JP7221275B2 - Ａａｖを送達するための組成物および方法 - Google Patents

Ａａｖを送達するための組成物および方法 Download PDF

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Description

本発明は、生体内分布が向上したアデノ随伴ウイルスカプシドを設計、調製、製造、使用、および／または製剤化するための組成物、方法およびプロセスに関する。
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターは、治療用遺伝子送達の有望な候補であり、臨床治験において安全性および有効性が証明されている。
体内の一部の系へのＡＡＶの送達は、特に困難であることが証明されており、十分なレベルの遺伝子移入には侵襲性手術が必要である。一部の体内系の場合、静脈内送達は、部分的には細胞への形質導入が非効率的であるため、歴史的に遺伝子移入が限定的である。当該技術分野では、静脈内送達によって投与され得るにも関わらず、数多くの疾患の治療にとって重要な領域を効率的に標的とすることができるＡＡＶベクターに対する必要性が依然として存在する。
送達が困難である系の１つの例は、中枢神経系である。中枢神経系（ＣＮＳ）の領域へのＡＡＶの送達は、特に困難であることが証明されており、十分なレベルの遺伝子移入には侵襲性手術が必要である（例えば、非特許文献１を参照のこと）。静脈内送達は、部分的には血液脳関門（ＢＢＢ）が存在するため、歴史的にＣＮＳへの遺伝子移入が限定的である。当該技術分野では、静脈内送達によって投与され得るにも関わらず、血液脳関門を効率的に越えることができ、数多くのＣＮＳ疾患の治療にとって重要なＣＮＳの領域を標的とすることができるＡＡＶベクターに対する必要性が依然として存在する。
送達が困難である系の別の例は、心血管系である。心血管系へのＡＡＶの送達は、特に困難であることが証明されており、十分なレベルの遺伝子移入には侵襲性手術が必要である。静脈内送達は、部分的には心筋細胞への形質導入が非効率的であるため、歴史的に心血管系への遺伝子移入は限定的である。当該技術分野では、静脈内送達によって投与され得るにも関わらず、数多くの疾患の治療にとって重要な心血管系の領域を効率的に標的とすることができるＡＡＶベクターに対する必要性が依然として存在する。
本発明は、静脈内送達後にＣＮＳ組織の効率的な形質導入を可能にする操作されたカプシドタンパク質を有する新規のＡＡＶ粒子を提供することにより、この必要性に対処する。更に、これらのＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、任意の数のＣＮＳ疾患の必要性に適するように変更され、血液脳関門を越えて、ＣＮＳ組織を標的とするためのプラットフォームカプシドを提供することができる。
ベバン（Ｂｅｖａｎ）ら著、モレキュラー・セラピー（Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．）、２０１１年１１月；第１９巻（第１１号）：ｐ．１９７１～１９８０
本発明は、カプシドおよびウイルスゲノムを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を提供する。
ＡＡＶ粒子は、限定はされないが、以下、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ－２６、ＡＡＶＧ２Ｂ－１３、ＡＡＶＴＨ１．１－３２、ＡＡＶＴＨ１．１－３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５（Ｇ２Ｂ５）、ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ１０－２、ＡＡＶシャッフル１００－１、ＡＡＶシャッフル１００－３、ＡＡＶシャッフル１００－７、ＡＡＶシャッフル１０－２、ＡＡＶシャッフル１０－６、ＡＡＶシャッフル１０－８、ＡＡＶシャッフル１００－２、ＡＡＶ ＳＭ１０－１、ＡＡＶ ＳＭ１０－８、ＡＡＶ ＳＭ１００－３、ＡＡＶ ＳＭ１００－１０、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、トゥルータイプ（ｔｒｕｅ ｔｙｐｅ）ＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ１０、日本ＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ


ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、および／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ならびにそれらの変異体などのカプシドまたはペプチドインサートを含み得る。一態様において、ＡＡＶ粒子のカプシドはＶＯＹ１０１である。一態様において、ＡＡＶ粒子のカプシドはＶＯＹ２０１である。一態様において、ＡＡＶ粒子はペプチドインサートを含み、ペプチドインサートはＡＡＶＰＨＰ．Ｎである。一態様において、ＡＡＶ粒子はペプチドインサートを含み、ペプチドインサートはＡＡＶＰＨＰ．Ｂである。一態様において、ＡＡＶ粒子はペプチドインサートを含み、ペプチドインサートはＡＡＶＰＨＰ．Ａである。一態様において、ＡＡＶ粒子はペプチドインサートを含み、ペプチドインサートはＡＡＶＰＨＰ．Ｓである。
一態様において、ＡＡＶ粒子は、２つの末端逆位配列（ＩＴＲ）間に核酸配列位置を含むウイルスゲノムを含む。
一態様において、ウイルスゲノムは、ＡＡＶ粒子の送達時に心筋細胞に形質導入する。送達は、限定はされないが、静脈内投与または頸動脈内送達など、当該技術分野で公知の任意の方法によるものであってよい。
一態様において、カプシドは、ＡＡＶ粒子の送達後に血液脳関門を透過する。送達は、限定はされないが、静脈内投与または頸動脈内送達など、当該技術分野で公知の任意の方法によるものであってよい。
本発明のＡＡＶ粒子は、投与後にＣＮＳ構造に形質導入することができる。ＣＮＳ構造の非限定的な例としては、脳、脊髄、脳幹核、小脳、大脳、運動皮質、尾状核、視床、視床下部、頚髄、胸髄、腰髄、線条体、黒質、海馬、扁桃体および／または大脳皮質が挙げられる。
一態様において、ＡＡＶ粒子は、発現されると細胞における目的の遺伝子（例えば、ＳＯＤ１、ＨＴＴ、ＡＰＯＥ、およびＭＡＰＴ）の発現を阻害または抑制する核酸配列を含むウイルスゲノムを含む。核酸配列は、独立に３０ヌクレオチド長以下であってもよいセンス鎖配列およびアンチセンス鎖配列を含み、センス鎖および／またはアンチセンス鎖は、少なくとも１つまたは少なくとも２つのヌクレオチドの３’突出を含み得る。センス配列およびアンチセンス鎖配列は、少なくとも４ヌクレオチド長（例えば、少なくとも１７ヌクレオチド長、１９～２１ヌクレオチド長、または１９ヌクレオチド長）の相補性の領域を共有し得る。アンチセンス鎖は、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、または９８％超、または９９％超の割合でＡＡＶ粒子から切り出され得る。アンチセンス鎖は、センス鎖の切り出しよりも高い（例えば、２倍、５倍、１０倍、または１０倍超）割合でＡＡＶ粒子から切り出され得る。
本明細書には、ＡＡＶ粒子を含む組成物（例えば、医薬組成物）が提供される。ＡＡＶ粒子は、目的のタンパク質（例えば抗体、ＡＡＤＣ、ＡＰＯＥ２、フラタキシン、ＡＴＰ２Ａ２、および／またはＳ１００Ａ１）をコードする核酸配列を含むウイルスゲノムを含み得る。ＡＡＶ粒子は、発現されると細胞における目的の遺伝子（例えば、ＳＯＤ１、ＨＴＴ、ＡＰＯＥ、および／またはＭＡＰＴ）の発現を阻害または抑制する核酸配列を含むウイルスゲノムを含み得る。
本明細書では、ＡＡＶ粒子を使用する方法が提供される。
一態様において、細胞（例えば、哺乳類細胞、またはＣＮＳの哺乳類細胞、または心筋細胞）における標的遺伝子の発現を阻害する方法が提供される。
一態様において、哺乳類細胞（例えば、ＣＮＳの哺乳類細胞、または心筋細胞）などの細胞における標的遺伝子の発現を増加させる方法が提供される。
一態様において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を投与することによって、対象の神経学的疾患を治療および／または改善する方法が提供される。投与は、静脈内または頸動脈内送達によるものであってもよい。本方法は、目的のタンパク質（例えば、抗体、ＡＡＤＣ、ＡＰＯＥ２、および／またはフラタキシン）の発現を増加させるために使用され得る。本方法は、目的の遺伝子（例えば、ＳＯＤ１、ＨＴＴ、ＡＰＯＥ、および／またはＭＡＰＴ）の発現量を減少させるために使用され得る。
一態様において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子を投与することによって、対象における目的のタンパク質または遺伝子のレベルを変更する方法が提供される。投与は、静脈内または頸動脈内送達によるものであってもよい。本方法は、目的のタンパク質（例えば、抗体、ＡＡＤＣ、ＡＰＯＥ２、フラタキシン、ＡＴＰ２Ａ２、および／またはＳ１００Ａ１）の発現を増加させるために使用され得る。本方法は、目的の遺伝子（例えば、ＳＯＤ１、ＨＴＴ、ＡＰＯＥ、および／またはＭＡＰＴ）の発現量を減少させるために使用され得る。
本明細書では、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の組成物を投与することによって、それを必要とする対象の心血管疾患を治療する方法が提供される。送達は、限定はされないが、静脈内投与または頸動脈内送達など、当該技術分野で公知の任意の方法によるものであってもよい。
本明細書では、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の組成物を投与することによって、それを必要とする対象の心不全を治療する方法が提供される。送達は、限定はされないが、静脈内投与または頸動脈内送達など、当該技術分野で公知の任意の方法によるものであってもよい。
本発明の種々の実施形態の詳細が下記の説明に示される。本発明の他の特徴、目的、および利点は、説明、図面、および特許請求の範囲から明らかになるであろう。説明においては、文脈上特に明確に指示されない限り、単数形は複数形も含む。特に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって広く理解されているものと同じ意味を有する。矛盾が生じた場合、本説明が優先するものとする。
前出の目的、特徴、および利点ならびに他の目的、特徴、および利点は、付属の図面において例示される、本発明の特定の実施形態についての以下の説明から明らかになるであろう。図面は、必ずしも縮尺通りではなく、本発明の多様な実施形態についての原理を例示することに強調を置いている。
本発明のウイルスゲノムの概略図。
本発明の１つ以上の実施形態の詳細が、下記の添付の説明に示される。本発明の実施または試験においては、本明細書に記載されるものと同様のまたは等価な任意の材料および方法を使用し得るが、ここでは好ましい材料および方法について説明する。本発明の他の特徴、目的および利点は、この説明から明らかになるであろう。説明においては、文脈上特に明確に指示されない限り、単数形は複数形も含む。特に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって広く理解されているものと同じ意味を有する。矛盾が生じた場合、本説明が優先するものとする。
Ｉ．本発明の組成物
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）およびＡＡＶ粒子
パルボウイルス科のウイルスは、一本鎖ＤＮＡゲノムによって特徴付けられる小型非エンベロープ二十面体カプシドウイルスである。パルボウイルス科ウイルスは、２つの亜科：脊椎動物に感染するパルボウイルス亜科および無脊椎動物に感染するデンソウイルス亜科で構成される。このウイルスファミリーは、その構造が比較的で単純であり、標準的分子生物学技法を使用して容易に操られるため、生物学的ツールとして有用である。ウイルスのゲノムは、所望のペイロードが担持されているかまたは所望のペイロードを発現もしくは送達するように操作されている機能的組換えウイルスまたはウイルス粒子をアセンブリするための最低限の成分を含有するように修飾することができ、所望のペイロードを、標的細胞、組織、臓器、または生物に送達することができる。
パルボウイルスおよびパルボウイルス科の他のメンバーは、ケネス Ｉ．ベルン（Ｋｅｎｎｅｔｈ Ｉ．Ｂｅｒｎｓ）、「パルボウイルス科：ウイルスおよびそれらの複製（Ｔｈｅ Ｖｉｒｕｓｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ）」、フィールズ・バイロロジー（ＦＩＥＬＤＳ ＶＩＲＯＬＯＧＹ）（第３版、１９９６年）の第６９章に概説されている。その内容は全体として参照により援用される。
パルボウイルス科は、限定はされないが、ヒト、霊長類、ウシ、イヌ、ウマ、およびヒツジ種を含む脊椎動物宿主において複製可能なアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含むディペンドウイルス属を含む。
ＡＡＶウイルスゲノムは、およそ５，０００ヌクレオチド（ｎｔ）長の線状一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）分子である。ＡＡＶウイルスゲノムは、ペイロード領域および少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）またはＩＴＲ領域を含み得る。ＩＴＲは、伝統的には、非構造タンパク質（Ｒｅｐ遺伝子によってコードされる）および構造タンパク質（カプシド遺伝子またはＣａｐ遺伝子によってコードされる）のコードヌクレオチド配列に隣接する。理論によって束縛されることを望むものではないが、ＡＡＶウイルスゲノムは、典型的には、２つのＩＴＲ配列を含む。ＡＡＶベクターゲノムは、エネルギー的に安定した二本鎖領域を形成するｓｓＤＮＡの５’末端および３’末端の自己相補的な末端１４５ｎｔによって規定される特徴的なＴ形ヘアピン構造を含む。二本鎖ヘアピン構造は、限定はされないが、宿主ウイルス複製細胞の内因性ＤＮＡポリメラーゼ複合体のプライマーとして機能することによってＤＮＡ複製の起点として働くことを含む、複数の機能を含む。
コード化異種性ペイロードに加えて、ＡＡＶ粒子は、全体または一部が、任意の天然に存在するおよび／または組換えのＡＡＶ血清型ヌクレオチド配列または変異体のウイルスゲノムを含み得る。ＡＡＶ変異体は、概して物理的および機能的等価物であるコンストラクトを産生し、同様の機序によって複製し、および同様の機序によってアセンブルするように、核酸レベル（ゲノムまたはカプシド）およびアミノ酸レベル（カプシド）において有意に相同性である配列を有し得る。チオリニ（Ｃｈｉｏｒｉｎｉ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ．）、第７１巻、ｐ．６８２３～３３（１９９７年）；スリバスタバ（Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ）、第４５巻、ｐ．５５５～６４（１９８３年）；チオリニ（Ｃｈｉｏｒｉｎｉ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ）、第７３巻、ｐ．１３０９～１３１９（１９９９年）；ラトリッジ（Ｒｕｔｌｅｄｇｅ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ）、第７２巻、ｐ．３０９～３１９（１９９８年）；およびウー（Ｗｕ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ）、第７４巻、ｐ．８６３５～４７（２０００年）。これらの各々の内容は、本明細書において全体として参照により援用される。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、複製欠損型である組換えＡＡＶウイルスベクターであり、それらのウイルスゲノム内に機能的ＲｅｐおよびＣａｐタンパク質をコードする配列を欠如する。これらの欠損ＡＡＶ粒子は、ほとんどのまたは全ての親コード配列を欠如してもよく、本質的に、１つまたは２つのＡＡＶ ＩＴＲ配列および細胞、組織、臓器または生物に送達するための目的の核酸のみを有していてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、そこにコードされたコード配列の複製、転写および翻訳を提供する少なくとも１つの制御エレメントを含む。コード配列が適切な宿主細胞中で複製、転写および／または翻訳されることが可能である限り、制御エレメントは全てが常に存在する必要があるわけではない。発現制御エレメントの非限定的な例としては、転写開始および／もしくは終結のための配列、プロモータおよび／もしくはエンハンサー配列、スプライシングおよびポリアデニル化シグナルなどの効率的ＲＮＡプロセシングシグナル、細胞質ｍＲＮＡを安定させる配列、翻訳有効性を増強する配列（例えば、コザックコンセンサス配列）、タンパク質安定性を増強する配列、ならびに／またはタンパク質プロセシングおよび／もしくは分泌を増強する配列が挙げられる。
本発明によれば、療法および／または診断に使用されるＡＡＶ粒子は、目的の核酸ペイロードまたはカーゴの形質導入に必要な最低限の成分へと純化または縮小されているウイルスを含む。このように、ＡＡＶ粒子は、野生型ウイルスに見られる有害な複製および／または組込み特徴を欠きながらも、特異的送達媒体として操作される。
本発明のＡＡＶ粒子は、組換え的に産生されてもよく、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づいていてもよい。本明細書で使用されるとき、「ベクター」は、本明細書に記載される核酸などの異種分子を輸送し、形質導入し、またはその他担体として働く任意の分子または部分を意味する。
一本鎖ＡＡＶウイルスゲノム（例えば、ｓｓＡＡＶ）に加えて、本発明はまた、自己相補的ＡＡＶ（ｓｃＡＡＶ）ウイルスゲノムも提供する。ｓｃＡＡＶベクターゲノムは、共にアニーリングして二本鎖ＤＮＡを形成するＤＮＡ鎖を含有する。第２鎖の合成をスキップすることにより、ｓｃＡＡＶは、細胞において迅速に発現することが可能である。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子はｓｃＡＡＶである。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子はｓｓＡＡＶである。
ＡＡＶ粒子を作製および／または修飾する方法は、シュードタイプＡＡＶ粒子など、当該技術分野において開示されている（国際公開第２０００２８００４号パンフレット、同第２００１２３００１号パンフレット、同第２００４１１２７２７号パンフレット、同第２００５００５６１０号パンフレットおよび同第２００５０７２３６４号パンフレット、これらの各々の内容は全体として参照により本明細書に援用される）。
ＡＡＶ粒子は、送達効率が増強されるように修飾されてもよい。かかる修飾されたＡＡＶ粒子は、効率的にパッケージングすることができ、高頻度でおよび最低限の毒性で標的細胞への感染を成功させるために使用することができる。一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子のカプシドは、米国特許出願公開第２０１３０１９５８０１号明細書に記載される方法に従って操作される。この内容は、本明細書において全体として参照によって援用される。
一実施形態において、本発明のポリペプチドをコードするペイロード領域を含むＡＡＶ粒子は、哺乳類細胞に導入することができる。
ＡＡＶ血清型
本発明のＡＡＶ粒子は任意の天然または組換えＡＡＶ血清型を含んでもよく、またはそれに由来してもよい。本発明によれば、ＡＡＶ粒子は以下のいずれか、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ－２６、ＡＡＶＧ２Ｂ－１３、ＡＡＶＴＨ１．１－３２、ＡＡＶＴＨ１．１－３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５（Ｇ２Ｂ５）、ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ １０－２、ＡＡＶシャッフル１００－１、ＡＡＶシャッフル１００－３、ＡＡＶシャッフル１００－７、ＡＡＶシャッフル１０－２、ＡＡＶシャッフル１０－６、ＡＡＶシャッフル１０－８、ＡＡＶシャッフル１００－２、ＡＡＶ ＳＭ １０－１、ＡＡＶ ＳＭ １０－８、ＡＡＶ ＳＭ １００－３、ＡＡＶ ＳＭ １００－１０、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ１０、ジャパニーズＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ


４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、および／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ならびにそれらの変異体から選択される血清型を利用してもよく、もしくはそれをベースとしてもよく、またはそれらのペプチドを含んでもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号６および６４）、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号７および７０）、ＡＡＶ３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号８および７１）、ＡＡＶ４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号６３）、ＡＡＶ５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１１４）、ＡＡＶ６（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号６５）、ＡＡＶ７（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１～３）、ＡＡＶ８（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号４および９５）、ＡＡＶ９（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号５および１００）、ＡＡＶ１０（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１１７）、ＡＡＶ１１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１１８）、ＡＡＶ１２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１１９）、ＡＡＶｒｈ１０（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号８１のアミノ酸１～７３８）、ＡＡＶ１６．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１０）、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１１）、ＡＡＶ２９．４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１２）、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１３）、ＡＡＶ１．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１４）、ＡＡＶ１３．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１５）、ＡＡＶ２４．１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１６）、ＡＡＶ２７．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１７）、ＡＡＶ７．２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１８）、ＡＡＶＣ１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１９）、ＡＡＶＣ３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２０）、ＡＡＶＣ５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２１）、ＡＡＶＦ１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２２）、ＡＡＶＦ３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２３）、ＡＡＶＦ５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２４）、ＡＡＶＨ６（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２５）、ＡＡＶＨ２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２６）、ＡＡＶ４２－８（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２７）、ＡＡＶ４２－１５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２８）、ＡＡＶ４２－５ｂ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２９）、ＡＡＶ４２－１ｂ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３０）、ＡＡＶ４２－１３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３１）、ＡＡＶ４２－３ａ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３２）、ＡＡＶ４２－４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３３）、ＡＡＶ４２－５ａ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３４）、ＡＡＶ４２－１０（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３５）、ＡＡＶ４２－３ｂ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３６）、ＡＡＶ４２－１１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３７）、ＡＡＶ４２－６ｂ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３８）、ＡＡＶ４３－１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３９）、ＡＡＶ４３－５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４０）、ＡＡＶ４３－１２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４１）、ＡＡＶ４３－２０（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４２）、ＡＡＶ４３－２１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４３）、ＡＡＶ４３－２３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４４）、ＡＡＶ４３－２５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４５）、ＡＡＶ４４．１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４６）、ＡＡＶ４４．５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４７）、ＡＡＶ２２３．１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４８）、ＡＡＶ２２３．２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４９）、ＡＡＶ２２３．４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５０）、ＡＡＶ２２３．５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５１）、ＡＡＶ２２３．６（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５２）、ＡＡＶ２２３．７（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５３）、ＡＡＶＡ３．４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５４）、ＡＡＶＡ３．５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５５）、ＡＡＶＡ３．７（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５６）、ＡＡＶＡ３．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５７）、ＡＡＶ４２．１２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５８）、ＡＡＶ４４．２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５９）、ＡＡＶ４２－２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号９）、またはそれらの変異体など、米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号７および２３）、ｒｈ２０（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１）、ｒｈ３２／３３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号２）、ｒｈ３９（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号３、２０および３６）、ｒｈ４６（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４および２２）、ｒｈ７３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号５）、ｒｈ７４（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号６）、ＡＡＶ６．１（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号２９）、ｒｈ．８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４１）、ｒｈ．４８．１（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４４）、ｈｕ．４４（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４５）、ｈｕ．２９（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４２）、ｈｕ．４８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号３８）、ｒｈ５４（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４９）、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号７）、ｃｙ．５（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号８および２４）、ｒｈ．１０（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号９および２５）、ｒｈ．１３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１０および２６）、ＡＡＶ１（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１１および２７）、ＡＡＶ３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１２および２８）、ＡＡＶ６（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１３および２９）、ＡＡＶ７（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１４および３０）、ＡＡＶ８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１５および３１）、ｈｕ．１３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１６および３２）、ｈｕ．２６（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１７および３３）、ｈｕ．３７（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１８および３４）、ｈｕ．５３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１９および３５）、ｒｈ．４３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号２１および３７）、ｒｈ２（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号３９）、ｒｈ．３７（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４０）、ｒｈ．６４（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４３）、ｒｈ．４８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４４）、ｃｈ．５（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４６）、ｒｈ．６７（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４７）、ｒｈ．５８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４８）、またはそれらの変異体など、限定はされないが、Ｃｙ５Ｒ１、Ｃｙ５Ｒ２、Ｃｙ５Ｒ３、Ｃｙ５Ｒ４、ｒｈ．１３Ｒ、ｒｈ．３７Ｒ２、ｒｈ．２Ｒ、ｒｈ．８Ｒ、ｒｈ．４８．１、ｒｈ．４８．２、ｒｈ．４８．１．２、ｈｕ．４４Ｒ１、ｈｕ．４４Ｒ２、ｈｕ．４４Ｒ３、ｈｕ．２９Ｒ、ｃｈ．５Ｒ１、ｒｈ６４Ｒ１、ｒｈ６４Ｒ２、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．１２、ｈｕ．４８Ｒ１、ｈｕ．４８Ｒ２、およびｈｕ．４８Ｒ３を含め、米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ９（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号１～３）、ＡＡＶ２（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号４）、ＡＡＶ１（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号５）、ＡＡＶ３（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号６）、およびＡＡＶ８（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号７）など、米国特許第７１９８９５１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４など、Ｎ・プリチャーラ（Ｎ Ｐｕｌｉｃｈｅｒｌａ）ら（モレキュラー・セラピー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ）、第１９巻、第６号、ｐ．１０７０～１０７８、２０１１年、この内容は本明細書において全体として参照により援用される）により記載されるとおりのＡＡＶ９配列における突然変異であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ３Ｂ（米国特許第６１５６３０３号明細書の配列番号１および１０）、ＡＡＶ６（米国特許第６１５６３０３号明細書の配列番号２、７および１１）、ＡＡＶ２（米国特許第６１５６３０３号明細書の配列番号３および８）、ＡＡＶ３Ａ（米国特許第６１５６３０３号明細書の配列番号４および９）、またはそれらの誘導体など、米国特許第６１５６３０３号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ８（米国特許出願公開第２０１４０３５９７９９号明細書の配列番号１）、ＡＡＶＤＪ（米国特許出願公開第２０１４０３５９７９９号明細書の配列番号２および３）、またはそれらの変異体など、米国特許出願公開第２０１４０３５９７９９号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、血清型は、グリム（Ｇｒｉｍｍ）ら（ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ）、第８２巻、第１２号、ｐ．５８８７～５９１１、２００８年、本明細書において全体として参照により援用される）により記載されるとおり、ＡＡＶＤＪまたはその変異体、例えばＡＡＶＤＪ８（またはＡＡＶ－ＤＪ８）などであってもよい。ＡＡＶＤＪ８のアミノ酸配列は、ヘパリン結合ドメイン（ＨＢＤ）を除去するため２つ以上の突然変異を含み得る。非限定的な例として、米国特許第７，５８８，７７２号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に配列番号１として記載されるＡＡＶ－ＤＪ配列は、２つの突然変異：（１）Ｒ５８７Ｑ［アミノ酸５８７のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；Ｇｌｎ）に変更される］および（２）Ｒ５９０Ｔ［アミノ酸５９０のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ；Ｔｈｒ）に変更される］を含み得る。別の非限定的な例として、３つの突然変異：（１）Ｋ４０６Ｒ［アミノ酸４０６のリジン（Ｋ；Ｌｙｓ）がアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）に変更される］、（２）Ｒ５８７Ｑ［アミノ酸５８７のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；Ｇｌｎ）に変更される］および（３）Ｒ５９０Ｔ［アミノ酸５９０のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ；Ｔｈｒ）に変更される］を含み得る。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ４（国際公開第１９９８０１１２４４号パンフレットの配列番号１～２０）など、国際公開第１９９８０１１２４４号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりのＡＡＶ４の配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、国際公開第２０１４１４４２２９号パンフレットに記載されおよび本明細書において全体として参照により援用されるとおりのＡＡＶ２Ｇ９を生じさせるＡＡＶ２配列における突然変異であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ３－３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２１７）、ＡＡＶ１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２１９および２０２）、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０）、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１）、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号６および８）、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８１）、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号７８）、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１７６および１７７）、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６８および１９２）、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５３および５７）、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５６および５６）、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１７０）、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１７４）、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号３２）、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０３および２５）、ＡＡＶ２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２１１および２２１）、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号３３および１１４）、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２１）、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２３および１０８）、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０４および２２）、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号５および８４）、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５５および５８）、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８６および１７６）、ＡＡＶ３－３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２００）、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４）、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号５０）、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号５１）、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９６および１８）、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１７）、ＡＡＶ４－４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２０１および２１８）、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１６）、ＡＡＶ５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９９および２１６）、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号６３）、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３３）、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２７）、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０５）、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２６）、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４９）、ＡＡＶ６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２０３および２２０）、ＡＡＶ７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２２２および２１３）、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号５５）、ＡＡＶ８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２２３および２１４）、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４６）、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４４）、ＡＡＶｈｕ．１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４４）、ＡＡＶｈｕ．１０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５６）、ＡＡＶｈｕ．１１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５３）、ＡＡＶｈｕ．１２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号５９）、ＡＡＶｈｕ．１３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２９）、ＡＡＶｈｕ．１４／ＡＡＶ９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２３および３）、ＡＡＶｈｕ．１５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４７）、ＡＡＶｈｕ．１６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４８）、ＡＡＶｈｕ．１７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８３）、ＡＡＶｈｕ．１８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４９）、ＡＡＶｈｕ．１９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３３）、ＡＡＶｈｕ．２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４３）、ＡＡＶｈｕ．２０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３４）、ＡＡＶｈｕ．２１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３５）、ＡＡＶｈｕ．２２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３８）、ＡＡＶｈｕ．２３．２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３７）、ＡＡＶｈｕ．２４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３６）、ＡＡＶｈｕ．２５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４６）、ＡＡＶｈｕ．２７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４０）、ＡＡＶｈｕ．２９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３２）、ＡＡＶｈｕ．３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４５）、ＡＡＶｈｕ．３１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２１）、ＡＡＶｈｕ．３２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２２）、ＡＡＶｈｕ．３４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２５）、ＡＡＶｈｕ．３５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６４）、ＡＡＶｈｕ．３７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８８）、ＡＡＶｈｕ．３９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０２）、ＡＡＶｈｕ．４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４１）、ＡＡＶｈｕ．４０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８７）、ＡＡＶｈｕ．４１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９１）、ＡＡＶｈｕ．４２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８５）、ＡＡＶｈｕ．４３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６０）、ＡＡＶｈｕ．４４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４４）、ＡＡＶｈｕ．４５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２７）、ＡＡＶｈｕ．４６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５９）、ＡＡＶｈｕ．４７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２８）、ＡＡＶｈｕ．４８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５７）、ＡＡＶｈｕ．４９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８９）、ＡＡＶｈｕ．５１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９０）、ＡＡＶｈｕ．５２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９１）、ＡＡＶｈｕ．５３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８６）、ＡＡＶｈｕ．５４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８８）、ＡＡＶｈｕ．５５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８７）、ＡＡＶｈｕ．５６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９２）、ＡＡＶｈｕ．５７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９３）、ＡＡＶｈｕ．５８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９４）、ＡＡＶｈｕ．６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８４）、ＡＡＶｈｕ．６０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８４）、ＡＡＶｈｕ．６１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８５）、ＡＡＶｈｕ．６３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９５）、ＡＡＶｈｕ．６４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９６）、ＡＡＶｈｕ．６６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９７）、ＡＡＶｈｕ．６７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９８）、ＡＡＶｈｕ．７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５０）、ＡＡＶｈｕ．８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号１２）、ＡＡＶｈｕ．９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５５）、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４）、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８６）、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号７）、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６３）、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４３）、ＡＡＶｐｉ．１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号２８）、ＡＡＶｐｉ．２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３０）、ＡＡＶｐｉ．３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号２９）、ＡＡＶｒｈ．３８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８６）、ＡＡＶｒｈ．４０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９２）、ＡＡＶｒｈ．４３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６３）、ＡＡＶｒｈ．４４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３４）、ＡＡＶｒｈ．４５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号４１）、ＡＡＶｒｈ．４７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３８）、ＡＡＶｒｈ．４８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１５）、ＡＡＶｒｈ．４９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０３）、ＡＡＶｒｈ．５０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０８）、ＡＡＶｒｈ．５１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０４）、ＡＡＶｒｈ．５２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレ


ットの配列番号９６）、ＡＡＶｒｈ．５３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９７）、ＡＡＶｒｈ．５５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３７）、ＡＡＶｒｈ．５６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５２）、ＡＡＶｒｈ．５７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０５）、ＡＡＶｒｈ．５８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０６）、ＡＡＶｒｈ．５９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号４２）、ＡＡＶｒｈ．６０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３１）、ＡＡＶｒｈ．６１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０７）、ＡＡＶｒｈ．６２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１４）、ＡＡＶｒｈ．６４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９９）、ＡＡＶｒｈ．６５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３５）、ＡＡＶｒｈ．６８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号１６）、ＡＡＶｒｈ．６９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３９）、ＡＡＶｒｈ．７０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号２０）、ＡＡＶｒｈ．７２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号９）、またはそれらの変異体など、限定はされないが、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．２５／４２ １５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ１４を含め、国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。変異体の非限定的な例としては、国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）の配列番号１３、１５、１７、１９、２４、３６、４０、４５、４７、４８、５１～５４、６０～６２、６４～７７、７９、８０、８２、８９、９０、９３～９５、９８、１００、１０１、１０９～１１３、１１８～１２０、１２４、１２６、１３１、１３９、１４２、１５１、１５４、１５８、１６１、１６２、１６５～１８３、２０２、２０４～２１２、２１５、２１９、２２４～２３６が挙げられる。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶｒｈ８Ｒ（国際公開第２０１５１６８６６６号パンフレットの配列番号９）、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ突然変異体（国際公開第２０１５１６８６６６号パンフレットの配列番号１０）、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ突然変異体（国際公開第２０１５１６８６６６号パンフレットの配列番号１１）、またはそれらの変異体など、国際公開第２０１５１６８６６６号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶｈＥ１．１（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４４）、ＡＡＶｈＥｒ１．５（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４５）、ＡＡＶｈＥＲ１．１４（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４６）、ＡＡＶｈＥｒ１．８（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４７）、ＡＡＶｈＥｒ１．１６（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４８）、ＡＡＶｈＥｒ１．１８（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４９）、ＡＡＶｈＥｒ１．３５（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５０）、ＡＡＶｈＥｒ１．７（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５１）、ＡＡＶｈＥｒ１．３６（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５２）、ＡＡＶｈＥｒ２．２９（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５３）、ＡＡＶｈＥｒ２．４（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５４）、ＡＡＶｈＥｒ２．１６（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５５）、ＡＡＶｈＥｒ２．３０（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５６）、ＡＡＶｈＥｒ２．３１（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５８）、ＡＡＶｈＥｒ２．３６（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５７）、ＡＡＶｈＥＲ１．２３（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５３）、ＡＡＶｈＥｒ３．１（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５９）、ＡＡＶ２．５Ｔ（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４２）、またはそれらの変異体など、米国特許第９２３３１３１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１）、ＡＡＶ－ＬＫ０１（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２）、ＡＡＶ－ＬＫ０２（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号３）、ＡＡＶ－ＬＫ０３（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号４）、ＡＡＶ－ＬＫ０４（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号５）、ＡＡＶ－ＬＫ０５（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号６）、ＡＡＶ－ＬＫ０６（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号７）、ＡＡＶ－ＬＫ０７（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号８）、ＡＡＶ－ＬＫ０８（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号９）、ＡＡＶ－ＬＫ０９（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１０）、ＡＡＶ－ＬＫ１０（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１１）、ＡＡＶ－ＬＫ１１（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１２）、ＡＡＶ－ＬＫ１２（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１３）、ＡＡＶ－ＬＫ１３（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１４）、ＡＡＶ－ＬＫ１４（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１５）、ＡＡＶ－ＬＫ１５（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１６）、ＡＡＶ－ＬＫ１６（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１７）、ＡＡＶ－ＬＫ１７（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１８）、ＡＡＶ－ＬＫ１８（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１９）、ＡＡＶ－ＬＫ１９（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２０）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２１）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２２）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２３）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２４）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２５）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２６）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２７）、またはそれらの変異体など、米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１（配列番号１ 米国特許第９１６３２６１号明細書）、またはその変異体など、米国特許第９１６３２６１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ－８ｈ（米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書の配列番号６）、ＡＡＶ－８ｂ（米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書の配列番号５）、ＡＡＶ－ｈ（米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書の配列番号２）、ＡＡＶ－ｂ（米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書の配列番号１）、またはそれらの変異体など、米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ ＳＭ １０－２（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号２２）、ＡＡＶシャッフル１００－１（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号２３）、ＡＡＶシャッフル１００－３（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号２４）、ＡＡＶシャッフル１００－７（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号２５）、ＡＡＶシャッフル１０－２（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３４）、ＡＡＶシャッフル１０－６（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３５）、ＡＡＶシャッフル１０－８（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３６）、ＡＡＶシャッフル１００－２（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３７）、ＡＡＶ ＳＭ １０－１（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３８）、ＡＡＶ ＳＭ １０－８（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３９）、ＡＡＶ ＳＭ １００－３（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号４０）、ＡＡＶ ＳＭ １００－１０（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号４１）、またはそれらの変異体など、米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ（米国特許出願公開第２０１５０２３８５５０号明細書の配列番号１）、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ（米国特許出願公開第２０１５０２３８５５０号明細書の配列番号３）、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ（米国特許出願公開第２０１５０２３８５５０号明細書の配列番号４）、またはそれらの変異体など、米国特許出願公開第２０１５０２３８５５０号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶｒｈ．５０（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１０８）、ＡＡＶｒｈ．４３（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１６３）、ＡＡＶｒｈ．６２（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１１４）、ＡＡＶｒｈ．４８（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１１５）、ＡＡＶｈｕ．１９（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１３３）、ＡＡＶｈｕ．１１（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１５３）、ＡＡＶｈｕ．５３（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１８６）、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１５）、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号２４）、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６０）、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６７）、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６６）、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６５）、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６４）、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６８）、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６９）、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号８０）、またはそれらの変異体など、米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）（国際公開第２０１５１２１５０１号パンフレットの配列番号２）、「ユーペンＡＡＶ１０」（国際公開第２０１５１２１５０１号パンフレットの配列番号８）、「ジャパニーズＡＡＶ１０」（国際公開第２０１５１２１５０１号パンフレットの配列番号９）、またはそれらの変異体など、国際公開第２０１５１２１５０１号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
本発明によれば、ＡＡＶカプシド血清型の選択または使用は様々な種からであってよい。一実施形態において、ＡＡＶは鳥類ＡＡＶ（ＡＡＡＶ）であってもよい。ＡＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＡＶ（米国特許第９，２３８，８００号明細書の配列番号１、２、４、６、８、１０、１２、および１４）、またはその変異体など、米国特許第９２３８８００号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一実施形態において、ＡＡＶはウシＡＡＶ（ＢＡＡＶ）であってもよい。ＢＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＢＡＡＶ（米国特許第９，１９３，７６９号明細書の配列番号１および６）、またはその変異体など、米国特許第９，１９３，７６９号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。ＢＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＢＡＡＶ（米国特許第７，４２７，３９６号明細書の配列番号５および６）、またはその変異体など、米国特許第７，４２７，３９６号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一実施形態において、ＡＡＶはヤギＡＡＶであってもよい。ヤギＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ヤギＡＡＶ（米国特許第７，４２７，３９６号明細書の配列番号３）、またはその変異体など、米国特許第７，４２７，３９６号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
他の実施形態において、ＡＡＶは２つ以上の親血清型からハイブリッドＡＡＶとして操作されてもよい。一実施形態において、このＡＡＶは、ＡＡＶ２およびＡＡＶ９からの配列を含むＡＡＶ２Ｇ９であってもよい。ＡＡＶ２Ｇ９ ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開第２０１６００１７００５号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一実施形態において、ＡＡＶは、プリチャーラ（Ｐｕｌｉｃｈｅｒｌａ）ら（モレキュラー・セラピー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ）、第１９巻、第６号、ｐ．１０７０～１０７８、２０１１年（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）により記載されるとおりのアミノ酸３９０～６２７（ＶＰ１付番）に突然変異を有するＡＡＶ９カプシドライブラリによって生成された血清型であってもよい。血清型ならびに対応するヌクレオチドおよびアミノ酸置換は、限定はされないが、ＡＡＶ９．１（Ｇ１５９４Ｃ；Ｄ５３２Ｈ）、ＡＡＶ６．２（Ｔ１４１８ＡおよびＴ１４３６Ｘ；Ｖ４７３ＤおよびＩ４７９Ｋ）、ＡＡＶ９．３（Ｔ１２３８Ａ；Ｆ４１３Ｙ）、ＡＡＶ９．４（Ｔ１２５０ＣおよびＡ１６１７Ｔ；Ｆ４１７Ｓ）、ＡＡＶ９．５（Ａ１２３５Ｇ、Ａ１３１４Ｔ、Ａ１６４２Ｇ、Ｃ１７６０Ｔ；Ｑ４１２Ｒ、Ｔ５４８Ａ、Ａ５８７Ｖ）、ＡＡＶ９．６（Ｔ１２３１Ａ；Ｆ４１１Ｉ）、ＡＡＶ９．９（Ｇ１２０３Ａ、Ｇ１７８５Ｔ；Ｗ５９５Ｃ）、ＡＡＶ９．１０（Ａ１５００Ｇ、Ｔ１６７６Ｃ；Ｍ５５９Ｔ）、ＡＡＶ９．１１（Ａ１４２５Ｔ、Ａ１７０２Ｃ、Ａ１７６９Ｔ；Ｔ５６８Ｐ、Ｑ５９０Ｌ）、ＡＡＶ９．１３（Ａ１３６９Ｃ、Ａ１７２０Ｔ；Ｎ４５７Ｈ、Ｔ５７４Ｓ）、ＡＡＶ９．１４（Ｔ１３４０Ａ、Ｔ１３６２Ｃ、Ｔ１５６０Ｃ、Ｇ１７１３Ａ；Ｌ４４７Ｈ）、ＡＡＶ９．１６（Ａ１７７５Ｔ；Ｑ５９２Ｌ）、ＡＡＶ９．２４（Ｔ１５０７Ｃ、Ｔ１５２１Ｇ；Ｗ５０３Ｒ）、ＡＡＶ９．２６（Ａ１３３７Ｇ、Ａ１７６９Ｃ；Ｙ４４６Ｃ、Ｑ５９０Ｐ）、ＡＡＶ９．３３（Ａ１６６７Ｃ；Ｄ５５６Ａ）、ＡＡＶ９．３４（Ａ１５３４Ｇ、Ｃ１７９４Ｔ；Ｎ５１２Ｄ）、ＡＡＶ９．３５（Ａ１２８９Ｔ、Ｔ１４５０Ａ、Ｃ１４９４Ｔ、Ａ１５１５Ｔ、Ｃ１７９４Ａ、Ｇ１８１６Ａ；Ｑ４３０Ｌ、Ｙ４８４Ｎ、Ｎ９８Ｋ、Ｖ６０６Ｉ）、ＡＡＶ９．４０（Ａ１６９４Ｔ、Ｅ５６５Ｖ）、ＡＡＶ９．４１（Ａ１３４８Ｔ、Ｔ１３６２Ｃ；Ｔ４５０Ｓ）、ＡＡＶ９．４４（Ａ１６８４Ｃ、Ａ１７０１Ｔ、Ａ１７３７Ｇ；Ｎ５６２Ｈ、Ｋ５６７Ｎ）、ＡＡＶ９．４５（Ａ１４９２Ｔ、Ｃ１８０４Ｔ；Ｎ４９８Ｙ、Ｌ６０２Ｆ）、ＡＡＶ９．４６（Ｇ１４４１Ｃ、Ｔ１５２５Ｃ、Ｔ１５４９Ｇ；Ｇ４８１Ｒ、Ｗ５０９Ｒ、Ｌ５１７Ｖ）、９．４７（Ｇ１２４１Ａ、Ｇ１３５８Ａ、Ａ１６６９Ｇ、Ｃ１７４５Ｔ；Ｓ４１４Ｎ、Ｇ４５３Ｄ、Ｋ５５７Ｅ、Ｔ５８２Ｉ）、ＡＡＶ９．４８（Ｃ１４４５Ｔ、Ａ１７３６Ｔ；Ｐ４８２Ｌ、Ｑ５７９Ｌ）、ＡＡＶ９．５０（Ａ１６３８Ｔ、Ｃ１６８３Ｔ、Ｔ１８０５Ａ；Ｑ５４６Ｈ、Ｌ６０２Ｈ）、ＡＡＶ９．５３（Ｇ１３０１Ａ、Ａ１４０５Ｃ、Ｃ１６６４Ｔ、Ｇ１８１１Ｔ；Ｒ１３４Ｑ、Ｓ４６９Ｒ、Ａ５５５Ｖ、Ｇ６０４Ｖ）、ＡＡＶ９．５４（Ｃ１５３１Ａ、Ｔ１６０９Ａ；Ｌ５１１Ｉ、Ｌ５３７Ｍ）、ＡＡＶ９．５５（Ｔ１６０５Ａ；Ｆ５３５Ｌ）、ＡＡＶ９．５８（Ｃ１４７５Ｔ、Ｃ１５７９Ａ；Ｔ４９２Ｉ、Ｈ５２７Ｎ）、ＡＡＶ．５９（Ｔ１３３６Ｃ；Ｙ４４６Ｈ）、ＡＡＶ９．６１（Ａ１４９３Ｔ；Ｎ４９８Ｉ）、ＡＡＶ９．６４（Ｃ１５３１Ａ、Ａ１６１７Ｔ；Ｌ５１１Ｉ）、ＡＡＶ９．６５（Ｃ１３３５Ｔ、Ｔ１５３０Ｃ、Ｃ１５６８Ａ；Ａ５２３Ｄ）、ＡＡＶ９．６８（Ｃ１５１０Ａ；Ｐ５０４Ｔ）、ＡＡＶ９．８０（Ｇ１４４１Ａ、；Ｇ４８１Ｒ）、ＡＡＶ９．８３（Ｃ１４０２Ａ、Ａ１５００Ｔ；Ｐ４６８Ｔ、Ｅ５００Ｄ）、ＡＡＶ９．８７（Ｔ１４６４Ｃ、Ｔ１４６８Ｃ；Ｓ４９０Ｐ）、ＡＡＶ９．９０（Ａ１１９６Ｔ；Ｙ３９９Ｆ）、ＡＡＶ９．９１（Ｔ１３１６Ｇ、Ａ１５８３Ｔ、Ｃ１７８２Ｇ、Ｔ１８０６Ｃ；Ｌ４３９Ｒ、Ｋ５２８Ｉ）、ＡＡＶ９．９３（Ａ１２７３Ｇ、Ａ１４２１Ｇ、Ａ１６３８Ｃ、Ｃ１７１２Ｔ、Ｇ１７３２Ａ、Ａ１７４４Ｔ、Ａ１８３２Ｔ；Ｓ４２５Ｇ、Ｑ４７４Ｒ、Ｑ５４６Ｈ、Ｐ５７１Ｌ、Ｇ５７８Ｒ、Ｔ５８２Ｓ、Ｄ６１１Ｖ）、ＡＡＶ９．９４（Ａ１６７５Ｔ；Ｍ５５９Ｌ）およびＡＡＶ９．９５（Ｔ１６０５Ａ；Ｆ５３５Ｌ）であってもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号２および２０）、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号３および２１）、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号５および２２）、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号６および２３）、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１１および２５）、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号７および２４）、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号８および２７）、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号９および２８）、ＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１０および２９）、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号４および２６）、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１２および３０）、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１４および３１）、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１５および３２）、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１６および３３）、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１７および３４）、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１３および３５）、またはそれらの変異体もしくは誘導体など、国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１３および８７）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１４および８８）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１５および８９）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１６および９０）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７および９１）、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１８および９２）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１９および９３）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２０および９４）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２１および９５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２２および９６）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２３および９７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２４および９８）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２５および９９）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２６および１００）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２７および１０１）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２８および１０２）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２９および１０３）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１３および８７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３０および１０４）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３１および１０５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３２および１０６）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３３および１０７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３４および１０８）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３５および１０９）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３６および１１０）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号ＸおよびＸ）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号ＸおよびＸ）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３９および１１３）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４０および１１４）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４１および１１５）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４２および１１６）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４３および１１７）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４３および１１７）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４４および１１８）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４３および１１７）、ＡＡＶ ＣＳｐ－１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４５および１１９）、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４６および１２０）、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４７および１２１）、ＡＡＶ ＣＳｐ－２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４８および１２２）、ＡＡＶ ＣＳｐ－３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４９および１２３）、ＡＡＶ ＣＳｐ－４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５０および１２４）、ＡＡＶ ＣＳｐ－６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５１および１２５）、ＡＡＶ ＣＳｐ－７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５２および１２６）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５３および１２７）、ＡＡＶ ＣＳｐ－９（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５４および１２８）、ＡＡＶ ＣＨｔ－２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５５および１２９）、ＡＡＶ ＣＨｔ－３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５６および１３０）、ＡＡＶ ＣＫｄ－１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５７および１３１）、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５８および１３２）、ＡＡＶ ＣＫｄ－２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５９および１３３）、ＡＡＶ ＣＫｄ－３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６０および１３４）、ＡＡＶ ＣＫｄ－４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６１および１３５）、ＡＡＶ ＣＫｄ－６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６２および１３６）、ＡＡＶ ＣＫｄ－７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６３および１３７）、ＡＡＶ ＣＫｄ－８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６４および１３８）、ＡＡＶ ＣＬｖ－１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３５および１３９）、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６６および１４０）、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６７および１４１）、ＡＡＶ ＣＬｖ－２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６８および１４２）、ＡＡＶ ＣＬｖ－３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６９および１４３）、ＡＡＶ ＣＬｖ－４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７０および１４４）、ＡＡＶ ＣＬｖ－６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７１および１４５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７２および１４６）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７３および１４７）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７４および１４８）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７５および１４９）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７６および１５０）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７７および１５１）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７８および１５２）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７９および１５３）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８０および１５４）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８１および１５５）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８２および１５６）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８３および１５７）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８４および１５８）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８５および１５９）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７７および１５１）、ＡＡＶ ＣＨｔ－１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８６および１６０）、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７１）、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７２）、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７３）、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７４）、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７５）、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７６）、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７７）、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７８）、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１８１）、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１８３）、またはそれらの変異体もしくは誘導体など、米国特許第８７３４８０９号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１および５１）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２および５２）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３および５３）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４および５４）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号５および５５）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号６および５６）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号７および５７）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号８および５８）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号９および５９）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１０および６０）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１１および６１）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１２および６２）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１３および６３）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１４および６４）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１５および６５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１６および６６）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１７および６７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１８および６８）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１９および６９）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２０および７０）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２１および７１）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２２および７２）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２３および７３）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２４および７４）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２５および７５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２６および７６）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２７および７７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２８および７８）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２９および７９）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３０および８０）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３１および８１）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３２および８２）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３３および８３）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３４および８４）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３５および８５）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３６および８６）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３７および８７）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３８および８８）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３９および８９）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４０および９０）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４１および９１）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４２および９２）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４３および９３）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４４および９４）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４５および９５）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４６および９６）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４７および９７）、ＡＡＶ３Ｂ（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４８および９８）、ＡＡＶ４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４９および９９）、ＡＡＶ５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号５０および１００）、またはそれらの変異体もしくは誘導体など、国際公開第２０１６０６５００１号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
一実施形態において、ＡＡＶは、表１に挙げられるもののいずれかから選択される血清型であってもよい。
一実施形態において、ＡＡＶは、表１にある配列の配列、その断片または変異体を含んでもよい。
一実施形態において、ＡＡＶは、表１に記載されるとおりの配列、断片または変異体によってコードされてもよい。
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Figure 0007221275000030
 一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ９（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２および１１または本明細書におけるそれぞれ配列番号１３５および１３６）、ＰＨＰ．Ｂ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号８および９、本明細書における配列番号３および４）、Ｇ２Ｂ－１３（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１２、本明細書における配列番号５）、Ｇ２Ｂ－２６（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１３、本明細書における配列番号３）、ＴＨ１．１－３２（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１４、本明細書における配列番号６）、ＴＨ１．１－３５（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１５、本明細書における配列番号７）またはそれらの変異体など、国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。更に、国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットに記載されるターゲティングペプチドまたはアミノ酸インサートのいずれかが、限定はされないが、ＡＡＶ９（ＤＮＡ配列について配列番号１３５およびアミノ酸配列について配列番号１３６）など、任意の親ＡＡＶ血清型に挿入されてもよい。一実施形態において、アミノ酸インサートは親ＡＡＶ（例えばＡＡＶ９）のアミノ酸５８６～５９２に挿入される。別の実施形態において、アミノ酸インサートは親ＡＡＶ配列のアミノ酸５８８～５８９に挿入される。アミノ酸インサートは、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＴＬＡＶＰＦＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１；本明細書における配列番号１２６０）、ＫＦＰＶＡＬＴ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３；本明細書における配列番号１２６１）、ＬＡＶＰＦＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３１；本明細書における配列番号１２６２）、ＡＶＰＦＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３２；本明細書における配列番号１２６３）、ＶＰＦＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３３；本明細書における配列番号１２６４）、ＴＬＡＶＰＦ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３４；本明細書における配列番号１２６５）、ＴＬＡＶＰ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３５；本明細書における配列番号１２６６）、ＴＬＡＶ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３６；本明細書における配列番号１２６７）、ＳＶＳＫＰＦＬ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２８；本明細書における配列番号１２６８）、ＦＴＬＴＴＰＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２９；本明細書における配列番号１２６９）、ＭＮＡＴＫＮＶ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３０；本明細書における配列番号１２７０）、ＱＳＳＱＴＰＲ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５４；本明細書における配列番号１２７１）、ＩＬＧＴＧＴＳ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５５；本明細書における配列番号１２７２）、ＴＲＴＮＰＥＡ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５６；本明細書における配列番号１２７３）、ＮＧＧＴＳＳＳ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５８；本明細書における配列番号１２７４）、またはＹＴＬＳＱＧＷ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号６０；本明細書における配列番号１２７５）のいずれかであってもよい。アミノ酸インサートをコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例としては、以下、ＡＡＧＴＴＴＣＣＴＧＴＧＧＣＧＴＴＧＡＣＴ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３について；本明細書における配列番号１２７６）、ＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２４および４９；本明細書における配列番号１２７７）、ＡＧＴＧＴＧＡＧＴＡＡＧＣＣＴＴＴＴＴＴＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２５；本明細書における配列番号１２７８）、ＴＴＴＡＣＧＴＴＧＡＣＧＡＣＧＣＣＴＡＡＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２６；本明細書における配列番号１２７９）、ＡＴＧＡＡＴＧＣＴＡＣＧＡＡＧＡＡＴＧＴＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２７；本明細書における配列番号１２８０）、ＣＡＧＴＣＧＴＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＴＡＧＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号４８；本明細書における配列番号１２８１）、ＡＴＴＣＴＧＧＧＧＡＣＴＧＧＴＡＣＴＴＣＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５０および５２；本明細書における配列番号１２８２）、ＡＣＧＣＧＧＡＣＴＡＡＴＣＣＴＧＡＧＧＣＴ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５１；本明細書における配列番号１２８３）、ＡＡＴＧＧＧＧＧＧＡＣＴＡＧＴＡＧＴＴＣＴ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５３；本明細書における配列番号１２８４）、またはＴＡＴＡＣＴＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＧＴＴＧＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５９；本明細書における配列番号１２８５）が挙げられる。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ９（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４５、本明細書における配列番号９）、ＰＨＰ．Ｎ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４６、本明細書における配列番号２）、ＰＨＰ．Ｓ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４７、本明細書における配列番号８）、またはそれらの変異体など、国際公開第２０１７１００６７１号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。更に、国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットに記載されるターゲティングペプチドまたはアミノ酸インサートのいずれかが、限定はされないが、ＡＡＶ９（配列番号９または配列番号１３１）など、任意の親ＡＡＶ血清型に挿入されてもよい。一実施形態において、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ９）のアミノ酸５８６～５９２に挿入される。別の実施形態において、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ配列のアミノ酸５８８～５８９に挿入される。アミノ酸インサートは、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＡＱＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１；本明細書における配列番号１２８６）、ＡＱＳＶＳＫＰＦＬＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２；本明細書における配列番号１２８７）、ＡＱＦＴＬＴＴＰＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列表の配列番号３；本明細書における配列番号１２８８）、ＤＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列表の配列番号４；本明細書における配列番号１２８９）、ＥＳＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５；本明細書における配列番号１２９０）、ＧＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６；本明細書における配列番号１２９１）、ＡＱＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７および３３；本明細書における配列番号１２９２）、ＡＴＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８；本明細書における配列番号１２９３）、ＤＧＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９；本明細書における配列番号１２９４）、ＧＧＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１０；本明細書における配列番号１２９５）、ＳＧＳＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１１；本明細書における配列番号１２９６）、ＡＱＴＬＡＱＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１２；本明細書における配列番号１２９７），ＡＱＴＬＱＱＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１３；本明細書における配列番号１２９８）、ＡＱＴＬＳＮＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１４；本明細書における配列番号１２９９）、ＡＱＴＬＡＶＰＦＳＮＰ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１５；本明細書における配列番号１３００）、ＱＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１６；本明細書における配列番号１３０１）、ＮＱＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１７；本明細書における配列番号１３０２）、ＥＧＳＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１８；本明細書における配列番号１３０３）、ＳＧＮＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１９；本明細書における配列番号１３０４）、ＥＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２０；本明細書における配列番号１３０５）、ＤＳＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの表１の配列番号２１；本明細書における配列番号１３０６）、ＡＶＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２２；本明細書における配列番号１３０７）、ＡＱＴＬＳＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２３；本明細書における配列番号１３０８）、ＡＱＴＬＰＱＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２４および３２；本明細書における配列番号１３０９）、ＡＱＴＬＳＱＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２５；本明細書における配列番号１３１０）、ＡＱＴＬＱＬＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２６；本明細書における配列番号１３１１）、ＡＱＴＬＴＭＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２７および３４、ならびに国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列表の配列番号３５；本明細書における配列番号１３１２）、ＡＱＴＬＴＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２８；本明細書における配列番号１３１３）、ＡＱＹＴＬＳＱＧＷＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２９；本明細書における配列番号１３１４）、ＡＱＭＮＡＴＫＮＶＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３０；本明細書における配列番号１３１５）、ＡＱＶＳＧＧＨＨＳＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３１；本明細書における配列番号１３１６）、ＡＱＴＬＴＡＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの表１の配列番号３５；本明細書における配列番号１３１７）、ＡＱＴＬＳＫＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３６；本明細書における配列番号１３１８）、ＱＡＶＲＴＳＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３７；本明細書における配列番号１３１９）、ＹＴＬＳＱＧＷ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３８；本明細書における配列番号１２７５）、ＬＡＫＥＲＬＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３９；本明細書における配列番号１３２０）、ＴＬＡＶＰＦＫ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列表の配列番号４０；本明細書における配列番号１２６０）、ＳＶＳＫＰＦＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４１；本明細書における配列番号１２６８）、ＦＴＬＴＴＰＫ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４２；本明細書における配列番号１２６９）、ＭＮＳＴＫＮＶ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４３；本明細書における配列番号１３２１）、ＶＳＧＧＨＨＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４４；本明細書における配列番号１３２２）、ＳＡＱＴＬＡＶＰＦＫＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４８；本明細書における配列番号１３２３）、ＳＸＸＸＬＡＶＰＦＫＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４９、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１３２４）、ＳＡＱＸＸＸＶＰＦＫＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５０、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１３２５）、ＳＡＱＴＬＸＸＸＦＫＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５１、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１３２６）、ＳＡＱＴＬＡＶＸＸＸＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５２、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１３２７）、ＳＡＱＴＬＡＶＰＦＸＸＸＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５３、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１３２８）、ＴＮＨＱＳＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６５；本明細書における配列番号１３２９）、ＡＱＡＱＴＧＷ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６６；本明細書における配列番号１３３０）、ＤＧＴＬＡＴＰＦＫ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６７；本明細書における配列番号１３３１）、ＤＧＴＬＡＴＰＦＫＸＸ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６８、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１３３２）、ＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８０；本明細書における配列番号１３３３）、ＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８１；本明細書における配列番号１３３４）、ＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８２；本明細書における配列番号１３３５）、ＡＱＴＬＡＶ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８３；本明細書における配列番号１３３６）、ＡＱＴＬＡＶＰＦ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８４；本明細書における配列番号１３３７）、ＱＡＶＲ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８５；本明細書における配列番号１３３８）、ＡＶＲＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８６；本明細書における配列番号１３３９）、ＶＲＴＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８７；本明細書における配列番号１３４０）、ＲＴＳＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８８；本明細書における配列番号１３４１）、ＱＡＶＲＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８９；本明細書における配列番号１３４２）、ＡＶＲＴＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９０；本明細書における配列番号１３４３）、ＶＲＴＳＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９１；本明細書における配列番号１３４４）、ＱＡＶＲＴＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９２；本明細書における配列番号１３４５）、またはＡＶＲＴＳＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９３；本明細書における配列番号１３４６）のいずれであってもよい。
アミノ酸インサートをコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例としては、以下、ＧＡＴＧＧＧＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧＧＣＡＣＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５４；本明細書における配列番号１３４７）、ＧＡＴＧＧＧＡＣＧＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧＧＣＡＣＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５５；本明細書における配列番号１３４８）、ＣＡＧＧＣＧＧＴＴＡＧＧＡＣＧＴＣＴＴＴＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５６；本明細書における配列番号１３４９）、ＣＡＧＧＴＣＴＴＣＡＣＧＧＡＣＴＣＡＧＡＣＴＡＴＣＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５７および７８；本明細書における配列番号１３５０）、ＣＡＡＧＴＡＡＡＡＣＣＴＣＴＡＣＡＡＡＴＧＴＧＧＴＡＡＡＡＴＣＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５８；本明細書における配列番号１３５１）、ＡＣＴＣＡＴＣＧＡＣＣＡＡＴＡＣＴＴＧＴＡＣＴＡＴＣＴＣＴＣＴＡＧＡＡＣ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５９；本明細書における配列番号１３５２）、ＧＧＡＡＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６０；本明細書における配列番号１３５３）、ＧＧＴＣＧＣＧＧＴＴＣＴＴＧＴＴＴＧＴＧＧＡＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６１；本明細書における配列番号１３５４）、ＣＧＡＣＣＴＴＧＡＡＧＣＧＣＡＴＧＡＡＣＴＣＣＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６２；本明細書における配列番号１３５５）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＧＧＴＧＧＴＴＴＧＴＣ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６３、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１３５６）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＡＡＡＡＧＧＣＡＣＣＧＣＣＡＡＡＧＴＴＴＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６９、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１３５７）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＣＡＣＣＧＣＣＡＡＡＧＴＴＴＧＧＧＣＡＣＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７０、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１３５８）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＣＴＴＡＡＡＭＮＮＭＮＮＭＮＮＣＡＡＡＧＴＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＧＧＴＧＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７１、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１３５９）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＣＴＴＡＡＡＡＧＧＣＡＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＧＧＴＧＧＴＴＴＧＴＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７２、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１３６０）、ＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７４；本明細書における配列番号１２７７）、ＡＧＴＧＴＧＡＧＴＡＡＧＣＣＴＴＴＴＴＴＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７５；本明細書における配列番号１２７８）、ＴＴＴＡＣＧＴＴＧＡＣＧＡＣＧＣＣＴＡＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７６；本明細書における配列番号１２７９）、ＴＡＴＡＣＴＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＧＴＴＧＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７７；本明細書における配列番号１２８５）、またはＣＴＴＧＣＧＡＡＧＧＡＧＣＧＧＣＴＴＴＣＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７９；本明細書における配列番号１３６１）が挙げられる。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ１（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８１）、ＡＡＶ６（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８２）、ＡＡＶ２（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８３）、ＡＡＶ３ｂ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８４）、ＡＡＶ７（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８５）、ＡＡＶ８（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８６）、ＡＡＶ１０（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８７）、ＡＡＶ４（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８８）、ＡＡＶ１１（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８９）、ｂＡＡＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９０）、ＡＡＶ５（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９１）、ＧＰＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９２；本明細書における配列番号９９２）、Ｂ１９（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９３；本明細書における配列番号９９３）、ＭＶＭ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９４；本明細書における配列番号９９４）、ＦＰＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９５；本明細書における配列番号９９５）、ＣＰＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９６；本明細書における配列番号９９６）、またはそれらの変異体など、米国特許第９６２４２７４号明細書（その内容は本明細書において本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。更に、米国特許第９６２４２７４号明細書に記載される構造タンパク質インサートのいずれかが、限定はされないが、ＡＡＶ２（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８３）などの任意の親ＡＡＶ血清型の、限定はされないが、Ｉ－４５３およびＩ－５８７に挿入されてもよい。アミノ酸インサートは、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＶＮＬＴＷＳＲＡＳＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号５０；本明細書における配列番号１３６２）、ＥＦＣＩＮＨＲＧＹＷＶＣＧＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号５５；本明細書における配列番号１３６３）、ＥＤＧＱＶＭＤＶＤＬＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８５；本明細書における配列番号１３６４）、ＥＫＱＲＮＧＴＬＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８６；本明細書における配列番号１３６５）、ＴＹＱＣＲＶＴＨＰＨＬＰＲＡＬＭＲ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８７；本明細書における配列番号１３６６）、ＲＨＳＴＴＱＰＲＫＴＫＧＳＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８８；本明細書における配列番号１３６７）、ＤＳＮＰＲＧＶＳＡＹＬＳＲ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８９；本明細書における配列番号１３６８）、ＴＩＴＣＬＷＤＬＡＰＳＫ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９０；本明細書における配列番号１３６９）、ＫＴＫＧＳＧＦＦＶＦ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９１；本明細書における配列番号１３７０）、ＴＨＰＨＬＰＲＡＬＭＲＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９２；本明細書における配列番号１３７１）、ＧＥＴＹＱＣＲＶＴＨＰＨＬＰＲＡＬＭＲＳＴＴＫ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９３；本明細書における配列番号１３７２）、ＬＰＲＡＬＭＲＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９４；本明細書における配列番号１３７３）、ＩＮＨＲＧＹＷＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９５；本明細書における配列番号１３７４）、ＣＤＡＧＳＶＲＴＮＡＰＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号６０；本明細書における配列番号１３７５）、ＡＫＡＶＳＮＬＴＥＳＲＳＥＳＬＱＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９６；本明細書における配列番号１３７６）、ＳＬＴＧＤＥＦＫＫＶＬＥＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９７；本明細書における配列番号１３７７）、ＲＥＡＶＡＹＲＦＥＥＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９８；本明細書における配列番号１３７８）、ＩＮＰＥＩＩＴＬＤＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９９；本明細書における配列番号１３７９）、ＤＩＳＶＴＧＡＰＶＩＴＡＴＹＬ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１００；本明細書における配列番号１３８０）、ＤＩＳＶＴＧＡＰＶＩＴＡ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０１；本明細書における配列番号１３８１）、ＰＫＴＶＳＮＬＴＥＳＳＳＥＳＶＱＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０２；本明細書における配列番号１３８２）、ＳＬＭＧＤＥＦＫＡＶＬＥＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０３；本明細書における配列番号１３８３）、ＱＨＳＶＡＹＴＦＥＥＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０４；本明細書における配列番号１３８４）、ＩＮＰＥＩＩＴＲＤＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０５；本明細書における配列番号１３８５）、ＤＩＳＬＴＧＤＰＶＩＴＡＳＹＬ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０６；本明細書における配列番号１３８６）、ＤＩＳＬＴＧＤＰＶＩＴＡ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０７；本明細書における配列番号１３８７）、ＤＱＳＩＤＦＥＩＤＳＡ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０８；本明細書における配列番号１３８８）、ＫＮＶＳＥＤＬＰＬＰＴＦＳＰＴＬＬＧＤＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０９；本明細書における配列番号１３８９）、ＫＮＶＳＥＤＬＰＬＰＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１０；本明細書における配列番号１３９０）、ＣＤＳＧＲＶＲＴＤＡＰＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１１；本明細書における配列番号１３９１）、ＦＰＥＨＬＬＶＤＦＬＱＳＬＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１２；本明細書における配列番号１３９２）、ＤＡＥＦＲＨＤＳＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号６５；本明細書における配列番号１３９３）、ＨＹＡＡＡＱＷＤＦＧＮＴＭＣＱＬ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１３；本明細書における配列番号１３９４）、ＹＡＡＱＷＤＦＧＮＴＭＣＱ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１４；本明細書における配列番号１３９５）、ＲＳＱＫＥＧＬＨＹＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１５；本明細書における配列番号１３８６）、ＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＷＡＮＰＱＡＥ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１６；本明細書における配列番号１３９７）、ＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＷＡＮＰ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１７；本明細書における配列番号１３９８）、ＳＳＲＴＰＳＤＫＰ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１８；本明細書における配列番号１３９９）、ＮＡＤＧＮＶＤＹＨＭＮＳＶＰ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１９；本明細書における配列番号１４００）、ＤＧＮＶＤＹＨＭＮＳＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１２０；本明細書における配列番号１４０１）、ＲＳＦＫＥＦＬＱＳＳＬＲＡＬＲＱ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１２１；本明細書における配列番号１４０２）、ＦＫＥＦＬＱＳＳＬＲＡ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１２２；本明細書における配列番号１４０３）、またはＱＭＷＡＰＱＷＧＰＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１２３；本明細書における配列番号１４０４）のいずれであってもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、天然ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸５８５～５９０位に１つ以上のアミノ酸の修飾を含むＡＡＶカプシドタンパク質など、米国特許第９４７５８４５号明細書（その内容は本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。更に、修飾は、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＲＧＮＲＱＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号３；本明細書における配列番号１４０５）、ＳＳＳＴＤＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４；本明細書における配列番号１４０６）、ＳＳＮＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５；本明細書における配列番号１４０７）、ＳＮＳＮＬＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６；本明細書における配列番号１４０８）、ＳＳＴＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７；本明細書における配列番号１４０９）、ＡＡＮＴＡＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８；本明細書における配列番号１４１０）、ＱＱＮＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９；本明細書における配列番号１４１１）、ＳＡＱＡＱＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０；本明細書における配列番号１４１２）、ＱＡＮＴＧＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１；本明細書における配列番号１４１３）、ＮＡＴＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２；本明細書における配列番号１４１４）、ＳＳＴＡＧＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３および２０；本明細書における配列番号１４１５）、ＱＱＮＴＡＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４；本明細書における配列番号１４１６）、ＰＳＴＡＧＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５；本明細書における配列番号１４１７）、ＮＱＮＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１６；本明細書における配列番号１４１８）、ＱＡＡＮＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１７；本明細書における配列番号１４１９）、ＳＩＶＧＬＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１８；本明細書における配列番号１４２０）、ＡＡＳＴＡＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１９および２７；本明細書における配列番号１４２１）、ＳＱＮＴＴＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２１；本明細書における配列番号１４２２）、ＱＱＤＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２２；本明細書における配列番号１４２３）、ＱＴＮＴＧＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２３；本明細書における配列番号１４２４）、ＱＴＮＧＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２４；本明細書における配列番号１４２５）、ＱＱＮＡＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２５；本明細書における配列番号１４２６）、またはＡＡＮＴＱＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２６；本明細書における配列番号１４２７）をもたらし得る。一実施形態において、アミノ酸修飾は、天然ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸２６２～２６５位、またはターゲティング配列を有する別のＡＡＶのカプシドタンパク質の対応する位置における置換である。ターゲティング配列は、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＮＧＲＡＨＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号３８；本明細書における配列番号１４２８）、ＱＰＥＨＳＳＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号３９および５０；本明細書における配列番号１４２９）、ＶＮＴＡＮＳＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４０；本明細書における配列番号１４３０）、ＨＧＰＭＱＫＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４１；本明細書における配列番号１４３１）、ＰＨＫＰＰＬＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４２；本明細書における配列番号１４３２）、ＩＫＮＮＥＭＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４３；本明細書における配列番号１４３３）、ＲＮＬＤＴＰＭ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４４；本明細書における配列番号１４３４）、ＶＤＳＨＲＱＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４５；本明細書における配列番号１４３５）、ＹＤＳＫＴＫＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４６；本明細書における配列番号１４３６）、ＳＱＬＰＨＱＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４７；本明細書における配列番号１４３７）、ＳＴＭＱＱＮＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４８；本明細書における配列番号１４３８）、ＴＥＲＹＭＴＱ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４９；本明細書における配列番号１４３９）、ＤＡＳＬＳＴＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５１；本明細書における配列番号１４４０）、ＤＬＰＮＫＫＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５２；本明細書における配列番号１４４１）、ＤＬＴＡＡＲＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５３；本明細書における配列番号１４４２）、ＥＰＨＱＦＮＹ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５４；本明細書における配列番号１４４３）、ＥＰＱＳＮＨＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５５；本明細書における配列番号１４４４）、ＭＳＳＷＰＳＱ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５６；本明細書における配列番号１４４５）、ＮＰＫＨＮＡＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５７；本明細書における配列番号１４４６）、ＰＤＧＭＲＴＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５８；本明細書における配列番号１４４７）、ＰＮＮＮＫＴＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５９；本明細書における配列番号１４４８）、ＱＳＴＴＨＤＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６０；本明細書における配列番号１４４９）、ＴＧＳＫＱＫＱ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６１；本明細書における配列番号１４５０）、ＳＬＫＨＱＡＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６２；本明細書における配列番号１４５１）、ＳＰＩＤＧＥＱ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６３；本明細書における配列番号１４５２）、ＷＩＦＰＷＩＱＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６４および１１２；本明細書における配列番号１４５３）、ＣＤＣＲＧＤＣＦＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６５；本明細書における配列番号１４５４）、ＣＮＧＲＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６６；本明細書における配列番号１４５５）、ＣＰＲＥＣＥＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６７；本明細書における配列番号１４５６）、ＣＴＴＨＷＧＦＴＬＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６８および１２３；本明細書における配列番号１４５７）、ＣＧＲＲＡＧＧＳＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６９；本明細書における配列番号１４５８）、ＣＫＧＧＲＡＫＤＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７０；本明細書における配列番号１４５９）、ＣＶＰＥＬＧＨＥＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７１および１１５；本明細書における配列番号１４６０）、ＣＲＲＥＴＡＷＡＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７２；本明細書における配列番号１４６１）、ＶＳＷＦＳＨＲＹＳＰＦＡＶＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７３；本明細書における配列番号１４６２）、ＧＹＲＤＧＹＡＧＰＩＬＹＮ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７４；本明細書における配列番号１４６３）、ＸＸＸＹＸＸＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７５；本明細書における配列番号１４６４）、ＹＸＮＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７６；本明細書における配列番号１４６５）、ＲＰＬＰＰＬＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７７；本明細書における配列番号１４６６）、ＡＰＰＬＰＰＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７８；本明細書における配列番号１４６７）、ＤＶＦＹＰＹＰＹＡＳＧＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７９；本明細書における配列番号１４６８）、ＭＹＷＹＰＹ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８０；本明細書における配列番号１４６９）、ＤＩＴＷＤＱＬＷＤＬＭＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８１；本明細書における配列番号１４７０）、ＣＷＤＤＸＷＬＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８２；本明細書における配列番号１４７１）、ＥＷＣＥＹＬＧＧＹＬＲＣＹＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８３；本明細書における配列番号１４７２）、ＹＸＣＸＸＧＰＸＴＷＸＣＸＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８４；本明細書における配列番号１４７３）、ＩＥＧＰＴＬＲＱＷＬＡＡＲＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８５；本明細書における配列番号１４７４）、ＬＷＸＸＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８６；本明細書における配列番号１４７５）、ＸＦＸＸＹＬＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８７；本明細書における配列番号１４７６）、ＳＳＩＩＳＨＦＲＷＧＬＣＤ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８８；本明細書における配列番号１４７７）、ＭＳＲＰＡＣＰＰＮＤＫＹＥ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８９；本明細書における配列番号１４７８）、ＣＬＲＳＧＲＧＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９０；本明細書における配列番号１４７９）、ＣＨＷＭＦＳＰＷＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９１；本明細書における配列番号１４８０）、ＷＸＸＦ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９２；本明細書における配列番号１４８１）、ＣＳＳＲＬＤＡＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９３；本明細書における配列番号１４８２）、ＣＬＰＶＡＳＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９４；本明細書における配列番号１４８３）、ＣＧＦＥＣＶＲＱＣＰＥＲＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９５；本明細書における配列番号１４８４）、ＣＶＡＬＣＲＥＡＣＧＥＧＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９６；本明細書における配列番号１４８５）、ＳＷＣＥＰＧＷＣＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９７；本明細書における配列番号１４８６）、ＹＳＧＫＷＧＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９８；本明細書における配列番号１４８７）、ＧＬＳＧＧＲＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９９；本明細書における配列番号１４８８）、ＬＭＬＰＲＡＤ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１００；本明細書における配列番号１４８９）、ＣＳＣＦＲＤＶＣＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０１；本明細書における配列番号１４９０）、ＣＲＤＶＶＳＶＩＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０２；本明細書における配列番号１４９１）、ＭＡＲＳＧＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０３；本明細書における配列番号１４９２）、ＭＡＲＡＫＥ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０４；本明細書における配列番号１４９３）、ＭＳＲＴＭＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０５；本明細書における配列番号１４９４）、ＫＣＣＹＳＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０６；本明細書における配列番号１４９５）、ＭＹＷＧＤＳＨＷＬＱＹＷＹＥ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０７；本明細書における配列番号１４９６）、ＭＱＬＰＬＡＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０８；本明細書における配列番号１４９７）、ＥＷＬＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０９；本明細書における配列番号１４９８


）、ＳＮＥＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１０；本明細書における配列番号１４９９）、ＴＮＹＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１１；本明細書における配列番号１５００）、ＷＤＬＡＷＭＦＲＬＰＶＧ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１３；本明細書における配列番号１５０１）、ＣＴＶＡＬＰＧＧＹＶＲＶＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１４；本明細書における配列番号１５０２）、ＣＶＡＹＣＩＥＨＨＣＷＴＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１６；本明細書における配列番号１５０３）、ＣＶＦＡＨＮＹＤＹＬＶＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１７；本明細書における配列番号１５０４）、ＣＶＦＴＳＮＹＡＦＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１８；本明細書における配列番号１５０５）、ＶＨＳＰＮＫＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１９；本明細書における配列番号１５０６）、ＣＲＧＤＧＷＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２０；本明細書における配列番号１５０７）、ＸＲＧＣＤＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２１；本明細書における配列番号１５０８）、ＰＸＸＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２２；本明細書における配列番号１５０９）、ＳＧＫＧＰＲＱＩＴＡＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２４；本明細書における配列番号１５１０）、ＡＡＡＡＡＡＡＡＡＸＸＸＸＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２５；本明細書における配列番号１５１１）、ＶＹＭＳＰＦ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２６；本明細書における配列番号１５１２）、ＡＴＷＬＰＰＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２７；本明細書における配列番号１５１３）、ＨＴＭＹＹＨＨＹＱＨＨＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２８；本明細書における配列番号１５１４）、ＳＥＶＧＣＲＡＧＰＬＱＷＬＣＥＫＹＦＧ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２９；本明細書における配列番号１５１５）、ＣＧＬＬＰＶＧＲＰＤＲＮＶＷＲＷＬＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３０；本明細書における配列番号１５１６）、ＣＫＧＱＣＤＲＦＫＧＬＰＷＥＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３１；本明細書における配列番号１５１７）、ＳＧＲＳＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３２；本明細書における配列番号１５１８）、ＷＧＦＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３３；本明細書における配列番号１５１９）、ＡＥＰＭＰＨＳＬＮＦＳＱＹＬＷＹＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３４；本明細書における配列番号１５２０）、ＷＡＹＸＳＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３５；本明細書における配列番号１５２１）、ＩＥＬＬＱＡＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３６；本明細書における配列番号１５２２）、ＡＹＴＫＣＳＲＱＷＲＴＣＭＴＴＨ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３７；本明細書における配列番号１５２３）、ＰＱＮＳＫＩＰＧＰＴＦＬＤＰＨ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３８；本明細書における配列番号１５２４）、ＳＭＥＰＡＬＰＤＷＷＷＫＭＦＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３９；本明細書における配列番号１５２５）、ＡＮＴＰＣＧＰＹＴＨＤＣＰＶＫＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４０；本明細書における配列番号１５２６）、ＴＡＣＨＱＨＶＲＭＶＲＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４１；本明細書における配列番号１５２７）、ＶＰＷＭＥＰＡＹＱＲＦＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４２；本明細書における配列番号１５２８）、ＤＰＲＡＴＰＧＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４３；本明細書における配列番号１５２９）、ＦＲＰＮＲＡＱＤＹＮＴＮ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４４；本明細書における配列番号１５３０）、ＣＴＫＮＳＹＬＭＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４５；本明細書における配列番号１５３１）、ＣＸＸＴＸＸＸＧＸＧＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４６；本明細書における配列番号１５３２）、ＣＰＩＥＤＲＰＭＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４７；本明細書における配列番号１５３３）、ＨＥＷＳＹＬＡＰＹＰＷＦ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４８；本明細書における配列番号１５３４）、ＭＣＰＫＨＰＬＧＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４９；本明細書における配列番号１５３５）、ＲＭＷＰＳＳＴＶＮＬＳＡＧＲＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５０；本明細書における配列番号１５３６）、ＳＡＫＴＡＶＳＱＲＶＷＬＰＳＨＲＧＧＥＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５１；本明細書における配列番号１５３７）、ＫＳＲＥＨＶＮＮＳＡＣＰＳＫＲＩＴＡＡＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５２；本明細書における配列番号１５３８）、ＥＧＦＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５３；本明細書における配列番号１５３９）、ＡＧＬＧＶＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５４；本明細書における配列番号１５４０）、ＧＴＲＱＧＨＴＭＲＬＧＶＳＤＧ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５５；本明細書における配列番号１５４１）、ＩＡＧＬＡＴＰＧＷＳＨＷＬＡＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５６；本明細書における配列番号１５４２）、ＳＭＳＩＡＲＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５７；本明細書における配列番号１５４３）、ＨＴＦＥＰＧＶ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５８；本明細書における配列番号１５４４）、ＮＴＳＬＫＲＩＳＮＫＲＩＲＲＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５９；本明細書における配列番号１５４５）、ＬＲＩＫＲＫＲＲＫＲＫＫＴＲＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１６０；本明細書における配列番号１５４６）、ＧＧＧ、ＧＦＳ、ＬＷＳ、ＥＧＧ、ＬＬＶ、ＬＳＰ、ＬＢＳ、ＡＧＧ、ＧＲＲ、ＧＧＨおよびＧＴＶのいずれであってもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９７；本明細書における配列番号１５４７）またはその変異体の部位特異的突然変異カプシドタンパク質であって、特異的部位が、ＶＰ１またはその断片の部位Ｒ４４７、Ｇ４５３、Ｓ５７８、Ｎ５８７、Ｎ５８７＋１、Ｓ６６２から選択される少なくとも１つの部位であるものなど、米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書（その内容は本明細書において本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの配列であってもよくまたはそれを有してしてもよい。
更に、米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書に記載される突然変異配列のいずれかが、限定はされないが、以下の配列、ＳＤＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１および配列番号２３１；本明細書における配列番号１５４８）、ＳＰＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２；本明細書における配列番号１５４９）、ＳＨＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３；本明細書における配列番号１５５０）、ＳＲＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４；本明細書における配列番号１５５１）、ＳＫＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５；本明細書における配列番号１５５２）、ＳＮＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６；本明細書における配列番号１５５３）、ＳＧＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７；本明細書における配列番号１５５４）、ＳＡＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８、１７５、および２２１；本明細書における配列番号１５５５）、ＳＥＳＧＴＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９；本明細書における配列番号１５５６）、ＳＴＴＧＧＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０；本明細書における配列番号１５５７）、ＳＳＡＧＳＴＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１；本明細書における配列番号１５５８）、ＮＮＤＳＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１２；本明細書における配列番号１５５９）、ＮＮＲＮＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１３；本明細書における配列番号１５６０）、ＮＮＮＫＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１４；本明細書における配列番号１５６１）、ＮＡＫＲＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１５；本明細書における配列番号１５６２）、ＮＤＥＨＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１６；本明細書における配列番号１５６３）、ＮＴＳＱＫＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７；本明細書における配列番号１５６４）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＤＴＱＳＲＬＶＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８；本明細書における配列番号１５６５）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＤＳＧＴＥＴＱＳＧＬＤＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１９；本明細書における配列番号１５６６）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＥＳＧＴＰＴＱＳＡＬＥＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０；本明細書における配列番号１５６７）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＨＳＧＴＨＴＱＳＰＬＨＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１；本明細書における配列番号１５６８）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＳＳＧＴＩＴＩＳＨＬＩＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２；本明細書における配列番号１５６９）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＲＳＧＩＭＴＫＳＳＬＭＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３；本明細書における配列番号１５７０）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＫＳＧＲＫＴＬＳＮＬＳＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２４；本明細書における配列番号１５７１）、ＹＹＬＳＲＴＮＤＧＳＧＰＶＴＰＳＫＬＲＦＳＱＲＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５；本明細書における配列番号１５７２）、ＹＹＬＳＲＴＮＡＡＳＧＨＡＴＨＳＤＬＫＦＳＱＰＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６；本明細書における配列番号１５７３）、ＹＹＬＳＲＴＮＧＱＡＧＳＬＴＭＳＥＬＧＦＳＱＶＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２７；本明細書における配列番号１５７４）、ＹＹＬＳＲＴＮＳＴＧＧＮＱＴＴＳＱＬＬＦＳＱＬＳＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２８；本明細書における配列番号１５７５）、ＹＦＬＳＲＴＮＮＮＴＧＬＮＴＮＳＴＬＮＦＳＱＧＲＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２９；本明細書における配列番号１５７６）、ＳＫＴＧＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３０；本明細書における配列番号１５７７）、ＳＫＴＤＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３１；本明細書における配列番号１５７８）、ＳＫＴＥＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３２；本明細書における配列番号１５７９）、ＳＫＴＰＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３３；本明細書における配列番号１５８０）、ＳＫＴＨＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３４；本明細書における配列番号１５８１）、ＳＫＴＱＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３５；本明細書における配列番号１５８２）、ＳＫＴＩＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３６；本明細書における配列番号１５８３）、ＳＫＴＭＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３７；本明細書における配列番号１５８４）、ＳＫＴＲＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３８；本明細書における配列番号１５８５）、ＳＫＴＮＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３９；本明細書における配列番号１５８６）、ＳＫＴＶＧＲＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４０；本明細書における配列番号１５８７）、ＳＫＴＡＤＲＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４１；本明細書における配列番号１５８８）、ＳＫＫＬＳＱＮＮＮＳＫＹＳＷＱＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４２；本明細書における配列番号１５８９）、ＳＫＰＴＴＧＮＮＮＳＤＹＳＷＰＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４３；本明細書における配列番号１５９０）、ＳＴＱＫＮＥＮＮＮＳＮＹＳＷＰＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４４；本明細書における配列番号１５９１）、ＨＫＤＤＥＧＫＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４５；本明細書における配列番号１５９２）、ＨＫＤＤＮＲＫＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４６；本明細書における配列番号１５９３）、ＨＫＤＤＴＮＫＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４７；本明細書における配列番号１５９４）、ＨＥＤＳＤＫＮＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４８；本明細書における配列番号１５９５）、ＨＲＤＧＡＤＳＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４９；本明細書における配列番号１５９６）、ＨＧＤＮＫＳＲＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５０；本明細書における配列番号１５９７）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＦＥＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５１；本明細書における配列番号１５９８）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＳＥＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５２；本明細書における配列番号１５９９）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＶＥＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５３；本明細書における配列番号１６００）、ＫＱＧＳＤＫＴＮＶＤＤＡＧＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５４；本明細書における配列番号１６０１）、ＫＱＧＳＳＫＴＮＶＤＰＲＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５５；本明細書における配列番号１６０２）、ＫＱＧＳＲＫＴＮＶＤＨＫＱＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５６；本明細書における配列番号１６０３）、ＫＱＧＳＫＧＧＮＶＤＴＮＲＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５７；本明細書における配列番号１６０４）、ＫＱＧＳＧＥＡＮＶＤＮＧＤＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５８；本明細書における配列番号１６０５）、ＫＱＤＡＡＡＤＮＩＤＹＤＨＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５９；本明細書における配列番号１６０６）、ＫＱＳＧＴＲＳＮＡＡＡＳＳＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６０；本明細書における配列番号１６０７）、ＫＥＮＴＮＴＮＤＴＥＬＴＮＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６１；本明細書における配列番号１６０８）、ＱＲＧＮＮＶＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６２；本明細書における配列番号１６０９）、ＱＲＧＮＮＥＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６３；本明細書における配列番号１６１０）、ＱＲＧＮＮＰＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６４；本明細書における配列番号１６１１）、ＱＲＧＮＮＨＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６５；本明細書における配列番号１６１２）、ＱＥＥＮＮＩＡＡＴＰＧＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６６；本明細書における配列番号１６１３）、ＱＰＰＮＮＭＡＡＴＨＥＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６７；本明細書における配列番号１６１４）、ＱＨＨＮＮＳＡＡＴＴＩＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６８；本明細書における配列番号１６１５）、ＱＴＴＮＮＲＡＡＦＮＭＶＥＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６９；本明細書における配列番号１６１６）、ＱＫＫＮＮＮＡＡＳＫＫＶＡＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７０；本明細書における配列番号１６１７）、ＱＧＧＮＮＫＡＡＤＤＡＶＫＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７１；本明細書における配列番号１６１８）、ＱＡＡＫＧＧＡＡＤＤＡＶＫＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７２；本明細書における配列番号１６１９）、ＱＤＤＲＡＡＡＡＮＥＳＶＤＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７３；本明細書における配列番号１６２０）、ＱＱＱＨＤＤＡＡＹＱＲＶＨＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７４；本明細書における配列番号１６２１）、ＱＳＳＳＳＬＡＡＶＳＴＶＱＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７５；本明細書における配列番号１６２２）、ＱＮＮＱＴＴＡＡＩＲＮＶＴＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７６；本明細書における配列番号１６２３）、ＮＹＮＫＫＳＤＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７７；本明細書における配列番号１６２４）、ＮＹＮＫＫＳＥＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７


８；本明細書における配列番号１６２５）、ＮＹＮＫＫＳＬＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７９；本明細書における配列番号１６２６）、ＮＹＮＫＫＳＰＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８０；本明細書における配列番号１６２７）、ＮＹＳＫＫＳＨＣＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８１；本明細書における配列番号１６２８）、ＮＹＲＫＴＩＹＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８２；本明細書における配列番号１６２９）、ＮＹＫＥＫＫＤＶＨＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８３；本明細書における配列番号１６３０）、ＮＹＧＨＲＡＩＶＱＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８４；本明細書における配列番号１６３１）、ＮＹＡＮＨＱＦＶＶＣＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８５；本明細書における配列番号１６３２）、ＮＹＤＤＤＰＴＧＶＬＬＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８６；本明細書における配列番号１６３３）、ＮＹＤＤＰＴＧＶＬＬＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８７；本明細書における配列番号１６３４）、ＮＦＥＱＱＮＳＶＥＷＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８８；本明細書における配列番号１６３５）、ＳＱＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８９および配列番号２４１；本明細書における配列番号１６３６）、ＮＮＧＳＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９０；本明細書における配列番号１６３７）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＷＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９１；本明細書における配列番号１６３８）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９２；本明細書における配列番号１６３９）、ＨＫＤＤＥＥＫＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９３、２０９、２１４、２１９、２２４、２３４、２３９、および２４４；本明細書における配列番号１６４０）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９４；本明細書における配列番号１６４１）、ＱＲＧＮＮＱＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９５；本明細書における配列番号１６４２）、ＮＹＮＫＫＳＶＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９６；本明細書における配列番号１６４３）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０６；本明細書における配列番号１６４４）、ＳＡＳＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０７；本明細書における配列番号１６４５）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０８；本明細書における配列番号１６４６）、ＳＡＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０９；本明細書における配列番号１６４７）、ＳＱＳＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１０；本明細書における配列番号１６４８）、ＳＡＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１１；本明細書における配列番号１６４９）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１２；本明細書における配列番号１６５０）、ＳＧＡＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１３；本明細書における配列番号１６５１）、ＳＧＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７６；本明細書における配列番号１６５２）、ＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７７、１８５、１９３、および２０２；本明細書における配列番号１６５３）、ＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７８；本明細書における配列番号１６５４）、ＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７９；本明細書における配列番号１６５５）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８０；本明細書における配列番号１６５６）、ＳＱＳＧＡＳＮＹ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８１、１８７、および１９８；本明細書における配列番号１６５７）、ＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８２、１８８、１９１、および１９９；本明細書における配列番号１６５８）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８３；本明細書における配列番号１６５９）、ＳＡＳＧＡＳＮＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８４；本明細書における配列番号１６６０）、ＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８６、１８９、１９４、１９７、および２０３；本明細書における配列番号１６６１）、ＳＡＳＧＡＳＮＹ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１９０および配列番号１９５；本明細書における配列番号１６６２）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１９２；本明細書における配列番号１６６３）、ＮＴＰＳＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１９６、；本明細書における配列番号１６６４）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２００；本明細書における配列番号１６６５）、ＳＧＡＧＡＳＮＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０１；本明細書における配列番号１６６６）、ＣＴＣＣＡＧＶＶＳＶＶＳＭＲＳＲＶＣＶＮＳＧＣＡＧＣＴＤＨＣＶＶＳＲＮＳＧＴＣＶＭＳＡＣＡＣＡＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０４；本明細書における配列番号１６６７）、ＣＴＣＣＡＧＡＧＡＧＧＣＡＡＣＡＧＡＣＡＡＧＣＡＧＣＴＡＣＣＧＣＡＧＡＴＧＴＣＡＡＣＡＣＡＣＡＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０５；本明細書における配列番号１６６８）、ＳＡＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０６；本明細書における配列番号１６６９）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＥＳＧＳＴＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０７；本明細書における配列番号１６７０）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０８、２２８、および２５３；本明細書における配列番号１６７１）、ＫＱＧＳＥＫＴＤＶＤＩＤＫＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１０；本明細書における配列番号１６７２）、ＳＴＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１１；本明細書における配列番号１６７３）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＴＳＧＩＥＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１２および配列番号２４７；本明細書における配列番号１６７４）、ＳＫＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１３および配列番号２４８；本明細書における配列番号１６７５）、ＫＱＧＡＡＡＤＤＶＥＩＤＧＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１５および配列番号２５０；本明細書における配列番号１６７６）、ＳＥＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１６；本明細書における配列番号１６７７）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１７、２３２および２４２；本明細書における配列番号１６７８）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１８、２３３、２３８、および２４３；本明細書における配列番号１６７９）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２０、２２５および２４５；本明細書における配列番号１６８０）、ＹＦＬＳＲＴＮＤＡＳＧＳＤＴＫＳＴＬＬＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２２；本明細書における配列番号１６８１）、ＳＴＴＰＳＥＮＮＮＳＥＹＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２３；本明細書における配列番号１６８２）、ＳＡＡＧＡＴＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２６および配列番号２５１；本明細書における配列番号１６８３）、ＹＦＬＳＲＴＮＧＥＡＧＳＡＴＬＳＥＬＲＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２７；本明細書における配列番号１６８４）、ＨＧＤＤＡＤＲＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２９および配列番号２５４；本明細書における配列番号１６８５）、ＫＱＧＡＥＫＳＤＶＥＶＤＲＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３０および配列番号２５５；本明細書における配列番号１６８６）、ＫＱＤＳＧＧＤＮＩＤＩＤＱＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３５；本明細書における配列番号１６８７）、ＳＤＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３６；本明細書における配列番号１６８８）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＥＧＧＨＤＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３７；本明細書における配列番号１６８９）、ＫＥＤＧＧＧＳＤＶＡＩＤＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２４０；本明細書における配列番号１６９０）、ＳＮＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２４６；本明細書における配列番号１６９１）、およびＹＦＬＳＲＴＮＧＥＡＧＳＡＴＬＳＥＬＲＦＳＱＰＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５２；本明細書における配列番号１６９２）のいずれであってもよく、またはいずれを有していてもよい。アミノ酸突然変異部位をコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例としては、以下、ＡＧＣＶＶＭＤＣＡＧＧＡＲＳＣＡＳＣＡＡＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９７；本明細書における配列番号１６９３）、ＡＡＣＲＡＣＲＲＳＭＲＳＭＡＧＧＣＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９８；本明細書における配列番号１６９４）、ＣＡＣＲＲＧＧＡＣＲ


ＲＣＲＭＳＲＲＳＡＲＳＴＴＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９９；本明細書における配列番号１６９５）、ＴＡＴＴＴＣＴＴＧＡＧＣＡＧＡＡＣＡＡＡＣＲＶＣＶＶＳＲＳＣＧＧＡＭＮＣＶＨＳＡＣＧＭＨＳＴＣＡＶＶＳＣＴＴＶＤＳＴＴＴＴＣＴＣＡＧＳＢＣＲＧＳＧＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１００；本明細書における配列番号１６９６）、ＴＣＡＡＭＡＭＭＡＶＮＳＲＶＣＳＲＳＡＡＣＡＡＣＡＡＣＡＧＴＲＡＳＴＴＣＴＣＧＴＧＧＭＭＡＧＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０１；本明細書における配列番号１６９７）、ＡＡＧＳＡＡＲＲＣＲＳＣＲＶＳＲＶＡＲＶＣＲＡＴＲＹＣＧＭＳＮＨＣＲＶＭＶＲＳＧＴＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０２；本明細書における配列番号１６９８）、ＣＡＧＶＶＳＶＶＳＭＲＳＲＶＣＶＮＳＧＣＡＧＣＴＤＨＣＶＶＳＲＮＳＧＴＣＶＭＳＡＣＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０３；本明細書における配列番号１６９９）、ＡＡＣＴＷＣＲＶＳＶＡＳＭＶＳＶＨＳＤＤＴＧＴＧＳＷＳＴＫＳＡＣＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０４；本明細書における配列番号１７００）、ＴＴＧＴＴＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＡＣＧＴＧＡＣＧＣＡＣＧＴＴＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５６、；本明細書における配列番号１７０１）、ＴＣＣＣＣＧＴＧＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＡＴＡＡＴＧＴＧＧＣＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５７；本明細書における配列番号１７０２）、ＴＴＣＣＡＣＡＣＴＣＣＧＴＴＴＴＧＧＡＴＡＡＴＧＴＴＧＡＡＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５８；本明細書における配列番号１７０３）、ＡＧＧＧＡＣＡＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＣＡＴＧＣＴＧＴＧＧＴＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５９；本明細書における配列番号１７０４）、ＡＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＴＣＣＧＡＣＴＣＧＣＣＣＴＡＡＴＣＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６０；本明細書における配列番号１７０５）、ＴＣＣＴＡＧＴＡＧＡＡＧＡＣＡＣＣＣＴＣＴＣＡＣＴＧＣＣＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６１；本明細書における配列番号１７０６）、ＡＧＴＡＣＣＡＴＧＴＡＣＡＣＣＣＡＣＴＣＴＣＣＣＡＧＴＧＣＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６２、；本明細書における配列番号１７０７）、ＡＴＡＴＧＧＡＣＧＴＴＣＡＴＧＣＴＧＡＴＣＡＣＣＡＴＡＣＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６３；本明細書における配列番号１７０８）、ＡＧＣＡＧＧＡＧＣＴＣＣＴＴＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＴＧＣＧＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６４；本明細書における配列番号１７０９）、ＡＣＡＡＧＣＡＧＣＴＴＣＡＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＣＡＣＴＧＡＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６５；本明細書における配列番号１７１０）、ＣＡＧＣＣＴＡＧＧＡＡＣＴＧＧＣＴＴＣＣＴＧＧＡＣＣＣＴＧＴＴＡＣＣＧＣＣＡＧＣＡＧＡＧＡＧＴＣＴＣＡＡＭＡＭＭＡＶＮＳＲＶＣＳＲＳＡＡＣＡＡＣＡＡＣＡＧＴＲＡＳＴＴＣＴＣＣＴＧＧＭＭＡＧＧＡＧＣＴＡＣＣＡＡＧＴＡＣＣＡＣＣＴＣＡＡＴＧＧＣＡＧＡＧＡＣＴＣＴＣＴＧＧＴＧＡＡＴＣＣＣＧＧＡＣＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＡＡＧＣＣＡＣＲＲＧＧＡＣＲＲＣＲＭＳＲＲＳＡＲＳＴＴＴＴＴＴＣＣＴＣＡＧＡＧＣＧＧＧＧＴＴＣＴＣＡＴＣＴＴＴＧＧＧＡＡＧＳＡＡＲＲＣＲＳＣＲＶＳＲＶＡＲＶＣＲＡＴＲＹＣＧＭＳＮＨＣＲＶＭＶＲＳＧＴＣＡＴＧＡＴＴＡＣＡＧＡＣＧＡＡＧＡＧＧＡＧＡＴＣＴＧＧＡＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６６；本明細書における配列番号１７１１）、ＴＧＧＧＡＣＡＡＴＧＧＣＧＧＴＣＧＴＣＴＣＴＣＡＧＡＧＴＴＫＴＫＫＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６７；本明細書における配列番号１７１２）、ＡＧＡＧＧＡＣＣＫＫＴＣＣＴＣＧＡＴＧＧＴＴＣＡＴＧＧＴＧＧＡＧＴＴＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６８；本明細書における配列番号１７１３）、ＣＣＡＣＴＴＡＧＧＧＣＣＴＧＧＴＣＧＡＴＡＣＣＧＴＴＣＧＧＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６９；本明細書における配列番号１７１４）、およびＴＣＴＣＧＣＣＣＣＡＡＧＡＧＴＡＧＡＡＡＣＣＣＴＴＣＳＴＴＹＹＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２７０；本明細書における配列番号１７１５）が挙げられる。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号９および配列番号１０など、国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの眼細胞ターゲティングペプチドを含み得る。更に、国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットに記載される眼細胞ターゲティングペプチドまたはアミノ酸のいずれかが、限定はされないが、ＡＡＶ２（国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号８；本明細書における配列番号１７１６）、またはＡＡＶ９（国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号１１；本明細書における配列番号１７１７）など、任意の親ＡＡＶ血清型に挿入されていてもよい。一部の実施形態において、挿入などの修飾は、ＡＡＶ２タンパク質のＰ３４～Ａ３５、Ｔ１３８～Ａ１３９、Ａ１３９～Ｐ１４０、Ｇ４５３～Ｔ４５４、Ｎ５８７～Ｒ５８８、および／またはＲ５８８～Ｑ５８９になされる。特定の実施形態において、挿入は、ＡＡＶ９のＤ３８４、Ｇ３８５、１５６０、Ｔ５６１、Ｎ５６２、Ｅ５６３、Ｅ５６４、Ｅ５６５、Ｎ７０４、および／またはＹ７０５になされる。眼細胞ターゲティングペプチドは、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＧＳＴＰＰＰＭ（国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号１；本明細書における配列番号１７１８）、またはＧＥＴＲＡＰＬ（国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号４；本明細書における配列番号１７１９）のいずれであってもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開第２０１７０１４５４０５号明細書（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりに修飾されていてもよい。ＡＡＶ血清型としては、修飾ＡＡＶ２（例えば、Ｙ４４４Ｆ、Ｙ５００Ｆ、Ｙ７３０Ｆおよび／またはＳ６６２Ｖの修飾）、修飾ＡＡＶ３（例えば、Ｙ７０５Ｆ、Ｙ７３１Ｆおよび／またはＴ４９２Ｖの修飾）、および修飾ＡＡＶ６（例えば、Ｓ６６３Ｖおよび／またはＴ４９２Ｖの修飾）が挙げられる。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、国際公開第２０１７０８３７２２号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりに修飾されていてもよい。ＡＡＶ血清型としては、ＡＡＶ１（Ｙ７０５＋７３１Ｆ＋Ｔ４９２Ｖ）、ＡＡＶ２（Ｙ４４４＋５００＋７３０Ｆ＋Ｔ４９１Ｖ）、ＡＡＶ３（Ｙ７０５＋７３１Ｆ）、ＡＡＶ５、ＡＡＶ５（Ｙ４３６＋６９３＋７１９Ｆ）、ＡＡＶ６（ＶＰ３変異体Ｙ７０５Ｆ／Ｙ７３１Ｆ／Ｔ４９２Ｖ）、ＡＡＶ８（Ｙ７３３Ｆ）、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９（ＶＰ３変異体Ｙ７３１Ｆ）、およびＡＡＶ１０（Ｙ７３３Ｆ）が挙げられ得る。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、国際公開第２０１７０１５１０２号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりに、アミノ酸ＳＰＡＫＦＡ（国際公開第２０１７０１５１０２号パンフレットの配列番号２４；本明細書における配列番号１７２０）またはＮＫＤＫＬＮ（国際公開第２０１７０１５１０２号パンフレットの配列番号２；本明細書における配列番号１７２１）を含む操作されたエピトープを含み得る。エピトープは、ＡＡＶ８（国際公開第２０１７０１５１０２号パンフレットの配列番号３）のＶＰ１カプシドの付番に基づきアミノ酸６６５～６７０の領域および／またはＡＡＶ３Ｂ（配列番号３）の残基６６４～６６８の領域に挿入されていてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、いずれかの組合せで、ＡＡＶ１のアミノ酸残基２６２～２６８、３７０～３７９、４５１～４５９、４７２～４７３、４９３～５００、５２８～５３４、５４７～５５２、５８８～５９７、７０９～７１０、７１６～７２２の１つ以上（例えば、２、３、４、５、６、または７つ）に、またはＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶｒｈ３２．３３、ウシＡＡＶ、もしくはトリＡＡＶの等価なアミノ酸残基に置換を含み得るカプシドタンパク質を有するＡＡＶ変異体など、国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載のとおりの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。アミノ酸置換は、限定はされないが、国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットに記載されるアミノ酸配列のいずれであってもよい。一実施形態において、ＡＡＶは、以下の残基、ＡＡＶ１（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号ｌ）の残基２５６Ｌ、２５８Ｋ、２５９Ｑ、２６１Ｓ、２６３Ａ、２６４Ｓ、２６５Ｔ、２６６Ｇ、２７２Ｈ、３８５Ｓ、３８６Ｑ、Ｓ４７２Ｒ、Ｖ４７３Ｄ、Ｎ５００Ｅ ５４７Ｓ、７０９Ａ、７１０Ｎ、７１６Ｄ、７１７Ｎ、７１８Ｎ、７２０Ｌ、Ａ４５６Ｔ、Ｑ４５７Ｔ、Ｎ４５８Ｑ、Ｋ４５９Ｓ、Ｔ４９２Ｓ、Ｋ４９３Ａ、Ｓ５８６Ｒ、Ｓ５８７Ｇ、Ｓ５８８Ｎ、Ｔ５８９Ｒおよび／または７２２Ｔのいずれかの組合せ、ＡＶＶ５（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号５）の２４４Ｎ、２４６Ｑ、２４８Ｒ、２４９Ｅ、２５０Ｉ、２５１Ｋ、２５２Ｓ、２５３Ｇ、２５４Ｓ、２５５Ｖ、２５６Ｄ、２６３Ｙ、３７７Ｅ、３７８Ｎ、４５３Ｌ、４５６Ｒ、５３２Ｑ、５３３Ｐ、５３５Ｎ、５３６Ｐ、５３７Ｇ、５３８Ｔ、５３９Ｔ、５４０Ａ、５４１Ｔ、５４２Ｙ、５４３Ｌ、５４６Ｎ、６５３Ｖ、６５４Ｐ、６５６Ｓ、６９７Ｑ、６９８Ｆ、７０４Ｄ、７０５Ｓ、７０６Ｔ、７０７Ｇ、７０８Ｅ、７０９Ｙおよび／または７１０Ｒのいずれかの組合せ、ＡＡＶ５（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号５）の２４８Ｒ、３１６Ｖ、３１７Ｑ、３１８Ｄ、３１９Ｓ、４４３Ｎ、５３０Ｎ、５３１Ｓ、５３２Ｑ ５３３Ｐ、５３４Ａ、５３５Ｎ、５４０Ａ、５４１Ｔ、５４２Ｙ、５４３Ｌ、５４５Ｇ、５４６Ｎ、６９７Ｑ、７０４Ｄ、７０６Ｔ、７０８Ｅ、７０９Ｙおよび／または７１０Ｒのいずれかの組合せ、ＡＡＶ６（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号６）の２６４Ｓ、２６６Ｇ、２６９Ｎ、２７２Ｈ、４５７Ｑ、５８８Ｓおよび／または５８９Ｉのいずれかの組合せ、ＡＡＶ８（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号８）の４５７Ｔ、４５９Ｎ、４９６Ｇ、４９９Ｎ、５００Ｎ、５８９Ｑ、５９０Ｎおよび／または５９２Ａのいずれかの組合せ、ＡＡＶ９（国際公開第２０１７０５８８９２の配列番号９）の４５１Ｉ、４５２Ｎ、４５３Ｇ、４５４Ｓ、４５５Ｇ、４５６Ｑ、４５７Ｎおよび／または４５８Ｑのいずれかの組合せでアミノ酸置換を含み得る。
一部の実施形態において、ＡＡＶは、国際公開第２０１７０６６７６４号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりに、ＶＰ１の１５５、１５６および１５７位またはＶＰ２の１７、１８、１９および２０位にアミノ酸の配列を含み得る。アミノ酸の配列は、限定はされないが、Ｎ－Ｓ－Ｓ、Ｓ－Ｘ－Ｓ、Ｓ－Ｓ－Ｙ、Ｎ－Ｘ－Ｓ、Ｎ－Ｓ－Ｙ、Ｓ－Ｘ－ＹおよびＮ－Ｘ－Ｙ、式中Ｎ、ＸおよびＹは、限定はされないが、独立に、非セリンまたは非トレオニンアミノ酸であり、ＡＡＶは、限定はされないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１およびＡＡＶ１２であってもよい。一部の実施形態において、ＡＡＶは、ＶＰ１の１５６、１５７もしくは１５８位またはＶＰ２の１９、２０もしくは２１位に少なくとも１つのアミノ酸の欠失を含んでいてもよく、ＡＡＶは、限定はされないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１およびＡＡＶ１２であってもよい。
一実施形態において、ＡＡＶは、デバーマン（Ｄｅｖｅｒｍａｎ）ら（ネイチャー・バイオテクノロジー（Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、第３４巻（第２号）：ｐ．２０４～２０９、２０１６年）（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）により記載されるとおりのＣｒｅ組換えに基づくＡＡＶ標的型進化（ＣＲＥＡＴＥ：Ｃｒｅ－ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ－ｂａｓｅｄ ＡＡＶ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）によって生成される血清型であってもよい。一実施形態において、このように生成されたＡＡＶ血清型は、他のＡＡＶ血清型と比較して向上したＣＮＳ形質導入ならびに／またはニューロンおよびアストロサイト向性を有する。非限定的な例として、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＰＨＰ．Ｂ、ＰＨＰ．Ｂ２、ＰＨＰ．Ｂ３、ＰＨＰ．Ａ、ＰＨＰ．Ｓ、Ｇ２Ａ１２、Ｇ２Ａ１５、Ｇ２Ａ３、Ｇ２Ｂ４、およびＧ２Ｂ５などの、ペプチドを挙げることができる。一実施形態において、これらのＡＡＶ血清型は、アミノ酸５８８～５８９に７個アミノ酸のインサートを有するＡＡＶ９（配列番号９または１３６）誘導体であってもよい。これらの７個アミノ酸のインサートの非限定的な例としては、ＴＬＡＶＰＦＫ（ＰＨＰ．Ｂ；配列番号１２６０），ＳＶＳＫＰＦＬ（ＰＨＰ．Ｂ２；配列番号１２６８），ＦＴＬＴＴＰＫ（ＰＨＰ．Ｂ３；配列番号１２６９），ＹＴＬＳＱＧＷ（ＰＨＰ．Ａ；配列番号１２７５），ＱＡＶＲＴＳＬ（ＰＨＰ．Ｓ；配列番号１３１９），ＬＡＫＥＲＬＳ（Ｇ２Ａ３；配列番号１３２０），ＭＮＳＴＫＮＶ（Ｇ２Ｂ４；配列番号１３２１）、および／またはＶＳＧＧＨＨＳ（Ｇ２Ｂ５；配列番号１３２２）が挙げられる。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ジャクソン（Ｊａｃｋｓｏｎ）ら（フロンティア・イン・モレキュラー・ニューロサイエンス（Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ）、第９巻：ｐ．１５４（２０１６年））（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりであってもよい。
本明細書で参照および／または記載されるＤＮＡおよびＲＮＡ配列では、一文字記号は、以下の説明を有する：Ａはアデニン；Ｃはシトシン；Ｇはグアニン；Ｔはチミン；Ｕはウラシル；Ｗは、アデニンまたはチミンなどの弱塩基；Ｓは、シトシンおよびグアニンなどの強ヌクレオチド（ｓｔｒｏｎｇ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）；Ｍは、アデニンおよびシトシンなどのアミノヌクレオチド；Ｋは、グアニンおよびチミンなどのケトヌクレオチド；Ｒは、プリンであるアデニンおよびグアニン；Ｙは、ピリミジンであるシトシンおよびチミン；Ｂは、Ａではない任意の塩基（例えば、シトシン、グアニン、およびチミン）；Ｄは、Ｃではない任意の塩基（例えば、アデニン、グアニン、およびチミン）；Ｈは、Ｇではない任意の塩基（例えば、アデニン、シトシン、およびチミン）；Ｖは、Ｔではない任意の塩基（例えば、アデニン、シトシン、およびグアニン）；Ｎは任意のヌクレオチド（ギャップでない）；およびＺはゼロである。
本明細書で参照および／または記載されるアミノ酸配列のいずれにおいても、一文字記号は、以下の説明を有する：Ｇ（Ｇｌｙ）はグリシン；Ａ（Ａｌａ）はアラニン；Ｌ（Ｌｅｕ）はロイシン；Ｍ（Ｍｅｔ）はメチオニン；Ｆ（Ｐｈｅ）はフェニルアラニン；Ｗ（Ｔｒｐ）はトリプトファン；Ｋ（Ｌｙｓ）はリジン；Ｑ（Ｇｌｎ）はグルタミン；Ｅ（Ｇｌｕ）はグルタミン酸；Ｓ（Ｓｅｒ）はセリン；Ｐ（Ｐｒｏ）はプロリン；Ｖ（Ｖａｌ）はバリン；Ｉ（Ｉｌｅ）はイソロイシン；Ｃ（Ｃｙｓ）はシステイン；Ｙ（Ｔｙｒ）はチロシン；Ｈ（Ｈｉｓ）はヒスチジン；Ｒ（Ａｒｇ）はアルギニン；Ｎ（Ａｓｎ）はアスパラギン；Ｄ（Ａｓｐ）はアスパラギン酸；Ｔ（Ｔｈｒ）はトレオニン；Ｂ（Ａｓｘ）はアスパラギン酸またはアスパラギン；Ｊ（Ｘｌｅ）はロイシンまたはイソロイシン；Ｏ（Ｐｙｌ）はピロリジン；Ｕ（Ｓｅｃ）はセレノシステイン；Ｘ（Ｘａａ）は任意のアミノ酸；およびＺ（Ｇｌｘ）はグルタミンまたはグルタミン酸である。
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．ＢまたはＡＡＶ９である。一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型をシナプシンプロモータと対にすると、より遍在性のプロモータ（すなわち、ＣＢＡまたはＣＭＶ）を使用する場合と比較して、ニューロン形質導入が増強される。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ（ＰＨＰ．Ｎ）ペプチドを含む血清型またはその変異体である。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）ペプチドを含む血清型またはその変異体である。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）ペプチドを含む血清型またはその変異体である。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｓペプチドを含む血清型またはその変異体である。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｂ２ペプチドを含む血清型またはその変異体である。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｂ３ペプチドを含む血清型またはその変異体である。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、Ｇ２Ｂ４ペプチドを含む血清型またはその変異体である。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、Ｇ２Ｂ５ペプチドを含む血清型またはその変異体である。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＶＯＹ１０１またはその変異体である。１つの好ましい実施形態において、ＶＯＹ１０１は、配列番号１の核酸配列を含む。別の実施形態において、カプシド配列は、配列番号１８０９の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＶＯＹ２０１またはその変異体である。１つの好ましい実施形態において、ＶＯＹ２０１は、配列番号１８１０の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶカプシドは、静脈内投与後に血液脳関門の透過が可能なものである。かかるＡＡＶカプシドの非限定的な例としては、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、または限定はされないが、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ（ＰＨＰ．Ｎ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＰＨＰ．Ｓ、Ｇ２Ａ３、Ｇ２Ｂ４、Ｇ２Ｂ５、Ｇ２Ａ１２、Ｇ２Ａ１５、ＰＨＰ．Ｂ２、ＰＨＰ．Ｂ３、およびＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）などのペプチドインサートを含むＡＡＶカプシドが挙げられる。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドはＶＯＹ１０１である。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドはＶＯＹ２０１である。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドは、ＰＨＰ．Ａペプチドインサートを含む。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドは、ＰＨＰ．Ｂペプチドインサートを含む。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドは、ＰＨＰ．Ｂ２ペプチドインサートを含む。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドは、ＰＨＰ．Ｂ３ペプチドインサートを含む。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドは、Ｇ２Ａ３ペプチドインサートを含む。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドは、Ｇ２Ｂ４ペプチドインサートを含む。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドは、Ｇ２Ｂ５ペプチドインサートを含む。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドは、ＰＨＰ．Ｎペプチドインサートを含む。一実施形態において、血液脳関門透過性カプシドは、ＰＨＰ．Ｓペプチドインサートを含む。
ウイルスゲノム成分：末端逆位配列（ＩＴＲ）
本発明のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのＩＴＲ領域とペイロード領域とを有するウイルスゲノムを含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは２つのＩＴＲを有する。これらの２つのＩＴＲは５’末端および３’末端でペイロード領域に隣接する。ＩＴＲは、複製のための認識部位を含む複製起点として働く。ＩＴＲは、相補的でかつ対称に配置され得る配列領域を含む。本発明のウイルスゲノムに組み込まれるＩＴＲは、天然に存在するポリヌクレオチド配列または組換え的に誘導されたポリヌクレオチド配列を含み得る。
ＩＴＲは、表１に挙げられる血清型のいずれか、またはその誘導体から選択される、カプシドと同じ血清型に由来してもよい。ＩＴＲはカプシドと異なる血清型であってもよい。一実施形態において、ＡＡＶ粒子は２つ以上のＩＴＲを有する。非限定的な例では、ＡＡＶ粒子は、２つのＩＴＲを含むウイルスゲノムを有する。一実施形態において、ＩＴＲは互いに同じ血清型である。別の実施形態において、ＩＴＲは異なる血清型である。非限定的な例としては、ＩＴＲのうちゼロ個、一方または両方がカプシドと同じ血清型を有することが挙げられる。一実施形態において、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムの両方のＩＴＲがＡＡＶ２ ＩＴＲである。
独立に、各ＩＴＲは約１００～約１５０ヌクレオチド長であってもよい。ＩＴＲは、約１００～１０５ヌクレオチド長、１０６～１１０ヌクレオチド長、１１１～１１５ヌクレオチド長、１１６～１２０ヌクレオチド長、１２１～１２５ヌクレオチド長、１２６～１３０ヌクレオチド長、１３１～１３５ヌクレオチド長、１３６～１４０ヌクレオチド長、１４１～１４５ヌクレオチド長または１４６～１５０ヌクレオチド長であってもよい。一実施形態において、ＩＴＲは１４０～１４２ヌクレオチド長である。ＩＴＲ長さの非限定的な例は、１０２、１０５、１３０、１４０、１４１、１４２、１４５ヌクレオチド長であり、それと少なくとも９０％の同一性、またはそれと少なくとも９５％の同一性、またはそれと少なくとも９８％の同一性、またはそれと少なくとも９９％の同一性を有するものである。
ウイルスゲノム成分：プロモータ
一実施形態において、ウイルスゲノムのペイロード領域は、トランス遺伝子標的特異性および発現を増強する少なくとも１つのエレメントを含む（例えば、パウエル（Ｐｏｗｅｌｌ）ら著、「遺伝子療法におけるトランス遺伝子標的特異性および発現を増強するウイルス発現カセットエレメント（Ｖｉｒａｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｃａｓｓｅｔｔｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｔｏ Ｅｎｈａｎｃｅ Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ Ｔａｒｇｅｔ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ）」、２０１５年を参照のこと；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。トランス遺伝子標的特異性および発現を増強するエレメントの非限定的な例としては、プロモータ、内因性ｍｉＲＮＡ、転写後調節エレメント（ＰＲＥ）、ポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列および上流エンハンサー（ＵＳＥ）、ＣＭＶエンハンサーおよびイントロンが挙げられる。
当業者であれば、標的細胞中での本発明のポリペプチドの発現には、限定はされないが、種特異的な、誘導可能な、組織特異的な、または細胞周期特異的なプロモータを含む、特異的なプロモータが必要とされ得ることを認識し得る（パー（Ｐａｒｒ）ら著、ネイチャー・メディシン（Ｎａｔ．Ｍｅｄ．）、第３巻、ｐ．１１４５～９（１９９７年）；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
一実施形態において、プロモータは、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムのペイロード領域にコードされたポリペプチドの発現をドライブする場合、有効とみなされる。
一実施形態において、プロモータは、標的とされている細胞中で発現をドライブする場合、有効とみなされるプロモータである。
一実施形態において、プロモータは、標的とされている細胞に向性を有するプロモータである。
一実施形態において、プロモータは、標的組織においてペイロードの発現をある期間ドライブする。プロモータによりドライブされた発現は、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日、１週間、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、２週間、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、３週間、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日、２９日、３０日、３１日、１ヵ月、２ヵ月、３ヵ月、４ヵ月、５ヵ月、６ヵ月、７ヵ月、８ヵ月、９ヵ月、１０ヵ月、１１ヵ月、１年、１３ヵ月、１４ヵ月、１５ヵ月、１６ヵ月、１７ヵ月、１８ヵ月、１９ヵ月、２０ヵ月、２１ヵ月、２２ヵ月、２３ヵ月、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年または１０年超の期間であってもよい。発現は、１～５時間、１～１２時間、１～２日、１～５日、１～２週間、１～３週間、１～４週間、１～２ヵ月、１～４ヵ月、１～６ヵ月、２～６ヵ月、３～６ヵ月、３～９ヵ月、４～８ヵ月、６～１２ヵ月、１～２年、１～５年、２～５年、３～６年、３～８年、４～８年または５～１０年であってもよい。非限定的な例として、プロモータは、神経組織においてペイロードを持続的に発現させる弱いプロモータである。
一実施形態において、プロモータは、少なくとも１ヵ月、２ヵ月、３ヵ月、４ヵ月、５ヵ月、６ヵ月、７ヵ月、８ヵ月、９ヵ月、１０ヵ月、１１ヵ月、１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、１１年、１２年、１３年、１４年、１５年、１６年、１７年、１８年、１９年、２０年、２１年、２２年、２３年、２４年、２５年、２６年、２７年、２８年、２９年、３０年、３１年、３２年、３３年、３４年、３５年、３６年、３７年、３８年、３９年、４０年、４１年、４２年、４３年、４４年、４５年、４６年、４７年、４８年、４９年、５０年、５５年、６０年、６５年、または６５年超にわたって、本発明のポリペプチドの発現をドライブする。
プロモータは、天然に存在してもよくまたは天然に存在しなくともよい。プロモータの非限定的な例としては、ウイルスプロモータ、植物プロモータおよび哺乳類プロモータが挙げられる。一部の実施形態において、プロモータは、ヒトプロモータであってもよい。一部の実施形態において、プロモータは、トランケート型であっても突然変異型であってもよい。
ほとんどの組織で発現をドライブまたは促進するプロモータとしては、限定はされないが、ヒト伸長因子１α－サブユニット（ＥＦ１α）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）前初期エンハンサーおよび／もしくはプロモータ、ニワトリβ－アクチン（ＣＢＡ）およびその誘導体ＣＡＧ、βグルクロニダーゼ（ＧＵＳＢ）、またはユビキチンＣ（ＵＢＣ）が挙げられる。限定はされないが、筋肉特異的プロモータ、Ｂ細胞プロモータ、単球プロモータ、白血球プロモータ、マクロファージプロモータ、膵腺房細胞プロモータ、内皮細胞プロモータ、肺組織プロモータ、アストロサイトプロモータ、またはニューロンもしくはニューロンのサブタイプ、アストロサイト、もしくはオリゴデンドロサイトに発現を制限するために使用することができる神経系プロモータなど、組織特異的発現エレメントを使用して、発現を特定の細胞型に限定することができる。
筋肉特異的プロモータの非限定的な例としては、哺乳類筋肉クレアチンキナーゼ（ＭＣＫ）プロモータ、哺乳類デスミン（ＤＥＳ）プロモータ、哺乳類トロポニンＩ（ＴＮＮＩ２）プロモータ、および哺乳類骨格筋型アルファ－アクチン（ＡＳＫＡ）プロモータ（例えば、米国特許出願公開第２０１１０２１２５２９号明細書を参照。その内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
ニューロンの組織特異的発現エレメントの非限定的な例としては、ニューロン特異的エノラーゼ（ＮＳＥ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、血小板由来増殖因子Ｂ鎖（ＰＤＧＦ－β）、シナプシン（Ｓｙｎ）、メチル－ＣｐＧ結合タンパク質（ＭｅＣＰ２）、Ｃａ２＋／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩＩ（ＣａＭＫＩＩ）、代謝調節型グルタミン酸受容体２（ｍＧｌｕＲ２）、ニューロフィラメント軽鎖（ＮＦＬ）または重鎖（ＮＦＨ）、β－グロビンミニ遺伝子ｎβ２、プレプロエンケファリン（ＰＰＥ）、エンケファリン（Ｅｎｋ）および興奮性アミノ酸トランスポーター２（ＥＡＡＴ２）プロモータが挙げられる。アストロサイトに対する組織特異的発現エレメントの非限定的な例としては、グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）およびＥＡＡＴ２プロモータが挙げられる。オリゴデンドロサイトに対する組織特異的発現エレメントの非限定的な例としては、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）プロモータが挙げられる。
一実施形態において、プロモータは、１ｋｂ未満であってもよい。プロモータは、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００または８００ヌクレオチド超の長さを有してもよい。プロモータは、２００～３００、２００～４００、２００～５００、２００～６００、２００～７００、２００～８００、３００～４００、３００～５００、３００～６００、３００～７００、３００～８００、４００～５００、４００～６００、４００～７００、４００～８００、５００～６００、５００～７００、５００～８００、６００～７００、６００～８００または７００～８００の長さを有してもよい。
一実施形態において、プロモータは、限定はされないが、ＣＭＶおよびＣＢＡなど、同じまたは異なる開始または親プロモータの２つ以上の成分の組合せであってもよい。各成分は、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００または８００超の長さを有してもよい。各成分は、２００～３００、２００～４００、２００～５００、２００～６００、２００～７００、２００～８００、３００～４００、３００～５００、３００～６００、３００～７００、３００～８００、４００～５００、４００～６００、４００～７００、４００～８００、５００～６００、５００～７００、５００～８００、６００～７００、６００～８００または７００～８００の長さを有してもよい。一実施形態において、プロモータは、３８２ヌクレオチドＣＭＶエンハンサー配列と２６０ヌクレオチドＣＢＡプロモータ配列との組合せである。
一実施形態において、ウイルスゲノムはユビキタスプロモータを含む。ユビキタスプロモータの非限定的な例としては、ＣＭＶ、ＣＢＡ（誘導体ＣＡＧ、ＣＢｈ等を含む）、ＥＦ－１α、ＰＧＫ、ＵＢＣ、ＧＵＳＢ（ｈＧＢｐ）、およびＵＣＯＥ（ＨＮＲＰＡ２Ｂ１－ＣＢＸ３のプロモータ）が挙げられる。
ユー（Ｙｕ）ら（モレキュラー・ペイン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐａｉｎ）、２０１１年、第７巻、ｐ．６３；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）は、レンチウイルスベクターを使用してラットＤＲＧ細胞および初代ＤＲＧ細胞におけるＣＡＧ、ＥＦＩα、ＰＧＫおよびＵＢＣプロモータ下のｅＧＦＰの発現を評価し、ＵＢＣが他の３つのプロモータよりも弱い発現を示し、全てのプロモータについてわずか１０～１２％のグリア細胞発現しか見られなかったことを見出した。セーデルブロム（Ｓｏｄｅｒｂｌｏｍ）ら（イー・ニューロ（Ｅ．Ｎｅｕｒｏ）、２０１５年、２（２）：ＥＮＥＵＲＯ．０００１～１５；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）は、運動皮質における注射後のＣＭＶおよびＵＢＣプロモータを含むＡＡＶ８およびＣＭＶプロモータを含むＡＡＶ２におけるｅＧＦＰの発現を評価した。ＵＢＣまたはＥＦＩαプロモータを含むプラスミドの鼻腔内投与は、ＣＭＶプロモータによる発現よりも高い持続的気道発現を示した（例えば、ギル（Ｇｉｌｌ）ら著、ジーン・セラピー（Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ）、２００１年、第８巻、ｐ．１５３９～１５４６（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）を参照のこと）。フセイン（Ｈｕｓａｉｎ）ら（ジーン・セラピー（Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ）、２００９年、１６（７）：ｐ．９２７～９３２；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）は、ｈＧＵＳＢプロモータ、ＨＳＶ－１ＬＡＴプロモータおよびＮＳＥプロモータを含むＨβＨコンストラクトを評価し、このＨβＨコンストラクトがマウス脳においてＮＳＥよりも弱い発現を示したことを見出した。パッシーニ（Ｐａｓｓｉｎｉ）およびウォルフ（Ｗｏｌｆｅ）（ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．）、２００１年、ｐ．１２３８２～１２３９２、これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）は、新生仔マウスにおける脳室内注射後のＨβＨベクターの長期効果を評価し、少なくとも１年間にわたり持続的発現があったことを見出した。スー（Ｘｕ）ら（ジーン・セラピー（Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ）、２００１年、第８巻、ｐ．１３２３～１３３２；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）により、ＮＦＬおよびＮＦＨプロモータを使用したとき、ＣＭＶ－ｌａｃＺ、ＣＭＶ－ｌｕｃ、ＥＦ、ＧＦＡＰ、ｈＥＮＫ、ｎＡＣｈＲ、ＰＰＥ、ＰＰＥ＋ｗｐｒｅ、ＮＳＥ（０．３ｋｂ）、ＮＳＥ（１．８ｋｂ）およびＮＳＥ（１．８ｋｂ＋ｗｐｒｅ）と比較して全ての脳領域で低発現が見出された。スー（Ｘｕ）らは、プロモータ活性が、降順に、ＮＳＥ（１．８ｋｂ）、ＥＦ、ＮＳＥ（０．３ｋｂ）、ＧＦＡＰ、ＣＭＶ、ｈＥＮＫ、ＰＰＥ、ＮＦＬおよびＮＦＨであることを見出した。ＮＦＬは６５０ヌクレオチドプロモータであり、ＮＦＨは９２０ヌクレオチドプロモータであり、両方とも肝臓には存在しないが、ＮＦＨは固有受容感覚ニューロン、脳および脊髄に豊富にあり、ＮＦＨは心臓に存在する。ＳＣＮ８Ａは、ＤＲＧ、脊髄および脳全体にわたって発現する４７０ヌクレオチドプロモータであり、特に海馬ニューロンおよび小脳プルキンエ細胞、皮質、視床および視床下部に高発現が見られる（例えば、ドレウス（Ｄｒｅｗｓ）ら著、「ナトリウムチャネル遺伝子ＳＣＮ８Ａにおける、進化的に保存された機能性非コードエレメントの同定」（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ，ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ ｇｅｎｅ ＳＣＮ８Ａ）、マンマリアン・ゲノム（Ｍａｍｍ Ｇｅｎｏｍｅ）（２００７年）、第１８巻、ｐ．７２３～７３１；およびレイモンド（Ｒａｙｍｏｎｄ）ら著、「選択的スプライスによるナトリウムチャネルα－サブユニット遺伝子の発現」（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｌｙ Ｓｐｌｉｃｅｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ｃｈａｎｎｅｌ α－ｓｕｂｕｎｉｔ ｇｅｎｅｓ）、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）２００４年、２７９（４４）、ｐ．４６２３４～４６２４１を参照のこと；この各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
前述のユー（Ｙｕ）、セーデルブロム（Ｓｏｄｅｒｂｌｏｍ）、ギル（Ｇｉｌｌ）、フセイン（Ｈｕｓａｉｎ）、パッシーニ（Ｐａｓｓｉｎｉ）、スー（Ｘｕ）、ドレウス（Ｄｒｅｗｓ）またはレイモンド（Ｒａｙｍｏｎｄ）によって教示されるプロモータはいずれも、本発明に使用することができる。
一実施形態において、プロモータは細胞特異的ではない。
一実施形態において、プロモータはユビキチンｃ（ＵＢＣ）プロモータである。ＵＢＣプロモータは、３００～３５０ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＵＢＣプロモータは３３２ヌクレオチド長である。
一実施形態において、プロモータは、β－グルクロニダーゼ（ＧＵＳＢ）プロモータである。ＧＵＳＢプロモータは、３５０～４００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＧＵＳＢプロモータは３７８ヌクレオチド長である。
一実施形態において、プロモータはニューロフィラメント軽鎖（ＮＦＬ）プロモータである。ＮＦＬプロモータはサイズが６００～７００ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ＮＦＬプロモータは６５０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、プロモータはニューロフィラメント重鎖（ＮＦＨ）プロモータである。ＮＦＨプロモータはサイズが９００～９５０ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ＮＦＨプロモータは９２０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、プロモータはＳＣＮ８Ａプロモータである。ＳＣＮ８Ａプロモータはサイズが４５０～５００ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ＳＣＮ８Ａプロモータは４７０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、プロモータは、フラタキシン（ＦＸＮ）プロモータである。
一実施形態において、プロモータは、ホスホグリセリン酸キナーゼ１（ＰＧＫ）プロモータである。
一実施形態において、プロモータは、ニワトリβ－アクチン（ＣＢＡ）プロモータである。
一実施形態において、プロモータは、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモータである。
一実施形態において、プロモータは、Ｈ１プロモータである。
一実施形態において、プロモータは、操作されたプロモータである。
一実施形態において、プロモータは、肝臓または骨格筋プロモータである。肝臓プロモータの非限定的な例としては、ヒトα－１－抗トリプシン（ｈＡＡＴ）およびチロキシン結合グロブリン（ＴＢＧ）が挙げられる。骨格筋プロモータの非限定的な例としては、デスミン、ＭＣＫまたは合成Ｃ５－１２が挙げられる。
一実施形態において、プロモータは、ＲＮＡ ｐｏｌ ＩＩＩプロモータである。非限定的な例として、ＲＮＡ ｐｏｌ ＩＩＩプロモータはＵ６である。非限定的な例として、ＲＮＡ ｐｏｌ ＩＩＩプロモータはＨ１である。
一実施形態において、プロモータは、心筋細胞特異的プロモータである。心筋細胞特異的プロモータの非限定的な例としては、αＭＨＣ、ｃＴｎＴ、およびＣＭＶ－ＭＬＣ２ｋが挙げられる。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのプロモータを含む。非限定的な例として、プロモータは、ＥＦ１αプロモータおよびＣＭＶプロモータである。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、エンハンサーエレメント、プロモータおよび／または５’ＵＴＲイントロンを含む。また、エンハンサーエレメントは、本明細書では「エンハンサー」とも称され、限定はされないが、ＣＭＶエンハンサーであってもよく、プロモータは、限定はされないが、ＣＭＶ、ＣＢＡ、ＵＢＣ、ＧＵＳＢ、ＮＳＥ、シナプシン、ＭｅＣＰ２、およびＧＦＡＰプロモータであってもよく、および５’ＵＴＲ／イントロンは、限定はされないが、ＳＶ４０およびＣＢＡ－ＭＶＭであってもよい。非限定的な例として、組合せで使用されるエンハンサー、プロモータおよび／またはイントロンは、（１）ＣＭＶエンハンサー、ＣＭＶプロモータ、ＳＶ４０ ５’ＵＴＲイントロン；（２）ＣＭＶエンハンサー、ＣＢＡプロモータ、ＳＶ４０ ５’ＵＴＲイントロン；（３）ＣＭＶエンハンサー、ＣＢＡプロモータ、ＣＢＡ－ＭＶＭ ５’ＵＴＲイントロン；（４）ＵＢＣプロモータ；（５）ＧＵＳＢプロモータ；（６）ＮＳＥプロモータ；（７）シナプシンプロモータ；（８）ＭｅＣＰ２プロモータおよび（９）ＧＦＡＰプロモータであってもよい。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、操作されたプロモータを含む。
別の実施形態において、ウイルスゲノムは、天然に発現されるタンパク質のプロモータを含む。
ウイルスゲノム成分：非翻訳領域（ＵＴＲ）
定義上、遺伝子の野生型非翻訳領域（ＵＴＲ）は、転写されるが翻訳されない。一般的には、５’ＵＴＲは、転写開始部位から始まり、開始コドンで終了し、３’ＵＴＲは、終止コドンの直後から始まり、転写の終結シグナルまで継続する。
特定の標的臓器の、豊富に発現される遺伝子に典型的に見出される特徴を、ＵＴＲ内に操作して、安定性およびタンパク質産生を増強することができる。非限定的な例として、肝臓において通常発現されるｍＲＮＡ（例えば、アルブミン、血清アミロイドＡ、アポリポタンパク質Ａ／Ｂ／Ｅ、トランスフェリン、アルファフェトプロテイン、エリスロポエチン、または第ＶＩＩＩ因子）に由来する５’ＵＴＲを、本発明のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムに使用して、肝細胞株または肝臓での発現を増強することができる。
理論によって束縛されることを望むものではないが、野生型５’非翻訳領域（ＵＴＲ）は、翻訳開始に役割を果たす特徴を含む。コザック配列は、リボソームが多数の遺伝子の翻訳を開始させる過程に関与することが広く知られており、通常は５’ＵＴＲに含まれている。コザック配列は、コンセンサスＣＣＲ（Ａ／Ｇ）ＣＣＡＵＧＧを有し、式中Ｒは、開始コドン（ＡＴＧ）の３塩基上流にあるプリン（アデニンまたはグアニン）であり、別の「Ｇ」がその後に続く。
一実施形態において、ウイルスゲノムの５’ＵＴＲは、コザック配列を含む。
一実施形態において、ウイルスゲノムの５’ＵＴＲは、コザック配列を含まない。
理論によって束縛されることを望むものではないが、野生型３’ＵＴＲは、アデノシンおよびウリジンのストレッチがそこに埋め込まれていることが知られている。これらのＡＵリッチシグネチャーは、高いターンオーバー率を有する遺伝子において特に広く見受けられる。それらの配列特徴および機能的特性に基づき、ＡＵリッチエレメント（ＡＲＥ）は、３つのクラスに分離することができる（チェン（Ｃｈｅｎ）ら著、１９９５年。その内容は本明細書において全体として参照により援用される）：限定はされないが、ｃ－ＭｙｃおよびＭｙｏＤなどのクラスＩ ＡＲＥは、Ｕリッチ領域内にＡＵＵＵＡモチーフの幾つかの分散コピーを含有する。限定はされないが、ＧＭ－ＣＳＦおよびＴＮＦ－ａなどのクラスＩＩ ＡＲＥは、２つ以上のオーバーラップＵＵＡＵＵＵＡ（Ｕ／Ａ）（Ｕ／Ａ）ノナマーを有する。限定はされないが、ｃ－ＪｕｎおよびミオゲニンなどのクラスＩＩＩ ＡＲＥＳは、それほど十分に規定されていない。これらのＵリッチ領域は、ＡＵＵＵＡモチーフを含有しない。ＡＲＥに結合するほとんどのタンパク質は、メッセンジャーを不安定化することが知られているが、ＥＬＡＶファミリーのメンバーである最も顕著にはＨｕＲは、ｍＲＮＡの安定性を増加させることが実証されている。ＨｕＲは、３つ全てのクラスのＡＲＥに結合する。ＨｕＲ特異的結合部位を核酸分子の３’ＵＴＲ内に、操作により加えることは、インビボにて、ＨｕＲ結合を、したがってメッセージの安定化をもたらすことになる。
３’ＵＴＲ ＡＵリッチエレメント（ＡＲＥ）の導入、除去または修飾を使用して、ポリヌクレオチドの安定性を調節することができる。特異的なポリヌクレオチド、例えばウイルスゲノムのペイロード領域を操作する場合、ＡＲＥの１つ以上のコピーを導入して、ポリヌクレオチドをより不安定にし、それにより、翻訳を減らし、結果として生じるタンパク質の産生を減少させることができる。同様に、ＡＲＥを、同定および除去または突然変異させて、細胞内安定性を増加させ、したがって結果として生じるタンパク質の翻訳および産生を増加させることができる。
一実施形態において、ウイルスゲノムの３’ＵＴＲは、ポリＡテールを鋳型付加するためのオリゴ（ｄＴ）配列を含み得る。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのｍｉＲＮＡシード、結合部位または完全な配列を含み得る。ｍｉｃｒｏＲＮＡ（またはｍｉＲＮＡまたはｍｉＲ）は、核酸標的の部位に結合し、核酸分子安定性を低減することまたは翻訳を阻害することのいずれかによって遺伝子発現を下方制御する１９～２５ヌクレオチド非コードＲＮＡである。ｍｉｃｒｏＲＮＡ配列は、「シード」領域、すなわち成熟ｍｉｃｒｏＲＮＡの２～８位の領域の配列を含む。この配列は、核酸のｍｉＲＮＡ標的配列に対して完全なワトソンクリック型相補性を有する。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのｍｉＲＮＡ結合部位、完全な配列またはシード領域を含む、変更するまたは除去するように操作されていてもよい。
当該技術分野で公知の任意の遺伝子に由来する任意のＵＴＲを、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムに組み込むことができる。これらのＵＴＲまたはそれらの部分は、それらが選択されたかまたはそれらの配向性もしくは位置が変更され得る遺伝子と同じ配向性に配置され得る。一実施形態において、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムに使用されるＵＴＲは、逆位化、短縮化、延長化、当該技術分野で公知の１つ以上の他の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲで作製され得る。本明細書で使用されるとき、用語「変更される」は、ＵＴＲに関する場合、ＵＴＲが、参照配列に対して何らかの点で変化していることを意味する。例えば、３’または５’ＵＴＲは、上記で教示されるような配向性または位置の変化によって野生型または天然ＵＴＲに対して変更されていてもよく、または追加ヌクレオチドの介在、ヌクレオチドの欠失、ヌクレオチドの交換もしくは転位によって変更されていてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、野生型ＵＴＲの変異体でない少なくとも１つの人工ＵＴＲを含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、そのタンパク質が、共通の機能、構造、特徴、または特性を共有する転写物のファミリーから選択されているＵＴＲを含む。
ウイルスゲノム成分：ポリアデニル化配列
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは少なくとも１つのポリアデニル化配列を含む。ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、ペイロードコード配列の３’末端と３’ＩＴＲの５’末端との間にポリアデニル化配列を含み得る。
一実施形態において、ポリアデニル化配列または「ポリＡ配列」は、存在しない～約５００ヌクレオチド長の範囲であってもよい。ポリアデニル化配列は、限定はされないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、および５００ヌクレオチド長であってもよい。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は５０～１００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は５０～１５０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は５０～１６０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は５０～２００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は６０～１００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は６０～１５０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は６０～１６０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は６０～２００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は７０～１００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は７０～１５０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は７０～１６０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は７０～２００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は８０～１００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は８０～１５０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は８０～１６０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は８０～２００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は９０～１００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は９０～１５０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は９０～１６０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は９０～２００ヌクレオチド長である。
ウイルスゲノム成分：イントロン
一実施形態において、本発明のＡＶＶ粒子のウイルスゲノムは、イントロンなど、トランス遺伝子標的特異性および発現を増強する少なくとも１つのエレメントを含む（例えば、パウエル（Ｐｏｗｅｌｌ）ら著、「遺伝子療法におけるトランス遺伝子標的特異性および発現を増強するウイルス発現カセットエレメント（Ｖｉｒａｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｃａｓｓｅｔｔｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｔｏ Ｅｎｈａｎｃｅ Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ Ｔａｒｇｅｔ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ）」、ディスカバリー・メディシン（Ｄｉｓｃｏｖ．Ｍｅｄ）、２０１５年、第１９巻（第１０２号）：ｐ．４９～５７を参照；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。イントロンの非限定的な例としては、ＭＶＭ（６７～９７ｂｐｓ）、Ｆ．ＩＸトランケート型イントロン１（３００ｂｐ）、β－グロビンＳＤ／免疫グロブリン重鎖スプライスアクセプター（２５０ｂｐ）、アデノウイルススプライスドナー／イムノグロビンスプライスアクセプター（５００ｂｐ）、ＳＶ４０後期スプライスドナー／スプライスアクセプター（１９Ｓ／１６Ｓ）（１８０ｂｐ）およびハイブリッドアデノウイルススプライスドナー／ＩｇＧスプライスアクセプター（２３０ｂｐ）が挙げられる。
一実施形態において、イントロンまたはイントロン部分は１００～５００ヌクレオチド長であってもよい。イントロンは、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０または５００ヌクレオチドの長さを有してもよい。イントロンは、８０～１００、８０～１２０、８０～１４０、８０～１６０、８０～１８０、８０～２００、８０～２５０、８０～３００、８０～３５０、８０～４００、８０～４５０、８０～５００、２００～３００、２００～４００、２００～５００、３００～４００、３００～５００、または４００～５００ヌクレオチドの長さを有してもよい。
ウイルスゲノム成分：スタッファー配列
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、スタッファー配列またはフィラー配列など、パッケージング効率および発現を向上させる少なくとも１つのエレメントを含む。スタッファー配列の非限定的な例としては、アルブミンおよび／またはアルファ－１抗トリプシンが挙げられる。任意の公知のウイルス配列、哺乳類配列、または植物配列をマニピュレートして、スタッファー配列として使用することができる。
一実施形態において、スタッファー配列またはフィラー配列は、約１００～３５００ヌクレオチド長であってもよい。スタッファー配列は、約１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、２２００、２３００、２４００、２５００、２６００、２７００、２８００、２９００、または３０００ヌクレオチドの長さを有してもよい。
ウイルスゲノム成分：ｍｉＲＮＡ
一実施形態において、ウイルスゲノムは、特定の組織におけるトランス遺伝子の発現を低減するｍｉＲＮＡをコードする少なくとも１つの配列を含む。ｍｉＲＮＡおよびそれらの標的組織は、当該技術分野で周知である。非限定的な例として、ｍｉＲ－１２２ ｍｉＲＮＡをウイルスゲノムにコードして、肝臓でのウイルスゲノムの発現を低減することができる。
ＡＡＶ産生
本発明は、ウイルス複製細胞におけるウイルスゲノム複製による、パルボウイルス粒子、例えばＡＡＶ粒子の作製方法を提供する。
本発明によると、ペイロード領域を含むウイルスゲノムは、ウイルス複製細胞で産生されるＡＡＶ粒子に組み込まれることになる。ＡＡＶ粒子を製作する方法は、当該技術分野において周知であり、例えば、以下の文献に記載されている：米国特許第６２０４０５９号明細書、同第５７５６２８３号明細書、同第６２５８５９５号明細書、同第６２６１５５１号明細書、同第６２７０９９６号明細書、同第６２８１０１０号明細書、同第６３６５３９４号明細書、同第６４７５７６９号明細書、同第６４８２６３４号明細書、同第６４８５９６６号明細書、同第６９４３０１９号明細書、同第６９５３６９０号明細書、同第７０２２５１９号明細書、同第７２３８５２６号明細書、同第７２９１４９８および同第７４９１５０８号明細書、同第５０６４７６４号明細書、同第６１９４１９１号明細書、同第６５６６１１８号明細書、同第８１３７９４８号明細書；または国際公開第１９９６０３９５３０号パンフレット、同第１９９８０１００８８号パンフレット、同第１９９９０１４３５４号パンフレット、同第１９９９０１５６８５号パンフレット、同第１９９９０４７６９１号パンフレット、同第２００００５５３４２号パンフレット、同第２００００７５３５３および同第２００１０２３５９７号パンフレット；分子生物学の方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、リチャード（Ｒｉｃｈａｒｄ）編、ヒューマナ・プレス（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ）、ニュージャージー州、１９９５年；オライリー（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ）ら著、「バキュロウイルス発現ベクター、実験マニュアル（Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｖｅｃｔｏｒｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ）」、オックスフォード大学出版局（Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ）、１９９４年；サムルスキ（Ｓａｍｕｌｓｋｉ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ．）、第６３巻、ｐ．３８２２～８、１９８９年；カジガヤ（Ｋａｊｉｇａｙａ）ら著、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ）、第８８巻、ｐ．４６４６～５０、１９９１年；ラフィング（Ｒｕｆｆｉｎｇ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ．）、第６６巻、ｐ．６９２２～３０、１９９２年；キムバウアー（Ｋｉｍｂａｕｅｒ）ら著、バイロロジー（Ｖｉｒ．）、第２１９巻、ｐ．３７～４４、１９９６年；チャオ（Ｚｈａｏ）ら著、バイロロジー（Ｖｉｒ．）、第２７２巻、ｐ．３８２～９３、２０００年。これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される。一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、国際特許公開第２０１５１９１５０８号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される方法を使用して製作される。
組換えＡＡＶウイルス粒子の作製に一般的に使用されるウイルス複製細胞としては、限定はされないが、米国特許第６１５６３０３号明細書、同第５３８７４８４号明細書、同第５７４１６８３号明細書、同第５６９１１７６号明細書、および同第５６８８６７６号明細書；米国特許出願公開第２００２／００８１７２１号明細書、および国際特許公開第２００００４７７５７号パンフレット、同第２００００２４９１６号パンフレット、および同第１９９６０１７９４７号パンフレット（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの、ＨＥＫ２９３細胞、ＣＯＳ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＫＢ細胞、および他の哺乳類細胞株が挙げられる。
一部の実施形態において、本発明は、１）コンピテント細菌細胞にバクミドベクターおよびウイルスコンストラクトベクターおよび／またはＡＡＶペイロードコンストラクトベクターのいずれかをコトランスフェクトする工程、２）得られたウイルスコンストラクト発現ベクターおよびＡＡＶペイロードコンストラクト発現ベクターを単離し、ウイルス複製細胞に個別にトランスフェクトする工程、３）ウイルスコンストラクト発現ベクターまたはＡＡＶペイロードコンストラクト発現ベクターを含む得られたペイロードおよびウイルスコンストラクト粒子を単離および精製する工程、４）ウイルス複製細胞に、ウイルスコンストラクト発現ベクターまたはＡＡＶペイロードコンストラクト発現ベクターを含むＡＡＶペイロードおよびウイルスコンストラクト粒子の両方を共感染させる工程、および５）ウイルスゲノムを含むＡＡＶ粒子を回収および精製する工程を含む、形質導入効率が増強された（増加した、向上した）ＡＡＶ粒子の作製方法を提供する。
一部の実施形態において、本発明は、１）限定はされないがＨＥＫ２９３細胞などの哺乳類細胞にペイロード領域、ｒｅｐおよびｃａｐ遺伝子を発現するコンストラクトならびにヘルパーコンストラクトを同時にコトランスフェクトする工程、２）ウイルスゲノムを含むＡＡＶ粒子を回収および精製する工程を含む、ＡＡＶ粒子の作製方法を提供する。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、任意選択で、選択可能なマーカーをコードする。選択可能なマーカーは、限定はされないが、受容体、ＣＤマーカー、レクチン、インテグリン、またはそれらのトランケート型を含む、細胞表面に発現される任意のタンパク質などの、細胞表面マーカーを含み得る。
一部の実施形態において、選択可能なマーカーレポーター遺伝子は、国際公開第１９９６０２３８１０号パンフレットおよび第１９９６０３０５４０号パンフレット；ハイム（Ｈｅｉｍ）ら著、カレント・バイオロジー（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、２巻：ｐ．１７８～１８２（１９９６年）；ハイム（Ｈｅｉｍ）ら著、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ）、（１９９５年）；またはハイム（Ｈｅｉｍ）ら著、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、３７３巻：ｐ．６６３～６６４（１９９５年）；に記載されているとおりである。これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される。
ゲノムサイズ
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むＡＡＶ粒子は、一本鎖または二本鎖ウイルスゲノムであってもよい。ウイルスゲノムのサイズは、小型、中型、大型または最大サイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、小型一本鎖ウイルスゲノムであってもよい。小型一本鎖ウイルスゲノムは、約２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、および３．５ｋｂサイズなど、２．１～３．５ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、小型一本鎖ウイルスゲノムは３．２ｋｂサイズであってもよい。別の非限定的な例として、小型一本鎖ウイルスゲノムは２．２ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、小型二本鎖ウイルスゲノムであってもよい。小型二本鎖ウイルスゲノムは、約１．３、１．４、１．５、１．６、および１．７ｋｂサイズなど、１．３～１．７ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、小型二本鎖ウイルスゲノムは１．６ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノム、例えば、ポリヌクレオチド、ｓｉＲＮＡもしくはｄｓＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡは、中型一本鎖ウイルスゲノムであってもよい。中型一本鎖ウイルスゲノムは、約３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２および４．３ｋｂサイズなど、３．６～４．３ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、中型一本鎖ウイルスゲノムは４．０ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、中型二本鎖ウイルスゲノムであってもよい。中型二本鎖ウイルスゲノムは、約１．８、１．９、２．０、および２．１ｋｂサイズなど、１．８～２．１ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、中型二本鎖ウイルスゲノムは２．０ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、大型一本鎖ウイルスゲノムであってもよい。大型一本鎖ウイルスゲノムは、約４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９および６．０ｋｂサイズなど、４．４～６．０ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、大型一本鎖ウイルスゲノムは４．７ｋｂサイズであってもよい。別の非限定的な例として、大型一本鎖ウイルスゲノムは４．８ｋｂサイズであってもよい。更に別の非限定的な例として、大型一本鎖ウイルスは６．０ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、大型二本鎖ウイルスゲノムであってもよい。大型二本鎖ウイルスゲノムは、約２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９および３．０ｋｂサイズなど、２．２～３．０ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、大型二本鎖ウイルスゲノムは２．４ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
本発明のペイロード
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのペイロード領域を含む。本明細書で使用されるとき、「ペイロード」または「ペイロード領域」は、ウイルスゲノムによりもしくはその内にコードされる１つ以上のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域、またはかかるポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域、例えばトランス遺伝子、ポリペプチドもしくはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの発現産物、または調節性核酸もしくは制御性核酸を指す。本発明のペイロードは、典型的には、ポリペプチドまたはその断片もしくは変異体をコードする。
ペイロード領域は、ｍＲＮＡの天然構成と同様のまたは反映した領域を再現するように構築され得る。
ペイロード領域は、コードおよび非コード核酸配列の組合せを含み得る。
一部の実施形態では、ＡＡＶペイロード領域は、コードまたは非コードＲＮＡをコードし得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、２つ以上の目的のポリペプチドをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。かかる実施形態において、２つ以上のポリペプチドをコードするウイルスゲノムは、ウイルス粒子へと複製またはパッケージングされ得る。２つ以上のポリペプチドを含むウイルス粒子で形質導入された標的細胞は、単一細胞においてポリペプチドの各々を発現し得る。
一実施形態において、ＡＡＶペイロード領域は、図１に示されるような成分を含み得る。ペイロード領域１１０は、ウイルスゲノム１００内に位置する。ペイロード領域１１０の５’末端および／または３’末端には、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）１２０が存在してもよい。一実施形態においてペイロード領域内には、プロモータ領域１３０、イントロン領域１４０およびコード領域１５０が存在する。
ＡＡＶ粒子ペイロード領域がポリペプチドをコードする場合、ポリペプチドは、ペプチドまたはタンパク質であってもよい。非限定的な例として、ペイロード領域は、限定はされないが、ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３および／またはＡｐｏＥ４などのアポリポタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ）の少なくとも１つの対立遺伝子をコードしてもよい。第２の非限定的な例として、ペイロード領域は、ヒトもしくは霊長類フラタキシンタンパク質またはその断片もしくは変異体をコードしてもよい。別の非限定的な例として、ペイロード領域は、抗体またはその断片をコードしてもよい。別の非限定的な例として、ペイロード領域は、ヒトＡＡＤＣまたはその断片もしくは変異体をコードしてもよい。別の非限定的な例として、ペイロード領域は、ヒトＡＴＰ２Ａ２またはその断片もしくは変異体をコードしてもよい。更なる別の例として、ペイロード領域は、ヒトＳ１００Ａ１またはその断片もしくは変異体をコードしてもよい。本明細書に記載されるポリペプチドをコードするＡＡＶウイルスゲノムは、ヒト疾患、ウイルス、感染症、獣医学的応用の分野、ならびに様々なインビボおよびインビトロ設定において有用であり得る。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、神経学的疾患および／または障害を治療、予防、緩和、または改善するための医学分野に有用である。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、タウオパシーを治療、予防、緩和または改善するための医学分野に有用である。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、アルツハイマー病を治療、予防、緩和または改善するための医学分野に有用である。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、フリードライヒ運動失調症、またはフラタキシンタンパク質の喪失または部分的喪失が原因である任意の疾患を治療、予防、緩和または改善するための医学分野に有用である。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、パーキンソン病を治療、予防、緩和または改善するための医学分野に有用である。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、筋萎縮性側索硬化症を治療、予防、緩和または改善するための医学分野に有用である。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ハンチントン病を治療、予防、緩和または改善するための医学分野に有用である。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、心血管疾患を治療、予防、緩和または改善するための医学分野に有用である。
ポリペプチドおよび変異体の性質
本発明のウイルスゲノムのペイロード領域によってコードされるアミノ酸配列は、１つ以上の核酸、核酸の断片または上述のいずれかの変異体によって独立してコードされ得る、ポリペプチド全体、複数のポリペプチドまたはポリペプチドの断片として翻訳され得る。本明細書で使用されるとき、「ポリペプチド」は、ほとんどの場合でペプチド結合によって一緒に連結されているアミノ酸残基（天然または非天然）のポリマーを意味する。この用語は、本明細書で使用されるとき、任意のサイズ、構造、または機能のタンパク質、ポリペプチド、およびペプチドを指す。一部の場合において、コードされたポリペプチドは、約５０アミノ酸より小さく、その場合は、ポリペプチドはペプチドと称される。ポリペプチドは、ペプチドである場合、少なくとも約２、３、４、または少なくとも５アミノ酸残基長であろう。したがって、ポリペプチドとしては、遺伝子産物、天然に存在するポリペプチド、合成ポリペプチド、上述のものの相同体、オルソログ、パラログ、断片および他の均等物、変異体、および類似体が挙げられる。ポリペプチドは、単一分子であってもよく、または二量体、三量体もしくは四量体などの多分子複合体であってもよい。また、それらは、単一鎖または複数鎖のポリペプチドを含んでいてもよく、付随または連結されていてもよい。用語「ポリペプチド」は、１つ以上のアミノ酸残基が、対応する天然に存在するアミノ酸の人工的化学類似体であるアミノ酸ポリマーにも該当し得る。
用語「ポリペプチド変異体」は、それらのアミノ酸配列が天然または参照配列と異なる分子を指す。アミノ酸配列変異体は、天然または参照配列と比較して、アミノ酸配列内の特定の位置に置換、欠失、および／または挿入を有し得る。大抵の場合、変異体は、天然または参照配列に対して少なくとも約５０％同一性（相同性）を有することになり、好ましくは、天然または参照配列に対して少なくとも約８０％、より好ましくは少なくとも約９０％同一（相同性）であるだろう。
一部の実施形態において、「変異体模倣体（ｖａｒｉａｎｔ ｍｉｍｉｃｓ）」が提供される。本明細書で使用されるとき、用語「変異体模倣体」は、活性化配列を模倣することになる１つ以上のアミノ酸を含有するものである。例えば、グルタミン酸は、リン酸化トレオニンおよび／またはリン酸化セリンの模倣体として働きをし得る。あるいは、変異体模倣体は、模倣体を含有する非活性化または不活性化産物をもたらし得る。例えば、フェニルアラニンは、チロシンの不活化置換として作用し得る。またはアラニンは、セリンの不活化置換として作用し得る。
用語「アミノ酸配列変異体」は、天然または開始配列と比較して、それらのアミノ酸配列に、ある差異を有する分子を指す。アミノ酸配列変異体は、アミノ酸配列内の特定の位置に置換、欠失、および／または挿入を有し得る。「天然」または「開始」配列は、野生型配列と混同されるべきではない。本明細書で使用されるとき、天然または開始配列は、比較をなし得る元の分子を指す相対的用語である。「天然」または「開始」配列または分子は、野生型（自然界に見出される配列）を表してもよいが、野生型配列である必要はない。
大抵の場合、変異体は、天然配列に対して少なくとも約７０％相同性を有することになり、好ましくは、天然配列に対して、少なくとも約８０％、より好ましくは少なくとも約９０％相同性であるだろう。「相同性」は、アミノ酸配列に適用されるとき、配列をアラインし、必要に応じてギャップを導入して最大の相同性パーセントを達成した後の、第２の配列のアミノ酸配列の残基と同一である候補アミノ酸配列の残基のパーセンテージとして定義される。アラインメントの方法およびコンピュータプログラムは、当該技術分野で周知である。相同性は、同一性パーセントの計算に依存するが、ギャップおよびペナルティが計算に導入されるため、値が異なり得ることが理解される。
「相同体」は、アミノ酸配列に適用されるとき、第２の種の第２の配列に対して実質的に同一性を有する他の種の対応する配列を意味する。
「類似体」は、１つ以上のアミノ酸変更、例えば、親ポリペプチドの特性を依然として維持する、アミノ酸残基の置換、付加、または欠失によって異なるポリペプチド変異体を含むことを意味する。
配列タグまたは１つ以上のリジンなどのアミノ酸を、本発明のペプチド配列に付加することができる（例えば、Ｎ末端またはＣ末端に）。配列タグは、ペプチド精製または局在化のために使用し得る。リジンは、ペプチド溶解度を増加させるために、またはビオチン化を可能にするために使用し得る。あるいは、任意選択で、ペプチドまたはタンパク質のアミノ酸配列のカルボキシおよびアミノ末端領域に位置するアミノ酸残基を欠失させて、トランケート型配列を提供してもよい。あるいは、特定のアミノ酸（例えば、Ｃ末端またはＮ末端残基）は、例えば、可溶性であるかまたは固体支持体に連結されているより大きな配列の一部としての配列の発現など、配列の使用に応じて欠失されてもよい。
「置換変異体」は、タンパク質を参照する場合、天然または開始配列の少なくとも１つのアミノ酸残基が除去され、その代わりに異なるアミノ酸が同じ位置に挿入されているものである。置換は、単一であってもよく、その場合は、分子中の１つのアミノ酸のみが置換されており、または複数であってもよく、その場合は、同じ分子中の２つ以上のアミノ酸が置換されている。
本明細書で使用されるとき、用語「保存的アミノ酸置換」は、サイズ、電荷、または極性が類似する異なるアミノ酸を有する配列に通常存在するアミノ酸の置換を指す。保存的置換の例としては、イソロイシン、バリンおよびロイシンなどの無極性（疎水性）残基を別の無極性残基に置換することが挙げられる。同様に、保存的置換の例としては、アルギニンとリジンとの間、グルタミンとアスパラギンとの間、およびグリシンとセリンとの間など、１つの極性（親水性）残基を別のものに置換することが挙げられる。加えて、リジン、アルギニンまたはヒスチジンなどの塩基性残基を別のものに置換すること、またはアスパラギン酸もしくはグルタミン酸などの１つの酸性残基を別の酸性残基に置換することは、保存的置換の追加の例である。非保存的置換の例としては、イソロイシン、バリン、ロイシン、アラニン、メチオニンなどの無極性（疎水性）アミノ酸残基を、システイン、グルタミン、グルタミン酸またはリジンなどの極性（親水性）残基に置換すること、および／または極性残基を無極性残基に置換することが挙げられる。
「挿入変異体」は、タンパク質を参照する場合、１つ以上のアミノ酸が、天然または開始配列の特定の位置のアミノ酸に直に隣接して挿入されているものである。アミノ酸に「直に隣接している」とは、アミノ酸のアルファ－カルボキシまたはアルファ－アミノ官能基のいずれかに接続されていることを意味する。
「欠失変異体」は、タンパク質を参照する場合、天然または開始アミノ酸配列の１つ以上のアミノ酸が除去されているものである。大抵の場合、欠失変異体は、分子の特定領域の１つ以上のアミノ酸が欠失しているだろう。
本明細書で使用されるとき、用語「誘導体」は、用語「変異体」と同義的に使用され、参照分子または開始分子と比べて任意の様式で修飾または変化されている分子を指す。一部の実施形態において、誘導体としては、有機タンパク質性または非タンパク質性誘導体化剤および翻訳後修飾によって修飾されている天然または開始タンパク質が挙げられる。共有結合修飾は、伝統的には、タンパク質の標的アミノ酸残基を、選択された側鎖または末端残基と反応可能である有機誘導体化剤と反応させることにより、または選択された組換え宿主細胞にて機能する翻訳後修飾の機序を活用することにより導入される。得られる共有結合誘導体は、生物学的活性にとって、イムノアッセイにとって、または組換え糖タンパク質の免疫親和性精製用の抗タンパク質抗体の調製にとって重要な残基の同定に向けたプログラムに有用である。かかる修飾は、当該技術分野の通常技術内にあり、過度の実験作業を行わずに実施される。
特定の翻訳後修飾は、発現されたポリペプチドに対する組換え宿主細胞の作用の結果である。グルタミニルおよびアスパラギニル残基は、対応するグルタミルおよびアスパルチル残基へと頻繁に翻訳後脱アミド化される。あるいは、これらの残基は、温和な酸性条件下で脱アミド化される。これらの残基はいずれかの形態で、本発明に従って使用されるタンパク質に存在し得る。
他の翻訳後修飾としては、プロリンおよびリジンのヒドロキシル化、セリルまたはトレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リジン、アルギニン、およびヒスチジン側鎖のアルファ－アミノ基のメチル化が挙げられる（Ｔ．Ｅ．クレイトン（Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ）、「タンパク質：構造および分子特性」、Ｗ．Ｈ．フリーマン＆ＣＯ．社（Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．）、サンフランシスコ、ｐ．７９～８６（１９８３年））。
「特徴」は、タンパク質を参照する場合、別個のアミノ酸配列に基づく分子成分として定義される。本発明のタンパク質の特徴としては、表面発現（ｓｕｒｆａｃｅ ｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎ）、局所的立体構造形状、フォールド（ｆｏｌｄ）、ループ、ハーフループ、ドメイン、ハーフドメイン、部位、末端、またはそれらの任意の組合せが挙げられる。
タンパク質を参照する際に本明細書で使用されるとき、用語「表面発現」は、最外側表面に現れる、ポリペプチドに基づくタンパク質成分を指す。
タンパク質を参照する際に本明細書で使用されるとき、用語「局所的立体構造形状」は、タンパク質の定義可能な空間内に位置する、タンパク質のポリペプチドに基づく構造的発現を意味する。
タンパク質を参照する際に本明細書で使用されるとき、用語「フォールド」は、エネルギー最小化時に得られるアミノ酸配列の立体構造を意味する。フォールドは、フォールディングプロセスの二次または三次レベルで生じ得る。二次レベルフォールドの例としては、ベータシートおよびアルファヘリックスが挙げられる。三次レベルフォールドの例としては、エネルギー力の集合または分離によって形成されるドメインおよび領域が挙げられる。このようにして形成される領域としては、疎水性および親水性ポケットなどが挙げられる。
本明細書で使用されるとき、用語「ターン」は、タンパク質立体構造に関する場合、ペプチドまたはポリペプチドの骨格の方向を変更し、１つ、２つ、または３つ以上のアミノ酸残基が関与し得る屈曲を意味する。
タンパク質を参照する際に本明細書で使用されるとき、用語「ループ」は、ペプチドまたはポリペプチドの骨格の方向を逆転させ、４つ以上のアミノ酸残基を含む、ペプチドまたはポリペプチドの構造的特徴を指す。オリバ（Ｏｌｉｖａ）らは、少なくとも５種類のタンパク質ループを同定している（ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ）２６６巻（４号）：ｐ．８１４～８３０；１９９７年）。
タンパク質を参照する際に本明細書で使用されるとき、用語「ハーフループ」は、それが由来するループのアミノ酸残基の少なくとも半数を有する同定されたループの部分を指す。ループは、必ずしも偶数のアミノ酸残基を含有するとは限らない場合があることが理解される。したがって、ループが奇数のアミノ酸を含有するかまたは含むと同定されている場合、奇数ループのハーフループは、ループの整数部分または次の整数部分を含むことになる（ループのアミノ酸数／２＋／－０．５個のアミノ酸）。例えば、７個アミノ酸のループであると同定されたループは、３個アミノ酸または４個アミノ酸のハーフループを生じさせ得る（７／２＝３．５＋／－０．５は、３または４である）。
タンパク質を参照する際に本明細書で使用されるとき、用語「ドメイン」は、１つ以上の同定可能な構造的または機能的特徴または特性を有する（例えば、結合能力、タンパク質間相互作用の部位として働く）ポリペプチドのモチーフを指す。
タンパク質を参照する際に本明細書で使用されるとき、用語「ハーフドメイン」は、それが由来するドメインのアミノ酸残基の少なくとも半数を有する同定されたドメインの部分を意味する。ドメインは、必ずしも偶数のアミノ酸残基を含有するとは限らない場合があることが理解される。したがって、ドメインが奇数のアミノ酸を含有するかまたは含むと同定されている場合、奇数ドメインのハーフドメインは、ドメインの整数部分または次の整数部分を含むことになる（ドメインのアミノ酸数／２＋／－０．５個のアミノ酸）。例えば、７個アミノ酸のドメインであると同定されたドメインは、３個アミノ酸または４個アミノ酸のハーフドメインを生じさせ得る（７／２＝３．５＋／－０．５は、３または４である）。ドメインまたはハーフドメイン内にはサブドメインが同定される場合があり、そうしたサブドメインは、それらが由来したドメインまたはハーフドメインに同定される構造的または機能的特性の全てよりも少ない特性を有することも理解される。ドメインタイプのいずれかを含むアミノ酸は、本明細書では、ポリペプチドの骨格に沿って連続している必要はない（すなわち、非隣接アミノ酸が構造的にフォールディングして、ドメイン、ハーフドメインまたはサブドメインを生じさせ得る）ことも理解される。
タンパク質を参照する際に本明細書で使用されるとき、用語「部位」は、アミノ酸に基づく実施形態に関する場合、「アミノ酸残基」および「アミノ酸側鎖」と同義的に使用される。部位は、本発明のポリペプチドに基づく分子内で修飾、マニピュレート、変更、誘導体化、または変異され得るペプチドまたはポリペプチド内の位置を表す。
本明細書で使用されるとき、用語「末端（複数）または末端」は、タンパク質を参照する場合、ペプチドまたはポリペプチドの端部を指す。かかる端部は、ペプチドまたはポリペプチドの最初または最後の部位のみに限定されず、末端領域にある追加のアミノ酸を含み得る。本発明のポリペプチドに基づく分子は、Ｎ末端（遊離アミノ基（ＮＨ２）を有するアミノ酸によって終端されている）およびＣ末端（遊離カルボキシル基（ＣＯＯＨ）を有するアミノ酸によって終端されている）を両方とも有すると特徴付けされ得る。本発明のタンパク質は、一部の場合、ジスルフィド結合または非共有結合力によって一緒にされた複数のポリペプチド鎖でできている（マルチマー、オリゴマー）。そうした種類のタンパク質は、複数のＮ末端およびＣ末端を有することになる。あるいは、ポリペプチドの末端は、場合によっては、有機コンジュゲートなどの非ポリペプチドに基づく部分から始まるかまたは終わるように修飾されてもよい。
特徴のいずれかが本発明の分子の成分として同定または定義されたら、そうした特徴の幾つかのマニピュレーションおよび／または修飾はいずれも、移動、交換、逆転、欠失、無作為化または複製によって実施することができる。更に、特徴のマニピュレーションは、本発明の分子に対する修飾と同じ結果をもたらし得ることが理解される。例えば、ドメイン欠失が関与するマニピュレーションは、全長未満の分子をコードするような核酸の修飾が変更することになる場合とまったく同じように、分子の長さの変更をもたらすだろう。
修飾およびマニピュレーションは、指定部位突然変異誘発などの当該技術分野で公知の方法により達成することができる。その後、得られた修飾分子を、本明細書に記載されるようなものなどのインビトロもしくはインビボアッセイまたは当該技術分野で公知の任意の他の好適なスクリーニングアッセイを使用して、活性について試験してもよい。
ペイロード：目的のタンパク質をコードする核酸
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、目的のタンパク質をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
アポリポタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ）
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、アポリポタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ）遺伝子（例えば、ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３、および／またはＡｐｏＥ４）の対立遺伝子をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、配列ＭＫＶＬＷＡＡＬＬＶＴＦＬＡＧＣＱＡ（配列番号１７２２）を有するアミノ酸シグナルペプチドをコードする核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、配列ＭＳＳＧＡＳＲＫＳＷＤＰＧＮＰＷＰＰＤＷＰＩＴＧＲＫＭＫＶＬＷＡＡＬＬＶＴＦＬＡＧＣＱＡ（配列番号１７２３）を有するアミノ酸シグナルペプチドをコードする核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表２に記載されるアミノ酸配列またはその断片もしくはその変異体をコードする核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表２に記載される核酸配列またはその断片もしくはその変異体を含む。
Figure 0007221275000031
 一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、配列番号１７２４の１つ以上の変異体をコードする１つ以上の核酸配列を含む。変異体は、限定はされないが、以下の変異体、Ｅ２１Ｋ（配列番号１７２４の２１位のアミノ酸Ｅ（Ｇｌｕ）がＫ（Ｌｙｓ）に変化されている）、Ｅ３１Ｋ（配列番号１７２４の３１位のアミノ酸Ｅ（Ｇｌｕ）がＫ（Ｌｙｓ）に変化されている）、Ｒ４３Ｃ（配列番号１７２４の４３位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＣ（Ｃｙｓ）に変化されている）、Ｌ４６Ｐ（配列番号１７２４の４６位のアミノ酸Ｌ（Ｌｅｕ）がＰ（Ｐｒｏ）に変化されている）、Ｔ６０Ａ（配列番号１７２４の６０位のアミノ酸Ｔ（Ｔｈｒ）がＡ（Ａｌａ）に変化されている）、Ｑ６４Ｈ（配列番号１７２４の６４位のアミノ酸Ｑ（Ｇｌｎ）がＨ（Ｈｉｓ）に変化されている）、Ｑ９９Ｋ（配列番号１７２４の９９位のアミノ酸Ｑ（Ｇｌｎ）がＫ（Ｌｙｓ）に変化されている）、Ｐ１０２Ｒ（配列番号１７２４の１０２位のアミノ酸Ｐ（Ｐｒｏ）がＲ（Ａｒｇ）に変化されている）、Ａ１１７Ｔ（配列番号１７２４の１１７位のアミノ酸Ａ（Ａｌａ）がＴ（Ｔｈｒ）に変化されている）、Ａ１２４Ｖ（配列番号１７２４の１２４位のアミノ酸Ａ（Ａｌａ）がＶ（Ｖａｌ）に変化されている）、Ｃ１３０Ｒ（配列番号１７２４の１３０位のアミノ酸Ｃ（Ｃｙｓ）がＲ（Ａｒｇ）に変化されている）、Ｇ１４５Ｄ（配列番号１７２４の１４５位のアミノ酸Ｇ（Ｇｌｙ）がＤ（Ａｓｐ）に変化されている）、Ｇ１４５ＧＥＶＱＡＭＬＧ（配列番号１７２４の１４５位のアミノ酸Ｇ（Ｇｌｙ）がＧＥＶＱＡＭＬＧ（Ｇｌｙ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ｍｅｔ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ）に変化されている）、Ｒ１５２Ｑ（配列番号１７２４の１５２位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＱ（Ｇｌｎ）に変化されている）、Ｒ１５４Ｃ（配列番号１７２４の１５４位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＣ（Ｃｙｓ）に変化されている）、Ｒ１５４Ｓ（配列番号１７２４の１５４位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＳ（Ｓｅｒ）に変化されている）、Ｒ１６０Ｃ（配列番号１７２４の１６０位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＣ（Ｃｙｓ）に変化されている）、Ｒ１６３Ｈ（配列番号１７２４の１６３位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＨ（Ｈｉｓ）に変化されている）、Ｒ１６３Ｐ（配列番号１７２４の１６３位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＰ（Ｐｒｏ）に変化されている）、Ｋ１６４Ｅ（配列番号１７２４の１６４位のアミノ酸Ｋ（Ｌｙｓ）がＥ（Ｇｌｕ）に変化されている）、Ｋ１６４Ｑ（配列番号１７２４の１６４位のアミノ酸Ｋ（Ｌｙｓ）がＱ（Ｇｌｎ）に変化されている）、Ａ１７０Ｐ（配列番号１７２４の１７０位のアミノ酸Ａ（Ａｌａ）がＰ（Ｐｒｏ）に変化されている）、Ｒ１７６Ｃ（配列番号１７２４の１７６位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＣ（Ｃｙｓ）に変化されている）、Ｒ２４２Ｑ（配列番号１７２４の２４２位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＱ（Ｇｌｎ）に変化されている）、Ｒ２４６Ｃ（配列番号１７２４の２４６位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＣ（Ｃｙｓ）に変化されている）、Ｖ２５４Ｅ（配列番号１７２４の２５４位のアミノ酸Ｖ（Ｖａｌ）がＥ（Ｇｌｕ）に変化されている）、ＥＥ２６２－２６３ＫＫ（配列番号１７２４の２６２～２６３位のアミノ酸ＥＥ（Ｇｌｕ－Ｇｌｕ）がＫＫ（Ｌｙｓ－Ｌｙｓ）に変化されている）、Ｒ２６９Ｇ（配列番号１７２４の２６９位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＧ（Ｇｌｙ）に変化されている）、Ｌ２７０Ｅ（配列番号１７２４の２７０位のアミノ酸Ｌ（Ｌｅｕ）がＥ（Ｇｌｕ）に変化されている）、Ｒ２９２Ｈ（配列番号１７２４の２９２位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＨ（Ｈｉｓ）に変化されている）、Ｓ３１４Ｒ（配列番号１７２４の３１４位のアミノ酸Ｓ（Ｓｅｒ）がＲ（Ａｒｇ）に変化されている）、アミノ酸１６７の除去、またはそれらの組合せの１つ以上を含み得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、配列番号１７２４の１３０位のアミノ酸Ｃ（Ｃｙｓ）がＲ（Ａｒｇ）に変化されているアミノ酸配列をコードする１つ以上の核酸配列を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、配列番号１７２４の１７６位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＣ（Ｃｙｓ）に変化されているアミノ酸配列をコードする１つ以上の核酸配列を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、配列番号１７２４の１３０位のアミノ酸Ｃ（Ｃｙｓ）がＲに変化されており、配列番号１７２４の１７６位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＣ（Ｃｙｓ）に変化されているアミノ酸配列をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、配列番号１７２２または１７２３に示されるようなシグナルペプチド配列を含むＡｐｏＥ分子をコードする１つ以上の核酸配列を含む。非限定的な例として、シグナルペプチドは、細胞プロセシング中に切断されて、配列番号１７２５、１７２７、１７２９、１７３１、および１７３３に示されるような成熟ペプチドを産出する。あるいは、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、配列番号１７２５、１７２７、１７２９、１７３１、および１７３３に示されるような、シグナルペプチド配列を欠如するＡｐｏＥ分子をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、配列番号１７２５の１つ以上の変異体をコードする１つ以上の核酸配列を含む。変異体は、限定はされないが、以下の変異体、Ｃ１１２Ｒ（配列番号１７２５の１１２位のアミノ酸Ｃ（Ｃｙｓ）がＲ（Ａｒｇ）に変化されている）またはＲ１５８Ｃ（配列番号１７２５の１５８位のアミノ酸Ｒ（Ａｒｇ）がＣ（Ｃｙｓ）に変化されている）の１つ以上を含み得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、ＡｐｏＥ２（ｃｙｓ１１２、ｃｙｓ１５８）をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、ＡｐｏＥ３（ｃｙｓ１１２、ａｒｇ１５８）をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、ＡｐｏＥ４（ａｒｇ１１２、ａｒｇ１５８）をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
フラタキシン（ＦＸＮ）
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、フラタキシン（ＦＸＮ）をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表３に記載されるアミノ酸配列またはその断片もしくはその変異体をコードする核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表３に記載される核酸配列またはその断片もしくはその変異体を含む。
Figure 0007221275000032
 芳香族Ｌ－アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、芳香族Ｌ－アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表４に記載されるアミノ酸配列またはその断片もしくはその変異体をコードする核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表４に記載される核酸配列またはその断片もしくはその変異体を含む。
Figure 0007221275000033
 ＡＴＰアーゼ筋小胞体Ｃａ２＋輸送２（ＡＴＰ２Ａ２、ＡＴＰａｓｅ Ｓａｒｃｏｐｌａｓｍｉｃ／Ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ Ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ Ｃａ２＋ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇ２）
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、ＡＴＰアーゼ筋小胞体Ｃａ２＋輸送２（ＡＴＰ２Ａ２）をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表５に記載されるアミノ酸配列またはその断片もしくはその変異体をコードする核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表５に記載される核酸配列またはその断片もしくはその変異体を含む。
Figure 0007221275000034
 Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ａ１（Ｓ１００Ａ１）
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ａ１（Ｓ１００Ａ１）をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表６に記載されるアミノ酸配列またはその断片もしくはその変異体をコードする核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表６に記載される核酸配列またはその断片もしくはその変異体を含む。
Figure 0007221275000035
 抗タウ対らせん状細線維（タウ－ＰＨＦ）抗体
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、フォールディング異常タウタンパク質によって形成される対らせん状細線維（ＰＨＦ）（タウ－ＰＨＦ）に特異的な抗体の重鎖および／または軽鎖をコードする１つ以上の核酸配列を含む。ペイロード領域は、重鎖および軽鎖をコードする核酸配列間にリンカー領域をコードする１つ以上の核酸配列もまた含み得る。非限定的な例として、リンカー領域は、フューリン切断認識配列（配列番号１８１１として示される核酸配列）および／または２Ａ ｃｉｓ作用性ヒドロラーゼエレメント（配列番号１８１２として示される核酸配列）を含む。非限定的な例として、リンカー領域の核酸配列は、配列番号１８１３である。非限定的な例として、タウ対らせん状細線維に特異的に結合する抗体はＰＨＦ－１である。ＰＨＦ－１抗体は、本開示で教示されるような重鎖および軽鎖を含み得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表７に記載されるアミノ酸配列またはその断片もしくはその変異体をコードする核酸配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表７に記載される核酸配列またはその断片もしくはその変異体を含む。
Figure 0007221275000036
 一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、国際公開第２０１５０３５１９０号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）の図５Ａに記載される、コザック（配列番号１８１７）、重鎖（配列番号１８１４）、リンカー領域（フューリン切断認識配列（配列番号１８１１）および２Ａシス作用性ヒドロラーゼエレメント配列（配列番号１８１２）を含む）、ＰＨＦ－１の軽鎖配列（配列番号１８１２）、および終止コドンＴＡＧを含む（５’から３’に）核酸配列配列番号１８１６を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、コザック（配列番号１８１７）、軽鎖（配列番号１８１５）、リンカー領域（フューリン切断認識配列（配列番号１８１１）および２Ａシス作用性ヒドロラーゼエレメント配列（配列番号１８１２）を含む）、ＰＨＦ－１の重鎖（配列番号１８１４）、および終止コドンＴＡＧを含む（５’から３’に）核酸配列配列番号１８１８を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、国際公開第２０１５０３５１９０号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）の図５Ａに教示されるようなＰＨＦ－１の重鎖および／または軽鎖をコードする核酸を含み、国際公開第２０１５０３５１９０号パンフレットのＰＨＦ－１の重鎖および／または軽鎖は変更されている（例えば、修飾および／または突然変異されている）。配列は、分子の状態または構造を変化させるように突然変異または修飾されてもよい。非限定的な例として、配列は、アミノ酸の付加、アミノ酸置換、および／またはアミノ酸の欠失を含み得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、軽鎖配列が、軽鎖アミノ酸配列の始めから２番目のメチオニンを除去するように変更されているＰＨＦ－１の軽鎖をコードする核酸を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、表８に示されるようなＰＨＦ－１の軽鎖をコードするアミノ酸配列をコードする核酸を含む。
Figure 0007221275000037
 一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、コザック（配列番号１８１７）、重鎖（配列番号１８１４）、リンカー領域（フューリン切断認識配列（配列番号１８１１）および２Ａシス作用性ヒドロラーゼエレメント配列（配列番号１８１２）を含む）、ＰＨＦ－１の軽鎖配列の５’末端に１つの「ＡＴＧ」コドンを有する軽鎖配列（配列番号１８１９）、および終止コドンＴＡＧを含む（５’から３’に）核酸配列配列番号１８２０を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、コザック（配列番号１８１７）、軽鎖配列の５’末端に１つの「ＡＴＧ」コドンを有する軽鎖配列（配列番号１８１９）、リンカー領域（フューリン切断認識配列（配列番号１８１１）および２Ａシス作用性ヒドロラーゼエレメント配列（配列番号１８１２）を含む）、ＰＨＦ－１の重鎖（配列番号１８１４）、および終止コドンＴＡＧを含む（５’から３’に）核酸配列配列番号１８２１を含む。
ペイロード：ペイロードとしての調節性ポリヌクレオチド
本開示のＡＡＶ粒子は、治療剤として１つ以上の調節性ポリヌクレオチド、例えばＲＮＡ分子またはＤＮＡ分子を含む少なくとも１つのペイロード領域を含む。例示的な調節性ポリヌクレオチドは、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、およびｓｉＲＮＡ二重鎖であってもよい。ＲＮＡ干渉媒介性遺伝子サイレンシングは、標的遺伝子発現を特異的に阻害することができる。次に本発明は、目的の遺伝子を標的とする低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）分子（低分子干渉ＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ）、かかるｓｉＲＮＡを含む医薬組成物、ならびにそれらの設計方法を提供する。本発明はまた、神経学的疾患を治療するために目的の遺伝子の遺伝子発現およびタンパク質産生を阻害するための、それらの使用方法も提供する。
本発明は、遺伝子発現および／またはタンパク質産生に干渉するために目的の遺伝子のｍＲＮＡを標的とする低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）二重鎖（およびそれらをコードする調節性ポリヌクレオチド）を提供する。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖は、それらの対応するヌクレオチド配列の任意のセグメントにある目的の遺伝子を標的とすることができる。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖は、ヌクレオチド配列内の目的の遺伝子の一塩基多型（ＳＮＰ）または変異体の位置を標的とすることができる。
一部の実施形態において、かかるｓｉＲＮＡ分子、またはｓｉＲＮＡ分子の単一鎖をコードする核酸配列は、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムに挿入され、細胞、具体的には中枢神経系の細胞へと導入される。
ＡＡＶ粒子は、幾つかのユニークな特徴があるため、ｓｉＲＮＡ送達が研究されている。特徴の非限定的な例としては、（ｉ）分裂細胞および非分裂細胞の両方に感染する能力があること；（ｉｉ）ヒト細胞を含めた感染の宿主範囲が広域であること；（ｉｉｉ）野生型ＡＡＶはいかなる疾患とも関連しておらず、および感染細胞で複製しないことが示されていること；（ｉｖ）ベクターに対する細胞媒介性免疫応答を欠如すること、および（ｖ）宿主染色体に組み込まれないという性質があり、それにより長期発現の可能性が低減されることが挙げられる。更に、ＡＡＶ粒子による感染は、細胞遺伝子発現パターンの変化に及ぼす影響が最小限である（スティルウェル（Ｓｔｉｌｗｅｌｌ）およびサムルスキ（Ｓａｍｕｌｓｋｉ）ら著、バイオテクニクス（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ）、２００３年、第３４巻、ｐ．１４８～１５０、この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
本発明のコード化ｓｉＲＮＡ二重鎖は、共にハイブリダイズして二重鎖構造を形成するアンチセンス鎖とセンス鎖とを含有し、アンチセンス鎖は、標的遺伝子の核酸配列に相補的であり、センス鎖は標的遺伝子の核酸配列に相同である。一部の態様において、アンチセンス鎖の５’末端は５’リン酸基を有し、センス鎖の３’末端は３’ヒドロキシル基を含有する。他の態様において、各鎖の３’末端にはヌクレオチド突出がない、１つある、または２つある。
本発明によれば、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖の各鎖は約１９～２５、１９～２４または１９～２１ヌクレオチド長、好ましくは約１９ヌクレオチド、２０ヌクレオチド、２１ヌクレオチド、２２ヌクレオチド、２３ヌクレオチド、２４ヌクレオチド、または２５ヌクレオチド長である。一部の態様において、ｓｉＲＮＡは未修飾ＲＮＡ分子であってもよい。
他の態様において、ｓｉＲＮＡは、塩基修飾、糖修飾または骨格修飾など、少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含有し得る。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡは、互いに相補的である少なくとも２つの配列を含む。ｄｓＲＮＡは、第１の配列を有するセンス鎖および第２の配列を有するアンチセンス鎖を含む。アンチセンス鎖は、標的遺伝子をコードするｍＲＮＡの少なくとも一部と実質的に相補的なヌクレオチド配列を含み、相補性の領域は３０ヌクレオチド以下、および少なくとも１５ヌクレオチド長である。概して、ｄｓＲＮＡは１９～２５、１９～２４または１９～２１ヌクレオチド長である。一部の実施形態において、ｄｓＲＮＡは約１５～約２５ヌクレオチド長であり、他の実施形態において、ｄｓＲＮＡは約２５～約３０ヌクレオチド長である。一部の実施形態において、ｄｓＲＮＡは、約１５ヌクレオチド長、１６ヌクレオチド長、１７ヌクレオチド長、１８ヌクレオチド長、１９ヌクレオチド、２０ヌクレオチド、２１ヌクレオチド、２２ヌクレオチド、２３ヌクレオチド、２４ヌクレオチド長、２５ヌクレオチド長、２６ヌクレオチド長、２７ヌクレオチド長、２８ヌクレオチド長、２９ヌクレオチド長、または３０ヌクレオチド長である。
ｄｓＲＮＡは、直接投与されるかまたは発現ベクターにコードされるかに関わらず、標的タンパク質を発現する細胞と接触すると、本明細書に記載されるような方法などによってアッセイして、タンパク質の発現を少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％または少なくとも４０％またはそれ以上阻害する。
本発明によれば、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡ分子を設計し、培養細胞において標的遺伝子の発現（例えば、標的遺伝子のｍＲＮＡレベル）を低減するそれらの能力を試験する。当該技術分野では、ｓｉＲＮＡ設計ツールが利用可能である。任意の市販ソフトウェアを使用して、目的の遺伝子に対するｓｉＲＮＡ二重鎖を設計することができる。
本発明によれば、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡの一方の鎖の核酸を有するペイロード領域を含むＡＡＶ粒子が産生され、ＡＡＶ粒子血清型は、限定はされないが、以下のカプシドおよび／またはペプチドインサート、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ－２６、ＡＡＶＧ２Ｂ－１３、ＡＡＶＴＨ１．１－３２、ＡＡＶＴＨ１．１－３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５（Ｇ２Ｂ５）、ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ１０－２、ＡＡＶシャッフル１００－１、ＡＡＶシャッフル１００－３、ＡＡＶシャッフル１００－７、ＡＡＶシャッフル１０－２、ＡＡＶシャッフル１０－６、ＡＡＶシャッフル１０－８、ＡＡＶシャッフル１００－２、ＡＡＶ ＳＭ１０－１、ＡＡＶ ＳＭ１０－８、ＡＡＶ ＳＭ１００－３、ＡＡＶ ＳＭ１００－１０、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ１０、日本ＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１、Ａ


ＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、および／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ならびにそれらの変異体であってもよくまたはそれを含んでもよい。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡ分子を使用して、標的タンパク質の発現を、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％低減させることができる。非限定的な例として、標的タンパク質の発現は５０～９０％低減し得る。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡ分子を使用して、標的ｍＲＮＡの発現を、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％低減させることができる。非限定的な例として、標的ｍＲＮＡの発現は５０～９０％低減し得る。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、ＣＮＳの少なくとも１つの領域における標的タンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低減させることができる。標的タンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は、ＣＮＳの少なくとも１つの領域において、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％低減される。非限定的な例として、ニューロン（例えば、皮質ニューロン）における標的タンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０～９０％低減される。非限定的な例として、ニューロン（例えば、皮質ニューロン）における標的タンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０～５０％低減される。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列を含む本発明のＡＡＶ粒子を、疾患、例えば神経学的障害または心血管疾患を治療および／または改善する必要のある対象に投与する。ＡＡＶ粒子血清型は、限定はされないが、以下のペプチド、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ－２６、ＡＡＶＧ２Ｂ－１３、ＡＡＶＴＨ１．１－３２、ＡＡＶＴＨ１．１－３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５、ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ１０－２、ＡＡＶシャッフル１００－１、ＡＡＶシャッフル１００－３、ＡＡＶシャッフル１００－７、ＡＡＶシャッフル１０－２、ＡＡＶシャッフル１０－６、ＡＡＶシャッフル１０－８、ＡＡＶシャッフル１００－２、ＡＡＶ ＳＭ１０－１、ＡＡＶ ＳＭ１０－８、ＡＡＶ ＳＭ１００－３、ＡＡＶ ＳＭ１００－１０、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ１０、日本ＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬ


ｖ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、および／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ならびにそれらの変異体であってもよくまたはそれを含んでもよい。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列を含むＡＡＶＰＨＰ．Ｂ粒子（ＰＨＰ．Ｂペプチドインサートを含むＡＡＶ粒子）を、神経学的疾患を治療および／または改善する必要のある対象に投与する。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列を含むＡＡＶＰＨＰ．Ａ粒子（ＰＨＰ．Ａペプチドインサートを含むＡＡＶ粒子）を、神経学的疾患を治療および／または改善する必要のある対象に投与する。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列を含むＡＡＶＰＨＰ．Ｎ粒子（ＰＨＰ．Ｎペプチドインサートを含むＡＡＶ粒子）を、神経学的疾患を治療および／または改善する必要のある対象に投与する。
一部の実施形態において、ＰＨＰ．Ｓペプチドインサートを含むＡＡＶ粒子は、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列を含み、ＡＡＶ粒子は、神経学的疾患を治療および／または改善する必要のある対象に投与され得る。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列を含むＶＯＹ１０１の血清型を有するＡＡＶ粒子を、神経学的疾患を治療および／または改善する必要のある対象に投与する。一実施形態において、ＶＯＹ１０１カプシドは、配列番号１の核酸配列を含む。一実施形態において、ＶＯＹ１０１カプシドは、配列番号１８０９の核酸配列を含む。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列を含むＶＯＹ２０１の血清型を有するＡＡＶ粒子を、神経学的疾患を治療および／または改善する必要のある対象に投与する。一実施形態において、ＶＯＹ２０１カプシドは、配列番号１８１０の核酸配列を含む。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列を含むＡＡＶ９の変異体の血清型を有するＡＡＶ粒子を、神経学的疾患を治療および／または改善する必要のある対象に投与する。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖（例えばペイロード）の核酸配列を含む第１のＡＡＶ粒子を、対象への投与のために選択してもよく、第１のＡＡＶ粒子は、同じペイロードを含む第２のＡＡＶ粒子と比較して、より高いレベルのウイルスゲノムを細胞（例えばアストロサイト）に提供する。一実施形態において、第１のウイルスゲノムのレベルは、細胞（例えばアストロサイト）において、第２のＡＡＶ粒子の対象の細胞におけるレベルと比較して、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９倍または９倍よりも高い。一実施形態において、第１のウイルスゲノムのレベルは、細胞（例えばアストロサイト）において、第２のウイルスゲノムのレベルよりも、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超高い。一実施形態において、第１のウイルスゲノムのレベルは、細胞（例えばアストロサイト）において、第２のウイルスゲノムのレベルよりも、１～１０％、５～１０％、１０～１５％、１０～２０％、１５～２０％、２０～３０％、２５～３０％、２５～３５％、３０～３５％、３０～４０％、３５～４０％、３５～４５％、４０～４５％、４０～５０％、４５～５０％、４５～５５％、５０～５５％、５０～６０％、５５～６０％、５５～６５％、６０～６５％、６０～７０％、６５～７０％、６５～７５％、７０～７５％、７０～８０％、７５～８０％、７５～８５％、８０～８５％、８０～９０％、８５～９０％、８５～９５％、９０～９５％、９０～９９％、または９５～９９％高い。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列を含む第１のＡＡＶ粒子を、対象への投与のために選択してもよく、第１のＡＡＶ粒子は、対象の肝臓に見られる量と比較して、より多くのウイルスゲノムをアストロサイトに提供する。第１の粒子は、肝臓における量と比較して、１、２、３、４、５、６、７、８、９倍、または９倍よりも多くのウイルスゲノムをアストロサイトに提供する。
一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子またはかかるｓｉＲＮＡ分子を含むＡＡＶ粒子は、対象の中枢神経系へと直接、例えば被殻への注入によって導入されてもよい。
一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子またはかかるｓｉＲＮＡ分子を含むＡＡＶ粒子は、対象の中枢神経系へと直接、例えば対象の視床への注入によって導入されてもよい。
一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子またはかかるｓｉＲＮＡ分子を含むＡＡＶ粒子は、対象の中枢神経系へと直接、例えば対象の白質への注入によって導入されてもよい。
一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子またはかかるｓｉＲＮＡ分子を含むＡＡＶ粒子は、対象の中枢神経系に、例えば対象への静脈内投与によって導入されてもよい。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖を含むＡＡＶ粒子は、疾患を治療するための単独療法として、または例えばニューロン変性を治療するための１つ以上の神経保護剤と併用した併用療法として使用され得る。
ｓｉＲＮＡ分子
本発明は、神経学的障害を治療するための、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）誘導性遺伝子発現阻害に関する。本明細書には、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡ（本明細書では、「ｓｉＲＮＡ分子」と総称される）が提供される。かかるｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、細胞、例えばアストロサイトまたはミクログリア、皮質ニューロン、海馬ニューロン、嗅内ニューロン、視床ニューロン、感覚ニューロンまたは運動ニューロンにおける標的遺伝子発現を低減またはサイレンシングして、それにより神経学的疾病の症状を改善することができる。
ＲＮＡｉ（転写後遺伝子サイレンシング（ＰＴＧＳ）、クエリング（ｑｕｅｌｌｉｎｇ）、または共抑制としても知られる）は、ＲＮＡ分子が、典型的には特定のｍＲＮＡ分子の破壊を引き起こすことによって遺伝子発現を配列特異的様式で阻害する転写後遺伝子サイレンシング過程である。ＲＮＡｉの活性成分は、典型的には１５～３０ヌクレオチド（例えば、１９～２５、１９～２４または１９～２１ヌクレオチド）および２ヌクレオチド３’突出を含有し、標的遺伝子の核酸配列と一致する、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）と呼ばれる短鎖／低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）である。これらの短鎖ＲＮＡ種は、インビボでは、より大きなｄｓＲＮＡのダイサー媒介性切断によって天然に産生される場合があり、哺乳類細胞にて機能性である。
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）と名付けられる、天然に発現される低分子ＲＮＡ分子は、ｍＲＮＡの発現を制御することによって遺伝子サイレンシングを誘発する。ｍｉＲＮＡを含有するＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）は、シード領域と呼ばれるｍｉＲＮＡの５’領域のヌクレオチド２～７と完全な配列相補性を表すｍＲＮＡおよびその３’領域との他の塩基対を標的とする。遺伝子発現のｍｉＲＮＡ媒介性下方制御は、標的ｍＲＮＡの切断、標的ｍＲＮＡの翻訳阻害、またはｍＲＮＡ分解によって引き起こされ得る。ｍｉＲＮＡ標的配列は、通常、標的ｍＲＮＡの３’－ＵＴＲに位置する。単一のｍｉＲＮＡが、種々の遺伝子の１００個よりも多くの転写物を標的としてもよく、１つのｍＲＮＡが、異なるｍｉＲＮＡにより標的とされてもよい。
特定のｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡを設計し、インビトロで合成し、ＲＮＡｉ過程を活性化させるため細胞へと導入してもよい。エルバシール（Ｅｌｂａｓｈｉｒ）らは、２１ヌクレオチドｓｉＲＮＡ二重鎖（低分子干渉ＲＮＡと称される）が、哺乳類細胞において免疫応答を誘導することなく強力で特異的な遺伝子ノックダウンを生じさせることが可能だったことを実証した（エルバシール・ＳＭ（Ｅｌｂａｓｈｉｒ ＳＭ）ら著、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、２００１年、第４１１巻、ｐ．４９４～４９８）。この最初の報告以来、ｓｉＲＮＡによる転写後遺伝子サイレンシングは、哺乳類細胞における強力な遺伝子解析ツールとして急速に浮上しており、新規療法を生み出す可能性を秘めている。
ＲＮＡｉを活性化させるため、インビトロ合成したｓｉＲＮＡ分子を細胞へと導入してもよい。外因性ｓｉＲＮＡ二重鎖は、細胞へと導入されると、内因性ｄｓＲＮＡと同様にアセンブルされて、ｓｉＲＮＡ二重鎖の２本の鎖のうちの一方（すなわちアンチセンス鎖）に相補的なＲＮＡ配列についてゲノムを探索することを容易にする多ユニット複合体であるＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）を形成することができる。この過程で、ｓｉＲＮＡのセンス鎖（またはパッセンジャー鎖）は複合体から失われ、ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖（またはガイド鎖）はその相補性ＲＮＡと一致する。特に、ｓｉＲＮＡを含有するＲＩＳＣ複合体の標的は、完全な配列相補性を表すｍＲＮＡである。その後、ｓｉＲＮＡ媒介性遺伝子サイレンシングが生じ、標的が切断、放出および分解される。
標的ｍＲＮＡに相同なセンス鎖と標的ｍＲＮＡに相補的なアンチセンス鎖とで構成されるｓｉＲＮＡ二重鎖は、標的ＲＮＡの破壊効率の点で、一本鎖（ｓｓ）－ｓｉＲＮＡ（例えば、アンチセンス鎖ＲＮＡまたはアンチセンスオリゴヌクレオチド）の使用と比較して非常に大きな利点をもたらす。多くの場合、対応する二重鎖の有効な遺伝子サイレンシング効力を達成するには、より高い濃度のｓｓ－ｓｉＲＮＡが必要とされる。
前述の分子はいずれも、ＡＡＶ粒子またはウイルスゲノムによってコードされてもよい。
標的遺伝子
本発明の調節性ポリヌクレオチドで治療することができる神経学的疾患の非限定的な例としては、タウオパシー、アルツハイマー病、ハンチントン病、および／または筋萎縮性側索硬化症が挙げられる。標的遺伝子は、限定はされないが、本明細書に挙げられるものなど、任意の神経学的疾患に関連する遺伝子のいずれであってもよい。
一実施形態において、標的遺伝子は、アポリポタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ）遺伝子（例えば、ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３、および／またはＡｐｏＥ４）の対立遺伝子である。非限定的な例として、標的遺伝子はＡＰＯＥであり、標的遺伝子は、表２に教示される配列の１つ、その断片または変異体を有する。
別の実施形態において、標的遺伝子は、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ１）である。非限定的な例として、標的遺伝子はＳＯＤ１であり、標的遺伝子は、配列番号１７５３（ＮＣＢＩ参照番号ＮＭ＿０００４５４．４）の配列、その断片または変異体を有する。
別の実施形態において、標的遺伝子はハンチンチン（ＨＴＴ）である。非限定的な例として、標的遺伝子は、配列番号１７５４（ＮＣＢＩ参照番号ＮＭ＿００２１１１．７）のヌクレオチド配列、その断片または変異体を有するＨＴＴである。非限定的な例として、標的遺伝子はＨＴＴであり、標的遺伝子は、配列番号１７５５（ＮＣＢＩ参照番号ＮＰ＿００２１０２．４）のアミノ酸配列、その断片または変異体をコードする。
更に別の実施形態において、標的遺伝子は、微小管結合タンパク質タウ（ＭＡＰＴ）である。非限定的な例として、標的遺伝子は、表９に示される核酸配列のいずれかのヌクレオチド配列、その断片または変異体を有するＭＡＰＴである。非限定的な例として、標的遺伝子はＭＡＰＴであり、標的遺伝子は、表９に示されるアミノ酸配列のいずれかのアミノ酸配列、その断片または変異体をコードする。
Figure 0007221275000038
 ｓｉＲＮＡ二重鎖の設計および配列
当該技術分野では、ｓｉＲＮＡの設計に関して幾つかの指針が提案されている。これらの指針は、概して、その遺伝子においてサイレンシングしようとする領域を標的とする１９ヌクレオチド二重鎖形成領域、対称２～３ヌクレオチド３’突出、５’－リン酸基および３’－ヒドロキシル基の生成を推奨した。ｓｉＲＮＡ配列の好ましさを左右し得る他の規則としては、限定はされないが、（ｉ）アンチセンス鎖の５’末端におけるＡ／Ｕ；（ｉｉ）センス鎖の５’末端におけるＧ／Ｃ；（ｉｉｉ）アンチセンス鎖の５’端側３分の１にある少なくとも５個のＡ／Ｕ残基；および（ｉｖ）９ヌクレオチド長よりも長いＧＣストレッチが一切存在しないことが挙げられる。標的遺伝子の具体的な配列と合わせて、かかる考慮点に従って、哺乳類標的遺伝子発現の抑制に不可欠な高度に有効なｓｉＲＮＡ分子を容易に設計し得る。
本発明によれば、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子（例えば、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡ）が設計される。かかるｓｉＲＮＡ分子は、標的遺伝子発現およびタンパク質産生を特異的に抑制することができる。一部の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞において、標的遺伝子変異体、つまり神経学的疾患において同定される転写物を選択的に「ノックアウト」するように設計および使用される。一部の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞において標的遺伝子変異体を選択的に「ノックダウン」するように設計および使用される。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、両方の鎖が共にハイブリダイズして二重鎖構造を形成するセンス鎖と相補的アンチセンス鎖とを含む。アンチセンス鎖は、標的特異的ＲＮＡｉを導くのに十分な標的ｍＲＮＡ配列との相補性を有し、すなわちｓｉＲＮＡ分子は、ＲＮＡｉ機構または過程による標的ｍＲＮＡの破壊を惹起するのに十分な配列を有する。
一部の実施形態において、アンチセンス鎖および標的ｍＲＮＡ配列は１００％の相補性を有する。アンチセンス鎖は、標的ｍＲＮＡ配列の任意の一部と相補的であってもよい。
他の実施形態において、アンチセンス鎖および標的ｍＲＮＡ配列は少なくとも１つのミスマッチを含む。非限定的な例として、アンチセンス鎖および標的ｍＲＮＡ配列は、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～９９％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～９９％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～９９％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～９９％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～９９％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～９９％、８０～９０％、８０～９５％、８０～９９％、９０～９５％、９０～９９％もしくは９５～９９％の相補性を有する。
本発明によれば、ｓｉＲＮＡ分子は、約１０～５０ヌクレオチドまたはそれ以上の長さを有し、すなわち、各鎖が１０～５０ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）を含む。好ましくは、ｓｉＲＮＡ分子は、各鎖が約１５～３０、例えば、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０ヌクレオチドの長さを有し、鎖の一方は標的領域と十分に相補的である。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、約１９～２５、１９～２４または１９～２１ヌクレオチドの長さを有する。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、約１９ヌクレオチド～約２５ヌクレオチド、および３’末端に２つの突出ヌクレオチドを含む合成ＲＮＡ二重鎖であってもよい。一部の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は未修飾ＲＮＡ分子であってもよい。他の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は、塩基修飾、糖修飾または骨格修飾など、少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含有してもよい。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、アンチセンス配列およびセンス配列、またはそれらの断片もしくは変異体を含んでいてもよい。非限定的な例として、アンチセンス配列およびセンス配列は、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～９９％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～９９％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～９９％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～９９％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～９９％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～９９％、８０～９０％、８０～９５％、８０～９９％、９０～９５％、９０～９９％もしくは９５～９９％の相補性を有する。
ＤＮＡ発現プラスミドを使用して、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡを細胞にて安定的に発現させ、標的遺伝子の長期阻害を達成することができる。一態様において、ｓｉＲＮＡ二重鎖のセンス鎖およびアンチセンス鎖は、典型的には、短いスペーサ配列によって連結され、低分子ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）と呼ばれるステム－ループ構造の発現につながる。ヘアピンはダイサーによって認識および切断され、したがって成熟ｓｉＲＮＡ分子が生成される。
他の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、細胞送達用のＡＡＶ粒子にコードすることができる。一実施形態において、ｓｉＲＮＡは、ＡＡＶウイルスゲノムに挿入され、ＩＴＲによって隣接されてもよい。
本発明によれば、目的の遺伝子のｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸を含むＡＡＶ粒子としては、ＡＡＶ粒子血清型を挙げることができ、および／または限定はされないが、以下のペプチドインサート、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ－２６、ＡＡＶＧ２Ｂ－１３、ＡＡＶＴＨ１．１－３２、ＡＡＶＴＨ１．１－３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５、ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ１０－２、ＡＡＶシャッフル１００－１、ＡＡＶシャッフル１００－３、ＡＡＶシャッフル１００－７、ＡＡＶシャッフル１０－２、ＡＡＶシャッフル１０－６、ＡＡＶシャッフル１０－８、ＡＡＶシャッフル１００－２、ＡＡＶ ＳＭ１０－１、ＡＡＶ ＳＭ１０－８、ＡＡＶ ＳＭ１００－３、ＡＡＶ ＳＭ１００－１０、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ１０、日本ＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬ


ｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、および／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ならびにそれらの変異体を含み得る。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、標的ｍＲＮＡを抑制（または分解）する。したがって、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、細胞、例えばニューロンまたはアストロサイトにおける標的遺伝子発現を実質的に阻害することができる。一部の態様において、標的遺伝子発現の阻害は、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％の阻害を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質産物は、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％阻害され得る。
一部の実施形態において、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子は、任意の利用可能な設計ツールを使用して設計することができる。本発明によれば、ｓｉＲＮＡ分子を設計し、培養細胞において標的遺伝子ｍＲＮＡレベルを低減するそれらの能力を試験する。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子を設計し、培養細胞においてＡｐｏＥ２レベルを低減するそれらの能力を試験する。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子を設計し、培養細胞においてＡｐｏＥ３レベルを低減するそれらの能力を試験する。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子を設計し、培養細胞においてＡｐｏＥ４レベルを低減するそれらの能力を試験する。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子を設計し、培養細胞においてＳＯＤ１レベルを低減するそれらの能力を試験する。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子を設計し、培養細胞においてＨＴＴレベルを低減するそれらの能力を試験する。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子を設計し、培養細胞においてタウレベルを低減するそれらの能力を試験する。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、ガイド鎖に対するｍｉＲＮＡシードマッチ（ｓｅｅｄ ｍａｔｃｈ）を含む。別の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、パッセンジャー鎖に対するｍｉＲＮＡシードマッチを含む。更に別の実施形態において、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖またはパッセンジャー鎖に対するシードマッチを含まない。
一実施形態において、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖に対して著しい完全長オフターゲットをほぼ有しないものであり得る。別の実施形態において、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、パッセンジャー鎖に対して著しい完全長オフターゲットをほぼ有しないものであり得る。目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、パッセンジャー鎖に対して、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、１～５％、２～６％、３～７％、４～８％、５～９％、５～１０％、６～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、１０～２０％、１０～３０％、１０～４０％、１０～５０％、１５～３０％、１５～４０％、１５～４５％、２０～４０％、２０～５０％、２５～５０％、３０～４０％、３０～５０％、３５～５０％、４０～５０％、４５～５０％未満の完全長オフターゲットを有してもよい。更に別の実施形態において、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖またはパッセンジャー鎖に対して著しい完全長オフターゲットをほぼ有しないものであり得る。目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖またはパッセンジャー鎖に対して、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、１～５％、２～６％、３～７％、４～８％、５～９％、５～１０％、６～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、１０～２０％、１０～３０％、１０～４０％、１０～５０％、１５～３０％、１５～４０％、１５～４５％、２０～４０％、２０～５０％、２５～５０％、３０～４０％、３０～５０％、３５～５０％、４０～５０％、４５～５０％未満の完全長オフターゲットを有してもよい。
一実施形態において、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、インビトロで高い活性を有してもよい。別の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、インビトロで低い活性を有してもよい。更に別の実施形態において、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡは、インビトロで高いガイド鎖活性および低いパッセンジャー鎖活性を有してもよい。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、インビトロで高いガイド鎖活性および低いパッセンジャー鎖活性を有する。ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は、少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、９９．５％または１００％であってもよい。ガイド鎖による標的ノックダウンは、６０～６５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６０～９９％、６０～９９．５％、６０～１００％、６５～７０％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、６５～９９％、６５～９９．５％、６５～１００％、７０～７５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７０～９９％、７０～９９．５％、７０～１００％、７５～８０％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、７５～９９％、７５～９９．５％、７５～１００％、８０～８５％、８０～９０％、８０～９５％、８０～９９％、８０～９９．５％、８０～１００％、８５～９０％、８５～９５％、８５～９９％、８５～９９．５％、８５～１００％、９０～９５％、９０～９９％、９０～９９．５％、９０～１００％、９５～９９％、９５～９９．５％、９５～１００％、９９～９９．５％、９９～１００％または９９．５～１００％であってもよい。非限定的な例として、ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は、７０％よりも大きい。
一実施形態において、最も近いオフターゲットに対するパッセンジャー鎖のＩＣ５０は、標的に対するガイド鎖のＩＣ５０の１００倍よりも高い。非限定的な例として、最も近いオフターゲットに対するパッセンジャー鎖のＩＣ５０が、標的に対するガイド鎖のＩＣ５０の１００倍よりも高い場合、そのｓｉＲＮＡ分子は、インビトロで高いガイド鎖活性および低いパッセンジャー鎖活性を有すると言われる。
一実施形態において、ガイド鎖の５’プロセシングは、インビトロまたはインビボで少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、インビトロで少なくとも９９％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、インビボで少なくとも９９％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも呼ばれる）の発現比は、インビトロまたはインビボで、１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１；１、２：１０、２：９、２：８、２：７、２：６、２：５、２：４、２：３、２：２、２：１、３：１０、３：９、３：８、３：７、３：６、３：５、３：４、３：３、３：２、３：１、４：１０、４：９、４：８、４：７、４：６、４：５、４：４、４：３、４：２、４：１、５：１０、５：９、５：８、５：７、５：６、５：５、５：４、５：３、５：２、５：１、６：１０、６：９、６：８、６：７、６：６、６：５、６：４、６：３、６：２、６：１、７：１０、７：９、７：８、７：７、７：６、７：５、７：４、７：３、７：２、７：１、８：１０、８：９、８：８、８：７、８：６、８：５、８：４、８：３、８：２、８：１、９：１０、９：９、９：８、９：７、９：６、９：５、９：４、９：３、９：２、９：１、１０：１０、１０：９、１０：８、１０：７、１０：６、１０：５、１０：４、１０：３、１０：２、１０：１、１：９９、５：９５、１０：９０、１５：８５、２０：８０、２５：７５、３０：７０、３５：６５、４０：６０、４５：５５、５０：５０、５５：４５、６０：４０、６５：３５、７０：３０、７５：２５、８０：２０、８５：１５、９０：１０、９５：５、または９９：１である。ガイド対パッセンジャー比は、ガイド鎖切り出し後のガイド鎖対パッセンジャー鎖の比を指す。例えば、８０：２０のガイド対パッセンジャー比であれば、前駆体からパッセンジャー鎖が２つ切り取られる毎に８つのガイド鎖が切り取られることになる。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビトロで８０：２０である。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビボで８０：２０である。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビトロで８：２である。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビボで８：２である。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビトロで９：１である。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビボで９：１である。
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも呼ばれる）の発現比は、インビトロまたはインビボで、１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１；１、２：１０、２：９、２：８、２：７、２：６、２：５、２：４、２：３、２：２、２：１、３：１０、３：９、３：８、３：７、３：６、３：５、３：４、３：３、３：２、３：１、４：１０、４：９、４：８、４：７、４：６、４：５、４：４、４：３、４：２、４：１、５：１０、５：９、５：８、５：７、５：６、５：５、５：４、５：３、５：２、５：１、６：１０、６：９、６：８、６：７、６：６、６：５、６：４、６：３、６：２、６：１、７：１０、７：９、７：８、７：７、７：６、７：５、７：４、７：３、７：２、７：１、８：１０、８：９、８：８、８：７、８：６、８：５、８：４、８：３、８：２、８：１、９：１０、９：９、９：８、９：７、９：６、９：５、９：４、９：３、９：２、９：１、１０：１０、１０：９、１０：８、１０：７、１０：６、１０：５、１０：４、１０：３、１０：２、１０：１、１：９９、５：９５、１０：９０、１５：８５、２０：８０、２５：７５、３０：７０、３５：６５、４０：６０、４５：５５、５０：５０、５５：４５、６０：４０、６５：３５、７０：３０、７５：２５、８０：２０、８５：１５、９０：１０、９５：５、または９９：１である。パッセンジャー対ガイド比は、ガイド鎖切り出し後のパッセンジャー鎖対ガイド鎖の比を指す。例えば、８０：２０のパッセンジャー対ガイド比であれば、前駆体からガイド鎖が２つ切り取られる毎に８つのパッセンジャー鎖が切り取られることになる。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビトロで８０：２０である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビボで８０：２０である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビトロで８：２である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビボで８：２である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビトロで９：１である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビボで９：１である。
一実施形態において、ｄｓＲＮＡをコードするウイルスゲノムの完全性は、コンストラクトの完全長の少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超である。非限定的な例として、ウイルスゲノムの完全性は、コンストラクトの全長の８０％である。
一実施形態において、パッセンジャー鎖および／またはガイド鎖は、欧州特許出願公開第１７５２５３６号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に概説される方法および規則に基づいて設計される。非限定的な例として、配列の３’－末端塩基は、アデニン、チミンまたはウラシルである。非限定的な例として、配列の５’－末端塩基は、グアニンまたはシトシンである。非限定的な例として、３’－末端配列は、アデニン、チミンおよびウラシルの１つ以上の塩基が豊富な７つの塩基を含む。非限定的な例として、塩基数は、細胞傷害性を発現せずにＲＮＡ干渉を引き起こすようなレベルである。
分子足場（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｃａｆｆｏｌｄ）
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、分子足場もまた含む調節性ポリヌクレオチドにコードされてもよい。本明細書で使用されるとき「分子足場」は、それに対して後続の分子を設計または製作するための配列または構造基盤を形成するフレームワークまたは出発分子である。
一実施形態において、ペイロード（例えば、本明細書に記載されるｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたは他のＲＮＡｉ剤）を含む調節性ポリヌクレオチドは、任意の長さであってよく、全体もしくは一部が野生型マイクロＲＮＡ配列に由来してもよくまたは完全に人工的であってもよい少なくとも１つの５’隣接配列を含む分子足場を含む。３’隣接配列は、サイズおよび起源の点で５’隣接配列を反映してもよい。隣接配列はいずれかが存在しなくともよい。一実施形態において、５’および３’隣接配列は両方とも存在しない。３’隣接配列は、任意選択で１つ以上のＣＮＮＣモチーフ（式中、「Ｎ」は任意のヌクレオチドを表す）を含有してもよい。
一部の実施形態において、５’および３’隣接配列は、同じ長さである。
一部の実施形態において、５’隣接配列は、１～１０ヌクレオチド長であるか、５～１５ヌクレオチド長であるか、１０～３０ヌクレオチド長であるか、２０～５０ヌクレオチド長であるか、４０ヌクレオチド長よりも長いか、５０ヌクレオチド長よりも長いか、１００ヌクレオチド長よりも長いか、または２００ヌクレオチド長よりも長い。
一部の実施形態において、５’隣接配列は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、または５００ヌクレオチド長であってもよい。
一部の実施形態において、３’隣接配列は、１～１０ヌクレオチド長であるか、５～１５ヌクレオチド長であるか、１０～３０ヌクレオチド長であるか、２０～５０ヌクレオチド長であるか、４０ヌクレオチド長よりも長いか、５０ヌクレオチド長よりも長いか、１００ヌクレオチド長よりも長いか、または２００ヌクレオチド長よりも長い。
一部の実施形態において、３’隣接配列は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、または５００ヌクレオチド長であってもよい。
一部の実施形態において、５’および３’隣接配列は、同じ配列である。一部の実施形態において、それらは、互いにアラインすると、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％または３０％超が異なる。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの３’隣接領域を含む。非限定的な例として、３’隣接領域は、任意の長さであってよく、全体または一部が野生型マイクロＲＮＡ配列に由来してもよくまたは完全に人工的な配列であってもよい３’隣接配列を含んでもよい。
ステムループ構造のステムの形成は、少なくとも１つのペイロード配列の必要最低限である。一部の実施形態において、ペイロード配列は、標的配列に部分的に相補性であるかまたはハイブリダイズすることになる少なくとも１つの核酸配列を含む。一部の実施形態において、ペイロードは、ｓｉＲＮＡ分子またはｓｉＲＮＡ分子の断片である。
一部の実施形態において、ステムループの５’アームは、センス配列を含む。
一部の実施形態において、ステムループの３’アームは、アンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、一部の例では、最も５’側の末端に「Ｇ」ヌクレオチドを含む。
他の実施形態において、センス配列は、ステムループ構造のステムの３’アームにあってもよく、アンチセンス配列は５’アームにある。
センス配列およびアンチセンス配列は、それらの長さのかなりの部分にわたって完全に相補的であってもよい。他の実施形態において、センス配列およびアンチセンス配列は、独立して鎖の長さの少なくとも５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、または９９％にわたって少なくとも７０、８０、９０、９５または９９％相補的であってもよい。
センス配列の同一性も、アンチセンス配列の相同性も、標的と１００％相補的である必要はない。
ステムループ構造のセンス配列およびアンチセンス配列を隔てるのは、ループ（ループモチーフとしても知られている）である。ループは、任意の長さ、４～３０ヌクレオチド、４～２０ヌクレオチド、４～１５ヌクレオチド、５～１５ヌクレオチド、６～１２ヌクレオチド、６ヌクレオチド、７ヌクレオチド、８ヌクレオチド、９ヌクレオチド、１０ヌクレオチド、１１ヌクレオチド、および／または１２ヌクレオチドであってもよい。
一部の実施形態において、ループは、少なくとも１つのＵＧＵＧモチーフを含む。一部の実施形態において、ＵＧＵＧモチーフは、ループの５’末端に位置する。
調節性ポリヌクレオチドには、１つ以上のモジュールを互いに隔てるためのスペーサ領域が存在してもよい。かかるスペーサ領域は１つ以上存在してもよい。
一実施形態において、センス配列と隣接配列との間には、８～２０、すなわち、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ヌクレオチドのスペーサ領域が存在してもよい。
一実施形態において、スペーサは１３ヌクレオチドであり、センス配列の５’末端と隣接配列との間に位置する。一実施形態において、スペーサは、配列のおよそ１ヘリカルターンを形成するのに十分な長さである。
一実施形態において、アンチセンス配列と隣接配列との間には、８～２０、すなわち、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ヌクレオチドのスペーサ領域が存在してもよい。
一実施形態において、スペーサ配列は、１０～１３、すなわち、１０、１１、１２または１３ヌクレオチドであり、アンチセンス配列の３’末端と隣接配列との間に位置する。一実施形態において、スペーサは、配列のおよそ１ヘリカルターンを形成するのに十分な長さである。
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドは、５’から３’方向に、５’隣接配列、５’アーム、ループモチーフ、３’アームおよび３’隣接配列を含む。非限定的な例として、５’アームはセンス配列を含んでもよく、３’アームはアンチセンス配列を含む。別の非限定的な例では、５’アームはアンチセンス配列を含み、３’アームはセンス配列を含む。
一実施形態において、５’アーム、ペイロード（例えば、センス配列および／またはアンチセンス配列）、ループモチーフおよび／または３’アーム配列は、変更されてもよい（例えば、１つ以上のヌクレオチドの置換、ヌクレオチドの付加および／またはヌクレオチドの欠失）。変更は、コンストラクトの機能に有益な変化を引き起こすことができる（例えば、標的配列のノックダウンを増加させ、コンストラクトの分解を低減し、オフターゲット効果を低減し、ペイロードの効率を増加させ、ペイロードの分解を低減する）。
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドの分子足場は、ガイド鎖の切り出し率をパッセンジャー鎖の切り出し率よりも高くするためにアラインされる。ガイド鎖またはパッセンジャー鎖の切り出し率は、独立に、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超であり得る。非限定的な例として、ガイド鎖の切り出し率は少なくとも８０％である。別の非限定的な例として、ガイド鎖の切断率は少なくとも９０％である。
一実施形態において、ガイド鎖の切り出し率は、パッセンジャー鎖の切り出し率よりも高い。一態様において、ガイド鎖の切断率は、パッセンジャー鎖よりも少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超高くてもよい。
一実施形態において、ガイド鎖の切り出し効率は、少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超である。非限定的な例として、ガイド鎖の切り出し効率は８０％よりも高い。
一実施形態において、分子足場からのガイド鎖の切り出し効率は、パッセンジャー鎖の切り出しよりも高い。分子足場からのガイド鎖の切り出しは、パッセンジャー鎖の切り出しよりも２、３、４、５、６、７、８、９、１０倍または１０倍超、効率的であり得る。
一実施形態において、分子足場は、二重機能ターゲティング調節性ポリヌクレオチドを含む。本明細書で使用されるとき、「二重機能ターゲティング」調節性ポリヌクレオチドは、ガイド鎖およびパッセンジャー鎖が両方とも同じ標的をノックダウンするかまたはガイド鎖およびパッセンジャー鎖が異なる標的をノックダウンするポリヌクレオチドである。
一実施形態において、本明細書に記載される調節性ポリヌクレオチドの分子足場は、５’隣接領域、ループ領域および３’隣接領域を含む。本明細書に記載される分子足場に使用することができる５’隣接領域、ループ領域および３’隣接領域の配列の非限定的な例は、表１０～１２に示される。
Figure 0007221275000039
Figure 0007221275000040
Figure 0007221275000041
 表８～１０に記載される領域はいずれも、本明細書に記載される分子足場に使用することができる。
一実施形態において、分子足場は、表１０に挙げられる１つの５’隣接領域を含み得る。非限定的な例として、分子足場は、５’隣接領域５Ｆ１、５Ｆ２、５Ｆ３、５Ｆ４、５Ｆ５、５Ｆ６、５Ｆ７、５Ｆ８または５Ｆ９を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、表１１に挙げられる１つのループモチーフ領域を含み得る。非限定的な例として、分子足場は、ループモチーフ領域Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ｌ５、Ｌ６、Ｌ７、Ｌ８、Ｌ９、またはＬ１０を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、表１２に挙げられる１つの３’隣接領域を含み得る。非限定的な例として、分子足場は、３’隣接領域３Ｆ１、３Ｆ２、３Ｆ３、３Ｆ４、３Ｆ５、３Ｆ６、３Ｆ７または３Ｆ８を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、表１０および表１１に記載されるような少なくとも１つの５’隣接領域および少なくとも１つのループモチーフ領域を含み得る。非限定的な例として、分子足場は、５Ｆ１およびＬ１、５Ｆ１およびＬ２、５Ｆ１およびＬ３、５Ｆ１およびＬ４、５Ｆ１およびＬ５、５Ｆ１およびＬ６、５Ｆ１およびＬ７、５Ｆ１およびＬ８、５Ｆ１およびＬ９、５Ｆ１およびＬ１０、５Ｆ２およびＬ１、５Ｆ２およびＬ２、５Ｆ２およびＬ３、５Ｆ２およびＬ４、５Ｆ２およびＬ５、５Ｆ２およびＬ６、５Ｆ２およびＬ７、５Ｆ２およびＬ８、５Ｆ２およびＬ９、５Ｆ２およびＬ１０、５Ｆ３およびＬ１、５Ｆ３およびＬ２、５Ｆ３およびＬ３、５Ｆ３およびＬ４、５Ｆ３およびＬ５、５Ｆ３およびＬ６、５Ｆ３およびＬ７、５Ｆ３およびＬ８、５Ｆ３およびＬ９、５Ｆ３およびＬ１０、５Ｆ４およびＬ１、５Ｆ４およびＬ２、５Ｆ４およびＬ３、５Ｆ４およびＬ４、５Ｆ４およびＬ５、５Ｆ４およびＬ６、５Ｆ４およびＬ７、５Ｆ４およびＬ８、５Ｆ４およびＬ９、５Ｆ４およびＬ１０、５Ｆ５およびＬ１、５Ｆ５およびＬ２、５Ｆ５およびＬ３、５Ｆ５およびＬ４、５Ｆ５およびＬ５、５Ｆ５およびＬ６、５Ｆ５およびＬ７、５Ｆ５およびＬ８、５Ｆ５およびＬ９、５Ｆ５およびＬ１０、５Ｆ６およびＬ１、５Ｆ６およびＬ２、５Ｆ６およびＬ３、５Ｆ６およびＬ４、５Ｆ６およびＬ５、５Ｆ６およびＬ６、５Ｆ６およびＬ７、５Ｆ６およびＬ８、５Ｆ６およびＬ９、５Ｆ６およびＬ１０、５Ｆ７およびＬ１、５Ｆ７およびＬ２、５Ｆ７およびＬ３、５Ｆ７およびＬ４、５Ｆ７およびＬ５、５Ｆ７およびＬ６、５Ｆ７およびＬ７、５Ｆ７およびＬ８、５Ｆ７およびＬ９、５Ｆ７およびＬ１０、５Ｆ８およびＬ１、５Ｆ８およびＬ２、５Ｆ８およびＬ３、５Ｆ８およびＬ４、５Ｆ８およびＬ５、５Ｆ８およびＬ６、５Ｆ８およびＬ７、５Ｆ８およびＬ８、５Ｆ８およびＬ９、５Ｆ８およびＬ１０、５Ｆ９およびＬ１、５Ｆ９およびＬ２、５Ｆ９およびＬ３、５Ｆ９およびＬ４、５Ｆ９およびＬ５、５Ｆ９およびＬ６、５Ｆ９およびＬ７、５Ｆ９およびＬ８、５Ｆ９およびＬ９、または５Ｆ９およびＬ１０を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、表１１および表１２に記載されるような少なくとも１つの３’隣接領域および少なくとも１つのループモチーフ領域を含み得る。非限定的な例として、分子足場は、３Ｆ１およびＬ１、３Ｆ１およびＬ２、３Ｆ１およびＬ３、３Ｆ１およびＬ４、３Ｆ１およびＬ５、３Ｆ１およびＬ６、３Ｆ１およびＬ７、３Ｆ１およびＬ８、３Ｆ１およびＬ９、３Ｆ１およびＬ１０、３Ｆ２およびＬ１、３Ｆ２およびＬ２、３Ｆ２およびＬ３、３Ｆ２およびＬ４、３Ｆ２およびＬ５、３Ｆ２およびＬ６、３Ｆ２およびＬ７、３Ｆ２およびＬ８、３Ｆ２およびＬ９、３Ｆ２およびＬ１０、３Ｆ３およびＬ１、３Ｆ３およびＬ２、３Ｆ３およびＬ３、３Ｆ３およびＬ４、３Ｆ３およびＬ５、３Ｆ３およびＬ６、３Ｆ３およびＬ７、３Ｆ３およびＬ８、３Ｆ３およびＬ９、３Ｆ３およびＬ１０、３Ｆ４およびＬ１、３Ｆ４およびＬ２、３Ｆ４およびＬ３、３Ｆ４およびＬ４、３Ｆ４およびＬ５、３Ｆ４およびＬ６、３Ｆ４およびＬ７、３Ｆ４およびＬ８、３Ｆ４およびＬ９、３Ｆ４およびＬ１０、３Ｆ５およびＬ１、３Ｆ５およびＬ２、３Ｆ５およびＬ３、３Ｆ５およびＬ４、３Ｆ５およびＬ５、３Ｆ５およびＬ６、３Ｆ５およびＬ７、３Ｆ５およびＬ８、３Ｆ５およびＬ９、３Ｆ５およびＬ１０、３Ｆ６およびＬ１、３Ｆ６およびＬ２、３Ｆ６およびＬ３、３Ｆ６およびＬ４、３Ｆ６およびＬ５、３Ｆ６およびＬ６、３Ｆ６およびＬ７、３Ｆ６およびＬ８、３Ｆ６およびＬ９、３Ｆ６およびＬ１０、３Ｆ７およびＬ１、３Ｆ７およびＬ２、３Ｆ７およびＬ３、３Ｆ７およびＬ４、３Ｆ７およびＬ５、３Ｆ７およびＬ６、３Ｆ７およびＬ７、３Ｆ７およびＬ８、３Ｆ７およびＬ９、３Ｆ７およびＬ１０、３Ｆ８およびＬ１、３Ｆ８およびＬ２、３Ｆ８およびＬ３、３Ｆ８およびＬ４、３Ｆ８およびＬ５、３Ｆ８およびＬ６、３Ｆ８およびＬ７、３Ｆ８およびＬ８、３Ｆ８およびＬ９、または３Ｆ８およびＬ１０を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、表１０および表１２に記載されるような少なくとも１つの５’隣接領域および少なくとも１つの３’隣接領域を含み得る。非限定的な例として、分子足場は、５Ｆ１および３Ｆ１、５Ｆ１および３Ｆ２、５Ｆ１および３Ｆ３、５Ｆ１および３Ｆ４、５Ｆ１および３Ｆ５、５Ｆ１および３Ｆ６、５Ｆ１および３Ｆ７、５Ｆ１および３Ｆ８、５Ｆ２および３Ｆ１、５Ｆ２および３Ｆ２、５Ｆ２および３Ｆ３、５Ｆ２および３Ｆ４、５Ｆ２および３Ｆ５、５Ｆ２および３Ｆ６、５Ｆ２および３Ｆ７、５Ｆ２および３Ｆ８、５Ｆ３および３Ｆ１、５Ｆ３および３Ｆ２、５Ｆ３および３Ｆ３、５Ｆ３および３Ｆ４、５Ｆ３および３Ｆ５、５Ｆ３および３Ｆ６、５Ｆ３および３Ｆ７、５Ｆ３および３Ｆ８、５Ｆ４および３Ｆ１、５Ｆ４および３Ｆ２、５Ｆ４および３Ｆ３、５Ｆ４および３Ｆ４、５Ｆ４および３Ｆ５、５Ｆ４および３Ｆ６、５Ｆ４および３Ｆ７、５Ｆ４および３Ｆ８、５Ｆ５および３Ｆ１、５Ｆ５および３Ｆ２、５Ｆ５および３Ｆ３、５Ｆ５および３Ｆ４、５Ｆ５および３Ｆ５、５Ｆ５および３Ｆ６、５Ｆ５および３Ｆ７、５Ｆ５および３Ｆ８、５Ｆ６および３Ｆ１、５Ｆ６および３Ｆ２、５Ｆ６および３Ｆ３、５Ｆ６および３Ｆ４、５Ｆ６および３Ｆ５、５Ｆ６および３Ｆ６、５Ｆ６および３Ｆ７、５Ｆ６および３Ｆ８、５Ｆ７および３Ｆ１、５Ｆ７および３Ｆ２、５Ｆ７および３Ｆ３、５Ｆ７および３Ｆ４、５Ｆ７および３Ｆ５、５Ｆ７および３Ｆ６、５Ｆ７および３Ｆ７、５Ｆ７および３Ｆ８、５Ｆ８および３Ｆ１、５Ｆ８および３Ｆ２、５Ｆ８および３Ｆ３、５Ｆ８および３Ｆ４、５Ｆ８および３Ｆ５、５Ｆ８および３Ｆ６、５Ｆ８および３Ｆ７、５Ｆ８および３Ｆ８、５Ｆ９および３Ｆ１、５Ｆ９および３Ｆ２、５Ｆ９および３Ｆ３、５Ｆ９および３Ｆ４、５Ｆ９および３Ｆ５、５Ｆ９および３Ｆ６、５Ｆ９および３Ｆ７、または５Ｆ９および３Ｆ８を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、表１０～１２に記載されるような少なくとも１つの５’隣接領域、少なくとも１つのループモチーフ領域および少なくとも１つの３’隣接領域を含み得る。非限定的な例として、分子足場は、５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ６；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ７；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ８；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ６；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ７；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ８；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ６；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ７；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ８；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ６；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ７；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ８；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ６；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ７；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ８；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ６；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ７；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ８；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ６；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ７；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ８；５Ｆ８、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ８、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ８、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ８、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ８、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ８、Ｌ１および３Ｆ６；５Ｆ８、Ｌ１および３Ｆ７；５Ｆ８、Ｌ１および３Ｆ８；５Ｆ９、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ９、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ９、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ９、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ９、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ９、Ｌ１および３Ｆ６；５Ｆ９、Ｌ１および３Ｆ７；５Ｆ９、Ｌ１および３Ｆ８；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ６；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ７；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ８；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ６；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ７；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ８；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ６；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ７；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ８；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ６；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ７；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ８；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ６；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ７；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ８；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ６；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ７；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ８；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ６；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ７；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ８；５Ｆ８、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ８、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ８、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ８、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ８、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ８、Ｌ２および３Ｆ６；５Ｆ８、Ｌ２および３Ｆ７；５Ｆ８、Ｌ２および３Ｆ８；５Ｆ９、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ９、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ９、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ９、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ９、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ９、Ｌ２および３Ｆ６；５Ｆ９、Ｌ２および３Ｆ７；５Ｆ９、Ｌ２および３Ｆ８；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ６；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ７；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ８；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ６；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ７；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ８；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ６；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ７；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ８；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ６；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ７；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ８；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ６；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ７；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ８；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ６；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ７；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ８；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ６；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ７；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ８；５Ｆ８、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ８、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ８、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ８、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ８、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ８、Ｌ３および３Ｆ６；５Ｆ８、Ｌ３および３Ｆ７；５Ｆ８、Ｌ３および３Ｆ８；５Ｆ９、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ９、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ９、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ９、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ９、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ９、Ｌ３および３Ｆ６；５Ｆ９、Ｌ３および３Ｆ７；５Ｆ９、Ｌ３および３Ｆ８；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ６；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ７；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ８；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ６；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ７；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ８；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ６；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ７；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ８；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ６；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ７；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ８；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ６；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ７；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ８；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ６；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ７；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ８；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ６；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ７；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ８；５Ｆ８、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ８、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ８、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ８、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ８、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ８、Ｌ４および３Ｆ６；５Ｆ８、Ｌ４および３Ｆ７；５Ｆ８、Ｌ４および３Ｆ８；５Ｆ９、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ９、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ９、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ９、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ９、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ９、Ｌ４および３Ｆ６；５Ｆ９、Ｌ４および３Ｆ７；５Ｆ９、Ｌ４および３Ｆ８；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ６；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ７；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ８；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ６；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ７；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ８；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ６；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ７；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ８；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ６；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ７；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ８；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ６；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ７；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ８；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ６；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ７；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ８；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ６；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ７；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ８；５Ｆ８、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ８、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ８、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ８、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ８、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ８、Ｌ５および３Ｆ６；５Ｆ８、Ｌ５および３Ｆ７；５Ｆ８、Ｌ５および３Ｆ８；５Ｆ９、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ９、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ９、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ９、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ９、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ９、Ｌ５および３Ｆ６；５Ｆ９、Ｌ５および３Ｆ７；または５Ｆ９、Ｌ５および３Ｆ８を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、当該技術分野において公知の１つ以上のリンカーを含み得る。リンカーは、領域間を隔てもよく、または１つの分子足場と別の分子足場とを隔ててもよい。非限定的な例として、分子足場は、ポリシストロン性であってもよい。
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドは、以下の特性の少なくとも１つを使用して設計される：ループ変異体、シードミスマッチ／バルジ／ゆらぎ（ｗｏｂｂｌｅ）変異体、ステムミスマッチ、ループ変異体および基部ステムミスマッチ変異体、シードミスマッチおよび基部ステムミスマッチ変異体、ステムミスマッチおよび基部ステムミスマッチ変異体、シードゆらぎおよび基部ステムゆらぎ変異体、またはステム配列変異体。
細胞への導入
ｓｉＲＮＡ分子は、標的細胞内部の目的の遺伝子を標的とするために標的細胞に送達されてもよい。一部の実施形態において、細胞としては、限定はされないが、哺乳類起源の細胞、ヒト起源の細胞、胚性幹細胞、人工多能性幹細胞、神経幹細胞、神経前駆細胞、および分化神経細胞を挙げることができる。
一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子（例えば、ｓｉＲＮＡ二重鎖）は、ＡＡＶ粒子などのウイルスベクターを使用して、標的細胞へと導入することができる。これらのＡＡＶ粒子は、トランスフェクションに容易には適さない細胞、例えばニューロンへのｓｉＲＮＡ分子の進入を促進するように操作および最適化される。また、一部の合成ウイルスベクターは、ｓｈＲＮＡを細胞ゲノム内に組み込む能力を有し、それにより安定したｓｉＲＮＡ発現および標的遺伝子の長期ノックダウンにつながる。このように、ウイルスベクターは、野生型ウイルスに見られる有害な複製および／または組込み特徴を欠如しつつ、特異的送達用の媒体として操作される。
一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、親油性担体、およびｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物に細胞を接触させることによって細胞へと導入される。他の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞にて転写されるとｓｉＲＮＡ分子を産生することが可能な核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞にトランスフェクトまたは感染させることによって細胞へと導入される。一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞にて転写されるとｓｉＲＮＡ分子を産生することが可能な核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞に注入することによって細胞へと導入される。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を、細胞へと形質導入してもよい。
他の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を、エレクトロポレーションによって細胞へと送達してもよい（例えば、米国特許出願公開第２００５００１４２６４号明細書；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
本明細書に記載されるｓｉＲＮＡ分子の核酸配列を含むＡＡＶ粒子を導入する他の方法としては、米国特許出願公開第２０１２０２６４８０７号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの光化学的内在化を挙げることができる。
一実施形態において、限定はされないが、ヒト、イヌ、マウス、ラットまたはサルなど、任意の関連種に由来するＡＡＶ粒子を細胞へと導入されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、治療しようとする疾患に関連性のある細胞へと導入されてもよい。非限定的な例として、疾患は、タウオパシーおよび／またはアルツハイマー病であり、標的細胞は、嗅内皮質ニューロン、海馬ニューロンまたは皮質ニューロンである。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、標的配列の内因性発現レベルが高い細胞へと導入されてもよい。
別の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、標的配列の内因性発現レベルが低い細胞へと導入されてもよい。
一実施形態において、細胞は、高いＡＡＶ形質導入効率を有するものであってもよい。
他の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を、中枢神経系へのｓｉＲＮＡ分子の送達に使用してもよい（例えば、米国特許第６，１８０，６１３号明細書；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
一部の態様において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、非ウイルス起源のペプチドを含む修飾カプシドを更に含み得る。他の態様において、ＡＡＶ粒子は、コード化ｓｉＲＮＡ二重鎖の脳および脊髄への送達を促進するために、ＣＮＳ特異的（例えば、ＣＮＳまたはＣＮＳ組織に対して向性である）キメラカプシドを含有し得る。例えば、ＣＮＳ向性を示すＡＡＶ変異体に由来するｃａｐヌクレオチド配列のアラインメントを構築して、可変領域（ＶＲ）配列および構造を同定してもよい。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ポリシストロン性分子であるｓｉＲＮＡ分子をコードしてもよい。加えて、ｓｉＲＮＡ分子は、ｓｉＲＮＡ分子の領域間に１つ以上のリンカーを含み得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、本明細書に記載されるｓｉＲＮＡ配列または二重鎖の少なくとも１つをコードする調節性ポリヌクレオチドの少なくとも１つを含み得る。
一実施形態において、発現ベクターまたはウイルスゲノムは、ＩＴＲからＩＴＲまで、５’から３’に挙げて、ＩＴＲ、プロモータ、イントロン、調節性ポリヌクレオチド、ポリＡ配列およびＩＴＲを含み得る。
一実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいて、限定はされないが、ＣＭＶ、Ｕ６、Ｈ１、ＣＢＡまたはＳＶ４０イントロンを有するＣＢＡプロモータなどのプロモータの下流に位置してもよい。更に、コード化ｓｉＲＮＡ分子はまた、発現ベクターにおいてポリアデニル化配列の上流に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０ヌクレオチド以内または３０ヌクレオチド超に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０ヌクレオチド以内に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％以内または２５％超に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流の最初の１～５％、１～１０％、１～１５％、１～２０％、１～２５％、５～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、１０～１５％、１０～２０％、１０～２５％、１５～２０％、１５～２５％、または２０～２５％に位置してもよい。
一実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてポリアデニル化配列の上流に位置してもよい。更に、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいて、限定はされないが、ＣＭＶ、Ｕ６、ＣＢＡ、またはＳＶ４０イントロンを有するＣＢＡプロモータなどのプロモータの下流に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０ヌクレオチド以内または３０ヌクレオチド超に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０ヌクレオチド以内に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％以内または２５％超に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流の最初の１～５％、１～１０％、１～１５％、１～２０％、１～２５％、５～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、１０～１５％、１０～２０％、１０～２５％、１５～２０％、１５～２５％、または２０～２５％に位置してもよい。
一実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、ｓｃＡＡＶに位置してもよい。
一実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、ｓｓＡＡＶに位置してもよい。
一実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてｆｌｉｐ ＩＴＲの５’末端付近に位置してもよい。別の実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてｆｌｉｐ ＩＴＲの３’末端付近に位置してもよい。更に別の実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてｆｌｏｐ ＩＴＲの５’末端付近に位置してもよい。更に別の実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてｆｌｏｐ ＩＴＲの３’末端付近に位置してもよい。一実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてｆｌｉｐ ＩＴＲの５’末端とｆｌｏｐ ＩＴＲの３’末端との間に位置してもよい。一実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてｆｌｉｐ ＩＴＲの３’末端とｆｌｉｐ ＩＴＲの５’末端との間に（例えば、ｆｌｉｐ ＩＴＲの５’末端とｆｌｏｐ ＩＴＲの３’末端との間またはｆｌｏｐ ＩＴＲの３’末端とｆｌｉｐ ＩＴＲの５’末端との間の中間に）位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばＦｌｉｐまたはＦｌｏｐ ＩＴＲ）の５’または３’末端から下流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０ヌクレオチド以内または３０ヌクレオチド超に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばＦｌｉｐまたはＦｌｏｐ ＩＴＲ）の５’または３’末端から上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０ヌクレオチド以内または３０ヌクレオチド超に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばＦｌｉｐまたはＦｌｏｐ ＩＴＲ）の５’または３’末端から下流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０ヌクレオチド以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばＦｌｉｐまたはＦｌｏｐ ＩＴＲ）の５’または３’末端から上流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０以内に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばＦｌｉｐまたはＦｌｏｐ ＩＴＲ）の５’または３’末端から上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％以内または２５％超に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばＦｌｉｐまたはＦｌｏｐ ＩＴＲ）の５’または３’末端から下流の最初の１～５％、１～１０％、１～１５％、１～２０％、１～２５％、５～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、１０～１５％、１０～２０％、１０～２５％、１５～２０％、１５～２５％、または２０～２５％内に位置してもよい。
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子の核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ＣＮＳ送達用に製剤化されてもよい。血液脳関門を越える薬剤を使用してもよい。血液脳関門を効率的に越えるように操作されたカプシドを使用してもよい。かかるカプシドまたはペプチドインサートの非限定的な例としては、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ、ＰＨＰ．Ｂ２、ＰＨＰ．Ｂ３、Ｇ２Ａ３、Ｇ２Ｂ４、Ｇ２Ｂ５、ＰＨＰ．Ｓ、およびそれらの変異体が挙げられる。例えば、ｓｉＲＮＡ分子を血液脳関門内皮へと標的化し得る何らかの細胞透過性ペプチドを使用して、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖を製剤化してもよい。
一実施形態において、本発明の目的のペイロード（例えば、フラタキシン、ＡＰＯＥ、タウ）の核酸配列を含むＡＡＶ粒子を、ＣＮＳ送達用に製剤化してもよい。血液脳関門を越える薬剤を使用してもよい。血液脳関門を効率的に越えるように操作されたカプシドを使用してもよい。かかるカプシドまたはペプチドインサートの非限定的な例としては、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ、ＰＨＰ．Ｂ２、ＰＨＰ．Ｂ３、Ｇ２Ａ３、Ｇ２Ｂ４、Ｇ２Ｂ５、ＰＨＰ．Ｓ、およびそれらの変異体が挙げられる。例えば、ペイロードを血液脳関門内皮に送達する何らかの細胞透過性ペプチドを使用して、目的の遺伝子のペイロードを製剤化してもよい。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を、ＣＮＳに直接投与してもよい。非限定的な例として、ベクターは、ＡｐｏＥ２を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ベクターは、ＡｐｏＥ３を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ベクターは、ＡｐｏＥ４を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ベクターは、ＳＯＤ１を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ベクターは、ＨＴＴを標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ベクターは、タウを標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。
具体的な実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子の組成物は、ベクターまたはｓｉＲＮＡ分子の中枢神経系への進入、ならびにＣＮＳ組織および／または細胞への透過を促進するように投与してもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡが脊髄および／または脳幹の運動ニューロンおよびアストロサイトを標的とするための治療有効量で対象に（例えば、髄腔内投与により対象のＣＮＳに）投与してもよい。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡは、標的タンパク質またはｍＲＮＡの発現を低減することができる。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡは、標的遺伝子またはタンパク質を抑制し、標的遺伝子またはタンパク質媒介性毒性を低減することができる。標的タンパク質および／またはｍＲＮＡならびに標的遺伝子および／またはタンパク質媒介性毒性の低減は、ほぼ炎症亢進を起こさずに達成することができる。
ＩＩ．製剤および送達
医薬組成物
本発明によると、ＡＡＶ粒子は、医薬組成物として調製することができる。かかる組成物は、１つ以上の活性成分を必ず含み、かつほとんどの場合で薬学的に許容される賦形剤を含むことが理解されるだろう。
本開示に係る医薬組成物中の活性成分（例えば、ＡＡＶ粒子）、薬学的に許容可能な賦形剤、および／または任意の追加成分の相対量は、治療下の対象のアイデンティティ、サイズ、および／または状態に応じて、更には組成物が投与される経路に応じて異なり得る。例えば、組成物は、０．１％～９９％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。例として、組成物は、０．１％～１００％、例えば０．５～５０％、１～３０％、５～８０％、少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。
一部の実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子医薬組成物は、少なくとも１つのペイロードを含み得る。非限定的な例として、医薬組成物は、１、２、３、４または５つのペイロードを有するＡＡＶ粒子を含有し得る。
本明細書で提供される医薬組成物の記載は、主にヒトへの投与に好適な医薬組成物を対象とするが、当業者であれば、かかる組成物が、一般に任意の他の動物、例えば非ヒト動物、例えば非ヒト哺乳類への投与に好適であることを理解するであろう。組成物を種々の動物への投与に好適にするための、ヒトへの投与に好適な医薬組成物の修飾については十分に理解されており、獣医薬理学の当業者は、あったとしても通常通りに過ぎない実験をもって、かかる修飾を設計および／または実施することができる。医薬組成物の投与が企図される対象としては、限定はされないが、ヒトおよび／または他の霊長類；ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、イヌ、マウス、ラットなど、商業的に関連性のある哺乳類を含めた哺乳類、家禽、ニワトリ、アヒル、ガチョウ、および／またはシチメンチョウなど、商業的に関連性のある鳥類を含めた鳥類が挙げられる。
一部の実施形態において、組成物は、ヒト、ヒト患者または対象に投与される。
製剤
本発明の製剤は、限定なしに、生理食塩水、リポソームを含み得る。かかる調製方法は、活性成分を、脂質ナノ粒子、ポリマー、ペプチド、タンパク質、ウイルスベクターをトランスフェクトした細胞（例えば、対象への移入または移植用）およびそれらの組合せと合わせる工程を含む。
本明細書に記載される医薬組成物の製剤は、薬理学の技術分野において公知のまたは今後開発される任意の方法によって調製されてもよい。本明細書で使用されるとき、用語「医薬組成物」は、少なくとも１つの活性成分および任意選択で１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む組成物を指す。
一般的賦形剤および／または１つ以上の他の補助成分。本明細書で使用されるとき、語句「活性成分」は、一般に、本発明のポリペプチドをコードするペイロード領域を担持するＡＡＶ粒子、または本明細書に記載されるようなＡＡＶ粒子のウイルスゲノムによってコードされる最終産物のいずれかを指す。
本明細書に記載されるＡＡＶ粒子および医薬組成物の製剤は、薬理学の技術分野において公知のまたは今後開発される任意の方法によって調製されてもよい。一般に、かかる調製方法は、活性成分を賦形剤および／または１つ以上の他の補助成分と合わせる工程、および次に、必要であればおよび／または望ましい場合には、生成物を所望の単回または複数回用量単位に分割、付形および／または包装する工程を含む。
本開示に係る医薬組成物は、バルクで、単回単位用量として、および／または複数の単回単位用量として調製、包装、および／または販売されてもよい。本明細書で使用されるとき、「単位用量」は、所定量の活性成分を含む医薬組成物の個別的な量を指す。活性成分の量は、概して対象に投与されるであろう活性成分の投薬量に等しく、および／またはかかる投薬量の好都合な一部、例えばかかる投薬量の２分の１または３分の１である。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、ｐＨが約７．０の０．００１％プルロニック酸（Ｆ－６８）を有するＰＢＳで製剤化され得る。
一部の実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ製剤は、少なくとも１つの発現機能性ペイロードの発現に十分なＡＡＶ粒子を含有し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、１、２、３、４または５つの機能性ペイロードをコードするウイルスゲノムを含有し得る。
一部の実施形態において、本明細書に記載される製剤は、目的のタンパク質をコードする核酸配列を含む少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含有し得る。目的のタンパク質は、限定はされないが、抗体、ＡＡＤＣ、ＡＰＯＥ２、フラタキシン、ＡＴＰ２Ａ２、および／またはＳ１００Ａ１を含み得る。
一部の実施形態において、本明細書に記載される製剤は、本明細書に記載されるｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含有し得る。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、１つの標的部位にある目的の遺伝子を標的としてもよい。別の実施形態において、製剤は、複数のＡＡＶ粒子を含み、各ＡＡＶ粒子は、異なる標的部位にある目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。標的遺伝子は、２、３、４、５つまたは５つ超の部位で標的とされてもよい。一実施形態において、標的遺伝子としては、限定はされないが、ＳＯＤ１、ＨＴＴ、ＡＰＯＥ、およびＭＡＰＴを挙げることができる。
本発明によると、ＡＡＶ粒子は、ＣＮＳ送達用に製剤化され得る。脳血液関門を通過する薬剤が使用されてもよい。例えば、分子を脳血液関門内皮へと標的化することができる一部の細胞透過性ペプチドが製剤に使用されてもよい（例えば、マスウパラ（Ｍａｔｈｕｐａｌａ）、エキスパート・オピニオン・オン・セラピュティック・パテント（Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｔｈｅｒ Ｐａｔ．）、２００９年、１９巻、ｐ．１３７～１４０。この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
他の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、他の組織および臓器、例えば心血管組織に送達するために製剤化されてもよい。
賦形剤および希釈剤
本発明のＡＡＶ粒子は、（１）安定性を増加させるために、（２）細胞トランスフェクションまたは形質導入を増加させるために、（３）ペイロードの持続放出または遅延放出を可能にするために、（４）生体内分布を変更するために（例えば、ウイルス粒子を、特定の組織または細胞タイプへと標的化するために）、（５）コード化タンパク質の翻訳を増加させるために、（６）コード化タンパク質の放出プロファイルを変更するために、および／または（７）本発明のペイロードの制御可能な発現を可能にするために、１つ以上の賦形剤または希釈剤を使用して製剤化され得る。
一部の実施形態において、薬学的に許容可能な賦形剤は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の純度であってもよい。一部の実施形態において、賦形剤はヒトへの使用および動物への使用が承認されている。一部の実施形態において、賦形剤は米国食品医薬品局によって承認されていてもよい。一部の実施形態において、賦形剤は医薬品グレードであってもよい。一部の実施形態において、賦形剤は、米国薬局方（ＵＳＰ）、欧州薬局方（ＥＰ）、英国薬局方、および／または国際薬局方の規格に適合し得る。
賦形剤には、本明細書で使用されるとき、限定はされないが、所望の特定の剤形に適するとおりのあらゆる溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体媒体、分散液または懸濁液助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、保存剤などが含まれる。医薬組成物を製剤化するための種々の賦形剤および組成物の調製技法は当該技術分野において公知である（「レミントン：薬学の科学と実践（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ）」、第２１版、Ａ・Ｒ・ジェンナロ（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ）著、リッピンコット・ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ）、メリーランド州ボルチモア（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ）、２００６年を参照のこと；全体として参照により本明細書に援用される）。従来の賦形剤媒体の使用は本開示の範囲内に企図され得るが、ただし、任意の望ましくない生物学的効果を生じたり、またはその他、医薬組成物の任意の他の１つまたは複数の成分と有害な形で相互作用したりするなどにより、任意の従来の賦形剤媒体が物質またはその誘導体と不適合である場合は除く。
例示的希釈剤としては、限定はされないが、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム ラクトース、スクロース、セルロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンスターチ、粉末糖等、および／またはこれらの組合せが挙げられる。
非活性成分
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子製剤は、少なくとも１つの非活性成分を含み得る。本明細書で使用されるとき、用語「非活性成分」は、製剤に含まれる医薬組成物の活性成分の活性に寄与しない１つ以上の薬剤を指す。一部の実施形態において、本発明の製剤に使用し得る非活性成分は、全てが米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認されているか、いずれも承認されていないか、または一部が承認されているものであり得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子医薬組成物は、限定ではないが、以下のものなどの少なくとも１つの非活性成分を含む：１，２，６－ヘキサントリオール；１，２－ジミリストイル－Ｓｎ－グリセロ－３－（ホスホ－Ｓ－（１－グリセロール））；１，２－ジミリストイル－Ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン；１，２－ジオレオイル－Ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン；１，２－ジパルミトイル－Ｓｎ－グリセロ－３－（ホスホ－Ｒａｃ－（１－グリセロール））；１，２－ジステアロイル－Ｓｎ－グリセロ－３－（ホスホ－Ｒａｃ－（１－グリセロール））；１，２－ジステアロイル－Ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン；１－Ｏ－トリルビグアニド；２－エチル－１，６－ヘキサンジオール；酢酸；氷酢酸；無水酢酸；アセトン；アセトン重亜硫酸ナトリウム；アセチル化ラノリンアルコール；アセチル化モノグリセリド；アセチルシステイン；アセチルトリプトファン，ＤＬ－；アクリレートコポリマー；アクリル酸－アクリル酸イソオクチルコポリマー；アクリル接着剤７８８；活性炭；Ａｄｃｏｔｅ７２Ａ１０３；接着テープ；アジピン酸；Ａｅｒｏｔｅｘレジン３７３０；アラニン；凝集アルブミン；コロイドアルブミン；ヒトアルブミン；アルコール；無水アルコール；変性アルコール；希釈アルコール；Ａｌｆａｄｅｘ；アルギン酸；アルキルアンモニウムスルホン酸ベタイン；アルキルアリールスルホン酸ナトリウム；アラントイン；アリル．アルファ．－イオノン；アーモンド油；アルファテルピネオール；アルファ－トコフェロール；アルファ－トコフェロールアセテート，Ｄｌ－；アルファ－トコフェロール，Ｄｌ－；酢酸アルミニウム；アルミニウムクロルヒドロキシアラントイネート；水酸化アルミニウム；水和水酸化アルミニウム－スクロース；水酸化アルミニウムゲル；水酸化アルミニウムゲルＦ５００；水酸化アルミニウムゲルＦ５０００；モノステアリン酸アルミニウム；酸化アルミニウム；アルミニウムポリエステル；ケイ酸アルミニウム；オクテニルコハク酸デンプンアルミニウム；ステアリン酸アルミニウム；塩基性酢酸アルミニウム；無水硫酸アルミニウム；Ａｍｅｒｃｈｏｌ Ｃ；Ａｍｅｒｃｈｏｌ－Ｃａｂ；アミノメチルプロパノール；アンモニア；アンモニア溶液；濃アンモニア溶液；酢酸アンモニウム；水酸化アンモニウム；ラウリル硫酸アンモニウム；アンモニウムノノキシノール－４スルフェート；Ｃ－１２－Ｃ－１５直鎖第一級アルコールエトキシレートのアンモニウム塩；硫酸アンモニウム；アンモニックス；Ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃ－２；Ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃ－９；アネトール；無水クエン酸；無水デキストロース；無水ラクトース；無水クエン酸三ナトリウム；アニス油；Ａｎｏｘｉｄ Ｓｂｎ；泡止剤；アンチピリン；アパフルラン；杏仁油Ｐｅｇ－６エスター；Ａｑｕａｐｈｏｒ；アルギニン；Ａｒｌａｃｅｌ；アスコルビン酸；アスコルビン酸パルミテート；アスパラギン酸；ペルーバルサム；硫酸バリウム；みつろう；合成みつろう；ベヘネス－１０；ベントナイト；塩化ベンザルコニウム；ベンゼンスルホン酸；塩化ベンゼトニウム；臭化ベンゾドデシニウム；安息香酸；ベンジルアルコール；安息香酸ベンジル；塩化ベンジル；ベータデクス；ビバプシチド（Ｂｉｂａｐｃｉｔｉｄｅ）；次没食子酸ビスマス；ホウ酸；ブロクリナト；ブタン；ブチルアルコール；ビニルメチルエーテルのブチルエステル／無水マレイン酸共重合体（１２５０００Ｍｗ）；ステアリン酸ブチル；ブチル化ヒドロキシアニソール；ブチル化ヒドロキシトルエン；ブチレングリコール；ブチルパラベン；酪酸；Ｃ２０～４０パレス－２４；カフェイン；カルシウム；炭酸カルシウム；塩化カルシウム；グルセプト酸カルシウム；水酸化カルシウム；乳酸カルシウム；カルコブトロール（Ｃａｌｃｏｂｕｔｒｏｌ）；カルジアミドナトリウム；カロキセト酸三ナトリウム（Ｃａｌｏｘｅｔａｔｅ Ｔｒｉｓｏｄｉｕｍ）；カルテリドールカルシウム（Ｃａｌｔｅｒｉｄｏｌ Ｃａｌｃｉｕｍ）；カナダバルサム；カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；カプリル酸／カプリン酸／ステアリン酸トリグリセリド；カプタン；カプチゾール；カラメル；カルボマー１３４２；カルボマー１３８２；カルボマー９３４；カルボマー９３４ｐ；カルボマー９４０；カルボマー９４１；カルボマー９８０；カルボマー９８１；カルボマーホモポリマーＢ型（アリルペンタエリトリトール架橋）；カルボマーホモポリマーＣ型（アリルペンタエリトリトール架橋）；二酸化炭素；カルボキシビニルコポリマー；カルボキシメチルセルロース；カルボキシメチルセルロースナトリウム；カルボキシポリメチレン；カラギナン；カラギナン塩；ヒマシ油；ニオイヒバ油；セルロース；微晶質セルロース；Ｃｅｒａｓｙｎｔ－Ｓｅ；セレシン；セテアレス－１２；セテアレス－１５；セテアレス－３０；セテアリルアルコール／セテアレス－２０；エチルヘキサン酸セテアリル；セテス－１０；セテス－２；セテス－２０；セテス－２３；セトステアリルアルコール；塩化セトリモニウム；セチルアルコール；セチルエステルワックス；パルミチン酸セチル；塩化セチルピリジウム；クロロブタノール；クロロブタノール半水和物；無水クロロブタノール；クロロクレゾール；クロロキシレノール；コレステロール；コレス；コレス－２４；クエン酸塩；クエン酸；クエン酸一水和物；含水クエン酸；コカミドエーテルスルフェート；コカミンオキシド；ココベタイン；ココジエタノールアミド；ココモノエタノールアミド；カカオ脂；ココ－グリセリド；ヤシ油；硬化ヤシ油；硬化ヤシ油／パーム核油グリセリド；ココイルカプリロカプラート；コラノキ種子抽出物；コラーゲン；着色料懸濁剤；トウモロコシ油；綿実油；クリーム基材；クレアチン；クレアチニン；クレゾール；クロスカルメロースナトリウム；クロスポビドン；硫酸銅；無水硫酸銅；シクロメチコーン；シクロメチコーン／ジメチコーンコポリオール；システイン；塩酸システイン；無水塩酸システイン；システイン，Ｄｌ－；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．２８；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．３３；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．３６；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．３９；Ｄ＆ＣイエローＮｏ．１０；ダルファムプリジン；Ｄａｕｂｅｒｔ１－５ Ｐｅｓｔｒ（Ｍａｔｔｅ）１６４ｚ；デシルメチルスルホキシド；ＤｅｈｙｄａｇワックスＳｘ；デヒドロ酢酸；Ｄｅｈｙｍｕｌｓ Ｅ；安息香酸デナトニウム；デオキシコール酸；デキストラン；デキストラン４０；デキストリン；デキストロース；デキストロース一水和物；デキストロース溶液；ジアトリゾ酸；ジアゾリジニル尿素；ジクロロベンジルアルコール；ジクロロジフルオロメタン；ジクロロテトラフルオロエタン；ジエタノールアミン；ピロ炭酸ジエチル；セバシン酸ジエチル；ジエチレングリコールモノエチルエーテル；ジエチルヘキシルフタル酸エステル；アミノ酢酸ジヒドキシアルミニウム；ジイソプロパノールアミン；ジイソプロピルアジパート；ジリノール酸ジイソプロピル；ジメチコーン３５０；ジメチコーンコポリオ－ル；ジメチコーンＭｄｘ４－４２１０；ジメチコーン医療用流体３６０；ジメチルイソソルビド；ジメチルスルホキシド；ジメチルアミノエチルメタクリレート－ブチルメタクリレート－メチルメタクリレートコポリマー；ジメチルジオクタデシルアンモニウムベントナイト；ジメチルシロキサン／ジメチルビニルシロキシコポリマー；ジノセブアンモニウム塩；ジパルミトイルホスファチジルグリセロール，Ｄｌ－；ジプロピレングリコール；ココアンホ二酢酸二ナトリウム；スルホコハク酸ラウレス二ナトリウム；スルホコハク酸ラウリル二ナトリウム；スルホサリチル酸二ナトリウム；ジソフェニン；ジビニルベンゼンスチレンコポリマー；Ｄｍｄｍヒダントイン；ドコサノール；ドクセートナトリウム；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ２８０－２５１６；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ３８７－２５１６；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８０－１１９６；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２０７０；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２１９４；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２２８７；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２２９６；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２８８８；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２９７９；エデト酸カルシウム二ナトリウム；エデト酸二ナトリウム；無水エデト酸二ナトリウム；エデト酸ナトリウム；エデト酸；卵リン脂質；エンツホン；エンツホンナトリウム；エピラクトース；エピテトラサイクリン塩酸塩；Ｅｓｓｅｎｃｅ Ｂｏｕｑｕｅｔ９２００；エタノールアミン塩酸塩；酢酸エチル；オレイン酸エチル；エチルセルロース；エチレングリコール；エチレン酢酸ビニルコポリマー；エチレンジアミン；エチレンジアミン二塩酸塩；エチレン－プロピレンコポリマー；エチレン－酢酸ビニルコポリマー（２８％酢酸ビニル）；エチレン－酢酸ビニルコポリマー（９％酢酸ビニル）；ヒドロキシステアリン酸エチルヘキシル；エチルパラベン；オイカリプトール；エキサメタジム；食用脂肪；固形脂肪；脂肪酸エステル；脂肪酸ペンタエリトリオールエステル；脂肪酸；クエン酸脂肪アルコール（Ｆａｔｔｙ Ａｌｃｏｈｏｌ Ｃｉｔｒａｔｅ）；脂肪アルコール；Ｆｄ＆ＣブルーＮｏ．１；Ｆｄ＆ＣグリーンＮｏ．３；Ｆｄ＆ＣレッドＮｏ．４；Ｆｄ＆ＣレッドＮｏ．４０；Ｆｄ＆ＣイエローＮｏ．１０（リストから除外）；Ｆｄ＆ＣイエローＮｏ．５；Ｆｄ＆ＣイエローＮｏ．６；塩化第二鉄；酸化第二鉄；香味料８９－１８６；香味料８９－２５９；香味料Ｄｆ－１１９；香味料Ｄｆ－１５３０；香味増強剤；香味料イチジク８２７１１８；香味料ラズベリーＰｆｃ－８４０７；医薬用香味料Ｒｈｏｄｉａ Ｎｏ．Ｒｆ４５１（Ｆｌａｖｏｒ Ｒｈｏｄｉａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｎｏ．Ｒｆ４５１）；フルオロクロロ炭化水素；ホルムアルデヒド；ホルムアルデヒド溶液；分留ヤシ油；芳香剤３９４９－５；芳香剤５２０ａ；芳香剤６．００７；芳香剤９１－１２２；芳香剤９１２８－Ｙ；芳香剤９３４９８ｇ；芳香剤マツバルサムＮｏ．５１２４；芳香剤Ｂｏｕｑｕｅｔ１０３２８；芳香剤Ｃｈｅｍｏｄｅｒｍ６４０１－Ｂ；芳香剤Ｃｈｅｍｏｄｅｒｍ６４１１；芳香剤Ｃｒｅａｍ Ｎｏ．７３４５７；芳香剤Ｃｓ－２８１９７；芳香剤Ｆｅｌｔｏｎ０６６ｍ；芳香剤Ｆｉｒｍｅｎｉｃｈ４７３７３；芳香剤Ｇｉｖａｕｄａｎ Ｅｓｓ９０９０／１ｃ；芳香剤Ｈ－６５４０；芳香剤Ｈｅｒｂａｌ１０３９６；芳香剤Ｎｊ－１０８５；芳香剤Ｐ Ｏ Ｆｌ－１４７；芳香剤Ｐａ５２８０５；芳香剤Ｐｅｒａ Ｄｅｒｍ Ｄ；芳香剤Ｒｂｄ－９８１９；芳香剤Ｓｈａｗ Ｍｕｄｇｅ Ｕ－７７７６；芳香剤Ｔｆ０４４０７８；芳香剤Ｕｎｇｅｒｅｒ Ｈｏｎｅｙｓｕｃｋｌｅ Ｋ２７７１；芳香剤Ｕｎｇｅｒｅｒ Ｎ５１９５；フルクトース；ガドリニウム酸化物；ガラクトース；ガンマシクロデキストリン；ゼラチン；架橋ゼラチン；ゲルフォームスポンジ；ジェランガム（低アシル）；Ｇｅｌｖａ７３７；ゲンチシン酸；ゲンチシン酸エタノールアミド；グルセプト酸ナトリウム；グルセプト酸ナトリウム二水和物；グルコノラクトン；グルクロン酸；グルタミン酸，Ｄｌ－；グルタチオン；グリセリン；硬化ロジンのグリセロールエステル；クエン酸グリセリル；イソステアリン酸グリセリル；ラウリン酸グリセリル；モノステアリン酸グリセリル；オレイン酸グリセリル；オレイン酸グリセリル／プロピレングリコール；パルミチン酸グリセリル；リシノール酸グリセリル；ステアリン酸グリセリル；ステアリン酸グリセリル－ラウレス－２３；ステアリン酸グリセリル／Ｐｅｇステアレート；ステアリン酸グリセリル／Ｐｅｇ－１００ステアレート；ステアリン酸グリセリル／Ｐｅｇ－４０ステアレート；ステアリン酸グリセリル－ステアルアミドエチルジエチルアミン；トリオレイン酸グリセリル；グリシン；グリシン塩酸塩；ジステアリン酸グリコール；ステアリン酸グリコール；グアニジン塩酸塩；グアーガム；ヘアコンディショナー（１８ｎ１９５－１ｍ）；ヘプタン；ヘタスターチ；ヘキシレングリコール；高密度ポリエチレン；ヒスチジン；ヒトアルブミンマイクロスフェア；ヒアルロン酸ナトリウム；炭化水素；可塑化炭化水素ゲル；塩酸；希塩酸；ヒドロコルチゾン；ヒドロゲルポリマー；過酸化


水素；硬化ヒマシ油；硬化パーム油；硬化パーム／パーム核油Ｐｅｇ－６エステル；硬化ポリブテン６３５－６９０；水酸化イオン；ヒドロキシエチルセルロース；ヒドロキシエチルピペラジンエタンスルホン酸；ヒドロキシメチルセルロース；ヒドロキシオクタコサニルヒドロキシステアレート；ヒドロキシプロピルセルロース；ヒドロキシプロピルメチルセルロース２９０６；ヒドロキシプロピル－ベータ－シクロデキストリン；ヒプロメロース２２０８（１５０００Ｍｐａ．Ｓ）；ヒプロメロース２９１０（１５０００Ｍｐａ．Ｓ）；ヒプロメロース；イミド尿素；ヨウ素；ヨードキサム酸；イオフェタミン塩酸塩；アイリッシュモス抽出物；イソブタン；イソセテス－２０；イソロイシン；アクリル酸イソオクチル；イソプロピルアルコール；イソステアリン酸イソプロピル；ミリスチン酸イソプロピル；ミリスチン酸イソプロピル－ミリスチルアルコール；パルミチン酸イソプロピル；ステアリン酸イソプロピル；イソステアリン酸；イソステアリルアルコール；等張食塩溶液；Ｊｅｌｅｎｅ；カオリン；カトンＣｇ；カトンＣｇＩＩ；ラクテート；乳酸；乳酸，Ｄｌ－；乳酸，Ｌ－；ラクトビオン酸；ラクトース；ラクトース一水和物；含水ラクトース；ラネス；ラノリン；ラノリンアルコール－鉱油；ラノリンアルコール；無水ラノリン；ラノリンコレステロール；ラノリン非イオン性誘導体；エトキシル化ラノリン；硬化ラノリン；塩化ラウラルコニウム；酸化ラウラミン；ラウルジモニウム加水分解動物コラーゲン；硫酸ラウレス；ラウレス－２；ラウレス－２３；ラウレス－４；ラウリン酸ジエタノールアミド；ラウリン酸ミリスチン酸ジエタノールアミド；ラウロイルサルコシン；乳酸ラウリル；硫酸ラウリル；ラベンデュラ・アングスチホリア（Ｌａｖａｎｄｕｌａ Ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ）花頂部；レシチン；無漂白レシチン；卵レシチン；硬化レシチン；硬化大豆レシチン；大豆レシチン；レモン油；ロイシン；レブリン酸；リドフェニン；軽油；軽油（８５Ｓｓｕ）；リモネン，（＋／－）－；リポコールＳｃ－１５；リジン；酢酸リジン；リジン一水和物；ケイ酸アルミニウムマグネシウム；ケイ酸アルミニウムマグネシウム水和物；塩化マグネシウム；硝酸マグネシウム；ステアリン酸マグネシウム；マレイン酸；マンニトール；マプロフィックス（Ｍａｐｒｏｆｉｘ）；メブロフェニン（Ｍｅｂｒｏｆｅｎｉｎ）；医療用接着剤改変型Ｓ－１５；医療用泡止剤Ａ－Ｆエマルジョン；メドロン酸二ナトリウム；メドロン酸；メグルミン；メントール；メタクレゾール；メタリン酸；メタンスルホン酸；メチオニン；メチルアルコール；メチルグルセス－１０；メチルグルセス－２０；セスキステアリン酸メチルグルセス－２０；セスキステアリン酸メチルグルコース；ラウリン酸メチル；メチルピロリドン；サリチル酸メチル；ステアリン酸メチル；メチルボロン酸；メチルセルロース（４０００Ｍｐａ．Ｓ）；メチルセルロース；メチルクロロイソチアゾリノン；メチレンブルー；メチルイソチアゾリノン；メチルパラベン；微結晶性ワックス；鉱油；モノおよびジグリセリド；クエン酸モノステアリル；モノチオグリセロール；マルチステロール（Ｍｕｌｔｉｓｔｅｒｏｌ）抽出物；ミリスチルアルコール；乳酸ミリスチル；ミリスチル－．ガンマ．－ピコリニウムクロリド；Ｎ－（カルバモイル－メトキシＰｅｇ－４０）－１，２－ジステアロイル－セファリンナトリウム；Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド；ナイアシンアミド；ニオキシム；硝酸；窒素；ノノキシノールヨード；ノノキシノール－１５；ノノキシノール－９；ノルフルラン；オートミール；オクタデセン－１／マレイン酸コポリマー；オクタン酸；オクチサレート；オクトキシノール－１；オクトキシノール－４０；オクトキシノール－９；オクチルドデカノール；オクチルフェノールポリメチレン；オレイン酸；オレス－１０／オレス－５；オレス－２；オレス－２０；オレイルアルコール；オレイン酸オレイル；オリーブ油；オキシドロン酸二ナトリウム；オキシキノリン；パーム核油；パルミタミンオキシド；パラベン；パラフィン；白色軟質パラフィン；香料Ｃｒｅｍｅ４５／３；ピーナッツ油；精製ピーナッツ油；ペクチン；Ｐｅｇ６－３２ステアレート／ステアリン酸グリコール；Ｐｅｇ植物油；Ｐｅｇ－１００ステアレート；Ｐｅｇ－１２ラウリン酸グリセリル；Ｐｅｇ－１２０ステアリン酸グリセリル；Ｐｅｇ－１２０ジオレイン酸メチルグルコース；Ｐｅｇ－１５コカミン；Ｐｅｇ－１５０ジステアレート；Ｐｅｇ－２ステアレート；Ｐｅｇ－２０ソルビタンイソステアレート；Ｐｅｇ－２２メチルエーテル／ドデシルグリコールコポリマー；Ｐｅｇ－２５プロピレングリコールステアレート；Ｐｅｇ－４ジラウレート；Ｐｅｇ－４ラウレート；Ｐｅｇ－４０ヒマシ油；Ｐｅｇ－４０ソルビタンジイソステアレート；Ｐｅｇ－４５／ドデシルグリコールコポリマー；Ｐｅｇ－５オレアート；Ｐｅｇ－５０ステアレート；Ｐｅｇ－５４硬化ヒマシ油；Ｐｅｇ－６イソステアレート；Ｐｅｇ－６０ヒマシ油；Ｐｅｇ－６０硬化ヒマシ油；Ｐｅｇ－７メチルエーテル；Ｐｅｇ－７５ラノリン；Ｐｅｇ－８ラウレート；Ｐｅｇ－８ステアレート；Ｐｅｇｏｘｏｌ７ステアレート；ペンタデカラクトン；ペンタエリトリトールココエート（Ｐｅｎｔａｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ Ｃｏｃｏａｔｅ）；ペンテト酸五ナトリウム；ペンテト酸カルシウム三ナトリウム；ペンテト酸；ハッカ油；ペルフルトレン；香料２５６７７；香料Ｂｏｕｑｕｅｔ；香料Ｅ－１９９１；香料Ｇｄ５６０４；香料Ｔａｎａ９０／４２Ｓｃｂａ；香料Ｗ－１９５２－１；ワセリン；白色ワセリン；石油蒸留物；フェノール；液化フェノール；フェノニップ（Ｐｈｅｎｏｎｉｐ）；フェノキシエタノール；フェニルアラニン；フェニルエチルアルコール；酢酸フェニル水銀；硝酸フェニル水銀；卵ホスファチジルグリセロール；リン脂質；卵リン脂質；ホスホリポン９０ｇ；リン酸；松葉油（パイナス・シルヴェストリス（Ｐｉｎｕｓ Ｓｙｌｖｅｓｔｒｉｓ））；ピペラジン六水和物；プラスチベース－５０ｗ；ポラクリリン；塩化ポリドロニウム；ポロキサマー１２４；ポロキサマー１８１；ポロキサマー１８２；ポロキサマー１８８；ポロキサマー２３７；ポロキサマー４０７；ポリ（ビス（Ｐ－カルボキシフェノキシ）プロパン無水物）：セバシン酸；末端ブロック化ポリ（ジメチルシロキサン／メチルビニルシロキサン／メチルヒドロゲンシロキサン）ジメチルビニルまたはジメチルヒドロキシまたはトリメチル；ポリ（Ｄｌ－乳酸－Ｃｏ－グリコール酸）、（５０：５０；ポリ（Ｄｌ－乳酸－Ｃｏ－グリコール酸）、エチルエステル終端、（５０：５０；ポリアクリル酸（２５００００Ｍｗ））；ポリブテン（１４００Ｍｗ）；ポリカルボフィル；ポリエステル；ポリエステルポリアミンコポリマー；ポリエステルレーヨン；ポリエチレングリコール１０００；ポリエチレングリコール１４５０；ポリエチレングリコール１５００；ポリエチレングリコール１５４０；ポリエチレングリコール２００；ポリエチレングリコール３００；ポリエチレングリコール３００－１６００；ポリエチレングリコール３３５０；ポリエチレングリコール４００；ポリエチレングリコール４０００；ポリエチレングリコール５４０；ポリエチレングリコール６００；ポリエチレングリコール６０００；ポリエチレングリコール８０００；ポリエチレングリコール９００；酸化第二鉄ブラック含有高密度ポリエチレン（Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ Ｈｉｇｈ Ｄｅｎｓｉｔｙ Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｆｅｒｒｉｃ Ｏｘｉｄｅ Ｂｌａｃｋ）（＜１％））；硫酸バリウム含有低密度ポリエチレン（Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ Ｌｏｗ Ｄｅｎｓｉｔｙ Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｂａｒｉｕｍ Ｓｕｌｆａｔｅ）（２０～２４％）；ポリエチレンＴ；テレフタル酸ポリエチレン；ポリグラクチン；ポリグルセリル－３オレアート；ポリグルセリル－４オレアート；メタクリル酸ポリヒドロキシエチル；ポリイソブチレン；ポリイソブチレン（１１０００００Ｍｗ）；ポリイソブチレン（３５０００Ｍｗ）；ポリイソブチレン１７８－２３６；ポリイソブチレン２４１－２９４；ポリイソブチレン３５－３９；低分子量ポリイソブチレン；中分子量ポリイソブチレン；ポリイソブチレン／ポリブテン接着剤；ポリラクチド；ポリオール；ポリオキシエチレン－ポリオキシプロピレン１８００；ポリオキシエチレンアルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレンプロピレン；ポリオキシル２０セトステアリルエーテル；ポリオキシル３５ヒマシ油；ポリオキシル４０硬化ヒマシ油；ステアリン酸ポリオキシル４０；ステアリン酸ポリオキシル４００；パルミトステアリン酸ポリオキシル６およびポリオキシル３２；ジステアリン酸ポリオキシル；ポリオキシルステアリン酸グリセリル；ポリオキシルラノリン；パルミチン酸ポリオキシル；ステアリン酸ポリオキシル；ポリプロピレン；ポリプロピレングリコール；ポリクオタニウム－１０；ポリクオタニウム－７（７０／３０アクリルアミド／Ｄａｄｍａｃ；ポリシロキサン；ポリソルベート２０；ポリソルベート４０；ポリソルベート６０；ポリソルベート６５；ポリソルベート８０；ポリウレタン；ポリ酢酸ビニル；ポリビニルアルコール；ポリ塩化ビニル；ポリ塩化ビニル－ポリ酢酸ビニルコポリマー；ポリビニルピリジン；ケシ油；炭酸カリウム；酢酸カリウム；カリウムミョウバン；炭酸水素カリウム；亜硫酸水素カリウム；塩化カリウム；クエン酸カリウム；水酸化カリウム；メタ重亜硫酸カリウム；リン酸二カリウム；リン酸二水素カリウム；カリウム石鹸；ソルビン酸カリウム；ポビドンアクリレートコポリマー；ポビドンヒドロゲル；ポビドンＫ１７；ポビドンＫ２５；ポビドンＫ２９／３２；ポビドンＫ３０；ポビドンＫ９０；ポビドンＫ９０ｆ；ポビドン／エイコサエンコポリマー；ポビドン；Ｐｐｇ－１２／Ｓｍｄｉコポリマー；Ｐｐｇ－１５ステアリルエーテル；Ｐｐｇ－２０メチルグルコースエーテルジステアレート；Ｐｐｇ－２６オレアート；プロダクトワット（Ｐｒｏｄｕｃｔ Ｗａｔ）；プロリン；プロムルゲン（Ｐｒｏｍｕｌｇｅｎ）Ｄ；プロムルゲンＧ；プロパン；噴霧剤Ａ－４６；没食子酸プロピル；炭酸プロピレン；プロピレングリコール；プロピレングリコールジアセテート；プロピレングリコールジカプリレート；プロピレングリコールモノラウレート；プロピレングリコールモノパルミトステアレート；プロピレングリコールパルミトステアレート；プロピレングリコールリシノレレート；プロピレングリコール／ジアゾリジニル尿素／メチルパラベン／プロピルパルベン；プロピルパラベン；硫酸プロタミン；タンパク質加水分解物；Ｐｖｍ／Ｍａコポリマー；クアテルニウム－１５；クアテルニウム－１５シス型；クアテルニウム－５２；Ｒａ－２３９７；Ｒａ－３０１１；サッカリン；サッカリンナトリウム；無水サッカリンナトリウム；サフラワー油；Ｓｄアルコール３ａ；Ｓｄアルコール４０；Ｓｄアルコール４０－２；Ｓｄアルコール４０ｂ；セピネオ（Ｓｅｐｉｎｅｏ）Ｐ６００；セリン；ゴマ油；シアバター；Ｓｉｌａｓｔｉｃ商標医療用管材料；Ｓｉｌａｓｔｉｃ医療用接着剤、シリコーンＡ型；歯科用シリカ；ケイ素；二酸化ケイ素；コロイド状二酸化ケイ素；シリコーン；シリコーン接着剤４１０２；シリコーン接着剤４５０２；シリコーン接着剤Ｂｉｏ－Ｐｓａ Ｑ７－４２０１；シリコーン接着剤Ｂｉｏ－Ｐｓａ Ｑ７－４３０１；シリコーンエマルジョン；シリコーン／ポリエステルフィルムストリップ；シメチコン；シメチコンエマルジョン；Ｓｉｐｏｎ Ｌｓ ２０ｎｐ；ソーダ灰；酢酸ナトリウム；無水酢酸ナトリウム；アルキル硫酸ナトリウム；アスコルビン酸ナトリウム；安息香酸ナトリウム；重炭酸ナトリウム；重硫酸ナトリウム；亜硫酸水素ナトリウム；硼酸ナトリウム；硼酸ナトリウム十水化物；炭酸ナトリウム；炭酸ナトリウム十水化物；炭酸ナトリウム一水和物；セトステアリル硫酸ナトリウム；塩素酸ナトリウム；塩化ナトリウム；塩化ナトリウム注射剤；静菌性塩化ナトリウム注射剤；コレステリル硫酸ナトリ


ウム；クエン酸ナトリウム；ココイルサルコシンナトリウム；デゾキシコール酸ナトリウム；亜ジチオン酸ナトリウム；ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム；ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム；グルコン酸ナトリウム；水酸化ナトリウム；次亜塩素酸ナトリウム；ヨウ化ナトリウム；乳酸ナトリウム；乳酸ナトリウム，Ｌ－；ラウレス－２硫酸ナトリウム；ラウレス－３硫酸ナトリウム；ラウレス－５硫酸ナトリウム；ラウロイルサルコシンナトリウム；ラウリル硫酸ナトリウム；ラウリルスルホ酢酸ナトリウム；メタ重亜硫酸ナトリウム；硝酸ナトリウム；リン酸ナトリウム；リン酸ナトリウム二水和物；リン酸水素ナトリウム；無水リン酸水素ナトリウム；リン酸水素ナトリウム二水和物；リン酸水素ナトリウム十二水和物；リン酸水素ナトリウム七水和物；リン酸一ナトリウム；無水リン酸一ナトリウム；リン酸一ナトリウム二水和物；リン酸一ナトリウム一水和物；ポリアクリル酸ナトリウム（２５０００００Ｍｗ）；ピロリン酸ナトリウム；ピロリドンカルボン酸ナトリウム；デンプングリコール酸ナトリウム；琥珀酸ナトリウム六水化物；硫酸ナトリウム；無水硫酸ナトリウム；硫酸ナトリウム十水化物；亜硫酸ナトリウム；スルホコハク酸ナトリウム化ウンデシレンモノアルキロールアミド（Ｓｏｄｉｕｍ Ｓｕｌｆｏｓｕｃｃｉｎａｔｅｄ Ｕｎｄｅｃｙｃｌｅｎｉｃ Ｍｏｎｏａｌｋｙｌｏｌａｍｉｄｅ）；酒石酸ナトリウム；チオグリコール酸ナトリウム；チオマリン酸ナトリウム；チオ硫酸ナトリウム；無水チオ硫酸ナトリウム；トリメタリン酸ナトリウム；キシレンスルホン酸ナトリウム；Ｓｏｍａｙ４４；ソルビン酸；ソルビタン；イソステアリン酸ソルビタン；モノラウリン酸ソルビタン；モノオレイン酸ソルビタン；モノパルミチン酸ソルビタン；モノステアリン酸ソルビタン；セスキオレイン酸ソルビタン；トリオレイン酸ソルビタン；トリステアリン酸ソルビタン；ソルビトール；ソルビトール溶液；大豆粉；大豆油；スペアミント油；鯨ろう；スクアラン；安定化オキシクロロ錯体；２－エチルヘキサン酸第一スズ；塩化第一スズ；無水塩化第一スズ；フッ化第一スズ；酒石酸第一スズ；デンプン；アルファ化デンプン１５００；トウモロコシデンプン；塩化ステアラルコニウム；ステアラルコニウムヘクトライト／炭酸プロピレン；ステアルアミドエチルジエチルアミン；ステアレス－１０；ステアレス－１００；ステアレス－２；ステアレス－２０；ステアレス－２１；ステアレス－４０；ステアリン酸；ステアリン酸ジエタノールアミド；ステアロキシトリメチルシラン；ステアルトリモニウム加水分解動物コラーゲン；ステアリルアルコール；吸入用滅菌水；スチレン／イソプレン／スチレンブロックコポリマー；サクシマー；コハク酸；スクラロース；スクロース；ジステアリン酸スクロース；スクロースポリエステル；スルファセタミドナトリウム；スルホブチルエーテル．ベータ．－シクロデキストリン；二酸化硫黄；硫酸；亜硫酸；Ｓｕｒｆａｃｔｏｌ Ｑｓ；タガトース，Ｄ－；タルク；トール油；獣脂グリセリド；酒石酸；酒石酸，Ｄｌ－；テノックス；テノックス－２；Ｔｅｒｔ－ブチルアルコール；Ｔｅｒｔ－ブチルヒドロペルオキシド；Ｔｅｒｔ－ブチルヒドロキノン；テトラキス（２－メトキシイソブチルイソシアニド）銅（Ｉ）テトラフルオロボレート；オルトケイ酸テトラプロピル；テトロホスミン；テオフィリン；チメロサール；トレオニン；チモール；スズ；二酸化チタン；トコフェロール；トコフェルソラン；完全非経口栄養剤、脂質エマルジョン；トリアセチン；トリカプリリン；トリクロロモノフルオロメタン；トリデセス－１０；ラウリル硫酸トリエタノールアミン；トリフルオロ酢酸；中鎖トリグリセリド；トリヒドロキシステアリン；トリラネス－４リン酸（Ｔｒｉｌａｎｅｔｈ－４ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）；トリラウレス－４リン酸；クエン酸三ナトリウム二水和物；Ｈｅｄｔａ三ナトリウム；トリトン７２０；トリトンＸ－２００；トロラミン；トロマンタジン；トロメタミン（ＴＲＩＳ）；トリプトファン；チロキサポール；チロシン；ウンデシレン酸；ユニオン７６ Ａｍｓｃｏ－Ｒｅｓ６０３８；尿素；バリン；植物油；硬化植物油グリセリド；硬化植物油；ベルセタミド；Ｖｉｓｃａｒｉｎ；ビスコース／コットン；ビタミンＥ；乳化ワックス；Ｗｅｃｏｂｅｅ Ｆｓ；白色セレシンワックス；白ろう；キサンタンガム；亜鉛；酢酸亜鉛；炭酸亜鉛；塩化亜鉛；および酸化亜鉛。
本明細書で開示されるＡＡＶ粒子の医薬組成物製剤は、カチオンまたはアニオンを含み得る。一実施形態において、製剤は、限定はされないが、Ｚｎ２＋、Ｃａ２＋、Ｃｕ２＋、Ｍｎ２＋、Ｍｇ＋およびこれらの組合せなどの、金属カチオンを含む。非限定的な例として、製剤は、金属カチオンとのポリマーおよび錯体を含み得る（例えば、米国特許第６，２６５，３８９号明細書および同第６，５５５，５２５号明細書を参照のこと。この各々の内容は全体として参照により本明細書に援用される）。
また、本発明の製剤は、１つ以上の薬学的に許容される塩を含み得る。本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容可能な塩」は、開示される化合物の誘導体を指し、ここで親化合物は、既存の酸または塩基部分からその塩形態への変換（例えば、遊離塩基基を好適な有機酸と反応させることによる）によって修飾される。薬学的に許容可能な塩の例としては、限定はされないが、アミン類などの塩基性残基の鉱酸塩または有機酸塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが挙げられる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、酢酸、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、カンファー酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトン酸塩、ヘキサン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなど、ならびに非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、およびアミン陽イオン、例えば、限定はされないが、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどが挙げられる。本開示の薬学的に許容可能な塩には、例えば非毒性無機酸または有機酸から形成される親化合物の従来の非毒性塩が含まれる。
本開示の薬学的に許容可能な塩は、従来の化学的方法により塩基または酸部分を含有する親化合物から合成することができる。概して、かかる塩は、遊離酸または塩基形態のこれらの化合物と、水中または有機溶媒中、またはこれら２つの混合物中（概して、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体が好ましい）にある化学量論量の適切な塩基または酸とを反応させることにより調製し得る。好適な塩の一覧については、「レミントンの薬学科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）」、第１７版、マック・パブリッシング・カンパニー（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ）、ペンシルベニア州イーストン（Ｅａｓｔｏｎ）、１９８５年、ｐ．１４１８、「薬学的塩：特性、選択、および使用（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ）」、Ｐ・Ｈ・シュタール（Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ）およびＣ・Ｇ・ウェルムス（Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ）編、ワイリー－ブイシーエイチ（Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ）、２００８年、およびベルジュ（Ｂｅｒｇｅ）ら著、ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンス（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ）、第６６巻、ｐ．１～１９、１９７７年が参照される；この各々の内容は全体として参照により本明細書に援用される。
用語「薬学的に許容可能な溶媒和物」は、本明細書で使用されるとき、好適な溶媒の分子が結晶格子に取り込まれている本発明の化合物を意味する。好適な溶媒は、投与される投薬量で生理学的に忍容可能である。溶媒和物は、有機溶媒、水、またはこれらの混合物を含む溶液から結晶化、再結晶化、または沈殿によって調製されてもよい。好適な溶媒の例は、エタノール、水（例えば、一水和物、二水和物、および三水和物）、Ｎ－メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ’－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ’－ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン（ＤＭＥＵ）、１，３－ジメチル－３，４，５，６－テトラヒドロ－２－（１Ｈ）－ピリミジノン（ＤＭＰＵ）、アセトニトリル（ＡＣＮ）、プロピレングリコール、酢酸エチル、ベンジルアルコール、２－ピロリドン、安息香酸ベンジルなどである。水が溶媒であるとき、その溶媒和物は「水和物」と称される。
ＩＩＩ．投与および用量設定
投与
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、対象の神経学的疾患の症状を低減するための治療有効量（例えば、公知の評価方法を使用して決定される）で対象に（例えば、対象のＣＮＳに）投与されてもよい。
本発明のＡＡＶ粒子は、治療上有効な結果をもたらす任意の送達経路によって投与されてもよい。それらとしては、限定はされないが、経腸（腸の中）、胃腸、硬膜上（硬膜の中）、経口（口を介して）、経皮、大脳内（大脳の中）、脳室内（脳室の中）、軟膜下（軟膜とＣＮＳ実質との間）、頸動脈内（頸動脈の中）、皮膚上（皮膚への塗布）、皮内（皮膚それ自体の中）、皮下（皮膚の下）、鼻腔投与（鼻を通じて）、静脈内（静脈の中）、静脈内ボーラス、静脈内点滴、動脈内（動脈の中）、全身性、筋肉内（筋肉の中）、心臓内（心臓の中）、骨内注入（骨髄の中）、髄腔内（脊柱管の中）、実質内（脳組織の中）、腹腔内（腹膜への注入または注射）、膀胱内注入、硝子体内（眼を通じて）、海綿体内注射（病的腔の中）、腔内（陰茎の基部の中）、腟内投与、子宮内、羊膜外投与、経皮（全身分布のためのインタクトな皮膚を通じた拡散）、経粘膜（粘膜を通じた拡散）、経腟、インサフレーション（鼻から吸い込む）、舌下、唇下、浣腸、点眼薬（結膜上）、または点耳薬で、耳介（耳内または耳を介して）、頬側（頬の方に向けて）、結膜、皮膚、歯（１本または複数の歯に対して）、電気浸透、子宮頚管内、副鼻腔内、気管内、体外、血液透析、浸潤、間質内、腹腔内、羊膜内、関節内、胆管内、気管支内、嚢内、軟骨内（軟骨の範囲内）、仙骨内（馬尾（ｃａｕｄａ ｅｑｕｉｎｅ）の範囲内）、大槽内（大槽小脳延髄槽の範囲内）、角膜内（角膜の範囲内）、歯冠内、冠内（冠動脈の範囲内）、海綿体内（ｉｎｔｒａｃｏｒｐｏｒｕｓ ｃａｖｅｒｎｏｓｕｍ）（陰茎海綿体（ｃｏｒｐｏｒｕｓ ｃａｖｅｒｎｏｓａ）の可膨張性腔の範囲内）、椎間板内（椎間板の範囲内）、管内（腺管の範囲内）、十二指腸内（十二指腸の範囲内）、硬膜内（硬膜の範囲内または真下）、表皮内（表皮に対して）、食道内（食道に対して）、胃内（胃の範囲内）、歯肉内（歯肉の範囲内）、回腸内（小腸の遠位部分の範囲内）、病巣内（局所病変の範囲内、またはそこに直接導入される）、管腔内（管の管腔の範囲内）、リンパ内（リンパの範囲内）、髄内（骨の髄腔の範囲内）、髄膜内（髄膜の範囲内）、心筋内（心筋の範囲内）、眼内（眼の範囲内）、卵巣内（卵巣の範囲内）、心膜内（心膜の範囲内）、胸膜内（胸膜の範囲内）、前立腺内（前立腺の範囲内）、肺内（肺、またはその気管支の範囲内）、洞内（鼻洞または眼窩周囲洞の範囲内）、脊髄内（脊柱の範囲内）、滑液嚢内（関節の滑膜腔の範囲内）、腱内（腱の範囲内）、精巣内（精巣の範囲内）、髄腔内（脳脊髄軸の任意のレベルにおける脳脊髄液の範囲内）、胸腔内（胸郭の範囲内）、細管内（臓器の細管の範囲内）、腫瘍内（腫瘍の範囲内）、鼓室内（中耳（ａｕｒｕｓ ｍｅｄｉａ）の範囲内）、血管内（１つまたは複数の血管の範囲内）、脳室内（脳室の範囲内）、イオントフォレシス（電流を用いるもので、可溶性塩のイオンが体の組織に移動する）、潅注（開放創または体腔を浸すまたはフラッシュする）、喉頭（喉頭に対して直接）、経鼻胃（鼻を通じて胃の中に）、密封包帯療法（局所経路投与、これは次に包帯で覆われ、包帯がその区域を閉塞する）、眼（外眼部に対して）、中咽頭（口および咽頭に対して直接）、非経口、経皮、関節周囲、硬膜外、神経周囲、歯周、直腸、呼吸器（局所または全身作用のため経口的または鼻腔的に吸入することにより気道の範囲内に）、球後（橋の後ろまたは眼球の後ろ）、軟部組織、くも膜下、結膜下、粘膜下、局所、経胎盤（胎盤を通じてまたは越えて）、経気管（気管の壁を通じて）、経鼓室（鼓室を越えてまたは通じて）、尿管（尿管に対して）、尿道（尿道に対して）、腟、仙骨ブロック、診断的、神経ブロック、胆管灌流、心灌流、フォトフェレーシスおよび脊髄が挙げられる。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子およびＡＡＶ粒子を含む組成物は、それらが血液脳関門、脈管障壁、または他の上皮性障壁を越えることを可能にするように投与してもよい。本発明のＡＡＶ粒子は任意の好適な形態で、液体溶液または懸濁液、液体溶液または液体溶液中の懸濁液に好適な固体形態のいずれとして投与されてもよい。ＡＡＶ粒子は、任意の適切なかつ薬学的に許容可能な賦形剤と共に製剤化されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は単一経路投与によって対象に送達されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は多部位投与経路によって対象に送達されてもよい。ＡＡＶ粒子には、２、３、４、５または５より多い部位に投与されてもよい。
一実施形態において、対象には、本発明のＡＡＶ粒子がボーラス注入を用いて投与されてもよい。
一実施形態において、対象には、本発明のＡＡＶ粒子が、数分間、数時間または数日間の時間をかけた徐放送達を用いて投与されてもよい。注入速度は、対象、分布、製剤または別の送達パラメータに応じて変更されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、筋肉内送達経路によって送達されてもよい。（例えば、米国特許第６５０６３７９号明細書を参照のこと。その内容は全体として参照により本明細書に援用される）。筋肉内投与の非限定的な例としては、静脈内注射または皮下注射が挙げられる。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、眼内送達経路によって送達されてもよい。眼内投与の非限定的な例としては、硝子体内注射が挙げられる。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、末梢注射によって対象に投与されてもよい。末梢注射の非限定的な例としては、腹腔内、筋肉内、静脈内、結膜、または関節注射が挙げられる。当該技術分野では、ＡＡＶ粒子の末梢投与は、中枢神経系へと、例えば運動ニューロンへと輸送され得ることが開示された（例えば、米国特許出願公開第２０１００２４０７３９号明細書；および同第２０１００１３０５９４号明細書。これらの各々の内容は全体として参照により本明細書に援用される）。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＣＳＦ経路への注射によって送達されてもよい。ＣＳＦ経路への送達の非限定的な例としては、髄腔内および脳室内投与が挙げられる。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、全身性送達によって送達されてもよい。非限定的な例として、全身性送達は、血管内投与によるものであってもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、頭蓋内送達によって対象に投与されてもよい（例えば、米国特許第８，１１９，６１１号明細書を参照のこと。この内容は全体として参照により本明細書に援用される）。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、注射によって投与されてもよい。非限定的な例として、本発明のＡＡＶ粒子は、注射によって対象に投与されてもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、筋肉注射によって投与されてもよい。非限定的な例として、本発明のＡＡＶ粒子は、筋肉投与によって対象に投与されてもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、筋肉内投与によって投与されてもよい。非限定的な例として、本発明のＡＡＶ粒子は、筋肉内投与によって対象に投与されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、対象に投与され、対象の筋肉に形質導入する。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、筋肉内投与によって対象に投与される。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、実質内注射によって投与されてもよい。非限定的な例として、本発明のＡＡＶ粒子は、実質内注投与によって対象に投与されてもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、静脈内投与によって投与されてもよい。非限定的な例として、本発明のＡＡＶ粒子は、静脈内投与によって対象に投与されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、静脈内送達によって投与されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、頸動脈内送達により投与してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、単一用量静脈内送達によって投与されてもよい。非限定的な例として、単一用量静脈内送達は、１回限りの治療であってもよい。神経学的疾患の状況では、単一用量静脈内送達は、神経学的疾患および／または関連症状を有する対象の持久的軽減を生じさせることができる。軽減は、限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９分間または５９分間超など、何分間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８時間、または４８時間超など、何時間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日間、または３１日間超など、何日間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週間、または１６週間超など、何週間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヵ月間、または２４ヵ月間超など、何ヵ月間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５年間、または１５年間超など、何年間も継続してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、ＤＲＧ侵害受容ニューロンへの静脈内送達によって投与されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、ＤＲＧ侵害受容ニューロンへの単一用量静脈内送達によって投与されてもよい。非限定的な例として、単一用量静脈内送達は、１回限りの治療であってもよい。神経学的疾患の状況では、単一用量静脈内送達は、神経学的疾患および／または関連症状を有する対象の持久的軽減を生じさせることができる。軽減は、限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９分間または５９分間超など、何分間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８時間、または４８時間超など、何時間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日間、または３１日間超など、何日間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週間、または１６週間超など、何週間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヵ月間、または２４ヵ月間超など、何ヵ月間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５年間、または１５年間超など、何年間も継続してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、髄腔内注射によって投与されてもよい。非限定的な例として、本発明のＡＡＶ粒子は、髄腔内注射によって投与されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、脊髄運動ニューロンおよび／またはアストロサイトに形質導入するために治療有効量で大槽に投与されてもよい。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、髄腔内投与されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、髄腔内注入を使用して、脊髄運動ニューロンおよび／またはアストロサイトに形質導入するために治療有効量で投与されてもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、単一用量髄腔内注射によって投与されてもよい。非限定的な例として、単一用量髄腔内注射は、１回限りの治療であってもよい。神経学的疾患の状況では、単一用量髄腔内注射は、神経学的疾患および／または関連症状を有する対象の持久的軽減を生じさせることができる。軽減は、限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９分間または５９分間超など、何分間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８時間、または４８時間超など、何時間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日間、または３１日間超など、何日間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週間、または１６週間超など、何週間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヵ月間、または２４ヵ月間超など、何ヵ月間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５年間、または１５年間超など、何年間も継続してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、ＤＲＧ侵害受容ニューロンへの髄腔内注射によって投与されてもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、ＤＲＧ侵害受容ニューロンへの単一用量髄腔内注射によって投与されてもよい。非限定的な例として、単一用量髄腔内注射は、１回限りの治療であってもよい。神経学的疾患の状況では、単一用量髄腔内注射は、神経学的疾患および／または関連症状を有する対象の持久的軽減を生じさせることができる。軽減は、限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９分間または５９分間超など、何分間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８時間、または４８時間超など、何時間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日間、または３１日間超など、何日間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週間、または１６週間超など、何週間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヵ月間、または２４ヵ月間超など、何ヵ月間も継続してもよく；限定ではないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５年間、または１５年間超など、何年間も継続してもよい。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、Ｃ１における髄腔内（ＩＴ）注入によって投与される。注入は、１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５時間または１５時間超であってもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、実質内注射によって投与されてもよい。非限定的な例として、本発明のＡＡＶ粒子は、実質内注射によって対象に投与されてもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、実質内注射および髄腔内注射によって投与されてもよい。非限定的な例として、本発明のＡＡＶ粒子は、実質内注射および髄腔内注射によって投与されてもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、皮下注射によって投与されてもよい。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、皮下注射によって対象に投与されてもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、局所的に投与されてもよい。非限定的な例として、本発明のＡＡＶ粒子は、局所的に対象に投与されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、脳内への直接注射によって送達されてもよい。非限定的な例として、脳送達は、線条体内投与によるものであってもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、線条体内注射によって投与されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、線条体内注射および本明細書に記載される別の投与経路によって投与されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、２つ以上の投与経路によって送達されてもよい。組合せ投与の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、髄腔内および脳室内投与によって、または静脈内および実質内投与によって送達されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、神経学的疾患を有する対象の機能および／または生存を改善するために治療有効量でＣＮＳに投与されてもよい。非限定的な例として、ベクターは、静脈内に投与されてもよい。
ＡＡＶ粒子は、「治療有効」量で、すなわち、疾患に関連する少なくとも１つの症状を軽減および／もしくは予防するのに十分な、または対象の状態の改善をもたらすのに十分な量で投与されてもよい。
一実施形態において、多部位送達のために、脊柱の２つ以上の部位にカテーテルが留置されてもよい。ＡＡＶ粒子は、連続および／またはボーラス注入で送達されてもよい。各送達部位は異なる投薬レジメンであってもよく、または同じ投薬レジメンを各送達部位に使用してもよい。非限定的な例として、送達部位は、頚部領域および腰部領域にあってもよい。別の非限定的な例として、送達部位は、頚部領域にあってもよい。別の非限定的な例として、送達部位は、腰部領域にあってもよい。
一実施形態では、対象は、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子を送達する前に、脊柱の解剖学的特徴および病理学的特徴について分析されてもよい。非限定的な例として、脊柱側弯症を有する対象は、脊柱側弯症を有してない対象と比較して、異なる投薬レジメンおよび／またはカテーテル留置を有してもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子送達中の対象の脊柱の向きは、地面に対して垂直であってもよい。
別の実施形態において、ＡＡＶ粒子送達中の対象の脊柱の向きは、地面に対して水平であってもよい。
一実施形態において、対象の脊柱は、ＡＡＶ粒子送達中、地面に対して傾いていてもよい。地面に対する対象の脊柱の角度は、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０または１８０度であってもよい。
一実施形態において、送達方法および継続期間は、脊髄での幅広い形質導入を提供するように選択される。非限定的な例として、脊髄の吻側－尾側の長さに沿って幅広い形質導入を提供するために、髄腔内送達が使用される。別の非限定的な例として、多部位注入は、脊髄の吻側－尾側の長さに沿ってより均一な形質導入を提供する。更に別の非限定的な例として、長期注入は、脊髄の吻側－尾側の長さに沿ってより均一な形質導入を提供する。
非経口および注射可能投与
一部の実施形態において、本発明の医薬組成物、ＡＡＶ粒子は、非経口投与されてもよい。経口および非経口投与用の液体剤形としては、限定ではないが、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁剤、シロップ剤、および／またはエリキシル剤が挙げられる。液体剤形は、活性成分に加えて、例えば、水または他の溶媒などの当該技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、およびそれらの混合物などの可溶化剤および乳化剤を含み得る。経口組成物は、不活性希釈剤の他に、湿潤剤、乳化および懸濁化剤、甘味料、香味料、および／または香料剤などのアジュバントを含むことができる。非経口投与の特定の実施形態において、組成物は、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（登録商標）、アルコール、油、変性油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、および／またはそれらの組合せなどの可溶化剤と混合される。他の実施形態において、ヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤が含まれる。
注射可能調製物、例えば無菌注射可能水性または油性懸濁剤は、公知の技術に従って好適な分散剤、湿潤剤、および／または懸濁化剤を使用して製剤化することができる。無菌注射可能調製物は、無毒性で非経口的に許容される希釈剤および／または溶媒、例えば１，３－ブタンジオール中の無菌注射可能液剤、懸濁剤、および／またはエマルジョンであってもよい。用いることができる許容される媒体および溶媒の中には、水、リンゲル溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、および等張食塩溶液がある。無菌固定油が、溶媒または懸濁化媒体として従来用いられる。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の非刺激性固定油を用いることができる。オレイン酸などの脂肪酸を、注射剤の調製に使用することができる。
注射可能製剤は、例えば、細菌保持フィルターによるろ過によって、および／または使用前に滅菌水もしくは他の無菌注射可能媒体に溶解または分散することができる無菌固形組成物の形態の滅菌剤を組み込むことによって、滅菌することができる。
活性成分の効果を延長させるために、皮下または筋肉内注射からの活性成分の吸収を遅延させることが望ましいことが多い。これは、不良な水溶解度を有する結晶性または非晶性物質の液体懸濁剤の使用によって達成されてもよい。活性成分の吸収速度は、ひいては結晶サイズおよび結晶性形態に依存し得る溶解速度に依存する。あるいは、非経口投与される薬物形態の遅延吸収は、薬物を油媒体に溶解または懸濁することによって達成される。注射可能デポー形態は、ポリラクチド－ポリグリコリドなどの生分解性ポリマーに薬物のマイクロ封入マトリックスを形成することにより製作される。薬物のポリマーに対する比および用いられる特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射可能製剤は、薬物を、体内組織と適合性であるリポソームまたはマイクロエマルジョンに捕捉することによって調製される。
デポー投与
本明細書に記載されるように、一部の実施形態において、本発明の医薬組成物、ＡＡＶ粒子は、持続放出のためにデポーで製剤化される。一般に、特定の臓器または組織（「標的組織」）が投与の標的とされる。
本発明の一部の態様において、本発明の医薬組成物、ＡＡＶ粒子は、標的組織内にまたは近傍に空間的に保持される。標的組織（１つ以上の標的細胞を含む）を、医薬組成物、ＡＡＶ粒子と、それらが標的組織に実質的に保持される、つまり、組成物の少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９．９、９９．９９％、または９９．９９％超が、標的組織に保持されるような条件下で接触させることによって、医薬組成物、ＡＡＶ粒子を哺乳類対象の標的組織に提供するための方法が提供される。有利には、保持は、１つ以上の標的細胞に進入する医薬組成物、およびＡＡＶ粒子の量を測定することによって決定される。例えば、対象に投与された医薬組成物、ＡＡＶ粒子の少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．９％、９９．９９％または９９．９９％超が、投与後の期間に細胞内に存在する、例えば哺乳類対象への筋肉内注射は、本発明の医薬組成物、ＡＡＶ粒子および１つ以上のトランスフェクション試薬を含む水性組成物を使用して実施してもよく、保持は、標的細胞に存在する医薬組成物、ＡＡＶ粒子の量を測定することによって決定される。
本発明の特定の態様は、標的組織（１つ以上の標的細胞を含む）を、医薬組成物、ＡＡＶ粒子と、それらがかかる標的組織に実質的に保持されるような条件下で接触させることによって、本発明の医薬組成物、ＡＡＶ粒子を哺乳類対象の標的組織に提供するための方法を対象とする。医薬組成物、ＡＡＶ粒子は、目的の効果が少なくとも１つの標的細胞で生じるのに十分な活性成分を含む。一部の実施形態において、医薬組成物、ＡＡＶ粒子は、一般に、１つ以上の細胞透過剤を含むが、薬学的に許容される担体を有するまたは有しない「ネイキッド」製剤（細胞透過剤または他の薬剤を有しないなど）も企図される。
経肺投与
一部の実施形態において、本発明の医薬組成物、ＡＡＶ粒子は、経肺投与に好適な製剤に調製、包装、および／または販売されてもよい。一部の実施形態において、かかる投与は、頬側口腔によってある。一部の実施形態において、製剤は、活性成分を含む乾燥粒子を含み得る。かかる実施形態において、乾燥粒子は、約０．５ｎｍから約７ｎｍまでまたは約１ｎｍから約６ｎｍまでの範囲の直径を有し得る。一部の実施形態において、製剤は、噴霧剤の流動を向けて、かかる粉末を分散させることができる乾燥粉末リザーバを含むデバイスを使用して投与するための乾燥粉末の形態であってもよい。一部の実施形態において、自己噴射溶媒／粉末分配容器を使用してもよい。かかる実施形態において、活性成分は、密閉容器中の低沸点噴射剤に溶解および／または懸濁してもよい。かかる粉末は、重量により粒子の少なくとも９８％が０．５ｎｍ超の直径を有し、数により粒子の少なくとも９５％が７ｎｍ未満の直径を有する粒子を含み得る。あるいは、重量により粒子の少なくとも９５％が１ｎｍ超の直径を有し、数により粒子の少なくとも９０％が６ｎｍ未満の直径を有する。乾燥粉末組成物は、糖などの固形微細粉末希釈剤を含んでもよく、便利には単位用量形態で提供される。
低沸点噴射剤としては、概して、大気圧下で１８．３℃（６５°Ｆ）未満の沸点を有する液体噴射剤が挙げられる。概して、噴射剤は、組成物の５０％～９９．９％（ｗ／ｗ）を構成してもよく、活性成分は、組成物の０．１％～２０％（ｗ／ｗ）を構成してもよい。噴射剤は、液体非イオン性および／または固体陰イオン性界面活性剤および／または固体希釈剤などの追加成分（活性成分を含む粒子と同桁の粒子サイズを有してもよい）を更に含み得る。
経肺送達用に製剤化された医薬組成物は、溶液および／または懸濁物の液滴の形態の活性成分を提供し得る。かかる製剤は、活性成分を含む任意選択で無菌の水性および／または希アルコール性溶液および／または懸濁物として調製、包装、および／または販売されてもよく、便利には任意の噴霧化および／または微粒化デバイスを使用して投与してもよい。かかる製剤は、限定はされないが、サッカリンナトリウムなどの香味料、揮発油、緩衝剤、界面活性剤、および／またはメチルヒドロキシベンゾアートなどの保存剤を含めた１つ以上の追加成分を更に含み得る。この投与経路によって提供される液滴は、約０．１ｎｍから約２００ｎｍまでの範囲の平均直径を有してもよい。
鼻腔内、経鼻、頬側投与
一部の実施形態において、本発明の医薬組成物、ＡＡＶ粒子は、経鼻および／または鼻腔内投与してもよい。一部の実施形態において、経肺送達に有用な本明細書に記載される製剤は、鼻腔内送達にも有用であり得る。一部の実施形態において、鼻腔内投与用の製剤は、活性成分を含み、約０．２μｍから５００μｍまでの平均粒子サイズを有する粗粉末を含む。かかる製剤は、鼻から吸い込む様式で、すなわち、鼻付近に保持された粉末の容器から鼻道を通して急速吸入することにより投与される。
経鼻投与に好適な製剤は、例えば、わずか約０．１％（ｗ／ｗ）から１００％（ｗ／ｗ）もの活性成分を含んでもよく、本明細書に記載される追加成分の１つ以上を含んでもよい。医薬組成物は、頬側投与に好適な製剤に調製、包装、および／または販売されてもよい。かかる製剤は、例えば、従来方法を使用して製作される錠剤および／またはロゼンジの形態であってもよく、例えば、０．１％～２０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み、残部は、経口溶解性および／または分解性組成物ならびに任意選択で本明細書に記載される追加成分の１つ以上を含み得る。あるいは、頬側投与に好適な製剤は、活性成分を含む粉末ならびに／またはアエロゾル化および／もしくは微粒化溶液および／もしくは懸濁物を含み得る。かかる粉末化、アエロゾル化、および／またはアエロゾル化製剤は、分散されると、約０．１ｎｍから約２００ｎｍまでの範囲の平均粒子および／または液滴サイズを含んでもよく、本明細書に記載される任意の追加成分の１つ以上を更に含んでもよい。
眼または耳投与
一部の実施形態において、本発明の医薬組成物、ＡＡＶ粒子は、眼および／または耳投与に好適な製剤に調製、包装、および／または販売されてもよい。かかる製剤は、例えば、水性および／または油性液体賦形剤中０．１／１．０％（ｗ／ｗ）の活性成分の溶液および／または懸濁物を含む、例えば点眼剤および／または点耳剤の形態であってもよい。かかる滴剤は、緩衝剤、塩、および／または本明細書に記載される任意の他の追加成分の１つ以上を更に含み得る。有用な他の眼科的に投与可能な製剤としては、微晶質形態のおよび／またはリポソーム調製物中の活性成分を含むものが挙げられる。網膜下インサートも、投与の形態として使用され得る。
送達、用量およびレジメン
本発明は、本発明に係るＡＡＶ粒子を、それを必要とする対象に投与する方法を提供する。本発明の医薬用、診断用、または予防用ＡＡＶ粒子および組成物は、疾患、障害および／または状態を予防、治療、管理、または診断するために効果的な任意の投与量および任意の投与経路を使用して投与され得る。必要となる正確な量は、対象の種、年齢、および全身状態、疾患の重症度、詳細な組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて対象毎に異なることになる。対象は、ヒト、哺乳類、または動物であってもよい。本発明に係る組成物は、典型的には、投与の簡便性および投薬量の均一性のため、単位剤形に製剤化される。しかしながら、本発明の組成物の１日の総使用量は主治医が妥当な医学的判断の範囲内で決定し得ることは理解されるであろう。任意の特定の個体のための具体的な治療有効用量レベル、予防有効用量レベル、または適切な診断用量レベルは、治療下の障害および障害の重症度；用いられる具体的なペイロードの活性；用いられる具体的な組成物；患者の年齢、体重、全般的な健康、性別および食事；用いられる具体的なＡＡＶ粒子の投与時間、投与経路、および排泄速度；治療継続期間；用いられる具体的なＡＡＶ粒子と併用してまたは同時に使用される薬物；および医学分野で周知の同様の要因を含めた種々の要因に依存することになる。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ＡＡＶ粒子の送達の結果として、最小限の重篤有害事象（ＳＡＥ）をもたらす。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、複数用量レジメンで送達されてもよい。複数用量レジメンは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０回または１０回よりも多くの用量であってもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、多部位投与経路によって対象に送達されてもよい。対象には、２、３、４、５または５つよりも多い部位にＡＡＶ粒子が投与されてもよい。
特定の実施形態において、本発明に係るＡＡＶ粒子医薬組成物は、１日当たり対象体重の約０．０００１ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇまで、約０．００１ｍｇ／ｋｇから約０．０５ｍｇ／ｋｇまで、約０．００５ｍｇ／ｋｇから約０．０５ｍｇ／ｋｇまで、約０．００１ｍｇ／ｋｇから約０．００５ｍｇ／ｋｇまで、約０．０５ｍｇ／ｋｇから約０．５ｍｇ／ｋｇまで、約０．０１ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇまで、約０．１ｍｇ／ｋｇから約４０ｍｇ／ｋｇまで、約０．５ｍｇ／ｋｇから約３０ｍｇ／ｋｇまで、約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇまで、約０．１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇから約２５ｍｇ／ｋｇまでを１日１回以上送達して、所望の治療効果、診断効果、または予防効果を得るのに十分な投薬量レベルで投与されてもよい。上記の投薬濃度は、ｖｇに、または１ｋｇ当たりのウイルスゲノムに、または当業者によって投与される総ウイルスゲノムへと変換され得ることが理解されるだろう。
特定の実施形態において、本開示に係るＡＡＶ粒子医薬組成物は、約１０～約６００μｌ／部位、５０～約５００μｌ／部位、１００～約４００μｌ／部位、１２０～約３００μｌ／部位、１４０～約２００μｌ／部位、約１６０μｌ／部位で投与されてもよい。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、５０μｌ／部位および／または１５０μｌ／部位で投与されてもよい。
一実施形態において、本発明に係る組成物の細胞への送達は、［ＶＧ／時間＝ｍＬ／時間×ＶＧ／ｍＬ］（式中、ＶＧはウイルスゲノムであり、ＶＧ／ｍＬは組成物濃度であり、およびｍＬ／時間は持続送達速度である）によって定義される送達速度を含む。
一実施形態において、本発明に係るＡＡＶ粒子を含む組成物の細胞への送達は、対象当たり約１×１０６ＶＧ（ウイルスゲノム）～約１×１０１６ＶＧの総濃度を含み得る。一部の実施形態において、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、２．１×１０１１、２．２×１０１１、２．３×１０１１、２．４×１０１１、２．５×１０１１、２．６×１０１１、２．７×１０１１、２．８×１０１１、２．９×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、７．１×１０１１、７．２×１０１１、７．３×１０１１、７．４×１０１１、７．５×１０１１、７．６×１０１１、７．７×１０１１、７．８×１０１１、７．９×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、６．１×１０１２、６．２×１０１２、６．３×１０１２、６．４×１０１２、６．５×１０１２、６．６×１０１２、６．７×１０１２、６．８×１０１２、６．９×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、８．１×１０１２、８．２×１０１２、８．３×１０１２、８．４×１０１２、８．５×１０１２、８．６×１０１２、８．７×１０１２、８．８×１０１２、８．９×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／対象の組成物濃度を含み得る。
一実施形態において、本発明に係るＡＡＶ粒子を含む組成物の細胞への送達は、対象当たり約１×１０６ＶＧ／ｋｇ～約１×１０１６ＶＧ／ｋｇの総濃度を含み得る。一部の実施形態において、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、２．１×１０１１、２．２×１０１１、２．３×１０１１、２．４×１０１１、２．５×１０１１、２．６×１０１１、２．７×１０１１、２．８×１０１１、２．９×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、７．１×１０１１、７．２×１０１１、７．３×１０１１、７．４×１０１１、７．５×１０１１、７．６×１０１１、７．７×１０１１、７．８×１０１１、７．９×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、６．１×１０１２、６．２×１０１２、６．３×１０１２、６．４×１０１２、６．５×１０１２、６．６×１０１２、６．７×１０１２、６．８×１０１２、６．９×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、８．１×１０１２、８．２×１０１２、８．３×１０１２、８．４×１０１２、８．５×１０１２、８．６×１０１２、８．７×１０１２、８．８×１０１２、８．９×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含み得る。一実施形態において、送達は、１×１０１３ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、２．１×１０１２ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、１×１０１３ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、６．７×１０１２ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、７×１０１２ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、２×１０１３ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、３×１０１１ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、３×１０１２ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、３×１０１３ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、６．３×１０１２ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含む。
一実施形態において、中枢神経系（例えば、実質）の細胞へのＡＡＶ粒子の送達は、約１×１０６ＶＧ～約１×１０１６ＶＧの総用量を含み得る。一部の実施形態において、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、１．９×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、３．７３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、２．５×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、６．１×１０１２、６．２×１０１２、６．３×１０１２、６．４×１０１２、６．５×１０１２、６．６×１０１２、６．７×１０１２、６．８×１０１２、６．９×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧの総用量を含み得る。非限定的な例として、総用量は１×１０１３ＶＧである。別の非限定的な例として、総用量は２．１×１０１２ＶＧである。別の非限定的な例として、総用量は、６．３×１０１２ＶＧである。
一実施形態において、１用量当たり約１０５～１０６ウイルスゲノム（単位）が投与されてもよい。
一実施形態において、本発明に係るＡＡＶ粒子を含む組成物の細胞への送達は、約１×１０６ＶＧ／ｍＬ～約１×１０１６ＶＧ／ｍＬの総濃度を含み得る。一部の実施形態において、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、３．１×１０１２、３．２×１０１２、３．３×１０１２、３．４×１０１２、３．５×１０１２、３．６×１０１２、３．７×１０１２、３．８×１０１２、３．９×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、６．１×１０１２、６．２×１０１２、６．３×１０１２、６．４×１０１２、６．５×１０１２、６．６×１０１２、６．７×１０１２、６．８×１０１２、６．９×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含み得る。
一実施形態において、中枢神経系（例えば、実質）の細胞へのＡＡＶ粒子の送達は、約１×１０６ＶＧ／ｍＬ～約１×１０１６ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含み得る。一部の実施形態において、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．１×１０１２、６．２×１０１２、６．３×１０１２、６．４×１０１２、６．５×１０１２、６．６×１０１２、６．７×１０１２、６．８×１０１２、６．９×１０１２、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含み得る。一実施形態において、送達は、１×１０１３ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、２．１×１０１２ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、１×１０１３ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、２×１０１３ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、３×１０１１ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、３×１０１２ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、６．３×１０１２ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。一実施形態において、送達は、３×１０１３ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。
特定の実施形態において、所望の投薬量は、複数回の投与（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４回、またはそれ以上の投与）を用いて送達されてもよい。複数回の投与が利用される場合、本明細書に記載されるような分割用量投与レジメンが用いられてもよい。本明細書で使用されるとき、「分割用量」は、「単一単位用量」または総１日用量を２つ以上の用量に分割するもの、例えば「単一単位用量」の２回以上の投与である。本明細書で使用されるとき、「単一単位用量」は、１用量／１回／単一の経路／単一の接触点、すなわち単一の投与イベントで投与される任意の治療薬の用量である。
本発明のＡＡＶ粒子の所望の投薬量は、「パルス用量」または「連続流」として投与されてもよい。本明細書で使用されるとき、「パルス用量」は、ある期間にわたって設定頻度で投与される任意の療法剤の一連の単一単位用量である。本明細書で使用されるとき、「連続流」は、単一経路／単一接触点で、すなわち連続投与事象で、ある期間にわたって連続的に投与される療法剤の用量である。総１日用量、２４時間の期間に与えられるかまたは処方される量は、これらの方法のいずれかによって、またはこれらの方法の組合せとして、または医薬品投与に好適な任意の他の方法によって投与されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子の対象への送達は、対象における標的遺伝子の活性の制御を提供する。制御活性は、対象における標的タンパク質産生の増加または対象における標的タンパク質産生の減少であってもよい。制御活性は、少なくとも１ヵ月間、２ヵ月間、３ヵ月間、４ヵ月間、５ヵ月間、６ヵ月間、７ヵ月間、８ヵ月間、９ヵ月間、１０ヵ月間、１１ヵ月間、１年間、１３ヵ月間、１４ヵ月間、１５ヵ月間、１６ヵ月間、１７ヵ月間、１８ヵ月間、１９ヵ月間、２０ヵ月間、２０ヵ月間、２１ヵ月間、２２ヵ月間、２３ヵ月間、２年間、３年間、４年間、５年間、６年間、７年間、８年間、９年間、１０年間または１０年間超にわたってもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、単一用量で１回限りの治療を使用して、対象に投与されてもよい。１回限りの治療の用量は、当該技術分野で公知のおよび／または本明細書に記載される任意の方法によって投与されてもよい。本明細書で使用されるとき、「１回限りの治療」は、１回のみ投与される組成物を指す。必要な場合、適切な有効性に到達することを保証するために、ブースター用量が対象に投与されてもよい。ブースターは、１回限りの治療の１ヵ月後、２ヵ月後、３ヵ月後、４ヵ月後、５ヵ月後、６ヵ月後、７ヵ月後、８ヵ月後、９ヵ月後、１０ヵ月後、１１ヵ月後、１２ヵ月後、１年後、１３ヵ月後、１４ヵ月後、１５ヵ月後、１６ヵ月後、１７ヵ月後、１８ヵ月後、１９ヵ月後、２０ヵ月後、２１ヵ月後、２２ヵ月後、２３ヵ月後、２４ヵ月後、２年後、３年後、４年後、５年後、６年後、７年後、８年後、９年後、１０年後または１０年後よりも後に投与されてもよい。
送達方法
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物は、米国特許第８，９９９，９４８号明細書または国際公開第２０１４１７８８６３号パンフレット（この各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される疾患の治療方法を使用して、投与または送達されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物は、米国特許出願公開第２０１５０１２６５９０号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるような、アルツハイマー病または他の神経変性状態において遺伝子療法を送達するための方法を使用して投与または送達されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物は、米国特許第６，４３６，７０８号明細書および同第８，９４６，１５２号明細書または国際公開第２０１５１６８６６６号パンフレット（この各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるようなＣＮＳ遺伝子療法を送達するための方法を使用して投与または送達されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物は、欧州特許出願第２６７８４３３号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるＡＡＶ粒子を使用してタンパク質を送達するための方法を使用して投与または送達されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物は、米国特許第６，２１１，１６３号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される血流へのＤＮＡの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物は、米国特許第７，５８８，７５７号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される中枢神経系へのペイロードの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物は、米国特許第８，２８３，１５１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるペイロードの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物は、国際公開第２００１０８９５８３号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるグルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）送達ベクターを用いたペイロードの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物は、国際公開第２０１２０５７３６３号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される神経細胞へのペイロードの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
細胞への送達
本開示は、上述のＡＡＶ粒子のいずれかを細胞または組織もしくは臓器に送達する方法であって、前記ＡＡＶ粒子と細胞または組織もしくは臓器を接触させることまたは前記ＡＡＶ粒子を含む製剤と細胞または組織もしくは臓器を接触させること、またはＡＡＶ粒子を含む医薬組成物を含めた記載される組成物のいずれかと細胞または組織もしくは臓器を接触させることを含む方法を提供する。ＡＡＶ粒子を細胞または組織もしくは臓器に送達する方法は、インビトロ、エキソビボ、またはインビボで達成することができる。
対象への送達
本開示は更に、上述のＡＡＶ粒子のいずれかを哺乳類対象を含めた対象に送達する方法であって、前記ＡＡＶ粒子を対象に投与すること、または前記ＡＡＶ粒子を含む製剤を対象に投与すること、または医薬組成物を含めた記載される組成物のいずれかを対象に投与することを含む方法を提供する。
一実施形態において、哺乳類対象はヒトである。一部の態様において、ヒト対象は、疾患、例えば神経学的疾患（ｎｅｕｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｓｅａｓｅ）または心血管疾患を有する患者である。
組合せ
ＡＡＶ粒子は、１つ以上の他の治療用、予防用、研究用または診断用薬剤と併用して使用されてもよい。「～と併用して」とは、その薬剤が同じ時点で投与されなければならない、および／または一緒に送達されるように製剤化されなければならないことを含意するよう意図するものではなく、しかしながらこれらの送達方法は本発明の範囲内にある。組成物は、１つ以上の他の所望の治療薬または医療手技と同時に、その前に、またはその後に投与することができる。一般に、各薬剤は、当該の薬剤について決定された用量および／またはタイムスケジュールで投与されることになる。一部の実施形態において、本開示は、医薬用、予防用、研究用、または診断用組成物を、それらのバイオアベイラビリティを向上させ、それらの代謝を低減および／もしくは修飾し、それらの排泄を阻害し、ならびに／またはそれらの体内分布を修飾することができる薬剤と組み合わせて送達することを包含する。
発現の測定
ウイルスゲノムからのペイロードの発現は、限定ではないが、免疫化学（例えば、ＩＨＣ）、インサイツハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、親和性ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＳＰＯＴ、フローサイトメトリー、免疫細胞学、表面プラズモン共鳴分析、速度論的排除アッセイ、液体クロマトグラフィ－質量分析（ＬＣＭＳ）、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）、ＢＣＡアッセイ、免疫電気泳動法、ウエスタンブロット、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、タンパク質免疫沈殿、および／またはＰＣＲなどの、当該技術分野で公知の種々の方法を使用して決定されてもよい。
バイオアベイラビリティ
ＡＡＶ粒子は、本明細書に記載されるような送達剤を有する組成物中に製剤化されると、本明細書に記載されるような送達剤を欠如する組成物と比較して、バイオアベイラビリティの増加を示すことができる。本明細書で使用されるとき、用語「バイオアベイラビリティ」は、哺乳類に投与された所定量のＡＡＶ粒子または発現ペイロードの全身性利用能を指す。バイオアベイラビリティは、組成物の曲線下面積（ＡＵＣ）または最大血清もしくは血漿濃度（Ｃｍａｘ）を測定することによって評価することができる。ＡＵＣは、化合物（例えば、ＡＡＶ粒子または発現ペイロード）の血清または血漿濃度が、横座標（Ｘ軸）の時間に対して縦座標（Ｙ軸）に沿ってプロットされる曲線下面積の決定である。一般に、特定の化合物のＡＵＣは、当業者に公知の方法、およびＧ．Ｓ．バンカー（Ｇ．Ｓ．Ｂａｎｋｅｒ）、「現代の医薬品、薬物および医薬品科学（Ｍｏｄｅｒｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，Ｄｒｕｇｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）」、７２巻、マルセル・デッカー・ニューヨーク・インク（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｉｎｃ．）、１９９６年（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載のような方法を使用して算出することができる。
Ｃｍａｘ値は、ＡＡＶ粒子を哺乳類に投与した後の哺乳類の血清または血漿にて達成されるＡＡＶ粒子または発現ペイロードの最大濃度である。Ｃｍａｘ値は、当業者に公知の方法を使用して測定することができる。語句「バイオアベイラビリティを増加させる」または「薬物動態を向上させる」は、本明細書で使用されるとき、哺乳類においてＡＵＣ、Ｃｍａｘ、またはＣｍｉｎとして測定される第１のＡＡＶ粒子または発現ペイロードの全身性利用能が、本明細書に記載されるような送達剤と共に同時投与される場合、かかる同時投与が行われない場合よりも大きいことを意味する。一部の実施形態において、バイオアベイラビリティは、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％増加し得る。
治療ウィンドウ
本明細書で使用されるとき、「治療ウィンドウ」は、治療効果を誘発する可能性が高い血漿濃度の範囲または作用部位における治療活性物質のレベルの範囲を指す。一部の実施形態において、本明細書に記載されるようなＡＡＶ粒子の治療ウィンドウは、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％増加し得る。
分布容積
本明細書で使用されるとき、用語「分布容積」は、合計量の薬物を血液中または血漿中と同じ濃度で体内に含有するために必要とされることになる流体容積を指す。Ｖｄｉｓｔは、体内における薬物の量／血液中または血漿中の薬物の濃度と等しい。例えば、１０ｍｇの用量および１０ｍｇ／Ｌの血漿濃度の場合、分布容積は、１リットルになるだろう。分布容積は、薬物が、脈管外組織に存在する程度を反映する。大きな分布容積は、化合物が、血漿タンパク結合と比較して、組織成分と結合する傾向があることを反映する。臨床設定では、Ｖｄｉｓｔを使用して負荷用量を決定し、定常状態濃度を達成することができる。一部の実施形態において、本明細書に記載されるようなＡＡＶ粒子の分布容積は、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％減少し得る。
生物学的効果
一実施形態において、動物に送達されたＡＡＶ粒子の生物学的効果は、動物中の発現ペイロードを分析することによって分類されてもよい。ペイロード発現は、本発明のＡＡＶ粒子が投与された哺乳類から収集される生物学的試料の分析から決定されてもよい。例えば、哺乳類に送達されるＡＡＶ粒子によってコードされるタンパク質の５０～２００ｐｇ／ｍｌのタンパク質発現を、哺乳類におけるタンパク質の治療有効量とみなすことができる。
ＩＶ．本発明の組成物の方法および使用
遺伝子発現
本発明のＡＡＶ粒子、ＡＡＶ粒子を含む組成物は、細胞、組織、臓器または対象における目的の遺伝子の発現を制御するために使用してもよい。
本発明によれば、細胞、組織、臓器または対象における標的タンパク質の発現を増加させる方法であって、細胞、組織、臓器または対象に、標的タンパク質をコードする核酸配列を含む機能性ペイロードを含むＡＡＶ粒子の有効量を投与する工程を含む方法が提供される。
したがって、標的タンパク質は、少なくとも約１０％、好ましくは少なくとも約１０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子、組成物および製剤を使用して、ニューロン、アストロサイトおよび／またはオリゴデンドロサイトなどのＣＮＳの細胞における標的タンパク質の発現を増加させることができる。一部の実施形態において、遺伝子は、限定はされないが、抗体、ＡＡＤＣ、ＡＰＯＥ２、およびフラタキシンを含めたタンパク質をコードしてもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子、組成物および製剤を使用して、細胞、組織、臓器または対象における目的の遺伝子の発現を減少、阻害および抑制することができる。したがって、ＡＡＶ粒子は、目的の標的遺伝子に特異的なｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡを含む少なくとも１つの機能性ペイロードを含む。
一部の実施形態において、本発明は、細胞における標的遺伝子発現を阻害／サイレンシングする方法を提供する。したがって、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、限定はされないが、アストロサイトまたはミクログリア、皮質ニューロン、海馬ニューロン、嗅内ニューロン、視床ニューロン、運動ニューロンまたは一次感覚ニューロンなどの細胞における標的遺伝子発現を実質的に阻害することができる。一部の態様において、標的遺伝子発現の阻害は、少なくとも約２０％、例えば少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％の阻害を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質産物は、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％阻害され得る。
一部の実施形態において、阻害しようとする遺伝子としては、限定はされないが、ＳＯＤ１、ＨＴＴ、ＡＰＯＥ、および／またはＭＡＰＴを挙げることができる。
神経学的疾患
種々の神経学的疾患を、本発明の医薬組成物、ＡＡＶ粒子、特に血液脳関門通過ＡＡＶ粒子で治療することができる。非限定的な例として、神経学的疾患は、透明中隔欠損、酸性リパーゼ病、酸性マルターゼ欠損症、後天性てんかん様失語症、急性散在性脳脊髄炎、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、アディー瞳孔、アディー症候群、副腎白質ジストロフィー、脳梁欠損症、失認症、アイカルディ症候群、アイカルディ－グティエール症候群障害、ＡＩＤＳ－神経学的合併症、アレキサンダー病、アルパーズ病、交代性片麻痺、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、無脳症、動脈瘤、アンジェルマン症候群、血管腫症、酸素欠乏症、抗リン脂質抗体症候群、失語症、失行症、くも膜嚢胞、くも膜炎、アーノルド－キアリ奇形、動静脈奇形、アスペルガー症候群、運動失調症、毛細血管拡張性運動失調症、運動失調および小脳または脊髄小脳変性症、心房細動および脳卒中、注意欠陥多動性障害、自閉症スペクトラム障害、自律神経機能異常、背部痛、バース症候群、バッテン病、ベッカー型ミオトニー（Ｂｅｃｋｅｒ’ｓ Ｍｙｏｔｏｎｉａ）、ベーチェット病、ベル麻痺、良性特発性眼瞼痙攣、良性局所性筋萎縮症、良性頭蓋内圧亢進、ベルンハルト－ロート症候群、ビンスワンゲル病、眼瞼痙攣、ブロッホ－サルズバーガー症候群、腕神経叢分娩損傷、腕神経叢損傷、ブラッドベリー－エグルストン症候群、脳脊髄腫瘍、脳動脈瘤、脳損傷、ブラウン－セカール症候群、球脊髄性筋萎縮症、皮質下梗塞および白質脳症を伴う常染色体優性脳動脈症（ＣＡＤＡＳＩＬ）、カナバン病、手根管症候群、灼熱痛、海綿腫、海綿状血管腫、海綿状奇形、頚髄中心症候群、脊髄中心症候群、中枢痛症候群、橋中心髄鞘崩壊症、頭部障害、セラミダーゼ欠損症、小脳変性症、小脳低形成、脳動脈瘤、脳動脈硬化症、脳萎縮症、脳性脚気、脳海綿状奇形、脳性巨人症、脳低酸素症、脳性小児麻痺、脳－眼－顔－骨格症候群（ＣＯＦＳ）、シャルコー－マリー－トゥース病、キアリ奇形、コレステロールエステル貯蔵病、舞踏病、有棘赤血球舞踏病（Ｃｈｏｒｅｏａｃａｎｔｈｏｃｙｔｏｓｉｓ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー（ＣＩＤＰ）、慢性起立不耐症、慢性疼痛、コケイン症候群ＩＩ型、コフィン－ローリー症候群、コルポセファリー、昏睡、複合性局所疼痛症候群、先天性両側顔面神経麻痺、先天性筋無力症、先天性ミオパシー、先天性血管海綿状奇形、大脳皮質基底核変性症、頭蓋動脈炎、頭蓋骨早期癒合症、クリー脳炎、クロイツフェルト－ヤコブ病、蓄積外傷性障害、クッシング症候群、巨細胞性封入体症、サイトメガロウイルス感染症、眼震足震症候群（Ｄａｎｃｉｎｇ Ｅｙｅｓ－Ｄａｎｃｉｎｇ Ｆｅｅｔ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ダンディー－ウォーカー症候群、ドーソン疾患、ドモルシア症候群、ドゥジュリーヌ－クルンプケ麻痺、認知症、多発脳梗塞性認知症、意味性認知症、皮質下認知症、レビー小体型認知症、歯状小脳性運動失調症、歯状核赤核萎縮症、皮膚筋炎、発達性統合運動障害、デビック症候群、糖尿病性ニューロパシー、びまん性硬化症、ドラベ症候群、自律神経異常症、書字障害、難読症、嚥下困難、統合運動障害、ミオクローヌス性小脳性共同運動障害、進行性小脳性共同運動障害、ジストニア、早期乳児てんかん性脳症、エンプティセラ症候群、脳炎、嗜眠性脳炎、脳ヘルニア、脳症、脳症（家族性乳児型）、脳３叉神経領域血管腫、てんかん、てんかん性片麻痺、エルブ麻痺、エルブ－デュシェンヌおよびデジェリーヌ－クルンプケ麻痺、本態性振戦、橋外髄鞘崩壊症（Ｅｘｔｒａｐｏｎｔｉｎｅ Ｍｙｅｌｉｎｏｌｙｓｉｓ）、ファブリー病、ファール症候群、気絶、家族性自律神経失調症、家族性血管腫、家族性特発性基底核石灰化症、家族性周期性四肢麻痺、家族性痙性麻痺、ファーバー病、熱性痙攣、線維筋性形成異常、フィッシャー症候群、筋緊張低下児症候群、下垂足、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、ゴーシェ病、全身性ガングリオシドーシス、ゲルストマン症候群、ゲルストマン－ストロイスラー－シャインカー病、巨大軸索ニューロパシー、巨細胞性動脈炎、巨細胞性封入体病、グロボイド細胞性白質ジストロフィー、舌咽神経痛、糖原病、ギラン－バレー症候群、ハレルフォルデン－スパッツ病、頭部外傷、頭痛、持続性偏頭痛、片側顔面痙攣、交代性片麻痺（Ｈｅｍｉｐｌｅｇｉａ Ａｌｔｅｒａｎｓ）、遺伝性ニューロパシー、遺伝性痙性対麻痺、遺伝性多発神経炎性失調症、帯状疱疹、耳性帯状疱疹、平山症候群、ホルムズ－アーディー症候群、全前脳症、ＨＴＬＶ－１関連脊髄症、ヒューズ症候群、ハンチントン病、水頭性無脳症、水頭症、正常圧水頭症、水脊髄症、コルチゾン過剰症、過眠症、筋緊張亢進、筋緊張低下、低酸素症、免疫媒介性脳脊髄炎、封入体筋炎、色素失調症、乳児筋緊張低下、乳児神経軸索性ジストロフィー、乳児フィタン酸蓄積症、乳児レフサム病、点頭痙攣、炎症性ミオパシー、後頭孔脳脱出症、腸性脂肪異栄養症、頭蓋内嚢胞、頭蓋内圧亢進、アイザクス症候群、ジュベール症候群、カーンズ－セイヤ症候群、ケネディー病、キンズボーン症候群、クライネ－レビン症候群、クリッペル－フェイル症候群、クリッペル－トレノーネイ症候群（ＫＴＳ）、クリューバー－ビューシー症候群、コルサコフ健忘症候群、クラッベ病、クーゲルバーグ－ヴェランダー病、クールー病、ランバート－イートン筋無力症候群、ランドウ－クレフナー症候群、外側大腿皮神経絞扼、外側髄症候群、学習障害、リー病、レノックス－ガストー症候群、レッシュ－ナイハン症候群、白質ジストロフィー、レバイン－クリッチュリー症候群、レビー小体認知症、脂質蓄積症、類脂質性タンパク症、脳回欠損、閉込め症候群、ルー－ゲーリッグ病、狼瘡－神経学的後遺症、ライム病－神経学的合併症、マシャド－ジョゼフ病、大脳症、巨脳症、メルカーソン－ローゼンタール症候群、脳膜炎、脳膜炎および脳炎、メンケス疾患、知覚異常性神経痛、異染性白質ジストロフィー、小頭症、偏頭痛、ミラー－フィッシャー症候群、軽度脳卒中、ミトコンドリアミオパシー、メビウス症候群、単肢筋萎縮症、運動ニューロン疾患、モヤモヤ病、ムコリピドーシス、ムコ多糖症、多発梗塞性認知症、多巣性運動ニューロパシー、多発性硬化症、先天性起立性低血圧症を伴う多系統萎縮症、筋ジストロフィー、先天性筋無力症、重症筋無力症、ミエリン破壊性びまん性硬化症（Ｍｙｅｌｉｎｏｃｌａｓｔｉｃ Ｄｉｆｆｕｓｅ Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、乳児期ミオクロニー脳症、ミオクローヌス、ミオパシー、先天性ミオパシー、甲状腺中毒性ミオパシー、ミオトニー、先天性ミオトニー、ナルコレプシー、神経有棘赤血球症、脳鉄蓄積を伴う神経変性、神経線維腫症、神経弛緩薬悪性症候群、ＡＩＤＳの神経学的合併症、ライム病の神経学的合併症、サイトメガロウイルス感染症の神経学的帰結、ポンペ病の神経学的所見、狼瘡の神経学的続発症、視神経脊髄炎、神経ミオトニー、神経セロイドリポフスチン症、神経細胞移動障害、遺伝性ニューロパシー、神経サルコイドーシス、神経梅毒、神経毒性、海綿状母斑、ニーマン－ピック病、オサリバン－マクラウド症候群、後頭神経痛、大田原症候群、オリーブ橋小脳萎縮症、眼球クローヌスミオクローヌス、起立性低血圧症、濫用症候群、慢性疼痛、パントテン酸キナーゼ関連神経変性、傍腫瘍性症候群、感覚異常、パーキンソン病、発作性舞踏病アテトーゼ、発作性偏頭痛、パリー－ロンベルグ、ペリツェウス－メルツバッハー病、ペナーショッカーＩＩ症候群、神経周囲嚢胞、周期性麻痺、末梢神ニューロパシー、脳室周囲白質軟化症、持続的植物状態、広汎性発達障害、フィタン酸蓄積症、ピック病、神経圧迫（Ｐｉｎｃｈｅｄ Ｎｅｒｖｅ）、梨状筋症候群、下垂体部腫瘍、多発性筋炎、ポンペ病、孔脳症、ポリオ後症候群、帯状疱疹後神経痛、感染後脳脊髄炎、体位性低血圧症、体位性起立性頻脈症候群、体位性頻脈症候群、原発性歯状核萎縮症（Ｐｒｉｍａｒｙ Ｄｅｎｔａｔｕｍ Ａｔｒｏｐｈｙ）、原発性側索硬化症、原発性進行性失語症、プリオン病、進行性顔面片側萎縮症、進行性歩行運動失調症、進行性多巣性白質脳症、進行性硬化性ポリオジストロフィー、進行性核上麻痺、顔貌失認、偽Ｔｏｒｃｈ症候群（Ｐｓｅｕｄｏ－Ｔｏｒｃｈ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、偽トキソプラズマ症候群（Ｐｓｅｕｄｏｔｏｘｏｐｌａｓｍｏｓｉｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、偽脳腫瘍、心因性運動、ラムゼイハント症候群Ｉ、ラムゼイハント症候群ＩＩ、ラスムッセン脳炎、反射性交感神経性ジストロフィー症候群、レフサム病、乳児レフサム病、反復運動障害、運動反復運動過多損傷、下肢静止不能症候群、レトロウイルス関連脊髄症、レット症候群、ライエ症候群、リューマチ脳炎、ライリー－デイ症候群、仙骨神経根嚢胞、舞踏病、唾液腺疾患、サンドホフ病、シルダー病、脳裂症、ザイテルベルガー病、発作性障害、意味性認知症、中隔視神経形成異常症、乳児重症ミオクローヌスてんかん（ＳＭＥＩ）、揺さぶられっ子症候群、帯状ヘルペス、シャイ－ドレーガー症候群、シェーグレン症候群、睡眠時無呼吸、睡眠病、ソトス症候群、痙性、二分脊椎、脊髄梗塞、脊髄損傷、脊髄腫瘍、脊髄性筋萎縮症、脊髄小脳萎縮、脊髄小脳変性症、スティール－リチャードソン－オルスゼフスキー症候群、全身硬直症候群、線条体黒質変性症、脳卒中、スタージ－ウェーバー症候群、亜急性硬化性汎脳炎、皮質下動脈硬化性脳症、短時間持続性片側神経痛様（ＳＵＮＣＴ、Ｓｈｏｒｔ－ｌａｓｔｉｎｇ， Ｕｎｉｌａｔｅｒａｌ， Ｎｅｕｒａｌｇｉｆｏｒｍ）頭痛、嚥下障害、シデナム舞踏病、失神、梅毒性脊髄硬化症、脊髄水空洞症、脊髄空洞症、全身性エリテマトーデス、脊髄ろう、遅発性ジスキネジア、ターロブ嚢胞、テイ－サックス病、側頭動脈炎、脊髄係留症候群、トムセンミオトニー、胸郭出口症候群、甲状腺中毒性ミオパシー、有痛性チェック、トッド麻痺、トゥーレット症候群、一過性脳虚血発作、伝達性海綿状脳症、横断性脊髄炎、外傷性脳損傷、振戦、三叉神経痛、熱帯性痙性不全対麻痺、トロイアー症候群、結節硬化症、血管勃起腫瘍（Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｅｒｅｃｔｉｌｅ Ｔｕｍｏｒ）、中枢および末梢神経系の血管炎症候群、フォン－エコーノモ病、フォンヒッペル－リンダウ疾患（ＶＨＬ）、フォンレックリングハウゼン病、ワレンベルグ症候群、ウェルトニッヒ－ホフマン病、ウェルニッケ－コルサコフ症候群、ウエスト症候群、むち打ち症、ウィップル病、ウィリアムズ症候群、ウィルソン病、ウォールマン病、Ｘ連鎖球脊髄性筋萎縮症。
加えて、本開示は、ヒト対象を含めた哺乳類対象の神経学的障害を治療または改善する方法であって、対象に、本発明のＡＡＶ粒子または医薬組成物のいずれかの薬学的有効量を投与する工程を含む方法を提供する。一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、血液脳関門通過粒子である。一部の実施形態において、本明細書に記載される方法によって治療される神経学的障害としては、限定はされないが、タウオパシー、アルツハイマー病（ＡＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病（ＨＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）、および／またはフリードライヒ運動失調症（ＦＡ）が挙げられる。一部の実施形態において、対象の神経学的障害の少なくとも１つの症状（ｓｙｍｐｏｔｏｍ）が、改善および／または治療される。
本開示は、ヒト対象を含めたそれを必要とする対象に、本発明のＡＡＶ粒子の治療有効量を投与して、疾患進行を遅延、停止または好転させる方法を提供する。非限定的な例として、疾患進行は、当業者に公知の試験または診断ツールによって測定され得る。別の非限定的な例として、疾患進行は、対象の脳、ＣＳＦまたは他の組織の病理学的特徴の変化によって測定され得る。
タウオパシー
タウオパシーは、微小管結合タンパク質タウの機能障害および／または凝集によって特徴付けられる一群の神経変性疾患である。タウは、通常、そのリン酸化の程度に基づき微小管に付随することが知られている非常に可溶性のタンパク質である。タウは、それらの固有構造を考慮すると、特に神経細胞における細胞内輸送過程に重要な成分であると考えられる。タウの高リン酸化は、微小管との結合および微小管アッセンブリ活性を低下させる。更に、タウの高リン酸化は、タウをミスフォールディングおよび凝集し易くする。タウオパシーでは、タウは、対らせん状細線維（ＰＨＦ）、ツイストリボンまたは直線状線維のＮＦＴとして、高リン酸化、ミスフォールディングおよび凝集する。これらのＮＦＴは、神経細胞死が差し迫っていることを示し、広範な神経細胞喪失に寄与し、様々な行動欠損および認識欠損につながると考えられる。
最初の遺伝学的に画定されたタウオパシーは、タウ遺伝子の突然変異が、１７番染色体に関係する前頭側頭型認知症（ｆｒｏｎｔｅｍｐｏｒａｌ ｄｅｍｅｎｔｉａ）およびパーキンソニズム（ＦＴＤＰ－１７）として知られている常染色体優勢遺伝性タウオパシーにつながることが示された際に記載された。これは、タウにおける変化が脳の神経変性変化につながり得るという最初の因果関係を示す証拠であった。これらの分子は、よりアミロイド形成的であると考えられ、それは、高リン酸化される可能性がより高く、ＮＦＴへと凝集する可能性がより高いことを意味する（ハットン，Ｍ．（Ｈｕｔｔｏｎ，Ｍ．）ら著、１９９８年、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ） 第３９３巻（第６６８６号）：ｐ．７０２～５）。
他の公知のタウオパシーとしては、限定はされないが、アルツハイマー病（ＡＤ）、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）、前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ）、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、進行性核上麻痺（ＰＳＰ）、ダウン症候群、ピック病、大脳皮質基底核変性症（ＣＢＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、プリオン病、クロイツフェルト－ヤコブ病（ＣＪＤ）、多系統萎縮症、タングル－オンリー認知症（Ｔａｎｇｌｅ－ｏｎｌｙ ｄｅｍｅｎｔｉａ）、および進行性皮質下グリオーシスが挙げられる。
タウオパシーは、主にタウタンパク質機能不全および凝集と関連し、ＡＤと酷似しているが、ＡｐｏＥは、この群の疾患の発病にも役割を果たすと考えられる。ＡｐｏＥは、コレステロール輸送分子であり、ＮＦＴがＡｐｏＥに対しても免疫反応性であったことが発見された際、タウオパシーに役割を有することが最初に疑われた。タウオパシーにおけるタウとＡｐｏＥとの間の相関性の調査は、矛盾する結果を示したが、ＡｐｏＥ４とＮＦＴ負荷増加とが関係することを示唆している。しかしながら、認知低下との相関性は示されていない。この分野の研究は、依然として活発に追求されている。
タウオパシーの治療法はまだ同定されていないが、幾つかの症状軽減を提供することができる。本発明のＡＡＶ粒子の送達は、タウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。一部の場合において、本発明の方法は、タウオパシーを発症した疑いのある対象を治療するために使用してもよい。本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ＮＦＴの蓄積減少をもたらすことができる。更に、これらのＮＦＴ負荷の減少は、認知、言語または行動活動領域の改善を伴うことも伴わないこともある。
一実施形態において、ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３またはＡｐｏＥ４ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、タウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３またはＡｐｏＥ４遺伝子および／またはタンパク質発現をサイレンシングするための調節性ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、タウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、タウ遺伝子および／またはタンパク質発現をサイレンシングするための調節性ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、タウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドは、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｓｉＲＮＡ二重鎖もしくはコード化ｄｓＲＮＡをコードする核酸である。
一実施形態において、抗タウ抗体をコードする核酸を含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、タウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、本明細書に記載される組成物は、タウオパシーの１つ以上の公知のまたは試験的な治療と併用して使用される。かかる治療の非限定的な例としては、メチレンブルー、フェノチアジン、アントラキノン、ｎ－フェニルアミンもしくはローダミンなどの、タウ凝集の阻害剤；ＮＡＰ、タキソールもしくはパクリタキセルなどの微小管安定化剤；ＧＳＫ３β（リチウム）もしくはＰＰ２Ａを標的とするものなどのキナーゼもしくはホスファターゼ阻害剤；および／またはタウホスホエピトープによる免疫化もしくは抗タウ抗体による治療が挙げられる。
アルツハイマー病
アルツハイマー病（ＡＤ）は消耗性神経変性疾患であり、今日では高齢者における認知症の主要原因であり、現在、合衆国では推定で５００万人および全世界では３５００万人超が罹患している。ＡＤは、大部分が極端な失念疾患であり、正常な生活を送る能力が極めて損なわれる。この疾患の臨床所見としては、記憶、実行機能（意思決定）および言語の進行性低下が挙げられる。ＡＤを有する個体は、悪液質、肺炎または敗血症などの二次的疾病のため死亡することが多い。
ＡＤは、おそらくは最も周知のタウオパシーであるが、アミロイドに基づく障害であると特徴付けられることが多い。ＡＤ脳は、２つの形態の病理学的凝集体：β－アミロイド（Ａβ）で構成される細胞外プラークおよび高リン酸化微小管結合タンパク質タウで構成される細胞内神経原線維タングル（ＮＦＴ）の存在によって特徴付けられる。初期の遺伝子知見に基づくと、β－アミロイド変更により疾患が開始され、タウの変化は下流にあると考えられた。そのため、ほとんどの臨床治験は、Ａβを中心にして行われている。
この疾患の伝統的な徴候（Ａβおよびタウ）に加えて、アポリポタンパク質Ｅは、遅発性ＡＤの発病における重要な危険因子であることが証明されている（Ａβプロセシングまたは産生の変更と遺伝的に関係しない形態のＡＤが、ＡＤ集団の９９％を占める）。ＡｐｏＥは、他のアポリポタンパク質と同様に、特定のリポタンパク質粒子の構造に寄与し、特定の細胞表面受容体へのリポタンパク質の輸送を指図し、重要なコレステロールトランスポーターである。ＡｐｏＥは、様々な細胞タイプで発現され、肝臓および脳において発現レベルが最も高いことは明らかである。脳において、ＡｐｏＥは、主にアストロサイトおよびミクログリアで発現され、シナプス結合およびシナプス形成の維持に寄与すると考えられる。ＡｐｏＥは、血液脳関門、自然免疫系、シナプス機能およびＡβの蓄積におけるその役割を介してＡＤ発症に寄与すると考えられる。
ＡｐｏＥの３つの最も一般的な変異体は、ＡＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３およびＡｐｏＥ４であり、ＡｐｏＥ２およびＡｐｏＥ４は、ＡＤの発症に関連するリスクが異なる。ＡｐｏＥ２は、防御的な対立遺伝子であると考えられ、ＡＤのリスクを減少させ、発病年齢を遅らせるが、ＡｐｏＥ４は、反対の効果を有し、ＡＤ発症のリスクを著しく増加させ、疾患の発病年齢を低減する。更に、ＡｐｏＥ２は、Ａβ蓄積の負担減少に関連するが、ＡｐｏＥ４は、Ａβ負荷の増加に関連する。
早期発症型のＡＤ（６５歳前、ＡＤ症例の＜５％を占める）は、アミロイドベータ前駆体タンパク質（ＡＰＰ）、プレセニリン１（ＰＳ１またはＰＳＥＮ１）またはプレセニリン２（ＰＳ２またはＰＳＥＮ２）の家族性突然変異によって引き起こされ得る。一般的な症状としては、記憶、実行機能、言語および認知の他の分野の進行性低下が挙げられる。これらの症状は、脳におけるアミロイドプラークおよび／もしくは神経原線維タングル、ニューロン喪失、シナプス喪失、脳萎縮、ならびに／または炎症によって引き起こされることが多い。
ＡＤには対症治療が長年にわたって利用可能であるが、この疾患の経過を変更することができるものは１つもない。本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ＡＤおよび他のタウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。一部の場合において、本発明の方法は、ＡＤまたは他のタウオパシーを発症した疑いのある対象を治療するために使用してもよい。本発明のＡＡＶ粒子の送達は、対象の脳および心血管系の両方におけるＡβ負荷の減少、またはＮＦＴ蓄積の減少をもたらすことができる。更に、これらのＡβまたはＮＦＴ負荷の減少は、認知、言語または行動活動領域の改善を伴うことも伴わないこともある。
一実施形態において、ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３またはＡｐｏＥ４ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ＡＤおよび他のタウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３またはＡｐｏＥ４遺伝子および／またはタンパク質をサイレンシングするための調節性ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ＡＤおよび他のタウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、タウ遺伝子および／またはタンパク質をサイレンシングするための調節性ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ＡＤおよび他のタウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドは、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｓｉＲＮＡ二重鎖もしくはコード化ｄｓＲＮＡをコードする核酸である。
一実施形態において、抗タウ抗体をコードする核酸を含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ＡＤおよび他のタウオパシーに罹患している対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、本明細書に記載される組成物は、ＡＤまたはタウオパシーの１つ以上の公知のまたは試験的な治療と併用して使用される。かかる治療の非限定的な例としては、コリンエステラーゼ阻害剤（ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン）；メマンチンなどのＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト；抗精神病剤；抗うつ剤；抗痙攣剤；セクレターゼ阻害剤；アミロイド凝集阻害剤；銅もしくは亜鉛調節剤；ＢＡＣＥ阻害剤；メチレンブルー、フェノチアジン、アントラキノン、ｎ－フェニルアミンもしくはローダミンなどのタウ凝集の阻害剤；ＮＡＰ、タキソールもしくはパクリタキセルなどの微小管安定化剤；ＧＳＫ３β（リチウム）もしくはＰＰ２Ａを標的とするものなどの、キナーゼもしくはホスファターゼ阻害剤；および／またはＡβペプチドもしくはタウホスホエピトープによる免疫化、または抗タウもしくは抗アミロイド抗体による治療が挙げられる。
一実施形態において、本明細書に記載される組成物は、限定はされないが、タウオパシーおよび／またはアルツハイマー病のマウスモデルなどの哺乳類モデルを使用して評価される。タウオパシーおよび／またはアルツハイマー病の表現型を模倣する多数のマウスモデルが利用可能である。しかしながら、既存のマウスモデルは、ヒトタウオパシーおよび／またはアルツハイマー病の全ての特徴を示すとは限らない。したがって、一部の場合において、２つ以上のマウスモデル、またはこれらのモデルの１つ以上を交雑させたマウスモデルを使用して、本発明の組成物の活性を評価してもよい。タウオパシーおよび／またはアルツハイマー病の例示的なマウスモデルとしては、限定はされないが、３ＸＴｇ－ＡＤ、５ＸＦＡＤ、Ｊ２０、Ｔｇ－ＳｗＤＩ、Ｔｇ－ＳｗＤＩ／Ｎｏｓ２、Ｔｇ２５７６、Ｒ１．４０、ＡＰＰＰＳ１、ＡＰＰ２３、ＰＤＡＰＰ、ＡＰＰ ＮＬ－Ｇ－Ｆ、ＴｇＣＲＮＤ８、ＴＡＳＤ－４１、ＢＲＩ－Ａβ４２Ａ、ＰＳＡＰＰ（Ｔｇ２５７６ｘＰＳ１）、ＡＰＰｓｗｅ／ＰＳＥＮ１ｄＥ９、２ｘＫＩ、ＴＡＰＰ（Ｔｇ２５７６ｘＪＮＰＬ３）、ｈＴａｕ、ＰＳ１Ｍ１４６Ｖ、ｒＴｇ４５１０、ｒＴｇ４５１０ｘＣａｍｋ２ａ－ｔＴＡ、ＰＳ１９、ｒＴｇ４５１０ｘＮｏｐ－ｔＴＡ、ＧＦＡＰ－ａｐｏＥ４、Ａｐｏｅｔｍ３（ＡＰＯＥ＊４）、ＡＰＰ．ＰＳ１／ＴＲＥ４、およびＡｐｏＥノックアウトまたはノックインマウス系統が挙げられる。（オノス（Ｏｎｏｓ）ら著、ブレイン・リサーチ・ブルテン（Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ Ｂｕｌｌ．）２０１６年；第１２２巻：ｐ．１～１１；ホール（Ｈａｌｌ）およびロバーソン．（Ｒｏｂｅｒｓｏｎ．）著、ブレイン・リサーチ・ブルテン（Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ Ｂｕｌｌ．）２０１２年；第８８巻（第１号）：ｐ．３～１２；エルダー（Ｅｌｄｅｒ）ら著、マウント・サイナイ・ジャーナル・オブ・メディシン（Ｍｔ Ｓｉｎａｉ Ｊ Ｍｅｄ．）２０１０年；第７７巻（第１号）：ｐ．６９～８１を参照のこと。これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
タウトランスジェニックマウスモデルは、野生型または突然変異体ヒトタウタンパク質を過剰発現する。異なるタウ突然変異を含有する２１個以上の系統が生成されている（デンク（Ｄｅｎｋ）およびウェード－マーティン（Ｗａｄｅ－Ｍａｒｔｉｎｓ）著、ニューロバイオロジー・オブ・エージング（Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ Ａｇｉｎｇ．）２００９年；第３０巻（第１号）：ｐ．１～１３の表２を参照のこと。この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。これらは、Ｇ２７２Ｖ、Ｐ３０１Ｌ、Ｐ３０１Ｓ、Ｎ２９７Ｋ、Ｖ３３７Ｍ、およびＲ４０６Ｗを含めた、タウオパシーおよび／またはアルツハイマー病を有する患者に存在する突然変異である。Ｐ３０１Ｓトランスジェニックマウスは、Ｐ３０１Ｓ突然変異を含有するヒトタウタンパク質を発現する。アレン（Ａｌｌｅｎ）らによって作り出された１つのＰ３０１Ｓモデル（Ｔｈｙ１．２プロモータの制御下にある４Ｒ／０Ｎタウ）は、高リン酸化タウの線維蓄積、神経変性、および神経炎症を含めた、ヒトタウオパシーと同様の特徴を示す。加えて、これらのマウスは、５～６月齢までに顕著な運動表現型を発症する（アレン（Ａｌｌｅｎ）ら著、ジャーナル・オブ・ニューロサイエンス（Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．）２００２年；第２２巻（第２１号）：ｐ．９３４０～５１；ベルッチ（Ｂｅｌｌｕｃｃｉ）ら著、アメリカン・ジャーナル・オブ・パソロジー（Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ．）２００４年；第１６５巻（第５号）：ｐ．１６４３～５２、この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。ヨシヤマ（Ｙｏｓｈｉｙａｍａ）らによって作り出された別のＰ３０１Ｓマウス系統（マウスプリオンプロモータの制御下にある４Ｒ／１Ｎタウ）は、３～６月齢までに海馬シナプス喪失、シナプス機能障害および同時にミクログリア活性化を表示する。また、動物は、９～１２月齢までに、病理学的高リン酸化タウ蓄積、ニューロン喪失、ならびに海馬および嗅内皮質萎縮を示した（ヨシヤマ（Ｙｏｓｈｉｙａｍａ）ら著、ニューロン（Ｎｅｕｒｏｎ）．２００７年；第５３巻（第３号）：ｐ．３３７～５１、この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
ＡＰＯＥノックインマウスは、ＡＰＯＥのヒトアイソフォームを発現する。一部の場合において、ヒトＡＰＯＥ遺伝子を操作して導入し、内因性マウスＡＰＯＥ対立遺伝子を置換（標的置換）した。ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３またはＡｐｏＥ４のこれらの標的配置（ＴＲ）モデルは、ノブヤ マエダ（Ｎｏｂｕｙａ Ｍａｅｄａ）の実験室で開発され（サリバン（Ｓｕｌｌｉｖａｎ）ら著、ジャーナル・オブ・クリニカル・インベスティゲーション（Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．）１９９８年；第１０２巻（第１号）：ｐ．１３０～５；サリバン（Ｓｕｌｌｉｖａｎ）ら著、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．）１９９７年；第２７２巻（第２９号）：ｐ．１７９７２～８０；ノーフ（Ｋｎｏｕｆｆ）ら著、ジャーナル・オブ・クリニカル・インベスティゲーション（Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．）１９９９年；第１０３巻（第１１号）：ｐ．１５７９～８６、これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）、多くの研究において特徴付けられた。ＡｐｏＥ ＴＲマウスは、空間記憶能力および回避挙動が異なる。ＡｐｏＥ４－ＴＲマウスは、ＡｐｏＥ３－ＴＲマウスと比較して、認識障害およびシナプス可塑性障害を示す。加えて、ＡｐｏＥ４－ＴＲマウスは、海馬および扁桃において解剖学的および機能的異常を示す（グルーテンドルスト（Ｇｒｏｏｔｅｎｄｏｒｓｔ）著、ビヘイバラス・ブレイン・リサーチ（Ｂｅｈａｖ Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．）２００５年；第１５９巻（第１号）：ｐ．１～１４；ボーア（Ｂｏｕｒ）ら著、ビヘイバラス・ブレイン・リサーチ（Ｂｅｈａｖ Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．）２００８年；第１９３巻（第２号）：ｐ．１７４～８２、これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
一実施形態において、ＡＡＶ－ＡｐｏＥ２粒子は、チャオ（Ｚｈａｏ）ら著、２０１６年、ニューロバイオロジー・オブ・エージング（Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ Ａｇｉｎｇ．）ｐ．１５９～１７２（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりのＰＤＡＰＰまたはＡＰＰ．ＰＳ１／ＴＲＥ４のマウスに投与してもよい。ＡＡＶ－ＡｐｏＥ２（ＡＡＶ９－ＣＡＧ－ＡＰＯＥ２またはＡＡＶｒｈ．１０－ＣＡＧ－ＡＰＯＥ２）の大脳内または視床内投与は、免疫組織化学法、ＥＬＩＳＡまたはウエスタンブロットで決定したところ、脳Ａβ（オリゴマー、可溶性および不溶性）、アミロイド沈着およびアミロイド病理の有意な減少を示した。より詳しくは、ＡＡＶ調製物（２μＬ、１．０×１０１０ｖｇ）を、定位脳手術によって成体マウスの海馬または視床のいずれかに０．２μＬ／分の速度で両側注射し、８週間にわたって発現を可能にしてから、死後分析のために組織を収集した。より低用量のＡＡＶ－ＡｐｏＥ２、または病理の後期での送達は、それほど有効でないことが証明された。
前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）
前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）は、前頭側頭部変性またはピック病としても知られており、脳における進行性神経細胞喪失によって引き起こされる一群の障害を指す。この神経細胞喪失は、脳の前頭葉および／または側頭葉の機能喪失（ｌｏｓｓ ｏｆ ｕｎｃｔｉｏｎ）を引き起こす場合がある。合衆国では約４５，０００人がＦＴＤを有しており、大多数は４５～６５歳である。
ＦＴＤには、行動変異性前頭側頭型認知症（ｂｖＦＴＤ、ｂｅｈａｖｒｉｏｒ ｖａｒｉａｎｔ ｆｒｏｎｔｏｔｅｍｐｏｒａｌ ｄｅｍｅｎｔｉａ）、原発性進行性失語症（ＰＰＡ）および運動機能障害（ｄｉｓｔｒｕｂａｎｃｅｓ ｏｆ ｍｏｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ）の３つのサブタイプが存在する。ｂｖＦＴＤを有する対象は、人格、対人関係および行動に大きな変化を有する傾向があり、神経喪失は、行動、共感、予測、および判断を制御する分野において最も顕著である。ＰＰＡは、言語スキル、発語、筆記、および理解に影響を及ぼす。ｂｖＦＴＤおよびＰＰＡは両方とも、６５歳を超える人々ではＡＤほど一般的ではないが、ｂｖＦＴＤおよびＰＰＡは、４５～６５歳の人々ではＡＤとほぼ同じくらい一般的である。
タウの突然変異は、ＦＴＤを有する対象と遺伝的に関連する。
筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）
筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）は、ルーゲーリッグ病または古典的運動ニューロン病としても知られており、急速に進行する致死性の神経学的疾患である。ＡＬＳは、上位および下位運動ニューロンの細胞変性および死滅と関連し、筋肉運動の無能化、随意筋運動の衰弱、消耗および制御不能につながる。初期症状としては、手、脚および嚥下筋の筋肉衰弱が挙げられ、最終的には隔膜不全による呼吸不能へと進行する。米国疾病管理予防センター（ＣＤＣ）によると、ＡＬＳは、米国において推定で１２，０００～１５，０００人に影響を及ぼしている。約５～１０％の症例は家族性である。
他の非感染性神経変性疾患としてのＡＬＳは、限定はされないが、タウ、アミロイド－ベータ（Ａベータ）、アルファ－シヌクレイン、ＨＴＴ（ハンチンチン）またはＳＯＤ１（スーパーオキシドジスムターゼ１タンパク質）を含めたミスフォールディングタンパク質、ならびにミエリン関連阻害剤およびそれらの受容体の存在によって特徴付けられる（例えば、クリシュナマーシー（Ｋｒｉｓｈｎａｍｕｒｔｈｙ）およびシグルズソン（Ｓｉｇｕｒｄｓｓｏｎ）著、２０１１年、ニュー・バイオテクノロジー（Ｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ）、第２８巻（第５号）：ｐ．５１１～７、およびムサロ（Ｍｕｓａｒｏ）著、２０１３年、ＦＥＢＳジャーナル（ＦＥＢＳ Ｊ．）；第２８０巻（第１７号）：ｐ．４３１５～２２、およびそれら内の参考文献を参照のこと）。家族性ＡＬＳは、ＴＡＲ ＤＮＡ結合タンパク質４３（ＴＤＰ－４３）およびＲＮＡ結合タンパク質ＦＵＳ／ＴＬＳの突然変異に関連している。限定はされないが、成長因子、例えばインスリン様成長因子１（ＩＧＦ－１）、グリア細胞株由来成長因子、脳由来成長因子、血管内皮成長因子および毛様体神経栄養因子、または筋肉成長を促進する成長因子、例えばミオスタチンなどの、ＡＬＳの進行を遅延させる幾つかのタンパク質が同定されている。
今日の時点で、ＡＬＳの予防法も治癒法も存在しない。ＦＤＡ認可薬物リルゾールが、平均余命を延長するために認可されているが、症状には効果を示さない。加えて、ＡＬＳに関連する疼痛および発作に耐えるための薬物および医療デバイスが利用可能である。根本的な病態生理に影響を及ぼす療法に対する必要性が依然として存在する。
一部の実施形態において、本発明の方法は、ＡＬＳを罹患している対象を治療するために使用してもよい。一部の場合において、本発明の方法は、ＡＬＳを発症した疑いのある対象を治療するために使用してもよい。
本発明に記載されるＡＡＶ粒子およびＡＡＶ粒子を使用する方法は、ＡＬＳを予防、管理および／または治療するために使用してもよい。非限定的な例として、ＡＬＳの治療、予防または管理に使用することができる本発明のＡＡＶ粒子は、ＳＯＤ１、ＨＴＴおよび／またはタウを標的とする調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
ハンチントン病
ハンチントン病（ＨＤ）は、脳の運動制御領域ならびに他の区域においてニューロンの変性を引き起こす希な遺伝性障害である。この疾患の典型的な症状としては、挙動、判断および認知の変化が伴う、無制御運動（舞踏病）、姿勢異常、協調運動障害、不明瞭発語ならびに摂食および嚥下困難が挙げられる。ＨＤは、ハンチンチン（ＨＴＴ）タンパク質と関連する遺伝子の突然変異によって引き起こされる。突然変異は、ＤＮＡの（ＣＡＧ）ブロックの異常反復を引き起こす。ＨＤは、米国ではおよそ３０，０００人に影響を及ぼしている。
ＨＤは、ポリグルタミン鎖の異常延長、例えばＣＡＧ反復によってコードされるグルタミン残基の長さの延長を有するハンチンチン（ＨＴＴ）タンパク質の突然変異によって特徴付けられる。この疾患が生じる延長閾値は、およそ３５～４０残基であると考えられる。ＨＤは、ＨＴＴのＮ末端領域によって形成される線条体ニューロンにおけるベータシートリッチ凝集体とも関連する。延長および凝集体は、ＨＤが進行すると共にニューロンの漸進的喪失につながる。加えて、ＨＤにおける細胞死は、アポトーシスを誘導することが知られている細胞死受容体６（ＤＲ６）と関連する。
今日の時点で、この疾患を治癒するかまたは進行を防止する療法は存在しない。利用可能な薬物療法は、症状の管理を目的とする。例えば、ＦＤＡは、舞踏病を予防するために処方されるテトラベネジン（ｔｅｔｒａｂｅｎｅｚｉｎｅ）を認可している。加えて、例えば抗精神病薬は、妄想、幻覚および暴力的感情発露の制御を支援することができる。根本的な病態生理に影響を及ぼす療法に対する必要性が依然として存在する。
一部の実施形態において、本発明の方法は、ＨＤを罹患している対象を治療するために使用してもよい。一部の場合において、本発明の方法は、ＨＤを発症した疑いのある対象を治療するために使用してもよい。
本発明に記載されるＡＡＶ粒子およびＡＡＶ粒子を使用する方法は、ＨＤを予防、管理および／または治療するために使用してもよい。非限定的な例として、ＨＤを治療、予防および／または管理するために使用される本発明のＡＡＶ粒子は、ＨＴＴを標的とする調節性ポリヌクレオチドであって、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｓｉＲＮＡ二重鎖もしくはコード化ｄｓＲＮＡをコードする核酸である調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
パーキンソン病
パーキンソン病（ＰＤ）は、特に脳の黒質に影響を及ぼす神経系の進行性障害である。ＰＤは、ドーパミン産生脳細胞の喪失の結果として発症する。ＰＤの典型的な初期症状としては、四肢、例えば手、腕、脚、足および顔面の振戦または震えが挙げられる。追加の特徴的症状は、四肢および胴体の硬直、運動遅延または運動不能、協調運動障害、認知変化、ならびに精神状態、例えばうつおよび幻覚である。ＰＤは、家族性および特発性形態を両方とも有し、遺伝的および環境的原因に関係することが示唆される。ＰＤは、世界中で４００万人超の人々に影響を及ぼしている。米国では、年間およそ６０，０００症例が同定されている。概して、ＰＤは、５０歳以上で始まる。状態の初期発症形態は、５０歳未満の年齢で始まり、若年性発症ＰＤは、２０歳前に始まる。
ＰＤに関連するドーパミン産生脳細胞の死滅は、アルファ－シヌクレインタンパク質の凝集、沈着および機能障害に関連している（例えば、マルケス（Ｍａｒｑｕｅｓ）およびオウテイロ（Ｏｕｔｅｉｒｏ）著、２０１２年、セル・デス・アンド・ディジーズ（Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ．）、第３巻：ｐ．ｅ３５０、ジェンナー（Ｊｅｎｎｅｒ）著、１９８９年、ジャーナル・オブ・ニューロロジー・ニューロサージェリー・アンド・サイキアトリー（Ｊ Ｎｅｕｒｏｌ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ）、特別増補版、ｐ．２２～２８、およびそれら内の参考文献を参照のこと）。研究は、アルファ－シヌクレインが、ドーパミン放出および輸送のシナプス前シグナル伝達、膜輸送および制御に役割を有することを示唆している。例えばオリゴマーの形態のアルファ－シヌクレイン凝集体は、神経機能障害および死滅の原因種であることが示唆されている。アルファ－シヌクレイン遺伝子（ＳＮＣＡ）の突然変異が、家族性形態のＰＤにおいて同定されているが、環境要因、例えば神経毒も、アルファ－シヌクレイン凝集に影響を及ぼす。ＰＤにおける脳細胞死の他の示唆されている原因は、プロテオソーム（ｐｒｏｔｅｏｓｏｍａｌ）系およびリソソーム系の機能障害、トコンドリア活性の低減である。
ＰＤは、「シヌクレイン症」と呼ばれる、アルファ－シヌクレイン凝集と関連する他の疾患に関連する。かかる疾患としては、限定はされないが、パーキンソン病認知症（ＰＤＤ）、多系統萎縮症（ＭＳＡ）、レビー小体型認知症、若年発症型全般神経軸索ジストロフィー（ｊｕｖｅｎｉｌｅ－ｏｎｓｅｔ ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ ｎｅｕｒｏａｘｏｎａｌ ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）（ハラーホルデン－スパッツ病）、純粋自律神経不全症（ＰＡＦ）、脳鉄蓄積を伴う神経変性１型（ＮＢＩＡ－１、ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｂｒａｉｎ ｉｒｏｎ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｔｙｐｅ－１）ならびにアルツハイマー病およびパーキンソン病の組合せが挙げられる。
今日の時点で、ＰＤに対する治癒療法または予防療法は同定されていない。利用可能な様々な薬物療法が、症状軽減を提供する。対症医学治療の非限定的な例としては、硬直および運動遅延を軽減するカルビドパおよびレボドーパの併用、ならびに振戦および硬直を軽減する抗コリン作用薬が挙げられる。他の任意選択の療法としては、例えば、深部脳刺激および手術が挙げられる。根本的な病態生理に影響を及ぼす療法に対する必要性が依然として存在する。
一部の実施形態において、本発明の方法は、ＰＤおよび他のシヌクレイン症を罹患している対象を治療するために使用してもよい。一部の場合において、本発明の方法は、ＰＤおよび他のシヌクレイン症を発症した疑いのある対象を治療するために使用してもよい。
フリードライヒ運動失調症
フリードライヒ運動失調症（ＦＡ）は、神経系に進行性損傷を引き起こす常染色体性劣性遺伝性疾患である。パーキンソン（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ）ら著、ジャーナル・オブ・ニューロケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、２０１３年、第１２６巻（増補版１）、ｐ．１０３～１１７（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）を参照のこと。発症は、通常、思春期に生じ、２５歳までに必ず生じる。カンプサーノ（Ｃａｍｐｕｚａｎｏ）ら著、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、第２７１巻、第５２５４号（１９９６年３月８日）：ｐ．１４２３（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）を参照のこと。ＦＡは、腕および脚の筋肉運動を指図するために（小脳との接続を通じて）不可欠である感覚ニューロンにおけるミトコンドリアタンパク質フラタキシン（ＦＸＮ）の発現低減による、脊髄の神経組織の変性に起因する。ケッペン（Ｋｏｅｐｐｅｎ）、アルヌルフ（Ａｒｎｕｌｆ）著；ジャーナル・オブ・ニューロロジカル・サイエンス（Ｊ Ｎｅｕｒｏｌ Ｓｃｉ．）、２０１１年４月１５日；第３０３巻（第１－２号）：ｐ．１～１２（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）を参照のこと。初期症状としては、歩行困難などの協調運動不全、平衡障害、脚衰弱、歩行能力低下、協調運動障害、構音障害、眼振、感覚障害、脊柱後側弯症、および足変形が挙げられる。パーキンソン（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ）ら著、ジャーナル・オブ・ニューロケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、２０１３年、第１２６巻（増補版１）、ｐ．１０３～１１７を参照のこと。この疾患は、概して、移動に車椅子が必要になるまで進行する。白人集団におけるＦＡの発症率は、約２０，０００人に１人～約５０，０００人に１人であり、欧州集団における推測保因者頻度は、約１２０人に１人である。ナゲシュワラン（Ｎａｇｅｓｈｗａｒａｎ）およびフェステンシュタイン（Ｆｅｓｔｅｎｓｔｅｉｎ）著、フロンティア・イン・ニューロロジー（Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ）、第６巻、Ａｒｔ．２６２（２０１５年）；カンプサーノ（Ｃａｍｐｕｚａｎｏ）ら著、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、第２７１巻、第５２５４号（１９９６年３月８日）：ｐ．１４２３（これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）を参照のこと。
ＦＸＮ遺伝子におけるイントロンＧＡＡトリプレット反復の延長は、ＦＡをもたらすフラタキシンの発現低減の遺伝的原因である。パーキンソン（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ）ら著、ジャーナル・オブ・ニューロケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、２０１３年、第１２６巻（増補版１）、ｐ．１０３～１１７を参照のこと。この欠損は、時間の経過と共に、前述の症状ならびに細胞代謝に対する影響による頻繁な疲労を引き起こす。
現在、ＦＡに有効な治療は存在せず、患者は、ほとんどの場合、症状管理のためにモニターされるに過ぎない。したがって、当該技術分野には、ＦＸＮ関連障害を治療するための医薬組成物および方法を開発し、ＦＡを被っている患者のタンパク質欠損を改善するための長年にわたる切実な必要性が依然として存在する。
本発明のＡＡＶ粒子の送達は、フリードライヒ運動失調症に罹患している対象を治療するために使用してもよい。一部の場合において、本発明の方法は、フリードライヒ運動失調症を発症した疑いのある対象を治療するために使用してもよい。本発明のＡＡＶ粒子の送達は、フラタキシンタンパク質の増加をもたらし得る。更に、フラタキシンタンパク質のこうした増加は、移動の改善を伴うことも伴わないこともある。
一実施形態において、フラタキシンポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、フリードライヒ運動失調症に罹患している対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、フラタキシンポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子は、小脳の歯状核、脳幹核および／または脊髄のクラーク柱に送達してもよい。これらの領域の１つ以上への送達は、対象のフリードライヒ運動失調症を治療および／またはその影響を軽減し得る。
一実施形態において、フラタキシンポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子は、対象のフリードライヒ運動失調症を治療するために、中枢神経系、末梢神経系、および／または末梢臓器へと静脈内投与によって送達してもよい。
心血管疾患
心臓疾患または心臓および血管疾患とも呼ばれる心血管疾患は、心臓および／または血管の多くの疾患または障害を記述する一般用語である。心血管疾患の疾患または障害の多くは、プラークが動脈の壁に集積するアテローム性動脈硬化症に関連する。この集積により、動脈が狭くなり、血液の流れが難しくなる。心血管疾患の非限定的な例としては、心不全（心臓が、しかるべく血液を押し出さなくなる場合）、不整脈（心臓のリズム異常、例えば、徐脈（１分当たり６０拍未満の心拍数）または頻脈（１分当たり１００拍超の心拍数））、心臓弁の問題（例えば、狭窄（弁が十分に開かず、血液がしかるべく流れることができないこと）、逆流（弁が適切に閉じないこと）、および逸脱（弁小葉が隆起または逸脱して上方心房へと戻ること））、脳卒中（例えば、脳に給送する血管が閉塞する場合の虚血性脳卒中）、および心臓発作（心臓への血流が阻止される場合）が挙げられる。
本発明のＡＡＶ粒子は、心血管疾患を罹患している対象を治療するために使用してもよい。
心不全
心不全は、合衆国における死亡の主要原因であり、１年当たり患者がおよそ５８０万人であり、３００，０００人が死亡する。心不全は、限定はされないが、食事、喫煙、高血圧または遺伝を含めた種々の要因によって引き起こされる心臓疾患の共通のエンドポイントである。心不全は、心筋収縮性障害につながるカルシウム処理の調節異常によって引き起こされる場合がある。心不全の現行治療としては、限定はされないが、対症療法（例えば、利尿剤、β－アドレナリン遮断剤、および／またはアンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害剤）、およびデバイスまたは手術療法（例えば、左室補助デバイス（ＬＶＡＤ）、弁置換術、および／または血管形成術）が挙げられる。こうした現行療法は、心臓収縮性を直接的には治さず、この疾患の短期解決策を提供するに過ぎない。心不全を治療する長期療法選択肢は、ＡＡＶ送達を使用する遺伝子療法である。
心臓ＡＡＶ遺伝子療法手法の大多数は、心筋収縮性をレスキューするために、β－アドレナリン作動系（βＡＲＫｃｔ、アデニリルシクラーゼ６）またはカルシウム処理タンパク質（ＳＥＲＣＡ２ａ、ＰＰ１、Ｓ１００Ａ１）に着目している。例えば、フロート（Ｈｕｌｏｔ）ら、２０１６年およびゾウエイン（Ｚｏｕｅｉｎ）＆ブーズ（Ｂｏｏｚ）、２０１３年（これらの内容は全体として参照により援用される）を参照のこと。しかしながら、本明細書に記載されるＡＡＶカプシドの全身送達または標的送達による心筋細胞の形質導入の増加は、心不全治療の最良の機会を提供する。
ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）は、心不全を有する対象を分類するための機能別分類方式を作成した。ＮＹＨＡは、対象が身体活動中にどの程度の制限を受けるかに基づき、４つのクラスの患者症状評価および４つのクラスの客観的評価を提供する。クラスＩ患者症状評価は、対象が身体活動の制限を有しないことを意味し、通常の身体活動は、対象に過度の疲労、動悸、または息切れを引き起こさない。クラスＩＩ患者症状評価は、対象が身体活動にわずかな制限を有することを意味し、安静時は快適であるが、通常の身体活動は、疲労、動悸、および息切れをもたらす。クラスＩＩＩ患者症状評価は、対象が身体活動の制限を有することを意味し、対象は、安静時は快適であるが、通常活動以外の活動は、疲労、動悸または息切れを引き起こす。クラスＩＶ患者症状評価は、対象が不快を感じずには、いかなる身体活動も続けることができないことを意味する。客観的評価は、対象が心血管疾患の客観的証拠を示さず、症状もなく、通常の身体活動の限界もないことを意味する。クラスＢ客観的評価は、最小限の心血管疾患の客観的証拠があり、軽度の症状および通常活動にわずかな制限があるが、対象は安静時には快適であることを意味する。クラスＣ客観的評価は、中等度に重度の心血管疾患の客観的証拠があり、対象は、安静時のみ快適であり、通常未満の活動中でさえ症状による顕著な活動制限を有することを意味する。クラスＤ客観的評価は、重度の心血管疾患の客観的証拠があり、対象は、安静時でさえ症状を示し、重度の活動限界を有することを意味する。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子の送達は、心不全を有する対象を治療するために使用してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子の送達は、心筋損傷後に生じる。一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子の送達は、対象が心室機能低下を示した後で生じる。一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ジゴキシンを対象に投与した後で生じる。一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ジゴキシンを対象に投与すると同時に生じる。一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子の送達は、対象が心室機能低下を示した後だが、患者が心拍出量低減を有する前に生じる。一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子の送達は、ベータ遮断剤を対象に投与する前に生じる。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、ジゴキシン、ベータ遮断剤、ＡＣＥ１、ａＲＢ、スピロノラクトン、利尿剤、および／または血管拡張剤と併用して投与される。
一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２（ＳＥＲＣＡ２ａとも呼ばれる）ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子が、心不全を有する対象を治療するために投与される。理論によって束縛されることを望むものではないが、ＡＴＰアーゼ筋小胞体Ｃａ２＋輸送２（筋小胞体Ｃａ２＋ ＡＴＰアーゼ（ＳＥＲＣＡ２ａ）とも呼ばれる）は、心筋細胞のカルシウム循環の成分である。筋小胞体（ＳＲ）におけるカルシウム輸送（Ｃａ２＋）に関与するタンパク質の機能低下は、心不全後に見られる収縮／弛緩欠損を引き起こす場合がある。ＡＴＰ２Ａ２の発現および活性の低下は、心不全後のヒト組織で観察されている（アライ（Ａｒａｉ）ら著、サーキュレーション・リサーチ（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）第７２巻（第２号）２０１３年２月を参照のこと。この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。カルシウムサイクルおよび収縮性は、対象におけるＡＴＰ２Ａ２過剰発現によって回復させることができる。
一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、対象におけるＡＴＰ２Ａ２発現を増加させる。発現は、目的の細胞、組織および／または臓器において増加させることができる。非限定的な例として、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心臓で増加する。非限定的な例として、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞で増加する。
一実施形態において、Ｓ１００Ａ１ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子が、心不全を有する対象を治療するために投与される。理論によって束縛されることを望むものではないが、Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ａ１は、ＡＴＰ２Ａ２、ＲｙＲ、ミトコンドリアＡＴＰ産生および／またはタイチン媒介性収縮の活性を増強する。筋小胞体（ＳＲ）におけるカルシウム輸送（Ｃａ２＋）に関与するタンパク質であるＡＴＰ２Ａ２の活性増加は、心不全後に見られる収縮／弛緩欠損を治すことができる。
一実施形態において、Ｓ１００Ａ１ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、対象におけるＳ１００Ａ１発現を増加させる。発現は、目的の細胞、組織および／または臓器において増加させることができる。非限定的な例として、Ｓ１００Ａ１の発現は、心臓において増加する。非限定的な例として、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞において増加する。
一実施形態において、Ｓ１００Ａ１ポリヌクレオチドを含む本発明のＡＡＶ粒子の送達は、対象におけるＡＴＰ２Ａ２の発現を増加させる。発現は、目的の細胞、組織および／または臓器において増加させることができる。非限定的な例として、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心臓において増加する。非限定的な例として、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞において増加する。
神経学的疾患を治療する方法
タンパク質ペイロードをコードするＡＡＶ粒子
本発明では、本発明のＡＡＶ粒子を細胞に導入する方法であって、ベクターのいずれかを、標的ｍＲＮＡおよびタンパク質の産生の増加が生じるのに十分な量で前記細胞へと導入する工程を含む方法が提供される。一部の態様において、細胞は、筋細胞、肝細胞、限定はされないが、運動ニューロン、海馬ニューロン、嗅内ニューロン、視床ニューロンまたは皮質ニューロンなどのニューロン、およびアストロサイトまたはミクログリアなどのグリア細胞であってもよい。
本発明には、治療を必要とする対象における標的タンパク質（例えば、ＡｐｏＥ、ＦＸＮ）の不十分な機能／存在に関連する神経学的疾患を治療する方法が開示される。この方法は、任意選択で、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を対象に投与する工程を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的遺伝子発現を増加させ、標的タンパク質産生を増加させ、したがって対象の神経学的疾患の１つ以上の症状を軽減することができ、対象は治療的に処置される。
一部の実施形態において、タンパク質ペイロードをコードする核酸を含む本発明のＡＡＶ粒子は、静脈内投与後に血液脳関門を越える伝達を可能にするＡＡＶカプシドを含む。一例において、ＡＡＶカプシドはＶＯＹ１０１であり、別の例において、ＡＡＶカプシドはＶＯＹ２０１である。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身性投与により対象の中枢神経系に投与される。一実施形態において、全身性投与は静脈内注射である。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の中枢神経系に投与される。他の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば、対象の脳）に投与される。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射により対象の中枢神経系に投与される。実質内注射の非限定的な例としては、視床内、線条体内、海馬内または嗅内皮質標的化が挙げられる。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射および髄腔内注射により対象の中枢神経系に投与される。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、限定はされないが、海馬ニューロン、皮質ニューロン、運動ニューロンもしくは嗅内ニューロン；オリゴデンドロサイト、アストロサイトおよびミクログリアを含めたグリア細胞；ならびに／またはＴ細胞などのニューロンの周囲にある他の細胞を含めた特定のタイプの標的細胞に送達してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、線条体および／または皮質のニューロンに送達してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、神経学的疾患の療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、タウオパシーの療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、アルツハイマー病の療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、筋萎縮性側索硬化症の療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、ハンチントン病の療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、パーキンソン病の療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、フリードライヒ運動失調症の療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を使用して、神経学的疾患を治療するためにアストロサイトにおける標的タンパク質発現を増加させてもよい。アストロサイトにおける標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ミクログリアにおける標的タンパク質を増加させるために使用してもよい。ミクログリアにおける標的タンパク質の増加は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、皮質ニューロンにおける標的タンパク質を増加させるために使用してもよい。皮質ニューロンにおける標的タンパク質の増加は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、海馬ニューロンにおける標的タンパク質を増加させるために使用してもよい。海馬ニューロンにおける標的タンパク質の増加は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＤＲＧおよび／または交感神経ニューロンにおける標的タンパク質を増加させるために使用してもよい。ＤＲＧおよび／または交感神経ニューロンにおける標的タンパク質の増加は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を使用して、神経学的疾患を治療するために、感覚ニューロンにおける標的タンパク質を増加させてもよい。感覚ニューロンにおける標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、標的タンパク質を増加させ、対象の神経学的疾患の症状を軽減するために使用してもよい。標的タンパク質の増加および／または神経学的疾患の症状の軽減は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％変更（標的タンパク質の産生が増加、および神経学的疾患の症状が軽減）され得る。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、限定はされないが、全機能的能力（ＴＦＣ：ｔｏｔａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｃａｐａｃｉｔｙ）尺度などの標準的な評価方式によって測定される機能的能力および日常生活活動の低下を軽減するために使用してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、神経学的疾患の症状を測定するために使用される任意の評価における能力を改善するために使用してもよい。かかる評価としては、限定はされないが、ＡＤＡＳ－ｃｏｇ（アルツハイマー病評価尺度－認知）、ＭＭＳＥ（ミニメンタルステート検査）、ＧＤＳ（老年期うつ尺度）、ＦＡＱ（機能活性質問票）、ＡＤＬ（日常生活の活動）、ＧＰＣＯＧ（一般開業医認知評価）、Ｍｉｎｉ－Ｃｏｇ、ＡＭＴＳ（簡易メンタル試験尺度）、時計描画試験、６－ＣＩＴ（６項目認知障害試験）、ＴＹＭ（自記式認知機能検査（Ｔｅｓｔ Ｙｏｕｒ Ｍｅｍｏｒｙ））、ＭｏＣａ（モントリオール認知評価）、ＡＣＥ－Ｒ（アデンブルックズ認知評価）、ＭＩＳ（記憶障害スクリーニング）、ＢＡＤＬＳ（ブリストル日常生活活動尺度）、バーセル指数、機能的自立度評価法、手段的日常生活動作能力、ＩＱＣＯＤＥ（高齢者における認知機能低下のインフォーマントアンケート（Ｉｎｆｏｒｍａｎｔ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ ｏｎ Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｄｅｃｌｉｎｅ ｉｎ ｔｈｅ Ｅｌｄｅｒｌｙ））、神経精神症状評価票、コーエン－マンスフィールドアジテーション評価票（Ｃｏｈｅｎ－Ｍａｎｓｆｉｅｌｄ Ａｇｉｔａｔｉｏｎ Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ）、ＢＥＨＡＶＥ－ＡＤ、ＥｕｒｏＱｏｌ、ショートフォーム－３６（Ｓｈｏｒｔ Ｆｏｒｍ－３６）および／またはＭＢＲ介護者緊張度指数（ＭＢＲ Ｃａｒｅｇｉｖｅｒ Ｓｔｒａｉｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）、またはシーハンＢ（Ｓｈｅｅｈａｎ Ｂ）（セラピュティック・アドバンス・イン・ニューロロジカル・ディスオーダー（Ｔｈｅｒ Ａｄｖ Ｎｅｕｒｏｌ Ｄｉｓｏｒｄ．）、第５巻（第６号）：ｐ．３４９～３５８（２０１２年）（この内容は本明細書において全体として参照により援用される））に記載される他の試験のいずれかが挙げられる。
一部の実施形態において、本組成物は、神経学的疾患を治療するための単独治療薬または併用治療薬として投与される。
標的タンパク質をコードするＡＡＶ粒子は、１つ以上の他の治療剤と併用して使用してもよい。「～と併用して」とは、その薬剤が同じ時点で投与されなければならないこと、および／または一緒に送達されるように製剤化されなければならないことを含意するよう意図するものではなく、しかしながらこれらの送達方法は本開示の範囲内にある。組成物は、１つ以上の他の所望の治療薬または医療手技と同時に、その前に、またはその後に投与することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤について決定された用量および／またはタイムスケジュールで投与されることになる。
本発明のＡＡＶ粒子と併用して使用することができる治療剤は、酸化防止剤、抗炎症剤、抗アポトーシス剤、カルシウム調節剤、抗グルタミン酸剤（ａｎｔｉｇｌｕｔａｍａｔｅｒｇｉｃ ａｇｅｎｔ）、構造タンパク質阻害剤、筋肉機能に関与する化合物、および金属イオン調節に関与する化合物である小分子化合物であってもよい。非限定的な例として、併用療法は、運動ニューロン変性に対するそれらの神経保護効果に関して試験されている、小分子化合物、成長因子およびホルモンなどの１つ以上の神経保護剤との併用であってもよい。
本明細書に記載されるＡＡＶ粒子と併用して使用することができる、神経学的疾患を治療するために試験されている化合物としては、限定はされないが、コリンエステラーゼ阻害剤（ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン）、メマンチンなどのＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、抗精神病剤、抗うつ剤、抗痙攣剤（例えば、ミオクローヌスに対するバルプロ酸ナトリウムおよびレベチラセタム）、セクレターゼ阻害剤、アミロイド凝集阻害剤、銅または亜鉛調節剤、ＢＡＣＥ阻害剤、メチレンブルー、フェノチアジン、アントラキノン、ｎ－フェニルアミンまたはローダミンなどのタウ凝集阻害剤、ＮＡＰ、タキソールまたはパクリタキセルなどの微小管安定化剤、ＧＳＫ３β（リチウム）またはＰＰ２Ａを標的とするものなどの、キナーゼまたはホスファターゼ阻害剤、Ａβペプチドまたはタウホスホエピトープによる免疫化、抗タウまたは抗アミロイド抗体、ドーパミン枯渇剤（例えば、舞踏病に対するテトラベナジン）、ベンゾジアゼピン（例えば、ミオクローヌス、舞踏病、ジストニア、こわばり、および／または痙縮に対するクロナゼパム）、ドーパミンのアミノ酸前駆体（例えば、こわばりに対するレボドーパ）、骨格筋弛緩剤（例えば、こわばりおよび／または痙縮に対するバクロフェン、チザニジン）、筋肉麻痺を引き起こす神経筋接合部でのアセチコリン（ａｃｅｔｙｃｈｏｌｉｎｅ）放出の阻害剤（例えば、歯ぎしりおよび／またはジストニアに対するボツリヌス毒素）、非典型神経遮断剤（例えば、精神病および／または被刺激性に対するオランザピンおよびクエチアピン、精神病、舞踏病および／または被刺激性に対するリスペリドン、スルピリドおよびハロペリドール、治療抵抗性精神病に対するクロザピン、顕著な陰性症状を有する精神病に対するアリピプラゾール）、選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）（例えば、うつ、不安、妄想強迫行動および／または被刺激性に対するシタロプラム、フルオキセチン、パロキセチン、セルトラリン、ミルタザピン、ベンラファキシン）、催眠剤（例えば、睡眠－覚醒サイクルの変更に対するキソピクロン（ｘｏｐｉｃｌｏｎｅ）および／またはゾルピデム）、抗痙攣剤（例えば、躁病または軽躁病に対するバルプロ酸ナトリウムおよびカルバマゼピン）および気分安定剤（例えば、躁病または軽躁病に対するリチウム）が挙げられる。
神経栄養因子を、本発明のＡＡＶ粒子との併用療法で神経学的疾患を治療するために使用してもよい。一般に、神経栄養因子は、ニューロンの生存、成長、分化、増殖および／または成熟を促進するか、またはニューロンの活性増加を刺激する物質であると定義される。一部の実施形態において、本方法は、治療を必要とする対象への１つ以上の栄養因子の送達を更に含む。栄養因子としては、限定はされないが、ＩＧＦ－Ｉ、ＧＤＮＦ、ＢＤＮＦ、ＣＴＮＦ、ＶＥＧＦ、コリベリン、キサリプロデン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンおよびＡＤＮＦ、ならびにこれらの変異体を挙げることができる。
一態様において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ－ＩＧＦ－Ｉ（例えば、ヴィンセント（Ｖｉｎｃｅｎｔ）ら著、ニューロモレキュラー・メディシン（Ｎｅｕｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、２００４年、第６巻、ｐ．７９～８５を参照のこと；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）およびＡＡＶ－ＧＤＮＦ（例えば、ワン（Ｗａｎｇ）ら著、ジャーナル・オブ・ニューロサイエンス（Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．）、２００２年、第２２巻、ｐ．６９２０～６９２８を参照のこと；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）などの、神経栄養因子を発現するＡＡＶ粒子と共投与してもよい。
一部の実施形態において、神経学的疾患を治療するための本発明の組成物は、必要とする対象に、静脈内、筋肉内、皮下、腹腔内、実質内、軟膜下、髄腔内および／または脳室内投与され、ＡＡＶ粒子が、血液脳関門および血液脊髄関門の一方または両方を通過することを可能にする。一部の態様において、この方法は、本発明のＡＡＶベクター粒子を含む組成物の治療有効量を（例えば、輸液ポンプおよび／または送達足場（ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｓｃａｆｆｏｌｄ）を使用して）対象の中枢神経系（ＣＮＳ）に直接投与（例えば、実質内投与、脳室内投与および／または髄腔内投与）する工程を含む。ベクターを使用して、標的遺伝子発現を増加させることができ、および／または対象の神経学的疾患の１つ以上の症状を軽減することができ、対象は治療的に処置される。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質レベルを増加させ得る。標的タンパク質レベルは、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも５０％増加させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも４０％増加させ得る。非限定的な例として、対象は、標的タンパク質の１０％の増加を有し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを、ベースラインから倍増させ得る。一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、５～６倍のより高いレベルの標的タンパク質につながる。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質の発現を増加させ得る。標的タンパク質の発現は、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも５０％増加させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも４０％増加させ得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への静脈内投与は、対象における標的タンパク質のＣＮＳ発現を増加させ得る。標的タンパク質の発現は、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、ＣＮＳにおける標的タンパク質の発現を少なくとも５０％増加させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、ＣＮＳにおける標的タンパク質の発現を少なくとも４０％増加させ得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質の発現を増加させることになり、標的タンパク質の発現増加は、対象の神経学的疾患の影響および／または症状を軽減させることになる。
調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子
本発明には、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞へと導入する方法であって、ベクターのいずれかを、標的ｍＲＮＡの分解が生じるのに十分な量で前記細胞へと導入し、それにより細胞において標的特異的ＲＮＡｉを活性化させる工程を含む方法が提供される。一部の態様において、細胞は、筋細胞、幹細胞、限定はされないが、運動ニューロン、海馬ニューロン、嗅内ニューロン、視床ニューロンまたは皮質ニューロンなどのニューロン、およびアストロサイトまたはミクログリアなどのグリア細胞であってもよい。
本発明には、治療を必要とする対象における標的タンパク質の機能障害に関連する神経学的疾患を治療する方法が開示される。この方法は、任意選択で、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を対象に投与する工程を含む。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子は、標的遺伝子発現をサイレンシングし、標的タンパク質産生を阻害し、対象の神経学的疾患の１つ以上の症状を軽減することができ、対象は治療的に処置される。
一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、静脈内投与後に血液脳関門を越える伝達を可能にするＡＡＶカプシドを含む。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の中枢神経系に投与される。他の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば、対象の脳）に投与される。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身性投与により対象の中枢神経系に投与される。一実施形態において、全身性投与は静脈内注射である。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内投与により対象の中枢神経系に投与される。実質内注射の非限定的な例としては、視床内、線条体内、海馬内または嗅内皮質標的化が挙げられる。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射および髄腔内注射により対象の中枢神経系に投与される。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、限定はされないが、海馬ニューロン、皮質ニューロン、運動ニューロンまたは嗅内ニューロン；オリゴデンドロサイト、アストロサイトおよびミクログリアを含めたグリア細胞；ならびに／またはＴ細胞などのニューロンの周囲にある他の細胞を含めた特定のタイプの標的細胞へと送達してもよい。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、線条体および／または皮質におけるニューロンに送達してもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、神経学的疾患に対する療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、タウオパシーに対する療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、アルツハイマー病に対する療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、筋萎縮性側索硬化症に対する療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ハンチントン病に対する療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、パーキンソン病に対する療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、フリードライヒ運動失調症に対する療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を使用して、神経学的疾患を治療するためにアストロサイトにおける標的タンパク質を抑制してもよい。アストロサイトにおける標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％抑制され得る。アストロサイトにおける標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％低減され得る。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ミクログリアにおける標的タンパク質を抑制するために使用してもよい。ミクログリアにおける標的タンパク質の抑制は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％抑制され得る。低減は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％であってもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、皮質ニューロンにおける標的タンパク質を抑制するために使用してもよい。皮質ニューロンにおける標的タンパク質の抑制は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％抑制され得る。低減は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％であってもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、海馬ニューロンにおける標的タンパク質を抑制するために使用してもよい。海馬ニューロンにおける標的タンパク質の抑制は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％抑制され得る。低減は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％であってもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ＤＲＧおよび／または交感神経ニューロンにおける標的タンパク質を抑制するために使用してもよい。ＤＧＲおよび／または交感神経ニューロンにおける標的タンパク質の抑制は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％抑制され得る。低減は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％であってもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を使用して、神経学的疾患を治療するために感覚ニューロンにおける標的タンパク質を抑制することができる。感覚ニューロンにおける標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％抑制され得る。感覚ニューロンにおける標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％または９０～９５％低減され得る。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、標的タンパク質を抑制するために、および対象の神経学的疾患の症状を軽減するために使用してもよい。標的タンパク質の抑制および／または神経学的疾患の症状の軽減は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％軽減または抑制され得る。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を使用して、限定はされないが全機能的能力（ＴＦＣ）尺度など、標準的な評価方式によって測定される機能的能力および日常生活活動の低下を軽減してもよい。
一部の実施形態において、本組成物は、神経学的疾患を治療するための単独治療薬または併用治療薬として投与される。
目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖をコードするＡＡＶ粒子は、１つ以上の他の治療剤と併用して使用してもよい。「～と併用して」とは、その薬剤が同じ時点で投与されなければならないこと、および／または一緒に送達されるように製剤化されなければならないことを含意するよう意図するものではなく、しかしながらこれらの送達方法は本開示の範囲内にある。組成物は、１つ以上の他の所望の治療薬または医療手技と同時に、その前に、またはその後に投与することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤について決定された用量および／またはタイムスケジュールで投与されることになる。
本発明のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列をコードするＡＡＶ粒子と併用して使用することができる治療剤は、酸化防止剤、抗炎症剤、抗アポトーシス剤、カルシウム調節剤、抗グルタミン酸剤、構造タンパク質阻害剤、筋機能に関与する化合物、および金属イオン調節に関与する化合物である小分子化合物であってもよい。
本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子と併用して使用することができる、神経学的疾患を治療するために試験された化合物としては、限定はされないが、コリンエステラーゼ阻害剤（ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン）、メマンチンなどのＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、抗精神病剤、抗うつ剤、抗痙攣剤（例えば、ミオクローヌスに対するバルプロ酸ナトリウムおよびレベチラセタム）、セクレターゼ阻害剤、アミロイド凝集阻害剤、銅または亜鉛調節剤、ＢＡＣＥ阻害剤、メチレンブルー、フェノチアジン、アントラキノン、ｎ－フェニルアミンまたはローダミンなどのタウ凝集阻害剤、ＮＡＰ、タキソールまたはパクリタキセルなどの微小管安定化剤、ＧＳＫ３β（リチウム）またはＰＰ２Ａを標的とするものなどの、キナーゼまたはホスファターゼ阻害剤、Ａβペプチドまたはタウホスホエピトープによる免疫化、抗タウまたは抗アミロイド抗体、ドーパミン枯渇剤（例えば、舞踏病に対するテトラベナジン）、ベンゾジアゼピン（例えば、ミオクローヌス、舞踏病、ジストニア、こわばり、および／または痙縮に対するクロナゼパム）、ドーパミンのアミノ酸前駆体（例えば、こわばりに対するレボドーパ）、骨格筋弛緩剤（例えば、こわばりおよび／または痙縮に対するバクロフェン、チザニジン）、筋肉麻痺を引き起こす神経筋接合部でのアセチコリン放出の阻害剤（例えば、歯ぎしりおよび／またはジストニアに対するボツリヌス毒素）、非典型神経遮断剤（例えば、精神病および／または被刺激性に対するオランザピンおよびクエチアピン、精神病、舞踏病および／または被刺激性に対するリスペリドン、スルピリドおよびハロペリドール、治療抵抗性精神病に対するクロザピン、顕著な陰性症状を有する精神病に対するアリピプラゾール）、選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）（例えば、うつ、不安、妄想強迫行動および／または被刺激性に対するシタロプラム、フルオキセチン、パロキセチン、セルトラリン、ミルタザピン、ベンラファキシン）、催眠剤（例えば、睡眠－覚醒サイクルの変更に対するキソピクロン（ｘｏｐｉｃｌｏｎｅ）および／またはゾルピデム）、抗痙攣剤（例えば、躁病または軽躁病に対するバルプロ酸ナトリウムおよびカルバマゼピン）および気分安定剤（例えば、躁病または軽躁病に対するリチウム）が挙げられる。
神経栄養因子を、神経学的疾患を治療するための本発明のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列をコードするＡＡＶ粒子との併用療法で使用してもよい。一般に、神経栄養因子は、ニューロンの生存、成長、分化、増殖および／もしくは成熟を促進するか、またはニューロンの活性増加を刺激する物質であると定義される。一部の実施形態において、本方法は、治療を必要とする対象への１つ以上の栄養因子の送達を更に含む。栄養因子としては、限定はされないが、ＩＧＦ－Ｉ、ＧＤＮＦ、ＢＤＮＦ、ＣＴＮＦ、ＶＥＧＦ、コリベリン、キサリプロデン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンおよびＡＤＮＦ、ならびにこれらの変異体を挙げることができる。
一態様において、目的の遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖の核酸配列をコードするＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ－ＩＧＦ－Ｉ（例えば、ヴィンセント（Ｖｉｎｃｅｎｔ）ら著、ニューロモレキュラー・メディシン（Ｎｅｕｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、２００４年、第６巻、ｐ．７９～８５を参照のこと；この内容は全体として参照により本明細書に援用される）およびＡＡＶ－ＧＤＮＦ（例えば、ワン（Ｗａｎｇ）ら著、ジャーナル・オブ・ニューロサイエンス（Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．）、２００２年、第２２巻、ｐ．６９２０～６９２８を参照のこと；この内容は全体として参照により本明細書に援用される）などの、神経栄養因子を発現するＡＡＶ粒子と共投与してもよい。
一部の実施形態において、神経学的疾患を治療するための本発明の組成物は、必要とする対象に、静脈内、筋肉内、皮下、腹腔内、実質内、髄腔内および／または脳室内投与され、ｓｉＲＮＡ分子またはｓｉＲＮＡ分子を含むベクターが、血液脳関門および血液脊髄関門の一方または両方を通過することを可能にする。一部の態様において、この方法は、本発明のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列をコードするＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を（例えば、輸液ポンプおよび／または送達足場を使用して）対象の中枢神経系（ＣＮＳ）に直接投与（例えば、実質内投与、脳室内投与および／または髄腔内投与）する工程を含む。ベクターを使用して、標的遺伝子発現をサイレンシングまたは抑制ことができ、および／または対象の神経学的疾患の１つ以上の症状を軽減することができ、対象は治療的に処置される。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡをコードするＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質レベルを低下させ得る。標的タンパク質レベルは、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％低下され得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも５０％低下させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも４０％低下させ得る。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡをコードするＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質の発現を低下させ得る。標的タンパク質の発現は、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％低下され得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも５０％低下させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも４０％低下させ得る。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡをコードするＡＡＶ粒子の対象への静脈内投与は、対象のＣＮＳにおける標的タンパク質の発現を低下させ得る。標的タンパク質の発現は、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％低下され得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも５０％低下させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも４０％低下させ得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質の発現を低減させることになり、標的タンパク質の発現低減は、対象の神経学的疾患の影響および／または症状を軽減することになる。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、対象の標的タンパク質を減少させるために使用してもよい。減少は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％であってもよい。非限定的な例として、対象は、標的タンパク質の７０％の減少を有し得る。非限定的な例として、対象は、標的タンパク質の５０％減少を有し得る。非限定的な例として、対象は、標的タンパク質の４０％減少を有し得る。非限定的な例として、対象は、標的タンパク質の１０％の減少を有し得る。
心血管疾患の治療法
本発明では、本発明のＡＡＶ粒子を細胞へと導入する方法であって、ベクターのいずれかを、標的ｍＲＮＡおよびタンパク質の産生の増加が生じるのに十分な量で前記細胞へと導入する工程を含む方法が提供される。一部の態様において、細胞は、限定はされないが心筋細胞などの筋細胞であってもよい。
本発明には、治療を必要とする対象における標的タンパク質（例えば、ＡＴＰ２Ａ２）の不十分な機能／存在に関連する神経学的疾患を治療する方法が開示される。この方法は、任意選択で、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を対象に投与する工程を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的遺伝子発現を増加させ、標的タンパク質産生を増加させ、したがって対象の心血管疾患の１つ以上の症状を軽減することができ、対象は治療的に処置される。
一部の実施形態において、タンパク質ペイロードをコードする核酸を含む本発明のＡＡＶ粒子は、静脈内投与後に心筋細胞への分布を可能にするＡＡＶカプシドを含む。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身性投与により対象に投与される。一実施形態において、全身性投与は静脈内注射である。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の心血管系に直接投与される。他の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば、対象の心臓）に投与される。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、髄腔内注射により対象の心血管系に投与される。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、限定はされないが心筋細胞を含めた、特定のタイプの標的細胞へと送達してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、心筋細胞に送達してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、心血管疾患の療法として使用してもよい。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、拡張型心筋症（ＤＣＭ）の療法として使用してもよい。ＤＣＭは、心臓の心室および心房に影響を及ぼし、心筋が拡張を始めて、心筋の異常な収縮を引き起こし、その結果、心臓は血液を効率的に送り出さなくなる。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、肥大型心筋症の療法として使用してもよい。肥大型心筋症では、心筋の部分が拡大して、心臓の血液送出しが困難になる。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、心臓組織において標的タンパク質を増加させるために使用してもよい。心臓組織における標的タンパク質の増加は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を使用して、心血管疾患を治療するために、心筋細胞における標的タンパク質発現を増加させてもよい。心筋細胞における標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、標的タンパク質を増加させ、対象の心血管疾患の症状を低減するために使用してもよい。標的タンパク質の増加および／または心血管疾患の症状の軽減は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％変更（標的タンパク質の産生が増加、および心血管疾患の症状が軽減）され得る。
一部の実施形態において、本組成物は、心血管疾患を治療するための単独治療薬または併用治療薬として投与される。
標的タンパク質をコードするＡＡＶ粒子は、１つ以上の他の治療剤と併用して使用してもよい。「～と併用して」とは、その薬剤が同じ時点で投与されなければならないこと、および／または一緒に送達されるように製剤化されなければならないことを含意するよう意図するものではなく、しかしながらこれらの送達方法は本開示の範囲内にある。組成物は、１つ以上の他の所望の治療薬または医療手技と同時に、その前に、またはその後に投与することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤について決定された用量および／またはタイムスケジュールで投与されることになる。
本発明のＡＡＶ粒子と併用して使用することができる治療剤は、酸化防止剤、抗炎症剤、抗アポトーシス剤、カルシウム調節剤、抗グルタミン酸剤、構造タンパク質阻害剤、筋肉機能に関与する化合物、利尿剤、ＡＣＥ阻害剤、β－アドレナリン遮断剤、および金属イオン調節に関与する化合物である小分子化合物であってもよい。
一部の実施形態において、心血管疾患を治療するための本発明の組成物は、必要とする対象に、静脈内、筋肉内、皮下、髄腔内、順行性冠動脈注射、および／または脳室内投与され、ＡＡＶ粒子が、所望の細胞、組織、および／または臓器に送達されることを可能にする。一部の態様において、この方法は、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を（例えば、輸液ポンプおよび／または送達足場を使用して）対象の心血管系に直接投与（例えば、実質内投与、脳室内投与および／または髄腔内投与）する工程を含む。ベクターを使用して、標的遺伝子発現を増加させることができ、および／または対象の心血管疾患の１つ以上の症状を軽減することができ、対象は治療的に処置される。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象の標的タンパク質レベルを増加させ得る。標的タンパク質レベルは、限定はされないが、対象の心血管系、心血管系の領域、または心血管の特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも５０％増加させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも４０％増加させ得る。非限定的な例として、対象は、標的タンパク質の１０％の増加を有し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを、ベースラインから倍増させ得る。一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、５～６倍のより高いレベルの標的タンパク質につながる。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質の発現を増加させ得る。標的タンパク質の発現は、限定はされないが、対象の心血管系、心血管系の領域、または心血管系の特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも５０％増加させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも４０％増加させ得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への静脈内投与は、対象における標的タンパク質の心血管系発現を増加させ得る。標的タンパク質の発現は、限定はされないが、対象の心血管系、心血管系の領域、または心血管系の特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、心血管系における標的タンパク質の発現を少なくとも５０％増加させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、心血管系における標的タンパク質の発現を少なくとも４０％増加させ得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質の発現を増加させることになり、標的タンパク質の発現増加は、対象の心血管疾患の影響および／または症状を軽減することになる。
心不全の治療方法
本発明では、本発明のＡＡＶ粒子を細胞へと導入する方法であって、ベクターのいずれかを、標的ｍＲＮＡおよびタンパク質の産生の増加が生じるのに十分な量で前記細胞へと導入する工程を含む方法が提供される。一部の態様において、細胞は、限定はされないが心筋細胞などの筋細胞であってもよい。
本発明には、治療を必要とする対象における標的タンパク質（例えば、ＡＴＰ２Ａ２）の不十分な機能／存在に関連する心不全を治療する方法が開示される。この方法は、任意選択で、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を対象に投与する工程を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的遺伝子発現を増加させることができ、標的タンパク質産生を増加させることができ、したがって対象の心不全の１つ以上の症状を軽減することができ、対象は治療的に処置される。
一部の実施形態において、タンパク質ペイロードをコードする核酸を含む本発明のＡＡＶ粒子は、静脈内投与後に心筋細胞への分布を可能にするＡＡＶカプシドを含む。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身性投与により対象に投与される。一実施形態において、全身性投与は静脈内注射である。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の心血管系に直接投与される。他の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば、対象の心臓）に投与される。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物は、髄腔内注射により対象の心血管系に投与される。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、限定はされないが心筋細胞を含めた、特定のタイプの標的細胞へと送達してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、心筋細胞に送達してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、心不全の療法として使用してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、対象の入院数を低減するために使用してもよい。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、対象の生存を延長するために使用してもよい。
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、心臓組織における標的タンパク質を増加させるために使用してもよい。心臓組織における標的タンパク質の増加は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子を使用して、心不全を治療するために、心筋細胞における標的タンパク質発現を増加させてもよい。心筋細胞における標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。
一部の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、標的タンパク質を増加させ、対象の心不全の症状を軽減するために使用してもよい。標的タンパク質の増加および／または心不全の症状の軽減は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％変更（標的タンパク質の産生が増加、および心不全の症状が軽減）され得る。
一部の実施形態において、本組成物は、心不全を治療するための単独治療薬または併用治療薬として投与される。
標的タンパク質をコードするＡＡＶ粒子は、１つ以上の他の治療剤と併用して使用してもよい。「～と併用して」とは、その薬剤が同じ時点で投与されなければならないこと、および／または一緒に送達されるように製剤化されなければならないことを含意するよう意図するものではなく、しかしながらこれらの送達方法は本開示の範囲内にある。組成物は、１つ以上の他の所望の治療薬または医療手技と同時に、その前に、またはその後に投与することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤について決定された用量および／またはタイムスケジュールで投与されることになる。
本発明のＡＡＶ粒子と併用して使用することができる治療剤は、酸化防止剤、抗炎症剤、抗アポトーシス剤、カルシウム調節剤、抗グルタミン酸剤、構造タンパク質阻害剤、筋肉機能に関与する化合物、利尿剤、ＡＣＥ阻害剤、β－アドレナリン遮断剤、および金属イオン調節に関与する化合物である小分子化合物であってもよい。
一部の実施形態において、心血管疾患を治療するための本発明の組成物は、必要とする対象に、静脈内、筋肉内、皮下、髄腔内、順行性冠動脈注射、および／または脳室内投与され、ＡＡＶ粒子が、所望の細胞、組織、および／または臓器に送達されることを可能にする。一部の態様において、この方法は、本発明のＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を（例えば、輸液ポンプおよび／または送達足場を使用して）対象の心血管系に直接投与（例えば、実質内投与、脳室内投与および／または髄腔内投与）する工程を含む。ベクターを使用して、標的遺伝子発現を増加させることができ、および／または対象の心不全の１つ以上の症状を軽減することができ、対象は治療的に処置される。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象の標的タンパク質レベルを増加させ得る。標的タンパク質レベルは、限定はされないが、対象の心血管系、心血管系の領域、または心血管の特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも５０％増加させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも４０％増加させ得る。非限定的な例として、対象は、標的タンパク質の１０％の増加を有し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを、ベースラインから倍増させ得る。一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、５～６倍のより高いレベルの標的タンパク質につながる。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質の発現を増加させ得る。標的タンパク質の発現は、限定はされないが、対象の心血管系、心血管系の領域、または心血管系の特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも５０％増加させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質の発現を少なくとも４０％増加させ得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への静脈内投与は、対象における標的タンパク質の心血管系発現を増加させ得る。標的タンパク質の発現は、限定はされないが、対象の心血管系、心血管系の領域、または心血管系の特定の細胞など、対象において、約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９５～１００％増加し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、心血管系における標的タンパク質の発現を少なくとも５０％増加させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、心血管系における標的タンパク質の発現を少なくとも４０％増加させ得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象の心筋細胞における標的タンパク質の発現を増加させ得る。標的タンパク質の発現は、約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９０～９５％増加し得る。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象の心筋細胞においてＡＴＰ２Ａ２を発現させ得る。心筋細胞におけるＡＴＰ２Ａ２の発現は、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９０～９５％であってもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の３０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の３０～４０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の３０～５０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の３０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の３０～６０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の３０～７０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の３０～８０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の３０～９０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の２０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の２０～４０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の２０～５０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の２０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の２０～６０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の２０～７０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の２０～８０％で見られてもよい。一実施形態において、ＡＴＰ２Ａ２の発現は、心筋細胞の２０～９０％で見られてもよい。
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象の心筋細胞においてＳ１００Ａ１を発現させ得る。心筋細胞におけるＳ１００Ａ１の発現は、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％もしくは９０～９５％であってもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の３０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の３０～４０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の３０～５０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の３０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の３０～６０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の３０～７０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の３０～８０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の３０～９０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の２０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の２０～４０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の２０～５０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の２０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の２０～６０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の２０～７０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の２０～８０％で見られてもよい。一実施形態において、Ｓ１００Ａ１の発現は、心筋細胞の２０～９０％で見られてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質の発現を増加させることになり、標的タンパク質の発現増加は、対象の心不全の影響および／または症状を軽減することになる。
一実施形態において、心不全を治療するために、１×１０１３ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、経皮冠動脈内投与によって対象に投与される。
一実施形態において、心不全を治療するために、１×１０１３ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、静脈内投与によって対象に投与される。
一実施形態において、心不全を治療するために、２×１０１３ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、経皮冠動脈内投与によって対象に投与される。
一実施形態において、心不全を治療するために、２×１０１３ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、静脈内投与によって対象に投与される。
一実施形態において、心不全を治療するために、３×１０１３ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、経皮冠動脈内投与によって対象に投与される。
一実施形態において、心不全を治療するために、３×１０１３ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、静脈内投与によって対象に投与される。
一実施形態において、心不全を治療するために、３×１０１１ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、経皮冠動脈内投与によって対象に投与される。
一実施形態において、心不全を治療するために、３×１０１１ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、静脈内投与によって対象に投与される。
一実施形態において、心不全を治療するために、３×１０１２ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、経皮冠動脈内投与によって対象に投与される。
一実施形態において、心不全を治療するために、３×１０１２ＶＧの用量の本発明のＡＡＶ粒子が対象に投与される。非限定的な例として、この用量のＡＡＶ粒子は、静脈内投与によって対象に投与される。
Ｖ．キットおよびデバイス
キット
一実施形態において、本発明は、本発明の方法を便宜的および／または効果的に実行するための様々なキットを提供する。典型的に、キットは、ユーザが対象の複数の治療を行うことおよび／または複数の実験を行うことを可能にするのに十分な量および／または数の構成要素を含むであろう。
本発明のＡＡＶ粒子のうちのいずれかが、キットに含まれ得る。一部の実施形態において、キットは、本発明の化合物および／または組成物を作製および／または合成するための試薬および／または説明書を更に含み得る。一部の実施形態において、キットはまた、１つまたは複数の緩衝液も含み得る。一部の実施形態において、本発明のキットは、タンパク質または核酸のアレイまたはライブラリを作製するための構成要素を含んでもよく、したがって、例えば、固体支持体を含んでもよい。
一部の実施形態において、キットの構成要素は、水性媒体または凍結乾燥形態のいずれかで、パッケージングされ得る。キットの容器手段には、一般に、少なくとも１つのバイアル、試験管、フラスコ、ボトル、シリンジ、または他の容器手段が含まれ、その中に、構成要素が配置され、好ましくは、好適にアリコートされ得る。１つを上回ってキットの構成要素が存在する場合（標識化試薬および標識が、一緒にパッケージングされてもよい）、キットはまた、通常、追加の構成要素が別個に配置され得る第２、第３、またはその他の追加の容器も含んでよい。一部の実施形態において、キットはまた、滅菌の薬学的に許容可能な緩衝液および／または他の希釈剤を格納する第２の容器手段を含んでもよい。一部の実施形態において、様々な組合せの構成要素が、１つまたは複数のバイアルに含まれてもよい。本発明のキットはまた、典型的に、本発明の化合物および／または組成物を格納するための手段、例えば、タンパク質、核酸、および任意の他の試薬の容器を、商業販売のために緊密に封止した状態で含み得る。そのような容器としては、所望されるバイアルが中に保持される、射出成形または吹込み成形された容器を挙げることができる。
一部の実施形態において、キットの構成要素は、１つおよび／または複数の溶液で提供される。一部の実施形態において、溶液は、水溶液であり、滅菌水溶液が、特に好ましい。一部の実施形態において、キットの構成要素は、乾燥粉末として提供されてもよい。試薬および／または構成要素が乾燥粉末として提供される場合、かかる粉末は、好適な容積の溶媒の添加によって、復元され得る。一部の実施形態において、溶媒が別の容器手段で提供され得ることも想定される。一部の実施形態において、標識化色素は、乾燥粉末として提供される。一部の実施形態において、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００マイクログラムまたは少なくとももしくは多くともこれらの量の乾燥色素が、本発明のキットにおいて提供されることが、企図される。かかる実施形態において、色素は、次いで、任意の好適な溶媒、例えば、ＤＭＳＯ中に再懸濁され得る。
一部の実施形態において、キットは、キットの構成要素の利用ならびにキットに含まれていない任意の他の試薬の使用に関する説明書を含んでもよい。説明書には、実装され得るバリエーションが含まれてもよい。
デバイス
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ粒子を送達するためのデバイスおよび頭部固定アセンブリを使用して、対象に送達されてもよい。頭部固定アセンブリは、限定はされないが、ＭＲＩインターベンションズ社（ＭＲＩ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ）によって販売されている頭部固定アセンブリのいずれかであってもよい。非限定的な例として、頭部固定アセンブリは、米国特許第８，０９９，１５０号明細書、同第８，５４８，５６９号明細書、および同第９，０３１，６３６号明細書、ならびに国際特許公開第２０１１０８４９５号パンフレットおよび同第２０１４０１４５８５号パンフレット（これらの各々の内容は全体として参照により援用される）に記載されているアセンブリのいずれかであってもよい。頭部固定アセンブリは、限定はされないが、国際特許公開第２０１３１８１００８号パンフレットおよび米国特許出願公開第２０１３０３２５０１２号明細書（これらの内容は全体として参照により本明細書に援用される）に記載されているＭＲＩ適合性ドリルなどのＭＲＩ適合性ドリルと組み合わせて使用されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ粒子を送達するために、装置を対象における標的点へと位置させるための方法、システム、および／またはコンピュータプログラムを使用して、送達されてもよい。非限定的な例として、この方法、システム、および／またはコンピュータプログラムは、米国特許第８，３４０，７４３号明細書（これらの内容は、本明細書においてその全体として参照により援用される）に記載される方法、システム、および／またはコンピュータプログラムであってもよい。この方法には、体内の標的点および参照点を決定する工程であって、標的点および参照点により、それらの間に延びる計画された軌道線（ＰＴＬ）が定められる、工程；視覚化面を決定する工程であって、ＰＴＬが、照準点で視覚化面と交差する、工程；ガイドデバイスをＰＴＬに関連して移動するように身体に対して載置する工程であって、ガイドデバイスが、視覚化面と交差しない、工程；ガイド軸と視覚化面との間の交差の点（ＧＰＰ）を決定する工程；ならびにＧＰＰを、視覚化面における照準点とアラインメントする工程が含まれ得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、コンベンション強化送達デバイス（ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ－ｅｎｈａｎｃｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｄｅｖｉｃｅ）を使用して、対象に送達されてもよい。対流を使用した薬物のターゲティング送達の非限定的な例は、米国特許出願公開第２０１００２１７２２８号明細書、同第２０１３００３５５７４号明細書、および同第２０１３００３５６６０号明細書、ならびに国際特許公開第２０１３０１９８３０号パンフレットおよび同第２００８１４４５８５号パンフレットに記載されており、これらの各々の内容は、本明細書においてそれらの全体として参照により援用される。
一実施形態において、対象は、ＡＡＶ粒子の送達の前、最中、および／または後に、イメージングされてもよい。イメージング方法は、当該技術分野において公知および／または本明細書に記載されている方法、例えば、限定はされないが、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）であってもよい。非限定的な例として、イメージングは、治療効果を評価するために使用してもよい。別の非限定的な例として、イメージングは、ＡＡＶ粒子の送達補助のために使用してもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩガイドデバイスを使用して、送達されてもよい。ＭＲＩガイドデバイスの非限定的な例は、米国特許第９，０５５，８８４号明細書、同第９，０４２，９５８号明細書、同第８，８８６，２８８号明細書、同第８，７６８，４３３号明細書、同第８，３９６，５３２号明細書、同第８，３６９，９３０号明細書、同第８，３７４，６７７号明細書、および同第８，１７５，６７７号明細書、ならびに米国特許出願公開第２０１４００２４９２７号明細書に記載されており、これらの各々の内容は、本明細書においてそれらの全体として参照により援用される。非限定的な例として、ＭＲＩガイドデバイスは、米国特許第８，８８６，２８８号および同第８，７６８，４３３号（これらの各々の内容は、本明細書においてその全体として参照により援用される）に記載されるものなど、リアルタイムでデータを提供することが可能であり得る。別の非限定的な例として、ＭＲＩガイドデバイスまたはシステムは、米国特許第８，１７５，６７７号明細書および同第８，３７４，６７７号明細書（これらの各々の内容は、本明細書においてそれらの全体として参照により援用される）に記載されるシステムなど、ターゲティングカニューレと共に使用されてもよい。なおも別の非限定的な例として、ＭＲＩガイドデバイスには、例えば、米国特許第９，０５５，８８４号明細書および米国特許出願第２０１４００２４９２７号（これらの各々の内容は、本明細書においてそれらの全体として参照により援用される）に記載されている介入デバイスをガイドするための軌道ガイドフレームが含まれる。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合性チップアセンブリを使用して送達されてもよい。ＭＲＩ適合性チップアセンブリの非限定的な例は、米国特許出願公開第２０１４０２７５９８０号明細書に記載されており、この内容は、本明細書においてその全体として参照により援用される。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合性であるカニューレを使用して送達されてもよい。ＭＲＩ適合性カニューレの非限定的な例としては、国際特許公開第２０１１１３０１０７号パンフレット（この内容は本明細書においてその全体として参照により援用される）に教示されているものが挙げられる。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合性であるカテーテルを使用して送達されてもよい。ＭＲＩ適合性カテーテルの非限定的な例としては、国際特許公開第２０１２１１６２６５号パンフレット、米国特許第８，８２５，１３３号明細書、および米国特許出願公開第２０１４００２４９０９号明細書（これらの各々の内容は、本明細書においてそれらの全体として参照により援用される）に教示されているものが挙げられる。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、米国特許出願公開第２０１４０２７６５８２号明細書および同第２０１４０２７６６１４号明細書（これらの各々の内容は、本明細書においてそれらの全体として参照により援用される）に記載されている細長い筒状体およびダイヤフラムを有するデバイスを使用して、送達されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、限定はされないが、米国特許出願公開第２０１５０２２３９０５号明細書および同第２０１５０２３０８７１号明細書（これらの各々の内容は、本明細書においてそれらの全体として参照により援用される）に記載されているものなどのＭＲＩ適合性局在化および／またはガイダンスシステムを使用して、送達されてもよい。非限定的な例として、ＭＲＩ適合性局在化および／またはガイダンスシステムは、患者への固定のために適合された載置台、少なくとも３次元的に制御可能に移動させることができるように、載置台に取り付けるように構成されたルーメンを有するターゲティングカニューレ、ならびにターゲティングカニューレのルーメン内をスライドを介して隙間なく前進および後退するように構成された細長いプローブを備えてもよく、細長いプローブは、刺激電極または記録電極のうちの少なくとも１つを備える。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、米国特許出願公開第２０１５００３１９８２号明細書および同第２０１４００６６７５０号明細書、ならびに国際特許公開第２０１５０５７８０７号パンフレットおよび同第２０１４０３９４８１号パンフレット（これらの各々の内容は、本明細書においてそれらの全体として参照により援用される）に記載されている軌道フレームを使用して、対象に送達されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、遺伝子銃を使用して、対象に送達されてもよい。
ＶＩ．定義
本明細書の様々な箇所において、本開示の化合物の置換基は、群または範囲で、開示されている。本開示は、かかる群および範囲のメンバーのありとあらゆる個々の部分的な組合せを含むことが、具体的に意図される。
特に明記しない限り、下記の用語および語句は下記に説明する意味を有する。これらの定義は、性質の限定を意図するものでなく、本発明のある特定の態様のより明確な理解を提供するための役目を果たす。
約：本明細書で使用されるとき、「約」という用語は、記載される値の±１０％を意味する。
アデノ随伴ウイルス：本明細書で使用される「アデノ随伴ウイルス」または「ＡＡＶ」という用語は、ディペンドウイルス属のメンバー（それに由来する任意の粒子、配列、遺伝子、タンパク質、または成分を含む）を指す。
ＡＡＶ粒子：本明細書で使用されるとき、「ＡＡＶ粒子」は、カプシドと、少なくとも１つのペイロード領域および少なくとも１つのＩＴＲ領域を有するウイルスゲノムとを含むウイルスである。本開示のＡＡＶ粒子は、組換え的に産生されてもよく、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づいてもよい。ＡＡＶ粒子は、本明細書に記載されるかもしくは当該技術分野において公知の任意の血清型（血清型の組合せ（すなわち「シュードタイプ」ＡＡＶ）を含める）、または様々なゲノム（例えば一本鎖もしくは自己相補的）に由来し得る。加えて、ＡＡＶ粒子は、複製欠損型および／またはターゲティング型であってもよい。
活性：本明細書で使用されるとき、用語「活性」は、物事が起こるかまたは行われる状態を指す。本発明の組成物は活性を有してもよく、この活性は、１つ以上の生物学的事象を含んでもよい。
投与する：本明細書で使用されるとき、用語「投与する」は、対象に医薬品または組成物を提供することを指す。
組み合わせて投与される：本明細書で使用されるとき、「組み合わせて投与される」または「組合せ投与」という用語は、２つ以上の薬剤が、患者に各薬剤の効果のオーバーラップが存在し得るように、同時またはある間隔で、対象に投与されることを意味する。一部の実施形態において、それらは、互いに、約６０分以内、３０分以内、１５分以内、１０分以内、５分以内、もしくは１分以内に投与される。一部の実施形態において、薬剤の投与は、コンビナトリアル（例えば、相乗）効果が達成されるように、十分に一緒に近接した間隔となっている。
改善：本明細書で使用されるとき、用語「改善」または「改善する」は、病態または疾患の少なくとも１つの指標の重症度を低下させることを指す。例えば、神経変性障害の文脈では、改善には、ニューロン喪失の低減が含まれる。
動物：本明細書で使用されるとき、「動物」という用語は、動物界の任意のメンバーを指す。一部の実施形態において、「動物」は、発達の任意のステージにあるヒトを指す。一部の実施形態において、「動物」は、発達の任意のステージにある非ヒト動物を指す。ある特定の実施形態において、非ヒト動物は、哺乳動物（例えば、齧歯動物、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類、またはブタ）である。一部の実施形態において、動物には、限定はされないが、哺乳動物、鳥類、爬虫類、両生類、魚類、および蠕虫が含まれる。一部の実施形態において、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子操作動物、またはクローンである。
アンチセンス鎖：本明細書で使用されるとき、ｓｉＲＮＡ分子の「アンチセンス鎖」または「第１の鎖」または「ガイド鎖」という用語は、サイレンシングのターゲティング遺伝子のｍＲＮＡの約１０～５０ヌクレオチド、例えば、約１５～３０、１６～２５、１８～２３、または１９～２２ヌクレオチドの一部分と実質的に相補的な鎖を指す。アンチセンス鎖または第１の鎖は、標的特異的サイレンシングを誘導するのに所望の標的ｍＲＮＡ配列と十分に相補的な、例えば、ＲＮＡｉ機構またはプロセスによって所望の標的ｍＲＮＡの破壊を引き起こすのに十分な相補性の配列を有する。
およそ：本明細書で使用されるとき、目的の１つまたは複数の値に適用される「およそ」または「約」という用語は、言及された参照値に類似である値を指す。ある特定の実施形態において、「およそ」または「約」という用語は、別途示されない限りまたは文脈から明らかでない限り、言及された参照値のいずれかの方向で（より大きいかまたは小さい）、２５％以内、２０％以内、１９％以内、１８％以内、１７％以内、１６％以内、１５％以内、１４％以内、１３％以内、１２％以内、１１％以内、１０％以内、９％以内、８％以内、７％以内、６％以内、５％以内、４％以内、３％以内、２％以内、１％以内、またはそれ以下に入る値の範囲を指す（ただし、かかる数が可能な値の１００％を超える場合を除く）。
会合している：本明細書で使用されるとき、「会合している」、「コンジュゲートされている」、「連結されている」、「結合している」、および「繋がれている」という用語は、２つ以上の部分に関して使用される場合、これらの部分が、直接的または連結剤として働く１つもしくは複数の追加の部分を介してのいずれかで、互いに物理的に会合または接続されて、十分に安定な構造体を形成しており、その結果、それらの部分が、その構造体が使用される条件、例えば、生理学的条件下において、物理的に会合されたままとなることを意味する。「会合」は、必ずしも、厳密に、直接的な共有結合による化学結合を通じたものとは限らない。これは、イオン結合もしくは水素結合またはハイブリダイゼーションに基づく、「会合している」実体が、物理的に会合したままとなるような十分に安定な接続も示唆し得る。
二機能性：本明細書で使用されるとき、「二機能性」という用語は、少なくとも２つの機能を行うことができるか、またはそれを維持する、任意の物質、分子、または部分を指す。機能は、同じ結果または異なる結果に作用し得る。機能をもたらす構造は、同じであっても異なってもよい。
生体適合性：本明細書で使用されるとき、用語「生体適合性」は、損傷、毒性または免疫系による拒絶のリスクがほとんどまたはまったくない生細胞、組織、臓器または系と適合性であることを意味する。
生分解性：本明細書で使用されるとき、用語「生分解性」は、生物の作用によって無害な産物へと分割することが可能であることを意味する。
生物学的に活性：本明細書で使用されるとき、「生物学的に活性」という語句は、生物システムおよび／または生物において活性を有する任意の物質の特徴を指す。例えば、生物に投与されたときに、その生物に対して生物学的作用を有する物質は、生物学的に活性であると考えられる。特定の実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、コード化ペイロードの部分が生物学的に活性であるか、または生物学的に関連すると考えられる活性を模倣する場合でさえ、生物学的に活性であるとみなすことができる。
カプシド：本明細書で使用されるとき、用語「カプシド」は、ウイルス粒子のタンパク質殻を指す。
相補的および実質的に相補的：本明細書で使用されるとき、用語「相補」は、ポリヌクレオチドが互いに塩基対を形成する能力を指す。塩基対は、典型的には逆平行ポリヌクレオチド鎖におけるヌクレオチド単位間の水素結合によって形成される。相補ポリヌクレオチド鎖は、ワトソン・クリック方式（例えば、ＡとＴ、ＡとＵ、ＣとＧ）、または二重鎖の形成を可能にする任意の他の方式で塩基対を形成することができる。当業者は認識しているとおり、ＤＮＡと対照的にＲＮＡを使用するとき、チミンでなくウラシルがアデノシンと相補的とみなされる塩基である。しかしながら、本発明の文脈でＵと表記されるとき、特に指定されない限り、Ｔに置き換え可能であることが含意される。完全な相補性または１００％の相補性とは、一方のポリヌクレオチド鎖の各ヌクレオチド単位が第２のポリヌクレオチド鎖のヌクレオチド単位と水素結合を形成することができる状況を指す。完全でない相補性とは、２本の鎖の全てではないものの一部のヌクレオチド単位が互いに水素結合を形成することができる状況を指す。例えば、２本の２０ｍｅｒについて、各鎖の２個の塩基対のみが互いに水素結合を形成することができる場合、このポリヌクレオチド鎖は１０％の相補性を呈する。同じ例で、各鎖の１８個の塩基対が互いに水素結合を形成することができる場合、このポリヌクレオチド鎖は９０％の相補性を呈する。本明細書で使用されるとき、「実質的に相補的」という用語は、ｓｉＲＮＡが、所望の標的ｍＲＮＡに結合して標的ｍＲＮＡのＲＮＡサイレンシングを引き起こすのに十分な配列を（例えばアンチセンス鎖に）有することを意味する。
化合物：本開示の化合物は、中間体または最終化合物において生じる原子の同位体の全てを含む。「同位体」は、同じ原子番号を有するが、核内の中性子の数が異なることにより生じる、異なる質量数を有する、原子を指す。例えば、水素の同位体には、トリチウムおよび重水素が含まれる。
本開示の化合物および塩は、ルーチンな方法により、溶媒または水分子と組み合わせて、溶媒和物および水和物を形成して、調製することができる。
条件付き活性：本明細書で使用されるとき、用語「条件付き活性」は、野生型ポリペプチドの突然変異体または変異体を指し、突然変異体または変異体は、生理学的条件下において、親ポリペプチドよりも活性が高くてもよくまたは低くてもよい。更に、条件付き活性ポリペプチドは、異常条件下において、親ポリペプチドと比較して活性が増加してもよくまたは減少してもよい。条件付き活性ポリペプチドは、正常な生理学的条件下または異常条件下において、可逆的にまたは不可逆的に不活化されてもよい。
保存されている：本明細書で使用されるとき、「保存されている」という用語は、比較されている２つ以上の配列の同じ位置に変更されずに生じる、ポリヌクレオチド配列またはポリペプチド配列の、それぞれ、ヌクレオチドまたはアミノ酸残基を指す。比較的保存されているヌクレオチドまたはアミノ酸は、配列の別の箇所に出現するヌクレオチドまたはアミノ酸よりも、関連する配列間で保存されているものである。
一部の実施形態において、２つ以上の配列は、それらが、互いに、１００％同一である場合に、「完全に保存されている」と言われる。一部の実施形態において、２つ以上の配列は、それらが、互いに、少なくとも７０％同一であるか、少なくとも８０％同一であるか、少なくとも９０％同一であるか、または少なくとも９５％同一である場合に、「高度に保存されている」と言われる。一部の実施形態において、２つ以上の配列は、それらが、互いに、約７０％同一であるか、約８０％同一であるか、約９０％同一であるか、約９５％、約９８％、または約９９％同一である場合に、「高度に保存されている」と言われる。一部の実施形態において、２つ以上の配列は、それらが、互いに、少なくとも３０％同一であるか、少なくとも４０％同一であるか、少なくとも５０％同一であるか、少なくとも６０％同一であるか、少なくとも７０％同一であるか、少なくとも８０％同一であるか、少なくとも９０％同一であるか、または少なくとも９５％同一である場合に、「保存されている」と言われる。一部の実施形態において、２つ以上の配列は、それらが、互いに、約３０％同一であるか、約４０％同一であるか、約５０％同一であるか、約６０％同一であるか、約７０％同一であるか、約８０％同一であるか、約９０％同一であるか、約９５％同一であるか、約９８％同一であるか、または約９９％同一である場合に、「保存されている」と言われる。配列の保存は、ポリヌクレオチド、もしくはポリペプチドの全長に適用され得るか、またはその一部分、領域、もしくは特徴に適用され得る。
制御エレメント：本明細書で使用されるとき、「制御エレメント」、「調節制御エレメント」または「調節配列」は、プロモータ領域、ポリアデニル化シグナル、転写終結配列、上流調節ドメイン、複製開始点、内部リボソーム侵入部位（「ＩＲＥＳ」）、およびエンハンサーなどを指し、受容細胞でのコード配列の複製、転写および翻訳を提供する。選択されたコード配列が適切な宿主細胞中で複製、転写および／または翻訳されることが可能である限り、これらの制御エレメントは全てが常に存在する必要があるわけではない。
徐放：本明細書で使用されるとき、用語「徐放」は、治療転帰を達成するための放出の特定のパターンと一致する医薬組成物または化合物放出プロファイルを指す。
細胞増殖抑制性：本明細書で使用されるとき、「細胞増殖抑制性」は、細胞（例えば、哺乳類細胞（例えば、ヒト細胞））、細菌、ウイルス、真菌、原生動物、寄生虫、プリオン、またはそれらの組合せの成長、分裂、または繁殖を阻害、低減、抑制することを指す。
細胞傷害性：本明細書で使用されるとき、「細胞傷害性」は、細胞（例えば、哺乳類細胞（例えば、ヒト細胞））、細菌、ウイルス、真菌、原生動物、寄生虫、プリオン、またはそれらの組合せを死滅させることまたはそれらに対する傷害性、毒性、または致死性効果を引き起こすことを指す。
送達：本明細書で使用されるとき、「送達」は、ＡＡＶ粒子、化合物、物質、実体、部分、カーゴ、またはペイロードを送達する動作または手段を指す。
送達剤：本明細書で使用されるとき、「送達剤」は、少なくとも部分的に、ターゲティングされる細胞への、ＡＡＶ粒子のインビトロ送達を容易にする、任意の物質を指す。
不安定化：本明細書で使用されるとき、「不安定」、「不安定化する」、または「不安定化領域」という用語は、同じ領域または分子の出発時点、野生型、または天然の形態よりも、安定性が低い領域または分子を意味する。
検出可能な標識：本明細書で使用されるとき、「検出可能な標識」は、放射線撮影法、蛍光、化学発光、酵素活性、吸光などを含む、当該技術分野において公知の方法によって容易に検出される、別の実体に結合するか、組み込まれるか、または会合される、１つまたは複数のマーカー、シグナル、または部分を指す。検出可能な標識としては、放射性同位体、フルオロフォア、発色団、酵素、色素、金属イオン、リガンド、例えば、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジン、およびハプテン、量子ドットなどを挙げられる。検出可能な標識は、本明細書に記載されるペプチドまたはタンパク質において、任意の位置に配置され得る。それらは、アミノ酸、ペプチド、もしくはタンパク質内にあってもよく、またはＮ末端もしくはＣ末端に配置されてもよい。
消化：本明細書で使用されるとき、用語「消化」は、より小さな小片または成分へとバラバラにすることを意味する。ポリペプチドまたはタンパク質に関する場合、消化は、ペプチドの産生をもたらす。
遠位：本明細書で使用されるとき、用語「遠位」は、中心から離れてまたは目的の地点または領域から離れて位置することを意味する。
投薬レジメン：本明細書で使用されるとき、「投薬レジメン」は、投与のスケジュール、または医師により決定される治療、予防、もしくは緩和ケアのレジメンである。
被包する：本明細書で使用されるとき、「被包する」という用語は、封入、包囲、または内包することを意味する。
操作されている：本明細書で使用されるとき、本発明の実施形態は、出発時点、野生型、または天然の分子から、構造的か化学的かに関わらず、変化した特徴または特性を有するように設計されている場合、「操作されている」。
有効量：本明細書で使用されるとき、薬剤の「有効量」という用語は、例えば、対象細胞への単回または複数回の用量の投与で、障害の１つまたは複数の症状の治癒、軽減、緩和、または改善において有益なまたは所望の結果、臨床結果を生じさせるのに十分な量であり、そのため「有効量」は、それが適用されるコンテクストに依存する。例えば、がんを治療する薬剤を投与するコンテクストでは、薬剤の有効量は、例えば、その薬剤の投与なしで得られる応答と比較して、本明細書に定義されるとおりのがんの治療を達成するのに十分な量である。
発現：本明細書で使用されるとき、核酸配列の「発現」は、以下の事象のうちの１つまたは複数を指す：（１）ＤＮＡ配列からのＲＮＡ鋳型の産生（例えば、転写による）、（２）ＲＮＡ転写産物のプロセシング（例えば、スプライシング、編集、５’キャップ形成、および／または３’末端プロセシングによる）、（３）ＲＮＡのポリペプチドまたはタンパク質への翻訳、ならびに（４）ポリペプチドまたはタンパク質の翻訳後修飾。
特徴：本明細書で使用されるとき、「特徴」は、特徴、特性、または特有のエレメントを指す。
製剤：本明細書で使用されるとき、「製剤」は、少なくとも１つのＡＡＶ粒子および送達剤を含む。
断片：「断片」は、本明細書で使用されるとき、部分を指す。例えば、タンパク質の断片は、培養細胞から単離した全長タンパク質を消化することによって得られる、ポリペプチドを含み得る。
機能性：本明細書で使用されるとき、「機能性」生体分子は、それによって特徴付けられる特性および／または活性を示す形態を有する、生体分子である。
遺伝子発現：用語「遺伝子発現」は、核酸配列が首尾よく転写およびほとんどの場合に翻訳を受けてタンパク質またはペプチドを産生する過程を指す。明確にするため、「遺伝子発現」の測定に言及するとき、それは、測定が核酸転写産物、例えばＲＮＡもしくはｍＲＮＡの測定またはアミノ酸翻訳産物、例えばポリペプチドもしくはペプチドの測定であり得ることを意味するものと理解されなければならない。ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ポリペプチドおよびペプチドの量またはレベルの測定方法は当該技術分野において周知である。
相同性：本明細書で使用されるとき、「相同性」という用語は、ポリマー分子間、例えば、ポリヌクレオチド分子（例えば、ＤＮＡ分子および／もしくはＲＮＡ分子）間、ならびに／またはポリペプチド分子間の、全般的な関連性を指す。一部の実施形態において、ポリマー分子は、それらの配列が、少なくとも２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％同一または類似である場合、互いに「相同」であると考えられる。「相同」という用語は、必然的に、少なくとも２つの配列（ポリヌクレオチド配列またはポリペプチド配列）間の比較を指す。本発明によると、２つのポリヌクレオチド配列は、それらがコードするポリペプチドが、少なくとも約２０アミノ酸の少なくとも１つのストレッチに関して、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または更には９９％である場合、相同であると考えられる。一部の実施形態において、相同なポリヌクレオチド配列は、少なくとも４～５個の固有に指定されるアミノ酸のストレッチをコードする能力によって特徴付けられる。６０ヌクレオチド長未満のポリヌクレオチド配列については、相同性は、４～５個の固有に指定されるアミノ酸のストレッチをコードする能力によって決定される。本発明によると、２つのタンパク質配列は、タンパク質が、少なくとも約２０アミノ酸の少なくとも１つのストレッチについて、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％同一である場合、相同であると考えられる。
異種性領域：本明細書で使用されるとき、用語「異種性領域」は、相同領域とはみなされないと考えられる領域を指す。
相同領域：本明細書で使用されるとき、用語「相同領域」は、位置、構造、進化起源、特色、形態または機能が類似する領域を指す。
同一性：本明細書で使用されるとき、「同一性」という用語は、ポリマー分子間、例えば、ポリヌクレオチド分子（例えば、ＤＮＡ分子および／もしくはＲＮＡ分子）間、ならびに／またはポリペプチド分子間の全般的な関連性を指す。２つのポリヌクレオチド配列の同一性パーセントの計算は、例えば、２つの配列を、最適な比較の目的でアラインメントすることによって、行われ得る（例えば、ギャップが、最適なアラインメントのために、第１および第２の核酸配列のうちの一方もしくは両方に導入されてもよく、非同一配列は、比較目的で無視されてもよい）。ある特定の実施形態において、比較目的でアラインメントされる配列の長さは、参照配列の長さの少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％である。対応するヌクレオチド位置にあるヌクレオチドが、次いで、比較される。第１の配列における位置が、第２の配列における対応する位置と同じヌクレオチドで占有されている場合、分子は、その位置において同一である。２つの配列間の同一性パーセントは、それらの配列が共有している同一な位置の数の関数であり、２つの配列の最適なアラインメントのために導入する必要のあるギャップの数および各ギャップの長さを考慮する。２つの配列間の配列の比較および同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成することができる。例えば、２つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、レスクＡ．Ｍ．（Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．）編、オックスフォードユニバーシティプレス（Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ）、ニューヨーク（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）、１９８８；Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ、スミスＤ．Ｗ．（Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｗ．）編、アカデミックプレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ）、ニューヨーク（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）１９９３；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、フォン へインジェＧ．（ｖｏｎ Ｈｅｉｎｊｅ，Ｇ．）、アカデミックプレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ）、１９８７；Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄａｔａ，Ｐａｒｔ Ｉ、グリフィンＡ．Ｍ．（Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ａ．Ｍ．）およびグリフィンＨ．Ｇ．（Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ｈ．Ｇ．）編、ヒューマナプレス（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ）、ニュージャージー所在（Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ）、１９９４；ならびにＳｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐｒｉｍｅｒ、グリブスコフＭ．（Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｍ．）およびデヴェルーＪ．（Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．）編、Ｍストックトンプレス（Ｍ ＳｔｏｃｋｔｏｎＰｒｅｓｓ）、ニューヨーク（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）、１９９１に記載されているものなどの方法を使用して、決定することができる。これらの各々は、本明細書において参照により援用される。例えば、２つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、アライン（ＡＬＩＧＮ）プログラム（バージョン２．０）に組み込まれているマイヤーズ（Ｍｅｙｅｒｓ）およびミラー（Ｍｉｌｌｅｒ）（ＣＡＢＩＯＳ、１９８９、４：１１－１７）のアルゴリズムを使用して、ＰＡＭ１２０の重み付け残基表、ギャップ長ペナルティ１２、およびギャップペナルティ４を使用して決定することができる。２つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、代替として、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックスを使用し、ＧＣＧソフトウェアパッケージにおいてＧＡＰプログラムを使用して決定することができる。配列間の同一性パーセントを決定するために一般的に利用される方法としては、限定はされないが、カリロＨ．（Ｃａｒｉｌｌｏ，Ｈ．）およびリップマンＤ．（Ｌｉｐｍａｎ，Ｄ．）、ＳＩＡＭ Ｊ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍａｔｈ．、４８：１０７３（１９８８）に開示されているものが挙げられ、これは、本明細書において参照により援用される。同一性を決定するための技法は、公的に利用可能なコンピュータプログラムにおいて成文化されている。２つの配列間の相同性を決定するための例示的なコンピュータソフトウェアとしては、限定はされないが、ＧＣＧプログラムパッケージ、デヴェルーＪ（Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．）ら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１２（１）、３８７（１９８４））、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮ、およびＦＡＳＴＡ（アルチュルＳ．Ｆ．（Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．）ら、Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．、２１５、４０３（１９９０））が挙げられる。
遺伝子の発現の阻害：本明細書で使用されるとき、語句「遺伝子の発現を阻害する」は、遺伝子の発現産物量の減少を生じさせることを意味する。発現産物は、遺伝子から転写されたＲＮＡ（例えば、ｍＲＮＡ）または遺伝子から転写されたｍＲＮＡから翻訳されたポリペプチドであり得る。典型的には、ｍＲＮＡのレベルが減少することにより、そこから翻訳されるポリペプチドのレベルが減少することになる。発現レベルは標準的なｍＲＮＡまたはタンパク質測定技法を用いて決定し得る。
インビトロ：本明細書で使用されるとき、用語「インビトロ」は、生物（例えば、動物、植物、または微生物）の中でなく、むしろ人工環境、例えば試験管または反応槽、細胞培養物、ペトリ皿等で起こるイベントを指す。
インビボ：本明細書で使用されるとき、用語「インビボ」は、生物（例えば、動物、植物、または微生物またはその細胞もしくは組織）の中で起こるイベントを指す。
単離された：本明細書で使用されるとき、用語「単離された」は、それが関連づけられる化合物の少なくとも一部から分離された（自然界の設定であるかまたは実験的設定であるかに関わらず）物質または実体を指す。単離された物質は、それが会合していた物質に関して、様々なレベルの純度を有し得る。単離された物質および／または実体は、当初それと会合していた他の成分のうちの少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、またはそれ以上から、分離されていてもよい。一部の実施形態では、単離された薬剤は、約８０％を上回って、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約９９％を上回って、純粋である。本明細書で使用されるとき、物質は、他の成分を実質的に含まない場合、「純粋」である。
実質的に単離された：「実質的に単離された」とは、物質が、それが形成または検出された環境から、実質的に分離されていることを意味する。部分的な分離には、例えば、本開示の物質またはＡＡＶ粒子中の濃縮されている組成物が含まれ得る。実質的な分離は、本開示の化合物またはその塩を少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９７重量％、または少なくとも約９９重量％を含有する組成物が含まれ得る。化合物およびそれらの塩を単離するための方法は、当該技術分野においてルーチンである。
リンカー：本明細書で使用されるとき、「リンカー」は、２つの分子を接続する分子または一群の分子を指す。リンカーは、２つの異なるポリペプチドをコードする２つの核酸配列を接続する核酸配列であってもよい。リンカーは翻訳されてもよくまたはされなくともよい。リンカーは、切断可能なリンカーであってもよい。
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）結合部位：本明細書で使用されるとき、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）結合部位は、少なくともｍｉＲＮＡの「シード」領域が結合する核酸転写物のヌクレオチド位置または領域を表す。
修飾された：本明細書で使用されるとき、「修飾された」は、本発明の分子の変化した状態または構造を指す。分子は、化学的、構造的、および機能的を含め、多くの方法で修飾することができる。
突然変異：本明細書で使用されるとき、用語「突然変異」は、後続の世代に伝達され得る変異体（「突然変異体」とも呼ばれる）をもたらす、遺伝子構造の任意の変化を指す。遺伝子の突然変異は、ＤＮＡにおける単一塩基の変更、または遺伝子もしくは染色体のより大きなセグメントの欠失、挿入、もしくは再編成によって引き起こされ得る。
天然に存在する：本明細書で使用されるとき、「天然に存在する」または「野生型」は、人工的な補助または人間の手の関与を伴わずに天然に存在していることを意味する。
非ヒト脊椎動物：本明細書で使用されるとき、「非ヒト脊椎動物」は、野生種および家畜種を含む、ホモ・サピエンス以外の全ての脊椎動物を含む。非ヒト脊椎動物の例としては、限定はされないが、アルパカ、バンテン、バイソン、ラクダ、ネコ、ウシ、シカ、イヌ、ロバ、ガヤル、ヤギ、モルモット、ウマ、ラマ、ラバ、ブタ、ウサギ、トナカイ、ヒツジ、水牛、およびヤクなどの哺乳動物が挙げられる。
オフターゲット：本明細書で使用されるとき、「オフターゲット」は、任意の１つまたは複数の標的、遺伝子、または細胞転写物に対する任意の意図しない効果を指す。
オープンリーディングフレーム：本明細書で使用されるとき、「オープンリーディングフレーム」または「ＯＲＦ」は、所与のリーディングフレーム内に終止コドンを含まない配列を指す。
作動可能に連結された：本明細書で使用されるとき、「作動可能に連結された」という語句は、２つ以上の分子、コンストラクト、転写産物、実体、部分などの間の機能的接続を指す。
粒子：本明細書で使用されるとき、「粒子」は、タンパク質カプシドおよびカプシド内に封入されるポリヌクレオチド配列という少なくとも２つの成分から構成されるウイルスである。
患者：本明細書で使用されるとき、「患者」は、治療を求めている場合があるもしくはそれを必要とし得る対象、治療を必要とする対象、治療を受けている対象、治療を受けるであろう対象、または特定の疾患もしくは病態について、訓練された専門家によるケアを受けている対象を指す。
ペイロード：本明細書で使用されるとき、「ペイロード」または「ペイロード領域」は、ウイルスゲノムによりもしくはその内にコードされる１つもしくは複数のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域、またはかかるポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域、例えばトランス遺伝子、ポリペプチドもしくはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの発現産物、または調節性核酸もしくは制御性核酸を指す。
ペプチド：本明細書で使用されるとき、「ペプチド」は、５０アミノ酸長未満であるかまたはそれに等しく、例えば、約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０アミノ酸長である。
薬学的に許容可能：「薬学的に許容可能」という語句は、本明細書では、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激作用、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症のない、妥当なリスク対効果比に相応の、ヒトおよび動物の組織との接触における使用に好適な化合物、材料、組成物、および／または剤形を指して用いられる。
薬学的に許容可能な賦形剤：語句「薬学的に許容される賦形剤」は、本明細書で使用されるとき、本明細書に記載される化合物以外の、患者において実質的に無毒性および非炎症性であるという特性を有する任意の成分（例えば、活性化合物を懸濁または溶解することが可能な媒体）を指す。賦形剤としては、例えば、次のものを挙げることができる：抗接着剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮補助剤、崩壊剤、色素（着色剤）、エモリエント、乳化剤、充填剤（希釈剤）、フィルム形成剤またはコーティング剤、香味剤、香料、滑剤（流動増強剤）、滑沢剤、保存剤、印刷用インク、吸着剤、懸濁または分散剤、甘味剤、および水和の水。例示的な賦形剤としては、限定はされないが、次のものが挙げられる：ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム（二塩基性）、ステアリン酸カルシウム、クロスカルメロース、架橋ポリビニルピロリドン、クエン酸、クロスポビドン、システイン、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、マルチトール、マンニトール、メチオニン、メチルセルロース、メチルパラベン、微晶質セルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポビドン、α化デンプン、プロピルパラベン、パルミチン酸レチニル、シェラック、二酸化ケイ素、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クエン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ソルビトール、デンプン（トウモロコシ）、ステアリン酸、スクロース、タルク、二酸化チタン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、およびキシリトール。
薬学的に許容可能な塩：本開示はまた、本明細書に記載される化合物の薬学的に許容される塩を含む。本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容可能な塩」は、開示される化合物の誘導体を指し、ここで、親化合物は、既存の酸または塩基部分からその塩形態（例えば、遊離塩基基を好適な有機酸と反応させることによって）への変換によって修飾される。薬学的に許容可能な塩の例としては、限定はされないが、アミン類などの塩基性残基の鉱酸塩または有機酸塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが挙げられる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、酢酸、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、カンファー酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトン酸塩、ヘキサン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなど、ならびに非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、およびアミンカチオン、例えば、限定はされないが、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどが挙げられる。本開示の薬学的に許容可能な塩には、例えば非毒性無機酸または有機酸から形成される親化合物の従来の非毒性塩が含まれる。本開示の薬学的に許容可能な塩は、従来の化学的方法により塩基または酸部分を含有する親化合物から合成され得る。一般に、かかる塩は、遊離酸または塩基形態のこれらの化合物と、水中または有機溶媒中、またはこれら２つの混合物中（概して、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体が好ましい）にある化学量論量の適切な塩基または酸とを反応させることによって調製することができる。好適な塩の一覧については、「レミントンの薬学科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）」、第１７版、マック・パブリッシング・カンパニー（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ）、ペンシルベニア州イーストン（Ｅａｓｔｏｎ）、１９８５年、ｐ．１４１８、「薬学的塩：特性、選択、および使用（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ）」、Ｐ．Ｈ．シュタール（Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ）およびＣ．Ｇ．ウェルムス（Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ）編、ワイリー－ブイシーエイチ（Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ）、２００８年、ならびにベルジュ（Ｂｅｒｇｅ）ら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，１－１９、（１９７７）において見出され、これらの各々は、本明細書においてその全体として参照により援用される。
薬学的に許容可能な溶媒和物：「薬学的に許容可能な溶媒和物」という用語は、本明細書で使用されるとき、好適な溶媒の分子が結晶格子に取り込まれている本発明の化合物を意味する。好適な溶媒は、投与される投薬量で生理学的に忍容可能である。例えば、溶媒和物は、有機溶媒、水、またはこれらの混合物を含む溶液から結晶化、再結晶化、または沈殿によって調製されてもよい。好適な溶媒の例は、エタノール、水（例えば、一水和物、二水和物、および三水和物）、Ｎ－メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ’－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ’－ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン（ＤＭＥＵ）、１，３－ジメチル－３，４，５，６－テトラヒドロ－２－（１Ｈ）－ピリミジノン（ＤＭＰＵ）、アセトニトリル（ＡＣＮ）、プロピレングリコール、酢酸エチル、ベンジルアルコール、２－ピロリドン、安息香酸ベンジルなどである。水が溶媒であるとき、その溶媒和物は「水和物」と称される。
薬物動態：本明細書で使用されるとき、「薬物動態」は、生きている生物に投与される物質の運命の決定に関連する場合、分子または化合物の任意の１つまたは複数の特性を指す。薬物動態は、吸収、分布、代謝、および排出の程度および速度を含む、複数の領域に分割される。これは、一般に、ＡＤＭＥと称され、ここで、（Ａ）吸収は、物質が血液循環に入るプロセスであり、（Ｄ）分布は、体液および身体組織全体への物質の分散または拡散であり、（Ｍ）代謝（または生体内変換）は、親化合物の娘代謝物への不可逆的変換であり、（Ｅ）排出（または排除）は、身体からの物質の排除を指す。珍しい事例では、一部の薬物は、身体組織に不可逆的に蓄積する。
物理化学的：本明細書で使用されるとき、「物理化学的」とは、物理的および／または化学的な特性を意味するか、またはそれに関連することを意味する。
予防すること：本明細書で使用されるとき、「予防すること」または「予防」という用語は、感染、疾患、障害、および／もしくは病態の発症を部分的もしくは完全に遅延させること；特定の感染、疾患、障害、および／もしくは病態の１つもしくは複数の症状、特徴、もしくは臨床兆候の発症を部分的もしくは完全に遅延させること；特定の感染、疾患、障害、および／もしくは病態の１つもしくは複数の症状、特徴、もしくは兆候の発症を部分的もしくは完全に遅延させること；感染、特定の疾患、障害、および／もしくは病態からの進行を部分的もしくは完全に遅延させること；ならびに／または感染、疾患、障害、および／もしくは病態と関連する病理の発生の危険性を減少させることを指す。
増殖する：本明細書で使用されるとき、「増殖する」という用語は、成長、拡大、もしくは増加すること、または急速な成長、拡大、もしくは増加を引き起こすことを意味する。「増殖性」は、増殖する能力を有することを意味する。「抗増殖性」は、増殖性の特性に対抗するかまたはそれに不適切な特性を有することを意味する。
予防的：本明細書で使用されるとき、「予防的」は、疾患の拡がりを予防するために使用される治療または作用過程を指す。
予防法：本明細書で使用されるとき、「予防法」は、健康を維持し、疾患の拡がりを予防するために取られる措置を指す。
目的のタンパク質：本明細書で使用されるとき、「目的のタンパク質」または「所望されるタンパク質」という用語には、本明細書に提供されるもの、ならびにその断片、突然変異体、変異体、および変更形態が含まれる。
近位：本明細書で使用されるとき、用語「近位」は、中心または目的の地点もしくは領域付近に位置することを意味する。
精製された：本明細書で使用されるとき、「精製する」、「精製された」、「精製」は、実質的に純粋、または望ましくない構成成分、汚染材料、混合物、もしくは不純物を含まないようにすることを意味する。「精製された」は、純粋である状態を指す。「精製」は、純粋にするプロセスを指す。
領域：本明細書で使用されるとき、「領域」という用語は、区域または一般的な範囲を指す。一部の実施形態において、タンパク質またはタンパク質モジュールに言及する場合、領域は、タンパク質もしくはタンパク質モジュールに沿ったアミノ酸の線形配列を含むか、または三次元の範囲、エピトープ、および／またはエピトープのクラスターを含み得る。一部の実施形態において、領域は、末端領域を含む。本明細書で使用されるとき、「末端領域」という用語は、所与の薬剤の端部または末端に位置している領域を指す。タンパク質に言及する場合、末端領域は、Ｎ末端および／またはＣ末端を含み得る。Ｎ末端は、遊離アミノ基を有するアミノ酸を含むタンパク質の端部を指す。Ｃ末端は、遊離カルボキシル基を有するアミノ酸を含むタンパク質の端部を指す。Ｎ末端領域および／またはＣ末端領域は、したがって、Ｎ末端および／またはＣ末端、ならびに周囲のアミノ酸を含み得る。一部の実施形態において、Ｎ末端領域および／またはＣ末端領域は、約３アミノ酸～約３０アミノ酸、約５アミノ酸～約４０アミノ酸、約１０アミノ酸～約５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１００アミノ酸、および／または少なくとも１００アミノ酸を含む。一部の実施形態において、Ｎ末端領域は、Ｎ末端を含む任意の長さのアミノ酸を含み得るが、Ｃ末端は含まない。一部の実施形態において、Ｃ末端領域は、Ｃ末端を含む任意の長さのアミノ酸を含み得るが、Ｎ末端は含まない。
一部の実施形態において、ポリヌクレオチドに言及する場合、領域は、ポリヌクレオチドに沿った核酸の線形配列を含み得るか、または三次元の範囲、二次構造、または三次構造を含み得る。一部の実施形態において、領域は、末端領域を含む。本明細書で使用されるとき、「末端領域」という用語は、所与の薬剤の端部または末端に位置している領域を指す。ポリヌクレオチドに言及する場合、末端領域は、５’末端および／または３’末端を含み得る。５’末端は、遊離リン酸基を有す核酸を含むポリヌクレオチドの端部を指す。３’末端は、遊離ヒドロキシル基を有する核酸を含むポリヌクレオチドの端部を指す。５’領域および３’領域は、したがって、５’末端および３’末端、ならびに周囲の核酸を含み得る。一部の実施形態において、５’末端領域および／または３’末端領域は、約９核酸～約９０核酸、約１５核酸～約１２０核酸、約３０核酸～約１５０核酸、約６０核酸～約３００核酸、および／または少なくとも３００核酸を含む。一部の実施形態において、５’領域は、５’末端を含む任意の長さの核酸を含み得るが、３’末端は含まない。一部の実施形態において、３’領域は、３’末端を含む任意の長さの核酸を含み得るが、５’末端は含まない。
ＲＮＡまたはＲＮＡ分子：本明細書で使用されるとき、用語「ＲＮＡ」または「ＲＮＡ分子」または「リボ核酸分子」は、リボヌクレオチドのポリマーを指す；用語「ＤＮＡ」または「ＤＮＡ分子」または「デオキシリボ核酸分子」は、デオキシリボヌクレオチドのポリマーを指す。ＤＮＡおよびＲＮＡは、例えばそれぞれＤＮＡ複製およびＤＮＡの転写により、天然で合成されることもでき；または化学的に合成されることもできる。ＤＮＡおよびＲＮＡは、一本鎖（すなわち、それぞれｓｓＲＮＡまたはｓｓＤＮＡ）または多重鎖（例えば、二本鎖、すなわち、それぞれｄｓＲＮＡおよびｄｓＤＮＡ）であり得る。用語「ｍＲＮＡ」または「メッセンジャーＲＮＡ」は、本明細書で使用されるとき、１つ以上のポリペプチド鎖のアミノ酸配列をコードする一本鎖ＲＮＡを指す。
ＲＮＡ干渉またはＲＮＡｉ：本明細書で使用されるとき、用語「ＲＮＡ干渉」または「ＲＮＡｉ」は、対応するタンパク質コード遺伝子の発現の阻害または干渉または「サイレンシング」をもたらすＲＮＡ分子によって媒介される配列特異的調節機構を指す。ＲＮＡｉは、植物、動物および真菌を含めた多くのタイプの生物で観察されている。ＲＮＡｉは、細胞において自然に起こり、外来性ＲＮＡ（例えば、ウイルスＲＮＡ）を除去する。天然ＲＮＡｉは、遊離ｄｓＲＮＡから切断され、分解機構を他の類似のＲＮＡ配列に仕向ける断片を介して進行する。ＲＮＡｉは、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）によって制御され、細胞質において短鎖／低分子ｄｓＲＮＡ分子によって開始され、ｄｓＲＮＡ分子は触媒ＲＩＳＣ成分アルゴノートと相互作用する。ｄｓＲＮＡ分子は、細胞へと外因的に導入することができる。外因性ｄｓＲＮＡは、リボヌクレアーゼタンパク質ダイサーを活性化させることによってＲＮＡｉを開始させ、ダイサーは、ｄｓＲＮＡに結合してそれを切断することにより、数個の対を成さない突出塩基を各末端に有する２１～２５塩基対の二本鎖断片を産生する。これらの短鎖二本鎖断片は、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）と呼ばれる。
試料：本明細書で使用されるとき、用語、「試料」または「生物学的試料」は、その組織、細胞または成分部分（例えば、限定はされないが、血液、粘液、リンパ液、滑液、脳脊髄液、唾液、羊水、羊膜内臍帯血、尿、膣液および精液を含めた体液）のサブセットを指す。試料は、限定はされないが、例えば、血漿、血清、髄液、リンパ液、皮膚の外側区画、呼吸器、腸管、および尿生殖器、涙、唾液、ミルク、血液細胞、腫瘍、臓器を含めた、生物全体またはその組織、細胞もしくは成分部分のサブセットから調製されたホモジネート、ライセートまたは抽出物、またはその画分もしくは部分を更に含み得る。更に、試料は、タンパク質または核酸分子などの細胞成分を含んでもよい栄養ブロスまたはゲルなどの培地を指す。
自己相補性ウイルス粒子：本明細書で使用されるとき、「自己相補性ウイルス粒子」は、タンパク質カプシドおよびカプシド内に封入される自己相補性ゲノムをコードするポリヌクレオチド配列という少なくとも２つの成分から構成される粒子である。
センス鎖：本明細書で使用されるとき、ｓｉＲＮＡ分子の「センス鎖」または「第２の鎖」または「パッセンジャー鎖」という用語は、アンチセンス鎖または第１の鎖と相補的な鎖を指す。ｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス鎖およびセンス鎖は、ハイブリダイズして二重鎖構造を形成する。本明細書で使用されるとき、「ｓｉＲＮＡ二重鎖」は、サイレンシングのターゲティングされる遺伝子のｍＲＮＡの約１０～５０ヌクレオチドの一部分に十分な相補性を有するｓｉＲＮＡ鎖、および他のｓｉＲＮＡ鎖と二重鎖を形成するのに十分な相補性を有するｓｉＲＮＡ鎖を含む。
短鎖干渉性ＲＮＡまたはｓｉＲＮＡ：本明細書で使用されるとき、用語「短鎖干渉性ＲＮＡ」、「低分子干渉ＲＮＡ」または「ｓｉＲＮＡ」は、ＲＮＡｉを指図または媒介することが可能な約５～６０ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）を含むＲＮＡ分子（またはＲＮＡ類似体）を指す。好ましくは、ｓｉＲＮＡ分子は、約１５～３０ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体、例えば、約１６～２５ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）、約１８～２３ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）、約１９～２２ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）（例えば、１９、２０、２１または２２ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体）、約１９～２５ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）、および約１９～２４ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）を含む。用語「短鎖」ｓｉＲＮＡは、５～２３ヌクレオチド、好ましくは２１ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）、例えば、１９、２０、２１または２２ヌクレオチドを含むｓｉＲＮＡを指す。用語「長鎖」ｓｉＲＮＡは、２４～６０ヌクレオチド、好ましくは約２４～２５ヌクレオチド、例えば、２３、２４、２５または２６ヌクレオチドを含むｓｉＲＮＡを指す。短鎖ｓｉＲＮＡは、一部の例では、１９ヌクレオチド未満、例えば、１６、１７または１８ヌクレオチド、またはわずか５ヌクレオチドを含んでもよく、ただし、これらの短いｓｉＲＮＡはＲＮＡｉを媒介する能力を保持しているものとする。同様に、長鎖ｓｉＲＮＡは、一部の例では、２６ヌクレオチド超、例えば、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、または更には６０ヌクレオチドを含んでもよく、ただし、これらの長いｓｉＲＮＡは、短鎖ｓｉＲＮＡへの更なるプロセシング、例えば酵素的プロセシングがない限りＲＮＡｉまたは翻訳抑制を媒介する能力を保持しているものとする。ｓｉＲＮＡは、一本鎖ＲＮＡ分子（ｓｓ－ｓｉＲＮＡ）またはハイブリダイズしてｓｉＲＮＡ二重鎖と呼ばれる二重鎖構造を形成するセンス鎖およびアンチセンス鎖を含む二本鎖ＲＮＡ分子（ｄｓ－ｓｉＲＮＡ）であってもよい。
シグナル配列：本明細書で使用されるとき、「シグナル配列」という語句は、タンパク質の輸送または局在化を誘導することができる配列を指す。
単一単位用量：本明細書で使用されるとき、「単一単位用量」は、１用量／１回／単一の経路／単一の接触点、すなわち単一の投与イベントで投与される、任意の治療薬の用量である。一部の実施形態において、単一単位用量は、別個の投薬形態（例えば、錠剤、カプセル、パッチ、充填済みシリンジ、バイアルなど）として提供される。
類似性：本明細書で使用されるとき、「類似性」という用語は、ポリマー分子間、例えば、ポリヌクレオチド分子（例えば、ＤＮＡ分子および／もしくはＲＮＡ分子）間、ならびに／またはポリペプチド分子間の、全般的な関連性を指す。ポリマー分子の互いに対する類似性パーセントの計算は、同一性パーセントの計算と同じ様式で行うことができるが、ただし、類似性パーセントの計算は、当該技術分野において理解されるように、保存的置換を考慮に入れることを除く。
分割用量：本明細書で使用されるとき、「分割用量」は、単一単位用量または総１日用量を２つ以上の用量に分割したものである。
安定：本明細書で使用されるとき、「安定」とは、反応混合物からの有用な程度の純度への単離に耐えるのに十分に堅強であり、好ましくは、有効な治療剤に製剤化することができる、化合物を指す。
安定化された：本明細書で使用されるとき、「安定化する」、「安定化された」、「安定化された領域」という用語は、安定にすることまたは安定になることを意味する。
対象：本明細書で使用されるとき、用語「対象」または「患者」は、例えば実験的、診断的、予防的、および／または治療的目的で本発明に係る組成物を投与し得る任意の生物を指す。典型的な対象としては、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、およびヒトなど、哺乳類）および／または植物が挙げられる。
実質的に：本明細書で使用されるとき、「実質的に」という用語は、目的の特徴または特性の完全またはほぼ完全な範囲または程度を示す定性的状態を指す。生物学分野の当業者であれば、生物学的現象および化学的現象が、生じるとしても完全となるおよび／もしくは完全性へと進行するか、または絶対的な結果を達成もしくは回避することがごくわずかであることを理解するであろう。「実質的に」という用語は、したがって、多くの生物学的現象および化学的現象において固有な完全性の欠如の可能性を捉えて、本明細書に使用される。
実質的に同等：本明細書で使用されるとき、用量間の時間的相違に関しての場合、この用語は、プラス／マイナス２％を意味する。
実質的に同時：本明細書で使用されるとき、複数の用量に関しての場合、この用語は、２秒以内を意味する。
罹患している：疾患、障害、および／または病態を「罹患している」個体は、疾患、障害、および／または病態と診断されているか、またはその１つもしくは複数の症状を呈する。
罹り易い：疾患、障害、および／または病態に「罹り易い」個体は、疾患、障害、および／もしくは病態と診断されていない、ならびに／またはその症状を呈さない可能性があるが、疾患またはその症状を発症する傾向を有する。一部の実施形態において、疾患、障害、および／または病態（例えば、がん）に罹り易い個体は、以下のうちの１つまたは複数によって特徴付けることができる：（１）疾患、障害、および／または病態の発症と関連する遺伝子突然変異、（２）疾患、障害、および／または病態の発症と関連する遺伝子多型、（３）疾患、障害、および／または病態と関連するタンパク質および／または核酸の発現および／または活性の増加および／または減少、（４）疾患、障害、および／または病態の発症と関連する習慣および／または生活様式、（５）疾患、障害、および／または病態の家族歴、ならびに（６）疾患、障害、および／または病態と関連する微生物への曝露および／または感染。一部の実施形態において、疾患、障害、および／または病態に罹り易い個体は、疾患、障害、および／または病態を発症するであろう。一部の実施形態において、疾患、障害、および／または病態に罹り易い個体は、疾患、障害、および／または病態を発症しないであろう。
持続放出：本明細書で使用されるとき、「持続放出」という用語は、特定の期間にわたる放出速度に適合する、医薬組成物または化合物の放出プロファイルを指す。
合成：「合成」という用語は、人間の手で生成、調製、および／または製造されることを意味する。本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチドまたは他の分子の合成は化学的または酵素的であってもよい。
ターゲティング：本明細書で使用されるとき、「ターゲティング」は、標的核酸にハイブリダイズして所望される効果を誘導するであろう核酸配列の設計および選択のプロセスを意味する。
ターゲティングされる細胞：本明細書で使用されるとき、「ターゲティングされる細胞」は、目的とされる任意の１つまたは複数の細胞を指す。細胞は、インビトロ、インビボ、インサイチュ、または生物の組織もしくは臓器において見出され得る。生物は、動物、好ましくは哺乳動物であり得、より好ましくはヒトであり得、最も好ましくは患者であり得る。
治療剤：「治療剤」という用語は、対象に投与されたときに、治療的、診断的、および／もしくは予防的な効果を有する、ならびに／または所望される生物学的効果および／もしくは薬理学的効果を誘起する、任意の薬剤を指す。
治療有効量：本明細書で使用されるとき、「治療有効量」という用語は、送達しようとする薬剤（例えば、核酸、薬物、治療剤、診断剤、予防剤など）が、感染、疾患、障害、および／または病態に罹患しているまたはそれに罹り易い対象に投与されたきに、感染、疾患、障害、および／または病態を治療する、その症状を改善する、それを診断する、予防する、および／またはその発症を遅延させるのに十分である、その薬剤の量を意味する。一部の実施形態において、治療有効量は、単一の用量で提供される。一部の実施形態において、治療有効量は、複数の用量を含む投薬レジメンにおいて投与される。当業者であれば、一部の実施形態において、単位剤形は、それがかかる投薬レジメンの一部として投与される場合に有効である量を含む場合、特定の薬剤または実体の治療有効量を含むと考えることができることを理解するであろう。
治療有効予後：本明細書で使用されるとき、「治療有効予後」という用語は、感染、疾患、障害、および／または病態を罹患しているかまたはそれに罹り易い対象において、感染、疾患、障害、および／または病態を治療する、その症状を改善する、それを診断する、予防する、および／またはその発症を遅延させるのに十分である予後を意味する。
総１日用量：本明細書で使用されるとき、「総１日用量」は、２４時間に与えられるまたは処方される量である。これは単一単位用量として投与されてもよい。
トランスフェクション：本明細書で使用されるとき、「トランスフェクション」という用語は、外因性核酸を細胞に導入する方法を指す。トランスフェクション方法としては、限定はされないが、化学的方法、物理的処理、およびカチオン性脂質または混合が挙げられる。
治療すること：本明細書で使用されるとき、「治療すること」という用語は、特定の感染、疾患、障害、および／または病態の１つまたは複数の症状または特徴を、部分的または完全に軽減する、改善する（ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｎｇ）、改善する（ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ）、緩和する、その発症を遅延する、その進行を阻害する、その重症度を低減させる、および／またはその発生を低減することを指す。例えば、がんを「治療すること」は、腫瘍の生存、成長、および／または拡がりを阻害することを指し得る。治療は、疾患、障害、および／または状態と関連する病理の発生の危険性を減少させる目的で、疾患、障害、および／もしくは病態の兆候を示していない対象、または疾患、障害、および／もしくは病態の初期兆候のみを示している対象に、投与されてもよい。
未修飾：本明細書で使用されるとき、「未修飾」は、任意の手段で変化される前の任意の物質、化合物、または分子を指す。未修飾は、野生型または天然の形態の生体分子を指す場合があるが、必ずしもそうとは限らない。分子は、一連の修飾を受けてもよく、その場合、各々の修飾された分子は、後続の修飾の「未修飾」出発分子としての機能を果たし得る。
ベクター：本明細書で使用されるとき、「ベクター」は、異種分子を輸送する、形質導入する、またはその他担体として働く、任意の分子または部分である。本発明のベクターは、組換えにより産生されてもよく、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づいてもよく、および／またはそれらを含んでもよい。かかる親または参照ＡＡＶ配列は、ベクターを操作するための元の、第２の、第３の、またはそれ以降の配列として働き得る。非限定的な例において、かかる親または参照ＡＡＶ配列は、以下の配列のうちのいずれか１つまたは複数を含み得る：野生型であってもよいかまたは野生型から修飾されていてもよく、タンパク質、タンパク質ドメイン、またはタンパク質の１つまたは複数のサブセットの全長または部分的な配列をコードし得る、ポリペプチドまたはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列；野生型であってもよいかまたは野生型から修飾されていてもよい、調節性または制御性核酸を含む、ポリヌクレオチド；ならびに野生型配列から修飾されていてもよくまたは修飾されていなくてもよい、トランス遺伝子。これらのＡＡＶ配列は、１つもしくは複数のコドン（核酸レベルで）もしくはアミノ酸（ポリペプチドレベルで）の「ドナー」配列、または１つもしくは複数のコドン（核酸レベルで）もしくはアミノ酸（ポリペプチドレベルで）の「アクセプター」配列のいずれかとして働き得る。
ウイルスゲノム：本明細書で使用されるとき、「ウイルスゲノム」または「ベクターゲノム」は、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）および少なくとも１つのコード化ペイロードを含むポリヌクレオチドである。ウイルスゲノムは、少なくとも１コピーのペイロードをコードする。
ＶＩＩ．実施例
実施例１．ＡＡＶ粒子の産生および精製
本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、例えば、三重トランスフェクションまたはバキュロウイルス媒介性ウイルス産生など、当該技術分野で公知の方法を使用して産生することができる。当該技術分野で公知の任意の好適な許容細胞またはパッケージング細胞を使用して、ベクターを産生することができる。哺乳類細胞が好ましいことが多い。複製欠損ヘルパーウイルスから欠失された機能を提供するトランス相補性パッケージング細胞株、例えば２９３細胞または他のＥ１ａトランス相補性細胞も好ましい。
遺伝子カセットは、パルボウイルス（例えばＡＡＶ）ｃａｐおよびｒｅｐ遺伝子の一部または全てを含有してもよい。しかしながら、好ましくは、ｃａｐおよびｒｅｐ機能の一部または全ては、カプシドおよび／またはＲｅｐタンパク質をコードするパッケージングベクターを細胞へと導入することによってトランスで提供される。最も好ましくは、遺伝子カセットは、カプシドまたはＲｅｐタンパク質をコードしない。あるいは、ｃａｐおよび／またはｒｅｐ遺伝子を発現するように安定的に形質転換されるパッケージング細胞株が使用される。
一部の場合において、組換えＡＡＶウイルス粒子は、米国特許出願公開第２０１６００３２２５４号明細書（この内容は参照により援用される）に記載のとおりの手順に従って産生し、培養上清から精製する。産生には、２９３Ｔ細胞、ｓｆ９昆虫細胞、三重トランスフェクションまたは任意の好適な産生方法を使用するものを含めた、当該技術分野で公知の方法もまた関与してよい。
一部の場合において、ＡＡＶの産生に必要なプラスミド、つまりＡＡＶ２ ｒｅｐ、アデノウイルスヘルパーコンストラクト、およびＩＴＲフランキングトランス遺伝子カセットを用いてＣａＰＯ４により、２９３細胞をトランスフェクトする。ＡＡＶ２ ｒｅｐプラスミドは、研究されている特定のウイルスのｃａｐ配列も含有する。血清含有ＤＭＥＭ中で生じるトランスフェクションの２４時間後、培地を、血清を有するかまたは有していない新鮮な培地と取り替える。トランスフェクションの３（三）日後、２９３接着細胞の培養培地から試料を採取する。続いて、細胞をこすり取り、容器に移す。遠心分離して細胞ペレットを取り出した後、こすり取った後の上清から第２の試料を採取する。次に、３回の連続凍結－解凍サイクル（－８０Ｃから３７Ｃ）によって細胞溶解を達成する。細胞残屑を除去し、培地から試料３を採取する。試料を、Ｔａｑｍａｎ（商標）ＰＣＲによるＤＮａｓｅ耐性ゲノム滴定によってＡＡＶ粒子について定量化する。かかるトランスフェクションの総産生収率は、試料３の粒子濃度と等しい。
ＡＡＶ粒子力価を、ゲノムコピー数（１ミリリットル当たりのゲノム粒子）により測定する。ゲノム粒子濃度は、以前に報告されている通り、ベクターＤＮＡのＴａｑｍａｎ（登録商標）ＰＣＲに基づく（クラーク（Ｃｌａｒｋ）ら著、（１９９９年）、ヒューマン・ジーン・セラピー（Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．）、第１０巻：ｐ．１０３１～１０３９；フェルトワイ（Ｖｅｌｄｗｉｊｋ）ら著、（２００２年）、モレキュラー・セラピー（Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ．）、第６巻：ｐ．２７２～２７８）。
実施例２．組織特異的発現
組織における種々のコード化ペイロードの発現を評価するために、遍在性および組織特異的プロモータのパネルによってドライブされるコード化配列を有する一連のＡＡＶ粒子を製作する。これらの粒子を、特定の組織に対して、例えば適切な経路、例えば単回静脈内注射により全身性投与し、発現をモニターして、この標的組織におけるペイロードならびに各プロモータの相対的発現能力を決定する。標準的技法を使用して、例えばＥＬＩＳＡによって、ペイロード産生の測定を実施する。
一部の場合において、サイトメガロウイルス最初期プロモータ（ＣＭＶ）、キメラニワトリ－ベータ－アクチン（ＣＡＧ）、およびユビキチンＣ（ＵＢＣ）、ＣＢＡ、Ｈ１、αＭＨＣ、ｃＴｎＴ、およびＣＭＶ－ＭＬＣ２ｋプロモータは、堅強な発現を提供する。
実施例３．ＶＯＹ１０１－ＧＦＰベクターによる静脈内処置後のインビボマウス生体内分布および発現レベル
アデノ随伴カプシド変異体（ＶＯＹ１０１）を、脳および心臓への広範な遺伝子移入のために操作した。ＡＡＶ２野生型末端逆位配列（ＩＴＲ）、ＣＭＶエンハンサーおよびニワトリ－ベータ－アクチンプロモータ（ＣＢＡ）で構成される合成プロモータ、高感度緑色蛍光タンパク質変異体（ｅＧＦＰ）およびウサギグロビンポリアデニル化配列を含むウイルスゲノムを使用して、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞への三重トランスフェクションによって、ＶＯＹ１０１またはＡＡＶ９のいずれかのカプシド血清型を有するＡＡＶ粒子を生成した。ウイルスゲノムのＩＴＲ～ＩＴＲの配列は、配列番号１７９９として提供される。
一本鎖ＡＡＶ粒子を精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化し、その後約４ｍｌ／ｋｇを６～７週齢の成体Ｃ５７Ｂｌ／６Ｊマウスに側尾静脈注射で投与した。ベクター濃度は５．０×１０１２ｖｇ／ｍＬだった。総用量は、２．０×１０１３ＶＧ／ｋｇだった。対照群を、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）で処置した。
投与のおよそ２８日後、幾つかの組織試料を収集した。ＧＦＰタンパク質定量化またはベクターゲノム定量化のために割り当てた組織試料を、液体窒素で瞬間凍結した。抗ＧＦＰ免疫組織化学法のために割り当てた組織試料を、４％パラホルムアルデヒドで一晩後固定した。抗ＧＦＰ抗体での免疫組織化学的染色およびその後のＤＡＢ基質発色による組織試料の分析は、ＶＯＹ１０１－ＧＦＰ粒子による全身性注射が、投与したＡＡＶ９－ＧＦＰ粒子と比較して脳および脊髄の全体にわたってＧＦＰレベルの増加をもたらしたことを示した。
ＧＦＰタンパク質レベルをＥＬＩＳＡで測定し、ｎｇ ＧＦＰ／総タンパク質ｍｇで報告した。結果は表１３に示される。ベクターゲノムデジタルＰＣＲ定量化を、ＣＢＡプロモータのＣＭＶエンハンサー領域に対するプローブセットを使用して実施し、宿主ＴＦＲＣ（トランスフェリンレセプタータンパク質１）に対して正規化し、１二倍体細胞当たりのベクターゲノム（ＶＧ／ＤＣ）で表した。結果は表１４および表１５に示される。表１３、表１４および表１５において、「ＢＬＬＱ」は、定量化の下限未満であることを意味する。
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Figure 0007221275000043
Figure 0007221275000044
 マウス線条体では、２．０×１０１３ＶＧ／ｋｇの静脈内注射の２８日後、ＶＯＹ１０１－ＧＦＰは、ＡＡＶ９－ＧＦＰよりも、５８倍高いＧＦＰレベルおよび１０１倍高いベクターゲノム分布をもたらした。マウス脊髄では、２．０×１０１３ＶＧ／ｋｇの静脈内注射の２８日後、ＶＯＹ１０１－ＧＦＰは、ＡＡＶ９－ＧＦＰよりも、７４倍高いＧＦＰレベルおよび１０４倍高いベクターゲノム分布をもたらした。マウス肝臓では、２．０×１０１３ＶＧ／ｋｇの静脈内注射の２８日後、ＶＯＹ１０１－ＧＦＰは、ＡＡＶ９－ＧＦＰよりも、４．９倍低いＧＦＰレベルおよび５．４倍少ないベクターゲノム分布をもたらした。
実施例４．ＶＯＹ１０１－ＦＸＮ ＡＡＶ粒子の静脈内送達
Ａ． ＶＯＹ１０１－ＦＸＮ ＡＡＶ粒子による静脈内処置後のインビボマウス生体内分布および発現レベル
マカカ・ファシキュラリス（ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）（カニクイザル）フラタキシン（ｃＦＸＮ）トランス遺伝子を有するウイルスゲノムを使用した場合も、脳および心臓への広範な遺伝子移入が観察された。ＡＡＶ２野生型ＩＴＲ、ＣＭＶエンハンサーおよびニワトリ－ベータ－アクチンプロモータ（ＣＢＡ）で構成される合成プロモータ、マカカ・ファシキュラリスフラタキシン（ｃＦＸＮ）およびヒト成長ホルモンポリアデニル化配列を含むウイルスゲノムを使用し、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞への三重トランスフェクションによって、ＶＯＹ１０１またはＡＡＶ９のいずれかのカプシド血清型を有するＡＡＶ粒子を生成した。ウイルスゲノムのＩＴＲ～ＩＴＲの配列は、配列番号１８０１として提供される。
一本鎖ＡＡＶ粒子を精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化し、その後約４ｍｌ／ｋｇを９週齢の成体Ｃ５７Ｂｌ／６Ｊマウスに側尾静脈注射で投与した。ベクター濃度は１．０×１０１２ｖｇ／ｍＬだった。総用量は４．２×１０１２ＶＧ／ｋｇだった。対照群を、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）で処置した。
ＡＡＶ粒子または媒体投与の７日後、幾つかの組織試料を収集した。組織試料を液体窒素で瞬間凍結した。ベクターゲノムデジタルＰＣＲ定量化を、ＣＢＡプロモータのＣＭＶエンハンサー領域に対するプローブセットを使用して実施し、宿主ＴＦＲＣに対して正規化し、１二倍体細胞当たりのベクターゲノム（ＶＧ／ＤＣ）で表した。ｃＦＸＮタンパク質レベルをＥＬＩＳＡで測定し、ｎｇ ｃＦＸＮ／総タンパク質ｍｇで報告した。ｃＦＸＮタンパク質レベルおよびベクターゲノム分布は、表１６および表１７に示される。表１６および表１７において、「ＢＬＬＱ」は、定量化の下限未満であること意味する。
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 マウス皮質では、４．２×１０１２ＶＧ／ｋｇの静脈内注射の７日後、ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮは、ＡＡＶ９－ｃＦＸＮよりも１６５倍高いベクターゲノムおよびＡＡＶ９－ｃＦＸＮよりも少なくとも２３４倍高いｃＦＸＮタンパク質発現をもたらした。マウス腰部脊髄では、４．２×１０１２ＶＧ／ｋｇの静脈内注射の７日後、ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮは、ＡＡＶ９－ｃＦＸＮよりも３３６倍高いベクターゲノムおよび少なくとも６４０倍高いｃＦＸＮタンパク質発現をもたらした。
後根神経節では、４．２×１０１２ＶＧ／ｋｇの静脈内注射の７日後、ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮは、ＡＡＶ９－ｃＦＸＮよりも１１．８倍高いベクターゲノムおよび１１２倍高いｃＦＸＮタンパク質発現をもたらした。三叉神経節では、４．２×１０１２ＶＧ／ｋｇの静脈内注射の７日後、ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮは、ＡＡＶ９－ｃＦＸＮよりも６１倍高いベクターゲノムおよび少なくとも１６倍高いｃＦＸＮタンパク質発現をもたらした。
心臓では、４．２×１０１２ＶＧ／ｋｇの静脈内注射の７日後、ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮは、ＡＡＶ９－ｃＦＸＮよりも２．７倍高いベクターゲノムおよび９．４倍高いｃＦＸＮタンパク質発現をもたらし、ＡＡＶ９と比較して著しくより高い発現を示した。
Ｂ． ＶＯＹ１０１－ＦＸＮ－ＨＡ ＡＡＶ粒子による処置後の非ヒト霊長類におけるｃＦＸＮ発現のインビボ研究
カニクイザル（マカカ・ファシキュラリス）で研究を実施し、ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡのＩＶ投薬後のＣＮＳ内のｃＦＸＮ発現を評価した。
ＨＡタグ付きカニクイザルフラタキシン（ｃＦＸＮ－ＨＡ）を含むウイルスゲノムを、一本鎖発現ベクターへと操作した。ＡＡＶ２野生型ＩＴＲ、ＣＭＶエンハンサーおよびニワトリ－ベータ－アクチンプロモータ（ＣＢＡ）で構成される合成プロモータ、ＨＡタグの３’配列を有するマカカ・ファシキュラリスフラタキシン（ｃＦＸＮ）およびヒト成長ホルモンポリアデニル化配列を含むウイルスゲノムを使用し、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞への三重トランスフェクションによって、ＶＯＹ１０１のカプシド血清型を有するＡＡＶ粒子を生成した。ウイルスゲノムのＩＴＲ～ＩＴＲの配列は、配列番号１８０１として提供される。
一本鎖ＡＡＶ粒子（ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡ）を精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化し、その後、５ｍｌ／ｋｇを伏在静脈注射により非ヒト霊長類（マカカ・ファシキュラリス）に投与した。ベクター濃度は１．３４×１０１２ｖｇ／ｍＬであり、総用量は６．７×１０１２ＶＧ／ｋｇだった。加えて、ＣＢＡプロモータと、ｃＦＸＮ－ＨＡ（ＡＡＶ９－ｃＦＸＮ－ＨＡ）を含むウイルスゲノムとを有する一本鎖ＡＡＶ９を、２×１０１３ＶＧ／ｋｇの用量での静脈内注射によって試験した。
ＡＡＶ粒子投与のおよそ２８日後、幾つかの組織試料を収集した。ｃＦＸＮ－ＨＡタンパク質定量化またはベクターゲノム定量化のために割り当てた組織試料を、瞬間凍結した。抗ＨＡ免疫組織化学法のために割り当てた組織試料を、２～８℃にて１２～７２時間４％パラホルムアルデヒドで後固定した。組織切片（２０μｍ厚）を、ＨＡタグに対するウサギモノクローナル抗体（１：１０００または１：２０００）で、その後ヤギ抗ウサギＩｇＧビオチン化二次抗体（１：１０００）で染色し、その後ＤＡＢ＋ニッケルで発色させた。ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮのＩＶ投薬後に、複数のＣＮＳ領域でｃＦＸＮ－ＨＡ染色が観察された。これらの領域としては、限定はされないが、脊髄（頚部区画、胸部区画および腰部区画）、脳幹核、小脳（小脳歯状核を含む）、視床、尾状核、および大脳皮質が挙げられる。６．７×１０１２ＶＧ／ｋｇのＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡのＩＶ投薬後に、脊髄の吻側－尾側範囲全体に沿って、特に前角運動ニューロンで、均質なＨＡ染色が観察された。脊髄および特に前角運動ニューロンは、ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡの用量が３分の１とより低いにも関わらず、ＡＡＶ９－ｃＦＸＮ－ＨＡよりもＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡで非常により大きな範囲で標識された。媒体処置対照非ヒト霊長類は、検出可能なバックグラウンド染色を本質的に示さなかった。
ＩＶ ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡ（６．７×１０１２ＶＧ／ｋｇ）後の運動ニューロンを含めた腰部前角におけるＨＡ染色は、類似用量の一本鎖ｒｈ１０ベクターとｃＦＸＮ－ＨＡとを含むウイルスゲノム（ＡＡＶｒｈ１０－ＦＸＮ－ＨＡ）のＩＴ投与と比較して類似していた。
ベクターゲノムデジタルＰＣＲ定量化を、ＣＢＡプロモータのＣＭＶエンハンサー領域に対するプローブセットを使用して実施し、宿主ＲｎａｓｅＰに対して正規化し、１二倍体細胞当たりのベクターゲノム（ＶＧ／ＤＣ）で表した。ｃＦＸＮ－ＨＡタンパク質レベルをＥＬＩＳＡで測定した。ｃＦＸＮ－ＨＡタンパク質レベル（ｎｇ ｃＦＸＮ－ＨＡ／総タンパク質ｍｇ）およびベクターゲノム分布（ＶＧ／ＤＣ）は、表１８に示される。表１８において、「ＢＬＬＱ」は、定量化の下限未満であること意味し、「ＮＡ」は、分析されなかったことを意味する。
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 これらの結果は、６．７×１０１２ＶＧ／ｋｇの静脈内注射の２８日後の非ヒト霊長類（ＮＨＰ）では、ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡが、脳形質導入をもたらしたことを示す。有意レベルのｃＦＸＮ－ＨＡタンパク質が、脊髄（頚部区画、胸部区画および腰部区画）および脳幹を含めた多くのＣＮＳ領域で検出された。ＩＶ投薬後、有意レベルのベクターゲノムが、脊髄（頚部区画、胸部区画および腰部区画）、脳幹、および皮質を含めた多くのＣＮＳ領域で検出された。
Ｃ． ＰＨＰ．Ｂ－ＦＸＮ－ＨＡ ＡＡＶ粒子による処置後の非ヒト霊長類におけるｃＦＸＮ発現のインビボ生体内分布および発現レベル
カニクイザル（マカカ・ファシキュラリス）で用量応答研究を実施し、ＰＨＰ．Ｂ－ｃＦＸＮ－ＨＡのＩＶ投薬後のＣＮＳ内のｃＦＸＮ発現を評価した。
ＨＡタグ付きカニクイザルフラタキシン（ｃＦＸＮ－ＨＡ）を含むウイルスゲノムを、一本鎖発現ベクターへと操作した。ＡＡＶ２野生型ＩＴＲ、ＣＭＶエンハンサーおよびニワトリ－ベータ－アクチンプロモータ（ＣＢＡ）で構成される合成プロモータ、ＨＡタグの３’配列を有するマカカ・ファシキュラリスフラタキシン（ｃＦＸＮ）、ｍｉＲ－１２２標的配列の三重反復（トランス遺伝子肝臓発現を低減するため）、およびヒト成長ホルモンポリアデニル化配列を含むウイルスゲノムを使用し、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞への三重トランスフェクションによって、ＰＨＰ．Ｂのカプシド血清型を有するＡＡＶ粒子を生成した。ウイルスゲノムのＩＴＲ～ＩＴＲの配列は、配列番号１８０２として提供される。
一本鎖ＡＡＶ粒子を精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化し、その後、５ｍｌ／ｋｇを伏在静脈注射により非ヒト霊長類（マカカ・ファシキュラリス）に投与した。ベクター濃度は１．５４×１０１１～４．７５×１０１２ｖｇ／ｍＬだった。動物には、６．３２×１０１１、２．０×１０１２、または２．０×１０１３ＶＧ／ｋｇで投薬した。
ＡＡＶ粒子投与のおよそ２８日後、幾つかの組織試料を収集した。ｃＦＸＮ－ＨＡタンパク質定量化またはベクターゲノム定量化のために割り当てた組織試料を、瞬間凍結した。抗ＨＡ免疫組織化学法のために割り当てた組織試料を、２～８℃にて１２～７２時間４％パラホルムアルデヒドで後固定した。単一標識の場合、組織切片（２０μｍ厚）を、ＨＡタグに対するウサギモノクローナル抗体（１：１０００または１：２０００）で、その後ヤギ抗ウサギＩｇＧビオチン化二次抗体（１：１０００）で染色し、その後ＤＡＢ＋ニッケルで発色させた。２×１０１３ｖｇ／ｋｇのＰＨＰ．Ｂ－ｃＦＸＮ－ＨＡのＩＶ投薬後、ＨＡ染色が複数のＣＮＳ領域で観察された。これらの領域としては、限定はされないが、脊髄（頚部区画、胸部区画および腰部区画）、小脳（歯状核を含む）、視床、黒質、線条体、ならびに感覚皮質および運動皮質が挙げられる。更に、ＨＡ染色は、黒質、歯状核および視床におけるニューロン形態のものを含めた、複数のＣＮＳ領域に多数のニューロンの形質導入を示した。加えて、脊髄、運動皮質および感覚皮質、ならびに線条体におけるニューロン形態の細胞は、ＨＡ免疫反応性だった。
ＨＡタグおよびニューロンマーカーＮｅｕＮの二重標識を、発色法を使用して実施した。組織切片（２０μｍ厚）を、ＨＡタグに対するウサギモノクローナル抗体（１：１０００）で、その後ヤギ抗ウサギＩｇＧビオチン化二次抗体（１：１０００）で染色し、その後ＤＡＢで発色させた（ニッケルを用いずに）。その後、切片を、ＮｅｕＮに対するマウスモノクローナル第２の一次抗体（ｍｏｕｓｅ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ｔｏ ＮｅｕＮ ｓｅｃｏｎｄ ｐｒｉｍａｒｙ ａｎｔｉｂｏｄｙ）で、その後ヤギ抗マウスＩｇＧビオチン化二次抗体で染色した。その後、ＮｅｕＮシグナルを緑色クロモゲンで検出した。複数のＨＡ＋細胞を、ニューロンマーカーＮｅｕＮで二重標識した。これらの結果は、２×１０１３ＶＧ／ｋｇのＰＨＰ．Ｂ－ｃＦＸＮ－ＨＡの静脈内注射後、小脳歯状核のニューロンがＨＡタグで標識されたことを示す。したがって、カニクイザルへの２×１０１３ｖｇ／ｋｇの静脈内用量後、小脳歯状核のニューロンが形質導入され、トランス遺伝子が発現される。
腰部後根神経節でのＨＡタグの発現は、大型（＞４０ｕｍ）および小型感覚ニューロンの両方に存在し、標識は、６．３２×１０１１、２．０×１０１２、または２．０×１０１３ＶＧ／ｋｇのＰＨＰ．Ｂ－ｃＦＸＮ－ＨＡのＩＶ注射と共に用量依存的様式で増加した。
ベクターゲノムデジタルＰＣＲ定量化を、ＣＢＡプロモータのＣＭＶエンハンサー領域に対するプローブセットを使用して実施し、宿主ＲｎａｓｅＰに対して正規化し、１二倍体細胞当たりのベクターゲノム（ＶＧ／ＤＣ）で表した。ｃＦＸＮ－ＨＡタンパク質レベルをＥＬＩＳＡで測定した。ＰＨＰ．Ｂカプシド血清型のｃＦＸＮ－ＨＡタンパク質レベル（ｎｇ ｃＦＸＮ－ＨＡ／総タンパク質ｍｇ）およびベクターゲノム分布（ＶＧ／ＤＣ）は、表１９に示される。表１９において、「ＢＬＬＱ」は、定量化の下限未満であることを意味し、「ＮＡ」は、分析しなかったことを意味する。
Figure 0007221275000048
 要約すると、ＰＨＰ．Ｂ－ｃＦＸＮ－ＨＡの静脈内注射の２８日後の非ヒト霊長類（ＮＨＰ）では、３つの用量レベル全てが脳形質導入をもたらした。有意レベルのｃＦＸＮ－ＨＡタンパク質が、脊髄（頚部区画、胸部区画および腰部区画）、脳幹、および小脳を含めた、多くのＣＮＳ領域で検出された。ＩＶ投薬後、有意レベルのベクターゲノムが、脊髄（頚部区画、胸部区画および腰部区画）、線条体、脳幹、小脳、および前頭皮質を含めた、多くのＣＮＳ領域で検出された。脊髄、脳幹、感覚皮質、運動皮質、小脳、視床、および黒質などの領域を含めた、ＮＨＰ ＣＮＳへの実質的な遺伝子移入が観察され、これらの領域におけるニューロン形態の細胞はトランス遺伝子発現を示した。加えて、後根神経節および心臓は、用量依存的なトランス遺伝子発現を示し、後根神経節の感覚ニューロンは形質導入を示した。
Ｄ． ＶＯＹ１０１－ＦＸＮ－ＨＡ ＡＡＶ粒子による処置後の非ヒト霊長類におけるｃＦＸＮ発現のインビボ用量依存研究
カニクイザル（マカカ・ファシキュラリス）で研究を実施し、一本鎖ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡの２つの異なるＩＶ用量レベル後のＣＮＳ内のｃＦＸＮ発現を評価した。
ＨＡタグ付きカニクイザルフラタキシン（ｃＦＸＮ－ＨＡ）を含むウイルスゲノムを、一本鎖発現ベクターへと操作した。ＡＡＶ２野生型ＩＴＲ、ＣＭＶエンハンサーおよびニワトリ－ベータ－アクチンプロモータ（ＣＢＡ）で構成される合成プロモータ、ＨＡタグの３’配列を有するマカカ・ファシキュラリスフラタキシン（ｃＦＸＮ）およびヒト成長ホルモンポリアデニル化配列を含むウイルスゲノムを使用して、ＶＯＹ１０１のカプシド血清型を有するＡＡＶ粒子を生成した。ウイルスゲノムのＩＴＲ～ＩＴＲの配列は、配列番号１８０１に提供される。
一本鎖ＡＡＶ粒子を精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化し、その後、５ｍｌ／ｋｇを伏在静脈注射により非ヒト霊長類（マカカ・ファシキュラリス）に投与した。総用量は６．７×１０１２ＶＧ／Ｋｇまたは４．９×１０１３ＶＧ／ＫｇのＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡだった。媒体陰性対照群も評価した。
ＡＡＶ粒子投与のおよそ２８日後、幾つかの組織試料を収集した。ｃＦＸＮ－ＨＡタンパク質定量化またはベクターゲノム定量化のために割り当てた組織試料を、瞬間凍結した。抗ＨＡ免疫組織化学法のために割り当てた組織試料を、２～８℃にて１２～７２時間４％パラホルムアルデヒドで後固定した。組織切片（２０μｍ厚）を、ＨＡタグに対するウサギモノクローナル抗体（１：１０００または１：２０００）で、その後ヤギ抗ウサギＩｇＧビオチン化二次抗体（１：１０００）で染色し、その後ＤＡＢ＋ニッケルで発色させた。
ベクターゲノムデジタルＰＣＲ定量化を、ＣＢＡプロモータのＣＭＶエンハンサー領域に対するプローブセットを使用して実施し、宿主ＴＦＲＣに対して正規化し、１細胞当たりのベクターゲノム（ＶＧ／細胞）で表した。ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡのベクターゲノム分布（平均＋標準偏差）は、表２０に示される。表２０において、ＳＣ－Ｃは頚部脊髄であり、ＳＣ－Ｌは腰部脊髄である。
Figure 0007221275000049
 ＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡのＩＶ投薬後、脊髄の吻側尾部範囲全体に沿って、特に前角運動ニューロンで、均質なＨＡ染色が観察された。４．９×１０１３ＶＧ／ｋｇの用量のＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡを受けている動物の頚部（Ｃ５）、胸部（Ｔ１２）および腰部（Ｌ４）脊髄におけるＨＡ染色は、脊髄の全て吻側－尾側レベルでの、特に前角運動ニューロンでの堅強なＨＡ染色を明らかにした（図５）。運動皮質における、オリーブ核、海馬、黒質、および外側膝状核を含めた脳幹における、ならびに歯状核を含めた深部小脳核におけるニューロン形態のものを含めた数多くのＨＡ＋細胞が、４．９×１０１３ＶＧ／ｋｇの用量のＶＯＹ１０１－ｃＦＸＮ－ＨＡを受けている動物で観察された。媒体処置対照は、本質的に検出可能でないかまたは非常に低いバックグラウンド染色を示した。
実施例５．フリードライヒ運動失調症を治療するためのＶＯＹ１０１－ＦＸＮ
Ａ． フリードライヒ運動失調症のマウスモデルにおけるＶＯＹ１０１－ＦＸＮの静脈内投薬によるインビボ分布、発現および有効性研究
ヒトフラタキシンをコードする核酸を含む選択されたウイルスゲノムを設計し、一本鎖ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ（ＣＭＶｉｅエンハンサー、ＣＢＡもしくはＣＭＶ、またはフラタキシンプロモータ、またはトランケート型ＣＢＡプロモータもしくはトランケート型ＣＭＶプロモータ、およびヒトベータグロビンイントロンを含む）、ｈＦＸＮ ｃＤＮＡ配列、ヒト成長ホルモンポリＡ配列、スタッファー配列としてのヒトアルブミンの断片、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化した。
７週齢であり、性別および同腹仔のバランスがとれたおよそ１０匹マウス／群の６群は、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ；２群）、または低（２群）または高用量（２群）レベル（およそ６．３×１０１２ｖｇ／ｋｇ～２×１０１３ｖｇ／ｋｇ体重）のいずれかのＶＯＹ１０１－ＦＸＮベクターを静脈内注射により受ける。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、マウスにおけるＶＯＹ１０１－ＦＸＮの有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、四肢筋電図検査、ノッチ付きバー歩行試験（ｎｏｔｃｈｅｄ ｂａｒ ｗａｌｋｉｎｇ ｔｅｓｔ）、ストリングハンギング試験（ｓｔｒｉｎｇ ｈａｎｇｉｎｇ ｔｅｓｔ）、ロータロッド試験、体重、および／または生存が挙げられる。他の読出しとしては、ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、免疫組織化学法およびインサイツハイブリダイゼーションによる組織（例えば、後根神経節、心臓、小脳、脊髄）でのＦＸＮタンパク質およびｍＲＮＡ発現、ならびに組織（後根神経節）切片におけるミトコンドリア酵素機能のインサイツ評価が挙げられる。様々な組織におけるベクターゲノムレベルを、ＰＣＲおよびＩＳＨで決定する。
３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、１８週までに安楽死させる。残り３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、生存に対する効果を評価するために６ヵ月以上維持する。対照群（ｎ＝１０／群）は、参照ベクターを投薬した野生型マウスおよび疾患モデルマウスを含む。
限定はされないが、ｈＦＸＮベクターを受けている動物のＤＲＧ、小脳、脊髄および心臓などの標的組織におけるヒトフラタキシン（ｈＦＸＮ）の分布および発現ならびにベクターゲノム分布を、ｈＦＸＮ発現についてはＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、ＩＳＨ、ＩＨＣによって、ベクターゲノム分析についてはＰＣＲおよびＩＳＨによって測定する。ヒトフラタキシン分析（ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、ＩＳＨ、ＩＨＣによる）は、ｈＦＸＮベクターが送達されると、標的組織、例えば、ＤＲＧ、小脳、脊髄および心臓での発現が、標的組織への分布と共に生じることを示す。ミトコンドリア酵素活性のインサイツ評価は、ｈＦＸＮベクターが送達されると、ＤＲＧの切片にて活性増加が生じることを示す。筋電図検査、ノッチ付きバー試験、ストリングハンギング試験およびロータロッド試験は、媒体対照動物よりも能力が改善していることを示す。
Ｂ． ＶＯＹ１０１－ＦＸＮの静脈内投与による非ヒト霊長類におけるインビボ分布および発現研究
ヒトフラタキシンをコードする核酸を含む選択されたウイルスゲノムを設計し、一本鎖（ｓｓ）ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでの一本鎖ウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ（ｐｒｏｏｔｅｒ）（ＣＭＶｉｅエンハンサー、ＣＢＡもしくはＣＭＶ、またはフラタキシンプロモータ、またはトランケート型ＣＢＡプロモータもしくはトランケート型ＣＭＶプロモータ、およびヒトベータグロビンイントロンを含む）、ｈＦＸＮ ｃＤＮＡ配列、ヒト成長ホルモンポリＡ配列、スタッファー配列としてのヒトアルブミンの断片、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化した。
およそ３歳以上であり、１群当たり少なくとも１匹の各性別の動物を有するおよそ３匹のカニクイザル／群の８群は、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ；２群）または低（２群）もしくは高用量（２群）レベル（およそ６．７×１０１２ｖｇ／ｋｇ～６×１０１３ｖｇ／ｋｇ体重）のいずれかのＶＯＹ１０１－ＦＸＮベクターを静脈内注射により受ける。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、ＮＨＰにおけるＶＯＹ１０１－ＦＸＮの有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、経時的な体重の測定、臨床モニタリング、組織病理学および血液安全性パネル試験（ｂｌｏｏｄ ｓａｆｅｔｙ ｐａｎｅｌ ｔｅｓｔｉｎｇ）が挙げられる。他の読出しとしては、ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、免疫組織化学法およびインサイツハイブリダイゼーションにより評価される、組織（例えば、後根神経節、心臓、小脳、脊髄）でのＦＸＮタンパク質およびｍＲＮＡ発現が挙げられる。様々な組織におけるベクターゲノムレベルを、ＰＣＲおよびＩＳＨで決定する。
３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、４週までに安楽死させる。残り３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、長期遺伝子発現を評価するために１２週間維持する。
限定はされないが、ｈＦＸＮベクターを受けている動物のＤＲＧ、小脳、脊髄および心臓などの標的組織におけるヒトフラタキシン（ｈＦＸＮ）の分布および発現ならびにベクターゲノム分布を、ｈＦＸＮ発現についてはＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、ＩＳＨ、ＩＨＣによって、ベクターゲノム分析についてはＰＣＲおよびＩＳＨによって測定する。霊長類フラタキシン発現データを、フリードライヒ運動失調症の遺伝子マウスモデルでのＦＡ疾患表現型のレスキューをもたらしたフラタキシン発現レベルと比較する。これらの結果に基づいて、臨床治験のための有効用量を計算する。
実施例６．アルツハイマー病を治療するためのＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ ｍｉＲＮＡ
Ａ． アルツハイマー病のマウスモデルにおけるｓｃＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ ｍＲＮＡの静脈内投薬のインビボ分布、発現および有効性研究
ＡＰＯＥを標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを含む選択されたウイルスゲノムを、自己相補的（ｓｃ）ＶＯＹ１０１－ｍｉＲＮＡ発現ベクターへと操作する。
ＩＴＲからＩＴＲまでのｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ＡｐｏＥを標的とするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ポリＡ配列、スタッファー配列、ならびに野生型ＩＴＲを含む。
ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
２ヵ月齢の３群のＰ３０１Ｓ突然変異体タウマウス、およそ２０匹マウス／群に、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、または高もしくは低用量レベル（およそ４×１０１２ｖｇ／ｋｇ～４×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかのＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ ｍｉＲＮＡを静脈内尾静脈注射により投与する。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、マウスでのＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ ｍｉＲＮＡの有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、体重、ｑＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＡＰＯＥ ｍＲＮＡの発現、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価されるＡＰＯＥタンパク質の発現、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価されるアミロイド－ベータ病理のレベル、免疫組織化学法によって評価される神経変性のレベル、およびデジタル液滴ＰＣＲによって測定されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。
動物は全て、体重および生存について評価する。ＡＰＯＥ ｍＲＮＡ発現、タウおよび／またはアミロイド病理、ならびに神経変性について脳、脊髄、および肝臓試料を評価するために、動物をおよそ１１ヵ月齢で安楽死させる。
ＰＣＲデータは、静脈内ＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ ｍｉＲＮＡベクターを受ける動物の脳全体にわたるベクターゲノムの送達を示すだろう。発現データは、ベクターを受ける動物の脳全体にわたるＡＰＯＥタンパク質およびｍＲＮＡの広範な低減を示すはずである。有意なＡＰＯＥ低減を示す脳領域は、嗅内皮質、海馬、および皮質を含めた、タウオパシー関連疾患に重要なものであるはずである。ベクターを受ける群は、病理学的アミロイド－ベータおよび神経変性の強力な低減を示す可能性が高いだろう。
Ｂ． ｓｃＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ ｍｉＲＮＡの静脈内投薬後の非ヒト霊長類におけるＡＰＯＥのインビボ分布および発現研究
ＡＰＯＥを標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを含む選択されたウイルスゲノムを、自己相補的（ｓｃ）ＶＯＹ１０１－ｍｉＲＮＡ発現ベクターへと操作する。
ＩＴＲからＩＴＲまでのｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ＡｐｏＥを標的とするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ポリＡ配列、スタッファー配列、ならびに野生型ＩＴＲを含む。
ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
３群の非ヒト霊長類（ＮＨＰ）（ＡＡＶ中和抗体について事前スクリーニングされた成体雄カニクイザルマカク（Ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ ｍａｃａｑｕｅ））に、ｓｃＶＯＹ１０１－ＡｐｏＥ ｍｉＲＮＡベクターを投与する。１群は媒体のみの対照である。ＮＨＰに、高または低用量レベル（およそ４×１０１２ｖｇ／ｋｇ～４×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかを静脈内送達を使用して投与する。投与の４週間後、生理食塩水灌流を実施し、脳を３ｍｍ冠状ブロックへと切片化し、瞬間凍結する。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、ＮＨＰにおけるＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ ｍｉＲＮＡの有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、ｑＲＴ－ＰＣＲによるＡＰＯＥ ｍＲＮＡの発現、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価されるタウタンパク質の発現、ならびにデジタル液滴ＰＣＲによって評価されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。
有意なＡＰＯＥ低減を示す脳領域は、嗅内皮質、海馬、および皮質を含めた、タウオパシー関連疾患に重要な区域をカバーすることが予想されるだろう。発現データと一致して、ＰＣＲは、脳にわたるベクターゲノムの広範な分布を示す可能性が高いだろう。
実施例７．アルツハイマー病および他のタウオパシーを治療するためのＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２
Ａ． アルツハイマー病および他のタウオパシーのマウスモデルにおけるＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２の静脈内投薬のインビボ分布、発現および有効性研究
ヒトＡＰＯＥ２をコードする核酸（アポリポタンパク質Ｅ２対立遺伝子）を、ＡＡＶウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドにパッケージングする。
ＡＡＶ－ＡＰＯＥ２ウイルスゲノムは、ＩＴＲからＩＴＲまで５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ヒトＡＰＯＥ２をコードする核酸、ポリＡ配列、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
９ヵ月齢の３群のＡＰＰ．ＰＳ１－２１／ＴＲＥ４マウス、およそ２０匹マウス／群に、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、または高もしくは低用量レベル（およそ４×１０１２ｖｇ／ｋｇ～４×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかのＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２を静脈内尾静脈注射により投与する。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、マウスにおけるＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２の有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、体重、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価されるＡＰＯＥ２の発現、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価されるアミロイド－ベータ病理のレベル、免疫組織化学法によって評価される神経変性のレベル、ならびにデジタル液滴ＰＣＲによって評価されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。
動物は全て、体重および生存について評価する。ＡＰＯＥ２発現、アミロイドおよび／またはタウ病理、ならびに神経変性について脳、脊髄、および肝臓試料を評価するために、動物をおよそ１１ヵ月齢で安楽死させる。
静脈内ＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２を受ける動物の脳にわたるベクターゲノムの分布を、ＰＣＲによって分析する。発現データは、ＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２ベクターを受ける動物の脳全体にわたる広範なＡＰＯＥ２の発現を示す可能性が高いだろう。有意なＡＰＯＥ２発現を示す脳領域は、嗅内皮質、海馬、および皮質を含めた、タウオパシー関連疾患に重要な区域をカバーする可能性が高いだろう。ＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２ベクターを受ける群は、病理学的アミロイド－ベータおよび／またはタウならびに神経変性の強力な低減を示すはずである。
Ｂ． 非ヒト霊長類におけるＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２の静脈内投薬のインビボ分布および発現研究
ヒトＡＰＯＥ２をコードする核酸配列（アポリポタンパク質Ｅ２対立遺伝子）を、ＡＡＶウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドにパッケージングする。
ＡＡＶ－ＡＰＯＥ２ウイルスゲノムは、ＩＴＲからＩＴＲまで５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ヒトＡＰＯＥ２をコードする核酸、ポリＡ配列、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
３群の非ヒト霊長類（ＮＨＰ）（ＡＡＶ中和抗体について事前スクリーニングされた成体雄カニクイザルマカク）に、ＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２ベクターを静脈注射によって投与する。１群は媒体のみの対照である（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）。ＮＨＰに、高または低用量レベル（およそ４×１０１２ｖｇ／ｋｇ～４×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかを静脈内送達を使用して投与する。投与の４週間後、生理食塩水灌流を実施し、脳を３ｍｍ冠状ブロックへと切片化し、瞬間凍結する。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、ＮＨＰにおけるＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２の有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価されるＡＰＯＥ２の発現、ならびにデジタル液滴ＰＣＲによって評価されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。
発現データは、ＶＯＹ１０１－ＡＰＯＥ２ベクターを受ける動物の脳全体にわたる広範なＡＰＯＥ２の発現を示す可能性が高いだろう。有意なＡＰＯＥ２レベルを示す脳領域は、嗅内皮質、海馬、および皮質を含めた、タウオパシー関連疾患に重要な区域をカバーする可能性が高いだろう。発現データと一致して、ＰＣＲは、脳にわたるベクターゲノムの広範な分布を示す可能性が高いだろう。
実施例８．ハンチントン病を治療するためのＶＯＹ１０１－ＨＴＴ ｍｉＲＮＡ
Ａ． ハンチントン病のマウスモデルにおけるＶＯＹ１０１－ｍｉＲＮＡのインビボ有効性研究
ＨＴＴを標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有する選択されたｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを、ｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、ＣＢＡプロモータ（ＣＭＶｉｅエンハンサー、ＣＢＡプロモータおよびＳＶ４０イントロンを含む）、ＨＴＴを標的にするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ウサギグロビンポリＡ配列、スタッファー配列としてのヒトアルファ－１抗トリプシンの断片、ならびに野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－ＨＴＴ ｍｉＲＮＡ粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
両側性線条体内投薬が使用されるだろう。およそ２ヵ月齢であり、性別のバランスがとれたおよそ１２匹マウス／群の３群は、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、または高または低用量レベル（１線条体当たりおよそ３×１０９ｖｇ～５×１０１０ｖｇ）のいずれかのＶＯＹ１０１－ＨＴＴ ｍｉＲＮＡベクターを受けるだろう。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、マウスにおけるＶＯＹ１０１－ＨＴＴ ｍＲＮＡの有効性を試験することができる。非限定的な例としては、体重の測定、ロータロッド試験、ポルソルト水泳試験、ならびに免疫組織化学法によって評価されるＨＴＴタンパク質凝集体の測定が挙げられる。
動物は全て、体重、ロータロッド試験、ポルソルト水泳試験、および生存について評価されるだろう。線条体組織試料のＨＴＴ ｍＲＮＡ抑制（ＲＴ－ｑＰＣＲによる）およびウエスタンブロットまたはＭＳＤアッセイによるＨＴＴタンパク質レベルについて評価するために、一部の動物を５ヵ月齢で（投薬３ヵ月後に）安楽死させることになるが、他の動物は、凝集体を評価するために（免疫組織化学法により）、およそ８ヵ月齢で（投薬６ヵ月後に）安楽死させることになる。
ＨＴＴ測定データは、主要標的区域（線条体および皮質）を含め、ＨＴＴ ｍｉＲＮＡベクターを受ける動物の脳全体にわたるヒトＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの広範な低減を示すはずである。ＨＴＴ ｍｉＲＮＡベクターを受ける群は、病理学的ＨＴＴ凝集体の低減も示し、寿命および運動活性における有意な改善を示すだろう。
Ｂ． ｓｃＶＯＹ１０１－ＨＴＴ ｍｉＲＮＡの静脈内投薬後の非ヒト霊長類におけるインビボ薬理学および分布研究
ＨＴＴを標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有する選択されたｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを、ｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ＨＴＴを標的にするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ポリＡ配列、スタッファー配列、ならびに野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－ＨＴＴ ｍｉＲＮＡ粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
３群の非ヒト霊長類（ＮＨＰ）（ＡＡＶ中和抗体について事前スクリーニングされた成体雄アカゲザルマカク（ｒｈｅｓｕｓ ｍａｃａｑｕｅ））に、ｓｃＶＯＹ１０１－ＨＴＴ ｍｉＲＮＡ粒子を投与する。ＮＨＰに、静脈内送達または頸動脈内送達を使用して、高、中または低用量レベル（およそ５×１０１２ｖｇ／ｋｇ、１．５×１０１３ｖｇ／ｋｇおよび４．５×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかを投与する。投与の４週間後、生理食塩水灌流を実施し、脊髄の一部、脳切片および選択された末梢組織を回収することになる。組織のサブセットを液体窒素で瞬間凍結させ、サブセットを４％ＰＦＡで後固定することになる。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、ＮＨＰにおけるＶＯＹ１０１－ＨＴＴ ｍｉＲＮＡの有効性を試験することができる。非限定的な例としては、ｂＤＮＡアッセイおよび／またはｑＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＨＴＴ ｍＲＮＡ発現、ウエストブロットによっておよび免疫組織化学法によって評価されるＨＴＴタンパク質の発現、ならびにデジタル液滴ＰＣＲによって評価されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。加えて、臨床観察、血清およびＣＳＦ臨床病理、ＣＮＳおよび末梢組織のＣＳＦバイオマーカーおよび組織病理を分析することになる。
実施例９．筋萎縮性側索硬化症を治療するためのＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡ
Ａ． ＡＬＳのマウスモデルにおけるＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡのインビボ薬理学研究
ＳＯＤ１を標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有する選択されたｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを、ｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、Ｈ１プロモータ、ＳＯＤ１を標的にするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ウサギグロビンポリＡ配列、ならびに野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡ粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
およそ４０～５０日齢であり、性別、年齢および同腹仔のバランスがとれたおよそ１０匹マウス／群の３群は、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、または高もしくは低用量レベル（およそ５×１０１１ｖｇ／マウスまたは２×１０１２ｖｇ／マウス）のいずれかのＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡベクターを受けるだろう。動物は全て、静脈内投薬されるだろう。動物は全て、静脈内投与のおよそ４週間後に安楽死させることになる。
当該技術分野で公知の分析方法を使用して、薬理学的プロファイルを評価することができる。一次読出しとしては、複数のＣＮＳ領域および選択された末梢組織におけるｈＳＯＤ１ ｍＲＮＡおよびタンパク質発現ならびにベクターゲノム生体内分布が挙げられるだろう。二次読出しとしては、体重、免疫組織化学法および症状観察（ｃａｇｅ ｓｉｄｅ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ）が挙げられるだろう。
Ｂ． ＡＬＳのマウスモデルにおけるＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡのインビボ有効性研究
ＳＯＤ１を標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有する選択されたｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを、ｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、Ｈ１プロモータ、ＳＯＤ１を標的にするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ウサギグロビンポリＡ、ならびに野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡ粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
およそ４０～５０日齢であり、性別、年齢および同腹仔のバランスがとれたおよそ３６匹マウス／群の３群は、媒体、または高もしくは低用量レベル（およそ５×１０１１ｖｇ／マウスまたは２×１０１２ｖｇ／マウス）のいずれかのベクターを受けるだろう。動物は全て、静脈内投薬されるだろう。
マウスにおけるＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡの有効性を評価するために、当該技術分野で公知の分析方法を使用して一次読出しを得ることができ、分析方法としては、体重、行動ニューロスコア（ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ ＮｅｕｒｏＳｃｏｒｅ）、生存、ならびに疾患開始および継続期間を挙げることができる。神経学的スコアは、毎日測定されるだろう。動物は、その動物のニューロスコア（ＮｅｕｒｏＳｃｏｒｅ）が４に達した際に安楽死させることになる。二次読出しとしては、ｈＳＯＤ１ ｍＲＮＡ／タンパク質発現、ベクターゲノム生体内分布およびＩＨＣ（骨格筋およびＮＭＪ画像診断、脊髄）が挙げられる。
データは、静脈内ＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡベクターが運動ニューロン、脳幹および運動皮質に送達されると、ＳＯＤ１タンパク質およびｍＲＮＡの広範な低減が生じることを示す。
Ｃ． ＡＬＳの疾患モデルとしてのイヌ変性性脊髄症におけるＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡのインビボ有効性研究
ＳＯＤ１を標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有する選択されたｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを、設計されたｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドにパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、Ｈ１プロモータ、ＳＯＤ１を標的にするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ウサギグロビンポリＡ配列、スタッファー配列、ならびに野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡ粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
伴侶ＤＭイヌを、インビトロ中和抗体アッセイにて血清試料を評価することによって、ＶＯＹ１０１カプシドに対する以前から存在する免疫についてスクリーニングすることになる。陰性ｎＡｂを有するイヌを、研究の候補にすることになる。イヌを、２つの治療群に分割し、静脈内投薬を使用してＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡまたは媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）のいずれかを投与することになる。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、イヌにおけるＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡの有効性を評価することができる。非限定的な例としては、足取りおよび神経学的転帰の縦断的モニタリング、ＤＴＩおよびＭＲＳ、電気診断試験、ＭＵＮＥならびに特定の時点での電気インピーダンス筋運動描記法（ＥＩＭ）が挙げられる。
イヌにおけるｐＮＦ－ＨおよびＮＦＬレベルを評価するために、血清およびＣＳＦ試料を指定の時点および安楽死の時点で収集することになる。安楽死の時点では、ＳＯＤ１ ｍＲＮＡ定量化およびベクターゲノム生体内分布分析のために、ＣＮＳおよび末梢組織を収集することになる。
データは、静脈内ＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡベクターが運動ニューロン、脳幹および運動皮質に送達されると、ＳＯＤ１タンパク質およびｍＲＮＡの低減が生じることを示す。
Ｄ． ｓｃＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡの静脈内投薬後の非ヒト霊長類におけるインビボ薬理学および分布研究
ＳＯＤ１を標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有する選択されたｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを、ｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ＳＯＤ１を標的にするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ポリＡ配列、スタッファー配列、ならびに野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡ粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
３群の非ヒト霊長類（ＮＨＰ）（ＡＡＶ中和抗体について事前スクリーニングされた成体雄カニクイザルマカク）に、ｓｃＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡベクターを投与する。ＮＨＰに、静脈内送達を使用して、高、中または低用量レベル（およそ５×１０１２ｖｇ／ｋｇ、１．５×１０１３ｖｇ／ｋｇおよび４．５×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかを投与する。投与の４週間後、生理食塩水灌流を実施し、脊髄の一部、脳切片および選択された末梢組織を回収することになる。収集した組織のサブセットを液体窒素で瞬間凍結させ、別のサブセットを４％ＰＦＡで後固定することになる。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、ＮＨＰにおける有効性および分布を決定することができる。非限定的な例としては、ｑＲＴ－ＰＣＲによるＳＯＤ１ ｍＲＮＡの発現、ＷＢによっておよび免疫組織化学法によって評価されるＳＯＤ１タンパク質の発現、ならびにデジタル液滴ＰＣＲによって評価されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。加えて、臨床観察、血清およびＣＳＦ臨床病理、ＣＮＳおよび末梢組織のＣＳＦバイオマーカーおよび組織病理を分析することになる。
データは、ＶＯＹ１０１－ＳＯＤ１ ｍｉＲＮＡベクターが骨髄運動ニューロン、脳幹および運動皮質に静脈内送達されると、ＳＯＤ１タンパク質およびｍＲＮＡの低減が生じることを示す。
実施例１０．アルツハイマー病および他のタウオパシーを治療するための抗タウ抗体送達
Ａ． アルツハイマー病および他のタウオパシーのマウスモデルにおけるＶＯＹ１０１－抗タウ抗体の静脈内投薬のインビボ分布、発現および有効性研究
タウを標的とするモノクローナル抗体をコードする核酸を、ＡＡＶウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドにて産生させる。
ウイルスゲノムは、ＩＴＲからＩＴＲまで５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、タウを標的とするモノクローナル抗体をコードする核酸、ポリＡ配列、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－抗タウ抗体粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
２ヵ月齢の３群のＰ３０１Ｓマウス、およそ２０匹マウス／群に、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、または高もしくは低用量レベル（およそ４×１０１２ｖｇ／ｋｇ～４×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかのＶＯＹ１０１－抗タウ抗体を静脈内尾静脈注射により投与する。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、マウスにおけるＶＯＹ１０１－抗タウ抗体の有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、体重、ロータロッド、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価される抗タウ抗体の発現、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価される病原性タウのレベル、免疫組織化学法によって評価される神経変性のレベル、ならびにデジタル液滴ＰＣＲによって測定されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。動物は全て、体重および生存について評価する。抗体発現、タウ病理、および神経変性について、脳、脊髄、および肝臓試料を評価するために、動物をおよそ５ヵ月齢で安楽死させる。
アルツハイマー病およびタウオパシーを治療するためのＶＯＹ１０１－抗タウ抗体送達が成功した場合、ＰＣＲデータは、静脈内ＶＯＹ１０１－抗タウ抗体ベクターを受ける動物の脳全体にわたるベクターゲノムの送達を示すことが予期できるだろう。発現データもまた、受動免疫化後のレベルと等しいかまたはそれを超えるレベルで、ベクターを受ける動物の脳全体にわたる抗タウ抗体の広範な発現を示す可能性が高いだろう。有意な抗体レベルを示すことが予想される脳領域としては、嗅内皮質、海馬、および皮質を含めた、タウオパシー関連疾患に重要な区域が挙げられる。ＶＯＹ１０１－抗タウ抗体ベクターを受ける群は、病理学的タウおよび神経変性の強力な低減を示し、寿命およびロータロッド能力の有意な改善を示すことが予想される。
Ｂ． 非ヒト霊長類におけるＶＯＹ１０１－抗タウ抗体の静脈内投薬のインビボ分布および発現研究
タウを標的とするモノクローナル抗体をコードする核酸をＡＡＶウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドにて産生させる。
ウイルスゲノムは、ＩＴＲからＩＴＲまで５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、タウを標的とするモノクローナル抗体をコードする核酸、ポリＡ配列、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－抗タウ粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
３群の非ヒト霊長類（ＮＨＰ）（ＡＡＶ中和抗体について事前スクリーニングされた成体雄カニクイザルマカク）にＶＯＹ１０１－抗タウベクターを投与する。１群は媒体のみの対照である（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）。ＮＨＰに、静脈内送達を使用して、高または低用量レベル（およそ４×１０１２ｖｇ／ｋｇ～４×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかを投与する。投与の４週間後、生理食塩水灌流を実施し、脳を３ｍｍ冠状ブロックへと切片化し、瞬間凍結する。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、ＮＨＰにおけるＶＯＹ１０１－抗タウ抗体の有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価される抗タウ抗体の発現、ならびにデジタル液滴ＰＣＲによって評価されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。
発現データは、抗タウ抗体が、受動免疫化後のレベルを超えるレベルでＮＨＰ脳にて広く発現されることを示すことが予期できるだろう。有意な抗体レベルを示すことが予想される脳領域としては、嗅内皮質、海馬、および皮質を含めた、タウオパシー関連疾患に重要な区域が挙げられる。発現データと一致して、ＰＣＲは、脳にわたるベクターゲノムの広範な分布を示す可能性が高いだろう。
実施例１１．タウオパシーを治療するためのＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡ
Ａ． タウオパシーのマウスモデルにおけるｓｃＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡの静脈内投薬のインビボ分布、発現および有効性研究
タウを標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有する選択されたｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを、ｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、タウを標的にするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ポリＡ配列、スタッファー配列、ならびに野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡ粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
２ヵ月齢の３群のＰ３０１Ｓマウス、およそ２０匹マウス／群に、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、または高もしくは低用量レベル（およそ４×１０１２ｖｇ／ｋｇ～４×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかのＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡベクターを静脈内尾静脈注射により投与する。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、マウスにおけるＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡの有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、体重、ロータロッド、ｑＲＴ－ＰＣＲによって測定されるタウｍＲＮＡの発現、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価される総ヒトタウ発現、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価される病原性タウのレベル、免疫組織化学法によって評価される神経変性のレベル、ならびにデジタル液滴ＰＣＲによって測定されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。
動物は全て、体重および生存について評価する。タウｍＲＮＡ発現、タウ病理、および神経変性について、脳、脊髄、および肝臓試料を評価するために、動物をおよそ５ヵ月齢で安楽死させる。
タウオパシーを治療するためのＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡ送達が成功した場合、ＰＣＲデータは、静脈内ＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡベクターを受ける動物の脳全体にわたるベクターゲノムの送達を示すことが予期できるだろう。発現データは、ＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡベクターを受ける動物の脳全体にわたるヒトタウタンパク質およびｍＲＮＡの広範な低減を示すことも予想されるだろう。有意なタウ低減を示す可能性が高い脳領域としては、嗅内皮質、海馬、および皮質を含めた、タウオパシー関連疾患に重要な区域が挙げられる。ＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡベクターを受ける群は、病理学的タウおよび神経変性の強力な低減を示し、寿命およびロータロッド能力の有意な改善を示す可能性が高いだろう。
Ｂ． ｓｃＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡの静脈内投薬後の非ヒト霊長類におけるタウのインビボ分布および発現研究
タウを標的にするガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含有する選択されたｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセットを、ｓｃＡＡＶ－ｍｉＲＮＡウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、タウを標的にするガイド配列およびパッセンジャー配列を含有するｐｒｉ－ｍｉＲＮＡカセット、ポリＡ配列、スタッファー配列、ならびに野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡ粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
３群の非ヒト霊長類（ＮＨＰ）（ＡＡＶ中和抗体について事前スクリーニングされた成体雄カニクイザルマカク）にｓｃＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡを投与する。１群は媒体のみの対照である（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）。ＮＨＰに、静脈内送達を使用して、高または低用量レベルのＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡ（およそ４×１０１２ｖｇ／ｋｇ～４×１０１３ｖｇ／ｋｇ）のいずれかを投与する。投与の４週間後、生理食塩水灌流を実施し、脳を３ｍｍ冠状ブロックへと切片化し、瞬間凍結する。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、ＮＨＰにおけるＶＯＹ１０１－タウｍｉＲＮＡの分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、ｑＲＴ－ＰＣＲによるタウｍＲＮＡの発現、免疫組織化学法および酵素結合免疫吸着測定法によって評価されるタウタンパク質の発現、ならびにデジタル液滴ＰＣＲによって評価されるベクターゲノムレベルの測定が挙げられる。
発現データは、タウタンパク質およびｍＲＮＡが脳において広く低減されることを示すことが予想できるだろう。有意なタウ低減を示す可能性が高い脳領域としては、嗅内皮質、海馬、および皮質を含めた、タウオパシー関連疾患に重要な区域が挙げられる。発現データと一致して、ＰＣＲは、脳にわたるベクターゲノムの広範な分布を示す可能性が高いだろう。
実施例１２．心血管疾患（例えば、心不全）を治療するためのＶＯＹ１０１－ＡＴＰ２Ａ２
Ａ． 心血管疾患のマウスモデルにおけるＶＯＹ１０１－ＡＴＰ２Ａ２の静脈内投薬によるインビボ分布、発現および有効性研究
ヒトＡＴＰ２Ａ２をコードする核酸を含む選択されたウイルスゲノムを設計し、一本鎖ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ｈＡＴＰ２Ａ２ ｃＤＮＡ配列、ヒト成長ホルモンポリＡ配列、スタッファー配列としてのヒトアルブミンの断片、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
７週齢であり、性別および同腹仔のバランスがとれたおよそ１０匹マウス／群の６群は、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ；２群）、または低（２群）もしくは高用量（２群）レベル（およそ６．３×１０１２ｖｇ／ｋｇ～２×１０１３ｖｇ／ｋｇ体重）のいずれかのＶＯＹ１０１－ＡＴＰ２Ａ２ベクターを静脈内注射により受ける。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、マウスにおけるＶＯＹ１０１－ＡＴＰ２Ａ２の有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、四肢筋電図検査、ノッチ付きバー歩行試験、ストリングハンギング試験、ロータロッド試験、体重、および／または生存が挙げられる。他の読出しとしては、ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、免疫組織化学法およびインサイツハイブリダイゼーションによる組織（例えば、後根神経節、心臓（例えば、心筋細胞）、小脳、脊髄）でのＡＴＰ２Ａ２タンパク質およびｍＲＮＡ発現、ならびに組織（後根神経節）切片におけるミトコンドリア酵素機能のインサイツ評価が挙げられる。様々な組織におけるベクターゲノムレベルを、ＰＣＲおよびＩＳＨで決定する。
３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、１８週までに安楽死させる。残り３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、生存に対する効果を評価するために６ヵ月以上維持する。対照群（ｎ＝１０／群）は、参照ベクターを投薬した野生型マウスおよび疾患モデルマウスを含む。
限定はされないが、ＡＴＰ２Ａ２ベクターを受ける動物のＤＲＧ、小脳、脊髄および心臓などの標的組織におけるヒトＡＴＰ２Ａ２の分布および発現ならびにベクターゲノム分布を、ｈＡＴＰ２Ａ２発現についてはＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、ＩＳＨ、ＩＨＣによって、ならびにベクターゲノム分析についてはＰＣＲおよびＩＳＨによって測定する。ヒトＡＴＰ２Ａ２分析（ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、ＩＳＨ、ＩＨＣによる）は、ｈＡＴＰ２Ａ２ベクターが送達されると、標的組織、例えば心臓での発現が、標的組織へのウイルスゲノムの分布と共に生じることを示す。ミトコンドリア酵素活性のインサイツ評価は、ｈＡＴＰ２Ａ２ベクターが送達されると、心臓の切片にて活性増加が生じることを示す。筋電図検査、ノッチ付きバー試験、ストリングハンギング試験およびロータロッド試験は、媒体対照動物よりも能力が改善していることを示す。
Ｂ． 非ヒト霊長類におけるＶＯＹ１０１－ＡＴＰ２Ａ２の静脈内投薬によるインビボ分布および発現研究
ヒトＡＴＰ２Ａ２をコードする核酸配列を含む選択されたウイルスゲノムを設計し、一本鎖（ｓｓ）ＶＯＹ１０１カプシドにパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでの一本鎖ウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ｈＡＴＰ２Ａ２ ｃＤＮＡ配列、ヒト成長ホルモンポリＡ配列、スタッファー配列としてのヒトアルブミンの断片、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
およそ３歳以上であり、１群当たり少なくとも１匹の各性別の動物を有するおよそ３匹カニクイザル／群の８群は、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ；２群）、または低（２群）もしくは高用量（２群）レベル（およそ６．７×１０１２ｖｇ／ｋｇ～６×１０１３ｖｇ／ｋｇ体重）のいずれかのＶＯＹ１０１－ＡＴＰ２Ａ２ベクターを静脈内注射により受ける。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、ＮＨＰにおけるＶＯＹ１０１－ＡＴＰ２Ａ２の有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、経時的な体重の測定、臨床モニタリング、組織病理学および血液安全性パネル試験が挙げられる。他の読出しとしては、ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、免疫組織化学法およびインサイツハイブリダイゼーションによって評価される、組織（例えば、心臓）でのＡＴＰ２Ａ２タンパク質およびｍＲＮＡ発現が挙げられる。様々な組織におけるベクターゲノムレベルを、ＰＣＲおよびＩＳＨで決定する。
３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、４週までに安楽死させる。残り３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、長期遺伝子発現を評価するために１２週間維持する。
限定はされないが、ｈＡＴＰ２Ａ２ベクターを受ける動物の心臓などの標的組織におけるヒトＡＴＰ２Ａ２（ｈＡＴＰ２Ａ２）の分布および発現ならびにベクターゲノム分布を、ｈＡＴＰ２Ａ２発現についてはＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、ＩＳＨ、ＩＨＣによって、ならびにベクターゲノム分析についてはＰＣＲおよびＩＳＨによって測定する。霊長類ＡＴＰ２Ａ２発現データを、心血管疾患の遺伝子マウスモデルにおける心血管疾患表現型のレスキューをもたらしたＡＴＰ２Ａ２発現レベルと比較する。これらの結果に基づいて、臨床治験のための有効用量を計算する。
実施例１３．心血管疾患（例えば、心不全）を治療するためのＶＯＹ１０１－Ｓ１００Ａ１
Ａ． 心血管疾患のマウスモデルにおけるＶＯＹ１０１－Ｓ１００Ａ１の静脈内投薬によるインビボ分布、発現および有効性研究
ヒトＳ１００Ａ１をコードする核酸を含む選択されたウイルスゲノムを設計し、一本鎖ＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでのウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ｈＳ１００Ａ１ ｃＤＮＡ配列、ヒト成長ホルモンポリＡ配列、スタッファー配列としてのヒトアルブミンの断片、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
７週齢であり、性別および同腹仔のバランスがとれたおよそ１０匹マウス／群の６群は、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ；２群）、または低（２群）または高用量（２群）レベル（およそ６．３×１０１２ｖｇ／ｋｇ～２×１０１３ｖｇ／ｋｇ体重）のいずれかのＶＯＹ１０１－Ｓ１００Ａ１ベクターを静脈内注射により受ける。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、マウスにおけるＶＯＹ１０１－Ｓ１００Ａ１の有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、四肢筋電図検査、ノッチ付きバー歩行試験、ストリングハンギング試験、ロータロッド試験、体重、および／または生存が挙げられる。他の読出しとしては、ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、免疫組織化学法およびインサイツハイブリダイゼーションによる組織（例えば、後根神経節、心臓（例えば、心筋細胞）、小脳、脊髄）でのＳ１００Ａ１タンパク質およびｍＲＮＡ発現、ならびに組織（後根神経節）切片におけるミトコンドリア酵素機能のインサイツ評価が挙げられる。様々な組織におけるベクターゲノムレベルを、ＰＣＲおよびＩＳＨで決定する。
３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、１８週までに安楽死させる。残り３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、生存に対する効果を評価するために６ヵ月以上維持する。対照群（ｎ＝１０／群）は、参照ベクターを投薬した野生型マウスおよび疾患モデルマウスを含む。
限定はされないが、ｈＳ１００Ａ１ベクターを受ける動物のＤＲＧ、小脳、脊髄および心臓などの標的組織におけるヒトＳ１００Ａ１の分布および発現ならびにベクターゲノム分布を、ｈＳ１００Ａ１発現についてはＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、ＩＳＨ、ＩＨＣによって、ならびにベクターゲノム分析についてはＰＣＲおよびＩＳＨによって測定する。ヒトＳ１００Ａ１分析（ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、ＩＳＨ、ＩＨＣによる）は、ｈＳ１００Ａ１ベクターが送達されると、標的組織、例えば心臓での発現が、標的組織へのウイルスゲノムの分布と共に生じることを示す。ミトコンドリア酵素活性のインサイツ評価は、ｈＳ１００Ａ１ベクターが送達されると、心臓の切片における活性増加が生じることを示す。筋電図検査、ノッチ付きバー試験、ストリングハンギング試験およびロータロッド試験は、媒体対照動物よりも能力が改善していることを示す。
Ｂ． 非ヒト霊長類におけるＶＯＹ１０１－Ｓ１００Ａ１の静脈内投薬によるインビボ分布および発現研究
ヒトＳ１００Ａ１をコードする核酸配列を含む選択されたウイルスゲノムを設計し、一本鎖（ｓｓ）ＶＯＹ１０１カプシドにパッケージングする。
ＩＴＲからＩＴＲまでの一本鎖ウイルスゲノムは、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、ｈＳ１００Ａ１ ｃＤＮＡ配列、ヒト成長ホルモンポリＡ配列、スタッファー配列としてのヒトアルブミンの断片、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムをＶＯＹ１０１カプシドへとパッケージングし、精製し、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
およそ３歳以上であり、１群当たり少なくとも１匹の各性別の動物を有するおよそ３匹カニクイザル／群の８群は、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ；２群）、または低（２群）もしくは高用量（２群）レベル（およそ６．７×１０１２ｖｇ／ｋｇ～６×１０１３ｖｇ／ｋｇ体重）のいずれかのＶＯＹ１０１－Ｓ１００Ａ１ベクターを静脈内注射により受ける。
当該技術分野で公知の任意の試験を使用して、ＮＨＰにおけるＶＯＹ１０１－Ｓ１００Ａ１の有効性、分布および発現を試験することができる。非限定的な例としては、経時的な体重の測定、臨床モニタリング、組織病理学および血液安全性パネル試験が挙げられる。他の読出しとしては、ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、免疫組織化学法およびインサイツハイブリダイゼーションによって評価される、組織（例えば、心臓）におけるＳ１００Ａ１タンパク質およびｍＲＮＡ発現が挙げられる。様々な組織におけるベクターゲノムレベルを、ＰＣＲおよびＩＳＨで決定する。
３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、４週までに安楽死させる。残り３群の動物（媒体、低用量、高用量）を、長期遺伝子発現を評価するために１２週間維持する。
限定はされないが、ｈＳ１００Ａ１ベクターを受ける動物の心臓などの標的組織におけるヒトＳ１００Ａ１（ｈＳ１００Ａ１）の分布および発現ならびにベクターゲノム分布を、ｈＳ１００Ａ１発現についてはＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、ＩＳＨ、ＩＨＣによって、ならびにベクターゲノム分析についてはＰＣＲおよびＩＳＨによって測定する。霊長類Ｓ１００Ａ１発現データを、心血管疾患の遺伝子マウスモデルにおける心血管疾患表現型のレスキューをもたらしたＳ１００Ａ１発現レベルと比較する。これらの結果に基づいて、臨床治験のための有効用量を計算する。
実施例１４．アルツハイマー病および他のタウオパシーの治療のための抗タウ抗体送達
Ａ． ＶＯＹ１０１またはＶＯＹ２０１－抗タウ抗体の静脈内投薬のインビボ分布、発現および有効性研究
タウを標的とするモノクローナル抗体ＰＨＦ－１をコードする核酸を、ＡＡＶウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシド（配列番号１８０９として提供されるカプシド配列）またはＶＯＹ２０１カプシド（配列番号１８１０として提供されるカプシド配列）にて産生させた。
ウイルスゲノムは、ＩＴＲからＩＴＲまで５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、タウを標的とするモノクローナル抗体ＰＨＦ－１をコードする核酸（配列番号１８１６として提供されるコザック、重鎖、リンカー領域、軽鎖および終止コドン）、ポリＡ配列、および野生型ＩＴＲを含んでいた。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１またはＶＯＹ２０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化した。ＶＯＹ１０１またはＶＯＹ２０１－抗タウ抗体粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化した。
２ヵ月齢の３群の野生型（ＷＴ）マウス、およそ５匹マウス／群に、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ１０１－抗タウ抗体ベクターまたは１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ２０１－抗タウ抗体ベクターを静脈内尾静脈注射により投与した。
ＡＡＶ粒子投与のおよそ２８日後、幾つかの組織試料を収集した。ベクターゲノムデジタルＰＣＲ定量化を、ＣＢＡプロモータのＣＭＶエンハンサー領域に対するプローブセットを使用して実施し、宿主ＴＦＲＣに対して正規化し、１細胞当たりのベクターゲノム（ＶＧ／細胞）で表した。ＶＯＹ１０１．ＰＨＦ－１およびＶＯＹ２０１．ＰＨＦ－１のベクターゲノム分布は、表２１に示される。表２１において、Ｈｐは海馬であり、ＳＣ－Ｃは頚髄であり、ＳＣ－Ｔは胸髄であり、ＳＣ－Ｌは腰髄である。
Figure 0007221275000050
 収集した組織における、組織ライセートの可溶性画分に存在するＰＨＦ－１の発現レベルもまた、ＥＬＩＳＡプレートにコーティングしたＰＨＦタウとの相互作用を検出することによって測定した。抗体－抗原複合体を、ＨＲＰ標識抗マウスＩｇＧおよびその基質ＴＭＢを使用し、続いてプレートリーダでＯＤ４５０を読み取ることによって視覚化および定量化し、入力組織タンパク質の量に対して正規化した。ＶＯＹ１０１．ＰＨＦ－１およびＶＯＹ２０１．ＰＨＦ－１についての、ＡＡＶ形質導入細胞からのＰＨＦ１発現は、表２２に示される。表２２において、Ｈｐは海馬であり、ＳＣは脊髄である。
Figure 0007221275000051
 ＶＯＹ２０１中のＰＨＦ－１のＩＶ投薬は、受動免疫化と比較して、マウスＣＮＳにおいて最大１５倍より高い抗タウ抗体レベルをもたらした。脳における抗体の受動免疫化レベルは、２０～４０ｎｇ／ｍｇタンパク質であり、ＶＯＹ２０１は、海馬では受動よりも２～５×倍高く、脳幹では受動よりも５～１０×倍高く、脊髄では受動よりも８～１６×倍高いレベルを提供した。ＶＯＹ１０１およびＶＯＹ２０１のＩＶ投薬は、ベクター化抗体の広範なＣＮＳ生体内分布および形質導入をもたらした。
マウス脳をヘミセクションし、組織試料を抗体免疫組織化学法のために割り当て、その後４％パラホルムアルデヒドで一晩後固定した。ＰＨＦ－１抗体を、抗マウスＩｇＧ１抗体（ＰＨＦ－１は、マウスＩｇＧ１抗体である）を使用して免疫組織化学法によって検出した。１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ１０１．ＰＨＦ－１またはＶＯＹ２０１．ＰＨＦ－１を静脈内尾静脈注射により投薬した動物では、海馬、皮質、線条体および視床を含めた脳全体にわたって染色が観察された。神経形態およびアストログリア形態を有するものを含めた、数多くのＰＨＦ１＋細胞が観察された。媒体処置対照は、本質的に検出可能でないバックグラウンド染色を示した。
１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ１０１．ＰＨＦ－１またはＶＯＹ２０１．ＰＨＦ－１を静脈内尾静脈注射により投与した後のＣＮＳ内のＰＨＦ－１発現を、マウス抗ＩｇＧ１および抗ＮｅｕＮ二重標識免疫蛍光染色によって評価した。ＰＨＦ－１はマウスＩｇＧ１抗体であり、したがって、抗ＩｇＧ１抗体染色によって検出される。共局在化研究は、神経マーカー（ＮｅｕＮ）により二重標識されたものを含め、複数のＰＨＦ１＋細胞を示した。
１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ１０１．ＰＨＦ－１を静脈内尾静脈注射により投与した後のＣＮＳ内のＰＨＦ－１発現を、マウス抗ＩｇＧ１および抗ＧＦＡＰ（グリア線維性酸性タンパク質）二重標識免疫蛍光染色によって評価した。ＰＨＦ－１はマウスＩｇＧ１抗体であり、したがって、抗ＩｇＧ１抗体染色によって検出される。共局在化研究は、アストロサイトマーカー（ＧＦＡＰ）により二重標識されたものを含め、複数のＰＨＦ１＋細胞を示した。
Ｂ． マウスモデルにおけるＶＯＹ１０１またはＶＯＹ２０１－抗タウ抗体の静脈内投薬のインビボ分布、発現および有効性研究
２ヵ月齢の３群のＰ３０１Ｓマウス、およそ２０匹マウス／群に、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ１０１－抗タウ抗体ベクター（ＶＯＹ１０１．ＰＨＦ－１）または５．０×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ２０１－抗タウ抗体ベクター（ＶＯＹ２０１．ＰＨＦ－１）を静脈内尾静脈注射により投与した。
ＡＡＶ粒子投与のおよそ３ヵ月後、幾つかの組織試料を収集した。ベクターゲノムデジタルＰＣＲ定量化を、ＣＢＡプロモータのＣＭＶエンハンサー領域に対するプローブセットを使用して実施し、宿主ＴＦＲＣに対して正規化し、１細胞当たりのベクターゲノム（ＶＧ／細胞）で表した。ＶＯＹ１０１．ＰＨＦ－１およびＶＯＹ２０１．ＰＨＦ－１のベクターゲノム分布は、表２３に示される。表２３において、Ｈｐは海馬であり、ＳＣは脊髄である。
Figure 0007221275000052
 収集した組織における、組織ライセートの可溶性画分に存在するＰＨＦ１の発現レベルもまた、ＥＬＩＳＡプレートにコーティングしたＰＨＦタウとの相互作用を検出することによって測定した。抗体－抗原複合体を、ＨＲＰ標識抗マウスＩｇＧおよびその基質ＴＭＢを使用し、続いてプレートリーダでＯＤ４５０を読み取ることによって視覚化および定量化し、入力組織タンパク質の量に対して正規化した。ＶＯＹ１０１．ＰＨＦ－１およびＶＯＹ２０１．ＰＨＦ－１についての、ＡＡＶ形質導入細胞からのＰＨＦ１発現は、表２４に示される。表２４において、Ｈｐは海馬であり、ＳＣは脊髄である。
Figure 0007221275000053
 ＶＯＹ１０１およびＶＯＹ２０１のＩＶ投薬は、Ｐ３０１タウオパシーマウスのＣＮＳに対する高レベルの抗体をもたらした。ＡＴ８免疫反応性（ＩＲ）は、ＰＨＦ１処置マウスにおいて有意に低減される。ＶＯＹ１０１およびＶＯＹ２０１の使用するＩＶ投薬は、Ｐ３０１Ｓタウオパシーマウスにおいて、ベクター化抗体の広範なＣＮＳ生体内分布および形質導入をもたらした。
実施例１５．アルツハイマー病を含めたタウオパシーの治療のための抗タウ抗体送達
Ａ． ＶＯＹ１０１またはＶＯＹ２０１－抗タウ抗体の静脈内投薬のインビボ分布、発現および有効性研究
タウを標的とするモノクローナル抗体ＰＨＦ－１をコードする核酸を、ＡＡＶウイルスゲノムへと操作し、ＶＯＹ１０１カプシド（配列番号１８０９として提供されるカプシド配列）またはＶＯＹ２０１カプシド（配列番号１８１０として提供されるカプシド配列）にて産生させた。
ウイルスゲノムは、ＩＴＲからＩＴＲまで５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、プロモータ、タウを標的とするモノクローナル抗体ＰＨＦ－１をコードする核酸（軽鎖（配列番号１８１９）、リンカー領域、重鎖（配列番号１８１４）および終止コドン）、ポリＡ配列、および野生型ＩＴＲを含む。ウイルスゲノムを、ＶＯＹ１０１またはＶＯＹ２０１カプシドへとパッケージングし、精製し、製剤化する。ＶＯＹ１０１またはＶＯＹ２０１－抗タウ抗体粒子を、０．００１％Ｆ－６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化する。
２ヵ月齢の３群の野生型（ＷＴ）マウス、およそ５匹マウス／群に、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ１０１－抗タウ抗体ベクター、または１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ２０１－抗タウ抗体ベクターを静脈内尾静脈注射により投与する。
ＡＡＶ粒子投与のおよそ２８日後、幾つかの組織試料を収集する。ベクターゲノムデジタルＰＣＲ定量化を、ＣＢＡプロモータのＣＭＶエンハンサー領域に対するプローブセットを使用して実施し、宿主ＴＦＲＣに対して正規化し、１細胞当たりのベクターゲノム（ＶＧ／細胞）で表す。
収集した組織における、組織ライセートの可溶性画分に存在するＰＨＦ１の発現レベルもまた、ＥＬＩＳＡプレートにコーティングしたＰＨＦタウとの相互作用を検出することによって測定する。抗体－抗原複合体を、ＨＲＰ標識抗マウスＩｇＧおよびその基質ＴＭＢを使用し、続いてプレートリーダでＯＤ４５０を読み取ることによって視覚化および定量化し、入力組織タンパク質の量に対して正規化する。
マウス脳をヘミセクションし、組織試料を抗体免疫組織化学法のために割り当てる。試料を、４％パラホルムアルデヒドで一晩後固定する。ＰＨＦ－１抗体を、抗マウスＩｇＧ１抗体（ＰＨＦ－１は、マウスＩｇＧ１抗体である）を使用して免疫組織化学法によって検出する。
１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ１０１．ＰＨＦ１またはＶＯＹ２０１．ＰＨＦ－１を静脈内尾静脈注射により投与した後のＣＮＳ内のＰＨＦ－１発現を、マウス抗ＩｇＧ１および抗ＮｅｕＮまたはＧＦＡＰ（グリア線維性酸性タンパク質）二重標識免疫蛍光染色によって評価する。ＰＨＦ－１はマウスＩｇＧ１抗体であり、したがって、抗ＩｇＧ１抗体染色によって検出される。
Ｂ． マウスモデルにおけるＶＯＹ１０１またはＶＯＹ２０１－抗タウ抗体の静脈内投薬のインビボ分布、発現および有効性研究
２ヵ月齢の３群のＰ３０１Ｓマウス、およそ２０匹マウス／群に、媒体（０．００１％Ｆ－６８含有ＰＢＳ）、１．４×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ１０１－抗タウ抗体ベクター（ＶＯＹ１０１．ＰＨＦ－１）または５．０×１０１３ｖｇ／ｋｇのＶＯＹ２０１－抗タウ抗体ベクター（ＶＯＹ２０１．ＰＨＦ－１）を静脈内尾静脈注射により投与する。
ＡＡＶ粒子投与のおよそ３ヵ月後、幾つかの組織試料を収集した。ベクターゲノムデジタルＰＣＲ定量化を、プロモータに対するプローブセットを使用して実施し、宿主ＴＦＲＣに対して正規化し、１細胞当たりのベクターゲノム（ＶＧ／細胞）で表す。
収集した組織における、組織ライセートの可溶性画分に存在するＰＨＦ１の発現レベルもまた、ＥＬＩＳＡプレートにコーティングした対らせん状細線維性タウとの相互作用を検出することによって測定する。抗体－抗原複合体を、ＨＲＰ標識抗マウスＩｇＧおよびその基質ＴＭＢを使用し、続いてプレートリーダでＯＤ４５０を読み取ることによって視覚化および定量化し、入力組織タンパク質の量に対して正規化する。
ＶＩＩＩ．均等物および範囲
当業者は、本明細書に記載される本発明に係る具体的な実施形態の多くの均等物を認識し、またはルーチンに過ぎない実験を用いて確かめることが可能であろう。本発明の範囲が上記の説明に限定されることは意図されず、それはむしろ添付の特許請求の範囲に示されるとおりである。
特許請求の範囲では、「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」などの冠詞は、反する旨が示されない限り、または文脈上特に明らかでない限り、１つまたは２つ以上を意味し得る。ある群の１つ以上のメンバーの間に「または」を含むクレームまたは説明は、反する旨が示されない限り、または文脈上特に明らかでない限り、その群メンバーの１つ、２つ以上、または全てが所与の製品または方法に存在する、それに用いられる、または他の形でそれに関連する場合に満たされるものとみなされる。本発明は、群の正確に１つのメンバーが所与の製品または方法に存在する、それに用いられる、または他の形でそれに関連する実施形態を含む。本発明は、２つ以上の、または全体の群メンバーが所与の製品または方法に存在する、それに用いられる、または他の形でそれに関連する実施形態を含む。
また、用語「～を含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は非限定的（ｏｐｅｎ）であることが意図され、追加の要素または工程の包含を許容するが必須ではないことも注記される。用語「～を含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」が本明細書で使用されるとき、したがって用語「～からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」もまた包含され、開示される。
範囲が提供されるとき、端点は含まれる。更に、特に指示されない限り、または文脈および当業者の理解から特に明らかでない限り、範囲として表される値は、文脈上特に明確に指示されない限り、その範囲の下限の単位の１０分の１に至るまでの、本発明の種々の実施形態において明示される範囲内にある任意の具体的な値または部分的範囲を想定し得ることが理解されるべきである。
加えて、先行技術に含まれる本発明の任意の特定の実施形態は、クレームの任意の１つ以上から明示的に除外され得ることが理解されるべきである。かかる実施形態は当業者に公知であるとみなされるため、除外が本明細書に明示的に示されないとしても、それらは除外され得る。本発明の組成物の任意の特定の実施形態（例えば、任意の抗生物質、治療薬、または活性成分；任意の生産方法；任意の使用方法など）が、先行技術の存在に関係するか否かに関わらず、何らかの理由で任意の１つ以上のクレームから除外されることがある。
使用した文言は、限定でなく、むしろ説明の文言であること、およびその広義の態様における本発明の真の範囲および趣旨から逸脱することなく、添付の特許請求の範囲内で変更が行われ得ることが理解されるべきである。
本発明をかなり詳しく、幾つかの説明される実施形態に関するある具体性をもって説明したが、それが任意のかかる具体例もしくは実施形態または任意の具体的な実施形態に限定されるべきであることを意図するものではなく、しかし先行技術を考慮してかかる特許請求の範囲の最も広義の可能な解釈を提供し、したがって本発明の意図される範囲を有効に包含するように添付の特許請求の範囲を参照して解釈されるべきである。
本明細書において言及される刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は全て、全体として参照により援用される。矛盾が生じる場合、定義を含め、本明細書が優先するものとする。加えて、節の見出し、材料、方法、および例は例示に過ぎず、限定を意図するものではない。
（付記）
好ましい実施形態として、上記実施形態から把握できる技術的思想について、以下に記載する。
［項目１］
カプシドおよびウイルスゲノムを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子であって、前記カプシドが、前記ＡＡＶ粒子の送達後に血液脳関門を透過するＡＡＶ粒子。
［項目２］
前記ＡＡＶ粒子が、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ－２６、ＡＡＶＧ２Ｂ－１３、ＡＡＶＴＨ１．１－３２、ＡＡＶＴＨ１．１－３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５（Ｇ２Ｂ５）、ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ１０－２、ＡＡＶシャッフル１００－１、ＡＡＶシャッフル１００－３、ＡＡＶシャッフル１００－７、ＡＡＶシャッフル１０－２、ＡＡＶシャッフル１０－６、ＡＡＶシャッフル１０－８、ＡＡＶシャッフル１００－２、ＡＡＶ ＳＭ１０－１、ＡＡＶ ＳＭ１０－８、ＡＡＶ ＳＭ１００－３、ＡＡＶ ＳＭ１００－１０、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ１０、日本ＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、
ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８および／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ならびにそれらの変異体からなる群から選択されるカプシドまたはペプチドインサートを含む、項目１に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３］
前記カプシドがＶＯＹ１０１である、項目２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目４］
前記カプシドのアミノ酸配列が、配列番号１と少なくとも９５％同一である、項目３に記載のＡＡＶ粒子。
［項目５］
前記カプシドのアミノ酸配列が、配列番号１と少なくとも９９％同一である、項目４に記載のＡＡＶ粒子。
［項目６］
前記カプシドのアミノ酸配列が、配列番号１である、項目５に記載のＡＡＶ粒子。
［項目７］
前記カプシドの核酸配列が、配列番号１８０９と少なくとも９５％同一である、項目３に記載のＡＡＶ粒子。
［項目８］
前記カプシドの核酸配列が、配列番号１８０９と少なくとも９９％同一である、項目７に記載のＡＡＶ粒子。
［項目９］
前記カプシドの核酸配列が、配列番号１８０９である、項目８に記載のＡＡＶ粒子。
［項目１０］
前記カプシドがＶＯＹ２０１である、項目２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目１１］
前記カプシドの核酸配列が、配列番号１８１０と少なくとも９５％同一である、項目１０に記載のＡＡＶ粒子。
［項目１２］
前記カプシドの核酸配列が、配列番号１８１０と少なくとも９９％同一である、項目１１に記載のＡＡＶ粒子。
［項目１３］
前記カプシドの核酸配列が、配列番号１８１０である、項目１２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目１４］
前記ペプチドインサートがＡＡＶＰＨＰ．Ｎである、項目２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目１５］
前記ペプチドインサートがＡＡＶＰＨＰ．Ｂである、項目２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目１６］
前記ペプチドインサートがＡＡＶＰＨＰ．Ａである、項目２のＡＡＶ粒子。
［項目１７］
送達が静脈内投与による、項目１～１６のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子。
［項目１８］
静脈内投与後にＣＮＳ構造に形質導入する、項目１７に記載のＡＡＶ粒子。
［項目１９］
送達が頸動脈内投与による、項目１～１６のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２０］
頸動脈内投与後にＣＮＳ構造に形質導入する、項目１９に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２１］
前記ＣＮＳ構造が、脳、脊髄、脳幹核、小脳、大脳、運動皮質、尾状核、視床、視床下部、頚髄、胸髄、腰髄、線条体、黒質、海馬、扁桃および／または大脳皮質からなる群から選択される１つ以上の領域である、項目１８または２０に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２２］
前記ウイルスゲノムが、２つの末端逆位配列（ＩＴＲ）間に配置されている核酸配列を含み、前記核酸は、発現されると細胞における目的の遺伝子の発現を阻害または抑制し、前記核酸配列は、センス鎖配列およびアンチセンス鎖配列を含み、前記センス配列およびアンチセンス鎖配列は、少なくとも４ヌクレオチド長の相補性の領域を共有する、項目１～２１のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２３］
前記核酸配列が、ｓｉＲＮＡ二重鎖のセンス鎖配列およびアンチセンス鎖配列を含む、項目２２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２４］
前記目的の遺伝子が、ＳＯＤ１、ＨＴＴ、ＡＰＯＥおよびＭＡＰＴからなる群から選択される、項目２２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２５］
前記相補性の領域が少なくとも１７ヌクレオチド長である、項目２２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２６］
前記相補性の領域が、１９～２１ヌクレオチド長である、項目２５に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２７］
前記相補性の領域が１９ヌクレオチド長である、項目２６に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２８］
前記センス鎖配列および前記アンチセンス鎖配列が、独立に３０ヌクレオチド以下である、項目２２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目２９］
前記センス鎖配列および前記アンチセンス鎖配列の少なくとも一方が、少なくとも１ヌクレオチドの３’突出を含む、項目２２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３０］
前記センス鎖配列および前記アンチセンス鎖配列の少なくとも一方が、少なくとも２ヌクレオチドの３’突出を含む、項目２９に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３１］
前記アンチセンス鎖が、少なくとも８０％の割合で前記ＡＡＶ粒子から切り出される、項目２２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３２］
前記アンチセンス鎖が、少なくとも９０％の割合で前記ＡＡＶ粒子から切り出される、項目２２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３３］
前記アンチセンス鎖が、少なくとも９５％の割合で前記ＡＡＶ粒子から切り出される、項目２２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３４］
前記アンチセンス鎖が、前記センス鎖の切り出しの割合よりも大きな割合で前記ＡＡＶ粒子から切り出される、項目２２に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３５］
前記アンチセンス鎖の切り出しの割合が、前記センス鎖の切り出しの割合よりも少なくとも２倍大きい、項目３４に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３６］
前記アンチセンス鎖の切り出しの割合が、前記センス鎖の切り出しの割合よりも少なくとも５倍大きい、項目３４に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３７］
前記アンチセンス鎖の切り出しの割合が、前記センス鎖の切り出しの割合よりも少なくとも１０倍大きい、項目３４に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３８］
前記ウイルスゲノムが、２つの末端逆位配列（ＩＴＲ）間に配置されている核酸配列を含み、前記核酸が標的タンパク質をコードし、前記核酸が発現されると、前記細胞における前記標的タンパク質のレベルが増加する、項目１～２１のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子。
［項目３９］
前記標的タンパク質が、抗体、ＡＡＤＣ、ＡＰＯＥ２またはフラタキシンである、項目３８に記載のＡＡＶ粒子。
［項目４０］
ＡＡＶ粒子を含む医薬組成物であって、前記ＡＡＶ粒子が、ＡＡＶカプシドおよびウイルスゲノムを含み、前記ＡＡＶカプシドが、前記ＡＡＶ粒子の送達後に血液脳関門を透過する医薬組成物。
［項目４１］
前記ＡＡＶカプシドが、ＶＯＹ１０１またはＶＯＹ２０１である、項目４０に記載の医薬組成物。
［項目４２］
前記ウイルスゲノムが、ｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む、項目４１に記載の医薬組成物。
［項目４３］
前記ｓｉＲＮＡ分子が、目的の遺伝子を標的とし、前記目的の遺伝子が、ＳＯＤ１、ＨＴＴ、ＡＰＯＥ、およびＭＡＰＴからなる群から選択される、項目４２に記載の医薬組成物。
［項目４４］
前記ウイルスゲノムが、標的タンパク質をコードする核酸配列を含む、項目４１に記載の医薬組成物。
［項目４５］
前記標的タンパク質が、抗体、ＡＡＤＣ、ＡｐｏＥ２、およびフラタキシンからなる群から選択される、項目４４に記載の医薬組成物。
［項目４６］
細胞における目的の標的遺伝子の発現を増加または阻害する方法であって、前記細胞に、項目１～３７のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子を含む組成物または項目４０～４３の組成物のいずれかを投与する工程を含む方法。
［項目４７］
前記細胞が哺乳類細胞である、項目４６に記載の方法。
［項目４８］
前記哺乳類細胞が、ＣＮＳの細胞である、項目４７に記載の方法。
［項目４９］
細胞における目的の遺伝子の発現を増加させる方法であって、前記細胞に、項目３８～３９のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子を含む組成物または項目４４～４５の医薬組成物のいずれかを投与する工程を含む方法。
［項目５０］
前記細胞が哺乳類細胞である、項目４９に記載の方法。
［項目５１］
前記哺乳類細胞が、ＣＮＳの細胞である、項目５０に記載の方法。
［項目５２］
対象のＣＮＳにおける目的のタンパク質のレベルを減少させる方法であって、前記対象に、項目１～３７のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子を含む組成物または項目４０～４３の組成物のいずれかを投与する工程を含む方法。
［項目５３］
前記投与の経路が静脈内投与である、項目５２に記載の方法。
［項目５４］
前記投与の経路が頸動脈内投与である、項目５２に記載の方法。
［項目５５］
対象のＣＮＳにおける目的のタンパク質のレベルを増加させる方法であって、前記対象に、項目３８～３９のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子を含む組成物または項目４４～４５の医薬組成物のいずれかを投与する工程を含む方法。
［項目５６］
前記投与の経路が静脈内投与である、項目５５に記載の方法。
［項目５７］
前記投与の経路が頸動脈内投与である、項目５５に記載の方法。
［項目５８］
治療を必要とする対象の神経学的疾患を治療および／または改善する方法であって、前記対象に、項目１～３９のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子を含む組成物または項目４０～４５の医薬組成物のいずれかの治療有効量を投与する工程を含む方法。
［項目５９］
前記ＡＡＶ粒子を含む組成物が、静脈内送達によって前記対象に投与される、項目５８に記載の方法。
［項目６０］
前記ＡＡＶ粒子を含む組成物が、頸動脈内送達によって前記対象に投与される、項目５８に記載の方法。
［項目６１］
前記ＡＡＶ粒子が、目的のタンパク質をコードする核酸配列を含む、項目５８～６０のいずれか一項に記載の方法。
［項目６２］
前記目的のタンパク質が、抗体、ＡＡＤＣ、ＡｐｏＥ２、およびフラタキシンからなる群から選択される、項目６１に記載の方法。
［項目６３］
前記ＡＡＶ粒子が、ｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む、項目５８～６０のいずれか一項に記載の方法。
［項目６４］
前記ｓｉＲＮＡ分子が目的の遺伝子を標的とし、前記目的の遺伝子が、ＳＯＤ１、ＨＴＴ、ＡＰＯＥ、およびＭＡＰＴからなる群から選択される、項目６３に記載の方法。
［項目６５］
カプシドおよびウイルスゲノムを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子であって、前記ウイルスゲノムは、前記ＡＡＶ粒子が送達されると心筋細胞に形質導入するＡＡＶ粒子。
［項目６６］
前記ＡＡＶ粒子が、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ－２６、ＡＡＶＧ２Ｂ－１３、ＡＡＶＴＨ１．１－３２、ＡＡＶＴＨ１．１－３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５（Ｇ２Ｂ５）、ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ１０－２、ＡＡＶシャッフル１００－１、ＡＡＶシャッフル１００－３、ＡＡＶシャッフル１００－７、ＡＡＶシャッフル１０－２、ＡＡＶシャッフル１０－６、ＡＡＶシャッフル１０－８、ＡＡＶシャッフル１００－２、ＡＡＶ ＳＭ１０－１、ＡＡＶ ＳＭ１０－８、ＡＡＶ ＳＭ１００－３、ＡＡＶ ＳＭ１００－１０、ＢＮＰ６１ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ１０、日本ＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、ＡＡＶ
ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８および／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ならびにそれらの変異体からなる群から選択されるカプシドまたはペプチドインサートを含む、項目６５に記載のＡＡＶ粒子。
［項目６７］
前記カプシドがＶＯＹ１０１である、項目６６に記載のＡＡＶ粒子。
［項目６８］
前記カプシドのアミノ酸配列が、配列番号１である、項目６７に記載のＡＡＶ粒子。
［項目６９］
前記カプシドの核酸配列が、配列番号１８０９である、項目６７に記載のＡＡＶ粒子。
［項目７０］
前記カプシドがＶＯＹ２０１である、項目６６に記載のＡＡＶ粒子。
［項目７１］
前記カプシドの核酸配列が、配列番号１８１０である、項目７０に記載のＡＡＶ粒子。
［項目７２］
前記ペプチドインサートが、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ、ＡＡＶＰＨＰ．ＢおよびＡＡＶＰＨＰ．Ａからなる群から選択される、項目６６に記載のＡＡＶ粒子。
［項目７３］
ＡＡＶ粒子を含む医薬組成物であって、前記ＡＡＶ粒子が、ＡＡＶカプシドおよびウイルスゲノムを含み、前記ウイルスゲノムが、目的のタンパク質をコードし、前記目的のタンパク質が、ＡＴＰ２Ａ２およびＳ１００Ａ１からなる群から選択される、医薬組成物。
［項目７４］
対象の心血管組織における目的のタンパク質のレベルを増加させる方法であって、項目７３に記載の医薬組成物を投与する工程を含む方法。
［項目７５］
それを必要とする対象の心血管疾患を治療する方法であって、前記対象に、項目７３に記載の医薬組成物を投与する工程を含む方法。
［項目７６］
それを必要とする対象の心不全を治療する方法であって、前記対象に、項目７３に記載の医薬組成物を投与する工程を含む方法。
［項目７７］
前記投与の経路が静脈内投与である、項目７４～７６のいずれか一項に記載の方法。

Claims (23)

  1. アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子であって、配列番号１のアミノ酸配列を含むＡＡＶカプシドタンパク質と、ペイロードをコードするＡＡＶウイルスゲノムとを含む、ＡＡＶ粒子。
  2. 前記ＡＡＶカプシドタンパク質をコードする核酸配列が、配列番号１８０９の配列を含む、請求項１に記載のＡＡＶ粒子。
  3. 前記ＡＡＶウイルスゲノムが、自己相補的ウイルスゲノムまたは一本鎖ウイルスゲノムである、請求項１または２に記載のＡＡＶ粒子。
  4. 前記ペイロードが、目的のタンパク質、目的のｍＲＮＡ、または目的タンパク質およびｍＲＮＡの両方の発現を阻害または抑制するタンパク質または核酸を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子。
  5. 前記タンパク質が、抗体または酵素である、請求項４に記載のＡＡＶ粒子。
  6. 前記タンパク質が、抗タウ抗体、芳香族Ｌ－アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）、ＡＴＰアーゼ筋小胞体輸送２（ＡＴＰ２Ａ２）、ＡＰＯＥ２、ＡＰＯＥ３、ＡＰＯＥ４、フラタキシン、および／またはＳ１００カルシウム結合タンパク質Ａ１（Ｓ１００Ａ１）、またはこれらタンパク質のいずれかの断片もしくは変異体である、請求項４または５に記載のＡＡＶ粒子。
  7. 前記タンパク質がフラタキシンである、請求項６に記載のＡＡＶ粒子。
  8. 前記核酸が、ｓｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡをコードする、請求項４に記載のＡＡＶ粒子。
  9. 前記核酸が、ＳＯＤ１遺伝子、ＨＴＴ遺伝子、ＡＰＯＥ遺伝子、またはＭＡＰＴ遺伝子をターゲットとする、請求項４または８に記載のＡＡＶ粒子。
  10. 前記ＡＡＶウイルスゲノムが、少なくとも１つのｍｉＲＮＡ結合部位を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子。
  11. 前記少なくとも１つのｍｉＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ１２２結合部位である、請求項１０に記載のＡＡＶ粒子。
  12. 前記ＡＡＶウイルスゲノムが、フラタキシンプロモータ、ニワトリβ－アクチン（ＣＢＡ）プロモータ、トランケート型ＣＢＡプロモータを含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子。
  13. 前記ＡＡＶウイルスゲノムが、ヒトベータグロビンイントロンを含む、請求項１～１２のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子。
  14. 前記ＡＡＶウイルスゲノムが、ヒト成長ホルモンポリＡ配列を含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子。
  15. 請求項１～１４のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子と、薬学的に許容される賦形剤とを含む、医薬組成物。
  16. 請求項１～１４のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子を含む細胞であって、任意選択で、前記細胞が哺乳類細胞、昆虫細胞、または細菌細胞である、細胞。
  17. 哺乳類対象にペイロードを送達することに使用するための、請求項１～１４のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子または請求項１５に記載の医薬組成物。
  18. 神経学的疾患、タウオパシー、または心血管疾患の治療に使用するための、請求項１７に記載のＡＡＶ粒子または医薬組成物。
  19. 前記神経学的疾患またはタウオパシーが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、またはパーキンソン病である、請求項１８に記載のＡＡＶ粒子または医薬組成物。
  20. 前記神経学的疾患が、フリードライヒ運動失調症、またはフラタキシンタンパク質レベルの低下に関連する疾患である、請求項１８に記載のＡＡＶ粒子または医薬組成物。
  21. 前記ペイロードが、血管内投与のために製剤化されている、請求項１７～２０のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子または医薬組成物。
  22. 前記血管内投与が、静脈内投与または動脈内投与である、請求項２１に記載のＡＡＶ粒子または医薬組成物。
  23. 前記ペイロードが、脳、脊髄、脳幹核、小脳、大脳、運動皮質、尾状核、視床、視床下部、頚髄、胸髄、腰髄、線条体、黒質、海馬、扁桃および大脳皮質から選択される１つ以上の領域に送達される、請求項１７～２２のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子または医薬組成物。
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