TWI558709B - Pyrrolopyrimidine ring compounds, their use and pharmaceutical compositions - Google Patents

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吡咯并嘧啶環化合物、其用途及藥物組合物
本發明關於新穎的作為TLR7促效劑的吡咯并嘧啶環化合物或其藥學上可接受的鹽,具體關於式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽。
Toll樣受體表達於複數種免疫細胞。Toll樣受體識別高度保守結構基序(motif):由微生物病原體表達的病原體相關的微生物模式(PAMP)或由壞死細胞釋放的損傷相關分子模式(DAMP)。通過相應的病原體相關的微生物模式(PAMP)或損傷相關分子模式(DAMP)刺激Toll樣受體引發信號級聯導致轉錄因子如AP-1、NF-κ B和干擾素調節因子(脈衝回應函數)的啟動。這導致複數種細胞反應,包括生產干擾素、促炎性細胞因子和效應細胞因子,從而產生免疫反應。迄今為止,哺乳動物中有13種Toll樣受體已被發現。Toll樣受體1、2、4、5和6主要表達在細胞表面上,Toll樣受體3、7、8和9表達在內體中。不同的 Toll樣受體識別不同病原體衍生的配體。對於Toll樣受體7(TLR7),它主要是由漿細胞樣樹突細胞(pDC)表達和配體識別而誘導干擾素-α(IFN-α)的分泌。Toll樣受體7(TLR7)和Toll樣受體8(TLR8)高度同源。因此TLR7配體在大多數情況下也是TLR8配體。TLR8刺激主要誘導產生細胞因子如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和趨化因子。干擾素α是治療慢性乙型肝炎或丙型肝炎的主要藥物之一,而TNF-α是一種促炎細胞因子,過多分泌可能導致嚴重的副作用。所以對TLR7和TLR8的選擇性對於開發TLR7促效劑用於治療病毒感染性疾病至關重要。幾個TLR7促效劑已有報導,如咪喹莫特、瑞喹莫德、GS-9620。但具備更好的選擇性、活性和安全性的新的TLR7促效劑仍然有很大需求。我們發現了一系列的新穎的吡咯并嘧啶衍生物是TLR7的促效劑。背景研發資料參照如下的期刊文章:Hoffmann,J.A.,Nature,2003,426,p33-38;Akira,S.,Takeda,K.,and Kaisho,T.,Annual.Rev.Immunology,2003,21,335-376;Ulevitch,R.J.,Nature Reviews:Immunology,2004,4,512-520;Coffman,R.L.,Nat.Med.2007,13,552-559;Paul A.Roethle,J.Med.Chem.2013,56(18),7324-7333。
本發明的目的在於提供一種式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽,
式中,L1、L2分別獨立地選自-O-、-CH2-、-S-、-NH-、-NHC(=O)-、-C(=O)-、-C(=O)NH-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-或-S(=O)2NH-,其中上述之-CH2-、-NH-、-NHC(=O)-、-C(=O)NH-、-NHS(=O)2-或-S(=O)2NH-任選被一種或複數種R4取代;R1選自氫、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10環烴基、3-10員雜環烴基、芳基、雜芳基,其中上述之C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10環烴基、3-10員雜環烴基、芳基、雜芳基任選被一種或複數種R4取代;R2選自氫、鹵素、氰基、羥基、巰基、胺基、COOH、-CONH2、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10環烴基、3-10員雜環烴基、芳基、雜芳基,其中上述之羥基、巰基、胺基、COOH、-CONH2、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10環烴基、3-10員雜環烴基、芳基、雜芳基任選被一種或複數種R4取代;B選自C3-10環烴基、3-10員雜環烴基、芳基、雜芳基;L3選自C0-6亞烷基、亞胺基、-O-、-S-、-S(=O)-或-S(=O)2-,其中上述之C0-6亞烷基、亞胺基任選被一種或複數種R4取代;R3選自氫、胺基、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10環烴 基、3-10員雜環烴基、芳基、雜芳基,其中上述之胺基、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10環烴基、3-10員雜環烴基、芳基、雜芳基任選被一種或複數種R4取代;或R3、L3與B環上鄰位原子一起形成飽和或不飽和的5-8員環,上述之5-8員環任選被一種或複數種R4取代;n為0、1、2、3、4或5;R4選自鹵素、氰基、-R、-OR、=O、-SR、-NR2、=NR、-C(鹵素)3、-CR(鹵素)2、-CR2(鹵素)、-OCN、-SCN、-N=C=O、-NCS、-NO、-NO2、-NRC(=O)R、-NRC(=O)OR、-NRC(=O)NRR、-C(=O)NRR、-C(=O)OR、-OC(=O)NRR、-OC(=O)OR、-C(=O)R、-S(=O)2OR、-S(=O)2R、-OS(=O)2OR、-S(=O)2NRR、-S(=O)R、-NRS(=O)2R、-NRS(=O)2NRR、-NRS(=O)2OR、-OP(=O)(OR)2、-P(=O)(OR)2、-C(=O)R、-C(=S)R、-C(=O)OR、-C(=S)OR、-C(=O)SR、-C(=S)SR、-C(=O)NRR、-C(=S)NRR、-C(=NR)NRR或-NRC(=NR)NRR;R獨立地選自H、C1-8烷基、C3-8環烴基、3-8員雜環烴基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基;並且,當L1為-CH2-或-NH-時,R3不為H。
在式(I)化合物的一些實施方案中,L1、L2分別獨立地選自-O-、-CH2-、-S-、-NH-、-C(=O)-、-S(=O)-或-S(=O)2-,其中上述之-CH2-、-NH-任選被一種或複數種R4取代。在式(I)化合物的一些實施方案中,L1、L2分別獨立地選自-O-、-CH2-、-S-、-NH-,其中上述之-CH2-、-NH-任選被一種或複數種R4取代。在式(I)化合物的一些實施方案中,L1、L2分別獨立地選自-O-、-CH2-,其中上述之-CH2-任選被一種或複數種R4取代。
在式(I)化合物的一些實施方案中,R1選自氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6環烴基、3-6員雜環烴基、芳基、雜芳基,其中上述之C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6環烴基、3-6員雜環烴基、芳基、雜芳基任選被一種或複數種R4取代。在式(I)化合物的一些實施方案中,R1選自C1-6烷基,其中上述之C1-6烷基任選被一種或複數種R4取代。
在式(I)化合物的一些實施方案中,R2選自氫、鹵素、氰基、羥基、巰基、胺基、CHO、COOH、-CONH2、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6環烴基、3-6員雜環烴基、芳基、雜芳基,其中上述之羥基、巰基、胺基、CHO、COOH、-CONH2、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6環烴基、3-6員雜環烴基、芳基、雜芳基任選被一種或複數種R4取代。在式(I)化合物的一些實施方案中,R2選自氫、鹵素、氰基、羥基、胺基、-CONH2、C1-6烷基,其中上述之羥基、胺基、-CONH2、C1-6烷基任選被一種或複數種R4取代。在式(I)化合物的一些實施方案中,R2選自氫、氰基、-CONH2,其中上述之-CONH2任選被一種或複數種R4取代。
在式(I)化合物的一些實施方案中,B選自芳基、雜芳基。在式(I)化合物的一些實施方案中,B選自5-7員芳基、5-7員雜芳基。在式(I)化合物的一些實施方案中,B選自苯基、吡啶基嘧啶基、縫嗪基(pyridazinyl)、吡嗪基(pyrazine)、噻吩基、噻唑基、呋喃基、噁唑基(Oxazole)、噻二唑基、異噁唑基、噁二唑基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、異噻唑基、三唑基。在式(I)化合物的一些實施方案中,B選自苯基、吡啶基。
在式(I)化合物的一些實施方案中,L3選自C0-6亞烷基,其中上 述之C0-6亞烷基任選被一種或複數種R4取代。
在式(I)化合物的一些實施方案中,R3選自氫、胺基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8環烴基、3-8員雜環烴基、芳基、雜芳基,其中上述之胺基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8環烴基、3-8員雜環烴基、芳基、雜芳基任選被一種或複數種R4取代;或R3、L3與B環上鄰位原子一起形成飽和或不飽和的5-8員環,上述之5-8員環任選被一種或複數種R4取代。在式(I)化合物的一些實施方案中,R3選自氫、胺基、C1-6烷基、C3-8環烴基、3-8員雜環烴基、芳基、雜芳基,其中上述之胺基、C1-6烷基、C3-8環烴基、3-8員雜環烴基、芳基、雜芳基任選被一種或複數種R4取代;或R3、L3與B環上鄰位原子一起形成飽和或不飽和的5-8員環,上述之5-8員環任選被一種或複數種R4取代。
在式(I)化合物的一些實施方案中,R4選自鹵素、氰基、-R、-OR、=O、-SR、-NR2、=NR、-C(鹵素)3、-CR(鹵素)2、-CR2(鹵素)、-OCN、-SCN、-N=C=O、-NCS、-NO、-NO2、-NRC(=O)R、-C(=O)NRR、-C(=O)OR、-OC(=O)NRR、-C(=O)R、-S(=O)2OR、-S(=O)2R、-OS(=O)2OR、-S(=O)2NRR、-S(=O)R、-NRS(=O)2R、-C(=O)R、-C(=O)OR或-C(=O)NRR。在式(I)化合物的一些實施方案中,R4選自鹵素、氰基、-R、-OR、=O、-NR2、=NR、-C(鹵素)3、-CR(鹵素)2、-CR2(鹵素)。在式(I)化合物的一些實施方案中,R4選自鹵素、-R、-OR、=O。
在一些實施方案中,式(I)化合物選自以下化合物:
本發明另一方面提供了一種治療病毒感染的方法,該方法包括給予治療有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽。
本發明的另一個方面提供了一種式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽在製備治療病毒感染的藥物的用途。
在本發明的一些實施方案中,該病毒感染是登革熱病毒、黃熱病毒、西尼祿病毒、日本腦炎病毒、蜱傳腦炎病毒、昆津病毒、墨累山谷腦炎病毒、聖路易腦炎病毒、鄂木斯克出血熱病毒、牛病毒性腹瀉病毒、濟卡病毒、肝炎病毒感染。在本發明的一個實施方案中,該病毒感染是肝炎病毒感染。在本發明的一個實施方案中,該病毒感染是乙型或丙型肝炎病毒感染。
本發明的另一方面提供了一種藥物組合物,其包含治療有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽;和一種或複數種藥學上可接受的載體或賦形劑。本發明的藥物組合物可以進一步含有一種或複數種額外的治療劑。
本發明的藥物組合物可通過將本發明的化合物或其鹽與適宜的藥學上可接受的載體組合而製備,例如可配製成固態、半固態、液態或氣態製劑,如片劑、丸劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、膏劑、乳劑、懸浮劑、溶液劑、栓劑、注射劑、吸入劑、凝膠劑、微球及氣溶膠等。
給予本發明的化合物或其藥物可接受的鹽或其立體異構體或其藥物組合物的典型途徑包括但不限於口服、直腸、透黏膜、經腸給 藥,或者局部、經皮、吸入、腸胃外、舌下、陰道內、鼻內、眼內、腹膜內、肌內、皮下、靜脈內給藥。
本發明的藥物組合物可以採用本領域眾所周知的方法製造,如常規的混合法、溶解法、製粒法、製糖衣藥丸法、磨細法、乳化法、冷凍乾燥法等等。
對於口服給藥,可以通過將活性化合物與本領域熟知的藥學上可接受的載體混合來配製該藥物組合物。這些載體能使本發明的化合物被配製成片劑、丸劑、錠劑、糖衣劑、膠囊劑、液體、凝膠劑、漿劑、懸浮劑等,用於對患者的口服給藥。
可以通過常規的混合、填充或壓片方法來製備固體口服組合物。例如,可通過下述方法獲得:將所述的活性化合物與固體賦形劑混合,任選地碾磨所得的混合物,如果需要則加入其它合適的輔劑,然後將該混合物加工成顆粒,得到了片劑或糖衣劑的核心。適合的輔料包括但不限於:黏合劑、稀釋劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、甜味劑或矯味劑等。如微晶纖維素、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠溶液、蔗糖和澱粉糊;滑石、澱粉、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸;乳糖、蔗糖、澱粉、甘露糖醇、山梨糖醇或磷酸二鈣;二氧化矽;交聯羧甲基纖維素鈉、預交化澱粉、澱粉羥乙酸鈉、藻酸、玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、甲基纖維素、瓊脂、羧甲基纖維素、交聯聚乙烯吡咯烷酮等。可以根據通常藥物實踐中公知的方法任選地對糖衣劑的核心進行包衣,尤其使用腸溶包衣。
藥物組合物還可適用於腸胃外給藥,如合適的單位劑型的無菌溶液劑、混懸劑或凍乾產品。能夠使用適當的賦形劑,例如填充劑、緩衝劑或表面活性劑。
本文所述的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽可以通過任何適用的途徑和方法給藥,例如通過口服或腸胃外(例如,靜脈內)給藥。式(I)化合物的治療有效量為從約0.0001到20mg/Kg體重/天,例如從0.001到10mg/Kg體重/天。
式(I)化合物的劑量頻率由患者個體的需求決定,例如,每天1次或2次,或每天更多次。給藥可以是間歇性的,例如,其中在若干天的期間內,患者接受式(I)化合物的每日劑量,接著在若干天或更多天的期間,患者不接受式(I)化合物的每日劑量。
有關定義:
除非另有說明,本文所用的下列術語和短語具有下列含義。一個特定的術語或短語在沒有特別定義的情況下不應該被認為是不確定的或不清楚的,而應該按照普通的含義去理解。當本文中出現商品名時,意在指代其對應的商品或其活性成分。
術語“任選”或“任選地”是指隨後描述的事件或情況可能發生或可能不發生,該描述包括發生所述事件或情況和不發生所述事件或情況。例如,乙基“任選”被鹵素取代,指乙基可以是未被取代的(CH2CH3)、單取代的(如CH2CH2F)、多取代的(如CHFCH2F、CH2CHF2等)或完全被取代的(CF2CF3)。本領域技術人員可理解,對於包含一個或多個取代基的任何基團,不會引入任何在空間上不可能存在和/或不能合成的取代或取代模式。
本文所用的Cm-n指該部分中具有m-n個碳原子。例如,“C3-10環烷基”指該環烷基具有3-10個碳原子。“C0-6亞烷基”指該亞烷基具有0-6個碳原子,當亞烷基具有0個碳原子時,該基團為鍵。
本文中的數字範圍,是指給定範圍中的各個整數。例如“C1-10” 是指該基團可具有1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子、6個碳原子、7個碳原子、8個碳原子、9個碳原子或10個碳原子。
術語“被取代”是指特定原子上的任意一個或多個氫原子被取代基取代,只要特定原子的價態是正常的並且取代後的化合物是穩定的。當取代基為酮基(即=O)時,意味著兩個氫原子被取代,酮取代不會發生在芳香基上。
當任何變數(例如R)在化合物的組成或結構中出現一次以上時,其在每一種情況下的定義都是獨立的。因此,例如,如果一個基團被0-2個R所取代,則所述基團可以任選地至多被兩個R所取代,並且每種情況下的R都有獨立的選項。此外,取代基及/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。
除非另有規定,術語“雜”表示雜原子或雜原子團(即含有雜原子的原子團),即碳和氫以外的原子或含有這些原子的原子團,雜原子獨立地選自氧、氮、硫、磷、矽、鍺、鋁、硼。在出現兩個或更多雜原子的實施方式中,所述兩個或更多雜原子可彼此相同,或者所述兩個或更多雜原子中的部分或全部彼此不同。
術語“鹵”或“鹵素”是指氟、氯、溴和碘。
術語“羥基”指-OH基團。
術語“氰基”指-CN基團。
術語“巰基”指-SH基團。
術語“胺基”指-NH2基團。
術語“烷基”是指由碳原子和氫原子組成的直鏈或支鏈的飽和的 脂肪烴基團,其通過單鍵與分子的其餘部分連接。烷基的非限制性實例包括但不限於甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、異丁基、第三-丁基、正-戊基、2-甲基丁基、新戊基、正己基、2-甲基己基、-CH2-環丙基等。
術語“亞烷基”是指飽和的直鏈或支鏈或環狀烴基,其具有2個從母體烷的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生出的殘基。亞烷基的非限制性實例包括但不限於亞甲基(-CH2-)、1,1-亞乙基(-CH(CH3)-)、1,2-亞乙基(-CH2CH2-)、1,1-亞丙基(-CH(CH2CH3)-)、1,2-亞丙基(-CH2CH(CH3)-)、1,3-亞丙基(-CH2CH2CH2-)、1,4-亞丁基(-CH2CH2CH2CH2-)等。
術語“亞胺基”指-NH-。
術語“烯基”是指由碳原子和氫原子組成的直鏈或支鏈的具有至少一個雙鍵的不飽和脂肪族烴基。烯基的非限制性實例包括但不限於乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、異丁烯基、1,3-丁二烯基等。
術語“炔基”是指由碳原子和氫原子組成的直鏈或支鏈的具有至少一個三鍵的不飽和脂肪族烴基。炔基的非限制性實例包括但不限於乙炔基(-C≡CH)、1-丙炔基(-C≡C-CH3)、2-丙炔基(-CH2-C≡CH)、1,3-丁二炔基(-C≡C-C≡CH)等。
術語“環烴基”是指由碳原子和氫原子組成的飽和的或不飽和的非芳香性的環狀烴基,較佳包含1或2個環。所述環烴基可以是單環、稠合多環、橋環或螺環結構。環烴基的非限制性實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、雙環[2.2.1]庚基和螺[3.3]庚基等。
術語“雜環烴基”是指無芳香性的單環、稠合多環、橋環或螺環體系基團,其中部分環原子是選自N、O、S(O)n(其中n為0、1或2)的雜原子,其餘環原子為C。這樣的環可以是飽和的或不飽和的(例如具有一個或多個雙鍵),但是不具有完全共軛的π-電子體系。3員雜環烴基的實例包括但不限於環氧乙烷基、環硫乙烷基、環氮乙烷基,4員雜環烴基的實例包括但不限於吖丁啶基、噁丁環基、噻丁環基,5員雜環烴基的實例包括但不限於四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯烷基、異噁唑烷基、噁唑烷基、異噻唑烷基、1,1-二氧代異噻唑烷基、噻唑烷基、咪唑烷基、四氫吡唑基、吡咯啉基、二氫呋喃基、二氫噻吩基,6員雜環烴基的實例包括但不限於呱啶基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、嗎啉基、哌嗪基、1,4-噻噁烷基、1,4-二氧六環基、硫代嗎啉基、1,2-、1,4-二噻烷基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、二氫吡喃基、四氫吡喃基、二氫噻喃基,7員雜環烴基的實例包括但不限於氮雜環庚烷基、氧雜環庚烷基、硫雜環庚烷基、氧雜氮雜雙環[2.2.1]庚基和氮雜螺[3.3]庚基等。
術語“芳基”是指具有共軛的π電子體系的全碳單環或稠合多環的芳香環基團。例如,芳基可以具有6-20個碳原子,6-14個碳原子或6-12個碳原子。芳基的非限制性實例包括但不限於苯基、萘基和蒽基等。
術語“雜芳基”是指單環或稠合多環體系,其中含有至少一個選自N、O、S的環原子,其餘環原子為C,並且具有至少一個芳香環。雜芳基的非限制性實例包括但不限於吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、喹啉基、異喹啉基、四唑基、三唑基、三嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚 基、異吲哚基等。
術語“藥學上可接受的”,是針對那些化合物、材料、組合物及/或劑型而言,它們在可靠的醫學判斷的範圍之內,適用於與人類和動物的組織接觸使用,而沒有過多的毒性、刺激性、過敏性反應或其它問題或併發症,與合理的利益/風險比相稱。
作為藥學上可接受的鹽,例如,可以提及金屬鹽、銨鹽、與有機鹼形成的鹽、與無機酸形成的鹽、與有機酸形成的鹽、與鹼性或者酸性胺基酸形成的鹽等。金屬鹽的非限制性實例包括但不限於鹼金屬的鹽,例如鈉鹽、鉀鹽等;鹼土金屬的鹽,例如鈣鹽、鎂鹽、鋇鹽等;鋁鹽等。與有機鹼形成的鹽的非限制性實例包括但不限於與三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、2,6-二甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、環己胺、二環己基胺等形成的鹽。與無機酸形成的鹽的非限制性實例包括但不限於與鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等形成的鹽。與有機酸形成的鹽的非限制性實例包括但不限於與甲酸、乙酸、三氟乙酸、富馬酸、草酸、蘋果酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸、甲磺酸、苯磺酸、對甲基苯磺酸等形成的鹽。與鹼性胺基酸形成的鹽的非限制性實例包括但不限於與精胺酸、離胺酸、鳥胺酸等形成的鹽。與酸性胺基酸形成的鹽的非限制性實例包括但不限於與天冬胺酸、麩胺酸等形成的鹽。
本發明的藥學上可接受的鹽可由含有酸根或鹼基的母體化合物通過常規化學方法合成。一般情況下,這樣的鹽的製備方法是:在水或有機溶劑或兩者的混合物中,經由游離酸或鹼形式的這些化合物與化學計量的適當的鹼或酸反應來製備。一般地,較佳為醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈等非水介質。
本發明的某些化合物可以以非溶劑化形式或者溶劑化形式存在,包括水合物形式。一般而言,溶劑化形式與非溶劑化的形式相當,都包含在本發明的範圍之內。本發明的某些化合物可以以多晶或無定形形式存在。
本發明的某些化合物可以具有不對稱碳原子(光學中心)或雙鍵。外消旋體、非對映異構體、幾何異構體和單個的異構體都包括在本發明的範圍之內。
本文中消旋體、兩可非外消旋(ambiscalemic)及非外消旋(scalemic)或者對映異構體純的化合物的圖示法來自Maehr,J.Chem.Ed.1985,62:114-120。除非另有說明,用楔形鍵和虛線鍵表示一個立體中心的絕對構型。當本文所述化合物含有烯屬雙鍵或其它幾何不對稱中心,除非另有規定,它們包括E、Z幾何異構體。同樣地,所有的互變異構形式均包括在本發明的範圍之內。
本發明的化合物可以存在特定的幾何或立體異構體形式。本發明設想所有的這類化合物,包括順式和反式異構體、(-)-和(+)-對對映異構體、(R)-和(S)-對映異構體、非對映異構體、(D)-異構體、(L)-異構體,及其外消旋混合物和其他混合物,例如對映異構體或非對映異構體富集的混合物,所有這些混合物都屬於本發明的範圍之內。烷基等取代基中可存在另外的不對稱碳原子。所有這些異構體以及它們的混合物,均包括在本發明的範圍之內。
可以通過的手性合成或手性試劑或者其他常規技術製備光學活性的(R)-和(S)-異構體以及DL異構體。如果想得到本發明某化合物的一種對映異構體,可以通過不對稱合成或者具有手性助劑的衍生作用來製備,其中將所得非對映異構體混合物分離,並且輔助基 團裂開以提供純的所需對映異構體。或者,當分子中含有鹼性官能團(如胺基)或酸性官能團(如羧基)時,與適當的光學活性的酸或鹼形成非對映異構體的鹽,然後通過本領域所公知的分步結晶法或色譜法進行非對映異構體拆分,然後回收得到純的對映異構體。此外,對映異構體和非對映異構體的分離通常是通過使用色譜法完成的,所述色譜法採用手性固定相,並任選地與化學衍生法相結合(例如由胺生成胺基甲酸鹽)。
本發明的化合物可以在一個或多個構成該化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如,可用放射性同位素標記化合物,比如氚(3H)、碘-125(125I)或C-14(14C)。本發明的化合物的所有同位素組成的變換,無論放射性與否,都包括在本發明的範圍之內。
術語“藥學上可接受的載體”是指對有機體無明顯刺激作用,而且不會損害該活性化合物的生物活性及性能的那些載體。“藥學上可接受的載體”是指與活性成份一同給藥的、有利於活性成份給藥的惰性物質,包括但不限於國家食品藥品監督管理局許可的可接受的用於人或動物(例如家畜)的任何助流劑、增甜劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、矯味增強劑、表面活性劑、潤濕劑、分散劑、崩解劑、助懸劑、穩定劑、等滲劑、溶劑或乳化劑。所述載體的非限制性實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖和各類澱粉、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇等。關於載體的其他資訊,可以參考Remington:The Science and Practice of Pharmacy,21st Ed.,Lippincott,Williams & Wilkins(2005),該文獻的內容通過引用的方式併入本文。
術語“賦形劑”通常是指配製有效的藥物組合物所需要載體、稀釋劑及/或介質。
針對藥物或藥理學活性劑而言,術語“有效量”或“治療有效量”是指無毒的但能達到預期效果的藥物或藥劑的足夠用量。對於本發明中的口服劑型,組合物中一種活性物質的“有效量”是指與該組合物中另一種活性物質聯用時為了達到預期效果所需要的用量。有效量的確定因人而異,取決於受體的年齡和一般情況,也取決於具體的活性物質,個案中合適的有效量可以由本領域技術人員根據常規試驗確定。
術語“活性成分”、“治療劑”,“活性物質”或“活性劑”是指一種化學實體,它可以有效地治療目標紊亂、疾病或病症。
本發明的化合物可以通過本領域技術人員所熟知的複數種合成方法來製備,包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本領域技術上人員所熟知的等同替換方式,較佳的實施方式包括但不限於本發明的實施例。
本發明具體實施方式的化學反應是在合適的溶劑中完成的,所述的溶劑須適合於本發明的化學變化及其所需的試劑和物料。為了獲得本發明的化合物,有時需要本領域技術人員在已有實施方式的基礎上對合成步驟或者反應流程進行修改或選擇。
本領域任何合成路線規劃中的一個重要考量因素是為反應性官能團(如本發明中的胺基)選擇合適的保護基。對於經過訓練的從業者來說,Greene and Wuts的Protective Groups In Organic Synthesis,Wiley and Sons,1991是這方面的權威。本發明引用的所有參考文獻整體上併入本發明。
本發明通式(II)的化合物可以由有機合成領域技術人員通過下述路線1用本領域的標準方法來製備:
通用流程1
從2,4-二氯-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(1-1)(商品化試劑)出發,用SEM保護,然後用NH3取代得到2-氯-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(1-2)。使用不同種類的醇(通式R1OH)、比如正丁醇,在鈉的作用下形成醇鈉,然後發生取代反應生成中間體(1-3)。然後與NBS反應,得到溴化物(1-4)。溴化物(1-4)在正丁基鋰作用下溴被交換成鋰鹽,然後與醛(R5選自甲醛基或任選帶有保護基的L3-R3)反應,得到仲醇(1-5)。仲醇(1-5)經過0-3步轉 化,然後用三氟乙酸、三乙基矽烷還原同時脫除保護基,生成最終產物(II)。
本發明通式(III)的化合物可以由有機合成領域技術人員通過下述路線2用本領域的標準方法來製備:
通用流程2
從按照路線1製備的中間體(2-1)(R6選自羧酸甲酯)出發,用NBS反應得到溴化物(2-2)。溴化物(2-2)進一步通過1到3步反應(比如用DIBAL-H還原成醛,然後與吡咯在甲醇溶劑中用NaBH3CN還原胺化)得到另一種溴化物(2-3)。溴化物(2-3)在Zn(CN)2/Zn/Pd2(dba)3/dppf/DMF條件下轉化成2-氰基化合物(2-4)。用三氟乙酸 脫除SEM得到最終產物(III)。
本領域技術人員應該知道,為了製備本發明化合物,反應路線1和2中反應步驟的順序可以是不同的,這也屬於本發明的範圍。
為清楚起見,發明進一步用實施例來闡述。但是實施例不局限於定義或者指定發明範圍。
本發明所使用的所有溶劑是市售的,無需進一步純化即可使用。反應一般是在惰性氮氣下、無水溶劑中進行的。質子核磁共振資料記錄在Bruker Avance III 400(400MHz)分光儀上,化學位移以四甲基矽烷低場處的(ppm)表示。質譜是在安捷倫1200系列加6110(&1956A)上測定。LC/MS或Shimadzu MS包含一個DAD:SPD-M20A(LC)和Shimadzu Micromass 2020檢測器。質譜儀配備有一個正或負模式下操作的電噴霧離子源(ESI)。
本發明採用下述縮略詞:aq代表含水的;SEMCl代表(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷;eq代表當量;1,3-DPPP代表1,3-雙(二苯基膦基)丙烷;DCM代表二氯甲烷;PE代表石油醚;DMF代表N,N-二甲基甲醯胺;NMP代表N-甲基吡咯烷酮;EtOAc代表乙酸乙酯;i-PrOH代表異丙醇;EtOH代表乙醇;MeOH是甲醇;THF代表四氫呋喃;BPO代表過氧苯甲醯;BOC代表第三丁氧羰基;HOAc為乙酸;NaCNBH3是氰基硼氫化鈉;LAH為氫化鋁鋰;9-BBN是9-硼二環壬烷;MsCl是甲磺醯氯;RT為室溫;O/N為過夜;Boc2O是二碳酸二第三丁酯;TFA為三氟乙酸;TFAA為三氟乙酸酐;TEA是三乙胺;DIBAL-H為二異丁基氫化鋁;NBS為溴代丁二醯胺;DPPF是1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵;Ph3P是三苯基膦;Pd(OAc)2是乙酸鈀;Pd(PPh3P)2CL2是雙(三苯基膦)氯化鈀;Pd2(dba)3是三(亞 苄基丙酮)二鈀;XANTPHOS是4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧雜蒽;n-BuLi是正丁基鋰。
化合物經手工或者ChemDraw®軟體命名,市售化合物採用供應商目錄名稱。
用配有ShimadzuSIL-20A自動進樣器和日本島津DAD:SPD-M20A探測器的島津LC20AB系統進行高效液相色譜分析,採用XtimateC18(3m填料,規格為2.1x300mm)色譜柱。0-60AB_6分鐘的方法:應用線性梯度,以100%A(A為0.0675%TFA的水溶液)開始洗脫,並以60%B(B為0.0625%TFA的MeCN溶液)結束洗脫,整個過程為4.2分鐘,然後以60%B洗脫1分鐘。將色譜柱再平衡0.8分鐘達到100:0,總執行時間為6分鐘。10-80AB_6分鐘的方法:應用線性梯度,以90%A(A為0.0675%TFA的水溶液)開始洗脫,並以80%B(B為0.0625%TFA的乙腈溶液)結束洗脫,整個過程為4.2分鐘,然後以80%B洗脫1分鐘。將色譜柱再平衡0.8分鐘達到90:10,總執行時間為6分鐘。柱溫為50℃,流速為0.8mL/min。二極體陣列檢測器掃描波長為200-400nm。
在Sanpont-group的矽膠GF254上進行薄層色譜分析(TLC),常用紫外光燈照射檢出斑點,在某些情況下也採用其他方法檢視斑點,在這些情況下,用碘(10g矽膠中加入約1g碘並徹底混合而成)、香草醛(溶解大約1g香草醛於100mL 10% H2SO4中製得)、茚三酮(從Aldrich購得)或特殊顯色劑(徹底混合(NH4)6Mo7O24˙4H2O、5g(NH4)2Ce(IV)(NO3)6、450mL H2O和50mL濃H2SO4而製得)展開薄層板,檢視化合物。採用Still,W.C.;Kahn,M.;and Mitra,M.Journal of Organic Chemistry,1978,43,2923-2925中所公開技術的類似方 法,在Silicycle的40-63μm(230-400目)矽膠上進行快速柱色譜。快速柱色譜或薄層色譜的常用溶劑是二氯甲烷/甲醇、乙酸乙酯/甲醇和己烷/乙酸乙酯的混合物。
在Gilson-281 Prep LC 322系統上採用吉爾森UV/VIS-156探測器進行製備色譜分析,所採用的色譜柱是Agella Venusil ASB Prep C18,5m、150×21.2mm;Phenomenex Gemini C18、5m、150×30mm;Boston Symmetrix C18,5m、150×30mm;或者Phenomenex Synergi C18、4m、150×30mm。在流速約為25mL/min時,用低梯度的乙腈/水洗脫化合物,其中水中含有0.05% HCl、0.25% HCOOH或0.5% NH3˙H2O,總執行時間為8-15分鐘。
圖1:HDI乙型肝炎感染小鼠模型體內藥效學試驗藥效結果(血漿)。
圖2:HDI乙型肝炎感染小鼠模型體內藥效學試驗藥效結果(肝臟)。
下面的具體實施例,其目的是使本領域的技術人員能更清楚地理解和實施本發明。它們不應該被認為是對本發明範圍的限制,而只是本發明的示例性說明和典型代表。
實施例1 2-丁氧基-7-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
反應流程:
實施例1流程
步驟A:將2,4-二氯-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(4克,21.4毫莫耳)溶解在無水四氫呋喃(30mL)中,然後在0攝氏度向其中分批加入氫化鈉(1.03克,60%的礦物油混合物,25.6毫莫耳)。反應液在室溫下攪拌30分鐘,將(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(3.9克,23.5毫莫耳)逐滴加入。室溫下再攪拌2小時,然後,用水(120毫升)稀釋,並用乙酸乙酯(100毫升×2)萃取。將合併的有機層用飽和碳酸鈉水溶液和鹽水洗滌,用無水硫酸鈉乾燥,並減壓濃縮。殘餘物用矽膠柱純化(洗脫劑:乙酸乙酯/石油醚5%至10%),得到2,4-二氯-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(5.8克,85%),為黃色固體。
MS(ESI)M/Z:318[M+H+]。
步驟B:在1000毫升高壓反應器中,將2,4-二氯-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶(5克,15.8毫莫耳)、異丙醇(15毫升)和氨水(250毫升)混合,在100-110攝氏度下攪拌3小時。在冷卻到室溫後,將該混合物用水稀釋(250毫升)並過濾,得到2-氯-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(4克,85%),無需進一步純化。
MS(ESI)M/Z:299[M+H+]。
步驟C:將2-氯-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(4克,13.4毫莫耳)和丁醇鈉(5.15克,53.6毫莫耳)溶於正丁醇(55毫升)。混合物在氮氣保護下加熱到100攝氏度,攪拌8小時。在冷卻到室溫後,將該混合物用水稀釋(200毫升),用乙酸乙酯(100毫升×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌,用無水硫酸鈉乾燥,並減壓濃縮。將殘餘物用矽膠柱層析純化(洗脫劑:乙酸乙酯/石油醚15%至25%),得到2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(4.1克,91%),為黃色固體。
MS(ESI)M/Z:337[M+H+]。
步驟D:將2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(4克,12毫莫耳)溶解在無水四氫呋喃(40mL中。把NBS(2.2克,12.5毫莫耳)配成無水四氫呋喃的飽和溶液,在20分鐘內低於0攝氏度下加入到上述溶液中。加完後,該反應混合物在0攝氏度下攪拌30分鐘,然後用鹽水(150毫升)稀釋,並用乙酸乙酯(100毫升×3)萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。將殘餘物用矽膠柱層析純化(洗脫劑:乙酸乙酯/石油醚5%至 15%)得到7-溴-2-丁氧基-5-(2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(3.85克,78%),為白色固體。
MS(ESI)M/Z:415,417[M+H+]。
步驟E:在-78攝氏度,向攪拌的7-溴-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(3克,7.25毫莫耳)的無水四氫呋喃(40毫升)溶液中在氮氣保護下加入正丁基鋰(2.5M,12毫升,30毫莫耳)。將反應混合物在-78攝氏度下攪拌1小時。然後,將間苯二甲醛(1.26克,9毫莫耳)的無水四氫呋喃(5毫升)溶液緩慢加入。此混合物在-78攝氏度下再攪拌30分鐘後,倒入飽和氯化銨水溶液(15毫升)中,並用乙酸乙酯(60毫升×2)萃取。將合併的有機層減壓濃縮,殘餘物經製備型HPLC純化,得到3-((4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(羥基)甲基)苯甲醛鹽共1.1克。
MS(ESI)M/Z:471[M+H+]。
步驟F:在0攝氏度下,向正在攪拌的3-((4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(羥基)甲基)苯甲醛(200毫克,0.43毫莫耳)和1-甲基哌嗪(87毫克,0.87毫莫耳)的乙醇(2.5毫升)的溶液中分批加入氰基硼氫化鈉(40毫克,0.64毫莫耳)。該反應混合物在室溫下攪拌2小時,然後用水(10ml)稀釋,並用乙酸乙酯(15毫升×2)萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥並在減壓濃縮,得到粗品(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)甲醇,直接用於下一步。
MS(ESI)M/Z:555[M+H+]。
步驟G:向正在攪拌的(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)甲醇(100毫克)的三氟乙酸(2毫升)溶液中分批加入三乙基矽烷(0.4毫升)。此反應混合物在55攝氏度在氮氣保護下攪拌1小時,並減壓濃縮。將殘餘物溶解在無水碳酸鉀(100毫克)的甲醇(5毫升)溶液中。此混合物於50℃再攪拌30分鐘並過濾。將濾液在減壓下濃縮,殘餘物經製備HPLC純化,得到36毫克2-丁氧基-7-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺三氟乙酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.33-7.21(m,4H),4.55(t,J=6.8Hz,2H),4.01(s,2H),3.67(s,2H),3.29-3.24(m,4H),2.87-2.80(m,7H),1.87-1.80(m,2H),1.56-1.49(m,2H),1.02(t,J=6.8Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:409[M+H+]。
實施例2 2-丁氧基-7-(3-(嗎啉代甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例1,在步驟F中用嗎啉替代1-甲基哌嗪,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(3-(嗎啉代甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:542[M+H+]。
步驟B:根據實施例1,用步驟G中所用的方法製得2-丁氧基-7-(3-(嗎啉代甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.41(s,2H),7.35-7.24(m,5H),4. 49(t,J=6.8Hz,2H),4.03(s,2H),3.82(s,2H),3.77-3.75(m,4H),2.77-2.73(m,4H),1.83-1.79(m,2H),1.55-1.49(m,2H),1.01(t,J=6.8Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:396[M+H+]。
實施例3 7-(3-(胺基甲基)苄基)-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例1,在步驟F中用乙酸銨替代1-甲基哌嗪,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(3-(胺基甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:472[M+H+]。
步驟B:根據實施例1,用步驟G中所用的方法製備7-(3-(胺基甲基)苄基)-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.31-7.15(m,4H),7.06(s,1H),4.32(t,J=6.6Hz,2H),4.00(s,2H),3.80(s,2H),1.79-1.73(m,2H),1.56-1.50(m,2H),1.01(t,J=7.4Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:326[M+H+]。
實施例4 2-丁氧基-7-(3-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4胺
步驟A:根據實施例1,在步驟F中用吡咯烷替代1-甲基哌嗪,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(3-(吡咯烷-1-基甲基)苯基)甲醇。
步驟B:根據實施例1,用步驟G中所用的方法製得2-丁氧基-7-(3-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.50(s,2H),7.41-7.28(m,5H),4.45(t,J=6.8Hz,2H),4.31(s,2H),4.06(s,2H),3.31-3.29(m,4H),2.10-2.07(m,4H),1.81-1.76(m,2H),1.54-1.49(m,2H),1.01(t,J=6.8Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:380[M+H+]。
實施例5 2-丁氧基-7-(4-((3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲基)苄基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例1,在步驟E中用對苯二甲醛替代間苯二甲醛,製備4-((4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(羥基)甲基)苯甲醛。
LCMS(ESI)m/z:471[M+H+]。
步驟B:根據實施例1,在步驟F中用3,3-二氟吡咯烷替代1-甲基哌嗪,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:562[M+H+]。
步驟C:根據實施例1,用步驟G中所用的方法製備2-丁氧基-7-(4-((3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.28-7.15(m,4H),7.04(s,1H),4.30(t,J=6.4Hz,2H),3.97(s,2H),3.59(s,2H),2.88-2.71(m,4H),2.30-2.19(m,2H),1.78-1.71(m,2H),1.55-1.46(m,2H),0.98(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:416[M+H+]。
實施例6 2-丁氧基-7-(4-((3-氟吡咯烷-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用3-氟吡咯烷替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((3-氟吡咯烷-1-基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:544[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C中所用的方法製備2-丁氧基-7-(4-((3-氟吡咯烷-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.30-7.24(m,4H),7.06(s,1H),5.24-5.08(m,1H),4.32(t,J=6.4Hz,2H),3.99(s,2H),3.69-3.57(m,2H),2.88-2.65(m,4H),2.45-2.43(m,1H),2.25-2.11(m,1H),2.02-1.91(m,1H),1.78-1.73(m,2H),1.57-1.50(m,2H),1.01(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:398[M+H+]。
實施例7 1-(4-((4-胺基-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)苄基)吡咯烷-3-醇
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用吡咯烷-3-醇替代3,3-二氟吡咯烷,製備1-(4-((4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(羥基)甲基)苄基)吡咯烷-3-醇。
LCMS(ESI)m/z:542[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製得1-(4-((4-胺基-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)苄基)吡咯烷-3-醇甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.43(s,2H),7.45-7.39(m,4H),7.25(s,1H),4.53(m,1H),4.44-4.27(m,2H),4.04(s,2H),3.54-3.47(m,1H),3.38-3.36(m,4H),3.22-3.19(m,1H),2.28-2.24(m,1H),2.05-2.01(m,1H),1.82-1.76(m,2H),1.56-1.50(m,2H),1.01(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:396[M+H+]。
實施例8 2-丁氧基-7-(4-(呱啶-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用呱啶替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-(呱啶-1-基甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:540[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製備2-丁氧基-7-(4-(呱啶-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.28(d,J=8.0Hz,2H),7.22(d,J=8.0Hz,2H),7.04(s,1H),4.30(t,J=6.6Hz,2H),3.98(s,2H),3.47(s,2H),2.42(s,4H),1.77-1.73(m,2H),1.60-1.57(m,4H),1.52-1.46(m,4H),0.99(t,J=7.4Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:394[M+H+]。
實施例9 2-丁氧基-7-(4-(嗎啉代甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用嗎啉替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-(嗎啉代甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:542[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製備2-丁氧基-7-(4-(嗎啉代甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.28(d,J=8.0Hz,2H),7.22(d,J=8.0Hz,2H),7.03(s,1H),4.29(t,J=6.6Hz,2H),3.96(s,2H),3.67-3.64(m,4H),3.46(s,2H),2.43(s,4H),1.77-1.72(m,2H),1.55-1.45(m,2H),0.98(t,J=7.4Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:396[M+H+]。
實施例10 2-丁氧基-7-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用1-甲基哌嗪替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:555[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製備2-丁氧基-7-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.29(d,J=8.0Hz,2H),7.22(d,J=8.0Hz,2H),7.04(s,1H),4.31(t,J=6.6Hz,2H),3.97(s,2H),3.50(s,2H),2.49-2.26(m,11H),1.79-1.72(m,2H),1.56-1.47(m,2H),0.99(t,J=7.4Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:409[M+H+]。
實施例11 2-丁氧基-7-(4-((二甲基胺基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用二甲基胺替代3,3-二氟代吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲 基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((二甲基胺基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:500[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製備2-丁氧基-7-(4-((二甲基胺基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.48(s,2H),7.41(s,4H),7.26(s,1H),4.43(t,J=6.8Hz,2H),4.22(s,2H),4.06(s,2H),2.79(s,6H),1.79(m,J=6.8Hz,2H),1.55-1.49(m,2H),1.01(t,J=6.8Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:354[M+H+]。
實施例12 2-丁氧基-7-(4-((二乙基胺基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5製備,在步驟B中用二乙胺代3,3-二氟代吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((二乙基胺基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:528[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製得2-丁氧基-7-(4-((二乙基胺基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.48(s,2H),7.42(s,4H),7.25(s,1H),4.41(t,J=6.8Hz,2H),4.28(s,2H),4.06(s,2H),3.20-3.15(m,4H),1.82-1.77(m,2H),1.55-1.49(m,2H),1.34(t,J=6.8Hz,6H),1.01(t,J=6.8Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:382[M+H+]。
實施例13 2-丁氧基-7-(4-((二丙基胺基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用二丙胺替代3,3-二氟代吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((二丙基胺基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:556[M+H+].
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製備2-丁氧基-7-(4-((二丙基胺基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.29-7.19(m,4H),7.04(s,1H),4.32(t,J=6.5Hz,1H),3.99(s,2H),3.55(s,2H),2.41-2.37(m,4H),1.78-1.74(m,2H),1.57-1.47(m,6H),1.00(t,J=7.4Hz,3H),0.87(t,J=7.4Hz,6H)。
MS(ESI)m/z:410[M+H+]。
實施例14 7-(4-(氮雜環丁烷-1-基甲基)苄基)-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用氮雜環丁烷替代3,3-二氟代吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-(氮雜環丁烷-1-基甲基)苯基)甲 醇。
LCMS(ESI)m/z:512[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製備7-(4-(氮雜環丁烷-1-基甲基)苄基)-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.28(d,J=8.0Hz,2H),7.18(d,J=8.0Hz,2H),7.04(s,1H),4.31(t,J=6.8Hz,2H),3.98(s,2H),3.59(s,2H),3.30-3.27(m,4H),2.15-2.10(m,2H),1.78-1.73(m,2H),1.56-1.52(m,2H),1.01(t,J=6.8Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:366[M+H+]。
實施例15 2-丁氧基-7-(4-((3-甲氧基氮雜環丁烷-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用3-甲氧基氮雜環丁烷替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((3-甲氧基氮雜環丁烷-1-基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:542[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製備2-丁氧基-7-(4-((3-甲氧基氮雜環丁烷-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.28(d,J=8.0Hz,2H),7.18(d,J=8.0Hz,2H),7.04(s,1H),4.31(t,J=6.8Hz,2H),4.06-4.04(m,1H),3.98(s,2H),3 .60(s,2H),3.54-3.52(m,2H),3.24(s,3H),3.04-3.02(m,2H),1.78-1.73(m,2H),1.56-1.52(m,2H),1.01(t,J=6.8Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:396[M+H+]。
實施例16 2-丁氧基-7-(4-((4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用1-甲基-1,4-二氮雜環庚烷替代3,3-二氟吡咯烷,製備((4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:569[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製得2-丁氧基-7-(4-((4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.41(s,3H),7.34-7.24(m,5H),4.52(t,J=6.8Hz,2H),3.99(s,2H),3.76(s,2H),3.38-3.36(m,2H),3.29-3.27(m,2H),2.95(s,2H),2.87-2.84(m,5H),2.07-2.05(m,2H),1.84-1.80(m,2H),1.55-1.49(m,2H),1.03-0.99(t,J=8.0Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:423[M+H+]。
實施例17 2-丁氧基-7-(4-((2,6-二甲基嗎啉基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用2,6-二甲基嗎啉替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((2,6-二甲基嗎啉基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:570[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製備2-丁氧基-7-(4-((2,6-二甲基嗎啉基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.30-7.28(d,J=8.0Hz,2H),7.23-7.21(d,J=8.0Hz,2H),7.06(s,1H),4.34-4.30(t,J=8.0Hz,2H),3.99(s,2H),3.69-3.64(m,2H),3.47(s,2H),2.73(d,J=12.0Hz,2H),1.77-1.70(m,4H),1.54-1.51(m,2H),1.11(d,J=10.4Hz,6H),1.00(t,J=8.0Hz,3H).
MS(ESI)m/z:424[M+H+]。
實施例18 7-(4-((1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-基甲基)苄基)-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用(1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙 環[2.2.1]庚烷替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-((1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-基甲基)苯基)(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:554[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製得7-(4-((1S,4S)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-基甲基)苄基)-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-D]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ:8.38(brs,2H),7.45(d,J=8.4Hz,2H),7.37(d,J=8.4Hz,2H),7.29(s,1H),4.66(s,1H),4.47(t,J=6.8Hz,2H),4.36-4.27(m,1H),4.24-4.23(m,2H),4.16-4.13(m,1H),4.04(s,2H),3.82-3.81(m,1H),3.33-3.31(m,2H),2.33-2.29(m,1H),2.14-2.11(m,1H),1.83-1.76(m,2H),1.56-1.48(m,2H),1.01(t,J=7.2Hz,3H).
MS(ESI)m/z:408[M+H+]。
實施例19 2-丁氧基-7-(4-((4-甲氧基呱啶-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用4-甲氧基呱啶替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((4-甲氧基呱啶-1-基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:570[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製得2-丁氧基-7-(4-((4-甲氧基呱啶-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ:8.45(s,2H),7.43-7.38(m,4H),7.28(s,1H),4.45(t,J=6.4Hz,2H),4.21(s,2H),4.05(s,2H),3.52-3.53(m,1H),3.33-3.39(m,3H),3.26-3.24(m,2H),3.13-3.10(m,2H),1.99-1.92(m,4H),1.84-1.77(m,2H),1.56-1.50(m,2H),1.01(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:424[M+H+]。
實施例20 2-丁氧基-7-(4-((4-異丙基哌嗪-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用1-異丙基哌嗪替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-((4-異丙基哌嗪-1-基)甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:583[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製得2-丁氧基-7-(4-((4-異丙基哌嗪-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,300MHz):δ:8.45(s,2H),7.31-7.25(m,5H),4.49(t,J=8.4Hz,2H),3.99(s,2H),3.64(s,2H),3.42-3.40(m,1H),3.21-3.25(m,4H),2.66-2.82(m,4H),1.84-1.79(m,2H),1.56-1.51(m,2H),1.35(d,J=8.8Hz,6H),1.04-0.99(t,J=10.0Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:437[M+H+]。
實施例21 2-丁氧基-7-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例5,在步驟B中用吡咯替代3,3-二氟吡咯烷,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(4-(吡咯烷-1-基甲基)苯基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:526[M+H+]。
步驟B:根據實施例5,用步驟C的方法製得2-丁氧基-7-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.41(s,2H),7.46(d,J=8.0Hz,2H),7.40(d,J=8.0Hz,2H),7.30(s,1H),4.48(t,J=6.8Hz,2H),4.33(s,2H),4.05(s,2H),3.32-3.30(m,4H),2.10-2.06(m,4H),1.83-1.89(m,2H),1.55-1.48(m,2H),1.02(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:380[M+H+]。
實施例22 2-丁氧基-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
6-(吡咯烷-1-基甲基)煙醛的製備路線:
步驟A:在室溫下,向6-甲基煙酸甲酯(10克,0.0662莫耳)在CCl4(100毫升)溶液中加入NBS(13.0克,0.0728莫耳)和BPO(1.6克,0.0066莫耳)。將反應混合物加熱至75℃並攪拌12小時。冷卻後,加入水(80毫升),並用乙酸乙酯(200毫升×2)萃取。將有機層依次用硫代硫酸鈉(80毫升)的飽和水溶液洗滌,用無水硫酸鈉乾燥,並減壓濃縮。殘餘物通過矽膠柱純化(洗脫劑:石油醚/乙酸乙酯=20/1),得到6-(溴甲基)煙酸甲酯(5.2克,產率34%),為棕色固體。
1 HNMR(CDCl 3 ,400MHz):δ9.18(d,J=1.6Hz,1H),8.32(dd,J 1 =8.0Hz,J 2 =2.0Hz,1H),7.55(d,J=8.0Hz,1H),4.60(s,2H),3.97(s,3H)。
MS(ESI)m/z:230,232[M+H+]。
步驟B:在0攝氏度下,向吡咯烷(3.09克,43.47毫莫耳)和三乙胺(3毫升,21.73毫莫耳)的無水四氫呋喃(100毫升)溶液中分批加入6-(溴甲基)煙酸甲酯(5.0克,21.73毫莫耳)。加完後,將該反應混合物在室溫下攪拌16小時,然後用水(80毫升)稀釋,並用乙酸乙酯(100毫升)萃取。將有機層用無水硫酸鈉乾燥,並減壓濃縮。殘餘物通過矽膠柱純化(洗脫劑:石油醚/乙酸乙酯=10/1),得到6-(吡咯烷-1-基甲基)煙酸甲酯(4.1克,產率86%),為棕色固體。
1 HNMR(CDCl 3 ,400MHz):δ9.11(d,J=2.0Hz,1H),8.22(dd,J 1 =8.0Hz ,J 2 =2.0Hz,1H),7.48(d,J=8.0Hz,1H),3.91(s,3H),3.81(s,2H),2.58-2.53(m,4H),1.81-1.77(m,4H)。
MS(ESI)m/z:221[M+H+]。
步驟C:在低於0℃下,向正在攪拌的6-(吡咯烷-1-基甲基)煙酸甲酯(3.0克,13.62毫莫耳)的無水四氫呋喃(70毫升)溶液中分批加入四氫鋰鋁(1.03克,27.24毫莫耳)。在大約0攝氏度反應2小時,並在室溫下進一步反應30分鐘。TLC顯示反應物消失。然後將該混合物冷卻至0℃,並非常緩慢地滴入水(1毫升)。然後,將15%的氫氧化鈉水溶液(1毫升)和外加水(3毫升)分別加入並劇烈攪拌。將所得混合物過濾。將濾液用無水Mg2SO4乾燥並減壓濃縮乾,得到(6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲醇(2.5克)。
1 HNMR(CDCl 3 ,400MHz):δ8.41(d,J=1.6Hz,1H),7.67(dd,J 1 =8.0Hz,J 2 =2.0Hz,1H),7.37(d,J=8.0Hz,1H),4.67(s,2H),3.75(s,2H),2.57-2.543(m,4H),1.81-1.76(m,4H)。
步驟D:將(6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲醇(2.5克,13毫莫耳)溶解在無水二氯甲烷(50毫升)中。將二氧化錳(5.0克,58毫莫耳)在0攝氏度下分批加入。將反應混合物在室溫下攪拌24小時,過濾。將濾液在真空下濃縮,殘餘物通過矽膠柱純化(洗脫劑:15%乙酸乙酯的石油醚溶劑),得到6-(吡咯烷-1-基甲基)煙醛(2.2克,粗品),為黃色油狀物。
LCMS(ESI)m/z:191[M+H+]。
2-丁氧基-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺的製備流程:
實施例22流程
步驟E:根據實施例1,在步驟E中用6-(吡咯烷-1-基甲基)煙醛替代間二苯甲醛,製備(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲醇。
LCMS(ESI)m/z:527[M+H+]。
步驟F:按照實施例1,用步驟G的方法製得2-丁氧基-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽,為白色固體。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.62(s,1H),8.40(brs,1H),7.77(d,J=8.0Hz,1H),7.40(d,J=8.0Hz,1H),7.35(s,1H),4.48(s,2H),4.45(t,J=6.4Hz,2H),4.08(s,2H),3.42-3.38(m,4H),2.13-2.10(m,4H),1.83-1.76(m,2H),1.5 5-1.49(m,2H),1.01(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:381[M+H+]。
實施例23 2-丁氧基-7-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
3-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯甲醛的製備路線:
步驟A:在氮氣保護下,將3-溴苯甲酸甲酯(17.0克,79.0毫莫耳)、三丁基(乙烯基)錫烷(33克,102毫莫耳)和Pd(PPh3)4(4.5克,4毫莫耳)的二噁烷(200毫升)溶液在110攝氏度下攪拌反應6小時,然後加10%的氟化鉀水溶液(100毫升)淬滅。將所得混合物在室溫下再攪拌10分鐘,並用乙酸乙酯(150毫升×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌,用無水硫酸鈉乾燥,並減壓濃縮。將殘餘物用矽膠柱 純化(洗脫劑:25%乙酸乙酯的石油醚溶液),得到約15克粗品3-乙烯基苯甲酸甲酯,為黃色油狀物。
MS(ESI)m/z:163[M+H+]。
步驟B:在氮氣氛圍下,向正在攪拌的3-乙烯基苯甲酸甲酯的無水四氫呋喃(100毫升)溶液中通過滴液漏斗加入9-BBN(0.5M,166毫升,83毫莫耳)並保持溫度低於-30攝氏度。加完後,將反應混合物升溫至室溫並攪拌16小時。然後冷卻至-30攝氏度,滴加H2O2的水溶液(品質比30%,19毫升),接著慢慢滴加15%氫氧化鈉水溶液(40毫升)。將所得混合物在環境溫度下再攪拌1小時後,加水(200毫升)稀釋,並用乙酸乙酯(200毫升×2)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌,用無水硫酸鈉乾燥,減壓濃縮得到約9克粗品3-(2-羥乙基)苯甲酸甲酯,為淡黃色油狀物,其直接用於下一步驟。
1 HNMR(CDCl 3 ,400MHz):δ7.92-7.90(m,2H),7.45-7.37(m,2H),3.92(s,3H),3.89(t,J=6.5Hz,2H),2.93(t,J=6.5Hz,2H)。
MS(ESI)m/z:181[M+H+]。
步驟C:在約0攝氏度下,向正在攪拌的3-(2-羥乙基)苯甲酸甲酯(10克)無水二氯甲烷(90mL)溶液中加入甲磺醯氯(34克,299毫莫耳)和三乙胺(12克,118毫莫耳)。反應物在0攝氏度下攪拌1小時,用水淬滅(50毫升),並用乙酸乙酯(100毫升×3)萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。將殘餘物用矽膠柱層析純化(洗脫劑:10%乙酸乙酯的石油醚溶液),得到2.7g的3-(2-((甲基磺醯基)氧基)乙基)苯甲酸甲酯,為無色油狀物。
MS(ESI)m/z:259[M+H+]。
步驟D:將吡咯烷(2.3克,31.3毫莫耳)和碳酸鉀(2.2克,16毫 莫耳)溶於無水乙腈(20毫升)并用10分鐘時間向其中加入3-(2-((甲基磺醯基)氧基)乙基)苯甲酸甲酯(2.7克,10.4毫莫耳)的乙腈(5毫升)溶液。將反應液在70℃攪拌16小時,冷卻到室溫後,用水(20毫升)稀釋,並用乙酸乙酯(20毫升×3)萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。將殘餘物用矽膠柱層析純化(洗脫劑:甲醇/二氯甲烷等於2%至5%),得到3-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯甲酸甲酯(1.7克,71%),為黃色油狀物。
MS(ESI)m/z:234[M+H+]。
步驟E:根據實施例22,用步驟C、D方法製備3-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯甲醛。
MS(ESI)m/z:204[M+H+]。
步驟F:根據實施例22,用步驟E、F方法製得2-丁氧基-7-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.42(s,2H),7.30-7.13(m,5H),4.38(t,J=6.4Hz,2H),4.01(s,1H),3.41(t,J=7.6Hz,2H),3.35-3.32(m,4H),3.01(t,J=7.6Hz,2H),2.09-2.05(m,4H),1.81-1.74(m,2H),1.57-1.48(m,2H),1.01(t,J=7.6Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:394[M+H+]。
實施例24 2-丁氧基-7-(4-(1-(吡咯烷-1-基)乙基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
4-(1-(吡咯烷-1-基)乙基)苯甲醛製備路線:
步驟A:在攪拌下,向4-氰基苯乙酮(4克,27.56毫莫耳)和吡咯烷(2.94克,41.33毫莫耳)的甲醇(100毫升)溶液中加入醋酸(0.5毫升)以及氰基硼氫化鈉(5.2克,82.67毫莫耳),並保持溫度低於0攝氏度。將反應物在室溫下攪拌16小時,然後減壓濃縮。將所得油狀物用矽膠柱層析純化(洗脫劑:石油醚/乙酸乙酯=1/3),得到2.8克4-(1-(吡咯烷-1-基)乙基)苄腈,為無色油狀物。
MS(ESI)m/z:201[M+H+]。
步驟B:在-20至-10攝氏度向4-(1-(吡咯烷-1-基)乙基)苄腈(2克,10毫莫耳)的無水甲苯(100毫升)溶液中加入DIBAL-H(1M,20毫升,20毫莫耳)的溶液並控制在1小時加完。將反應液再攪拌3小時,然後用氯化銨飽和水溶液淬滅,並用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機層,用無水硫酸鈉乾燥,並減壓濃縮。將所得固體物用矽膠柱層析純化(洗脫劑:石油醚/乙酸乙酯=50/1至10/1),得到4-(1-(吡咯烷-1-基)乙基)苯甲醛(680毫克,33.5%),為無色油狀物。
(ESI)m/z:204[M+H+]。
步驟C:根據實施例22,用步驟E、F的方法製得2-丁氧基 -7-(4-(1-(吡咯烷-1-基)乙基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.50(s,2H),7.44-7.38(m,4H),7.27(s,1H),4.45(t,J=6.4,2H),4.33-4.28(m,1H),4.04(s,2H),3.37-3,33(m,2H),3.14-3.11(m,2H),2.04-2.02(m,4H),1.83-1.78(m,2H),1.72-1.70(m,3H),1.55-1.49(m,2H),1.01(t,J=7.4,3H)。
MS(ESI)m/z:394[M+H+]。
實施例25 2-丁氧基-7-(4-(1-甲基呱啶-4-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
4-(4-甲醯基苯基)呱啶-1-甲酸第三丁酯的製備路線:
步驟A:將4-溴吡啶(3.0克,19.0毫莫耳)、(4-(甲氧羰基)苯基)硼酸(2.63克,14.6毫莫耳)、Pd(PPh3)2Cl2(0.35克,0.5毫莫耳)和碳酸鈉(6.91克,65.2毫莫耳)的1,2-二甲氧基乙烷(40毫升)混合物在氮 氣氣氛下加熱至90℃並攪拌10小時。將所得混合物減壓濃縮,殘餘物通過矽膠柱層析純化(洗脫劑:石油醚/乙酸乙酯=6/1至2/1),得到4-(吡啶-4-基)苯甲酸甲酯(2.7克,收率:86.8%),為白色固體。
MS(ESI)m/z:214[M+H+]。
步驟B:向4-(吡啶-4-基)苯甲酸甲酯(3.8克,17.8毫莫耳)和PtO2(0.2克)的甲醇(40毫升)溶液中加入2毫升鹽酸,加熱到約50攝氏度,在氫氣氛圍下(50psi)攪拌16小時。將所得混合物過濾,濾液減壓濃縮,得到粗品4-(呱啶-4-基)苯甲酸甲酯(4.0克),為鹽酸鹽,無需進一步純化。
MS(ESI)m/z:220[M+H+]。
步驟C:向正在攪拌的4-(呱啶-4-基)苯甲酸甲酯(5.0克,22.8毫莫耳)和碳酸鉀(25.0克,182.2毫莫耳)的四氫呋喃(50毫升)/水(50毫升)混合溶液中分批加入二碳酸二第三丁酯(10.0克,45.8毫莫耳)並保持溫度低於10℃。加完後,將反應混合物在室溫下攪拌另外0.5小時,然後用水(50毫升)稀釋,並用乙酸乙酯(50毫升×2)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌,用無水硫酸鈉乾燥,並在真空下濃縮。殘餘物通過矽膠柱層析純化(洗脫劑:石油醚/乙酸乙酯=6/1至1/1),得到4-(4-(甲氧羰基)苯基)呱啶-1-甲酸第三丁酯(1.9克,收率:26.4%),為白色固體。
1 HNMR(CDCl 3 ,400MHz):δ7.98(d,J=8.4Hz,2H),7.28(d,J=7.6Hz,2H),4.27(s,1H),3.91(s,3H),2.84-2.68(m,3H),1.85(d,J=12.8Hz,2H),1.66-1.59(m,2H),1.49(s,9H)。
MS(ESI)m/z:320[M+H+]。
步驟D:根據實施例22,用步驟C、D的方法製備4-(4-甲醯基 苯基)呱啶-1-甲酸第三丁酯。
MS(ESI)m/z:312.1[M+Na+]。
步驟F:根據實施例22,用步驟E、F的方法製備2-丁氧基-7-(4-(呱啶-4-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
MS(ESI)m/z:380.2[M+H+]。
2-丁氧基-7-(4-(1-甲基呱啶-4-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺的製備:
步驟G:在攪拌5分鐘後,向2-丁氧基-7-(4-(呱啶-4-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100毫克,0.264毫莫耳)和HCHO(20毫克,0.666毫莫耳)的甲醇(5毫升)溶液中加入氰基硼氫化鈉(50毫克,0.796毫莫耳)。此反應物在室溫攪拌0.5小時,用水稀釋,並用乙酸乙酯萃取。將有機層在真空下濃縮,殘餘物經製備型HPLC純化,得到7.48毫克2-丁氧基-7-(4-(1-甲基呱啶-4-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol,400MHz):δ7.21(d,J=8.0Hz,2H),7.11(d,J=8.0Hz,2H),7.00(s,1H),4.32-4.28(m,2H),3.94(s,2H),3.00-2.97(m,2H),2.52-2.47(m,1H),2.32(s,3H),2.19-2.15(m,2H),1.80-1.72(m,6H),1.53-1.48(m,2H),0.98(t,J=7.4Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:394[M+H+]。
實施例26 2-丁氧基-7-(4-(1-甲基吡咯烷-2-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
2-(4-甲醯基苯基)吡咯烷-1-甲酸第三丁酯的製備路線:
步驟A:在N2氛圍、0攝氏度下,向NaH(446毫克,18.6毫莫耳)的無水四氫呋喃(20毫升)混合物中加入1-烯丙基-吡咯-2-酮(1.14克,9.11毫莫耳)。然後緩慢加入4-溴苯甲酸甲酯的無水四氫呋喃(10毫升)溶液。此混合物在90攝氏度下攪拌2小時,然後冷卻至室溫,用6N鹽酸稀釋。將所得混合物在110攝氏度下攪拌12小時,然後將水相用乙酸乙酯(50毫升)洗滌。用1N氫氧化鈉溶液鹼化,使pH約為9,再用乙酸乙酯(50毫升×2)萃取。將合併的有機層在真空下濃縮至乾,得到2.0克5-(4-溴苯基)-3,4-二氫-2H-吡咯,為黃色固體,將其直接用於下一步驟。
步驟B:在0攝氏度下,向正在攪拌的5-(4-溴苯基)-3,4-二氫-2H-吡咯(2.0克,9.0毫莫耳)甲醇(20毫升)溶液中慢慢地加入硼氫化鈉(684毫克,18.1毫莫耳)。加完後,將該反應混合物在室溫下攪拌1小時。TLC(石油醚/乙酸乙酯=2:1)顯示原料完全消耗。將得到的混合物用水稀釋(30毫升)。向上述步驟中的混合物加入碳酸鉀(1.51克,10.9毫莫耳)和Boc2O(2.3克,10.5毫莫耳)。將該混合物在20攝氏度下攪拌2小時後,薄層色譜板(展開劑:石油醚/乙酸乙酯=2/1)顯示起始物質被消耗完全。然後用乙酸乙酯(50毫升×2)萃取,萃取液減壓濃縮,用矽膠色譜純化殘餘物,得到2-(4-溴苯基)吡咯烷-1-甲酸第三丁酯(1.5克,收率:51.1%),為黃色固體。
步驟C:在氮氣氛圍、-78攝氏度下,向正在攪拌的2-(4-溴苯基)吡咯烷-1-甲酸第三丁酯(0.6克,1.839毫莫耳)的無水四氫呋喃(20毫升)溶液中加入n-BuLi(1.5毫升,2.76毫莫耳)。將反應混合物在-78攝氏度下攪拌30分鐘,然後將N,N-二甲基甲醯胺(192毫克,2.63毫莫耳)緩慢加入到混合物中。將所得混合物升溫至室溫,攪拌另外30分鐘,用3毫升碳酸氫鈉水溶液淬滅。用水稀釋(30毫升),並用乙酸乙酯(25毫升×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌,用硫酸鈉乾燥,過濾並減壓蒸乾。將殘餘物通過矽膠色譜純化(石油醚:乙酸乙酯=15:1至10:1),得到2-(4-甲醯基苯基)吡咯烷-1-甲酸第三丁酯(0.4g,收率:79.1%),為無色油。
MS(ESI)m/z:276.0[M+1+]。
2-丁氧基-7-(4-(吡咯烷-2-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]2嘧啶-4-胺的製備:步驟D:根據實施例22,用步驟E、F的方法製備2-丁氧基 -7-(4-(吡咯烷-2-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
MS(ESI)m/z:366.2[M+1+]。
2-丁氧基-7-(4-(1-甲基吡咯烷-2-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺的製備:步驟E:根據實施例25,用步驟G的方法製備2-丁氧基-7-(4-(1-甲基吡咯烷-2-基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.27(d,J=8.0Hz,2H),7.22(d,J=8.0Hz,2H),7.03(s,1H),4.30(t,J=7.4Hz,2H),3.97(s,2H),3.31-3.19(m,1H),3.07-3,03(m,1H),2.31-2.87(m,1H),2.18-2.15(m,1H),2.13(s,3H),1.89-1.72(m,5H),1.54-1.48(m,2H),0.98(t,J=7.4Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:380[M+1+]。
實施例27 1-(4-((4-胺基-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)苯基)-4-甲基哌嗪-2-酮
4-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)苯甲醛的製備:
步驟A:向4-溴-苯甲醛(1.8克,9.73毫莫耳)、4-甲基哌嗪-2-酮(1.44克,12.6毫莫耳)、Pd2(dba)3(768毫克,0.84毫莫耳)、 Xantphos(435毫克,0.75毫莫耳)和碳酸銫(5.48克,16.8毫莫耳)的二噁烷(30mL)溶液中加入水(1滴)。將混合物在氮氣氣氛、90攝氏度下攪拌1.5小時。冷卻後,將該混合物過濾。將濾液在真空下濃縮至乾,殘餘物通過矽膠色譜法純化,得到4-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)苯甲醛(1.8克,84.8%),為白色固體。
MS(ESI)m/z:219[M+H+]。
1-(4-((4-胺基-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)苯基)-4-甲基哌嗪-2-酮的製備:步驟B:根據實施例22,用步驟E、F的方法製備1-(4-((4-胺基-2-丁氧基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)苯基)-4-甲基哌嗪-2-酮。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz)δ7.36(s,1H),7.30(d,J=8.4Hz,2H),7.22(d,J=8.4Hz,2H),4.52(t,J=6.4Hz,2H),4.02(s,2H),3.72-3.69(m,2H),3.27(s,2H),2.89-2.86(m,2H),2.44(s,3H),1.83-1.79(m,2H),1.54-1.48(m,2H),1.00(t,J=7.4Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:409[M+H+]。
實施例28 2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
7-甲醯基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸第三丁酯的製備路線:
步驟A:在氮氣氣氛、0攝氏度下,向2-(4-溴苯基)乙胺(27克,0.13莫耳)和三乙胺(16.4克,0.16莫耳)的無水二氯甲烷(300毫升)溶液中滴加入三氟乙酸酐(34克,0.16莫耳)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時,然後用水稀釋。將有機層分離並在真空下濃縮至乾,得到N-(4-溴苯乙基)-三氟乙醯胺(37克,96.1%),為白色固體。
MS(ESI)m/z:296,298[M+H+]。
步驟B:向N-(4-溴苯乙基)-三氟乙醯胺(37克,0.12毫莫耳)的濃硫酸(200毫升)/乙酸(300毫升)攪拌懸浮液溶液中分批加入多聚甲醛(10.2克,0.34莫耳)。加完後,該反應混合物在室溫下攪拌12小時,然後倒入冰水(1升)中,用乙酸乙酯(400毫升×2)萃取。將合併的有機層依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌,用無水硫酸鎂乾燥,並減壓濃縮。將殘餘物用矽膠柱色譜法純化(洗脫劑:5%乙酸乙酯的石油醚溶液),得到1-(7-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-三氟乙酮(33克,89.3%)。
MS(ESI)m/z:308,310[M+H+]。
步驟C:向1-(7-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-三氟乙酮(30克,0.1莫耳)的無水甲基吡咯烷-2-酮(300毫升)溶液中加入氰化亞銅(18克,0.2莫耳)。將反應混合物在180攝氏度、氮氣氣氛下攪拌4小時。在冷卻到室溫後,將該混合物慢慢地倒入冰水(500毫升)中,並用乙酸乙酯(200毫升×2)萃取。將合併的有機層用水洗滌,經無水硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮,得到25克粗品2-三氟乙醯基-四氫異喹啉-7-甲腈,其直接用於下一步驟。
MS(ESI)m/z:255[M+H+]。
步驟D:將2-三氟乙醯基-四氫異喹啉-7-甲腈(25克,0.1莫耳)和碳酸鉀(25克,0.18莫耳)溶解在甲醇(300毫升)和水(60毫升)的混合溶劑中,在室溫下攪拌2小時。然後在10分鐘內將二碳酸二第三丁酯(26克,0.12莫耳)分批加入。將反應混合物在室溫下再攪拌4小時後,用水(200毫升)稀釋,並用乙酸乙酯(200毫升×2)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌,用無水硫酸鈉乾燥,並在真空下濃縮。將殘餘物用矽膠柱色譜法純化(洗脫劑:5%乙酸乙酯的石油醚溶液),得到7-氰基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸第三丁酯(14克,54%),為白色固體。
MS(ESI)m/z:259[M+H+]。
步驟E:在-10攝氏度、氮氣氣氛下,向7-氰基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸第三丁酯(1克,3.9毫莫耳)的無水四氫呋喃(20毫升)溶液中滴加二異丁基氫化鋁(1M,6毫升,6.0毫莫耳)。加完後,將反應混合物在0攝氏度下攪拌5小時,並用水(0.24毫升)淬滅。然後,將15%的氫氧化鈉水溶液(0.24毫升)加入,再加入0.6毫升水。將所 得混合物在室溫下進一步攪拌15分鐘後,用無水硫酸鎂乾燥並過濾。將濾液在真空下濃縮,殘餘物用矽膠柱色譜法純化(洗脫劑10%的乙酸乙酯石油醚溶液),得到7-甲醯基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-羧酸第三丁酯(700毫克,70%),為黃色油狀物。
MS(ESI)m/z:262[M+H+]。
2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺的製備:步驟F:根據實施例22,用步驟E、F的方法製得2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.49(s,2H),7.23-7.15(m,3H),7.10(s,1H),4.44(t,J=6.5Hz,2H),4.30(s,2H),3.98(s,2H),3.47(t,J=6.1Hz,2H),3.08(t,J=6.1Hz,2H),1.83-1.76(m,2H),1.55-1.49(m,2H),1.01(t,J=7.4Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:352[M+H+]。
實施例29 2-丁氧基-7-((2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
以2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺為原料,根據實施例25,用步驟G的方法製備2-丁氧基-7-((2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4- 胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.11-7.09(m,1H),7.03-7.00(m,3H),4.32(t,J=6.4Hz,2H),3.92(s,2H),3.55(s,2H),2.91-2.88(m,2H),2.73-2.71(m,2H),2.43(s,3H),1.80-1.73(m,2H),1.56-1.52(m,2H),1.01(t,J=7.6Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:366[M+H+]。
實施例30 2-丁氧基-7-((2-乙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
以2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺為原料,根據實施例25,用步驟G的方法製得2-丁氧基-7-((2-乙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.43(s,2H),7.25-7.18(m,3H),7.10(s,1H),4.45(t,J=6.4Hz,2H),4.34(s,2H),3.99(s,2H),3.51(t,J=6.0Hz,2H),3.32-3.26(m,2H),3.15(t,J=6.0Hz,2H),1.84-1.77(m,2H),1.58-1.48(m,2H),1.42(t,J=8.0Hz,3H),1.01(t,J=6.0Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:380[M+H+]。
實施例31 2-丁氧基-7-((2-異丙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
以2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺為原料,根據實施例25,用步驟G的方法製備2-丁氧基-7-((2-異丙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.10-7.08(m,1H),7.03-7.00(m,3H),4.32(t,J=6.4Hz,2H),3.93(s,2H),3.70(s,2H),2.90-2.86(m,3H),2.83-2.80(m,2H),1.80-1.73(m,2H),1.56-1.50(m,2H),1.17(d,J=6.4Hz,6H),1.01(t,J=7.6Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:394[M+H+]。
實施例32 2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
N-第三丁氧羰基1,2,3,4-四氫異喹啉-6-甲醛的製備路線:
步驟A:向6-溴異喹啉(10克,48毫莫耳)的N,N-二甲基甲醯胺/甲醇(V/V=1/1)(200毫升)混合溶液中加入乙酸鈉(5.0克,61毫莫耳)、三苯基膦(3.0克,11.4毫莫耳)和醋酸鈀(2.8克,12毫莫耳)。混合物處於通入有300千帕一氧化碳的高壓釜中,並加熱至100攝氏度。攪拌15小時後,通過LC-MS判定反應完成,其反應物通過矽藻土過濾(用乙酸乙酯洗脫)。將所得混合物濃縮,在減壓下將殘餘物通過矽膠柱色譜純化(洗脫劑:石油醚/乙酸乙酯=5/1)。得到異喹啉-6-羧酸甲酯(8.9克,收率:98%)。
MS(ESI)m/z:188[M+H+]。
步驟B:在氮氣保護下,向正在攪拌的異喹啉-6-羧酸甲酯(10克,53.5毫莫耳)的甲醇(100毫升)溶液中加乙酸(2毫升)和PtO2(200毫克)。在氫氣氣氛中,將該混合物在40攝氏度下攪拌反應3小時,然後將催化劑通過矽藻土過濾掉,並在真空下濃縮,得到1,2,3,4-四氫異喹啉-6-羧酸甲酯(9克,收率:88%)無需進一步純化。
MS(ESI)m/z:192[M+H+]。
步驟C:根據實施例25,用步驟C的方法製備N-第三丁氧羰基1,2,3,4-四氫異喹啉-6-羧酸甲酯。
MS(ESI)m/z:292[M+H+]。
步驟D:根據實施例22,用步驟C、D的方法製備N-第三丁氧羰基1,2,3,4-四氫異喹啉-6-甲醛。
MS(ESI)m/z:262[M+H+]。
2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺的製備:步驟E:根據實施例22,用步驟E、F的方法製備2-丁氧基 -7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.12-7.09(m,1H),7.08(s,1H),7.04(s,1H),6.96(d,J=7.6Hz,1H),4.32(t,J=7.4Hz,2H),3.98(s,2H),3.93(s,2H),3.13(t,J=6.2Hz,2H),2.85-2.82(m,2H),1.79-1.73(m,2H),1.58-1.48(m,2H),1.01(s,3H)。
MS(ESI)m/z:352[M+H+]。
實施例33 2-丁氧基-7-((2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
以2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺為原料,根據實施例25,用步驟G的方法製備2-丁氧基-7-((2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.10-7.09(m,2H),7.03(s,1H),6.96(d,J=8.4Hz,1H),4.32(t,J=6.6Hz,2H),3.93(s,2H),3.60(s,2H),2.92-2.89(m,2H),2.77-2.74(m,2H),2.46(s,3H),1.81-1.73(m,2H),1.58-1.48(m,2H),1.01(t,J=7.4Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:366[M+H+]。
實施例34 2-丁氧基-7-((2-乙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
以2-丁氧基-7-((1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺為原料,根據實施例25,用步驟G的方法製備2-丁氧基-7-((2-乙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.11-7.08(m,2H),7.03(s,1H),6.97(d,J=8.0Hz,1H),4.32(t,J=6.6Hz,2H),3.94(s,2H),3.63(s,2H),2.93-2.88(m,2H),2.79-2.76(m,2H),2.65-2.60(m,2H),1.79-1.75(m,2H),1.56-1.52(m,2H),1.21(t,J=7.2Hz,3H),1.01(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:380[M+H+]。
實施例35 7-苄基-2-(2-甲氧基乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
步驟A:根據實施例1,用步驟C、D、E的方法製備(4-胺基-2-(2-甲氧基乙氧基)-5-((2-(三甲基矽基乙基)-5H-吡咯[3,2-d]嘧啶-7-基)(苯基)甲醇。
MS(ESI)m/z:445[M+H+]。
步驟B:根據實施例1,用步驟G的方法製得7-苄基-2-(2-甲氧基乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.39(s,1H),7.29-7.19(m,6H),4.61-4.58(m,2H),4.00(s,1H),3.79-3.76(m,2H),3.42(s,3H)。
MS(ESI)m/z:299[M+H+]。
實施例36 2-(2-甲氧基乙氧基)-7-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
根據實施例35,用步驟A、B的方法製得2-(2-甲氧基乙氧基)-7-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.34(s,3H),7.66(dd,J=2.4Hz/J=8.0Hz,1H),7.31(s,1H),7.24(d,J=8.0Hz,1H),4.57-4.55(m,2H),4.01(s,2H),3.77-3.75(m,2H),3.41(s,3H),2.51(s,3H)。
MS(ESI)m/z:314[M+H+]。
實施例37 7-((5-氯吡啶-2-基)甲基)-2-(2-甲氧基乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
根據實施例35,用步驟A、B的方法製得7-((5-氯吡啶-2-基)甲基)-2-(2-甲氧基乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.45(s,1H),8.40(s,1H),7.77(dd,J=2.4Hz/J=8.0Hz,1H),7.38(d,J=8.0Hz,1H),7.32(s,1H),4.52(t,J=4.0Hz,2H),4.17(s,2H),3.75(t,J=4.0Hz,2H),3.42(s,3H)。
MS(ESI)m/z:334[M+H+]。
實施例38 2-(2-甲氧基乙氧基-)-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
根據實施例35,用步驟A、B的方法製得2-(2-甲氧基乙氧基)-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.62(s,1H),8.41(s,2H),7.79-7.76(m,1H),7.36(d,J=8.4Hz,1H),7.28(s,1H),4.49-4.44(m,4H),4.05(s,2H),3.74-3.72(m,2H),3.39(s,3H),3.33-3.30(m,4H),2.10-2.07(m,4H)。
MS(ESI)m/z:383[M+H+]。
實施例39 1-(4-((4-胺基-2-(2-甲氧基乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)苯基)-4-甲基哌嗪-2-酮
根據實施例35,用步驟A、B的方法製備1-(4-((4-胺基-2-(2-甲氧基乙氧基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)苯基)-4-甲基哌嗪-2-酮。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.35(s,1H),7.31(d,J=8.4Hz,2H) ,7.22(d,J=8.4Hz,2H),4.65-4.62(m,2H),4.01(s,2H),3.77-3.76(m,2H),3.70-3.67(m,2H),3.35(s,3H),3.32-3.28(m,2H),2.90-2.88(m,2H),2.45(s,3H)。
MS(ESI)m/z:411[M+H+]。
實施例40 2-丁氧基-7-((5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-2-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺
根據實施例22的流程,製得2-丁氧基-7-((5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-2-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺甲酸鹽。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.61(s,1H),8.46(brs,2H),7.91(d,J=8.0Hz,1H),7.47(d,J=7.6Hz,1H),7.37(s,1H),4.44(t,J=6.4Hz,2H),4.35(s,2H),4.22(s,2H),3.33-3.27(m,4H),2.09-2.06(m,4H),1.83-1.76(m,2H),1.57-1.50(m,2H),1.01(t,J=7.6Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:381[M+H+]。
實施例41 4-胺基-2-丁氧基-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
實施例41流程:
實施例41流程
步驟A:在氮氣氛、-78℃下,向7-溴-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(10.00克,24.07毫莫耳)的無水四氫呋喃(200毫升)溶液中加入n-BuLi(6.17克,96.28毫莫耳)。將混合物在-78℃下攪拌1小時。然後將6-氯煙醛(10.22克,72.21毫莫耳)的四氫呋喃(200毫升)溶液逐滴加入。將反應混合物在-78℃下再攪拌1小時,慢慢地倒入水(150毫升)中,在室溫下攪拌20分鐘,然後用乙酸乙酯(100毫升×3)萃取。將合併的有機相用飽和鹽水(50毫升×2)洗滌,經無水硫酸鈉乾燥,過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠色譜法純化(洗離線:石油醚/乙酸乙酯=5/1到1/3),得到(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(6-氯吡啶-3-基)甲醇(5.00克,43.45%),為黃色固體。
1 HNMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.52(d,J=2.3Hz,1H),7.87 (dd,J=2.4,8.2Hz,1H),7.34(d,J=8.0Hz,1H),6.65(s,1H),6.14(s,1H),5.97(br.s.,2H),5.39-5.26(m,2H),4.31(t,J=6.7Hz,2H),3.62-3.49(m,2H),1.86-1.71(m,2H),1.51(qd,J=7.5,14.9Hz,2H),1.28(t,J=7.2Hz,1H),1.06-0.87(m,5H),0.00(s,9H)。
MS(ESI)m/z:478[M+H+]。
步驟B:在室溫下,向(4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)(6-氯吡啶吡啶-3-基)甲醇(5.00克,10.46毫莫耳)的三氟乙酸(50毫升)溶液中分批加入三乙基矽烷(6.08克,52,30毫莫耳)。將反應混合物在環境溫度下攪拌24小時,倒入碳酸氫鈉飽和水溶液(150毫升),並進一步攪拌20分鐘,然後用乙酸乙酯(100毫升×3)萃取。將合併的有機相用鹽水(20毫升×2)洗滌,經無水硫酸鈉乾燥,過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠色譜法(洗脫劑:石油醚/乙酸乙酯=3/1)純化,得到2-丁氧基-7-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(2.30克,47.59%),為黃色固體。
1 HNMR(300MHz,CHLOROFORM-d)δ8.52(d,J=2.3Hz,1H),7.88(dd,J=2.4,8.1Hz,1H),7.35(d,J=8.3Hz,1H),6.64(s,1H),6.14(s,1H),5.89(br.s.,2H),5.40-5.23(m,2H),4.31(t,J=6.6Hz,2H),3.66-3.47(m,2H),1.88-1.70(m,2H),1.60-1.46(m,2H),1.07-0.82(m,5H),0.00(s,9H)。
MS(ES1)m/z:462[M+H+]。
步驟C:向2-丁氧基-7-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-D]嘧啶-4-胺(2.30克,4.98毫莫耳)的N,N-二甲基甲醯胺(15毫升)溶液中加入醋酸鈀(111.75毫克,0.5毫莫耳)、1,3-雙二苯基膦丙烷(205.30毫克,0.5毫莫耳)、三乙胺(1.51 克,14.93毫莫耳)和甲醇(797.43毫克,24.89毫莫耳)。將懸浮液抽真空,充一氧化碳數次。將混合物加熱到100攝氏度,在一氧化碳氣氛(3兆帕)下攪拌24小時。薄層色譜板(展開劑:石油醚/乙酸乙酯=1/1)檢測顯示原料完全消耗。過濾掉不溶物,並濃縮。將粗產物經矽膠色譜法純化(洗脫劑:用石油醚/乙酸乙酯=1/1),得到5-((4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡啶甲酸甲酯(1.10克,45.48%),為黃色固體。
1 HNMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.76(d,J=1.8Hz,1H),8.06(d,J=8.0Hz,1H),7.85(dd,J=2.0,8.0Hz,1H),6.82(s,1H),5.71(br.s.,2H),5.35(s,2H),4.33(t,J=6.5Hz,2H),4.19-4.08(m,3H),4.00(s,3H),3.60-3.51(m,2H),1.85-1.74(m,2H),1.53(qd,J=7.4,15.0Hz,2H),1.28(t,J=7.2Hz,2H),1.02-0.90(m,5H),0.00(s,9H)。
MS(ESI)m/z:486[M+H+]。
步驟D:在低於0攝氏度下,向5-((4-胺基-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡啶甲酸甲酯(800.00毫克,1.65毫莫耳)的四氫呋喃(10毫升)溶液中分批加入溴代丁二醯胺(293.18毫克,1.65毫莫耳)。將反應混合物在0攝氏度下攪拌1小時,用水(30毫升)稀釋並用二氯甲烷(20毫升×2)萃取。將合併的有機相用硫酸鎂乾燥並在真空下濃縮。殘餘物通過製備薄層色譜板純化,得到5-((4-胺基-6-溴-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡啶甲酸甲酯(160.00毫克,17.18%),為黃色固體。
1HNMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.83(s,1H),8.03(d,J=8.0Hz,1H),7.86(d,J=8.0Hz,1H),5.85(br.s,,2H),5.55(s,2H),4.34(t,J=6.5Hz,2 H),4.10(s,2H),4.00(s,3H),3.71-3.60(m,2H),1.84-1.72(m,4H),1.59-1.47(m,2H),0.98(q,J=7.8Hz,5H),0.01(s,9H)。
MS(ESI)m/z:565,567[M+H+]。
步驟E:在氮氣氛、-78攝氏度下,向正在攪拌的5-((4-胺基-6-溴-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡啶甲酸甲酯(150.00毫克,0.266毫莫耳)的無水四氫呋喃(8毫升)溶液中滴加入二異丁基氫化鋁(56.28毫克,0.396毫莫耳)。加完後,將該反應混合物在-78攝氏度下攪拌1小時。隨後將反應混合物用甲醇(5毫升)淬滅,用水稀釋(20毫升),並用乙酸乙酯(30毫升×2)萃取。合併的有機層在真空下濃縮至乾,得到約150毫克粗品5-((4-胺基-6-溴-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡啶醛,無需進一步純化。
1 HNMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ10.05(s,1H),8.87(s,1H),7.96-7.80(m,2H),5.72(br.s,2H),5.56(s,2H),4.34(t,J=6.5Hz,2H),4.12(s,2H),3.71-3.62(m,2H),1.84-1.72(m,2H),1.56-1.48(m,2H),1.06-0.81(m,5H),0.01(s,9H)。
MS(ESI)m/z:535,537[M+H+]。
步驟F:向5-((4-胺基-6-溴-2-丁氧基-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7基)甲基)吡啶醛(150.00毫克,0.281毫莫耳)、吡咯烷(29.94毫克,0.421毫莫耳)、乙酸(0.2毫升)的四氫呋喃(5毫升)溶液中加入氰基硼氫化鈉(35.27毫克,0.561毫莫耳),並在室溫下攪拌12小時。然後倒入冰/水(體積比=1/1,15毫升)混合物中攪拌20分鐘,並用乙酸乙酯(40毫升×3)萃取。用鹽水(20毫升×2)洗滌合併的有機相,用無水硫酸鈉乾燥,過濾並在減 壓濃縮。殘餘物通過製備型HPLC純化,得到150毫克的6-溴-2-丁氧基-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺,為黃色固體。
MS(ESI)m/z:589,591[M+H+]。
步驟G:將6-溴-2-丁氧基-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-胺(150.00毫克,254.39微莫耳)、Pd2(dba)3(23.30毫克,25.44微莫耳)、1,1’-雙(二苯基膦)二茂鐵(14.10毫克,25.44微莫耳)、二氰化鋅(59.74毫克,508.78微莫耳)和鋅(33.27毫克,508.78微莫耳)加到無水N,N-二甲基甲醯胺(2毫升)中,置換氮氣,然後在氮氣氣氛下加熱到110攝氏度並保持3小時。冷卻後,該混合物用水稀釋(30毫升),並用乙酸乙酯(25毫升×3)萃取。將合併的有機相用鹽水(30毫升)洗滌,經無水硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮,殘餘物用製備TLC純化,得到4-胺基-2-丁氧基-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(120毫克,88.05%)
MS(ESI)m/z:536[M+H+]。
步驟H:將4-胺基-2-丁氧基-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(120毫克,0.224毫莫耳)的三氟乙酸(5毫升)溶液在20攝氏度下攪拌12小時,然後在真空下濃縮至乾,殘餘物通過製備型HPLC純化,得到8.7毫克的4-胺基-2-丁氧基-7-((6-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ8.52(s,1H),7.79(d,J=8.0Hz,1H) ,7.43(d,J=8.0Hz,1H),4.33(t,J=6.8Hz,2H),4.17(s,2H),3.76(s,2H),2.61(s,4H),1.82-1.72(m,6H),1.54-1.49(m,2H),1.02-0.99(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:406[M+H+]。
實施例42 4-胺基-2-丁氧基-7-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
4-胺基-2-丁氧基-7-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈按照實施例41的流程製備,具體步驟見實施例41的步驟A、B、C、D、E、F、G、H。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.34-7.32(d,J=8.4Hz,2H),7.26-7.24(d,J=8.4Hz,2H),4.36-4.33(t,J=6.8Hz,2H),4.13(s,2H),3.62(s,2H),2.57(brs,4H),1.82-1.77(m,6H),1.52-1.49(m,2H),1.00(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:405[M+H+]。
實施例43 4-胺基-2-丁氧基-7-(4-(嗎啉代甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
4-胺基-2-丁氧基-7-(4-(嗎啉代甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈鹽酸鹽按照實施例41的流程製備,具體步驟見實施例41的步驟A、B、C、D、E、F、G、H。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ:7.55(d,J=7.8Hz,2H),7.43(d,J=7.8Hz,2H),4.60(t,J=6.5Hz,2H),4.38(s,2H),4.23(s,2H),4.06-4.02(m,2H),3.80-3.73(m,2H),3.47-3.35(m,2H),3.28-3.14(m,2H),1.89-1.82(m,2H),1.59-1.51(m,2H),1.03(t,J=7.4Hz,3H)。
LCMS(ESI)m/z:421[M+H+]。
實施例44 4-胺基-2-丁氧基-7-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
4-胺基-2-丁氧基-7-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈鹽酸鹽按照實施例41的流程製備,具體步驟見實施例41的步驟A、B、C、D、E、F、G、H。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ:7.61(d,J=7.8Hz,2H),7.42(d,J=7.8Hz,2H),4.60(t,J=6.5Hz,2H),4.47(s,2H),4.23(s,2H),3.89-3.45(m,8H),3.02(s,3H),1.92-1.80(m,2H),1.61-1.44(m,2H),1.03(t,J=7.3Hz,3H)。
LCMS(ESI)m/z:434[M+H+]。
實施例45 4-胺基-2-丁氧基-7-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲醯胺
實施例45製備流程:
步驟A:將4-胺基-2-丁氧基-7-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(90毫克,0.22毫莫耳)和氫氧化鈉(34毫克,0.85毫莫耳)溶於甲醇(10毫升)和水(10毫升)的混合溶劑,在80攝氏度下攪拌12小時。冷卻後,用水(10毫升)稀釋,並用乙酸乙酯(15毫升×2)萃取。將合併的有機層在真空下濃縮至乾,然後通過製備型HPLC純化,得到10毫克的4-胺基-2-丁氧基-7-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-6-甲醯胺。
1 HNMR(Methanol-d4,400MHz):δ7.46(d,J=8.0Hz,2H),7.32(d,J=8.0Hz,2H),4.58(t,J=6.4Hz,2H),4.39(s,2H),4.34(s,2H),3.34-3.32(m,2H),3.18-3.16(m,2H)2.17-2.16(m,2H),2.03-2.00(m,2H),1.86-1.82(m,2H),1.56-1.50(m,2H),1.02(t,J=7.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:423[M+H+]。
實驗例1:Toll樣受體7和Toll樣受體8體外受體結合活性篩選方案
試劑:HEK-blue hTLR7細胞和HEK-blue hTLR8細胞(來源於InvivoGen公司)
DMEM培養基
熱滅活胎牛血清
抗支原體試劑NormocinTM
博來黴素
殺稻瘟菌素
方案:
1. 96孔化合物板的準備:利用液體工作站POD將化合物從10毫莫耳/升濃度起始,用DMSO做3倍梯度稀釋,共稀釋10個點(從第2列到第11列,每個點2個重複)。在第12列加入1微升5毫克/毫升的陽性化合物R848作為陽性對照,在第1列加入1微升DMSO作為陰性對照。每孔中含有的DMSO體積都是1微升。
2. 收取細胞培養瓶中的細胞,將細胞密度稀釋成250,000個細胞/毫升。
3. 加入200微升(50,000個細胞/孔)細胞懸液至準備好的化合物板中。每孔中DMSO終濃度為0.5%。
4. 將含有細胞和化合物的培養板放入CO2培養箱中培養24小時,培養條件為37攝氏度,5%CO2濃度。
5. 培養24小時後,從細胞培養板中每孔取出20微升上清液轉移到一塊96孔透明檢測板中。然後向檢測板中每孔加入180微升Quanti-Blue試劑,并置於37攝氏度,5%CO2培養箱孵育1小時。
6. 1小時後,用酶標儀OD650讀板檢測20微升上清液中鹼性磷酸酶的含量。
7. 利用Prism軟體分析資料,得出各化合物的EC50
實驗結果如表1所示:
注:1nMA100nM;100nM<B1000nM;1000nM<C50μM。
實施例21化合物與對照品Toll樣受體7促效劑GS-9620頭對頭測試實驗結果如表2所示:
結論:本發明的實施例21化合物,展現出比對照品Toll樣受體7促效劑GS-9620更高的與Toll樣受體7體外受體結合活性,和比對照品Toll樣受體7促效劑GS-9620更低的與Toll樣受體8體外受體結合活性。
實驗例2:外周血單個核細胞試驗方案
本方案的目的在於檢測利用現有化合物物刺激人外周血單核細胞(PBMC)24h後細胞因子的表達水準。檢測時細胞上清液不稀釋,直接檢測IFN-α和TNF-α的水準。實驗過程中首先將化合物配製成20mM的DMSO儲存液,用細胞培養基做10倍梯度稀釋,總共稀釋11個點。取其中9個稀釋點的化合物(化合物的最高濃度為200微摩/升)加入96孔板中,每孔50微升,然後接種新鮮的人外周血單核細胞,每孔接種150微升體系,其中含有450,000個細胞。將細胞培養板置於37℃和5%CO2培養箱中培養24小時,培養結束後將培養板以1200rpm的速度離心5分鐘,隨後收集上清並將其儲存於-20℃以待檢測。細胞因子的檢測利用BD公司的流式液相多重蛋白定量技術(CBA),在流式細胞儀上完成檢測。利用上述檢測方法,我們將刺激產生最低檢測限至少3倍以上細胞因子水準的最低藥物濃度,定義為該化合物在該細胞因子刺激實驗上的MEC(Minimal Effective Concentration)值。
實驗結果如表3所示:
注:0.01nMA1nM;1nM<B10nM;10nM<C100μM。
實施例21化合物與對照品Toll樣受體7促效劑GS-9620頭對頭測試實驗結果如表4所示:
結論:本發明的實施例21化合物展示出相對於對照品Toll樣受體7促效劑GS-9620更好的體外PBMC的IFN-α誘導活性以及相當的TNF-α的誘導活性。
實驗例3:大鼠藥代動力學實驗
試驗用雄性SD大鼠共12隻,分成四組,每組3隻SD大鼠。2組動物靜脈注射給藥,分別注射對照品Toll樣受體7促效劑GS-9620和實施例21化合物的10%羥丙基-β-環糊精水溶液(濃度0.5mg/mL)1mg/kg。另外2組口服給藥,分別口服GS-9620和實施例21化合物的0.5%甲基纖維素/0.2%吐溫80純水混懸液(濃度1mg/mL)5mg/kg。靜脈注射後的每隻大鼠於給藥後2、15、30分鐘和1、2、4、8、24小時連續採集全血樣本并製備血漿;口服給藥後的每隻大鼠於給藥後15、30分鐘和1、2、4、8、24小時連續採集全血樣本並製備血漿。應用LC-MS/MS方法,分別測定GS-9620和實施例21化合物血漿濃度。結果如表5所示。
結論:本發明的實施例21化合物展示出在同等條件下,相對於對照品Toll樣受體7促效劑GS-9620在大鼠中有更長的半衰期和更高的曝露量。
實驗例4:乙型肝炎感染雛鴨模型體內藥效學試驗
實驗設計和方法:實驗採用一日齡北京鴨靜脈注射鴨乙型肝炎病毒陽性鴨血清,7天後開始分組給藥,每組6隻鴨。對照組:生理鹽水。供試樣品為GS-9620、實施例21化合物,每個樣品2個劑量組:20mg/kg和5mg/kg。供試樣品均為灌胃給藥,20mg/kg組為隔2天給1次藥(每3天給1次藥),5mg/kg組為連續每天給藥,每天給藥1次。共給16天。陽性對照藥物拉米夫定由葛蘭素史克藥業公司生產,50mg/kg,為灌胃給藥,每天給藥2次,連續給藥16天。對於鴨乙型肝炎病毒感染對照組,以溶劑代替藥物。於感染後 7天給藥前(T0)、給藥後8天(T8)、給藥後16天(T16)和停藥後3天(P3)取血,分離鴨血清,冷凍保存。鴨血清用於鴨乙型感染病毒DNA(DHBV-DNA)的檢測,比較GS-9620、實施例21化合物和陽性對照拉米夫定對鴨乙型肝炎病毒的療效。鴨血清DNA(DHBV-DNA)的檢測方法:同批不同鴨血清用即時螢光定量PCR法測定鴨血DHBV-DNA的水準。統計學處理:採用配對和成組分析統計法,計算藥物對鴨血清DHBV-DNA抑制作用的顯著性,判斷效果。藥效結果見表6。
成組t檢驗,同一時間點同病毒對照組相比。*p<0.05,**p<0.01。
結論:相對於對照品Toll樣受體7促效劑GS-9620,本發明的實施例21化合物在同等條件下在乙肝感染雛鴨模型上展示出更優的藥效:20mg/kg隔2天給藥一次,抑制率大致相當;5mg/kg每天給藥一次連續給藥,實施例21化合物抑制率優勢十分明顯;停藥3 天後,GS-9620的20mg/kg隔2天給藥一次組出現HBV-DNA複製反彈,而對應實施例21化合物組沒有。
實驗例5:HDI(hydrodynamic injection)乙型肝炎感染小鼠模型體內藥效學試驗
實驗設計和方法:給藥途徑:灌胃
給藥時間:第1天到第7天,實驗週期共7天
給藥組:第一組:載體(Vehicle):10% HP-β-CD;第二組:GS-9620,20mg/kg;第三組:實施例21,20mg/kg。
實驗第1、3、5、7天給藥4小時後收集血漿樣本,第7天給藥4小時後收集肝樣本。詳情見表7。
HDI(hydrodynamic injection)乙型肝炎感染小鼠模型體內藥效學試驗藥效結果詳情見圖1和圖2。結論:血漿中的HBV拷貝數和肝臟中的HBV拷貝數檢測資料顯示,實施例21化合物在同等條件下藥效優於對照品Toll樣受體7促效劑GS-9620。

Claims (9)

  1. 一種式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽, 式中,L1為-O-;L2為-CH2-;R1選自氫、C1-10烷基,上述之C1-10烷基任選被一種或複數種R4取代;R2選自氫、氰基、-CONH2;B選自C6-12芳基、雜芳基,上述雜芳基是指單環或稠合多環體系,其中含有至少一個選自N、O、S的環原子,其餘環原子為C,並且具有至少一個芳香環;L3選自C0-6亞烷基、亞胺基,上述C0-6亞烷基、亞胺基任選被一種或複數種R4取代;R3選自氫、胺基、C1-10烷基、C3-10環烴基、3-10員雜環烴基,上述之胺基、C1-10烷基、C3-10環烴基、3-10員雜環烴基任選被一種或複數種R4取代;或R3、L3與B環上鄰位原子一起形成飽和或不飽和的5-8員環,上述之5-8員環任選被一種或複數種R4取代;n為0、1、2、3、4或5; R4選自鹵素、-R、-OR、=O;R獨立地選自H、C1-8烷基。
  2. 如請求項1所記載之式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽,其中R1選自氫、C1-6烷基,上述之C1-6烷基任選被一種或複數種R4取代。
  3. 如請求項2所記載之式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽,其中R1選自C1-6烷基,上述之C1-6烷基任選被一種或複數種R4取代。
  4. 如請求項1所記載之式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽,其中B選自苯基、吡啶基。
  5. 如請求項1所記載之式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽,其中L3選自C0-6亞烷基,上述之C0-6亞烷基任選被一種或複數種R4取代。
  6. 如請求項1所記載之式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽,其中R3選自氫、胺基、C1-6烷基、3-8員雜環烴基,上述之胺基、C1-6烷基、3-8員雜環烴基任選被一種或複數種R4取代;或R3、L3與B環上鄰位原子一起形成飽和或不飽和的5-8員環,上述之5-8員環任選被一種或複數種R4取代。
  7. 一種下式表示的化合物或其藥學上可接受的鹽:
  8. 一種如請求項1至7中任一項所記載之化合物或其藥學上可接受的鹽在製備治療乙型肝炎或丙型肝炎病毒感染的藥物的用途。
  9. 一種藥物組合物,其包含治療有效量的如請求項1至7中任一項所記載之化合物或其藥學上可接受的鹽;及一種或複數種藥學上可接受的載體或賦形劑。
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Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6028076A (en) * 1996-07-03 2000-02-22 Japan Energy Corporation Purine derivative
US6329381B1 (en) * 1997-11-28 2001-12-11 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Heterocyclic compounds
WO2014081644A1 (en) * 2012-11-20 2014-05-30 Glaxosmithkline Llc Novel compounds
WO2014081645A1 (en) * 2012-11-20 2014-05-30 Glaxosmithkline Llc Novel compounds
WO2014081643A1 (en) * 2012-11-20 2014-05-30 Glaxosmithkline Llc Novel compounds
WO2015124591A1 (en) * 2014-02-20 2015-08-27 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.2) Limited Pyrrolo[3,2] pyrimidine derivatives as inducers of human interferon

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6028076A (en) * 1996-07-03 2000-02-22 Japan Energy Corporation Purine derivative
US6329381B1 (en) * 1997-11-28 2001-12-11 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Heterocyclic compounds
WO2014081644A1 (en) * 2012-11-20 2014-05-30 Glaxosmithkline Llc Novel compounds
WO2014081645A1 (en) * 2012-11-20 2014-05-30 Glaxosmithkline Llc Novel compounds
WO2014081643A1 (en) * 2012-11-20 2014-05-30 Glaxosmithkline Llc Novel compounds
WO2015124591A1 (en) * 2014-02-20 2015-08-27 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.2) Limited Pyrrolo[3,2] pyrimidine derivatives as inducers of human interferon

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