JPS6140265A - がん治療用白金挿入組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 本発明はがん治療用の新規な白金挿入錯体に関する。

本発明の前にも、抗悪性腫瘍剤として有用な広範な種類
の白金化合物が利用されている。これらの利用可能な白
金抗悪性腫瘍化合物は多種の腫瘍に対して非常に有効で
ある。しかし、それらの化合物は水への溶解度が小さい
ので、病人に投与することが難しい。その上、これらの
治療用白金化合物、例えばシスプラチン、に対して抵抗
性のある腫瘍細胞系に出合うことが通常である。

代表的な抗悪性腫瘍性白金化合物は、例えば米国特許第
４，０５３，５８７号、第４，１）５，４１８号、第４
．１４０，７０７号、第４．１’　７７，２６３号、第
４，２５８，０５１号、第４，３５９，４３７号、およ
び第４．４１９，３５１号明細書に開示されている。

さらにビンブラスチンとプレオマイシンのような挿入薬
剤（１ｎｔｅｒｃａ’１ａｔｉｖｅ　ｄｒｕｇ）が有効
な抗悪性腫瘍剤であることは公知である。挿入化合物と
は、ＤＮＡの二重らせんの塩基対の間に挿入し、そして
ＤＮＡを形成するヌクレオチドの特定の部位に結合する
ことのできる化合物である。このように結合することに
よって、挿入薬剤はＤＮＡの細胞生殖を妨げ、それによ
って腫瘍のさらに成長することを禁止するかまたは妨げ
ると信じられている。

バグ９ツタら（Ｅａｇｅｔｔａ　ａｔ　ａｌ）はカフ”
Ｊ−−−トリートメント・レボーツ（Ｃａｎｃｅｒ　Ｔ
ｒｅａｔｍｅｎｔＨｅｐｏｒｔｓ　）、第６６巻、第６
号、１９８２年６月において、シス−ジアミンジクロル
白金（…）（シスプラチン）と、挿入薬剤であるビンシ
ラステンとプレオマイシンを組合せて、転移悪性黒色腫
に悩まされている患者を治療するために使用することを
提案した。この著者らは、この薬剤の組合せの投与は、
シスプラチンの累加毒性のために、一般の使用に適応し
ないように思われると述べている。またライラチスら（
Ｗｉｔｔｅｓ　ｅｔ　ａｌ　）はオンコロジー（Ｏｎｃ
ｏｌｏｇｙ　）、第３２巻、２０２−２０７頁（１９７
５年）においてシスプラチンとプレオマイシンをがんの
治療のため患者に同時に投与すると相剰作用が認められ
ることを報告している。

投与するに便利であり、そして現在利用できる化学療法
剤と少なくとも同じ位に有効な抗悪性腫瘍剤を投与する
手段を提供できれば、それは非常に望ましいことである
。さらにまた、一連の異なる種類のがんを治療すること
のできる手段を提供することも非常に望まれることであ
る。

発明の要約 本発明は、白金抗がん薬剤と化学的に結合して単一の分
子を形成しているＤＮＡ挿入薬剤から成り、患者処投与
できる新規な抗がん薬剤を提供するものである。本発明
の化合物は対応する未変性白金薬剤に比較してより高い
水溶性を有し且つ単独に投与された場合に、未変性白金
抗がん薬に対して抵抗性を有する腫瘍細胞に対して有毒
であることが発見された。挿入薬剤と白金抗がん薬剤は
ある分子橋によって結合されており、その分子橋は挿入
薬剤または白金薬剤の腫瘍細胞に対する活性のいずれに
も逆効果を与えないものである。好ましい分子橋はアル
キル鎖、ポリアミン鎖、ポリエーテル鎖などであり、そ
れらは長さと組成を変えることができる。

特有の態様の説明 本発明の化合物は抗腫瘍活性を有する白金化合物から形
成され、結合鎖が連結され得る部位、例えば反応性環置
換基（すなわち、アミン基、ヒドロキシル基、スルフヒ
ドリル基）、反応性環炭素、環窒素基など、を含んで（
・る。環窒素基は挿入化合物と白金化合物の間の結合部
分を結ぶために利用される。適当な白金化合物の代表的
な例に含まれるものはジクロロエチレンジアミン白金（
…）、シス−ジアミンジクロロ白金（ｎ）、１．２−ジ
アミノシクロヘキサンジクロロ白金（■）、シス−ジア
ミンマロナト白金（Ｉｆ）などである。

適当な挿入薬剤の代表的なものは挿入活性を有し且つ結
合基が連結できる部分、例えば環窒素原子、を有するも
のである。代表的な適当な挿入薬剤の例に含まれるもの
はアクリジンオレンジ、２−メトキシ−６−クロロアク
リジン、９−アミノアクリジン、プロフラビンまたはそ
の他のアクリジン類、アドリアマイシン、ダウンマイシ
ン、エリシチジン、臭化エチジウム、および関連するフ
エナントリジン類である。

本発明の化合物は、挿入薬剤の挿入活性または白金薬剤
の抗腫瘍活性に逆効果を与えないような方法で製造され
る。本発明の化合物（Ｉ）の典型的合成法として、挿入
薬剤としてアクリジンオレンジ、および抗腫瘍白金薬剤
としてジクロロエチレンジアミン白金（ｎ）を用いた場
合について、ここに説明する。

出発原料のアクリジンオレンジ塩酸塩と６−クロロ−１
−ヒドロキシヘキサンを、６−クロロ−１−ヒドロキシ
ヘキサンのヒドロキシル基をジヒドロビランで保護する
条件の下で反応させる。クロリド基は次に、　ＮａＩ　
／　ＮａＨＣＯ３／アセトンによって行なわれるフィン
フレスフィン−ハライド交換反応を使用して、ヨウシト
基に置換される。それによって生成したヨウ素化合物を
次に適当な溶媒、例えば熱キシレン、の中でアクリジン
オレンジの遊離塩基の形と縮合させ、それによって環窒
素の第４級化を起させる。この反応は、その鎖の端に保
護されたヒドロキシル基を含むアルキル側鎖を有するア
クリジンオレンジを生成する。ヒドロキシル官能基の脱
保護は希薄な酸、例えは希薄なＨＣＩエタノール溶液、
によって達成される。その後、ヒドロキシル基は４８チ
臭化水素酸を使用してプロミド基によって置換されて、
アルキル鎖の端に反応性の臭素を有するアルキル化アク
リジンオレンジを生成する。その臭素は、適当な溶媒、
例えばメタノール中でエチレンジアミンによって容易に
置換され、それによってアルキル鎖の端にエチレンジア
ミン基を有するアルキル化アクリジンオレンジを生成す
る。この化合物を次に適当な溶媒、例えばジメチルホル
ムアミドと水、の中でＰｔＩ、”−と反応させ、それに
より白金イオンをエチレンジアミンのキレートに結合さ
せる。二つのヨウ素を化学量論量の硝酸ナトリウムを使
用した後ＨＣＩで処理することにより塩素に置換するこ
とにより、式Ｉの化合物を生成する。

式■の化合物は抗腫瘍薬として有用であり、シスプラチ
ンに優るいくつかの利点を有する。例えば、その水溶解
度は２０１ｎ９７１であり、シスプラチンのそれの６■
／ｌにはるかに優っている。その上、式Ｉの化合物はま
た、アクリジンオレンジ部分のＤＮＡに対する高い挿入
的親和力のために、他の白金抗腫瘍薬剤に比較して、Ｄ
ＮＡをほどく（ｕｎｗｉｎａｉｎｇ　）より大きな能力
を有する。アクリジンオレンジ部分と白金部分の両方共
生勧学的に活性な化合物である。その二つを一分子中に
持つことは両方の効果をさらに高める。式■の化合物は
普通の腫瘍細胞に対して活性であるばかりでなく、シス
プラチン抵抗性腫瘍細胞に対しても活性であることが発
見された。その上、弐Ｉの化合物は光活性ＤＮＡ分解剤
であることが判った。

次の実施例は本発明を例示するものであって、本発明を
限定するものではない。

本発明の薬剤を使用するため適当な用量は約２５■／に
９体重と約２．５１ｎ９／に＆の間である。例えば、式
Ｉの化合物を約２．５１ｎ９／ｋｌ？と約１５＃／に５
Ｆの間の用量で使用することができる。

実施例Ｉ 合成法 保護された６−クロロヘキサノール（Ｉｔ）３１．０ｍ
Ｊのジヒドロピラン（３４１ミリモル）を６７５−〇〇
Ｈ２Ｃ１２に溶解した。１．３（ｌのＰＰＴＳを触媒と
して加えた。２６ｍ１の６−クロロヘキサノール（２２
７ミリモル）を加えてから、その溶液を室温で５時間攪
拌した。その混合物を次に分液漏斗中で、２５０ｄの半
濃縮Ｎａｃｌ溶液に２ｇのＮａＨＣＯ３を加えたものに
よって２回洗浄した（半濃縮ＮａＣＩＪ溶液合計使用量
５００罰、ＮａＨＣＯ３合計使用量４９）。ｃＨ２ｃ１
２相を無水Ｎａ　２　Ｓｏ　４で乾燥した。溶媒を回転
蒸発によって除くと、４９．８　ｇの粗製の黄色物質を
得た。真空蒸留（＜１０Ｔｏｒｒ）をすると主留分３１
．７１（６３チ、沸点：９９−１００℃、１０　Ｔｏｒ
ｒ　）を透明な液として得た。

保護された６−ヨードヘキサノール（１）すべてのガラ
ス器具を使用に先立って乾燥器中で乾燥した。１０，９
の保護された６−クロロヘキサノール（Ｉｔ）　（４５
，３ミリモル）を５ｏ−の乾燥した蒸留したばかりのア
セトン中に溶解した。

６．８ｇのＮａＨＣＯ３（４５，４ミリモル）ヲソノ反
応混合物に加えてから、次に２０．４．９のＮａＩ　（
１３６，１ミリモル）を加えた。この混合物をＮ２雰囲
気の下で１９時間還流加熱した。アセトンを回転蒸発に
よって除去した。

残留物を脱イオン水に溶解した。分液漏斗中で２相が形
成された。その混合物を２Ｘ５０ｍＪのＥｔ２０で抽出
した。エーテル相を集めて５０’＋ＩＬｅの脱イオン水
（＋　１／２１）　ＮａＨＣＯ３）で洗ってから、次に
Ｎａ２ＳＯ４によって乾燥した。溶媒を次に回転蒸発に
よって除いてから、得られた油状物を真空デシケータ−
中で一晩乾燥した。収量：　１３．１　＆（９２，０％
） すべてのガラス器具を乾燥器中で一晩中乾燥した。キシ
レンを４人分子ふるい上で乾燥した。アクリジンオレン
ジ遊離塩基を真空デシケータ−中で一晩乾燥した。１）
．７７ｇ（３７，７ミリモル）の保護された６−ヨード
ヘキサノール（１）と６５罰のキシレンを混合した。５
　ｇ（１８，８ミリモル）のアクリジンオレンジを加え
てけん濁させた。スパチュラ−の先に一杯のＮａＨＣＯ
３を加えた。その混合物を激しく攪拌しなから５１／２
時間還流加熱した。その反応混合物を冷却してから吸引
濾過した。Ｅｔ２０で洗浄後、明るいオレンジ色の微結
晶固体が得られた。真空デシケータ−中で乾燥後、粗製
品の収量は８．９　ｇ（８３，６％）であった。その生
成物を、Ｅｔ２０を曇り点（ｆｏｇ　ｐｏｉｎｔ　）ま
で加えながら、ＥｔＯＨから２回再結晶させた。７．９
６ｇ（７３，３％）の明るし・赤オレンジ色の微結晶固
体を得た。

５．３６　ｇ（９，６１ミリモル）の保護されたアルコ
ール基を有する化合物（Ｖ）を６００祷の９５％ＥｔＯ
Ｈ中に蒸気浴上で加熱することにより溶解した。２．６
ｒｘｌ＃）濃Ｈｃｉｌを０．１　Ｍ　ＨＣ７／ＥｔＯＨ
溶液を作るために加えた。その溶液を蒸気浴上で２時間
攪拌してから、次に室温でさらに２時間攪拌した。

溶媒をそれから回転蒸発によって除くと深赤色の固体が
生成した。その固体をＥｔ２０と共にこねてから、次に
２５０１Ｌｅの脱イオン水中に溶解した。

水溶液を分液漏斗中で３Ｘ５０幅のＥ２０で洗った。

次に水相を回転蒸発によって蒸発させた。真空デシケー
タ−中で乾燥の後、粗製品の収量は４．６８ｇ（９７，
８％　）であった。１　：　１　ｉ　−ＰｒＯＨ：Ｍｅ
ＯＨからの再結晶により数群の結晶が生成したが、それ
らは暗赤色の針状結晶から明るい赤色微結晶固体に亘っ
た。合計の再結晶収量：　３．３４　ｇ（６９，８％）
。

４８　％　ＨＢｒを赤リンの存在でＮ２雰囲気の下に蒸
留した。１．３．９　（２，６３ミリモル）のアルコー
ル（■１）を６０ａｅの蒸留したばかりの４８％ＨＢｒ
に直接加えた。その混合物を油浴上でＮ２雰囲気の下に
９５℃で４１／２時間攪拌した。次にその溶液を２５０
−の冷たい脱イオン水中に注入した。直ちに薄オレンジ
色の沈澱か生じた。これをガラスフリットを通して吸引
濾過することにより集めた。

次に脱イオン水とＥｔ２０で洗った。真空デシケータ−
中で一晩乾燥した後、１．３ｇ（９７％）の臭素化合物
（Ｖｎ）が得られた。この物質はアルコールから再結晶
する間に若干分解することが観察された。この粗製の固
体はＩＨＮＭＲによって非常に純粋なことか証明された
ので、それ以上精製をせずに使用された。

臭素化合物（Ｖｉｌ）を反応させる前にデシケータ−中
で完全に乾燥させた。すべてのガラス器具を使用前に乾
燥器中で乾燥した。２．８０　ｇの臭素化合物（■）　
（５，５ミリモル）を２００−の乾燥した蒸留ＭｅＯＨ
中にけん濁させた。反応器をＮ２で洗い流してから、次
に７．５６ｔｕｌの乾燥した蒸留エチレンジアミン（１
）０ミリモル）を注射器で加えた。

反応は７０℃で常時Ｎ２圧の下に撹拌して行なわれた。

初めの１時間の後、臭素化合物（■１）はすべて溶解し
た。反応物を全部で６１／２時間攪拌してから、大部分
のＭｅＯＨを回転蒸発により除去した。

４０ｍＪのＤＭＦを加えてから、５５°Ｃで真空ポンプ
を使う回転蒸発により除いた。深赤褐色の固体がフラス
コ中に生成した。これを真空デシケータ−中で一晩乾燥
した。その固体をＥｔ２ｏ　（３ｘ　３０罰）とこねて
から、再び真空デシケータ−中で乾燥した。収量：３．
１２１）（定量的）。

配位子の再結晶による四基酸塩（■）の製造２１）の粗
製配位子を１００罰の乾燥した蒸留ＥｔＯＨ中にけん濁
させた。これを蒸気浴上で溶液に変化させた。乾燥Ｈｃ
ｌｌガスをその溶液に通した。

初めに沈殿を生じたが、これはさらに多くのＨＣＩを泡
を立てて通気するに従かい再び溶解して、元のものより
もずっと濃い赤色の溶液を生成した。

その溶液を徐々に室温まで冷却させ、ゴム膜で覆ってか
ら、水浴中で冷却した。生成した固体を吸引濾過で集め
、冷たいＥｔｏａ　（２００プルーフ）で洗ってから、
そのフィルター上でＮ２の速い流れの下に乾燥させた。

これを真空デシケータ−中で乾燥した後、収量１．６ｇ
（７７，３％　）の四基酸塩を得た。

０．５　ｇ（０，８４８ミリモル）の四基酸塩（■）を
初めに１０１の脱イオン水に溶解してＦＪ−１）０の溶
液を作った。これに５罰のＤＭＦを加えた後に回転蒸発
によって濃縮した。白色結晶を除き、最終的に２　：　
１　（７）ＤＭＦ　：　Ｈ２０溶液１５ｄを調製した。

０．５．９　（１，２１ミリモル）のに２ＰｔＣＡ！４
を５１の脱イオン水中に溶解した。また１、６１ｇのＫ
Ｉ　Ｃ９，６８ミリモル）を５鮮の脱イオン水に溶解し
た。そのＫＩ浴溶液前記に２ＰｔＣ１４溶液に１５分間
に亘って滴下して加え、その後その溶液を５０℃に１５
分間加熱した。それから２０ｍ１のＤＭＦを加えた。

前記配位子溶液を徐々にこのに２ＰｔＩ、溶液に２時間
に亘って加えた。すべてを溶液状態に維持するため必要
な場合にはＤＭＦを添加した。その浴液を一晩中５０℃
において攪拌した。それから溶媒の量を回転蒸発により
少ない量に減少させた。脱イオン水を加えて生成物を沈
殿させた。この生成物を濾過し、ＥｔＯＨとＥｔ２０で
洗ってから、次に真空デシケータ−で−晩乾燥させた。

収量：　７４４．７雫（８９，２％）。

３００■（０，３’０５ミリモル）の、配位子を有する
白金ショート錯体（■）を１５ＷＬｌのＤＭＦ’に溶解
した。１５３．７１ｎ９（１，０６ミリ％　ｋ　）　ノ
ＡｇＮＯ３を６１）ＬｌのＤＭＦに溶解した。この後者
の溶液を錯体（ＩＫ）の溶液に滴下して加えた。重い白
っぽい沈殿が生成した。その溶液を蒸気浴上で加熱して
ＡｇＩを凝固させてから、さらに５分間攪拌した。

次にその溶液をミリボアー（Ｍｉｌｌｉｐｏｒθ）フィ
ルターを通して濾過しく収量：　２０３．８ｍ９．９５
．９チのＡｇＩ）、その上１時間攪拌してから、フィル
ムで覆って冷蔵犀中にＯ’Ｏで１時間冷却した。再びミ
リボアーフィルターを通して濾過した後、溶液を回転蒸
発により濃縮してその量を減少させてから５１のＤＭＦ
と５罰の０．４　Ｍ　Ｈｅ’ｄを加えた。

溶液を一晩放置してから濾過した。回転蒸発によりＤＭ
Ｆを１〜２ｍｌを残してすべて除去した後、１ＰｒＯＨ
を加えて生成物を沈殿させた。その固体を吸引濾過で集
めてから、ＥｔＯＨとｇｔ２ｏで洗った。

真空デシケータ−中で乾燥した後、　　１９６．３〜の
ジクロロ白金錯体（Ｘ）　（９０，６％）を鮮紅色の固
体として得た。

実施例■ 毒性試験を式１の化合物についてマウスで行なった。表
１に記載さねた細胞系の一連の培養平板を種々な濃度の
化合物に暴露させて、細胞増殖速度が５０％減少する濃
度（ＩＤ５ｏ）を測定した。

その結果を表Ｉに示す。

表　　Ｉ 細胞系　　　　　　　　　　より５０１　Ｉｎ９／ｍ１
Ｌ１２１０　（白血病腫瘍細胞系）　　　　　　　　　
　　０．８３Ｔ１８１５　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　３．１５式■の化合物の濃度を変えて、す
なわち、２．５．５．０．１０．０．２０．０およヒ４
０．０７１）＆／ｍヲ夫々２匹のマウスに投与してマウ
スの生存率に対するその化合物の効果を測定した。２．
５および５．０　ｍ９／ｋｌｉ’では、マウスは生存し
た。１０．０り／ｋｇでは、マウスは１４日後に体重を
減じた。２０．０および４０．０１％ｇ／ｋＰではマウ
スは死んだ。

マウスにＬｌ　２１０細胞系を腹膜間に内植し、その後
マウスのあるものに式Ｉの化合物を６．７〜２０〜／ｋ
ｌ？の用量で投与した。最適用量は、Ｌｌ　２１０を内
植されたが上記薬剤で処置されなかった対照のマウスに
対して５１％の％　ＩＬＳを与える１　５り／ｋＩＩで
ある。試験結果を表■に詳細に示す。シスプラチン（シ
スＤＤＰ　）についての１ＩＬＳ値も表■に示しである
。

表　　■ Ｌｌ　２Ｉ　Ｑ１０式１　２０　　ｄｌ、５．　９．９
　１０％１０　９．１３１２．３５８％ ５　　１０．６１９％ 泌ＤＤＰ　３　　１）．９３４％ Ｌ１２１　Ｑ１０式１　１５　　ｄＬ　５．１３．９　
５１％１０　９．１３１）．３２３％ ６．７　　１）．５２３％ 汐ＤＤＰ　４．５　　１９．６１）３％３．０　　１３
．９５１％ ２．０　　１）．６　２６％ シスＤＤＰに抵抗性の腫瘍細胞系を内植されたマウスに
６．７〜１５＋１）９／ｋｌｉ’の用量で式Ｉの化合物
によって処置した場合は温和な活性を示した。これらの
試験結果を表１に示す。

表　　Ｉ Ｌｌ　２１　Ｑ／ＰＤＤ式１）５　　　ｑ４ａｘ４　１
２．３　　１２％１０　　１２．１　１０チ ロ、７　　１）．４　４％ 泌ＤＤＰ　４．５　　１），０　０ ３．０　　１０．８　０ ２．０　　１）．０　０

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）挿入薬剤の挿入活性または白金薬剤の抗悪性腫瘍
   活性に逆効果を与えない部分によつて結合された挿入薬
   剤と抗悪性腫瘍活性を有する白金薬剤とから成るがん性
   腫瘍の治療に適する組成物。
2. （２）下記の式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物。