DE03016585T1 - NANBV-Diagnostika und Impfstoffe - Google Patents
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Abstract
Rekombinantes
Polynukleotid, das eine von HCV-cDNA abgeleitete Sequenz umfasst,
wobei sich die HCV-cDNA in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder
Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon
CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon
18g oder Klon 16jh befindet, oder wobei die HCV-cDNA eine Sequenz
aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866
in 17 angegeben wird.
Claims (34)
- Rekombinantes Polynukleotid, das eine von HCV-cDNA abgeleitete Sequenz umfasst, wobei sich die HCV-cDNA in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh befindet, oder wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird. - Rekombinantes Polynukleotid nach Anspruch 1, das für ein Epitop aus HCV kodiert.
- Rekombinanter Vektor, der das Polynukleotid nach Anspruch 1 oder 2 umfasst.
- Wirtszelle, die mit dem Vektor nach Anspruch 3 transformiert ist.
- Rekombinantes Expressionssystem, das einen aus DNA des rekombinanten Polynukleotids nach Anspruch 1 oder 2 ableiteten offenen Leserahmen (ORF) umfasst, wobei der ORF funktionell an eine mit dem gewünschten Wirt verträgliche Kontrollsequenz geknüpft ist.
- Zelle, die mit dem rekombinanten Expressionssystem nach Anspruch 5 transformiert ist.
- Polypeptid, das durch die Zelle nach Anspruch 6 gebildet wird.
- Gereinigtes Polypeptid, das ein innerhalb von HCV-cDNA kodiertes Epitop umfasst, wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird. - Immunogenes Polypeptid, das durch eine Zelle gebildet wird, die mit einem rekombinanten Expressionsvektor transformiert ist, der einen aus HCV-cDNA abgeleiteten ORF aus DNA umfasst, wobei die HCV-cDNA aus einer Sequenz besteht, die abgeleitet ist aus der HCV-cDNA-Sequenz in Klon CA279a oder Klon CA74a oder Klon 13i oder Klon CA290a oder Klon 33C oder Klon 40b oder Klon 33b oder Klon 25c oder Klon 14c oder Klon 8f oder Klon 33f oder Klon 33g oder Klon 39c oder Klon 15e, und wobei der ORF funktionell an eine mit dem gewünschten Wirt verträgliche Kontrollsequenz geknüpft ist.
- Polypeptid, welches das Peptid nach Anspruch 10 umfasst.
- An ein festes Substrat gebundenes immunogenes Polypeptid, wobei das Polypeptid Anspruch 7 oder Anspruch 8 oder Anspruch 9 oder Anspruch 10 oder Anspruch 11 entspricht oder wobei das Polypeptid ein Epitop umfasst, das innerhalb von HCV-cDNA kodiert wird, wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird. - Monoklonaler Antikörper, der gegen ein innerhalb von HCV-cDNA kodiertes Epitop gerichtet ist, wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird oder welche die in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh vorhandene Sequenz ist. - Zubereitung von gereinigten polyklonalen Antikörpern, die gegen ein Polypeptid gerichtet sind, das ein innerhalb von HCV-cDNA kodiertes Epitop umfasst, wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, oder welche die in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh vorhandene Sequenz ist. - Polynukleotidsonde für HCV, wobei die Sonde eine HCV-Sequenz umfasst, die von einer durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegebenen Sequenz oder dem Komplement der HCV-cDNA-Sequenz abgeleitet ist. - Kit zum Analysieren von Proben auf die Anwesenheit von Polynukleotiden aus HCV hin, das eine Polynukleotidsonde umfasst, die eine Nukleotidsequenz von ungefähr 8 oder mehr Nukleotiden enthält, wobei die Nukleotidsequenz von HCV-cDNA abgeleitet ist, die eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, wobei sich die Polynukleotidsonde in einem geeigneten Behälter befindet. - Kit zum Analysieren von Proben auf die Anwesenheit eines HCV-Antigens hin, das einen Antikörper umfasst, der immunologisch mit einem HCV-Antigen reagiert, wobei das Antigen ein Epitop enthält, das innerhalb von HCV-cDNA kodiert wird, die eine Sequenz aufweist, die durch die Nu kleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, oder wobei die HCV-cDNA in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CR290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh vorhanden ist. - Kit zum Analysieren von Proben auf die Anwesenheit eines HCV-Antikörpers hin, das ein antigenes Polypeptid umfasst, welches ein HCV-Epitop enthält, das innerhalb von HCV-cDNA kodiert wird, die eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, oder die in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh vorhanden ist. - Kit zum Analysieren von Proben auf die Anwesenheit eines HCV-Antikörpers hin, das ein antigenes Polypeptid umfasst, welches ausgehend von HCV-cDNA in Klon CA279a oder Klon CA74a oder Klon 13i oder Klon CA290a oder Klon 33C oder Klon 40b oder Klon 33b oder Klon 25c oder Klon 14c oder Klon 8f oder Klon 33f oder Klon 33g oder Klon 39c oder Klon 15e exprimiert wird, wobei das antigene Polypeptid in einem geeigneten Behälter vorliegt.
- Verfahren zum Nachweisen von HCV-Nukleinsäuren in einer Probe, das die Schritte umfasst: (a) Umsetzen der Nukleinsäuren der Probe mit einer Polynukleotidsonde für HCV, wobei die Sonde eine HCV-Sequenz umfasst, die von einer durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegebenen Sequenz abgeleitet ist, und wobei die Umsetzung unter Bedingungen erfolgt, welche die Bildung eines Polynukleotid-Doppelstrangs zwischen der Sonde und der HCV-Nukleinsäure aus der Probe erlauben, (b) Nachweisen eines die Sonde enthaltenden Polynukleotid-Doppelstrangs, der in Schritt (a) gebildet worden ist. - Immunoassay zum Nachweisen eines HCV-Antigens, das die Schritte umfasst: (a) Inkubieren einer Probe, von der vermutet wird, dass sie ein HCV-Antigen enthält, mit einem Antikörper, der gegen ein in HCV-cDNA kodiertes HCV-Epitop gerichtet ist, wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, oder welche die in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh vorhandene Sequenz ist, und wobei das Inkubieren unter Bedingungen erfolgt, welche die Bildung eines Antigen-Antikörper-Komplexes erlauben; und (b) Nachweisen eines in Schritt (a) gebildeten Antikörper-Antigen-Komplexes, der den Antikörper enthält. - Immunoassay zum Nachweisen von gegen ein HCV-Antigen gerichteten Antikörpern, das die Schritte umfasst: (a) Inkubieren einer Probe, von der vermutet wird, dass sie anti-HCV-Antikörper enthält, mit einem Antigen-Polypeptid, das ein in HCV-cDNA kodiertes Epitop enthält, wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, oder welche die in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh vorhandene Sequenz ist, und wobei das Inkubieren unter Bedingungen erfolgt, welche die Bildung eines Antigen-Antikörper-Komplexes erlauben; und (b) Nachweisen eines in Schritt (a) gebildeten Antikörper-Antigen-Komplexes, der das Antigen-Polypeptid enthält. - Immunoassay zum Nachweisen von gegen ein HCV-Antigen gerichteten Antikörpern, das die Schritte umfasst: (a) Inkubieren einer Probe, von der vermutet wird, dass sie anti-HCV-Antikörper enthält, mit dem Polypeptid nach Anspruch 9 unter Bedingungen, welche die Bildung eines Antigen-Antikörper-Komplexes erlauben; und (b) Nachweisen eines in Schritt (a) gebildeten Antikörper-Antigen-Komplexes, der das Antigen-Polypeptid enthält.
- Impfstoff zur Behandlung einer HCV-Infektion, der ein immunogenes Polypeptid umfasst, das ein in HCV-cDNA kodiertes HCV-Epitop enthält, wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, oder welche die in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh vorhandene Sequenz ist, und wobei das immunogene Polypeptid in einer pharmakologisch wirksamen Dosis in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger vorliegt. - Verfahren zum Herstellen von Antikörpern gegen HCV, welches das Verabreichen eines isolierten immunogenen Polypeptids, das ein in HCV-cDNR kodiertes HCV-Epitop enthält, an ein Individuum umfasst, wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, oder welche die in Klon CA279a oder Klon CA74a oder Klon 13i oder Klon CA290a oder Klon 33C oder Klon 40b oder Klon 33b oder Klon 25c oder Klon 14c oder Klon 8f oder Klon 33f oder Klon 33g oder Klon 39c oder Klon 15e vorhandene Sequenz ist, und wobei das immunogene Polypeptid in einer pharmakologisch wirksamen Dosis in einem pharmazeutisch annehmbaren Träger vorliegt. - Gegensinn-Polynukleotid, das aus HCV-cDNA abgeleitet ist, wobei die HCV-cDNR jene in
17 gezeigte ist. - Verfahren zum Herstellen von gereinigtem Fusionspolypeptid C100-3, das die Schritte umfasst: (a) Bereitstellen eines rohen Zelllysats, das Polypeptid C100-3 enthält; (b) Behandeln des rohen Zelllysats mit einer Menge Aceton, die bewirkt, dass das Polypeptid ausfällt; (c) Isolieren und Solubilisieren des ausgefällten Materials; (d) Isolieren des C100-3-Polypeptids durch Anionenaustauschchromatographie; und (e) weiteres Isolieren des C100-3-Polypeptids aus Schritt (d) durch Gelfiltration.
- Verfahren zum Herstellen eines HCV-Polypeptids, das die Schritte umfasst: (a) Bereitstellen einer Wirtszelle, die mit einem rekombinanten Expressionssystem transformiert ist, welches einen von HCV-cDNA abgeleiteten offenen Leserahmen (ORF) aus DNA umfasst, wobei sich die HCV-cDNA in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh befindet, oder wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, wobei der ORF funktionell an eine mit dem gewünschten Wirt verträgliche Kontrollsequenz geknüpft ist; und (b) Inkubieren der Wirtszelle unter Bedingungen, welche die Expression des HCV-Polypeptids erlauben. - Verfahren zum Herstellen eines immunogenen HCV-Polypeptids, das die Schritte umfasst: (a) Bereitstellen einer Wirtszelle, die mit einem rekombinanten Expressionsvektor transformiert ist, welcher einen von HCV-cDNA abgeleiteten ORF aus DNA umfasst, wobei die HCV-cDNA eine von der HCV-cDNA-Sequenz in Klon CA279a oder Klon CA74a oder Klon 13i oder Klon CA290a oder Klon 33c oder Klon 40b oder Klon 33b oder Klon 25c oder Klon 14c oder Klon 8f oder Klon 33f oder Klon 33g oder Klon 39c oder Klon 15e abgeleitete Sequenz umfasst, wobei der OEF (ORF) funktionell an eine mit dem gewünschten Wirt verträgliche Kontrollsequenz geknüpft ist; und (b) Inkubieren der Wirtszelle unter Bedingungen, welche die Expression des HCV-Polypeptids erlauben.
- Verfahren zum Herstellen einer Wirtszelle, die mit einem rekombinanten Polynukleotid transformiert ist, das eine von der HCV-cDNA in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh abgeleitete Sequenz von HCV-cDNA umfasst, oder wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, das die Schritte umfasst: (a) Bereitstellen einer zur Transformation befähigten Wirtszelle; (b) Bereitstellen des rekombinanten Polynukleotids; und (c) Inkubieren von (a) mit (b) unter Bedingungen, welche die Transformation der Wirtszelle mit dem Polynukleotid erlauben. - Verfahren zum Herstellen eines rekombinanten Polynukleotids, das eine von der HCV-cDNA in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh abgeleitete Sequenz von HCV-cDNA umfasst, oder wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird, das die Schritte umfasst: (a) Bereitstellen einer mit dem rekombinanten Polynukleotid transformierten Wirtszelle; und (b) Isolieren des Polynukleotids aus dieser Wirtszelle. - Verfahren zum Herstellen von Blut, das frei von HCV ist, das die Schritte umfasst: (a) Bereitstellen einer Blutprobe, von der vermutet wird, dass sie HCV und anti-HCV-Antikörper enthält; (b) Bereitstellen eines nach Anspruch 28 oder 29 hergestellten immunogenen Polypeptids; (c) Inkubieren der Probe aus (a) mit dem immunogenen Polypeptid aus (b) unter Bedingungen, welche die Bildung von Antikörper-HCV-Polypeptid-Komplexen erlauben; (d) Nachweisen der in Schritt (c) gebildeten Komplexe; und (e) Aufbewahren des Blutes, in welchem in (d) keine Komplexe nachgewiesen wurden.
- Verfahren zum Herstellen von Blut, das frei von HCV ist, das die Schritte umfasst: (a) Bereitstellen von Nukleinsäuren aus einer Blutprobe, von der vermutet wird, dass sie HCV-Polynukleotide enthält; (b) Bereitstellen einer Sonde für HCV, wobei die Sonde eine HCV-Sequenz umfasst, die von einer HCV-cDNA abgeleitet ist, welche eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird; (c) Umsetzen von (a) mit (b) unter Bedingungen, welche die Bildung eines Polynukleotid-Doppelstrangs zwischen der Sonde und der HCV-Nukleinsäure aus der Probe erlauben; (d) Nachweisen eines in Schritt (c) gebildeten Polynukleotids, das die Sonde enthält; und (e) Aufbewahren des Blutes, in welchem in (d) keine Komplexe nachgewiesen wurden. - Verfahren zum Herstellen eines Hybridoms, das monoklonale anti-HCV-Antikörper bildet, das die Schritte umfasst: (a) Immunisieren eines Individuums mit einem immunogenen Polypeptid, das ein in HCV-cDNA kodiertes Epitop enthält, wobei die HCV-cDNA die HCV-cDNA in Klon 13i oder Klon 26j oder Klon 59a oder Klon 84a oder Klon CA156e oder Klon 167b oder Klon pi14a oder Klon CA216a oder Klon CA290a oder Klon ag30a oder Klon 205a oder Klon 18g oder Klon 16jh ist, oder wobei die HCV-cDNA eine Sequenz aufweist, die durch die Nukleotidnummern –319 bis 1348 oder 8659 bis 8866 in
17 angegeben wird; oder (b) Immunisieren eines Individuums mit einem nach Anspruch 29 hergestellten immunogenen Polypeptid; (c) Immortalisieren Antikörper-produzierender Zellen aus dem immunisierten Individuum; (d) Auswählen einer unsterblichen Zelle, die Antikörper bildet, die mit einem HCV-Epitop in dem immunogenen Polypeptid aus (a) oder (b) reagieren; und (e) Vermehren dieser unsterblichen Zelle.
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