JP5228912B2

JP5228912B2 - 高血圧改善剤

Info

Publication number: JP5228912B2
Application number: JP2008533207A
Authority: JP
Inventors: 史子荻野; 俊一神谷; 昌彦中野; 和俊吉川
Original assignee: Mitsubishi Gas Chemical Co Inc
Current assignee: Mitsubishi Gas Chemical Co Inc
Priority date: 2006-09-08
Filing date: 2007-09-07
Publication date: 2013-07-03
Anticipated expiration: 2027-09-07
Also published as: CA2662705A1; EP2062892A1; JPWO2008029907A1; CN101553488A; WO2008029907A1; EP2062892A4; US20100190815A1

Description

本発明は、ピロロキノリンキノンもしくはそのエステル、またはその塩を有効成分として含有する高血圧改善剤に関する。

高血圧は、心筋梗塞、狭心症、脳梗塞、脳出血、脳血管障害性痴呆などの発症の原因となる危険因子であり、血圧を正常な範囲に保持することは、健康の維持に重要である。高血圧治療薬には、ナトリウムおよび水利尿をもたらし、循環血液量を減少させることにより血圧を降下させる利尿薬、血圧調節に極めて重要な役割を果たしている交感神経系の活性を中枢あるいは末梢で抑制して血圧を降下させる交感神経抑制薬、血管平滑筋細胞内へのカルシウムの取り込みを抑制して血管を拡張させるカルシウム拮抗薬、昇圧物質であるアンジオテンシンＩＩの産生を抑制するとともに、ブラジキニンおよびプロスタグランジンの増量をきたして血管を拡張させるアンジオテンシンＩ変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬などがある（非特許文献１）。

ピロロキノリンキノン（以下、ＰＱＱと略す）は１９７９年メタノール資化性菌のメタノール脱水素酵素の補酵素として見出され（非特許文献２、３）、細菌類以外にも、大豆、空豆、ピーマン、ジャガイモ、パセリ、ホウレンソウなどの食用植物や、酢、茶、ココア、納豆、豆腐等の加工食品からも検出されている（非特許文献４）。また、ヒトやラットの生体内にも存在すること（非特許文献５）が報告されている。

近年までに、ＰＱＱ類の細胞の増殖促進作用（特許文献１）、活性酸素除去作用（特許文献２）、アルドース還元酵素阻害作用（特許文献３）、神経成長因子産生促進作用（特許文献４）、逆転写酵素阻害作用（特許文献５）、抗白内障作用（特許文献６）、メラニン産生抑制及び美白作用（特許文献７）、紫外線吸収作用(特許文献８）など様々な作用が明らかにされている。

しかしながら、ＰＱＱもしくはそのエステル、またはそれらの塩による高血圧改善作用は知られていない。
田中千賀子、加藤隆一編、「ＮＥＷ薬理学」、改訂第３版、株式会社南江堂、１９９６年、ｐ．３８０−３８１「ネイチャー（Nature）」、１９７９年、第２３０巻、ｐ．８４３−８４４「フェブスレター（FEBS Letters）」、１９７９年、第１０８巻、ｐ．４４３−４４６「バイオケミカルジャーナル（Biochemical Journal）」、１９９５年、第３０７巻、ｐ．３３１−３３３「バイオキミカエトバイオフィジカアクタ（Biochimica et Biophysica Acta）」、１９９２年、第１１５６巻、ｐ．６２−６６特開昭６１−５８５８４号公報特開平５−０７８２４７号公報特開平６−２５６１９１号公報特開平６−２１１６６０号公報特公平８−００５７９２号公報特公平８−００５７９１号公報特開平８−０２０５１２号公報特許第３６２５４９３号公報

本発明の目的は、高血圧改善剤を提供することにある。

本発明は、下記の（１）〜（３）の高血圧改善剤を提供するものである。

（１）一般式（Ｉ）

（式中、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は同一または異なって、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アラルキル、アラアリール、フェニル、水素原子を表す。）で表される化合物［以下、化合物（Ｉ）という］、またはその塩を有効成分として含有する高血圧改善剤。

（２）上記（１）に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物、またはその塩の有効量を、必要とする対象に投与する高血圧改善方法。

（３）高血圧改善剤の製造のための、上記（１）に記載の一般式（I）で表される化合物、またはその塩の使用。

本発明により、安全で効果的な高血圧改善剤を提供することができる。

本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願２００６−２４４４４５号の明細書に記載される内容を包含する。

化合物（Ｉ）の定義において、式中、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は同一または異なって、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アラルキル、アラアリール（アルキルアリール）、フェニル、水素原子を表すが、これらの低級アルキルおよびアラルキル、アラアリールのアルキル部分としては、例えば直鎖または分岐状の炭素数１〜６のアルキルがあげられ、より具体的には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル等があげられ、中でも、メチルまたはエチルが好ましい。

低級アルケニルとしては、例えば直鎖または分岐状の炭素数２〜６のアルケニルがあげられ、より具体的にはビニル、アリル、１−プロペニルメタクリル、クロチル、１−ブテニル、３−ブテニル、２−ペンテニル、４−ペンテニル、２−ヘキセニル、５−ヘキセニル等があげられる。

低級アルキニルとしては、例えば直鎖または分岐状の炭素数２〜６のアルキニルがあげられ、より具体的にはエチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル等があげられる。

アラルキルとしては、例えば炭素数７〜１５のアラルキルがあげられ、より具体的にはベンジル、フェネチル、ベンズヒドリル、ナフチルメチル等があげられる。

アラアリールのアリール部分としては、例えば炭素数６〜１４のアリールがあげられ、より具体的にはフェニル、ナフチル、アントリル等があげられる。したがって、アラアリールとしては、メチルフェニル、エチルフェニル等があげられる。

ＰＱＱ、すなわち上述の一般式（Ｉ）においてＲ_１、Ｒ_２およびＲ_３がいずれも水素原子である化合物は、有機化学的方法（例えば、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０３，５５９９−５６００（１９８１））および発酵法、例えば、メタノール資化性を有し、かつピロロキノリンキノンを生産する能力を有する細菌を、炭素源としてメタノールを含有し鉄化合物の濃度を制御した培養液中で培養することによりピロロキノリンキノンを生産する方法（特開平１−２１８５９７号公報）などにより製造することが可能である。

化合物（Ｉ）で示されるＰＱＱのエステル体の製造法は、ＰＱＱより常法のエステル化反応に従って合成することができる。

ＰＱＱのトリエステル体は、例えば、ＰＱＱまたはその塩を酸性条件下でアルコール類と反応させる方法（例えば、特開平３−１２３７８１号公報、特開平３−１４５４９２号公報）や、ＰＱＱまたはその塩を塩基の存在下でハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルケニル、ハロゲン化アルキニル、ハロゲン化アラルキル、ハロゲン化アラアリール等と反応させる方法などにより容易に合成することができる。また、上記方法によって得られるＰＱＱのトリエステル体を酸性あるいは塩基性条件下で部分加水分解することで、モノエステル体、ジエステル体を得ることができる。

このようにして得られる化合物（Ｉ）は、カラムクロマトグラフィー、再結晶法、および溶媒抽出法などの通常の方法により、反応液中から分離・精製することができる。また、化合物（Ｉ）の同定には、元素分析、ＮＭＲスペクトル、ＩＲスペクトル、質量分析などの各種手段が用いられる。

化合物（Ｉ）の塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム、トリエタノールアミン、トリエチルアミン等の有機アミン塩、リジン、アルギニン等の塩基性アミノ酸塩等があげられる。

本発明の高血圧改善剤としては、有効成分として化合物（Ｉ）またはその塩を単独または混合して、あるいは任意の他の治療のための有効成分との混合物として含有する製剤とすることができる。該製剤は、有効成分を薬理学的に許容される一種もしくはそれ以上の担体と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の方法により製造される。

製剤の投与形態は、治療に際し最も効果的なものを使用するのが望ましく、経口投与または、例えば静脈内、腹膜内もしくは皮下投与等の非経口投与をあげることができるが、経口投与が好ましい。

投与する剤形としては、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、浸剤・煎剤、カプセル剤、シロップ剤、液剤、エリキシル剤、エキス剤、チンキ剤、流エキス剤等の経口剤、注射剤、点滴剤、クリーム剤、坐剤等の非経口剤のいずれでもよいが、経口剤として好適に用いられる。

経口剤として製剤化する際には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、潤沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、希釈剤、緩衝剤、抗酸化剤、細菌抑制剤等の添加剤を用いることができる。

また、経口投与に適当な、例えば錠剤、散剤および顆粒剤等は、乳糖、白糖、ブドウ糖、蔗糖、マンニトール、ソルビトール等の糖類、バレイショ、コムギ、トウモロコシ等の澱粉、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム等の無機物、結晶セルロース、カンゾウ末、ゲンチアナ末等の植物末等の賦形剤、澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、カルメロースナトリウム、カルメロースカルシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク、水素添加植物油、マクロゴール、シリコーン油等の滑沢剤、ポリビニールアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、カルメロース、ゼラチン、澱粉のり液等の結合剤、脂肪酸エステル等の界面活性剤、グリセリン等の可塑剤などを添加して製剤化することができる。

剤形がシロップ剤のような液体調製物である場合は、水、蔗糖、ソルビトール、果糖等の糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール等のグリコール類、ごま油、オリーブ油、大豆油等の油類、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤、パラオキシ安息香酸メチル等のパラオキシ安息香酸誘導体、安息香酸ナトリウム等の保存剤、ストロベリーフレーバー、ペパーミント等のフレーバー類などを添加して製剤化することができる。

また、経口投与に適当な製剤には、一般に飲食品に用いられる食品添加剤、例えば甘味料、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、発色料、漂白料、防かび剤、ガムベース、苦味料、酵素、光沢剤、酸味料、調味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料、香辛料抽出物等が添加されてもよい。経口投与に適当な製剤は、そのまま、または例えば粉末食品、シート状食品、瓶詰め食品、缶詰食品、レトルト食品、カプセル食品、タブレット状食品、流動食品、ドリンク剤等の形態で、高血圧改善用の健康食品、機能性食品、栄養補助食品、特定保健用食品等の飲食品として用いてもよい。

非経口投与に適当な、例えば注射剤は、好ましくは受容者の血液と等張である化合物（Ｉ）またはその塩を含む滅菌水性剤からなる。例えば、注射剤の場合は、塩溶液、ブドウ糖溶液または塩溶液とブドウ糖溶液の混合物からなる担体等を用いて注射用の溶液を調製する。

また、これら非経口剤においても、経口剤で例示した希釈剤、防腐剤、フレーバー類、賦形剤、崩壊剤、潤沢剤、結合剤、界面活性剤、可塑剤などから選択される１種またはそれ以上の補助成分を添加することができる。

本発明の製剤の投与量および投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度により異なるが、通常、成人一日当り、化合物（Ｉ）またはその塩として通常は０．５ｍｇ〜１００００ｍｇ、好ましくは０．５ｍｇ〜５０００ｍｇ、より好ましくは５ｍｇ〜１０００ｍｇとなるように一日一回ないし数回投与する。

投与期間は、特に限定されないが、通常は１日間〜１年間、好ましくは２週間〜３ヶ月間である。

なお、本発明の製剤は、ヒトだけでなく、ヒト以外の動物（以下、非ヒト動物と略す）に対しても使用することができる。非ヒト動物としては、ほ乳類、鳥類、は虫類、両生類、魚類等、ヒト以外の動物をあげることができる。

非ヒト動物に投与する場合の投与量は、動物の年齢、種類、症状の性質もしくは重篤度により異なるが、通常、体重１ｋｇ１日当たり、化合物（Ｉ）またはその塩として０．０１ｍｇ〜２００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、より好ましくは１ｍｇ〜２０ｍｇとなるように一日一回ないし数回投与する。

以下に、化合物（Ｉ）による高血圧改善効果を調べた試験例を示す。

（試験例）
自然発症高血圧ラットであるｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔｓ（ＳＨＲ）を用いた。雄性ＳＨＲ／Ｉｚｍ（日本エスエルシー社、１０週齢）１８匹の収縮期血圧を投与１日目に測定し、平均値がほぼ等しくなるように、６匹ずつ３つの群に分け、第１群〜第３群とした。

第１群のラットには、０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース水溶液を、第２群のラットには、０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース水溶液に懸濁させたピロロキノリンキノン二ナトリウム塩（以下、ＰＱＱ二ナトリウム塩という、三菱瓦斯化学社製）１ｍｇ／ｍＬ溶液を、第３群のラットには０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース水溶液に懸濁させたＰＱＱ二ナトリウム塩４ｍｇ／ｍＬ溶液を、５ｍＬ／ｋｇの容量で１日１回、２９日間、経口投与した。１回あたりのＰＱＱ二ナトリウム塩の投与量は、第２群で５ｍｇ／ｋｇ、第３群で２０ｍｇ／ｋｇである。投与１日目、８日目、１５日目、２２日目、および２９日目において、投与前（前日の投与から２４時間後）、およびＰＱＱ二ナトリウム塩投与４時間後に収縮期血圧を測定した。収縮期血圧は、マウス・ラット用無加温型非観血式血圧計（ＭＫ−２０００、室町機械）を用いて、ｔａｉｌ−ｃａｆｆ法にて測定した。１度につき５回測定し、最高値と最低値を除いた３回の収縮期血圧の平均値を個体の値とした。

値は平均値±標準誤差（ｎ＝６）で示した。統計学的な有意差は、各測定ポイントにおいて、一元配置分散分析を行うことにより求めた。一元配置分散分析で有意性が認められた場合は、パラメトリックなＤｕｎｎｅｔｔの多重比較検定を行い、第１群に対する第２群および第３群の有意差を求めた。なお、危険率（ｐ値）が０．０５未満で有意差ありと判断した。

投与前の収縮期血圧の結果を表１に示す。

表１に示されるとおり、第１群の収縮期血圧は試験期間を通じて徐々に上昇し高血圧が進行した。それに対し、投与８日目以降試験期間を通じて、第２群の収縮期血圧は第１群に比べて低値を示し、第３群の収縮期血圧は第２群よりさらに低値を示した。

ＰＱＱ二ナトリウム塩投与４時間後の収縮期血圧の結果を表２に示す。

表２に示されるとおり、投与８日目以降、試験期間を通じて、第２群の収縮期血圧は第１群に比べて低値を示した。第３群の収縮期血圧はさらに低値を示し、投与２９日目のＰＱＱ二ナトリウム塩投与４時間後においては第１群に対して、有意に低値を示した。

以上の結果より明らかなとおり、ＰＱＱ二ナトリウム塩を投与した高血圧ラットで血圧降下作用、すなわち高血圧改善作用が示された。

次に、本発明に係る組成物の配合例を示す実施例により、本発明をさらに具体的に説明するが、これらに限定されるものではない。

（実施例１）
表３記載の配合により高血圧改善用清涼飲料水（１０本分）を製造する。

水にて１０００ｍＬとする。

（実施例２）
表４記載の配合により高血圧改善用茶飲料１０００ｍＬを製造する。

水１０００ｍＬにて溶出する。

（実施例３）
表５記載の配合により高血圧改善用チューインガム（３０個分）を製造する。

（実施例４）
表６記載の配合により高血圧改善用キャンディー（２０個分）を製造する。

（実施例５）
表７記載の処方で常法により高血圧改善用錠剤（１錠あたり２００ｍｇ）を製造する。

（実施例６）
表８記載の処方で常法により高血圧改善用散剤（１包あたり５５０ｍｇ）を製造する。

（実施例７）
表９記載の処方で高血圧改善用ハードカプセル剤（１カプセルあたり１６０ｍｇ）を製造する。

５ｍｇのＰＱＱモノアリルエステルに乳糖９０ｍｇおよびコーンスターチ４５ｍｇを添加して混合し、これにヒドロキシプロピルセルロース２０ｍｇの水溶液を添加して練合する。次いで、押し出し造粒機を用いて、常法により顆粒を製造する。この顆粒をゼラチンハードカプセルに充填することにより、ハードカプセル剤を製造する。

（実施例８）
表１０記載の処方で高血圧改善用ソフトカプセル剤（１カプセルあたり１７０ｍｇ）を製造する。

大豆油１６５ｍｇにＰＱＱ二ナトリウム塩５ｍｇを添加して混合する。次いで、ロータリー・ダイズ式自動成型機を用いて、常法に従い、ソフトカプセルに充填することにより、ソフトカプセル剤を製造する。

本発明により、ピロロキノリンキノンもしくはそのエステル、またはその塩を有効成分として含有する高血圧改善剤を提供することができる。

本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。

Claims

一般式（Ｉ）

（式中、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は同一または異なって、直鎖または分岐状の炭素数１〜６のアルキル、直鎖または分岐状の炭素数２〜６のアルケニル、直鎖または分岐状の炭素数２〜６のアルキニル、アラルキル、アラアリール、フェニル、水素原子を表す。）で表される化合物、またはその塩を有効成分として含有する高血圧改善剤。
請求項１に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物、またはその塩の有効量を、必要とする非ヒト動物に投与する高血圧改善方法。
高血圧改善剤の製造のための、請求項１に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物、またはその塩の使用。