JPH01299293A

JPH01299293A - 白金グリーン錯体の製造方法

Info

Publication number: JPH01299293A
Application number: JP63129376A
Authority: JP
Inventors: Hiroaki Okuno; 奥野　洋明; Takehiko Shimura; 志村　武彦; Takenori Tomohiro; 岳則友廣
Original assignee: Agency of Industrial Science and Technology
Current assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Priority date: 1988-05-26
Filing date: 1988-05-26
Publication date: 1989-12-04
Also published as: JPH0546324B2; EP0343772A3; EP0343772A2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、抗腫瘍剤活性を有し、医薬として有用な白金
グリーン錯体を選択的に製造する方法に関する。

（従来の技術〕ローゼンベルグらにより抗腫瘍活性を有することが証明
〔ネイチャー　（Ｎａ　ｔｕｒｅ）第２２２巻、３８５
ページ（１９６９年）〕されたシスプラチンは、そのす
ぐれた作用により前立腺癌、卵巣癌、胃癌などの治療に
広く用いられている。しかしながら、腎毒性や悪心・嘔
吐などの副作用があり、大きな問題となっている。この
副作用軽減のため投与法などの改良が行われているほか
に、シスプラチンよりも抗腫瘍活性がすぐれ、かつ副作
用が低減された白金錯体化合物の合成研究が盛んに行わ
れてきている。

米国特許第４．４１９，３５１号明細書には、２，４−
ジオキソピリミジン化合物とシス−シアコシアンミン白
金（ＩＩ）とを反応させて、抗腫瘍、抗細菌および抗ウ
ィルス作用を有する白金−〔２，４−ジオキソピリミジ
ン化合物〕ブルーまたはグリーン錯体またはその混合物
が得られることが記載されている。

また、ジャーナル・オプ・ジ・アメリカン・ケミカル・
ソサイエティ（Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、）第１０
６巻、２０４９〜２０５４ページ（１９８４年）にはシ
ス−ジアンミンジクロロ白金（ＩＩ）　とα−ピロリド
ンとのグリーン錯体の構造について報告されている。

ところで、前記米国特許明細書によると、ウラシル、チ
ミン、ピリミジン、ポリウラシルなどの塩基およびウリ
ジン誘導体またはチミジン誘導体などとの白金錯体が得
られている。塩基との錯体については白金ブルー錯体が
主成分として得られ、白金グリーン錯体は第二沈澱物と
して得られている。また白金ブルー錯体については、元
素分析、可視部吸収スペクトルなどにより同定が行われ
、かつ、生物学的活性の検討がなされている。しかしな
がら、白金グリーン錯体については、その物理化学的諸
性質は不明瞭であり、特に、沈澱物として析出しない水
溶性白金グリーン錯体については、その精製法、理化学
的性質、抗腫瘍活性などに関し、何ら報告されていない
。一方、ウリジン誘導体またはチミジン誘導体との錯体
については、ブルー錯体のみが得られており、しかも、
若干の抗腫瘍活性が記載されているに過ぎない。ウリジ
ン誘導体またはチミジン誘導体のグリーン錯体について
はその製造法も抗腫瘍活性も何ら記載されていない。

〔発明が解決しようとする課題〕

本発明の目的は、抗腫瘍剤として有用な白金グリーン錯
体を効率よく得ることにある。

（本頁以下余白）〔課題を解決するための手段〕本発明は、−数式（式中、ＸはＣＩ、又は■であり、ＹはＮＨ３゜で表わ
される化合物とウリジン、チミジン、ウラシル、チミン
、２′−デオキシウリジン、ウリジン−５′−モノフォ
スフエイト、５−フルオロウラシル、又は１．２−ジア
ミノシクロヘキサンを銀塩及び過酸化水素の存在下に反
応させることを特徴とする白金グリーン錯体の製造方法
である。

本発明方法により得られる白金グリーン錯体は、ウリジ
ン、チミジン、ウラシル、チミン、２′−デオキシウリ
ジン、ウリジン−５′　−モノフォスフエイト、５−フ
ルオロウラシル又は１，２−ジアミノシクロヘキサンが
白金に配位した白金グリーン錯体であり、白金数は３〜
１８、特に６〜１５の場合に抗腫瘍活性が高い。

反応は適当な溶媒（水、メタノール、エタノール、第３
級ブタノールなどのアルコール系溶媒、ジメトキシエタ
ン、テトラヒドロフラン、ジオキサンなどのエーテル系
溶媒、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、
ヘキサメチレンホスホノアミド、酢酸、ピリジンなど、
またはそれらの混合溶媒）中、ｐＨ１〜８、好ましくは
ｐＨ２〜６で、０−１００″Ｃ１好ましくは１〜７５°
Ｃの温度下、３０分から２ケ月程度、好ましくは４５分
〜１ケ月で進行する。

一般式（１）の化合物と、上記塩基又は塩基誘導体との
反応モル比は１：ｌ〜１：４の範囲でよいが、一般には
１：ｌ付近が最適である。

銀塩としてはＡｇｚＳＯ４，ＡｇＮ０ｚ、　ＡｇＣｌＯ
４等反応によって銀塩化物を生成するものであればよい
が、好ましくは硫酸塩である。

用いられる過酸化水素は好ましくは０．１〜１０％過酸
化水素水である。

このようにして得られた白金グリーン錯体は、常法によ
り分離精製することができる。すなわち、反応混合物を
溶媒抽出、沈澱およびイオン交換、分配、ゲル濾過、ア
フィニティなどの各種クロマトグラフィーなどにより分
離することができる。

本発明方法においては、特にゲル濾過が好適であり、担
体として、セファデックス、セファアクリル、セファロ
ース、バイオゲル、トヨパール、フラクトゲル、セルロ
ファインなどいずれも使用することができる。これらの
操作は好ましくは窒素気流下など嫌気下で行う。

こうして分離された白金錯体は、それ自身の特異的な可
視部吸収スペクトルを用いて同定される。

たとえば、ウリジンを配位子とした白金グリーン錯体は
７３０ｒ＋ｎ＋領域に特徴的な吸収を有している。

紫外部は２６０〜２７０ｎｍ付近で強いπ→π“吸収を
示す。

赤外吸収スペクトル（Ｉ　Ｒ）でＣ＝Ｏ伸縮振動が１６
４５ｃｌ’にシフトしていること（ウリジンでは１６９
０ｃｍ”に現れる）、及び１３Ｃ−ｎｍｒ（核磁気共鳴
）スペクトルでウリジンのＣ−４及びＣ−２に対応する
カーボンが非常に大きな（前者で１１〜８　ｐｐＬ後者
で６〜４　ｐｐｍ）低磁場シフトを示すことがら、白金
（２価又は３価）にウリジンのＣ−４位あるいはＣ−２
位が配位していることを強く示唆している。このグリー
ン錯体に於いて、Ｐｔ　（ＩＩＩ）の常磁性共鳴スペク
トル（Ｅ　Ｓ　Ｒ）が観察された。このスペクトルは典
型的な軸対称パターンを示し、ｇ、、＝１．９９１．　
　ｇ工＝２．４１３であった。超微細構造の検討から、
不対電子は１つの白金に局在化はせず、いくつかの白金
に非局在化していることが判明した。

式（１）の化合物としてＹ＝ＮＨ＊、Ｘ・■の化合物を
用い、ウリジンと種々の条件下において反応させ白金グ
リーン錯体を合成し、その条件及び結果を表１に示した
。

（本頁以下余白）表１　白金ウリジングリーン錯体の合成（１）　　　　
　２　　　　Ａ　　　０．１　　２ｈｋ　　　４３．８
（２）　　　　　２　　　　Ａ　　　Ｏ，１４ｈｋ　　
　５１．０（３）　　　　２５　　　　Ａ　　　Ｏ，１
２４ｈｒ　　　４６．１（４）　　　　４０　　　　Ａ
　　　Ｏ，１３ｈｒ　　　３３．４（５）　　　　７５
　　　　Ａ　　　Ｏ，０１３ｈｒ（６）　　　　７５　
　　　Ａ　　　０．１　　４５ｍ１ｎ　　　７４．４（
７）（ブルー）６０　　　　　　　Ｂ　　　　　　Ｏ，
１２ｈｒ　　　　　　４０．７ａ　）　Ａ　：　Ａｇｚ
ＳＯａおよび１％過酸化水素水使用Ｂ：空気による酸化ｂ）基質濃度Ｃ）白金４核錯体、平均白金価数２．２５として計算こ
れらの化合物の各々の元素分析値は以下の通りである。

化合物（１）測定値：　Ｃ，１５，４７ｉ　　Ｈ，３，２９；　　Ｎ
、　９．３１　；Ｐｔ、”　４２．６＊　ａｓｈから求めた。以下ｐｔについては同様である
。

化合物（２）測定値：Ｃ，１５，３９；　　Ｈ，３，２５；　　Ｎ、
　９．７８；ｐｔ、　４１．８化合物（３）測定値：Ｃ，１６，７４ｉ　　Ｈ，３，１１；　　Ｎ、
　９．３７；Ｐｔ、　４０．５化合物（４）測定値：Ｃ，９，６７；　　Ｈ，２，７２；　　ＩＩＩ
、　９．２９；ｐｔ、　４７．７化合物（５）測定値：Ｃ，１６，３１；　Ｈ，２，６８；　Ｎ、　９
．３５；Ｐｔ、　４０．７化合物（６）測定値：Ｃ，１５，３７；　　Ｈ，３，０９；　　Ｎ、
　９．３８；Ｐｔ、　４１．５化合物（７）（ブルー）測定値：Ｃ＋　２０．５５；　　Ｈ，３，０２；　　Ｎ
、　８．２０；ｐｔ、　３８．０同様に化合物（１）　（Ｙ＝ＮＨｚ、　Ｘ＝Ｉ）及び表
２に示す基質を用いた他の化合物の合成条件と元素分析
値を以下に示す。

表２　　　白金グリーン類の合成８）化合物　　基　質　　　　温度　　時間　　収率ｂ′（
”Ｃ）　　　　　　　（χ）（８）　　　ウラシル　　　　　　　　　　　　　　　
３７　　　　　　３ｈ　　　　　３８．８（９）５−フ
ルオロウラシル　　　　　　　　　７５　　　　４５ｍ
１ｎ　　　　　３４．０ＧＯ）ｃ）ジ７ミ／シクｏへ＄
”Ｊ：ｚ　　　　　　　　　ｓｏ　　　　　　１　　ｄ
　　　　　６９．３（１１）”グアノシン　　　　　　
　　　　　　　　７５　　　　　　２ｄ　　　　　　４
７．９（Ｊ２Ｊ”４／’ｉｙ　　　　　　　　　　　　
　　　　７５　　　　　２　　ｄ　　　　　９４．３０
Ｊ　　ウリジン−５゛−モノフォスフエイト　　２５　
　　　　　１ｄ　　　　　　１３．９０４　　チミジン
　　　　　　　　　　　　　　　７５　　　　３０ｍ１
ｎ　　　　　２２．４ａ）基質濃度０．１Ｍ、　　１％
ｎｚｏ□を用いて合成したｂ）白金４核錯体、平均白金
価数２．２５として計算したＣ）黄色錯体ｄ）茶色錯体ｅ）無色錯体元素分析値（測定値）化合物（８）測定値：Ｃ，３，３７；　　Ｈ，２，０３；　　Ｎ、　
９．１５；Ｐｔ、　５８．２化合物（９）測定値：（：、　６．０９　　ｉ　　Ｈ，２，２２；　
　Ｎ、　１０．８４　　；Ｐｔ、　５２．９化合物Ｇｏ）測定値：Ｃ，２４，２３ｉ　　Ｈ，４，１１；　　Ｎ、
　８．０５；Ｐｔ、　３６．３化合物（ＩＩ）測定値：Ｃ，１９，９４；　　Ｈ，３，２９；　　Ｎ、
　１６．０６　　；Ｐｔ、　３２．１化合物０２１測定値：Ｃ，１９，３２；　　ｔｔ、　３．００；　　
Ｎ、　１４．１２　；Ｐｔ、　２９．２化合物Ｇ■ 測定値：Ｃ，１４，１８；　　Ｈ，２，８９；　　Ｎ、
　８．８６；Ｐｔ、　４９．４化合物０４）測定値：　Ｃ，１０，８１；　　Ｈ，２，８１；　　Ｎ
、　８．５１　；Ｐｔ、４８．１本発明製造方法で得られる白金グリーン錯体は、以下の
実験例から明らかな通り、強い抗腫瘍活性を示して制癌
剤として有効である。

実験例：　Ｌ１２１０に対する抗腫瘍活性本発明の白金
グリーン錯体の抗腫瘍活性は、Ｌ１２１０培養細胞を用
いて、その生育阻害率を求めることにより測定した。す
なわち、１ｄ当りｌＸｌ０’の細胞数をもつ液に、テス
トサンプル（最終濃度１μｇ／−あるいは１０μｇ／ｒ
Ｉｉ）を注入し、通常４日間、３７°Ｃで培養した。培
地にはＧＩＢＣＯＲＰＭＩ　１６４０゜カナマイシン及
び１０％ＦＢＳ（Ｆｅｔａｌ　Ｂｏｖｉｎ　Ｓｅｒｕｍ
）を含むものを用いた。コントロール（通常１．４×１
０６細胞数／−に増殖）との生育比から阻害率を算出し
た。それらの結果を表３に示す。

（本頁以下余白）表３　白金グリーン誘導体の生理活性３）（１）　　　
　　　５９．１　　　　　　９９．８（２）　　　　　
　５５．８　　　　　　９９．４（３）　　　　　　６
３．７　　　　　　９９．１（４）　　　　　　８０．
２　　　　　　９９．７（５）　　　　　　２６，４　
　　　　　９８．１（６）　　　　　　２５，５　　　
　　　９９．１（７）　　　　　　　　　　　　　　−
１，９（８）　　　　　　８６．３　　　　　１００（
９）　　　　　　４６．４　　　　　　９９．７（Ｉｎ
）　　　　　　３１．５　　　　　　９７．８（ＩＩ）
　　　　　　７，１　　　　　　２０．４面　　　　　
−０，７１，９０３）　　　　　　１２．５　　　　　　９９．００４
）　　　　　　５８．３　　　　　１００ａ）　　Ｌ　
Ｌ２１０培養細胞を用いた。

ｂ）活性試験に用いた試料の濃度。

表３より、白金グリーン体はＬ　１２１０に対して高い
活性を示すがブル一体は全く不活性であり、著しい相違
がみられた。さらに、詳細に検討してみると、グリーン
体の分子サイズと活性の相関が認められ、小さいサイズ
の分子の方が、大きなものより活性が高い。即ち、白金
数３〜１８のもの、特に６〜１５のものが高活性である
。

また、通常のＬ　１２１０細胞に比べ、約２倍の直径を
もつ巨大細胞の生成が見い出され、活性の高いグリーン
体の場合はど、巨大細胞の割合が高いことが判明した。

本発明製造方法によって得られる化合物を医薬として用
いる場合には、薬理学上許容され得る適宜の賦形剤、担
体、希釈剤などの医薬製剤用添加物と混合して、錠剤、
顆粒、粉末、カプセル荊、注射剤、軟膏および坐剤など
の形態で、経口または非経口的に投与することができる
。投与量は、腫瘍の種類、症状、投与形態、患者の年齢
、体重などにより変化し得るが、一般に有効投与量は０
．１〜５　、０００ｍｇ／　ｋｇ　、好ましくは０．１
〜１．０００ｍｇ／ｋｇ。

さらに好ましくは１〜５００ｍｇ／ｋｇであり、これを
１日１〜６回に分けて投与することができる。

〔実施例〕

以下、実施例により本発明を説明するが、本発明はこれ
らの実施例によって何ら限定されるものではない。

実施例シス−ショートジアンミン白金１４５■と硫酸銀９３．
５■に水３−を加え、さらにウリジン７３．２ｍｇ（０
，３ｍｍｏｌ）を加えた後、１％過酸化水素溶液３３６
μ２を加えた。アルゴン気流下４０″Ｃにて撹拌し、３
時間反応させた。得られた反応液を濾別し、濾液をゲル
濾過（担体：トヨパール）にて精製すると、緑色のウリ
ジンを配位子とする白金グリーン錯体５３．４■が得ら
れた。以上の操作は窒素あるいはアルゴン下で行った。

可視部吸収：λｍａｘ　７３０ｎｍＩＲ（ＫＢｒ）　　　：　１６４５（Ｃ＝Ｏ）、　８７
０．８１５．５８５（Ｐｔ−Ｎ）ｃｍ−’ 融　　　　点：　＞　３００°Ｃ円偏光二色性（ＣＤスペクトル）：〔θ〕（λＩＩＩａｘ　ｎｍ）Ｈ３７，８００（２７２
）。

−３７，８００（２１９）Ｉ３Ｃ−Ｎｍｒ（ＤｚＯ；　ＤＳＳ標準）：ｐｐｍ６３
．５．７２．１．７６．３．８６．９．９２．８゜１０
４．７．１４３．６．１６０．２．１５８．５゜１７９
．８及び１７６．７〔発明の効果〕本発明によれば、抗腫瘍剤として有用な白金グリーン錯
体を簡便に効率よく製造しうる。

特許出願人　工業技術院長　飯塚幸三

Claims

【特許請求の範囲】１、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＸはＣｌ又はＩであり、ＹはＮＨ＿３、Ｃ＿ｎ
＿３Ｈ＿２＿ｎ＿＋＿１ＮＨ＿２、（ｎ＝１〜１２）、
ＮＨ＿２−Ｃ＿ｍＨ＿２＿ｍ−ＮＨ＿２、（ｍ＝２〜１
０）、▲数式、化学式、表等があります▼を示す）で表わされる化合物とウリジン、チミジン、ウラシル、
チミン、２′−デオキシウリジン、ウリジン−５′−モ
ノフォスフェイト、５−フルオロウラシル、又は１，２
−ジアミノシクロヘキサンを銀塩及び過酸化水素の存在
下に反応させることを特徴とする、白金グリーン錯体の
製造方法。２、分子中の白金数が３〜１８であることを特徴とする
請求項１記載の製造方法。３、分子中の白金数が６〜１５であることを特徴とする
請求項２記載の製造方法。