DE60210456T2 - Solubilisierung von capsulären Polysacchariden - Google Patents
Solubilisierung von capsulären Polysacchariden Download PDFInfo
- Publication number
- DE60210456T2 DE60210456T2 DE60210456T DE60210456T DE60210456T2 DE 60210456 T2 DE60210456 T2 DE 60210456T2 DE 60210456 T DE60210456 T DE 60210456T DE 60210456 T DE60210456 T DE 60210456T DE 60210456 T2 DE60210456 T2 DE 60210456T2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- ethanol
- meningitidis
- polysaccharide
- serogroup
- polysaccharides
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/095—Neisseria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/04—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from fish or other sea animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
- A23J1/205—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey from whey, e.g. lactalbumine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
- A61K38/4893—Botulinum neurotoxin (3.4.24.69)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
- A61K39/092—Streptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/22—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Neisseriaceae (F)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/285—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Pasteurellaceae (F), e.g. Haemophilus influenza
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09F—NATURAL RESINS; FRENCH POLISH; DRYING-OILS; DRIERS (SICCATIVES); TURPENTINE
- C09F1/00—Obtaining purification, or chemical modification of natural resins, e.g. oleo-resins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09G—POLISHING COMPOSITIONS; SKI WAXES
- C09G1/00—Polishing compositions
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
- Y10S424/831—Drug, bio-affecting and body treating compositions involving capsular polysaccharide of bacterium, e.g. polyribosyl ribitol phosphate
Description
- TECHNISCHES GEBIET
- Die vorliegende Erfindung liegt auf dem Gebiet der Impfstoffe, insbesondere gegen Meningokokken-Infektionen und Meningokokken-Erkrankungen.
- STAND DER TECHNIK
- Neisseria meningitidis ist ein Gram-negatives humanes Pathogen. Sie besiedelt den Kehlkopf und ruft Meningitis sowie gelegentlich auch eine Septikämie bei fehlender Meningitis hervor. Dieser Erreger steht in enger Beziehung zu N. gonorrhoeae, obgleich ein Merkmal, durch das er sich klar von Meningococcus unterscheidet, das Torliegen einer Polysaccharidkapsel ist, die bei allen pathogenen Meningococci vorliegt.
- Auf der Basis des capsulären Polysaccharids des Organismus wurden zwölf Serogruppen von N. meningitidis identifiziert (A, B, C, H, I, K, L, 29E, W135, X, Y und Z). Das Pathogen der Gruppe A ist in den meisten Fällen am epidemischen Auftreten der Erkrankung in Afrika südlich der Sahara beteiligt. Die Serogruppen B und C sind für die überwiegende Zahl der Fälle in den USA und in den meisten entwickelten Ländern verantwortlich. Die Serogruppen W135 und Y sind für die übrigen Fälle in den USA und den entwickelten Ländern verantwortlich.
- Die capsulären Polysaccharide von N. meningitidis werden üblicherweise nach einem Verfahren hergestellt, das die Schritte der Polysaccharidfällung (zum Beispiel mit einem kationischen Detergens), der Ethanolfraktionierung, der kalten Phenolextraktion (zur Proteinentfernung) und der Ultrazentrifugierung (zur Entfernung von LPS) umfasst (vgl. z. B. Lit. 1].
- Ein tetravalentes Vakzin aus capsulären Polysacchariden der Serogruppen A, C, Y und W135 ist seit vielen Jahren bekannt [2, 3] und für die humanmedizinische Anwendung zugelassen. Obgleich es bei Heranwachsenden und Erwachsenen wirksam ist, induziert es nur eine geringe Immunantwort und führt nur zu einer kurzen Schutzdauer und kann bei Kindern nicht verwendet werden [vgl. z. B. 4]. Der Grund hierfür liegt darin, dass die Polysaccharide T-Zellenunabhängige Antigene sind, die eine schwache Immunantwort hervorrufen, die nicht geboostet werden kann. Die Polysaccharide in diesem Impfstoff sind nicht konjugiert und liegen im Verhältnis 1:1:1:1 vor [5]. Das Produkt MENCEVAX ACWYTM enthält 50 μg jedes dieser Polysaccharide in gereinigter Form nach Rekonstituierung aus der lyophilisierten Form.
- Die konjugierten Oligosaccharide der Serogruppe C wurden ebenfalls zur humanmedizinischen Verwendung zugelassen [z. B. Menjugat®; vgl. Lit. 6]. Es besteht allerdings nach wie vor ein Bedürfnis nach Verbesserungen bei konjugierten Vaccinen gegen die Serogruppen A, W135 und Y sowie ihrer Herstellung.
- OFFENBARUNG DER ERFINDUNG
- Die Erfindung gibt ein Verfahren zur Reinigung eines bakteriellen capsulären Polysaccharids an, das folgende Schritte umfasst: (a) Fällung des Polysaccharids unter Verwendung eines oder mehrerer kationischer Detergentien und anschließend (b) Solubilisierung des gefällten Polysaccharids mit einem Alkohol, wie Ethanol. Das Polysaccharid kann zur Herstellung von Impfstoffen, wie etwa konjugierten Impfstoffen, insbesondere gegen N. meningitidis der Serogruppen A, W135 und Y, verwendet werden.
- Fällung und Solubilisierung mit Ethanol
- Im Stand der Technik sind zahlreiche Verfahren zur Fällung von löslichen Polysacchariden bekannt. Die Verfahren der vorliegenden Erfindung machen von einem oder mehreren kationischen Detergentien Gebrauch. Die Detergentien besitzen bevorzugt die nachstehende allgemeine Formel: worin:
R1, R2 und R3, die gleich oder verschieden sind, jeweils Alkyl oder Aryl bedeuten oder R1 und R2 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen gesättigten heterocyclischen Ring bilden, und R3 Alkyl oder Aryl bedeutet;
oder R1, R2 und R3 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen, am Stickstoffatom ungesättigten Ring bilden,
R4 Alkyl oder Aryl bedeutet und
X- ein Anion bezeichnet. - Besonders bevorzugte Detergentien zur Verwendung in diesem Verfahren sind Tetrabutylammoniumsalze und Cetyltrimethylammoniumsalze (zum Beispiel die Bromide). Besonders bevorzugt ist Cetyltrimethylammoniumbromid ("CTAB") [8]. CTAB ist auch als Hexadecyltrimethylammoniumbromid, Cetrimoniumbromid, Cetavlon und Centimide bekannt. Beispiele für andere Detergentien sind Hexadimethrinbromid und Myristyltrimethylammoniumsalze.
- Die capsulären Polysaccharide werden während der Kultivierung in die Medien hinein freigesetzt. Dementsprechend ist das Ausgangsmaterial für die Fällung typischerweise der Überstand einer zentrifugierten Bakterienkultur oder eine aufkonzentrierte Kultur.
- Der Fällungsschritt kann für Polysaccharide selektiv sein, jedoch werden typischerweise auch andere Komponenten (z. B. Proteine, Nucleinsäure, etc.) copräzipitiert.
- Das ausgefällte Polysaccharid kann vor der Solubilisierung durch Zentrifugieren gewonnen werden. Nach der Fällung muss das Polysaccharid (typischerweise in Form eines Komplexes mit dem kationischen Detergens) wieder solubilisiert werden. Dabei wird bevorzugt ein Lösungsmittel verwendet, das für das Polysaccharid relativ selektiv ist, um die Menge der Verunreinigungen (z. B. Proteine, Nucleinsäure, etc.) zu minimieren. Es wurde festgestellt, dass Ethanol diesbezüglich vorteilhaft ist und eine hohe Selektivität für den CTAB-Polysaccharid-Komplex besitzt. Andere niedere Alkohole können verwendet werden (z. B. Methanol, Propan-1-ol, Propan-2-ol, Butan-1-ol, Butan-2-ol, 2-Methylpropan-1-ol, 2-Methylpropan-2-ol, Diole, etc.).
- Das Ethanol wird vorzugsweise in einer Menge zu dem ausgefällten Polysaccharid zugegeben, dass eine Endkonzentration des Ethanols (bezogen auf den Gesamtgehalt von Ethanol und Wasser) von 50 bis 95 % (z. B. etwa 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 % oder etwa 90 %) und vorzugsweise 75 bis 95 % resultiert. Das Optimum der Endkonzentration des Ethanols hängt von der Serogruppe des Bakteriums ab, von dem das Polysaccharid gewonnen wird.
- Das Ethanol kann in reiner Form oder in mit einem mischbaren Lösungsmittel (z. B. Wasser) verdünnter Form zu dem ausgefällten Polysaccharid zugegeben werden. Bevorzugte Lösungsmittelgemische sind Ethanol:Wasser-Gemische, wobei das bevorzugte Mischungsverhältnis etwa 70:30 bis etwa 95:5 (z. B. 75:25, 80:20, 85:15, 90:10) beträgt.
- Im Vergleich mit herkömmlichen Verfahren zur Herstellung von capsulären Polysacchariden ist das zweistufige Verfahren der Fällung mit anschließender Ethanolextraktion schneller und einfacher.
- Im Gegensatz zu dem in Lit. 9 beschriebenen Verfahren verwendet das Verfahren statt eines anionischen Detergens ein kationisches Detergens. Im Unterschied zu dem Verfahren von Lit. 10 wird das Polysaccharid unter Verwendung von Ethanol und nicht durch Kationenaustausch unter Verwendung von Calcium- oder Magnesiumsalzen resolubilisiert. Im Unterschied zu dem Verfahren von Lit. 11 erfordert die Fällung keinen inerten porösen Träger. Ein weiterer Unterschied zu herkömmlichen Verfahren besteht darin, dass der Alkohol zur Resolubilisierung des Polysaccharids und nicht zu seiner Fällung verwendet wird.
- Das bakterielle capsuläre Polysaccharid stammt üblicherweise von Neisseria. Es stammt bevorzugt von N. meningitidis, einschließlich der Serogruppen A, B, C, W135 und Y. Bevorzugte Serogruppen sind A, W135 und Y.
- Das Verfahren eignet sich auch zur Herstellung des capsulären Polysaccharids von Haemophilus influenzae (insbesondere Typ B oder "Hib") sowie von Streptococcus pneumoniae (Pneumococcus).
- Weitere Verarbeitung des solubilisierten Polysaccharids
- Nach der Wiederauflösung kann das Polysaccharid zur Entfernung von Verunreinigungen weiter behandelt werden. Dies ist besonders in Fällen von Bedeutung, in denen auch eine geringfügige Verunreinigung nicht akzeptabel ist (z. B. zur Herstellung von Impfstoffen für die Humanmedizin). Hierbei werden typischerweise ein oder mehrere Filtrationsschritte angewandt.
- Die tiefe Filtration kann verwendet werden. Sie eignet sich besonders zur Klärung.
- Eine Filtration durch Aktivkohle kann Verwendung finden. Sie eignet sich zur Entfernung von Pigmenten und Spuren organischer Verbindungen. Die Filtration kann wiederholt werden, bis beispielsweise die optische Dichte OD275nm < 0,2 ist.
- Die Filtration nach Größe oder die Ultrafiltration können angewandt werden.
- Nach der Filtration zur Entfernung von Verunreinigungen kann das Polysaccharid zur weiteren Behandlung und/oder Verarbeitung gefällt werden. Dies kann geeigneterweise durch Kationenaustausch vorgenommen werden (z. B. durch Zusatz von Calcium- oder Natriumsalzen).
- Das Polysaccharid kann chemisch modifiziert werden. Es kann zum Beispiel so modifiziert werden, dass eine oder mehrere Hydroxylgruppen durch blockierende Gruppen ersetzt werden. Dies eignet sich insbesondere für MenA [12]. Die Polysaccharide der Serogruppe B können N-propionyliert werden [13].
- Das (gegebenenfalls modifizierte) Polysaccharid wird typischerweise unter Bildung von Oligosacchariden hydrolysiert. Dies wird bevorzugt vorgenommen, um einen endgültigen mittleren Polymerisationsgrad (DP) des Oligosaccharids von weniger als 30 zu erzielen (z. B. von 10 bis 20 und bevorzugt von etwa 10 für Serogruppe A; von 15 bis 25 für die Serogruppen W135 und Y, bevorzugt von etwa 15 bis 20; etc.). Die Oligosaccharide sind gegenüber den Polysacchariden zur Verwendung in Impfstoffen bevorzugt. Der Polymerisationsgrad DP kann günstigerweise durch Ionenaustauschchromatographie oder durch kolorimetrische Tests gemessen werden [14].
- Wenn Hydrolyse durchgeführt wird, wird das Hydrolysat allgemein nach Größe aufgetrennt, um kurze Oligosaccharide zu entfernen. Dies kann auf verschiedenen Wegen vorgenommen werden, zum Bei spiel durch Ultrafiltration und anschließende Ionenaustauschchromatographie. Oligosaccharide mit einem Polymerisationsgrad von weniger als oder gleich etwa 6 werden bevorzugt für Serogruppe A abgetrennt, und Oligosaccharide mit einem Polymerisationsgrad von weniger als etwa 4 werden vorzugsweise für die Serogruppen W135 und Y entfernt.
- Zur Verstärkung der Immunogenität werden die Polysaccharide oder Oligosaccharide der Erfindung bevorzugt mit einem Träger konjugiert (
4 ). Die Konjugation an Trägerproteine ist ganz besonders für Vakzine für die Pädiatrie geeignet [z. B. Lit. 15] und stellt eine gut bekannte Technik dar [z. B. abgehandelt in Lit. 16 bis 24, etc.]. - Bevorzugte Trägerproteine sind bakterielle Toxine oder Toxoide, wie Diphtherie- oder Tetanustoxoide. Das Diphtherietoxoid CRM197 [25, 26, 27] ist besonders bevorzugt. Beispiele für andere geeignete Trägerproteine sind das äußere Membranprotein von N. meningitidis (28], synthetische Peptide [29, 30,], Hitzeschockproteine [31, 32], Pertussisproteine [33, 34], Cytokine [35], Lymphokine [35], Hormone [35], Wachstumsfaktoren [35], künstliche Proteine, die mehrere humane CD4+-Zellepitope von verschiedenen von Pathogenen abgeleiteten Antigenen aufweisen [36], das Protein D von H. influenzae [37], Toxin A oder B von C. difficile [38], etc. Es ist möglich, Gemische von Trägerproteinen zu verwenden.
- Konjugate mit einem Saccharid:Protein-Verhältnis (W/W) von 0,5:1 (d. h. mit Proteinüberschuss) bis 5:1 (d. h. mit Saccharidüberschuss) sind bevorzugt, wobei Konjugate mit einem Verhältnis von 1:1,25 bis 1:2,5 noch bevorzugter sind.
- Ein einziges Trägerprotein kann mehrere unterschiedliche Saccharide tragen [39]. Konjugate können in Verbindung mit dem freien Trägerprotein verwendet werden [40].
- Es kann eine beliebige geeignete Konjugierungsreaktion herangezogen werden, erforderlichenfalls mit einem geeigneten Linker.
- Das Saccharid wird typischerweise vor der Konjugierung aktiviert oder funktionalisiert. Die Aktivierung kann zum Beispiel Cyanylierungsreagentien, wie CDAP (z. B. 1-Cyano-4-dimethylaminopyridiniumtetrafluorborat [41, 42]) umfassen. Bei anderen geeigneten Techniken werden Carbodiimide, Hydrazide, aktive Ester, Norboran, p-Nitrobenzoesäure, N-Hydroxysuccinimid, S-NHS, EDC, TSTU verwendet; vergleiche auch die Einführung von Lit. 22.
- Die Verknüpfungen über eine Linkergruppe können unter Anwendung beliebiger bekannter Verfahren erzeugt werden, zum Beispiel unter Anwendung der Verfahren, die in den Literaturreferenzen 43 und 44 beschrieben sind. Ein Typ der Verknüpfung umfasst die reduktive Aminierung des Polysaccharids, die Kupplung der resultierenden Aminogruppe mit einem Ende einer Adipinsäure-Linkergruppe und die anschließende Kupplung eines Proteins an das andere Ende der Adipinsäure-Linkergruppe [20, 45, 46]. Beispiele für weitere Linker sind B-Propionamido-Linker [47], Nitrophenylethylamin [48], Halogenacylhalogenide [49], glycosidische Verknüpfungen [50], 6-Aminocapronsäure [51], ADH [52], C4-C12-Gruppen [53], etc. Als Alternative zur Verwendung eines Linkers kann eine direkte Verknüpfung angewandt werden. Direkte Verknüpfungen mit dem Protein können die Oxidation des Polysaccharids und die anschlie ßende reduktive Aminierung mit dem Protein umfassen, wie dies zum Beispiel in den Literaturreferenzen 54 und 55 beschrieben ist.
- Ein Verfahren ist bevorzugt, bei dem Aminogruppen in das Saccharid eingeführt werden (z. B. durch Ersetzen von endständigen = 0-Gruppen durch -NH2), anschließend eine Derivatbildung mit einem Adipinsäureester (z. B. Adipinsäure-N-hydroxysuccinimidodiester) vorgenommen wird und dann mit dem Trägerprotein umgesetzt wird.
- Nach der Konjugierung können die freien und die konjugierten Saccharide voneinander getrennt werden. Hierzu gibt es zahlreiche geeignete Verfahren, zu denen die hydrophobe Chromatographie, die Tangentialultrafiltration, die Diafiltration, etc. gehören [vergleiche ferner Lit. 56 und 57].
- Immunogene Zusammensetzungen und Vakzine
- Die Polysaccharide, Oligosaccharide und Konjugate der Erfindung eignen sich besonders zum Einbringen in immunogene Zusammensetzungen und Impfstoffe. Ein Verfahren der Erfindung kann daher den Schritt der Formulierung des Polysaccharids, des Oligosaccharids oder des Konjugats als immunogene Zusammensetzung oder Vakzin umfassen.
- Immunogene Zusammensetzungen und Impfstoffe der Erfindung enthalten typischerweise, zusätzlich zu den Meningokokken-Sacchariden, "pharmazeutisch akzeptable Träger", was beliebige Träger einschließt, die nicht selbst die Erzeugung von Antikörpern induzieren, die für das Individuum schädlich sind, welches die Zusammensetzung erhält. Geeignete Träger sind typischerweise große, langsam metabolisierte Makromoleküle, wie Proteine, Polysaccharide, Polymilchsäuren, Polyglycolsäuren, polymere Aminosäuren, Aminosäure-Copolymere, Trehalose [121], Lipidaggregate (wie Öltröpfchen oder Liposomen) sowie inaktive Viruspartikel. Solche Träger sind den Fachleuten auf diesem Gebiet geläufig. Die Vakzine können ferner auch Verdünnungsmittel, wie Wasser, Salzlösung, Glycerin, etc. enthalten. Zusätzlich können auch Hilfssubstanzen, wie Netzmittel oder Emulgatoren, pH-Puffersubstanzen und dergleichen, vorliegen. Eine detaillierte Abhandlung pharmazeutisch geeigneter Excipientien findet sich in Lit. 122.
- Immunogene Zusammensetzungen, die als Impfstoffe verwendet werden, enthalten eine immunologisch wirksame Menge des Saccharid-Antigens sowie beliebige andere Komponenten, wie oben beschrieben, falls erforderlich. Unter einer "immunologisch wirksamen Menge" wird verstanden, dass die Verabreichung dieser Menge an ein Individuum entweder in einer einzigen Dosis oder als Teil einer Reihe von Verabreichungen für die Behandlung oder die Vorbeugung wirksam ist. Diese Menge hängt vom Gesundheitszustand und vom körperlichen Zustand des zu behandelnden Individuums, dem Alter, der taxonomischen Gruppe des zu behandelnden Individuums (z. B. nichtmenschliche Primaten, Primaten, etc.), der Fähigkeit des Immunsystems des Individuums zur Synthese von Antikörpern, dem angestrebten Grad des Schutzes, der Formulierung des Vakzins, der Beurteilung der medizinischen Situation durch den Arzt und anderen relevanten Faktoren ab. Es ist zu erwarten, dass die Menge in einen relativ weiten Bereich fällt, der durch Routineversuche ermittelt werden kann. Die Dosierung bei der Behandlung kann nach einem Einzeldosenschema oder nach einem Mehrfachdosenschema (z. B. einschließlich Booster-Dosen) erfolgen.
- Die Vakzine können in Verbindung mit anderen immunregulatorischen Mitteln verabreicht werden.
- Der Impfstoff kann ein Adjuvans enthalten. Bevorzugte Adjuvantien zur Förderung der Wirksamkeit der Zusammensetzung umfassen, ohne allerdings darauf beschränkt zu sein, folgende Stoffe: (1) Aluminiumsalze (Aluminiumsulfat), wie Aluminiumhydroxide (einschließlich Oxyhydroxiden), Aluminiumphosphate (einschließlich Hydroxyphosphaten), Aluminiumsulfat, etc. [Kapitel 8 und 9 in Lit. 123]; (2) Öl-in-Wasser-Emulsionsformulierungen (mit oder ohne andere spezifische immunstimulierende Mittel, wie Muramylpeptiden [Muramylpeptide umfassen N-Acetylmuramyl-L-threonyl-D-isoglutamin (thr-MDP), N-Acetylnormuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin (nor-MDP), N-Acetylmuramyl-L-alanyl-d-isoglutaminyl-L-alanin-2-(1'-2'-dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyphosphoryloxy)-ethylamin-MTP-PE), etc.] oder Bakterienwandbestandteile), wie zum Beispiel (a) MF59TM [Kapitel 10 in Lit. 123; 124, 125], das 5 % Squalen, 0,5 % Tween 80 und 0,5 % Span 85 (wahlweise mit Gehalt an MTP-PE) enthält und mit einem Microfluidizer zu Submikronpartikeln formuliert ist, (b) SAF, das 10 % Squalen, 0,4 % Tween 80, 5 % mit Pluronic geblocktes Polymer L121 und thr-MDP enthält und entweder zu einer Submikronemulsion mikrofluidisiert oder mit einem Vortexer zur Erzeugung einer Emulsion mit größerer Partikelgröße gemischt ist, und (c) das RibiTM-Adjuvanssystem (RAS) (Ribi Immunochem, Hamilton, MT), das 2 % Squalen, 0,2 % Tween 80 sowie einen oder mehrere Bakterienzellwandbestandteile aus der Gruppe enthält, die besteht aus Monophosphoryllipid A (MPL), Trehalosedimycolat (TDM) und Zellwandskelett (CWS), bevorzugt MPL + CWS (Detox®); (3) Saponin-Adjuvantien [Kapitel 22 von Lit. 123], wie WS21 oder StimulonTM (Cambridge Bioscience, Worcester, MA), entweder in einfacher Form oder in Form von daraus erzeugten Teilchen, wie ISCOMs (immunstimulierende Komplexe; Kapitel 23 von Lit. 123); die ISCOMs können frei von zusätzlichen Detergentien sein, zum Beispiel Lit. 126; (4) vollständiges Freundsches Adjuvans (CFA) und unvollständiges Freundsches Adjuvans (IFA); (5) Cytokine, wie Interleukine (z. B. IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-12 [127], etc.), Interferone (z. B. Gamma-Interferon), Makrophagen-Kolonie-stimulierenden Faktor (M-CSF), Tumornekrosefaktor (TNF), etc.; (6) Monophosphoryllipid A (MPL) oder 3-O-deacyliertes MPL (3dMPL), z. B. Lit. 128 und 129, wahlweise bei im Wesentlichen Fehlen von Aluminiumsulfat bei Verwendung mit Pneumokokken-Sacchariden, z. B. Lit. 13; (7) Kombinationen von 3dMPL mit beispielsweise QS21 und/oder Öl-in-Wasser-Emulsionen, z. B. Lit. 131, 132 und 133; (8) Oligonucleotide, die CpG-Einheiten enthalten (Roman et al., Nat. Med., 1997, 3, 849–854; Weiner et al., PNAS USA, 1997, 94, 10833–10837; Davis et al., J. Immunol., 1998, 160,870–876; Chu et al., J. Exp. Med., 1977, 186, 1623–1631; Lipford et al., Eur. J. Immunol., 1997, 27, 2340–2344; Moldoveanu et al., Vaccine, 1988, 16, 1216–1224, Krieg et al., Nature, 1995, 374, 546–549; Klinman et al., PNAS USA, 1996, 93, 2879–2883; Ballas et al., J. Immunol., 1996, 157, 1840–1845; Cowdery et al., J. Immunol., 1996, 156, 4570–4575; Halpern et al., Cell. Immunol., 1996, 167, 72–78; Yamamoto et al., Jpn. J. Cancer Res., 1988, 79 866–873; Stacey et al., J. Immunol., 1996, 157, 2116–2122; Messina et al., J. Immunol., 1991, 147, 1759–1764; Yi et al., J. Immunol., 1996, 157, 4918–4925; Yi et al., J. Immunol., 1996, 157, 5394–5402; Yi et al., J. Immunol., 1998, 160, 4755–4761; und Yi et al., J. Immunol., 1998, 160, 5898–5906; internationale Patentanmeldungen WO96/02555, WO98/16247, WO98/18810, WO 98/40100, WO98/55495, WO98/37919 und WO 98/52581), d. h., die mindestens ein CG-Dinucleotid enthalten, wobei wahlweise 5-Methylcytosin anstelle von Cytosin verwendet ist; (8) ein Polyoxyethylenether oder ein Polyoxyethylenester, z. B. Lit. 134; (9) ein Polyoxyethylen-sorbitanester als grenzflächenaktives Mittel in Kombination mit einem Octoxynol [135] oder ein Polyoxyethylenalkylether oder Polyoxyethylenalkylester als grenzflächenaktives Mittel in Kombination mit mindestens einem zusätzlichen nichtionischen grenzflächenaktiven Mittel wie einem Octoxynol [136]; (10) ein Saponin und ein immunstimulierendes Oligonucleotid (z. B. ein CpG-Oligonucleotid) [137]; (11) ein immunstimulierendes Mittel und ein partikelförmiges Metallsalz, z. B. Lit. 138; (12) ein Saponin und eine Öl-in-Wasser-Emulsion, z. B. Lit. 139; (13) ein Saponin (z. B. QS21) + 3dMPL + IL-12 (wahlweise + ein Sterin), z. B. Lit. 140; (14) hitzelabiles E. coli-Enterotoxin ("LT") oder nichttoxisch gemachte Mutanten davon, wie die Mutanten K63 oder R72 (z. B. Kapitel 5 von Lit. 141); (15) Choleratoxin ("CT") oder nichttoxisch gemachte Mutanten davon [z. B. Kapitel 5 von Lit. 141 ]; (16) Liposomen [Kapitel 13 und 14 von Lit. 123]; (17) Chitosan [z. B. Lit. 142]; (18) doppelsträngige RNA; (19) Mikropartikel (d. h., Partikel mit einem Durchmesser von ~100 nm bis ~150 μm, bevorzugter mit einem Durchmesser von ~200 nm bis ~30 μm und am meisten bevorzugt mit einem Durchmesser von ~500 nm bis ~10 μm), die aus Materialien bestehen, die biologisch abbaubar und nichttoxisch sind (z. B. eine Poly(α-hydroxysäure), wie Poly(lactid-co-glycolid), eine Polyhydroxybuttersäure, ein Polyorthoester, ein Polyanhydrid, ein Polycaprolacton, etc.), die gegebenenfalls so behandelt sind, dass sie eine negative Oberflächenladung besitzen (z. B. mit SDS) oder eine positive Oberflächenladung aufweisen (z. B. mit einem kationischen grenzflächenaktiven Mittel, wie CTAB), oder (20) andere Substanzen, die als immunstimulierende Mittel zur Förderung der Wirksamkeit der Zusammensetzung wirken [z. B. Kapitel 7 von Lit. 123].
- Aluminiumsalze (insbesondere Aluminiumphosphate und/oder Aluminiumhydroxide) und MF59 sind für die Verwendung mit den Saccharid-Antigenen der vorliegenden Erfindung bevorzugt. Wenn ein Aluminiumphosphat verwendet wird, ist es möglich, ein oder mehrere Saccharide am Aluminiumsalz zu adsorbieren, jedoch ist es bevorzugt, die Saccharide nicht am Salz zu adsorbieren; dies wird durch Einbringen von freien Sulfationen in die Lösung (z. B. durch die Verwendung eines Phosphatpuffers) begünstigt. Wenn ein Aluminiumhydroxid verwendet wird, ist es bevorzugt, die Saccharide am Salz zu adsorbieren. Die Verwendung von Aluminiumhydroxid als Adjuvans ist für Saccharide der Serogruppe A besonders vorteilhaft.
- Es ist bei den Zusammensetzungen der Erfindung möglich, einige Antigene an einem Aluminiumhydroxid zu adsorbieren, wobei jedoch andere Antigene zusammen mit einem Aluminiumphosphat vorliegen. Für tetravalente Serogruppenkombinationen von N. meningitidis sind zum Beispiel folgende Permutationen verfügbar:
-
- Nach der Formulierung können die Zusammensetzungen der Erfindung dem Individuum direkt verabreicht werden. Die zu behandelnden Individuen können Tiere sein; insbesondere können Menschen behandelt werden. Die Vakzine eignen sich besonders günstig zur Impfung von Kindern und Jugendlichen. Die Verabreichung kann auf dem systemischen Weg und/oder über den Schleimhautweg erfolgen.
- Die immunogenen Zusammensetzungen werden typischerweise als injizierbare Zusammensetzungen, entweder als flüssige Lösungen oder als Suspensionen, hergestellt; feste Formen, die sich zum Lösen oder Suspendieren in flüssigen Trägern vor der Injektion eignen, können ebenfalls hergestellt werden. Die Präparation kann ferner auch emulgiert oder in die Liposomen eingeschlossen werden, um die Adjuvanswirkung zu verstärken. Die direkte Verabreichung der Zusammensetzungen erfolgt allgemein parenteral (z. B. durch Injektion, entweder subkutan oder intraperitoneal, intravenös oder intramuskulär oder in den Interstitialraum eines Gewebes hinein). Die Zusammensetzungen können ferner auch in eine Läsion hinein verabreicht werden. Zu anderen Verabreichungsarten gehören die orale oder pulmonale Verabreichung, die Verabreichung über Suppositorien und die transdermale oder transkutane Verabreichung (vgl. z. B. Lit. 143) sowie die Verabreichung über Nadeln und Hyposprays. Das Dosierungsregime kann ein Regime mit einer einzigen Dosis oder ein Regime mit mehreren Dosen sein (z. B. einschließlich Booster-Dosen).
- Die Vakzine der Erfindung sind bevorzugt steril. Sie sind vorzugsweise pyrogenfrei. Sie sind bevorzugt gepuffert, z. B. auf einen pH-Wert zwischen 6 und 8 und allgemein auf einen pH-Wert um pH 7. Wenn ein Vakzin ein Aluminiumhydroxidsalz enthält, ist es bevorzugt, einen Histidinpuffer zu verwenden [144].
- Die Vakzine der Erfindung können ein grenzflächenaktives Mittel (z. B. ein Tween, wie Tween 80) in geringer Menge enthalten (z. B. < 0,01 %). Die Vakzine der Erfindung können einen Zuckeralkohol (z. B. Mannit) oder Trehalose enthalten, z. B. in einer Menge von etwa 15 mg/ml, insbesondere, wenn sie lyophilisiert werden sollen.
- Die optimalen Dosen der individuellen Antigene können empirisch ermittelt werden. Die Saccharid-Antigene der Erfindung werden allerdings allgemein in einer Dosis von 0,1 bis 100 μg jedes Saccharids pro Dosis verabreicht, wobei das typische Dosierungsvolumen 0, 5 ml beträgt. Die Menge beträgt typischerweise 5 bis 20 μg pro Saccharid pro Dosis. Diese Werte sind als Saccharid gemessen.
- Die Impfstoffe gemäß der Erfindung können entweder prophylaktisch (d. h., zur Vorbeugung einer Infektion) oder therapeutisch sein (d. h., zur Behandlung einer Erkrankung nach der Infektion), sind jedoch typischerweise prophylaktisch.
- Die Vakzine können in Standard-Tiermodellen getestet werden (vgl. z. B. Lit. 145).
- Die Erfindung gibt ferner ein Verfahren zur Solubilisierung eines bakteriellen capsulären Polysaccharids, das mit einem oder mehreren kationischen Detergentien gefällt wurde, an, wobei Ethanol als Lösungsmittel verwendet wird.
- Definitionen
- Das Wort "umfassen" bedeutet "enthalten" sowie "bestehen aus"; so kann z. B. eine Zusammensetzung, die X "umfasst", ausschließlich aus X bestehen oder noch etwas Zusätzliches enthalten, z. B. X + Y.
- Das Wort "etwa" in Verbindung mit einem Zahlenwert x bedeutet zum Beispiel x ± 10 %.
- KURZE BESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGEN
-
1 zeigt die Wirkung der Veränderung des Verhältnisses Ethanol:Wasser auf die Polysaccharid-Solubilisierung. -
2 ist eine Eichkurve, die unter Verwendung von MenA-Polysaccharid-Testproben bei unterschiedlichen Hydrolysezeiten erhalten wurde. Die Kurve zeigt die lineare Beziehung zwischen dem Reziprokwert des Polymerisationsgrades und dem optischen Drehvermögen. -
3 ist eine Eichkurve, die unter Verwendung von MenY-Polysaccharid-Testproben bei unterschiedlichen Hydrolysezeiten erhalten wurde. Die Kurve zeigt die lineare Beziehung zwischen dem Logarithmus des Polymerisationsgrades und KD (Verteilungskoeffizient). -
4 erläutert die Herstellung eines Oligosaccharid-Konjugats. - ARTEN DER DURCHFÜHRUNG DER ERFINDUNG
- A. Herstellung und Reinigung von Meningococcus-Polysacchariden
- Meningokokken der Serogruppen A, W135 und Y wurden in 500 ml-Flaschen, die 150 ml Franz A als Medium enthielten, 12 Stunden bei 35 ± 1°C kultiviert. Das Schütteln wurde mit einer 35 mm-Schüttelmaschine bei einer eingestellten Drehzahl von 150 U/min vorgenommen. 85 ml der Kultur wurden dann als Inoculum in einen 20 1-Fermenter gegeben, der Watson als Medium enthielt.
- Nach 18,5 Stunden (W135 und Y) oder 16,5 Stunden (A), wenn OD = 10 erreicht war, wurde die Fermentation durch Zusatz von 300 ml Formalin unterbrochen; dann wurde der Fermenter nach 2 Stunden Inkubation auf 10°C abgekühlt. Der Überstand wurde durch Zentrifugieren gewonnen und anschließend filtriert (0,22 μm) und mit einer 30 kDa-Membran ultrafiltriert.
- Das rohe konzentrierte Polysaccharid wurde dann durch Zusatz von CTAB in wässeriger Lösung mit einem Gehalt von 100 mg/ml gefällt. Die zugesetzten Volumina sind in der nachstehenden Tabelle aufgeführt. Nach 12 Stunden bei Raumtemperatur wurden die CTAB-Komplexe durch Zentrifugieren gewonnen. Der CTAB-Komplex wurde durch Zusatz einer 95 %-igen Ethanollösung bei Raumtemperatur und 16–20 Stunden kräftiges Rühren extrahiert. Das Volumen an zugesetztem Ethanol ist in der nachstehenden Tabelle aufgeführt:
- Die resultierenden Suspensionen wurden durch ein CUNO 10 SP-Tiefenfilter filtriert. Das Filtrat wurde durch eine CUNO Zetacarbon®-Kartusche rückgeführt, bis OD275nm < 0,2 war. Das Zetacarbon-Filtrat wurde dann gesammelt und durch ein 0,22 μm-Filter filtriert. Das Polysaccharid wurde dann aus der Ethanolphase durch Zusatz einer wässerigen 2M CaCl2-Lösung (10–12 ml/l EtOH der resultierenden Lösung) gefällt. Das gereinigte Polysaccharid wurde dann durch Zentrifugieren gesammelt, mit 95 %-igem Ethanol gewaschen und im Vakuum getrocknet.
- Bei anderen Versuchen wurde die Endkonzentration des zur Extraktion verwendeten Ethanols variiert (
1 ). Für das Polysaccharid der Serogruppe A war ein Bereich von 80 bis 95 % Ethanol am wirksamsten, wobei die Extraktionswirksamkeit bei niedrigeren Prozentanteilen abfiel. Für die Serogruppe W135 wurde eine gute Extraktion mit 75 bis 90 % Ethanol erzielt, wobei 95 % weniger wirksam war. Für die Serogruppe Y wurden die besten Ergebnisse mit 75 bis 85 % Ethanol erzielt, wobei höhere Prozentanteile (z. B. 90 %, 95 %) weniger wirksam waren. Allgemein wurde festgestellt, dass Ethanol-Prozentanteile unterhalb der hier angegebenen zu der Tendenz einer Erhöhung der Codextraktion von Verunreinigungen wie etwa Proteinen führten. Die Ethanol-Prozentanteile, die in diesem Abschnitt angegeben sind, sind als Endkonzentration ausgedrückt (Ethanol als Prozentanteil am Gesamtvolumen Ethanol + Wasser) und auf einen Wassergehalt in den CTAB-Polysaccharid-Pasten, die durch Zentrifugieren gewonnen wurden, von etwa 50 % bezogen (d. h. 500 g H2O pro kg feuchte Paste). Dieser Wert wurde empirisch bei Versuchen in kleinem Maßstab ermittelt. - B. Konjugation von Polysacchariden der Serogruppe A
- a) Hydrolyse
- Polysaccharid der Meningokokken-Serogruppe A wurde etwa 3 h bei 73°C in 50 mM Natriumacetatpuffer von pH 4,7 hydrolysiert. Die Hydrolyse wurde so kontrolliert, dass Oligosaccharide mit einem mittleren Polymerisationsgrad (DP) von etwa 10 erhalten wurden, bestimmt durch das Verhältnis (W/W) zwischen dem gesamten organischen Phosphor und dem Monoesterphosphat.
- Der Wert DP als Verhältnis von gesamtem organischem Phosphor zu Phosphormonoester ist umgekehrt proportional zum optischen Drehvermögen (α), wie aus
2 hervorgeht. Diese Beziehung kann dazu verwendet werden, das Ausmaß der Hydrolyse bequemer zu überwachen als durch direkte Phosphorbestimmungen. - b) Auftrennung nach der Größe
- In diesem Schritt werden die während des Hydrolyseprozesses erzeugten kurzkettigen Oligosaccharide entfernt. Das oben erhaltene Hydrolysat wurde durch eine Membran mit einer Ausschlussgrenze von 30 kDa einer Ultrafiltration unterzogen (12 Diafiltrationsvolumina, 5 mM Acetatpuffer, pH 6,5). Das zurückgehaltene Material, das die Species mit hohem Molekulargewicht enthielt, wurde verworfen; das Permeat wurde auf eine Q-Sepharose-Fast-Flow-Säule aufgegeben, die mit 5 mM Acetatpuffer, pH 6,5, äquilibriert worden war. Die Säule wurde dann mit 5 Säulenvolumina (CV) des Äquilibrierungspuffers und dann mit 10 CV 5 mM Acetatpuffer/125 mM NaCl, pH 6,5, gewaschen, um Oligosaccharide mit DP ≤ 6 zu entfernen. Das Oligosaccharid mit der gewünschten Größe wurde dann mit 5 CV 5 mM Acetatpuffer/0,5 M NaCl, pH 6,5, eluiert.
- Die eluierte Oligosaccharid-Population besaß einen mittleren Wert DP von etwa 15.
- c) Einführung einer primären Aminogruppe am reduzierenden Ende
- Die Lösung des größenrichtigen Oligosaccharids wurde mit einem Ammoniumsalz (Acetat oder Chlorid) versetzt bis zu einer Endkonzentration im Bereich von 49 bis 300 g/l; dann wurde Natriumcyanoborhydrid bis zu einer Endkonzentration im Bereich von 12 bis 73 g/l zugesetzt. Nach Einstellung des pH-Werts auf 6–7,3 wurde das Gemisch 5 Tage bei 37°C inkubiert.
- Die Amino-Oligosaccharide wurden dann durch Ultrafiltration mit tangentialer Strömung mit einer Membran mit einer Ausschlussgrenze von 1 kDa oder 3 kDa unter Anwendung von 13 Diafiltrationsvolumina von 0, 5 M NaCl-Lösung und anschließend von 7 Diafiltrationsvolumina von 20 mM NaCl-Lösung gereinigt. Die gereinigte Lösung des Amino-Oligosaccharids wurde nach dem Verfahren von Lit. 146 auf ihren Phosphorgehalt analysiert (eine chemische Aktivität des Antigens), und die Menge an eingeführten Aminogruppen wurde nach dem Verfahren von Lit. 147 bestimmt.
- Die gereinigten Oligosaccharide wurden dann mit einem Rotationsverdampfer zur Entfernung des Wassers getrocknet.
- d) Derivatisierung zum aktiven Ester
- Die getrockneten Amino-Oligosaccharide wurden in destilliertem Wasser zu einer Aminogruppenkonzentration von 40 mM gelöst; dann wurden 9 Volumina DMSO und anschließend Triethylamin zu einer Endkonzentration von 200 mM zugegeben. Zu der resultierenden Lösung wurde Adipinsäure-N-hydroxysuccinimidodiester bis zu einer Endkonzentration von 480 mM zugegeben.
- Die Reaktion wurde unter Rühren bei Raumtemperatur 2 Stunden aufrechterhalten; dann wurde das aktivierte Oligosaccharid mit Aceton (Endkonzentration 80 % V/V) gefällt. Das Präzipitat wurde durch Zentrifugieren gesammelt und einige Male mit Aceton gewaschen, um nicht umgesetzten Adipinsäure-N-hydroxysuccinimidodiester und Nebenprodukte zu entfernen. Schließlich wurde das aktivierte Oligosaccharid im Vakuum getrocknet.
- Die Menge der in der Oligosaccharidstruktur eingeführten aktiven Estergruppen wurde nach einem kolorimetrischen Verfahren bestimmt, wie es in Lit. 148 beschrieben ist.
- e) Konjugation an CRM197
- Das getrocknete aktivierte Oligosaccharid wurde zu einer Lösung von CRM197 in 0,01 M Phosphatpuffer von pH 7,2 mit einem Gehalt an CRM197 von 45 mg/ml so zugegeben, dass das Verhältnis aktiver Ester/Protein (mol/mol) 12:1 betrug. Die Umsetzung wurde bei Raumtemperatur unter Rühren über Nacht aufrechterhalten. Nach dieser Zeit wurde das Konjugat durch hydrophobe Chromatographie oder Ultrafiltration mit tangentialer Strömung gereinigt. Das gereinigte MenA-CRM197-Konjugat wurde sterilfiltriert und bis zur Formulierung des Impfstoffs bei –20°C oder –60°C aufbewahrt.
- Die Konjugat wurde analysiert auf den Proteingehalt (microBCA Protein Assay), den Gehalt an MenA-Saccharid (kolorimetrische Analyse des Phosphors), den Gehalt an freiem Saccharid, das HPLC-Profil (an TSKGel G4000SW 7,5 mm ID × 30 cm), und SDS-PAGE. Eigenschaften von typischen Präparationen sind in der nachstehenden Tabelle aufgeführt:
- C. Konjugation von Polysacchariden der Serogruppe W135
- a) Hydrolyse
- Das Meningokokken-Polysaccharid der Gruppe W wurde etwa 3 Stunden bei 80°C in essigsaurem 50 mM Natriumacetatpuffer, pH 4,7, hydrolysiert. Dies führte zu Oligosacchariden mit einem mittleren Polymerisationsgrad DP von etwa 15 bis 20, bestimmt durch das Verhältnis von Sialinsäure (SA) zu reduzierter endständiger SA.
- Der Wert DP als Verhältnis der gesamten SA zur reduzierten endständigen SA wird mit dem KD-Wert, der durch HPLC-SEC bestimmt wurde, in Beziehung gesetzt, wie in
3 gezeigt ist. Diese Beziehung kann zu einer bequemeren Überwachung des Ausmaßes der Hydrolyse als durch direkte SA-Messungen herangezogen werden. - b) Trennung nach Größe
- Das Hydrolysat wurde durch eine Membran mit einer Ausschlussgrenze von 30 kDa der Ultrafiltration unterzogen (12 bis 20 Diafiltrationsvolumina von 5 mM Acetatpuffer/15–30 mM NaCl, pH 6,5). Das Retentat, das die Species mit hohem Molekulargewicht enthielt, wurde verworfen, während das Permeat auf eine Q-Sepharose-Fast-Flow-Säule aufgegeben wurde, die mit 5 mM Acetatpuffer/15 mM NaCl, pH 6,5, äquilibriert worden war. Die Säule wurde dann mit 10 CV Äquilibrierungspuffer gewaschen, um Oligosaccharide mit DP ≤ 3–4 zu entfernen, und mit 3 CV 5 mM Acetatpuffer/500 mM NaCl, pH 6, 5, eluiert.
- Einführung einer primären Aminogruppe am reduzierenden Ende
- Zu der Lösung des größenrichtigen Oligosaccharids wurde Ammoniumchlorid oder Ammoniumacetat bis zu einer Endkonzentration von 300 g/l zugegeben; dann wurde Natriumcyanoborhydrid auf eine Endkonzentration von 49 g/l oder 73 g/l zugegeben. Das Gemisch wurde 3 Tage bei 50 °C inkubiert.
- Die Amino-Oligosaccharide wurden dann durch Ultrafiltration mit tangentialer Strömung gereinigt, wie dies für die Serogruppe A beschrieben wurde. Das gereinigte Material wurde auf seinen Gehalt an Sialinsäure (kolorimetrisches Verfahren nach Lit. 149 und/oder Galactose (HPLC) (chemische Aktivitäten des MenW135-Antigens) analysiert. Die gereinigten Oligosaccharide wurden dann zur Entfernung des Wassers mit einem Rotationsverdampfer getrocknet.
- d) Derivatisierung zum aktiven Ester
- Die getrockneten Amino-Oligosaccharide wurden derivatisiert, wie oben für die Serogruppe A beschrieben wurde.
- e) Konjugation mit CRM197
- Die Konjugation wurde vorgenommen, wie dies oben für die Serogruppe A beschrieben wurde, jedoch wurde zur Reinigung des Konjugats eine Diafiltration mit einer Membran mit einer Ausschlussgrenze von 30 kDa verwendet (50 Diafiltrationsvolumina 10mM Phosphatpuffer, pH 7,2). Das gereinigte Konjugat wurde sterilfiltriert und bis zur Formulierung des Impfstoffs bei –20°C oder –60°C aufbewahrt.
-
- D. Konjugation von Polysacchariden der Serogruppe Y
- a) Hydrolyse
- Das Meningokokken-Polysaccharid der Gruppe Y wurde hydrolysiert, wie dies oben für die Serogruppe W135 beschrieben wurde. Dies ergab Oligosaccharide mit einem mittleren Polymerisationsgrad DP von etwa 15 bis 20, bestimmt durch das Verhältnis von SA zu reduzierter endständiger SA (günstigerweise indirekt gemessen, wie oben unter C(a) beschrieben).
- b) Trennung nach Größe, c) Einführung der Aminogruppe, d) Derivatisierung zum aktiven Ester und e) Konjugation
- Diese Schritte wurden vorgenommen, wie dies oben für die Serogruppe W135 beschrieben wurde. Das gereinigte Konjugat wurde sterilfiltriert und bis zur Impfstoffformulierung bei –20°C oder –60°C aufbewahrt.
-
- E. Oligosaccharid-Konjugate von MenA, W135 und Y
-
- LITERATURREFERENZEN
-
- [1] Frash (1990), S. 123–145, von Advances in Biotechnological Processes, Bd. 13 (Hrsg. Mizrahi & Van Wezel)
- [2] Armand et al. (1982) J. Biol. Stand. 10:35–339.
- [3] Cadoz et al. (1985) Vaccine 3340–342.
- [4] MMWR (1997) 46(RR5) 1–10.
- [5] Baklaic et al. (1983) Infect. Immun 42:599–604.
- [6] Costantino et al. (1992) Vaccine 10:691–698.
- [7] WO02/00249.
- [8] Inzana (1987) Infect. Immun. 55:1573–1579
- [9] WO98/32873.
- [10] US-Patent 4,753,796.
- [11] Europäisches Patent 0072513.
- [12] UK-Patentanmeldung 0207117.3.
- [13] Pon et al. (1997) J Exp Med 185:1929–1938.
- [14] Ravenscroft et al. (1999) Vaccine 17:2802–2816.
- [15] Ramsay et al. (2001) Lancet 357(9251):195–196.
- [16] Lindberg (1999) Vaccine 17 Suppl. 2:S28–36.
- [17] Buttery & Moxon (2000) J R Coll Physicians Lond 34:163–168.
- [18] Ahmad & Chapnick (1999) Infects Dis Clin North Am 1:13–133, vii.
- [19] Goldblatt (1998) J. Med. Microbiol. 47:563–567.
- [20] Europäisches Patent 0477508.
- [21] US-Patent 5,306,492.
- [22] WO98/42721.
- [23] Dick et al. in Conjugate Vaccines (Hrsg. Cruse et al.) Karger, Basel, 1989, Bd. 10, S. 48–114.
- [24] Hermanson Bioconjugate Techniques, Academic Press, San Diego (1996) ISBN: 0123423368.
- [25] Anonymus (Jan 2002) Research Disclosure, 453077.
- [26] Anderson (1983) Infect Immun 39(1):233–238.
- [27] Anderson et al. (1985) J Clin Invest 76(1):52–59.
- [28] EP-A-0372501.
- [29] EP-A-0378881.
- [30] EP-A-0427347.
- [31] WO93/17712
- [32] WO94/03208.
- [33] WO98/58668.
- [34] EP-A-0471177.
- [35] WO91/01146
- [36] Falugi et al. (2001) Eur J Immunol 31:3816–3824.
- [37] WO00/56360.
- [38] WO00/61761.
- [39] WO99/42130.
- [40] WO96/40242
- [41] Lees et al. (1996 Vaccine 14:190–198.
- [42] WO95/08348.
- [43] US-Patent 4,882,317
- [44] US-Patent 4,695,624
- [45] Mol. Immunol., 1985, 22, 907–919
- [46] EP-A-0208375
- [47] WO00/10599
- [48] Gever et al., Med. Microbiol. Immunol. 165:171–288 (1979).
- [49] US-Patent 4,057,685.
- [50] US-Patente 4,673,574; 4,761,283; 4,808,700.
- [51] US-Patent 4,459,286.
- [52] US-Patent 4,965,338
- [53] US-Patent 4,663,160.
- [54] US-Patent 4,761,283.
- [55] US-Patent 4,356,170.
- [56] Lei et al. (2000) Dev Biol (Basel) 103:259–264.
- [57] WO00/38711; US-Patent 6,146,902.
- [121] WO00/56365.
- [122] Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy. 20. Ausgabe ISBN: 0683306472
- [123] Vaccine Design... (1995) Hrsg. Powell & Newman. ISBN: 030644867X. Plenum.
- [124] WO90/14837.
- [125] US-Patent 6,299,884.
- [126] WO00/07621.
- [127] WO99/44636.
- [128] GB-2220221.
- [129] EP-A-0689454.
- [130] WO00/56358.
- [131] EP-A-0835318.
- [132] EP-A-0735898.
- [133] EP-A-0761231.
- [134] WO99/52549.
- [135] WO01/21207.
- [136] WO01/21152.
- [137] WO00/62800.
- [138] WO00/23105.
- [139] WO99/11241.
- [140] WO98/57659.
- [141] Del Giudice et al. (1998) Molecular Aspects of Medicine, Bd. 19, Nummer 1.
- [142] WO99/27960.
- [143] WO98/20734.
- [144] GB-Patentanmeldung 0118249.2.
- [145] WO01/30390.
- [146] Chen et al. (1956) Anal. Chem. (1956) 28:1756–1758.
- [147] Habeeb et al. (1966) Anal. Biochem. 14:328–336.
- [148] Miron und Wilchek (1982) Anal. Biochem. 126:433–435.
- [149] Svennerholm (1957) Biochem. Biophys. Acta 24:604–611.
- [150] Carlone et al. (1992) J. Clin. Microbiol. 30:154–159.
Claims (27)
- Verfahren zur Reinigung eines bakteriellen capsulären Polysaccharids, das folgende Schritte umfasst: (a) Fällung des Polysaccharids unter Verwendung eines oder mehrerer kationischer Detergentien und anschließend (b) Solubilisierung des gefällten Polysaccharids mit einem Alkohol.
- Verfahren nach Anspruch 1, bei dem das kationische Detergens/die kationischen Detergentien die nachstehende allgemeine Formel aufweist/aufweisen, worin: R1, R2 und R3, die gleich oder verschieden sind, jeweils Alkyl oder Aryl bedeuten; oder R1 und R2 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen gesättigten heterocyclischen Ring bilden, und R3 Alkyl oder Aryl bedeutet; oder R1, R2 und R3 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen, am Stickstoffatom ungesättigten Ring bilden, R4 Alkyl oder Aryl bedeutet und X- ein Anion bezeichnet.
- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, bei dem das kationische Detergens/die kationischen Detergentien ein Cetyltrimethylammoniumsalz, ein Tetrabutylammoniumsalz, ein Myristyltrimethylammoniumsalz und/oder Hexadimethrinbromid umfasst/umfassen.
- Verfahren nach Anspruch 3, bei dem das kationische Detergens Cetyltrimethylammoniumbromid ist.
- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, bei dem der in Schritt (b) verwendete Alkohol Ethanol ist.
- Verfahren nach Anspruch 5, bei dem das Ethanol eine Endkonzentration von 50 bis 95 % besitzt.
- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, bei dem das bakterielle capsuläre Polysaccharid von N. meningitidis stammt.
- Verfahren nach Anspruch 7, bei dem das N. meningitidis aus der Serogruppe A, W135 oder Y stammt.
- Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, bei dem das bakterielle capsuläre Polysaccharid von Haemophilus influenzae oder Streptococcus pneumoniae stammt.
- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, das ferner den Schritt (c) der Behandlung des in Schritt (b) erhalte nen Polysaccharids zur Entfernung von Verunreinigungen umfasst.
- Verfahren nach Anspruch 10, bei dem Schritt (c) eine Filtration umfasst.
- Verfahren nach Anspruch 11, bei dem Schritt (c) Tiefenfiltration, Filtration durch Aktivkohle, Größenfiltration und/oder Ultrafiltration umfasst.
- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, bei dem das in Schritt (b) oder Schritt (c) erhaltene Polysaccharid anschließend gefällt wird.
- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, das ferner den Schritt der Hydrolyse zur Erzeugung von Oligosacchariden umfasst.
- Verfahren nach Anspruch 14, das ferner den Schritt des Sizings zur Entfernung kurzkettiger Oligosaccharide umfasst.
- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, das ferner den Schritt der Konjugation an ein Trägerprotein umfasst.
- Verfahren nach Anspruch 16, bei dem das Trägerprotein ein Diphtherietoxoid, ein Tetanustoxoid, ein CRM197-Diphtherietoxoid oder ein Protein D von Haemophilus influenzae ist.
- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, das ferner den Schritt des Mischens mit anderen biologischen Molekülen umfasst.
- Verfahren nach Anspruch 18, bei dem die weiteren biologischen Moleküle aus der Gruppe ausgewählt sind, die besteht aus: Saccharid-Antigenen aus der Serogruppe C von N. meningitidis und Protein-Antigenen aus der Serogruppe B von N. meningitidis.
- Verfahren nach Anspruch 18, bei dem die Saccharid-Antigene der Stämme A, C, W135 und/oder Y von N. meningitidis gemischt sind.
- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, das ferner den Schritt/die Schritte der Vaccinformulierung umfasst.
- Verfahren nach Anspruch 21, bei dem der Schritt/die Schritte der Vaccin-Formulierung das Mischen des Saccharid-Antigens/der Saccharid-Antigene mit einem Adjuvans umfasst/umfassen.
- Verfahren nach Anspruch 22, bei dem das Adjuvans ein Aluminiumphosphat und/ein Aluminiumhydroxid umfasst.
- Verfahren zur Solubilisierung eines unter Verwendung von einem oder mehreren kationischen Detergentien gefällten capsulären Polysaccharids, bei dem Ethanol als Lösungsmittel verwendet wird.
- Verfahren nach Anspruch 24, bei dem das Ethanol in Form eines Ethanol-Wasser-Gemischs im Verhältnis 95:5 vorliegt.
- Verfahren nach Anspruch 24 oder 25, bei dem das bakterielle capsuläre Polysaccharid von N. meningitidis stammt.
- Verfahren nach Anspruch 26, bei dem das N. meningitidis aus der Serogruppe A, W135 oder Y stammt.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB0115176 | 2001-06-20 | ||
GBGB0115176.0A GB0115176D0 (en) | 2001-06-20 | 2001-06-20 | Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
PCT/IB2002/003191 WO2003007985A2 (en) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Capsular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
EP02755452.6A EP1401489B2 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Solubisierung von kapseln polysacchariden |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE60210456D1 DE60210456D1 (de) | 2006-05-18 |
DE60210456T2 true DE60210456T2 (de) | 2006-11-16 |
DE60210456T3 DE60210456T3 (de) | 2013-09-05 |
Family
ID=9917070
Family Applications (6)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE122010000042C Pending DE122010000042I1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Solubilisierung von capsulären Polysacchariden |
DE60210456T Expired - Lifetime DE60210456T3 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Solubisierung von kapseln polysacchariden |
DE122011000003C Pending DE122011000003I1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Neisseria meningitidis Kombinationimpfstoffe |
DE122010000040C Pending DE122010000040I1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Solubilisierung von capsulären Polysacchariden |
DE122010000041C Pending DE122010000041I1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Solubilisierung von capsulären Polysacchariden |
DE60237123T Expired - Lifetime DE60237123D1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Neisseria meningitidis Kombinationimpfstoffe |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE122010000042C Pending DE122010000042I1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Solubilisierung von capsulären Polysacchariden |
Family Applications After (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE122011000003C Pending DE122011000003I1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Neisseria meningitidis Kombinationimpfstoffe |
DE122010000040C Pending DE122010000040I1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Solubilisierung von capsulären Polysacchariden |
DE122010000041C Pending DE122010000041I1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Solubilisierung von capsulären Polysacchariden |
DE60237123T Expired - Lifetime DE60237123D1 (de) | 2001-06-20 | 2002-06-20 | Neisseria meningitidis Kombinationimpfstoffe |
Country Status (23)
Country | Link |
---|---|
US (9) | US8753651B2 (de) |
EP (10) | EP2229954B1 (de) |
JP (4) | JP5075317B2 (de) |
CN (4) | CN101524533A (de) |
AT (3) | ATE556718T1 (de) |
AU (3) | AU2002321716B2 (de) |
BE (4) | BE2010C033I2 (de) |
BR (2) | BRPI0210590B8 (de) |
CA (3) | CA2450203C (de) |
CY (6) | CY1110820T1 (de) |
DE (6) | DE122010000042I1 (de) |
DK (6) | DK2189165T3 (de) |
ES (9) | ES2670219T3 (de) |
FR (4) | FR10C0042I1 (de) |
GB (1) | GB0115176D0 (de) |
LU (4) | LU91732I2 (de) |
MX (1) | MXPA03011462A (de) |
NL (3) | NL300458I2 (de) |
NZ (2) | NZ529881A (de) |
PT (6) | PT2277536T (de) |
RU (2) | RU2381814C2 (de) |
TR (2) | TR201808055T4 (de) |
WO (1) | WO2003007985A2 (de) |
Families Citing this family (118)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB9928196D0 (en) | 1999-11-29 | 2000-01-26 | Chiron Spa | Combinations of B, C and other antigens |
PT2332581E (pt) | 2001-01-23 | 2015-10-16 | Sanofi Pasteur Inc | Vacina meningocócica tri- ou tetravalente de conjugados de polissacárido e crm-197 |
GB0115176D0 (en) | 2001-06-20 | 2001-08-15 | Chiron Spa | Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
GB0118249D0 (en) * | 2001-07-26 | 2001-09-19 | Chiron Spa | Histidine vaccines |
MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
DE60325565D1 (de) * | 2002-03-26 | 2009-02-12 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Modifizierte saccharide mit verbesserter stabilität in wasser |
MXPA04011249A (es) | 2002-05-14 | 2005-06-06 | Chiron Srl | Vacunas mucosales con adyuvante de quitosano y antigenos meningococicos. |
GB0302218D0 (en) | 2003-01-30 | 2003-03-05 | Chiron Sri | Vaccine formulation & Mucosal delivery |
CA2493124C (en) * | 2002-08-02 | 2014-04-29 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vaccine |
GB0220194D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-10-09 | Chiron Spa | Improved vesicles |
ATE492288T1 (de) | 2002-10-11 | 2011-01-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Polypeptidimpstoffe zum breiten schutz gegen hypervirulente meningokokken-linien |
PT2279746E (pt) | 2002-11-15 | 2013-12-09 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Proteínas de superfície de neisseria meningitidis |
GB0227346D0 (en) | 2002-11-22 | 2002-12-31 | Chiron Spa | 741 |
JP4827726B2 (ja) * | 2003-01-30 | 2011-11-30 | ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル | 複数の髄膜炎菌血清群に対する注射可能ワクチン |
GB0308198D0 (en) | 2003-04-09 | 2003-05-14 | Chiron Srl | ADP-ribosylating bacterial toxin |
JP4918356B2 (ja) * | 2003-06-23 | 2012-04-18 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッド | Y群髄膜炎菌ワクチン及びそれらの髄膜炎菌組合せワクチン |
GB0323103D0 (en) * | 2003-10-02 | 2003-11-05 | Chiron Srl | De-acetylated saccharides |
CN103357002A (zh) * | 2003-10-02 | 2013-10-23 | 诺华疫苗和诊断有限公司 | 多种脑膜炎球菌血清群的液体疫苗 |
GB0406013D0 (en) * | 2004-03-17 | 2004-04-21 | Chiron Srl | Analysis of saccharide vaccines without interference |
GB0408977D0 (en) | 2004-04-22 | 2004-05-26 | Chiron Srl | Immunising against meningococcal serogroup Y using proteins |
GB0408978D0 (en) | 2004-04-22 | 2004-05-26 | Chiron Srl | Meningococcal fermentation for preparing conjugate vaccines |
RU2379052C2 (ru) | 2004-04-30 | 2010-01-20 | Чирон С.Р.Л. | Вакцинация менингококковыми конъюгатами |
GB0409745D0 (en) | 2004-04-30 | 2004-06-09 | Chiron Srl | Compositions including unconjugated carrier proteins |
GB0500787D0 (en) | 2005-01-14 | 2005-02-23 | Chiron Srl | Integration of meningococcal conjugate vaccination |
GB0410866D0 (en) | 2004-05-14 | 2004-06-16 | Chiron Srl | Haemophilius influenzae |
GB0411387D0 (en) | 2004-05-21 | 2004-06-23 | Chiron Srl | Analysis of saccharide length |
GB0413868D0 (en) * | 2004-06-21 | 2004-07-21 | Chiron Srl | Dimensional anlaysis of saccharide conjugates |
BRPI0515125A (pt) * | 2004-08-30 | 2008-07-08 | Sanofi Pasteur Inc | conjugados de polissacarìdeo derivatizado-proteìna multivalentes, meningocócicos e vacina |
AU2005286798A1 (en) * | 2004-09-21 | 2006-03-30 | Sanofi Pasteur, Inc. | Multivalent meningococcal derivatized polysaccharide-protein conjugates and vaccine |
GB0424092D0 (en) | 2004-10-29 | 2004-12-01 | Chiron Srl | Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins |
GB0502095D0 (en) * | 2005-02-01 | 2005-03-09 | Chiron Srl | Conjugation of streptococcal capsular saccharides |
GB0502096D0 (en) | 2005-02-01 | 2005-03-09 | Chiron Srl | Purification of streptococcal capsular polysaccharide |
SG164344A1 (en) | 2005-02-18 | 2010-09-29 | Novartis Vaccines & Diagnostics Srl | Immunogens from uropathogenic escherichia coli |
EP1858920B1 (de) | 2005-02-18 | 2016-02-03 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Proteine und nukleinsäuren von meningitis-/sepsis-assoziierten escherichia coli |
GB0505518D0 (en) | 2005-03-17 | 2005-04-27 | Chiron Srl | Combination vaccines with whole cell pertussis antigen |
KR101730748B1 (ko) | 2005-04-08 | 2017-04-26 | 와이어쓰 엘엘씨 | 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물 |
WO2006113528A2 (en) | 2005-04-18 | 2006-10-26 | Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. | Expressing hepatitis b virus surface antigen for vaccine preparation |
GB0513071D0 (en) * | 2005-06-27 | 2005-08-03 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Immunogenic composition |
GB0513069D0 (en) * | 2005-06-27 | 2005-08-03 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Immunogenic composition |
US8431136B2 (en) | 2005-06-27 | 2013-04-30 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Immunogenic composition |
RU2457858C2 (ru) | 2005-09-01 | 2012-08-10 | Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс Гмбх Унд Ко Кг | Множественная вакцинация, включающая менингококки серогруппы с |
CA2621578C (en) * | 2005-09-05 | 2014-07-22 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Serum bactericidal assay for n. meningitidis specific antisera |
GB0524066D0 (en) | 2005-11-25 | 2006-01-04 | Chiron Srl | 741 ii |
CA2644724C (en) | 2006-03-17 | 2016-05-24 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Methods for preparing complex multivalent immunogenic conjugates |
ES2670231T3 (es) | 2006-03-22 | 2018-05-29 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Regímenes para inmunización con conjugados meningocócicos |
US10828361B2 (en) * | 2006-03-22 | 2020-11-10 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Regimens for immunisation with meningococcal conjugates |
GB0605757D0 (en) | 2006-03-22 | 2006-05-03 | Chiron Srl | Separation of conjugated and unconjugated components |
TW200806315A (en) * | 2006-04-26 | 2008-02-01 | Wyeth Corp | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
CN101081296B (zh) * | 2006-05-29 | 2010-08-04 | 北京民海生物科技有限公司 | 一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖制备方法及其联合疫苗 |
US7491517B2 (en) | 2006-07-19 | 2009-02-17 | Jeeri R Reddy | Method of producing meningococcal meningitis vaccine for Neisseria meningitidis serotypes A,C,Y, and W-135 |
EP2586790A3 (de) | 2006-08-16 | 2013-08-14 | Novartis AG | Immunogene von uropathogenen Escherichia coli |
AU2007307800C1 (en) * | 2006-10-10 | 2014-03-13 | Wyeth Llc | Purification of Streptococcus pneumoniae type 3 polysaccharides |
GB0700136D0 (en) | 2007-01-04 | 2007-02-14 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Process for manufacturing vaccines |
GB0700562D0 (en) * | 2007-01-11 | 2007-02-21 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Modified Saccharides |
DK2129693T3 (en) * | 2007-03-23 | 2017-02-13 | Wyeth Llc | BRIEF PURIFICATION PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE-Capsule POLYACCHARIDES |
US8398985B2 (en) * | 2007-04-23 | 2013-03-19 | Serum Institute Of India Ltd. | Antigenic polysaccharides and process for their preparation |
EP2152302B1 (de) | 2007-06-04 | 2015-10-07 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Formulierung eines impfstoffes gegen meningitis |
GB0713880D0 (en) | 2007-07-17 | 2007-08-29 | Novartis Ag | Conjugate purification |
CA2698157C (en) * | 2007-09-11 | 2016-10-11 | University Of Guelph | Novel polysaccharide immunogens from clostridium difficile |
ES2383231T3 (es) | 2007-10-19 | 2012-06-19 | Novartis Ag | Formulaciones para vacunas meningocócicas |
ES2532946T3 (es) | 2008-02-21 | 2015-04-06 | Novartis Ag | Polipéptidos PUfH meningocócicos |
CN101724085B (zh) * | 2008-10-22 | 2011-09-21 | 上海生物制品研究所 | 一种荚膜多糖纯化方法 |
AU2009309416B2 (en) | 2008-10-27 | 2015-05-28 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Purification method |
GB0822633D0 (en) | 2008-12-11 | 2009-01-21 | Novartis Ag | Formulation |
GB0822634D0 (en) | 2008-12-11 | 2009-01-21 | Novartis Ag | Meningitis vaccines |
US20100189737A1 (en) | 2008-12-17 | 2010-07-29 | Arico Beatrice | Meningococcal vaccines including hemoglobin receptor |
CN102596240B (zh) | 2009-08-27 | 2015-02-04 | 诺华股份有限公司 | 包括脑膜炎球菌fHBP序列的杂交多肽 |
CA2779798C (en) | 2009-09-30 | 2019-03-19 | Novartis Ag | Conjugation of staphylococcus aureus type 5 and type 8 capsular polysaccharides |
MX2012004850A (es) | 2009-10-27 | 2012-05-22 | Novartis Ag | Polipeptidos fhbp meningococicos modificados. |
EP3199177A1 (de) | 2009-10-30 | 2017-08-02 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Reinigung von kapselförmigen polysacchariden typ 5 und typ 8 aus staphylococcus aureus |
EP2547357A1 (de) | 2010-03-18 | 2013-01-23 | Novartis AG | Adjuvierte impfstoffe für serogruppen-b-meningokokken |
WO2012025873A2 (en) | 2010-08-23 | 2012-03-01 | Wyeth Llc | STABLE FORMULATIONS OF NEISSERIA MENINGITIDIS rLP2086 ANTIGENS |
EP2612148B1 (de) | 2010-09-04 | 2019-06-12 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Bakterizide antikörpertests zur beurteilung der immunogenität und potenz von impfstoffen mit meningokokken-kapselsacchariden |
PE20140173A1 (es) | 2010-09-10 | 2014-02-20 | Wyeth Llc | Variantes no lipidadas de antigenos orf2086 de neisseria meningitidis |
GB201101665D0 (en) | 2011-01-31 | 2011-03-16 | Novartis Ag | Immunogenic compositions |
WO2012085668A2 (en) | 2010-12-24 | 2012-06-28 | Novartis Ag | Compounds |
RU2013144207A (ru) | 2011-03-02 | 2015-04-10 | Новартис Аг | Комбинированные вакцины с пониженными дозами антигена и/или адъюванта |
US9149541B2 (en) | 2011-07-08 | 2015-10-06 | Novartis Ag | Tyrosine ligation process |
CU20110202A7 (es) | 2011-11-02 | 2013-12-27 | Inst Finlay Ct De Investigación Producción De Sueros Y Vacunas | Composición inmunogénica de polisacáridos planos adyuvados y las formulaciones resultantes |
CN104080479B (zh) | 2011-11-07 | 2019-11-05 | 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 | 包括spr0096和spr2021抗原的运载体分子 |
CA2863178C (en) * | 2012-01-30 | 2021-04-06 | Serum Institute Of India Ltd. | Immunogenic composition |
EP2822584A1 (de) | 2012-03-08 | 2015-01-14 | Novartis AG | Kombinationsimpfstoffe mit tlr4-agonisten |
SG10201602558UA (en) | 2012-03-09 | 2016-05-30 | Pfizer | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
MX2014014067A (es) | 2012-05-22 | 2015-02-04 | Novartis Ag | Conjugado de serogrupo x de meningococo. |
CN104487086B (zh) * | 2012-07-07 | 2019-08-30 | 巴拉特生物技术国际有限公司 | 无动物源的不含酒精的疫苗组合物及其制备方法 |
CN103623404B (zh) * | 2012-08-28 | 2016-08-03 | 天士力制药集团股份有限公司 | 一种b型流感嗜血杆菌多糖结合疫苗的制备方法 |
CA2882619A1 (en) | 2012-09-06 | 2014-03-13 | Novartis Ag | Combination vaccines with serogroup b meningococcus and d/t/p |
CA2892035C (en) * | 2012-11-21 | 2019-11-05 | Serum Institute Of India Ltd. | Production of neisseria meningitidis x capsular polysaccharide |
CN105007935A (zh) | 2012-12-18 | 2015-10-28 | 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 | 用于保护免于白喉和/或破伤风的缀合物 |
EP2964665B1 (de) | 2013-03-08 | 2018-08-01 | Pfizer Inc | Immunogene fusionspolypeptide |
EP3613755A1 (de) | 2013-07-11 | 2020-02-26 | Novartis AG | Lysinspezifische chemoenzymatische proteinmodifikationen unter einsatz von mikrobieller transglutaminase |
US9910041B2 (en) | 2013-07-12 | 2018-03-06 | Emd Millipore Corporation | Method of determining virus removal from a sample containing a target protein using activated carbon |
CA2923129C (en) | 2013-09-08 | 2020-06-09 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
RS61246B1 (sr) | 2014-02-28 | 2021-01-29 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Modifikovani meningokokni fhbp polipeptidi |
EP3148577B1 (de) | 2014-05-24 | 2021-01-20 | Biological E Limited | Neuer halbsynthetischer meningokokken-konjugat-impfstoff |
CN104548090B (zh) * | 2015-01-27 | 2016-11-30 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种β-葡聚糖修饰的脑膜炎多糖结合疫苗及其制备方法 |
BR112017017460A2 (pt) | 2015-02-19 | 2018-04-10 | Pfizer Inc. | composições de neisseria meningitidis e métodos das mesmas |
CN105037579A (zh) * | 2015-08-31 | 2015-11-11 | 成都欧林生物科技股份有限公司 | A群脑膜炎球菌细菌荚膜粗多糖的制备工艺 |
BE1024634B1 (fr) | 2016-04-05 | 2018-05-14 | Gsk Vaccines S.R.L. | Compositions immunogenes |
SG11201901394XA (en) | 2016-09-02 | 2019-03-28 | Sanofi Pasteur Inc | Neisseria meningitidis vaccine |
CA3035320A1 (en) | 2016-09-02 | 2018-03-08 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Vaccines for neisseria gonorrhoeae |
US11951165B2 (en) | 2016-12-30 | 2024-04-09 | Vaxcyte, Inc. | Conjugated vaccine carrier proteins |
AU2018215585B2 (en) | 2017-01-31 | 2022-03-17 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
CA3052621A1 (en) | 2017-02-03 | 2018-08-09 | Schadeck, Eva Barbara | Haemophilus influenzae saccharide-carrier conjugate compositions and uses thereof |
US20200061542A1 (en) * | 2017-02-24 | 2020-02-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Methods for improving filterability of polysaccharide-protein conjugate reactions |
US11400162B2 (en) | 2017-02-24 | 2022-08-02 | Merck Sharp & Dohme Llc | Processes for the formulation of pneumococcal polysaccharides for conjugation to a carrier protein |
AU2018262438B2 (en) * | 2017-05-05 | 2022-07-14 | Serum Institute Of India Private Limited | Method for removal of impurities from bacterial capsular polysaccharide based preparations |
KR20200010321A (ko) * | 2017-05-17 | 2020-01-30 | 엠에스디 웰컴 트러스트 힐레맨 랩스 피브이티. 리미티드 | 세균성 다당류의 정제 |
EP3678694A4 (de) * | 2017-09-07 | 2021-10-20 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Verfahren zur formulierung von pneumokokken-polysacchariden zur konjugation an ein trägerprotein |
WO2019175900A1 (en) * | 2018-03-16 | 2019-09-19 | Msd Wellcome Trust Hilleman Laboratories Pvt. Ltd. | Purification of neisseria meningitidis polysaccharides |
CN113966234A (zh) | 2019-05-10 | 2022-01-21 | 葛兰素史克生物有限公司 | 缀合物的产生 |
CA3161857A1 (en) | 2019-11-22 | 2021-05-27 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Dosage and administration of a bacterial saccharide glycoconjugate vaccine |
GB202013262D0 (en) | 2020-08-25 | 2020-10-07 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Vaccine Composition |
CN115721709A (zh) * | 2021-08-27 | 2023-03-03 | 康希诺生物股份公司 | 一种肺炎球菌结合疫苗制备方法 |
GB202115151D0 (en) | 2021-10-21 | 2021-12-08 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Methods |
GB202208089D0 (en) | 2022-06-01 | 2022-07-13 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunogenic composition |
GB202208093D0 (en) | 2022-06-01 | 2022-07-13 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunogenic composition |
Family Cites Families (146)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB207117A (en) | 1923-04-05 | 1923-11-22 | Fernand Prosper Constant Lebru | Improvements in otter boards |
US4057685A (en) | 1972-02-02 | 1977-11-08 | Abbott Laboratories | Chemically modified endotoxin immunizing agent |
US4123520A (en) * | 1977-08-01 | 1978-10-31 | Merck & Co., Inc. | Method for preparing high molecular weight meningococcal Group C vaccine |
US4134214A (en) | 1977-08-05 | 1979-01-16 | Merck & Co., Inc. | Freeze-drying process for the preparation of meningococcus vaccine without degradation of potency |
DE2748132A1 (de) * | 1977-10-27 | 1979-05-03 | Behringwerke Ag | Stabilisator fuer polysaccharid |
US4220717A (en) | 1977-12-22 | 1980-09-02 | American Cyanamid Company | Isolation and purification of polyribosyl ribitol phosphate from Haemophilus influenzae type b. |
US4242501A (en) * | 1979-08-08 | 1980-12-30 | American Cyanamid Company | Purification of pneumococcal capsular polysaccharides |
US4351762A (en) | 1981-03-10 | 1982-09-28 | Bioresearch, Inc. | Rapid, quantitative peptide synthesis using mixed anhydrides |
US4356170A (en) | 1981-05-27 | 1982-10-26 | Canadian Patents & Development Ltd. | Immunogenic polysaccharide-protein conjugates |
BE889979A (fr) † | 1981-08-14 | 1982-02-15 | Smith Kline Rit | Procede de preparation de polysaccharides bacteriens capsulaires antigeniques purifies, produits obtenus et leur utilisation |
US4902506A (en) | 1983-07-05 | 1990-02-20 | The University Of Rochester | Immunogenic conjugates |
US4673574A (en) | 1981-08-31 | 1987-06-16 | Anderson Porter W | Immunogenic conjugates |
US4451446A (en) * | 1982-03-04 | 1984-05-29 | Smithkline-Rit | Process for the preparation of polysaccharide-protein complexes from bacterial capsules, obtained products and immunogenic compositions containing them |
US4496538A (en) | 1982-07-06 | 1985-01-29 | Connaught Laboratories, Inc. | Haemophilus influenzae b polysaccharide-diphtheria toxoid conjugate vaccine |
EP0109688A3 (de) | 1982-11-23 | 1986-12-03 | The Wellcome Foundation Limited | Komplexe, Verfahren zu deren Herstellung und diese Komplexe enthaltende Zusammensetzungen |
JPS59176214A (ja) * | 1982-11-23 | 1984-10-05 | ザ・ウエルカム・フアウンデ−シヨン・リミテツド | 抗原性組成物 |
US4459286A (en) | 1983-01-31 | 1984-07-10 | Merck & Co., Inc. | Coupled H. influenzae type B vaccine |
US4663160A (en) | 1983-03-14 | 1987-05-05 | Miles Laboratories, Inc. | Vaccines for gram-negative bacteria |
US4761283A (en) | 1983-07-05 | 1988-08-02 | The University Of Rochester | Immunogenic conjugates |
US4762713A (en) | 1983-07-05 | 1988-08-09 | The University Of Rochester | Boosting of immunogenic conjugate vaccinations by unconjugated bacterial capsular polymers |
EP0145359B1 (de) * | 1983-11-21 | 1991-01-16 | The Wellcome Foundation Limited | Komplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung und dieselben enthaltende Formulierungen |
US4695624A (en) | 1984-05-10 | 1987-09-22 | Merck & Co., Inc. | Covalently-modified polyanionic bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers, and methods of preparing such polysaccharides and conjugates and of confirming covalency |
US4882317A (en) | 1984-05-10 | 1989-11-21 | Merck & Co., Inc. | Covalently-modified bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers and methods of preparing such polysaccharides and conjugataes and of confirming covalency |
US4808700A (en) | 1984-07-09 | 1989-02-28 | Praxis Biologics, Inc. | Immunogenic conjugates of non-toxic E. coli LT-B enterotoxin subunit and capsular polymers |
IT1187753B (it) | 1985-07-05 | 1987-12-23 | Sclavo Spa | Coniugati glicoproteici ad attivita' immunogenica trivalente |
US4814276A (en) | 1986-04-25 | 1989-03-21 | Becton, Dickinson And Company | Selective medium for growth of neisseria |
US4877613A (en) | 1987-08-05 | 1989-10-31 | Biotech Connections, Inc. | Process for preparing veterinary acellular vaccines against gram-negative nonenteric pathogenic bacilli |
US4761713A (en) * | 1987-11-06 | 1988-08-02 | North American Philips Corp. | Glycol based mid-volt capacitor |
GB8815795D0 (en) | 1988-07-02 | 1988-08-10 | Bkl Extrusions Ltd | Glazing bead |
NL8802046A (nl) | 1988-08-18 | 1990-03-16 | Gen Electric | Polymeermengsel met polyester en alkaansulfonaat, daaruit gevormde voorwerpen. |
DE3841091A1 (de) | 1988-12-07 | 1990-06-13 | Behringwerke Ag | Synthetische antigene, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
JP3436756B2 (ja) | 1988-12-19 | 2003-08-18 | アメリカン・サイアナミド・カンパニー | 髄膜炎菌のクラスiの外膜タンパク質のワクチン |
EP0378881B1 (de) | 1989-01-17 | 1993-06-09 | ENIRICERCHE S.p.A. | Synthetische Peptide und deren Verwendung als allgemeine Träger für die Herstellung von immunogenischen Konjugaten, die für die Entwicklung von synthetischen Impfstoffen geeignet sind |
US4963534A (en) | 1989-05-19 | 1990-10-16 | Merck & Co., Inc. | Process for solubilizing polyanoinic bacterial polysaccharides in aprotic solvents |
JPH0832638B2 (ja) | 1989-05-25 | 1996-03-29 | カイロン コーポレイション | サブミクロン油滴乳剤を含んで成るアジュバント製剤 |
CA2063271A1 (en) | 1989-07-14 | 1991-01-15 | Subramonia Pillai | Cytokine and hormone carriers for conjugate vaccines |
IT1237764B (it) | 1989-11-10 | 1993-06-17 | Eniricerche Spa | Peptidi sintetici utili come carriers universali per la preparazione di coniugati immunogenici e loro impiego per lo sviluppo di vaccini sintetici. |
ES2071288T3 (es) * | 1989-12-14 | 1995-06-16 | Ca Nat Research Council | Vacuna mejorada de conjugado de polisacarido de meningococos. |
ATE128628T1 (de) | 1990-08-13 | 1995-10-15 | American Cyanamid Co | Faser-hemagglutinin von bordetella pertussis als träger für konjugierten impfstoff. |
US5256294A (en) * | 1990-09-17 | 1993-10-26 | Genentech, Inc. | Tangential flow filtration process and apparatus |
US5153312A (en) | 1990-09-28 | 1992-10-06 | American Cyanamid Company | Oligosaccharide conjugate vaccines |
CA2059692C (en) * | 1991-01-28 | 2004-11-16 | Peter J. Kniskern | Pneumoccoccal polysaccharide conjugate vaccine |
CA2059693C (en) | 1991-01-28 | 2003-08-19 | Peter J. Kniskern | Polysaccharide antigens from streptococcus pneumoniae |
DE69231663T2 (de) | 1991-03-12 | 2001-08-23 | Nasa | Polysaccharid-protein-konjugate |
SK18594A3 (en) * | 1991-08-16 | 1994-08-10 | Merck & Co Inc | Method of production of capsular polysacharide without lipid and endotoxine |
US5314811A (en) | 1992-07-13 | 1994-05-24 | Merck & Co., Inc. | Process for converting lipid-containing bacterial capsular polysaccharide into lipid-free polysaccharide |
FR2682388B1 (fr) | 1991-10-10 | 1995-06-09 | Pasteur Merieux Serums Vacc | Procede de preparation d'un oligoside par depolymerisation d'un polyoside issu d'un agent pathogene, oligoside ainsi obtenu et son utilisation notamment comme agent vaccinal. |
EP0967279B1 (de) | 1992-03-02 | 2008-01-02 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Helicobacter pylori Cytotoxin verwendbar in Impfstoffe und Diagnostik |
IT1262896B (it) | 1992-03-06 | 1996-07-22 | Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini. | |
NZ253065A (en) | 1992-05-23 | 1996-10-28 | Smithkline Beecham Biolog | Combination vaccines comprising hepatitis b surface antigens and other antigens wherein aluminium phosphate adjuvant is used to adsorb the hepatitis antigen |
HU219808B (hu) | 1992-06-25 | 2001-08-28 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Adjuvánst tartalmazó vakcinakompozíció és eljárás annak előállítására |
IL102687A (en) | 1992-07-30 | 1997-06-10 | Yeda Res & Dev | Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them |
DE69405551T3 (de) | 1993-03-23 | 2005-10-20 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | 3-0-deazylierte monophosphoryl lipid a enthaltende impfstoff-zusammensetzungen |
AU678613B2 (en) * | 1993-09-22 | 1997-06-05 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | Method of activating soluble carbohydrate using novel cyanylating reagents for the production of immunogenic constructs |
GB9326253D0 (en) | 1993-12-23 | 1994-02-23 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
ATE229978T1 (de) | 1994-07-01 | 2003-01-15 | Chiron Corp | Helicobacter proteine und impstoffe |
US6207646B1 (en) | 1994-07-15 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
CA2194761C (en) | 1994-07-15 | 2006-12-19 | Arthur M. Krieg | Immunomodulatory oligonucleotides |
GB9422096D0 (en) * | 1994-11-02 | 1994-12-21 | Biocine Spa | Combined meningitis vaccine |
US6696065B1 (en) * | 1995-05-04 | 2004-02-24 | Aventis Pastuer Limited | Acellular pertussis vaccines and methods of preparation thereof |
US20030157129A1 (en) | 1995-06-23 | 2003-08-21 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Vaccine comprising a polysaccharide antigen - carrier protein conjugate and free carrier protein |
US5811102A (en) | 1995-06-07 | 1998-09-22 | National Research Council Of Canada | Modified meningococcal polysaccharide conjugate vaccines |
ES2308962T3 (es) | 1995-06-07 | 2008-12-16 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vacunas que comprenden un conjugado de antigeno polisacarido-proteina transportadora y una proteina transportadora libre. |
SI1082965T1 (sl) | 1995-06-23 | 2009-08-31 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Sestavek cepiva, ki vsebuje antigen konjugata polisaharida, adsorbiranega na aluminijevem fosfatu |
US20020054884A1 (en) | 1995-06-23 | 2002-05-09 | Smithkline Beecham Biologicals, Sa | Vaccine composition comprising a polysaccharide conjugate antigen adsorbed onto aluminium phosphate |
GB9513261D0 (en) | 1995-06-29 | 1995-09-06 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
AU1463097A (en) | 1996-01-04 | 1997-08-01 | Rican Limited | Helicobacter pylori bacterioferritin |
KR19990082265A (ko) | 1996-02-01 | 1999-11-25 | 다니엘 제이. 압둔-나비 | 효모중에서 b군 나이세리아 멘인기티디스 외막(mb3)단백질을 발현시키는 방법 및 백신 |
DK0897427T3 (da) † | 1996-02-14 | 2005-02-14 | Merck & Co Inc | Fremgangsmåde til fældning af polysaccharid |
DE19630390A1 (de) | 1996-07-26 | 1998-01-29 | Chiron Behring Gmbh & Co | Proteine, insbesondere Membranproteine von Helicobacter pylori, ihre Herstellung und Verwendung |
JP4162267B2 (ja) | 1996-08-27 | 2008-10-08 | カイロン コーポレイション | Neisseria meningitidis血清型B複合糖質およびその使用法 |
ATE292980T1 (de) | 1996-10-11 | 2005-04-15 | Univ California | Immunostimulierende oligonucleotidekonjugate |
US5980898A (en) | 1996-11-14 | 1999-11-09 | The United States Of America As Represented By The U.S. Army Medical Research & Material Command | Adjuvant for transcutaneous immunization |
US6248334B1 (en) | 1997-01-08 | 2001-06-19 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | Process for preparing conjugate vaccines including free protein and the conjugate vaccines, immunogens, and immunogenic reagents produced by this process |
AU722315B2 (en) * | 1997-01-21 | 2000-07-27 | Pasteur Merieux Serums Et Vaccins | Polysaccharide-peptide conjugates |
EP0975790B1 (de) * | 1997-01-24 | 2004-09-29 | Schweiz. Serum-&Impfinstitut Bern | Neues verfahren zur isolierung von polysacchariden |
WO1998037919A1 (en) | 1997-02-28 | 1998-09-03 | University Of Iowa Research Foundation | USE OF NUCLEIC ACIDS CONTAINING UNMETHYLATED CpG DINUCLEOTIDE IN THE TREATMENT OF LPS-ASSOCIATED DISORDERS |
ATE441432T1 (de) | 1997-03-10 | 2009-09-15 | Ottawa Hospital Res Inst | Verwendung von nicht-methyliertem cpg dinukleotid in kombination mit aluminium als adjuvantien |
US6299881B1 (en) | 1997-03-24 | 2001-10-09 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | Uronium salts for activating hydroxyls, carboxyls, and polysaccharides, and conjugate vaccines, immunogens, and other useful immunological reagents produced using uronium salts |
US6403306B1 (en) | 1997-04-09 | 2002-06-11 | Emory University | Serogroup-specific nucleotide sequences in the molecular typing of bacterial isolates and the preparation of vaccines thereto |
ES2230687T3 (es) | 1997-04-24 | 2005-05-01 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | Copulacion de proteinas nomodificadas con polisacaridos derivados de haloacilo o de dihaloacilo para la preparacion de vacunas que incluyen proteinas-polisacaridos. |
EP1003531B1 (de) | 1997-05-20 | 2007-08-22 | Ottawa Health Research Institute | Verfahren zur Herstellung von Nukleinsäurekonstrukten |
EP1849860B1 (de) | 1997-05-28 | 2010-11-17 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Verfahren zur Herstellung eines immunogenen Faktors von Corynebacterium diphtheriae unter Verwendung eines Kulturmediums mit Hefeextrakt als Aminosäurenquelle und ohne Proteinkomplexe tierischer Herkunft |
CA2291483C (en) | 1997-06-06 | 2012-09-18 | Dynavax Technologies Corporation | Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof |
GB9712347D0 (en) | 1997-06-14 | 1997-08-13 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
GB9713156D0 (en) | 1997-06-20 | 1997-08-27 | Microbiological Res Authority | Vaccines |
JP2002506448A (ja) | 1997-06-24 | 2002-02-26 | カイロン コーポレイション | 抗髄膜炎菌ワクチン組成物を使用して成体を免疫する方法 |
DK1007546T3 (da) * | 1997-08-27 | 2009-03-16 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Molekylære mimetika af meningokok-B-epitoper |
EP1009382B1 (de) | 1997-09-05 | 2003-06-18 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Öl in wasser emulsionen mit saponinen |
US5965714A (en) | 1997-10-02 | 1999-10-12 | Connaught Laboratories, Inc. | Method for the covalent attachment of polysaccharides to protein molecules |
BR9813930A (pt) | 1997-11-06 | 2006-12-19 | Chiron Spa | antìgeno neisserial |
CA2307846A1 (en) | 1997-11-21 | 1999-06-03 | Genset S.A. | Chlamydia pneumoniae genomic sequence and polypeptides, fragments thereof and uses thereof, in particular for the diagnosis, prevention and treatment of infection |
GB9725084D0 (en) | 1997-11-28 | 1998-01-28 | Medeva Europ Ltd | Vaccine compositions |
BR9814912A (pt) | 1997-11-28 | 2000-10-03 | Genset Sa | Sequência genÈmica e polipeptìdeos de chlamydia trachomatis, fragmentos dos mesmos e usos dos mesmos, em particular para o diagnóstico, a prevenção e o tratamento de infecção |
CA2316975C (en) | 1997-12-23 | 2009-03-24 | North American Vaccine, Inc. | Procedures for the extraction and isolation of bacterial capsular polysaccharides for use as vaccines or linked to proteins as conjugate vaccines |
EP1047784B2 (de) | 1998-01-14 | 2015-03-18 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Antigene aus neisseria meningitidis |
US7018637B2 (en) | 1998-02-23 | 2006-03-28 | Aventis Pasteur, Inc | Multi-oligosaccharide glycoconjugate bacterial meningitis vaccines |
US6303114B1 (en) | 1998-03-05 | 2001-10-16 | The Medical College Of Ohio | IL-12 enhancement of immune responses to T-independent antigens |
GB9806456D0 (en) * | 1998-03-25 | 1998-05-27 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
WO1999052549A1 (en) | 1998-04-09 | 1999-10-21 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Adjuvant compositions |
NZ532665A (en) | 1998-05-01 | 2005-11-25 | Inst Genomic Research | Neisseria meningitidis antigens and compositions |
JP5074644B2 (ja) | 1998-05-29 | 2012-11-14 | ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス,インコーポレーテッド | 組合わせの髄膜炎菌b/cワクチン |
GB9817052D0 (en) | 1998-08-05 | 1998-09-30 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
CA2340692A1 (en) | 1998-08-19 | 2000-03-02 | North American Vaccine, Inc. | Immunogenic .beta.-propionamido-linked polysaccharide protein conjugate useful as a vaccine produced using an n-acryloylated polysaccharide |
US6128656A (en) * | 1998-09-10 | 2000-10-03 | Cisco Technology, Inc. | System for updating selected part of configuration information stored in a memory of a network element depending on status of received state variable |
MXPA01003557A (es) | 1998-10-09 | 2004-04-05 | Chiron Corp | Secuencias genomicas de neisseria y metodos para su uso. |
DE122007000087I1 (de) | 1998-10-16 | 2008-03-27 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Adjuvanzsysteme und impfstoffe |
AU1722300A (en) | 1998-11-12 | 2000-05-29 | Regents Of The University Of California, The | Chlamydia pneumoniae genome sequence |
GB9828000D0 (en) | 1998-12-18 | 1999-02-10 | Chiron Spa | Antigens |
US6146902A (en) | 1998-12-29 | 2000-11-14 | Aventis Pasteur, Inc. | Purification of polysaccharide-protein conjugate vaccines by ultrafiltration with ammonium sulfate solutions |
BR0009163A (pt) | 1999-03-19 | 2001-12-26 | Smithkline Beecham Biolog | Vacina |
FR2791895B1 (fr) | 1999-03-23 | 2001-06-15 | Pasteur Merieux Serums Vacc | Utilisation de trehalose pour stabiliser un vaccin liquide |
JP2002541808A (ja) | 1999-04-09 | 2002-12-10 | テクラブ, インコーポレイテッド | ポリサッカリド結合体ワクチンのための組換えトキシンaタンパク質キャリア |
BRPI0010612B8 (pt) | 1999-04-19 | 2021-05-25 | Smithkline Beecham Biologicals S A | vacinas |
CA2373236C (en) | 1999-05-19 | 2014-08-26 | Chiron S.P.A. | Combination neisserial compositions |
GB9918319D0 (en) * | 1999-08-03 | 1999-10-06 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
US6531131B1 (en) | 1999-08-10 | 2003-03-11 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Conjugate vaccine for Neisseria meningitidis |
CZ20021045A3 (cs) | 1999-09-24 | 2002-08-14 | Smithkline Beecham Biologicals S. A. | Pomocný prostředek |
KR20020038770A (ko) | 1999-09-24 | 2002-05-23 | 장 스테판느 | 애쥬번트로서의 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와옥톡시놀의 조합물의 용도 및 백신과 관련된 이의 용도 |
GB9925559D0 (en) | 1999-10-28 | 1999-12-29 | Smithkline Beecham Biolog | Novel method |
ES2307553T3 (es) * | 1999-12-02 | 2008-12-01 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Composiciones y procedimientos para estabilizar moleculas biologicas tras liofilizacion. |
EP2275129A3 (de) | 2000-01-17 | 2013-11-06 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Ergänzter Außenmembranvesikel-Impfstoff gegen Meningokokken |
WO2001064920A2 (en) | 2000-02-28 | 2001-09-07 | Chiron Spa | Hybrid expression of neisserial proteins |
US6800455B2 (en) | 2000-03-31 | 2004-10-05 | Scios Inc. | Secreted factors |
GB0108364D0 (en) * | 2001-04-03 | 2001-05-23 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine composition |
AU8189501A (en) | 2000-06-29 | 2002-01-08 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
DE60139690D1 (de) | 2000-07-03 | 2009-10-08 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Immunisierung gegen chlamydia pneumoniae |
GB0022742D0 (en) | 2000-09-15 | 2000-11-01 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
CN101428006A (zh) * | 2000-09-28 | 2009-05-13 | 诺华疫苗和诊断公司 | 微粒体组合物及其生产方法 |
SG165981A1 (en) | 2000-10-27 | 2010-11-29 | Chiron Srl | Nucleic acids and proteins from streptococcus groups a & b |
PT2332581E (pt) * | 2001-01-23 | 2015-10-16 | Sanofi Pasteur Inc | Vacina meningocócica tri- ou tetravalente de conjugados de polissacárido e crm-197 |
WO2002080648A2 (en) * | 2001-04-05 | 2002-10-17 | Chiron Corporation | Mucosal boosting following parenteral priming |
GB0115176D0 (en) * | 2001-06-20 | 2001-08-15 | Chiron Spa | Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
GB0121591D0 (en) | 2001-09-06 | 2001-10-24 | Chiron Spa | Hybrid and tandem expression of neisserial proteins |
AU2002334844B2 (en) | 2001-10-03 | 2007-08-02 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Adjuvanted meningococcus compositions |
DE60325565D1 (de) | 2002-03-26 | 2009-02-12 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Modifizierte saccharide mit verbesserter stabilität in wasser |
GB0302218D0 (en) | 2003-01-30 | 2003-03-05 | Chiron Sri | Vaccine formulation & Mucosal delivery |
CA2485999C (en) | 2002-05-14 | 2015-02-17 | Chiron Srl | Mucosal combination vaccines for bacterial meningitis |
GB0220198D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-10-09 | Chiron Spa | Modified saccharides,conjugates thereof and their manufacture |
ATE492288T1 (de) | 2002-10-11 | 2011-01-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Polypeptidimpstoffe zum breiten schutz gegen hypervirulente meningokokken-linien |
JP4827726B2 (ja) | 2003-01-30 | 2011-11-30 | ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル | 複数の髄膜炎菌血清群に対する注射可能ワクチン |
GB0409745D0 (en) * | 2004-04-30 | 2004-06-09 | Chiron Srl | Compositions including unconjugated carrier proteins |
ES2670231T3 (es) | 2006-03-22 | 2018-05-29 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Regímenes para inmunización con conjugados meningocócicos |
US10828361B2 (en) | 2006-03-22 | 2020-11-10 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Regimens for immunisation with meningococcal conjugates |
GB0822633D0 (en) * | 2008-12-11 | 2009-01-21 | Novartis Ag | Formulation |
GB2495341B (en) * | 2011-11-11 | 2013-09-18 | Novartis Ag | Fermentation methods and their products |
-
2001
- 2001-06-20 GB GBGB0115176.0A patent/GB0115176D0/en not_active Ceased
-
2002
- 2002-06-20 BR BR0210590-0 patent/BRPI0210590B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-06-20 EP EP09075010.0A patent/EP2229954B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 EP EP10007477.2A patent/EP2263688B2/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 ES ES09075010.0T patent/ES2670219T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 PT PT101797975T patent/PT2277536T/pt unknown
- 2002-06-20 EP EP06075175A patent/EP1741442B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 EP EP10179806.4A patent/EP2277537B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 ES ES10007477T patent/ES2387592T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 DE DE122010000042C patent/DE122010000042I1/de active Pending
- 2002-06-20 TR TR2018/08055T patent/TR201808055T4/tr unknown
- 2002-06-20 DE DE60210456T patent/DE60210456T3/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 AT AT10007477T patent/ATE556718T1/de active
- 2002-06-20 CA CA2450203A patent/CA2450203C/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 JP JP2003513590A patent/JP5075317B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 EP EP10179797.5A patent/EP2277536B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 CN CNA2009101281393A patent/CN101524533A/zh active Pending
- 2002-06-20 BR BR122019009186A patent/BR122019009186B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-06-20 ES ES02755452T patent/ES2261705T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 RU RU2004101284/13A patent/RU2381814C2/ru not_active Application Discontinuation
- 2002-06-20 MX MXPA03011462A patent/MXPA03011462A/es active IP Right Grant
- 2002-06-20 NZ NZ529881A patent/NZ529881A/xx not_active IP Right Cessation
- 2002-06-20 WO PCT/IB2002/003191 patent/WO2003007985A2/en active IP Right Grant
- 2002-06-20 DE DE122011000003C patent/DE122011000003I1/de active Pending
- 2002-06-20 EP EP09075009.2A patent/EP2216044B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 AT AT02755452T patent/ATE322287T1/de active
- 2002-06-20 DE DE122010000040C patent/DE122010000040I1/de active Pending
- 2002-06-20 CA CA2641585A patent/CA2641585C/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 DE DE122010000041C patent/DE122010000041I1/de active Pending
- 2002-06-20 PT PT02755452T patent/PT1401489E/pt unknown
- 2002-06-20 EP EP10180707A patent/EP2277539A3/de not_active Ceased
- 2002-06-20 ES ES10179806.4T patent/ES2539134T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 PT PT06075175T patent/PT1741442E/pt unknown
- 2002-06-20 CN CNB028124448A patent/CN100482273C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 TR TR2018/08026T patent/TR201808026T4/tr unknown
- 2002-06-20 PT PT101798064T patent/PT2277537E/pt unknown
- 2002-06-20 ES ES09075005.0T patent/ES2603275T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 CN CN200910128140.6A patent/CN101524534B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 NZ NZ544332A patent/NZ544332A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-06-20 DK DK09075006.8T patent/DK2189165T3/en active
- 2002-06-20 US US10/481,457 patent/US8753651B2/en active Active
- 2002-06-20 ES ES09075009.2T patent/ES2670196T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 ES ES10179797.5T patent/ES2662015T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 DE DE60237123T patent/DE60237123D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 EP EP02755452.6A patent/EP1401489B2/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 EP EP09075006.8A patent/EP2189165B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 ES ES06075175T patent/ES2347458T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 AU AU2002321716A patent/AU2002321716B2/en not_active Expired
- 2002-06-20 EP EP09075005.0A patent/EP2184071B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 DK DK09075005.0T patent/DK2184071T3/en active
- 2002-06-20 ES ES09075006.8T patent/ES2573259T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 PT PT10007477T patent/PT2263688E/pt unknown
- 2002-06-20 DK DK06075175.7T patent/DK1741442T3/da active
- 2002-06-20 DK DK02755452.6T patent/DK1401489T4/da active
- 2002-06-20 DK DK10179797.5T patent/DK2277536T3/en active
- 2002-06-20 DK DK10007477.2T patent/DK2263688T4/da active
- 2002-06-20 PT PT90750050T patent/PT2184071T/pt unknown
- 2002-06-20 CN CN200910128141.0A patent/CN101524535B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-20 AT AT06075175T patent/ATE474594T1/de active
- 2002-06-20 CA CA2730856A patent/CA2730856C/en not_active Expired - Lifetime
-
2007
- 2007-07-24 AU AU2007203442A patent/AU2007203442B2/en not_active Expired
-
2009
- 2009-01-09 US US12/351,281 patent/US8889152B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2009-01-14 US US12/353,409 patent/US8852606B2/en active Active
- 2009-01-20 US US12/321,418 patent/US9782466B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2009-01-20 US US12/321,464 patent/US9358278B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2009-01-20 US US12/321,420 patent/US20090130147A1/en not_active Abandoned
- 2009-01-20 US US12/321,417 patent/US9452207B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2009-01-20 US US12/321,434 patent/US9782467B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2009-02-26 JP JP2009044924A patent/JP5220658B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2009-02-26 JP JP2009044925A patent/JP5380111B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2009-03-11 RU RU2009108660/10A patent/RU2528066C2/ru active
-
2010
- 2010-09-13 FR FR10C0042C patent/FR10C0042I1/fr active Active
- 2010-09-13 BE BE2010C033C patent/BE2010C033I2/fr unknown
- 2010-09-13 BE BE2010C032C patent/BE2010C032I2/fr unknown
- 2010-09-13 NL NL300458C patent/NL300458I2/nl unknown
- 2010-09-13 NL NL300459C patent/NL300459I2/nl unknown
- 2010-09-13 NL NL300460C patent/NL300460I2/nl unknown
- 2010-09-13 FR FR10C0043C patent/FR10C0043I1/fr active Active
- 2010-09-13 BE BE2010C031C patent/BE2010C031I2/fr unknown
- 2010-09-13 FR FR10C0044C patent/FR10C0044I1/fr active Active
- 2010-09-14 LU LU91732C patent/LU91732I2/fr unknown
- 2010-09-14 LU LU91734C patent/LU91734I2/fr unknown
- 2010-09-14 LU LU91733C patent/LU91733I2/fr unknown
- 2010-10-11 CY CY20101100902T patent/CY1110820T1/el unknown
- 2010-11-19 AU AU2010246331A patent/AU2010246331B2/en not_active Expired
-
2011
- 2011-01-13 BE BE2011C001C patent/BE2011C001I2/fr unknown
- 2011-01-13 LU LU91778C patent/LU91778I2/fr unknown
- 2011-01-14 FR FR11C0001C patent/FR11C0001I2/fr active Active
- 2011-01-18 CY CY2011001C patent/CY2011001I1/el unknown
-
2012
- 2012-08-03 CY CY20121100693T patent/CY1113020T1/el unknown
- 2012-10-05 JP JP2012222942A patent/JP2013007057A/ja not_active Withdrawn
-
2016
- 2016-05-18 CY CY20161100432T patent/CY1117528T1/el unknown
- 2016-10-21 CY CY20161101065T patent/CY1118130T1/el unknown
- 2016-10-31 US US15/339,741 patent/US10716841B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2018
- 2018-03-30 CY CY20181100356T patent/CY1120499T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE60210456T2 (de) | Solubilisierung von capsulären Polysacchariden | |
DE69627652T2 (de) | Verbesserte meningokokken polysaccharid-konjugat vakzine | |
AU2002321716A1 (en) | Capsular polysaccharide solubilisation and combination vaccines | |
AU2014218428B2 (en) | Capsular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
8363 | Opposition against the patent | ||
8327 | Change in the person/name/address of the patent owner |
Owner name: NOVARTIS VACCINES AND DIAGNOSTICS S.R.L., SIEN, IT |
|
8327 | Change in the person/name/address of the patent owner |
Owner name: NOVARTIS AG, BASEL, CH |
|
V448 | Application of spc |
Free format text: PRODUCT NAME: MENINGOKOKKEN-GRUPPE A-OLIGOSACCHARID KONJUGIERT AN CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAECRM197-PROTEIN IN ALLEN DEM SCHUTZ DES GRUNDPATENTS UNTERLIEGENDEN FORMEN; REGISTRATION NO/DATE: EU/1/10/614/001, 20100315 Spc suppl protection certif: 12 2010 000 040 Filing date: 20100914 Free format text: PRODUCT NAME: MENINGOKOKKEN-GRUPPE Y-OLIGOSACCHARID KONJUGIERT AN CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAECRM197-PROTEIN IN ALLEN DEM SCHUTZ DES GRUNDPATENTS UNTERLIEGENDEN FORMEN; REGISTRATION NO/DATE: EU/1/10/614/001, 20100315 Spc suppl protection certif: 12 2010 000 041 Filing date: 20100914 Free format text: PRODUCT NAME: MENINGOKOKKEN-GRUPPE W135-OLIGOSACCHARID KONJUGIERT AN CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE CRM197-PROTEIN IN ALLEN DEM SCHUTZ DES GRUNDPATENTS UNTERLIEGENDEN FORMEN; REGISTRATION NO/DATE: EU/1/10/614/001, 20100315 Spc suppl protection certif: 12 2010 000 042 Filing date: 20100914 |