添加し、反応物を２時間撹拌した。ＴＨＦを除去し、溶液をＥｔＯＡｃ(１０mL)に希釈した。水層を１Ｎ ＨＣｌ水溶液を使用してｐＨ３に酸性化した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮後、粗製生成物を黄色ガム状物として得て、直接工程３で使用した。
工程３：
工程２からの固体に、ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ(１.６５８mL、６.６３mmol)を添加し、混合物を２時間撹拌した。溶媒蒸発後、粗製生成物を０℃に冷却し、５％Ｎａ２ＣＯ３水溶液／ＡｃＣＮ(２：１)(３０mL)に溶解した。(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(２,５−ジオキソピロリジン−１−イル)カーボネート(２４６mg、０.７２９mmol)を溶液に添加し、反応混合物を１６時間撹拌した。混合物を１５.０mLのＥｔＯＡｃで希釈し、水層を数滴の１Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和した。有機溶媒を蒸発し、粗製生成物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液およびＥｔＯＡｃに分配した。粗製生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、次の条件を使用する分取ＬＣＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０、５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：３５〜１００％Ｂを５０分かけて、次いで１００％Ｂに１０分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥して、３０mgの(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−クロロ−３−フルオロフェニル)プロパン酸を得た。分析ＬＣＭＳ条件Ａ：ｒｔ＝１.６５分、８５％純度；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４６２.０(Ｍ＋Ｎａ)
実施例３０５２の製造
実施例３０５２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０、５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：Ａ中２５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５mgであり、３０分にわたる３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用したＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８２５.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０５３の製造
実施例３０５３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：Ａ中２５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１５mgであり、３０分にわたる３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用したＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度はであった９２％。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８１８.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０５４の製造
実施例３０５４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：Ａ中２５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２１mgであり、３０分にわたる３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用したＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度はであった９９％。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８４２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０５５の製造
実施例３０５５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：Ａ中２５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１９mgであり、９２％３０分にわたる３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用したＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度はであった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ７６０.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０５６の製造
実施例３０５６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：２５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。２個の異性体(異性体３０５６−Ａおよび異性体３０５６−Ｂ)を得た。生成物異性体３０５６−Ａおよび異性体３０５６−Ｂの収量はそれぞれ３.６mgおよび５.７mgであり、３０分にわたり、６０℃でＡ中２０％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析条件Ｂ”で推定される純度はそれぞれ８３％および９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：異性体３０５６−Ａ、保持時間＝１.２１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.２(Ｍ＋２Ｈ)；異性体３０５６−Ｂ、１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０５７の製造
実施例３０５７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０、５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：Ａ中２０〜８５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１０.３mgであり、６０℃で３０分にわたるＡ中２０％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”で推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０５８の製造
実施例３０５８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０、５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：Ａ中２０〜８５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。２個の異性体(異性体３０５８−Ａおよび異性体３０５８−Ｂ)を得た。生成物異性体３０５８−Ａおよび異性体３０５８−Ｂの収量はそれぞれ４.３mgおよび７.６mgであり、６０℃で３０分にわたるＡ中２０％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”で推定される純度はそれぞれ９３％および９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：異性体３０５８−Ａ、保持時間＝０.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８９.１(Ｍ＋２Ｈ)；異性体３０５８−Ｂ、１.１０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８９.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０５９の製造
実施例３０５９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：Ａ中３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥して、９.２mgの生成物を９６％純度で得た。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１１.８０(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.８０(Ｍ＋２Ｈ)、１８１１.８０(Ｍ＋Ｈ)
実施例３０６０の製造
実施例３０６０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：Ａ中２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。２個の異性体(異性体３０６０−Ａおよび異性体３０６０−Ｂ)を得た。生成物異性体３０６０−Ａおよび異性体３０６０−Ｂの収量はそれぞれ５.５mgおよび１.７mgであり、“分析条件ＤおよびＥ”により推定される純度はそれぞれ９５％および８６％であった。
分析条件Ｄ：異性体３０６０−Ａ：保持時間＝１.４５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.６５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｄ：異性体３０６０−Ｂ：保持時間＝１.５７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.６０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析条件Ｅ：異性体３０６０−Ａ：保持時間＝１.５４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.４５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｅ：異性体３０６０−Ｂ：保持時間＝１.６６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.７０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０６１の製造
実施例３０６１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥して、３.２mgを９８％純度で得た。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１１.８０(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.８０(Ｍ＋２Ｈ)、１８１１.８０(Ｍ＋Ｈ)
実施例３０６２の製造
実施例３０６２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥して、５.７mgを９５％純度で得た。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１３.７０(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１３.６５(Ｍ＋Ｈ)
実施例３０６３の製造
実施例３０６３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８２５.９０(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８２５.８５(Ｍ＋Ｈ)
実施例３０６４の製造
実施例３０６４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.３１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７７７.９５(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７７８.８０(Ｍ＋Ｈ)
実施例３０６５の製造
実施例３０６５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３０〜８０％Ｂを５０分かけて、次いで８０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.１mgであり、３０分にわたる３５％〜７５％緩衝液Ｂの勾配を使用したＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度は、９６％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０６６の製造
実施例３０６６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３０〜７０％Ｂを５０分かけて、次いで７０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.５mgであり、３０分にわたる３５％〜７５％緩衝液Ｂの勾配を使用したＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度は９１％であった
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０６７の製造
実施例３０６７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３０〜７０％Ｂを５０分かけて、次いで７０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１１.８mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”のＨＰＬＣにより推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０６８の製造
実施例３０６８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３０〜９０％Ｂを５０分かけて、次いで９０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１１.８mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０６９の製造
実施例３０６９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３０〜９０％Ｂを５０分かけて、次いで９０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.１mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７０の製造
実施例３０７０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３０〜９０％Ｂを５０分かけて、次いで９０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.９mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７１の製造
実施例３０７１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３０〜９０％Ｂを５０分かけて、次いで９０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.３mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７２の製造
実施例３０７２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３０〜９０％Ｂを５０分かけて、次いで９０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.５mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８７０.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７３の製造
実施例３０７３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.９mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７４の製造
実施例３０７４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３０〜９０％Ｂを５０分かけて、次いで９０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.８mgであり、３０分にわたり３０％〜９０％緩衝液Ｂの勾配を使用する“分析ＨＰＬＣ条件Ｂ”により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７５の製造
実施例３０７５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：３０〜９０％Ｂを６０分かけて、次いで９０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.５mgであり、３０分にわたり３０％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”で推定されるその純度は、９７％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７６の製造
実施例３０７６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３５〜９５％Ｂを６０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１１.９mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”で推定されるその純度は、９９％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７７の製造
実施例３０７７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３５〜９５％Ｂを６０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１２.３mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”で推定されるその純度は、９９％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７８の製造
５０mLポリプロピレンチューブにＳｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加し、チューブをＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザーに乗せた。その後、次の方法を連続的に実施した。
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”に、１０当量を２時間、７５℃を使用してＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”にＦｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”に、５当量を１０分を使用してＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”に、５当量を１０分を使用して、Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”に、５当量を１０分を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ(ペンタ−Ｆ)−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”に従った；
“包括的脱保護方法Ｂ”に従った；
“環化方法Ｃ”に従った。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.０５％ＴＦＡ；勾配：３０− ７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１０.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０７９の製造
実施例３０７９を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１０.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０８０の製造
実施例３０８０を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.７１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０８１の製造
実施例３０８１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０８２の製造
実施例３０８２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０８３の製造
実施例３０８３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８２.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０８６の製造
実施例３０８６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０８７の製造
実施例３０８７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ ２５０×２０mm カラム；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：３０〜９０％Ｂを５５分かけて、次いで９０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。ペプチドはまったく綺麗ではなく、次の条件でさらに分取ＨＰＬＣを実施した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ ２５０×２０mm カラム；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：４０〜８０％Ｂを５０分かけて、次いで８０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.５mgであり、３０分にわたり３５％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”で推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０８８の製造
実施例３０８８を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ ２５０×２０mm カラム；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：３０〜９０％Ｂを５５分かけて、次いで９０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。ペプチドはまったく綺麗ではなく、次の条件でさらに分取ＨＰＬＣを実施した。カラム：ＹＭＣ ＡＱ−ＯＤＳ ２５０×２０mm カラム；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：４０〜８０％Ｂを５０分かけて、次いで８０％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。２個の異性体(異性体３０８８−Ａおよび異性体３０８８−Ｂ)を得た。生成物異性体３０８８−Ａおよび異性体３０８８−Ｂの収量はそれぞれ１.１mgおよび０.８１mgであり、３０分にわたる３５％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度は、異性体３０８８−Ａおよび異性体３０８８−Ｂでそれぞれ９９％および９３％純度であった。ＬＣ／ＭＳで、ＬＣＭＳ“分析条件Ａ”を使用して生成物を確認した。
異性体３０８８−Ａ：分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.７(Ｍ＋２Ｈ)
異性体３０８８−Ｂ：分析ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０８９の製造
実施例３０８９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９０の製造
実施例３０９０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.１１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９１の製造
実施例３０９１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９２の製造
実施例３０９２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９３の製造
実施例３０９３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで６０％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９４の製造
実施例３０９４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９５の製造
実施例３０９５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９６の製造
実施例３０９６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９７の製造
実施例３０９７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９８の製造
実施例３０９８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.０(Ｍ＋２Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３０９９の製造
実施例３０９９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.０(Ｍ＋２Ｈ)。
実施例３１００の製造
実施例３１００を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１０.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１０１の製造
実施例３１０１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１０２の製造
実施例３１０２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１０３の製造
実施例３１０３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１０４の製造
実施例３１０４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１０５の製造
実施例３１０５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１０６の製造
実施例３１０６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１０７の製造
実施例３１０７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１０９の製造
実施例３１０９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１０の製造
実施例３１１０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３５〜８０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１１の製造
実施例３１１１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は８８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１２の製造
実施例３１１２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３５〜８０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７７.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７８.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１３の製造
実施例３１１３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７７.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７７.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１４の製造
実施例３１１４を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１５の製造
実施例３１１５を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１６の製造
実施例３１１６を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１７の製造
実施例３１１７を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１８の製造
実施例３１１８を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１１９の製造
実施例３１１９を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１２０の製造
実施例３１２０を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１２１の製造
実施例３１２１を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１２２の製造
実施例３１２２を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１２３の製造
実施例３１２３を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１２４の製造
実施例３１２４を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１２５の製造
実施例３１２５を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１３０の製造
実施例３１３０を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１３１の製造
実施例３１３１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０９.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１３２の製造
実施例３１３２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで６５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０９.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０９.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１３３の製造
実施例３１３３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は０.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１３４の製造
実施例３１３４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は０.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１３５の製造
実施例３１３５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで５５％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１３６の製造
実施例３１３６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１３８の製造
実施例３１３８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１３９の製造
実施例３１３９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１４.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４０の製造
実施例３１４０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４１の製造
実施例３１４１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４２の製造
実施例３１４２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は８７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４３の製造
実施例３１４３を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.２５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.３mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”で推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４４の製造
実施例３１４４を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.２５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.１mgであり、３０分にわたり３５％〜９５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”で推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４５の製造
実施例３１４５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１８.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０９.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４６の製造
実施例３１４６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４７の製造
実施例３１４７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４８の製造
実施例３１４８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１４９の製造
実施例３１４９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５０の製造
実施例３１５０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１２.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５１の製造
実施例３１５１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５−６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ フェニル、１９×１５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５〜５５％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに１０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５２の製造
実施例３１５２を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８４.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５３の製造
実施例３１５３を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９１.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５４の製造
実施例３１５４を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５５の製造
実施例３１５５を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１５.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５６の製造
実施例３１５６を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成配列に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５７の製造
実施例３１５７を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５８の製造
実施例３１５８を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１５９の製造
実施例３１５９を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％純度であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１６０の製造
実施例３１６０を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”および“カスタムアミノ酸カップリング方法”。
上記ペプチジル−樹脂(０.０３３mmol)をＮ２でパージし、マイクロ波リアクター用１５mL円錐形バイアル(撹拌子を備える)に入れた。次いで５mLの１,２−ジクロロエタンに溶解した０.０３３mmolのHoveydaGrubbs第二世代触媒を添加した。混合物をマイクロ波で１２０℃で１時間加熱した。反応完了後、樹脂を濾過し、フィルターを備えたシリンジ中、ＤＭＦ(２×５mL)、次いでＤＣＭ(３×５mL)で洗浄した。包括的脱保護および環化の方法を、実施例３０７８“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”で実施したとおり繰り返した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：３５〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は０.７７mgであり、３０分にわたり３５％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度は８６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１６１の製造
実施例３１６１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８５.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１６２の製造
実施例３１６２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１６３の製造
実施例３１６３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１６４の製造
実施例３１６４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１６５の製造
実施例３１６５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１６６の製造
実施例３１６６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１８.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１６７の製造
実施例３１６７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１０.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.１４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１６８の製造
実施例３１６８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１７.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１７１の製造
実施例３１７１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８１.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８１.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１７２の製造
実施例３１７２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９１.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９１.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１７３の製造
実施例３１７３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３５〜８０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝２.２６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.２５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０３.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１７４の製造
実施例３１７４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１７５の製造
実施例３１７５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１７６の製造
実施例３１７６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８７９.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８７８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１７７の製造
実施例３１７７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８７.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８６.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１７８の製造
実施例３１７８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８７.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１７９の製造
実施例３１７９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロフェニル)プロパン酸を使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８０の製造
実施例３１８０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−クロロ−３−フルオロフェニル)プロパン酸を使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８１の製造
実施例３１８１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８２の製造
実施例３１８２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８２.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８２.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９８２.４３３０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９８２.４３０７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８３の製造
実施例３１８３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８４の製造
実施例３１８４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２１.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８５の製造
実施例３１８５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３,５−ジクロロ−４−フルオロフェニル)プロパン酸を使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに６分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８６の製造
実施例３１８６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４,５−ジフルオロフェニル)プロパン酸を使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：.３５〜８５％Ｂを５０分かけて、次いで８５％Ｂで５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.３mgであり、２０分にわたる３０％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８７の製造
実施例３１８７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８８の製造
実施例３１８８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１８９の製造
実施例３１８９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９０の製造
実施例３１９０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９１の製造
実施例３１９１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９３.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９２の製造
実施例３１９２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９３の製造
実施例３１９３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９４の製造
実施例３１９４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９５の製造
実施例３１９５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９６の製造
実施例３１９６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９７の製造
実施例３１９７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８１.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９８の製造
実施例３１９８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３１９９の製造
実施例３１９９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２００の製造
実施例３２００を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２０１の製造
実施例３２０１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２０２の製造
実施例３２０２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２０３の製造
実施例３２０３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５９.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２０４の製造
実施例３２０４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２０５の製造
実施例３２０５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は０.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.５(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１７.９１７３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１７.９１４７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２０６の製造
実施例３２０６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ(３−Ｆ)−ＯＨの第８のカップリング方法を“Ｎ−メチル化樹脂上方法Ａ”方法を使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：２０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１１.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.０(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９０７.４２６６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９０７.４２３７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２０７の製造
実施例３２０７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜６５％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１６.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６７.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６７.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：８６６.４３９４(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：８６６.４３６７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２０８の製造
実施例３２０８を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：４０〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。２個の異性体(異性体３２０８−Ａおよび異性体３２０８−Ｂ)を得た。生成物異性体３２０８−Ａおよび異性体３２０８−Ｂの収量はそれぞれ１.６８mgおよび１.４７mgであり、２５分にわたる３５％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”で推定される純度は、それぞれ９７％および９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：異性体３２０８−Ａについて保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.７(Ｍ＋２Ｈ)および異性体３２０８−Ｂについて保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.３(Ｍ＋２Ｈ)
異性体３２０８−ＡについてＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５３.９４７３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９５３.９４５６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３２０９の製造
実施例３２０９を、次の一般的方法からなる実施例３０７８の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“カスタムアミノ酸カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ２０×２５０ ５μ粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；勾配：４０〜９５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂに５分維持；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。２個の異性体(異性体３２０９−Ａおよび異性体３２０９−Ｂ)を得た。生成物異性体３２０９−Ａおよび異性体３２０９−Ｂの収量はそれぞれ２.３５mgおよび３.２mgであり、２５分にわたる３５％〜８５％緩衝液Ｂの勾配を使用するＨＰＬＣ“分析条件Ｂ”で推定される純度はそれぞれ９６％および９９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：異性体３２０９−Ａについて保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８１.７(Ｍ＋２Ｈ)および異性体３２０９−Ｂについて保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８１.４(Ｍ＋２Ｈ)
異性体３２０９−ＡについてＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９８０.９３３２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９８０.９３１８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５００の製造
実施例３５００を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜５５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は２３.２mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８５５.５(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５０１の製造
実施例３５０１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜５５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は２２.３mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９７.６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８３８.７(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５０２の製造
実施例３５０２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜５５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は３３.４mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６.６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１１.７(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５０３の製造
実施例３５０３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜５５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１９.４mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６.６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８６１.９(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５０４の製造
実施例３５０４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜５５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１３.６mgであり、次の条件を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８.９％であった。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｊｕｐｉｔｅｒ ５μ Ｃ１８ ３００Ａ １５０×４.６mm (５７５２８９−１７)；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３０〜９５％Ｂを３０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nm。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７９８.６(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５０５の製造
実施例３５０５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜５５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１８.４mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９７.２％であった
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７４８.０(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５０６の製造
実施例３５０６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は３.４mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９.６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７９０.９(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５０７の製造
実施例３５０７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４５分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１４.３mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７６４.０(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５０８の製造
実施例３５０８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は８.７mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８４１.１(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５０９の製造
実施例３５０９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４５分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は９.５mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９８.６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１３.８(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５１０の製造
実施例３５１０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は７.１mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９.６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.２９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５１１の製造
実施例３５１１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は５.０mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は８３％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５１２の製造
実施例３５１２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４５分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は２９.７mgであり、３０分にわたる３５〜８０％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８６９.９(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５１３の製造
実施例３５１３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は７.１mgであり、３０分にわたる３５〜８０％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は８７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.２７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５１４の製造
実施例３５１４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は５.０mgであり、３０分にわたる３５〜８０％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９０％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５１５の製造
実施例３５１５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は５.６mgであり、３０分にわたる３５〜８０％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５１６の製造
実施例３５１６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１.８mgであり、次の条件を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は８９％であった。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｋｉｎｅｔｅｘ ２.６μ Ｃ１８(２) ２.１×５０mm Ｓｅｒ. ＃５１５５６１−５７；移動相Ａ：０.０２５％酢酸アンモニウムの５％メタノール／水溶液；移動相Ｂ：アセトニトリル／水(４：１)；勾配：３０〜９５％Ｂを２０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nM、オーブン：６０℃。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１２.１(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５１７の製造
実施例３５１７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。予め充填されたＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−トリチル樹脂をＳｅｉｂｅｒ樹脂の代わりに使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は５.６mgであり、３０分にわたる３０〜８０％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５１８の製造
実施例３５１８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は２.８mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は８２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７７２.７(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５１９の製造
実施例３５１９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１５.７mgであり、３０分にわたる３５〜９５％の一般的“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８４７.４(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５２０の製造
実施例３５２０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１０.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５２２の製造
実施例３５２２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５２３の製造
実施例３５２３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５２４の製造
実施例３５２４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１２.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５２５の製造
実施例３５２５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５２６の製造
実施例３５２６を次に記戴する一般的合成手順に従い製造した。
５０mLポリプロピレンチューブにＳｉｅｂｅｒ樹脂(１４０mg、０.１００mmol)を添加し、チューブをＣＥＭ Ｌｉｂｅｒｔｙマイクロ波ペプチドシンセサイザー上に置いた。その後、次の方法を連続的に実施した。
“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”を、１０当量を２時間、７５℃を使用してＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”をＦｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”を、５当量を１０分を使用してＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”を、５当量を１０分を使用してＦｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｐｈｅ−ＯＨを用いて従った；
“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”を、５当量を１０分を使用してＦｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨを用いて従った；
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”に従い、“包括的脱保護方法Ｂ”に従い、そして“環化方法Ｃ”に従った。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８７.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５２７の製造
実施例３５２７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５２８の製造
実施例３５２８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５２９の製造
実施例３５２９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５３１の製造
実施例３５３１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５３２の製造
実施例３５３２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５３３の製造
実施例３５３３を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.４１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５３４の製造
実施例３５３４を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.７２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５３５の製造
実施例３５３５を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.８１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５３６の製造
実施例３５３６を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.６１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５３７の製造
実施例３５３７を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.８１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１.１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５３８の製造
実施例３５３８を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は０.９１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５３９の製造
実施例３５３９を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.５２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４０の製造
実施例３５４０を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.５２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４１の製造
実施例３５４１を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１０.４１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４２の製造
実施例３５４２を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０３.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０３.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４３の製造
実施例３５４３を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.７１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４４の製造
実施例３５４４を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９６.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９６.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４５の製造
実施例３５４５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１１.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４６の製造
実施例３５４６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４７の製造
実施例３５４７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.１２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４８の製造
実施例３５４８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９４.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５４９の製造
実施例３５４９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は８.４１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５５０の製造
実施例３５５０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１３.７２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５５１の製造
実施例３５５１を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.８２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５５２の製造
実施例３５５２を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.６１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５５３の製造
実施例３５５３を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.２２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５５５の製造
実施例３５５５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.８２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５５６の製造
実施例３５５６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.０２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５５７の製造
実施例３５５７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は５.３mgであり、次の条件を使用してＨＰＬＣ分析により推定される純度は８３％であった。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｋｉｎｅｔｅｘ ２.６μ Ｃ１８(２) ２.１×５０mm Ｓｅｒ. ＃５１５５６１−５７；移動相Ａ：０.０２５％酢酸アンモニウムの５％メタノール／水溶液；移動相Ｂ：アセトニトリル／水(４：１)；勾配：２５〜７５％Ｂを２０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：６０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１５.０(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５５８の製造
実施例３５５８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１.８mgであり、次の条件を使用してＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６％であった。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｋｉｎｅｔｅｘ ２.６μ Ｃ１８(２) ２.１×５０mm Ｓｅｒ. ＃５１５５６１−５７；移動相Ａ：０.０２５％酢酸アンモニウムの５％メタノール／水溶液；移動相Ｂ：アセトニトリル／水(４：１)；勾配：２５〜７５％Ｂを２０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nm、オーブン：６０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８３７.１(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５５９の製造
実施例３５５９を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：ダブルカップルカップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は３.５mgであり、次の条件を使用してＨＰＬＣ分析で推定される純度は８９％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｋｉｎｅｔｅｘ ２.６μ Ｃ１８(２) ２.１×５０mm Ｓｅｒ. ＃５１５５６１−５７；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：２５〜５５％Ｂを２０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：６０℃。
分析的ＬＣＭＳ条件Ａ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８３７.１(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５６０の製造
実施例３５６０を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２０.７２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５６１の製造
実施例３５６１を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１６.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５６２の製造
実施例３５６２を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１１.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４.９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５６３の製造
実施例３５６３を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１１.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５６４の製造
実施例３５６４を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５６５の製造
実施例３５６５を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９１.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５６６の製造
実施例３５６６を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.５６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５６７の製造
実施例３５６７を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)プロパン酸を使用した。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：４０〜８５％Ｂを３５分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は９.８２mgであり、次の条件を使用してＨＰＬＣ分析で推定される純度は９８.８％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｋｉｎｅｔｅｘ ２.６μ Ｃ１８(２) ２.１×５０mm Ｓｅｒ. ＃５１５５６１−５７；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：２５〜５５％Ｂを２０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：４０℃。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８４９.９(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５６８の製造
実施例３５６８を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：４０〜８５％Ｂを３５分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は８.０８mgであり、次の条件を使用してＨＰＬＣ分析で推定される純度は９８.８％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｋｉｎｅｔｅｘ ２.６μ Ｃ１８(２) ２.１×５０mm Ｓｅｒ. ＃５１５５６１−５７；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：２５〜５５％Ｂを２０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：４０℃。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８１５.０(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５６９の製造
実施例３５６９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１６.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５７０の製造
実施例３５７０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５７１の製造
実施例３５７１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９００.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５７２の製造
実施例３５７２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１６.０１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９０.８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５７３の製造
実施例３５７３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は９.７１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５７４の製造
実施例３５７４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１６.８mgであり、次の条件を使用してＨＰＬＣ分析で推定される純度は９４.１％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｋｉｎｅｔｅｘ ２.６μ Ｃ１８(２) ２.１×５０mm Ｓｅｒ. ＃５１５５６１−５７；移動相Ａ：０.０２５％酢酸アンモニウムの５％メタノール／水溶液；移動相Ｂ：アセトニトリル／水(４：１)；勾配：２５〜５５％Ｂを２０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：６０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８４８.５(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５７５の製造
実施例３５７５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。最少量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１９.７mgであり、“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析で推定される純度は９４.１％である；勾配：３０〜７５％Ｂを３０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：６０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８３９.３(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５７６の製造
実施例３５７６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.７０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５７７の製造
実施例３５７７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.９２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１.３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５７８の製造
実施例３５７８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.２１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５７９の製造
実施例３５７９を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.５２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９.１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５８０の製造
実施例３５８０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.８１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６.１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝２.０６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５８１の製造
実施例３５８１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２８.２２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５８２の製造
実施例３５８２を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２６.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６.８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５８３の製造
実施例３５８３を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１４.６０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５８４の製造
実施例３５８４を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを５０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は３.０６mgであり、次の条件を使用してＨＰＬＣ分析で推定される純度は９５.４％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｋｉｎｅｔｅｘ ２.６μ Ｃ１８(２) ２.１×５０mm Ｓｅｒ. ＃５１５５６１−５７；移動相Ａ：０.０２５％酢酸アンモニウムの５％メタノール／水溶液；移動相Ｂ：アセトニトリル／水(４：１)；勾配：２５〜５５％Ｂを２０分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：６０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８３７.１(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５８５の製造
実施例３５８５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４０分かけて、次いで８５％Ｂまでの勾配を５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。異性体ＡおよびＢの２個の異性体生成物を単離した。
異性体Ａの収量は１.７０mgであり、次の条件を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は１００.０％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｊｕｐｉｔｅｒ ５μ Ｃ１８ １５０×４.６mm ３００Ａ.；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液：３０〜６０％Ｂを１５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：４０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８４５.１(Ｍ＋Ｈ)
異性体Ｂの収量は２.１８mgであり、次の条件を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９２.８％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｊｕｐｉｔｅｒ ５μ Ｃ１８ １５０×４.６mm ３００Ａ.；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液：３５〜６０％Ｂを１５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：４０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８４７.９(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５８６の製造
実施例３５８６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は４.７９mgであり、次の条件を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６.６％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｊｕｐｉｔｅｒ ５μ Ｃ１８ １５０×４.６mm ３００Ａ.；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液：３５〜６０％Ｂを１５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：４０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８３２.９(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５８８の製造
実施例３５８８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４０分かけて、次いで９５％Ｂまで５分の勾配；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は３.１９mgであり、次の条件を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９１.９％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｊｕｐｉｔｅｒ ５μ Ｃ１８ １５０×４.６mm ３００Ａ.；移動相Ａ：０.０２５％酢酸アンモニウムの５％メタノール／水溶液；移動相Ｂ：アセトニトリル／水(４：１)：３０〜６０％Ｂを１５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：４０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８３８.３(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５８９の製造
実施例３５８９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.３１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.３％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７４.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５９０の製造
実施例３５９０を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.６０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５９１
実施例３５９１を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１０.２１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５９２の製造
実施例３５９２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.４０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５９３の製造
実施例３５９３を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は７.８０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５９４の製造
実施例３５９４を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４０分かけて、次いで８５％Ｂまでの勾配を５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は２.０８mgであり、“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は８９.３％である；３０〜６０％Ｂを１５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：４０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.２９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １９２５.６(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １９２４.４(Ｍ＋Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６２.４６０５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６２.４５８２１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５９５の製造
実施例３５９５を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４０分かけて、次いで８５％Ｂまでの勾配を５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は３.３９mgであり、“分析条件Ｂ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は１００％である；３５〜７５％Ｂを１５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ、オーブン：４０℃。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １９２５.４ (Ｍ(−Ｔｒｔ)＋Ｈ)。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １９２７.６ (Ｍ(−Ｔｒｔ)＋Ｈ)。
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：１０８３.５１５３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１０８３.５１１６９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５９６の製造
実施例３５９６を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＨＰＬＣで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４０分かけて、次いで８５％Ｂまでの勾配を５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は２.５２mgであり、次の条件を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９０.６％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｊｕｐｉｔｅｒ ５μ Ｃ１８ １５０×４.６mm ３００Ａ.；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液：３５〜６０％Ｂを２５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nｍ。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １９７８.３(Ｍ＋Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １９７９.４(Ｍ＋Ｈ)
実施例３５９７の製造
実施例３５９７を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。２個の異性体生成物を単離した。
異性体Ａの収量は３.４０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.９％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.４(Ｍ＋２Ｈ)
異性体Ｂの収量は４.５０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５９８の製造
実施例３５９８を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.４５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３５９９の製造
実施例３５９９を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.０１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２.７％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６００の製造
実施例３６００を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.４０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.４％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６０１の製造
実施例３６０１を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は５.３０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６０２の製造
実施例３６０２を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを３５分かけて、次いで８５％Ｂまでの勾配を５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は０.９９mgであり、次の条件を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６％である。カラム：ＹＭＣ Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＡＱ ３μm １５０×；移動相Ａ：０.０２５ 酢酸アンモニウム／アセトニトリル(８：２)；移動相Ｂ：０.０２５％酢酸アンモニウム／アセトニトリル(２：８)：３０〜６０％Ｂを１５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nM。オーブン４０℃。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７８３.０(Ｍ＋Ｈ)
分析条件Ａ：保持時間＝１.２７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １７８３.８(Ｍ＋Ｈ)
実施例３６０３の製造
実施例３６０３を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、Ｆｍｏｃ−２−Ｎａｌ−ＯＨのＮ−メチル化のための“Ｎ−メチル化樹脂上方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４０分かけて、次いで８５％Ｂまでの勾配を５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は０.８９mgであり、“分析条件Ｃ”を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は１００％である：３０〜６０％Ｂを１５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nM。オーブン４０℃。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８４５.８(Ｍ＋Ｈ)
分析条件Ａ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８４７.５(Ｍ＋Ｈ)
実施例３６０４の製造
実施例３６０４を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８(２) ２５０×２１.２ Ａｘｉａ、１００Ａ Ｓｅｒ. ＃５２０２２１−１；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液；勾配：３５〜７５％Ｂを４０分かけて、次いで８５％Ｂまでの勾配を５分かけて；流速：１５mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物を最小量のアセトニトリルおよび水に溶解し、凍結および凍結乾燥して、白色非晶質固体を得た。生成物の収量は１.１０mgであり、次の条件を使用するＨＰＬＣ分析により推定される純度は９６％である。カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｊｕｐｉｔｅｒ ５μ Ｃ１８ １５０×４.６mm ３００Ａ.；移動相Ａ：０.１％ＴＦＡの水溶液；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液：３５〜６０％Ｂを２５分かけて；流速：１mL／分。検出ＵＶ：２１７nM。オーブン４０℃。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｃ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １８３９.９(Ｍ＋Ｈ)
実施例３６０５の製造
実施例３６０５を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は６.５０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３.８％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６０６の製造
実施例３６０６を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.０７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６７.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６０７の製造
実施例３６０７を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は３.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６.２％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６０８の製造
実施例３６０８を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１.４９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１.１％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５０.４２３０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９５０.４２００(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６０９の製造
実施例３６０９を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は０.３９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.０(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３３.４１４６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３３.４１２６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６１０の製造
実施例３６１０を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は１４.７９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.０(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：８９１.９２６７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：８９１.９２２９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６１１の製造
実施例３６１１を、次の一般的方法からなる実施例３０２６の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“ＣＥＭ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：標準的カップリング方法”、“ＣＥＭ方法Ａ：カスタムアミノ酸カップリング方法”、“クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は２５.５３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００.０％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２９.４４４７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２９.４４２８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例３６１３の製造
実施例３６１３を、次の一般的方法からなる実施例７２の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：二級アミンカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロ酢酸カップリング方法Ａ”、“包括的脱保護方法Ｂ”および“環化方法Ｃ”。
粗製の物質を次の条件を使用して分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３００、１９×２５０mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：３０〜７０％Ｂを２５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、乾燥した。生成物の収量は４.９３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.５％であった。
分析的ＬＣＭＳ条件Ｄ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析的ＬＣＭＳ条件Ｅ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析データ：
マススペクトロメトリー：“ＥＳＩ−ＭＳ(＋)”は、陽イオンモードで実施するエレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＭＳ(−)”は、陰イオンモードで実施するエレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)”は、陽イオンモードで実施する高解像度エレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(−)”は、陰イオンモードで実施する高解像度エレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す。検出した質量を、“ｍ／ｚ”単位指定に従い示す。１０００より大きい正確な質量の化合物は、二重荷電または三重荷電イオンとしてしばしば検出された。
分析条件Ａ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＢＥＨ Ｃ１８、２.０×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；温度：５０℃；勾配：０％Ｂ、０〜１００％Ｂを３分かけて、次いで０.１００％Ｂに５分維持；流速：１mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析条件Ｂ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＢＥＨ Ｃ１８、２.０×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；温度：５０℃；勾配：０％Ｂ、０〜１００％Ｂを３分かけて、次いで０.１００％Ｂに５分維持；流速：０.５mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析条件Ｃ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＡＱＵＩＴＹ(登録商標)ＢＥＨ Ｃ１８ ２.１×５０mm １.７μm粒子；移動相Ａ：水と０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリルと０.０５％ＴＦＡ；温度：４０℃；勾配：０％Ｂ、０〜１００％Ｂを１.５分かけて、次いで０.１００％Ｂに５分維持；流速：０.８mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
一般的方法：
全ての操作をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、底フリットに接続した１０mLポリプロピレンチューブで行った；反応の規模が０.１００mmolを超えるとき、底フリットに接続した４０mLポリプロピレンチューブを使用したを使用した。チューブをチューブの底部と上部の両方からＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに接続した。ＤＭＦおよびＤＣＭをチューブの上部から添加でき、同様にチューブの側面から洗い落とす。残りの反応材をチューブの下部から添加し、フリットを通して上げて、樹脂と接触させる。全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的撹拌”は底フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味し、該パルスは約５秒続き、３０秒毎に生じる。ＤＭＦ中のクロロアセチルクロライド溶液を、製造２４時間以内に使用した。アミノ酸溶液は、一般に製造から３週間を超えては使用しなかった。ＨＡＴＵ溶液を製造５日以内に使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｒｉｎｋ＝(２,４−ジメトキシフェニル)(４−アルコキシフェニル)メタンアミン、ここで、“４−アルコキシはポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用する樹脂はＲｉｎｋリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.５６mmol／ｇ荷重である。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＲｉｎｋリンカーの量により決定する。この規模は、約１７８mgの上記Ｒｉｎｋ−メリフィールド樹脂に対応する。全ての方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、下に“樹脂膨潤方法”として記戴する樹脂膨潤から開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“単カップリング方法”を使用した。二級アミンＮ末端へのアミノ酸のカップリングは下記“ダブルカップリング方法”を使用した。クロロアセチルのペプチドのＮ末端へのカップリングは下の“クロロアセチルクロライドカップリング方法”により詳述する。
樹脂膨潤方法：
１０mLポリプロピレン固相反応容器に、メリフィールド：Ｒｉｎｋ樹脂(１７８mg、０.１００mmol)を添加した。樹脂を、次のとおり３回洗浄(膨潤)した。反応容器に、ＤＭＦ(２.０mL)を添加し、その時点で混合物を１０分周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。。
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、０.５mL、４当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物(２.０mL)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
ダブルカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、０.５mL、４当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、０.５mL、４当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物(２.０mL)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を直接次工程で使用した。
クロロアセチルクロライドカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に６回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.８Ｍ、３.０mL、２４当量)、次いでクロロアセチルクロライド(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.６５mL、１３.２当量)を添加した。混合物を３０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０mL)を容器の上部から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂をＮ２流下に１５分置いた。
Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ：
この一連の方法は、記戴する例外以外、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”と同一である。全ての方法において、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーの代わりにＳｙｍｐｈｏｎｙ Ｘペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)を使用し、全ての反応材は反応容器の上部から添加した。
樹脂膨潤方法：
この方法は、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”と同一である。
単カップリング方法：
この方法は、ＤＩＰＥＡ溶液の濃度が０.４Ｍであり、１.０mLのこの溶液を反応に送達した以外、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”と同一である。
ダブルカップリング方法：
この方法は、ＤＩＰＥＡ溶液の濃度が０.４Ｍであり、１.０mLのこの溶液を反応に送達した以外、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”と同一である。
クロロアセチルクロライドカップリング方法：
この方法は、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”と同一である。
包括的脱保護方法Ａ：
全ての操作を、特に断らない限り手動で行った。“包括的脱保護方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＲｉｎｋリンカーの量により決定する。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。“脱保護溶液”は、４０mLガラスバイアルでトリフルオロ酢酸(２２mL)、フェノール(１.３２５ｇ)、水(１.２５mL)およびトリイソプロピルシラン(０.５mL)を合わせることにより調製した。樹脂を反応容器から除き、４mLガラスバイアルに移した。バイアルに“脱保護溶液”(２.０mL)を添加した。混合物をシェーカーで激しく混合した(１０００RPMで１分、次いで５００RPMで１〜２時間)。混合物を０.２μシリンジフィルターで濾過し、固体を“脱保護溶液”(１.０mL)またはＴＦＡ(１.０mL)で抽出した。
合わせた濾液を入れた２４mL試験管にＥｔ２Ｏ(１５mL)を添加した。混合物を激しく撹拌し、相当量の白色固体が沈殿した。混合物を５分遠心分離し、次いで溶液を固体から傾捨し、廃棄した。固体をＥｔ２Ｏ(２０mL)に懸濁し、混合物を５分遠心分離し、溶液を固体から傾捨し、廃棄した。最終回には、固体をＥｔ２Ｏ(２０mL)に懸濁し、混合物を５分遠心分離し、溶液を固体から傾捨し、廃棄して、粗製のペプチドを白色〜灰白色固体として得た。
環化方法Ａ：
全ての操作を、特に断らない限り手動で行った。“環化方法Ａ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模はペプチドの製造に使用した樹脂に結合するＲｉｎｋリンカーの量により決定する。この規模は方法において使用するペプチドの量の直接の決定には基づかない。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。粗製のペプチド固体をＭｅＣＮ：０.１Ｍ ＮＨ４ＯＡｃ水溶液(３０mL：３０mL)に溶解し、溶液をＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を使用して注意深くｐＨ＝８.５〜９.０に調節した。溶液を撹拌せずに１２〜１８時間静置した。反応溶液を濃縮し、残渣をＤＭＳＯ：ＭｅＯＨに溶解した。この溶液を逆相ＨＰＬＣ精製に付して、所望の環状ペプチドを得た。
環化方法Ｂ：
全ての操作を、特に断らない限り手動で行った。“環化方法Ｂ”の方法は０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模はペプチドの製造に使用した樹脂に結合するＲｉｎｋリンカーの量により決定する。この規模は方法において使用するペプチドの量の直接の決定には基づかない。方法は、記戴する体積を規模の倍数で調節することにより、０.１００mmol規模を超えて拡大できる。粗製のペプチド固体をＭｅＣＮ：０.１Ｍ ＮＨ４ＯＡｃ水溶液(１：１)に総体積１８〜２２mL間で溶解し、溶液をＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を使用して注意深くｐＨ＝８.５〜９.０に調節した。溶液を撹拌せずに１２〜１８時間静置した。反応溶液を濃縮し、残渣をＤＭＳＯ：ＭｅＯＨに溶解した。この溶液を逆相ＨＰＬＣ精製に付して、所望の環状ペプチドを得た。
一般的合成手順Ａ：
“一般的合成手順Ａ”は、ここに記戴する環状ペプチドを得るために使用した一般的方法配列を記戴する。この一般的方法の目的で、“Ｓｙｍｐｈｏｎｙ方法Ａ”の方法は“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ”のものと交換可能である。１０mLポリプロピレン固相反応容器にＲｉｎｋ−メリフィールド樹脂(１７８mg、０.１００mmol)を添加し、反応容器をＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに置いた。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”に従った。次いで一連のアミノ酸カップリングを、樹脂結合ペプチドのＮ末端が一級アミンであるならば“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”に、樹脂結合ペプチドのＮ末端が二級アミンであるならば“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”に従い、Ｐｒｅｌｕｄｅ上で連続的に行った。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”に従った；次いで“包括的脱保護方法Ａ”に従った；次いで“環化方法Ａ”に従った。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)([１３Ｃ]メチル)アミノ)ヘキサン酸の製造
スキーム：
工程１：
パラホルムアルデヒド(１３Ｃ標識)(５００mg、１６.６５mmol)、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)ヘキサン酸(４５２７mg、１２.８１mmol)およびｐ−トルエンスルホン酸(２２１mg、１.２８１mmol)を含む混合物を、トルエン(１００mL)中、２時間還流した。反応物をＲＴに冷却し、飽和重炭酸ナトリウム溶液、続いて塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発して、工程１の生成物(４.６９４ｇ、１２.８１mmol)を黄色油状物として得た。収率は１００％と推定された。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝３８９.２(Ｍ＋Ｎａ)
工程２：
工程１の生成物全部(４.６９４ｇ、１２.８３mmol)をＣＨＣｌ３(４０mL)に溶解し、溶液にトリエチルシラン(１０.２４mL、６４.１mmol)、続いてＴＦＡ(１０mL、１３０mmol)を添加した。溶液を、ＲＴで、Ｎ２の陽圧下１８時間撹拌した。揮発物を減圧下除去して、粘性油状物を得た。この油状物をＥｔＯＡｃに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム(２×１００mL)で抽出した。相界面の固体を水層と共に回収した。水層をＨＣｌ水溶液でｐＨ４〜５に調節した。白色固体がｐＨ調節の終点付近で沈殿した。混合物をＥｔＯＡｃ(２００mL)で抽出し、有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して、精製済の生成物(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(([１３Ｃ]メチル)アミノ)ヘキサン酸(３ｇ、８.１４mmol、６３.５％収率)を白色固体として得た。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.78 (d, J=7.1 Hz, 2H), 7.66 - 7.52 (m, 2H), 7.41 (d, J=6.8 Hz, 2H), 7.33 (d, J=6.1 Hz, 2H), 4.84 - 4.59 (m, 1H), 4.55 - 4.40 (m, 2H), 4.34 - 4.17 (m, 1H), 3.16 - 2.98 (m, 1H), 2.71 (br. s., 1H), 1.77 (br. s., 1H), 1.44 - 1.14 (m, 5H), 0.91 (d, J=7.3 Hz, 3H). ESI-MS(+) m/z=369.4(M+H)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)([１３Ｃ]メチル)アミノ)プロパン酸の製造
スキーム：
工程１：
パラホルムアルデヒド(Ｃ１３標識)(２５０mg、８.３３mmol)、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)プロパン酸(１９９４mg、６.４０mmol)およびｐ−トルエンスルホン酸(１１０mg、０.６４０mmol)を含む混合物を、トルエン(５０mL)中、２時間還流した。反応物をＲＴに冷却し、飽和重炭酸ナトリウム溶液、続いて塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発して、工程１の生成物(２.０８ｇ、６.４１mmol)を黄色油状物として得た。収率は１００％と推定された。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝３４８.１(Ｍ＋Ｎａ)
工程２：
工程１の生成物全部(２.０８ｇ、６.４１mmol)をＣＨＣｌ３(２０mL)に溶解し、溶液にトリエチルシラン(５.１２mL、３２.１mmol)、続いてＴＦＡ(４.９４mL、６４.１mmol)を添加した。溶液を、ＲＴで、Ｎ２の陽圧下１８時間撹拌した。揮発物を除去して、粘性油状物を得た。この油状物をＥｔＯＡｃに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム(２×１００mL)で抽出した。相界面の固体を水層と共に回収した。水層をＨＣｌ水溶液でｐＨ４〜５に調節した。白色固体がｐＨ調節の終点付近で沈殿した。混合物をＥｔＯＡｃ(２００mL)で抽出し、有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して、精製済の生成物(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)([１３Ｃ]メチル)アミノ)プロパン酸(１ｇ、３.０６mmol、４７.８％収率)を白色固体として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.79 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.62 (br. s., 2H), 7.43 (t, J=7.2 Hz, 2H), 7.34 (t, J=7.3 Hz, 2H), 4.88 (br. s., 1H), 4.52 - 4.37 (m, 2H), 4.29 (d, J=6.1 Hz, 1H), 3.11 (s, 1H), 2.76 (s, 2H), 1.49 (d, J=6.8 Hz, 2H), 1.39 (br. s., 1H). ESI-MS(+) m/z=349.2(M+H)
(２Ｓ,５Ｓ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボン酸の製造
スキーム：
工程１：
ＴＦＡ(５mL、６４.９mmol)を、(２Ｓ,５Ｓ)−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル５−ヒドロキシピペリジン−１,２−ジカルボキシレート(１ｇ、３.３２mmol)のＤＣＭ(５mL)溶液にＲＴで添加し、溶液を１時間撹拌し、その時点でＬＣＭＳ分析により完全な変換が示された(Ｂｏｃの除去)。溶液を減圧下除去し、残渣を３mLの濃ＨＣｌ水溶液で処理した。溶液を５分撹拌し、その時点でＬＣＭＳ分析により完全な変換が示された(ｔＢｕの除去)。溶液を減圧下濃縮して、(２Ｓ,５Ｓ)−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボン酸、ＨＣｌ(０.６ｇ)を油状物として得た。収率は１００％と推定された。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝１４６.２(Ｍ＋Ｈ)
工程２：
(２Ｓ,５Ｓ)−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボン酸、ＨＣｌ(.６０３ｇ、３.３２mmol)の１,４−ジオキサン(４mL)および水(１６mL)溶液に、炭酸カリウム(１.８３５ｇ、１３.２８mmol)、続いてクロロギ酸(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(０.８５９ｇ、３.３２mmol)を０℃で添加した。混合物をＲＴで１８時間撹拌し、水(１０ml)で処理した。得られた混合物をジエチルエーテル(２×１５ml)で抽出した。水層をＨＣｌ水溶液(１Ｍ)でｐＨ２〜３に酸性化し、ＤＣＭ(３×２０ml)で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、粗製の生成物(２Ｓ,５Ｓ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボン酸(８００mg、６５.６％収率)を白色固体として得た。1H NMR (500MHz, メタノール-d4) δ 7.86 - 7.78 (m, 2H), 7.69 - 7.57 (m, 2H), 7.48 - 7.37 (m, 2H), 7.37 - 7.20 (m, 2H), 4.81 - 4.77 (m, 1H), 4.59 - 4.36 (m, 2H), 4.32 - 4.20 (m, 1H), 4.18 - 4.08 (m, 1H), 3.75 - 3.64 (m, 2H), 3.58 - 3.43 (m, 1H), 2.01 - 1.89 (m, 1H), 1.81 - 1.57 (m, 1H), 1.30 - 1.17 (m, 1H). ESI-MS(+) m/z=368.2(M+Na)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)オキシ)−３−ブロモフェニル)プロパン酸の製造
スキーム：
工程１：
撹拌棒を備えた２５０mL丸底フラスコに酢酸(５０mL)および臭化水素酸のＡｃＯＨ溶液(２７mL、１４９mmol)、次いで(Ｓ)−２−アミノ−３−(４−ヒドロキシフェニル)プロパン酸(１３.４７ｇ、７４.３mmol)を添加した。撹拌中の溶液に臭素(４.１４mL、８０mmol)のＡｃＯＨ(２０mL)溶液を３時間かけて滴下漏斗から滴下した。溶液を室温で撹拌した。９日後、撹拌を停止し、混合物を濾過した(反応時間は最適化していない)。フィルターケーキをＡｃＯＨ(１００mL)、次いでＥｔ２Ｏ(１５０mL)で洗浄した。単離した灰白色固体を真空下に乾燥して、生成物(Ｓ)−２−アミノ−３−(３−ブロモ−４−ヒドロキシフェニル)プロパン酸臭化水素酸塩(２３.９ｇ、８５％収率)を淡黄色粉末として得た。1H NMR (500MHz, メタノール-d4) δ 7.47 - 7.41 (m, 1H), 7.12 (dd, J=8.2, 2.2 Hz, 1H), 6.92 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.22 (dd, J=7.6, 5.4 Hz, 1H), 3.23 (dd, J=14.8, 5.4 Hz, 1H), 3.08 (dd, J=14.7, 7.7 Hz, 1H)
工程２：
(Ｓ)−２−アミノ−３−(３−ブロモ−４−ヒドロキシフェニル)プロパン酸臭化水素酸塩(３ｇ、８.８０mmol)の１,４−ジオキサン(１２mL)および水(４８mL)溶液に炭酸カリウム(４.８６ｇ、３５.２mmol)、続いてクロロギ酸(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(２.２７６ｇ、８.８０mmol)を０℃で添加した。混合物をＲＴで１８時間撹拌し、水(５０mL)で処理した。得られた混合物をジエチルエーテル(２×１５ml)で抽出した。水層をＨＣｌ水溶液(１Ｍ)でｐＨ２〜３に酸性化し、ＤＣＭ(３×２０ml)で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、粗製の生成物を得た。粗製の生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(１２０ｇカラム、３０〜９０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、２０カラム体積)で精製して、生成物(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)オキシ)−３−ブロモフェニル)プロパン酸(３.４２ｇ、５５.２％収率)を明黄色固体として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.80 (t, J=7.9 Hz, 4H), 7.68 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.60 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.49 - 7.32 (m, 9H), 7.16 (br. s., 2H), 5.32 (s, 1H), 4.73 (br. s., 1H), 4.58 (d, J=7.3 Hz, 2H), 4.54 - 4.34 (m, 2H), 4.24 (t, J=6.6 Hz, 1H), 3.31 - 3.03 (m, 2H). ESI-MS(+) m/z=721(M+H2O)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸の製造
スキーム：
工程１：
０℃の(Ｓ)−メチル２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３−(１Ｈ−インドール−３−イル)プロパノエート(４ｇ、１２.５６mmol)および炭酸セシウム(４.５０ｇ、１３.８２mmol)のＤＭＦ(４０mL)溶液に、２−ブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル(２.０１５mL、１３.８２mmol)を添加し、氷浴を外すことによりＲＴに温め、１８時間撹拌した。反応物を１：１氷水：１Ｎ ＨＣｌに注加し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、回収し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発して、粗製の生成物を得た。粗製の生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(８０ｇカラム、０〜５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンを２０ＣＶで)で精製して、生成物(Ｓ)−メチル３−(１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)−２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)プロパノエート(４.６９ｇ、８６％収率)を得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.56 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.26 - 7.18 (m, 2H), 7.17 - 7.12 (m, 1H), 6.92 (s, 1H), 5.09 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.73 - 3.59 (m, 3H), 3.30 (d, J=5.1 Hz, 2H), 1.45 (s, 18H). ESI-MS(+) m/z=433(M+H)
工程２：
水酸化リチウム一水和物(０.４５５ｇ、１０.８４mmol)を(Ｓ)−メチル３−(１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)−２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)プロパノエート(４.６９ｇ、１０.８４mmol)のジオキサン(５０mL)および水(１６.６７mL)溶液に添加し、ＲＴで１時間撹拌した。反応物を１Ｍ ＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、回収し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発して、粗製の物質を得た。粗製の物質をシリカゲルクロマトグラフィー(１２０ｇカラム、０〜５０％ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを２０ＣＶで)で精製して、生成物(Ｓ)−３−(１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)−２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)プロパン酸(３.５４ｇ、７８％収率)を得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.62 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.26 - 7.21 (m, 2H), 7.15 (ddd, J=7.9, 5.6, 2.3 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 5.08 (d, J=7.8 Hz, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.65 (br. s., 1H), 3.42 - 3.31 (m, 2H), 1.46 (s, 18H). ESI-MS(+) m/z=441(M+Na)
工程３：
ＨＣｌ(ジオキサン中４Ｍ、１０ml、４０.０mmol)を、Ｎ２雰囲気下、氷浴で冷却した。(Ｓ)−３−(１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)−２−((ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)プロパン酸(１ｇ、２.３９０mmol)をＨＣｌ溶液に添加した。氷浴を外し、反応物を３０分撹拌した。溶液を濃縮して(浴温度＝ＲＴ)、生成物(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸、ＨＣｌ(８４８mg、１００％収率)を粘性油状物として得た。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝３１９.２(Ｍ＋Ｎａ)
工程４：
(Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸、ＨＣｌ(８４８mg、２.３９０mmol)の１,４−ジオキサン(５mL)および水(２０mL)の溶液に、炭酸カリウム(１３２１mg、９.５６mmol)、続いてクロロギ酸(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(６１８mg、２.３９０mmol)を０℃で添加した。混合物をＲＴで１８時間撹拌し、水(１０ml)で処理した。得られた混合物をジエチルエーテル(２×１５ml)で抽出した。水層をＨＣｌ水溶液(１Ｍ)でｐＨ２〜３に酸性化し、ＤＣＭ(３×２０ml)で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、粗製の生成物を得た。粗製の生成物を分取ＨＰＬＣ(１０〜１００％ＣＨ３ＣＮ：水と０.１％ＴＦＡ緩衝液)で精製して、生成物(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸(４０５mg、０.７４９mmol、３１.３％収率)を白色固体として得た。1H NMR (500MHz, メタノール-d4) δ 7.80 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.67 - 7.60 (m, 2H), 7.39 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.32 - 7.22 (m, 3H), 7.18 (td, J=7.6, 0.9 Hz, 1H), 7.08 (td, J=7.5, 0.9 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.54 (dd, J=8.4, 4.9 Hz, 1H), 4.36 - 4.23 (m, 2H), 4.23 - 4.14 (m, 1H), 3.43 - 3.35 (m, 2H), 3.25 - 3.09 (m, 1H), 1.55 - 1.38 (m, 9H). ESI-MS(+) m/z=541.3(M+H)
(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−((６−メトキシイソキノリン−１−イル)オキシ)ピロリジン−２−カルボン酸の製造
スキーム：
工程１：
(２Ｓ,４Ｒ)−４−((６−メトキシイソキノリン−１−イル)オキシ)ピロリジン−２−カルボン酸、ＨＣｌ(７５０mg、２.３０９mmol)の１,４−ジオキサン(５mL)および水(２０mL)溶液に、炭酸カリウム(１２７７mg、９.２４mmol)、続いてクロロギ酸(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(５９７mg、２.３０９mmol)を０℃で添加した。混合物をＲＴで１８時間撹拌し、水(１０ml)で処理した。得られた混合物をＨＣｌ水溶液(１Ｍ)でｐＨ２〜３に酸性化し、ＤＣＭ(３×２０ml)で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、粗製の生成物を得た。粗製の生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(４０ｇカラム、ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液０〜１０％を２０ＣＶで)で精製して、生成物(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−((６−メトキシイソキノリン−１−イル)オキシ)ピロリジン−２−カルボン酸を白色固体として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 8.09 (d, J=9.3 Hz, 1H), 8.00 - 7.88 (m, 1H), 7.80 - 7.65 (m, 2H), 7.65 - 7.47 (m, 2H), 7.37 (t, J=7.2 Hz, 2H), 7.34 - 7.29 (m, 2H), 7.25 - 7.12 (m, 2H), 7.09 - 7.04 (m, 1H), 5.83 (br. s., 1H), 4.76 (t, J=7.9 Hz, 1H), 4.61 - 4.39 (m, 3H), 4.30 - 4.19 (m, 2H), 4.06 - 3.94 (m, 3H), 2.70 (dd, J=7.9, 3.3 Hz, 2H). ESI-MS(+) m/z=511(M+H)
(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−((３−ブロモキノリン−２−イル)オキシ)ピロリジン−２−カルボン酸の製造
スキーム：
工程１：
ＴＦＡ(５.０ml、６５mmol)を、(２Ｓ,４Ｒ)−４−((３−ブロモキノリン−２−イル)オキシ)−１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ピロリジン−２−カルボン酸(３００mg、０.６８６mmol)のＤＣＭ(５mL)溶液に添加し、ＲＴでＬＣＭＳ分析により完全な変換が示されるまで撹拌した。溶液を濃縮して、生成物(２Ｓ,４Ｒ)−４−((３−ブロモキノリン−２−イル)オキシ)ピロリジン−２−カルボン酸、ＴＦＡ(３１０mg)を粘性油状物として得た。収率は１００％と推定された。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝３３７(Ｍ＋Ｈ)
工程２：
(２Ｓ,４Ｒ)−４−((３−ブロモキノリン−２−イル)オキシ)ピロリジン−２−カルボン酸、ＴＦＡ(３１０mg、０.６８７mmol)の１,４−ジオキサン(３mL)および水(１２mL)溶液に、炭酸カリウム(３８０mg、２.７５mmol)、続いてクロロギ酸(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(１７８mg、０.６８７mmol)を０℃で添加した。混合物をＲＴで１８時間撹拌し、水(１０ml)で処理した。得られた混合物をジエチルエーテル(２×１５ml)で抽出した。水層をＨＣｌ水溶液(１Ｍ)でｐＨ２〜３に酸性化し、ＤＣＭ(３×２０ml)で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、粗製の生成物を得た。粗製の生成物を分取ＨＰＬＣ(１０〜１００％ＣＨ３ＣＮ：水、０.１％ＴＦＡ緩衝液)で精製して、生成物(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−((３−ブロモキノリン−２−イル)オキシ)ピロリジン−２−カルボン酸(２５０mg、６５％収率)を白色固体として得た。1H NMR (500MHz, メタノール-d4) δ 7.90 - 7.75 (m, 2H), 7.73 - 7.63 (m, 2H), 7.58 - 7.49 (m, 2H), 7.49 - 7.39 (m, 2H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.26 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.20 - 7.14 (m, 1H), 7.12 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.04 (td, J=7.4, 1.0 Hz, 1H), 4.68 - 4.56 (m, 2H), 4.51 (t, J=8.3 Hz, 1H), 4.44 - 4.33 (m, 2H), 4.27 - 4.16 (m, 2H), 3.99 - 3.92 (m, 1H), 3.81 - 3.73 (m, 1H), 3.73 - 3.64 (m, 1H). ESI-MS(+) m/z=337(M+H)
(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−(ベンジルオキシ)ピロリジン−２−カルボン酸の製造
スキーム：
工程１：
ＴＦＡ(５ml、６４.９mmol)を、(２Ｓ,４Ｒ)−４−(ベンジルオキシ)−１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ピロリジン−２−カルボン酸(５００mg、１.５５６mmol)のＤＣＭ(５mL)溶液に添加し、ＲＴでＬＣＭＳ分析により完全な変換が示されるまで撹拌した。溶液を濃縮して、生成物を得た。収率は１００％と推定された。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝２２２(Ｍ＋Ｈ)
工程２：
(２Ｓ,４Ｒ)−４−(ベンジルオキシ)ピロリジン−２−カルボン酸、ＴＦＡ(５２２mg、１.５５７mmol)の１,４−ジオキサン(４mL)および水(１６mL)の溶液に、炭酸カリウム(８６１mg、６.２３mmol)、続いてクロロギ酸(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(４０３mg、１.５５７mmol)を０℃で添加した。混合物をＲＴで１８時間撹拌し、水(１０ml)で処理した。得られた混合物をジエチルエーテル(２×１５ml)で抽出した。水層をＨＣｌ水溶液(１Ｍ)でｐＨ２〜３に酸性化し、ＤＣＭ(３×２０ml)で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、粗製の生成物を得た。粗製の生成物を分取ＨＰＬＣ(１０〜１００％ＣＨ３ＣＮ：水０.１％ＴＦＡ緩衝液)で精製して、精製済生成物(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−(ベンジルオキシ)ピロリジン−２−カルボン酸(４３０mg、６２.３％収率)を白色固体として得た。1H NMR (500MHz, メタノール-d4) δ 7.86 - 7.76 (m, 2H), 7.71 - 7.57 (m, 2H), 7.44 - 7.27 (m, 9H), 4.58 - 4.50 (m, 2H), 4.49 - 4.33 (m, 3H), 4.29 - 4.19 (m, 2H), 3.72 - 3.49 (m, 2H), 2.49 (br. s., 1H), 2.10 (ddd, J=13.4, 8.2, 4.8 Hz, 1H). ESI-MS(+) m/z=444(M+H)
(Ｓ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ピペラジン−２−カルボン酸の製造
スキーム：
工程１：
(Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ピペラジン−２−カルボン酸(５００mg、２.１７１mmol)の１,４−ジオキサン(５mL)および水(２０mL)溶液に、炭酸カリウム(１２００mg、８.６９mmol)、続いてクロロギ酸(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(５６２mg、２.１７１mmol)を０℃で添加した。混合物をＲＴで１８時間撹拌し、水(１０ml)で処理した。得られた混合物をジエチルエーテル(２×１５ml)で抽出した。水層をＨＣｌ水溶液(１Ｍ)でｐＨ２〜３に酸性化し、ＤＣＭ(３×２０ml)で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、粗製の生成物を得た。粗製の生成物を分取ＨＰＬＣ(１０〜１００％ＣＨ３ＣＮ：水と０.１％ＴＦＡ緩衝液)で精製して、生成物(Ｓ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ピペラジン−２−カルボン酸(２９４mg、３０％収率)を白色固体として得た。1H NMR (500MHz, メタノール-d4) δ 7.83 (t, J=6.6 Hz, 2H), 7.68 - 7.58 (m, 2H), 7.45 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.30 (m, 2H), 4.65 (br. s., 1H), 4.58 (d, J=13.7 Hz, 1H), 4.55 - 4.39 (m, 3H), 4.33 - 4.18 (m, 1H), 2.91 - 2.85 (m, 4H), 1.47 (s, 9H). ESI-MS(+) m/z=475(M+Na)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸の製造
スキーム：
工程１：
撹拌棒を備えた丸底フラスコに、(Ｓ)−メチル３−ヒドロキシ−２−(トリチルアミノ)プロパノエート(１０.０ｇ、２７.７mmol)、トリフェニルホスフィン(７.９８ｇ、３０.４mmol)およびトルエン(１００mL)を添加した。溶液を室温で３０分撹拌し、次いで溶液にｍ−クレゾール(３.７８mL、３６.０mmol)およびジイソプロピルアゾジカルボキシレート(“ＤＩＡＤ”、５.９２mL、３０.４mmol)を添加した。溶液を撹拌しながら８０℃で１８時間加熱した。溶液を室温に冷却し、濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン：ＥｔＯＡｃ)に付して、(Ｓ)−メチル３−(ｍ−トリルオキシ)−２−(トリチルアミノ)プロパノエート、８.２８ｇ(６６％)を得た。1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.53 (d, J=7.6 Hz, 6H), 7.29 - 7.23 (m, 5H), 7.21 - 7.11 (m, 4H), 6.77 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.73 - 6.64 (m, 2H), 5.30 (s, 2H), 4.25 (dd, J=9.3, 4.9 Hz, 1H), 4.01 (dd, J=9.2, 6.7 Hz, 1H), 3.76 - 3.68 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.88 (d, J=10.5 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H)
工程２：
撹拌棒を備え、(Ｓ)−メチル３−(ｍ−トリルオキシ)−２−(トリチルアミノ)プロパノエート(８.２８ｇ、１８.３４mmol)のＭｅＯＨ(３０mL)およびＴＨＦ(３０mL)溶液を入れた丸底フラスコに、水酸化リチウムの水溶液(５５.０mmol、２７.５mL)を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、有機層を単離し、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、(Ｓ)−３−(ｍ−トリルオキシ)−２−(トリチルアミノ)プロパン酸、１.４７ｇ(１８％)を得た。1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.44 (d, J=7.1 Hz, 6H), 7.35 - 7.24 (m, 8H), 7.09 (t, J=7.8 Hz, 1H), 6.76 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.46 (d, J=8.1 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=9.2, 2.3 Hz, 1H), 3.71 (t, J=3.2 Hz, 1H), 2.79 (dd, J=9.2, 4.0 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H)
工程３：
撹拌棒を備え、０℃に冷却した(Ｓ)−３−(ｍ−トリルオキシ)−２−(トリチルアミノ)プロパン酸(１.４７ｇ、３.３６mmol)を入れた丸底フラスコに、トリフルオロ酢酸(６.０ml、７８mmol)を添加した。溶液を１時間撹拌した。揮発物を減圧下除去し、残渣をＭｅＯＨ(５mL)に溶解し、再び減圧下濃縮した。得られた粗製の(Ｓ)−２−アミノ−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸ＴＦＡ塩を直接工程４で使用した。
工程４：
撹拌棒を備え、工程３で得た(Ｓ)−２−アミノ−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸ＴＦＡ塩全部(推定３.３６mmol)を入れた丸底フラスコに、１,４−ジオキサン(４mL)および水(１６mL)、次いでＫ２ＣＯ３(１.１７ｇ、８.４９mmol)を添加した。混合物を０℃に冷却し、次いで混合物にクロロギ酸(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル(５４９mg、２.１２mmol)を添加した。混合物を１８時間撹拌しながら室温に温めた。混合物を水(１０mL)で希釈し、ジエチルエーテル(２×１５mL)で洗浄した。水層をＨＣｌ水溶液(１Ｍ)でｐＨ２〜３に酸性化し、ＣＨ２Ｃｌ２(３×２０ml)で抽出した。合わせたＣＨ２Ｃｌ２溶液をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下濃縮して、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸を白色固体、４３０mgとして得た(２工程で３１％)。
工程５：
Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置を使用して、パラホルムアルデヒド(３４０mg、１１.３４mmol)、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸(７８９mg、１.８９０mmol)およびｐ−トルエンスルホン酸(３２.５mg、０.１８９mmol)を含む混合物を、トルエン(１５mL)中２時間還流した。反応物をＲＴに冷却し、飽和重炭酸ナトリウム溶液、続いて塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して、生成物(Ｓ)−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル５−オキソ−４−((ｍ−トリルオキシ)メチル)オキサゾリジン−３−カルボキシレート(８１２mg、１.８９１mmol、１００％収率)を黄色油状物として得た。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝４３０(Ｍ＋Ｈ)
工程６：
(Ｓ)−(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル５−オキソ−４−((ｍ−トリルオキシ)メチル)オキサゾリジン−３−カルボキシレート(８２５mg、１.９２１mmol)をＣＨＣｌ３(１０mL)に溶解し、トリエチルシラン(１.５３４ml、９.６０mmol)、続いてＴＦＡ(１０ml、１３０mmol)を添加し、ＲＴでＮ２の陽圧下、１８時間撹拌した。反応物を粘性油状物が残るまで回転蒸発により蒸発した。この油状物をＥｔＯＡｃに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム(１０ml×２)で抽出した。水層と有機層の間に中間層があり、脱プロトン化生成物であると考えられた。水層と中間層を分離し、回収し、ｐＨ４〜５になるまで酸性化した。酸性になると、溶液から沈殿が形成された。ＥｔＯＡｃ(２００ml)を使用して、沈殿を抽出した。有機層を塩水で洗浄し、回収し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発して、精製済生成物(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸(５０６mg、１.１７３mmol、６１.０％収率)を白色固体として得た。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝４５４(Ｍ＋Ｎａ)
実施例５００１の製造
実施例５００１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３２.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５００２の製造
実施例５００２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに４分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ６１７.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５００３の製造
実施例５００３を、環化方法Ａ”の変わりに環化方法Ｂ”に置き換えて、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５００４の製造
実施例５００４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.０(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４０.９３９８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４０.９３７８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５００５の製造
実施例５００５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸を第四のアミノ酸カップリング工程で使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５００６の製造
実施例５００６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４２.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５００７の製造
実施例５００７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４４.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５００８の製造
実施例５００８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：７０〜１００％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３０.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.００分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３３.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５００９の製造
実施例５００９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１０の製造
実施例５０１０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３１.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１１の製造
実施例５０１１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１２の製造
実施例５０１２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１３の製造
実施例５０１３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１４の製造
実施例５０１４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１５の製造
実施例５０１５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８７６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８７７.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１６の製造
実施例５０１６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１７の製造
実施例５０１７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１８の製造
実施例５０１８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.００分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０１９の製造
実施例５０１９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２０の製造
実施例５０２０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２１の製造
実施例５０２１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.１４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２２の製造
実施例５０２２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２３の製造
実施例５０２３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２４の製造
実施例５０２４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２７.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.０７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２５の製造
実施例５０２５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３６.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２６の製造
実施例５０２６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：水と２０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と２０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９５.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２７の製造
実施例５０２７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９８.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２８の製造
実施例５０２８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２９の製造
実施例５０２９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０３０の製造
実施例５０３０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０３１の製造
実施例５０３１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０３２の製造
実施例５０３２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９３２.０(Ｍ−２Ｈ)
実施例５０３３の製造
実施例５０３３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０３４の製造
実施例５０３４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３２.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０３５の製造
実施例５０３５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０２６の製造
実施例５０３６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０３７の製造
実施例５０３７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０３８の製造
実施例５０３８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０３９の製造
実施例５０３９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４０の製造
実施例５０４０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４１の製造
実施例５０４１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜５０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４２の製造
実施例５０４２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４３の製造
実施例５０４３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜５０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４４の製造
実施例５０４４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４５の製造
実施例５０４５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５５〜９５％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４６の製造
実施例５０４６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜５０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４７の製造
実施例５０４７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜５０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４８の製造
実施例５０４８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９５.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９５.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０４９の製造
実施例５０４９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９５.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０５０の製造
実施例５０５０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜５０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１０〜５０％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０５１の製造
実施例５０５１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０５２の製造
実施例５０５２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７８.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９７７.３(Ｍ−２Ｈ)
実施例５０５３の製造
実施例５０５３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０５４の製造
実施例５０５４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０５５の製造
実施例５０５５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９４９.２(Ｍ−２Ｈ)
実施例５０５６の製造
実施例５０５６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０５７の製造
実施例５０５７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０５８の製造
実施例５０５８を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０５９の製造
実施例５０５９を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０６０の製造
実施例５０６０を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３７.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０６１の製造
実施例５０６１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０３.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９０１.６(Ｍ−２Ｈ)
実施例５０６２の製造
実施例５０６２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９２６.８(Ｍ−２Ｈ)
実施例５０６３の製造
実施例５０６３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３７.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ８９３.８(Ｍ−２Ｈ)
実施例５０６４の製造
実施例５０６４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９３３.２(Ｍ−２Ｈ)
実施例５０６５の製造
実施例５０６５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０６６の製造
実施例５０６６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０６７の製造
実施例５０６７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０６８の製造
実施例５０６８を、次の修飾をする以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用し、規模は０.６００mmolであり、全ての反応材比をそれに応じて調節し、樹脂は２−クロロトリチル樹脂であり、予め樹脂上に充填されたＦｍｏｃ−Ｇｌｙを有した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで５分維持。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０６９の製造
実施例５０６９を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用し、０.３００mmol規模で実施し、それに応じて全ての反応材の比を調節した以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１２.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９７０.４７９８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９７０.４７６４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０７０の製造
実施例５０７０を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０９.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０９.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０７１の製造
実施例５０７１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０７２の製造
実施例５０７２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０７３の製造
実施例５０７３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０７４の製造
実施例５０７４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０７５の製造
実施例５０７５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.８(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９４０.３(Ｍ−２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４１.４５８９(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４１.４５６８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０７６の製造
実施例５０７６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.１(Ｍ＋２Ｈ)；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９４７.７(Ｍ−２Ｈ)
実施例５０７７の製造
実施例５０７７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７６分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９６０.３(Ｍ−２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６１.４７４５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６１.４７１５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０７８の製造
実施例５０７８を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２７.４４３２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２７.４４０２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０７９の製造
実施例５０７９を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分
分析条件Ｃ：保持時間＝１.０２４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.３５(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３３.４６１４(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３３.４５８３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８０の製造
実施例５０８０を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６４分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４０.４６９２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４０.４６７５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８１の製造
実施例５０８１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×ｍｍ、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７１分
分析条件Ｃ：保持時間＝０.９９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.５(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４０.４５１１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４０.４４８４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８２の製造
実施例５０８２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７１分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２８.４８１８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２８.４７９４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８３の製造
実施例５０８３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×ｍｍ、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７４分
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１５.４７４０ (Ｍ＋２Ｈ) 実測値：９１５.４７０９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８４の製造
実施例５０８４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ １８５５.３(Ｍ−Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２８.４５１１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２８.４４８３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８５の製造
実施例５０８５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３０.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３８.４５８５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３８.４５６２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８６の製造
実施例５０８６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４４.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９６１.８(Ｍ−２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６２.９８５６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６２.９８２７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８７の製造
実施例５０８７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２８.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９１２.７(Ｍ−２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１３.９３７８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１３.９３５３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８８の製造
実施例５０８８を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３０.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３８.４５８５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３８.４５６２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０８９の製造
実施例５０８９を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Waters ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６２.００８５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６２.００５２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９０の製造
実施例５０９０を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４１.４７７１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４１.４７３９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９１の製造
実施例５０９１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３４.４６９２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３４.４６６２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９２の製造
実施例５０９２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５５.９７７８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９５５.９７４９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９３の製造
実施例５０９３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２９.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２８.９４９４(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２８.４４７６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９４の製造
実施例５０９４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４８.４９０５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４８.４８７２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９５の製造
実施例５０９５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.４(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６２.５００５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６２.４９６９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９６の製造
実施例５０９６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４８.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.４(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６３.４７２０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６３.４６８５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９７の製造
実施例５０９７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２７.９５３４(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２７.９４９８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９８の製造
実施例５０９８を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３１.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４９.９４８３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４９.９４６０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５０９９の製造
実施例５０９９を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：５〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.００(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９７０.４６１６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９７０.４５９５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１００の製造
実施例５１００を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：５〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６９.９８７８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６９.９８５０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１０１の製造
実施例５１０１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２８.４３２９(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２８.４３０１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１０２の製造
実施例５１０２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２９.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６３.４７７６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６３.４７４０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１０３の製造
実施例５１０３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１０４の製造
実施例５１０４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３４.９６６９(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３４.９６３７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１０５の製造
実施例５１０５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.０(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５６.４６９８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９５６.４６７０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１０６の製造
実施例５１０６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７０.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７０.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６９.９６９６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６９.９６６２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１０７の製造
実施例５１０７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.４(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４０.９７９４(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４０.９７６２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１０８の製造
実施例５１０８を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２１.９３５２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２１.９３１８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１０９の製造
実施例５１０９を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.０(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２６.４５３６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２６.４５０４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１０の製造
実施例５１１０を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。物質を、次の条件を用いる分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８４.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９８４.００９１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９８４.００６１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１１の製造
実施例５１１１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.２８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４２.９４０５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４２.９３８０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１２の製造
実施例５１１２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６３.４７２０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６３.４６８８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１３の製造
実施例５１１３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６３.４４７６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６３.４７４２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１４の製造
実施例５１１４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４２.４４６１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４２.４４８５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１５の製造
実施例５１１５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜９５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１６.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１６.４４５４(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１６.４４３１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１６の製造
実施例５１１６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８１.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ８８０.５(Ｍ−２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：８８２.４２６７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：８８２.４２４１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１７の製造
実施例５１１７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８３.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ８８１.８(Ｍ−２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：８８３.３９８２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：８８３.３９５６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１８の製造
実施例５１１８を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ８９４.２(Ｍ−２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：８９５.９３２２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：８９５.９２９７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１１９の製造
実施例５１１９を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.６(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：８９６.９１９３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：８９６.９２１８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２０の製造
実施例５１２０を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４９.４５６３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４９.４５３７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２１の製造
実施例５１２１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２８.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２８.４３２９(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２８.４３０１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２２の製造
実施例５１２２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０６.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９０５.９４０３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９０５.９３７５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２３の製造
実施例５１２３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２９.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４９.４６２０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４９.４５８９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２４の製造
実施例５１２４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７０.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９７０.４８５４(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９７０.４８２０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２５の製造
実施例５１２５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４０.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１３.４２７６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１３.４２４２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２６の製造
実施例５１２６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４９.４３８１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４９.４３５５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２７の製造
実施例５１２７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９０１.４４０２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９０１.４３７５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２８の製造
実施例５１２８を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０４.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９０３.４１９４(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９０３.４１６７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１２９の製造
実施例５１２９を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１７.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９１６.４５１１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９１６.４４８２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１３０の製造
実施例５１３０を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３２.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３１.４５６３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３１.４５３４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１３１の製造
実施例５１３１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３７.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.６(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３０.９６４３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３０.９６１７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１３２の製造
実施例５１３２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４４.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.４(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４９.４６２０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４９.４５８７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１３３の製造
実施例５１３３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２１.９３５２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２１.９３１８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１３４の製造
実施例５１３４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４２.４５４１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４２.４５１３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１３５の製造
実施例５１３５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８６９.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８７０.０(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：８６９.４００７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：８６９.３９８６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１３７の製造
実施例５１３７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用し、０.３００mmol規模で実施し、それに応じて全ての反応材の量を調節した以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０２.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６３.４７２０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６３.４６８７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１３８の製造
実施例５１３８を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用し、０.３００mmol規模で実施し、それに応じて全ての反応材の量を調節した以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５７.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１３９の製造
実施例５１３９を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用し、０.３００mmol規模で実施し、それに応じて全ての反応材の量を調節した以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２７.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４９.４５６３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４９.４５４１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１４０の製造
実施例５１４０を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３６.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０１.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９０１.４８２２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９０１.４８００(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１４１の製造
実施例５１４１を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.５(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３４.９４８７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３４.９４７１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１４２の製造
実施例５１４２を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.６(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３４.９４８７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３４.９４６７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１４３の製造
実施例５１４３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.４(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３４.９４８７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３４.９４６４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１４４の製造
実施例５１４４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５１.９４０９(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９５１.９３８５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１４５の製造
実施例５１４５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９３４.２(Ｍ−２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３５.４４０７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３５.４３８５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１４６の製造
実施例５１４６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は０.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９３３.２(Ｍ−２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３４.９４８７(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３４.９４６４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例５１４７の製造
実施例５１４７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３３.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５１.９４０９(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９５１.９３７７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６００１の製造
実施例６００１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.２５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６００２の製造
実施例６００２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７８.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７７.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６００３の製造
実施例６００３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３２.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６００４の製造
実施例６００４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６００５の製造
実施例６００５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３７.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２０.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６００６の製造
実施例６００６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６００７の製造
実施例６００７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１９.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６００８の製造
実施例６００８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６００９の製造
実施例６００９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０１０の製造
実施例６０１０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０１１の製造
実施例６０１１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２６.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０１２の製造
実施例６０１２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０１３の製造
実施例６０１３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ２５８.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０８分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９５６.５(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０１４の製造
実施例６０１４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５５〜９５％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０１５の製造
実施例６０１５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０１６の製造
実施例６０１６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０１７の製造
実施例６０１７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８４.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９８３.１(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０１８の製造
実施例６０１８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７６.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０１９の製造
実施例６０１９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：６０〜１００％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９０.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９１.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０２０の製造
実施例６０２０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３２.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １００４.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １００４.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０２１の製造
実施例６０２１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜５０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２８.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０２２の製造
実施例６０２２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５５〜９５％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０２３の製造
実施例６０２３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０２４の製造
実施例６０２４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９１１.９(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０２５の製造
実施例６０２５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０２６の製造
実施例６０２６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９４０.９(Ｍ−２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９４０.７(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０２７の製造
実施例６０２７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４１.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０２８の製造
実施例６０２８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９３７.８(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０２９の製造
実施例６０２９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４７.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０３０の製造
実施例６０３０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０３１の製造
実施例６０３１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)−３−(ｍ−トリルオキシ)プロパン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０３２の製造
実施例６０３２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０３３の製造
実施例６０３３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０３４の製造
実施例６０３４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９４１.８(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０３５の製造
実施例６０３５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)([１３Ｃ]メチル)アミノ)プロパン酸および(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(([１３Ｃ]メチル)アミノ)ヘキサン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９５５.７(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０３６の製造
実施例６０３６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)オキシ)−３−ブロモフェニル)プロパン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７４.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０３７の製造
実施例６０３７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(([１３Ｃ]メチル)アミノ)ヘキサン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０３８の製造
実施例６０３８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)(([１３Ｃ]メチル)アミノ)ヘキサン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０３９の製造
実施例６０３９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)([１３Ｃ]メチル)アミノ)プロパン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０４０の製造
実施例６０４０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６４分
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分
実施例６０４１の製造
実施例６０４１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０４２の製造
実施例６０４２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(２Ｓ,５Ｓ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０４３の製造
実施例６０４３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)オキシ)−３−ブロモフェニル)プロパン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５３.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９５０.６(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０４４の製造
実施例６０４４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)オキシ)−３−ブロモフェニル)プロパン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９５７.７(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０４５の製造
実施例６０４５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(４−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)オキシ)−３−ブロモフェニル)プロパン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに０分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３８.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(−) ｍ／ｚ ９３５.５(Ｍ−２Ｈ)
実施例６０４６の製造
実施例６０４６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０４７の製造
実施例６０４７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−(ベンジルオキシ)ピロリジン−２−カルボン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２９.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０４８の製造
実施例６０４８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−((６−メトキシイソキノリン−１−イル)オキシ)ピロリジン−２−カルボン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９４.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０４９の製造
実施例６０４９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−((３−ブロモキノリン−２−イル)オキシ)ピロリジン−２−カルボン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜７０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １０１８.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １０１８.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例６０５０の製造
実施例６０５０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。アミノ酸(Ｓ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ピペラジン−２−カルボン酸を使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜９５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.０(Ｍ＋２Ｈ)
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−フェニル−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸の製造
１５０mL再利用可能密閉丸底フラスコ中、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸(５００mg、１.１７２mmol)およびテトラフルオロホウ酸銀(Ｉ)(４５６mg、２.３４５mmol)の混合物に、ｒ.ｔ.でＮ２下、ヨードベンゼン(４７８mg、２.３４５mmol)のＤＭＦ(３mL)の混合物、続いてトリフルオロ酢酸(０.０９０mL、１.１７２mmol)のＤＭＦ(３mL)中の混合物、次いでジアセトキシパラジウム(１３.１６mg、０.０５９mmol)のＤＭＦ(４mL)中の混合物を添加した。フラスコをきつく蓋し、９５℃で油浴中、１７時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ(１５０mL)で希釈し、濾過した。濾液を蒸発し、残渣をＭｅＯＨに溶解し、次の分離方法を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ−ＶＰ分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ〜９０％Ｈ２Ｏ〜０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ〜１０％Ｈ２Ｏ〜０.１％ＴＦＡ、開始％Ｂ＝５０、最終％Ｂ＝１００、勾配時間＝１０分、停止時間＝１２分、流速＝３０mL／分、カラム：ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ １９×１００ ５μm(２２０nmでＵＶ検出)。保持時間＝８.５１３分の合わせた所望のフラクションを蒸発して、生成物の灰白色固体を得た(２４７mg)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.70 (br s, 1H), 11.23 (s, 1H), 7.88 (d, J=7.3, 2H), 7.80 (d, J=8.1, 1H), 7.73 (d, J=7.8, 1H), 7.70 - 7.62 (m, 4H), 7.49 (t, J=7.6, 2H), 7.43 - 7.34 (m, 4H), 7.30 (m, 1H), 7.25 (m, 1H), 7.10 (t, J=7.5, 1H), 7.00 (m, 1H), 4.35 - 4.30 (m, 1H), 4.16 - 4.09 (m, 3H), 3.41 (m, 1H), 3.20 (dd, J=14.4, 8.6, 1H)。インドールＣ２のフェニル環の位置はフェニルプロトンＨ１１／Ｈ１５とインドール炭素Ｃ２の間のＣ−Ｈ長距離相関により示される。光学回転[α]２０ Ｄ −９.８３°(１.７５mg／mL、ＭｅＯＨ)。ＬＣＭＳ (ＥＳ＋) ｍ／ｚ＝５０３.１(Ｍ＋Ｈ)、保持時間＝２.２５０分。ＬＣＭＳ２２０nmでＵＶ検出するＳｈｉｍａｄｚｕ−ＶＰ装置およびＷａｔｅｒｓ ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ(登録商標)を使用して実施した。ＨＰＬＣ方法：溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ９０％Ｈ２Ｏ０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ１０％Ｈ２Ｏ０.１％ＴＦＡ、開始％Ｂ＝０、最終％Ｂ＝１００、勾配時間＝２分、３分で停止時間、流速＝１ml／分、カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)−Ｌｕｎａ、２.０×３０mm、３μm。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−フルオロフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸の製造
１５０mL再利用可能密閉丸底フラスコ中、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸(１ｇ、２.３４５mmol)およびテトラフルオロホウ酸銀(Ｉ)(０.９１３ｇ、４.６９mmol)の混合物に、ｒ.ｔ.でＮ２下、１−フルオロ−４−ヨードベンゼン(１.０４１ｇ、４.６９mmol)のＤＭＦ(５mL)中の混合物、続いてトリフルオロ酢酸(０.１８１mL、２.３４５mmol)のＤＭＦ(５mL)中の混合物、次いでジアセトキシパラジウム(０.０２６ｇ、０.１１７mmol)のＤＭＦ(５mL)中の混合物を添加した。さらに５mLのＤＭＦを反応混合物に添加した。フラスコをきつく蓋し、反応混合物を、９５℃で油浴中、１８時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ(３００mL)で希釈し、濾過し、濾液を塩水(２×１００mL)で洗浄した。有機溶液を蒸発した。残渣をＭｅＯＨに溶解し、次の分離方法を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ−ＶＰ分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ〜９０％Ｈ２Ｏ〜０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ〜１０％Ｈ２Ｏ〜０.１％ＴＦＡ、開始％Ｂ＝５０、最終％Ｂ＝１００、勾配時間＝１０分、停止時間＝１２分、流速＝３０mL／分、カラム：ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ １９×１００ ５μm、(２２０nmでＵＶ検出)。保持時間＝８.６７９分の合わせた所望のフラクションを蒸発して、生成物の灰白色固体を得た(５８６.８mg)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.68 (br s, 1H), 11.24 (s, 1H), 7.88 (d, J=7.6, 2H), 7.79 (d, J=8.3, 1H), 7.72 - 7.63 (m, 5H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.35 - 7.23 (m, 5H), 7.10 (t, J=7.6, 1H), 7.00 (m, 1H), 4.33 - 4.28 (m, 1H), 4.15 - 4.09 (m, 3H), 3.36 (m, 1H), 3.18 (dd, J=14.4, 8.8, 1H)。[α]２０ Ｄ −１０.０７°(１.３５mg／mL、溶媒)。ＬＣＭＳ (ＥＳ＋) ｍ／ｚ＝５２１.０(Ｍ＋Ｈ)、保持時間＝２.２６２分。ＬＣＭＳ２２０nmでＵＶ検出するＳｈｉｍａｄｚｕ−ＶＰ装置およびＷａｔｅｒｓ ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ(登録商標)を使用して実施した。ＨＰＬＣ方法：溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ９０％Ｈ２Ｏ０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ〜１０％Ｈ２Ｏ〜０.１％ＴＦＡ、開始％Ｂ＝０、最終％Ｂ＝１００、勾配時間＝２分、３分で停止時間、流速＝１ml／分、カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)−Ｌｕｎａ、２.０×３０mm、３μm。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(３−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸の製造
１５０mL密閉丸底フラスコに、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸(１ｇ、２.３４５mmol)、テトラフルオロホウ酸銀(Ｉ)(０.９１３ｇ、４.６９mmol)、ＤＭＦ(２０mL)、３−ヨードアニソール(１.０９８ｇ、４.６９mmol)、２,２,２−トリフルオロ酢酸(０.１８１mL、２.３４５mmol)およびジアセトキシパラジウム(０.０２６ｇ、０.１１７mmol)を添加した。混合物を窒素で５分通気／脱気した。フラスコをきつく蓋し、混合物を９５℃で１８時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３００mL)で希釈し、濾過し、濾液を塩水(２×１００mL)で洗浄した。有機溶液を蒸発した。残渣をカラムクロマトグラフィー(ＢＩＯＴＡＧＥ(登録商標)シリカゲルカラム２５ｍ、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝０〜１００％)で精製して、生成物(５６０mg、４２％)を明褐色固体として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 8.19 (s, 1H), 7.81 - 7.68 (m, 3H), 7.53 - 7.04 (m, 13H), 6.92 (dd, J=8.3, 2.0 Hz, 1H), 5.20 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.72 - 4.62 (m, 1H), 4.26 - 4.19 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.65 - 3.45 (m, 2H)；[α]20 D −１０.３５°(２.８８mg／mL、ＭｅＯＨ)。ＬＣＭＳ保持時間＝１.８６２分、ｍ／ｚ＝５３３(Ｍ＋Ｈ)、９５.０％純度。ＬＣＭＳデータを、次の設定を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ分析的ＬＣ／ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ(登録商標)Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＬＣ(ＥＳＩ＋)で２２０nmで得た。ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ３μm Ｃ１８、２×５０mmカラム、０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配を流速１mL／分で２分かけて、１分維持。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸の製造
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸(１.１２ｇ、８５％)を、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸および１−ヨード−４−メトキシベンゼンから、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(３−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸について記戴する方法により得た。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.89 - 12.48 (m, 1H), 11.14 (s, 1H), 7.93 - 7.77 (m, 2H), 7.72 - 7.58 (m, 5H), 7.46 - 7.22 (m, 6H), 7.11 - 6.94 (m, 4H), 4.30 (dd, J=8.5, 6.0 Hz, 1H), 4.18 - 4.07 (m, 3H), 3.84 - 3.77 (s, 3H), 3.35 (m, 1H), 3.23 - 3.14 (m, 1H)；[α]２０ Ｄ −９.４４°(３.０５mg／mL、ＭｅＯＨ)。ＬＣＭＳ保持時間＝１.８１０分、ｍ／ｚ＝５３３(Ｍ＋Ｈ)、９７.３％純度。ＬＣＭＳデータを、次の設定を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ分析的ＬＣ／ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ(登録商標)Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＬＣ(ＥＳＩ＋)で２２０nmで得た。ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ３μm Ｃ１８、２×５０mmカラム、０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配を流速１mL／分で２分かけて、１分維持。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−エトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸の製造
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−エトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸(１.１１ｇ、６６％)を、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸および１−ヨード−４−エトキシベンゼンから、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(３−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸について記戴する方法により得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 8.12 (s, 1H), 7.77 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.69 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.54 - 7.34 (m, 8H), 7.33 - 7.12 (m, 4H), 6.97 - 6.90 (m, 2H), 5.16 (d, J=7.8 Hz, 1H), 4.64 (d, J=6.3 Hz, 1H), 4.28 - 4.06 (m, 4H), 3.62 - 3.42 (m, 2H), 1.44 - 1.36 (t, J=8.0Hz, 3H)；[α]２０ Ｄ −１０.６８°(４.０１mg／mL、ＭｅＯＨ)。ＬＣＭＳ保持時間＝１.８９８分、ｍ／ｚ ５４７＝(Ｍ＋Ｈ)、９８.２％純度。ＬＣＭＳデータを、次の設定を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ分析的ＬＣ／ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ(登録商標)Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＬＣ(ＥＳＩ＋)で２２０nmで得た。ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ３μm Ｃ１８、２×５０mmカラム、０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配を流速１mL／分で２分かけて、１分維持。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−プロポキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸の製造
工程１：１−ヨード−４−プロポキシベンゼン
４−ヨードフェノール(３ｇ、１３.６４mmol)、１−ブロモプロパン(１.８４５ｇ、１５.００mmol)および炭酸ナトリウム(７.５４ｇ、５４.５mmol)のＤＭＦ(３０mL)懸濁液を、８０℃で４時間撹拌した。反応混合物を水(２５０mL)で希釈し、ＥｔＯＡｃ(３×７５mL)で抽出した。合わせた有機抽出物を０.５Ｍ ＮａＯＨ(２×５０mL)および水(２×５０mL)およびで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を除去した。粗製の生成物(３.１１ｇ)を得て、これをさらに精製することなく次反応で使用した。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.61 - 7.53 (m, 2H), 6.74 - 6.67 (m, 2H), 3.90 (t, J=6.5 Hz, 2H), 1.88 - 1.76 (m, 2H), 1.05 (t, J=7.4 Hz, 3H)
工程２：
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−プロポキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸(８３０mg、５７％)を、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸および１−ヨード−４−プロポキシベンゼンから、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(３−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸について記戴する方法により得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 8.14 (s, 1H), 7.83 - 7.59 (m, 3H), 7.54 - 7.12 (m, 11H), 6.93 (d, J=8.5 Hz, 2H), 5.43 - 5.12 (m, 1H), 4.71 - 4.53 (m, 1H), 4.29 - 4.05 (m, 3H), 3.88 (t, J=6.4 Hz, 2H), 3.63 - 3.41 (m, 2H), 1.79 (sxt, J=7.0 Hz, 2H), 1.09 - 0.98 (m, 3H)；[α]２０ Ｄ −７.５４°(３.０５mg／mL、ＭｅＯＨ)。ＬＣＭＳ保持時間＝１.９５２分、ｍ／ｚ＝５６１(Ｍ＋Ｈ)、９９.１％純度。ＬＣＭＳデータを、次の設定を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ分析的ＬＣ／ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ(登録商標)Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＬＣ(ＥＳＩ＋)で２２０nmで得た。ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ３μm Ｃ１８、２×５０mmカラム、０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配を流速１mL／分で２分かけて、１分維持。
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(３−プロポキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸の製造
工程１：
ヨード−３−プロポキシベンゼン(３.５３ｇ、９８％)を、３−ヨードフェノールおよび１−ブロモプロパンから、１−ヨード−４−プロポキシベンゼンについて記戴する方法を使用して得た。１H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.33 - 7.25 (m, 2H), 7.05 - 6.97 (m, 1H), 6.92 - 6.85 (m, 1H), 3.91 (t, J=6.5 Hz, 2H), 1.82 (sxt, J=7.0 Hz, 2H), 1.05 (t, J=7.4 Hz, 3H)
工程２：
(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(３−プロポキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸(１.２５ｇ、８３％)を、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸および１−ヨード−３−プロポキシベンゼンから、(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(３−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸について記戴する方法により得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 8.28 (s, 1H), 7.80 - 7.70 (m, 3H), 7.53 - 7.09 (m, 13H), 6.94 - 6.87 (m, 1H), 5.23 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.68 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.22 - 4.15 (m, 2H), 3.93 (t, J=6.7 Hz, 2H), 3.60 (d, J=5.3 Hz, 1H), 3.52 (d, J=7.0 Hz, 1H), 1.85 - 1.72 (m, 2H), 1.01 (t, J=7.4 Hz, 3H)；[α]２０ Ｄ −１１.３４°(４.２５mg／mL、ＭｅＯＨ)。ＬＣＭＳ保持時間＝１.９７２分、ｍ／ｚ＝５６１(Ｍ＋Ｈ)、９９.０％純度。ＬＣＭＳデータを、次の設定を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ分析的ＬＣ／ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ(登録商標)Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＬＣ(ＥＳＩ＋)で２２０nmで得た。ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ(登録商標)Ｌｕｎａ ３μm Ｃ１８、２×５０mmカラム、０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配を流速１mL／分で２分かけて、１分維持。
実施例７００１の製造
実施例７００１を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−フェニル−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８６.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８６.４(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：１９６９.９８９４、実測値：１９６９.９８６５ (Ｍ＋Ｈ)；計算値：９８５.４９８３、実測値：９８５.４９６４(Ｍ＋２Ｈ)；計算値：６５７.３３４７、実測値：６５７.３３２７ (Ｍ＋３Ｈ)。
実施例７００２の製造
実施例７００２を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−フルオロフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５５〜９５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９７７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９７７.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９７６.９８５６、実測値：９７６.９８３８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７００３の製造
実施例７００３を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(３−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８３.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８３.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９８２.９９５６、実測値：９８２.９９３６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７００４の製造
実施例７００４を、次の一般的方法からなる実施例７００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(３−プロポキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９９６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９９７.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９９７.０１１３、実測値：９９７.００８８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７００５の製造
実施例７００５を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−プロポキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３１.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９９６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９９７.５(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９９７.０１１３、実測値：９９７.００８６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７００６の製造
実施例７００６を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８３.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８３.６(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９８２.９９５６、実測値：９８２.９９３０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７００７の製造
実施例７００７を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９０.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９０.６(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９９０.００３５、実測値：９９０.０００８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７００８の製造
実施例７００８を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−メトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９７５.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９７５.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９７４.９９８２、実測値：９７４.９９４９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７００９の製造
実施例７００９を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−エトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９９０.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９９０.００３５、実測値：９９０.００１４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１０の製造
実施例７０１０を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−エトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９９７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９９７.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１１の製造
実施例７０１１を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。(Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(２−(４−エトキシフェニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)プロパン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８２.６(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９８２.００６０、実測値：９８２.００３５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１２の製造
実施例７０１２を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”を、最終アミノ酸カップリング工程としてＴｙｒ１のアミノ末端をアクリル酸でキャッピングするために使用した。得られた樹脂結合ペプチドを下記“閉環オレフィンメタセシス(ＲＣＭ)反応”、続いて“包括的脱保護方法Ａ”に付した。
閉環オレフィンメタセシス(ＲＣＭ)反応：ペプチドに結合した樹脂(０.０４４mmol)をマイクロ波リアクター用２０mL円錐形バイアルに入れた。Hoveyda-Grubb第二世代触媒((１,３−ビス−(２,４,６−トリメチルフェニル)−２−イミダゾリジニリデン)ジクロロ(ｏ−イソプロポキシフェニルメチレン)ルテニウム)(２７.５mg、０.０３３mmol)および１,２,−ジクロロエタン(１０mL)を添加した。混合物を脱気し、マイクロ波リアクター中、１２０℃で１時間加熱した。反応完了後、樹脂を濾過し、ＤＭＦ(２×５mL)、続いてＤＣＭ(３×５mL)で洗浄し、乾燥した。粗製の物質を“包括的脱保護方法Ａ”を使用して脱保護した。
粗製の生成物を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３８.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１３の製造
実施例７０１３を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”を、最終アミノ酸カップリング工程としてＴｙｒ１のアミノ末端をアクリル酸でキャッピングするために使用した。得られた樹脂結合ペプチドを下記“閉環オレフィンメタセシス(ＲＣＭ)反応”、続いて“包括的脱保護方法Ａ”に付した。
閉環オレフィンメタセシス(ＲＣＭ)反応：ペプチドに結合した樹脂(０.２６２mmol)を６バッチに分けた。各バッチ(０.０４４mmol)を、マイクロ波リアクター用２０mL円錐形バイアルに入れた。Hoveyda-Grubb第二世代触媒(２７.５mg、０.０３３mmol)および１,２,−ジクロロエタン(１０mL)を添加した。混合物を脱気し、マイクロ波リアクター中、１２０℃で１時間加熱した。反応完了後、樹脂を濾過し、ＤＭＦ(２×５mL)、続いてＤＣＭ(３×５mL)で洗浄し、乾燥した。６バッチを合わせ、粗製の物質を“包括的脱保護方法Ａ”を使用して脱保護した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９２０.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９２０.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１４〜７０６４を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”。実施例７０１４〜７０６４の製造に使用した“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”は下記のとおり修正した。包括的脱保護方法Ａ：“包括的脱保護方法Ａ”は、０.１００mmol規模で実施する実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＲｉｎｋリンカーの量により決定する。“脱保護溶液”を、４０mLガラスジャー中、トリフルオロ酢酸(２２mL)、フェノール(１.３２５ｇ)、水(１.２５mL)およびトリイソプロピルシラン(０.５mL)を合わせることにより調製した。樹脂を反応容器から除き、４mLガラスバイアルに移した。バイアルに“脱保護溶液”(２.０mL)を添加した。混合物をオービタルシェーカー(１７５RPMで２時間)上で混合した。混合物を漏斗で濾過し、固体をさらなる“脱保護溶液”(１.０mL)で洗浄し、４０mLスクリューキャップ付きバイアルに集めた。合わせた濾液にＥｔ２Ｏ(１５mL)を添加した。混合物を激しく混合し、その時点で相当量の白色固体が沈殿した。混合物３分、２０００RPMで遠心分離し、溶液を固体から傾捨して捨て、廃棄した。本工程を３回繰り返し、固体をベンチ上に乗せ、１〜２時間空気乾燥して、粗製のペプチドを灰白色固体として得た。環化方法Ａ：“環化方法Ａ”の方法は、０.１００mmol規模で実施する実験を記戴する。粗製のペプチド固体をＭｅＣＮ：０.１Ｍ ＮＨ４ＯＡｃ水溶液(１５mL：１５mL)に溶解し、溶液をＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を使用してｐＨ＝９.０に注意深く調整した。バイアルに蓋をし、溶液をオービタルシェーカーで１７５RPMで一夜(〜１８時間)混合した。反応溶液を濃縮し、残渣をＭｅＯＨに溶解した。この溶液を逆相ＨＰＬＣ精製に付して、所望の環状ペプチドを得た。
実施例７０１４の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９２３.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９２３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１５の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４０.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５５.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１６の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４２.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４９.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４９.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１７の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３９.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５５.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５５.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１８の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５４.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０１９の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０２０の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９１０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９１０.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０２１の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４４.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９１０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９１０.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０２２の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝８９８.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝８９８.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０２３の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５５〜９５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と２０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と２０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は８０％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９１６.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９１６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０２４の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４８.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０２５の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５.４％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４８.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４８.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０２６の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６１.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６１.７ (Ｍ＋２Ｈ)、９７２.６ (Ｍ＋Ｈ＋Ｎａ)。
実施例７０２７の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３１.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６１.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６１.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０２８の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６１.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０２９の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４８.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４８.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３０の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７.８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.０５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５６.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５６.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５５.９７０９、実測値：９５５.９６６７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３１の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９１.４％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５２.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５２.１ (Ｍ＋２Ｈ)、９７１.７ (Ｍ＋ＭｅＣＮ＋２Ｈ)。
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５１.４６１４、実測値：９５１.４５９１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３２の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と２０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と２０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５１.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５１.４６１４、実測値：９５１.４５８７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３３の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と２０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と２０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８.５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.０５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５２.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５１.５ (Ｍ＋２Ｈ)、９７２.０ (Ｍ＋ＭｅＣＮ＋２Ｈ)。
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５１.４６１４、実測値：９５１.４５９０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３４の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３８.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５５.７(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５５.９７０９、実測値：９５５.９６７９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３５の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３７.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.０２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９２８.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９２８.７ (Ｍ＋２Ｈ)、９４０.６ (Ｍ＋Ｈ＋Ｎａ)。
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２８.９８５１、実測値：９２８.９８２２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３６の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３６.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.２１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５０.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.１７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５０.５(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５０.００８５、実測値：９５０.００５４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３７の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３５.２ (Ｍ＋２Ｈ)、９４５.７(Ｍ＋Ｈ＋Ｎａ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３４.４７４９、実測値：９３４.４７１９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３８の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４０.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３４.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３４.４７４９、実測値：９３４.４７１９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０３９の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３７.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３６.９８２５、実測値：９３６.９７９９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０４０の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５１.７ (Ｍ＋２Ｈ)、９６３.８ (Ｍ＋Ｈ＋Ｎａ)。
実施例７０４１の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４４.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０４２の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５〜４０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３７.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３７.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０４３の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：６０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９４０.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０４４の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.０８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３９.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３９.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０４５の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.１８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９７６.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.１３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９７６.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０４６の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６０.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０４７の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５７.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５７.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０４８の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５５.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３１.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２。分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０４９の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９７６.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９７６.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５０の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６９.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５１の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６６.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.００分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６６.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５２の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８２.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.１３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５３の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６２.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５４の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝２.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６５.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５５の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９３０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５６の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５７の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５５.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５５.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５８の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１。分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６０.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６０.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０５９の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５５.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５５.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０６０の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６３.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０６１の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６６.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９６６.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０６２の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３６.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８３.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９８２.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０６３の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５７.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.１５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例７０６４の製造
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３０〜７０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。
本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、５μm、１９×２００mm、移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：０〜４０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。
生成物の収量は７.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５１.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ＝９５１.２ (Ｍ＋２Ｈ)、６３４.５ (Ｍ＋３Ｈ)。
シリーズ９０００
下に例示する全９０００シリーズ実施例を、上記“一般合成手順Ａ”に従い製造した。
実施例９００１の製造
実施例９００１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９００２の製造
実施例９００２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９００３の製造
実施例９００３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９００４の製造
実施例９００４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.３８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９００５の製造
実施例９００５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９００６の製造
実施例９００６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９００７の製造
実施例９００７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９００８の製造
実施例９００８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９００９の製造
実施例９００９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１０の製造
実施例９０１０の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３２.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１１の製造
実施例９０１１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１２の製造
実施例９０１２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７２.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１３の製造
実施例９０１３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１４の製造
実施例９０１４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１５の製造
実施例９０１５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１６の製造
実施例９０１６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１７の製造
実施例９０１７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１８の製造
実施例の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０１９の製造
実施例９０１９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２０の製造
実施例９０２０の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１５４。分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６９.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７０.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２１の製造
実施例９０２１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２２の製造
実施例９０２２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２３の製造
実施例９０２３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２４の製造
実施例９０２４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２９.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２５の製造
実施例９０２５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２６の製造
実施例９０２６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２７の製造
実施例９０２７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２８の製造
実施例９０２８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０２９の製造
実施例９０２９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２１.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３０の製造
実施例９０３０の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３１の製造
実施例９０３１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３２の製造
実施例９０３２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.２７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３３の製造
実施例９０３３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３４の製造
実施例９０３４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.２３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.２４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３５の製造
実施例９０３５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３６の製造
実施例９０３６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３９。分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３７の製造
実施例９０３７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３８の製造
実施例９０３８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０３９の製造
実施例９０３９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５５〜９５％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７３.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４０の製造
実施例９０４０の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４１の製造
実施例９０４１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４９.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４２の製造
実施例９０４２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４３の製造
実施例９０４３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４４の製造
実施例９０４４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４５の製造
実施例９０４５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４６の製造
実施例９０４６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１７.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４７の製造
実施例９０４７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４８の製造
実施例９０４８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５５〜９５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７１.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０４９の製造
実施例９０４９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５０の製造
実施例９０５０の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５１の製造
実施例９０５１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５２の製造
実施例９０５２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５３の製造
実施例９０５３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３５.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５４の製造
実施例９０５４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２７.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５５の製造
実施例９０５５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５６の製造
実施例９０５６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。Ｆｒａｃｔｉｏｎｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｄｅｓｉｒｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔ ｗｅｒｅ ｃｏｍｂｉｎｅｄおよびｄｒｉｅｄ ｖｉａ ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ 蒸発。生成物の収量は２１.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５７の製造
実施例９０５７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.３３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５８の製造
実施例９０５８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と０.１％トリフルオロ酢酸；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０５９の製造
実施例９０５９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３６.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３６.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６０の製造
実施例９０６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６１の製造
実施例９０６１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６２の製造
実施例９０６２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：水と２０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と２０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は９.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６３の製造
実施例９０６３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６４の製造
実施例９０６４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６５の製造
実施例９０６５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５６.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６６の製造
実施例９０６６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６７の製造
実施例９０６７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２９.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３４.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６８の製造
実施例９０６８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０６９の製造
実施例９０６９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７０の製造
実施例９０７０の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７１の製造
実施例９０７１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜１００％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７２の製造
実施例９０７２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７３の製造
実施例９０７３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７４の製造
実施例９０７４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７５の製造
実施例９０７５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.１８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７６の製造
実施例９０７６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４４.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.１１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７７の製造
実施例９０７７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３０.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７８の製造
実施例９０７８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３９.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６６.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０７９の製造
実施例９０７９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５７.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５８.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０８０の製造
実施例９０８０の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４５.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０８１の製造
実施例９０８１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０８２の製造
実施例９０８２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０８３の製造
実施例９０８３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０８４の製造
実施例９０８４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０８５の製造
実施例９０８５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９０％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８９.１(Ｍ＋２Ｈ)＋
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８９.１(Ｍ＋２Ｈ)＋
実施例９０８６の製造
実施例９０８６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０８７の製造
実施例９０８７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０８８の製造
実施例９０８８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０８９の製造
実施例９０８９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９２％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９０の製造
実施例９０９０の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２８.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９１の製造
実施例９０９１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９２の製造
実施例９０９２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.１(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４８.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９３の製造
実施例９０９３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２２.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８９.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８８９.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９４の製造
実施例９０９４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９７.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９５の製造
実施例９０９５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１９.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９６.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９６.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９６の製造
実施例９０９６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２７.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０５.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９７の製造
実施例９０９７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３１.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９８の製造
実施例９０９８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９０９９の製造
実施例９０９９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１１.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％
分析条件Ａ：保持時間＝１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１００の製造
実施例９１００の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１０５の製造
実施例９１０５の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.０(Ｍ＋２Ｈ)＋
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.２(Ｍ＋２Ｈ)＋
実施例９１０６の製造
実施例９１０６の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１０７の製造
実施例９１０７の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１０８の製造
実施例９１０８の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１０９の製造
実施例９１０９の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１２.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１１０の製造
実施例９１１０の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は７.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.４６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０２.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１１１の製造
実施例９１１１の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は８.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１１２の製造
実施例９１１２の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１１３の製造
実施例９１１３の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９３％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.３９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５２.１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例９１１４の製造
実施例９１１４の粗製の物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｓｈｉｅｌｄ ＲＰ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：３５〜７５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は６.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６０.６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０００１
実施例１０００１を、次の一般的方法からなる実施例５００１の製造について記戴した一般的合成手順に従い製造した。“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：樹脂膨潤方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：単カップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：ダブルカップリング方法”、“Ｐｒｅｌｕｄｅ方法Ａ：クロロアセチルクロライドカップリング方法”、“包括的脱保護方法Ａ”および“環化方法Ａ”。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを２０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに４分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝３.０１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ８９２.６(Ｍ＋２Ｈ)
(２Ｓ,３Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)ブタン酸の製造
スキーム：
(Ｅ)−３−(１Ｈ−インドール−３−イル)アクリル酸(４.２ｇ、２２.４４mmol)、(Ｂｏｃ)２Ｏ(１０.４２ml、４４.９mmol)およびＥｔ３Ｎ(７.８２ml、５６.１mmol)をＴＨＦ(１１２ml)中で撹拌し、続いてＤＭＡＰ(０.１３７ｇ、１.１２２mmol)を添加した。反応物を１６時間撹拌した。飽和重炭酸ナトリウムで反応停止させ、１０分激しく撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌで酸性化した。有機層を回収し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下に乾燥して、(Ｅ)−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)アクリル酸を得て、これを直接工程２で使用した。
工程２：
(Ｅ)−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)アクリル酸(７.１４ｇ、２４.８５mmol)のＴＨＦ(４００mL)溶液に、−７８℃でＥｔ３Ｎ(１０.３９ml、７４.６mmol)および塩化ピバロイル(６.１２ml、４９.７mmol)を添加した。混合物を１５分、−７８℃で撹拌し、次いで０℃で１.５時間温めた。混合物を−７８℃に冷却し、それにｎ−ブチルリチウム(ヘキサン中１.６Ｍ)(１４mL、２２.４mmol)を添加し、続いて(Ｒ)−４−フェニル−２−オキサゾリジノンのリチウム塩[ｎ−ブチルリチウム(ヘキサン中１.６Ｍ)(３１ml、４９.７mmol)を(Ｒ)−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン(８.１１ｇ、４９.７mmol)の溶液に添加することにより製造]のＴＨＦ(２００mL)溶液に、−７８℃でカニューレにより添加した。反応物を−７８℃で２時間、次いでｒｔで１６時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止させた。有機層を減圧下除去し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を回収し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。粗製の生成物を１０〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物フラクションを集め、溶媒を減圧下除去して、((Ｒ,Ｅ)−ｔｅｒｔ−ブチル３−(３−オキソ−３−(２−オキソ−４−フェニルオキサゾリジン−３−イル)プロプ−１−エン−１−イル)−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート、７.１２ｇ(６６％)を得た。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ４３３.４(Ｍ＋１)
工程３：
臭化銅(Ｉ)メチルスルフィド錯体(５.０８ｇ、２４.７０mmol)およびジメチルスルフィド(１５mL)のＴＨＦ(３０mL)中の混合物に、−４℃で臭化メチルマグネシウム(ジエチルエーテル中３Ｍ)(５.４９ml、１６.４６mmol)を添加した。１０分撹拌後、(Ｒ,Ｅ)−ｔｅｒｔ−ブチル３−(３−オキソ−３−(２−オキソ−４−フェニルオキサゾリジン−３−イル)プロプ−１−エン−１−イル)−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート(７.１２ｇ、１６.４６mmol)のＴＨＦ(７０mL)溶液を添加した。混合物を−４℃で１時間、ｒｔで２時間撹拌した。混合物を−７８℃に冷却し、ＮＢＳ(５.８６ｇ、３２.９mmol)のＴＨＦ(１２０mL)溶液を、カニューレから反応物に添加した。反応物を、１時間、−７８℃で、次いでｒｔで２時間撹拌した。０.５Ｎ ＮａＨＳＯ４：塩水(１：１、２００mL)で反応停止させた。有機層を分離し、０.５Ｎ Ｎａ２Ｓ２Ｏ３(２×１００mL)で洗浄した。有機層をＮＨ４Ｃｌ、次いで塩水で洗浄した。有機層を回収し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。粗製の生成物を１０〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物フラクションを集め、溶媒を減圧下に除去して、ｔｅｒｔ−ブチル３−((２Ｓ,３Ｒ)−３−ブロモ−４−オキソ−４−((Ｒ)−２−オキソ−４−フェニルオキサゾリジン−３−イル)ブタン−２−イル)−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート、４.０ｇ(４６％)を得た。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ５４９.２(Ｍ＋Ｎａ)。１H NMR (500MHz, クロロホルム-d) δ 8.16 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.64 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.43 - 7.22 (m, 7H), 6.18 (d, J=10.9 Hz, 1H), 5.16 (dd, J=8.8, 4.3 Hz, 1H), 4.45 (t, J=8.9 Hz, 1H), 4.16 (dd, J=8.9, 4.3 Hz, 1H), 3.75 (dq, J=10.8, 7.0 Hz, 1H), 1.69 (s, 9H), 1.60 (d, J=7.1 Hz, 3H)
工程４：
ｔｅｒｔ−ブチル３−((２Ｓ,３Ｒ)−３−ブロモ−４−オキソ−４−((Ｒ)−２−オキソ−４−フェニルオキサゾリジン−３−イル)ブタン−２−イル)−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート(４ｇ、７.５８mmol)をＤＭＳＯ(５０.６ml)に溶解し、ＮａＮ３(１.９７２ｇ、３０.３mmol)を添加した。反応物を２時間撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。有機層を回収し、水、次いで塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に乾燥して、粗製の生成物を得て、これを１５〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物フラクションを集め、溶媒を減圧下に除去して、ｔｅｒｔ−ブチル３−((２Ｓ,３Ｓ)−３−アジド−４−オキソ−４−((Ｒ)−２−オキソ−４−フェニルオキサゾリジン−３−イル)ブタン−２−イル)−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート、３.４ｇ(９１％)を得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 8.16 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.37 - 7.20 (m, 7H), 5.55 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.51 (dd, J=8.8, 4.4 Hz, 1H), 4.79 (t, J=8.9 Hz, 1H), 4.38 (dd, J=8.9, 4.3 Hz, 1H), 3.68 - 3.57 (m, 1H), 1.69 - 1.66 (m, 9H), 1.27 (d, J=6.8 Hz, 3H)
工程５：
ｔｅｒｔ−ブチル３−((２Ｓ,３Ｓ)−３−アジド−４−オキソ−４−((Ｒ)−２−オキソ−４−フェニルオキサゾリジン−３−イル)ブタン−２−イル)−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート(３.３８ｇ、６.９０mmol)の水(２９mL)およびＴＨＦ(８６mL)中の混合物に、０℃で過酸化水素(４.６７ml、４５.７mmol)、次いで水酸化リチウム(０.３３１ｇ、１３.８１mmol)を添加した。反応物を２時間撹拌した。Ｎａ２ＳＯ３(７ｇ)の４０mL水溶液で反応停止した。反応物を３０分、ｒｔで撹拌した。溶媒を減圧下除去し、反応物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。ｐＨを２に調節した。有機層を回収し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に乾燥して、残渣を得て、これをＥｔ２Ｏで摩砕して固体を得て、これを濾過により回収し、乾燥して、(２Ｓ,３Ｓ)−２−アジド−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)ブタン酸、２.３８ｇ(１００％)を得た。ESI-MS(-) m/z 343.3 (M-H).1H NMR (500MHz, クロロホルム-d) δ 8.15 (d, J=5.5 Hz, 1H), 7.60 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.58 - 7.55 (m, 1H), 7.33 (td, J=7.7, 1.1 Hz, 1H), 7.27 - 7.23 (m, 1H), 4.29 (d, J=6.5 Hz, 1H), 3.68 (quin, J=6.9 Hz, 1H), 1.70 (s, 9H), 1.51 (d, J=7.1 Hz, 3H)
工程６：
１０％Ｐｄ／炭素(１.１９ｇ、１.１１８mmol)を、Ｎ２(ｇ)ブランケット下、フラスコに入れた。触媒をＭｅＯＨ(５mL)で湿らせた。フラスコに(２Ｓ,３Ｓ)−２−アジド−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)ブタン酸(２.３８ｇ、６.９１mmol)をＭｅＯＨ(６９.１ml)溶液として添加した。フラスコを排気し、次いでＨ２(ｇ)を充填した。反応物を２時間撹拌した。フラスコを排気し、Ｎ２(ｇ)を２回通気した。反応物をセライト(登録商標)で濾過し、フィルターケーキをＭｅＯＨで洗浄した。有機層を減圧下に乾燥して、(２Ｓ,３Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)ブタン酸を得て、これをそのまま工程７で使用した。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ３１９.４(Ｍ＋Ｈ)
工程７：
(２Ｓ,３Ｓ)−２−アミノ−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)ブタン酸(２１９７mg、６.９mmol)を水(３５mL)とＴＨＦ(１００mL)の混合物に溶解した。重炭酸ナトリウム(２１７４mg、２５.９mmol)および(９Ｈ−フルオレン−９−イル)メチル２,５−ジオキソピロリジン−１−カルボキシレート(４４３４mg、１３.８０mmol)を溶液に添加し、反応物を１６時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム溶液(２００mL)を反応物に添加し、溶媒を減圧下除去した。残った水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を回収し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。粗製の物質を、２０分かけて２０〜８０％ＡＣＮ／水の勾配と０.１％ＴＦＡモディファイヤーを使用する逆相ＢＩＯＴＡＧＥ(登録商標)Ｃ−１８カラムで精製した。生成物フラクションを回収し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、次いで塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に乾燥して、(２Ｓ,３Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)ブタン酸、５００mg(１３％)を得た。ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ５４１.５(Ｍ＋Ｈ)。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.79 (br. s., 1H), 8.03 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.90 - 7.85 (m, 2H), 7.73 (dd, J=8.1, 4.7 Hz, 2H), 7.62 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.56 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.39 (td, J=7.4, 4.0 Hz, 2H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 7.28 - 7.18 (m, 3H), 4.45 (t, J=8.2 Hz, 1H), 4.30 - 4.25 (m, 1H), 4.21 - 4.15 (m, 1H), 4.15 - 4.09 (m, 1H), 3.48 (quin, J=7.2 Hz, 1H), 1.57 (s, 9H), 1.34 (d, J=7.3 Hz, 3H)
実施例１０５０１
実施例１０５０１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを１５分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５０.５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５０２
実施例１０５０２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５０３
実施例１０５０３を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４４.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５０４
実施例１０５０４を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４９.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５０５
実施例１０５０５を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５１.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５０６
実施例１０５０６を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３０.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５０７
実施例１０５０７を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１３.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４４.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５０８
実施例１０５０８を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ｃ−１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：５０〜９０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は７９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３７.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５０９
実施例１０５０９を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５１０
実施例１０５１０を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２２.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５１１
実施例１０５１１を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１５.８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５１２
実施例１０５１２を、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜５０％Ｂを４０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２５.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.４(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９０８.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５１３
実施例１０５１３を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。(２Ｓ,３Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)ブタン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１０.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５４.４９５０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９５４.４８７４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５１４
実施例１０５１４を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。(２Ｓ,３Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)ブタン酸を第六アミノ酸カップリング工程で使用した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６２.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６２.４８８０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６２.４８５１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５１５
実施例１０５１５を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。(２Ｓ,３Ｓ)−２−((((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)−３−(１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−１Ｈ−インドール−３−イル)ブタン酸ｗａｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｅｉｇｈｔｈアミノ酸ｃｏｕｐｌｉｎｇ ｓｔｅｐ。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１５.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６３.０(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６２.４８８０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６２.４８４４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５１６
実施例１０５１６を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７６.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７６.４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１０５１７
実施例１０５１７を、“環化方法Ａ”の代わりに“環化方法Ｂ”を使用する以外、“一般的合成手順Ａ”に従い製造した。粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８３.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８３.８(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９８３.００１２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９８２.９９８６(Ｍ＋２Ｈ)
分析データ：
マススペクトロメトリー：“ＥＳＩ−ＭＳ(＋)”は、陽イオンモードで実施するエレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＭＳ(−)は、陰イオンモードで実施するエレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋)”は、陽イオンモードで実施する高解像度エレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す；“ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(−)”は、陰イオンモードで実施する高解像度エレクトロスプレーイオン化マススペクトロメトリーを示す。検出した質量を、“ｍ／ｚ”単位指定に従い示す。１０００より大きい正確な質量の化合物は、二重荷電または三重荷電イオンとしてしばしば検出された。
分析条件Ａ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＢＥＨ Ｃ１８、２.０×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；温度：５０℃；勾配：０％Ｂ、０〜１００％Ｂを３分かけて、次いで０.１００％Ｂに５分維持；流速：１mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
分析条件Ｂ：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＢＥＨ Ｃ１８、２.０×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；温度：５０℃；勾配：０％Ｂ、０〜１００％Ｂを３分かけて、次いで０.１００％Ｂに５分維持；流速：０.５mL／分；検出：２２０nmのＵＶ。
実施例１３００１〜１４００８：のための一般法
全ての操作をＳｙｍｐｈｏｎｙ−Ｘペプチドシンセサイザー(Protein Technologies)の自動化の下に行った。全ての方法は、断らない限り、底フリットを備えた１０mLポリプロピレンチューブで行った。チューブをチューブの底部と上部の両方からＰｒｅｌｕｄｅペプチドシンセサイザーに接続した。ＤＭＦおよびＤＣＭをチューブの上部から添加でき、これはチューブの底の側面から等しく洗い落とす。残りの反応材をチューブの下部から添加し、フリットを通して上げて、樹脂と接触させる。全ての溶液をチューブの底から除去する。“周期的撹拌”は底フリットからのＮ２ガスの短いパルスを意味し、該パルスは約５秒続き、３０秒毎に生じる。ＤＭＦ中のクロロアセチルクロライド溶液は、製造後２４時間以内に使用した。アミノ酸溶液は製造後３週間を超えて使用しなかった。ＨＡＴＵ溶液は製造後５日以内に使用した。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＨＡＴＵ＝１−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−１Ｈ−１,２,３−トリアゾロ[４,５−ｂ]ピリジニウム３−ｏｘｉｄ ヘキサフルオロホスフェート；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；Ｒｉｎｋ＝(２,４−ジメトキシフェニル)(４−アルコキシフェニル)メタンアミンここで、“４−アルコキシ”はポリスチレン樹脂への結合性の位置およびタイプを意味する。使用した樹脂はＲｉｎｋリンカー(窒素でＦｍｏｃ保護)を伴うメリフィールドポリマー(ポリスチレン)；１００〜２００メッシュ、１％ＤＶＢ、０.５６mmol／ｇ荷重である。使用する一般的アミノ酸を下に記戴し、側鎖保護基はカッコ内に示す。
Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｂｆ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｂｚｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ(Ｂｏｃ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ(ｔＢｕ)−ＯＨ；Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ
本方法は０.１００mmol規模で行う実験を記戴し、ここで、規模は樹脂に結合するＲｉｎｋリンカーの量により決定する。このは、約１７８mgの上記Ｒｉｎｋ−メリフィールド樹脂に対応する。アミノ酸カップリングの前に、全てのペプチド合成手順は、下に“樹脂膨潤方法”として記戴する樹脂膨潤から開始する。アミノ酸の一級アミンＮ末端へのカップリングは下記“単カップリング方法”を使用した。二級アミンＮ末端へのカップリングは下記“ダブルカップリング方法”を使用した。クロロアセチル基のペプチドのＮ末端へのカップリングは下の“クロロアセチルクロライドカップリング方法”により詳述する。
樹脂膨潤方法：
１０mLポリプロピレン固相反応容器にメリフィールド：Ｒｉｎｋ樹脂(１７８mg、０.１００mmol)を添加した。樹脂を、次のとおり３回洗浄(膨潤)した。反応容器にＤＭＦ(２.０mL)を添加し、混合物を１０分周期的撹拌し、溶媒をフリットから排出した。
単カップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部(底フリットからではない)から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.４Ｍ、１.０mL、４当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部(底フリットからではない)から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物(２.０mL)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部(底フリットからではない)から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を次工程で直接使用した。
ダブルカップリング方法：
先の工程からの樹脂を含む反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に、ピペリジン：ＤＭＦ(２０：８０ｖ／ｖ、２.０mL)を添加した。混合物を３分周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり６回連続的に洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部(底フリットからではない)から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.４Ｍ、１.０mL、４当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部(底フリットからではない)から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器にアミノ酸(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、次いでＨＡＴＵ(ＤＭＦ中０.２Ｍ、１.０mL、２当量)、最後にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.４Ｍ、１.０mL、４当量)を添加した。混合物を１５分周期的撹拌し、次いで反応溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり２回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部(底フリットからではない)から添加し、得られた混合物を３０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。反応容器に酢酸無水物(２.０mL)を添加した。混合物を１０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部(底フリットからではない)から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を次工程で直接使用した。
クロロアセチルクロライドカップリング方法：
反応容器にＤＩＰＥＡ(ＤＭＦ中０.４Ｍ、３.０mL、２４当量)、次いでクロロアセチルクロライド(ＤＭＦ中０.８Ｍ、１.５mL、１３.２当量)を添加した。混合物を３０分周期的撹拌し、次いで溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に３回洗浄した。各洗浄時、ＤＭＦ(２.０mL)を容器の上部(底フリットからではない)から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。樹脂を次のとおり連続的に４回洗浄した。各洗浄時、ＣＨ２Ｃｌ２(２.０mL)を容器の上部(底フリットからではない)から添加し、得られた混合物を９０秒周期的撹拌し、溶液をフリットから排出した。得られた樹脂を１５分Ｎ２中下に置き、それにより樹脂は硬く、取り扱いが容易となった。
包括的脱保護方法：
“脱保護溶液”を、４０mLガラスバイアル中、トリフルオロ酢酸(２２mL)、フェノール(１.３２５ｇ)、水(１.２５mL)およびトリイソプロピルシラン(０.５mL)を合わせることにより調製した。樹脂を反応容器から除き、４mLガラスバイアルに移した。バイアルに“脱保護溶液”(２.０mL)を添加した。混合物をシェーカー(１０００RPMで１分、次いで５００RPMで１.５時間)で混合した。混合物を０.２μシリンジフィルターで１８×１５０mm試験管に濾過し、固体を２回の“脱保護溶液”(１.０mL)で抽出した。１８×１５０mm試験管中の合わせた濾液をＥｔ２Ｏ(１５mL)で希釈し、それにより相当量の白色固体が沈殿した。混合物を２分遠心分離し、次いで溶液を傾捨した。固体をＥｔ２Ｏ(２０mL)に懸濁し、混合物を５分遠心分離し、溶液を傾捨した。最終回について、固体をＥｔ２Ｏ(２０mL)に懸濁し、混合物を５分遠心分離し、溶液を傾捨した。
環化方法：
固体を２０mL ＭｅＣＮ：０.１Ｍ ＮＨ４ＯＡｃ水溶液(１：１)に溶解し、溶液を、ＮａＯＨ水溶液(１.０Ｍ)を使用して、ｐＨ＝８.５〜９.０に注意深く調整した。溶液を一夜(約１８時間)静置した(撹拌は不必要)。１mL ＤＭＳＯを添加し、反応溶液をＳＰＥＥＤＶＡＣ(登録商標)遠心分離機蒸発器で、一夜穏やかな加熱により濃縮した。約１mLのＭｅＯＨを残渣に添加し、得られた溶液を個々の実施例に記戴する方法で精製した。
(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−フェニルピロリジン−２−カルボン酸の製造
スキーム：
工程１：
(２Ｓ,４Ｒ)−１−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−４−フェニルピロリジン−２−カルボン酸(１.２０ｇ、４.１２mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(２０.５９ml)溶液に、ＴＦＡ(４.１３ml、５３.５mmol)を添加した。得られた溶液をｒｔで撹拌した。ＬＣ／ＭＳでの分析により反応の完了が示されたとき、揮発物を減圧下除去し、トルエン(１０mL)を添加し、揮発物を再び除去した。
工程２：
工程１からの残渣を１Ｍ Ｎａ２ＣＯ３水溶液(２４.７１ml、２４.７１mmol)に取り込み、溶解度のために〜５mL ＴＨＦを添加した。ＦＭＯＣ−ＯＳＵ(１.６６７ｇ、４.９４mmol)を添加し、混合物を一夜、ｒｔで撹拌した。反応混合物を２回エーテルで抽出した(廃棄)。１Ｍ ＨＣｌの添加によりｐＨを〜２に調節し、得られた懸濁液をＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせたＥｔＯＡｃ抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下濃縮した。粗製の(２Ｓ,４Ｒ)−１−(((９Ｈ−フルオレン−９−イル)メトキシ)カルボニル)−４−フェニルピロリジン−２−カルボン酸を、さらなる化学反応にそのまま使用した。
実施例１３００１
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−[ｔｒａｎｓ−４−フルオロ−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３２.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.７(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４３.７(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４２.９５４３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４２.９５１７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３００２
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−[ｔｒａｎｓ−４−フルオロ−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２６.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９２９.８(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９２８.９３３１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９２８.９３０６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３００３
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−[ｔｒａｎｓ−４−フルオロ−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｏｒｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３９.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９１０.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９０９.９６１６(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９０９.９５８７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３００４
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−[ｔｒａｎｓ−４−(２Ｈ−テトラゾール−５−イル)−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.３６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６８.２(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.５５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６８.３(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６７.９６５２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６７.９６１６(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３００５
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−[ｃｉｓ−４−フェニル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｏｒｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.８mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.６(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.６(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３８.９８２０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３８.９８０４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３００６
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−[ｃｉｓ−４−フェニル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１０〜４５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。本物質を、次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２８.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １００１.１(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １００１.１(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：１０００.４９８０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１０００.４９５５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３００７
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−[ｔｒａｎｓ−４−ベンジル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３４.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６２分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７９.３(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７９.７(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９７８.９８２５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９７８.９８１０(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３００８
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−[ｔｒａｎｓ−４−ベンジル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３１.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９５％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６５.７(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６４.９６１３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６４.９５８２(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３００９
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−[ｔｒａｎｓ−４−ベンジル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｏｒｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２５〜６５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４６.５(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９４５.９８９８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９４５.９８７５(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３０１０
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−[ｔｒａｎｓ−４−ベンジル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３３.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １００８.３(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １００８.３(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：１００７.５０５８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１００７.５０２７(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３０１１
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−[ｔｒａｎｓ−４−(４−フルオロベンジル)−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は４１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６３分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８８.６(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９８８.７(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９８７.９７７８(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９８７.９７５８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３０１２
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−[ｔｒａｎｓ−４−(４−フルオロベンジル)−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.５mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７４.８(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９０分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７４.４(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９７３.９５６５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９７３.９５３８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３０１３
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−[ｔｒａｎｓ−４−(４−フルオロベンジル)−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｏｒｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９７％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.５(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５５.８(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９５４.９８５１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９５４.９８１９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１３０１４
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−[ｔｒａｎｓ−４−(４−フルオロベンジル)−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は１８.１mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は１００％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.５４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １０１７.３(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １０１６.９(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：１０１６.５０１１(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１０１６.４９９１(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１４００１
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−[ｔｒａｎｓ−４−フェニル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｏｒｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.９mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４０.２(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９３９.６(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９３８.９８２０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９３８.９７９９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１４００２
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−[ｔｒａｎｓ−４−フェニル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は５１.０mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.４８分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １０００.８(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １００１.２(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：１０００.４９８０(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１０００.４９５８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１４００３
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−[ｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシ−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｏｒｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：１５〜５５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２３.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９６％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.６(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９５４.３(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１４００４
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−[ｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシ−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４０〜８０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は３５.６mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９４％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.６５分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １０１５.７(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.６６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １０１６.２(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：１０１５.５０３３(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１０１５.５００８(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１４００５
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−[ｔｒａｎｓ−４−シクロヘキシル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２４.４mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７６分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７５.０(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.８７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９７５.１(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９７４.９９８２(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９７４.９９５４(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１４００６
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−[ｔｒａｎｓ−４−シクロヘキシル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２９.２mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.３(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９９分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９６１.４(Ｍ＋２Ｈ)
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：９６０.９７６９(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：９６０.９７４９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１４００７
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｄａｐ−Ｌｅｕ−[ｔｒａｎｓ−４−シクロヘキシル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｏｒｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：２０〜６０％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２０.３mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９８％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７７分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.８(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
分析条件Ｂ：保持時間＝２.９１分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ ９４２.８(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
実施例１４００８
次のペプチドを上記方法に従い合成した。下線を引いた工程は、ダブルカップリング方法を用いた。
ＣｌＡｃ−Ｔｙｒ−[Ｎ−Ｍｅ]Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−[ｔｒａｎｓ−４−シクロヘキシル−Ｌ−プロリン]−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−[Ｎ−Ｍｅ]Ｎｌｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
上記方法に従う脱保護および環化後、化合物を次のとおり精製した。
粗製の物質を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した。カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：９５：５メタノール：水と１０mM 酢酸アンモニウム；勾配：４５〜８５％Ｂを３０分かけて、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥した。生成物の収量は２１.７mgであり、ＬＣＭＳ分析により推定される純度は９９％であった。
分析条件Ａ：保持時間＝１.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １００３.９(Ｍ＋２Ｈ)
分析条件Ｂ：保持時間＝２.７４分；ＥＳＩ−ＭＳ(＋) ｍ／ｚ １００４.２(Ｍ＋２Ｈ)、最も豊富なイオン
ＥＳＩ−ＨＲＭＳ(＋) ｍ／ｚ：計算値：１００３.５２１５(Ｍ＋２Ｈ)；実測値：１００３.５１８９(Ｍ＋２Ｈ)
実施例１２０ − 均一時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)結合アッセイを使用する大環状ペプチドがＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１への結合を競合する能力を試験する方法
本発明の大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１に結合する能力をＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１均一時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)結合アッセイを使用して試験した。このアッセイの模式図を図１に示す。
方法
可溶性ＰＤ−１の可溶性ＰＤ−Ｌ１への結合の均一時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)アッセイ。可溶性ＰＤ−１および可溶性ＰＤ−Ｌ１は、膜貫通領域を除くためのカルボキシル末端短縮化を有し、異種性配列、特にヒト免疫グロブリンＧ配列(Ｉｇ)のＦｃ部分またはヘキサヒスチジンエピトープタグ(Ｈｉｓ)と融合したタンパク質をいう。全ての結合研究を、０.１％(ｗ／ｖ)ウシ血清アルブミンおよび０.０５％(ｖ／ｖ)Ｔｗｅｅｎ−２０を添加したｄＰＢＳからなるＨＴＲＦアッセイ緩衝液で行った。ＰＤ−１−Ｉｇ／ＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓ結合アッセイについて、阻害剤をＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓ(１０nM最終)と、１５分、４μlのアッセイ緩衝液とプレインキュベートし、続いて１μlのアッセイ緩衝液中のＰＤ−１−Ｉｇ(２０nM最終)を添加し、さらに１５分インキュベートした。ヒト、カニクイザルまたはマウスのいずれかからのＰＤ−Ｌ１融合タンパク質を使用した。ＨＴＲＦ検出を、ユウロピウムクリプテート標識抗Ｉｇモノクローナル抗体(１nM最終)およびアロフィコシアニン(ＡＰＣ)標識抗Ｈｉｓモノクローナル抗体(２０nM最終)を使用して達成した。抗体をＨＴＲＦ検出緩衝液で希釈し、５μlを結合反応の上部に分配した。反応を３０分平衡化させ、シグナル(６６５nm／６２０nm比)をＥｎＶｉｓｉｏｎ蛍光光度計を使用して得た。さらなる結合アッセイをＰＤ−１−Ｉｇ／ＰＤ−Ｌ２−Ｈｉｓ(それぞれ２０nMおよび５nM)、ＣＤ８０−Ｈｉｓ／ＰＤ−Ｌ１−Ｉｇ(それぞれ１００nMおよび１０nM)およびＣＤ８０−Ｈｉｓ／ＣＴＬＡ４−Ｉｇ(それぞれ１０nMおよび５nM)で確立した。ビオチニル化化合物番号７１とヒトＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓの間の競合研究を次のとおり行った。大環状ペプチド阻害剤をＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓ(１０nM最終)と６０分、４μlのアッセイ緩衝液中でプレインキュベートし、１μlのアッセイ緩衝液中のビオチニル化化合物番号７１(０.５nM最終)を添加した。結合を３０分平衡化させ、５μlのＨＴＲＦ緩衝液中のユウロピウムクリプテート標識ストレプトアビジン(２.５pM最終)およびＡＰＣ標識抗Ｈｉｓ(２０nM最終)を添加した。反応を３０分平衡化させ、シグナル(６６５nm／６２０nm比)をＥｎＶｉｓｉｏｎ蛍光光度計を使用して得た。
組み換えタンパク質。Ｃ末端ヒトＩｇエピトープタグを有するカルボキシル切断型ヒトＰＤ−１(アミノ酸２５〜１６７)[ｈＰＤ−１(２５−１６７)−３Ｓ−ＩＧ]およびＣ末端Ｈｉｓエピトープタグを有するヒトＰＤ−Ｌ１(アミノ酸１８−２３９)[ｈＰＤ−Ｌ１(１９−２３９)−タバコ葉脈斑紋ウイルスプロテアーゼ開裂部位(ＴＶＭＶ)−Ｈｉｓ]をＨＥＫ２９３Ｔ細胞で発現させ、ｒＰｒｏｔｅｉｎ Ａ親和性クロマトグラフィーおよび分子ふるいクロマトグラフィーで連続的に精製した。ヒトＰＤ−Ｌ２−Ｈｉｓ(Sino Biologicals)、ＣＤ８０−Ｈｉｓ(Sino Biologicals)、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ(RnD Systems)を全て商業的供給源から得た。
組み換えヒトＰＤ−１−Ｉｇの配列
(配列番号１)
組み換えヒトＰＤ−Ｌ１−ＴＶＭＶ−Ｈｉｓ(ＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓ)の配列
(配列番号２)
結果を表６に示す。示すように、本発明の大環状ペプチドは、ＰＤ−Ｌ１−ＴＶＭＶ−Ｈｉｓ(ＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓ)へのＰＤ−１−Ｉｇ結合活性の強力な阻害を示した。
実施例１２１ − 均一時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)結合アッセイを使用する化合物番号９９異型大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１への結合を阻害する能力を試験する方法
本発明の化合物番号９９ペプチドの異型大環状ペプチドが、ＰＤ−Ｌ１−ＨｉｓへのＰＤ−１−Ｉｇ結合を阻害する能力を、構造活性相関を確立するために試験した。
ＨＴＲＦ実験を、本質的に上に概説するとおりに実施した。異型大環状ペプチドをここで概説するとおり製造した。
結果を表７に示す。他の表からの各親大環状ペプチドの結果を比較目的でこの表に含ませた。示すように、本発明の異型大環状ペプチドはＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１−Ｉｇ結合の強力な阻害を示し、活性が感受性である領域および変動性に抵抗性の領域を同定した。
実施例１２２ − 均一時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)を使用する化合物番号１異型大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１結合を阻害する能力を試験する方法
結合アッセイ
本発明の化合物番号１の異型大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１の結合を阻害する能力を、構造活性相関を確立するために試験した。
ＨＴＲＦ実験を、本質的に上に概説するとおりに実施した。異型大環状ペプチドをここで概説するとおり製造した。
結果を表８に示す。他の表からの各親大環状ペプチドの結果を比較目的でこの表に含ませた。示すように、本発明の異型大環状ペプチドはＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１結合の強力な阻害を示し、活性が感受性である領域および変動性に抵抗性の領域を同定した。
実施例１２３ − 均一時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)を使用する化合物番号７１異型大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１の結合を阻害する能力を試験する方法
結合アッセイ
本発明の化合物番号７１の異型大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１の結合を阻害する能力を、構造活性相関を確立するために試験した。
ＨＴＲＦ実験を、本質的に上に概説するとおりに実施した。異型大環状ペプチドをここで概説するとおり製造した。
結果を表９に示す。他の表からの各親大環状ペプチドの結果を比較目的でこの表に含ませた。示すように、本発明の異型大環状ペプチドはＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１結合の強力な阻害を示し、活性が感受性である領域および変動性に抵抗性の領域を同定した。
実施例１２４ − 均一時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)結合アッセイを使用する化合物番号１１６異型大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１に結合する能力を試験する方法
本発明の化合物番号１１６が異型大環状ペプチドに結合する能力ＰＤ−Ｌ１を、構造活性相関を確立するために試験した。
ＨＴＲＦ実験を、上に概説するとおりに実施した。異型大環状ペプチドをここで概説するとおり製造した。
結果を表１０に示す。他の表からの各親大環状ペプチドの結果を比較目的でこの表に含ませた。示すように、本発明の異型大環状ペプチドは、ＰＤ−Ｌ１への強力な結合活性を示し、感受性である領域および変動性に抵抗性の領域を同定した。
実施例１２５ − サイトメガロウイルス(ＣＭＶ)特異的Ｔ細胞機能アッセイにおける大環状ペプチドがインターフェロンガンマ(ＩＦＮγ)分泌を促進する能力を測定する方法
ＣＭＶ特異的Ｔ細胞において本発明の大環状ペプチドがＩＦＮγ分泌を用量依存的様式で促進する能力を試験した。
方法
ＣＭＶ特異的Ｔ細胞機能アッセイ。ＣＭＶ血清陽性のドナーからの末梢血単核細胞(PBMC, Astarte Biologics, Redmond, WA)を、２.５×１０５細胞／ウェルで平底組織培養(ＴＣ)処理９６ウェルプレートで、０.５μg／mL ＣＭＶ＋細胞ライセート(Microbix Biosystems, Mississauga, Ontario)存在下、抗ＰＤ−Ｌ１抗体または記戴する大環状ペプチドの漸増濃度存在下または非存在下で培養した。１０％熱不活性化ウシ胎児血清(ＦＢＳ、Sigma, St Louis, MO)を補ったＡＩＭ−Ｖ培地(Life Technologies, Grand Island, NY)を、２００μL／ウェルの総体積で３連で使用した。細胞を４日間、３７℃、５％ＣＯ２で培養し、その時点で、ＥＬＩＳＡ(OptEIA hIFNγ ELISA Kit, BD Biosciences, San Jose, CA)による分泌ＩＦＮγの測定のために、培養上清を回収した。
図１０Ａ〜Ｃに示すように、抗ＰＤ−Ｌ１抗体およびペプチドは、いずれも用量依存的様式でＣＭＶ特異的Ｔ細胞によるＩＦＮγ分泌の促進を示した。最も強い応答はＰＤ−Ｌ１に対する抗体(ＭＤＸ−１１０５、ＥＣ５０ ０.６nM)により生じ、続いて化合物番号７１(ＥＣ５０ ３００nM)、化合物番号１(ＥＣ５０ ４００nM)、化合物番号２(ＥＣ５０ ４００nM)および化合物番号９９(ＥＣ５０ ＞１０,０００nM)であった。これらの結果は、大環状ペプチド阻害剤を用いるＰＤ−Ｌ１結合が、予め永続性抗原に暴露することにより産生した記憶Ｔ細胞集団からのＩＦＮγ放出を促進できることを示す。
実施例１２６ − ＨＩＶ特異的Ｔ細胞機能アッセイにおける大環状ペプチドがＩＦＮγ分泌を促進する能力を測定する方法
ＨＩＶ特異的Ｔ細胞において本発明の大環状ペプチドがＩＦＮγ分泌を用量依存的様式で促進する能力を試験した。
方法
ＨＩＶ特異的Ｔ細胞機能アッセイ。感染の慢性段階にあるウイルス血症ＨＩＶ＋ドナー由来のヒトＰＢＭＣ(Bioreclamation LLC, Westbury, NY)を、２.０×１０６細胞／ウェルでＴＣ処理４８ウェルプレートで培養した。細胞を、各６プールの２０重複ペプチド(１１残基が重複した１５量体)からなるＨＩＶ−Ｇａｇ(カプシド、Ｇａｇ＝群特異抗原)ペプチドライブラリー(ProImmune, Sarasota, FL)で刺激した。培養中の最終濃度はペプチドあたり２μg／mLであった。ＨＩＶ−Ｇａｇ抗原刺激を＋／−抗ＰＤ−Ｌ１抗体(０.１μＭ最終)またはペプチド化合物番号７１(７.５μＭ最終)で行った。１０％熱不活性化ＦＢＳ(Sigma, St Louis, MO)および１０Ｕ／ml ｒＩＬ−２(Peprotech, Rocky Hill, NJ)を補ったＲＰＭＩ培地(Life Technologies, Grand Island, NY)を、１mL／ウェルの総体積で使用した。細胞を６日間、３７℃、５％ＣＯ２で培養し、その時点で培養を洗浄し、抗ＩＦＮγ被覆ＥＬＩＳｐｏｔプレート(hIFNγ ELISpot PRO Kit, Mabtech, Mariemont, OH)で１８時間、３７℃、５％ＣＯ２で再刺激した。再刺激のために、インビトロ増殖細胞を、２.０×１０５細胞／ウェルで、ｒＩＬ−２を欠くＲＰＭＩ培地で、１００μL／ウェルの総体積で培養した。ＨＩＶ−Ｇａｇ抗原および抗ＰＤ−Ｌ１阻害剤の最終濃度は、上に記戴したのと同じであった。ＥＬＩＳｐｏｔプレートを５日間空気乾燥し、ImmunoSpot S6 Fluorospotアナライザー(C.T.L., Shaker Heights, OH)を使用して読んだ。
図２に示すように、抗ＰＤ−Ｌ１抗体およびペプチドは、いずれも用量依存的様式でＨＩＶ特異的Ｔ細胞によるＩＦＮγ分泌の促進を示した。ウェルあたりの平均ＩＦＮγスポット形成細胞(ＳＦＣ)を２個のウェルから計算し、非刺激ウェルに存在するバックグラウンド(＜２５ＳＦＣ)を減算した。データをまた、ＤＭＳＯ対照処置を超える増加倍率としても表す。抗ＰＤ−Ｌ１抗体およびペプチドは、いずれも少なくとも６種のＨＩＶ−Ｇａｇ抗原プールの一つに応答した、ＨＩＶ特異的Ｔ細胞によるＩＦＮγ分泌を増強する。これらの結果は、ペプチド阻害剤を用いるＰＤ−Ｌ１結合が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体と同様、進行中の慢性ウイルス感染に応答するＴ細胞集団からのＩＦＮγ放出を増強できることを示す。
実施例１２７ − 細胞結合アッセイにおける大環状ペプチドがＰＤ−Ｌ１への結合を阻害する能力を測定する方法
本発明の大環状ペプチドがＪｕｒｋａｔ、マウスＢ細胞株(ＬＫ３５.２)およびヒト肺腺癌細胞株(Ｌ２９８７)に結合する能力を試験した。
方法
Ｊｕｒｋａｔ−ＰＤ−１細胞結合アッセイ。フィコエリトリン(ＰＥ)をヒトＰＤ−Ｌ１−ＩｇのＩｇエピトープタグに共有結合させ、蛍光性標識ＰＤ−Ｌ１−Ｉｇを、ヒトＰＤ−１を過発現するＪｕｒｋａｔ細胞株(Ｊｕｒｋａｔ−ＰＤ−１)での結合研究に使用した。簡単に述べると、組み換えＰＤ−Ｌ１−Ｉｇ(１０nM最終)を、阻害剤と、１５分、３０μl体積の２％ウシ胎児血清添加ＲＰＭＩ中でプレインキュベートした。１×１０５ Ｊｕｒｋａｔ−ＰＤ−１細胞を２％ウシ胎児血清を添加した２０μl ＲＰＭＩ中のＰＤ−Ｌ１−Ｉｇおよび阻害剤の上部に分配し、室温で１時間結合させた。細胞をｄＰＢＳで３回洗浄した。細胞を２００μlのｄＰＢＳに再懸濁し、結合をフローサイトメトリーにより測定した。
ＬＫ３５.２−ｈＰＤ−Ｌ１細胞結合アッセイ。フィコエリトリン(ＰＥ)をヒトＰＤ−１−ＩｇのＩｇエピトープタグと共有結合させ、蛍光性標識ＰＤ−１−Ｉｇを、ヒトＰＤ−Ｌ１を安定に過発現するマウスＢ細胞株(ＬＫ３５.２)(ＬＫ３５.２−ｈＰＤ−Ｌ１)での結合研究に使用した。簡単に述べると、１×１０５ ＬＫ３５.２−ｈＰＤ−Ｌ１細胞を、２％ウシ胎児血清を添加した３０μl体積のＲＰＭＩ中、阻害剤と１５分プレインキュベートした。２％ウシ胎児血清を添加したＲＰＭＩで希釈した２０μlのＰＥ標識ＰＤ−１−Ｉｇ(２nM最終)を細胞および阻害剤の上部に分配し、室温で１時間結合させた。細胞をｄＰＢＳで３回洗浄した。細胞を２００μlのｄＰＢＳに再懸濁し、結合をフローサイトメトリーにより測定した。
Ｌ２９８７Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ細胞結合アッセイ。フィコエリトリン(ＰＥ)をヒトＰＤ−１−ＩｇのＩｇエピトープタグと共有結合させ、蛍光性標識ＰＤ−１−Ｉｇを自然にＰＤ−Ｌ１を発現するヒト肺腺癌細胞株(Ｌ２９８７)での結合研究に使用した。簡単に述べると、１２,０００ Ｌ２９８７細胞を、９６ウエル黒色透明底プレートで、５％ウシ胎児血清を添加した５０μlのＤＭＥＭ中に懸濁した。翌日、阻害剤を無血清ＤＭＥＭで希釈し、２５μlを細胞の上部に分配した。１５分インキュベート後、ｓＰＤ−１−Ｉｇ(３０nM最終)を、２５μlの無血清ＤＭＥＭ中の細胞および阻害剤の上部に分配した。サンプルを１時間、３７℃でインキュベートし、ｄＰＢＳで２回洗浄し、３０分４％パラホルムアルデヒドで固定した。サンプルをｄＰＢＳでさらに２回洗浄した。ヘキスト(最終１μg／ml)を最終洗浄物に添加して、核を染色した。プレートをａＣｅｌｌｏｍｉｃｓ ＡＲＲＡＹＳＣＡＮ(登録商標)を使用して処理した。
結果を図２〜９に示す。示すように、本発明の代表的大環状ペプチドは、試験したＪｕｒｋａｔ、マウスＢ細胞株(ＬＫ３５.２)およびヒト肺腺癌細胞株(Ｌ２９８７)の各々と結合できた。さらに、ＰＤ−Ｌ１大環状ペプチドは、互いにならびに内部的に発生した抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体とＰＤ−Ｌ１の同じ結合部位に結合するように見える。
化合物番号９９、化合物番号１および化合物番号７１シリーズのペプチドのさらなる細胞結合アッセイを、それぞれ表１１〜１３に示す。
実施例１２８
方法
ＬＫ３５.２−ｈＰＤ−Ｌ１細胞結合ハイコンテントスクリーニングアッセイ。フィコエリトリン(ＰＥ)をヒトＰＤ−１−ＩｇのＩｇエピトープタグと共有結合させ、蛍光性標識ＰＤ−１−Ｉｇを、ヒトＰＤ−Ｌ１を安定に過発現するマウスＢ細胞株(ＬＫ３５.２)(ＬＫ３５.２−ｈＰＤ−Ｌ１)での結合研究に使用した。簡単に述べると、３×１０３ ＬＫ３５.２−ｈＰＤ−Ｌ１細胞を、３８４ウェルプレートで、１０％ウシ胎児血清を添加した２０μlのＲＰＭＩに篩い分け、一夜培養した。１２５nlの化合物、１０％ウシ胎児血清を添加したＲＰＭＩで希釈した５μlのＰＥ標識ＰＤ−１−Ｉｇ(１nM最終)を細胞に添加し、３７℃で１時間インキュベートした。細胞を１００μl ｄＰＢＳで３回洗浄し、１０μg／ml ヘキスト３３３４２を含む３０μlの４％パラホルムアルデヒドのｄＰＢＳ溶液で室温で、３０分固定した。細胞を１００μlのｄＰＢＳで３回洗浄し、１５μlのｄＰＢＳの最終添加をした。データをＣｅｌｌ Ｉｎｓｉｇｈｔ ＮＸＴ Ｈｉｇｈ Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｉｍａｇｅｒおよび関連ソフトウェアを使用して採取し、処理した。
２９３Ｔ−ｈＰＤ−Ｌ１細胞結合ハイコンテントスクリーニングアッセイ。フィコエリトリン(ＰＥ)をヒトＰＤ−１−ＩｇのＩｇエピトープタグに共有結合し、蛍光性標識ＰＤ−１−ＩｇをヒトＰＤ−Ｌ１を安定に過発現するヒト胚腎臓細胞株(２９３Ｔ)(２９３Ｔ−ｈＰＤ−Ｌ１)での結合研究に使用した。簡単に述べると、２×１０３ ２９３Ｔ−ｈＰＤ−Ｌ１細胞を、３８４ウェルプレートで、１０％ウシ胎児血清を添加した２０μlのＤＭＥＭ中で播種し、一夜培養した。１２５nlの化合物、１０％ウシ胎児血清を添加したＤＭＥＭで希釈した５μlのＰＥ標識ＰＤ−１−Ｉｇ(０.５nM最終)を細胞に添加し、３７℃で１時間インキュベートした。細胞を１００μl ｄＰＢＳで３回洗浄し、１０μg／ml ヘキスト３３３４２を含む３０μlの４％パラホルムアルデヒドのｄＰＢＳ溶液で室温で、３０分固定した。細胞を１００μlのｄＰＢＳで３回洗浄し、１５μlのｄＰＢＳの最終添加をした。データをＣｅｌｌ Ｉｎｓｉｇｈｔ ＮＸＴ Ｈｉｇｈ Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｉｍａｇｅｒおよび関連ソフトウェアを使用して採取し、処理した。
ここに記戴するおよび請求する主題の多くの修飾および変更が、上記教示に鑑みて可能である。それゆえに、添付する特許請求の範囲の範囲内で、本請求の範囲に引用する主題を、ここで具体的に記戴した以外の方法で実施し得ることは理解される。
本発明はここに開示した態様の範囲により限定されず、これらは本発明の個々の面の一つの説明として意図され、機能的に同等なあらゆるものが本発明の範囲内である。ここに記戴するものに加えて、本発明のモデルおよび方法への種々の修飾が、上の記戴および教示から当業者には明らかとなり、同様に本発明の範囲内に入ると意図される。このような修飾または他の態様は、本発明の真の範囲および精神から逸脱することなく実施できる。
本明細書で引用する各文件(特許、特許出願、学術論文、要約、実習マニュアル、書籍、ＧＥＮＢＡＮＫ(登録商標)Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ番号、ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴ(登録商標)Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ番号または他の開示を含む)の各々の全ての開示を、その全体を引用することにより本明細書に包含させる。さらに、ここに提出する配列表のハードコピーを、その対応するコンピューター読み取り可能形式に加えて、引用によりその全体を本明細書に包含させる。

Claims (22)

  1. 式(Ｉ)
    〔式中、
    Ａは
    であり；
    ここで、
    はカルボニル基への結合点を示し、
    は窒素原子への結合点を示し；
    ｎは０または１であり；
    Ｒ１４およびＲ１５は独立して水素およびメチルから選択され；および
    Ｒ１６は水素、−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨＲ１８Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨＲ１８Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２から選択され；
    ここで、Ｒ１７は水素および−ＣＨ２ＯＨから選択され、Ｒ１８は水素およびメチルから選択され；
    Ｒｃ、Ｒｆ、Ｒｈ、Ｒｉ、ＲｍおよびＲｎは水素であり；
    Ｒａ、Ｒｅ、およびＲｊは各々独立して水素およびメチルから選択され；
    Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ１３は独立して天然アミノ酸側鎖および非天然アミノ酸側鎖から選択されまたは下記のとおり対応する隣接Ｒ基と環を形成し；
    Ｒ ｅ は、対応する隣接Ｒ基およびそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成でき；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
    Ｒｂはメチルであるか、またはＲｂとＲ２はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
    Ｒ ｄ はメチルであるか、またはＲ ｄ およびＲ ４ はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで、各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよく；
    Ｒ ｇ はメチルであるか、またはＲ ｇ とＲ ７ はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、場合によりハロ基で置換されていてよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、場合によりメトキシ基で置換されていてよいイソキノリニルオキシ、場合によりハロ基で置換されていてよいキノリニルオキシおよびテトラゾリルから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよく；そしてピロリジン環およびピペリジン環は場合によりシクロヘキシル基、フェニル基またはインドール基と縮合していてよく；
    Ｒ ｋ はメチルであるか、またはＲ ｋ およびＲ １１ はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよく；および
    Ｒｌはメチルであるか、またはＲｌおよびＲ１２はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジンおよびピロリジンから選択される環を形成し、ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよい。〕
    の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  2. ＲｄとＲ４がそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環が場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよく；
    ＲｇとＲ７がそれらが結合している原子と一体となってピロリジン環を形成し、ここで該環が場合によりアミノ、場合によりハロ基で置換されていてよいベンジル、ベンジルオキシ、シアノ、シクロヘキシル、メチル、ハロ、ヒドロキシ、場合によりメトキシ基で置換されていてよいイソキノリニルオキシ、場合によりハロ基で置換されていてよいキノリニルオキシおよびテトラゾリルから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよく；そしてピロリジン環およびピペリジン環が場合によりシクロヘキシル基、フェニル基またはインドール基と縮合していてよく；
    Ｒｋがメチルである、
    請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  3. Ｒ８が
    アザインドリルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンゾチアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンゾチエニルＣ１−Ｃ３アルキル、ベンジルオキシＣ１−Ｃ３アルキル、ジフェニルメチル、フラニルＣ１−Ｃ３アルキル、イミダゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、ナフチルＣ１−Ｃ３アルキル、ピリジニルＣ１−Ｃ３アルキル、チアゾリルＣ１−Ｃ３アルキル、チエニルＣ１−Ｃ３アルキル；および
    インドリルＣ１−Ｃ３アルキル(ここで、インドリル部分が場合によりＣ１−Ｃ３アルキル、シアノ、ハロおよびヒドロキシから選択される１個の基で置換されていてよい)
    から選択される、
    請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  4. Ｒ８が場合によりＣ１−Ｃ３アルキル、ハロ、ヒドロキシまたはシアノから選択される１個の基で置換されていてよい３−インドリルＣ１−Ｃ３アルキルである、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  5. 次のものからなる群から選択される化合物：








































































































































































































































































































































































































































































































































    および
    ；またはその薬学的に許容される塩。
  6. 式(II)
    〔式中、
    Ａは結合、
    から選択され；
    ここで、
    はカルボニル基への結合点を示し、
    は窒素原子への結合点を示し；
    ｎは０または１であり；
    Ｒ１４およびＲ１５は独立して水素およびメチルから選択され；
    Ｒ１６は水素、−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨＲ１８Ｃ(Ｏ)ＮＨ２および−ＣＨＲ１７Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨＲ１８Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＨ２から選択され；
    ここで、Ｒ１７は水素および−ＣＨ２ＯＨから選択され、Ｒ１８は水素およびメチルから選択され；
    Ｒａ、Ｒｆ、Ｒｊ、Ｒｋ、ＲｌおよびＲｍは水素であり；
    ＲｂおよびＲｃはメチルであり；
    Ｒｇは水素およびメチルから選択され；
    Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は独立して天然アミノ酸側鎖および非天然アミノ酸側鎖から選択されまたは下記のとおり対応する隣接Ｒ基と環を形成し；
    Ｒｄは水素およびメチルから選択されるか、またはＲｄとＲ４はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
    Ｒｅは水素およびメチルから選択されるか、またはＲｅとＲ５はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；
    Ｒｈは水素およびメチルから選択されるか、またはＲｈとＲ８はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよく；および
    Ｒｉは水素およびメチルから選択されるか、またはＲｉとＲ９はそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１〜４個の基で置換されていてよい。〕
    の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  7. Ａが
    である、請求項６に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  8. Ｒｄがメチルであるか、またはＲｄとＲ４がそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環は場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよく；
    Ｒｇがメチルであり；
    Ｒｉがメチルであるか、またはＲｉとＲ９がそれらが結合している原子と一体となってアゼチジン、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジンおよびテトラヒドロチアゾールから選択される環を形成し；ここで各環が場合によりアミノ、シアノ、メチル、ハロ、ハロメチルおよびヒドロキシから独立して選択される１個または２個の基で置換されていてよい、
    請求項７に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  9. Ｒ７が場合によりフルオロ基で置換されていてよいフェニルＣ１−Ｃ３アルキルである、請求項８に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  10. 次のものからなる群から選択される化合物：































































































































































































































































































































































































































































































    および
    ；またはその薬学的に許容される塩。


















  11. および
    から選択される化合物；
    またはその薬学的に許容される塩。
  12. 下記の化合物：
    またはその薬学的に許容される塩。
  13. 請求項１〜１２のいずれか少なくとも１個の化合物を含む、免疫応答を増強、刺激および／または上昇させる薬剤。
  14. 該薬剤の前、後または同時に別の薬剤を投与することを特徴とする、請求項１３に記載の薬剤。
  15. 該別の薬剤が抗菌剤、抗ウイルス剤、細胞毒性剤および／または免疫応答修飾剤である、請求項１４に記載の薬剤。
  16. 請求項１〜１２のいずれか１個以上の化合物を含む、癌細胞の成長、増殖または転移を阻害する薬剤。
  17. 癌が黒色腫、腎細胞癌、扁平非小細胞性肺癌(ＮＳＣＬＣ)、非扁平ＮＳＣＬＣ、結腸直腸癌、去勢抵抗性前立腺癌、卵巣癌、胃癌、肝細胞癌、膵臓癌、頭頸部の扁平上皮細胞癌、食道、消化管および乳房の癌および造血器腫瘍から選択される、請求項１６に記載の薬剤。
  18. 請求項１〜１２のいずれか少なくとも１個の化合物を含む、感染性疾患の治療剤。
  19. 感染性疾患がウイルスが原因である、請求項１８に記載の薬剤。
  20. ウイルスがＨＩＶ、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ヘルペスウイルスおよびインフルエンザから選択される、請求項１９に記載の薬剤。
  21. 請求項１〜１２のいずれか１個以上の化合物を含む、敗血症性ショックの治療剤。
  22. 請求項１〜１２のいずれか少なくとも１個の化合物を含む、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１および／またはＣＤ８０の相互作用の遮断剤。
JP2016502061A 2013-03-15 2014-03-13 Ｐｄ−１／ｐｄ−ｌ１およびｃｄ８０（ｂ７−１）／ｐｄ−ｌ１タンパク質／タンパク質相互作用の大環状阻害剤 Active JP6387082B2 (ja)

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