KR20140026392A - 저용량의 항원 및/또는 보조제를 갖는 조합 백신 - Google Patents

저용량의 항원 및/또는 보조제를 갖는 조합 백신 Download PDF

Info

Publication number
KR20140026392A
KR20140026392A KR1020137026063A KR20137026063A KR20140026392A KR 20140026392 A KR20140026392 A KR 20140026392A KR 1020137026063 A KR1020137026063 A KR 1020137026063A KR 20137026063 A KR20137026063 A KR 20137026063A KR 20140026392 A KR20140026392 A KR 20140026392A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
composition
adjuvant
antigen
denatured toxin
toxin
Prior art date
Application number
KR1020137026063A
Other languages
English (en)
Inventor
바바라 보드너
데이비드 에이.지. 스키빈스키
만모한 싱
데렉 오하간
Original Assignee
노파르티스 아게
데렉 오하간
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=45852630&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=KR20140026392(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by 노파르티스 아게, 데렉 오하간 filed Critical 노파르티스 아게
Publication of KR20140026392A publication Critical patent/KR20140026392A/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0016—Combination vaccines based on diphtheria-tetanus-pertussis
    • A61K39/0018—Combination vaccines based on acellular diphtheria-tetanus-pertussis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/095—Neisseria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/116—Polyvalent bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/125—Picornaviridae, e.g. calicivirus
    • A61K39/13—Poliovirus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32611—Poliovirus
    • C12N2770/32634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

조합 백신 조성물뿐만 아니라 그것들의 제조 방법은 상대적으로 소량의 항원 및/또는 상대적으로 소량의 알루미늄을 갖지만, 그것들은 그럼에도 불구하고 상대적으로 대량의 항원 및/또는 상대적으로 대량의 알루미늄을 가진 조합 백신과 비슷한 면역원성을 갖는다. 알루미늄이 없는 조합 백신 조성물, 예를 들어, 수중유 에멀젼 보조제로 보조된 조성물이 또한 제공된다.

Description

저용량의 항원 및/또는 보조제를 갖는 조합 백신{COMBINATION VACCINES WITH LOWER DOSES OF ANTIGEN AND/OR ADJUVANT}
본 발명은 백신의 투여가 하나 이상의 병원체에 대하여 대상을 동시에 면역화할 수 있는, 조합 백신, 즉, 하나 이상의 병원체의 혼합된 면역원을 함유하는 조합 백신의 분야에 있다.
일회 투여량 내에 하나 이상의 병원성 유기체의 항원을 함유하는 백신은 "다가" 또는 "조합" 백신으로 알려져 있다. 다양한 조합 백신은 EU 및 USA에서 사람 사용에 대하여 승인되었으며, 디프테리아 (diphtheria), 파상풍 (tetanus) 및 백일해 (pertussis)로부터 보호하는 3가 백신 ("DTP" 백신) 및 홍역 (measles), 볼거리 (mumps) 및 풍진 (rubella) ("MMR" 백신)으로부터 보호하는 3가 백신을 포함한다. 조합 백신은 환자에게 감소된 횟수의 주사를 받는 이점을 제안하며, 이것은, 특히 소아 백신 접종에 대한 증가된 적합성의 임상적 이점으로 이어질 수도 있다 (예를 들어, 참고문헌 1의 29장 참조).
현재의 조합 백신은 보조제로서 상대적으로 많은 양의 알루미늄 염을 포함할 수 있으며 이것은 일부 환자 압력 집단에 대한 우려를 유발한다 [2, 3]. 예를 들어, 알려진 조합 백신 중의 알루미늄 수준은 다음과 같다 (또한 하기 표 A 참조):
Figure pct00001
낮은 수준의 알루미늄이 들어있는 백신은 일부 환자 그룹에 유용할 것이고, 이상적으로 백신 효능의 손실 없이, 이러한 백신을 제공하는 것이 본 발명의 목적이다.
현재의 백신의 또 다른 문제점은 그것들이 상대적으로 많은 양의 항원이 필요한 점인 반면, 다양한 문서들이 더 소량의 항원을 가지고 보호 효과가 달성될 수도 있다는 것을 나타내는데, 예를 들어, 참고문헌 4는 D-T-Pw-Hib 백신에서 Hib 항원의 양이 면역학적 반응의 손실 없이 반으로 줄어들 수 있다는 것을 나타내고, 참고문헌 5는 소아마비 (polio)에 대하여 충분한 수준의 보호를 유지하면서 감소된 IPV 투여량이 사용될 수 있다는 것을 주장한다. 이상적으로 면역 보호 효과의 손실 없이, 감소된 양의 항원을 갖는 추가의 백신을 제공하는 것이 본 발명의 목적이다.
본 발명은 다양한 조합 백신 조성물뿐만 아니라 그것들의 제조 방법을 제공한다. 전형적으로 조성물은 상대적으로 소량의 항원 및/또는 상대적으로 소량의 알루미늄을 갖지만, 그것들은 그럼에도 불구하고 상대적으로 많은 양의 항원 및/또는 상대적으로 많은 양의 알루미늄을 가진 조합 백신과 비슷한 면역원성을 가질 수 있다. 알루미늄이 없는 조합 백신 조성물, 예를 들어, 수중유 에멀젼 보조제로 보조된 조성물이 또한 제공된다.
첫 번째 구체예에서, 본 발명은 (i) 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소, 및 (ii) 알루미늄 염 보조제를 포함하는, 환자에게 투여되는 단위 투여 형태의 면역원성 조성물을 제공하며, 단위 투여량에서 Al+++의 양은 0.2 mg보다 적다.
본 발명은 또한 (i) 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소 및 (ii) 알루미늄 염 보조제를 포함하는 면역원성 조성물을 제공하며, Al+++의 농도는 0.4 mg/ml보다 적다.
두 번째 구체예에서, 본 발명은 (i) 알루미늄 염 보조제 및 (ii) 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 포함하는 면역원성 조성물을 제공한다.
세 번째 구체예에서, 본 발명은 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소, 및 (ii) 알루미늄 염 보조제를 포함하는, 환자에게 투여되는 단위 투여 형태의 면역원성 조성물을 제공하며, 단위 투여량에서 Al+++의 양은 0.2 mg보다 적다.
본 발명은 또한 (i) 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소 및 (ii) 알루미늄 염 보조제를 포함하는 면역원성 조성물을 제공하며, Al+++의 농도는 0.4 mg/ml보다 적다.
네 번째 구체예에서, 본 발명은 (i) 수중유 에멀젼 보조제, (ii) 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 백일해 변성 독소, 및 Hib 콘쥬게이트 (conjugate), (iii) B형 간염 (hepatitis B) 바이러스 표면 항원 및/또는 불활성화된 폴리오바이러스 (poliovirus) 항원을 포함하는 면역원성 조성물을 제공한다. 조성물은 이상적으로 알루미늄이 없다.
하기 논의된 바와 같이, 알루미늄 염 보조제는 유리하게 흡착형 TLR 작용제를 갖는다.
본 발명의 추가의 양태는 하나 또는 두 가지의 DTaP 함유 조성물만이 투여되는 유아를 위한 면역화 계획이다. 이 양태는 하기 더 상세히 설명된다.
디프테리아 변성 독소
디프테리아는 코리네박테리움 디프테리애 (Corynebacterium dipththeriae), 그람 양성 비-포자 형성 호기성 박테리아에 의해 유발된다. 이 유기체는 프로파지-암호화된 ADP-리보실화 외독소 ('디프테리아 독소')를 발현하며, 이것은 더 이상 독성이 없지만 항원성을 유지하고 주사 후 특이적 항-독소 항체의 생산을 자극할 수 있는 변성 독소를 제공하기 위해 처리될 수 있다 (예를 들어, 포름알데히드를 사용하여). 디프테리아 변성 독소는 참고문헌 1의 13장에서 더 상세히 개시된다. 바람직한 디프테리아 변성 독소는 포름알데히드 처리에 의해 제조된 것들이다. 디프테리아 변성 독소는 성장 배지 (예를 들어, Fenton 배지, 또는 Linggoud & Fenton 배지)에서 씨. 디프테리애를 키운 후, 이어서 포름알데히드 처리, 한외여과 및 침전에 의해 얻어질 수 있으며, 이것은 소 추출물로 보충될 수도 있다. 변성 독소화된 물질은 멸균 여과 및/또는 투석을 포함하는 공정에 의해 처리될 수도 있다.
디프테리아 변성 독소의 양은 국제 단위 (IU)로 표현될 수 있다. 예를 들어, NIBSC [6]는 '디프테리아 변성 독소 흡착형 3차 국제 표준 1999 (Diphtheria Toxoid Adsorbed Third International Standard 1999)'를 공급하며 [7, 8], 이것은 앰플 당 160 IU를 함유한다. IU 시스템의 대안으로서, 'Lf 단위' ("응집 단위 (flocculating unit)", "경계 응집 용량 (limes flocculating dose)", 또는 "응집의 한계 (limit of flocculation)")는 변성 독소의 양으로서 정의되며, 이것은 1 국제 단위의 항독소와 혼합될 때, 최적의 응집 혼합물을 생산한다 [9]. 예를 들어, NIBSC는 앰플 당 300 Lf를 함유하는, '디프테리아 변성 독소, 플레인 (Diphtheria Toxoid, Plain)' [10], 및 앰플 당 900 Lf를 함유하는, '응집 테스트용 디프테리아 변성 독소에 대한 1차 국제 참고 시약 (The 1st International Reference Reagent For Diphtheria Toxoid For Flocculation Test)'을 공급한다 [11]. 조성물에서 디프테리아 독소의 농도는 이러한 참고 시약에 대하여 보정된 참고 물질과 비교하는 응집 검정을 사용하여 쉽게 결정될 수 있다. IU 및 Lf 시스템의 전환은 특정 변성 독소 제제에 의존한다.
본 발명의 일부 구체예에서, 조성물은 '저용량'의 디프테리아 변성 독소를 포함한다. 이것은 조성물 중의 디프테리아 변성 독소의 농도가 ≤8 Lf/ml, 예를 들어, <7, <6, <5, <4 <3, <2, <1 Lf/ml, 등인 것을 의미한다. 그러므로, 전형적인 0.5 ml 단위 투여량에서, 디프테리아 변성 독소의 양은 4 Lf 미만, 예를 들어, <3, <2, <1, <½ Lf, 등이다.
본 발명의 조성물이 알루미늄 염 보조제를 포함하는 경우 조성물 중의 디프테리아 변성 독소는 바람직하게 상기 염에, 바람직하게 알루미늄 히드록시드 보조제에 흡착된다 (더 바람직하게 완전히 흡착된다).
파상풍 변성 독소
파상풍은 클로스트리듐 테타니 (Clostridium tetani), 그람 양성, 포자 형성 바실루스에 의해 유발된다. 이 유기체는 엔도펩티다제 ('파상풍 독소')를 발현하며, 이것은 더 이상 독성이 없지만 항원성을 유지하고 주사 후 특이적 항-독소 항체의 생산을 자극할 수 있는 변성 독소를 제공하기 위해 처리될 수 있다. 파상풍 변성 독소는 참고문헌 1의 27장에서 더 상세히 개시된다. 바람직한 파상풍 변성 독소는 포름알데히드 처리에 의해 제조된 것들이다. 파상풍 변성 독소는 성장 배지 (예를 들어, 소 카세인으로부터 유도된 Latham 배지)에서 씨. 테타니를 키운 후, 이어서 포름알데히드 처리, 한외여과 및 침전에 의해 얻어질 수 있다. 물질은 멸균 여과 및/또는 투석을 포함하는 공정에 의해 처리될 수도 있다.
파상풍 변성 독소의 양은 국제 단위 (IU)로 표현될 수 있다. 예를 들어, NIBSC는 '파상풍 변성 독소 흡착형 3차 국제 표준 2000 (Tetanus Toxoid Adsorbed Third International Standard 2000)'를 공급하며 [12, 13], 이것은 앰플 당 469 IU를 함유한다. 디프테리아 변성 독소에서, 'Lf' 단위는 IU 시스템에 대한 대안이다. NIBSC는 '응집 테스트용 파상풍 변성 독소에 대한 1차 국제 참고 시약 (The 1st International Reference Reagent for Tetanus Toxoid For Flocculation Test)'을 공급하며 [14] 이것은 앰플 당 1000 LF를 함유한다. 조성물 중의 디프테리아 독소의 농도는 이러한 참고 시약에 대하여 보정된 참고 물질과 비교에 의한 응집 검정을 사용하여 쉽게 결정될 수 있다.
본 발명의 일부 구체예에서, 조성물은 '저용량'의 파상풍 변성 독소를 포함한다. 이것은 조성물 중의 파상풍 변성 독소의 농도가 ≤3.5 Lf/ml, 예를 들어, <3, <2.5, <2, <1.5 <1, <½ Lf/ml, 등인 것을 의미한다. 그러므로, 전형적인 0.5 ml 단위 투여량에서, 파상풍 변성 독소의 양은 1.75 Lf 미만, 예를 들어, <1.5, <1, <½, <¼ Lf, 등이다.
본 발명의 조성물이 알루미늄 염 보조제를 포함하는 경우 조성물 중의 파상풍 변성 독소는 바람직하게 상기 염에, 바람직하게 알루미늄 히드록시드 보조제에 흡착된다 (더 바람직하게 완전히 흡착됨).
백일해 변성 독소
보르데텔라 페르투씨스 (Bordetella Pertussis)는 백일해 (whooping cough)를 유발한다. 백신 중의 백일해 항원은 세포성 (불활성화된 비. 페르투씨스 세포의 형태인, 전체 세포; 'wP') 또는 무세포성 ('aP')이다. 세포성 백일해 항원의 제제는 잘 기록되어 있으며 (예를 들어, 참고문헌 1의 21장 참조), 예를 들어, 그것은 비. 페르투씨스의 단계 I 배양물의 열 불활성화에 의해 얻어질 수도 있다. 무세포성 항원이 사용되는 경우, 다음 항원 중 하나, 둘 또는 (바람직하게) 셋이 포함된다: (1) 독소가 제거된 백일해 독소 (백일해 변성 독소, 또는 'PT'); (2) 섬유성 헤마글루티닌 ('FHA'); (3) 퍼탁틴 ('69 킬로달톤 외막 단백질'로도 알려짐). 이들 세 가지 항원은 변형된 Stainer-Scholte 액체 배지에서 자란 비. 페르투씨스 배양물로부터 분리에 의해 제조될 수 있다. PT 및 FHA는 발효 배양액으로부터 분리될 수 있는 반면에 (예를 들어, 히드록시 아파타이트 겔 상에 흡착에 의해), 퍼탁틴은 열 처리 및 응집 (예를 들어, 바륨 클로라이드)에 의해 세포로부터 추출될 수 있다. 항원은 연속적인 크로마토그래피 및/또는 침전 단계로 정제될 수 있다. PT 및 FHA는 소수성 크로마토그래피, 친화도 크로마토그래피 및 크기 배제 크로마토그래피에 의해 정제될 수 있다. 퍼탁틴은 이온 교환 크로마토그래피, 소수성 크로마토그래피 및 크기 배제 크로마토그래피에 의해, 또는 IMAC에 의해 정제될 수 있다. FHA 및 퍼탁틴은 본 발명에 따라 사용 전에 포름알데히드가 처리될 수도 있다. PT는 바람직하게 포름알데히드 및/또는 글루타르알데히드의 처리에 의해 독소가 제거된다. 이 화학적 독소 제거 과정에 대한 대안으로서 PT는 효소 활성이 돌연변이 생성 [15] (예를 들어, 9K/129G 이중 돌연변이 [16])에 의해 감소된 돌연변이 PT일 수도 있지만, 화학적 처리에 의한 독소 제거는 바람직하다.
본 발명은 PT 함유 wP 항원 또는, 바람직하게, PT 함유 aP 항원을 사용할 수 있다. aP 항원을 사용할 때 본 발명의 조성물은 전형적으로, PT에 더하여, FHA 및, 임의로, 퍼탁틴을 포함할 것이다. 그것은 또한 임의로 핌브리애 (fimbriae) 타입 2 및 3을 포함할 수 있다.
무세포성 백일해 항원의 양은 전형적으로 미크로그램으로 표현된다. 본 발명의 일부 구체예에서, 조성물은 '저용량'의 백일해 변성 독소를 포함한다. 이것은 조성물 중의 백일해 변성 독소의 농도가 ≤5 μg/ml, 예를 들어, <4, <3, <2.5, <2, <1 μg/ml, 등인 것을 의미한다. 그러므로, 전형적인 0.5 ml 단위 투여량에서, 백일해 변성 독소의 양은 2 μg 미만, 예를 들어, <2, <1.5, <1, <0.5 μg, 등이다.
본 발명의 조성물이 알루미늄 염 보조제를 포함하는 경우 조성물 중의 백일해 변성 독소는 바람직하게 상기 염에, 바람직하게 알루미늄 히드록시드 보조제에 흡착된다 (더 바람직하게 완전히 흡착됨). 어떤 FHA도 알루미늄 히드록시드 보조제에 흡착될 수 있다. 어떤 퍼탁틴도 알루미늄 포스페이트 보조제에 흡착될 수 있다.
Hib 콘쥬게이트
해모필루스 인플루엔재 (Haemophilus influenzae) 타입 b ('Hib')는 박테리아 수막염 (meningitis)을 유발한다. Hib 백신은 전형적으로 캡슐 당류 항원에 기초하며 (예를 들어, 참고문헌 1의 14장), 이것의 제제는 잘 기록되어 있다 (예를 들어, 참고문헌 17 내지 26). Hib 당류는, 특히 아이에서, 그것의 면역원성을 향상시키기 위해 담체 단백질에 콘쥬게이션된다 (conjugated). 전형적인 담체 단백질은 파상풍 변성 독소, 디프테리아 변성 독소, 디프테리아 변성 독소의 CRM 197 유도체, 에이치. 인플루엔재 단백질 D, 및 혈청군 B 수막염균 (meningococcus)의 외막 단백질 복합체이다. 일반적으로 'PRP-T'로 언급되는 제품에 사용된 바와 같이, 파상풍 변성 독소는 바람직한 담체이다. PRP-T는 시아노겐 브로마이드를 사용하여 Hib 캡슐 다당류를 활성화하고, 활성화된 당류를 아디프 산 결합자 (예를 들어, (1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필) 카르보디이미드), 전형적으로 히드로클로라이드 염)에 커플링시키고 결합자-당류 실체물을 파상풍 변성 독소 담체 단백질과 반응시킴으로써 만들어질 수 있다. 콘쥬게이트의 당류 모이어티는 Hib 박테리아로부터 제조된 전체 길이 폴리리보실리비톨 포스페이트 (PRP), 및/또는 전체 길이 PRP의 단편을 포함할 수도 있다. 1:5 (즉, 초과 단백질) 내지 5:1 (즉, 초과 당류)의 당류:단백질 중량비, 예를 들어, 1:2 내지 5:1의 비율 및 및 1:1.25 내지 1:2.5의 비율을 가진 콘쥬게이트가 사용될 수도 있다. 하지만, 바람직한 백신에서, 담체 단백질에 대한 당류의 중량비는 1:2.5 내지 1:3.5이다. 백신에서, 파상풍 변성 독소가 항원으로서 및 담체 단백질로서 존재하는 경우, 콘쥬게이트에서 담체 단백질에 대한 당류의 중량비는 1:0.3 내지 1:2일 수도 있다 [27]. Hib 콘쥬게이트의 투여는 바람직하게 ≥0.15 μg/ml, 및 더 바람직하게 ≥1 μg/ml의 항-PRP 항체 농도를 발생시키고, 이들은 표준 반응 한계점이다.
Hib 항원의 양은 전형적으로 미크로그램으로 표현된다. 콘쥬게이트 항원에 대하여, 이 도면은 콘쥬게이트의 당류 함량에 기초한다. 본 발명의 일부 구체예에서, 조성물은 '저용량'의 Hib 콘쥬게이트를 포함한다. 이것은 조성물 중의 Hib 당류의 농도가 ≤5 μg/ml, 예를 들어, <4, <3, <2.5, <2, <1, 등인 것을 의미한다. 그러므로, 전형적인 0.5 ml 단위 투여량에서, Hib의 양은 2 μg 미만, 예를 들어, <2, <1.5, <1, <0.5, 등이다.
본 발명의 조성물이 알루미늄 염 보조제를 포함하는 경우 Hib 콘쥬게이트는 염에 흡착될 수 있거나 흡착되지 않을 수 있다.
B형 간염 바이러스 표면 항원
B형 간염 바이러스 (HBV)는 바이러스 간염을 유발하는 알려진 약제 중 하나이다. HBV 비리온은 외부 단백질 코팅 또는 캡시드에 의해 둘러싸인 내부 코어로 구성되고, 바이러스 코어는 바이러스 DNA 게놈을 함유한다. 캡시드의 주요 성분은 HBV 표면 항원 또는, 더 일반적으로, 'HBsAg'로 알려진 단백질이며, 이것은 전형적으로 ~24 kDa의 분자량을 갖는 226-아미노산 폴리펩티드이다. 기존의 B형 간염 백신 모두 HBsAg를 함유하고, 이 항원이 정상 백신에게 투여될 때, 그것은 HBV 감염에 대하여 보호하는 항-HBsAg 항체의 생산을 자극한다.
백신 제조에 대하여, HBsAg는 두 가지 방법으로 만들어질 수 있다. 첫 번째 방법은 HBsAg의 많은 양이 간에서 합성되고 HBV 감염 중에 혈류로 방출되기 때문에, 만성 B형 간염 담체의 혈장으로부터 미립자 형태의 항원을 정제하는 단계를 수반한다. 두 번째 방법은 재조합 DNA 방법에 의해 단백질을 발현하는 단계를 수반한다. 본 발명의 방법으로 사용되는 HBsAg는 효모 세포에서 재조합에 의해 발현된다. 적합한 효모는 사카로미세스 (Saccharomyces) (예를 들어, 에스. 세레비시애 (S. cerevisiae)) 또는 하넨술라 (Hanensula) (예를 들어, 에이치. 폴리모파 (H.polymorpha)) 숙주를 포함한다.
고유의 HBsAg와 달리 (즉, 혈장-정제 생성물에서와 같이), 효모-발현 HBsAg는 일반적으로 비-글리코실화되고, 이것은 본 발명으로 사용되는 HBsAg의 가장 바람직한 형태이다. 효모-발현 HBsAg는 매우 면역원성이고 혈액 제품 오염의 위험 없이 제조될 수 있다.
HBsAg는 일반적으로 실질적인 구형 입자의 형태 (약 20 nm의 평균 지름)일 것이며, 인지질을 포함하는 지질 매트릭스를 포함한다. 효모-발현 HBsAg 입자는 포스파티딜이노시톨을 포함할 수도 있으며, 이것은 천연 HBV 비리온에서 발견되지 않는다. 입자는 또한 면역 시스템을 자극하기 위해 LPS의 비-독성인 양을 포함할 수 있다 [28]. 입자는 비-독성 계면활성제 (예를 들어, 폴리소르베이트 20)가 효모의 붕괴 중에 사용되었으면 이를 유지할 수도 있다 [29].
HBsAg를 정제하는 바람직한 방법은 세포 붕괴 후, 한외여과; 크기 배제 크로마토그래피; 음이온 교환 크로마토그래피; 초원심분리; 탈염; 및 멸균 여과를 수반한다. 용해물은 세포 붕괴 후 침전될 수도 있으며 (예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜을 사용하여), HBsAg를 용액에 남겨두고, 한외여과를 준비한다.
정제 후 HBsAg는 투석 (예를 들어, 시스테인으로)을 받을 수도 있으며, 이것은 HBsAg 제조 중에 사용될 수도 있는 티메로살과 같은 어떤 수은 보존제도 제거하기 위해 사용될 수 있다 [30]. 티메로살이 없는 제제가 바람직하다.
HBsAg는 바람직하게 HBV 서브타입 adw2의 것이다.
HBsAg의 양은 전형적으로 미크로그램으로 표현된다. 본 발명의 일부 구체예에서, 조성물은 '저용량'의 HBsAg를 포함한다. 이것은 조성물 중의 HBsAg의 농도가 ≤5 μg/ml, 예를 들어, <4, <3, <2.5, <2, <1, 등인 것을 의미한다. 그러므로, 전형적인 0.5 ml 단위 투여량에서, HBsAg의 양은 2.5 μg 미만, 예를 들어, <2, <1.5, <1, <0.5, 등이다.
본 발명의 조성물이 알루미늄 염 보조제를 포함하는 경우 HBsAg는 바람직하게 상기 염에 흡착될 수 있다 (바람직하게 알루미늄 포스페이트 보조제에 흡착됨).
불활성화된 폴리오바이러스 항원 ( IPV )
폴리오미엘리티스 (Poliomyelitis)는 세 가지 타입의 폴리오바이러스 중 하나에 의해 유발될 수 있다. 세 가지 타입은 유사하고 동일한 증상을 유발하지만, 그것들은 항원성이 매우 다르고 한 타입에 의한 감염은 다른 것에 의한 감염을 보호하지 않는다. 그러므로 참고문헌 1의 24장에 설명된 바와 같이, 본 발명에 세 가지 폴리오바이러스 항원 - 폴리오바이러스 타입 1 (예를 들어, Mahoney 균주), 폴리오바이러스 타입 2 (예를 들어, MEF-1 균주), 및 폴리오바이러스 타입 3 (예를 들어, Saukett 균주)을 사용하는 것이 바람직하다. 예를 들어, 참고문헌 31 & 32에 논의된 바와 같이, 이들 균주에 대한 대안으로서, 타입 1 내지 3의 Sabin 균주가 사용될 수 있다.
폴리오바이러스는 세포 배양물에서 자랄 수도 있다. 바람직한 배양물은 Vero 세포주를 사용하며, 이것은 원숭이 신장으로부터 유도된 연속 세포주이다. Vero 세포는 편의상 배양된 미크로담체일 수 있다. 바이러스 감염 전에 및 중에 Vero 세포의 배양물은 소-유도 물질, 예를 들어, 송아지 혈청, 및 락탈부민 가수분해 생성물 (예를 들어, 락탈부민의 효소에 의한 분해에 의해 얻어짐)의 사용을 수반할 수도 있다. 이러한 소-유도 물질은 BSE 또는 다른 TSE가 없는 공급원으로부터 얻어져야 한다.
성장 후에, 비리온은 한외여과, 투석여과, 및 크로마토그래피와 같은 기술을 사용하여 정제될 수도 있다. 환자에게 투여 전에, 폴리오바이러스는 불활성화되어야 하고, 이것은 바이러스가 본 발명의 공정에 사용되기 전에 포름알데히드의 처리에 의해 이루어질 수 있다.
바이러스는 바람직하게 개별적으로 자라고, 정제되고 불활성화되고 본 발명에 사용되는 대량의 혼합물을 제공하기 위해 결합된다.
불활성화된 폴리오바이러스 (IPV)의 양은 전형적으로 'DU' 단위 ("D-항원 단위" [33])로 표현된다. 본 발명의 일부 구체예에서, 조성물은 '저용량'의 폴리오바이러스를 포함한다. 타입 1 폴리오바이러스에 대하여, 이것은 조성물 중의 바이러스의 농도가 ≤20 DU/ml, 예를 들어, <18, <16, <14, <12, <10, 등인 것을 의미한다. 타입 2 폴리오바이러스에 대하여, 이것은 조성물 중의 바이러스의 농도가 ≤4 DU/ml, 예를 들어, <3, <2, <1, <0.5, 등인 것을 의미한다. 타입 3 폴리오바이러스에 대하여, 이것은 조성물 중의 바이러스의 농도가 ≤16 DU/ml, 예를 들어, <14, <12, <10, <8, <6, 등인 것을 의미한다. 타입 1, 2 및 3 폴리오바이러스 중 세 가지 모두가 존재하는 경우 세 가지 항원은 각각 5:1:4의 DU 비율로, 또는 어떤 적합한 비율, 예를 들어, Sabin 균주를 사용할 때 15:32:45의 비율로도 존재할 수 있다 [31]. ≤10 DU 타입 1, ≤20 DU 타입 2, 및 ≤30 DU 타입 3 (단위 투여 당)을 갖는Sabin 균주의 저용량의 항원이 특히 유용하다.
본 발명의 조성물이 알루미늄 염 보조제를 포함하는 경우 HBsAg는 바람직하게 상기 염에 흡착될 수 있다 (바람직하게 알루미늄 포스페이트 보조제에 흡착됨).본 발명의 조성물이 알루미늄 염 보조제를 포함하는 경우 폴리오바이러스는 그것들이 조제되기 전에 바람직하게 어떤 보조제에도 흡착되지 않지만, 조제 후에 그것들은 조성물 중의 어떤 알루미늄 보조제(들)에도 흡착될 수 있다.
추가 항원
D, T, Pa, HBsAg, Hib 및/또는 폴리오바이러스 항원을 포함하는 것뿐만 아니라, 본 발명의 면역원성 조성물은 추가의 병원체의 항원을 포함할 수도 있다. 예를 들어, 이들 항원은 엔. 메닝기티디스 (N. meningitidis) (혈청군 A, B, C, W135 및/또는 Y 중 하나 이상) 또는 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae)의 것일 수도 있다.
수막염균 당류
조성물이 네이세리아 메닝기티디스 (Neisseria meningitidis) 캡슐 당류 콘쥬게이트를 포함하는 경우 하나 또는 하나 이상의 이러한 콘쥬게이트가 있을 수도 있다. 혈청군 A, C, W135 및 Y 중 2, 3, 또는 4개를 포함하는 것은 전형적으로, 예를 들어, A+C, A+W135, A+Y, C+W135, C+Y, W135+Y, A+C+W135, A+C+Y, A+W135+Y, A+C+W135+Y, 등이다. MENACTRA™ 및 MENVEO™ 제품에서와 같이, 혈청군 A, C, W135 및 Y 중 네 가지 모두의 당류를 포함하는 성분이 유용하다. 하나 이상의 혈청군의 콘쥬게이트가 포함되는 경우 그것들은 실질적으로 같은 질량으로 존재할 수도 있고, 예를 들어, 각각의 혈청군의 당류의 질량은 서로의 ± 10% 내에 있다. 전형적인 혈청군 당 양은 1 μg 내지 20 μg, 예를 들어, 혈청군 당 2 내지 10 μg, 또는 약 4 μg 또는 약 5 μg 또는 약 10 μg이다. 실질적으로 같은 비율에 대한 대안으로서, 혈청군 A 당류의 이중 질량이 사용될 수도 있다.
콘쥬게이트의 투여는 바람직하게 적어도 4배, 및 바람직하게 적어도 8배의 적절한 혈청군에 대하여 혈청 살균 검정 (SBA) 역가의 증가를 일으킨다. SBA 역가는 새끼 토끼 보체 또는 사람 보체를 사용하여 측정될 수 있다 [34].
혈청군 A 수막염균의 캡슐 당류는 (α1→6)-결합된 N-아세틸-D-만노사민-1-포스페이트호모폴리머이며, C3 및 C4 위치에 부분적 O-아세틸화를 갖는다. C-3 위치에서 아세틸화는 70-95%일 수 있다. 당류를 정제하기 위해 사용된 조건은 데-O-아세틸화를 일으킬 수 있지만 (예를 들어, 염기성 조건 하에), 이 C-3 위치에 OAc를 유지하는 것이 유용하다. 일부 구체예에서, 혈청군 A 당류에서 만노사민 잔기의 적어도 50% (예를 들어, 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 95% 이상)는 C-3 위치에서 O-아세틸화된다. 아세틸 기는 가수분해를 방지하기 위해 차단 기로 대체될 수 있지만 [35], 이러한 변형된 당류는 여전히 본 발명의 의미 내에서 혈청군 A 당류이다.
혈청군 C 캡슐 당류는 (α2→9)-결합된 시알산 (N-아세틸 뉴라민산, 또는 'NeuNAc')의 호모폴리머이다. 당 구조는 →9)-Neu p NAc 7/8 OAc-(α2→로 쓰여진다. 대부분의 혈청군 C 균주는 시알산 잔기의 C-7 및/또는 C-8 위치에 O-아세틸 기를 갖지만, 임상적 분리체의 약 15%는 이들 O-아세틸 기가 없다 [36, 37]. OAc 기의 존재 또는 부재는 독특한 에피토프를 발생시키고, 당에 결합하는 항체의 특이성은 그것의 O-아세틸화된 (OAc-) 및 데-O-아세틸화된 (OAc+) 균주에 대한 살균 작용에 영향을 미칠 수도 있다 [38-40]. 본 발명에 사용된 혈청군 C 당류는 OAc+ 또는 OAc-균주로부터 제조될 수도 있다. 허가된 MenC 콘쥬게이트 백신은 OAc- (NEISVAC-C™) 및 OAc+ (MENJUGATE™ & ME NGITEC™) 당류 둘 다를 포함한다. 일부 구체예에서, 혈청군 C 콘쥬게이트를 생산하는 균주는, 예를 들어, 혈청형 16, 혈청형 P1.7a,1, 등의 OAc+ 균주이다. 따라서, C:16:P1.7a,1 OAc+ 균주가 사용될 수도 있다. 혈청형 P1.1의 OAc+ 균주, 예를 들어, C11 균주도 또한 유용하다. 바람직한 MenC 당류는 OAc+ 균주, 예를 들어, 균주 C11로부터 취해진다.
혈청군 W135 당류는 시알산-갈락토스 이당류 단위의 폴리머이다. 혈청군 C 당류와 유사하게, 그것은 시알산 7 및 9 위치에서만 가변적 O-아세틸화를 갖는다 [41]. 구조는 다음과 같이 쓰여진다: →4)-D-Neu/p5Ac(7/90Ac)-α-(2→6)-D-Gal-α-(1→.
혈청군 Y 당류는 이당류 반복 단위가 갈락토스 대신에 글루코스를 포함한다는 점을 제외하고, 혈청군 W135 당류와 유사하다. 혈청군 W135와 유사하게, 그것은 시알산 7 및 9 위치에서 가변적 O-아세틸화를 갖는다 [41]. 혈청군 Y 구조는 다음과 같이 쓰여진다: →4)-D-Neu/p5Ac(7/90Ac)-α-(2→6)-D-Glc-α-(1→.
본 발명에 따라 사용된 당류는 상기 설명된 바와 같이 O-아세틸화될 수도 있거나 (예를 들어, 고유의 캡슐 당류에서 보이는 바와 같은 O-아세틸화 패턴으로), 그것들은 당 고리의 하나 이상의 위치에서 부분적으로 또는 전체적으로 데-O-아세틸화될 수도 있거나, 그것들은 고유의 캡슐 당류에 관하여 초-O-아세틸화될 수도 있다. 예를 들어, 참고문헌 42는 80% 이상 데-O-아세틸화된 혈청군 Y 당류의 사용을 보고한다.
수막염균 콘쥬게이트의 당류 모이어티는 수막염균으로부터 제조된 바와 같이 전체 길이 당류를 포함할 수도 있고, 및/또는 전체 길이 당류의 단편을 포함할 수도 있다, 즉, 당류는 박테리아에서 보이는 고유의 캡슐 당류보다 더 짧을 수도 있다. 따라서 당류는 탈폴리머화될 수도 있으며, 탈폴리머화는 당류 정제 중에 또는 후에, 하지만 콘쥬게이션 전에 발생한다. 탈폴리머화는 당류의 사슬 길이를 감소시킨다. 한 탈폴리머화 방법은 과산화수소의 사용을 수반한다 [43]. 과산화수소는 당류에 추가되고 (예를 들어, 1%의 최종 H2O2 농도를 제공하기 위해), 혼합물은 원하는 사슬 길이 감소가 이루어질 때까지 배양된다 (예를 들어, 약 55 ℃에서). 또 다른 탈폴리머화 방법은 산 가수분해를 수반한다 [44]. 다른 탈폴리머화 방법은 업계에 알려져 있다. 본 발명에 따라 사용되는 콘쥬게이트를 제조하기 위해 사용된 당류는 이들 탈폴리머화 방법 중 어느 하나에 의해서도 얻어질 수 있다. 탈폴리머화는 면역원성을 위한 최적의 사슬 길이를 제공하고 및/또는 당류를 물리적으로 관리하기 쉽도록 사슬 길이를 감소시키기 위해 사용될 수 있다. 일부 구체예에서, 당류는 다음 범위의 평균 폴리머화의 정도 (Dp)를 갖는다: A=10-20; C=12-22; W135=15-25; Y=15-25. Dp 대신에, 분자량에 관하여, 모든 혈청군에 대하여 유용한 범위는 다음과 같다: <100 kDa; 5 kDa-75 kDa; 7 kDa-50 kDa; 8 kDa-35 kDa; 12 kDa-25 kDa; 15 kDa-22 kDa. 다른 구체예에서, 수막염균 혈청군 A, C, W135 및 Y의 각각의 당류에 대한 평균 분자량은 50kD 초과, 예를 들어, >75 kDa, >100 kDa, >110 kDa, >120 kDa, >130 kDa, 등 [45], 및, 특히 MALLS에 의해 결정된 바와 같이, 최대 1500 kDa일 수도 있다. 예를 들어, MenA 당류는 범위 50-500 kDa, 예를 들어, 60-80 kDa에 있을 수도 있고; MenC 당류는 범위 100-210 kDa에 있을 수도 있고; MenW135 당류는 범위 60-190 kDa, 예를 들어, 120-140 kDa에 있을 수도 있고; 및/또는 MenY 당류는 범위 60-190 kDa, 예를 들어, 150-160 kDa에 있을 수도 있다.
일부 구체예에서, 조성물의 성분이 Hib 및 수막염균 콘쥬게이트 둘 다를 포함하면, Hib 당류의 질량은 실질적으로 특정 수막염균 혈청군 당류의 질량과 같을 수 있다. 일부 구체예에서, Hib 당류의 질량은 특정 수막염균 혈청군 당류의 질량보다 적을 것이다 (예를 들어, 적어도 1.5x 적음).
조성물이 하나 이상의 수막염균 혈청균의 당류를 포함하는 경우, 혈청군 당 평균 당류 질량이 있다. 각 혈청군의 실질적으로 같은 질량이 사용되면, 평균 질량은 각 개개의 질량과 같을 것이다; 같지 않은 질량이 사용된 경우 평균은, 예를 들어, MenACWY 혼합물에 대한 10:5:5:5 μg 양과 다를 것이고, 평균 질량은 혈청군 당 6.25 μg이다. 일부 구체예예서, Hib 당류의 질량은 혈청군 당 수막염균 당류의 평균 질량과 실질적으로 같을 것이다. 일부 구체예예서, Hib 당류의 평균은 혈청군 당 수막염균 당류의 평균 질량보다 적을 것이다 (예를 들어, 적어도 1.5x).
수막염균 폴리펩티드
네이세리아 메닝기티디스 혈청군 B의 캡슐 당류는 유용한 백신 면역원이 아니고 그래서 폴리펩티드 항원이 대신 사용될 수 있다. 예를 들어, 참고문헌 47에서 Novartis Vaccines에 의해 보고된 "혈청군 B 수막염균에 대한 보편적인 백신"이 본 발명에 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 인자 H 결합 단백질 (fHBP) 항원을 포함할 수 있다. fHBP 항원이 상세히 특성화되어 있다. 그것은 단백질 '741 ' [참고문헌 48의 SEQ IDs 2535 & 2536], 'NMB1870', 'GNA1870' [참고문헌 49-51], 'P2086', 'LP2086' 또는 'ORF2086' [52-54]으로도 알려져 있다. 그것은 천연 지질단백질이고 모든 수막염균 혈청군을 통해 발현된다. fHBP 항원은 세 개의 뚜렷한 변이체로 나누어지고 [55] 모든 변이체에 대하여 항원을 포함하는 것이 바람직하다.
본 발명의 조성물은 네이세리아 헤파린 결합 항원 (Neisserial Heparin Binding Antigen; NHBA)을 포함할 수도 있다 [56]. 이 항원은 유전자 NMB2132로서 수막염균 혈청군 B 균주 MC58에 대하여 공개된 게놈 서열에 포함되었다 [57].
본 발명의 조성물은 NadA 항원을 포함할 수도 있다. NadA 항원은 유전자 NMB1994로서 수막염균 혈청군 B 균주 MC58에 대하여 공개된 게놈 서열에 포함되었다 [57].
본 발명의 조성물은 NspA 항원을 포함할 수도 있다. NspA 항원은 유전자 NMB0663으로서 수막염균 혈청군 B 균주 MC58에 대하여 공개된 게놈 서열에 포함되었다 [57].
본 발명의 조성물은 NhhA 항원을 포함할 수도 있다. NhhA 항원은 유전자 NMB0992로서 수막염균 혈청군 B 균주 MC58에 대하여 공개된 게놈 서열에 포함되었다 [57].
본 발명의 조성물은 App 항원을 포함할 수도 있다. App 항원은 유전자 NMB1985로서 수막염균 혈청군 B 균주 MC58에 대하여 공개된 게놈 서열에 포함되었다 [57].
본 발명의 조성물은 Omp85 항원을 포함할 수도 있다. Omp85는 유전자 NMB0182로서 수막염균 혈청군 B 균주 MC58에 대하여 공개된 게놈 서열에 포함되었다 [57].
본 발명의 조성물은 수막염균 외막 소포를 포함할 수도 있다.
폐렴 구균 당류
스트렙토코쿠스 뉴모니애 (Streptococcus pneumoniae)는 박테리아 수막염을 유발하고 기존의 백신은 캡슐 당류에 기초한다. 따라서 본 발명의 조성물은 담체 단백질에 콘쥬게이션된 적어도 하나의 폐렴 구균 캡슐 당류를 포함할 수 있다.
본 발명은 하나 이상의 다른 폐렴 구균 혈청형의 캡슐 당류를 포함할 수 있다. 조성물이 하나 이상의 혈청형의 당류 항원을 포함하는 경우, 이들은 바람직하게 별도로 제조되고, 별도로 콘쥬게이션되고, 결합된다. 폐렴 구균 캡슐 당류를 정제하는 방법은 업계에 알려져 있고 (예를 들어, 참고문헌 58 참조) 23개의 다른 혈청형으로부터 정제된 당류에 기초한 백신은 몇 년 동안 알려져 있었다. 이들 방법에 대한 개선은 또한, 예를 들어, 참고문헌 59에 설명된 바와 같이 혈청형 3에 대하여, 또는 참고문헌 60에 설명된 바와 같이 혈청형 1, 4, 5, 6A, 6B, 7F 및 19A에 대하여 설명되었다.
폐렴 구균 캡슐 당류(들)는 전형적으로 다음 혈청형으로부터 선택될 것이다: 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F 및/또는 33F. 따라서, 전체로서, 조성물은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23개 이상의 다른 혈청형의 캡슐 당류를 포함할 수도 있다. 적어도 혈청형 6B 당류를 포함하는 조성물이 유용하다.
혈청형의 유용한 조합은 7가 조합이며, 예를 들어, 혈청형 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F, 및 23F의 각각의 캡슐 당류를 포함한다. 또 다른 유용한 조합은 9가 조합이며, 예를 들어, 혈청형 1, 4, 5, 6B, 9V, 14, 18C, 19F 및 23F의 각각의 캡슐 당류를 포함한다. 또 다른 유용한 조합은 10가 조합이며, 예를 들어, 혈청형 1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F 및 23F의 각각의 캡슐 당류를 포함한다. 11가 조합은 혈청형 3의 당류를 추가로 포함할 수도 있다. 12가 조합은 11가 혼합물에 추가될 수도 있다: 혈청형 6A 및 19A; 6A 및 22F; 19A 및 22F; 6A 및 15B; 19A 및 15B; 또는 22F 및 15B. 13가 조합은 11가 혼합물에 추가될 수도 있다: 혈청형 19A 및 22F; 8 및 12F; 8 및 15B; 8 및 19A; 8 및 22F; 12F 및 15B; 12F 및 19A; 12F 및 22F; 15B 및 19A; 15B 및 22F; 6A 및 19A, 등.
따라서 유용한 13가 조합은 혈청형 1, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19 (또는 19A), 19F 및 23F의 캡슐 당류를 포함하며, 예를 들어, 참고문헌 61 내지 64에서 개시된 바와 같이 제조된다. 한 이러한 조합은 약 8 μg/ml로 혈청형 6B 당류 및 각각 약 4 μg/ml의 다른 12개의 당류를 포함한다. 또 다른 이러한 조합은 각각 약 8 μg/ml로 혈청형 6A 및 6B 및 각각 약 4 μg/ml의 다른 11개의 당류를 포함한다.
콘쥬게이트에 적합한 담체 단백질은 박테리아 독소, 예를 들어, 디프테리아 또는 파상풍 독소, 또는 변성 독소 또는 이들의 돌연변이를 포함한다. 이들은 보통 콘쥬게이트 백신에 사용된다. 예를 들어, CRM 197 디프테리아 독소 돌연변이는 유용하다 [65]. 다른 적합한 담체 단백질은 합성 펩티드 [66,67], 열 충격 단백질 [68,69], 백일해 단백질 [70,71], 시토킨 [72], 림포킨 [72], 호르몬 [72], 성장 인자 [72], N19 [74]와 같이 다양한 병원체-유도 항원 [73]의 다중 사람 CD4+ T 세포 에피토프를 포함하는 인조 단백질, 에이치. 인플루엔재의 단백질 D [75-77], 뉴모리신 (pneumolysin) [78] 또는 그것의 비-독성 유도체 [79], 폐렴 구균 표면 단백질 PspA [80], 철 섭취 단백질 [81], 씨. 디피실레 (C. difficile)의 독소 A 또는 B [82], 재조합 슈도모나스 애루기노사 (Pseudomonas aeruginosa) 세포 외 단백질 A (rEPA) [83], 등을 포함한다.
폐렴 구균 콘쥬게이트 백신에 특히 유용한 담체 단백질은 CRM 197, 파상풍 변성 독소, 디프테리아 변성 독소 및 에이치. 인플루엔재 단백질 D이다. CRM197은 PREVNAR™에 사용된다. 13가 혼합물은 13개의 콘쥬게이트 각각에 대한 담체 단백질로서 CRM 197을 사용할 수도 있고, CRM 197은 약 55-60 μg/ml로 존재할 수도 있다.
조성물이 하나 이상의 폐렴 구균 혈청형의 콘쥬게이트를 포함하는 경우, 각각 별도의 콘쥬게이트에 대하여 같은 담체 단백질을 사용하거나, 다른 담체 단백질을 사용하는 것이 가능하다. 둘 다의 경우에서, 다른 콘쥬게이트의 혼합물은 보통 각 혈청형 콘쥬게이트를 별도로 제조하고, 그것들을 혼합하여 별도의 콘쥬게이트의 혼합물을 형성함으로써 형성될 것이다. 참고문헌 84는 다가 폐렴 구균 콘쥬게이트 백신에서 다른 담체 단백질을 사용할 때 잠재적 이점을 설명하지만, PREVNAR™ 제품은 일곱 개의 다른 혈청형의 각각에 대하여 같은 담체를 성공적으로 사용한다.
담체 단백질은 폐렴 구균 당류에 직접적으로 또는 결합자를 통해 공유 결합으로 콘쥬게이션될 수도 있다. 다양한 결합자가 알려져 있다. 예를 들어, 부착은 카르보닐을 통한 것일 수도 있으며, 이것은 변형된 당류의 자유 히드록실 기의 CDI와 반응에 의해 형성된 후 이어서 단백질과 반응하여 카르바메이트 결합자를 형성할 수도 있다 [85, 86]. 카르보디이미드 축합이 사용될 수 있다 [87]. 아디프 산 결합자가 사용될 수 있으며, 이것은 자유 -NH2 기 (예를 들어, 아미노화에 의해 당류에 도입됨)를 아디프 산과 커플링시키고 (예를 들어, 디이미드 활성화를 사용하여), 단백질을 결과의 당류-아디프 산 중간물에 커플링시킴으로써 형성될 수도 있다. 다른 결합자는 β-프로피온아미도 [90], 니트로페닐-에틸아민 [91], 할로아실 할리드 [92], 클리코시드 결합 [93], 6-아미노카프로 산 [94], N-숙신이미딜-3-(2-피리딜디티오)-프로피오네이트 (SPDP) [95], 아디프 산 디히드라지드 ADH [96], C4 내지 C12 모이어티 [97], 등을 포함한다.
환원성 아미노화를 통한 콘쥬게이션이 사용될 수 있다. 당류는 먼저 알데히드 기를 토입하기 위해 페리오데이트로 산화될 수도 있으며, 이것은 환원성 아미노화를 통해 담체 단백질, 예를 들어, 리신의 ε-아미노 기에 직접적인 공유 결합을 형성할 수 있다. 당류가 분자 당 다중 알데히드 기를 포함하면 다중 알데히드가 다중 담체 아민과 반응하는 경우, 이 결합 기술은 교차 결합된 생성물로 이어질 수 있다. 이 교차 결합 콘쥬게이션 기술은 적어도 폐렴 구균 혈청형 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F 및 23F에 특히 유용하다.
폐렴 구균 당류는 폐렴 구균으로부터 제조된 전체 길이 온전한 당류를 포함할 수도 있고, 및/또는 전체 길이 당류의 단편을 포함할 수도 있다, 즉, 당류는 박테리아에서 보이는 고유의 캡슐 당류보다 더 짧을 수도 있다. 따라서 당류는 탈폴리머화될 수도 있으며, 탈폴리머화는 당류 정제 중에 또는 후에 하지만 콘쥬게이션 전에 발생한다. 탈폴리머화는 당류의 사슬 길이를 감소시킨다. 탈폴리머화는 면역원성을 위한 최적의 사슬 길이를 제공하고 및/또는 당류의 물리적 통제 능력을 위해 사슬 길이를 감소시키기 위해 사용될 수 있다. 하나 이상의 폐렴 구균 혈청형이 사용되면 각 혈청형에 대한 온전한 당류, 각 혈청형에 대한 단편을 사용하거나, 일부 혈청형에 대한 온전한 당류 및 다른 혈청형에 대한 단편을 사용하는 것이 가능하다.
조성물이 혈청형 4, 6B, 9V, 14, 19F 및 23F 중 어느 하나의 당류를 포함하는 경우, 이들 당류는 바람직하게 온전하다. 반대로, 조성물이 혈청형 18C의 당류를 포함하는 경우, 이 당류는 바람직하게 탈폴리머화된다.
혈청형 3 당류도 탈폴리머화될 수 있는데, 예를 들어, 혈청형 3 당류는 탈폴리머화를 위해, 예를 들어, 아세트산을 사용하는 산 가수분해를 받을 수 있다 [61]. 결과의 단편은 활성화를 위해 산화될 수도 있고 (예를 들어, 아마 2가양이온의 존재시, 예를 들어, MgCl2로 페리오데이트 산화), 환원 조건 하에 담체 (예를 들어, CRM 197)에 접합될 수도 있고 (예를 들어, 나트륨 시아노보로히드라이드를 사용하여), (임의로) 당류에서 어떤 반응하지 않은 알데히드도 캐핑 (cap)될 수 있다 (예를 들어, 나트륨 보로히드라이드를 사용하여) [61]. 콘쥬게이션은, 예를 들어, 활성화된 당류 및 담체를 동시-동결건조한 후 동결건조된 물질에서 수행될 수도 있다.
혈청형 1 당류는 적어도 부분적으로 데-O-아세틸화되는데, 예를 들어, 알칼리성 pH 버퍼 처리에 의해 [62] 비카르보네이트/카르보네이트 버퍼를 사용함으로써 이루어질 수도 있다. 이러한 (부분적으로) 데-O-아세틸화된 당류는 활성화를 위해 산화될 수 있고 (예를 들어, 페리오데이트 산화), 환원 조건 하에 담체 (예를 들어, CRM 197)에 콘쥬게이션될 수 있고 (예를 들어, 나트륨 시아노보로히드라이드를 사용하여), (임의로) 당류에서 어떤 반응하지 않은 알데히드도 캐핑될 수 있다 (예를 들어, 나트륨 보로히드라이드를 사용하여) [62]. 콘쥬게이션은, 예를 들어, 활성화된 당류 및 담체를 동시-동결건조한 후 동결건조된 물질에서 수행될 수도 있다.
혈청형 19A 당류는 활성화를 위해 산화될 수 있고 (예를 들어, 페리오데이트 산화), 환원 조건 하에 DMSO에서 담체 (예를 들어, CRM 197)에 콘쥬게이션될 수 있고, (임의로) 당류에서 어떤 반응하지 않은 알데히드도 캐핑될 수 있다 (예를 들어, 나트륨 보로히드라이드를 사용하여) [98]. 콘쥬게이션은, 예를 들어, 활성화된 당류 및 담체를 동시-동결건조한 후 동결건조된 물질에서 수행될 수도 있다.
하나 이상의 폐렴 구균 캡슐 당류 콘쥬게이트는 동결건조된 형태로 존재할 수도 있다.
폐렴 구균 콘쥬게이트는 이상적으로 적절한 당류에 결합하는 항캡슐 항체를 유도할 수 있는데, 예를 들어, >0.20 μg/mL의 항-당류 항체 수준을 유도할 수 있다 [99]. 항체는 효소 면역 검정 (EIA) 및/또는 옵소닌식세포 활성의 측정 (OPA)에 의해 평가될 수도 있다. EIA 방법은 널리 입증되었고 항체 농도 및 백신 효율 사이의 결합이 있다.
알루미늄 염 보조제
일부 구체예예서, 본 발명의 조성물은 알루미늄 염 보조제를 포함하지만, 다른 구체예에는 알루미늄이 없을 수도 있다.
현재 사용되는 알루미늄 염 보조제는 전형적으로 "알루미늄 히드록시드" 또는 "알루미늄 포스페이트" 보조제로서 언급된다. 하지만, 존재하는 실제 화합물의 정확한 설명이 없기 때문에, 이들은 편의상의 이름이다 (예를 들어, 참고문헌 100의 9장 참조). 본 발명은 보조제로서 유용한 "히드록시드" 또는 "포스페이트" 염 중 어느 것도 사용할 수 있다. 히드록시드 이온을 포함하는 알루미늄 염은 이들 히드록시드 이온이 항원 및/또는 TLR 작용제의 흡착을 위한 리간드 교환을 쉽게 겪을 수 있기 때문에 바람직하게 본 발명에 사용되는 불용성 금속 염이다. 따라서 TLR 작용제의 흡착을 위해 바람직한 염은 알루미늄 히드록시드 및/또는 알루미늄 히드록시포스페이트이다. 이들은 안정한 흡착을 제공하기 위해 인-함유 기 (예를 들어, 포스페이트, 포스포네이트)와 리간드 교환을 쉽게 겪을 수 있는 표면 히드록실 모이어티를 갖는다. 알루미늄 히드록시드 보조제가 가장 바람직하다.
"알루미늄 히드록시드"로 알려진 보조제는 전형적으로 알루미늄 옥시 히드록시드 염이며, 이것은 보통 적어도 부분적으로 결정형이다. 알루미늄 옥시히드록시드는 식 AlO(OH)로 나타날 수 있으며, 적외선 (IR) 분광학에 의해, 특히 1070 cm-1에 흡착 밴드 및 3090-3100 cm-1에서 강한 어깨의 존재에 의해 알루미늄 화합물, 예를 들어, 알루미늄 히드록시드 Al(OH)3과 구별될 수 있다 (참고문헌 100의 9장). 알루미늄 히드록시드 보조제의 결정도는 절반 높이에서 회절 밴드의 넓이 (the width of the diffraction band at half height; WHH)에 의해 반영되며, 불량한 결정 입자는 더 작은 결정 크기로 인해 넓어진 더 큰 선을 나타낸다. WHH가 증가함에 따라 표면적이 증가하고, 더 높은 WHH 값을 가진 보조제는 더 큰 항원 흡착 능력을 갖는 것으로 보인다. 섬유 형태 (예를 들어, 투과 전자 현미경 사진에 보이는 바와 같이)는 전형적으로, 예를 들어, 약 2 nm의 지름을 갖는 바늘-유사 입자를 가진 알루미늄 히드록시드 보조제를 위한 것이다. 알루미늄 히드록시드 보조제의 PZC는 전형적으로 약 11이다, 즉, 보조제 자체는 생리학적 pH에서 양성 표면 전하를 갖는다. pH 7.4에서 Al+++ 당 1.8-2.6 mg 단백질의 흡착 능력은 알루미늄 히드록시드 보조제에 대하여 보고되었다.
"알루미늄 포스페이트"로 알려진 보조제는 전형적으로 알루미늄 히드록시포스페이트이며, 또한 종종 소량의 술페이트를 함유한다. 그것들은 침전에 의해 얻어질 수도 있고, 침전 중에 반응 조건 및 농도는 염에서 포스페이트의 히드록실로 치환의 정도에 영향을 미친다. 히드록시포스페이트는 일반적으로 0.3 내지 0.99의 PO4/Al 분자비를 갖는다. 히드록시포스페이트는 히드록실 기의 존재에 의해 완전한 AlPO4와 구별될 수 있다. 예를 들어, 3164 cm-1에서 IR 스펙트럼 밴드 (예를 들어, 200 ℃로 가열될 때)는 구조 히드록실의 존재를 나타낸다 (참고문헌 100의 9장).
알루미늄 포스페이트 보조제의 P04/A13+ 분자비는 일반적으로 0.3 내지 1.2, 바람직하게 0.8 내지 1.2, 및 더 바람직하게 0.95 ± 0.1일 것이다. 알루미늄 포스페이트는, 특히 히드록시 포스페이트 염에 대하여, 일반적으로 무정형일 것이다. 전형적인 보조제는 0.84 내지 0.92의 PO4/Al 분자비를 갖는 무정형 알루미늄 히드록시포스페이트이며, 0.6 mg Al3 +/ml에서 포함된다. 알루미늄 포스페이트는 일반적으로 미립자일 것이다. 입자의 전형적인 지름은 어떤 항원 흡착 후에 범위 0.5-20 μm (예를 들어, 약 5-10 μm)에 있다. pH 7.4에서 mg Al+++ 당 0.7-1.5 mg 단백질의 흡착력이 알루미늄 포스페이트 보조제로서 보고되었다.
알루미늄 포스페이트의 PZC는 반대로 포스페이트의 히드록실로 치환의 정도와 관련되고, 이 정도의 치환은 침전에 의해 염을 제조하는데 사용된 반응 조건 및 반응물의 농도에 의존하여 달라질 수 있다. PZC는 또한 용액 중의 자유 포스페이트 이온의 농도를 변화시킴으로써 (더 많은 포스페이트 = 더 산성 PZC) 또는 히스티딘 버퍼와 같은 버퍼를 추가함으로써 (PZC를 더 염기성으로 만든다) 변화된다. 본 발명에 따라 사용된 알루미늄 포스페이트는 일반적으로 4.0 내지 7.0, 더 바람직하게 5.0 내지 6.5, 예를 들어, 약 5.7의 PZC를 가질 것이다.
용액에서 알루미늄 포스페이트 및 히드록시드 보조제는 둘 다 지름이 1-10 μm인, 안정한 다공성 응집체를 형성하는 경향이 있다 [101].
조성물은 알루미늄 히드록시드 및 알루미늄 포스페이트 둘 다의 혼합물을 포함할 수 있고, 성분은 이들 염 중 하나 또는 둘 다에 흡착될 수도 있다.
본 발명의 조성물을 제조하기 위해 사용된 알루미늄 포스페이트 용액은 버퍼 (예를 들어, 포스페이트 또는 히스티딘 또는 트리스 버퍼)를 함유할 수도 있지만, 이것은 항상 필수적인 것은 아니다. 알루미늄 포스페이트 용액은 바람직하게 멸균되고 발열원이 없다. 알루미늄 포스페이트 용액은, 예를 들어, 1.0 내지 20 mM, 바람직하게 5 내지 15 mM, 및 더 바람직하게 약 10 mM의 농도로 존재하는, 자유 수성 포스페이트 이온을 포함할 수도 있다. 알루미늄 포스페이트 용액은 또한 나트륨 클로라이드를 포함할 수도 있다. 나트륨 클로라이드의 농도는 바람직하게 0.1 내지 100 mg/ml (예를 들어, 0.5-50 mg/ml, 1-20 mg/ml, 2-10 mg/ml)의 범위 및 더 바람직하게 약 3 ± 1 mg/ml이다. NaCl의 존재는 항원의 흡착 전에 pH의 올바른 측정을 가능하게 한다.
본 발명의 일부 구체예에서, 조성물은 단위 투여량 당 0.2 mg 미만의 Al+++를 포함한다. Al+++의 양은 이것보다 더 낮을 수 있는데, 예를 들어, <150 μg, <100 μg, <75 μg, <50 μg, <25 μg, <10 μg, 등일 수 있다.
본 발명의 일부 구체예에서, 조성물은 0.4 mg/ml 미만의 Al+++ 농도를 갖는다. Al+++의 농도는 이것보다 더 낮을 수 있는데, 예를 들어, <300 μg/ml, <250 μg/ml, <200 μg/ml, <150 μg/ml, <100 μg/ml, <75 μg/ml, <50 μg/ml, <20 μg/ml, 등일 수 있다.
본 발명의 조성물이 알루미늄 기반 보조제를 포함하는 경우, 성분의 침전물이 저장 중에 발생할 수도 있다. 그러므로 조성물은 환자에게 투여 이전에 흔들어져야한다. 흔들어진 조성물은 탁한 흰색 현탁액일 것이다.
톨 유사 수용체 ( Toll - like receptor ) 작용제
본 발명의 조성물이 알루미늄 염 보조제를 포함하는 경우 TLR 작용제를 상기 알루미늄 염에 흡착함으로써, 보조제의 면역 강화 효과를 개선하는 것이 가능하다 [102]. 이것은 더 나은 면역 반응으로 이어지고 및/또는 조성물에서 알루미늄의 양의 감소를 허용하는 한편, 동등한 보조제 효과를 유지한다.
그러므로 본 발명의 조성물은 TLR 작용제 (바람직하게 TLR7 작용제, 및 더 바람직하게 사람 TLR7의 작용제가 흡착되는 알루미늄 염 (바람직하게, 알루미늄 히드록시드)을 포함할 수 있다. 작용제 및 염은 염의 항원을 흡착하는 능력을 유지하는 안정한 보조제 복합체를 형성할 수 있다.
흡착 성질을 가진 TLR 작용제는 전형적으로 알루미늄 염의 표면 기, 예들 들어, 표면 히드록시드 기와 리간드 교체를 겪을 수 있는 인-함유 모이어티를 포함한다. 따라서 유용한 TLR 작용제는 포스페이트, 포스포네이트, 포스피네이트, 포스포니트, 포스피니트, 포스페이트, 등을 포스페이트, 포스포네이트, 포스피네이트, 포스포니트, 포스피니트, 포스페이트, 등을 포함할 수도 있다. 바람직한 TLR 작용제는 적어도 하나의 포스페이트 또는 포스포네이트 기를 포함한다 [102].
유용한 흡착 TLR2 및 TLR7 작용제는 참고문헌 102 내지 106에서 개시된다. 원하는 특이적 흡착 TLR7 작용제는 참고문헌 107의 페이지 79-84의 표 A의 화합물 1A 내지 27A를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, TLR7 작용제는 다음 중 하나일 수 있다:
Figure pct00002
Figure pct00003
이들 화합물은 간단한 혼합에 의해 알루미늄 염 보조제에 흡착될 수 있다. 예를 들어, 화합물 (1 mg/ml)은 10 mM NaOH에 용해될 수 있고 알루미늄 히드록시드 보조제 (2 mg/ml)의 현탁액에 추가하여 100 μg/투여량의 최종 TLR 작용제 농도를 제공할 수 있다. 바람직하게, 0.1 mg/ml, 더 바람직하게 0.01 mg/ml의 화합물이 2 mg/ml 알루미늄 히드록시드에 추가된다. 알루미늄 염의 TLR 작용제에 대한 질량비는 2:1 내지 400:1, 바람직하게 20:1, 더 바람직하게 200:1이다. 상온에서 1시간 동안 배양은 보통 >90% 흡착에 충분하다. 흡착은 pH의 범위, 예를 들어, 6.5 내지 9에 걸쳐 일어날 수 있다. 바람직한 구체예에서, 알루미늄 염 및 TLR 작용제는, 편의상 pH 6.5에서, 히스티딘 버퍼, 예를 들어, 5-20 mM (예를 들어, 10 mM) 히스티딘 버퍼에서 제조된다. 알루미늄 히드록시드에 최적의 항원 흡착을 위해, pH는 범위 6.0 내지 6.5에 있어야 한다. pH는 또한 항원의 무결성 및 안전성에 및, 단백질 항원의 경우에, 최종 백신 조제시 그것들의 적절한 폴딩 (folding)에 결정적이다.
한 유용한 TLR7 작용제는 하기 실시예에 사용되며, '화합물 T' (참고문헌 107의 페이지 80의 화합물 6A)이다. 그것은 물에서 약 4 mg/ml의 용해도를 갖고 알루미늄 히드록시드에 잘 흡착된다:
Figure pct00004
일반적으로, 조성물이 TLR 작용제 및 알루미늄 염 둘 다를 포함할 때, 작용제의 Al+++에 대한 중량비는 5:1보다 작고, 4:1보다 작고, 3:1보다 작고, 2:1보다 작거나 1:1보다 작다. 따라서, 예를 들어, 0.5 mg/ml의 Al+++ 농도로, TLR 작용제의 최대 농도는 2.5 mg/ml일 것이다. 하지만 더 높거나 낮은 수준이 사용될 수 있다. Al+++보다 더 낮은 질량의 TLR 작용제가 전형적이며, 예를 들어, 투여량 당 0.2 mg Al+++을 갖는 100 μg의 TLR 작용제 등이다.
단위 투여량 중의 TLR 작용제의 양은 일상적인 시험을 통해 결정될 수 있는, 상대적으로 넓은 범위에서 하락할 것이다. 1-1000 μg/투여량의 양, 예를 들어, 투여량 당 5-100 μg 또는 투여량 당 10-100 μg, 및 이상적으로 투여량 당 <300 μg, 예를 들어, 투여량 당 약 5 μg, 10 μg, 20 μg, 25 μg, 50 μg 또는 100 μg이 사용될 수 있다.따라서 본 발명의 조성물에서 TLR 작용제의 농도는 2-2000 μg/ml, 예를 들어, 10-200 μg/ml, 또는 약 5, 10, 20, 40, 50, 100 또는 200 μg/ml, 및 이상적으로 <600 μg/ml일 수도 있다.
조성물에서 적어도 50 질량%, 예를 들어, >60 질량%, >70 질량%, >80 질량%, >85 질량%, >90 질량%, >92 질량%, >94 질량%, >95 질량%, >96 질량%, >97 질량%, >98 질량%, >99 질량%, 또는 100 질량%의 작용제가 금속 염에 흡착되는 것이 바람직하다.
본 발명의 조성물이 금속 염에 흡착된 TLR 작용제를 포함하고, 또한 버퍼를 포함하는 경우, 높은 농도의 포스페이트 이온이 탈착을 유발할 수 있기 때문에, 버퍼에서 어떤 포스페이트 이온의 농도도 50 mM (예를 들어, 1-15 mM)보다 낮아야 하는 것이 바람직하다. 히스티딘 버퍼의 사용이 바람직하다.
수중유 에멀젼 보조제
수중유 에멀젼은 유용한 보조제로서 알려져 있는데, 예를 들어, MF59 및 AS03은 유럽에서 공인된 백신에 둘 다 존재한다. 다양한 유용한 에멀젼 보조제가 알려져 있고, 그것들은 전형적으로 적어도 하나의 오일 및 적어도 하나의 계면활성제를 포함하며, 오일(들) 및 계면활성제(들)는 생분해성이고 (대사 가능함) 생체에 적합하다. 에멀젼 중의 오일 방울은 일반적으로 1 미크론 미만의 지름을 가지며, 이들 작은 크기는 안정한 에멀젼을 제공하기 위해 미세유동화기를 가지고 이루었다. 220 nm 미만의 크기를 갖는 방울은 그것들이 필터 멸균을 받을 수 있기 때문에 바람직하다.
본 발명은 오일, 예를 들어, 동물 (예를 들어, 물고기) 또는 식물성 공급원의 것들과 함께 사용될 수 있다. 식물성 오일에 대한 공급원은 견과류, 씨앗 및 곡물을 포함한다. 가장 흔히 이용 가능한 땅콩 오일, 대두 오일, 코코넛 오일, 및 올리브 오일이 견과류 오일의 예가 된다. 예를 들어, 조조바 콩으로부터 얻은 조조바 (jojoba) 오일이 사용될 수 있다. 씨앗 오일은 홍화 (safflower) 오일, 목화씨 오일, 해바라기 씨 오일, 참깨 씨 오일 등을 포함한다. 곡물 그룹에서, 옥수수 오일이 가장 쉽게 이용 가능하지만, 밀, 귀리, 호밀, 쌀, 테프 (teff), 라이밀 (triticale) 등과 같은 다른 곡류 곡물의 오일도 사용될 수 있다. 글리세롤 및 1,2-프로판디올의 6-10개의 탄소 지방산 에스테르는, 씨앗 오일에서 자연 발생하지 않는 한편, 견과류 및 씨앗 오일로부터 시작한 적절한 물질의 가수분해, 분리 및 에스테르화에 의해 제조될 수도 있다. 포유동물 젖의 지방 및 오일은 대사 가능하고 그러므로 본 발명의 실행에 사용될 수도 있다. 분리, 정제, 비누화하는 과정 및 동물 공급원으로부터 순수한 오일을 얻는데 필요한 다른 수단은 업계에 잘 알려져 있다. 대부분의 물고기는 쉽게 회수될 수 있는 대사 가능한 오일을 함유한다. 예를 들어, 대구 간 오일, 상어 간 오일, 및 경랍 (spermaceti)고래 오일이 여기에 사용될 수도 있는 여러 물고기 오일의 예가 된다. 많은 분지형 사슬 오일이 생화학적으로 5-탄소 이소프렌 단위로 합성되고 일반적으로 테르페노이드로 언급된다. 상어 간 오일은 스쿠알렌, 2,6,10,15,19,23-헥사메틸-2,6,10,14,18,22-테트라코사헥사엔으로 알려진 분지형, 불포화 테르페노이드를 함유하며, 이것은 여기에서 특히 바람직하다. 스쿠알란, 스쿠알렌에 대한 포화 유사체도 바람직한 오일이다. 스쿠알렌 및 스쿠알란을 포함하는, 물고기 오일은 상업적 공급원으로부터 쉽게 이용 가능하고 업계에 알려진 방법에 의해 얻을 수도 있다. 다른 바람직한 오일은 토코페롤이다 (하기 참조). 오일의 혼합물이 사용될 수 있다.
계면활성제는 그것들의 'HLB' (친수/친유 평형)에 의해 분류될 수 있다. 본 발명의 바람직한 계면활성제는 적어도 10, 바람직하게 적어도 15, 및 더 바람직하게 적어도 16의 HLB를 갖는다. 본 발명은 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 계면활성제 (보통 Tweens로 언급됨), 특히 폴리소르베이트 20 및 폴리소르베이트 80; 선형 EO/PO 블록 코폴리머와 같이, DOWFAX™ 상표명 하에 시판된, 에틸렌 옥시드 (EO), 프로필렌 옥시드 (PO), 및/또는 부틸렌 옥시드 (BO)의 코폴리머; 반복 에톡시 (옥시-1,2-에탄디일) 기의 수가 달라질 수 있는 옥톡시놀로서, 옥톡시놀-9 (Trinton X-100, 또는 t-옥틸페녹시폴리에톡시에탄올)는 특히 흥미롭다; (옥틸페녹시)폴리에톡시에탄올 (IGEPAL CA-630/NP-40); 포스파티딜콜린 (레시틴)과 같은 인지질; 노닐페놀 에톡실레이트, 예를 들어, Tergitol™ NP 시리즈; 라우릴, 세틸, 스테아릴 및 올레일 알콜로부터 유도된 폴리옥시에틸렌 지방 에테르 (Brij 계면활성제로 알려짐), 예를 들어, 트리에틸렌글리콜 모노라우릴 에테르 (Brij 30); 및 소르비탄 에스테르 (보통 SPANs로 알려짐), 예를 들어, 소르비탄 트리올레에이트 (Span 85) 및 소르비탄 모노라우레이트를 포함하지만, 이에 제한되지 않는 계면활성제와 함께 사용될 수 있다. 비이온성 계면활성제가 바람직하다. 에멀젼에 포함되는 바람직한 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트; Tween 80), Span 85 (소르비탄 트리올레에이트), 레시틴 및 Triton X-100이다.
계면활성제의 혼합물, 예를 들어, Tween 80/Span 85 혼합물이 사용될 수 있다. 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르, 예를 들어, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트 (Tween 80) 및 옥톡시놀, 예를 들어, t-옥틸페녹시폴리에톡시에탄올 (Triton X-100)의 조합이 또한 적합하다. 또 다른 유용한 조합은 laureth 9 플러스 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 및/또는 옥톡시놀을 포함한다.
계면활성제의 바람직한 양 (중량%)은 다음과 같다: 0.01 내지 1 중량%, 특히 약 0.1 중량%의 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 (예를 들어, 폴리소르베이트 80); 0.001 내지 0.1 중량%, 특히 0.005 내지 0.02 중량%의 옥틸- 또는 노닐페녹시 폴리옥시에탄올 (예를 들어, Triton X-100, 또는 Triton 시리즈 중에서 다른 세정제); 0.1 내지 20 중량% 바람직하게 0.1 내지 10 중량% 및 특히 0.1 내지 1 중량% 또는 약 0.5 중량%의 폴리옥시에틸렌 에테르 (예를 들어, laureth 9).
본 발명에 유용한 특정 수중유 에멀젼 보조제는 다음을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다:
● 스쿠알렌, 폴리소르베이트 80, 및 소르비탄 트리올레에이트의 1 미크론 미만의 에멀젼. 에멀젼의 조성은 약 5 부피% 스쿠알렌, 약 0.5 부피% 폴리소르베이트 80 및 약 0.5 부피% 소르비탄 트리올레에이트일 수 있다. 중량에 관하여, 이들 비율은 4.3 중량% 스쿠알렌, 0.5 중량% 폴리소르베이트 80 및 0.48 중량% 소르비탄 트리올레에이트가 된다. 이 보조제는 참고문헌 100의 10장 및 참고문헌 111의 12장에 더 상세히 설명된 바와 같이, 'MF59'로 알려져 있다 [108-110]. MF59 에멀젼은 유익하게 시트레이트 이온, 예를 들어, 1O mM 나트륨 시트레이트 버퍼를 포함한다.
● 스쿠알렌, 토코페롤, 및 폴리소르베이트 80의 에멀젼. 에멀젼은 포스페이트 완충된 식염수를 포함할 수도 있다. 그것은 또한 소르비탄 트리올레에이트 (예를 들어, 1%로) 및/또는 레시틴을 포함할 수도 있다. 이들 에멀젼은 2 내지 10% 스쿠알렌, 2 내지 10% 토코페롤 및 0.3 내지 3% 폴리소르베이트 80을 가질 수도 있고 스쿠알렌:토코페롤의 중량비는 바람직하게 ≤1 (예를 들어, 0.90)이며, 이것이 더 안정한 에멀젼을 제공하기 때문이다. 스쿠알렌 및 폴리소르베이트 80은 약 5:2의 부피비, 또는 약 11:5의 중량비로 존재할 수도 있다. 따라서 세 개의 성분 (스쿠알렌, 토코페롤, 폴리소르베이트 80)은 1068:1186:485 또는 약 55:61:25의 중량비로 존재할 수도 있다. 하나의 이러한 에멀젼 ('AS03')은 PBS에 폴리소르베이트 80을 용해시켜 2% 용액을 제공하고, 이 용액의 90 ml을 (DL-α-토코페롤 5 g 및 5 ml 스쿠알렌)의 혼합물과 혼합하고, 혼합물을 미세유동화함으로써 만들어질 수 있다. 결과의 에멀젼은, 예를 들어, 100 내지 250 nm, 바람직하게 약 180 nm의 평균 지름을 갖는 1 미크론 미만의 오일 방울을 가질 수도 있다. 에멀젼은 또한 3-데-O-아실화된 모노포스포릴 지질 A (3d-MPL)을 포함할 수도 있다. 이 타입의 또 다른 유용한 에멀젼은, 예를 들어, 상기 논의된 비율로, 사람 투여량 당 0.5-10 mg 스쿠알렌, 0.5-11 mg 토코페롤, 및 0.1-4 mg 폴리소르베이트 80을 포함할 수도 있다 [112].
● 스쿠알렌, 토코페롤, 및 Triton 세정제 (예를 들어, Triton X-100)의 에멀젼. 에멀젼은 또한 3d-MPL을 포함할 수도 있다 (하기 참조). 에멀젼은 포스페이트 버퍼를 함유할 수 있다.
● 폴리소르베이트 (예를 들어, 폴리소르베이트 80), Triton 세정제 (예를 들어, Triton X-100) 및 토코페롤 (예를 들어, α-토코페롤 숙시네이트)을 포함하는 에멀젼. 에멀젼은 이들 세 개의 성분을 약 75:11:10의 질량비로 포함할 수도 있고 (예를 들어, 750 μg/ml 폴리소르베이트 80, 110 μg/ml Triton X-100 및 100 μg/ml α-토코페롤 숙시네이트), 이들 농도는 항원의 이들 성분의 어떤 기여도 포함해야 한다. 에멀젼은 또한 스쿠알렌을 포함할 수도 있다. 에멀젼은 또한 3d-MPL을 포함할 수도 있다 (하기 참조). 수성 단계는 포스페이트 버퍼를 함유할 수도 있다.
● 스쿠알란, 폴리소르베이트 80 및 폴록사머 401 ("Pluronic™ L121")의 에멀젼. 에멀젼은 포스페이트 완충된 식염수, pH 7.4에서 조제될 수 있다. 이 에멀젼은 무라밀 디펩티드에 대한 유용한 전달 비히클 (vehicle)이고, "SAF-1" 보조제 [113] 중의 트레오닐-MDP와 함께 사용되었다 (0.05-1% Thr-MDP, 5% 스쿠알란, 2.5% Pluronic L121 및 0.2% 폴리소르베이트 80). 그것은 또한 "AF" 보조제 [114]에서와 같이 Thr-MDP 없이 사용될 수 있다 (5% 스쿠알란, 1.25% Pluronic L121 및 0.2% 폴리소르베이트 80). 미세유동화가 바람직하다.
● 스쿠알렌, 수용매, 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르 친수성 비이온성 계면활성제 (예를 들어, 폴리옥시에틸렌 (12) 세토스테아릴 에테르) 및 소수성 비이온성 계면활성제 (예를 들어, 소르비탄 에스테르 또는 만니드 에스테르, 예를 들어, 소르비탄 모놀레에이트 또는 'Span 80')를 포함하는 에멀젼. 에멀젼은 바람직하게 열가역적이고 및/또는 200 nm보다 작은 크기를 갖는 오일 방울의 적어도 90 부피%를 갖는다 [115]. 에멀젼은 또한 다음 중 하나 이상을 포함한다: 알디톨; 동결 방지제 (예를 들어, 오데실말토시드 및/또는 수크로스와 같은 당); 및/또는 알킬폴리글리코시드. 그것은 TLR4 작용제, 예를 들어, 화학적 구조가 당 고리를 포함하지 않는 것들을 포함할 수도 있다 [116]. 이러한 에멀젼은 동결건조될 수도 있다.
● 0.5-50%의 오일, 0.1-10%의 인지질, 및 0.05-5%의 비이온성 계면활성제를 갖는 에멀젼. 참고문헌 117에 설명된 바와 같이, 바람직한 인지질 성분은 포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜세린, 포스파티딜이노시톨, 포스파티딜글리세롤, 포스파티드 산, 스핑고미엘린 및 카르디올리핀이다. 1 미크론 미만의 방울 크기가 유익하다.
● 비-대사 가능 오일 (예를 들어, 백색 광물 오일) 및 적어도 하나의 계면활성제 (예를 들어, 레시틴, 폴리소르베이트 80 또는 Span 80)의 1 미크론 미만의 수중유 에멀젼. QuilA 사포닌, 콜레스테롤, 사포닌-친유성 콘쥬게이트 (예를 들어, GPI-0100, 참고문헌 118에 설명됨, 글루쿠론 산의 카르복실 기를 통해 지방족 아민의 데사실사포닌에 추가에 의해 생성됨), 디메티이디옥타데실암모늄 브로마이드 및/또는 N,N-디옥타데실-N,N-비스 (2-히드록시에틸)프로판디아민과 같은, 첨가제가 포함될 수도 있다.
● 사포닌 (예를 들어, QuilA 또는 QS21) 및 스테롤 (예를 들어, 콜레스테롤)이 나선형 미셀 (micelle)로서 결합된 에멀젼 [119].
● 미네랄 오일, 비이온성 친유성 에톡실화된 지방 알콜, 및 비이온성 친수성 계면활성제 (예를 들어, 에톡실화된 지방 알콜 및/또는 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 차단 코폴리머)를 포함하는 에멀젼 [120].
● 미네랄 오일, 비이온성 친수성 에톡실화된 지방 알콜, 및 비이온성 친유성 계면활성제 (예를 들어, 에톡실화된 지방 알콜 및/또는 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 차단 코폴리머)를 포함하는 에멀젼 [120].
본 발명에 사용되는 바람직한 수중유 에멀젼은 스쿠알렌 및/또는 폴리소르베이트 80을 포함한다.
에멀젼은 제조 중에 항원과 혼합될 수도 있거나, 그것들은 전달될 때 즉시 혼합될 수도 있다. 따라서 보조제 및 항원은 포장된 또는 유통된 백신으로 별도로 보관될 수도 있고, 사용시 최종 조제물을 위해 준비할 수도 있다. 항원은 일반적으로 백신이 두 개의 액체를 혼합함으로써 최종적으로 제조되는, 수성 형태일 것이다. 혼합되는 두 개의 액체의 부피비는 다를 수 있지만 (예를 들어, 5:1 내지 1:5) 일반적으로 약 1:1이다. 에멀젼 및 항원이 다회수 투여 키트 (다수의 단위 투여량이 취해질 수 있는)에 별도로 저장되면 제품은 에멀젼을 함유하는 바이알 및 혼합되어 보조된 액체 백신을 제공하는, 수성 항원을 함유하는 바이알로서 제공될 수도 있다.
백신의 조제시에 사용될 때, MF59는 바람직하게 포스페이트 완충된 식염수 중의 항원과 혼합되어 MF59 조제물의 장기간 안정성을 보존하고 최종 백신의 생리학적 pH 및 삼투질 농도 값을 보장한다. 이 혼합은 1:1 부피비일 수 있다. PBS는 pH 7.2를 가질 수 있다.
조성물이 토코페롤을 포함하는 경우, α, β, γ, δ, ε 또는 ξ 토코페롤 중 어느 것도 사용될 수 있지만, α-토코페롤이 바람직하다. 토코페롤은 여러 형태, 예를 들어, 다른 염 및/또는 이소머를 취할 수 있다. 염은 유기 염, 예를 들어, 숙시네이트, 아세테이트, 니코티네이트, 등을 포함한다. D-α-토코페롤 및 DL-α-토코페롤은 둘 다 사용될 수 있다. 비타민 E가 이 환자 그룹의 면역 반응에 대한 양성 효과를 갖는 것으로 보고되었기 때문에, 토코페롤은 유익하게 고령의 환자 (예를 들어, 60살 이상)에 사용되는 백신에 포함된다. 그것들은 또한 에멀젼을 안정화하도록 도울 수도 있는 항산화 성질을 갖는다 [121]. 바람직한 α-토코페롤은 DL-α-토코페롤이고, 이 토코페롤의 바람직한 염은 숙시네이트이다. 숙시네이트 염은 생체 내에서 TNF-관련된 리간드와 협력하는 것이 발견되었다.
면역원성 조성물
본 발명의 조성물은 (a) 항원 성분; 및 (b) 비-항원 성분을 포함할 수도 있다. 항원 성분은 상기 논의된 항원을 포함하거나 이들로 구성될 수 있다. 비-항원 성분은 담체, 보조제, 첨가제, 버퍼, 등을 포함할 수 있다. 이들 비-항원 성분은 다양한 공급원을 가질 수도 있다. 예를 들어, 그것들은 제조 중에 사용되는 항원 또는 보조제 재료 중 하나로 존재할 수도 있거나 이들 성분으로부터 별도로 추가될 수도 있다.
바람직한 본 발명의 조성물은 하나 이상의 약학적 담체(들) 및/또는 첨가제(들)를 포함한다.
탄성을 조절하기 위해, 나트륨 염과 같은 생리학적 염을 포함하는 것이 바람직하다. 나트륨 클로라이드 (NaCl)가 바람직하며, 이것은 1 내지 20 mg/ml로 존재할 수도 있다.
조성물은 일반적으로 200 mOsm/kg 내지 400 mOsm/kg, 바람직하게 240-360 mOsm/kg의 삼투질 농도를 가질 것이고, 더 바람직하게 280-320 mOsm/kg의 범위 내로 하락할 것이다. 삼투질 농도는 이전에 보고되었지만 [122], 그럼에도 불구하고 이 범위에서 삼투질 농도를 유지하는 것이 바람직하다.
본 발명의 조성물은 하나 이상의 버퍼를 포함할 수도 있다. 전형적인 버퍼는 다음을 포함한다: 포스페이트 버퍼; 트리스 버퍼; 보레이트 버퍼; 숙시네이트 버퍼; 히스티딘 버퍼; 또는 시트레이트 버퍼. 버퍼는 전형적으로 5-20 mM 범위에 포함될 것이다.
본 발명의 조성물은 실질적으로 계면활성제가 없을 수 있다 (어떤 에멀젼 보조제와도 혼합하기 전에). 특히, 본 발명의 조성물은 실질적으로 폴리소르베이트 80이 없을 수 있다. 예를 들어, 그것은 0.1 μg/ml 미만의 폴리소르베이트 80를 함유하고, 바람직하게 검출 가능한 폴리소르베이트 80을 함유하지 않는다. 하지만, 조성물이 HBsAg를 포함하는 경우, 예를 들어, 그것이 효모 붕괴 중에 사용되면 그것은 보통 폴리소르베이트 20을 포함할 것이다 [29].
본 발명의 조성물의 pH는 일반적으로 6.0 내지 7.5일 것이다. 그러므로 제조 공정은 포장 전에 조성물의 pH를 조절하는 단계를 포함한다. 환자에게 투여된 수성 조성물은 5.0 내지 7.5, 및 최적의 안정성을 위해 더 전형적으로 5.0 내지 6.0의 pH를 가질 수 있다; 디프테리아 변성 독소 및/또는 파상풍 변성 독소가 존재하는 경우, pH는 이상적으로 6.0 내지 7.0이다.
본 발명의 조성물은 바람직하게 멸균된다.
본 발명의 조성물은 바람직하게 비-발열성이며, 예를 들어, 투여량 당 <1 EU (내독소 단위, 표준 측정; 1 EU는 0.2 ng FDA 참고문헌 표준 내독소 EC-2 'RSE'와 같다), 및 바람직하게 투여량 당 <0.1 EU를 함유한다.
본 발명의 조성물은 바람직하게 글루텐이 없다.
항원의 흡착된 특성으로 인해, 백신 생성물은 혼탁한 모습의 현탁액일 수도 있다. 이 모습은 미생물 오염이 쉽게 볼 수 없다는 것을 의미하고, 그래서 백신은 바람직하게 항미생물제를 함유한다. 이것은 백신이 다회수 투여 용기에 포장될 때 특히 중요하다. 포함된 바람직한 항미생물제는 2- 페녹시에탄올 및 티메로살이다. 하지만, 본 발명의 공정 중에 수은 보존제 (예를 들어, 티메로살)를 사용하지 않는 것이 바람직하다. 따라서, 공정에 사용된 성분 중 1개 내지 모두는 실질적으로 수은 보존제가 없을 수도 있다. 하지만, 성분에 본 발명에 사용되기 전에 이러한 보존제가 처리됐으면 미량의 존재는 불가피할 수도 있다. 하지만, 안전성을 위해, 최종 조성물이 약 25 ng/ml 미만의 수은을 함유하는 것이 바람직하다. 더 바람직하게, 최종 백신 생성물은 검출 가능한 티메로살을 함유하지 않는다. 이것은 일반적으로 본 발명의 공정에서 추가 전에 항원 제제로부터 수은 보존제를 제거함으로써 또는 조성물을 만들기 위해 사용된 성분의 제조 중에 티메로살의 사용을 방지함으로써 이루어질 것이다. 수은이 없는 조성물이 바람직하다.
본 발명의 조성물은 일반적으로 수성 형태일 것이다.
제조 중에, 원하는 최종 농도를 제공하기 위한 성분의 희석은 보통 WFI (주사용 물)로 수행될 것이다.
본 발명은 개개의 투여량으로 포장하는데 적합한 대량의 물질을 제공할 수 있으며, 이것은 환자에게 투여를 위해 유통될 수 있다. 상기 논의된 농도는 전형적으로 최종 포장된 투여량의 농도이고, 그래서 대량의 백신의 농도는 더 높을 수도 있다 (예를 들어, 희석에 의해 최종 농도로 감소됨).
본 발명의 조성물은 바람직하게 환자에게 0.5 ml 단위 투여량으로 투여된다. 0.5 ml 투여량에 대한 참고문헌은 정상적인 변화, 예를 들어, 0.5 ml + 0.5 ml을 포함하는 것으로 생각될 것이다. 다회수 투여 상황에서, 다중 투여량이 추출되고 단일 용기에 함께 포장되는데, 예를 들어, 10회 투여용 다회수 투여 용기에 5 ml (또는 10% 과다 채움으로 5.5 ml)이 포장될 것이다.
개개의 항원 성분의 잔류 물질은 또한 본 발명의 공정에 의해 생산된 최종 백신에서 미량으로 존재할 수도 있다. 예를 들어, 포름알데히드가 디프테리아, 파상풍 및 백일해의 변성 독소를 제조하기 위해 사용되면 최종 백신 생성물은 미량의 포름알데히드를 유지할 수도 있다 (예를 들어, 10 μg/ml 미만, 바람직하게 <5 μg/ml). 배지 또는 안정화제는 폴리오바이러스 제조 중에 사용될 수도 있고 (예를 들어, 배지 199), 이들은 최종 백신을 통해 운반할 수도 있다. 유사하게, 자유 아미노산 (예를 들어, 알라닌, 아르기닌, 아스파르테이트, 시스테인 및/또는 시스틴, 글루타메이트, 글루타민, 글리신, 히스티딘, 프롤린 및/또는 히드록시프롤린, 이소류신, 류신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신 및/또는 발린), 비타민 (예를 들어, 콜린, 아스코르베이트, 등), 이나트륨 포스페이트, 일칼륨 포스페이트, 칼슘, 글루코스, 아데닌 술페이트, 페놀 레드, 나트륨 아세테이트, 칼륨 칼로라이드, 등은 최종 백신에서 각각 <100 μg/ml, 바람직하게 <10 μg/ml로 유지될 수도 있다. 항원 제제의 다른 성분, 예를 들어, 네오마이신 (예를 들어, 특히 폴리오바이러스 성분의 네오마이신 술페이트), 폴리믹신 B (예를 들어, 특히 폴리오바이러스 성분의 폴리믹신 B 술페이트) 등은 또한 투여량 당 나노그램 미만의 양으로 존재할 수도 있다. 항원 제제에서 유래한 최종 백신의 추가의 가능한 성분은 항원의 전체보다 적은 정제로부터 발생한다. 그러므로 소량의 비. 페르투시스, 씨. 디프테리애, 씨. 테타니 및 에스. 세레비시애 단백질 또는 게놈 DNA가 존재할 수도 있다. 이들 잔류 성분의 양을 최소화하기 위해, 항원 제제가 바람직하게 항원이 본 발명으로 사용되기 전에 그것들을 제거하기 위해 처리된다.
폴리오바이러스 성분이 사용되는 경우, 그것은 일반적으로 Vero 세포에서 성장할 것이다. 최종 백신은 바람직하게 10 ng/ml, 바람직하게 <1 ng/ml, 예를 들어, <500 pg/ml 또는 <50 pg/ml, 예를 들어, 10 ng/ml의, 50개의 염기쌍 길이 미만인 Vero 세포 DNA를 함유한다.
용기에서 사용되는 본 발명의 조성물이 제공된다. 적합한 용기는 바이알 및 일회용 주사기 (바람직하게 멸균한 것)을 포함한다. 본 발명의 공정은 백신을 사용되는 용기에 포장하는 단계를 포함할 수도 있다. 적합한 용기는 바이알 및 일회용 주사기 (바람직하게 멸균한 것)을 포함한다.
본 발명의 조성물이 바이알에 제공되는 경우, 이것은 바람직하게 유리 또는 플라스틱 재료로 만들어진다. 바이알은 바람직하게 조성물이 그것에 추가되기 전에 멸균된다. 라텍스 민감성 환자의 문제를 막기 위해, 바이알은 라텍스가 없는 마개로 밀봉될 수도 있다. 바이알은 백신의 일회 투여량을 포함할 수도 있거나, 그것은 하나 이상의 투여량, 예를 들어, 10회 투여량을 포함할 수도 있다 ('다회수 투여량' 바이알). 다회수 투여량 바이알을 사용할 때, 각 투여량은 엄격한 무균 조건 하에 멸균 바늘 및 주사기로 회수되어야 하며, 바이알 내용물의 오염을 막기 위해 주의해야한다. 바람직한 바이알은 무색 유리로 만들어진다.
바이알은 미리 채워진 주사기가 캡 (cap)으로 삽입될 수 있고, 주사기의 내용물이 바이알로 배출될 수 있고 (예를 들어, 그 안에 동결건조된 물질을 재구성하기 위해), 바이알의 내용물이 주사기로 다시 제거될 수 있도록 적용된 캡 (예를 들어, Luer lock)을 가질 수 있다. 바이알에서 주사기의 제거 후, 바늘이 부착되고 조성물은 환자에게 투여될 수 있다. 캡은 바람직하게 캡이 접근될 수 있기 전에 제거되어야 하는 밀봉 부분 또는 커버 내에 위치한다.
조성물이 주사기에 포장되는 경우, 주사기는 정상적으로 그것에 부착된 바늘을 갖지 않지만, 별도의 바늘이 조립 및 사용을 위해 주사기와 함께 공급될 수도 있다. 안전 바늘이 바람직하다. 1-인치 23-게이지, 1-인치 25-게이지 및 5/8-인치 25-게이지 바늘이 전형적이다. 주사기는 기록 유지를 가능하게 하기 위해, 내용물의 로트 번호 및 유효기간이 인쇄될 수도 있는 필 오프 (peel-off) 표지와 함께 제공될 수도 있다. 주사기의 플런저 (plunger)는 바람직하게 흡인 중에 플런저가 우연히 제거되는 것을 방지하는 마개를 갖는다. 주사기는 라텍스 고무 캡 및/또는 플런저를 가질 수도 있다. 일회용 주사기는 백신의 일회 투여량을 함유한다. 주사기는 일반적으로 바늘의 부착 전에 끝을 밀봉하는 팁 캡 (tip cap)을 가질 것이고, 팁 캡은 바람직하게 부틸 고무로 만들어진다. 주사기 및 바늘이 별도로 포장되면 바늘은 바람직하게 부틸 고무 실드 (shield)를 장착한다. 회색 부틸 고무가 바람직하다. 바람직한 주사기는 상표명 "Tip-Lok"™ 하에 시판되는 것들이다.
유리 용기 (예를 들어, 주사기 또는 바이알)이 사용되는 경우, 소다 석회 유리 (soda lime glass) 대신에 보로실리케이트 유리로 만들어진 용기를 사용하는 것이 바람직하다.
조성물이 용기에 포장된 후에, 용기는 유통을 위한 박스 내에, 예를 들어, 카드보드 (cardboard) 박스 내부에 넣어질 수 있고, 박스는 백신의 상세한 내용, 예를 들어, 그것의 상표명, 백신에서 항원의 목록 (예를 들어, 'B형 간염 재조합', 등), 제공 용기 (예를 들어, '일회용 미리 채워진 Tip-Lok 주사기' 또는 '10 x 0.5 ml 일회 투여량 바이알'), 그것의 투여량 (예를 들어, '각각 하나의 0.5 ml 투여량을 함유'), 경고 (예를 들어, '성인 전용' 또는 '소아 전용'), 유효기간, 징후, 환자 수, 등이 표지될 것이다. 각 박스는 하나 이상의 포장된 백신, 예를 들어, 5 또는 10개의 포장된 백신 (특히 바이알에)을 함유할 수도 있다.
백신은 백신의 상세한 내용, 예를 들어, 투여를 위한 설명, 백신 내에 항원의 상세한 내용, 등을 포함하는 전단과 함께 (예를 들어, 같은 박스에) 포장될 수도 있다. 설명은 또한, 예를 들어, 백신 접종 후 과민 반응의 경우에 쉽게 이용 가능한 아드레날린의 용액을 유지하기 위한 경고, 등을 함유할 수도 있다.
포장된 백신은 바람직하게 2 ℃ 내지 8 ℃에서 저장된다. 그것은 얼려져서는 안된다.
백신은 제조 후 전체-액체 형태 (즉, 모든 항원 성분이 수성 용액 또는 현탁액에 있는 경우)로 제공될 수 있거나, 그것들은 백신이 두 개의 성분을 함께 혼합함으로써 사용의 사간/시점에서 즉석으로 제조될 수 있는 형태로 제조될 수 있다. 이러한 이성분 구체예는 액체/액체 혼합 및, 예를 들어, 수성 물질의 동결건조된 물질과 혼합에 의한 액체/고체 혼합을 포함한다. 예를 들어, 한 구체예에서, 백신은 (a) 수성 항원 및/또는 보조제를 포함하는 첫 번째 성분; 및 (b) 동결건조된 항원을 포함하는 두 번째 성분을 혼합함으로써 만들어질 수 있다. 또 다른 구체예에서, 백신은 (a) 수성 항원 및/또는 보조제를 포함하는 첫 번째 성분; 및 (b) 수성 항원을 포함하는 두 번째 성분을 혼합함으로써 만들어질 수 있다. 또 다른 구체예에서, 백신은 (a) 수성 항원을 포함하는 첫 번째 성분; 및 (b) 수성 보조제를 포함하는 두 번째 성분을 혼합함으로써 만들어질 수 있다. 두 개의 성분은 바람직하게 별도의 용기 (예를 들어, 바이알 및/또는 주사기)에 있고, 본 발명은 성분 (a) 및 (b)를 포함하는 키트를 제공한다.
또 다른 유용한 액체/동결건조된 포맷은 (a) 수중유 에멀젼 보조제 및 (b) 하나 이상의 항원을 포함하는 동결건조된 성분을 포함한다. 환자 투여에 적합한 백신 조성물은 성분 (a) 및 (b)를 혼합함으로써 얻어진다. 일부 구체예에서, 성분 (a)는 최종 백신의 모든 항원 성분이 성분 (b)로부터 유도되는, 항원이 없다; 다른 구체예에서, 성분 (a)는 최종 백신의 항원 성분이 성분 (a) 및 (b) 둘 다로부터 유도되는 하나 이상의 항원(들)을 포함한다.
또 다른 유용한 액체/동결건조된 포맷은 (a) 알루미늄 염 및 TLR 작용제의 수성 복합체 및 (b) 하나 이상의 항원을 포함하는 동결건조된 성분을 포함한다. 환자 투여에 적합한 백신 조성물은 성분 (a) 및 (b)를 혼합함으로써 얻어진다. 일부 구체예에서, 성분 (a)는 최종 백신의 모든 항원 성분이 성분 (b)로부터 유도되는, 항원이 없다; 다른 구체예에서, 성분 (a)는 최종 백신의 항원 성분이 성분 (a) 및 (b) 둘 다로부터 유도되는 하나 이상의 항원(들)을 포함한다.
따라서 본 발명은 상기 지시된 바와 같이 성분 (a) 및 (b)를 포함하는, 조합 백신을 제조하는 키트를 제공한다. 키트 성분은 전형적으로 바이알 또는 주사기이고, 단일 키트는 바이알 및 주사기 둘 다를 함유할 수도 있다. 본 발명은 또한 다음 단계를 포함하는, 이러한 키트를 제조하기 위한 공정을 제공한다: (i) 상기 설명된 바와 같이 수성 성분 백신을 제조하는 단계; (ii) 첫 번째 용기, 예를 들어, 주사기에 상기 수성 조합 백신을 포장하는 단계; (iii) 동결건조된 형태의 항원-함유 성분을 제조하는 단계 (iv) 두 번째 용기, 예를 들어, 바이알에 상기 동결건조된 항원을 포장하는 단계; 및 (v) 키트에 첫 번째 용기 및 두 번째 용기를 포장하는 단계. 그때 키트는 의사에게 유통될 수 있다.
액체/동결건조된 포맷은 이들이 동결건조된 형태에서 더 안정할 수도 있기 때문에, 콘쥬게이트 성분, 특히 Hib 및/또는 수막염균 및/또는 폐렴 구균 콘쥬게이트를 포함하는 백신에 특히 유용하다. 따라서 콘쥬게이트는 본 발명으로 그것들의 사용 전에 동결건조될 수도 있다.
성분이 동결건조된 경우 그것은 일반적으로, 예를 들어, 안정화제로서 동결건조 전에 추가된 비-활성 성분을 포함한다. 포함되는 바람직한 안정화제는 락토스, 수크로스 및 만니톨, 뿐만 아니라 이들의 혼합물, 예를 들어, 락토스/수크로스 혼합물, 수크로스/만니톨 혼합물, 등이다. 따라서 동결건조된 물질의 수성 재구성에 의해 얻어진 최종 백신은 락토스 및/또는 수크로스를 함유할 수도 있다. 동결건조된 백신을 제조할 때 무정형 첨가제 및/또는 무정형 버퍼를 사용하는 것이 바람직하다 [123].
본 발명의 바람직한 조성물은 (1) 디프테리아, 파상풍 및 백일해 변성 독소, 타입 1, 2 & 3의 불활성화된 폴리오바이러스, 플러스 (2) B형 간염 바이러스 표면 항원 및/또는 Hib 콘쥬게이트를 포함한다. 이들 조성물은 명시된 항원으로 구성될 수도 있거나, 추가적인 병원체 (예를 들어, 수막염균)의 항원을 추가로 포함할 수도 있다. 따라서 조성물은 백신 그 자체로서, 또는 추가의 백신의 성분으로서 사용될 수도 있다.
조성물이 디프테리아 및 파상풍 변성 독소 둘 다를 포함하는 경우 이들은 다양한 비율로 존재할 수도 있다. 바람직하게 디프테리아 변성 독소의 초과량 (Lf 단위로 측정됨), 예를 들어, 파상풍 변성 독소보다 2-4x 더 많은, 예를 들어, 2.5x 또는 3x 더 많은 디프테리아 변성 독소가 있다.
백신의 처리, 및 투여 방법
본 발명의 조성물은 사람 환자에게 투여에 적합하고, 본 발명은 본 발명의 조성물을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자의 면역 반응을 발생시키는 방법을 제공한다.
본 발명은 또한 의약품으로 사용된 본 발명의 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한 단위 투여량 당 0.2 mg 미만의 Al+++을 포함하는 조합 백신의 제조시, (i) 적어도 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소 및 (ii) 알루미늄 염 보조제의 사용을 제공한다.
본 발명은 또한 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 포함하는 조합 백신의 제조시, (i) 적어도 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소 및 (ii) 알루미늄 염 보조제의 사용을 제공한다.
본 발명은 또한 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 포함하고 단위 투여량 당 0.2 mg 미만의 Al+++을 갖는 조합 백신의 제조시, (i) 적어도 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소 및 (ii) 알루미늄 염 보조제의 사용을 제공한다.
본 발명은 또한 조합 백신의 제조시, (i) 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 백일해 변성 독소, 및 Hib 콘쥬게이트 (ii) B형 간염 바이러스 표면 항원 및/또는 불활성화된 폴리오바이러스 항원, 및 (iii) 수중유 에멀젼 보조제의 사용을 제공한다.
본 발명의 면역원성 조성물은 바람직하게 적어도 디프테리아, 파상풍, 백일해의 방지에 사용되는 백신이다. 그것들의 항원 함량에 의존적으로 백신은 또한 박테리아 수막염, 폴리오, 간염, 등으로부터 보호할 수도 있다.
완전한 효능을 갖기 위해, 전형적인 1차 면역화 계획 (특히 아이들에 대해)은 하나 이상의 투여량을 투여하는 단계를 수반할 수도 있다. 예를 들어, 투여는 0 & 6개월 (처음 투여되는 시간 0); 0, 1, 2 & 6 개월; 0일, 21일 및 6 & 12개월 사이에 3차 투여; 2, 4 & 6개월; 3, 4 & 5개월; 6, 10 & 14주; 2, 3 & 4개월; 또는 0, 1, 2, 6 & 12개월에 될 수도 있다.
조성물은 또한, 예를 들어, 태어난 지 2년의 아이에게 촉진 투여량으로서 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 근육 내 주사에 의해, 예를 들어, 팔 또는 다리에게 투여될 수 있다.
더 적은 투여량으로 유아 면역화 계획
상기 언급된 바와 같이, 본 발명의 추가의 양태는 유아 (즉, 출생 내지 1살의 아이)에 대한 면역화 계획이며, 하나 또는 두 개의 DTP-함유 조성물만이 투여된다. 따라서, 일부 구체예에서, 본 발명은 현재의 정상 3-투여 계획와 비교하여 면역 보호 효과의 손실이 없지만, 더 적은 투여량을 전달한다.
그러므로 이 양태에 따라, 본 발명은 다음을 제공한다:
■ 유아를 적어도 디프테리아, 파상풍 및 백일해 (백일해)로부터 면역화하는 방법으로서, 유아에게 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 포함하는 두 번 미만의 투여량의 조합 백신을 투여하는 단계를 포함하는 방법.
■ 유아를 적어도 디프테리아, 파상풍 및 백일해 (백일해)로부터 면역화하는 방법으로서, 유아에게 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 백일해 변성 독소, 및 알루미늄 염 보조제를 포함하는 두 번 미만의 투여량의 조합 백신을 투여하는 단계를 포함하며, 백신의 각각의 투여량은 0.2 mg 미만의 Al+++을 함유하는 방법.
■ 유아를 적어도 디프테리아, 파상풍 및 백일해 (백일해)로부터 면역화하는 방법으로서, 유아에게 알루미늄 염 보조제 및 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 포함하는 두 번 미만의 투여량의 조합 백신을 투여하는 단계를 포함하는 방법.
■ 유아를 적어도 디프테리아, 파상풍 및 백일해 (백일해)로부터 면역화하는 방법으로서, 유아에게 (i) 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소, 및 (ii) 알루미늄 염 보조제를 포함하는 두 번 미만의 투여량의 조합 백신을 투여하는 단계를 포함하며; 백신의 각각의 투여량은 0.2 mg 미만의 Al+++을 함유하는 방법.
■ 유아를 적어도 디프테리아, 파상풍 및 백일해 (백일해)로부터 면역화하는 방법으로서, 유아에게 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 백일해 변성 독소, 및 수중유 에멀젼 보조제를 포함하는 두 번 미만의 투여량의 조합 백신을 투여하는 단계를 포함하는 방법. 백신은 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 가질 수도 있다.
■ 유아를 적어도 디프테리아, 파상풍 및 백일해에 대하여 면역화하는 조합 백신의 제조시 적어도 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소의 사용으로서, 백신은 유아에게 두 번 미만의 투여량의 조합 백신의 투여를 위해 제조되는 사용. 백신은 (i) 알루미늄 염 보조제를 포함하며, 이 경우에 그것은 단위 투여량 당 0.2 mg 미만의 Al+++를 포함할 수도 있고; 및/또는 (ii) 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 가질 수도 있다.
■ 유아를 적어도 디프테리아, 파상풍 및 백일해에 대하여 면역화하는 알루미늄이 없는 조합 백신의 제조시 적어도 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소의 사용으로서, 백신은 유아에게 두 번 미만의 투여량의 조합 백신의 투여를 위해 제조되는 사용. 백신은, 제조 중에 또는 사용의 시점에, 수중유 에멀젼 보조제를 포함할 수도 있다. 백신은 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 가질 수도 있다.
■ 유아에게 두 번 미만의 투여량의 조합 백신을 투여함으로써 유아를 적어도 디프테리아, 파상풍 및 백일해 (백일해)로부터 면역화하는 방법에 사용되는, 적어도 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 포함하는 조합 백신. 백신은 (i) 알루미늄 염 보조제를 포함하며, 이 경우에 그것은 단위 투여량 당 0.2 mg 미만의 Al+++를 포함할 수도 있고; 및/또는 (ii) 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 가질 수도 있다.
■ 유아에게 두 번 미만의 투여량의 조합 백신을 투여함으로써 유아를 적어도 디프테리아, 파상풍 및 백일해 (백일해)로부터 면역화하는 방법에 사용되는, 적어도 수중유 에멀젼 보조제, 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 포함하는 알루미늄이 없는 조합 백신.다. 백신은 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 가질 수도 있다.
이 양태에 따라, 상기 개시된 바와 같이, 백신이 알루미늄 염 보조제를 포함하는 경우, 백신은 또한 상기 알루미늄 염에 흡착될 수도 있는 TLR 작용제를 포함할 수 있다.
이 양태에 따라, 조합 백신은 백일해 변성 독소를 포함한다. 이것은 세포성 백일해 항원 내 단백질로서 백신에 통합될 수도 있지만, 상기 더 상세히 논의된 바와 같이, 무세포성 백일해 항원을 사용하는 것이 바람직하다.
이 양태에 따라, 두 번 미만의 투여량의 백신이 유아에게 제공되고, 즉, 유아는 백신의 일회 투여량 또는 두 번의 투여량을 받지만, 세 번 (또는 그 이상)의 투여량을 받지 않는다. 하지만, 유아는 그들의 생활의 이후에, 즉, 그들의 첫 번째 생일 후 또는 그들의 두 번째 생일 후 세 번째의 (및 아마도 추가의) 투여를 받는다.
한 번 또는 두 번의 투여(들)는 바람직하게 (i) 1 내지 5개월, (ii) 2 내지 4개월, (iii) 3 내지 5개월, (iv) 6 내지 16개월, (v) 0 내지 3개월의 유아에게 제공된다. 예를 들어, 두 번의 투여는 (i) 1 & 2개월 (ii) 2 & 4개월 (iii) 3 & 4개월 (iv) 2 & 3개월 (v) 0 및 1개월, 등에 제공될 수도 있다.
일반
용어 "포함하다"는 "포함하다" 뿐만 아니라 "구성된다"를 포함하는데, 예를 들어, X를 "포함하는" 조성물은 오직 X로만 구성될 수도 있거나 추가적인 어떤 것, 예를 들어, X + Y를 포함할 수도 있다.
단어 "실질적으로"는 "완벽히"를 제외하지 않는데, 예를 들어, Y가 "실질적으로 없는" 조성물은 Y가 완벽히 없을 수도 있다. 필요한 경우, 단어 "실질적으로"는 본 발명의 정의로부터 제외될 수도 있다.
수치 x에 관하여 용어 "약"은, 예를 들어, x ± 10%를 의미한다.
명확하게 진술되지 않으면, 둘 이상의 성분을 혼합하는 단계를 포함하는 공정은 혼합의 어떤 특정 순서도 필요하지 않다. 따라서 성분은 어떤 순서로도 혼합될 수 있다. 세 개의 성분이 있는 경우 두 개의 성분은 서로 결합될 수 있고 조합은 세 번째 성분과 결합될 수도 있다.
항원이 보조제에 "흡착되는" 것으로 설명되는 경우, 상기 항원의 적어도 50 중량%, 예를 들어, 50 중량%, 60 중량%, 70 중량%, 80 중량%, 90 중량%, 95 중량%, 98 중량% 이상이 흡착되는 것이 바람직하다. 디프테리아 변성 독소 및 파상풍 변성 독소는 둘 다 완전히 흡착되고, 즉, 상층액에서 아무것도 관찰할 수 없는 것이 바람직하다. HBsAg의 완전한 흡착이 사용될 수 있다.
콘쥬게이트의 양은 담체의 선택으로 인한 차이를 방지하기 위해 일반적으로 당류의 질량의 측면에서 제공된다 (즉, 전체적으로 콘쥬게이트 (담체 + 당류)의 투여량이 진술된 투여량보다 더 크다).
조성물이 알루미늄 보조제를 포함하는 경우 바람직하게 그것은 또한 수중유 에멀젼 보조제를 포함하지 않는다. 반대로, 조성물이 수중유 에멀젼 보조제를 포함하는 경우 바람직하게 그것은 또한 알루미늄 염 보조제를 포함하지 않는다.
본 발명으로 이용된 인 함유 기는 주위 환경의 pH, 예를 들어, 그것들이 용해되는 용매의 pH에 의존적으로 많은 양성화 및 음성화된 형태로 존재할 수도 있다. 그러므로, 특정 형태가 여기에 설명될 수도 있지만, 달리 언급되지 않으면, 특이적 양성화된 또는 음성화된 형태를 단지 대표하지만 이에 제한되지 않는 이들 설명에 대한 것이다. 예를 들어, 포스페이트 기의 경우에서, 이것은 -OP(0)(OH)2로 설명될 수 있지만 정의는 산성 조건에서 존재할 수도 있는 양성화된 형태 -[OP(0)(OH2)(OH)]+ 및 -[OP(0)(OH2)2]2+ 및 염기성 조건에서 존재할 수도 있는 음성화된 형태 -[OP(0)(OH)(0)]- 및 [OP(0)(0)2]2-를 포함한다. 본 발명은 이러한 형태 모두를 포함한다.
TLR 작용제는 약학적으로 허용 가능한 염으로서 존재할 수 있다. 따라서, 화합물은 그것들의 약학적으로 허용 가능한 염, 즉, 생리학적으로 또는 독성학적으로 허용할 수 있는 염 (이것은 적절할 때, 약학적으로 허용 가능한 염기 추가 염 및 약학적으로 허용 가능한 산 추가 염을 포함함)의 형태로 사용될 수도 있다.
토토머 형태 (tautomeric form) (즉, 케토 형 또는 에놀 형)으로 존재할 수도 있는, 여기에 나타난 TLR 작용제의 경우에서, 화합물은 이러한 토토머 형태 모두로 사용될 수 있다.
화합물이 조성물의 일부로서 신체에게 투여되는 경우 상기 화합물은 대안으로 적합한 프로드러그 (prodrug)에 의해 대체될 수도 있다.
동물 (및 특히 소) 재료가 세포의 배양에 사용된 경우, 그것들은 전파성 해면양뇌증 (transmissible spongiform encephalopathy; TSE)이 없고, 특히, 광우병 (bovine spongiform encephalopathy; BSE)이 없는 공급원으로부터 얻어져야 한다.
항원에 보조제 흡착
3가 (DTaP) 또는 6가 (DTaP-HBsAg-IPV-Hib) 백신을 알루미늄 히드록시드 단독, 미리 흡착된 '화합물 T', 폴리(락티드-코-글리콜리드) 미세입자 ('PLG'), 및 MF59 수중유 에멀젼을 갖는 알루미늄 히드록시드로 보조하였다. 알루미늄 히드록시드 및 미리 흡착된 '화합물 T'를 갖는 알루미늄 히드록시드를 히스티딘 버퍼 pH 6.5에서 제조하였다. pH 6.5에서, 알루미늄 히드록시드는 양성 순전하 (net charge)를 갖는 한편, 대부분의 단백질은 음성 순전하를 갖는다. 테스트된 항원의 대부분의 좋은 흡착을 제공하는 pH 값을 선택하였다. 알루미늄 히드록시드 또는 미리 흡착된 '화합물 T'를 갖는 알루미늄 히드록시드로 보조된 모든 조제물은 최적의 pH (6.5 - 6.8 ± 0.1) 및 삼투질 농도값 (0.300 ± 50 mO)을 나타냈다. 삼투질 농도를 NaCl로 조정하였다. MF59로 보조된 조제물에 대한 항원을 PBS에서 제조하였다. 결과의 제제는 6.2 내지 7.3의 pH 값 및 약 0.300 ± 50mO의 삼투질 농도값을 가졌다. PLG 미세입자를 함유하는 조제물을 물에서 제조하였다. PLG 조제물은 차선의 삼투질 농도값을 나타냈다. PLG 조제물의 pH는 5.8 내지 6.5 + 0.1의 범위였다. PLG 미세입자를 미세입자에 음성 순전하를 부여하는 디옥틸술포숙시네이트 (DSS)로 제조하였다. 따라서 미세입자의 항원과의 상호작용은 항원 표면의 양전하에 의해 매개된다.
알루미늄 히드록시드 단독, 미리 흡착된 '화합물 T'를 갖는 알루미늄 히드록시드, 및 PLG에 대하여, 흡착을 원심분리에 의해 흡착되지 않은 항원으로부터 보조제-항원 복합체를 분리합으로써 검출하였다. 0.4% DOC를 흡착되지 않은 항원을 함유하는 상층액에 추가하였다. 항원을 60% TCA의 추가에 의해 침전시켰고 원심분리에 의해 수거하였다. TCA 침전된 항원을 함유하는 펠렛을 로딩 버퍼에 재현탁하였고 SDS-PAGE 겔에 로딩하였다. 보조제-항원 복합체를 함유하는 펠렛을 탈착 버퍼 (4X 농도: 0.5 M Na2HP04 pH, 8 g SDS, 25 g 글리세롤, 6.16 g DTT 및 브로모페놀 블루)에서 재현탁하였고, 알루미늄 히드록시드를 원심분리에 의해 제거하였고 상층액을 SDS-PAGE 겔에 적용하였다. 항원을 함유하는 MF59 수중유 에멀젼을 원심분리에 의해 유상 및 수상으로 분리하였다. 흡착되지 않은 항원을 함유하는 수상 및 아마도 MF59-관련 항원을 함유하는 유상 둘 다를 로딩 버퍼와 혼합하였고 SDS-PAGE 겔에 적용하였다. 샘플의 전기 영동 분리 후, 겔을 쿠마시 블루 (Coomassie Blue) 염색에 의해 또는 웨스턴 블로팅에 의해 분석하였다.
2 mg/ml의 농도로 알루미늄 히드록시드 단독을 사용하여, 쿠마시 블루에 의해 검출된 DT, TT, PT, FHA 및 69K에 대한 흡착 프로파일은 3가 조제물 및 6가 조제물 둘 다에 완벽하였다. DOC-TCA-처리된 상층액에서는 아무 밴드도 검출되지 않았다. 웨스턴 블롯 분석은 3가 조제물 및 6가 조제물 둘 다에 대하여 DT, TT, PT, FHA 및 69K에 대한 완벽한 알루미늄 히드록시드 흡착을 확인하였다. 유사하게, 다른 다섯 개의 항원-IPV1, IPV2, IPV3, HBsAg 및 Hib-CRM-은 알루미늄 히드록시드-흡착된 조제물의 DOC-TCA-처리된 상층액에서 어떤 검출 가능한 밴드도 나타내지 않았다. 따라서, 6가 조제물에 존재하는 열 개의 항원 모두는 완벽하게 알루미늄 히드록시드에 흡착하였다.
미리 흡착된 '화합물 T'를 갖는 알루미늄 히드록시드에 대하여, 항원 흡착은 3가 조제물 및 6가 조제물 사이에서 달랐다. 네 개의 다른 '화합물 T' 농도를 테스트하였다 (0.1, 0.025, 0.01, 0.005 mg/ml). 알루미늄 히드록시드 농도를 2 mg/ml로 일정하게 유지하였다. 0.1 mg/ml '화합물 T'에서, 3가 조제물의 모든 항원은 완벽하게 흡착하였다. 그에 반해, 6가 조제물의 69K 및 PT는 쿠마시 블루 염색에 의해 결정된 바와 같이 완벽하게 흡착되지 않았다. 0.01 mg/ml '화합물 T'에서, 웨스턴 블롯 분석은 6가 조제물에서 모든 열 개의 항원의 흡착을 확인하였다. 소량의 TT만이 웨스턴 블롯을 사용하여 상층액에서 여전히 검출 가능했다. TT가 웨스턴 블롯에 의해 상층액에서 검출될 수 있지만 SDS-PAGE에서는 아닌 점은 전자의 방법의 더 큰 민감도 때문일 것이다. 따라서, 더 높은 농도에서, '화합물 T'는 보조제에 결합에 대하여 항원과 경쟁하는 것으로 나타난다. 이것은 효과가 더 많은 수의 항원의 존재시에만 분명해지는 이유, 즉, 항원 당 더 적은 알루미늄 히드록시드가 이용 가능할 때를 설명할 수 있다.
PLG 미세입자를 사용하여, Hib-CRM 콘쥬게이트의 DT, TT, IPV1, IPV2, IPV3, FHA 및 CRM은 항원-보조제 복합체를 함유하는 펠렛에서 웨스턴 블롯에 의해 검출되는 극소량의 DT, IPV1, IPV2 및 FHA만을 갖는 상층액에 대부분 제공되었다. 69K 및 PT는 상층액 및 펠렛에 유사한 양이 제공되는 것으로 보였다. HBsAg는 PLG 조제물의 상층액 및 펠렛 둘 다에서 검출될 수 없다. 알루미늄 히드록시드 또는 미리 흡착된 '화합물 T'를 갖는 알루미늄 히드록시드를 함유하는 제제와 비교하여, PLG는 훨씬 더 적은 항원을 흡착한다. 게다가, PLG를 사용하여 얻은 항원 흡착 프로파일은 아마 PLG의 음성 순전하 대 알루미늄 히드록시드 또는 미리 흡착된 '화합물 T'를 갖는 알루미늄 히드록시드의 양성 순전하를 반영하는, 다른 두 개의 보조제의 존재시 나타난 것들과 반대의 경향을 나타냈다.
주사 부위에서 항원 기탁의 결핍 및 MF59 및 항원의 독립적인 제거에 의해 나타난 바와 같이 MF59는 물리적으로 항원과 상호작용할 수 없는 것으로 일반적으로 생각되는 전달 시스템이다 (참고문헌 124 및 125 참조). 1:1, 1:3 및 1:10 비율 (MF59의 완벽한 항원 조제물에 대한 v:v)을 테스트하였다. 세 개의 테스트된 비율 모두에 대하여, SDS-PAGE 및 웨스턴 블롯 분석은 열 개의 테스트된 항원 모두가 MF59 보조된 조제물의 수상에 존재한다는 것을 나타냈다. 따라서 MF59 보조된 조제물의 항원 프로파일은 보조되지 않은 조제물의 프로파일과 일치한다. 결과는 MF59가 테스트된 항원 중 어떤 것과도 상호작용하지 않는다는 것을 확인하였다.
알루미늄 염 보조제의 대체 또는 감소
GlaxoSmithKline의 INFANRIX HEXA 제품은 >30 IU 디프테리아 변성 독소, >40 IU 파상풍 변성 독소, 무세포성 백일해 성분 (25/25/8 μg의 PT/FHA/퍼탁틴), 10 μg HBsAg, 3가 IPV 성분 (40/8/32 DU의 타입 1/2/3), 및 10 μg Hib 콘쥬게이트를 함유한다. 백신은 Hib 콘쥬게이트를 그것의 동결건조된 형태로부터 재구성하기 위해, 0.95 mg 알루미늄 히드록시드 및 1.45 mg 알루미늄 포스페이트를 함유하는 사람 유아용 0.5 ml 수성 단위 투여량을 제공하기 위해, 사용되는 5가 수성 백신으로서 제공된다.
대안의 보조제를 조사하기 위해 (상기 참조) 6가 혼합물을 알루미늄 히드록시드 단독 (히스티딘 버퍼 중에 2 mg/ml), 미리 흡착된 '화합물 T'를 갖는 알루미늄 히드록시드 (상기 참조; 1 mg/ml), 폴리(락티드-코-글리콜리드) 미세입자 ('PLG', 40 mg/ml로 사용됨), 또는 MF59 수중유 에멀젼 (포스페이트 완충된 식염수 중의 항원과 같은 양으로 혼합됨)으로 보충하였다. 같은 희석액을 하기 설명된 모든 마우스 실험에 사용하였다. 조제물의 삼투질 농도를 필요한 경우 NaCl로 조정하였다. 보조제가 없는 대조군을 또한 제조하였다. 항원 농도는 다음과 같다 (ml 당):
Figure pct00005
같은 보조제를 또한 3가 D-T-Pa 혼합물과 함께 사용하였다 (같은 농도).
생리학적 허용 가능성을 확인하기 위해 성분을 결합시킨 후 삼투질 농도 및 pH를 측정하였다 (및, 필요하면, 조정하였다). 모든 3가 조성물에 대하여 pH는 5.9 내지 7.1이었고 삼투질 농도는 290-320 mOsm/kg (>400 mOsm/kg인 것을 제외)이었다. 모든 6가 조성물에 대하여 pH는 5.5 내지 6.8이었고 삼투도는 260-320 mOsm/kg (>500 mOsm/kg인 것을 제외)이었다. 버퍼 대조군은 pH 7.3 및 276 mOsm/kg을 갖는다.
결합된 항원의 무결성 및 면역원성을 또한 테스트하였다. 조합으로서 조제된 후 항원 중 아무것도 변화된 분석 프로파일을 나타내지 않았다, 즉, 항원 및 보조제는 함께 생리학적으로 호환 가능하다.
알루미늄 히드록시드 단독을 가지고 모든 항원은 웰을 보조제에 흡착하였다. TT, 퍼탁틴 및 PT가 부분적으로 탈착된 점을 제외하고, 알루미늄 히드록시드 및 화합물 'T' (즉, 안정한 보조제 복합체의 형성을 위한 흡착을 허용하기 위해 '화합물 T'와 미리 혼합된 알루미늄 히드록시드; 이후로 'Al-T')를 가지고 모든 항원을 웰에 흡착하였다.
PLG 보조제를 가지고 디프테리아 및 파상풍 변성 독소를 탈착하였지만 백일해 변성 독소를 흡착하였다.
마우스 (암컷 Balb/c, 4주령)를 제 0일 및 제 28일에 각 조성물의 100 μl (즉, 1/5 사람 투여량)로 근육 내로 면역화하였다. 혈청을 각 주사 후 14일에 수거하였다. 2차 면역화 후 IgG 항체 역가는 다음과 같았다:
Figure pct00006
따라서 이들 항원의 모두에 대하여 보조제의 포함은 IgG 항체 역가를 증가시켰다. 최고의 역가는 Al-T를 사용할 때 나타났다. 그 다음 최고는 MF59로 되었으며, 이것은 알루미늄 히드록시드 단독보다 더 나은 결과를 제공하였다. Al-T를 사용하여 얻은 역가는 모든 항원에 대하여, 퍼탁틴을 제외하고, Infanrix Hexa로 나타난 것들보다 더 낫다.
게다가, 데이터는 3가 백신으로 이루어진 좋은 결과가 IPV, Hib 및 HBsAg가 추가된 후에도 유지된다는 것을 나타낸다.
IgG 반응을 또한 서브클래스에 의해 조사하였다. 6가 백신 중의 항원의 대부분에 대하여 보조제는 IgG1 역가에 대하여 거의 영향을 미치지 않지만, 그것들은 IgG2a 및 IgG2b 역가를 증가시킨다. 최고의 IgG2a 및 IgG2b 역가를 Al-T로, 및 그때 MF59로 얻었다.
알루미늄 히드록시드 단독, 또는 Infanrix Hexa에서 나타난 알루미늄 염의 혼합물과 비교된, Al-T로 나타난 증가된 역가는 투여량 당 알루미늄의 총 양이 감소되는 한편, 면역 반응의 향상을 유지할 수 있다는 것을 의미한다.
항원 투여량의 감소
개선된 보조제가 투여량 당 항원의 양을 감소시키기 위해 사용될 수 있는지 조사하기 위해 실험을 설계하였다. 6가 항원 조합의 10배, 50배 및 100배 희석 (사람 투여에 관하여, 즉, 각 마우스에 100 μl 투여량 당 1 μg, 0.2 μg 또는 0.1 μg HBsAg를 전달하기 위해)을 만드는 한편, 보조제 농도를 유지하였다.
희석 후 삼투도 및 pH를 측정하였다 (및, 필요하면, 조정하였다). 모든 6가 조성물에 대하여 pH는 6.1 내지 7.0이었고 삼투도는 275-320 mOsm/kg이었다. 버퍼 대조군은 pH 7.3 및 285 mOsm/kg을 가졌다.
마우스를 상기 논의된 바와 같은 방법으로 면역화하였다. 2번의 면역화 후 총 혈청 IgG 역가는 다음과 같다:
Figure pct00007
따라서 보조제의 존재는 5배 또는 10배의 투여량 감소를 허용하는 한편 보조되지 않은 항원과 비슷하거나 더 높은 IgG 역가를 허용한다. MF59 및 Al-T는 특히 이 방식에서 항원의 투여량 절약에 유용하다.
보조제 투여
100배 항원 희석으로 보조제의 양이 또한 감소되었다. MF59 에멀젼을 항원과 1:1 부피비 또는 1:3 비율 (즉, 총 량을 유지하기 위해 2 ml의 버퍼와 함께, 모든 3 ml의 항원에 대하여 1 ml의 에멀젼) 또는 1:10 비율로 혼합하였다. Al-T 복합체를 투여량 당 5 μg, 25 μg 또는 100 μg의 '화합물 T'를 가지고 2 mg/ml 알루미늄 히드록시드를 갖는 3 강도로 제조하였다. 비교를 위해 1:100 항원 투여량을 보조되지 않은 형태에서 또는 알루미늄 히드록시드 단독으로 테스트하였다. Infanrix Hexa의 1:100 희석을 또한 비교에 사용하였다.
혼합 후 (Infanrix Hexa를 제외) 삼투도 및 pH를 측정하였다 (및, 필요하면, 조정하였다). 모든 6가 조성물에 대하여 pH는 6.2 및 7.3이었고 삼투도는 270-320 mOsm/kg이었다. 버퍼 대조군은 pH 7.3 및 280 mOsm/kg을 가졌다.
마우스를 전과 같이 면역화하였다. 2번의 면역화 후 총 혈청 IgG 역가는 다음과 같았다:
Figure pct00008
따라서 더 소량의 MF59 및 Al-T는 여전히 좋은 보조성을 유지하고 보조되지 않은 6가 항원 조제물에 의해 유발된 것들보다 더 높은 IgG 항체 역가를 유발할 수 있다. 보조제의 양을 감소시킴으로써, 면역학적 효율을 유지하는 한편, 백신의 안전 프로파일은 개선될 수 있으며 이것은 소아과 설정에 특히 중요하다.
본 발명은 예시의 방법으로만 설명되고 본 발명의 범위 및 사상을 유지하면서 변형이 만들어질 수도 있다.
표 A: 다양한 시판된 백신의 항원 및 Al +++ 함량 (단위 투여량 당 )
Figure pct00009
주석:
(1) Pa 투여량은 백일해 변성 독소, FHA, 퍼탁틴의 양을 나타낸다 (μg). Pediacel, Daptacel 및 Adacel의 Pa 성분은 또한 핌브리애 타입 2 및 3을 함유한다.
(2) Hib 투여량은 PRP 캡슐 당류의 양을 나타낸다 (μg).
(3) IPV 투여량은 타입 1, 타입 2, 타입 3의 양을 나타낸다 (DU로 측정됨).
(4) Tritanrix-HepB, Quinvaxem, TripVac HB 및 SII Q-Vac은 전체 세포 백일해 항원을 포함한다.
참고문헌
[1] Vaccines. (eds. Plotkin & Orenstein). 4th edition, 2004, ISBN: 0-7216-9688-0.
[2] Francois et al. (2005) Pediatr Infect Dis J 24:953-61.
[3] Baylor et al. (2001) Vaccine 20 (Supplement 3):S18-S23.
[4] Tamm et al. (2005) Vaccine 23:1715-19.
[5] WO2008/028956.
[6] National Institute for Biological Standards and Control; Potters Bar, UK. www.nibsc.ac.uk
[7] Sesardic et al. (2001) Biologicals 29:107-22
[8] NIBSC code: 98/560.
[9] Module 1 of WHO's The immunological basis for immunization series (Galazka).
[10] NIBSC code: 69/017.
[11] NIBSC code: DIFT.
[12] Sesardic et al. (2002) Biologicals 30:49-68.
[13] NIBSC code: 98/552.
[14] NIBSC code: TEFT.
[15] Rappuoli et al. (1991) TIBTECH 9:232-238.
[16] Nencioni et al. (1991) Infect Immun. 59(2): 625-30.
[17] Ramsay et al. (2001) Lancet 357(9251): 195-196.
[18] Lindberg (1999) Vaccine 17 Suppl 2:S28-36.
[19] Buttery & Moxon (2000) JR Coll Physicians Lond 34:163-168.
[20] Ahmad & Chapnick (1999) Infect Dis Clin North Am 13: 113-133, vii.
[21] Goldblatt (1998) J. Med. Microbiol. 47:563-567.
[22] European patent 0477508.
[23] US patent 5,306,492.
[24] W098/42721.
[25] Conjugate Vaccines (eds. Cruse et al.) ISBN 3805549326, particularly vol. 10:48-114.
[26] Hermanson (1996) Bioconjugate Techniques ISBN: 0123423368 or 012342335X.
[27] WO96/40242.
[28] Vanlandschoot et al. (2005) J Gen Virol 86:323-31.
[29] WO2007/054820.
[30] WO03/066094.
[31] Liao et al. (2012) J Infect Dis. 205:237-43.
[32] Verdijk et al. (2011) Expert Rev Vaccines. 10:635-44.
[33] Module 6 of WHO' s The immunological basis for immunization series (Robertson)
[34] W.H.O. Tech. Rep. Ser. 594:51, 1976.
[35] WO03/080678.
[36] Glode et al. (1979) J Infect Dis 139:52-56.
[37] WO94/05325; US patent 5,425,946.
[38] Arakere & Frasch (1991) Infect. Immun. 59:4349-4356.
[39] Michon et al. (2000) Dev. Biol. 103:151-160.
[40] Rubinstein & Stein (1998) J. Immunol. 141:4357-4362.
[41] WO2005/033148.
[42] WO2005/000347.
[43] WO02/058737.
[44] WO03/007985.
[45] WO2007/000314.
[46] WO2007/000322.
[47] Giuliani et al. (2006) Proc Natl Acad Sci USA 103(29):10834-9.
[48] WO99/57280.
[49] Masignani et al. (2003) J Exp Med 197:789-799.
[50] Welsch et al. (2004) J Immunol 172:5605-15.
[51] Hou et al. (2005) J Infect Dis 192(4):580-90.
[52] WO03/063766.
[53] Fletcher et al. (2004) Infect Immun 72:2088-2100.
[54] Zhu et al. (2005) Infect Immun 73(10):6838-45.
[55] WO2004/048404
[56] Serruto et al. (2010) PNAS USA 107:3770-5.
[57] Tettelin et al. (2000) Science 287: 1809-15.
[58] WHO Technical Report Series No. 927, 2005. Pages 64-98.
[59] US-2008/0102498.
[60] US-2006/0228381.
[61] US-2007/0231340.
[62] US-2007/0184072.
[63] US-2006/0228380.
[64] WO2008/143709.
[65] Research Disclosure, 453077 (Jan 2002)
[66] EP-A-0378881.
[67] EP-A-0427347.
[68] W093/17712
[69] WO94/03208.
[70] W098/58668.
[71] EP-A-0471177.
[72] WO91/01146
[73] Falugi et al. (2001) Eur J Immunol 31:3816-3824.
[74] Baraldo et al. (2004) Infect Immun 72(8):4884-7.
[75] EP-A-0594610.
[76] Ruan et al. (1990) J Immunol 145:3379-3384.
[77] WO00/56360.
[78] Kuo et al. (1995) Infect Immun 63:2706-13.
[79] Michon et al. (1998) Vaccine. 16: 1732-41.
[80] WO02/091998.
[81] WO01/72337
[82] WO00/61761.
[83] WO00/33882
[84] WO2007/071707
[85] Bethell G.S. et al, J. Biol. Chem. 1979, 254, 2572-4
[86] Hearn M.T.W. J. Chromatogr. 1981, 218, 509-18
[87] WO2007/000343.
[88] Mol. Immunol, 1985, 22, 907-919
[89] EP-A-0208375
[90] WO00/10599
[91] Gever et al. Med. Microbiol. Immunol, 165: 171-288 (1979).
[92] US patent 4,057,685.
[93] US patents 4,673,574; 4,761,283; 4,808,700.
[94] US patent 4,459,286.
[95] US patent 5,204,098
[96] US patent 4,965,338
[97] US patent 4,663,160.
[98] US-2007/0184071.
[99] Jodar et al. (2003) Vaccine 21:3265-72.
[100] Vaccine Design: The Subunit and Adjuvant Approach (eds. Powell & Newman) Plenum Press 1995 (ISBN 0-306-44867-X).
[101] Clausi et al. (2008) J Pharm Sci DOI 10.1002/jps.21390.
[102] International patent application PCT/US2011/050231.
[103] US patent application 61/316,551.
[104] US patent application 61/379,126.
[105] WO2011/027222.
[106] WO2011/024072.
[107] WO2010/144734.
[108] WO90/14837.
[109] Podda & Del Giudice (2003) Expert Rev Vaccines 2: 197-203.
[110] Podda (2001) Vaccine 19: 2673-2680.
[111] Vaccine Adjuvants: Preparation Methods and Research Protocols (Volume 42 of Methods in Molecular Medicine series). ISBN: 1-59259-083-7. Ed. O'Hagan.
[112] WO2008/043774.
[113] Allison & Byars (1992) Res Immunol 143:519-25.
[114] Hariharan et al. (1995) Cancer Res 55:3486-9.
[115] US-2007/014805.
[116] WO2007/080308.
[117] WO95/11700.
[118] US patent 6,080,725.
[119] WO2005/097181.
[120] WO2006/113373.
[121] US-6630161.
[122] Nony et al. (2001) Vaccine 27:3645-51.
[123] WO01/41800.
[124] Dupuis et al. (1999) Vaccine 18:434-9.
[125] Immunopotentiators in Modern Vaccines (2006) Schijns and O'Hagan (eds.) ISBN: 0-12-088403-8.

Claims (25)

  1. (i) 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소, 및 (ii) 단위 투여량에서 Al+++의 양이 0.2 mg 미만인 알루미늄 염 보조제를 포함하는, 환자에게 투여되는 단위 투여 형태의 면역원성 조성물.
  2. (i) 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소 및 (ii) Al+++의 농도가 0.4 mg/ml 미만인 알루미늄 염 보조제를 포함하는 면역원성 조성물.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 조성물은 (i) Hib 콘쥬게이트, (ii) B형 간염 바이러스 표면 항원, 및/또는 (iii) 불활성화된 폴리오바이러스 항원 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. (i) 알루미늄 염 보조제 및 (ii) 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소를 포함하는 면역원성 조성물.
  5. (i) 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소, 및 (ii) 단위 투여량에서 Al+++의 양이 0.2 mg 미만인 알루미늄 염 보조제를 포함하는, 환자에게 투여되는 단위 투여 형태의 면역원성 조성물.
  6. (i) 각각 저용량의 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 및 백일해 변성 독소 및 (ii) Al+++의 농도가 0.4 mg/ml 미만인 알루미늄 염 보조제를 포함하는 면역원성 조성물.
  7. 제 4항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 ≤ 8 Lf/ml 디프테리아 변성 독소를 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제 4항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 ≤3.5 Lf/ml 파상풍 변성 독소를 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
  9. 제 4항 내지 제 8항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 ≤5 μg/ml 백일해 변성 독소를 갖는 무세포성 백일해 항원을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  10. 제 4항 내지 제 9항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 저용량의 Hib 콘쥬게이트를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  11. 제 10항에 있어서, 조성물은 ≤5 μg/ml Hib 당류를 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
  12. 제 4항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 저용량의 HBsAg를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  13. 제 12항에 있어서, 조성물은 ≤5 μg/ml HBsAg를 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
  14. 제 4항 내지 제 13항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 저용량의 불활성화된 폴리오바이러스를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  15. 제 14항에 있어서, 조성물은 (i) ≤20 DU/ml 타입 1 폴리오바이러스 및/또는 (ii) ≤4 DU/ml 타입 2 폴리오바이러스 및/또는 (iii) ≤16 DU/ml 타입 3 폴리오바이러스를 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
  16. 제 1항 내지 제 15항 중 어느 한 항에 있어서, 알루미늄 염 보조제는 (i) 알루미늄 히드록시드 보조제 또는 (ii) 알루미늄 포스페이트 보조제 또는 (iii) 알루미늄 히드록시드 보조제 및 알루미늄 포스페이트 보조제의 혼합물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  17. 제 1항 내지 제 16항 중 어느 한 항에 있어서, TLR 작용제가 흡착되는 알루미늄 히드록시드 보조제 (예를 들어, 여기에서 TLR7 작용제는 '화합물 T'이다)를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  18. (i) 수중유 에멀젼 보조제 (ii) 디프테리아 변성 독소, 파상풍 변성 독소, 백일해 변성 독소, 및 Hib 콘쥬게이트 (iii) B형 간염 바이러스 표면 항원 및/또는 불활성화된 폴리오바이러스 항원을 포함하는 면역원성 조성물.
  19. 제 18항에 있어서, 조성물은 알루미늄이 없는 것을 특징으로 하는 조성물.
  20. 제 18항 또는 제 19항에 있어서, 수중유 에멀젼 보조제는 1 미크론 미만의 지름을 갖는 오일 방울을 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
  21. 제 18항 내지 제 20항 중 어느 한 항에 있어서, 수중유 에멀젼 보조제는 스쿠알렌 및/또는 폴리소르베이트 80을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  22. 제 1항 내지 제 21항 중 어느 한 항에 있어서, 수막염균 혈청군 A, C, W135 및/또는 Y 중 하나 이상으로부터 콘쥬게이션된 캡슐 당류를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  23. 제 1항 내지 제 22항 중 어느 한 항에 있어서, 폐렴 구균 혈청형 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F 및/또는 33F 중 하나 이상으로부터 콘쥬게이션된 캡슐 당류를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  24. 제 1항 내지 제 23항 중 어느 한 항에 있어서, (i) 수막염균 인자 H 결합 단백질 항원 및/또는 (ii) 네이세리아 헤파린 결합 항원 및/또는 (iii) 수막염균 NhhA 항원 및/또는 (iv) 수막염균 외막 소포를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  25. 환자의 면역 반응을 발생시키는 방법으로서, 환자에게 제 1항 내지 제 24항 중 어느 한 항의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 방법.
KR1020137026063A 2011-03-02 2012-03-02 저용량의 항원 및/또는 보조제를 갖는 조합 백신 KR20140026392A (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161448226P 2011-03-02 2011-03-02
US61/448,226 2011-03-02
US201161565980P 2011-12-01 2011-12-01
US61/565,980 2011-12-01
PCT/IB2012/050989 WO2012117377A1 (en) 2011-03-02 2012-03-02 Combination vaccines with lower doses of antigen and/or adjuvant

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20140026392A true KR20140026392A (ko) 2014-03-05

Family

ID=45852630

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020137026063A KR20140026392A (ko) 2011-03-02 2012-03-02 저용량의 항원 및/또는 보조제를 갖는 조합 백신

Country Status (12)

Country Link
US (3) US20140112950A1 (ko)
EP (1) EP2680885B8 (ko)
JP (2) JP6191082B2 (ko)
KR (1) KR20140026392A (ko)
CN (1) CN103533954B (ko)
AU (1) AU2012222883A1 (ko)
BR (1) BR112013022397A2 (ko)
CA (1) CA2828844C (ko)
ES (1) ES2681698T3 (ko)
RU (1) RU2013144207A (ko)
TR (1) TR201811280T4 (ko)
WO (1) WO2012117377A1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190142311A (ko) * 2016-08-26 2019-12-26 세럼 인스티튜트 오브 인디아 프라이비트 리미티드 다가 백신 조성물

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX339524B (es) 2001-10-11 2016-05-30 Wyeth Corp Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica.
AU2010290896B2 (en) 2009-09-02 2014-07-03 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Immunogenic compositions including TLR activity modulators
US8822663B2 (en) 2010-08-06 2014-09-02 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
ES2458355T3 (es) 2010-09-01 2014-05-05 Novartis Ag Adsorción de inmunopotenciadores sobre sales metálicas insolubles
PE20140173A1 (es) 2010-09-10 2014-02-20 Wyeth Llc Variantes no lipidadas de antigenos orf2086 de neisseria meningitidis
HUE058896T2 (hu) 2010-10-01 2022-09-28 Modernatx Inc N1-metil-pszeudo-uracilt tartalmazó ribonukleinsavak és azok felhasználásai
BR112013022397A2 (pt) 2011-03-02 2017-09-26 Derek O’Hagan vacinas combinadas com doses menores de antígeno e/ou adjuvante
US8710200B2 (en) 2011-03-31 2014-04-29 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids encoding a modified erythropoietin and their expression
IN2014CN02152A (ko) * 2011-09-01 2015-09-04 Novartis Ag
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
RS62993B1 (sr) 2011-10-03 2022-03-31 Modernatx Inc Modifikovani nukleozidi, nukleotidi, i nukleinske kiseline, i njihove upotrebe
CN104114572A (zh) 2011-12-16 2014-10-22 现代治疗公司 经修饰的核苷、核苷酸和核酸组合物
JP2015510872A (ja) * 2012-03-07 2015-04-13 ノバルティス アーゲー Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ抗原の増強された製剤
CN104159603A (zh) * 2012-03-08 2014-11-19 诺华股份有限公司 带有tlr4激动剂的联合疫苗
AU2013229432A1 (en) * 2012-03-08 2014-10-16 Novartis Ag Adjuvanted formulations of booster vaccines
SA115360586B1 (ar) 2012-03-09 2017-04-12 فايزر انك تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
DE18200782T1 (de) 2012-04-02 2021-10-21 Modernatx, Inc. Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen
US9303079B2 (en) 2012-04-02 2016-04-05 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
RU2015106930A (ru) 2012-09-06 2016-10-20 Новартис Аг Комбинированные вакцины с менингококком серогруппы в и к/д/с
RU2662970C2 (ru) * 2012-09-18 2018-07-31 Новартис Аг Везикулы наружной мембраны
EP4074834A1 (en) 2012-11-26 2022-10-19 ModernaTX, Inc. Terminally modified rna
US9968673B2 (en) 2013-02-26 2018-05-15 Commissariat á l'ènergie atomique et aux ènergies alternatives Immunogenic composition in emulsion form comprising two dispersed phases, one comprising an antigen and the other comprising an immunostimulating agent
FR3002454B1 (fr) 2013-02-26 2015-04-10 Commissariat Energie Atomique Composition immunogene sous forme d'emulsion
ES2597832T3 (es) 2013-03-08 2017-01-23 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Vacuna acelular contra la tosferina
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
MX369534B (es) * 2013-09-08 2019-11-11 Pfizer Composiciones de neisseria meningitidis y sus metodos.
EP3052106A4 (en) 2013-09-30 2017-07-19 ModernaTX, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
MX2016004249A (es) 2013-10-03 2016-11-08 Moderna Therapeutics Inc Polinulcleotidos que codifican el receptor de lipoproteina de baja densidad.
US10872313B2 (en) 2015-06-02 2020-12-22 ROCA Medical Ltd. Method for repurposing NDC codes in a pharmaceutical database for venom derived allergens involved in venom immunotherapy
PT3134131T (pt) 2014-04-23 2022-03-24 Modernatx Inc Vacinas de ácidos nucleicos
CN104013955B (zh) * 2014-06-18 2016-02-24 中国科学院过程工程研究所 一种不含表面活性剂的水包油乳液及其用途
WO2016063291A1 (en) * 2014-10-07 2016-04-28 Serum Institute Of India Private Limited Improved methods for enterovirus inactivation, adjuvant adsorption and dose reduced vaccine compositions obtained thereof
CN107249626A (zh) 2015-02-19 2017-10-13 辉瑞大药厂 脑膜炎奈瑟球菌组合物及其方法
US10548974B2 (en) * 2015-06-02 2020-02-04 ROCA Medical Ltd. Therapeutic treatment kit for allergies based on DNA profiles
CN106075428A (zh) * 2015-07-01 2016-11-09 北京科兴中维生物技术有限公司 一种免疫原性组合物及其制备方法
MA42317B2 (fr) * 2015-09-16 2021-11-30 Lg Chemical Ltd Composition de vaccin combinée pour administration multiple
WO2017085248A1 (fr) * 2015-11-18 2017-05-26 Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives Composition immunogène sous forme d'émulsion comprenant deux phases dispersées, l'une comprenant un antigène et l'autre comprenant un agent immunostimulant
FR3043558B1 (fr) * 2015-11-18 2017-12-29 Commissariat Energie Atomique Composition immunogene sous forme d'emulsion comprenant deux phases dispersees, l'une comprenant un antigene et l'autre comprenant un agent immunostimulant
US11344619B2 (en) * 2016-05-16 2022-05-31 Access To Advanced Health Institute Formulation containing TLR agonist and methods of use
CN106039301A (zh) * 2016-06-30 2016-10-26 武汉博沃生物科技有限公司 肺炎球菌‑b型流感嗜血杆菌‑百白破联合疫苗的制备方法
MX2019002489A (es) * 2016-09-02 2019-10-21 Sanofi Pasteur Inc Vacuna contra neisseria meningitidis.
SG11201906519RA (en) 2017-01-31 2019-08-27 Pfizer Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
GB201807303D0 (en) 2018-05-03 2018-06-20 London School Of Hygeine & Tropical Medicine Glyconjugate vaccines
CN111643661A (zh) * 2020-06-08 2020-09-11 王竹林 新型免疫佐剂、化合物及其应用
CN114917331A (zh) * 2022-06-02 2022-08-19 金宇保灵生物药品有限公司 一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜a型荚膜多糖疫苗及其制备方法

Family Cites Families (146)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4057685A (en) 1972-02-02 1977-11-08 Abbott Laboratories Chemically modified endotoxin immunizing agent
US4673574A (en) 1981-08-31 1987-06-16 Anderson Porter W Immunogenic conjugates
DE3485094D1 (de) 1983-01-25 1991-10-31 Ciba Geigy Ag Neue peptidderivate.
US4459286A (en) 1983-01-31 1984-07-10 Merck & Co., Inc. Coupled H. influenzae type B vaccine
US4663160A (en) 1983-03-14 1987-05-05 Miles Laboratories, Inc. Vaccines for gram-negative bacteria
US4761283A (en) 1983-07-05 1988-08-02 The University Of Rochester Immunogenic conjugates
US4808700A (en) 1984-07-09 1989-02-28 Praxis Biologics, Inc. Immunogenic conjugates of non-toxic E. coli LT-B enterotoxin subunit and capsular polymers
IT1187753B (it) 1985-07-05 1987-12-23 Sclavo Spa Coniugati glicoproteici ad attivita' immunogenica trivalente
US5204098A (en) 1988-02-16 1993-04-20 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Polysaccharide-protein conjugates
NL8802046A (nl) 1988-08-18 1990-03-16 Gen Electric Polymeermengsel met polyester en alkaansulfonaat, daaruit gevormde voorwerpen.
CA2006700A1 (en) 1989-01-17 1990-07-17 Antonello Pessi Synthetic peptides and their use as universal carriers for the preparation of immunogenic conjugates suitable for the development of synthetic vaccines
JPH0832638B2 (ja) 1989-05-25 1996-03-29 カイロン コーポレイション サブミクロン油滴乳剤を含んで成るアジュバント製剤
JPH04506662A (ja) 1989-07-14 1992-11-19 アメリカン・サイアナミド・カンパニー 接合体ワクチンのためのサイトカイニンおよびホルモンのキヤリヤー
US5059258A (en) 1989-08-23 1991-10-22 Aluminum Company Of America Phosphonic/phosphinic acid bonded to aluminum hydroxide layer
IT1237764B (it) 1989-11-10 1993-06-17 Eniricerche Spa Peptidi sintetici utili come carriers universali per la preparazione di coniugati immunogenici e loro impiego per lo sviluppo di vaccini sintetici.
SE466259B (sv) 1990-05-31 1992-01-20 Arne Forsgren Protein d - ett igd-bindande protein fraan haemophilus influenzae, samt anvaendning av detta foer analys, vacciner och uppreningsaendamaal
ATE128628T1 (de) 1990-08-13 1995-10-15 American Cyanamid Co Faser-hemagglutinin von bordetella pertussis als träger für konjugierten impfstoff.
US6699474B1 (en) 1990-08-20 2004-03-02 Erich Hugo Cerny Vaccine and immunserum against drugs of abuse
US5153312A (en) 1990-09-28 1992-10-06 American Cyanamid Company Oligosaccharide conjugate vaccines
US5936076A (en) 1991-08-29 1999-08-10 Kirin Beer Kabushiki Kaisha αgalactosylceramide derivatives
CA2131729C (en) 1992-03-02 2008-02-12 Antonello Covacci Helicobacter pylori proteins useful for vaccines and diagnostics
IT1262896B (it) 1992-03-06 1996-07-22 Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini.
IL102687A (en) 1992-07-30 1997-06-10 Yeda Res & Dev Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them
US5425946A (en) 1992-08-31 1995-06-20 North American Vaccine, Inc. Vaccines against group C Neisseria meningitidis
PT658118E (pt) 1992-08-31 2002-05-31 Baxter Healthcare Sa Vacinas contra neisseria meningitidis do grupo c
WO1995011700A1 (en) 1993-10-29 1995-05-04 Pharmos Corp. Submicron emulsions as vaccine adjuvants
FR2718452B1 (fr) 1994-04-06 1996-06-28 Pf Medicament Elément d'immunogène, agent immunogène, composition pharmaceutique et procédé de préparation.
EP0769018B1 (en) 1994-07-01 2002-12-18 Chiron Corporation Helicobacter proteins and vaccines
KR100417508B1 (ko) 1994-11-24 2004-03-18 바실리어 파마슈티카 아게 신규한벤질피리미딘
ATE400295T1 (de) 1995-06-07 2008-07-15 Glaxosmithkline Biolog Sa Vakzine mit einem polysaccharide antigen- trägerprotein konjugat und freiem trägerprotein
WO1997025429A1 (en) 1996-01-04 1997-07-17 Rican Limited Helicobacter pylori bacterioferritin
GB9623233D0 (en) 1996-11-07 1997-01-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
US6406705B1 (en) * 1997-03-10 2002-06-18 University Of Iowa Research Foundation Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant
US6299881B1 (en) 1997-03-24 2001-10-09 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Uronium salts for activating hydroxyls, carboxyls, and polysaccharides, and conjugate vaccines, immunogens, and other useful immunological reagents produced using uronium salts
US6080725A (en) 1997-05-20 2000-06-27 Galenica Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulating and vaccine compositions employing saponin analog adjuvants and uses thereof
GB9713156D0 (en) 1997-06-20 1997-08-27 Microbiological Res Authority Vaccines
ES2304065T3 (es) 1998-05-01 2008-09-01 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Antigenos y composiciones de neisseria meningitidis.
WO1999056776A2 (en) 1998-05-07 1999-11-11 Corixa Corporation Adjuvant composition and methods for its use
EP1109576B1 (en) 1998-08-19 2009-10-21 Baxter Healthcare SA Immunogenic beta-propionamido-linked polysaccharide protein conjugate useful as a vaccine produced using an n-acryloylated polysaccharide
AU1626199A (en) 1998-12-04 2000-06-26 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The A vi-repa conjugate vaccine for immunization against salmonella typhi
GB9828000D0 (en) 1998-12-18 1999-02-10 Chiron Spa Antigens
EP1880735A3 (en) 1999-03-19 2008-03-12 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Vaccine
JP2002541808A (ja) 1999-04-09 2002-12-10 テクラブ， インコーポレイテッド ポリサッカリド結合体ワクチンのための組換えトキシンａタンパク質キャリア
PT1233784E (pt) 1999-12-02 2008-11-03 Novartis Vaccines & Diagnostic Composições e métodos para a estabilização de moléculas biológicas após a liofilização
DE10012370A1 (de) 2000-03-14 2001-09-27 Chiron Behring Gmbh & Co Adjuvans für Vakzinen
GB0007432D0 (en) 2000-03-27 2000-05-17 Microbiological Res Authority Proteins for use as carriers in conjugate vaccines
GB0108364D0 (en) 2001-04-03 2001-05-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine composition
AU2001276619A1 (en) 2000-07-03 2002-01-14 Chiron S.P.A. Immunisation against chlamydia pneumoniae
JP2005504718A (ja) 2001-01-23 2005-02-17 アヴェンティス パストゥール 多価髄膜炎菌多糖−タンパク質複合ワクチン
AU2002309706A1 (en) 2001-05-11 2002-11-25 Aventis Pasteur, Inc. Novel meningitis conjugate vaccine
AU2002302814A1 (en) * 2001-06-08 2002-12-23 Powderject Vaccines, Inc. Spray freeze-dried compositions
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
FR2827605B1 (fr) 2001-07-20 2004-07-16 Pf Medicament Nouveaux peptides derives de la proteine g du vrs et leur utilisation dans un vaccin
MX339524B (es) 2001-10-11 2016-05-30 Wyeth Corp Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica.
JP4413617B2 (ja) 2001-12-12 2010-02-10 カイロン ソチエタ ア レスポンサビリタ リミタータ Ｃｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓに対する免疫化
GB0202901D0 (en) 2002-02-07 2002-03-27 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel vaccine
MXPA04009339A (es) 2002-03-26 2005-01-25 Chiron Srl Sacaridos modificados que tienen estabilidad mejorada en agua.
GB0211118D0 (en) 2002-05-15 2002-06-26 Polonelli Luciano Vaccines
WO2003105769A2 (en) 2002-06-13 2003-12-24 New York University Synthetic c-glycolipid and its use for treating cancer infectious diseases and autoimmune diseases
AU2003274511B2 (en) 2002-10-11 2009-06-04 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Polypeptide-vaccines for broad protection against hypervirulent meningococcal lineages
GB0227346D0 (en) 2002-11-22 2002-12-31 Chiron Spa 741
US7818252B2 (en) 2003-02-20 2010-10-19 Gilat Satellite Networks, Ltd Enforcement of network service level agreements
AU2004247305B2 (en) 2003-06-16 2010-02-18 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry, Academy Of Sciences Of The Czech Republic Pyrimidine compounds having phosphonate groups as antiviral nucleotide analogs
BRPI0411815A (pt) 2003-06-23 2006-08-08 Baxter Int vacinas contra neisseria meningitidis do tipo y e suas combinações meningocócicas
US20100255002A1 (en) 2003-06-26 2010-10-07 Chiron Corporation Immunogenic compositions for chlamydia trachomatis
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides
US7771726B2 (en) 2003-10-08 2010-08-10 New York University Use of synthetic glycolipids as universal adjuvants for vaccines against cancer and infectious diseases
RU2006134631A (ru) 2004-03-02 2008-04-10 Чирон Корпорейшн (Us) Иммуногенные композиции против chlamidia pneumoniae
GB0405787D0 (en) 2004-03-15 2004-04-21 Chiron Srl Low dose vaccines
JP2007531768A (ja) 2004-03-31 2007-11-08 ニューヨーク・ユニバーシティ 感染症、癌および自己免疫疾患を治療するための新規な合成ｃ−糖脂質、その合成および使用
KR20070008625A (ko) 2004-04-05 2007-01-17 화이자 프로덕츠 인코포레이티드 미세유체화된 수중유 유화액 및 백신 조성물
AU2006214064B2 (en) 2005-02-18 2012-04-26 J. Craig Venter Institute, Inc. Proteins and nucleic acids from meningitis/sepsis-associated escherichia coli
MX291624B (es) 2005-02-18 2011-11-04 Novartis Vaccines & Diagnostic Inmunogenos de escherichia coli uropatogenica.
EP1866319B1 (en) 2005-04-01 2011-11-23 The Regents of The University of California Phosphono-pent-2-en-1-yl nucleosides and analogs
US7709001B2 (en) 2005-04-08 2010-05-04 Wyeth Llc Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
ME01334B (me) 2005-04-08 2013-12-20 Wyeth Llc Polivalentni pripravak konjugata pneumokoknog polisaharida s proteinom
US7955605B2 (en) 2005-04-08 2011-06-07 Wyeth Llc Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
US20070184072A1 (en) 2005-04-08 2007-08-09 Wyeth Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
MX2007012337A (es) 2005-04-08 2007-11-21 Wyeth Corp Separacion de contaminantes de polisacarido de streptococcus pneumoniae por manipulacion de ph.
US7691368B2 (en) 2005-04-15 2010-04-06 Merial Limited Vaccine formulations
JP2008544745A (ja) 2005-05-12 2008-12-11 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス， インコーポレイテッド Ｃｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓのための免疫原性組成物
MX2007016403A (es) 2005-06-27 2008-03-07 Glaxosmithkline Biolog Sa Composicion inmunogenica.
US8703095B2 (en) 2005-07-07 2014-04-22 Sanofi Pasteur S.A. Immuno-adjuvant emulsion
TWI382019B (zh) 2005-08-19 2013-01-11 Array Biopharma Inc 作為類鐸受體（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）調節劑之胺基二氮雜呯
TW200801003A (en) 2005-09-16 2008-01-01 Astrazeneca Ab Novel compounds
JPWO2007034817A1 (ja) 2005-09-22 2009-03-26 大日本住友製薬株式会社 新規アデニン化合物
WO2007034916A1 (ja) 2005-09-22 2007-03-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 新規アデニン化合物
TW200745114A (en) 2005-09-22 2007-12-16 Astrazeneca Ab Novel compounds
US20090192153A1 (en) 2005-09-22 2009-07-30 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. a corporation of Japan Novel adenine compound
US20090105212A1 (en) 2005-09-22 2009-04-23 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. a corporation of Japan Novel adenine compound
CA2628424A1 (en) 2005-11-04 2007-05-10 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Adjuvanted influenza vaccines including cytokine-inducing agents
GB0522765D0 (en) 2005-11-08 2005-12-14 Chiron Srl Combination vaccine manufacture
GB0524066D0 (en) 2005-11-25 2006-01-04 Chiron Srl 741 ii
AR058592A1 (es) 2005-12-22 2008-02-13 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacuna
EP1976557A2 (en) 2005-12-22 2008-10-08 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Chlamydial antigens
FR2896162B1 (fr) 2006-01-13 2008-02-15 Sanofi Pasteur Sa Emulsion huile dans eau thermoreversible
KR20080085232A (ko) 2006-02-17 2008-09-23 화이자 리미티드 Ｔｌｒ7 조절제로서 3-데아자퓨린 유도체
CA2646891A1 (en) 2006-03-23 2007-09-27 Novartis Ag Immunopotentiating compounds
ATE539079T1 (de) * 2006-03-23 2012-01-15 Novartis Ag Imidazochinoxalinverbindungen als immunmodulatoren
ATE450271T1 (de) * 2006-06-12 2009-12-15 Glaxosmithkline Biolog Sa Impfstoff
CN101500603A (zh) * 2006-06-15 2009-08-05 诺华有限公司 节省佐剂的多剂量流感疫苗接种方案
US8138172B2 (en) 2006-07-05 2012-03-20 Astrazeneca Ab 8-oxoadenine derivatives acting as modulators of TLR7
US8338593B2 (en) 2006-07-07 2012-12-25 Gilead Sciences, Inc. Modulators of toll-like receptor 7
JP2010500399A (ja) 2006-08-16 2010-01-07 ノバルティス アーゲー 尿路病原性大腸菌由来の免疫原
GB0616306D0 (en) 2006-08-16 2006-09-27 Novartis Ag Vaccines
PL2097102T3 (pl) 2006-09-07 2012-10-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Szczepionka skojarzona o zmniejszonej ilości antygenu wirusa polio
MX2009003730A (es) 2006-10-10 2009-04-22 Wyeth Corp Purificacion de polisacaridos de streptococcus pneumoniae tipo 3.
KR101151202B1 (ko) 2006-10-12 2012-06-11 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 수중유 에멀젼 애주번트를 포함하는 백신
WO2008047174A1 (en) 2006-10-18 2008-04-24 Centre National De La Recherche Scientifique Alpha-galactosylceramide analogs, their methods of manufacture, intermediate compounds useful in these methods, and pharmaceutical compositions containing them
EP2125792B1 (en) 2007-02-19 2010-12-01 GlaxoSmithKline LLC Purine derivatives as immunomodulators
PE20081887A1 (es) 2007-03-20 2009-01-16 Dainippon Sumitomo Pharma Co Nuevo compuesto de adenina
MY150519A (en) 2007-05-08 2014-01-30 Astrazeneca Ab Imidazoquinolines with immuno-modulating properties
ES2359123T3 (es) * 2007-08-03 2011-05-18 Pfizer Limited Imidazopiridinonas.
PT2200642E (pt) 2007-10-19 2012-05-30 Novartis Ag Formulações de vacinas meningocócicas
PE20091236A1 (es) 2007-11-22 2009-09-16 Astrazeneca Ab Derivados de pirimidina como immunomoduladores de tlr7
JP5415449B2 (ja) 2007-12-24 2014-02-12 ノバルティス アーゲー 吸着されたインフルエンザワクチンのためのアッセイ
PT2268618E (pt) * 2008-03-03 2015-10-12 Novartis Ag Compostos e composições moduladores da actividade tlr
CN103396415B (zh) 2008-03-24 2016-08-10 4Sc股份有限公司 新的取代的咪唑并喹啉化合物
WO2010003009A2 (en) 2008-07-01 2010-01-07 Emory University Synergistic induction of humoral and cellular immunity by combinatorial activation of toll-like receptors
AU2009270399A1 (en) * 2008-07-18 2010-01-21 Id Biomedical Corporation Of Quebec Chimeric respiratory syncytial virus polypeptide antigens
ES2438496T3 (es) 2008-08-01 2014-01-17 Ventirx Pharmaceuticals, Inc. Formulaciones de agonistas de receptores de tipo toll y su uso
TWM352127U (en) 2008-08-29 2009-03-01 Bestac Advanced Material Co Ltd Polishing pad
TWI432436B (zh) 2008-12-09 2014-04-01 Gilead Sciences Inc 類鐸受體的調節劑
GB0822633D0 (en) 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Formulation
EP2398821B1 (en) * 2009-02-17 2017-08-30 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Inactivated dengue virus vaccine with aluminium-free adjuvant
JP5830009B2 (ja) 2009-04-14 2015-12-09 ノバルティス アーゲー Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓに対して免疫化するための組成物
RU2536248C2 (ru) * 2009-04-30 2014-12-20 Коули Фармасьютикал Груп, Инк. Пневмококковая вакцина и ее применения
US8808712B2 (en) * 2009-05-01 2014-08-19 Osaka University Malaria vaccine
ES2531115T3 (es) 2009-06-01 2015-03-10 Novartis Ag Combinaciones de clados de RrgB neumocócicos
WO2010144734A1 (en) 2009-06-10 2010-12-16 Novartis Ag Benzonaphthyridine-containing vaccines
JP2013502918A (ja) 2009-08-27 2013-01-31 ノバルティス アーゲー 髄膜炎菌ｆＨＢＰ配列を含むハイブリッドポリペプチド
AU2010290896B2 (en) 2009-09-02 2014-07-03 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Immunogenic compositions including TLR activity modulators
TWI445708B (zh) 2009-09-02 2014-07-21 Irm Llc 作為ｔｌｒ活性調節劑之化合物及組合物
WO2011057267A1 (en) 2009-11-09 2011-05-12 National Jewish Health Vaccine composition
WO2011119759A1 (en) 2010-03-23 2011-09-29 Irm Llc Compounds (cystein based lipopeptides) and compositions as tlr2 agonists used for treating infections, inflammations, respiratory diseases etc.
EP2558069A1 (en) 2010-04-13 2013-02-20 Novartis AG Benzonapthyridine compositions and uses thereof
ES2458355T3 (es) * 2010-09-01 2014-05-05 Novartis Ag Adsorción de inmunopotenciadores sobre sales metálicas insolubles
US9618508B2 (en) 2010-12-14 2017-04-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Flow cytometry analysis of materials adsorbed to metal salts
BR112013022397A2 (pt) 2011-03-02 2017-09-26 Derek O’Hagan vacinas combinadas com doses menores de antígeno e/ou adjuvante
IN2014CN02152A (ko) 2011-09-01 2015-09-04 Novartis Ag
PL2822947T3 (pl) 2012-03-07 2017-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Sole argininowe agonisty TLR7
EP2822589A1 (en) 2012-03-07 2015-01-14 Novartis AG Adjuvanted formulations of rabies virus immunogens
JP2015510872A (ja) 2012-03-07 2015-04-13 ノバルティス アーゲー Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ抗原の増強された製剤
AU2013229432A1 (en) * 2012-03-08 2014-10-16 Novartis Ag Adjuvanted formulations of booster vaccines
RU2015106930A (ru) 2012-09-06 2016-10-20 Новартис Аг Комбинированные вакцины с менингококком серогруппы в и к/д/с
MX2015005306A (es) 2012-10-25 2015-07-17 Glaxosmithkline Biolog Sa Nicotinamida como adyuvante.

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190142311A (ko) * 2016-08-26 2019-12-26 세럼 인스티튜트 오브 인디아 프라이비트 리미티드 다가 백신 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
US20180169204A1 (en) 2018-06-21
WO2012117377A1 (en) 2012-09-07
EP2680885B8 (en) 2018-07-25
CN103533954B (zh) 2015-09-09
CA2828844C (en) 2020-07-14
ES2681698T3 (es) 2018-09-14
TR201811280T4 (tr) 2018-08-27
RU2013144207A (ru) 2015-04-10
US20180256695A1 (en) 2018-09-13
US10603369B2 (en) 2020-03-31
CN103533954A (zh) 2014-01-22
AU2012222883A1 (en) 2013-10-17
EP2680885A1 (en) 2014-01-08
JP2014506916A (ja) 2014-03-20
BR112013022397A2 (pt) 2017-09-26
US20140112950A1 (en) 2014-04-24
JP6191082B2 (ja) 2017-09-06
EP2680885B1 (en) 2018-05-30
JP2017197546A (ja) 2017-11-02
CA2828844A1 (en) 2012-09-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10603369B2 (en) Combination vaccines with lower doses of antigen and/or adjuvant
AU2014204425B2 (en) Formulation of meningitis vaccines
US20180318410A1 (en) Combination vaccines with serogroup b meningococcus and d/t/p
US20200138927A1 (en) Non-cross-linked acellular pertussis antigens for use in combination vaccines
US20150125486A1 (en) Adjuvanted formulations of pediatric antigens
CA2894260A1 (en) Conjugates for protecting against diphtheria and/or tetanus

Legal Events

Date Code Title Description
WITN Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid