MXPA00011624A - Complejo de platino, su preparacion y su aplicacion terapeutica - Google Patents

Abstract

Se describe un complejo de platino de la fórmula (I) en donde X representa unátomo de halógeno y A representa un grupo -NH2-R, en donde R es una porción de hidrocarburo tricíclico que contenga de 10 a 14átomos de carbono, que puede estar opcionalmente sustituida en el anillo triciclico por medio de uno o dos grupos alquilo conteniendo cada uno de 1 a 4átomos de carbono, y además un complejo de inclusión de platino del complejo de platino anterior con beta- o gamma- ciclodextrina que puede opcionalmente estar sustituida con gurpos hidroxialquilo que contenga de 1 a 6átomos de carbono. También se describe un proceso para la manufactura del complejo de la fórmula (I) en base a la reacción de una señal de metal alcalino de ammintrihalogenoplatinato (II) en un solvente orgánico polar o en agua con una amina primaria de la fórmula r-NH2, en donde R es una porción de hidrógeno tricíclica que contiene de 10 a 14átomos de carbono, que puede estar opcinalmente substituida ene l anillo tricíclico por uno o dos grupos alquilo que contiene cada uno 1 a 4átomos de carbono, a la temperatura en el rango de 0 a 100°C, asícomo un método para la fabricación del complejo de inclusión anterior. Los dos complejos descritos pueden usarse como tales o como parte de una composición farmacéutica en uan terapia para las enfermedades oncológicas.

Description

COMPLEJO DE PLATINO, SU PREPARACIÓN Y SU APLICACIÓN - TERAPÉUTICA CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a un nuevo complejo de platino que es útil en la práctica medicina L para la terapia de enfermedades oncológicas. La invención además describe un proceso para la preparación de tal complejo; el uso del complejo como un medicamento y composiciones farmacéuticas que contienen el complejo de platino como sustancia activa. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los complejos de platino efectivos como agentes citostáticos se introdujeron en la práctica medicinal a finales de la década de los años setenta de este siglo. El primer producto farmacéutico basado en complejo de platino fue el cisplatino (complejo de cis-diamina-dicloroplatino (II) ) . Durante el posterior desarrollo de esos complejos se sintetizaron y examinaron decenas de complejos de platino; entre ellos el carboplatino (complejo de cis-diammmina-/l, 1-ciclobuitanodicarboxilato/platino (II)) logró alta importancia en la oncología. Además, se han descrito complejos asimétricos de platino en los cuales un ligante de ammino ha sido reemplazado por un grupo alquilamina (USP 4,329,299). La publicación J.MED. CHEM. (1995) , 38 (16), 3014-24 describe un tetracoordinado de complejos de platino trans que contienen grupos halógeno y grupos amino. La publicación INORG. CHEM. (1993 (,32 (12) ,2717-23 describe complejo de dicloroplatino cis (II) que .portan un grupo adamantino y otra amina que difieren de los compuestos de la presente invención en que no portan ningún ligante NH3. El documento de patente EP-A-0 503 830 describe complejos de trans-platino (IV) obtenidos de sus correspondientes complejos de trans-platino (II) . Ninguno de esos complejos entran dentro del alcance de los compuestos de la presente solicitud de patente que tiene la geometría cis. Actualmente se buscan complejos de platino que expresen una mayor eficacia antitumoral y menores efectos laterales en comparación con los complejos de platino conocidos . Ahora, con la presente invención se encontraron algunos nuevos complejos de platino que poseen mayor eficacia antitumoral y menores efectos laterales en comparación con ios complejos de platino de la técnica anterior. Esos nuevos complejos representan la base de la presente invención. SUMARIO DE LA INVENCIÓN De acuerdo con un primer aspecto de la invención, se provee un complejo de platino de la fórmula (I) NH3 X A/ AP \\? en donde: X representa un átomo de halógeno, y A representa un grupo -NH?-R, en donde R es una porción de hidrocarburo triciclico que contenga de 10 a 14 átomos de carbono, que puede estar opcionalmente sustituida en el anillo triciclico por medio de uno o dos grupos alquilo conteniendo cada uno de 1 a 4 átomos de carbono. De acuerdo con el segundo aspecto de la invención, se provee un complejo de inclusión de platino con el número de oxidación II de la fórmula (I) NH3 X ' ^X en donde : X representa un átomo de halógeno, y A representa un grupo -NH2-R, en donde R es una porción de hidrocarburo triciclico que contenga de 10 a 14 átomos de carbono, que puede estar opcionalmente sustituida en el anillo triciclico por medio de uno o dos grupos alquilo conteniendo cada uno de 1 a 4 átomos de carbono, con beta- o gamma- ciclodextrina que puede opcionalmente estar sustituida con grupos hidroxialquilo que contengan de 1 a 6 átomos de carbono . Complejos de platino de la presente invención especialmente ventajosos, son los complejos de la fórmula (I) en donde A representa un grupo adamantilami o y X tiene el significado antes definido. Además, otro complejo de platino ventajoso de la presente invención es un complejo de la fórmula general (I) en donde A representa un grupo 3,5-dimetiladamantilamino y X tiene el significado antes definido. En otro aspecto de la presente invención, se provee un proceso para la preparación del complejo de platino de la fórmula (I) que está caracterizado porque una solución de una sal de metal alcalino de platinato (II) de amintrihalógeno en un solvente orgánico polar o en agua se somete a una reacción con una amina primaria de la fórmula NH2-R, en donde R es una porción de hidrógeno triciclico que contiene de 10 a 14 átomos de carbono que puede estar opcionalmente substituida con uno o dos grupos alquilo con de uno a cuatro átomos de carbono, a la temperatura de 0 a 100°C. La invención también provee un proceso para la preparación de un complejo de inclusión del complejo de platino de la fórmula (I) con Beta- o Gamma- ciclodextrina, que puede opcionalmente estar sustituida con un grupo hidroxialquilo que contenga de 1 a 6 átomos de carbono, el proceso está caracterizado por mezclar una solución del complejo de platino de la fórmula (I) en un solvente orgánico con una solución acuosa de Beta-o Gamma- ciclodextrina que está opcionalmente sustituida por medio de grupos hidroxialquilo que contengan de 1 a 6 átomos de carbono y en la siguiente etapa los solventes de evaporan de la solución obtenida . Otro aspecto de la invención es el complejo de platino de la formula (I) anterior o sus complejo de inclusión con Beta- o Gamma- ciclodextrina para usarse como un medicamento. El siguiente aspecto de la invención provee una composición farmacéutica para la terapia de enfermedades oncológicas, caracterizado porque contiene como sustancia activa, cuando menos 1 complejo de platino de la anterior fórmula (I) o su complejo de inclusión con Beta- o Gamma-ciclodextrina que puede opcionalmente estar sustituida como se define antes y cuando menos un excipiente. Además, los complejos de platino de la formula (I) puede usarse además como substancias de partida para la producción de complejos de platino análogamente substituidos con un numero de oxidación IV que también son útiles para la aplicación peroral. Los complejos de platino de la presente invención son compuestos químicos novedosos ya que hasta ahora ninguno de esos compuestos ha sido descrito específicamente en ningún documento de la técnica anterior ni tampoco han sido caracterizadas sus propiedades ni se ha descrito un método para su producción. La utilidad de esos compuestos como sustancias activas en la terapia de las enfermedades oncológicas es igualmente nueva e inventiva ya que no era posible deducir de la técnica anterior por medio de una via obvia que la presencia de ligantes de amina triciclicos en complejos de platino divaleptes, conducirla a un aumento básico de una actividad antitumoral de los nuevos compuestos de la presente invención. Posteriormente la invención será descrita más detalladamente por medio de ejemplos concretos. Debe entenderse que esos ejemplos tienen propósitos ilustrativos y de ninguna manera limitan el alcance de la invención que se define por medio de las reivindicaciones. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN EJEMPLO 1: .Sinte-sis de complejo de cis- (1-adamatilamina) -ammina-dicloroplatino (II) (de aquí en adelante llamado "LA-9") Una solución de 19.55 g (54.6 mmol) de ammin-tricloroplatinato (II) de potasio en 84 ml de agua se filtró y se agregó al filtrado una mezcla de 84 ml de agua y 45.4g (273.4 mmol) de yoduro de potasio. A la mezcla se agregaron 8.27 g (54.6 mmol) de 1-adamtilamina bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agito bajo la exclusión de aire y luz a la temperatura ambiente durante 22 horas. El precipitado resultante se filtró bajo nitrógeno y se lavó con agua libre de gases disueltos, después de secar en una secadora al vacío, se obtuvo un intermedio que contenía 3.09% de cloro y 33.03% de yodo. Este intermedio se suspendió en 170 ml de agua y 17.75 g (104.5 mmol) de nitrato de plata (90% de la cantidad teórica en base al contenido de halogenuros en el intermedio) se agregó a la suspensión. Después de agitar durante 70 horas a la temperatura ambiente bajo la exclusión de luz y aire, la parte no disuelta se filtró y se lavó con una pequeña cantidad de agua. Ácido clorhídrico concentrado (19 ml, 205 mol) se agregó lentamente al filtrado y la mezcla se agitó bajo la exclusión de aire y luz a la temperatura ambiente durante 20 horas. EL producto crudo solido se filtró y se lavo subsecuentemente con ácido clorhídrico 0.1M, etanol y éter. Después de secar en un horno de vacío, se obtuvieron 16.46 g del producto crudo (68%, en base a la ammin-tricloroplatinato de potasio inicial) . El producto crudo (16.36 g, 37.7 mmol) se disolvió en 200 ml de dimetilformamida, la solución obtenida se filtró y bajo enfriamiento, 600 ml de ácido clorhídrico 0.1M se agregaron al filtrado. El precipitado solido resultante se filtró, se lavó subsecuentemente con ácido cJ orhídrico 0.1M, etanol y éter y se secó en una secadora al vacío. El rendimiento fue de 14.70 g. del producto deseado (89.8% de teoría, en base al producto crudo inicial) . La identidad del producto obtenido se confirmo por medio de análisis espectral Rl y RMN 1H. La estructura cristalina y molecular del complejo de platino obtenido se estudio en un análisis de estructura por ra^os x del cristal simple, con lo cual se confirmaron los resultados de los métodos espectrales. La pureza del producto obtenido se determinó por medio de cromatografia de líquidos de alto desempeño . Análisis elemental del producto para C?oH2oCl2N2Pt : C(%) H(%) N(%) Cl( ) encontrado 27.75 4.55 6.37 16.25 calculado 27.66 4.64 6.45 16.33 Ejemplo 2 Síntesis de complejo de cis (l-amino-3, 5-d?metiladamantano) -amptina-dicloroplatino (II) (llamado de aquí en adelante "LA-13") . l-amino-3, 5-dimetiladamantano (8.06 ml, 42 mmol) se agregó a una solución recién filtrada de 13.95 g (339 mmol) de a min-tricloroplatinato (II) de potasio bajo agitación, a la temperatura ambiente y bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agito durante 15 horas a 50?C bajo una protección contra la luz y aire. Después de enfriar a la temperatura ambiente, el precipitado solido resultante se filtró bajo una cubierta de nitrógeno y se lavó n-hexano. La masa de filtrado se seco al pasar una corriente de aire a través del embudo y el producto crudo seco se disolvió en 120 ml de dimetilfsrmamida. El filtrado se mezclo con 360 ml de ácido clorhídrico 0.1M. El precipitado resultante se filtró y se lavó con ácido clorhídrico 0.1M éter. Después de secar en un horno de vacio, se obtuvieron 6.25g del producto deseado (34.6% del rendimiento teórico, en base al ammin-tricloroplatmato (III) de potasio inicial) . La identidad del producto obtenido se confirmó por medio de análisis espectral Rl mientras que su pureza se determinó por medio de cromatografía de líquido de alto desempeño. Análisis elemental del producto para C?2H24Cl2N2Pt : C(%) H(%) N(%) Cl(%) encontrado - 31.59 5.37 5.98 15.53 calculado 31.18 5.23 6.06 15.34 Ej emplo 3 Síntesis del complejo de inclusión del compuesto LA-9 con iiidroxipropil-beta-ciclodextrina (llamado de aquí en adelante como "medicamento de inclusión de LA-9") El compuesto LA-9 se disolvió en dimetilformamida para obtener una solución con una concentración final de 25g/l. Se agrego a la solución hidroxipropil-beta- ciclodextrina en una cantidad necesaria para obtener una proporción molar LA-9/cilodextrina de 1:3. La fase acuosa amortiguada de lOmM Hepes con pH 7.3 se agregó a la solución de LA-9 y ciclodextrina bajo agitación a una temperatura ambiente hasta que la proporción de volumen final de dimetilformamida y la fase acuosa fue de 1:10. La ciclodextrina no disuelta se disuelve rápidamente después de las primeras adiciones de la fase acuosa. Dimetilformamida y agua se retiraron de la solución del complejo de inclusión por medio de liofilizacion. La actividad citostática de los compuestos de la presente invención ha sido estudiada en vitro en tumores. La prueba MTT se seleccionó para estudiar la efectividad de los compuestos respectivos. La prueba se basa en a reacción de una sal de tetrazolio con mitrocondrias de células vivas respirando. El formazan insoluble resultante se solubiliza y su cantidad se determina en un lector de microplaca. Este método se usa como un estándar para la evaluación del efecto citostático de los compuestos farmacéuticamente activos (Tí Mosmann, Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival, Application to proliferation and cytotoxicity assays, Journal of ímmunological Methods, 65 (1993), 55-63). La constante de inhibición (IC 50) representa una concentración de una substancia que provoca una supresión del 50% del crecimiento del cultivo celular. Esta constante ha sido determinada desde una gráfica de dependencia del valor MTT (actividad mitocondrial de las células) en la concentración de la substancia estudiada. Un programa GraphPad Prism se uso para la determinación de la constante a partir de los valores medidos, usándose sigmoide de Boltzman parta construir una curva a partir de puntos experimentales simples. Las familias celulares son familias estándar usadas para el estudio de rutina del efecto citostático de los compuestos farmacológicamente activos. Ejemplo 4 Actividad antitumoral en líneas de tumores en ratones En este ejemplo se probaron las líneas P 815 (mastocitoma) y L 1210 (linea de leucemia de linfocitos) . el Efecto de la-9 se comparó a la de carboplatino por medio de la prueba MTT. Los valores encontrados de IC50 fueron 1.1 uM para ia línea P-815 y 1.5 µM para la línea 1210. Por el contrario, el carboplatino (ambos en forma libre o como complejo con ciclodextrina) presentaron el valor IC50 de 105µM, esto es fue aproximadamente cien veces menos activo que LA-9. Ejemplo 5 Actividad antitumora'l en células tumorales humanas Experimentos comparativos se realizaron en la línea de leucemia linfoblastica C Mt. La prueba MTT se usó para evaluar el efecto citotóxico. La constante de inhibición IC 50 se determinó para los compuestos LA-9 (IC50=0.36 µM) , cisplatino (IC50-1.9µM) , .carboplatino (IC=30.4 µM) y oxaliplatino (IC50=4.8 µM) . La expresión gráfica de los cursos de las curvas de inhibición en la figura 1. Los puntos en las curvas se marcan de la siguiente manera: para LA-9= triángulo orientado hacia arriba, para carboplatino= triángulo orientado hacia abajo, para cisplatino=cuadrado, para oxal lplatino=circulo.

La vitalidad de las células se determinó por medio de prueba MTT espectro étrica en base a la reducción de bromuro de 3- (4, 5-dimetiltiazol-2-il) -2, 5-difeniltetrazol?o por células vitales bajo la formación de un formazano. La melanoma ocular VUP (Masaryk Oncological Institute, Brno) presentó una sensibilidad aproximadamente diez veces mayor frente a LA-9 (IC50=9µM) en comparación con Carboplatino (IC50=95µM) . Ej emplo 6 Actividad antitumoral in vivo La actividad antitumoral del compuesto LA-9 y el cisplatino ha sido comparada en animales con adenocarcinoma mamario sólido MC 111 después de la aplicación intravenosa de una sola dosis el día 5 después de la inoculación de las células tumorales. Esta forma de administración que es característica de los complejos de platino fue posible por medio de una preparación de una forma de aplicación soluble.

Ratones hembra DBA/1 con una masa corporal 22.9-25.8 g se usaron en este experimento. Los tumores se desarrollaron por medio de inoculación s.C. De 0.2 Ml de un homogenato de tumores diluido en una proporción volumétrica 1:1 con una solución de glucosa isotónica. Los compuestos estudiados se aplicaron en forma de una solución acuosa isotónica preparada inmediatamente antes de la aplicación por medio de disolución de un producto liofilizado correspondiente en agua para inyecciones y además por medio de la dilución con solución de cloruro de sodio isotónica preparada de acuerdo con la necesidad, en volúmenes de 0.1-0.4 ml por 20 g de masa corporal de un animal como forma evidente de la tabla siguiente. Tabla: Actividad antitumoral n = cantidad de animales en un grupo LTS= Sobrevivientes a largo plazo (cantidad de animales que sobreviven durante 125 días y que se destruyen después de terminar el experimento) . Plantidiam = medicamento comercializado (Lachema) que contiene complejo de cis-diammina-d cloroplatino (II) (cisplatino) como substancia activa El compuesto LA-9 aumento el tiempo de sobrevivencia mediano a una dosis de 12 mg/kg en 410% en comparación con el grupo de control, en donde la distribución de los tiempos de sobrevivencia individuales difieren estadísticamente en un nivel de significancia or=0.05 evaluados por medio de pruebas no paramétricas de acuerdo con Hajek (Fabián V., Zakladni statisticke metoy (Métodos básicos de estadísticas), NCSAV Praga 1963). La mitad de los animales sobrevivió en remisión completa permenente y se destruyeron después de terminar el experimento sin la manifestación macroscópica de un tumor. La influencia positiva sobe la sobrevivencia, aunque es estadísticamente insignificante, puede considerarse como una prueba suficiente de la actividad antitumoral y la baja toxicidad de los compuestos estudiados. La baja toxicidad de LA-9 puede demostrarse también por medio de la evaluación del coeficiente de la ganancia del peso corporal. La administración de LA-9 ha sido acompañado con una perdida menor al 10% del peso corporal. La dosis óptima de LA-9 ha sido de 13-16 mg/kg para animales usados en las pruebas. El valor de la dosis tolerable máxima (MDT) puede estimarse en aproximadamente 25 mg/kg.

Claims (8)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES 1.- Un complejo de platino con número de oxidación II de la fórmula (I)
2. NH. X A' -X caracterizado porque en la fórmula significan X representa un átomo de halógeno, A representa un grupo -NH2-R, en donde R es una porción de hidrocarburo tricíclico que contenga de 10 a 14 átomos de carbono, que puede estar opcionalmente sustituida en el anillo tricíclico por medio de uno o dos grupos alquilo conteniendo cada uno de 1 a 4 átomos de carbono. 2.- Un complejo de inclusión de un complejo de platino con un número de oxidación II de la fórmula (I)
3. NH^ X A' -X caracterizado porque en la fórmula significa X representa un átomo de halógeno, y A representa un grupo -NH2-R, en donde R es una porción de hidrocarburo tricíclico que contenga de 10 a 14 átomos de carbono, que puede estar opciona] mente sustituida en el anillo tricíclico por medio de uno o dos grupos alquilo conteniendo cada uno de 1 a 4 átomos de carbono, con beta- o gamma- ciclodextrina que puede opcionalmente estar sustituida con grupos hidroxialquilo que contengan de 1 a 6 átomos de carbono . 3.- Un complejo de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula (I) caracterizado porque A representa un grupo adamantilamino y X tiene el significado definido en la reivindicación 1.
4. 4.- Un complejo de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula (I) caracterizado porque A representa un grupo 3, 5-dimetiladamantilamino y X tiene el significado definido en la reivindicación 1.
5. 5.- Un proceso para la preparación del complejo de platino de la fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 caracterizado porque una solución de una sal de metal alcalino de platinato (II) de amintrihalogeno en un solvente orgánico polar o en agua se somete a una reacción con una amina primaria de la fórmula NH?-R, en donde R es una porción de hidrógeno tricíclico que contiene de 10 a 14 átomos de carbono que puede estar opcionalmente substituida con uno o dos grupos alquilo con de uno a cuatro átomos de carbono, a la temperatura de 0 a 100A. -
6. 6.- Un proceso para la preparación de un complejo de inclusión del complejo de platino de la fórmula (I) con Beta-o Gamma- ciclodextpna, que puede opc onalmente estar sustituida con un grupo hidroxialquilo que contenga de 1 a 6 átomos de carbono de acuerdo con la reivindicación 2, el proceso está caracterizado por mezclar una solución del complejo de platino de la fórmula (1) en un solvente orgánico con una solución acuosa de Beta-o Gamma- ciclodextrina que está opcionalmente sustituida por medio de grupos hidroxialquilo que contengan de 1 a 6 átomos de carbono y en la siguiente etapa los solventes de evaporan de la solución obtenida.
7. 7.- El complejo de platino de acuerdo con la fórmula general (I), o su complejo de inclusión con beta- o ga maciclodextrina de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 para usarse como un fármaco.
8. 8.- Una composición farmacéutica para la terapia de enfermedades oncológicas caracterizada porque contiene cuando menos un complejo de platino de la fórmula (I) o su complejo de inclusión con beta- o gamma-dextrina de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 como la substancia activa y cuando menos un excipiente farmacéutico.