EA020631B1 - Производные пурина для применения в лечении аллергических, воспалительных и инфекционных заболеваний - Google Patents

Производные пурина для применения в лечении аллергических, воспалительных и инфекционных заболеваний Download PDF

Info

Publication number
EA020631B1
EA020631B1 EA201100113A EA201100113A EA020631B1 EA 020631 B1 EA020631 B1 EA 020631B1 EA 201100113 A EA201100113 A EA 201100113A EA 201100113 A EA201100113 A EA 201100113A EA 020631 B1 EA020631 B1 EA 020631B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
pharmaceutically acceptable
amine
formula
oxy
Prior art date
Application number
EA201100113A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201100113A1 (ru
Inventor
Кейт Биггадайк
Дайан Мэри Коэ
Сяо Цин Льюэлл
Шарлотт Джейн Митчелл
Стефан Аллан Смит
Наимиша Триведи
Original Assignee
ГЛАКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41187189&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA020631(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by ГЛАКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи filed Critical ГЛАКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи
Publication of EA201100113A1 publication Critical patent/EA201100113A1/ru
Publication of EA020631B1 publication Critical patent/EA020631B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/18—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 one oxygen and one nitrogen atom, e.g. guanine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0043—Nose
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/16—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two nitrogen atoms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Предложены соединения формулы (I)где Rпредставляет собой Cалкиламино, Cалкокси; m равен целому числу, имеющему значение от 3 до 6; n равен целому числу, имеющему значение от 0 до 4, и их соли, которые являются индукторами человеческого интерферона, а также содержащая их фармацевтическая композиция. Предложено также применение заявленных соединений в терапии, в частности в лечении аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, например аллергического ринита и астмы, в лечении инфекционных заболеваний и рака, а также в качестве вакцинных адъювантов.

Description

(72) Изобретатель:
Биггадайк Кейт, Коэ Дайан Мэри, Льюэлл Сяо Цин, Митчелл Шарлотт Джейн, Смит Стефан Аллан, Триведи Наимиша (СВ)
020631 ΒΙ (56) ЕР-А-1939198 \¥О-А-2007142755 АУО-А-2008114008 АУО-А-2008Ю1867
020631 В1 (74) Представитель:
где К1 представляет собой Сн.алкиламино. См,алкокси: ш равен целому числу, имеющему значение от 3 до 6; η равен целому числу, имеющему значение от 0 до 4, и их соли, которые являются индукторами человеческого интерферона, а также содержащая их фармацевтическая композиция. Предложено также применение заявленных соединений в терапии, в частности в лечении аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, например аллергического ринита и астмы, в лечении инфекционных заболеваний и рака, а также в качестве вакцинных адъювантов.
Предшествующий уровень техники
Настоящее изобретение относится к соединениям, способам их получения, содержащим их композициям, к их применению в лечении различных расстройств, в частности аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, например аллергического ринита и астмы, инфекционных заболеваний, рака, а также в качестве вакцинных адъювантов.
Позвоночным животным постоянно угрожает инвазия микроорганизмов, и у них развились механизмы иммунной защиты для устранения инфекционных патогенов. У млекопитающих эта иммунная система включает две ветви: врожденный иммунитет и приобретенный иммунитет. Первая линия защиты хозяина представляет собой систему врожденного иммунитета, которая опосредована макрофагами и дендритными клетками. Приобретенный иммунитет включает устранение патогенов на более поздних стадиях инфекции и также обеспечивает формирование иммунологической памяти. Приобретенный иммунитет является высокоспецифическим вследствие широкого репертуара лимфоцитов с антигенспецифическими репертуарами, которые претерпевают генетическую перегруппировку.
Ответ в системе врожденного иммунитета, как изначально считалось, является неспецифическим, но в настоящее время известно, что она способна отличать свое от разнообразия патогенов. Система врожденного иммунитета распознает микробы путем ограниченного количества генетически кодируемых образ-распознающих рецепторов (Ра!!ет-Кесодщ!юп РсесрЮгк. РКК), которые обладают множеством важных характеристик.
То11-подобные рецепторы (ТЕК) представляют собой семейство из 10 образ-распознающих рецепторов, описанных у людей. ТЬК экспрессируются преимущественно клетками системы врожденного иммунитета, где их роль заключается в контроле окружающей среды в отношении показателей инфицирования и после активации в мобилизации механизмов защиты, цель которых заключается в устранении проникших патогенов. Ранние ответы врожденного иммунитета, запускаемые ТЬК, ограничивают распространение инфекции, тогда как провоспалительные цитокины и хемокины, которые они могут индуцировать, приводят к рекрутингу и активации антигенпрезентирующих клеток, В- и Т-клеток. ТЬК могут модулировать природу адаптивных иммунных ответов с обеспечением соответствующей защиты путем активации дендритных клеток и высвобождения цитокина (Акта 8. е! а1., Ναι. 1ттипо1., 2001, 2, 675680). Профиль ответа, обнаруживаемого для различных агонистов ТЬК, зависит от типа активируемых клеток.
ТЬК7 представляет собой член подгруппы ТЬК (ТЬК 3, 7, 8 и 9), локализованный в эндосомальном компартменте клеток, которые специализированы для обнаружения нуклеиновых кислот, отличающихся от нуклеиновых кислот хозяина. ТЬК7 играет ключевую роль в антивирусной защите путем распознавания κκΡΝΑ (одноцепочечной РНК) (О1еЬо1б 8.8. е! а1., 8с1епсе, 2004, 303, 1529-1531 и Ьцпб ТМ. е! а1., ΡΝΑ8, 2004, 101, 5598-5603). ТЬК7 обладает ограниченным профилем экспрессии у людей и экспрессируется преимущественно В-клетками и плазмацитоидными дендритными клетками (рОС) и в меньшей степени моноцитами. Плазмоцитоидные ОС представляют собой уникальную популяцию лимфоидных дендритных клеток (0,2-0,8% мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС)), которые представляют собой главные интерферон-продуцирующие клетки I типа, секретирующие высокие уровни интерферона альфа (ΙΡΝα) и интерферона бета (ΙΡΝβ) в ответ на вирусные инфекции (Ни Υ.-Τ, Аппи. Кеу. 1ттипо1., 2005, 23, 275-306).
Аллергические заболевания ассоциированы со смещенным в сторону ТЬ2 иммунным ответом на аллергены. ТЬ2-ответы ассоциированы с повышенными уровнями 1дЕ, который благодаря своим действиям в отношении тучных клеток способствует гиперчувствительности в отношении аллергенов, приводя в результате к симптомам, наблюдаемым, например, при аллергическом рините. У здоровых индивидов иммунный ответ на аллергены в большей степени сбалансирован со смешанным ТН2/ТН1 и регуляторным Т-клеточным ответом. Показано, что лиганды ТЬК7 уменьшают высвобождение ТЬ2-цитокина и усиливают высвобождение ТЬ1-цитокина ш уПго и уменьшают интенсивность воспалительных ответов ТЬ2-типа в аллергических легочных моделях ш У1уо (Ρί1ί Ь. е! а1., 1. А11. СНп. 1ттипо1., 2006, 118, 511517; Мо1кап 1. е! а1., Ат. 1. РЬу8ю1. Ьип§ Се11 Мо1. РЬу8ю1., 2006, 290, Ь987-995; Тао е! а1., СЫп. Меб. 1., 2006, 119, 640-648). Таким образом, лиганды ТЬК7 обладают потенциалом возвращать равновесие иммунного ответа, обнаруживаемого у индивидов, страдающих аллергией, и приводят к модификации заболевания.
В центре образования эффективного ответа врожденного иммунитета у млекопитающих находятся механизмы, которые приводят к индукции интерферонов и других цитокинов, которые действуют в отношении клеток, вызывая множество эффектов. Зги эффекты могут включать активацию экспрессии противоинфекционных генов, активацию презентации антигена в клетках для запуска сильного антигенспецифического иммунитета и стимуляцию фагоцитоза в фагоцитирующих клетках.
Интерферон изначально описывали как вещество, которое может защищать клетки от вирусной инфекции (18аас8 & Ьшбетапп, 1. Ути8 1п1егГегепсе. Ргос. К. 8ос. Ьоп. 8ег. В. Вю1. 8с1. 1957, 147, 258-267). У людей интерфероны I типа представляют собой семейство родственных белков, кодируемых генами на хромосоме 9, которые кодируют по меньшей мере 13 изоформ интерферона альфа (ΙΡΝα) и одну изо- 1 020631 форму интерферона бета (ΙΡΝβ). Рекомбинантный ΙΡΝα представлял собой первый одобренный биологический терапевтический агент и стал важным терапевтическим средством при вирусных инфекциях и при раке. Известно, что помимо непосредственного антивирусного действия на клетки интерфероны являются сильными модуляторами иммунного ответа, действуя на клетки иммунной системы.
В качестве первой линии терапии заболевания, вызванного вирусом гепатита С (НСУ), комбинации интерферона могут быть высокоэффективны для снижения вирусной нагрузки и у некоторых субъектов для устранения репликации вируса. Тем не менее, для множества пациентов не удалось продемонстрировать устойчивый противовирусный ответ, и у этих пациентов вирусная нагрузка не контролируется. Дополнительно, терапия путем инъекции интерферона может быть ассоциирована со множеством нежелательных неблагоприятных действий, которые, как показано, влияют на соблюдение пациентом схемы лечения (Ииб1еу Т, е! а1., Си!., 2006, 55(9), 1362-3).
Введение небольшой молекулы соединения, которое может стимулировать ответ системы врожденного иммунитета, включающий активацию интерферонов I типа и других цитокинов, может представлять собой важную стратегию для лечения или предупреждения заболеваний людей, включая вирусные инфекции. Этот тип иммуномодулирующей стратегии дает возможность идентифицировать соединения, которые могут быть полезны не только при инфекционных заболеваниях, но также при раке (Кпед. Сигг. Опсо1. Кер., 2004, 6(2), 88-95), аллергических заболеваниях (Мо1каи 1. е! а1., Ат. 1. РЬукю1. Ьиид Се11 Мо1. РЬу8ю1., 2006, 290, Ь987-995), других воспалительных состояниях, таких как синдром раздраженного кишечника (РакоГГ-Шкоит 8., Се11., 2004, 23, 118(2):229-41), и в качестве вакцинных адъювантов (Регк1ид е! а1. Тгеибк МютоЬюк 2002:10(10 8ирр1), 832-7).
В моделях на животных имиквимод продемонстрировал адъювантные активности местно (Абатк 8. е! а1., 1. 1ттиио1., 2008, 181:776-84; 1оНик!ои Ό. е! а1., Уассте, 2006, 24:1958-65) или системно (Ргаикеи Р. е! а1., 1иГес!. 1ттии., 2007, 75:5939-46). Также продемонстрировано, что резиквимод и другие родственные агонисты ТЬК.7/8 демонстрируют адъювантную активность (Ма К. е! а1., Вюскет. Вюркук. Кек. Соттии., 2007, 361:537-42; ^Ше-Кеесе и. е! а1., Ргос. №б. Асаб. δοΐ. И8А, 2005, 102:15190-4; М11еКеесе и. е! а1., И82006045885 А1).
Механизмы, которые ведут к индукции интерферонов I типа, только частично поняты. Один из механизмов, которые могут вести к индукции интерферона во множестве клеточных типов, заключаются в распознавании двухцепочечной вирусной РНК РНК-хеликазами К1С-1 и МИА5. Полагают, что этот механизм представляет собой первичный механизм, при помощи которого интерфероны индуцируются инфицированием клеток вирусом Сендай.
Дополнительные механизмы индукции интерферонов опосредованы ТЬК-зависимыми сигнальными событиями. У людей плазмацитоидные дендритные клетки (рИС), представляющие собой профессиональные интерферон-продуцирующие клетки, способны продуцировать значительные количества интерферонов в ответ на вирусную инфекцию, например. Продемонстрировано, что рИС преимущественно экспрессируют ТЬК7 и ТЬК9, и стимуляция этих рецепторов вирусной РНК или ДНК соответственно может индуцировать экспрессию интерферона альфа.
Описаны олигонуклеотидные агонисты ТЬК7 и ТЬК9 и низкомолекулярные агонисты ТЬК7 на основе пурина, которые могут индуцировать высвобождение интерферона альфа этими типами клеток у животных и у людей (Такеба К. е! а1., Аиии. Кеу. 1ттиио1., 2003, 21, 335-76). Агонисты ТЬК7 включают имидазохинолиновые соединения, такие как имиквимод и резиквимод, оксоадениновые аналоги и также нуклеозидные аналоги, такие как локсорибин и 7-тиа-8-оксогуанозин, который, как давно известно, индуцирует высвобождение интерферона альфа. В публикации международной заявки \УО 2008/114008 (Ак!та2еиеса АВ/ИаШррои 8итПото РНагта Со. Ь!б.) раскрыты 9-замещенные-8-оксоадениновые соединения в качестве модуляторов ТЬК7.
Остается не ясным то, каким образом низкомолекулярные соединения типа пуринов могут индуцировать интерфероны I типа и другие цитокины, поскольку молекулярные мишени этих известных индукторов не идентифицированы. Тем не менее, разработана стратегия анализа для характеристики низкомолекулярных индукторов человеческого интерферона ΙΡΝα (независимо от механизма), которая основана на стимуляции первичных человеческих донорных клеток соединениями и раскрыта здесь.
Краткое описание изобретения
Показано, что определенные соединения по изобретению представляют собой индукторы человеческого интерферона и могут демонстрировать улучшенный профиль в отношении известных индукторов человеческого интерферона, например улучшенную эффективность, и могут демонстрировать улучшенную селективность в отношении ΙΡΝα по сравнению с ΊΝΡα. Например, некоторые соединения по изобретению указывают на более чем 1000-кратную селективность в отношении индукции ΙΡΝα по сравнению с индукцией ΊΝΡα. Соединения, которые индуцируют человеческий интерферон, могут быть полезны в лечении различных расстройств, например в лечении аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, например аллергического ринита и астмы, в лечении инфекционных заболеваний и рака, и также могут быть полезны в качестве вакцинных адъювантов.
- 2 020631
Некоторые соединения по изобретению представляют собой сильные иммуномодуляторы, и, соответственно, следует соблюдать осторожность при их использовании.
Краткое изложение сущности изобретения Согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (I)
где К1 представляет собой С1-6алкиламино, С!-6алкокси; т равен целому числу, имеющему значение от 3 до 6; η равен целому числу, имеющему значение от 0 до 4, или его соль.
Предпочтительным является соединение, как оно определено выше, или его соль, где К1 представляет собой н-бутилокси или (18)-1-метилбутилокси.
Особенно предпочтительными являются соединения по изобретению или их соли, выбранные из перечня, состоящего из
6-амино-2-(бутилокси)-9-[6-(1-пирролидинил)гексил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она;
6-амино-2-(бутилокси)-9-[6-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)гексил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она;
6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она;
6-амино-9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-7,9-дигидро-8Нпурин-8-она;
6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она и
6-амино-9-[5-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)пентил]-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-7,9-дигидро-8Нпурин-8-она, и их солей.
Особенно предпочтительным является соединение по изобретению, представляющее собой 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он или его соль.
В еще одном аспекте изобретения предложено соединение формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме фармацевтически приемлемой соли.
Предпочтительным является соединение по изобретению, представляющее собой 6-амино-2-{ [(18)1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он или его фармацевтически приемлемую соль.
В еще одном аспекте изобретения предложено соединение формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме свободного основания.
Предпочтительным является соединение, представляющее собой 6-амино-2-{[(18)-1метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он в виде свободного основания.
В еще одном аспекте изобретения предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли, в частности 6-амино-2-{[(18)-1метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она или его фармацевтически приемлемой соли, в терапии.
Также предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме свободного основания, в частности 6-амино-2-[[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она в виде свободного основания, в терапии.
В еще одном аспекте изобретения предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли, в частности 6-амино-2-{[(18)-1метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она или его фармацевтически приемлемой соли, в лечении аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, инфекционных заболеваний и рака.
Также предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме свободного основания, в частности 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она в виде свободного основания, в лечении аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, инфекционных заболеваний и рака.
В еще одном аспекте изобретения предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли, в частности 6-амино-2-{[(18)-1метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она или его фармацевтически
- 3 020631 приемлемой соли, в лечении аллергического ринита.
Также предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме свободного основания, в частности 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она в виде свободного основания, в лечении аллергического ринита.
В еще одном аспекте изобретения предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли, в частности 6-амино-2-{[(18)-1метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она или его фармацевтически приемлемой соли, в лечении астмы.
Также предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме свободного основания, в частности 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она в виде свободного основания, в лечении астмы.
Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, включающий введение субъекту - человеку, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли, в частности 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она или его фармацевтически приемлемой соли, либо соединения формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме свободного основания, в частности 6-амино-2-{ [(18)-1 -метилбутил]окси}-9-[5-( 1 -пиперидинил)пентил] -7,9-дигидро-8Н-пурин-8она в виде свободного основания.
Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения аллергического ринита, включающий введение субъекту - человеку, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли, в частности 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она или его фармацевтически приемлемой соли, либо соединения формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме свободного основания, в частности 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она в виде свободного основания.
В еще одном аспекте изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемую соль, в частности 6амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он или его фармацевтически приемлемую соль, и один или более чем один фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
В еще одном аспекте изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме свободного основания, в частности 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он в виде свободного основания, и один или более чем один фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
В еще одном аспекте изобретения предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли в качестве вакцинного адъюванта.
В еще одном аспекте изобретения предложено применение соединения формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли, в частности 6-амино-2-{ [(18)-1метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она или его фармацевтически приемлемой соли, либо соединения формулы (I), как оно определено выше, которое находится в форме свободного основания, в частности 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она в виде свободного основания, для изготовления лекарственного средства для лечения аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, в частности для лечения аллергического ринита.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение описано в терминах, известных и понятных специалистам в данной области техники. Для облегчения ссылок здесь определены некоторые термины. Однако тот факт, что определены некоторые термины, не следует рассматривать как показатель того, что определенные термины используются таким образом, что не согласуются с обычным значением или, альтернативно, что какойлибо термин, который не определен, является не идентифицированным или не используется в обычном и приемлемом смысле. Скорее полагают, что все использованные здесь термины описывают изобретение таким образом, что специалист в данной области техники может понять объем настоящего изобретения. Следующие определения предназначены для разъяснения, а не ограничения определенных терминов.
Ссылки на алкил включают ссылки на алифатические изомеры с прямой и разветвленной цепью соответствующего алкила, содержащего вплоть до шести атомов углерода, например вплоть до четырех атомов углерода или вплоть до двух атомов углерода. Такие ссылки на алкил также применимы тогда, когда алкильная группа представляет собой часть другой группы, например алкиламино или алкоксигруппы. Примеры таких алкильных групп и групп, содержащих алкильные группы, представляют собой С!-6алкил, С!-6алкиламино и С!-6алкокси.
- 4 020631
Ссылки на циклоалкил относятся к моноциклическим алкильным группам, содержащим от трех до семи атомов углерода, например четыре атома углерода, или пять атомов углерода, или шесть атомов углерода. Такие ссылки на циклоалкил также применимы тогда, когда циклоалкильная группа представляет собой часть другой группы, например циклоалкоксигруппы. Примеры таких циклоалкильных групп представляют собой циклобутил, циклопентил и циклогексил.
Ссылки на гетероцикл или гетероциклил относятся к моноциклическому насыщенному гетероциклическому алифатическому кольцу, содержащему 3-7 атомов углерода и один гетероатом, который представляет собой азот. Такое гетероциклическое кольцо представляет собой азетидин или азетидинил, пирролидин или пирролидинил, пиперидин или пиперидинил, гексагидроазепин или гексагидроазепинил и октагидроазоцин или гексагидро-(2Н)-азоцинил.
Ссылки на галоген относятся к йоду, брому, хлору или фтору, типично брому, хлору или фтору. Ссылки на галогено относятся к йодо, бромо, хлоро или фторо, типично бромо, хлоро или фторо.
Следует понимать, что приведенные здесь ссылки на соединения по изобретению означают соединение формулы (I) в виде свободного основания или в виде соли, например фармацевтически приемлемой соли.
Соли соединений формулы (I) включают фармацевтически приемлемые соли и соли, которые могут не быть фармацевтически приемлемыми, но могут быть полезны при получении соединений формулы и их фармацевтически приемлемых солей. Соли могут быть получены из некоторых неорганических или органических кислот или некоторых неорганических или органических оснований.
Изобретение включает в своем объеме все возможные стехиометрические и нестехиометрические формы солей соединений формулы (I).
Примеры солей представляют собой фармацевтически приемлемые соли. Фармацевтически приемлемые соли включают соли присоединения кислот и соли присоединения оснований. Обзор подходящих солей см. в Вегде е! а1., 1. Рйатт. δει., 66:1-19 (1977).
Примеры фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот соединений формулы (I) включают соли гидробромид, гидрохлорид, сульфат, паратолуолсульфонат, метансульфонат, нафталинсульфонат и фенилсульфонат.
Соли могут быть получены с использованием способов, хорошо известных в данной области техники, например осаждением из раствора с последующим фильтрованием или выпариванием растворителя.
Типично, фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты может быть получена путем взаимодействия соединения формулы (I) с подходящей сильной кислотой (такой как бромистоводородная, соляная, серная, паратолуолсульфоновая, метансульфоновая или нафталинсульфоновая кислоты), возможно в подходящем растворителе, таком как органический растворитель, с получением соли, которую обычно выделяют, например, путем кристаллизации и фильтрования.
Следует понимать, что многие органические соединения могут образовывать комплексы с растворителями, в которых они вступают во взаимодействие или из которых они осаждаются или кристаллизуются. Эти комплексы известны как сольваты. Например, комплекс с водой известен как гидрат. Растворители, обладающие высокой температурой кипения, и/или растворители, обладающие высокой тенденцией образовывать водородные связи, такие как вода, этанол, изопропиловый спирт и Ν-метилпирролидинон, могут быть использованы для образования сольватов. Способы идентификации сольватов включают ЯМР (ядерный магнитный резонанс) и микроанализ, но не ограничиваются ими. Сольваты соединений формулы (I) находятся в объеме изобретения. Использованный здесь термин сольват охватывает сольваты свободного основания соединения, а также любой его соли.
Некоторые из соединений по изобретению могут содержать хиральные атомы и/или множественные связи и, следовательно, могут существовать в одной или более чем одной стереоизомерной форме. Настоящее изобретение охватывает все из стереоизомеров соединений по изобретению, включая оптические изомеры, в виде индивидуальных стереоизомеров или в виде их смесей, включая рацемические модификации. Любой стереоизомер может содержать менее 10 мас.%, например менее 5 мас.% или менее 0,5 мас.% любого другого стереоизомера. Например, любой оптический изомер может содержать менее 10 мас.%, например менее 5 мас.% или менее 0,5 мас.% своего антипода.
Некоторые из соединений по изобретению могут существовать в таутомерных формах. Понятно, что настоящее изобретение охватывает все из таутомеров соединений по изобретению в виде индивидуальных таутомеров или в виде их смесей.
Соединения по изобретению могут находиться в кристаллической или аморфной форме. Кроме того, некоторые из кристаллических форм соединений по изобретению могут существовать в виде полиморфов, все из которых включены в объем настоящего изобретения. Наиболее термодинамически стабильная полиморфная форма или формы соединений по изобретению представляют особенный интерес.
Полиморфные формы соединений по изобретению могут быть охарактеризованы и дифференцированы с использованием множества обычных аналитических способов, включающих дифракцию рентгеновских лучей на порошке (ΧΚΡΌ), инфракрасную спектроскопию (ТК.), рамановскую спектроскопию, дифференциальную сканирующую калориметрию (ЭЗС). термогравиметрический анализ (ТСА) и ядерный магнитный резонанс твердого состояния (δδΝΜΚ), но не ограничивающихся ими.
- 5 020631
Из предшествующего описания понятно, что в объем изобретения включены сольваты, гидраты, изомеры и полиморфные формы соединений формулы (I) и их соли и сольваты.
Примеры болезненных состояний, при которых соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли обладают потенциально благоприятными эффектами, включают аллергические заболевания и другие воспалительные состояния, например аллергический ринит и астма, инфекционные заболевания и рак. Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть использованы в качестве вакцинных адъювантов.
В качестве модуляторов иммунного ответа соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть полезны, взятые отдельно или в комбинации, в качестве адъюванта в лечении и/или предупреждении опосредованных иммунной системой расстройств, включающих воспалительные или аллергические заболевания, такие как астма, аллергический ринит и риноконъюнктивит, пищевая аллергия, гиперчувствительность легкого, эозинофильная пневмония, расстройства гиперчувствительности замедленного типа, атеросклероз, панкреатит, гастрит, колит, остеоартрит, псориаз, саркоидоз, легочный фиброз, респираторный дистресс-синдром, бронхиолит, хроническое обструктивное заболевание легкого, синусит, муковисцидоз, актинический кератоз, кожная дисплазия, хроническая крапивница, экзема и все типы дерматита, но не ограничивающихся ими.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть полезны в лечении и/или предупреждении реакций против респираторных инфекций, включающих обострения вирусных заболеваний дыхательных путей и тонзиллит, но не ограничивающихся ими. Соединения также могут быть полезны в лечении и/или предупреждении аутоиммунных заболеваний, включающих ревматоидный артрит, псориатический артрит, системную красную волчанку, синдром Шегрена, анкилозирующий спондилоартрит, склеродермию, дерматомиозит, сахарный диабет, отторжение трансплантата, включая заболевание трансплантат против хозяина, воспалительные заболевания кишечника, включающие без ограничения болезнь Крона и неспецифический язвенный колит, но не ограничивающихся ими.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть полезны в лечении инфекционных заболеваний, включающих заболевания, вызванные вирусами гепатита (например, вирусом гепатита В, вирусом гепатита С), вирусом иммунодефицита человека, папилломавирусами, вирусами герпеса, респираторными вирусами (например, вирусами гриппа, респираторно-синцитиальным вирусом, риновирусом, метапневмовирусом, вирусом парагриппа, δΆΚδ) и вирусом Западного Нила, но не ограничивающихся ими. Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть полезны в лечении микробных инфекций, вызванных, например, бактериями, грибами или простейшими. Они включают туберкулез, бактериальную пневмонию, аспергиллез, гистоплазмоз, кандидоз, пневмоцитоз, лепру, хламидиоз, криптококковое заболевание, криптоспоридиоз, токсоплазмоз, лейшманию, малярию и трипаносомоз, но не ограничиваются ими.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть полезны в лечении различных форм рака, в частности лечении форм рака, которые, как известно, чувствительны к иммунотерапии и включают почечно-клеточный рак, рак легкого, рак молочной железы, колоректальный рак, рак мочевого пузыря, меланому, лейкоз, лимфомы и рак яичника, но не ограничиваются ими.
Специалисту в данной области техники понятно, что приведенные здесь ссылки на лечение или терапию в зависимости от состояния могут распространяться на профилактику, а также лечение установленных состояний.
В соответствии с упомянутым здесь соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть полезны в качестве терапевтических агентов.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть изготовлены в виде препаратов для введения любым удобным путем.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть изготовлены, например, для перорального, местного, ингаляционного, интраназального, трансбуккального, парентерального (например, внутривенного, подкожного, внутрикожного или внутримышечного) или ректального введения. В одном из аспектов соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли готовят для перорального введения. В еще одном аспекте соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли готовят для местного введения, например интраназального или ингаляционного введения.
Таблетки и капсулы для перорального введения могут содержать обычные эксципиенты, такие как связывающие агенты, например жидкую смолу, аравийскую камедь, желатин, сорбит, трагакантовую камедь, клейкое вещество крахмала, целлюлозу или поливинилпирролидон; наполнители, например лактозу, микрокристаллическую целлюлозу, сахар, кукурузный крахмал, ортофосфат кальция или сорбит; смазывающие вещества, например стеарат магния, стеариновую кислоту, тальк, полиэтиленгликоль или диоксид кремния; разрыхлители, например картофельный крахмал, натрий-кроскармеллозу или натрийкрахмалгликолят; или увлажнители, такие как лаурилсульфат натрия. Таблетки могут быть покрыты оболочкой в соответствии со способами, известными в данной области техники.
Жидкие препараты для перорального введения могут находиться в форме, например, водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или эликсиров или могут быть представлены в виде
- 6 020631 безводного продукта для разведения перед использованием водой или другим подходящим разбавителем. Такие жидкие препараты могут содержать обычные добавки, такие как суспендирующие агенты, например сироп сорбита, метилцеллюлозу, глюкозный/сахарный сироп, желатин, гидроксиметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, гель стеарата алюминия или гидрогенированные пищевые жиры; эмульгаторы, например лецитин, сорбитанмоноолеат или аравийскую камедь; неводные разбавители (которые могут включать пищевые масла), например миндальное масло, фракционированное кокосовое масло, масляные сложные эфиры, пропиленгликоль или этиловый спирт; или консерванты, например метилили пропил-пара-гидроксибензоаты или сорбиновую кислоту. Препараты также могут содержать при необходимости буферные соли, корригенты, красители и/или подсластители (например, маннит).
Композиции для интраназального введения включают водные композиции, вводимые в нос при помощи капель или при помощи нагнетаемой помпы. Подходящие композиции для этой цели содержат воду в качестве разбавителя или носителя. Композиции для введения в легкое или нос могут содержать один или более чем один эксципиент, например один или более чем один суспендирующий агент, один или более чем один консервант, одно или более чем одно поверхностно-активное вещество, один или более чем один агент, регулирующий тоничность, один или более чем один сорастворитель, и могут включать компоненты для контроля рН композиции, например буферную систему. Кроме того, композиции может содержать другие эксципиенты, такие как антиоксиданты, например метабисульфит натрия, и агенты, маскирующие вкус. Композиции также могут быть введены в носовую полость или другие части дыхательных путей посредством распыления.
Композиции для интраназального введения могут обеспечить доставку соединения(й) формулы (I) или его (их) фармацевтически приемлемой(ых) соли(ей) во все области носовых полостей (тканьмишень) и, кроме того, могут обеспечить контакт соединения(й) формулы (I) или его(их) фармацевтически приемлемой(ых) соли(ей) с тканью-мишенью в течение более длительных периодов времени. Подходящая схема введения дозы для композиций для интраназального введения является такой, когда пациент медленно ингалирует через нос после очистки носовой полости. Во время ингаляции композиция может быть введена в одну ноздрю, тогда как другая зажимается вручную. Эта процедура затем может быть повторена для другой ноздри. Типично, один или два спрея на ноздрю могут быть введены при помощи вышеприведенной процедуры один, два или три раза в сутки, идеально один раз в сутки. Особенный интерес представляют композиции для интраназального введения, подходящие для введения один раз в сутки.
Если суспендирующий(ие) агент(ы) включен(ы), то он(и) типично представлен(ы) в количестве от 0,1 до 5% (мас./мас.), таком как от 1,5 до 2,4% (мас./мас.), в расчете на общую массу композиции. Примеры фармацевтически приемлемых суспендирующих агентов включают Άνίοβΐ® (микрокристаллическая целлюлоза и натриевая карбоксиметилцеллюлоза), натриевую карбоксиметилцеллюлозу, вигум, трагакантовую камедь, бентонит, метилцеллюлозу, ксантановую смолу, карбопол и полиэтиленгликоли, но не ограничиваются ими.
Композиции для введения в легкое или нос могут содержать один или более чем один эксципиент, могут быть защищены от микробной или грибковой контаминации и роста путем включения одного или более чем одного консерванта. Примеры фармацевтически приемлемых противомикробных агентов или консервантов включают четвертичные аммониевые соединения (например, бензалконий хлорид, бензэтоний хлорид, цетримид, цетилпиридиний хлорид, лаурилалконий хлорид и миристилпиколиний хлорид), ртутные агенты (например, нитрат фенилртути, ацетат фенилртути и тимеросал), спиртовые агенты (например, хлорбутанол, фенилэтиловый спирт и бензиловый спирт), антибактериальные сложные эфиры (например, сложные эфиры парагидроксибензойной кислоты), хелатообразующие агенты, такие как динатрия эдетат (ЕБТА), и другие антимикробные агенты, такие как хлоргексидин, хлоркрезол, сорбиновая кислота и ее соли (такие как сорбат калия) и полимиксин, но не ограничиваются ими. Примеры фармацевтически приемлемых противогрибковых агентов или консервантов включают бензоат натрия, сорбиновую кислоту, пропионат натрия, метилпарабен, этилпарабен, пропилпарабен и бутилпарабен, но не ограничиваются ими. Если включен консервант(ы), то он может быть представлен в количестве от 0,001 до 1% (мас./мас.), таком как от 0,015 до 0,5% (мас./мас.), в расчете на общую массу композиции.
Композиции (например, где по меньшей мере одно соединение находится в суспензии) могут включать одно или более чем одно поверхностно-активное вещество, которое действует для облегчения растворения частиц лекарственного средства в водной фазе композиции. Например, количество используемого поверхностно-активного вещества представляет собой количество, которое не вызывает вспенивания во время смешивания. Примеры фармацевтически приемлемых поверхностно-активных веществ включают спирты жирных кислот, сложные и простые эфиры, такие как полиоксиэтилен (20) сорбитанмоноолеат (Ро1у8ОгЬа1е 80), простые эфиры макрогола и полоксамеры. Поверхностно-активное вещество может быть представлено в количестве, составляющем от приблизительно 0,01 до 10% (мас./мас.), таком как от 0,01 до 0,75% (мас./мас.), например приблизительно 0,5% (мас./мас.), в расчете на общую массу композиции.
- 7 020631
Один или более чем один агент, регулирующий тоничность, может быть включен для достижения тоничности с жидкостями организма, например жидкостями в носовой полости, приводя в результате к уменьшенным уровням раздражения. Примеры фармацевтически приемлемых агентов, регулирующих тоничность, включают хлорид натрия, декстрозу, ксилит, хлорид кальция, глюкозу, глицерин и сорбит, но не ограничиваются ими. Если присутствует агент, регулирующий тоничность, то он может быть включен в количестве от 0,1 до 10% (мас./мас.), таком как от 4,5 до 5,5% (мас./мас.), например приблизительно 5,0% (мас./мас.), в расчете на общую массу композиции.
Композиции по изобретению могут быть забуферены путем добавления подходящих забуферивающих агентов, таких как цитрат натрия, лимонная кислота, трометамол, фосфаты, такие как двузамещенный фосфат натрия (например, додекагидрат, гептагидрат, дигидрат и безводные формы), или ортофосфат натрия и их смеси.
Если присутствует забуферивающий агент, то он может быть включен в количестве от 0,1 до 5% (мас./мас.), например от 1 до 3% (мас./мас.), в расчете на общую массу композиции.
Примеры агентов, маскирующих вкус, включают сукралозу, сахарозу, сахарин или его соль, фруктозу, декстрозу, глицерин, кукурузный сироп, аспартам, ацесульфам-К, ксилит, сорбит, эритрит, глицирризинат аммония, тауматин, неотам, маннит, ментол, эвкалиптовое масло, камфору, природный корригент, искусственный корригент и их комбинации.
Один или более чем один сорастворитель может быть включен для того, чтобы способствовать растворимости лекарственного(ых) соединения(й) и/или других эксципиентов. Примеры фармацевтически приемлемых сорастворителей включают пропиленгликоль, дипропиленгликоль, этиленгликоль, глицерин, этанол, полиэтиленгликоли (например, ΡΕ0300 или РЕ0400) и метанол, но не ограничиваются ими. В одном из воплощений сорастворитель представляет собой пропиленгликоль.
Если присутствует сорастворитель(и), то он может быть включен в количестве от 0,05 до 30% (мас./мас.), таком как от 1 до 25% (мас./мас.), например от 1 до 10% (мас./мас.), в расчете на общую массу композиции.
Композиции для ингаляционного введения включают водные, органические или водные/органические смеси, сухие порошковые или кристаллические композиции, вводимые в дыхательные пути при помощи сжимаемого насоса или ингалятора, например сухих порошковых ингаляторов с резервуаром, сухих порошковых ингаляторов, содержащих разовую дозу, сухих порошковых ингаляторов с предварительно отмеренными дробными дозами, назальных ингаляторов или аэрозольных ингаляторов под давлением, распылителей или инсуффляторов. Подходящие композиции содержат воду в качестве разбавителя или носителя для этой цели и могут быть предложены с обычными эксципиентами, такими как буферные агенты, агенты, модифицирующие тоничность, и т.п. Водные композиции также могут быть введены в нос и другие части дыхательных путей посредством распыления. Такие композиции могут представлять собой водные растворы или суспензии либо аэрозоли, доставляемые из упаковок под давлением, таких как дозирующий ингалятор, с использованием подходящего сжиженного пропеллента.
Композиции для местного введения в нос (например, для лечения ринита) или в легкое включают аэрозольные композиции под давлением и водные композиции, доставляемые в носовые полости при помощи сжимаемого насоса. Особенный интерес представляют композиции, которые не находятся под давлением и подходят для местного введения в носовую полость. Подходящие композиции содержат воду в качестве разбавителя или носителя для этой цели. Водные композиции для введения в легкое или нос могут быть предложены с обычными эксципиентами, такими как буферные агенты, агенты, модифицирующие тоничность, и т.п. Водные композиции также могут быть введены в нос посредством распыления.
Жидкостный диспенсер может типично быть использован для доставки жидкой композиции в носовые полости. Жидкая композиция может быть водной или неводной, но обычно водной. Такой жидкостный диспенсер может иметь раздаточную форсунку или раздаточное отверстие, через которое выдается отмеренная доза жидкой композиции при приложении пользователем силы к нагнетающему механизму жидкостного диспенсера. Такие жидкостные диспенсеры, как правило, оборудованы резервуаром с большим количеством отмеренных доз жидкой композиции, причем дозы выдаются при последовательных приведениях в действие насоса. Раздаточные форсунка или отверстие могут быть выполнены с возможностью вставления в ноздри пользователя для выдачи жидкой композиции в виде спрея в носовую полость. Жидкостный диспенсер вышеупомянутого типа описан и проиллюстрирован в публикации международной заявки \УО 2005/044354 (О1ахо Огоир Ышйей). Диспенсер имеет кожух, который вмещает нагнетающее жидкость устройство, имеющее нагнетающий насос, установленный на контейнере, содержащем жидкую композицию. Кожух имеет по меньшей мере один приводимый в действие пальцем боковой рычаг, который выполнен с возможностью перемещения внутрь относительно кожуха для перемещения контейнера вверх в кожухе при помощи эксцентрика, приводя к тому, что насос сжимается и выталкивает отмеренную дозу композиции из стержня насоса через назальную форсунку кожуха. В одном из вариантов выполнения жидкостный диспенсер представляет собой диспенсер общего типа, проиллюстрированный на фиг. 30-40 в \УО 2005/044354.
- 8 020631
Водные композиции, содержащие соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, также могут быть доставлены при помощи насоса, как раскрыто в публикации международной заявки ^02007/138084 (О1ахо Отоир ЫпШеб). например, как раскрыто со ссылкой на фиг. 22-46 в ней, или как раскрыто в заявке на патент Великобритании № ОВ0723418.0 (О1ахо Огоир Ытйеб), например, как раскрыто со ссылкой на фиг. 7-32 в ней. Насос может быть приведен в действие при помощи привода, как раскрыто на фиг. 1-6 ВОВ0723418.0.
Сухие порошкообразные композиции для местной доставки в легкое путем ингаляции могут быть представлены, например, в капсулах и картриджах, например из желатина, или блистерах, например из ламинированной алюминиевой фольги, для применения в ингаляторе или инсуффляторе. Порошковые композиции, как правило,. содержат порошкообразную смесь для ингаляции соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли и подходящего порошкообразного основания (вещество носитель/разбавитель/эксципиент), такого как моно-, ди- или полисахариды (например, лактоза или крахмал). Сухие порошкообразные композиции также могут включать, в дополнение к лекарственному средству и носителю, дополнительный эксципиент (например, третичный агент, такой как эфир сахара, например целлобиозы октаацетат, стеарат кальция или стеарат магния).
В одном из воплощений композиция, подходящая для ингаляционного введения, может быть включена во множество контейнеров с заключенной дозой, устроенных на медицинскую упаковку(и), закрепляемую(ые) внутри подходящего ингалирующего устройства. Контейнеры могут быть протыкаемыми, вскрываемыми или иным образом раскрываемыми поочередно, и дозы сухой порошкообразной композиции введены путем ингаляции через мундштук ингалирующего устройства, как известно в данной области техники. Упаковка лекарственного средства может принимать множество различных форм, например форму диска или удлиненной полоски. Типичные ингалирующие устройства представляют собой устройства ΌΙδΚΗΛΤΕΚ™ и ΌΙδΚυδ™, поставляемые на рынок О1ахо8тййК1ше.
Сухая порошкообразная ингалируемая композиция также может быть доставлена при помощи объемного резервуара в ингалирующем устройстве, где устройство тогда может быть оснащено дозирующим механизмом, отмеривающим дозу композиции из резервуара в ингалирующий канал, где эта отмеренная доза готова для ингалирования пациентом через мундштук данного устройства. Примеры представленных на рынке устройств этого типа представляют собой ТиКВиНАЬЕК™ (А81та2епеса), Т^ШТНАЬЕК™ (§сйетшд) и СЫСКНАЬЕК™ (1ииоуа1а.)
Еще один способ доставки сухой порошкообразной ингалируемой композиции заключается в том, чтобы отмеренные дозы композиции были представлены в капсулах (одна доза на капсулу), которые затем загружаются в ингаляционное устройство, как правило, при потребности пациента. Устройство имеет средства для прокалывания, прорыва или открывания иным образом капсулы, таким образом, чтобы доза могла проникнуть в легкое пациента при ее ингаляции через мундштук устройства. В качестве представленных на рынке примеров таких устройств можно упомянуть КОТАНАЬЕК™ (О1ахо8тйЬК1ше) и НАЫОИАЕЕК™ (ВоеЬттдет 1п§е1йе1т.)
Аэрозольные композиции под давлением, подходящие для ингаляции, могут представлять собой суспензии или раствор и могут содержать соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и подходящий пропеллент, такой как фторуглерод или содержащий водород хлорфторуглерод или их смеси, в частности гидрофторалканы, в частности 1,1,1,2-тетрафторэтан, 1,1,1,2,3,3,3-гептафторн-пропан или их смесь. Аэрозольная композиция может содержать дополнительные эксципиенты композиции, хорошо известные в данной области техники, такие как поверхностно-активные вещества, например олеиновую кислоту, лецитин или олигомолочную кислоту или ее производное, например, как описано в \УО 94/21229 и \УО 98/34596 (М1иие8о1а Μίηίη§ апб МапиГас1игш§ Сотрапу), и сорастворители, например этанол. Композиции под давлением, как правило, содержатся в контейнере (например, алюминиевом контейнере), закрытом клапаном (например, отмеривающим клапаном), и заполняются в активатор, оборудованный мундштуком.
Мази, кремы и гели, например, могут быть приготовлены с водной или масляной основой при добавлении подходящего загустителя и/или гелеобразующего агента и/или растворителей. Таким образом, такие основы могут, например, включать воду и/или масло, такое как жидкий парафин или растительное масло, такое как арахисовое масло или касторовое масло, или растворитель, такой как полиэтиленгликоль. Загустители и гелеобразующие агенты, которые могут быть использованы в соответствии с природой основы, включают мягкий парафин, стеарат алюминия, цетостеариловый спирт, полиэтиленгликоли, ланолин, пчелиный воск, карбоксиполиметилен и производные целлюлозы, и/или глицерилмоностеарат ,и/или неионные эмульгаторы.
Лосьоны могут быть приготовлены с водной или масляной основой и, как правило, также содержат один или более чем один эмульгатор, стабилизатор, диспергирующий агент, суспендирующий агент или загуститель.
Порошки для наружного применения могут быть приготовлены с помощью любой подходящей порошковой основы, например талька, лактозы или крахмала. Капли могут быть приготовлены с водным или неводным основанием, также содержащим один или более чем один диспергирующий агент, солю- 9 020631 билизирующий агент, суспендирующий агент или консервант.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут, например, быть приготовлены для трансдермальной доставки путем помещения композиции в пластыри или другие устройства (например, устройства со сжатым газом), которые доставляют активный компонент в кожу.
Для трансбуккального введения композиции могут принимать форму таблеток или лепешек, приготовленных традиционным образом.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть приготовлены в виде суппозиториев, например, содержащих обычные основы суппозиториев, такие как масло какао или другие глицериды.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть приготовлены для парентерального введения путем болюсной инъекции или непрерывной инфузии и могут быть представлены в стандартной лекарственной форме, например в виде ампул, флаконов, инфузий небольшого объема или предварительно заполненных шприцев, или в многодозовых контейнерах с добавленным консервантом. Композиции могут принимать такие формы, как растворы, суспензии или эмульсии в водных или неводных разбавителях, и могут содержать агенты, используемые при приготовлении, такие как антиоксиданты, буферы, антимикробные агенты и/или агенты, регулирующие тоничность. Альтернативно, активный ингредиент может находиться в порошкообразной форме для разведения перед использованием подходящим разбавителем, например стерильной апирогенной водой. Сухая твердая композиция может быть приготовлена путем асептического заполнения стерильного порошка в индивидуальные стерильные контейнеры или путем асептического заполнения стерильного раствора в каждый контейнер и лиофилизации.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть приготовлены с вакцинами в качестве адъювантов для модуляции их активности. Такие композиции могут содержать антитело(а) или фрагмент(ы) антитела или антигенный компонент, включающий белок, ДНК, живые или мертвые бактерии и/или вирусы, или вирусоподобные частицы вместе с одним или более чем одним компонентом, обладающим адъювантной активностью, включая соли алюминия, масляные и водные эмульсии, но не ограничиваясь ими, белки теплового шока, препараты и производные липида А, гликолипиды, другие агонисты ТЬК, такие как СрО ДНК или подобные агенты, цитокины, такие как ОМ-С8Р (колониестимулирующий гранулоцитарно-макрофагеальный фактор) или ГЬ-12 или подобные агенты, но не ограничиваясь ими.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы отдельно или в комбинации с другими терапевтическими агентами. Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли и другой фармацевтически активный агент(ы) могут быть введены вместе или раздельно, и при раздельном введении последнее может быть осуществлено одновременно или последовательно в любом порядке. Количества соединения(й) формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей и другого фармацевтически активного агента(ов) и относительные времена введения выбирают таким образом, чтобы достичь желаемого объединенного терапевтического эффекта. Введение комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли с другими агентами для лечения может быть осуществлено путем одновременного введения в одной фармацевтической композиции, включающей оба соединения, или в отдельных фармацевтических композициях, каждая из которых включает одно из соединений. Альтернативно, комбинация может быть введена по отдельности последовательным образом, когда один агент для введения вводят первым, а другой вторым, или наоборот. Такое последовательное введение может быть близким по времени или удаленным по времени.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы в комбинации с одним или более чем одним агентом, полезным в предупреждении или лечении вирусных инфекций. Примеры таких агентов включают, без ограничения, ингибиторы полимеразы, такие как раскрытые в АО 2004/037818-А1, а также раскрытые в АО 2004/037818 и АО 2006/045613; ЛК-003, ЛК-019, ΝΜ-283, НСУ-796, К-803, К1728, К1626, а также раскрытые в АО 2006/018725, АО 2004/074270, АО 2003/095441, И82005/0176701, АО 2006/020082, АО 2005/080388, АО 2004/064925,
АО 2004/065367, АО 2003/007945, АО 02/04425, АО 2005/014543, АО 2003/000254, ЕР 1065213, АО 01/47883, АО 2002/057287, АО 2002/057245, и подобные агенты; ингибиторы репликации, такие как ацикловир, фамцикловир, ганцикловир, цидофовир, ламивудин и подобные агенты; ингибиторы протеазы, такие как ингибиторы протеазы ШУ (вируса иммунодефицита человека), саквинавир, ритонавир, индинавир, нелфинавир, ампренавир, фосампренавир, бреканавир, атазанавир, типранавир, палинавир, ласинавир, и ингибиторы протеазы НСУ (вируса гепатита С) Β!ΡΝ2061. УХ-950, 8СН503034; и подобные агенты; нуклеозидные и нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы, такие как зидовудин, диданозин, ламивудин, залцитабин, абакавир, ставидин, адефовир, адефовир дипивоксил, фозивудин, тодоксил, эмтрицитабин, аловудин, амдоксовир, элвуцитабин и подобные агенты; ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (включающие агент, обладающий антиоксидантной активностью, такой как иммунокал, олтипраз и т.д.), такие как невирапин, делавирдин, эфавиренз, ловирид, иммунокал, олтипраз, каправирин, ТМС-278, ТМС-125, этравирин и подобные агенты; ингибиторы проникновения, такие как энфувиртид (Т-20), Т-1249, РКО-542, РКО-140, ΤΝΧ-355, ВМ8-806, 5-Нейх и подобные агенты; ин- 10 020631 гибиторы интегразы, такие как Ь-870180 и подобные агенты; ингибиторы активной репликации вируса после проникновения в клетку, такие как РА-344 и РА-457 и подобные агенты; ингибиторы хемокинового рецептора, такие как викривирок (8ей-С), δοΗ-Ω. ТАК779, маравирок (ИК-427,857), ТАК449, а также раскрытые в АО 02/74769, АО 2004/054974, АО 2004/055012, АО 2004/055010, АО 2004/055016, АО 2004/055011 и АО 2004/054581, и подобные агенты; ингибиторы нейраминидазы, такие как С8-8958, занамивир, оселтамивир, перамивир и подобные агенты; блокаторы ионных каналов, такие как амантадин или римантадин, и подобные агенты; и интерферирующая РНК и антисмысловые олигонуклеотиды, такие как 1818-14803 и подобные агенты; антивирусные агенты неустановленного механизма действия, например, раскрытые в АО 2005/105761, АО 2003/085375, АО 2006/122011, рибавирин и подобные агенты. Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть использованы в комбинации с одним или более чем одним другим агентом, который может быть полезен в профилактике или лечении вирусных инфекций, например, иммунотерапевтическим средством (например, интерфероном или другими цитокинами/хемокинами, модуляторами цитокинового/хемокинового рецептора, цитокиновыми агонистами или антагонистами и подобными агентами); и терапевтическими вакцинами, противофиброзными агентами, противовоспалительными агентами, такими как кортикостероиды или Ν8ΑΙΌ (нестероидные противовоспалительные агенты) и подобными агентами.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы в комбинации с одним или более чем одним другим агентом, который может быть полезен в предупреждении или лечении аллергического заболевания, воспалительного заболевания, аутоиммунного заболевания, например антигенным иммунотерапевтическим средством, антигистаминами, стероидами, Ν8ΑΙΌ, бронходилататорами (например, бета-2 агонистами, адренергическими агонистами, антихолинергическими агентами, теофиллином), метотрексатом, лейкотриеновыми модуляторами и подобными агентами; терапией моноклональными антителами, такими как антитела против 1дЕ, антитела против ΤΝΡ (фактор некроза опухоли), антитела против 1Ь-5, антитела против 1Ь-6, антитела против ГЬ-12, антитела против ГЬ-1 и подобные агенты; рецепторной терапией, например энтанерцепт и подобные агенты; антигеннеспецифическими иммунотерапевтическими средствами (например, интерферон или другие цитокины/хемокины, модуляторы цитокинового/хемокинового рецептора, цитокиновые агонисты или антагонисты, агонисты ТЬК и подобные агенты).
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы в комбинации с одним или более чем одним другим агентом, который может быть полезен в предупреждении или лечении рака, например химиотерапевтическими агентами, такими как алкилирующие агенты, ингибиторы топоизомеразы, антиметаболиты, антимитотические агенты, ингибиторы киназы и подобные агенты; агентами для терапии моноклональными антителами, такими как трастузумаб, гемтузумаб и другие подобные агенты; и агентами для гормональной терапии, такими как тамоксифен, гозерелин и подобные агенты.
Фармацевтические композиции по изобретению также могут быть использованы отдельно или в комбинации по меньшей мере с одним другим терапевтическим агентом в других терапевтических областях, например при желудочно-кишечном заболевании. Композиции по изобретению также могут быть использованы в комбинации с гензаместительной терапией.
Изобретение раскрывает комбинацию, содержащую соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль вместе по меньшей мере с одним другим терапевтически активным агентом.
Вышеупомянутые комбинации для удобства могут быть представлены для применения в форме фармацевтической композиции, и, таким образом, фармацевтические композиции, содержащие комбинацию, определенную выше, вместе по меньшей мере с одним ее фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, также раскрыты в изобретении.
Терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли зависит от множества факторов. Например, вид, возраст и масса тела реципиента, точное состояние, которое требует лечения, и его тяжесть, природа композиции и путь введения представляют собой факторы, которые следует рассматривать. Терапевтически эффективное количество в конечном итоге должно находиться на усмотрении лечащего врача. Вне зависимости, эффективное количество соединения по настоящему изобретению для лечения людей, страдающих болезнью, как правило, должно находиться в диапазоне от 0,0001 до 100 мг/кг массы тела реципиента в сутки. Обычно эффективное количество должно находиться в диапазоне от 0,001 до 10 мг/кг массы тела в сутки. Таким образом, для взрослого человека массой 70 кг один пример действительного количества в сутки обычно может составлять от 7 до 700 мг. Для интраназального и ингаляционного путей введения типичные дозы для взрослого человека массой 70 кг должны находиться в диапазоне от 1 мкг до 1 мг в сутки. Это количество может быть введено в разовой дозе в сутки или во множестве (таких как две, три, четыре, пять или более) субдоз в сутки, так что общая суточная доза является той же самой. Эффективное количество фармацевтически приемлемой соли соединения формулы (I) может быть определено как доля эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли как таковая. Подобные дозы должны подходить для лечения других упомянутых здесь состояний.
- 11 020631
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть введены с любой подходящей частотой, например 1-7 раз в неделю. Точная схема введения доз, безусловно, зависит от факторов, таких как терапевтическое показание, возраст и состояние пациента и конкретный выбранный путь введения.
Фармацевтические композиции могут быть представлены в стандартных лекарственных формах, содержащих предопределенное количество активного ингредиента на стандартную дозу. Такая доза может содержать в качестве не ограничивающего примера от 0,5 мг до 1 г соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в зависимости от состояния, которое лечат, пути введения и возраста, массы тела и состояния пациента. Предпочтительные композиции стандартной дозы представляют собой композиции, содержащие суточную дозу или субдозу, как изложено выше, или ее подходящую фракцию активного ингредиента. Такие фармацевтические композиции могут быть изготовлены любым из способов, хорошо известных в области фармации.
Таким образом, дополнительно предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
Также раскрыт способ изготовления такой фармацевтической композиции, включающий смешивание соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли с одним или более чем одним фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
В описании и следующей формуле изобретения, если иное не требуется по контексту, следует понимать, что слово содержать и варианты, такие как содержит и содержащий, подразумевают включение указанного целого числа, или стадии, или группы целых чисел, но не исключение какого-либо другого целого числа, или стадии, или группы целых чисел или стадий.
Соединения формулы (I) и его соли могут быть получены описанными ниже способами, составляющими дополнительные аспекты данного изобретения.
Соответственно, раскрыт способ получения соединения формулы (I), включающий удаление защиты с соединения формулы (II)
где К1, т и η являются такими, как определено выше для соединения формулы (I);
К2 представляет собой С1-6алкил и затем при необходимости одну или более чем одну из следующих возможных стадий:
(1) удаление любой необходимой защитной группы;
(2) получение соли образованного таким образом соединения.
Например, соединение формулы (II) растворяют в подходящем растворителе в присутствии раствора подходящей кислоты, например раствора хлороводорода в 1,4-диоксане, и перемешивают при подходящей температуре, например температуре окружающей среды, в течение подходящего периода времени, например 12-24 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в подходящем растворителе, например метаноле, и наносят на ионообменный картридж, например аминопропиловый δΡΕ-картридж. Картридж элюируют подходящим растворителем, например метанолом, и растворитель удаляют с получением соединения формулы (I).
Соединение формулы (II) может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (III)
где К1 и т являются такими, как определено выше для соединения формулы (I);
К2 является таким, как определено выше для соединения формулы (II);
X представляет собой уходящую группу, например группу галогено, такую как бромо или хлоро, с соединением формулы (IV) где η является таким, как определено для соединения формулы (I).
- 12 020631
Например, соединение формулы (III), соединение формулы (IV) и подходящее основание, например Ν,Ν-диизопропилэтиламин, растворяют в подходящем растворителе, например ΌΜΡ (диметилформамид), и нагревают при подходящей температуре, например 50-60°С, в течение подходящего периода времени, например 46-50 ч. При необходимости добавляют дополнительное количество соединения формулы (IV) и основание и эту реакционную смесь нагревают при подходящей температуре, например 50-60°С, в течение подходящего периода времени, например 46-50 ч. Продукт затем экстрагируют из реакционной смеси с использованием обычных способов, например путем распределения между подходящим органическим растворителем и водой, а затем отделения органической фазы и удаления растворителя и при необходимости очистки.
Соединение формулы (III) может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (V), например соли соединения формулы (V), такой как соль трифторацетат:
где К1 является таким, как определено выше для соединения формулы (I); К2 является таким, как определено выше для соединения формулы (II), с соединением формулы (VI)
где т является таким, как определено выше для соединения формулы (I);
X является таким, как определено выше для соединения формулы (III).
Например, соль трифторацетат соединения формулы (V) и подходящее основание, например карбонат калия, суспендируют в подходящем растворителе, например ΌΜΡ, и нагревают до подходящей температуры, например 50-60°С, в подходящей атмосфере, например атмосфере азота, в течение подходящего периода времени, например 20-120 мин. Эту смесь охлаждают до подходящей температуры, например температуры окружающей среды, и добавляют соединение формулы (VI) и перемешивание продолжают при температуре окружающей среды в течение подходящего периода времени, например 18-24 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток распределяют между подходящим растворителем, например ЭСМ. и водой. Неочищенный продукт затем выделяют из органической фазы и очищают обычными способами, такими как колоночная хроматография.
Альтернативно, соединение формулы (II) может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (V), например соли соединения формулы (V), такой как соль трифторацетат, с соединением формулы (VI), где X представляет собой бромо, с соединением формулы (IV) в виде однореакторного способа.
Например, соль трифторацетат соединения формулы (V) растворяют в подходящем растворителе, например ΌΜΡ, и добавляют подходящее основание, например карбонат калия. Реакционную смесь перемешивают при подходящей температуре, например 45-60°С, в подходящей атмосфере, например атмосфере азота, в течение подходящего периода времени, например 1-2 ч, и затем охлаждают до подходящей температуры, например температуры окружающей среды. Затем добавляют соединение формулы (VI), где X представляет собой бромо, и после перемешивания в течение подходящего периода времени, например 40-60 мин, добавляют соединение формулы (IV) и подходящее основание, например триэтиламин, в подходящем растворителе, например ΌΜΡ. Реакционную смесь затем перемешивают в течение подходящего периода времени, например 12-24 ч. Растворитель удаляют и остаток распределяют между подходящим органическим растворителем, например дихлорметаном, и водой. Неочищенный продукт формулы (II) выделяют обычными способами и очищают, например, хроматографией.
Соль соединения формулы (V) может быть получена путем удаления защиты с соединения формулы (VII)
где К1 является таким, как определено выше для соединения формулы (I);
К2 является таким, как определено выше для соединения формулы (II);
Р представляет собой защитную группу, например группу тетрагидро-2Н-пиран-2-ил, в присутствии подходящей кислоты, например трифторуксусной кислоты.
Например, подходящую кислоту, например трифторуксусную кислоту, добавляют к раствору соединения формулы (VII) в подходящем растворителе, например метаноле. Смесь перемешивают при подходящей температуре, например температуре окружающей среды, в течение подходящего периода
- 13 020631 времени, например 48-72 ч. Реакционную смесь затем концентрируют при пониженном давлении, а затем разбавляют подходящим растворителем, например этилацетатом. Получающуюся в результате смесь фильтруют и промывают небольшим объемом подходящего растворителя, например этилацетата, до обесцвечивания фильтрата. Остаток сушат на воздухе и затем при пониженном давлении с получением соли соединения формулы (V). Фильтрат можно сконцентрировать и концентрат разбавить небольшим объемом подходящего растворителя, например этилацетата, и затем отфильтровать и высушить с получением второго выхода соли соединения формулы (V).
Соль соединения формулы (V), например соль трифторацетат, также может быть получена путем
где К1 является таким, как определено выше для соединения формулы (I);
Р является таким, как определено выше для соединения формулы (VII), с подходящим галогенирующим агентом, например Ν-бромсукцинимидом, а затем взаимодействия с алкоксид-анионом, например метоксид-анионом, и затем выделена в присутствии подходящей кислоты, например трифторуксусной кислоты.
Например, к раствору неочищенного соединения формулы (IX) в подходящем безводном растворителе, например безводном хлороформе, при подходящей температуре, например температуре окружающей среды, порциями добавляют подходящий галогенирующий агент, например Ν-бромсукцинимид, в течение подходящего периода времени, например 5 мин. Раствор перемешивают при подходящей температуре, например температуре окружающей среды, в течение подходящего периода времени, например 25-35 мин. Реакционную смесь затем промывают водой и органическую фазу сушат путем, например, пропускания через гидрофобную фритту и концентрируют при пониженном давлении. Полученное в результате твердое вещество растворяют в подходящем безводном растворителе, например безводном метаноле, и добавляют подходящий алкоксид, например раствор метоксида натрия в метаноле, при подходящей температуре, например температуре окружающей среды, в инертной атмосфере, например атмосфере азота. Реакционную смесь нагревают при подходящей температуре, например 60-70°С, с присоединенным конденсатором, в течение подходящего периода времени, например 12-18 ч. Реакционную смесь затем охлаждают и концентрируют при пониженном давлении. Остаток затем суспендируют в подходящем растворителе, например этилацетате, и вливают в подходящую водную среду, например насыщенный водный раствор хлорида аммония. Органический слой отделяют и дополнительно промывают водой, сушат, например, над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. К раствору этого вещества в подходящем безводном растворителе, таком как безводный метанол, при подходящей температуре, например температуре окружающей среды, добавляют подходящую кислоту, например трифторуксусную кислоту. Реакционную смесь перемешивают в течение подходящего периода времени, например 25-35 ч, и концентрируют при пониженном давлении с получением соединения формулы (V).
Соединение формулы (VII) может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (VIII)
где К1 является таким, как определено выше для соединения формулы (I);
Р является таким, как определено выше для соединения формулы (VII);
О представляет собой атом галогена, например атом брома, с алкоксид-анионом, например метоксид-анионом.
Например, раствор соединения формулы (VIII) в подходящем растворителе, например метаноле, нагревают до температуры дефлегмации с раствором подходящего алкоксида, например метоксида натрия, в подходящем растворителе, например метаноле, в течение подходящего периода времени, например 4-5 ч. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и распределяют между подходящим органическим растворителем, например этилацетатом, и подходящей водной средой, например насыщенным водным раствором хлорида аммония. Органическую фазу отделяют, промывают, например, рассолом, и сушат путем, например, пропускания через гидрофобную фритту. Растворитель затем удаляют при пониженном давлении с получением соединения формулы (VII).
Соединение формулы (VIII) может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (IX) с подходящим галогенирующим агентом, таким как Ν-бромсукцинимид.
- 14 020631
Например, соединение формулы (IX) растворяют в подходящем растворителе, например хлороформе, и охлаждают до подходящей температуры, например 0-0,5°С. К этому раствору добавляют подходящий галогенирующий агент, такой как Ν-бромсукцинимид, поддерживая температуру ниже приблизительно 3°С. Раствор перемешивают при подходящей температуре, например 2-3 °С, в течение подходящего периода времени, например 30-45 мин, затем оставляют нагреваться до подходящей температуры, например температуры окружающей среды, и перемешивают в течение подходящего периода времени, например 5-7 ч. Реакционную смесь затем промывают водой и органическую фазу сушат и отделяют от водной фазы с использованием, например, гидрофобной фритты. Органический растворитель затем удаляют и неочищенный продукт очищают, например, хроматографией с получением соединения формулы (VIII).
Соединение формулы (IX), где К1 представляет собой С1-6алкокси, может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (X)
где Р является таким, как определено выше для соединения формулы (VII);
Т представляет собой подходящую уходящую группу, например атом галогена, например атом хлора или атом фтора, с раствором соединения формулы (XIII)
К1-М (XIII), где К1 представляет собой С!-6алкокси;
М представляет собой подходящий лиганд щелочного металла, такого как натрий, приготовленным в растворителе формулы (Ш8)
Р1-Н (ХШ5), где группа К1 в соединении формулы (XIII) является такой же, как группа К1 в растворителе формулы (ИЛЗ).
Например, соединение формулы (XIII), такое как трет-бутоксид натрия, добавляют к растворителю формулы ^08). Смесь перемешивают до гомогенного состояния, затем добавляют соединение формулы (VII). Реакционную смесь нагревают до подходящей температуры, например 100°С, в течение подходящего периода времени, например 12-18 ч. Растворитель в значительной степени удаляют при пониженном давлении и смесь распределяют между подходящим растворителем, например диэтиловым эфиром, и водой. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют дополнительным количеством растворителя. Органические слои затем отделяют, объединяют, сушат с использованием подходящего осушителя, например безводного сульфата магния. Осушитель удаляют путем фильтрования и растворитель удаляют из продукта при пониженном давлении с получением соединения формулы (IX), где К1 представляет собой С1-6алкокси.
Соединение формулы (IX), где К1 представляет собой С1-6алкиламино, может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (X) с соединением формулы (XIV)
К1-Н (XIV), где К1 представляет собой С1-6алкиламино.
Например, соединение формулы (XIV) добавляют к раствору соединения формулы (X) в подходящем безводном растворителе, например безводном этиленгликоле, при подходящей температуре, например температуре окружающей среды, в подходящей инертной атмосфере, например атмосфере азота. Реакционную смесь нагревают при подходящей температуре, например 110-130°С, в течение подходящего периода времени, например 12-18 ч. Реакционную смесь затем охлаждают до подходящей температуры, например температуры окружающей среды, разбавляют подходящим растворителем, например этилацетатом, и промывают водой. Органический слой сушат подходящим осушителем, например безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении с получением соединения формулы (IX), где К1 представляет собой С!-6алкиламино.
Соединение формулы (X) может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (XI)
где Р является таким, как определено выше для соединения формулы (VII);
Т является таким, как определено выше для соединения формулы (X);
V представляет собой подходящую уходящую группу, например атом галогена, например атом хло- 15 020631 ра, со спиртовым раствором аммиака, например раствором аммиака в изопропиловом спирте.
Например, соединение формулы (XI) нагревают со спиртовым раствором аммиака, например 2 М раствором аммиака в изопропиловом спирте, при подходящей температуре, например 50-60°С, в течение подходящего периода времени, например 5-6 ч. Реакционную смесь затем оставляют при подходящей температуре, например температуре окружающей среды, в течение подходящего периода времени, например 12-18 ч. Дополнительное количество спиртового раствора аммиака, например 2 М раствора аммиака в изопропиловом спирте, добавляют для разрушения образующегося в результате осадка и реакционную смесь нагревают в течение дополнительного периода времени, например 8-10 ч, до полного завершения реакции. Воду добавляют к этой реакционной смеси и твердое вещество удаляют путем фильтрования, промывают подходящей промывочной средой, например смесью изопропилового спирта и воды, и затем сушат, например путем сушки на воздухе при аспирации с получением первого выхода соединения формулы (X). Фильтрат оставляют на дополнительный период времени, например 12-18 ч, и образующийся в результате второй выход соединения формулы (X) выделяют путем фильтрования и сушат.
Соединение формулы (X) также может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (XII)
где Т является таким, как определено выше для соединения формулы (X); V является таким, как определено выше для соединения формулы (XI), с соединением формулы (XV)
где Ри представляет собой подходящий предшественник для защитной группы Р, например 3,4-дигидро-2Н-пиранильную группу, с последующим взаимодействием со спиртовым раствором аммиака, например раствором аммиака в изопропиловом спирте.
Например, моногидрат паратолуолсульфоновой кислоты добавляют к раствору соединения формулы (XII) в подходящем безводном растворителе, например безводном этилацетате. Реакционную смесь нагревают до подходящей температуры, например 50-60°С, и добавляют соединение формулы (XV). Реакционную смесь перемешивают при подходящей температуре, например 50-60°С, в течение подходящего периода времени, например 1-2 ч, и растворитель удаляют при пониженном давлении. Суспензию образующегося в результате твердого вещества в спиртовом растворе аммиака, например 2 М растворе аммиака в изопропиловом спирте, нагревают в подходящей инертной атмосфере, например атмосфере азота, при подходящей температуре, например 60-70°С, в течение подходящего периода времени, например 4-5 ч, с присоединенным конденсатором. Реакционную смесь вливают в воду и оставляют охлаждаться в течение подходящего периода времени, например 12-18 ч. Образующийся в результате осадок выделяют путем фильтрования и сушат с получением соединения форму лы (X).
Соединение формулы (X) также может быть получено путем взаимодействия соединения формулы ^А)
с подходящим защитным агентом, например силилирующим агентом, таким как ^О-бис-(триметилсилил)ацетамид, с последующим взаимодействием защищенного соединения формулы (XI А) с соединением формулы №νΕ)
Ри-Е (ХУЕ) где Ри представляет собой подходящий предшественник защитной группы Р, например 3,4-дигидро-2Н-пиранильную группу;
Е представляет собой ацилоксигруппу, например ацетатную группу.
Например, подходящий защитный агент, например ^О-бис-(триметилсилил)ацетамид, добавляют к перемешиваемой суспензии соединения формулы ^^), например 2-фтор-1Н-пурин-6-амина, в подходящем безводном растворителе, например безводном ацетонитриле, и получающуюся в результате смесь нагревают до температуры дефлегмации в течение подходящего периода времени, например 2-3 ч. Реакционную смесь затем охлаждают до подходящей температуры, например 0-5°С. Затем медленно добавляют раствор соединения формулы ^νΕ). например тетрагидропиранилацетата, в подходящем безвод- 16 020631 ном растворителе, например безводном ацетонитриле, а затем по каплям добавляют кислоту Льюиса, например триметилсилил-трифторметансульфонат. Температуру реакционной смеси доводят до подходящей температуры, например 8-15°С, и перемешивание поддерживают в течение дополнительного периода времени, например 1-2 ч. Смесь затем гасят путем добавления 1М карбоната натрия. Органический слой охлаждают до 0°С при перемешивании. Осажденное твердое вещество затем собирают путем, например, фильтрования и сушат.
Соединение формулы (XI) может быть получено путем взаимодействия соединения формулы (XII) с соединением формулы (XV).
Например, к соединению формулы (XII) добавляют подходящий органический растворитель, например этилацетат, а затем паратолуолсульфоновую кислоту. Смесь нагревают до подходящей температуры, например 50-60°С, и затем добавляют 3,4-дигидро-2Н-пиран. Реакционную смесь затем нагревают при подходящей температуре, например 50-60°С, в течение подходящего периода времени, например 4-5 ч. Растворитель затем удаляют из реакционной смеси при пониженном давлении с получением соединения формулы (XI).
Сокращения.
В следующем перечне приведены определения некоторых используемых здесь сокращений. Понятно, что перечень не является избыточным, но значения тех сокращений, которые не определены ниже, легко понятны специалисту в данной области техники.
ΌΕΜ - дихлорметан;
ΌΜΡ - Ν,Ν-диметилформамид;
ΌΜδΟ - диметилсульфоксид;
ЕЮАс - этилацетат;
Е12О - диэтиловый эфир;
НС1 - соляная кислота;
НРЬС - высокоэффективная жидкостная хроматография;
КСО Сотрашоп - автоматическое оборудование для флэш-хроматографии с анализом фракций по УФ (ультрафиолетовому) поглощению, поставляемое Рге8еагсй Ытйей, Ва8ш§81оке, Най8, КС24 8ΡΖ, ИК;
ΜΌΑΡ НРЬС - обращенно-фазовая НРЬС на колонке С18 с использованием градиента двух растворителей и анализа фракций с использованием масс-спектрометрии с распылением электронов;
8РЕ - твердофазная экстракция;
МеОН - метанол; мин - минуты;
8йтррей - десорбированный;
ТРА - трифторуксусная кислота;
1Рг - изопропил; ΐ-Ви - трет-бутил;
Μ8 - мезил;
Ас - ацетил; п-Ви - н-бутил;
Рй - фенил;
к.т. - комнатная температура.
Описанные выше способы синтеза обобщены на схеме 1.
- 17 020631
А. Дигидропиран/паратолуолсульфоновая кислота, например 50°С в течение 3-6 ч.
А1) Дигидропиран/паратолуолсульфоновая кислота, например 50°С в течение 1 ч, затем аммиак/ίΡιΟΗ, например 60°С в течение 4 ч, затем добавляют воду и охлаждают до температуры окружающей среды в течение 12-18 ч.
А2) ΒδΑ в МеСЫ, кипячение с обратным холодильником, охлаждение до 0°С, затем ТНР ацетат в МеСЫ, нагревание до 10°С, затем ЫаНСО3 (водн.);
Β) Аммиак/ίΡτΟΗ, например 50°С в течение 5 ч, затем температура окружающей среды в течение 12-18 ч, затем 50°С в течение 9 ч.
- 18 020631
С) Для Χ=ΝΉ, КА=С1-6алкил: РАМН2/этиленгликоль, например 120°С в течение 12-18 ч; для Ζ=0, КА=С1-6алкил: ΡАΟNа/ΒиΟН/диметоксиэтан, например 93-110°С в течение 12-18 ч.
С1) ΝΒ8 (Ν-бромсукцинимид) в СНС13, например 0-5°С в течение 30 мин, затем температура окружающей среды в течение 0,5-1 ч, затем, например, №0Ме/метаиол при Ν2/60-70°ί.’/12-18 ч, затем ТРА/Ме0Н, например при температуре окружающей среды в течение 18-65 ч.
Ό) ΝΒ8 в СНС13, например 0-5°С в течение 30 мин, затем температура окружающей среды в течение 36-48 ч.
Е) №0Ме/Ме0Н. например кипячение с обратным холодильником в течение 4-6 ч.
Р) ТРА/Ме0Н, например температура окружающей среды в течение 18-65 ч.
О) К2С03/ОМР, затем 50°С в течение 1-1,5 ч, затем добавляют (VI), перемешивают в течение 40 мин, затем добавляют (Γν)/Εί3Ν, затем температура окружающей среды в течение 18 ч.
О1) К2С03/ОМР, затем 50°С в атмосфере Ν2 в течение 30 мин, затем температура окружающей среды, добавляют (VI), перемешивают в течение 20 ч.
О2) Раствор в ОМР с Ν,Ν-диизопропилэтиламином, затем 50°С в течение 48 ч, затем добавляют дополнительное количество (IV), затем еще 50°С в течение 48 ч.
Н) НС1/метанол, затем температура окружающей среды в течение 18 ч.
Соединения формул (IV), (VI), (ΧΗ), (XII), (XIII), (XIV) и (XV) известны из литературы или имеются в продаже, например от 81дта-А1бггеЬ, ИК, или могут быть получены аналогично известным способам, например способам, раскрытым в стандартных изданиях по методологии синтеза, таких как I. МагсЬ, Абуапсеб 0гдайс СЬеткЬу, 6'1' Εάίίίοη (2007), ХУПеуВЬюЛуеП, или СотргеЬеп81уе 0гдатс 8уйЬе818 (Тго81 В.М. апб Р1еттд I., (Еб8.), Регдатоп Рге88, 1991), каждое из которых включено здесь путем ссылки как относящееся к таким способам.
Примеры других защитных групп, которые могут быть использованы в описанных здесь путях синтеза, и способы их удаления можно найти в Τ.ν. Огеепе Рго1есИуе Огоир8 ίη 0гдайс 8уйЬе818, 4'1' ЕбШоп, I. \УПеу & 8оп8, 2006, включенном в данное описание путем ссылки как относящийся к таким способам.
Для любой из описанных ранее реакций или способов могут быть использованы обычные способы нагревания и охлаждения, например масляные бани с регулировкой температуры или термоблоки с регулировкой температуры, и бани лед/соль или бани лед/ацетон соответственно. Могут быть использованы обычные способы выделения, например экстракция из водного или неводного растворителя или в водный или неводный растворитель. Могут быть использованы обычные способы сушки органических растворителей, растворов или экстрактов, такие как встряхивание с безводным сульфатом магния или безводным сульфатом натрия или пропускание через гидрофобную фритту. При необходимости могут быть использованы обычные способы очистки, например кристаллизация и хроматография, например хроматография на диоксиде кремния или обращенно-фазовая хроматография. Кристаллизация может быть осуществлена с использованием обычных растворителей, таких как этилацетат, метанол, этанол или бутанол или их водные смеси. Понятно, что температуры в конкретные моменты времени типично могут быть определены способами контроля взаимодействия, например тонкослойной хроматографии и ЬС-М8 (жидкостная хроматография/масс-спектрометрия).
Когда подходит, индивидуальные изомерные формы соединений по изобретению могут быть получены в виде индивидуальных изомеров с использованием обычных способов, таких как фракционная кристаллизация диастереоизомерных производных или хиральная высокоэффективная жидкостная хроматография (хиральная НРЬС).
Абсолютная стереохимия соединений может быть определена с использованием обычных способов, таких как рентгеновская кристаллография.
Аспекты изобретения проиллюстрированы путем ссылки на следующие примеры, но никаким образом не ограничиваются ими.
Общее подробное описание экспериментов.
Соединения названы с использованием программного обеспечения для присваивания химических названий ЛСП/Ште РК0 6.02 от Абуапсеб СЬет181гу Эеуе1ортей8 Лс., Тогойо, 0йагю, М5Н2Ь3, Сапаба.
Подробности экспериментов для приведенных здесь систем А-Ό ЬСМ8 являются следующими.
Система А.
Колонка: 50x2,1 мм ГО (внутренний диаметр), 1,7 м АсциЬу ИРЬС ВЕН С18.
Скорость потока: 1 мл/мин.
Температура: 40°С.
Диапазон УФ-детекции: 210-350 нм.
Масс-спектр: Регистрировали на масс-спектрометре с использованием альтернативного режима сканирования положительных и отрицательных ионов с распылением электронов путем ионизации.
Растворители:
А: 0,1% об./об. муравьиная кислота в воде;
- 19 020631
В: 0,1% об./об. муравьиная кислота в ацетонитриле. Градиент:
Время (мин) А% В%
0 97 3
0,1 97 3
1,4 0 100
1,9 0 100
2,0 97 3
Система В.
Колонка: 30x4,6 мм ГО, 3,5 мкм §цийге С18.
Скорость потока: 3 мл/мин.
Температура: 30°С.
Диапазон УФ-детекции: 210-350 нм.
Масс-спектр: Регистрировали на масс-спектрометре с использованием альтернативного режима сканирования положительных и отрицательных ионов с распылением электронов путем ионизации.
Растворители:
А: 0,1% об./об. раствор муравьиной кислоты в воде;
В: 0,1% об./об. раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле.
Градиент: Время (мин) А% В%
97 3
0,1 97 3
4,2 0 100
4.8 0 100
4.9 97 3
5,0 97 3
Система С.
Колонка: 50x2,1 мм ГО, 1,7 мкм Асцийу ИРЬС ВЕН С18.
Скорость потока: 1 мл/мин.
Температура: 40°С.
Диапазон УФ-детекции: 210-350 нм.
Масс-спектр: Регистрировали на масс-спектрометре с использованием альтернативного режима сканирования положительных и отрицательных ионов с распылением электронов путем ионизации.
Растворители:
А: 10 мМ бикарбонат аммония в воде, доведенный до рН 10 раствором аммиака;
В: ацетонитрил.
Градиент: Время (мин) 0
1,5
1,9
2,0
А% в%
99 1
3 97
3 97
0 100
Система Б.
Колонка: 50x4,6 мм ГО, 3,5 мкм ХВпбде С18.
Скорость потока: 3 мл/мин.
Температура: 30°С.
Диапазон УФ-детекции: 210-350 нм.
Масс-спектр: Регистрировали на масс-спектрометре с использованием альтернативного режима сканирования положительных и отрицательных ионов с распылением электронов путем ионизации.
Растворители:
А: 10 мМ бикарбонат аммония в воде, доведенной до рН10 раствором аммиака.
В: ацетонитрил.
- 20 020631
Г радиент:
Время (мин) А% В%
0 99 1
0,1 99 1
4,0 3 97
5,0 3 97
Хроматографическую очистку, как правило, осуществляли с использованием предварительно упакованных картриджей силикагеля. Р1а8ЬМа81ет II представляет собой автоматическую многопользовательскую систему флэш-хроматографии, доступную от Атдопаи! ТесЬио1о§1е8 Ь1б, в которой используются одноразовые картриджи для твердофазной экстракции (8РЕ) с нормальной фазой (от 2 до 100 г). Она обеспечивает смешивание четырех растворителей в потоке для обеспечения реализации градиентных способов. Образцы поочередно обрабатывают с использованием многофункционального программного обеспечения с открытым доступом, которое управляет растворителями, скоростями потока, профилем градиента и условиями сбора. Система оборудована УФ-детектором с изменяемой длиной волны Кпаиег и двумя коллекторами фракций Сб8оп РС204, обеспечивающими автоматический выход пиков, сбор и отслеживание пиков.
Удаление растворителей с использованием потока азота осуществляли при 30-40°С в системе СгеепНои8е В1о\\бо\\п. доступной от Раб1еу8 Э18соуегу ТесЬпо1одге8 8аГГгоп \Уа1беп. Е88ех, СВ11 3ΑΖ, ик.
Спектры 1Н ЯМР регистрировали в СЭС13 или ЭМ8О-б6 на спектрометре Вгикег ЭРХ 400, или Вгикег Ауапсе БРХ, или Уапап Ипбу 400, все из которых функционируют при 400 МГц. Внутренний использованный стандарт представлял собой тетраметилсилан или остаточный протонированный растворитель при 7,25 млн-1 для СЭС13 или 2,50 млн-1 для ЭМ8О-б6.
Автопрепаративную НРЬС с управлением по массе осуществляли в приведенных ниже условиях. УФ-детекция представляла собой усредненный сигнал в диапазоне длин волн от 210 до 350 нм, и массспектры регистрировали на масс-спектрометре с использованием альтернативного режима сканирования положительных и отрицательных ионов с распылением электронов путем ионизации.
Способ А.
Способ А осуществляли на колонке ХВпбде С18 (типично 150x19 мм в.д., диаметр упакованных частиц 5 мкм) при температуре окружающей среды. Используемые растворители представляли собой:
А: 10 мМ водный бикарбонат аммония, доведенный до рН 10 раствором аммиака;
В: ацетонитрил.
Способ В.
Способ В осуществляли на колонке 8ипйге С18 (типично 150x30 мм в.д., диаметр упакованных частиц 5 мкм) при температуре окружающей среды. Используемые растворители представляли собой:
А: 0,1% об./об. раствор муравьиной кислоты в воде;
В: 0,1% об./об. раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле.
Способ С.
Способ С осуществляли на колонке 8иийге С18 (типично 150x30 мм в.д., диаметр упакованных частиц 5 мкм) при температуре окружающей среды. Используемые растворители представляли собой:
А: 0,1% об./об. раствор трифторуксусной кислоты в воде;
В: 0,1% об./об. раствор трифторуксусной кислоты в ацетонитриле.
Способ Ό.
Способ Б осуществляли на колонке АбапЙ8 С18 (типично 100x30 мм в.д., диаметр упакованных частиц 5 мкм) при температуре окружающей среды. Используемые растворители представляли собой:
А: 0,1% об./об. раствор муравьиной кислоты в воде;
В: 0,1% об./об. раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле.
Способ Е.
Способ Е осуществляли на колонке 8ире1со8б ΑΡΖ+Ρ1υ8 (типично 100x21,2 мм в.д., диаметр упакованных частиц 5 мкм) при температуре окружающей среды. Используемые растворители представляли собой:
А: 0,1% об./об. раствор муравьиной кислоты в воде;
В: ацетонитрил:вода 95:5 + 0,05% муравьиная кислота.
- 21 020631
Примеры
Промежуточное соединение 1. 2,6-Дихлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин
К 2,6-дихлорпурину (25,0 г) (например, доступному от Αΐάπαΐι, ИК) добавляли этилацетат (260 мл), а затем паратолуолсульфоновую кислоту (0,253 г). Смесь нагревали до 50°С и затем добавляли 3,4-дигидро-2Н-пиран (16,8 г). Реакционную смесь затем нагревали при 50°С в течение 4 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (36,9 г).
Ή ЯМР (СЭС13): 8.35 (1Н, 5), 5.77 (1Н, άά), 4.20 (1Н, т), 3.79 (1Н, т), 2.20-1.65 (6Н, т).
Промежуточное соединение 2. 2-Хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин
2,6-Дихлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин (36,9 г) нагревали с 2 М аммиаком в изопропаноле (250 мл) при 50°С в течение 5 ч. После выстаивания при температуре окружающей среды в течение ночи добавляли дополнительное количество 2 М аммиака в изопропаноле (100 мл) для разрушения возникающего в результате осадка и реакционную смесь нагревали в течение еще 9 ч до завершения реакции. К реакционной смеси добавляли воду (70 мл) и желтое твердое вещество отфильтровывали. Это твердое вещество промывали смесью изопропиловый спирт:вода (5:1 (об./об.), 60 мл) и затем сушили на воздухе при аспирации с получением первого выхода. Фильтрат повторно фильтровали после выстаивания в течение ночи с выделением осадка и оба твердых вещества сушили в вакууме. Первый выход был чистым, тогда как второй выход вещества продемонстрировал очень малое количество примесей (выделенный широкий сигнал при 3,5 млн-1, не обнаруживаемый в первом выходе), но в иных отношениях был идентичным. Первый выход твердого вещества (28,4 г), второй выход твердого вещества (3,42 г).
1Н ЯМР (СЭС13): 8.01 (1Н, 5), 5.98 (2Н, шир. 5), 5.70 (1Н, άά), 4.16 (1Н, т), 3.78 (1Н, т), 2.15-1.60 (6Н, перекрывающиеся т).
Промежуточное соединение 2 (альтернативный способ). 2-Хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амин
К раствору 2,6-дихлорпурина (25 г) (например, доступному от Αΐάπαΐι, ЦК) в безводном этилацетате (200 мл) добавляли моногидрат паратолуолсульфоновой кислоты (235 мг). Реакционную смесь нагревали до 50°С и добавляли однократно 3,4-дигидро-2Н-пиран (18,1 мл). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 50°С в течение 1 ч и растворитель удаляли при сниженном давлении. Это дало желтое твердое вещество. Суспензию этого твердого вещества (приблизительно 36 г) в 2 М аммиаке в изопропаноле (460 мл) нагревали в атмосфере азота при 60°С в течение 4 ч с присоединенным конденсатором. Реакционную смесь вливали в воду (50 мл) и оставляли охлаждаться в течение ночи. Осадок отфильтровывали и сушили в роторном испарителе (60°С) в течение 30 мин с получением указанного в заголовке соединения в виде беловатого твердого вещества, 31 г (93%, 2 стадии).
Μδ вычислено для (С10Н12С1Ы5О)+ = 254, 256.
Μδ найдено (распыление электронов): (М)+ = 254, 256 (3:1).
1Н ЯМР (^ϋ3)2δΟ): δ 8.43 (1Н, 5), 7.82 (2Н, 5), 5.55 (1Н, άά), 4.00 (1Н, т), 3.69 (1Н, т), 2.21 (1Н, т), 1.95 (2Н, т), 1.74 (1Н, т), 1.56 (2Н, т).
Промежуточное соединение 3. 2-(Бутилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин
- 22 020631
К бутан-1-олу (76 мл) порциями добавляли трет-бутоксид натрия (15,2 г) (указание: реакционная смесь нагревается). Вышеприведенную смесь перемешивали до гомогенного состояния (приблизительно 15 мин), а затем к полученному в результате бледно-желтому раствору добавляли 2-хлор-9-(тетрагидро2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (10,0 г). Реакционную смесь затем нагревали до 100°С в течение ночи. Реакционную смесь упаривали для удаления максимально возможного количества бутан-1-ола, а затем распределяли между диэтиловым эфиром и водой. Фазу диэтилового эфира отделяли и водную фазу снова экстрагировали дополнительным количеством диэтилового эфира. Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния (безводным). Сульфат магния отфильтровывали и фильтрат упаривали с получением коричневого вязкого масла, которое подвергали азеотропной перегонке с толуолом (3 раза) и помещали в высокий вакуум в течение ночи, переносили в новую колбу с дихлорметаном и упаривали, помещали в высокий вакуум с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого стекловидного вещества (9,45 г).
Ή ЯМР (СБС13): 7.85 (1Н, 5), 5.92 (2Н, Ьгоай 5), 5.64 (1Н, ά), 4.32 (2Н, ΐ), 4.14 (1Н, т), 3.75 (1Н, т), 2.10-1.95 (3Н, перекрывающиеся т), 1.81-1.58 (5Н, перекрывающиеся т), 1.50 (2Н, т), 0.97 (3Н, ΐ).
Промежуточное соединение 4. 8-Бром-2-(бутилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6амин
2-(Бутилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (9,45 г) растворяли в хлороформе (50 мл) и охлаждали до 0°С (ледяная баня). К этому раствору порциями добавляли Ν-бромсукцинимид (6,07 г), поддерживая температуру ниже 3°С. Полученный таким образом темно-зеленый раствор перемешивали при 2,5°С в течение 30 мин, а затем оставляли нагреваться до комнатной температуры и затем перемешивали в течение 6 ч. Реакционную смесь затем промывали водой (100 мл, дважды). Органическую фазу сушили/отделяли с использованием гидрофобной фритты и упаривали с получением темнокоричневой смолы, которую очищали путем хроматографии на силикагеле (120 г) Н8СО) с использованием градиентной элюции 0-50% этилацетат:циклогексан с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (8,37 г).
Ή ЯМР (СБС13): 5.61 (1Н, йй), 5.49 (2Н, шир. 5), 4.32 (2Н, т), 4.17 (1Н, т), 3.71 (1Н, т), 3.04 (1Н, т), 2.11 (1Н, шир. ά), 1.89-1.45 (6Н, перекрывающиеся т), 1.50 (2Н, т), 0.97 (3Н, ΐ).
Промежуточное соединение 5. 2-(Бутилокси)-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амин
8-Бром-2-(бутилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (8,37 г) нагревали до температуры дефлегмации с 25% метоксидом натрия в метаноле (14,4 мл) и метаноле (65 мл) в течение 4,5 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и распределяли между этилацетатом и насыщенным раствором хлорида аммония. Органическую фазу отделяли и проводили повторную экстракцию в этилацетат. Объединенные органические фазы промывали рассолом (дважды). Органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту после отделения водной фазы и упаривали с получением светло-коричневой смолы, которую помещали в высокий вакуум с получением пены (7,52 г), которая сжималась до смолы (7,34 г) при давлении окружающей среды и затвердевала в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого аморфного твердого вещества.
М8 вычислено для (С15Н23М5О3)+ = 321.
М8 найдено (распыление электронов): (М+Н)' = 322.
Ή ЯМР (СОС13): 5.50 (1Н, άά), 5.17 (2Н, шир. 5), 4.29 (2Н, ΐ), 4.12 (3Н, 5 и 1Н, т), 3.70 (1Н, т), 2.77 (1Н, т), 2.05 (1Н, т), 1.82-1.63 (6Н, перекрывающиеся т), 1.50 (2Н, т), 0.97 (3Н, ΐ).
- 23 020631
Промежуточное соединение 6. Соль трифторацетат 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амина
К раствору 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (7,34 г) в метаноле (100 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (10 мл). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение выходных дней с получением суспензии. Реакционную смесь концентрировали до небольшого объема (густая суспензия), а затем разбавляли этилацетатом (50 мл). Полученную в результате суспензию отфильтровывали и промывали небольшим объемом этилацетата до обесцвечивания фильтрата. Оставшееся твердое вещество сушили на воздухе и затем в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (6,20 г). Полученный ранее фильтрат концентрировали с получением суспензии, которую разбавляли небольшим объемом этилацетата (10 мл) и затем фильтровали и сушили, как указано выше. Этот второй выход выделяли в виде белого твердого вещества (0,276 г). Оба выхода были идентичны по ЯМР.
Μδ вычислено для (С10Н15^О2)+ = 237.
Μδ найдено (распыление электронов): (М+Н)' = 238.
1Н ЯМР (СОзОО): 4.47 (2Н, ΐ), 4.15 (3Н, 5), 1.80 (2Н, т), 1.50 (2Н, т), 0.99 (3Н, ΐ) (взаимозаменяемые ΝΗ2, ΝΉ и СООН протоны не обнаружены).
Промежуточное соединение 7. ^-Бутил-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-2,6-диамин
К раствору 2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (10 г) в безводном этиленгликоле (50 мл) при комнатной температуре и в атмосфере азота однократно добавляли н-бутиламин (16 мл). Реакционную смесь нагревали при 120°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (150 мл) и промывали водой (2x50 мл). Органический слой сушили над Μ§δО4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Это дало указанное в заголовке соединение в виде вязкого зеленого масла (10,2 г), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Μδ вычислено для (С14Н22^О)+ = 290.
Μδ найдено (распыление электронов): (М+Н)+ = 291.
Ή ЯМР ((СО3)^О): δ 7.8 (1Н, 5), 6.6 (2Н, 5), 6.2 (1Н, ΐ), 5.4 (1Н, άά), 4.0 (1Н, т), 3.6 (1Н, т), 3.2 (2Н, т), 2.2 (1Н, т), 1.9 (1Н, т), 1.8 (1Н, т), 1.7 (1Н, т), 1.5 (2Н, т), 1.4 (2Н, т), 1.3 (2Н, т), 0.9 (3Н, ΐ).
Промежуточное соединение 8. Соль трифторуксусной кислоты ^-бутил-8-(метилокси)-9Н-пурин2,6-диамина
К раствору неочищенного ^-бутил-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-2,6-диамина (приблизительно 10,2 г) в безводном хлороформе (100 мл) при комнатной температуре порциями добавляли Ν-бромсукцинимид (6,3 г) в течение 5 мин. Темный раствор оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь промывали водой (20 мл). Органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и концентрировали в вакууме. Это дало бежевое твердое вещество, которое растворяли в безводном метаноле (100 мл), и при комнатной температуре в атмосфере азота однократно добавляли раствор метоксида натрия (25 мас.% в метаноле, 24 мл). Реакционную смесь нагревали при 65°С с присоединенным конденсатором в течение ночи. Эту реакционную смесь охлаждали и концентрировали в вакууме. Полученный в результате оранжевый остаток помещали в этилацетат (150 мл) и эту смесь вливали в насыщенный водный хлорид аммония (50 мл). Органический слой отделяли и промывали дополнительным количеством воды (50 мл). Органический слой сушили над Μ§δО4, фильтровали и концентрировали в вакууме. К этому веществу в безводном метаноле (70 мл) при комнатной температуре однократно добавляли трифторуксусную кислоту (7 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 ч и концентрировали в вакууме с получением темно-коричневого твердого вещест- 24 020631 ва. Его суспендировали в диэтиловом эфире (20 мл) и растирали. Твердое вещество отфильтровывали с получением указанного в заголовке соединения в виде бежевого твердого вещества (3,3 г, 35%, 4 стадии).
Μδ вычислено для (ϋι0Η16Ν6Ο)+ = 236.
Μδ найдено (распыление электронов): (М+Н)' = 237.
Ή ЯМР ((СЭ3)28О): δ 13.3-12.3 (1Н, Ъг.т), 8.6-7.3 (2Н, т), 4.05 (3Н, в), 3.28 (2Н, т), 1.52 (2Н, т), 1.33 (2Н, т), 0,89 (3Н, Г) (оставшиеся взаимозаменяемые протоны не ясны).
Промежуточное соединение 9. 2-{[(18)-1-Метилбутил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амин
Способ А.
трет-Бутоксид натрия (48,5 г, 505 ммоль) порциями при комнатной температуре добавляли к (8)-2-пентанолу (185 мл) (например, доступному от ЛиНсН СЫга1 δοϊιιΐίοηβ, Оегтапу), перемешивали до гомогенного состояния (указание: реакция является экзотермической). Добавляли 2-хлор-9-(тетрагидро2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (32 г, 126 ммоль) и эту реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 72 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между этилацетатом (500 мл) и водой (500 мл). Органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл), сушили (Μ§δΟ4), фильтровали и упаривали. Остаток растирали с простым эфиром и твердое вещество отфильтровывали. Осадок повторно промывали простым эфиром и фильтраты объединяли и упаривали. Неочищенное вещество (приблизительно 30 г) растворяли в смеси ЭМ8О:метанол (1:1) и очищали путем хроматографии на колонке с обращенной фазой (С18) (330 г) с использованием градиента 25-65% ацетонитрил (+0,1%ТРЛ)-вода(+0,1%ТРЛ) в 8 объемах колонки, фракции немедленно нейтрализовали насыщенным водным раствором карбоната натрия. Соответствующие фракции объединяли и распределяли между дихлорметаном и насыщенным водным гидрокарбонатом натрия. Органическую фазу сушили путем пропускания через гидрофобную фритту, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-кремовой пены (14,97 г).
ЬСМБ (система В): ГКЕТ (время удерживания) = 2,21 мин.
МН+ = 306.
Способ В.
трет-Бутоксид натрия (206 г, 2,144 моль) добавляли к (8)-2-пентанолу (720 мл, 6,58 моль) (например, доступному от ШПсН СШга1 δοϊυΐίοπβ, Оегтапу) в круглодонной колбе объемом 2 л. Смесь перемешивали при 50°С до растворения всего трет-бутоксида натрия. Затем добавляли 2-фтор-9-(тетрагидро2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (130 г, 548 ммоль) порциями в течение 5 мин. Через 3 ч ЬСМБ-анализ показал полное потребление исходного вещества, смесь вливали в лед/воду (3 л) и затем экстрагировали метил-трет-бутиловым эфиром. Это привело в результате к образованию эмульсии, смесь фильтровывали через целит и органическую фазу отделяли. Водный слой затем обрабатывали твердым Ν;·ιΟ и затем повторно экстрагировали метил-трет-бутиловым эфиром. Органические экстракты объединяли и промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и затем упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-коричневой смолы (158,59 г).
ЬСМБ (система Ό): ГЕЕТ = 2,65 мин.
МН+ = 306.
Промежуточное соединение 10. 8-Бром-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)9Н-пурин-6-амин
Ν-Бромсукцинимид (12,16 г, 68,3 ммоль) добавляли порциями в течение 5 мин к перемешиваемому раствору 2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (14,9 г, 48,8 ммоль) в хлороформе (80 мл) при <5°С в атмосфере азота. Эту реакционную смесь перемешивали при <5°С в течение 5 ч, затем промывали насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (80 мл), затем водой (80 мл). Пену растворяли в ЭСМ (50 мл) и промывали водой (50 мл), затем рассолом (50 мл). Объединенные водные фазы промывали ЭСМ (50 мл). Объединенные органические слои сушили через гидрофобную фритту и растворитель удаляли в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде оранжевой пены (18,5 г).
- 25 020631
ЬСМ§ (система Ό): !КЕТ = 3,06 мин.
МН+ = 384/386.
Промежуточное соединение 11. 2-{[(1§)-1-Метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Нпиран-2 -ил) -9Н -пурин-6 -амин
8-Бром-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (7,1 г, 18,48 ммоль) растворяли в безводном метаноле (70 мл) и по каплям добавляли раствор метоксида натрия (25%) в метаноле (8 мл) в атмосфере азота. Раствор нагревали до температуры дефлегмации при 90°С в течение 4 ч в атмосфере азота. Добавляли дополнительное количество метоксида натрия в метаноле (25% раствор, 3 мл) и эту реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение еще 16 ч. Добавляли дополнительную порцию метоксида натрия в метаноле (25% раствор, 5 мл) и реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение еще 7 ч. Растворитель удаляли в роторном испарителе и неочищенный продукт распределяли между Е!ОАс (75 мл) и насыщенным раствором хлорида аммония (75 мл). Органический слой промывали рассолом (75 мл). Растворитель удаляли в роторном испарителе с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-оранжевой пены (6 г).
ЬСМ§ (система С): !КЕТ = 1,14 мин.
МН+ = 336, 337.
Промежуточное соединение 12. Соль трифторацетат 2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)9Н-пурин-6-амина
ρ
2-{[(1§)-1-Метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (6 г, 17,89 ммоль) растворяли в метаноле (50 мл). По каплям добавляли трифторуксусную кислоту (20,67 мл, 268 ммоль) и эту смесь перемешивали при 20°С в течение 72 ч в атмосфере азота. Растворитель удаляли в вакууме и полученное в результате твердое вещество промывали этилацетатом и фильтровали. Фильтрат упаривали и остаток промывали этилацетатом. Объединенные твердые остатки сушили в вакуумсушильном шкафу в течение 2 ч с получением указанного в заголовке соединения в виде беловатого твердого вещества (5,3 г).
ЬСМ§ (система С): !КЕТ = 0,76 мин.
МН+ = 252, 253.
Промежуточное соединение 13. 2-(Бутилокси)-9-(3-хлорпропил)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин
Трифторацетат 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амина (4,7 г, 13,38 ммоль) и карбонат калия (4,62 г, 33,4 ммоль) в безводном ИМР (50 мл) перемешивали и нагревали при 50°С в атмосфере азота в течение 75 мин. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и затем охлаждали до 0°С и добавляли 1-бром-3-хлорпропан (2,106 г, 13,38 ммоль). Эту смесь перемешивали при 0-10°С в течение приблизительно 5 ч, затем оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение приблизительно еще 40 ч, когда ЬСМ§ указала приблизительно на 70% желаемого продукта. Смесь оставляли осаждаться и супернатант отбирали путем пипетирования, а растворитель выпаривали в роторном испарителе с использованием высоковакуумного насоса приблизительно при 23 °С. Хлороформ и воду добавляли к объединенным остаткам, которые перемешивали, и фазы разделяли с использованием гидрофобной фритты. Водный слой повторно экстрагировали дополнительными порциями хлороформа и объединенные экстракты в хлороформе упаривали в высоком вакууме при 23°С с получением желтого твердого вещества (2,798 г). Это неочищенное вещество объединяли с аналогичным веществом, полученным в результате двух аналогичных получений (0,56 г и 0,995 г), и объединяли путем колоночной флэш-хроматографии на диоксиде кремния с использованием смеси этилацетат/хлороформ 2:1 в качестве элюента с получением указанного в заголовке соединения в виде беловатого твердого вещества (3,011 г).
- 26 020631
ЬСМ§ (система Ό): = 2,79 мин.
МН+ =314, 316.
Промежуточное соединение 14. 2-(Бутилокси)-9-(4-хлорбутил)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин
Трифторацетат 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин (2 г, 5,69 ммоль) и карбонат калия (1,967 г, 14,23 ммоль) суспендировали в ΌΜΡ (20 мл) и нагревали до 50°С в атмосфере азота в течение 30 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли 1-бром-4-хлорбутан (0,656 мл, 5,69 ммоль) и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток распределяли между ЭСМ (40 мл) и водой (40 мл). Слои разделяли с использованием гидрофобной фритты и водный слой промывали ЭСМ (10 мл). Объединенные органические экстракты концентрировали в вакууме с получением неочищенного вещества, которое очищали путем хроматографии на силикагеле с использованием Р1а8ЙМа81ег (картридж 70 г), элюируя градиентом циклогексан:этилацетат 0-100% в течение 30 мин. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (1,4 г).
ЬСМ§ (система Ό): !КЕТ = 2,92 мин.
МН+ = 328, 330.
Промежуточное соединение 15. 2-(Бутилокси)-9-(5-хлорпентил)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин
Трифторацетат 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амина (2 г, 5,69 ммоль) и карбонат калия (1,967 г, 14,23 ммоль) суспендировали в ΌΜΡ (20 мл) и нагревали до 50°С в атмосфере азота в течение 1 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли 1-бром-5-хлорпентан (0,75 мл, 5,69 ммоль) и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь распределяли между ОС'.М (40 мл) и водой (40 мл) и слои разделяли с использованием гидрофобной фритты. Водный слой снова экстрагировали ЭСМ (10 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным раствором хлорида лития, отделяли (гидрофобная фритта) и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (1,946 г).
ЬСМ§ (система В): !КЕТ = 2,58 мин.
МН+ = 342, 344.
Промежуточное соединение 16. 2-(Бутилокси)-9-(5-хлоргексил)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин
К раствору соли трифторацетата 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амина (3 г, 8,54 ммоль) в ΌΜΡ (30 мл) добавляли карбонат калия (2,95 г, 21,35 ммоль) и смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч в атмосфере азота. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры и добавляли 1-бром-6-хлоргексан (1,27 мл, 8,54 ммоль) и эту реакционную смесь нагревали до 50°С и перемешивали в течение ночи в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляли водой (приблизительно 50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x70 мл). Объединенные органические экстракты сушили (Μ§δΟ4), фильтро- 27 020631 вали и фильтрат концентрировали с получением оранжевого масла (приблизительно 3,5 г). Это вещество растворяли в дихлорметане и очищали на Р1а8ЬМа81ег II (аминопропиловый картридж 70 г) с использованием градиента 0-100% этилацетат в циклогексане в течение 60 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла, которое затвердевало до бледно-желтого твердого вещества (1,2 г).
ЬСМБ (система Б): 1ЕЕТ = 3,59 мин.
МН+ = 356, 358.
Промежуточное соединение 17. Ы2-Бутил-9-(3-хлорпропил)-8-(метилокси)-9Н-пурин-2,6-диамин
Трифторацетат Ы2-бутил-8-(метилокси)-9Н-пурин-2,6-диамина (701 мг, 2,001 ммоль) и карбонат калия (690 мг, 4,99 ммоль) суспендировали в БМР (10 мл) и смесь нагревали при 50°С в атмосфере азота в течение 2 ч. Смесь оставляли охлаждаться и затем добавляли 1-бром-3-хлорпропан (198 мкл, 2,002 ммоль) и эту реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение ночи. Через 16 ч реакционную смесь распределяли между водой и БСМ (25 мл каждого). Водную фазу экстрагировали дополнительным количеством БСМ (2x20 мл). Объединенные экстракты БСМ сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения с примесями в виде бледно-желтого масла с некоторым количеством твердого вещества (0,76 г), которое использовали без дополнительной очистки.
ЬСМБ (система Б): 1ЕЕТ = 2,75 мин.
МН+ = 313, 315.
Промежуточное соединение 18. Ы2-Бутил-9-(4-хлорбутил)-8-(метилокси)-9Н-пурин-2,6-диамин
Трифторацетат Ы2-бутил-8-(метилокси)-9Н-пурин-2,6-диамина (5 г, 14,27 ммоль) и карбонат калия (4,93 г, 35,7 ммоль) суспендировали в БМР (40 мл) и нагревали до 50°С в атмосфере азота в течение 30 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли 1-бром-4-хлорбутан (1,645 мл, 14,27 ммоль) и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель концентрировали в вакууме и остаток распределяли между БСМ (100 мл) и водой (100 мл). Слои разделяли с использованием гидрофобной фритты и водную фазу повторно экстрагировали БСМ (100 мл). Объединенные органические экстракты концентрировали в вакууме и остаток очищали путем хроматографии с использованием аппарата Р1а8ЬМа81ег (100 г картридж диоксида кремния) и с использованием градиента БСМ:метанол 0-25% в течение 40 мин. Желаемые фракции объединяли и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения с примесями в виде желтого масла (5,1 г).
ЬСМБ (система Б): 1ЕЕТ = 2,88 мин.
МН+ = 327, 329.
Промежуточное соединение 19. 9-(5-Хлорпентил)-2-{[(1§)-1-метилбутил]-окси)-8-(метилокси)-9Нпурин-6-амин
Трифторацетат 2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амина (600 мг, 1,642 ммоль) и карбонат калия (567 мг, 4,11 ммоль) перемешивали при 60°С в БМР (10 мл) в течение 1 ч
- 28 020631 в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, когда добавляли 1-бром-5-хлорпентан (0,216 мл, 1,642 ммоль) и триэтиламин (0,343 мл, 2,464 ммоль), и эту смесь перемешивали при 20°С в атмосфере азота в течение 16 ч. Смесь затем разбавляли водой (10 мл) и рассолом (10 мл) и экстрагировали ЭСМ (2x10 мл). Объединенные органические экстракты упаривали и остаток растворяли в ЭСМ и очищали путем колоночной хроматографии с использованием Р1а8ЬМа81ег II (70 г аминопропиловый картридж) с градиентом 0-100% этилацетата в циклогексане в течение 40 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой смолы (430 мг).
ЬСМ8 (система Ό): ΐΚΕΤ = 4,15 мин.
МН+ = 356, 358.
Промежуточное соединение 20. 9-[3-(1-Азетидинил)пропил]-2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Нпурин-6-амин
Трифторацетат 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-1Н-пурин-6-амина (100 мг, 0,285 ммоль) растворяли в ЭМР (1 мл) и добавляли карбонат калия (98 мг, 0,712 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в атмосфере азота в течение 1 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 1,3-дибромпропан (0,029 мл, 0,285 ммоль) и после перемешивания в течение еще 40 мин добавляли азетидин (0,038 мл, 0,569 ммоль) и триэтиламин (0,079 мл, 0,569 ммоль) в ЭМР (1 мл). Реакционную смесь затем перемешивали в течение еще 18 ч. Растворитель удаляли и остаток распределяли между дихлорметаном (2 мл) и водой (2 мл). Слои разделяли с использованием гидрофобной фритты и водную фазу повторно экстрагировали ЭСМ (2 мл). Объединенные органические экстракты концентрировали и остаток растворяли в смеси МеОН:ЭМ8О 1:1 (1 мл) и очищали посредством МЭАР (способ А). Продукт, содержащий фракции, упаривали в потоке азота с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (13 мг).
ЬСМ8 (система В): ΐΚΕΤ = 1,07 мин.
МН+ = 335.
Промежуточное соединение 21. 2-(Бутилокси)-8-(метилокси)-9-[3-(1-пирролидинил)пропил]-9Нпурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 20 из трифторацетата 2-(бутилокси)-8(метилокси)-1Н-пурин-6-амина, 1,3-дибромпропана и пирролидина.
ЬСМ8 (система С): ΐΚΕΤ = 0,60 мин.
МН+ = 349.
Промежуточное соединение (метилокси)-9Н-пурин-6-амин
22. 2-(Бутилокси)-9-[3-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)пропил]-8-
Получали аналогично промежуточному соединению 20 из трифторацетата 2-(бутилокси)-8(метилокси)-1Н-пурин-6-амина, 1,3-дибромпропана и гексагидро-1Н-азепина.
ЬСМ8 (система В): ΐΚΕΤ = 1,24 мин.
МН+ = 377.
- 29 020631
Промежуточное соединение 23. 9-[4-(1-Азетидинил)бутил]-2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин6-амин
2-(Бутилокси)-9-(4-хлорбутил)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин (100 мг, 0,305 ммоль), азетидин (0,021 мл, 0,305 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,107 мл, 0,610 ммоль) растворяли в ОМР (2 мл) и нагревали при 50°С в течение 48 ч. ЬСМ8 показала, что реакция не завершена, поэтому добавляли дополнительное количество азетидина (0,021 мл, 0,305 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламина (0,107 мл, 0,610 ммоль) и эту реакционную смесь нагревали при 50°С в течение еще 48 ч. Смесь затем распределяли между ОСМ (4 мл) и водой (4 мл) и слои разделяли с использованием гидрофобной фритты. Водную фазу повторно экстрагировали ОСМ (4 мл) и объединенные органические экстракты концентрировали и остаток очищали посредством МОАР (способ А). Фракции, содержащие продукт, упаривали в потоке азота с получением указанного в заголовке соединения в виде прозрачной смолы (7,6 мг).
ЬСМ8 (система В): !КЕТ = 1,15 мин.
МН+ = 349.
Промежуточное соединение 24. Соль 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-[4-(1-пирролидинил)бутил]9Н-пурин-6-амина и муравьиной кислоты
Получали аналогично промежуточному соединению 20 из трифторацетата 2-(бутилокси)-8(метилокси)-1Н-пурин-6-амина, 1,4-дибромбутана и пирролидина, но с автопрепаративной ВЭЖХ с управлением по массе, используя способ О.
ЬСМ8 (система В): !КЕТ = 1,19 мин.
МН+ = 363.
Промежуточное соединение 25. Соль 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-9Нпурин-6-амина и муравьиной кислоты
Получали аналогично промежуточному соединению 20 из трифторацетата 2-(бутилокси)-8(метилокси)-1Н-пурин-6-амина, 1,4-дибромбутана и пиперидина, но с последовательными автопрепаративными ВЭЖХ с управлением по массе, используя способ А, а затем способ О.
ЬСМ8 (система В): !КЕТ = 1,22 мин.
МН+ = 377.
- 30 020631
Промежуточное соединение 26. 2-(Бутилокси)-9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 20 из трифторацетата 2-(бутилокси)-8(метилокси)-1Н-пурин-6-амина, 1,4-дибромбутана и гексагидро-1Н-азепина.
ЬСМ§ (система В): Ееет = 1,30 мин.
МН+ = 391.
Промежуточное соединение 27. 9-[5-(1-Азетидинил)пентил]-2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Нпурин-6-амин
2-(Бутилокси)-9-(5-хлорпентил)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин (100 мг, 0,293 ммоль), азетидин (0,020 мл, 0,293 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,102 мл, 0,585 ммоль) растворяли в ΌΜΡ (2 мл) и нагревали при 50°С в течение 72 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток распределяли между ОСМ (5 мл) и водой (5 мл) и слои разделяли с использованием гидрофобной фритты. Водную фазу повторно экстрагировали ОСМ (5 мл) и объединенные органические экстракты концентрировали и остаток растворяли в смеси МеОНГОМБО 1:1 (1 мл) и очищали посредством МОАР (способ А). Фракции, содержащие продукт, упаривали в потоке азота с получением указанного в заголовке соединения в виде прозрачной смолы (6,8 мг).
ЬСМ§ (система В): Ееет = 1,26 мин.
МН+ = 363.
Промежуточное соединение 28. 2-(Бутилокси)-8-(метилокси)-9-[5-(1-пирролидинил)пентил]-9Нпурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 27 из 2-(бутилокси)-9-(5-хлорпентил)-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина и пирролидина.
ЬСМ§ (система В): Ееет = 1,27 мин.
МН+ = 377.
- 31 020631
Промежуточное соединение 29. 2-(Бутилокси)-8-(метилокси)-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-9Нпурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 27 из 2-(бутилокси)-9-(5-хлорпентил)-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина и пиперидина.
ЬСМ§ (система В): = 1,33 мин.
МН+ = 391.
Промежуточное соединение 30. 2-(Бутилокси)-9-[5-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)пентил]-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 27 из 2-(бутилокси)-9-(5-хлорпентил)-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина и гексагидро-1Н-азепина, но с последовательными очистками посредством ΜΌΑΡ с использованием способа А, а затем способа Е.
ЬСМ§ (система В): = 1,38 мин.
МН+ = 405.
Промежуточное соединение 31. 2-(Бутилокси)-9-[5-(гексагидро-1(2Н)-азоцинил)пентил]-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 38 из 2-(бутилокси)-9-(5-хлорпентил)-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина и октагидроазоцина.
ЬСМ§ (система В): = 1,45 мин.
МН+ = 419.
- 32 020631
Промежуточное соединение 32. 2-(Бутилокси)-8-(метилокси)-9-[6-(1-пирролидинил)гексил]-9Нпурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 38 из 2-(бутилокси)-9-(6-хлоргексил)-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина и пирролидина.
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 2,97 мин.
МН+ = 391.
Промежуточное соединение 33. 2-(Бутилокси)-8-(метилокси)-9-[6-(1-пиперидинил)гексил]-9Нпурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 38 из 2-(бутилокси)-9-(6-хлоргексил)-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина и пиперидина.
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 3,12 мин.
МН+ = 405.
Промежуточное соединение 34. 2-(Бутилокси)-9-[6-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)гексил]-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 38 из 2-(бутилокси)-9-(6-хлоргексил)-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина и гексагидро-1Н-азепина.
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 3,20 мин.
МН+ = 419.
- 33 020631
Промежуточное соединение 35. Ы2-Бутил-8-(метилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-9Н-пурин-2,6диамин
Трифторацетат Ы2-бутил-8-(метилокси)-3Н-пурин-2,6-диамина (192 мг, 0,547 ммоль) и карбонат калия (189 мг, 1,368 ммоль) суспендировали в ΌΜΡ (3 мл) и нагревали до 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли 1-бром-4-хлорбутан (0,063 мл, 0,547 ммоль) и эту реакционную смесь перемешивали в течение еще 18 ч. Добавляли пиперидин (0,054 мл, 0,547 ммоль) и триэтиламин (0,076 мл, 0,547 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 60°С в течение 72 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток распределяли между ЭСМ (2 мл) и водой (2 мл). Водную фазу повторно экстрагировали ЭСМ (2 мл) и объединенные органические экстракты концентрировали. Остаток (приблизительно 200 мг) растворяли в смеси МеОНГОМБО 1:1 (1 мл) и очищали посредством МОАР (способ А). Продукт, содержащий фракции, упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения с примесями в виде желтой смолы (106 мг), которую использовали без дополнительной очистки.
ЬСМ§ (система В): !ЕЕТ = 1,11 мин.
МН+ = 376.
Промежуточное соединение 36. Ы2-Бутил-9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-8-(метилокси)9Н-пурин-2,6-диамин
Трифторацетат Ы2-бутил-8-(метилокси)-3Н-пурин-2,6-диамина (192 мг, 0,547 ммоль) и карбонат калия (189 мг, 1,368 ммоль) суспендировали в ЭМЕ (3 мл) и нагревали до 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли 1-бром-4-хлорбутан (0,063 мл, 0,547 ммоль) и эту реакционную смесь перемешивали в течение еще 18 ч. Добавляли гексагидро-1Н-азепин (54,2 мг, 0,547 ммоль) и триэтиламин (0,076 мл, 0,547 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 60°С в течение 18 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток распределяли между ЭСМ (5 мл) и водой (5 мл). Водную фазу повторно экстрагировали ЭСМ (5 мл) и объединенные органические экстракты концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в смеси МеОНГОМБО 1:1 (2 мл) и очищали путем 2 инжекций посредством МЭАР (способ В). Это дало вещество (74 мг), которое все еще содержало примеси и которое повторно очищали посредством МЭАР (способ А). Продукт, содержащий фракции, упаривали в потоке азота с получением указанного в заголовке соединения в виде прозрачной смолы (13 мг).
ЬСМ§ (система В): !ЕЕТ = 1,12 мин.
МН+ = 390.
Промежуточное соединение 37. метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин
9-[4-(Гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-2-{[(1§)-1-
Получали аналогично 2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)-1Н-пурин-6-амина, из трифторацетата 1-бром-4-хлорбутана и гексагидро-1Н- 34 020631 азепина, с тремя последовательными ΜΌΑΡ с использованием способа В, а затем способа А (х2).
Εί',’Μδ (система В): ΐΚΕΤ = 1,41 мин.
МН+ = 405.
Промежуточное соединение 38. 2-{[(Ш)-1-Метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9-[5-(1-
9-(5-Хлорпентил)-2-{[(Ш)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин (80 мг,
0,225 ммоль), триэтиламин (0,031 мл, 0,225 ммоль) и пиперидин (0,045 мл, 0,45 ммоль) суспендировали в ΌΜΡ (3 мл) и смесь нагревали до 70°С в течение 18 ч. Растворитель удаляли и остаток распределяли между ЭСМ (4 мл) и насыщенным бикарбонатом натрия (4 мл). Водную фазу повторно экстрагировали дополнительным количеством ЭСМ и объединенные органические экстракты концентрировали и остаток растворяли в смеси ΜеΟΗ:^ΜδΟ 1:1 (1 мл) и очищали посредством МОАГ (способ А). Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали в потоке азота с получением указанного в заголовке соединения (47,2 мг).
^СΜδ (система Ό ): ΐΚΕΤ = 3,11 мин.
МН+ = 405.
Промежуточное соединение 39. 2-Фтор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин
Ы,О-бис-(Триметилсилил)ацетамид (975 мл, 3,988 моль) добавляли к перемешиваемой суспензии 2-фтор-1Н-пурин-6-амина (200 г, 1,306 ммоль) (например, доступного от А1Ией81§па1, υδ) в безводном ацетонитриле (4 л) в контролируемом лабораторном реакторе объемом 10 л и полученную в результате смесь нагревали до температуры дефлегмации и поддерживали при этой температуре в течение 2 ч. Циркулятор затем перепрограммировали и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Затем через капельную воронку медленно добавляли раствор тетрагидропиранилацетата (получение описано в Те1га1вМгоп Ьейет5, 2006, 47(27), 4741) (282 г, 1,959 моль) в безводном ацетонитриле (500 мл), а затем триметилсилил-трифторметансульфонат (283 мл, 1,567 моль). Какой-либо значительной экзотермии не наблюдалось. Температуру циркулятора повторно устанавливали на 10°С и перемешивание поддерживали в течение еще 1 ч. Смесь затем гасили путем добавления 1 М карбоната натрия (4 л). Наблюдали выделение твердого осадка и проверяли, чтобы значение рН было основным. Дополнительное количество воды добавляли к суспензии (1 л) и после отстаивания слои разделяли, причем водный слой содержал значительное количество твердых неорганических веществ. Большую часть водного и неорганического твердого вещества отделяли. Органический слой все еще содержал значительное количество твердого вещества, и его охлаждали до 0°С при перемешивании для стимуляции дополнительного осаждения. Твердое вещество собирали путем фильтрования и слой очень хорошо промывали водой, затем сушили в вакууме при 40°С в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения в виде кремового твердого вещества (152,8 г).
ΡΟ^δ (система Ό): ΐΚΕΤ = 1,71 мин.
МН+ = 238.
Промежуточное соединение 40. 2-{[(Ш)-1-Метилпропил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амин
трет-Бутоксид натрия (3,24 г, 33,7 ммоль) добавляли порциями при перемешивании к (2δ)-2-бутанолу (10 г, 135 ммоль). К полученной в результате суспензии добавляли
- 35 020631
2-фтор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (2 г, 8,43 ммоль) и эту смесь нагревали до 50°С в течение 6 ч, когда ^Μδ^^^ продемонстрировал завершение реакции. После охлаждения смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и промывали водой (50 мл) и водный слой снова экстрагировали этилацетатом (50 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили с использованием гидрофобной фритты и упаривали в вакууме (при 62°С для удаления избытка спирта). Остаток (2,52 г) растворяли в дихлорметане и очищали на аминопропиловом картридже (110 г) с использованием аппарата Ηα5ΐιΜα5ΐθΓ II и элюции градиентом 0-100% этилацетата в циклогексане в течение 60 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (1,935 г).
Εί',’Μδ (система Ό): ^т = 2,41 мин.
МН+ = 292.
Промежуточное соединение 41. 8-Бром-2-{[(Ш)-1-метилпропил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2ил)-9Н-пурин-6-амин
Ν-Бромсукцинимид (1,182 г, 6,64 ммоль) добавляли порциями к раствору 2-{[(Ш)-1-метилпропил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (1,935 г, 6,64 ммоль) в хлороформе (50 мл) при 0-5°С. Полученный в результате зеленый раствор перемешивали при 0-5°С в течение 1 ч, в течение которых он становился красным, и эту смесь затем оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Полученный в результате зеленый раствор промывали водой (2x20 мл), разделяли с использованием гидрофобной фритты и концентрировали. Остаток растворяли в дихлорметане и очищали путем хроматографии на силикагеле (картридж 100 г) с использованием аппарата Ηα5ΐιΜα5ΐθΓ II и градиента 0-100% этилацетат-циклогексан в течение 60 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой пены (1,79 г).
Εί',’Μδ (система В): ^т = 2,58 мин.
МН+ = 370/372.
Промежуточное соединение 42. 8-(Метилокси)-2-{[(Ш)-1-метилпропил]-окси}9-(тетрагидро-2Нпиран-2 -ил) -9Н -пурин-6 -амин
8-Бром-2-{[(Ш)-1-метилпропил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (1,79 г, 4,83 ммоль) растворяли в метаноле (15 мл) и добавляли 25% метоксид натрия в метаноле (3,2 мл, 4,83 ммоль) и эту смесь нагревали до температуры дефлегмации в течение 2,5 ч. Реакционную смесь оставляли при комнатной температуре на ночь и затем концентрировали в вакууме и остаток распределяли между дихлорметаном (40 мл) и насыщенным раствором хлорида аммония (40 мл). Слои разделяли с использованием гидрофобной фритты и водную фазу повторно экстрагировали дихлорметаном (40 мл). Объединенные органические экстракты концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой пены (1,65 г).
Εί',’Μδ (система В): ΐΚΕΤ = 2,11 мин.
МН+ = 322.
Промежуточное соединение 43. Трифторацетат 8-(метилокси)-2-{[(Ш)-1-метилпропил]окси}-1Нпурин-6-амина
ρ
Получали аналогично промежуточному соединению 12 из 8-(метилокси)-2-{[(Ш)-1метилпропил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина.
Εί',’Μδ (система В): ΐΚΕΤ = 1,19 мин.
- 36 020631
МН+ = 238.
Промежуточное соединение 44. 9-(4-Хлорбутил)-8-(метилокси)-2-{[(18)-1-метилпропил]окси}-9Нпурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 18 из трифторацетата 8-(метилокси)-2-{[(18)-1метилпропил]окси}-1Н-пурин-6-амина и 1-бром-4-хлорбутана с очисткой на аминопропиловом (ΝΉ2) картридже с использованием градиента 0-100% этилацетат-циклогексан.
ЬСМ8 (система Ό): ίΚΕΤ = 2,83 мин.
МН+ = 328/330.
Промежуточное соединение 45. 2-{[18)-1-Метилпентил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амин
трет-Бутоксид натрия (4,86 г, 50,6 ммоль) добавляли порциями к перемешиваемой смеси (8)-2-гексанола (12 г, 117 ммоль) и 1,2-диметоксиэтана (12 мл). Полученную в результате смесь нагревали до 50°С в атмосфере азота и добавляли затем 2-фтор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (3 г, 12,65 ммоль). Полученную смесь выдерживали при 50°С в течение 20 ч, когда ЬСМ8-анализ указал на завершение реакции. Смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл). Органическую фазу промывали водой (100 мл), затем насыщенным рассолом (50 мл), сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в дихлорметане и очищали на аминопропиловом (ΝΉ2) картридже (100 г), элюируя градиентом 0-100% этилацетат в циклогексане в течение 40 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (1,665 г).
ЬСМ8 (система Ό): ίΚΕΤ = 2,88 мин.
МН+ = 320.
Промежуточное соединение 46. 8-Бром-2-{[(18)-1-метилпентил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2ил)-9Н-пурин-6-амин
Ν-Бромсукцинимид (1,504 г, 8,45 ммоль) порциями добавляли к перемешиваемому раствору 2-{[(18)-1-метилпентил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (2,453 г, 7,68 ммоль) в хлороформе (40 мл) в атмосфере азота, охлажденному в ледяной бане. Через 3 ч ЬСМ8 указала на то, что реакция на 80% завершена, поэтому добавляли дополнительное количество Ν-бромсукцинимида (0,68 г) и перемешивание продолжали в течение еще 2 ч. Добавляли воду (40 мл) и фазы разделяли с использованием гидрофобной фритты. Органическую фазу упаривали и остаток растворяли в дихлорметане и очищали на аминопропиловом (ΝΉ2) картридже (100 г) с использованием градиента 0-100% этилацетат в циклогексане, а затем 0-20% метанол (+1% триэтиламин) в течение 60 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (2,38 г).
ЬСМ8 (система Ό): ίΚΕΤ = 3,24 мин.
МН+ = 398/400.
- 37 020631
Промежуточное соединение 47. 8-(Метилокси)-2-{[(18)-1-метилпентил]окси}-9-(тетрагидро-2Нпиран-2 -ил) -9Н -пурин-6 -амин
Раствор метоксида натрия в метаноле (0,5 М, 20 мл, 10 ммоль) добавляли к раствору 8-бром-2-{[(18)-1-метилпентил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (2,368 г, 5,95 ммоль) в метаноле (10 мл) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч. Добавляли дополнительное количество метоксида натрия в метаноле (4 мл, 2 ммоль) и эту смесь кипятили с обратным холодильником в течение еще 2 ч и затем охлаждали и упаривали. Остаток распределяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл). Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным рассолом, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в дихлорметане и очищали на аминопропиловом (ΝΉ2) картридже (100 г) с использованием градиента 0-100% этилацетат в циклогексане в течение 40 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (1,725 г).
ЬСМ8 (система Ό): !КЕТ = 3,06 мин.
МН+ = 350.
Промежуточное соединение 48. Трифторацетат 8-(метилокси)-2-{[(18)-1-метилпентил]окси}-1Нпурин-6-амин
Трифторуксусную кислоту (2,3 мл, 3,40 г, 29,9 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 8(метилокси)-2-{[(18)-1-метилпентил]окси}-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (1,479 г, 4,23 ммоль) в метаноле (25 мл). Полученную в результате смесь перемешивали в течение 66 ч в атмосфере азота и затем упаривали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (1,65 г).
ЬСМ8 (система Ό): !КЕТ = 2,14 мин.
МН+ = 266.
Промежуточное соединение 49. 9-(4-Хлорбутил)-8-(метилокси)-2-{[(18)-1-метилпентил]окси}-9Нпурин-6-амин
С1
Получали аналогично промежуточному соединению 44 из трифторацетата 8-(метилокси)-2-[[(18)-1метилпентил]окси}-1Н-пурин-6-амина и 1-бром-4-хлорбутана.
ЬСМ8 (система Ό): !КЕТ = 3,22 мин.
МН+ = 356/358.
Промежуточное соединение 50. 2-[(1-Метилэтил)окси]-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6амин
трет-Бутоксид натрия (1,30 г, 13,53 ммоль) добавляли порциями к 2-пропанолу (16,95 мл, 220 ммоль) при перемешивании в течение 5 мин. Добавляли 2-фтор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амин (2 г, 8,43 ммоль) и эту реакционную смесь нагревали и перемешивали при 50°С в течение 4 ч, а затем оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Реакционную смесь затем разбавляли
- 38 020631 этилацетатом (75 мл), промывали водой (3x25 мл) и объединенные водные слои снова экстрагировали этилацетатом (2x25 мл). Объединенные органические слои сушили путем пропускания через гидрофобную фритту, фильтровали и упаривали с получением беловатого твердого вещества (2,30 г). Это вещество растворяли в дихлорметане и очищали с использованием аминопропилового 8РЕ картриджа (70 г), элюируемого градиентом 0-100% этилацетат в циклогексане. Соответствующие фракции объединяли и упаривали с получением белого твердого вещества (1,6 г), которое дополнительно очищали путем колоночной хроматографии с использованием обращенно-фазовой системы (С18) ΠηδΗΜη:^!' II с загрузкой в ΜеΟН/^ΜδΟ 1:1 и элюцией градиентом 0-50% ацетонитрил (+0,1% ТРА) в воде (+0,1% ТРА) в течение 40 мин, собирая фракции во флаконы, содержащие приблизительно 2 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Соответствующие фракции объединяли и экстрагировали дихлорметаном (3x100 мл). Объединенные органические экстракты сушили путем пропускания через гидрофобную фритту и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (888 мг).
ΕΤΜδ (система В): !КЕТ = 1,76 мин.
МН+ = 278.
Промежуточное соединение 51. 8-Бром-2-[(1-метилэтил)окси]-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амин
Ν-Бромсукцинимид (604 мг, 3,39 ммоль) добавляли к раствору 2-[(1-метилэтил)окси]-9(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (888 мг, 3,20 ммоль) в хлороформе (30 мл) при 0-5°С в атмосфере азота. Эту смесь перемешивали при 0-5°С в течение 1 ч, в течение которых она становилась красновато-коричневой по цвету, и ее затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 4 ч. ^СΜ§-анализ указал на то, что реакция не завершена, поэтому добавляли дополнительное количество Ν-бромсукцинимида (114 мг, 0,641 ммоль) и эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь затем разбавляли хлороформом (30 мл), промывали водой (2x20 мл) и слои разделяли с использованием гидрофобной фритты и органический слой упаривали с получением красного твердого вещества (1,16 г). Это вещество растворяли в дихлорметане и очищали путем хроматографии на силикагеле на 8РЕ картридже (50 г) с использованием градиента 0-100% этилацетат в циклогексане в качестве элюента. Соответствующие фракции объединяли и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества 712 мг.
ΕΤΜδ (система В): !КЕТ = 2,36 мин.
МН+ = 356/358.
Промежуточное соединение 52. 2-[(1-Метилэтил)окси]-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2ил)-9Н-пурин-6-амин
К перемешиваемой суспензии 8-бром-2-[(1-метилэтил)окси]-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амина (690 мг, 1,937 ммоль) в метаноле (15 мл) добавляли метоксид натрия (30% мас./об. раствор в метаноле, 2,4 мл) и эту реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 2 ч. Реакционную смесь затем нагревали до 70°С и перемешивали в течение 2,5 ч. Растворитель выпаривали и остаток распределяли между насыщенным водным раствором хлорида аммония (15 мл) и этилацетатом (20 мл). Слои разделяли, водную фазу экстрагировали дополнительным количеством этилацетата (2x10 мл) и органические экстракты объединяли, сушили путем пропускания через гидрофобную фритту и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (573 мг).
ΕΤΜδ (система В): !КЕТ = 1,92 мин.
МН+ = 308.
- 39 020631
Промежуточное соединение 53. Трифторацетат 2-[(1-метилэтил)окси]-8-(метилокси)-1Н-пурин-6амин
Р
Трифторуксусную кислоту (1 мл, 12,98 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 2-[(1-метилэтил)окси]-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (568 мг, 1,848 ммоль) в метаноле (10 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли дополнительное количество трифторуксусной кислоты (0,2 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 1,5 ч и затем упаривали в вакууме. Твердый остаток растирали с этилацетатом, собирали путем фильтрования, промывали этилацетатом и сушили в вакууме в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (405 мг).
ЬСМ§ (система В): Ееет = 1,02 мин.
МН+ = 224.
Промежуточное соединение 54. 9-(5-Хлорпентил)-2-[(1-метилэтил)окси]-8-(метилокси)-9Н-пурин6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 44 из трифторацетата 2-[(1-метилэтил)окси]-8(метилокси)-1Н-пурин-6-амина и 1-бром-5-хлорпентана.
ЬСМ§ (система А): Ееет = 0,93 мин.
МН+ = 328/330.
Промежуточное соединение 55. 2-(Циклобутилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6амин
трет-Бутоксид натрия (3,31 г, 34,2 ммоль) добавляли порциями к циклобутанолу (10 мл) при комнатной температуре. Смесь становилась очень густой, и ее нагревали до 50°С. Добавляли 2-фтор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (2 г, 8,43 ммоль), а затем 1,2-диметоксиэтан (3 мл) и эту смесь перемешивали при 50°С в течение 90 мин и затем охлаждали и распределяли между этилацетатом (50 мл) и водой (50 мл). Осадок, который не растворился ни в одной из фаз, удаляли путем фильтрования. Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным рассолом, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и упаривали с получением кремовой пены. Это вещество растворяли в дихлорметане и очищали на аминопропиловом (ΝΉ2) картридже (110 г) с использованием градиента 0-100% этилацетат в циклогексане, а затем 0-20% метанол (+1% триэтиламин) в течение 40 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде беловатого твердого вещества (0,655 г).
ЬСМ§ (система В): Ееет = 1,98 мин.
МН+ = 290.
- 40 020631
Промежуточное пурин-6-амин соединение 56. 8-Бром-2-(циклобутилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-
Ν-Бромсукцинимид (1,152 г, 6,47 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 2-(циклобутилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (1,248 г, 4,31 ммоль) в хлороформе (15 мл) при 0°С. Эту смесь нагревали до комнатной температуры и оставляли на ночь, после чего добавляли воду (15 мл) и фазы разделяли. Водный слой экстрагировали дихлорметаном и органические экстракты объединяли, промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом магния и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде оранжевой пены (1,79 г).
ЬСМ8 (система Ό): ϊεετ = 2,72 мин.
МН+ = 368/370.
Промежуточное соединение 57. 2-(Циклобутилокси)-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)9Н-пурин-6-амин
8-Бром-2-(циклобутилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (1,79 г, 4,86 ммоль) растворяли в безводном метаноле (25 мл) и добавляли 25% метоксид натрия в метаноле (2,274 мл, 9,72 ммоль) в атмосфере азота. Эту смесь нагревали при 67°С в течение 24 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли этилацетат и воду и слои разделяли. Водный слой дважды экстрагировали дополнительным количеством этилацетата и органические экстракты объединяли, промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом магния и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде кремовой пены (1,27 г).
ЬСМ8 (система Ό): ΐΚΕΤ = 2,53 мин.
МН+ = 320.
Промежуточное соединение 58. Трифторацетат 2-(циклобутилокси)-8-(метилокси)-1Н-пурин-6амина
Трифторуксусную кислоту (3 мл, 38,9 ммоль) добавляли к раствору 2-(циклобутилокси)-8(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (1,27 г, 3,98 ммоль) в метаноле (50 мл) и эту смесь перемешивали при 20°С в атмосфере азота в течение 21 ч. Растворитель удаляли в вакууме и оставшееся твердое вещество растирали с 1,1-диметилэтилметиловым эфиром и затем собирали путем фильтрования и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде кремового твердого вещества (1,0922 г).
ЬСМ8 (система Ό): ΐΚΕΤ = 1,17 мин.
МН+ = 236.
Промежуточное соединение 59. 9-(4-Хлорбутил)-2-(циклобутилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6амин
Получали аналогично промежуточному соединению 44 из трифторацетата 2-(циклобутилокси)-8- 41 020631 (метилокси)-1Н-пурин-6-амина и 1-бром-4-хлорбутана.
ЬСМ§ (система Ό): !КЕТ = 2,76 мин.
МН+ = 326/328.
Промежуточное соединение 60. 2-(Циклопентилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6амин
Циклопентанол (25 мл, 275 ммоль) добавляли к трет-бутоксиду натрия (4,05 г, 42,2 ммоль) с получением густой суспензии, которую разбавляли 1,2-диметоксиэтаном (35 мл) и нагревали до 50°С. 2-Фтор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амин (2,5 г, 10,54 ммоль) добавляли к полученному в результате раствору, который затем перемешивали в атмосфере азота при 50°С в течение 20 ч. Эту смесь охлаждали и добавляли воду и этилацетат. Слои разделяли и водный слой снова промывали этилацетатом. Органические экстракты объединяли, промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении при 40°С. Остаток загружали в циклогексане (50 мл) на 330 г картридж диоксида кремния и элюировали сначала градиентом 0-100% этилацетат в циклогексане в 10 объемах колонки, а затем градиентом 0-30% метанол в этилацетате. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (2,51 г).
ЬСМ§ (система Ό): !КЕТ = 2,51 мин.
МН+ = 304.
Промежуточное соединение 61. 8-Бром-2-(циклопентилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 56 из 2-(циклопентилокси)-9-(тетрагидро-2Нпиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система Ό): !КЕТ = 2,88 мин.
МН+ = 382/384.
Промежуточное соединение 62. 2-(Циклопентилокси)-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)9Н-пурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 57 из 8-бром-2-(циклопентилокси)-9(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система С): !КЕТ = 1,11 мин.
МН+ = 334.
Промежуточное соединение 63. Трифторацетат 2-(циклопентилокси)-8-(метилокси)-1Н-пурин-6амин
Получали аналогично промежуточному соединению 58 из 2-(циклопентилокси)-8-(метилокси)-9(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система В): !КЕТ = 1,27 мин.
МН+ = 250.
- 42 020631
Промежуточное соединение 64. 9-(4-Хлорбутил)-2-(циклопентилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6амин
Получали аналогично промежуточному соединению 44 из трифторацетата 2-(циклопентилокси)-8(метилокси)-1Н-пурин-6-амина и 1-бром-4-хлорбутана.
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 2,90 мин.
МН+ = 340/342.
Промежуточное соединение 65. 2-(Циклогексилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6амин
трет-Бутоксид натрия (3,29 г, 34,2 ммоль) добавляли порциями к циклогексанолу (15 мл) при комнатной температуре. Смесь становилась очень густой, поэтому добавляли дополнительное количество циклогексанола (10 мл) и смесь нагревали до 50°С. Добавляли 2-фтор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амин (2 г, 8,43 ммоль) и эту смесь нагревали при 50°С в течение 1 ч и затем нагревали до 60°С и продолжали нагревание в течение еще 2 ч, после чего ЬСМ8-анализ показал на завершение реакции. Эту смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между этилацетатом (150 мл) и водой (150 мл). Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным рассолом, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и упаривали на водяной бане при 60°С. Остаток растворяли в дихлорметане и очищали на 70 г аминопропиловом (Ν42) картридже с использованием градиента 0-100% этилацетат в циклогексане, а затем градиента 0-20% метанол (+1% триэтиламин) в течение 30 мин. Некоторые фракции, содержащие продукт, были загрязнены циклогексанолом, и их повторно очищали на 70 г картридже диоксида кремния с использованием градиента 0-100% этилацетат-циклогексан в течение 40 мин. Фракции от двух очисток, содержащие продукт, объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтой пены (1,59 г).
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 2,65 мин.
МН+ = 318.
Промежуточное соединение 66. пурин-6-амин
8-Бром-2-(циклогексилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-
Ν-Бромсукцинимид (0,214 г, 1,2 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 2-(циклогексилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина (0,254 г, 0,80 ммоль) в хлороформе (5 мл) при 0°С. Полученную в результате смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч и затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 2 ч. Добавляли воду (5 мл) и фазы разделяли с использованием гидрофобной фритты. Органическую фазу упаривали и остаток растворяли в дихлорметане и очищали на 70 г аминопропиловом (Ν42) картридже с элюцией градиентом 0-100% этилацетат в циклогексане в течение 40 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (0,252 г).
ЬСМ8 (система В): 1КЕТ = 2,83 мин.
МН+ = 396/398.
- 43 020631
Промежуточное соединение 67. 2-(Циклогексилокси)-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)9Н-пурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 57 из 8-бром-2-(циклогексилокси)-9(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система Б): 1РЕТ = 2,86 мин.
МН+ = 348.
Промежуточное соединение 68. Трифторацетат 2-(циклогексилокси)-8-(метилокси)-1Н-пурин-6амина
Получали аналогично промежуточному соединению 58 из 2-(циклогексилокси)-8-(метилокси)-9(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система В): 1РЕТ = 1,43 мин.
МН+ = 264.
Промежуточное соединение 69. 9-(4-Хлорбутил)-2-(циклогексилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6амин
Получали аналогично промежуточному соединению 44 из трифторацетата 2-(циклогексилокси)-8(метилокси)-1Н-пурин-6-амина и 1-бром-4-хлорбутана.
ЬСМ§ (система Б): 1РЕТ = 3,05 мин.
МН+ = 354/356.
Промежуточное соединение 70. Ы2-[(1К)-1-Метилбутил]-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин2,6-диамин
Неочищенный образец (2Р)-2-пентанамина, содержащий дихлорметан (11,12 г, содержащий приблизительно 3,1 г, 35,6 ммоль амина), добавляли к суспензии 2-фтор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-6-амина (5,00 г, 21,08 ммоль) в этиленгликоле (50 мл). Смесь нагревали при 110°С в течение 20 ч и затем охлаждали до комнатной температуры и распределяли между водой (200 мл) и этилацетатом (200 мл). Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным рассолом, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в дихлорметане и очищали на 110 г аминопропиловом (ΝΉ2) картридже с использованием градиента 0-100% этилацетат-циклогексан в течение 40 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме и остаток растирали с диэтиловым эфиром и некоторое количество нерастворимого исходного вещества удаляли путем фильтрования. Упаривание эфирного фильтрата дало указанное в заголовке соединение в виде беловатой пены (2,34 г).
ЬСМ§ (система Б): 1РЕТ = 2,63 мин.
МН+ = 305.
- 44 020631
Промежуточное соединение 71. 8-Бром-Ы2-[(1К)-1-метилбутил]-9-(те1рагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-2,6-диамин
Ν-Бромсукцинимид (2,08 г, 11,69 ммоль) добавляли порциями к перемешиваемому раствору ^-[(1К)-1-метилбутил]-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-2,6-диамина (2,27 г, 7,46 ммоль) в хлороформе (30 мл) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 1,5 ч, пока добавляли хлороформ (20 мл) и воду (50 мл). После перемешивания слои разделяли с использованием гидрофобной фритты, водный слой промывали дополнительной порцией хлороформа и объединенные органические экстракты упаривали. Остаток растворяли в дихлорметане и очищали на 110 г аминопропиловом (ΝΉ2) картридже с использованием градиента 0-100% этилацетат в циклогексане в течение 40 мин. Соответствующие фракции объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде беловатой пены (0,846 г).
ЬСМ§ (система Б): 1ЕЕТ = 3,05 мин.
МН+ = 383/385.
Промежуточное соединение 72. ^-[(1К)-1-Метилбутил]-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2ил)-9Н-пурин-2,6-диамин
Раствор метоксида натрия в метаноле (0,5 М, 9 мл, 4,5 ммоль) добавляли к раствору 8-бром-^-[(1К)-1-метилбутил]-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-2,6-диамина (0,844 г,
2,20 ммоль) в метаноле (12 мл) и полученный в результате раствор кипятили с обратным холодильником в течение 23,5 ч. Затем добавляли дополнительное количество метоксида натрия в метаноле (0,5 М, 4,5 мл) и кипячение с обратным холодильником продолжали в течение еще 4 ч. Снова добавляли дополнительное количество метоксида натрия в метаноле (0,5 М, 4,5 мл) и кипячение с обратным холодильником продолжали в течение еще 16,5 ч, после чего ЬСМ§-анализ показал на завершенность реакции. Эту реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, упаривали и остаток распределяли между этилацетатом (75 мл) и водой (75 мл). Водную фазу повторно экстрагировали этилацетатом (75 мл) и объединенные органические фазы промывали насыщенным рассолом, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в дихлорметане и очищали на 100 г аминопропиловом (ΝΉ2) картридже с использованием градиента 0-100% этилацетат в циклогексане, затем градиента 0-20% метанол (+1% триэтиламин) в течение 15 мин. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (0,614 г).
ЬСМ§ (система Б): 1ЕЕТ = 2,83 мин.
МН+ = 335.
Промежуточное соединение 73. Трифторацетат ^-[(1К)-1-метилбутил]-8-(метилокси)-3Н-пурин2,6-диамина
Трифторуксусную кислоту (1 мл, 1,48 г, 7,08 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору ^-[(1К)-1-метилбутил]-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-2,6-диамина (0,613 г, 1,833 ммоль) в метаноле (10 мл). Полученную в результате смесь перемешивали в течение 66 ч в атмосфере азота и затем упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде беловатого твердого вещества (0,690 г).
ЬСМ§ (система Б): 1ЕЕТ = 1,89 мин.
МН+ = 251.
- 45 020631
Промежуточное соединение 74. 9-(4-Хлорбутил)-№-[(1К)-1-метилбутил]-8-(метилокси)-9Н-пурин2,6-диамин
С1
Получали аналогично промежуточному соединению 44 из трифторацетата ^-[(1К)-1-метилбутил]8-(метилокси)-3Н-пурин-2,6-диамина и 1-бром-4-хлорбутана.
ЬСМ8 (система Ό): ΐΚΕΤ = 3,02 мин.
МН+ = 341/343.
Промежуточное соединение 75. ^-[(18)-1-Метилбутил]-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин2,6-диамин
Получали аналогично промежуточному соединению 70 из 2-фтор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)9Н-пурин-6-амина и (28)-2-пентанамина.
ЬСМ8 (система Ό): ΐΚΕΤ = 2,63 мин.
МН+ = 305.
Промежуточное соединение 76. 8-Бром-^-[(18)-1-метилбутил]-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Нпурин-2,6-диамин
Получали аналогично промежуточному соединению 71 из ^-[(18)-1-метилбутил]-9-(тетрагидро2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-2,6-диамина.
ЬСМ8 (система Ό): 1кеТ = 3,05 мин.
МН+ = 383/385.
Промежуточное соединение 77. ^-[(18)-1-Метилбутил]-8-(метилокси)-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2ил)-9Н-пурин-2,6-диамин
Раствор метоксида натрия в метаноле (0,5 М, 13 мл, 6,5 ммоль) добавляли к раствору 8-бром-^-[(18)-1-метилбутил]-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-2,6-диамина (1,26 г, 3,29 ммоль) в метаноле (10 мл) и полученный в результате раствор кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. Затем добавляли дополнительное количество метоксида натрия в метаноле (0,5 М, 12 мл, 6 ммоль) и кипячение с обратным холодильником продолжали в течение еще 18 ч. Смесь охлаждали и упаривали и остаток распределяли между этилацетатом (75 мл) и водой (75 мл). Водную фазу повторно экстрагировали этилацетатом (75 мл) и объединенные органические фазы промывали насыщенным рассолом, сушили над безводным сульфатом магния и упаривали. Остаток растворяли в дихлорметане и очищали на 100 г аминопропиловом (ΝΉ2) картридже с использованием градиента 0-100% этилацетат в циклогексане, а затем градиента 0-20% метанол (+1% триэтиламин) в течение 15 мин. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (0,848 г).
ЬСМ8 (система Ό): 1кеТ = 2,83 мин.
МН+ = 335.
- 46 020631
Промежуточное соединение 78. 2,6-диамина
Трифторацетат Ν2-[( 1 §)-1-метилбутил] -8-(метилокси)-3Н-пурин-
Получали аналогично промежуточному соединению 73 из ^-[(1§)-1-метилбутил]-8-(метилокси)-9(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-2,6-диамина.
ЬСМ§ (система Ό): ГЕЕТ = 1,89 мин.
МН+ = 251.
Промежуточное соединение 79. 9-(4-Хлорбутил)-^-[(1§)-1-метилбутил]-8-(метилокси)-9Н-пурин2,6-диамин
Получали аналогично промежуточному соединению 44 из трифторацетата ^-[(1§)-1-метилбутил]8-(метилокси)-3Н-пурин-2,6-диамина и 1-бром-4-хлорбутана.
ЬСМ§ (система Ό): ГЕЕТ = 3,02 мин.
МН+ = 341/343.
Промежуточное соединение 80. 9-(3-Хлорпропил)-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9Нпурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 44 из трифторацетата 2-{[(1δ)-1метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амина и 1-бром-3-хлорпропана.
ЬСМ5 (система Ό): ГЕЕТ = 2,90 мин.
МН+ = 328/330.
Промежуточное соединение 81. 9-(5-Хлорпентил)-8-(метилокси)-2-{[(^)-1-метилпропил]окси}-9Нпурин-6-амин
Получали аналогично промежуточному соединению 14 из трифторацетата 8-(метилокси)-2-{[(^)-1метилпропил]окси}-1Н-пурин-6-амина и 1-бром-5-хлорпентана.
ЬСМ5 (система А): ГЕЕТ = 1,00 мин.
МН+ = 342/344.
- 47 020631
Промежуточное соединение пиперидинил)пентил]-9Н-пурин-6-амин
82. 8-(Метилокси)-2-{[(18)-1-метилпропил]окси}-9-[5-(1-
Получали аналогично промежуточному соединению 38 из 9-(5-хлорпентил)-8-(метилокси)-2-{[(1§)1-метилпропил]окси}-9Н-пурин-6-амина и пиперидина, но с очисткой на диоксиде кремния с использованием градиента 0-25% метанол в дихлорметане.
ЬСМ§ (система А): !КЕТ = 0,61 мин.
МН+ = 391.
Промежуточное соединение 83. 2-(Бутилокси)-8-(метилокси)-9-[3-(1-пиперидинил)пропил]-9Нпурин-6-амин, соль муравьиной кислоты
Получали аналогично промежуточному соединению 20 из трифторацетата 2-(бутилокси)-8(метилокси)-1Н-пурин-6-амина, 1,3-дибромпропана и пиперидина, но с последовательными очистками посредством МИАР с использованием способа А, а затем способа Ό.
ЬСМ§ (система В): !КЕТ = 1,16 мин.
МН+ = 363.
Пример 1. 6-Амино-9-[3-(1-азетидинил)пропил]-2-(бутилокси)-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Г и
9-[3-(1-Азетидинил)пропил]-2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амин (13 мг, 0,039 ммоль) растворяли в метаноле (3 мл) и добавляли 4 М хлорид водорода в 1,4-диоксане (0,243 мл, 0,972 ммоль) и эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток растворяли в метаноле и загружали на аминопропиловый 8РЕ картридж (2 г). Картридж элюировали метанолом и растворитель удаляли с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (13 мг).
ЬСМ§ (система В): !КЕТ = 1,12 мин.
МН+ = 321.
Пример 2. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[3-(1-пирролидинил)пропил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
2-(Бутилокси)-8-(метилокси)-9-[3-(1-пирролидинил)пропил]-9Н-пурин-6-амин (49 мг, 0,141 ммоль) растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли 4 М хлорид водорода в 1,4-диоксане (0,879 мл, 3,52 ммоль) и эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Растворитель удаляли в вакууме с получением кремового твердого вещества, которое растворяли в метаноле и наносили на аминопропиловый 8РЕ картридж (2 г) и элюировали метанолом. Растворитель выпаривали с получением указанного в
- 48 020631 заголовке соединения в виде белого твердого вещества (43 мг).
ЬСМ§ (система С): Ееет = 0,70 мин.
МН+ = 335.
Пример 3. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[3-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)-пропил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-(бутилокси)-9-[3-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)пропил]-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система В): Ееет = 1,33 мин.
МН+ = 363.
Пример 4. 6-Амино-9-[4-(1-азетидинил)бутил]-2-(бутилокси)-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 9-[4-(1-азетидинил)бутил]-2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Нпурин-6-амина.
ЬСМ§ (система В): Ееет = 1,16 мин.
МН+ = 335.
Пример 5. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[4-(1-пирролидинил)бутил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из соли муравьиной кислоты и 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-[4(1-пирролидинил)бутил]-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система В): Ееет = 1,23 мин.
МН+ = 349.
Пример 6. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из соли муравьиной кислоты и 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-[4(1-пиперидинил)бутил]-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система В): Ееет = 1,29 мин.
МН+ = 363.
- 49 020631
Пример 7. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-7,9-дигидро-8Н-пурин8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-(бутилокси)-9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ8 (система В): !КЕТ = 1,37 мин.
МН+ = 377.
Пример 8. 6-Амино-9-[5-(1-азетидинил)пентил]-2-(бутилокси)-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 9-[5-(1-азетидинил)пентил]-2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9Нпурин-6-амина.
ЬСМ8 (система В): !КЕТ = 1,25 мин.
МН+ = 349.
Пример 9. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[5-(1-пирролидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-[5-(1-пирролидинил)пентил]-9Нпурин-6-амина.
ЬСМ8 (система В): !КЕТ = 1,28 мин.
МН+ = 363.
Пример 10. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-9Нпурин-6-амина.
ЬСМ8 (система В): !КЕТ = 1,35 мин.
МН+ = 377.
- 50 020631
Пример 11. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[5-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)-пентил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Способ А.
Получали аналогично примеру 2 из 2-(бутилокси)-9-[5-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)пентил]-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина.
ΕΤ’Μδ (система В): !КЕТ = 1,55 мин.
МН+ = 391.
Способ В.
Получали аналогично примеру 19 из трифторацетата 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-1Н-пурин-6амина, 1-бром-5-хлорпентана и гексагидро-1Н-азепина.
ЬСМЗ (система В): !КЕТ = 1,54 мин.
МН+ = 391.
Пример 12. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[5-(гексагидро-1(2Н)-азоцинил)пентил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-(бутилокси)-9-[5-(гексагидро-1(2Н)-азоцинил)пентил]-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМЗ (система Ό): !КЕТ = 3,17 мин.
МН+ = 405.
Пример 13. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[6-( 1 -пирролидинил)гексил] -7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-[6-(1-пирролидинил)гексил]-9Нпурин-6-амина.
ΕΤ’Μδ (система Ό): !КЕТ = 2,47 мин.
МН+ = 377.
- 51 020631
Пример 14. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[6-(1-пиперидинил)гексил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-[6-(1-пиперидинил)гексил]-9Нпурин-6-амина.
ЬСМ8 (система Ό): ΐΚΕΤ = 2,68 мин.
МН+ = 391.
Пример 15. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[6-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)-гексил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-(бутилокси)-9-[6-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)гексил]-8(метилокси)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ8 (система Ό): ΐΚΕΤ = 2,76 мин.
МН+ = 405.
Пример 16. 6-Амино-2-(бутиламино)-9-[3-(1-пиперидинил)пропил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Смесь ^-бутил-9-(3-хлорпропил)-8-(метилокси)-9Н-пурин-2,6-диамина (250 мг, 0,8 ммоль), пиперидина (340 мг, 4 ммоль) и йодида натрия (360 мг, 2,4 ммоль) в ТНР (8 мл) нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 48 ч. Растворитель выпаривали и остаток очищали посредством препаративной ТЬС, затем растворяли в метаноле (5 мл). Добавляли хлорид водорода в метаноле (0,5 мл) и эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель затем выпаривали и рН остатка доводили до 7-8 путем добавления раствора бикарбоната натрия. Продукт экстрагировали в этилацетат и экстракт упаривали, а остаток очищали посредством препаративной НРЬС с получением указанного в заголовке соединения (16 мг).
ЬСМ8 (система Α): ΐΚΕΤ = 0,55 мин.
МН+ = 348.
- 52 020631
Пример 17. 6-Амино-2-(бутиламино)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из ^-бутил-8-(метилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-9Н-пурин2,6-диамина.
ЬСМ8 (система В): 1ЕЕТ = 0,96 мин.
МН+ = 362.
Пример 18. 6-Амино-2-(бутиламино)-9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)-бутил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из ^-бутил-9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-8(метилокси)-9Н-пурин-2,6-диамина.
ЬСМ8 (система В): 1ЕЕТ = 1,12 мин.
МН+ = 376.
Пример 19. 6-Амино-2-(бутиламино)-9-[5-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)пентил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Трифторацетат ^-бутил-8-(метилокси)-3Н-пурин-2,6-диамина (192 мг, 0,547 ммоль) и карбонат калия (189 мг, 1,368 ммоль) суспендировали в ОМР (3 мл) и нагревали до 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли 1-бром-5-хлорпентан (0,072 мл, 0,547 ммоль) и эту реакционную смесь перемешивали в течение еще 18 ч. Добавляли гексагидро-1Н-азепин (54,2 мг, 0,547 ммоль) и триэтиламин (0,076 мл, 0,547 ммоль) и эту реакционную смесь нагревали до 70°С в течение 24 ч. ЬСМ8-анализ продемонстрировал главный пик с МН+ равным 404, согласующийся с образованием ^-бутил-9-[5-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)пентил]-8-(метилокси)-9Н-пурин-2,6-диамина. Растворитель удаляли в вакууме и остаток распределяли между ЭСМ (2 мл) и водой (2 мл). Водный слой снова экстрагировали ЭСМ (2 мл) и объединенные органические экстракты концентрировали и остаток растворяли в смеси Ме0Н:ЭМ80 1:1 (2 мл) и очищали посредством МЭАР (способ С). Упаривание продукта, содержащего фракции, дало остаточную соль ТРА, для которой ЬСМ8-анализ показал, что соль претерпела гидролиз 8-метоксигруппы, предположительно при концентрировании в присутствии ТРА. Это неочищенное вещество растворяли еще раз в смеси Ме0Н:ЭМ80 1:1 (2 мл) и повторно очищали посредством МЭАР (способ А). Фракции, содержащие продукт, упаривали в потоке азота с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (39 мг).
ЬСМ8 (система В): 1ЕЕТ = 1,18 мин.
МН+ = 390.
- 53 020631
Пример 20. 6-Амино-2-{[(18)-метилбутил]окси}-9-[4-(1-пиперидинил)-бутил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 19 из трифторацетата 2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)1Н-пурин-6-амина, 1-бром-4-хлорбутана и пиперидина.
ЬСМ8 (система В): ίΚΕΤ = 1,38 мин.
МН+ = 377.
Пример 21. 6-Амино-9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-7,9дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-2-{[(18)-1метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ8 (система В): ίΚΕΤ = 1,48 мин.
МН+ = 391.
Пример 22. 6-Амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-9Н-пурин-6-амина в соответствии со следующим.
Раствор хлорид водорода в диоксане (4 М, 0,71 мл) добавляли к раствору 2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-9Н-пурин-6-амина (0,046 г, 0,126 ммоль) в метаноле (3 мл). Полученную в результате смесь оставляли на ночь при комнатной температуре и затем концентрировали в атмосфере азота. Остаток растворяли в метаноле и наносили на 2 г аминопропиловый 8ΡΕ картридж (предварительно уравновешенный метанолом), элюировали метанолом и полученный раствор концентрировали в атмосфере азота с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (40,97 мг).
ЬСМ8 (система Ό): ίΚΕΤ = 2,70 мин.
МН+ = 391.
Полученный аналогичным образом образец (1,7 г) перекристаллизовывали из этилацетата (приблизительно 50 мл). Кристаллы собирали, промывали охлажденным на льду этилацетатом (15 мл) и сушили в вакууме при 50°С в течение 3 ч с получением указанного в заголовке соединения в виде кремового кристаллического твердого вещества (1,33 г).
Начальная температура плавления (Ό8ί'.’): 207,4°С (см. фиг. 2).
УКРО: (см. фиг. 1 и таблицу).
- 54 020631
Пример 23. 6-Амино-9-[5-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)пентил-2{[(18)-1-метилбутил]окси}-7,9дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 19 из трифторацетата 2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)1Н-пурин-6-амина, 1-бром-5-хлорпентана и гексагидро-1Н-азепина.
ЬСМ8 (система В): 1РЕТ = 1,54 мин.
МН+ = 405.
Пример 24. 6-Амино-2-{[(18)-1-метилпропил]окси}-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 29 из 9-(4-хлорбутил)-8-(метилокси)-2-{[(18)-1-метилпропил]окси}9Н-пурин-6-амина и пиперидина.
ЬСМ8 (система Б): 1РЕТ = 2,27 мин.
МН+ = 363.
Также выделяли образец промежуточного соединения 8-метоксипроизводного 8-(метилокси)-2{[(18)-1 -метилпропил]окси}-9-[4-( 1 -пиперидинил)бутил] -9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ8 (система Б): 1РЕТ = 2,56 мин.
МН+ = 377.
Пример 25. 6-Амино-2-{[(18)-1-метилпентил]окси}-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 29 из 9-(4-хлорбутил)-8-(метилокси)-2-{[(18)-1-метилпентил]окси}9Н-пурин-6-амина и пиперидина.
ЬСМ8 (система Б): 1РЕТ = 2,72 мин.
МН+ = 391.
Также выделяли образец промежуточного соединения 8-метоксипроизводного 8-(метилокси)-2{[(18)-1 -метилпентил]окси}-9-[4-( 1 -пиперидинил)бутил] -9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ8 (система Б): 1РЕТ = 3,01 мин.
МН+ = 405.
- 55 020631
Пример 26. 6-Амино-2-[(1-метилэтил)окси]-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8он
Получали аналогично примеру 29 из 9-(5-хлорпентил)-2-[(1-метилэтил)окси]-8-(метилокси)-9Нпурин-6-амина и пиперидина.
ЬСМ§ (система Ό): !ЕЕТ = 2,18 мин.
МН+ = 363.
Также выделяли промежуточное соединение 8-метоксипроизводное 2-[(1-метилэтил)окси]-8(метилокси)-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система Ό): !ЕЕТ = 2,43 мин.
МН+ = 377.
Пример 27 (родственное 7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он соединение). 6-Амино-2-(циклобутилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-
О
Получали аналогично примеру 29 из 9-(4-хлорбутил)-2-(циклобутилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин6-амина и пиперидина.
ЬСМ§ (система Ό): !ЕЕТ = 2,24 мин.
МН+ = 361.
Также выделяли образец промежуточного соединения 8-метоксипроизводного 2-(циклобутилокси)8-(метилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система Ό): !ЕЕТ = 2,49 мин.
МН+ = 375.
Пример 28 (родственное соединение). 6-Амино-2-(циклопентилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
О
Получали аналогично примеру 29 из 9-(4-хлорбутил)-2-(циклопентилокси)-8-(метилокси)-9Нпурин-6-амина и пиперидина.
ЬСМ§ (система Ό): !ЕЕТ = 2,38 мин.
МН+ = 375.
Также выделяли образец промежуточного соединения 8-метоксипроизводного 2-(циклопентилокси)-8-(метилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ§ (система Ό): !ЕЕТ = 2,64 мин.
МН+ = 389.
- 56 020631
Пример 29 (родственное соединение). 6-Амино-2-(циклогексилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]7,9 -дигидро -8Н -пурин-8-он
Йодид натрия (0,006 г, 0,04 ммоль) добавляли к перемешиваемой смеси 9-(4-хлорбутил)-2(циклогексилокси)-8-(метилокси)-9Н-пурин-6-амина (0,103 г, 0,303 ммоль), Ν,Ν-диизопропилэтиламина (0,105 мл, 0,079 г, 0,609 ммоль) и пиперидина (0,120 мл, 0,103 г, 1,215 ммоль) в ЭМР (1,5 мл). Полученную в результате смесь нагревали при 80°С в течение 20 ч, после чего ^СΜδ-анализ показал образование двух продуктов, один из которых соответствовал замещению хлорида на пиперидин, а второй соответствовал сопутствующему гидролизу 8-метоксигруппировки. Эту реакционную смесь распределяли между дихлорметаном (6 мл) и водой (6 мл) и фазы разделяли с использованием гидрофобной фритты. Растворитель удаляли из органической фазы в потоке азота в устройстве для продувки и остаток растворяли в смеси ΜеΟΗ:^ΜδΟ 1:1 (2 мл) и разделяли посредством автопрепаративной ВЭЖХ с управлением по массе (способ А) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (16,6 мг).
ΡΟ^δ (система Ό): ΐΚΕΤ = 2,53 мин.
МН+ = 389.
Также выделили промежуточное соединение 2-(циклогексилокси)-8-(метилокси)-9-[4-(1пиперидинил)бутил]-9Н-пурин-6-амин в виде бесцветного твердого вещества (55,2 мг).
ΡΟ^δ (система Ό): ΐΚΕΤ = 2,80 мин.
МН+ = 403.
Пример 30. 6-Амино-2-{[(1К)-1-метилбутил]амино}-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 29 из 9-(4-хлорбутил)-Ы2-[(1К)-1-метилбутил]-8-(метилокси)-9Нпурин-2,6-диамина и пиперидина.
ΡΟ^δ (система Ό): ΐΚΕΤ = 2,47 мин.
МН+ = 376.
Также выделили образец промежуточного соединения 8-метоксипроизводного Ы2-[(1К)-1-метилбутил]-8-(метилокси)-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-9Н-пурин-2,6-диамина.
ΡΟ^δ (система Ό): ΐΚΕΤ = 2,76 мин.
МН+ = 390.
Пример 31. 6-Амино-2-{ [(1δ)-1 -метилбутил]амино}-9-[4-( 1 -пиперидинил)бутил] -7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 29 из 9-(4-хлорбутил)-Ы2-[(Ш)-1-метилбутил]-8-(метилокси)-9Н- 57 020631 пурин-2,6-диамина и пиперидина.
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 2,47 мин.
МН+ = 376.
Также выделили образец промежуточного соединения 8-метоксипроизводного
Ν2-[( 18)-1 -метилбутил] -8-(метилокси)-9-[4-( 1 -пиперидинил)бутил] -9Н-пурин-2,6-диамина.
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 2,76 мин.
МН+ = 390.
Пример 32. 6-Амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[3-(1-пиперидинил)пропил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 29 из 9-(3-хлорпропил)-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)9Н-пурин-6-амина и пиперидина.
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 2,52 мин.
МН+ = 363.
Также выделили образец промежуточного соединения 8-метоксипроизводного 2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-8-(метилокси)-9-[3 -(1 -пиперидинил)пропил] -9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 2,87 мин.
МН+ = 377.
Пример 33. 6-Амино-2-{[(18)-1-метилпропил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Нпурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 8-(метилокси)-2-{[(18)-1-метилпропил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-9Н-пурин-6-амина.
ЬСМ8 (система Ό): 1КЕТ = 2,39 мин.
МН+ = 377.
Пример 34. 6-Амино-2-(бутилокси)-9-[3-(1-пиперидинил)пропил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он
Получали аналогично примеру 1 из 2-(бутилокси)-8-(метилокси)-9-[3-(1-пиперидинил)пропил]-9Нпурин-6-амина.
ЬСМ8 (система В): 1КЕТ = 1,23 мин.
МН+ = 349.
Полиморфизм.
Дифракцию рентгеновских лучей на порошке (ΧΡΡΌ) и дифференциальную сканирующую калориметрию (Э8С) осуществляли для 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9дигидро-8Н-пурин-8-она в соответствии со следующими способами.
ΧΡΡΌ.
Данные ΧΡΡΌ получали при помощи порошкового дифрактометра ΡΑΝαΙνΙίοαΙ Х'Рей Рго, оборудованного детектором Х'Се1ега1ог. Условия регистрации были следующими: излучение: СиКа, напряжение
- 58 020631 на генераторе: 40 кВ, сила тока генератора: 45 мА, начальный угол: 2,0° 2θ, конечный угол: 40,0° 2θ, величина шага: 0,0167° 2θ. Время на шаг составляло 31,750 с. Образец готовили путем закрепления нескольких миллиграмм образца на 8ί подложку (нулевой фон), давая тонкий слой порошка.
Характеристические положения пиков и вычисленные б-значения обобщены в таблице. Их рассчитывали по необработанным данным с использованием программного обеспечения Шдйксоге. Экспериментальная ошибка положений пика составляет приблизительно ±0,1° 2θ. Относительные интенсивности пиков варьируют в зависимости от предпочтительной ориентации.
Характеристические положения пиков ХКРЭ для твердой формы 1
6-амино-2-{(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она
Типичная дифрактограмма ХКРЭ для 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она приведена на фиг. 1.
О8С.
Термограмму Э8С получали с использованием калориметра ТА 1п8!гитеп!8. Образец взвешивали в алюминиевый поддон, сверху закрывали крышкой и слегка обжимали, не закрывая поддон плотно. Эксперимент проводили с использованием скорости нагревания 10°С мин-1.
Типичная термограмма Э8С для 6-амино-2-{[(18)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она изображена на фиг. 2.
Биологические данные.
Соединения по изобретению тестировали в отношении биологической активности ш уйго в соответствии со следующими анализами или подобными анализами.
Анализ индукции интерферона α с использованием криоконсервированных человеческих мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС)
Приготовление соединения.
Соединения растворяли в ЭМ8О. Готовили серийные 2-кратные разведения ЭМ8О и по 0,25 мкл распределяли в 384-луночные прозрачные полипропиленовые планшеты Огетег.
Подготовка РВМС.
Образцы крови объемом до 200 мл получали у здоровых доноров людей. Цельную кровь в объемах 25 мл наслаивали на 15-мл градиенты Р1со11 в пробирках Ьеисокер и центрифугировали при 1000/д в течение 20 мин. Клетки в полосе на границе плазма крови/ЫвЮрацие осторожно удаляли и промывали дважды забуференным фосфатом физиологическим раствором (РВ8) (центрифугировали при 400/д в течение 5 мин для сбора). Конечный осадок ресуспендировали в среде для заморозки (90% инактивированная теплом сыворотка крови, 10% ЭМ8О) до концентрации клеток 4/107 клеток/мл. Ресуспендированные клетки затем подвергали криоконсервации (замораживали) с использованием морозильной камеры с контролем скорости замораживания и хранили при -140°С в течение до 4 месяцев.
Инкубация и анализ интерферона-α.
Непосредственно перед анализом флаконы с криоконсервированными (замороженными) РВМС подвергали быстрому оттаиванию в водяной бане при 37°С. Готовили разведение клеток 1:10 в трипановом синем и клетки подсчитывали. РВМС затем разбавляли в средах для роста [КРМ1 1640, содержащая 10% фетальную телячью сыворотку Дпуйгодеп), пенициллин + стрептавидин (О1Ьсо номер по каталогу 25030-024, 1:50), Ь-глутамин 2 мМ и 1000 Ед/мл рекомбинантный человеческий ΙΡΝ-гамма (Ргерго!есй, номер по каталогу 300-02)] до плотности 1/106 клеток/мл и по 50 мкл/лунку распределяли в 384-луночные прозрачные полипропиленовые планшеты Огетег, содержащие 0,25 мкл ЭМ8О или тестируемое соединение в 0,25 мкл ЭМ8О. Верхняя конечная концентрация соединения типично составляла
- 59 020631 или 5 мкМ (с получением аппроксимирующей кривой для высокоактивных соединений). Планшеты инкубировали в течение 24 ч при 37°С в 5% СО2.
Мультиизоформный иммуноанализ использовали для количественного анализа ΓΡΝ-α в супернатантах РВМС. Кроличье поликлональное антитело против человеческого ΓΡΝ-α (номер по каталогу 31101, ЗбаГесЬ δοίοηΙίΓίο) разбавляли 1:10000 в буфере для анализа (КΡΜI 1640, содержащая 10% фетальную телячью сыворотку, !пуЦгодеп) и 20 мкл добавляли в каждую лунку 384-луночного планшета ΜδΌ (Μе5Ο-δса1е О15соуегу) с одной небольшой точкой на лунку ОАК (покрытого козьим антителом против кроличьих антител). Планшет инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре при интенсивном встряхивании. После трех промывок ΡΒδ 20 мкл клеточного супернатанта добавляли в каждую лунку планшета. Планшет затем инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре при интенсивном встряхивании. Пару моноклональных антител против ΣΡΝ-α (номера по каталогу 21100 и 21112, 36ййсЬ δ^ηΙίΓχ), меченных сульфо-ТАО (ΜδΌ), разбавляли 1:1000 в буфере для анализа и 20 мкл добавляли в каждую лунку планшета. Планшет дополнительно инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре при интенсивном встряхивании. После трех промывок ΡΒδ 2x30 мкл Т-буфера (ΜδΌ) добавляли в каждую лунку и планшет визуализировали в планшет-ридере ΜδΌ δесΐо^ 6000.
Данные нормализовали в соответствии с внутренними контролями в планшетах: 1 мкМ резиквимод (п=16) и ^ΜδО (п=16). Значения рЕС50 (обратного десятичного логарифма средней эффективной концентрации) получали при помощи 4-параметрической подгонки кривой с ГОРЗ в АсИуПуВа5е на основе 11-точечного двукратного серийного разведения тестируемых соединений.
Результаты.
Соединения примеров 1-34 имели среднее значение рЕС50 >5,5.
Анализ индукции ΣΡΝ-α и ΤΝΡ-α с использованием свежих мононуклеарных клеток периферической крови человека (РВМС).
Приготовление соединения.
Соединения растворяли и готовили серию разведений в ^ΜδО с получением 100 х требуемого диапазона концентраций с использованием Вютек 2000. 1 мкл тестируемого соединения переносили в 96-луночные планшеты для культур ткани с использованием Вютек ΡΧ. Каждое соединение анализировали для каждого донора в двух параллельных опытах. Каждый планшет содержал серии разведения агониста ТЬК7/8 резиквимода в качестве стандарта, и колонка 11 содержала 1 мкл 200 мкМ резиквимода (с получением 2 мкМ конечной концентрации, используемой для определения приблизительного максимального ответа на резиквимод).
Приготовление РВМС.
Образцы крови двух доноров людей собирали в пробирки с гепарином натрия (10 Ед/мл). Объемы цельной крови по 25 мл наслаивали на 15 мл Н15Юрас.1ие в пробирках Ьеисо5ер, которые центрифугировали при 800хд в течение 20 мин и слой на границе раздела плазма крови/Й51орацие осторожно удаляли. Собранные клетки центрифугировали при 2500 об/мин в течение 10 мин и осадок ресуспендировали в 10 мл среды (КΡΜI 1640 (низкое содержание эндотоксина), дополненная 10% об./об. фетальной телячьей сыворотки (РСЗ, низкое содержание эндотоксина), 100 Ед/мл пенициллина О, 100 мкг/мл стрептомицина, 10 мМ Ь-глутамина и 1х заменимых аминокислот). Разведение клеток 1:20 готовили с использованием трипанового синего и клетки подсчитывали с использованием гемоцитометра. РВМС разбавляли с получением конечной концентрации 2х106/мл и 100 мкл этой клеточной суспензии добавляли в лунки, содержащие 1 мкл разбавленного тестируемого соединения.
Инкубация и анализы ΣΡΝ-α и ΤΝΡ-α.
Клеточные препараты инкубировали в течение 24 ч (37°С, 95% воздух, 5% СО2), после чего образец супернатанта удаляли с использованием Вютек ΡΧ и анализировали в отношении ΣΡΝ-α и ΤΝΡ-α с использованием ΜδΌ ^е5О5са1е Э|5соуегу) платформы для электрохемилюминесцентного анализа. Анализ ΣΕΝ-α осуществляли аналогично описанному выше. Анализ ΤΝΡ-α осуществляли в соответствии с инструкциями к набору (номер по каталогу К111ВНВ).
Высвобождение цитокина выражали в виде процента относительно 2 мкМ резиквимода в качестве контроля (колонка 11). Этот процент наносили на график против значений концентрации соединения и рЕС50 для ответа определяли путем нелинейной подгонки кривой по методу наименьших квадратов. Для ответов в виде ΞΕΝ-α, как правило, выбирали 4-параметрическую логарифмическую модель. Для ответов в виде ΤΝΡ, когда получали ясный максимальный ответ (т.е. в ответе наблюдается четко определяемое плато), тогда использовали, как правило, 4-параметрическую модель. Если верхняя асимптота кривой четко не определялась, тогда подгонку кривой, как правило, ограничивали максимальным ответом 100% (т.е. ответом на 2 мкМ резиквимод) или ответом при наивысшей тестируемой концентрации, если он превосходил ответ на резиквимод. Некоторые кривые имели форму колокола для одного или обоих цитокинов, и данные для ответа в виде цитокина на нисходящей части колоколообразной кривой (т.е. концентрации выше тех, которые обеспечивают максимальный ответ), как правило, исключали из подгонки, обычно за исключением концентрации, непосредственно превосходящей максимальный ответ. Таким образом, подгонка кривой концентрировалась на восходящем наклоне кривой зависимости ответа от дозы.
- 60 020631
Результаты.
Соединения примеров 5 и 9 показали средние рЕС50 для индукции ΓΡΝ-α и ΤΝΡ-α >7,5 и <5,5 соответственно. Соединения примеров 6, 7, 10-12, 14 и 18 показали средние рЕС50 для индукции ΣΡΝ-α и ΤΝΡ-α >8 и <6 соответственно. Соединения примеров 13, 15 и 20-23 показали средние рЕС50 для индукции ΣΡΝ-α и ΤΝΡ α >9 и <6 соответственно.
Зависимый от аллергена цитокиновый анализ с использованием свежих мононуклеарных клеток периферической крови человека (РВМС) добровольцев, страдающих атопической аллергией/
Разработали анализ, основанный на совместном выращивании мононуклеарных клеток периферической крови доноров людей (РВМС), страдающих атопической аллергией, с аллергеном и тестируемыми соединениями. После 5-6 суток выращивания клеточные супернатанты анализировали в отношении диапазона цитокинов.
Приготовление соединения.
Соединения растворяли в ΌΜδΟ, затем готовили серийные разведения в среде для роста (среда ΚΡΜI 1640, дополненная 100 Ед/мл пенициллина С, 100 мкг/мл стрептомицина, 10 мМ Ь-глутамина) с получением 4x диапазона желаемой концентрации в присутствии 0,04% ΌΜδΟ. Каждое соединение анализировали в трех параллельных опытах при всех концентрациях.
Приготовление РВМС.
Дефибринированную человеческую кровь добровольцев, про которых известно, что они страдают аллергией на тимофеевку луговую, центрифугировали при 2500 об/мин в течение 15 мин. Верхний слой сыворотки крови отбирали и инактивировали тепловым воздействием при 56°С в течение 30 мин (Н1-аутологическая сыворотка крови). Нижний слой клеток ресуспендировали в 50 мл ΡВδ (+Са +Μ§), 25 мл разбавленной крови наслаивали на 20 мл Ьутрйоргер в пробирках объемом 50 мл, затем центрифугировали при 2500 об/мин в течение 20 мин при к.т. Слой на поверхности раздела сыворотка крови/Ьутрйоргер осторожно удаляли. Собранные клетки промывали ΡВδ и ресуспендировали в концентрации 4x106/мл в среде для роста с Н1-аутологической сывороткой крови. РВМС высевали в концентрации 0^106 клеток/лунку в плоскодонные 96-луночные планшеты в присутствии 10 мкг/мл антигена тимофеевки луговой (А1к АЬе11о) и тестируемых соединений в соответствующих концентрациях в общем объеме 200 мкл.
Инкубация и цитокиновый анализ.
Планшеты инкубировали при 37°С в 5% СО2 в течение вплоть до 6 суток. Клеточную среду из каждой лунки отбирали и хранили при -20°С до анализа. Цитокины и хемокины в супернатантах обнаруживали с использованием спот-планшетов Μе8о δса1е ОКсоуегу 10 для человеческих цитокинов ТН1/ТН2.
В вышеприведенном анализе данные отдельных исследований с РВМС трех страдающих аллергией доноров показали, что соединение примера 22 уменьшает продуцирование Тй2 цитокинов РЬ-5 и РЬ-13 в зависимости от дозы, причем >50% уменьшение обнаружено при 0,04 мкМ по сравнению с аллергеном в качестве контроля.
Соединения примеров 21 и 22 по изобретению также тестировали в отношении биологической активности ίη У1уо в следующей модели.
Анализ индукции ΣΡΝ-α после интраназального введения дозы мышам.
Соединения растворяли в 0,2% Т\уееп 80 в физиологическом растворе и вводили интраназально (5 мкл суммарно для двух ноздрей) самкам мышей ВАЬВ/с (п=6) под общей анестезией. Животных умерщвляли через 2 ч после введения дозы и окончательный образец крови отбирали и уровни ΣΡΝ-α в сыворотке крови измеряли с использованием анализа ΕΜδΛ (иммуноферментного анализа).
В этой модели соединение примера 21 показало средние уровни в сыворотке крови ΣΡΝ-α 20326 пг/мл, и соединение примера 22 показало средние уровни в сыворотке крови ΣΡΝ-α 21029 пг/мл. ΣΡΝ-α не обнаружен в контролях, обработанных разбавителем.

Claims (24)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (I) где К1 представляет собой С1-6алкиламино, С1-6алкокси; т равен целому числу, имеющему значение от 3 до 6; п равен целому числу, имеющему значение от 0 до 4, или его соль.
  2. 2. Соединение по п.1 или его соль, где К1 представляет собой н-бутилокси.
  3. 3. Соединение по п.1 или его соль, где К1 представляет собой (1§)-1-метилбутилокси.
  4. 4. Соединение или его соль, выбранные из перечня, состоящего из
    6-амино-2-(бутилокси)-9-[6-(1-пирролидинил)гексил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она;
    6-амино-2-(бутилокси)-9-[6-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)гексил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она;
    6-амино-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-9-[4-(1-пиперидинил)бутил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она;
    6-амино-9-[4-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)бутил]-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-7,9-дигидро-8Нпурин-8-она;
    6-амино-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-она и
    6-амино-9-[5-(гексагидро-1Н-азепин-1-ил)пентил]-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-7,9-дигидро-8Нпурин-8-она и их солей.
  5. 5. Соединение по любому из пп.1-4, которое находится в форме фармацевтически приемлемой соли.
  6. 6. Соединение, представляющее собой 6-амино-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он или его соль.
  7. 7. Соединение, представляющее собой 6-амино-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он или его фармацевтически приемлемую соль.
  8. 8. Соединение по любому из пп.1-4, которое находится в форме свободного основания.
  9. 9. Соединение, представляющее собой 6-амино-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро-8Н-пурин-8-он в виде свободного основания.
  10. 10. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли в терапии.
  11. 11. Применение соединения по любому из пп.8, 9 в терапии.
  12. 12. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли в лечении аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, инфекционных заболеваний и рака.
  13. 13. Применение соединения по любому из пп.8, 9 в лечении аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, инфекционных заболеваний и рака.
  14. 14. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли в лечении аллергического ринита.
  15. 15. Применение соединения по любому из пп.8, 9 или его фармацевтически приемлемой соли в лечении аллергического ринита.
  16. 16. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли в лечении астмы.
  17. 17. Применение соединения по любому из пп.8, 9 в лечении астмы.
  18. 18. Способ лечения аллергических заболеваний и других воспалительных состояний, включающий введение субъекту - человеку, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли или соединения по любому из пп.8 или 9.
  19. 19. Способ лечения аллергического ринита, включающий введение субъекту - человеку, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли или соединения по любому из пп.8 или 9.
  20. 20. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемую соль и один или более фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
  21. 21. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.8, 9 и один или более
    - 62 020631 фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
  22. 22. Применение соединения по любому из пп.1-9 или его фармацевтически приемлемой соли в качестве вакцинного адъюванта.
  23. 23. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли или соединения по любому из пп.8, 9 для изготовления лекарственного средства для лечения аллергических заболеваний и других воспалительных состояний.
  24. 24. Применение по п.23 для лечения аллергического ринита.
    Дифрактограмма ΧΡΡΌ для 6-амино-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-
    Термограмма Э5С для 6-амино-2-{[(1§)-1-метилбутил]окси}-9-[5-(1-пиперидинил)пентил]-7,9-дигидро8Н-пурин-8-она
EA201100113A 2008-08-11 2009-08-07 Производные пурина для применения в лечении аллергических, воспалительных и инфекционных заболеваний EA020631B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US8777708P 2008-08-11 2008-08-11
PCT/EP2009/060265 WO2010018133A1 (en) 2008-08-11 2009-08-07 Purine derivatives for use in the treatment of allergic, inflammatory and infectious diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201100113A1 EA201100113A1 (ru) 2011-10-31
EA020631B1 true EA020631B1 (ru) 2014-12-30

Family

ID=41187189

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201100113A EA020631B1 (ru) 2008-08-11 2009-08-07 Производные пурина для применения в лечении аллергических, воспалительных и инфекционных заболеваний

Country Status (38)

Country Link
US (7) US8067426B2 (ru)
EP (3) EP2324026B1 (ru)
JP (1) JP5529867B2 (ru)
KR (1) KR101669939B1 (ru)
CN (2) CN102177159B (ru)
AU (1) AU2009281197B2 (ru)
BR (1) BRPI0917138A2 (ru)
CA (1) CA2733749C (ru)
CL (1) CL2011000301A1 (ru)
CO (1) CO6351791A2 (ru)
CR (1) CR20110116A (ru)
CY (1) CY1119992T1 (ru)
DK (2) DK2324026T3 (ru)
DO (1) DOP2011000048A (ru)
EA (1) EA020631B1 (ru)
ES (2) ES2661671T3 (ru)
HK (3) HK1157770A1 (ru)
HR (2) HRP20150938T1 (ru)
HU (2) HUE036570T2 (ru)
IL (1) IL210757A (ru)
LT (1) LT3000813T (ru)
MA (1) MA32624B1 (ru)
ME (1) ME02274B (ru)
MX (2) MX2011001666A (ru)
MY (1) MY162538A (ru)
NO (1) NO3000813T3 (ru)
NZ (2) NZ602812A (ru)
PE (1) PE20110674A1 (ru)
PL (2) PL3000813T3 (ru)
PT (2) PT3000813T (ru)
RS (2) RS56984B1 (ru)
SG (1) SG192547A1 (ru)
SI (2) SI2324026T1 (ru)
SM (1) SMT201500224B (ru)
TR (1) TR201802648T4 (ru)
UA (1) UA103195C2 (ru)
WO (1) WO2010018133A1 (ru)
ZA (1) ZA201100845B (ru)

Families Citing this family (62)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BRPI0509258A8 (pt) * 2004-03-26 2019-01-22 Astrazeneca Ab composto de 8-oxoadenina 9-substituída
EP1874772A1 (en) * 2005-04-05 2008-01-09 Pharmacopeia, Inc. Purine and imidazopyridine derivatives for immunosuppression
WO2007034817A1 (ja) * 2005-09-22 2007-03-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 新規アデニン化合物
WO2008004948A1 (en) * 2006-07-05 2008-01-10 Astrazeneca Ab 8-oxoadenine derivatives acting as modulators of tlr7
TW200831105A (en) * 2006-12-14 2008-08-01 Astrazeneca Ab Novel compounds
TW200843779A (en) * 2007-02-19 2008-11-16 Smithkline Beecham Corp Compounds
US8067413B2 (en) * 2007-03-19 2011-11-29 Astrazeneca Ab 9-substituted-8-oxo-adenine compounds as toll-like receptor (TLR7 ) modulators
ATE530549T1 (de) * 2007-03-19 2011-11-15 Astrazeneca Ab 9-substituierte 8-oxoadeninverbindungen als modulatoren des toll-like-receptor (tlr7)
AR065784A1 (es) * 2007-03-20 2009-07-01 Dainippon Sumitomo Pharma Co Derivados de 8-oxo adenina,medicamentos que los contienen y usos como agentes terapeuticos para enfermedades alergicas, antivirales o antibacterianas.
WO2008114819A1 (ja) * 2007-03-20 2008-09-25 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 新規アデニン化合物
EP2155743B1 (en) * 2007-05-08 2012-08-29 AstraZeneca AB Imidazoquinolines with immuno-modulating properties
PT2170888E (pt) * 2007-06-29 2015-08-21 Gilead Sciences Inc Purina derivados e sua utilização como moduladores de recetor de tipo toll 7
UY31531A1 (es) 2007-12-17 2009-08-03 Sales derivadas de 8-oxoadenina composiciones farmacéuticas que las contienen y su uso en terapia como moduladores de receptor tipo toll (tlr)
JPWO2009091031A1 (ja) * 2008-01-17 2011-05-26 大日本住友製薬株式会社 アデニン化合物の製造方法
EP2246353A4 (en) 2008-01-17 2011-04-20 Dainippon Sumitomo Pharma Co PROCESS FOR PREPARING AN ADENINE COMPOUND
US8802684B2 (en) 2008-08-11 2014-08-12 Glaxosmithkline Llc Adenine derivatives
WO2010018130A1 (en) 2008-08-11 2010-02-18 Smithkline Beecham Corporation Purine derivatives for use in the treatment of allergic, inflammatory and infectious diseases
PT2320905T (pt) 2008-08-11 2017-09-19 Glaxosmithkline Llc Novos derivados de adenina
UA103195C2 (ru) 2008-08-11 2013-09-25 Глаксосмитклайн Ллк Производные пурина для применения в лечении аллергий, воспалительных и инфекционных заболеваний
CN102272134B (zh) 2008-12-09 2013-10-16 吉里德科学公司 Toll样受体调节剂
CN102481376B (zh) 2009-05-27 2016-12-21 西莱克塔生物科技公司 免疫调节剂-聚合物化合物
WO2011049825A1 (en) 2009-10-22 2011-04-28 Gilead Sciences, Inc. Derivatives of purine or deazapurine useful for the treatment of (inter alia) viral infections
WO2011068233A1 (en) * 2009-12-03 2011-06-09 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. Imidazoquinolines which act via toll - like receptors (tlr)
US20110150836A1 (en) * 2009-12-22 2011-06-23 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating hbv and hcv infection
US8575340B2 (en) 2010-02-10 2013-11-05 Glaxosmithkline Llc Purine derivatives and their pharmaceutical uses
CN102753553B (zh) * 2010-02-10 2016-03-30 葛兰素史密丝克莱恩有限责任公司 6-氨基-2-{[(1s)-1-甲基丁基]氧基}-9-[5-(1-哌啶基)-7,9-二氢-8h-嘌呤-8-酮马来酸盐
AU2011258156B2 (en) 2010-05-26 2016-11-24 Selecta Biosciences, Inc. Multivalent synthetic nanocarrier vaccines
EP2640190A4 (en) 2010-11-05 2016-05-11 Selecta Biosciences Inc MODIFIED NICOTINIC COMPOUNDS AND ASSOCIATED METHODS
ES2575688T3 (es) 2010-12-16 2016-06-30 Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd. Derivado de imidazo[4,5-c]quinolin-1-ilo útil en terapia
JP5978226B2 (ja) 2010-12-17 2016-08-24 大日本住友製薬株式会社 プリン誘導体
US9289477B2 (en) 2011-04-29 2016-03-22 Selecta Biosciences, Inc. Tolerogenic synthetic nanocarriers to reduce cytotoxic T lymphocyte responses
LT2734186T (lt) * 2011-07-22 2018-12-10 Glaxosmithkline Llc Kompozicija
WO2013019658A2 (en) 2011-07-29 2013-02-07 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarriers comprising polymers comprising multiple immunomodulatory agents
GB201119999D0 (en) 2011-11-20 2012-01-04 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
GB201120000D0 (en) 2011-11-20 2012-01-04 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
EP2674170B1 (en) 2012-06-15 2014-11-19 Invivogen Novel compositions of TLR7 and/or TLR8 agonists conjugated to lipids
UY34987A (es) * 2012-08-24 2014-03-31 Glaxosmithkline Llc ?nuevos compuestos inductores del interferón humano para el tratamiento de diversos trastornos?
EP2732825B1 (en) 2012-11-19 2015-07-01 Invivogen Conjugates of a TLR7 and/or TLR8 agonist and a TLR2 agonist
ES2625023T3 (es) 2012-11-20 2017-07-18 Glaxosmithkline Llc Compuestos novedosos
RS56233B1 (sr) 2012-11-20 2017-11-30 Glaxosmithkline Llc Nova jedinjenja
US9550785B2 (en) 2012-11-20 2017-01-24 Glaxosmithkline Llc Pyrrolopyrimidines as therapeutic agents for the treatment of diseases
EP2769738B1 (en) 2013-02-22 2016-07-20 Invivogen Conjugated TLR7 and/or TLR8 and TLR2 polycationic agonists
KR20160124157A (ko) * 2014-02-20 2016-10-26 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 (넘버 2) 리미티드 인간 인터페론의 유도인자로서의 피롤로[3,2]피리미딘 유도체
WO2015130584A2 (en) 2014-02-25 2015-09-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Lipid nanoparticle vaccine adjuvants and antigen delivery systems
EP3160453A1 (en) 2014-06-25 2017-05-03 Selecta Biosciences, Inc. Methods and compositions for treatment with synthetic nanocarriers and immune checkpoint inhibitors
AU2015287773B2 (en) 2014-07-11 2018-03-29 Gilead Sciences, Inc. Modulators of toll-like receptors for the treatment of HIV
CN106715431A (zh) 2014-09-16 2017-05-24 吉利德科学公司 Toll样受体调节剂的固体形式
JP2017533925A (ja) * 2014-11-13 2017-11-16 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム アレルギー性疾患又は他の炎症状態の治療に有用なアデニン誘導体
WO2017205383A1 (en) * 2016-05-23 2017-11-30 University Of Iowa Research Foundation Method of treating cystic fibrosis airway disease
CN109476696B (zh) * 2016-06-02 2022-06-10 细胞基因公司 动物及人抗锥虫和抗利什曼原虫剂
CA3057813A1 (en) 2017-03-29 2018-10-04 Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd. Vaccine adjuvant formulation
CN108948016B (zh) * 2017-05-19 2021-02-26 江苏恒瑞医药股份有限公司 嘌呤酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN111587114A (zh) 2017-11-14 2020-08-25 儿童医学中心公司 用于调节人免疫应答的咪唑并嘧啶的用途
JP7304855B2 (ja) 2017-11-14 2023-07-07 ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレーション 新規イミダゾピリミジン化合物およびそれらの使用
US11812433B2 (en) 2017-11-17 2023-11-07 Ntt Docomo, Inc. User terminal and radio communication method
WO2019124500A1 (ja) 2017-12-21 2019-06-27 大日本住友製薬株式会社 Ｔｌｒ７アゴニストを含む併用薬
WO2020022272A1 (ja) 2018-07-23 2020-01-30 公益財団法人ヒューマンサイエンス振興財団 インフルエンザワクチンを含む組成物
US11486970B1 (en) 2019-02-11 2022-11-01 Innovusion, Inc. Multiple beam generation from a single source beam for use with a LiDAR system
CA3138461A1 (en) * 2019-05-23 2020-11-26 Helene Bazin-Lee Vaccine adjuvants based on tlr receptor ligands
WO2020263660A1 (en) * 2019-06-24 2020-12-30 Merck Sharp & Dohme Corp. Process for the preparation of 2-fluoroadenine
CN110772523B (zh) * 2019-11-07 2020-06-26 黑龙江中医药大学 一种用于防治肾病的药物组合物
WO2024028794A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Temple Therapeutics BV Methods for treating endometrial and ovarian hyperproliferative disorders

Family Cites Families (117)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB427857A (en) 1934-08-02 1935-05-01 Newsum Sons & Company Ltd H A new or improved system of construction for skeleton structures, particularly vehicle body frames and door frames
TW530047B (en) 1994-06-08 2003-05-01 Pfizer Corticotropin releasing factor antagonists
US6403599B1 (en) 1995-11-08 2002-06-11 Pfizer Inc Corticotropin releasing factor antagonists
US7067664B1 (en) 1995-06-06 2006-06-27 Pfizer Inc. Corticotropin releasing factor antagonists
AU3176297A (en) 1996-06-25 1998-01-14 Novartis Ag Substituted 7-amino-pyrrolo{3,2-d}pyrimidines and the use thereof
US6126919A (en) 1997-02-07 2000-10-03 3M Innovative Properties Company Biocompatible compounds for pharmaceutical drug delivery systems
US5985848A (en) 1997-10-14 1999-11-16 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Inhibitors of nucleoside metabolism
TW572758B (en) 1997-12-22 2004-01-21 Sumitomo Pharma Type 2 helper T cell-selective immune response inhibitors comprising purine derivatives
US6187777B1 (en) 1998-02-06 2001-02-13 Amgen Inc. Compounds and methods which modulate feeding behavior and related diseases
US6232320B1 (en) 1998-06-04 2001-05-15 Abbott Laboratories Cell adhesion-inhibiting antiinflammatory compounds
CZ27399A3 (cs) 1999-01-26 2000-08-16 Ústav Experimentální Botaniky Av Čr Substituované dusíkaté heterocyklické deriváty, způsob jejich přípravy, tyto deriváty pro použití jako léčiva, farmaceutická kompozice a kombinovaný farmaceutický přípravek tyto deriváty obsahující a použití těchto derivátů pro výrobu léčiv
EP1065213A3 (en) 1999-07-02 2003-11-05 Japan Tobacco Inc. HCV polymerase suitable for crystal structure analysis and method for using the enzyme
SK13752001A3 (sk) 1999-12-27 2002-07-02 Japan Tobacco, Inc. Zlúčeniny s fúzovanými kruhmi a ich použitie ako liečiv
AU3540101A (en) 2000-01-07 2001-07-16 Universitaire Instelling Antwerpen Purine derivatives, process for their preparation and use thereof
TW200505900A (en) 2000-04-28 2005-02-16 Acadia Pharm Inc Muscarinic agonists
US6448281B1 (en) 2000-07-06 2002-09-10 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
US6310224B1 (en) 2001-01-19 2001-10-30 Arco Chemical Technology, L.P. Epoxidation catalyst and process
CZ20032005A3 (en) 2001-01-22 2004-04-14 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
KR20030093248A (ko) 2001-03-19 2003-12-06 오노 야꾸힝 고교 가부시키가이샤 트리아자스피로[5.5]운데칸 유도체를 유효성분으로서함유하는 약제
GB0114286D0 (en) * 2001-06-12 2001-08-01 Hoffmann La Roche Nucleoside Derivatives
AR035543A1 (es) 2001-06-26 2004-06-16 Japan Tobacco Inc Agente terapeutico para la hepatitis c que comprende un compuesto de anillo condensado, compuesto de anillo condensado, composicion farmaceutica que lo comprende, compuestos de benzimidazol, tiazol y bifenilo utiles como intermediarios para producir dichos compuestos, uso del compuesto de anillo con
ATE541246T1 (de) 2001-06-29 2012-01-15 Maruman Products Co Ltd Funkarmbanduhr
CA2448737C (en) 2001-07-20 2010-06-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
TW200301251A (en) 2001-12-20 2003-07-01 Wyeth Corp Azaindolylalkylamine derivatives as 5-hydroxytryptamine-6 ligands
EP1348707B1 (en) 2002-03-28 2010-08-25 Ustav Experimentalni Botaniky AV CR, v.v.i. (Institute of Experimental Botany Academy of Sciences of the Czech Republic, PRO) Pyrazolo[4,3-d]pyrimidines, processes for their preparation and methods for therapy
CA2481502A1 (en) 2002-04-04 2003-10-16 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Hcv antiviral and cytotoxicity drug screening assay
CN1653077A (zh) 2002-05-06 2005-08-10 健亚生物科技公司 治疗c型肝炎病毒感染的核苷衍生物
DOP2003000641A (es) 2002-05-10 2003-11-15 Pfizer Inhibidores de las arn polimerasa dependiente de arn del virus de las hepatitis c y composiciones y tratamiento que los usan
US6713241B2 (en) 2002-08-09 2004-03-30 Eastman Kodak Company Thermally developable emulsions and imaging materials containing binder mixture
RU2330042C2 (ru) 2002-08-21 2008-07-27 Альберт Эйнштейн Колледж Оф Медсин Оф Йешива Юниверсити Ингибиторы нуклеозидфосфорилаз и нуклеозидаз
ES2387388T3 (es) 2002-09-27 2012-09-21 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. Compuesto de adenina y uso del mismo
AR041816A1 (es) 2002-10-24 2005-06-01 Glaxo Group Ltd Compuesto de acil-pirrolidina, su uso para preparar una composicion farmaceutica, composicion farmaceutica que lo comprende y procedimiento para prepararlo
US7569579B2 (en) 2002-12-13 2009-08-04 Smithkline Beecham Corporation Cyclopropyl compounds as ccr5 antagonists
JP2006511554A (ja) 2002-12-13 2006-04-06 スミスクライン ビーチャム コーポレーション Ｃｃｒ５アンタゴニストとしてのピペリジン誘導体
ATE410426T1 (de) 2002-12-13 2008-10-15 Smithkline Beecham Corp Heterocyclische verbindungen alsccr5-antagonisten
AU2003300952A1 (en) 2002-12-13 2004-07-09 Smithkline Beecham Corporation Indane compounds as ccr5 antagonists
JP2006514646A (ja) 2002-12-13 2006-05-11 スミスクライン ビーチャム コーポレーション Ｃｃｒ５アンタゴニストとしてのシクロヘキシル化合物類
US7271172B2 (en) 2002-12-13 2007-09-18 Smithkline Beecham Corporation Pyrrolidine and azetidine compounds as CCR5 antagonists
US7098231B2 (en) 2003-01-22 2006-08-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
US7223785B2 (en) 2003-01-22 2007-05-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
US7148226B2 (en) 2003-02-21 2006-12-12 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hepatitis C virus RNA-dependent RNA polymerase, and compositions and treatments using the same
EP1646614A4 (en) 2003-07-01 2008-09-10 Merck & Co Inc OPHTHALMIC COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF OCCULAR HYPERTONIA
WO2005014543A1 (ja) 2003-08-06 2005-02-17 Japan Tobacco Inc. 縮合環化合物及びそのｈｃｖポリメラーゼ阻害剤としての利用
WO2005020892A2 (en) 2003-08-08 2005-03-10 Mitochroma Research, Inc. Pharmaceutical compositions and methods for metabolic modulation
GEP20084545B (en) 2003-09-05 2008-11-25 Anadys Pharmaceuticals Inc Introducing tlr7 ligands and prodrugs thereof for the treatment of hepatitis c viral infection
AR046172A1 (es) 2003-10-03 2005-11-30 3M Innovative Properties Co Pirazolopiridinas y sus analogos; composiciones farmaceuticas que los contienen y su uso en la inhibicion de la biosintesis de citocinas
BRPI0416128B8 (pt) 2003-11-03 2021-06-22 Glaxo Group Ltd dispositivo de dispensação de fluido
ES2326082T3 (es) 2003-12-01 2009-09-30 L'oreal Derivados de 4-5-diamino-n,n-dihidro-pirazol-3-ona condensados, utilizados para la tincion de fibras queratinicas.
UA86962C2 (en) 2004-02-20 2009-06-10 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Viral polymerase inhibitors
EP1728792A4 (en) * 2004-03-26 2010-12-15 Dainippon Sumitomo Pharma Co 8-OXOADENINE COMPOUND
BRPI0509258A8 (pt) * 2004-03-26 2019-01-22 Astrazeneca Ab composto de 8-oxoadenina 9-substituída
ATE471871T1 (de) 2004-03-31 2010-07-15 Yuyama Mfg Co Ltd Tablettenzuführvorrichtung
MXPA06011423A (es) 2004-04-02 2007-01-23 Osi Pharm Inc Inhibidores de proteina cinasa heterobiciclica sustituida en el anillo 6,6-biciclico.
WO2005105761A1 (en) 2004-04-28 2005-11-10 Arrow Therapeutics Limited Morpholinylanilinoquinazo- line derivatives for use as antiviral agents
MXPA06013250A (es) 2004-05-14 2007-02-28 Abbott Lab Inhibidores de quinasa como agentes terapeuticos.
US20060029642A1 (en) 2004-08-03 2006-02-09 Dusan Miljkovic Methods and compositions for improved chromium complexes
US7153848B2 (en) 2004-08-09 2006-12-26 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
GEP20115305B (en) 2004-08-18 2011-10-10 Pfizer Inhibitors of hepatitis c virus rna-dependent rna polymerase, compositions containing them and using the same for treatment
US20060045885A1 (en) 2004-08-27 2006-03-02 Kedl Ross M Method of eliciting an immune response against HIV
GB0420719D0 (en) 2004-09-17 2004-10-20 Addex Pharmaceuticals Sa Novel allosteric modulators
GB0423673D0 (en) 2004-10-25 2004-11-24 Glaxo Group Ltd Compounds
MX2007013780A (es) * 2005-05-04 2008-02-05 Pfizer Ltd Derivados 2 amido-6-amino-8-oxo purina como moduladores del receptor como tipo peaje (toll) para el tratamiento del cancer y las infecciones virales tal como la hepatitis c.
EA200702445A1 (ru) 2005-05-09 2008-04-28 Ачиллион Фармасьютикалз, Инк. Соединения тиазола и способы их применения
NZ540160A (en) 2005-05-20 2008-03-28 Einstein Coll Med Inhibitors of nucleoside phosphorylases
AU2006272876A1 (en) 2005-07-22 2007-02-01 Sunesis Pharmaceuticals, Inc. Pyrazolo pyrimidines useful as aurora kinase inhibitors
EP1931352B1 (en) * 2005-08-22 2016-04-13 The Regents of The University of California Tlr agonists
US8003624B2 (en) 2005-08-25 2011-08-23 Schering Corporation Functionally selective ALPHA2C adrenoreceptor agonists
BRPI0615307A2 (pt) 2005-08-25 2009-08-04 Schering Corp agonistas de adrenorreceptor alfa2c
JP4584335B2 (ja) 2005-09-02 2010-11-17 ファイザー・インク ヒドロキシ置換１ｈ−イミダゾピリジンおよび方法
TW200801003A (en) * 2005-09-16 2008-01-01 Astrazeneca Ab Novel compounds
WO2007034917A1 (ja) * 2005-09-22 2007-03-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 新規なアデニン化合物
WO2007034817A1 (ja) * 2005-09-22 2007-03-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 新規アデニン化合物
US20080269240A1 (en) * 2005-09-22 2008-10-30 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. a corporation of Japan Novel Adenine Compound
JPWO2007034916A1 (ja) * 2005-09-22 2009-03-26 大日本住友製薬株式会社 新規アデニン化合物
JPWO2007034881A1 (ja) * 2005-09-22 2009-03-26 大日本住友製薬株式会社 新規アデニン化合物
TW200745114A (en) * 2005-09-22 2007-12-16 Astrazeneca Ab Novel compounds
CN1947717B (zh) 2005-10-14 2012-09-26 卓敏 选择性抑制腺苷酸环化酶1的化合物在制备用于治疗神经性疼痛和炎性疼痛的药物中的应用
AU2007216247A1 (en) 2006-02-17 2007-08-23 Pfizer Limited 3 -deazapurine derivatives as TLR7 modulators
US8349850B2 (en) 2006-03-28 2013-01-08 Atir Holding S.A. Heterocyclic compounds and uses thereof in the treatment of sexual disorders
GB0610666D0 (en) 2006-05-30 2006-07-05 Glaxo Group Ltd Fluid dispenser
CA2653941C (en) * 2006-05-31 2013-01-08 The Regents Of The University Of California Substituted amino purine derivatives and uses thereof
US20070282962A1 (en) 2006-06-01 2007-12-06 Microsoft Corporation Auto-Subscribing to Syndication Feeds Using Contact Lists
WO2008004948A1 (en) * 2006-07-05 2008-01-10 Astrazeneca Ab 8-oxoadenine derivatives acting as modulators of tlr7
AU2007269557B2 (en) * 2006-07-07 2013-11-07 Gilead Sciences, Inc. Modulators of toll-like receptor 7
TW200831105A (en) * 2006-12-14 2008-08-01 Astrazeneca Ab Novel compounds
TW200843779A (en) 2007-02-19 2008-11-16 Smithkline Beecham Corp Compounds
US8067413B2 (en) 2007-03-19 2011-11-29 Astrazeneca Ab 9-substituted-8-oxo-adenine compounds as toll-like receptor (TLR7 ) modulators
ATE530549T1 (de) * 2007-03-19 2011-11-15 Astrazeneca Ab 9-substituierte 8-oxoadeninverbindungen als modulatoren des toll-like-receptor (tlr7)
WO2008114819A1 (ja) * 2007-03-20 2008-09-25 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 新規アデニン化合物
AR065784A1 (es) * 2007-03-20 2009-07-01 Dainippon Sumitomo Pharma Co Derivados de 8-oxo adenina,medicamentos que los contienen y usos como agentes terapeuticos para enfermedades alergicas, antivirales o antibacterianas.
US7928111B2 (en) 2007-06-08 2011-04-19 Senomyx, Inc. Compounds including substituted thienopyrimidinone derivatives as ligands for modulating chemosensory receptors
PT2170888E (pt) * 2007-06-29 2015-08-21 Gilead Sciences Inc Purina derivados e sua utilização como moduladores de recetor de tipo toll 7
GB0715087D0 (en) 2007-08-03 2007-09-12 Summit Corp Plc Drug combinations for the treatment of duchenne muscular dystrophy
EP2187883A2 (en) 2007-08-10 2010-05-26 Genelabs Technologies, Inc. Nitrogen containing bicyclic chemical entities for treating viral infections
UY31531A1 (es) 2007-12-17 2009-08-03 Sales derivadas de 8-oxoadenina composiciones farmacéuticas que las contienen y su uso en terapia como moduladores de receptor tipo toll (tlr)
WO2009151910A2 (en) * 2008-05-25 2009-12-17 Wyeth Combination product of receptor tyrosine kinase inhibitor and fatty acid synthase inhibitor for treating cancer
US8946239B2 (en) 2008-07-10 2015-02-03 Duquesne University Of The Holy Spirit Substituted pyrrolo, -furano, and cyclopentylpyrimidines having antimitotic and/or antitumor activity and methods of use thereof
PT2320905T (pt) 2008-08-11 2017-09-19 Glaxosmithkline Llc Novos derivados de adenina
US8802684B2 (en) 2008-08-11 2014-08-12 Glaxosmithkline Llc Adenine derivatives
UA103195C2 (ru) 2008-08-11 2013-09-25 Глаксосмитклайн Ллк Производные пурина для применения в лечении аллергий, воспалительных и инфекционных заболеваний
WO2010018132A1 (en) 2008-08-11 2010-02-18 Smithkline Beecham Corporation Compounds
JP2011530562A (ja) 2008-08-11 2011-12-22 グラクソスミスクライン エルエルシー アレルギー性、炎症性及び感染性疾患治療用のプリン誘導体
WO2010018130A1 (en) 2008-08-11 2010-02-18 Smithkline Beecham Corporation Purine derivatives for use in the treatment of allergic, inflammatory and infectious diseases
WO2010083725A1 (zh) 2009-01-20 2010-07-29 山东轩竹医药科技有限公司 含有取代的含氮稠杂环的头孢菌素衍生物
EA023536B1 (ru) 2009-08-07 2016-06-30 Глаксосмитклайн Байолоджикалс Са Производные оксоаденина, конъюгированные с фосфо- или фосфонолипидами
CN102753553B (zh) 2010-02-10 2016-03-30 葛兰素史密丝克莱恩有限责任公司 6-氨基-2-{[(1s)-1-甲基丁基]氧基}-9-[5-(1-哌啶基)-7,9-二氢-8h-嘌呤-8-酮马来酸盐
US8575340B2 (en) 2010-02-10 2013-11-05 Glaxosmithkline Llc Purine derivatives and their pharmaceutical uses
WO2012009258A2 (en) 2010-07-13 2012-01-19 Edward Roberts Peptidomimetic galanin receptor modulators
WO2012092552A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarriers with reactive groups that release biologically active agents
USRE47009E1 (en) 2011-02-01 2018-08-28 The Children's Hospital Of Philadelphia HDAC inhibitors and therapeutic methods using the same
WO2012106522A2 (en) 2011-02-04 2012-08-09 Duquesne University Of The Holy Spirit Bicyclic and tricyclic pyrimidine tyrosine kinase inhibitors with antitubulin activity and methods of treating a patient
LT2734186T (lt) 2011-07-22 2018-12-10 Glaxosmithkline Llc Kompozicija
UY34987A (es) 2012-08-24 2014-03-31 Glaxosmithkline Llc ?nuevos compuestos inductores del interferón humano para el tratamiento de diversos trastornos?
US9550785B2 (en) 2012-11-20 2017-01-24 Glaxosmithkline Llc Pyrrolopyrimidines as therapeutic agents for the treatment of diseases
RS56233B1 (sr) 2012-11-20 2017-11-30 Glaxosmithkline Llc Nova jedinjenja
ES2625023T3 (es) 2012-11-20 2017-07-18 Glaxosmithkline Llc Compuestos novedosos
KR20160124157A (ko) 2014-02-20 2016-10-26 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 (넘버 2) 리미티드 인간 인터페론의 유도인자로서의 피롤로[3,2]피리미딘 유도체

Also Published As

Publication number Publication date
UA103195C2 (ru) 2013-09-25
CA2733749A1 (en) 2010-02-18
US20180117048A1 (en) 2018-05-03
DK2324026T3 (en) 2015-09-21
TR201802648T4 (tr) 2018-03-21
ZA201100845B (en) 2012-07-25
RS56984B1 (sr) 2018-05-31
CR20110116A (es) 2011-07-28
AU2009281197A1 (en) 2010-02-18
US9346806B2 (en) 2016-05-24
CN102177159B (zh) 2014-07-23
US20140336175A1 (en) 2014-11-13
IL210757A (en) 2014-09-30
CN102177159A (zh) 2011-09-07
LT3000813T (lt) 2018-03-12
US20100075995A1 (en) 2010-03-25
HRP20180202T1 (hr) 2018-03-09
CA2733749C (en) 2016-10-11
US20160228445A1 (en) 2016-08-11
PE20110674A1 (es) 2011-10-07
PT2324026E (pt) 2015-10-22
MA32624B1 (fr) 2011-09-01
MY162538A (en) 2017-06-15
JP2011530563A (ja) 2011-12-22
NZ590782A (en) 2012-10-26
BRPI0917138A2 (pt) 2015-11-17
ES2661671T3 (es) 2018-04-03
EP3000813B1 (en) 2017-12-13
RS54266B1 (en) 2016-02-29
SG192547A1 (en) 2013-08-30
CY1119992T1 (el) 2018-12-12
HUE027637T2 (en) 2016-11-28
IL210757A0 (en) 2011-03-31
EP3000813A1 (en) 2016-03-30
US20190038631A1 (en) 2019-02-07
WO2010018133A1 (en) 2010-02-18
EP2324026A1 (en) 2011-05-25
US10117873B2 (en) 2018-11-06
CN104098568B (zh) 2016-08-17
EP2324026B1 (en) 2015-07-08
CN104098568A (zh) 2014-10-15
KR101669939B1 (ko) 2016-10-27
US9877968B2 (en) 2018-01-30
HK1157770A1 (en) 2012-07-06
MX2011001666A (es) 2011-03-24
NO3000813T3 (ru) 2018-05-12
SI3000813T1 (en) 2018-03-30
ME02274B (me) 2016-02-20
PL2324026T3 (pl) 2015-11-30
US9233962B2 (en) 2016-01-12
US20110229500A1 (en) 2011-09-22
MX336345B (es) 2016-01-15
CO6351791A2 (es) 2011-12-20
DOP2011000048A (es) 2011-03-31
EP3336089A1 (en) 2018-06-20
PT3000813T (pt) 2018-03-05
US8067426B2 (en) 2011-11-29
KR20110042230A (ko) 2011-04-25
SMT201500224B (it) 2015-10-30
HK1253532A1 (zh) 2019-06-21
SI2324026T1 (sl) 2015-10-30
EA201100113A1 (ru) 2011-10-31
HRP20150938T1 (hr) 2015-10-09
JP5529867B2 (ja) 2014-06-25
US8765772B2 (en) 2014-07-01
HK1222857A1 (zh) 2017-07-14
PL3000813T3 (pl) 2018-05-30
CL2011000301A1 (es) 2011-07-15
DK3000813T3 (da) 2018-01-29
US20120035193A1 (en) 2012-02-09
ES2549154T3 (es) 2015-10-23
AU2009281197B2 (en) 2014-09-11
NZ602812A (en) 2014-04-30
HUE036570T2 (hu) 2018-07-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA020631B1 (ru) Производные пурина для применения в лечении аллергических, воспалительных и инфекционных заболеваний
JP5519670B2 (ja) アレルギー性、炎症性及び感染性疾患治療用のプリン誘導体
JP5785078B2 (ja) 新規アデニン誘導体
JP5922587B2 (ja) ６−アミノ−２−｛［（１ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８ｈ−プリン−８−オンマレイン酸塩
EP2922550B1 (en) Novel compounds
JP2011530562A (ja) アレルギー性、炎症性及び感染性疾患治療用のプリン誘導体
RU2676684C2 (ru) ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРРОЛО[3,2-d]ПИРИМИДИНА В КАЧЕСТВЕ ИНДУКТОРОВ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО ИНТЕРФЕРОНА
US20150284396A1 (en) Novel compounds
TWI530289B (zh) 作為人類干擾素誘發物之嘌呤化合物及其組合物和用途
AU2014271321B2 (en) Purine derivatives for use in the treatment of allergic, inflammatory and infectious diseases

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU