LU83606A1 - Compositions et procede pharmaceutiques - Google Patents

Description

*

MÉMOIRE DESCRIPTIF

j DÉPOSÉ A L'APPUI D'UNE DEMANDE

□E

BREVET D’INVENTION

t

j FORMÉE PAR

!

i BRISTOL-MYERS COMPANY

i t | pour

Compositions et procédé pharmaceutigués.

La présente invention concerne une forme microcristalline, stable et facilement soluble du cisplatine, de même que des mélanges secs de ce composé qui, après reconstitution avec de l'eau stérile, sont administrés par injection en chimiothérapie du cancer.

Les composés du platine constituent un groupe remarquable d'agents antinéoplasiques. Initialement, Rosenberg et collaborateurs ont observé en 1965 leur effet antiobiotique [Rosenberg, B. et al., Nature (London), 205, 698-699 (1965)]j mais ultérieurement ces auteurs ont découvert qu’ils sont de puissants agents antinéoplasiques chez les animaux [Rosenberg, B. et al., Nature (London), 222, 385-386 (1969)].

Ces composés sont des complexes comprenant un atome central de platine entouré par des atomes de chlore ou des radicaux ammoniac en position cis ou trans par rapport au plan. La structure de deux des composés du platine les plus couramment étudiés est la suivante:

Ci

Cl NEU Gl NEU

/^/ /^/

Cl NHj Cl. | NHj ·

Cl

Di chlorure de cisplatine (II) Tétrachlorure de cis-diammine platine (IV) diammine

Comme il est apparent, les atomes de chlore et radicaux ammoniac se trouvent dans un même plan dans le dichlorure de cisplatine (II) diammine. Ce composé, appelé aussi cisplatine dans le système USAN (United States Adopted Name), est obtenu par la réaction suivante:

Nff^Cl ^[PtCl^] + 2NH5 ->cis-[Pt(NH5)2Cl2] + 2KC1 [voir Kauffman, G. B. et al., dans Inorganic Synthesis, J. Kleinberg (Ed.), pages 239-245, McGraw-Hill Book Co., J= . Inc., New York, 1963].

Breusova-Baidala, Y. G. et al., dans Akademia Nauk SSSR, n° 6, pages 1239-1242 (Juin 1974), décrivent l’isomérisation lente du dichlorure de cisplatine (II) diammine en solution aqueuse en sa forme trans.

Reishus, J. W. et Martin, D. S. décrivent dans Journal of The American Chemical Society, 83, 2457-2462 (1961)

V

l'hydrolyse acide du cisplatine à 25°C et 35°0- Ces études ont été faites sur des solutions aqueuses 1,5 x ΙΟ“5 M, 2,5 x 10-5 M et 5î0 χ 10-3 Mî c'est-à-dire contenant 0,45, 0,75 et 1,5 mg/ml, respectivement. Ces auteurs indiquent que la localisation de l'origine (c'est-à-dire du "point zéro") pour les courtes d'hydrolyse laisse subsister un certain doute parce que la dissolution complète des sels exige 10 à 30 minutes, même à ces faibles concentrations.

Rozencweig, M. et al., reprennent dans Annals of Internai Medicine, 86, 803-812 (1977) les résultats de dif- férentes investigations précliniques et cliniques sur l'uti lisation du cisplatine dans des tumeurs expérimentales chez les animaux et contre différents types de tumeurs chez 1;homme. Ces auteurs indiquent que le médicament expérimental, mis à la disposition des chercheurs qualifiés par 1 ' Investigational Drug Brauch of the Cancer Therapy Evaluation Programm of the National Cancer Institute, est présenté sous la forme d'une poudre lyophilisée blanche dans des fioles contenant 10 mg de cisplatine, 90 mg de chlorure de sodium, 100 mg de mannitol (Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique) et de l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH. Après reconstitution avec 10 ml d'eau stérile pour injection (Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique), la solution résultante contient, par ml, 1 mg de cisplatine, r - 10 mg de mannitol et 9 mg de chlorure de sodium.

Talley, R. V. et _al., décrivent dans Cancer Chemotherapy Reports, 57, 465-471 (1973) les résultats de la phase I de leur étude clinique de l'administration du cisplatine pour le traitement de 65 patients humains atteints de différents néoplasmes. Comme dans le cas précédent, r.&çi r»hATv»ViônT»e τγαπ+γ 1 o η άτηκτη+: Ηπ ΜαΊτι final ΠατίΛοτ

Institute dans des fioles contenant 10 mg de cisplatine, 90 mg de chlorure de sodium et 100 mg de mannitol pour la reconstitution avec 10 ml d'eau stérile.

Rossof, A. H. et al. décrivent dans Cancer, 30 > 1451-1456 (1972) les résultats de l'administration du cisplatine pour le traitement de 31 patients humains atteints de différentes tumeurs. Ils indiquent que le médicament provenant du National Cancer Institute est fabriqué par la Société Ben Venue Laboratories, Inc. et contient, par fiole, 10 mg de cisplatine, 10 mg (sic) de mannitol et 9 mg (sic) de chlorure de sodium et que la poudre blanc - jaunâtre se dissout aisément dans 8'à 10 ml d'eau stérile.

Certaines informations relatives aux propriétés chimiques et aux formes pharmaceutiques du cisplatine sont données aux pages 1-5 et 31-52 de la publication intitulée "CLINICAL BROCHURE, CIS-PLATINUM (II) DIAMMIREDICHLORIDE

t (NSC-119875)"î H* Handelsman et al., Investigational Drug Brauch, Cancer Chemotherapy Evaluation Program, Division of Cancer Treatment, National Cancer Institute (Révision août 1974).· Les pages 31 et 32 concernent la composition du cisplatine attribué gratuitement par le National Cancer Institute aux médecins pour leur évaluation clinique dans la chimiothérapie du cancer et portent les indications suivantes:

Données pharmaceutiques ÿ NSC-119875 Cis-diamminodichloroplatine (II)

Norme dosée 10 mg/fiole : Le contenu de chaque fiole de verre de 20 ml est une masse lyophilisée blanc cassé. Chaque fiole contient 10 mg de NSC-119875, 90 mg de chlorure de sodium, 100 mg de mannitol et de l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH.

Préparation de la solution 10 mg/fiole : Après reconstitution avec 10 ml d'eau stérile pour injection (Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique), chaque ml de la solution résultante contient 1 mg de ÏTSC-119875 î 10 mg de mannitol et 9 mS de chlorure de sodium et a un pH de 3»9 à 4,5.

Conservation : Les fioles non ouvertes sèches doivent être conservées à l'armoire frigorique (4-8°C).

Stabilité : Les fioles intactes ont une stabilité pré-- vue de 1 an lorsqu'elles sont conservées à l'armoire frigorifique (4 à 8°C). Les critères de stabilité pourraient être corrigés au terme d'une étude de conservation de 2 ans. La reconstitution comme indiqué donne une solution jaune pâle dont la stabilité n'excède pas 1 heure à la température ambiante (22°C) en éclairage normal et n'excède pas 8 heures à la température ambiante (22°C) à l'abri de la lumière. Les solutions reconstituées peuvent former un précipité après 1 heure à la température de l'armoire frigorifique (4-8°C).

Précaution : Les formes dosées lyophilisées sont exemptes d'agents de conservation et il est donc recommandé de jeter les solutions 8 heures après la reconstitution.

Août 1974

Clinical Drug Distribution Section

Drug Development Brauch L'invention a pour objet une forme microcristalline, stable du cisplatine qui est facilement soluble dans l'eau, de même qu'un procédé pour la préparer. Elle a aussi pour objet un mélange sec, stable, stérile de cette forme microcristalline du cisplatine se prêtant à une reconstitution rapide avec de l'eau stérile et à l'administration par voie intraveineuse à l'homme; ce mélange sec contenant éventuellement une source inorganique stérile non toxique pharma-ceutiquement acceptable d'ions chlorure en quantité équivalente à celle établie par le chlorure de sodium en concentration d’environ là 20 mg et de préférence d’environ 9 mg par mg de cisplatine microcristallin; ce mélange sec contenant éventuellement aussi un excipient ordinaire inoffensif physiologiquement acceptable, qui est de préférence le mannitol, en concentration d'environ 2 à 150 mg et de préférence d'environ 10 mg par mg de cisplatine microcristallin; ce mélange sec étant complètement soluble dans l’eau stérile en environ 3 minutes (et habituellement en environ 2 minutes) à une concernation de 1 mg de cisplatine microcristallin par ml d'eau stérile.

L'invention a en outre pour objet un mélange sec stérile, stable de cisplatine microcristallin en récipient scellé tel qu’une ampoule ou fiole sous forme de dose unitaire se prêtant à la reconstitution rapide avec de l’eau stérile et à l'administration intraveineuse à l'homme; ce mélange sec comprenant, par ml d'eau stérile servant à la 7- reconstitution, environ 0,1 à 1 mg et de préférence en-' viron 1 mg de cisplatine microcristallin stérile; ce mélange sec contenant éventuellement, par ml d'eau stérile servant à la reconstitution, une source inorganique stérile non toxique pharmaceutiquement acceptable d'ions chlorure en quantité équivalente à celle établie par le chlorure de sodium un f'.nnr'Ant.T'ati λπ H J ünwi r-.n 1 λ OO w, ™ d’environ 9 mg; ce mélange sec contenant éventuellement aussi, par ml d'eau stérile servant à la reconstitution, environ 2 à 150 mg et de préférence environ 10 mg d'un excipient ordinaire inoffensif physiologiquement acceptable, qui est de préférence le mannitol, ce mélange sec étant complètement soluble dans l'eau stérile en environ 3 minutes (et habituellement en environ 2 minutes) à une concentration de 1 mg de cisplatine microcristallin par ml d'eau stérile.

L'invention a de plus pour objet un procédé de préparation de cisplatine microcristallin suivant lequel, i· à des stades successifs: a) on constitue une première solution comprenant un amide organique liquide, qui est de préférence un amide tertiaire et le plus avantageusement le diméthylformamide, et contenant, en volume, environ 1 à 20% et de préférence environ 10% d'acide chlorhydrique aqueux dJune concentration d'environ 6 à 12 N et de préférence d'environ 12 N; b) on dissout du cisplatine dans cette première solution en quantité d'environ 10 à 60 g et de préférence d'environ 40 g par litre de la première solution, pour obtenir une seconde solution; c) on mélange cette seconde solution, sous agitation, et avec environ 0,5 à 5 volumes, de préférence environ 0,75 à 2,5 volumes et le plus avantageusement environ 2 volu-mes d'eau ou d'acide chlorhydrique aqueux dilué d'une concentration s'élevant jusqu'à environ 0,2 N et de préférence . d'environ 0,1 I, à une température d'environ 10 à 40°C et de préférence à peu près à la température ambiante, pour former du cisplatine microcristallin; d) on recueille le cisplatine microcristallin par filtration ; » f e) on soumet le cisplatine microcristallin recueilli à un lavage avec de l'eau ou de l'acide chlorhydrique aqueux d'une concentration s'élevant jusqu'à environ 0,2 Ή et de préférence d'environ 0,1 N; f) éventuellement, on lave le cisplatine microcristallin en outre avec un solvant organique volatil inerte miscible à l'eau, de préférence choisi parmi les alcanols inférieurs et les dialkylcétones inférieures ; et g) on sèche éventuellement le cisplatine microcristallin lavé.

Des considérations d'ordre pratique imposent qu'un - médicament qui doit être reconstitué avec de l'eau en une solution avant d'être administré par le médecin soit rapidement soluble dans la quantité convenable d'eau pour éviter une agitation fastidieuse par le médecin ou son assistant. Le cisplatine, préparé suivant les techniques habituelles, exige normalement 10 à 25 minutes pour sa dissolution dans l'eau en une concentration de 1 mg/ml, même s'il est préalablement tamisé en particules de 7^ yum. La durée nécessaire est la même pour dissoudre le cisplatine à la même concentration dans un véhicule aqueux contenant 9 mg de chlorure de sodium et 10 mg de mannitol par ml ou pour dissoudre un mélange de cisplatine, de chlorure de sodium et de mannitol (dans un rapport pondéral de 1:9:10) dans de l'eau à une concentration de 1 mg de cisplatine par ml.

Le cisplatine est actuellement disponible dans le commerce pour la chimiothérapie du cancer sous la marque déposée PLATINOL. Il est présenté sous forme de dose unitaire à l'état de poudre lyophilisée dans une fiole contenant 10 mg de cisplatine, 90 mg de chlorure de sodium et 100 mg de mannitol pour la reconstitution avec 10 ml d'eau * stérile. La reconstitution de ce produit peut être effectuée en 3 minutes d'agitation. Toutefois, le mode de fabrication exige de lyophiliser dans chaque fiole une solution aqueuse de cisplatine, de chlorure de sodium, de mannitol et d'acide chlorhydrique dilué, ce qui est une opération à marche discontinue, onéreuse et lente. Par exemple, la lyophilisation industrielle de 40.000 ampoules serait achevée en environ 4 à 6 jours. Cette durée corn-· prend les temps nécessaires pour la disposition des fioles sur les étagères de la chambre, la congélation des solutions, la mise de la chambre sous vide jusqu'au terme ï de la lyophilisation, l'ajustement de la température de la chambre au-delà de la température ambiante pour l'achèvement du séchage, l'admission de l'air dans la chambre, le scellement des fioles et le retrait de ces dernières hors de la chambre. D;autre part, il est à prévoir qu>un remplissage à sec stérile typique au moyen d'une seule machine introduisant 200 mg de solides par fiole permettrait de produire environ 40.000 ampoules remplies et scellées en une durée de 8 heures. De plus, comme la solubilité du cisplatine n'est que d'environ 1 mg/ml, les dépenses pour la préparation de formes dosées contenant plus d'environ 25 mg de cisplatine lyophilisé par fiole deviennent prohibitives en raison du grand volume d'eau qu'il faut chasser. Ces formes dosées peuvent, par contre, être préparées aisément suivant les techniques de remplissage à sec. D'autres inconvénients de la lyophilisation sont la possibilité d'une panne de courant au cours de cette longue préparation, ce qui entraînerait normalement le rejet de tout le lot de cisplatine. En outre, l'acide chlorhydrique éliminé pendant la lyophilisation peut corroder la chambre et l'appareil de lyophilisation.

3 »

Tant les indications pharmaceutiques données par le National Cancer Institue pour le cisplatine que la note officielle relative à l'emballage du PLATINOL (cisplatine) ci-dessus précisent que la fiole fermée contenant le produit lyophilisé doit être conservée à la température de l'armoire frigorifique. Les essais de stabilité sur le cisplatine microcristallin et ses mélanges secs ont indiqué sa bonne stabilité à la température ambiante.

Des essais de stabilité sur trois lots de cisplatine micro-; cristallin ont révélé chacun une perte de moins de 1% après 5 mois à 56°C et 45°C, 4 mois à 37°0 et 10 mois à 25°C lorsque le produit est contenu dans des fioles en verre ambré obturées avec des bouchons en caoutchouc recouverts de téflon et conservées dans .des boîtes en carton. La perte est inférieure à 1,7% pour du cisplatine microcristallin contenu dans des fioles en verre ambré obturées avec des bouchons en caoutchouc recouverts de téflon lors d'un essai de vieillissement accéléré à la lumière à la température ambiante sans emballage de carton.

Des essais de stabilité sur des mélanges secs de cisplatine microcristallin contenant 10 mg de cisplatine microcristallin, 90 mg de chlorure de sodium et 100 mg de mannitol dans des fioles en verre ambré obturées avec des bouchons en caoutchouc recouverts de téflon ont permis d'observer des pertes d'efficacité de moins de 7% après 2 et 3 mois à 56°C et 45°C, de moins de 5% après 4 et 6 mois à 37°0 et de moins de 6% après 10 et 11 mois à 25°C.

Le cisplatine microcristallin obtenu conformément à l'invention a un spectre granulométrique tel qu;il comprend au moins environ 80% de particules de 0 à 3 yirm, moins d; environ 20% de particules de 5 à 20 yum, et sensiblement aucune particule de plus de 20 >um. Préparé dans les conditions préférées, le- '.cisplatine microcristallin ne contient normalement pas de particules de plus de 10 ^um.

Ce spectre granulométriqué est du même ordre que celui du cisplatine qui a été lyophilisé à partir de l'acide chlorhydrique dilué et est sensiblement plus fin que le spectre granulométrique typique des produits pharmaceutique s micronisés à la machine. La tableau I ci-après indique le spectre granulométrique évalué au microscope pour trois lots de cisplatine microcristallin, pour un lot de cisplatine lyophilisé (à partir d'acide chlorhydrique 0,07 N) et pour un lot typique de benzathine-céphapirine : micronisée à la machine de 'type commercial.

TABLEAU I Spectre granulométrique (%)

yüJR

Composé ------- 0-5 5-10 10-20 10-750

Cisplatine microcristallin 96 4 0 - (n° 759)_

Cisplatine microcristallin 82 14 4 (n° 315)

Cisplatine microcristallin 83 15 0 (n° 277)

Cisplatine lyophilisé (n° 276) 97 3 0 -

Benzathine-céphapirine micro- 11,3 85,5 " 3,Si nisée à la machine (n° 158)

Bien que l'étude du spectre granulométrique indique que la finesse du cisplatine microcristallin est du même ordre que celle du cisplatine lyophilisé et que l'examen microscopique immédiat montre que le cisplatine microcristallin diffère nettement par sa granulométrie du cisplatine ordinaire (grossier), il n'en est pas de même de la structure cristalline. Les diagrammes de diffraction des rayons X relevés suivant la technique des poudres montrent que le cisplatine microcristallin et le cisplatine lyophilisé ont des formes cristallines nettement différentes et que le cisplatine microcristallin et le cisplatine grossier ont la même forme cristalline (des différences mineures des diagrammes de diffraction étant dues à des différences de granulométrie, de tassement dans le capillaire, etc.).

Le tableau II comprend les données obtenues par diffraction des rayons X suivant la technique des poudres (rayonnement

’ O

Cu Ka filtré, "X = 1,54-051 A) pour le cisplatine grossier, : le cisplatine microcristallin et le cisplatine lyophilisé.

TABLEAU II

Diagramme de diffraction des rayons X de différentes formes du cisplatine

Composé 21^ (°) I/I Equidistances

j U O

____(A) 13,89 100 6,370 15,00 49 5,901 16.30 28 5,4-33

Cisplatine grossier 24,10 11 3,690 (n° 389) 26,84 40 3,319 28,37 18 3,14-3 38.30 3 2,34-8 TABLEAU II (suite) 12,51 5 7,070 12,76 5 6,932 13,88 100 6,375 14.13 100 6,263

Cisplatine 19,90 6 4,458 lyophilisé 20,19 66 4,394 (n° 359) 28,11 8 3,172 28,71 9 3,107 31,90 4 2,803 13,81 100 6,407 14,93 84 5,929 16,26 71 5,447

Cisplatine 24’°5 2? 5.697 microcristallin 25 ^ 22 3 332 (n° 7°5) 28,37 16 3,143 30,35 13 2,943 33.14 15 2,701

Pour la préparation du cisplatine microcristallin de l'invention, on commence par dissoudre du ciplastine ordinaire (grossier) dans une solution formée d'un amide v organique liquide et d'acide chlorhydrique. Les amides appropriés sont évidents pour le spécialiste, les critères étant la stabilité de 1'amide et une solubilité suffisante du cisplatine dans le mélange d'acide chlorhydrique et d'amide. Des amides convenant aux fins de l'invention sont, par exemple, le formamide, le U-méthylformamide, le ÎT,U-dimé-thylformamide, le N-éthylformamide, le U,U-diéthylformamide, le Ν,Ν-diméthylacétamide, le Ν,Ν-diéthylacétamide, le U-(2- € hydroxyéthyl)acét amide, la N-méthyl-2-pyrrolidone, etc..

La Demanderesse préfère utiliser les amides tertiaires, comme les W,îi-dialkylformamides et ΪΓ,ΓΓ-dialkylacétamides. L'amide spécialement préféré est le N,N-diméthylformamide.

Il est préférable d'utiliser un amide de haute qualité pour le procédé. Lors d'expériences exécutées en parallèle (a) avec du diméthylformamide de qualité pour analyse et (h) du diméthylformamide de qualité technique inférieure, la Demanderesse a découvert que le diméthylformamide de qualité inférieure fait baisser d'environ 4% le rendement en produit et augmente d'environ 5 minutes la durée ^ de dissolution du produit.

La solution formée par l'amide et l'acide chlorhydrique peut contenir environ 1 à 20% en volume d'acide chlorhydrique et la concentration de l'acide chlorhydrique peut s'échelonner d'environ 6 à 12 N. La composition optimale pour la solution formée par l'amide et l'acide chlorhydrique, pour un amide donné quelconque, peut être déterminée aisément par le spécialiste. Pour l'amide préféré, qui est le Ν,Ν-diméthylformamide, la Demanderesse préfère prendre une solution contenant environ 90% en volume d'amide et environ 10% en volume d'acide chlorhydrique à environ 12 1T. Il convient de noter qu'une concentration trop élevée en acide chlorhydrique peut provoquer une V · certaine dégradatation du cisplatine.

Suivant la nature de l'amide utilisé et la composition de la solution formée par l'amide et l'acide chlorhydrique, on peut dissoudre environ 10 à 60 g de cisplatine par litre de cette solution d'amide et d'acide chlorhydrique. De nombreuses solutions d'amide et d'acide chlorhydrique peuvent dissoudre sensiblement plus de 60 g de cisplatine par litre, mais la Demanderesse a découvert aue la cristallisa # tion ultérieure à partir de solutions trop concentrées conduit à un produit qui ne serait pas dissous complètement en 3 minutes. Aux basses concentrations, une quantité de cisplatine de moins d’environ 10 g/litre conduit d'habitude à des rendements sensiblement moindres et exige évidemment des volumes exagérés de solution pour une quantité déterminée de produit. Dans le cas de la solution préférée formée par du diméthylformamide et de l'acide chlorhydrique concentré (dans un rapport en volume d'environ 9:1)> la Demanderesse préfère utiliser environ 40 g de cisplatine par litre.

La cristallisation peut être effectuée à une température d'environ 10 à 35°C. Aux températures plus élevées, le rendement en produit est inférieur en raison d'une augmentation de la solubilité. Au-dessous d'environ 10°C, le produit a souvent une durée de dissolution de plus de 3 minutes. L'hypothèse avancée est que ce phénomène est dû au fait que le produit est "chassé" trop rapidement de la solution au lieu de former un peu plus lentement du cisplatine microcristallin convenable. Toutefois, cette hypothèse ne limite nullement la validité de l'invention.

Il est évidemment le plus facile d'exécuter la cristallisation à la température ambiante et comme des rendements • ^ . excellents en cisplatine microcristallin de haute qualité sont atteints à la température ambiante (par exemple 20 à 25°C), cette température est préférée aux fins de‘1'invention pour la cristallisation.

La cristallisation est conduite par mélange de la solution de cisplatine dans le système amide-acide chlorhydrique avec environ 0,5 à 3 volumes d'eau ou d'acide chlorhydrique dilué dont la concentration peut s'élever jusqu'à pmn τ>ηη O P "ΚΓ T,a onlivhïnn Sa pi ίηΙηΗπρ τίαιτΗ a Ήτά ηπηπ+τόο à l'eau (ou à l'acide chlorhydrique aqueux dilué) ou réciproquement. Les deux modes opératoires donnent sensiblement le même rendement et la même qualité de cisplatine microcristallin. Le volume optimal d'eau (ou d'acide chlorhydrique aqueux dilué) qu'il faut mélanger avec la solution de cisplatine dépend de la nature de 1'amide, ainsi que de la composition de la solution formée par 1'amide, l'acide chlorhydrique et le cisplatine. Le volume optimal pour une solution donnée quelconque de cisplatine peut être déterminé ampiriquement. En règle générale, la Demanderesse préfère prendre environ 1,5 à 2,5 volumes d'eau (ou d'acide chlorhydrique aqueux dilué) par volume de solution consistant en amide, en acide chlorhydrique et en cisplatine.

Dans le cas du système préféré formé par du diméthylformamide et de l'acide chlorhydrique concentré (dans un rapport volumique de 9si) contenant environ 40 g de cisplatine par litre, la Demanderesse préfère prendre environ 2 volumes d'eau (ou d'acide chlorhydrique aqueux dilué) par volume de solution consistant en diméthylformamide, en acide chlorhydrique et en cisplatine. Il convient de noter qu'un trop grand volume d'eau (ou d'acide chlorhydrique aqueux dilué) tend à faire cristalliser aussi les impuretés contenues dans le cisplatine de départ, par exemple le transplatine.

Comme indiqué ci-dessus, le cisplatine microcristallin peut être amené à cristalliser par addition d'eau ou d'acide chlorhydrique aqueux dilué à sa solution dans un mélange d'amide et d'acide chlorhydrique·. Le mode d'addition n'est pas critique et la Demanderesse établit son choix à partir de la quantité et de la concentration de l'acide chlorhydrique dans la solution consistant en amide, en acide chlorhydrique et en cisplatine. Par conséquent, si Λ _ J—L Λ _ λΊ * J* 4- _____4-4 4- ' T _4- ____4— ^ d'acide chlorhydrique, voisine de la limite inférieure d'environ 1% de HCl 6 H, la Demanderesse préfère utiliser de l'acide chlorhydrique à environ 0,2 N pour conduire la cristallisation. Réciproquement, si la'solution consistant en amide, en acide chlorhydrique et en cisplatine contient une grande quantité d'acide chlorhydrique, voisine de la limite supérieure de 20% de HCl 12 N, la Demanderesse préfère utiliser de l'eau pour conduire la cristallisation. Dans le cas préféré conformément à l'invention où on uti-=- lise du diméthylformamide et de l'acide chlorhydrique con centré (9:1) contenant environ 40 g de cisplatine par litre, la Demanderesse préfère utiliser de l'acide chlorhydrique environ 0,1 N pour conduire la cristallisation.

Le cisplatine microcristallin obtenu suivant l'invention (après stérilisation) peut être emballé isolément dans un récipient scellé, comme une ampoule ou fiole, de préférence sous forme de dose unitaire, pour la reconstitution avec de l'eau stérile (au moins 1 ml par mg de cisplatine microcristallin) donnant une solution se prêtant à l'administration intraveineuse. En variante, le cisplatine microcristallin peut être mélangé avec une source inorganique stérile non toxique pharmaceutiquement acceptable d'ions chlorure en quantité équivalente à celle , établie par le chlorure de sodium en concentration d'envi ron 1 à 20 mg (et de préférence environ 9 mg) par mg de cisplatine microcristallin. De préférence, la source d'ions chlorure est le chlorure de sodium. Dans une autre forme de réalisation, le cisplatine microcristallin stérile peut être mélangé avec un excipient stérile ordinaire inoffensif physiologiquement acceptable, qui est de préférence le mannitol, en quantité d'environ 2 à 150 mg (et de préférence

_Ί I______ï____^ *Ί Λ ... .. \ ... -1 · -II· · · T

une autre forme de réalisation encore, le cisplatine microcristallin stérile peut être mélangé avec la source d'ions chlorure et l'excipient ci-dessus en les quantités indiquées. Chacun de ces mélanges secs est alors emballé dans un récipient scellé tel qu'une ampoule ou fiole, de préférence sous forme de dose unitaire, pour la reconstitution avec de l'eau stérile (au moins 1 ml par mg de cisplatine microcristallin) donnant une solution se prêtant à l'administration intraveineuse. Les mélanges secs ci-^ dessus peuvent être préparés par simple mélange à sec des constituants désirés ou par granulation par voie humide, : ces deux opérations étant classiques. Pour la granulation par voie humide, il est préférable que des granules soient formés au moyen de tous les constituants à l'exception du cisplatine et qu'après séchage, les granules soient mélangés avec la quantité désirée de cisplatine microcristallin.

Le cisplatine microcristallin conforme à l'invention et ses mélanges secs sont facilement solubles dans l'eau stérile (au moins 1 ml par mg de cisplatine microcristallin) en environ 3 minutes. La solution à reconstituer, lorsqu'elle n'est pas utilisée immédiatement, doit être conservée à peu près à la température ambiante. La réfrigération au-dessous d'environ 10°0 provoque une cristallisation du cisplatine sous une forme non microcristalline. Ce cisplatine est extrêmement difficile à redissoudre à la température ambiante, mais la dissolution peut être opérée par chauffage à environ 35-40°C.

Le cisplatine est un composé inorganique initialement observé comme empêchant la reproduction de E. coli et dont il a été constaté ultérieurement qu'il a une activité contre les tumeurs. Ce composé entrave la synthèse /ί Λ 1. I rt Λ *1 Λ A η Λ TJ U r »·? bl l λΊ rv -Μ ΛΤΤ λ ηπ n Vi -4— Π n A4*4 Λ11 T n A Λ·Μ de brins complémentaires de l'acide désoxyribonucléique.

Il manifeste son activité dans différentes tumeurs, notamment la tumeur 1/1210, le sarcome 180, le carcinosarcome de Walker 256, les tumeurs mammaires induites par DMBA et le mélanosarcome ascitique B16. Ce composé est spécialement intéressant du fait qu'il manifeste de la synergie avec de nombreux agents chimio thérapeutique s d'usage courant. Les études toxicologiques sur gros animaux ont révélé de la nécrose tubulaire rénale, de l’entérocolite, de l'hypoplasie de la moelle osseuse et de l'atrophie lymphoïde. Les études de stade I ont révélé l®s toxicités suivantes: myélosuppression, insuffisance rénale, ototoxicité très fréquente et intolérance gastro-intestinale. Les doses d'usage courant associées à une toxicité moyenne à 2 modérément acceptable sont de 60 à 100 mg/m i.v. en dose unique ou en plusieurs prises réparties sur 5 à 5 jours, à répéter à intervalles de 4 semaines. Les premiers essais cliniques révèlent un certain effet du médicament sur les tumeurs des cellules germinales, les lymphomes, les sarcomes et les carcinomes du sein, de la tête et du cou.

2

Une dose de 60 mg/m correspond à peu près à 1,5 mg/kg, soit environ 105 mg pour un patient d'un poids de 70 kg.

Le cisplatine microcristallin conforme à l'invention et ses mélanges secs, après reconstitution, sont utilisés de la même façon et. aux mêmes fins Que celles indiquées ci-dessus et dans les autres publications, de même que dans l'abondante littérature médicale sur ce sujet. Comme déjà indiqué, pour obtenir les meilleurs résultats, le composé est fréquemment administré avec d'autres agents chimiothé- ___ Ί Ί_ _ ^ _ ι j ✓ · r η -I I · conformes à l'invention peuvent être ajoutées immédiatement avant l'administration à un diluant aqueux stérile pharmaceutiquement acceptable ou une solution de glucose, ou de chlorure de sodium. L'administration est effectuée par injection intraveineuse directe ou perfusion intraveineuse.

Dans la description: "Platinol" est une marque déposée de la Demanderesse pour le cisplatine.

"Darco" est une marque déposée de la Société Atlas Chemical Industries pour du charbon activé.

"Millipore" est une marque déposée de la Société Millipore Corporation pour des membranes filtrantes.

EXEMPLE 1,-

Préparation du cisplatine microcristallin

On ajoute 280 mg de cisplatine à une solution formée de 0,7 ml d'acide chlorhydrique 0,1 Ή et de 6,3 ml de diméthylformamide et on agite le mélange pendant 1 heure sans atteindre la dissolution complète. On ajoute un supplément de 2 ml de diméthylformamide et de 0,7 ml d'acide chlorhydrique concentré et on agite la solution pendant 1 heure, puis on la divise en deux fractions.

(a) On ajoute à l'une des fractions de la solution ci-dessus (4,9 ml) 20 ml d'acide chlorhydrique 0,1 Έ et on agite le précipité résultant pendant 15 minutes. On recueille les solides par filtration, on les lave avec 1,5 ml d'acide chlorhydrique 0,1 N et 3 ml d'acétone, puis on les sèche sous vide à 20°C pendant 18 heures. La production de cisplatine microcristallin est de 93 mg (66%). L'analyse suivant Karl Pischer indique que le produit est exempt d'eau et l'examen du spectre de résonance magnétique nucléaire i nrH miP mi ’i 1 Ait S-Î τηό+τΤτσΊ ·Ρητ»τηοτη-ϊ S o o-t- Λ·αί>ό·|-ητΐΰ

Analyse pour Pt

Calculé : H, 2,02; N, 9,34; 01, 23,6? %

Trouvé :H, 1,89; N, 9,33; 01, 22,59 %

On introduit par pesée 10 mg de cisplatine microcristallin ci-dessus dans une fiole de 17 ml au contenu de laquelle on ajoute 90 mg de chlorure de sodium et 100 mg de mannitol.

On ajoute 9,9 ml d'eau stérile à ce mélange et en 1 minute d'agitation on atteint la dissolution complète. On agite une autre aliquote de 10 mg du cisplatine microcristallin ci-dessus avec 10 ml d'une solution aqueuse de chlorure de sodium (90 mg/10 ml) et de mannitol (100 mg/10 ml), la dissolution complète étant atteinte en 1 minute.

(h) On ajoute l'autre fraction de la solution ci-dessus (4,8 ml) à 20 ml d'acide chlorhydrique 0,1 N et on agite le précipité résultant pendant 15 minutes. On recueille les solides par filtration, on les lave avec 1,5 ml d'acide chlorhydrique 0,1 N et 3 ml d’acétone, puis on les sèche sous vide à 20°C pendant l8 heures. La production de cisplatine microcristallin est de 98 mg (70%). On agite une aliquote de 10 mg de ce produit avec 10 ml d'une solution aqueuse de chlorure de sodium (90 mg/100 ml) et de mannitol (100 mg/100 ml), la dissolution complète étant atteinte en 1 minute.

EXEMPLE 2,-

Préparation du cisplatine microcristallin

On dissout 280 mg de cisplatine dans 7,0 ml d'une solution formée de diméthylformamide et d'acide chlorhydrique par mélange de 0,7 ml d'acide chlorhydrique concentré avec 6,3 ml de diméthylformamide. On agite la solution pendant 1 heure, puis on y ajoute 14 ml d'acide chlorhydrique 0,1 I. On agite le précipité résultant pendant 15 minutes et on recueille les solides par filtration, on les lave avec

O T I πλ1? J a λ Vil λ -»aV> tt4 -»ο -î λιι /a Λ T Ί\Τ n AO A λ 4“ i 1 -m *1 4 ! « »-> i4* /\·»α λ »h, A

on les sèche sous vide à 20°C pendant 20 heures. La production de cisplatine microcristallin est de 225 mg (80%).

On agite une aliquote de 10 ml de ce produit avec 10 ml d'une solution aqueuse de chlorure de sodium (90 mg/10 ml) et de mannitol (100 mg/10 ml), la dissolution complète étant atteinte en 5 minutes. On mélange une autre aliquote de 10 mg du produit avec 90 mg de chlorure de sodium et 100 mg de mannitol pour obtenir un mélange sec qui est complètement soluble en 5 minutes dans 9»9 ml d'eau. s EXEMPLE 5.-

Préparation du cisplatine microcristallin

On ajoute 210 mg de cisplatine à 3 ml d'une solution formée de diméthylformamide et d'acide' chlorhydrique par mélange de 0,3 ml d'acide chlorhydrique concentré et de 2,7 ml de diméthylformamide. On n'atteint pas la dissolution complète après 1 heure d'agitation, de sorte qu'on ajoute encore 0,1 ml d'acide chlorhydrique concentré et 0,9 ml de diméthylformamide. On agite la solution résultante pendant 1 heure, puis on y ajoute 8 ml d'acide chlorhydrique 0,1 N. On agite le précipité résultant pendant 15 minutes, puis on recueille les solides par filtration, on les lave avec 1,5 ml d'acide chlorhydrique 0,1 N et 2 ml d'acétone et on les sèche sous vide à 20°C pendant 20 heures. La production de cisplatine microcristallin est de 162 mg (77%).

EXEMPLE 'impréparation du cisplatine microcristallin

On dissout 210 mg de cisplatine dans 5j25 ml d'une solution formée de diméthylformamide et d'acide chlorhydrique (9:1). On agite la solution pendant 1 heure, puis on y ajoute 10,5 ml d'acide chlorhydrique 0,1 I. On agite le pré- Λ1 m 4“û r»û cm 1 4"on +* -r\nivf· Ί £ τη-ΐ πτΙ-λπ -roi τ *-» rs-v» λπ /-v-ï Ί /-* <~i •solides par filtration, on les lave avec 1 ml d’acide chlorhydrique 0,1 N et 2 ml d'acétone et on les sèche sous vide à 20°C pendant 18 heures. La production de cisplatine microcristallin est de 168 mg (80%). On agite 10 mg de ce produit avec 10 ml d'une solution aqueuse de chlorure de sodium (90 mg/10 ml) et de mannitol (100 mg/10 ml), la dissolution complète étant atteinte en 2 minutes. On mélange une autre aliquote de 10 mg de ce produit avec 90 mg de chlorure de sodium et 100 mg de mannitol pour obtenir un mélange sec qui est complètement soluble dans 9,9 ml d'eau stérile en 2 minutes d'agitation.

EXEMPLE 5,-

Préparation du cisplatine microcristallin

On dissout 1,0 g de cisplatine dans 25 ml d'une solution formée de diméthylformamide et d'acide chlorhydrique (9:1). On agite la solution limpide pendant 1 heure en atmosphère d'azote, puis on y ajoute 50 ml d'acide chlorhydrique 0,1 ÏT. On agite le précipité résultant pendant 15 minutes, puis on recueille les solides par filtration et on les lave avec 5 ml ‘d'acide chlorhydrique 0,1 N

\ à 4°C et 10 ml d'acétone. On sèche à peu près un quart des solides sous vide à 40°C pendant 18 heures pour obtenir 0,120 g de produit. On sèche le reste des solides sous vide à 20°C pendant 18 heures pour obtenir 0,682 g de produit. La production totale de cisplatine microcristallin est de 0,802 g (80%).

. On agite une aliquote de 10 mg de chacun des .produits séchés avec 10 ml d'une solution aqueuse contenant du chlorure de sodium (90 mg/100 ml) et du mannitol (100 mg/100 ml), chacun des produits étant totalement soluble en 3 minutes.

Tin f'.hT’nma'hnP’Pfmh'ï a ρπ p.mif.hpî tm’nr.p rl pr rlpn-y nT>nrliTÏ -hc ne révèle aucune impureté ni dans l’un ni dans l’autre. La chromatographie liquide à haute performance des deux produits indique un titre de 984- yug/mg pour le produit séché à 40°C et de 1.027 /ug/mg pour le produit séché à 20°C.

Analyse pour PtHgNgClg

Calculé: H, 2,02; K, 9,54-; Cl, 23,63 % (séché à 4-0°C) Trouvé: H, 1,77; N, 9,31; Cl, 23,29 % (séché à 20°C) Trouvé: H, 1,79; N, 9,21; Cl, 23,13 % EXEMPLE 6,-

Préparation du cisplatine microcristallin

On dissout 2,5 g de cisplatine dans 62,5 ml d'une solution formée de diméthylformamide et d'acide chlorhydrique (par dissolution de 15 ml d'acide chlorhydrique ecncaitré dans 135 ml de diméthylformamide). On agite la solution pendant 1 heure en atmosphère d'azote, puis on y ajoute 125 ml d'acide chlorhydrique 0,1 N. On agite le précipité résultant pendant 15 minutes, puis on recueille les solides par filtration, on les lave avec 12 ml d’acide chlorhydrique 0,1 Ή et 25 ml d'acétone et on les sèche sous vide à 20°C pendant 18 heures. La production de cisplatine microcristallin est de 2,0 g (80%). On agite une aliquote de 10 mg de ce produit avec 10 ml d'une solution aqueuse contenant du chlorure de sodium (90 mg/10 ml) et du mannitol (100 mg/10 ml), la dissolution complète étant atteinte en 2 minutes.'

On prépare un mélange sec en mélangeant soigneusement 750 mg du produit ci-dessus (74- yum), 6,75 g de chlorure de sodium (74- yum) et 7,5 g de mannitol (74- yum). EXEMPLE 7.-

Préparation du chlorure de sodium stérile apyrogène

On dissout 18,5 g de chlorure de sodium dans 62 ml rï * fifin rî i stn Ί "1 . fin n-imi+tP à αοίπ+:·ΐ nn Ί oc: o· nVnn bon activé (Larco KB) et on agite le mélange pendant 30 minutes. On prépare le charbon par filtration sur du papier filtre dur, puis on ajoute le filtrat lentement à 62 ml d'acide chlorhydrique vivement agité. On agite le précipité résultant pendant 30 minutes, on le recueille par filtration sur du papier filtre dur et on le sèche à 100°C pendant 18 heures. La production est de 13,8 g (75%)· τπτπΜρτ.-π 8,-

Préparation du mannitol stérile apyrogène

On dissout 10 mg de mannitol dans 67 ml d'eau distillée. On ajoute du chardon activé (1,0 g, Darco KB) et on agite le mélange pendant 30 minutes. On filtre ensuite le mélange sur du papier filtre dur et on ajoute le filtrat lentement à 335 ml d'acétone vivement agitée. On agite le précipité résultant pendant 30 minutes, on le recueille par filtration sur du papier filtre dur et on le sèche à 100°C pendant 18 heures. La production est de 8,0 g (80%). EXEMPLE 9.-

Préparation du cisplatine stérile en mélange sec pour injection (10 mg de cisplatine par fiole) A. Préparation du cisplatine microcristallin stérile

Précautions

Tout le personnel intervenant dans la manipulation de ce produit doit être protégé comme indiqué ci-après: (a) Port du masque, d'une protection oculaire, de gants et de vêtements protecteurs pendant la fabrication, le traitement et l'emballage.

(b) Eviter tout contact avec le médicament par inhalation ou contact dermique.

(c) Nettoyage soigneux de tout l'appareillage et de la zone de fabrication pour éliminer une contamination nnssnbTe πατ* 1p Tnp>rH r».siTnmn+:-

Mode opératoire 1. Introduire 90 ml de diméthylformamide (*) dans un récipient en verre approprié et entretenir dans celui-ci une atmosphère d'azote. Commencer et poursuivre une agitation rapide. Ajouter lentement 10 ml d'acide chlorhydrique concentré (Pharmacopéee des Etats-Unis d'Amérique). Maintenir la température de 20 à 27°C.

* Le diméthylformamide doit être exempt de dimêthyl-amide et avoir une pureté à peu près équivalente à celle du diméthylformamide distillé en appareil de verre de la Société Burdick et Jackson Laboratories ou du diméthylformamide certifié Pisher (ACS), liste D-119.

2. Poursuivre l'agitation rapide des 100 ml de solution fraîchement préparée en atmosphère d'azote en maintenant la température de 20 à 27°C.

3. Ajouter lentement 4 g de cisplatine en 5 minutes. Poursuivre l'agitation rapide en atmosphère d'azote pendant 1 heure. Il se forme une solution ou quasi-solution.

4-, Sous surpression d'azote, faire passer la solution à travers un filtre Millipore de 0,22 ^um stérile dans un récipient en verre apyrogène stérile approprié, suivant une technique aseptique dans un milieu stérile.

5. Ajouter en 3 minutes au filtrat maintenu sous ; agitation rapide 200 ml d'acide chlorhydrique 0,1 U apy- ! rogène stérile à 20-27°C. Il se forme des microcristaux jaunes denses. Agiter pendant 15 minutes.

' . 6. Suivant une technique aseptique, recueillir les cristaux par filtration convenable. Essorer le gâteau de filtration jusqu'à siccité apparente. Ne pas faire passer un excès d'air dans le gâteau de filtration. Conserver le filtrat.

7. Laver le gâteau de filtration avec 10 ml d'acide chlorhydrique 0,1 N apyrogène stérile à 20-27°C. Ajouter les eaux de lavage au filtrat du stade 6. Essorer le gâteau de filtration jusqu’à siccité apparente. Ne pas faire passer un excès d'air à travers le gâteau de filtration.

Laver le gâteau de filtration avec 20 ml d'acétone apyrogène stérile. Ajouter la liqueur de lavage au filtrat. Essorer le gâteau de filtration jusqu'à siccité apparente. Ne pas faire passer un excès d'air à travers le gâteau de filtration. (Conserver les filtrats combinés. L'isolement du cisplatine à partir du filtrat est indiqué au stade 9 ci-après).

8. Suivant une technique aseptique, recueillir et sécher sous vide poussé le cisplatine microcristallin (à l'abri de la lumière) pendant 24 heures à 37-4-2°C. Production: environ 3,5 à 3,5 g (rendement de 80 à 86%). Conserver les microcristaux jaunes dans un récipient en verre ambré apyrogène stérile approprié obturé au moyen d'un bouchon métallique à visser portant une garniture de téflon ou de polyéthylène, à la température ambiante constante et à l'abri de la lumière.

9. (a) Refroidir le filtrat du stade 7 sous agitation jusqu'à 0-4°C. Un milieu aseptique n'est pas nécessaire. Maintenir le mélange sous agitation pendant 48 heures à 0-4°C. Il se dépose des cristaux jaune d'or. Séparer les cristaux par filtration. Laver avec 20 ml d'acétone et sécher les cristaux sous vide poussé (à l'abri de la lumière) à 37“4-2°C pen-dans 24 heures. Production: environ 0,2 g (rendement de 5%)· Ces cristaux n'ont pas les propriétés de dissolution de la forme microcristalline et doivent être retraités suivant le procédé ci-dessus pour donner le cisplatine microcristallin.

("b) Les composés du platine subsistant dans le filtrat peuvent être recueillis par distillation de l'eau et du diméthylformamide.

Propriétés du cisplatine microcristallin stérile préparé suivant le procédé ci-dessus 1. Chromatographie liquide à haute performance : pic unique à 2,8 minutes de rétention (1.028 yUg/mg).

2. IR : Compatible avec la structure.

3. EMU : Dans l'acide trifluoroacétique ; pas d'indice d'acétone ou de diméthylf ormamide.

4-, Analyse élémentaire : Compatible avec la formule; le produit apparaît anhydre.

5. Morphologie cristalline : Au grossissement de 250 fois dans l'huile minérale sous le microscope polarisant, les microcristaux apparaissent sous forme de bâtonnets très petits manifestant une extinction spécifique. Le cisplatine de départ se présente en très grandes plaques irrégulières (peut être des centaines de fois la dimension des microcristaux) manifestant une biréfringence du spectre coloré.

B. Préparation du chlorure de sodium stérile 1. Introduire 90 ml d'eau stérile pour injection (Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique) dans un récipient en verre approprié. Commencer et poursuivre l'agitation à une température de 20-26°C. Ajouter et dissoudre 27 g de chlorure de sodium. Poursuivre l'agitation jusqu'à dissolution.

2. Poursuivre l'agitation et ajouter 2,7 g de charbon actif Darco KB. Poursuivre l'agitation pendant 1,0 heure.

3. Séparer le charbon par filtration. Laver le gâteau de charbon avec 100 ml d'eau stérile pour injection. Ajouter l'eau de lavaee au filtrat.

4. En surpression d'azote et suivant une technique aseptique, faire passer le filtrat à travers un filtre Millipore de 0,22 yum apyrogène stérile approprié dans un récipient en verre apyrogène stérile convenable. Ceci constitue la solution A.

5· Suivant une technique aseptique, ajouter 5 volumes (environ 550 ml) d'acétone filtrée à travers un filtre Millipore de 0,22 yum stérile, en 10 minutes, à la solution A filtrée à travers un filtre Millipore et vivement agitée. (En variante, la solution 1 peut être ajoutée à 550 ml d'acétone vivement agitée qui a été filtrée à travers un filtre Millipore de 0,22 stérile). Il se forme des cristaux.

6. Poursuivre l'agitation à la température ambiante pendant 50 minutes.

7. Séparer les cristaux par filtration appropriée suivant une technique aseptique.

8. Laver les cristaux sur le filtre avec deux aliquotes de 4-0 ml d'acétone filtrée à travers un filtre Millipore de 0,22 yum stérile.

9. Suivant une technique aseptique, recueillir les cristaux du filtre et les sécher à l*air à 115-125°C pendant 24 heures. Production: environ 21,5 g (rendement de 80%).

10. Conserver les cristaux dans un récipient en verre ambré apyrogène -stérile approprié obturé au moyen d'un bouchon métallique à visser portant une garniture de téflon ou de polyéthylène.

Propriétés du chlorure de sodium stérile préparé par le procédé ci-dessus 1. Acétone non décelable en EMN.

2. Eau (Karl Fisher) : normalement environ 1% .

C. Préparation du mannitol stérile 1. Introduire 90 ml d’eau stérile pour injection (Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique) dans un récipient en verre approprié. Commencer et poursuivre l'agitation à une température de 20 à 26°C. Ajouter et dissoudre 13,6 g de mannitol. Poursuivre l'agitation jusqu'à dissolution.

2. Poursuivre l'agitation et ajouter 1,4 g de charbon activé Dareo KB. Poursuivre l'agitation pendant 1 heure.

3. Séparer le charbon par filtration. Laver le gâteau de charbon avec 5 ml d'eau stérile pour injection (Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique). Ajouter l'eau de lavage au filtrat.

4. En surpression d'azote et suivant une technique aseptique, faire passer le filtrat à travers un filtre Millipore de 0,22 yrn apyrogène stérile approprié dans un récipient en verre apyrogène stérile approprié.

5. Suivant une technique aseptique, ajouter au filtrat, sous vive agitation et en 10 minutes, 500 ml d'acétone qui a été filtrée à travers un filtre Millipore de 0,22 yum stérile. Il se forme des cristaux. (En variante, le filtrat peut être ajouté en 10 minutes à 500 ml d'acétone vivement agitée qui a été filtrée à travers un filtre Millipore de 0,22 ^um stérile). Poursuivre l'agitation pendant 30 minutes à la température ambiante.

6. Recueillir les cristaux par filtration appropriée suivant une technique aseptique.

7· Laver les cristaux sur le filtre avec deux aliquotes de 20 ml d'acétone qui a été filtrée à travers un filtre Millipore de 0,22 ^/um stérile.

8. Suivant une technique aseptique, recueillir les cristaux du filtre et les sécher à l'air à 100-115°C

pendant 24- heures. Production : environ 11,4- g (rendement de 84-%).

9. Conserver les cristaux dans un récipient en verre ambré apyrogène stérile approprié obturé, au moyen d'un bouchon métallique à visser portant une garniture de téflon.

Propriétés du mannitol stérile préparé par le procédé ci-dessus 1. Acétone non décelable en EMIT.

2. Eau (Karl Eisher) : normalement environ 0,4—1% D. Préparation de granules stériles de mannitol et de chlorure de sodium pour un mélange sec stérile de cisplatine microcristallin pour injection

Pormule

Par fiole Par 10.000 fioles de 10 mg de 10 mg de cisplatine de cisplatine

Mannitol stérile 0,1000 g 1.000,00 g

Chlorure de sodium stérile 0,0900 g 900,00 g

Eau stérile çour injection 0,025 ml* 250,00 ml* (Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique) * La quantité d'eau utilisée peut être modifiée pour donner des granules humides de consistance appropriée. L'eau est chassée au cours des manipulations.

Instructions de fabrication (Eespecter les précautions indiquées ci-après) 1. Suivant une technique aseptique et dans un appareillage apyrogène- stérile approprié, faire passer séparément le mannitol apyrogène stérile et le chlorure de sodium apyrogène stérile à travers un tamis à mailles de 0,4-2 mm.

2. Suivant une technique aseptique, introduire les quantités requises de mannitol et de chlorure de sodium apy-rogènes stériles calibrés dans un mélangeur apyrogène stérile convenable. Un mélangeur à lame en V sous vide à chemise ou un mélangeur à cônes muni d'un barreau agitateur convient. Mélanger pendant 1 heure.

2. Ajouter peu à peu une quantité suffisante d'eau apyrogène stérile pour injection (Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique*) par le barreau agitateur, tandis que le mélangeur tourne, jusqu'à obtenir des granules de consistance convenable. Après chaque addition d'eau pour injection, faire fonctionner le barreau agitateur pendant deux périodes de 5 minutes au cours d'une demi-heure de mélange.

* La quantité d'eau indiquée est celle déterminée lors d'une expérience à l'échelle du laboratoire. Suivant la nature de l'appareillage utilisé pour des lots plus importants, la quantité d'eau nécessaire pour préparer des granules de consistance convenable peut différer de la quantité indiquée.

4·. Lorsque des granules convenables ont été obtenus, entretenir la rotation du mélangeur en arrêtant le barreau agitateur et sécher sous vide dans le mélangeur en admettant de l'eau à 50-?0°C dans la chemise pendant 24- heures ou jusqu'à ce que la teneur en eau soit inférieure à 0,3%·

En variante, le mélange peut être retiré du mélangeur et séché à 50-60°C dans une étuve à vide Devine stérile pendant 4-8 heures.

5· Suivant une technique aseptique, faire passer le mélange séché dans un moulin apyrogène stérile approprié muni d'un tamis apyrogène stérile de 0,25 mm ou équivalent.

6. Introduire les granules stériles tamisés dans un mélangeur apyrogène stérile approprié et mélanger pendant 30 minutes ou jusqu'à uniformité du contenu. Le dosage de la teneur en chlorure de la poudre peut être effectué de temps à autre pour la vérification de l'uniformité de teneur.

9. nonsfiT’VfiT "Ια Ηα-πα Har -ραρ.ίτπ ArrbR απ va-p-pa ambré apyrogènes stériles appropriés obturés au moyen d’un bouchon métallique à visser contenant une garniture de téflon ou de polyéthylène. En variante, la quantité requise de mélange stérile peut être conservée dans le mélangeur et additionnée de la quantité requise de cisplatine microcristallin pour la production du cisplatine pour injection.

Mesures de précaution

Tout le personnel intervenant dans la manipulation de ce produit doit être protégé comme indiqué ci-après: K = (a) Port du masque, d'une protection oculaire, de gants et de vêtements protecteurs pendant la fabrication, le traitement et l'emballage.

(b) Eviter tout contact avec le médicament par inhalation ou contact dermique.

(c) Nettoyage soigneux de tout l'appareillage et de la zone de fabrication pour éliminer une contamination possible par le médicament.

E. Cisplatine en mélange sec stérile pour injection (10 mg de cisplatine par fiole)

Etiquetage : 10 mg de cis-diamminedichloroplatine (II) (cisplatine) par fiole.

Précautions

Tout le personnel intervenant dans la manipulation de ce produit doit être protégé comme indiqué ci-après: (a) Port du masque, d'une protection oculaire, de gants et de vêtements protecteurs pendant la fabrication, le traitement et l’emballage.

(b) Eviter tout contact avec le médicament par contact dermique ou inhalation.

(c) Nettoyage soigneux de tout l'appareillage et de la zone de fabrication pour éliminer une contamination

Formule

Constituant Par fiole Par 100 fioles

Cisplatine microcristallin 0,0100 g* 1,00 g apyrogène stérile

Chlorure de sodium apyrogène 0,0900 g 9,00 g stérile (0,42 mm)

Mannitol apyrogène stérile 0,1000 g 10,00 g (0,42 mm) - - 0,2000 g 20,00 g * Ce poids de cisplatine assure un titre de 1.000 yug/mg.

Pour calculer la quantité de cisplatine, appliquer la formule suivante: , 1.000 X 0,0100 g ..... — = g de cisplatine par titre du cisplatine en yug/mg fiole

Instructions de fabrication 1. Suivant une technique aseptique et à l'aide d'un appareillage apyrogène stérile approprié, faire passer séparément le mannitol apyrogène stérile et le chlorure de sodium apyrogène stérile à travers un tamis à mailles de 0,42 mm.

2. Mélanger les quantités requises de chlorure de sodium et de mannitol apyrogènes stériles tamisés dans un mélangeur apyrogène stérile approprié pendant 1 heure. Un mélangeur à lames en Y ou un mélangeur à cônes muni d'un barreau agitateur est recommandable.

3· Faire passer le cisplatine microcristallin à travers un tamis stérile à mailles de 0,42 mm pour éliminer les grumeaux éventuels. Introduire dans le mélangeur contenant le mélange formé au stade précédent (ou les granules obtenus au stade D ci-dessus) la quantité voulue de cisplatine micrûcristallin apyrogène stérile en trois fractions distinctes à peu près égales. Mélanger pendant 30 minutes après chaque addition. Faire passer le mélange à travers •J *l*m 4-*~1 TT, π (1 η4· Α·η·1 Π Λ A TV, η *1 Ί rwi /1 λ Λ /1 Ο τητη r-\4 ·ν» i-î ν» 4--^-»Λ ·ΐ ·ν\ λ /3 η ν-ι η le broyeur. Mélanger pendant J>0 minutes ou davantage jusqu'à uniformité du mélange.

4. Déverser le mélange dans des récipients en verre ambré apyrogènes stériles appropriés obturés au moyen de bouchons métallique à visser contenant une garniture de téflon. Conserver la réserve à l'obscurité.

5. Introduire la quantité requise de mélange dans des fioles en verre ambré apyrogènes stériles appropriées. Bouclier et sceller à l'aide de bouchons en caoutchouc recouvert de téflon apyrogène stérile et sceller avec des coiffes en aluminium. Conserver les fioles à l'obscurité.

6. La fiole de 10 mg de cisplatine doit être reconstituée avec non moins de 10 ml d'eau stérile pour injection (Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique) à 22-30°C. Une solution limpide doit être obtenue en 3 minutes d'agitation. Le pH noté est de 4,0 à 5»5· Les solutions de cisplatine d'une concentration de plus de 0,5 mg/ml ne peuvent être mises au réfrigérateur parce que le cisplatine se dépose en cristaux à partir de la solution.

Claims (19)

1. Cisplatine microcristallin stable ayant un spectre granulometrique tel qu’il comprend au moins environ 80% de particules de moins d'environ 5 /Um, moins d'environ 20% de particules de 5 à 20 et sensiblement aucune particule de plus de 20 yum, la forme microcristalline de ce cisplatine microcristallin étant aisément différenciée de celle du cisplatine lyophilisé par son diagramme de diffraction des rayons X relevé suivant la technique des poudres et ce cisplatine microcristallin étant complètement soluble dans l'eau en environ 3 minutes à une concentration de 1 mg/ml. 2, - Cisplatine microcristallin suivant la revendication 1 présentant un diagramme de diffraction des rayons X relevé suivant la technique des poudres sensiblement tel que ci-après: 2 if"* (°) I/I Equidistances O o _ _ (A) 13,81 100 6,407 14,93 84 5,929 16,26 71 5,447 24,05 27 3,697 26,57 22 3,352 28,37 16 3,143 30,35 13 2,943 33,14 15 · 2,701

3·- Cisplatine microcristallin suivant la revendication 1 ou 2, quise trouve à l'état stérile.

4.- Cisplatine microcristallin stable stérile, dans un récipient scellé sous forme de dose unitaire à reconstituer avec de l'eau stérile en environ 3 minutes à une concentration de 1 me de cinlatine microcristallin uar ml d'eau stérile et se prêtant à l'administration intraveineuse à l'homme, ce cisplatine microcristallin ayant une granulométrie telle qu'il comprend au moins environ 80% de particules de moins d'environ 5 yum, moins d'environ 20% de particules de 5 à 20 yum et sensiblement aucune particule de plus de 20 yum, la forme microcristalline de ce cisplatine microcristallin étant aisément différenciée de celle du cisplatine lyophilisé par son diagramme de diffraction des rayons X relevé suivant la technique des poudres. Vf

5·- Forme dosée unitaire stérile de cisplatine microcristallin suivant la revendication 4, dont le cisplatine microcristallin a un diagramme de diffraction des rayons X relevé suivant la technique des poudres sensiblement tel que ci-après: 2*\l· (°) I/T Equidistances O o _ _ (A) 13,81 100 6,407 14-,93 84 5,929 16,26 71 5,447 24,05 27 3,697 26,57 22 3,352 29,37 16 3,14-3 30,35 13 2,943 33,14- 15 2,701

6.- Mélange sec. stable stérile de cisplatine micro cristallin, dans un récipient scellé, sous forme de dose unitaire à reconstituer avec de l'eau stérile en environ 3 minutes à une concentration de 1 mg de cisplatine microcristallin par ml d'eau stérile et se prêtant à l'administration intraveineuse à l'homme, ce mélange sec contenant és·«! ement nne smiTOfi inn-peani nne σ+;4τ>-ΐΊρ nnn -hrvsri nnp pharmaceutiquement acceptable d'ions chlorure en quantité équivalente à celle établie par le chlorure de sodium en concentration d'environ 1 à 20 ig par mg de cisplatine microcristallin, ce cisplatine microcristallin ayant un spectre granulométrique telle qu'il comprend au moins environ 80% de particules de moins d'environ 5 ^um, moins d'environ 20% de particules de 5 à 20 ^um et sensiblement aucune particule de plus de 20 yum, la forme microcristalline de ce cisplatine microcristallin étant aisément différenciée de celle du cisplatine lyophilisé par son diagramme de diffraction des rayons X relevé suivant la technique des poudres.

7. Mélange sec suivant la revendication 6, dans lequel la source inorganique d'ions chlorure est le chlorure de sodium..

8. Mélange sec suivant la revendication 7? dans lequel le chlorure de sodium est présent en concentration d'environ 9 mg par mg de cisplatine microcristallin.

9·- Mélange sec stable stérile de cisplatine microcristallin, dans un récipient scellé, sous forme de dose unitaire à reconstituer avec de l'eau stérile en environ 3 minutes à une concentration d'environ 1 mg de cisplatine microcristallin par ml d'eau stérile et se prêtant à l'administration intraveineuse à l'homme, ce mélange sec contenant également un excipient ordinaire, inoffensif, physiologiquement acceptable en une concentration d'environ 2 à 150 mg par mg de cisplatine microcristallin, ce cisplatine microcristallin ayant une granulométrie telle qu'il comprend au moins environ 80% de particules de moins d'environ 5 yiim, moins d'environ 20% de particules de 5 à 20 yum et sensiblement· aucune particule de plus de 20 ^um, la forme microcn' étal line rie ce risnlntinp mi r»r>cr>.T>i a-hal 1 -în étant aisément différenciée· de celle du cisplatine lyophilisé par son diagramme de diffraction des rayons X relevé suivant la technique des poudres.

10. Mélange sec suivant la revendication 9} dans lequel l'excipient est le mannitol„

11. Mélange sec suivant la revendication 10, dans lequel le mannitol est présent en concentration d'environ 10 mg par mg de cisplatine micro cristallin.

12. Mélange sec stähle stérile de cisplatine microcristallin, dans un récipient scellé, sous forme de dose unitaire à reconstituer avec de l'eau stérile en environ 3 minutes à une concentration de 1 mg de cisplatine microcristallin par ml d'eau stérile et se prêtant à l'administration intraveineuse à l'homme, ce mélange sec contenant aussi une source inorganique stérile non toxique, pharmaceutiquement acceptable d'ions chlorure en quantité équivalente à celle établie par le chlorure de sodium en concentration d'environ là 20 mg par mg de cisplatine microcristallin, et un excipient ordinaire inoffensif physiologiquement acceptable en concentration d'environ 2 à 150 mg par mg de cisplatine microcristallin, ce cisplatine microcristallin ayant un spectre granulométrique tel qu'il comprend au moins environ 80% de particules de moins d'environ 5 yum, moins d'environ 20% de particules de 5 à 20 y-um et sensiblement aucune particule de plus de 20 yum, la forme microcristalline de ce cisplatine microcristallin étant aisément différenciée de celle du cisplatine lyophilisé par son diagramme de diffraction des rayons X relevé suivant la technique des poudres.

13. Mélange sec suivant la revendication 12, dans lequel la source inorganique d'ions chlorure est le Λ ni Λ·«ΐνΛΛ Λ Λ Π λ/Q ίι lim r» 4— l I r\ 1 «r-v “ι Λνι 4» a r-i 4— 1 a -m Λ 1Λ1Λ i -4— a T

14.- Mélange sec suivant la revendication 13, dans lequel le chlorure de sodium est présent en une concentration d'environ 9 mg par mg de cisplatine microcristallin et le mannitol est présent en une concentration d'environ 10 mg par mg de cisplatine microcristallin.

13·- Mélange sec suivant la revendication 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ou 14, dans lequel le cisplatine microcristallin a un diagramme de diffraction des rayons X relevé suivant la technique des poudres sensiblement tel que ci-après: 2$ (°) I/I Equidistances O o _ _ (A) 13,81 100 6,407 14,93 84 5,929 16,26 71 5,447 24,05 27 3,697 26,57 22 3,353 28,37 16 3,143 30,35 13 2,943 33,14 15 2,701

16.- Procédé de préparation de cisplatine microcristallin, suivant lequel, à des- :stades successifs: (a) on constitue une première solution comprenant un amide organique liquide contenant, en volume, environ 1 à 20% d'acide chlorhydrique aqueux d'une concentration d'environ 6 à 12 H; ^ (b) on dissout du cisplatine dans cette première solution en une quantité d'environ 10 à 60 g par litre de la première solution, pour obtenir une seconde solution; (c) on mélange la seconde solution, sous agitation, avec environ 0,5 à 5 volumes d'eau ou d'acide chlorhydrique amifiiiY Hiliip Η'ιιπρ f'.nnn.Antpfltion s1 p! Avant iiiHnn'à ρτπγι-nnn 0,2 N à une température d'environ 10 à 40°C pour former le cisplatine microcristallin; (d) on recueille le cisplatine microcristallin par filtration; (e) on soumet le cisplatine microcristallin recueilli à un lavage avec de l'eau ou de l'acide chlorhydrique aqueux d'une concentration s'élevant jusqu'à environ 0,2 N; (f) éventuellement, on poursuit le lavage du cisplatine microcristallin avec un solvant organique volatil, inerte miscible à l'eau et (g) on sèche éventuellement le cisplatine microcris-tallin lavé.

17·- Procédé suivant la revendication 16, dans lequel l'amide organique liquide est un amide tertiaire.

18.- Procédé de préparation de cisplatine microcristallin, suivant lequel, à des stades successifs: (a) on constitue une première solution comprenant un amide organique tertiaire liquide contenant, en volume, environ 5 à 15% d'acide chlorhydrique aqueux d'une concentration d'environ 12 H; (h) on dissout du cisplatine dans cette première solution en une quantité d'environ 40 g par litre de la première solution, pour obtenir une seconde solution; (c) on mélange la seconde solution, sous agitation, avec environ 0,75 à 2,5 volumes d'eau ou d'acide chlorhy- 0 drique aqueux dilué d'une concentration s'élevant jusqu'à environ 0,2 N à peu près à la température ambiante pour former du cisplatine microcristallin; (d) on recueille le cisplatine microcristallin par filtration; (e) on soumet le cisplatine microcristallin recueilli au lavage avec de l'acide chlorhydrique aqueux d?une con- * ----- centration s'élevant jusqu'à environ 0,2 N; (f) éventuellement, on poursuit le lavage du cisplatine microcristallin avec un solvant organique volatil inerte miscible à l'eau et (g) on sèche éventuellement le cisplatine microcristallin lavé.

19. Procédé suivant la revendication 18, caractérisé en ce que l'amide organique tertiaire liquide est un Ν,Ν-dialkylformamide, un Ν,Ν-dialkylacétamide ou là IT-méthyl-2-pyrrolidinone.

20. Procédé de préparation de cisplatine micro-cristallin, suivant lequel, à des stades successifs; (a) on constitue une première solution comprenant du diméthylformamide contenant, en volume, environ 10% d'acide chlorhydrique aqueux d'une concentration d'environ 12 N; (h) on dissout du cisplatine dans cette première solution en une quantité d'environ 40 g par litre de la première solution, pour obtenir une seconde solution; (c) on mélange la seconde solution, sous agitation, avec environ 2 volumes d'acide chlorhydrique aqueux dilué d'une concentration d'environ 0,1 N à peu près à la température ambiante pour former du cisplatine microcristallin; (d) on recueille le cisplatine microcristallin par filtration; (e) on soumet le cisplatine microcristallin recueilli ^ au lavage avec de l'acide chlorhydrique aqueux d'une con centration d'environ 0,1 ÏT; (f) éventuellement, on poursuit le lavage du cispla-^ tine microcristallin avec un solvant organique volatil inerte miscible à l'eau choisi par les alcanols inférieurs et les dialkylcétones inférieures, et (g) on sèche éventuellement le cisplatine microcristallin lavé.