FI72302B - Foerfarande foer framstaellning av stabilt mikrokristallint ciplatin - Google Patents

Description

72302

Menetelmä pysyvän mikrokiteisen cisplatiinin valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää pysyvän, nopeasti liukenevan mikrokiteisen cisplatiinin valmistamiseksi. Näin val-5 mistettua cisplatiinia sisältäviä kuivaseoskoostumuksia käytetään rekonstituoituina steriilin veden kanssa injektioval-misteina syövän kemoterapiässä.

Platinayhdisteet muodostavat ainutlaatuisen neoplastis-ten aineiden yhdisteryhmän. Vuonna 1965 Rosenberg et ai. en- 10 simmäisenä havaitsivat niillä olevan aintibiottivaikutusta (Rosenberg, B. et ai., Nature (Lontoo), 205, 698-699 (1965), ja myöhemmin Rosenberg et ai. havaitsivat niiden olevan voimakkaasti vaikuttavia kasvaintenvastaisia aineita eläimillä /"(Rosenberg, B. et ai., Nature (Lontoo), 222, 385-386 (1969 )_7.

15 Rakenteeltaan nämä yhdisteet ovat kompleksiyhdisteitä, joissa keskellä olevaa platina-atomia ympäröi tason suhteen joko cis- tai transasemassa erilailla järjestyneinä kloori-atomeja ja ammoniakkiryhmiä„ Kaksi eniten tutkittua platina-yhdistettä ovat seuraavat: 20 C1 C1 NH3 Cl j NH3 zv Δ/

Cl NH, ^ lm3 25 Cl

Cis-platina (II) diammiini- Cis-platina (IV) diammiini- dikloridi tetrakloridi

Kuten voidaan havaita, cis-platina (II) diammiinidiklo-ridin kaikki klooriatomit ja aminoryhmät ovat samassa tasossa.

30 Tämä yhdiste, joka USAN-nimitys (United States Adopted Name) on cisplatiini, on syntetisoitu seuraavasti: NH .Cl 4 K2ZPtCl47 + 2NH3 -> cis-/Pt (NH3) 2Cl27 + 2KC1 35 Breusova-Baidala, Y.G. et ai. /Akademia Nauk SSSR, no.

6, s. 1239-1242 (kesäkuu 1974) käsittelevät cisplatina(II)-diamiinidikloridin hidasta isomeroitumista vesiliuoksessa transmuotoon.

2 72302

Reishus, J.W ja Martin, D.S [Journal of The American Chemical Society, 83, 2457-2462 (1961)} kuvaavat cispla-tiinin hapanta hydrolyysiä 25°C:ssa ja 35°C:ssa. Nämä tutkimukset suoritettiin vesiliuoksissa konsentraatioissa 1,5 x -3 -3 -3 5 10 -m, 2,5 x 10 -m ja 5,0 x 10 -m, jotka vastaavat kon- sentraatioita 0,45, 0,75 ja 1,5 mg/ml. Tutkimuksen suorittajat ilmoittavat, että hydrolyysikäyrien lähtökohdan ("nollapiste") paikallistamisessa oli jonkin verran epäselvyyttä, koska näytteiden täydelliseen liukenemiseen näinkin alhaiso sissa konsentraatioissa tarvittiin 10-30 minuuttia.

Rozencweig, M. et ai.[Annals of Internal Medicine, 86, 803-812 (1977)] esittävät yhteenvedon useista esikliini-sistä ja kliinisistä tutkimuksista koskien cisplatiinin käyttöä eläimillä keinotekoisesti aikaansaatuja kasvaimia vastaan ^5 ja eri tyyppisiä ihmisten kasvaimia vastaan. He ilmoittavat käyttäneensä tutkimuksiin kvalifioiduille tutkijoille myönnettävää (toimittaja: Investigational Drug Branch of the

Cancer Therapy Evaluation Program of the Cancer Institute) valkoista lyofilisoitua jauhetta, joka koostui 10 mg:sta cispla-20 tiinia, 90 mg:sta natriumkloridia, 100 mgrsta mannitolia (U.S.P.) sekä kloorivetyhaposta pH:n säätämiseen. Rekonstruoituna 10 ml:lla steriiliä, injektiotarkoituksiin sopivaa vettä (U.S.P.) saatiin liuos, joka sisälsi ml:aa kohti 1 mg cisplatiinia, 10 mg mannitolia ja 9 mg NaCl.

25 Talley, R.W. et ai. [Cancer Chemotherapy Reports, 57, 465-471 (1973)] kuvaavat suorittamiaan vaiheen I kliinisiä tutkimuksia, joissa he käyttivät cisplatiinia 65 ihmispoti-laalle, joilla oli eri laatuisia syöpäkasvaimia. Kuten edellisessä tapauksessa lääkettä toimitti National Cancer Institute 30 lääkepulloissa, jotka sisälsivät 10 mg cisplatiinia, 90 mg natriumkloridia ja 100 mg mannitolia, joka seos rekonstituoitiin lisäämällä 10 ml steriiliä vettä.

Rossof, A.H. et ai. [Cancer, 30, 1451-1456 (1972)] kuvaavat cisplatiinilla saamiansa tuloksia 31 ihmispotilaan kä-35 sittelyssä, joilla oli erilaisia kasvaintyyppejä. He ilmoittavat, että lääkkeen, jonka toimitti National Cancer Institute, oli valmistanut Ben Venue Laboratories, Inc., ja että se sisälsi lääkepulloa kohti 10 mg cisplatiinia, 10 mg (sic) mannitolia 1! 3 72302 ja 9 mg (sig) NaCl:ia ja että tämä kellertävänvalkoinen jauhe liukeni helposti 8-10 ml:aan steriiliä vettä.

Cisplatiinin kemiaa ja farmaseuttisia koostumuksia koskevia tietoja on julkaisun "Clinical Brochure, Cis-Plati-5 num (II) diamminedichloride (NSC-119875)", H.Handelsman et ai., Investigational Drug Branch, Cancer Chemotherapy Evaluation Program, Division of Cancer Treatment, National Cancer Institute (uudelleen toimitettu elokuussa 1974) sivuilla 1-5 ja 31-32. Sivuilla 31 ja 32 käsitellään N.C.Irn 10 kliinisiin tutkimuksiin ilmaiseksi annettavaa cisplatiinival-mistetta ja sen kliinistä arviointia syövän kemoterapiassa seuraavasti:

Farmaseuttisia tietoja: NSC-119875 Cis-Diammiinidiklooriplatina (II)

Annostuskoostumua 10 mg/lääkepullo: 20 ml:n kvartsilasipullossa oleva lyo- filisoitu tuote on lähes valkoisena kakkuna. Jokainen pullo sisältää 10 mg 20 NSC-119875, 90 mg NaCl, 100 mg mannito-lia ja kloorivetyhappoa pH:n säätämiseen.

Liuoksen valmistaminen 10 mg/lääkepullo: Rekonstituoituna 10 ml:11a steriiliä, 2t- injektiotarkoituksiin sopivaa vettä (USP) saadun liuoksen jokainen ml sisältää 1 mg NSC-119875, 10 mg mannitolia ja 9 mg NaCl, ja liuoksen pH on 3,5-4,5. Säilytys: Kuivia, avaamatttomia lääkepulloja tulisi 2q säilyttää jääkaappilämpötilassa (4-8°C).

Pysyvyys: Avaamattomia lääkepulloja voidaan alusta vien tutkimusten mukaan säilyttää 1 vuoden ajan jääkaappilämpötilassa (4-8°C). Pysyvyyssuosituksia saatetaan muuttaa, kun 2 vuoden säilytystä koskeva tutkimus on saatettu loppuun. Reakonstituoimalla suositetulla tavalla saadaan vaaleankel- 4 72302 täinen liuos, joka on huoneen lämpötilassa (22°C) ja normaalissa huone-valaistuksessa pysyvä korkeintaan tunnin ajan ja valolta suojattuna 5 huoneen lämpötilassa (22°C) korkein taan 8 tuntia. Reakonstituoiduissa liuoksissa saattaa muodostua sakkaa tunnin säilytyksen aikana jääkaappi-lämpötilassa (4-8°C).

10 Varotoimet; Lyofilisoidut annoskoostumukset eivät sisällä säilöntäainetta, joten liuokset on syytä hävittää 8 tunnin kuluessa rekonstruoinnista.

Elokuu 1974 15 Clinical Drug Distribution Section Drug Development Branch

Keksinnön mukaisella menetelmällä saadaan cisplatiinin pysyvä mikrokiteinen muoto, joka liukenee nopeasti veteen. Tämän mikrokiteisen cisplatiinimuodon pysyvä kuivaseos so-20 veltuu steriilillä vedellä rekonstituoituna suonensisäiseen lääkeantoon ihmisille. Tämä kuivaseos sisältää valinnaisesti kloridi-ionien steriiliä, myrkytöntä, farmaseuttisesti hyväksyttävää epäorgaanista lähdettä määränä, joka aikaansaa konsentraation, joka vastaa natriumkloridin lisäyksellä 1 -25 noin 20 mg, edullisesti noin 9 mikrokiteisen cisplatiiniin mg:aa kohti aikaansaatua konsentraatiota; lisäksi kuivaseos sisältää valinnaisesti tavanomaista, haitatonta, fysiologisesti hyväksyttävää täyteainetta, joka on edullisesti manni-toli, noin 2 - noin 150 mg, edullisesti noin 10 mg mikroki-30 teisen cisplatiinin mg:aa kohti; tämä kuivaseos on täysin liukeneva steriiliin veteen noin 3 minuutin kuluessa (tavallisesti noin 2 minuutissa) pitoisuudeksi 1 mg mikrokiteistä cisplatiinia/ml steriiliä vettä.

Keksinnön mukaisesti valmistetun pysyvän mikrokiteisen 35 cisplatiinin kuivaseos voidaan toimittaa pakattuna steriilis-ti tiiviisti suljettuun astiaan, kuten ampulliin tai lääke-pulloon, ykkösannosmuodossa, joka sopii nopeasti reskontuoi- 5 72302 tavaksi steriilillä vedellä ja sellaisena suonensisäiseen lääkeantoon ihmisille. Tälle kuvaseoskoostumukselle on tunnusomaista, että se sisältää rekonstituointiin käytettävän veden ml:aa kohti noin 0,1 - noin 1 mg, edullisesti noin 1 mg 5 steriiliä mikrokiteistä cisplatiinia ja valinnaisesti rekonstruoitiin käytettävän steriilin veden ml:aa kohti steriiliä, myrkytöntä, farmaseuttisesti hyväksyttävää epäorgaanista kloridi-ionilähdettä määränä, joka vastaa noin 1 - noin 20 mg:aa, edullisesti noin 9 mg:aa natriumkloridia, ja että 10 kuivaseos valinnaisesti sisältää rekonstituointiin käytettävän steriilin veden ml:aa kohti noin 2 - noin 150 mg, edullisesti noin 10 mg tavanomaista, haitatonta, fysiologisesti hyväksyttävää täyteainetta, edullisesti mannitolia, ja että tämä kuivaseos on täysin liukeneva steriiliin veteen noin 3 15 minuutissa (tavallisesti noin 2 minuutissa) konsentraatioksi 1 mg mikrokiteistä cisplatiinia/ml steriiliä vettä.

Keksinnön kohteena olevalle menetelmälle on tunnusomaista, että a) valmistetaan ensimmäinen liuos, joka sisältää neste-20 mäisessä orgaanisessa amidissa noin 1 - noin 20 tilavuus-% vesipitoista kloorivetyhappoa, jonka konsentraatio on noin 6 mol/1 - noin 12 mol/1, b) liuotetaan cisplatiinia ensimmäiseen liuokseen noin 10 - noin 60 g ensimmäisen liuoksen litraa kohti, jolloin 25 saadaan toinen liuos, c) toiseen liuokseen lisätään sekoittaen noin 0,5 -noin 5 tilavuusosaa vettä tai laimeata vesipitoista kloorivetyhappoa, jonka konsentraatio on korkeintaan noin 0,2 mol/1, lämpötilassa noin 10 - noin 40°C, jolloin muodostuu 30 mikrokiteistä cisplatiinia, d) mikrokiteinen cisplatiini otetaan talteen suodattamalla, e) talteenotettu mikrokiteinen cisplatiini pestään vedellä tai vesipitoisella kloorivetyhapolla, jonka konsentraa- 35 tio on korkeintaan noin 0,2 mol/1.

6 72302 f) mikrokiteinen cisplatiini pestään mahdollisesti lisäksi inertillä, veden kanssa sekoittuvalla, haihtuvalla orgaanisella liuottimena, ja g) pesty mikrokiteinen cisplatiini mahdollisesti kui-5 vataan.

Käytännön syistä on tärkeätä, että ennen lääkärin suorittamaa lääkeantoa vedellä rekonstituoitava lääke liukenee nopeasti sopivaan vesimäärään, jotta lääkärin tai hänen avustajansa aikaa ei kuluisi hukkaan valmistetta ravistettaessa. 10 Tavallisella valmistusmenetelmällä valmistetun cisplatiinin liuottamiseen veteen konsentraatioksi 1 mg/ml tarvitaan tyypillisesti 10-25 minuuttia, vaikka valmiste olisi etukäteen seulottu raekokoon 200 mesh. Yhtä pitkä aika tarvitaan cisplatiinin liuottamiseen samassa konsentraatioissa vesipitoi-15 seen väliaineeseen, joka sisältää 9 mg/ml natriumkloridia ja 10 mg/ml mannitolia, tai cisplatiinin, natriumkloridin ja mannitolin seoksen painosuhteessa 1:9:10) liuottamiseen veteen cisplatiinin konsentraatioksi 1 mg/ml.

Cisplatiinia on nykyisin kaupallisesti saatavana käytet-20 täväksi syöpäterapiassa nimellä "Platinoi”. Se on lyofilisoi-tua jauheen yksikköannoksina pakattuna lääkepulloihin, joista jokainen sisältää 10 mg cisplatiinia, 90 mg natriumkloridia ja 100 mg mannitolia, ja se on tarkoitettu rekonstruoitavaksi 10 ml :11a steriiliä vettä. Tämän tuotteen rekonstituointi 25 saattaa tapahtua ravistelemalla kolmessa minuutissa. Tuotteen valmistus tapahtuu lyofilisoimalla erillisissä lääkepullois-sa cisplatiinin, natriumkloridin, mannitolin ja laimean HCl:n vesiliuokset, mikä on kallis ja aikaavievä, panoksittain tapahtuva menetelmä. Esimerkiksi 40 000 lääkepullon kaupalli-30 sessa mittakaavassa tapahtuvaan lyof ilisointiin kuluu aikaa noin 4-6 vrk. valmistus käsittää lääkepullojen täyttämisen kaapin hyllyillä, liuosten jäädyttämisen, kaapin evakuoinnin, kunnes lyofili-sointi on tapahtunut täydellisesti, kaapin lämpötilan säätämisen huoneen lämpötilaa korkeammaksi täydellisen kuivumisen 35 aikaansaamiseksi, ilman päästämisen kaappiin, pullojen sulkemisen ja kaapin tyhjentämisen. Toisaalta tyypillisessä 7 72302 steriilissä kuivan aineen täytössä käyttäen yhtä täyttöko-netta ja täytettäessä 200 mg kiinteätä jauhetta kuhunkin lääke-pulloon voidaan 8 tunnin työvuorossa täyttää ja sulkea 40 000 lääkepulloa. Lisäksi cisplatiinin liukoisuuden ollessa vain 5 noin 1 mg/ml sellaisten annosyksikkömuotojen valmistus, jotka sisältävät yli noin 25 mg cisplatiinia lääkepulloa kohti, on liian kallista poistettavan suuren vesimäärän vuoksi. Tällaisia annosyksikkömuotoja voidaan kuitenkin helposti valmistaa steriilillä kuivatäyttömenetelmällä. Lyofilisoitiin liitty-10 vistä epäkohdista on lisäksi mainittava mahdollinen sähkö-katkos pitkän valmistusvaiheen aikana, mikä normaalisti aiheuttaisi koko cisplatiinierän hylkäämisen. Lyofilisoinnin aikana poistuva HC1 saattaa myös syövyttää lyofilisointikaap-pia ja -systeemiä.

15 Edellä käsitellyt julkaisut N.C.I. Pharmaceutical Data

Sheet for Cisplatin ja Official Package Circular for Platinoi (cisplatin) esittävät, että lyofilisoitua tuotetta sisältävää avaamatonta lääkepulloa tulee säilyttää jääkaappilämpötilassa. Mikrokiteisellä cisplatiinilla ja sen kuivajauhekoostumuksil-20 la on pysyvyyskokeissa todettu olevan hyvä pysyvyys huoneen lämpötilassa. Kolmella eri cisplatiinierällä tehdyissä pysyvyyskokeissa saatiin tulokseksi, että 3 kuukauden säilytyksessä 56°C:ssa ja 45°C:ssa, 4 kuukauden säilytyksessä 37°C:ssa ja 10 kuukauden säilytyksessä 25°C:ssa häviö oli alle 1 %, 25 kun tuote oli pakattu ruskeisiin lasipulloihin, jotka oli suljettu tiiviisti teflonpäällysteisillä kumitulpilla ja pullot pakattu kartonkipakkauksiin. Mikrokiteisen cisplatiinin häviö oli alle 1,7 %, kokeessa, jossa cisplatiini oli pakattu ruskeisiin lasipulloihin, jotka oli suljettu teflon-30 päällysteisillä kumitulpilla ja pulloja säilytettiin karton-keihin pakkaamattoman valon vaikutukselle alttiina huoneen lämpötilassa.

Myös mikrokiteisen kuivaseoskoostumuksilla suoritettiin pysyvyyskokeita; koostumukset sisälsivät 10 mg mikrokiteistä 35 cisplatiinia, 90 mg natriumkloridia ja 100 mg mannitolia, ja 8 72302 ne oli pakattu ruskeisiin lääkepulloihin, jotka oli suljettu teflonpäällysteisillä kumitulpilla. Vaikuttavan aineen väheneminen 2 ja 3 kuukauden säilytyksessä 56°C:ssa ja 45°C:ssa oli alle 7 %, 4 ja 6 kuukauden säilytyksessä 37°C:ssa alle 5 5 % ja 10 ja 11 kuukauden säilytyksessä 25°C:ssa alle 6 %.

Keksinnön mukaisesti valmistetulla mikrokiteisella cis-platiinilla on raekokojakautuma, jossa vähintään noin 80 % rakeista on kokoa 0-5yum ja alle noin 20 % on kokoa 5-20yum eikä olennaisesti lainkaan rakeita ole kokoa yli 20yum. Kun 10 mikrokiteinen cisplatiini valmistetaan edullista valmistustapaa noudattaen, ei siinä ole lainkaan yli 10yum rakeita.

Tämä raekokojakautuma on samaa suuruusluokkaa kuin lyofili-soimalla laimeasta kloorivetyhaposta valmistetun cisplatiinin raekokojakautuma ja on merkitsevästi pienempi kuin tyypillinen 15 mekaanisesti jauhetun lääkeaineen raekokojakautuma. Seuraa- vassa taulukossa 1 on kolmen mikrokiteisen cisplatiinierän mikroskooppi sesti määritelty raekokojaukautuma sekä yhden lyofi-lisoimalla valmistetun cisplatiinin (0,07-n HCl:stä) ja tyypillisen kaupallisen mekaanisesti jauhetun bentsatiinikefa-20 piriinierän raekokojaukautuma.

Taulukko 1

Raekokojakautuma (%) 25p--η

Materiaali un 0-5 5-10 10-20 10-730

Mikrokiteinen cisplatiini (no. 759) 96___4__0____

Mikrokiteinen cisplatiini (no. 315) 82 14__4____

Mikrokiteinen cisplatiini (no. 277) 85 15___0_____

Lyofilisoitu cisplatiini (no. 276) 97__3__0__—-_

Mekaanisesti jauhettu bentsatiini- 11,3 85,5 - 3,4 kefapiriini (no. 158) il· 35 9 72302

Vaikka raekokojaukautumatutkimuket osoittavat, että mikrokiteisen cisplatiinin raekoko on samaa suurussluokkaa kuin lyofilisoidun cisplatiinin, yksinkertainen mikroskoppi-tutkimus osoittaa mikrokiteisen cisplatiinin raekokonsa puo-5 Iestä eroavan selvästi tavallisesta massatavarasta, niin kide-rakennetutkimukset osoittavat selvimmän eron. Mikrokiteisen cisplatiinin ja lyofilisoidun cisplatiinin röntgensädejauhe-diffraktiomallit osoittavat, että niiden kiderakenteet ovat selvästi erilaisia ja että mikrokiteisellä cisplatiinilla ja 10 tavanomaisella cisplatiinilla on sama kidemuoto (vähäisiä eroja diffraktiomallissa havaitaan raekoon johdosta ja erilaisen kapillaarin täytön johdosta jne. Taulukossa 2 on esitetty tavallisen cisplatiinin, mikrokiteisen cisplatiinin ia lyofilisoidun cisplatiinin röntgensädejauhediffraktiotutki-15 musten tulokset (CuKa-säteily, 1,54051 A).

10 72302

Taulukko 2

Cisplatiinin eri muotojen röntgen-sädetutkimukset Näyte 2 'ty' Suhteellinen Kidetasojen (asteita) intensiteetti etäisyydet -J.-----(Ä)____ 13.89 100 6.370

Tavallinen 15.00 49 1 ^ ! cisplatiini . , ,ft 1 (no. 389, U·30 24·10 11 3.690 26.84 40 3.319 28.37 18 3.143 38,30 3 2.348 12,51 5 7.070

Lyofilisoitu i-j 7<: «.

. 1 .· 5 6.932 cisplatiini (no. 359) 13.88 100 6.375 14,13 100 6.263 19.90 6 4.458 20,19 66 4.394 28,11 8 3.172 28,71 9 3.107 31.90 4 2.803 13.81 100 6.407

Mikrokiteinen ..... 14.93 84 5929 cisplatiini (no. 705) 16.26 71 5.447 24.05 27 3.697 26.57 22 I 3.353 23.37 16 i 3.143 30·35 12 f 2.943 ___33,14 15 2.701 11 72302

Keksinnön mukaisessa mikrokiteisen cisplatiinin valmistuksessa tavallinen(massatavara) cisplatiini liuotetaan ensin nestemäiseen orgaaniseen amidiin ja kloorivetyhappoon. Sopiva amidi on alan asinatuntijalle selvä, kun sille ase-5 tetut vaatimukset ovat pysyvyys ja cisplatiinin riittävä liukoisuus amidi-HCl-seokseen. Sopivia amideja menetelmässä käytettäviksi ovat esimerkiksi formamidi, N-metyyliformamidi, N,Ν-dimetyyliformamidi, N-etyyliformamidi, N,N-dietyyliforma-midi, N,N-dimetyyliasetamidi, Ν,Ν-dietyyliasetamidi, N-(2-hyd-10 roksietyyli)asetamidi, N-metyyli-2-pyrrolidinoni ym. Edullisia ovat tertiääriset amidit, kuten Ν,Ν-dialkyyliforma-midit ja Ν,Ν-dialkyyliasetamidit. Edullisin on N,N-dime-tyyliformamidi. On suositeltavaa käyttää tässä menetelmässä korkealaatuista amidia. Rinnakkaiskokeissa, joissa käytettiin 15 (a) reagenssilaatua olevaa DMF:ää ja (b) alempilaatuista tek nistä DMFrää, havaittiin, että alempilaatuista DMF:ää käytettäessä saanto aleni noin 4 % ja tuotteen liukenemisnopeus kasvoi noin 5 minuutiksi.

Amidi-HCl-liuoksen koostumus saattaa vaihdella sen si-20 sältäessä noin 1 tilavuus-%:sta noin 20 tilavuus-%:iin kloori-vetyhappoa ja kloorivetyhapon konsentraatio voi olla noin 6 - noin 12-n. Tietyn amidin edullisin amidi-HCl-koostumus voidaan helposti määrittää standardikokein. Edullisesti käytetyllä amidilla amidi-HCl-liuossuhde on edullisesti noin 90 ti-25 lavuus-% amidia ja noin 10 tilavuus-% noin 12-n HCl. On huomattava, että liian korkea HCl-konsentraatio aiheuttaa jonkin verran cisplatiinin hajoamista.

Riippuen kulloinkin käytetystä amidista ja amidi-HCl-liuoksen koostumuksesta cisplatiinia voidaan liuottaa noin 30 10 - noin 60 g yhteen litraan amidi-HCl-liuosta. Moniin amidi- HCl-liuoksiin voidaan liuottaa merkitsevästi yli 60 g cisplatiinia, mutta on todettu, että liian konsentroiduista liuoksista saatu tuote ei liukene täydellisesti 3 minuutissa. Konsent-raation alarajalla on todettu, että cisplatiinin konsent-35 raation ollessa alle noin 10 g/1 saadaan tavallisesti pienempiä saantoja ja tarvitaan tietenkin kohtuuttoman suuria liuos-

TT

12 72302 määriä tiettyä tuotemäärää kohti. Käytettäessä edullista DMF-väkevä HCl-liuosta (tilavuussuhde noin 9:1) on edullista liuottaa noin 40 g cisplatiinia litraan.

Kiteyttäminen voidaan suorittaa noin 10 - noin 5 35°C:ssa. Korkeammissa lämpötiloissa tuotteen saanto on alempi, koska liukoisuus on suurempi. Alle 10°C:n lämpötiloissa saadun tuotteen liukenemisaika on usein yli 3 minuuttia. Tämän uskotaan johtuvan tuotteen liian nopeasta "sokki”-kiteytymisestä liuoksesta, kun mikrokiteinen cispla-10 tiini kiteytyy liuoksesta hitaasti kiteitä kasvattaen. Tämä on teoriaa, joka ei kuulu keksintöön. Sopivinta on tietenkin suorittaa kiteytys huoneen lämpötilassa, koska huoneen lämpötilassa (20-25°C) saadaan korkealaatuista mikrokiteistä cisplatiinia hyvällä saannolla. Edullinen kiteytyslämpötila 15 on siten huoneen lämpötila.

Kiteytys suoritetaan sekoittamalla cisplatiinin amidi-HCl-liuos veden tai laimean, korkeintaan noin 2-n HCl:n kanssa (noin 0,5-5 tilavuutta). Cisplatiiniliuos voidaan lisätä veteen (tai laimeaan HCl-vesiliuokseen) tai päinvastoin. Kum-20 mailakin tavalla saadaan olennaisesti samalla saannolla ja samanlaatuista mikrokiteistä cisplatiinia. Sopivin tilavuus-määrä vettä (tai laimeata HCl-vesiliuosta) sekoitettavaksi cis-platiiniliuokseen riippuu kulloinkin käytetystä amidista sekä myös amidi-HCl-cisplatiinikoostumuksesta. Optimitilavuus 25 voidaan määrittää rutiinikokein. Tavallisesti käytetään edullisesti noin 1,5- noin 2,5 tilavuusosaa vettä (tai laimeata HCl-vesiliuosta) yhtä amidi-HCl-cisplatiiniliuoksen tilavuusosaa kohti. Kun käytetään edullista DMF-väkevä HC1 (9:1, tila-vuusosina) -liuosta, joka sisältää noin 40 g cisplatiinia/1, 30 niin edullisesti käytetään noin 2 tilavuusosaa vettä (tai laimeata HCl-vesiliuosta) yhtä tilavuusosaa kohti DMF-HCl-cispla-tiiniliuosta. On huomattava, että liian suuren vesimäärän (tai HCl-vesiliuoksen määrä) käyttö saattaa aiheuttaa lähtöaineessa olevien epäpuhtauksien, esimerkiksi transplatinan, ki-35 teytymistä.

72302 13

Kuten edellä todettiin, mikrokiteinen cisplatiini voidaan kiteyttää amidi-HCl-liuoksestaan lisäämällä vettä tai laimeata HCl-vesiliuosta. Ei ole kriittistä, kumpaa niistä käytetään, ja ohjeena käytetään edullisesti amidi-5 HCl-cisplatiiniliuoksessa läsnäolevaa HCl-määrää ja konsent-raatiota. Jos liuos sisältää suhteellisen alhaisen määrän HCl:ää so. lähellä alarajaa (noin 1 % 6-n HC1) olevan määrän, niin kiteytyksessä käytetään edullisesti noin 0,2-n HCl-liu-osta. Toisaalta, jos amidi-HCl-cisplatiiniliuos sisältää 10 suuren määrän HCl:ää, so. lähellä ylärajaa (20 % 12-n HCl) olevan määrän, niin kiteytyksessä käytetään edullisesti vettä. Käytettäessä edullista DMF-väkevä HCl (9:1) liuosta, joka sisältää noin 40 g cisplatiinia/1, kiteytys suoritetaan edullisesti noin 0,1-n HCl-liuoksella.

15 Keksinnön mukaisesti valmistettu cisplatiini voidaan (steriloinnin jälkeen) pakata sellaisenaan suljettuun astiaan, kuten ampulliin tai lääkepulloon, edullisesti annosyksikkönä, joka ennen käyttöä rekonstituoidaan lisäämällä steriiliä vettä (vähintään 1 ml/mg mikrokiteistä cisplatiinia), jolloin saa-20 daan suonensisäiseen lääkeantoon sopiva liuos. Vaihtoehtoisesti mikrokiteinen cisplatiini voidaan sekoittaa steriiliin, myrkyttömän, farmaseuttisesti hyväksyttävän kloridi-ionilähteen kanssa, jonka määrä on sellainen, että se vastaa natriumklori-din noin 1 - noin 20 mg :11a (edullisesti noin 9 mg) yhtä 25 cisplatiinin mg:aa kohti aikaansaatua Cl-ionimäärää. Edullisesti kloridi-ionilähteenä käytetään natriumkloridia. Toisessa toteutusmuodossa mikrokiteinen steriili cisplatiini sekoitetaan steriilin, tavanomaisen, haitattoman, fysiologisesti hyväksyttävän täyteaineen kanssa, edullisesti mannitolin kanssa, jonka 30 määrä on noin 2 - noin 150 mg (edullisesti noin 10 mg) yhtä steriilin mikrokiteisen cisplatiinin mg:aa kohti. Vielä eräässä toteutusmuodossa steriili, mikrokiteinen cisplatiini sekoitetaan sekä edellä mainitun kloridi-ionilähteen että täyteaineen kanssa edellä mainituissa suhteissa. Jokainen näistä kuivaseoksista 35 pakataan sitten tiivisti suljettuihin astioihin, kuten ampulleihin tai lääkepulloihin, edullisesti annosyksikkömuodossa, 14 72302 josta rekonstituoitua steriilin veden (vähintään 1 ml/mg mikrokiteistä cisplatiinia) saadaan suonensisäiseen lääke-antoon sopiva liuos. Edellä mainittuja kuivaseoksia voidaan valmistaa yksinkertaisesti sekoittamalla halutut aineosat kui-5 vina tai käyttämällä märkärakeistustekniikkaa, jotka molemmat menetelmät ovat alalla hyvin tunnettuja. Käytettäessä märkä-rakeistusmenetelmää on edullista rakeistaa kaikki muut aineosat cisplatiinia lukuunottamatta ja sekoittaa rakeistetut aineet kuivaamisen jälkeen haluttuna määränä mikrokiteisen 10 cisplatiinin kanssa.

Keksinnön mukaisesti valmistettu cisplatiini ja sitä sisältävät kuivaseokset ovat helppoliukoisia steriiliin veteen (vähintään 1 ml vettä/mg mikrokiteistä cisplatiinia noin 3 minuutin kuluessa. Rekonstituoitua liuosta ei käytetä vä-15 littömästi, sitä tulisi säilyttää huoneen lämpötilassa. Jäähdytettäessä liuos alle noin 10°C cisplatiini kiteytyy siitä ei-mikrokiteisenä. Tämän cisplatiinin uudelleen liuottaminen on vaikeata huoneen lämpötilassa, mutta se saadaan liukenemaan kuumentamalla noin 35-40°C:ssa.

20 Cisplatiini on epäorgaaninen yhdiste, jonka ensin ha vaittiin pystyvän estämään E. Colin lisääntyminen ja jolla sitten todettiin olevan kavaintenvastaista aktiviteettia. Lääkkeen teho perustuu sen vaikutukseen DNA-synteesiin sen aiheuttaessa DNA:n komplementtisäikeiden ristisidoksia. Sillä on 25 aktiviteettia seuraavia kasvainsysteemejä vastaan: L1210,

Sarcoma 180, Walker 256 arcinosarkoma, DMBA-indusoidut rinta-kasvaimet ja askiittinen B16 melanosarkoma. Yhdiste on erityisen mielenkiintoinen, koska sillä on synergististä vaikutusta sitä käytettäessä yhdessä useiden nykyisin käytettyjen 30 kemoterapeuttisten aineidne kanssa. Laajoissa myrkyllisyys-tutkimuksissa eläimillä todettiin munuaistiehyeiden nekroosia, enetrokoliittia, luuydin hypoplasiaa ja imusuoniatrofiaa. Ensimmäisen vaiheen tutkimukset osoittivat seuraavia myrkkyvaikutuksia: luuydinsurkastumaa, munuaisten vajaatoimintaa, kor- 35 keafrekvenssi-ototoksisuutta ja GI-intoleranssia. Nykyisin käytetyt annokset, joilla on lievä tai kohtuullinen hyväksyttävä 2 15 72302 myrkkyvaikutus, ovat suuruusluokkaa 60-100 mg/m suonensisäisesti annettuna yhtenä annoksena tai jauhettuina annoksina 3-5 vuorokauden aikana, joka käsittely voidaan toistaa 4 viikon välein. Alustavat kliiniset kokeet osoittavat lääk-^ keellä saatavan vaikutusta sukusolukasvaimiin, lymfooma-kasvaimiin, sarkoomakasvaimiin, rinnan, pään ja kaulan karsinoomaan.

2

Annos 60 mg/m vastaa suunnilleen annosta 1,5 mg/kg, joka puolestaan on noin 105 mg/70 kg painava potilas.

^0 Esillä olevan keksinnön mukaisesti valmistettua mikro- kiteistä cisplatiinia tai sen kuivaseoksia käytetään re-konstituoinnin jälkeen samalla tavalla ja samaan tarkoitukseen kuin edellä on esitetty ja tätä aihetta käsittelevässä laajassa lääketieteellisessä kirjallisuudessa on ilmoitettu. Kuten ^ siitä ilmenee, käytetään parhaiden tulosten saamiseksi usein samanaikaisesti muita kemoterapeuttisia aineita. Haluttaessa esillä olevan keksinnön mukaiset liuokset voidaan välittömästi ennen käyttöä lisätä steriiliin, farmaseuttisesti hyväksyttävään vesipitoiseen laimennusaineeseen, kuten glukoosiin tai 2Q suolaliuokseen. Lääkeanto tapahtuu joko suoraan suonensisäisenä injektiona tai suonensisäisenä infuusiona.

"Platinoi" on firman Bristol-Myers Company rekisteröimä cisplatiinin tavaramerkki "Darco" on firman Atlas Chemical Industries rekisteröity tavaramerkki aktivoidulle hiilelle.

25 "Millipore" on firman Millipore Corporation rekisteröity tavaramerkki membraanisuodattimille.

Esimerkki 1

Mikrokiteisen cisplatiinin valmistus 3Q 1-n HCl:n (0,7 ml) ja dimetyyliformamidin (DMF) (6,3 ml) liuokseen lisättiin 280 mg cisplatiinia, ja seosta sekoitettiin tunnin ajan ilman, että saatiin täydellinen liuos. Lisättiin vielä 2 ml DMF:ää ja 0,7 ml väkevää HCl:ää, ja saatua liuosta sekoitettiin tunnin ajan, sitten liuos jaettiin kahteen osaan. 25 (a) Toiseen osaan edellä saatua liuosta (4,9 ml) lisät tiin 20 ml 0,1-n HCl:ää, ja saatua sakkaa sekoitettiin 15 mi- 72302 16 nuuttia. Kiinteä aine suodatettiin, pestiin 1,5 ml :11a 0,1-n HC1 ja 3 ml:11a asetonia ja kuivattiin vakuumissa 20°C:ssa 18 tuntia. Saatiin 93 mg (66 %) mikrokiteisiä cisplatiinia. Karl Fischer analyysi osoitti tuotteen ole-5 van vedetöntä ja NMR-analyysi osoitti, ettei se sisältänyt DMF:ää eikä asetonia.

Analyysi, laskettu kaavasta PtH,N_Cl„: H 2,02 N 9,34 o Z λ

Cl 23,63

Saatu: H 1,89 N 9,33 10 Cl 22,59.

10 mg edellä saatua mikrokiteistä cisplatiinia punnittiin 17 ml:n lääkepulloon yhdessä NaCl:n (90 mg) ja mannitolin (100 mg) kanssa. Tähän seokseen lisättiin 9,9 ml steriiliä vettä, jolloin kaikki aine liukeni ravistettaessa 1 minuutin 15 ajan. Toista 10 mg:n annosta edellä valmistettua mikrokiteistä cisplatiinia ravisteltiin 10 ml:ssa NaCl:n (90 mg)10 ml) ja mannitolin (100 mg/10 ml) vesiliuosta, jolloin 1 minuutissa saatiin täydellinen liukeneminen.

(b) Toiseen osaan (4,8 ml) edellä saatua liuosta li-20 sättiin 20 ml 0,1-n HCl:ää, ja saatua sakkaa sekoitettiin 15 minuuttia. Sakka suodatettiin, pestiin 1,5 ml:11a 0,1-n HCl:ää ja 3 ml:11a asetonia, ja kuivattiin 20°C:ssa vakuumissa 18 tuntia. Saatiin 98 mg (70 %) mikrokiteistä cispplatiinia. 10 mg tätä tuotetta ravisteltiin 10 ml:ssa NaCl:n (90 mg/10 ml) ja 25 mannitolin (100 mg/10 ml) vesiliuosta, jolloin 1 minuutissa saatiin täydellinen liukeneminen.

Esimerkki 2

Mikrokiteisen cisplatiinin valmistus 30 280 mg cisplatiinia liuotettiin 7,0 ml:aan DMF-HCl-liu- osta, joka oli valmistettu sekoittamalla 0,7 ml väkevää HCl:ää ja 6,3 ml DMF:ää. Liuosta sekoitettiin tunnin ajan, sitten siihen lisättiin 14 ml 0,1-n HCl:ää. Sakkaa sekoitettiin 15 minuttia, sitten sakka suodatettiin, pestiin 2 ml:11a 0,1-n 35 HCl:ää (0°C) ja 4 ml:11a asetonia ja kuivattiin vakuumissa 20°C:ssa 20 tuntia. Saatiin 225 mg (80 %) mikrokiteistä cisplatiinia. 10 mg tätä tuotetta ravisteltiin 10 ml:ssa NaCl:n il 17 72302 (90 mg/10 ml) ja mannitolin (100 mg/10 ml) vesiliuosta, jolloin liukeneminen oli täydellinen 3 minuutissa. Toinen 10 mg:n näyte sekoitettiin NaClrn (90 mg) ja mannitolin (100 mg) kanssa kuivaseokseksi, joka lisättäessä 9,9 ml vettä 5 liukeni täydellisesti 3 minuutissa.

Esimerkki 3

Mikrokiteisen cisplatiinin valmistus 210 mg cisplatiinia lisättiin 3 ml:aan DMF-HCl-liuosta, 10 joka oli valmistettu sekoittamalla 0,3 ml väkevää HCl:ää ja 2,7 ml DMFrää. Tunnin sekoittamisen jälkeen ei kaikki aine ollut liuennut, ja seokseen lisättiin vielä 0,1 ml väkevää HCl:ää ja 0,9 ml DMFrää. Saatua liuosta sekoitettiin tunnin ajan, sitten siihen lisättiin 8 ml 0,1-n HClrää. Saatua sak-15 kaa sekoitettiin 15 minuuttia, sitten sakka suodatettiin, pestiin 1,5 mlrlla 0,1-n HClrää ja 2 mlrlla asetonia, kuivattiin vakuumissa 20°Crssa 20 tuntia. Saatiin 162 mg (77 %) mikroki-teistä cisplatiinia.

Esimerkki 4 20

Mikrokiteisen cisplatiinin valmistus 210 mg cisplatiinia liuotettiin 5,25 ml:aan DMF-HCl-liuosta (9:1). liuosta sekoitettiin tunnin ajan, sitten siihen lisättiin 10,5 ml 0,1-n HClrää. Saatua sakkaa sekoitettiin 25 15 minuuttia, sakka suodatettiin, pestiin 1 mlrlla 0,1-n HClrää ja 2 mlrlla asetonia ja kuivattiin vakuumissa 20°C:ssa 18 tuntia. Saatiin 168 mg (80 %) mikrokiteistä cisplatiinia. 10 mg tätä tuotetta ravisteltiin 10 mlrssa NaClrn (90 mg/10 ml ja mannitolin (100 mg/10 ml) vesiliuosta, jolloin liukeneminen 30 tapahtui täydellisesti 2 minuutissa. Toinen 10 mg:n näute sekoitettiin NaClrn (90 mg) ja mannitolin (100 mg) kanssa kuiva-seokseksi, joka ravistettaessa liukeni täydellisesti 9,9 mlraan steriiliä vettä 2 minuutissa.

18 72302

Esimerkki 5

Mikrokiteisen cisplatiinin valmistus 1,0 g cisplatiinia liuotettiin 25 ml:aan DMF-HC1-liuosta (9:1). Kirkasta liuosta sekoitettiin tunnin ajan typ-5 pikehässä, sitten siihen lisättiin 50 ml 0,1-n HCl:ää. Saatua sakkaa sekoitettiin 15 minuuttia, sakka suodatettiin ja pestiin 5 ml:lla 0,1-n HCl:ää (4°C) ja 10 ml:lla asetonia.

Noin 1/4 tuotteesta kuivattiin vakuumissa 40°C:ssa 18 tuntia, jolloin saatiin 0,120 g tuotetta. Loppuosa kuivattiin vakuu-10 missä 20°C:ssa 18 tuntia, jolloin saatiin 0,682 g tuotetta.

Mikrokiteisen cisplatiinin kokonaissaanto oli 0,802 g (80 %).

Kummastakin kuivatusta tuote-erästä otettiin 10 mg:n näyte, jota ravisteltiin 10 ral:ssa NaCl:n (90 mg/10 ml) ja mannitolin (100 mg/ml) vesiliuosta; kumpikin näyte liukeni 15 täysin 3 minuutissa. Ohutkerrokromatografiällä (TLC) ei kummassakaan näytteessä todettu epäpuhtauksia. Suurisuoritusky-kyisellä nestekromatografiällä (HPLC) todettiin 40°C:ssa kuivatun tuotteen vahvuudeksi 984/^Aim/mg ja 20°C:ssa kuivatun tuotteen vahvuudeksi 10 27y*ig/mg.

20 Analyysi, laskettu kaavasta PtH,N0Cl0: H 2,02 N 9,34 O 2 2

Cl 23,63

Saatu (kuivattu 40°C:ssa): H 1,77 N 9,31 Cl 23,29

Saatu (kuivattu 20°C:ssa): H 1,79 N 9,21 Cl 23,13.

Esimerkki 6 25

Mikropitoisen cisplatiinin valmistus 2,5 g cisplatiinia liuotettiin 62,5 ml:aan DMF-HCl-liu-osta (valmistettu 15 mlrsta väkevää kloorivetyhappoa ja 135 ml:sta DMF:ää). Liuosta sekoitettiin tunnin ajan typpikehässä, 30 sitten siihen lisättiin 125 ml 0,1-n Hcl:ää. Saatua sakkaa sekoitettiin 15 minuuttia, sakka suodatettiin, pestiin 12 ml :11a 0,1-n HCl:ää ja 25 ml :11a asetonia ja kuivattiin vakuumissa 20°C:ssa 18 tuntia. Mikrokiteistä cisplatiinia saatiin 2,0 g (80 %). 10 mg:n näytettä ravisteltiin 10 ml:ssa NaCl:n 35 (90 mg/10 ml) ja mannitolin (100mg/10 ml) vesiliuosta, jolloin täydellinen liukeneminen tapahtui 2 minuutissa.

il 19 72302

Valmistettiin kuivaseos sekoittamalla perusteellisesti yhteen 750 mg edellä valmistettua tuotetta (200 mesh), 6,75 g NaClzää (200 mesh) ja 7,5 g mannitolia (200 mesh).

Esimerkki 7 5

Steriilin, pyrogeenivapaan natriumkloridun valmistus

NaCl (18,5 g) liuotettiin 62 ml:aan tislattua vettä. Liuokseen lisättiin 1,85 g aktiivihiiltä (Darco KF), ja seosta sekoitettiin 0,5 tuntia. Hiili suodatettiin pois käyttäen ko-10 vaa suodatinpaperia ja suodos lisättiin hitaasti 62 ml:aan väkevää HCl:ää samalla voimakkaasti sekoittaen. Saatua sakkaa sekoitettiin 0,5 tuntia, sakka suodatettiin kovalla paperi-suodattimella ja kuivattiin 100°C:ssa 18 tuntia. Tuotetta saatiin 13,8 g (75 %).

15

Esimerkki 8

Steriilin, pyrogeenivapaa mannitolin valmistus

Mannitoli (10 g) liuotettiin 67 ml:aan tislattua vettä. Liuokseen lisättiin aktiivihiiltä (1,0 g, Darco KB), ja seosta 20 sekoitettiin 0,5 tuntia. Seos suodatettiin kovalla suodatinpaperilla, ja suodos lisättiin hitaasti 335 ml:aan asetonia samalla voimakkaasti sekoittaen. Saatua sakkaa sekoitettiin 0,5 tuntia, sakka suodatettiin kovalla suodatinpaperilla ja kuivattiin 100°C:ssa 18 tuntia. Tuotetta saatiin 8,0 g (80 %).

25

Esimerkki 9

Steriilin cisplatiinin kuivatäyttövalmisteen valmistus injektiotarkoituksiin (10 mg cisplatiinia/lääkepullo) A. Steriilin mikrokiteisen cisplatiinin valmistus 30 Varotoimet

Kaikkien tätä tuotetta käsittelevien henkilöiden tulisi suojautua seuraavasti: (a) Valmistuksen, tuotannon ja pakkauksen aikana tulee käyttää kasvosuojusta, silmäsuojusta, käsineitä ja suojavaatteita.

35 (b) Kosketusta lääkkeen kanssa sisäänhengittämällä tai ihon kautta tulee välttää.

20 72302 (C) Kaikki laitteet ja valmistustilat tulee puhdistaa mahdollisen lääkeaineen poistamiseksi.

Menetelmä ^ 1. 90 ml dimetyyliformamidia (DMF ei saa sisältää dimetyyli- amiinia, ja sen tulee olla puhtausasteeltaan firman Burdick and Jackson Laboratories määrittelemä laadulle Dimethylforma-mide, Distilled In Glass, tai Fisher Certified (ACS) Dimet-hylformamide, List D-119), pannaan sopivaan lasiastiaan ja suo-jataan typpikaasulla. Siihen lisätään hitaasti koko ajan sekoittaen 10 ml väkevää kloorivetyhappoa, U.S.P. Lämpötila pidetään 20-27°C:ssa.

2. Liuoksen sekoittamista typpikehässä jatketaan; lämpötila pidetään 20-27°C:ssa.

3.5 minuutin kuluessa lisätään hitaasti 4 g cisplatiinia ja voimakasta sekoittamista typpikehässä jatketaan tunnin ajan. Kaikki tai lähes kaikki aines on tällöin liuennut.

4. Liuos johdetaan steriilissä huonetilassa käyttäen aseptista tekniikkaa typenpaineen avulla steriilin 0,22^um Millipore- 2Q suodattimen lävitse steriiliin, pyrogeenivapaaseen lasiastiaan.

5. Suodosta sekoitetaan koko ajan nopeasti, kun siihen lisätään 5 minuutin aikana 200 ml 20-27°C:ista steriiliä pyrogeeni-vapaata 0,1-n kloorivetyhappoa. Muodostuu painavia, keltaisia mikrokiteitä. Sekoitetaan 15 minuuttia.

25 6. Kiteet eristetään aseptisesti suodattamalla. Suodatuskakku imetään näennäisesti kuivaksi. Sen lävitse ei saa johtaa ylimäärin ilmaa. Suodos säilytetään.

7. Suodatuskakku pestään 10 ml:11a 20-27°C:ista steriiliä, pyrogeenivapaata 0,1-n kloorivetyhappoa. Pesuneste lisätään vaiheen 6 suodokseen. Suodatuskakku imetään näennäisen kuivaksi. Sen lävitse ei saa johtaa ylimäärin ilmaa.

Suodatuskakku pestään 20 ml:11a steriiliä, pyrogeenivapaata asetonia. Pesuneste lisätään suodokseen. Suodatus-kakku imetään näennäisen kuivaksi. Sen lävitse ei saa johtaa 25 ylimäärin ilmaa. (Yhdistetyt suodokset säilytetään. Niistä otetaan talteen cisplatiinia jäljempänä esitetyn vaiheen 9 mukaisesti).

Il 21 72302 8. Mikrokiteinen cisplatiini poistetaan suodattimelta valon vaikutukselta suojattuna) aseptisesti ja kuivataan suurvakuu-missa 24 tuntia 37-42°C:ssa. Saanto: noin 3,3-3,5 g (8Q-86 %) . Keltaisia mikrokiteitä säilytetään kontrolloidussa 5 huoneen lämpötilassa valolta suojattuna sopivassa, steriilissä, pyrogeenivapaassa ruskeassa astiassa, joka on suljettu metallisella kierretulpalla, jossa on teflon tiiviste.

9. (a) Vaiheesta 7 saatu suodos jäähdytetään sekoittaen 0-4°C: seen. Seos saa seistä sekoittamatta 48 tuntia 0-4°C:ssa.

10 Siitä saostuu kullanvärisiä kiteitä. Kiteet suodatetaan, pestään 20 ml:11a asetonia ja kuivataan suurtyhjössä (valolta suojattuna) 37-42°C:ssa 24 tuntia. Saadaan noin 0,2 g (5 %). Näillä kiteillä ei ole mikrokiteisen muodon liukenemisominai-suuksia, ja ne on saatettava edellä olevaan prosessiin, jotta 15 niistä saataisiin mikrokiteistä cisplatiinia.

(b) Suodokseen jääneet platinayhdisteet voidaan ottaa talteen tislaamalla pois vesi ja dimetyyliformamidi .

Edellä olevalla menetelmällä valmistetun steriilin mikrokiteisen cisplatiinin ominaisuudet 20 1. HPLC: Yksi ainoa piikki 2,8 minuutin kohdalla (1028^ug/mg) .

2. IR: Vastaa rakennetta.

3. NMR: TFA:ssa ei löydy asetonia eikä dimetyyli- formamidia.

4. Alkuaineanalyysi: Vastaa rakennetta; tuote on vedetön.

5. Kidemorfologia: 250-kertaisella suurennuksella mineraaliöljyssä polarisaatiomikroskoopilla mikrokiteet nä- 2Q kyvät pieninä tankoina, joilla on spesifinen ekstinktio. Lähtöaineena käytetty cisplatiini esiintyy sangen suurina säännöttöminä laattoina (niiden koko saattaa olla useita satoja kertoja mikrokiteiden koko), joilla on värispektrin birefrin-gensi.

35 B. Steriilin natriumkloridin valmistus 1. 90 ml steriiliä, injektiotarkoituksiin sopivaa vettä (U.S.P.) pannaan sopivaan lasiastiaan. Vettä sekoitetaan 20-26°C:ssa ja siihen liuotetaan 27 g natriumkloridia.

22 7 2 3 0 2

Sekoitusta jatketaan, kunnes kaikki on liuennut.

2. Edelleen sekoittaen lisätään 2,7 g aktiivi-hiiltä Darco KB. Sekoitetaan tunnin ajan.

3. Hiili poistetaan suodattamalla ja pestään 5 ml :11a 5 steriiliä, injektiotarkoituksiin sopivaa vettä. Pesuneste lisätään suodokseen.

4. Suodos painetaan typpikaasulla aseptisesti sopivan, steriilin, pyrogeenivapaan Micropore-suodattimen (0,22yUm) lävitse sopivaan, steriiliin, polygeenivapaaseen lasiastiaan.

10 Tämä on liuos A.

5. Käyttäen aseptista tekniikkaa lisätään 5 tilavuus-osaa (noin 550 ml) asetonia, joka on suodatettu steriilillä Millipore-suodattimella (0,22^/um), sekoitettuun Millipore-suo-datettuun liuos A:hän 10 minuutin aikana. (Vaihtoehtoisesti 15 liuos A voidaan lisätä 550 ml:aan voimakkaasti sekoitettua,

Millipore-suodattimella (0,22^/um) suodatettua steriiliä asetonia) . Muodostuu kiteitä.

6. Sekoitusta jatketaan huoneen lämpötilassa 0,5 tuntia.

20 7. Kiteet suodatetaan aseptisesti.

8. Kiteet pestään suodattimena steriilillä Millipore-suodatetulla (0,22^um) asetonilla (2x40 ml).

9. Kiteet poistetaan suotimella aseptisesti ja ilmakui- vataan 115-125°C:ssa 24 tuntia. Saanto: noin 21,5 g(80 %).

25 10. Kiteitä säilytetään sopivassa, steriilissä, pyro- geenivapaassa, ruskeassa lasiastiassa, joka on suljettu kierre-tulpalla, jossa on teflon- tai polyetyleenitiiviste.

Edellä olevalla menetelmällä valmistetun steriilin nat- riumkloridin ominaisuudet 30 1. NMR-spektrillä ei voida todeta asetonia.

2. Vettä (Karl Fischer): tyypillisesti noin 1 %.

C. Steriilin mannitolin valmistus 1. 90 ml steriiliä, injektiotarkoituksiin sopivaa 35 vettä (U.S.P) pannaan sopivaan lasiastiaan. Vettä sekoitetaan 20-26 C:ssa, ja siihen liuotetaan 13,6 g mannitolia. Sekoitusta jatketaan, kunnes kaikki on liuennut.

23 72302 2. Sekoitusta jatketaan, ja seokseen lisätään 1,4 g aktiivihiiltä Darco KB. Sekoitetaan tunnin ajan.

3. Hiili poistetaan suodattamalla ja pestään 5 ml :11a 5 ml:11a steriiliä, injektiotarkoituksiin sopivaa vettä 5 (U.S.P.). Pesuneste ja suodos yhdistetään.

4. Suodos painetaan typellä aseptisesti sopivan, steriilin, pyrogeenivapaan Millipore-suodattimen (0,22^um) lävitse sopivaan, steriiliin, pyrogeenivapaaseen lasiastiaan.

5. Suodokseen lisätään aseptisesti voimakkaasti sekoitit) taen 10 minuutin aikana 500 ml asetonia, joka on suodatettu steriilillä Milliporesuodattimella (0,22^/um). Muodostuu kiteitä. (Vaihtoehtoisesti suodos voidaan lisätä voimakkaasti sekoittaen 10 minuutin aikana 500 ml:aan asetonia, joka on suodatettu steriilillä Millipore-suodattimella (0,22^um)). Se-15 koittamista jatketaan huoneen lämpötilassa 0,5 tuntia.

6. Kiteet suodatetaan sopivalla menetelmällä aseptisesti .

7. Kiteet pestään suodattimena steriilillä Millipore-suodatetulla (0,22y*Jm) asetonilla (2 x 20 ml).

20 8. Kiteet poistetaan aseptisesti suodattimelta ja il- makuivataan 100-115°C:ssa 24 tuntia. Saanto: noin 11,4 g (84 %) .

9. Kiteitä säilytetään sopivassa, steriilissä, pyro-geenivapaassa lasiastiassa, joka on suljettu kierretulpalla, 25 jossa on teflontiiviste.

Edellä valmistetun steriilin mannitolin ominaisuudet 1. Asetonia ei havaita NMR:llä.

2. Vettä (Karl Fischer): tyypillisesti noin 0,4-1 %.

30 D. Steriilin rakeistetun mannitolin ja natriumkloridin val mistus käytettäväksi steriiliin mikrokiteisen cisplatiinin kuivatäyttövalmisteeseen injektiotarkoituksiin 24 72302

Koostumus 10 mg:n 10 000 cispla- cisplatiini- tiinilääke-lääkepulloa pulloa 10 mg 5 kohti_ kohti_

Steriili mannitoli 0,1000 g 1000,00 g

Steriili natriumkloridi 0,0900 g 900,00 g

Steriili vesi injektiotarkoituksiin 0,025 ml* 250,00 ml* (U.S.P.) 10 ♦Vesimäärä saattaa vaihdella riippuen märkägranuloin-nissa saadusta konsistenssista. Vesi poistetaan prosessin aikana.

Valmistusohje ^ (Alla luetellut turvatoimet huomioitava) 1. Aseptisesti ja käyttäen sopivaa steriiliä, pyro-geenivapaata laitteistoa steriili, pyrogeenivapaa mannitoli ja steriili, pyrogeenivapaa natriumkloridi jauhetaan erikseen 2Q 40 meshin seulan lävitse.

2. Aseptisesti tarvittavat määrät jauhettua steriiliä, pyrogeenivapaata natriumkloridia ja mannitolia pannaan sopivaan steriiliin, pyrogeenivapaaseen sekoittimeen. Sopivia ovat sekoitustangolla varustettu vaipallinen vakuumi-V-sekoitin tai 2^ kartiosekoitin. Sekoitetaan tunnin ajan.

3. Sekoitustangon lävitse lisätään pieninä määrinä vähitellen riittävästi steriiliä, pyrogeenivapaata injektio- *) tarkoituksiin sopivaa vettä (U.S.P. ja sekoitinta käytetään, kunnes on saatu sopivan konssitenssin omaava granulaatti.

3Q Kunkin vesilisäyksen jälkeen sekoitintangon annetaan käydä puolen tunnin sekoitusjakson aikana 2x5 minuuttia.

*Huom: Koostumuksissa esitetyt vesimäärät saatiin pienessä mittakaavassa suoritetuissa laboratoriokokeissa. Suurten tuotemäärien valmistuksessa käytetystä laitteistosta riippuen ra-25 keistuksessa tarvittava vesimäärä sopivan konsistenssin saamiseksi saattaa vaihdella ilmoitetuissa rajoissa.

25 7 2 3 0 2 4. Kun on saatu sopiva granulaatti, sekoittimen annetaan pyöriä ja sekoitintanko pysäytetään. Vaipan kuumennuksella 50-70°C:ssa 24 tunnin ajan rakeiden vesipitoisuus alennetaan vakuumissa alle 0,3 %.

5 Vaihtoehtoisesti seos voidaan poistaa sekoittimesta ja kuivata 50-60°C:ssa steriilissä Devine-vakuumiuunissa 48 tuntia.

5. Aseptisella tekniikalla kuivattu seos johdetaan sopivan steriilin pyrogeenivapaan myllyn lävitse, joka on 10 varustettu steriilillä, pyrogeenivapaalla 60 meshin tai vastaavalla seulalla.

6. Jauhettu, steriili granulaatti pannaan sopivaan steriiliin, pyrogeenivapaaseen sekoittimeen ja sekoitetaan siinä 0,5 tunita, kunnes se on homogeenista. Jauheen klori- 15 dipitoisuus voidaan analysoida homogeenisuuden toteamiseksi.

7. Jauhetta säilytetään sopivassa steriilissä, pyro-geevapaassa ruskeassa lasiastiassa, joka on suljettu kierre-tulpalla, jossa on teflon- tai polyetyleenitiiviste. Vaihtoehtoisesti tarvittava steriilin seoksen määrä jätetään se- 20 koittimeen, johon lisätään tarvittava määrä mikrokiteistä cisplatiinia cisplatiinin injektoitavan valmisteen saamiseksi.

Varotoimet

Kaikkien tätä tuotetta käsittelevien henkilöiden tulisi 2^ suojautua seuraavasti: (a) Valmistuksen, tuotannon ja pakkauksen aikana tulee käyttää kasvosuojusta, silmäsuojusta, käsineitä ja suojavaatteita.

(b) Kosketusta lääkkeen kanssa sisäänhengittämällä tai ihon kautta tulee välttää.

3Q (c) Kaikki laitteet ja valmistustilat tulee puhdistaa mahdollisen lääkeaineen poistamiseksi.

E. Cisplatiinin steriili kuivakäyttöinjektiovalmiste (10 mg cisplatiinia/lääkepullo [Sisällöksi ilmoitetaan 10 mg cis-diammiinidikloori- 35 platina (II) (cisplatiini) lääkepulloa kohti].

26 72302

Varotoimet

Kaikkien tätä tuotetta käsittelevien henkilöiden tulee käyttää kasvosuojusta, käsineitä ja suojavaatteita.

(b) Kosketusta lääkkeen kanssa sisäänhengittämällä tai ihon 5 kautta tulee välttää.

(c) Kaikki laitteet ja valmistustilat tulee puhdistaa mahdollisen lääkeaineen poistamiseksi.

Koostumus Lääkepulloa 100 lääkepulloa 10 Aineosa *2ϋ£ί kohti

Steriili, pyrogeenivapaa *0,0100 g 1,00 g mikrokiteinen, cisplatiini

Steriili, pyrogeenivapaa NaCl(40 mesh) 0,0900 g 9,00 g

Steriili, pyrogeenivapaa mannitoli 0,1000 g 10,00 g 15 (40 mesh) 0,2000 g 20,00 g.

♦Edellytyksenä tälle cisplatiinimäärälle on, että sen voimakkuus on 1000yug/mg. Sopivan cisplatiinimäärän laskemiseksi käytetään seuraavaa kaavaa.

20 1000 x 0,0100 q ...............

---a = g) cisplatnnia laakepulloa cisplatiinin voi- , , , .

kohti makkuus ^/igioina/mg

Valmistusohjeet; 25 1. Aseptisellä menetelmällä ja sopivassa steriilissä, pyrogeenivapaassa laitteistossa jauhetaan erikseen steriili, pyrogeenivapaa mannitoli ja steriili, pyrogeenivapaa natrium-kloridi 40 meshin seulan lävitse.

2. Tarvittavat määrät seulottua, steriiliä, pyrogee-30 nivapaata natriumkloridia ja mannitolia sekoitetaan sopivassa steriilissä, pyrogeenivapaassa sekoituslaitteessa tunnin ajan. Sekoitussauvalla varustettu V-sekoitin tai kartiosekoitin on sopiva.

27 7 2 3 0 2 3. Mikrokiteinen cisplatiini seulotaan 40 meshin seulan lävitse mahdollisten kokkareiden hajottamiseksi. Edellisessä vaiheessa saatuun sekoittimessa olevaan seokseen (tai aikaisemmin esitettyyn vaiheen D granulaattiin) lisätään tar- 5 vittava määrä steriiliä, pyrogeenivapaata mikrokiteistä cis-platiinia kolmena erillisenä yhtä suurena määränä. Kunkin lisäyksen jälkeen sekoitetaan 30 minuuttia. Seos seulotaan steriilillä 40 meshin seulalla ja palautetaan sekoittimeen. Sekoitetaan 30 minuuttia tai kauemmin, kunnes saadaan tasinen 10 seos.

4. Seos täytetään sopiviin, steriileihin, pyrogeeni-vapaisiin ruskeisiin astioihin, jotka suljetaan kierretul-pilla, joissa on teflontiiviste. Tuotetta säilytetään pimeässä .

15 5. Tarvittava määrä seosta täytetään sopiviin, sterii leihin, pyrogeenivapaisiin ruskeisiin lasilääkepulloihin.

Ne suljetaan ilmatiiviisti sopivilla steriileillä, pyrogeeni-vapailla teflonpäällysteisillä kumitulpilla ja kapseloidaan alumiinikapseleilla. Lääkepulloja säilytetään pimeässä.

20 6. 10 mg cisplatiinia rekonstituoidaan lisäämällä vä hintään 10 ml 22-30°C:ista steriiliä injektiotarkoituksiin sopivaa vettä (U.S.P.). Kirkas liuos saadaan ravistettaessa 3 minuuttia pH on 4,0-5,5. Cisplatiiniliuosta, jonka konsent-raatio on yli 0,5 mg/ml, ei saa säilyttää jääkaappilämmössä, 25 sillä cisplatiinia kiteytyy tällöin liuoksesta.

Claims (5)

28 72302

1. Menetelmä pysyvän, mikrokiteisen cisplatiinin valmistamiseksi, jonka raekokojakautuma on sellainen, että vähintään 5 noin 80 % rakeista on alle 5/um, vähemmän kuin noin 20 % on 5-20 /am eikä olennaisesti lainkaan rakeita ole yli 20 /um, ja joka on helposti erotettavissa lyofilisoidusta cisplatiinista röntgenjauhediffraktion perusteella, joka on olennaisesti seu-raavaa: 1 0 λΓ\

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että nestemäinen orgaaninen amidi on ter-tiäärinen amidi.

2 Suhteellinen Kidetasojen (asteita) intensiteetti etäisyydet (A) 13,81 100 6,407 14,93 84 5,929 15 16,26 71 5,447 24,05 27 3,697 26,57 22 3,352 28,37 16 3,143 30,35 13 2,943 20 33,14 15 2,701 ja joka cisplatiini on täysin liukeneva veteen noin 3 minuutissa pitoisuutena 1 mg/ml, tunnettu siitä, että a) valmistetaan ensimmäinen liuos, joka sisältää neste-25 mäisessä orgaanisessa amidissa noin 1 - noin 20 tilavuss-% vesipitoista kloorivetyhappoa, jonka konsentraatio on noin 6 mol/1 - noin 12 mol/1, b) liuotetaan cisplatiinia ensimmäiseen liuokseen noin 10 - noin 60 g ensimmäisen liuoksen litraa kohti, jolloin saa- 30 daan toinen liuos, c) toiseen liuokseen lisätään sekoittaen noin 0,5 -noin 5 tilavuusosaa vettä tai laimeata vesipitoista kloorivetyhappoa, jonka konsentraatio on korkeintaan noin 0,2 mol/1, lämpötilassa noin 10°C-noin 40°C, jolloin muodostuu 35 mikrokiteistä cisplatiinia, 29 72302 d) mikrokiteinen cisplatiini otetaan talteen suodattamalla, e) talteenotettu mikrokiteinen cisplatiini pestään vedellä tai vesipitoisella kloorivetyhapolla, jonka konsentraa- 5 tio on korkeintaan noin 0,2 mol/1, f) mikrokiteinen cisplatiini pestään mahdollisesti lisäksi inertillä, veden kanssa sekoittuvalla, haihtuvalla orgaanisella liuottimena, ja g) pesty mikrokiteinen cisplatiini mahdollisesti kui- 10 vataan.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä mik-15 rokiteisen cisplatiinin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) valmistetaan ensimmäinen liuos, joka sisältää nestemäisessä orgaanisessa tertiäärisessä amidissa noin 5 -noin 15 tilavuus-% vesipitoista kloorivetyhappoa, jonka kon- 20 sentraatio on noin 12 mol/1, b) liuotetaan cisplatiinia ensimmäiseen liuokseen noin 40 g ensimmäisen liuoksen litraa kohti, jolloin saadaan toinen liuos, c) toiseen liuokseen lisätään noin huoneen lämpötilas-25 sa sekoittaen noin 0,75 - noin 2,5 tilavuusosaa vettä tai laimeaa vesipitoista kloorivetyhappoa, jonka konsentraatio on korkeintaan noin 0,2 mol/1, jolloin muodostuu mikrokiteistä cisplatiinia, d) mikrokiteinen cisplatiini otetaan talteen suodatta- 30 maila, e) talteenotettu mikrokiteinen cisplatiini pestään vesipitoisella kloorivetyhapolla, jonka konsentraatio on korkeintaan noin 0,2 mol/1, f) mikrokiteinen cisplatiini pestään mahdollisesti li-35 säksi intertillä, veden kanssa sekoittuvalla, haihtuvalla orgaanisella liuottimena, ja 30 72302 g) pesty mikrokiteinen cisplatiini mahdollisesti kuivataan .

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että nestemäinen tertiäärinen orgaaninen 5 amidi on N,N-dialkyyliformamidi, Ν,Ν-dialkyyliasetamidi tai N-metyyli-2-pyrrolidinoni.

5. Jonkin patenttivaatimuksen 1-4 mukainen menetelmä mikrokiteisen cisplatiinin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 10 a) valmistetaan ensimmäinen liuos, joka sisältää dime- tyyliformamidissa noin 10 tilavuus-% vesipitoista kloorivety-happoa, jonka konsentraatio on noin 12 mol/1, b) liuotetaan cisplatiinia ensimmäiseen liuokseen noin 40 g ensimmäisen liuoksen litraa kohti, jolloin saadaan toi- 15 nen liuos, c) toiseen liuokseen lisätään noin huoneen lämpötilassa sekoittaen noin 2 tilavuusosaa laimeata vesipitoista kloo-rivetyhappoa, jonka konsentraatio on korkeintaan noin 0,1 mol/1, jolloin muodostuu mikrokiteistä cisplatiinia, 20 d) mikrokiteinen cisplatiini otetaan talteen suodatta malla, e) talteenotettu mikrokiteinen cisplatiini pestään vesipitoisella kloorivetyhapolla, jonka konsentraatio on noin 0,1 mol/1, 25 f) mikrokiteinen cisplatiini pestään mahdollisesti li säksi inertillä, veden kanssa sekoittuvalla, haihtuvalla orgaanisella liuottimena, joka on alempi alkanoli tai di (alempi alkyyli)ketoni, ja g) pesty mikrokiteinen cisplatiini mahdollisesti kui- 30 vataan. li 3i 72302