FI116058B - Kolme ydintä käsittävät kationiset platinakompleksit, joilla on kasvaimenvastainen vaikutus, sekä niitä sisältävät farmaseuttiset koostumukset - Google Patents

Description

116058

Kolme ydintä käsittävät kationiset platinakompleksit, joilla on kasvaimen-vastainen vaikutus, sekä niitä sisältävät farmaseuttiset koostumukset Trinukleära katjoniska platinakomplex med tumormotverkande effekt och 5 farmaceutiska sammansättningar som innehäller sädana

Esillä olevan keksinnön kohteena ovat platinakompleksit, joilla on kasvainten vas-10 täinen vaikutus, menetelmät niiden valmistamiseksi sekä niitä sisältävät farmaseuttiset valmisteet.

Teknologinen tausta 15 Platinakompleksien kuten cisplatinan ja carboplatinan käyttö syövän kemiallisessa hoidossa on alalla hyvin vakiintunutta. Lukuisia platinakomplekseja kuten cisplati-naa käytetään kives-, munasaija-, pään ja kaulan karsinooman sekä keuhkojen pik-kusolukarsinooman hoitamiseksi. Cisplatinahoitoon voi kuitenkin liittyä vakavaa •. · munuaisiin kohdistuvaa toksisuutta. Toinen kliininen haitta on lääkeaineelle kehitty- .: : 20 vä ongelmallinen vastustuskyky, joka johtaa siihen, ettei kasvain reagoi hoidon aika-

t I

' · ‘ ’ na tähän aineeseen.

• » * • »

Yleisesti oletetaan, että platinakompleksien kuten cisplatinan biologinen aktiivisuus * * on seurausta niiden kovalenttisesta vuorovaikutuksesta DNA:n kanssa. Cisplatina , 25 aikaansaa erityisesti erilaisten DNA:n additiotuotteiden muodostumisen, mukaan lu- '!;; kien yksihampaiset additiotuotteet, kaksihampaiset additiotuotteet kuten GG tai AG, sekä juosteen sisäiset GNG-sillat [Reedijk et ai., Structure and Bonding, (1987), 67, * I l *· : 53 - 89]. Cisplatina johtaa myös vähäisemmässä määrin juosteen välisiin GG- » * » I » siltoihin sekä DNA-proteiini-siltoihin [Rahmouni et ai., Biochemistry, (1987) 26, 30 7229 - 7234]. Nämä DNA-vauriot johtavat konformaatiomuutoksiin, jotka heijastu-: vat DNA:n taipumisessa ja kierteen paikallisessa avautumisessa. Näiden DNA- 116058 2 vaurioiden on esitetty estävän useiden DNA-polymeraasien aktiivisuutta [Vallan et ai., Nucl. Acids Res.. (1988) 16, 4407 - 4418; Pinto et ai, Proc. Natl. Acad. Sei., (1985) 82, 4616 - 4619; sekä Gralla et 1., Cancer Res.. (1987) 47, 5092 - 5096]. Samoin ollaan osoitettu, että kahden vierekkäisen guaniiniemäksen välissä juosteiden 5 välinen silta estää RNA-polymeraasin toiminnan. [Lemaire et ai., Proc. Natl. Acad.

Sei. (1991) 88,1982 - 1985]. Näin ollen cisplatinan sytotoksiset vaikutukset liittyvät mitä todennäköisimmin näiden DNA-vaurioiden yhteisvaikutuksiin, eikä se siis johdu mistään yhdestä erityisestä vauriosta.

10 Alalla tunnetaan mono(platina)- ja bis(platina)-kompleksit, jotka sisältävät vastaavasti yhden tai kaksi platina-atomia (US-patenttijulkaisut 4 225 529, 4 250 189, 4 533 502, 4 565 884,4 571 335 sekä 4 797 393). Mono(platina)komplekseihin kuuluu esimerkiksi monomeerisia neliö-tasomaisia kloramiini-Pt(II)-yhdisteitä, jotka ovat nelikoordinoituja. Kloridi- ja ammoniakkiryhmien suhteellinen lukumäärä täl-15 laisissa yhdisteissä voi vaihdella, ja niinpä näitä yhdisteitä voidaan kuvata yleisellä kaavalla: [PtClm(NH3)4-m](2'm)+

Niinpä näiden yhdisteiden rakenne voi vaihdella muodosta [Pt(NH3)4]2+, missä m=0, •.: : muotoon PtCl/, missä m=4. Koska Cl korvautuu herkemmin kuin ammoniakki, niin : 20 kompleksit [PtCl2(NH3)2] ja [PtCl(NH3)3]Cl katsotaan vastaavasti bifunktionaali- • » •. ·. · seksi ja monofiinktionaaliseksi, joissa käsitteissä etuliitteillä "bi" ja "mono" tarkoite- • · · I * ‘ taan poistuvien ligandien lukumäärää. Kompleksien varaus saadaan ottamalla huo- • I * ’*·’·' mioon se, että Pt(II)-kationin muodollinen varaus on +2, jolloin varausten neutra- '·' ’ lointiin tarvittava varaus on -2. Esimerkiksi, kun m=0, neutraloituminen saadaan 25 aikaan kahdella koordinaatioalueen ulkopuolisella kloridianionilla.

• · *! * Sidoksen muodostumista platinan ja ammoniakin, joka on neutraali ligandi, välille • · • · · : voidaan kuvata tapahtumaksi, jossa NH3 luovuttaa elektroniparin Pt(II)-atomin tyh jille orbitaaleille. Niinpä tässä tilanteessa ei esiinny Pf.lle ja NH3-ryhmälle yhteisiä 30 elektroneja. Tällaisten yhteisten elektronien puuttumisen seurauksena neutraalien ligandien lukumäärä ei vaikuta kokonaisvaraukseen Pt-koordinaatioalueessa. Näin 116058 3 ollen [Pt(NH3)4]2+ on muodollisesti 2+ -kationi, jonka tapauksessa tarvitaan koor-dinoitumaton anioni tai anioneja tai vastaioneja, joiden negatiivinen nettovaraus on 2- tämän kompleksin neutraloimiseksi. Neutraloituminen voidaan saada aikaan esimerkiksi kahdella mononegatiivisesti varautuneella anionilla (esim. NO3", Cl", PF6", 5 BF4 sekä monokarboksylaateilla, joilla on yleinen kaava RCOO"), tai yhdellä dine-gatiivisesti varautuneella anionilla (esim. SO42, dikarboksylaatit, joilla on yleinen kaava [R(COO)2]2"). Niinpä näiden samojen periaatteiden mukaisesti [PtC^NI^] on neutraali kompleksi.

10 Tämä tarkastelu ei päde vain ammoniakkiin, vaan myös neutraaleihin ligandeihin kuten primääreihin tai sekundäärisiin amiineihin.

Huomattakoon, että anioniset ligandit kuten Cl" voivat olla joko koordinoituneesti sitoutuneita (eli ne muodostavat Pt-Cl-sidoksen), tai ne voivat toimia vasta-anionina 15 ilman kovalenttisen sidoksen muodostamistarvetta. Se täsmällinen muoto, jossa anionit kuten Cl" ovat läsnä tietyssä platinakompleksissa, riippuu sekä teoreettisista tekijöistä (kinetiikka suhteessa termodynaamisiin vaikutuksiin), että kompleksin valmistamiseksi käytetyistä varsinaisista synteesimenetelmätekijöistä (esim. reaktion : etenemisaste, happamuus, kyseessä olevan, reaktioseoksessa läsnäolevan anionin :.: : 20 kuten Cl pitoisuus). Tämä tarkastelu pätee myös muihin anionisiin ja neutraaleihin t 1 ' * ‘’ ligandeihin.

• * ·

Se tosiseikka, että monoplatinakompleksien kokonaisvaraus riippuu Pt(II)-metalliin *' ’ sitoutuneiden neutraalien ja anionisten ligandien suhteellisesta lukumäärästä, pätee , 25 myös yhtä hyvin monta ydintä käsittäviin komplekseihin [jotka sisältävät useampia '!;; kuin yhden Pt(II)-koordinaatioalueen] sekä sellaisiin Pt(IV):tä sisältäviin komplek-

• I

‘.' ’ seihin, joissa platinaryhmän hapetustila on 4+. Esimerkiksi kaksi ydintä käsittävät • · » ‘ · ’ · kompleksit, joissa kaksi ekvivalenttia Pt(II)-koordinaatioaluetta on liitetty toisiinsa t I t 4 » diamiinisillan avulla, voidaan esittää yleisellä kaavalla ..: I'‘ 30 [PtClm(NH3)3-m)2 (diamiini)]2(2m)+ * 1 M I t t 4 116058

Niinpä, kun m=2 ja kun läsnä on kaksi bifunktionaalista koordinaatioaluetta, niin yhdiste on neutraali. Sitä vastoin, kun m=l, niin läsnä on ainoastaan monofunktio-naalisia koordinaatioalueita ja platinaosuuden muodollinen varaus on +2, jonka vastapainona on oltava läsnä yksi tai useampia sellaisia vasta-anioneja, joiden nettova-5 raus on 2-,

Kirjallisuudessa on kuvattu jokin aika sitten esimerkkejä kolme ydintä käsittävistä platinakomplekseista (joita kutsutaan myös tri-platinakomplekseiksi) [Yun Qu et ai.,

Inorg. Chem., 32, 2591-2593 (1993)]. Nämä yhdisteet, joissa ligandeilla on cis-10 konfiguraatio, ovat neutraaleja komplekseja tai sellaisia komplekseja, joiden koko-naisvaraus on +2, ja ne voidaan esittää seuraavilla yleisillä kaavoilla:

Χ\ρ^Χ V X>^X

—R—NH^ R—NH^ '"NH, Γχ x NH* xv V st>t R—«C ''NHj-R—»C ''NH, * * ai :.; : missä X tarkoittaa labiilia ligandia (kuten klooriatomia) ja R tarkoittaa alkeeniketjua.

* * I · v. * Edellä esitetyn perusteella on ilmeistä, että niissä komplekseissa, joissa kokonaisva- • > · • *' 15 raus on +2, tämä varaus sijaitsee keskimmäisessä, neljä neutraalia ligandia käsittä- *' * ‘ * vässä platina-atomissa, kun taas kaksi reunimmaista platina-atomia ovat muodolli- v sesti neutraaleja ja, kuten edellä on määritelty, ne ovat bifunktionaalisia. Nämä kompleksit on kuvattu mahdollisiksi kasvaintenvastaisiksi aineiksi, mutta kokeellista * * * ’!; näyttöä ei ole esitetty.

• · ’r’ 20 • § » ’· : Keksinnön kuvaus * · .. i j * Esillä olevan keksinnön kohteena ovat tri-platinakompleksit, joissa kolme platina- » ’ · ‘ : atomia on liitetty toisiinsa diamiiniketjujen välityksellä, ja joissa keskimmäiseen 5 116058 platina-atomiin on koordinoitunut neljä neutraalia ligandia, kun taas kumpaankin kahteen reunimmaiseen platina-atomiin on koordinoitunut sekä kolme neutraalia ligandia että yksi ligandi, jonka varaus on -1.

5 Näin ollen esillä olevan keksinnön mukaiset yhdisteet eroavat nykyisen tekniikan tason mukaisista yhdisteistä siinä suhteessa, että niiden kokonaisvaraus on +4, ja erityisesti siinä suhteessa, että niissä keskimmäisen platina-atomin muodollinen varaus on +2 ja kahden reunimmaisen platina-atomin muodollinen varaus on kulloinkin +1.

10

Lisäksi, kuten edellä on osoitettu, kaksi reunimmaista platina-atomia ovat mono-funktionaalisi a.

Muuna erona alalla kuvattuihin, nykyisen tekniikan tason mukaisiin tri-platinakom-15 plekseihin on se, että esillä olevan keksinnön mukaisissa yhdisteissä ligandeilla on trans-konfiguraatio.

Keksinnön kohteena ovat erityisesti tri-platinakompleksit, joilla on kaava (I): r I4* L’i ct^ ^nh, tn, —«ay»— -(Ctyn-»i ΤΊΗ, ' »C o • · 20 • > » ;' '; missä n on alueella 2-7 oleva kokonaisluku, raja-arvot mukaan lukien; Z'm on anioni, joka on valittu kloridin, bromidin, jodidin, nitraatin ja sulfaatin (m=2) ; · joukosta; : m on kokonaisluku, jolla on arvo 1 tai 2.

25 ....: Edullisia kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ovat ne, joissa n on kokonaisluku 6.

116058 6

Erityisen edullisia kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ovat ne, joissa n on kokonaisluku 6, Z"m on kloridi- tai nitraattianioni ja m on 1.

Esillä olevan keksinnön kohteena ovat myös menetelmät kaavan (I) mukaisten yh-5 disteiden valmistamiseksi.

Menetelmä kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi käsittää välituotteen (III) synteesin lähtemällä trans-platinasta, joka on aktivoitu edeltäkäsin korvaamalla klooriatomi dimetyyliformamidilla, ja jonka annetaan reagoida kaavan (II) mukaisen 10 amiinin kanssa seuraavan kaavion mukaisesti: a lnfr, f e, 1 * *** \ ^mh, *| · r ö J ny trans-platina (II) missä P on sopiva tavanomainen suojaava ryhmä kuten tert.-butoksikarbonyyli tai p-15 metoksibentsyylioksikarbonyyli ja n on edellä esitetyn määritelmän mukainen.

Kaavan (UI) mukaisesta välituotteesta saadaan suojaavan ryhmän P irrottamisen :* ·' jälkeen kaavan (IV) mukainen välituote: Γ l* [ΝΗΤ^^-,ανπ-*,] ««* m • * t • j ’ 20 missä n on edellä esitetyn määritelmän mukainen, Q m on vastaioni, joka riippuu • · · niistä olosuhteista, joissa ryhmä P irrotetaan. Esimerkiksi, mikäli P on tert.-butoksi-,:, karbonyyliryhmä, niin Q m voi olla kloridi- tai trifluoriasetaattianioni.

. ‘ . Sitten välituote (IV) muunnetaan välituotteeksi (V): r r nK SNH,—(Ctyn—NH, 2N0* m

25 L J

7 116058 missä n on edellä esitetyn määritelmän mukainen, Q'm -ionin ja nitraatti-ionin välisellä vaihtoreaktiolla. Siinä tapauksessa, että Q'm on kloridianioni, tämä vaihto-reaktio voidaan suorittaa hopeanitraatin läsnäollessa ja liuottimissa kuten vedessä tai alkoholeissa (metanoli, etanoli).

5 Tämän jälkeen välituote (V) saatetaan reagoimaan trans-platinan kanssa, jota trans-platinaa käytetään puoli moolia ja joka on aktivoitu edeltäkäsin korvaamalla molemmat klooriatomit kahdella dimetyyliformamidimolekyylillä, jolloin saadaan kaavan (I) mukaisia yhdisteitä: V* 1* ί~ν* r

****» NH$ (CHj)n—NH, 0,5 [ ''‘(ojomfJ

10 L J -►

(V) NaOH

r l4* _^ /NH, NH, /NH,-(Ctyn-»WNH,

NhC^NHj-(CHJfl-»C "H, ^ missä Zm on nitraattianioni. Sitten nämä yhdisteet voidaan muuntaa kaavan (I) mu-; ’ j ‘; 15 kaisiksi yhdisteiksi, joissa Z‘m on halidi tai sulfaatti, käyttäen tavanomaisia, kirjalli- • ; ’: suudessa laajasti kuvattuja vaihtoreaktioita, joista voidaan mainita käsittely alkali- tai maa-alkalimetallihalidilla tai -sulfaatilla. Vaihtoehtoisesti, kaavan (I) mukaisia yh-: * : disteitä, joissa Z'm on sulfaattianioni, voidaan saada vastaavista kaavan (I) mukaisista yhdisteistä, joissa Z"m on halidi, käsittelemällä hopeasulfaatilla.

20

Edullinen menetelmä niiden kaavan (I) mukaisten yhdisteiden, joissa Z‘m on kloridi, valmistamiseksi kaavan (I) mukaisista yhdisteistä (I), joissa Z'm on nitraatti, on reak-' · ·.1 tio kloorivetyhapon molaarisen ylimäärän kanssa alueella 0 - 50 °C olevassa lämpö- ' ‘ ·' tilassa.

* > ·:··: 25 ·;· Toinen menetelmä kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi käsittää ensin •: * ·: vaiheen, jossa kaksi moolia kaavan (II) mukaista amiinia saatetaan reagoimaan 8 116058 trans-platinan kanssa, joka on aktivoitu edeltäkäsin korvaamalla molemmat kloo-riatomit kahdella dimetyyliformamidimolekyylillä, jolloin saadaan kaavan (VI) mukaista välituotetta: NH, -{CHJn-NH-P 2* ivi) P-NH—(CH,K»-NH, VNH, 2N0* 5 missä P on edellä esitetyn määritelmän mukainen. P-ryhmien irrotus johtaa kaavan (VII) mukaiseen välituotteeseen, jossa Q'm on edellä esitetyn määritelmän mukainen, ja joka muunnetaan tämän jälkeen kaavan (VIII) mukaiseksi välituotteeksi: ^NH,-(Cign-NH, * NH,-mjn-* 1 m NH, ^NHj-(CH^n-NH, ** -► NH,-ICSyn-4NO,*

10 M

• « · * I · * * I · : V; Tämä muuntaminen toteutetaan Q'm -ionin ja nitraatti-ionin välisellä vaihtoreaktiolla.

Siinä tapauksessa, että Q'm on kloridianioni, tämä vaihtoreaktio voidaan suorittaa : : hopeanitraatin läsnäollessa ja liuottimissa kuten vedessä tai alkoholeissa (metanoli, ·*,·’: 15 etanoli).

..! Γ Sitten tämä välituote (VIII) saatetaan reagoimaan transplatinan kanssa, jota käyte- tään kaksi moolia, ja joka on aktivoitu edeltäkäsin korvaamalla klooriatomi dimetyy-: ’ \: liformamidilla, jolloin saadaan kaavan (I) mukaisia yhdisteitä: r ~\** <V s**·-W-.«ni" <oy«—1*0*, »Oaj w 9 116058 missä Z'm on nitraattianioni. Sitten nämä yhdisteet voidaan muuntaa kaavan (I) mukaisiksi yhdisteiksi, joissa Z m on halidi tai sulfaatti, käyttäen tavanomaisia, kirjallisuudessa laajasti kuvattuja vaihtoreaktioita, joista voidaan mainita käsittely alkali- tai 5 maa-alkalimetallihalidilla tai -sulfaatilla. Vaihtoehtoisesti, kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa Z'm on sulfaattianioni, voidaan saada vastaavista kaavan (I) mukaisista yhdisteistä, joissa Z'm on halidi, käsittelemällä hopeasulfaatilla.

Edullinen menetelmä niiden kaavan (I) mukaisten yhdisteiden, joissa Z m on kloridi, 10 valmistamiseksi sellaisista kaavan (I) mukaisista yhdisteistä (I), joissa Z'm on nitraatti, on reaktio kloorivetyhapon molaarisen ylimäärän kanssa alueella 0-50 °C olevassa lämpötilassa.

Mahdollisista menetelmistä P-ryhmien poistamiseksi voidaan mainita käsittely epä-15 orgaanisella hapolla (kuten kloorivetyhapon vesi-, alkoholi- tai eetteriliuoksella) tai orgaanisella hapolla (kuten trifluorietikkahapolla). Kun P on tert.-butoksikarbo-nyyliryhmä, niin edulliset olosuhteet sen irrottamiseksi ovat ne, joissa käytetään klooorivetyä alkoholiliuoksessa. Kuten edellä on mainittu, tässä tapauksessa vastaio-'·' * ni Qm on kloridi-ioni.

:·: : 20

Keksinnön mukaiset yhdisteet liukenevat yleensä hyvin veteen, fysiologisiin sekä * ; ’ veteen sekoittuviin liuottimiin.

Keksinnön mukaisilla yhdisteillä ei ole ainoastaan selvää kasvainten vastaista vaiku-. 25 tusta, vaan niillä on myös vähäinen myrkyllisyys, joten niiden terapeuttinen indeksi ’i i on erityisen edullinen.

’ * *; Lisäksi esillä olevan keksinnön mukaisten tri-platinakompleksien suuren vesiliukoi suuden ansiosta ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti ja suun kautta annettavien far-...: 30 maseuttisten muotojen valmistus on helppoa.

ίο 116058

Keksinnön mukaisten yhdisteiden sytotoksinen vaikutus testattiin in vitro erilaisilla kasvainsolulinjoilla, mukaan lukien hiiren leukemia L-1210, ihmisen munasarjan karsinooma A2780 tai vastaavilla cisplatinalle vastustuskykyisillä alalinjoilla L-1210/CDDP ja A2780/CDDP. Solulinjalla A2780 toteutettu koe on vakiintunut me-5 netelmä, jolla arvioidaan platinakompleksien soveltuvuutta kasvainten vastaisiksi aineiksi. Lisäksi keksinnön mukaiset yhdisteet testattiin in vivo -kokeessa, jossa L-1210-kasvainsoluja siirretään hiiren vatsaontelon sisään ja yhdistettä annetaan vatsaontelon sisäisesti sen jälkeen, kun kasvainsolujen siirtämisestä on kulunut 24, 120 ja 216 tuntia. Esillä olevan keksinnön mukaisilla yhdisteillä oli voimakas kas-10 vainten vastainen vaikutus edellä kuvatuissa kokeellisissa malleissa.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet kykenevät saamaan aikaan näiden kasvaimien häviämistä, kun niitä annetaan ihmisille ja eläimille, joissa esiintyviä kasvaimia voi- Λ daan hoitaa platinakomplekseilla, alueella 0,1 mg - 1,2 g /m kehon pinta-alaa olevi-15 na annoksina.

Näin ollen esillä olevan keksinnön toisena tavoitteena on kaavan (I) mukaisten yhdisteiden käyttö kasvaimien hoitoa ajatellen käyttökelpoisen lääkkeen valmistami- i i t ' seksi.

: 20 • · ·

Kliiniset alan asiantuntijat kykenevät määrittämään keksinnön mukaisten yhdistei- * ;* den tehokkaat annokset tavanomaisia menetelmiä käyttäen. Toisaalta eri lajeihin ;;; kuuluvissa ja eri kokoisissa eläimissä ja toisaalta ihmisissä käytettyjen annosten (yk- • * · 2 sikössä mg/m kehon pinta-alaa) suhteita toisiinsa on kuvattu julkaisussa Freirech, . 25 E.J. et ai., Quantitative Comparison of Toxicity of Anticancer Agents in Mouse, Rat, " I ', Hamster, Dog, Monkey and Man (syövänvastaisten aineiden toksisuuden kvantitatii vinen vertaaminen hiiren, rotan, hamsterin, koiran, apinan ja ihmisen tapauksessa), ; Cancer Chemother. Rep., 50, N. 4, 219 - 244 (1966).

11 116058

Kuitenkin tavallisesti potilaalle annetaan tätä kompleksia annoksena, jonka suuruus on 0,1 - 1200 mg painokiloa kohden, tämän annostuksen vaihdellessa erilaisista, kliinisille alan asiantuntijoille hyvin tunnetuista tekijöistä riippuen.

5 Joskus saattaa osoittautua edulliseksi antaa esillä olevan keksinnön mukaisia pla-tinakomplekseja yhdessä yhden tai useamman muun sellaisen aineen kanssa, jotka aineet voimistaa kasvaimen vastaista vaikutusta tai lievittävät platinakompleksien ei-toivottuja sivuvaikutuksia.

10 Esillä olevan keksinnön mukaisia platinakomplekseja voidaan esimerkiksi annostella yhdessä pelkistetyn glutationin kanssa, kuten patenttijulkaisuissa GB 2174905 sekä US 4 871 528 on esitetty.

Lisäksi saattaa olla edullista antaa esillä olevan keksinnön mukaisia platinakomplek-15 seja yhdessä muiden sellaisten platinakompleksien kanssa, joilla komplekseilla on kasvainten vastaista vaikutusta.

Edelleen esillä olevan keksinnön muuna tavoitteena on farmaseuttinen koostumus, v · joka sisältää vähintään yhtä kaavan (I) mukaista yhdistettä yhdistettynä sellaiseen :.: : 20 platinakompleksiin, jolla on kasvainten vastaista vaikutusta.

* · · : ·' Potilaissa esiintyvät kasvaimet, joita voidaan hoitaa esillä olevan keksinnön mukai- • * · silla platinakomplekseilla, ovat sellaisia kasvaimia, joiden tiedetään reagoivan cis-**’ platinahoitoon. Esillä olevan keksinnön mukaiset kompleksit ovat myös tehokkaita 25 eräitä cisplatinalle resistenttejä kasvaimia vastaan.

• · ·

Yleisemmin, keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää niiden samojen patolo- • · ‘ · ” gisten tilojen hoitoon, joita tiloja hoidetaan myös cisplatinalla. Esimerkkeinä voidaan mainita kasvaimien hoito, herkistäminen sädehoidolle tai sädehoidon tehostus 30 [Douple et ai., Cisplatin Current Status and Developments, toim. A.W. Prestayk et ’*’ * ai., Academic Press, 125 (1980); Douple et ai., Platinum Metals Res., 29, 118 12 116058 (1985)] sekä loisten aiheuttamien sairauksien kuten afrikkalaisen unisairauden (African Sleeping Sickness) hoito [Farrell et ai., Biochem. Pharmacol., 33,961 (1984)].

Hoitavaa annostusta voidaan vaihdella kliinisille alan asiantuntijoille hyvin tutulla 5 tavalla riippuen käsiteltävän kasvaimen tyypistä sekä potilaan tilasta.

Edelleen esillä olevan keksinnön muuna tavoitteena ovat farmaseuttiset koostumukset, jotka sisältävät terapeuttisesti vaikuttavan määrän vähintään yhtä kaavan (I) mukaista yhdistettä sekoitettuna tavanomaisiin kantajiin ja täyteaineisiin.

10

Esillä olevan keksinnön mukaisia yhdisteitä annetaan edullisesti steriileinä vesiliuoksina, jotka sisältävät valinnaisesti natriumkloridia sopivana pitoisuutena (0,1-0,9 mg/ml). Näitä liuoksia annetaan edullisesti laskimon tai valtimon sisäisesti, vaikka erikoistapauksissa voidaan myös käyttää muita annostelutapoja.

15

Ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti annettavista farmaseuttisista koostumuksista voidaan mainita edellä määritellyt steriilit suolaliuokset tai steriilit jauheet, joista valmistetaan liuoksia välittömästi ennen käyttöä, sekä lihaksen sisään tai vatsa-’ _ · ' ontelon sisään annettavat öljymäiset valmisteet.

20 •, ·. · Muita käyttökelpoisia farmaseuttisia koostumuksia voivat olla siirapit tai samankal- : ’. * täiset nestemäiset muodot sekä kiinteät muodot kuten tabletit, kapselit ja muut vas- *.:.' taavat.

♦ « * 25 Esillä olevan keksinnön mukaiset farmaseuttiset koostumukset valmistetaan tunne-·;;; tuilla menetelmillä, joita on kuvattu esimerkiksi teoksessa Remington's Pharma- ’ 1 · ceutical Sciences Handbook, XVII laitos., Mack Pub., N. Y., USA.

• I

‘ ’ Seuraavat esimerkit havainnollistavat keksintöä edelleen.

30 13 116058

Valmistus 1 N-BOC-heksaanidiamiini valmistetaan lähtien sen hydrokloridisuolasta, joka on kaupallinen tuote.

5 2,1 g N-BOC-heksaanidiamiini-hydrokloridia liuotetaan dietyylieetteriin (20 ml) ja sitä käsitellään samalla sekoittaen 16 ml:lla natriumhydroksidin IN vesiliuosta.

Sitten orgaaninen kerros pestään suolaliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja liuo-10 tin haihdutetaan pois alennetussa paineessa, jolloin saadaan N-BOC-heksaanidiamiinia vapaana emäksenä, sen saannon ollessa teoreettinen.

Esimerkki 1 15 Yhdisteen t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH-B0C]+N03· valmistus 2 g trans-platinaa liuotetaan 133 ml:aan vedetöntä dimetyyliformamidia (DMF), ja tähän liuokseen lisätään 1,13 g hopeanitraattia yhtenä eränä. Reaktioseosta sekoite-v : taan ja se suojataan valolta 18 tunnin ajan. Tämän jälkeen saostunut hopeakloridi 1: 20 poistetaan suodattamalla ja kirkas suodos jäähdytetään -20 °C:n lämpötilaan ja siihen t « · lisätään liuos, joka sisältää N-BOC-l,6-heksaanidiamiinia (1,36 g) 40 mlrssa vede- • · · • * · * ; * töntä DMF:ia. Tämä lisäys kestää noin 30 minuuttia. Seosta sekoitetaan -20 °C:n * * ·

I I I

! I; lämpötilassa 3 tuntia ja yhden tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Sitten liuotin pois- • « · * * · tetaan haihduttamalla alennetussa paineessa, pitäen liuoksen lämpötila 40 °C ala-(25 puolella, ja jäännös sekoitetaan 200 ml:aan etyylieetteriä, seosta sekoitetaan 20 mi-, · ·, nuuttia ja sitten se suodatetaan. Tuloksena saatu kiintoaine liuotetaan 200 ml.aan , metanolia ja liuosta sekoitetaan 15 tuntia mahdollisten trans-platinajäämien saosta- ! miseksi. Erottunut trans-platina poistetaan suodattamalla ja liuosta käsitellään aktii- • vihiilellä (1 g), se suodatetaan jälleen ja lopulta liuotin haihdutetaan pois alennetussa » t * • · · 30 paineessa. Jäännös puhdistetaan suspendoimalla se asetoniin (100 ml) ja sekoit tamalla 30 minuuttia. Suodattamisen jälkeen saadaan 2,3 g tuotetta.

14 116058

Alkuaineanalyysi (laskettu/todettu, %): C 24,33/24,05; H 5,57/5,64; N 12,90/12,84; Cl 6,53/6,40; Pt 35,93/36,06 195Pt-NMR liuotti messa DMFM7-DMF: -2433 ppm.

5

Esimerkki 2

Yhdisteen t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6^H3]2+2N03· valmistus 10 Liuos, joka sisältää 1,5 g yhdistettä t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH-B0C]+N03 150 ml:ssa metanolia, lisätään 21 ml kloorivedyn 6,5 M etanoliliuosta. Reaktioseosta sekoitetaan 24 tuntia huoneen lämpötilassa, sitten kiintoaine suodatetaan, pestään suodattimen päällä metanolilla ja etyylieetterillä ja lopuksi se kuivataan.

15 Tuloksena saatu kiintoaine liuotetaan 180 ml:aan metanolia ja siihen lisätään liuos, joka sisältää hopeanitraattia (0,825 g) 45 mkssa metanolia. Reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, hopeakloridi poistetaan suodattamalla ja kirkas suodos haihdutetaan kuiviin. Jäännös sekoitetaan asetoniin, seosta sekoitetaan 15 minuuttia, suodatetaan ja kuivataan, jolloin saadaan 0,925 g tuotetta.

: 20 ' ·' · ‘ Alkuaineanalyysi (laskettu/todettu, %): I · · • C 14,65/14,19; H 4,71/4,66; N 14,24/16,62; Cl 7,21/6,91; Pt 39,67/36,10 » · · ’;;;" 19SPt-NMR liuottimessa DMF/d7-DMF: -2433 ppm.

I I · 25 Esimerkki 3 » I ·

> M I

’ ‘‘ ’ Yhdisteen t,t,t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2- ’· Ί PtCl(NH3)2]4+4N03'valmistus 30 61 mg trans-platinaa suspendoidaan 2 ml:aan vedetöntä dimetyyliformamidia ja siihen lisätään 69,1 mg hopeanitraattia. Reaktioseosta sekoitetaan 65 °C:ssa 6 tuntia, 15 116058 sitten se jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja hopeakloridisakka poistetaan suodattamalla. Tähän suodokseen lisätään liuos, joka sisältää yhdistettä t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH3]2+2N03' (200 mg) 2 ml:ssa dimetyyliformamidia, sekä 0,4 ml natriumhydroksidin IN metanoliliuosta. Tuloksena saatua reaktioseosta pide-5 tään huoneen lämpötilassa yön yli, sitten se laimennetaan etyylieetterillä, kunnes kiintoaine eroaa, ja tämä kiintoaine suodatetaan, pestään etyylieetterillä, sitten asetonilla ja lopuksi se kuivataan, jolloin saadaan 220 mg tuotetta.

Tämä tuote suspendoidaan DMF:iin (5 ml) ja suspensiota sekoitetaan 10 minuuttia, 10 sitten tuote otetaan talteen suodattamalla ja se suspendoidaan uudestaan asetoniin (10 ml), ja suspensiota sekoitetaan vielä 30 minuuttia. Suodattamisen ja kuivaamisen jälkeen saadaan 150 mg tuotetta.

Alkuaineanalyysi (laskettu/todettu, %): 15 C 11,63/11,70; H 4,07/3,95; N 15,83/15,20; Cl 5,71/4,60; Pt 47,24/47,10 195Pt-NMR NaCl:n 0,3 % vesiliuoksessa: -2416 ppm; -2667 ppm.

!H-NMR (200 MHz) D20:ssa: 1,35 ppm (m, 8H); 1,68 ppm (m, 8H); 2,65 ppm (leveä m, 8H).

·· > « • » i • » · : 20 Esimerkki4 « · • · · • · « · · • Yhdisteen t-[BOC-NH-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH-BOC]2+2N03 # ' ’ · * ’ valmistus

• ( I

, 25 Suspensioon, joka sisältää 1,028 g trans-platinaa 35 ml:ssa vedetöntä dimetyylifor- 7!! mamidia, lisätään 1,16 g hopeanitraattia. Reaktioseos lämmitetään 60 °C:n lämpöti- t · laan valolta suojattuna 5 tunniksi, sitten hopeakloridisakka poistetaan suodattamalla.

’ '; Tämän jälkeen lisätään liuos, joka sisältää N-BOC-l,6-heksaanidiamiinia (1,48 g) 5 ml :ssa dimetyyliformamidia, ja tuloksena olevaa reaktioseosta pidetään huoneen -.; 30 lämpötilassa yön yli. Seos laimennetaan 300 ml:lla etyylieetteriä, jolloin valkoista kiintoainetta erottuu, tämä kiintoaine suodatetaan, se liuotetaan uudestaan metanoliin 16 116058 ja suodatetaan 0,2 mikronin Millex-suodattimen läpi mahdollisten hopeasuolajäämi-en poistamiseksi. Sitten metanoliliuos laimennetaan etyylieetterillä. Tällöin kiteytyy valkoista kiintoainetta, joka suodatetaan ja kuivataan, jolloin saadaan 1,94 g tuotetta. Alkuaineanalyysi (laskettu/todettu, %): 5 C 33,63/33,44; H 6,93/7,00; N 14,26/14,30; Cl 7,21/6,91; Pt 24,83/25,06 195Pt-NMR liuottimessa DMF/d7-DMF: -2687 ppm.

Esimerkki 5 10 Yhdisteen t-[NH3-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH3]4+ 4C1 valmistus 500 mg yhdistettä t-[BOC-NH-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH-B(X:]2+2N<>f liuotetaan 50 mkaan metanolia ja tähän liuokseen lisätään 5 ml kloorivedyn 6,5 M etanoliliuosta. Reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 42 tuntia, sitten kiin-15 toaine suodatetaan ja pestään etyylieetterillä, jolloin saadaan 340 g tuotetta.

Alkuaineanalyysi (laskettu/todettu, %): C 23,81/23,14; H 6,66/6,73; N 13,88/13,51; Cl 23,42/22,03; Pt 32,23/31,68.

195Pt-NMR vedessä: -2674 ppm.

i : : 20 Esimerkki 6

• I

It * ; Yhdisteen t,t,t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2- i

PtCl(NH3)2]4+ 4N03' valmistus » 25 200 g yhdistettä t-[NH3-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH]4+ Cl' liuotetaan 10

' * I

;; ml:aan tislattua vettä ja sitä käsitellään 224 mg:lla hopeanitraattia. Tuloksena olevaa i suspensiota pidetään huoneen lämpötilassa ja sitä sekoitetaan 10 minuuttia, sitten * t 1 t • ; hopeakloridisakka poistetaan suodattamalla. Suodos väkevöidään lähes kuiviin, sit- , * ten se laimennetaan asetonilla. Tällöin erottuu valkoista kiintoainetta, joka suodate- 30 taan, pestään asetonilla ja kuivataan, jolloin saadaan 204 mg yhdistettä t '; : t-[NH3-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH3]4+ 4N03'.

17 116058

Liuosta, joka sisältää 172 mg trans-platinaa 21,5 ml:ssa vedetöntä dimetyyliforma-midia, käsitellään 98 mg:lla hopeanitraattia. Tuloksena saatua suspensiota sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli valolta suojattuna, sitten hopeakloridisakka pois-5 tetaan suodattamalla. Liuosta, joka sisältää 204 mg yhdistettä t-[NH3-(CH2)ö-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH3]4+ 4N03~ 7 ml:ssa dimetyyliformamidia, käsitellään 0,57 ml:11a natriumhydroksidin IN metanoliliuosta, sitten tämä liuos lisätään huoneen lämpötilassa edellä saatuun suodokseen, joka sisältää dimetyyliformamidilla aktivoitua trans-platinaa. Kuuden tunnin kuluttua liuos suodatetaan 0,2 mikronin Millex-10 suodattimen läpi mahdollisten hopeasuolajäämien poistamiseksi, sitten suodos laimennetaan etyylieetterillä. Saostunut kiintoaine erotetaan suodattamalla, jolloin saatiin 326 mg tuotetta.

195Pt-NMR NaCl:n 0,3 % vesiliuoksessa: -2416 ppm; -2667 ppm.

!H-NMR (200 MHz) D20:ssa: 1,35 ppm (m, 8H); 1,68 ppm (m, 8H); 2,65 ppm (le-15 veäm, 8H).

Esimerkki 7 v: ‘: Yhdisteen t,t,t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2- 20 PtCl(NH3)2]4+ 4C1 valmistus • · 326 mg yhdistettä t,t,t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2- > •.:,: PtCl(NH3)2]4+ 4NO3' liuotetaan suolaliuokseen (0,9 % natriumkloridi), sitten tämä ’ ·' * liuos suodatetaan 0,2 mikronin Millex-suodattimen läpi ja sitä väkevöidään niin kau- 25 an, kunnes erottuu valkoista kiintoainetta, joka suodatetaan, jolloin saadaan 187 mg ;;; tuotetta.

•; · Alkuaineanalyysi (laskettu/todettu, %): C 12,73/12,60; H 4,45/4,45; N 12,37/12,85; Cl 18,78/14,77; Pt 51,68/48,33.

* ' 195Pt-NMR NaChn 0,3 % vesiliuoksessa:-2416 ppm;-2671 ppm.

_ >:' 30 ‘H-NMR (200 MHz) D20:ssa: 1,40 ppm (m, 8H); 1,70 ppm (m, 8H); 2,70 ppm (le- ': * ’: veä m, 8H).

18 116058

Esimerkki 8

Seuraavat trans-tri-platinakompleksit saadaan menettelemällä esimerkeissä 1, 2 ja 3 kuvatulla tavalla tai menettelemällä valinnaisesti esimerkeissä 4, 5 ja 6 kuvatulla 5 tavalla ja lähtemällä sopivalla tavalla monosuojatusta diamiinista: [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03·; [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03·; [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03'; [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03·; 10 [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)7-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)7-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03'.

195Pt-NMR NaCl:n 0,3 % vesiliuoksessa: -2422 ppm; -2670 ppm.

Esimerkki 9 15 Seuraavat yhdisteet valmistetaan menettelemällä esimerkissä 7 kuvatulla tavalla ja lähtemällä esimerkin 8 mukaisesti saaduista trans-tri-platina-komplekseista: [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2PtCl(NH3)2]4+4Cr; [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2PtCl(NH3)2]4+4Cl·; 0': [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03·; I.: *: 20 [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2PtCl(NH3)2]4+4Cr; ::** [PtCl(NH3)2H2N-(CH2)7-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)7-NH2PtCl(NH3)2]4+4Cr.

i ‘H-NMR (200 MHz) D20:ssa: 1,39 ppm (s, 12H); 1,68 ppm (br m, 8H); 2,67 ppm *·:·* (brm, 8H).

« · ·

I · I

25 Esimerkki 10 ‘ ‘' Yhdisteen t,t,t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2- • * ;.' * i PtCl(NH3)2]4+ 4CP valmistus • « * ► » 30 Suspensio, joka sisälsi 1,3 g yhdistettä t,t,t-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-PtCl(NH3)2]4+ 4N03‘ kloorivetyhapon 0,1 N vesiliuok- 19 116058 sessa (65 ml), valmistettiin typpi-ilmakehässä, ja sitten yhdiste liuotettiin 54 °C:ssa.

Sen jälkeen, kun liuosta oli pidetty yhden tunnin ajan tässä lämpötilassa, se jäähdytettiin 20 °C:n lämpötilaan ja suodatettiin lasikuitusuodattimella mekaanisten epäpuhtauksien poistamiseksi: kirkkaaseen liuokseen lisättiin 7,8 ml kloorivetyhapon 5 4N vesiliuosta ja saostuminen alkoi muutaman minuutin kuluttua. Suspensiota sekoitettiin 20 °C:ssa 30 minuuttia, sitten vielä 30 minuuttia 10 °C:ssa. Sakka suodatettiin Buchner-suppilolla ja se pestiin kloorivetyhapon 0,4 N vesiliuoksella (0,5 ml) ja asetonilla. Talteen saatua valkoista sakkaa kuivattiin yön yli tyhjössä, 40°C:ssa, jolloin saatiin 1,03 g tuotetta.

10 Alkuaineanalyysi (laskettu/todettu, %) x 2 H2O: C 12,33/12,34; H 4,65/4,73; N 11,98/12,05; Cl 18,21/17,55; Pt 50,07/49,97.

• « * · • » · > · · » * » • »

Claims (19)

116058

1. Yhdisteet, joilla on yleinen kaava (I) Γ "14* /NH, NH, ^NH,—W—m, .m, mz<* Μζ’^ΝΗΐ-»C» |Q 5 missä: n on alueella 2-7 oleva kokonaisluku, raja-arvot mukaan lukien; Z'm on anioni, joka on valittu kloridin, bromidin, jodidin, nitraatin ja sulfaatin joukosta; m on kokonaisluku, jolla on arvo 1 tai 2. 10

2. Patenttivaatimuksen 1 mukaiset yhdisteet, tunnettu siitä, että n on kokonaisluku 6.

3. Patenttivaatimusten 1 ja 2 mukaiset yhdisteet, tunnettu siitä, että Z on valittu 15 kloridin ja nitraatin joukosta ja m on 1.

·'. 4. Jonkin edellä esitetyn patenttivaatimuksen mukainen yhdiste, tunnettu siitä, . ·, ·. että se on valittu seuraavista yhdisteistä: ; ·. ·. PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2PtCl(NH3)2]4+ 4N03‘;

20 PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2PtCl(NH3)2]4+4Cr; .' i *. PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH2PtCl(NH3)2]4+ 2S042'. ·;· 5. Menetelmä patenttivaatimusten 1-4 mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, tunnettu siitä, että se käsittää vaiheet, joissa: .·. ; 25 a) trans-platina aktivoidaan korvaamalla klooriatomi dimetyyliformamidilla ho- ....; peanitraatin läsnäollessa; b) tämä aktivoitu välituote saatetaan reagoimaan kaavan (II) ;;;\ H2N-(CH2)n-NH-p oi) 116058 mukaisen diamiinin kanssa, jossa kaavassa n on alueella 2-7 oleva kokonaisluku, raja-arvot mukaan lukien, P on sopiva tavanomainen suojaava ryhmä, jolloin tämän suojaavan ryhmän irrottamisen jälkeen saadaan kaavan (IV) mukainen välituote: ‘V r "MH.—(CHJO—J "«· «

5. J missä n on edellä esitetyn määritelmän mukainen, m on kokonaisluku 1 tai 2 ja Q m on vastaioni, joka riippuu P-ryhmän irrottamiseen käytetyistä olosuhteista; c) Q'm -anionin ja NO3" -anionin välillä toteutetaan vaihtoreaktio sellaisessa liuotti-messa kuten vedessä tai alkoholissa, jolloin saadaan kaavan (V) mukainen väli- 10 tuote aSp^NH, jfc •n P’NNHt—(Oyn-NH, 2N0* M missä n on edellä esitetyn määritelmän mukainen; d) kaavan (V) mukainen välituote saatetaan reagoimaan trans-platinan kanssa, joka trans-platina on aktivoitu edeltäkäsin korvaamalla kaksi klooriatomia kahdella : 15 dimetyyliformamidimolekyylillä hopeanitraatin ollessa läsnä moolisuhteessa tl· · . ·. *. 1:0,5, jolloin saadaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa kaavassa n on edellä j V. esitetyn määritelmän mukainen, m on 1 ja Z~m on nitraattianioni; ja toivottaessa : e) tämän nitraattianionin ja toisen Zm -anionin välillä toteutetaan vaihtoreaktio, symbolin Z'm ollesasa edellä esitetyn määritelmän mukainen. 20

;:* 6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että P-ryhmä on •.,.: valittu tert.-butoksikarbony ylin j a p-metoksibentsyylioksikarbonyylin joukosta. • » •;·’i

7. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että P-ryhmä on .:, 25 tert.-butoksikarbonyyli ja tämä ryhmä irrotetaan kloorivetyhapolla. 116058

8. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa e) tämä nitraattianioni vaihdetaan ensin Z'm -kloridianioniksi, sitten tämä kloridianioni vaihdetaan sulfaattianioniksi, ja että tässä prosessissa kloridin ja sulfaatin välinen vaihto tapahtuu hopeasulfaatilla käsittelemällä. 5

9. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa e) nitraattianioni vaihdetaan kloridianioniksi reaktiolla vesiliuoksessa olevan kloorive-tyhapon molaarisen ylimäärän kanssa alueella 0 - 50 °C olevassa lämpötilassa.

10. Menetelmä patenttivaatimusten 1-4 mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, tunnettu siitä, että se käsittää vaiheet, joissa: a) kaavan (II) H2N-(CH2)n-NH-P (II) jossa n on alueella 2-7 oleva kokonaisluku, raja-arvot mukaan lukien ja P on 15 sopiva tavanomainen suojaava ryhmä, mukainen amiini saatetaan reagoimaan trans-platinan kanssa, joka trans-platina on aktivoitu edeltäkäsin korvaamalla kaksi klooriatomia kahdella dimetyyliformamidimolekyylillä hopeanitraatin ollessa läsnä moolisuhteessa 2:1, jolloin saadaan kaavan (VI) mukainen välituote Γ NH, .NH,-(CH^n—NH-P U m P-NH—(Oyn-NH, 1«, 2N0g* : *,* L J * * * « « ‘’ 20 missä n ja P ovat edellä esitettyjen määritelmien mukaisia; ’ ·' ’ b) suojaava ryhmä P irrotetaan, jolloin saadaan kaavan (VII) mukainen välituote Γ -(CHJn-NH, * NH,-(CH^n-Alm O* / u m "·' '' missä n on edellä esitetyn määritelmänmukainen ja Q"m on irrotusreaktiosta pe- •; · räisin oleva anioni; 116058 c) Q m -anionin ja N03 -anionin välillä toteutetaan vaihtoreaktio, jolloin saadaan kaavan (VIII) mukainen vastaava nitraatti NH^ ^.NHj-(CH,)n-NH, ** NHj-«O^n-Νΐζ^ΝΗ, 4 NO* m d) kaavan (VIII) mukainen välituote saatetaan reagoimaan trans-platinan kanssa, 5 joka trans-platina on aktivoitu edeltäkäsin korvaamalla klooriatomi dimetyyli- formamidimolekyylillä hopeanitraatin ollessa läsnä moolisuhteessa 1:2, jolloin saadaan kaavan (I) mukainen yhdiste l4* XNH, NH,, ^NH,-(Oyo-“W". .«nz" -{Ctyi—«C>H, ' **C O ||j jossa kaavassa n on edellä esitetyn määritelmän mukainen, m on 1 ja Z'm on nit-10 raattianioni; ja toivottaessa e) tämän nitraattianionin ja toisen Z'm -anionin välillä toteutetaan vaihtoreaktio, symbolin Z'm ollessa edellä esitetyn määritelmän mukainen.

.’ 11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että P-ryhmä ” V 15 on valittu tert. -butoksikarbonyylin j a p-metoksibentsyylioksikarbonyylin j oukosta. • » · • * t · · • « · • · I · .

. ·, 12. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että P-ryhmä t > I . *: ’. on tert.-butoksikarbonyyli ja tämä ryhmä irrotetaan kloorivetyhapolla. * · 20

13. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa : * "; e) tämä nitraattianioni vaihdetaan ensin Z'm -kloridianioniksi, sitten tämä kloridianio- , ·. : ni vaihdetaan sulfaattianioniksi, ja että tässä prosessissa kloridin ja sulfaatin välinen .,.,; vaihto tapahtuu hopeasulfaatilla käsittelemällä. ’ ’ ] ’. 25

14. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa e) mainittu nitraattianioni vaihdetaan kloridianioniksi reaktiolla vesiliuoksessa ole- 116058 van kloorivetyhapon molaarisen ylimäärän kanssa alueella 0 - 50 °C olevassa lämpötilassa.

15. Patenttivaatimusten 1-4 mukaisten yhdisteiden käyttö kasvainten hoidossa 5 käyttökelpoisen lääkkeen valmistamiseksi.

16. Farmaseuttiset koostumukset, jotka sisältävät vaikuttavana aineena terapeuttisesti tehokkaan määrän vähintään yhtä patenttivaatimusten 1-4 mukaista yhdistettä sekoitettuna tavanomaisiin kantajiin ja täyteaineisiin. 10

17. Patenttivaatimuksen 16 mukaiset koostumukset, tunnettu siitä, että tämä tehokas määrä on sellainen, että vaikuttavan aineen annettava annos on 0,1 -1200 mg painokiloa kohden.

18. Patenttivaatimusten 16 ja 17 mukaiset koostumukset, tunnettu siitä, että niitä annetaan ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti.

19. Patenttivaatimusten 16-18 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu ' · ‘ 1 siitä, että se sisältää vähintään yhtä patenttivaatimusten 1-4 mukaista yhdistettä : : · 20 yhdistettynä platinakompleksiin, jolla on kasvainten vastainen vaikutus. ***··» 0 • · 0 * · · 116058