JP2010533659A

JP2010533659A - ２’−フルオロ−４’−置換−ヌクレオシド類似体、その製造方法及び使用

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Publication number: JP2010533659A
Application number: JP2010516351A
Authority: JP
Inventors: 常俊▲標▼
Original assignee: 鄭州大学; 河南省分析測試研究中心
Priority date: 2007-07-16
Filing date: 2008-06-27
Publication date: 2010-10-28
Also published as: CN100532388C; KR20100102089A; US20100234584A1; EP2177527B1; CN101177442A; US8835615B2; WO2009009951A1; EP2177527A4; EP2177527A1

Abstract

本発明はヌクレオシド類似体、その製造方法及び使用を開示し、具体的には、２’−フルオロ−４’−置換ヌクレオシド類似体またはそのプロドラッグまたはその5’-リン酸エステル（5’-リン酸エステルのプロドラッグを含む）、その製造方法及び使用に関する。該化合物は下記の構造式を有する。
【化１】

それは活性化合物（Ｉ）と有機酸または無機酸とを反応させ、塩を形成することによって、塩の形式で存在することができる。それをウイルス感染治療用薬剤の合成、特にＨＢＶ、ＨＣＶまたはＨＩＶ感染治療用薬剤の合成に使用する。

Description

本発明はヌクレオシド類似体、その製造方法及び使用に関し、特に２’−フルオロ−４’−置換−ヌクレオシド類似体、その製造方法及び使用に関する。

エイズの最初の例が１９８１年に米国で発見されたが、１９８３年、科学者がすでにエイズウイルス（ＨＩＶ）を分離・鑑定し、ＨＩＶがレトロウイルス科のレンチウイルス亜科に属し、９７４９個のヌクレオチドのみからなることを発見した。現在すでに、ＨＩＶ複製サイクルプロセスが基本的にわかり、その繁殖プロセスは略、吸着、侵入及び脱殻、逆転写、組み込み、ウイルスＲＮＡ及びタンパク質の合成、組み立て、放出及び成熟のようなステップからなり、そのうちのいずれのステップが共にＨＩＶ薬をスクリーニングするターゲットになることができ、特にタンパク質の合成及びウイルスゲノムの核酸複製は最も重要なステップである。

現在、抗ＨＩＶ薬のスクリーニングの焦点は、逆転写酵素（ＲＴ）阻害剤、タンパク質合成酵素阻害剤及び逆転写酵素開始因子阻害剤などを含む特異性酵素の阻害剤を探すことに集中している。ＨＩＶの逆転写酵素は多機能酵素であり、ＲＮＡを依頼するＤＮＡポリメラーゼ、ＤＮＡを依頼するＤＮＡポリメラーゼ及びＲｈａｓｅＨ活性を同時に備える。ＨＩＶはまずウイルスゲノムのＲＮＡをテンプレートとし、宿主細胞の転移ＲＮＡをプライマーとして（−）鎖ＤＮＡの合成を行い、その後同様な手段で（＋）鎖ＤＮＡを合成する。逆転写の終了後、ＨＩＶに携われたすべての遺伝情報は一本鎖ＲＮＡから二本鎖ｍＤＮＡに転化される。逆転写酵素はｍＤＮＡの伸長を阻止し、ＨＩＶの逆転写プロセスを妨害することができるため、エイズの化学治療の薬物になる。それらの作用メカニズムによって、阻害剤が２種類に分けられる。１）ＨＩＶのＤＮＡ逆転写のプロセスに作用し、ウイルスＤＮＡに挿入することによって、それを欠陥ＤＮＡになさせ、ＨＩＶの宿主細胞のＤＮＡが組込み後複製できなくなり、抗ＨＩＶの作用を達成させるヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤、従来の薬物としては、アジドチミジン（ＡＺＴ）、ジデオキシイノシン（ｄｄＩ）、ジデオキシシチジン（ｄｄＣ）、サタブジン（ｄ４Ｔ）、ラミブジン（３ＴＣ）、アバカビル（Ａｂａｃａｖｉｒ）が挙げられる。２）ＨＩＶのＤＮＡがＲＴに直接連接することを阻止し、ＤＮＡにコードすることを失敗させる非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤、従来の薬物としては、ネビラピン（Ｎｅｖｉｒａｐｉｎｅ）、デラビルジン（Ｄｅｌａｖｉｒｄｉｎｅ）、エファビレンツ（Ｅｆａｖｉｒｅｎｚ）が挙げられる。

１９８７年に最初に登場した抗ＨＩＶ薬アジドチミジンはヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤である。該薬物の毒性は非常に大きく、且つ一人の患者も治癒しなかったが、それによって症状を軽減し、患者の命を延長させることができる。複数のヌクレオシド類似体抗ＨＩＶ薬がその後さらに登場したことから、ヌクレオシド類似体が抗ＨＩＶ活性を有する重要な化合物であることを説明した。現在、これらの薬物にはある程度の不足が存在しており、薬効に限界がある一方、長期に服用した場合、厳重な副作用を有し、且つ耐性が発生される。そのため、新型ヌクレオシド類似体の合成は依然として重要な研究方向である。より有効なヌクレオシド系抗ウイルス薬を発見するため、ヌクレオシドに対する様々な修飾が行われた。フルオロを含有するヌクレオシド類似体がそのうちの１種である。（Ｃｌａｒｋ, Ｊ. ＰＣＴＰａｔｅｎｔＡｐｐｌ., ＷＯ２００５００３１７４；Ｉｓｍａｉｌｉ，Ｈ.Ｍ.Ａ．ＰＣＴＰａｔｅｎｔＡｐｐｌ., ＷＯ０１６０３１５Ａ２２００１）。該種類の化合物がともに異なる程度の抗ウイルス活性を有し、新型の、抗ウイルス活性を有する化合物であることが研究によって表明されたが、従来の文献においては、本発明の２’−フルオロ−４’−置換−Ｄ−とＬ−ヌクレオシド類似体の合成、及びそれによって抗ＨＩＶ、抗ＨＢＶと抗ＨＣＶウイルス薬を製造することに関する報道は今までまだされなかった。

本発明の目的は２’−フルオロ−４’−置換ヌクレオシド類似体を提供することにある。もう１つの目的は該種類の化合物の合成方法を提供することにある。さらにもう１つの目的は該種類の化合物の薬物方面における使用を提供することにある。

本発明の目的を実現するため、以下のような技術手段を採用する。
本発明の２’−フルオロ−４’−置換ヌクレオシド類似体は式（Ｉ）で示される構造を有する。

それは活性化合物（Ｉ）またはそのプロドラッグまたはその５’−リン酸エステルと有機酸または無機酸とを反応させ、塩を形成することによって、塩の形式で存在することができる。
以下の化合物のうちの１つであることができるが、それらに限定されるわけではない。

本発明は薬物製造における２’−フルオロ−４’−置換−ヌクレオシド類似体の使用を含み、それを抗ＨＢＶまたは抗ＨＣＶまたは抗ＨＩＶウイルス薬に使用する。前記抗ＨＢＶウイルス薬は抗Ｂ型肝炎薬で、前記抗ＨＩＶウイルス薬は抗エイズ薬で、前記抗ＨＣＶウイルス薬は抗C型肝炎薬である。本発明は２’−フルオロ−４’−置換ヌクレオシド類似体の製造反応を含み、Ｒ＝Ｎ₃の場合、経路は以下のようである。

化合物iiの合成：化合物i（Ｄ−リボースまたはＬ−リボース）をＨＣｌ／ＭｅＯＨに溶かし、水浴上で保温密封撹拌し、ピリジンを加えて反応を終止させ、減圧乾燥して、淡黄色のシロップ状物質化合物iiを得る。

化合物iiiの合成：化合物iiを乾燥ピリジンに溶かし、氷塩浴で塩化ベンゾイルを徐々に滴下し、室温で撹拌反応させ、反応完了後反応液を氷水に注入し、クロロホルムで抽出を行い。水層が弱アルカリ性を呈するまで、順次に氷水、予め冷却した硫酸、飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、さらに、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、減圧乾燥して、淡黄色のシロップ状物質化合物iiiを得る。

化合物ivの合成：ベンゾイル化合物化合物iiiをクロロホルムに溶かし、赤リンを加え、氷水浴で撹拌しながら臭素を滴下し、約３０分撹拌し、徐々に氷水を滴下し、室温で撹拌し、その後砕氷を加えて撹拌して溶解させ、さらに反応液を氷水に注入し、クロロホルムで抽出を行い。水層が弱アルカリ性を呈するまで飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧乾燥して、濃黄色のシロップを得、シリカゲルカラムで分離することによって、白色のドライシロップ化合物ivを得る。

化合物vの合成：化合物ivを乾燥ピリジンに溶かし、氷水浴で酸無水物を徐々に滴下し、約３０分撹拌し、氷水浴を除き、室温で約７時間撹拌し、４０℃まで昇温した後約１時間維持し、砕氷を加えて撹拌して溶解させた後、反応液を氷水に注入し、クロロホルムで抽出を行い。水層が弱アルカリ性を呈するまで、順次に氷水、予め冷却した硫酸、飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、減圧乾燥して、淡黄色のシロップ状物質化合物vを得る。

化合物viの合成：化合物vを乾燥ジクロロメタンに溶かし、氷水浴で乾燥ＨＣｌガスを徐々に流し入れ、氷水を加えて洗い、有機層が分けられ得、水層が弱アルカリ性を呈するまで飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、減圧乾燥して、淡黄色のシロップを得、再結晶によって白色の固体化合物viを得る。

化合物viiの合成：化合物viを乾燥ジクロロメタン及び乾燥ＤＭＦに溶かし、約−１５℃で撹拌しながらＳＯ₂Ｃｌ₂を徐々に加え、−１５℃で約３０ｍｉｎ撹拌し、自然に室温まで温度を上げて反応させ、０℃でイミダゾールを３回に分けて加え、混合液を室温で撹拌し、反応完了後反応液をＣＨ₂Ｃｌ₂で薄め、氷水で洗い、ＣＨ₂Ｃｌ₂で水層に対して抽出を行い、合わせて１つにした有機層に後無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し、溶媒を減圧抽出して淡黄色のシロップを得、シリカゲルカラムで分離精製することによって、白色の固体化合物viiを得る。

化合物viiiの合成：化合物viiを酢酸エチルに溶かし、撹拌しながらＥｔ₃Ｎ・３ＨＦを加え、温度を約６０℃まで上げて約３時間撹拌を行い、７０℃で約１．５時間撹拌し、冷塩水を加えて反応を終止させ、次いでジクロロメタンで抽出を行い、合わせて１つにした有機層を順次に塩水、水、飽和炭酸水素ナトリウムで洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、溶媒を減圧抽出して濃黄色のシロップを得、精製によって淡黄色のシロップを得、不純物に結晶を生じさせて白色の結晶化合物viiiを得る。

化合物ixの合成：化合物viiiを無水ジクロロメタンに溶かし、ＨＢｒ−ＡｃＯＨの混合液を加え、室温で撹拌反応させ、反応完了後混合物を蒸発乾固し、ジクロロメタンで残留物を溶かし、且つ炭酸水素ナトリウムでジクロロメタン溶液を洗い、ジクロロメタンを蒸発除去して、シロップ状物を得る。同時に、保護されたシトシン及び(ＮＨ₄)₂ＳＯ₄をＨＭＤＳにおいて窒素の保護で還流反応させ、反応完了後、溶媒を蒸発除去し、シリル化したシトシンを得る。前記反応によって得たシロップ状物をジクロロエタンに溶かしてシリル化したシトシンに加え、窒素の保護で混合物を還流反応させる。氷で反応を終止させ、ジクロロメタンで浸出を行い、順次に飽和炭酸水素ナトリウム、塩水でジクロロメタン層を洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、乾燥後溶媒を蒸発除去し、白色の固体を得、カラムクロマトグラフィーによって分離精製を行い、化合物ixを得る。

化合物xの合成：化合物ixを飽和ＮＨ₃−ＣＨ₃ＯＨに溶かし、室温で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、得た残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物xを得る。

化合物xiの合成：化合物x、イミダゾール、トリフェニルホスフィンをテトラヒドロフランに溶かし、ヨウ素が溶解されたテトラヒドロフラン液を徐々に加える。室温で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物に酢酸エチルを加え、濾過する。酢酸エチルを蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離し、化合物xiを得る。

化合物xiiの合成：化合物xiをテトラヒドロフランに溶かし、ＤＢＵを加える。約６０℃で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離し、化合物xiiを得る。

化合物xiiiの合成：約０℃で、ＩＣｌが溶解されたＤＭＦ液をＮａＮ₃が溶解されたＤＭＦ液に加え、氷点で約１０ｍｉｎ撹拌し、化合物xiiが溶解されたＤＭＦ液を前記溶液に徐々に加え、続けて反応させ、反応完了後、ヨウ素の色が完全に消えるまで混合液に亜硫酸ナトリウムを加える。減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物xiiiを得る。

化合物xivの合成：化合物xiiiをＤＭＦに溶かし、撹拌しながら酢酸銀を加え、室温で反応させ、反応完了後ろ過を行い、減圧で溶媒を除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物xivを得る。

化合物xvの合成：化合物xivをトリエチルアミンメタノール溶液に溶かし、室温で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物xvを得る。
本発明は２’−フルオロ−４’−置換ヌクレオシド類似体の製造反応を含み、Ｒ＝ＣＨ₃、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨの場合、経路は以下のようである。

化合物ｂの合成：化合物ａを取り、アセトンを加え、撹拌しながら濃硫酸を徐々に加え、室温で撹拌反応させ、ＴＬＣ試験で反応完了後、濃アンモニア水を用いてｐＨ調整し、ろ過を行い、減圧によってほとんどのアセトンを蒸発除去させ、撹拌しながら０．４％希塩酸を加え、アセトン還流条件において反応し、化合物ａを全部化合物ｂに加水分解させる。固体ＮａＨＣＯ₃で反応液を中和し、ろ過を行い、減圧でろ液に溶媒を蒸発除去させ、残留物をジクロロメタンで溶かし、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で一夜乾燥させ、ろ過を行い、溶媒を蒸発除去した後、黄色の粘っこい油性物ｂを得る。

化合物ｃの合成：化合物ｂ及びトリエチルアミンをジクロロメタンに溶かし、氷塩浴で4-クロロベンゾイルクロライドを徐々に滴下し、０℃以下を維持して機械撹拌反応させ、反応完了後飽和ＮａＨＣＯ₃溶液を加え、水、飽和食塩水でジクロロメタン層を洗い、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、ろ過を行い、減圧で溶媒を蒸発除去し、且つ残留物を再結晶させ、白色の結晶化合物ｃを得る。
化合物ｄの合成：化合物ｃを無水ジクロロメタンに溶かし、窒素の保護でイミダゾール及びｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（ＴＢＤＭＳＣｌ）を加える。室温で反応させ、反応完了後塩酸で反応を中和し、両層を分離させ、それぞれ水及び飽和食塩水で有機層を洗った後、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｄを得る。

化合物ｅの合成：化合物ｄをナトリウムメトキシド／メタノール混合液に加え、室温で反応させ、反応完了後希酢酸で中和し、ろ過を行い、メタノールで洗い、減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｅを得る。

化合物ｆの合成：約−６０℃でオキサリルクロリドのジクロロメタン溶液にＤＭＳＯを1滴ずつ滴下し、同一の温度で約１５ｍｉｎ撹拌した後、化合物ｅのジクロロメタン溶液を滴下する。約−６５℃で約３０ｍｉｎ撹拌反応させ、トリエチルアミンを加え、室温で撹拌反応させる。反応完了後反応液に水を加え、有機層を分離させ、無水硫酸マグネシウムで有機層を乾燥させる。溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｆを得る。

化合物ｇの合成：発生瓶に水酸化ナトリウム及び水を加え、撹拌して均一にさせた後、ホルムアルデヒド溶液、９５％エタノールを加え、さらに化合物ｆを加える。約３５℃で撹拌反応させ、反応完了後、撹拌しながら生成物が完全に析出するまで氷水で発生瓶を冷却する。吸引ろ過し、中性を呈するまで固体を水で洗って加熱乾燥させ、得た固体を無水メタノールに溶かし、さらに水素化ホウ素ナトリウムを加え、還流反応させ、反応完了後希塩酸で反応液を中和し、ジクロロメタンで反応液に対して浸出を行い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた後溶媒を蒸発除去し、化合物ｇを得る。

化合物ｈの合成：化合物ｇをメタノールに溶かし、ＤｏｗｅｘＨ⁺（事前にメタノールを用いて洗う）を加え、室温で反応させ、反応完了後樹脂をろ過除去し、且つメタノールで樹脂を繰り返して洗い、溶液を蒸発乾固して固体を得る。得た固体をアセトンに溶かし、撹拌しながら濃硫酸（触媒量）を徐々に加え、室温で撹拌反応させ、濃アンモニア水を用いてｐＨ調整し、ろ過を行い、減圧でアセトンを蒸発除去し、化合物ｈを得る。

化合物ｉの合成：−６０℃でオキサリルクロリドのジクロロメタン溶液にＤＭＳＯを1滴ずつ滴下し、滴下完了後約１５ｍｉｎ撹拌し、化合物ｈのジクロロメタン溶液を滴下する。滴下完了後約−６０℃で約３０ｍｉｎ反応させ、トリエチルアミンを加え、室温で約３０ｍｉｎ反応させた後水を加えて反応を終止させ、有機層を分離させ、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で有機層を乾燥させる。溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製して固体を得る。ＣｌＣＨ₂Ｐ（Ｃ₆Ｈ₅）₃Ｃｌを無水テトラヒドロフランに加え、約−７８℃まで冷却し、ｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液を加え、約１時間撹拌反応させ、その後得た固体の乾燥テトラヒドロフラン溶液を加える。徐々に温度を約０℃まで上げ、続けて反応させる。反応完了後注意しながら飽和のＮＨ₄Ｃｌ溶液を滴下し、酢酸エチルで浸出を行い、塩水で有機層を２回洗い、最終に無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させる。減圧で溶媒を蒸発除去し、得た残留物を無水テトラヒドロフランに溶かし、約−７８℃まで冷却し、ｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液を徐々に滴下し、約２時間撹拌反応させ、飽和ＮＨ₄Ｃｌ溶液で注意しながら反応を終止させ、飽和食塩水で有機層を洗い、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物を高速カラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｉを得る。

化合物ｊの合成：化合物ｉを希塩酸溶液に加え、室温で撹拌反応させ、反応完了後固体ＮａＨＣＯ₃で中和し、ろ過を行い、減圧でろ液に溶媒を蒸発除去させ、ジクロロメタンで残留物を溶かし、且つ無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した後ろ過し、溶媒を蒸発除去し、化合物ｊを得る。

化合物ｋの合成：化合物ｊをピリジンに溶かし、ＢｚＣｌを滴下し、室温で反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物を精製した後化合物ｋを得る。

化合物ｌの合成：化合物ｋ及び２，２，６，６‐テトラメチルピペリジン‐Ｎ‐オキシルをジクロロメタンに溶かし、約０℃まで冷却し、混合した次亜塩素酸ナトリウム溶液、ＮａＨＣＯ₃と水の混合液を反応液に加え、約０℃で約３０ｍｉｎ反応させ、イソプロパノールを加え、室温で撹拌する。分離されたジクロロメタン層を水で２回洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した後ろ過し、溶媒を蒸発除去し、得た残留物に対して再結晶を行い、化合物ｌを得る。

化合物ｍの合成：化合物ｌを無水エタノール／酢酸エチルの混合液に加え、約０℃まで冷却し、水素化ホウ素ナトリウムを数回に分けて加え、撹拌反応させ、反応完了後希酢酸で中和し、ろ過を行い、ろ液を蒸発乾固し、残留物をさらにジクロロメタンで溶かし、その後水で洗い、ジクロロメタン層を無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、減圧でジクロロメタンを蒸発除去し、ジクロロメタンと石油エーテルとの混合溶媒で残留物に対して再結晶を行い、固体物を得る。得た固体物をピリジンに溶かし、約０℃でＢｚＣｌを滴下し、滴下完了後室温で反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、酢酸エチルで残留物に対して浸出を行い、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した後ろ過し、溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｍを得る。

化合物ｎの合成：化合物ｍをメタノールに溶かし、濃塩酸／ジオキサンの混合溶液を加え、室温で反応させ、反応完了後ＮａＨＣＯ₃を用いて反応液を中和し、ろ過を行い、ろ液に対して減圧蒸留を行って溶媒を除去し、残留物を適量のジクロロメタンに溶かし、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で一夜乾燥させ、ろ液を蒸発乾固し、カラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｎを得る。
化合物ｏの合成：化合物ｎをジクロロメタンに溶かし、室温でＤＡＳＴを加えて撹拌反応させ、反応完了後混合物を飽和ＮａＨＣＯ₃溶液に注入し、有機層を分離させ、且つ飽和ＮａＨＣＯ₃溶液で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、カラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｏを得る。

化合物ｐの合成：化合物ｏをギ酸溶液に加え、室温で撹拌反応させ、反応完了後減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物をトルエンと共に蒸発して固体物を得、得た固体物を乾燥ピリジン及び無水酢酸溶液に溶かし、室温で反応させ、反応完了後反応液を濃縮し、その後トルエンと共に蒸発させ、化合物ｐを得る。

化合物ｑの合成：化合物ｐを無水ジクロロメタンに溶かし、それを約０℃まで冷却し、その後飽和するまでＨＣｌガスを徐々に流し入れ、室温で溶媒を真空蒸発除去し、残留物を真空中で乾燥させ、化合物ｑを得る。

化合物ｒの合成：２，６−ジアミノプリンとヘキサメチルジンラザンとを(ＮＨ₄)₂ＳＯ₄の存在で透明溶液になるまで加熱還流させ、真空中で溶媒を蒸発除去して白色の固体を得、該固体を１，２ −ジクロロエタンに溶かし、さらに化合物ｑの１，２ −ジクロロエタン溶液及びゼオライトを加え、窒素の保護で室温において撹拌反応させ、ＴＬＣ試験で反応完了後、反応液にジクロロメタンを加え、且つ珪藻土でろ過を行い、それぞれ飽和ＮａＨＣＯ₃及び食塩水でろ液を洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で有機層を一夜乾燥させ、溶媒を蒸発除去し、得た残留物を減圧カラムクロマトグラフィーによって分離し、化合物ｒを得る。

化合物ｓの合成：化合物ｒをＮＨ₃−ＣＨ₃ＯＨの飽和の溶液に溶かし、室温で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｓを得る。

有益効果：グリコシル基及びアルカリ基に対して修飾することによって、該Ｄ−及びＬ−ヌクレオシド類似体にフルオロ基、アルキニル基、アジド、シアノ基など特別な構造を含有させ、従来のＤ−及びＬ−ヌクレオシド類似体の副作用の大きさ及び活性の弱さの不足を克服でき、且つ該合成方法は簡単で、実行することも可能で、収率が比較的に高いため、それを抗ＨＢＶまたは抗ＨＣＶまたは抗ＨＩＶウイルス薬の製造に使用すれば、よい使用価値を有する。

本発明の構造式化合物Ｉの合成経路に従い、且つ実施例に合わせて本発明に対してより詳しく説明を行う。但し本発明の範囲を制限するものではない。

実施例１アルカリ基はシトシンである場合の化合物１５の合成
化合物iiの合成：化合物i（Ｄ−リボースまたはＬ−リボース）（８．６６ｍｍｏｌ）を31.2ml ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（０．２ｍｍｏｌ／Ｌ）に溶かし、２７℃水浴上で３ｈ保温密封撹拌し、７．８ｍｌピリジンを加えて反応を終止させ、減圧乾燥して、淡黄色のシロップ状物質化合物ii（９６％）を得る。
化合物iiiの合成：化合物ii（７．９２ｍｍｏｌ）を２１ｍｌ乾燥ピリジンに溶かし、氷塩浴で塩化ベンゾイル（０．０４４７ｍｏｌ）５．２ｍｌを徐々に滴下し、室温で１７ｈ撹拌反応させ、反応完了後反応液を３９ｍｌ氷水に入れ、クロロホルムで抽出を行い。水層が弱アルカリ性を呈するまで、順次に氷水、３ｍｏｌ／Ｌ予め冷却した硫酸、飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、さらに、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで４ｈ以上乾燥を行い、減圧乾燥して、淡黄色のシロップ状物質化合物iii（８０．０％）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δｐｐｍ：７．２８〜８．１０(ｍ，１５Ｈ，ＯＢｚ)，５．８７(ｍ，１Ｈ，Ｈ−３)，５．６８(ｄ，１Ｈ，Ｈ−２)，５．１６(ｓ，１Ｈ，Ｈ−１)，４．７２(ｍ，２Ｈ，Ｈ−５)，４．５２(ｑ，１Ｈ，Ｈ−４)，３．４２(ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ₃)。

化合物ivの合成：ベンゾイル化合物化合物iii（０．００２７ｍｏｌ）をクロロホルム１３ｍｏｌに溶かし、赤リン（３９０ｍｇ，０．０１２６ｍｏｌ）を加え、氷水浴で撹拌しながら臭素（１．３ｍｌ，０．０２５ｍｍｏｌ）を滴下し、約３０ｍｉｎ撹拌し、徐々に氷水１．３ｍｌを滴下し、室温で４ｈ撹拌し、その後砕７ｇ氷を加えて撹拌して溶解させ、さらに反応液を氷水１４ｍｌに注入し、クロロホルムで抽出を行い。水層が弱アルカリ性を呈するまで飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで４ｈ以上乾燥させ、減圧乾燥して、濃黄色のシロップを得、シリカゲルカラムで分離する（石油エーテル、アセトンで勾配溶出）ことによって、白色のドライシロップ化合物iv（６４．２％）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δｐｐｍ：７．３２〜８．１０(ｍ，１５Ｈ，ＯＢｚ)，５．９０(ｍ，１Ｈ，Ｈ−３)，５．７０(ｄ，１Ｈ，Ｈ−２)，５．６３(ｓ，１Ｈ，Ｈ−１)，４．５５〜４．７９(ｍ，３Ｈ，Ｈ−５，Ｈ−４)。

化合物vの合成：化合物iv（２．７３ｍｍｏｌ）を乾燥ピリジン５ｍｌに溶かし、氷水浴で酸無水物（０．０２７６ｍｏｌ）を徐々に滴下し、約３０ｍｉｎ撹拌し、氷水浴を除き、室温で約７ｈ撹拌し、４０℃まで昇温した後約１ｈ維持し、砕氷６．５ｇを加えて撹拌して溶解させた後、反応液を氷水１３ｍｌに注入し、クロロホルムで抽出を行い。水層が弱アルカリ性を呈するまで、順次に氷水、３ｍｏｌ／Ｌ予め冷却した硫酸、飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで４ｈ以上乾燥を行い、減圧乾燥して、淡黄色のシロップ状物質化合物v（９２．１%）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δｐｐｍ：７．３０~８．１０（ｍ，１５Ｈ，ＯＢｚ），６．４３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１），５．９０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３），５．８０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−２），４．５０~４．８０（ｍ，２Ｈ，Ｈ−５），２．００（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃ＣＯＯ−）。

化合物viの合成：化合物v（２．５７ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン２６ｍｌに溶かし、氷水浴で乾燥ＨＣｌガスを徐々に２．５ｈ流し入れ、氷水１９．５ｍｌを加えて洗い、有機層が分けられ得、水層が弱アルカリ性を呈するまで飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで４ｈ以上乾燥を行い、減圧乾燥して、淡黄色のシロップを得る。ヘキサン／ジクロロメタン混合溶媒で再結晶することによって白色の固体化合物vi（６５．１％）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δｐｐｍ：７．３６~８．１４（ｍ，１５Ｈ，ＯＢｚ），６．６８（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１），５．５９（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３），４．６４~４．８０（ｍ，４Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−４ａｎｄＨ−５）。Ｍ．ｐ．１３９~１４０℃。

化合物viiの合成：化合物vi（２．８１ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン１３ｍｌ及び乾燥ＤＭＦ３．５ｍｌに溶かし、−１５℃で撹拌しながらＳＯ₂Ｃｌ₂（０．００７９ｍｍｏｌ）を徐々に加え、−１５℃で約３０ｍｉｎ撹拌し、自然に室温まで温度を上げて３ｈ反応させ、０℃でイミダゾール（０．０４０７ｍｍｏｌ）を３回に分けて加え、混合液を室温で１５ｈ撹拌し、反応完了後反応液をＣＨ₂Ｃｌ₂（２６ｍｌ）で薄め、氷水（３５ｍｌ）で洗い、ＣＨ₂Ｃｌ₂で水層に対して抽出を行い、合わせて１つにした有機層に後無水硫酸ナトリウムを加えて４ｈ以上乾燥し、溶媒を減圧抽出して淡黄色のシロップを得、シリカゲルカラムで分離精製する（石油エーテル、アセトンで勾配溶出）ことによって、白色の固体化合物vii（７６．０％）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δｐｐｍ：７．００~８．１０（ｍ，１５Ｈ，ＯＢｚ），６．７１（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１），５．５９（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３），５．２５（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２），４．５６~４．８１（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４，Ｈ−５）。Ｍ．ｐ．１２８~１２９℃。

化合物viiiの合成：化合物vii（２．２ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（５４ｍｌ）に溶かし、撹拌しながらＥｔ₃Ｎ・３ＨＦ（２．０８ｍｌ，０．０１３ｍｍｏｌ）を加え、温度を約６０℃まで上げて約３ｈ撹拌を行い、７０℃で約１．５ｈ撹拌し、冷塩水（１０ｍｌ）を加えて反応を終止させ、次いでジクロロメタンで抽出を行い、合わせて１つにした有機層を順次に塩水、水、飽和炭酸水素ナトリウムで洗い、無水硫酸ナトリウムで４ｈ以上乾燥を行い、溶媒を減圧抽出して濃黄色のシロップを得、シリコン漏斗（５ｃｍ×５ｃｍ）で精製することによって淡黄色のシロップ（８６．８％）を得、９５％エタノール溶液において不純物に結晶を生じさせて白色の結晶化合物viii（６６．４％）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δｐｐｍ：７．３１〜８．１０（ｍ，１５Ｈ，ＯＢｚ），６．７１（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１），５．６８（ｄｄ，Ｊ＝１９．４４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−３），５．３２（ｄ，Ｊ＝４８．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２），４．６５〜４．７７（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４，Ｈ−５）。Ｍ．ｐ．８０〜８２℃。

化合物ixの合成：化合物viii（６．０ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（２０ｍｌ）に溶かし、ＨＢｒ−ＡｃＯＨ（４５％，Ｖ／Ｖ，４．６ｍｌ，２５ｍｍｏｌ）の混合液を加え、室温で２０ｈ撹拌反応させ、混合物を蒸発乾固し、ジクロロメタン（５０ｍｌ）で残留物を溶かし、且つ炭酸水素ナトリウム（３×３０ｍｌ）でジクロロメタン溶液を洗い、ジクロロメタンを蒸発除去して、シロップ状物を得る。同時に、保護されたシトシン（１５ｍｍｏｌ）及び（ＮＨ₄)₂ＳＯ₄（０．１ｇ）をＨＭＤＳ（３０ｍｌ）において窒素の保護で１７ｈ還流反応させ、減圧で溶媒を蒸発除去し、シリル化したシトシンを得る。前記反応によって得たシロップ状物をジクロロエタン（２５ｍｌ）に溶かしてシリル化したシトシンに加え、窒素の保護で混合物を１５ｈ還流反応させる。氷で反応を終止させ、ジクロロメタン（３×４５ｍｌ）で浸出を行い、順次に飽和炭酸水素ナトリウム、塩水でジクロロメタン層を洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、乾燥後溶媒を蒸発除去し、白色の固体を得、カラムクロマトグラフィー（１％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）によって分離精製を行い、化合物ix（７１％）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δｐｐｍ：８．０７（ｄ，Ｊ＝９．８６Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝９．８２Ｈｚ，１Ｈ），７．２６〜８．１０（ｍ，１０Ｈ，ＯＢｚ），６．０３（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１），５．６４（ｄｄ，Ｊ＝１９．４４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−３），５．２６（ｄ，Ｊ＝４８．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２），４．６５〜４．７７（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４，Ｈ−５）。

化合物xの合成：化合物ix（３．６０ｍｍｏｌ）を飽和ＮＨ₃−ＣＨ₃ＯＨ（３０ｍｌ）に溶かし、室温で１５ｈ撹拌反応させ、溶媒を蒸発除去し、得た残留物をカラムクロマトグラフィー（１５：１ＣＨＣｌ₃− ＭｅＯＨ）によって精製し、化合物x（８０％）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δｐｐｍ：８．１０（ｄ，Ｊ＝９．８６Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝９．８２Ｈｚ，１Ｈ），６．０３（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１），５．６４（ｄｄ，Ｊ＝１９．４４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−３），５．２６（ｄ，Ｊ＝４８．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２），４．５０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４），３．７０〜３．７７（ｍ，２Ｈ，Ｈ−５）。

化合物xiの合成：化合物x（９．４６ｍｍｏｌ）、イミダゾール（１８．９３ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１４．１９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）に溶かし、ヨウ素（１４．１８ｍｍｏｌ）が溶解されたテトラヒドロフラン液１５ｍｌを徐々に加える。室温で３ｈ撹拌反応させ、溶媒を蒸発除去し、残留物に酢酸エチル（１００ｍｌ)を加え、濾過する。酢酸エチルを蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離し、化合物xi（８３．９％）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δｐｐｍ：８．０６（ｄ，Ｊ＝９．８６Ｈｚ，１Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝９．８２Ｈｚ，１Ｈ），６．０１（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１），５．６６（ｄｄ，Ｊ＝1９．４４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−３），５．２２（ｄ，Ｊ＝４８．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２），４．５７（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４），３．５８〜３．６９（ｍ，２Ｈ，Ｈ−５）。

化合物xiiの合成：化合物xi（５．８８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）に溶かし、ＤＢＵ（６．４４ｍｍｏｌ）を加える。約６０℃で３ｈ撹拌反応させ、溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離し、化合物xii（７５．１％）を得、直接次のステップの反応に用いる。

化合物xiiiの合成：約０℃で、ＩＣｌ（１３．９ｍｍｏｌ）が溶解されたＤＭＦ液１５ｍｌをＮａＮ₃（９．７５ｍｍｏｌ）が溶解されたＤＭＦ液（１５ｍｌ）に加え、０℃で約１０ｍｉｎ撹拌し、化合物xii（６．８ｍｍｏｌ）が溶解されたＤＭＦ液（２０ｍｌ）を前記溶液に徐々に加え、0℃で１ｈ反応させる。ヨウ素の色が完全に消えるまで混合液に亜硫酸ナトリウムを加える。減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物xiii（７７．６％）を得、直接次のステップの反応に用いる。

化合物xivの合成：化合物xiii（５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５ｍｌ）に溶かし、撹拌しながら酢酸銀（６ｍｍｏｌ）を加え、室温で８ｈ反応させ、ろ過する。減圧で溶媒を除去し（５０℃以下）、残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物xiv（７１．３％）を得る。

¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，３００ＭＨｚ）δ：８．１２（ｄ，１Ｈ），７．４０（ｄ，１Ｈ），７．２６（ｂｒ，２Ｈ），６．１２（ｄｄ，１Ｈ），５．８７（ｄ，１Ｈ），５．０９（ｔ，１Ｈ），４．９０（ｄｔ，１Ｈ），４．１８（ｄｔ，１Ｈ），３．７４−３．８７（ｍ，２Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃）。

化合物xvの合成：化合物xiv（５ｍｍｏｌ）を５％トリエチルアミンメタノール溶液（１００ｍｌ）に溶かし、室温で１２ｈ撹拌反応させ、溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物xv（８９．０％）を得る。

ＥＳＩ−ＭＳ：２８７［Ｍ＋Ｈ］。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，３００ＭＨｚ）δ：８．１４（ｄ，１Ｈ），７．３２（ｄ，１Ｈ），７．２１（ｂｒ，２Ｈ），６．０８（ｄｄ，１Ｈ），５．８２（ｄ，１Ｈ），５．１１（ｔ，１Ｈ），４．９２（ｄｔ，１Ｈ），４．１６（ｄｔ，１Ｈ），３．６２−３．６９（ｍ，２Ｈ）。

実施例２４’−位置における置換基はアルキニル基で、アルカリ基は１，６−ジアミノプリンである場合の化合物２５の合成
化合物ｂの合成：化合物ａ（６０ｇ）を取り、アセトン（２Ｌ）を加え、撹拌しながら濃硫酸（４０ｍｌ）を徐々に加え、室温で４０ｍｉｎ撹拌反応させ、ＴＬＣ試験で反応完了後、濃アンモニア水を用いてｐＨ＝７〜８調整し、ろ過を行い、減圧によってほとんどのアセトンを蒸発除去させ、残留アセトンに水約１５０ｍｌを加え、撹拌しながら０．４％希塩酸（１５０ｍｌ）を加え、アセトン還流条件において２０ｍｉｎ反応し、化合物ａを全部化合物ｂに加水分解させる。固体ＮａＨＣＯ₃で反応液をｐＨ＝７〜８まで中和し、ろ過を行い、減圧でろ液に溶媒を蒸発除去させ、残留物をジクロロメタン（２００ｍｌ）で溶かし、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で一夜乾燥させ、ろ過を行い、溶媒を蒸発除去した後、黄色の粘っこい油性物ｂ（７３ｇ，９５％）を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：１９１［Ｍ＋Ｈ］。

化合物ｃの合成：化合物ｂ（１５４ｇ，０．８１ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３３９ｍｌ，２．４３ｍｏｌ）をジクロロメタン（１．５０Ｌ）に溶かし、氷塩浴で温度を０℃まで冷却させ、４−クロロベンゾイルクロライド（１１３ｍｌ，０．８９１ｍｏｌ）を徐々に滴下し、０℃以下を維持して４ｈ機械撹拌反応させ、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液（５００ｍｌ）を加え、水、飽和食塩水でジクロロメタン層を洗い、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、ろ過を行い、減圧で溶媒を蒸発除去し、且つ残留物を再結晶させ、白色の結晶化合物ｃ（１９６ｇ，７４．６％）を得る。ＥＳＩ−ＭＳ：３３０［Ｍ＋Ｈ］。

化合物ｄの合成：化合物ｃ（０．１１４ｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（６００ｍｌ）に溶かし、窒素の保護でイミダゾール（１５．５ｇ，０．２２８ｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（ＴＢＤＭＳＣｌ）（１８．９ｇ，０．１２５ｍｏｌ）を加える。室温で３ｈ反応させ、反応完了後１Ｎ塩酸で反応を中和し、両層を分離させ、それぞれ水及び飽和食塩水で有機層を洗った後、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｄを得る。収率６９．２％、ＥＳＩ−ＭＳ：４４４［Ｍ＋Ｈ］。
化合物ｅの合成：化合物ｄ（０．６４ｍｍｏｌ）を０．２Ｎナトリウムメトキシド／メタノール混合液（１５ｍｌ）に加え、室温で４ｈ反応させ、希酢酸で中和し、ろ過を行い、メタノールで洗い、減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｅを得、収率は７５％である。ＥＳＩ−ＭＳ：３０５［Ｍ＋Ｈ］。

化合物ｆの合成：−６０℃でオキサリルクロリド（３．４ｍｌ，３８．７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（８０．０ｍｌ）にＤＭＳＯ（５．５ｍｌ，７７．５ｍｍｏｌ）を１滴ずつ滴下し、同一の温度で約１５ｍｉｎ撹拌した後、化合物ｅ（２５．７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１００ｍｌ）を滴下する。−６５℃で約３０ｍｉｎ撹拌反応させ、トリエチルアミン（１０．９ｍｌ，７８．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０ｍｉｎ撹拌反応させる。反応混合物に水を加え、有機層を分離させ、無水硫酸マグネシウムで有機層を乾燥させる。溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｆを得る。収率９４．６％、ＥＳＩ−ＭＳ：３０３［Ｍ＋Ｈ］。

化合物ｇの合成：発生瓶に水酸化ナトリウム（１．３ｇ）及び水（１１．５ｍｌ）を加え、撹拌して均一にさせた後、３０％ホルムアルデヒド溶液、７．２ｍｌの９５％エタノールを加え、さらに化合物ｆ（２５ｍｍｏｌ）を加える。反応温度を３０〜３５℃制御して２ｈ撹拌反応させ、反応完了後、撹拌しながら生成物が完全に析出するまで氷水で発生瓶を冷却する。吸引ろ過し、中性を呈するまで固体を水で洗って加熱乾燥させ、得た固体を無水メタノールに溶かし、さらに水素化ホウ素ナトリウム（０．９２５ｇ，２５ｍｍｏｌ）を加え、１ｈ還流反応させ、希塩酸で反応液を中和し、ジクロロメタンで反応液に対して浸出を行い（３×５０ｍｌ）、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた後溶媒を蒸発除去し、化合物ｇを得る。収率９０．５％、ＥＳＩ−ＭＳ：３３５［Ｍ＋Ｈ］。

化合物ｈの合成：化合物ｇ（９．７ｍｍｏｌ）をメタノール（２６０ｍｌ）に溶かし、ＤｏｗｅｘＨ⁺（４０ｍｌ、事前にメタノールを用いて洗う）を加え、室温で４ｈ反応させ、樹脂をろ過除去し、且つメタノールで樹脂を繰り返して洗い、溶液を蒸発乾固して固体を得る。得た固体をアセトン（２００ｍｌ）に溶かし、撹拌しながら濃硫酸（触媒量、２ｍｌ）を徐々に加え、室温で約０．５ｈ撹拌反応させ、濃アンモニア水を用いてｐＨ＝７〜８まで調整し、ろ過を行い、減圧でアセトンを蒸発除去し、残留物をジクロロメタンで溶かし、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた後溶媒を蒸発除去し、化合物ｈを得る。収率８０．２％、ＥＳＩ−ＭＳ：２６１［Ｍ＋Ｈ］。
化合物ｉの合成：−６０℃でオキサリルクロリド（３．４ｍｌ，３８．７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（８０ｍｌ）にＤＭＳＯ（５．５ｍｌ，７７．５ｍｍｏｌ）を1滴ずつ滴下し、滴下完了後約１５ｍｉｎ撹拌し、化合物ｈ（２５．７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１００ｍｌ）を滴下する。滴下完了後−６０℃で３０ｍｉｎ反応させ、トリエチルアミン（１０．９ｍｌ，７８．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で約３０ｍｉｎ反応させた後水を加えて反応を終止させ、有機層を分離させ、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で有機層を乾燥させる。溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製して固体を得る。ＣｌＣＨ₂Ｐ（Ｃ₆Ｈ₅）₃Ｃｌ（２．１５ｇ，６．１９ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン（５０ｍｌ）に加え、−７８℃まで冷却し、ｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液（１．６Ｍ，４．０ｍｌ）を加え、１ｈ撹拌反応させ、その後得た固体（１．５１ｍｍｏｌ）の乾燥テトラヒドロフラン溶液（５０ｍｌ）を加える。徐々に温度を約０℃まで上げ、続けて３ｈ反応させる。注意しながら飽和のＮＨ₄Ｃｌ溶液（１０ｍｌ）を滴下し、酢酸エチルで浸出を行い（２×１００ｍｌ）、塩水で有機層を２回洗い（２×７５ｍｌ）、最終に無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させる。減圧で溶媒を蒸発除去し、得た残留物を無水テトラヒドロフラン（４０ｍｌ）に溶かし、−７８℃まで冷却し、ｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液（１．６Ｍ，２０ｍｌ）を徐々に滴下し、２ｈ撹拌反応させ、飽和ＮＨ₄Ｃｌ溶液（２０ｍｌ）で注意しながら反応を終止させ、飽和食塩水で有機層を洗い、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物を高速カラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｉを得る。収率４８．５％、ＥＳＩ−ＭＳ：２５５［Ｍ＋Ｈ］。

化合物ｊの合成：化合物ｉ（１０ｍｍｏｌ）を０．２％希塩酸溶液（５０ｍｌ）に加え、室温で６ｈ撹拌反応させ、固体ＮａＨＣＯ₃でｐＨ＝７〜８まで反応を中和し、ろ過を行い、減圧でろ液に溶媒を蒸発除去させ、ジクロロメタンで残留物を溶かし、且つ無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した後ろ過し、溶媒を蒸発除去し、化合物ｊを得る。収率９９．０％、ＥＳＩ−ＭＳ：２１５［Ｍ＋Ｈ］。
化合物ｋの合成：化合物ｊ（５ｍｍｏｌ）をピリジン（２０ｍｌ）に溶かし、ＢｚＣｌ（５ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で６ｈ反応させ、蒸発乾固し、残留物を精製した後化合物ｋを得る。収率８５．３％、ＥＳＩ−ＭＳ：３１９［Ｍ＋Ｈ］。

化合物ｌの合成：化合物ｋ（５９．３ｍｍｏｌ）及び２，２，６，６‐テトラメチルピペリジン‐Ｎ‐オキシル（０．０５９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（９９ｍｌ）に溶かし、０℃まで冷却し、次亜塩素酸ナトリウム溶液（３３．６ｍｌ，８．５〜１３．５％有効塩素）、ＮａＨＣＯ₃（１１．２ｇ）と水（１９０ｍｌ）の混合液を反応液に加え、０℃で３０ｍｉｎ反応させ、イソプロパノール（１．９５ｍｌ）を加え、室温で１０ｍｉｎ反応させ、分離されたジクロロメタン層を水で２回洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した後ろ過し、溶媒を蒸発除去し、得た残留物に対して再結晶を行い、化合物ｌを得る。収率８７．８％、ＥＳＩ−ＭＳ：３１７［Ｍ＋Ｈ］。
化合物ｍの合成：化合物ｌ（０．０５ｍｏｌ）を無水エタノール（６０ｍｌ）／酢酸エチル（３０ｍｌ）の混合液に加え、０℃まで冷却し、水素化ホウ素ナトリウム（２３．３ｇ，６１２ｍｍｏｌ）を数回に分けて加え、０℃で１ｈ撹拌反応させ、希酢酸でｐＨ＝７〜８まで中和し、ろ過を行い、ろ液を蒸発乾固し、残留物をさらにジクロロメタンで溶かし、その後水で洗い、ジクロロメタン層を無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、減圧でジクロロメタンを蒸発除去し、ジクロロメタンと石油エーテルとの混合溶媒で残留物に対して再結晶を行い、固体物を得る。得た固体物をピリジンに溶かし、０℃でＢｚＣｌ（５０ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させ、溶媒を蒸発除去し、酢酸エチルで残留物に対して浸出を行い、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した後ろ過し、溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｍを得る。収率８９．７％、ＥＳＩ−ＭＳ：４２３［Ｍ＋Ｈ］。
化合物ｎの合成：化合物ｍ（４ｍｍｏｌ）をメタノール（２２ｍｌ）に溶かし、４．０Ｍ濃塩酸／ジオキサンの混合溶液（２０ｍｌ）を加え、室温で１０ｈ反応させ、ＮａＨＣＯ₃を用いて反応液をｐＨ＝７〜８まで中和し、ろ過を行い、ろ液に対して減圧蒸留を行って溶媒を除去し、残留物を適量のジクロロメタンに溶かし、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で一夜乾燥させ、ろ液を蒸発乾固し、カラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｎを得る。収率8９．５%、ＥＳＩ−ＭＳ：３９７［Ｍ＋Ｈ］。

化合物ｏの合成：化合物ｎ（１．７６ｍｍｏｌ）をジクロロメタンに溶かし、室温でＤＡＳＴ（０．４ｍｌ，３．０３ｍｍｏｌ）を加えて１２ｈ撹拌し、それを飽和ＮａＨＣＯ₃溶液１０ｍｌに注入し、有機層を分離させ、且つ飽和ＮａＨＣＯ₃溶液で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、カラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｏを得る。収率１１．５％、ＥＳＩ−ＭＳ：３９９［Ｍ＋Ｈ］。

化合物ｐの合成：化合物ｏ（１０ｍｍｏｌ）を８０％ギ酸溶液２０ｍｌに加え、室温で１２ｈ撹拌反応させ、減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物をトルエンと共に蒸発して固体物を得、得た固体物を乾燥ピリジン及び無水酢酸溶液に溶かし、室温で４ｈ反応させ、反応液を濃縮し、その後トルエンと共に蒸発させ、化合物ｐを得る。収率９０．３％、ＥＳＩ−ＭＳ：４２７［Ｍ＋Ｈ］。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，３００ＭＨｚ）δ：２．０７（ｓ，３Ｈ），２．８５（ｓ，１Ｈ），４．６２−４．７７（ｍ，２Ｈ），４．８９−５．０７（ｍ，３Ｈ），７．３２−８．１７（ｍ，１０Ｈ）。

化合物ｑの合成：化合物ｐ（４．７６ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（４０ｍｌ）に溶かし、それを０℃まで冷却し、その後飽和するまでＨＣｌガスを徐々に流し入れ（約３ｈ）、室温で溶媒を真空蒸発除去し、残留物を真空中で２ｈ乾燥させ、化合物ｑを得る。収率８７．１％、化合物ｑは直接次のステップの反応に用いる。

化合物ｒの合成：２，６−ジアミノプリン（４．７８ｍｍｏｌ）とヘキサメチルジンラザン（ＨＭＤＳ，９ｍｌ）とを(ＮＨ₄)₂ＳＯ₄（５０ｍｇ）の存在で透明溶液になるまで加熱還流させ（約５ｈ）、真空中で溶媒を蒸発除去して白色の固体を得、該固体を１，２ −ジクロロエタン（３５ｍｌ）に溶かし、さらに化合物ｑの１，２ −ジクロロエタン溶液（４．５６ｍｍｏｌ，３０ｍｌ）及び０．４ｎｍゼオライト（２．６ｇ）を加え、窒素の保護で室温において６日撹拌反応させ、ＴＬＣ試験で反応完了後、反応液にジクロロメタン（８０ｍｌ）を加え、且つ珪藻土でろ過を行い、それぞれ飽和ＮａＨＣＯ₃及び食塩水でろ液を洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で有機層を一夜乾燥させ、溶媒を蒸発除去し、得た残留物を減圧カラムクロマトグラフィーによって分離し、化合物ｒを得る。収率７８．５％、ＥＳＩ−ＭＳ：５１７［Ｍ＋Ｈ］。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，３００ＭＨｚ）δ：２．８５（ｓ，１Ｈ），４．６７−４．７９（ｍ，２Ｈ），４．９２−５．１３（ｍ，３Ｈ），５．７９（ｂｒ，１Ｈ），７．３２−８．１７（ｍ，９Ｈ），８．３５（ｓ，１Ｈ）。

化合物２５の合成：化合物ｒ（３．６０ｍｍｏｌ）をＮＨ₃−ＣＨ₃ＯＨの飽和の溶液（３０ｍｌ）に溶かし、室温で１５ｈ撹拌反応させ、溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物２５を得る。収率７８．９％、ＥＳＩ−ＭＳ：３０９［Ｍ＋Ｈ］。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，３００ＭＨｚ）δ：２．８５（ｓ，１Ｈ），３．６９−３．７９（ｍ，２Ｈ），４．７９−５．０７（ｍ，３Ｈ），５．６０（ｂｒ，１Ｈ），５．７９（ｂｒ，１Ｈ），７．３２−８．１７（ｍ，４Ｈ），８．３５（ｓ，１Ｈ）。

本発明の化合物の体外抗ＨＩＶ活性試験：細胞培養における化合物１、９、１５、１９、３６、３９、４６、５０、５２の抗ＨＩＶ活性。

試験対象薬剤：化合物１、９、１５、１９、３６、３９、４６、５０、５２、ロット無し、水に溶けない、ＤＭＳＯに溶けられ、試験するときＤＭＳＯで溶かし、適宜な濃度に調製した後培地で希釈し、直ちに細胞を入れて培養する。

陽性対照薬剤：
「１」アジドチミジン（Ｚｉｄｏｖｕｄｉｎｅ，ＡＺＴ）、臨床に使用されており、既知のヌクレオシド系ＨＩＶ−１逆転写酵素阻害剤であり、白色の粉末である。上海迪賽諾化学製薬有限公司から購入され、ロット番号０４０２０１ｂである。
「２」ネビラピン（ｎｅｖｉｒａｐｉｎｅ，ＮＶＰ）、南京澤衆医化情報研究センターから購入され、ロット番号０３０１００１で、臨床に使用されており、既知の非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤である。

ＨＩＶ―１ＩＩＩＢ試験ウイルス種、米国ＭｏｕｎｔＳｉｎａｉＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ蒋建東博士より贈与され、Ｈ９細胞において拡増され、−１９６℃で冷凍保存される。
継代ヒトＴリンパ球ＭＴ―４、米国コロラド大学医学研究センター張興権教授より贈与され、本室で継代され、−１９６℃で冷凍保存される。細胞培地：ＲＰＭＩＭｅｄｉｕｍ１６４０培地に１０％牛胎児血清、１００ＩＵ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン及びカナマイシンを加え、またL -グルタミンも含む。３７℃、５％ＣＯ₂インキュベーターに培養し、３日ごとに継代を行う。

主要試薬：ＲＰＭＩＭｅｄｉｕｍ１６４０培地は米国ＧＩＢＣＯ社の製品、牛胎児血清（ＦｅｔａｌＢｏｖｉｎｅＳｅｒｕｍ）は天津市川頁生物化学製品有限公司の製品、ペニシリン及びストレプトマイシンは華北製薬工場製品、カナマイシンは上海旭東海普薬業有限公司の製品、チアゾリルブルー（Ｔｈｉａｚｏｌｙｌｂｌｕｅ，ＭＴＴ）、クエン酸は米国Ｓｉｇｍａ社の製品、ＴｒｉｔｏｎＸ―１００はスウェーデンＫＥＢＯＡＢＳＴＯＣＫＨＯＬＭ社の製品、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ―ＤｉｍｅｔｈｙｌＦｏｒｍａｍｉｄｅ）は北京化学工場製品、ＨＩＶ―１Ｐ２４抗原測定キットはオランダＢｉｏＭｅｒｉｅｕｘ社の製品を使用する。
主要装置：Ｅｍａｘ^TMマイクロプレートリーダーは米国ＭｏｌＩＣｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ社の製品である。

試験方法：薬剤及び陽性対照薬剤ウイルス抑制試験群に分割し、９６ウェル培養プレートのウェルごとに、測定対象薬剤の異なる濃度のＤＭＳＯ溶液１００ｕｌまたは陽性対照薬剤ＡＺＴとＮＶＰまたはラット経口薬の異なる分量群を加えた後、異なる時間に血の異なる希釈群を取ってウェルごとに１００ｕｌを加え、同時に、細胞対照とウイルス対照群、陽性薬剤ＡＺＴとＮＶＰ対照群を設ける。ＭＴ―４細胞を１００ＴＣＩＤ₅₀ ＨＩＶ―１ＩＩＩＢで１．５ｈ感染した後、培地で１回洗って、２×１０⁵細胞／ｍｌのように調製された後薬剤ウイルス抑制試験群、陽性対照薬剤群及びウイルス対照群の９６ウェル培養プレートに接種する。細胞対照群に等量の培養液を加える。培養４日後、顕微鏡で細胞の病変を観察し、同時にＭＴＴで染色し、毒性を測定する。上澄液は説明書に記載された方法でＰ２４抗原を測定する。抑制率、５０％細胞毒性濃度（ＣＣ₅₀）、５０％阻害濃度（ＣＣ₅₀）及びＳＩをそれぞれ計算する。

ＭＴ―４細胞培養における、化合物１，９，１５，１９，３６，３９，４６，５０，５２のＨＩＶ―１に対する抑制作用
ＭＴＴ法で化合物１，９，１５，１９，３６，３９，４６，５０，５２の細胞に対する毒性及び抗ＨＩＶ―１活性を測定し、また、ＨＩＶ−１感染細胞と未感染細胞とを用いて薬剤の細胞に対する毒性を測定するときのＣＣ₅₀及びＳＩに与える影響を比較する。結果は表１を参照する。
表１、化合物１，９，１５，１９，３６，３９，４６，５０，５２及び陽性薬剤ＡＺＴとＮＶＰのＭＴ−４細胞培養における抗ＨＩＶ−１活性

*：細胞毒性：ＭＴＴ法

表２、野生型ＨＩＶ―１複製薬理学的モデルで化合物１、１５及び１９に対する薬理学的スクリーニングの結果

表１と表２から分かるように、新型２’−フルオロ−４’−置換−ヌクレオシドはともに良好な抗ＨＩＶ活性を有し、特に化合物１、化合物１５及び化合物１９は優れた使用開発前景を持っている。該種類の化合物の開発はエイズ患者にとって福音である。

本発明体外抗Ｂ型肝炎ウイルス薬のスクリーニング
目的：ＨＢＶゲノムトランスフェクトしたＨｅｐＧ２．２．１５細胞で抗Ｂ型肝炎ウイルス薬のスクリーニングを行い、新しい抗Ｂ型肝炎薬の研究及び開発に理論及び試験根拠を提供する。
方法：ラミブジン、化合物１５、１７のＴＣ₅₀以下の薬剤濃度を選んで細胞に作用させ、１４４ｈ、２１６ｈで細胞培養上澄液をそれぞれ採集し、蛍光定量ＰＣＲ法によってＨＢＶＤＮＡの含量を測定する。

結果：ラミブジン、化合物１５の投薬によって、HBV DNAのコピー数を顕著に低減させることができる。
結論：化合物１５は体外においてHBV DNAを顕著に低減させることができ、且つ毒性が低い。本試験は化合物の抗ＨＢＶ作用をより深く研究することに根拠を提供した。

細胞株：ＨＢＶＤＮＡクローニングトランスフェクトしたヒト肝細胞癌ＨｅｐＧ２のＨｅｐＧ２．２．１５細胞株は米国ＴｈｅＭｏｕｎｔＳｉｎａｉＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒによって１９８６年に設けられ、e抗原と表面抗原を安定に表現することができ、中国科学院武漢ウイルス研究所より贈与され、本研究所自分で継代され、培養過程中Ｇ４１８でスクリーニングを行った。

試験対象薬剤：本発明合成薬剤である化合物１５、１７。対照薬剤：ラミブジン（3TC）、グラクソ・スミスクライン株式会社（蘇州）有限公司の製品
主要試薬及び材料：ＤＭＥＭ培養液（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、牛胎児血清（杭州四季青）、２４ウェル培養プレート（米国ｃｏｒｎｉｎｇ）、培養フラスコ（米国ｃｏｒｎｉｎｇ）、Ｂ型肝炎ウイルス核酸増幅蛍光定量測定キット（シンセン匹基）、Ｇ４１８（ｉｎｔｒｏｖｅｇｅｎ）。

抗ＨＢＶの体外試験研究：
ＨｅｐＧ２．２．１５細胞の培養：１０％牛胎児血清、５００ｍｇ／ＬＧ４１８を含んだＤＭＥＭ培養液で細胞を培養し、０．２５％トリプシン−０．０２％ＥＤＴＡの消化液で消化し、且つ１：３に従い継代培養を行い、３日ごとに継代する。

薬剤の抗ＨＢＶ作用の研究：
成長状態良いの細胞を取り、細胞濃度を２＊１０⁴個／ｍｌになるように調整し、２４ウェル培養プレートの各ウェルに１ｍｌを接種して３７℃、５％ＣＯ₂のインキュベーターに４８ｈ培養し、細胞が壁に貼り付けて成長が良いとき試験を始まる。調製した異なる濃度に従い３種の薬剤に対して群を分け（表１）、濃度ごとに２つのマルチウェルを設け、同時に、薬剤を添加しなかった細胞培養対照をブランクコントロールとする。投薬３、６、９日目に同一濃度の薬剤含有培地及びブランク群培養液に１回換え、且つ各ウェルの培養上澄液をＥＰチューブに吸い込んで、―２０℃保管、検査対象とする。
表１、３種の薬剤（ラミブジン、化合物１５、１７）の濃度

薬剤対ＨＢＶ（蛍光定量ＰＣＲ法）：
ＨＢＶＤＮＡ抑制率（％）＝（ブランク群ＨＢＶＤＮＡコピー数−試験群ＨＢＶＤＮＡコピー数）／ブランク群ＨＢＶＤＮＡコピー数＊１００％
結果：ＨｅｐＧ２．２．１５細胞培養上澄ＨＢＶＤＮＡに対する薬剤の抑制作用は表２、３を参照する。

表２、ラミブジンの作用による細胞上澄液におけるＨＢＶＤＮＡコピー数に対する影響（コピー数ｘ×１０⁵）
群別濃度(μg/ml) HBV DNA含量抑制率
_______________________________________________________________________
正常 / 99.79 /
3TC 20μg /ml 12.15 87.82
2μg /ml 25.32 74.63
0.2μg /ml 39.59 60.33
0.02μg /ml 55.98 43.9
３ＴＣＥＣ₅₀は３８．７８μｇ／Ｌである。

表３、化合物１５、１７の作用による細胞上澄液におけるＨＢＶＤＮＡコピー数に対する影響（コピー数ｘ×１０⁵）
群別分量 HBV DNA コピー数(*10⁵) 抑制率(%)
_______________________________________________________________________
正常 / 32.01 /
3TC 10,000μg/L 5.49 82.8
15 2μg/L 5.21 83.7
0.4μg/L 10.3 67.8
0.08μg/L 13.5 57.8
0.016μg/L 18.9 41.0
17 1000μg/L 10.2 67.9
500μg/L 14.3 52.2
100μg/L 19.2 40.6
_______________________________________________________________________
化合物１５ＥＣ₅₀は０．１９μｇ／Ｌである。

表４、ＨｅｐＧ２．２．１５細胞に対する化合物１５の毒性（ＭＴＴ法）
_____________________________________________________________________
群別投与量 OD値細胞生存率
______________________________________________________________________
正常 / 0.644 /
15 1000μg/ml 0.520 82.6%
200μg/ml 0.552 85.5%
40μg/ml 0.606 96.7%
8μg/ml 0.626 98.7%
_____________________________________________________________________

Claims

式（Ｉ）で示される構造を有することを特徴とする２’−フルオロ−４’−置換ヌクレオシド類似体。
それは活性化合物（Ｉ）と有機酸または無機酸とを反応させて塩を形成し、塩の形式で存在することができることを特徴とする請求項１に記載の２’−フルオロ−４’−置換ヌクレオシド類似体またはそのプロドラッグまたはその５’−リン酸エステル。
前記化合物は以下の化合物のうちの１つであることを特徴とする請求項１に記載の２’−フルオロ−４’−置換ヌクレオシド類似体。
以下のステップを含むことを特徴とする請求項１に記載のヌクレオシド類似体の製造方法。

化合物iiの合成：化合物i（Ｄ−リボースまたはＬ−リボース）をＨＣｌ／ＭｅＯＨに溶かし、水浴上で保温密封撹拌し、ピリジンを加えて反応を終止させ、減圧乾燥して、淡黄色のシロップ状物質化合物iiを得る。
化合物iiiの合成：化合物iiを乾燥ピリジンに溶かし、氷塩浴で塩化ベンゾイルを徐々に滴下し、室温で撹拌反応させ、反応完了後反応液を氷水に注入し、クロロホルムで抽出を行い。水層が弱アルカリ性を呈するまで、順次に氷水、予め冷却した硫酸、飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、さらに、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、減圧乾燥して、淡黄色のシロップ状物質化合物iiiを得る。
化合物ivの合成：ベンゾイル化合物化合物iiiをクロロホルムに溶かし、赤リンを加え、氷水浴で撹拌しながら臭素を滴下し、約３０ｍｉｎ撹拌し、徐々に氷水を滴下し、室温で撹拌し、その後砕氷を加えて撹拌して溶解させ、さらに反応液を氷水に注入し、クロロホルムで抽出を行い。水層が弱アルカリ性を呈するまで飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧乾燥して、濃黄色のシロップを得、シリカゲルカラムで分離することによって、白色のドライシロップ化合物ivを得る。
化合物vの合成：化合物ivを乾燥ピリジンに溶かし、氷水浴で酸無水物を徐々に滴下し、約３０分撹拌し、氷水浴を除き、室温で約７ｈ撹拌し、４０℃まで昇温した後約１ｈ維持し、砕氷を加えて撹拌して溶解させた後、反応液を氷水に注入し、クロロホルムで抽出を行い。水層が弱アルカリ性を呈するまで、順次に氷水、予め冷却した硫酸、飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、減圧乾燥して、淡黄色のシロップ状物質化合物vを得る。
化合物viの合成：化合物vを乾燥ジクロロメタンに溶かし、氷水浴で乾燥ＨＣｌガスを徐々に流し入れ、氷水を加えて洗い、有機層が分けられ得、水層が弱アルカリ性を呈するまで飽和炭酸水素ナトリウムを用いて有機層を洗い、水層が中性を呈するまで氷水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、減圧乾燥して、淡黄色のシロップを得、再結晶によって白色の固体化合物viを得る。
化合物viiの合成：化合物viを乾燥ジクロロメタン及び乾燥ＤＭＦに溶かし、約−１５℃で撹拌しながらＳＯ₂Ｃｌ₂を徐々に加え、−１５℃で約３０ｍｉｎ撹拌し、自然に室温まで温度を上げて反応させ、０℃でイミダゾールを３回に分けて加え、混合液を室温で撹拌し、反応完了後反応液をＣＨ₂Ｃｌ₂で薄め、氷水で洗い、ＣＨ₂Ｃｌ₂で水層に対して抽出を行い、合わせて１つにした有機層に後無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し、溶媒を減圧抽出して淡黄色のシロップを得、シリカゲルカラムで分離精製することによって、白色の固体化合物viiを得る。
化合物viiiの合成：化合物viiを酢酸エチルに溶かし、撹拌しながらＥｔ₃Ｎ・３ＨＦを加え、温度を約６０℃まで上げて約３ｈ撹拌を行い、７０℃で約１．５ｈ撹拌し、冷塩水を加えて反応を終止させ、次いでジクロロメタンで抽出を行い、合わせて１つにした有機層を順次に塩水、水、飽和炭酸水素ナトリウムで洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、溶媒を減圧抽出して濃黄色のシロップを得、精製によって淡黄色のシロップを得、不純物に結晶を生じさせて白色の結晶化合物viiiを得る。
化合物ixの合成：化合物viiiを無水ジクロロメタンに溶かし、ＨＢｒ−ＡｃＯＨの混合液を加え、室温で撹拌反応させ、反応完了後混合物を蒸発乾固し、ジクロロメタンで残留物を溶かし、且つ炭酸水素ナトリウムでジクロロメタン溶液を洗い、ジクロロメタンを蒸発除去して、シロップ状物を得る。同時に、保護されたシトシン及び(ＮＨ₄)₂ＳＯ₄をＨＭＤＳにおいて窒素の保護で還流反応させ、反応完了後、溶媒を蒸発除去し、シリル化したシトシンを得る。前記反応によって得たシロップ状物をジクロロエタンに溶かしてシリル化したシトシンに加え、窒素の保護で混合物を還流反応させる。氷で反応を終止させ、ジクロロメタンで浸出を行い、順次に飽和炭酸水素ナトリウム、塩水でジクロロメタン層を洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥を行い、乾燥後溶媒を蒸発除去し、白色の固体を得、カラムクロマトグラフィーによって分離精製を行い、化合物ixを得る。
化合物xの合成：化合物ixを飽和ＮＨ₃−ＣＨ₃ＯＨに溶かし、室温で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、得た残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物xを得る。
化合物xiの合成：化合物x、イミダゾール、トリフェニルホスフィンをテトラヒドロフランに溶かし、ヨウ素が溶解されたテトラヒドロフラン液を徐々に加える。室温で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物に酢酸エチルを加え、濾過する。酢酸エチルを蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離し、化合物xiを得る。
化合物xiiの合成：化合物xiをテトラヒドロフランに溶かし、ＤＢＵを加える。約６０℃で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離し、化合物xiiを得る。
化合物xiiiの合成：０℃で、ＩＣｌが溶解されたＤＭＦ液をＮａＮ₃が溶解されたＤＭＦ液に加え、氷点で約１０ｍｉｎ撹拌し、化合物xiiが溶解されたＤＭＦ液を前記溶液に徐々に加え、続けて反応させ、反応完了後、ヨウ素の色が完全に消えるまで混合液に亜硫酸ナトリウムを加える。減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物xiiiを得る。
化合物xivの合成：化合物xiiiをＤＭＦに溶かし、撹拌しながら酢酸銀を加え、室温で反応させ、反応完了後ろ過を行い、減圧で溶媒を除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物xivを得る。
化合物xvの合成：化合物xivをトリエチルアミンメタノール溶液に溶かし、室温で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物xvを得る。
以下のステップを含むことを特徴とする請求項１に記載のヌクレオシド類似体の製造方法。

化合物ｂの合成：化合物ａを取り、アセトンを加え、撹拌しながら濃硫酸を徐々に加え、室温で撹拌反応させ、ＴＬＣ試験で反応完了後、濃アンモニア水を用いてｐＨ調整し、ろ過を行い、減圧によってほとんどのアセトンを蒸発除去させ、撹拌しながら０．４％希塩酸を加え、アセトン還流条件において反応し、化合物ａを全部化合物ｂに加水分解させる。固体ＮａＨＣＯ₃で反応液を中和し、ろ過を行い、減圧でろ液に溶媒を蒸発除去させ、残留物をジクロロメタンで溶かし、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で一夜乾燥させ、ろ過を行い、溶媒を蒸発除去した後、黄色の粘っこい油性物ｂを得る。
化合物ｃの合成：化合物ｂ及びトリエチルアミンをジクロロメタンに溶かし、氷塩浴で4-クロロベンゾイルクロライドを徐々に滴下し、０℃以下を維持して機械撹拌反応させ、反応完了後飽和ＮａＨＣＯ₃溶液を加え、水、飽和食塩水でジクロロメタン層を洗い、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、ろ過を行い、減圧で溶媒を蒸発除去し、且つ残留物を再結晶させ、白色の結晶化合物ｃを得る。
化合物ｄの合成：化合物ｃを無水ジクロロメタンに溶かし、窒素の保護でイミダゾール及びｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（ＴＢＤＭＳＣｌ）を加える。室温で反応させ、反応完了後塩酸で反応を中和し、両層を分離させ、それぞれ水及び飽和食塩水で有機層を洗った後、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｄを得る。
化合物ｅの合成：化合物ｄをナトリウムメトキシド―メタノール混合液に加え、室温で反応させ、反応完了後希酢酸で中和し、ろ過を行い、メタノールで洗い、減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｅを得る。
化合物ｆの合成：約−６０℃でオキサリルクロリドのジクロロメタン溶液にＤＭＳＯを1滴ずつ滴下し、同一の温度で約１５ｍｉｎ撹拌した後、化合物ｅのジクロロメタン溶液を滴下する。約−６５℃で約３０ｍｉｎ撹拌反応させ、トリエチルアミンを加え、室温で撹拌反応させる。反応完了後反応液に水を加え、有機層を分離させ、無水硫酸マグネシウムで有機層を乾燥させる。溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｆを得る。
化合物ｇの合成：発生瓶に水酸化ナトリウム及び水を加え、撹拌して均一にさせた後、ホルムアルデヒド溶液、９５％エタノールを加え、さらに化合物ｆを加える。約３５℃で撹拌反応させ、反応完了後、撹拌しながら生成物が完全に析出するまで氷水で発生瓶を冷却する。吸引ろ過し、中性を呈するまで固体を水で洗って加熱乾燥させ、得た固体を無水メタノールに溶かし、さらに水素化ホウ素ナトリウムを加え、還流反応させ、反応完了後希塩酸で反応液を中和し、ジクロロメタンで反応液に対して浸出を行い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた後溶媒を蒸発除去し、化合物ｇを得る。
化合物ｈの合成：化合物ｇをメタノールに溶かし、ＤｏｗｅｘＨ⁺（事前にメタノールを用いて洗う）を加え、室温で反応させ、反応完了後樹脂をろ過除去し、且つメタノールで樹脂を繰り返して洗い、溶液を蒸発乾固して固体を得る。得た固体をアセトンに溶かし、撹拌しながら濃硫酸（触媒量）を徐々に加え、室温で撹拌反応させ、濃アンモニア水を用いてｐＨ調整し、ろ過を行い、減圧でアセトンを蒸発除去し、化合物ｈを得る。
化合物ｉの合成：約−６０℃でオキサリルクロリドのジクロロメタン溶液にＤＭＳＯを1滴ずつ滴下し、滴下完了後約１５ｍｉｎ撹拌し、化合物ｈのジクロロメタン溶液を滴下する。滴下完了後−６０℃で約３０ｍｉｎ反応させ、トリエチルアミンを加え、室温で約３０ｍｉｎ反応させた後水を加えて反応を終止させ、有機層を分離させ、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で有機層を乾燥させる。溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製して固体を得る。ＣｌＣＨ₂Ｐ（Ｃ₆Ｈ₅）₃Ｃｌを無水テトラヒドロフランに加え、約−７８℃まで冷却し、ｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液を加え、約１ｈ撹拌反応させ、その後得た固体の乾燥テトラヒドロフラン溶液を加える。徐々に温度を約０℃まで上げ、続けて反応させる。反応完了後飽和のＮＨ₄Ｃｌ溶液を滴下し、酢酸エチルで浸出を行い、塩水で有機層を２回洗い、最終に無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させる。減圧で溶媒を蒸発除去し、得た残留物を無水テトラヒドロフランに溶かし、−７８℃まで冷却し、ｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液を徐々に滴下し、約２ｈ撹拌反応させ、飽和ＮＨ₄Ｃｌ溶液で反応を終止させ、飽和食塩水で有機層を洗い、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物を高速カラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｉを得る。
化合物ｊの合成：化合物ｉを希塩酸溶液に加え、室温で撹拌反応させ、反応完了後固体ＮａＨＣＯ₃で中和し、ろ過を行い、減圧でろ液に溶媒を蒸発除去させ、ジクロロメタンで残留物を溶かし、且つ無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した後ろ過し、溶媒を蒸発除去し、化合物ｊを得る。
化合物ｋの合成：化合物ｊをピリジンに溶かし、ＢｚＣｌを滴下し、室温で反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物を精製した後化合物ｋを得る。
化合物ｌの合成：化合物ｋ及び２，２，６，６‐テトラメチルピペリジン‐Ｎ‐オキシルをジクロロメタンに溶かし、０℃まで冷却し、混合した次亜塩素酸ナトリウム溶液、ＮａＨＣＯ₃と水の混合液を反応液に加え、約０℃で約３０ｍｉｎ反応させ、イソプロパノールを加え、室温で撹拌する。分離されたジクロロメタン層を水で２回洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した後ろ過し、溶媒を蒸発除去し、得た残留物に対して再結晶を行い、化合物ｌを得る。
化合物ｍの合成：化合物ｌを無水エタノール／酢酸エチルの混合液に加え、約０℃まで冷却し、水素化ホウ素ナトリウムを数回に分けて加え、撹拌反応させ、反応完了後希酢酸で中和し、ろ過を行い、ろ液を蒸発乾固し、残留物をさらにジクロロメタンで溶かし、その後水で洗い、ジクロロメタン層を無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、減圧でジクロロメタンを蒸発除去し、ジクロロメタンと石油エーテルとの混合溶媒で残留物に対して再結晶を行い、固体物を得る。得た固体物をピリジンに溶かし、約０℃でＢｚＣｌを滴下し、滴下完了後室温で反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、酢酸エチルで残留物に対して浸出を行い、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した後ろ過し、溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｍを得る。
化合物ｎの合成：化合物ｍをメタノールに溶かし、濃塩酸／ジオキサンの混合溶液を加え、室温で反応させ、反応完了後ＮａＨＣＯ₃を用いて反応液を中和し、ろ過を行い、ろ液に対して減圧蒸留を行って溶媒を除去し、残留物を適量のジクロロメタンに溶かし、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で一夜乾燥させ、ろ液を蒸発乾固し、カラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｎを得る。
化合物ｏの合成：化合物ｎをジクロロメタンに溶かし、室温でＤＡＳＴを加えて撹拌反応させ、反応完了後混合物を飽和ＮａＨＣＯ₃溶液に注入し、有機層を分離させ、且つ飽和ＮａＨＣＯ₃溶液で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、カラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｏを得る。
化合物ｐの合成：化合物ｏをギ酸溶液に加え、室温で撹拌反応させ、反応完了後減圧で溶媒を蒸発除去し、残留物をトルエンと共に蒸発して固体物を得、得た固体物を乾燥ピリジン及び無水酢酸溶液に溶かし、室温で反応させ、反応完了後反応液を濃縮し、その後トルエンと共に蒸発させ、化合物ｐを得る。
化合物ｑの合成：化合物ｐを無水ジクロロメタンに溶かし、それを０℃まで冷却し、その後飽和するまでＨＣｌガスを徐々に流し入れ、室温で溶媒を真空蒸発除去し、残留物を真空中で乾燥させ、化合物ｑを得る。
化合物ｒの合成：２，６−ジアミノプリンとヘキサメチルジンラザンとを(ＮＨ₄)₂ＳＯ₄の存在で透明溶液になるまで加熱還流させ、真空中で溶媒を蒸発除去して白色の固体を得、該固体を１，２ −ジクロロエタンに溶かし、さらに化合物ｑの１，２ −ジクロロエタン溶液及びゼオライトを加え、窒素の保護で室温において撹拌反応させ、ＴＬＣ試験で反応完了後、反応液にジクロロメタンを加え、且つ珪藻土でろ過を行い、それぞれ飽和ＮａＨＣＯ₃及び食塩水でろ液を洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で有機層を一夜乾燥させ、溶媒を蒸発除去し、得た残留物を減圧カラムクロマトグラフィーによって分離し、化合物ｒを得る。
化合物ｓの合成：化合物ｒをＮＨ₃−ＣＨ₃ＯＨの飽和の溶液に溶かし、室温で撹拌反応させ、反応完了後溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって分離精製し、化合物ｓを得る。
それを抗ＨＢＶウイルス薬または抗ＨＣＶウイルス薬または抗ＨＩＶウイルス薬の製造に使用することを特徴とする請求項１または２または３に記載の２’−フルオロ−４’−置換ヌクレオシド類似体の薬剤製造における使用。
抗ＨＢＶウイルス薬は抗Ｂ型肝炎薬で、抗ＨＩＶウイルス薬は抗エイズ薬で、抗ＨＣＶウイルス薬は抗Ｃ型肝炎薬であることを特徴とする請求項６に記載の２’−フルオロ−４’−置換−ヌクレオシド類似体の薬剤製造における使用。