CH647216A5

CH647216A5 - Stabiles, mikrokristallines cis-platin.

Info

Publication number: CH647216A5
Application number: CH5865/81A
Authority: CH
Inventors: Murray Arthur Kaplan; Alphonse Peter Granatek
Original assignee: Bristol Myers Co
Priority date: 1979-10-02
Filing date: 1981-09-10
Publication date: 1985-01-15
Also published as: AT375326B; SE455469B; SE8300623L; US4302446A; CA1152289A; AU7390681A; FR2511357A1; SE8300623D0; BE890192A; JPS5832029A; JPH0313174B2; SE8104661L; DE3133443A1; ATA374981A; GB2103591B; FR2511357B1; SE450830B; US4322391A; NL8103784A; GB2103591A

Description

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf stabiles, mikrokristallines cis-Platin, auf ein Verfahren zu dessen Herstellung und auf die Verwendung des cis-Platins zur Herstellung einer Dosierungseinheit in trockener Form, die in einem so Behälter eingeschlossen und mittels sterilem Wasser innert etwa 3 min in einer Konzentration von 1 mg mikrokristallinem cis-Platin pro 1 ml sterilem Wasser zu einer für intravenöse Verabreichung an Menschen geeigneten Zubereitung gelöst werden kann, die beispielsweise als Injektionslösung 55 in der Chemotherapie von Krebs verwendet werden kann.

Die Platinverbindungen sind eine einzigartige Gruppe von Verbindungen in der antineoplastischen Gruppe von Mitteln. Zuerst wurde deren antibiotische Wirksamkeit durch Rosenberg und seine Kollegen in 1965 erkannt (Ro-60 senberg, B. et al., «Nature» (London), 205, S. 698-699 (1965)), und danach entdeckten die gleichen Autoren, dass sie in Tieren potente Antitumormittel darstellen (Rosenberg, B. et al., «Nature» (London), 222, S. 385-386 (1969)).

Strukturell stellen diese Verbindungen einen Komplex 65 dar, der aus einem zentralen Atom von Platin, umgeben von verschiedenen Anordnungen von Chloratomen oder Ammoniakgruppen in entweder einem eis- oder trans-Ebenenver-hältnis, gebildet ist. Zwei der am meisten studierten Platin-

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Verbindungen sind mit den nachstehenden Strukturformeln angegeben:

V-» X

Cl NH3 Cl NH,

ZE7 /v

C1 NH3 Cl NH3

Cl cis-Platin (Il)-diammin- cis-Platin (IV)-diammin-

dichlorid tetrachlorid

Es ist ersichtlich, dass im cis-Platin(II)-diammin-dichlorid alle Chloratome und Aminogruppen in einer einzigen Ebene liegen. Diese Verbindung, die nun unter dem «United States Adopted Name» (USAN) cis-Platin bekannt ist, wurde nach dem nachstehenden Reaktionsschema synthetisiert, wie von Kauffman, G.B. et al., in «Inorganic Synthesis», J. Kleinberg, S. 239-245, McGraw-Hill Book Co., Inc., New-York, 1963 beschrieben:

K2[PtCl4]+2NH 3 NH4C1 cis-[Pt(NH3)2Cl2]+2KC1

Von Breusova-Baidala, Y.G. et al. wird in «Akademia Nauk SSSR», Nr. 6, S. 1239-1242 (Juni 1974) die langsame Isomerisation von cis-Platin(II)-diammin-dichlorid in wässriger Lösung zur trans-Form beschrieben.

Reishus, J.W. und Martin, D.S. beschreiben in «Journal of The Americal Chemical Society», 83, S. 2457-2462 (1961) die saure Hydrolyse von cis-Platin bei 25 und 35 °C. Diese Studien wurden an wässrigen Lösungen bei Konzentrationen von 1,5 x 10-3 mol/1, 2,5 x I0~3 mol/1 und 5,0 x 10~3 mol/1, entsprechend 0,45,0,75 bzw. 1,5 mg/ml, ausgeführt. Die Autoren stellen fest, dass die Feststellung des Ausgangspunktes, d.h. des Nullpunktes, für die Hydrolysekurven etwas Schwierigkeiten bereitete, da die Versuchssubstanzen für vollständige Lösung, selbst bei diesen niedrigen Konzentrationen, 10-30 min benötigten.

Rozencweig, M. et al. erörtern in «Annais of Internal Medicine», 86, S. 803-812 (1977) die Resultate von verschiedenen vorklinischen und klinischen Untersuchungen in be-zug auf die Verwendung von cis-Platin in experimentellen Tumoren in Tieren wie auch verschiedenen Typen von Tumoren an Menschen. Sie heben hervor, dass das untersuchte Arzneimittel, das qualifizierten Forschern durch die Versuchsabteilung für Arzneimittel des Krebstherapie-Auswertungsprogramms des nationalen Krebsinstituts geliefert wird, in Form eines weissen, lyophilisierten Pulvers in Ampullen, enthaltend 10 mg cis-Platin, 90 mg Natriumchlorid, 100 mg Mannit U.S.P. und Salzsäure für die Einstellung des pH-Wertes, abgegeben wurde. Nach Lösung des Ampulleninhaltes mit 10 ml sterilem Wasser für Injektionszwecke U.S.P. enthielt die erhaltene Lösung pro 1 ml 1 mg cis-Platin, 10 mg Mannit und 9 mg Natriumchlorid.

Talley, R.W. et al. beschrieben in «Cancer Chemothera-py Reports», 57, S. 465-471 (1973) die Resultate der Phase I ihrer klinischen Studie der Verwendung von cis-Platin in der Behandlung von 65 menschlichen Patienten mit stark unterschiedlichen Neoplasmen. Wie in der vorstehend angeführten Veröffentlichung wurde ihnen das Arzneimittel durch das nationale Krebsinstitut in Ampullen, enthaltend 10 mg cis-Platin, 90 mg Natriumchlorid und 100 mg Mannit, zur Aufbereitung mit 10 ml sterilem Wasser geliefert.

Rossof, A.H. et al. beschreiben in «Cancer», 30, S. 1451-1456 (1972) die Resultate ihrer Versuche mit cis-Platin in der Behandlung von 31 menschlichen Patienten mit einer Anzahl verschiedener Typen von Tumoren. Sie stellen fest,

dass das vom nationalen Krebsinstitut bezogene Arzneimittel durch Ben Venue Laboratories, Inc. hergestellt wurde und pro Ampulle 10 mg cis-Platin, 10 mg (sie) Mannit und 9 mg (sie) Natriumchlorid enthielt, und dass das gelblich-weisse Pulver in 8-10 ml sterilem Wasser leicht löslich war.

Gewisse Informationen hinsichtlich der Chemie und pharmazeutischen Formulierung von cis-Platin sind in S. 1-5 und 31—32 der Publikation «Clinical Brochure, cis-Plati-num(II)-diamminedichloride (NSC-119875)» von H. Han-delsman et al., der Versuchsabteilung für Arzneimittel des Krebstherapie-Auswertungsprogramms des nationalen Krebsinstituts N.C.I. (revidiert August 1974) enthalten.

S. 31 und 32 beziehen sich auf die Formulierung von cis-Platin, das Klinikern für deren klinische Auswertung in der Chemotherapie von Krebs durch das N.C.I. gratis abgegeben wird, und lauten folgendermassen:

Pharmazeutisches Datenblatt NSC-119875 cis-Diammin-dichlorplatin(II)

Dosierungsformulierung

10 mg/Ampulle: Der Inhalt jeder 20 ml Quartzglasam-pulle erscheint als lyophilisierter Kuchen von gebrochener Weissfärbung. Jede Ampulle enthält 10 mg NSC-119875, 90 mg Natriumchlorid, 100 mg Mannit und Salzsäure zur Re- * gulierung des pH-Wertes.

Herstellung der Lösung

10 mg/Ampulle: Bei Lösen mit 10 ml sterilem Wasser für Injektionszwecke USP enthält jeder ml der erhaltenen Lösung 1 mg NSC-119875, 10 mg Mannit und 9 mg Natriumchlorid, und der pH-Wert der Lösung liegt im Bereich von 3,5-4,5.

Lagerung:

Die trockenen, ungeöffneten Ampullen sollen im Kühlschrank bei 4-8 "C gelagert werden.

Stabilität:

Unbeschädigte Ampullen sind bei Lagerung im Kühlschrank bei 4-8 "C während 1 Jahr lagerbeständig. Stabilitätsempfehlungen können auch Abschluss einer Studie der Lagerbeständigkeit während 2 Jahren angepasst werden. Lösung wie vorgeschlagen ergibt eine hellgelbe Lösung, die bei 22 "C und unter Einwirkung von normaler Raumbeleuchtung während nicht mehr als 1 h und bei 22 °C unter Licht-abschluss während nicht mehr als 8 h stabil ist. Nach Herstellung der Lösung kann nach 1 h Lagerung im Kühlschrank bei 4-8 "C eine Ausfallung auftreten.

Vorsichtsmassnahmen:

Die lyophilisierten Dosierungszubereitungen enthalten kein Konservierungsmittel, und es ist daher empfehlenswert, Lösungen 8 h nach deren Zubereitung zu verwerfen.

August 1974

Klinische Arzneimittel-Verteilungsabteilung Arzneimittelentwicklungsstelle

Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist das im Patentanspruch 1 definierte, stabile, mikrokristalline cis-Platin.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist das im Patentanspruch 4 definierte Verfahren zur Herstellung des stabilen, mikrokristallinen cis-Platins.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist die im Patentanspruch 9 definierte Verwendung des stabilen, mikrokristallinen cis-Platins.

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20

25

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35

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45

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55

60

65

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Besondere Ausführungsformen des erfindungsgemässen stabilen, mikrokristallinen cis-Platins sind in den Ansprüchen 2 und 3, besondere Ausführungsformen des erfindungsgemässen Verfahrens in den Ansprüchen 5-8 und besondere Ausführungsformen der erfindungsgemässen Verwendung in den Ansprüchen 10-13 definiert.

Üblicherweise ist das erfindungsgemässe mikrokristalline cis-Platin in sterilem Wasser in der angegebenen Konzentration innert 2 min löslich.

Praktische Erwägungen diktieren, dass ein Medikament, das vor der Verabreichung durch einen Doktor in Wasser gelöst werden muss, in der zweckentsprechenden Wassermenge schnell löslich sein muss, um durch längeres Schütteln durch den Doktor oder seinen Assistenten bedingten Zeitverlust zu vermeiden. Nach üblichen Herstellungsmethoden hergestelltes cis-Platin verlangt zum Lösen in einer Konzentration von 1 mg/ml, selbst wenn es vorgängig auf eine Teilchengrösse von 0,074 mm gemahlen wurde, 10-25 min. Eine gleiche Zeitdauer wird benötigt, um cis-Platin in gleicher Konzentration in einem wässrigen Medium, enthaltend 9 mg/ml Natriumchlorid und 10 mg/ml Mannit, oder um ein Gemisch von cis-Platin, Natriumchlorid und Mannit in einem Gewichtsverhältnis von 1 : 9 :10 in Wasser zu einer Konzentration von 1 mg cis-Platin pro 1 ml Lösung zu lösen.

Gegenwärtig ist cis-Platin für die Chemotherapie von Krebs im Handel unter der Handelsmarke «Platinol» erhältlich und wird in einer Dosierungseinheit in einer Ampulle in Form eines lyophilisierten Pulvers, enthaltend pro Ampulle 10 mg cis-Platin, 90 mg Natriumchlorid und 100 mg Mannit, wobei der Ampulleninhalt in 10 ml sterilem Wasser gebrauchsfertig gelöst werden muss, abgegeben. Die Aufbereitung dieses Produktes kann durch Schütteln innerhalb von 3 min ausgeführt werden. Das Herstellungsverfahren verlangt jedoch Lyophilisierung der einzelnen Ampullen einer wässrigen Lösung von cis-Platin, Natriumchlorid, Mannit und verdünnter Salzsäure, was eine teure und zeitraubende ansatzweise Methode bedingt. Industrielle Lyophilisierung von beispielsweise 40 000 Ampullen würde für deren Ab-schluss eine Behandlungsdauer von 4-6 d bedingen. Diese Methode umfasst Einsetzen der Ampullen auf Gestelle in der Lyophilisierungskammer, Einfrieren der Lösung in den Ampullen, Evakuation der Kammer bis zur vollständigen Lyophilisierung, Regulierung der Temperatur in der Kammer auf oberhalb Zimmertemperatur, um die Trocknung abzu-schliessen, Einleitung von Luft in die Kammer, Verschliessen der Ampullen und Entladen der Kammer. Eine typische sterile trockene Abfüllbehandlung unter Verwendung einer einzigen Abfüllmaschine zum trockenen Abfüllen von 200 mg Festkörper pro Ampulle ergibt anderseits etwa 40 000 gefüllte und verschlossene Ampullen pro 8 h Schicht. Da die Wasserlöslichkeit von cis-Platin nur etwa 1 mg/ml beträgt, wären ausserdem die Kosten für die Herstellung von Dosiseinheiten mit einem Gehalt von mehr als etwa 25 mg cis-Platin pro Ampulle durch Lyophilisation aufgrund des grossen zu entfernenden Wasservolumens prohibitiv. Derartige Dosierungsformen können jedoch leicht durch sterile Trockenein-füllungsmethoden hergestellt werden. Weitere Nachteile der Lyophilisierung sind beispielsweise die Möglichkeit eines Energieausfalls während der langen Herstellungsdauer, was normalerweise bedeuten würde, dass der gesamte Ansatz cis-Platin verworfen werden müsste. Auch kann während der Lyophilisierung freigesetzte Salzsäure die Lyophilisierungskammer und das Behandlungssystem korrodieren.

Sowohl das pharmazeutische Datenblatt der N.C.I. für cis-Platin wie auch das Zirkular in der offiziellen Packung des vorstehend erwähnten «Platinol» erwähnen, dass die ungeöffnete Ampulle des lyophilisierten Produktes im Kühlschrank gelagert werden muss. Stabilitätsprüfungen an mikrokristallinem cis-Platin und dieses enthaltenden Trockengemischen zeigen jedoch gute Stabilität bei Zimmertemperatur. Stabilitätsversuche mit 3 Ansätzen von mikrokristalli-5 nem cis-Platin zeigten weniger als 1 Gew.-% Verlust nach Lagerung während 3 Monaten bei 56 und 45 °C, 4 Monaten bei 37 "C und 10 Monaten bei 25 C, wenn braungefärbte Glasampullen verwendet, mit «Teflon»-beschichteten Gummistopfen verschlossen und in Kartonschachteln verpackt io wurden. Weniger als 1 Gew.-% Verlust an mikrokristallinem cis-Platin ergab sich bei Prüfung dieser Ampullen bei beschleunigter Prüfung unter Lichteinwirkung bei Zimmertemperatur während einem Monat ohne Kartonverpackung.

Es wurden auch Stabilitätsprüfungen ausgeführt mit ei-15 nem Trockengemisch, enthaltend 10 mg mikrokristallines cis-Platin, 90 mg Natriumchlorid und 100 mg Mannit, in braunen, mit «Teflon» beschichteten Gummistopfen verschlossenen Glasampullen. Die hierbei festgestellten Gewichtsverluste betrugen nach 2 und 3 Monaten Lagerung bei 20 56 und 45 °C weniger als 7 Gew.-%, nach 4 und 6 Monaten bei 37 °C weniger als 5 Gew.-% und nach 10 und 11 Monaten bei 25 "C weniger als 6 Gew.-%.

Nach dem beschriebenen Verfahren unter bevorzugten Bedingungen hergestelltes, erfindungsgemässes mikrokristal-25 lines cis-Platin enthält typischerweise keine Teilchen einer Teilchengrösse von mehr als 10 |j.m. Diese Teilchengrösse-verteilung ist von gleicher Grössenordnung wie diejenige von cis-Platin, das aus verdünnter Salzsäure lyophilisiert wurde und ist bedeutend kleiner als die typische Teilchengrösse von 30 maschinell mikronisierten Pharmazeutika. In der nachstehenden Tabelle 1 ist die mikroskopische Teilchengrösseaus-wertung von 3 Ansätzen von mikrokristallinem cis-Platin angegeben, wobei vergleichsweise ein Ansatz aus 0,07N Salzsäure lyophilisiertes cis-Platin und ein typischer Ansatz kom-35 merzielles, maschinell mikronisiertes Benzathin-Cephapirin ist.

Tabelle 1 Teilchengrösseverteilung, %

40

Material

Teilchengrösse, um

0-5

5-10 10-20 10-730

mikrokristallines cis-Platin « Nr. 759 96 4 0 -

mikrokristallines Cis-Platin 82 14 4 -Nr. 315

mikrokristallines cis-Platin Nr. 277 85 15 0

50 lyophilisiertes cis-Platin

Nr. 276 97 3 0 -

maschinell mikronisiertes

Benzathin-cephapirin

Nr. 158 11,3 85,5 - 3,4

55

Obwohl Studien der Teilchengrösseverteilung ergeben, dass die Teilchengrösse von mikrokristallinem cis-Platin von gleicher Grössenordnung ist wie diejenige von lyophilisier-60 tem cis-Platin und einfache mikroskopische Untersuchung zeigt, dass mikrokristallines cis-Platin sich in der Teilchengrösse von regulärem Masse-cis-Platin unterscheidet, ist die Situation hinsichtlich Kristallstruktur umgekehrt. Röntgen-Beugungsgitter des Pulvers zeigen, dass sich die Kristallfor-65 men von mikrokristallinem und lyophilisiertem cis-Platin klar unterscheiden, und dass mikrokristallines und reguläres cis-Platin gleiche Kristallform aufweisen, wobei geringfügige Unterschiede in den Beugungsgittern auf unterschiedliche

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Teilchengrösse (Stopfung der Kapillare und dergleichen) zurückzuführen sind. In Tabelle 2 sind die Daten der Röntgen-Beugungsgitter des Pulvers (filtrierte Cu Ka-St Strahlung, 1,54051 x 10"10 m) von regulärem, mikrokristallinem und lyophilisiertem cis-Platin zusammengefasst.

Tabelle 2

Röntgen-Beugungsgitter von verschiedenen Formen von cis-

Platin

Form des cis-Platins 2 x, relative In- Abstand der

tensität

Ebenen, x 10

reguläres cis-

13,89

100

6,370

Platin Nr. 389

15,00

49

5,901

16,30

28

5,443

24,10

11

3,690

26,84

40

3,319

28,37

18

3,143

38,30

3

2,348

lyophilisiertes-

12,51

5

7,070

cis-Platin Nr. 359

12,76

5

6,932

13,88

100

6,375

14,13

100

6,263

19,90

6

4,458

20,19

66

4,394

28,11

8

3,172

28,71

9

3,107

31,90

4

2,803

mikrokristallines

13,81

100

6,407

cis-Platin Nr. 705

14,93

84

5,929

16,26

71

5,447

24,05

27

3,697

26,57

22

3,352

28,37

16

3,143

30,35

13

2,943

33,14

15

2,701

Im nachstehenden wird die Herstellung von erfindungsge-mässem mikrokristallinem cis-Platin beispielsweise erläutert.

Reguläres Massen-cis-Platin wird zuerst in einer Lösung eines flüssigen organischen Amids und Salzsäure gelöst. Geeignete Amide sind dem Fachmann bekannt, wobei die Anforderungen auf Stabilität des Amids und genügende Löslichkeit von cis-Platin im Amid/Salzsäure-Gemisch gerichtet sind. Hierfür verwendbare Amide sind beispielsweise Form-amid, N-Methyl-, N,N-Dimethyl-, N-Äthyl-, N,N-Diäthyl-formamid, N,N-Dimethyl-, N,N-Diäthyl- und N-(2-Hydroxyäthyl)-acetamid, N-Methyl-2-pyrrolidinon und dergleichen. Bevorzugt wird die Verwendung von tertiären Amiden, wie N,N-Dialkylformamiden und -acetamiden, wovon N,N-Dimethylformamid besonders bevorzugt wird. Vorzugsweise wird in diesem Verfahren ein Amid hoher Qualität verwendet. Bei Vergleichsversuchen unter Verwendung von a) Reagensqualität DMF und b) technischem DM F geringer Qualität wurde gefunden, dass letzteres die Ausbeute an Endprodukt um etwa 4 Gew.-% herabsetzte und die für die Lösung des Produktes benötigte Zeitdauer auf etwa 5 min erhöhte.

Die volumenmässige Zusammensetzung der Amid/Salz-säure-Lösung kann in einem Bereich von 1-20 Vol.-% Salzsäure und die Konzentration der Salzsäure in einem Bereich von 6-12N variieren. Eine optimale Zusammensetzung der Amid/Salzsäure-Lösung für jedes beliebige Amid kann vom Fachmann leicht durch Routineversuche ermittelt werden. Mit dem bevorzugten N,N-Dimethylformamid wird vorzugsweise eine Amid/Salzsäure-Lösung von 90 Vol.-% Amid und 10 VoL-% Salzsäure einer Konzentration von 12N verwendet. Es ist zu beachten, dass eine zu hohe Salzsäurekonzentration zu einem Abbau von cis-Platin führen kann.

In Abhängigkeit vom jeweils verwendeten Amid und der s Zusammensetzung der Amid/Salzsäure-Lösung werden 10-60 g/1 cis-Platin in der Amid/Salzsäure-Lösung gelöst. Mit vielen Amid/Salzsäure-Lösungen könnten bedeutend mehr als 60 g/1 cis-Platin physikalisch gelöst werden, wobei jedoch gefunden wurde, dass anschliessende Kristallisation io aus Lösungen zu hoher Konzentration ein Produkt ergibt, das sich innert 3 min nicht vollständig löst. An der unteren Grenze des Konzentrationsbereichs wurde beobachtet, dass weniger als 10 g/1 cis-Platin üblicherweise eine bedeutend verminderte Ausbeute ergibt und selbstverständlich für einen i5 bestimmten Mengenanteil Endprodukt ein ungewöhnlich hohes Volumen der Lösung verlangt. Bei Einsatz der bevorzugten Lösung von DMF und Salzsäure konz. von volumen-mässig etwa 9 : 1 wird es bevorzugt, etwa 40 g/1 cis-Platin zu lösen.

20 Die Kristallisationsstufe kann in einem Temperaturbereich von 10-35 "C ausgeführt werden. Bei höherer Temperatur ist die Ausbeute aufgrund erhöhter Löslichkeit geringer. Unterhalb 10 "C wurde gefunden, dass das Endprodukt oft eine Lösungsdauer in Wasser von mehr als 3 min auf-25 weist. Es wird angenommen, dass dies darauf zurückzuführen ist, dass das Endprodukt zu schnell aus der Lösung «ausgeschreckt» wird, anstelle eines langsameren Anwachsens zu zweckentsprechendem mikrokristallinem cis-Platin. Dies ist jedoch nur eine theoretische Erwägung und bildet keinen Be-30 standteil der Erfindung. Es ist natürlich sehr zweckmässig, die Kristallisationsstufe bei Zimmertemperatur auszuführen, und da bei Zimmertemperatur im Bereich von 20-25 °C eine hervorragende Ausbeute am mikrokristallinem cis-Platin hoher Qualität erhalten wird, ist dies die bevorzugte Kristalli-35 sationstemperatur.

Die Kristallisation wird erreicht durch Mischen der Amid/Salzsäure-Lösung von cis-Platin mit dem 0,5-5fachen Volumen Wasser oder verdünnter Salzsäure einer Konzentration von bis zu 0,2N. Die Lösung von cis-Platin kann dem 40 Wasser oder der verdünnten Salzsäure zugesetzt werden oder umgekehrt. Nach jedem Vorgehen wird praktisch die gleiche Ausbeute und Qualität von mikrokristallinem cis-Platin erhalten. Das optimale Volumen an Wasser oder verdünnter Salzsäure für die Vermischung mit der Lösung von 45 cis-Platin ist sowohl vom jeweils verwendeten Amid als auch der Zusammensetzung der Amid/Salzsäure-cis-Platin-Lösung abhängig und kann für jede beliebige cis-Platin-Lösung durch Vorversuche ermittelt werden. Im allgemeinen wird bevorzugt, das l,5-2,5fache Volumen Wasser oder verso dünnter Salzsäure pro Volumen Amid/Salzsäure/cis-Platin-Lösung zu verwenden. Bei Verwendung der bevorzugten Lösung von DMF/Salzsäure konz. von volumenmässig 9 : 1, enthaltend 40 g/1 cis-Platin, wird es bevorzugt, das etwa 2fa-che Volumen Wasser oder verdünnte wässrige Salzsäure pro 55 Volumen DMF/Salzsäure/cis-Platin-Lösung einzusetzen. Es ist zu beachten, dass bei Verwendung eines zu grossen Volumens Wasser oder verdünnter wässriger Salzsäure die Neigung besteht, dass auch im Ausgangs-cis-Platin enthaltene Verunreinigungen, wie trans-Platin, auskristallisieren. 60 Wie vorstehend erwähnt, kann mikrokristallines cis-Platin aus dessen Amid/Salzsäure-Lösung durch Zusatz von Wasser oder verdünnter wässriger Salzsäure auskristallisiert werden. Die Auswahl zwischen diesen beiden ist nicht kritisch, und es wird bevorzugt, sich durch den Mengenanteil 65 und die Konzentration der in der Amid/Salzsäure/cis-Platin-Lösung enthaltenen Salzsäure leiten zu lassen. Wenn diese Lösung also einen relativ geringen Mengenanteil Salzsäure in der Nähe der unteren Grenze von etwa 1 Gew.-% 6N

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6

Salzsäure enthält, wäre die Verwendung von etwa 0,2N Salzsäure zur Erzielung der Kristallisation zu bevorzugen. Wenn entgegengesetzt die Amid/Salzsäure/cis-Platin-Lösung einen hohen Mengenanteil Salzsäure in der Nähe der oberen Grenze von 20 Gew.-% 12N Salzsäure enthält, wäre es bevorzugt, zur Erzielung der Kristallisation Wasser einzusetzen. Bei Verwendung der bevorzugten DMF/Salzsäure konz. Lösung von volumenmässig 9:1, enthaltend 40 g/1 cis-Platin wird für die Erzielung der Kristallisation vorzugsweise 0,1N Salzsäure eingesetzt.

Das erfmdungsgemässe mikrokristalline cis-Platin kann nach Sterilisation allein in einen verschlossenen Behälter, beispielsweise eine Ampulle oder Phiole, vorzugsweise in Form einer Dosierungseinheit zur Aufbereitung mit sterilem Wasser (mindestens 1 ml Wasser pro 1 mg mikrokristallines cis-Platin) zur Bildung einer für intravenöse Verabreichung geeigneten Lösung verpackt werden. Alternativ kann das mikrokristalline cis-Platin mit einer pulverförmigen, sterilen, nicht-toxischen, pharmazeutisch annehmbaren, anorganischen Quelle für Chloridionen in der in den Patentansprüchen 10 und 11 angegebenen Konzentration vermischt werden. Vorzugsweise wird als Quelle für Chloridionen Natriumchlorid eingesetzt. In einer anderen Ausführungsform kann das sterile, mikrilristalline cis-Platin mit einem pulverförmigen, sterilen, unschädlichen, physiologisch annehmbaren Träger, vorzugsweise Mannit, in der in den Patentansprüchen 12 und 13 angegebenen Konzentration vermischt werden. In einer weiteren Ausführungsform kann das sterile, mikrokristalline cis-Platin mit beiden der vorstehend genannten Zusatzmittel d.h. der Quelle für Chloridionen und dem Träger, in den angegebenen Mengenanteilen vermischt werden. Jedes dieser Trockengemische wird dann in einem verschlossenen Behälter, beispielsweise einer Ampulle oder Phiole, vorzugsweise in Form einer Dosierungseinheit zur Aufbereitung mit sterilem Wasser (mindestens 1 ml Wasser pro mg mikrokristallines cis-Platin) zur Bildung einer für intravenöse Verabreichung geeigneten Lösung, verpackt. Die genannten Trockengemische können durch einfaches trockenes Vermischen der jeweiligen Komponenten oder durch eine Nassgranulierungsmethode, die beide dem Fachmann wohlbekannt sind, hergestellt werden. Bei Nassgranulierung wird vorzugsweise ein Granulat aus allen Komponenten mit Ausnahme des cis-Platins hergestellt und letzteres nach dem Trocknen des Granulats im gewünschten Mengenanteil beigemischt.

Das erfmdungsgemässe mikrokristalline cis-Platin und Trockengemische davon sind in sterilem Wasser in einer Konzentration von mindestens 1 ml Wasser pro mg mikrokristallines cis-Platin innert 3 min leicht löslich. Die aufbereitete Lösung sollte, falls sie nicht unmittelbar verwendet wird, bei Zimmertemperatur gelagert werden. Abkühlung auf unterhalb 10"C führt zu Kristallisation von cis-Platin, das dann nicht in mikrokristalliner Form vorliegt. Dieses cis-Platin ist bei Zimmertemperatur äusserst schwierig wieder lösbar, kann jedoch durch Erwärmen auf 35-40 "C wieder gelöst werden.

cis-Platin ist eine anorganische Verbindung, von welcher zuerst die Verhinderung der Fortpflanzung von E. coli und danach Antitumor-Wirksamkeit entdeckt wurden. Das Arzneimittel übt eine störende Wirkung auf DNA-Synthese aus, indem es komplementäre Stränge von DNA zur Vernetzung bringt. Es ist wirksam auf eine Anzahl von Tumorsystemen, einschliesslich LI 210, Sarcoma 180, Walker 256 Carcinosar-coma, DMBA induzierte Tumore der weiblichen Brust und aszitische B16 Melanosarcoma. Die Verbindung ist insofern besonders interessant, da sie mit einer grossen Anzahl von heute verwendeten chemotherapeutischen Mitteln synergistische Wirkung zeigt. Grosse Toxikologiestudien an Tieren zeigten renale Tubularnecrosis, Enterocolitis, Hypoplasie des Knochenmarks und lymphoide Atrophie. Studien der Phase I ergaben die nachstehenden Toxizitäten: Myelosup-pression, renale Insuffizienz, Hochfrequenz-Ototoxizität und TI-Intoleranz. Heute eingesetzte Dosierungen mit mild bis mässig annehmbarer Toxizität sind im Bereich von 60-100 mg/m2 IV als Einzeldosis oder über 3-5 d verteilt, wiederholt mit Intervallen von 4 Wochen. Frühe klinische Versuche zeigen Reaktion auf das Arzneimittel in Keimzellentumoren, Lymphomas, Sarcomas, Brust-, Kopf- und Nacken-Carci-nomas.

Eine Dosierung von 60 mg/m2 entspricht grob etwa 1,5 mg/kg, was wiederum grob 105 mg/Patient von 70 kg Gewicht entspricht.

Das erfmdungsgemässe mikrokristalline cis-Platin oder Trockengemische davon können nach Zubereitung durch Lösen mit sterilem Wasser auf gleiche Art und für die gleichen Verwendungszwecke eingesetzt werden, wie vorstehend und in anderen Publikationen und in der umfangreichen medizinischen Literatur betreffend dieses Gebiet angegeben. Wie dort festgestellt, wird oft kombinierte Therapie mit anderen chemotherapeutischen Mitteln zur Erzielung der bestmöglichen Resultate angewendet. Gewünschtenfalls kann eine wie beschrieben erhaltene Lösung unmittelbar vor dem Gebrauch einem sterilen, pharmazeutisch annehmbaren wässrigen Verdünnungsmittel, wie Glucose oder Salzlösung, zugesetzt werden. Die Verabreichung kann entweder durch direkte intravenöse Injektion oder durch intravenöse Infusion erfolgen.

Von den hier verwendeten Handelsbezeichnungen bezieht sich «Platinol» auf cis-Platin der Bristol-Myers Co., «Darco» auf Aktivkohle der Atlas Chemical Industries und «Millipore» auf Membranfilter der Millipore Corporation.

Die nachstehenden Beispiele 1-6 beziehen sich auf die Herstellung von erfindungsgemässem mikrokristallinem cis-Platin.

Beispiel 1

Eine Lösung von 0,7 ml IN HCl und 6,3 ml Dimethyl-formamid (DMF) wurde mit 280 mg cis-Platin versetzt und das Gemisch während 1 h gerührt, wobei keine vollständige Lösung eintrat. Dann wurden zusätzliche 2 ml DMF und 0,7 ml HCl konz. zugesetzt, und die erhaltene Lösung wurde während 1 h gerührt und dann in zwei Teile aufgeteilt.

a) Einem Teil von 4,9 ml der erhaltenen Lösung wurden 20 ml 0,1 N HCl zugesetzt, und die erhaltene Ausfallung wurde während 15 min aufgeschlämmt. Die Festkörper wurden abfiltriert» mit 1,5 ml 0,IN HCl und 3 ml Aceton gewaschen und im Vakuum während 18 h bei 20 °C getrocknet. Mit 66% Ausbeute wurden 93 mg mikrokristallines cis-Platin erhalten.

Analyse nach Karl Fischer zeigte, dass das erhaltene Produkt wasserfrei war, und NMR-Analyse ergab, dass es frei von DMF und Aceton war.

Analyse für PtH0N2Cl2:

errechnet: H 2,02 N 9,34 Cl 23,63 gefunden: H 1,89 N 9,33 Cl 22,59

10 mg des erhaltenen mikrokristallinen cis-Platins wurden zusammen mit 90 mg NaCl und 100 mg Mannit in eine 17 ml Ampulle eingewogen. Das erhaltene Gemisch wurde mit 9,9 ml sterilem Wasser versetzt, und nach 1 min Schütteln wurde vollständige Lösung erzielt.

Weitere 10 mg des erhaltenen mikrokristallinen cis-Platins wurden mit 10 ml einer wässrigen Lösung von 30 mg/ 10 ml und 100 mg/10 ml Mannit geschüttelt und innert 1 min vollständig gelöst.

b) Der andere Teil von 4,8 ml der erhaltenen Lösung wurde mit 20 ml 0,1 N HCl versetzt und die erhaltene Auf-

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schliimmung während 15 min aufgeschlämmt. Dann wurden die Festkörper abfiltriert, mit 1,5 ml 0,1 N HCl und 3 ml Aceton gewaschen und während 18 h bei 20 ' C im Vakuum getrocknet. Mit 70% Ausbeute wurden 98 mg mikrokristallines cis-Platin erhalten. 10 mg des erhaltenen Produktes wurden mit 10 ml einer wässrigen Lösung von 90 mg/10 ml NaCl und 100 mg/10 ml Mannit geschüttelt und innert 1 min vollständig gelöst.

Beispiel 2

280 mg cis-Platin wurden in 7,0 ml einer durch Mischen von 0,7 ml HCl konz. und 6,3 ml DMF hergestellten DMF/ HCl-Lösung gelöst. Die Lösung wurde während 1 h gerührt und dann mit 14 ml 0,1 N HCl versetzt. Die erhaltene Ausfällung wurde während 15 min aufgeschlämmt, und dann wurden die Festkörper abfiltriert, mit 2 ml 0,1 N HCl von 0°C und 4 ml Aceton gewaschen und während 20 h bei 20 °C im Vakuum getrocknet. Mit 80% Ausbeute wurden 225 mg mikrokristallines cis-Platin erhalten. 10 mg des erhaltenen Produktes wurden mit 10 ml einer wässrigen Lösung von 90 mg/ 10 ml NaCl und 100 mg/10 ml Mannit geschüttelt und innert 3 min vollständig gelöst. Weitere 10 mg des erhaltenen mikrokristallinen cis-Platins wurden mit 90 mg NaCl und 100 mg Mannit vermischt, und das erhaltene Trockengemisch wurde in 9,9 ml Wasser innert 3 min vollständig gelöst.

Beispiel 3

210 mg cis-Platin wurden mit 3 ml einer durch Mischen von 0,3 ml HCl konz. und 2,7 ml DMF hergestellten DMF/ HCl-Lösung versetzt. Nach 1 h Rühren wurde keine vollständige Lösung erzielt, so dass weitere 0,1 ml HCl konz. und 0,9 ml DMF zugesetzt wurden. Die erhaltene Lösung wurde während 1 h gerührt und dann mit 8 ml 0,1 N HCl versetzt. Die erhaltene Ausfallung wurde während 15 min aufgeschlämmt, und dann wurden die Festkörper abfiltriert, mit 1,5 ml 0,1 N HCl und 2 ml Aceton gewaschen und während 20 h bei 20 "C im Vakuum getrocknet. Mit 77% Ausbeute wurden 162 mg mikrokristallines cis-Platin erhalten.

Beispiel 4

210 mg cis-Platin wurden in 5,25 ml einer DMF/HC1-Lösung im Volumenverhältnis 9 : 1 gelöst. Die Lösung wurde während 1 h gerührt und dann mit 10,5 ml 0,1N HCl versetzt. Die erhaltene Ausfallung wurde während 15 min aufgeschlämmt und dann wurden die Festkörper abfiltriert, mit 1 ml 0,1 N HCl und 2 ml Aceton gewaschen und während 18 h bei 20 C im Vakuum getrocknet. Mit 80% Ausbeute wurden 168 mg mikrokristallines cis-Platin erhalten. 10 mg des erhaltenen Produktes wurden mit 10 ml einer wässrigen Lösung von 90 mg/10 ml NaCl und 100 mg/10 ml Mannit geschüttelt und innert 2 min vollständig gelöst.

Weitere 10 mg des erhaltenen mikrokristallinen cis-Platins wurden mit 90 mg NaCl und 100 mg Mannit vermischt, und das erhaltene Trockengemisch war in 9,9 ml sterilem Wasser unter Schütteln in 2 min vollständig gelöst.

Beispiel 5

1,0 g cis-Platin wurde in 25 ml einer DMF/HCl-Lösung im Volumenverhältnis 9 : 1 gelöst. Die klare Lösung wurde während 1 h unter Stickstoff gerührt und dann mit 50 ml 0,1N HCl versetzt. Die erhaltene Ausfallung wurde während 15 min aufgeschlämmt, und dann wurden die Festkörper abfiltriert, mit 5 ml 0,1 N HCl von 4 C und 10 ml Aceton gewaschen. Etwa XA der Festkörper wurde während 18 h bei 40 ' C im Vakuum getrocknet, wobei 0,120 g Endprodukt erhalten wurde. Der restliche Teil der Festkörper wurde während 18 h bei 20 C im Vakuum getrocknet, wobei 0,682 g Endprodukt erhalten wurde. Mit 80% Gesamtausbeute wurde 0,802 g mikrokristallines cis-Platin erhalten.

Je 10 mg der beiden erhaltenen Endprodukte wurden in 10 ml einer wässrigen Lösung von 90 mg/10 ml NaCl und 100 mg/10 ml Mannit geschüttelt, und beide Muster waren innert 3 min vollständig löslich.

Dünnschichtchromatographie (TLC) der beiden erhaltenen Produkte zeigte in keinem irgendwelche Verunreinigungen. Hochleistungs-Flüssigchromatographie (HPLC) der beiden erhaltenen Endprodukte zeigte eine Potenz von 984 Hg/mg des bei 40 °C getrockneten Materials und eine solche von 1027 Hg/mg des bei 20 °C getrockneten Materials.

Analyse für PtH6N2Cl2:

errechnet:

H 2,02, N 9,34, Cl 23,63 getrocknet bei 40 °C, gefunden:

H 1,77, N 9,31, Cl 23,29 getrocknet bei 20 °C, gefunden:

H 1,79, N 9,21, Cl 23,13

Beispiel 6

2,5 g cis-Platin wurden in 62,5 ml einer durch Lösen von 15 ml HCl konz. in 135 ml DMF hergestellten DMF/HCl-Lösung gelöst. Die Lösung wurde während 1 h unter Stickstoff gerührt und dann mit 125 ml 0,1N HCl versetzt. Die erhaltene Ausfallung wurde während 15 min aufgeschlämmt, und dann wurden die Festkörper abfiltriert, mit 12 ml 0,1 N HCl und 25 ml Aceton gewaschen und während 18 h bei 20 "C im Vakuum getrocknet. Mit 80% Ausbeute wurden 2,0 g mikrokristallines cis-Platin erhalten. 10 mg des erhaltenen Endproduktes wurden mit 10 ml einer wässrigen Lösung von 90 mg/10 ml NaCl und 100 mg/10 ml Mannit geschüttelt und innert 2 min vollständig gelöst.

Durch gründliches Mischen von 750 mg des erhaltenen Endproduktes, 6,75 g NaCl und 7,5 g Mannit, alle mit einer Teilchengrösse von 0,074 mm, wurde eine Trockengemisch-Zubereitung hergestellt.

Herstellung von sterilem, pyrogenfreiem Natriumchlorid 18,5 g NaCl wurden in 62 ml dest. Wasser gelöst. Die erhaltene Lösung wurde mit 1,85 g Aktivkohle «Darco» KB versetzt, und das Gemisch wurde während 30 min gerührt. Dann wurde die Aktivkohle durch hartes Filterpapier abfiltriert und das Filtrat unter heftigem Rühren langsam zu 62 ml HCl konz. gegeben. Die erhaltene Ausfallung wurde während 30 min aufgeschlämmt, durch hartes Filterpapier abfiltriert und während 18 h bei 100 °C getrocknet. Mit 75% Ausbeute wurden 13,8 g Endprodukt erhalten.

Herstellung von sterilem, pyrogenfreiem Mannit 10 g Mannit wurden in 67 ml dest. Wasser gelöst mit 1,0 g Aktivkohle «Darco» KB versetzt und dann während 30 min gerührt. Das Gemisch wurde durch hartes Filterpapier filtriert und das Filtrat unter heftigem Rühren langsam zu 335 ml Aceton gegeben. Die erhaltene Ausfällung wurde während 30 min aufgeschlämmt, durch hartes Filterpapier abfiltriert und während 18 h bei 100 °C getrocknet. Mit 80% Ausbeute wurden 8,0 g Endprodukt erhalten.

Beispiel 7

Herstellung von sterilem Trockenfüllungs-cis-Platin für Injektionszwecke mit 10 mg cis-Platin pro Ampulle

A) Herstellung von sterilem, mikrokristallinem cis-Platin V orsichtsmassnahmen

Alle mit der Handhabung dieses Produktes beschäftigten Personen sollten wie folgt geschützt sein:

a) Tragen von Gesichtsmaske, Augenschutz, Handschuhen und Schutzkleidung während der Herstellung, Verarbeitung und Verpackung:

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b) Vermeiden jeglichen Kontaktes mit dem Arzneimittel durch Inhalation oder Hautberührung;

c) Gründliche Reinigung jeglicher Ausrüstung und des Arbeitsgebietes zur Entfernung einer möglichen Kontamination mit dem Arzneimittel.

Vorgehen

1. Einfüllen von 90 ml Dimethylformamid, das frei sein soll von Dimethylamin und ungefähr äquivalent in Reinheit gemäss Dimethylformamid, destilliert in Glas gemäss Burdick and Jackson Laboratories oder «Fisher Certified» (ACS) Dimethylformamid, Liste D-l 19, in einen Glasbehälter unter Stickstoff. Beginn und Beibehaltung von heftigem Rühren. Langsamer Zusatz von 10 ml Salzsäure konz. U.S.P.. Einhaltung einer Temperatur im Bereich von 20-27 C.

2. Weiterführung des heftigen Rührens der 100 ml frisch zubereiteten Lösung unter Stickstoff unter Einhaltung der Temperatur im Bereich von 20-27"C.

3. Langsame Zugabe von 4 g cis-Platin über eine Zeitspanne von 5 min. Weiterführung des heftigen Rührens unter Stickstoff während 1 h, wobei vollständige oder nahezu vollständige Lösung erfolgt.

4. Passieren der Lösung durch ein steriles 0,22 |xm «Milli-pore»-Filter unter Stickstoffdruck in einen sterilen, pyrogen-freien Glasbehälter unter aseptischen Bedingungen in steriler Umgebung.

5. Unter heftigem Rühren des Filtrats Zusatz über eine Zeitspanne von 5 min von 200 ml steriler, pyrogenfreier 0,1N Salzsäure von 20-27 "C zum Filtrat, wobei sich dichte, gelbe Mikrokristalle bilden. Weiterrühren während 15 min.

6. Isolierung der Kristalle durch Filtration unter aseptischen Bedingungen, Absaugen des Filterkuchens zu scheinbarer Trockene, ohne überschüssige Luft durch den Filterkuchen zu ziehen. Rückbehaltung des Filtrats.

7. Waschen des Filterkuchens mit 10 ml steriler, pyrogenfreier 0,1N Salzsäure von 20-27 "C. Zusatz der Waschflüssigkeit zum Filtrat aus der vorangehenden Behandlungsstufe 6. Absaugen des Filterkuchens zu scheinbarer Trockene ohne Hindurchziehen von überschüssiger Luft durch den Filterkuchen. Waschen des Filterkuchens mit 20 ml sterilem, pyrogenfreiem Aceton. Zusatz der Waschflüssigkeit zum Filtrat aus der vorangehenden Behandlungsstufe 6. Absaugen des Filterkuchens zu scheinbarer Trockene, ohne überschüssige Luft durch den Filterkuchen hindurchzuziehen. Rückbehaltung der vereinigten Filtrate. Die Rückgewinnung von cis-Platin aus dem Filtrat ist in der nachfolgenden Behandlungsstufe 9 beschrieben.

8. Entnahme und Trocknung des mikrokristallinen cis-Platins unter aseptischen Bedingungen und Abschirmung gegen Lichteinwirkung während 24 h bei 37-42 C im Hochvakuum. Ausbeute: 80-86% = 3,3-3,5 g. Lagerung der erhaltenen gelben Mikrokristalle in einem sterilen, pyrogenfreien, braunen Glasbehälter, der mit einem Schraubenverschluss aus Metall mit Dichtung aus «Teflon» oder Polyäthylen bei regulierter Zimmertemperatur unter Lichtabschluss.

9. a) Kühlung des Filtrats aus der vorangehenden Verfahrensstufe 7 unter Rühren auf 0-4 C, wobei keine aseptischen Bedingungen verlangt sind. Stehenlassen des Gemischs ohne Rühren während 48 h bei 0-4 C, wobei goldfarbene Kristalle abgelagert werden. Abfiltrieren der Kristalle und Waschen mit 20 ml Aceton, danach Trocknung der Kristalle unter Lichtabschluss während 24 h bei 37-42 C im Hochvakuum. Ausbeute: 5% = 0,2 g. Die erhaltenen Kristalle zeigen nicht die Löslichkeitseigenschaften der mikrokristallinen Form und sollten nach dem vorstehend beschriebenen Vorgehen zu mikrokristallinem cis-Platin verarbeitet werden.

b) Die im Filtrat verbliebenen Platinverbindungen können durch Abdestillieren des Wassers und Dimethylformamid rückgewonnen werden.

Eigenschaften des nach dem vorstehenden Vorgehen erhaltenen sterilen, mikrokristallinen cis-Platins

1. H.P.L.C. Befund: Einzelner Fleck nach 2,8 min Reten-tionsdauer (1028 jig/mg).

2. IR: Konsistente Struktur.

3. NMR: In T.F.A.: kein Anzeichen von Aceton oder Dimethylformamid.

4. Elementaranalyse: Konsistenz der Formel, das Produkt erscheint wasserfrei.

5. Kristallmorphologie: Bei 250facher Vergrösserung in Mineralöl unter Verwendung des Polarisationsmikroskops erscheinen die Mikrokristalle als sehr kleine Stäbchen mit spezifischer Extinktion. Das Stamm-cis-Platin erscheint als sehr grosse unregelmässige Platten von möglicherweise mehrhundertfacher Grösse der Mikrokristalle und zeigt eine Doppelbrechung des Farbspektrums.

B) Herstellung von sterilem Natriumchlorid

Vorgehen

1. Einfüllen von 90 ml sterilem Wasser für Injektionszwecke U.S.P. in einen Glasbehälter. Beginn des Rührens unter Einhaltung der Temperatur im Bereich von 20-26 ' C. Zusatz und Lösung von 27 g Natriumchlorid unter Einhaltung des Rührens bis zur vollständigen Lösung.

2. Unter fortgesetztem Rühren Zusatz von 2,7 g Aktivkohle «Darco» KB. Weiterrühren während 1 h.

3. Abfiltrieren der Aktivkohle. Waschen des Filterkuchens mit 5 ml sterilem Wasser für Injektionszwecke unter Vereinigung der Waschflüssigkeit mit dem Filtrat.

4. Passieren des Filtrats unter aseptischen Bedingungen und Stickstoffdruck durch ein steriles, pyrogenfreies 0,22 um «Millipore» Filter in einem sterilen, pyrogenfreien Glasbehälter. Die erhaltene Lösung wird mit A bezeichnet.

5. Zusatz des 5fachen Volumens von etwa 550 ml vorgängig durch ein steriles 0,22 (im «Millipore»-Filter filtriertem Aceton unter heftigem Rühren und aseptischen Bedingungen über eine Zeitspanne von 10 min zur Lösung A Alternativ kann die Lösung A auch unter heftigem Rühren zu 550 ml des vorgängig wie beschrieben filtrierten Acetons gegeben werden. Es bilden sich Kristalle.

6. Fortsetzung des Rührens bei Zimmertemperatur während 30 min.

7. Abfiltrieren der Kristalle unter aseptischen Bedingungen.

8. Waschen der Kristalle auf dem Filter mit 2 x 40 ml vorgängig wie in der vorangehenden Verfahrensstufe 5 beschrieben filtriertem Aceton.

9. Entnahme der Kristalle vom Filter und Lufttrocknung bei 115-125 "C während 24 h unter aseptischen Bedingungen. Ausbeute: 80% = etwa 21,5 g.

10. Lagerung der erhaltenen Kristalle in einem sterilen, pyrogenfreien, braunen Glasbehälter mit Schraubverschluss aus Metall mit Dichtung aus «Teflon» oder Polyäthylen.

Eigenschaften des nach dem vorstehend beschriebenen Vorgehen erhaltenen, sterilen Natriumchlorids

1. Durch NMR kein Aceton feststellbar.

2. Wassergehalt nach Karl Fisher: typisch etwa 1 Gew.-

%.

C) Herstellung von sterilem Mannit

Vorgehen

1. Einfüllen von 90 ml sterilem Wasser für Injektionszwecke U.S.P. in einen Glasbehälter. Beginn des Rührens unter Einhaltung einer Temperatur im Bereich von

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20-26 C, Zusatz und Lösen von 13,6 g Mannit unter fortgesetztem Rühren bis zur vollständigen Lösung.

2. Unter fortgesetztem Rühren Zusatz von 1,4 g Aktivkohle «Darco» KB'und Weiterrühren während 1 h.

3. Abfiltrieren der Aktivkohle und Waschen des Filterkuchens mit 5 ml sterilem Wasser für Injektionszwecke U.S.P.. Unter Vereinigung der Waschflüssigkeit mit dem Filtrat.

4. Passieren des Filtrats unter Stickstoffdruck und aseptischen Bedingungen durch ein steriles, pyrogenfreies 0,22 |im «Millipore»-Filter in einen sterilen, pyrogenfreien Glasbehälter.

5. Zusatz von 500 ml vorgängig durch ein steriles, 0,22 |xm «Millipore»-Filter filtriertem Aceton unter aseptischen Bedingungen und rapidem Rühren über eine Zeitspanne von 10 min zum Filtrat, wobei sich Kristalle bilden. Alternativ kann das Filtrat auch über eine Zeitspanne von 10 min unter heftigem Rühren zu 500 ml des vorgängig wie vorstehend beschrieben filtrierten Acetons gegeben werden. Fortsetzen des Rührens bei Zimmertemperatur während 30 min.

6. Abfiltrieren der Kristalle unter aseptischen Bedingungen.

7. Waschen der Kristalle auf dem Filter mit 2 x 20 ml vorgängig wie im vorangehenden Verfahrensschritt 5 beschrieben filtriertem Aceton.

8. Entnahme und Lufttrocknung der Kristalle während 24 h bei 100-115 C unter aseptischen Bedingungen. Ausbeute: 84% = etwa 11,4 g.

9. Lagerung der Kristalle in einem sterilen, pyrogenfreien, braunen Glasbehälter mit Schraubverschluss aus Metall mit Dichtung aus «Teflon».

Eigenschaften des nach dem vorstehend beschriebenen Vorgehen erhaltenen sterilen Mannits

1. Durch NMR kein Aceton feststellbar.

2. Wassergehalt nach Karl Fisher: typisch etwa 0,4-1 Gew.-%.

D) Herstellung eines sterilen Granulats aus Mannit und Natriumchlorid für die Verwendung in einem sterilen Trok-

kengemisch mit mikrokristallinem cis-Platin für Injektionszwecke.

Formulierung

Komponente pro Ampulle, ent- pro 10 000 Ampul-

haltend 10 mg eis- len, enthaltend je 10 Platin mg cis-Platin steriles Mannit 0,1000 g 1000,00 g steriles Natriumchlorid 0,0900 g 900,00 g steriles Wasser für In- 0,025 ml* 250,00 ml*

jektionszwecke U.S.P.

* Der Mengenanteil Wasser kann insofern variieren, als ein feuchtes Gemisch zweckentsprechender Konsistenz erhalten werden soll. Das Wasser wird während der Verarbeitung entfernt.

Vorgehen

Unter den vorstehend unter A angeführten

Vorsichtsmassnahmen a)-c)

1. Separates Mahlen des sterilen, pyrogenfreien Mannits und des sterilen, pyrogenfreien Natriumchlorids und Absieben durch ein Sieb mit 0,42 mm Maschenweite unter Verwendung von zweckentsprechender, steriler, pyrogenfreier Ausrüstung und aseptischen Bedingungen.

2. Einfüllen der erforderlichen Mengenanteile des gemahlenen sterilen, pyrogenfreien Mannits und Natriumchlorids in einen zweckentsprechenden sterilen, pyrogenfreien Mischer unter aseptischen Bedingungen, wobei ein mit einem Doppelmantel und Rührstab ausgerüsteter Vakuum V- oder Konus-Mischer erwünscht ist. Mischen während 1 h.

3. Zusatz einer genügenden Menge von sterilem, pyrogenfreiem Wasser für Injektionszwecke U.S.P. in kleinen Portionen* durch den Rührstab bei laufendem Mischer bis zur Bildung eines feuchten Gemischs zweckentsprechender Konsistenz. Nach jeder Wasserzugabe Laufenlassen des Rührstabs während 2x5 min innert einer Mischdauer von 30 min.

* Anmerkung: Der in der vorstehenden Formulierung angeführte Mengenanteil Wasser wurde in einem Vorversuch in Labormassstab ermittelt. In Abhängigkeit von der für die Herstellung grösserer Ansätze verwendeten Ausrüstung kann der zur Herstellung eines granulierbaren Gemischs zweckentsprechender Konsistenz gegenüber dem angegebenen Mengenanteil variieren.

"4. Nach Erhalt eines zweckentsprechenden, granulierbaren Gemischs, Fortsetzung des Betriebs des Mischers bei abgestelltem Rührstab und Vakuumtrocknung im Mischer unter Zirkulation von Wasser von 50-70 °C im Doppelmantel während 24 h oder bis zur Herabsetzung des Wassergehaltes unterhalb 0,3 Gew.-%. Alternativ kann das Gemisch aus dem Mischer entnommen und während 48 h bei 50-60 "C in einem sterilen «Devine»-Vakuumofen getrocknet werden.

5. Mahlen des erhaltenen getrockneten Gemischs unter aseptischen Bedingungen in einer sterilen, pyrogenfreien Mühle mit einem sterilen, pyrogenfreien Sieb einer Maschenöffnung von 0,25 mm oder Absieben durch ein solches Sieb.

6. Einfüllen des gemahlenen, sterilen Granulats in einen sterilen, pyrogenfreien Mischer und Mischen während 30 min oder bis zum Erreichen von Einheitlichkeit. Zur Überprüfung der Einheitlichkeit kann der Chloridgehalt des Pulvers mit zeitlichen Abständen ermittelt werden.

7. Einfüllen und Lagerung des Pulvers in einem sterilen, pyrogenfreien, braunen Glasbehälter mit Schraubverschluss aus Metall mit Dichtung aus «Teflon» oder Polyäthylen. Alternativ kann der benötigte Mengenanteil des sterilen Pulvers im Mischer belassen und der benötigte Mengenanteil mikrokristallines cis-Platin für die Herstellung des Gemischs für Injektionszwecke zugegeben werden.

D) Steriles Trockengemisch von cis-Platin für Injektionszwecke, enthaltend 10 mg cis-Platin pro Ampulle Auf der Produktetikette wird angegeben: 10 mg cis-

Diammin-dichlor-platin(II) (cis-Platin) pro Ampulle.

Formulierung

Komponente pro Ampulle g pro 100 Ampullen,

g

Steriles, pyrogenfreies mikrokristallines cis-Platin 0,0100* 1,00 Steriles, pyrogenfreies Natriumchlorid, Teil-

chengrösse 0,42 mm

0,0900

9,00

steriles, pyrogenfreies

Mannit, Teilchengrösse

0,1000

10,00

0,42 mm

0,2000

20,00

* Diese Einwaage cis-Platin ergibt eine Potenz von 1000 |ig/mg. Der einzusetzende Mengenanteil cis-Platin wird nach der nachstehenden Formel errechnet:

Potenz cis-Platin in ng/mg

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Vorgehen

Unter den vorstehend unter A angegebenen Sicher-heitsmassnahmen a)-c).

1. Separates Mahlen des sterilen, pyrogenfreien Mannits und des sterilen, pyrogenfreien Natriumchlorids und Absieben durch ein Sieb mit 0,42 mm Maschenweite unter Verwendung von zweckentsprechender steriler, pyro-genfreier Ausrüstung und aseptischen Bedingungen.

2. Mischen der benötigten Mengenanteile des gesiebten, sterilen, pyrogenfreien Natriumchlorids und Mannits in zweckentsprechender steriler, pyrogenfreier Mischeinrichtung während I h, wofür ein mit einem Rührstab ausgerüsteter V- oder Konus-Mischer erwünscht ist.

3. Durchtreiben des mikrokristallinen cis-Platins durch ein steriles Sieb mit 0,42 mm Maschenweite zur Beseitigung allfälliger Klumpen. Zusatz des benötigten Mengenanteils von sterilem, pyrogenfreiem, mikrokristallinem cis-Platin in den das Gemisch der vorausgehenden Verfahrensstufe 2 enthaltenden Mischer (oder der vorstehend unter D in Verfahrensstufe 7 erwähnten Gra-nulierungsstufe mit zeitlichen Abständen in drei etwa gleich grossen Teilportionen. Mischen während 30 min nach jeder Portionenzugabe. Durchtreiben des erhaltenen Gemischs durch ein steriles Sieb mit 0,42 mm Maschenweite und Rückführung in den Mischer. Mischen während 30 min oder länger bis zum Erreichen eines ein-5 heitlichen Gemischs.

4. Einfüllen des erhaltenen Gemischs in sterile, pyro-genfreie, braune Glasbehälter mit Schraubverschluss aus Metall mit Dichtung aus «Teflon». Lagerung der gefüllten Behälter unter Lichtabschluss im Dunkeln, io 5. Einfüllen der benötigten Mengenanteile des Gemischs in sterile, pyrogenfreie braune Glasampullen. Verschliessen der gefüllten Ampullen mit sterilen, pyrogenfreien mit «Teflon» beschichteten Gummistopfen, die mit Aluminiumkapseln fixiert werden. Lagerung der Amis pullen unter Lichtabschluss im Dunkeln.

6. Der 10 mg cis-Platin enthaltende Ampulleninhalt muss für den Gebrauch mit nicht weniger als 10 ml sterilem Wasser für Injektionszwecke U.S.P. bei 22-30 °C gelöst werden. Eine klare Lösung mit einem pH-Wert von 20 4,0-5,5 soll unter Schütteln innert 3 min erhalten werden. Lösungen von cis-Platin einer Konzentration von mehr als 0,5 mg/ml sollen nicht gekühlt werden, da aus der Lösung cis-Platin auskristallisieren würde.

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Claims

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PATENTANSPRÜCHE

1. Stabiles, mikrokristallines cis-Platin, dadurch gekennzeichnet, dass es eine TeilchengrössenVerteilung von mindestens 80% Teilchen einer Teilchengrösse von weniger als

5 |am, weniger als 20% der Teilchen einer Teilchengrösse im Bereich von 5-20 (im und praktisch keinen Teilchen einer Teilchengrösse von mehr als 20 um aufweist, dass die kristalline Form des mikrokristallinen cis-Platins leicht von derjenigen von lyophilisiertem cis-Platin anhand des Röntgen-Beugungsgitters des Pulvers unterschieden werden kann, und dass das mikrokristalline cis-Platin innert etwa 3 min in einer Konzentration von 1 mg/ml vollständig wasserlöslich ist.
2. Mikrokristallines cis-Platin nach Anspruch 1, gekennzeichnet durch das nachstehende Röntgen-Beugungsgitter des Pulvers:

2 t," relative Intensität Abstand der Ebenen,

x 10~10 m

13,81

100

6,407

14,93

84

5,929

16,26

71

5,447

24,05

27

3,697

26,57

22

3,352

28,37

16

3,143

30,35

13

2,943

33,14

15

2,701
3. Mikrokristallines cis-Platin nach Anspruch 1 oder 2, da durch gekennzeichnet, dass es in steriler Form vorliegt.
4. Verfahren zur Herstellung von mikrokristallinem cis-Platin nach Anspruch 1, gekennzeichnet durch die nachstehenden, aufeinanderfolgenden Verfahrensschritte:

a) Herstellung einer ersten Lösung von einem flüssigen organischen Amid, enthaltend l-20Vol.-% wässrige, 6-12N Salzsäure,

b) Lösen von 10-60 g/1 cis-Platin in der ersten Lösung zur Bildung einer zweiten Lösung,

c) Mischen der zweiten Lösung bei 10-40 °C unter Rühren oder Schütteln mit dem 0,5-5fachen Volumen Wasser oder verdünnter wässriger Salzsäure einer Konzentration bis zu 0,2N zur Bildung von mikrokristallinem cis-Platin,

d) Gewinnung des mikrokristallinen cis-Platins durch Filtration,

e) Waschen des abfiltrierten mikrokristallinen cis-Platins mit Wasser oder verdünnter wässriger Salzsäure einer Konzentration von bis zu 0,2N.
5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass man das erhaltene mikrokristalline cis-Platin mit einem nicht reaktiven, mit Wasser mischbaren, flüchtigen organischen Lösungsmittel, vorzugsweise einem niederen Alkanol oder einem Di-niederalkyl-keton wäscht und danach gegebenenfalls trocknet.
6. Verfahren nach Anspruch 4 oder 5, dadurch gekennzeichnet, dass man im Verfahrensschritt a) als flüssiges organisches Amid ein tertiäres Amid, vorzugsweise ein N,N-Dialkylformamid oder -acetamid oder N-Methyl-2-pyrroli-dinon, verwendet.
7. Verfahren nach einem der Ansprüche 4-6, dadurch gekennzeichnet, dass man im Verfahrensschritt a) 5-15 Vol.-% 12N Salzsäure einsetzt, im Verfahrensschritt b) das cis-Platin in einer Konzentration von 40 g/1 löst, und im Verfahrensschritt c) die zweite Lösung bei Zimmertemperatur mit dem

0,75-2,5fachen Volumen Wasser oder verdünnter wässriger Salzsäure löst.
8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass man im Verfahrensschritt a) eine Lösung von Dimethyl-

5 formamid, enthaltend 10 Vol.-% wässrige Salzsäure einer Konzentration von 12N herstellt, im Verfahrensschritt c) die zweite Lösung mit dem zweifachen Volumen verdünnter wässriger Salzsäure einer Konzentration von 0,1N vermischt und im Verfahrensschritt e) das gewonnene mikrokristalline io cis-Platin mit wässriger Salzsäure einer Konzentration von 0,1N wäscht.
9. Verwendung von stabilem, mikrokristallinem cis-Platin nach Anspruch 1 zur Herstellung einer Dosierungseinheit in trockener Form, die in einem Behälter eingeschlos-

i5 sen und mittels sterilem Wasser innert etwa 3 min in einer Konzentration von 1 mg mikrokristallinem cis-Platin pro 1 ml sterilem Wasser zu einer für intravenöse Verabreichung an Menschen geeigneten Zubereitung gelöst werden kann.
10. Verwendung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeich-20 net, dass man das trockene mikrokristalline cis-Platin mit einer pulverförmigen, sterilen, nicht-toxischen, pharmazeutisch annehmbaren, anorganischen Quelle für Chloridionen in einem äquivalenten Mengenanteil, der durch die Anwesenheit von 1-20 mg Natriumchlorid pro 1 mg mikrokristal-

25 linem cis-Platin entspricht, vermischt.
11. Verwendung nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, dass man als anorganische Quelle für Chloridionen Natriumchlorid, vorzugsweise in einer Konzentration von

9 mg pro 1 mg mikrokristallinem cis-Platin, verwendet. 30 12. Verwendung nach einem der Ansprüche 9-11, dadurch gekennzeichnet, dass man das trockene, mikrokristalline cis-Platin mit einem pulverförmigen, unschädlichen, physiologisch annehmbaren Träger in einer Konzentration ■ von 2-150 mg pro 1 mg mikrokristallines cis-Platin ver-35 mischt.
13. Verwendung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass man als Träger Mannit, vorzugsweise in einer Konzentration von 10 mg pro 1 mg mikrokristallines cis-Platin, verwendet.

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