JPWO2020028039A5

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Publication number: JPWO2020028039A5
Application number: JP2021504769A
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Publication date: 2023-03-22

Description

様々な具体的な実施形態を例証し、説明してきたが、本発明の趣旨および範囲を逸脱することなく様々な変化を加えることができることが理解されるであろう。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目１)
配列番号２に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれより高い配列同一性を有するポリペプチド配列を含む、操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２)
配列番号２０に対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれより高い配列同一性であるポリペプチドを含む、項目１に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、４１／７２／２３３／３３８、４１／７２／３３８、４１／１４４／２３３、４１／２３３、４１／２３３／３３８、６１、６１／８７／９１／１０７、６１／８７／９１／２５９、６１／９１／４３１、６１／１０７、６１／２５９／４２８、６１／４０７／４２８、６１／４１１、７２、７２／７６、７２／７６／１６３／１９７、７２／７６／１９５／２３３、７２／７６／１９７／２０４、７２／７６／２０７／２３３、７２／７６／２０７／３３８、７２／８１、７２／８１／１９５／２３３、７２／１３９／１９５／２０４、７２／１４４／３３８、７２／２００／２０４／２０７、７２／２０７、７６／１４４／１９７／２００、７６／１９５／１９７／２０４／２０７／２３３、７６／１９７／２０７／２３３、７６／２３３、８１／１３９／１４４／１９５／２００／２０４／２０７／２３３、８１／１４４／２３３、８１／１９７／２００／２０７／２３３／３３８、８１／２３３／３３８、８１／３３８、１０７、１０７／２５９、１３９／１４４／２３３、１４４／２３３、１４４／２３３／３３８、１５６／４０７、１６３／２３３／３３８、２００／２０４／２０７／２３３、２３３／３３８、および２５９から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２０を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、７１、８０、８１、８１／２７０、８３、８５、９７、１２４、２６３、２８６、３３４、４０２、４２０および４５６から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２０を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目５)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、４１／７２／２３３／３３８、４１／７２／３３８、６１、６１／９１／４３１、６１／２５９／４２８、６１／４０７／４２８、８１／１３９／１４４／１９５／２００／２０４／２０７／２３３および８１／１９７／２００／２０７／２３３／３３８から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２０を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目６)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、７３／８１／１４４／２０７／２５９、７３／８１／１４４／２０７／２８５／４５１、７３／８１／２５９／２８５／４２６／４５１、７３／８１／２５９／４５１、７３／１１１／２８５／４５１、７３／１４４／２０７／２５２／４２６／４５１、７３／１４４／２０７／２５９／２８５／４２６／４５１、７３／１４４／２０７／２５９／２８５／４５１、７３／１４４／２０７／２５９／４２６／４５１、７３／１４４／２５９／２８５、７３／２５９／４２６／４５１、７３／２５９／４５１、８１／１１１／１４４／２０７／２８５／４５１、８１／１１１／２５９／４５１、８１／１４４／２０７／２５２／２８５／４２６、８１／１４４／２０７／２５９／４５１、８１／１４４／２５２／２５９／２８５／４５１、８１／１４４／２５９、８１／１４４／２５９／２８５、８１／１４４／２５９／４５１、８１／２０７／２５２／２５９／４５１、８１／２０７／２８５／４２６／４５１、８１／２８５、８１／２８５／４５１、１１１／１４４／２０７／２５２／２８５／４２６／４５１、１１１／１４４／２５２／２５９／２８５／４５１、１１１／１４４／２５９／２８５／４２６／４５１、１１１／２０７／２８５、１４４／２０７／２５２／２５９、１４４／２０７／２５９、１４４／２０７／２５９／２８５／４５１、１４４／２０７／２５９／４２６／４５１、１４４／２０７／２８５／４２６、１４４／２０７／４５１、１４４／２５２／２５９／２８５、１４４／２５２／２５９／２８５／４５１、１４４／２５２／２５９／４２６、１４４／２５２／２５９／４２６／４５１、１４４／２５９／２８５、１４４／２８５、１４４／２８５／４５１、１４４／４５１、２０７、２０７／２５２／２５９／４５１、２０７／２５２／４５１、２０７／２５９、２０７／２５９／４２６／４５１、２０７／２８５／４２６／４５１、２０７／４５１、２５２／２５９、２５９、２５９／２８５／４５１、２８５、および２８５／４５１から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号３６を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目７)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、８１／１１１／１４４／２０７／２８５／４５１、１４４／２０７／２５２／２５９、１４４／２０７／２５９／２８５／４５１、１４４／２５２／２５９／４２６、１４４／２５２／２５９／４２６／４５１および１４４／２８５／４５１から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号３６を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目８)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、８０／８１、８０／８１／８５、８０／８１／８５／２３８、８０／８１／８５／２５１／２５９、８０／８１／８５／２５２／２５６／２５９、８０／８１／８５／２５９、８０／８１／２５１／２５２／２５９、８０／８５、８０／８５／２３８、８０／８５／２３８／２５１／２５９、８０／８５／２５１、８０／８５／２５１／２５２、８０／８５／２５１／２５２／２５６／２５９、８０／８５／２５１／２５２／２５９、８０／８５／２５１／２５９、８０／８５／２５９、８０／２５９、８１／８５、８１／８５／２５１／２５２、８１／８５／２５９、８５、８５／２３８、８５／２５１、８５／２５１／２５２／２５６、８５／２５１／２５９、８５／２５６／２５９、１７５／４０２、２５１／２５２／２５９、２５９、２７０／４０２、および４２０から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１７４を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目９)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、３、５、７、９９、１５３、２３２／３１７、２５２、２７３、２９９、３２６、３９３、４０４、４０９、４２２、４４３、４５１および４５５から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１７４を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１０)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、８０／８１／８５、８０／８５、８０／８５／２５１／２５９、８５、８５／２５１／２５２／２５６、１７５／４０２および２７０／４０２から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１７４を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１１)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、８１／８５、８１／８５／１７５／２５９／４０２、８１／８５／２５１、８１／８５／２５１／２５９、８１／８５／２５９、８１／８５／２５９／４０２、８５、８５／１７５、８５／１７５／２５１、８５／１７５／２５１／２５９／４０２、８５／１７５／２５９、８５／１７５／２５９／４０２、８５／１７５／４０２、８５／２５９、８５／２５９／４０２、および８５／４０２から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４０６を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１２)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１５３、１５３／３２６、１５３／３２６／４４３、１５３／３２６／４４３／４５５、２３２、２３２／２７３／２９９、２３２／３９３／４５１、２９９／４５１、３２６、４０４および４５１から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４０８を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１３)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、２５、１１６、１４６、１７０、１７３、２２７、２９６、３００、３１５、３２７、３３０、３６１、４０８、４１２、４３８、４４８および４４９から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４０８を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１４)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１５３、２３２、２３２／３９３／４５１および４５１から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４０８を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１５)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１４６／１７０／１９６、１４６／１７０／１９６／２３２、１４６／１７０／１９６／２３２／４２３、１４６／１７０／１９６／２３２／４５１／４５５、１４６／１７０／１９６／４０８／４５１、１４６／１７０／２３２、１４６／１７０／２３２／４２３、１４６／１７０／２３２／４２３／４４８／４５１／４５５、１４６／１７０／２５９、１４６／１９６、１４６／１９６／２３２、１４６／１９６／２３２／２５９／４４８／４５１、１４６／１９６／４５５、１４６／２３２／２５９／４５５、１４６／２３２／３１５、１４６／２３２／３１５／４２３／４５１／４５５、１４６／２３２／３２６、１４６／２３２／４４８、１４６／２３２／４５１、および１４６／４１３／４５１／４５５から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４４０を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１６)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、９、１２、１０７、１３１、１５６、１６１、１６９、１９９、２０４、２０９、２３３、２６２、２８９、３３７および４１７から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４４０を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１７)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１４６／１７０／１９６、１４６／１７０／１９６／２３２、１４６／１７０／１９６／２３２／４５１／４５５、１４６／１７０／２３２、１４６／１７０／２３２／４２３／４４８／４５１／４５５、１４６／１９６／２３２、１４６／１９６／２３２／２５９／４４８／４５１および１４６／２３２／４４８から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４４０を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１８)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、９／１２／１０７／１６１／１９９／２０９／３３７、９／１２／１６１／１６９／１９９／２０９／３３７、９／１２／１９９／２０４／２０９／３３７／４５５、９／１２／１９９／２０９／３３７／４５１／４５５、９／１０７／１３１／２０４／２５９／４１７／４５１、９／１０７／１５６／１６１／１９９／２０４／４１７／４５５、９／１０７／１６１／２０９／２５９／２８９／４５１／４５５、９／１３１／１５６／２０９／２８９／３３７、９／１３１／２０４／３３７／４５１、９／１５６／１６９／２０４／３３７、９／１６９／２０４／２８９／３３７／４５１／４５５、９／２０４、９／２０４／２５９／２８９、９／３３７、１２／１４／１０７／２０４／２８９／４５５、１２／１０７／１３１／２０４／２８９／３３７／４１７／４５１／４５５、１２／１０７／１５６／２０９／２８９／４５５、１０７／１６１／１６９／１９９／２０４／２５９／４５１、１０７／１９９／２０４／２８９、１０７／１９９／２０９／２５９／４５１／４５５、１０７／２０４、１５６／１６９／１９９／２０４／２０９／２５９／２８９、１６１／２０４／４１７、２０４／４５１／４５５、２８９、および４５１／４５５から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号５２０を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目１９)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１６、５３、５４、７８、８０、９５、１１１、２２１、２５７、３３６、３４９、３９１、４１０、４１３、４２６および４３０から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号５２０を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２０)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、９／１２／１９９／２０４／２０９／３３７／４５５、９／１３１／１５６／２０９／２８９／３３７、９／２０４、１２／１４／１０７／２０４／２８９／４５５、１０７／１６１／１６９／１９９／２０４／２５９／４５１、１０７／１９９／２０４／２８９および２０４／４５１／４５５から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号５２０を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２１)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１６、１６／５９／８０／４１３、１６／８０、１６／８０／１１１、１６／８０／１１１／２５７、１６／８０／２２１／２５７／３３６／４１０、１６／８０／２２１／３３６／４１０、１６／８０／２５７、１６／１１１／２２１、１６／１１１／２２１／２５７／３９１、１６／２２１、１６／２２１／２５７、１６／２２１／２５７／３３６／３９１、１６／２２１／４１０、１６／２５７、１６／２５７／３３６／４１３／４２０、８０／１１１／２２１／２５７／４１０、１１１／２２１／２５７／３３６／３９１、１１１／２２１／２５７／３９１、２２１、および２２１／２５７から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号６２６を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２２)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、５、７、１４、６５、９１、９９、１０２、１１８、１３８、１９４、２５４、２８６、４１６、４１８および４２０から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号６２６を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２３)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１６／８０／２２１／２５７／３３６／４１０、１６／１１１／２２１、１６／２２１／２５７、１６／２２１／４１０、１６／２５７、８０／１１１／２２１／２５７／４１０および２２１から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号６２６を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２４)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、５、５／１４／９９、５／１４／４１６、５／９１、５／９１／１０２／１１８、５／９１／１０２／２５４／４１８、５／９１／１０６／２５４／２８６、５／９１／１１８／１９４／２５４／２８６、５／９１／１１８／１９４／２５４／４１８、５／９１／１１８／１９４／４１８、５／９１／１１８／２５４／２８６／４１８、５／９１／１１８／２８６、５／９１／１９４／２５４、５／９１／１９４／４１８、５／９１／２５４、５／９１／２５４／２８６、５／１０２／４１８、５／１１８／１９４／２８６／４１８、５／１１８／２５４、５／１１８／２８６、５／１９４、５／２５４／２８６、５／４１８、７／１４、７／１４／６５／９９、７／１４／９９／４１６、１４、１４／６５／９９／４１６、１４／９９、１４／９９／２５４、１４／９９／２５４／４１６、１４／９９／２５４／４１６／４５５、１４／９９／４１６、１４／１６７、１４／２５４、１４／４５５、９１、９１／１０２／１９４、９１／１１８、９１／１１８／１９４、９１／１１８／１９４／２８６、９１／１１８／１９４／４１８、９１／１１８／２８６、９１／１９４／２５４／２８６、９１／２８６、および１１８／２８６／４１８から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号６７８を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２５)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、５／９１／１０６／２５４／２８６、５／９１／１１８／２８６、５／９１／２５４／２８６、１４、１４／６５／９９／４１６、１４／９９および１４／９９／２５４から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号６７８を基準にして番号が付けられている、項目２に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２６)
配列番号１２に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれより高い配列同一性を有するポリペプチド配列を含む、操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２７)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１６、１６／１２７／１６９、１６／１３４、１６／１４３／４２３、１６／１６９、１６／１６９／３９８／３９９、１６／１６９／４２３、１６／３９８、１６／３９８／３９９、１６／３９８／４２７、１６／４２３、１６／４２３／４２７、１３４、１４３、３９９／４２３および４２３／４２７から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２４を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２８)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、３、８、１１、４１、４４、５６、６０、１２２、１３５、１３７、１３８、１３９、１５８、１６４、１７６、２２１、２３２、２３３、２３５、２４８、２４９、２８１、２８４、２８５、３０１、３２２、３７２、３９２、４００、４２１、４２６、４２７、４３３、４４０、４４３および４４６から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２４を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目２９)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１６、１６／１２７／１６９および１６／１６９から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２４を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３０)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、３／２２／１９８／４２１、３／２２／４２１、３／２０１／２４８／３２２、３／２０１／２４８／３２２／３９２、１３／２３３／３３１／４４０、１３／４４０／４４３、２２／３２／５６／６０／１９８／２４８／３２２／３９２／４２１、２２／５６、２２／５６／１３７／１９８／２０１／２４８／３２２／３９２、２２／５６／１３７／１９８／２４８／３９２／４２１、２２／５６／１３７／３２２、２２／５６／１３７／３２２／３９２／４２３、２２／５６／１９８／２０２／２４８、２２／５６／１９８／２４８／３２２／３９２／４２１、２２／５６／１９８／２４８／４２１／４２３、２２／５６／４２１／４２３、２２／６０／３９２／４２１、２２／１３７、２２／１３７／１９８／２０２／２４８、２２／１９８／２０２／２４８／３９２、２２／２４８／３９２、２２／３９２、２２／４２１、２２／４２１／４２３、２２／４２３、４４／１６４／２３３、４４／１６４／２３３／３２９／３３１、４４／３３１、１２５、１２５／２３３／４４３／４４６、１６４／２２１／２３３／３３１／４４０／４４６、１６４／２３３／３３１／４４０、１６４／２３３／４４６、１６４／３３１、１６４／４４０、１６４／４４３、１９８／２０２／３９２、２２１／３２９／３３１、２３３、２３３／４４６、３２９、４２１／４２３、および４４３／４４６から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号８５８を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３１)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、３／２２／１９８／４２１、１３／４４０／４４３、２２／５６／１９８／２０２／２４８、２２／１３７、２２／１９８／２０２／２４８／３９２、１６４／２２１／２３３／３３１／４４０／４４６、１６４／２３３／３３１／４４０および２３３／４４６から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号８５８を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３２)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、８３／２０２／２３３、１６４、１６４／２０２、１６４／２０２／２３３／３３１、１６４／２０２／２４８／２７２、１６４／２０２／３３１、１６４／２０２／３３１／４２３、１６４／４２３、２０２／２３３、２０２／２３３／２４８、２０２／２３３／２４８／４２３、２０２／２４８、２０２／３３１、２０２／４２１／４２３、２０２／４２３、２０２／４４６、２３３、２４８、および４２３から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号９９４を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３３)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、７、９、１０、５４、７３、８４、１０６、１１５、１１６、１３２、１６５、２８６、３０９、３８９、４０６、４２２および４３８から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号９９４を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３４)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、８３／２０２／２３３、１６４、１６４／２０２、１６４／４２３、２０２／２３３／２４８および２３３から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号９９４を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３５)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、７／９／７３／１６５／２８６、７／９／１６５／２８６、７／９／４２２、７／１１６／１６５／２８６、７／１６５、９／７３／１１６／１６５／２８６／４２２、９／２８６／３８９、５４、５４／８４、５４／４０６、７３、７３／１１６／１６５／２８６／３８９、７３／１１６／２８６、７３／１１６／２８６／４２２、７３／１６５／２８６、７３／２８６／３８９、７３／２８６／４２２、７３／４２２、８４、１１５、１１６、１１６／１６５、１１６／１６５／２８６／４２２、１１６／３８９、１６５、１６５／２８６、１６５／３８９、１６５／３８９／４２２、２８６、２８６／４２２、３８９／４２２、および４２２から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１０８０を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３６)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１８５／１９０、２１９、２２０、２５５、２５７、３０２、３８５、３９５、３９５／４３７、３９９、４０１、４０９、４１２、４１６、４３４、４４１、４４５、４４７および４４９から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１０８０を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３７)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、９／７３／１１６／１６５／２８６／４２２、５４、５４／８４、５４／４０６、７３／１１６／２８６／４２２、１１６／１６５／２８６／４２２および２８６／４２２から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１０８０を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３８)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、５４、５４／１８５／１９０、５４／１８５／１９０／２１９／２５７／３０２／３８５／３８９／３９５／４４５／４４７／４４９、５４／１８５／１９０／２１９／３８５、５４／１８５／１９０／２１９／３８５／３８９／３９５／３９９／４４１／４４５／４４７／４４９、５４／１８５／１９０／２１９／３８５／３９５／３９９／４４１／４４５／４４７／４４９、５４／１８５／１９０／２１９／３８５／４４５／４４７、５４／１８５／１９０／２１９／３８９／３９５／３９９／４４１／４４５／４４７／４４９、５４／１８５／１９０／３０２、５４／１８５／１９０／３０２／３９５／３９９、５４／１８５／１９０／３８５／４４７／４４９、５４／１８５／１９０／３８９／３９５、５４／１８５／１９０／３８９／４４１／４４５／４４７／４４９、５４／１８５／１９０／３８９／４４５、５４／１８５／１９０／３９５／３９９／４４１／４４５／４４７／４４９、５４／１８５／２１９／３８９、５４／１８５／２５７／３８９／４４１／４４５／４４７／４４９、５４／１８５／３０２／３８５／３９９／４４５／４４７、５４／１８５／３８５／３８９／３９５／４４１／４４５／４４９、５４／１８５／３８５／３９５／３９９／４４５／４４７／４４９、５４／１８５／３８９／３９５／４４５／４４７、５４／１９０／２１９／２５７／３０２、５４／１９０／２１９／２５７／３９５／４４５／４４７／４４９、５４／１９０／２５７、５４／１９０／２５７／３０２／３９９、５４／１９０／２５７／３０９／３８５／３８９／３９５／３９９／４４５、５４／１９０／２５７／３８５／３８９、５４／１９０／２５７／３９５／４４５／４４９、５４／１９０／３０２／３８９、５４／１９０／３０２／３８９／３９５／３９９／４４５／４４７、５４／１９０／３８５／３８９／３９５／４４１／４４５、５４／１９０／３８５／３９５、５４／１９０／３８５／４４５／４４７／４４９、５４／１９０／３９５、５４／１９０／３９５／４４５／４４７、５４／２１９／３０２／３９５／４４１／４４５／４４７、５４／２１９／３８５／３８９／３９５／４４１／４４５／４４７、５４／２５７、５４／２５７／３８５／４４９、５４／２５７／３８９、５４／２５７／３９９、５４／２５７／４４１／４４７、５４／２５７／４４１／４４９、５４／３０２／３８５／３９９／４４１／４４５／４４７、５４／３０２／３８５／３９９／４４１／４４５／４４９、５４／３８５、５４／３８５／３８９／４４１／４４５／４４７／４４９、５４／３８９／３９５／３９９／４４７／４４９、１８５／１９０／２１９／２５７／３８９／３９５／４４５／４４７、１８５／１９０／２５７／３０２／３９５／４４１／４４５／４４７、１８５／１９０／２５７／３８５／３８９／３９９、１８５／１９０／２５７／３８５／３９９／４４５／４４７、１８５／１９０／２５７／３８９／３９５、１８５／１９０／２５７／３８９／３９５／３９９／４４１／４４７／４４９、１８５／１９０／３８５／３８９／４４１／４４５／４４７、１８５／１９０／３８９／４４７／４４９、１８５／１９０／３９５／３９９、１８５／２１９／２５７／３９９／４４５／４４７、１８５／２５７／３８５／３９５／３９９／４４５／４４７、１８５／３０２／３９５／３９９／４４１／４４５／４４７／４４９、１８５／３９５／３９９／４４１／４４５／４４７、１９０／２１９／２５７／３８５／３８９／４４１／４４５／４４７／４４９、１９０／２１９／３０２／３８５／３９９／４４５、１９０／２５７／３０２／３８５／３９９、１９０／２５７／３８５／３８９／３９９、１９０／２５７／３８５／３８９／４４５／４４７、１９０／２５７／３８５／３９５、１９０／２５７／３８５／４４１／４４５／４４７／４４９、１９０／２５７／３８９／３９５／４４１／４４５／４４７、１９０／２５７／３９９／４４７／４４９、１９０／３０２／３８５／３８９／３９５／３９９／４４１／４４５／４４７、１９０／３８９、２１９／２５７／３８５／３８９／３９５／４４１／４４７／４４９、２１９／２５７／３９５、２１９／３８５／３８９／３９９／４４５／４４９、２１９／３９５、２５７／３８５／３８９／３９９、２５７／３８９／３９５／３９９／４４５／４４７、２５７／３８９／３９５／３９９／４４５／４４９、２５７／３８９／３９９、３０２／３８９／３９５／４４５、３８５／３８９、３８５／３９５、３８９／３９５／４４５／４４７、３９５／３９９、および３９９から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１２１６を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目３９)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、５、１４、９６、１０８、１５７、１８１、１８８、２７８、２９３および３４１から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１２１６を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４０)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、５４／１８５／１９０／２１９／２５７／３０２／３８５／３８９／３９５／４４５／４４７／４４９、５４／１８５／１９０／３８５／４４７／４４９、５４／１９０／２５７／３０２／３８５／３９５／３９９、５４／１９０／３０２／３８９／３９５／３９９／４４５／４４７、５４／２５７／３８５／４４９、５４／２５７／３８９、および５４／３８９／３９５／３９９／４４７／４４９から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１２１６を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４１)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１４／４２／５１／１０８／１８１、１４／４２／５１／１５７／３４１、１４／４２／３４１、１４／５１／９６／１５７、１４／５１／９６／１５７／３４１、１４／５１／９６／３４１、１４／５１／１０８、１４／５１／３４１、１４／９６、１４／９６／１０８／１３３、１４／９６／１０８／１８１／３４１、１４／９６／１０８／１８８、１４／９６／３４１、１４／１０８／１５７、１４／１０８／１５７／１８８、１４／１５７／１８１／２７８、１４／２７８、４２／９６／１５７／３４１、４２／１８８／３４１、９６／１０８／１８１／２９３、９６／１０８／１８８、９６／１０８／１８８／３４１、９６／１８８、１８１、１８８、および２９３から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１４８８を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４２)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１２２、１４４、１４７、１８７、１９６、１９７、１９８、１９９、２０１、２６８および３２４から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１４８８を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４３)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１４／４２／３４１、１４／９６、１４／９６／１０８／１３３、１４／９６／１０８／１８１／３４１および１８８から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１４８８を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４４)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１４７／１８８／１９６／２０１、１５２／１８７／１８８／３２４、１５２／１８８、１５２／１８８／１９６／１９８／１９９／３２４、１５２／１８８／１９６／１９９、１５２／１８８／１９６／２０１／３２４、１５２／１８８／３２４、１８８、１８８／１９６／１９８／１９９／２０１、１８８／１９６／１９８／１９９／２０１／３２４、１８８／１９６／１９８／２０１、１８８／１９６／１９８／３２４、１８８／１９６／２０１、１８８／１９８／１９９／２０１／３２４、１８８／１９８／１９９／２６８、１８８／１９８／２０１／３２４、１８８／１９８／３２４、１８８／１９９／２０１、１８８／２０１、１８８／２０１／３２４、および１８８／３２４から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１５１６を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４５)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１５２／１８８／１９６／１９８／１９９／３２４、１８８／１９６／１９８／１９９／２０１、１８８／１９６／１９８／２０１、１８８／１９６／２０１、１８８／１９８／１９９／２６８、１８８／２０１および１８８／３２４から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１５１６を基準にして番号が付けられている、項目２６に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４６)
ベータ－１，２－グリコシルトランスフェラーゼおよびベータ－１，３－グリコシルトランスフェラーゼから選択される、項目１から４５のいずれかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４７)
ＡＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＡＧＴ）、ＣＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＣＧＴ）、ＧＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＧＧＴ）、ＴＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＴＧＴ）およびＩＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＩＧＴ）から選択される、ＮＤＰ－グリコシルトランスフェラーゼである、項目１から４６のいずれかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４８)
ＡＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼである、項目１から４７のいずれかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目４９)
ウラシル二リン酸以外の糖ドナーを優先的に使用する、項目１から４８のいずれかに記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
(項目５０)
項目１から４８のいずれかで提供される少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼポリペプチドをコードする操作されたポリヌクレオチド。
(項目５１)
項目５０に記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチドを含むベクター。
(項目５２)
少なくとも１つの制御配列をさらに含む、項目５１に記載のベクター。
(項目５３)
項目５０に記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
(項目５４)
項目５１および／または５２に記載の少なくとも１つのベクターを含む宿主細胞。
(項目５５)
真核生物および原核生物から選択される、項目５３または５４に記載の宿主細胞。
(項目５６)
項目１から４５のいずれかで提供される少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを産生するための方法であって、項目５３から５５のいずれかに記載の宿主細胞を、前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが前記宿主細胞により産生されるような条件下で培養するステップを含む、方法。
(項目５７)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼを回収するステップをさらに含む、項目５６に記載の方法。
(項目５８)
項目１から４５のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを含む組成物。
(項目５９)
配列番号６に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれより高い配列同一性を有するポリペプチド配列を含む、操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６０)
配列番号２２に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれより高い配列同一性を有するポリペプチド配列を含む、操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６１)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、３／５４８、４、７、１２、４１、４２、４４、４７、５２、５７、５９、７１、８１、８５、９３、９７、１２２、１２９、１３４、１３６、１３９、１５４、１７５、２１５、２６６、２７０、３４３、３５８、３８１、３８８、４３４、４４２、５１９、５２４、５３２、５３６、５７０、５８９、６０３、６０６、６１５、６３５、６４１、６５２、７２４、７２７、および７３８から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６２)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、４１、５２、１３４、３８１、４４２、５１９、５２４および７２４から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６３)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、２５／４４／５２／１３４／４３４／７２４、４１／４４／５２／９７／４４２／７１９／７２４、４１／４４／５２／１３４／４４２、４１／４４／５２／４３４／４４２／５３２／７２４、４１／４４／５２／４３４／７２４、４１／４４／１３６／３２９、４１／４４／１３６／４４２、４１／４４／５３２、４１／５２／９７／４３４／４４２／５３２／７２４、４１／５２／１３４／１３６／４３４、４１／５２／１３４／４４２／７２４、４１／５２／１３６、４１／５２／４３４、４１／５２／４３４／４４２、４１／５２／４３４／４４２／７２４、４１／５２／４４２、４１／９７／１３４／４３４／４４２／５３２／５５３、４１／１３４／４４２／５３２、４１／３２９／４４２、４１／４３４／４４２／５３２、４１／４３４／４４２／５３２／７２４、４１／４３４／５３２、４１／５３２、４４／５２／９７／４３４／４４２／７２４、４４／５２／９７／４４２／７２４、４４／５２／１３４／１３６／３２９／４３４／４４２／５３２、４４／５２／１３４／４３４／５３２、４４／１３６／３２９／４３４／５３２、４４／１３６／５３２、４４／４３４／４４２／５５３、５２、５２／９７、５２／９７／４３４／４４２、５２／９７／４４２、５２／９７／５３２、５２／１３４、５２／１３４／１３６／４３４、５２／１３４／１３６／４４２、５２／１３４／３２９／４３４、５２／１３４／３２９／５３２、５２／１３４／４３４／４４２／５３２／５５３、５２／１３４／４４２／７２４、５２／１３６、５２／１３６／４３４、５２／１３６／４３４／４４２、５２／１３６／４３４／４４２／５３２、５２／１３６／４３４／７２４、５２／１３６／４４２、５２／４３４、５２／４３４／４４２／５３２、５２／４３４／４４２／７２４、５２／４３４／５３２、５２／４４２、５２／４４２／５３２／７２４、５２／４４２／５５３／７２４、５２／４４２／７２４、５２／５３２、５２／５５３、５７／９７／４３４／４４２／７２４、９７／１３４／１３６／４４２／５３２、９７／１３４／１３６／５３２、９７／１３４／４４２、９７／１３６／４３４／４４２、９７／３２９／７２４、９７／４４２、１３４、１３４／１３６／４３４／４４２、１３４／１３６／４３４／４４２／５３２／５５３／７２４、１３４／１３６／４３４／４４２／５５３／７２４、１３４／１３６／４３４／５３２／７２４、１３４／１３６／４４２／５３２、１３４／４３４／４４２／７２４、１３６、１３６／４４２、１３６／４４２／７２４、１３６／５３２／７２４、４３４、４３４／４４２、４４２、４４２／７２４、および５３２／７２４から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１６５２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６４)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、３、４、２２、３２、３４、３８、４７／４８８、５１、５１／４３３、６２、７５／１６９、１０１、１６９、１９５／２１３、７０８および７１８から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１６５２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６５)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、４４／５２／９７／４４２／７２４、５２／９７／４４２、９７／４４２および４３４／４４２から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１６５２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６６)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、４／２２、４／２２／３４、４／２２／３４／３８、４／２２／３４／３８／１６９／７０８、４／２２／３４／４７／５１／１６９／２１３、４／２２／５１／７０８、４／２２／１０１、４／３４／３８／１０１、４／３４／７０８、４／６２／４３３／７０８、４／１６９、４／１６９／４３３、４／１６９／７０８、４／４３３、４／７０８、２２／３４、２２／３４／３８、２２／３４／１０１／１６９、２２／３４／１０１／１６９／１９５、２２／３４／１６９／７０８、２２／４７／１６９／４３３、２２／７５、３４／３８／６２、３４／６２／１６９／４３３、３４／１０１、６２／７０８、７５／１６９、１６９／７０８、および１９５／７０８から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１８２２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６７)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、４、２２、３４、１２１、１６９、３４１、４１１、４３３、４４１、５１８、５２６、５２７、５２８、５４４、５５７、５５８、５６５、５８５、６０２、６０４、６２３、７０８、７３１および７７０から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１８２２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６８)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、４、４／２２／３４／３８、４／１６９、４／１６９／４３３、４／４３３、６２／７０８および１６９／７０８から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１８２２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目６９)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、３４／６２／４１１／５２６／５５７、３４／６２／４１１／５５７／６０２／６０４、３４／６２／４４１／５５７／６２３、３４／６２／５１８／６２３、３４／６２／６２３／７３１、３４／１２１／４４１／５４４／６０４／６２３、３４／１２１／５２６／６０４／７３１、３４／４１１／４４１、３４／４１１／４４１／５１８／５２６／５５７／５６５／７３１、３４／４１１／４４１／５１８／５４４／５５７／５６５／７０８／７３１、３４／４１１／４４１／５１８／５８５／６０４／７７０、３４／４４１／５１８／５２６／５８５／６０４／７３１、３４／４４１／５２６／５６５／７０８／７７０、３４／４４１／５４４／５５７／５８５／６０２／６２３、３４／４４１／５８５／６２３／７０８／７３１、３４／５２６／５８５／６２３、６２／１２１／３２９／５１８／５５７／５６５／６２３／７０８、６２／１２１／４１１／４４１／５１８／５４４／５５７／５８５／６０４／６２３、６２／１２１／４４１／５１８／５２６／６２３／７７０、６２／１２１／４４１／５６５／５８５、６２／１２１／５１８／５５７／５８５／６０４／７０８／７７０、６２／４１１／５２６／５６５／６０４／６２３、６２／４１１／５８５／７３１、６２／４４１／５１８／５５７／６０４／６２３／７０８／７３１、６２／４４１／６２３／７０８／７７０、６２／４４１／７７０、１２１／４４１／５１８／５２６／６０２／６０４、１２１／４４１／５１８／５２６／６２３／７０８、１２１／４４１／５２６／５５７／５６５／７０８、１２１／６０４／７０８／７３１／７７０、４１１／４４１／５１８／５５７／６２３、４１１／４４１／５１８／７０８、４１１／４４１／６０４／６２３／７０８／７３１、４１１／５１８／５２６／６０４／６２３／７３１、４１１／５６５／６０４／６２３、４１１／５８５／６２３、４４１／５１８／５２６／５５７／５６５／６０２／６０４／６２３／７０８、４４１／５１８／５２６／５５７／５８５／６０４／６２３／７０８、４４１／５１８／５２６／６０４／６２３、４４１／５１８／５５７／５６５／５８５、４４１／５１８／５６５／６２３／７３１／７７０、４４１／５１８／５８５、４４１／５８５、４４１／５８５／６０２／６０４／６２３／７０８／７３１、４４１／７０８／７３１、５５７／６０２／６０４、５５７／６０４、５８５／６２３／７０８、および６２３から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２０９２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目７０)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、６３、６５、２６９、３２３、４０６、４１６、４６９、５１１および６４０から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２０９２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目７１)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、３４／６２／４４１／５５７／６２３、３４／４４１／５８５／６２３／７０８／７３１、６２／４４１／６２３／７０８／７７０、４１１／４４１／５１８／５５７／６２３、４１１／４４１／６０４／６２３／７０８／７３１、４４１／５１８／５２６／５５７／５８５／６０４／６２３／７０８、４４１／５１８／５５７／５６５／５８５、および４４１／５８５／６０２／６０４／６２３／７０８／７３１から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２０９２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目７２)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、３４、３４／６２、３４／６２／６５／６４０、３４／６２／３２３、３４／６３／６５／３２３／５２８／６４０、３４／６３／６５／４０６／５２８／６４０／７１３、３４／６３／３２３／５２６／５２８／６４０、３４／６３／４０６／５２８／６４０／７３１、３４／６５、３４／６５／５２８／６４０、３４／３２３／４０６／６４０、３４／３２３／６４０、３４／６４０、３８／６４０、６２／６３、６２／６３／６５／５２８／６４０、６２／６３／６９／３２３／４０６／６４０、６２／６３／５２６／６４０／７３１、６２／３２３／６４０、６３／６５／３２３／４０６／５２６／５２８／６４０／７３１、６３／６５／４０６／７３１、６３／６５／５２８／６４０／７３１、６３／６５／６４０、６３／３２３／４０６／６４０、６３／４０６、６３／４０６／６４０、６３／５２６／５２８／６４０／７３１、６３／７３１、３２３／４０６／６４０、３２３／４０６／６４０／７３１、３２３／５２６／５２８／６４０、３２３／５２６／６４０、３２３／６４０／７３１、４０６／６４０、５２６／５２８／６４０／７３１、および７３１から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２１８２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目７３)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、２８、３０、３０／１５８、３７、５９、１０２、１０８、１５８、１６４、１８３、１９１、２０６、２３５、３０７、３１１、４０９、４１９、５３３、５４３、５４６、５５９、６８３、７１０、７５２および７９３から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２１８２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目７４)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、３４／６２、３４／６５、３４／３２３／６４０、３４／６４０、３８／６４０および６３／６５／４０６／７３１から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２１８２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目７５)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、３４／６５／３２３／４０６／４１１／５６５、３４／３２３／４０６／４１１／５６５、３４／３２３／４０６／５６５／７３１、６２／６５／３２３／４０６／５６５、６２／６５／３２３／４０６／５６５／７３１、６２／６５／３２３／４１１／５６５、６２／６５／４０６／４１１／５６５／７３１、６２／３２３／４０６／４１１、６２／３２３／４０６／４１１／５６５、６２／３２３／４１１／５６５、６３／６５／３２３／４０６／５６５／７３１、６３／６５／４０６／４１１／５６５、６５／３２３／４０６／５６５、３２３／４０６／４１１／５６５、３２３／４１１／５６５、および６３６から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２３２２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目７６)
前記操作されたスクロースシンターゼの前記ポリペプチド配列が、３４／６５／３２３／４０６／４１１／５６５、３４／３２３／４０６／４１１／５６５、６２／６５／３２３／４０６／５６５、６２／６５／４０６／４１１／５６５／６３６／７３１、６２／６５／４０６／４１１／５６５／７３１、６２／３２３／４０６／４１１、６２／３２３／４０６／４１１／５６５、および６２／３２３／４１１／５６５から選択される１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２３２２を基準にして番号が付けられている、項目５９に記載の操作されたスクロースシンターゼ。
(項目７７)
項目５９から７６のいずれかで提供される少なくとも１つの操作されたスクロースシンターゼポリペプチドをコードする操作されたポリヌクレオチド。
(項目７８)
項目７７に記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチドを含むベクター。
(項目７９)
少なくとも１つの制御配列をさらに含む、項目７８に記載のベクター。
(項目８０)
項目７８に記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
(項目８１)
項目７８または項目７９に記載のベクターを含む宿主細胞。
(項目８２)
真核生物および原核生物から選択される、項目８０および／または８１に記載の宿主細胞。
(項目８３)
項目５９から７６のいずれかで提供される少なくとも１つの操作されたスクロースシンターゼ改変体を産生するための方法であって、項目８０から８２のいずれかに記載の宿主細胞を、前記操作されたスクロースシンターゼ改変体が前記宿主細胞により産生されるような条件下で培養するステップを含む、方法。
(項目８４)
前記操作されたスクロースシンターゼ改変体を回収するステップをさらに含む、項目８３に記載の方法。
(項目８５)
項目６０から７５のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたスクロースシンターゼ改変体を含む組成物。
(項目８６)
基質のグリコシル化のための方法であって、少なくとも１つの基質、項目１から４５のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、および前記基質と前記グリコシルトランスフェラーゼとを、前記基質がグリコシル化されて少なくとも１つのグリコシル化産物を産生するような条件下で接触させるステップを含む、方法。
(項目８７)
前記基質が、少なくとも１つのステビオールグリコシドを含む、項目８６に記載の方法。
(項目８８)
前記グリコシル化産物が、少なくとも１つのモノグリコシル化および／またはポリグリコシル化産物を含む、項目８６に記載の方法。
(項目８９)
レバウジオシドＭを産生するための方法であって、レバウジオシドＤおよび／またはレバウジオシドＩ基質、ＮＤＰ－グルコース、ならびに項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドＤおよびレバウジオシドＩ基質、ＮＤＰ－グルコース、ならびに前記グリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＭが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目９０)
レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ－グルコース、および項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ－グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目９１)
レバウジオシドＤを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ－グルコース、および項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ－グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＤが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目９２)
前記ＮＤＰ－グルコースが、ＡＤＰ－グルコース、ＣＤＰ－グルコース、ＴＤＰ－グルコース、ＧＤＰ－グルコース、および／またはＩＤＴ－グルコースから選択される、項目８６から９１のいずれかに記載の方法。
(項目９３)
前記ＮＤＰ－グルコースが、ＵＤＰ－グルコースではない、項目８６から９２のいずれかに記載の方法。
(項目９４)
前記グリコシルトランスフェラーゼが、項目１から２５および／または項目２６から４５のいずれかに記載の少なくとも１つのグリコシルトランスフェラーゼを含む、項目８６から９３のいずれかに記載の方法。
(項目９５)
レバウジオシドＭを産生するための方法であって、レバウジオシドＤおよび／またはレバウジオシドＩ基質、ＡＤＰ－グルコース、ならびに項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドＤおよび／またはレバウジオシドＩ基質、ＡＤＰ－グルコース、ならびにグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＭが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目９６)
レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ＡＤＰ－グルコース、および項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたＡＤＰ－グリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＡＤＰ－グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目９７)
レバウジオシドＤを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ＡＤＰ－グルコース、および項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＡＤＰ－グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＤが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目９８)
レバウジオシドＭを産生するための方法であって、レバウジオシドＤおよび／またはレバウジオシドＩ基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびに項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドＤ基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＭが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目９９)
レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、および項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目１００)
レバウジオシドＤを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、および項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＤが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目１０１)
レバウジオシドＭを産生するための方法であって、少なくとも１つのステビオシドを含むおよび／またはステビオシドとｒｅｂＡの混合物を含むステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、ならびに項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＭが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目１０２)
レバウジオシドＭを産生する方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、少なくとも１つのスクロースシンターゼ、および項目１から４５に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＡが先ず産生され、次いでレバウジオシドＤおよび／またはレバウジオシドＩが産生され、最後にレバウジオシドＭが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
(項目１０３)
前記スクロースシンターゼが、項目５９から７６のいずれかで提供される操作されたスクロースシンターゼである、項目９８から１０２のいずれかに記載の方法。
(項目１０４)
ワンポット反応として行われる、項目８６から１０３のいずれかに記載の方法。
(項目１０５)
逐次的に行われる、項目８６から１０４のいずれかに記載の方法。
(項目１０６)
前記方法の前記ステップを反復するステップをさらに含む、項目８６から１０４のいずれかに記載の方法。
(項目１０７)
前記スクロースが、反復されるステップを通して再利用される、項目１０６に記載の方法。
(項目１０８)
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼおよび／または他の反応成分が、再利用される、項目１０６および／または１０１に記載の方法。
(項目１０９)
前記ステビオシド基質が、Ｓｔｅｖｉａｒｅｂａｕｄｉａｎａから抽出される、項目８６から１０８のいずれかに記載の方法。
(項目１１０)
前記ステビオシド基質が、合成により産生される、項目８６から１０８のいずれかに記載の方法。
(項目１１１)
前記グリコシルトランスフェラーゼおよび／または前記スクロースシンターゼが、固定化されている、項目８６から１１０のいずれかに記載の方法。
(項目１１２)
フルクトースを含む反応産物を産生する、項目８６から１１０のいずれかに記載の方法。
(項目１１３)
前記フルクトースが、前記反応産物から除去される、項目１１２に記載の方法。
(項目１１４)
洗浄ステップをさらに含む、項目８６から１１３のいずれかに記載の方法。
(項目１１５)
少なくとも１つのカラムクロマトグラフィーステップをさらに含む、項目８６から１１４のいずれかに記載の方法。
(項目１１６)
前記少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目２６から４５のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ－１，２－グリコシルトランスフェラーゼである、項目８６から１１５のいずれかに記載の方法。
(項目１１７)
前記少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目１から２５のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ－１，３－グリコシルトランスフェラーゼである、項目８６から１１６のいずれかに記載の方法。
(項目１１８)
前記少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目２６から４５のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ－１，２－グリコシルトランスフェラーゼであり、少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、項目１から２５のいずれかに記載のグリコシルトランスフェラーゼから選択されるベータ－１，３－グリコシルトランスフェラーゼであることをさらに含む、項目８６から１１７のいずれかに記載の方法。
(項目１１９)
項目５９から７６のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたスクロースシンターゼをさらに含む、項目８６から１１８に記載の方法。
(項目１２０)
項目８６から１１９のいずれかに記載の方法に従って産生される、少なくとも１つのレバウジオシド。
(項目１２１)
項目１２０に記載のレバウジオシドを含む、組成物。
(項目１２２)
項目８６から８９、９２から９５、９８、および／または１０１から１２１のいずれかに記載の方法に従って産生される、レバウジオシドＭ。
(項目１２３)
項目１２２に記載のレバウジオシドＭを含む、組成物。
(項目１２４)
項目８６から９４、９６、９９、および／または１０１から１２１のいずれかに記載の方法に従って産生される、レバウジオシドＡ。
(項目１２５)
項目１２４に記載のレバウジオシドＡを含む、組成物。
(項目１２６)
項目８６から９４、９６、９９、および／または１０１から１２１のいずれかに記載の方法に従って産生される、レバウジオシドＩ。
(項目１２７)
項目１２６に記載のレバウジオシドＩを含む、組成物。
(項目１２８)
項目８６から９４、９７、および／または１００から１２１のいずれかに記載の方法に従って産生される、レバウジオシドＤ。
(項目１２９)
項目１２８に記載のレバウジオシドＤを含む、組成物。
(項目１３０)
項目１２２、１２４、１２６および／または１２８で提供される少なくとも２つのレバウジオシドを含む、組成物。
(項目１３１)
項目１２３、１２５、１２７および／または１２９で提供される少なくとも２つの組成物の混合物を含む、組成物。

Claims

配列番号２０、３６、１７４、４０６、４０８、４４０、５２０、６２６、または６７８に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれより高い配列同一性を有するポリペプチド配列を含む、操作されたグリコシルトランスフェラーゼであって、前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が：
（ａ）１４６、２２１、１６、１９６、２３２、および／または４１０の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異を含むか、または１５３Ｃ、２０４Ｍ、１７０Ｔ、１７５Ｄ、２０７Ｖ、２８５Ｓ、２８９Ａ、３３８Ａ、および／または４０２Ｉの１つまたは複数の変異を含み、前記位置が、配列番号２０、３６、１７４、４０８、４４０、または５２０を基準にして番号が付けられている；
（ｂ）４１／７２／２３３／３３８、４１／７２／３３８、４１／１４４／２３３、４１／２３３、４１／２３３／３３８、６１、６１／８７／９１／１０７、６１／８７／９１／２５９、６１／９１／４３１、６１／１０７、６１／２５９／４２８、６１／４０７／４２８、６１／４１１、７２、７２／７６、７２／７６／１６３／１９７、７２／７６／１９５／２３３、７２／７６／１９７／２０４、７２／７６／２０７／２３３、７２／７６／２０７／３３８、７２／８１、７２／８１／１９５／２３３、７２／１３９／１９５／２０４、７２／１４４／３３８、７２／２００／２０４／２０７、７２／２０７、７６／１４４／１９７／２００、７６／１９５／１９７／２０４／２０７／２３３、７６／１９７／２０７／２３３、７６／２３３、８１／１３９／１４４／１９５／２００／２０４／２０７／２３３、８１／１４４／２３３、８１／１９７／２００／２０７／２３３／３３８、８１／２３３／３３８、８１／３３８、１０７、１０７／２５９、１３９／１４４／２３３、１４４／２３３、１４４／２３３／３３８、１５６／４０７、１６３／２３３／３３８、２００／２０４／２０７／２３３、２３３／３３８、２５９、７１、８０、８１、８１／２７０、８３、８５、９７、１２４、２６３、２８６、３３４、４０２、４２０、および４５６の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号２０を基準にして番号が付けられている；
（ｃ）７３／８１／１４４／２０７／２５９、７３／８１／１４４／２０７／２８５／４５１、７３／８１／２５９／２８５／４２６／４５１、７３／８１／２５９／４５１、７３／１１１／２８５／４５１、７３／１４４／２０７／２５２／４２６／４５１、７３／１４４／２０７／２５９／２８５／４２６／４５１、７３／１４４／２０７／２５９／２８５／４５１、７３／１４４／２０７／２５９／４２６／４５１、７３／１４４／２５９／２８５、７３／２５９／４２６／４５１、７３／２５９／４５１、８１／１１１／１４４／２０７／２８５／４５１、８１／１１１／２５９／４５１、８１／１４４／２０７／２５２／２８５／４２６、８１／１４４／２０７／２５９／４５１、８１／１４４／２５２／２５９／２８５／４５１、８１／１４４／２５９、８１／１４４／２５９／２８５、８１／１４４／２５９／４５１、８１／２０７／２５２／２５９／４５１、８１／２０７／２８５／４２６／４５１、８１／２８５、８１／２８５／４５１、１１１／１４４／２０７／２５２／２８５／４２６／４５１、１１１／１４４／２５２／２５９／２８５／４５１、１１１／１４４／２５９／２８５／４２６／４５１、１１１／２０７／２８５、１４４／２０７／２５２／２５９、１４４／２０７／２５９、１４４／２０７／２５９／２８５／４５１、１４４／２０７／２５９／４２６／４５１、１４４／２０７／２８５／４２６、１４４／２０７／４５１、１４４／２５２／２５９／２８５、１４４／２５２／２５９／２８５／４５１、１４４／２５２／２５９／４２６、１４４／２５２／２５９／４２６／４５１、１４４／２５９／２８５、１４４／２８５、１４４／２８５／４５１、１４４／４５１、２０７、２０７／２５２／２５９／４５１、２０７／２５２／４５１、２０７／２５９、２０７／２５９／４２６／４５１、２０７／２８５／４２６／４５１、２０７／４５１、２５２／２５９、２５９、２５９／２８５／４５１、２８５、および２８５／４５１の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号３６を基準にして番号が付けられている；
（ｄ）８０／８１、８０／８１／８５、８０／８１／８５／２３８、８０／８１／８５／２５１／２５９、８０／８１／８５／２５２／２５６／２５９、８０／８１／８５／２５９、８０／８１／２５１／２５２／２５９、８０／８５、８０／８５／２３８、８０／８５／２３８／２５１／２５９、８０／８５／２５１、８０／８５／２５１／２５２、８０／８５／２５１／２５２／２５６／２５９、８０／８５／２５１／２５２／２５９、８０／８５／２５１／２５９、８０／８５／２５９、８０／２５９、８１／８５、８１／８５／２５１／２５２、８１／８５／２５９、８５、８５／２３８、８５／２５１、８５／２５１／２５２／２５６、８５／２５１／２５９、８５／２５６／２５９、１７５／４０２、２５１／２５２／２５９、２５９、２７０／４０２、４２０、３、５、７、９９、１５３、２３２／３１７、２５２、２７３、２９９、３２６、３９３、４０４、４０９、４２２、４４３、４５１、および４５５の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号１７４を基準にして番号が付けられている；
（ｅ）８１／８５、８１／８５／１７５／２５９／４０２、８１／８５／２５１、８１／８５／２５１／２５９、８１／８５／２５９、８１／８５／２５９／４０２、８５、８５／１７５、８５／１７５／２５１、８５／１７５／２５１／２５９／４０２、８５／１７５／２５９、８５／１７５／２５９／４０２、８５／１７５／４０２、８５／２５９、８５／２５９／４０２、および８５／４０２の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４０６を基準にして番号が付けられている；
（ｆ）１５３、１５３／３２６、１５３／３２６／４４３、１５３／３２６／４４３／４５５、２３２、２３２／２７３／２９９、２３２／３９３／４５１、２９９／４５１、３２６、４０４、４５１、２５、１１６、１４６、１７０、１７３、２２７、２９６、３００、３１５、３２７、３３０、３６１、４０８、４１２、４３８、４４８、および４４９の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４０８を基準にして番号が付けられている；
（ｇ）１４６／１７０／１９６、１４６／１７０／１９６／２３２、１４６／１７０／１９６／２３２／４２３、１４６／１７０／１９６／２３２／４５１／４５５、１４６／１７０／１９６／４０８／４５１、１４６／１７０／２３２、１４６／１７０／２３２／４２３、１４６／１７０／２３２／４２３／４４８／４５１／４５５、１４６／１７０／２５９、１４６／１９６、１４６／１９６／２３２、１４６／１９６／２３２／２５９／４４８／４５１、１４６／１９６／４５５、１４６／２３２／２５９／４５５、１４６／２３２／３１５、１４６／２３２／３１５／４２３／４５１／４５５、１４６／２３２／３２６、１４６／２３２／４４８、１４６／２３２／４５１、１４６／４１３／４５１／４５５、９、１２、１０７、１３１、１５６、１６１、１６９、１９９、２０４、２０９、２３３、２６２、２８９、３３７、および４１７の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号４４０を基準にして番号が付けられている；
（ｈ）９／１２／１０７／１６１／１９９／２０９／３３７、９／１２／１６１／１６９／１９９／２０９／３３７、９／１２／１９９／２０４／２０９／３３７／４５５、９／１２／１９９／２０９／３３７／４５１／４５５、９／１０７／１３１／２０４／２５９／４１７／４５１、９／１０７／１５６／１６１／１９９／２０４／４１７／４５５、９／１０７／１６１／２０９／２５９／２８９／４５１／４５５、９／１３１／１５６／２０９／２８９／３３７、９／１３１／２０４／３３７／４５１、９／１５６／１６９／２０４／３３７、９／１６９／２０４／２８９／３３７／４５１／４５５、９／２０４、９／２０４／２５９／２８９、９／３３７、１２／１４／１０７／２０４／２８９／４５５、１２／１０７／１３１／２０４／２８９／３３７／４１７／４５１／４５５、１２／１０７／１５６／２０９／２８９／４５５、１０７／１６１／１６９／１９９／２０４／２５９／４５１、１０７／１９９／２０４／２８９、１０７／１９９／２０９／２５９／４５１／４５５、１０７／２０４、１５６／１６９／１９９／２０４／２０９／２５９／２８９、１６１／２０４／４１７、２０４／４５１／４５５、２８９、４５１／４５５、１６、５３、５４、７８、８０、９５、１１１、２２１、２５７、３３６、３４９、３９１、４１０、４１３、４２６、および４３０の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号５２０を基準にして番号が付けられている；あるいは
（ｉ）１６、１６／５９／８０／４１３、１６／８０、１６／８０／１１１、１６／８０／１１１／２５７、１６／８０／２２１／２５７／３３６／４１０、１６／８０／２２１／３３６／４１０、１６／８０／２５７、１６／１１１／２２１、１６／１１１／２２１／２５７／３９１、１６／２２１、１６／２２１／２５７、１６／２２１／２５７／３３６／３９１、１６／２２１／４１０、１６／２５７、１６／２５７／３３６／４１３／４２０、８０／１１１／２２１／２５７／４１０、１１１／２２１／２５７／３３６／３９１、１１１／２２１／２５７／３９１、２２１、２２１／２５７、５、７、１４、６５、９１、９９、１０２、１１８、１３８、１９４、２５４、２８６、４１６、４１８、および４２０の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号６２６を基準にして番号が付けられている；
（ｊ）５、５／１４／９９、５／１４／４１６、５／９１、５／９１／１０２／１１８、５／９１／１０２／２５４／４１８、５／９１／１０６／２５４／２８６、５／９１／１１８／１９４／２５４／２８６、５／９１／１１８／１９４／２５４／４１８、５／９１／１１８／１９４／４１８、５／９１／１１８／２５４／２８６／４１８、５／９１／１１８／２８６、５／９１／１９４／２５４、５／９１／１９４／４１８、５／９１／２５４、５／９１／２５４／２８６、５／１０２／４１８、５／１１８／１９４／２８６／４１８、５／１１８／２５４、５／１１８／２８６、５／１９４、５／２５４／２８６、５／４１８、７／１４、７／１４／６５／９９、７／１４／９９／４１６、１４、１４／６５／９９／４１６、１４／９９、１４／９９／２５４、１４／９９／２５４／４１６、１４／９９／２５４／４１６／４５５、１４／９９／４１６、１４／１６７、１４／２５４、１４／４５５、９１、９１／１０２／１９４、９１／１１８、９１／１１８／１９４、９１／１１８／１９４／２８６、９１／１１８／１９４／４１８、９１／１１８／２８６、９１／１９４／２５４／２８６、９１／２８６、および１１８／２８６／４１８の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異または変異のセットを含み、前記位置が、配列番号６７８を基準にして番号が付けられている、
操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１４６、１６、１９６、２２１、２３２、および／または４１０の１つまたは複数の位置に少なくとも１つの変異を含み、前記変異が１４６Ｇ、１６Ｍ、１９６Ｉ、２２１Ａ、２３２Ｉ、および／または４１０Ｖであり、前記位置が、配列番号２０、３６、１７４、４０８、４４０、または５２０を基準にして番号が付けられている、請求項１に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼの前記ポリペプチド配列が、１５３Ｃ、２０４Ｍ、１７０Ｔ、１７５Ｄ、２０７Ｖ、２８５Ｓ、２８９Ａ、３３８Ａ、および／または４０２Ｉの１つまたは複数の変異を含み、前記位置が、配列番号２０、３６、１７４、４０８、４４０、または５２０を基準にして番号が付けられている、請求項１に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
ベータ－１，３－グリコシルトランスフェラーゼである、請求項１から３のいずれか一項に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
ＡＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＡＧＴ）、ＣＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＣＧＴ）、ＧＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＧＧＴ）、ＴＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＴＧＴ）およびＩＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼ（ＩＧＴ）から選択される、ＮＤＰ－グリコシルトランスフェラーゼである、請求項１から４のいずれか一項に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
ＡＤＰ－グルコース依存性グリコシルトランスフェラーゼである、請求項１から４のいずれか一項に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、配列番号２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、１６８、１７０、１７２、１７４、１７６、１７８、１８０、１８２、１８４、１８６、１８８、１９０、１９２、１９４、１９６、１９８、２００、２０２、２０４、２０６、２０８、２１０、２１２、２１４、２１６、２１８、２２０、２２２、２２４、２２６、２２８、２３０、２３２、２３４、２３６、２３８、２４０、２４２、２４４、２４６、２４８、２５０、２５２、２５４、２５６、２５８、２６０、２６２、２６４、２６６、２６８、２７０、２７２、２７４、２７６、２７８、２８６、２８８、２９０、２９２、２９４、２９６、２９８、３００、３０２、３０４、３０６、３０８、３１０、３１２、３１４、３１６、３１８、３２０、３２２、３２４、３２６、３２８、３３０、３３２、３３４、３３６、３３８、３４０、３４２、３４４、３４６、３４８、３５０、３５２、３５４、３５６、３５８、３６０、３６２、３６４、３６６、３６８、３７０、３７２、３７４、３７６、３７８、３８０、３８２、３８４、３８６、３８８、３９０、３９２、３９４、３９６、３９８、４００、４０２、４０４、４０６、４０８、４１０、４１２、４１４、４１６、４１８、４２０、４２２、４２４、４２６、４２８、４３０、４３２、４３４、４３６、４３８、４４０、４４２、４４４、４４６、４４８、４５０、４５２、４５４、４５６、４５８、４６０、４６２、４６４、４６６、４６８、４７０、４７２、４７４、４７６、４７８、４８０、４８２、４８４、４８６、４８８、４９０、４９２、４９４、４９６、４９８、５００、５０２、５０４、５０６、５０８、５１０、５１２、５１４、５１６、５１８、５２０、５２２、５２４、５２６、５２８、５３０、５３２、５３４、５３６、５３８、５４０、５４２、５４４、５４６、５４８、５５０、５５２、５５４、５５６、５５８、５６０、５６２、５６４、５６６、５６８、５７０、５７２、５７４、５７６、５７８、５８０、５８２、５８４、５８６、５８８、５９０、５９２、５９４、５９６、５９８、６００、６０２、６０４、６０６、６０８、６１０、６１２、６１４、６１６、６１８、６２０、６２２、６２４、６２６、６２８、６３０、６３２、６３４、６３６、６３８、６４０、６４２、６４４、６４６、６４８、６５０、６５２、６５４、６５６、６５８、６６０、６６２、６６４、６６６、６６８、６７０、６７２、６７４、６７６、６７８、６８０、６８２、６８４、６８６、６８８、６９０、６９２、６９４、６９６、６９８、７００、７０２、７０４、７０６、７０８、７１０、７１２、７１４、７１６、７１８、７２０、７２２、７２４、７２６、７２８、７３０、７３２、７３４、７３６、７３８、７４０、７４２、７４４、７４６、７４８、７５０、７５２、７５４、７５６、７５８、７６０、７６２、７６４、７６６、７６８、７７０、７７２、７７４、７７６、７７８、７８０、７８２、７８４、７８６、７８８、７９０、７９２、７９４、７９６、７９８、８００、８０２、８０４、８０６、８０８、８１０、８１２、８１４、８１６、８１８、８２０、８２２、８２４、８２６、８２８、８３０、８３２、８３４、８３６、８３８、８４０、８４２、８４４、８４６、８４８、８５０、８５２、８５４、または８５６を含むポリペプチド配列を含む、請求項１に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、配列番号２０の配列を有する操作されたグリコシルトランスフェラーゼと比較して、レバウジオシドＡまたはレバウジオシドＤからのレバウジオシドＭの増加した産生により特徴づけられる、請求項１から７のいずれか一項に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、配列番号２０の配列を有する操作されたグリコシルトランスフェラーゼと比較して、ステビオールからのレバウジオシドＡの増加した産生により特徴づけられる、請求項１から８のいずれか一項に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが、配列番号３６の配列を有する操作されたグリコシルトランスフェラーゼと比較して増大した熱安定性により特徴づけられる、請求項１から９のいずれか一項に記載の操作されたグリコシルトランスフェラーゼ。
請求項１から１０のいずれか一項で提供される少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼポリペプチドをコードする操作されたポリヌクレオチド。
請求項１１に記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチドを含むベクター。
少なくとも１つの制御配列をさらに含む、請求項１２に記載のベクター。
請求項１１に記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチド、あるいは請求項１２または１３に記載のベクターを含む宿主細胞。
真核生物および原核生物から選択される、請求項１４に記載の宿主細胞。
請求項１から１０の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを産生するための方法であって、請求項１４または１５に記載の宿主細胞を、前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼが前記宿主細胞により産生されるような条件下で培養するステップを含む、方法。
前記操作されたグリコシルトランスフェラーゼを回収するステップをさらに含む、請求項１６に記載の方法。
請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを含む組成物。
（ａ）基質のグリコシル化のための方法であって、少なくとも１つの基質、請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、および前記基質と前記グリコシルトランスフェラーゼとを、前記基質がグリコシル化されて少なくとも１つのグリコシル化産物を産生するような条件下で接触させるステップを含む、方法；
（ｂ）レバウジオシドＭを産生するための方法であって、レバウジオシドＤ基質、ＮＤＰ－グルコース、および請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドＤ基質、ＮＤＰ－グルコース、および前記グリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＭが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法；
（ｃ）レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ－グルコース、および請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ－グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法
（ｄ）レバウジオシドＤを産生するための方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ－グルコース、請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼ、およびベータ－１，２－グリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ－グルコース、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＤが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
（ａ）前記ＮＤＰ－グルコースが、ＡＤＰ－グルコース、ＣＤＰ－グルコース、ＴＤＰ－グルコース、ＧＤＰ－グルコース、および／またはＩＤＴ－グルコースから選択される；かつ／または
（ｂ）前記ＮＤＰ－グルコースが、ＵＤＰ－グルコースではない、請求項１９に記載の方法。
（ａ）について、前記基質が少なくとも１つのステビオールグリコシドを含み；ならびに／あるいは前記グリコシル化産物が少なくとも１つのモノグリコシル化および／またはポリグリコシル化産物を含む、請求項１９に記載の方法。
（ａ）レバウジオシドＭを産生する方法であって、レバウジオシドＤ基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、および請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記レバウジオシドＤ基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＭが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法；
（ｂ）レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩを産生する方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、および請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＡおよび／またはレバウジオシドＩが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法；
（ｃ）レバウジオシドＤを産生する方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼ、およびベータ－１，２－グリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＤが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法
（ｄ）レバウジオシドＭを産生する方法であって、少なくとも１つのステビオシドを含むおよび／またはステビオシドとｒｅｂＡの混合物を含むステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼ、ならびにベータ－１，２－グリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、スクロースシンターゼ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＭが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法；あるいは
（ｅ）レバウジオシドＭを産生する方法であって、ステビオシド基質、ＮＤＰ、スクロース、少なくとも１つのスクロースシンターゼ、請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの操作されたグリコシルトランスフェラーゼ、およびベータ－１，２－グリコシルトランスフェラーゼを提供するステップ、前記ステビオシド基質、ＮＤＰ、およびグリコシルトランスフェラーゼを、レバウジオシドＡが先ず産生され、次いでレバウジオシドＤおよび／またはレバウジオシドＩが産生され、最後にレバウジオシドＭが産生されるような条件下で組み合わせるステップを含む、方法。
前記スクロースシンターゼが、操作されたスクロースシンターゼである、請求項２２に記載の方法。
（ｉ）前記方法が、ワンポット反応として行われる；
（ｉｉ）前記方法が、逐次的に行われる；かつ／または
（ｉｉｉ）前記方法の前記ステップを反復するステップをさらに含む、請求項１９または２２に記載の方法。
前記ステビオシド基質が、Ｓｔｅｖｉａｒｅｂａｕｄｉａｎａから抽出されるか、または合成により産生される、請求項１９から２３のいずれか一項に記載の方法。
前記グリコシルトランスフェラーゼが、固定化されている、請求項１９から２３のいずれか一項に記載の方法。
フルクトースを含む反応産物を産生する、請求項２２または２３に記載の方法。
前記フルクトースが、前記反応産物から除去される、請求項２７に記載の方法。