JP2021101735A - メッセンジャーrnaの精製方法 - Google Patents
メッセンジャーrnaの精製方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2021101735A JP2021101735A JP2021065401A JP2021065401A JP2021101735A JP 2021101735 A JP2021101735 A JP 2021101735A JP 2021065401 A JP2021065401 A JP 2021065401A JP 2021065401 A JP2021065401 A JP 2021065401A JP 2021101735 A JP2021101735 A JP 2021101735A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- mrna
- purified
- item
- membrane
- vitro
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
- C12N15/1017—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by filtration, e.g. using filters, frits, membranes
Abstract
Description
本出願は、2014年4月25日に出願された米国仮特許出願第61/984,503号の優先権を主張するものであり、当該出願の開示内容は参照により本明細書に援用される。
本明細書は、配列表(「Sequence listing.txt」と名付けられ、.txtファイルとして2015年4月24日に電子的に提出されている)を参照するものである。当該.txtファイルは2015年4月22日に作成されたものであり、11,184バイトのサイズがある。当該配列表の全内容が、参照により本明細書において援用される。
特定の態様において、例えば以下の項目が提供される:
(項目1)
メッセンジャーRNA(mRNA)の精製方法であって、
(a)不純調製物からmRNAを沈殿させること、及び
(b)沈殿したmRNAを含有する前記不純調製物を、前記沈殿したmRNAが膜に捕捉される膜ろ過を含む精製工程に供すること、及び
(c)前記mRNAを再可溶化することにより前記膜から前記捕捉された沈殿mRNAを溶離し、それにより精製されたmRNA溶液を得ること、
を含む前記方法。
(項目2)
膜ろ過を含む前記精製工程が、タンジェンシャルフローろ過である、項目1に記載の方法。
(項目3)
膜ろ過を含む前記精製工程が、ダイレクトフローろ過である、項目1に記載の方法。
(項目4)
mRNAを沈殿させる前記ステップが、前記不純調製物を、塩化リチウム、塩化カリウム、塩化グアニジニウム、チオシアン酸グアニジニウム、イソチアン酸グアニジニウム、酢酸アンモニウム、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される試薬を含有する溶液を用いて処理することを含む項目1、2、または3のいずれか1項に記載の方法。
(項目5)
前記試薬が、チオシアン酸グアニジニウムである、項目4に記載の方法。
(項目6)
前記溶液が、4Mのチオシアン酸グアニジニウム、0.5%のラウリルサルコシルナトリウム、及び25mMのクエン酸ナトリウムを含有する、項目5に記載の方法。
(項目7)
前記溶液が、4Mのチオシアン酸グアニジニウム、及び0.5%のラウリルサルコシルナトリウムを含有する、項目5に記載の方法。
(項目8)
前記溶液が、4Mのチオシアン酸グアニジニウム、及び25mMのクエン酸ナトリウムを含有する、項目5に記載の方法。
(項目9)
前記mRNAを沈殿させるステップが、無水エタノールを用いて前記不純調製物を処理するステップを含む、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目10)
前記膜が、ポリエーテルスルホン(mPES)(修飾なし)、ポリエーテルスルホン(mPES)中空糸膜、フッ化ポリビニリデン(PVDF)、酢酸セルロース、ニトロセルロース、MCE(混合セルロースエステル類)、超高分子量ポリエチレン(UPE)、ポリフルオロテトラエチレン(PTFE)、ナイロン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目11)
前記方法が、溶離の前に前記捕捉された沈殿mRNAを洗浄することをさらに含む、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目12)
前記洗浄ステップが、グアニジニウム緩衝液及びエタノールを含有する洗浄溶液、次いで約70〜80%のエタノールを用いた複数回のすすぎサイクルを含む、項目11に記載の方法。
(項目13)
前記複数回のすすぎサイクルは、5回より多いサイクルである、項目12に記載の方法。
(項目14)
前記溶離ステップは、RNAseが含まれていない水を用いて前記捕捉された沈殿mRNAを再可溶化することを含む、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目15)
前記RNAseが含まれていない水が、5〜10分間、再循環される、項目14に記載の方法。
(項目16)
前記方法がさらに、前記精製されたmRNA溶液を透析するステップを含む、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目17)
前記精製されたmRNA溶液が、100kDaの分子量カットオフ(MWCO)膜を用いて、1mMのクエン酸ナトリウムと透析される、項目16に記載の方法。
(項目18)
前記mRNAはin vitro合成され、前記不純調製物がIn vitro mRNA合成反応混合物を含有する、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目19)
前記不純調製物が未完了で中断されたRNA配列及び/またはin vitro合成において用いられた酵素試薬を含有する、項目18に記載の方法。
(項目20)
前記精製されたmRNA溶液が、1%未満の未完了で中断されたRNA配列及び/またはin vitro合成において用いられた酵素試薬を含有する、項目19に記載の方法。
(項目21)
前記精製されたmRNA溶液が、0.5%未満の未完了で中断されたRNA配列及び/またはin vitro合成において用いられた酵素試薬を含有する、項目19に記載の方法。
(項目22)
前記精製されたmRNA溶液が、0.1%未満の未完了で中断されたRNA配列及び/またはin vitro合成において用いられた酵素試薬を含有する、項目19に記載の方法。
(項目23)
前記精製されたmRNA溶液が、未完了で中断されたRNA配列及び/またはin vitro合成において用いられた酵素試薬を実質的に含まない、項目19に記載の方法。(項目24)
前記未完了で中断されたRNA配列及び/またはin vitro合成において用いられた酵素試薬が、銀染色、ゲル電気泳動、HPLC、UPLC、及び/またはキャピラリー電気泳動により測定される、項目23に記載の方法。
(項目25)
前記未完了で中断されたRNA配列が、15未満の塩基を含有する、項目19〜24のいずれか1項に記載の方法。
(項目26)
前記未完了で中断されたRNA配列が、約8〜12の塩基を含有する、項目19〜24のいずれか1項に記載の方法。
(項目27)
前記in vitro合成において用いられた酵素試薬が、T7 RNAポリメラーゼ、DNAseI、ピロホスファターゼ、及び/またはRNAse阻害剤を含有する、項目19〜24のいずれか1項に記載の方法。
(項目28)
前記mRNAが、バッチ当たり1グラム、10グラム、100グラム、1kg、10kg、または100kg以上の規模で精製される、先行項目のいずれか1項に記載の方法。(項目29)
前記mRNAが、キャップ及びテールが前記mRNAに付加される前に精製される、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目30)
前記mRNAが、キャップ及びテールが前記mRNAに付加された後に精製される、項目1〜28のいずれか1項に記載の方法。
(項目31)
前記mRNAが、キャップが付加された後に精製される、項目1〜28のいずれか1項に記載の方法。
(項目32)
前記mRNAが、キャップ及び/またはテールが前記mRNAに付加される前及び後の両方で精製される、項目1〜28のいずれか1項に記載の方法。
(項目33)
前記mRNAが、約1kb、1.5kb、2kb、2.5kb、3kb、3.5kb、4kb、4.5kb、5kb、6kb、7kb、8kb、9kb、10kb、11kb、12kb、13kb、14kb、15kb、または20kb以上の長さである、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目34)
前記mRNAが、安定性を増強させるために1つ以上の修飾を含有する、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目35)
前記1つ以上の修飾が、修飾ヌクレオチド及び/または修飾糖リン酸主鎖を含有する、項目34に記載の方法。
(項目36)
前記mRNAが修飾されていない、項目1〜33のいずれか1項に記載の方法。
(項目37)
前記精製されたmRNAが、95%以上の完全性を有する、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目38)
前記精製されたmRNAが、98%以上の完全性を有する、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目39)
前記精製されたmRNAが、99%以上の完全性を有する、先行項目のいずれか1項に記載の方法。
(項目40)
メッセンジャーRNA(mRNA)の精製方法であって、
(a)不純調製物からmRNAを沈殿させること、及び
(b)沈殿されたmRNAを含有する前記不純調製物を、前記沈殿されたmRNAがろ過膜に捕捉される一方で不純物が透過により廃棄されるよう、タンジェンシャルフローろ過に供すること、及び
(c)前記沈殿したmRNAの再可溶化により前記捕捉された沈殿mRNAを溶離させ、それにより精製されたmRNA溶液を得ること、
を含む前記方法。
(項目41)
メッセンジャーRNA(mRNA)の作製方法であって、
in vitroでmRNAを合成すること、及び
先行項目のいずれか1項に記載の方法を用いて前記in vitro合成されたmRNAを精製すること、
を含む前記方法。
(項目42)
先行項目のいずれか1項に記載の方法を用いて精製されたメッセンジャーRNA(mRNA)。
(項目43)
ヒト対象への投与に適した単一種のmRNAを5グラム以上含有する精製されたmRNAのバッチ。
(項目44)
10グラム以上の単一種のmRNAを含有する、項目43に記載のバッチ。
(項目45)
25グラム以上の単一種のmRNAを含有する、項目43に記載のバッチ。
(項目46)
mRNA合成工程からの不純物が実質的に含まれていない、項目42〜45のいずれか1項に記載のバッチ。
(項目47)
前記バッチが、未完了で中断されたRNA配列、DNA鋳型、及び/または前記単一種のmRNAのin vitro合成において用いられた酵素試薬を実質的に含まない、項目46に記載の方法。
(項目48)
前記精製されたmRNAが、約5%未満のin vitro合成において用いられた酵素試薬を含有する、項目43〜47のいずれか1項に記載のバッチ。
(項目49)
前記精製されたmRNAが、約95%を超える完全性を有する、項目43〜48のいずれか1項に記載のバッチ。
(項目50)
先行項目のいずれか1項に記載の方法を用いて精製されたメッセンジャーRNAを含有する組成物。
(項目51)
in vitro合成されたメッセンジャーRNAを含有する組成物であって、前記組成物は、1%未満の未完了で中断されたRNA配列及び/またはin vitro合成において用いられた酵素試薬を含有する、前記組成物。
(項目52)
in vitro合成されたメッセンジャーRNA(mRNA)を含有する組成物であって、前記mRNAは、95%以上の完全性を有する、前記組成物。
本発明がさらに簡便に理解されるために、まず若干数の用語を以下に定義する。以下の用語及び他の用語の追加の定義は、本明細書全体を通して記述されている。
本発明は、とりわけ、mRNAを沈殿させ、次いで膜ろ過(たとえば、タンジェンシャルフローろ過)を行うことを含む工程に基づいた、不純調製物(たとえば、in vitro合成反応混合物)からmRNAを精製するための改善された方法を提供するものである。
本発明を用いて、任意のmRNAを精製してもよい。mRNAとは一般的にDNAからリボソームへと情報を運搬するRNA型と考えられている。mRNAの存在は一般的に非常に短く、プロセッシングと翻訳、その後の分解を含んでいる。一般的に、真核生物体においてmRNAのプロセッシングは、N−終末(5’)末端上に「キャップ」を、及びC−終末(3’)末端上に「テール」を付加することを含む。典型的なキャップは、7−メチルグアノシンキャップであり、7−メチルグアノシンキャップは最初の転写ヌクレオチドに5’−5’−三リン酸結合を介して結合されるグアノシンである。キャップの存在は、ほとんどの真核細胞に存在しているヌクレアーゼに対する抵抗性をもたらすという点で重要である。テールは一般的にポリアデニル化事象であり、それによりポリアデニリル部分がmRNA分子の3’末端に付加される。この「テール」の存在により、エキソヌクレアーゼ分解からのmRNAの保護が供される。メッセンジャーRNAはリボソームにより一連のアミノ酸へと翻訳され、当該アミノ酸がタンパク質を形成する。
RNAポリメラーゼ)、DNAseI、ピロホスファターゼ、ならびに/またはRNAse阻害剤を用いて行われる。正確な条件は具体的な応用方法によって変化し得る。これら試薬の存在は、いくつかの実施形態による最終産物中においては望ましいものではなく、それ故、不純物と呼称され得、これら不純物を1つ以上含有する調製物は不純調製物と呼称され得る。
本発明によると、mRNAはたとえばin vitro合成反応混合物等の不純調製物から当分野に公知の様々な沈殿法を用いて沈殿されてもよい。本明細書において、「沈殿」という用語(またはその文法的に同等のすべての用語)は、溶液中での固体の形成を指す。mRNAに関連して使用されるとき、当該「沈殿」という用語は、液体中のmRNAの不溶性形態または固体形態の形成を指す。
本発明によると、沈殿したmRNAを含有する不純調製物を、当該沈殿したmRNAが膜に捕捉または保持される、膜ろ過を含む精製工程に供してもよい。したがって、一部の実施形態において、不純調製物は、不溶物を除去するための前処理を行わずに沈殿を行った後に膜ろ過に供される。
典型的には、負荷ステップは、膜上に供給物(たとえば沈殿mRNAを含有する不純調製物)を負荷し、供給物を陽圧または陰圧により強制的に通過させ、残留物を膜上に捕捉または保持させることを含む。本明細書において、「残留物」という用語は、膜により保持される任意の非透過性の溶質及び/または不溶性物質を指す。本発明によると沈殿したmRNAは残留物として膜に捕捉される。本明細書において、「膜」という用語は、任意の多孔質の層または物質のシートを指す。本出願において、「膜」という用語は、フィルターと相互交換可能に用いられる。
典型的には、捕捉された不溶性mRNAは、膜上に保持された不純物を取り除くため、溶離の前に洗浄され得る。一部の実施形態において、洗浄ステップは、1以上の洗浄溶液を用いた複数回のすすぎサイクルを含む。たとえば、洗浄ステップは、グアニジニウム緩衝液及びエタノール、その後に70〜80%のエタノール(たとえば、約70%、75%、または80%のエタノール)を用いた複数回のすすぎサイクルにより行われてもよい。ある特定の実施形態において、当該複数回のすすぎサイクルは、2回より多い、3回より多い、4回より多い、5回より多い、6回より多い、7回より多い、8回より多い、9回より多い、または10回より多いサイクルである。
典型的には、捕捉または保持されたmRNAは、当該沈殿mRNAの溶液への再可溶化により溶離される。たとえば、捕捉されたmRNAはRNAseが含まれていない水を用いて溶離されてもよい。ある特定の実施形態において、捕捉されたmRNAの溶離は、RNAseを含まない水の再循環が含まれる。たとえば、当該RNAseを含まない水は、約5〜30分間(たとえば、約5〜25分、約5〜20分、または約5〜15分)循環されてもよい。特定の実施形態において、当該RNAseを含まない水は、約5〜10分間(たとえば、約5、6、7、8、9、または10分間)再循環される。
本発明により提供される特有の利点は、mRNA、特にin vitro合成されたmRNAを大規模で、または工業規模で精製する能力である。たとえばin vitro合成されたmRNAは、バッチ当たり約1グラム、1グラム、10グラム、50グラム、100グラム、200グラム、300グラム、400グラム、500グラム、600グラム、700グラム、800グラム、900グラム、1kg、5kg、10kg、50kg、または100kg以上の規模で精製され得る。一つの特定の実施形態において、in vitro合成されたmRNAはバッチ当たり10グラムの規模で精製され得る。他の特定の実施形態において、in vitro合成されたmRNAはバッチ当たり100グラムの規模で精製され得る。さらに他の特定の実施形態において、in vitro合成されたmRNAはバッチ当たり1kgの規模で精製され得る。
本発明は、治療応用に要求される高度な純度及び完全性を有する精製mRNAの大規模産生に対する緊急の必要性に取り組むものである。従来からある方法は一般的に規模の小さいものであり、充分に費用効率が高く、ヒト対象への投与に適した工業規模でのmRNA製造に必要とされる程度にまで規模を拡張することができない。対照的に、本発明方法は実施例において示されるように十分に拡張可能なものであり、医薬グレードのmRNAの費用効率が高い大規模製造が可能である。
メッセンジャーRNAの合成
蛍ルシフェラーゼ(FFL)、アルギニノコハク酸シンテターゼ(ASS1)、及びヒト嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子(CFTR)のメッセンジャーRNAを、当該遺伝子をコートするプラスミドDNA鋳型からin vitro転写により合成し、次いでそれらに5’キャップ構造(Cap1)(Fechter, P.; Brownlee, G.G. “Recognition of mRNA cap structures by viral and cellular proteins” J. Gen. Virology 2005, 86, 1239−1249)、及びゲル電気泳動で測定して、およそ200ヌクレオチドの長さの3’ポリ(A)テールを付加した。各mRNA産物中に存在する5’及び3’非翻訳領域はそれぞれX及びYと表され、記述されるように定義される(以下を参照のこと)。標的メッセンジャーRNA構築物の合成は、5’及び3’非翻訳領域に隣接するコード配列からなる初期鎖が合成される2ステップの工程を含んだ。このキャップ及びテールを有さない構築物は精製され、さらにキャップ付加ステップで処理され、次いでポリ−A付加テール付加ステップが行われた。テール付加反応の最後に、初期精製工程と同様の方法で第二の精製ステップが行われた。
構築物の設計:
X1−配列番号1−Y1
AUGCAGCGGUCCCCGCUCGAAAAGGCCAGUGUCGUGUCCAAACUCUUCUUCUCAUGGACUCGGCCUAUCCUUAGAAAGGGGUAUCGGCAGAGGCUUGAGUUGUCUGACAUCUACCAGAUCCCCUCGGUAGAUUCGGCGGAUAACCUCUCGGAGAAGCUCGAACGGGAAUGGGACCGCGAACUCGCGUCUAAGAAAAACCCGAAGCUCAUCAACGCACUGAGAAGGUGCUUCUUCUGGCGGUUCAUGUUCUACGGUAUCUUCUUGUAUCUCGGGGAGGUCACAAAAGCAGUCCAACCCCUGUUGUUGGGUCGCAUUAUCGCCUCGUACGACCCCGAUAACAAAGAAGAACGGAGCAUCGCGAUCUACCUCGGGAUCGGACUGUGUUUGCUUUUCAUCGUCAGAACACUUUUGUUGCAUCCAGCAAUCUUCGGCCUCCAUCACAUCGGUAUGCAGAUGCGAAUCGCUAUGUUUAGCUUGAUCUACAAAAAGACACUGAAACUCUCGUCGCGGGUGUUGGAUAAGAUUUCCAUCGGUCAGUUGGUGUCCCUGCUUAGUAAUAACCUCAACAAAUUCGAUGAGGGACUGGCGCUGGCACAUUUCGUGUGGAUUGCCCCGUUGCAAGUCGCCCUUUUGAUGGGCCUUAUUUGGGAGCUGUUGCAGGCAUCUGCCUUUUGUGGCCUGGGAUUUCUGAUUGUGUUGGCAUUGUUUCAGGCUGGGCUUGGGCGGAUGAUGAUGAAGUAUCGCGACCAGAGAGCGGGUAAAAUCUCGGAAAGACUCGUCAUCACUUCGGAAAUGAUCGAAAACAUCCAGUCGGUCAAAGCCUAUUGCUGGGAAGAAGCUAUGGAGAAGAUGAUUGAAAACCUCCGCCAAACUGAGCUGAAACUGACCCGCAAGGCGGCGUAUGUCCGGUAUUUCAAUUCGUCAGCGUUCUUCUUUUCCGGGUUCUUCGUUGUCUUUCUCUCGGUUUUGCCUUAUGCCUUGAUUAAGGGGAUUAUCCUCCGCAAGAUUUUCACCACGAUUUCGUUCUGCAUUGUAUUGCGCAUGGCAGUGACACGGCAAUUUCCGUGGGCCGUGCAGACAUGGUAUGACUCGCUUGGAGCGAUCAACAAAAUCCAAGACUUCUUGCAAAAGCAAGAGUACAAGACCCUGGAGUACAAUCUUACUACUACGGAGGUAGUAAUGGAGAAUGUGACGGCUUUUUGGGAAGAGGGUUUUGGAGAACUGUUUGAGAAAGCAAAGCAGAAUAACAACAACCGCAAGACCUCAAAUGGGGACGAUUCCCUGUUUUUCUCGAACUUCUCCCUGCUCGGAACACCCGUGUUGAAGGACAUCAAUUUCAAGAUUGAGAGGGGACAGCUUCUCGCGGUAGCGGGAAGCACUGGUGCGGGAAAAACUAGCCUCUUGAUGGUGAUUAUGGGGGAGCUUGAGCCCAGCGAGGGGAAGAUUAAACACUCCGGGCGUAUCUCAUUCUGUAGCCAGUUUUCAUGGAUCAUGCCCGGAACCAUUAAAGAGAACAUCAUUUUCGGAGUAUCCUAUGAUGAGUACCGAUACAGAUCGGUCAUUAAGGCGUGCCAGUUGGAAGAGGACAUUUCUAAGUUCGCCGAGAAGGAUAACAUCGUCUUGGGAGAAGGGGGUAUUACAUUGUCGGGAGGGCAGCGAGCGCGGAUCAGCCUCGCGAGAGCGGUAUACAAAGAUGCAGAUUUGUAUCUGCUUGAUUCACCGUUUGGAUACCUCGACGUAUUGACAGAAAAAGAAAUCUUCGAGUCGUGCGUGUGUAAACUUAUGGCUAAUAAGACGAGAAUCCUGGUGACAUCAAAAAUGGAACACCUUAAGAAGGCGGACAAGAUCCUGAUCCUCCACGAAGGAUCGUCCUACUUUUACGGCACUUUCUCAGAGUUGCAAAACUUGCAGCCGGACUUCUCAAGCAAACUCAUGGGGUGUGACUCAUUCGACCAGUUCAGCGCGGAACGGCGGAACUCGAUCUUGACGGAAACGCUGCACCGAUUCUCGCUUGAGGGUGAUGCCCCGGUAUCGUGGACCGAGACAAAGAAGCAGUCGUUUAAGCAGACAGGAGAAUUUGGUGAGAAAAGAAAGAACAGUAUCUUGAAUCCUAUUAACUCAAUUCGCAAGUUCUCAAUCGUCCAGAAAACUCCACUGCAGAUGAAUGGAAUUGAAGAGGAUUCGGACGAACCCCUGGAGCGCAGGCUUAGCCUCGUGCCGGAUUCAGAGCAAGGGGAGGCCAUUCUUCCCCGGAUUUCGGUGAUUUCAACCGGACCUACACUUCAGGCGAGGCGAAGGCAAUCCGUGCUCAACCUCAUGACGCAUUCGGUAAACCAGGGGCAAAACAUUCACCGCAAAACGACGGCCUCAACGAGAAAAGUGUCACUUGCACCCCAGGCGAAUUUGACUGAACUCGACAUCUACAGCCGUAGGCUUUCGCAAGAAACCGGACUUGAGAUCAGCGAAGAAAUCAAUGAAGAAGAUUUGAAAGAGUGUUUCUUUGAUGACAUGGAAUCAAUCCCAGCGGUGACAACGUGGAACACAUACUUGCGUUACAUCACGGUGCACAAGUCCUUGAUUUUCGUCCUCAUCUGGUGUCUCGUGAUCUUUCUCGCUGAGGUCGCAGCGUCACUUGUGGUCCUCUGGCUGCUUGGUAAUACGCCCUUGCAAGACAAAGGCAAUUCUACACACUCAAGAAACAAUUCCUAUGCCGUGAUUAUCACUUCUACAAGCUCGUAUUACGUGUUUUACAUCUACGUAGGAGUGGCCGACACUCUGCUCGCGAUGGGUUUCUUCCGAGGACUCCCACUCGUUCACACGCUUAUCACUGUCUCCAAGAUUCUCCACCAUAAGAUGCUUCAUAGCGUACUGCAGGCUCCCAUGUCCACCUUGAAUACGCUCAAGGCGGGAGGUAUUUUGAAUCGCUUCUCAAAAGAUAUUGCAAUUUUGGAUGACCUUCUGCCCCUGACGAUCUUCGACUUCAUCCAGUUGUUGCUGAUCGUGAUUGGGGCUAUUGCAGUAGUCGCUGUCCUCCAGCCUUACAUUUUUGUCGCGACCGUUCCGGUGAUCGUGGCGUUUAUCAUGCUGCGGGCCUAUUUCUUGCAGACGUCACAGCAGCUUAAGCAACUGGAGUCUGAAGGGAGGUCGCCUAUCUUUACGCAUCUUGUGACCAGUUUGAAGGGAUUGUGGACGUUGCGCGCCUUUGGCAGGCAGCCCUACUUUGAAACACUGUUCCACAAAGCGCUGAAUCUCCAUACGGCAAAUUGGUUUUUGUAUUUGAGUACCCUCCGAUGGUUUCAGAUGCGCAUUGAGAUGAUUUUUGUGAUCUUCUUUAUCGCGGUGACUUUUAUCUCCAUCUUGACCACGGGAGAGGGCGAGGGACGGGUCGGUAUUAUCCUGACACUCGCCAUGAACAUUAUGAGCACUUUGCAGUGGGCAGUGAACAGCUCGAUUGAUGUGGAUAGCCUGAUGAGGUCCGUUUCGAGGGUCUUUAAGUUCAUCGACAUGCCGACGGAGGGAAAGCCCACAAAAAGUACGAAACCCUAUAAGAAUGGGCAAUUGAGUAAGGUAAUGAUCAUCGAGAACAGUCACGUGAAGAAGGAUGACAUCUGGCCUAGCGGGGGUCAGAUGACCGUGAAGGACCUGACGGCAAAAUACACCGAGGGAGGGAACGCAAUCCUUGAAAACAUCUCGUUCAGCAUUAGCCCCGGUCAGCGUGUGGGGUUGCUCGGGAGGACCGGGUCAGGAAAAUCGACGUUGCUGUCGGCCUUCUUGAGACUUCUGAAUACAGAGGGUGAGAUCCAGAUCGACGGCGUUUCGUGGGAUAGCAUCACCUUGCAGCAGUGGCGGAAAGCGUUUGGAGUAAUCCCCCAAAAGGUCUUUAUCUUUAGCGGAACCUUCCGAAAGAAUCUCGAUCCUUAUGAACAGUGGUCAGAUCAAGAGAUUUGGAAAGUCGCGGACGAGGUUGGCCUUCGGAGUGUAAUCGAGCAGUUUCCGGGAAAACUCGACUUUGUCCUUGUAGAUGGGGGAUGCGUCCUGUCGCAUGGGCACAAGCAGCUCAUGUGCCUGGCGCGAUCCGUCCUCUCUAAAGCGAAAAUUCUUCUCUUGGAUGAACCUUCGGCCCAUCUGGACCCGGUAACGUAUCAGAUCAUCAGAAGGACACUUAAGCAGGCGUUUGCCGACUGCACGGUGAUUCUCUGUGAGCAUCGUAUCGAGGCCAUGCUCGAAUGCCAGCAAUUUCUUGUCAUCGAAGAGAAUAAGGUCCGCCAGUACGACUCCAUCCAGAAGCUGCUUAAUGAGAGAUCAUUGUUCCGGCAGGCGAUUUCACCAUCCGAUAGGGUGAAACUUUUUCCACACAGAAAUUCGUCGAAGUGCAAGUCCAAACCGCAGAUCGCGGCCUUGAAAGAAGAGACUGAAGAAGAAGUUCAAGACACGCGUCUUUAA(配列番号1)
構築物の設計:
X1−配列番号2−Y1
AUGGAAGAUGCCAAAAACAUUAAGAAGGGCCCAGCGCCAUUCUACCCACUCGAAGACGGGACCGCCGGCGAGCAGCUGCACAAAGCCAUGAAGCGCUACGCCCUGGUGCCCGGCACCAUCGCCUUUACCGACGCACAUAUCGAGGUGGACAUUACCUACGCCGAGUACUUCGAGAUGAGCGUUCGGCUGGCAGAAGCUAUGAAGCGCUAUGGGCUGAAUACAAACCAUCGGAUCGUGGUGUGCAGCGAGAAUAGCUUGCAGUUCUUCAUGCCCGUGUUGGGUGCCCUGUUCAUCGGUGUGGCUGUGGCCCCAGCUAACGACAUCUACAACGAGCGCGAGCUGCUGAACAGCAUGGGCAUCAGCCAGCCCACCGUCGUAUUCGUGAGCAAGAAAGGGCUGCAAAAGAUCCUCAACGUGCAAAAGAAGCUACCGAUCAUACAAAAGAUCAUCAUCAUGGAUAGCAAGACCGACUACCAGGGCUUCCAAAGCAUGUACACCUUCGUGACUUCCCAUUUGCCACCCGGCUUCAACGAGUACGACUUCGUGCCCGAGAGCUUCGACCGGGACAAAACCAUCGCCCUGAUCAUGAACAGUAGUGGCAGUACCGGAUUGCCCAAGGGCGUAGCCCUACCGCACCGCACCGCUUGUGUCCGAUUCAGUCAUGCCCGCGACCCCAUCUUCGGCAACCAGAUCAUCCCCGACACCGCUAUCCUCAGCGUGGUGCCAUUUCACCACGGCUUCGGCAUGUUCACCACGCUGGGCUACUUGAUCUGCGGCUUUCGGGUCGUGCUCAUGUACCGCUUCGAGGAGGAGCUAUUCUUGCGCAGCUUGCAAGACUAUAAGAUUCAAUCUGCCCUGCUGGUGCCCACACUAUUUAGCUUCUUCGCUAAGAGCACUCUCAUCGACAAGUACGACCUAAGCAACUUGCACGAGAUCGCCAGCGGCGGGGCGCCGCUCAGCAAGGAGGUAGGUGAGGCCGUGGCCAAACGCUUCCACCUACCAGGCAUCCGCCAGGGCUACGGCCUGACAGAAACAACCAGCGCCAUUCUGAUCACCCCCGAAGGGGACGACAAGCCUGGCGCAGUAGGCAAGGUGGUGCCCUUCUUCGAGGCUAAGGUGGUGGACUUGGACACCGGUAAGACACUGGGUGUGAACCAGCGCGGCGAGCUGUGCGUCCGUGGCCCCAUGAUCAUGAGCGGCUACGUUAACAACCCCGAGGCUACAAACGCUCUCAUCGACAAGGACGGCUGGCUGCACAGCGGCGACAUCGCCUACUGGGACGAGGACGAGCACUUCUUCAUCGUGGACCGGCUGAAGAGCCUGAUCAAAUACAAGGGCUACCAGGUAGCCCCAGCCGAACUGGAGAGCAUCCUGCUGCAACACCCCAACAUCUUCGACGCCGGGGUCGCCGGCCUGCCCGACGACGAUGCCGGCGAGCUGCCCGCCGCAGUCGUCGUGCUGGAACACGGUAAAACCAUGACCGAGAAGGAGAUCGUGGACUAUGUGGCCAGCCAGGUUACAACCGCCAAGAAGCUGCGCGGUGGUGUUGUGUUCGUGGACGAGGUGCCUAAAGGACUGACCGGCAAGUUGGACGCCCGCAAGAUCCGCGAGAUUCUCAUUAAGGCCAAGAAGGGCGGCAAGAUCGCCGUGUAA(配列番号2)
構築物の設計:
X1−配列番号3−Y2
AUGAGCAGCAAGGGCAGCGUGGUGCUGGCCUACAGCGGCGGCCUGGACACCAGCUGCAUCCUGGUGUGGCUGAAGGAGCAGGGCUACGACGUGAUCGCCUACCUGGCCAACAUCGGCCAGAAGGAGGACUUCGAGGAGGCCCGCAAGAAGGCCCUGAAGCUGGGCGCCAAGAAGGUGUUCAUCGAGGACGUGAGCCGCGAGUUCGUGGAGGAGUUCAUCUGGCCCGCCAUCCAGAGCAGCGCCCUGUACGAGGACCGCUACCUGCUGGGCACCAGCCUGGCCCGCCCCUGCAUCGCCCGCAAGCAGGUGGAGAUCGCCCAGCGCGAGGGCGCCAAGUACGUGAGCCACGGCGCCACCGGCAAGGGCAACGACCAGGUGCGCUUCGAGCUGAGCUGCUACAGCCUGGCCCCCCAGAUCAAGGUGAUCGCCCCCUGGCGCAUGCCCGAGUUCUACAACCGCUUCAAGGGCCGCAACGACCUGAUGGAGUACGCCAAGCAGCACGGCAUCCCCAUCCCCGUGACCCCCAAGAACCCCUGGAGCAUGGACGAGAACCUGAUGCACAUCAGCUACGAGGCCGGCAUCCUGGAGAACCCCAAGAACCAGGCCCCCCCCGGCCUGUACACCAAGACCCAGGACCCCGCCAAGGCCCCCAACACCCCCGACAUCCUGGAGAUCGAGUUCAAGAAGGGCGUGCCCGUGAAGGUGACCAACGUGAAGGACGGCACCACCCACCAGACCAGCCUGGAGCUGUUCAUGUACCUGAACGAGGUGGCCGGCAAGCACGGCGUGGGCCGCAUCGACAUCGUGGAGAACCGCUUCAUCGGCAUGAAGAGCCGCGGCAUCUACGAGACCCCCGCCGGCACCAUCCUGUACCACGCCCACCUGGACAUCGAGGCCUUCACCAUGGACCGCGAGGUGCGCAAGAUCAAGCAGGGCCUGGGCCUGAAGUUCGCCGAGCUGGUGUACACCGGCUUCUGGCACAGCCCCGAGUGCGAGUUCGUGCGCCACUGCAUCGCCAAGAGCCAGGAGCGCGUGGAGGGCAAGGUGCAGGUGAGCGUGCUGAAGGGCCAGGUGUACAUCCUGGGCCGCGAGAGCCCCCUGAGCCUGUACAACGAGGAGCUGGUGAGCAUGAACGUGCAGGGCGACUACGAGCCCACCGACGCCACCGGCUUCAUCAACAUCAACAGCCUGCGCCUGAAGGAGUACCACCGCCUGCAGAGCAAGGUGACCGCCAAGUGA(配列番号3)
X1=
GGACAGAUCGCCUGGAGACGCCAUCCACGCUGUUUUGACCUCCAUAGAAGACACCGGGACCGAUCCAGCCUCCGCGGCCGGGAACGGUGCAUUGGAACGCGGAUUCCCCGUGCCAAGAGUGACUCACCGUCCUUGACACG(配列番号4)
Y1=
CGGGUGGCAUCCCUGUGACCCCUCCCCAGUGCCUCUCCUGGCCCUGGAAGUUGCCACUCCAGUGCCCACCAGCCUUGUCCUAAUAAAAUUAAGUUGCAUCAAGCU(配列番号5)
Y2=
GGGUGGCAUCCCUGUGACCCCUCCCCAGUGCCUCUCCUGGCCCUGGAAGUUGCCACUCCAGUGCCCACCAGCCUUGUCCUAAUAAAAUUAAGUUGCAUCAAAGCU(配列番号6)
以下の各実施例において、mRNAの合成はRNAseが完全に無い状態で行われた。すべての試験管、バイアル、ピペットチップ、ピペット、緩衝液等は別段の明示が無い限り、ヌクレアーゼ不含有であることが必要であった。
vitro転写を介して合成された。所望されるmRNA前駆体(IVT)構築物を作製するために、約8mgの直線型DNA、rNTP(7.25mM)、DTT(10mM)、T7 RNAポリメラーゼ、RNAse阻害剤、ピロホスファターゼ、及び反応緩衝液(10xで、800mM Hepes(pH 8.0)、20mMのスペルミジン、250mMのMgCl2、pH7.7)の混合物を、RNaseが含まれていない水を用いて調製し、最終体積を180mLとした。反応混合物を20分〜60分の間の時間幅で、37℃でインキュベートする。終了した時点で、当該混合物をDNaseIでさらに15分間処理し、適切にクエンチする。
上記のIVTステップからの精製mRNA産物(及び場合によって同様に最初のTFFろ過物)を10分間、65℃で変性させた。別個に、ある分量のGTP(1.0mM)、S−アデノシルメチオニン、RNAse阻害剤、2’−O−メチルトランスフェラーゼ、及びグアニリルトランスフェラーゼを反応緩衝液(10xで、500mMのTris−HCl(pH 8.0)、60mMのKCl、12.5mMのMgCl2)とともに混合し、最終濃度は1.6Lとする。変性が行われた時点で、mRNAを氷上で冷却させ、次いで当該反応混合物へ加えた。混合溶液を37℃で25〜90分の間の時間幅でインキュベートした。完了後、ATP(2.0mM)、ポリAポリメラーゼ、及びテール付加反応緩衝液(10xで、500mMのTris−HCl(pH8.0)、2.5MのNaCl、100mMのMgCl2)のアリコートを添加し、総反応混合物をさらに37℃、20〜45分の間の時間幅でインキュベートした。完了後、最終反応混合物をクエンチし、適切に精製した。
mRNAの精製
メッセンジャーRNAは様々な方法を用いて沈殿させることができる。たとえば塩化リチウム、塩化カリウム、塩化グアニジニウム、チオシアン酸グアニジニウム、イソチオシアン酸グアニジニウム、酢酸アンモニウム、及び他の塩の使用により、反応混合物からmRNAが効率的に沈殿される。
以下の実施例において、他で別段の表記が無い限り、タンジェンシャルフローろ過(TFF)系は、ろ過膜及び蠕動ポンプ(Spectrum system社)から構成され、膜を通過する液体のタンジェンシャル循環は約130mL/分の供給速度であり、透過に対する流速は30mL/分であった。使用されたTFF膜は、MidiKros 500kDa mPES 115cm2(Spectrum Labs社)であった。使用前に、フィルターカートリッジはヌクレアーゼが含まれていない水を用いて洗浄され、さらに0.2NのNaOHを用いて清浄化された。最終的に当該系は、透過物及び残留物のpHが約pH6に達するまでヌクレアーゼが含まれていない水を用いて清浄化された。TFFを介したmRNAの単離は図1に記載されるように行うことができる。
mRNA精製の代表的な例として、1グラムのバッチの蛍ルシフェラーゼ(FFL)mRNAを、in vitro法を用いて転写し、キャップ及びポリAテールが無い上記の中間構築物を製造した。この反応は、総量約180mLを維持し、完了した時点でDNAseI(約9.0KU)を添加することによりクエンチされた。得られた溶液は4Mのチオシアン酸グアニジニウム、0.5%のラウリルサルコシルナトリウム、及び25mMのクエン酸ナトリウムの均一な溶液(1500mL)を用いて処理され、総量は1.68Lとした。得られた混合物は約5分間、大気温度中に置かれ、次いで1.1Lの無水エタノールでさらに処理された。mRNAはゆっくりと沈殿し、懸濁液は約5分間、大気温度に置かれた。完了した時点で、タンジェンシャルフローろ過(TFF)を用いて全ての不均一懸濁液をろ過膜にポンプで通した。
mRNA精製の第二の代表例として、1グラムのバッチのASS1 mRNAをin vitro法を用いて転写し、キャップ及びポリAテールが無い上記の中間構築物を製造した。この反応は、総量約180mLを維持し、完了した時点でDNAseI(約9.0KU)を添加することによりクエンチされた。得られた溶液を4Mのチオシアン酸グアニジニウム、0.5%のラウリルサルコシルナトリウム、及び25mMのクエン酸ナトリウムの均一な溶液(1500mL)を用いて処理し、総量は1.68Lとした。得られた混合物は約5分間、大気温度中に置かれ、次いで1.1Lの無水エタノールでさらに処理された。メッセンジャーRNAはゆっくりと沈殿し、懸濁液は約5分間、大気温度に置かれた。完了した時点で、タンジェンシャルフローろ過(TFF)を用いて全ての不均一懸濁液をろ過膜にポンプで通し、上述のように単離した。
mRNA精製の第三の代表例として、1.5グラムのバッチの修飾CFTR mRNAをin vitro法を用いて転写し、キャップ及びポリAテールが無い上記の中間構築物を製造した。この反応は、総量約270mLを維持し、完了した時点でDNAseI(約13.5KU)を添加することによりクエンチされた。得られた溶液を4Mのチオシアン酸グアニジニウム、0.5%のラウリルサルコシルナトリウム、及び25mMのクエン酸ナトリウムの均一な溶液(1500mL)を用いて処理し、総量は1.77Lとした。得られた混合物は約5分間、大気温度中に置かれ、次いで1.1Lの無水エタノールでさらに処理された。mRNAはゆっくりと沈殿し、懸濁液は約5分間、大気温度に置かれた。完了した時点で、タンジェンシャルフローろ過(TFF)を用いて全ての不均一懸濁液をろ過膜にポンプで通し、上述のように単離した。
精製されたmRNA中の酵素の存在に関する検証
SYPRO染色ゲル
標準的なSYPRO染色タンパク質ゲルを行い、精製の前後に存在するすべての残留試薬酵素の有無を測定した。ゲルは35分間、200Vで泳動された。
すべてのmRNAバッチ及び分画の銀染色は、SilverQuest(登録商標)(Life Technologies社、カタログ番号LC6070)を用いて、メーカーのプロトコールを使用し行われた。簡潔に述べると、試料を負荷し(RNAseの処理有り、またはなし)、負荷された酵素対照のレーンと比較しながらモニターされた。ゲルは35分間、200Vで泳動された。露出時間は8分間、割り当てられた。
別段の表記が無い限り、mRNAのサイズ及び完全性は、ゲル電気泳動を用いて評価された。自分達で注ぎ作製した1.0%のアガロースゲル、またはInvitrogen社のE−Gelプレキャスト1.2%アガロースゲルのいずれかを用いた。メッセンジャーRNAはウェル当たり1.0〜1.5μgの量で負荷した。完了した時点で、mRNAのバンドはエチジウムブロミドを用いて可視化させた。
別段の記載がない限り、蛍ルシフェラーゼ(FFL)、アルギニノコハク酸シンテターゼ(ASS1)のmRNA、及びCFTRのmRNAのin vitroトランスフェクションは、HEK293T細胞を用いて行われた。1マイクログラムの各mRNA構築物のトランスフェクションは、リポフェクタミンを用いて別々のウェル中で行われた。細胞は、選択時点(たとえば4時間、8時間等)で回収され、各タンパク質産物が解析された。FFL mRNAに対しては、生物発光アッセイ法を用いて、細胞溶解物がルシフェラーゼ産生に関し解析された。ASS1 mRNAに対しては、ELISAアッセイ法を用いて、細胞溶解物がASS1産生に関し解析された。CFTR mRNAに対しては、ウェスタンブロット法を用いて、細胞溶解物がCFTR産生に関し解析された。
Promega社のLuciferase Assay System(商品番号E1500)を用いて生物発光アッセイ法が行われた。ルシフェラーゼアッセイ試薬は、10mLのルシフェラーゼアッセイ緩衝液をルシフェラーゼアッセイ基質に加え、ボルテックスにより混合することにより調製された。20μLの均一な試料を96ウェルプレート上に負荷し、次いで20μLの各試料に対するプレート対照を負荷した。それとは別に、120μLのルシフェラーゼアッセイ試薬(上述のように調製)を96ウェルの平底プレートの各ウェルに負荷した。Molecular Device社のFlex Station装置を用いて適切なチャンバーに各プレートを挿入し、発光量を相対発光量(RLU)にて測定した。
続いて標準的なELISA法を、捕捉抗体としてマウス抗ASS1 2D1−2E12
IgGを、二次(検出)抗体としてウサギ抗ASS1 #3285 IgG(Shire Human Genetic Therapies社)を用いて行った。西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)結合ヤギ抗ウサギIgGは、3,3’,5,5’−テトラメチルベンジジン(TMB)基質溶液の活性化のために用いた。20分後、反応は2NのH2SO4を用いてクエンチされた。検出はMolecular Device社のSpectraMax装置上で吸光(450nm)によりモニターされた。未処理のマウス血清及び器官、ならびにヒトASS1タンパク質を、それぞれ陰性対照及び陽性対照として用いた。
ウェスタンブロットは免疫沈降法(DynabeadsG)を用いて得られたタンパク質試料上で行われた。概略すると、細胞及び組織のホモジネートを処理し、抗ヒトCFTR抗体(R&D Systems社、MAB25031)に前もって結合されたDynabead Gを用いて処理した。ヒトCFTRタンパク質の検出はAb570を用いて行われた。
本実施例は、沈殿後にタンジェンシャルフローろ過を用いることにより、酵素試薬ならびにショートマーが除去され、蛍ルシフェラーゼ(FFL)mRNA、アルギニノコハク酸シンテターゼ(ASS1)mRNA、及び嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子(CFTR)mRNAの精製が成功したことを示す。多くの典型的なカオトロピック条件の使用に成功し、上記に列記されるmRNAを沈殿させた。
mRNAであった。
FFL構築物:
1.外部供給業者から購入したFFL mRNA
2.市販キットで精製したFFL mRNA
3.沈殿−TFF法で精製したFFL mRNA
当分野の当業者であれば、本明細書に記載される本発明の特定の実施形態の多くの均等物を認識する、または日常的な実験の範囲を超えずに確認することができるであろう。本発明の範囲は上記の詳細な説明に限定されず、以下の請求項において記載される通りである。
Claims (1)
- 明細書に記載の発明。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2023037742A JP2023072010A (ja) | 2014-04-25 | 2023-03-10 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201461984503P | 2014-04-25 | 2014-04-25 | |
US61/984,503 | 2014-04-25 | ||
JP2019146189A JP6866433B2 (ja) | 2014-04-25 | 2019-08-08 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019146189A Division JP6866433B2 (ja) | 2014-04-25 | 2019-08-08 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023037742A Division JP2023072010A (ja) | 2014-04-25 | 2023-03-10 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2021101735A true JP2021101735A (ja) | 2021-07-15 |
JP7245278B2 JP7245278B2 (ja) | 2023-03-23 |
Family
ID=54333288
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016562218A Active JP6571679B2 (ja) | 2014-04-25 | 2015-04-24 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
JP2019146189A Active JP6866433B2 (ja) | 2014-04-25 | 2019-08-08 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
JP2021065401A Active JP7245278B2 (ja) | 2014-04-25 | 2021-04-07 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
JP2023037742A Pending JP2023072010A (ja) | 2014-04-25 | 2023-03-10 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016562218A Active JP6571679B2 (ja) | 2014-04-25 | 2015-04-24 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
JP2019146189A Active JP6866433B2 (ja) | 2014-04-25 | 2019-08-08 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023037742A Pending JP2023072010A (ja) | 2014-04-25 | 2023-03-10 | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (6) | US9850269B2 (ja) |
EP (2) | EP3134506B1 (ja) |
JP (4) | JP6571679B2 (ja) |
KR (2) | KR102470198B1 (ja) |
CN (3) | CN110511927A (ja) |
AU (2) | AU2015249312B2 (ja) |
BR (1) | BR112016024632A2 (ja) |
CA (1) | CA2944800A1 (ja) |
DK (1) | DK3134506T3 (ja) |
EA (1) | EA201691696A1 (ja) |
ES (1) | ES2750661T3 (ja) |
IL (1) | IL247973A0 (ja) |
MX (2) | MX2016013965A (ja) |
PT (1) | PT3134506T (ja) |
SG (1) | SG11201608725YA (ja) |
WO (1) | WO2015164773A1 (ja) |
Families Citing this family (58)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
PL3338765T3 (pl) | 2009-12-01 | 2019-06-28 | Translate Bio, Inc. | Pochodna steroidowa dla dostarczania mrna w ludzkich chorobach genetycznych |
CN103748078B (zh) | 2011-06-08 | 2016-11-09 | 夏尔人类遗传性治疗公司 | 可裂解脂质 |
EP2970955B1 (en) * | 2013-03-14 | 2018-11-14 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
US10077439B2 (en) * | 2013-03-15 | 2018-09-18 | Modernatx, Inc. | Removal of DNA fragments in mRNA production process |
SG11201608725YA (en) * | 2014-04-25 | 2016-11-29 | Shire Human Genetic Therapies | Methods for purification of messenger rna |
EP3294885B1 (en) | 2015-05-08 | 2020-07-01 | CureVac Real Estate GmbH | Method for producing rna |
EP3744843A1 (en) | 2015-05-29 | 2020-12-02 | CureVac Real Estate GmbH | A method for producing and purifying rna, comprising at least one step of tangential flow filtration |
WO2018157141A1 (en) | 2017-02-27 | 2018-08-30 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
EP3971291A1 (en) | 2017-02-27 | 2022-03-23 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
WO2018157154A2 (en) | 2017-02-27 | 2018-08-30 | Translate Bio, Inc. | Novel codon-optimized cftr mrna |
DK3585886T3 (da) | 2017-02-27 | 2024-02-19 | Translate Bio Inc | Storskalasyntese af messenger-rna |
EP3658672A1 (en) * | 2017-07-24 | 2020-06-03 | Modernatx, Inc. | Modified mrna encoding a glucose-6-phosphatase and uses thereof |
MA49922A (fr) | 2017-08-18 | 2021-06-02 | Modernatx Inc | Procédés pour analyse par clhp |
CN108486098B (zh) * | 2018-03-06 | 2021-07-06 | 中山大学肿瘤防治中心(中山大学附属肿瘤医院、中山大学肿瘤研究所) | 一种用SLFN13从总RNA中纯化总mRNA的方法 |
AU2019325702A1 (en) * | 2018-08-24 | 2021-02-25 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger RNA |
MA53609A (fr) * | 2018-09-13 | 2021-07-21 | Modernatx Inc | Polynucléotides codant la glucose-6-phosphatase pour le traitement de la glycogénose |
CA3105153A1 (en) * | 2018-10-24 | 2020-04-30 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Process for the purification of oligonucleotides |
EP3877538A1 (en) | 2018-11-08 | 2021-09-15 | Translate Bio, Inc. | Methods and compositions for messenger rna purification |
WO2020160087A1 (en) * | 2019-01-29 | 2020-08-06 | Flagship Pioneering Innovations V, Inc. | Methods of separating long polynucleotides from a composition |
CN113396219A (zh) * | 2019-02-11 | 2021-09-14 | 埃泽瑞斯公司 | 通过切向流过滤纯化mRNA |
WO2020168466A1 (en) | 2019-02-19 | 2020-08-27 | Stemirna Therapeutics Co., Ltd. | Modified nucleoside and synthetic methods thereof |
KR20220029556A (ko) | 2019-05-15 | 2022-03-08 | 트랜슬레이트 바이오 인코포레이티드 | 전령 rna의 정제 방법 |
US20210009987A1 (en) * | 2019-07-10 | 2021-01-14 | Locana, Inc. | Rna-targeting knockdown and replacement compositions and methods for use |
KR20220038365A (ko) | 2019-07-23 | 2022-03-28 | 트랜슬레이트 바이오 인코포레이티드 | Mrna-로딩된 지질 나노입자의 안정한 조성물 및 제조 방법 |
CN214973877U (zh) | 2019-08-09 | 2021-12-03 | 胡桃钳医疗公司 | 用于形成治疗性多核苷酸的微流体设备及微流体路径装置 |
CA3155003A1 (en) | 2019-09-20 | 2021-03-25 | Translate Bio, Inc. | Mrna encoding engineered cftr |
JP2022552286A (ja) | 2019-10-09 | 2022-12-15 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | メッセンジャーrnaの組成物、方法および使用 |
EP4048316A1 (en) | 2019-10-21 | 2022-08-31 | Translate Bio, Inc. | Compositions, methods and uses of messenger rna |
CN115461042A (zh) | 2019-12-20 | 2022-12-09 | 翻译生物公司 | 制备负载mrna的脂质纳米颗粒的改进方法 |
US20230051811A1 (en) | 2019-12-20 | 2023-02-16 | Translate Bio, Inc | Rectal delivery of messenger rna |
US11576966B2 (en) | 2020-02-04 | 2023-02-14 | CureVac SE | Coronavirus vaccine |
CN115443338A (zh) | 2020-02-10 | 2022-12-06 | 翻译生物公司 | 用于信使rna纯化的方法和组合物 |
AU2021224892A1 (en) | 2020-02-18 | 2022-10-13 | Translate Bio, Inc. | Improved processes for in vitro transcription of messenger RNA |
JP2023514450A (ja) | 2020-02-25 | 2023-04-05 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | Mrna担持脂質ナノ粒子を調製する改善された方法 |
CN113521268A (zh) | 2020-04-22 | 2021-10-22 | 生物技术Rna制药有限公司 | 冠状病毒疫苗 |
CA3177940A1 (en) | 2020-05-07 | 2021-11-11 | Anusha DIAS | Optimized nucleotide sequences encoding sars-cov-2 antigens |
WO2021226463A1 (en) | 2020-05-07 | 2021-11-11 | Translate Bio, Inc. | Composition and methods for treatment of primary ciliary dyskinesia |
EP4146342A1 (en) | 2020-05-07 | 2023-03-15 | Translate Bio, Inc. | Improved compositions for cftr mrna therapy |
JP2023528586A (ja) * | 2020-05-12 | 2023-07-05 | クランフィールド ユニヴァーシティー | Rnaを用いた治療薬の合成方法及び合成モジュール式装置 |
AU2021273502A1 (en) | 2020-05-15 | 2023-02-02 | Translate Bio, Inc. | Lipid nanoparticle formulations for mRNA delivery |
JP2023544167A (ja) * | 2020-10-01 | 2023-10-20 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | メッセンジャーrnaの精製のための方法 |
EP4225268A1 (en) | 2020-10-06 | 2023-08-16 | Translate Bio, Inc. | Improved process and formulation of lipid nanoparticles |
WO2022081548A1 (en) | 2020-10-12 | 2022-04-21 | Translate Bio, Inc. | Improved process of preparing ice-based lipid nanoparticles |
JP2023545128A (ja) | 2020-10-12 | 2023-10-26 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | mRNA搭載脂質ナノ粒子を製造する改善された方法 |
WO2022082001A1 (en) | 2020-10-15 | 2022-04-21 | Translate Bio, Inc. | Large scale synthesis of messenger rna |
EP4240326A1 (en) | 2020-11-09 | 2023-09-13 | Translate Bio, Inc. | Improved compositions for delivery of codon-optimized mrna |
IL303165A (en) | 2020-11-25 | 2023-07-01 | Translate Bio Inc | Stable liquid formulations of lipid nanoparticles |
AU2021405281A1 (en) | 2020-12-22 | 2023-07-06 | CureVac SE | Rna vaccine against sars-cov-2 variants |
EP4277929A1 (en) | 2021-01-14 | 2023-11-22 | Translate Bio, Inc. | Methods and compositions for delivering mrna coded antibodies |
EP4313115A1 (en) | 2021-03-25 | 2024-02-07 | Translate Bio, Inc. | Optimized nucleotide sequences encoding the extracellular domain of human ace2 protein or a portion thereof |
EP4326338A1 (en) | 2021-04-19 | 2024-02-28 | Translate Bio, Inc. | Improved compositions for delivery of mrna |
EP4330427A1 (en) | 2021-04-29 | 2024-03-06 | Translate Bio, Inc. | Methods for measuring poly a tail length |
KR20240021170A (ko) | 2021-05-12 | 2024-02-16 | 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 | 변형된 mRNA, 변형된 비-코딩 RNA, 및 그의 용도 |
WO2023278754A1 (en) | 2021-07-01 | 2023-01-05 | Translate Bio, Inc. | Compositions for delivery of mrna |
WO2023086893A1 (en) | 2021-11-10 | 2023-05-19 | Translate Bio, Inc. | Composition and methods for treatment of primary ciliary dyskinesia |
WO2023150256A1 (en) * | 2022-02-03 | 2023-08-10 | Modernatx, Inc. | Continuous precipitation for mrna purification |
JP2023181989A (ja) | 2022-06-13 | 2023-12-25 | 上海臻上医薬科技有限公司 | マイクロニードル注射製剤およびその使用 |
US11878055B1 (en) | 2022-06-26 | 2024-01-23 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998005673A1 (en) * | 1996-08-01 | 1998-02-12 | Megabios Corporation | Methods for purifying nucleic acids |
JP2014506873A (ja) * | 2010-12-10 | 2014-03-20 | トンプソン トレイシー | 分離方法のための組成物 |
WO2014152966A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
JP6571679B2 (ja) * | 2014-04-25 | 2019-09-04 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Family Cites Families (489)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2647121A (en) | 1951-02-02 | 1953-07-28 | Ruth P Jacoby | Diamine-bis-acetamides |
US2819718A (en) | 1953-07-16 | 1958-01-14 | Isidore H Goldman | Drainage tube |
US2717909A (en) | 1953-09-24 | 1955-09-13 | Monsanto Chemicals | Hydroxyethyl-keryl-alkylene-ammonium compounds |
US2844629A (en) | 1956-04-25 | 1958-07-22 | American Home Prod | Fatty acid amides and derivatives thereof |
US3096560A (en) | 1958-11-21 | 1963-07-09 | William J Liebig | Process for synthetic vascular implants |
FR1378382A (fr) | 1962-12-01 | 1964-11-13 | Sandoz Sa | Amides de l'acide amino-propionique, utilisables en particulier pour le traitement des fibres textiles |
GB1072118A (en) | 1962-12-01 | 1967-06-14 | Sandoz Ag | Amides of aminopropionic acid |
JPS5141663B1 (ja) | 1966-03-12 | 1976-11-11 | ||
JPS4822365B1 (ja) | 1968-10-25 | 1973-07-05 | ||
NL143127B (nl) | 1969-02-04 | 1974-09-16 | Rhone Poulenc Sa | Versterkingsorgaan voor een defecte hartklep. |
US3614955A (en) | 1970-02-09 | 1971-10-26 | Medtronic Inc | Standby defibrillator and method of operation |
US3614954A (en) | 1970-02-09 | 1971-10-26 | Medtronic Inc | Electronic standby defibrillator |
JPS5024216B1 (ja) | 1970-12-29 | 1975-08-14 | ||
JPS5012146Y2 (ja) | 1971-07-27 | 1975-04-15 | ||
US3945052A (en) | 1972-05-01 | 1976-03-23 | Meadox Medicals, Inc. | Synthetic vascular graft and method for manufacturing the same |
US3805301A (en) | 1972-07-28 | 1974-04-23 | Meadox Medicals Inc | Tubular grafts having indicia thereon |
JPS49127908A (ja) | 1973-04-20 | 1974-12-07 | ||
JPS5624664B2 (ja) | 1973-06-28 | 1981-06-08 | ||
US4013507A (en) | 1973-09-18 | 1977-03-22 | California Institute Of Technology | Ionene polymers for selectively inhibiting the vitro growth of malignant cells |
JPS5123537A (ja) | 1974-04-26 | 1976-02-25 | Adeka Argus Chemical Co Ltd | Kasozaisoseibutsu |
GB1527592A (en) | 1974-08-05 | 1978-10-04 | Ici Ltd | Wound dressing |
US3995623A (en) | 1974-12-23 | 1976-12-07 | American Hospital Supply Corporation | Multipurpose flow-directed catheter |
JPS5813576B2 (ja) | 1974-12-27 | 1983-03-14 | アデカ ア−ガスカガク カブシキガイシヤ | 安定化された合成高分子組成物 |
DE2520814A1 (de) | 1975-05-09 | 1976-11-18 | Bayer Ag | Lichtstabilisierung von polyurethanen |
US4281669A (en) | 1975-05-09 | 1981-08-04 | Macgregor David C | Pacemaker electrode with porous system |
JPS5210847A (en) | 1975-07-16 | 1977-01-27 | Nippon Steel Corp | Pinch roll |
US4096860A (en) | 1975-10-08 | 1978-06-27 | Mclaughlin William F | Dual flow encatheter |
CA1069652A (en) | 1976-01-09 | 1980-01-15 | Alain F. Carpentier | Supported bioprosthetic heart valve with compliant orifice ring |
US4134402A (en) | 1976-02-11 | 1979-01-16 | Mahurkar Sakharam D | Double lumen hemodialysis catheter |
US4072146A (en) | 1976-09-08 | 1978-02-07 | Howes Randolph M | Venous catheter device |
US4335723A (en) | 1976-11-26 | 1982-06-22 | The Kendall Company | Catheter having inflatable retention means |
US4099528A (en) | 1977-02-17 | 1978-07-11 | Sorenson Research Co., Inc. | Double lumen cannula |
US4140126A (en) | 1977-02-18 | 1979-02-20 | Choudhury M Hasan | Method for performing aneurysm repair |
US4265745A (en) | 1977-05-25 | 1981-05-05 | Teijin Limited | Permselective membrane |
US4182833A (en) | 1977-12-07 | 1980-01-08 | Celanese Polymer Specialties Company | Cationic epoxide-amine reaction products |
US4180068A (en) | 1978-04-13 | 1979-12-25 | Motion Control, Incorporated | Bi-directional flow catheter with retractable trocar/valve structure |
DE2960875D1 (en) | 1978-04-19 | 1981-12-10 | Ici Plc | A method of preparing a tubular product by electrostatic spinning |
US4284459A (en) | 1978-07-03 | 1981-08-18 | The Kendall Company | Method for making a molded catheter |
US4227533A (en) | 1978-11-03 | 1980-10-14 | Bristol-Myers Company | Flushable urinary catheter |
US4375817A (en) | 1979-07-19 | 1983-03-08 | Medtronic, Inc. | Implantable cardioverter |
US4500707A (en) | 1980-02-29 | 1985-02-19 | University Patents, Inc. | Nucleosides useful in the preparation of polynucleotides |
US5132418A (en) | 1980-02-29 | 1992-07-21 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
US4458066A (en) | 1980-02-29 | 1984-07-03 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
DE3010841A1 (de) | 1980-03-21 | 1981-10-08 | Ulrich Dr.med. 6936 Haag Uthmann | Katheder |
US4308085A (en) | 1980-07-28 | 1981-12-29 | Jenoptik Jena Gmbh | Process for the preparation of high molecular thermoplastic epoxide-amine-polyadducts |
US4973679A (en) | 1981-03-27 | 1990-11-27 | University Patents, Inc. | Process for oligonucleo tide synthesis using phosphormidite intermediates |
US4668777A (en) | 1981-03-27 | 1987-05-26 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite nucleoside compounds |
US4415732A (en) | 1981-03-27 | 1983-11-15 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite compounds and processes |
US4339369A (en) | 1981-04-23 | 1982-07-13 | Celanese Corporation | Cationic epoxide-amine reaction products |
US4401796A (en) | 1981-04-30 | 1983-08-30 | City Of Hope Research Institute | Solid-phase synthesis of polynucleotides |
US4373071A (en) | 1981-04-30 | 1983-02-08 | City Of Hope Research Institute | Solid-phase synthesis of polynucleotides |
US4406656A (en) | 1981-06-01 | 1983-09-27 | Brack Gillium Hattler | Venous catheter having collapsible multi-lumens |
US4475972A (en) | 1981-10-01 | 1984-10-09 | Ontario Research Foundation | Implantable material |
US4401472A (en) | 1982-02-26 | 1983-08-30 | Martin Marietta Corporation | Hydraulic cement mixes and processes for improving hydraulic cement mixes |
US4568329A (en) | 1982-03-08 | 1986-02-04 | Mahurkar Sakharam D | Double lumen catheter |
US4546499A (en) | 1982-12-13 | 1985-10-15 | Possis Medical, Inc. | Method of supplying blood to blood receiving vessels |
US4530113A (en) | 1983-05-20 | 1985-07-23 | Intervascular, Inc. | Vascular grafts with cross-weave patterns |
US4550447A (en) | 1983-08-03 | 1985-11-05 | Shiley Incorporated | Vascular graft prosthesis |
US4647416A (en) | 1983-08-03 | 1987-03-03 | Shiley Incorporated | Method of preparing a vascular graft prosthesis |
US5104399A (en) | 1986-12-10 | 1992-04-14 | Endovascular Technologies, Inc. | Artificial graft and implantation method |
US4710169A (en) | 1983-12-16 | 1987-12-01 | Christopher T Graham | Urinary catheter with collapsible urethral tube |
US4571241A (en) | 1983-12-16 | 1986-02-18 | Christopher T Graham | Urinary catheter with collapsible urethral tube |
US4737518A (en) | 1984-04-03 | 1988-04-12 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Lipid derivatives, their production and use |
US4562596A (en) | 1984-04-25 | 1986-01-07 | Elliot Kornberg | Aortic graft, device and method for performing an intraluminal abdominal aortic aneurysm repair |
US4782836A (en) | 1984-05-24 | 1988-11-08 | Intermedics, Inc. | Rate adaptive cardiac pacemaker responsive to patient activity and temperature |
US4897355A (en) | 1985-01-07 | 1990-01-30 | Syntex (U.S.A.) Inc. | N[ω,(ω-1)-dialkyloxy]- and N-[ω,(ω-1)-dialkenyloxy]-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor |
US4662382A (en) | 1985-01-16 | 1987-05-05 | Intermedics, Inc. | Pacemaker lead with enhanced sensitivity |
US4762915A (en) | 1985-01-18 | 1988-08-09 | Liposome Technology, Inc. | Protein-liposome conjugates |
US4860751A (en) | 1985-02-04 | 1989-08-29 | Cordis Corporation | Activity sensor for pacemaker control |
US5223263A (en) | 1988-07-07 | 1993-06-29 | Vical, Inc. | Liponucleotide-containing liposomes |
CA1320724C (en) | 1985-07-19 | 1993-07-27 | Koichi Kanehira | Terpene amino alcohols and medicinal uses thereof |
US4701162A (en) | 1985-09-24 | 1987-10-20 | The Kendall Company | Foley catheter assembly |
US4737323A (en) | 1986-02-13 | 1988-04-12 | Liposome Technology, Inc. | Liposome extrusion method |
US5153319A (en) | 1986-03-31 | 1992-10-06 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
DE3616824A1 (de) | 1986-05-17 | 1987-11-19 | Schering Ag | Verwendung von haertbaren kunstharzmischungen fuer oberflaechenbeschichtungen und druckfarben und verfahren zu ihrer herstellung |
EP0255899B1 (de) | 1986-07-31 | 1992-07-15 | Werner Prof. Dr.-Ing. Irnich | Frequenzadaptierender Herzschrittmacher |
US4960409A (en) | 1986-09-11 | 1990-10-02 | Catalano Marc L | Method of using bilumen peripheral venous catheter with adapter |
JPH0829776B2 (ja) | 1986-10-29 | 1996-03-27 | 東燃化学株式会社 | 合成樹脂製容器及びその製造用金型 |
US4720517A (en) | 1986-11-24 | 1988-01-19 | Ciba-Geigy Corporation | Compositions stabilized with N-hydroxyiminodiacetic and dipropionic acids and esters thereof |
US4920016A (en) | 1986-12-24 | 1990-04-24 | Linear Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
DE3728917A1 (de) | 1987-08-29 | 1989-03-09 | Roth Hermann J | Neue lipide mit unsymmetrisch substituierter disulfidbruecke |
US4946683A (en) | 1987-11-18 | 1990-08-07 | Vestar, Inc. | Multiple step entrapment/loading procedure for preparing lipophilic drug-containing liposomes |
US4843155A (en) | 1987-11-19 | 1989-06-27 | Piotr Chomczynski | Product and process for isolating RNA |
US5138067A (en) | 1987-12-17 | 1992-08-11 | Shionogi & Co. Ltd. | Lipid derivatives |
US5047540A (en) | 1987-12-17 | 1991-09-10 | Shionogi & Co., Ltd. | Lipid derivatives |
US4892540A (en) | 1988-04-21 | 1990-01-09 | Sorin Biomedica S.P.A. | Two-leaflet prosthetic heart valve |
US5176661A (en) | 1988-09-06 | 1993-01-05 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Composite vascular catheter |
US5024671A (en) | 1988-09-19 | 1991-06-18 | Baxter International Inc. | Microporous vascular graft |
US5200395A (en) | 1988-10-18 | 1993-04-06 | Ajinomoto Company, Inc. | Pharmaceutical composition of BUF-5 for treating anemia |
CA2001401A1 (en) | 1988-10-25 | 1990-04-25 | Claude Piantadosi | Quaternary amine containing ether or ester lipid derivatives and therapeutic compositions |
US5262530A (en) | 1988-12-21 | 1993-11-16 | Applied Biosystems, Inc. | Automated system for polynucleotide synthesis and purification |
US5047524A (en) | 1988-12-21 | 1991-09-10 | Applied Biosystems, Inc. | Automated system for polynucleotide synthesis and purification |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
US6214804B1 (en) | 1989-03-21 | 2001-04-10 | Vical Incorporated | Induction of a protective immune response in a mammal by injecting a DNA sequence |
NL8900725A (nl) * | 1989-03-23 | 1990-10-16 | Az Univ Amsterdam | Werkwijze en combinatie van middelen voor het isoleren van nucleinezuur. |
FR2645866B1 (fr) | 1989-04-17 | 1991-07-05 | Centre Nat Rech Scient | Nouvelles lipopolyamines, leur preparation et leur emploi |
US5194654A (en) | 1989-11-22 | 1993-03-16 | Vical, Inc. | Lipid derivatives of phosphonoacids for liposomal incorporation and method of use |
US5863770A (en) * | 1989-08-22 | 1999-01-26 | Hsc Research And Development Limited Partnership | Stable meterologous propagation of CFTR protein variant cDNA |
US5279833A (en) | 1990-04-04 | 1994-01-18 | Yale University | Liposomal transfection of nucleic acids into animal cells |
US5101824A (en) | 1990-04-16 | 1992-04-07 | Siemens-Pacesetter, Inc. | Rate-responsive pacemaker with circuitry for processing multiple sensor inputs |
US5264618A (en) | 1990-04-19 | 1993-11-23 | Vical, Inc. | Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules |
US5405379A (en) | 1990-07-26 | 1995-04-11 | Lane; Rodney J. | Self expanding vascular endoprosthesis for aneurysms |
US5693338A (en) | 1994-09-29 | 1997-12-02 | Emisphere Technologies, Inc. | Diketopiperazine-based delivery systems |
JPH0765267B2 (ja) | 1990-08-22 | 1995-07-12 | 花王株式会社 | 柔軟仕上剤 |
US5256294A (en) | 1990-09-17 | 1993-10-26 | Genentech, Inc. | Tangential flow filtration process and apparatus |
DE9117152U1 (de) | 1990-10-09 | 1996-07-11 | Cook Inc | Stent |
ATE120971T1 (de) | 1990-12-19 | 1995-04-15 | Osypka Peter | Herzschrittmacherleitung mit einem inneren kanal und mit einem elektrodenkopf. |
US5116360A (en) | 1990-12-27 | 1992-05-26 | Corvita Corporation | Mesh composite graft |
JP2547524Y2 (ja) | 1991-01-22 | 1997-09-10 | 東洋ラジエーター株式会社 | オイルクーラ |
US5405363A (en) | 1991-03-15 | 1995-04-11 | Angelon Corporation | Implantable cardioverter defibrillator having a smaller displacement volume |
US5330768A (en) | 1991-07-05 | 1994-07-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Controlled drug delivery using polymer/pluronic blends |
US5545449A (en) | 1991-10-02 | 1996-08-13 | Weyerhaeuser Company | Polyether-reinforced fiber-based materials |
US5151105A (en) | 1991-10-07 | 1992-09-29 | Kwan Gett Clifford | Collapsible vessel sleeve implant |
US5284491A (en) | 1992-02-27 | 1994-02-08 | Medtronic, Inc. | Cardiac pacemaker with hysteresis behavior |
US5352461A (en) | 1992-03-11 | 1994-10-04 | Pharmaceutical Discovery Corporation | Self assembling diketopiperazine drug delivery system |
SE9200951D0 (sv) | 1992-03-27 | 1992-03-27 | Kabi Pharmacia Ab | Pharmaceutical composition containing a defined lipid system |
CA2132342A1 (en) | 1992-04-06 | 1993-10-14 | Kenneth F. Buechler | Novel opiate derivatives and protein and polypeptide opiate derivative conjugates and labels |
US6670178B1 (en) | 1992-07-10 | 2003-12-30 | Transkaryotic Therapies, Inc. | In Vivo production and delivery of insulinotropin for gene therapy |
KR950702628A (ko) | 1992-08-01 | 1995-07-29 | 치세이 라 | 항알레르기 조성물(Antiallergic agent) |
US5334761A (en) | 1992-08-28 | 1994-08-02 | Life Technologies, Inc. | Cationic lipids |
US5461223A (en) | 1992-10-09 | 1995-10-24 | Eastman Kodak Company | Bar code detecting circuitry |
US5300022A (en) | 1992-11-12 | 1994-04-05 | Martin Klapper | Urinary catheter and bladder irrigation system |
US5496362A (en) | 1992-11-24 | 1996-03-05 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Implantable conformal coil patch electrode with multiple conductive elements for cardioversion and defibrillation |
US5552155A (en) | 1992-12-04 | 1996-09-03 | The Liposome Company, Inc. | Fusogenic lipsomes and methods for making and using same |
US5716395A (en) | 1992-12-11 | 1998-02-10 | W.L. Gore & Associates, Inc. | Prosthetic vascular graft |
WO1994018987A1 (en) | 1993-02-19 | 1994-09-01 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | Drug composition containing nucleic acid copolymer |
US5395619A (en) | 1993-03-03 | 1995-03-07 | Liposome Technology, Inc. | Lipid-polymer conjugates and liposomes |
US5697953A (en) | 1993-03-13 | 1997-12-16 | Angeion Corporation | Implantable cardioverter defibrillator having a smaller displacement volume |
US5624976A (en) | 1994-03-25 | 1997-04-29 | Dentsply Gmbh | Dental filling composition and method |
US5314430A (en) | 1993-06-24 | 1994-05-24 | Medtronic, Inc. | Atrial defibrillator employing transvenous and subcutaneous electrodes and method of use |
DE4321904B4 (de) | 1993-07-01 | 2013-05-16 | Qiagen Gmbh | Verfahren zur chromatographischen Reinigung und Trennung von Nucleinsäuregemischen |
DE4325848A1 (de) | 1993-07-31 | 1995-02-02 | Basf Ag | Verfahren zur Herstellung von N-(2-Hydroxyethyl)-piperazin |
EP0875280B1 (en) | 1993-10-06 | 2001-08-22 | The Kansai Electric Power Co., Inc. | Method for removing carbon dioxide from combustion exhaust gas |
US5609624A (en) | 1993-10-08 | 1997-03-11 | Impra, Inc. | Reinforced vascular graft and method of making same |
SE9303481L (sv) | 1993-10-22 | 1995-04-23 | Berol Nobel Ab | Hygienkomposition |
AU1091095A (en) | 1993-11-08 | 1995-05-29 | Harrison M. Lazarus | Intraluminal vascular graft and method |
JPH09505593A (ja) | 1993-11-24 | 1997-06-03 | メガバイオス・コーポレイション | ピペラジンの両親媒性誘導体 |
US5595756A (en) | 1993-12-22 | 1997-01-21 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents |
US5464924A (en) | 1994-01-07 | 1995-11-07 | The Dow Chemical Company | Flexible poly(amino ethers) for barrier packaging |
ATE302208T1 (de) * | 1994-02-11 | 2005-09-15 | Qiagen Gmbh | Verfahren zur trennung von doppelstrang/einzelstrangnukleinsäurestrukturen |
US5844107A (en) | 1994-03-23 | 1998-12-01 | Case Western Reserve University | Compacted nucleic acids and their delivery to cells |
WO1995027478A1 (en) | 1994-04-12 | 1995-10-19 | The Liposome Company, Inc. | Fusogenic liposomes and methods of making and using same |
US5776747A (en) | 1994-07-20 | 1998-07-07 | Cytotherapeutics, Inc. | Method for controlling the distribution of cells within a bioartificial organ using polycthylene oxide-poly (dimethylsiloxane) copolymer |
US5820873A (en) | 1994-09-30 | 1998-10-13 | The University Of British Columbia | Polyethylene glycol modified ceramide lipids and liposome uses thereof |
US5885613A (en) | 1994-09-30 | 1999-03-23 | The University Of British Columbia | Bilayer stabilizing components and their use in forming programmable fusogenic liposomes |
US5641665A (en) | 1994-11-28 | 1997-06-24 | Vical Incorporated | Plasmids suitable for IL-2 expression |
US6071890A (en) | 1994-12-09 | 2000-06-06 | Genzyme Corporation | Organ-specific targeting of cationic amphiphile/DNA complexes for gene therapy |
US5965434A (en) | 1994-12-29 | 1999-10-12 | Wolff; Jon A. | Amphipathic PH sensitive compounds and delivery systems for delivering biologically active compounds |
US6485726B1 (en) | 1995-01-17 | 2002-11-26 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Receptor specific transepithelial transport of therapeutics |
US5830430A (en) | 1995-02-21 | 1998-11-03 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Cationic lipids and the use thereof |
EP0822835A1 (en) | 1995-04-17 | 1998-02-11 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Hybrid magnetic resonance contrast agents |
US20010047091A1 (en) * | 1998-09-09 | 2001-11-29 | Brian Miki | Cryptic regulatory elements obtained from plants |
US5772694A (en) | 1995-05-16 | 1998-06-30 | Medical Carbon Research Institute L.L.C. | Prosthetic heart valve with improved blood flow |
US5700642A (en) | 1995-05-22 | 1997-12-23 | Sri International | Oligonucleotide sizing using immobilized cleavable primers |
US5783383A (en) | 1995-05-23 | 1998-07-21 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Method of detecting cytomegalovirus (CMV) |
US5705385A (en) | 1995-06-07 | 1998-01-06 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer |
US5609629A (en) | 1995-06-07 | 1997-03-11 | Med Institute, Inc. | Coated implantable medical device |
US7422902B1 (en) | 1995-06-07 | 2008-09-09 | The University Of British Columbia | Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer |
JP4335310B2 (ja) | 1995-06-07 | 2009-09-30 | ザ ユニバーシティ オブ ブリティッシュ コロンビア | 疎水性脂質−核酸複合中間体を通して調製される脂質−核酸粒子、及び遺伝子移送のための使用 |
US5981501A (en) | 1995-06-07 | 1999-11-09 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Methods for encapsulating plasmids in lipid bilayers |
US5607385A (en) | 1995-08-17 | 1997-03-04 | Medtronic, Inc. | Device and algorithm for a combined cardiomyostimulator and a cardiac pacer-carioverter-defibrillator |
US5744335A (en) | 1995-09-19 | 1998-04-28 | Mirus Corporation | Process of transfecting a cell with a polynucleotide mixed with an amphipathic compound and a DNA-binding protein |
FR2740978B1 (fr) | 1995-11-10 | 1998-01-02 | Ela Medical Sa | Dispositif medical actif du type defibrillateur/cardioverteur implantable |
US5874105A (en) | 1996-01-31 | 1999-02-23 | Collaborative Laboratories, Inc. | Lipid vesicles formed with alkylammonium fatty acid salts |
US6417326B1 (en) | 1996-04-11 | 2002-07-09 | The University Of British Columbia | Fusogenic liposomes |
US5935936A (en) | 1996-06-03 | 1999-08-10 | Genzyme Corporation | Compositions comprising cationic amphiphiles and co-lipids for intracellular delivery of therapeutic molecules |
US5913848A (en) | 1996-06-06 | 1999-06-22 | Luther Medical Products, Inc. | Hard tip over-the-needle catheter and method of manufacturing the same |
US5677124A (en) | 1996-07-03 | 1997-10-14 | Ambion, Inc. | Ribonuclease resistant viral RNA standards |
JP3734189B2 (ja) | 1996-07-19 | 2006-01-11 | 株式会社小松製作所 | 2ピースブーム型建設機械のストロークエンドショック低減装置 |
EP0921780A1 (en) | 1996-07-23 | 1999-06-16 | Raymond L. Mitchell | Wheelchair propulsion kit |
US5736573A (en) | 1996-07-31 | 1998-04-07 | Galat; Alexander | Lipid and water soluble derivatives of drugs |
US7288266B2 (en) | 1996-08-19 | 2007-10-30 | United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Liposome complexes for increased systemic delivery |
CA2264140A1 (en) | 1996-08-26 | 1998-03-05 | Transgene S.A. | Cationic lipid-nucleic acid complexes |
ES2305157T3 (es) | 1996-09-13 | 2008-11-01 | Lipoxen Technologies Limited | Liposomas. |
TW520297B (en) | 1996-10-11 | 2003-02-11 | Sequus Pharm Inc | Fusogenic liposome composition and method |
WO1998019709A2 (en) | 1996-11-04 | 1998-05-14 | Qiagen Gmbh | Cationic reagents for transfection |
US6887665B2 (en) | 1996-11-14 | 2005-05-03 | Affymetrix, Inc. | Methods of array synthesis |
CN1244215B (zh) | 1996-11-20 | 2010-11-03 | 荷兰克鲁塞尔公司 | 改进的腺病毒载体生产和纯化方法 |
US5985930A (en) * | 1996-11-21 | 1999-11-16 | Pasinetti; Giulio M. | Treatment of neurodegenerative conditions with nimesulide |
US6204297B1 (en) | 1996-11-26 | 2001-03-20 | Rhodia Inc. | Nonionic gemini surfactants |
JPH10197978A (ja) | 1997-01-09 | 1998-07-31 | Mitsubishi Paper Mills Ltd | ハロゲン化銀写真感光材料 |
EP0853123A1 (de) | 1997-01-10 | 1998-07-15 | Roche Diagnostics GmbH | Reinigung von DNA durch Cross-Flow-Filtration |
FR2760193B1 (fr) | 1997-02-28 | 1999-05-28 | Transgene Sa | Lipides et complexes de lipides cationiques et de substances actives, notamment pour la transfection de cellules |
US5837283A (en) | 1997-03-12 | 1998-11-17 | The Regents Of The University Of California | Cationic lipid compositions targeting angiogenic endothelial cells |
US5945326A (en) | 1997-03-20 | 1999-08-31 | New England Biolabs, Inc. | Method for cloning and producing the Spel restriction endonuclease |
US6835395B1 (en) | 1997-05-14 | 2004-12-28 | The University Of British Columbia | Composition containing small multilamellar oligodeoxynucleotide-containing lipid vesicles |
DE69841002D1 (de) | 1997-05-14 | 2009-09-03 | Univ British Columbia | Hochwirksame verkapselung von nukleinsäuren in lipidvesikeln |
US20030104044A1 (en) | 1997-05-14 | 2003-06-05 | Semple Sean C. | Compositions for stimulating cytokine secretion and inducing an immune response |
JPH115786A (ja) | 1997-06-13 | 1999-01-12 | Pola Chem Ind Inc | 新規アミノヒドロキシプロピルピペラジン誘導体 |
WO1998059076A1 (en) | 1997-06-25 | 1998-12-30 | Promega Corporation | Method of isolating rna |
EP1007683A1 (en) * | 1997-07-12 | 2000-06-14 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Coffee storage proteins |
US6067471A (en) | 1998-08-07 | 2000-05-23 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Atrial and ventricular implantable cardioverter-defibrillator and lead system |
JPH1180142A (ja) | 1997-09-05 | 1999-03-26 | Pola Chem Ind Inc | ジフェニルアルキル化合物の製造法 |
AU9319398A (en) | 1997-09-19 | 1999-04-05 | Sequitur, Inc. | Sense mrna therapy |
DE19746874A1 (de) | 1997-10-23 | 1999-04-29 | Qiagen Gmbh | Verfahren zur Isolierung und Reinigung von Nukleinsäuren an hydrophoben Oberflächen - insbesondere unter Verwendung hydrophober Membranen |
US6165763A (en) | 1997-10-30 | 2000-12-26 | Smithkline Beecham Corporation | Ornithine carbamoyltransferase |
US5972613A (en) | 1997-12-09 | 1999-10-26 | The Perkin-Elmer Corporation | Methods of nucleic acid isolation |
US6096075A (en) | 1998-01-22 | 2000-08-01 | Medical Carbon Research Institute, Llc | Prosthetic heart valve |
US6617171B2 (en) | 1998-02-27 | 2003-09-09 | The General Hospital Corporation | Methods for diagnosing and treating autoimmune disease |
US20020115135A1 (en) * | 1998-03-06 | 2002-08-22 | Henry Yue | Synapse related glycoproteins |
US6271209B1 (en) | 1998-04-03 | 2001-08-07 | Valentis, Inc. | Cationic lipid formulation delivering nucleic acid to peritoneal tumors |
US6176877B1 (en) | 1998-04-20 | 2001-01-23 | St. Jude Medical, Inc. | Two piece prosthetic heart valve |
US6986902B1 (en) | 1998-04-28 | 2006-01-17 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Polyanionic polymers which enhance fusogenicity |
DE19822602A1 (de) | 1998-05-20 | 1999-11-25 | Goldschmidt Ag Th | Verfahren zur Herstellung von Polyaminosäureestern durch Veresterung von sauren Polyaminosäuren oder Umesterung von Polyaminosäureestern |
NO313244B1 (no) | 1998-07-08 | 2002-09-02 | Crew Dev Corp | Fremgangsmåte for isolering og produksjon av magnesitt eller magnesiumklorid |
US6055454A (en) | 1998-07-27 | 2000-04-25 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Cardiac pacemaker with automatic response optimization of a physiologic sensor based on a second sensor |
US6299604B1 (en) | 1998-08-20 | 2001-10-09 | Cook Incorporated | Coated implantable medical device |
US6210892B1 (en) | 1998-10-07 | 2001-04-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Alteration of cellular behavior by antisense modulation of mRNA processing |
US20030064951A1 (en) * | 1998-11-12 | 2003-04-03 | Valentis, Inc. | Methods for purifying nucleic acids |
WO2000030444A1 (en) | 1998-11-25 | 2000-06-02 | Vanderbilt University | Cationic liposomes for gene transfer |
US6248725B1 (en) | 1999-02-23 | 2001-06-19 | Amgen, Inc. | Combinations and methods for promoting in vivo liver cell proliferation and enhancing in vivo liver-directed gene transduction |
US6379698B1 (en) | 1999-04-06 | 2002-04-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Fusogenic lipids and vesicles |
WO2000062813A2 (en) | 1999-04-20 | 2000-10-26 | The University Of British Columbia | Cationic peg-lipids and methods of use |
CN1244376C (zh) | 1999-04-23 | 2006-03-08 | 阿尔萨公司 | 可释放的键和含有该键的组合物 |
US6169923B1 (en) | 1999-04-23 | 2001-01-02 | Pacesetter, Inc. | Implantable cardioverter-defibrillator with automatic arrhythmia detection criteria adjustment |
US6794140B1 (en) | 1999-04-30 | 2004-09-21 | Andrew Simon Goldsborough | Isolation of nucleic acid |
ATE369384T1 (de) | 1999-05-19 | 2007-08-15 | Emd Lexigen Res Ct Corp | Expression und export von interferon-alpha proteinen als fc fusionsproteine |
US6696424B1 (en) | 1999-05-28 | 2004-02-24 | Vical Incorporated | Cytofectin dimers and methods of use thereof |
US6346382B1 (en) | 1999-06-01 | 2002-02-12 | Vanderbilt University | Human carbamyl phosphate synthetase I polymorphism and diagnostic methods related thereto |
US20020010145A1 (en) | 1999-07-12 | 2002-01-24 | Willson Richard C. | Apparatus, methods and compositions for biotechnical separations |
EP1202714A1 (en) | 1999-07-16 | 2002-05-08 | Purdue Research Foundation | Vinyl ether lipids with cleavable hydrophilic headgroups |
US6313285B1 (en) | 1999-07-23 | 2001-11-06 | Genentech, Inc. | Purification of plasmid DNA |
US6358278B1 (en) | 1999-09-24 | 2002-03-19 | St. Jude Medical, Inc. | Heart valve prosthesis with rotatable cuff |
US6371983B1 (en) | 1999-10-04 | 2002-04-16 | Ernest Lane | Bioprosthetic heart valve |
US7060291B1 (en) | 1999-11-24 | 2006-06-13 | Transave, Inc. | Modular targeted liposomal delivery system |
CN1433478A (zh) | 1999-12-30 | 2003-07-30 | 诺瓦提斯公司 | 用于基因治疗的新的胶体合成载体 |
JP3460673B2 (ja) * | 2000-02-04 | 2003-10-27 | 浜松ホトニクス株式会社 | 特定の遺伝子を発現した生細胞の選択的分離方法 |
EP1261379A2 (en) | 2000-02-17 | 2002-12-04 | Genzyme Corporation | Genetic modification of the lung as a portal for gene delivery |
US6370434B1 (en) | 2000-02-28 | 2002-04-09 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Cardiac lead and method for lead implantation |
US6565960B2 (en) | 2000-06-01 | 2003-05-20 | Shriners Hospital Of Children | Polymer composite compositions |
IL138474A0 (en) | 2000-09-14 | 2001-10-31 | Epox Ltd | Highly branched water-soluble polyamine oligomers, process for their preparation and applications thereof |
USRE43612E1 (en) | 2000-10-10 | 2012-08-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable poly(β-amino esters) and uses thereof |
US7427394B2 (en) | 2000-10-10 | 2008-09-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable poly(β-amino esters) and uses thereof |
US6998115B2 (en) | 2000-10-10 | 2006-02-14 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable poly(β-amino esters) and uses thereof |
CA2426244A1 (en) | 2000-10-25 | 2002-05-02 | The University Of British Columbia | Lipid formulations for target delivery |
GB0028361D0 (en) | 2000-11-21 | 2001-01-03 | Glaxo Group Ltd | Method of separating extra chromosomal dna from other cellular components |
US20020094528A1 (en) | 2000-11-29 | 2002-07-18 | Salafsky Joshua S. | Method and apparatus using a surface-selective nonlinear optical technique for detection of probe-target interations |
JP2002167368A (ja) | 2000-12-01 | 2002-06-11 | Nitto Denko Corp | アルキル置換デンドリマーおよびその製造法 |
US20050004058A1 (en) | 2000-12-07 | 2005-01-06 | Patrick Benoit | Sequences upstream of the carp gene, vectors containing them and uses thereof |
JP2004527236A (ja) * | 2001-02-14 | 2004-09-09 | ベイラー カレッジ オブ メディスン | Rna増幅の方法及び組成物 |
DE10109897A1 (de) | 2001-02-21 | 2002-11-07 | Novosom Ag | Fakultativ kationische Liposomen und Verwendung dieser |
US20020192721A1 (en) | 2001-03-28 | 2002-12-19 | Engeneos, Inc. | Modular molecular clasps and uses thereof |
KR100823815B1 (ko) | 2001-04-23 | 2008-04-21 | 신에쓰 가가꾸 고교 가부시끼가이샤 | 에스테르 구조를 갖는 신규 3급 아민 화합물 및 그 제조방법 |
US6585410B1 (en) | 2001-05-03 | 2003-07-01 | The United States Of America As Represented By The Administrator Of The National Aeronautics And Space Administration | Radiant temperature nulling radiometer |
ES2340532T3 (es) | 2001-06-05 | 2010-06-04 | Curevac Gmbh | Arnm con un contenido g/c aumentado que codifica para un antigeno bacteriano y utilizacion del mismo. |
US7124372B2 (en) | 2001-06-13 | 2006-10-17 | Glen David Brin | Interactive communication between a plurality of users |
US20030044771A1 (en) * | 2001-08-30 | 2003-03-06 | Anderson Norman G. | Method for discovering new infectious particles |
EP2428571B1 (en) | 2001-09-28 | 2018-07-18 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | MicroRNA molecules |
CA2463317A1 (en) | 2001-10-12 | 2003-04-24 | Gentra Systems, Inc. | Compositions and methods for using a solid support to purify rna |
CA2466328A1 (en) | 2001-11-09 | 2003-05-15 | Bayer Healthcare Ag | Isotopically coded affinity markers 3 |
DE10162480A1 (de) | 2001-12-19 | 2003-08-07 | Ingmar Hoerr | Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen |
DE10207178A1 (de) | 2002-02-19 | 2003-09-04 | Novosom Ag | Komponenten für die Herstellung amphoterer Liposomen |
US20030170637A1 (en) * | 2002-03-06 | 2003-09-11 | Pirrung Michael C. | Method of analyzing mRNA splice variants |
AU2003220249A1 (en) | 2002-03-15 | 2003-09-29 | Arcturus Bioscience, Inc. | Improved nucleic acid amplification |
DE10214983A1 (de) | 2002-04-04 | 2004-04-08 | TransMIT Gesellschaft für Technologietransfer mbH | Vernebelbare Liposomen und ihre Verwendung zur pulmonalen Applikation von Wirkstoffen |
GB0208390D0 (en) * | 2002-04-11 | 2002-05-22 | Univ London | Adeno-associated virus producer system |
US20060217535A1 (en) * | 2002-05-09 | 2006-09-28 | Debra Yuhas | Hemipteran muscarinic receptor |
US20030215395A1 (en) | 2002-05-14 | 2003-11-20 | Lei Yu | Controllably degradable polymeric biomolecule or drug carrier and method of synthesizing said carrier |
US7601367B2 (en) | 2002-05-28 | 2009-10-13 | Mirus Bio Llc | Compositions and processes using siRNA, amphipathic compounds and polycations |
DE60230071D1 (de) * | 2002-06-14 | 2009-01-08 | Monier Tadros | Methode für die herstellung von protamin |
WO2004002453A1 (en) | 2002-06-28 | 2004-01-08 | Protiva Biotherapeutics Ltd. | Method and apparatus for producing liposomes |
DE10229872A1 (de) | 2002-07-03 | 2004-01-29 | Curevac Gmbh | Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA |
US20040028804A1 (en) | 2002-08-07 | 2004-02-12 | Anderson Daniel G. | Production of polymeric microarrays |
EP1539936A2 (en) | 2002-08-22 | 2005-06-15 | Celltran Limited | Cell culture surface |
US20060160759A1 (en) * | 2002-09-28 | 2006-07-20 | Jianzhu Chen | Influenza therapeutic |
JP2006505644A (ja) | 2002-11-04 | 2006-02-16 | ジーイー・バイエル・シリコーンズ・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング・ウント・コンパニー・コマンジツトゲゼルシヤフト | 線状ポリアミノおよび/またはポリアンモニウムポリシロキサン共重合体i |
JP2006515574A (ja) | 2002-11-22 | 2006-06-01 | ノボ・ノルデイスク・エー/エス | 肥満症の治療に使用される化合物 |
US7169892B2 (en) | 2003-01-10 | 2007-01-30 | Astellas Pharma Inc. | Lipid-peptide-polymer conjugates for long blood circulation and tumor specific drug delivery systems |
KR100774067B1 (ko) | 2003-01-20 | 2007-11-06 | 아사히 가세이 일렉트로닉스 가부시끼가이샤 | 포인팅 디바이스 |
AU2004217437B2 (en) | 2003-03-05 | 2009-11-19 | Senesco Technologies, Inc. | Use of antisense oligonucleotides or siRNA to suppress expression of eIF-5A1 |
US7267950B2 (en) | 2003-05-01 | 2007-09-11 | Veridex, Lcc | Rapid extraction of RNA from cells and tissues |
US20040224912A1 (en) | 2003-05-07 | 2004-11-11 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Modulation of PAI-1 mRNA-binding protein expression |
US7619017B2 (en) | 2003-05-19 | 2009-11-17 | Wacker Chemical Corporation | Polymer emulsions resistant to biodeterioration |
WO2005007810A2 (en) | 2003-06-16 | 2005-01-27 | Grinstaff Mark W | Functional synthetic molecules and macromolecules for gene delivery |
US20050059024A1 (en) * | 2003-07-25 | 2005-03-17 | Ambion, Inc. | Methods and compositions for isolating small RNA molecules |
US20050042660A1 (en) * | 2003-07-31 | 2005-02-24 | Hall Gerald Edward | Devices and methods for isolating RNA |
NZ592917A (en) | 2003-09-15 | 2012-12-21 | Protiva Biotherapeutics Inc | Stable polyethyleneglycol (PEG) dialkyloxypropyl (DAA) lipid conjugates |
WO2005028619A2 (en) | 2003-09-15 | 2005-03-31 | Massachusetts Institute Of Technology | Nanoliter-scale synthesis of arrayed biomaterials and screening thereof |
US20050069590A1 (en) | 2003-09-30 | 2005-03-31 | Buehler Gail K. | Stable suspensions for medicinal dosages |
AU2004279991B2 (en) | 2003-10-10 | 2010-11-25 | Powderject Vaccines, Inc. | Nucleic acid constructs |
WO2005037226A2 (en) | 2003-10-17 | 2005-04-28 | Georgia Tech Research Corporation | Genetically engineered enteroendocrine cells for treating glucose-related metabolic disorders |
EP1683784A4 (en) | 2003-11-10 | 2007-08-22 | Nippon Kayaku Kk | DIIMONIUM SALT CONNECTION AND ITS USE |
US7318898B2 (en) * | 2003-11-18 | 2008-01-15 | Exxonmobil Research And Engineering Company | Polymeric membrane wafer assembly and method |
US8075780B2 (en) | 2003-11-24 | 2011-12-13 | Millipore Corporation | Purification and concentration of synthetic biological molecules |
ATE466080T1 (de) | 2003-12-16 | 2010-05-15 | Qiagen North American Holdings | Formulierungen und verfahren zum denaturieren von proteinen |
US7022214B2 (en) | 2004-01-21 | 2006-04-04 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Carrier ampholytes of high pH range |
ITMI20040167A1 (it) | 2004-02-04 | 2004-05-04 | Univ Padova | Metodo per l'estrazione simultanea di acidi nucleici da un campione biologico |
US7556684B2 (en) | 2004-02-26 | 2009-07-07 | Construction Research & Technology Gmbh | Amine containing strength improvement admixture |
US20060228404A1 (en) | 2004-03-04 | 2006-10-12 | Anderson Daniel G | Compositions and methods for treatment of hypertrophic tissues |
WO2005093052A1 (en) | 2004-03-26 | 2005-10-06 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Method for selectively separating and purifying rna and method for separating and purifying nucleic acid |
US7794932B2 (en) | 2004-04-16 | 2010-09-14 | Piotr Chomczynski | Reagents and methods for isolation of purified RNA |
EP1781593B1 (en) | 2004-06-07 | 2011-12-14 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Cationic lipids and methods of use |
ATE536418T1 (de) | 2004-06-07 | 2011-12-15 | Protiva Biotherapeutics Inc | Lipidverkapselte interferenz-rna |
US7670595B2 (en) | 2004-06-28 | 2010-03-02 | Merck Patent Gmbh | Fc-interferon-beta fusion proteins |
US20060099605A1 (en) | 2004-11-11 | 2006-05-11 | Hall Gerald E Jr | Devices and methods for isolating RNA |
GB0418172D0 (en) | 2004-08-13 | 2004-09-15 | Ic Vec Ltd | Vector |
US7361465B2 (en) * | 2004-09-07 | 2008-04-22 | Applera Corporation | Methods and compositions for tailing and amplifying RNA |
DE102004043342A1 (de) | 2004-09-08 | 2006-03-09 | Bayer Materialscience Ag | Blockierte Polyurethan-Prepolymere als Klebstoffe |
AU2005300638A1 (en) | 2004-11-05 | 2006-05-11 | Novosom Ag | Improvements in or relating to pharmaceutical compositions comprising an oligonucleotide as an active agent |
EP1856262B1 (en) | 2005-01-31 | 2012-08-15 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Upstream and a downstream purification process for large scale production of plasmid dna |
GB0502482D0 (en) | 2005-02-07 | 2005-03-16 | Glaxo Group Ltd | Novel compounds |
WO2007086883A2 (en) | 2005-02-14 | 2007-08-02 | Sirna Therapeutics, Inc. | Cationic lipids and formulated molecular compositions containing them |
WO2006105043A2 (en) | 2005-03-28 | 2006-10-05 | Dendritic Nanotechnologies, Inc. | Janus dendrimers and dendrons |
CA2611944A1 (en) | 2005-06-15 | 2006-12-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Amine-containing lipids and uses thereof |
ES2937245T3 (es) | 2005-08-23 | 2023-03-27 | Univ Pennsylvania | ARN que contiene nucleósidos modificados y métodos de uso del mismo |
US9012219B2 (en) | 2005-08-23 | 2015-04-21 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | RNA preparations comprising purified modified RNA for reprogramming cells |
WO2007031091A2 (en) | 2005-09-15 | 2007-03-22 | Santaris Pharma A/S | Rna antagonist compounds for the modulation of p21 ras expression |
EP1948674A4 (en) | 2005-11-02 | 2009-02-04 | Protiva Biotherapeutics Inc | MODIFIED SIRNA MOLECULES AND APPLICATIONS THEREOF |
US7238791B1 (en) | 2005-12-16 | 2007-07-03 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | 6-monoacetylmorphine derivatives useful in immunoassay |
US20090221684A1 (en) | 2005-12-22 | 2009-09-03 | Trustees Of Boston University | Molecules for Gene Delivery and Gene Therapy, and Methods of Use Thereof |
CN100569877C (zh) | 2005-12-30 | 2009-12-16 | 财团法人工业技术研究院 | 含多uv交联反应基的分枝状结构化合物及其应用 |
US20070281336A1 (en) | 2006-04-14 | 2007-12-06 | Epicentre Technologies | Kits and methods for generating 5' capped RNA |
US9085778B2 (en) | 2006-05-03 | 2015-07-21 | VL27, Inc. | Exosome transfer of nucleic acids to cells |
US20070275923A1 (en) | 2006-05-25 | 2007-11-29 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | CATIONIC PEPTIDES FOR siRNA INTRACELLULAR DELIVERY |
US8808681B2 (en) | 2006-06-05 | 2014-08-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Crosslinked, degradable polymers and uses thereof |
US20080113357A1 (en) * | 2006-06-29 | 2008-05-15 | Millipore Corporation | Filter device for the isolation of a nucleic acid |
US20090186805A1 (en) | 2006-07-06 | 2009-07-23 | Aaron Thomas Tabor | Compositions and Methods for Genetic Modification of Cells Having Cosmetic Function to Enhance Cosmetic Appearance |
ES2293834B1 (es) | 2006-07-20 | 2009-02-16 | Consejo Superior Investig. Cientificas | Compuesto con actividad inhibidora de las interacciones ubc13-uev, composiciones farmaceuticas que lo comprenden y sus aplicaciones terapeuticas. |
EP2046266A4 (en) | 2006-07-21 | 2009-11-04 | Massachusetts Inst Technology | ENDMODICIFIED POLY (BETA AMINO ESTER) AND ITS USE |
DK2068886T3 (da) | 2006-10-03 | 2013-11-18 | Tekmira Pharmaceuticals Corp | Lipidholdige præparater |
DE102006051516A1 (de) | 2006-10-31 | 2008-05-08 | Curevac Gmbh | (Basen-)modifizierte RNA zur Expressionssteigerung eines Proteins |
DK2104739T3 (da) | 2006-12-21 | 2013-10-07 | Novozymes Inc | Modificerede messenger-RNA-stabiliseringssekvenser til ekspression af gener i bakterieceller |
DE102007001370A1 (de) | 2007-01-09 | 2008-07-10 | Curevac Gmbh | RNA-kodierte Antikörper |
US20100092572A1 (en) * | 2007-01-29 | 2010-04-15 | Peter Kaeuper | Chitosan-based colloidal particles for rna delivery |
US8859229B2 (en) | 2007-02-02 | 2014-10-14 | Yale University | Transient transfection with RNA |
WO2008113364A2 (en) | 2007-03-20 | 2008-09-25 | Recepticon Aps | Amino derivatives to prevent nephrotoxicity and cancer |
JP5186126B2 (ja) | 2007-03-29 | 2013-04-17 | 公益財団法人地球環境産業技術研究機構 | 新規トリアジン誘導体ならびにその製法およびそのガス分離膜としての用途 |
MX2009011165A (es) | 2007-04-18 | 2009-12-09 | Cornerstone Pharmaceuticals In | Formulaciones farmaceuticas que contienen derivados del acido lipoico. |
WO2008137470A1 (en) | 2007-05-01 | 2008-11-13 | Pgr-Solutions | Multi-chain lipophilic polyamines |
US20090163705A1 (en) | 2007-05-21 | 2009-06-25 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Cationic lipids |
EP2197495A2 (en) | 2007-10-02 | 2010-06-23 | MDRNA, Inc. | Lipopeptides for delivery of nucleic acids |
AU2008333811B2 (en) | 2007-12-04 | 2014-05-01 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Carbohydrate conjugates as delivery agents for oligonucleotides |
WO2009120247A2 (en) | 2007-12-27 | 2009-10-01 | The Ohio State University Research Foundation | Lipid nanoparticle compositions and methods of making and using the same |
WO2009082817A1 (en) | 2007-12-27 | 2009-07-09 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Silencing of polo-like kinase expression using interfering rna |
US20110097720A1 (en) | 2008-01-02 | 2011-04-28 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Screening method for selected amino lipid-containing compositions |
FR2926560A1 (fr) * | 2008-01-21 | 2009-07-24 | Millipore Corp | Procede d'extraction et de purification d'acides nucleiques sur membrane |
WO2009100254A2 (en) * | 2008-02-05 | 2009-08-13 | Brent Townshend | Protein tyrosine phosphatase inhibitors |
EP2274425A2 (en) | 2008-04-11 | 2011-01-19 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Site-specific delivery of nucleic acids by combining targeting ligands with endosomolytic components |
AU2009238175C1 (en) | 2008-04-15 | 2023-11-30 | Arbutus Biopharma Corporation | Novel lipid formulations for nucleic acid delivery |
US20090263407A1 (en) | 2008-04-16 | 2009-10-22 | Abbott Laboratories | Cationic Lipids and Uses Thereof |
WO2009127230A1 (en) | 2008-04-16 | 2009-10-22 | Curevac Gmbh | MODIFIED (m)RNA FOR SUPPRESSING OR AVOIDING AN IMMUNOSTIMULATORY RESPONSE AND IMMUNOSUPPRESSIVE COMPOSITION |
EP2297322A1 (en) | 2008-06-04 | 2011-03-23 | The Board of Regents of The University of Texas System | Modulation of gene expression through endogenous small rna targeting of gene promoters |
US20100029501A1 (en) | 2008-07-09 | 2010-02-04 | Eva Samal | Method of identifying micro-rna targets |
US20100035249A1 (en) | 2008-08-05 | 2010-02-11 | Kabushiki Kaisha Dnaform | Rna sequencing and analysis using solid support |
JP5492207B2 (ja) * | 2008-08-27 | 2014-05-14 | ライフ テクノロジーズ コーポレーション | 生物学的サンプルの処理装置および処理方法 |
JP2010053108A (ja) | 2008-08-29 | 2010-03-11 | Asahi Kasei Corp | 荷電を有する限外濾過膜を用いた生体成分の分離方法およびモジュール、装置 |
AU2009303345B2 (en) | 2008-10-09 | 2015-08-20 | Arbutus Biopharma Corporation | Improved amino lipids and methods for the delivery of nucleic acids |
CN104382853A (zh) | 2008-10-16 | 2015-03-04 | 玛瑞纳生物技术有限公司 | 基因沉默治疗剂的脂质体有效递送方法和组合物 |
US9080211B2 (en) | 2008-10-24 | 2015-07-14 | Epicentre Technologies Corporation | Transposon end compositions and methods for modifying nucleic acids |
WO2010062322A2 (en) | 2008-10-27 | 2010-06-03 | Massachusetts Institute Of Technology | Modulation of the immune response |
JP6087504B2 (ja) | 2008-11-07 | 2017-03-01 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | アミノアルコールリピドイドおよびその使用 |
HUE037082T2 (hu) | 2008-11-10 | 2018-08-28 | Arbutus Biopharma Corp | Új lipidek és készítmények terápiás hatóanyagok szállítására |
CA2742689A1 (en) | 2008-11-17 | 2010-05-20 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Branched cationic lipids for nucleic acids delivery system |
EP3156494B8 (en) * | 2008-12-04 | 2018-09-19 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Genome editing in rats using zinc-finger nucleases |
CA2744510A1 (en) * | 2008-12-09 | 2010-06-17 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Method for obtaining an excipient-free antibody solution |
WO2010083615A1 (en) | 2009-01-26 | 2010-07-29 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions and methods for silencing apolipoprotein c-iii expression |
WO2010088517A1 (en) | 2009-01-30 | 2010-08-05 | The U.S.A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Methods and systems for purifying transferring and/or manipulating nucleic acids |
US20100222489A1 (en) | 2009-02-27 | 2010-09-02 | Jiang Dayue D | Copolymer composition, membrane article, and methods thereof |
US20100267806A1 (en) | 2009-03-12 | 2010-10-21 | David Bumcrot | LIPID FORMULATED COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING EXPRESSION OF Eg5 AND VEGF GENES |
EP2415124B1 (en) | 2009-04-02 | 2017-02-15 | The Siemon Company | Telecommunications patch panel |
JP5713325B2 (ja) | 2009-04-17 | 2015-05-07 | アイシス イノヴェイション リミテッド | 遺伝物質の送達用の組成物 |
JP5769701B2 (ja) | 2009-05-05 | 2015-08-26 | テクミラ ファーマシューティカルズ コーポレイションTekmira Pharmaceuticals Corporation | 脂質組成物 |
DK2440183T3 (en) | 2009-06-10 | 2018-10-01 | Arbutus Biopharma Corp | Improved lipid formulation |
US9051567B2 (en) | 2009-06-15 | 2015-06-09 | Tekmira Pharmaceuticals Corporation | Methods for increasing efficacy of lipid formulated siRNA |
EA201270019A1 (ru) | 2009-06-15 | 2012-06-29 | Элнилэм Фармасьютикалз, Инк. | Двуцепочечная рнк, включенная в липидный состав и мишенью которой является ген pcsk9 |
US9018187B2 (en) | 2009-07-01 | 2015-04-28 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents |
WO2011000106A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Improved cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents |
EP2449106B1 (en) | 2009-07-01 | 2015-04-08 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Compositions and methods for silencing apolipoprotein b |
US8716464B2 (en) | 2009-07-20 | 2014-05-06 | Thomas W. Geisbert | Compositions and methods for silencing Ebola virus gene expression |
MX2012001339A (es) | 2009-07-30 | 2012-03-07 | Salvat Lab Sa | Compuestos inhibidores de apaf-1. |
EP2459231B1 (de) | 2009-07-31 | 2016-06-08 | Ethris Gmbh | Rna mit einer kombination aus unmodifizierten und modifizierten nucleotiden zur proteinexpression |
WO2011021666A1 (ja) * | 2009-08-19 | 2011-02-24 | 国立大学法人奈良先端科学技術大学院大学 | 環境ストレス下の翻訳抑制を回避する5'utrをコードする組換えdna分子 |
DE102009043342A1 (de) | 2009-09-29 | 2011-03-31 | Bayer Technology Services Gmbh | Stoffe für selbstorganisierte Träger zur kontrollierten Freisetzung eines Wirkstoffs |
US8470585B2 (en) | 2009-10-15 | 2013-06-25 | Crucell Holland B.V. | Process for adenovirus purification from high cell density cultures |
US20130224730A1 (en) * | 2009-11-18 | 2013-08-29 | Arizona Board Of Regents Acting For And On Behalf Of Arizona State University | Peptide ligands |
PL3338765T3 (pl) | 2009-12-01 | 2019-06-28 | Translate Bio, Inc. | Pochodna steroidowa dla dostarczania mrna w ludzkich chorobach genetycznych |
KR102505097B1 (ko) | 2009-12-07 | 2023-03-02 | 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실베니아 | 세포 리프로그래밍을 위한 정제된 변형 rna를 포함하는 rna 제제 |
ES2749426T3 (es) | 2009-12-18 | 2020-03-20 | Univ British Columbia | Métodos y composiciones para administración de ácidos nucleicos |
EP2516010A2 (en) | 2009-12-23 | 2012-10-31 | Novartis AG | Lipids, lipid compositions, and methods of using them |
US9315802B2 (en) * | 2009-12-30 | 2016-04-19 | Quest Diagnostics Investments Incorporated | RNA isolation from soluble urine fractions |
JP2012246222A (ja) * | 2010-01-29 | 2012-12-13 | Axis Inc | 変形性関節症治療剤または予防剤を製造するための使用 |
JP2013527856A (ja) | 2010-05-12 | 2013-07-04 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 陽イオン性脂質およびその使用方法 |
NZ605079A (en) | 2010-06-03 | 2015-08-28 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Biodegradable lipids for the delivery of active agents |
CN101863544B (zh) | 2010-06-29 | 2011-09-28 | 湖南科技大学 | 一种氰尿酸基重金属螯合絮凝剂及其制备方法 |
WO2012000104A1 (en) | 2010-06-30 | 2012-01-05 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Non-liposomal systems for nucleic acid delivery |
WO2012016184A2 (en) | 2010-07-30 | 2012-02-02 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for delivery of active agents |
EP3578205A1 (en) | 2010-08-06 | 2019-12-11 | ModernaTX, Inc. | A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof |
WO2012019630A1 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein |
DK2607482T3 (en) | 2010-08-18 | 2017-07-03 | Toray Industries | Solution for extraction of RNA |
JP5740754B2 (ja) * | 2010-08-26 | 2015-07-01 | アイシン精機株式会社 | 酵素結晶固定化電極及び酵素結晶固定化電極の製造方法、並びに酵素結晶固定化電極を備えるバイオ電池及びバイオセンサー |
EP2609135A4 (en) | 2010-08-26 | 2015-05-20 | Massachusetts Inst Technology | POLY (BETA-AMINO ALCOHOLS), THEIR PREPARATION AND USES THEREOF |
WO2012031294A2 (en) * | 2010-09-03 | 2012-03-08 | University Of Maryland, College Park | Methods for determining protein ligand binding |
US20120237975A1 (en) | 2010-10-01 | 2012-09-20 | Jason Schrum | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2012075040A2 (en) | 2010-11-30 | 2012-06-07 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | mRNA FOR USE IN TREATMENT OF HUMAN GENETIC DISEASES |
PL2691443T3 (pl) | 2011-03-28 | 2021-08-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Sprzężone lipomery i ich zastosowania |
EP2691101A2 (en) | 2011-03-31 | 2014-02-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
WO2012133737A1 (ja) | 2011-03-31 | 2012-10-04 | 公益財団法人地球環境産業技術研究機構 | 架橋性アミン化合物、該化合物を用いた高分子膜及びその製造方法 |
US11767534B2 (en) | 2011-05-04 | 2023-09-26 | The Broad Institute, Inc. | Multiplexed genetic reporter assays and compositions |
CA2835428A1 (en) | 2011-05-17 | 2012-11-22 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof for non-human vertebrates |
EP2532649B1 (en) | 2011-06-07 | 2015-04-08 | Incella GmbH | Amino lipids, their synthesis and uses thereof |
CN103748078B (zh) | 2011-06-08 | 2016-11-09 | 夏尔人类遗传性治疗公司 | 可裂解脂质 |
EP4043025A1 (en) | 2011-06-08 | 2022-08-17 | Translate Bio, Inc. | Lipid nanoparticle compositions and methods for mrna delivery |
WO2013003475A1 (en) | 2011-06-27 | 2013-01-03 | Cellscript, Inc. | Inhibition of innate immune response |
KR20140045398A (ko) | 2011-06-30 | 2014-04-16 | 시그마-알드리치 컴퍼니., 엘엘씨 | Cmp-n-아세틸뉴라민산 하이드록실라제 및/또는 당단백질 알파-1,3-갈락토실트랜스퍼라제가 결핍된 세포 |
WO2013039861A2 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | modeRNA Therapeutics | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2013039857A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | modeRNA Therapeutics | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
RU2014117690A (ru) | 2011-10-05 | 2015-11-10 | Протива Байотерапьютикс Инк. | Композиции и способы для сайленсинга альдегид-дегидрогеназы |
AU2012328570B2 (en) | 2011-10-27 | 2017-08-31 | Massachusetts Institute Of Technology | Amino acid derivatives functionalized on the n-terminus capable of forming drug encapsulating microspheres and uses thereof |
US20140343129A1 (en) | 2011-12-14 | 2014-11-20 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleic acids, and acute care uses thereof |
US20140378538A1 (en) | 2011-12-14 | 2014-12-25 | Moderma Therapeutics, Inc. | Methods of responding to a biothreat |
WO2013090814A2 (en) * | 2011-12-16 | 2013-06-20 | Board Of Trustees Of Michigan State University | p-Coumaroyl-CoA:Monolignol Transferase |
KR20140102759A (ko) | 2011-12-16 | 2014-08-22 | 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 | 변형된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 핵산 조성물 |
AU2012358384A1 (en) | 2011-12-21 | 2014-07-31 | Moderna Therapeutics, Inc. | Methods of increasing the viability or longevity of an organ or organ explant |
US20140371302A1 (en) | 2011-12-29 | 2014-12-18 | Modema Therapeutics, Inc. | Modified mrnas encoding cell-penetrating polypeptides |
PL3421601T3 (pl) | 2011-12-30 | 2020-06-01 | Cellscript, Llc | Wytwarzanie i stosowanie zsyntetyzowanego in vitro ssRNA do wprowadzania do ssaczych komórek w celu indukcji efektu biologicznego lub biochemicznego |
US9352042B2 (en) | 2012-02-24 | 2016-05-31 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Trialkyl cationic lipids and methods of use thereof |
CN104334161A (zh) | 2012-03-29 | 2015-02-04 | 夏尔人类遗传性治疗公司 | 可电离的阳离子脂质 |
CN104487055A (zh) | 2012-03-29 | 2015-04-01 | 夏尔人类遗传性治疗公司 | 脂质衍生的中性纳米颗粒 |
US20150050354A1 (en) | 2012-04-02 | 2015-02-19 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the treatment of otic diseases and conditions |
US9878056B2 (en) | 2012-04-02 | 2018-01-30 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
AU2013243949A1 (en) | 2012-04-02 | 2014-10-30 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of biologics and proteins associated with human disease |
US20140275229A1 (en) | 2012-04-02 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides encoding udp glucuronosyltransferase 1 family, polypeptide a1 |
CA2868398A1 (en) | 2012-04-02 | 2013-10-10 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
US9572897B2 (en) | 2012-04-02 | 2017-02-21 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
EP3884949A1 (en) | 2012-06-08 | 2021-09-29 | Translate Bio, Inc. | Pulmonary delivery of mrna to non-lung target cells |
CA2873274C (en) * | 2012-06-08 | 2021-06-01 | Ethris Gmbh | Pulmonary delivery of messenger rna |
EP2859102A4 (en) | 2012-06-08 | 2016-05-11 | Shire Human Genetic Therapies | NUCLEASE RESISTANT POLYNUCLEOTIDES AND USES THEREOF |
EP2674167A1 (en) * | 2012-06-14 | 2013-12-18 | PLS-Design GmbH | Controlled activation of complement components for use as endogenous adjuvant |
WO2014028487A1 (en) | 2012-08-13 | 2014-02-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Amine-containing lipidoids and uses thereof |
CN104995311A (zh) | 2012-08-30 | 2015-10-21 | 外来体诊断公司 | 用于核酸测定的对照 |
US20140093952A1 (en) * | 2012-10-02 | 2014-04-03 | David Serway | Bioreactor Tangential Flow Perfusion Filter System |
US20150307542A1 (en) | 2012-10-03 | 2015-10-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleic acid molecules and uses thereof |
CA2892035C (en) | 2012-11-21 | 2019-11-05 | Serum Institute Of India Ltd. | Production of neisseria meningitidis x capsular polysaccharide |
JP6144355B2 (ja) | 2012-11-26 | 2017-06-07 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 化学修飾mRNA |
WO2014089486A1 (en) | 2012-12-07 | 2014-06-12 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Lipidic nanoparticles for mrna delivering |
WO2014093574A1 (en) | 2012-12-13 | 2014-06-19 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for altering cell phenotype |
CA2897941A1 (en) | 2013-01-17 | 2014-07-24 | Moderna Therapeutics, Inc. | Signal-sensor polynucleotides for the alteration of cellular phenotypes |
WO2014158795A1 (en) | 2013-03-12 | 2014-10-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Diagnosis and treatment of fibrosis |
US20160024181A1 (en) | 2013-03-13 | 2016-01-28 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
ES2680595T3 (es) | 2013-03-14 | 2018-09-10 | Translate Bio, Inc. | Evaluación cuantitativa para eficacia de ARN mensajero para tapar |
KR20150127582A (ko) | 2013-03-14 | 2015-11-17 | 샤이어 휴먼 지네틱 테라피즈 인크. | 4''-티오 개질된 뉴클레오티드를 갖는 리보핵산 및 관련 방법 |
ES2708562T3 (es) | 2013-03-14 | 2019-04-10 | Translate Bio Inc | Evaluación cuantitativa de la eficacidad de tapa de ARN mensajero |
HUE055044T2 (hu) | 2013-03-14 | 2021-10-28 | Translate Bio Inc | MRNS-kódolt ellenanyagok bejuttatására szolgáló eljárások és készítmények |
PT2968586T (pt) | 2013-03-14 | 2018-11-13 | Ethris Gmbh | Composições de arnm de cftr e métodos e utilizações relacionados |
US10258698B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-04-16 | Modernatx, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
WO2014152940A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Mrna therapeutic compositions and use to treat diseases and disorders |
WO2014144711A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Analysis of mrna heterogeneity and stability |
US20160032273A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-04 | Moderna Therapeutics, Inc. | Characterization of mrna molecules |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
ES2923018T3 (es) | 2013-03-15 | 2022-09-22 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Métodos de purificación de ARN |
US10077439B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-09-18 | Modernatx, Inc. | Removal of DNA fragments in mRNA production process |
US11377470B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-07-05 | Modernatx, Inc. | Ribonucleic acid purification |
EP2983804A4 (en) | 2013-03-15 | 2017-03-01 | Moderna Therapeutics, Inc. | Ion exchange purification of mrna |
EP3388834B1 (en) | 2013-03-15 | 2020-04-15 | Translate Bio, Inc. | Synergistic enhancement of the delivery of nucleic acids via blended formulations |
US10138507B2 (en) * | 2013-03-15 | 2018-11-27 | Modernatx, Inc. | Manufacturing methods for production of RNA transcripts |
US9315472B2 (en) | 2013-05-01 | 2016-04-19 | Massachusetts Institute Of Technology | 1,3,5-triazinane-2,4,6-trione derivatives and uses thereof |
US9895443B2 (en) | 2013-06-26 | 2018-02-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Multi-tailed lipids and uses thereof |
DK3019619T3 (da) | 2013-07-11 | 2021-10-11 | Modernatx Inc | Sammensætninger, der omfatter syntetiske polynukleotider, som koder for crispr-beslægtede proteiner, og syntetiske sgrna'er, og anvendelsesfremgangsmåder |
JP6620093B2 (ja) | 2013-07-23 | 2019-12-11 | アービュートゥス バイオファーマ コーポレイションArbutus Biopharma Corporation | メッセンジャーrnaを送達するための組成物及び方法 |
US20160194368A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-07 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
WO2015034928A1 (en) | 2013-09-03 | 2015-03-12 | Moderna Therapeutics, Inc. | Chimeric polynucleotides |
EP3052106A4 (en) | 2013-09-30 | 2017-07-19 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
WO2015051173A2 (en) | 2013-10-02 | 2015-04-09 | Moderna Therapeutics, Inc | Polynucleotide molecules and uses thereof |
US10385088B2 (en) | 2013-10-02 | 2019-08-20 | Modernatx, Inc. | Polynucleotide molecules and uses thereof |
EP3058082A4 (en) | 2013-10-18 | 2017-04-26 | ModernaTX, Inc. | Compositions and methods for tolerizing cellular systems |
AU2014340092B2 (en) | 2013-10-22 | 2019-09-19 | Translate Bio, Inc. | mRNA therapy for Argininosuccinate Synthetase Deficiency |
WO2015061491A1 (en) | 2013-10-22 | 2015-04-30 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Mrna therapy for phenylketonuria |
WO2015061461A1 (en) | 2013-10-22 | 2015-04-30 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Cns delivery of mrna and uses thereof |
US20170173128A1 (en) | 2013-12-06 | 2017-06-22 | Moderna TX, Inc. | Targeted adaptive vaccines |
EP2918275B1 (en) | 2013-12-13 | 2016-05-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Alternative nucleic acid molecules and uses thereof |
EP3083579B1 (en) * | 2013-12-19 | 2022-01-26 | Novartis AG | Lipids and lipid compositions for the delivery of active agents |
US20170002060A1 (en) | 2014-01-08 | 2017-01-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides for the in vivo production of antibodies |
CA2946751A1 (en) | 2014-04-23 | 2015-10-29 | Modernatx, Inc. | Nucleic acid vaccines |
JP2017536092A (ja) | 2014-10-02 | 2017-12-07 | プロティバ バイオセラピューティクス インコーポレイテッド | B型肝炎ウイルスの遺伝子発現をサイレンシングするための組成物及び方法 |
WO2016071857A1 (en) | 2014-11-07 | 2016-05-12 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions and methods for silencing ebola virus expression |
EP3461904A1 (en) | 2014-11-10 | 2019-04-03 | ModernaTX, Inc. | Alternative nucleic acid molecules containing reduced uracil content and uses thereof |
EP3218508A4 (en) | 2014-11-10 | 2018-04-18 | Modernatx, Inc. | Multiparametric nucleic acid optimization |
US20180000953A1 (en) | 2015-01-21 | 2018-01-04 | Moderna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions |
EP3247398A4 (en) | 2015-01-23 | 2018-09-26 | Moderna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions |
US20180245077A1 (en) | 2015-03-20 | 2018-08-30 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions and methods for treating hypertriglyceridemia |
WO2016164762A1 (en) | 2015-04-08 | 2016-10-13 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor egf-a and intracellular domain mutants and methods of using the same |
WO2016183366A2 (en) | 2015-05-12 | 2016-11-17 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions and methods for silencing expression of hepatitis d virus rna |
EP3744843A1 (en) | 2015-05-29 | 2020-12-02 | CureVac Real Estate GmbH | A method for producing and purifying rna, comprising at least one step of tangential flow filtration |
US20180245074A1 (en) | 2015-06-04 | 2018-08-30 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Treating hepatitis b virus infection using crispr |
US10626393B2 (en) | 2015-06-04 | 2020-04-21 | Arbutus Biopharma Corporation | Delivering CRISPR therapeutics with lipid nanoparticles |
WO2016201377A1 (en) | 2015-06-10 | 2016-12-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Targeted adaptive vaccines |
US11920174B2 (en) | 2016-03-03 | 2024-03-05 | CureVac SE | RNA analysis by total hydrolysis and quantification of released nucleosides |
-
2015
- 2015-04-24 SG SG11201608725YA patent/SG11201608725YA/en unknown
- 2015-04-24 CA CA2944800A patent/CA2944800A1/en active Pending
- 2015-04-24 CN CN201910848460.2A patent/CN110511927A/zh active Pending
- 2015-04-24 AU AU2015249312A patent/AU2015249312B2/en active Active
- 2015-04-24 EA EA201691696A patent/EA201691696A1/ru unknown
- 2015-04-24 CN CN201580019400.XA patent/CN106164248B/zh active Active
- 2015-04-24 KR KR1020167028137A patent/KR102470198B1/ko active IP Right Grant
- 2015-04-24 BR BR112016024632A patent/BR112016024632A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2015-04-24 CN CN202311262878.8A patent/CN117402871A/zh active Pending
- 2015-04-24 DK DK15783316.1T patent/DK3134506T3/da active
- 2015-04-24 PT PT157833161T patent/PT3134506T/pt unknown
- 2015-04-24 ES ES15783316T patent/ES2750661T3/es active Active
- 2015-04-24 JP JP2016562218A patent/JP6571679B2/ja active Active
- 2015-04-24 EP EP15783316.1A patent/EP3134506B1/en active Active
- 2015-04-24 MX MX2016013965A patent/MX2016013965A/es active IP Right Grant
- 2015-04-24 WO PCT/US2015/027563 patent/WO2015164773A1/en active Application Filing
- 2015-04-24 US US14/696,140 patent/US9850269B2/en active Active
- 2015-04-24 EP EP19190270.9A patent/EP3636742A1/en active Pending
- 2015-04-24 KR KR1020227040314A patent/KR20220158867A/ko not_active Application Discontinuation
-
2016
- 2016-09-22 IL IL247973A patent/IL247973A0/en unknown
- 2016-10-24 MX MX2020004603A patent/MX2020004603A/es unknown
-
2017
- 2017-12-04 US US15/831,252 patent/US10155785B2/en active Active
-
2018
- 2018-11-20 US US16/196,664 patent/US11059841B2/en active Active
-
2019
- 2019-08-08 JP JP2019146189A patent/JP6866433B2/ja active Active
-
2021
- 2021-04-07 JP JP2021065401A patent/JP7245278B2/ja active Active
- 2021-06-10 US US17/344,535 patent/US20220135608A1/en active Pending
- 2021-06-30 AU AU2021204521A patent/AU2021204521B2/en active Active
-
2022
- 2022-07-06 US US17/811,022 patent/US11884692B2/en active Active
- 2022-07-06 US US17/811,029 patent/US20220402959A1/en active Pending
-
2023
- 2023-03-10 JP JP2023037742A patent/JP2023072010A/ja active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998005673A1 (en) * | 1996-08-01 | 1998-02-12 | Megabios Corporation | Methods for purifying nucleic acids |
JP2014506873A (ja) * | 2010-12-10 | 2014-03-20 | トンプソン トレイシー | 分離方法のための組成物 |
WO2014152966A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
JP6571679B2 (ja) * | 2014-04-25 | 2019-09-04 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JOURNAL OF VIROLOGY, vol. 10, no. 6, JPN6019010883, 1972, pages 1126 - 1129, ISSN: 0004857771 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6866433B2 (ja) | メッセンジャーrnaの精製方法 | |
JP6941084B2 (ja) | メッセンジャーrnaの精製方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210407 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220114 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220414 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220826 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20221125 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230210 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230310 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7245278 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |