ES2909778T3 - Heterociclos tricíclicos como inhibidores de proteína BET para su uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa en combinación con un inhibidor de Janus quinasas - Google Patents

Abstract

Un inhibidor de una proteína BET para su uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa, en donde el inhibidor de una proteína BET se administra en combinación con un inhibidor de Janus quinasas, en donde el inhibidor de Janus quinasas es tofacitinib, baricitinib, CYT387, lestaurtinib, pacritinib, TG101348 o un inhibidor selectivo de JAK1, y en donde dicho inhibidor de una proteína BET se selecciona de: 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazin-2(1H)-ona; (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazin-2(1H)-ona; y (4S)-2-(4-acetilpiperazin-1-il)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4- de][1,4]benzoxazina; y sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los mencionados anteriormente.

Description

DESCRIPCIÓN

Heterociclos tricíclicos como inhibidores de proteína BET para su uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa en combinación con un inhibidor de Janus quinasas

CAMPO TÉCNICO

La presente descripción se refiere a heterociclos tricíclicos que son inhibidores de proteínas BET tales como BRD2, BRD3, BRD4, y BRD-t y son útiles en el tratamiento de enfermedades como el cáncer.

ANTECEDENTES

Los genomas de los organismos eucariotas son altamente organizado dentro del núcleo de la célula. El ADN se empaqueta en cromatina envolviendo un núcleo de proteínas histonas para formar un nucleosoma. Estos nucleosomas se compactan por agregación y plegamiento para formar una estructura de cromatina altamente condensada. Es posible un rango de diferentes estados de condensación, y la estanqueidad de esta estructura varía durante el ciclo celular, siendo más compacta durante El proceso de división celular. La estructura de la cromatina desempeña un papel fundamental en la regulación de la transcripción génica regulando el acceso de proteínas al ADN. La estructura de la cromatina está controlada por una serie de modificaciones posteriores a la traducción de las proteínas histonas, principalmente dentro de las colas de las histonas H3 y H4 que se extienden más allá de la estructura del nucleosoma central. Estas modificaciones reversibles incluyen acetilación, metilación, fosforilación, ubiquitinación y SUMOilación. Estas marcas epigenéticas son escritas y borradas por enzimas específicas que modifican residuos específicos dentro de la cola de la histona, formando así un código epigenético. Otras proteínas nucleares se unen a estas marcas y producen resultados especificados por esta información a través de regulación de la estructura de la cromatina y la transcripción génica. Cada vez más pruebas vinculan los cambios genéticos con genes que codifican modificadores y reguladores epigenéticos que conducen a marcas de histonas aberrantes en enfermedades como trastornos neurodegenerativos, enfermedades metabólicas, inflamación y cáncer.

La acetilación de histonas se asocia típicamente con la activación de la transcripción de genes, como la modificación debilita la interacción entre el ADN y las proteínas histonas, lo que permite un mayor acceso a ADN por la maquinaria transcripcional. Las proteínas específicas se unen a los residuos de lisina acetilada dentro de las histonas para "leer" el código epigenético. Un módulo de proteína altamente conservado llamado bromodominio se une a los residuos de lisina acetilada en la histona y otras proteínas. Hay más de 60 proteínas que contienen bromodominio en el genoma humano.

La familia BET (bromodominio y Extra-Terminal) de proteínas que contienen bromodominio comprende 4 proteínas (BRD2, BRD3, BRD4 y BRD-t) que comparten una organización estructural conservada que contiene bromodominios tándem N-terminales capaces de unirse a residuos de lisina acetilados de histonas y otras proteínas. BRD2, BRD3 y BRD4 se expresan de forma ubicua, mientras que BRD-t se limita a las células germinales. Las proteínas BRD desempeñan funciones esenciales, pero no superpuestas, en la regulación de la transcripción génica y el control del crecimiento celular. Las proteínas BET están asociadas con complejos de proteínas grandes, incluidos Mediador, PAFc y complejo de súper alargamiento que regulan muchos aspectos de la transcripción génica. Se ha demostrado que las proteínas BRD2 y BRD4 permanecen en complejo con los cromosomas durante la mitosis y son necesarias para promover la transcripción de genes críticos, como la ciclina D y c-Myc, que inician el ciclo celular. Mochizuki y col., J. Biol. Chem 2008, 283, 9040-9048. BRD4 es esencial para reclutar el complejo del factor B de alargamiento traslacional de proteínas a los promotores de genes inducibles que resultan en la fosforilación de la ARN polimerasa II y estimulan la transcripción y elongación productiva de genes. Jang y col., Mol. Cell, 2005, 19, 523-534. En algunos casos, una actividad quinasa de BRD4 puede fosforilar directamente y activar la ARN polimerasa II. Devaiah y col., Proc. Nat. Acad. Sci., Estados Unidos. 2012, 109, 6927-6932. Las células que carecen de BRD4 muestran una progresión deteriorada a través del ciclo celular. Se informa que BRD2 y BRD3 se asocian con histonas a lo largo de genes transcritos activamente y pueden estar involucrados en facilitar el alargamiento transcripcional. Leroy y col., Mol. Cell, 2008, 30, 51-60. Además de las histonas acetiladas, se ha demostrado que las proteínas BET se unen selectivamente a factores de transcripción acetilados, incluida la subunidad RelA de NF-kB y GATA1, lo que regula directamente la actividad transcripcional de estas proteínas para controlar la expresión de genes implicados en la inflamación y la diferenciación hematopoyética. Huang y col., Mol. Cell Biol., 2009, 29, 1375-1387; Lamonica y col., Proc. Nat. Acad. Sci., EE.UU., 2011, 108, E159-168.

Una translocación recurrente que implica NUT (proteína nuclear en los testículos) con BRD3 o BRD4 para formar una novela de fusión oncogén, BRD-NUT, se encuentra en una forma altamente maligno de neoplasia epiteliales. French et al., Cancer Res., 2003, 63, 304-307; French y col., J. Clin. Oncol., 2004, 22, 4135-4139. La ablación selectiva de este oncogén restaura la diferenciación celular normal y revierte el fenotipo tumorigénico. Filippakopoulos et al., Nature, 2010, 468, 1068-1073. Se ha demostrado que la eliminación genética de BRD2, BRD3 y BRD4 perjudica el crecimiento y la viabilidad de una amplia gama de células tumorales hematológicas y sólidas. Zuber et al., Nature, 2011,478, 524-528; Delmore et al., Cell, 2011, 146, 904-917. Además de un papel en el cáncer, las proteínas BET regulan las respuestas inflamatorias al desafío bacteriano, y un modelo de ratón hipomorfo BRD2 mostró niveles dramáticamente más bajos de citocinas inflamatorias y protección contra la diabetes inducida por la obesidad. Wang y col., Biochem. J., 2009, 425, 71-83; Belkina y col., J. Immunol. 102838, publicación en línea antes de la impresión, 18 de febrero de 2013. Además, algunos virus hacen uso de estas proteínas BET para unir sus genomas a la cromatina de la célula huésped, como parte del proceso de replicación viral o usan proteínas BET para facilitar la transcripción de genes virales y represión. You et al., Cell, 2004, 117, 349-60; Zhu et al., Cell Reports, 2012, 2, 807-816.

Por consiguiente, existe la necesidad de compuestos que modulan la actividad de la familia de proteínas BET, incluidos BRD2, BRD3 y BRD4, que se pueden usar para tratar enfermedades asociadas a proteínas BET como el cáncer. Los compuestos de la invención ayudan a satisfacer esta necesidad.

RESUMEN

La presente invención proporciona un inhibidor de una proteína BET para su uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa, en donde el inhibidor de una proteína BET se administra en combinación con un inhibidor de Janus quinasas, en donde el inhibidor de las Janus quinasas es tofacitinib, baricitinib, CYT387, lestaurtinib, pacritinib, TG101348 o un inhibidor selectivo de JAK1, y en donde dicho inhibidor de una proteína BET se selecciona de: 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazin-2(1 H)-ona;

(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazin-2( 1H)-ona; y

(4S)-2-(4-acetilpiperazin-1-il)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina;

y sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los mencionados anteriormente.

La presente invención también proporciona una combinación de un inhibidor de una proteína BET y un inhibidor de Janus quinasas para su uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa, en donde el inhibidor de las Janus quinasas es tofacitinib, baricitinib, CYT387, lestaurtinib, pacritinib, TG101348 o un inhibidor selectivo de JAK1, y en donde dicho inhibidor de una proteína BET se selecciona de:

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazin-2(1 H)-ona;

(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazin-2( 1H)-ona; y

(4S)-2-(4-acetilpiperazin-1-il)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina;

y sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los mencionados anteriormente.

DESCRIPCIÓN DETALLADA

Por los términos "por ejemplo," y "tales como," y equivalentes gramaticales del mismo, la frase "y sin limitación" se entiende que siga menos que se indique explícitamente lo contrario.

Las formas singulares “un”, “una”, “el” y “la” incluyen referentes plurales a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

El término "aproximadamente" significa "alrededor de" (por ejemplo, más o menos aproximadamente 10% del valor indicado).

I. COMPUESTOS

En la presente se describe un compuesto de un compuesto inhibidor de la proteína BET de Fórmula (I):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

— representa un enlace sencillo o un doble enlace;

L es CR9R9a, O, S, SO o SO2 ;

Cy1 se selecciona de fenilo o un grupo heteroarilo de 5-6 miembros que comprende carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde dicho fenilo o heteroarilo de 5-6 miembros de Cy¹ está opcionalmente sustituido con 1,2, 3 o 4 grupos seleccionados independientemente de R¹¹;

R¹ y R² se seleccionan independientemente de H, halo, CN, OH, C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, C1-6 haloalquilo, OR^a1, SR^a1, C(=O)R^b1, C(=O)NR^c1R^d1, C(=O)OR^a1, OC(=O)R^b1, OC(=O)NR^c1R^d1, NR^c1 R^d1, NR^c1C(=O)R^b1, NR^c1 C(=O)NR^c1Rd1, NR^c1 C(=O)OR^a1, S(=O)R^b1, S(=O)NR^c1 R^d1, S(=O)² R^b1, NR^c1S(=O)² R^b1 y S(=O)²NR^c1R^d1, en el que dicho C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo y C^2-6 alquinilo de R¹ y R² están opcionalmente sustituidos con 1, 2 o 3 grupos seleccionados independientemente de halo, CN, Oh , OR^a1, SR^a1, C(=O)R^b1, C(=O)NR^c1 R^d1, C(=O)OR^a1, OC(=O)R^b1, OC(=O)NR^c1 R^d1, NR^c1R^d1, NR^c1C(=O)R^b1, NR^c1C(=O)NR^c1R^d1, NR^c1C(=O)OR^a1, S(=O)R^b1, S(=O)NR^c1R^d1, S(=O)² R^b1, NR^c1S(=O)² R^b1 y S(=O)²NR^c1R¹ ; proporcionado ni R¹ ni R² son Cl, Br, I, CN, OH o cuando L es O o S;

alternativamente, R¹ y R² junto con el átomo de carbono al que están unidos se combinan para formar un grupo cicloalquilo C3-7, en el que dicho grupo cicloalquilo está opcionalmente sustituido con 1,2, 3 o 4 grupos seleccionados independientemente de R²⁰ ;

Cy³ se selecciona de fenilo, cicloalquilo C3-7, un grupo heteroarilo de 5-10 miembros que comprende carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo heterocicloalquilo de 4-10 miembros que comprende carbono y 1, 2, o 3 heteroátomos seleccionados de N, o y S, en el que dicho fenilo, C3-7 cicloalquilo, heteroarilo de 5-10 miembros, y 4-10 heterocicloalquilo de de Cy³ está opcionalmente sustituido con 1,2, 3, o 4 grupos seleccionados independientemente de R¹³, en donde un átomo de nitrógeno formador de anillo de dicho grupo heteroarilo de 5-10 miembros o un átomo de nitrógeno formador de anillo de dicho grupo heterocicloalquilo de 4-10 miembros está opcionalmente oxidado;

R⁴ es H, C(=O)NR^14aR^14b, C(=O)R^14a, C(=O)OR^14a, o C^1-6 alquilo opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, NR^14aR^14b, OR^14a, SR^14a, CN, C(=O)R^14a, C(=O)NR^14aR^14b, C(=O)OR^14a, OC(=O)R^14b, OC(=O)NR^14aR^14b, NR^14aC(=O)R^14b NR^14aC(=O)NR^14aR^14b, NR^14aC(=O)OR^14b, S(=O)R^14a, S(=O)NR^14aR^14b, S(=O)² R14a, NR^14aS(=O)² R14b y S(=O)²NR^14aR^14b;

R⁵ se selecciona de = O y = S cuando C— N es un enlace simple,

alternativamente, cuando C— N es un enlace doble, entonces R⁵ se selecciona de H, C^1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, haloC^1-6 alquilo, NR^15aR^15b, -C(=O)NR^15aR^15b, C(=O)OR^15a, fenilo, C^3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-6 miembros que comprende carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo heterocicloalquilo de 4 a 10 miembros que comprende carbono y 1, 2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde dicho alquilo, fenilo, C3-7 cicloalquilo, heteroarilo de 5-6 miembros, y 4­ 10 heterocicloalquilo de de R⁵ está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 grupos independientemente seleccionados de R15;

R⁶ se selecciona de H, C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, C1-6 alcoxi, y C1-6 haloalquilo, en el que dichos alquilo, alquenilo y alquinilo de R⁶ son cada uno opcionalmente sustituido con 1, 2, 3 o 4 grupos independientemente seleccionados R¹⁶;

alternativamente, R⁶ se selecciona de C^6-10 arilo, C^3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-10 miembros que comprende carbono y 1,2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo de 4-7 miembros grupo heterocicloalquilo que comprende carbono y 1, 2, o 3 heteroátomos seleccionados de N, o y S, en donde dicho C6-10 arilo, C3-7 cicloalquilo, de 5-10 miembros heteroarilo y heterocicloalquilo de 4-7 de R⁶ son cada uno opcionalmente sustituido con 1,2, 3 o 4 grupos independientemente seleccionados R²⁰;

R⁷ se selecciona de H, halo, CN, OR^a , NR^c R^d , SR^b , C(=O)NR^c R^d , C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, haloC^1-6 alquilo, fenilo, C^3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-6 miembros que comprende carbono y 1,2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo heterocicloalquilo de 4-7 miembros que comprende carbono y 1,2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, fenilo, cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5 a 6 miembros y un grupo heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros de R⁷ están opcionalmente sustituidos con 1,2 o 3 grupos seleccionados independientemente de R¹⁷;

R⁸ se selecciona de H, C1-3 alquilo, C2-3 alquenilo, C2-3 alquinilo, C1-3 haloalquilo, halo, CN, OR^a , NR^cR^d , SR^b , y C(=O)NR^cR^d , en el que dicho alquilo C1-3 de R⁸ está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 grupos seleccionados independientemente de R¹⁸;

R⁹ y R^9a se seleccionan independientemente de H, C1-3 alquilo, C1-3 haloalquilo, halo, CN, OR^a , NR^c R^d , SR^b , y C(=O)NR^c R^d ;

R¹¹ es independientemente en cada caso seleccionado de H, C1-3 alquilo, C1-3 haloalquilo, halo, CN, OR^a , NR^cR^d , SR^b , y C(=O)NR^c R^d , en donde dicho alquilo C1-3 está opcionalmente sustituido con OH;

R¹³ es independientemente en cada caso seleccionado de H, halo, CN, OH, C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, C1-6 haloalquilo, OR^a3, SR^a3, C(=O)R^b3, C(=O)NR^c3R^d3, C(=O)OR^a3, OC(=O)R^b3, OC(=O)NR^c3R^d3, NR^c3R^d3, NRc3 C(=O)R^b3, NR^c3C(=O)NR^c3R^d3, NR^c3C(=O)OR^a3, S(=O)R^b3, S(=O)NR^c3R^d3, S(=O)² R^b3, NR^c3S(=O)² R^b3 y S(=O)²NR^c3R^d3, en el que dicho C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo y C^2-6 alquinilo de R¹³ está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 grupos seleccionados independientemente de halo, CN, OH, OR^a3, SR^a3, C(=O)R^b3, C(=O)NR^c3R^d3, C(=O)OR^a3, OC(=O)R^b3, OC(=O)NR^c3R^d3, NR^c3R^d3, NR^c3C(=O)R^b3, NR^c3C(=O)NR^c3R^d3, NR^c3C(=O)OR^a3, S(=O)R^b3, S(=O)NR^c3R^d3, S(=O)² R^b3, NR^c3S(=O)² R^b3 y S(=O)²NR^c3R^d3; R¹⁵ se selecciona independientemente en cada aparición de H, C^1-6 alquilo, C^3-7 cicloalquilo, heterocicloalquilo de 4-7 miembros, fenilo, heteroarilo de 5-6 miembros, halo, CN, OR^a5, SR^a5, C(=O)R^b5, C(=O)NR^c5R^d5, C(=O)OR^a5, OC(=O)R^b5, OC(=O)NR^c5R^d5, NR^c5R^d5, NR^c5C(=O)R^b5, NR^c5C(=O)NR^c5R^d5, NR^c5C(=O)OR^a5, S(=O)R^b5, S(=O)NR^c5R^d5, S(=O)² R^b5, NR^c5S(=O)² R^b5 y S(=O)²NR^c5R^d5, en donde dicho C^1-6 alquilo, C^3-7 cicloalquilo, heterocicloalquilo de 4-7 miembros, fenilo, y heteroarilo de 5-6 miembros están cada uno opcionalmente sustituidos con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, CN, OR^a5, SR^a5, C(=O)R^b5, C(=O)NR^c5R^d5, C(=O)OR^a5, OC(=O)R^b5, OC(=O)NR^c5R^d5, NR^c5R^d5, NR^c5C(=O)R^b5, NR^c5C(=O)NR^c5R^d5, NR^c5C(=O)OR^a5, S(=O)R^b5 S(=O)NR^c5R^d5, S(=O)² R^b5, NR^c5S(=O)² R^b5, S(=O)²NR^c5R^d5, heteroarilo de 5-6 miembros, heterocicloalquilo de 4-7 miembros, fenilo y C3-7 cicloalquilo;

R^14a y R^14b se seleccionan independientemente en cada aparición de H y C^1-6 alquilo, en donde dicho C^1-6 alquilo de R^14a y R^14b está opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 sustituyentes seleccionados de R²⁰;

o R^14a y R^14b junto con el átomo de N al que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 4-7 miembros opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 sustituyentes seleccionados de R²⁰ ;

R^15a y R^15b se seleccionan independientemente en cada aparición de H y C^1-6 alquilo, en donde dicho C^1-6 alquilo de R^15a y R^15b está opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 sustituyentes seleccionados de R²⁰;

o R^15a y R^15b junto con el átomo de N al que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 4-7 miembros opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 sustituyentes seleccionados de R²⁰ ;

R¹⁶ se selecciona independientemente en cada caso de halo, CN, OH, OR^a6, SR^a6, C(=O)R^b6, C(=O)NR^c6R^d6, C(=O)OR^a6 OC(=O)R^b6, OC(=O)NR^c6R^d6, NR^c6R^d6, NR^c6C(=O)R^b6, NR^c6C(=O)NR^c6R^d6, NR^c6C(=O)OR^a6, S(=O)R^b6, S(=O)NR^c6R^d6, S(=O)² R^b6, NR^c6S(=O)²k^b6 y S(=O)²NR^c6R^d6, C^6-10 arilo, C^3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-10 miembros que comprende carbono y 1,2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo heterocicloalquilo de 4-7 miembros que comprende carbono y 1,2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde dicho C^6-10 arilo, C^3-7 cicloalquilo, heteroarilo de 5-10 miembros y heterocicloalquilo de 4-7 miembros de R¹⁶ están cada uno opcionalmente sustituidos con 1, 2, 3 o 4 grupos seleccionados independientemente R²⁰;

R¹⁷ y R¹⁸ se seleccionan independientemente en cada caso de halo, C^1-4 alquilo, CN, OR^a , NR^cR^d , SR^b , C(=O)NR^cR^d , C(=O)OR^a y NR^cC(=O)R^a ;

R^a , R^c y R^d se seleccionan independientemente en cada aparición de H, C^1-6 alquilo, C(O)R^e , S(=O)² Rf, C(=O)NR^g R^h, y fenilo opcionalmente sustituido por C1-4 alcoxi;

R^b es en cada aparición C1-6 alquilo;

R^e es cada vez que aparece C^1-4 alquilo opcionalmente sustituido con un grupo seleccionado de fenilo, alcoxi C1-4 , amino, alquilamino C1-4 y dialquilamino C2-8 ;

R^f es C1-4 alquilo;

R^g y R^h se seleccionan independientemente en cada aparición de H y C^1-4 alquilo; R^a1, R^b1, R^c1 y R^d1 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, y C1-6 haloalquilo, en donde dicho C^1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo y C^2-6 alquinilo formando R^a1, R^b1, R^c1 y R^d1 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1,2, o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R²⁰ ;

R^a3, R^b3, R^c3 y R^d3 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, C3-6 cicloalquilo, y C1-6 haloalquilo, en el que dichos C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo y C^2-6 formando alquinilo R^a3, R^b3, R^c3 y R^d3 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1,2, o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, CN, OH, OR^a4, SR^a4, C(=O)R^b4, C(=O)NR^c4R^d4, C(=O)OR^a4, OC(=O)R^b4, OC(=O)NR^c4R^d4, NR^c4R^d4, NRc4C(=O)R^b4, NR^c4C(=O)NR^c4R^d4, NR^c4C(=O)OR^a4, S(=O)R^b4, S(=O)NR^c4R^d4, S(=O)² R^b4, NR^c4S(=O)² R^b4 y S(=O)²NR⁴ R^d4; R^a4, R^b4, R^c4 y R^d4 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, y C1-6 haloalquilo, en donde dicho C^1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo y C^2-6 alquinilo formando R^a4, R^b4, R^c4 y R^d4 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1, 2, o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R²⁰ ; R^a5, R^b5, R^c5 y R^d5 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, C3-6 cicloalquilo, heterocicloalquilo de 5-6 miembros, y C1-6 haloalquilo en el que dicho C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo y C^2-6 alquinilo formando R^a5, R^b5, R^c5 y R^d5 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1, 2, o 3 sustituyentes independientemente seleccionado de R²⁰ ; o

R^c5 y R^d5 junto con el átomo de N al que están unidos forman un anillo de heterocicloalquilo de 4-7 miembros opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R²⁰ ;

R^a6, R^c6 y R^d6 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, y C1-6 haloalquilo en el que dicho C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo y C^2-6 alquinilo formando R^a6, R^c6 y R^d6 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1, 2, o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R²⁰ ;

alternativamente, R^c6 y R^d6 junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros que comprende carbono, nitrógeno y 0, 1 o 2 heteroátomos adicionales seleccionados de N, O y S, en donde dicho 4 El grupo heterocicloalquilo de 7 miembros está opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R²⁰ ;

R^b6 es independientemente en cada caso seleccionado de C1-6 alquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, C1-6 haloalquilo, fenilo, C3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-6 miembros que comprende carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros que comprende carbono y 1,2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, fenilo, cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5 a 6 miembros y grupo heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros están cada uno opcionalmente sustituidos con 1,2 ó 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R²⁰; y R²⁰ es en cada caso independientemente seleccionado de H, halo, OH, CN, amino, C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 alquiltio, C1-4 alquilamino, di (C1-4 alquilo) amino, C1-4 haloalquilo, C1-4 haloalcoxi, C1-4 alquilo-C(=O)-, C1-4 alquilo-C(=O)O-, C1-4 alquilo-OC(=O)-, HOC(=O)-, H2NC(=o )-, C^1-4 alquilo-NHC(=O)-, di(C^1-4 alquilo) NC(=O)-, C1-4 alquilo-C(=O)NH-, C1-4 alquilo O-C(=O)NH-,C 1-4 alquilo-S(=O)-, H²NS(=O)-, C1-4 alquiloNHS(=O)-, di (Ci-4 alquilo)NS(=O)-, Ci-4 alquilo-S(=O)2 Ci-4 alquilo-S(=O)²NH-, H²NS(=O)2 C^1-4 alquilo-NHS(=O)2 -, y di(C^1-4 alquilo) NS(=O)2-.

La divulgación también describe a un compuesto de un compuesto inhibidor de la proteína BET de Fórmula (I):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

— representa un enlace sencillo o un doble enlace;

L es CR9R9a, O, S, SO o SO2;

Cy1 se selecciona de fenilo o un grupo heteroarilo de 5-6 miembros que comprende carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde dicho fenilo o heteroarilo de 5-6 miembros de Cy1 está opcionalmente sustituido con 1,2, 3 o 4 grupos seleccionados independientemente de R11;

R1 y R2 se seleccionan independientemente de H, halo, CN, OH, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, C1-6 haloalquilo, ORa1, SRa1, C(=O)Rb1, C(=O)NRc1Rd1, C(=O)ORa1, OC(=O)Rb1, OC(=O)NRc1Rd1, NRc1 Rd1, NRc1C(=O)Rb1, NRc1C(=O)NRc1Rd1, NRc1C(=O)ORa1, S(=O)Rb1, S(=O)NRc1 Rd1, S(=O)2Rb1, NRc1S(=O)2Rb1 y S(=O)2NRc1Rd1, en el que dicho C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo y C2-6 alquinilo de R1 y R2 están opcionalmente sustituidos con 1, 2 o 3 grupos seleccionados independientemente de halo, CN, Oh , ORa1, SRa1, C(=O)Rb1, C(=O)NRc1 Rd1, C(=O)ORa1, OC(=O)Rb1, OC(=O)NRc1Rd1, NRc1 Rd1, NRc1C(=O)Rb1, NRc1C(=O)NRc1Rd1, NRc1C(=O)ORa1, S(=O)Rb1, S(=O)NRc1 Rd1, S(=O)2Rb1, NRc1S(=O)2Rb1 y S(=O)2NRc1R1;

siempre que ni R1 ni R2 son Cl, Br, I, CN, OH o cuando L es O o S;

alternativamente, R1 y R2 junto con el átomo de carbono al que están unidos pueden combinarse para formar un grupo C3-7 cicloalquilo, en el que dicho grupo cicloalquilo está opcionalmente sustituido con 1, 2, 3 o 4 grupos seleccionados independientemente de R20;

Cy3 se selecciona de fenilo, C3-7 cicloalquilo, un grupo heteroarilo de 5-10 miembros que comprende carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo heterocicloalquilo de 4-10 miembros que comprende carbono y 1, 2, o 3 heteroátomos seleccionados de N, o y S, en el que dicho fenilo, C3-7 cicloalquilo, heteroarilo de 5-10 miembros, y 4-10 heterocicloalquilo de de Cy3 está opcionalmente sustituido con 1,2, 3, o 4 grupos seleccionados independientemente de R13, en donde un átomo de nitrógeno formador de anillo de dicho grupo heteroarilo de 5-10 miembros o un átomo de nitrógeno formador de anillo de dicho grupo heterocicloalquilo de 4-10 miembros está opcionalmente oxidado;

R4 es H o C1-6 alquilo;

R5 se selecciona de = O y = S cuando C — N es un enlace simple,

alternativamente, cuando C— N es un enlace doble, entonces R5 se selecciona de H, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, haloC1-6 alquilo, NR15aR15b, fenilo, C3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-6 miembros que comprende carbono y 1,2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y una que comprende carbono 4-7 grupo heterocicloalquilo de y 1,2, o 3 heteroátomos seleccionados de N, o y S, en el que dichos alquilo, fenilo, C3-7 cicloalquilo, heteroarilo de 5-6 miembros, y heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros de R5 está opcionalmente sustituido con 1,2, 3 o 4 grupos seleccionados independientemente de R15;

R6 se selecciona de H, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, y C1-6 haloalquilo, en donde dicho alquilo, alquenilo, y alquinilo de R6 están cada uno opcionalmente sustituidos por 1, 2, 3 o 4 grupos seleccionaron independientemente R16;

alternativamente, R6 se selecciona de C6-10 arilo, C3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-10 miembros que comprende carbono y 1,2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo de 4-7 miembros grupo heterocicloalquilo que comprende carbono y 1, 2, o 3 heteroátomos seleccionados de N, o y S, en donde dicho C6-10 arilo, C3-7 cicloalquilo, de 5-10 miembros heteroarilo y heterocicloalquilo de 4-7 de R6 son cada uno opcionalmente sustituido con 1,2, 3 o 4 grupos independientemente seleccionados R20;

R7 se selecciona de H, halo, CN, ORa, NRcRd, SRb, C(=O)NRcRd, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, haloC1-6 alquilo, fenilo, C3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-6 miembros que comprende carbono y 1,2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo heterocicloalquilo de 4-7 miembros que comprende carbono y 1,2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, fenilo, cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5 a 6 miembros y un grupo heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros de R7 están opcionalmente sustituidos con 1,2 o 3 grupos independientemente seleccionados de R17;

R8 se selecciona de H, C1-3 alquilo, C2-3 alquenilo, C2-3 alquinilo, C1-3 haloalquilo, halo, CN, ORa, NRcRd, SRb, y C(=O)NRcRd, en el que dicho alquilo C1-3 de R8 está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 grupos seleccionados independientemente de R18;

R9 y R9a se seleccionan independientemente de H, C1-3 alquilo, C1-3 haloalquilo, halo, CN, ORa, NRcRd, SRb, y C(=O)NRcRd; R11 es independientemente en cada caso seleccionado de H, C1-3 alquilo, C1-3 haloalquilo, halo, CN, ORa, NRcRd, SRb, y C(=O)NRcRd;

R13 es independientemente en cada caso seleccionado de H, halo, CN, OH, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, C1-6 haloalquilo, ORa3, SRa3, C(=O)Rb3, C(=O)NRc3Rd3, C(=O)ORa3, OC(=O)Rb3, OC(=O)NRc3Rd3, NRc3Rd3, NRc3C(=O)Rb3, NRc3C(=O)NRc3Rd3, NRc3C(=O)ORa3, S(=O)Rb3, S(=O)NRc3R13, S(=O)2Rb3, NRc3S(=O)2Rb3 y S(=O)2NRc3Rd3, en el que dicho C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo y C2-6 alquinilo de R13 está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 grupos seleccionados independientemente de halo, CN, OH, ORa3, SRa3, C(=O)Rb3, C(=O)NRc3Rd3, C(=O)ORa3, OC(=O)Rb3, OC(=O)NRc3Rd3, NRc3Rd3, NRc3C(=O)Rb3, NRc3C(=O)NRc3Rd3, NRc3C(=O)ORa3, S(=O)Rb3 S(=O)NRc3Rd3, S(=O)2Rb3, NRc3S(=O)2Rb3 y S(=O)2NRc3Rd3; R15 se selecciona independientemente en cada caso de H, halo, CN, o H, ORa5, SRa5, C(=O)Rb5, C(=O)NRc5Rd5, C(=O)ORa5, OC(=O)Rb5, OC(=O)NRc5Rd5, NRc5Rd5, NRc5C(=O)Rb5, NRc5C(=O)NRc5Rd5, NRc5C(=O)ORa5, S(=O)Rb5, S(=O)NRc5Rd5, S(=O)2Rb5, NRc5S(=O)2Rb5 y S(=O)2NRc5Rd5;

R15a y R15b se seleccionan independientemente de H y C1-6 alquilo, en donde dicho alquilo de R15a y R15b está opcionalmente sustituido con 0, 1,2 o 3 sustituyentes seleccionados de R20;

R16 se selecciona independientemente en cada caso de halo, CN, OH, ORa6, SRa6, C(=O)Rb6, C(=O)NRc6Rd6, C(=O)ORa6, OC(=O)Rb6, OC(=O)NRc6Rd6, NRc6Rd6 NRc6C(=O)Rb6, NRc6C(=O)NRc6Rd6, NRc6C(=O)ORa6, S(=O)Rb6, S(=O)NRc6Rd6, S(=O)2Rb6, NRc6S(=O)2Rb6 y S(=O)2NRc6Rd6, C6-10 arilo, C3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-10 miembros que comprende carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo heterocicloalquilo de 4-7 miembros que comprende carbono y 1,2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde dicho C6-10 arilo, C3-7 cicloalquilo, heteroarilo de 5-10 miembros y heterocicloalquilo de 4-7 miembros de R16 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1, 2, 3 o 4 grupos seleccionaron independientemente R20;

R17 y R18 se seleccionan independientemente en cada caso de halo, CN, ORa, NRcRd, SRb, y C(=O)NRcRd; Ra, Rc y Rd se seleccionan independientemente en cada caso de H y C1-6 alquilo;

Rb es en cada aparición C1-6 alquilo;

Ra1, Rb1, Rc1 y Rd1 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, y C1-6 haloalquilo, en donde dicho C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo y C2-6 alquinilo formando Ra1, Rb1, Rc1 y Rd1 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1,2, o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R20;

Ra3, Rb3, Rc3 y Rd3 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, y C1-6 haloalquilo, en donde dicho C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo y C2-6 alquinilo formando Ra3, Rb3, Rc3 y Rd3 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1,2, o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, CN, OH, ORa4, SRa4, C(=O)Rb4, C(=O)NRc4Rd4, C(=O)ORa4, OC(=O)Rb4, OC(=O)NRc4Rd4, NRc4Rd4, NRc4C(=O)Rb4, NRc4C(=O)NRc4Rd4, NRc4C(=O)ORa4, S(=O)Rb4, S(=O)NRc4Rd4, S(=O)2Rb4, NRc4S(=O)2Rb4 y S(=O)2NRc4Rd4;

Ra4, Rb4, Rc4 y Rd4 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, y C1-6 haloalquilo, en donde dicho C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo y C2-6 alquinilo formando Ra4, Rb4, Rc4 y Rd4 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1,2, o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R20;

Ra5, Rb5, Rc5 y Rd5 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, y C1-6 haloalquilo en el que dicho C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo y C2-6 alquinilo formando Ra5, Rb5, Rc5 y Rd5 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1,2, o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R20;

Ra6, Rc6 y Rd6 son independientemente en cada caso seleccionados de H, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, y C1-6 haloalquilo en el que dicho C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo y C2-6 alquinilo formando Ra6, Rc6 y Rd6 están cada uno opcionalmente sustituidos con 1, 2, o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R20;

alternativamente, Rc6 y Rd6 junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos pueden combinarse para formar un grupo heterocicloalquilo de 4-7 miembros que comprende carbono, nitrógeno y 0, 1 o 2 heteroátomos adicionales seleccionados entre N, O y S, en el que dicho grupo heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros está opcionalmente sustituido con 1 , 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R20;

Rb6 es independientemente en cada caso seleccionado de C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo, C1-6 haloalquilo, fenilo, C3-7 cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5-6 miembros que comprende carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de N, O y S, y un grupo heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros que comprende carbono y 1,2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, fenilo, cicloalquilo, grupo heteroarilo de 5 a 6 miembros y grupo heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros están cada uno opcionalmente sustituidos con 1,2 ó 3 sustituyentes seleccionados independientemente de R20; y R20 es en cada caso independientemente seleccionado de H, halo, OH, CN, amino, C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 alquiltio, C1-4 alquilamino, di(C1-4 alquilo) amino, C1-4 haloalquilo, C1-4 haloalcoxi, C1-4 alquilo-C(=O)-, C1-4 alquilo-C(=O)O-, C1-4 alquilo-OC(=O)-, HOC(=o )-, H2NC(=O)-, C1-4 alquilo-NHC(=O)-, di(C1-4 alquilo) NC(=O)-, C1-4 alquilo-C(=O)NH-, alquilo C1-4 S(=O)-, H2NS(=O)-, C1-4 alquilo-NHS(=O)-, di(C1-4 alquilo)NS(=O)-, C1-4 alquilo-S(=O)2 C1-4 alquilo-S(=O)2NH-, H2NS(=O)2-, C1-4 alquilo-NHS(=O)2-, y di(Ci-4 alquilo) NS(=O)2-

También se describen compuestos de Fórmula (I), en donde el compuesto es un compuesto de fórmula (la):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

------representa un enlace simple o un enlace doble;

Cy¹ se selecciona de isoxazolilo y pirazolilo, en donde dicho isoxazolilo y pirazolilo de Cy¹ está opcionalmente sustituido con 1 o 2 grupos independientemente seleccionados de R¹¹ ;

R¹ se selecciona de H, metilo, -C(=O)OCH²CH³ ,-C(=O)N(H)CH²CH³ , -C(=O)N(H)CH²CH²OH y -C(=O)N(CH³)² ;

Cy³ se selecciona de fenilo, piridinilo, oxidopiridinilo, tiazolilo, ciclohexilo, dihidrobenzofuranilo y tetrahidrofuranilo, en donde dicho fenilo, piridinilo, oxidopiridinilo, tiazolilo, ciclohexilo, dihidrobenzofuranilo y tetrahidrofuranilo de Cy³ está opcionalmente sustituido con 1,2, 3 o 4 grupos seleccionado independientemente de R¹³;

R⁵ es =O cuando C ^ - N es un enlace simple,

alternativamente, cuando C - - N es un enlace doble, entonces R⁵ es H, metilo, -CH=CH² , -N(H)CH³ , -N(H)CH²CH³, -N(H)CH(CH³)² , -N(CH³)² , -N(H)CH²CH²OH, -N(H)CH(CH³)CH²OH, -N(H)CH²CH(OH)CH³ ,-n (h )c (CH3)2CH2OH, -N(CH³)CH²CH²OH, morfolinilo, pirrolidinilo, hidroxipirrolidinilo, piperidinilo, hidroxipiperidinilo, azetidinilo, hidroxiazetidinilo, piperazinilo, butoxicarbonilpiperazinilo y fenilo;

R⁶ se selecciona de H, metilo, etilo y propilo, en donde dichos metilo, etilo y propilo de R⁶ están opcionalmente sustituidos con 1,2 o 3 grupos R¹⁶ independientemente seleccionados;

R⁷ se selecciona de H, F, Cl, Br, metilo, metoxi, etoxi, CN, fenilo y piridinilo;

R¹¹ se selecciona independientemente en cada aparición de H, metilo, etilo, cloro y metoxi;

R¹³ se selecciona independientemente en cada aparición de H, F, CN, metoxi, -CF³ , -OCH²C(=O)OH, -OCH²C(=O)N(H)CH²CH³ , -OCH²C(=O)N(H)CH²CH²OH, y -OCH2² (=O)N(CH³)² ; y

R¹⁶ se selecciona independientemente en cada aparición de H, morfolinilo y piperidinilo.

El inhibidor de una proteína BET para su uso de acuerdo con la invención es un compuesto de Fórmula (I), en donde el compuesto se selecciona de los siguientes compuestos:

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazin-2(7H)-ona;

(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazin-2(7H)-ona;

(4S)-2-(4-acetilpiperazin-1-il)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Cuando los compuestos enumerados anteriormente contienen un centro quiral, los compuestos pueden ser cualquiera de los estereoisómeros posibles. En compuestos con un único centro quiral, la estereoquímica del centro quiral puede ser (R) o (S). En compuestos con dos centros quirales, la estereoquímica de los centros quirales puede ser cada uno independientemente (R) o (S), por lo que la configuración de los centros quirales puede ser (R) y (R),

(R) y (S); (S) y (R), o (S) y (S). En compuestos con tres centros quirales, la estereoquímica de cada uno de los tres centros quirales puede ser cada uno independientemente (R) o (S), por lo que la configuración de los centros quirales puede ser (R), (R) y (R); (R), (R) y (S); (R), (S) y (R) ; (R), (S) y (S); (S), (R) y (R); (S) y (S).

Se aprecia que ciertas características de la invención, que son, para mayor claridad, descritas en el contexto de distintos modos de realización, también pueden proporcionarse en combinación en una única realización. A la inversa, varias características de la invención que, por brevedad, se describen en el contexto de una sola realización, también se pueden proporcionar por separado o en cualquier subcombinación adecuada.

El término "sustituido" significa que un átomo o grupo de átomos reemplaza formalmente hidrógeno como un "sustituyente" unido a otro grupo. El átomo de hidrógeno se elimina formalmente y se reemplaza por un sustituyente.

Un único sustituyente divalente, por ejemplo, oxo, puede reemplazar dos átomos de hidrógeno. El término "opcionalmente sustituido" significa no sustituido o sustituido. Los sustituyentes se seleccionan independientemente, y la sustitución puede estar en cualquier posición químicamente accesible. Debe entenderse que la sustitución en un átomo dado está limitada por la valencia. A lo largo de las definiciones, el término "Cn-m" indica un rango que incluye los puntos finales, en donde n y m son enteros e indican el número de carbonos. Los ejemplos incluyen C1-4, C1-6 y similares.

El término "n-miembros", donde n es un entero típicamente describe el número de átomos que forman el anillo en un resto en el que el número de átomos que forman el anillo es n. Por ejemplo, piperidinilo es un ejemplo de un anillo de heterocicloalquilo de 6 miembros, pirazolilo es un ejemplo de un anillo de heteroarilo de 5 miembros, piridilo es un ejemplo de un anillo de heteroarilo de 6 miembros y 1, 2, 3, 4-tetrahidro-naftaleno es un ejemplo de un grupo cicloalquilo de 10 miembros.

Tal como se utiliza aquí, el término "C^n-m alquilo", usado sólo o en combinación con otros términos, se refiere a un anillo saturado grupo hidrocarbonado que puede ser de cadena lineal o ramificada, que tiene n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, el grupo alquilo contiene de 1 a 6 átomos de carbono o de 1 a 4 átomos de carbono, o de 1 a 3 átomos de carbono. Los ejemplos de restos alquilo incluyen, pero no se limitan a, grupos químicos tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, s-butilo y t-butilo.

Tal como se utiliza aquí, el término "C^n-m alcoxi", usado sólo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -O-alquilo, en el que el grupo alquilo tiene de n a m átomos de carbono. Los grupos alcoxi de ejemplo incluyen metoxi, etoxi y propoxi (por ejemplo, n-propoxi e isopropoxi). En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene 1 a 3 átomos de carbono.

Tal como se utiliza aquí, el término "alquileno", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de enlace alquilo divalente. Los ejemplos de grupos alquileno incluyen, pero no se limitan a, etano-1,2-diilo, propano-1, 3-diilo, propano-1,2-diilo, butano-1,4-diilo, butano-1,3-diilo, butano-1,2-diilo, 2-metilo-propano-1,3-diilo y similares.

Como se usa en el presente documento, "C^n-m alquenilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo alquilo que tiene uno o más dobles enlaces carbono-carbono y que tiene n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, el resto alquenilo contiene de 2 a 6 o de 2 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos alquenilo incluyen, pero no se limitan a, etenilo, n-propenilo, isopropenilo, n-butenilo, sec-butenilo y similares.

Como se usa en el presente documento, "C^n-m alquinilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo alquilo que tiene uno o más triples enlaces carbono-carbono y que tiene n a m átomos de carbono. Los grupos alquinilo de ejemplo incluyen, pero sin limitación, etinilo, propin-1-ilo, propin-2-ilo y similares. En algunas realizaciones, el resto alquinilo contiene 2 a 6 o 2 a 4 átomos de carbono.

Tal como se utiliza aquí, el término "C^n-m alquilamino", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -NH(alquilo), en el que el grupo alquilo tiene de n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene 1 a 6 o 1 a 4 átomos de carbono.

Tal como se utiliza aquí, el término "di-C^n-m-alquilamino", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -N(alquilo)2 , en el que los dos grupos alquilo cada uno tiene, independientemente, n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, cada grupo alquilo tiene independientemente 1 a 6 o 1 a 4 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "tio", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -SH.

Tal como se utiliza aquí, el término "C^n-m alquiltio", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -S-alquilo, en el que el grupo alquilo tiene de n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene 1 a 6 o 1 a 4 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "C^n-m alquilsulfinilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -S(=O)-alquilo, en el que el grupo alquilo tiene n am átomos de carbono. En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene 1 a 6 o 1 a 4 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "C^n-m alquilsulfonilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -S(=O)2 -alquilo, en el que el grupo alquilo tiene de n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene 1 a 6 o 1 a 4 átomos de carbono.

Tal como se utiliza aquí, el término "amino", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -NH2.

Tal como se utiliza aquí, el término "arilo", usado sólo o en combinación con otros términos, se refiere a un anillo monocíclico o policíclico (p. ej., que tiene 2, 3 o 4 anillos fusionados) de hidrocarburo aromático, tales como, pero no limitado a fenilo, 1 -naftilo, 2-naftilo, antracenilo, fenantrenilo y similares. En algunas realizaciones, arilo es C610 arilo. En algunas realizaciones, el grupo arilo es un anillo de naftaleno o un anillo de fenilo. En algunas realizaciones, el grupo arilo es fenilo.

Tal como se utiliza aquí, el término "arilalquilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -alquileno-arilo. En algunas realizaciones, arilalquilo es C6-10 arilo-C1-3 alquilo. En algunas realizaciones, arilalquilo es C6-10 arilo-C^1-4 alquilo. En algunas realizaciones, arilalquilo es bencilo.

Tal como se utiliza aquí, el término "carbonilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo -C(=O)-.

Tal como se utiliza aquí, el término "carboxi", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -C(=O)OH.

Tal como se utiliza aquí, el término "cicloalquilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un resto hidrocarburo cíclico no aromático, que puede contener opcionalmente uno o más grupos alquenileno como parte del anillo de estructura. Los grupos cicloalquilo pueden incluir sistemas de anillos mono o policíclicos (por ejemplo, que tienen 2, 3 o 4 anillos condensados). También se incluyen en la definición de cicloalquilo restos que tienen uno o más anillos aromáticos fusionados (es decir, que tienen un enlace en común) con el anillo de cicloalquilo, por ejemplo, derivados benzo de ciclopentano, ciclopenteno, ciclohexano y similares. Uno o más átomos de carbono formadores de anillo de un grupo cicloalquilo pueden oxidarse para formar enlaces carbonilo. En algunas formas de realización, cicloalquilo es C3-7 cicloalquilo, que es monocíclico o bicíclico. Los ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo, cicloheptatrienilo, norbornilo, norpinilo, norcarilo y similares. En algunas realizaciones, el grupo cicloalquilo es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo.

Tal como se utiliza aquí, el término "cicloalquilalquilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -alquileno-cicloalquilo. En algunas realizaciones, cicloalquilalquilo es C^3-7 cicloalquilo-C1-3 alquilo, en el que el cicloalquilo porción es monocíclico o bicíclico. En algunas realizaciones, cicloalquilalquilo es C^3-7 cicloalquilo-C1-4 alquilo, en el que la porción de cicloalquilo es monocíclica o bicíclica.

Como se usa en el presente documento, "C^n-m haloalcoxi", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -O-haloalquilo que tiene de n a m átomos de carbono. Un ejemplo de grupo haloalcoxi es OCF³. Un ejemplo adicional de grupo haloalcoxi es OCHF2. En algunas realizaciones, el grupo haloalcoxi está fluorado solamente. En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene 1 a 6 o 1 a 4 átomos de carbono.

Tal como se utiliza aquí, el término "halo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un átomo de halógeno seleccionado entre F, Cl, I o Br. En algunas realizaciones, "halo" se refiere a un átomo de halógeno seleccionado de F, Cl o Br. En algunas formas de realización, grupos halo ejemplares son F.

Tal como se utiliza aquí, el término "C^n-m haloalquilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un alquilo que tiene de un átomo de halógeno a 2s 1 átomos de halógeno que puede ser igual o diferente, donde "s" es el número de átomos de carbono en el grupo alquilo, en donde el grupo alquilo tiene n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, el grupo haloalquilo está fluorado solamente. En algunas realizaciones, el grupo haloalquilo es fluorometilo, difluorometilo o trifluorometilo. En algunas realizaciones, el grupo haloalquilo es trifluorometilo. En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene 1 a 6 o 1 a 4 átomos de carbono.

Tal como se utiliza aquí, el término "heteroarilo", usado sólo o en combinación con otros términos, se refiere a un anillo monocíclico o policíclico (por ejemplo, que tienen 2, 3 o 4 anillos fusionados) fracción de hidrocarburo aromático, que tiene uno o más miembros de anillo heteroátomico seleccionados de nitrógeno, azufre y oxígeno. En algunas realizaciones ,heteroarilo es un heteroarilo C1-9 de 5 a 10 miembros, que es monocíclico o bicíclico y que tiene 1,2, 3 o 4 miembros del anillo heteroátomo seleccionados independientemente de nitrógeno, azufre y oxígeno. Cuando el grupo heteroarilo contiene más de un miembro del anillo heteroátomo, los heteroátomos pueden ser iguales o diferentes. Los átomos de nitrógeno en el (los) anillo (s) del grupo heteroarilo pueden oxidarse para formar N-óxidos. Los grupos heteroarilo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, piridina, pirimidina, pirazina, piridazina, pirrol, pirazol, azolilo, oxazol, tiazol, imidazol, furano, tiofeno, quinolina, isoquinolina, indol, benzotiofeno, benzofurano, benzisoxazol, imidazo[1,2-¿>]tiazol, purina o similares.

Un heteroarilo de anillo de cinco miembros es un grupo heteroarilo que tiene cinco átomos de anillo que comprende carbono y uno o más (por ejemplo, 1, 2 o 3) átomos de anillo seleccionados independientemente de N, O y S. Heteroarilos de anillo de cinco miembros ejemplares son tienilo, furilo, pirrolilo, imidazolilo, tiazolilo, oxazolilo, pirazolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, 1,2,3-triazolilo, tetrazolilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,3,4-triazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo y 1,3,4-oxadiazolilo.

Un heteroarilo de anillo de seis miembros es un heteroarilo con un anillo que tiene seis átomos de anillo en el que uno o más (por ejemplo, 1, 2 o 3) átomos del anillo se seleccionan independientemente de N, O y S. Los heteroarilos de anillo de seis miembros ejemplares son piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, triazinilo y piridazinilo.

Tal como se utiliza aquí, el término "heteroarilalquilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -alquileno-heteroarilo. En algunas realizaciones, heteroarilalquilo es C1-9 heteroarilo-C1-3 alquilo, en el que la porción de heteroarilo es monocíclica o bicíclica y tiene 1, 2, 3, o 4 miembros del anillo de heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, azufre y oxígeno. En algunas realizaciones, heteroarilalquilo es C^1-9 heteroarilalquilo-C^1-4 alquilo, en el que la porción de heteroarilo es monocíclica o bicíclica y tiene 1,2, 3 o 4 miembros del anillo heteroátomo seleccionados independientemente de nitrógeno, azufre y oxígeno.

Como se usa en este documento, el término "heterocicloalquilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere al sistema de anillo no aromático, que puede contener opcionalmente uno o más alquenilenos o alquinilenos como parte del anillo de la estructura, y que tiene al al menos un miembro del anillo heteroátomo seleccionado independientemente de nitrógeno, azufre y oxígeno. Cuando los grupos heterocicloalquilo contienen más de un heteroátomo, los heteroátomos pueden ser iguales o diferentes. Los grupos heterocicloalquilo pueden incluir sistemas de anillos mono o policíclicos (por ejemplo, que tienen 2, 3 o 4 anillos fusionados), que incluyen sistemas espiro. También se incluyen en la definición de restos de heterocicloalquilo que tienen uno o más anillos aromáticos fusionados (es decir, que tienen un enlace en común) con el anillo no aromático, por ejemplo, 1,2,3,4-tetrahidroquinolina, dihidrobenzofurano y similares. Los átomos de carbono o heteroátomos en el anillo o anillos del grupo heterocicloalquilo pueden oxidarse para formar un grupo carbonilo, o sulfonilo (u otro enlace oxidado) o un átomo de nitrógeno puede cuaternizarse. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquilo C2-9 de 5 a 10 miembros, que es monocíclico o bicíclico y que tiene 1, 2, 3 o 4 miembros del anillo heteroátomo seleccionados independientemente de nitrógeno, azufre y oxígeno. Los ejemplos de grupos heterocicloalquilo incluyen 1, 2, 3, 4-tetrahidro-quinolina, dihidrobenzofurano, azetidina, azepano, pirrolidina, piperidina, piperazina, morfolina, tiomorfolina y pirano.

Tal como se utiliza aquí, el término "heterocicloalquilalquilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula -alquileno-heterocicloalquilo. En algunas realizaciones, heterocicloalquilalquilo es C2-9 heterocicloalquil-C1-3 alquilo, en donde la parte de heterocicloalquilo es monocíclico o bicíclico y tiene 1, 2, 3, o 4 miembros del anillo de heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, azufre y oxígeno. En algunas realizaciones, heterocicloalquilalquilo es C2-9 heterocicloalquilo-C1-4 alquilo, en el que la porción de heterocicloalquilo es monocíclica o bicíclica y tiene 1, 2, 3 o 4 miembros del anillo heteroátomo seleccionados independientemente de nitrógeno, azufre y oxígeno.

Los compuestos descritos en este documento pueden ser asimétricos (por ejemplo, que tienen uno o más estereocentros). Todos los estereoisómeros, tales como enantiómeros y diastereoisómeros, están destinados a menos que se indique lo contrario. Los compuestos de la presente invención que contienen átomos de carbono sustituidos asimétricamente pueden aislarse en formas ópticamente activas o racémicas. Los métodos sobre cómo preparar formas ópticamente activas a partir de materiales de partida ópticamente inactivos son conocidos en la técnica, tales como por resolución de mezclas racémicas o por síntesis estereoselectiva. Muchos isómeros geométricos de olefinas, enlaces dobles C=N y similares también pueden estar presentes en los compuestos descritos en el presente documento, y todos estos isómeros estables se contemplan en la presente invención. Los isómeros geométricos cis y trans de los compuestos de la presente invención se describen y pueden aislarse como una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas.

La resolución de mezclas racémicas de compuestos puede llevarse a cabo mediante cualquiera de los numerosos métodos conocidos en la técnica. Un método de ejemplo incluye la recristalización fraccionada usando un ácido de resolución quiral que es un ácido orgánico formador de sal ópticamente activo. Los agentes de resolución adecuados para los métodos de recristalización fraccionada son, por ejemplo, ácidos ópticamente activos, tales como las formas D y L de ácido tartárico, ácido diacetiltartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido mandélico, ácido málico, ácido láctico o los diversos ácidos canforsulfónicos ópticamente activos tales como ácido p-camporsulfónico. Otros agentes de resolución adecuados para los métodos de cristalización fraccionada incluyen formas estereoisoméricamente puras de a-metilbencilamina (por ejemplo, formas S y R, o formas diastereoisoméricamente puras), 2-fenilglicinol, norefedrina, efedrina, N-metilefedrina, ciclohexiletilamina, 1,2-diaminociclohexano, y similares.

La resolución de mezclas racémicas también se puede llevar a cabo mediante elución en una columna empaquetada con un agente de resolución ópticamente activo (por ejemplo, dinitrobenzoilfenilglicina). La composición solvente de elución adecuada puede ser determinada por un experto en la materia.

Los compuestos de la invención también incluyen formas tautoméricas. Las formas tautoméricas resultan del intercambio de un enlace simple con un enlace doble adyacente junto con la migración concomitante de un protón. Las formas tautoméricas incluyen tautómeros prototrópicos que son estados de protonación isoméricos que tienen la misma fórmula empírica y carga total. Los tautómeros prototrópicos de ejemplo incluyen pares cetona-enol, pares amida-ácido imídico, pares lactama-lactim, pares amida-ácido imídico, pares enamina-imina y formas anulares donde un protón puede ocupar dos o más posiciones de un sistema heterocíclico, por ejemplo, 1H- y 3H-imidazol, 1H-, 2H-y 4H- 1,2,4-triazol, 1H- y 2H-isoindol, y 1H- y 2H-pirazol. Las formas tautoméricas pueden estar en equilibrio o bloqueadas estéricamente en una forma mediante la sustitución apropiada.

Los compuestos de la invención también pueden incluir todos los isótopos de átomos que aparecen en los compuestos intermedios o finales. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico pero diferentes números de masa.

El término "compuesto", como se usa en el presente documento, pretende incluir todos los estereoisómeros, isómeros geométricos, tautómeros e isótopos de las estructuras representadas. Los compuestos aquí identificados por nombre o estructura como una forma tautomérica particular están destinados a incluir otras formas tautoméricas a menos que se especifique lo contrario (por ejemplo, en el caso de los anillos de purina, a menos que indicado de otra manera, cuando el nombre o estructura del compuesto tiene el tautómero 9H, se entiende que el tautómero 7H también está incluido).

Todos los compuestos, y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se pueden encontrar junto con otras sustancias tales como agua y disolventes (por ejemplo, hidratos y solvatos) o se pueden aislar.

En algunas realizaciones, los compuestos de la invención, o sus sales, están sustancialmente aislados. Por "sustancialmente aislado" se entiende que el compuesto está al menos parcial o sustancialmente separado del entorno en el que se formó o detectó. La separación parcial puede incluir, por ejemplo, una composición enriquecida en los compuestos de la invención. La separación sustancial puede incluir composiciones que contienen al menos aproximadamente 50%, al menos aproximadamente 60%, al menos aproximadamente 70%, al menos aproximadamente 80%, al menos aproximadamente 90%, al menos aproximadamente 95%, al menos aproximadamente 97% o al al menos aproximadamente el 99% en peso de los compuestos de la invención, o sal de los mismos. Los métodos para aislar compuestos y sus sales son rutinarios en la técnica.

La frase "farmacéuticamente aceptable" se emplea en el presente documento para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que, dentro del alcance del buen juicio médico, son adecuados para usar en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, proporcional a una relación beneficio/riesgo razonable.

Las expresiones "temperatura ambiente" y "temperatura de la habitación", como se usa en este documento, se entienden en la técnica, y se refieren en general a una temperatura de, por ejemplo, una temperatura de reacción, que es aproximadamente la temperatura ambiente en la que la reacción se lleva a cabo, por ejemplo, a una temperatura de aproximadamente 20°C a aproximadamente 30°C.

La presente invención también incluye sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos descritos en el presente documento. Como se usa en el presente documento, "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos descritos en los que el compuesto original se modifica convirtiendo un resto ácido o base existente en su forma de sal. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales de ácidos minerales u orgánicos de residuos básicos tales como aminas; sales alcalinas u orgánicas de residuos ácidos tales como ácidos carboxílicos; y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención incluyen las sales no tóxicas convencionales del compuesto original formado, por ejemplo, a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención se pueden sintetizar a partir del compuesto original que contiene un resto básico o ácido por métodos químicos convencionales.

Generalmente, tales sales pueden prepararse haciendo reaccionar las formas de ácido o base libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de los dos; generalmente, se prefieren medios no acuosos como éter, acetato de etilo, alcoholes (por ejemplo, metanol, etanol, iso-propanol o butanol) o acetonitrilo (MeCN). Las listas de sales adecuadas se encuentran en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a Ed., (Mack Publishing Company, Easton, 1985), pág. 1418, Berge y col., J. Pharm. Sci., 1977, 66 (1), 1-19, y en Stahl et al., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, (Wiley, 2002). En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento incluyen las formas de N-óxido.

Las siguientes abreviaturas pueden usarse en la presente memoria: AcOH (ácido acético); Ac2Ü (anhídrido acético); aq. (acuoso); atm. (atmósfera(s)); Boc (f-butoxicarbonilo); br (ancho); Cbz (carboxibencilo); calc. (calculado);

d (doblete); dd (doblete de dobletes); d CM (diclorometano); DEAD (azodicarboxilato de dietilo); DIAD (N,N'-diisopropilo azidodicarboxilato); DIPEA (N,N-diisopropiletilamina); DMF (N,N-dimetilformamida); Et (etilo); EtOAc (acetato de etilo);

g (gramo (s)); h (hora(s)); HATU (N,N,N',N'-tetrametilo-O-(7-azabenzotriazol-1-ilo) uronio hexafluorofosfato); HCl (ácido clorhídrico); HPLC (cromatografía líquida de alta resolución); Hz (hercios); J (constante de acoplamiento); LCMS (cromatografía líquida - espectrometría de masas); m (multiplete); M (molar); mCPBA (ácido 3-cloroperoxibenzoico);

MgSO4 (sulfato de magnesio); MS (espectrometría de masas); Me (metilo); MeCN (acetonitrilo); MeOH (metanol); mg (miligramo(s)); min. (minutos(s)); mL (mililitro(s)); mmol (milimoles(s)); N (normal); NaHCO3 (bicarbonato de sodio);

NaOH (hidróxido de sodio); Na2SO4 (sodio sulfato); NH4Cl (cloruro de amonio); NH4OH (hidróxido de amonio); nM (nanomolar); RMN (espectroscopía de resonancia magnética nuclear); OTf (trifluorometanosulfonato); Pd (paladio);

Ph (fenilo); pM (picomolar); POCl3 (cloruro de fosforilo); RP-HPLC (cromatografía líquida de alto rendimiento en fase inversa); s (singlete); t (triplete o terciario); TBS (tertbutildimetilsililo); terciario; tt (triplete de tripletes); f-Bu (ferc-butilo); TFA (ácido trifluoroacético); THF (tetrahidrofurano); pg/ml (microgramo(s)); pl (microlitro(s)); pm (micromolar); % en peso (porcentaje en peso).

II. SÍNTESIS

Los compuestos de la invención, incluyendo sales de los mismos, se pueden preparar usando técnicas de síntesis orgánica conocidas y pueden ser sintetizadas de acuerdo con cualquiera de las numerosas rutas sintéticas posibles.

Las reacciones para preparar compuestos de la invención pueden llevarse a cabo en disolventes adecuados que pueden seleccionarse fácilmente por un experto en la técnica de la síntesis orgánica. Los disolventes adecuados pueden ser sustancialmente no reactivos con los materiales de partida (reactivos), los intermedios o los productos a las temperaturas a las que se llevan a cabo las reacciones, por ejemplo, temperaturas que pueden variar desde la temperatura de congelación del disolvente hasta la temperatura de ebullición del disolvente. Una reacción dada puede llevarse a cabo en un disolvente o una mezcla de más de un disolvente. Dependiendo de la etapa de reacción particular, el experto en la materia puede seleccionar disolventes adecuados para una etapa de reacción particular.

La preparación de compuestos de la invención puede implicar la protección y desprotección de diversos grupos químicos. Un experto en la materia puede determinar fácilmente la necesidad de protección y desprotección, y la selección de grupos protectores apropiados. La química de los grupos protectores se describe, por ejemplo, en Kocienski, Protecting Groups, (Thieme, 2007); Robertson, Protecting Group Chemistry, (Oxford University Press, 2000); Smith et al., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 6a Ed. (Wiley, 2007); Peturssion et al., "Protecting Groups in Carbohydrate Chemistry", J. Chem. Educ., 1997, 74 (11), 1297; y Wuts et al., Protective Groups in Organic Synthesis, 4a Ed., (Wiley, 2006).

Las reacciones pueden monitorizarse de acuerdo con cualquier método adecuado conocido en la técnica. Por ejemplo, la formación del producto puede controlarse por medios espectroscópicos, como la espectroscopía de resonancia magnética nuclear (p. e j, 1H o 13C), espectroscopía infrarroja, espectrofotometría (p. ej., UV-visible), espectrometría de masas o métodos cromatográficos como cromatografía líquida de rendimiento (HPLC), cromatografía líquida-espectroscopía de masas (LCMS) o cromatografía en capa fina (TLC). Los expertos en la técnica pueden purificar los compuestos mediante una variedad de métodos, incluida la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) (“Preparative LCMS Purification: Improved Compound Specific Method Optimization” Karl F. Blom, Brian Glass, Richard Sparks, Andrew P. Combs J. Combi. Chem. 2004, 6 (6), 874-883) y cromatografía de sílice en fase normal.

Los compuestos de Fórmula (I) se pueden formar como se muestra en el Esquema I. Los tioles (L = S) o fenoles (L = O) (i) puede alquilarse usando condiciones de alquilación estándar (Cy3COC (R1 R2)-X (ii), X = grupo saliente, como halo (Br, Cl, I o mesilato) o condiciones de Mitsunobu (p. ej., Cy3COC (R1R2)-X, donde X = OH (ii), DEAD, Ph3P) para proporcionar derivados de tioéter o éter (iii), respectivamente. La ciclación in situ o con calentamiento puede proporcionar imina (iv) que con el tratamiento con un reactivo de Grignard de fórmula R4-MgX1 (X1 = halo) y la reducción del grupo nitro (por ejemplo, H2Pd/COFe) para dar una amina (v). Los compuestos (v) pueden hacerse reaccionar con carbonildiamidazol o fosgeno para formar una urea y luego halogenarse con N-clorosuccinimida, N-bromosuccinimida o N-yodosuccinimida para dar haluro tricíclico (vi) donde X = Cl, Br o I o halogenado primero y luego reaccionar con carbonildiamidazol o fosgeno para formar una urea y dar haluro tricíclico (vi). El compuesto (vi) puede ser alquilado (p. ej., R6-X, donde X = halo (X = Br, Cl o I) y una base, tal como trietilamina, NaH o Na2CO3; o en condiciones de Mitsunobu) para proporcionar la urea tetrasustituida (vii). Finalmente, el grupo halo de (vii) se puede acoplar a M-Cy1, donde M es un ácido borónico, un éster borónico o un metal apropiadamente sustituido (por ejemplo, Cy1-M es Cy1-B(OH)2, Cy1-Sn(Bu)4, o Zn-Cy1), bajo condiciones estándar de Suzuki o condiciones estándar de Stille (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y un base (p. ej., una base de bicarbonato o carbonato) o condiciones estándar de Negishi (p. ej., en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), para dar un derivado de Fórmula (I) (viii) en donde R5 es = O. Alternativamente, M-Cy1 puede ser un heterociclo que contiene amina (donde M es H y está unido al nitrógeno de la amina del heterociclo Cy1) con acoplamiento al compuesto (vii) por calentamiento de una base o en condiciones de Buchwald (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (por ejemplo, una base de alcóxido)) para dar un derivado de Fórmula (I) (viii). Alternativamente, la urea (vi) se puede acoplar a M-Cy1, donde M es un ácido borónico, un éster borónico o un metal apropiadamente sustituido (por ejemplo, Cy1-M es Cy1-B(OH)2, Cy1-Sn(Bu)4 o Zn-Cy1), en condiciones estándar de Suzuki o condiciones estándar de Stille (p. ej., en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (p. ej., una base de bicarbonato o carbonato) o condiciones estándar de Negishi (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), para dar un derivado de Fórmula (I) (ix) que puede alquilarse (por ejemplo, R6-X, donde X = halo (X = Br, Cl o I) y una base, tal como trietilamina, NaH o Na2CO3; o en condiciones de Mitsunobu) para proporcionar la urea tetrasustituida de Fórmula (I) (viii). Alternativamente, la urea (vi) se puede convertir en el 2-halo-imidazol, como Cl tras el tratamiento con POCl3, y luego se trata con una amina (HNRR) para dar benzoimidazol (x) donde R5 = NRR. Benzoimidazol (x) se puede acoplar a M-Cy1, donde M es un ácido borónico, un éster borónico o un metal apropiadamente sustituido (p. ej., Cy1-M es Cy1-B(OH)2, Cy1-Sn(Bu)4, o Zn-Cy1), en condiciones estándar de Suzuki o condiciones estándar de Stille (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (por ejemplo, una base de bicarbonato o carbonato) o condiciones estándar de Negishi (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), para dar un derivado de Fórmula (I) (xi). M-Cy1 puede ser un heterociclo que contiene amina (donde M es H y está unido al nitrógeno de amina del heterociclo Cy1) con acoplamiento al compuesto (x) que se realiza calentando con una base o en condiciones de Buchwald (por ejemplo, en la presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (p. ej., una base de alcóxido)) para dar un derivado de Fórmula (I) (xi). Alternativamente, la urea (ix) puede convertirse en el 2-haloimidazol, como Cl después del tratamiento con POCl3, y luego tratarse con una amina (HNRR) para dar bencimidazol (xi) donde R5 = NRR o el derivado de cloruro puede ser acoplado a MR5, donde M es un ácido borónico, un éster borónico o un metal apropiadamente sustituido (p. ej., R5-M es R5-B(OH)2, R5-Sn(Bu)4 o Zn-R5), bajo condiciones estándar de Suzuki o condiciones estándar de Stille (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (por ejemplo, una base de bicarbonato o carbonato) o Negishi estándar condiciones (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), tal como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), para dar un derivado de Fórmula (I) (xi). M-Cy1 puede ser un heterociclo que contiene amina (donde M es H y está unido al nitrógeno de la amina del heterociclo Cy1) con acoplamiento al haluro de (ix) calentándolo con una base o en condiciones de Buchwald (p. ej., en presencia de un catalizador de paladio (0), tal como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (por ejemplo, una base de alcóxido)) para dar un derivado de Fórmula (I) (xi). El compuesto amino (v) se puede tratar con un orto-éster, como R5C(OEt)3, o un aldehído R5 CHO y NaHSO 3 para dar un bencimidazol que se puede halogenar con W-clorosuccinimida, W-bromosuccinimida o W-yodosuccinimida para dar halo-bencimidazol (x), donde X = Cl, Br o I, o estos dos pasos se pueden ejecutar en el orden opuesto para dar el mismo bencimidazol (x) que se puede convertir adicionalmente en compuestos de Fórmula (I) (xi) como se describió anteriormente anteriormente.

Los compuestos de Fórmula (I) se pueden formar como se muestra en el Esquema II. El nitro-haluro (i) puede hacerse reaccionar con una amina, como HNR 6, para dar un derivado amino que puede alquilarse con (Cy3COC (R1R2)-X (ii) usando condiciones de alquilación estándar, X = grupo saliente, como halo (Br, Cl, I) o mesilato) o condiciones de Mitsunobu (p. ej., Cy3COC (R1R2)-X, donde X = OH (ii), DEAD, Ph3P) para proporcionar derivados de tioéter o éter (iii), respectivamente. La reducción del grupo nitro de (iii) en condiciones estándar (p. ej., Fe o Zn) puede dar el compuesto amino que puede ciclar in situ o al calentar para proporcionar una imina que con el tratamiento con un reactivo de Grignard de fórmula R4 -MgX1 (X1 = halo) para dar una amina (iv) o (iii) se puede reducir con H2 sobre Pd/C para dar la amina (iv) donde R4 = H. Los compuestos (iv) pueden o bien hacer reaccionar con carbonildiimidazol o fosgeno para formar una urea y luego halogenado con N-clorosuccinimida, N-bromosuccinimida o N-yodosuccinimida para dar haluro tricíclico (v) donde X = Cl, Br o I o halogenado primero y luego reaccionar con carbonildiimidazol o fosgeno para formar una urea y dar haluro tricíclico (v). Finalmente, el grupo halo de (v) se puede acoplar a M-Cy1, donde M es un ácido borónico, un éster borónico o un metal apropiadamente sustituido (por ejemplo, Cy1-M es Cy1-B(OH)2, Cy1-Sn(Bu)4 o Zn-Cy1), en condiciones estándar de Suzuki o condiciones estándar de Stille (p. ej., en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (por ejemplo, una base de bicarbonato o carbonato) o condiciones estándar de Negishi (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), tal como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), para dar un derivado de Fórmula (I) (vi). M-Cy1 puede ser un heterociclo que contiene amina (donde M es H y está unido al nitrógeno de amina del heterociclo Cy1) con acoplamiento al compuesto (v) mediante calentamiento con una base o en condiciones de Buchwald (p. ej., en la presencia de un catalizador de paladio (0), tal como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (p. ej., una base alcóxido)) para dar un derivado de Fórmula (I) (vi).

Esquema II

Los compuestos de la Fórmula (I) se puede formar como se muestra en el Esquema III. El nitro-haluro (i) se puede hacer reaccionar con una amina de fórmula HO2CC(R1R2)C(Cy3R4)-NH2, para dar un derivado de ácido carboxílico (iii). La conversión del ácido carboxílico (iii) en un haluro de acilo, como el cloruro de acilo mediante el tratamiento con cloruro de oxalilo, puede afectar la ciclación intramolecular de Friedel-Crafts para dar cetona (iv). La reducción del grupo cetona y el grupo nitro de (iv) en condiciones estándar (p. ej., H2 sobre Pd/C o una reacción de Wolff-Kishner (NH2NH2 , KOH) seguido de la reducción del grupo nitro con Fe) puede dar el derivado de diamina (v). La diamina (v) se puede convertir en compuestos de Fórmula (I) (donde L =CH2) por métodos similares para la diamina (v) que se muestran en el Esquema I.

Esquema III

i

ho

1. Reducción

Los compuestos de Fórmula (I) se pueden formar como se muestra en el Esquema IV. Los compuestos (i) se pueden halogenar con W-clorosuccinimida, W-bromosuccinimida o W-yodosuccinimida para dar haluro tricíclico (v) donde X = Cl, Br o I y el grupo halo de (ii) se pueden acoplar a MR7, donde M es un ácido borónico, un éster borónico o un metal apropiadamente sustituido (p. ej., R7 -M es R7 -B(OH)2, R7 -Sn(Bu)4 o Zn-R7), según Suzuki estándar condiciones o condiciones estándar de Stille (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (por ejemplo, una base de bicarbonato o carbonato) o condiciones estándar de Negishi (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), para dar un derivado de Fórmula (I) (vi). MR7 puede ser un heterociclo que contiene amina (donde M es H y está unido a el nitrógeno de la amina del heterociclo R7) con acoplamiento al compuesto (ii) se realiza calentando con una base o en condiciones de Buchwald (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), tal como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (por ejemplo, una base de alcóxido)) para dar un derivado de Fórmula (I) (iii).

Esquema IV

Los compuestos de Fórmula (I) se pueden formar como se muestra en el Esquema V . La nitroanilina (i) se puede hacer reaccionar con un aldehído de fórmula OHCC(R1) =CHCy3 (ii), para dar derivados de quinolona (iii). La reducción del grupo de quinolina y grupo nitro de (iii) bajo condiciones estándar (p. ej., H2 sobre Pd/C puede dar el derivado de diamina (iv). Diamina (iv) luego puede ser convertido a compuestos de Fórmula (I) (donde L =CH2) por métodos similares para diamina (v) se muestra en el Esquema I.

Esquema V

Los compuestos de Fórmula (I) se pueden formar como se muestra en el Esquema VI. El sulfuro (i) puede hacerse reaccionar con un oxidante, tal como mCPBA o H²O² o dioxirano, para dar el sulfóxido (ii) que puede ser oxidado adicionalmente con un oxidante, tal como mCPBA o H²O² o dioxirano, para dar la sulfona (iii).

Esquema VI

Las halocetonas intermedias (ii) del Esquema I y el Esquema II pueden sintetizarse como se muestra en el Esquema VII. El ácido carboxílico (i) puede activarse con un agente de acoplamiento (por ejemplo, HBTU, HATU o EDC) y luego reaccionar con N,0-dimetilhidroxilamina para dar un derivado de N-metoxi-N-metilcarboxamida (ii). La amida (ii) a continuación, se puede hacer reaccionar con un Grignard reactivo de fórmula R1R2-CH-MgX1 (X¹ = halo) para dar una cetona (iii) que se puede halogenar con Br² o NXS (X = Br, Cl o I) para dar halo-cetona (iv). La halocetona (iv) puede transformarse usando métodos similares a los mostrados en el Esquema I y el Esquema II para proporcionar compuestos de Fórmula (I).

Esquemas VII

Los compuestos de Fórmula (I) se pueden formar como se muestra en el Esquema VIII. La 2-bromoquinolina (i) se puede acoplar al M-Cy3, donde M es un ácido borónico, un éster borónico o un metal apropiadamente sustituido (p. ej., Cy1-M es Cy1-B(OH)² , Cy1-Sn(Bu)4 o Zn-Cy1), en condiciones estándar de Suzuki o condiciones estándar de Stille (p. ej., en presencia de un catalizador de paladio (0), tal como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (por ejemplo, una base de bicarbonato o carbonato) o condiciones estándar de Negishi (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), tal como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), para dar el compuesto (ii). El compuesto (ii) puede reducirse (por ejemplo, borano/piridina o 1,4-dihidro-3,5-dicarbetoxi-2,6-dimetilpiridina/difenilo hidrógeno fosfato) para dar el compuesto (iii). El compuesto (iii) se puede convertir en (iv) usando trifosgeno/metoxilamina o 4-nitrofenilo metoxicarbamato. La ciclación de (iv) se puede lograr con [/,/-bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno para dar (v). El grupo metoxi de (v) puede eliminarse por hidrogenación (Pd/C) para dar (vi). El compuesto (vi) se puede halogenar con N-clorosuccinimida, N-bromosuccinimida o N-yodosuccinimida para dar haluro tricíclico (vii) donde X = Cl, Br o I. Finalmente, el grupo halo de (vii) se puede acoplar a M-Cy1, donde M es un ácido borónico, un éster borónico o un metal apropiadamente sustituido (p. ej., Cy1-M es Cy1-B(OH)² , Cy1-Sn(Bu)4 o Zn-Cy1), en condiciones estándar de Suzuki o condiciones estándar de Stille (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y una base (por ejemplo, una base de bicarbonato o carbonato) o condiciones estándar de Negishi (por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio (0), tal como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), para dar un derivado de Fórmula (I) (viii).

Esquema VIII

Para la síntesis de compuestos particulares, los esquemas generales descritos anteriormente se pueden modificar. Por ejemplo, los productos o productos intermedios se pueden modificar para introducir grupos funcionales particulares. Alternativamente, los sustituyentes se pueden modificar en cualquier etapa de la síntesis global por métodos conocidos por un experto en la materia, por ejemplo, según lo descrito por Larock, Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations (Wiley, 1999); y Katritzky et al. (Ed.), Comprehensive Organic Functional Group Transformations (Pergamon Press 1996).

Los materiales de partida, reactivos e intermedios cuya síntesis no se describe en el presente documento están disponibles comercialmente, se conocen en la literatura o se pueden preparar mediante métodos conocidos por un experto en la materia.

Un experto en la materia apreciará que los procesos descritos no son los medios exclusivos por los cuales los compuestos de la invención pueden sintetizarse y que está disponible un amplio repertorio de reacciones orgánicas sintéticas para ser potencialmente empleados en la síntesis de compuestos de la invención. El experto en la materia sabe cómo seleccionar e implementar rutas sintéticas apropiadas. Los métodos sintéticos adecuados de materiales de partida, productos intermedios y productos pueden identificarse por referencia a la literatura, incluyendo fuentes de referencia tales como: Advances in Heterocyclic Chemistry, Vols. 1-107 (Elsevier, 1963-2012); Journal of Heterocyclic Chemistry Vols. 1 -49 (Journal of Heterocyclic Chemistry, 1964-2012); Carreira, et al. (Ed.) Science of Synthesis, Vols.

1 -48 (2001 -2010) and Knowledge Updates KU2010/1 -4; 2011/1-4; 2012/1 -2 (Thieme, 2001 -2012); Katritzky, et al. (Ed.) Comprehensive Organic Functional Group Transformations, (Pergamon Press, 1996); Katritzky et al. (Ed.); Comprehensive Organic Functional Group Transformations II (Elsevier, 2a Ed., 2004); Katritzky y col. (Ed.), Comprehensive Heterocyclic Chemistry (Pergamon Press, 1984); Katritzky et al., Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, (Pergamon Press, 1996); Smith et al., March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 6a ed. (Wiley, 2007); Trost y col. (Ed.), Comprehensive Organic Synthesis (Pergamon Press, 1991).

III. USOS DE LOS COMPUESTOS

Los compuestos de la invención son inhibidores de la proteína BET y, por lo tanto, son útiles en el tratamiento de enfermedades y trastornos asociados con la actividad de las proteínas BET. Para los usos descritos en este documento, se puede usar cualquiera de los compuestos de la invención, incluida cualquiera de las realizaciones de los mismos.

Los compuestos de Fórmula (I) pueden inhibir una o más de las proteínas BET BRD2, BRD3, BRD4, y BRD-t. En algunas realizaciones, los compuestos de la invención inhiben selectivamente una o más proteínas BET sobre otra. "Selectivo" significa que el compuesto se une o inhibe a una proteína BET con mayor afinidad o potencia, respectivamente, en comparación con una referencia, como otra proteína BET. Por ejemplo, los compuestos pueden ser selectivos para BRD2 sobre BRD3, BRD4 y BRD-t, selectivos para BRD3 sobre BRD2, BRD4 y BRD-t, selectivos para BRD4 sobre BRD2, BRD3 y BRD-t, o selectivos para BRD-t sobre BRD2, BRD3 y BRD4. En algunas realizaciones, los compuestos inhiben dos o más de las proteínas BET, o todas las proteínas BET. En general, la selectividad puede ser al menos aproximadamente 5 veces, al menos aproximadamente 10 veces, al menos aproximadamente 20 veces, al menos aproximadamente 50 veces, al menos aproximadamente 100 veces, al menos aproximadamente 200 veces, al menos aproximadamente 500 veces o al menos aproximadamente 1000 veces.

Los compuestos de Fórmula (I) son por lo tanto útiles para el tratamiento de trastornos mediados por proteínas BET. El término "mediado por BET" se refiere a cualquier enfermedad o afección en la que una o más de las proteínas BET, como BRD2, BRD3, BRD4 y/o BRD-t, o un mutante de las mismas, desempeña un papel, o donde la enfermedad o afección está asociada con la expresión o actividad de una o más de las proteínas BET. Por lo tanto, los compuestos de la invención pueden usarse para tratar o disminuir la gravedad de enfermedades y afecciones en las que se sabe que las proteínas BET, tales como BRD2, BRD3, BRD4 y/o BRD-t, o un mutante de las mismas, desempeñan un papel.

Las enfermedades y afecciones tratables usando los compuestos de Fórmula (I) incluyen cáncer y otros trastornos proliferativos, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias crónicas, enfermedades inflamatorias agudas, sepsis e infección viral. Las enfermedades pueden tratarse administrando a un individuo (por ejemplo, un paciente) que necesita el tratamiento una cantidad o dosis terapéuticamente efectiva de un compuesto de Fórmula (I), o cualquiera de sus realizaciones, o una composición farmacéutica del mismo. La presente descripción también proporciona un compuesto de Fórmula (I), o cualquiera de sus realizaciones, o una composición farmacéutica del mismo, para usar en el tratamiento de una enfermedad o trastorno mediado por BET. También se proporciona el uso de un compuesto de Fórmula (I), o cualquiera de sus realizaciones, o una composición farmacéutica del mismo, en la fabricación de un medicamento para tratar una enfermedad o trastorno mediado por BET.

Las enfermedades que pueden tratarse con los compuestos de Fórmula (I) incluyen cánceres. Los cánceres pueden incluir cáncer suprarrenal, carcinoma de células acínicas, neuroma acústico, melanoma acral lentiginoso, acrospiroma, leucemia eosinofílica aguda, leucemia eritroide aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia megacarioblástica aguda, leucemia monocítica aguda, leuceoma de carcinoma promonocítico agudo, adenocarcinoma de adenoides agudo, carcinoma adenocítico, adenocarcinoma agudo, adenocarcinoma agudo, adenocidoma, adenoma, tumor odontogénico adenomatoide, carcinoma adenoescamoso, neoplasia de tejido adiposo, carcinoma adrenocortical, leucemia/linfoma de células T adultas, leucemia de células NK agresiva, linfoma relacionado con el SIDA, rabdomiosarcoma alveolar, sarcoma de parte blanda alveolar, fibroma de células grandes ameloblásticas, linfoma anaplásico de células grandes, cáncer anaplásico de tiroides, linfoma angioinmunoblástico de células T, angiomiolipoma, angiosarcoma, astrocitoma, tumor rabdoide teratoideo atípico, leucemia linfocítica crónica de células B, leucemia prolinfocítica de células B, linfoma de células B, carcinoma de células basales, cáncer de vías biliares, cáncer de vejiga, blastoma, cáncer de hueso, tumor de Brenner, tumor de Brown, linfoma de Burkitt, cáncer de mama, cáncer de cerebro, carcinoma, carcinoma in situ, carcinosarcoma, tumor de cartílago, cemento, sarcoma mieloide, condroma, cordoma, coriocarcinoma, papiloma del plexo coroideo, sarcoma de células claras del riñón, craneofaringioma, linfoma cutáneo de células T, cáncer de cuello uterino, cáncer colorrectal, enfermedad de Degos, tumor desmoplásico de células pequeñas y redondas, linfoma difuso de células B grandes, tumor neuroepitelial disembrioplásico, disgerminoma, carcinoma embrionario, neoplasia de glándulas endocrinas, tumor de seno endodérmico, linfoma de células T asociado a enteropatía, cáncer de esófago, feto en feto, fibroma, fibrosarcoma, linfoma folicular, cáncer de tiroides folicular, ganglioneuroma, cáncer gastrointestinal, tumor de células germinales, coriocarcinoma gestacional, fibroblastoma de células gigantes, tumor de células gigantes del hueso, tumor glial, glioblastoma multiforme, glioma, gliomatosis cerebri, glucagonoma, gonadoblastoma, tumor de células de la granulosa, ginendroblastoma, cáncer de vesícula biliar, cáncer gástrico, leucemia de células pilosas, hemangi oblastoma, cáncer de cabeza y cuello, hemangiopericitoma, neoplasia maligna hematológica, hepatoblastoma, linfoma hepatoesplénico de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, carcinoma lobular invasivo, cáncer intestinal, cáncer de riñón, cáncer de laringe, lentigo maligno, carcinoma letal de línea media, leucemia tumor de células de Leydig, liposarcoma, cáncer de pulmón, linfangioma, linfangiosarcoma, linfoepitelioma, linfoma, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena aguda, leucemia linfocítica crónica, cáncer de hígado, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, linfoma MALT, histoma fibroso maligno, tumor maligno de la vaina del nervio periférico, tumor maligno del tritón, linfoma de células del manto, linfoma de células B de la zona marginal, leucemia de mastocitos, germen mediastínico, tumor de células, carcinoma medular de mama, cáncer medular de tiroides, meduloblastoma, melanoma, meningioma, cáncer de células de Merkel, mesotelioma, carcinoma urotelial metastásico, Tumor de Mullerian mixto, tumor mucinoso, mieloma múltiple, neoplasia de tejido muscular, micosis fungoide, liposarcoma mixoide, mixoma, mixosarcoma, carcinoma nasofaríngeo, neurinoma, neuroblastoma, neurofibroma, neuroma, melanoma nodular, cáncer ocular, oligoastrocitoma, menoma, endometoma, nervio, endometoma, tumor del nervio óptico, cáncer oral, osteosarcoma, cáncer de ovario cáncer, tumor de Pancoast, cáncer de tiroides papilar, paraganglioma, pinealoblastoma, pineocitoma, pituicytoma, pituitaria adenoma, tumor de la hipófisis, plasmocitoma, polyembryoma, precursor linfoma T-linfoblástico, linfoma del sistema nervioso central primario, linfoma de derrame primario, cáncer peritoneal primario, cáncer de próstata, cáncer pancreático, cáncer faríngeo, pseudomixoma peritoneal, carcinoma de células renales, carcinoma medular renal, retinoblastoma, rabdomioma, rabdomiosarcoma, transformación de Richter, cáncer rectal, sarcoma, schwannomatosis, seminoma, tumor de sertoli, seminoma tumor del estroma del cordón sexual-gonadal, célula del anillo de sello carcinoma, cáncer de piel, tumores pequeños de células redondas azules, carcinoma de células pequeñas, sarcoma de tejidos blandos, somatostatinoma, verruga de hollín, tumor espinal, linfoma de la zona marginal esplénica, carcinoma de células escamosas, sarcoma sinovial, enfermedad de Sezary, cáncer de intestino delgado, carcinoma escamoso, cáncer de estómago, linfoma de células T, cáncer testicular, tecoma, cáncer de tiroides, carcinoma de células de transición, cáncer de garganta, cáncer de uraco, cáncer urogenital, carcinoma urotelial, melanoma uveal, cáncer uterino, carcinoma verrugoso, glioma de la vía visual, cáncer de vulva, vaginal cáncer, macroglobulinemia de Waldenstrom, tumor de Warthin y tumor de Wilms. En algunas realizaciones, el cáncer puede ser adenocarcinoma, leucemia/linfoma de células T adultas, cáncer de vejiga, blastoma, cáncer de huesos, cáncer de mama, cáncer de cerebro, carcinoma, sarcoma mieloide, cáncer cervical, cáncer colorrectal, cáncer esofágico, cáncer gastrointestinal, glioblastoma multiforme, glioma, cáncer de vesícula biliar, cáncer gástrico, cáncer de cabeza y cuello, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer intestinal, cáncer de riñón, cáncer de laringe, leucemia, cáncer de pulmón, linfoma, cáncer de hígado, cáncer de pulmón de células pequeñas, no pequeño cáncer de pulmón celular, mesotelioma, mieloma múltiple, cáncer ocular, tumor del nervio óptico, cáncer oral, cáncer de ovario, tumor pituitario, linfoma primario del sistema nervioso central, cáncer de próstata, cáncer pancreático, cáncer de faringe, carcinoma de células renales, cáncer rectal, sarcoma, cáncer de la piel, tumor espinal, cáncer de intestino delgado, cáncer de estómago, linfoma de células T, cáncer testicular, cáncer de tiroides, cáncer de garganta, cáncer urogenital, carcinoma urotelial, cáncer uterino, cáncer vaginal o tumor de Wilms.

Las enfermedades tratables usando los compuestos de Fórmula (I) también incluyen cánceres MYC dependientes en el que el cáncer está asociado con al menos una de la expresión de ARN de m Yc o expresión de la proteína MYC. Se puede identificar a un paciente para dicho tratamiento determinando la expresión de ARN MYC o la expresión de la proteína en el tejido o las células cancerosas.

Las enfermedades que pueden tratarse con compuestos de Fórmula (I) también incluyen trastornos proliferativos no cancerosos. Los ejemplos de trastornos proliferativos que pueden tratarse incluyen, entre otros, tumores benignos de tejidos blandos, tumores óseos, tumores cerebrales y espinales, tumores de párpados y orbitarios, granuloma, lipoma, meningioma, neoplasia endocrina múltiple, pólipos nasales, tumores pituitarios, prolactinoma, seudotumor cerebral, queratosis seborreicas, pólipos estomacales, nódulos tiroideos, neoplasias quísticas del páncreas, hemangiomas, nódulos de cuerdas vocales, pólipos y quistes, enfermedad de Castleman, enfermedad pilonidal crónica, dermatofibroma, quiste pilar, granuloma piógeno y síndrome de poliposis juvenil.

Las enfermedades y condiciones que se pueden tratar con los compuestos de Fórmula (I) también incluyen autoinmune crónica y condiciones inflamatorias. Los ejemplos de afecciones autoinmunes e inflamatorias que pueden tratarse incluyen el rechazo agudo, hiperagudo o crónico de órganos trasplantados, gota aguda, respuestas inflamatorias agudas (como síndrome de dificultad respiratoria aguda y lesión por isquemia/reperfusión), enfermedad de Addison, agammaglobulinemia, rinitis alérgica, alergia, alopecia, enfermedad de Alzheimer, apendicitis, ateroesclerosis, asma, osteoartritis, artritis juvenil, artritis psoriásica, artritis reumatoide, dermatitis satópica, alopecia autoinmune, estados hemolíticos y trombocitopénicos autoinmunes, hipopituitarismo autoinmune, enfermedad poliglandular autoinmune, enfermedad de la piel del bulbo, enfermedad de la piel del bulbo colecistitis, púrpura trombocitopénica idiopática crónica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), cirrosis, enfermedad articular degenerativa, depresión, dermatitis, dermatomiositis, eccema, enteritis, encefalitis, gastritis glomerulonefritis, arteritis de células gigantes, síndrome de Goodpasture, síndrome de Guillain-Barre, gingivitis, enfermedad de Graves, tiroiditis de Hashimoto, hepatitis, hipofisitis, enfermedad inflamatoria intestinal (enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa), enfermedad inflamatoria pélvica, síndrome del intestino irritable, enfermedad de Kawasaki, shock endotóxico inducido por LPS, meningitis, esclerosis múltiple, miocarditis, miastenia gravis, micosis fungoide, miositis, nefritis, osteomielitis, pancreatitis, enfermedad de Parkinson, pericarditis, anemia perniciosa, neumonitis, colangitis esclerosante biliar primaria, poliarteritis nodosa, psoriasis, retinitis, escleritis, escleracierma, esclerodermia, enfermedad de sinusitis, sepsis, shock, sepsis quemaduras solares, lupus eritematoso sistémico, rechazo de injerto de tejido, tiroiditis, diabetes tipo I, arteritis de Takayasu, uretritis, uveítis, vasculitis, vasculitis incluyendo arteritis de células gigantes, vasculitis con afectación de órganos como glomerulonefritis, vitiligo, macroglobulinemia de Waldenstrom y granulomatosis de Wegener.

Las enfermedades y afecciones que pueden tratarse con los compuestos de Fórmula (I) también incluyen enfermedades y afecciones que implican respuestas inflamatorias a infecciones con bacterias, virus, hongos, parásitos o sus toxinas, tales como sepsis, síndrome de sepsis, séptico shock, endotoxemia, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SIRS), síndrome de disfunción multiorgánica, síndrome de shock tóxico, lesión pulmonar aguda, SDRA (síndrome de dificultad respiratoria del adulto), insuficiencia renal aguda, hepatitis fulminante, quemaduras, pancreatitis aguda, síndromes posquirúrgicos, sarcoidosis, reacciones de Herxheimer, encefalitis, mielitis, meningitis, malaria, SIRS asociados con infecciones virales como influenza, herpes zoster, herpes simple y coronavirus.

Las enfermedades para las están indicadas que los compuestos de Fórmula (I) también incluyen enfermedades asociadas con un síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, tales como sepsis, quemaduras, pancreatitis, trauma mayor, hemorragia e isquemia. El compuesto de Fórmula (I) se puede administrar para reducir la incidencia de: SIRS, aparición de shock, síndrome de disfunción multiorgánica, que incluye la aparición de lesión pulmonar aguda, SDRA, lesión renal, hepática, cardíaca y gastrointestinal aguda y mortalidad. Por ejemplo, los compuestos de la invención pueden administrarse antes de procedimientos quirúrgicos u otros asociados con un alto riesgo de sepsis, hemorragia, daño tisular extenso, SIRS o MODS.

Otras enfermedades que pueden tratarse con los compuestos de Fórmula (I) incluyen infecciones virales. Los ejemplos de infecciones virales que pueden tratarse incluyen el virus de Epstein-Barr, el virus de la hepatitis B, el virus de la hepatitis C, el virus del herpes, el virus de la inmunodeficiencia humana, el virus del papiloma humano, el adenovirus, el poxvirus y otros virus de ADN basados en episomas. Por lo tanto, los compuestos se pueden usar para tratar enfermedades y afecciones tales como infecciones y reactivaciones por herpes simple, herpes labial, infecciones y reactivaciones por herpes zoster, varicela, herpes zóster, virus del papiloma humano, neoplasia cervical, infecciones por adenovirus, incluidas enfermedades respiratorias agudas e infecciones por poxvirus. como el virus de la viruela bovina y la viruela y la peste porcina africana. En una realización particular, los compuestos de Fórmula (I) están indicados para el tratamiento de infecciones por virus del papiloma humano de piel o epitelios cervicales.

Las enfermedades y condiciones que pueden ser tratadas con los compuestos de Fórmula (I) también incluyen las condiciones que se asocian con la lesión por isquemia-reperfusión. Los ejemplos de tales afecciones incluyen, entre otras, afecciones como infarto de miocardio, isquemia cerebrovascular (accidente cerebrovascular), síndromes coronarios agudos, lesión por reperfusión renal, trasplante de órganos, injerto de derivación de arteria coronaria, procedimientos de derivación cardiopulmonar y procedimientos de derivación pulmonar, renal y hepática, embolia gastrointestinal o periférica de la extremidad.

Los compuestos de Fórmula (I) también son útiles en el tratamiento de trastornos del metabolismo de lípidos a través de la regulación de APO-A1 tales como hipercolesterolemia, la aterosclerosis y la enfermedad de Alzheimer.

Los compuestos de Fórmula (I) también se pueden utilizar para el tratamiento de afecciones fibróticas tales como idiopática fibrosis pulmonar, fibrosis renal, estenosis post-operatorio, formación de queloides, la esclerodermia y fibrosis cardiaca.

Los compuestos de Fórmula (I) también se pueden utilizar para tratar indicaciones oftalmológicas tales como ojo seco.

Como se usa en el presente documento, el término "contacto" se refiere a la unión de restos indicados en un sistema in vitro o un sistema in vivo. Por ejemplo, "poner en contacto" una proteína BET con un compuesto de la invención incluye la administración de un compuesto de la presente invención a un individuo o paciente, como un ser humano, que tiene una proteína BET, así como, por ejemplo, introducir un compuesto de la invención en una muestra que contiene una preparación celular o purificada que contiene la proteína BET.

Como se usa en el presente documento, el término "individual" o "paciente", usado indistintamente, se refiere a cualquier animal, incluidos mamíferos, preferiblemente ratones, ratas, otros roedores, conejos, perros, gatos, cerdos, vacas, ovejas, caballos, o primates, y lo más preferiblemente humanos.

Como se usa en el presente documento, la frase "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que provoca la respuesta biológica o medicinal que se busca en un tejido, sistema, animal, individuo o humano por un investigador, veterinario, médico u otro clínico.

Como se usa en el presente documento, el término "tratar" o "tratamiento" se refiere a uno o más de (1) prevenir la enfermedad; por ejemplo, prevenir una enfermedad, afección o trastorno en un individuo que puede estar predispuesto a la enfermedad, afección o trastorno pero que aún no experimenta o muestra la patología o sintomatología de la enfermedad; (2) inhibición de la enfermedad; por ejemplo, inhibir una enfermedad, afección o trastorno en un individuo que está experimentando o mostrando la patología o sintomatología de la enfermedad, afección o trastorno (es decir, deteniendo un mayor desarrollo de la patología y/o sintomatología); y (3) mejorar la enfermedad; por ejemplo, mejorar una enfermedad, afección o trastorno en un individuo que está experimentando o mostrando la patología o sintomatología de la enfermedad, afección o trastorno (es decir, revertir la patología y/o sintomatología), como disminuir la gravedad de la enfermedad.

Terapias de combinación

Los compuestos de Fórmula (I) pueden usarse en tratamientos de combinación en los que el compuesto de la invención se administra junto con otro tratamiento tal como la administración de uno o más agentes terapéuticos adicionales. Los agentes terapéuticos adicionales son típicamente aquellos que normalmente se usan para tratar la afección particular a tratar. Los agentes terapéuticos adicionales pueden incluir, por ejemplo, agentes quimioterapéuticos, antiinflamatorios, esteroides, inmunosupresores, así como inhibidores de quinasa Bcr-Abl, Flt-3, RAF, FAK y JAK para el tratamiento de enfermedades, trastornos o afecciones asociadas a proteínas BET. El uno o más agentes farmacéuticos adicionales se pueden administrar a un paciente de forma simultánea o secuencial.

Los compuestos de Fórmula (I) pueden usarse en combinación con un agente terapéutico que se dirige a un regulador epigenético. Los ejemplos de reguladores epigenéticos incluyen las histona lisina metiltransferasas, histona arginina metilo transferasas, histona desmetilasas, histona desacetilasas, histona acetilasas y ADN metiltransferasas. Los inhibidores de histona desacetilasa incluyen, por ejemplo, vorinostat.

Para el tratamiento del cáncer y otras enfermedades proliferativas, los compuestos para su uso de acuerdo con la invención se pueden usar en combinación con agentes quimioterapéuticos u otros agentes antiproliferativos. Los compuestos de la invención también pueden usarse en combinación con terapia médica tal como cirugía o radioterapia, por ejemplo, radiación gamma, radioterapia con haz de neutrones, radioterapia con haz de electrones, terapia con protones, braquiterapia e isótopos radiactivos sistémicos. Los ejemplos de agentes quimioterapéuticos adecuados incluyen cualquiera de: abarelix, aldesleucina, alemtuzumab, alitretinoína, alopurinol, altretamina, anastrozol, trióxido de arsénico, asparaginasa, azacitidina, bevacizumab, bexaroteno, bleomicina, bortezombi, bortezomib, busulfan intravenoso, busulfan oral, calusterona, capecitabina, carboplatino, carmustina, cetuximab, clorambucilo, cisplatino, cladribina, clofarabina, ciclofosfamida, citarabina, dacarbazina, dactinomicina, dalteparina sódica, dasatinib, daunorubicina, decitabina, diftitox, denileucina diftitox, dexrazoxano, docetaxel, doxorrubicina, dromostanolona propionato, eculizumab, epirubicina, erlotinib, estramustina, fosfato de etopósido, etopósido, exemestano, filgrastim, floxuridina, fludarabina, fluorouracilo, fulvestrant, gefitinib, gemcitabina, gemtuzumab ozogamicina, acetato de goserelina, acetato de histrelina, ibritumomab tiuxetan, idarrubicina, ifosfamida, mesilato de imatinib, interferón alfa 2a, irinotecan, lapatinib ditosilato, lenalidomida, letrozol, leucovorina, acetato de leuprolida, levamisol, lomustina, mecloretamina, acetato de megestrol, melfalan, mercaptopurina, metotrexato, metoxsalen, mitomicina C, mitotano, mitoxantrona, fenopropionato de nandrolona, nelarabina, nofetumomab, oxaliplatino, paclitaxel, pamidronato, panitumumab, pegaspargasa, pegfilgrastim, disodio pemetrexado, pentostatina, pipobromán, plicamicina, procarbazina, quinacrina, rasburicasa, rituximab, ruxolitinib, sorafenib, estreptozocina, sunitinib, sunitinib maleato, tamoxifeno, temozolomida, tenipósido, testolactona, talidomida, tioguanina, tiotepa, topotecano, toremifeno, tositumomab, trastuzumab, tretinoína, mostaza de uracilo, valrubicina, vinblastina, vincristina, vinorelbina, vorinostat y zoledronato.

Para tratar afecciones autoinmunes o inflamatorias, el compuesto de Fórmula (I) puede administrarse en combinación con un corticosteroide como triamcinolona, dexametasona, fluocinolona, cortisona, prednisolona o flumetolona.

Para tratar afecciones autoinmunes o inflamatorias, el compuesto de Fórmula (I) puede administrarse en combinación con un supresor inmune como acetónido de fluocinolona (Retisert®), rimexolona (AL-2178, Vexol, Alcon) o ciclosporina (Restasis®).

Para tratar afecciones autoinmunes o inflamatorias, el compuesto de Fórmula (I) se puede administrar en combinación con uno o más agentes adicionales seleccionados de Dehydrex™ (Holles Labs), Civamida (Opko), hialuronato de sodio (Vismed, Lantibio/TRB Chemedia), ciclosporina (ST-603, Sirion Therapeutics), ARG101 (T) (testosterona, Argentis), AGR1012 (P) (Argentis), ecabet sódico (Senju-Ista), gefarnato (Santen), 15-(s)-ácido hidroxieicosatetraenoico (15(S)-HETE), cevilemina, doxiciclina (ALTY-0501, Alacrity), minociclina, iDestrin™ (NP50301, Nascent Pharmaceuticals), ciclosporina A (Nova22007, Novagali), oxitetraciclina (Duramicina, MOLI1901, Lantibio), CF101 (2S, 3S, 4R, 5R)-3,4-dihidroxi-5-[6-[(3-yodofenil)metilamino]purina-9-ilo]-N-metilo-oxolano-2-carbamilo, Can-Fite Biopharma), voclosporina (LX212 o LX214, Lux Biosciences), ARG103 (Agentis), RX-10045 (análogo de resolución sintética, Resolvyx), DYN15 (Dyanmis Therapeutics), rivoglitazona (DE011, Daiichi Sanko), Tb4 (RegeneRx), OPH-01 (Ophtalmis Monaco), PCS101 (Pericor Science), REV1-31 (Evolutec), Lacritin (Senju), rebamipida (Otsuka-Novartis), OT-551 (Othera), PAI-2 (Universidad de Pennsylvania y Temple University), pilocarpina, tacrolimus, pimecrolimus (AMS981, Novartis), loteprednol etabonato, rituximab, diquafosol tetrasodio (INS365, Inspire), KLS-0611 (Kissei Pharmaceuticals), dehidroepiandrosterona, anakinra, efalizumab, micofenolato sodio, etanercept (Embrel®), hidroxicloroquina, NGX267 (TorreyPines Therapeutics), o talidomida.

El compuesto de Fórmula (I) puede administrarse en combinación con uno o más agentes seleccionados de un antibiótico, antiviral, antifúngico, anestésico, agentes antiinflamatorios que incluyen antiinflamatorios esteroideos y no esteroideos, y agentes alérgicos antiinflamatorios. Los ejemplos de medicamentos adecuados incluyen aminoglucósidos tales como amikacina, gentamicina, tobramicina, estreptomicina, netilmicina y kanamicina; fluoroquinolonas tales como ciprofloxacina, norfloxacina, ofloxacina, trovafloxacina, lomefloxacina, levofloxacina y enoxacina; naftiridina; sulfonamidas; polimixina; cloranfenicol; neomicina; paramomicina; colistimetato; bacitracina; vancomicina; tetraciclinas; rifampicina y sus derivados (''rifampicina''); cicloserina; betalactámicos; cefalosporinas; anfotericinas; fluconazol; flucitosina; natamicina; miconazol; ketoconazol; corticosteroides diclofenaco; flurbiprofeno; ketorolaco; suprofeno cromolina; lodoxamida; levocabastina; nafazolina; antazolina; feniramina; o antibiótico de azalida.

Otros ejemplos de agentes, uno o más de los cuales también se puede combinar un compuesto de Fórmula (I) incluyen: un tratamiento para la enfermedad de Alzheimer tal como donepezil y rivastigmina; un tratamiento para la enfermedad de Parkinson, como L-DOPA/carbidopa, entacapona, ropinirol, pramipexol, bromocriptina, pergolida, trihexifenidilo y amantadina; un agente para tratar la esclerosis múltiple (EM) como el interferón beta (por ejemplo, Avonex® y Rebif®), acetato de glatirámero y mitoxantrona; un tratamiento para el asma tal como albuterol y montelukast; un agente para tratar la esquizofrenia como zyprexa, risperdal, seroquel y haloperidol; un agente antiinflamatorio tal como un corticosteroide, tal como dexametasona o prednisona, un bloqueador de TNF, IL-1 RA, azatioprina, ciclofosfamida y sulfasalazina; un agente inmunomodulador, que incluye agentes inmunosupresores, tales como ciclosporina, tacrolimus, rapamicina, micofenolato mofetilo, un interferón, un corticosteroide, ciclofosfamida, azatioprina y sulfasalazina; un factor neurotrófico tal como un inhibidor de acetilcolinesterasa, un inhibidor de MAO, un interferón, un anticonvulsivo, un bloqueador de canales iónicos, riluzol o un agente antiparkinsoniano; un agente para tratar enfermedades cardiovasculares como un betabloqueante, un inhibidor de la ECA, un diurético, un nitrato, un bloqueador de los canales de calcio o una estatina; un agente para el tratamiento de enfermedades del hígado, como un corticosteroide, colestiramina, un interferón y un agente antiviral; un agente para tratar trastornos de la sangre, como un corticosteroide, un agente antileucémico o un factor de crecimiento; o un agente para tratar trastornos de inmunodeficiencia como la gammaglobulina.

Los compuestos de la invención se usan en combinación con un inhibidor de Janus quinasas seleccionado de tofacitinib, baricitinib, CYT387, lestaurtinib, pacritinib, TG101348 y un inhibidor de Janus quinasas que es selectivo para JAK1.

IV. Formulación, formas de dosificación y administración

Cuando se emplean como productos farmacéuticos, los compuestos de fórmula (I) se pueden administrar en forma de composiciones farmacéuticas. Estas composiciones pueden prepararse de una manera bien conocida en la técnica farmacéutica, y pueden administrarse por una variedad de rutas, dependiendo de si se desea un tratamiento local o sistémico y del área a tratar. La administración puede ser tópica (incluidas las membranas transdérmicas, epidérmicas, oftálmicas y mucosas, incluido el suministro intranasal, vaginal y rectal), pulmonar (por ejemplo, por inhalación o insuflación de polvos o aerosoles, incluso por nebulizador; intratraqueal o intranasal), oral o parenteral. La administración parenteral incluye intravenosa, intraarterial, subcutánea, intraperitoneal intramuscular o inyección o infusión; o administración intracraneal, por ejemplo, intratecal o intraventricular. La administración parenteral puede ser en forma de una sola dosis en bolo, o puede ser, por ejemplo, mediante una bomba de perfusión continua. Las composiciones y formulaciones farmacéuticas para administración tópica pueden incluir parches transdérmicos, pomadas, lociones, cremas, geles, gotas, supositorios, aerosoles, líquidos y polvos. Los portadores farmacéuticos convencionales, bases acuosas, en polvo o aceitosas, espesantes y similares pueden ser necesarios o deseables.

Esta invención también incluye composiciones farmacéuticas que contienen, como ingrediente activo, el compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con uno o más vehículos (excipientes) farmacéuticamente aceptables. En algunas realizaciones, la composición es adecuada para administración tópica. Al hacer las composiciones de la invención, el ingrediente activo se mezcla típicamente con un excipiente, se diluye con un excipiente o se encierra dentro de dicho vehículo en forma de, por ejemplo, una cápsula, bolsita, papel u otro recipiente. Cuando el excipiente sirve como diluyente, puede ser un material sólido, semisólido o líquido, que actúa como vehículo, vehículo o medio para el ingrediente activo. Por lo tanto, las composiciones pueden estar en forma de tabletas, píldoras, polvos, pastillas, sobres, sellos, elixires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles (como un medio sólido o líquido), ungüentos que contienen, por ejemplo, hasta 10% en peso del compuesto activo, cápsulas de gelatina blandas y duras, supositorios, soluciones inyectables estériles y polvos envasados estériles.

Al preparar una formulación, el compuesto activo se puede moler para proporcionar el tamaño de partícula apropiado antes de combinarlo con los otros ingredientes. Si el compuesto activo es sustancialmente insoluble, se puede moler a un tamaño de partícula de menos de 200 mallas. Si el compuesto activo es sustancialmente soluble en agua, el tamaño de partícula se puede ajustar mediante molienda para proporcionar una distribución sustancialmente uniforme en la formulación, por ejemplo, aproximadamente 40 mallas.

Los compuestos de la invención pueden molerse usando procedimientos de molienda conocidos tales como molienda en húmedo para obtener un tamaño de partícula apropiado para la formación de comprimidos y para otros tipos de formulaciones. Las preparaciones finamente divididas (nanoparticuladas) de los compuestos de la invención pueden prepararse mediante procesos conocidos en la técnica, por ejemplo, véase la aplicación internacional N° WO 2002/000196.

Algunos ejemplos de excipientes adecuados incluyen lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones, goma de acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua, jarabe y metilcelulosa. Las formulaciones pueden incluir adicionalmente: agentes lubricantes tales como talco, estearato de magnesio y aceite mineral; agentes humectantes; agentes emulsionantes y de suspensión; agentes conservantes tales como metilo y propilhidroxibenzoatos; agentes edulcorantes; y agentes aromatizantes. Las composiciones de la invención pueden formularse para proporcionar una liberación rápida, sostenida o retardada del ingrediente activo después de la administración al paciente empleando procedimientos conocidos en la técnica.

Las composiciones se pueden formular en una forma de dosificación unitaria, conteniendo cada dosis de aproximadamente 5 a aproximadamente 1000 mg (1g), más habitualmente de aproximadamente 100 mg a aproximadamente 500 mg, del ingrediente activo. El término "formas de dosificación unitarias" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, cada unidad que contiene una cantidad predeterminada de material activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un excipiente farmacéutico adecuado.

En algunas realizaciones, las composiciones de la invención contienen de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 50 mg del ingrediente activo. Un experto en la materia apreciará que esto incorpora compuestos o composiciones que contienen aproximadamente 5 mg a aproximadamente 10 mg, aproximadamente 10 mg a aproximadamente 15 mg, aproximadamente 15 mg a aproximadamente 20 mg, aproximadamente 20 mg a aproximadamente 25 mg, aproximadamente 25 mg a aproximadamente 30 mg, aproximadamente 30 mg a aproximadamente 35 mg, aproximadamente 35 mg a aproximadamente 40 mg, aproximadamente 40 mg a aproximadamente 45 mg, o aproximadamente 45 mg a aproximadamente 50 mg del ingrediente activo.

En algunas realizaciones, las composiciones de la invención contienen de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 500 mg del ingrediente activo. Un experto en la materia apreciará que esto incorpora compuestos o composiciones que contienen aproximadamente 50 mg a aproximadamente 100 mg, aproximadamente 100 mg a aproximadamente 150 mg, aproximadamente 150 mg a aproximadamente 200 mg, aproximadamente 200 mg a aproximadamente 250 mg, aproximadamente 250 mg a aproximadamente 300 mg, aproximadamente 350 mg a aproximadamente 400 mg, o aproximadamente 450 mg a aproximadamente 500 mg del ingrediente activo.

En algunas realizaciones, las composiciones de la invención contienen de aproximadamente 500 mg a aproximadamente 1,000 mg del ingrediente activo. Un experto en la materia apreciará que esto incorpora compuestos o composiciones que contienen aproximadamente 500 mg a aproximadamente 550 mg, aproximadamente 550 mg a aproximadamente 600 mg, aproximadamente 600 mg a aproximadamente 650 mg, aproximadamente 650 mg a aproximadamente 700 mg, aproximadamente 700 mg a aproximadamente 750 mg, aproximadamente 750 mg a aproximadamente 800 mg, aproximadamente 800 mg a aproximadamente 850 mg, aproximadamente 850 mg a aproximadamente 900 mg, aproximadamente 900 mg a aproximadamente 950 mg, o aproximadamente 950 mg a aproximadamente 1000 mg de ingrediente activo.

El compuesto activo puede ser eficaz en un amplio intervalo de dosificación y se administra generalmente en una cantidad farmacéuticamente eficaz. Sin embargo, se entenderá que la cantidad del compuesto administrado realmente será determinada generalmente por un médico, de acuerdo con las circunstancias relevantes, incluida la afección a tratar, la ruta de administración elegida, el compuesto real administrado, la edad, peso y respuesta del paciente individual, la gravedad de los síntomas del paciente y similares.

Para preparar composiciones sólidas tales como tabletas, el ingrediente activo principal se mezcla con un excipiente farmacéutico para formar una composición de preformulación sólida que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención. Cuando se hace referencia a estas composiciones de preformulación como homogéneas, el ingrediente activo se dispersa típicamente de manera uniforme en toda la composición, de modo que la composición se puede subdividir fácilmente en formas de dosificación unitarias igualmente eficaces, tales como tabletas, píldoras y cápsulas. Esta preformulación sólida se subdivide luego en formas de dosificación unitarias del tipo descrito anteriormente que contienen, por ejemplo, de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 1000 mg del ingrediente activo de la presente invención.

Los comprimidos o píldoras de la presente invención pueden recubrirse o componerse de otra manera para proporcionar una forma de dosificación que proporcione la ventaja de una acción prolongada. Por ejemplo, la tableta o píldora puede comprender una dosificación interna y un componente de dosificación externa, esta última en forma de una envoltura sobre la primera. Los dos componentes pueden estar separados por una capa entérica que sirve para resistir la desintegración en el estómago y permite que el componente interno pase intacto al duodeno o se retrase su liberación. Se puede usar una variedad de materiales para tales capas o recubrimientos entéricos, tales materiales que incluyen varios ácidos poliméricos y mezclas de ácidos poliméricos con materiales tales como goma laca, alcohol cetílico y acetato de celulosa.

Las formas líquidas en las que los compuestos y composiciones de la presente invención pueden incorporarse para administración oral o por inyección incluyen soluciones acuosas, jarabes adecuadamente aromatizados, suspensiones acuosas u oleosas, y emulsiones aromatizadas con aceites comestibles tales como aceite de semilla de algodón, sésamo aceite, aceite de coco o aceite de maní, así como elixires y vehículos farmacéuticos similares.

Las composiciones para inhalación o insuflación incluyen soluciones y suspensiones en disolventes acuosos u orgánicos farmacéuticamente aceptables, o mezclas de los mismos, y polvos. Las composiciones líquidas o sólidas pueden contener excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados como se describe anteriormente. En algunas realizaciones, las composiciones se administran por vía respiratoria oral o nasal para un efecto local o sistémico. Las composiciones se pueden nebulizar mediante el uso de gases inertes. Las soluciones nebulizadas se pueden respirar directamente desde el dispositivo de nebulización o el dispositivo de nebulización se puede conectar a una tienda de máscaras faciales o a una máquina de respiración de presión positiva intermitente. Las composiciones de solución, suspensión o polvo pueden administrarse por vía oral o nasal desde dispositivos que administran la formulación de manera apropiada.

Las formulaciones tópicas pueden contener uno o más vehículos convencionales. En algunas realizaciones, los ungüentos pueden contener agua y uno o más vehículos hidrófobos seleccionados, por ejemplo, parafina líquida, polioxietileno alquilo éter, propilenglicol, vaselina blanca y similares. Las composiciones portadoras de cremas se pueden basar en agua en combinación con glicerol y uno o más de otros componentes, por ejemplo, monoestearato de glicerina, monoestearato de glicerina PEG y alcohol cetilestearílico. Los geles pueden formularse usando alcohol isopropílico y agua, adecuadamente en combinación con otros componentes tales como, por ejemplo, glicerol, hidroxietilcelulosa y similares. En algunas realizaciones, las formulaciones tópicas contienen al menos aproximadamente 0,1, al menos aproximadamente 0,25, al menos aproximadamente 0,5, al menos aproximadamente 1, al menos aproximadamente 2 o al menos aproximadamente 5% en peso del compuesto de la invención. Las formulaciones tópicas se pueden empaquetar adecuadamente en tubos de, por ejemplo, 100 g que se asocian opcionalmente con instrucciones para el tratamiento de la indicación seleccionada, por ejemplo, psoriasis u otra afección de la piel.

La cantidad de compuesto o composición administrada a un paciente variará dependiendo de lo que se esté administrando, el propósito de la administración, tal como profilaxis o terapia, el estado del paciente, la forma de administración y similares. En aplicaciones terapéuticas, las composiciones se pueden administrar a un paciente que ya padece de una enfermedad en una cantidad suficiente para curar o al menos detener parcialmente los síntomas de la enfermedad y sus complicaciones Las dosis efectivas dependerán de la condición de la enfermedad que se está tratando, así como del juicio del médico tratante, dependiendo de factores tales como la gravedad de la enfermedad, la edad, el peso y el estado general del paciente, y similares.

Las composiciones administradas a un paciente pueden estar en forma de composiciones farmacéuticas descritas anteriormente. Estas composiciones pueden esterilizarse mediante técnicas de esterilización convencionales, o pueden filtrarse estérilmente. Las soluciones acuosas pueden envasarse para su uso tal cual, o liofilizarse, la preparación liofilizada se combina con un vehículo acuoso estéril antes de la administración. El pH de las preparaciones de compuestos típicamente estará entre 3 y 11, más preferiblemente de 5 a 9 y lo más preferiblemente de 7 a 8. Se entenderá que el uso de ciertos excipientes, vehículos o estabilizadores anteriores dará como resultado la formación de sales farmacéuticas.

La dosis terapéutica de un compuesto de la presente invención puede variar según, por ejemplo, el particular uso para el que se hace el tratamiento, la manera de administración del compuesto, la salud y el estado del paciente, y el juicio del médico que prescribe. La proporción o concentración de un compuesto de la invención en una composición farmacéutica puede variar dependiendo de una serie de factores que incluyen dosificación, características químicas (por ejemplo, hidrofobicidad) y la vía de administración. Por ejemplo, los compuestos de la invención pueden proporcionarse en una solución de tampón fisiológica acuosa que contiene aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10% p/v del compuesto para administración parenteral. Algunos rangos de dosis típicos son de aproximadamente 1 pg/kg a aproximadamente 1 g/kg de peso corporal por día. En algunas realizaciones, el intervalo de dosis es de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por día. Es probable que la dosis dependa de variables tales como el tipo y el grado de progresión de la enfermedad o trastorno, el estado general de salud del paciente en particular, la eficacia biológica relativa del compuesto seleccionado, la formulación del excipiente y su vía de administración. Las dosis efectivas se pueden extrapolar a partir de curvas de dosis-respuesta derivadas de sistemas de prueba in vitro o de modelos animales.

Las composiciones de la invención pueden incluir además uno o más agentes farmacéuticos adicionales tales como un quimioterapéutico, esteroide, compuesto antiinflamatorio o inmunosupresor, cuyos ejemplos se enumeran anteriormente.

V. Compuestos marcados y métodos de ensayo

En otro aspecto, la presente descripción proporciona compuestos marcados de Fórmula (I) (radiomarcados, marcados con fluorescencia, etc.) que pueden ser útiles no solo en técnicas de imagen sino también en ensayos, ambos in vitro e in vivo, para localizar y cuantificar proteínas BET en muestras de tejido, incluido el humano, y para identificar ligandos de proteínas BET mediante la unión por inhibición de un compuesto marcado. En consecuencia, la divulgación proporciona ensayos de proteínas BET que contienen dichos compuestos marcados.

Un compuesto "isotópico" o "radiomarcado" es un compuesto de la invención en el que uno o más átomos son reemplazados o sustituidos por un átomo que tiene una masa atómica o un número de masa diferente de la masa atómica o número de masa que se encuentra típicamente en naturaleza (es decir, de origen natural). Los radionúclidos adecuados que pueden incorporarse en los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, 3H (también escrito como T para tritio), 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 18F, 35S, 36Cl, 82Br, 75Br, 76Br, 77Br, 123I, 124I, 125I y 131I. El radionúclido que se incorpora en los compuestos radiomarcados instantáneos dependerá sobre la aplicación específica de ese compuesto radiomarcado. Por ejemplo, para ensayos de etiquetado y competencia de proteína BET in vitro, los compuestos que incorporan 3H, 14C, 82Br, 125I, 131I, 35S o serán generalmente los más útiles. Para aplicaciones de imágenes de radio 11C, 18F, 125I, 123I, 124I, 131I, 75Br, 76Br o 77Br generalmente serán las más útiles.

Debe entenderse que un "compuesto radiomarcado" o "compuesto marcado" es un compuesto que se ha incorporado a al menos un radionúclido. En algunas realizaciones, el radionúclido se selecciona del grupo que consiste en 3H, 14C, 125I, 35S y 82Br. En algunas realizaciones, el compuesto incorpora 1,2 o 3 átomos de deuterio. Los métodos sintéticos para incorporar radioisótopos en compuestos orgánicos son conocidos en la técnica.

La presente invención puede incluir, además, métodos sintéticos para incorporar radioisótopos en compuestos de la invención. Los métodos sintéticos para incorporar radioisótopos en compuestos orgánicos son bien conocidos en la técnica, y un experto en la materia reconocerá fácilmente los métodos aplicables a los compuestos de la invención.

Un compuesto marcado de la invención puede usarse en un ensayo de selección para identificar/evaluar compuestos. Por ejemplo, un compuesto recién sintetizado o identificado (es decir, el compuesto de prueba) que está marcado puede evaluarse por su capacidad para unirse a una proteína BET al monitorear su variación de concentración cuando entra en contacto con la proteína BET, a través del seguimiento del etiquetado. Por ejemplo, un compuesto de prueba (marcado) puede evaluarse por su capacidad para reducir la unión de otro compuesto que se sabe que se une a una proteína BET (es decir, un compuesto estándar). En consecuencia, la capacidad de un compuesto de prueba para competir con el compuesto estándar para unirse a la proteína BET se correlaciona directamente con su afinidad de unión. Por el contrario, en algunos otros ensayos de detección, el compuesto estándar está marcado y los compuestos de prueba no están etiquetados. Por consiguiente, la concentración del compuesto estándar marcado se controla para evaluar la competencia entre el compuesto estándar y el compuesto de prueba, y de este modo se determina la afinidad de unión relativa del compuesto de prueba.

VI. Kits

La presente invención también incluye kits farmacéuticos útiles, por ejemplo, en el tratamiento o la prevención de enfermedades BET asociados a la proteína o trastornos, como el cáncer, que incluyen uno o más recipientes que contienen una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), o cualquiera de sus realizaciones. Dichos kits pueden incluir además, si se desea, uno o más de varios componentes de kit farmacéutico convencionales, tales como, por ejemplo, recipientes con uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, recipientes adicionales, etc., como será fácilmente evidente para los expertos en el técnica. Las instrucciones, ya sea como insertos o como etiquetas, que indican las cantidades de los componentes a administrar, las pautas para la administración y/o las pautas para mezclar los componentes, también se pueden incluir en el kit.

La invención se describirá con mayor detalle por medio de ejemplos específicos. Los siguientes ejemplos se ofrecen con fines ilustrativos, y no pretenden limitar la invención de ninguna manera. Los expertos en la materia reconocerán fácilmente una variedad de parámetros no críticos que se pueden cambiar o modificar para obtener esencialmente los mismos resultados. Se encontró que los compuestos de los Ejemplos son inhibidores de una o más proteínas BET como se describe a continuación.

EJEMPLOS

Ejemplo de Referencia 1

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-fen¡lo-4,5-d¡hidro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H>ona

Paso 1. 5-Nitro-3-fenilo-2H-1,4-benzoxazina

La 2-bromoacetofenona (3,9 g, 19 mmol) [Aldrich, cat. n° 115835] se añadió en porciones a una suspensión agitada de 2-amino-3-nitrofenol (2,5 g, 16 mmol) [Aldrich, cat. n° 297003] y K²CO³ (3,4 g, 24 mmol) en MeCN (100 ml) a temperatura ambiente. La reacción se controló por LC/MS. Después de agitarse durante 3 h la reacción se completó y luego EtOAc añadió y la solución se filtró para eliminar los sólidos y la capa orgánica se lavó con agua, 1N HCl, salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para dar 5-nitro-3-fenilo-2H-1,4-benzoxazina como un aceite oscuro (4,1 g, 100%). LCMS calc. para C¹⁴H¹¹N²O³ (M+H)⁺: m/z = 255,3; encontrado: 255,1.

Paso 2. 3-Fenilo-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-5-amina

Se recogió 5-nitro-3-fenilo-2H-1,4-aceite de benzoxazina en MeOH (50 ml) en una botella agitadora Parr, se desoxigenó con nitrógeno, se añadió el catalizador Pd al 10% sobre carbono (0,25 g), el recipiente de reacción se cargó a 55 psi con hidrógeno y se agitó. Después de 2 h, la reacción se completó por LC/MS. La reacción se filtró para eliminar el catalizador y se concentró a presión reducida para dar 3-fenilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-5-amina como un aceite oscuro. (3,5 g, 97%). LCMS calc. para C¹⁴H¹⁵N²O (M+H)⁺ : m/z = 227,1; encontrado: 227,1. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d⁶) 57,44 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,37 (dd, J = 7,5 Hz, 2H), 7,31 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 6,35 (dd, J = 7,9 Hz, 1H), 6,21 (dd, J = 7,8, 1,0 Hz, 1H), 6,07 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,00 (s, 1H), 4,62 (s, 2H), 4,44 (dd, J = 4,9, 2,6 Hz, 1H), 4,21-4,13 (m, 1H), 3,87 (dd, J = 10,4, 7,7 Hz, 1H).

Paso 3. 4-Fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

El 3-fenilo-3,4-dihidro - Se disolvió 2 H -1,4-benzoxazina-5-amina (0,95 g, 4,2 mmol) en THF (30 ml) y DIPEA (1,5 ml, 8,4 mmol) a temperatura ambiente (temperatura ambiente). El N,N-carbonildiimidazol (0,82 g, 5,0 mmol) se añadió en porciones durante 10 min. La reacción se calentó a 70°C durante 1 h y se dejó enfriar a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. A la mezcla de reacción se le añadió EtOAc, y luego la mezcla se lavó con agua, agua con bicarbonato de sodio y salmuera, luego se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar el producto crudo como un aceite oscuro. El aceite se trituró con éter etílico para dar un precipitado. Los sólidos se trituraron dos veces con éter etílico y luego los sólidos se recogieron y se secaron al aire para dar 4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como un sólido marrón (0,51 g, 48%). LCMS calc. para C15 H 13 N²O 2 (M+H)⁺: m/z = 253,1; encontrado: 253,1. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-d⁶) 510,88 (s, 1H), 7,39 - 7,22 (m, 3H), 7,15 a 7,4 (m, 2H), 6,88 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,67 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,45 (s, 1H), 4,54 (dd, J = 11,6, 2,2 Hz, 1H), 4,37 (dd, J = 11,6, 3,0 Hz, 1H).

Paso 4. 7-Bromo-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-dé][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Una mezcla de 4-fenilo -4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona (400 mg, 2 mmol) y N-bromosuccinimida (310 mg, 1,7 mmol) en AcOH (10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se concentró para eliminar AcOH. El residuo se recogió en EtOAc y se lavó con agua saturada de NaHCO3, salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna en un sistema Biotage eluyendo con un gradiente de hexano: EtOAc (0-40%) a dando 7-bromo-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona como un aceite ámbar (0,30 g, 60%). LCMS calc. para C15 H¹²BrN²O 2 (M+H)⁺ : m/z = 331,1,333,1; encontrado: 331,0, 333,0.

¹H RMN (300 MHz, CD³OD) 57,42 - 7,23 (m, 3H), 7,23 - 7,09 (m, 3H), 6,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,46 (dd, J = 2,6 Hz, 1H), 4,66 (dd, J = 11,6, 2,4 Hz, 1H), 4,47 (dd, J = 11,6, 3,1 Hz, 1H).

Paso 5. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

7-Bromo-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona

(200 mg, 0,6 mmol) y 3,5-dimetilo-4-(4, 4, 5, 5-tetrametilo-1,3, 2-dioxaborolano-2-ilo) isoxazol (160 mg, 0,72 mmol) [Aldrich, cat. n° 643882] se disolvieron en 1,4-dioxano (20 ml) y carbonato de potasio (200 mg, 1 mmol) en agua (8 ml). La reacción se desoxigenó con nitrógeno y se añadió el catalizador [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) complejado con DCM (1:1) (20 mg, 0,03 mmol). La mezcla de reacción se desoxigenó con nitrógeno y se calentó a 100°C. Después de calentar durante 2 h, la reacción se completó por LCMS. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, se añadió EtOAc y la mezcla se lavó con agua, salmuera, luego se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó en HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente de MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como un sólido blanco (0,10 g, 50%). LCMS calc. para C20H¹⁸N³O³ (M+H)⁺: m/z = 348,1; encontrado: 348,1. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 510,96 (s, 1H), 7,38 - 7,24 (m, 3H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,47 (s, 1H), 4,57 (dd, J = 11,6, 2,2 Hz, 1H), 4,40 (dd, J = 11,6, 3,1 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 1A

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona (enantiómero 1)

Ejemplo de Referenc¡a 1B

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona (enant¡ómero) 2)

Se separaron los enantiómeros de la mezcla racémica 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona del Ejemplo 1, Paso 5 por HPLC en columna quiral usando una columna Phenomenex Lux Cellulose-4, 5 micras, 21,2 x 250 mm, eluyendo con etanol al 30% en hexanos con un caudal de 18 ml/min. cargando aprox. 36 mg por inyección con UV, detección de 220 nm para dar el pico 1 a: 14,32 min. y pico 2 a: 18,89 min.

Enantiómero 1: Pico 1: Ejemplo 1A (enantiómero más activo), LCMS calc. para C²⁰H¹⁸N³O³ (M+H)⁺ : m/z = 348,1; encontrado: 348,1. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d^s ) 510,96 (s, 1H), 7,38 - 7,24 (m, 3H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,47 (s, 1H), 4,57 (dd, J = 11,6, 2,2 Hz, 1H), 4,40 (dd, J = 11,6, 3,1 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).

Enantiómero 1: Pico 2: Ejemplo 1B (enantiómero menos activo), LCMS calc. para C²⁰H¹⁸N³O³ (M+H)⁺ : m/z = 348,1; encontrado: 348,1. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d⁶) 510,96 (s, 1H), 7,38 - 7,24 (m, 3H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,47 (s, 1H), 4,57 (dd, J = 11,6, 2,2 Hz, 1H), 4,40 (dd, J = 11,6, 3,1 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 2

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-1-met¡lo-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona

Se añadió hidruro sódico en aceite mineral al 60% (3,2 mg, 0,13 mmol) a una solución de 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (0,040 g, 0,10 mmol) del Ejemplo 1, Paso 5 en DMF (3 ml) enfriado en un baño de hielo. La mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos. y se añadió yoduro de metilo (8 ml, 0,1 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos. y fue completada por LCMS. La mezcla de reacción se repartió entre agua y EtOAc. La capa orgánica se concentró y se purificó en HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un agua: gradiente de MeCN tamponado a pH 2 con TFA para dar el compuesto del título como un producto sólido sólido (0,015 g, 37%). LCMS calc. para C²¹H²⁰N³O³ (M+H)⁺: m/z = 362,1; encontrado: 362,1. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-d^s ) 57,39-7,24 (m, 5H), 7,19 a 7,12 (m, 2H), 5,52 (s, 1H), 4,59 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 8,4 Hz, 1H), 3,38 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,09 (s, 3H).

Ejemplo de Referenc¡a 3

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-5-met¡lo-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona

El compuesto del título se preparó mediante métodos análogos al Ejemplo 1, pero usando 2-bromo-1-fenilopropano-1-ona [Alfa Aesar, cat. n° A10661] en el Paso 1. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un agua: gradiente de MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,015 g, 37%). LCMS calc. para C²¹H²⁰N³O³ (M+H)⁺ : m/z = 362,1; encontrado: 362,1. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d^s ) 510,89 (s, 1H), 7,36 - 7,26 (m, 3H), 7,6 a 7,1 (m, 2H), 6,87 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,62 - 4,54 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,12 (d, J = 6,4 Hz, 3H).

Ejemplo de Referenc¡a 4

4-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-4-¡lo]benzon¡tr¡lo

El compuesto del título se preparó mediante métodos análogos al Ejemplo 1, pero utilizando 4-(2-bromoacetilo)benzonitrilo [Aldrich, cat. n° 539392] en el Paso 1. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,021 g, 52%). LCMS calc. para C²¹H¹⁷N⁴O³ (M+H)⁺: m/z = 373,1; encontrado: 373,2. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-a^fe) 511,03 (s, 1H), 7,83 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,37 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,86 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,60 (s, 1H), 4,60 (dd, J = 11,7, 2,4 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 11,7, 3,1 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 5

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona

El compuesto del título se preparó mediante métodos análogos al Ejemplo 1 pero usando (piridina-3-ilo) etanona-1-2-bromo [Oakwood, cat. n° 005885] en el Paso 1. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar la sal TFA del compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,010 g, 25 %). LCMS calc. para C¹⁹H¹⁷N⁴O³ (M+H)⁺: m/z = 349,1; encontrado: 349,1. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d^s + TFA) 511,09 (s, 1H), 8,94 (bs, 2H), 8,37 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,04 (s, 1H), 6,89 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,76 (s, 1H), 4,65 (dd, J = 11,7, 3,5 Hz, 1H), 4,53 (dd, J = 11,7, 3,1 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,11 (s, 3H).

Ejemplo de Referenc¡a 6

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-(3-metox¡fen¡lo)-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 1 pero usando 2-bromo-1-(3metoxifenilo) etanona [Aldrich, cat. n° 115673] en el Paso 1 y usando diciciohexilo (2’,4’,6’-triisopropilbifenilo-2-ilo)fosfina-(2’-aminobifenilo-2-ilo) (cloro)paladio como catalizador en el Paso 5. El producto fue purificado por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un agua: gradiente de MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,015 g, 37%). LCMS calc. para C²¹H²⁰N³O⁴ (M+H)⁺ : m/z = 378,1; encontrado: 378,1. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-d^s ) 510,97 (s, 1H), 7,21 (t,

J = 7,9 Hz, 1H), 6,88 - 6,79 (m, 2H), 6,77 - 6,71 (m, 2H), 6,63 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 5,42 (s, 1H), 4,57 (dd, J = 11,5 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 11,6, 2,9 Hz, 1H), 3,67 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,06 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 7

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-(2-metox¡fenilo)-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4- cte][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 1 pero usando 2-bromo-1-(2-metoxifenilo)etanona [Aldrich, Cat. n° 100854] en el Paso 1 y usando diciclohexilo (2’,4’,6’-triisopropilbifenilo-2-ilo)fosfina-(2’-aminobifenilo-2-ilo) (cloro)paladio como catalizador en el Paso 5. El producto fue purificado por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,010 g, 25%). LCMS calc. para C²¹H²⁰N³O⁴ (M+H)⁺ : m/z = 378,1; encontrado: 378,1. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-d^s ) 511,03 (s, 1H), 7,37 - 7,21 (m, 1H), 7,09 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,91 -6,74 (m, 3H), 6,38 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 5,61 (s, 1H), 4,49 (dd, J = 11,5 Hz, 1H), 4,37 (dd, J = 11,3, 3,0 Hz, 1H), 3,88 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

Ejemplo de Referenc¡a 8

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-(2,4-d¡fluorofen¡lo)-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona

El compuesto del título se preparó mediante métodos análogos al Ejemplo 1, pero usando 2-bromo-1-(2,4-difluorofenilo)etanona [Aldrich, cat. n° 595152] en el Paso 1 y usando diciclohexilo (2’,4’,6’-triisopropilbifenilo-2-ilo)fosfina-(2’-aminobifenilo-2-ilo) (cloro)paladio como catalizador en el Paso 5. El producto fue purificado por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,018 g, 45%). LCMS calc. para C²⁰H¹⁶F²N³O³ (M+H)⁺ : m/z = 384,1; encontrado: 384,1. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-a^fe) 511,05 (s, 1H), 7,44-7,27 (m, 1H), 7,09 - 6,97 (m, 1 H), 6,95 -6,82 (m, 2H), 6,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,62 (s, 1H), 4,54 - 4,36 (m, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,09 (s, 3H).

Ejemplo de Referenc¡a 9

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-met¡lo-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 1 pero usando 1,1,1-trimetoxietano [Aldrich, cat. n° 237876] en el Paso 3. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar la sal TFA del compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,003 g, 7 %). LCMS calc. para C²¹H²⁰N³O² (M+H)⁺ : m/z = 346,1; encontrado: 346,2. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d^s ) 57,44 - 7,36 (m, 4H), 7,26 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 6,03 (s, 1H), 4,72 (dd, J = 11,8, 3,9 Hz, 1H), 4,64 (dd, J = 11,7, 3,3 Hz, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,13 (s, 3H)

Ejemplo de Referencia 10

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-1-(2-morfol¡na-4-¡let¡lo)-4-fen¡lo-4,5-dih¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona

Paso 1. 7-Bromo-1-(2-morfolina-4-iletilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

A una mezcla de 0°C de 7-bromo-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona (0,065 g, 0,20 mmol) del Ejemplo 1, paso 4 y clorhidrato de 4-(2-cloroetilo)morfolina (0,12 g, 0,63 mmol) en DMF (1mL) se añadió NaH en aceite mineral (0,048 g, 1,2 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante un fin de semana. Se añadieron EtOAc y agua. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na²SO4 y se evaporó a sequedad para dar un aceite naranja. El producto en bruto se purificó por LCMS (columna C18 eluyendo con un gradiente de MeCN/H²O que contiene 0,15% de NH⁴OH en 5 mL/min.) Y dio un sólido (7,7 mg, rendimiento del 9%) blanco. ¹H RMN (400 MHz, CD^aOD/CDCl^a): d 7,31 (3H, m); 7,18 (3 H, m); 6,65 (1H, d); 5,19 (1H, m); 4,61 (1H, m); 4,43 (1H, m); 3,99 (2 H, m); 3,6 (4H, m); 2,65 (2 H, m); 2,51 (4H, m). lCm S calc. para C²⁶H²⁹N⁴O⁴ (m H)+: m/z =; encontrado: 444,1,446,1.

Paso 2. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-1-(2-morfolina-4-iletilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Una solución desoxigenada de 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-1-(2-morfolina-4-iletilo)-4-fenilo-4,5 dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona (7,0 mg, 0,015 mmol), 3,5-dimetilo-4-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)isoxazol (4,6 mg, 0,021 mmol), diciclohexilo (2’,4’,6’-triisopropilbifenilo-2-ilo)fosfina-(2'-aminobifenilo-2-ilo) (cloro)paladio (1:1) (0,0017 g, 0,0022 mmol) y fosfato de potasio (0,013 g, 0,061 mmol) en 1,4-dioxano (0,2 ml) y agua (0,08 ml) se calentó a reflujo durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y luego reactivos adicionales (3,5-dimetilo-4-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)isoxazol (4,6 mg), se añadieron fosfato de potasio (12 mg) y catalizador (2,7 mg). La mezcla de solución se desoxigenó y luego se calentó a reflujo durante 2,3 h. Se añadieron EtOAc y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera y luego se concentró para dar un vidrio/aceite naranja pálido (22 mg). El producto en bruto se purificó por LCMS (columna C18 eluyendo con un gradiente de MeCN/H²O que contiene 0,15% de NH⁴OH en 5 mL/min.) Y dio el compuesto del título como un sólido (7,6 mg, rendimiento del 95%) de color blanco. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-a^fe): d 7,35 (3H, m); 7,18 (2 H, m); 7,0 (1H, m); 6,95 (1H, m); 5,55 (1H, m); 4,61 (1H, m); 4,42 (1H, m); 3,99 (2 H, m); 3,5 (4H, m); 2,63 (2 H, m); 2,42 (4H, m); 2,23 (3 H, s); 2,08 (3 H, s). Lc MS calc. para C²¹H²³BrN³O³ (M+H)⁺ : m/z = 460,2; encontrado: 460,2.

Ejemplo de Referencia 11

7-(3,5-dimetilo-1 H-pirazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona

El compuesto del título se preparó mediante métodos análogos al Ejemplo 1, pero utilizando 3,5-dimetilo-4-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)- 1H- pirazol [Aldrich, cat. n° 636010] añadido en el Paso 5. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,018 g, 45%). LCMS calc. para C²⁰H¹⁹N⁴O² (M+H)⁺: m/z = 347,1; encontrado: 347,2.

Ejemplo de Referencia 12

7-(3-Metilo-1 H-pirazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona

El compuesto del título se preparó mediante métodos análogos al Ejemplo 1, pero utilizando 3-metilo-4-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)-1H -pirazol [Aldrich, cat. n° 706078] añadido en el Paso 5. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente de MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,018 g, 45%). LCMS calc. para C¹⁹H¹⁷N⁴O² (M+H)⁺ : m/z = 333,1; encontrado: 333,2.

Ejemplo 13

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

El compuesto del título se preparó mediante métodos análogos al Ejemplo 1, pero usando 2-bromo-1-(pir¡d¡na-2-ilo)etanona HBr [Maybridge CC04005DA] en el paso 1. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un agua: gradiente MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar la sal TFA del compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,015 g, 30%). LCMS calc. para C¹⁹H¹⁷N⁴O³ (M+H)⁺: m/z = 349,1; encontrado: 349,1. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-d^s ) 511,01 (s, 1H), 8,52 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,79 (td, 1H), 7,32 (dd, J = 7,5,4,9 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,76 (d,

J = 8,0 Hz, 1H), 5,52 (s, 1H), 4,76 (dd, 1H), 4,44 (dd, J = 11,4, 3,1 Hz, 1H), 2,22 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

Ejemplo 14

7-(3,5-D¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona (enantiómero 1)

Ejemplo 15

7-(3,5-D¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(7H>ona (Enant¡ómero 2)

Los enantiómeros se prepararon a partir de 7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-dihidroimidazo^ ,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona del Ejemplo 13, por HPLC en columna quiral usando una columna C4 Phenomenex Lux Cellulose, 5 micras, 21,2 x 250 mm, eluyendo con etanol al 60% en hexanos con un caudal de 18 ml/min., cargando aprox. 36 mg por inyección con detección UV (220 nm) para dar el pico 1 a: 7,51 min. y pico 2 a: 12,92 min.

Enantiómero 2. Pico 1: Ejemplo 15. LCMS calc. para C⁴⁹H¹⁷N⁴O³ (M+H)⁺: m/z = 349,1; encontrado: 349,1. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-d^a) 511,01 (s, 1H), 8,52 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,79 (td, 1H), 7,32 (dd, J = 7,5,4,9 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,52 (s, 1H), 4,76 (dd, 1H), 4,44 (dd, J = 11,4, 3,1 Hz, 1H), 2,22 (s, 3H), 2,05 (s, 3H). Se cree que este enantiómero tiene la configuración S basada en datos de cristalografía de rayos X.

Enantiómero 1. Pico 2: Ejemplo 14. LCMS calc. para C¹⁹H¹⁷N⁴O³ (M+H)⁺: m/z = 349,1; encontrado: 349,1. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-d^a) 511,01 (s, 1H), 8,52 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,79 (td, 1H), 7,32 (dd, J = 7,5,4,9 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,52 (s, 1H), 4,76 (dd, 1H), 4,44 (dd, J = 11,4, 3,1 Hz, 1H), 2,22 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

Ejemplo de Referenc¡a 16

7-(3,5-D¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-(1-ox¡dop¡r¡d¡na-2-¡lo)-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H>ona

se añadió metiltrioxorenio (VII) (2 mg, 0,008 mmol) a una solución de 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina 2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona (20 mg, 0,06 mmol) del Ejemplo 15, en tetrahidrofurano (2 ml) a temperatura ambiente y luego se añadió peróxido de hidrógeno 3,0 M en agua (0,04 ml). La mezcla de reacción se calentó a 80°C durante 20 min. se dejó enfriar y se diluyó con agua y EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para dar el producto bruto. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un agua: gradiente de MeCN tamponado pH 10 para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,007 g, 30%). LCMS calc. para C¹⁹H¹⁷N⁴O⁴ (M+H)⁺: m/z = 365,1; encontrado: 365,1. 1H RMN (400 MHz, DMSO-a^fe) 511,12 (s, 1H), 8,37 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,39 (td, J = 7,2, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,25 (td, J = 7,7, 0,9 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,63 (dd, J = 7,9, 2,0 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,78 (dd, J = 11,6, 1,3 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 11,6, 3,4 Hz, 1H), 2,17 (s, 3H), 2,00 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 17

4-C¡clohex¡lo-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H>ona

Paso 1.2-Bromo-1-cidohexiletanona

Ciclohexilo metilo cetona (0,30 ml, 2,4 mmol) [Alfa Aesar Cat. n° L05501] se disolvió en metanol (3,0 ml, 74 mmol) se enfrió en un baño de hielo y se añadió bromo (0,38 g, 2,4 mmol) gota a gota. La mezcla se agitó durante 2 h y luego se añadió agua (3,0 ml) y la mezcla de reacción se dejó agitar durante 4 h. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc: hexano (3:1). La capa orgánica combinada se lavó con carbonato de potasio saturado con agua, salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar 2-bromo-1 -ciclohexiletanona como un aceite transparente (0,49 g, 100%). 1H RMN (300 MHz, CDCla) 53,96 (s, 2H), 2,86 - 2,55 (m, 1H), 2,24 a 1,8 (m, 10H).

Paso 2.

El compuesto del título se preparó mediante métodos análogos al Ejemplo 1, pero usando 2-bromo-1-ciclohexiletanona del Paso 1 anterior. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un gradiente de agua: MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,010 g, 30%). LCMS calc. para C²⁰H²⁴N³O³ (M+H)⁺ : m/z = 354,1; encontrado: 354,2. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d^s ) 510,86 (s, 1H), 6,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,68 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,65 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 3,97 (dd, J = 11,8, 2,9 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,82 - 1,51 (m, 6H), 1,13 (d, J = 18,1 Hz, 5H). Ejemplo de Referencia 18A

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-(tetrahidrofurano-2-ilo)-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H>ona (diastereoisómero 1)

Ejemplo de Referencia 18B

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-(tetrahidrofurano-2-ilo)-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H>ona (diastereoisómero 2)

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 1, pero usando 2-bromo-1-(furano-2-ilo)etanona en el Paso 1 y el furano se redujo al tetrahidrofurano en el Paso 2. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente de MeCN tamponado pH2 para dar el compuesto del título como dos diastereoisómeros separados

Diastereoisómero 1. Pico 1. Ejemplo 18A. Residuo sólido LCMS calc. para C¹⁸H²⁰N³O⁴ (M+H)⁺ : m/z = 342,1; encontrado: 342,1.

Diastereoisómero 2. Pico 2. Ejemplo 18B. Residuo sólido LCMS calc. para C¹⁸H²⁰N³O⁴ (M+H)⁺ : m/z = 342,1; encontrado: 342,1.

Ejemplo de Referencia 19

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-(5-fluoropiridina-2-ilo)-4,5-dihidroimidazo[l,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H>ona

Paso 1.2-(1-etoxivinilo)-5-fluoropiridina

Una mezcla de 2-bromo-5-fluoropiridina (200 mg, 1 mmol), tributilo(1-etoxivinilo)estaño (500 mg, 1 mmol), yoduro de cobre(I) (20 mg, 0,1 mmol) y cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (50 mg, 0,07 mmol) en MeCN (5 ml) se calentó a 80°C durante 30 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc, se lavó con 5% de NH⁴OH, salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para dar un aceite bruto. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna sobre gel de sílice eluyendo con un hexano; Gradiente de EtOAc (0-30%) para dar 2-(1-etoxivinilo)-5-fluoropiridina como un aceite transparente (0,2 g, 90%). LCMS calc. para C⁹H¹¹FNO (M+H)⁺ : m/z = 168,1; encontrado: 168,2.

Paso 2. 2-Bromo-1-(5-fluoropiridina-2-ilo)etanona

O

í f Y ^ Br

Se añadió /V-bromosuccinimida (200 mg, 1 mmol) a una mezcla de 2-(1-etoxivinilo)-5-fluoropiridina (200 mg, 1 mmol) en THF (6 ml) y agua (2 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 min, se diluyó con EtOAc y se lavó con salmuera. La capa orgánica combinada se secó con MgSO4, se filtró y se concentró para dar 2-bromo-1-(5-fluoropiridina-2-ilo)etanona como un aceite transparente, que se usó en el siguiente paso.

Paso 3. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-(5-fluoropiridina-2-ilo)-4,5-dihidroimidazo[ 1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-2(1H)-ona El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 1, pero usando 2-bromo-1-(5-fluoropiridina-2-ilo)etanona de lo anterior, en el Paso 1. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un agua: MeCN gradiente tamponado pH2 para dar el compuesto del título como un residuo sólido. LCMS calc. para C¹⁹H¹⁶FN⁴O³ (M+H)⁺ : m/z = 367,1; encontrado: 367,1.

Ejemplo de Referencia 20

Etilo 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-5-carboxilato

El bromo (0,83 g, 5,2 mmol) en cloroformo (2 ml) se añadió lentamente a una solución de etilo 3-oxo-3-piridina-2-ilpropanoato (1,0 g, 5,2 mmol) y cloroformo (25,0 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora y se concentró a presión reducida para dar sal de hidrobromuro de 1 etilo 2-bromo-3-oxo-3-piridina-2-ilpropanoato como un aceite ámbar (1,8 g, 100%). LCMS calc. para C10HnBrNO3 (M+H)+: m/z = 272,0, 274,0; encontrado: 272,0, 274,0.

Paso 2. Etilo 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[ 1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-5-carboxilato

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 1, pero usando 2-bromo-3-oxo-3-piridina-2-ilpropanoato de arriba, en el Paso 1. El producto fue purificado por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un agua: gradiente de MeCN tamponado pH 10 para dar una mezcla de los dos diastereoisómeros del compuesto del título como un residuo sólido. Lc Ms calc. para C²²H²¹N⁴O⁵ (M+H)⁺ : m/z = 421,1; encontrado: 421,1.

Ejemplo de Referencia 21

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-(1, 3-tiazol-2-ilo)-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H )-ona

Paso 1.2-Bromo-1-(1,3-tiazol-2-ilo)etanona

Se añadió bromo (70 |il, 1 mmol) a una mezcla de 1-(1,3-tiazol-2-ilo)etanona (200 mg, 2 mmol) en AcOH (5 ml). La mezcla de reacción se agitó a 100°C durante 30 min. y se concentró a presión reducida para dar 2-bromo-1-(1,3-tiazol-2-ilo)etanona como un aceite (100%) usado como crudo.

Paso 2. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-(1,3-tiazol-2-ilo)-4,5-dihidroimidazo[ 1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

El compuesto del título se preparó por un método análogo al Ejemplo 1, pero usando 2-bromo-1-(1,3-tiazol-2-ilo)etanona de arriba, en el Paso 1. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un gradiente de agua: MeCN tamponado pH 2 para dar el compuesto del título como un residuo sólido. LCMS calc. para C¹⁷H¹⁵N⁴O³S (M+H)⁺ : m/z = 355,1; encontrado: 355,1. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d⁶) 511,05 (s, 1H), 7,78 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,90 (s, 1H), 4,83 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,44 (dd, J = 11,6, 2,9 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 22

2-{2-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-4-¡lo]fenox¡}-W-etilacetamida

Paso 1. Metilo (2-acetilfenoxi)acetato

1-(2-hidroxifenil)etanona (1,0 g, 7,3 mmol) y bromoacetato de metilo (0,70 ml, 7,3 mmol) se combinaron en acetona (20,0 ml) con carbonato de potasio (2,0 g, 15 mmol) y se agitó a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 18 h, se diluyó con EtOAc y se filtró para eliminar los sólidos. La capa orgánica se concentró para dar el compuesto del subtítulo como un aceite transparente (1,5 g, 100%). LCMS calc. para C¹¹H¹³O⁴ (M+H)⁺ : m/z = 209,1; encontrado: 209,1.

Paso 2. Metilo [2-(bromoacetilo)fenoxi]acetato

Se añadió bromo (1,2 g, 7,2 mmol) en cloroformo (5 ml) gota a gota a una solución de acetato de metilo (2-acetilfenoxi) (1,5 g, 7,2 mmol) en cloroformo (45 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc y se lavó con agua de bicarbonato de sodio, salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar el compuesto del subtítulo como un aceite que solidificó (2,1 g, 100%). LCMS calc. para CnH12BrO4 (M+H)+: m/z = 287,0, 289,0; encontrado: 287,0, 289,0.

Paso 3. {2-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]fenoxi} acético ácido

El compuesto intermedio se preparó por métodos análogos al Ejemplo 1, pero usando metilo [2-(bromoacetilo)fenoxi]acetato de arriba, en el Paso 1 y se encontró que el éster se saponifica en el Paso 5 para dar el compuesto del subtítulo como un residuo sólido. LCMS calc. para C²²H²⁰N³O⁶ (M+H)⁺ : m/z = 422,1; encontrado: 422,1.

Paso 4. 2-{2-[7-(3,5-óimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]fenoxi}-N-etilacetamida

Una mezcla de {2-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]fenoxil}ácido acético (0,03 g, 0,07 mmol) en DMF (2,0 ml) con DIPEA (0,025 ml, 0,14 mmol) y h ATu (0,027 g, 0,071 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. y se añadió etilamina (0,0064 g, 0,14 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h y el producto se purificó sin tratamiento por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: tampón gradiente MeCN pH 2 tamponado con TFA para dar el compuesto del título como un sólido amorfo blanquecino. LCMS calc. para C²⁴H²⁵N⁴O⁵ (M+H)⁺ : m/z = 449,1; encontrado: 449,2.

Ejemplo de Referencia 23

Etilo 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-fenilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de metilo

Etilo benzoilacetato (0,27 ml, 1,6 mmol) [Fluka Cat. n° 12990] se disolvió en sulfoxido de dimetilo (5,0 ml) a temperatura ambiente y se añadió en porciones la W-bromosuccinimida (0,30 g, 1,7 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 3 h y se añadió EtOAc y se lavó con agua, bicarbonato de sodio saturado con agua, salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar etilo 2-bromo-3-oxo-3-fenilpropanoato (0,40 g, 95%) como un % de aceite). LCMS calc. para CnH12BrO3 (M+H)+: m/z = 271,0, 273,0; encontrado: 271,0, 273,0.

Paso 2. Etilo 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-fenilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[ 1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-5-carboxilato

El compuesto del título se preparó mediante un método análogo al Ejemplo 1, pero usando acetato de 2-bromo-3-oxo-3-fenilpropanoato del Paso 1 anterior. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un gradiente de agua: MeCN tamponado pH 2 con TFA para dar una mezcla de diastereoisómeros del compuesto del título como un sólido amorfo blanco (0,012 g, 25%). LCMS calc. para C23H22N3O5 (M+H)+: m/z = 320,1; encontrado: 320,2. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) 511,01 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,38 - 7,19 (m, 3H), 7,14 - 6,94 (m, 2H), 6,94 - 6,65 (m, 2H), 5,70 (s, 0,4H), 5,54 (t, J = 2,4 Hz, 1H), 5,36 (d, J = 3,3 Hz, 0,6H), 3,99 (dq, J = 14,2, 7,1 Hz, 2H), 2,29 (s, 1,8H), 2,19 (s, 1,2H), 2,14 (s, 1,8H), 2,02 (s, 1,2H), 0,99 (dt, J = 9,8, 7,1 Hz, 3H).

Ejemplo de Referencia 24A

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-W-et¡lo-2-oxo-4-fen¡lo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-5-carboxamida (d¡astereo¡sómero 1).

Ejemplo de Referenc¡a 24B

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-W-et¡lo-2-oxo-4-fen¡lo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-5-carboxam¡da (d¡astereo¡sómero 2).

Paso 1. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-fenilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[ 1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-5-ácido carboxílico

Etilo 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-fenilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-5-carboxilato (0,150 g, 0,358 mmol) del Ejemplo 23 se disolvió en MeOH (3,0 ml) e hidróxido de litio, monohidrato (0,030 g, 0,72 mmol) disuelto en agua (1,0 ml) fue añadido. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, se diluyó con EtOAc y se lavó con agua saturada con cloruro de amonio, salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar una mezcla de los diastereoisómeros del compuesto del título como un residuo sólido (0,145 g, 100%) Lc Ms calc. para C²¹H¹⁸N³O⁵ (M+H)⁺ : m/z = 392,1; encontrado: 392,1.

Paso 2. 7-(3,5-d\met\\isoxazol-4-ilo)-N-etilo-2-oxo-4-fenilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-5-carboxamida

7-(3,5-dimeti\\soxazo\-4-i\o)-2-oxo-4-feni\o-1,2,4,5-tetrah\dro\m\dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz\na-5-ác\do carboxí\\co (0,04 g, 0,1 mmo\) se d\so\v\ó en DMF (2,0 m\) con DIPEA (0,036 m\, 0,20 mmo\) a temperatura ambiente. Se añadió HATU (0,054 g, 0,14 mmo\) y \uego se añadió et\\am\na 2,0 M en THF (0,20 m\, 0,41 mmo\). La mezc\a de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una hora y se d\\uyó con EtOAc. La capa orgánica se \avó con 1N HC\, sa\muera, se secó sobre su\fato de magnesio y se concentró para dar un só\\do. E\ producto se purificó por HPLC preparativa en una co\umna C-18 e\uyendo con un agua: gradiente de MeCN tamponado a pH 2 para dar e\ compuesto de\ títu\o como dos diastereoisómeros separados.

Diastereoisómero 1. Pico 1. Ejemp\o 24A. Residuo só\\do (0,010 g, 25%). LCMS ca\c. para C²³H²³N⁴O⁴ (M+H)⁺: m/z = 419,1; encontrado: 419,1.

Diastereoisómero 2. Pico 2. Ejemp\o 24B. Residuo só\\do (0,008 g, 20%). LCMS ca\c. para C²³H²³N⁴O⁴ (M+H)⁺: m/z = 419,1; encontrado: 419,1.

Ejemplo de Referencia 25

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-W-¡soprop¡l-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-am¡na

Paso 1.2-cloro-7-(3,5-d\met\\isoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[ 1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina

A 7-(3,5-dimeti\isoxazo\-4-i\o)-4-feni\o-4,5-dih\droimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz\na-2(1 H)-ona (40,0 mg, 0,115 mmo\) en un v\a\, se añadió c\oruro de fosfor\\o (1,5 mL, 16 mmo\) y \a mezc\a se ca\entó a 95°C durante \a noche. La mezc\a se evaporó y se extrajo con EtOAc. Los extractos se \avaron con bicarbonato de sodio saturado, sa\muera y se secaron sobre su\fato de sodio. La f\\trac\ón y \a evaporación dieron e\ compuesto deseado (42 mg, 100%). LCMS ca\c. para C2üH17C\N3O2 (M+H)⁺ : m/z = 366,1; encontrado: 366,1.

Paso 2. 7-(3,5-d'\met\\isoxazol-4-ilo)-N-isopropil-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-amina A 2-c\oro-7-(3,5-dimeti\isoxazo\-4-i\o)-4-feni\o-4,5-dihidro\midazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (9,1 mg, 0,025 mmo\) en N-meti\p\rro\idinona (0,40 m\), tr\eti\amina (10 p\, 0,075 mmo\) y 2-propanamina (21,2 p\, 0,25 mmo\) y \a mezc\a se ca\entó a 120°C durante \a noche. La mezc\a se d\\uyó con MeOH y se purificó por LCMS preparativa (pH 10) para dar e\ compuesto deseado (2,8 mg, 29%). ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d⁶): 57,29 (3h , m); 6,92 (3 H, m); 6,78 (1H, m); 6,55 (1H, m); 5,80 (1H, s); 4,68 (1H, m); 4,45 (1H, m); 4,00 (1H, m); 2,20 (3 H, s); 2,02 (3 H, s); 1,20 (3 H, m); 1,09 (3 H, m). LCMS ca\c. para C²³H²⁵N⁴O² (M+H)⁺: m/z = 389,2; encontrado: 389,2.

Ejemplo de Referencia 26

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-W-met¡lo-4-fen¡lo-4,5-dih¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-am¡na

El compuesto del título se preparó mediante un método análogo al Ejemplo 25, pero usando metilamina en el Paso 2. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un agua: gradiente de MeCN pH 10 tamponado con hidróxido de amonio para dar el compuesto del título (2,1 mg, 13%). ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d⁶): d 7,29 (3H, m); 6,93 (3 H, m); 6,83 (1H, m); 6,79 (1H, m); 5,70 (1H, s); 4,61 (1H, m); 4,43 (1H, m); 2,87 (3 H, m); 2,11 (3H, s); 2,03 (3 H, s); 1,49 (1H, m). LCMS calc. para C²¹H²¹N⁴O² (M+H)⁺: m/z = 361,2; encontrado: 361,2.

Ejemplo de Referenc¡a 27

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-W-et¡lo-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-am¡na

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 25, pero usando etilo amina en el Paso 2. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente de MeCN tamponado pH 10 con hidróxido de amonio para dar el compuesto del título (6,0 mg, 42%). ¹H RMN (500 MHz, DMSO-o^fe): d 7,29 (3H, m); 6,93 (3 H, m); 6,87 (1H, m); 6,78 (1H, m); 5,78 (1H, s); 4,63 (1H, m); 4,43 (1H, m); 3,32 (2 H, m); 2,20 (3 H, s); 2,02 (3 H, s); 1,12 (3 H, m). LCMS calc. para C²²H²³N⁴O² (M+H)⁺: m/z = 375,2; encontrado: 375,2.

Ejemplo de Referenc¡a 28

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-W,W-d¡met¡lo-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-am¡na

El compuesto del título se preparó mediante métodos análogos al ejemplo 25, pero utilizando dimetilamina en el Paso 2. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con un agua: gradiente MeCN tamponado pH 10 con hidróxido de amonio para dar el compuesto del título (6,7 mg, 72%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-a^fe): 57,29 (3H, m); 7,00 (1H, m); 6,85 (3 H, m); 6,11 (1H, s); 4,52 (2 H, m); 2,99 (6H, s); 2,20 (3 H, s); 2,02 (3 H, s). LCMS calc. para C²²H²³N⁴O² (M+H)⁺ : m/z = 375,2; encontrado: 375,2

Ejemplo de Referencia 29

2-{[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]amino}etanol

El compuesto del título se preparó mediante un método análogo al Ejemplo 25, pero usando etanolamina [Aldrich n° 411000] en el Paso 2. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 10 con hidróxido de amonio para dar el compuesto del título (5,5 mg, 40%). LCMS calc. para C²²H²³N⁴O³ (M+H)⁺ : m/z = 391,2; encontrado: 391,2.

Ejemplo de Referencia 30

2-{[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]amino}propano-1-ol (diastereoisómero 1)

Ejemplo de Referencia 31

2-{[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]amino}propano-1-ol (diastereoisómero 2)

El compuesto del título se preparó por un método análogo al Ejemplo 25, pero usando DL-alaninol [Aldrich n° 192171] en el Paso 2. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 10 con hidróxido de amonio para dar los dos diastereoisómeros racémicos del compuesto del título.

Diastereoisómero 1. Pico I. Ejemplo 30 (3,9 mg, 27%). ¹H RMN (500 MHz, DMSO-a^fe): d 7,30 (4H, m); 6,92 (3 H, m); 6,79 (1H, m); 6,53 (1H, m); 5,82 (1H, s); 4,76 (1H, m); 4,68 (1H, m); 4,43 (1H, m); 3,92 (1 H, m); 3,45 (1H, m); 3,20 (1H, m); 2,20 (3 H, s); 2,03 (3 H, s); 1,19 (3 H, m). LCMS calc. para C²³H²⁵N⁴O³ (M+H)⁺ : m/z = 405,2; encontrado: 405.2.

Diastereoisómero 2. Pico 2. Ejemplo 31. LCMS calc. para C²³H²⁵N⁴O³ (M+H)⁺ : m/z = 405,2; encontrado: 405.2.

Ejemplo de Referencia 32

1-{[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]amino}propano-2-ol

[0284] El compuesto del título se preparó mediante un método análogo al Ejemplo 25, pero usando 1 -amino-2-propanol [Aldrich n° 110248] en el paso 2. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 10 con hidróxido de amonio para dar el compuesto del título (5,3 mg, 37%) como una mezcla de diastereoisómeros. LCMS calc. para C²³H²⁵N⁴O³ (M+H)⁺ : m/z = 405,2; encontrado: 405,2.

Ejemplo de Referencia 33

2-{[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]amino}-2-metilpropano-1-ol

El compuesto del título se preparó mediante un método análogo al Ejemplo 25, pero usando 2-amino-2-metilo-1- propanol [Aldrich n° A65182] en el Paso 2. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 10 con hidróxido de amonio para dar el compuesto del título (1,5 mg, 10%). LCMS calc. para C²⁴H²⁷N⁴O³ (M+H)⁺: m/z = 419,2; encontrado: 419,2.

Ejemplo de Referencia 34

2- [[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo](metilo)amino]etanol

El compuesto del título se preparó mediante un método análogo al Ejemplo 25, pero usando 2-(metilamino)etanol [Aldrich n° 471445] en el paso 2. El producto se purificó por HPLC preparativa en una Columna C-18 eluyendo con agua: gradiente MeCN tamponado pH 10 con hidróxido de amonio para dar el compuesto del título (2,6 mg, 18%). LCMS calc. para C²³H²⁵N⁴O³ (M+H)⁺ : m/z = 405,2; encontrado: 405,2.

Ejemplo de Referencia 35

7-(1-metilo-1H-pirazol-5-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

7-bromo-4-fen¡lo-4,5-dih¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (100 mg, 0,3 mmol) se disolvió en 1,4-dioxano (2,4 ml). Una solución de 1 -metilo-5-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)-1 H-pirazol (94 mg, 0,45 mmol) y fosfato de potasio (100 mg, 0,6 mmol) en agua (0,60 ml) se añadió. La reacción fue desoxigenada con nitrógeno. Se añadió diciclohexilo (2’,4’,6’-triisopropilbifenilo-2-ilo)fosfina-(2'-aminobifenilo-2-ilo) (cloro)paladio (1:1) (7 mg, 0,009 mmol) y se desoxigeno con nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a 100°C durante 4 h. Se añadieron agua y EtOAc y las capas se separaron. La capa orgánica se concentró a presión reducida. La purificación sobre sílice usando EtOAc/hexanos dio el compuesto del título (61 mg). LCMS calc. para C¹⁹H¹⁷N⁴O² (M+H)⁺ : m/z = 333,1; encontrado: 333,2. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-d^s;: d 7,40 (s, 1H); 7,31 (m, 3 H); 7,13 (m, 2 H); 6,92 (m, 1 H); 6,79 (m, 1 H); 6,22 (s, 1 H); 5,49 (s, 1 H); 4,59 (m, 1 H); 4,41 (m, 1 H); 3,60 (s, 3 H).

Ejemplo de Referencia 36

9-Bromo-7-(1-metilo-1 H-pirazol-5-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona

A una solución de 7-(1-metilo-1H-pirazol-5-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona (32 mg, 0,096 mmol) en THF (0,7 ml) se añadió W-bromosuccinimida (19 mg, 0,10 mmol). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y luego se concentró a presión reducida. La purificación en gel de sílice usando EtOAc/hexano dio el compuesto del título, 24 mg. LCMS calc. para C1gH16BrN4O2 (M+H)+: m/z = 411,0, 413,0; encontrado: 411,1,413,1. 1H RMN (300 MHz, DMSO-afe;: d 7,40 (s, 1H); 7,31 (m, 3 H); 7,13 (m, 2 H); 7,08 (s, 1 H); 6,30 (s, 1 H); 5,50 (s, 1 H); 4,59 (m, 1 H); 4,41 (m, 1 H); 3,60 (s, 3 H).

Ejemplo de Referencia 37

9-Metilo-7-(1-metilo-1H-pirazol-5-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona Una mezcla de reacción de 9-bromo-7-(1-metilo-1H-pirazol-5-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (17 mg, 0,04 mmol), una solución de cloruro de metilzinc 2,0 M en THF (0,10 ml) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (2) mg, 0,002 mmol) en THF (0,5 ml) bajo nitrógeno se calentó en un microondas a 130°C durante 5 min. El compuesto del título se purificó por LCMS preparativa usando un tampón de pH 10. LCMS calc. para C²⁰H¹⁹N⁴O² (M+H)⁺ : m/z = 347,1; encontrado: 347,2.

Ejemplo de Referencia 38

7-(4-Cloro-1-metilo-1 H-p¡razol-5-¡lo)-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona

Paso 1.4-cloro-1-metilo-5-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)-1H-pirazol

Una mezcla de 1-metilo-5-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)-1H-pirazol (1,3 g, 6,3 mmol), N-clorosuccinimida (0,93 g, 7,0 mmol) y THF (6,6 ml) se agitó a 70°C durante 3 h. La mezcla se extrajo con EtOAc, se secó y se concentró a presión reducida. El compuesto del subtítulo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando EtOAc al 40% en hexanos dio el compuesto deseado, 1,456 g, 95%.

Paso 2. 7-(4-cloro-1-metilo-1H-pirazol-5-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

El compuesto del título se preparó mediante un método análogo al Ejemplo 35, pero usando 4-cloro-1-metilo-5-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)-1H-pirazol. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo con agua: gradiente de MeCN tamponado a pH 2 para dar el compuesto del título. LCMS calc. para C¹⁹H¹⁶ClN⁴O² (M+H)⁺ : m/z = 367,1; encontrado: 367,1.

Ejemplo de Referenc¡a 39

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na

Una mezcla de reacción de 2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (15 mg, 0,041 mmol), 0,5 M de bromo(propilo)zinc en THF (0,5 ml) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (2 mg, 0,002 mmol) en THF (0,4 ml) bajo nitrógeno se calentó en un microondas a 150°C durante 5 min. La purificación del producto por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 dio el compuesto del título. LCMS calc. para C²⁰H¹⁷N³O² (M+H)⁺ : m/z = 332,1; encontrado: 332,2.

Ejemplo de Referencia 40

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-fen¡lo-2-p¡peraz¡na-1-ilo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na

4-[7-(3,5-Dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]piperazina-1-carboxilato (Ejemplo 60) se agitó en 4 N HCl durante 15 min. a temperatura ambiente y se evaporó. La purificación por LCMS preparativa a pH 10 dio el compuesto deseado que se aisló como la sal de diclorhidrato. LCMS calc. para C24H26N5O2 (M+H)+: m/z = 416,2; encontrado: 416,2.

Ejemplo de Referenc¡a 41

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2,4-difenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina

Una mezcla de 2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (14 mg, 0,039 mmol), ácido fenilborónico (5,6 mg, 0,046 mmol),[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), complejo con DCM (1:1) (2 mg, 0,002 mmol) y carbonato de potasio (16 mg, 0,12 mmol) en 1,4-dioxano (0,2 ml) y agua (0,1 ml). La mezcla resultante se calentó a 80°C durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH y se purificó en LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto deseado. LCMS calc. para C²⁶H²²N³O² (M+H)⁺: m/z = 408,2; encontrado: 408,2.

Ejemplo de Referenc¡a 42

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-oxo-4-fen¡lo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-9-carbon¡tr¡lo

9-Bromo-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (6,9 mg, 0,016 mmol), cianuro de zinc (19 mg, 0,16 mmol) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (2,8 mg, 0,0024 mmol) se disolvieron en DMF (1,6 ml) y la solución se desoxigenó. La mezcla de reacción agitada se calentó a 150°C en un microondas durante 5 min. La mezcla se diluyó con MeOH y se purificó mediante LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título. LCMS calc. para C²¹H¹⁷N⁴O³ (M+H)⁺: m/z = 373,1; encontrado: 373,2. Ejemplo de Referencia 43

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4,9-d¡fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H>ona

Una mezcla de 9-bromo-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona (9,0 mg, 0,021 mmol), ácido fenilborónico (3,1 mg, 0,025 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), complejo con DCM (1:1) (0,9 mg, 0,001 mmol) y carbonato de potasio (8,8 mg, 0,063 mmol) en 1,4- dioxano (0,1 ml) y agua (0,07 ml) se calentó a 80°C durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante LCMS preparativa usando un tampón de pH 10 para dar el compuesto del título. LCMS calc. para C²⁶H²²N³O³ (M+H)⁺: m/z = 424,2; encontrado: 424,0.

Ejemplo de Referenc¡a 44

7-(1,4-d¡met¡lo-1 H-p¡razol-5-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona

Paso 1. 1,4-dimetilo-5-(4¡4¡5,5-tetrametilo-1¡3¡ 2-dioxaborolano-2-ilo)-1H-pirazol

Se agitó 1,4-dimetilo-1H-pirazol (50 mg, 0,5 mmol) en THF (2 ml) y se enfrió a 02C. Se añadió gota a gota una solución de n-butilo litio 1,6 M en hexanos (390 ml) con una jeringa y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se enfrió a -78°C y se añadió gota a gota 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano (110 ml, 0,52 mmol) gota a gota con una jeringa. La mezcla se agitó a -78°C durante 15 min. y a 0°C durante 3 h. La mezcla se diluyó con EtOAc y se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. La purificación por cromatografía sobre gel de sílice usando EtOAc en hexanos dio el compuesto del subtítulo. LCMS calc. para C¹¹H²⁰BN²O² (M+H)⁺ : m/z = 223,2; encontrado: 223,0.

Paso 2. 7-(1,4-dimetilo-1H-pirazol-5-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

7-Bromo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona (28 mg, 0,084 mmol) se disolvió en 1,4-dioxano (0,67 ml). 1,4-dimetilo-5-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)-1 H-pirazol (28 mg, 0,13 mmol) y fosfato de potasio (40 mg, Se añadieron 0,2 mmol) en agua (0,17 ml). La mezcla de reacción se desoxigenó con nitrógeno. Se añadió diciclohexilo (2’,4’,6’-triisopropilbifenilo-2-ilo)fosfina-(2'-aminobifenilo-2-ilo) (cloro)paladio (1:1) (2 mg, 0,002 mmol) y la mezcla fue nuevamente desoxigenado con nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó luego a 90°C bajo nitrógeno durante 2 h. El producto se purificó usando LCMS preparativa (pH 10) para dar el compuesto del título. LCMS calc. para C¹⁹H¹⁷N⁵O² (M+H)⁺ : mn/z = 348,1; encontrado: 348,0.

Ejemplo de Referencia 45

9-Bromo-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H>ona

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 36, pero usando 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona. Lc Ms calc. para C^2üH¹⁷BrN³O³ (M+H)⁺ : m/z = 426,0; encontrado: 426,0.

Ejemplo de Referenc¡a 46

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-9-met¡lo-4-fen¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 37, pero usando 9-bromo-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona. LCMS calc. para C²¹H²⁰N³O³ (M+H)⁺: m/z = 362,1; encontrado: 362,2.

Ejemplos de Referencia 47A-52

Los procedimientos experimentales utilizados para preparar los compuestos de los Ejemplos 47A a 52 se resumen en la Tabla 1 a continuación. Los ejemplos 47A y 47B y los ejemplos 48A y 48B son pares de diastereoisómeros que se separaron cromatográficamente por métodos análogos a las separaciones descritas anteriormente

Ejemplos de Referencia 53-60

Los procedimientos experimentales usados para preparar los compuestos de los Ejemplos 53 a 61 se resumen en la Tabla 2 a continuación.

Tabla 2

Ejemplo de Referencia 61A

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-5,5-d¡met¡lo-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡hidro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (d¡astereo¡sómero 1)

Ejemplo de Referenc¡a 61B

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-5,5-d¡met¡l-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona (d¡astereo¡sómero 2)

Paso 1.2-Bromo-2-metilo-1-(pirídina-2-ilo) propano-1-ona

se añadió bromo (2,1 g, 13,4 mmol) disuelto en ácido acético (1ml) lentamente a una mezcla de 2-metilo-(1-piridina-2-ilo) propano-1 -ona (2,0 g, 13 mmol) en ácido acético (20 ml) a temperatura ambiente. La reacción se calentó a 105°C durante 3H, se dejó enfriar a temperatura ambiente y se concentró al vacío para dar un semisólido oscuro. El producto bruto se repartió entre acetato de etilo y bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar 2-bromo-2-metilo-1-(piridina-2-ilo) propano-1-ona como un aceite muy oscuro (3,0 g, 98 %). LCMS calculada para C^gH^u BrNO (M+H)⁺ : m/z = 227,9, 229,9; encontrado: 228,1,230,1.

Paso 2. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-5,5-dimetilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 13, pero usando 2-bromo-2-metilo-1-(piridina-2-ilo) propano-1-ona en el Paso 1 El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo un gradiente de agua: acetonitrilo tamponado a pH 10 para dar el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros. Los isómeros se separaron por cromatografía en columna quiral preparativa usando las siguientes condiciones: Columna: phenomenex Lux Cellulose C-2 5 gm, 21, 2x250 mm, Fase móvil: 45% EtOH/Hexanos, condición de gradiente: isocrático a 18 ml/min, Carga: 13,0 mg en 900 gl, tiempo de ejecución: 18 min, tiempo pico: 9,0 y 12,0 min.

Diastereoisómero 1, Pico 1 como un residuo sólido. LCMS calculada para C²¹H²¹N⁴O³ (M+H)⁺: m/z = 377,1; encontrado: 377,1. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 510,87 (s, 1H), 8,41 (dt, J = 4,0, 0,9 Hz, 1H), 7,74 (td, J = 7,7, 1,8 Hz, 1H), 7,27 (ddd, J = 7,6, 4,8, 1,1 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5.24 (s, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,36 (s, 3H), 1,11 (s, 3H).

Diastereoisómero, Pico 2 como un residuo sólido. LCMS calculada para C21H21N4O3 (M+H)⁺ : m/z = 377,1; encontrado: 377,1. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 510,87 (s, 1H), 8,41 (dt, J = 4,0, 0,9 Hz, 1H), 7,74 (td, J = 7,7, 1,8 Hz, 1H), 7,27 (ddd, J = 7,6, 4,8, 1,1 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5.24 (s, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,36 (s, 3H), 1,11 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 62A

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-5-(h¡drox¡met¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona (d¡astereo¡sómero 1)

Ejemplo de Referenc¡a 62B

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-5-(h¡drox¡met¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona (d¡astereo¡sómero 2)

Ejemplo de Referenc¡a 62C

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-5-(h¡drox¡met¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona (d¡astereo¡sómero 3)

Ejemplo de Referenc¡a 62D

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-5-(h¡drox¡met¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona (d¡astereo¡sómero 4)

Se añadió tetrahidroborato de litio (1,6 mg, 0,071 mmol) a etilo 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-5-carboxilato (20 mg, 0,05 mmol), del Ejemplo 20, en tetrahidrofurano (3 ml). La reacción se agitó a 70°C durante 3 h, luego se repartió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se concentró y el producto bruto se purificó por FCC sobre gel de sílice eluyendo un gradiente de hexano: acetato de etilo para obtener el producto como una mezcla de diastereómeros. Los isómeros se separaron por cromatografía en columna quiral preparativa usando las siguientes condiciones: Columna: fenomenex Lux Cellulose C-2 5 gm, 21, 2x250 mm, fase móvil: 45% EtOH/Hexanos, Estado del gradiente: isocrático a 18 ml/min, Carga: 13,5 mg en 900 gl, tiempo de ejecución: 18 min, tiempo pico: 9,0, 12,1,24,2 y 15,0 min.

Diastereoisómero 1, Pico 1 como un residuo sólido. LCMS calculada para C20H19N4O4 (M+H)⁺: m/z = 379,1; encontrado: 379,1.

Diastereoisómero 2, Pico 2 como un residuo sólido. LCMS calculada para C20H19N4O4 (M+H)⁺: m/z = 379,1; encontrado: 379,1. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-de) 510,93 (s, 1H), 8,47 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 7,79 - 7,65 (m, 1H), 7,26 (dd, J = 7,0, 5,2 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,67 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,37 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 5,22 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 4,71-4,57 (m, 1H), 3,45 (q, J = 5,5 Hz, 2H), 2,17 (s, 3H), 2,01 (s, 3H).

Diastereoisómero 3, PiCO³ como un residuo sólido. LCMS calculada para C²⁰H¹⁹N⁴O4 (M+H)⁺: m/z = 379,1; encontrado: 379,1.

Diastereoisómero 4, Pico 4 como un residuo sólido. LCMS calculada para C²⁰H¹⁹N⁴O4 (M+H)⁺: m/z = 379,1; encontrado: 379,1.

Ejemplo de Referencia 63A

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡perid¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona 2,2,2-trifluoroacetato (d¡astereo¡sómero 1)

Ejemplo de Referencia 63B

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-y |)-4-piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona 2,2,2-tr¡fluoroacetato (d¡astereo¡sómero 2)

Paso 1.4-Piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-dé][ 1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

El triciclo intermedio, 4-piridina- El 2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (0,25 g, 0,98 mmol) del Ejemplo 13, se disolvió parcialmente en metanol (50,0 ml) y 12,0 M de cloruro de hidrógeno en agua (1,0 ml, 12 mmol) en una botella Parr. La reacción se desgasificó con nitrógeno, seguido de la adición de paladio (10% sobre carbono), y la reacción se cargó a 55 PSI de hidrógeno y se agitó durante 6 días. La reacción se filtró para eliminar el catalizador y se concentró al vacío para dar 4-piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como un aceite oscuro (0,21 g, 82%). LCMS calculada para C14H18N3O2 (M+H)+: m/z = 260,1; encontrado: 260,1.

Paso 2. 7-Bromo-4-piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[ 1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-2( 1H)-ona

El 4-piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (0,20 g, 0,77 mmol) del Paso 1 se disolvió en ácido acético (10,0 ml, 176 mmol) a temperatura ambiente y se añadió lentamente W-bromosuccinimida (0,14 g, 0,77 mmol). La reacción se agitó durante 2 h y se concentró al vacío para dar un residuo. El residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó con carbonato de potasio acuoso, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar 7-bromo-4-piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como un aceite oscuro (0,22 g, 85%). LCMS calculada para CuH 17BrN3O2 (M+H)+: m/z = 338,0, 340,0; encontrado: 338,0, 340,0. Paso 3. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[ 1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona 2,2,2-trifluoroacetato

El 7-bromo-4-piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (0,025 g, 0,074 mmol) del Paso 2 se combinó con ácido (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo) borónico (0,016 g, 0,11 mmol) en 1,4-dioxano (3,0 mL) con carbonato de potasio (0,02 g, 0,15 mmol) en agua (0,38 ml) y se desgasificó con nitrógeno. Se añadió el complejo de catailst [1,1 ’-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) con diclorometano (1:1) (0,006 g, 0,007 mmol) y la reacción se calentó en un tubo sellado a 100°C. Después de agitarse durante 2 h, la reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar el producto crudo como un aceite oscuro. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo un gradiente de agua: acetonitrilo tamponado a pH 2 con TFA para dar 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como dos fracciones.

Diastereoisómero 1, Pico 1 como un residuo sólido (0,008 g, 30%). LCMS calculada para C19H23N4O3 (M+H)+: m/z = 355,1; encontrado: 355,1. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 511,13 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 8,78 (d, J = 8 ,6 Hz, 1H), 6 ,86 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 4,79 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 4,42 (dd, J = 8,7, 2,1 Hz, 1 H), 4,02 (dd, J = 12,3, 2,8 Hz, 1H), 3,37 (s, 2H), 3,26 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 2,84 (s, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,01 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 1,75 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 1,64 - 1,52 (m, 1H), 1,47 (s, 1H).

Diastereoisómero 2, Pico 2 como un residuo sólido (0,007 g, 27%). LCMS calculada para C19H23N4O3 (M+H)+: m/z = 355,1; encontrado: 355,1.

Ejemplo de Referencia 69A

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-metilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona (diastereoisómero 1)

Ejemplo de Referencia 69B

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-met¡lo-4-p¡r¡d¡na-2-ilo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona (diastereoisómero 2)

Se añadió hidrobromuro de 2-bromo-1 -(piridina-3-ilo)etanona (600 mg, 2 mmol) (sal de HBr) a una mezcla de 2-amino-3-nitrofenol (300 mg, 2 mmol) y carbonato de potasio (400 mg, 3 mmol) en acetona (30 ml, 400 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, se diluyó con agua y luego se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron para dar 2-(2-amino-3-nitrofenoxi)-1-piridina-3-iletanona bruta (0,35 g, 60%). LCMS calculada para C¹³H12N³O4 (M+H)⁺: m/z = 274,1; encontrado: 274,1.

Paso 2. 2-Nitro-6-[(2-pirídina-2-ilprop-2-en-1 -ilo)oxi]anilina

Se añadió terc-butóxido de potasio (1,10 g, 9,9 mmol) a una suspensión de bromuro de metiltrifenilfosfonio (3,0 g, 8 mmol) en tetrahidrofurano (30 ml) bajo nitrógeno. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, seguido de la adición de 2-(2-amino-3-nitrofenoxi)-1-piridina-2-iletanona (2 g, 8 mmol). La mezcla se agitó durante 3 h, y luego se repartió entre agua y éter etílico. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó por FCC sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de hexano: acetato de etilo para dar 2-nitro-6-[(2-piridina-2-ilprop-2-en-1-ilo)oxi]anilina como un sólido marrón claro (0,5 g, 20%). LCMS calculada para C¹⁴H¹⁴N³O3 (M+H)⁺ : m/z = 272,1; encontrado: 272,1.

Paso 3. 2-{ 1 -[(2-Azido-3-nitrofenoxi)metilo]vinilo}piridina

Se añadió nitrito de sodio (100 mg, 2 mmol) en agua (4 ml, 60 mmol) a una solución de 2-nitro-6-[(2-piridina-2-ilprop-2-en-1 -ilo)oxi]anilina (350 mg, 1,3 mmol) en cloruro de hidrógeno 4,0 M en agua (4ml, 10 mmol) a 0°C. La reacción se agitó durante 5 min y luego se neutralizó a pH 6-7 con bicarbonato de sodio sólido. Se añadió gota a gota azida de sodio (80 mg, 1 mmol) en agua (2 ml) a la mezcla, seguido de agitación durante 30 min, tiempo durante el cual la mezcla de reacción se convirtió en una suspensión espesa. La mezcla resultante se filtró y se secó para dar 2-{1-[(2-azido-3-nitrofenoxi)metilo]vinilo}piridina como un sólido amarillo oscuro (0,25 g. 83%). LCMS calculada para C¹⁴H¹²N⁵O3 (M+H)⁺: m/z = 298,1; encontrado: 298,1

Paso 4. 7-Nitro- 1a-piridina-2-ilo-1 a,2-dihidro-1 H-azireno[2,1 -c][ 1,4]benzoxazina

Una mezcla de 2-{1-[(2-azido-3-mtrofenoxi)metilo]vmilo}pmdina (250 mg, 0,84 mmol) en benceno (15 ml) reflujo a 80°C durante 15 h. La reacción se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó por FCC sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de hexano: acetato de etilo para dar 7-nitro-1 a-piridina-2-ilo-1 a,2-dihidro-1 H-azireno[2,1-c][1,4]benzoxazina como un sólido (0,225 g, 90%). LCMS calculada para C14H12N3O3 (M+H)+: m/z = 270,1; encontrado: 270,1.

Paso 5. 3-Metilo-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-5-amina

Una mezcla de 7-nitro-1a-pmdina-2-ilo-1a,2-dimdro-1 H-azireno[2,1-c][1,4]benzoxazina (100 mg, 0,4 mmol) en metanol (6 ml) y tetrahidrofurano (2 ml) se desgasificó con nitrógeno en una Botella de Parr seguida de la adición de paladio (10% sobre carbono) (30 mg, 0,28 mmol). La reacción se cargó con hidrógeno a 40 psi y se agitó durante 6 h. La reacción se filtró y se concentró para dar 3-metilo-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-5-amina bruta (0,030 g. 30%). LCMS calculada para CuH16N3O(M+H)+: m/z = 242,1; encontrado: 242,1.

Paso 6. 4-Metilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Trifosgeno (40 mg, 0,1 mmol) se añadió a la solución de 3-metilo-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-5-amina (90 mg, 0,4 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) y N,N-diisopropiletilamina (100 gl) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante 1 h y luego se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 4-metilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como semisólido (0,10 g. 90%). LCMS calculada para C15H¹⁴N³O2 (M+H)⁺ : m/z = 268,1; encontrado: 268,0.

Paso 7. 7-Bromo-4-metilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

N-bromosuccinimida (60 mg, 0,3 mmol) se añadió a una solución de 4-metilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (90 mg, 0,3 mmol), ácido acético (6 ml) y acetonitrilo (6 ml) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a 0°C, se inactivó con agua y se concentró para dar el producto bruto. El producto bruto se disolvió en acetato de etilo y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar un aceite oscuro. El producto se purificó por FCC sobre gel de sílice eluyendo un gradiente de hexano: acetato de etilo que contenía etanol al 20% para dar 7-bromo-4-metilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como un sólido blanquecino (0,090 g. 80%). LCMS calculada para C¹⁵H13BrN³Ü2 (M+h )+: m/z = 346,1, 348,1; encontrado: 345,9,347,9.

Paso 8. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-metilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

7-Bromo-4-metilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (80 mg, 0,2 mmol) se combinó en 1,4-dioxano (10 ml) con borato de potasio (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo) (trifluoro) (0,070 g, 0,35 mmol) y carbonato de potasio (60 mg, 0,5 mmol) en agua (5 ml) y se desgasificó con nitrógeno. Se añadió el complejo catalizador [1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) con diclorometano (1:1) (30 mg, 0,04 mmol) y la reacción se agitó a 80°C durante 4 h, en las cuales La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se repartió entre agua y acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron para dar el producto bruto. El producto se purificó por FCC sobre gel de sílice eluyendo un gradiente de hexano: acetato de etilo que contenía etanol al 20% para dar 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-metilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como un aceite transparente. Los enantiómeros se separaron en una columna quiral usando las siguientes condiciones: Phenomenex Lux Cellulose C-4, 5 gm, 21x2x250 mm; fase móvil: etanol al 45% en gradiente de hexanos: 18 ml/min isocrático; Tiempo de ejecución: 11 min; Carga: 4 mg en 900 gl; Tiempo pico: 7,1 y 8,8 min.

Diastereoisómero 1, Pico 1, como un sólido amorfo blanco (0,010 g. 10%). LCMS calculada para C²⁰H¹⁹N⁴O3 (M+H)⁺: m/z = 363,1; encontrado: 363,1. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d^s ) 5 11,02 (s, 1H), 8,55 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,83 - 7,69 (m, 1H), 7,29 (dd, J = 7,3, 4,9 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,79 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 2,17 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,95 (s, 3H).

Diastereoisómero 2, Pico 2, como un sólido amorfo blanco (0,010 g. 10%). LCMS calculada para C²⁰H¹⁹N⁴O3 (M+H)⁺: m/z = 363,1; encontrado: 363,1.

Ejemplo de Referencia 70

7-(3,5-D¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-et¡lo-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxaz¡na-2(1H>ona 2,2,2-trifluoroacetato

Paso 1. 5-Nitro-3-pirídina-2-ilo-2H-1,4-benzoxazina

La mezcla de 5-nitro-3-piridina-2-ilo-2H-1,4-benzoxazina y 5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ol (intermedio, Ejemplo 13) (200 mg, 0,7 mmol) se disolvió en acetonitrilo (0,2 ml) y ácido acético (0,8 ml) a temperatura ambiente y se agitó durante 10 min. La reacción se diluyó con acetonitrilo (15 ml) y se concentró a temperatura ambiente para eliminar el ácido acético residual para dar 5-nitro-3-piridina-2-ilo-2H-1,4-benzoxazina como un sólido verde claro (0,20 g. 100%) LCMS calculada para C¹³H10N³O3 (M+H)⁺ : m/z = 256,1; encontrado: 255,9.

Paso 2. 3-Etilo-5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina

Etilo litio 0,5 M en benceno-ciclohexano (1,8 ml, Se añadieron 0,88 mmol) gota a gota a una solución de 5-nitro- 3-piridina-2-ilo-2H-1,4-benzoxazina (0,025 g, 0,88 mmol) en tetrahidrofurano (4ml), se enfrió a -78°C. La reacción se agitó durante 1 hora a -78°C y luego se inactivó con metanol. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua, y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó por FCC sobre gel de sílice eluyendo un gradiente de hexano: acetato de etilo para dar 3-etilo-5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina como un sólido (0,021 g. 84%). LCMS calculada para C15H16N3O3 (M+H)+: m/z = 286,1; encontrado: 286,0.

Paso 3. 3-Etilo-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-5-amina

3-Etilo-5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina (10 mg, 0,3 mmol) se disolvió en metanol (10 ml) en una botella Parr, se desgasificó con nitrógeno y paladio (10% en carbono) (10 mg) fue añadido. El recipiente de reacción se presurizó a 50 PSI con hidrógeno y se agitó durante 2 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró para dar 3-etilo-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-5-amina bruta (0,005 g, 40%). LCMS calculada para C15H1sN3O(M+H)+: m/z = 256,1; encontrado: 256,0.

Paso 4. 4-Etilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Se añadió trifosgeno (40 mg, 0,1 mmol) a una solución de 3-etilo-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-5-amina (80 mg, 0,3 mmol) en tetrahidrofurano (5 ml) y W,W-diisopropiletilamina (0,1 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y luego se repartió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 4-etilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (0,060 g. 60%). LCMS calculada para C16H16N3O2 (M+H)+: m/z = 282,1; encontrado: 282,0.

Paso 5. 7-Bromo-4-etilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Se añadió N-bromosuccinimida (70 mg, 0,4 mmol) a una solución de 4-etilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (80 mg, 0,4 mmol) en acetonitrilo (5 ml) y ácido acético (10 ml) enfriado a 0°C. La reacción se agitó durante 30 min, se concentró para eliminar el ácido acético residual y el residuo resultante se disolvió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 7-bromo-4-etilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona cruda (0,07 g. 80%). Lc MS calculada para C16H¹⁵BrN³O2 (M+H)⁺ : m/z = 360,1,362 ,1 ; encontrado: 359,8, 361,8.

Paso 6. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-etilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona 2,2,2-trifluoroacetato

7-Bromo-4-etilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (50 mg, 0,1 mmol) fue combinada en 1,4-dioxano (6 ml) con borato de potasio (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo) (trifluoro) (42 mg, 0,21 mmol) y carbonato de potasio (40 mg, 0,3 mmol) en agua (3 ml) y se desgasificó con nitrógeno. Se añadió el complejo catalizador [1,1 ’-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) con diclorometano (1:1) (20 mg, 0,02 mmol) y la mezcla se agitó a 100°C durante 18 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y luego se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó en HPLC preparativa usando una columna C-18 eluyendo un gradiente de agua: acetonitrilo tamponado a pH 2 con TFA para dar 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-etilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como un sólido blanco (0,005 g, 10%). LCMS calculada para C21H21N⁴O3 (M+H)⁺ : m/z = 377,1; encontrado: 377,0. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 511,01 (s, 1H), 8,58 - 8,47 (m, 1H), 7,75 (td, J = 7,7, 1,8 Hz, 1H), 7,28 (dd, J = 6,6, 4,8 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,29 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,71 -2,51 (m, 1H), 2,37 - 2,21 (m, 1H), 2,16 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

Ejemplo de Referencia 71

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-W-met¡lo-2-oxo-4-p¡r¡d¡na-2-ilo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-4-carboxam¡da 2,2,2-tr¡fluoroacetato

Paso 1. 5-Nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-3-carbonitrilo

Se añadió cianuro de potasio (500 mg, 7 mmol) a una solución de 5-nitro-3-piridina-2-ilo-2H-1,4-benzoxazina (1g, 4 mmol) (Ejemplo 70, Etapa 1), en acetonitrilo (20 ml), y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se repartió entre acetato de etilo y agua, y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. El producto se cristalizó en cloruro de metileno para dar 5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carbonitrilo como un polvo amarillo oscuro (0,60 g. 60%). LCMS calculada para C¹⁴H¹¹N⁴O3 (M+H)⁺: m/z = 283,1; encontrado: 282,9

Paso 2. 5-Nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ácido carboxílico

Se disolvió 5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carbonitrilo (80 mg, 0,3 mmol) en ácido clorhídrico concentrado (3 ml, 100 mmol) y se calentó a 100°C durante 2 h. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, se diluyó con agua, y el pH se ajustó a pH 7 con bicarbonato de sodio. La solución neutralizada se extrajo luego con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron para dar 5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ácido carboxílico crudo como un sólido (0,025 g. 30%). LCMS calculada para C¹⁴H¹²N³O5 (M+H)⁺: m/z = 302,1; encontrado: 301,9.

Paso 3. N-Metilo-5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carboxamida

5-Nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ácido carboxílico (0,044 g. 0,15 mmol) en N,N-dimetilformamida (3 ml) se combinó con N,N,N',N'-tetrametilo-O-(7-azabenzotriazol-1-ilo) uronio hexafluorofosfato [Oakwood n°: 023926] (160 mg, 0,42 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (100 pl, 0,6 mmol) a temperatura ambiente. Se añadió metilamina 3,0 M en etanol (0,2 ml, 0,6 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 1 hora, momento en el que la mezcla se repartió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con 1 N HCl, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar n-metilo-5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carboxamida sólida cruda (0,020 g. 30%). LCMS calculada para C15H¹⁵N⁴O4 (M+H)⁺ : m/z = 315,1; encontrado: 315,0.

Paso 4. 5-Amino-N-metilo-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-3-carboxamida

N-Metilo-5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carboxamida (25 mg, 0,080 mmol) se disolvió en metanol (5 ml) en una botella Parr y se desgasificó con nitrógeno, seguido por adición de paladio (10% en carbono) (5 mg, 0,05 mmol). El recipiente de reacción se cargó a 50 PSI de hidrógeno y se agitó durante 2 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró al vacío para dar 5-amino-N-metilo-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carboxamida bruta (0,005 g. 100 %). LCMS calculada para C15H¹⁷N⁴O2 (M+H)⁺: m/z = 285,1; encontrado: 285,0.

Paso 5. N-metilo-2-oxo-4-piridina-2-ilo- 1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-4-carboxamida

Se añadió trifosgeno (10 mg, 0,04 mmol) a una solución de 5-amino-N-metilo-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carboxamida (30 mg, 0,1 mmol) en tetrahidrofurano (3 ml) y N,N-diisopropiletilamina (40 gl, 0,2 mmol) a temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. La mezcla de reacción se repartió luego entre acetato de etilo y agua, y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar N-metilo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida cruda como semisólido (0,031 g, 100%). LCMS calculada para C16H15N4O3 (M+H)+: m/z = 311,1; encontrado: 311,1.

Paso 6. 7-Bromo-N-metilo-2-oxo-4-piridina-2-ilo- 1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-dé][ 1,4]benzoxazina-4-carboxamida

N-Metilo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida (20 mg, 0,1 mmol) se disolvió en acetonitrilo (3 ml) y ácido acético (2 ml), y se enfrió a 0°C, seguido de adición de N-bromosuccinimida (20 mg, 0,1 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1H y luego se concentró para dar un residuo crudo. El residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 7-bromo-N-metilo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida cruda (0,020 g, 50%). LCMS calculada para C16H14BrN4O3 (M+H)+: m/z = 389,1,391,1; encontrado: 388,9, 390,9.

Paso 7. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-N-metilo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina-4-carboxamida 2,2,2-trifluoroacetato

7-Bromo-N-metilo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida (20 mg, 0,05 mmol) se combinó con 1,4-dioxano (2 ml), potasio (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo) (trifluoro) borato (16 mg, 0,077 mmol) y carbonato de potasio (10 mg, 0,1 mmol) en agua (1ml, 60 mmol) y se desgasificó con nitrógeno. Se añadió el complejo catalizador [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) con diclorometano (1:1) (7 mg, 0,008 mmol), y la mezcla de reacción se agitó a 110°C durante 5 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y luego se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó en HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo un gradiente de agua: acetonitrilo tamponado a pH 2 con TFA para dar 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-N-metilo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida como un sólido blanquecino (0,007 g, 30%). LCMS calculada para C21H20N5O4 (m H)+: m/z = 406,1; encontrado: 405,9. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 511,03 (s, 1H), 8,57 - 8,45 (m, 1H), 8,19 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 7,82 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,36 (ddd, J = 7,6, 4,8, 1,0 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,73 (s, 2H), 2,72 - 2,60 (m, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 72

N-{[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-y1)-2-oxo-4-p¡r¡d¡na-2-ilo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-4-ilo]metilo}acetamida 2,2,2-tr¡fluoroacetato

Se añadió hidruro de diisobutilaluminio 1,0 M en tolueno (200 gl, 0,2 mmol) gota a gota a una solución de 5-nitro- 3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carbonitrilo (50 mg, 0,2 mmol) (Ejemplo 71, Paso 1), en tolueno (5 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 10 min, luego se inactivó con metanol. La mezcla resultante se repartió entre acetato de etilo y bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 1 -(5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H -1,4-benzoxazina-3 en bruto-ilo)metanamina sólida (0,05 g. 100%). lCm S calculada para C44 H¹⁵N⁴O3 (M+H)⁺ : m/z = 287,1; encontrado: 287,1.

Paso 2. N-[(5-Nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ilo)metilo] acetamida

Cloruro de acetilo (15 gl, 0,21 mmol) se añadió a una mezcla de 1 -(5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ilo)metanamina (50 mg, 0,2 mmol) en cloruro de metileno (3 ml), N,N-diisopropiletilamina (60 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se repartió luego entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar N-[(5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina en bruto 3-ilo)metilo] acetamida (0,040 g. 70%). LCMS calculada para C16 H¹⁷N⁴O4 (M+H)⁺ : m/z = 329,1; encontrado: 329,0

Paso 3. N-[(5-Amino-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-3-ilo)metilo] acetamida

N-[(5-Nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ilo)metilo] acetamida (0,040 g. 0,122 mmol) se disolvió en etanol (5 ml) en una botella Parr y desgasificada con nitrógeno, seguido de la adición de catalizador de paladio (10% sobre carbono) (10 mg, 0,09 mmol). El recipiente de reacción se cargó a 50 PSI con hidrógeno y se agitó durante 2 h. La mezcla se filtró y se concentró para dar N-/(5-amino-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ilo)metilo]acetamida bruta (0,040 g, 80%). LCMS calculada para C16H19N⁴O2 (M+H)⁺ : m/z = 299,1; encontrado: 299,0.

Paso 4. N-/(2-Oxo-4-piridina-2-ilo- 1,2,4,5-tetrahidroimidazo/1,5,4-dé][ 1,4]benzoxazina-4-ilo)metilo]acetamida

Trifosgeno (20 mg, 0,07 mmol) se añadió a una mezcla de N-[(5-amino-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ilo)metilo]acetamida (50 mg, 0,2 mmol), tetrahidrofurano (5 ml) y N,N-diisopropiletilamina (60 pl) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante 1 h, luego se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar N-/(2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo en bruto[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo)metilo]acetamida (0,040 g. 70%). LCMS calculada para C47H¹⁷N⁴O3 (M+H)⁺ : m/z = 325,1; encontrado: 325,1.

Paso 5. N-/(7-Bromo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo/1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo)metilo]acetamida

N-bromosuccinimida (40 mg, 0,2 mmol) se añadió a una mezcla de N-/(2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo)metilo]acetamida en acetonitrilo (5 ml) y ácido acético (3 ml), y se enfrió a 0°C. La reacción se agitó durante 1 h, se concentró para eliminar el ácido acético residual y se repartió entre acetato de etilo y bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar N-/(7-bromo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo)metilo]acetamida (0,040 g. 60%). LCMS calculada para C17 H16BrN4O3 (M+H)+: m/z = 403,1, 405,1; encontrado: 402,9, 405,0.

Paso 6. N-{[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo/1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]metilo}acetamida 2,2,2-trifluoroacetato

N-/(7-Bromo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo)metilo]acetamida (20 mg, 0,05 mmol) se combinó en 1,4-dioxano (2 ml) con potasio (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo) (trifluoro) borato (16 mg, 0,077 mmol) y carbonato de potasio (10 mg, 0,1 mmol) en agua (1ml) y se desgasificó con nitrógeno. Se añadió el complejo catalizador [1,1 ’-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) con diclorometano (1:1) (7 mg, 0,008 mmol) y la reacción se agitó a 110°C durante 5 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, en cuyo momento se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo un gradiente de agua: acetonitrilo tamponado a pH 2 con TFA para dar N-{[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]metilo}acetamida como un sólido blanquecino (0,010 g, 50%) LCMS calculada para C22H22N5O4 (M+H)+: m/z = 420,1; encontrado: 420,1.

Ejemplo de Referencia 73

4-(Am¡nomet¡lo)-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona b¡s(2,2,2-tr¡fluoroacetato)

N-{[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo] se disolvió metilo}acetamida (10 mg, 0,02 mmol) en tetrahidrofurano (1ml) y ácido clorhídrico concentrado (200 pl, 6 mmol) en agua (800 pl). La reacción se calentó a 100°C durante 4 h y luego se purificó sin tratamiento previo mediante HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo un gradiente de agua: acetonitrilo tamponado a pH 2 con TFA para dar 4-(aminometilo)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como un sólido blanquecino (0,0045 g, 40%). LCMS calculada para C²⁰H20N5O3 (M+H)⁺: m/z = 378,1; encontrado: 378,1. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d^s ) 5 11,40 (s, 1H), 8,68 - 8,58 (m, 1H), 8,20 (sa, 2H), 7,84 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,48 - 7,37 (m, 1H), 7,16 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,73 (d, 1H), 4,41 (d, 1H), 4,12 - 3,97 (m, 1H), 3,75 - 3,58 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,00 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 74

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-oxo-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-4-carboxamida 2,2,2-tr¡fluoroacetato

5-Nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carbonitrilo (100 mg, 0,4 mmol) a una mezcla de óxido de aluminio en agitación vigorosa (100 mg, 1 mmol) y ácido metanosulfónico (2 ml, 30 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó luego a 120°C durante 20 minutos, se dejó enfriar a temperatura ambiente y se repartió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó por FCC sobre gel de sílice eluyendo un gradiente de hexano: acetato de etilo para dar 5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carboxamida como un aceite transparente (0,040 g. 40%). LCMS calculada para C¹⁴H13N⁴O4 (M+H)⁺ : m/z = 301,1; encontrado: 301,1.

Paso 2. 5-Amino-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-3-carboxamida

Se disolvió 5-nitro-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carboxamida (0,040 g, 0,13 mmol) en metanol (5 ml) en una botella Parr y desgasificada con nitrógeno, seguido de la adición de paladio (10% en carbono) (20 mg, 0,2 mmol). El recipiente de reacción se cargó a 50 PSI con hidrógeno y se agitó durante 2 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró para dar 5-amino-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carboxamida bruta como un vidrio (0,040 g. 100%). LCMS calculada para C¹⁴H¹⁵N⁴O2 (M+H)⁺ : m/z = 271,1; encontrado: 271,1.

Paso 3. 2-Oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-dé][1,4]benzoxazina-4-carboxamida

Trifosgeno (20 mg, 0,07 mmol) se añadió a una solución de 5-amino-3-piridina-2-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-carboxamida (40 mg, 0,2 mmol) en tetrahidrofurano (5 ml) y W,W-diisopropiletilamina (60 gl, 0,3 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante 1 hora y luego se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo en bruto[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida (0,040 g. 80%). LCMS calculada para C¹⁵H13N⁴O3 (M+H)⁺: m/z = 297,1; encontrado: 297,1.

Paso 4. 7-Bromo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida

Se añadió W-bromosuccinimida (40 mg, 0,2 mmol) a una solución de 2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida, acetonitrilo (5 ml) y ácido acético (3 ml) y se enfría a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h y luego se concentró para eliminar el ácido acético residual. El residuo resultante se repartió entre acetato de etilo y bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 7-bromo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo en bruto[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida (0,040 g. 60%). LCMs calculada para C15H12BrN4O3 (M+H)+: m/z = 375,1,377,1; encontrado: 375,0, 376,9.

Paso 5. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo- 1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida 2,2,2-trifluoroacetato

7-Bromo-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-carboxamida (20 mg, 0,05 mmol) se combinó en 1,4-dioxano (2 ml) con borato de potasio (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo) (trifluoro) (16 mg), 0,077 mmol) y carbonato de potasio (10 mg, 0,1 mmol) en agua (1ml) se desgasificó con nitrógeno. Se añadió el catalizador [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), complejo con diclorometano (1:1) (7 mg, 0,008 mmol) y se desgasificó con nitrógeno. La reacción se agitó a 110°C durante 5 h, se dejó enfriar a temperatura ambiente y se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar el producto bruto. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo un gradiente de agua: acetonitrilo tamponado a pH 2 para dar 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5 tetrahidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-4-carboxamida como un sólido blanquecino (0,010 g. 50%). LCMS calculada para C²⁰H18N5O4 (M+H)⁺: m/z = 392,1; encontrado: 392,1. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-a^fe) 5 11,04 (s, 1H), 8,56 - 8,48 (m, 1H), 7,83 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,78 - 7,70 (m, 2H), 7,52 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,42 - 7,32 (m, 1H), 6,83 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,76 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,71 (d, 1H), 2,23 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 79

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-[1-(met¡lsulfon¡l)p¡per¡d¡na-2-¡lo]-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona

La amina 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piperidina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (0,05 g, 0,14 mmol) (Ejemplo 63) se disolvió en cloruro de metileno (2,0 ml) y W,W-diisopropiletilamina (0,049 ml, 0,28 mmol) a ta bajo nitrógeno. Se añadió cloruro de metanosulfonilo (0,010 ml, 0,14 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente. Después de agitarse durante 1 h, la reacción se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua, salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar el producto bruto como un aceite oscuro. El producto se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 eluyendo agua: gradiente de acetonitrilo tamponado pH 2 con TFA para dar 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-[1-(metilsulfonil)piperidina-2-ilo]-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona como dos fracciones: Ejemplo 79, Pico 1 como un residuo sólido (0,015 g, 26%) LCMS calculada para C²⁰H25N⁴O5 S (M+H)⁺ : m/z = 433,1; encontrado: 433,2. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-afe) 510,69 (s, 1H), 6,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,89 - 4,65 (m, 3H), 4,4-3,9 (m, 2H), 3,62 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,96 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,73 - 1,51 (m, 3H), 1,41 (m, 1H), 1,1 (m, 1H).

Ejemplo 79, Pico 2 como un residuo sólido (0,010 g, 18%). LCMS calculada para C²⁰H25 N⁴O⁴S (M+H)⁺ : m/z = 433,1; encontrado: 433,2.

Ejemplos de Referenc¡a 75-87

Los procedimientos experimentales usados para preparar los compuestos de los Ejemplos 75 a 87 se resumen en la Tabla 3 a continuación.

Tabla 3

Ejemplo de Referencia 88

(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-2-v¡n¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na

(4Sj-2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina (277 mg, 0,755 mmol), 4,4,5,5-tetrametilo-2-vinilo-1, 3,2-dioxaborolano (0,19 ml, 1,1 mmol) [Aldrich, cat. n° 633348] y fosfato de potasio (0,3 g, 2 mmol) [Aldrich, cat. n° P5629], se disolvieron en agua (2,4 ml) y 1,4-dioxano (10 ml). La mezcla de reacción se desoxigenó con nitrógeno y diciclohexilo (2’,4’,6'-triisopropilbifenilo-2-ilo)fosfina-(2’-aminobifenilo-2-ilo) (cloro)paladio (1:1) (0,03 g, 0,04 mmol) [Aldrich, cat. n° 741825] fue agregado. La mezcla resultante se desoxigenó con nitrógeno y se calentó a 80°C durante 3 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se añadió acetato de etilo y la mezcla se lavó con agua y salmuera, luego se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida eluyendo acetato de etilo en hexanos (75-100%, acetato de etilo que contenía MeOH al 20%) para proporcionar el producto deseado (0,21 g, 78%). LCMS para C21H19O2N4 (M+H)⁺ : calculado m/z = 359,2; encontrado 359,3; ¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 58,61-8,53 (m, 1H), 7,74 (m, 1H), 7,39 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,34 (dd, J = 7,7, 4,8 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 6,34 (dd, J = 17,5, 1,0 Hz, 1H), 6,09 (dd, J = 2,5 Hz, 2H), 5,68 (dd, J = 11,4, 1,0 Hz, 1H), 4,96 (dd, J = 11,6, 2,1 Hz, 1H), 4,64 (dd, J = 11,6, 3,1 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,15 (s, 3H).

Ejemplo de Referenc¡a 89

(1R)-1-[(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]etano-1,2-d¡ol

(4Sj-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-2-vinilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina (40 mg, 0,1 mmol) se disolvió en alcohol ferc-butílico (4ml) y agua (4ml). A la solución resultante, la mezcla de A-D mezcla p (300 mg, 0,7 mmol) [Aldrich, cat. n° 392766] se añadió a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó durante la noche. Se añadió sulfito de sodio acuoso saturado (2 ml) y la suspensión se agitó durante 15 min a temperatura ambiente. La mezcla se extrajo luego con diclorometano. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el producto deseado (0,021 g, 50%). LCMS para C21H21O4N4 (M+H)+: calculado m/z = 393,2; encontrado 393,2.

Ejemplo de Referenc¡a 90

1-[(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]etanol

Paso 1. (4S)-7-(3,5-d\me\\\isoxazoi-4-iio)-4-piridina-2-iio-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-dé\[1,4]benzoxazina-2-carbaidehído

(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-2-vinilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de\[1,4\benzoxazina (0,05 g, 0,1 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (1,7 ml). La solución resultante se enfrió a 0°C, luego una solución de tetraóxido de osmio 0,16 M en agua (0,3 ml, 0,04 mmol) [Aldrich, cat. n° 251755] y metaperiodato de sodio (140 mg, 0,66 mmol) [Aldrich, cat. n° S1878\ en agua (0,1 ml) fueron añadidos. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 1 h. La reacción se interrumpió con sulfito de sodio acuoso saturado (10 ml) durante 10 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de un tapón de Celite y el tapón se enjuagó con diclorometano. La capa orgánica se concentró al vacío. El residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida eluyendo acetato de etilo en hexanos (75-100%, acetato de etilo que contenía 20% de MeOH) para proporcionar el producto deseado (0,053 g, 100%). LCMS para C²⁰H17 O³ N⁴ (M+H)⁺ : calculado m/z = 361,1; encontrado 361,2.

Paso 2. 1-[(4S)-7-(3,5-d'imetilisoxazoi-4-iio)-4-pirídina-2-iio-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-dé\[1,4\benzoxazina-2-iio]etanoi

A la solución de ^S ^-^^ -d im e tilisoxa zoW -ilo ^ -p ir id ina ^ -ilo ^^ -d ih id ro im id azo ^^^ -de\[1,4\benzoxazina-2-carbaldehído (8 mg, 0,02 mmol) en tetrahidrofurano (1ml) a 0°C, cloruro de metilmagnesio 3,0 M en THF (0,01 ml, 0,04 mmol) [Aldrich, Cat. N° 189901\ se agregó gota a gota. Después de continuar agitando durante 30 min a 0°C, la reacción se interrumpió mediante la adición de cloruro de amonio acuoso saturado (0,5 ml) gota a gota. La mezcla resultante se diluyó con acetato de etilo/salmuera (3:1), y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el producto deseado como una mezcla de diastereómeros (4mg, 50%). LCMS para C21H21O³ N⁴ (M+H)⁺ : calculado m/z = 377,2, encontrado 377,1.

Ejemplo de Referencia 91

(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-W,W-d¡met¡lo-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-carboxamida

Ejemplo de Referencia 92

(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-dih¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na

Ejemplo de Referenc¡a 93

ferc-but¡lo (4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2-carbox¡lato

(4Sj-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-2-carbaldehído (15 mg, 0,042 mmol) y clorhidrato de dimetilamina (0,0041 g, 0,050 mmol) [Aldrich, cat. n° 126365] se disolvieron en acetonitrilo (1,5 ml) a temperatura ambiente. A la mezcla resultante, sulfato de cobre (II) pentahidrato (0,0005 g, 0,002 mmol) [Aldrich, cat. n° 209198], carbonato de calcio (0,0046 g, 0,046 mmol) [Aldrich, cat. n° C6763] e hidroperóxido de ferc-butilo 6,0 M en decano (0,0076 ml, 0,046 mmol) [Aldrich, cat. n° 416665] se agregaron. El recipiente de reacción se tapó, se desgasificó y se dejó agitar a 40°C durante 10 horas. Después de la filtración a través de Celite, la solución se concentró y el residuo resultante se purificó por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contenía hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó los siguientes tres compuestos:

Ejemplo 91 (7,2 mg, 43%) LCMS para C22H22O3N5 (M+H)⁺ : calculado m/z = 404,2; encontrado 404,2. ¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 58,49 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 7,81-7,71 (m, 1H), 7,46 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,37 - 7,28 (m, 1H), 7,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 6,15 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 5,48 (s, 1H), 4,79 (dd, J = 11,8, 3,9 Hz, 2H), 4,70 (dd, J = 11,7, 3,2 Hz, 1H), 3,38 (s, 3H), 2,94 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,15 (s, 3H).

Ejemplo 92 (2,4 mg, 17%) LCMS para C19H¹⁷O2N4 (M+H)⁺ : calculado m/z = 333,1; encontrado 333,2¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 58,61 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,83 (dd, J = 7,8 Hz, 1H), 7,48 - 7,36 (m, 2H), 7,14 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,06 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 5,94 (s, 1H), 4,82-4,74 (m, 2H), 4,74-4,67 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,18 (s, 3H).

Ejemplo 93 (3,2 mg, 18%) LCMS para C24H25O4N4 (M+H)⁺ : calculado m/z = 433,2, encontrado 433,2; ¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 58,52 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,77 - 7,67 (m, 1H), 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,38 - 7,29 (m, 1H), 7,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,40 (s, 1H), 5,00 (dd, J = 11,7, 3,1 Hz, 1H), 4,69 (dd, J = 11,8, 3,1 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,47 (s, 9H).

Ejemplo de Referencia 94

(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-(morfol¡na-4-¡lcarbon¡l)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 91, usando morfolina [Aldrich, cat. n° 252360] como el nucleófilo. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el compuesto del título. LCMS para C24H24O4N5 (M+H)⁺ : calculado m/z = 446,2, encontrado 446,1; ¹H Rm N (400 MHz, CD³OD) 58,51 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 7,78 (m, 1H), 7,47 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,34 (dd, J = 7,1, 5,4 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,20 (m, 1H), 4,81 (dd, J = 11,8, 3,7 Hz, 1H), 4,72 (dd, J = 11,7, 3,3 Hz, 1H), 4,12 (s, 2H), 3,83 - 3,69 (m, 2H), 3,59 (t, J = 8,1 Hz, 4H), 2,16 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).

Ejemplo de Referenc¡a 95

(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-n-met¡lo-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-carboxam¡da

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 91, usando metilamina 2,0 M en tetrahidrofurano [Aldrich, Cat. n° 395056] como el nucleófilo. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el compuesto del título. LCMS para C21H20O³N⁵ (M+H)⁺ : calculado m/z = 390,2, encontrado 390,2; ¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 58,49 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,49 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,28 (dd, J = 6,9, 4,9 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,56 - 6,50 (m, 1H), 4,96 (dd, J = 11,7, 3,1 Hz, 1H), 4,65 (dd, J = 11,7, 3,0 Hz, 1H), 2,88 (s, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,13 (s, 3H).

Ejemplo de Referenc¡a 96

(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡ne-2-carboxam¡da

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 91, usando hidrocloruro de hidroxilamina [Aldrich, cat. n° 159417] como el nucleófilo. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el compuesto del título. Lc MS para C²⁰H18O³N⁵ (M+H)⁺ : calculado m/z = 376,1, encontrado 376,2; ¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 58,49 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,28 (dd, J = 6,9, 4,9 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,33 (m, 1H), 4,96 (dd, J = 11,7, 3,1 Hz, 1H), 4,65 (dd, J = 11,7, 3,0 Hz, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,13 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 97

terc-Butilo 4-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazina-2-ilo]-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato

(4Sj-2-Cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina (80 mg, 0,2 mmol), terc-butilo 4-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato (100 mg, 0,4 mmol) [Aldrich, cat. n° CDS015890] y fosfato de potasio (0,09 g, 0,4 mmol) [Aldrich, cat. n° P5629] se suspendieron en 1,4-dioxano (3 ml) y agua (0,70 ml). La mezcla resultante se desgasificó con nitrógeno durante 10 minutos y diciclohexilo (2’,4’,6'-triisopropilbifenilo-2-ilo)fosfina-(2'-aminobifenilo-2-ilo) (cloro)paladio (1:1) (0,008 g, 0,01 mmol) [Aldrich, cat. n° 741825] fue agregado, seguido de 10 min adicionales de desgasificación. La mezcla de reacción se selló y se calentó a 50°C durante 16 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida eluyendo acetato de etilo en hexanos (75-100%) para proporcionar el producto deseado (98 mg, 90%). LCMS para C29H32O4N5 (M+H)⁺ : calculado m/z = 514,2, encontrado 514,2; ¹H RMN (300 MHz, CD³OD) 58,54 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 7,72 (m, 2H), 7,44 -7,27 (m, 2H), 7,10 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,14 (s, 1H), 6,07 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,78 (dd, J = 11,6, 2.9 Hz, 1H), 4,59 (dd, J = 11,6, 3,1 Hz, 1H), 4,11-3,72 (m, 2H), 3,51 (d, J = 16,0 Hz, 2H), 2,60 (s, 2H), 2,25 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1,42 (s, 9H).

Ejemplo de Referencia 98

terc-Butilo 3-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazina-2-ilo]-2,5-dihidro-1H-pirrol-1-carboxilato

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 97, usando ferc-butilo 3-(4,4,5,5-tetrametilo- 1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)-2,5-dihidro-1H-pirrol-1-carboxilato [Combi-Blocks, cat. n° FM2879] como el reactivo de acoplamiento Suzuki. El producto bruto se purificó por cromatografía instantánea con acetato de etilo en hexanos (75-100%) para proporcionar el compuesto del título. LCMS para C28H30O4N5 (M+H) ⁺ : calculado m/z = 500,2, encontrado 500,4; ¹ H RMN (400 MHz, CD ³ OD) 58,64 - 8,52 (m, 1H), 7,78 - 7,67 (m, 1H), 7,43 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,39 - 7,29 (m, 1H), 7,16 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,70 (m, 1H), 6,30 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,95 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,63 (dd, J = 11,6, 3,1 Hz, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,32 (d, J = 17,3 Hz, 1H), 4,21 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,51 (s, 6H), 1,48 (s, 3H).

Ejemplo de Referencia 99

terc-Butilo 5-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 97, usando ferc-butilo 5-(4,4,5,5-tetrametil--1,3,2-dioxaborolano-2-ilo)-3,6-dihidropiridina-1 (2H)-carboxilato [Anisyn, cat. n° CT603191] como el reactivo de acoplamiento Suzuki. El producto bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida eluyendo acetato de etilo en hexanos (75-100%) para proporcionar el compuesto del título. LCMS para C29H32O4N5 (M+H) ⁺ : calculado m/z = 514,2, encontrado 514,2; ¹ H RMN (400 MHz, CD ³ OD) 58,56 (m, 1H), 7,74 (dd, J = 7,8, 1,7 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,33 (dd, J = 6,9, 5,0 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,30 (s, 1H), 6,08 (t, J = 2,8 Hz, 1H), 4,81 (dd, J = 11,6, 2,9 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 11,6, 3,1 Hz, 1H), 4,39 (s, 2H), 4,14 -4,02 (m, 2H), 3,50 (m, 1H), 3,31 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 1,47 (s, 9H).

Ejemplo de Referencia 100

terc-Butilo 4-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]piperidina-1 -carboxilato

(ferc-Butilo 4-[(4Sj-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato (80 mg, 0,2 mmol) se disolvió en metanol (6 ml) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno durante 15 minutos, seguido de la adición de paladio sobre carbono (30 mg, 0,02 mmol) [Aldrich, cat. n° 130108]. Después de tres vacíos/gas nitrógeno ciclos de recarga, se cargó gas de hidrógeno de 1 atm a la mezcla con un globo.Después de agitarse durante 2 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró a través de Celite y el filtro se lavó posteriormente con metanol (30 ml). se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía instantánea eluyendo acetato de etilo en hexanos (75-100%) para proporcionar el producto deseado (48 mg, 60%). LCMS para C29H34O4N5 (M+H) ⁺ : calculado m/z = 516,3, encontrado 516,2; ¹ H RMN (400 MHz, CD ³ OD) 58,59 - 8,49 (m, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,36 - 7,28 (m, 2H), 7,06 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,00 (m, 1H), 4,89 (dd, J = 11,7, 3,1 Hz, 1H), 4,60 (dd, J = 11,6, 3,1 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 2,95 (ddd, J = 11,8, 8,3, 3,6 Hz, 1H), 2,88 - 2,51 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,06 - 1,94 (m, 1H), 1,92 - 1,66 (m, 2H), 1,44 (s, 9H).

Ejemplo de Referencia 101A

terc-Butilo 3-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]pirrolidina-1-carboxilato (d¡astereo¡sómero 1)

Ejemplo de Referencia 101B

terc-Butilo 3-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]pirrolidina-1-carboxilato (diastereoisómero 2)

Los compuestos del título se prepararon por métodos análogos al Ejemplo 99, usando ferc-butilo 3-[(4Sj-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]-2,5-dihidro-1 H-pirrol-1 -carboxilato como partida material. La purificación por LCMs preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el compuesto del título como dos diastereoisómeros.

Diastereoisómero 1. LCMS preparativa pico I. LCMS para C28H32O ⁴ N ⁵ (M+H) ⁺: calculado m/z = 502,2; encontrado 502,1; ¹ H RMN (400 MHz, CD ³ OD) 58,57 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,37 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 7,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,93 - 6,77 (m, 1H), 6,04 (s, 1H), 4,96 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,64 (dd, J = 11,7, 2,9 Hz, 1H), 3,63 (d, J = 5,0 Hz, 2H), 3,38 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,45 (s, 3H), 1,39 (s, 6H).

Diastereoisómero 2. LCMS preparativa Pico II. LCMS para C28H32O ⁴ N ⁵ (M+H) ⁺ : calculado m/z = 502,2; encontrado 502,1; ¹ H RMN (400 MHz, CD ³ OD) 58,57 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,76 (m, 1H), 7,42 - 7,29 (m, 2H), 7,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,91 -6,73 (m, 1H), 6,04 (s, 1H), 4,93 (dd, J = 11,7, 2,0 Hz, 2H), 4,64 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,96 - 3,82 (m, 1H), 3,80 - 3,49 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,11-1,82 (m, 2H), 1,47 (s, 9H).

Ejemplo de Referencia 102

ferc-Butilo 3-[(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]piperidina-1-carboxilato

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 100, usando ferc-butilo 5-[(4Sj-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-dih¡dro¡m¡dazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-2-ilo]-3,6-dihidropiridina-1 (2H)-carboxilato como material de partida. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el compuesto del título. LCMS para C29H34O⁴N⁵ (M+H)⁺ : calculado m/z = 516,3, encontrado 516,2.

Ejemplo de Referencia 103

(4S>2-(1-Acetilpiperidina-4-ilo)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina

ferc-Butilo 4-[(4Sj-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡rid¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-2-¡lo]-3,6-dih¡drop¡r¡d¡na-1 (2H)-carboxilato (3 mg, 0,006 mmol) se disolvió en metanol (0,5 ml) a temperatura ambiente, seguido de la adición de cloruro de hidrógeno 4,0 M en dioxano (0,5 ml, 2 mmol) [Aldrich, cat. n° 345547]. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Los disolventes se eliminaron bajo un flujo de gas nitrógeno. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el compuesto del título (1,8 mg, 70%). LCMS para C24H26O2N5 (M+H)+: calculado m/z = 416,2, encontrado 416,2.

Ejemplos de Referencia 104-108

Los procedimientos experimentales usados para preparar los compuestos de los Ejemplos 104 a 108 en la Tabla 4 fueron análogos a los usados para la síntesis del compuesto del Ejemplo 103.

Tabla 4

Ejemplo de Referencia 109

(4S>2-(1-Acet¡lp¡per¡d¡na-4-¡lo)-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na

A la solución de ferc-butilo 4-[(4Sj-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-2-ilo]piperidina-1-Se añad¡ó carbox¡lato (8,8 mg, 0,017 mmol) en metanol (1ml) cloruro de h¡drógeno 4,0 M en dioxano (1ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. Los disolventes se evaporaron luego bajo un vapor de nitrógeno. Se añadió trietilamina (0,23 ml, 1,7 mmol) al residuo resultante, seguido de cloruro de acetilo (0,029 ml, 0,41 mmol). La mezcla se agitó entonces bajo una corriente de nitrógeno durante 5 minutos a temperatura ambiente, seguido de la eliminación de disolventes y reactivos residuales. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el compuesto del título (6,3 mg, 81%). LCMS para C26H28O³N⁵ (M+H)⁺ : calculado m/z = 458,2, encontrado 458,2.

Ejemplos de Referencia 110-121

Los procedimientos experimentales utilizados para preparar los compuestos de los Ejemplos 110 a 121 en la Tabla 5 fueron análogos a los utilizados para la síntesis del Ejemplo 109.

Tabla 5

Ejemplo de Referencia 120

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-fen¡lo-5,6-d¡h¡dro-4H-¡m¡dazo[4,5,1-//]qu¡nol¡na-2(1H)-ona

Paso 1.2-Fenilo-1,2,3,4-tetrahidroquinolina

Una solución de 2-fenilquinolina, (0,248 g, 1,21 mmol) [Aldrich, cat. n° 299650] en ácido acético (6,0 ml) se trató con complejo de borano-piridina (0,605 ml, 5,99 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (50 ml) y se lavó con solución de hidróxido de sodio 3 M (70 ml), agua (20 ml) y salmuera (20 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para dar un aceite crudo. La purificación por cromatografía instantánea en columna (100% de hexanos a 25% de acetato de etilo/hexanos) dio el producto deseado (0,247 g, 98%) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C15H16N (M+H)+: m/z = 210,1; encontrado: 210,1.

Paso 2. N-metoxi-2-fenilo-3,4-dihidroquinolina-1 (2H)-carboxamida

Una solución de 2-fenilo-1,2,3,4-tetrahidroquinolina (2,13 g, 10,2 mmol) y trietilamina (4,26 ml, 30,5 mmol) en tetrahidrofurano (30,0 ml) se añadió a una solución de trifosgeno (3,20 g, 10,8 mmol) en tetrahidrofurano (38,0 ml) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 1 h, se trató con hidrocloruro de metoxilamina (1,70 g, 20,3 mmol) y trietilamina (4,26 ml, 30,5 mmol), y se agitó a temperatura ambiente durante 19 h adicionales. La mezcla de reacción se diluyó con agua (200 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para dar un aceite crudo. La purificación por cromatografía instantánea en columna (100% de hexanos a 70% de acetato de etilo/hexanos, el acetato de etilo que contiene 5% de metanol) dio el producto deseado (2,25 g, 78%) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C17H19N²O2 (M+H)⁺: m/z = 283,1; encontrado: 283,1.

Paso 3. 1-Metoxi-4-fenilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolina-2(1H)-ona

Una solución de N-metoxi-2-fenilo-3,4-dihidroquinolina-1(2H)-carboxamida (0,869 g, 3,08 mmol) en cloroformo (23,2 ml) a 0°C se trató con [/,/bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (1,59 g, 3,69 mmol) en cuatro porciones durante 20 min. La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 30 min y a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se diluyó luego con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (40 ml) y se extrajo con diclorometano (50 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para dar un aceite crudo. La purificación por cromatografía ultrarrápida en columna (100% de hexanos a 70% de acetato de etilo/hexanos, el acetato de etilo que contenía 5% de metanol) dio el producto deseado (0,576 g, 66%) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C17H¹⁷N²O2 (M+H)⁺ : m/z = 281,1; encontrado: 281,1.

Paso 4. 4-Fenilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolina-2(1H)-ona

Una suspensión de 1-metoxi-4-fenilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-i/]quinolina-2(1H)-ona (0,575 g, 2,05 mmol) en etanol (35,9 ml, 615 mmol) se calentó para disolver los sólidos residuales y la solución resultante se enfrió a temperatura ambiente. La solución se trató con ácido acético (0,233 ml, 4,10 mmol), se desgasificó con nitrógeno, se trató con catalizador de paladio (0,575 g, 100% en peso) (10% de Pd sobre carbono, tipo Degussa) y se hidrogenó durante 17 h. La mezcla de reacción se filtró y el catalizador se lavó con etanol y metanol. El filtrado se concentró luego para dar el producto deseado (0,436 g, 85%) como una mezcla racémica que se usó sin purificación adicional. LCMS calculada para C16H¹⁵N²O (M+H)⁺: m/z = 251,1; encontrado: 251,1.

Paso 5. 7-Bromo-4-fenilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolina-2(1H)-ona

Una suspensión de 4-fenilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-i/]quinolina-2(1H)-ona (0,200 g, 0,799 mmol) en acetonitrilo (10,0 ml) y ácido acético (2,42 ml) se calentó para disolver los sólidos residuales y la solución resultante se enfrió a 0°C. La solución resultante se trató con una solución de W-bromosuccinimida (0,144 g, 0,807 mmol) en acetonitrilo (3,0 ml), se agregó gota a gota, a 0°C y posteriormente se agitó a 0°C durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró hasta un residuo que se disolvió en cloroformo (50 ml) y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (40 ml) y salmuera (20 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para dar un sólido bruto. La purificación por cromatografía de columna instantánea (100% de hexanos a 50% de acetato de etilo/hexanos, el acetato de etilo que contiene 5% de metanol) dio el producto deseado (0,177 g, 67%) como una mezcla racémica junto con otro isómero bromado adicional, 8-bromo-4-fenilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-i/]quinolina-2(1H)-ona (que no se separó) en una proporción de 4,4:1. LCMS calculada para C16H^u BrN²O (M+H)⁺ : m/z = 329,0, 331,0; encontrado: 329,0, 331,0.

Paso 6. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolina-2(1H)-ona

Una mezcla de 7-bromo-4-fenilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolina-2(1H)-ona (0,050 g, 0,15 mmol) (4,4: 1 mezcla de isómeros con 8-bromo-4-fenilo-5,6-dihidro-4 H- imidazo[4,5,1-i/]quinolina-2(1 H)-ona como el isómero menor), (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)ácido borónico (10,7 mg, 0,0759 mmol) y carbonato de cesio (99,0 mg, 0,304 mmol) en 1, 2-dimetoxietano (1,21 ml) y agua (0,303 ml) se desgasificó con nitrógeno durante 5 minutos. La mezcla de reacción se trató con PEPPSI-IPr (5,2 mg, 0,0076 mmol) [Aldrich, cat. n° 669032], se desgasificó con nitrógeno durante 5 min y se calentó a 90°C durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó luego con acetato de etilo (25 ml) y agua (20 ml). La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para dar un residuo crudo. La purificación mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene ácido trifluoroacético al 0 ,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (14,7 mg, 28 %) como una mezcla racémica. ¹H RMN (500 MHz, CDCta) 510,00 (s, 1H), 7,34 - 7,20 (m, 3H), 7,08 - 6,95 (m, 3H), 6 ,88 - 6,76 (m, 1H), 5,54 (s, 1H), 2,45 - 1,96 (m, 10H); LCMS calculada para C21H20N³O2 (M+H)⁺: m/z = 346,2; encontrado: 346,1.

Ejemplo de Referencia 121

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-1-met¡lo-4-fen¡lo-5,6-d¡h¡dro-4H-¡m¡dazo[4,5,1-//]qu¡nol¡na-2(1 H)-ona

Una solución de 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-fenilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-//]quinolina-2(1 H)-ona (10,7 g, 0,031 mmol) en W,W-dimetilformamida (0,50 ml) se trató con carbonato de cesio (20,2 g, 0,062 mmol) seguido de yoduro de metilo (2,9 pl, 46,5 pmol) y agitado a temperatura ambiente durante 16 h. La purificación mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contenía ácido trifluoroacético al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (8,2 mg, 74%) como una mezcla racémica. ¹H RMN (400 MHz, CDCl^a) 57,35-7,20 (m, 3H), 7,03 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 6,99 - 6,93 (m, 1H), 6,93 - 6,84 (m, 1H), 5,53 (s, 1H), 3,49 (s, 3H), 2,48 - 2,11 (m, 7H), 2,09 - 1,84 (m, 3H); LCMS calculada para C22H22N³O2 (M+H)⁺ : m/z = 360,2; encontrado: 360,1.

Ejemplo de Referencia 122

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-1-metox¡-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-5,6-d¡h¡dro-4H-¡m¡dazo[4,5,1-//]qu¡nol¡na-2(1 H)-ona trifluoroacetato

Paso 1.2-P/ríd/na-2-/lqu/nol/na

Una solución de 2-bromoquinolina (1,00 g, 4,81 mmol) [Aldrich, cat. n° 716278] en W,W-dimetilformamida (10,0 ml) (desgasificado con nitrógeno) se trató con 2-(tributilstanil)piridina (1,83 ml, 4,81 mmol) y cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,337 g, 0,481 mmol) La mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno durante 5 min y se calentó a 110°C durante 17 h. La mezcla de reacción se diluyó luego con agua (50 ml) y éter (50 ml) y se filtró sobre Celite. Los sólidos se lavaron con éter adicional (150 ml). El filtrado se lavó con agua (150 ml) y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para dar un residuo crudo. La purificación por cromatografía instantánea en columna (100% de hexanos a 70% de acetato de etilo/hexanos, el acetato de etilo que contiene 5% de metanol) dio el producto deseado (0,771 g, 78%). LCMS calculada para C¹⁴H¹¹N2 (M+H)⁺: m/z = 207,1; encontrado: 207,1.

Paso 2. 2-p/r/d/na-2-/lo-1,2,3,4-tetrah/droqu/nol/na

Una suspensión de 2-piridina-2-ilquinolina (0,767 g, 3,72 mmol), 1,4-dihidro-3,5-dicarbetoxi-2,6-dimetilpiridina (2,17 g, 8,55 mmol) y el fosfato de difenilo hidrógeno (0,0093 g, 0,037 mmol) en benceno (18,6 ml) se calentaron a 60°C durante 10 h. La mezcla de reacción se trató con 2-fenilquinolina (0,305 g, 1,49 mmol) y se calentó a 60°C durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró luego hasta un sólido bruto. La purificación por cromatografía instantánea en columna (100% de hexanos a 50% de acetato de etilo/hexanos [el acetato de etilo contenía 5% de metanol]) dio el producto deseado (0,735 g, 94%) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C¹⁴H¹⁵N2 (M+H)⁺ : m/z = 211,1; encontrado: 211,1.

Paso 3. N-metoxi-2-piridina-2-ilo-3,4-dihidroquinolina-1 (2H)-carboxamida

Una solución de 2-piridina-2-ilo-1,2,3,4-tetrahidroquinolina (0,723 g, 3,44 mmol) en cloruro de metileno (10,3 ml) se trató con 4-nitrofenilo metoxicarbamato (0,948 g, 4,47 mmol) (Org Process Res. Dev. 2012, 16, 109-116) seguido de la adición gota a gota de N,N-diisopropiletilamina (1,20 ml, 6,88 mmol), y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla de reacción se vertió luego sobre agua (25 ml) y bicarbonato de sodio saturado (25 ml) y se extrajo con diclorometano (2 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para dar un sólido oleoso crudo. La purificación por cromatografía instantánea en columna (100% de hexanos a 20% de acetato de etilo/hexanos [el acetato de etilo contenía 5% de metanol]) dio el producto deseado (0,923 g, 95%) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C16H18N3O2 (M+H)+: m/z = 284,1; encontrado: 284,0.

Paso 4. 1 -metoxi-4-piridina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1 -ij]quinolina-2( 1 H)-ona

Este compuesto fue sintetizado según el procedimiento del Ejemplo 120, paso 3, usando N-metoxi-2-piridina-2-ilo-3,4-dihidroquinolina-1 (2H)-carboxamida como material de partida. LCMS calculada para C16H16N3O2 (M+H)+: m/z = 282,1; encontrado: 282,0.

Paso 5. 7-Bromo-1 -metoxi-4-piridina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1 -ij]quinolina-2( 1 H)-ona

Este compuesto se sintetizó de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 120, paso 5, usando 1-metoxi-4-piridina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-/j]quinolina-2(1H)-onacomo material de partida. LCMS calculada para C16H15BrN3O2 (M+H)+: m/z = 360,0, 362,0; encontrado: 359,9, 361,9.

Paso 6. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-1-metoxi-4-piridina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolina-2(1H)-ona trifluoroacetato

Una suspensión de 7-bromo-1 -metoxi-4-piridina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-i/]quinolina-2(1 H)-ona (0,132 g, 0,367 mmol) (como una mezcla de isómeros bromados) y fluoruro de cesio (0,195 g, 1,29 mmol) en alcohol terc-butílico (1,22 ml) y agua (0,612 ml) desgasificada con nitrógeno por 10 min. La mezcla de reacción se trató con (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)ácido borónico (0,0518 g, 0,367 mmol) seguido de la adición de 4-(di-terc-butilfosfino)-N,N-dimetilanilina-dicloropaladio (2:1) (5,2 mg, 7,35 gmol). La mezcla se desgasificó con nitrógeno durante 5 min adicionales y se calentó a 80°C durante 1,5 h, momento en el que la mezcla de reacción se trató con fluoruro de cesio (0,0558 g, 0,367 mmol), (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)ácido borónico (0,104 g, 0,735 mmol) y 4-(di-terc-butilfosfino)-N,N-dimetilanilina-dicloropaladio (2:1) (5,20 mg, 0,00735 mmol), desgasificado con nitrógeno y agitado a 100°C durante 14 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (40 ml) y agua (20 ml). La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para dar un residuo crudo. La purificación por cromatografía instantánea en columna (100% de hexanos a 20% de acetato de etilo/hexanos, el acetato de etilo que contiene 5% de metanol) produjo un producto bruto. La purificación adicional mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contenía ácido trifluoroacético al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (95 mg, 53%) como una mezcla racémica. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d⁶) 58,52 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 7,84 (dd, J = 7,5 Hz, 1H), 7,42 - 7,31 (m, 1H), 7,31-7,23 (m, 1H), 7,18 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,04 - 6,90 (m, 1H), 5,44 (s, 1H), 4,02 (s, 3H), 2,54 - 2,46 (m, 3H), 2,45 - 2,31 (m, 2H), 2,29 - 2,16 (m, 2H), 2,08 (d, J = 25,9 Hz, 3H); lCm S calculada para C21H21N⁴O3 (M+H)⁺: m/z = 377,2; encontrado: 377,0.

Ejemplo de Referencia 123

7-(3,5-D¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-5,6-d¡h¡dro-4H-¡m¡dazo[4,5,1-//]qu¡nol¡na-2(1H>ona trifluoroacetato

Paso 1.4-Pirídina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolina-2(1H)-ona

Esto el compuesto se sintetizó de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 120, paso 4, usando 1-metoxi-4-piridina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-/y]quinolina-2(1H)-ona como material de partida. LCMS calculada para C45HuN3O(M+H)+: m/z = 252,1; encontrado: 252,1.

Paso 2. 7-Bromo-4-pirídina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolina-2(1H)-ona

Este compuesto fue sintetizado según el procedimiento del ejemplo 120, paso 5, usando 4-piridina-2-ilo-5,6 -dihidro-4H-imidazo[4,5,1-i/]quinolina-2(1H)-ona como material de partida. LCMS calculada para C¹⁵H13BrN³O(M+H)⁺ : m/z = 330,0, 332,0; encontrado: 329,9, 331,9.

Paso 3. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolina-2(1H)-ona trifluoroacetato Este compuesto se sintetizó de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 120, paso 6, usando 7-bromo-4-piridina-2-ilo-5,6-dihidro-4H-imidazo[4,5,1-iy]quinolina-2(1H)-ona como material de partida. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-d^s) 510,89 (s, 1H), 8,55 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 7,85 (dd, J = 7,3 Hz, 1H), 7,49 - 7,31 (m, 1H), 7,25 - 7,10 (m, 1H), 6,96 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,90 - 6,72 (m, 1H), 5,41 (s, 1H), 2,55 - 2,28 (m, 5H), 2,27 - 1,89 (m, 5H); LCMS calculada para C²⁰H¹⁹N⁴O2 (M+H)⁺ : m/z = 347,1; encontrado: 347,1.

Ejemplo de Referenc¡a 124

7-[5-(H¡drox¡met¡lo)-3-met¡l¡soxazol-4-¡lo]-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2(1H> ona

Paso 1. Prop-2-in-1-ilo benzoato

Una solución de 2-propin-1-ol (10,0 ml, 172 mmol) en cloruro de metileno (496 ml) y la trietilamina (47,9 ml, 344 mmol) a 0°C se trató con cloruro de benzoilo (20,0 ml, 172 mmol), añadido durante un período de 5 min. La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 min, seguido de agitación adicional a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua (300 ml). La capa acuosa se separó y se extrajo con diclorometano (2 x 200 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 x 200 ml) y salmuera (100 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron para dar el producto deseado (27 g, 98%) que se usó sin purificación adicional. LCMS calculada para C10H9O2 (M+H)+: m/z = 161,1; encontrado: 161,0.

Paso 2. (3-Metilisoxazol-5-ilo)metilo benzoato

Una solución de prop-2-in-1-ilo benzoato (26,0 g, 162 mmol) en cloroformo (598 ml) se trató con trietilamina (11,3 ml, 81,2 mmol) y acetaldoxima (14,4 g, 244 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a 0°C, se trató con hipoclorito de sodio (551 ml, 487 mmol) (grado comercial ~5% acuoso), y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 200 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron para dar el producto bruto. La purificación por cromatografía en columna instantánea (100% de hexanos a 30% de acetato de etilo/hexanos) dio el producto deseado (20,1 g, 57%). LCMS calculada para C12H¹²NO3 (M+H)⁺ : m/z = 218,1; encontrado: 218,1.

Paso 3. (4-Bromo-3-metilisoxazol-5-ilo)benzoato de metilo

Una solución de (3-metilisoxazol-5-ilo) benzoato de metilo (20,1 g, 92,4 mmol) en ácido acético (77,3 ml) se trató con W-bromosuccinimida (19,7 g, 111 mmol) y se calentó en un tubo sellado a 90°C durante 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con salmuera y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. La purificación por cromatografía en columna instantánea (100% de hexanos a 20% de acetato de etilo/hexanos) dio el producto deseado (21,6 g, 79%). LCMS calculada para C12H11BrNO3 (M+H)+: m/z = 296,0, 298,0; encontrado: 296,0, 298,0.

Paso 4. {5-[(Benzoiloxi)metilo]-3-metilisoxazol-4-ilo}ácido borónico

Un matraz que contiene cloruro de bis(acetonitrilo)paladio (II) (0,40 g, 1,6 mmol) y 2’-(diciclohexilfosfino)-N,N-dimetilbifenilo-2-amina (2,10 g, 5,34 mmol) se evacuó y se volvió a llenar con nitrógeno (repetido durante tres ciclos). A la adición de (4-bromo-3-metilisoxazol-5-ilo) benzoato de metilo (14,9 g, 50,4 mmol) (como una solución en 1,4-dioxano (32 ml)), le siguió la adición de 1,0 M 4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolano en tetrahidrofurano (85,7 ml) y trietilamina (21,1 ml, 151 mmol). La mezcla resultante se burbujeó con nitrógeno durante 5 minutos y luego se calentó a 100°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó luego con acetato de etilo y agua. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar éster de boronato crudo. La purificación por cromatografía instantánea en columna (100% de hexanos a 40% de acetato de etilo/hexanos) dio el éster de boronato intermedio. El éster de boronato purificado se disolvió en tetrahidrofurano (110 ml), se diluyó con agua (50 ml) y se trató con peryodato de sodio (20,3 g, 94,7 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente durante 15 minutos, se trató con cloruro de hidrógeno 1,0 M en agua (64,0 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se extrajo luego con acetato de etilo (3 x 60 ml), se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el ácido borónico crudo. La recristalización en acetato de etilo/hexanos dio el producto deseado (2,2 g). El filtrado se concentró y el residuo resultante se lavó con hexanos para producir producto adicional (4,85 g) (7,05 g en total, 54% de rendimiento combinado). LCMS calculada para C12H13BNO5 (m H)+: m/z = 262,1; encontrado: 262,1.

Paso 5. [3-Metilo-4-(2-oxo-4-piridina-2il- 1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-dé\[1,4]benzoxazina-7-ilo)isoxazol-5-ilo]benzoato de metilo

Una solución de 7-bromo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de\[1,4\benzoxazina-2(1 H)-ona (687 mg, 2,07 mmol) y {5-[(benzoiloxi)metilo\-3-metilisoxazol-4-ilo}ácido borónico (1,08 g, 4,14 mmol) en 1,4-dioxano (15,7 ml) y agua (4ml) se desgasificó con nitrógeno. La mezcla de reacción se trató con [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno\dicloropaladio (II), complejo con diclorometano (1:1) (253 mg, 0,310 mmol), se desgasificó con nitrógeno y se calentó en un tubo sellado a 80°C durante 30 min, momento en el que la mezcla de reacción se trató con {5-[(benzoiloxi)metilo\-3-metilisoxazol-4-ilo}ácido borónico (1,08 g, 4,14 mmol) y [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno\-dicloropaladio (II), complejo con diclorometano (1:1) (10 mg, 12,2 gmol), desgasificado con nitrógeno y calentado a 80°C durante 30 minutos más. La mezcla de reacción se diluyó luego con acetato de etilo y agua. La capa orgánica se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. La purificación por cromatografía ultrarrápida en columna (30% de acetato de etilo/hexanos a 100% de acetato de etilo [el acetato de etilo contenía 5% de metanol\) dio el producto deseado (0,589 g, 58%) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C26H21N⁴O5 (M+H)⁺ : m/z = 469,1; encontrado: 469,1.

Paso 6. 7-[5-(Hidroximetilo)-3-metilisoxazol-4-ilo]-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de\[1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Una solución de [3-metilo-4-(2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de\[1,4\benzoxazina-7-ilo)isoxazol-5-ilo\benzoato de metilo (15,0 mg, 0,0320 mmol) en tetrahidrofurano (1,0 ml) y metanol (1,0 ml) se trató con hidróxido de litio 2,0 M en agua (0,10 ml, 0,20 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 20 min. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro de hidrógeno 6 N en agua (a pH ~ 2) y luego se concentró. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 30 ml/min) dio el producto deseado (8 mg, 69%) como una mezcla racémica. 1H RMN (300 MHz, DMSO-ds) 58,51 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,77 (ddd, J = 7,7, 7,7, 1,7 Hz, 1H), 7,31 (dd, J = 7,4, 4,9 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,51 (s, 1H), 4,77 (dd, J = 11,4, 1,8 Hz, 1H), 4,42 (dd, J = 11,4, 3,1 Hz, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,15 (s, 1H), 2,06 (s, 3H); LCMS calculada para C19H¹⁷N⁴O4 (M+H)⁺ : m/z = 365,1; encontrado: 365,1.

Ejemplo de Referencia 125

Trifluoroacetato de 7-[5-(Fluorometilo)-3-metilisoxazol-4-ilo]-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona

Una solución de 7-[5-(hidroximetilo)-3-metilisoxazol-4-ilo]-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (15,0 mg, 0,0412 mmol) en cloruro de metileno (0,30 ml) se enfrió a -78°C, se trató con trifluoruro de dimetilaminosulfuro (6,03 mg, 0,0453 mmol) y se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró luego para dar un residuo crudo. La purificación mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene ácido trifluoroacético al 0,1%, a una velocidad de flujo de 30 ml/min) dio El producto deseado (8 mg, 40%) como una mezcla racémica. ¹H RMN (300 MHz, CD³OD) 58,59 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 7,89 (ddd, J = 7,8, 7,8, 1,7 Hz, 1H), 7,43 (dd, J = 7,5, 5,0 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,60 (dd, J = 2,7, 2,7 Hz, 1H), 5,37 (s, 1H), 5.21 (s, 1H), 4,82 (dd, J = 11,5, 2,6 Hz, 1H), 4,52 (dd, J = 11,5, 3,2 Hz, 1H), 2,19 (s, 3H); LCMS calculada para C19H¹⁶FN⁴O3 (M+H)⁺ : m/z = 367,1; encontrado: 367,1.

Ejemplo de Referencia 126

3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina-2-carbonitrilo

Paso 1.2-Bromo-1-(2-bromopiridina-3-ilo)etanona

Una solución de 1-(2-bromopiridina-3-ilo)etanona (2,10 g, 10,5 mmol) en ácido acético (28,0 ml) se trató con bromo (595 pl, 11,5 mmol) y se calentó a 90°C durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La capa acuosa se separó y se extrajo adicionalmente con acetato de etilo (2 x 80 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron para dar el producto bruto. La purificación por cromatografía instantánea en columna (10% de acetato de etilo/hexanos a 30% de acetato de etilo/hexanos) dio el producto deseado (2,15 g, 73%). LCMS calculada para C7H6Br2NO (M+H)+: m/z = 277,9, 279,9, 281,9; encontrado: 277,7, 279,7, 281,8.

Paso 2. 3-(2-bromopiridina-3-ilo)-5-nitro-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-3-ol

Una solución de 2-bromo-1-(2-bromopiridina-3-ilo)etanona (2,15 g, 7,71 mmol) en cloruro de metileno (77,1 ml) y agua (19,3 ml) se trató con carbonato de potasio (2,13 g, 15,4 mmol), bromuro de tetra-W-butilamonio (500 mg, 1,50 mmol) y 2-amino-3-nitrofenol (1,31 g, 8,48 mmol), y se calentó a 40°C durante 5 h. La mezcla de reacción se diluyó luego con salmuera. La capa acuosa se separó y se extrajo con diclorometano (2 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron para dar el producto bruto. La purificación por cromatografía en columna instantánea (100% de hexanos a 35% de acetato de etilo/hexanos) dio el producto deseado (2,45 g, 90%) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C13H11BrN3O4 (M+H)+: m/z = 352,0, 354,0; encontrado: 351,7, 353,8.

Paso 3. 3-(2-Bromopiridina-3-ilo)-2H- 1,4-benzoxazina-5-amina

Una suspensión de hierro (1,71 g, 30,7 mmol) (<10 micras) en etanol (33,5 ml) se trató con cloruro de hidrógeno 1,0 M en agua (3,1 ml, 3,1 mmol) y se agitó a 60°C durante 2 h. La mezcla se enfrió luego a 55-60°C y se trató con cloruro de amonio 5,0 M en agua (5,3 ml, 26,4 mmol) seguido de la adición de 3-(2-bromopiridina-3-ilo)-5-nitro-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-3-ol (2,16 g, 6,13 mmol, lavado con 5 ml de etanol). La suspensión resultante se agitó a 60-65°C durante 2 h. La suspensión se diluyó con acetonitrilo hasta aproximadamente 100 ml y se filtró sobre Celite. El sólido se lavó con acetonitrilo adicional y el filtrado se concentró hasta un sólido. Este sólido se disolvió en acetato de etilo que luego se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto deseado (1,85 g, 99%), usado sin purificación adicional. LCMS calculada para C13H11BrN3O(M+H)+: m/z = 304,0, 306,0; encontrado: 304,0, 306,0.

Paso 4. 3-(2-bromopiridina-3-ilo)-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-5-amina tris-trifluoroacetato

Una suspensión de 3-(2-bromopiridina-3-ilo)-2H-1,4-benzoxazina-5-amina (1,85 g, 6,08 mmol) en etanol (20,0 ml) y agua (4,0 ml) se trató con tetrahidroborato de sodio (460 mg, 12,2 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante la noche, momento en el cual la mezcla se trató con tetrahidroborato de sodio adicional (200 mg, 5,3 mmol) y se calentó a 90°C durante 2 h. La mezcla de reacción se inactivó con ácido acético y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se separó y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado, agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. La purificación mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contenía ácido trifluoroacético al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (1,69 g, 66%) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C13H13BrN3O(M+H)+: m/z = 306,0, 308,0; encontrado: 305,9, 307,9.

Paso 5. 4-(2-bromopiridina-3-ilo)-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Una solución de 3-(2-bromopiridina-3-ilo)-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-5-amina tris-trifluoroacetato (1,69 g, 4,01 mmol) en acetato de etilo (17,8 ml) a 50°C se trató con N,N-carbonildiimidazol (0,78 g, 4,8 mmol) y se agitó a 50°C durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió luego a 0°C. El precipitado resultante se recogió por filtración y se lavó con éter. El filtrado se concentró para dar un sólido bruto. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a un caudal de 30 ml/min) dio el producto deseado que se combinó con el material precipitado (0,970 g en total, 73% de rendimiento combinado) como una mezcla racémica. LCMS calculada para CuHnBrNaOz (M+H)+: m/z = 332,0, 334,0; encontrado: 331,8, 333,8.

Paso 6. 3-(2-Oxo- 1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-dé\[ 1,4]benzoxazina-4-ilo)piridina-2-carbonitrilo

Una suspensión de 4-(2-bromopiridina-3-ilo)-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de\[1,4\benzoxazina-2(1 H)-ona (964 mg, 2,90 mmol), cianuro de zinc (1,00 g, 8,70 mmol) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (335 mg, 0,290 mmol) en N,N-dimetilformamida (20,4 ml) se desgasificó y calentó en un microondas a 160°C durante 20 min. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado, agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. El producto bruto se suspendió en acetato de etilo caliente y se diluyó con hexanos hasta el doble del volumen, lo que dio como resultado la precipitación de un sólido. El sólido se recogió por filtración y se lavó con acetato de etilo para dar el producto deseado (656 mg). El filtrado se concentró hasta un residuo que se purificó mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contenía hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) para dar el producto deseado que se combinó con El material precipitado (0,709 g en total, 88% de rendimiento combinado) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C15 H¹¹N⁴O2 (M+H)⁺ : m/z = 279,1; encontrado: 278,9.

Paso 7. 3-(7-Bromo-2-oxo- 1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-dé\[ 1,4]benzoxazina-4-ilo)piridina-2-carbonitrilo

Una solución de 3-(2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de\[1,4\benzoxazina-4-ilo)piridina-2-carbonitrilo (709 mg, 2,548 mmol) en N,N-dimetilformamida (25,0 ml) se trató con N-bromosuccinimida (630 mg, 3,54 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (0,44 g, 48%) como una mezcla racémica. LCMS calculada para C¹⁵H10BrN⁴O2 (M+H)⁺ : m/z = 357,0, 359,0; encontrado: 356,8, 358,8.

Paso 8. 3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de\[1,4\benzoxazina-4-ilo]piridina-2-carbonitrilo

Un tubo sellado que contiene 4-(di-terc-butilfosfino)-N,N-dimetilanilina-dicloropaladio (2:1) (11,5 mg, 0,0162 mmol), fluoruro de cesio (574 mg, 3,78 mmol), 3-(7-bromo-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de\[1,4\benzoxazina-4-ilo)piridina-2-carbonitrilo (386 mg, 1,01 mmol) y (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)ácido borónico (533 mg, 3,78 mmol) se colocaron al vacío y se volvieron a llenar con nitrógeno (repetido 3x). El tubo sellado se cargó con 1 -butanol (4,92 ml) y agua (1,2 ml) y la mezcla se desgasificó burbujeando nitrógeno durante 15 minutos y se calentó a 100°C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a un caudal de 60 ml/min) dio el producto deseado (342 mg, 85%) como una mezcla racémica. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-d⁶) 5 11,00 (br s, 1H), 8,81 -8,66 (m, 1H), 7,80-7,62 (m, 2H), 6,90 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,74 - 5,51 (m, 1H), 4,58 (d, J = 3,4 Hz, 2 H), 2,29 (s, 3H), 2,12 (s, 3H); LCMS calculada para C²⁰H16 N 5 O 3 (M+H)⁺ : m/z = 374,1; encontrado: 374,1.

Ejemplo de Referencia 127

3-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazina-4-¡lo]p¡r¡d¡na-2-carboxamida tr¡fluoroacetato

Una solución de 3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina-2-carbonitrilo (12,0 mg, 0,0321 mmol) en dimetilo sulfóxido (120 pl) a 0°C se trató con peróxido de hidrógeno (5,36 pl, 0,0524 mmol) (solución al 30%), seguido de carbonato de potasio (1mg, 0,008 mmol) y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La purificación mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene ácido trifluoroacético al 0,1%, a una velocidad de flujo de 30 ml/min) dio el producto deseado (10 mg, 62%) como una mezcla racémica. ¹H r Mn (300 MHz, OMSO-d^s) 5 11,06 (s, 1H), 8,73 -8,49 (m, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,49 (dd, J = 8,0, 4,6 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,56 - 6,41 (m, 1H), 4,53 (d, J = 2,1 Hz, 2H), 2,24 (s, 3H), 2,07 (s, 3H); LCMS calculada para C²⁰H18 N⁵O⁴ (M+H)⁺ : m/z = 392,1; encontrado: 392,1.

Ejemplo de Referenc¡a 128 3-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrah¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-4-¡lo]-W-met¡lp¡r¡d¡na-2-carboxam¡da

Una solución de 3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina Se calentó-2-carbonitrilo (342 mg, 0,916 mmol) en cloruro de hidrógeno 6,0 M en agua (32,6 ml, 196 mmol) en el microondas a 160°C durante 30 min. La mezcla de reacción se concentró para dar el producto deseado (357 mg, 91%) como una mezcla racémica que se usó sin purificación adicional. LCMS calculada para C²⁰H17N⁴O5 (M+H)⁺ : m/z = 393,1; encontrado: 392,9.

Paso 2. 3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo- 1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida

Una solución de 3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5, 4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina-2-ácido carboxílico (10,0 mg, 0,026 mmol) en N,N-dimetilformamida (0,50 ml) se trató con cloruro de metilamonio (4,30 mg, 0,064 mmol) seguido de W,W-diisopropiletilamina (22,2 pl, 0,127 mmol) y agitado a temperatura ambiente durante 5 min. La mezcla de reacción se trató con hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfonio [Aldrich n°: 226084] (16,9 mg, 0,038 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (5 mg, 48%) como una mezcla racémica. ¹H r Mn (300 MHz, DMSO-a^fe) 59,06 - 8,91 (m, 1H), 8,57 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 8,1,4,6 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,93 - 6,74 (m, 2H), 6,47 (s, 1H), 4,65 -4,37 (m, 2H), 2,62 (d, J = 10,1 Hz, 6H), 2,24 (s, 1,5 H), 2,07 (s, 1,5 H); LCMS calculada para C21H20N⁵O⁴ (M+H)⁺ : m/z = 406,1; encontrado: 406,1.

Ejemplo de Referencia 129

3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazina-4-ilo]-W,W-dimetilpiridina-2-carboxamida

El compuesto del título se sintetizó de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 128, paso 2, sustituyendo dimetilamina como material de partida. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-a^fe) 58,53 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 7,40 (dd, J = 8,0, 4,7 Hz, 1H), 7,33 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,27 (dd, J = 3,3, 3,3 Hz, 1H), 4,47 -4,28 (m, 2H), 3,04 (s, 1,5H), 2,86 (s, 1,5H), 2,62 (d, J = 10,1 Hz, 6H), 2,27 (s, 1,5H), 2,10 (s, 1,5H); LCMS calculada para C22 H 22 N⁵O⁴ (M+H)⁺: m/z = 420,2; encontrado: 420,1.

Ejemplo de Referencia 130

4-[2-(Aminometilo)piridina-3-ilo]-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona bis(trifluoroacetato)

Una solución de 3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina-2-carbonitrilo (50,0 mg, 0,134 mmol) en metanol (25,0 ml) y 6,0 M de cloruro de hidrógeno en agua (0,250 ml, 1,50 mmol) en una botella Parr se enjuagó con nitrógeno y se trató con catalizador de paladio (28,5 mg, 0,013 mmol) (10% Pd en carbono, tipo Degussa) El recipiente de reacción se cargó a 50 PSI de hidrógeno y se agitó durante 5 h. La mezcla de reacción se filtró luego sobre Celite. Los sólidos se lavaron con metanol adicional (150 ml) y el filtrado se concentró para dar el producto bruto. La purificación mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contenía ácido trifluoroacético al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (39 mg, 48%) como una mezcla racémica. ¹H RMN (300 MHz, DMSO-a^fe) 511,08 (s, 1H), 8,60 (dd, J = 4,5, 1,8 Hz, 1H), 8,48 - 8,23 (m, 2H), 7,54 - 7,28 (m, 2H), 6,90 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,80 - 5,54 (m, 1H), 4,85-4,30 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,12 (s, 3H); LCMS calculada para C²⁰H20N5O3 (M+H)⁺ : m/z = 378,2; encontrado: 378,1.

Ejemplo de Referencia 131

W-({3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina-2-ilo}metilo)acetamida

Una solución de 4-[2-(aminometilo)piridina-3-ilo]-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona bis(trifluoroacetato) (35,0 mg, 0,058 mmol) en cloruro de metileno (2,0 ml) tratado con W,W-diisopropiletilamina (50,3 pl, 0,289 mmol) y agitado. Una vez que el material de partida se disolvió completamente, la mezcla de reacción se trató con cloruro de acetilo (49,3 ml, 0,069 mmol) (añadido como una solución al 10% en diclorometano) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se inactivó con metanol y el disolvente se concentró para dar el producto bruto. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (18 mg, 74%) como una mezcla racémica. ¹H RMN (500 MHz, DMSO-a^fe) 5 10,98 (br s, 1H), 8,50 - 8,47 (m, 1H), 8,44 (dd, J = 5,2, 5,2 Hz, 1H), 7,26 (dd, J = 7,9, 4,7 Hz, 1H), 7,23 - 7,16 (m, 1H), 6,88 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,68 (dd, J = 3,1, 3,1 Hz, 1H), 4,71 (dd, J = 15,1, 6,1 Hz, 1H), 4,55 -4,47 (m, 2H), 4,44 (dd, J = 11,6, 3,2 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,88 (s, 3H); LCMS calculada para C22H22N⁵O⁴ (m H)+: m/z = 420,2; encontrado: 420,1.

Ejemplo de Referencia 132

Metilo 3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina-2-carboxilato

Una solución de 3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina-2-ácido carboxílico (294 mg, 0,7493 mmol) en metanol (60,0 ml) se trató con una gota de ácido sulfúrico concentrado y se calentó en un tubo sellado durante la noche a 80°C. La mezcla de reacción se concentró luego hasta un residuo bruto. Este residuo se diluyó con acetato de etilo (100 ml) y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de la disolución, la capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron para dar el producto bruto. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (300 mg, 99%) como una mezcla racémica. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-a^fe) 58,63 (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 8,1,4,6 Hz, 1H), 7,29 (dd, J = 8,1, 1,4 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,00 (dd, J = 2,9, 2,9 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 2,9 Hz, 2H), 3,91 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,09 (s, 3H); Lc Ms calculada para C21H19N⁴O5 (M+H)⁺ : m/z = 407,1; encontrado: 407,0.

Ejemplo de Referencia 133

Enantiómero individual de 3-[7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-tfe][1,4]benzoxazina-4-ilo]-N-etilpiridina-2-carboxamida

Paso 1. Separación de isómeros de 3-[7-(3,5-d\met\lisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina-2-carbonitrilo

La mezcla racémica

-oxo-1,2,4,5-tetrah\dro\m\dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz\na-4-\lo]p\r\d\na-2-carbon\tr\lo se separó por HPLC quiral (columna Phenomenex Lux Cellulose C2, 21,2 x 250 mm, tamaño de partícula de 5 micras, eluyendo con etanol al 60% en hexanos a 18 ml/min, 90 mg por inyección) para dar el pico 1 (TA = 9,2 min) y el pico 2 (RT = 15,9 min). Se determinó que el pico 1 era más activo y se usó para la síntesis de análogos posteriores.

Paso 2. Enantiómero individual de 3-[7-(3,5-d\met\lisoxazol-4-ilo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo5,4-de][ 1,4]benzoxazina-4-ilo]piridina-2-ácido carboxílico

Una solución de 3-[7-(3,5-d\met\l\soxazol-4-\lo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrah\dro\m\dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz\na-4-\lo]p\r\d\na-2-carbon\tr\lo (2,23 g, 5,97 mmol) (Pico 1 del paso 1) en cloruro de hidrógeno 6,0 M en agua (50 ml, 300 mmol) se calentó en el microondas a 160°C durante 30 min. La mezcla de reacción se concentró para dar el producto bruto. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (1,41 g, 60%) como un enantiómero único. LCMS calculada para C²⁰H17N⁴O5 (M+H)⁺ : m/z = 393,1; encontrado: 393,1.

Paso 3. 3-[(4S)-7-(3,5-d\met\lisoxazol-4-ilo)-2-oxo- 1,2!4!5-tetrahidroimidazo[1!5,4-dé][1,4]benzoxazina-4-ilo]-N-etilpiridina-2-carboxamida

Una solución de 3-[7-(3,5-d\met\l\soxazol-4-\lo)-2-oxo-1,2,4,5-tetrah\dro\m\dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz\na-4-\lo]p\r\d\na-2-ác\do carboxílico (30,0 mg, 0,0764 mmol) (del paso 2) en N,N-d\met\lformam\da (1,0 mL) fue tratado con etilamina (10,8 gl, 0,191 mmol) seguido de N,N-d\\soprop\let\lam\na (66,6 gl, 0,382 mmol) y agitado a temperatura ambiente durante 5 min. La mezcla de reacción se trató posteriormente con benzotriazol-1-iloxitrina (dimetilamino) fosfoniohexafluorofosfato [Aldrich n°: 226084] (50,7 mg, 0,115 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) proporcionó el producto deseado (23 mg, 71%) como un enantiómero único. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d⁶) 59,03 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,58 (dd, J = 4,6, 1,4 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 8,0, 4,6 Hz, 1H), 7,11 (dd, J = 8,0, 1,2 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,54 - 6,41 (m, 1H), 4,64 -4,45 (m, 2H), 3,43 - 3,24 (m, 2H), 2,24 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 1,15 (t, J = 7,2 Hz, 3H); LCMS calculada para C22H22N⁵O⁴ (M+h )+: m/z = 420,2; encontrado: 420,2.

Ejemplos de Referencia 134-136

Los ejemplos 134-136 enumerados en la Tabla 6 se sintetizaron como enantiómeros individuales de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 133.

Tabla 6

Ejemplo 137

(4S>9-(Am¡nometMo)-7-(3,5-d¡metM¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-Mo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona b¡s(tr¡fluoroacetato)

Una solución de (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4] benzoxazina-2(1 H)-ona (2,50 g, 7,18 mmol) en tetrahidrofurano (47 ml) se trató con N-bromosuccinimida (1,40 g, 7,89 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, momento en el cual la mezcla de reacción se trató con N-bromosuccinimida adicional (0,70 g, 3,93 mmol) y se agitó a 45°C durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. La purificación por cromatografía ultrarrápida en columna (acetato de etilo al 50%/hexanos a acetato de etilo al 100%) dio el producto deseado (3,0 g, 98%) como un enantiómero único. LCMS calculada para C19H16BrN4O3 (M+H)+: m/z = 427,1,429,1; encontrado: 426,8, 428,8.

Paso 2. (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-9-vinilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Una mezcla de (4S)-9-bromo-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (3,00 g, 7,02 mmol), 4,4,5,5-tetrametilo-2-vinilo- 1,3,2-dioxaborolano (2,14 ml, 12,6 mmol), [1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), complejo con diclorometano (1:1) (570 mg, 0,70 mmol) y carbonato de potasio (2,90 g, 21 mmol) en 1,4-dioxano (40 ml) y agua (20 ml) se calentó a 80°C durante 1 h. La mezcla se vertió luego sobre agua y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna instantánea (40% acetato de etilo/hexanos a 90% acetato de etilo/hexanos) dio el producto deseado (1,69 g, 64%) como un enantiómero único. LCMS calculada para C21H19N⁴O3 (M+H)⁺ : m/z = 375,1; encontrado: 375,1.

Paso 3. (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-9-carbaldehído

Una mezcla de (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-9-vinilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (1690 mg, 4,51 mmol) en agua (7,8 ml) y tetrahidrofurano (104 ml) se trató con metaperiodato de sodio (2,90 g, 13,5 mmol) y calentado a 60°C durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. La purificación por cromatografía en columna instantánea (acetato de etilo al 50%/hexanos a acetato de etilo al 100%/hexanos) dio el producto deseado (0,797 g, 47%) como un enantiómero único. LCMS calculada para C²⁰H17N⁴O4 (M+H)⁺ : m/z = 377,1; encontrado: 376,9.

Paso 4. (4S)-9-{[(2,4-Dimetoxibencil)amino]metilo}-7-(3¡5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo [1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Una solución (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-de][1,4] benzoxazina-9-carbaldehído (250 mg, 0,664 mmol) en etanol (12,5 mL) se trató con 1-(2,4-dimetoxifenil)metanamina [Aldrich n°: 432725] (150 pl, 0,996 mmol) y ácido acético (20,0 pl, 0,352 mmol) y se calentó a 60°C durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se trató con cianoborohidruro de sodio (210 mg, 3,3 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se enfrió luego con ácido acético (1ml) y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto deseado (0,40 g, 97%) como un enantiómero único que se usó sin purificación adicional. LCMS calculada para C29H30N5O5 (M+H)⁺ : m/z = 528,2; encontrado: 528,0.

Paso 5. (4S)-9-(Aminometilo)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona bis(trifluoroacetato)

Una solución de (4S)-9-1 [(2,4-dimetoxibencil)amino]metilo}-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (70,0 mg, 0,133 mmol) en ácido trifluoroacético (5 ml) y agua (30 ml) se calentó en el microondas a 120°C durante 10 min. La mezcla de reacción se concentró para dar un residuo crudo. La purificación mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contenía ácido trifluoroacético al 0 ,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (66 mg, 82 %) como un enantiómero único. ¹H Rm N (300 MHz, DMSO-d⁶) 5 11,28 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,18 (br s, 2H), 7,80 (ddd, J = 7,7, 7,7, 1,7 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 7,1, 5,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,59 (s, 1H), 4,89 -4,73 (m, 1H), 4,44 (dd, J = 11,5, 3,0 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 2,24 (s, 3H), 2,07 (s, 3H); lCm S calculada para C²⁰H20N⁵O³ (M+H)⁺: m/z = 378,2; encontrado: 378,0.

Ejemplo de Referencia 138

N-{[(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-oxo-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-1,2,4,5-tetrahidro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-9-ilo]metilo}acetamida tr¡fluoroacetato

Una solución de (4S)-9-(aminometilo)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona bis(trifluoroacetato) (10,0 mg, 0,0265 mmol) en cloruro de metileno (1,00 ml) se trató con W,W-diisopropiletilamina (13,8 pl, 0,0795 mmol) seguido de cloruro de acetilo (2,26 pl, 0,0318 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró para dar un residuo crudo. La purificación mediante LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contenía ácido trifluoroacético al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado (9 mg, 81%) como un enantiómero único. ¹H Rm N (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 10,89 (s, 1H), 8,52 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 8,31 (dd, J = 5,7, 5,7 Hz, 1H), 7,79 (ddd, J = 7,7, 7,7, 1,8 Hz, 1H), 7,41-7,27 (m, 1H), 7,14 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,70 (s, 1H), 5,53 (dd, J = 2,4, 2,4 Hz, 1H), 4,76 (dd, J = 11,5, 2,0 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 11,5, 3,1 Hz, 1H), 4,32 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 2,22 (s, 3H), 2,05 (s, 3H), 1,87 (s, 3H); LCMS calculada para C22H22N⁵O⁴ (M+H)⁺ : m/z = 420,2; encontrado: 420,0.

Ejemplos de Referencia 139-143

Los Ejemplos 139 a 142 de la Tabla 7 se sintetizaron como enantiómeros individuales de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 138.

El Ejemplo 143 de la Tabla 7 se sintetizó de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 128, Paso 2.

Tabla 7

Ejemplo de Referencia 144A

(4S)-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-9-(1-h¡drox¡et¡l)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡droim¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-ona (d¡astereo¡sómero 1)

Ejemplo de Referenc¡a 144B

(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-9-(1-h¡drox¡et¡l)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona (d¡astereo¡sómero 2)

Una solución de (4,Sj-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-9-carbaldehído (1,30 g, 3,45 mmol) (enantiómero simple del Ejemplo 137, paso 3) en tetrahidrofurano (30,0 ml) se trató con yoduro de metilmagnesio 3,0 M en éter dietílico (4,03 ml, 12,1 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto bruto. La purificación por LCMS preparativa (columna XBridge C18, eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua que contiene hidróxido de amonio al 0,1%, a una velocidad de flujo de 60 ml/min) dio el producto deseado como una mezcla de diastereoisómeros. Los diastereoisómeros se separaron por HPLC quiral (columna Chiracel AD-H, 20 x 250 mm, tamaño de partícula de 5 mieras, eluyendo con etanol al 50% en hexanos a 12 ml/min, 45 mg por inyección) para dar el pico 1 (diastereoisómero 1, TA = 10,2 min) y pico 2 (Diastereoisómero 2, TA = 12,6 min).

Diastereoisómero 1, Pico 1: ¹ H RMN (400 MHz, DMSO-d ^s ) 5 11,03 (br s, 1H), 8,51 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 7,78 (ddd, J = 7,7, 7,7, 1,6 Hz, 1H), 7,31 (dd, J = 7,3, 5,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,83 (s, 1H), 5,52 (s, 1H), 5,21 (br s, 1H), 4,95 (q, J = 6,3 Hz, 1H), 4,76 (dd, J = 11,4, 1,5 Hz, 1 H), 4,42 (dd, J = 11,4, 3,0 Hz, 1H), 2,22 (s, 3H), 2,05 (s, 3H), 1,37 (d, J = 6,4 Hz, 3H); LCMS calculada para C21H21N ⁴ O4 (M+H) ⁺ : m/z = 393,2; encontrado: 393,0.

Diastereoisómero 2, Pico 2: ¹ H RMN (400 MHz, DMSO-a ^fe ) 5 10,97 (br s, 1H), 8,52 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 7,78 (ddd, J = 7,7, 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 7,4, 4,9 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,20 (br s, 1H), 4,92 (q, J = 6,3 Hz, 1H), 4,75 (dd, J = 11,4, 1,7 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 11,4, 3,0 Hz, 1H), 2,23 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 1,40 (d, J = 6,4 Hz, 3H); ^lC^m S calculada para C21H21N ⁴ O4 (M+H) ⁺ : m/z = 393,2; encontrado: 393,1.

Ejemplo de Referencia 145

(3fí)-1-[(4S)-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]-Nisopropilpirrolidina-3-carboxamida

Paso 1. (3R)-N-Isopropilpirrolidina-3-carboxamida

A (3R)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidina-3-ácido carboxílico (150 mg, 0,70 mmol) en N,N-dimetilformamida (3,0 ml), N,N-diisopropiletilamina (0,25 ml, 1,4 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol (94 mg, 0,70 mmol) fueron agregados. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos, seguido de la adición de clorhidrato de N-(3 -dimetilaminopropilo)-N'-etilcarbodiimida (150 mg, 0,77 mmol). La mezcla se agitó luego durante 20 min. Se añadió 2-propanamina (59 pl, 0,69 mmol) y la mezcla se agitó durante la noche. La mezcla se diluyó luego con acetato de etilo y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo adicional. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se concentraron y se purificaron por LCMS preparativa usando tampón de pH 2 para dar el intermedio deseado protegido con boc. Las fracciones del producto se concentraron y se trataron con cloruro de hidrógeno 4,0 M en 1,4-dioxano (2,0 ml) durante 30 min, momento en el que la mezcla se concentró y se disolvió en DCM/MeOH y se trató con resina de trisamina (Silicycle) durante 30 min. La mezcla resultante se filtró y los disolventes se evaporaron para dar el compuesto deseado (63 mg, 58%) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. LCMS calc. para C8H ¹⁷ N ² O (M+H) ⁺ : m/z = 157,1; encontrado: 157,2.

Paso 2. (3R)-1-[(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo(1,5,4-dé\[1,4]benzoxazina-2-ilo]-N-isopropilpirrolidina-3-carboxamida

Se añadió trietilamina (110 pl, 0,79 mmol) y (3R)-N-isopropilpirrolidina-3-carboxamida (120 mg, 0,74 mmol) fueron añadidas a una solución de (4S)-2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de\[1,4\benzoxazina (66,0 mg, 0,18 mmol) en N-metilpirrolidinona (1,5 ml), y la mezcla resultante se calentó en un microondas a 120°C durante 5 minutos. La mezcla se diluyó con metanol y se purificó dos veces por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título, (8,9 mg, 10%) LCMS calculada para C27H31N6O3 (M+H) ⁺ : m/z = 487,2; encontrado:. 487,3 ¹ H RMN (500 MHz, DMSO) 58,54 (dd, J = 4,8, 0,8 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,72 (td, J = 7,7, 1,8 Hz, 1H), 7,29 (dd, J = 6,8, 4,9 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,09 (t, 1H), 4,82 (dd, J = 11,4, 1,3 Hz, 1H), 4,53 (dd, J = 11,5, 2,8 Hz, 1H), 3,85 - 3,71 (m, 3H), 3,43 (dd, J = 9,6, 7,6 Hz, 1H), 3,39 - 3,32 (m, 1H), 2,90 (p, J = 7,8 Hz, 1H), 2,19 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 2,00 - 1,89 (m, 2H), 1,01 (dd, J = 10,1,6,6 Hz, 6H).

Ejemplo de Referencia 146A

1-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]-3-metilpirrolidina-3-ol (d¡astereo¡sómero 1)

Ejemplo de Referencia 146B

1-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]-3-met¡lp¡rrol¡d¡na-3-ol (d¡astereo¡sómero 2)

Ejemplo de Referencia 146C

1-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]-3-met¡lp¡rrol¡d¡na-3-ol (mezcla de d¡astereo¡sómeros)

Trietilamina (0,76 ml, 5,5 mmol) y clorhidrato de 3-metilpirrolidina-3-ol (563 mg, 4,09 mmol) se añadieron a (4S)-2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (100 mg, 0,27 mmol) en W-metilpirrolidinona (3 ml) y la mezcla resultante se calentó en un microondas a 150°C durante 20 min. La mezcla se diluyó luego con metanol y se purificó mediante LCMS preparativa a tampón de pH 2 seguido de LCMC preparativa a tampón de pH 10 para dar el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros (47,1 mg, 40%). LCMS calc. para C24H26N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 432,2; encontrado: 432,2. Los isómeros se separaron mediante cromatografía en columna quiral preparativa: Columna: phenomenex Lux Cellulose C-2 5 pm, 21, 2x250 mm, Fase móvil: 20% EtOH/Hexanos, condición de gradiente: ¡socrático a 18 mL/min, tiempo de ejecución: 30 min, tiempo pico: 23,0 y 25,7 min.

Ejemplo 146A, Pico 1, 12,6 mg, 11%, LCMS calc. para C24H26N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 432,2; encontrado: 432,2. Ejemplo 146B, Pico 2, 12,6 mg, 11%, LCMS calc. para C24H26N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 432,2; encontrado: 432,2. Ejemplo de Referencia 147

4-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]-1,4-diazepane-1-sulfonamida

Paso 1. terc-Butilo 4-[(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-dé][1,4]benzoxazina-2-ilo]- 1,4-diazepano-1 -carboxilato

El compuesto del título fue preparado por métodos análogos al Ejemplo 146, sustituyendo con ferc-butilo 1,4 -diazepano-1-carboxilato. La mezcla se concentró y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título (63 mg, 36%). LCMS calc. para C29H35N6O4 (M+H)+: m/z = 531,3; encontrado: 531,3. Paso 2. (4S)-2-(1,4-diazepano-1-ilo)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][ 1,4]benzoxazina

ferc-Butilo 4-[(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]-1,4-diazepano Se trató-1-carboxilato (53 mg, 0,10 mmol) con una solución de cloruro de hidrógeno 4,0 M en 1,4-dioxano (2,0 ml) durante 10 min. La mezcla se concentró y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título (28,5 mg, 66%). LCMS calc. para C24H27N6O2 (M+H)+: m/z = 431,2; encontrado: 431,3. Paso 3. 4-[(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]-1,4-diazepano-1 -sulfonamida

(4S)-2-(1,4-diazepano-1-ilo)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (5,8 mg, 0,013 mmol) y sulfamida (7,8 mg, 0,081 mmol) se disolvieron en piridina (0,71 ml) y la solución se calentó a 120°C durante 3 minutos en un microondas. La mezcla se diluyó con metanol y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título (5,1 mg, 74%). LCMS calc. para C24H27N7O4S (M+H)+: m/z = 510,2; encontrado: 509,7.

Ejemplo de Referencia 148

(4S>2-(4-acet¡lo-1,4-d¡azepano-1-¡lo)-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na

A una solución de (4S)-2-(1,4-diazepano-1-ilo)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (5,0 mg, 0,012 mmol) en cloruro de metileno (0,44 ml), se añadió trietilamina (8,1 ml, 0,058 mmol) seguido de cloruro de acetilo (1,6 ml, 0,023 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 mins. La mezcla se diluyó luego con metanol y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título (3,5 mg, 64%). LCMS calc. para C26H29N6O3 (M+H)+: m/z = 473,2; encontrado: 473,3.

Ejemplo de Referencia 149

(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-[4-(met¡lsulfon¡l)-1,4-d¡azepano-1-¡lo]-4-pir¡d¡na-2-¡lo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na

Trietilamina (8,1 pl, 0,058 mmol) se añadió a una solución de (4S)-2-(1,4-diazepano-1-ilo)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (5,0 mg, 0,012 mmol) en cloruro de metileno (0,44 ml), y la mezcla se enfrió a 0°C. Luego se añadió cloruro de metanosulfonilo (1,8 pl, 0,023 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 minutos a 0°C. La mezcla se diluyó con metanol y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título (3,8 mg, 64%). LCMS calc. para C25H29N6O4S (M+H)+: m/z = 509,2; encontrado: 509,2.

Ejemplo de Referencia 150

(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-p¡peraz¡na-1-¡lo-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-dih¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]

tr¡h¡drocloruro de benzoxaz¡na

Paso 1. terc-Butilo 4-[(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-dé][1,4]benzoxazina-2-ilo]piperazina-1 -carboxilato

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 146, sustituyendo ferc-butilo piperazina-1- carboxilato. La mezcla se concentró y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el producto. LCMS calc. para C28H33N6O4 (M+h )+: m/z = 517,3; encontrado: 517,4.

Paso 2. (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-piperazina-1-ilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4] benzoxazina frihidrocloruro

ferc-Butilo 4-[(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2- ilo]piperazina-1-carboxilato (45 mg, 0,087 mmol) se agitó en 4 N HCl en dioxanos (3 ml) y metanol (2 ml) durante 30 minutos, momento en el que el disolvente se evaporó para dar el compuesto del título (45 mg, 92%). LCMS calc. para C27H32N7O3 (M+H)+: m/z = 417,2; encontrado: 417,3.

Ejemplo de Referencia 151

2-{4-[(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2-ilo]piperazina-1-ilo}-W,W-dimetilacetamida

A una solución de (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-piperazina-1-ilo-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo [1,5,4-de][1,4]benzoxazina trihidrocloruro (10 mg, 0,03 mmol) en cloruro de metileno (1,0 ml), se añadió carbonato de potasio (18 mg, 0,13 mmol), seguido de 2-cloro-W,W-dimetilacetamida (2,7 pl, 0,026 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 minutos. La mezcla se calentó luego a 60°C durante la noche. La mezcla se diluyó con metanol y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título (3,7 mg, 30%). LCMS calc. para C27H32N7O3 (M+H)+: m/z = 502,2; encontrado: 502,3.

Ejemplo de Referencia 152

2-C¡ano-W-{(3fí)-1-[(4S>7-(3,5-d¡met¡Msoxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]pirrolidina-3-ilo}-W-metilacetamida

Trietilamina (8,2 pl, 0,059 mmol) y etanol (1,0 ml) se añadieron a una solución de (3R)-1-[(4Sj-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]-n-metilpirrolidina-3-amina (8,5 mg, 0,020 mmol) en cloruro de metileno (0,50 ml), seguido de la adición de 3-[(2,5-dioxopirrolidina-1-ilo)oxi]-3-oxopropanonitrilo (7,2 mg, 0,039 mmol) y la mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó luego con y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título (1,4 mg, 14%). LCMS calc. para C27H28N7O3 (M+H)+: m/z = 498,2; encontrado: 498,3.

Ejemplo de Referencia 153

W-{(3fí)-1-[(4S>7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡droim¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2-ilo]pirrolidina-3-ilo}morfolina-4-carboxamida

A una solución de (3R)-1-[(4Sj-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5 dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-2-ilo]pirrolidina-3-amina trihidrocloruro (35 mg, 0,068 mmol) en cloruro de metileno (1,0 ml), se añadió trietilamina (18 pl, 0,13 mmol) seguido de cloruro de morfolina-4-carbamoilo (10 pl, 0,1 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 min. La mezcla se diluyó con metanol y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título (4,1 mg, 30%). LCMS calc. para C28H32N7O4 (M+H)+: m/z = 530,2; encontrado: 530,3. Ejemplo de Referencia 154

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-2-met¡lo-4-p¡r¡d¡na-2-ilo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na

Una mezcla de 2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4] benzoxazina (45 mg, 0,12 mmol), cloruro de metilzinc 2,0 M en THF (310 pl) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (7 mg, 0,006 mmol) en THF (2 ml) bajo nitrógeno se calentó en un microondas a 150°C durante 5 min. La purificación por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 dio el compuesto del título (21 mg, 49%). LCMS calc. para C ²⁰ H ¹⁹ N ⁴ O2 (M+H) ⁺ : m/z = 347,1; encontrado: 347,2. ¹ H RMN (300 MHz, CD ³ OD) 58,58 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 7,1,5,3 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,59 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,03 (s, 1H), 4,55 (dd, J = 11,5, 2,8 Hz, 2H), 4,29 - 4,09 (m, 1H), 4,00 - 3,71 (m, 2H), 3,63 - 3,50 (m, 3H), 3,40 (dd, J = 9,8, 4,6 Hz, 1H), 2,23 (s, 3H), 2,23 - 2,11 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 1,98 - 1,83 (m, 1H).

Ejemplo de Referencia 155

Metilo {(3fí)-1-[(4S>7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-ilo]pirrolidina-3-ilo}carbamato

Paso 1. (3R)-1-[(4S)-7-(3,5-d'imetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-dé][1,4]benzoxazina-2-ilo]pirrolidina-3-amina trihidrocloruro

(4S)-2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (300 mg, 0,8 mmol) de terc-butilo (3R)-pirrolidina-3-ilcarbamato de (4,57 g, 24,5 mmol) y trietilamina (570 gl, 4,1 mmol) se agitaron en W-metilpirrolidinona (10 ml) y se calentaron a 150°C en un microondas durante 5 min. La purificación por LCMS preparativa (pH 10) dio el intermedio deseado protegido con boc. El tratamiento con 4 N HCl en dioxanos/metanol y la posterior evaporación de los solventes dieron el compuesto del título (36 mg, 100%). LCMS calc. para C23H25N6O2 (M+H) ⁺ : m/z = 417,2; encontrado: 417,3.

Paso 2. metilo {(3R)-1-[(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]pirrolidina-3-ilo}carbamato

Trihidrocloruro de (3R)-1 -[(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4] benzoxazina-2-ilo]pirrolidina-3-amina (35 mg, 0,068 mmol) se agitó en metileno cloruro (1,0 ml) con trietilamina (47 gl, 0,34 mmol), seguido de la adición de cloroformiato de metilo (10 gl, 0,14 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y se concentró. La purificación por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 dio el compuesto del título (24 mg, 75%). LCMS calc. para C25H27N ⁶ O ⁴ (M+H) ⁺ : m/z = 475,2; encontrado: 475,3. ¹ H RMN (300 MHz, CD ³ OD) 58,58 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 7,1,5,3 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,59 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,03 (s, 1H), 4,55 (dd, J = 11,5, 2,8 Hz, 2H), 4,29 -4,09 (m, 1H), 4,00 - 3,71 (m, 2H), 3,63 - 3,50 (m, 3H), 3,40 (dd, J = 9,8, 4,6 Hz, 1H), 2,23 (s, 3H), 2,23 - 2,11 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 1,98 - 1,83 (m, 1H).

Ejemplo de Referencia 155

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-9-fluoro-W,W-d im e t i lo-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazina-2-amina

Paso 1. 6-Bromo-4-fluoro-2,3-dinitrofenol

A una solución de 2-bromo-4-fluoro-5-nitrofenol (4,0 g, 17 mmol) en cloruro de metileno (29,5 ml), se agregó ácido nítrico 2,0 M en DCM (25 ml) y la mezcla se agitó durante 15 min. a temperatura ambiente. La mezcla se vertió sobre agua fría y se extrajo con cloruro de metileno para dar el producto.

Paso 2. 2-amino-6-bromo-4-fluoro-3-nitrofenol

6-Bromo-4-fluoro-2,3-dinitrofenol (4,4 g, 16 mmol) se agitó en metanol (88 ml) y cloruro de hidrógeno 12,0 M en agua (40 ml), seguido de la adición de dihidrato de cloruro estannoso (11 g, 47 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó y se concentró. La purificación en gel de sílice eluyendo acetato de etilo en hexanos dio el producto de amina.

Paso 3. 8-Bromo-6-fluoro-5-nitro-3-piridina-3-ilo-3,4-dihidro-2H- 1,4-benzoxazina-3-ol

2-Amino-6-bromo-4-fluoro-3-nitrofenol (500 mg, 2,0 mmol) y carbonato de potasio (780 mg, 5,7 mmol) se agitaron en acetona (8 ml) durante 15 min seguido de la adición de bromhidrato de 2-bromo-1 -piridina-3-iletanona (530 mg, 1,9 mmol) durante un período de 5 minutos. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 min y se vertió sobre agua. La mezcla acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La purificación sobre gel de sílice eluyendo acetato de etilo en hexanos proporcionó el producto bicíclico. LCMS calc. para C ¹³ H10BrFN ³ O ⁴ (M+H) ⁺ : m/z = 370,0; encontrado: 370,0.

Paso 4. 8-Bromo-6-fluoro-3-piridina-3-ilo-2H- 1,4-benzoxazina-5-amina

Se añadió hierro (91 mg, 1,6 mmol) a una mezcla de 8-bromo-6-fluoro-5-nitro-3-piridina-3-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4- benzoxazina-3-ol (121,0 mg, 0,3269 mmol) en ácido acético (3 ml), y se calentó durante la noche a 60°C. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y la capa orgánica se concentró. La purificación en gel de sílice eluyendo acetato de etilo en hexanos proporcionó el producto. LCMS calc. para C ¹³ H10 PNBR ³ O (M+H) ⁺ : m/z = 322,0; encontrado: 322,0. Paso 5. 8-Bromo-6-fluoro-3-piridina-3-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-5-amina

Tetrahidroborato de sodio (44 mg, 1,2 mmol) se añadió a una solución de 8-bromo-6-fluoro-3-piridina-3-ilo-2H-1,4- benzoxazina-5-amina (190 mg, 0,58 mmol) en etanol (4ml) y agua (1ml) y se calentó a 90°C durante 15 min. La mezcla se concentró, se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. Los disolventes orgánicos se evaporaron para proporcionar el producto. Lc MS calc. para C13H12BrFN3O (M+H)+: m/z = 324,0; encontrado: 324,0.

Paso 6. 7-Bromo-9-fluoro-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

Se añadió trietilamina (140 gl, 1,0 mmol) a una solución de 8-bromo-6-fluoro-3-piridina-3-ilo-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazina-5-amina (160 mg, 0,50 mmol)) en THF (6,0 ml), seguido de la adición de trifosgeno (60 mg, 0,2 mmol), y la mezcla fue posteriormente se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera y se concentraron. La purificación en gel de sílice eluyendo acetato de etilo en hexanos proporcionó el compuesto del título. LCMS calc. para CuH10BrFN3O2 (M+H)+: m/z = 350,0; encontrado: 350,0.

Paso 7. 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-9-fluoro-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona

7-Bromo-9-fluoro-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (50 mg, 0,14 mmol), potasio (3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)(trifluoro)borato(1-) (43 mg, 0,21 mmol), [1,1’- bis(difenilfosfino) ferroceno]dicloropaladio (II), complejo con diclorometano (1:1) (10 mg, 0,01 mmol) y carbonato de potasio (39 mg, 0,28 mmol) se agitaron en 1,4-dioxano (1,1 ml) y agua (0,28 ml) bajo un flujo de gas nitrógeno durante 5 min. La mezcla se calentó luego a 90°C durante 6 h. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se recogieron y se evaporaron para dar el compuesto deseado. LCMS calc. para C19H16FN4O3 (M+H)+: m/z = 367,1; encontrado: 367,1.

Paso 8.2-doro-7-(3,5-dimeti\isoxazol-4-ilo)-9-fluoro-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina

Se añadió cloruro de fosforita (1,5 m\, 16 mmo\) a un vial cargado con 7-(3,5-dimeti\isoxazo\-4-i\o)-9-f\uoro-4-piridina-3-i\o-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (32 mg, 0,087 mmo\) y \a mezc\a se agitó durante \a noche a 90°C. La mezc\a se inactivó con agua enfriada con hie\o, se di\uyó con NaHCO3 y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se recogieron y se evaporaron para proporcionar e\ compuesto de\ títu\o. LCMS ca\c. para C ¹⁹ H ¹⁵ C\FN ⁴ O ² (M+H) ⁺ : m/z = 385,1; encontrado: 385,1.

Paso 9. 7-(3,5-dimet'i\isoxazol-4-ilo)-9-fluoro-N,N-dimeti\o-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4] benzoxazina-2-amina

Se añadieron trieti\amina (16 g\, 0,12 mmo\) y dimeti\amina (0,2 m\, 4 mmo\) a 2-c\oro-7-(3,5-dimeti\isoxazo\-4-i\o)-9-f\uoro-4-piridina-3-i\o-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (15 mg, 0,040 mmo\) en N-meti\pirro\idinona (0,41 m\) y \a mezc\a se ca\entó en un microondas a 150°C durante 20 min. La mezc\a se di\uyó con metano\ y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para proporcionar e\ compuesto de\ títu\o (3,0 mg, 19%). LCMS ca\c. para C ²¹ H21FN ⁵ O ² (M+H) ⁺ : m/z = 394,2; encontrado: 394,1.

Ejemplo de Referencia 157

1-[7-(3,5-dimetMisoxazol-4-Mo)-9-fluoro-4-piridina-3-Mo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-ilo]pirrolidina-3-ol

Se añadieron trieti\amina (16 g\, 0,12 mmo\) y 3-pirro\idino\ (0,2 m\, 3 mmo\) a 2-c\oro-7-(3,5-dimeti\isoxazo\-4-i\o)-9-f\uoro-4-piridina-3-i\o-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (15 mg, 0,040 mmo\) en N-meti\pirro\idinona (0,41 m\) y \a mezc\a se ca\entó en un microondas a 150°C durante 20 min. La mezc\a se di\uyó con metano\ y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para proporcionar e\ compuesto de\ títu\o (2,4 mg, 14%). LCMS ca\c. para C ²³ H ²³ FN ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 436,2; encontrado: 436,1.

Ejemplo de Referencia 158

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-W-etilo-9-fluoro-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina-2-amina

Se agregaron trietilamina (16 ml, 0,12 mmol) y etilamina (0,2 ml, 3 mmol) a 2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-9-fluoro-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina (15 mg, 0,040 mmol) en W-metilpirrolidinona (0,41 ml) y el La mezcla se calentó en un microondas a 150°C durante 20 min. La mezcla se diluyó con metanol y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para proporcionar el compuesto del título (3,0 mg, 19%). LCMS calc. para C ²¹ H21FN ⁵ O ² (M+H) ⁺ : m/z = 394,2; encontrado: 394,1.

Ejemplo de Referencia 159A

(3fí)-1-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-ilo]pirrolidina-3-ol (d¡astereo¡sómero 1)

Ejemplo de Referencia 159B

(3fí)-1-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡hidro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]p¡rrol¡d¡na-3-ol (d¡astereo¡sómero 2A)

Ejemplo de Referencia 159C

(3fí)-1-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡hidro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]p¡rrol¡d¡na-3-ol (d¡astereo¡sómero 2B)

Ejemplo de Referencia 159D

(3fí)-1-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡hidro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]p¡rrol¡d¡na-3-ol (d¡astereo¡sómero 3)

Ejemplo de Referencia 159E

(3fí)-1-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡hidro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-ilo]pirrolidina-3-ol (Mezcla de diastereoisómeros)

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 157, sustituyendo 2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina y 3R-pirrolidinol La mezcla se diluyó con metanol y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para proporcionar el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros (13,3 mg, 75%). LCMS calc. para C ²³ H ²⁴ N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 418,2; encontrado: 418,2. Los isómeros se separaron por cromatografía en columna quiral preparativa usando las siguientes condiciones: Columna: phenomenex Lux Cellulose C-2 5 pm, 21, 2x250 mm, Fase móvil: 45% EtOH/Hexanos, condición de gradiente: isocrático a 18 ml/min, Carga: 5,0 mg en 900 pl, tiempo de ejecución: 18 min, tiempo pico: 12,0, 14,0 y 16,0 min.

Ejemplo 159A, Pico 1, LCMS calc. para C ²³ H ²⁴ N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 418,2; encontrado: 418,2.

El pico 2 se aisló como una mezcla de 2 diastereómeros y se separó adicionalmente mediante cromatografía en columna quiral preparativa: Columna: fenomenex Lux Cellulose C-4 5 gm, 21, 2x250 mm, Fase móvil: 30% EtOH/Hexanos, condición de gradiente: isocrático a 18 mL/min, Carga: 1,5 mg en 900 gl, tiempo de ejecución: 23 min, tiempo pico: 18,5 y 20,0 min.

Ejemplo 159B, Pico 2A, LCMS calc. para C ²³ H ²⁴ N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 418,2; encontrado: 418,2.

Ejemplo 159C, Pico 2B, LCMS calc. para C ²³ H ²⁴ N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 418,2; encontrado: 418,2.

Ejemplo 159D, Pico 3, LCMS calc. para C ²³ H ²⁴ N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 418,2; encontrado: 418,2.

Ejemplo de Referencia 160A

1-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]azet¡d¡na-3-ol Ejemplo de Referenc¡a 160B

1-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]azet¡d¡na-3-ol Ejemplo de Referenc¡a 160C

1-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]azet¡d¡na-3-ol Ejemplo de Referenc¡a 160D

1-[7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-3-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][1,4]benzoxaz¡na-2-¡lo]azet¡d¡na-3-ol [0600]

El compuesto del título se preparó por métodos análogos al Ejemplo 157, sustituyendo 2-cloro-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-3-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina, clorhidrato de azetidina-3-ol y extendiendo el tiempo de reacción a 60 min. La mezcla se diluyó con metanol y se purificó por LCMS preparativa usando tampón de pH 10 para dar el compuesto del título como una mezcla racémica (16 mg, 23%). LCMS calc. para C ²² H ²² N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 404,2; encontrado: 404,2. Los isómeros se separaron por cromatografía en columna quiral preparativa usando las siguientes condiciones: Columna: phenomenex Lux Cellulose C-25 gm, 21, 2x250 mm, Fase móvil: 45% EtOH/Hexanos, condición de gradiente: isocrático a 18 ml/min, Carga: 2,0 mg en 900 gl, tiempo de ejecución: 24 min, tiempo pico: 12,0, 14,0, 16,0 y 21,0 min.

Ejemplo 160A, Pico 1, LCMS calc. para C ²² H ²² N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 404,2; encontrado: 404,2. ¹ H RMN (500 MHz, DMSO) 58,47 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 8,43 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,58 (dt, J = 7,9, 1,9 Hz, 1H), 7,35 (dd, J = 7,9, 4.8 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,42 (t, 1H), 5,07 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 11,6, 1.9 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 11,6, 2,9 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 11,5, 2,8 Hz, 1H), 3,67 (dd, J = 11.5.4.2 Hz, 1H), 3,40 - 3,34 (m, 1H), 3,17 (dd, J = 14,3,4,2 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

Ejemplo 160B, Pico 2, LCMS calc. para C ²² H ²² N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 404,2; encontrado: 404,2. ¹ H RMN (500 MHz, DMSO) 58,47 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 8,43 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,58 (dt, J = 7,9, 1,9 Hz, 1H), 7,35 (dd, J = 7,9, 4.8 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,42 (t, 1H), 5,07 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 11,6, 1.9 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 11,6, 2,9 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 11,5, 2,8 Hz, 1H), 3,67 (dd, J = 11.5.4.2 Hz, 1H), 3,40 - 3,34 (m, 1H), 3,17 (dd, J = 14,3, 4,2 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

Ejemplo 160C, Pico 3, LCMS calc. para C ²² H ²² N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 404,2; encontrado: 404,2. ¹ H RMN (500 MHz, DMSO) 58,47 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 8,43 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,58 (dt, J = 7,9, 1,9 Hz, 1H), 7,35 (dd, J = 7,9, 4,8 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,42 (t, 1H), 5,07 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 11,6, I , 9 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 11,6, 2,9 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 11,5, 2,8 Hz, 1H), 3,67 (dd, J = I I , 5,4,2 Hz, 1H), 3,40 - 3,34 (m, 1H), 3,17 (dd, J = 14,3, 4,2 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

Ejemplo 160D, Pico 4, LCMS calc. para C ²² H ²² N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 404,2; encontrado: 404,2. ¹ H RMN (500 MHz, DMSO) 58,47 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 8,43 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,58 (dt, J = 7,9, 1,9 Hz, 1H), 7,35 (dd, J = 7,9, 4.8 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,42 (t, 1H), 5,07 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 11,6, 1.9 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 11,6, 2,9 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 11,5, 2,8 Hz, 1H), 3,67 (dd, J = 11,5,4,2 Hz, 1H), 3,40 - 3,34 (m, 1H), 3,17 (dd, J = 14,3, 4,2 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

Ejemplo 224 y Ejemplos de Referencia 161 -223 y 225-251

Los compuestos de los Ejemplos 161 a 251 se exponen en la Tabla 8 a continuación.

Tabla 8

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

Ejemplo de Referencia 252

(4S)-8,9-d¡cloro-7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-de][14]benzoxaz¡na-2(1)-ona b¡str¡fluoroacetato

Una mezcla de (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidaz [15,4-de][1,4]benzoxazina-2(1H)-ona (35 mg, 0,10 mmol) W-clorosuccinimida (15 mg, 0,11 mmol) y tetrahidrofurano (1,0 ml) se agitó a 60°C durante 3 h. La mezcla se extrajo con EtOAc, se secó, se concentró, se purificó sobre gel de sílice y se eluyó con EtOAc al 40% en hexano. La purificación por LCMS preparativa usando tampón de pH 2 dio el compuesto del título como una sal de bistrifluoroacetato. LCMS calc. para C49QH15Cl2N4O3 (M+H)+: m/z = 417,0; encontrado: 417,2.

Ejemplo de Referencia 253

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-9-[(¡soprop¡lam¡no)met¡lo]-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cte][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroim¡dazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-9-carbaldehído (15 mg, 0,04 mmol) del Ejemplo 137, Etapa 3 se agitó en metanol (1,0 ml) con 2-propanamina (10 ml, 0,12 mmol), seguido de la adición de cianoborohidruro de sodio (7,5 mg, 0,12 mmol). La mezcla se calentó a 602C durante la noche, luego se diluyó con metanol. La purificación por LCMS preparativa (pH 10) proporcionó el compuesto del título. LCMS calc. para C ²³ H ²⁶ N ⁵ O ³ (M+H) ⁺ : m/z = 420,2; encontrado: 420,1.

Ejemplo de Referenc¡a 254

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-9-(h¡drox¡met¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxaz¡na-2(1 H)-ona

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-2-oxo-4-piridina-2-ilo-1,2,4,5-tetrahidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-9-carbaldehído (15 mg, 0,040 mmol) del Ejemplo 137, el Paso 3 se agitó en etanol (0,58 ml), seguido de la adición de tetrahidroborato de sodio (2,3 mg, 0,060 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La purificación por LCMS preparativa (pH 10) proporcionó el compuesto del título. LCMS calc. para C ²⁰ H ¹⁹ N ⁴ O ⁴ (M+H) ⁺ : m/z = 379,1; encontrado: 379,2.

Ejemplo de Referenc¡a 255

7-(3,5-d¡met¡l¡soxazol-4-¡lo)-4-p¡r¡d¡na-2-¡lo-4,5-d¡h¡dro¡m¡dazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxaz¡na-2(1H)-t¡ona 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-ilo)-4-piridina-2-ilo-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-ate][1,4]benzoxazina-2(1 H)-ona (50 mg, 0,1 mmol) del Ejemplo 13 se agitó en 1,4-dioxano (2 ml) y 2,4-bis(4-metoxifenilo)-2,4-ditioxo-1,3,2,4-ditiadifosfetano [Aldrich n°: 227439] (58 mg, 0,14 mmol) se añadió. La mezcla se calentó a 100°C durante 3 h y se concentró. La purificación por LCMS preparativa (pH 10) proporcionó el compuesto del título. LCMS calc. para C ¹⁹ H ¹⁷ N ⁴ O ² S (M+H) ⁺ : m/z = 365,1; encontrado: 365,1.

Ejemplos de Referencia 256-269B

Los procedimientos experimentales usados para preparar los compuestos de los Ejemplos 256 a 269B se resumen en la Tabla 9 a continuación.

Tabla 9

(Continuación)

Datos analíticos

Datos 1H RMN (espectrómetro Varian Inova 500, un espectrómetro Mercury 400 o un espectrómetro Varian (o Mercury) 300) y datos espectrales de masa LCMS (MS) para los compuestos de los Ejemplos 47A-51,75-87, 104­ 108, 110-119, 134-136 y 139-143 se proporcionan a continuación en la Tabla 10.

Tabla 10

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

Protocolos de ensayo biológico:

Ejemplo A1

Ensayo BRD4 AlphaScreen™

Los ensayos BRD4-BD1 y BRD4-BD2 se realizaron en una placa blanca de poliestireno de 384 pocilios en un volumen final de 20 pl para BD1 y 40 pl para BD2. Los inhibidores se diluyeron primero en serie en DMSO y se agregaron a los pocillos de la placa antes de la adición de otros componentes de reacción. La concentración final de DMSO en el ensayo fue 1,25% (BD1) y 0,83% (BD2). Los ensayos se llevaron a cabo a temperatura ambiente durante 75 min. en el tampón de ensayo (HEPES 50 mM, pH 7,4, NaCl 100 mM, CHAPS al 0,05%, bSa al 0,01%), que contiene péptido de histona H4 tetraacetilado marcado con biotina 50 nM (H4Ac4), 3,8 nM (BRD4-BD1, BPS Bioscience n° 31040) o 20 nM (BRD4-BD2, BPS Bioscience n° 31041). La reacción siguió con la adición de 20 ml de tampón de ensayo suplementado con perlas donadoras de estreptavidina (PerkinElmer 6760002) y perlas del aceptor GSH (PerkinElmer-AL109C) a 4 pg/ml bajo luz reducida. Después del sellado de la placa, la placa se incubó en la oscuridad a temperatura ambiente durante 75 min antes de leerse en un lector de placas PHERAstar FS (BMG Labtech). La determinación de CI ⁵⁰ se realizó ajustando la curva del porcentaje de actividad de control frente al logaritmo de la concentración de inhibidor usando el software GraphPad Prism 5,0.

Los datos de CI ⁵⁰ para los compuestos de los Ejemplos determinados por el Ensayo A1 se presentan en la T a b la 11

Tabla 11

Ejemplo A2 Ensayo BRD4 AlphaScreen™

Los ensayos BRD4-BD1 y BRD4-BD2 se realizaron en una placa blanca de poliestireno de 384 pocilios en un volumen final de 40 pl para BD1 y 60 pl para BD2. Los inhibidores se diluyeron primero en serie en DMSO y se agregaron a los pocillos de la placa antes de la adición de otros componentes de reacción. La concentración final de DMSO en el ensayo fue 1,25% (BD1) y 0,83% (BD2). Los ensayos se llevaron a cabo a temperatura ambiente en el tampón de ensayo (Tris-HC1 50 mM, pH 7,5, Tween- 20 al 0,01%, BSA al 0,01%, DTT 5 mM), que contiene péptido de histona H4 tetraacetilado marcado con biotina 50 nM (H4Ac4) y proteína BRD4-BD1 o BRD4-BD2 a una concentración inferior a 1 nM. La incubación durante 75 min. fue seguida por la adición de 20 ml de tampón de ensayo suplementado con perlas de donador de estreptavidina (PerkinElmer 6760002) y perlas de aceptor GSH (PerkinElmer-AL109C) a una concentración final de 2-4 pg/ml bajo luz reducida. Después del sellado de la placa, la placa se incubó en la oscuridad a temperatura ambiente durante 75 min. antes de leerse en un lector de placas PHERAstar FS (BMG Labtech). La determinación de CI ⁵⁰ se realizó ajustando la curva del porcentaje de actividad de control frente al logaritmo de la concentración de inhibidor usando el software GraphPad Prism 5,0.

Los datos de CI ⁵⁰ para los compuestos de los Ejemplos determinados por el Ensayo A2 se presentan en la Tabla 12.

Tabla 12

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

Ejemplo B1: Ensayo de viabilidad celular KMS,12.BM

La línea celular KMS,12.BM (mieloma humano) se adquirió de JCRB (Osaka, Japón)) y se mantuvo en RPMI con 10% de medio de cultivo FBS. Para medir la actividad citotóxica de los compuestos a través de la cuantificación de ATP, las células KMS.12.BM se colocan en placas en el medio de cultivo RPMI a 5000 células/pocillo/por 100 pl en una placa de cultivo de tejido negro transparente de poliestireno de 96 pocillos (Greiner-bio-one a través de VWR, NJ), en presencia o ausencia de un rango de concentración de compuestos de prueba. Después de 3 días, se añaden a cada pocillo 100 ml de agente de cultivo celular luminiscente Cell Titer-GLO (Promega, Madison, WI) durante 10 minutos. a temperatura ambiente para estabilizar la señal luminiscente. Esto determina el número de células viables en cultivo en función de la cuantificación del ATP presente, lo que indica la presencia de células metabólicamente activas. La luminiscencia se mide con el Top Count 384 (Packard Bioscience a través de Perkin Elmer, Boston, MA). La inhibición del compuesto se determina en relación con las células cultivadas sin fármaco y el CI ⁵⁰ se informa como la concentración del compuesto requerida para una muerte celular del 50%.

Los datos de CI ⁵⁰ para los compuestos de los Ejemplos determinados por el Ensayo B1 se presentan en la Tabla 13.

Tabla 13

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

Ejemplo C1

Ensayo C-myc ELISA KMS,12.BM

Se adquirió la línea celular KMS,12.BM (mieloma humano) de JCRB (Osaka, Japón) y se mantuvo en RPMI con 10% de medio de cultivo FBS. Para medir la actividad inhibidora de C-myc de los compuestos, las células KMS.

12.BM se colocan en placas en el medio de cultivo RPMI a 75000 células/pocillo/por 200 pl en una placa de cultivo de tejido de poliestireno de fondo plano de 96 pocillos (Corning a través de VWR, NJ), en presencia o ausencia de un rango de concentración de compuestos de prueba. Después de 2 h, las células se sedimentan y se lisaron con tampón de extracción celular (BioSource, Carlsbad, CA) en presencia de inhibidores de la proteasa (Life Technologies, Grand Island, NY y Sigma, St Louis, MO). Los lisados clarificados se prueban en un ELISA comercial C-myc (Life Technologies, Grand Island, NY). La inhibición del compuesto se determina en relación a las células cultivadas sin fármaco y el CI ⁵⁰ informado que la concentración de compuesto requerida para 50% de inhibición de C-myc.

Datos CI ⁵⁰ para los compuestos de los Ejemplos determinados por el Ensayo C1 se presentan en la Tabla 14.

Tabla 14

(Continuación)

(Continuación)

Claims (7)

REIVINDICACIONES

1. Un inhibidor de una proteína BET para su uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa, en donde el inhibidor de una proteína BET se administra en combinación con un inhibidor de Janus quinasas, en donde el inhibidor de Janus quinasas es tofacitinib, baricitinib, CYT387, lestaurtinib, pacritinib, TG101348 o un inhibidor selectivo de JAK1, y en donde dicho inhibidor de una proteína BET se selecciona de:

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazin-2(1 H)-ona;

(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazin-2(7H)-ona; y

(4S)-2-(4-acetilpiperazin-1-il)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina;

y sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los mencionados anteriormente.

2. Una combinación de un inhibidor de una proteína BET y un inhibidor de Janus quinasas para su uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa, en donde el inhibidor de Janus quinasas es tofacitinib, baricitinib, CYT387, lestaurtinib, pacritinib, TG101348 o un inhibidor selectivo de JAK1, y en donde dicho inhibidor de una proteína BET se selecciona de:

7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazin-2(1 H)-ona;

(4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-cfe][1,4]benzoxazin-2(7H)-ona; y

(4S)-2-(4-acetilpiperazin-1-il)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazina;

y sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los mencionados anteriormente.

3. El inhibidor de una proteína BET para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, o la combinación de un inhibidor de una proteína BET y un inhibidor de Janus quinasas para su uso de acuerdo con la reivindicación 2, en donde dicho inhibidor de una proteína BET es (4S)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazin-2(1 H)-ona, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4.. El inhibidor de una proteína BET para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, o la combinación de un inhibidor de una proteína BET y un inhibidor de Janus quinasas para su uso de acuerdo con la reivindicación 2, en donde dicho inhibidor de una proteína BET es 7-(3,5- dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4]benzoxazin-2(1 H)-ona, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. El inhibidor de una proteína BET para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, o la combinación de un inhibidor de una proteína BET y un inhibidor de Janus quinasas para su uso de acuerdo con la reivindicación 2, en donde dicho inhibidor de una proteína BET es (4S)-2-(4-acetilpiperazin-1-il)-7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-4-piridin-2-il-4,5-dihidroimidazo[1,5,4-de][1,4] benzoxazina, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

6. El inhibidor de una proteína BET para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 o las reivindicaciones 3-5, o la combinación de un inhibidor de una proteína BET y un inhibidor de Janus quinasas para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 2-5, en donde dicho inhibidor de Janus quinasas y dicho inhibidor de una proteína BET se administran simultáneamente.

7. El inhibidor de una proteína BET para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 o las reivindicaciones 3-5, o la combinación de un inhibidor de una proteína BET y un inhibidor de Janus quinasas para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 2-5, en donde dicho inhibidor de Janus quinasas y dicho inhibidor de una proteína BET se administran secuencialmente.