DK157484B - Fremgangsmaade til fremstilling af et cisplatin-praeparat - Google Patents

Description

i

DK 157484 B

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer stabile, hurtigt opløselige, mi krokrystalli nske former af cisplatin, og tør-blandede formuleringer deraf, som, efter rekonstituering med sterilt vand, kan anvendes ved injektion i kemoterapien af cancer.

5 Platinforbindelserne er en særlig gruppe af forbindelser blandt de antineoplasti ske midler. De blev først fundet at besidde antibiotisk virkning af Rosenberg og hans kollegaer i 1965 [Rosenberg, B. et al., Nature (London, 205, 698-699 (1965)], og derefter fundet af Rosenberg og hans kollegaer at være kraftige antitumormidler i dyr 10 [Rosenberg, B. et al., Nature (London), 222, 385-386 (1965)].

Strukturelt repræsenterer de et kompleks dannet af et centralt platinatom omgivet af forskellige arrangementer af chloratomer eller ammoniakgrupper i enten cis- eller transplanær relation. To af de mere almindeligt studerede platinforbindelser er vist nedenfor 15 cl

Cl I NH, _i'H3 Æ7 * 20 /77 Z_!/ / / Cl NK,

Cl NH-,

Cl 25

Cisplatin (II) Cisplatin (IV)

Di ammi ndi chlori d Di ammi ntetrachlori d 30 Som det kan ses, har forbindelsen cisplatin (II) diammindichlo-rid alle sine chlor- og amino-grupper i et enkelt plan. Denne forbindelse, der nu er kendt under navnet cisplatin, er blevet syntetiseret i henhold til følgende reaktion 35 NH4C1 K2[PtCl4] + 2NH3 -^ cis-[Pt(NH3)2Cl2] + 2KC1 „2

DK 157484B

[Jfr. Kauffman, G.B. et al., i Inorginic Synthesis, J. Kleinberg (Ed.), siderne 239-245, McGraw-Hill Book Co., Inc., New York, 1963].

^Breusovia-Baldala, Ύ.Τ5. et al, diskuterer i Akademi a Hauk SSSR, nr.

5 6. siderne 1239-1242 (juni 1974) den langsomme isomerisering af cisplatin (II) di ammindichlorid i vandig opløsning til transformen.

Reishus, J.W. og Martin, D.S., beskriver i Journal of the American Chemical Society, 83, 2457-2462 (1961), den sure hydrolyse af cisplatin ved 25°C og 35°C. Disse studier udførtes i vandige opløsninger ved 10 koncentrationer på 1,5 x 10~3 M, 2,5 x 10"3 M og 5,0 x 10”3 M, hvilket svarer til hhv. 0,45, 0,75 og 1,5 mg/ml. Forfatterne anfører, at der var en vis dobbelttydighed ved lokaliseringen af oprindelsen (dvs. "nulpunktet") for hydrolysekurverne, fordi prøverne kræver fra 10 til 30 minutter til at opløses fuldstændigt, selv ved disse lave koncentra-15 tioner.

Rozencweig, M. et al., gør i Annals of Internal Medicine, 86, 803-812 (1977) rede for resultaterne af de forskellige prækliniske og kliniske undersøgelser af brugen af cisplatin i eksperimentelle tumorer i dyr såvel som i forskellige typer af humane tumorer. De anfø-20 rer, at det undersøgte lægemiddel, der er tilgængeligt for kvalice-rede specialister gennem Investigational Drug Branch of the Cancer Therapy Evaluation Program of the National Cancer Institute, leveredes som et hvidt lyophiliseret pulver i hætteglas indeholdende 10 mg cisplatin, 90 mg natriumchlorid, 100 mg mannitol (U.S.P.) og saltsyre 25 til pH-justering. Ved rekonstituering med 10 ml sterilt vand til injektion (U.S.P) vil hver ml af den resulterende opløsning indeholde 1 mg cisplatin, 10 mg mannitol og 9 mg NaCl.

Talley, R. W. et al beskriver i Cancer Chemotherapy Reports, 57, 465-471 (1973), resultaterne af deres kliniske studium, fase I, af 30 brugen af cisplatin i behandlingen af 65 personer med stor variation af neoplasmer. Ligesom i den foregående publikation blev lægemidlet leveret til dem af The National Cancer Institute i hætteglas indeholdende 10 mg cisplatin, 90 mg natriumchlorid og 100 mg mannitol, til rekonstituering med 10 ml sterilt vand.

35 Rossof, A.H. et al., beskriver i Cancer, 30, 1451-1456 (1972) resultaterne af deres anvendelse af cisplatin i behandlingen af 31 personer med variation af tumortyper. De anfører, at det fra The National Cancer Institute leverede lægemiddel var fremstillet af Ben 3

DK 157484 B

Venue Laboratories, Inc. og pr. hætteglas indeholdt 10 mg cisplatin, 10 mg (sic) mannitol og 9 mg (sic) NaCl, og at det gulligt-hvide pulver let opløstes i 8-10 ml sterilt vand.

Visse oplysninger med hensyn til cisplatins kemi og farmaceutiske 5 formulering gives på siderne 1-5 og 31-32 i publikationen "CLINICAL BROCHURE, CIS-PLATINUM (II) DIAMMINEDICHLORIDE (NSC-119875)", H. Handelsman et al., Investigational Drug Branch, Cancer Chemotherapy Evaluation Program, Division of Cancer Treatment, National Cancer Institute (revideret august 1974). Siderne 31 og 32 deri angår formu-10 leringen af cisplatin til gratis levering af N.C.I. til læger for deres kliniske vurdering i kemoterapien af cancer og lyder i oversættelse som følger FARMACEUTISK DATABLAD 15 NSC-119875 Cis-diammindichlorplatin (II)

Dosisformulerina 10 mg/hætteglas: Indholdet af hvert 20 ml flint-hættegias fremtræder 20 som en grålig hvid lyophiliseret kage. Hvert hætte glas indeholder 10 mg NSC-119875, 90 mg natrium-chlorid, 100 mg mannitol og saltsyre til pH-justering.

Fremstilling 25 af opløsning 10 mg/hætteglas: Ved rekonstituering med 10 ml sterilt vand til injektion, USP, vil hver ml af den resulterende opløsning indeholde 1 jng NSC-119875, 10 mg mannitol, og 9 mg natriumchlorid med en pH-30 værdi i intervallet 3,5-4,5.

Opbevaring: De tørre, uåbnede hætteglas skal opbevares ved køleskabstemperatur (4-8°C).

35 4

DK 157484 B

Stabilitet: Intakte hætteglas har en foreløbig stabilitet på 1 år, når de opbevares ved køleskabstemperatur (4-8°C). Stabilitetsanvisningerne kan justeres efter afslutningen af et toårs lagringsstudium.-5 Rekonstituering som anbefalet resulterer i en bleg, gul opløsning, som er stabil i højest én time ved stuetemperatur (22°C) ved udsættelse for normal stuebelysning og højest otte timer ved stuetemperatur (22°C) beskyttet mod lys.

10— Rekonstituerede opløsninger kan danne et bund fald efter én time ved køleskabstemperatur (4-8°C).

Advarsel: De lyofiliserede dosispræparater indeholder ingen præserveringsmidler, og det anbefales derfor at 15 kassere opløsninger otte timer efter rekonsti tuering.

August 1984

Clinical Drug Distribution Section 20 Drug Development Branch

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer en fremgangsmåde til fremstilling af en stabil, mikrokrystallinsk form af cisplatin, som er hurtigt opløselig i vand, samt en fremgangsmåde til fremstilling deraf.

25 Den foreliggende opfindelse tilvejebringer ligeledes en fremgangsmåde til fremstilling af en steril, stabil, tør-blånding af den nævnte mi krokrystallinske form af cisplatin, som er egnet til hurtig rekonstituering med sterilt vand og intravenøs indgivelse til mennesker, idet denne tør-blanding om ønsket indeholder en steril, ikke-toxisk, 30 farmaceutisk acceptabel, uorganisk kilde af chloridioner i en mængde, der er ækvivalent med den, der frembringes ved tilstedeværelsen af natriumchlorid i en koncentration på fra 1 til 20 mg, og fortrinsvis 9 mg, pr. mg mikrokrystallinsk cisplatin, og idet denne tør-blanding også om ønsket indeholder en sædvanlig, uskadelig, fysiologisk 35 acceptabel excipient, som fortrinsvis er mannitol, i en koncentration på fra 2 mg til 150 mg, og fortrinsvis 10 mg, pr. mg mikrokrystallinsk cisplatin, hvilken tør-blanding er fuldstændig opløselig i sterilt vanu indenfor tre minutter (og sædvanligvis indenfor to minutter) ved en 5

DK 157484 B

koncentration på 1 mg mikrokrystallinsk cisplatin pr. ml sterilt vand.

Der tilvejebringes ligeledes ved den foreliggende opfindelse en fremgangsmåde til fremstilling af en steril, stabil tør-blanding af mikrokrystallinsk cisplatin i en forseglet beholder, såsom en ampul 5 eller et hætteglas, på enhedsdosisform, som er egnet til hurtig rekonstituering med sterilt vand og til intravenøs indgivelse til mennesker, idet denne tør-blåndede formulering indeholder, pr. ml sterilt vand der skal anvendes til rekonstituering, fra 0,1 til 1 mg, og fortrinsvis 1 mg, sterilt mikrokrystallinsk cisplatin, og idet denne 10 tør-blanding om ønsket indeholder, pr. ml sterilt vand der skal anvendes til rekonstituering, en steril, ikke-toxisk, farmaceutisk acceptabel, uorganisk kilde af chloridioner i en mængde, der er ækvivalent med den, der frembringes ved tilstedeværelsen af fra 1 til 20 mg, og fortrinsvis 9 mg, natriumchlorid, og idet denne tør-blanding også om ønsket inde-15 holder, pr. ml sterilt vand der skal anvendes til rekonstituering, fra 2 til 150 mg, og fortrinsvis 10 mg, af en sædvanlig, uskadelig, fysiologisk acceptabel excipient, som fortrinsvis er mannitol, hvilken tørblanding er fuldstændig opløselig i sterilt vand indenfor tre minutter (og sædvanligvis indenfor to minutter) ved en koncentration på 1 mg 20 mikrokrystallinsk cisplatin pr. ml sterilt vand.

Fremgangsmåden til fremstilling af mikrokrystallinsk cisplatin omfatter, at man i rækkefølge a) tilvejebringer en første opløsning omfattende et flydende organisk amid, og fortrinsvis et tertiært amid, og mest foretrukket 25 dimethyl formamid, indeholdende efter volumen fra 1% til 20%, og fortrinsvis 10%, vandig saltsyre med en koncentration på 6N til 12N, og fortrinsvis 12N, b) opløser cisplatin i nævnte første opløsning i en mængde på fra 10 til 60 g, og fortrinsvis 40 g, pr. liter af nævnte første opløs-30 ning, til frembringelse af en anden opløsning, c) blander nævnte anden opløsning, under omrøring, med fra 0,5 til 5 volumen, og fortrinsvis fra 0,75 til 2,5 volumen, og mest foretrukket 2 volumen, vand eller fortyndet vandig saltsyre med en koncentration på indtil 0,2N, og fortrinsvis 0,1N, ved en temperatur på fra 10°C til 35 40°C, og fortrinsvis ved stuetemperatur, til dannelse af mikrokry-stallinsk cisplatin, d) udvinder det mikrokrystallinske cisplatin ved filtrering, e) vasker det udvundne mikrokrystallinske cisplatin med vand 6

DK 157484 B

eller vandig saltsyre med en koncentration på indtil 0,2N, og fortrinsvis 0,1N, f) om ønsket yderl igere vasker det mikrokrystall inske cisplatin med et ikke-reaktivt, vand-blandbart, flygtigt, organisk opløsnings- 5 middel, fortrinsvis udvalgt blandt gruppen bestående af (lavere)-alkanoler og di(lavere)al kyl ketoner, og g) om ønsket tørrer den vaskede mikrokrystallinske cisplatin.

Praktiske hensyn dikterer, at et medikament, som kræver rekonstituering med vand til dannelse af en opløsning før indgivelse af en 10 læge, må være hurtigt opløseligt i den passende mængde vand, således at lægen eller dennes assistent undgår tidsspilde og trættende omrystning. Cisplatin, fremstillet ved de sædvanlige fremstillingsprocedurer, kræver typisk 10-25 minutter til opløsning i vand ved en koncentration på 1 mg/ml, selv når den først er sigtet til 200 mesh. Samme tidsperiode er 15 nødvendig for at opløse cisplatin ved samme koncentration i et vandigt bæremiddel indeholdende 9 mg/ml natriumchlorid og 10 mg/ml mannitol eller for at opløse en blanding af cisplatin, natriumchlorid og mannitol (i et vægtforhold 1:9:10) i vand ved en koncentration på 1 mg cisplatin pr. ml.

20 Cisplatin er for tiden kommercielt tilgængelig til cancer-kemoterapi under varemærket ,rPLATIN0L". Det leveres på enhedsdosisform i et hætteglas som et lyofiliseret pulver indeholdende 10 mg cisplatin, 90 mg natriumchlorid og 100 mg mannitol, og det skal rekonstitueres med 10 ml sterilt vand. Rekonstituering af dette produkt kan udføres indenfor 3 25 minutters omrystning. Imidlertid nødvendiggør fremstillingsmetoden lyofilisering af de individuelle hætteglas med en vandig opløsning af cisplatin, natriumchlorid, mannitol og fortyndet HC1, hvilket er en kostbar og tidskrævende process. Således kræver en kommerciel 1yofiliseri ngsoperati on af f.eks. 40.000 hætteglas 4-6 dage til færdiggørelse.

30 Denne procedure indbefatter anbringelse af hætteglassene på hylderne i kammeret, frysning af opløsningerne, evakuering af kammeret indtil lyofilisering er fuldstændig, indstilling af temperaturen i kammeret til over stuetemperatur for at fuldstændiggøre tørringen, indlukning af luft i kammeret, forsegling af hætteglassene og tømning af kammeret. I mod-, 35 sætning hertil forventes det, at en typisk steril tør-fyldnings- operation, der benytter en enkelt fyldningsmaskine til ifyldning af 200 mg faststoffer pr. hætteglas, kan producere 40.000 fyldte og forseglede hætteglas pr. 8 timers arbejdsskift. Hertil kommer, at fordi cisplatins 7

DK 157484 B

opløselighed kun er 1 mg/ml, bliver omkostningerne ved fremstilling af dosisformer indeholdende mere end 25 mg cisplatin pr. hætteglas ved lyofilisering prohibitive, på grund af det store volumen vand, der skal fjernes. Sådanne dosisformer kan imidlertid let fremstilles ved sterile 5 tørfyldningsteknikker. Yderligere ulemper, der er forbundet med lyofilisering, omfatter muligheden for strømsvigt under den lange cyklus-periode, hvilket normalt ville betyde, at hele portionen af cisplatin må kastes bort. Ligeledes kan det under lyofilisering fjernede HC1 korrodere lyofiliseringskammeret og -systemet.

10 Både N.C.I. Pharmaceutical Data Sheet for cisplatin og det officielle emballage cirkulære (Official Package Circular) for det ovenfor omtalte PLATINOL (cisplatin) nævner, at det uåbnede hætteglas med lyofiliseret produkt må opbevares ved køleskabstemperatur. Stabilitetsprøver på mikrokrystallinsk cisplatin og tør-blåndede formuleringer 15 deraf indicerer god stabilitet ved stuetemperatur. Stabilitetsprøver af 3 portioner af mikrokrystallinsk cisplatin viste hver mindre end 1% tab efter opbevaring i 3 måneder ved 56°C og 45°C, 4 måneder ved 37°C og 10 måneder ved 25°C, når det var pakket i ravfarvede gi as-hættegi as, forseglet med teflon-belagte gummipropper og anbragt i papkartoner. Der 20 opstod mindre end 1,7% tab med mikrokrystallinsk cisplatin pakket i ravfarvede glas-hætteglas med teflon-belagte gummipropper, når de afprøvedes under accelererede lysbetingelser ved stuetemperatur i en måned uden kartoner.

Stabilitetsprøver udførtes også på mikrokrystallinske tør-blandede 25 formuleringer indeholdende 10 mg mikrokrystallinsk cisplatin, 90 mg natriumchlorid og 100 mg mannitol, pakket i ravfarvede glas-hætteglas forseglet med teflon-belagte gummipropper. Styrketab observeret efter opbevaring i 2 og 3 måneder ved 56°C og 45°C var mindre 7%; tab efter 4 og 6 måneder ved 37°C var mindre end 5%; og tab efter 10 og 11 måneder 30 ved 25°C var mindre end 6%.

Mikrokrystallinsk cisplatin fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse har en parti kel større!sesfordeling på mindst 80% i intervallet 0-5 /un, og mindre end 20% i intervallet 5-20 /im, og i det væsentlige ingen partikler større end 20 jam. Når mikrokrystallinsk 35 cisplatin fremstilles under foretrukne betingelser, indeholder det typisk ingen partikler, der er større end 10 μια. Denne parti kelstørrelsesfordel ing er af samme størrelsesorden som for cisplatin, der er blevet lyofiliseret fra fortyndet saltsyre, og er signifikant 8

DK 157484 B

mindre end den typiske partikelstørrelse for maskinelt mi kroni serede farmaceutika. Tabel I nedenfor viser den mikroskopiske partikelstørrelsesvurdering af tre portioner af mikrokrystallinsk cisplatin, én portion lyofiliseret cisplatin (fra 0,07N HC1) og en typisk portion 5 kommerciel maskinelt mikroniseret benzathincephapirin.

TABEL I

Parti kelstørrelsesfordel i ng (%) 10 Materiale _ftm_ 0-5 5-10 10-20 10-730

Mikrokrystallinsk cisplatin (nr. 759) 96 4 0 15 Mikrokrystallinsk cisplatin (nr. 315) 82 14 4

Mikrokrystallinsk cisplatin (nr. 277) 85 15 0

Lyofiliseret cisplatin 20 (nr. 276) 97 3 0

Maskinelt mikroniseret benzathi ncephapi ri n (nr. 158) 11,3 85,5 - 3,4 25

Skønt studier over parti kelstørrelsesfordeling indicerer, at partikelstørrelsen for mikrokrystallinsk cisplatin er af samme størrelsesorden som for lyofiliseret cisplatin, og simpel mikroskopisk undersøgelse viser, at mikrokrystallinsk cisplatin adskiller sig bemærkelses-30 værdigt i partikelstørrelse fra almindelig (bulk) cisplatin, er situationen omvendt, når det drejer sig som krystalstruktur. Røntgenpulverdiffraktionsmønstre viser, at mikrokrystallinsk cisplatin og lyofiliseret cisplatin er klart forskellige krystallinske former, og at mikrokrystallinsk cisplatin og almindelig cisplatin er af samme krystallinske 35 form (idet mindre forskelligheder i diffraktionsmønstrene skyldes forskel i partikelstørrelse, kapi11ærpakning, etc.). Tabel II angiver de fra røntgenpulverdiffraktionsstudier (filtreret Cu Ka bestråling, 1,54051 Ångstrøm) opnåede data for almindelig cisplatin, mi krokrystal- 9

DK 157484 B

linsk cisplatin og lyofiliseret cisplatin.

TABEL II

Røntgendata for forskellige former for cisplatin 5

Prøve To theta Relativ Interplanare (grader) intensitet afstande Ångstrøm 10 Almindelig cisplatin 13,89 100 6,370 (nr. 389) 15,00 49 5,901 16.30 28 5,433 24.10 11 3,690 26,84 40 3,319 15 28,37 18 3,143 38.30 3 2,348

Lyofiliseret cisplatin 12,51 5 7,070 (nr. 359) 12,76 5 6,932 20 13,88 100 6,375 14,13 100 6,263 19.90 6 4,458 20,19 66 4,394 28.11 8 3,172 25 28,71 9 3,107 31.90 4 2,803

Mikrokrystallinsk 13,81 100 6,407 cisplatin 14,93 84 5,929 30 (nr. 705) 16,26 71 5,447 24,05 27 3,697 26,57 22 3,352 29,37 16 3,143 30,35 13 2,943 35 33,14 15 2,701

DK 157484B

10

Ved fremstilling af det mikrokrystall inske cisplatin ifølge den foreliggende opfindelse opløses først almindeligt (bulk) cisplatin i en opløsning af et flydende organisk amid og saltsyre. Egnede amider vil være indlysende for fagmanden, idet kravene er stabilitet af amidet og 5 tilstrækkelig opløselighed af cisplatin i amid-HCl blandingen. Egnede amider til brug i denne fremgangsmåde indbefatter f.eks. formamid, limet hyl formamid, Ν,Ν-dimethylformamid, N-ethylformamid, N,N-diethyl-formamid, Ν,Ν-dimethylacetamid, N,N-diethylacetamid, N-(2-hydroxyethyl)-acetamid, N-methyl-2-pyrrolidinon, og lignende. Det foretrækkes at 10 anvende tertiære amider, såsom Ν,Ν-dialkylformamiderne og N,N-dialkyl-acetamiderne. Det mest foretrukne amid er Ν,Ν-dimethylformamid. Det foretrækkes, at der anvendes et amid af høj kvalitet i denne fremgangsmåde. I parallelle forsøg, hvor der anvendtes (a) reagenskvalitet DMF og (b) teknisk DMF af lav kvalitet, viste det sig, at DMF af lav kvalitet 15 nedsatte produktudbyttet med 4% og forøgede produktets opløselighedstid til fem minutter.

Sammensætningen af amid-HCl opløsningen kan variere fra 1% (volumen) til 20% (volumen) saltsyre, og koncentrationen af saltsyren kan variere fra 6N til 12N. Den bedste sammensætning af amid-HCl 20 opløsningen for ethvert givet amid kan let bestemmes af fagmanden ved rutine testforsøg. Med det foretrukne amid, Ν,Ν-dimethylformamid, foretrækkes det at anvende en amid-HCl opløsning, der indeholder 90% (volumen) amid og 10% (volumen) 12N HC1. Det bør bemærkes, at en for høj koncentration af HC1 kan forårsage nogen nedbrydning af cisplatinet.

25 Afhængigt af det særlige amid, der anvendes, og sammensætningen af amid-HCl opløsningen, kan fra 10 til 60 g cisplatin opløses pr. liter amid-HCl opløsning. Med mange amid-HCl opløsninger kan signifikant mere end 60 g cisplatin fysisk opløses pr. liter, men det har vist sig, at efterfølgende krystallisation fra for højt koncentrerede opløsninger 30 giver et produkt, som ikke vil opløses fuldstændigt i løbet af 3 minutter. I den nedre ende har det vist sig, at mindre end 10 g cisplatin pr. liter sædvanligvis giver signifikant nedsatte udbytter og naturligvis kræver uforholdsmæssigt store voluminer opløsning til tilvejebringelse af en given mængde produkt. Ved anvendelse af den 35 foretrukne DMF-koncentreret HC1 opløsning (9:1 efter volumen) foretrækkes det at anvende 40 g cisplatin pr. liter.

Krystal!isationstrinnet kan udføres ved en temperatur på fra 10°C til 35°C. Ved højere temperaturer er produktudbyttet lavere på 11

DK 157484 B

grund forøget opløselighed. Ved temperaturer under 10°C har det vist sig, at produktet ofte har opløselighedstider over 3 minutter. Det antages, at dette skyldes, at produktet "chokeres" ud af opløsning, snarere end at den egentlige mikrokrystallinske cisplatin noget mere 5 langsomt vokser. Dette er imidlertid kun en teoretisk opfattelse og er ikke en del af opfindelsen. Det er naturligvis mest bekvemt at udføre krystallisationstrinnet ved stuetemperatur, og da der opnås udmærkede udbytter af mikrokrystallinsk cisplatin af høj kvalitet ved stuetemperatur {f.eks. 20-25°C), er dette den foretrukne krystallisations-10 temperatur.

Krystallisation sker ved at sammenblande amid-HCl opløsningen af cisplatin med fra 0,5 til 5 volumen vand eller fortyndet HC1 med en koncentration på op til 0,2N. Cispi ati nopløsningen kan sættes til vandet (eller fortyndet vandig HC1), eller omvendt. Hver fremgangsmåde giver i 15 det væsentlige samme udbytte og kvalitet af mikrokrystallinsk cisplatin.

Det mest hensigtsmæssige volumen vand (eller fortyndet vandig HC1), der skal sammenblandes med cisplatinopløsningen, afhænger af det særlige amid, der anvendes, samt af sammensætningen af amid-HCl-cisplatin opløsningen. Det mest hensigtsmæssige volumen for enhver given 20 cisplatinopløsning kan bestemmes ved rutine tests. I almindelighed foretrækkes det at anvende 1,5 til 2,5 volumen vand (eller fortyndet vandig HC1) pr. volumen amid-HCl-cispiatin opløsning. Når det foretrukne DMF-koncentreret HC1 (9:1 efter volumen) indeholdende 40 g cisplatin pr. liter anvendes, foretrækkes det anvende 2 volumen vand 25 (eller fortyndet vandig HC1) pr. volumen DMF-HC1-cispiatin opløsning.

Det bør bemærkes, at anvendelse af et for stort volumen vand (eller fortyndet vandig HC1) har tendens til også at udkrystallisere urenheder, som fandtes i udgangs-cisplatinet, f.eks. transpi atinum.

Som nævnt ovenfor kan mikrokrystallinsk cisplatin krystalliseres 30 fra dets amid-HCl opløsning ved tilsætning af vand eller fortyndet vandig HC1. Valget mellem disse to er ikke kritisk, og det foretrækkes at lade mængden og koncentrationen af det i amid-HCl-cispiatin opløsningen tilstedeværende HC1 være retningsgivende. Derfor, hvis denne opløsning indeholdt en forholdsvis ringe mængde HC1, i nærheden af den nedre 35 grænse på 1% 6N HC1, foretrækkes det at anvende 0,2N HC1 for at bevirke krystallisationen. Omvendt foretrækkes det, hvis amid-HCl-cisplatin opløsningen indeholdt en stor mængde HC1, i nærheden af den øvre grænse på 20% 12N HC1, at anvende vand for at bevirke krystallisationen. Ved 9

DK 157484B

12 anvendelse af det foretrukne DMF-koncentreret HC1 (9:1) indeholdende 40 g cisplatin pr. liter, foretrækkes det at anvende 0,1N HC1 for at bevirke krystallisationen.

Det ifølge den foreliggende opfindelse tilvejebragte mi krokrystal -5 linske cisplatin kan (efter sterilisation) pakkes alene i en forseglet beholder, såsom en ampul eller et hætteglas, fortrinsvis i enhedsdosisform, til rekonstituering med sterilt vand (mindst 1 ml pr. mg mikrokrystallinsk cisplatin) til frembringelse af en opløsning, der er egnet til intravenøs indgivelse. Alternativt kan det mi krokrystal1 in-10 ske cispiatin_ sammenblandes med en steril, ikke-toxisk, farmaceutisk acceptabel, uorganisk kilde af chloridioner i en mængde, der er ækvivalent med den, der-tilvejebringes ved tilstedeværelsen af natrium-chlorid i en koncentration på fra 1 til 20 mg (og fortrinsvis 9 mg) pr. mg mikrokrystallinsk cisplatin. Fortrinsvis er kilden af chloridioner 15 natriumchlorid. I en anden udførelsesform kan det sterile mi krokrystal-linske cisplatin sammenblandes med en steril, sædvanlig, uskadelig, fysiologisk excipient, som fortrinsvis er mannitol, i en mængde på fra 2 mg til 150 mg (og fortrinsvis 10 mg) pr. mg sterilt mikrokrystallinsk cisplatin. I yderligere en anden udførelsesform kan det sterile mikro-20 krystallinske cisplatin sammenblandes med både den førnævnte kilde af chloridion og excipient i de nævnte mængder. Hver af disse tør-blan-dinger pakkes derpå i en forseglet beholder, såsom en ampul eller et hætteglas, fortrinsvis i enhedsdosisform, til rekonstituering med sterilt vand (mindst 1 ml pr. mg mikrokrystallinsk cisplatin) til frem-25 bringelse af en opløsning, der er egnet til intravenøs indgivelse. De tidligere nævnte tør-blåndinger kan fremstilles ved simpel tør blanding af de ønskede bestanddele eller ved vådgranuleringsteknikker, som begge er velkendte. Hed vådgranuleringsfremgangsmåder foretrækkes det, at der fremstilles et granulat af alle bestanddele undtagen cisplatin, 30 og at granulatet efter tørring sammenblandes med den ønskede mængde mikrokrystallinsk cisplatin.

Det mikrokrystallinske cisplatin ifølge den foreliggende opfindelse og tør-blåndinger deraf er let opløseligt i sterilt vand (mindst 1 ml pr. ml mikrokrystallinsk cisplatin) inden for tre minutter. Den 35 rekonstituerede opløsning bør, hvis den ikke anvendes øjeblikkeligt, opbevares ved stuetemperatur. Afkøling ved temperaturer under 10°C resulterer i krystallisation af cisplatin, som ikke er på mikrokrystallinsk form. Dette cisplatin er overordentlig vanskeligt at genopløse ved 13

DK 157484 B

stuetemperatur, men opløsning kan opnås ved opvarmning til 35-40°C.

Cisplatin er en uorganisk forbindelse, som først iagttoges at forhindre repli kation af E. coli og derefter fandtes at besidde antitumor aktivitet. Lægemidlet udøver dets effekt, som består i at interferere 5 med DNA syntese, ved at forårsage tværbinding af komplementære strenge af DNA. Det er aktivt i en række tumorsystemer, herunder L1210, Sarcoma 180, Walker 256 carcinosarcoma, DMBA-induceret brysttumorer og ascitisk B16 melanosarcoma. Forbindelsen er særlig interessant, fordi den udviser synergism med et stort antal kemoterapeutiske midler, der anvendes for 10 tiden. Omfattende dyretoxikologi-studier viste renal tubulær nekrosis, enterocolitis, benmarvs-hypoplasia og lymfoid atrofi. Fase I studier har vist følgende toxiciteter: myelosuppression, renal insufficiens, højfrekvens ototoxicitet og GI intolerance. De for tiden anvendte doser med mild til moderat acceptabel toxicitet ligger i intervallet 60-100 15 mg/m2 IV som en enkelt dosis eller delt over 3-5 dage, som skal gentages med fire ugers intervaller. Tidlige kliniske forsøg viser nogen virkning af lægemidlet i kimcelle-tumorer, lymphomae, sarcomae, bryst-, hoved- og hals-carcinomae.

En dosis på 60 mg/m2 svarer groft til 1,5 mg/kg, som igen svarer 20 groft til 105 mg/patient med en vægt på 70 kg.

Det mikrokrystallinske cisplatin ifølge den foreliggende opfindelse eller tør-blåndinger deraf, anvendes efter rekonstituering på samme måde og med samme formål som anført ovenfor og i den omfangsrige litteratur inden for dette emne. Som det anføres der, anvendes der ofte behandling 25 sideløbende med andre kemoterapeutiske midler for at opnå de bedste resultater. Når det ønskes kan opløsningerne ifølge den foreliggende opfindelse umiddelbart før brug sættes til et sterilt, farmaceutisk acceptabelt, vandigt fortyndingsmiddel, såsom glucose eller saltvand. Indgivelse sker enten ved direkte intravenøs injektion eller ved 30 intravenøs infusion.

"Platinol" er af Bristol-Myers Company registreret som varemærke for cisplatin.

"Darco" er af Atlas Chemical Industries registreret som varemærke for aktiveret carbon.

35 "Millipore" er af Mi 11 ipore Corporation registreret som varemærke for membranfiltre.

DK 157484B

14

Eksempel 1

Fremstilling af mikrokrvstallinsk cisplatin

Til en opløsning af 0,7 ml IN HC1 og 6,3 ml dimethyl formamid (DMF) sattes 280 mg cisplatin, og blandingen omrørtes i 1 time, uden at der 5 opnåedes fuldstændig opløsning. Der tilsattes yderligere 2 ml DMF og 0,7 ml koncentreret HCL, og den resulterende opløsning omrørtes i 1 time og deltes derpå i to dele.

(a) Til én del af den ovenfor anførte opløsning (4,9 ml) sattes 20 ml 0,1N HCL, og det resulterende bundfald opslæmmedes i 15 minutter.

10 Faststofferne udvandtes ved filtrering, vaskedes med 1,5 ml 0,1N HC1 og 3 ml acetone og tørredes i vakuum ved 20°C i 18 timer. Udbyttet af mikrokrystallinsk cisplatin var 93 mg (66%). Karl Fischer analyse viste, at produktet var fri for vand, og NMR analyse viste, at det var fri for DMF og acetone.

15 Analyse beregnet for PtHgN2Cl2: H: 2,02, N: 9,34, Cl: 23,63,

Fundet: H: 1,89, N: 9,33, Cl: 22,59.

10 mg af det ovennævnte mi krokrystallinske cisplatin afvejedes i et 17 ml hætteglas sammen med 90 mg NaCl og 100 mg mannitol. Til denne 20 blanding sattes 9,9 ml sterilt vand, og der opnåedes fuldstændig opløsning indenfor 1 minuts omrystning. En anden 10 mg portion af det ovennævnte mikrokrystallinske cisplatin omrystedes med 10 ml af en vandig opløsning af NaCl (90 mg/10 ml) og mannitol (100 mg/10 ml) og opløstes fuldstændigt indenfor 1 minut.

25 (b) Den anden del af den ovennævnte opløsning (4,8 ml) sattes til 20 ml 0,IN HC1, og det resulterende bundfald opslæmmedes i 15 minutter. Faststofferne udvandtes ved filtrering, vaskedes med 1,5 ml 0,IN HC1 og 3 ml acetone og tørredes i vakuum ved 20°C i 18 timer. Udbyttet af 30 mikrokrystallinsk cisplatin var 98 mg (70%). En 10 mg portion af dette produkt rystedes med 10 ml af en vandig opløsning af NaCl (90 mg/10 ml) og mannitol (100 mg/10 ml) og opløstes fuldstændigt indenfor 1 minut.

Eksempel 2 35 Fremstilling af mikrokrystallinsk cisplatin

Cisplatin (280 mg) opløstes i 7,0 ml af en DMF-HC1 opløsning fremstillet ved at blande 0,7 ml koncentreret HC1 og 6,3 ml DMF. Opløsningen omrørtes i 1 time, og derpå tilsattes 14 ml 0,1N HC1. Det resul-

DK 157484B

15 terende bundfald opslæmmedes i 15 minutter, og faststofferne udvandtes derpå ved filtrering, vaskedes med 2 ml 0°C 0,1N HC1 og 4 ml acetone og tørredes i vakuum ved 20°C i 20 timer. Udbyttet af mikrokrystallinsk cisplatin var 225 mg (80%). En 10 mg prøve af dette produkt rystedes med 5 10 ml af en vandig opløsning af NaCl (90 mg/10 ml) og mannitol (100 mg/10 ml) og opløstes fuldstændigt indenfor 3 minutter. En anden 10 mg prøve af produktet blandedes med 90 mg NaCl og 100 mg mannitol, og denne tør-blandede formulering var fuldstændig opløselig i 9,9 ml vand indenfor 3 minutter.

10

Eksempel 3

Fremstilling af mikrokrystallinsk cisplatin

Cisplatin (210 mg) sattes til 3 ml af en DMF-HC1 opløsning fremstillet ved at blande 0,3 ml koncentreret HC1 og 2,7 ml DMF. Der opnåe-15 des ikke fuldstændig opløsning efter 1 times omrøring, så der tilsattes yderligere 0,1 ml koncentreret HC1 og 0,9 ml DMF. Den resulterende opløsning omrørtes i 1 time, og 8 ml 0,1N HC1 tilsattes derpå. Det resulterende bundfald opslæmmedes i 15 minutter, og faststofferne udvandtes dernæst ved filtrering, vaskedes med 1,5 ml 0,1N HC1 og 2 ml 20 acetone og tørredes i vakuum ved 20°C i 20 timer. Udbyttet af mikrokrystallinsk cisplatin var 162 mg (77%).

Eksempel 4

Fremstilling af mikrokrystallinsk cisplatin 25 Cisplatin (210 mg) opløstes i 5,25 ml af en opløsning af DMF-HC1 (9:1). Opløsningen omrørtes i 1 time, og 10,5 ml 0,1N HC1 tilsattes derpå. Det resulterende bundfald opslæmmedes i 15 minutter, og faststofferne udvandtes så ved filtrering, vaskedes med 1 ml 0,IN HC1 og 2 ml acetone og tørredes i vakuum ved 20°C i 18 timer. Udbyttet af 30 mikrokrystallinsk cisplatin var 168 mg (80%). 10 mg af dette produkt rystedes med 10 ml af en vandig opløsning af NaCl (90 mg/10 ml) og mannitol (100 mg/10 ml) opløstes fuldstændigt indenfor 2 minutter.

Yderligere 10 mg af dette produkt blandedes med 90 mg NaCl og 100 mg mannitol, og tør-blandingen var fuldstændig opløselig i 9,9 ml sterilt 35 vand indenfor 2 minutters omrystning.

16

DK 157484 B

Eksempel 5

Fremstilling af mikrokrvstallinsk cisplatin

Cisplatin (1,0 g) opløstes i 25 ml DMF-HC1 (9:1) opløsning. Den klare opløsning omrørtes i 1 time under en nitrogenatmosfære, og 50 ml 5 0,1N HC1 tilsattes dernæst. Det resulterende bundfald opslæmmedes i 15 minutter, og faststofferne udvandtes derpå ved filtrering og vaskedes med 5 ml 4°C 0,1N HC1 og 10 ml acetone. Ca. en fjerdedel af faststofferne tørredes i vakuum ved 40°C i 18 timer til dannelse af 0,120 g af produktet. Resten af faststofferne tørredes i vakuum ved 20°C i 18 timer 10 til dannelse af 0,682 g af produktet. Total udbyttet af mikrokrystallinsk cisplatin var 0,802 g (80%).

En 10 mg prøve af hvert af de tørrede produkter rystedes med 10 ml af en vandig opløsning indeholdende NaCl (90 mg/10 ml) og mannitol (100 mg/10 ml), og hver fandtes at være fuldstændig opløselig indenfor 3 15 minutter.

Tyndtlagskromatografi (TLC) af de to produkter afslørede ikke urenheder i nogen af dem. "High performance" væskekromatografi (HPLC) af de to produkter indicerede en styrke på 984 /ig/mg for materialet tørret ved 40°C, og en styrke på 1027 ηρ/mg for materialet tørret ved 20°C.

20 Analyse beregnet for PtHg^Clg: H: 2,02, N: 9,34, Cl: 23,63, (Tørret ved 40°C) Fundet: H: 1,77, N: 9,31, Cl: 23,29, (Tørret ved 20°C) Fundet: H: 1,79, N: 9,21, Cl: 23,13.

25 Eksempel 6

Fremstilling af mikrokrvstallinsk cisplatin

Cisplatin (2,5 g) opløstes i 62,5 ml DMF-HC1 opløsning (fremstillet ved opløsning af 15 ml koncentreret HC1 i 135 ml DMF). Opløsningen omrørtes i 1 time under nitrogen, og 125 ml 0,IN HC1 tilsattes 30 derpå. Det resulterende bundfald opslæmmedes i 15 minutter, og faststofferne udvandtes så ved filtrering, vaskedes med 12 ml 0,1N HC1 og 25 ml acetone og tørredes i vakuum ved 20°C i 18 timer. Udbyttet af mi krokrystallinsk cisplatin var 2,0 g (80%). En 10 mg prøve af produktet rystedes med 10 ml af en vandig opløsning indeholdende NaCl (90 mg/10 35 ml) og mannitol (100 mg/10 ml) og var fuldstændig opløselig indenfor 2 minutter.

En tør-blandet formulering fremstilledes ved grundigt at blande 750 mg af det ovenfor anførte produkt (200 mesh), 6,75 g NaCl (200 mesh) 17

DK 157484 B

og 7,5 mg mannitol (200 mesh).

Eksempel 7

Fremstilling af sterilt, ovrogen-frit natriumchlorid 5 NaCl (18,5 g) opløstes i 62 ml destilleret vand. Til denne opløsning sattes 1,85 g aktiveret carbon ("Darco KB"), og blandingen omrørtes i 0,5 timer. Carbonet fjernedes ved filtrering gennem hårdt filterpapir, og filtratet sattes langsomt til 62 ml hurtigt omrørt koncentreret HC1. Det resulterende bundfald opslæmmedes i 0,5 timer, 10 udvandtes ved filtrering gennem hårdt filterpapir og tørredes ved 100°C i 18 timer. Udbyttet af produktet var 13,8 g (75%).

Eksempel 8

Fremstilling af steril, pvroaen-fri mannitol 15 Mannitol (10 g) opløstes i 67 ml destilleret vand. Aktiveret carbon 1,0 g, "Darco KB") tilsattes, og blandingen omrørtes i 0,5 timer. Blandingen filtreredes derpå gennem hårdt filterpapir, og filtratet sattes langsomt til 335 ml hurtigt omrørt acetone. Det resulterende bundfald opslæmmedes i 0,5 timer, udvandtes ved filtrering gennem hårdt filter-20 papir og tørredes ved 100°C i 18 timer. Udbyttet af produktet var 8,0 g (80%).

Eksempel 9

Fremstilling af sterilt, tør fvidt cisplatin til injektion 25 (10 mg cisplatin or. hætteolasl A. Fremstilling af sterilt mikrokrvstallinsk cisplatin

Forholdsregler 30 Alt personel beskæftiget med håndtering af dette produkt bør beskytte sig som følger: (a) Der skal anvendes ansigtsmaske, øjenbeskyttelse, handsker og beskyttelsesklæder under fremstilling, oparbejdning og emballering.

(b) Undgå enhver kontakt med lægemidlet gennem inhalation eller 35 gennem huden.

(c) Rens alt udstyr og fremstillingsområdet grundigt for at fjerne eventuel lægemiddel forurening.

18

DK 157484 B

Fremgangsmåde 1. 90 ml dimethyl formamid* anbringes i en passende glasbeholder og der opretholdes en nitrogenoverlejring. Hurtig omrøring påbegyndes og opretholdes. 10 ml koncentreret saltsyre U.S.P. tilsættes langsomt.

5 Temperaturen opretholdes i området 20 til 27°€.

2. Der fortsættes med hurtigt at omrøre de 100 ml frisk fremstillet opløsning under et dække af nitrogen, idet temperaturen opretholdes i området 20-27°C.

3. Der tilsættes langsomt 4 g cisplatin i løbet af 5 minutter.

10 Hurtig omrøring fortsættes under et dække af nitrogen i 1 time. Der opnås en opløsning eller næsten opløsning.

4. Idet der anvendes nitrogentryk passeres opløsningen gennem et sterilt 0,22 μ "Millipore" filter til en egnet, steril, pyrogen-fri glasbeholder under anvendelse af aseptisk teknik i et sterilt område.

15 *Dimethyl formamidet bør være frit for dimethylamin og i renhed tilnærmelsesvis ækvivalent med Burdick og Jackson Laboratories--dimethylformamid, destilleret i glas, eller Fisher certificeret (ACS)-dimethylformamid, liste D-119.

20 5. Til filtratet, der opretholdes under hurtig omrøring, tilsættes i løbet af en periode på 5 minutter 200 ml 20-27°C steril, pyrogen-fri saltsyre. Der dannes tætte, gule mikrokrystaller. Der omrøres i 15 minutter.

25 6. Under anvendelse af aseptisk teknik isoleres krystallerne ved passende filtrering. Filterkagen suges til tilsyneladende tørhed. Overskydende luft bør ikke ledes gennem filterkagen. Filtratet bibeholdes.

7. Filterkagen vaskes med 10 ml 20-27°C steril, pyrogen-fri 0,1N saltsyre. Vaskevæsken sættes til filtratet fra trin 6. Filterka- 30 gen suges til tilsyneladende tørhed. Overskydende luft bør ikke ledes gennem filterkagen.

Filterkagen vaskes med 20 ml steril, pyrogen-fri acetone. Vaskevæsken sættes til filtratet. Filterkagen suges til tilsyneladende tørhed. Overskydende luft bør ikke ledes gennem filterkagen. (De forenede 35 filtrater gemmes. Udvinding af cisplatin fra filtratet beskrives i trin 9 nedenfor).

8. Under anvendelse af aseptisk teknik fjernes det mi krokrystal li nske cisplatin og tørres under højvakuum (i fravær af lys) i 24

' DK 157484 B

19 timer ved 37-42°C. Udbytte; ca. 3,3-3,5 g (80-86% udbytte). De gule mikrokrystaller opbevares i en passende, steril, pyrogen-fri, ravfarvet glasbeholder, som lukkes med et metal skruel åg, indeholdende et for af teflon eller polyethylen, ved kontrolleret stuetemperatur i fravær af 5 lys.

9. (a) Filtratet fra trin 7 ovenfor afkøles under omrøring til 0-4°C. Der kræves ikke aseptiske betingelser. Blandingen holdes uden omrøring i 48 timer ved 0-4°C. Gyldne krystaller udfældes. Krystallerne fjernes ved filtrering. Krystallerner vaskes med 20 ml acetone og 10 højvakuum-tørres (i fravær af lys) ved 37-42°C i 24 timer. Udbytte: ca.

0,2 g (5% udbytte). Disse krystaller besidder ikke den mikrokrystal-linske forms opløsningsegenskaber og bør bearbejdes med den ovenfor anførte fremgangsmåde til dannelse af mi krokrystallinsk cisplatin.

15 9. (b) De platinforbindelser, der bliver tilbage i filtratet, kan fjernes ved destillering af vandet og dimethyl formamidet.

Egenskaber af sterilt mikrokrystallinsk cisplatin fremstillet ved den ovenfor anførte fremgangsmåde 20 1. H.P.L.C. prøve: Enkelt toppunkt ved 2,8 minutters reten tionstid (1028 pg/mg).

2. IR: Konsistent med strukturen.

3. NMR: I T.F.A.; ingen tegn på acetone eller dimethyl formamid.

4. Grundstofanalvse: Konsistent med formlen; produktet er 25 tilsyneladende vandfrit.

5. Krystalmorfologi: Ved 250X i mineralsk olie under anvendelse af polariseringsmikroskop kommer mikrokrystallerne til syne som meget små stænger udvisende specifik ekstinktion. Ophavs-cisplatinet kommer til syne som meget store irregulære plader (muligvis flere hundrede 30 gange mi krokrystallernes størrelse) udvisende en dobbeltbrydning af farvespektret.

B. Fremstilling af sterilt natriumchlorid 1. 90 ml sterilt vand til injektion, U.S.P. anbringes i en passende 35 glasbeholder. Omrøring påbegyndes og opretholdes ved en temperatur 1 området 20-26°C. 27 g natriumchlorid tilsættes og opløses. Omrøring opretholdes, indtil der er opnået opløsning.

2. Omrøring fortsættes, og der tilsættes 2,7 g "Darcø KB" aktiveret 20

DK 157484 B

carbon. Omrøring opretholdes i 1,0 timer.

3. Carbonet fjernes ved filtrering. Carbonkagen vaskes med 5 ml sterilt vand til injektion. Vaskevæsken sættes til filtratet.

4. Under anvendelse af nitrogentryk og aseptisk teknik ledes 5 filtratet gennem et egnet, sterilt, pyrogen-frit 0,22 /im "Millipore" filter til en passende, steril, pyrogen-fri glasbeholder. Dette er opløsning A.

5. Under anvendelse af aseptisk teknik sættes 5 volumen (550 ml) acetone, som er blevet filtreret gennem et sterilt 0,22 /im "Millipore" 10 filter, til den under hurtig omrøring værende "Millipore" filtrerede opløsning A i løbet af en periode på 10 minutter. (Alternativt kan opløsning A sættes til 550 ml under hurtig omrøring værende acetone, som er blevet filtreret gennem et sterilt 0,22 /im "Millipore" filter).

Krystaller dannes.

15 6. Omrøring opretholdes ved stuetemperatur i 0,5 timer.

7. Krystallerne fjernes ved passende filtrering under anvendelse af aseptisk teknik.

8. Krystallerne vaskes på filtret med to 40 ml portioner acetone, som er blevet filtreret gennem et sterilt 0,22 μ "Millipore" filter.

20 9. Under anvendelse af aseptisk teknik fjernes krystallerne fra filtret og lufttørres ved 115-125°C i 24 timer. Udbytte: ca. 21,5 g (80% udbytte).

10. Krystallerne opbevares i en passende, steril, pyrogen-fri, ravfarvet glasbeholder, der er lukket med et metal skruel åg, som 25 indeholder et teflon- eller polyethylenfor.

Egenskaber af sterilt natriumchlorid fremstillet ved den ovenfor anførte fremgangsmåde 1. Acetone kan ikke spores ved NMR.

30 2. Vand (Karl Fisher) = Typisk ca. 1%.

C. Fremstilling af steril mannitol 1. 90 ml sterilt vand til injektion, U.S.P. anbringes i en passende glasbeholder. Omrøring påbegyndes og opretholdes ved en temperatur i 35 området 20-26°C. 13,6 g mannitol tilsættes og opløses. Omrøring opretholdes, indtil der er opnået opløsning.

2. Omrøring fortsættes, og der tilsættes 1,4 g "Darco KB" aktiveret carbon. Omrøring opretholdes i 1 time.

21 : DK 1574848 3. Carbonet fjernes ved filtrering. Carbonkagen vaskes med 5 ml sterilt vand til injektion, U.S.P. Vaskevæsken sættes til filtratet.

4. Under anvendelse af nitrogentryk og aseptisk teknik ledes filtratet gennem et egnet, sterilt, pyrogen-frit 0,22 øm "Mil!ipore" 5 filter til en passende, steril, pyrogen-fri glasbeholder.

5. Under anvendelse af aseptisk teknik sættes, under hurtig omrøring og i løbet af en periode på 10 minutter, 500 ml acetone, som er blevet filtreret gennem et sterilt 0,22 pm "Millipore" filter, til filtratet. Krystaller dannes. (Alternativt kan filtratet i løbet af 10 en periode på 10 minutter sættes til 500 ml under hurtig omrøring værende acetone, som er blevet filtreret gennem et sterilt 0,22 pm "Millipore" filter). Omrøring opretholdes i 0,5 timer ved stuetemperatur.

6. Krystallerne fjernes ved passende filtrering under anvendelse af 15 aseptisk teknik.

7. Krystallerne vaskes på filtret med to 20 ml portioner acetone, som er blevet filtreret gennem et sterilt 0,22 μ "Millipore" filter.

8. Under anvendelse af aseptisk teknik fjernes krystallerne fra filtret og lufttørres ved 100-115°C i 24 timer. Udbytte: ca. 11,4 g 20 (84% udbytte).

9. Krystallerne opbevares i en passende, steril, pyrogen-fri, ravfarvet glasbeholder, der er lukket med et metal skruel åg, som indeholder et teflonfor.

25 Egenskaber af steril mannitol fremstillet ved den ovenfor anførte fremgangsmåde 1. Der sporedes ingen acetone ved NMR.

2. Vand (Karl Fisher) = typisk ca. 0,4-1%.

30 D. Fremstilling af et sterilt granulat af mannitol og natriumchlorid til anvendelse i sterilt tør-fvldt mikrokrystallinsk cispi at in f.il injektion 35

DK 157484B

22

Formel

Pr. 10 mg Pr. 10.000 cisplatin 10 mg cisplatin hætteal as hættealas 5 Steril mannitol 0,1000 g 1000,00 g

Sterilt natriumchlorid 0,0900 g 900,00 g

Sterilt vand til injektion, U.S.P. 0,025 ml* 250,00 ml* ♦Mængden af anvendt vand kan variere som en funktion af 10 opnåelse af våd-granulering med passende konsistens. Vandet fjernes gennem bearbejdning.

Fremstil1 i nasi nstrukti oner (De nedenfor anførte sikkerhedsforholdsreal er skal iaattaaesl 15 1. Under anvendelse af aseptisk teknik og passende, sterilt, pyrogen-frit udstyr formales det sterile pyrogen-frie mannitol og det sterile, pyrogen-frie natriumchlorid separat gennem en 40 mesh screen.

2. Under anvendelse af aseptisk teknik anbringes de nødvendige mængder af formalet steril, pyrogen-fri mannitol og natriumchlorid i en 20 egnet, steril, pyrogen-fri blender. En med kappe forsynet vakuum V-B1ender eller Cone Blender forsynet med en omrøringsstang er ønskelig.

Der blandes i 1 time.

3. Der tilsættes i små portioner en tilstrækkelig mængde sterilt, pyrogen-frit vand til injektion, U.S.P.* gennem omrøringsstangen med 25 blenderen i rotation, indtil der dannes et granulat af passende konsistens. Efter hver tilsætning af vand til injektion aktiveres omrøringsstangen i to 5 minutters perioder i løbet af en halv times blandingsperiode.

♦Note: Mængden af vand vist i formlen bestemtes i et labora-30 torieforsøg i lille målestok. Afhængig af udstyret, der anvendes til frembringelse af større portioner, kan mængden af vand, der er nødvendig til fremstilling af et granulat med passende konsistens, afvige fra den indicerede mængde.

4. Når et passende granulat er opnået, fortsættes blenderrota-35 tionen med omrøringsstangen inaktiveret, og der vakuumtørres i blenderen med opvarmningsvandet i kappen indstillet på 50-70°C i 24 timer, eller indtil vandindholdet er under 0,3%.

Alternativt kan blandingen fjernes fra blenderen og tørres ved 23

DK 157484 B

50-60°C i en steril "Devine" vakuumovn i 48 timer.

5. Under anvendelse af aseptisk teknik ledes den tørrede blanding gennem en egnet, steril, pyrogen-fri mølle forsynet med en steril, pyrogen-fri 60 mesh eller ækvivalent screen.

5 6. Det formalede, sterile granulat anbringes i en egnet, steril, pyrogen-fri blender og blandes i en halv time, eller indtil der er opnået ensartethed af indholdet. Pulveret kan testes for chloridind-hold i løbet af perioden som en kontrol for indholdets ensartethed.

7. Pulveret opbevares i egnede, sterile, pyrogen-frie, ravfarvede 10 glasbeholdere, der er lukket med et metal skruel åg forsynet med et for af teflon eller polyethylen. Alternativt kan den nødvendige mængde steril blanding efterlades i blenderen, og den nødvendige mængde mi krokrystallinsk cisplatin tilsættes til frembringelse af cisplatin til injektion.

15 Sikkerhedsregler

Alt personel beskæftiget med håndtering af dette produkt bør beskytte sig som følger: (a) Der skal anvendes ansigtsmaske, øjenbeskyttelse, handsker og beskyttelsesklæder under fremstilling, oparbejdning og emballering.

20 (b) Undgå enhver kontakt med lægemidlet gennem inhalation eller gennem huden.

(c) Rens alt udstyr og fremstillingsområdet grundigt for at fjerne eventuel lægemiddel forurening.

25 E. Sterilt, tør-fvldt cisplatin til injektion (10 ma cisol atin pr. hætteqlasl [Kravet i henhold til etiketten er 10 mg cis-diammindichlor- platinum II (cisplatin) pr. hætteglas] 30 Forholdsregler

Alt personel beskæftiget med håndtering af dette produkt bør beskytte sig som følger: (a) Der skal anvendes ansigtsmaske, øjenbeskyttelse, handsker* &g beskyttelsesklæder under fremstilling, oparbejdning og emballering.

35 (b) Undgå enhver kontakt med lægemidlet gennem inhalation eller gennem huden.

(c) Rens alt udstyr og fremstillingsområdet grundigt for at fjerne eventuel lægemiddel forurening.

DK 157484B

24

Formel

Bestanddel Pr. hætteal as Pr. 100 hættealas

Sterilt, pyrogen-frit mikro- 5 krystallinsk cisplatin *0,0100 g 1,00 g

Sterilt, pyrogen-frit natrium- chlorid (40 mesh) 0,0900 g 9,00 g

Steril, pyrogen-fri mannitol (40 mesh) 0.1000 α 10.00 α 10 0,2000 g 20,00 g *Denne cisplatinvægt forudsætter en styrke på 1000 /ig/ml. For at bestemme den nødvendige cispiatinmængde anvendes følgende formel: 15 1000 X 0.0100 Q ni- -i ni r Itnlitin ri- Imt + cnl i c -3 = gram cisplatin pr. hætteglas cisplatinstyrke i øg/mg Fremstil!inosinstruktioner 20 1. Under anvendelse af aseptisk teknik og passende, sterilt, pyrogen-frit udstyr formales den sterile pyrogen-frie mannitol og det sterile, pyrogen-frie natriumchlorid separat gennem en 40 mesh screen.

2. De nødvendige mængder af screenet, sterilt, pyrogen-frit 25 natriumchlorid og mannitol blandes i et egnet, sterilt, pyrogen-frit blandings- eller blenderudstyr i 1 time. En V-Blender eller Cone Blender forsynet med en omrøringsstang er ønskelig.

3. Det mikrokrystallinske cisplatin passeres gennem en steril 40 mesh screen til eliminering af klumper. Til blenderen, som inde- 30 holder blandingen ifølge det foregående trin (eller granulationen fra trin D ovenfor), sættes den nødvendige mængde sterilt, pyrogen-frit mikrokrystallinsk cisplatin i tre separate og lige store portioner. Der blandes i 30 minutter efter hver tilsætning. Blandingen passeres gennem en steril 40 mesh screen og returneres til blenderen. Der blandes i 30 35 minutter eller længere, indtil en ensartet blanding er fremkommet.

4. Blandingen anbringes i passende, sterile, pyrogen-frie, ravfarvede glasbeholdere, der er lukket med et metal skruel åg forsynet med et teflonfor. Det hele opbevares i mørke.

DK 157484 B

.:25 5. Den nødvendige mængde blanding fyldes på egnede, sterile, pyrogen-frie, ravfarvede gi as-hættegi as. De lukkes og forsegles med egnede, sterile, pyrogen-frie teflonbelagte gummipropper og forsegles med aluminiumhætter. Hætteglassene opbevares i mørke.

5 6. 10 mg's cisplatin-hætteglasset skal rekonstitueres med ikke mindre end 10 ml sterilt vand til injektion, U.S.P. ved 22-30°C. En klar opløsning bør opnås indenfor 3 minutters omrystning. Der bemærkes en pH-værdi på 4,0 til 5,5. Cisplatinopløsninger ved en koncentration højere end 0,5 mg/ml bør ikke anbringes i køleskab, da cisplatin vil krystal -10 li sere ud af opløsning.

Claims (3)

1. Fremgangsmåde til fremstilling af mikrokrystallinsk cisplatin, KENDETEGNET ved, at man i rækkefølge 5 a) tilvejebringer en første opløsning omfattende et flydende organisk amid indeholdende efter volumen 1% til 20% vandig saltsyre med en koncentration på 6N til 12N, b) opløser cisplatin i denne første opløsning i en mængde fra 10 til 60 g pr. liter af den første opløsning til tilvejebringelse af en 10 anden opløsning, c) blander en anden opløsning under omrøring med fra 0,5 til 5 volumendele vand eller fortyndet vandig saltsyre med en koncentration indtil 0,2N ved en temperatur fra 10°C til 40°C til dannelse af mikrokrystallinsk cisplatin, 15 d) udvinder det mikrokrystallinske cisplatin ved filtrering, e) vasker det udvundne mikrokrystallinske cisplatin med vand eller vandig saltsyre med en koncentration indtil 0,2N, f) om ønsket yderligere vasker det mikrokrystallinske cisplatin med en non-reaktivt, vandblandbart, flygtigt, organisk opløsningsmiddel, og 20 g) om ønsket tørrer det vaskede mikrokrystallinske cisplatin.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at der som flydende organisk amid anvendes et tertiært amid.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, KENDETEGNET ved, at der som flydende, tertiært, organisk amid anvendes N,N-di al kyl formamid, N,N-di - 25 alkylacetamid eller N-methyl-2-pyrrolidinon. 30 35