JP3647748B2 - 白金錯体、その製造および治療適用 - Google Patents

Description

【０００１】
本発明は、腫瘍学的疾患の治療のための医学療法に有用な、酸化数ＩＩの新規な白金錯体に関する。本発明は、更に薬剤としての上記錯体の使用および活性物質として上記白金錯体を含む医薬組成物を開示する。
【０００２】
細胞分裂抑制剤として有効な白金錯体が、本世紀の７０年目の終わりに医学療法に導入された。この型の最初の医薬品は、シスプラチン（ｃｉｓ−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体）であった。更なる開発中、１０個の白金錯体が合成され、試験された。そのうち、カルボプラチン（ｃｉｓ−ジアンミン／１，１−シクロブタンジカルボキシラート／白金（ＩＩ）錯体）が、腫瘍学において最大の重要性を獲得した。更に、１個のアンミノ配位子がアルキルアミン基に置き換えられた白金の不斉錯体が記載されている（ＵＳＰ４，３２９，２９９)。
【０００３】
現在、既知の白金錯体と比較して、一層高い抗腫瘍効果および一層低い副作用を有する白金錯体が依然として探究されている。
【０００４】
本発明の範囲において、従来技術の白金錯体と比較して一層高い抗腫瘍効果および上記既知の錯体と比較して一層低い望ましくない副作用を有するある種の新規な白金錯体が見出された。これら新規錯体は本発明の主要部を表す。
【０００５】
本発明の第１の様相は、一般式（Ｉ）の酸化数IIの白金錯体：
【化３】

（式中、Ｘはハロゲン原子を表し、Ａは基−ＮＨ₂−Ｒ（ここで、Ｒは、３環系の環に１乃至４の炭素原子の１個または２個のアルキル基が任意に置換してもよい１０乃至１４の炭素原子を含む３環系炭化水素部分である）を表す）である。
本発明の第２の様相は、式（Ｉ）の酸化数IIの白金錯体：
【化４】

（式中、Ｘはハロゲン原子を表し、Ａは基ＮＨ₂−Ｒ（ここで、Ｒは、３環系の環に１乃至４の炭素原子の１個または２個のアルキル基が任意に置換してもよい１０乃至１４の炭素原子を含む３環系炭化水素部分である）を表す）と、１乃至６の炭素原子のヒドロキシアルキル基で任意に置換してもよいβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体である。
【０００６】
本発明の特に有利な錯体は、Ａがアダマンチルアミノ基であり、Ｘが上記で定義した意味を有する一般式（Ｉ）の白金錯体である。更に、本発明の別の有利な白金錯体は、Ａが３，５−ジメチルアダマンチルアミノ基を表し、およびＸが上記で定義した意味を有する一般式（Ｉ）の錯体である。
【０００７】
本発明の別の様相は、極性有機溶剤または水中のアンミントリハロゲン白金（II）酸のアルカリ金属塩の溶液を、式ＮＨ₂−Ｒ（ここで、Ｒは、１乃至４の炭素原子の１個または２個のアルキル基で３環系の環に任意に置換してもよい１０乃至１４の炭素原子を含む３環系炭化水素部分である）の一級アミンと、０乃至１００℃の温度で反応させることを特徴とする、一般式（Ｉ）の白金錯体の製造方法である。
【０００８】
本発明はまた、式（Ｉ）の白金錯体と、１乃至６の炭素原子を含むヒドロキシアルキル基で任意に置換してもよいβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体の製造方法を提供し、その製造方法は、有機溶剤中の式（Ｉ）の白金錯体の溶液を、１乃至６の炭素原子を含むヒドロキシアルキル基で任意に置換してもよいβ−またはγ−シクロデキストリンの水溶液と混合し、次いで得られた溶液から溶剤を蒸発させることを特徴とする。
【０００９】
本発明のなお別の様相は、薬剤として使用するための前記式（Ｉ）の白金錯体またはβ−またはγ−シクロデキストリンとのその包接錯体である。
【００１０】
本発明の次の様相は、活性物質として少なくとも１種の前記式（Ｉ）の白金錯体またはβ−またはγ−シクロデキストリンとのその包接錯体、および少なくとも１種の医薬賦形剤を含むことを特徴とする、腫瘍学的疾患の治療用の医薬組成物を提供する。
【００１１】
更に、式（Ｉ）の白金錯体は、経口投与に有用な酸化数ＩＶの類似の置換白金錯体の製造のための原料としても使用できる。
【００１２】
本発明の白金錯体は、これまで、従来技術のいずれの文献にも特に開示されてきておらず、その性質は特徴づけられておらず、その製造方法も開示されていないので、新規な化学的化合物である。２価白金錯体中の一級３環系アミン配位子の存在が、本発明の新規な化合物の抗腫瘍活性の実質的増加に導くことを、明らかな方法により従来技術で推定することはできなかったので、腫瘍学的疾患の治療における活性物質としてのこれらの化合物の有用性も同様に新規でありかつ進歩性を有する発明である。
【００１３】
更に、具体的実施態様の実施例により、本発明をさらに詳細に説明する。これらの実施例は例示の目的で開示するものであり、特許請求の範囲に規定された本発明の範囲を決して限定するものではないことを、理解すべきである。
【００１４】
実施例１
ｃｉｓ−（１−アダマンチルアミン）−アンミンジクロロ白金（ＩＩ）錯体（以後”ＬＡ−９”と略号する）の合成
水８４ｍｌ中のアンミントリクロロ白金（ＩＩ）酸カリウム１９．５５ｇ（５４．６ｍｍｏｌ）の溶液を濾過し、濾液に水８４ｍｌおよびヨウ化カリウム４５．４ｇ（２７３．４ｍｍｏｌ）の混合物を添加した。この混合物に、窒素雰囲気下１−アダマンチルアミン８．２７ｇ（５４．６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、空気および光を排除して、室温で２２時間攪拌した。得られた沈殿物を、窒素下濾別し、溶解ガスが無くなるまで水洗浄した。真空乾燥機で乾燥後、塩素３．０９％、およびヨウ素３３．０３％を含む中間物を得た。この中間物を水１７０ｍｌに懸濁し、硝酸銀１７．７５ｇ（１０４．５ｍｍｏｌ）（中間物中のハロゲン化物の含量規準で理論量の９０％）を懸濁物に加えた。光および空気を排除して、室温で７０時間攪拌後、非溶解部分を濾過し、少量の水で洗浄した。濾液に濃塩酸（１９ｍｌ、２０５ｍｏｌ）をゆっくり添加し、混合物を空気および光を排除して室温で２０時間攪拌した。固体粗生成物を濾別し、０．１Ｍ塩酸、エタノ−ル、エ−テルで順次洗浄した。真空オーブンで乾燥後、粗生成物１６．４６ｇを得た（原料アンミントリクロロ白金酸カリウム規準で６８％）。
【００１５】
この粗生成物（１６．３６ｇ，３７．７ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド２００ｍｌに溶解し、得られた溶液を濾過し、冷却下で０．１Ｍ塩酸６００ｍｌを濾液に添加した。得られた固体沈殿物を濾別し、０．１Ｍ塩酸、エタノ−ル、エ−テルで順次洗浄し、真空乾燥機で乾燥した。所望の生成物は１４．７０ｇ（原料粗生成物規準で理論値の８９．８％）の収量であった。
【００１６】
得られた生成物の同定は、ＩＲおよび１Ｈ−ＮＭＲスペクトル解析により確認した。得られた白金錯体の結晶および分子構造は、Ｘ線構造解析により、製造した単結晶で試験し、スペクトル法の結果を確認した。得られた生成物の純度は、高速液体クロマトグラフィーで決定した。
【００１７】

【００１８】
実施例２
ｃｉｓ−（１−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン）−アンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体（以後”ＬＡ−１３”と呼ぶ）の合成
１−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン（８．０６ｍｌ、４２ｍｍｏｌ）を、室温で窒素雰囲気下攪拌下でアンミントリクロロ白金（ＩＩ）酸カリウム１３．９５ｇ（３９ｍｍｏｌ）の新しく濾過した溶液に添加した。得られた混合物を、光および空気に対し保護して、５０℃で１５時間攪拌した。室温まで冷却した後、得られた固体沈殿物を、窒素ブランケット下で濾過し、ｎ−ヘキサンで洗浄した。濾過ケーキを、漏斗を通し空気流を送ることにより乾燥し、乾燥粗生成物をジメチルホルムアミド１２０ｍｌに溶解した。濾液を０．１Ｍ塩酸３６０ｍｌと混合した。得られた沈殿物を濾別し、０．１Ｍ塩酸およびエーテルで洗浄した。真空オーブンで乾燥後、所望の生成物６．２５ｇを得た（原料アンミントリクロロ白金（ＩＩ）酸カリウム規準で理論収量の３４．６％）。
【００１９】
得られた生成物の同定は、ＩＲスペクトル解析により確認し、その純度は高速液体クロマトグラフィーにより決定した。

【００２０】
実施例３
化合物ＬＡ−９とヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの包接錯体（以後”ＬＡ−９の包接薬形と呼ぶ）の合成
化合物ＬＡ−９をジメチルホルムアミドに溶解し、最終濃度２５ｇ／ｌの溶液を得た。この溶液に、ＬＡ−９／シクロデキストリンのモル比１：３を得るに必要な量で、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを添加した。ＬＡ−９およびシクロデキストリンの溶液に、攪拌下室温で、ジメチルホルムアミドと水相の最終容量比が１：１０となるまで、ｐＨ７．３の１０ｍＭ Ｈｅｐｅｓの緩衝水相を添加した。水相の最初の添加でも、未溶解シクロデキストリンは迅速に溶解した。凍結乾燥により、包接錯体溶液からジメチルホルムアミドおよび水を除去した。
【００２１】
本発明の化合物の細胞分裂抑制活性は、腫瘍ラインで試験管内で試験した。それぞれの化合物の有効性をふるい分けるため、ＭＴＴ試験を選択した。この試験は、テトラゾリウム塩と、生きている細胞の呼吸するミトコンドリアとの反応に基づくものである。得られた不溶ホルマザンを可溶化し、その量をマイクロプレートリーダで決定する。この方法は、製薬活性化合物の細胞分裂抑制効果の評価の標準法として使用されている（Tim Mosmann、細胞の増殖および生存の迅速比色検定、増殖および細胞分裂抑制検定への適用、Journal of Immunological Methods, 65 (1983), 55-63)。阻害定数(ＩＣ５０)は、細胞培養物の増殖の５０％抑制を起こさせる物質の濃度を表す。この定数は、試験物質の濃度に対する、ＭＴＴ値（細胞のミトコンドリア活性）の依存性のグラフから決定されてきた。測定値からのこの定数の決定には、Graph Pad Prism プログラムが使用され、単一の実験点から曲線の構成にBoltzmanのＳ字状屈曲部が使用された。選択したセルラインは、薬理学的活性化合物の細胞分裂抑制効果の普通のふるい分けに使用される標準ラインである。
【００２２】
実施例４
マウスの腫瘍ラインに対する抗腫瘍活性
この実施例では、ライン Ｐ−８１５（肥満細胞腫）およびＬ１２１０（リンパ球白血病ライン）を試験した。ＬＡ−９の効果を、ＭＴＴ試験によりカルボプラチンの効果と比較した。
ＩＣ５０の見いだされた値は、Ｐ−８１５ラインでは１．１μＭ、Ｌ−１２１０ラインでは１．５μＭであった。これに対し、カルボプラチン（遊離形またはシクロデキスリンとの錯体としての両者）は、１０５μＭのＩＣ５０値を示し、すなわちＬＡ−９の約１００倍低い活性であった。
【００２３】
実施例５
ヒト腫瘍細胞に対する抗腫瘍活性
リンパ芽球白血病ライン ＣＥＭｔで、比較実験を実施した。ＭＴＴ試験を、細胞分裂抑制効果の評価に使用した。阻害定数ＩＣ５０を、化合物ＬＡ−９（ＩＣ５０＝０．３６μＭ）、シスプラチン（ＩＣ５０＝１．９μＭ）、カルボプラチン（ＩＣ５０＝３０．４μＭ）、オキザリプラチン（ＩＣ５０＝４．８μＭ）に対し決定した。
【００２４】
阻害曲線の過程のグラフ表示を、図１に示す。曲線上の点は次のように印をつけた。ＬＡ−９に対しては上向きの三角、カルボプラチンに対しては下向きの三角、シスプラチンに対しては四角、オキザリプラチンに対しては丸。細胞の活力は、ホルマザンの形成下での生命力のある細胞による３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミドの還元に基づく標準分光光度ＭＴＴ試験により決定した。目黒色腫ＶＵＰ（Masaryk Oncological Institute，Brno) は、カルボプラチン（ＩＣ５０＝９５μＭ）に比較して、ＬＡ−９（ＩＣ５０＝９μＭ）で約１０倍高い感度を示した。
【００２５】
実施例６
生体内抗腫瘍活性
腫瘍細胞の接種後、５日目に単一投薬量で静脈内投与後、固化哺乳動物腺がんＭＣ２１１１を有する動物で、化合物ＬＡ−９およびシスプラチンの抗腫瘍活性を比較した。白金錯体に特徴的なこの投与法は、可溶適用形の製造により可能となった。
体重２２．９〜２５．８ｇのマウスの雌ＤＢＡ／１をこの実験に使用した。等張グルコース溶液で１：１容量比に希釈した腫瘍ホモジネート０．２ｍｌを皮下接種することにより、腫瘍を発展させた。以下の表から明らかなように、動物の体重２０ｇ当たり０．１〜０．４ｍｌの容量で、使用直前に注入のため水に相当する凍結乾燥した製品を溶かすことにより準備した等張水溶液形で、さらに必要により特別に等張塩化ナトリウム溶液で希釈することにより、試験化合物を適用した。
【００２６】

【００２７】
化合物ＬＡ−９は、対照群と比較して、１２ｍｇ／ｋｇの投薬量で４１０％に生存時間中央値を増加した。Hajek に従う非媒介変数試験（Fabian V,Zakladni statisticke metody [統計学の基本方法],NCSAV Prague 1963)により評価した場合、単一生存時間の分布は、有意水準α値＝０．０５で、統計的に著しく異なった。動物の半分は、腫瘍の巨視的発現なしで、永続する完全な緩解傾向で生存し、実験の終了後殺傷した。統計的に有意ではないが、生存に対する正の影響は、試験化合物の抗腫瘍活性および低毒性の十分な証拠と見なすことができる。
【００２８】
ＬＡ−９の低毒性は、体重増加係数の評価により証明することもできる。ＬＡ−９の投与は、体重の１０％未満の減少を伴った。試験で使用した動物に対しては、ＬＡ−９の最適の投薬量は、１３〜１６ｍｇ／ｋｇであった。最高許容投薬量（ＭＤＴ）の値は、約２５ｍｇ／ｋｇと評価できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 ヒト腫瘍細胞に対する抗腫瘍活性の阻害曲線の過程を表わすグラフである。

Claims (8)

1. 式（Ｉ）の酸化数IIの白金錯体：
   

   

   式中、Ｘはハロゲン原子を表し、
   Ａは基−ＮＨ₂−Ｒ（ここで、Ｒは、３環系の環に１乃至４の炭素原子の１個または２個のアルキル基が任意に置換してもよい１０乃至１４の炭素原子を含む３環系炭化水素部分である）を表す。
2. 式（Ｉ）の酸化数IIの白金錯体：
   

   

   （式中、Ｘはハロゲン原子を表し、
   Ａは基−ＮＨ₂−Ｒ（ここで、Ｒは、３環系の環に１乃至４の炭素原子の１個または２個のアルキル基が任意に置換してもよい１０乃至１４の炭素原子を含む３環系炭化水素部分である）を表す）と１乃至６の炭素原子のヒドロキシアルキル基で任意に置換してもよいβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体。
3. Ａがアダマンチルアミノ基を表し、およびＸは請求項１で定義した意味を有する、一般式（Ｉ）の請求項１記載の白金錯体。
4. Ａが３，５−ジメチルアダマンチルアミノ基を表し、およびＸは請求項１で定義した意味を有する、一般式（Ｉ）の請求項１記載の白金錯体。
5. 極性有機溶剤または水中のアンミントリハロゲン白金（II）酸のアルカリ金属塩の溶液を、式Ｒ−ＮＨ₂（ここで、Ｒは１乃至４の炭素原子の１個または２個のアルキル基により３環系の環に任意に置換してもよい１０乃至１４の炭素原子を含む３環系炭化水素部分である）の一級アミンと、０乃至１００℃の範囲の温度で反応させることを特徴とする、請求項１記載の一般式（Ｉ）の白金錯体の製造方法。
6. 有機溶剤中の一般式（Ｉ）の白金錯体の溶液を、１乃至６の炭素原子を含むヒドロキシアルキル基で任意に置換してもよいβ−またはγ−シクロデキストリンの水溶液と混合し、得られた溶液から溶剤を蒸発させることを特徴とする、請求項２記載の一般式（Ｉ）の白金錯体と１乃至６の炭素原子を含むヒドロキシアルキル基で任意に置換してもよいβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体の製造方法。
7. 薬剤として使用するための請求項１または２記載の一般式（Ｉ）の白金錯体または当該白金錯体とβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体。
8. 活性物質として、少なくとも１種の請求項１または２記載の一般式（Ｉ）の白金錯体または当該白金錯体とβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体、および少なくとも１種の医薬賦形剤を含むことを特徴とする、腫瘍学的疾患の治療用医薬組成物。

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