DK175849B1

DK175849B1 - Fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler omfattende et lægemiddelstof, formulering med forlænget afgivelse, octreotidpamoat og fremgangsmåde til fremstilling heraf

Info

Publication number: DK175849B1
Application number: DK199001625A
Authority: DK
Inventors: Thomas Kissel; David Bodmer; Jones Wing Fong; Hawkins Valliant Maulding; Oskar Nagele; Jane Edna Pearson
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1989-07-07
Filing date: 1990-07-05
Publication date: 2005-03-29
Also published as: FR2649319A1; CY1965A; ATA144090A; AU2332195A; JPH08198771A; CA2020477C; GB2265311A; AU5874690A; IT1241460B; FI20000059A; KR100303681B1; GB2234896A; IL131880A; NO983923D0; PT94628B; GR900100513A; IE64411B1; SG26416G; LU87764A1; CA2020477A1

Description

DK 175849 B1 i

Den foreliggende opfindelse angår lægemiddelformuleringer med forlænget afgivelse (depotformuleringer), især vandopløselige peptider, fx somatostatin eller somatostatina-naloger såsom octreotid, i et bionedbrydeligt og biokompa-5 tibelt polymert bærestof, fx en matrix eller et overtræk, fx i form af en implanterbar indretning eller fortrinsvis i form af mikropartikler (også kendt som mikrokapsler eller mikromikrosfærer).

10 Opfindelsen angår også sådanne formuleringer, der udviser tilfredsstillende peptidafgivelsesprofiler hen over et specifikt tidsrum.

Nærmere betegnet angår opfindelsen en fremgangsmåde til 15 fremstilling af mikropartikler omfattende et lægemiddelstof, jf. krav 1-15, en formulering med forlænget afgivelse, jf. krav 16-34 og krav 37, samt octreotidpamoat som angivet i krav 35 og en fremgangsmåde til fremstiling deraf som angivet i krav 36.

20

Efter oral eller parenteral administration udviser peptidlægemiddelstoffer ofte en lav biotilgængelighed i blodet, fx på grund af deres korte biologiske halveringstid forårsaget af deres metaboliske instabilitet. Såfremt de 25 administreres oralt eller nasalt, udviser de ydermere ofte en lav resorption gennem slimhinderne. Det er vanskeligt at opnå et terapeutisk relevant blodniveau i et længere tidsrum.

30 Parenteral administration af peptidlægemiddelstoffer i form af en depotformulering i en bionedbrydelig polymer, fx som mikropartikler eller implantater, har været foreslået til muliggørelse af forlænget afgivelse efter en nogen tids ophold i polymeren, som beskytter peptidet mod de biologi-35 ske mediers enzymatiske og hydrolytiske påvirkninger.

I DK 175849 B1 I

2

I Skønt visse parenterale depotformuleringer af peptidlæge- I

I middelstoffer i en polymer i form af mikropartikler eller I

I en implanterbar indretning er kendte, er tilfredsstillende I

I peptidafgivelsesprofiler i praksis kun opnået i meget få

I 5 tilfælde. Der må træffes særlige foranstaltninger for at I

I opnå en kontinuerlig peptidafgivelse med henblik på et I

terapeutisk virksomt serumniveau af lægemiddelstoffet og, I

om ønsket, for at undgå for høje lægemiddelstofserumkon- I

centrationer, der forårsager uønskede farmakologiske bi- I

10 virkninger. I

I Afgivelsesmønsteret for peptidlægemiddelstof afhænger af

I talrige faktorer, fx peptidets art, og fx om det er til I

I stede i fri form eller i anden form, fx i saltform, hvilket

I 15 kan påvirke dets vandopløselighed. En anden vigtig faktor I

er valg af polymer blandt den omfattende række af mulig- I

I heder, som er beskrevet i litteraturen.

I Hver polymertype har sin karakteristiske biologiske ned- I

I 20 brydningshastighed. Der kan dannes frie carboxylgrupper, I

I hvilket bidrager til pH-værdien i polymeren og således I

I yderligere påvirker peptidets vandopløselighed og dermed I

I afgivelsesmønsteret deraf. I

I 25 Andre faktorer, som kan påvirke depotformuleringens af- I

I givelsesmønster, er, den mængde af lægemiddelstof, der I

I fyldes i det polymere bærestof, fordelingsmåden af lægemid- I

I delstof i polymeren, partikelstørrelsen og yderligere, når I

I det drejer sig om en implanterbar indretning, dets form. I

I 30 Endvidere har formuleringens placering i kroppen betyd- I

ning. I

I Hidtil er der ikke markedsført noget somatostatinpræparat I

I med forlænget afgivelse til parenteral administration, I

I 35 måske fordi der ikke har kunnet opnås et præparat, der I

I udviser en tilfredsstillende serumniveauprofil. I

3 DK 175849 B1

Polymerformuleringer med lægemiddelstoffer, .hvilke formuleringer er udformet til forlænget eller forsinket afgivelse af lægemiddelstoffet, er kendte inden for området.

5 I US patentskrift nr. 3.773.919 beskrives formuleringer med styret lægemiddelstofafgivelse, hvor lægemiddelstoffet, fx et vandopløseligt peptidlægemiddelstof, dispergeres i en bionedbrydelig og biokompatibel lineær polylactid- eller polylactid-co-glycolidpolymer. Der er imidlertid ikke blevet 10 beskrevet lægemiddelstofafgivelsesmønstre, og der findes ingen henvisning til somatostatin. I US patentskrift nr. 4.293.539 beskrives antibakterielle formuleringer i mikro-partikelform.

15 I US patentskrift nr. 4.675.189 beskrives formuleringer med forlænget afgivelse af det LHRH-analoge decapeptid-nafarelin og beslægtede LHRH-analoger i polylactid-co-glycolidpolyme-rer. Der er ikke beskrevet afgivelsesmønstre.

20 T. Chana har i J. Bioeng. 1, s. 25-32, 1976 beskrevet forlænget afgivelse af biologiske substanser, enzymer og vacciner fra mikropartikler.

Polymerer/co-polymerer af mælkesyre og lactid-/glycolid-co-25 polymerer og beslægtede præparater til kirurgisk anvendelse og til forlænget afgivelse og bionedbrydning er beskrevet i US patentskrift nr. 3.991.776, 4.076.798 og 4.118.470.

I EP patentskrift nr. 0.203.031 beskrives en række somato-30 statin-octapeptidanaloger, fx forbindelse RC-160 med formlen: * * D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 med en bro mellem -Cys-grupperne i spalte 15-16.

35

DK 175849 B1 I

Muligheden for, at somatostatinerne kan være mikroindkapslet I

med polylactid-co-glycolidpolymer er nævnt i EP-skriftets I

krav 18, men der er ingen anvisninger på, hvorledes et kon- I

tinuerligt terapeutisk virksomt serumniveau kan opnås. I

I US patentskrift nr. 4.011.312 beskrives, at der kan opnås I

en kontinuerlig afgivelse af et antimikrobielt lægemiddel- I

stof, fx det vandopløselige polymyxin B fra en polylactid- I

co-glycolidmatrix med en lav molekylvægt (under 2000) og et I

10 relativt højt glycol idindhold i form af en implanterbar I

indretning, når den implanterbare indretning er indlagt i I

en kopatte. Lægemiddelstoffet afgives inden for et kort I

tidsrum på grund af polymerens høje glycolidindhold og lave I

molekylvægt, hvilke begge stimulerer en hurtig bionedbrydning

15 af polymeren og dermed en tilsvarende hurtig afgivelse af I

lægemiddelstof. Et relativt højt indhold af lægemiddelstof I

bidrager yderligere til en hurtig lægemiddelstofafgivelse. I

Der er ikke beskrevet somatostatiner eller lægemiddelstof-

afgivelsesmønstre. I

20 I

I EP-patentskrift nr. 58.481 beskrives, at en kontinuerlig I

afgivelse af et vandopløseligt peptid fra en polylactid- I

polymerholdig implanterbar indretning stimuleres ved nedsæt- I

telse af molekylvægten af i det mindste en del af polymer- I

25 molekylerne ved indføring af glycolidenheder i polymermole- I

kylet, ved forøgelse af polymerens blokpolymerkarakter, når I

der anvendes polylactid-co-glycolidmolekyler, ved forøgelse I

af lægemiddelstof indholdet i polymermatricen og ved forøgelse I

af implantatets overflade. I

30 I

Selv om somatostatiner er omtalt som vandopløselige pepti- I

der, er der ikke beskrevet afgivelsesprofiler for soma- I

tostatin, og der er ingen angivelse af, hvordan alle disse I

parametre skal kombineres for fx at opnå et kontinuerligt I

35 somatostatinserumniveau i et tidsrum på mindst én uge, fx I

en måned. I

5 DK 175849 B1 s ί i I EP patentskrift nr. 92.918 beskrives, at der kan opnås en kontinuerlig afgivelse af peptider, fortrinsvis af hydrofile peptider, i et længere tidsrum, når pepidet inkorporeres i en konventionel hydrofob polymermatrix, fx af polylactid, 5 der er gjort mere tilgængelig for vand ved i polymermolekylet at indføre en hydrofil enhed, fx af polyethylenglycol, poly-vinylalkohol, dextran, polymethacrylamid. Det hydrofile bidrag til den amfipatiske polymer kommer fra alle ethylen-oxidgrupper, når det drejer sig om polyethylenglycolen-10 heder, fra de frie hydroxylgrupper, når det drejer sig om en polyvinylalkoholenhed eller en dextranenhed; og fra amidgrupper, når det drejer sig om en polymethyacrylamiden-hed. På grund af den hdyrofile enheds tilstedeværelse i polymermolekylerne opnår implantaterbar indretning hydro- .

15 gelagtige egenskaber efter absorption af vand. Somatostatin omtales som et hydrofilt peptid, men ingen afgivelsesprofiler er beskrevet, og der er ingen angivelser af hvilken type polymer, der foretrækkes til dette peptid, og hvilken molekylvægt og hvor mange hydrofile grupper, polymeren bør 2 0 have.

i I GB patentskrift nr. 2.145.422 B beskrives, at der kan opnås en forlænget afgivelse af forskellige slags lægemiddelstoffer, fx af vitaminer, enzymer, antibiotika, antigener, 25 over en længere periode, når lægemiddelstoffet inkorporeres i en implanterbar indretning, fx af mikropartikelstørrelse, fremstillet af en polyolpolymer, fx af glucose eller mannitol, der har én eller flere, fortrinsvis mindst 3, poly-lactidestergrupper. Polylactidestergrupperne indeholder 30 fortrinsvis fx glycolidenheder.

Der er ikke omtalt peptider, fx somatostatiner, som lægemiddelstoffer, og ingen serumniveauer for lægemiddelstof er beskrevet.

35

DK 175849 B1 I

Den foreliggende opfindelse angår formuleringer, fx mikro- H

partikelformuleringer, med forlænget afgivelse af et læge- H

middelstof, især af et hormonalt aktivt, vandopløseligt H

somatostatin eller en hormonalt aktiv, vandopløselig soma- I

5 tostatinanalog såsom octreotid, hvilke formuleringer til- H

vejebringer et tilfredsstillende plasmaniveau for lægemid- I

delstof, og, fx i en bionedbrydelig, biokompatibel polymer, H

fx i en indkapslende polymermatrix. Polymermatricen kan

være en syntetisk eller naturlig polymer. H

Mikropartiklerne ifølge den foreliggende opfindelse kan I

fremstilles ifølge en hvilken som helst konventionel tek- H

nik, fx en organisk faseadskillelsesteknik, en spraytør- I

ringsteknik eller en tripelemulsionsteknik, hvor polymeren I

15 udfældes sammen med lægemiddelstoffet, og hvor det resul- I

terende produkt derefter hærdes, når der anvendes fasead- I

skillelses- eller tripelemulsionsteknik. I

Formuleringerne med forlænget afgivelse kan, om ønsket, I

20 foreligge i form af en implanterbar indretning. I

Der er nu fundet en særlig nyttig modificering af fasead- I

skillelsesteknikken til fremstilling af mikropartikler med I

et hvilket som helst lægemiddelstof. I

I overensstemmelse hermed tilvejebringer den foreliggende H

opfindelse også en fremgangsmåde til fremstilling af mi- I

kropartikler, der omfatter lægemiddelstof i bionedbryde- I

ligt, biokompatibelt bærestof, hvilken fremgangsmåde om- I

30 fatter følgende trin: I

a) opløsning af det polymere bærestofmateriale i et I

hensigtsmæssigt opløsningsmiddel, i hvilket lægemid- I

delstoffet ikke er opløselig, I

7 DK 175849 B1 b) tilsætning til og dispersion i oplosningen fra trin a) af en oplosning af lægemiddelstof i et hensigtsmæssigt oplosningsmiddel, fx en alkohol, i hvilket polymeren ikke er opløselig, 5 c) tilsætning af et faseinduceringsmiddel til dispersionen fra trin b) for at fremkalde mikropartikeldannel- i se, 10 d) tilsætning af en olie-i-vand emulsion til blandingen fra trin c) til hærdning af mikropartiklen, og e) isolering af mikropartiklen.

15 Der er yderligere fundet en særlig nyttig modificering af tripelemulsionsteknikken til fremstilling af mikropartikler med et hvilket som helst lægemiddelstof.

I overensstemmelse hermed tilvejebringer den foreliggende 20 opfindelse:

En fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler, hvilken fremgangsmåde omfatter 25 (i) kraftig blanding af en vand-i-olie-emulsion dannet af et vandigt medium og et organisk opløsningsmiddel, der ikke er blandbart med vand, indeholder lægemiddelstoffet i én fase og en bionedbrydelig, biokompatibel polymer i den anden fase, med et overskud af et vandigt medium, der 30 indeholder en emulgerende substans eller et beskyttelses-kolloid til dannelse af en vand-i-olie-i-vand-emulsion uden tilsætning af lægemiddelstoftilbageholdende substans til vand-i-olie-emulsionen eller anvendelse af mellemliggende viskositetsforøgende trin, 35 (ii) desorbering af det organiske opløsningsmiddel derfra, (iii) isolering og tørring af de fremkomne mikropartikler.

DK 175849 B1 I

H

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer også: I

a) en formulering med forlænget afgivelse, der omfatter I

et peptidlægemiddelstof i en fra 40/60 til 60/40 I

5 polylactid-co-glycolidester af en polyol, idet polyol- I

enheden er valgt fra gruppen bestående af en alkohol

indeholdende (C3_6)-carbonkæde med 3-6 hydroxylgrupper I

og et mono- eller disaccharid, og idet den esteri- I

ficerede polyol har mindst 3 polylactid-co-glycolid- I

10 kæder. I

b) en formulering med forlænget afgivelse, der omfatter I

et peptidlægemiddelstof valgt fra gruppen bestående af I

en calcitonin, en lypressin eller et somatostatin i en I

fra 40/60 til 60/40 polylactid-co-glycolidpolymer, der I

har lineære kæder med en molekylvægt Mw på mellem I

25.000 og 100.000, en polydispersitet Mw/Mn på mellem I

1,2 og 2 og med en peptidlægemiddelstofkoncentration I

på fra 0,2 vægtprocent, fortrinsvis fra 2 til 10 I

20 vægtprocent. I

c) en formulering med forlænget afgivelse, der omfatter I

octreotid eller et salt eller derivat deraf i et I

bionedbrydeligt, biokompatibelt, polymert bærestof.

25 I

Det har vist sig, at et hidtil ukendt octreotidsalt er I

pamoatet, som er meget stabilt i sådanne formuleringer. I

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer i overensstem- I

30 melse hermed (i) octreotidpamoat og (ii) en fremgangsmåde I

til fremstilling af octreotidpamoat, hvilken fremgangsmåde I

omfatter omsætning af octreotid med embonsyre (eller et I

reaktivt derivat deraf) .

3 5 En fremgangsmåde til administration af et peptid til et I

individ omfatter parenteral administration af en depotfor- I

9 DK 175849 B1 mulering som defineret ovenfor til et individ, der har behov for en sådan behandling, især til behandling af akromegali eller brystkræft.

5 Lægemiddelstofferne, der anvendes ifølge opfindelsen, er fortrinsvis vandopløselige lægemiddelstoffer, fx peptider.

Peptiderne, der anvendes ved fremgangsmåderne og i formuleringerne ifølge den foreliggende opfindelse, kan være en 10 calcitonin, fx laksecalcitonin, en lypressin og det naturligt forekommende somatostatin og syntetiske analoger deraf.

Det naturligt forekommende somatostatin er ét af de foretrukne forbindelser og er et tetradecapeptid, der har 15 strukturen:

Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp

Cys-Ser-Thr-Phe-Thr-Lys* 20 Dette hormon frembringes af hypothalamuskirtlen samt andre organer, fx mave-tarmkanalen og medierer sammen med GRF, q.v. neuroreguleringen af hypofysens afgivelse af væksthormon. Ud over inhibering af hypofysens afgivelse af væksthormon er somatostatin en potent inhibitor af et antal 25 systemer, herunder det centrale og perifere nervesystem, mave-tarmsystemet og vaskulær, glat muskulatur. Den hæmmer også afgivelsen af insulin og glucagon.

Udtrykket "somatostatin" omfatter analoger eller derivater 30 deraf. Ved derivater og analoger forstås ligekædede, broforbundne eller cykliske polypeptider, hvor én eller flere aminosyreenheder er udeladt og/eller erstattet med ét eller flere andre aminoradikal(er), og/eller hvor én eller flere funktionelle grupper er erstattet med én eller flere andre 35 funktionelle grupper, og/eller én eller flere grupper er ; erstattet med én eller flere andre isosteriske grupper.

Udtrykket dækker generelt alle modificerede derivater af et

I DK 175849 B1 I

I 10 I

I biologisk aktivt peptid, der udviser den kvalitativt sanune I

I virkning som det umodificerede somatostatinpeptid. I

Somatostatinagonistanaloger er således nyttige til erstat- I

I 5 ning af naturligt somatostatin med hensyn til virkningen I

I deraf på regulering af fysiologiske funktioner. I

I Foretrukne kendte somatostatiner er: I

ίο * * I

I a) (D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol I

(Generisk navn Octreotid) I

I I

I 15 b) (D)Phe-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys-ThrNH2 I

I I

I c) (D)Phe-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys-TrpNH2 I

I 20 * I

I d) (D)Trp-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-ThrNH2 I

I I

I e) (D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-ThrNH2 I

I

I i

f) 3-(2-(Naphthyl)-(D)Ala-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys- I

I ThrNH2 I

I 30 I

I g) (D)Phe-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys-0-Nal-NH2 I

I I

h) 3-(2-naphtyl)-Ala-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys-ø-Nal-NH2 I

I 35 I

i i

I i) (D) Phe-Cys-/3-Nal-(D)Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 I

11 DK 175849 B1 hvor der i hver af forbindelserne a)-i) er en bro mellem aminosyrerne markeret med * som vist i nedenstående formel.

Andre foretrukne somatostatiner er: 5 ★--------—-----------—-------—— *

H-Cys-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-Cys-OH

(jf. Vale et al., Metabolism, 27, supp.l, 139 (1978)).

10 * *

Asn-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba (jf. EP 1295 og EP patent nr. 78100994.9).

* * 15 MeAla-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Phe (jf. Verber et al., Life Sciences, 34, 1371-1378 (1984) og EP patent nr. 82106205.6 (offentliggjort som EP 70021)) også kendt som cyclo (N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe).

20 * * NMePhe-His-(D)Trp-Lys-Val-Ala (jf. R. F. Nutt et al., Klin. Wochenschr. (1986) 64 (suppl. VII) 25 * *

H-Cys-His-His-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-°H

(jf. EP-A-200,188) 30 * ’ * X-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2 og 35 * * X-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol hvor X er et kationisk "anker",

DK 175849 B1 I

især I

Ac-hArg(Et2)-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-NH2 I

5 (jf. EP 0363589A2) I

hvor der i de ovennævnte aminosyrer er en bro mellem amino- I

syrerne markeret med *. I

I nærværende beskrivelse og krav henvises der specifikt til I

indholdet af alle de ovennævnte publikationer, herunder de I

10 særlige forbindelser. I

Udtrykket "derivat" omfatter også de tilsvarende derivater I

med en sukkerrest. I

Når somatostatiner har en sukkerrest, er denne fortrinsvis I

forbundet med én N-terminal aminogruppe og/eller med mindst I

15 én aminogruppe, der er til stede i pept ids idekæden, især I

til en N-terminal aminogruppe. Sådanne forbindelser og I

fremstillingen deraf er beskrevet fx i WO 88/02756. I

I Udtrykket "octreotidderivater" omfatter sådanne, der har en I

gruppe I

I 20 I

-D-Phe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys- med en bro mellem Cys- I

resterne. I

Særligt foretrukne derivater er N“-[a-glucosyl-{l-4-deoxy- ι I

fructosyl]-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol og NQ-[/9- I

25 deoxyfructosyl]-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol, der I

H hver har en bro mellem -Cys-grupperne, især i form af I

H acetatsaltet, og som er beskrevet i henholdsvis eksempel 2 I

og 1 i ovennævnte ansøgning. I

Somatostatinerne kan foreligge fx i fri form, saltform I

30 eller i form af komplekser deraf. Syreadditionssalte kan I

13 DK 175849 B1 være dannet med fx organiske syrer, polymere syrer og uorganiske syrer. Syreadditionssalte omfatter fx hydro-chloridet og acetater. Komplekser er fx dannet ved fra somatostatiner efter tilsætning af uorganiske stoffer, fx 5 uorganiske salte eller hydroxider såsom Ca- og Zn-salte, og/eller tilsætning af polymere organiske stoffer.

Acetatsaltet er et foretrukket salt til sådanne formuleringer, især til mikropartikler, idet det medfører en reduktion af indledende pludselig afgivelse af lægemiddelstof.

10 Den foreliggende opfindelse angår også pamoatsaltet, der er nyttigt, især til implanterbare indretninger, og fremgangsmåde til fremstilling deraf.

Pamoatet kan vindes på konventionel måde, fx ved omsætning af embonsyre (2,2'-dihydroxy-l,l'-dinaphthylmethan-3,3'-15 dicarboxylsyre) med octreotid fx i fri baseform. Omsætningen kan udføres i et polært opløsningsmiddel, fx ved stuetemperatur.

Somatostatinerne er indikeret til anvendelse i behandlingen af sygdomme, hvor der forudses langvarig anvendelse af 20 lægemiddelstoffet, fx sygdomme med en ætiologi, der omfatter eller er forbundet med for stor væksthormonsekretion, fx i behandlingen af akromegali, til anvendelse i behandlingen af gastrointestinale sygdomme, fx i behandlingen eller profylaksen af peptisk ulcus, enterokutane og 25 pankreatikokutane fistler, irritabelt tarmsyndrom, dumpingsyndrom, vanddiarrésyndrom, akut pankreatitis og ga-stroenteropatiske endokrine tumorer (fx vipomer, GRFomer, glucagonomer, insulinomer, gastrinomer og karcinoide tumorer) samt gastrointestinale blødninger, brystkræft og 30 komplikationer relateret til diabetes.

Det polymere bærestof kan være fremstillet ud fra biokompatible og bionedbrydelige polymerer, fx lineære polyestre, forgrenede polyestre, som er lineære kæder, der stråler ud fra en polyolgruppe, fx glucose; andre estre er estre af

I DK 175849 B1 I

I 14 I

I polymælkesyre, polyglycolsyre, polyhydroxysmørsyre, polyca- I

I prolactone, polyalkylenoxalat, polyalkylenglycolestre af I

I syrer fra Krebs' cyklus, fx citronsyre og lignende, og I

I copolymerer deraf. I

I 5 De foretrukne polymerer er de lineære polyestere og de for- I

I grenede polyestre. I

I De lineære polyestere kan fremstilles ud fra a-hydroxy- I

I carboxylsyrer, fx mælkesyre og glycolsyre, ved kondensering I

I af lactondimererne, jf. fx US 3,773,919. I

I 1 I

I 10 Lineære polylactid-co-glycolider, som fortrinsvis anvendes I

ifølge opfindelsen, har hensigtsmæssigt en molekylvægt på I

I mellem 25.000 og 100.000 og en polydispersibilitet Mw/Mn I

I fx på mellem 1,2 og 2. I

De forgrenede estere, der fortrinsvis anvendes ifølge op- I

I 15 findelsen, kan fremstilles under anvendelse af polyhydroxy- I

I forbindelser, fx polyol, fx glucose eller mannitol, som I

I initiator. Disse polyolestre er kendte og beskrevet i I

I GB 2.145.422 B. Polyolen indeholder mindst 3 hydroxygrupper I

og har en molekylvægt på op til 20.000, idet mindst 1, I

20 fortrinsvis mindst 2, fx gennemsnitligt 3 af polyolens I

I hydroxygrupper foreligger i form af estergrupper, som I

indeholder polylactid- eller co-polylactidkæder. Der an- I

vendes typisk 0,2% glucose til initiering af polymerise- I

ring. De forgrenede polyesteres struktur er stjerneformede. I

I 25 De foretrukne polyesterkæder i de lineære og stjerneformede ; I

I polymerforbindelser, der fortrinsvis anvendes ifølge opfin- I I

delsen, er copolymerer af a-carboxylsyregrupper, mælkesyre I

og glycolsyre, eller af lactondimerer. Molforholdet lac- I

H tid:glycolid ligger på fra ca. 75:25 til 25:75, fx fra I

I 30 60:40 til 40:60, hvor de mest foretrukne er fra 55:45 til I

45:55, fx fra 55:45 til 50:50. I

De stjerneformede polymerer kan fremstilles ved omsætning I

af en polyol med et lactid og fortrinsvis også et glycolid I

^— - -1 DK 175849 B1 15 ved forhøjet temperatur i nærværelse af en katalysator, hvilket muliggør en ringåbningspolymerisation.

I Det har vist sig, at én fordel ved den stjerneformede poly- | mertype i formuleringerne ifølge den foreliggende opfindelse I ' 5 er, at dens molekylvægt kan være relativt høj, hvilket giver fysisk stabilitet, fx en vis hårdhed, til implanter-bare indretninger og mikropartikler, hvilket hindrer, at de klæber sammen, selv om der er relativt korte polylactid-; kæder til stede, hvilket medfører en regulerbar bioned- 10 brydningshastighed af polymeren i området fra flere uger til 1 til 2 måneder og en tilsvarende forlænget afgivelse af peptidet, hvilket gør en depotformulering, der er fremstillet deraf, egnet til fx én måneds afgivelse.

De stjerneformede polymerer har fortrinsvis hovedsageligt 15 en molekylvægt Mw i området på fra ca. 10.000 til 200.000, fortrinsvis fra 25.000 til 100.000, især fra 35.000 til 60.000 og en polydispersitet fx på fra 1,7 til 3,0, fx fra 2.0 til 2,5. Grænseviskositeten af de stjerneformede polymerer Mw 35.000 og Mw 60.000 er henholdsvis 0,36 og 0,51 20 dl/g i chloroform. En stjerneformet polymer med Mw 52.000 har en viskositet på 0,475 dl/g i chloroform.

I forbindelse med den foreliggende opfindelse anses udtrykkene "mikrosfære, mikrokapsel og mikropartikel" for at være ækvivalente eller indbyrdes udskiftelige og betegner 25 peptidernes indkapsling ved hjælp af polymeren, fortrinsvis med peptidet fordelt i polymeren, som derved er en matrix for peptidet. I det tilfælde anvendes fortrinsvis udtrykkene mikrosfære eller mere generelt mikropartikel.

Ved at anvende faseadskillelsesteknikken ifølge den fore-30 liggende opfindelse kan formuleringerne ifølge opfindelsen fremstilles fx ved opløsning af det polymere bærestofmateriale i et opløsningsmiddel, som ikke er opløsningsmiddel for peptidet, efterfulgt af tilsætning af en opløsning af peptidet og dispersion deraf i det polymere solventpræ-

I DK 175849 B1 I

I 16 I

I parat. Et faseinduceringsmiddel, fx et siliconepræparat, I

I tilsættes derefter for at fremkalde peptidindkapsling ved I

I hjælp af polymeren. I

I Den pludselige afgivelse af lægemiddelstof ("burst") kan I

I 5 være væsentligt nedsat ved in situ udfældning af ultrafine I

I lægemiddelstofpartikler ved tilsætning af en lægemiddel- I

I stofopløsning til polymeropløsningen før faseadskillelse. I

I Den tidligere kendte fremgangsmåde omfatter tilsætning af I

I tørre partikler direkte til polymeropløsningen. I

I 10 Den terapeutiske varighed af peptidafgivelsen kan øges ved, I

I at mikropartiklerne hærdes/vaskes med en buffer/heptan- I

I emulsion. Den tidligere kendte fremgangsmåde omfatter et I

I hærdningstrin efterfulgt af enten ingen efterfølgende vask I

I eller et særskilt vandbaseret vasketrin. I

I 15 En emulsion af typen olie-i-vand (= o/v) kan anvendes til I

vask og hærdning af mikrosfærerne og til at fjerne ikke- I

indkapslet peptid. Vaskningen bidrager til fjernelse af I

I ikke-indkapslet peptid fra mikrosfærernes overflade. Fjer- I

I nelse af overskydende peptid fra mikrosfærerne nedsætter I

20 den indledende pludselige afgivelse af lægemiddelstof, I

hvilket er karakteristisk for mange konventionelle ind- I

I kapslingsformuleringer. Således muliggør de foreliggende

I mikrosfæreformuleringer en mere ensartet lægemiddelstofaf- I

givelse over et tidsrum. I

I 25 Emulsionen bidrager også til fjernelsen af tilbageværende I

polymeropløsningsmiddel og siliconevæske. Emulsionen kan I

I sættes til polymerpeptidblandingen, eller blandingen kan I

I sættes til emulsionen. Det foretrækkes, at polymerpeptid- I

blandingen sættes til emulsionen. I

I 30 O/w-emulsionen kan fremstilles under anvendelse af en I

emulgator såsom sorbitanmonooleat (Span SO ICI Corp.) og I

I lignende til dannelse af en stabil emulsion. Emulsionen kan I

I ' buf res med en buffer, der ikke er skadelig for peptidet og I

17 DK 175849 B1 polymermatrixmaterialet. Bufferen kan have en pH-værdi på fra 2 til 8, især foretrækkes pH 4. Bufferen kan fremstilles af sure buffere såsom phosphatbuffer, acetatbuffer og lignende. Kun vand kan erstatte bufferen.

5 Heptan, hexan og lignende kan anvendes som den organiske fase i bufferen.

Emulsionen kan indeholde dispersionsmidler såsom silico-neolie.

En foretrukken emulsion kan omfatte heptan, phosphatbuffer 10 på pH 4, siliconeolie og sorbitanmonooleat. Når en indledende lægemiddelstofafgivelse er ønskelig, kan et enkelt hærdningstrin med ikke-opløsningsmiddel erstatte emulsionshærdningen. Heptan, hexan og lignende kan anvendes som opløsningsmiddel .

15 Andre alternativer til o/w-emulsionen kan anvendes til hærdning af mikrokapsler, fx:

Opløsningsmiddel plus emulgator til hærdning af mikrokaps-lerne uden vask; og opløsningsmiddel plus emulgator til hærdning efterfulgt af et særskilt vasketrin.

20 O/w-emulsionen kan anvendes uden dispersionsmiddel. Dispersionsmidlet forhindrer dog den aggregering af de tørre mikrokapselpartikler, der skyldes statisk elektricitet, og det bidrager til at nedsætte niveauet af tilbageblivende opløsningsmiddel.

25 Eksempler på opløsningsmiddel for polymermatrixmaterialet omfatter methylenchlorid, chloroform, benzen, ethylacetat og lignende. Peptidet opløses fortrinsvis i et alkoholisk opløsningsmiddel, fx methanol, som er blandbart med polymeropløsningsmidlet .

I DK 175849 B1 I

I 18 I

I I

i I

Faseinducermgsmidlerne (koacervationsmidler) er opløs- I

I ningsmidler, som er blandbare med polymer-lægemiddelstof- I

I , blandingen, og som forårsager, at de embryoniske mikro- I

I i kapsler dannes før hærdning; siliconeolier er foretrukne I

I I 5 faseinduceringsmidler. I

I O/w-emulsionen kan fremstilles på konventionel måde under I

I anvendelse af heptan, hexan og lignende til de organiske I

I faser. I

10 I

I Mikropartiklerne kan også fremstilles ifølge den almindeligt I

I kendte spraytørrings fremgangsmåde . Ifølge denne fremgangsmåde I

I blandes somatostatin eller en opløsning af peptidet i et I

I organisk opløsningsmiddel, fx methanol, i vand eller i en I

I 15 buffer, fx med en pH-værdi på 3-8, og en opløsning af poly- I

I meren i et organisk opløsningsmiddel, der ikke er bland- I

I bart med ovennævnte, fx methylenchlorid. I

I Den dannede opløsning, suspension eller emulsion sprayes I

I ; 20 derefter i en luftstrøm, fortrinsvis i varm luft. De frem- I

I komne mikropartikler opsamles, fx ved hjælp af en cyklon, I

og vaskes om ønsket, fx i en bufferopløsning med fx en pH- I

H værdi på 3,0-8,0, fortrinsvis pH 4,0, eller i destilleret I

vand og tørres i vakuum, fx ved en temperatur på 20-40eC. I

I 25 Vasketrinet kan anvendes, hvis partiklerne udviser en I

pludselig afgivelse af lægemiddelstof in vivo. og omfanget I

I af denne pludselige afgivelse af lægemiddelstof er uønsket. I

Som buffer kan der anvendes en acetatbuffer. I

30 Der kan i overensstemmelse hermed vindes mikropartikler, I

der in vivo udviser en forbedret somatostatinafgivelsespro- I

I fil- I

I Opfindelsen tilvejebringer således yderligere en formu- I

I 35 lering med forlænget afgivelse, hvilken formulering er I

DK 175849 Bl * 19 fremstillet ved at blande somatostatin eller en opløsning af somatostatin i methanol eller vand eller en buffer med en pH-værdi på 3-8 med en opløsning af polylactid-co-glyco-lid i methylenchlorid og spraye den dannede somatostatin-5 opløsning, -emulsion eller -suspension i polymeropløsningen i en varm luftstrøm, opsamle mikros faer erne og vaske dem i en bufferopløsning med en pH-vaerdi på 3,0-8,0 eller i destilleret vand og tørre dem i vakuum ved en temperatur i området fra 20eC til 40°C. I sammenligning med mikropartik-10 ler, der er fremstillet ifølge faseadskillelsesteknikken, indeholder de ikke siliconeolie, end ikke spor deraf, da siliconeolie ikke anvendes ved spraytørringsteknikken.

Formuleringerne ifølge opfindelsen kan også fremstilles under anvendelse af en tripelemulsionsfremgangsmåde. Ved en 15 typisk teknik opløses peptid, fx octreotid, i et hensigtsmæssigt opløsningsmiddel, fx vand, og emulgeres grundigt i en opløsning af polymeren, fx 50/50 poly(D,L-lactid-co-glycolid)glucose i et opløsningsmiddel, som ikke er et opløsningsmiddel for peptidet, fx i methylenchlorid. Eksemp-20 ler på opløsningsmidler for polymermatrixmaterialet omfatter methylenchlorid, chloroform, benzen, ethylacetat og lignende. Den resulterende vand/olie-emulsion (w/o) emulgeres yderligere i et overskud af vand, der indeholder en emulgerende substans, fx et anionisk eller ikke-ionisk 25 overfladeaktivt middel eller lecithin eller et beskyttel-seskolloid, fx gelatine, dextrin, carboxymethylcellulose, polyvinylpyrrolidon, polyvinylalkohol, hvilken substans giver kontinuerlig dannelse af tripel-emulsionen (w/o/w). Mikropartiklerne dannes ved spontan udfældning af polymeren 30 og hærdes ved afdampning af det organiske opløsningsmiddel. Gelatine medvirker til at forhindre agglomeration af mi-krosfærerne. Efter sedimentation af mikropartiklerne dekanteres supernatanten, og mikropartiklerne vaskes med vand og derefter med acetatbuffer. Mikropartiklerne filtreres og 35 tørres derefter.

DK 175849 B1 I

20 I

Peptidet kan også dispergeres direkte i polymeropløsningen, I

hvorefter den resulterende suspension blandes med den I

gelatineholdige vandfase. I

Tripelemulsionsfremgangsmåden er kendt fra US 4,652,441. I

5 Ifølge dette patentskrift blandes i et første trin en

lægemiddelstofopløsning (1) i et opløsningsmiddel, fx I

somatostatin i vand (spalte 2, 1. 31-32), grundigt med et I

overskud af en polylactid-co-glycolidopløsning (2) i et I

andet opløsningsmiddel, i hvilket det første opløsnings- I

10 middel ikke er opløseligt, fx methylenchlorid, hvilket I

giver en vand-i-olie-emulsion (w/o) (3) af fine lægemiddel- I

stofholdige dråber af (1) i opløsning (2). I opløsning (1) I

opløses yderligere en såkaldt lægemiddelstoftilbageholdende I

substans (spalte 1, 1. 31), fx gelatine, albumin, pectin I

15 eller agar. I

I et andet trin øges viskositeten af den indre fase (l) på I

hensigtsmæssig måde såsom ved opvarmning, afkøling, ændring

af pH-værdien, tilsætning af metalioner eller tværbinding I

af fx gelatine med en aldehyd. I

20 I et tredje trin blandes et overskud af vand grundigt med I

w/o-emulsionen (3), (spalte 7, 1. 52-54), hvilket giver en I

tredobbeltemulsion af w/o/w-typen. I overskuddet af vand kan der, om ønsket, findes et såkaldt emulgerende middel

(spalte 7, 1. 56) valgt fra gruppen bestående af fx et I

25 anionisk eller ikke-ionisk overfladeaktivt middel eller fx I

polyvinylpyrrolidon, polyvinylalkol eller gelatine.

I et fjerde trin udsættes w/o/w-emulsionen for "i-vand- I

I tørring” (1. 52). Dette betyder, at det organiske opløs- I

I ningsmiddel i olielaget desorberes til dannelse af mikro- I

30 partikler. Desorptionen udføres på en måde, der er kendt I

I per se. (spalte 8, 1. 3-5), fx ved sænkning af trykket I

I under omrøring (spalte 8, 1. 5-7) eller fx ved at blæse I

I nitrogengas gennem olielaget (fx methylenchlorid) (1. 19). I

I De dannede mikropartikler isoleres ved centrifugering eller I

21 DK 175849 B1 filtrering (1. 26-27), og de komponenter, der ikke er inkorporeret i polymeren, fjernes ved vask med vand (1.

29). Om ønsket opvarmes mikropartiklerne under reduceret tryk for at opnå bedre fjernelse af vand og opløsnings-5 middel (fx methylenchlorid fra mikropartikelvæggen (1.

30-32)).

Selv om ovennævnte fremgangsmåde er tilfredsstillende til fremstillingen af formuleringerne ifølge opfindelsen, er den ovennævnte såkaldte lægemiddelstoftilbageholdende 10 substans, fx gelatine, albumin, pectin eller agar, dog stadig indeholdt i de resulterende mikropartikler.

Det har nu vist sig, at der endog kan opnås tilfredstillende mikropartikler, når tilsætningen af lægemiddelstoftilba- i geholdende substans undgås (= i opløsning (1), og der 15 undgås det trin, der bevirker forøgelse af den indre fases viskositet ved overskud af vand i den tredobbelte w/o/w-emulsion, og der bibeholdes foranstaltningen med tilsætning ; af en emulgerende substans eller et beskyttelseskolloid, fx gelatine. Desuden indeholder mikropartiklerne ingen læge-20 middelstoftilbageholdende substans og kun en meget lille mængde methylenchlorid.

Opfindelsen tilvejebringer derfor en fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler, der er fremstillet ved grunding blanding af:

25 a) en opløsning af et lægemiddelstof, fortrinsvis somatostatin, især octreotid, i et vandigt medium, for- I

trinsvis vand eller en buffer, fortrinsvis i et vægt/- j volumenforhold på 0,8-4,0 g/1-120 ml, især 2,5/10 og i ! en buffer med en pH-værdi på 3-8, især en acetatbuf-30 fer, og b) en opløsning af en polymer, fortrinsvis et polylactid-co-glycolid som nævnt ovenfor, i et organisk opløsningsmiddel, der ikke er blandbart med det vandige

DK 175849 B1 I

medium, fx methylenchlorid, fortrinsvis i et vægt/- H

volumenforhold på 40 g/90-400 ml, især 40/100, for- I

trinsvis på en sådan måde, at vægt/vægtforholdet H

mellem lægemiddelstoffet og polymeren ligger på fra H

5 1/10 til 50, især 1/16, og volumen/volumenforholdet af H

vandigt medium/organisk opløsningsmiddel er 1/1,5-30, I

især 1/10, og grundig blanding af w/o-emulsionen fra H

a) i b) sammen med

10 c) et overskud af et vandigt medium, fortrinsvis vand H

eller en buffer, fx en acetat- eller phosphatbuffer, H

fortrinsvis med en pH-værdi på 3-8, indeholdende en H

emulgerende substans eller et beskyttelseskolloid, H

fortrinsvis i en koncentration på 0,01-15,0 vægtpro- H

15 cent, især gelatine, fortrinsvis i en koncentration på

0,1-3 vægtprocent, især 0,5 vægtprocent, fortrinsvis i H

et forhold mellem volumen og volumenblandingshastighed H

for ab) og c) på fra 1/10 til 100, især 1/40, I

20 uden tilsætning af nogen lægemiddelstoftilbageholdende H

substans til vand-i-olie-emulsionen eller anvendelse af H

mellemtrin til viskositetsforøgelse, hærdning af de em- bryoniske mikropartikler i den dannede w/o/w-emulsion ved desorption, fortrinsvis ved afdampning, af det organiske

25 opløsningsmiddel, fortrinsvis methylenchlorid, og H

ved isolering, eventuelt vask og tørring af de dannede H

mikropartikler. H

20 Opfindelsen tilvejebringer også en fremgangsmådevariant, H

hvor lægemiddelstoffet dispergeres direkte i polymeropløs- H

ningen, hvorefter den resulterende dispersion blandes med

den gelatineholdige vandfase. I

35 Mikropartikler, der er fremstillet ifølge ovennævnte frem- H

gangsmåder, indeholder ligesom mikropartiklerne fremstillet H

DK 175849 B1 23 ifølge spraytørringsteknikken ikke siliconeolie. I sammenligning med mikropartikierne fremstillet ifølge den kendte tripelemulsionsfremgangsmådetype indeholder de ikke et beskyt tel seskol loid.

5

Formuleringerne med forlænget afgivelse kan også fremstilles ifølge fremgangsmåder, der er kendt per se. fx - hvis peptidet er tilstrækkeligt stabilt til fremstilling 10 af en implanterbar indretning, ved opvarmning af mikropar-tiklerne indeholdende peptidet, fx et somatostatin i et polylactid-co-glycolid, især et sådant som beskrevet ovenfor eller en blanding deraf opnået ved blanding af peptidet og polymeren ved en temperatur på fx fra 70*C til 100®C og 15 ekstrudering og afkøling af den kompakte masse, hvorefter ekstrudatet skæres og eventuelt vaskes og tørres.

Formuleringerne ifølge opfindelsen fremstilles hensigtsmæssigt under aseptiske betingelser.

20

Formuleringerne ifølge opfindelsen kan anvendes i depotform, fx i form af injicerbare mikrosfærer eller implanterbar e indretninger.

25 De kan administreres på konventionel måde, fx ved subkutan eller intramuskulær injektion, fx til indikationer kendte for det deri indeholdte lægemiddelstof.

Formuleringerne roed forlænget afgivelse indeholdende oc-30 treotid kan administreres til alle kendte indikationer for octreotidet eller derivater deraf, fx sådanne som er beskrevet i GB 2,199,829 A, s. 89-96, samt for akromegali og brystkræft.

35

I DK 175849 B1 I

I 24 I

Mikropartiklerne kan have en diameter i et størrelsesområde I

I på fra ca. 1 til 250 /zm, fortrinsvis fra 10 til 200 μπ\, I

I især fra 10 til 130 /zm, fx fra 10 til 90 /zm. Implantater I

I kan være fx fra ca. 1 til 10 mm3. Mængden af lægemiddelstof, I

I 5 dvs. peptid, der er til stede i formuleringen, afhænger af I

den ønskede dosis, der dagligt afgives, og således at den I

I indkapslende polymers bionedbrydningshastighed. Den nøjagtige I

I peptidmængde kan betemmes ved biotilgængelighedsforsøg. I

I Formuleringerne kan indeholde peptid i en mængde på fra I

10 mindst 0,2, fortrinsvis fra 0,5 til 20 vægtprocent i forhold I

til polymermatricen, fortrinsvis fra 2,0 til 10, især fra I

I 3,0 til 6 vægtprocent. I

I Afgivelsestiden for peptidet fra mikropartiklen kan være I

I 15 fra 1 eller 2 uger til ca. 2 måneder. I

Formuleringen med forlænget afgivelse indeholder hensigts- I

I mæssigt et somatostatin, fx octreotid, i et bionedbryde- I

I ligt, biokompatibelt polymerbærestof, som, når det admini- I

2 0 streres subkutant til en rotte med en dosis på 10 mg soma- I

I tostat in pr. kg dyre legemss vægt, udviser en somatostatin- I

koncentration i blodplasmaet på mindst 0,3 ng/ml og for- I

I trinsvis mindre end 20 ng/ml i et tidsrum på 30 dage eller I

I hensigtsmæssigt i et tidsrum på 60 dage. I

I 25 I

I Formuleringen med forlænget afgivelse omfatter alternativt I

hensigtsmæssigt et somatostatin, fx octreotid, i et bioned- I

brydeligt, biokompatibelt polymer bærestof, som, når det I

I administreres intramuskulært til en kanin i en dosis på I

30 5 mg pr. kg legemsvægt, udviser en somatostatinkoncentra- I

tion på mindst 0,3 ng/ml i et tidsrum på 50 dage og hen- I

sigtsmæssigt en koncentration på højst 20 ng/ml. I

Yderlige foretrukne egenskaber hos de opnåede depotfor- I

35 muleringer, fx somatostatiner indeholdende octreotid, er, I

afhængigt af den anvendte fremgangsmåde: I

25 DK 175849 B1

Faseadskillelsesteknik

Kanin 5 mg somatostatin/kg, intramuskulært retardering (0-42 dage) 76% gennemsnitligt plasmaniveau 5 (cp, ideal) (0-42 dage) 4 ng/ml AUC (0-42 dage) 170 ng/ml x dage

Spravtørringsteknik

Rotte 10 mg somatostatin/kg, subkutant retardering (0-42 dage) > 75% 10 gennemsnitligt plasmaniveu (cp, ideal) (0-42 dage) 4-6 ng/ml AUC (0-42 dage) 170-210 ng/ml x dage

Kanin 5 mg somatostatin/kg, intramuskulært retardering (0-43 dage) > 75% 15 gennemsnitligt plasmaniveu (cp, ideal) (0-43 dage) 4-6 ng/ml AUC (0-43 dage) 200-240 ng/ml x dage

Tripelemulsionsteknik

Rotte 10 mg somatostatin/kg, subkutant 20 retardering (0-42 dage) > 75% gennemsnitligt plasmaniveu (cp, ideal) (0-42 dage) 4-6,5 ng/ml AUC (0-42 dage) 170-230 ng/ml x dage

Kanin 5 mg somatostatin/kg, intramuskulært · 25 retardering (0-42/43 dage) > 74% gennemsnitligt plasmaniveu (cp, ideal) (0-42/43 dage) 3,5-6,5 ng/ml AUC (0-42/43 dage)160-270 ng/ml x dage i

DK 175849 B1 I

Opfindelsen tilvejebringer således også somatostatinpræ- I

parater, fortrinsvis octreotid- og octreotidanalogpræpara- I

ter, med følgende egenskaber: H

1. en retardering på mindst 70%, fortrinsvis mindst 74%, H

5 fx mindst 75%, 80%, 88% eller mindst 89%, i en periode H

på fra 0 til 42 eller 43 dage, og/eller I

2. et gennemsnitligt plasmaniveau (Cp, ideal) på H

2,5-6,5 ng/ml, fortrinsvis 4-6,5 ng/ml, i en periode H

på fra 0 til 42 dage i rotte, når 10 mg somatostatin H

10 administreres subkutant, og/eller et gennemsnitligt H

plasmaniveau på 3,5-6,5 ng/ml, fx 4-6,5 ng/ml, i en I

periode på fra 0 til 42 eller 43 dage i kanin, når I

5 mg somatostatin administreres intramuskulært, og/el- H

ler I

15 3. et AUC i en periode på fra 0 til 42 dage på mindst I

160, fortrinsvis 170-230, ng/ml x dage for rotte, når I

10 mg somatostatin administreres subkutant, og/eller I

et AUC i en periode på fra 0 til 42 eller 43 dage på I

mindst 160, fortrinsvis fra 180 til 275, fx fra 200 I

20 til 275, ng/ml x dage for kanin, når 5 mg somatostatin I

administreres intramuskulært. I

Til kvantitativ karakterisering af ovenfor beskrevne for- I

muleringer med forlænget afgivelse anvendes den metode for I

områdeafvigelse "area deviation" (AD), der er offentlig- H

25 gjort af F. Nimmerfall og J. Rosenthaier,· Intern. J. Phar- I

maceut. 32, 1-6 (1986). I korthed går AD-metoden ud på, at I

den eksperimentelle plasmaprofils områdeafvigelse udregnes

ud fra en idealprofil, som er et konstant gennemsnitligt I

plasmaniveau (= cp,ideal), der er fremkommet ved omdannelse H

30 af det eksperimentelle areal under plasmaniveau-tidskurven I

(AUC) til et rektangel med lige stort areal. Ud fra den I

procentuelle områdeafvigelse (med henvisning til AUC)

beregnes den procentuelle retardering på følgende måde: H

27 DK 175849 B1 procentuel retardering = 100 x (l - AD/AUC)

Ved denne fremgangsmåde karakteriseres hele plasmaprofilen målt i et forudbestemt tidsrum, ved hjælp af et enkelt numerisk indeks.

5 I Proc. natl. Acad. Sci. USA 85 (1988) 5688-5692 er der i fig. 4 beskrevet en plasmaniveauprofil for octapeptidanalo-gen af somatostatin med formlen * * D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 10 i rotte.

Imidlertid kan der ikke foretages en klar sammenligning med de ovennævnte plasmaniveaudata for præparatet ifølge opfindelsen i rotte nævnt ovenfor, da den beskrevne plasmaniveauprof il er baseret på en anden administrationsmåde 15 (intramuskulær injektion) og - hvad der er vigtigere - mikrokapslernes fyldning (mellem 2% og 6%) og doseringsmængde til administration (25-50 mg portioner af mikro-kapsler i 30 dage, selv om der blev foretaget bestemmelser i mindst 45 dage) ikke er nøjagtigt angivet. Desuden er den 20 anvendte slags poly(D,L-lactid-co-glycolid) ikke nøjagtigt beskrevet.

Værdien af det i publikationen beskrevne er således for lav til, at publikationen kan anses for at være en forudgående offentliggørelse, der kolliderer med den foreliggende op-25 findelse.

Følgende eksempler illustrerer opfindelsen.

Mw af polymerer er den gennemsnitlige molekylvægt bestemt ved GLPC under anvendelse af polystyren som standard.

i

DK 175849 B1 I

EKSEMPEL 1 I

1 g poly(D,L,-lactid-co-glycolid)(50/50 molær, Mw = 45.000; I

polydispersitet ca. 1,7) blev under magnetisk omroring I

opløst i 15 ml methylenchlorid efterfulgt af tilsætning af I

5 75 mg octreotidacetat opløst i 0,5 ml methanol. 15 ml I

siliconeolie (af mærket Dow 360 Medical Fluid, 1000 cs) H

siliconevæske) blev sat til polymerpeptid-blandingen. Den I

resulterende blanding blev sat til en omrørt emulsion, der I

indeholdt 400 ml n-heptan, 100 ml phosphatbuffer pH 4, I

10 40 ml Dow 360 Medical Fluid, 350 cs og 2 ml Span 80 (emul- I

gator). Omrøring fortsattes i mindst 10 minutter. De resul- H

terende mikropartikler blev isoleret ved filtrering og H

tørret natten over i en vakuumovn. Udbyttet blev ca. 90% H

mikropartikler størrelsesområdet 10-40 μτη. I

15 Mikropartiklerne blev suspenderet i et vehikel og admini- I

streret intramuskulært i en 4 mg octreotiddosis til hvide H

New Zealand-kaniner. Der blev periodisk taget blodprøver, H

der viste plasmaniveauer på fra 0,5 til 1,0 ng/ml i 30 H

dage målt ved radioimmunoanalyse (RIA).

i I

29 DK 175849 B1 EKSEMPEL 2 i i 1 g poly(D,L,-lactid-co-glycolid)glucose (Mw = 45.000 (55/45 molær fremstillet ifølge fremgangsmåden beskrevet i GB 2,145,422 B; polydispersitet ca. 1,7; fremstillet ud fra 5 0,2% glucose) blev under magnetisk omrøring opløst i 25 ml ethylacetat efterfulgt af tilsætning af 75 mg octreotid opløst i 3 ml methanol. 25 ml siliconeolie (af mærket Dow 360 Medical Fluid, 1000 cs) blev sat til polymer-peptidblandingen. Den resulterende blanding blev sat til emulsio-10 nen, der er beskrevet i eksempel 1. Omrøring fortsattes i mindst 10 minutter. De resulterende mikropartikler blev isoleret ved vakuumfiltrering og tørret natten over i en vakuumovn. Udbyttet var mere end 80% af mikropartiklerne i størrelsesområdet 10-40 μΐπ.

15 Mikropartiklerne blev suspenderet’i et vehikel og administreret intramuskulært i en 4 mg octreotiddosis til hvide New Zealand-kaniner. Der blev periodisk taget blodprøver, der målt ved RIA viste plasmaniveauer på 0,5-2 ng/ml i 21 dage.

20 EKSEMPEL 3

En opløsning på 1,5 g octreotidacetat i 20 ml methanol blev under omrøring sat til en opløsning af 18,5 g poly(D,L,-lactid-co-glycolid)glucose (50:50 molær, Mw 45.000) i 500 ml methylenchlorid. Faseadskillelse blev udført ved 25 tilsætning af 500 ml Dow 360 Medical Fluid (1000 cs) og 800 ml Dow 360 Medical Fluid (350 cs) til peptid-polymer-suspensionen. Den resulterende blanding blev sat til en omrørt emulsion bestående af 1800 ml n-heptan, 2000 ml sterilt vand og 40 ml Span 80. Efter omrøring i 10 minutter 30 blev mikrosfærerne opsamlet ved vakuumfiltrering.

I DK 175849 B1 I

I 30 I

I Halvdelen af produktet blev tørret natten over i en vakuum- I

I ovn ved 37*C. Niveauet af det tilbageblevne methylenchlorid I

I var 1,2%. I

I Den anden halvdel af produktet blev vasket ved omrøring med I

I 5 1000 ml ethanol indeholdende 1 ml Span 80. Efter omrøring i I

I 1 time blev ethanolet dekanteret, og mikropartiklerne blev I

I omrørt med 1000 ml n-heptan indeholdende 1 ml Span 80. I

I Efter omrøring i 1 time blev mikropartiklerne opsamlet ved I

I vakuumfiltrering og tørret natten over i en vakuumovn ved I

I 10 37‘C. Niveauet af det tilbageblevne methylenchlorid i I

mikropartiklerne, der var vasket på denne måde, var redu- I

I ceret fra 1,2% til 0,12%. I

Det samlede produktudbytte var 18,2 g (91%) af mikropar- I

I tikler indeholdende 5,6% octreotid, gennemsnitligt diame- I

I 15 ter 24 μΐη, 1,5% tilbageværende heptan. I

Mikropartiklerne blev suspenderet i et vehikel og injiceret I

intramuskulært i 5 mg/kg octreotiddoser til hvide kaniner. I

I Der blev periodisk taget blodprøver, der målt ved RIA viste I

I plasmaniveauer på 0,3-7,7 ng/ml i 49 dage. I

I 20 EKSEMPEL 4 I

I 1 g poly(D,L,-lactid-co-glycolid)glucose Mw 46.000 (50:50) I

I molær fremstillet ifølge fremgangsmåden beskrevet i I

I GB 2,145,422 B, polydispersitet ca. 1,7, fremstillet ud fra I

I 0,2% glucose) blev under magnetisk omrøring opløst i 10 ml I

I 25 methylen-chlorid efterfulgt af tilsætning af 75 mg octreo- I

I tid opløst i 0,133 ml methanol. Blandingen blev blandet I

I kraftigt, fx ved hjælp af en Ultra-Turax, i 1 minut ved I

20.000 omdrejninger/minut, hvilket gav en suspension af

meget små octreotidkrystaller i polymeropløsningen. I

31 DK 175849 B1

Suspensionen blev sprayet ved hjælp af en "high speed"-turbine (Niro Atomizer), og de små dråber blev torret i en varm luftstrøm til dannelse af mikropartikler. Mikropartik-lerne blev opsamlet af en "zyklon" og tørret natten over 5 ved stuetemperatur i en vakuumovn.

Mikropartiklerne blev vasket med 1/15 molær acetatbuffer, pH 4,0, i 5 minutter og tørret igen ved stuetemperatur i en vakuumovn. Efter 72 timer blev mikropartiklerne sigtet (0,125 mm maskestørrelse), hvilket gav slutproduktet.

10 Mikropartiklerne blev suspenderet i et vehikel og administreret intramuskulært i 5 mg/kg octreotiddoser til hvide kaniner (chinchilla-bastarder) og subkutant i en 10 mg/kg dosis til hanrotter. Der blev periodisk taget blodprøver, der målt ved radioimmunoanalyse (RIA) viste plasmaniveauer 15 på 0,3-10,0 ng/ml (5 mg dosis) hos kaniner og 0,5-7,0 ng/ml hos rotter i 42 dage.

EKSEMPEL 5

Mikropartikler blev fremstillet ved spraytørring på samme måde som beskrevet i eksempel 4 med den enkelte ændring, at 20 octreotid blev suspenderet direkte i polymeropløsningen uden anvendelse af methanol.

Mikropartiklerne blev suspenderet i et vehikel og administreret subkutant i en 10 mg/kg octreotiddosis til hanrotter. Der blev periodisk taget blodprøver, der målt ved 25 radioimmunoanalyse (RIA) viste plasmaniveauer på 0,5-10,0 ng/ml i rotter i 42 dage.

DK 175849 B1 I

EKSEMPEL 6 I

1 g poly(D,L,-lactid-co-glycolid)glucose, Mw 46.000 (50:50 I

molær fremstillet ifølge fremgangsmåden beskrevet i I

GB 2,145,422 B, polydispersitet ca. 1,7, fremstillet ud fra

5 0,2% glucose) blev opløst i 2,5 ml methylenchlorid efter- I

fulgt af tilsætning af 75 mg octreotid opløst i 0,125 ml I

deioniseret vand. Blandingen blandedes kraftigt, fx ved H

hjælp af en Ultra-Turax, i 1 minut ved 20.000 omdrejnin- I

ger/minut (indre w/o-fase). I

10 1 g Gelatine λ blev opløst i 200 ml deioniseret vand ved H

50eC, og opløsningen blev afkølet til 20®C (ydre w-fase). H

W/o- og w-faserne blev blandet kraftigt. Derved blev den I

indre w/o-fase skilt fra i små dråber, som homogent blev I

dispergeret i den ydre w-fase. Den resulterende tripele- H

15 mulsion blev omrørt langsomt i 1 time. Herved blev methy- H

lenchlorid afdampet, og mikrokapslerne blev hærdet ud fra H

smådråberne fra den indre fase. Efter sedimentering af H

mikropartiklerne blev supernatanten suget fra, og mikropar- I

tiklerne blev isoleret ved vakuumfiltrering og renset med H

20 vand for at fjerne gelatine. Tørring, sigtning, vask og H

sekundær tørring af mikropartiklerne blev udført som be-

skrevet i eksempel 4. I

Mikropartiklerne blev suspenderet i et vehikel og admini- H

streret intramuskulært i 5 mg/kg octreotiddosis til hvide

25 kaniner (chinchillabastard) og subkutant i en 10 mg/kg I

dosis til hanrotter. Der blev periodisk taget blodprøver, H

der målt ved radioimmunoanalyse (RIA) viste plasmaniveauer j I

på 0,3-15,0 ng/ml (5 mg dosis) hos kaniner og 0,5-8,0 ng/ml I

hos rotter i 42 dage. H

EKSEMPEL 7 DK 175849 B1 33

Mikropartikler blev fremstillet ved tripelemulsionsteknik på samme måde som beskrevet i éksempel 6 med følgende tre ændringer: 5 l. 0,25 ml acetatbuffer pH 4,0 blev anvendt i stedet for 0,125 ml vand til fremstilling af den indre w/o-fase.

2. vask efter opsamling af mikropartiklerne blev udført med 1/45 molær acetatbuffer pH 4,0 i stedet for med vand.

10 3. yderligere vask af mikropartikler blév udeladt.

EKSEMPEL 8

Mikropartikler blev fremstillet ved tripelemulsionsteknik på samme måde som beskrevet i eksempel 7 med den enkelte ændring, at den indre w/o-fase blev fremstillet under 15 anvendelse af vand indeholdende 0,7% (w/v) natriumchlorid i stedet for acetatbuffer.

EKSEMPEL 9

Mikropartikler blev fremstillet på samme måde som beskrevet i eksempel 6 med den eneste forskel, at lægemiddelstoffet 20 direkte dispergeres i polymeropløsningen, hvorefter den resulterende dispersion blev blandet med den gelatineholdi-ge vandfase.

I DK 175849 B1 I

I 34 I

I EKSEMPEL 10 I

I Octreotidpamoat I

I 10,19 g octreotid i form af fri base (10 mM) og 3,88 em- I

I bonsyre (10 mM) opløses ill vand/dioxan (1:1). Reaktions- · I

I 5 blandingen filtreres og lyofiliseres, hvilket giver et I

I gult pulver [a]20D = + 7,5" (C = 0,35, i DMF), octreotid- I

I pamoathydrat. Faktor = 1,4, hvor faktor « lyofilisatvæg- I

I ten/vægten af det deri indeholdte octreotid. I

I Pamoatet kan erstatte det octreotid, der er til stede i I

10 mikropartiklerne i eksempel 1-9, og har en fremragende I

stabilitet.

I EKSEMPEL 11 I

I En opløsning af l g poly(D,L-lactid-co-glycolid) (50:50 I

I molær, Mw = 36.100) i 20 ml methylenchlorid blev under I

15 omrøring sat til en opløsning af 100 mg calcitonin i 1,5 ml I

I methanol. Faseadskillelse blev udført ved tilsætning af I

I 20 ml siliconevæske (Dow 360 Medical Fluid, 1000 cs). Den I

I resulterende blanding blev sat til en omrørt emulsion be- I

I stående af 100 ml phosphatbuffer pH 4, 400 ml n-heptan, I

I 20 4 ml Span 80 og 40 ml siliconevæske (Dow 360 Medical Fluid, I

1000 cs). Efter omrøring i 10 minutter blev mikrosfærerne

I opsamlet ved vakuumfiltrering og tørret i vakuumovn ved H

I 37°C natten over. Udbyttet var 1,1 g mikrosfærer indehol- I

I dende 5,9% calcitonin.

I 25 EKSEMPEL 12 I

I En opløsning af 9,9 g poly(D,L-lactid-co-glycolid) (50/50 I

I molær, Mw = 44.300) i 140 ml methylenchlorid blev sat til I

I 100 mg lypressin. Dispersionen blev omrørt med magnetom- I

I rører i 1 time før tilsætning af 140 ml siliconevæske (Dow I

35 DK 175849 B1 360 Medical Fluid, 1000 cs) og 2,5 ml Span 80. Blandingen ( blev sat til 2000 ml heptan og omrørt i 10 minutter. De resulterende mikrokapsler blev opsamlet ved vakuumfiltrering, vasket 3 gange med heptan og tørret i 10 minutter 5 under sugning. Halvdelen af prøven blev under omrøring vasket i vand i 10 minutter; den anden halvdel blev ikke vasket. Begge prøver blev tørret i vakuumovn ved 30°C natten over. Det samlede udbytte blev 10,65 g mikrokapsler.

Analyse af den vaskede prøve viste 0,5% lypressin og 0,6% 10 for den prøve, der ikke blev vasket med vand.

Claims

1. Fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler om- I I fattende et lægemiddelstof i et bionedbrydeligt, biokompa- I I 5 tibelt polymert bærestof, I I kendetegnet ved, at den omfatter følgende trin: I I a) det polymere bærestofmateriale opløses i et hensigts- I I mæssigt opløsningsmiddel, i hvilket lægemiddelstoffet I I 10 ikke er opløseligt, I I b) en opløsning af lægemiddelstoffet sættes til og dis- I pergeres i et hensigtsmæssigt opløsningsmiddel, i I I hvilket polymeren i opløsningen fra trin a) ikke er I I 15 opløselig, I I c) et faseinduceringsmiddel sættes til dispergeringen fra I I trin b) for at fremkalde mikropartikeldannelse, I 20 d) en olie-i-vand-emulsion sættes til blandingen fra trin I I c) til hærdning af mikropartiklerne, og I I e) mikropartiklerne isoleres. I I 25 2. Fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler om- I I fattende et lægemiddelstof i et bionedbrydeligt, biokompa- I tibelt bærestof, kendetegnet ved, at den omfatter I I 30 i) kraftig blanding af en vand-i-olie-emulsion dannet af I I et vandigt medium og et organisk opløsningsmiddel, der I I ikke er blandbart med vand, hvilken emulsion inde- I I holder lægemiddelstoffet i én fase og en bionedbryde- I I lig/ biokompatibel polymer i den anden fase, med et I 35 overskud af vandigt medium, der indeholder en emul- I gerende substans eller et beskyttelseskolloid til I dannelse af en vand-i-olie-i-vand-emulsion uden til- I sætning af lægemiddelstoftilbageholdende substans til I --1 DK 175849 B1 vand-i-olie-emulsionen eller anvendelse af mellemliggende viskositetsforøgende trin, ii) desorbering af det organiske opløsningsmiddel derfra, 5 iii) isolering og tørring af de resulterende mikropartik-ler.

3. Fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler inde-10 holdende et lægemiddelstof i en bionedbrydelig, biokompatibel polymer, kendetegnet ved, at den omfatter i) kraftig blanding af en lægemiddelstofsuspension 15 dannet af et lægemiddelstof og et organisk opløsnings middel, der ikke er blandbart med vand, og som indeholder en bionedbrydelig, biokompatibel polymer, med i i I overskud af vandigt medium indeholdende en emulgerende j substans eller et beskyttelseskolloid til dannelse af j 20 en olie-i-vand-emulsion, idet lægemiddelstoffet dis- i pergeres i oliekomponenten uden tilsætning af lægemid-delstoftilbageholdende substans eller anvendelse af mellemliggende viskositetsforøgende trin, 25 ii) desorbering af det organiske opløsningsmiddel derfra, iii) isolering og tørring af de resulterende mikropartikler.

4. Fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler, kendetegnet ved, at den omfatter kraftig blanding af: a) en opløsning af et lægemiddelstof i et vandigt medium 35 og b) en opløsning af en polymer i et organisk opløsningsmiddel, der ikke er blandbart med det vandige medium, DK 175849 B1 I

38 I kraftig blanding af w/o/emulsionen fra a) og b) sammen med c) et overskud af et vandigt medium indeholdende et I 5 beskyttelseskolloid uden tilsætning af lægemiddelstof I tilbageholdende substans til vand-i-olie-emulsionen eller anvendelse af mellemliggende viskositetsfor- I øgende trin, hærdning af de embryoniske mikropartikler I i den dannede w/o/w/emulsion ved desorption og iso- I 10 lering af de resulterende mikropartikler. I

5. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, at lægemiddelstoffet er et I somatostatin.

15 I

6. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, I at lægemiddelstoffet er octreotid. I

7. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, I 20 at lægemiddelstoffet er octreotid-pamoatsalt. I

8. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, I at polymeren er et polylactid-coglycolid. I

9. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, I at det vandige medium er vand eller en buffer. I

10. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet I ved, at det vandige medium er en buffer med en pH-værdi på I 30 3-8. I

11. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet I ved, at det organiske opløsningsmiddel er methylenchlorid. I

35 I ^________π • I DK 175849 B1

12. Fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler, kendetegnet ved, at den omfatter kraftig blanding af: 5 a) en somatostatinopløsning i vand eller en buffer i et vægt/volumenforhold på 0,8-4,0 g/1-120 ml og b) en opløsning af et polylactid-co-glycolid i et organisk opløsningsmiddel, der ikke er blandbart med det •10 vandige medium, i et vægt/volumenforhold på 40 g/- i 90-400 ml på en sådan måde, at vægt/vægtforholdet mellem lægemiddelstoffet og polymeren ligger på fra 1/10 til 50 og volumen/volumenforholdet af det vandige medium/organiske opløsningsmiddel er 1/1,5-30, og 15 kraftig blanding af w/o-emulsionen fra a) i b) sammen med c) et overskud af vand eller en buffer indeholdende et beskyttelseskolloid i et forhold mellem volumen og 20 volumenblandingshastighed for ab) og c) på fra 1/10 til 100, > uden tilsætning af lægemiddelstoftilbageholdende substans til vand-i-olie-emulsionen eller anvendelse af mellemtrin 25 til viskositetsforøgelse, hærdning af de embryoniske mikro-partikler i den dannede w/o/w-emulsion ved afdampning af det organiske opløsningsmiddel og isolering af de frembragte mikropartikler.

13. Fremgangsmåde ifølge krav 12, kendetegnet ved, at beskyttelseskolloidet er gelatine.

14. Fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler, kendetegnet ved, at den omfatter kraftig blanding af: a) en opløsning af somatostatin i et vandigt^medium i et 35 DK 175849 B1 I I 40 I vægt/volumenforhold på 2,5 mg/10 ml og B b) en opløsning af et polylactid-coglycolid i et organisk I opløsningsmiddel, der ikke er blandbart med det van- B I . 5 dige medium, i et vægt/volumenforhold på 40 g/100 ml ‘ B ' på en sådan måde, at vægt/volumenforholdet mellem læge- I middelstoffet og polymeren er 1/16, og volumen/volumen- B forholdet mellem det vandige medium og organisk opløs- B ningsmiddel er 1/10, kraftig blanding af w/o-emuisionen B 10 af a) i b) sammen med 1 B c) et overskud af et vandigt medium indeholdende et beskyt- B telseskolloid i en koncentration på 0,01 til 15,0% ved B et volumen/volumen-blandingshastighedsforhold mellem fl 15 ab) og c) på 1/40, I B uden tilsætning af lægemiddelstoftilbageholdende substans B til vand-i-olie-emulsionen eller anvendelse af mellemtrin B til viskositetsforøgelse, hærdning af de embryoniske mi- B kropartikler i den dannede w/o/w-emulsion ved afdampning B 20 af det organiske opløsningsmiddel og isolering af de frem- B bragte mikropartikler. B

15. Fremgangsmåde til fremstilling af mikropartikler, k e η- B detegnet ved, at den omfatter kraftig blanding af: B

25 I a) en opløsning af octreotid i et vægt/volumenforhold på B 2,5 g/10 ml i en buffer med en pH-værdi på 3-8 og B b) en opløsning af et polylactid-coglycolid i methylen i B 30 et vægt/volumenforhold på 40 g/100 ml på en sådan mde, B at vægt/vægtforholdet mellem lægemiddelstoffet og poly- B meren er 1/16, og volumen/volumenforholdet mellem det B vandige medium og organisk opløsningsmiddel er 1/10, B kraftig blanding af w/o-emulsionen af a) i b) sammen med B B c) et overskud af et buffer med en pH-værdi på 3-8, in- B . ., I DK 175849 B1 deholdende gelatine i en koncentration på 0,5 vægtprocent ved et volumen/volumenblandingshastighedsfor-hold mellem ab) og c) på 1/40, , uden tilsætning af lægemiddelstoftilbageholdende substans j 5 til vand-i-olie-emulsionen eller anvendelse af mellemtrin til viskositetsforøgelse, hærdning af de embryoniske mikro-j partikler i den dannede w/o/w-emulsion ved afdampning af I methylenchlorid og ! isolering, vask og tørring af de frembragte mikropartikler. : io

16. Formulering med forlænget afgivelse, kendetegnet ved, at den omfatter octreotid eller et salt eller derivat deraf i et bionedbrydeligt, biokompatibelt polymert bærestof. 15

17. Formulering ifølge krav 16, kendetegnet ved, at polymeren er poly-(DL-lactid-coglycolid)-glucose.

18. Formulering ifølge krav 16 på mikropartikelform, k e n- 20 detegnet ved, at overfladen er i det væsentlige fri | for lægemiddelforbindelse. ’

19. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, kendetegnet ved, at den er fremstillet ved at 25 blande lægemiddelforbindelsen eller en opløsning deraf i methanol eller vand eller en buffer med pH = 3-8 og en opløsning af et polylactid-coglycolid i methylenchlorid og spraying af den dannede suspensionsopløsning eller emulsion af lægemiddelforbindelse i polymeropløsningen i en strøm af 30 varm luft, opsamling af mikrosfærerne og vask deraf i en bufferopløsning ved pH = 3,0-8,0 eller destilleret vand og tørring deraf i vakuum ved en temperatur fra 20 til 40°C. I DK 175849 B1 I i 42 I

20. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, H I kendetegnet ved, at octreotidkoncentrationen er H 2,0-10 vægtprocent. H I 5 21. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, H I kendetegnet ved, at den har mikropartikelform H med en diameter fra 1 til 250 μτη. H

22. Formulering med forlænget afgivelse, H I 10 kendetegnet ved, at den omfatter en peptidlæge- H I middelforbindelse i en fra 40/60 til 60/40 polylactid-cogly- H I colidester af polyol, idet polyolenheden er valgt fra gruppen H I bestående af alkohol indeholdende en (C3_g)-carbonkæde med H I 3-6 hydroxylgrupper og et mono- eller disaccharid, idet den H I 15 esterificerede polyol har mindst 3 polylactid-coglycolid- : H kæder. H

23. Formulering med forlænget afgivelse, H I kendetegnet ved, at den omfatter et peptidlæge- H I 20 middelstof valgt fra gruppen bestående af calcitonin, lypres- H I sin og somatostatin i en lineær fra 40/60 til 60/40 polylac- H I tid-coglycolidpolymer med kæder med en molekylvægt Mw på I mellem 25.000 og 100.000, en polydispersitet Mw/Mn på mellem H I 1,2 og 2, i en peptidlægemiddelforbindelseskoncentration på H 25 fra 0,2 til 10 vægtprocent. H

24. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 22, H I kendetegnet ved, at den har en hovedmolekylvægt H I Mw på fra 10.000 til 200.000 og en polydispersitet Mw/Mn H I 30 på fra 1,7 til 3,0. H

25. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 22, H kendetegnet ved, at Mw er fra 35.000 til 60.000. H I 35 26. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 22, H I kendetegnet ved, at Mw/Mn er fra 2,0 til 2,5. H DK 175849 B1

27. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, 22 eller 23, kendetegnet ved, at når formuleringen administreres subkutant til en rotte i en dosis på 10 mg lægemid-5 delstof pr. kg legemsvægt, udvises en lægemiddelstofkoncentration i blodplasmaet på mindst 0,3 ng/ml og mindre end 20 ng/ml i en 30 dages periode.

28. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, 22 10 eller 23, kendetegnet ved, at når formuleringen administreres intramuskulært til en kanin i en dosis på 5 mg lægemiddelstof pr. kg legemsvægt, udvises en lægemiddelstofkoncentration på mindst 0,3 ng/ml og højst 20 ng/ml i 15 en 50 dages periode.

29. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, 22 eller 23, kendetegnet ved, at når formuleringen admini-20 streres intramuskulært til en kanin i en dosis på 5 mg lægemiddelstof pr. kg legemsvægt, udvises en retardering på mindst 70% i en periode på fra 0 til 42 eller 43 dage.

30. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, 22 25 eller 23, kendetegnet ved, at når formuleringen administreres subkutant til en rotte i en dosis på 10 mg lægemid-‘ delstof pr. kg legemsvægt, udvises et gennemsnitligt plas maniveau (cp-ideal) på fra 2,5 til 6,5 ng/ml i en tids-30 periode på fra o til 42 dage.

31. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, 22 eller 23, kendetegnet ved, at når formuleringen admini-35 streres intramuskulært til en kanin i en dosis på 5 mg· lægemiddelstof pr. kg legemsvægt, udvises et gennemsnitligt plasmaniveau (cp-ideal) på fra 3,5 til 6,5 ng/ml. — - - ------ . - - ---. H ^Β I DK 175849 B1 I I I

32. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, 22 I I eller 23, I I kendetegnet ved, at når formuleringen admini- I I streres subkutant til en rotte i en dosis på 10 mg lægemid- I 5 delstof pr. kg legemsvægt, udvises en AUC på fra 160 til B I 230 g/ml x dage i en periode på fra 0 til 42 eller 43 dage. B

33. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16, 22 B I eller 23, B I 10 kendetegnet ved, at når formuleringen admini- B ; streres intramuskulært til en kanin i en dosis på 5 mg B I 1 lægemiddelstof pr. kg legemsvægt, udvises en AUC på fra 160 B I til 275 ng/ml x dage i en periode på fra 0 til 42 eller 43 B dage. B I 15 I

34. Formulering med forlænget afgivelse ifølge krav 16 til B anvendelse ved behandling eller forebyggelse af akromegali B I eller brystcancer. B I 20 35. Octreotidpamoat. B I 1 I

36. Fremgangsmåde til fremstilling af octreotidpamoat, B I kendetegnet ved, at octreotid omsættes med embon- B I syre eller et reaktivt derivat deraf. B 1 25 I

37. Formulering med forlænget afgivelse, B I kendetegnet ved, at den omfatter et peptidlæge- B I middelstof valgt fra gruppen bestående af calcitonin og / B I lypressin og farmaceutisk acceptable salte deraf i en bio- B I 30 nedbrydelig, biokompatibel polymermatrix. . B