JP2020506704A5 - - Google Patents
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種々の特定の実施形態を例示し、記載してきたが、本発明の主旨および範囲から逸脱することなく種々の変化をなすことができることが理解されよう。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目1)
配列番号2に対して少なくとも60%、65%、70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれより高い配列同一性であるポリペプチド配列を含む操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目2)
配列番号4、8、32、232、348、548、562、696、758、696、770、792、954、696、1002、1054、2600、2718、2814、2884、3016、3082、3244、3502、3346、3502、3696、4256、4684、4838、4876、5066、5290、5372、5562、5708、5976、6138、6288、6468、684、7388、および/または8088に対して少なくとも60%、65%、70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれより高い配列同一性であるポリペプチドを含む、項目1に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目3)
ウラシル二リン酸以外の糖供与体を優先的に使用する、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目4)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、10、262、10/262、278/284/311/339/360、283、307、309、339/361、344/361、および361から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目5)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、112/172/283/318、112/261/318、112/282/283/431、137/283、137/283/431、163/318、261/283/306/337、261/283/337、261/337、269/318、282/283、282/283/431、283、283/306/308/360、283/306/337/426、283/318/337/360、283/360、318、360、および431から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号8を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目6)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、4、6、22、22/84/87/154/198/199/356、22/84/87/154/198/199/306/356、22/84/87/154/199/306/356、 22/84/87/154/356、22/84/87/154/198/199/306/356、22/84/87/154/199/306/356、22/84/87/198/199/306/356、22/84/87/198/199/356、22/84/87/198/199/306/356、 22/84/87/198/199/356、22/84/87/199/306/356、22/84/87/199/356、22/84/154/198/199/207/306、22/84/154/198/199/306、22/84/154/198/199/356、22/84/154/198/199/356、22/84/154/198/199/356、22/84/154/199/356、22/84/154/199/207、22/84/154/199/356、22/84/154/207/306/356、22/84/154/306/356、22/84/154/198/199/306/356、22/84/154/198/199、22/84/154/198/199/306/356、22/84/154/199/306/356、22/84/154/199/356、22/84/154/199/356、22/84/198/199/306/356、22/84/199/356、22/84/207/356、22/84/356、22/84/154/198/199/306/356、22/87/154/198/199/356、22/87/154/199/306/356、22/87/154/322/356、22/87/154/198/199/356、22/87/154/199/356、22/87/154/198/199/207/306/356、22/87/154/199/207/356、22/87/154/199/356、22/87/154/199/306/356、22/87/198/199/306/356、22/87/198/199/306/356、22/87/198/199/207/356、22/87/198/199/356、22/87/199/356、22/87/199/356、22/154/198/199/207/306/356、22/154/198/199/356、22/154/199/356、22/154/198/199/306/356、22/154/199/356、22/154/199/207/306/356、22/198/199/356、22/198/199/207/329/356、22/199/356、22/207/356、22/356、64、74、84、84/154/198/199、87、97、106、 110、112、137、139、154、159、 169、179、191、195、198、199、 207、233、259、261、 262、306、347、356、396、417、 421、427および435から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号32を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目7)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、64/106/109/112/131/159/233/421/427/431、64/106/109/112/417/421/427/431、64/106/109/139/179/417/421/427/431、64/106/109/233/347/427/431、64/106/112/347/417/421、64/106/139/179/233/417/427/431、64/106/417/421、64/106/431、64/106/109/112/131/179/417/427/431、64/106/109/417/421/427/431/439、64/106/112/139/159/179/204/396/417、64/106/112/159/179/417/421、64/106/204/417/421/427、64/109/112/139/159/179/417/431、64/109/112/139/417、 64/109/139/233/417/421、64/109/159/179/204/233/417/421、64/109/417/421、64/109/417/421、64/139/233/417/427/431/439、64/139/347/417/421/427/431、64/417/421/431、106/109/112/131/159/179/417/421、106/109/112/131/159/204/347/417/421/427、106/109/112/204/347/421/439、106/109/112/261/417/431、106/109/112/347/427、106/109/139/427/431、106/109/417/421/427、106/112/159/204/233/417/421/427/431、106/112/233/417、106/112/396/417/421、106/139/159/233/347/417/421/427/431、106/233/421/427、106/417、106/109/139/347/417/421/427、106/109、106/109/139/233/417/421、106/109/139/417、106/109/233/427/431、106/112/159/179/204/417/421、106/112/159/179/233/417/421/427/439、106/131/179/233/421/427/431、106/139/421、106/347/417/427/431、109/112/131/159/179/439、109/112/131/159/417/421、109/112/139/179/417/427、109/112/159/179/417/421、109/112/159/417/427、109/112/179/204/233/417/421/427、109/112/179/347/417、109/112/204/233/417、109/112/204/427、109/112/233/417/431、109/112/417/421/427、109/112/417/427/431、 109/131/139/179/261/396/421、109/131/204、109/139/179/417/421/427、109/139/179/417/427、 109/179/233/421、109/204/417/431、109/417/421、109/417/427/431、112/131/179/204/417/421/427、112/131/179/347/417/421、112/139/179/204/233/347/427、112/159/417/421、112/417/421、131/179/233/417/427、139/233/417、159/347/417/421/431、179/417/421、233/417/421/427/431および347/417から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号232を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目8)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、14/100、28/44/365/407、38/118/290/351/375/401/422、38/178/401、38/290/351/401/422、54/413、74/102/137/161/259/289、92/118、98/233、102/161/250/435、106/112/204/347/396/417、106/112/204/347/396/417/427、106/112/204/347/396/417/427/431、110/222/250/259/435、112/204/347/396/417/427、112/204/347/396/417/427/431、118/156/178/290/375/401/422、137/161/435、137/169、159/169/173/300/424/438、185/290/401/422、204/347/396/417/431、290/351/401および435/438から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号348を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目9)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、14/28/38/74/100/102/118/161/169/178/233/250/407/422/438、14/28/38/74/102/156/159/233/250/289/413/422/424/435/438、 14/28/38/100/102/110/159/161/233/259/290/300/351/435、14/28/38/110/137/161/222/289/401、14/28/44/74/98/102/137/159/161/185/222/250、14/28/44/92、14/28/44/161/169、14/28/44/375、14/28/54/161/185/413、14/28/54/365、14/28/74/98/100/102/161/173/178/233/250/259/290/407、14/28/92/100/102/159/161/169/233、14/28/92/100/102/159/161/233/351/422、14/28/92/100/102/422/424/435、14/28/92/100/161/222/233/289/300、14/28/100/137/156/161/222/259/289/365/401/435/438、14/28/100/156/161/250、14/28/102/118/137/161/185/222/250/259/401、14/28/159/289/290/300、14/28/159/365/435、14/28/35、14/38/74/110/156/161/173/178/222/300、14/38/100/102/161/173/178/222/250/375/401/413、44/74/100/102/161/233/365/435/438、14/74/110/159/161/169/173/250/259/290/375/407/422、14/74/161/375/401、14/92/98/100/159/161/259/365/422/424/435、14/110/156/161/375/401/435/438、14/159/161/365/435/438、14/161/222/250/259/289/375/401/413、14/161/222/250/435/438、14/161/300、28、28/38/92/98/100/102/156/161、28/44/74/401、28/44/92/161/222/300/413、28/44/98/100/102/118、28/44/118/156/161/222/289/435/M438、28/44/289/290/351/422、28/44/435/438、28/54/92/159/161/290、28/54/159/290/438、28/54/250/439、28/74/156/159/161/178/300/365/435/438、28/74/156/161/365/407、 28/74/161/290/365、28/92/100/102/110/161/185/250/300/375/435、28/92/98/100/110/156/161/401、28/92/118/159/222/250/259/300/407、28/156/161/185/435/438、28/156/161/233/259/300/435、 28/98/100/102/161/185/351/401/435/438、38/161/300/438、74/98/100/102/110/118/161/178/250/289/290/300/435/438、74/98/100/102/118/156/159/161/435/438、74/156/161/173/178/424/435、74/375/435、98/100/118/159/161/300、98/100/156/159/161/178/259/289/290/351/422、102/137/159/161/422/424、118、137/159/161/185/300/351/365/435、156/159/161/169、159/161/222/290/375/407、159/161/401および 161/259/289/435/438から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号548を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目10)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、19/44/110/191/198/199/208/300/365、19/75/76/87/92/199/207/208、19/87/92/191/199/209/413/435、44/76/197/199/208/351、44/87/92/137/159/199/209、44/87/137/159/169/191/199/208、44/87/137/191/197/209/289/401、44/87/199/208、75/76/87/92、75/76/87/92/290/300、75/76/87/191、75/76/87/191/197/199/209/300、75/87/92/169/207/208/300/413/435、75/87/110/137/169/191/199/208/209/289/435、75/87/110/191/197/198/207/208/289/290/300/401/413、75/87/300、75/110/197/199/208/290/300/401/413、76/92/199/209、87/92/197/198/199/208/300、 87/137/435、87/169/191/199/207/209/401/413、87/191/198/199/222/244/289/300/435、87/92/110/169/199/207/209/290/300、87/92/159/169/191/198/290/413/435、87/92/159/191/199/208/209/289/290、87/92/208/401、87/435、92/137/191/199/209、92/197/199/207/208/401、137/198/199/207/208/426/435、137/199/208/209/290/435、137/365、159/197/199/207/209、169/191/197/199/207/208、169/197/199/207/209/222/300/413/435、191/207/208/289/290/413/435および197/198/199/208/209から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号562を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目11)
前記操作されたNDP−グリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、69/173/175/243/246/354/365/383/399、69/173/243/383/399、56/191/354/383/399、70/225/246/409/413、70/115/225/409、70/225/413、70/225/247、74/310/396/424、74/396および173/175/191/365/383/399から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号758を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたNDP−グリコシルトランスフェラーゼ。
(項目12)
前記操作されたNDP−グリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、24、24/28、24/28/262、24/28/262/264、24/28/262/264/423、24/264/294、28、28/262/264、28/423、32、56/69/70/175/191/246、56/69/70/175/191/246/354、56/69/70/175/354、56/69/70/191/246/354/365、56/69/70/246/354、56/69/175/191/246/354、56/69/175/246/354、56/69/175/246/354/365、56/69/246/354、56/69/246/365、56/70/175/191/246、56/70/175/191/246/354、56/70/175/191/354/365、56/70/175/246/354、56/70/175/246/365、56/70/191/246/354/365、56/70/191/354、56/175/246、56/175/354、56/175/354/365、56/191/246/354、56/191/354/383/399、56/246、56/246/354/365、56/354、69、69/70/175/191/246/354/365、69/70/191/246/354/365、69/70/246、69/70/354/365、69/173/175/243/246/354/365/383/399、69/173/243/383/399、69/175/191/246/354、69/175/354、69/246/354/365、69/354、70、70/115/225/409、70/175/191/246/354/365、70/175/191/354/365、70/191/246/354/365、70/191/246/365、70/225/246/409/413、70/225/247、70/225/413、74/310/396/424、74/396、126、126/220、126/403、173/175/191/365/383/399、175、175/191、175/191/246/354/365、175/191/354、175/191/354/365、175/246/354、175/246/354/365、175/354、191/246/354、246/354、262/264、264、264/29、269、325、341、351、354、354/365および366から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号770を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたNDP−グリコシルトランスフェラーゼ。
(項目13)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、24/32/264/269/330/402/403、24/32/264/269/382/403/406、24/32/264/330、24/32/269、24/32/269/382/385/389/402/406、24/32/269/403、24/32/330、24/264/269/389/402/406、70/126/175/191/246/325/354/366、70/126/175/325/330/351/354/366、70/126/191/246/325/351/354/366/423、70/126/191/246/325/351/354/423、 70/126/191/246/325/351/366/423、70/126/191/246/354/366、70/126/246/330/366、 70/126/246/354/366、126/211/220/253/316/342、126/211/220/275/279/323、126/211/260/423、126/220/260、126/220/316、56/220/260/423、220/260および220/260/423から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号792を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目14)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、24/32/97/162/202、24/32/126/198/201/367、24/32/126/198/202/220/226/260/269S、24/32/146/226、24/32/198/201/220/226、24/32/198/201/226、24/97/260/367、32/97/198/202/226/260、32/202/367、32/226/367、56/175/197/211/330/382/385、56/175/197/253/385/389、56/175/264/382/385/389/402/406、56/197/264/279/330/382/389/402/403/406、56/211/253/316/323、56/211/264/316/389、56/211/279/323/330/402、56/264/385/389、97/202/367、162/220/226/367、175/197/211/264/330、175/211/264/279/316/323、175/211/279/323/330/402/403/406、175/211/323/382/402/403/406、175/211/403/406、175/264/316/323/330/403/406、175/264/316/389/402、175/264/323/330、197/211/316/342/406、197/211/316/382/389/402/403、197/211/402、197/279/323、198/201/367、198/202/220/269/367、201/202/367、211/382/406、211/385/389、211/402/403および389から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号954を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目15)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、24/32/175/211/260/330/403/406、24/32/175/226/253/275/316、24/32/201/226/260/264/330/402/406、24/162/175/198/211/226/275/316/323/389、24/162/175/201/275/316、24/162/198/201/211/226/323/351、24/162/198/201/226/351、24/162/201/253/264/351/402/406、24/175/198/211/226/253/316、24/175/201/275/316/351、24/175/201/316、24/175/211/220/260/275/330/389、24/175/211/253/316、24/175/211/316/330、24/175/226/323/351、24/198/201、24/198/201/211、24/198/201/211/220/260、24/198/201/220/275/389/402/406、24/198/201/226/330/389、24/198/201/351、24/201/211/253/323/351/366/389/402/403、24/201/226/253/402/403/406、24/226/330/351/403、175/198/201/211/226/260/264/323/402/406および175/198/226/260/351/402/403/406から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1054を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目16)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、21/127/129/161、21/127/129/161/162、21/127/129/162/199/200、127/129/161/162/199、127/129/161/199/200、127/129/162、156、156/161、156/161/162、156/162/199、および156/199/200から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1002を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目17)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/7/12/15/175/260/318、7/12/400/435、7/318/451、12/15/57/71/175/260/400/402、12/15/57/220/254/260/318/402、12/15/57/318/402/435、12/15/318/400/402/406、12/57/175/451、12/175/260/264/318/400、12/175/400/402/406、12/318/402/404/406/451、12/318/402/404/451、15/175/318/400/402、32、57/175/220/260/264/402、57/175/404、57/220/260/400/402/406、57/260/400/402/404、57/400/402、57/402、135、148、152、152/192/195、160/186/195、186、195、260、237、239、240、323、325、326、327、330、331、356および400/402から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2600を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目18)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、11、14/23/274/326/329、14/31/184/274/322/326/329/330、14/56/184/185/194/238/239/274/329/399、14/56/184/194/234/315/326/329/399/401、14/56/194/238/315/325/326/329/330/399、14/56/252/274/315/326/329/330/401、14/184/185/194/234/325/326/329、14/184/185/194/388/399/401、14/184/194/355/399、14/185/194/238/399、14/185/236/238/239/274/322/326/329/355/399/401、14/194、14/322/326/330、14/326/330、14/355、14/355/399、23/31/147/184/185/238/252/325/329/330/388/401、31/56/315/329/330、45、55、56、58、65、65/114/132/238、65/238/240、104、113、114、132、135、138、147/236/238/243/315/329/330/399/401、165、185/194/236/239/325/326、223/412、238、256、273、286、309、391、422、430および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2718を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目19)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、23/31/185/324/401、23/31/185/355、31/134/185/252/274/324/388、31/134/238/252/322/324/388、31/134/252/324、31/184/185/238/239/322、31/236、31/322、31/388、122、134/184/185/234/236/239/274/324/388、164、176、177、184/185/322、234/236/238/322/324/355、236、238/324/329/355、316、322/324、324/329/355/401、325、400、425、426、427、440および446から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2814を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目20)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、11、11/45/58/132/138/286、11/58、11/58/65/104/107/138/286、11/58/65/107/135/223/286/391/430、11/58/65/135/138、11/58/104/107/114/138/223/391、11/58/114/286/309/391、11/58/132/165/286/391/422/430、11/58/138/309、11/65/104/107/138/165/286/391/430、11/65/107/135/165/391/430、11/65/132/135/138/223/391、11/65/132/135/252、11/65/132/391/430、11/65/135/138、11/104/132/138/309/391、11/104/132/138/391、11/107/114/223/309/430、11/107/138、11/114/135/138/223、11/114/223/252/286/391、11/132/135/138/223/286、11/132/138/223/286/391、11/138/165/223/309、58/65/138、58/65/138/165、58/65/165/309/430、58/104/114/165/391、107/114/132/138、107/430、135/138/165/309/430および223/309から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2884を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目21)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、8/448、9、58/107/122/176/236/324/325/400/426/427、58/107/122/236/324/400/425/446、58/107/122/322/400/425/427/440/446、58/107/164/400、58/107/236/400、58/107/400、58/122/164/236/446、58/122/176/236/400/446、58/122/176/322/324/426/427、58/122/176/400/425/426/427/446、58/122/322/325、58/122/325、58/122/440、58/164/176、58/164/324/425/427、58/176/236、58/236、65、106、107/122/236/425/426/446、107/164/236/400/446、107/176/322/325/440/446、107/176/400/425/427/440、107/236、107/440、115、116、122/164/176/324/400、122/164/400/440、122/164/400/440/446、122/176/236/400、122/176/324/400/440、122/400、122/425/426/446、122/440/446、139、139/252、164、164/271/425/426、164/322/324/325/400/425/440/446、164/400、172、176/400、178、189、200、210、213、240、242、245、255、324/400/425/426/440/446、324/423、385、408、409、411、412、415、416、423、447および448から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3016を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目22)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、3,8、8/107/139/164/415/416/440/448、8/107/139/255/322/325/415/416/440/448、8/107/164/255、8/107/164/423/440、8/139、8/139/164/200/236/240/322/440/448、8/139/164/236/416/423/440、8/139/189/240/325/416、8/139/200/236/240/255/423、8/139/255/415/416、8/164、8/164/189/200/322/324/325/416/448、8/164/240/423、8/164/252/255/448、8/164/448、8/236/240/252/448、8/240/423、8/252/255/322/325/448、12/164/440、20/126/128/155/161、20/126/128/160/161、20/126/128/160/161/198、20/126/128/161、20/126/128/161/198/199、20/126/155/160/198、20/126/155/161、20/126/160、20/126/160/161、20/126/161、20/128/155/160/161/198、20/128/155/161/199、20/128/155/199、20/128/160/161/198、20/155/160、20/155/160/161、20/155/161、20/155/161/199、20/160/161/198、34、72、73、75、107/139、107/139/200/240/322/324/325/448、107/236/240/325/440、107/240/252/423/448、107/423、113、114、121/126/128/161/369、126/128/155/160/161、126/128/155/160/161/199、126/128/155/161/199、126/128/160/161/369、126/128/160/198/369、126/128/160/199/369、126/128/160/369、126/128/161/199/369、126/128/161/369、126/128/369、126/160/161/199/369、126/160/198/369、126/196/198/369、126/198/369、126/199/369、126/369、128/155/160/161、128/155/160/161/199、128/155/160/198、128/155/199、128/160/161/369、128/161/199/369、128/198/199/369、128/199/369、128/369、139、139/164/236/240、139/255/325/415/440、155/161/198/199、155/199、160/161/369、161/198/369、161/369、164/189、164/189/236/240、164/189/240/252/415/423、164/200/236、164/200/236/240/324/416/440、164/200/236/255/322/324/423/440、164/236、164/236/240/440、164/236/423、164/322/325、164/322/325/416/423、164/416/448、186、189、199/369、200/236/322/325/416、200/322/325/415/448、221、235、236/415/416、237、239、240、240/252/255/322/415/416、240/252/255/415/448、255/423、256、286、299、305、309、312、313、323、325、355、389、406、415/416/448、422、438および446から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3082を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目23)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、14、35、42、46、49、105、106/164/172/200/409、106/164/172/210/240/415、106/164/172/242/409/416、106/164/200/210/242、106/164/200/210/415、106/164/200/240/408/409/416、106/164/210/240/408/409/416、106/164/210/408/409、106/164/240/415、106/164/409/415/423、106/172/200/210/240/242/408/415/416/423、106/172/200/210/242、106/172/240、106/172/240/242/409/415、106/172/242、106/172/242/416/423、106/172/408/409、106/172/409/423、106/200/210/409、106/210/240、106/210/240/408/415、106/240/242、106/240/242/409、106/242/408/409、134、143、164/172/200/210/242/409、164/172/240/242/415、164/172/242/408、164/200/408/415/416、164/240/242/408、164/240/242/415/423、164/423、172/200/210/240/408、172/200/240、172/200/408/416、172/210/415、172/240、172/240/242/415、172/240/409、179、181、200/210/240/242/409、200/240/242/407、200/242/415/416/423、200/408/409、210/240、232、240、240/242、240/242/408/416、240/242/415/423、240/408、240/415、278、290、336、373、381、401、409/415および441から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3244を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目24)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、21、91、125、127、130/187、143、143/150、145、152、156、186、187、195、197、200、201、202、264、268、364、365、および415から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3346を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目25)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/5/113/186/237/406、2/73/186/237、2/189/286、2/286/355/416/422、5/34/73/113/406、5/73/186/406、5/113/237/406、5/186/237/245/256/406、5/186/237/406、5/256/406、34/113/186/237/406、72/73/172/235/240/242/438、72/172/239/240/242/408、72/172/240/242、73/172、73/172/235/239/240、73/172/235/239/242、73/172/239/240、73/172/239/240/242、73/172/240/242/408、73/172/240/408、73/186/237/406、73/235/240/323、73/235/240/408、73/237、73/239/242、96、113/186/406、127、132、144、153、155、156、172、172/188/323、172/235、172/235/239/240/242、172/235/239/408、172/235/240、172/235/240/242/438、172/239/240/242/323/408、172/240、172/240/299/323、186、186/237、186/237/286、186/406、187、189/333/355/421,196、199、200、235/239/240、235/240/242、237、239/240、239/240/242/256/323、239/240/242/323/408、239/240/408、239/242/408、240/242/256/438および242/408から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3502を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目26)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/5/35/105/143/237/373/416/422、2/5/35/143/232/237/416/422/441、2/5/35/232/278/373/416、2/5/105/143/232/373/416/422、2/5/278、2/105/143/232/237/278/373/441、2/143/232/373/441、2/143/373/441、3、5/35/232/373/416/422、5/105/232/237/373/416/441、5/105/237/278/422/441、5/105/237/416/422/441、5/143/189/232/237/441、5/143/232/237/278、5/143/232/237/416/422、5/143/232/373/422/441、5/143/237/278/373/416/422、5/143/373、5/189/237/278/373/416/422/441、5/232/416/422、5/237/373/422、5/373/416、8、26/42、26/42/46/49、26/42/46/49/134、26/42/46/49/134/186、26/42/46/134、26/42/49/134、26/42/49/134/186/355、26/42/49/134/401、26/42/134/401、26/49/134、26/134、26/134/186/355/401、26/134/355、26/134/401、26/355/401、35、35/105/189/232/373/416、42/46/49/97/134/401、42/46/49/134、42/46/49/134/186、42/46/49/134/186/355、42/46/49/134/235/355/401、42/46/49/134/401、42/46/49/186、42/49/134/186/355、42/49/134/186/401、42/49/134/355/401、42/134/186、42/186/355、46/49/134、49/134/355、50、61、62、101、105/143/232/237/373/416/422/441、105/143/278/373、105/189/237、105/237/278/373/416/422、105/237/373/422/441、105/373、105/373/441、134/401、137、143、143/189、143/189/232/422/441、143/189/237/373/416/422、143/232、143/237、143/237/422/441、158、161、164、176、186/355、189/232/373/416/422/441、189/237/278/416/441、193、223、223/243、232/237、237/373、235、237、 237/373/441および239、240、243、244、248、249、301、323、330、352、364、426および427から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3696を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目27)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、5/73/113/186/187/373/423、5/73/143/144/179/186/187/422、5/73/144/179/186/373/423、5/73/144/187/373/422、5/143/144/179/181/186/187/373、5/144/179/181/373/422、5/144/373/422、11、12、41、44、44/187、45、49/96/127/132/156/196、49/96/127/153/278、49/96/132/153/155/156/237/278/406、49/96/132/153/199/200、49/96/132/155、49/96/132/155/237/278、49/96/155/199/200/406、49/153/155、55、56、57、65、66、70、72、73、73/113/143/179/181/422、73/113/179/181/186/187、73/143/144/179/186/187/373/423、73/179/181/186/187/373、73/179/181/186/373/422、73/181/186/187、74/238、82、83、85、 96/127/132/153/278、96/127/153/155、96/132/153/155、96/132/153/155/156、96/132/153/155/156/200、96/132/153/156、96/132/196/199、96/132/278、96/153/155/156、96/153/155/199/200/237、96/153/406、103、111、113、113/143/179/186/187、113/144/186/423、113/144/373、113/181/186/373/422、113/373/422、114、117、127/132、127/132/153/156、127/132/155/156/406、127/153/155/199/200/237、127/406、 132、132/153/155、132/153/237/406、132/155、132/237、135、138、140、143/144/179/181/186/187/422、143/179/181/186/187/422/423、144/179/181/186/187/373、144/179/186/187/373、153/155/156/237、153/155/196/199/237、153/199/406、153/237、155/199、159、160、162、167、179/181/186、179/181/186/187/423、179/186/187、179/187/373/422、181/186/187/422/423、182、214、220、222、223、226、236、238、256、286、299、309、373/423、387、388、389、391、393、406、408、412、418、422、429、430、449および450および373/423から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3956を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目28)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、7、8/375、9、10、12、50/137/189/375、53、62/153/155/156/159、62/153/155/156/159/427、62/153/155/199/406、65、68、99、106、110、115、116、131、132、136、137/164/375、153、153/155/156、153/155/156/159/199/238/406、153/155/237/238/239/406、153/155/238/239、153/155/427、153/156/159、153/156/199/237/427、153/156/427、153/159/237/238/352、153/176/181/427、155/156、155/156/176/181/199、155/156/176/238/427、155/181/199/238/406、156/199、156/199/427、164/375/433、170、178、190、192、194、200、220、223/375、238、242、245、257、272、280、302、304、335、375、385、395、399、402、408、412、416、423、427、445、447および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4256を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目29)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、11/41/44/127/132/406、11/41/44/127/278/406、11/41/45/73/127/278/406/408、11/41/45/127/278/406、11/41/132/278、11/44/45/127、11/44/73/127/132/135、11/44/73/127/132/135/406/408、11/44/127、11/44/132/278/406、11/45/73/127/135、11/45/127/132/135/138/182、11/45/406、11/73/127/132/135/182/278、11/73/127/132/278/406/408、11/73/127/132/406/408、11/73/132、11/73/132/135/408、11/127/132/135、11/127/132/135/182、11/127/132/135/406、11/127/132/138/182、11/127/132/182、11/132/135/406、11/182/406、41/44/45/73/127/132/278、41/45/127/132/135/278/406、41/73/132/135/406、44/45/73/132/135/406、44/45/127/132/135/138/182/406/408、44/45/127/132/278、44/73/127/135、44/73/127/135/182/278/406/408、44/73/132/135/406/408、45/73/127/132/135/406/408、45/73/132、45/73/132/135/182、45/73/278/406/408、45/127/132、45/127/132/135/182、45/127/132/135/182/406/408、45/127/135、45/132/408、45/406、56/309/449、57、65/114/422/427、65/114/427、65/143、65/143/235/427、73/127、73/127/132、127、127/132/135/182、127/132/135/182/406、132/135、132/135/182、132/135/406、132/406、164、164/220/309/449、164/220/449、164/449、182、220/449、309、309/449、406、418/427、427、427/429および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4550を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目30)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、4、7/10/73/127/132/385/423、10、10/53/73/99、10/53/272/423/427、10/53/423、10/73、10/73/127、10/127/132/385、10/132/302/385、11/44、11/71、11/287、11/441、37、40、42、42/138、42/141、43、46、47、48/398、49、49/406/408、51、53/73/200/423、53/127/132/385、53/127/136/385、53/132/136/302/423/427、53/132/302/385/423/427、64、65/106/445/447/449、65/143/220、65/220/309/445/447、65/220/445/449、65/399/406/447/449、65/402/406/445/449、65/445/447/449、65/447/449、71、73、73/127/427、73/132/136/385/427、73/385、73/385/427、76、97、100、106/220/399/402/406、108、108/172、109、112、115/116/278、115/170/190/238/412、115/190/194、115/245/278、116/170/190、116/190/406/408、116/238、116/238/245、116/416、117/157/301、118、118/406/408、119、119/172、127、130、132、133、134、141、143/220/445/447、143/309/402、143/309/445/447/449、157、169、170、170/190/192/194、170/192、170/192/194/278、170/192/194/335、170/194、170/194/335/416、170/238、170/335、170/335/416、172/420、172/437、179、181、190、190/192/194、190/194、190/194/238/245、190/194/335/416、190/194/412、190/245/412、192/194、192/194/242/406/408、194、200、200/385、220/399、220/445、220/445/447、257/385、259、272/302、272/385、274、275、278、287、288、302/385、309/399/449、309/445/447/449、333/398、333/406/408、338、356、357、376、381、385、394/420、396、397/406/408、398、401、385、385/427、399/406、399/406/449、402/445/449、406/408、406/445/447/449、406/445/449、410、417、420、423/427、434、437、441、445/447/449、445/449、447および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号7324を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目31)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、10、10/144、10/199、11、11/64/109、11/445、13、14、15、15/394、16、22、36、42/43、42/44/71/73/116、43/73/141、46/47/51、46/51、47/49、47/51、64、64/65/109、64/65/112、64/112、64/134、64/445、65/112、65/112/445、71、71/73、71/73/141、71/141、71/302、73、73/116/141、73/141、73/302、89、93、96、109、109/112、109/115/118、109/134、109/406、112、112/445、116、116/123、116/287、116/143、116/350、123、125、127、127/169/172、127/169/287、127/169/376/398/399、127/169/398/399、127/287、127/376、141、141/302、143、144、149、156、169/172/287、169/172/288、169/172/288/398/399/420/423/427、169/172/398/399、169/287、169/398、169/398/399、186、187、197、198、199、201、202、203、268、287、287/288、287/376、287/398、287/399、287/420/423/427、288、288/376/398、288/398、288/399、302、324、331、350、376、376/398、376/399、398、398/399、398/399/420、398/427、399および420から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号7784を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目32)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、22、25、51、56、71、78、80、81、88、157、185/208/230/252/255/290/365、189/206/208/365、200、208/365/435、243、245、249、259、262/401、279、282、284、304/322/365/401、308、338、339、352、362、364、365/401/413/435、366および374から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号696を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目33)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、51/56、51/56/243/249/282/353/362/366、51/56/243/249/308/362/364、51/56/249/353、51/56/249/362/364、51/56/249/362/366、51/243/249/308/353、51/243/249/348/362/366、51/249、51/249/282/284/364、51/249/282/353/366、51/249/284/308/362/366、51/249/353/362/364、51/353/362、56、56/243/249/282/364/366、56/243/364/366、56/249、56/249/284/353、56/249/353、56/284/366、243/249/282/284/362/364/366、243/249/308/353/366、243/249/353/362/366、243/282/353/362/364、243/282/362/364/366、243/308/353、249/353/362/366、282、308/366および362/366から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4684を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目34)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、25、25/56/353、25/243/249/259/366、25/243/249/362、25/362/366、51、51/56/200/243/249/259/338、51/56/362、51/71/249/279/284/362/366、56/243/249、56/362/366、70/198/259/313、85、88、88/173、110、159、163、171、174、175、177、198、198/313、198/313/428、200/243/249/259、208、208/320、209、209/234、222、226、234、234/408、243/338/362/366、253、256、259、265、272、289、322、336、353/362、405、411、428および439から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4838を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目35)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、8、9、25、25/198/209、25/200/209/338、25/200/243/249、25/209/243、25/209/243/249、25/209/243/259、25/209/249/259/366、25/209/259、25/209/279/366、25/209/289/366、25/249、25/259/279、25/259/279/289、25/279/284、25/279/284/289、25/289、34、53、54、55、61、69、70、73、79、87、91、107、108、111、141、153、158、174、190、194、198、198/200/209/243/249/289、198/249/338、200/209/366、201、205、209、209/249/259/279/338/366、209/249/259/289、209/249/279/284/289、209/249/338、209/279/289、209/366、234/297、238、247、249/259、252、253、254、256、259/366、279、279/338、289、297、308、321、322、327、336、338、341、342、364、366、388、392、411、412、414、426、430、432、446および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4876を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目36)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、88、88/110、88/110/159/198/200、88/110/159/198/234/259/265、88/110/159/198/259、88/110/198、88/110/234、88/159/198、88/198、88/198/200/259、88/198/259、88/259、88/259/265、110/259/265/411、159/198/411、159/259/411、171/174/175/177/208/320/428/439、171/175/177/208/320/428、171/177、171/177/226/428/439、171/208/320、171/208/320/428、171/208/428、174/175/177/208/320/428、174/175/428、174/320、198、198/200、198/200/234、198/234、198/259、208、208/320/331/428、208/320/428、208/428、234、259、320/428および428から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5066を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目37)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、7、25/61/208/252/253、25/61/428、25/107/208/320/428、25/208/247/252/253/364/428、25/247/249/252/364/428、38、53/54/55/153/201、53/54/308/392、53/171/308/392、54、61/107/208/252/253/254/364/428、61/208/252/254/428、64、68、73/87/201、91/201/439/444、99、106、107、107/208/320/364/428、107/247/249/252/254/364、107/247/252、107/247/428、109、159、169、171、172、177、179、190、190/208/247/252/428、222、233、233/269、247/249/252/254/320/428、249/252/253/254、249/252/254/428、251、252/253/254、253/320、259、264、289、296、300、308、308/327/439、317、318、320、320/364/428、320/428、347、404、408、417、424、427、428、428/434、431、435および438から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5290を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目38)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、49、73、87、87/88、87/88/94/159/177/208、87/88/159/198、87/88/177/198/249、87/88/208、87/159/177、87/159/320、87/177/249、87/198、87/198/199、87/198/208/320、87/208、87/208/320、87/320、88、88/177、88/177/208、88/177/320、88/198、88/199、88/199/208、88/208、88/208/249/320、88/320、113、134、135、158、159/177/198、159/177/208、159/198/208/320、171、173、177/198、177/208、195、214、222、253、256、257、268、272、289、300、302、330、348、374、392、399、408、411、412、437、439、445および453から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5372を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目39)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/7/107/233/252/253/320、2/7/107/233/252/253/320/408/428、2/7/233/252/253/320/427/428、2/233/252/317/320、7/107/190/233/252/253/317/408/427、7/107/233/252/253、7/107/233/252/317/320、7/107/233/252/317/408、7/190/233/252/253/320/427、7/190/233/252/317/320/427/428、7/190/233/252/408/427、7/233/252/253/317/408/427、7/233/252/253/408、7/233/252/317/320/427、7/233/252/317/428、14、55、56、64/169/201/347/392、64/172/264/268/347/392/417、91/94/171/172/201/264/347、91/201/264/347/392、94/201/264/347/435、107/190/233/252、107/190/233/252/317/320、107/233/252/253、107/252/317、169/171/172/264/392/435、169/171/201/264/392/435、169/172/201/264/347、169/172/201/264/347/392/435、169/172/201/347/392、169/172/201/417/435、171/172/201/264/392/417/435、171/201/392/417、190/233/252、190/233/252/253/317/320/408/428、190/233/252/317/408、190/233/252/320/408、201/264/347/392/417/435、201/264/347/392/435、201/264/347/417/435、233/252/253/317/320/427/428、233/252/253/408/427、233/252/317/408、233/252/317/427、233/252/320、233/252/320/408/428、255、282、308、336、342、348/374/435、364、374、391、407および422から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5562を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目40)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/4/113/158/163/302/364/399/449、2/4/113/158/163/330/449、2/4/113/163/449、2/4/158/163/364/449、2/4/158/222/257/302/330、2/4/158/330、2/4/163/222/302/330/364/449、2/4/163/257、2/4/163/257/330/399/449、2/4/163/330/449、2/4/163/364、2/4/163/364/453、2/4/302、2/113、2/113/163、2/113/163/449、2/113/330/399、2/113/449、2/158/163、2/158/163/364/399、2/163/364/453、2/364/449、4/113/158/163/330/364/399、4/113/158/302/330/364、4/113/163/364/399、4/158/163/364/399、4/364/449、87、87/95/198、87/198、87/266、87/322、107/134/135/195/412/417、107/195/268/322/439、107/195/272、107/195/417/439、107/374/417/439、113/158/163/364/399、134、134/135/195/268/317、158/163/257/330/364/449、158/163/302/330/364/399、158/163/364、163/257/302/364、163/302/330/364/449、163/364、173、173/190/233/252/427/437、173/190/252/257/347/427/437、173/190/257/374/437、173/190/257/427/437、173/233/252/257/427、173/233/437、173/252、173/252/268/437、173/252/347/411、173/257/374/437、173/374/437、173/427/437、190/233/252/257/347/411/437、190/252、190/252/257/285/427、190/252/257/411/437、190/252/257/427、190/374/427/437、195/272/320/439、195/317/320、198、198/244、198/292、233/252、233/252/257、233/252/257/347、233/252/257/347/411/437、233/252/257/427/437、233/252/285、233/252/285/437、233/252/411/437、233/252/437、233/374、233/374/437、252/257、252/257/347/437、257/347/411/437、268/417、285/347/437、302/364、330/364、347/411/437、347/427/437、364/399、374、374/411/437、408/417、411/437および437から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5708を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目41)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/4/14/158/282/364/449、2/4/14/158/282/407、2/4/14/163/198、2/4/14/163/282/399、2/4/14/198/308/407、2/4/14/282/308/364、2/4/14/282/308/407、2/4/14/282/364、2/4/158/163/364/399/407、2/4/158/198/282/364/407、2/4/163/198/282/308/342、2/4/163/282/342/364、2/4/163/364/399/449、2/4/198/282/449、2/4/198/364/391/449、2/4/282/342/364/407、2/14/158/198/407/449、2/14/163/308/364、2/14/163/364/407、2/14/282、2/14/282/308、2/14/282/308/364、2/14/282/399、2/14/308、2/14/308/364、2/158/163/407/449、2/163/282、2/163/282/308/364、2/198/282/308/342、2/198/282/399、2/282、2/282/308/342/407、2/282/308/391/407、2/282/399、2/282/399/407、2/308、2/308/364/399、4/14/158/163/198/282/407、4/14/158/282/364/391/407、4/14/163/282、4/14/163/282/308/342/407/449、4/14/198/308/364、4/14/282、4/14/282/308/364/407/449、4/14/282/342/399/407、4/14/364/391、4/158/282/364/399、4/163/282/308/407、4/198/399/407、4/282/342/364/407、4/282/364/407、4/364、12、14/158/163/198/364、14/158/163/282/364、14/158/198/282/342/364/449、14/158/364、14/163/198/282/342/364/449、14/163/282/308、14/282、14/282/308、14/282/342/364/391、14/282/364、14/282/364/391/407/449、14/282/399/407/449、14/407、37、44、70、71/331、74、75、90、106、108、112、114、115、131、138、139、156、158/282/407、158/282/407/449、158/364/399/407/449、158/364/449、162、163/198/282/342、163/282/308/364/399、163/282/399/407、163/282/407/449、174、198/282/308/342、198/282/407、198/308、247、248、254、258、282/308/342/364/449、282/308/449、365、389、401/402、416、427、429、432、433および456から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5976を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目42)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、14/113/158、14/113/158/163、14/113/158/163/190/257/308/342、14/113/158/163/437、14/113/158/308/317/330/449、14/113/163/190/308/317、14/113/163/257/308/342/437/449、14/113/163/257/437、14/113/163/308/317/320/322/330/449、14/113/320/437/449、14/158、14/158/163/190/257/308/317/330/437、14/158/163/190/342/437、14/158/163/257、14/158/163/257/308/449、14/158/257/308/437/449、14/158/317/320/330/437、14/163/317/320、14/190、14/190/257/317/320/322、14/257/308/320/322/330、14/257/308/322/330/437、14/317、14/330、14/449、19、29/375、41、45、46、71、72、80、81、83、84、85、88、95、105、113/158/163/190/257/437、113/158/163/190/308/317/322、113/158/163/190/308/320、113/158/163/257/308/317/322/437/449、113/158/190/257/320、113/158/190/320/322/449、113/158/320/322/437、113/257/308、113/257/317/322/437、155、158/163、158/163/190/257/308/342/449、158/163/308、158/163/322/437、158/308/320/437、158/320/437/449、163/308/330/437/449、168、190/449、197、199、202、209、243、249、263、273、317/320/322/330、322/330、366、375および383から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号6138を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目43)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、5/449、6、10、25、25/449、37/71/125/174/247/248/427、37/71/247/331/365/389/401/429、37/139/329/365/427/433/449、37/139/427/432/433/449、37/139/429/432/433、37/174/401/402/433/449、37/248/331/389/427/433、37/248/389/401/429、37/331/432/433、69、69/449、71/139/389/427/429/432/433/449、71/174/329/427/429/432/433、71/174/365/427/432、71/248/365/389/401、71/248/449、71/254/433/449、71/427/432/433/449、71/432/433、87、87/449、91、91/449、139/156/174/389/401/427/433/449、139/156/247/365/401/433/449、139/156/247/389/401/427/433/449、139/156/248/389、139/156/248/389/401/416/427/429/433、139/156/365、139/174/248/331/389/401/449、139/174/254、139/174/365/401/402/427/433/449、139/247/248/331/401/417/432/449、139/248/254/449、139/248/402/416/427/433/449、139/248/432/433、139/254/401/416/427/433/449、139/401/449、144/449、153、153/449、156/248/256、156/254/331/365/427/432/449、156/389/401/402/416/432/433、159、159/449、172、172/449、174/247/248/389/401/432/433、174/329/432/449、174/365、174/389/429/432/433/449、212/449、233、233/449、247/248/401、247/248/449、247/331/401/427/432/449、247/401、247/427/432、248/331/427/429/433、248/365/389/427/429/432/449、248/401/429/432/433、248/416、248/416/449、248/449、254/365、254/427/433、288/449、303、317、331/365/429/432/433/449、347/449、361、365/401/402/429/432/433、369、389/401/416/432/449、389/401/427/432、401/427、416/427/433/449、416/432/433、416/432/433/449、421、427/432、427/432/449、432および433/449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号6288を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目44)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、3、4、9、37/41/45/72/81/83/84/88/155/163/168/190/331/375、37/41/45/72/81/83/84/88/155/263/273/331/375/432、37/41/45/72/81/83/84/88/155/331/366/375、37/41/45/72/81/83/84/88/155/331/375、37/41/45/72/81/83/84/88/248/375、37/41/45/72/81/83/84/88/331/366/432/433、37/41/45/72/88/155/168/190/331/366/375/432、37/41/45/72/88/155/168/190/331/375、37/41/45/72/88/190/263/273/331/366、37/41/45/72/155/163/168/190/243/263/273/331/366/432、37/41/45/72/155/163/168/243/248/273/331/366/432/433、37/41/45/72/155/163/168/263/366/432/433、37/41/45/72/155/163/331/366/375、37/41/45/72/155/190/243/248/273/331/432/433、37/41/45/72/155/190/248/263/331、37/41/45/72/155/190/263/331/366、37/41/45/72/155/190/273/331/366/375、37/41/45/72/155/190/273/366、37/41/45/72/155/190/273/366/375/432、37/41/45/72/155/248/263/273/366、37/41/45/72/155/263/331/375、37/41/45/72/155/263/375、37/41/45/72/155/273/366、37/41/45/72/155/331/366/375/432/433、37/41/45/72/190/263/273/331、37/41/45/72/190/331/366、37/41/45/72/190/366、37/41/45/72/263/331/366、37/41/45/72/263/366/432/433、37/41/45/72/331/366、37/41/45/81/83/84/88/155/168/190/243/331/366、37/41/45/81/83/84/88/155/168/331/375、37/41/45/81/83/84/88/155/263/273/331/366、37/41/45/81/83/84/88/163/168/263/273/331/366/375、37/41/45/155/163/168/263/331/375、37/41/45/155/168/248/273/331/375、37/41/45/155/190/331/366/375、37/41/45/155/366、37/41/45/155/366/432/433、37/41/45/155/375、37/41/45/243/248/273/331、37/41/45/263/331/375/432、37/41/45/331/366/432/433、37/72/81/83/88/155/190、37/72/197/273/331/375/432、37/83/263/365/366/375、37/190/202、41/45/72/155/263/331/366/375/432/433、41/45/163/168/243/248/273/366/432、45/72/84/88/197/375、45/72/88/366、45/72/163/202/365/366/375、45/72/168/243/331/365/366/429/432、45/84/168/190/199/254/273/365/366、45/163/168/190/199/366/429/432、45/163/168/197/263/331/365/366、53/437、61、64、72/81/83/84/88/155/163/168/190/366、72/81/83/84/88/155/190、72/81/83/84/88/155/190/273/331/366/432、72/81/83/84/88/155/273/331/375、72/81/83/84/88/155/366、72/81/83/84/88/163/168/190/243/263/331/366、72/81/83/84/88/163/168/263/331/375、72/81/84/190/248、72/83/84/88/202/254/273/366/375、72/83/84/197/202/243/263/365/366、72/83/88/243/263/331/365/366、72/155/163/168/190/366/432/433、72/155/190、72/155/190/263/331/366、72/155/190/366、72/155/273/331/375/432、72/243/248/263/366/432/433、72/243/248/273/366/432/433、72/243/248/366/432/433、72/248、72/170、72/405、81/83/84/88/155/163/168/273/331/375、81/83/84/88/155/190/263/331/366、81/83/84/88/155/263/366/375、81/83/84/88/155/366、81/83/84/88/190/263/375、81/83/84/88/263/273/331/366/432、81/83/169/190/263、81/83/190/263/365/366、81/83/202/365/366/402、81/88/375/402、83/88/155/273/366/375、84/155/168/197/199/331/366/375/383/402、84/168/197/202/263/366、84/197/366/402、94、96、98、113、118、118/120、120、129、134/158、155/168/190/197/199/366、155/168/375、155/263/366/432/433、158、165、170、171、173、183、190/199/202/331/366、193、197/199/202、197/202/248、197/248、199/263/331/365/366、214、214/222、222、226、229、234、248/375、253、265、269、272、289、296、300、302、304、322、322/407、330、365/366、365/375/402、390、395/439、396、398、399、403、405、408、411、412、423、428、434、435、438、439、442、444、448、449、452および454から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号6468を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目45)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、5/6/25/317、5/6/69/288/303、5/6/91/288/317、5/25/91/212/303/317、5/25/91/263、5/25/288、5/69/91/212/288、5/69/91/212/303、5/91/288/303、5/91/303、5/91/317/421、5/288、6/91/212/288/303/369/421、6/212/288/303、6/288、25/91/212/288、25/91/263/288/303、25/91/303/317/369、25/91/317/369、25/263/317、87/144、87/144/159/361、87/144/159/361/433、87/433、88/144、88/144/159、91/263/317/369、91/288/303/317/369、91/288/317/369/421、91/303、91/317、91/317/369、109/144/153/155/159/433、144、212/288、263/288/303/317および288から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号6864を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目46)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/3/433/435/442、2/81、9/37/113/396、9/87、9/144/331、37/113/144/396、37/233、41、53/144/233/269/331/428、53/233/269/390/395/396、53/234、61、56、61/120/156/163/165/197/303/308、61/120/159/300/308/407、61/120/300/303/407、61/156/159/163/165/243/248/253/300/303/308、61/156/163/243/248/300/303/308/407、61/156/163/300/365/411、61/156/197/253、61/163/300/303/308/405/407/411、61/165/248/253/407/411、61/214、61/214/300/308、61/243/300/308/407/411、61/300/303/308、61/300/303/405、61/365/405、69、69/81、69/134、69/263、69/263/434/438/439、69/439、72、76、 81、81/134、81/222、81/222/263/322/435/442、81/433/435/438/442、85/156/159/243/248/253/308/405/407/411、87、87/144、87/144/396、88、107、113/233/234、120/156/159/169/197/214/303/308/365/405/407、120/156/159/248/300/308、120/156/248/303/308/411、120/159、120/159/165/197、120/159/197/308/407/411、120/159/197/365/411、120/197/253/300/308、120/253/300/303/308/407、120/308/407/411、134/222/263、139、144/234/269、156、156/165/248/300/303/308、156/197/248/300/411、156/214/308/411、156/248/253/308、159/163/165/197/214/243/300/303/308/407、163/197/253/300/303/308/365、171/263、183/233/234/331/428、197/253/308/407、197/300/303/308/365、197/300/308/411、222、222/263/435/442、233/396/399、263、269、269/428/437、300/303/308、300/308/405/411、308、322、338および407から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号7388を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目47)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、37/72/76/81、37/72/76/107/156/331、37/72/195/331、53/81/195/197、55、69/72/76/107、72/76/107/156、72/76/107/195/197、72/269、81/107/195、87、87/91、87/91/94、87/91/94/120、87/91/94/233、87/91/94/233/259、87/91/94/263/389、87/91/120/233、87/91/120/233/411/431/435/437、87/91/144/259、87/91/163、87/91/163/233、87/91/163/233/263、87/91/163/389、87/91/233、87/91/233/389、87/91/259/263/389/428/431/435/437、87/91/263/389、87/91/322、87/91/389、87/94、87/94/144/263/428/435、87/94/263、87/163/233、87/233、87/233/259、87/233/322/389/411、87/233/389、87/259、87/263、87/428/431/435、87/435、91、91/94、91/94/120/233、91/94/120/233/389/431/438、91/94/233/259、91/120、91/120/233、91/233、91/233/259/389、91/233/389、94/233/411、111、144/389、163/233、195/197、197、233、233/259/263、233/259/389、233/438、252、255、259、263、263/389、322、324、328、389、413、428/431/435および451から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号8088を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目48)
ベータ−1,2−グリコシルトランスフェラーゼおよびベータ−1,3−グリコシルトランスフェラーゼから選択される、項目2〜47のいずれかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目49)
ADP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(AGT)、CDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(CGT)、GDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(GGT)、TDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(TGT)、およびIDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(IGT)から選択されるNDP−グリコシルトランスフェラーゼである、項目1〜48のいずれかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目50)
ADP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼである、項目48に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目51)
項目1〜50のいずれかに提供される少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼポリペプチドをコードする、操作されたポリヌクレオチド。
(項目52)
項目51に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチドを含むベクター。
(項目53)
少なくとも1つの制御配列をさらに含む、項目52に記載のベクター。
(項目54)
項目51に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
(項目55)
項目52および/または53に記載の少なくとも1つのベクターを含む宿主細胞。
(項目56)
真核生物および原核生物から選択される、項目54または55に記載の宿主細胞。
(項目57)
項目1〜50のいずれかに提供される少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを産生するための方法であって、項目54〜56のいずれかに記載の宿主細胞を、前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが前記宿主細胞において産生される条件下で培養するステップを含む、方法。
(項目58)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼを回収するステップをさらに含む、項目57に記載の方法。
(項目59)
項目1〜50のいずれかに記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを含む組成物。
(項目60)
配列番号72に対して少なくとも60%、65%、70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれより高い配列同一性であるポリペプチド配列を含む、操作されたスクロースシンターゼ。
(項目61)
配列番号74、1080、1158、1222、1392、1456、1582、1764、1804、1840、2064、2432、2510、7506、および/または8420に対して少なくとも60%、65%、70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれより高い配列同一性であるポリペプチド配列を含む、操作されたスクロースシンターゼ。
(項目62)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、4/9/349/532、4/13/113/343/532、4/13/113/532、4/33/47/52/343/532、4/47/52/532、4/113/532、4/13/113、4/13/532、4/33/113、4/343、7、8、44、95、117/440、136、221、343/532、440、444、478、532、583、611、615、615/789、695、722および788から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号74を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目63)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、8/221、47/221、68/129/248、68/129/248/595/600/756、68/146/248/387/506/550、68/189/272/316/477/719/756、75/105/154/215/264/345、75/105/345/410/769、75/105/530、75/345/530、85/170/225/266/534、87/125/230/267/375/464/708、93/129/506/550/595/719/756、93/477/635、95/136/788、95/201/478/583/724/788、95/385/478/583/788、95/440/478/724/788/792、95/444/478/603/792、95/444/478/724/788、95/478/724、98/250、113/225/266/415、126/314/499/549/589/755、136/440/444/478/603、136/440/444/478/583/788、136/444/478/583/788/792、225/372/534、266、306/358/703/776、358/636/737、440/444/583/724/788、440/478および466から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1080を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目64)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、8/68/95/98/358/478/595/724/792、8/68/98/221/248/250/440/477/534/595/724、8/68/788、8/93/95/98/136/221/595/600/788、8/93/95/113/250/440/595/600/724/788、8/95/98/440/478/534/600/788、8/136/248/478/788、47/75/85/105/125/129/170/635、47/75/85/105/375/756/776、47/75/85/264/267/372/415/635、47/75/85/87/129/375/776、47/75/85/87/170/372/756、47/85/105/129/201/230/267/583、47/85/125/372/583/635/756、47/85/170/756、47/85/87/105/125/635、47/85/87/154/756、47/125/129/375/756/776、47/129/170/635、47/154/372/375/583/635/708/756、68/93/95/358/440/444/478/534/595/603、68/93/95/444/788、68/93/98/136/248/250/358/440/534/724、75/85/87/105/264/267/583/708、75/85/129/154/264/375、85/125/215/375/415/635/776、85/87/105/215/267/756、85/87/129/375/756/776、87/125/129/170/230/756、87/154/306/375/756、93/95/98/534/792、95/440/444/724/788、129/215/372/756および170/264/267から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1158を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目65)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、47/68/93/98/358/440、47/68/154/372/375、47/93/98/136/154/772/776、47/93/98/154/372/375/776、47/93/98/358/583/635、47/93/129/136/154/250/372/534/635/724、47/93/129/136/375/534/583、47/93/358/372/375/440/724、47/93/358/372/375/776、47/98/129/358/372/375/438/534、47/98/129/375/534/635/724/776、47/98/372/375、47/125/154、47/129/136/372/375/534、47/129/248/250/372/375/534/724、47/136/583/776、47/358/440/724、47/358/635/776、47/372/635/776、68/93/98/129/358/375/724、68/93/154/358/372/440/776、68/129/440、68/129/583/724、68/136/724、68/154/358/375、68/154/534/635、68/375/440/534/724/776、93/98/125/154/248、93/98/125/154/250/440、93/98/129/154/248、93/98/154/250/358/375/534、93/98/154/635/776、93/98/534、93/125/154/440/534、93/129/250/358/372/375/583、93/154/248/724、93/358/534/635、98/129/375/583、98/534/583/635、129/136/154/248/250/372/375/534、129/136/375、129/154/248/250/358/375/534/635、129/358/372/635、154/250/358/375/583、154/358/375/534/776、154/534/635/724、372/375/776、375/635および534/583から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1222を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目66)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、17/357/364/434/519/684、17/357/434/519/684、17/434/684、17/684、54/97/118/307/694/727/738、68/98/129/136、68/98/129/136/154、68/98/129/136/154/534、68/98/129/154/534、68/98/129/154/635、68/98/136/154/534/635、68/98/136/154/635、68/98/154、68/98/154/534、68/98/154/534/635、68/129/136、68/129/136/154、68/129/136/154/464/635、68/129/136/534/635、68/129/154、68/129/154/765、68/136/154/534/635、68/136/534/635、68/136/635、68/154、68/154/534/635、68/154/635、97/118/442/694/727/738、98/129/136/154、98/129/136/154/635、98/129/136/534、98/129/136/635、98/129/154、98/129/154/534/635、98/129/534/635、98/136/154/635、98/136/534/635、98/136/635、98/154、98/154/534、122、129/136、129/136/154/635、129/136/534、129/136/635、129/154/534、129/154/635、129/635、132/136/154/534/635、136/154/635、136/534/635、136/603、136/635、154、154/635、157、160、161、167、253、285、381、519、550、563、564、635および785から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1392を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目67)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、17/54/97/136/329/550/684/738、17/54/97/329/524/684、17/54/161/519/727/738、17/54/524/550/727、17/161/434/524/766、17/434/524/684、17/434/738、17/442/524/550/684/721、17/727、17/738、54/97/161/434/442、54/97/434/524/550/684/727、54/136/442/550、54/434/524/738、97/136/519/550/727/738および329/550/684/727/738から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1456を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目68)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、14/137/356/745、14/570、14/570/745、26/117/365、26/164/165/213/586、71/158/222/356、71/222/236、71/319/356/606、117/158/213/332/608、117/164/707、117/213/365/517、117/311/332、117/608、122、122/160/161/167/550、122/160/161/282/381/550、122/160/161/282/381/550/636、122/160/161/282/550、122/160/161/550/636、122/160/167/282/381/550/636、122/160/282/381、122/160/282/381/550、122/160/282/550、122/160/381/550、122/160/381/550/636、122/160/550、122/160/550/636、122/161/550、122/167、122/167/550、122/282/381/550、122/282/550、122/282/550/636、122/381/706、122/550、137/319/570、157/253/519、160/161、160/161/282/381/550、160/161/282/550、160/161/550/636/735、160/167/282/381/636、160/282、160/282/381/550、160/282/550/636、160/381/550/636/681、161/282/550/636、161/381/550、165/311、167/282/636、167/550、213/365/517/707、236、253/519、253/519/563、253/519/635、253/563/635、270/322/517、270/367/452/517/613/700/750、270/452/517/700/750、270/570、282/381/550、282/550、356/570、381/550、517、517/562/750、517/640、519/563、550、550/636および562から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1582を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目69)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、63/536、117/122/270/540/681、181/536/548、181/536/548/705、181/548/705、270/681、347/532、347/536/548/705、407/570/681、407/681、536、536/548、536/548/699、536/705、548、548/580、548/705、580、681、699および705から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1764を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目70)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、13、17、18、30、37、52、57、60、71、85、87、90、98、99、118、129、164、180、183、347/434/517/562/640/681、347/434/532/562/640/681、347/434/550/562/681、347/434/681、347/517/532/681、347/532/550/640/681/699、347/536/562/681、347/550/580/681、347/550/681、347/681、365、388、389、415、433、434/517/532/681、517/681、531、532/681、535、536/580/681、539、562/681、589、606、608、707、711、727、738、748、765、769および789から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1804を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目71)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、14、15、17/52/87/118/129/388/589/738/765、17/52/87/118/129/589/738、17/52/87/118/129/589/738/765、17/52/87/118/129/589/765、17/52/87/129/388/589、17/52/87/129/388/589/738、17/52/87/129/738、17/52/87/388/589/765、17/52/87/589/738/765、17/52/118/129/265/589/765、17/52/118/129/388/589/738/765、17/52/118/129/589/738/765、17/52/118/129/738/765、17/52/118/388/589/738、17/52/118/388/589/738/765、17/52/118/388/738/765、17/52/129/388/589/738、17/52/129/388/589/738/765、17/52/129/589、17/52/129/589/738、17/52/129/589/765、17/52/129/653/738/765、17/52/129/738、17/52/129/738/765、17/52/388/589/738、17/52/388/589/738/765、17/52/589/738/765、17/52/589/765、17/87/118/388/738、17/87/129/388/738、17/118/129/388/738/765、17/129/589、17/129/589/738、17/129/589/738/765、17/129/738/765、17/388/589/738、17/589/738、17/589/765、17/738/765、18/362、20、24、26、33、33/154、46、50、52/84/129/388/738/765、52/87/118/129/388/765、52/87/118/388/589/738、52/87/118/589/738/765、52/87/129/388/738/765、52/87/129/765、52/87/589/738、52/87/738、52/118/129/589/738、52/118/129/765、52/118/388/589/738、52/118/388/738/765、52/129/589/738/765、52/129/589/765、52/129/738、52/388/738/765、52/589/738、52/589/738/765、52/738/765、54、58、59、59/72、79、81、84/129/589/738/765、87/118/129/765、87/129/388/589、92、93、97/154、104、105、130、134、154、165、175、185、212、213、218、241、256、263、316、319、349、360、362、364、390、393、434、480、498、530、534、534/739、542、589/738/765、603および652から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1840を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目72)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、21、25/112、41、57/71/87/347/434/562/606、57/71/129/180/434/536/562、57/71/129/434/531/536/562、57/71/129/531/532/536/539/606、57/71/562/606/711/789、57/71/789、57/87/180/531/532/562/606/612/711、57/87/347/562、57/90/129/562、57/90/129/562/711、57/96/129/180/531/532/550/562、57/129/347/531/532/539/562/711/747、57/129/347/536/550/562/711/789、57/129/347/550/711、57/129/531/539/562/789、57/129/536/606/789、57/129/606、57/180/562、57/180/562/606/612、57/347/434/531/532/539/789、57/434/550/562/606/612/789、57/531/532/536/562、57/562/606/711、57/562/711、71/129/180/347/531/539/550、71/129/180/434/532/536/539/711/789、71/129/531、71/129/606、71/347/532/550/562/711、71/347/536/562/612/789、71/536/539/562、87/189/532/536/562/711/789、87/347/531/606/789、87/347/536/539/550、89、90/129/539/550/606、91、112、129/180/434/562/711/789、129/180/606/711/789、129/347/562、129/536/539/562、129/539/562/789、129/550、129/550/562、129/562/606/711、180/532、180/550/606、186、200、226、259、318、330、347/531/550/711、347/536/539/550/711/789、347/536/562/606/612、347/550/562/606、434/531/539/550/562/711、434/550、485、487、531/532/536/539/562/711/789、531/532/536/550/562/606/789、531/532/562/606/711、532/539/550、562/711、641、674、684、688、763および764から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2064を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目73)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、25、33/47/59/81/175/530/534/550/606、33/58/59/81/130/480/530/534/550/652、33/58/59/480/530/534/550、33/58/154/480/534/550/603/606、33/59/480/530/534/550/606、33/79/81/175/530/534、33/79/81/175/530/534/603、33/79/154/480/530/534/550、33/81/130/480/530/534/550、33/81/175/530/534/542/550/652、33/130/530/534/550、33/154/480/530/534/603/606、33/154/534、33/530/534/550、42、58/59/79/175/480/534/550/652、59/154/530/534/550、70、75、77、79/81/480/530/534/550/603/606/652、81/480/530/534/550、106、130/480/530/534/550/603/606、199、265、267、380、410、561、642および758から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2432を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目74)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、7/12、12、27、29、41、41/71、41/71/112、41/71/112/259/485/487/684/688、41/71/112/259/485/688、41/71/259/485/532、41/71/485、41/71/485/532/684、41/71/487、41/71/487/532/684、41/71/532、41/71/532/684、41/71/684、41/84/259/485/487、41/91/112/485、41/91/112/485/487/532/684、41/91/112/485/532/684、41/91/485、41/112、41/112/259/485/487、41/112/259/487/532/684、41/112/485/684、41/112/487/684、41/112/532、41/112/684/688、41/259/485、41/259/485/487、41/259/485/487/532/684、41/259/485/487/684/688、41/259/532、41/485、41/485/487、41/485/487/684/688、41/485/532、41/485/532/688、41/485/684/688、41/487/684、41/532、41/684、41/684/688、44、44/112/684/688、45、47、48、51、55、71/112/259/485/487/684、71/112/485/688、71/485/684/688、71/532、71/684/688、72、95、100、112、112/259、112/259/532/684/688、112/259/684/688、112/485/684、112/485/684/688、116、136、139、176、178、198、201、205、205/485、207、208、226/487/684/688、259/485/487/684、259/485/532、259/487/684/688、259/532、280、303、317、343、358、361、440、478、485、485/487、485/487/532、485/487/532/684、485/487/684、485/487/684/688、485/532、485/684、485/684/688、532、532/684/688、611、615、630、675、684、684/688、724、756および788から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2510を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目75)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、8/25/55/95/208/358/440/517/788、12/45/47、12/45/47/48/51/136/142/630、12/45/47/51/136/139/630/758、12/45/47/136/139/142/675/758、12/45/51/136/139/630/675/756/758、12/45/51/630/756、12/48/51/136/139/758、12/136/139/142/756/758、12/136/142、12/630/756、25/29/208/440、25/100/154/208/440/517/705/788、25/517、29/208/361/517/788、42/198/199/480/532/539/561、42/198/532/561、42/198/532/561/724、42/199/480/532/561、42/259/480/561、42/259/480/652、42/480/561、42/480/561/724、42/561、47/51/136/756/758、55、55/410/440/603/788、55/517、55/517/788、70、70/642、77/176/487/615/642、95/603、106/199/539/561/652、116、136/139/142、154/361/440/517/603/788、176、198/199/480/561、198/199/480/561/724、198/199/561/724、198/480/561、198/480/724、199/532/539/561/652/724、259/480、267/611/642、280/440/517、380、480/561/652、480/561/652/724/764、480/724、517、532/539/561、532/561/724、603および642から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号7506を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目76)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、12/45/95/136/139/199/517/630/756、12/45/95/136/756、12/45/136/139/199/517/603、12/45/136/139/208/603/630/756、12/45/136/139/517/603/756、12/45/136/139/517/630/642/756、12/45/136/139/517/756、12/45/136/139/603/756、12/45/136/139/642/756、12/45/136/176/517/603/630/642、12/45/136/208/517/630/756、12/45/136/517/603/642/756/789、12/45/136/517/630/642/756、12/45/136/603/756、12/45/136/630/642、12/45/139/176/208/517/603/630、12/45/139/199/208/603、12/45/139/517/756、12/45/139/756、12/45/176/603/630/642/756、12/45/199/208/517/603/630/756、12/45/208/517/603/642/756、12/95/136/139/517/603/756、12/95/139/517/630/756、12/95/139/517/642、12/95/139/630/642、12/95/199/517/642、12/95/517/630/756、12/95/630/756、12/136、12/136/139/176/517/603/630、12/136/139/176/517/603/756、12/136/139/176/630/756、12/136/139/176/642、12/136/139/176/756、12/136/139/199/208/517/603/756、12/136/139/199/208/517/630/642/756、12/136/139/208/517、12/136/139/517、12/136/139/517/603/630/642/756、12/136/139/517/603/630/756、12/136/139/517/603/756、12/136/139/517/630、12/136/139/517/630/642、12/136/139/517/630/642/756、12/136/139/517/756、12/136/139/603/630、12/136/139/603/630/642、12/136/139/603/630/756、12/136/139/603/642/756、12/136/139/630、12/136/139/630/642/756、12/136/139/630/756、12/136/139/642/756、12/136/176/208/517/603/630/756、12/136/176/517/642、12/136/176/603/756、12/136/199/208/517/603/642/756、12/136/199/208/630/642、12/136/199/517/756、12/136/208、12/136/208/603/642、12/136/517/603/630/642、12/136/517/603/630/756、12/136/517/630、12/136/517/630/642、12/136/517/642、12/136/517/642/756、12/136/517/756、12/136/603/630/642/756、12/136/603/630/756、12/136/603/642、12/136/603/642/756、12/136/603/756、12/136/630、12/136/630/756、12/139/176/517/603/630/756、12/139/176/630/756、12/139/199/208/642、12/139/199/517/630/756、12/139/208/517、12/139/208/642、12/139/517/603/642/756、12/139/517/630/642/756、12/139/517/642、12/139/603/642/756、12/139/603/756、12/139/630/642、12/139/630/642/756、12/139/630/756、12/176/517/603/630、12/176/517/630/642/756、12/176/517/756、12/176/603/630/756、12/176/603/756、12/199/208/517/642、12/199/630/642/756、12/199/642/756、12/199/756、12/208/517/603/623/630/642、12/208/603/630/756、12/208/630/756、12/517/603/630/642/756、12/517/603/630/756、12/517/603/756、12/517/630/642/756、12/517/642/756、12/603/630/756、12/603/642/756、12/603/756、12/630/642/756、12/630/756、25/176/198/532/539、116/142/198/434/440、136/139/176/199/208/517/630/642、136/139/176/517/630/642/756、136/139/199/517/603/756、136/139/208/517/630/756、136/139/208/603/630/756、136/139/517/603/630/642/756、136/139/517/603/642/756、136/139/517/603/756、136/139/517/756、136/139/603、136/139/630/642/756、136/517/756、136/603/756、136/630/642、136/630/756、136/642、136/642/756、136/756、139/199/208/517/630/756、139/199/517/642、139/208/517/630/642/756、139/517/603/756、139/517/630/756、139/642/756、154/532/652/788、199/517/603/630/756、208/517/630/642/756、517/603/630/642/756、517/630/756、603/630/756および603/756から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号8420を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目77)
項目60〜76のいずれかに提供される少なくとも1つの操作されたスクロースシンターゼポリペプチドをコードする、操作されたポリヌクレオチド。
(項目78)
項目77に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチドを含むベクター。
(項目79)
少なくとも1つの制御配列をさらに含む、項目78に記載のベクター。
(項目80)
項目78に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
(項目81)
項目78または項目79に記載のベクターを含む宿主細胞。
(項目82)
真核生物および原核生物から選択される、項目80および/または81に記載の宿主細胞。
(項目83)
項目60〜76に提供される少なくとも1つの操作されたスクロースシンターゼ改変体を産生するための方法であって、項目80〜82のいずれかに記載の宿主細胞を、前記操作されたスクロースシンターゼ改変体が前記宿主細胞によって産生される条件下で培養するステップを含む、方法。
(項目84)
前記操作されたスクロースシンターゼ改変体を回収するステップをさらに含む、項目83に記載の方法。
(項目85)
項目60〜75のいずれかに記載の少なくとも1つの操作されたスクロースシンターゼ改変体を含む組成物。
(項目86)
基質をグリコシル化するための方法であって、少なくとも1つの基質、項目1〜50のいずれかに記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、および前記基質がグリコシル化されて少なくとも1つのグリコシル化産物を産生する条件下で、前記基質に前記グリコシルトランスフェラーゼを接触させるステップを含む、方法。
(項目87)
前記基質が、少なくとも1つのステビオール配糖体を含む、項目86に記載の方法。
(項目88)
前記グリコシル化産物が、少なくとも1つのモノグリコシル化および/またはポリグリコシル化産物を含む、項目86に記載の方法。
(項目89)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドI基質、NDP−グルコース、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドDおよびレバウジオシドI基質、NDP−グルコース、ならびに前記グリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドMが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目90)
レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP−グルコース、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP−グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目91)
レバウジオシドDを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP−グルコース、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP−グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドDが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目92)
前記NDP−グルコースが、ADP−グルコース、CDP−グルコース、TDP−グルコース、GDP−グルコース、および/またはIDT−グルコースから選択される、項目86〜91のいずれかに記載の方法。
(項目93)
前記NDP−グルコースがUDP−グルコースではない、項目86〜92のいずれかに記載の方法。
(項目94)
前記グリコシルトランスフェラーゼが、項目48〜50のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼを含む、項目86〜93のいずれかに記載の方法。
(項目95)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドI基質、ADP−グルコース、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドI基質、ADP−グルコース、ならびにグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドMが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目96)
レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ADP−グルコース、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたADP−グリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ADP−グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目97)
レバウジオシドDを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ADP−グルコース、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ADP−グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼをレバウジオシドDが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目98)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドI基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドD基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびにグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドMが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目99)
レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目100)
レバウジオシドDを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドDが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目101)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、少なくとも1つのステビオシドおよび/またはステビオシドとrebAの混合物を含むステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドMが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目102)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP、スクロース、少なくとも1つのスクロースシンターゼ、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドAが最初に産生され、レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドIが次に産生され、レバウジオシドMが最終的に産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目103)
前記スクロースシンターゼが、項目60〜76のいずれかに提供される操作されたスクロースシンターゼである、項目98〜102のいずれかに記載の方法。
(項目104)
ワンポット反応として実施される、項目86〜103のいずれかに記載の方法。
(項目105)
逐次的に実施される、項目86〜104のいずれかに記載の方法。
(項目106)
前記方法のステップを繰り返すステップをさらに含む、項目86〜104のいずれかに記載の方法。
(項目107)
前記スクロースが繰り返されるステップの間に再利用される、項目106に記載の方法。
(項目108)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼおよび/または他の反応構成要素が再利用される、項目106および/または101に記載の方法。
(項目109)
前記ステビオシド基質が、Stevia rebaudianaから抽出される、項目86〜108のいずれかに記載の方法。
(項目110)
前記ステビオシド基質が合成により産生される、項目86〜108のいずれかに記載の方法。
(項目111)
前記グリコシルトランスフェラーゼおよび/または前記スクロースシンターゼが固定される、項目86〜110のいずれかに記載の方法。
(項目112)
フルクトースを含む反応産物を産生する、項目86〜110のいずれかに記載の方法。
(項目113)
前記フルクトースが、前記反応産物から除去される、項目112に記載の方法。
(項目114)
洗浄ステップをさらに含む、項目86〜113のいずれかに記載の方法。
(項目115)
少なくとも1つのカラムクロマトグラフィーステップをさらに含む、項目86〜114のいずれかに記載の方法。
(項目116)
前記少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目11〜31のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ−1,2グリコシルトランスフェラーゼである、項目86〜115のいずれかに記載の方法。
(項目117)
前記少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目4〜10および32〜47のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ−1,3グリコシルトランスフェラーゼである、項目86〜116のいずれかに記載の方法。
(項目118)
前記少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目11〜31のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ−1,2グリコシルトランスフェラーゼであり、項目4〜10および31〜47のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ−1,3グリコシルトランスフェラーゼである少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼをさらに含む、項目86〜117のいずれかに記載の方法。
(項目119)
項目60〜76のいずれかに記載の少なくとも1つの操作されたスクロースシンターゼをさらに含む、項目86〜118に記載の方法。
(項目120)
項目86〜119のいずれかに記載の方法に従って産生された少なくとも1つのレバウジオシド。
(項目121)
項目120に記載のレバウジオシドを含む組成物。
(項目122)
項目86〜89、92〜95、98、および/または101〜121のいずれかに記載の方法に従って産生されたレバウジオシドM。
(項目123)
項目122に記載のレバウジオシドMを含む組成物。
(項目124)
項目86〜94、96、99、および/または101〜121のいずれかに記載の方法に従って産生されたレバウジオシドA。
(項目125)
項目124に記載のレバウジオシドAを含む組成物。
(項目126)
項目86〜94、96、99、および/または101〜121のいずれかに記載の方法に従って産生されたレバウジオシドI。
(項目127)
項目126に記載のレバウジオシドIを含む組成物。
(項目128)
項目86〜94、97、および/または100〜121のいずれかに記載の方法に従って産生されたレバウジオシドD。
(項目129)
項目128に記載のレバウジオシドDを含む組成物。
(項目130)
項目122、124、126、および/または128に提供される少なくとも2つのレバウジオシドを含む組成物。
(項目131)
項目123、125、127、および/または129に提供される少なくとも2つの組成物の混合物を含む組成物。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目1)
配列番号2に対して少なくとも60%、65%、70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれより高い配列同一性であるポリペプチド配列を含む操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目2)
配列番号4、8、32、232、348、548、562、696、758、696、770、792、954、696、1002、1054、2600、2718、2814、2884、3016、3082、3244、3502、3346、3502、3696、4256、4684、4838、4876、5066、5290、5372、5562、5708、5976、6138、6288、6468、684、7388、および/または8088に対して少なくとも60%、65%、70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれより高い配列同一性であるポリペプチドを含む、項目1に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目3)
ウラシル二リン酸以外の糖供与体を優先的に使用する、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目4)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、10、262、10/262、278/284/311/339/360、283、307、309、339/361、344/361、および361から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目5)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、112/172/283/318、112/261/318、112/282/283/431、137/283、137/283/431、163/318、261/283/306/337、261/283/337、261/337、269/318、282/283、282/283/431、283、283/306/308/360、283/306/337/426、283/318/337/360、283/360、318、360、および431から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号8を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目6)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、4、6、22、22/84/87/154/198/199/356、22/84/87/154/198/199/306/356、22/84/87/154/199/306/356、 22/84/87/154/356、22/84/87/154/198/199/306/356、22/84/87/154/199/306/356、22/84/87/198/199/306/356、22/84/87/198/199/356、22/84/87/198/199/306/356、 22/84/87/198/199/356、22/84/87/199/306/356、22/84/87/199/356、22/84/154/198/199/207/306、22/84/154/198/199/306、22/84/154/198/199/356、22/84/154/198/199/356、22/84/154/198/199/356、22/84/154/199/356、22/84/154/199/207、22/84/154/199/356、22/84/154/207/306/356、22/84/154/306/356、22/84/154/198/199/306/356、22/84/154/198/199、22/84/154/198/199/306/356、22/84/154/199/306/356、22/84/154/199/356、22/84/154/199/356、22/84/198/199/306/356、22/84/199/356、22/84/207/356、22/84/356、22/84/154/198/199/306/356、22/87/154/198/199/356、22/87/154/199/306/356、22/87/154/322/356、22/87/154/198/199/356、22/87/154/199/356、22/87/154/198/199/207/306/356、22/87/154/199/207/356、22/87/154/199/356、22/87/154/199/306/356、22/87/198/199/306/356、22/87/198/199/306/356、22/87/198/199/207/356、22/87/198/199/356、22/87/199/356、22/87/199/356、22/154/198/199/207/306/356、22/154/198/199/356、22/154/199/356、22/154/198/199/306/356、22/154/199/356、22/154/199/207/306/356、22/198/199/356、22/198/199/207/329/356、22/199/356、22/207/356、22/356、64、74、84、84/154/198/199、87、97、106、 110、112、137、139、154、159、 169、179、191、195、198、199、 207、233、259、261、 262、306、347、356、396、417、 421、427および435から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号32を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目7)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、64/106/109/112/131/159/233/421/427/431、64/106/109/112/417/421/427/431、64/106/109/139/179/417/421/427/431、64/106/109/233/347/427/431、64/106/112/347/417/421、64/106/139/179/233/417/427/431、64/106/417/421、64/106/431、64/106/109/112/131/179/417/427/431、64/106/109/417/421/427/431/439、64/106/112/139/159/179/204/396/417、64/106/112/159/179/417/421、64/106/204/417/421/427、64/109/112/139/159/179/417/431、64/109/112/139/417、 64/109/139/233/417/421、64/109/159/179/204/233/417/421、64/109/417/421、64/109/417/421、64/139/233/417/427/431/439、64/139/347/417/421/427/431、64/417/421/431、106/109/112/131/159/179/417/421、106/109/112/131/159/204/347/417/421/427、106/109/112/204/347/421/439、106/109/112/261/417/431、106/109/112/347/427、106/109/139/427/431、106/109/417/421/427、106/112/159/204/233/417/421/427/431、106/112/233/417、106/112/396/417/421、106/139/159/233/347/417/421/427/431、106/233/421/427、106/417、106/109/139/347/417/421/427、106/109、106/109/139/233/417/421、106/109/139/417、106/109/233/427/431、106/112/159/179/204/417/421、106/112/159/179/233/417/421/427/439、106/131/179/233/421/427/431、106/139/421、106/347/417/427/431、109/112/131/159/179/439、109/112/131/159/417/421、109/112/139/179/417/427、109/112/159/179/417/421、109/112/159/417/427、109/112/179/204/233/417/421/427、109/112/179/347/417、109/112/204/233/417、109/112/204/427、109/112/233/417/431、109/112/417/421/427、109/112/417/427/431、 109/131/139/179/261/396/421、109/131/204、109/139/179/417/421/427、109/139/179/417/427、 109/179/233/421、109/204/417/431、109/417/421、109/417/427/431、112/131/179/204/417/421/427、112/131/179/347/417/421、112/139/179/204/233/347/427、112/159/417/421、112/417/421、131/179/233/417/427、139/233/417、159/347/417/421/431、179/417/421、233/417/421/427/431および347/417から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号232を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目8)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、14/100、28/44/365/407、38/118/290/351/375/401/422、38/178/401、38/290/351/401/422、54/413、74/102/137/161/259/289、92/118、98/233、102/161/250/435、106/112/204/347/396/417、106/112/204/347/396/417/427、106/112/204/347/396/417/427/431、110/222/250/259/435、112/204/347/396/417/427、112/204/347/396/417/427/431、118/156/178/290/375/401/422、137/161/435、137/169、159/169/173/300/424/438、185/290/401/422、204/347/396/417/431、290/351/401および435/438から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号348を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目9)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、14/28/38/74/100/102/118/161/169/178/233/250/407/422/438、14/28/38/74/102/156/159/233/250/289/413/422/424/435/438、 14/28/38/100/102/110/159/161/233/259/290/300/351/435、14/28/38/110/137/161/222/289/401、14/28/44/74/98/102/137/159/161/185/222/250、14/28/44/92、14/28/44/161/169、14/28/44/375、14/28/54/161/185/413、14/28/54/365、14/28/74/98/100/102/161/173/178/233/250/259/290/407、14/28/92/100/102/159/161/169/233、14/28/92/100/102/159/161/233/351/422、14/28/92/100/102/422/424/435、14/28/92/100/161/222/233/289/300、14/28/100/137/156/161/222/259/289/365/401/435/438、14/28/100/156/161/250、14/28/102/118/137/161/185/222/250/259/401、14/28/159/289/290/300、14/28/159/365/435、14/28/35、14/38/74/110/156/161/173/178/222/300、14/38/100/102/161/173/178/222/250/375/401/413、44/74/100/102/161/233/365/435/438、14/74/110/159/161/169/173/250/259/290/375/407/422、14/74/161/375/401、14/92/98/100/159/161/259/365/422/424/435、14/110/156/161/375/401/435/438、14/159/161/365/435/438、14/161/222/250/259/289/375/401/413、14/161/222/250/435/438、14/161/300、28、28/38/92/98/100/102/156/161、28/44/74/401、28/44/92/161/222/300/413、28/44/98/100/102/118、28/44/118/156/161/222/289/435/M438、28/44/289/290/351/422、28/44/435/438、28/54/92/159/161/290、28/54/159/290/438、28/54/250/439、28/74/156/159/161/178/300/365/435/438、28/74/156/161/365/407、 28/74/161/290/365、28/92/100/102/110/161/185/250/300/375/435、28/92/98/100/110/156/161/401、28/92/118/159/222/250/259/300/407、28/156/161/185/435/438、28/156/161/233/259/300/435、 28/98/100/102/161/185/351/401/435/438、38/161/300/438、74/98/100/102/110/118/161/178/250/289/290/300/435/438、74/98/100/102/118/156/159/161/435/438、74/156/161/173/178/424/435、74/375/435、98/100/118/159/161/300、98/100/156/159/161/178/259/289/290/351/422、102/137/159/161/422/424、118、137/159/161/185/300/351/365/435、156/159/161/169、159/161/222/290/375/407、159/161/401および 161/259/289/435/438から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号548を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目10)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、19/44/110/191/198/199/208/300/365、19/75/76/87/92/199/207/208、19/87/92/191/199/209/413/435、44/76/197/199/208/351、44/87/92/137/159/199/209、44/87/137/159/169/191/199/208、44/87/137/191/197/209/289/401、44/87/199/208、75/76/87/92、75/76/87/92/290/300、75/76/87/191、75/76/87/191/197/199/209/300、75/87/92/169/207/208/300/413/435、75/87/110/137/169/191/199/208/209/289/435、75/87/110/191/197/198/207/208/289/290/300/401/413、75/87/300、75/110/197/199/208/290/300/401/413、76/92/199/209、87/92/197/198/199/208/300、 87/137/435、87/169/191/199/207/209/401/413、87/191/198/199/222/244/289/300/435、87/92/110/169/199/207/209/290/300、87/92/159/169/191/198/290/413/435、87/92/159/191/199/208/209/289/290、87/92/208/401、87/435、92/137/191/199/209、92/197/199/207/208/401、137/198/199/207/208/426/435、137/199/208/209/290/435、137/365、159/197/199/207/209、169/191/197/199/207/208、169/197/199/207/209/222/300/413/435、191/207/208/289/290/413/435および197/198/199/208/209から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号562を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目11)
前記操作されたNDP−グリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、69/173/175/243/246/354/365/383/399、69/173/243/383/399、56/191/354/383/399、70/225/246/409/413、70/115/225/409、70/225/413、70/225/247、74/310/396/424、74/396および173/175/191/365/383/399から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号758を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたNDP−グリコシルトランスフェラーゼ。
(項目12)
前記操作されたNDP−グリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、24、24/28、24/28/262、24/28/262/264、24/28/262/264/423、24/264/294、28、28/262/264、28/423、32、56/69/70/175/191/246、56/69/70/175/191/246/354、56/69/70/175/354、56/69/70/191/246/354/365、56/69/70/246/354、56/69/175/191/246/354、56/69/175/246/354、56/69/175/246/354/365、56/69/246/354、56/69/246/365、56/70/175/191/246、56/70/175/191/246/354、56/70/175/191/354/365、56/70/175/246/354、56/70/175/246/365、56/70/191/246/354/365、56/70/191/354、56/175/246、56/175/354、56/175/354/365、56/191/246/354、56/191/354/383/399、56/246、56/246/354/365、56/354、69、69/70/175/191/246/354/365、69/70/191/246/354/365、69/70/246、69/70/354/365、69/173/175/243/246/354/365/383/399、69/173/243/383/399、69/175/191/246/354、69/175/354、69/246/354/365、69/354、70、70/115/225/409、70/175/191/246/354/365、70/175/191/354/365、70/191/246/354/365、70/191/246/365、70/225/246/409/413、70/225/247、70/225/413、74/310/396/424、74/396、126、126/220、126/403、173/175/191/365/383/399、175、175/191、175/191/246/354/365、175/191/354、175/191/354/365、175/246/354、175/246/354/365、175/354、191/246/354、246/354、262/264、264、264/29、269、325、341、351、354、354/365および366から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号770を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたNDP−グリコシルトランスフェラーゼ。
(項目13)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、24/32/264/269/330/402/403、24/32/264/269/382/403/406、24/32/264/330、24/32/269、24/32/269/382/385/389/402/406、24/32/269/403、24/32/330、24/264/269/389/402/406、70/126/175/191/246/325/354/366、70/126/175/325/330/351/354/366、70/126/191/246/325/351/354/366/423、70/126/191/246/325/351/354/423、 70/126/191/246/325/351/366/423、70/126/191/246/354/366、70/126/246/330/366、 70/126/246/354/366、126/211/220/253/316/342、126/211/220/275/279/323、126/211/260/423、126/220/260、126/220/316、56/220/260/423、220/260および220/260/423から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号792を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目14)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、24/32/97/162/202、24/32/126/198/201/367、24/32/126/198/202/220/226/260/269S、24/32/146/226、24/32/198/201/220/226、24/32/198/201/226、24/97/260/367、32/97/198/202/226/260、32/202/367、32/226/367、56/175/197/211/330/382/385、56/175/197/253/385/389、56/175/264/382/385/389/402/406、56/197/264/279/330/382/389/402/403/406、56/211/253/316/323、56/211/264/316/389、56/211/279/323/330/402、56/264/385/389、97/202/367、162/220/226/367、175/197/211/264/330、175/211/264/279/316/323、175/211/279/323/330/402/403/406、175/211/323/382/402/403/406、175/211/403/406、175/264/316/323/330/403/406、175/264/316/389/402、175/264/323/330、197/211/316/342/406、197/211/316/382/389/402/403、197/211/402、197/279/323、198/201/367、198/202/220/269/367、201/202/367、211/382/406、211/385/389、211/402/403および389から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号954を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目15)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、24/32/175/211/260/330/403/406、24/32/175/226/253/275/316、24/32/201/226/260/264/330/402/406、24/162/175/198/211/226/275/316/323/389、24/162/175/201/275/316、24/162/198/201/211/226/323/351、24/162/198/201/226/351、24/162/201/253/264/351/402/406、24/175/198/211/226/253/316、24/175/201/275/316/351、24/175/201/316、24/175/211/220/260/275/330/389、24/175/211/253/316、24/175/211/316/330、24/175/226/323/351、24/198/201、24/198/201/211、24/198/201/211/220/260、24/198/201/220/275/389/402/406、24/198/201/226/330/389、24/198/201/351、24/201/211/253/323/351/366/389/402/403、24/201/226/253/402/403/406、24/226/330/351/403、175/198/201/211/226/260/264/323/402/406および175/198/226/260/351/402/403/406から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1054を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目16)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、21/127/129/161、21/127/129/161/162、21/127/129/162/199/200、127/129/161/162/199、127/129/161/199/200、127/129/162、156、156/161、156/161/162、156/162/199、および156/199/200から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1002を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目17)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/7/12/15/175/260/318、7/12/400/435、7/318/451、12/15/57/71/175/260/400/402、12/15/57/220/254/260/318/402、12/15/57/318/402/435、12/15/318/400/402/406、12/57/175/451、12/175/260/264/318/400、12/175/400/402/406、12/318/402/404/406/451、12/318/402/404/451、15/175/318/400/402、32、57/175/220/260/264/402、57/175/404、57/220/260/400/402/406、57/260/400/402/404、57/400/402、57/402、135、148、152、152/192/195、160/186/195、186、195、260、237、239、240、323、325、326、327、330、331、356および400/402から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2600を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目18)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、11、14/23/274/326/329、14/31/184/274/322/326/329/330、14/56/184/185/194/238/239/274/329/399、14/56/184/194/234/315/326/329/399/401、14/56/194/238/315/325/326/329/330/399、14/56/252/274/315/326/329/330/401、14/184/185/194/234/325/326/329、14/184/185/194/388/399/401、14/184/194/355/399、14/185/194/238/399、14/185/236/238/239/274/322/326/329/355/399/401、14/194、14/322/326/330、14/326/330、14/355、14/355/399、23/31/147/184/185/238/252/325/329/330/388/401、31/56/315/329/330、45、55、56、58、65、65/114/132/238、65/238/240、104、113、114、132、135、138、147/236/238/243/315/329/330/399/401、165、185/194/236/239/325/326、223/412、238、256、273、286、309、391、422、430および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2718を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目19)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、23/31/185/324/401、23/31/185/355、31/134/185/252/274/324/388、31/134/238/252/322/324/388、31/134/252/324、31/184/185/238/239/322、31/236、31/322、31/388、122、134/184/185/234/236/239/274/324/388、164、176、177、184/185/322、234/236/238/322/324/355、236、238/324/329/355、316、322/324、324/329/355/401、325、400、425、426、427、440および446から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2814を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目20)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、11、11/45/58/132/138/286、11/58、11/58/65/104/107/138/286、11/58/65/107/135/223/286/391/430、11/58/65/135/138、11/58/104/107/114/138/223/391、11/58/114/286/309/391、11/58/132/165/286/391/422/430、11/58/138/309、11/65/104/107/138/165/286/391/430、11/65/107/135/165/391/430、11/65/132/135/138/223/391、11/65/132/135/252、11/65/132/391/430、11/65/135/138、11/104/132/138/309/391、11/104/132/138/391、11/107/114/223/309/430、11/107/138、11/114/135/138/223、11/114/223/252/286/391、11/132/135/138/223/286、11/132/138/223/286/391、11/138/165/223/309、58/65/138、58/65/138/165、58/65/165/309/430、58/104/114/165/391、107/114/132/138、107/430、135/138/165/309/430および223/309から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2884を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目21)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、8/448、9、58/107/122/176/236/324/325/400/426/427、58/107/122/236/324/400/425/446、58/107/122/322/400/425/427/440/446、58/107/164/400、58/107/236/400、58/107/400、58/122/164/236/446、58/122/176/236/400/446、58/122/176/322/324/426/427、58/122/176/400/425/426/427/446、58/122/322/325、58/122/325、58/122/440、58/164/176、58/164/324/425/427、58/176/236、58/236、65、106、107/122/236/425/426/446、107/164/236/400/446、107/176/322/325/440/446、107/176/400/425/427/440、107/236、107/440、115、116、122/164/176/324/400、122/164/400/440、122/164/400/440/446、122/176/236/400、122/176/324/400/440、122/400、122/425/426/446、122/440/446、139、139/252、164、164/271/425/426、164/322/324/325/400/425/440/446、164/400、172、176/400、178、189、200、210、213、240、242、245、255、324/400/425/426/440/446、324/423、385、408、409、411、412、415、416、423、447および448から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3016を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目22)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、3,8、8/107/139/164/415/416/440/448、8/107/139/255/322/325/415/416/440/448、8/107/164/255、8/107/164/423/440、8/139、8/139/164/200/236/240/322/440/448、8/139/164/236/416/423/440、8/139/189/240/325/416、8/139/200/236/240/255/423、8/139/255/415/416、8/164、8/164/189/200/322/324/325/416/448、8/164/240/423、8/164/252/255/448、8/164/448、8/236/240/252/448、8/240/423、8/252/255/322/325/448、12/164/440、20/126/128/155/161、20/126/128/160/161、20/126/128/160/161/198、20/126/128/161、20/126/128/161/198/199、20/126/155/160/198、20/126/155/161、20/126/160、20/126/160/161、20/126/161、20/128/155/160/161/198、20/128/155/161/199、20/128/155/199、20/128/160/161/198、20/155/160、20/155/160/161、20/155/161、20/155/161/199、20/160/161/198、34、72、73、75、107/139、107/139/200/240/322/324/325/448、107/236/240/325/440、107/240/252/423/448、107/423、113、114、121/126/128/161/369、126/128/155/160/161、126/128/155/160/161/199、126/128/155/161/199、126/128/160/161/369、126/128/160/198/369、126/128/160/199/369、126/128/160/369、126/128/161/199/369、126/128/161/369、126/128/369、126/160/161/199/369、126/160/198/369、126/196/198/369、126/198/369、126/199/369、126/369、128/155/160/161、128/155/160/161/199、128/155/160/198、128/155/199、128/160/161/369、128/161/199/369、128/198/199/369、128/199/369、128/369、139、139/164/236/240、139/255/325/415/440、155/161/198/199、155/199、160/161/369、161/198/369、161/369、164/189、164/189/236/240、164/189/240/252/415/423、164/200/236、164/200/236/240/324/416/440、164/200/236/255/322/324/423/440、164/236、164/236/240/440、164/236/423、164/322/325、164/322/325/416/423、164/416/448、186、189、199/369、200/236/322/325/416、200/322/325/415/448、221、235、236/415/416、237、239、240、240/252/255/322/415/416、240/252/255/415/448、255/423、256、286、299、305、309、312、313、323、325、355、389、406、415/416/448、422、438および446から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3082を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目23)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、14、35、42、46、49、105、106/164/172/200/409、106/164/172/210/240/415、106/164/172/242/409/416、106/164/200/210/242、106/164/200/210/415、106/164/200/240/408/409/416、106/164/210/240/408/409/416、106/164/210/408/409、106/164/240/415、106/164/409/415/423、106/172/200/210/240/242/408/415/416/423、106/172/200/210/242、106/172/240、106/172/240/242/409/415、106/172/242、106/172/242/416/423、106/172/408/409、106/172/409/423、106/200/210/409、106/210/240、106/210/240/408/415、106/240/242、106/240/242/409、106/242/408/409、134、143、164/172/200/210/242/409、164/172/240/242/415、164/172/242/408、164/200/408/415/416、164/240/242/408、164/240/242/415/423、164/423、172/200/210/240/408、172/200/240、172/200/408/416、172/210/415、172/240、172/240/242/415、172/240/409、179、181、200/210/240/242/409、200/240/242/407、200/242/415/416/423、200/408/409、210/240、232、240、240/242、240/242/408/416、240/242/415/423、240/408、240/415、278、290、336、373、381、401、409/415および441から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3244を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目24)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、21、91、125、127、130/187、143、143/150、145、152、156、186、187、195、197、200、201、202、264、268、364、365、および415から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3346を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目25)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/5/113/186/237/406、2/73/186/237、2/189/286、2/286/355/416/422、5/34/73/113/406、5/73/186/406、5/113/237/406、5/186/237/245/256/406、5/186/237/406、5/256/406、34/113/186/237/406、72/73/172/235/240/242/438、72/172/239/240/242/408、72/172/240/242、73/172、73/172/235/239/240、73/172/235/239/242、73/172/239/240、73/172/239/240/242、73/172/240/242/408、73/172/240/408、73/186/237/406、73/235/240/323、73/235/240/408、73/237、73/239/242、96、113/186/406、127、132、144、153、155、156、172、172/188/323、172/235、172/235/239/240/242、172/235/239/408、172/235/240、172/235/240/242/438、172/239/240/242/323/408、172/240、172/240/299/323、186、186/237、186/237/286、186/406、187、189/333/355/421,196、199、200、235/239/240、235/240/242、237、239/240、239/240/242/256/323、239/240/242/323/408、239/240/408、239/242/408、240/242/256/438および242/408から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3502を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目26)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/5/35/105/143/237/373/416/422、2/5/35/143/232/237/416/422/441、2/5/35/232/278/373/416、2/5/105/143/232/373/416/422、2/5/278、2/105/143/232/237/278/373/441、2/143/232/373/441、2/143/373/441、3、5/35/232/373/416/422、5/105/232/237/373/416/441、5/105/237/278/422/441、5/105/237/416/422/441、5/143/189/232/237/441、5/143/232/237/278、5/143/232/237/416/422、5/143/232/373/422/441、5/143/237/278/373/416/422、5/143/373、5/189/237/278/373/416/422/441、5/232/416/422、5/237/373/422、5/373/416、8、26/42、26/42/46/49、26/42/46/49/134、26/42/46/49/134/186、26/42/46/134、26/42/49/134、26/42/49/134/186/355、26/42/49/134/401、26/42/134/401、26/49/134、26/134、26/134/186/355/401、26/134/355、26/134/401、26/355/401、35、35/105/189/232/373/416、42/46/49/97/134/401、42/46/49/134、42/46/49/134/186、42/46/49/134/186/355、42/46/49/134/235/355/401、42/46/49/134/401、42/46/49/186、42/49/134/186/355、42/49/134/186/401、42/49/134/355/401、42/134/186、42/186/355、46/49/134、49/134/355、50、61、62、101、105/143/232/237/373/416/422/441、105/143/278/373、105/189/237、105/237/278/373/416/422、105/237/373/422/441、105/373、105/373/441、134/401、137、143、143/189、143/189/232/422/441、143/189/237/373/416/422、143/232、143/237、143/237/422/441、158、161、164、176、186/355、189/232/373/416/422/441、189/237/278/416/441、193、223、223/243、232/237、237/373、235、237、 237/373/441および239、240、243、244、248、249、301、323、330、352、364、426および427から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3696を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目27)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、5/73/113/186/187/373/423、5/73/143/144/179/186/187/422、5/73/144/179/186/373/423、5/73/144/187/373/422、5/143/144/179/181/186/187/373、5/144/179/181/373/422、5/144/373/422、11、12、41、44、44/187、45、49/96/127/132/156/196、49/96/127/153/278、49/96/132/153/155/156/237/278/406、49/96/132/153/199/200、49/96/132/155、49/96/132/155/237/278、49/96/155/199/200/406、49/153/155、55、56、57、65、66、70、72、73、73/113/143/179/181/422、73/113/179/181/186/187、73/143/144/179/186/187/373/423、73/179/181/186/187/373、73/179/181/186/373/422、73/181/186/187、74/238、82、83、85、 96/127/132/153/278、96/127/153/155、96/132/153/155、96/132/153/155/156、96/132/153/155/156/200、96/132/153/156、96/132/196/199、96/132/278、96/153/155/156、96/153/155/199/200/237、96/153/406、103、111、113、113/143/179/186/187、113/144/186/423、113/144/373、113/181/186/373/422、113/373/422、114、117、127/132、127/132/153/156、127/132/155/156/406、127/153/155/199/200/237、127/406、 132、132/153/155、132/153/237/406、132/155、132/237、135、138、140、143/144/179/181/186/187/422、143/179/181/186/187/422/423、144/179/181/186/187/373、144/179/186/187/373、153/155/156/237、153/155/196/199/237、153/199/406、153/237、155/199、159、160、162、167、179/181/186、179/181/186/187/423、179/186/187、179/187/373/422、181/186/187/422/423、182、214、220、222、223、226、236、238、256、286、299、309、373/423、387、388、389、391、393、406、408、412、418、422、429、430、449および450および373/423から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号3956を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目28)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、7、8/375、9、10、12、50/137/189/375、53、62/153/155/156/159、62/153/155/156/159/427、62/153/155/199/406、65、68、99、106、110、115、116、131、132、136、137/164/375、153、153/155/156、153/155/156/159/199/238/406、153/155/237/238/239/406、153/155/238/239、153/155/427、153/156/159、153/156/199/237/427、153/156/427、153/159/237/238/352、153/176/181/427、155/156、155/156/176/181/199、155/156/176/238/427、155/181/199/238/406、156/199、156/199/427、164/375/433、170、178、190、192、194、200、220、223/375、238、242、245、257、272、280、302、304、335、375、385、395、399、402、408、412、416、423、427、445、447および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4256を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目29)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、11/41/44/127/132/406、11/41/44/127/278/406、11/41/45/73/127/278/406/408、11/41/45/127/278/406、11/41/132/278、11/44/45/127、11/44/73/127/132/135、11/44/73/127/132/135/406/408、11/44/127、11/44/132/278/406、11/45/73/127/135、11/45/127/132/135/138/182、11/45/406、11/73/127/132/135/182/278、11/73/127/132/278/406/408、11/73/127/132/406/408、11/73/132、11/73/132/135/408、11/127/132/135、11/127/132/135/182、11/127/132/135/406、11/127/132/138/182、11/127/132/182、11/132/135/406、11/182/406、41/44/45/73/127/132/278、41/45/127/132/135/278/406、41/73/132/135/406、44/45/73/132/135/406、44/45/127/132/135/138/182/406/408、44/45/127/132/278、44/73/127/135、44/73/127/135/182/278/406/408、44/73/132/135/406/408、45/73/127/132/135/406/408、45/73/132、45/73/132/135/182、45/73/278/406/408、45/127/132、45/127/132/135/182、45/127/132/135/182/406/408、45/127/135、45/132/408、45/406、56/309/449、57、65/114/422/427、65/114/427、65/143、65/143/235/427、73/127、73/127/132、127、127/132/135/182、127/132/135/182/406、132/135、132/135/182、132/135/406、132/406、164、164/220/309/449、164/220/449、164/449、182、220/449、309、309/449、406、418/427、427、427/429および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4550を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目30)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、4、7/10/73/127/132/385/423、10、10/53/73/99、10/53/272/423/427、10/53/423、10/73、10/73/127、10/127/132/385、10/132/302/385、11/44、11/71、11/287、11/441、37、40、42、42/138、42/141、43、46、47、48/398、49、49/406/408、51、53/73/200/423、53/127/132/385、53/127/136/385、53/132/136/302/423/427、53/132/302/385/423/427、64、65/106/445/447/449、65/143/220、65/220/309/445/447、65/220/445/449、65/399/406/447/449、65/402/406/445/449、65/445/447/449、65/447/449、71、73、73/127/427、73/132/136/385/427、73/385、73/385/427、76、97、100、106/220/399/402/406、108、108/172、109、112、115/116/278、115/170/190/238/412、115/190/194、115/245/278、116/170/190、116/190/406/408、116/238、116/238/245、116/416、117/157/301、118、118/406/408、119、119/172、127、130、132、133、134、141、143/220/445/447、143/309/402、143/309/445/447/449、157、169、170、170/190/192/194、170/192、170/192/194/278、170/192/194/335、170/194、170/194/335/416、170/238、170/335、170/335/416、172/420、172/437、179、181、190、190/192/194、190/194、190/194/238/245、190/194/335/416、190/194/412、190/245/412、192/194、192/194/242/406/408、194、200、200/385、220/399、220/445、220/445/447、257/385、259、272/302、272/385、274、275、278、287、288、302/385、309/399/449、309/445/447/449、333/398、333/406/408、338、356、357、376、381、385、394/420、396、397/406/408、398、401、385、385/427、399/406、399/406/449、402/445/449、406/408、406/445/447/449、406/445/449、410、417、420、423/427、434、437、441、445/447/449、445/449、447および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号7324を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目31)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、10、10/144、10/199、11、11/64/109、11/445、13、14、15、15/394、16、22、36、42/43、42/44/71/73/116、43/73/141、46/47/51、46/51、47/49、47/51、64、64/65/109、64/65/112、64/112、64/134、64/445、65/112、65/112/445、71、71/73、71/73/141、71/141、71/302、73、73/116/141、73/141、73/302、89、93、96、109、109/112、109/115/118、109/134、109/406、112、112/445、116、116/123、116/287、116/143、116/350、123、125、127、127/169/172、127/169/287、127/169/376/398/399、127/169/398/399、127/287、127/376、141、141/302、143、144、149、156、169/172/287、169/172/288、169/172/288/398/399/420/423/427、169/172/398/399、169/287、169/398、169/398/399、186、187、197、198、199、201、202、203、268、287、287/288、287/376、287/398、287/399、287/420/423/427、288、288/376/398、288/398、288/399、302、324、331、350、376、376/398、376/399、398、398/399、398/399/420、398/427、399および420から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号7784を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目32)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、22、25、51、56、71、78、80、81、88、157、185/208/230/252/255/290/365、189/206/208/365、200、208/365/435、243、245、249、259、262/401、279、282、284、304/322/365/401、308、338、339、352、362、364、365/401/413/435、366および374から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号696を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目33)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、51/56、51/56/243/249/282/353/362/366、51/56/243/249/308/362/364、51/56/249/353、51/56/249/362/364、51/56/249/362/366、51/243/249/308/353、51/243/249/348/362/366、51/249、51/249/282/284/364、51/249/282/353/366、51/249/284/308/362/366、51/249/353/362/364、51/353/362、56、56/243/249/282/364/366、56/243/364/366、56/249、56/249/284/353、56/249/353、56/284/366、243/249/282/284/362/364/366、243/249/308/353/366、243/249/353/362/366、243/282/353/362/364、243/282/362/364/366、243/308/353、249/353/362/366、282、308/366および362/366から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4684を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目34)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、25、25/56/353、25/243/249/259/366、25/243/249/362、25/362/366、51、51/56/200/243/249/259/338、51/56/362、51/71/249/279/284/362/366、56/243/249、56/362/366、70/198/259/313、85、88、88/173、110、159、163、171、174、175、177、198、198/313、198/313/428、200/243/249/259、208、208/320、209、209/234、222、226、234、234/408、243/338/362/366、253、256、259、265、272、289、322、336、353/362、405、411、428および439から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4838を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目35)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、8、9、25、25/198/209、25/200/209/338、25/200/243/249、25/209/243、25/209/243/249、25/209/243/259、25/209/249/259/366、25/209/259、25/209/279/366、25/209/289/366、25/249、25/259/279、25/259/279/289、25/279/284、25/279/284/289、25/289、34、53、54、55、61、69、70、73、79、87、91、107、108、111、141、153、158、174、190、194、198、198/200/209/243/249/289、198/249/338、200/209/366、201、205、209、209/249/259/279/338/366、209/249/259/289、209/249/279/284/289、209/249/338、209/279/289、209/366、234/297、238、247、249/259、252、253、254、256、259/366、279、279/338、289、297、308、321、322、327、336、338、341、342、364、366、388、392、411、412、414、426、430、432、446および449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号4876を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目36)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、88、88/110、88/110/159/198/200、88/110/159/198/234/259/265、88/110/159/198/259、88/110/198、88/110/234、88/159/198、88/198、88/198/200/259、88/198/259、88/259、88/259/265、110/259/265/411、159/198/411、159/259/411、171/174/175/177/208/320/428/439、171/175/177/208/320/428、171/177、171/177/226/428/439、171/208/320、171/208/320/428、171/208/428、174/175/177/208/320/428、174/175/428、174/320、198、198/200、198/200/234、198/234、198/259、208、208/320/331/428、208/320/428、208/428、234、259、320/428および428から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5066を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目37)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、7、25/61/208/252/253、25/61/428、25/107/208/320/428、25/208/247/252/253/364/428、25/247/249/252/364/428、38、53/54/55/153/201、53/54/308/392、53/171/308/392、54、61/107/208/252/253/254/364/428、61/208/252/254/428、64、68、73/87/201、91/201/439/444、99、106、107、107/208/320/364/428、107/247/249/252/254/364、107/247/252、107/247/428、109、159、169、171、172、177、179、190、190/208/247/252/428、222、233、233/269、247/249/252/254/320/428、249/252/253/254、249/252/254/428、251、252/253/254、253/320、259、264、289、296、300、308、308/327/439、317、318、320、320/364/428、320/428、347、404、408、417、424、427、428、428/434、431、435および438から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5290を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目38)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、49、73、87、87/88、87/88/94/159/177/208、87/88/159/198、87/88/177/198/249、87/88/208、87/159/177、87/159/320、87/177/249、87/198、87/198/199、87/198/208/320、87/208、87/208/320、87/320、88、88/177、88/177/208、88/177/320、88/198、88/199、88/199/208、88/208、88/208/249/320、88/320、113、134、135、158、159/177/198、159/177/208、159/198/208/320、171、173、177/198、177/208、195、214、222、253、256、257、268、272、289、300、302、330、348、374、392、399、408、411、412、437、439、445および453から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5372を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目39)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/7/107/233/252/253/320、2/7/107/233/252/253/320/408/428、2/7/233/252/253/320/427/428、2/233/252/317/320、7/107/190/233/252/253/317/408/427、7/107/233/252/253、7/107/233/252/317/320、7/107/233/252/317/408、7/190/233/252/253/320/427、7/190/233/252/317/320/427/428、7/190/233/252/408/427、7/233/252/253/317/408/427、7/233/252/253/408、7/233/252/317/320/427、7/233/252/317/428、14、55、56、64/169/201/347/392、64/172/264/268/347/392/417、91/94/171/172/201/264/347、91/201/264/347/392、94/201/264/347/435、107/190/233/252、107/190/233/252/317/320、107/233/252/253、107/252/317、169/171/172/264/392/435、169/171/201/264/392/435、169/172/201/264/347、169/172/201/264/347/392/435、169/172/201/347/392、169/172/201/417/435、171/172/201/264/392/417/435、171/201/392/417、190/233/252、190/233/252/253/317/320/408/428、190/233/252/317/408、190/233/252/320/408、201/264/347/392/417/435、201/264/347/392/435、201/264/347/417/435、233/252/253/317/320/427/428、233/252/253/408/427、233/252/317/408、233/252/317/427、233/252/320、233/252/320/408/428、255、282、308、336、342、348/374/435、364、374、391、407および422から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5562を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目40)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/4/113/158/163/302/364/399/449、2/4/113/158/163/330/449、2/4/113/163/449、2/4/158/163/364/449、2/4/158/222/257/302/330、2/4/158/330、2/4/163/222/302/330/364/449、2/4/163/257、2/4/163/257/330/399/449、2/4/163/330/449、2/4/163/364、2/4/163/364/453、2/4/302、2/113、2/113/163、2/113/163/449、2/113/330/399、2/113/449、2/158/163、2/158/163/364/399、2/163/364/453、2/364/449、4/113/158/163/330/364/399、4/113/158/302/330/364、4/113/163/364/399、4/158/163/364/399、4/364/449、87、87/95/198、87/198、87/266、87/322、107/134/135/195/412/417、107/195/268/322/439、107/195/272、107/195/417/439、107/374/417/439、113/158/163/364/399、134、134/135/195/268/317、158/163/257/330/364/449、158/163/302/330/364/399、158/163/364、163/257/302/364、163/302/330/364/449、163/364、173、173/190/233/252/427/437、173/190/252/257/347/427/437、173/190/257/374/437、173/190/257/427/437、173/233/252/257/427、173/233/437、173/252、173/252/268/437、173/252/347/411、173/257/374/437、173/374/437、173/427/437、190/233/252/257/347/411/437、190/252、190/252/257/285/427、190/252/257/411/437、190/252/257/427、190/374/427/437、195/272/320/439、195/317/320、198、198/244、198/292、233/252、233/252/257、233/252/257/347、233/252/257/347/411/437、233/252/257/427/437、233/252/285、233/252/285/437、233/252/411/437、233/252/437、233/374、233/374/437、252/257、252/257/347/437、257/347/411/437、268/417、285/347/437、302/364、330/364、347/411/437、347/427/437、364/399、374、374/411/437、408/417、411/437および437から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5708を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目41)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/4/14/158/282/364/449、2/4/14/158/282/407、2/4/14/163/198、2/4/14/163/282/399、2/4/14/198/308/407、2/4/14/282/308/364、2/4/14/282/308/407、2/4/14/282/364、2/4/158/163/364/399/407、2/4/158/198/282/364/407、2/4/163/198/282/308/342、2/4/163/282/342/364、2/4/163/364/399/449、2/4/198/282/449、2/4/198/364/391/449、2/4/282/342/364/407、2/14/158/198/407/449、2/14/163/308/364、2/14/163/364/407、2/14/282、2/14/282/308、2/14/282/308/364、2/14/282/399、2/14/308、2/14/308/364、2/158/163/407/449、2/163/282、2/163/282/308/364、2/198/282/308/342、2/198/282/399、2/282、2/282/308/342/407、2/282/308/391/407、2/282/399、2/282/399/407、2/308、2/308/364/399、4/14/158/163/198/282/407、4/14/158/282/364/391/407、4/14/163/282、4/14/163/282/308/342/407/449、4/14/198/308/364、4/14/282、4/14/282/308/364/407/449、4/14/282/342/399/407、4/14/364/391、4/158/282/364/399、4/163/282/308/407、4/198/399/407、4/282/342/364/407、4/282/364/407、4/364、12、14/158/163/198/364、14/158/163/282/364、14/158/198/282/342/364/449、14/158/364、14/163/198/282/342/364/449、14/163/282/308、14/282、14/282/308、14/282/342/364/391、14/282/364、14/282/364/391/407/449、14/282/399/407/449、14/407、37、44、70、71/331、74、75、90、106、108、112、114、115、131、138、139、156、158/282/407、158/282/407/449、158/364/399/407/449、158/364/449、162、163/198/282/342、163/282/308/364/399、163/282/399/407、163/282/407/449、174、198/282/308/342、198/282/407、198/308、247、248、254、258、282/308/342/364/449、282/308/449、365、389、401/402、416、427、429、432、433および456から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号5976を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目42)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、14/113/158、14/113/158/163、14/113/158/163/190/257/308/342、14/113/158/163/437、14/113/158/308/317/330/449、14/113/163/190/308/317、14/113/163/257/308/342/437/449、14/113/163/257/437、14/113/163/308/317/320/322/330/449、14/113/320/437/449、14/158、14/158/163/190/257/308/317/330/437、14/158/163/190/342/437、14/158/163/257、14/158/163/257/308/449、14/158/257/308/437/449、14/158/317/320/330/437、14/163/317/320、14/190、14/190/257/317/320/322、14/257/308/320/322/330、14/257/308/322/330/437、14/317、14/330、14/449、19、29/375、41、45、46、71、72、80、81、83、84、85、88、95、105、113/158/163/190/257/437、113/158/163/190/308/317/322、113/158/163/190/308/320、113/158/163/257/308/317/322/437/449、113/158/190/257/320、113/158/190/320/322/449、113/158/320/322/437、113/257/308、113/257/317/322/437、155、158/163、158/163/190/257/308/342/449、158/163/308、158/163/322/437、158/308/320/437、158/320/437/449、163/308/330/437/449、168、190/449、197、199、202、209、243、249、263、273、317/320/322/330、322/330、366、375および383から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号6138を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目43)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、5/449、6、10、25、25/449、37/71/125/174/247/248/427、37/71/247/331/365/389/401/429、37/139/329/365/427/433/449、37/139/427/432/433/449、37/139/429/432/433、37/174/401/402/433/449、37/248/331/389/427/433、37/248/389/401/429、37/331/432/433、69、69/449、71/139/389/427/429/432/433/449、71/174/329/427/429/432/433、71/174/365/427/432、71/248/365/389/401、71/248/449、71/254/433/449、71/427/432/433/449、71/432/433、87、87/449、91、91/449、139/156/174/389/401/427/433/449、139/156/247/365/401/433/449、139/156/247/389/401/427/433/449、139/156/248/389、139/156/248/389/401/416/427/429/433、139/156/365、139/174/248/331/389/401/449、139/174/254、139/174/365/401/402/427/433/449、139/247/248/331/401/417/432/449、139/248/254/449、139/248/402/416/427/433/449、139/248/432/433、139/254/401/416/427/433/449、139/401/449、144/449、153、153/449、156/248/256、156/254/331/365/427/432/449、156/389/401/402/416/432/433、159、159/449、172、172/449、174/247/248/389/401/432/433、174/329/432/449、174/365、174/389/429/432/433/449、212/449、233、233/449、247/248/401、247/248/449、247/331/401/427/432/449、247/401、247/427/432、248/331/427/429/433、248/365/389/427/429/432/449、248/401/429/432/433、248/416、248/416/449、248/449、254/365、254/427/433、288/449、303、317、331/365/429/432/433/449、347/449、361、365/401/402/429/432/433、369、389/401/416/432/449、389/401/427/432、401/427、416/427/433/449、416/432/433、416/432/433/449、421、427/432、427/432/449、432および433/449から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号6288を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目44)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2、3、4、9、37/41/45/72/81/83/84/88/155/163/168/190/331/375、37/41/45/72/81/83/84/88/155/263/273/331/375/432、37/41/45/72/81/83/84/88/155/331/366/375、37/41/45/72/81/83/84/88/155/331/375、37/41/45/72/81/83/84/88/248/375、37/41/45/72/81/83/84/88/331/366/432/433、37/41/45/72/88/155/168/190/331/366/375/432、37/41/45/72/88/155/168/190/331/375、37/41/45/72/88/190/263/273/331/366、37/41/45/72/155/163/168/190/243/263/273/331/366/432、37/41/45/72/155/163/168/243/248/273/331/366/432/433、37/41/45/72/155/163/168/263/366/432/433、37/41/45/72/155/163/331/366/375、37/41/45/72/155/190/243/248/273/331/432/433、37/41/45/72/155/190/248/263/331、37/41/45/72/155/190/263/331/366、37/41/45/72/155/190/273/331/366/375、37/41/45/72/155/190/273/366、37/41/45/72/155/190/273/366/375/432、37/41/45/72/155/248/263/273/366、37/41/45/72/155/263/331/375、37/41/45/72/155/263/375、37/41/45/72/155/273/366、37/41/45/72/155/331/366/375/432/433、37/41/45/72/190/263/273/331、37/41/45/72/190/331/366、37/41/45/72/190/366、37/41/45/72/263/331/366、37/41/45/72/263/366/432/433、37/41/45/72/331/366、37/41/45/81/83/84/88/155/168/190/243/331/366、37/41/45/81/83/84/88/155/168/331/375、37/41/45/81/83/84/88/155/263/273/331/366、37/41/45/81/83/84/88/163/168/263/273/331/366/375、37/41/45/155/163/168/263/331/375、37/41/45/155/168/248/273/331/375、37/41/45/155/190/331/366/375、37/41/45/155/366、37/41/45/155/366/432/433、37/41/45/155/375、37/41/45/243/248/273/331、37/41/45/263/331/375/432、37/41/45/331/366/432/433、37/72/81/83/88/155/190、37/72/197/273/331/375/432、37/83/263/365/366/375、37/190/202、41/45/72/155/263/331/366/375/432/433、41/45/163/168/243/248/273/366/432、45/72/84/88/197/375、45/72/88/366、45/72/163/202/365/366/375、45/72/168/243/331/365/366/429/432、45/84/168/190/199/254/273/365/366、45/163/168/190/199/366/429/432、45/163/168/197/263/331/365/366、53/437、61、64、72/81/83/84/88/155/163/168/190/366、72/81/83/84/88/155/190、72/81/83/84/88/155/190/273/331/366/432、72/81/83/84/88/155/273/331/375、72/81/83/84/88/155/366、72/81/83/84/88/163/168/190/243/263/331/366、72/81/83/84/88/163/168/263/331/375、72/81/84/190/248、72/83/84/88/202/254/273/366/375、72/83/84/197/202/243/263/365/366、72/83/88/243/263/331/365/366、72/155/163/168/190/366/432/433、72/155/190、72/155/190/263/331/366、72/155/190/366、72/155/273/331/375/432、72/243/248/263/366/432/433、72/243/248/273/366/432/433、72/243/248/366/432/433、72/248、72/170、72/405、81/83/84/88/155/163/168/273/331/375、81/83/84/88/155/190/263/331/366、81/83/84/88/155/263/366/375、81/83/84/88/155/366、81/83/84/88/190/263/375、81/83/84/88/263/273/331/366/432、81/83/169/190/263、81/83/190/263/365/366、81/83/202/365/366/402、81/88/375/402、83/88/155/273/366/375、84/155/168/197/199/331/366/375/383/402、84/168/197/202/263/366、84/197/366/402、94、96、98、113、118、118/120、120、129、134/158、155/168/190/197/199/366、155/168/375、155/263/366/432/433、158、165、170、171、173、183、190/199/202/331/366、193、197/199/202、197/202/248、197/248、199/263/331/365/366、214、214/222、222、226、229、234、248/375、253、265、269、272、289、296、300、302、304、322、322/407、330、365/366、365/375/402、390、395/439、396、398、399、403、405、408、411、412、423、428、434、435、438、439、442、444、448、449、452および454から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号6468を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目45)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、5/6/25/317、5/6/69/288/303、5/6/91/288/317、5/25/91/212/303/317、5/25/91/263、5/25/288、5/69/91/212/288、5/69/91/212/303、5/91/288/303、5/91/303、5/91/317/421、5/288、6/91/212/288/303/369/421、6/212/288/303、6/288、25/91/212/288、25/91/263/288/303、25/91/303/317/369、25/91/317/369、25/263/317、87/144、87/144/159/361、87/144/159/361/433、87/433、88/144、88/144/159、91/263/317/369、91/288/303/317/369、91/288/317/369/421、91/303、91/317、91/317/369、109/144/153/155/159/433、144、212/288、263/288/303/317および288から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号6864を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目46)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、2/3/433/435/442、2/81、9/37/113/396、9/87、9/144/331、37/113/144/396、37/233、41、53/144/233/269/331/428、53/233/269/390/395/396、53/234、61、56、61/120/156/163/165/197/303/308、61/120/159/300/308/407、61/120/300/303/407、61/156/159/163/165/243/248/253/300/303/308、61/156/163/243/248/300/303/308/407、61/156/163/300/365/411、61/156/197/253、61/163/300/303/308/405/407/411、61/165/248/253/407/411、61/214、61/214/300/308、61/243/300/308/407/411、61/300/303/308、61/300/303/405、61/365/405、69、69/81、69/134、69/263、69/263/434/438/439、69/439、72、76、 81、81/134、81/222、81/222/263/322/435/442、81/433/435/438/442、85/156/159/243/248/253/308/405/407/411、87、87/144、87/144/396、88、107、113/233/234、120/156/159/169/197/214/303/308/365/405/407、120/156/159/248/300/308、120/156/248/303/308/411、120/159、120/159/165/197、120/159/197/308/407/411、120/159/197/365/411、120/197/253/300/308、120/253/300/303/308/407、120/308/407/411、134/222/263、139、144/234/269、156、156/165/248/300/303/308、156/197/248/300/411、156/214/308/411、156/248/253/308、159/163/165/197/214/243/300/303/308/407、163/197/253/300/303/308/365、171/263、183/233/234/331/428、197/253/308/407、197/300/303/308/365、197/300/308/411、222、222/263/435/442、233/396/399、263、269、269/428/437、300/303/308、300/308/405/411、308、322、338および407から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号7388を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目47)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、37/72/76/81、37/72/76/107/156/331、37/72/195/331、53/81/195/197、55、69/72/76/107、72/76/107/156、72/76/107/195/197、72/269、81/107/195、87、87/91、87/91/94、87/91/94/120、87/91/94/233、87/91/94/233/259、87/91/94/263/389、87/91/120/233、87/91/120/233/411/431/435/437、87/91/144/259、87/91/163、87/91/163/233、87/91/163/233/263、87/91/163/389、87/91/233、87/91/233/389、87/91/259/263/389/428/431/435/437、87/91/263/389、87/91/322、87/91/389、87/94、87/94/144/263/428/435、87/94/263、87/163/233、87/233、87/233/259、87/233/322/389/411、87/233/389、87/259、87/263、87/428/431/435、87/435、91、91/94、91/94/120/233、91/94/120/233/389/431/438、91/94/233/259、91/120、91/120/233、91/233、91/233/259/389、91/233/389、94/233/411、111、144/389、163/233、195/197、197、233、233/259/263、233/259/389、233/438、252、255、259、263、263/389、322、324、328、389、413、428/431/435および451から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号8088を参照して番号付けられている、項目2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目48)
ベータ−1,2−グリコシルトランスフェラーゼおよびベータ−1,3−グリコシルトランスフェラーゼから選択される、項目2〜47のいずれかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目49)
ADP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(AGT)、CDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(CGT)、GDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(GGT)、TDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(TGT)、およびIDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(IGT)から選択されるNDP−グリコシルトランスフェラーゼである、項目1〜48のいずれかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目50)
ADP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼである、項目48に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目51)
項目1〜50のいずれかに提供される少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼポリペプチドをコードする、操作されたポリヌクレオチド。
(項目52)
項目51に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチドを含むベクター。
(項目53)
少なくとも1つの制御配列をさらに含む、項目52に記載のベクター。
(項目54)
項目51に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
(項目55)
項目52および/または53に記載の少なくとも1つのベクターを含む宿主細胞。
(項目56)
真核生物および原核生物から選択される、項目54または55に記載の宿主細胞。
(項目57)
項目1〜50のいずれかに提供される少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを産生するための方法であって、項目54〜56のいずれかに記載の宿主細胞を、前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが前記宿主細胞において産生される条件下で培養するステップを含む、方法。
(項目58)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼを回収するステップをさらに含む、項目57に記載の方法。
(項目59)
項目1〜50のいずれかに記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを含む組成物。
(項目60)
配列番号72に対して少なくとも60%、65%、70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれより高い配列同一性であるポリペプチド配列を含む、操作されたスクロースシンターゼ。
(項目61)
配列番号74、1080、1158、1222、1392、1456、1582、1764、1804、1840、2064、2432、2510、7506、および/または8420に対して少なくとも60%、65%、70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれより高い配列同一性であるポリペプチド配列を含む、操作されたスクロースシンターゼ。
(項目62)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、4/9/349/532、4/13/113/343/532、4/13/113/532、4/33/47/52/343/532、4/47/52/532、4/113/532、4/13/113、4/13/532、4/33/113、4/343、7、8、44、95、117/440、136、221、343/532、440、444、478、532、583、611、615、615/789、695、722および788から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号74を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目63)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、8/221、47/221、68/129/248、68/129/248/595/600/756、68/146/248/387/506/550、68/189/272/316/477/719/756、75/105/154/215/264/345、75/105/345/410/769、75/105/530、75/345/530、85/170/225/266/534、87/125/230/267/375/464/708、93/129/506/550/595/719/756、93/477/635、95/136/788、95/201/478/583/724/788、95/385/478/583/788、95/440/478/724/788/792、95/444/478/603/792、95/444/478/724/788、95/478/724、98/250、113/225/266/415、126/314/499/549/589/755、136/440/444/478/603、136/440/444/478/583/788、136/444/478/583/788/792、225/372/534、266、306/358/703/776、358/636/737、440/444/583/724/788、440/478および466から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1080を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目64)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、8/68/95/98/358/478/595/724/792、8/68/98/221/248/250/440/477/534/595/724、8/68/788、8/93/95/98/136/221/595/600/788、8/93/95/113/250/440/595/600/724/788、8/95/98/440/478/534/600/788、8/136/248/478/788、47/75/85/105/125/129/170/635、47/75/85/105/375/756/776、47/75/85/264/267/372/415/635、47/75/85/87/129/375/776、47/75/85/87/170/372/756、47/85/105/129/201/230/267/583、47/85/125/372/583/635/756、47/85/170/756、47/85/87/105/125/635、47/85/87/154/756、47/125/129/375/756/776、47/129/170/635、47/154/372/375/583/635/708/756、68/93/95/358/440/444/478/534/595/603、68/93/95/444/788、68/93/98/136/248/250/358/440/534/724、75/85/87/105/264/267/583/708、75/85/129/154/264/375、85/125/215/375/415/635/776、85/87/105/215/267/756、85/87/129/375/756/776、87/125/129/170/230/756、87/154/306/375/756、93/95/98/534/792、95/440/444/724/788、129/215/372/756および170/264/267から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1158を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目65)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、47/68/93/98/358/440、47/68/154/372/375、47/93/98/136/154/772/776、47/93/98/154/372/375/776、47/93/98/358/583/635、47/93/129/136/154/250/372/534/635/724、47/93/129/136/375/534/583、47/93/358/372/375/440/724、47/93/358/372/375/776、47/98/129/358/372/375/438/534、47/98/129/375/534/635/724/776、47/98/372/375、47/125/154、47/129/136/372/375/534、47/129/248/250/372/375/534/724、47/136/583/776、47/358/440/724、47/358/635/776、47/372/635/776、68/93/98/129/358/375/724、68/93/154/358/372/440/776、68/129/440、68/129/583/724、68/136/724、68/154/358/375、68/154/534/635、68/375/440/534/724/776、93/98/125/154/248、93/98/125/154/250/440、93/98/129/154/248、93/98/154/250/358/375/534、93/98/154/635/776、93/98/534、93/125/154/440/534、93/129/250/358/372/375/583、93/154/248/724、93/358/534/635、98/129/375/583、98/534/583/635、129/136/154/248/250/372/375/534、129/136/375、129/154/248/250/358/375/534/635、129/358/372/635、154/250/358/375/583、154/358/375/534/776、154/534/635/724、372/375/776、375/635および534/583から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1222を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目66)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、17/357/364/434/519/684、17/357/434/519/684、17/434/684、17/684、54/97/118/307/694/727/738、68/98/129/136、68/98/129/136/154、68/98/129/136/154/534、68/98/129/154/534、68/98/129/154/635、68/98/136/154/534/635、68/98/136/154/635、68/98/154、68/98/154/534、68/98/154/534/635、68/129/136、68/129/136/154、68/129/136/154/464/635、68/129/136/534/635、68/129/154、68/129/154/765、68/136/154/534/635、68/136/534/635、68/136/635、68/154、68/154/534/635、68/154/635、97/118/442/694/727/738、98/129/136/154、98/129/136/154/635、98/129/136/534、98/129/136/635、98/129/154、98/129/154/534/635、98/129/534/635、98/136/154/635、98/136/534/635、98/136/635、98/154、98/154/534、122、129/136、129/136/154/635、129/136/534、129/136/635、129/154/534、129/154/635、129/635、132/136/154/534/635、136/154/635、136/534/635、136/603、136/635、154、154/635、157、160、161、167、253、285、381、519、550、563、564、635および785から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1392を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目67)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、17/54/97/136/329/550/684/738、17/54/97/329/524/684、17/54/161/519/727/738、17/54/524/550/727、17/161/434/524/766、17/434/524/684、17/434/738、17/442/524/550/684/721、17/727、17/738、54/97/161/434/442、54/97/434/524/550/684/727、54/136/442/550、54/434/524/738、97/136/519/550/727/738および329/550/684/727/738から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1456を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目68)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、14/137/356/745、14/570、14/570/745、26/117/365、26/164/165/213/586、71/158/222/356、71/222/236、71/319/356/606、117/158/213/332/608、117/164/707、117/213/365/517、117/311/332、117/608、122、122/160/161/167/550、122/160/161/282/381/550、122/160/161/282/381/550/636、122/160/161/282/550、122/160/161/550/636、122/160/167/282/381/550/636、122/160/282/381、122/160/282/381/550、122/160/282/550、122/160/381/550、122/160/381/550/636、122/160/550、122/160/550/636、122/161/550、122/167、122/167/550、122/282/381/550、122/282/550、122/282/550/636、122/381/706、122/550、137/319/570、157/253/519、160/161、160/161/282/381/550、160/161/282/550、160/161/550/636/735、160/167/282/381/636、160/282、160/282/381/550、160/282/550/636、160/381/550/636/681、161/282/550/636、161/381/550、165/311、167/282/636、167/550、213/365/517/707、236、253/519、253/519/563、253/519/635、253/563/635、270/322/517、270/367/452/517/613/700/750、270/452/517/700/750、270/570、282/381/550、282/550、356/570、381/550、517、517/562/750、517/640、519/563、550、550/636および562から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1582を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目69)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、63/536、117/122/270/540/681、181/536/548、181/536/548/705、181/548/705、270/681、347/532、347/536/548/705、407/570/681、407/681、536、536/548、536/548/699、536/705、548、548/580、548/705、580、681、699および705から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1764を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目70)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、13、17、18、30、37、52、57、60、71、85、87、90、98、99、118、129、164、180、183、347/434/517/562/640/681、347/434/532/562/640/681、347/434/550/562/681、347/434/681、347/517/532/681、347/532/550/640/681/699、347/536/562/681、347/550/580/681、347/550/681、347/681、365、388、389、415、433、434/517/532/681、517/681、531、532/681、535、536/580/681、539、562/681、589、606、608、707、711、727、738、748、765、769および789から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1804を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目71)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、14、15、17/52/87/118/129/388/589/738/765、17/52/87/118/129/589/738、17/52/87/118/129/589/738/765、17/52/87/118/129/589/765、17/52/87/129/388/589、17/52/87/129/388/589/738、17/52/87/129/738、17/52/87/388/589/765、17/52/87/589/738/765、17/52/118/129/265/589/765、17/52/118/129/388/589/738/765、17/52/118/129/589/738/765、17/52/118/129/738/765、17/52/118/388/589/738、17/52/118/388/589/738/765、17/52/118/388/738/765、17/52/129/388/589/738、17/52/129/388/589/738/765、17/52/129/589、17/52/129/589/738、17/52/129/589/765、17/52/129/653/738/765、17/52/129/738、17/52/129/738/765、17/52/388/589/738、17/52/388/589/738/765、17/52/589/738/765、17/52/589/765、17/87/118/388/738、17/87/129/388/738、17/118/129/388/738/765、17/129/589、17/129/589/738、17/129/589/738/765、17/129/738/765、17/388/589/738、17/589/738、17/589/765、17/738/765、18/362、20、24、26、33、33/154、46、50、52/84/129/388/738/765、52/87/118/129/388/765、52/87/118/388/589/738、52/87/118/589/738/765、52/87/129/388/738/765、52/87/129/765、52/87/589/738、52/87/738、52/118/129/589/738、52/118/129/765、52/118/388/589/738、52/118/388/738/765、52/129/589/738/765、52/129/589/765、52/129/738、52/388/738/765、52/589/738、52/589/738/765、52/738/765、54、58、59、59/72、79、81、84/129/589/738/765、87/118/129/765、87/129/388/589、92、93、97/154、104、105、130、134、154、165、175、185、212、213、218、241、256、263、316、319、349、360、362、364、390、393、434、480、498、530、534、534/739、542、589/738/765、603および652から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号1840を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目72)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、21、25/112、41、57/71/87/347/434/562/606、57/71/129/180/434/536/562、57/71/129/434/531/536/562、57/71/129/531/532/536/539/606、57/71/562/606/711/789、57/71/789、57/87/180/531/532/562/606/612/711、57/87/347/562、57/90/129/562、57/90/129/562/711、57/96/129/180/531/532/550/562、57/129/347/531/532/539/562/711/747、57/129/347/536/550/562/711/789、57/129/347/550/711、57/129/531/539/562/789、57/129/536/606/789、57/129/606、57/180/562、57/180/562/606/612、57/347/434/531/532/539/789、57/434/550/562/606/612/789、57/531/532/536/562、57/562/606/711、57/562/711、71/129/180/347/531/539/550、71/129/180/434/532/536/539/711/789、71/129/531、71/129/606、71/347/532/550/562/711、71/347/536/562/612/789、71/536/539/562、87/189/532/536/562/711/789、87/347/531/606/789、87/347/536/539/550、89、90/129/539/550/606、91、112、129/180/434/562/711/789、129/180/606/711/789、129/347/562、129/536/539/562、129/539/562/789、129/550、129/550/562、129/562/606/711、180/532、180/550/606、186、200、226、259、318、330、347/531/550/711、347/536/539/550/711/789、347/536/562/606/612、347/550/562/606、434/531/539/550/562/711、434/550、485、487、531/532/536/539/562/711/789、531/532/536/550/562/606/789、531/532/562/606/711、532/539/550、562/711、641、674、684、688、763および764から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2064を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目73)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、25、33/47/59/81/175/530/534/550/606、33/58/59/81/130/480/530/534/550/652、33/58/59/480/530/534/550、33/58/154/480/534/550/603/606、33/59/480/530/534/550/606、33/79/81/175/530/534、33/79/81/175/530/534/603、33/79/154/480/530/534/550、33/81/130/480/530/534/550、33/81/175/530/534/542/550/652、33/130/530/534/550、33/154/480/530/534/603/606、33/154/534、33/530/534/550、42、58/59/79/175/480/534/550/652、59/154/530/534/550、70、75、77、79/81/480/530/534/550/603/606/652、81/480/530/534/550、106、130/480/530/534/550/603/606、199、265、267、380、410、561、642および758から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2432を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目74)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、7/12、12、27、29、41、41/71、41/71/112、41/71/112/259/485/487/684/688、41/71/112/259/485/688、41/71/259/485/532、41/71/485、41/71/485/532/684、41/71/487、41/71/487/532/684、41/71/532、41/71/532/684、41/71/684、41/84/259/485/487、41/91/112/485、41/91/112/485/487/532/684、41/91/112/485/532/684、41/91/485、41/112、41/112/259/485/487、41/112/259/487/532/684、41/112/485/684、41/112/487/684、41/112/532、41/112/684/688、41/259/485、41/259/485/487、41/259/485/487/532/684、41/259/485/487/684/688、41/259/532、41/485、41/485/487、41/485/487/684/688、41/485/532、41/485/532/688、41/485/684/688、41/487/684、41/532、41/684、41/684/688、44、44/112/684/688、45、47、48、51、55、71/112/259/485/487/684、71/112/485/688、71/485/684/688、71/532、71/684/688、72、95、100、112、112/259、112/259/532/684/688、112/259/684/688、112/485/684、112/485/684/688、116、136、139、176、178、198、201、205、205/485、207、208、226/487/684/688、259/485/487/684、259/485/532、259/487/684/688、259/532、280、303、317、343、358、361、440、478、485、485/487、485/487/532、485/487/532/684、485/487/684、485/487/684/688、485/532、485/684、485/684/688、532、532/684/688、611、615、630、675、684、684/688、724、756および788から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号2510を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目75)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、8/25/55/95/208/358/440/517/788、12/45/47、12/45/47/48/51/136/142/630、12/45/47/51/136/139/630/758、12/45/47/136/139/142/675/758、12/45/51/136/139/630/675/756/758、12/45/51/630/756、12/48/51/136/139/758、12/136/139/142/756/758、12/136/142、12/630/756、25/29/208/440、25/100/154/208/440/517/705/788、25/517、29/208/361/517/788、42/198/199/480/532/539/561、42/198/532/561、42/198/532/561/724、42/199/480/532/561、42/259/480/561、42/259/480/652、42/480/561、42/480/561/724、42/561、47/51/136/756/758、55、55/410/440/603/788、55/517、55/517/788、70、70/642、77/176/487/615/642、95/603、106/199/539/561/652、116、136/139/142、154/361/440/517/603/788、176、198/199/480/561、198/199/480/561/724、198/199/561/724、198/480/561、198/480/724、199/532/539/561/652/724、259/480、267/611/642、280/440/517、380、480/561/652、480/561/652/724/764、480/724、517、532/539/561、532/561/724、603および642から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号7506を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目76)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、12/45/95/136/139/199/517/630/756、12/45/95/136/756、12/45/136/139/199/517/603、12/45/136/139/208/603/630/756、12/45/136/139/517/603/756、12/45/136/139/517/630/642/756、12/45/136/139/517/756、12/45/136/139/603/756、12/45/136/139/642/756、12/45/136/176/517/603/630/642、12/45/136/208/517/630/756、12/45/136/517/603/642/756/789、12/45/136/517/630/642/756、12/45/136/603/756、12/45/136/630/642、12/45/139/176/208/517/603/630、12/45/139/199/208/603、12/45/139/517/756、12/45/139/756、12/45/176/603/630/642/756、12/45/199/208/517/603/630/756、12/45/208/517/603/642/756、12/95/136/139/517/603/756、12/95/139/517/630/756、12/95/139/517/642、12/95/139/630/642、12/95/199/517/642、12/95/517/630/756、12/95/630/756、12/136、12/136/139/176/517/603/630、12/136/139/176/517/603/756、12/136/139/176/630/756、12/136/139/176/642、12/136/139/176/756、12/136/139/199/208/517/603/756、12/136/139/199/208/517/630/642/756、12/136/139/208/517、12/136/139/517、12/136/139/517/603/630/642/756、12/136/139/517/603/630/756、12/136/139/517/603/756、12/136/139/517/630、12/136/139/517/630/642、12/136/139/517/630/642/756、12/136/139/517/756、12/136/139/603/630、12/136/139/603/630/642、12/136/139/603/630/756、12/136/139/603/642/756、12/136/139/630、12/136/139/630/642/756、12/136/139/630/756、12/136/139/642/756、12/136/176/208/517/603/630/756、12/136/176/517/642、12/136/176/603/756、12/136/199/208/517/603/642/756、12/136/199/208/630/642、12/136/199/517/756、12/136/208、12/136/208/603/642、12/136/517/603/630/642、12/136/517/603/630/756、12/136/517/630、12/136/517/630/642、12/136/517/642、12/136/517/642/756、12/136/517/756、12/136/603/630/642/756、12/136/603/630/756、12/136/603/642、12/136/603/642/756、12/136/603/756、12/136/630、12/136/630/756、12/139/176/517/603/630/756、12/139/176/630/756、12/139/199/208/642、12/139/199/517/630/756、12/139/208/517、12/139/208/642、12/139/517/603/642/756、12/139/517/630/642/756、12/139/517/642、12/139/603/642/756、12/139/603/756、12/139/630/642、12/139/630/642/756、12/139/630/756、12/176/517/603/630、12/176/517/630/642/756、12/176/517/756、12/176/603/630/756、12/176/603/756、12/199/208/517/642、12/199/630/642/756、12/199/642/756、12/199/756、12/208/517/603/623/630/642、12/208/603/630/756、12/208/630/756、12/517/603/630/642/756、12/517/603/630/756、12/517/603/756、12/517/630/642/756、12/517/642/756、12/603/630/756、12/603/642/756、12/603/756、12/630/642/756、12/630/756、25/176/198/532/539、116/142/198/434/440、136/139/176/199/208/517/630/642、136/139/176/517/630/642/756、136/139/199/517/603/756、136/139/208/517/630/756、136/139/208/603/630/756、136/139/517/603/630/642/756、136/139/517/603/642/756、136/139/517/603/756、136/139/517/756、136/139/603、136/139/630/642/756、136/517/756、136/603/756、136/630/642、136/630/756、136/642、136/642/756、136/756、139/199/208/517/630/756、139/199/517/642、139/208/517/630/642/756、139/517/603/756、139/517/630/756、139/642/756、154/532/652/788、199/517/603/630/756、208/517/630/642/756、517/603/630/642/756、517/630/756、603/630/756および603/756から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含み、前記位置が、配列番号8420を参照して番号付けられている、項目61に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目77)
項目60〜76のいずれかに提供される少なくとも1つの操作されたスクロースシンターゼポリペプチドをコードする、操作されたポリヌクレオチド。
(項目78)
項目77に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチドを含むベクター。
(項目79)
少なくとも1つの制御配列をさらに含む、項目78に記載のベクター。
(項目80)
項目78に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
(項目81)
項目78または項目79に記載のベクターを含む宿主細胞。
(項目82)
真核生物および原核生物から選択される、項目80および/または81に記載の宿主細胞。
(項目83)
項目60〜76に提供される少なくとも1つの操作されたスクロースシンターゼ改変体を産生するための方法であって、項目80〜82のいずれかに記載の宿主細胞を、前記操作されたスクロースシンターゼ改変体が前記宿主細胞によって産生される条件下で培養するステップを含む、方法。
(項目84)
前記操作されたスクロースシンターゼ改変体を回収するステップをさらに含む、項目83に記載の方法。
(項目85)
項目60〜75のいずれかに記載の少なくとも1つの操作されたスクロースシンターゼ改変体を含む組成物。
(項目86)
基質をグリコシル化するための方法であって、少なくとも1つの基質、項目1〜50のいずれかに記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、および前記基質がグリコシル化されて少なくとも1つのグリコシル化産物を産生する条件下で、前記基質に前記グリコシルトランスフェラーゼを接触させるステップを含む、方法。
(項目87)
前記基質が、少なくとも1つのステビオール配糖体を含む、項目86に記載の方法。
(項目88)
前記グリコシル化産物が、少なくとも1つのモノグリコシル化および/またはポリグリコシル化産物を含む、項目86に記載の方法。
(項目89)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドI基質、NDP−グルコース、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドDおよびレバウジオシドI基質、NDP−グルコース、ならびに前記グリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドMが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目90)
レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP−グルコース、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP−グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目91)
レバウジオシドDを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP−グルコース、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP−グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドDが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目92)
前記NDP−グルコースが、ADP−グルコース、CDP−グルコース、TDP−グルコース、GDP−グルコース、および/またはIDT−グルコースから選択される、項目86〜91のいずれかに記載の方法。
(項目93)
前記NDP−グルコースがUDP−グルコースではない、項目86〜92のいずれかに記載の方法。
(項目94)
前記グリコシルトランスフェラーゼが、項目48〜50のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼを含む、項目86〜93のいずれかに記載の方法。
(項目95)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドI基質、ADP−グルコース、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドI基質、ADP−グルコース、ならびにグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドMが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目96)
レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ADP−グルコース、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたADP−グリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ADP−グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目97)
レバウジオシドDを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ADP−グルコース、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ADP−グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼをレバウジオシドDが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目98)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドI基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドD基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびにグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドMが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目99)
レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドAおよび/またはレバウジオシドIが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目100)
レバウジオシドDを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドDが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目101)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、少なくとも1つのステビオシドおよび/またはステビオシドとrebAの混合物を含むステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびに項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドMが産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目102)
レバウジオシドMを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP、スクロース、少なくとも1つのスクロースシンターゼ、および項目1〜50に記載の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、NDP、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドAが最初に産生され、レバウジオシドDおよび/またはレバウジオシドIが次に産生され、レバウジオシドMが最終的に産生される条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目103)
前記スクロースシンターゼが、項目60〜76のいずれかに提供される操作されたスクロースシンターゼである、項目98〜102のいずれかに記載の方法。
(項目104)
ワンポット反応として実施される、項目86〜103のいずれかに記載の方法。
(項目105)
逐次的に実施される、項目86〜104のいずれかに記載の方法。
(項目106)
前記方法のステップを繰り返すステップをさらに含む、項目86〜104のいずれかに記載の方法。
(項目107)
前記スクロースが繰り返されるステップの間に再利用される、項目106に記載の方法。
(項目108)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼおよび/または他の反応構成要素が再利用される、項目106および/または101に記載の方法。
(項目109)
前記ステビオシド基質が、Stevia rebaudianaから抽出される、項目86〜108のいずれかに記載の方法。
(項目110)
前記ステビオシド基質が合成により産生される、項目86〜108のいずれかに記載の方法。
(項目111)
前記グリコシルトランスフェラーゼおよび/または前記スクロースシンターゼが固定される、項目86〜110のいずれかに記載の方法。
(項目112)
フルクトースを含む反応産物を産生する、項目86〜110のいずれかに記載の方法。
(項目113)
前記フルクトースが、前記反応産物から除去される、項目112に記載の方法。
(項目114)
洗浄ステップをさらに含む、項目86〜113のいずれかに記載の方法。
(項目115)
少なくとも1つのカラムクロマトグラフィーステップをさらに含む、項目86〜114のいずれかに記載の方法。
(項目116)
前記少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目11〜31のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ−1,2グリコシルトランスフェラーゼである、項目86〜115のいずれかに記載の方法。
(項目117)
前記少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目4〜10および32〜47のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ−1,3グリコシルトランスフェラーゼである、項目86〜116のいずれかに記載の方法。
(項目118)
前記少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目11〜31のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ−1,2グリコシルトランスフェラーゼであり、項目4〜10および31〜47のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ−1,3グリコシルトランスフェラーゼである少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼをさらに含む、項目86〜117のいずれかに記載の方法。
(項目119)
項目60〜76のいずれかに記載の少なくとも1つの操作されたスクロースシンターゼをさらに含む、項目86〜118に記載の方法。
(項目120)
項目86〜119のいずれかに記載の方法に従って産生された少なくとも1つのレバウジオシド。
(項目121)
項目120に記載のレバウジオシドを含む組成物。
(項目122)
項目86〜89、92〜95、98、および/または101〜121のいずれかに記載の方法に従って産生されたレバウジオシドM。
(項目123)
項目122に記載のレバウジオシドMを含む組成物。
(項目124)
項目86〜94、96、99、および/または101〜121のいずれかに記載の方法に従って産生されたレバウジオシドA。
(項目125)
項目124に記載のレバウジオシドAを含む組成物。
(項目126)
項目86〜94、96、99、および/または101〜121のいずれかに記載の方法に従って産生されたレバウジオシドI。
(項目127)
項目126に記載のレバウジオシドIを含む組成物。
(項目128)
項目86〜94、97、および/または100〜121のいずれかに記載の方法に従って産生されたレバウジオシドD。
(項目129)
項目128に記載のレバウジオシドDを含む組成物。
(項目130)
項目122、124、126、および/または128に提供される少なくとも2つのレバウジオシドを含む組成物。
(項目131)
項目123、125、127、および/または129に提供される少なくとも2つの組成物の混合物を含む組成物。
Claims (17)
- 配列番号4、8、32、232、348、548、562、696、4684、4838、4876、5066、5290、5372、5562、5708、5976、6138、6288、6468、684、7388および/または8088と、少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%またはそれより高い配列同一性を有するポリペプチドを含む操作されたグリコシルトランスフェラーゼであって、前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、
(a)配列番号4を参照して番号付けられた位置309、または
(b)配列番号696、4876、5290もしくは5562を参照して番号付けられた位置308
から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含む、操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。 - 前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、ウラシル二リン酸以外の糖供与体を優先的に使用する、請求項1に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
- 前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、
(a)配列番号4を参照して番号付けられた位置309R、10−/309R、309L、309Nもしくは309S、
(b)配列番号4を参照して番号付けられた位置V309R、R10−/V309R、V309L、V309NもしくはV309S、または
(c)配列番号4を参照して番号付けられた位置309もしくは10/309
から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含む、請求項1または請求項2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。 - 前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、
(a)配列番号696を参照して番号付けられた位置308Fもしくは308Yであって、必要に応じて、1つまたは複数の位置の前記少なくとも1つの変異または変異の組が、配列番号696を参照して番号付けられた位置R308FもしくはR308Yから選択される、位置308Fもしくは308Y、
(b)配列番号4876を参照して番号付けられた位置308C、308Lもしくは308Tであって、必要に応じて、1つまたは複数の位置の前記少なくとも1つの変異または変異の組が、配列番号4876を参照して番号付けられた位置R308C、R308LもしくはR308Tから選択される、位置308C、308Lもしくは308T、
(c)配列番号5290を参照して番号付けられた位置308Lであって、必要に応じて、1つまたは複数の位置の前記少なくとも1つの変異または変異の組が、配列番号5290を参照して番号付けられた位置R308Lから選択される、位置308L、
(d)配列番号5562を参照して番号付けられた位置308Lもしくは308Qであって、必要に応じて、1つまたは複数の位置の前記少なくとも1つの変異または変異の組が、配列番号5562を参照して番号付けられた位置R308LもしくはR308Qから選択される、位置308Lもしくは308Q、または
(e)配列番号7388を参照して番号付けられた位置308Lであって、必要に応じて、1つまたは複数の位置の前記少なくとも1つの変異または変異の組が、配列番号7388を参照して番号付けられた位置であってR308Lから選択される、位置308L
から選択される1つまたは複数の位置で少なくとも1つの変異または変異の組を含む、請求項1または請求項2に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。 - 前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、表2.1、3.1、5.1、6.1、6.3、8.1、9.1、9.2、9.4、11.1、12.1、60.1、60.2、61.1、61.2、62.1、62.2、63.1、63.2、64.1、64.2、65.1、65.2、66.1、66.2、67.1、67.2、67.3、68.1、68.2、69.1、69.2、70.1、70.2、71.1、71.2、71.3、72.1、72.2、72.3、73.1、73.2、74.1、74.2、74.3,75.1、75.2、75.3および/または77.1.において提供される操作されたグリコシルトランスフェラーゼ改変体を含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
- 前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、ベータ−1,3−グリコシルトランスフェラーゼである、請求項1〜5のいずかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
- 前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、ADP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(AGT)、CDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(CGT)、GDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(GGT)、TDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(TGT)、およびIDP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ(IGT)から選択されるNDP−グリコシルトランスフェラーゼであり、必要に応じて、前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼはADP−グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼである、請求項1〜6のいずれかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
- 請求項1〜7のいずれかにおいて提供される少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼをコードする、操作されたポリヌクレオチド。
- 請求項8に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチドを含むベクターであって、必要に応じて、前記ベクターは少なくとも1つの制御配列をさらに含む、ベクター。
- (a)請求項8に記載の少なくとも1つの操作されたポリヌクレオチド、または
(b)請求項9に記載の少なくとも1つのベクター
を含む、宿主細胞であって、必要に応じて、前記宿主細胞が、真核および原核生物から選択される、宿主細胞。 - 請求項1〜7のいずれかにおいて提供される少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを産生する方法であって、請求項10に記載の宿主細胞を、前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが前記宿主細胞によって産生される条件下で培養するステップを含み、必要に応じて、前記方法は、操作されたグリコシルトランスフェラーゼ改変体を回収するステップをさらに含む、方法。
- 請求項1〜7のいずれかの少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを含む組成物。
- (a)基質のグリコシル化のための方法であって、少なくとも1つの基質および請求項1〜7のいずれかの少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、および前記基質がグリコシル化され、少なくとも1つのグリコシル化産物を産生する条件下で、前記基質を前記グリコシルトランスフェラーゼと接触させるステップを含み、必要に応じて、
(i)前記基質が、少なくとも1つのステビオールグリコシドを含むか、もしくは
(ii)前記グリコシル化産物が、少なくとも1つのモノグリコシル化産物および/もしくはポリグリコシル化産物を含む、方法、
(b)レバウジオシドMを産生するための方法であって、レバウジオシドD基質、NDP−グルコースおよび請求項1〜7の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、レバウジオシドMが産生される条件下で、前記レバウジオシドD基質、NDP−グルコースおよび前記グリコシルトランスフェラーゼを組み合わせるステップを含む、方法、
(c)レバウジオシドAおよび/もしくはレバウジオシドIを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP−グルコースおよび請求項1〜7の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、レバウジオシドAおよび/もしくはレバウジオシドIが産生される条件下で、前記ステビオシド基質、NDP−グルコースおよびグリコシルトランスフェラーゼを組み合わせるステップを含む、方法、または
(d)レバウジオシドDを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP−グルコースおよび請求項1〜7の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、レバウジオシドDが産生される条件下で、前記ステビオシド基質、NDP−グルコースおよびグリコシルトランスフェラーゼを組み合わせるステップを含む、方法。 - (a)前記NDP−グルコースが、ADP−グルコース、CDP−グルコース、TDP−グルコース、GDP−グルコースおよび/もしくはIDT−グルコースから選択されるか、
(b)前記NDP−グルコースがUDPグルコースでないか、
(c)前記グリコシルトランスフェラーゼが請求項6もしくは7のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼを含むか、ならびに/または
(d)前記NDP−グルコースがADP−グルコースである、
請求項13に記載の方法。 - (a)レバウジオシドMを産生するための方法であって、レバウジオシドD基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼおよび請求項1〜7の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、レバウジオシドMが産生される条件下で、前記レバウジオシドD基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼおよびグリコシルトランスフェラーゼを組み合わせるステップを含む、方法、
(b)レバウジオシドAおよび/もしくはレバウジオシドIを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼおよび請求項1〜7の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、レバウジオシドAおよび/もしくはレバウジオシドIが産生される条件下で、前記ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼおよびグリコシルトランスフェラーゼを組み合わせるステップを含む、方法、
(c)レバウジオシドDを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼおよび請求項1〜7の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、レバウジオシドDが産生される条件下で、前記ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼおよびグリコシルトランスフェラーゼを組み合わせるステップを含む、方法、
(d)レバウジオシドMを産生するための方法であって、少なくとも1つのステビオシドおよび/もしくはステビオシドとrebAの混合物を含むステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼおよび請求項1〜7の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、レバウジオシドMが産生される条件下で、前記ステビオシド基質、NDP、スクロース、スクロースシンターゼおよびグリコシルトランスフェラーゼを組み合わせるステップを含む、方法、または
(e)レバウジオシドMを産生するための方法であって、ステビオシド基質、NDP、スクロース、少なくとも1つのスクロースシンターゼおよび請求項1〜7の少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、レバウジオシドAが最初に産生され、レバウジオシドDおよび/もしくはレバウジオシドIが次に産生され、レバウジオシドMが最終的に産生される条件下で、前記ステビオシド基質、NDPおよびグリコシルトランスフェラーゼを組み合わせるステップを含む、方法 - 前記スクロースシンターゼが、配列番号72と、少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%またはそれより高い配列同一性を有するポリペプチド配列を含む操作されたスクロースシンターゼである、請求項15に記載の方法。
- (a)前記方法がワンポット反応として実施され、必要に応じて、
(i)前記方法が逐次的に実施されるか、もしくは
(ii)前記方法が、前記方法のステップを繰り返すステップをさらに含み、例えば、
(I)前記スクロースが繰り返されるステップの間に再利用されるか、もしくは
(II)前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼおよび/もしくは他の反応構成要素は再利用されるか、
(b)前記ステビオシド基質が、
(i)Stevia rebaudianaから抽出されるか、もしくは
(ii)合成によって産生されるか、
(c)前記グリコシルトランスフェラーゼおよび/もしくは前記スクロースシンターゼは固定されているか、
(d)前記方法は、フルクトースを含む反応産物が産生し、必要に応じて、前記フルクトースは前記反応産物から除去されるか、
(e)前記方法は洗浄ステップをさらに含むか、
(f)前記方法は少なくとも1つのカラムクロマトグラフィーステップをさらに含むか、
(g)前記少なくとも1つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼは、請求項1〜7のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択される、ベータ−1,3グリコシルトランスフェラーゼであるか、ならびに/または
(h)前記方法は、少なくとも1つの操作されたスクロースシンターゼをさらに含み、前記操作されたスクロースシンターゼが、配列番号72と、少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%またはそれより高い配列同一性を有するポリペプチド配列を含む、
請求項13〜16のいずれかに記載の方法。
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