HU221275B1 - Replication defective recombinant adenoviruses expressing anti-tumor cytokines, process for production thereof and their uses - Google Patents

Replication defective recombinant adenoviruses expressing anti-tumor cytokines, process for production thereof and their uses Download PDF

Info

Publication number
HU221275B1
HU221275B1 HU9303229A HU9303229A HU221275B1 HU 221275 B1 HU221275 B1 HU 221275B1 HU 9303229 A HU9303229 A HU 9303229A HU 9303229 A HU9303229 A HU 9303229A HU 221275 B1 HU221275 B1 HU 221275B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
adenovirus
adenoviral vector
promoter
nucleic acid
cells
Prior art date
Application number
HU9303229A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9303229D0 (en
HUT66486A (en
Inventor
Hedi Haddada
Michel Perricaudet
Thierry Ragot
Original Assignee
Centre Nat Rech Scient
Roussy Inst Gustave
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Centre Nat Rech Scient, Roussy Inst Gustave filed Critical Centre Nat Rech Scient
Publication of HU9303229D0 publication Critical patent/HU9303229D0/hu
Publication of HUT66486A publication Critical patent/HUT66486A/hu
Publication of HU221275B1 publication Critical patent/HU221275B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
    • A61K35/761—Adenovirus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/10011—Adenoviridae
    • C12N2710/10211—Aviadenovirus, e.g. fowl adenovirus A
    • C12N2710/10241—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/10243—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/10011—Adenoviridae
    • C12N2710/10311—Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
    • C12N2710/10332—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/10011—Adenoviridae
    • C12N2710/10311—Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
    • C12N2710/10341—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/10343—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector

Abstract

A találmány tárgya rekombináns adenovírus-vektor, amelynek genomiszekvenciájából hiányzik legalább egy, repliká- cióhoz szükségesszekvencia, azonban nem hiányoznak azok a szekvenciák, amelyek azadenovírusnak a sejtekbe történő belépéséhez szükségesek, valamint azadenovírus kapszidképzéséhez szükséges esszenciális szekvenciák egykészlete; és amelynek genomi szekvenciája tartalmaz egy, citokintkódoló nukleinsavszekvenciát tartalmazó inszer- tumot, és amelyadenovírus-vektorból hiányoznak az adenovírus E1A és E1Btranszaktivátorai és E3 régiója. A találmány tárgyát képezik továbbáeljárások az adenovírus-vektor előállítására, az adenovírus-vektorttartalmazó gyógyászati készítmény, valamint a hiányos adenovírusalkalmazása tumor elleni drog előállítására. A találmány szerintimegoldás tumoros megbetegedések citokinekkel történő kezelésébenalkalmazható. ŕ

Description

A találmány tárgya rekombináns adenovírus-vektor, amelynek genomi szekvenciájából hiányzik legalább egy, replikációhoz szükséges szekvencia, azonban nem hiányoznak azok a szekvenciák, amelyek az adenovirusnak a sejtekbe történő belépéséhez szükségesek, valamint az adenovírus kapszidképzéséhez szükséges esszenciális szekvenciák egy készlete; és amelynek genomi szekvenciája tartalmaz egy, citokint kódoló nukleinsavszekvenciát tartalmazó inszertumot, és amely adenovírus-vektorból hiányoznak az adenovírus E1A és E1B transzaktivátorai és E3 régiója.
A találmány tárgyát képezik továbbá eljárások az adenovírus-vektor előállítására, az adenovírus-vektort tartalmazó gyógyászati készítmény, valamint a hiányos adenovírus alkalmazása tumor elleni drog előállítására.
A találmány szerinti megoldás előnyösen alkalmazható tumoros megbetegedések citokinekkel történő kezelésében.
A citokinek olyan molekulák (hormonok), amelyeket az antigének stimuláló, vagy más tényezők aktiváló hatására termelnek a sejtek. Elsőként az interleukin 1 citokint (IL-1) állították elő. Ez az anyag teszi lehetővé a T-sejtek aktiválódását, amelyek azután sorjában a limfokinek egész sorozatát kezdik termelni; ezek közül egyesek nélkülözhetetlenek az immunrendszer aktiválásához, valamint a vírus- vagy parazitafertőzések elleni védelemhez.
Néhány éve alkalmazzák a citokineket a rák elleni immunterápiában. A szokott módon végzett alkalmazásuk azonban több problémát vet fel. így például az IL-2 eléggé jelentős másodlagos hatást fejt ki, továbbá gyorsan metabolizálódik, és ennek következtében nagy dózisokban, ismételten kell adagolni.
Ezért folyik a kutatás jobb adagolási módszerek iránt, amelyek a citokinek hatékonyságát képesek növelni a nem kívánt mellékhatások csökkentésével párhuzamosan.
A fentiek alapján a találmány célja olyan, egy vagy több citokint kifejező, hiányos rekombináns adenovírusok kialakítása, valamint ezen rekombináns adenovírusok felhasználása gyógyászati, különösen daganatgátló (daganat elleni) hatású gyógyászati készítmények előállítására, amelyek szilárd daganatokba közvetlenül befecskendezhetők.
A jelen találmány olyan, hiányos (szerkezetű) rekombináns adenovírusokra vonatkozik, amelyekre jellemző, hogy hiányos, nem replikálódó adenovírus-genomot hordoznak, amelyben egy vagy több citokint, nevezetesen limfokint kódoló, egy vagy több nukleinsavszekvencia van beépítve, s ezek egy vagy több promoter kontrollja alatt állnak, amelyeket az emberi sejtek, különösen az emberi daganatsejtek vagy a daganatba beszűrődő (a daganatot infiltráló) sejtek polimeráz enzimjei felismerni képesek.
Még közelebbről a találmány olyan rekombináns nukleinsavakra vonatkozik, amelyek ilyen hiányos, rekombináns adenovírusok előállítására használhatók.
Egy ilyen rekombináns nukleinsavra jellemző, hogy egyrészt egy hiányos adenovírus genomszekvenciáját hordozza - mivel a replikációhoz szükséges szekvenciái hiányoznak - másrészt viszont olyan szekvenciákkal rendelkezik, amelyek: ebben a genomban elősegítik az adenovírusnak az általa fertőzhető sejtekbe hatolásához szükséges genetikai információt; valamint ennek az adenovírusnak a héjképzéséhez szükséges, esszenciális szekvenciák együttesét; és jellemző másrészt, hogy olyan, nukleinsavszekvenciát tartalmazó inszertumot hordoz, amely egy citokint kódol; és ez az inszertum egy meglévő, vagy a fenti genomszekvenciába előzőleg beépített promoter kontrollja alatt áll.
Az adenovírusok, nevezetesen a 2. vagy 5. típusú adenovírusok, amelyek ember fertőzésére képesek (emberi adenovírusok), valamint a 4. és 7. szerotípusú adenovírusok a jelen találmányon belül különösen előnyös vektorokat képeznek, főként az idegen DNS nagy mérete miatt, amely egy vírus genomjába építhető.
A fentebb említett inszerciós nukleinsavszekvenciák - amelyek egy vagy több, előre meghatározott citokint kódolnak - olyan hiányos adenovírus-genomban vannak jelen, amelyből ezen adenovírusok replikációjához szükséges, esszenciális nukleotidszekvenciák - különösen El A és El B transzaktivátorok, és adott esetben az adenovírus E3 régiója (tartománya), vagy még az El és E3 régiói (tartományai) is - hiányoznak.
Másként kifejezve a találmány ezeknek a hiányos, rekombináns adenovírusoknak azt a képességét hasznosítja, hogy azt a beépített szekvenciát, amelyet tartalmaznak, képesek kifejezni a megtámadott sejtekben, azonban - hiányos jellegük következtében - nem szaporodnak. Más szavakkal fogalmazva, a találmány célja a citokineknek a ki választatása magában a kezelendő daganatsejtekben (azaz a daganatsejtekben, valamint a daganatba beszűrődő sejtekben, nevezetesen limfocitákban), mivel ezek hiányos adenovírusokkal vannak fertőzve, különösen akkor, ha az adenovírusokat közvetlenül a daganatba fecskendezzük. így tehát a termelődött citokinek elsősorban in situ a daganatba szűrődő citotoxikus sejteket, valamint a daganat közvetlen közelében lévő sejteket fogják aktiválni.
Ami a hiányos, rekombináns adenovírus genomjába épített inszerciós szekvenciát illeti, bármely szekvenciát választhatunk, amely akár közvetlen daganatgátló hatás kifejtésére képes, akár a szervezet immunrendszeri védelmében részt vesz, akár mindkét hatással rendelkezik.
E citokinek közül példaként említjük az IL—1, IL-2, 1L-3, IL-4, IL-5, IL-6, alfa-interferon, gamma-interferon, „tumomekrózis-faktor-alfa” (TNF-α) citokineket.
Ugyanezek a rekombináns adenovírusok alkalmazhatók egyes olyan betegségek esetében, ahol immunhiány áll fenn, valamint bizonyos paraziták vagy vírusok okozta betegségekben (különösen a gamma-interferon, alfa-interfon és /vagy GM-CSF („Colony Stimulating Factor”, azaz kolóniastimuláló faktor), mégpedig a konvencionális adagolási úton, vagy sejtek, előnyösen emberi sejtek közvetítésével, amelyeket emberekbe fecskendezésre alkalmas állapotban veszünk ki, és amely sejteket előzőleg egy találmány szerinti, hiányos, rekombináns adenovírussal fertőzünk.
HU 221 275 Bl
Az alábbiakban néhány citokin sajátságait foglaljuk össze.
Interleukin 1 (IL—1)
Ezt a citokint lényegében monociták és aktivált makrofágok termelik. Molekulatömege körülbelül 17 kilodalton. Többféle hatása van, így például:
a) kémiai vonzó hatást fejt ki polimorf magvú (lebenyes magvú) sejtekre és makrofágokra;
b) növeli a spontán citotoxikus sejtek („Natural Killer”, rövidítve: NK) citotoxikus aktivitását;
c) fertőzés következtében lázat vált ki;
d) elsősorban a T-sejteket aktiválja más faktorok termelésére.
Interleukin 2 (IL—2), interleukin 4 (IL-4) és interleukin 5 (IL—5)
Ezeket a citokineket az aktivált T-limfociták termelik. E citokinek hatása az immunrendszer sejtjeire korlátozódik, azok szaporodását és aktiválódását váltják ki. Az IL-2 és IL-4 citokineket egéren és emberen vizsgálták a daganatgátló immunterápia vonatkozásában. E citokinek egereken szinergetikusan hatnak, és a daganat regresszióját idézik elő.
Interleukin 6 (IL—6)
Ezt a citokint számos sejttípus, így a T-limfociták, makrofágok, fibroblasztok termelik. E citokin váltja ki a B-limfociták végső differenciálódását, amelyek antitesttermelővé válnak.
Az alfa-tumomekrózis-faktor (TNF-a)
Ezt a faktort a makrofágok termelik. Hatása kettős: közvetlenül hat a daganatsejtekre, mivel lízisüket okozza; továbbá aktiválja az immunrendszert.
A TNF-a-faktort emberen óvatosan kell alkalmaznunk, mivel számos sejt rendelkezik e citokin receptorával. Ebből ered az a törekvés, hogy elválasztása csak lokálisan, magában a tumorban történjék, nem kívánt, a daganatot hordozó egyed más sejtjeire kifejtett hatásainak korlátozása céljából.
Interleukin 3 (IL—3), interleukin 7 (IL—7) és a „Colony Stimulating Factor” (CSF)
Ezek az anyagok vérképző növekedési faktorok, amelyeket lényegében limfociták, monociták és makrofágok termelnek. A vérképzés különböző szintjein, azaz a velősejtek vérsejtekké differenciálódásának különböző lépcsőiben hatnak. Másrészt a CSF jelentős hatásokat fejt ki a szervezetnek bakteriális támadások elleni, elsődleges védelmében, mivel a CSF a makrofágokat a fertőzés helyére vonzza, és fagocitáló képességüket növeli.
A GM-CSF IL-2 és IL-4 citokinekkel kombinálva jelentős daganat elleni faktornak bizonyult.
A gamma-interferon (IFN-γ)
Ezt a faktort aktivált T-sejtek termelik, antivirális sajátságokkal rendelkezik, gátolja vírusok és paraziták szaporodását, valamint a fertőzött sejtek és egyes daganatsejtek lizisét idézi elő.
Az alfa-interferon (IFN-a)
E faktort T-sejtek és monociták termelik; antivirális hatása van, és lítikusan hat a fertőzött sejtekre. Az IFN-a faktort felhasználták bizonyos típusú rákos daganatok így a mezotélium rákos daganatainak - immunterápiájában.
Nyilvánvaló, hogy a találmány - a találmány szerinti adenovírusokban alkalmazható inszerciós szekvenciák megválasztásában - nem korlátozódik a fentebb felsorolt faktorokra. Ezek a faktorok csupán azoknak a lehetőségeknek a palettáját mutatják, amelyek a gyógyító orvos rendelkezésére állnak, hogy a legalkalmasabb hiányos, rekombináns adenovírust válassza a megszüntetni kívánt daganat jellege szerint.
A találmány azokra a gyógyászati készítményekre is vonatkozik, amelyek egy vagy több - például fentebb említett - rekombináns vektort gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal együtt (összekeverve) tartalmaznak; a találmány különösen a kezelésre szoruló daganatba közvetlenül befecskendezhető, steril, izotóniás készítményekre, vagy száraz, nevezetesen liofilizált készítményekre vonatkozik, amelyek sterilizált víz vagy fiziológiás konyhasóoldat hozzáadásával a daganatba közvetlenül fecskendezhető oldatokká alakíthatók vagy rekonstruálhatók.
A módosított, nem replikálódó adenovírusok közvetlenül a daganatba fecskendezése azzal az előnnyel jár, hogy egyrészt elkerülhető a rekombináns adenovírusok szóródása az általános keringésben, aminek következményeként a kifejezett citokinek által kiváltott másodlagos hatások érvényesülnének azon helyeken, ahol hatásuk kívánatos, azaz a daganatsejtekben, vagy a daganatba szűrődő limfocitákon vagy a daganat közvetlen közelében lévő sejteken kívül. A befecskendezést előnyösen az elsődleges daganatnak legalább egy helyén végezzük.
A találmány azonban nem korlátozódik a kérdéses citokineket kódoló szekvenciákat tartalmazó rekombináns adenovírusoknak közvetlenül a daganatokba fecskendezésére. Figyelembe vehető az adagolás bármely módja, amely lehetővé teszi, hogy a rekombináns adenovírusok a kezelésre szoruló daganatba jussanak. E célra különösen alkalmasak a daganatot hordozó gazdaszervezettel összeegyeztethető sejtek, például emberi fibroblasztsejtek, amelyeket előnyösen a gazdaszervezetből előzőleg veszünk ki.
A találmány még továbbá azokra a sejttenyészetekre, például fibroblaszttenyészetekre is vonatkozik, amelyeket előzőleg a rekombináns nukleinsavakkal, különösen a fentebb definiált, hiányos adenovírusokkal fertőzünk. Ezek a fertőzött, adott esetben gyengített vagy immunológiai szempontból közömbössé tett (közömbösített) (például sugárzással közömbösített) sejtek konvencionális úton adagolva hozzájárulnak a daganat megszüntetéséhez. A befecskendezés tervezhető a hagyományos módon önmagában, vagy a hagyományos módon és közvetlenül a daganatba adagolással együttesen.
A találmány továbbá a fentebb leirt, rekombináns adenovírusok előállítási eljárására is vonatkozik. Ez az eljárás abban áll, hogy előbb megszerkesztjük a tulajdonképpeni vektort egy vagy több inszerciós nukleinsavnak az adenovírus-genomjába építésével; egy következő lépésben olyan, felsőbbrendű eukarióták (nevezetesen emberi vagy állati eukarióták) transzformálható sejtvonalait transzformáljuk, amelyek egy megkülönböztetett nukleotidszekvenciát hordoznak, amelyek al3
HU 221 275 Β1 kalmasak azon szakasz vagy szakaszok (rész vagy részek) kiegészítésére (komplementálására), amelyek a hiányos adenovírus genomjából hiányoznak, s amelyek nélkül a replikáció tiltott. Az említett, megkülönböztetett szekvencia előnyösen be van építve a fentebb említett sejtvonal genomjába.
Ezen sejtvonalak előnyös példájaként említjük a 293-as vonalat egy, az emberi embrió veséjéből származó vonalat, amely genomjában integrálva egy 5. típusú adenovírus (Ad5) genomja baloldali végének első 11 százalékát tartalmazza. Ezek tehát képesek kiegészíteni olyan rekombináns, hiányos vírusokat, amelyekből ez a rész hiányzik (deléciós). Ilyen előállítási eljárást ismertetnek részletesen a 1985. november 20-án bejelentett, 0 185 573 számú, közzétett európai szabadalmi bejelentésben.
E sejtvonalak transzformálása után az így szaporított és termelt, hiányos adenovírust a sejttenyészet közegéből kinyerjük, és tisztítjuk.
Az alábbiakban részletesen leírjuk a találmányt, amikor is egy olyan, rekombináns adenovírus vektor szerkesztését mutatjuk be, amely legalább egy, valamely citokint, célszerűen limfokint kódoló szekvenciát tartalmaz.
I. Módszerek
a) Sejtek és vírus
Az emberi embrióveséből származó, Ad5-tel transzformáit 293-as sejtvonalat (Graham és munkatársai, 1977) használunk fel a DNS transzfekciójához, valamint az adenovírus (Ad) szaporításához és titrálásához. A 293-as sejtvonal valóban kiegészíti (komplementálja) az E1A és E1B funkciós gének fúnkcióit, és lehetővé teszi a hiányos Ad-rekombinánsok replikációját. A rekombináns Ad felépítésére az emberi Ad5-dl324-et alkalmaztuk, amelynek El régiójában (3,9-10,5 m.u.) és E3 régiójában (78,5-84,3 m.u.) deléciók vannak (Shenk és Williams, 1984). A 293-as sejtvonalakat (Hela és Verő) 10% boíjúmagzatszérummal kiegészített Eagleféle minimálesszenciális táptalajon tartottuk.
b) A különböző citokinek kifejezését biztosító plazmidok szerkesztése
Az eukarióta pMLPlO kifejező vektort (expressziós vektort) leírták (Ballay és munkatársai, 1985). E vektor egyik származékát (pMLP18) olyan szekvencia beillesztésével építettük fel, amely különleges restrikciós helyeket tartalmazott az adenovírus késői, fő promoterjétől lefelé eső irányban. E helyek tehát lehetővé teszik különböző, előre megválasztott citokineket a víruspromoter kontrollja mellett kódoló gének klónozását. Ezen különleges restrikciós helyeket tartalmazó szekvenciáktól lefelé eső irányban helyeztük el az SV40 vírus korai antigénjeit kódoló génpoliadenilező szignálját. Lefelé eső irányban klónoztuk a BglII—HindlII fragmentumot. Ez a 3 Kpb méretű szekvencia a IX fehérjét kódoló gént tartalmazza, amely szükséges a vírusgenom héjképzéséhez normális méretének több mint 97%-ában, és lehetővé teszi az utólagos (későbbi) rekombinációt in vivő körülmények között. A különböző citokinek génjét kódoló szekvenciákat a kapott plazmidokból izoláltuk. Ezeket a szekvenciákat - különböző restrikciós enzimekkel végzett hasítás után - a fentebb leírt expressziós vektor (pMLP18) többszörös klónozási helyén vezettük be. így nyertük a különböző, pMLP-citokinnek (IL-2-, IL-4- stb.-nek) nevezett, különböző plazmidokat, amelyeket az alábbiak szerint rekombináns vírusok létesítésére alkalmaztunk.
c) A DNS transzfektálása és a rekombináns vírus elkülönítése
A hiányos, rekombináns Ad-citokin vírusokat az előzőleg Cla I restrikciós enzimmel hasított vírusgenom jobb oldali fragmentumának és a fentebb leírt pMLPcitokin plazmidban lévő homológ szekvenciának a rekombinációjával kaptuk. A vírusgenom hasítás után tisztított fragmentumának (2,6 m.u.-lOO m.u.) és Cla I vagy Pvu I restrikciós enzim által linearizált plazmidnak a keverékét a 293-as sejtekben transzfekciónak vetettük alá a kalcium-foszfátos kicsapási módszerrel (Graham és Van Dér Eb, 1973). A citopátiás hatást mutató sejtplakkokat 10 nap eltelte után izoláltuk, és a vírust tenyésztéssel szaporítottuk. A vírus-DNS-t Hirt eljárásával extraháltuk (Graham és munkatársai, 1977), és a rekombináns vírusokat restrikciós enzimtérkép segítségével azonosítottuk.
Az 1. ábra vázlatosan mutat egy ilyen típusú szerkesztést, aminek során egy interleukint (IL-2, IL—4) kódoló szekvenciát alkalmaztunk.
Ezen az ábrán:
- „leaders” megfelel egy háromtagú vezető szakasznak; - „Del” deléciót jelent;
- Ad dl 324 jelentése a fentebb meghatározott deléciós helyeket tartalmazó adenovírus.
d) Kifejezett citokint kódoló szekvenciák expressziója (kifejezése)
A Hela vagy Verő sejtvonalakat a kapott, hiányos rekombináns vírusokkal fertőztük. A valóban transzformáit sejteket alapvetően jellemezni tudtuk, mivel a tenyésztőközegükben felszabadult citokin aktivitása kimutatható. Az IL-2 esetében az elérhető hozam 1-2 pg interleukin 106 sejtre vonatkoztatva.
A rekombináns Ad-citokinnel fertőzött sejtek a tenyésztőközegben változó mennyiségű citokint választanak el. A termelt citokinek kimutatására és mennyiségi meghatározására különböző módszereket alkalmazhatunk.
1) Kvantitatív módszerek:
- az ELISA-módszer, specifikus antitestek alkalmazásával;
- a radioimmun-meghatározás (RIA); és - a Western „biot” eljárás.
2) Kvalitatív módszerek (biológiai tesztek, biotesztek):
Ezek a citokinek biológiai sajátságain alapulnak. Például:
IL-2: CTL-L2 sejtek szaporodási (burjánzást) tesztje (a CTL-L2 sejtek csak akkor szaporodnak és maradnak meg a tenyészetben, ha tenyésztőközegükben IL-2 van jelen).
IL-3 és GM-CSF: TF-1 sejtek szaporodási tesztje,
IL-4: CTL-L2 sejtek szaporodási tesztje; valamint CD23 oldható részek indukciója egyes sejtek, így limfociták által.
HU 221 275 Β1
INF-α: az L92-9 sejtekre kifejtett citotoxikus hatás tesztje.
Közömbösítési teszt: a citokinek hatása gátolható, ha a célsejteket specifikus antitesteket tartalmazó sejtek jelenlétében inkubáljuk.
Az alábbiakban közöljük néhány eredményünket, amelyeket az IL-2 (Ad-IL-2) gént hordozó adenovírus-vektorral kaptunk.
1) Az Ad-IL-2-vel in vitro fertőzött sejtek jelentős mennyiségű funkcionális IL-2 terméket választanak el.
2) Ha az IL-2 gént hordozó vektort közvetlenül fecskendezzük be állatokon már kifejlődött daganatokba (ahol a daganat átmérője a befecskendezés időpontjában 4-7 mm), akkor ez megindítja az immunrendszer serkentését, ami a daganat méretének stabilizálódásában tükröződik, mindaddig, amíg az esetek 40-50%-ában a daganat teljes regressziója be nem következik.
Ez az eredmény még javítható, ha a daganatokat fejlődésük korábbi fázisában kezeljük, vagy különböző vektorokat alkalmazunk, például ha az Ad-IL-2-t Ad-INF-vel és/vagy Ad-IL-4-vel, Ad-GM-CSF-vel, vagy Ad-IL-3-mal kombináljuk. E kombinációt a daganat típusa szerint kell pontosan megállapítanunk.
3) Az in vitro fertőzött daganatsejtek szingenikus vagy immunhiányos állatokba (Nu/Nu egerek) fecskendezve daganatképző hajlamukat elvesztik (az állatoknak legalább 80%-a a beültetett daganatsejteket kilöki; másként fogalmazva, a sejtek befecskendezése után az immunhiányos állatoknak több mint 80%-ában a beültetett daganatsejtek nem szaporodnak).
4) Azok az állatok, amelyek az első ízben befecskendezett, fertőzött daganatsejteket kilökték, erélyesen immunizáltak, és védettek olyan (nem fertőzött) daganatsejtekkel szemben, amelyeket különböző időpontokban, különböző helyekre fecskendezünk be.
Ezeknek az állatoknak az in vitro fertőzött daganatsejtekkel együtt befecskendezett, immunizált lépsejtjei képesek továbbá a danaganatellenes immunitást további befogadó állatra átvinni.
Nyilvánvaló, hogy a hiányos rekombináns adenovírusok szerkesztését a fenti leírásban nem korlátozó jelleggel ismertetjük. Egyéb szerkesztési módok is megvalósíthatók, célszerűen az alábbiakban példaként megadott lépések variálásával.
1) A promoterek változtatása
Az adenovírus fő kései promotere más, általánosan elterjedt, azonban külső eredetű promoterekkel helyettesíthető; ilyenek például:
- az RSV (Rous-Szarkóma-Vírus) LTR-ben (Long Terminál Repeat) jelen lévő promoter;
- a CMV (cytomegalovirus) IE génjének a promotere;
- MMTV (az egér emlőtumorvírusa) promoterek, és a metallotionin indukálható promoterek.
A promoterek specifikus, a promotemek a daganatsejtekre korlátozott kifejezését teszik lehetővé; ennek hasznosítására példaként megemlítjük:
- a Hl parvovírus rep génjének a promoter szekvenciáját.
A jelen találmány továbbá a fentebb meghatározott típusú rekombináns nukleinsavakra is vonatkozik, amelyekre jellemző, hogy az adenovírus genomszekvenciájából az 5’-végződés tartománya az adenovírus El A tartományának korai promoterétől lefelé hiányzik, amennyiben a citokint kódoló szekvencia ennek a korai promoternek a kontrollja alatt helyezkedik el. Ez a rekombináns nukleinsav egyaránt alkalmazható különösen olyan rekombináns DNS-ekkel kapcsolatban, amelyekben a citokint kódoló szekvencia az adenovírus fő kései promoterjének kontrollja alatt helyezkedik el.
2) Több citokingén egyidejű kifejezése
Háromféle szerkesztési típust írtak le:
- a citokinnek génjei két (akár azonos, akár különböző, például MLP és RSV) promoter kontrollja alatt állnak, és egyik a másik után helyezkedik el;
- a citokingének különböző promoterek kontrollja alatt állnak, és a vírus különböző tartományaiban klónozódnak.

Claims (15)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Adenovírus genomi szekvenciáját tartalmazó adenovírus-vektor, amely genomi szekvencia
    a) hiányos abban a tekintetben, hogy az adenovírusból hiányzik legalább egy, replikációhoz szükséges szekvencia, azonban tartalmazza azokat a szekvenciákat, amelyek a megfelelő - fertőzőképes - adenovírusnak a sejtekbe történő belépéséhez szükségesek;
    b) tartalmazza az adenovírus kapszidképzéséhez szükséges esszenciális szekvenciák egy készletét;
    c) endogén vagy heterológ promoter ellenőrzése alatt álló, citokint kódoló nukleinsavszekvenciát tartalmazó inszertumot tartalmaz; és az adenovírus-vektorból hiányoznak az adenovírus E1A és E1B transzaktivátorai és E3 régiója.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti adenovírus-vektor, amelyben a citokint kódoló nukleinsavszekvencia az adenovírus El A régiója egy korai promoterének kontrollja alatt áll.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti adenovírus-vektor, amelyben a citokint kódoló nukleinsavszekvencia az adenovírus egy késői promoterének kontrollja alatt áll.
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti adenovírus-vektor, amelyben a citokint kódoló nukleinsavszekvencia egy heterológ promoter kontrollja alatt áll.
  5. 5. A 4. igénypont szerinti adenovírus-vektor, amelyben a heterológ promoter az alábbiak bármelyike: RousSzarkóma-Vírus „Long Terminál Repeat” régiójában (LTR) található promoter, citomegalovírus (CMV) IE génjének promotere, egér emlőtumorvírusának (MMTV) promotere, metallotionin-indukálható promoter és a Hl parvovírus rep génjének promotere.
  6. 6. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti adenovírus-vektor, amely az alábbi citokinek bármelyikét kódolja: IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, a-interferon, γ-interferon, TNF-a, CSF, valamint GM-CSF.
  7. 7. Az 1. igénypont szerinti adenovírus-vektor, amelyben a nukleinsavinszert egynél több citokint kó5
    HU 221 275 BI dőlő egynél több szekvenciát tartalmaz vagy különböző citokineket kódoló, különálló nukleinsavinszerteket tartalmaz, amely nukleinsavinszertek különálló promoterek kontrollja alatt állnak.
  8. 8. Az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti adenovírus-vektort tartalmazó, hiányos adenovírus.
  9. 9. A 8. igénypont szerinti hiányos adenovírussal fertőzött sejttenyészet.
  10. 10. Eljárás adenovírus-vektor előállítására, azzal jellemezve, hogy
    i) az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti adenovírus-vektort állítunk elő;
    ii) az adenovírus-vektort eukarióta sejtvonalak alkalmazásával transzformáljuk, amely sejtvonalak különböző, a hiányos adenovírus-genomból hiányzó rész(ek) kiegészítésére képes, különálló nukleinsavszekvenciát tartalmaznak; és iii) az adenovírus-vektort kinyerjük.
  11. 11. Eljárás terápiásán hasznos, hiányos adenovírusvektor előállítására, azzal jellemezve, hogy
    a) adenovírusból a replikációhoz szükséges szekvenciákat távolítunk el, míg megtartjuk azokat a szekvenciákat a genomban, amelyek szükségesek az adenovírusnak az adenovírussal fertőzhető - sejtekbe történő behatolásához, továbbá egyéb, a kapszidképzéshez szükséges szekvenciák egy készletét; és
    b) legalább egyetlen citokint kódoló - az adenovírusban jelen lévő vagy a genomi szekvenciába előre beinszertált promoter kontrollja alatt álló - nukleinsavszekvenciát beinszertálunk.
  12. 12. A 11. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hiányos adenovírus-vektor előállítása során emberi, 2-es vagy 5-ös típusú vagy 4-es és/vagy 7-es szerotípusú, emberi adenovírus-vektorból indulunk ki.
  13. 13. Gyógyászati készítmény amely a 8. igénypont szerinti, hiányos adenovírus-vektort tartalmaz, gyógyászatilag elfogadható vivőanyaggal kombináltan.
  14. 14. Gyógyászati készítmény, amely a 9. igénypont szerinti sejteket tartalmaz közvetlenül a gazdaszervezet tumorjába injektálható formában.
  15. 15. A 8. igénypont szerinti, hiányos adenovírus alkalmazása tumor elleni gyógyászati készítmény előállítására.
HU9303229A 1992-03-16 1993-03-16 Replication defective recombinant adenoviruses expressing anti-tumor cytokines, process for production thereof and their uses HU221275B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9203120A FR2688514A1 (fr) 1992-03-16 1992-03-16 Adenovirus recombinants defectifs exprimant des cytokines et medicaments antitumoraux les contenant.
PCT/FR1993/000264 WO1993019191A1 (fr) 1992-03-16 1993-03-16 Adenovirus recombinants defectifs exprimant des cytokines pour traitement antitumoral

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9303229D0 HU9303229D0 (en) 1994-03-28
HUT66486A HUT66486A (en) 1994-11-28
HU221275B1 true HU221275B1 (en) 2002-09-28

Family

ID=9427724

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9303229A HU221275B1 (en) 1992-03-16 1993-03-16 Replication defective recombinant adenoviruses expressing anti-tumor cytokines, process for production thereof and their uses

Country Status (17)

Country Link
US (2) US6811774B2 (hu)
EP (2) EP1138774A2 (hu)
JP (1) JP3422995B2 (hu)
AT (1) ATE205883T1 (hu)
AU (1) AU672195B2 (hu)
CA (1) CA2102302C (hu)
DE (1) DE69330774T2 (hu)
DK (1) DK0593755T3 (hu)
ES (1) ES2164669T3 (hu)
FI (1) FI935058A (hu)
FR (1) FR2688514A1 (hu)
HU (1) HU221275B1 (hu)
NO (2) NO315454B1 (hu)
NZ (1) NZ255950A (hu)
PT (1) PT593755E (hu)
SG (1) SG49002A1 (hu)
WO (1) WO1993019191A1 (hu)

Families Citing this family (318)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5662896A (en) * 1988-03-21 1997-09-02 Chiron Viagene, Inc. Compositions and methods for cancer immunotherapy
US5591439A (en) * 1989-03-24 1997-01-07 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Recombinant cytomegalovirus vaccine
US5670488A (en) * 1992-12-03 1997-09-23 Genzyme Corporation Adenovirus vector for gene therapy
US5747469A (en) 1991-03-06 1998-05-05 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions comprising DNA damaging agents and p53
EP0575518A1 (en) 1991-03-06 1993-12-29 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for the selective inhibition of gene expression
US6410010B1 (en) 1992-10-13 2002-06-25 Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant P53 adenovirus compositions
US6099831A (en) * 1992-09-25 2000-08-08 Centre National De La Recherche Scientifique Viral recombinant vectors for expression in muscle cells
US6743623B2 (en) 1991-09-27 2004-06-01 Centre National De La Recherche Scientifique Viral recombinant vectors for expression in muscle cells
FR2688514A1 (fr) 1992-03-16 1993-09-17 Centre Nat Rech Scient Adenovirus recombinants defectifs exprimant des cytokines et medicaments antitumoraux les contenant.
FR2717496B1 (fr) * 1994-03-18 1996-04-12 Rhone Poulenc Rorer Sa Virus recombinants, préparation et utilisation en thérapie génique.
CA2592997A1 (en) * 1992-12-03 1994-06-09 Genzyme Corporation Pseudo-adenovirus vectors
US5846945A (en) * 1993-02-16 1998-12-08 Onyx Pharmaceuticals, Inc. Cytopathic viruses for therapy and prophylaxis of neoplasia
FR2704234B1 (fr) * 1993-04-22 1995-07-21 Centre Nat Rech Scient Virus recombinants, preparation et utilisation en therapie genique.
FR2705361B1 (fr) * 1993-05-18 1995-08-04 Centre Nat Rech Scient Vecteurs viraux et utilisation en thérapie génique.
AU710962B2 (en) * 1993-05-28 1999-09-30 Transgene S.A. Defective adenoviruses and corresponding complementation lines
US6133028A (en) * 1993-05-28 2000-10-17 Transgene S.A. Defective adenoviruses and corresponding complementation lines
AU727970B2 (en) * 1993-05-28 2001-01-04 Transgene S.A. Defective adenoviruses and corresponding complementation lines
FR2705686B1 (fr) * 1993-05-28 1995-08-18 Transgene Sa Nouveaux adénovirus défectifs et lignées de complémentation correspondantes.
ES2249761T3 (es) * 1993-06-24 2006-04-01 Advec Inc. Vectores de adenovirus para terapia genica.
US5919676A (en) * 1993-06-24 1999-07-06 Advec, Inc. Adenoviral vector system comprising Cre-loxP recombination
US6080569A (en) * 1993-06-24 2000-06-27 Merck & Co., Inc. Adenovirus vectors generated from helper viruses and helper-dependent vectors
US6140087A (en) * 1993-06-24 2000-10-31 Advec, Inc. Adenovirus vectors for gene therapy
US6120764A (en) * 1993-06-24 2000-09-19 Advec, Inc. Adenoviruses for control of gene expression
US7045347B2 (en) 1993-06-24 2006-05-16 Advec, Inc. Helper dependent adenovirus vectors based on integrase family site-specific recombinases
US20020136708A1 (en) 1993-06-24 2002-09-26 Graham Frank L. System for production of helper dependent adenovirus vectors based on use of endonucleases
US6730507B1 (en) 1993-06-24 2004-05-04 Merck & Co., Inc. Use of helper-dependent adenoviral vectors of alternative serotypes permits repeat vector administration
FR2710536B1 (fr) * 1993-09-29 1995-12-22 Transgene Sa Usage anti-cancéreux d'un vecteur viral comportant un gène modulateur de la réponse immunitaire et/ou inflammatoire.
TW442569B (en) * 1993-10-25 2001-06-23 Canji Inc Recombinant adenoviral vector
EP2113569A1 (en) * 1993-10-25 2009-11-04 CANJI, Inc. Recombinant adenoviral vector and methods of use
FR2712602B1 (fr) * 1993-11-18 1996-02-09 Centre Nat Rech Scient Virus recombinants, préparation et utilisation en thérapie génique.
FR2712603B1 (fr) * 1993-11-18 1996-02-09 Centre Nat Rech Scient Virus recombinants, préparation et utilisation en thérapie génique.
FR2717497B1 (fr) * 1994-03-18 1996-04-12 Rhone Poulenc Rorer Sa Virus recombinants, préparation et utilisation en thérapie génique.
FR2717495B1 (fr) * 1994-03-18 1996-04-12 Rhone Poulenc Rorer Sa Virus recombinants, préparation et utilisation en thérapie génique.
FR2726575B1 (fr) * 1994-11-09 1996-12-20 Rhone Poulenc Rorer Sa Virus recombinants, preparation et utilisation en therapie genique
IL113052A0 (en) * 1994-03-23 1995-06-29 Rhone Poulenc Rorer Sa Recombinant viruses, their preparation and their use in gene therapy
FR2717823B1 (fr) * 1994-03-23 1996-04-26 Rhone Poulenc Rorer Sa Virus recombinants, préparation et utilisation en thérapie génique.
FR2717824B1 (fr) 1994-03-25 1996-04-26 Rhone Poulenc Rorer Sa Virus recombinants, préparation et utilisation en thérapie génique.
FR2718150B1 (fr) * 1994-03-29 1996-04-26 Rhone Poulenc Rorer Sa Virus recombinants, préparation et utilisation en thérapie génique.
US7252989B1 (en) 1994-04-04 2007-08-07 Board Of Regents, The University Of Texas System Adenovirus supervector system
US6379943B1 (en) 1999-03-05 2002-04-30 Merck & Co., Inc. High-efficiency Cre/loxp based system for construction of adenovirus vectors
DK0707071T3 (da) 1994-08-16 2003-11-17 Crucell Holland Bv Rekombinante vektorer afledt fra adenovirus til anvendelse i genterapi
JP3822261B2 (ja) * 1994-09-09 2006-09-13 財団法人癌研究会 癌の遺伝子治療剤
FR2725213B1 (fr) * 1994-10-04 1996-11-08 Rhone Poulenc Rorer Sa Vecteurs viraux et utilisation en therapie genique
FR2725726B1 (fr) * 1994-10-17 1997-01-03 Centre Nat Rech Scient Vecteurs viraux et utilisation en therapie genique
WO1996013597A2 (en) * 1994-10-28 1996-05-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Improved adenovirus and methods of use thereof
US5637456A (en) * 1995-02-17 1997-06-10 The University Of Texas, Board Of Regents Rapid test for determining the amount of functionally inactive gene in a gene therapy vector preparation
FR2730637B1 (fr) 1995-02-17 1997-03-28 Rhone Poulenc Rorer Sa Composition pharmaceutique contenant des acides nucleiques, et ses utilisations
US6372208B1 (en) 1999-09-28 2002-04-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Method of reducing an immune response to a recombinant virus
US6251957B1 (en) 1995-02-24 2001-06-26 Trustees Of The University Of Pennsylvania Method of reducing an immune response to a recombinant virus
US5756283A (en) * 1995-06-05 1998-05-26 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Method for improved production of recombinant adeno-associated viruses for gene therapy
US5698202A (en) * 1995-06-05 1997-12-16 The Wistar Institute Of Anatomy & Biology Replication-defective adenovirus human type 5 recombinant as a rabies vaccine carrier
US6281010B1 (en) 1995-06-05 2001-08-28 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Adenovirus gene therapy vehicle and cell line
US6019978A (en) * 1995-06-05 2000-02-01 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Replication-defective adenovirus human type 5 recombinant as a vaccine carrier
US6974694B2 (en) 1995-06-07 2005-12-13 Advec, Inc. Adenoviruses for control of gene expression
DE19642970C2 (de) * 1995-10-18 2003-10-30 Volkswagen Ag Verfahren zum Beschichten einer Karosserie
ATE325872T1 (de) * 1995-11-30 2006-06-15 Univ Texas Verfahren und zusammensetzungen zur behandlung von krebs
US6448389B1 (en) 1996-04-23 2002-09-10 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Human cytomegalovirus DNA constructs and uses therefor
US5958892A (en) 1996-07-30 1999-09-28 Board Of Regents, The University Of Texas System 2-methoxyestradiol-induced apoptosis in cancer cells
EP0834323A1 (en) * 1996-09-30 1998-04-08 Introgene B.V. Cytokine gene therapy for treatment of malignacies
US6544523B1 (en) 1996-11-13 2003-04-08 Chiron Corporation Mutant forms of Fas ligand and uses thereof
US6884430B1 (en) * 1997-02-10 2005-04-26 Aventis Pharma S.A. Formulation of stabilized cationic transfection agent(s) /nucleic acid particles
DE69826124T3 (de) 1997-06-30 2007-10-11 Institut Gustave Roussy Verabreichung der nukleinsäure in den quergestreiften muskel
US6696423B1 (en) 1997-08-29 2004-02-24 Biogen, Inc. Methods and compositions for therapies using genes encoding secreted proteins such as interferon-beta
BR9813930A (pt) 1997-11-06 2006-12-19 Chiron Spa antìgeno neisserial
DK1047784T4 (en) 1998-01-14 2015-06-15 Novartis Vaccines & Diagnostic NEISSERA meningitidis ANTIGENS
EP2261345A3 (en) 1998-05-01 2012-01-11 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Neisseria meningitidis antigens and compositions
US7691370B2 (en) 1998-10-15 2010-04-06 Canji, Inc. Selectivity replicating viral vector
DK1721979T3 (da) 1998-11-27 2010-12-13 Ucb Pharma Sa Sammensætninger og fremgangsmåder til forøgelse af knoglemineralisering
ES2477194T3 (es) 1999-04-30 2014-07-16 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Ant�genos neisseriales conservados
GB9911683D0 (en) 1999-05-19 1999-07-21 Chiron Spa Antigenic peptides
GB9916529D0 (en) 1999-07-14 1999-09-15 Chiron Spa Antigenic peptides
FR2799472B1 (fr) 1999-10-07 2004-07-16 Aventis Pharma Sa Preparation d'adenovirus recombinants et de banques adenovirales
EP2975127A1 (en) 1999-10-29 2016-01-20 GlaxoSmithKline Biologicals SA Neisserial antigenic peptides
CA2392103A1 (en) 1999-11-18 2001-05-25 Chiron Corporation Human fgf-21 gene and gene expression products
PT1248647E (pt) 2000-01-17 2010-11-18 Novartis Vaccines & Diagnostics Srl Vacina de vesícula da membrana externa (omv) compreendendo proteínas de membrana externa de n. meningitidis do serogrupo b
EP1854476A3 (en) 2000-02-09 2008-05-07 Bas Medical, Inc. Use of relaxin to treat diseases related to vasoconstriction
US20020082205A1 (en) 2000-03-08 2002-06-27 Nobuyuki Itoh Human FGF-23 gene and gene expression products
US7700359B2 (en) 2000-06-02 2010-04-20 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Gene products differentially expressed in cancerous cells
DE60134275D1 (de) 2000-06-15 2008-07-10 Novartis Vaccines & Diagnostic Polynukleotide zur bestimmung von kolonkrebs
EP2284181A1 (en) 2000-10-27 2011-02-16 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Nucleic acids and proteins from streptococcus groups A and B
EP2339035A1 (en) 2000-12-07 2011-06-29 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Endogenous retroviruses up-regulated in prostate cancer
GB0107658D0 (en) 2001-03-27 2001-05-16 Chiron Spa Streptococcus pneumoniae
GB0107661D0 (en) 2001-03-27 2001-05-16 Chiron Spa Staphylococcus aureus
AU2002258728A1 (en) 2001-04-06 2002-10-21 Georgetown University Gene brcc-3 and diagnostic and therapeutic uses thereof
AU2002303261A1 (en) 2001-04-06 2002-10-21 Georgetown University Gene brcc2 and diagnostic and therapeutic uses thereof
AU2002305151A1 (en) 2001-04-06 2002-10-21 Georgetown University Gene scc-112 and diagnostic and therapeutic uses thereof
FR2829136B1 (fr) 2001-08-29 2006-11-17 Aventis Pharma Sa Derives lipidiques d'aminoglycosides
US20030086903A1 (en) 2001-11-02 2003-05-08 Genvec, Inc. Therapeutic regimen for treating cancer
US7498407B2 (en) 2001-11-09 2009-03-03 Georgetown University Vascular endothelial cell growth inhibitor, VEGI-192a
NZ533428A (en) 2001-12-12 2008-03-28 Chiron Srl Immunisation against chlamydia trachomatis
JP4376629B2 (ja) 2002-01-08 2009-12-02 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド 癌性胸部細胞において差次的に発現された遺伝子産物およびその使用方法
HUE036402T2 (hu) 2002-01-17 2018-07-30 Alfa Laval Corp Ab Merülõpárologtató, amely lemezes hõcserélõt és hengeres házat tartalmaz, ahol a lemezes hõcserélõ el van helyezve
WO2003078453A1 (en) 2002-03-15 2003-09-25 Wyeth Holdings Corporation Mutants of the p4 protein of nontypable haemophilus influenzae with reduced enzymatic activity
EP1501855A4 (en) 2002-03-21 2006-02-22 Sagres Discovery Inc NEW COMPOSITIONS AND METHODS FOR CANCER
US7244565B2 (en) 2002-04-10 2007-07-17 Georgetown University Gene shinc-3 and diagnostic and therapeutic uses thereof
CA2425021A1 (en) * 2002-04-12 2003-10-12 Sumitomo Electric Industries, Ltd. Control of the ratio of lap to lip
EP1532161B1 (en) 2002-06-13 2012-02-15 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Vectors for expression of hml-2 polypeptides
UA80447C2 (en) 2002-10-08 2007-09-25 Methods for treating pain by administering nerve growth factor antagonist and opioid analgesic
US7569364B2 (en) 2002-12-24 2009-08-04 Pfizer Inc. Anti-NGF antibodies and methods using same
US9498530B2 (en) 2002-12-24 2016-11-22 Rinat Neuroscience Corp. Methods for treating osteoarthritis pain by administering a nerve growth factor antagonist and compositions containing the same
WO2004058184A2 (en) 2002-12-24 2004-07-15 Rinat Neuroscience Corp. Anti-ngf antibodies and methods using same
EP2058408A3 (en) 2003-02-14 2009-09-09 Sagres Discovery, Inc. Therapeutic GPCR targets in cancer
US20040170982A1 (en) 2003-02-14 2004-09-02 Morris David W. Novel therapeutic targets in cancer
US7767387B2 (en) 2003-06-13 2010-08-03 Sagres Discovery, Inc. Therapeutic targets in cancer
BRPI0407375A (pt) 2003-02-19 2006-02-07 Rinat Neuroscience Corp Métodos para tratar dor por meio da administração de um antagonista do fator de crescimento neural e u nsaid e composições contendo os mesmos
GB0308198D0 (en) 2003-04-09 2003-05-14 Chiron Srl ADP-ribosylating bacterial toxin
US20070178066A1 (en) 2003-04-21 2007-08-02 Hall Frederick L Pathotropic targeted gene delivery system for cancer and other disorders
ATE513471T1 (de) 2003-04-21 2011-07-15 Epeius Biotechnologies Corp Verfahren und zusammensetzungen zur behandlung von erkrankungen
KR20070001932A (ko) 2003-12-23 2007-01-04 리나트 뉴로사이언스 코퍼레이션 작용물질 항 티알케이씨 항체 및 그의 사용 방법
US8268324B2 (en) 2004-03-29 2012-09-18 Galpharma Co., Ltd. Modified galectin 9 proteins and use thereof
KR101637908B1 (ko) 2004-04-07 2016-07-11 리나트 뉴로사이언스 코프. 신경성장인자 길항제의 투여에 의한 골암 통증의 치료방법
EP2495252B1 (en) 2004-07-09 2018-04-18 The Henry M. Jackson Foundation for the Advancement of Military Medicine, Inc. Soluble forms of hendra and nipah virus G glycoprotein
US20060024677A1 (en) 2004-07-20 2006-02-02 Morris David W Novel therapeutic targets in cancer
KR101068289B1 (ko) 2004-07-30 2011-09-28 리나트 뉴로사이언스 코퍼레이션 아밀로이드-베타 펩티드에 대해 지시된 항체 및 이의 사용 방법
NZ599345A (en) 2005-02-18 2013-07-26 Novartis Vaccines & Diagnostic Immunogens from uropathogenic Escherichia Coli
EP1865981A2 (en) 2005-04-07 2007-12-19 Chiron Corporation Cacna1e in cancer diagnosis, detection and treatment
EP1910557A2 (en) 2005-04-07 2008-04-16 Chiron Corporation Cancer-related genes
CA2615615A1 (en) 2005-07-22 2007-02-01 Y's Therapeutics Co., Ltd. Anti-cd26 antibodies and methods of use thereof
BRPI0618705B8 (pt) 2005-11-14 2021-05-25 Labrys Biologics Inc anticorpos antagonistas humanizados direcionados contra peptídeo relacionado ao gene da calcitonina, composição farmacêutica e uso dos mesmos
CA2637707A1 (en) * 2006-02-02 2007-08-09 Rinat Neuroscience Corporation Methods for treating obesity by administering a trkb antagonist
NL2000464C2 (nl) * 2006-02-02 2007-09-11 Rinat Neuroscience Corp Werkwijzen voor het behandelen van ongewenst gewichtsverlies of eetstoornissen door het toedienen van een TRKB-agonist.
JP5313886B2 (ja) 2006-06-07 2013-10-09 バイオアライアンス セー．フェー． 癌細胞で発現するｃｄ−４３およびｃｅａの炭水化物含有エピトープを認識する抗体およびそれを使用する方法
EP2054431B1 (en) 2006-06-09 2011-08-31 Novartis AG Conformers of bacterial adhesins
WO2008013918A2 (en) * 2006-07-26 2008-01-31 Myelin Repair Foundation, Inc. Cell cycle regulation and differentiation
AU2007285484B2 (en) 2006-08-16 2013-05-02 Novartis Ag Immunogens from uropathogenic Escherichia coli
US20100035974A1 (en) * 2006-10-04 2010-02-11 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs Compositions comprising a sirna and lipidic 4,5-disubstituted 2-deoxystreptamine ring aminoglycoside derivatives and uses thereof
US20100029189A1 (en) * 2007-03-27 2010-02-04 Wood Jeffrey H Methods for stiffening thin wall direct manufactured structures
AP2009005028A0 (en) 2007-04-10 2009-12-31 Univ Tulane Soluble and membrane-anchored forms of lassa virussubunit proteins
KR100896483B1 (ko) 2007-07-13 2009-05-08 연세대학교 산학협력단 Ｉｌ-12 및 4-1ｂｂｌ을 발현하는 종양 선택적 살상 재조합아데노바이러스 및 수지상 세포를 유효성분으로 포함하는항종양용 약제학적 조성물
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
JP5737944B2 (ja) 2007-12-17 2015-06-17 ファイザー・リミテッドＰｆｉｚｅｒ Ｌｉｍｉｔｅｄ 間質性膀胱炎の治療
WO2009079649A1 (en) 2007-12-18 2009-06-25 Bioalliance C.V. Antibodies recognizing a carbohydrate containing epitope on cd-43 and cea expressed on cancer cells and methods using same
JP2011516078A (ja) 2008-04-10 2011-05-26 セル・シグナリング・テクノロジー・インコーポレイテツド 癌におけるｅｇｆｒ突然変異を検出する組成物および方法
WO2009150623A1 (en) 2008-06-13 2009-12-17 Pfizer Inc Treatment of chronic prostatitis
WO2010026537A1 (en) 2008-09-05 2010-03-11 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Novel multimodular assembly useful for intracellular delivery
TWI516501B (zh) 2008-09-12 2016-01-11 禮納特神經系統科學公司 Ｐｃｓｋ９拮抗劑類
WO2010086828A2 (en) 2009-02-02 2010-08-05 Rinat Neuroscience Corporation Agonist anti-trkb monoclonal antibodies
US8568732B2 (en) 2009-03-06 2013-10-29 Novartis Ag Chlamydia antigens
WO2010118243A2 (en) 2009-04-08 2010-10-14 Genentech, Inc. Use of il-27 antagonists to treat lupus
CN109248313B (zh) 2009-04-14 2023-01-17 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 用于免疫接种以抵御金黄色葡萄球菌的组合物
WO2010146511A1 (en) 2009-06-17 2010-12-23 Pfizer Limited Treatment of overactive bladder
MX2012000734A (es) 2009-07-16 2012-01-27 Novartis Ag Inmunogenos destoxificados de escherichia coli.
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
TWI552760B (zh) 2010-02-24 2016-10-11 雷那特神經科學股份有限公司 拮抗劑抗－ｉｌ－７受體抗體及方法
GB201003333D0 (en) 2010-02-26 2010-04-14 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
CA2792740A1 (en) 2010-03-11 2011-09-15 Rinat Neuroscience Corporation Antibodies with ph dependent antigen binding
GB201005625D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
WO2011133931A1 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Genentech, Inc. Use of il-27 antagonists for treating inflammatory bowel disease
US9862931B2 (en) * 2010-04-28 2018-01-09 Institut Gustave Roussy Adenovirus vaccine vectors
JP5988961B2 (ja) 2010-04-28 2016-09-07 ザ ジェイ． デヴィッド グラッドストーン インスティテューツ 心筋細胞を発生させるための方法
JP5926242B2 (ja) 2010-05-10 2016-05-25 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア エンドリボヌクレアーゼ組成物およびその使用方法
US20130150256A1 (en) 2010-06-11 2013-06-13 Jane Synnergren Novel micrornas for the detection and isolation of human embryonic stem cell-derived cardiac cell types
US8747844B2 (en) 2010-07-30 2014-06-10 Saint Louis University Methods of treating pain
WO2012072769A1 (en) 2010-12-01 2012-06-07 Novartis Ag Pneumococcal rrgb epitopes and clade combinations
WO2012075243A2 (en) 2010-12-01 2012-06-07 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for targeting sites of neovascular growth
US20130071375A1 (en) 2011-08-22 2013-03-21 Saint Louis University Compositions and methods for treating inflammation
WO2013028527A1 (en) 2011-08-23 2013-02-28 Indiana University Research And Technology Corporation Compositions and methods for treating cancer
AR088693A1 (es) 2011-11-11 2014-06-25 Rinat Neuroscience Corp Anticuerpos especificos para trop-2 y sus usos
CA2859364C (en) 2011-12-16 2019-05-07 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Opsin polypeptides and methods of use thereof
WO2013093693A1 (en) 2011-12-22 2013-06-27 Rinat Neuroscience Corp. Staphylococcus aureus specific antibodies and uses thereof
BR112014014824A2 (pt) 2011-12-22 2019-09-24 Rinat Neuroscience Corp anticorpos antagonistas do receptor do hormônio de crescimento humano e métodos de uso dos mesmos
GB201122458D0 (en) 2011-12-30 2012-02-08 Univ Wageningen Modified cascade ribonucleoproteins and uses thereof
US10266850B2 (en) 2012-05-25 2019-04-23 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for RNA-directed target DNA modification and for RNA-directed modulation of transcription
AU2013290424B2 (en) 2012-07-19 2018-01-25 Redwood Bioscience, Inc. Antibody specific for CD22 and methods of use thereof
US8603470B1 (en) 2012-08-07 2013-12-10 National Cheng Kung University Use of IL-20 antagonists for treating liver diseases
BR112015003326A2 (pt) 2012-08-16 2017-07-04 Ipierian Inc métodos de tratamento de uma tauopatia
AU2013334229B2 (en) 2012-10-25 2018-02-15 Bioverativ Usa Inc. Anti-complement C1s antibodies and uses thereof
EP3906944A1 (en) 2012-11-02 2021-11-10 Bioverativ USA Inc. Anti-complement c1s antibodies and uses thereof
RU2015115956A (ru) 2012-11-09 2017-01-10 Пфайзер Инк. Антитела, специфичные в отношении фактора роста тромбоцитов в, и их композиции и применения
WO2014127148A1 (en) 2013-02-14 2014-08-21 The J. David Gladstone Institutes Compositions and methods of use thereof for identifying anti-viral agents
ES2758227T3 (es) 2013-02-15 2020-05-04 Univ California Receptor de antígeno quimérico y métodos de uso del mismo
EP2970945B1 (en) 2013-03-14 2024-05-01 GenVivo, Inc. Improved thymidine kinase gene
JP2016519652A (ja) 2013-03-14 2016-07-07 カリブー・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッド 核酸ターゲティング核酸の組成物および方法
WO2014153204A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Salk Institute For Biological Studies Oncolytic adenovirus compositions
IL292121B2 (en) 2013-03-15 2024-02-01 Takeda Pharmaceuticals Co Anti-plasma kallikrein antibodies
SG11201508264UA (en) 2013-05-07 2015-11-27 Rinat Neuroscience Corp Anti-glucagon receptor antibodies and methods of use thereof
PT3007726T (pt) 2013-06-10 2020-06-22 Ipierian Inc Métodos de tratamento de uma tauopatia
JP6802063B2 (ja) 2013-06-25 2020-12-16 エピアクシス セラピューティクス プロプライエタリー リミテッド 癌幹細胞を調節するための方法および組成物
EP3044314B1 (en) 2013-07-12 2019-04-10 SeNa Research, Inc. Methods and compositions for interference with dna polymerase and dna synthesis
US10208125B2 (en) 2013-07-15 2019-02-19 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Anti-mucin 1 binding agents and uses thereof
TWI623551B (zh) 2013-08-02 2018-05-11 輝瑞大藥廠 抗ｃｘｃｒ４抗體及抗體－藥物結合物
SG11201601408PA (en) 2013-09-18 2016-04-28 Univ Canberra Stem cell modulation ii
BR112016009797A2 (pt) 2013-11-13 2017-12-05 Bristol Myers Squibb Co anticorpos específicos de ligante 1a do tipo fator de necrose tumoral e composições e usos dos mesmos
CA2930877A1 (en) 2013-11-18 2015-05-21 Crispr Therapeutics Ag Crispr-cas system materials and methods
WO2015087187A1 (en) 2013-12-10 2015-06-18 Rinat Neuroscience Corp. Anti-sclerostin antibodies
EP3080266B1 (en) 2013-12-12 2021-02-03 The Regents of The University of California Methods and compositions for modifying a single stranded target nucleic acid
WO2015109212A1 (en) 2014-01-17 2015-07-23 Pfizer Inc. Anti-il-2 antibodies and compositions and uses thereof
PT3119431T (pt) 2014-03-21 2024-04-16 Teva Pharmaceuticals Int Gmbh Anticorpos antagonistas dirigidos contra o peptídeo relacionado com o gene da calcitonina e métodos de utilização dos mesmos
WO2015168474A1 (en) 2014-04-30 2015-11-05 President And Fellows Of Harvard College Fusion proteins for treating cancer and related methods
US10329556B2 (en) 2014-05-13 2019-06-25 Bioatla, Llc Conditionally active biological proteins
AU2015277460B2 (en) 2014-06-18 2020-10-08 Albert Einstein College Of Medicine, Inc. Syntac polypeptides and uses thereof
US9840553B2 (en) 2014-06-28 2017-12-12 Kodiak Sciences Inc. Dual PDGF/VEGF antagonists
CA2994927A1 (en) 2014-08-08 2016-02-11 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University High affinity pd-1 agents and methods of use
CN107106517A (zh) 2014-08-25 2017-08-29 堪培拉大学 用于调节癌干细胞的组合物及其用途
JP7286267B2 (ja) 2014-08-28 2023-06-05 バイオアトラ インコーポレイテッド 修飾ｔ細胞に対する条件的活性型キメラ抗原受容体
US11111288B2 (en) 2014-08-28 2021-09-07 Bioatla, Inc. Conditionally active chimeric antigen receptors for modified t-cells
BR112017004675A2 (pt) 2014-09-09 2017-12-05 Unum Therapeutics receptores quiméricos e usos dos mesmos em terapia imunológica
TWI595006B (zh) 2014-12-09 2017-08-11 禮納特神經系統科學公司 抗ｐｄ－１抗體類和使用彼等之方法
JP6588995B2 (ja) 2015-03-13 2019-10-09 ザ ジャクソン ラボラトリーＴｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ 三構成要素ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ複合体系およびその使用
US9758575B2 (en) 2015-04-06 2017-09-12 Yung Shin Pharmaceutical Industrial Co. Ltd. Antibodies which specifically bind to canine vascular endothelial growth factor and uses thereof
SG10201909180SA (en) 2015-04-06 2019-11-28 Bioverativ Usa Inc Humanized anti-c1s antibodies and methods of use thereof
JP6960396B2 (ja) 2015-04-07 2021-11-05 ザ ジェイ． デビッド グラッドストーン インスティテューツ、 ア テスタメンタリー トラスト エスタブリッシュド アンダー ザ ウィル オブ ジェイ． デビッド グラッドストーン 分裂終了細胞の細胞分裂を誘発するための方法
US9969809B2 (en) 2015-04-13 2018-05-15 Pfizer Inc. Therapeutic antibodies and their uses
WO2016196655A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 The Regents Of The University Of California Cas9 variants and methods of use thereof
MX2018000714A (es) 2015-07-21 2019-11-18 Dyax Corp Un inhibidor de anticuerpo monoclonal de factor xiia.
US10877045B2 (en) 2015-07-21 2020-12-29 Saint Louis University Compositions and methods for diagnosing and treating endometriosis-related infertility
CA3025896A1 (en) 2015-07-23 2017-01-26 The Regents Of The University Of California Antibodies to coagulation factor xia and uses thereof
US11273167B2 (en) 2015-08-03 2022-03-15 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for modulating ABHD2 activity
JP6664467B2 (ja) 2015-08-19 2020-03-13 ファイザー・インク 組織因子経路インヒビター抗体およびその使用
ES2842306T3 (es) 2015-09-02 2021-07-13 Immutep Sas Anticuerpos anti LAG-3
CN113912718A (zh) 2015-09-15 2022-01-11 供石公司 抗-原肌生长抑制素/潜伏肌生长抑制素抗体及其用途
WO2017064546A1 (en) 2015-09-24 2017-04-20 Crispr Therapeutics Ag Novel family of rna-programmable endonucleases and their uses in genome editing and other applications
CN116712535A (zh) 2015-10-16 2023-09-08 纽约市哥伦比亚大学理事会 用于抑制谱系特异性抗原的组合物和方法
JP7030689B2 (ja) 2015-10-23 2022-03-07 ファイザー インコーポレイティッド 抗ｉｌ－２抗体ならびにその組成物及び使用
WO2017075037A1 (en) 2015-10-27 2017-05-04 Scholar Rock, Inc. Primed growth factors and uses thereof
CN106699889A (zh) 2015-11-18 2017-05-24 礼进生物医药科技（上海）有限公司 抗pd-1抗体及其治疗用途
RU2744860C2 (ru) 2015-12-30 2021-03-16 Кодиак Сайенсиз Инк. Антитела и их конъюгаты
CN116334113A (zh) 2016-01-08 2023-06-27 加利福尼亚大学董事会 有条件活性的异二聚体多肽及其使用方法
JP2019506398A (ja) 2016-01-21 2019-03-07 ファイザー・インク 上皮増殖因子受容体変異体ｉｉｉおよびｃｄ３の単一および二重特異性抗体およびそれらの使用
EP4155411A1 (en) 2016-02-23 2023-03-29 Salk Institute for Biological Studies Exogenous gene expression in therapeutic adenovirus for minimal impact on viral kinetics
EP3390428B1 (en) 2016-02-23 2019-09-25 Salk Institute for Biological Studies High throughput assay for measuring adenovirus replication kinetics
JP7372036B2 (ja) 2016-03-03 2023-10-31 キュー バイオファーマ， インコーポレイテッド Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド及びその使用方法
WO2020047527A2 (en) 2018-09-02 2020-03-05 F1 Bioventures, Llc Methods and compositions for genetically modifying lymphocytes in blood or in enriched pbmcs
MX2018011345A (es) 2016-03-19 2019-05-27 F1 Oncology Inc Métodos y composiciones para transducir linfocitos y expansión regulada de los mismos.
US11111505B2 (en) 2016-03-19 2021-09-07 Exuma Biotech, Corp. Methods and compositions for transducing lymphocytes and regulating the activity thereof
US11325948B2 (en) 2016-03-19 2022-05-10 Exuma Biotech Corp. Methods and compositions for genetically modifying lymphocytes to express polypeptides comprising the intracellular domain of MPL
IL295288B1 (en) 2016-04-04 2024-04-01 Bioverativ Usa Inc Anti-complement factor BB antibodies and their uses
TW201805307A (zh) 2016-05-13 2018-02-16 美商拜奧亞特拉公司 抗-ror2抗體、抗體片段、其免疫結合物及其用途
CN109689096A (zh) 2016-05-18 2019-04-26 阿尔伯特爱因斯坦医学院公司 变体pd-l1多肽、t细胞调节性多聚体多肽及其使用方法
KR20190019068A (ko) 2016-05-18 2019-02-26 큐 바이오파마, 인크. T-세포 조절 다량체 폴리펩타이드 및 이의 사용 방법
AU2017292936C1 (en) 2016-07-08 2024-05-02 Exuma Biotech, Corp. Methods and compositions for transducing lymphocytes and regulating the activity thereof
CN109982710A (zh) 2016-09-13 2019-07-05 杰克逊实验室 靶向增强的dna去甲基化
US10578610B2 (en) 2016-09-20 2020-03-03 Washington University Peptide regulators of mitochondrial fusion and methods of use
BR112019007309A2 (pt) 2016-10-12 2019-07-02 Bioverativ Usa Inc anticorpos anti-c1s e métodos de uso dos mesmos
US20180119141A1 (en) 2016-10-28 2018-05-03 Massachusetts Institute Of Technology Crispr/cas global regulator screening platform
US11332713B2 (en) 2016-11-16 2022-05-17 KSQ Therapeutics, Inc. Gene-regulating compositions and methods for improved immunotherapy
AU2017375633C1 (en) 2016-12-12 2023-04-27 Salk Institute For Biological Studies Tumor-targeting synthetic adenoviruses and uses thereof
IL303806B1 (en) 2016-12-22 2024-01-01 Cue Biopharma Inc Multimeric polypeptides modulate T cells and methods for their use
WO2018129474A1 (en) 2017-01-09 2018-07-12 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
EP3571294A1 (en) 2017-01-18 2019-11-27 F1 Oncology, Inc. Methods of transducing and expanding immune cells and uses thereof
CN110177808A (zh) 2017-01-18 2019-08-27 F1肿瘤医学公司 针对axl或ror2的嵌合抗原受体及其使用方法
WO2018148246A1 (en) 2017-02-07 2018-08-16 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for rna-guided genetic circuits
EP3589657A1 (en) 2017-03-03 2020-01-08 Rinat Neuroscience Corp. Anti-gitr antibodies and methods of use thereof
SG11201907814SA (en) 2017-03-03 2019-09-27 F1 Oncology Inc Methods and compositions for transducing and expanding lymphocytes and regulating the activity thereof
US20200056190A1 (en) 2017-03-16 2020-02-20 Pfizer Inc. Tyrosine prototrophy
CA3059938A1 (en) 2017-04-14 2018-10-18 Kodiak Sciences Inc. Complement factor d antagonist antibodies and conjugates thereof
TWI757499B (zh) 2017-06-02 2022-03-11 美商輝瑞大藥廠 對flt3具特異性之抗體及其用途
CN111033631B (zh) 2017-06-13 2024-03-12 波士顿基因公司 用于生成分子功能谱、对其进行可视化和分类的系统和方法
WO2019016784A1 (en) 2017-07-21 2019-01-24 Universidade De Coimbra ANTI-NUCLEOLIN ANTIBODIES
AU2018327224A1 (en) 2017-09-07 2020-04-23 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptide with conjugation sites and methods of use thereof
BR112020004543A2 (pt) 2017-09-08 2020-09-08 Maverick Therapeutics, Inc. proteínas de ligação ativadas condicionalmente restritas
WO2019051122A2 (en) 2017-09-08 2019-03-14 Maverick Therapeutics, Inc. CONDITIONAL ACTIVATED BOND FRACTIONS CONTAINING FC REGIONS
CN111093715A (zh) 2017-09-18 2020-05-01 儿童医院医疗中心 强绝缘子和其在基因递送中的用途
US20200271657A1 (en) 2017-10-04 2020-08-27 Opko Pharmaceuticals, Llc Articles and methods directed to personalized therapy of cancer
JP7369121B2 (ja) 2017-10-11 2023-10-25 バイオベラティブ・ユーエスエイ・インコーポレイテッド 補体活性を誘発する方法
AU2018386301A1 (en) 2017-12-14 2020-06-18 Bayer Healthcare Llc Novel RNA-programmable endonuclease systems and their use in genome editing and other applications
WO2019139896A1 (en) 2018-01-09 2019-07-18 Cue Biopharma, Inc. Multimeric t-cell modulatory polypeptides and methods of use thereof
EP3746482A1 (en) 2018-02-01 2020-12-09 Pfizer Inc Antibodies specific for cd70 and their uses
SG11202006883QA (en) 2018-02-01 2020-08-28 Pfizer Chimeric antigen receptors targeting cd70
US11667949B2 (en) 2018-02-15 2023-06-06 The Trustees Of Princeton University Reporter construct and biosensor for interferon second messenger 2-5A
US11059876B2 (en) 2018-02-28 2021-07-13 Pfizer Inc. IL-15 variants and uses thereof
BR112020018620A2 (pt) 2018-03-15 2020-12-29 KSQ Therapeutics, Inc. Composições de regulação gênica e métodos para imunoterapia aprimorada
US20210054353A1 (en) 2018-03-19 2021-02-25 Crispr Therapeutics Ag Novel rna-programmable endonuclease systems and uses thereof
SG11202010580TA (en) 2018-05-23 2020-12-30 Pfizer Antibodies specific for cd3 and uses thereof
MX2020012607A (es) 2018-05-23 2021-01-29 Pfizer Anticuerpos especificos para gucy2c y sus usos.
US20210309756A1 (en) 2018-08-09 2021-10-07 Maverick Therapeutics, Inc. Coexpression and purification method of conditionally activated binding proteins
BR112021003670A2 (pt) 2018-08-28 2021-05-18 Vor Biopharma, Inc. células-tronco hematopoéticas geneticamente modificadas e seus usos
CN113164556A (zh) 2018-08-30 2021-07-23 特纳亚治疗股份有限公司 用心肌蛋白和ascl1进行的心脏细胞重编程
TW202039542A (zh) 2018-12-19 2020-11-01 美商庫爾生物製藥有限公司 多聚體ｔ細胞調節多肽及其使用方法
AU2020231391A1 (en) 2019-03-05 2021-10-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited Conditionally activated binding proteins containing Fc regions and moieties targeting tumor antigens
CN114390938A (zh) 2019-03-05 2022-04-22 武田药品工业有限公司 受约束的条件性活化的结合蛋白
WO2020181062A1 (en) 2019-03-06 2020-09-10 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
EP4219700A1 (en) 2019-03-07 2023-08-02 The Regents of the University of California Crispr-cas effector polypeptides and methods of use thereof
EP3937963A2 (en) 2019-03-12 2022-01-19 CRISPR Therapeutics AG Novel high fidelity rna-programmable endonuclease systems and uses thereof
JP2022527860A (ja) 2019-04-02 2022-06-06 ケンジョッケティ バイオテクノロジー，インク． 排出ポンプ－癌抗原マルチ特異性抗体ならびにそれに関する組成物、試薬、キットおよび方法
US20210005283A1 (en) 2019-07-03 2021-01-07 Bostongene Corporation Techniques for bias correction in sequence data
EP3997226A1 (en) 2019-07-11 2022-05-18 Tenaya Therapeutics, Inc. Cardiac cell reprogramming with micrornas and other factors
EP4003508A1 (en) 2019-07-31 2022-06-01 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Perfusion modulated tumor dose sculpting with single dose radiotherapy
CA3153932A1 (en) 2019-10-07 2021-04-15 Jonathan Kipnis Modulating lymphatic vessels in neurological disease
CA3157509A1 (en) 2019-10-10 2021-04-15 Kodiak Sciences Inc. Methods of treating an eye disorder
US20240092935A1 (en) 2019-10-11 2024-03-21 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Anti-tn antibodies and uses thereof
WO2021113736A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Massachusetts Institute Of Technology Single-domain antibody to chloramphenicol
EP4093426A1 (en) 2020-01-24 2022-11-30 University of Virginia Patent Foundation Modulating lymphatic vessels in neurological disease
US20230103731A1 (en) 2020-03-02 2023-04-06 Tenaya Therapeutics, Inc. Gene vector control by cardiomyocyte-expressed micrornas
WO2021205325A1 (en) 2020-04-08 2021-10-14 Pfizer Inc. Anti-gucy2c antibodies and uses thereof
EP4146688A1 (en) 2020-05-06 2023-03-15 CRISPR Therapeutics AG Mask peptides and masked anti-ptk7 antibodies comprising such
EP4161564A1 (en) 2020-06-04 2023-04-12 Kenjockety Biotechnology, Inc. Abcg2 efflux pump-cancer antigen multi-specific antibodies and compositions, reagents, kits and methods related thereto
JP2023533793A (ja) 2020-07-17 2023-08-04 ファイザー・インク 治療用抗体およびそれらの使用
JP2023535604A (ja) 2020-07-30 2023-08-18 ファイザー・インク 遺伝子複製を有する細胞およびその使用
EP4176058A1 (en) 2020-08-07 2023-05-10 The Jackson Laboratory Targeted sequence insertion compositions and methods
US11781156B2 (en) 2020-10-09 2023-10-10 Tenaya Therapeutics, Inc. Plakophillin-2 gene therapy methods and compositions
WO2022120256A2 (en) 2020-12-04 2022-06-09 Bostongene Corporation Hierarchical machine learning techniques for identifying molecular categories from expression data
WO2022187289A1 (en) 2021-03-01 2022-09-09 Exuma Biotech Corp. Methods and compositions for the delivery of retroviral particles
US20220372580A1 (en) 2021-04-29 2022-11-24 Bostongene Corporation Machine learning techniques for estimating tumor cell expression in complex tumor tissue
WO2022259190A1 (en) 2021-06-10 2022-12-15 Janssen Biotech, Inc. Nucleic acid coding for klk2-gpi fusion protein, recombinant cells, and uses thereof
EP4352214A1 (en) 2021-06-11 2024-04-17 Bayer AG Type v rna programmable endonuclease systems
EP4101928A1 (en) 2021-06-11 2022-12-14 Bayer AG Type v rna programmable endonuclease systems
CA3227875A1 (en) 2021-08-02 2023-02-09 Pfizer Inc. Improved expression vectors and uses thereof
EP4144841A1 (en) 2021-09-07 2023-03-08 Bayer AG Novel small rna programmable endonuclease systems with impoved pam specificity and uses thereof
AU2022349103A1 (en) 2021-09-27 2024-03-28 Sotio Biotech Inc. Chimeric receptor polypeptides in combination with trans metabolism molecules that re-direct glucose metabolites out of the glycolysis pathway and therapeutic uses thereof
WO2023091909A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Sotio Biotech Inc. Treatment of myxoid/round cell liposarcoma patients
WO2023102388A1 (en) 2021-11-30 2023-06-08 Sanofi Pasteur Inc. Human metapneumovirus viral vector-based vaccines
WO2023114658A1 (en) 2021-12-13 2023-06-22 Kenjockety Biotechnology, Inc. Anti-abcb1 antibodies
WO2023118068A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 Bayer Aktiengesellschaft Novel small type v rna programmable endonuclease systems
US20230245479A1 (en) 2022-01-31 2023-08-03 Bostongene Corporation Machine learning techniques for cytometry
WO2023148598A1 (en) 2022-02-02 2023-08-10 Pfizer Inc. Cysteine prototrophy
WO2023159220A1 (en) 2022-02-18 2023-08-24 Kenjockety Biotechnology, Inc. Anti-cd47 antibodies
WO2023168305A1 (en) 2022-03-01 2023-09-07 Exuma Biotech Corp. Viral particles with membrane-bound hyaluronidase
WO2023237587A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Bayer Aktiengesellschaft Novel small type v rna programmable endonuclease systems
WO2024005863A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Inari Agriculture Technology, Inc. Compositions, systems, and methods for genome editing
EP4299739A1 (en) 2022-06-30 2024-01-03 Inari Agriculture Technology, Inc. Compositions, systems, and methods for genome editing
WO2024005864A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Inari Agriculture Technology, Inc. Compositions, systems, and methods for genome editing
EP4299733A1 (en) 2022-06-30 2024-01-03 Inari Agriculture Technology, Inc. Compositions, systems, and methods for genome editing
US20240029884A1 (en) 2022-07-15 2024-01-25 Bostongene Corporation Techniques for detecting homologous recombination deficiency (hrd)
WO2024040208A1 (en) 2022-08-19 2024-02-22 Sotio Biotech Inc. Genetically engineered immune cells with chimeric receptor polypeptides in combination with multiple trans metabolism molecules and therapeutic uses thereof
WO2024040207A1 (en) 2022-08-19 2024-02-22 Sotio Biotech Inc. Genetically engineered natural killer (nk) cells with chimeric receptor polypeptides in combination with trans metabolism molecules and therapeutic uses thereof
WO2024044659A1 (en) 2022-08-24 2024-02-29 Tectonic Therapeutic, Inc. Constitutively active g protein-coupled receptor compositions and methods of use thereof
WO2024068996A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (C.H.U.V.) Anti-sars-cov-2 antibodies and use thereof in the treatment of sars-cov-2 infection

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2573436B1 (fr) * 1984-11-20 1989-02-17 Pasteur Institut Adn recombinant comportant une sequence nucleotidique codant pour un polypeptide determine sous le controle d'un promoteur d'adenovirus, vecteurs contenant cet adn recombinant, cellules eucaryotes transformees par cet adn recombinant, produits d'excretion de ces cellules transformees et leurs applications, notamment a la constitution de vaccins
NZ221298A (en) * 1986-08-01 1990-07-26 Commw Scient Ind Res Org A recombinant vaccine comprising an antigenic polypeptide component together with a lymphokine component
US5662896A (en) * 1988-03-21 1997-09-02 Chiron Viagene, Inc. Compositions and methods for cancer immunotherapy
US5698531A (en) * 1989-03-31 1997-12-16 The Regents Of The University Of Michigan Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor
US6013638A (en) * 1991-10-02 2000-01-11 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Adenovirus comprising deletions on the E1A, E1B and E3 regions for transfer of genes to the lung
FR2688514A1 (fr) * 1992-03-16 1993-09-17 Centre Nat Rech Scient Adenovirus recombinants defectifs exprimant des cytokines et medicaments antitumoraux les contenant.

Also Published As

Publication number Publication date
FI935058A0 (fi) 1993-11-16
US20020031499A1 (en) 2002-03-14
ES2164669T3 (es) 2002-03-01
NZ255950A (en) 1996-03-26
CA2102302C (fr) 2003-05-20
DK0593755T3 (da) 2001-12-31
FR2688514A1 (fr) 1993-09-17
DE69330774T2 (de) 2002-07-04
NO20033523D0 (no) 2003-08-08
US6811774B2 (en) 2004-11-02
JPH06508039A (ja) 1994-09-14
DE69330774D1 (de) 2001-10-25
ATE205883T1 (de) 2001-10-15
HU9303229D0 (en) 1994-03-28
PT593755E (pt) 2002-03-28
HUT66486A (en) 1994-11-28
JP3422995B2 (ja) 2003-07-07
NO934061D0 (no) 1993-11-09
EP0593755A1 (fr) 1994-04-27
EP0593755B1 (fr) 2001-09-19
NO20033523L (no) 1993-11-09
AU672195B2 (en) 1996-09-26
NO315454B1 (no) 2003-09-08
WO1993019191A1 (fr) 1993-09-30
US7306793B2 (en) 2007-12-11
US20050048031A1 (en) 2005-03-03
FI935058A (fi) 1994-01-14
EP1138774A2 (fr) 2001-10-04
CA2102302A1 (fr) 1993-09-17
AU3757093A (en) 1993-10-21
FR2688514B1 (hu) 1994-12-30
SG49002A1 (en) 1998-05-18
NO934061L (no) 1993-11-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU221275B1 (en) Replication defective recombinant adenoviruses expressing anti-tumor cytokines, process for production thereof and their uses
Andreansky et al. Treatment of intracranial gliomas in immunocompetent mice using herpes simplex viruses that express murine interleukins
JP4094053B2 (ja) 免疫または炎症応答の調節による抗がん遺伝子療法
US6218180B1 (en) Gene therapy for the treatment of solid tumors using recombinant adeno-associated virus vectors
US7744899B2 (en) Recombinant herpes simplex virus useful for treating neoplastic disease
Haag et al. Highly efficient transduction and expression of cytokine genes in human tumor cells by means of autonomous parvovirus vectors; generation of antitumor responses in recipient mice
Wetzel et al. Transduction of human MCP‐3 by a parvoviral vector induces leukocyte infiltration and reduces growth of human cervical carcinoma cell xenografts
Toda et al. Combination suicide/cytokine gene therapy as adjuvants to a defective herpes simplex virus-based cancer vaccine
US5831062A (en) Use of the human interferon consensus gene for gene therapy
JP2021511048A (ja) 組換えワクシニアウイルスおよびそれを含む医薬組成物
CN1528887A (zh) 肿瘤靶向双基因-病毒的构建方法
Hoang-Le et al. A Kunjin replicon vector encoding granulocyte macrophage colony-stimulating factor for intra-tumoral gene therapy
CN1509764A (zh) 一种抗癌靶向基因病毒药物的制备方法
KR20220122551A (ko) 항암 바이러스 및 이의 용도
JPH08507757A (ja) 腫瘍の治療並びにヒトと動物の免疫化に使用する組成物
JP7227654B2 (ja) 固形癌及び微生物感染を治療するための方法及び組成物
EP0879294B1 (en) Transduced human hematopoietic stem cells
Qiao et al. Construction and characterization of a recombinant adenoviral vector expressing human interleukin-12
AU729199B2 (en) Composition for use in the treatment of tumours and the immunization of humans and animals
WO2002056917A1 (fr) Virus recombinant capable d'eradiquer de maniere specifique une tumeur associee au virus eb et son procede de construction

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee