ES2625023T3 - Compuestos novedosos - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I), o una sal del mismo:**Fórmula** en la que: R1 es n-alquilo C3-6; R2 es hidrógeno o metilo; R3 es hidrógeno o alquilo C1-6; m es un número entero que tiene un valor de 1 a 4.

Description

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DESCRIPCION

Compuestos novedosos Campo tecnico de la invencion

La presente invencion se refiere a compuestos, procedimientos para su preparacion, composiciones que los contienen, a su uso en el tratamiento de diversos trastornos, en particular enfermedades alergicas y otras afecciones inflamatorias, por ejemplo, rinitis alergica y asma, enfermedades infecciosas y cancer, y como adyuvantes de vacuna.

Antecedentes de la invencion

Los vertebrados estan constantemente amenazados por la invasion de microorganismos y han desarrollado mecanismos de defensa inmunologica para eliminar patogenos infecciosos. En los mairnferos, este sistema inmune comprende dos ramas: la inmunidad innata y la inmunidad adquirida. La primera lrnea de defensa del huesped es el sistema inmune innato, que es mediado por los macrofagos y las celulas dendrfticas. La inmunidad adquirida implica la eliminacion de patogenos en las ultimas etapas de la infeccion y permite tambien la generacion de memoria inmunologica. La inmunidad adquirida es altamente espedfica, debido al enorme repertorio de linfocitos con receptores espedficos de antfgenos que han experimentado reordenacion genica.

Los mecanismos que provocan la induccion de interferones y otras citoquinas que actuan sobre las celulas para inducir una serie de efectos son centrales para la generacion de una respuesta inmune innata efectiva en los mamferos. En el ser humano, los interferones de tipo I son una familia de protemas relacionadas codificadas por genes en el cromosoma 9 y que codifican al menos 13 isoformas de interferon alfa (IFNa) y una isoforma de interferon beta (IFNp). El interferon fue descrito por primera vez como una sustancia que podrfa proteger las celulas contra la infeccion viral (Isaacs & Lindemann, J. Virus Interference. Proc. R. Soc. Lon. Ser. B. Biol. Sci. 1957:147, 258-267). El IFNa recombinante fue el primer tratamiento terapeutico biologico aprobado y se ha convertido en una terapia importante en infecciones virales y en cancer. Al igual que la actividad antiviral directa sobre las celulas, se sabe que los interferones son potentes moduladores de la respuesta inmune, que actuan sobre las celulas del sistema inmune (Gonzalez-Navajas J.M. et al., Nature Reviews Immunology, 2012; 2, 125-35).

Los receptores de tipo Toll (TLRs) son una familia de diez Receptores de Reconocimiento de Patrones descritos en el ser humano (Gay, N.J. et al., Annu. Rev. Biochem., 2007: 46, 141-165). Los TLRs se expresan predominantemente por las celulas inmunes innatas en las que su funcion es vigilar el entorno para detectar signos de infeccion y, con la activacion, movilizar mecanismos de defensa dirigidos a la eliminacion de los patogenos invasores. Las respuestas inmunes innatas tempranas desencadenadas por los TLRs limitan la propagacion de la infeccion, mientras que las citoquinas pro- inflamatorias y las quimioquinas que inducen conducen al reclutamiento y a la activacion de las celulas presentadoras de antfgenos, celulas B y celulas T. Los TLRs pueden modular la naturaleza de las respuestas inmunes adaptativas para proporcionar una proteccion adecuada via activacion de celulas dendrfticas y liberacion de citoquinas (Akira S. et al., Nat. Immunol., 2001: 2, 675-680). El perfil de la respuesta observada desde diferentes agonistas de TLR depende del tipo de celula activada.

El TLR7 es un miembro del subgrupo de TLRs (TLRs 3, 7, 8 y 9), localizado en el compartimiento endosomal de celulas que se han especializado para detectar los acidos nucleicos no propios. El TLR7 desempena un papel clave en la defensa anti-viral mediante el reconocimiento de ARNss (Diebold S.S. et al., Science, 2004: 303, 1529-1531; y Lund J. M. et al., PNAS, 2004: 101, 5598-5603). El TLR7 tiene un perfil de expresion restringido en el ser humano y se expresa predominantemente por las celulas B y las celulas dendrfticas plasmacitoides (pDC), y en menor medida por los monocitos. Las DC plasmacitoides son una poblacion unica de celulas dendrfticas derivadas de linfocitos (0,2-0,8% de celulas mononucleares de sangre periferica (PBMCs)) que son las celulas productoras de interferon tipo I primarias que secretan altos niveles de interferon alfa (IFNa) e interferon beta (IFNp) en respuesta a infecciones virales (Liu Y-J, Annu. Rev. Immunol., 2005: 23, 275-306).

La administracion de un compuesto de molecula pequena que podrfa estimular la respuesta inmune innata, incluyendo la activacion de interferones de tipo I y otras citoquinas mediante receptores de tipo Toll, podrfa convertirse en una estrategia importante para el tratamiento o la prevencion de enfermedades humanas. Se han descrito agonistas de moleculas pequenas de TLR7 que pueden inducir interferon alfa en animales y en seres humanos (Takeda K. et al., Annu. Rev. Immunol., 2003: 21, 335-76). Los agonistas de TLR7 incluyen compuestos de imidazoquinolina tales como imiquimod y resiquimod, analogos de oxoadenina y tambien analogos de nucleosidos tales como loxoribina y 7-tia-8-oxoguanosina que se conoce desde hace mucho tiempo que inducen interferon Alfa (Czarniecki. M., J. Med, Chem., 2008: 51, 66216626; Hedayat M. et al., Medicinal Research Reviews, 2012: 32, 294-325). Este tipo de estrategia inmunomoduladora tiene el potencial de identificar compuestos que pueden ser utiles en el tratamiento de enfermedades alergicas (Moisan J. et al., Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol., 2006: 290, L987-995), infecciones virales (Horcroft N.J. et al., J. Antimicrob. Chemther, 2012: 67, 789-801), cancer (Krieg A., Curr. Oncol. Rep., 2004: 6 (2), 88-95), otras afecciones inflamatorias

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tales como la enfermedad del intestino irritable (Rakoff-Nahoum S., Cell., 2004, 23, 118(2): 229-41), y como adyuvantes de vacuna (Persing et al. Trends Microbiol. 2002:10 (10 Suppl), S32-7).

Mas espedficamente, las enfermedades alergicas estan asociadas con una respuesta inmune influenciada por Th2 a los alergenos. Las respuestas Th2 estan asociadas con niveles elevados de IgE que, via sus efectos sobre los mastocitos, promueve una hipersensibilidad a los alergenos, resultando en los smtomas observados, por ejemplo, en el asma y la rinitis alergica. En individuos sanos, la respuesta inmune a los alergenos es mas equilibrada con una respuesta Th2/Th1 mixta y de celulas T reguladoras. Se ha demostrado que los ligandos de TLR7 reducen la citoquina Th2 y mejoran la liberacion de citoquinas Th1 in vitro y para mejorar las respuestas inflamatorias de tipo Th2 en modelos de pulmon alergico in vivo (Duechs M.J., Pulmonary Pharmacology & Therapeutics, 2011: 24, 203-214; Fili L. et al., J. All. Clin. Immunol., 2006: 118, 511-517; Tao et al., Chin. Med. J., 2006: 119, 640-648; Van L.P. Eur. J. Immunol., 2011: 41, 19921999). De esta manera, los ligandos TLR7 tienen el potencial de reequilibrar la respuesta inmune observada en individuos alergicos y conducir a la modificacion de la enfermedad. Estudios clmicos recientes con el agonista de TLR7 han demostrado una estimulacion intranasal repetida de TLR7 para producir una reduccion sostenida en la capacidad de respuesta al alergeno en pacientes tanto con rinitis alergica como con asma alergica (Greiff L. Respiratory Research, 2012: 13, 53; Leaker B. R. et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2012: 185, A4184).

Los documentos WO2010/018131, WO2010/018133 y WO2011/098451 divulgan derivados de purina para su uso como inductores de interferon humano.

En la busqueda de novedosos inductores de moleculas pequenas de interferon IFNa humano, se ha desarrollado una estrategia de ensayo para caracterizar una molecula pequena (independientemente del mecanismo) que se basa en la estimulacion de celulas donantes humanas primarias o sangre completa con compuestos y se divulga en la presente memoria.

Sumario de la invencion

En un primer aspecto, la presente invencion se refiere a compuestos de formula (I) y sales de los mismos:

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en la que:

R1 es n-alquilo C3-6;

R2 es hidrogeno o metilo;

R3 es hidrogeno o alquilo C-i-a;

m es un numero entero que tiene un valor de 1 a 4.

Se ha demostrado que ciertos compuestos de la invencion son inductores del interferon humano y pueden poseer un perfil de capacidad de desarrollo deseable en comparacion con los inductores de interferon humano conocidos. Ademas, ciertos compuestos de la invencion pueden mostrar tambien selectividad para IFNa con respecto a TNFa. Los compuestos que inducen interferon humano pueden ser utiles en el tratamiento de diversos trastornos, por ejemplo, el tratamiento de enfermedades alergicas y otras afecciones inflamatorias, por ejemplo, la rinitis alergica y el asma, el tratamiento de enfermedades infecciosas y el cancer. Por consiguiente, la invencion se refiere ademas a composiciones farmaceuticas que comprenden un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. La presente invencion

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se refiere ademas a procedimientos de tratamiento de trastornos asociados con el mismo, usando un compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, o una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos de la invencion pueden tener uso tambien como coadyuvantes de vacunas. Por consiguiente, la presente invention se refiere ademas a una composicion de vacuna que comprende un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un antfgeno o una composicion de antfgeno.

Ciertos compuestos de la invencion son inmunomoduladores potentes y, por consiguiente, debena tenerse cuidado en su manipulacion.

Descripcion detallada de la invencion

En un primer aspecto, la presente invencion se refiere a compuestos de formula (I) y sales de los mismos:

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en la que:

R1 es n-alquilo C3-6;

R2 es hidrogeno o metilo;

R3 es hidrogeno o alquilo C-i-a; m es un numero entero que tiene un valor de 1 a 4.

En un aspecto adicional, R1 es n-butilo.

En un aspecto adicional, R2 es hidrogeno.

En un aspecto adicional, R2 es metilo.

En otro aspecto, m es un numero entero que tiene un valor de 1, 2, 3 o 4.

En un aspecto adicional, m es un numero entero que tiene un valor de 1 o 3.

En un aspecto adicional, R3 es isopropilo o etilo.

En el siguiente grupo se proporcionan ejemplos de compuestos de formula (I), y forman un aspecto adicional de la invencion:

2-butil-7-(5-(piperazin-1-il)pentil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1 -il)pentil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1-il)pentil)-a-metil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

2-butil-7-(5-(4-etilpiperazin-1-il)pentil)-a-metil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

2-butil-7-(3-(piperazin-1-il)propil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

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2-butil-7-(4-(4-isopropilpiperazin-1-il)butil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina, y

2-butil-7-(3-(4-etilpiperazin-1-il)propil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina; y sus sales.

Como se usa en la presente memoria, el termino "alquilo" se refiere a una cadena hidrocarbonada saturada que tiene el numero especificado de atomos miembros. A menos que se indique lo contrario, el termino 'alquilo' incluye grupos alquilo lineales y ramificados. Por ejemplo, alquilo C1.6 se refiere a una cadena hidrocarbonada saturada, lineal o ramificada, que tiene de 1 a 6 atomos de carbono, tal como etilo e isopropilo, y n-alquilo C3-6 se refiere a una cadena hidrocarbonada lineal saturada que tiene de 3 a 6 atomos de carbono, tal como n-propilo, y n-butilo.

Debe entenderse que las referencias en la presente memoria a los compuestos de la invention significan un compuesto de formula (I) como la base libre, o como una sal, por ejemplo, una sal farmaceuticamente aceptable.

En un aspecto de la invencion, un compuesto de formula (I) esta en forma de una base libre.

Las sales de los compuestos de formula (I) incluyen sales farmaceuticamente aceptables y sales que pueden no ser farmaceuticamente aceptables pero que pueden ser utiles en la preparation de compuestos de formula (I) y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos. En un aspecto de la invencion, un compuesto de formula (I) esta en forma de una sal farmaceuticamente aceptable. Las sales pueden derivarse de ciertos acidos inorganicos u organicos.

Los ejemplos de sales son sales farmaceuticamente aceptables. Las sales farmaceuticamente aceptables incluyen sales de adicion de acido. Para una revision acerca de las sales adecuadas, vease Berge et al., J. Pharm. Sci., 66: 1-19 (1977).

Los ejemplos de sales de adicion de acido farmaceuticamente aceptables de un compuesto de formula (I) incluyen acidos inorganicos tales como, por ejemplo, acido clorlddrico, acido bromddrico, acido ortofosforico, acido mtrico, acido fosforico o acido sulfurico o con acidos organicos tales como, por ejemplo, acido metanosulfonico, acido etanosulfonico, acido p- toluenosulfonico, acido acetico, acido propionico, acido lactico, acido dtrico, acido fumarico, acido malico, acido sucdnico, acido salidlico, acido maleico, acido glicerofosforico, tartarico, benzoico, glutamico, aspartico, bencenosulfonico, naftalenosulfonico tal como 2-naftalenosulfonico, acido hexanoico o acido acetilsalidlico.

La invencion incluye dentro de su alcance todas las posibles formas estequiometricas y no estequiometricas de las sales de los compuestos de formula (I). Por ejemplo, una sal dimaleato o hemi-succinato del compuesto de formula (I).

Las sales pueden formarse usando tecnicas bien conocidas en la materia, por ejemplo, mediante precipitation a partir de una solucion seguido de filtracion, o mediante evaporacion del disolvente.

Tfpicamente, una sal de adicion de acido farmaceuticamente aceptable puede formarse mediante reaction de un compuesto de formula (I) con un acido adecuado (tal como acido bromlddrico, clorhfdrico, sulfurico, maleico, p- toluenosulfonico, metanosulfonico, naftalensulfonico o sucdnico), opcionalmente en un disolvente adecuado tal como un disolvente organico, para dar la sal que se afsla normalmente, por ejemplo, mediante cristalizacion y filtration.

Se apreciara que muchos compuestos organicos pueden formar complejos con disolventes en los que se hacen reaccionar o a partir de los cuales se precipitan o cristalizan. Estos complejos se conocen como "solvatos". Por ejemplo, un complejo con agua se conoce como un "hidrato". Los disolventes con altos puntos de ebullition y/o los disolventes con alta propension a formar enlaces de hidrogeno tales como agua, etanol, alcohol iso-propflico, y N-metilpirrolidinona pueden usarse para formar solvatos. Los procedimientos para la identification de solvatados incluyen, pero no se limitan a, RMN y microanalisis. Los solvatos de los compuestos de formula (I) estan dentro del alcance de la invencion. Tal como se usa en la presente memoria, el termino solvato incluye solvatos tanto de un compuesto de base libre como de cualquier sal del mismo.

Algunos de los compuestos de la invencion pueden contener atomos quirales y/o enlaces multiples y, por lo tanto, pueden existir en una o mas formas estereoisomeras. La presente invencion abarca todos los estereoisomeros de los compuestos de la invencion, incluyendo isomeros opticos, ya sea como estereoisomeros individuales o como mezclas de los mismos, incluyendo modificaciones racemicas. Cualquier estereoisomero puede contener menos del 10% en peso, por ejemplo, menos del 5% en peso, o menos del 0,5% en peso, de cualquier otro estereoisomero. Por ejemplo, cualquier isomero optico puede contener menos del 10% en peso, por ejemplo, menos del 5% en peso, o menos del 0,5% en peso, de su opuesto.

Algunos de los compuestos de la invencion pueden existir en formas tautomeras. Se entendera que la presente invencion abarca todos los tautomeras de los compuestos de la invencion, ya sea como tautomeras individuales o como mezclas de los mismos.

Los compuestos de la invencion pueden estar en forma cristalina o amorfa. Ademas, algunas de las formas cristalinas de los compuestos de la invencion pueden existir como polimorfos, todas las cuales estan incluidas dentro del alcance de la presente invencion. La forma o las formas polimorficas, mas estables termodinamicamente, de los compuestos de la

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invencion son de particular interes.

Las formas polimorficas de los compuestos de la invencion pueden caracterizarse y diferenciarse usando una serie de tecnicas analfticas convencionales, incluyendo, pero sin limitarse a, difraccion de rayos X en polvo (XRPD), espectroscopia infrarroja (IR), espectroscopia Raman, calorimetna de barrido diferencial (DSC), analisis termogravimetrico (TGA) y resonancia magnetica nuclear de estado solido (ssNMR).

La presente invencion incluye tambien todas las variantes isotopicas adecuadas de un compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. Una variante isotopica de un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, se define como una en la que al menos un atomo es reemplazado por un atomo que tiene el mismo numero atomico pero una masa atomica diferente de la masa atomica encontrada normalmente en la naturaleza. Los ejemplos de isotopos que pueden incorporarse en los compuestos de la invencion incluyen isotopos de hidrogeno, carbono, nitrogeno, oxfgeno, fluor y cloro tales como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 18F y 36Cl, respectivamente. Ciertas variantes isotopicas de un compuesto de formula (I) o una sal o solvato del mismo, por ejemplo, aquellas en las que se incorpora un isotopo radiactivo, tal como 3H o 14C, son utiles en estudios de distribucion de farmacos y/o sustratos de tejidos. Los isotopos tritiados, es decir, 3H, y carbono-14, es decir, 14C, son particularmente preferentes por su facilidad de preparation y detectabilidad. Ademas, la sustitucion con isotopos tales como deuterio, es decir, 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapeuticas como resultado de una mayor estabilidad metabolica, por ejemplo, una mayor vida media in vivo o menores requisitos de dosificacion y, por lo tanto, pueden ser preferentes en algunas circunstancias. Las variantes isotopicas de un compuesto de formula (I), o una sal farmaceutica del mismo, pueden prepararse generalmente mediante procedimientos convencionales, tal como mediante los procedimientos ilustrativos o mediante las preparaciones descritas en los Ejemplos siguientes usando variantes isotopicas apropiadas de reactivos adecuados.

A partir de lo indicado anteriormente, se apreciara que los solvatos, hidratos, isomeros y formas polimorficas de los compuestos de formula (I) y las sales y los solvatos de los mismos estan incluidos dentro del alcance de la invencion.

Preparacion de compuestos

Los compuestos de formula (I) y sus sales pueden prepararse mediante la metodologfa descrita a continuation, que constituye aspectos adicionales de la presente invencion.

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Los compuestos de formula (I) y sus sales pueden prepararse mediante la metodologfa descrita a continuacion, que constituye aspectos adicionales de la presente invencion.

Por consiguiente, se proporciona un procedimiento para la preparacion de un compuesto de formula (I), cuyo procedimiento comprende la desproteccion de un compuesto de formula (II):

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en la que R1, R2 y m son como se ha definido anteriormente en la presente memoria para un compuesto de formula (I),

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R4 es R3 o es un grupo protector adecuado, como, por ejemplo, t-butoxicarbonilo (BOC), R5 es un grupo protector, como, por ejemplo, benciloximetilo (BOM), 2-(trimetilsilil)etoximetilo o p-toluenosulfonilo, y a continuacion, si es necesario, la preparacion de una sal del compuesto formado de esta manera.

Por ejemplo, un compuesto de formula (II) en la que R5 es equivalente a BOM se disuelve en un disolvente adecuado, por ejemplo metanol o etanol, y se pasa sobre un catalizador adecuado, por ejemplo, paladio al 10% sobre carbono en presencia de hidrogeno, a una temperatura adecuada, por ejemplo 20-60°C, en un aparato como Thales H-cube™. El producto (I) se afsla mediante eliminacion del disolvente y purificacion, si es necesaria.

Por ejemplo, un compuesto de formula (II) en la que R4 Es BOC se disuelve en un disolvente adecuado, por ejemplo, metanol, y se trata con una solucion de cloruro de hidrogeno en un disolvente adecuado, por ejemplo, 1,4-dioxano, a temperatura ambiente durante un periodo de tiempo adecuado, por ejemplo 21 horas, para dar un compuesto de formula (II) en la que R4=H que, tras retirar R5 como se ha indicado anteriormente, dana un compuesto de formula (I) en la que R3=H.

Un compuesto de formula (II) puede prepararse mediante reaccion de un compuesto de formula (III):

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en la que R1, R2, R4, R5 y m son como se ha definido anteriormente en la presente memoria, con hidrogeno en presencia de un catalizador.

Por ejemplo, un compuesto de formula (III) se disuelve en un disolvente adecuado, por ejemplo alcohol metilico o alcohol etilico, y se pasa sobre un catalizador adecuado, por ejemplo paladio al 10% sobre carbono, en presencia de hidrogeno a una temperatura adecuada, por ejemplo 20-60°C, en un aparato de hidrogenacion de flujo adecuado como Thales H- Cube™. El producto (II) se afsla mediante eliminacion del disolvente y mediante purificacion, si es necesaria.

Cuando el grupo protector R5 es el grupo BOM, la reaccion para la reduccion del alquino puede dar lugar a la eliminacion simultanea del grupo protector para proporcionar directamente los compuestos de formula (I).

Un compuesto de formula (III) puede prepararse mediante reaccion de un compuesto de formula (IV):

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en la que R1, R2 y R5 son como se ha definido anteriormente en la presente memoria e Y es un grupo saliente, por ejemplo un halogeno como yodo o bromo, o un sulfonato de alquilo, como un trifluorometanosulfonato, con un compuesto de formula (V):

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en l que R4 y m son como se ha definido anteriormente en la presente memoria.

Por ejemplo, un compuesto de formula (IV) y un compuesto de formula (V) se disuelven en un disolvente adecuado, por ejemplo DMF, en presencia de yoduro de cobre (I), un catalizador adecuado, por ejemplo bis(trifenilfosfina)paladio II) y una base adecuada, por ejemplo trietilamina, y se calienta a una temperatura adecuada, por ejemplo 20-55°C durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 0,5-17 horas. El producto (III) se afsla despues de un tratamiento acuoso y purificacion.

Un compuesto de formula (V) puede prepararse mediante reaccion de un compuesto de formula (VI):

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en la que m se define para un compuesto de formula (I) y X es un grupo saliente como un halogeno, por ejemplo cloro, bromo o yodo, o un sulfonato de alquilo, por ejemplo p-toluenosulfonato, con un compuesto de formula (VII):

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en el que R4 es como se ha definido anteriormente en la presente memoria.

Por ejemplo, un compuesto de formula (VI), un compuesto de formula (VII) y una base adecuada, por ejemplo hidrogenocarbonato de sodio, se disuelven en un disolvente adecuado, por ejemplo N,N-dimetilformamida, y se calienta a una temperatura adecuada, por ejemplo 80 - 100°C durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 16 -18 horas. El producto (V) se afsla despues de tratamiento acuoso y purificacion.

Los compuestos de formula (VI) y formula (VII) estan comercialmente disponibles o pueden prepararse mediante procedimientos descritos en la bibliograffa.

De manera alternativa, un compuesto de formula (III) puede prepararse mediante reaccion de un compuesto de formula (VIII):

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en la que R1, R2, R5 y m son como se han definido anteriormente y X es un grupo saliente como se ha definido para los compuestos de formula (VI) con un compuesto de formula (VII):

Por ejemplo, un compuesto de formula (VIII), un compuesto de formula (VII) y una base adecuada, por ejemplo trietilamina, se disuelven en un disolvente adecuado, por ejemplo acetonitrilo y se calientan a una temperatura adecuada, por ejemplo 60 - 80°C durante un periodo de tiempo adecuado, por ejemplo 16 - 26 horas. El producto (III) se afsla despues de un tratamiento acuoso y purificacion.

Los compuestos de formula (VIII) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (IV) con compuestos de formula (VI). Por ejemplo, un compuesto de formula (IV), un compuesto de formula (VI) se disuelven en un disolvente adecuado, por ejemplo DMF, en presencia de yoduro de cobre (I), un catalizador adecuado, por ejemplo bis(trifenilfosfina)paladio (II) y una base adecuada, por ejemplo trietilamina, y se calienta a una temperatura adecuada, por ejemplo 20°C durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 18 - 20 horas. El producto (VIII) se afsla despues de

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un tratamiento acuoso y purificacion.

De manera alternativa, un compuesto de formula (II) puede prepararse tambien mediante la reaccion de un compuesto de formula (II) en la que R4 = H. Por ejemplo, un agente reductor adecuado, por ejemplo triacetoxiborohidruro sodico, se anade a una mezcla de un compuesto de formula (II) en la que R4 = H, un compuesto de formula (VII) y un agente desecante, por ejemplo tamices moleculares 4A, en un disolvente adecuado, por ejemplo diclorometano, y se agita a una temperatura adecuada, por ejemplo 20°C, durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 2-16 horas. El compuesto de formula (II) se afsla despues de un tratamiento acuoso y purificacion.

Ademas, un compuesto de formula (II) puede prepararse tambien mediante reaccion de compuestos de formula (IX)

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en la que R1, R2, R5 y m son como se ha definido anteriormente en la presente memoria.

Por ejemplo, un agente reductor adecuado, por ejemplo triacetoxiborohidruro de sodio, se anade a una mezcla de un compuesto de formula (IX), un compuesto de formula (VII) y un agente desecante, por ejemplo tamices moleculares 4A, en un disolvente adecuado, por ejemplo diclorometano, y se agita a una temperatura adecuada, por ejemplo 20°C, durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 2 -16 horas. El compuesto de formula (II) se afsla despues de un tratamiento acuoso y purificacion

Los compuestos de formula (IX) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (X):

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en la que Ri, R2, R5 y m son como se ha definido anteriormente en la presente memoria.

Por ejemplo, un compuesto de formula (X), un oxidante adecuado, por ejemplo perrutenato de tetrapropilamonio en presencia de 4-metilmorfolina N-oxido, en un disolvente adecuado, por ejemplo una mezcla de diclorometano y acetonitrilo, se agito a una temperatura adecuada, por ejemplo 20°C, durante un periodo de tiempo adecuado, por ejemplo 2 horas. El compuesto de formula (IX) se afsla mediante eliminacion del disolvente y purificacion, si es necesario.

Los compuestos de formula (X) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (XI):

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en la que Ri, R2, R5 y m son como se ha definido anteriormente en la presente memoria.

Los compuestos de formula (X) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (XI) con hidrogeno en presencia de un catalizador. Por ejemplo, un compuesto de formula (XI) se disuelve en un disolvente adecuado, por 5 ejemplo etanol, y se pasa sobre un catalizador adecuado, por ejemplo paladio al 10% sobre carbono en presencia de hidrogeno, a una temperatura adecuada, por ejemplo 20 - 60°C en un aparato como Thales H-cube™. El compuesto de formula (X) se afsla mediante eliminacion del disolvente y purificacion, si es necesario.

Los compuestos de formula (XI) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (IV) con alquin-1-oles apropiados. Por ejemplo, un compuesto de formula (IV) y un alquin-1-ol se disuelven en un disolvente adecuado, por 10 ejemplo DMF, en presencia de yoduro de cobre (I), un catalizador adecuado, por ejemplo bis(trifenilfosfina)paladio (II) y una base adecuada, por ejemplo trietilamina, y se calienta a una temperatura adecuada, por ejemplo 20°C durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 1 -17 horas. El compuesto de formula (XI) se afsla despues de un tratamiento acuoso y purificacion.

Los compuestos de formula (IV) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (XII):

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20 en la que R1, R2 y R5 son como se ha definido anteriormente en la presente memoria e Y se define para un compuesto de formula (IV) con una solucion de amomaco.

Por ejemplo, una solucion de amomaco acuoso (0,88) se anade a una solucion de un compuesto de formula (XII) en un disolvente adecuado, por ejemplo alcohol iso-propflico. La mezcla resultante se calienta a continuacion en un calentador de microondas a una temperatura adecuada, por ejemplo 120-150°C durante un periodo de tiempo adecuado, por 25 ejemplo 1 - 2 horas. El producto (IV) se afsla despues de un tratamiento acuoso y purificacion.

Los compuestos de formula (XII) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (XIII):

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en la que R1 y R2 son como se han definido anteriormente para un compuesto de formula (I) con un compuesto de formula (XIV):

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en el que el compuesto de formula (XIV) es un precursor adecuado para el grupo protector R5, por ejemplo bencil clorometil eter o (2-(clorometoxi)etil)trimetilsilano.

Por ejemplo, un compuesto de formula (XIII) en un disolvente adecuado, por ejemplo N,N-dimetilformamida o tetrahidrofurano, se trata con una base adecuada, por ejemplo una suspension de hidruro sodico en aceite. Se anade un 40 compuesto de formula (XIV), por ejemplo bencil clorometil eter o (2-(clorometoxi)etil)trimetilsilano, la mezcla de reaccion se agita a una temperatura adecuada, por ejemplo 20°C durante un periodo de tiempo adecuado, por ejemplo 1 - 4 horas. El compuesto de formula (XII) se afsla despues de un tratamiento acuoso y purificacion.

Los compuestos de formula (XIII) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (XV):

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en la que Ri y R2 son como se ha definido anteriormente para un compuesto de formula (I), con un reactivo halogenante, por ejemplo N-yodosuccinimida.

Un compuesto de formula (XV) se disuelve en un disolvente adecuado, por ejemplo tetrahidrofurano, se hace reaccionar con N-yodosuccinimida a una temperature adecuada, por ejemplo 20°C durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 1 - 2 horas. El compuesto de formula (XIII) se afsla despues de un tratamiento acuoso y purificacion.

Los compuestos de formula (XV) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (XVI):

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en la que Ri y R2 son como se han definido anteriormente para un compuesto de formula (I) con un reactivo de cloracion, por ejemplo oxicloruro de fosforo.

Un compuesto de formula (XVI) se suspende en oxicloruro de fosforo y se calienta a una temperatura adecuada, por ejemplo 120°C durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 3 - 4 horas. El exceso de oxicloruro de fosforo puede eliminarse en vado, a continuacion el residuo se vierte sobre hielo y el pH de la mezcla se ajusta a 7 - 9. El producto se extrae a continuacion en un disolvente organico adecuado, por ejemplo acetato de etilo. El compuesto de formula (XV) se afsla mediante eliminacion del disolvente y purificacion, si es necesario.

Los compuestos de formula (XVI) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (XVII):

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en la que Ri y R2 son como se han definido anteriormente para un compuesto de formula (I) con una base adecuada, por ejemplo hidroxido sodico.

Una solucion de compuestos de formula (XVII) en un disolvente adecuado, por ejemplo alcohol etflico, se trata con una solucion acuosa de hidroxido de sodio y la mezcla de reaccion se agita a una temperatura adecuada, por ejemplo 80 - 100°C durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 4 -18 horas. El compuesto de formula (XVI) se afsla despues de un tratamiento acuoso y purificacion.

Los compuestos de formula (XVII) pueden prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (XVIII):

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con compuestos de formula (XIX):

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en la que R1 y R2 son como se han definido anteriormente para un compuesto de formula (I).

Por ejemplo, una suspension de un compuesto de formula (XVIII) en un compuesto de formula (XIX) se trata con una solucion de cloruro de hidrogeno en un disolvente adecuado, por ejemplo una solucion de cloruro de hidrogeno en 1,4- dioxano se calienta a una temperatura adecuada, 50 - 70°C durante un penodo de tiempo adecuado, por ejemplo 16 -18 horas. El compuesto de formula (XVII) se afsla despues de la filtracion y despues de la adicion de un disolvente adecuado, por ejemplo tert-butil metil eter.

De manera alternativa, un compuesto de formula (XVI) puede prepararse mediante reaccion de compuestos de formula (XVIII) con compuestos de formula (XX):

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en la que R1 es como se ha definido anteriormente en la presente memoria para un compuesto de formula (I).

Por ejemplo, una mezcla de compuestos de formula (XVIII) y compuestos de formula (XX) se calienta en un disolvente adecuado, por ejemplo o-xileno, a una temperatura adecuada, por ejemplo reflujo, durante un periodo de tiempo adecuado, por ejemplo, 3 dfas. Despues de enfriar a temperatura ambiente, el producto (XVI) se afsla despues de la filtracion.

Los compuestos de formulas (VI), (VII), (XIV), (XVIII), (XIX) y (XX) son bien conocidos en la literatura o estan disponibles comercialmente, por ejemplo en Sigma-Aldrich, Reino Unido, o pueden prepararse por analogfa con procedimientos conocidos, por ejemplo los descritos en textos de referencia estandar de metodologfa sintetica tales como J. March, Advanced Organic Chemistry, 6a Edicion (2007), WileyBlackwell, o Comprehensive Organic Synthesis (Trost B.M. and Fleming I., (Eds.), Pergamon Press, 1991), cada uno incorporado a la presente memoria por referencia en lo que se refiere a dichos procedimientos.

Ejemplos de otros grupos protectores que pueden emplearse en las rutas de smtesis descritas en la presente memoria y los medios para su eliminacion pueden encontrarse en T. W. Greene “Protective Groups in Organic Synthesis", 4a Edicion, J. Wiley and Sons, 2006, incorporado en la presente memoria por referencia en lo que se refiere a dichos procedimientos.

Para cualquiera de las reacciones o procedimientos descritos anteriormente pueden emplearse procedimientos de calentamiento y enfriamiento convencionales, por ejemplo banos de aceite de temperatura regulada o bloques calientes de temperatura regulada, y banos de hielo/sal o banos de hielo seco/acetona, respectivamente. Pueden usarse procedimientos de aislamiento convencionales, por ejemplo extraccion de o en disolventes acuosos o no acuosos. Pueden emplearse procedimientos de secado convencionales de disolventes, disoluciones o extractos organicos, tales como agitacion con sulfato de magnesio anhidro, o sulfato de sodio anhidro, o el paso a traves de una frita hidrofoba. Pueden usarse procedimientos de purificacion convencionales, por ejemplo cristalizacion y cromatograffa, por ejemplo cromatograffa de sflice o cromatograffa de fase inversa, segun se requiera. La cristalizacion puede realizarse usando disolventes convencionales tales como acetato de etilo, metanol, etanol o butanol, o mezclas acuosas de los mismos. Se apreciara que las temperaturas y los tiempos de reaccion espedficos pueden determinarse ffpicamente mediante tecnicas de supervision de reaccion, por ejemplo cromatograffa en capa fina y LC-MS.

Cuando sea apropiado, las formas isomericas individuales de los compuestos de la invention pueden prepararse como isomeros individuales usando procedimientos convencionales tales como cristalizacion fraccionada de derivados diastereoisomeros o cromatograffa ffquida de alto rendimiento quiral (HPLC quiral).

La estereoqmmica absoluta de los compuestos puede determinarse usando procedimientos convencionales, tales como cristalograffa de rayos X.

Procedimientos de uso

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Los ejemplos de estados patologicos en los que los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables tienen efectos potencialmente beneficiosos incluyen enfermedades alergicas y otras afecciones inflamatorias, por ejemplo, rinitis alergica y asma, enfermedades infecciosas y cancer. Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables tienen tambien un uso potencial como coadyuvantes de vacunas.

Como moduladores de la respuesta inmunitaria, los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden ser utiles tambien en el tratamiento y/o la prevencion de trastornos mediados por el sistema inmune, incluyendo pero sin limitarse a enfermedades inflamatorias o alergicas tales como asma, rinitis alergica y rinoconjuctivitis, alergia alimentaria, enfermedades pulmonares de hipersensibilidad, neumonitis eosinofflica, trastornos de hipersensibilidad de tipo retardada, aterosclerosis, pancreatitis, gastritis, colitis, osteoartritis, psoriasis, sarcoidosis, fibrosis pulmonar, smdrome de dificultad respiratoria, bronquiolitis, enfermedad pulmonar obstructiva cronica, sinusitis, fibrosis qmstica, queratosis actmica, displasia cutanea, urticaria cronica, eczema y todo tipo de dermatitis.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden ser utiles tambien en el tratamiento y/o la prevencion de reacciones contra infecciones respiratorias, incluyendo, pero sin limitarse a, exacerbaciones virales de las vfas respiratorias y amigdalitis. Los compuestos pueden ser utiles tambien en el tratamiento y/o la prevencion de enfermedades autoinmunes incluyendo, pero sin limitarse a, artritis reumatoide, artritis psoriasica, lupus eritematoso sistemico, enfermedad de Sjoegrens, espondilitis anquilosante, esclerodermia, dermatomiositis, diabetes, rechazo de injerto, incluyendo enfermedad injerto contra huesped, enfermedades inflamatorias del intestino, incluyendo, pero sin limitarse a, enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden ser utiles tambien en el tratamiento de enfermedades infecciosas incluyendo, pero sin limitarse a, las causadas por virus de hepatitis (por ejemplo, virus de hepatitis B, virus de hepatitis C), virus de inmunodeficiencia humana, papilomavirus, herpesvirus, virus respiratorios (por ejemplo, virus de la gripe, virus respiratorio sincitial, rinovirus, metapneumovirus, parainfluenzavirus, SRAS) y virus del Nilo Occidental. Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden ser utiles tambien en el tratamiento de infecciones microbianas causadas, por ejemplo, por bacterias, hongos o protozoos. Estas incluyen, pero no se limitan a, tuberculosis, neumoma bacteriana, aspergilosis, histoplasmosis, candidosis, pneumocistosis, lepra, clamidia, enfermedad criptococica, criptosporidosis, toxoplasmosis, leishmania, malaria y tripanosomiasis.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden ser utiles tambien en el tratamiento de diversos canceres, en particular el tratamiento de canceres que se sabe que son sensibles a inmunoterapia e incluyen, pero no se limitan a, carcinoma de celulas renales, cancer de pulmon, cancer de mama, cancer colorrectal, cancer de vejiga, melanoma, leucemia, linfomas y cancer de ovario.

Las personas con conocimientos en la materia apreciaran que las referencias en la presente memoria descriptiva al tratamiento o a la terapia pueden extenderse, dependiendo de la afeccion, a la profilaxis, asf como al tratamiento de las afecciones establecidas.

De esta manera, se proporciona como un aspecto adicional de la invention un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.

Se apreciara que, cuando un compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo se usa en terapia, se usa como un agente terapeutico activo. Por lo tanto, se proporciona tambien un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de enfermedades alergicas y otras afecciones inflamatorias, enfermedades infecciosas y cancer.

Por lo tanto, se proporciona tambien un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de la rinitis alergica.

Por lo tanto, se proporciona tambien un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento del asma.

Se proporciona ademas el uso de un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de enfermedades alergicas y otras afecciones inflamatorias, enfermedades infecciosas y cancer.

Se proporciona ademas el uso de un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en la fabrication de un medicamento para el tratamiento de la rinitis alergica.

Se proporciona ademas el uso de un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento del asma.

Se describe ademas un procedimiento de tratamiento de enfermedades alergicas y otras afecciones inflamatorias,

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enfermedades infecciosas y cancer, cuyo procedimiento comprende administrar a un ser humano que lo necesita una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de formula (I), o un compuesto farmaceuticamente aceptable de una sal aceptable del mismo.

Se describe ademas un procedimiento de tratamiento de la rinitis alergica, cuyo procedimiento comprende administrar a un ser humano que lo necesita una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.

Se describe ademas un procedimiento de tratamiento del asma, cuyo procedimiento comprende administrar a un ser humano que lo necesita una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables tiene tambien uso potencial como coadyuvantes de vacunas.

De esta manera, se proporciona como un aspecto adicional de la invention una composition de vacuna que comprende un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un antfgeno o una composicion de antfgeno para su uso en terapia.

De esta manera, se proporciona como un aspecto adicional de la invencion el uso de un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un antfgeno o una composicion de antfgeno en la fabrication de un medicamento para su uso en terapia.

Se describe ademas un procedimiento de tratamiento o de prevention de enfermedades que comprende la administration a un ser humano que padece o es susceptible de padecer una enfermedad, una composicion de vacuna que comprende un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un antfgeno o una composicion de antfgeno.

Composiciones

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables se formularan normalmente, pero no necesariamente, en composiciones farmaceuticas antes de la administracion a un paciente. Por consiguiente, en otro aspecto de la invencion se proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden formularse para la administracion de cualquier manera conveniente. Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden formularse, por ejemplo, para administracion oral, topica, inhalada, intranasal, bucal, parenteral (por ejemplo, intravenosa, subcutanea, intradermica o intramuscular) o rectal. En un aspecto, los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables se formulan para administracion oral. En un aspecto adicional, los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables se formulan para administracion topica, por ejemplo, administracion intranasal o inhalada.

Los comprimidos y las capsulas para administracion oral pueden contener excipientes convencionales tales como agentes aglutinantes, por ejemplo jarabe, acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto, mudlago de almidon, celulosa o polivinilpirrolidona; cargas, por ejemplo, lactosa, celulosa microcristalina, azucar, almidon de mafz, fosfato de calcio o sorbitol; lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, acido estearico, talco, polietilenglicol o sflice; desintegrantes, por ejemplo, almidon de patata, croscarmelosa sodica o glicolato sodico de almidon; o agentes humectantes tales como laurilsulfato de sodio. Los comprimidos pueden revestirse segun procedimientos bien conocidos en la tecnica.

Las preparaciones lfquidas orales pueden estar en forma, por ejemplo, de suspensiones, disoluciones, emulsiones, jarabes o elixires acuosos o aceitosos, o pueden presentarse como un producto seco para su constitution con agua u otro vehfculo adecuado antes del uso. Dichas preparaciones lfquidas pueden contener aditivos convencionales tales como agentes de suspension, por ejemplo, jarabe de sorbitol, metilcelulosa, jarabe de glucosa/azucar, gelatina, hidroximetilcelulosa, carboximetilcelulosa, gel de estearato de aluminio o grasas comestibles hidrogenadas; agentes emulsionantes, por ejemplo, lecitina, mono-oleato de sorbitan o acacia; vehfculos no acuosos (que pueden incluir aceites comestibles), por ejemplo aceite de almendra, aceite de coco fraccionado, esteres oleosos, propilenglicol o alcohol etilico; o conservantes, por ejemplo, phidroxibenzoatos de metilo o propilo o acido sorbico. Las preparaciones pueden contener tambien sales de tampon, agentes aromatizantes, colorantes y/o edulcorantes (por ejemplo manitol), segun sea apropiado.

Las composiciones para administracion intranasal incluyen composiciones acuosas administradas a la nariz mediante gotas o mediante bomba presurizada. Las composiciones adecuadas contienen agua como diluyente o vehfculo para este fin. Las composiciones para administracion al pulmon o la nariz pueden contener uno o mas excipientes, por ejemplo, uno

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o mas agentes de suspension, uno o mas conservantes, uno o mas tensioactivos, uno o mas agentes de ajuste de tonicidad, uno o mas co-disolventes, y pueden incluir componentes para controlar el pH de la composicion, por ejemplo, un sistema tampon. Ademas, las composiciones pueden contener otros excipientes tales como antioxidantes, por ejemplo, metabisulfito sodico, y agentes enmascaradores del sabor. Las composiciones pueden administrarse tambien a la nariz o a otras regiones del tracto respiratorio mediante nebulizacion.

Las composiciones intranasales pueden permitir que el compuesto o los compuestos de formula (I) o (a) sus sales farmaceuticamente aceptables sean administrados a todas las areas de las cavidades nasales (el tejido diana) y, ademas, pueden permitir que el compuesto o los compuestos de formula (I) o (a) sus sales farmaceuticamente aceptables permanezcan en contacto con el tejido diana durante periodos de tiempo mas prolongados. Un regimen de dosificacion adecuado para las composiciones intranasales serfa uno en el que el paciente inhala lentamente a traves de la nariz despues de que la cavidad nasal sea aclarada. Durante la inhalacion, la composicion se administrana a una fosa nasal mientras que la otra se comprimina manualmente. Este procedimiento se repetina a continuacion para la otra fosa nasal. Tfpicamente, se administranan uno o dos pulverizadores por fosa nasal mediante el procedimiento anterior una, dos o tres veces al dfa, idealmente una vez al dfa. De particular interes son las composiciones intranasales adecuadas para una administracion una vez al dfa.

El agente o los agentes de suspension, si estan incluidos, estaran presentes tfpicamente en una cantidad del 0,1 al 5% (p/p), tal como del 1,5% al 2,4% (p/p), en base al peso total de composicion. Los ejemplos de agentes de suspension farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, Avicel® (celulosa microcristalina y carboximetilcelulosa sodica), carboximetilcelulosa sodica, veegum, tragacanto, bentonita, metilcelulosa, goma de xantano, carbopol y polietilenglicoles.

Las composiciones para administracion al pulmon o la nariz pueden contener uno o mas excipientes que pueden estar protegidos contra la contaminacion y el crecimiento microbianos o fungicos mediante la inclusion de uno o mas conservantes. Los ejemplos de agentes antimicrobianos o conservantes farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, compuestos de amonio cuaternario (por ejemplo cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, cetrimida, cloruro de cetilpiridinio, cloruro de lauralconio y cloruro picolinio miristilico), agentes de mercurio (por ejemplo nitrato fenilmercurico, acetato fenilmercurico y timerosal), agentes alcoholicos (por ejemplo clorobutanol, alcohol feniletflico y alcohol bencflico), esteres antibacterianos (por ejemplo esteres de acido parahidroxibenzoico), agentes quelantes tales como edetato disodico (EDTA) y otros agentes antimicrobianos tales como clorhexidina, clorocresol, acido sorbico y sus sales (tales como sorbato de potasio) y polimixina. Los ejemplos de agentes anti-fungicos o conservantes farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, benzoato de sodio, acido sorbico, propionato de sodio, metilparabeno, etilparabeno, propilparabeno y butilparabeno. El o los conservantes, si estan incluidos, pueden estar presentes en una cantidad del 0,001 al 1% (p/p), tal como del 0,015% al 0,5% (p/p) en base al peso total de la composicion.

Las composiciones (por ejemplo, en las que al menos un compuesto esta en suspension) pueden incluir uno o mas tensioactivos que funcionan para facilitar la disolucion de las partfculas de medicamento en la fase acuosa de la composicion. Por ejemplo, la cantidad de tensioactivo usado es una cantidad que no causara espumacion durante el mezclado. Los ejemplos de tensioactivos farmaceuticamente aceptables incluyen alcoholes grasos, esteres y eteres, tales como monooleato de polioxietileno (20) sorbitan (Polisorbato 80), eteres de macrogol y poloxameros. El tensioactivo puede estar presente en una cantidad de entre aproximadamente el 0,01 al 10% (p/p), tal como del 0,01 al 0,75% (p/p), por ejemplo aproximadamente el 0,5% (p/p), en base al peso total de la composicion.

Pueden incluirse uno o mas agentes de ajuste de tonicidad para conseguir tonicidad con fluidos corporales, por ejemplo, fluidos de la cavidad nasal, resultando en niveles reducidos de irritacion. Los ejemplos de agentes de ajuste de tonicidad farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, cloruro de sodio, dextrosa, xilitol, cloruro de calcio, glucosa, glicerina y sorbitol. Un agente de ajuste de tonicidad, si esta presente, puede incluirse en una cantidad del 0,1 al 10% (p/p), tal como del 4,5 al 5,5% (p/p), por ejemplo aproximadamente el 5,0% (p/p), en base al peso total de la composicion.

Las composiciones de la invention pueden tamponarse mediante la adicion de agentes tampon adecuados tales como citrato de sodio, acido dtrico, trometamol, fosfatos tales como fosfato disodico (por ejemplo, dodecahidrato, heptahidrato, dihidrato y formas anhidras) o fosfato sodico y sus mezclas.

Un agente tampon, si esta presente, puede incluirse en una cantidad del 0,1 al 5% (p/p), por ejemplo del 1 al 3% (p/p) en base al peso total de la composicion.

Los ejemplos de agentes de enmascaramiento del sabor incluyen sucralosa, sacarosa, sacarina o una sal de la misma, fructosa, dextrosa, glicerol, jarabe de mafz, aspartamo, acesulfamo-K, xilitol, sorbitol, eritritol, glicirricinato de amonio, taumatina, neotamo, manitol, mentol, aceite de eucalipto, alcanfor, un agente aromatizante natural, un agente aromatizante artificial, y sus combinaciones.

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Pueden incluirse uno o mas codisolventes para ayudar a la solubilidad del compuesto o los compuestos de medicamento y/u otros excipientes. Los ejemplos de co-disolventes farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, propilenglicol, dipropilenglicol, etilenglicol, glicerol, etanol, polietilenglicoles (por ejemplo PEG300 o PEG400) y metanol. En una realizacion, el codisolvente es propilenglicol.

El co-disolvente o los co-disolventes, si estan presentes, pueden incluirse en una cantidad del 0,05 al 30% (p/p), tal como del 1 al 25% (p/p), por ejemplo del 1 al 10% (p/p) en base al peso total de la composicion.

Las composiciones para administracion inhalada incluyen mezclas acuosas, organicas o acuosas/organicas, polvo seco o composiciones cristalinas administradas al tracto respiratorio mediante bomba o inhalador presurizado, por ejemplo, inhaladores de polvo seco con deposito, inhaladores de polvo seco de dosis unitaria, Inhaladores de polvo seco de multiples dosis medidas previamente, inhaladores nasales o inhaladores de aerosol presurizados, nebulizadores o insufladores. Las composiciones adecuadas contienen agua como diluyente o vehfculo para este proposito y pueden proporcionarse con excipientes convencionales tales como agentes tamponantes, agentes modificadores de tonicidad y similares. Las composiciones acuosas pueden administrarse tambien a la nariz y otras regiones del tracto respiratorio mediante nebulizacion. Dichas composiciones pueden ser soluciones o suspensiones acuosas o aerosoles suministrados desde envases presurizados, tales como un inhalador de dosis medida, con el uso de un propelente licuado adecuado.

Las composiciones para administracion topica a la nariz (por ejemplo, para el tratamiento de la rinitis) o al pulmon, incluyen composiciones en aerosol presurizadas y composiciones acuosas suministradas a las cavidades nasales mediante bomba presurizada. Las composiciones que no estan presurizadas y son adecuadas para administracion topica a la cavidad nasal son de particular interes. Las composiciones adecuadas contienen agua como diluyente o vehfculo con este fin. Las composiciones acuosas para la administracion al pulmon o a la nariz pueden proporcionarse con excipientes convencionales tales como agentes tamponantes, agentes modificadores de la tonicidad y similares. Las composiciones acuosas pueden administrarse tambien a la nariz mediante nebulizacion.

Tfpicamente, puede usarse un dispensador de fluido para suministrar una composicion fluida a las cavidades nasales. La composicion fluida puede ser acuosa o no acuosa, pero tfpicamente es acuosa. El compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, puede formularse como una suspension o solucion. Dicho dispensador de fluido puede tener una boquilla dispensadora u orificio dispensador a traves del cual se dispensa una dosis medida de la composicion fluida tras la aplicacion de una fuerza aplicada por el usuario a un mecanismo de bombeo del dispensador de fluido. Dichos dispensadores de fluido estan provistos generalmente de un deposito de multiples dosis medidas de la composicion de fluido, pudiendo dispensarse las dosis tras accionamientos secuenciales de la bomba. De manera alternativa, el dispensador de fluido para el suministro de una composicion fluida a las cavidades nasales puede estar disenado para ser de dosis limitada, por ejemplo un dispensador de un solo uso que comprende una dosis unica. La boquilla u orificio dispensador puede configurarse para su insercion en las fosas nasales del usuario para el suministro mediante pulverization de la composicion fluida en la cavidad nasal. Un dispensador de fluido del tipo indicado anteriormente se describe e ilustra en la publication de solicitud de patente internacional N° WO 2005/044354 (Glaxo Group Limited). El dispensador tiene una carcasa que aloja un dispositivo de descarga de fluido que tiene una bomba de compresion montada sobre un recipiente para contener una composicion fluida. La carcasa tiene al menos una palanca lateral accionable con un dedo que puede ser movida hacia el interior con respecto a la carcasa para mover el contenedor hacia arriba en la carcasa por medio de una leva para causar que la bomba comprima y bombee una dosis medida de la composicion desde un vastago de bomba a traves de una boquilla nasal de la carcasa. En una realizacion, el dispensador de fluido es del tipo general ilustrado en las Figuras 30-40 del documento WO 2005/044354.

Las composiciones acuosas que contienen un compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo pueden suministrarse tambien mediante una bomba tal como se describe en la publicacion de solicitud de patente internacional N° WO2007/138084 (Glaxo Group Limited), por ejemplo tal como se describe con referencia a las Figuras 22-46 de la misma, o tal como se describe en la solicitud de patente del Reino Unido N° GB0723418.0 (Glaxo Group Limited), por ejemplo tal como se describe con referencia a las Figuras 7-32 de la misma. La bomba puede ser accionada mediante un accionador tal como se describe en las Figuras 1-6 del documento GB0723418.0.

Las composiciones de polvo seco para la administracion topica al pulmon por inhalation pueden presentarse, por ejemplo, en capsulas y cartuchos, por ejemplo, de gelatina, o ampollas, por ejemplo, de lamina de aluminio laminada, para su uso en un inhalador o un insuflador. Las composiciones de mezcla en polvo contienen generalmente una mezcla en polvo para la inhalacion del compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y una base en polvo adecuada (substancia vehfculo/diluyente/excipiente) tal como mono-, di- o polisacaridos (por ejemplo, lactosa o almidon). Las composiciones de polvo seco pueden incluir tambien, ademas del farmaco y el vehfculo, un excipiente adicional (por ejemplo un agente ternario, tal como un ester de azucar, por ejemplo octaacetato de celobiosa, estearato de calcio o estearato de magnesio.

En una realizacion, una composicion adecuada para la administracion inhalada puede incorporarse en una pluralidad de recipientes de dosis sellados proporcionados en envases de medicamento montados en el interior de un dispositivo de

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inhalacion adecuado. Los recipientes pueden ser rompibles, desprendibles o si no pueden abrirse uno a uno y las dosis de la composicion de polvo seco pueden administrarse por inhalacion en una boquilla del dispositivo de inhalacion, tal como se conoce en la tecnica. El envase de medicamento puede adoptar una serie de formas diferentes, por ejemplo, una forma de disco o una tira alargada. Los dispositivos de inhalacion representativos son los dispositivos DISKHALER™ y DISKUS™, comercializados por GlaxoSmithKline.

Una composicion inhalable de polvo seco puede proporcionarse tambien como un deposito a granel en un dispositivo de inhalacion, estando provisto el dispositivo de un mecanismo de dosificacion para dosificar una dosis de la composicion desde el deposito a un canal de inhalacion donde la dosis medida puede ser inhalada por un paciente que inhala en una boquilla del dispositivo. Los ejemplos de dispositivos comercializados de este tipo son TURBUHALER™ (AstraZeneca), TWISTHALER™ (Schering) y CLICKHALER™ (Innovata).

Un procedimiento de suministro adicional para una composicion inhalable de polvo seco es uno en el que las dosis medidas de la composicion se proporcionan en capsulas (una dosis por capsula) que, a continuacion, se cargan en un dispositivo de inhalacion, tfpicamente por el paciente cuando lo solicita. El dispositivo tiene medios para romper, perforar o si no abrir la capsula de manera que la dosis pueda ser introducida al pulmon del paciente cuando este inhala en la boquilla del dispositivo. Como ejemplos comercializados de dichos dispositivos, pueden mencionarse ROTAHALER™ (GlaxoSmithKline) y HANDIHALER™ (Boehringer Ingelheim).

Las composiciones de aerosol presurizadas adecuadas para la inhalacion pueden ser una suspension o una solucion y pueden contener un compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un propulsor adecuado tal como un fluorocarbono o clorofluorocarbono que contiene hidrogeno o sus mezclas, particularmente hidrofluoroalcanos, especialmente 1,1,1,2-tetrafluoroetano, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-n-propano o una mezcla de los mismos. Opcionalmente, la composicion de aerosol puede contener excipientes de composicion adicionales bien conocidos en la tecnica tales como tensioactivos, por ejemplo acido oleico, lecitina o un acido oligolactico o un derivado del mismo, por ejemplo, tal como se describe en los documentos WO 94/21229 y WO 98/34596 (Minnesota Mining and Manufacturing Company) y co-disolventes, por ejemplo etanol. Las composiciones presurizadas se retendran generalmente en un recipiente (por ejemplo, un recipiente de aluminio) cerrado con una valvula (por ejemplo, una valvula dosificadora) y ajustado en un actuador provisto de una boquilla.

Los unguentos, las cremas y los geles pueden formularse, por ejemplo, con una base acuosa u oleosa con la adicion de agentes espesantes y/o gelificantes y/o disolventes adecuados. De esta manera, dichas bases pueden incluir por ejemplo agua y/o un aceite tal como parafina lfquida o un aceite vegetal tal como aceite de cacahuete o aceite de ricino, o un disolvente tal como polietilenglicol. Los agentes espesantes y gelificantes que pueden usarse segun la naturaleza de la base incluyen parafina blanda, estearato de aluminio, alcohol cetoesteanlico, polietilenglicoles, lana grasa, cera de abejas, carboxipolimetileno y derivados de celulosa, y/o monoestearato de glicerilo y/o agentes emulsionantes ionicos.

Las lociones pueden formularse con una base acuosa u oleosa y en general contienen tambien uno o mas agentes emulsionantes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agentes de suspension o agentes espesantes.

Los polvos para aplicacion externa pueden formarse con la ayuda de cualquier base en polvo adecuada, por ejemplo, talco, lactosa o almidon. Las gotas pueden formularse con una base acuosa o no acuosa que comprende tambien uno o mas agentes dispersantes, agentes solubilizantes, agentes de suspension o conservantes.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden formularse, por ejemplo, para el suministro transdermico mediante composicion en parches u otros dispositivos (por ejemplo, dispositivos con gas presurizado) que suministran el componente activo a la piel.

Para la administracion bucal, las composiciones pueden adoptar la forma de comprimidos o pastillas formuladas de la manera convencional.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden formularse tambien como supositorios, por ejemplo, que contienen bases de supositorio convencionales tales como manteca de cacao u otros gliceridos.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden formularse tambien para administracion parenteral mediante inyeccion en bolo o infusion continua y pueden presentarse en forma de dosis unitaria, por ejemplo como ampollas, viales, infusiones de pequeno volumen o jeringas precargadas, o en envases multidosis con un conservante anadido. Las composiciones pueden adoptar formas tales como soluciones, suspensiones o emulsiones en vehfculos acuosos o no acuosos, y pueden contener agentes de formulacion tales como antioxidantes, tampones, agentes antimicrobianos y/o agentes de ajuste de la tonicidad. De manera alternativa, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo para su constitucion con un vehfculo adecuado, por ejemplo esteril, libre de pirogenos, antes de su uso. La presentacion solida seca puede prepararse llenando asepticamente un polvo esteril en recipientes esteriles individuales o llenando asepticamente una solucion esteril en cada recipiente y liofilizando.

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Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden formularse tambien con vacunas como adyuvantes para modular su actividad. Dichas composiciones pueden contener anticuerpos o fragmented de anticuerpos o un componente antigenico incluyendo, pero sin limitarse a, protefrias, ADN, bacterias y/o virus vivos o muertos o partteulas similares a virus, junto con uno o mas componentes con actividad adyuvante incluyendo, pero sin limitarse, a sales de aluminio, emulsiones de aceite y agua, protemas de choque termico, preparaciones y derivados de lfpidos A, glicolfpidos, otros agonistas de TLR tales como ADN de CpG o agentes similares, citoquinas tales como GM-CSF o IL-12 o agentes similares.

En un aspecto adicional de la invencion, se proporciona un adyuvante de vacuna que comprende un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.

Se proporciona ademas una composicion de vacuna que comprende un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un anfrgeno o una composicion de anfrgeno.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden emplearse individualmente o en combinacion con otros agentes terapeuticamente activos. La invencion proporciona, en un aspecto adicional, una combinacion que comprende un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, junto con al menos otro agente terapeuticamente activo.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables y el otro agente o agentes terapeuticamente activos pueden administrarse conjuntamente o por separado y, cuando se administran por separado, la administracion puede tener lugar simultanea o secuencialmente, en cualquier orden. Las cantidades del compuesto o compuestos de formula (I) o (a) sus sales farmaceuticamente aceptables y el agente o agentes terapeuticamente activos y las temporizaciones de administracion relativas se seleccionaran con el fin de conseguir el efecto terapeutico combinado deseado. La administracion de una combinacion de un compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo con otros agentes de tratamiento puede ser mediante administracion concomitantemente en una composicion farmaceutica unitaria que incluye ambos compuestos, o en composiciones farmaceuticas separadas cada una de las cuales incluye uno de los compuestos. De manera alternativa, la combinacion puede administrarse por separado de una manera secuencial en la que un agente de tratamiento se administra primero y el otro segundo o viceversa. Dicha administracion secuencial puede ser cercana en el tiempo o alejada en el tiempo.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden usarse en combinacion con uno o mas agentes utiles en la prevencion o el tratamiento de infecciones virales. Los ejemplos de dichos agentes incluyen, sin limitacion, inhibidores de polimerasa tales como los descritos en el documento WO 2004/037818-A1, asf como los descritos en los documentos WO 2004/037818 y WO 2006/045613; JTK-003, JTK-019, NM-283, HCV-796, R-803, R1728, R1626, asf como los descritos en los documentos WO 2006/018725, WO 2004/074270, WO 2003/095441, US2005/0176701, WO 2006/020082, WO2005/080388, WO 2004/064925, WO 2004/065367, WO 2003/007945, WO 02/04425, WO 2005/014543, WO2003/000254, EP 1065213, WO 01/47883, WO 2002/057287, WO 2002/057245 y agentes similares; inhibidores de la replicacion tales como aciclovir, famciclovir, ganciclovir, cidofovir, lamivudina y agentes similares; inhibidores de la proteasa tales como los inhibidores de la proteasa del VIH ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brecanavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir, y los inhibidores de la proteasa del VHC BILN2061, VX-950, SCH503034; y agentes similares; inhibidores nucleosidos y nucleotidos de la transcriptasa inversa tales como zidovudine, didanosine, lamivudine, zalcitabine, abacavir, stavidine, adefovir, adefovir dipivoxil, fozivudine, todoxil, emtricitabine, alovudine, amdoxovir, elvucitabine y agentes similares; inhibidores no nucleosidos de la transcriptasa inversa (incluyendo un agente que tiene actividad antioxidante tal como immunocal, oltipraz, etc.) tales como nevirapine, delavirdine, efavirenz, loviride, immunocal, oltipraz, capravirine, TMC-278, TMC-125, etravirine y agentes similares; inhibidores de entrada tales como enfuvirtide (T-20), T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX- 355, BMS-806, 5-Helix y agentes similares; inhibidores de integrasa tales como L-870,180 y agentes similares; inhibidores de brotacion tales como PA-344 y PA-457, y agentes similares; inhibidores de receptores de quimioquinas tales como vicriviroc (Sch-C), Sch-D, TAK779, maraviroc (UK-427.857), TAK449, asf como los descritos en los documentos WO 02/74769, WO 2004/054974, WO 2004/055012, WO 2004/055010, WO 2004/055016, WO 2004/055011 y WO 2004/05458, y agentes similares; inhibidores de neuraminidasa tales como CS-8958, zanamivir, oseltamivir, peramivir y agentes similares; bloqueadores de canales ionicos tales como amantadina o rimantadina y agentes similares; y ARN de interferencia y oligonucleotidos antisentido y tales como ISIS-14803 y agentes similares; antivirales de mecanismo de accion indeterminado, por ejemplo los divulgados en los documentos WO 2005/105761, WO 2003/085375, WO 2006/122011, ribavirina y agentes similares. Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden usarse tambien en combinacion con uno o mas de otros agentes que pueden ser utiles en la prevencion o el tratamiento de infecciones virales, por ejemplo terapias inmunitarias (por ejemplo, interferon u otras citoquinas/quimiocinas, moduladores de receptores de citoquinas/quimioquinas, agonistas o antagonistas de citoquinas y agentes similares); y vacunas terapeuticas, agentes antifibroticos, agentes antiinflamatorios tales como corticosteroides o AINEs (agentes antiinflamatorios no esteroideos) y agentes similares.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden usarse en combinacion con uno o mas

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de otros agentes que pueden ser utiles en la prevencion o el tratamiento de enfermedades alergicas, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, por ejemplo; inmunoterapias de antfgeno, antihistammicos, esteroides, AINEs, broncodilatadores (por ejemplo agonistas beta 2, agonistas adrenergicos, agentes anticolinergicos, teofilina), metotrexato, moduladores de leucotrienos y agentes similares; terapia de anticuerpos monoclonales tales como anti-IgE, anti-TNF, anti-IL-5, anti-IL-6, anti-IL-12, anti-IL-1 y agentes similares; terapias de receptores, por ejemplo entanercept y agentes similares; inmunoterapias no espedficas de antfgeno (por ejemplo, interferon u otras citoquinas/quimiocinas, moduladores de receptores de citocinas/quimiocinas, agonistas o antagonistas de citocinas, agonistas de TLR y agentes similares).

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden usarse en combinacion con uno o mas de otros agentes que pueden ser utiles en la prevencion o el tratamiento del cancer, por ejemplo agentes quimioterapeuticos tales como agentes alquilantes, inhibidores de topoisomerasa, antimetabolitos, agentes antimitoticos, inhibidores de quinasas y agentes similares; terapia de anticuerpos monoclonales tal como trastuzumab, gemtuzumab y otros agentes similares; y terapia hormonal tal como tamoxifeno, goserelina y agentes similares.

Las composiciones farmaceuticas segun la invention pueden usarse tambien individualmente o en combinacion con al menos otro agente terapeutico en otras areas terapeuticas, por ejemplo enfermedad gastrointestinal. Las composiciones segun la invencion pueden usarse tambien en combinacion con una terapia de reemplazo de genes.

La invencion incluye en un aspecto adicional una combinacion que comprende un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, junto con al menos otro agente terapeuticamente activo.

Las combinaciones a las que se ha hecho referencia anteriormente pueden presentarse convenientemente para su uso en forma de una composicion farmaceutica y de esta manera las composiciones farmaceuticas que comprenden una combinacion tal como se ha definido anteriormente junto con al menos un diluyente o vehfculo farmaceuticamente aceptable de los mismos representan un aspecto adicional de la invencion.

Una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo dependera de una serie de factores. Por ejemplo, la especie, la edad y el peso del receptor, la condition precisa que requiere tratamiento y su gravedad, la naturaleza de la composition y la via de administration son todos ellos factores a considerar. En ultima instancia, la cantidad terapeuticamente eficaz debena ser a discretion del medico asistente. Independientemente, una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invencion para el tratamiento de seres humanos que sufren de fragilidad, generalmente, debena estar comprendida en el intervalo de 0,0001 a 100 mg/kg de peso corporal del receptor por dfa. Mas normalmente, la cantidad eficaz debena estar comprendida en el intervalo de 0,001 a 10 mg/kg de peso corporal por dfa. De esta manera, para un adulto de 70 kg, un ejemplo de una cantidad real por dfa sena normalmente de 7 a 700 mg. Para las vfas de administracion intranasal e inhalada, las dosis tfpicas para un adulto de 70 kg debenan estar comprendidas en el intervalo de 0,1 microgramos a 1 mg por dfa, por ejemplo 1 |jg, 10 j o 100 j. Esta cantidad puede proporcionarse en una dosis unica por dfa o en un numero (tal como dos, tres, cuatro, cinco o mas) de subdosis por dfa, de manera que la dosis diaria total sea la misma. Una cantidad eficaz de una sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de formula (I) puede determinarse como una proportion de la cantidad eficaz del compuesto de formula (I) o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo per se. Dosificaciones similares debenan ser apropiadas para el tratamiento de las otras condiciones a las que se ha hecho referencia en la presente memoria.

Los compuestos de formula (I) y sus sales farmaceuticamente aceptables pueden administrarse tambien con cualquier frecuencia apropiada, por ejemplo 1-7 veces por semana. Por supuesto, el regimen de dosificacion preciso dependera de factores tales como la indication terapeutica, la edad y la condicion del paciente, y la via de administracion particular elegida. En un aspecto de la invencion, un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, puede administrarse una vez por semana durante un penodo de 4 a 8 semanas, por ejemplo 4, 5, 6, 7 u 8 semanas.

Las composiciones farmaceuticas pueden presentarse en formas de dosis unitarias que contienen una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria. Dicha unidad puede contener, como ejemplo no limitativo, de 0,5 mg a 1 g de un compuesto de formula (I) o de una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, dependiendo de la condicion que se este tratando, de la via de administracion y la edad, el peso y la condicion del paciente. Las composiciones de dosificacion unitaria preferentes son aquellas que contienen una dosis o subdosis diaria, tal como se ha indicado anteriormente en la presente memoria, o una fraction apropiada de la misma, de un ingrediente activo. Dichas composiciones farmaceuticas pueden prepararse por cualquiera de los procedimientos bien conocidos en la tecnica farmaceutica.

Se proporciona tambien un procedimiento para preparar dicha composicion farmaceutica que comprende mezclar un compuesto de formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, con uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables.

Abreviaturas

La siguiente lista proporciona definiciones de ciertas abreviaturas, tal como se usan en la presente memoria. Se apreciara

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que la lista no es exhaustiva, pero el significado de aquellas abreviaturas que no se definen a continuacion sera facilmente evidente para las personas con conocimientos en la materia.

DCM

Diclorometano

DMF

N,N-dimetilformamida

DMSO

Dimetilsulfoxido

DME

1,2-dimetoxietano

THF

Tetrahidrofurano

EtOAc

Acetato de etilo

MeOH

Metanol

EtOH

Etanol

MeCN

Acetonitrilo

HCl

Acido clorhndrico

HPLC

Cromatograffa lfquida de alta resolucion

MDAP

HPLC autopreparativa dirigida en masa

SPE

Extraccion en fase solida

MeOH

Metanol

TFA

Acido trifluoroacetico

DIPEA

N,N-diisopropiletilamina

TBME

Tert-butil metil eter

Detalles experimentales 1H RMN

Los espectros de 1H RMN se registraron en CDCh o DMSO-d6 en un espectrometro Bruker DPX 400 o Bruker Avance DRX, Varian Unity 400 o JEOL Delta, todos funcionando a 400 MHz. El estandar interno usado era tetrametilsilano o el disolvente protonado residual a 7,25 ppm para CDCh o 2,50 ppm para DMSO-d6.

LCMS

Sistema A

Columna: 50 mm x 2,1 mm ID, 1,7 pm Acquity UPLC BEH C18 Caudal: 1 ml/min.

Temperatura: 40°C

Rango de deteccion UV: 210 a 350 nm

Espectro de masas: Registrado en un espectrometro de masas usando ionizacion por electrospray en modo de barrido alternativo positivo y negativo

Disolventes:

A: 0,1% v/v de acido formico en agua B: 0,1% v/v de acido formico acetonitrilo

Gradiente: Tiempo (min.) A% B%

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0 97 3

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Sistema B

2,0 97 3

Columna: 50 mm x 2,1 mm ID, 1,7 pm Acquity UPLC BEH C18 Caudal: 1 ml/min.

Temperatura: 40°C

Rango de deteccion UV: 210 a 350 nm

Espectro de masas: Registrado en un espectrometro de masas usando ionizacion por electrospray en modo de barrido alternativo positivo y negativo

Disolventes:

A: bicarbonato de amonio 10 mM en agua ajustado a pH 10 con solucion de amomaco B: acetonitrilo.

Gradiente: Tiempo (min.) A% B%

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1,5

3 97

1,9

3 97

2,0

0 100

HPLC autopreparativa dirigida en masa (MDAP)

La HPLC autopreparativa dirigida en masa se llevo a cabo bajo las condiciones proporcionadas a continuacion. La deteccion UV fue una senal promediada desde una longitud de onda de 210 nm a 350 nm y los espectros de masas se registraron en un espectrometro de masas usando ionizacion por electrospray en modo alternativo positivo y negativo.

Procedimiento A

El procedimiento A se realizo en una columna Sunfire C18 (tfpicamente de 150 mm x 30 mm y un diametro de empaque de 5 pm) a temperatura ambiente. Los disolventes empleados fueron:

A = solucion al 0,1% v/v de acido formico en agua

B = solucion al 0,1% v/v de acido formico en acetonitrilo.

Procedimiento B

El procedimiento B se llevo a cabo en una columna XBridge C18 (tfpicamente de 100 mm x 30 mm y un diametro de empaque de 5 pm) a temperatura ambiente. Los disolventes empleados fueron:

A = bicarbonato de amonio acuoso 10 mM ajustado a pH 10 con solucion de amomaco.

B = acetonitrilo.

Procedimiento C

El procedimiento C se realizo en una columna Sunfire C18 (tfpicamente de 150 mm x 30 mm y un diametro de empaque de 5 pm) a temperatura ambiente. Los disolventes empleados fueron:

A = solucion al 0,1% v/v de acido trifluoroacetico en agua

B = solucion al 0,1% v/v de acido trifluoroacetico en acetonitrilo.

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Preparacion intermedia

Intermedio 1: 3-pentanimidamido-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo

Se anadio gota a gota una solucion de cloruro de hidrogeno en dioxano (12 ml, 4M, 48 mmoles) a una suspension de clorhidrato de 3-amino-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (2,04 g, 10,7 mmol) (J. Org. Chem. 1999,64 (22), 8411) en valeronitrilo (30 ml). La mezcla resultante se calento a 50°C durante 18 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y el material solido se recogio mediante filtracion y se lavo con TBME. El compuesto del titulo se obtuvo como un solido blanquecino (2,19 g). Se anadio una porcion adicional de TBME al filtrado y la mezcla se filtro de nuevo, el precipitado se lavo con TBME y se seco para dar una porcion adicional del compuesto del titulo (0,275 g). 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 Delta ppm 12,22 (br. s., 1 H) 10,88 (s, 1 H) 9,39 (br. s., 1 H) 8,25 (br. s., 1 H) 7,09 (t, J=2,9 Hz, 1 H) 6,19 (t, J=2,5 Hz, 1 H) 4,23 (q, J=7,0 Hz, 2 H) 2,52 - 2,60 (m, 2 H) 1,63 - 1,77 (m, 2 H) 1,34 - 1,47 (m, 2 H) 1,27 (t, J=7,2 Hz, 3 H) 0,94 (t, J=7,4 Hz, 3 H)

Intermedio 2: 2-butil-3H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4(-5H)-ona

Se anadio una solucion de hidroxido de sodio (1,44 g, 35,9 mmol) en agua (7 ml) a una solucion de clorhidrato de 3- pentanimidamido-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (2,46 g, 8,99 mmol) en etanol (30 ml). La mezcla resultante se calento a reflujo durante un total de 4 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y el pH se ajusto a pH 6,5 con acido dtrico acuoso. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion acuosa saturada de cloruro sodico, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se evaporaron para dar el compuesto del titulo como un solido de color marron palido (1,69 g).

LCMS (Sistema B): tRET = 0,66 min; MH+192

Intermedio 3: 2-butil-4-cloro-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina

Se anadio oxicloruro de fosforo (20 ml, 21,46 mmol) a 2-butil-3H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4(5H)-ona (1,69 g). La mezcla resultante se calento a 100°C. Despues de 4 horas, la mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y a continuacion se vertio sobre hielo. La fase acuosa se trato con solucion acuosa de hidroxido de sodio (5 M) hasta pH 7. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (2 x 150 ml). La fase organica combinada se lavo con salmuera, se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo para dar el compuesto del titulo (10,69 g)

LCMS (Sistema B): tRET = 0,90 min; MH+ 210, 212

Intermedio 4: 2-butil-4-cloro-7-vodo-5H-pirrolo[3,2-d1pirimidina

Se anadio en porciones N-yodosuccinimida (2,09 g, 9,29 mmol) a una solucion agitada de 2-butil-4-cloro-5H-pirrolo[3,2- d]pirimidina (1,69 g, 8,06 mmol) en THF (35 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reaccion se diluyo con TBME (50 ml), a continuacion, se lavo con solucion acuosa de tiosulfato sodico (50 ml) y, a continuacion, con una solucion acuosa saturada de cloruro sodico (20 ml). La fase organica se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo. La muestra se disolvio en diclorometano y se purifico mediante cromatograffa sobre sflice usando un gradiente de 0-100% de diclorometano-ciclohexano durante 30 minutos seguido de un gradiente de 0-100% de TBME- ciclohexano seguido de 0-20% de metanol durante 15 minutos. Las fracciones apropiadas se identificaron mediante LCMS, a continuacion, se combinaron y se evaporaron en vado para dar el compuesto del titulo como un solido de color amarillo (2,2 g).

LCMS (Sistema B): tRET = 1,14 min; MH+ 336, 338

Intermedio 5: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-4-cloro-7-yodo-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidina

Se anadio en porciones hidruro sodico (0,338 g, 60% en aceite, 14,08 mmol) a una solucion agitada de 4-cloro-7-yodo-2- butil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina (2,19 g, 6,53 mmol) en DMF (30 ml) enfriada en un bano de hielo. Despues de 30 minutos, se anadio bencil clorometil eter (1,13 ml, 1,278 g, 8,16 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se inactivo con agua y la mezcla resultante se repartio entre acetato de etilo (150 ml) y agua (150 ml). La fase organica se lavo con agua y, a continuacion, con solucion acuosa saturada de cloruro sodico, se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo. La muestra se disolvio en diclorometano y se purifico mediante cromatograffa sobre sflice (100 g) usando un gradiente de 0-100% de acetato de etilo-ciclohexano durante 30 minutos. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para dar el compuesto del titulo como un aceite de color amarillo (2,82 g).

LCMS (Sistema B): tRET = 1,49 min; MH+ 456, 458

Intermedio 6: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-vodo-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-4-amina

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solucion de amomaco al 35% (0,88) (4 ml). La reaccion se agito a 120°C durante 90 minutes en un microondas Biotage Initiator. Se anadio 1 ml adicional de solucion de amomaco al 35% (0,88) a la reaccion. La reaccion se agito a 120°C durante 90 minutes en un microondas Biotage Initiator. La reaccion se evaporo en vacte para dar un aceite de color amarillo palido. El aceite se disolvio en el volumen mmimo de metanol al 20% en diclorometano y se purifico mediante cromatograffa sobre s^lice usando un gradiente de 0-100% de acetato de etilo en gradiente de ciclohexano durante 80 minutos. Las fracciones se combinaron y se evaporaron en vacte para producir el compuesto del titulo como un aceite incoloro (768 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 1,19 min; MH+ 437

Intermedio 7: 5-metil-3-pentanimidamido-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo

Se anadio gota a gota cloruro de hidrogeno en dioxano (4M, 308 ml, 1,2 mol) a 3-amino-5-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (38,3 g, 228 mmol) (J. Med. Chem. 2008,51, 68) en valeronitrilo (383 ml). La mezcla resultante se calento a 50°C durante la noche. Se anadio una porcion adicional de acido (160 ml, 0,64 moles) y la mezcla se calento a 55°C durante la noche. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente, se filtro y el filtrado se evaporo. El residuo se suspendio en TBME (1.200 ml) durante 30 minutos, a continuacion, el solido se filtro y se lavo con TMBE y se seco. El compuesto del titulo se obtuvo como un solido de color marron (58,9 g).

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm incluye 11,90 (br, s, 1 H) 11,09 (s, 1 H) 9,52 (br, s, 1 H) 8,14 (br, s, 1 H) 5,82 (br, s, 1 H) 4,12 (q, J=7,1 Hz, 2 H) 3,48 (br, s, 1 H) 2,14 (s, 3 H) 1,51 -1,70 (m, 2 H) 1,05 - 1,40 (m, 6 H) 0,84 (t, J=7,1 Hz, 3 H)

Intermedio 8: 2-butil-6-metil-3H-pirrolo[3,2-d1pirimidin-4(5H)-ona

Se anadio gota a gota una solucion acuosa de hidroxido de sodio (6 M, 138 ml) a una solucion de 5-metil-3- pentanimidamido-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (58,9 g, 0,2 mol) en etanol (550 ml) enfriada en un bano de hielo. La mezcla de reaccion se calento a reflujo durante 2,5 horas y, a continuacion, se enfrio a temperatura ambiente. Se anadio agua (700 ml) y el pH se ajusto a pH 6,5 usando acido dtrico acuoso (2M). La mezcla resultante se agito durante 45 minutos, a continuacion, se filtro y el material solido se lavo con agua. El material se seco en una estufa de vacte a 50°C para dar el compuesto del titulo.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm incluye 11,60 (s, 1 H) 11,53 (s, 1 H) 5,91 (s, 1 H) 2,33 -2,50 (m, 2 H) 2,19 (s, 3H) 1,45 -1,60 (m, 2 H) 1,10 -1,26 (m, 2 H) 0,70 - 0,84 (m, 3 H)

Intermedio 9: 2-butil-4-cloro-6-metil-5H-pirrolo[3,2-d1pirimidina

Se anadio gota a gota oxicloruro de fosforo (42,8 ml, 70,4 g, 0,459 moles) a una solucion de 2-butil-6-metil-3H-pirrolo[3,2- d]pirimidin-4(5H)-ona (37,5 g, 0,183 mol) en acetonitrilo (750 ml) en una atmosfera de nitrogeno. La mezcla de reaccion se calento a reflujo durante la noche. Despues de enfriar a temperatura ambiente, se anadio gota a gota una porcion adicional de oxicloruro de fosforo (42,8 ml, 70,4 g, 0,459 mol) y se continuo el calentamiento durante 3,5 horas adicionales. La reaccion se enfrio de nuevo a temperatura ambiente y se anadio gota a gota otra porcion de oxicloruro de fosforo (42,8 ml, 70,4 g, 0,459 mol) y se continuo el calentamiento durante 3 horas. La mezcla de reaccion se dejo reposar a temperatura ambiente durante la noche y, a continuacion, se calento a reflujo durante 3,5 horas. La mezcla de reaccion se enfrio, a continuacion, se concentro. El residuo se enfrio en un bano de hielo y se anadio cuidadosamente agua enfriada con hielo (650 ml). El pH se ajusto a 8 usando una solucion acuosa de hidroxido de potasio y, a continuacion, la mezcla se agito durante 45 minutos. La mezcla se repartio entre diclorometano (1.000 ml) y agua (1.000 ml). La capa acuosa y el material solido se volvieron a extraer con diclorometano (2 x 500 ml). Las capas organicas combinadas se secaron (Na2SO4) y se filtraron a traves de un tapon de alumina neutra. El filtrado se concentro hasta un aceite de color amarillo, se anadieron un cristal de siembra y hexano. El material solido se filtro, se lavo con hexano y se seco para dar el compuesto del titulo como un solido blanquecino (15,5 g).

LCMS (Sistema A): tRET = 0,81 min; MH+ 224 / 226

Intermedio 10: 2-butil-4-cloro-7-vodo-6-metil-5H-pirrolo[3,2-d1pirimidina

Preparado de manera similar al Intermedio 4 a partir de 2-butil-4-cloro-6-metil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina.

LCMS (Sistema B): tRET = 1,20 min; MH+ 350, 352

Intermedio 11: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-4-cloro-7-yodo-6-metil-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidina

LCMS (Sistema B): tRET = 1,54 min; MH+ 470, 472

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Intermedio 12: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-vodo-6-metil-5H-pirrolor3.2-d1pirimidin-4-amina

Preparado de manera similar al Intermedio 6 a partir de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-4-cloro-7-yodo-6-metil-5H-pirrolo[3,2- d1pirimidina

LCMS (Sistema B): tRET = 1.24 min; MH+ 451

Intermedio 13: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(5-cloropent-1-il)-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-4-amina

A una suspension desgasificada de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-yodo-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina (2,768 g. 6,34 mmol). yoduro de cobre (I) (0,242 g, 1,269 mmol), y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,445 g, 0,634 mmol) en

N, N-dimetilformamida anhidra (40 ml) se anadio gota a gota, durante 2 minutos, una solucion de 5-cloropent-1 -ina (0,781 g. 7,61 mmol) y trietilamina (1,231 ml. 8.88 mmol) en N.N-dimetilformamida anhidra (20 ml). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 17 horas. La reaccion se concentro en vado y el aceite de color marron resultante se repartio entre agua (500 ml) y acetato de etilo (500 ml). La parte organica se separo y la parte acuosa se extrajo de nuevo con acetato de etilo (250 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera (400 ml). se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron en vado. La muestra se disolvio en diclorometano y se purifico mediante cromatograffa sobre sflice (Si) (2 x 100 g) usando un gradiente de acetato de etilo-ciclohexano 0-100% durante 60 minutos. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para dar un aceite de color rojo. La muestra se disolvio en diclorometano y se purifico mediante cromatograffa sobre sflice usando un gradiente de acetato de etilo- ciclohexano 0-100% durante 80 minutos. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para dar el compuesto del titulo como un solido de color amarillo. (1,13 g).

LCMS (Sistema B): tRET = 1.29 min; MH+ 411, 413

Intermedio 14: 4-(5-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-7-il)pent-4-in-1-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo

A una solucion de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(5-cloropent-1-in-1-il)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina (100 mg. 0,243 mmol) en N.N-dimetilformamida anhidra (2 ml) se le anadio 1-BOC-piperazina (50 mg. 0,268 mmol) y trietilamina (51 pl.

O, 366 mmol). La reaccion se agito a 70°C durante 22 horas. Se anadieron 100 mg adicionales (0,537 mmol) de 1-BOC- piperazina y 0.1 ml (0.717 mmol) de trietilamina a la reaccion. La reaccion se agito a 70°C durante 24 horas adicionales. La reaccion enfriada se evaporo en vado y se repartio entre diclorometano y agua. La capa organica se hizo pasar a traves de una frita hidrofoba y se evaporo en vado para dar un aceite de color amarillo. El aceite se disolvio en MeOH:DMSO (1:1) (2 x 1 ml) y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para producir el compuesto del titulo como un aceite incoloro (80 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 1.35 min; MH+ 561.

Intermedio 15: 1-iso-propil-4-(pent-4-in-1-il)piperazina

Una mezcla de 1-(1-metiletil)piperazina (6 g. 46,8 mmol). 5-cloro-1-penteno (4.91 ml. 46,8 mmol) y bicarbonato de sodio (3.93 g. 46,8 mmol) en N.N-dimetilformamida (75 ml) se calento a 80°C durante la noche. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y, a continuacion. se repartio entre eter (100 ml) y agua (100 ml). La fase organica se lavo con salmuera (25 ml). a continuacion, se seco usando una frita hidrofoba y se evaporo. El material bruto se purifico en un cartucho SCX de 50 g (preacondicionado con MeOH) eluido con MeOH y enjuagado con NH3/ MeOH 2 M. Las fracciones apropiadas se concentraron y se secaron en vado para obtener el compuesto del titulo como un aceite de color pardo claro (3,22 g).

1H RMN (400 MHz. CDCla) contiene las siguientes senales 8 ppm 2,39 -2,69 (m. 10 H) 2,19 -2,27 (m. 2 H) 1,93 -1,97 (m. 1 H) 1,67 - 1,78 (m. 2 H) 1,01 -1,10 (m. 6 H)

Intermedio 16: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1-il)pent-1-in-1-il)-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-4-amina

A una solucion desgasificada de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-yodo-5H-pirrolo[3,2-d]-pirimidin-4-amina (223 mg. 0,511 mmol) en N.N-dimetilformamida anhidra (3.5 ml) en atmosfera de nitrogeno a temperatura ambiente se anadio yoduro de cobre (I) (19 mg. 0,10 mmol). bis(trifenilfosfina)paladio (II) (40 mg. 0,057 mmol) y finalmente trietilamina (0,128 ml. 0,920 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente bajo una atmosfera de nitrogeno durante 10 minutos y, a continuacion, se anadio gota a gota una solucion de 1-(1-metiletil)-4-(4-pentin-1-il)piperazina (159 mg. 0,818 mmol) en N.N-dimetilformamida (0.5 ml). La mezcla de reaccion se agito a 55°C durante 40 minutos. Se anadio una solucion de 1- (1-metiletil)-4-(4-pentin-1-il)piperazina 60 mg (0,309 mmol) en N.N-dimetilformamida anhidra desgasificada (0.5 ml). La mezcla de reaccion se agito a 55°C durante 30 minutos. La reaccion se evaporo en vado para dar un aceite de color amarillo oscuro. El aceite se repartio entre agua y diclorometano. La capa organica se separo y la capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano. Los extractos organicos combinados se pasaron a traves de una frita hidrofoba y se

evaporaron en vado para dar un aceite de color amarillo oscuro. El aceite se disolvio en MeOH:DMSO (1:1) (4x1 ml) y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para producir el compuesto del titulo como un aceite de color amarillo (80 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 1,17 min; MH+ 503.

5 Intermedio 17: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1-il)pent-1-in-1-il)-6-metil-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-4- amina

A una solucion desgasificada de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-yodo-6-metil-5H-pirrolo[3,2-d]-pirimidin-4-amina (159 mg. 0.353 mmol) en N.N-dimetilformamida anhidra (3 ml) bajo una atmosfera de nitrogeno a temperatura ambiente se anadio yoduro de cobre (I) (19 mg. 0.100 mmol). bis(trifenilfosfina)paladio (II) (40 mg. 0.057 mmol) y finalmente trietilamina 10 (0.088 ml. 0.636 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente en atmosfera de nitrogeno durante 10 minutos y. a

continuacion. se anadio gota a gota una solucion de 1-(1-metiletil)-4-(4-pentin-1-il)piperazina (110 mg. 0.565 mmol) en

N. N-dimetilformamida (1 ml). La mezcla de reaccion se agito a 55°C durante 40 minutos. Se anadio 1-(1-metiletil)-4-(4- pentin-1 -il)piperazina adicional (110 mg. 0.565 mmol) y la mezcla de reaccion se dejo agitar a 55°C durante 45 minutos. Se anadio 1-(1-metiletil)-4-(4-pentin-1-il)piperazina (110 mg. 0.565 mmol) y la mezcla de reaccion se dejo agitar a 55°C

15 durante 45 minutos. La reaccion se evaporo en vado para dar un aceite de color amarillo oscuro. El aceite se repartio entre agua y diclorometano. La capa organica se separo y la capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano. Los extractos organicos combinados se pasaron a traves de una frita hidrofoba y se evaporaron en vado para dar un aceite de color amarillo oscuro. El producto bruto se disolvio en 6 ml de DMSO/MeOH 50:50 y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). Las fracciones que conteman el producto se concentraron para dar el compuesto del titulo como un 20 aceite de color amarillo (61 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 1.22 min; MH+ 517.

Intermedio 18: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(5-(4-etilpiperazin-1-il)pent-1-in-1-il)-6-metil-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-4-amina

Preparado de manera similar al Intermedio 17 a partir de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-yodo-6-metil-5H-pirrolo[3.2- d]pirimidin-4-amina y 1-etil-4-(pent-4-in-1-il)piperazina (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011.21 (6). 1601; WO2006/105372).

25 LCMS (Sistema B): tRET = 1.17 min; MH+ 503

Intermedio 19: 4-(3-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-7-il)prop-2-in-1-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo

A una solucion desgasificada de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-yodo-5H-pirrolo[3.2-d]-pirimidin-4-amina (150 mg. 0.344 mmol) en N.N-dimetilformamida anhidra (3 ml) en atmosfera de nitrogeno a temperatura ambiente se anadio yoduro de 30 cobre (I) (13 mg. 0.068 mmol). bis(trifenilfosfina)paladio (II) (27 mg. 0.038 mmol) y. finalmente. trietilamina (0.086 ml.

O. 619 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente en atmosfera de nitrogeno durante 10 minutos y. a continuacion. se anadio 4-(prop-2-in-1-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo (139 mg. 0.619 mmol) en una porcion. La mezcla de reaccion se calento a 55°C en un bano de aceite precalentado y se agito a 55°C durante 40 minutos. La reaccion se evaporo en vado para dar un aceite de color marron oscuro. El aceite se repartio entre agua y diclorometano.

35 La capa organica se separo y la capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano. Los extractos organicos combinados se pasaron a traves de una frita hidrofoba y se evaporaron en vado para dar un aceite de color marron oscuro. El aceite se disolvio en MeOH:DMSO (1:1) (2 x 1 ml) y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para producir el compuesto del titulo como un aceite de color marron (180 mg).

40 LCMS (Sistema B): tRET = 1.26 min; MH+ 533

Intermedio 20: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(3-(piperazin-1-il)prop-1-in-1-il)-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-4-amina

A una solucion de 4-(3-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3.2-d]pirimidin-7-il)prop-2-in-1-il)piperazin-1- carboxilato de tert-butilo (85 mg. 0.160 mmol) en metanol anhidro (5 ml) se anadio cloruro de hidrogeno 4 M en 1.4- dioxano (0.5 ml. 2.0 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 19 horas. Se anadieron 0.5 ml 45 adicionales (2.0 mmol) de cloruro de hidrogeno 4 M en 1.4-dioxano a la reaccion. La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La reaccion se evaporo hasta la sequedad bajo una corriente de nitrogeno para dar un aceite de color verde. El aceite se disolvio en MeOH:DMSO (1: 1) (2 x 1 ml) y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para producir el compuesto del titulo como un aceite de color amarillo palido (38 mg).

50 LCMS (Sistema B): tRET = 0.97 min; MH+ 433

Intermedio 21: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(3-(4-etilpiperazin-1-il)prop-1-in-1-il)-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-4-amina

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A una solucion de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(3-(piperazin-1-il)prop-1-in-1-il)-5H-pirrolo[3,2-d]-pirimidin-4-amina (38 mg, 0,088 mmol) en N,N-dimetilformamida anhidra (1 ml) a temperature ambiente se anadieron trietilamina (25 pl, 0,179 mmol) y yodoetano (10 pl, 0,125 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 5 horas. La reaccion se evaporo en vado para dar un aceite de color amarillo palido. El aceite se disolvio en MeOH:DMSO (1:1) (1 ml) y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). La fraccion apropiada se evaporo en vado para producir el compuesto del titulo como un aceite de color amarillo palido (28 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 1,04 min; MH+ 461

Intermedio 22: 4-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3.2-d1pirimidin-7-il)but-3-in-1-ol

A una solucion de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-yodo-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina (3,04 g, 6,97 mmol) en N, N- dimetilformamida (35 ml) se anadio dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,489 g, 0,697 mmol) y yoduro de cobre (I) (0,265 g, 1,394 mmol). La solucion se agito y se desgasifico con nitrogeno durante 5 minutos, a continuacion, la mezcla de reaccion se coloco bajo una atmosfera de nitrogeno. Se anadio una solucion de but-3-in-1-ol (0,733 g, 10,45 mmol) y trietilamina (1,457 ml, 10,45 mmol) en N,N-dimetilformamida (15 ml) gota a gota durante 5 minutos. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla de reaccion se concentro en vado a 60°C y el residuo se repartio entre 3:1 de CHCh (250 ml) y agua (250 ml). La capa organica se separo y la capa acuosa se extrajo de nuevo con CHCh:IPA (2 x 100 ml). Las fases organicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron en vado para dar un aceite de color marron viscoso (5,34 g). La muestra se disolvio en CHCh:IPA y se precargo en florisil. La muestra se purifico mediante cromatograffa sobre sflice (2 x 100 g) usando un gradiente de 0-10% de metanol-TBME durante40 minutos. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para dar un solido de color naranja (2,064 g). El solido se trituro con eter diefflico, se filtro y se seco a 50°C durante la noche para dar el compuesto del titulo como un solido de color marron palido (1,53 g).

LCMS (Sistema B): tRET = 0,95 min; MH+ 379

Intermedio 23: 4-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3,2-d1pirimidin-7-il)butan-1-ol

Una solucion de 4-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-7-il)but-3-in-1-ol (948 mg, 2,505 mmol) en acetato de etilo (50 ml) y etanol (50 ml) se hidrogeno usando el cubo H (ajustes: 25°C, H2 completo, caudal 1 ml/min) y Pd/C CatCart 70 al 10% como catalizador. La mezcla de reaccion se concentro en vado a 60°C para dar el compuesto del titulo como un aceite de color amarillo viscoso que cristalizo en reposo (884 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 0,98 min; MH+ 383

Intermedio 24: 4-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3,2-d1pirimidin-7-il)butanal

Una mezcla de 4-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-7-il)butan-1-ol (884 mg, 2,311 mmol), N- oxido de N-metilmorfolina (420 mg, 3,59 mmol), tamices moleculares de 4 A en polvo y perrutenato de tetrapropilamonio (58 mg, 0,165 mmol) se coloco bajo nitrogeno y se anadio una mezcla de diclorometano anhidro (27 ml) y acetonitrilo anhidro (3 ml). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. Se anadieron N-oxido de N- metilmorfolina (390 mg, 3,33 mmol) y perrutenato de tetrapropilamonio (38 mg, 0,108 mmol) en DCM anhidro (5 ml) adicionales y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 horas adicionales. Se anadieron N-oxido de N-metilmorfolina (130 mg, 1,11 mmol) y perrutenato de tetrapropilamonio (100 mg, 0,284 mmoles) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 30 minutos adicionales. La mezcla de reaccion se filtro a traves de Celite y la torta se lavo tres veces con DCM. El disolvente de reaccion se elimino en vado y el residuo se disolvio en DCM y se paso a traves de Celite una segunda vez. La torta se lavo tres veces con DCM y el disolvente se elimino en vado para dar una goma de color negro. La muestra se disolvio en diclorometano y se purifico mediante cromatograffa sobre sflice (100 g) usando un gradiente de 0-25% de metanol-diclorometano durante 40 minutos. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para dar una goma de color naranja con un tinte negro. La muestra se disolvio en diclorometano y se purifico mediante cromatograffa sobre sflice (100 g) usando un gradiente de 0-25% de metanol- diclorometano durante 80 minutos. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para dar el compuesto del titulo como una goma de color amarillo palido (268 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 1,08 min; MH+ 381

Intermedio 25: 4-(4-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3,2-d1pirimidin-7-il)butil)piperazin-1-carboxilato de tert- butilo

Una suspension de 4-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-7-il)butanal (268 mg, 0,704 mmol) y tamices moleculares de 4 A en diclorometano anhidro (20 ml) se coloco bajo nitrogeno y piperazin-1-carboxilato de tert- butilo (262 mg, 1,409 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 minuto, a continuacion, se anadio triacetoxiborohidruro sodico (299 mg, 1,409 mmol) y la reaccion se agito durante 30 minutos adicionales. Se

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anadieron tamices moleculares 4A adicionales y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 16,5 horas. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celite y la torta se lavo con DCM. Se elimino el disolvente en vado para dar un aceite de color amarillo viscoso. El aceite se volvio a disolver en DCM (50 ml). La capa organica se lavo con solucion saturada de hidrogenocarbonato de sodio (50 ml), las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo de nuevo con DCM (2 x 25 ml). Las fases organicas combinadas se secaron a traves de una frita hidrofoba y se concentraron en vado para dar una goma de color amarillo (488 mg). La muestra se disolvio en diclorometano y se purifico mediante cromatograffa sobre un cartucho de sflice (100 g) usando un gradiente de 0-10% MeOH:TBME durante 40 minutos. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para dar el compuesto del fftulo como una goma de color amarillo palido (338 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 1,31 min; MH+ 551

Intermedio 26: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(4-(piperazin-1-il)butil)-5H -pirrolo [3,2-d]pirimidin-4-amina

Se disolvio 4-(4-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-7-il) butil)piperazin-1-carboxilato de tert- butilo (338 mg, 0,614 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) y, a continuacion, se anadio lentamente HCL (solucion 4 M en dioxano) (2 ml, 8,00 mmol). El recipiente de reaccion se sello y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 15 h, tiempo durante el cual se formo un precipitado de color amarillo. La mezcla de reaccion se concentro en vado a 55°C y se trituro con eter diefflico para dar una goma de color amarillo. La goma se disolvio de nuevo en metanol y se sometio a destilacion azeotropica con eter dietflico para dar el compuesto del titulo como un solido pegajoso de color amarillo (298 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 1,03 min; MH+ 451

Intermedio 27: 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(4-(4-isopropilpiperazin-1-il)butil)-5H-pirrolo[3,2-d1pirimidin-4-amina

A una suspension agitada de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(4-(piperazin-1-il)butil)-5H-pirrolo[3,2-d]-pirimidin-4-amina (227 mg, 0,466 mmol), trietilamina (0,071 ml, 0,513 mmol) y tamices moleculares 4A en diclorometano anhidro (15 ml) se anadio acetona (0,05 ml, 0,681 mmol) seguido de triacetoxiborohidruro sodico (198 mg, 0,932 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1,5 horas. A la reaccion se anadio acetona adicional (0,05 ml, 0,681 mmol) y trietilamina adicional (0,035 ml, 0,256 mmol) y la reaccion se agito a 40°C durante 1 h. La reaccion se agito durante 45 minutos adicionales antes de anadir acetona adicional (0,05 ml, 0,681 mmol) y triacetoxiborohidruro sodico adicional (100 mg, 0,46 mmol) y la agitacion a 40°C continuo durante 16 h. A la reaccion se anadio acetona adicional (0,05 ml, 0,681 mmol) y triacetoxiborohidruro sodico adicional (100 mg, 0,46 mmol) y la agitacion a 40°C continuo durante 2 h. La mezcla de reaccion se diluyo con DCM (35 ml) y se filtro a traves de una almohadilla de celite. La torta de filtracion se lavo con DCM (10 ml), los filtrados combinados se lavaron con bicarbonato sodico acuoso saturado (50 ml). La capa organica se seco usando una frita hidrofoba y se concentro en vado. La muestra se disolvio en diclorometano y se purifico mediante cromatograffa sobre un cartucho de sflice funcionalizado con aminopropilo (20 g) usando un gradiente de 0-100% de acetato de etilo-ciclohexano durante 40 minutos. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para dar el compuesto del titulo como una goma incolora (57 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 1,14 min; MH+ 493

Ejemplo de preparacion

Ejemplo 1: 2-butil-7-(5-(piperazin-1-il)pentil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina

imagen23

Se paso 4-(5-(4-amino-5-((benciloxi)metil)-2-butil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-7-il)pent-4-in-1-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo (80 mg, 0,143 mmol) en etanol (15 ml) a traves del cubo H, (ajustes: 45°C, hidrogeno completo, caudal 1 ml/min y paladio al 10% sobre carbono CatCart30 como catalizador). La solucion se paso de nuevo por el cubo H (ajustes: 45°C, hidrogeno completo, caudal 1 ml/min). La solucion se evaporo en vado para dar un solido de color blanco.

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El solido se disolvio en MeOH:DMSO (1:1) (1 ml) y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para dar un solido de color blanco (37 mg). El solido se disolvio en metanol anhidro (2,5 ml) y cloruro de hidrogeno 4 M en 1,4-dioxano (0,5 ml 2 mmol) y se agito a temperature ambiente durante 17 horas. La reaccion se evaporo hasta la sequedad bajo una corriente de nitrogeno para dar un aceite de color amarillo. El aceite se disolvio en MeOH:DMSO (1:1) (1 ml) y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron en vado para producir el compuesto del titulo como un aceite incoloro (26 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 0,80 min; MH+ 345

Ejemplo 2: 2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1-il)pentil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina

imagen24

5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1 -il)pent-1 -in-1 -il)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina (77 mg, 0,153 mmol) en etanol (20 ml) a traves del cubo H (ajustes: 45°C, hidrogeno completo, caudal 1 ml/min y paladio al 10% sobre carbono CatCart30 como el catalizador). Se inserto un nuevo cartucho de paladio al 10% sobre carbono CatCart30 en el cubo H y la solucion se volvio a pasar a traves del cubo H (ajustes: 45°C, hidrogeno completo, caudal 1 ml/min). La solucion se evaporo en vado para dar un solido de color blanco. El solido se disolvio en MeOH:DMSO (1:1) (1 ml) y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). La fraccion apropiada se evaporo en vado para producir el compuesto del titulo como un solido de color blanco (21 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 0,90 min; MH+ 387

Ejemplo 3: 2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1-il)pentil)-6-metil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina

imagen25

Una solucion de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1-il)pent-1-in-1-il)-6-metil-5H-pirrolo[3,2-d] pirimidin - 4-amina (61 mg, 0,118 mmol) en metanol (15 ml) se paso tres veces a traves del cubo H (ajustes: 40°C, hidrogeno completo, caudal 1 ml/min y paladio al 10% sobre carbono CatCart30 como el catalizador). La solucion se evaporo en vado para producir 29 mg de un solido de color amarillo palido. El producto bruto se disolvio en 1 ml de DMSO/MeOH 50:50 y se purifico mediante MDAP (Procedimiento B). Las fracciones que conteman el producto se concentraron para dar el compuesto del titulo como un solido de color blanco (14 mg).

LCMS (Sistema B): tRET = 0,93 min; MH+ 401

5

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15

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imagen26

Preparado de manera similar al Ejemplo 3 a partir de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(5-(4-etMpiperazin-1 -il)pent-1 -in-1 -il)-6- metil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina.

LCMS (Sistema B): tRET = 0,91 min; MH+ 387

Ejemplo 5: 2-butil-7-(3-(piperazin-1-il)propil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina

imagen27

Preparado de manera similar al Ejemplo 1 a partir de 5-((bencNoxi)metN)-2-butN-7-(5-(4-etNpiperazin-1-il)pent-1-in-1-N)-6- metil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina. LCMS (Sistema B): tRET = 0,68 min; MH+ 317

Ejemplo 6: 2-butil-7-(3-(4-etilpiperazin-1-il) propil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina

imagen28

Preparado de manera similar al Ejemplo 1 a partir de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(3-(4-etilpiperazin-1-il) prop-1 -in-1 -il)-5H- pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina.

LCMS (Sistema B): tRET = 0,72 min; MH+ 345

Ejemplo 7: 2-butil-7-(4-(4-isopropilpiperazin-1-il)butil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina

5

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40

45

imagen29

Preparado de manera similar al Ejemplo 3 a partir de 5-((benciloxi)metil)-2-butil-7-(4-(4-isopropilpiperazin-1 -il) butil)-5H- pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina LCMS (Sistema B): tRET = 0,85 min; MH+ 373

Evaluacion Bioloaica

Los compuestos de la invencion se ensayaron para determinar la actividad biologica in vitro segun el siguiente ensayo. Ensayo para la induccion de interferon-a y TNF-a usando sanare entera humana fresca (WB)

Preparacion de compuestos

Los compuestos se prepararon a 100x de la concentracion requerida en DMSO en placas de microtitulacion de fondo plano a un volumen de 1,5 pl. Las columnas 1-10 conteman una dilucion en serie de 1 en 4 del compuesto de ensayo. Se incluyo en cada placa una dilucion en serie del agonista TLR7/8 resiquimod como estandar y la columna 11 contema 1,5 pl de resiquimod 200 pM (dando una concentracion final de 2 pM, usada para definir la respuesta maxima aproximada al resiquimod). Cada compuesto se ensayo por duplicado para cada donante.

Incubacion y ensayos para interferon-a y TNF-a

Se recogieron muestras de sangre de tres donantes humanos en heparina sodica (10 U/ml). Se dispensaron 150 jl de sangre entera en las Col 1 a 11 de las placas de ensayo que conteman 1,5 jl de compuesto de ensayo o estandar en DMSO. Las placas se colocaron en una incubadora durante la noche (37°C, 95% de aire, 5% de CO2). Despues de la incubacion durante la noche, las placas se retiraron de la incubadora y se mezclaron en un agitador orbital durante aproximadamente 1 minuto. Se anadieron 100 jl de solucion salina al 0,9% a cada pocillo y las placas se mezclaron de nuevo en un agitador orbital. A continuacion, las placas se centrifugaron (2.500 rpm, 10 min), despues de lo cual se retiro una muestra de plasma usando un Biomek FX y se ensayo tanto para IFN-a como para TNF-a usando la plataforma de ensayo de electroquimioluminiscencia MSD (Mesoscale Discovery). El ensayo de IFN-a se llevo a cabo de manera similar a la descrita anteriormente. El ensayo de TNF-a se llevo a cabo segun las instrucciones del kit (N° de cat. K111BHB).

La citoquina liberada se expreso como un porcentaje del control de resiquimod 2 jm (columna 11). Este porcentaje se represento en funcion de la concentracion del compuesto y el valor pEC50 para la respuesta determinada por ajuste de curvas de mmimos cuadrados no lineal. Para las respuestas IFN-a, generalmente se selecciono un modelo logfstico de 4 parametros. Para las respuestas de TNF-a en las que se obtuvo una respuesta maxima clara (es decir, se observo una meseta bien definida en la respuesta), se uso generalmente un modelo de 4 parametros. Si la asmtota superior de la curva no estaba bien definida, entonces el ajuste de la curva se limito generalmente a una respuesta maxima del 100% (es decir, a la respuesta a 2 pM de resiquimod) o a la respuesta de la concentracion mas alta ensayada si esta era mayor que la respuesta con resiquimod. Algunas curvas teman forma de campana para una o ambas citoquinas y los datos de citoquinas en la pendiente descendente de la respuesta con forma de campana (es decir, concentraciones por encima de aquellas que dan la respuesta maxima) fueron generalmente excluidos del ajuste, normalmente con la exception de la concentracion inmediatamente por encima del pico de respuesta. De esta manera, el ajuste de la curva se concentro en la pendiente ascendente de la curva de respuesta a la dosis.

Resultados

Los Ejemplos 1 a 7 teman un valor pEC50 medio para IFN-a de > 5,8.

Los Ejemplos 1 a 7 teman un valor pECsg medio para TNF-a de < 5,3.

Claims (15)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de formula (I), o una sal del mismo:

   imagen1

   en la que:

   R1 es n-alquilo C3-6;

   R2 es hidrogeno o metilo;

   R3 es hidrogeno o alquilo C-i-a; m es un numero entero que tiene un valor de 1 a 4.
2. 2. Compuesto segun la reivindicacion 1, o una sal del mismo, en el que R1 es n-butilo.
3. 3. Compuesto segun la reivindicacion 1 o la reivindicacion 2, o una sal del mismo, en el que R2 es hidrogeno.
4. 4. Compuesto segun la reivindicacion 1 o la reivindicacion 2, o una sal del mismo, en el que R2 es metilo.
5. 5. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-4, o una sal del mismo, en el que m es un numero entero que tiene un valor de 1, 2, 3 o 4.
6. 6. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-5, o una sal del mismo, en el que m es un numero entero que tiene un valor de 1 o 3.
7. 7. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-6, o una sal del mismo, en el que R3 es isopropilo o etilo.
8. 8. Compuesto segun la reivindicacion 1, o una sal del mismo, seleccionado de entre el grupo que consiste en:

   2-butil-7-(5-(piperazin-1-il)pentil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

   2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1-il)pentil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

   2-butil-7-(5-(4-isopropilpiperazin-1-il)pentil)-a-metil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

   2-butil-7-(5-(4-etilpiperazin-1-il)pentil)-a-metil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

   2-butil-7-(3-(piperazin-1-il)propil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina,

   2-butil-7-(3-(4-etilpiperazin-1 -il)propil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina; y. 2-butil-7-(4-(4-isopropilpiperazin-1-il)butil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina.
9. 9. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-8, que esta en forma de una sal farmaceuticamente aceptable.
10. 10. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-8, que esta en forma de una base libre.
11. 11. Composicion farmaceutica que comprende un compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-8, o una sal

    farmaceuticamente aceptable del mismo, y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables.
12. 12. Composicion de vacuna que comprende un compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-8, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un antigeno o una composicion de antigeno.
13. 13. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-8, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su

    5 uso en terapia.
14. 14. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-8, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de enfermedades alergicas y otras afecciones inflamatorias, enfermedades infecciosas y cancer.
15. 15. Uso de un compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-8, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de enfermedades alergicas y otras afecciones

    10 inflamatorias, enfermedades infecciosas y cancer.