UA121464C2 - Анти-jagged1 антитіло та способи його застосування - Google Patents

Анти-jagged1 антитіло та способи його застосування Download PDF

Info

Publication number
UA121464C2
UA121464C2 UAA201609358A UAA201609358A UA121464C2 UA 121464 C2 UA121464 C2 UA 121464C2 UA A201609358 A UAA201609358 A UA A201609358A UA A201609358 A UAA201609358 A UA A201609358A UA 121464 C2 UA121464 C2 UA 121464C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
amino acid
antibody
acid sequence
zeo
antibodies
Prior art date
Application number
UAA201609358A
Other languages
English (en)
Inventor
Івон Чин
Ивон Чин
Джулі К. Хан
Джули К. Хан
Кристіан В. Зібель
Кристиан В. Зибель
Янь У
Даніель Лафкас
Original Assignee
Дженентек, Інк.
Дженентек, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=52574459&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=UA121464(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Дженентек, Інк., Дженентек, Инк. filed Critical Дженентек, Інк.
Publication of UA121464C2 publication Critical patent/UA121464C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Abstract

Винахід стосується анти-Jagged1 антитіла і способів його застосування.

Description

ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ, ЯКОЇ СТОСУЄТЬСЯ ВИНАХІД
Даний винахід стосується анти-Уаддеай антитіл і способів їхнього застосування.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
Сигнальний шлях Моїспй регулює широкий спектр клітинних функцій ІКорап еї аї., Сеї!І 137, 216-233 (2009)). У ссавців були ідентифіковані чотири рецептори Моїсі, а саме, Моїсй 1-4, які мають спільні основні структурні елементи, включаючи позаклітинний домен, трансмембранний домен і внутрішньоклітинний домен. Аналогічним чином, канонічні ліганди Моїспй мають визначену структурну подібність, але також був ідентифікований ряд неканонічних лігандів
Моїсй ІКорап еї аї., СеїІ 137, 216-233 (2009)). П'ятьма канонічними лігандами у ссавців є ОекКа-
ІКе 1, Оейа-їКе З, Оепа-їКе 4, даддеа1 ї хаддед2. Зв'язування ліганду Моїсп з позаклітинним доменом рецептора Моїспй запускає в рух сигнальний каскад, який починається з протеолітичного розщеплення позаклітинного сайту 52 за допомогою альфа-секретази із сімейства АБАМ (дизінтегринів і металопротеаз). За розщепленням за 52 йде протеолітичне розщеплення гамма-секретазою за внутрішньоклітинним сайтом 53, що призводить до вивільнення внутрішньоклітинного домену і наступних подій, які у підсумку активують Моїсп- залежні фактори транскрипції, такі як Не51 апа Неу.
Порушена експресія Моїсп і передача сигналу залучені до ряду захворювань, включаючи ракові захворювання |Косі еї аї., СеїЇ. Мої. І Ме 5сі. 64, 2746-2762 (2007)). Зовсім очевидно, що як і раніше існує потреба в агентах, які мають клінічні характеристики, оптимальні для створення терапевтичних агентів. Винахід, описаний у даному документі, задовольняє цю потребу й забезпечує інші переваги.
СУТЬ ВИНАХОДУ
Даний винахід стосується анти-Уаддей1 антитіл і способів їхнього застосування.
Автори даного винаходу неочікувано з'ясували, що анти-Уаддей1 антитіло А1 (див. фіг. 4 їі публікацію РСТ Мо 2014/028446) розщеплюється по важкому ланцюгу після термічної обробки або заморожування-відтавання. Погана стабільність антитіла потенційно знижує його цінність як терапевтичного засобу. Аналіз сайту розщеплення не виявив відомих мотивів розщеплення протеазами. Тому, було невідомо, чи можуть зміни в послідовності антитіла знизити спостережуване розщеплення. Крім того, оскільки сайт розщеплення знаходиться в НУК
Зо важкого ланцюга, навіть якщо зміна амінокислоти(т) зменшила б розщеплення, невідомо, чи можна було б здійснити зміни без істотного зниження афінності антитіла до даддейа1. Автори винаходу неочікувано з'ясували, що мутація амінокислоти в положенні 101 у НМК-НЗ знижує розщеплення тільки з невеликою втратою афінності.
У деяких варіантах здійснення запропоновано виділене антитіло, яке зв'язується з даддеа1 людини, де антитіло включає НМЕ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 55 або 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло містить щонайменше один, щонайменше два, щонайменше три, щонайменше чотири або п'ять НУК, вибраних з НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 35 або 78; НУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 28 або 36; НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 38; НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮО МО: 39; ії НМК-І3, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16 або 40. У деяких варіантах здійснення антитіло містить: (а) НМК-НІ, яка містить амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮ МО: 78; НМЕ-НЕІ, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 36; і
НМВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5620 ІЮ МО: 55; або (Б) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 78; НМЕ-НаІ, яка містить амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 36; і НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 59; або (с) НМА-
НТ, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮО МО: 78; НМАК-НУ2, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 28; ії НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 59.
У будь-якому з варіантів, описаних у даному документі, антитіло може включати (а) НМЕ-І11, яка
БО містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 38; НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 39; ії НМА-1І З, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 40; або (Б) НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 39; ї НМК-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 16; або (с) НМК-111, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 38; НМЕ-
І2, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮО МО: 39; ї НМЕ-1І-3, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16.
У деяких варіантах здійснення, виділене антитіло, яке зв'язується з Удаддей 1, включає: (а)
НМУВ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 78; НМК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 36; НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 60 ЗЕО ІЮ МО: 55; НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; НМЕ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 39; ії НМК-І3, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮО МО: 40; або (Б) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 78; НУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 36; НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 59; НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 38; НУВ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 39; ії НМЕА-І 3, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16; або (с) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 78; НМК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 28;
НМУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕБЕО ОО МО: 59; НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 38; НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 39; і НМЕА-1І3, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 16.
У деяких варіантах здійснення виділене антитіло, яке зв'язується з даддеа!, містить послідовність УН, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю ЗЕ
ІЮ МО: 54, 58 або 62. У деяких варіантах здійснення виділене антитіло, яке зв'язується з
У9аддеа1, містить послідовність МІ, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 10, 26 або 34. У деяких варіантах здійснення антитіло містить: (а) послідовність УН, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю БЕО
ІЮО МО: 54, і послідовність МІ, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 34; або (Б) послідовність УН, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 58, і послідовність МІ, яка має щонайменше 95 90 ідентичності з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 10; або (с) послідовність МН, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 62, і послідовність
МІ,, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 26.
У деяких варіантах здійснення виділене антитіло, яке зв'язується з Удхаддейа1 людини, містить: (а) послідовність МН з 5ЕО ІЮ МО: 54, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5, і послідовність
МІ. з БЕО ІО МО: 34; або (Б) послідовність МН з БЕО ІЮО МО: 58, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5, і послідовність МІ з ЗЕО ІЮО МО: 10; або (с) послідовність МН з 5ЕО ІЮ МО: 62, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5, і послідовність МІ з 5ЕО ІЮ МО: 26. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло містить послідовність МН з 5ЕО ІО МО: 54 і послідовність МІ 5ЕО
ІО МО: 34. У деяких варіантах здійснення важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність
Ко) ЗЕО ІО МО: 56, і легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 53. У деяких варіантах здійснення важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 57, і легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 53.
У будь-якому з варіантів, описаних у даному документі, Х може являти собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У будь-якому з варіантів, описаних у даному документі, Х може бути вибраний з А, О, Е, б, І, К, І, М, О, ЕК, Т і М. У будь-якому з варіантів, описаних у даному документі, Х може бути Т.
У деяких варіантах здійснення запропоновано виділене антитіло, яке зв'язується з даддеа1 людини, яке включає: (а) НМА-НІ, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 78; НМЕ-
Н2, яка містить амінокислотну послідовність з«ЕО ІЮ МО: 36; НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 37; НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність зБЕО ІО МО: 38;
НМУВ-І2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ОО МО: 39; і НМК-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 40; або (Б) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 78; НМК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 36;
НМУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕБЕО І МО: 64; НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 39; і НМК-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 16; або (с) НМЕ-
НТ, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮО МО: 78; НМАК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 28; НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 64;
НМВ-І1, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ОО МО: 38; НМК-І2, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 39; ї НМК-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність
ЗЕОІЮ МО: 16.
У деяких варіантах здійснення запропоновано виділене антитіло, яке зв'язується з даддеа1 людини, яке включає: (а) послідовність МН з БЕО ІО МО: 33 і послідовність МІ з 5ЕО ІЮО МО: 34; або (Б) послідовність МН з 5ЕО ІЮ МО: 65 і послідовність МІ з ЗЕО ІО МО: 10; або (с) послідовність МН з 5ЕО ІЮ МО: 66 і послідовність МІ з ЗЕО ІЮ МО: 26. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло містить послідовність МН з ЗЕО ІЮ МО: 33 і послідовність МІ. з
ЗЕО ІЮ МО: 34.
У будь-якому із зазначених вище варіантів здійснення, описаних у даному документі, антитіло може бути моноклональним антитілом. У деяких варіантах здійснення винаходу бо антитіло являє собою людське, гуманізоване або химерне антитіло. У будь-якому із зазначених вище варіантів здійснення, описаних у даному документі, антитіло може являти собою фрагмент антитіла.
Будь-який з вищевказаних варіантів може являти собою повнорозмірне Ідс1-антитіло. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло являє собою Ідс1-антитіло без ефекторних функцій. У деяких варіантах антитіло являє собою Ідс1-антитіло, яке містить мутації М2976 або
М297А. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло являє собою Ідс1-антитіло, яке містить мутацію М2970.
У деяких варіантах здійснення запропоновано виділене антитіло, яке зв'язується з даддеа 1, де важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 51, і легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність 5ЕОО ІЮО МО: 53. У деяких варіантах здійснення важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 52, і легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність ЗЕ ІО МО: 53. у деяких варіантах здійснення антитіло включає: (а) важкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність, ЗЕО ІЮ МО: 69, і легкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 75; або (5) важкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮО МО: 70, і легкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 76; або (с) важкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 79, і легкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 75; або (4) важкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність ЗХЕО ІЮО МО: 80, і легкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 76.
У будь-якому з варіантів, описаних у даному описі, антитіло може бути антагоністом
Уаддед1-опосередкованого сигнального шляху. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддей1 людини і миші. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з Удхаддед1 людини, миші, щура і яванської макаки. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддей!, але не зв'язується з даддед2. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддейа! людини, але не зв'язується з даддед2 людини. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з дхаддед1 людини і миші, але не зв'язується з даддед2 людини або миші. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з Удхаддед! людини, миші, щура і яванської макаки, але не зв'язується з
Удаддед2 людини, миші, щура і яванської макаки. У деяких варіантах здійснення винаходу
Зо антитіло зв'язується з даддейд1і, але не зв'язується дУадде42 або 0111. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддей! людини, але не зв'язується з даддеа2 людини або 0/1 людини. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з
Уаддед1 людини і миші, але не зв'язується з даддед2 людини або миші або з 0/1 людини або миші. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддей! людини, миші і яванської макаки, але не зв'язується з хаддед2 людини, миші або яванського макака або ОСІ 1 людини, миші або яванської макаки. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддейа!, але не зв'язується з даддед2, 0/1 або 01/14. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддеай! людини, але не зв'язується Удаддеа2 людини, БТ людини або 0/4 людини. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддеді людини і миші, але не зв'язується з дхдаддед2 людини або миші, 0 І 1 людини або миші або 01 І 4 людини або миші. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддед1 людини, миші, щура і яванської макаки, але не зв'язується з даддед2 людини, миші або яванської макаки, або з 0 1 людини, миші або яванської макаки, або збі І 4 людини, миші або яванської макаки.
У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з дхаддей1 людини з афінністю (Ка) 2 нМ або вищою (тобто нижче 2 нМ). У деяких варіантах здійснення антитіло зв'язується з
Уаддеді людини з афінністю (Ка) 1,5 нМ або вищою, або 1 нМ або вищою, або 0,9 нМ або вищою, 0,8 нМ або вищою, або 0,7 нМ або вищою (тобто нижче 1,5 нМ, нижче 1 нМ, нижче 0,9
НМ, нижче 0,8 нМ або нижче 0,7 нМ). У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується дУаддед! миші з афінністю (Ка) 2 нМ або вищою (тобто нижче 2 нМ). У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується мишачим аддеай1 з афінністю (Ка) 1,5 нм або вищою, або 1 нМ або вищою, або 0,9 нМ або вищою, 0,8 нМ або вищою, 0,7 нМ або вищою, або 0,6 нМ або вищою, або 0,5 нМ або вищою (тобто нижче 1,5 нМ, нижче 1 нМ, нижче 0,9 нМ, нижче 0,8 НМ, нижче 0,7 нМ, нижче 0,6 нМ або нижче 0,5 нМ). У деяких варіантах здійснення афінність (Ка) вимірюють за допомогою поверхневого плазмонного резонансу.
У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з Чаддеайа!ї людини з константою асоціації (Кол), яка складає щонайменше 1,0Ен04/Мес, або щонайменше 1,5БЕ04/Мес, або щонайменше 2,0Е-04/М:»с. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з дхаддед1 людини з константою дисоціації (Коб) нижче 10,0Е-04/с або нижче 9,0Е- 60 04/с, або нижче 8,0Е-04/с, або нижче 7,0Е-04/с5. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується даддед! миші з константою асоціації (Копл), яка складає щонайменше 1,0Е--04/Мес, або щонайменше 1,5Ен04/Мес, або щонайменше 2,0Е04/Мес, або щонайменше
З, 0Е04/Мес, або щонайменше 4,0Е-04/Мес, або щонайменше 5,0Е-04/Мес, або щонайменше 6б,0Е04/Мес, або щонайменше 7,0Е-04/М»с. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується даддей1 мишії з константою дисоціації (Коб) нижче 10,0Е-04/с або нижче 9,0Е-04/с, або нижче 8,0Е-04/с або нижче 7,0Е-04/с. У деяких варіантах здійснення константи асоціації й дисоціації вимірюють за допомогою поверхневого плазмонного резонансу.
У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язує нативний, згорнутий даддес1, але не зв'язує денатурований даддед1. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язує
У9аддед1! у твердофазному імуноферментному аналізі (ЕГІ5А), але не зв'язує даддейї! на
Вестерн-блоті. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язує згорнутий Уаддей1 у твердофазному імуноферментному аналізі (ЕГІ5ЗА), але не зв'язує денатурований даддеа1 на
Вестерн-блоті. У деяких варіантах здійснення антитіло зв'язує згорнутий Чдаддеа1 у фізіологічних умовах, але не зв'язує денатурований Чаддеаї1.
У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло сповільнює ріст пухлини в ксенотрансплантатній мишачій моделі, не викликаючи втрату ваги. У деяких варіантах здійснення даного винаходу ксенотрансплантатна мишача модель є ксенотрансплантатною моделлю раку печінки. У деяких варіантах здійснення ріст пухлини знижується щонайменше на 50, щонайменше на 60, щонайменше на 70, щонайменше на 80 або щонайменше на 90 95
АМс/день (ТО, інгібування росту пухлини у 96).
У деяких варіантах здійснення застосування антитіла до ЧУдхаддед! зменшує метаплазію келихоподібних клітин у легенях у мишачій моделі гіперреактивності дихальних шляхів. У деяких варіантах здійснення введення антитіла зменшує кількість келихоподібних клітин у легенях щонайменше на 30 95, щонайменше на 40 95, щонайменше на 50 95, щонайменше на 60 до, щонайменше на 70 95, щонайменше, на 80 96 або щонайменше на 90 95. Відповідно до іншого аспекту винахід стосується виділеного антитіла, яке конкурує з будь-яким із зазначених вище варіантів здійснення в специфічному зв'язуванні з дхаддеа1. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке конкурує за зв'язування з даддеа1 людини з антитілом, яке містить варіабельну область важкого ланцюга, яка містить послідовність 5ЕО ІЮО МО: 33, і варіабельну область
Ко) легкого ланцюга, яка містить послідовність ЗЕО ІЮ МО: 34, де антитіло не є антитілом А, антитілом А-1 або антитілом А-2.
В іншому своєму аспекті даний винахід стосується виділеної нуклеїнової кислоти, яка кодує виділене антитіло за вищевказаними варіантами здійснення. У ще одному аспекті даний винахід стосується клітини-хазяїна, яка містить виділену нуклеїнову кислоту, яка кодує антитіло. У додатковому аспекті даний винахід стосується способу одержання антитіла, який включає культивування клітини-хазяїна таким чином, що продукується антитіло.
В іншому аспекті даний винахід стосується імунокон'югату, який містить антитіло за будь- яким із зазначених вище варіантів здійснення і цитотоксичний агент.
В іншому аспекті даний винахід стосується фармацевтичної композиції, яка містить антитіло за будь-яким із зазначених вище варіантів здійснення і фармацевтично прийнятний носій.
В іншому аспекті запропоноване антитіло за будь-яким із зазначених вище варіантів здійснення для використання як лікарського препарату. У деяких варіантах здійснення запропоноване антитіло за будь-яким із зазначених вище варіантів здійснення для застосування в лікуванні раку. У деяких варіантах здійснення запропоноване антитіло за будь-яким із зазначених вище варіантів здійснення для застосування для зниження росту ракових клітин.
В іншому аспекті запропонований спосіб інгібування даддеа1-опосередкованого сигнального шляху. В одному варіанті здійснення запропонований спосіб інгібування даддеай1- опосередкованого сигнального шляху іп міго. В одному варіанті здійснення запропонований спосіб інгібування дхаддеда1-опосередкованого сигнального шляху іп мімо.
В іншому аспекті запропонований спосіб лікування індивідуума, який має рак, який включає введення індивідууму ефективної кількості антитіла за будь-яким із зазначених вище варіантів здійснення. В одному з варіантів здійснення рак вибраний із групи, яка складається з: раку молочної залози, раку легень, раку головного мозку, раку шийки матки, раку товстої кишки, раку печінки, раку жовчних протоків, раку підшлункової залози, раку шкіри, В-клітинних злоякісних новоутворень і Т-клітинних злоякісних новоутворень.
Автори даного винаходу з'ясували, що вплив анти-УЗаддеді антитіла зміщує диференціювання клітин у дихальних шляхах з диференціювання в секреторні клітини (включаючи келихоподібні клітини) і на диференціювання у війчасті клітини. Сигнальний шлях
Уаддед1! має важливе значення для підтримки секреторного диференціювання клітин, й бо інгібування даддеа1-сигнального шляху попереджує метаплазію келихоподібних клітин. Автори даного винаходу також показали, що перетворення клітин Клара у війчасті є прямим і не пов'язане з розподілом клітин (дані не показані). Це трансдиференціювання одного типу клітин в інший зустрічається в легенях дорослих людей і відрізняється від вибору шляху клітинного диференціювання, яке включає розподіл клітин-попередників, наприклад, після ушкодження або в процесі розвитку. Метаплазія келихоподібних клітин або надлишок слизу є ознакою ряду захворювань дихальних шляхів, таких як астма, кістозний фіброз, хронічна обструктивна хвороба легень (ХОХЛ) і стравохід Барретта. Ці результати інгібування даддеа-сигнального шляху забезпечують основу для застосування в терапії, включаючи використання інгібіторів
Уаддед1 або даддед2 для попередження або інверсії метаплазії келихоподібних клітин і для лікування станів, які характеризуються надлишком слизу, як при захворюваннях дихальних шляхів (наприклад, при астмі, ХОХЛ, кістозному фіброзі) і стравоході Барретта.
У деяких варіантах здійснення запропоновані способи перетворення клітини Клара у війчасту клітину, які включають введення індивідууму антагоністичного антитіла, яке зв'язується з Уаддеді! людини (включаючи, але не обмежуючись цим, будь-які з анти-Удаддейд1 антитіл, описаних у даному документі). У деяких варіантах здійснення запропоновані способи посилення перетворення клітин Клара у війчасті клітини, які включають введення індивідууму антагоністичного антитіла, яке зв'язується з дхдаддед1 людини (включаючи, але не обмежуючись цим, будь-які з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у даному документі). У деяких варіантах здійснення даного винаходу клітина Клара присутня у дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення перетворення відбувається без розподілу клітини Клара. У деяких варіантах здійснення індивідуум має захворювання, вибране з алергії, астми, аутоїмунних захворювань, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення запропоновані способи зменшення числа келихоподібних клітин, які включають введення індивідууму антагоністичного антитіла, яке зв'язується з даддеа1 людини (включаючи, але не обмежуючись цим, будь-які з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у
Зо даному документі). У деяких варіантах здійснення запропоновані способи зниження перетворення клітин Клара в келихоподібні клітини, які включають введення індивідууму антагоністичного антитіла, яке зв'язується з дхдаддед1 людини (включаючи, але не обмежуючись цим, будь-які з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у даному документі). У деяких варіантах здійснення келихоподібна клітина (клітини) присутня у дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу індивідуум має захворювання, вибране з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення запропоновані способи зменшення утворення келихоподібних клітин у суб'єкта, які включають введення індивідууму антагоністичного антитіла, яке зв'язується з даддеаї людини (включаючи, але не обмежуючись цим, будь-які з анти-Уаддейд1 антитіл, описаних у даному документі). У деяких варіантах здійснення знижується утворення келихоподібних клітин у дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу індивідуум має захворювання, вибране з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення запропоновані способи зниження кількості слизу, які включають введення індивідууму антагоністичного антитіла, яке зв'язується з Ухаддей1 людини (включаючи, але не обмежуючись цим, будь-які з анти-Заддед1і антитіл, описаних у даному документі). У деяких варіантах здійснення слиз являє собою слиз у дихальних шляхах. У деяких варіантах здійснення слиз присутній у дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу індивідуум має захворювання, вибране з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу. У 60 деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення запропоновані способи збільшення числа війчастих клітин, які включають введення індивідууму антагоністичного антитіла, яке зв'язується з хаддей1! людини (включаючи, але не обмежуючись цим, будь-які з анти-Уаддед1і антитіл, описаних у даному документі). У деяких варіантах здійснення запропоновані способи посилення утворення війчастих клітин, введення індивідууму антагоністичного антитіла, яке зв'язується з Уаддеа1 людини (включаючи, але не обмежуючись цим, будь-які з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у даному документі). У деяких варіантах здійснення війчаста клітина присутня в дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу індивідуум має захворювання, вибране з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу
Барретта.
У деяких варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується з Удхаддед1і! людини (включаючи, наприклад, кожне з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у даному документі), запропоновано для застосування в лікуванні захворювання, вибраного з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу, що включає введення індивідууму з раковим захворюванням ефективної кількості антитіла за будь-яким з варіантів здійснення, описаних у даному документі. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується з Удхаддед1і! людини (включаючи, наприклад, кожне з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у даному документі), запропоновано для застосування в лікуванні захворювання, вибраного з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і
Зо захворювань, пов'язаних з надлишком слизу, що включає введення індивідууму з раковим захворюванням ефективної кількості антитіла за будь-яким з варіантів здійснення, описаних у даному документі, де антитіло, яке зв'язується з дхдаддейда1 людини, підсилює перетворення клітин
Клара у війчасті клітини в дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми,
ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується з Удхаддед1і! людини (включаючи, наприклад, кожне з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у даному документі), запропоновано для застосування в лікуванні захворювання, вибраного з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу, що включає введення індивідууму з раковим захворюванням ефективної кількості антитіла за будь-яким з варіантів здійснення, описаних у даному документі, де антитіло, яке зв'язується з даддеа1 людини, знижує число келихоподібних клітин у дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується з даддей1 людини (включаючи, наприклад, кожне з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у даному документі), запропоновано для застосування в лікуванні захворювання, вибраного з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу, що включає введення індивідууму з раковим захворюванням ефективної кількості антитіла за будь-яким з варіантів здійснення, описаних у даному документі, де антитіло, яке зв'язується з Чаддей! людини, зменшує утворення келихоподібних клітин у дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми,
ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується з Удхаддед1і! людини (включаючи, бо наприклад, кожне з анти-Уаддейд1 антитіл, описаних у даному документі), запропоноване для застосування в лікуванні захворювання, вибраного з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу, що включає введення індивідууму з раковим захворюванням ефективної кількості антитіла за будь-яким з варіантів здійснення, описаних у даному документі, де антитіло, яке зв'язується з Чдхаддед! людини, знижує кількість слизу в дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується з Удхаддед1і! людини (включаючи, наприклад, кожне з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у даному документі), запропоновано для застосування в лікуванні захворювання, вибраного з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу, що включає введення індивідууму з раковим захворюванням ефективної кількості антитіла за будь-яким з варіантів здійснення, описаних у даному документі, де антитіло, яке зв'язується з даддед1 людини, збільшує число війчастих клітин у дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У деяких варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується з Удхаддед1і! людини (включаючи, наприклад, кожне з анти-Уаддед1 антитіл, описаних у даному документі), запропоноване для застосування в лікуванні захворювання, вибраного з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу, що включає введення індивідууму з раковим захворюванням ефективної кількості антитіла за будь-яким з варіантів здійснення, описаних у даному документі, де антитіло, яке зв'язується з даддеа1 людини, підсилює утворення війчастих клітин у дихальних шляхах дорослої людини (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин. У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
В іншому аспекті запропоновані способи: (а) перетворення війчастих клітин у клітини Клара (наприклад, де війчаста клітина знаходиться в дихальних шляхах дорослої людини, наприклад, у легенях), (Б) збільшення кількості слизу (наприклад, слизу в дихальних шляхах), (с) зменшення кількості війчастих клітин (наприклад, війчастих клітин дихальних шляхів людини), які включають введення індивідууму агоніста даддеа1-сигнального шляху.
У деяких варіантах здійснення запропонований спосіб лікування захворювання, вибраного з алергії астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях), і захворювань, пов'язаних з надлишком слизу, що включає введення суб'єкту з раковим захворюванням ефективної кількості антитіла, яке зв'язується з ЧУдаддей1 людини (включаючи, наприклад, кожне з антитіл, які зв'язуються з
Удаддед1 людини, описаних у даному документі). У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях). У деяких варіантах здійснення даного винаходу захворювання вибирають з астми, ХОХЛ, кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
У будь-якому з варіантів, описаних у даному документі, анти-Уаддейд1 антитіло знижує ріст пухлини в ксенотрансплантатній мишачії моделі, не викликаючи втрати ваги.
У будь-якому з варіантів, описаних у даному документі, анти-Уаддед1 антитіло може бути кон'юговане з міткою. У деяких варіантах здійснення мітка являє собою позитронний емітер. У деяких варіантах здійснення позитронним емітером є 8927. У деяких варіантах здійснення запропонований спосіб виявлення Чадде4! людини у біологічному зразку, який включає забезпечення контакту біологічного зразка з антитілом, описаним у даному документі, в умовах, які дозволяють зв'язування антитіла з природним даддей! людини, і детекцію утворення комплексу між антитілом і природним даддед1 людини у біологічному зразку. У деяких варіантах здійснення даного винаходу біологічний зразок вибраний з раку молочної залози, раку легень, раку головного мозку, раку шийки матки, раку товстої кишки, раку печінки, раку жовчної протоки, раку підшлункової залози, раку шкіри, В-клітинних злоякісних новоутворень і Т-клітинних злоякісних новоутворень.
КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР бо На фіїг. 1 показані типові амінокислотні послідовності людського і мишачого білка даддей1.
На фіг. 2 показані типові амінокислотні послідовності людського і мишачого білка даддед2.
На фіг. ЗА-О показані амінокислотні послідовності пептидів, використаних для скринінгу і селекції фагової бібліотеки антитіл. Усі білюим були проекспресовані у вигляді секретованого білка в клітинах ВЕМ5, і їхні послідовності зазначені в напрямку з М-кінця до С-кінця. (А) Амінокислотна послідовність експресованого мишачого білка дхаддеа1-051-ЕСЕ1-4 (9034-0377).
Напівжирним шрифтом на М-кінці виділена коротка лінкерна послідовність (АБ 5) (ЗЕО ІЮО МО: 82). Напівжирним шрифтом на С-кінці виділена коротка лінкерна послідовність (ЕС), сайт розщеплення тромбіном (СМРКО5) (5ЕО І МО: 83), Ссі-спейсер і 6-гістидинова мітка (6-Нів). (В)
Амінокислотна послідовність експресованого людського білка Чдад1-0О5І-ЕСЕ1-4. Показана тільки послідовність Уад1, хоча антиген також містив сайт розщеплення протеази ТЕМ і 6-Нів- мітку на С-кінці. (С) Амінокислотна послідовність експресованого мишачого білка дад2-О51 -
ЕС Е1-4 (М27-ЕЗ388). Напівжирним шрифтом на М-кінці виділена коротка лінкерна послідовність (Арі ов) (ЗБО І МО: 82). Напівжирним шрифтом на С-кінці виділена коротка лінкерна послідовність (ЕКО), сайт розщеплення тромбіном (МРС) (ЗЕО ІЮ МО: 83), С-спейсер і 6-
Нів-мітка. (0) Амінокислотна послідовність експресованого людського білка дад2-051-ЕСЕ1-4 (Н2-Е388). Напівжирним шрифтом на С-кінці виділена коротка лінкерна послідовність (ЕЕС), сайт розщеплення тромбіном (І МРКО5) (ЗЕО ІЮ МО: 83), С-спейсер і 6-Нівз-мітка.
На фіг. 4А-1-8-2 показане вирівнювання амінокислотних послідовностей для варіабельних доменів важкого (фіг. 4А-1 і фіг. 4А-2) і легкого (фіг. 48-1 і фіг. 4В-2) ланцюгів анти-Чаддеа1 (А,
А-1, А-2), анти-Уадаеад2 (В, В-1, В-2, В-3) і анти-Ууаддеа1/2 антитіл (С, С-1, О, 0-1, 0-2, 0-3, 0-4, 0-5). Зазначено позиції амінокислот областей, які визначають комплементарність (СОМ).
На фіг. 5А-В показані послідовності гіперваріабельних ділянок важкого ланцюга (НМК), НІ,
Н2 ї НУ, анти-Уаддед1 антитіл, описаних у прикладах. Амінокислотні позиції пронумеровані відповідно до системи нумерації Кабата, описаної в даному документі й в інших джерелах.
На фіг. 6 показані послідовності НМК легкого ланцюга, 11, 12 їі ІЗ, анти-Уаддейд1 антитіл, описаних у прикладах. Амінокислотні позиції пронумеровані відповідно до системи нумерації
Кабата, описаної нижче.
На фіг. 7 показані послідовності каркасних областей легких і важких ланцюгів анти-Чаддес антитіл, описаних у прикладах. Числа у верхньому регістрі вказують позиції амінокислот за
Коо) Кабатом.
На фіг. 8 показана специфічність зв'язування антитіл, отриманих після скринінгу. Наведено результати аналізів ЕГІЗА, у яких виміряна специфічність зв'язування антитіл А і В, ідентифікованих при скринінгу з використанням людського дад1і-О51-ЕС(Е1-4 (фіг. ЗВ) для антитіла А і мишачого і людського дад2-О51-ЕСюІ1-4 (фіг. ЗС ії ОБ) для антитіла В. Чорні стовпчики - зв'язування з даддейа1 людини; сірі стовпчики - зв'язування з Ххаддед2 людини. С-1 являє собою антитіло, яке зв'язується з обома даддеай1 і даддед2.
На фіг. 9А-В показано інгібування Моїсп-сигнального шляху за допомогою анти-Чаддеа антитіл з дозрілою афінністю. Аналізи з використанням спільного культивування проводили, як описано в прикладі 3. Фагові антитіла із заданою концентрацією зазначені на осі х. ОАРТ у зазначених концентраціях служив як позитивний контроль для інгібування Моїсп-сигнального шляху; ОМ5О служив як контрольний носій. Сигнал індукували за допомогою Заддеа1 (темно- сірі стовпчики) або за допомогою аддеад?2 (світло-сірі стовпчики). Неопрацьовані - культури, які не були стимульовані лігандом і не оброблені антитілом; Без стимуляції - культури, не стимульовані лігандом; адО - контрольне ізотипне антитіло; Стим./без АТ - культури, стимульовані лігандом, але не оброблені антитілом; САРТ - інгібітор гамма-секретази або
РМ5О - контроль носія для САРТ.
На фіг. Т10А-В показано, що комбіноване інгібування даддейд! і даддед2 призводить до швидкої втрати ваги. (А) Мишам два рази на тиждень вводили дози анти-Уаддейа1/2 антитіла С-1 (анти-ОУ1/2; 5-10 трК (мг/кг ваги тіла)), анти-Уаддей1 антитіла А-2 (анти-)1; 5-20 тркК), анти-
Уаддед2 антитіла В-3 (анти-9У2; 5-20 тркК), антитіл А-2 і В-3 разом (анти-)1852; по 5 трК кожного) або контрольного ізотипного антитіла (20 трК). Загальна концентрація антитіл у кожній дозі була доведена до 20 трк з використанням контрольного ізотипного антитіла, де це було необхідно. Зміну середньої ваги тіла (вісь у) відкладали на графік у вигляді відсотка від початкової ваги тіла залежно від часу (вісь х). (В) Мишам Ваїр/с (по десять у кожній групі, які утримувалися індивідуально) вводили внутрішньоочеревинно двічі на тиждень 30 трК анти-д0 контрольного ізотипного антитіла або комбінацію 15 трК антитіла А-2 плюс 15 трК антитіла В-3 протягом восьми днів. Споживання їжі оцінювали щодня, зважуючи їжу, яка видається, і їжу, яка залишається в кожній клітині. Планки похибок представляють стандартне відхилення (п--10).
На фіг. 11А-1-8-2 показано інгібування росту клітин раку легень людини за допомогою бо антагоністичного анти-Уаддейд1 антитіла іп мімо. Мишам, які несуть ксенотрансплантати раку легень людини, двічі на тиждень вводили внутрішньоочеревинно (ІР) 20 трК анти-90 ізотипного контрльного антитіла (ізотипного контрольного АТ) або анти-Уаддед1 антитіла А-2 (анти-дазд1), причому ін'єкції починали після того, як середній об'єм пухлини (виміряний штангенциркулем) становив близько 180 мм3. Об'єм пухлини (вісь у) далі вимірювали протягом 19 днів. Фіг. 11А-1 і фіг. 11А-2: середній об'єм пухлини за кожною групою (п-10) відкладали на графіку залежно від часу (вісь х), використовуючи модель лінійних змішаних ефектів (фіг. 11А-1.). Об'єми пухлини для кожної миші в кожній групі зображені на двох панелях на фіг. 11А-2. Фіг. 118-1 ї фіг. 118-2: загальну вагу тіла кожної миші вимірювали й відкладали на графіку у вигляді зміни у відсотках, усередненого для кожної групи (фіг. 118-1), або для кожної миші в кожній групі (фіг. 118-2).
На фіг. 12А-В показано інгібування росту клітин раку молочної залози людини анти-Уаддеаї і анти-Уаддед2 антагоністичними антитілами іп мімоло Мишам С.В-17 5СІЮО.Б9 (із ксенотрансплантатами раку молочної залози людини вводили в дні 0, 4, 7, 12, 15, 18, 22, 25, 29, 32, 36, 43, 50 ії 57 анти-д40О контрольне ізотипне антитіло (анти-9), контрольне ізотипне антитіло до антигену з амброзії (анти-амброзія), анти-Уаддеа1 антитіло А-2 у каркасі антитіла Ідс1 людини (анти-)ад1 А-2 (ПІДО1)), анти-Уаддей1 антитіло А-2 у каркасі мишачого Ідсга (анти-дад1
А-2 (тідсг2а)) або анти-даддед2 антитіло В-3 у каркасі антитіла (901 людини (анти-Уад2 Б-3 (пІдС1)). Об'єми пухлини (вісь у) для груп (А) або окремої тварин (В) відкладали на графіку, використовуючи модель лінійних змішаних ефектів залежно від часу (вісь х).
На фіг. 13А-С показано розщеплення анти-Уаддей1 антитіл у важкому ланцюзі. (А) Антитіла
А, А1 і А-2 були проаналізовані за допомогою стандартних способів електрофорезу в ДСН-ПААГ і забарвлення білка за відсутності (-) або за присутності (Ж) відновника ОТТ, як зазначено. Також показані молекулярні стандарти мас (у кДа). На панелі (В) показаний репрезентативний скан мас-спектрометричного (МС) аналізу (І С-М5/ТОЕ, відновлювальні умови) антитіла А-1. Позиції значимих фрагментів (піки) прокоментовані, і молекулярні маси показані над піками. Цей аналіз показав, що сайт розщеплення знаходився між амінокислотами 5100 ії 5101 у СОКЗ важкого ланцюга, як схематично зазначено в амінокислотній послідовності важкого ланцюга в панелі (С) стрілкою, яка вказує місце розщеплення.
На фіг. 14А-С показні результати М-кінцевого пептидного секвенування сайту розщеплення важкого ланцюга анти-)аддейд1 антитіла. За допомогою стандартних способів електрофорезу в
Ко) ДСН-ПААГ в умовах, які відновлюють, і забарвлення білка, були розділені й ідентифіковані повнорозмірні й розщеплені фрагменти препарати зазначених антитіл (А). С-кінцевий (В) і М- кінцевий (С) розщеплені пептидні фрагменти вирізали з гелю і секвенували з використанням стандартних способів пептидного М-кінцевого секвенування, щоб точно визначити ділянку розщеплення. Послідовності, виділені червоним шрифтом на панелях (В) і (С), вказують М- кінцеві послідовності кожного із секвенованих пептидів, причому послідовність на панелі (В) вказує сайт розщеплення, а послідовність на панелі (С) вказує М-кінець важкого ланцюга.
На фіг. 15 показаний ефект зміни амінокислоти 5101 у важкому ланцюзі анти-Уаддеа!1 антитіл на розщеплення важкого ланцюга.
На фіг. 16А-В показаний (А) аналіз методом в ДСН-ПААГ розщеплення анти-аддеа!1 антитіл, інкубованих при 70 "С; і (в) результати (у відсотках) розщеплення важкого ланцюга, які спостерігаються для кожного препарату антитіла при 70 і при 95 760.
На фіг. 17А-В показаний (А) аналіз методом електрофорезу в ДСН-ПААГ розщеплення анти-
Уаддед1 антитіла А1 після різної кількості циклів заморожування-відтавання, і (В) відсоток розщеплення важкого ланцюга, який спостерігається при кожних умовах.
На фіг. 18А-С показано (А) інгібування .«аддеа1-індукованої активації анти-)адаєй!1 антитілами АТ (ліві стовпчики) і А1(5101Т) (праві стовпчики) при різних концентраціях. На панелях (В) і (С) показані середні значення активності люциферази світляка і середні значення люциферази з КепіїЇа, відповідно, які були використані для розрахунку даних у (А), як описано в прикладі 10.
На фіг. 19 показано імунофлуоресцентне забарвлення війчастих клітин (відзначених імунофлуоресцентною детекцією альфа-тубуліну в червоному каналі) і клітин Клара (відзначених імунофлуоресцентною детекцією СС10 у зеленому каналі) у бронхіолярному епітелії мишей, яким вводили анти-)аддед2 антитіла в сполученні з анти-Уаддед1 антитілом А1 або А-1 (5101Т) або ізотипним контролем, як описано в прикладі 11.
На фіг. 20А-В показані (А) І МЕ-графік (лінійних змішаних ефектів) об'єму пухлини в мишей із ксенотрансплантатами раку печінки, які одержували анти-Уаддед1 антитіло А1 або А1(51017Т), і (В) групи лікування, показані в (А), а також доза, об'єм пухлини в останній день дослідження (день 44), АОС/день 95 ТО (площа під кривою за день (інгібування росту пухлини у відсотках (ТОЇ)) порівняно з контролем, де нижнє і верхнє значення стосуються мінімального і 60 максимальний, відповідно, значенню 95 ТО для окремих тварин у кожній групі), час подвоєння пухлини в добі (ТТР 2Х) і число мишей, які показують часткову відповідь у ході експерименту (РЕ).
На фіг. 21А-В показані (А) І МЕ-графік ваги тіла мишей залежно від часу для мишей, показаних на фіг. 20, ї (В) групи лікування, показані в (А), ії доза, 95 зміна ваги тіла в останній день дослідження (95 ВТ в останній день), максимальна зміна (у 95) ваги тіла (макс. 95 ВТ), день, коли відбулася максимальна зміна ваги тіла (день макс. 95 ВТ) ї (АОС/день (нижня, верхня межі)).
На фіг. 22А-В показані амінокислотні послідовності варіабельних доменів (А) важкого ланцюга і (В) легкого ланцюга анти-Уаддед1 антитіла А-1(5101Т). Зазначено позиції амінокислот областей, які визначають комплементарність (СОК).
На фіг. 23А-С показані (А) забарвлення перйодною кислотою - реактивом Шиффа легеневих дихальних шляхів у мишей, які одержували контроль, анти-Уаддед!, анти-Уаддед2 або комбінацію анти-д)аддейді1 і анти-даддед2 антитіл, (В) визначення числа келихоподібних клітин у дихальних шляхах груп, які одержували різне лікування, і (С) показник запалення, оцінений шляхом НаЕ-забарвлення (гематоксиліном/еозином).
На фіг. 24 показано зв'язування (ліворуч) анти-Уаддей1 антитіла А-2 і (праворуч) анти-
У9аддед1/2 антитіла С-1 з Хдаддед1 людини, Щдаддед1 миші, даддед2 людини, Щдаддед2 миші, 01 людини, 01 миші, ОІІ4 людини і ОГІ 4 миші.
На фіг. 25 показаний кліренс анти-Уаддейд1 антитіла А-1-5101Т у мишей після однократного внутрішньовенного введення трьох різних доз антитіла.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВАРІАНТІВ ЗДІЙСНЕННЯ ВИНАХОДУ
Ї. ВИЗНАЧЕННЯ
Для цілей даного винаходу «акцепторна каркасна область людини» являє собою каркасну область, яка містить амінокислотну послідовність каркасної області варіабельного домену легкого ланцюга (МІ) або каркасної області варіабельного домену важкого ланцюга (МН), отриману з каркасної області імуноглобуліну людини або консенсусної каркасної області людини, визначеної нижче. Акцепторна каркасна область людини, «отримана з» каркасної області імуноглобуліну людини або консенсусної каркасної області людини, може містити таку ж амінокислотну послідовність, або вона може включати зміни амінокислотної послідовності. У деяких варіантах здійснення число амінокислотних замін складає 10 або менше, 9 або менше, 8 або менше, 7 або менше, 6 або менше, 5 або менше, 4 або менше, 3 або менше, або 2 або менше. У деяких варіантах здійснення акцепторна каркасна область Мі людини ідентична по послідовності каркасної області МІ імуноглобуліну людини або консенсусної послідовності каркасної області людини. «Афінність» стосується сили загальної суми нековалентних взаємодій між одним сайтом зв'язування молекули (наприклад, антитіла) і її партнером за зв'язуванням (наприклад, антигеном). Якщо не зазначено інше, використаний у даному документі термін «афінність зв'язування» стосується власної афінності зв'язування, яка відбиває взаємодію у співвідношенні 171 між членами пари, яка зв'язується, (наприклад, антитілом і антигеном). Афінність молекули
Х до її партнера М може бути зазвичай наведена за допомогою константи дисоціації (Ка).
Афінність можна виміряти за допомогою звичайних способів, відомих у даній галузі техніки, включаючи ті, котрі описані в даному документі. Конкретні ілюстративні варіанти і варіанти, які наводяться як приклад, вимірювання афінності зв'язування описуються нижче.
Антитіло з «дозрілою афінністю» стосується антитіла з однією або декількома змінами в одному або декількох гіперваріабельних ділянках (НМК) порівняно з батьківським антитілом, у якому немає таких змін, при цьому такі зміни призводять до підвищення афінності антитіла до антигену.
Терміни «анти-Уаддей антитіло» і «антитіло, яке зв'язується з дхаддед» стосуються антитіла, яке здатне зв'язуватися даддеа1, даддед2 або даддеа!1 і 2 (даддед1/2) з достатньою афінністю, так що антитіло є корисним як діагностичний і/або терапевтичний агент для спрямованого впливу на даддей. В одному варіанті здійснення ступінь зв'язування анти-Уаддей антитіла з неспорідненим, яке не є даддей білком, складає приблизно менше 10 95 від зв'язування антитіла з даддед, виміряна, наприклад, за допомогою радіоїмуноаналізу (КІА). У деяких варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується з даддей, має константу дисоціації (Ка) «1 мкМ, «100 нм, «10 НМ, «1 нМ, «0,1 нМ, «0,01 нМ або «0,001 нМ (наприклад, 108 М або менше, наприклад, від 108 М до 10-73 М, наприклад, від 1079 М до 10-73 М). У деяких варіантах здійснення анти-)аддей антитіло зв'язується з епітопом Уаддей, який є консервативним серед Чдаддеа з різних видів.
Терміни «анти-Уаддейд1 антитіло» і «антитіло, яке зв'язується з дхаддед1» стосуються антитіла, яке здатне зв'язуватися з Чаддей1! достатньою афінністю, що антитіло є корисним як бо діагностичний і/або терапевтичний агент для спрямованого впливу на даддей1.
Термін «антитіло» використовується в даному описі у найширшому змісті й охоплює різні структури антитіл, які включають, але не обмежені ними, моноклональні антитіла, поліклональні антитіла, поліспецифічні антитіла (наприклад, біспецифічні антитіла) і фрагменти антитіл, якщо вони виявляють бажану антигензв'язувальну активність.
Використаний у даному документі термін «астма» стосується складного захворювання, яке характеризується мінливими і рецидивуючими симптомами, оборотною обструкцією дихальних шляхів (наприклад, у результаті дії бронхолітичного засобу) і бронхіальною гіперчутливістю, яка необов'язково може бути пов'язана запаленням, яке є її основою. Приклади астми включають аспірин-чуттєву астму/загострення астми, атопічну астму, важку астму, легку астму, помірну або важку астму, кортикостероїд-незалежну астму, хронічну астму, кортикостероїд-стійку астму, кортикостероїд-резистентну астму, вперше діагностовану і неліковану астму, обумовлену палінням астму, астму, яка не піддається контролю кортикостероїдами, й інші види астми, описані в . АІПегду Сіїп Іттипої (2010) 126(5):926-938. «Блокуюче» антитіло, або «антагоністичне» антитіло являє собою антитіло, яке по суті інгібує (частково або повністю) біологічну активність антигену, з яким воно зв'язується. «Фрагмент антитіла» стосується молекули, яка відрізняється від інтактного антитіла, яке містить частину інтактного антитіла, яке зв'язується з антигеном, з яким зв'язується інтактне антитіло. Приклади фрагментів антитіла включають, але не обмежуються ними, Ем, Бар, Рар',
Еаб'-5Н, К(аб')», діантитіла, лінійні антитіла, одноланцюжкові молекули антитіл (наприклад, 5ОЕм) і поліспецифічні антитіла, утворені з фрагментів антитіл. «Антитіло, яке зв'язується з тим же епітопом», що й еталонне антитіло, стосується антитіла, яке блокує зв'язування еталонного антитіла зі своїм антигеном у конкурентному аналізі на 50 905 або більше, і навпаки, контрольне антитіло блокує зв'язування антитіла зі своїм антигеном у конкурентному аналізі на 50 95 або більше. Приклад конкурентного аналізу наведений у даному описі.
Термін «химерне» антитіло стосується антитіла, у якому ділянка важкого і/або легкого ланцюга належить до одного джерела або біологічного виду, у той час як залишок важкого і/або легкого ланцюга належить до іншого джерела або біологічного виду. «Клас» антитіла стосується типу константного домену або константної області, яка несе
Зо його важкий ланцюг. Існує п'ять основних класів антитіл: ІА, дО, ЧЕ, дос і ДМ, ї деякі з них можна далі підрозділити на підкласи (ізотипи), наприклад, Іде, Ідс2, ІдОЗ, Ідс4, ІДА1 і ІдА2.
Константні домени важкого ланцюга, які відповідають різним класам імуноглобулінів, називаються а, 6, є, є і М, відповідно.
Використаний у даному документі термін «цитотоксичний агент» стосується речовини, яка інгібує або перешкоджає функціонуванню клітин і/або призводить до загибелі або руйнування клітин. Цитотоксичні агенти включають, але не обмежуються ними, радіоактивні ізотопи (наприклад, А2!!, 151, (125, 90 Де86, Де88. пі», Вігт2, рзг2г, рр і радіоактивні ізотопи Гц), хіміотерапевтичні агенти або лікарські засоби (наприклад, метотрексат, адріаміцин, вінкаалкалоїди (вінкристин, вінбластин, етопозид), доксорубіцин, мелфалан, мітоміцин С, хлорамбуцил, даунорубіцин або інші агенти, які інтеркалюють), агенти, які інгібують ріст, ферменти і їхній фрагменти, такі як нуклеази, антибіотики, токсини, такі як низькомолекулярні токсини або ферментативно активні токсини бактеріального, грибкового, рослинного або тваринного походження, включаючи їхні фрагменти і/або варіанти, й різні протипухлинні або протиракові агенти, розкриті нижче. «Ефекторні функції» стосуються таких видів біологічної активності, які можуть бути властивої Ес-області антитіла і змінюються залежно від ізотипу антитіла. Приклади ефекторних функцій антитіл включають зв'язування С1д і комплементзалежну цитотоксичність (СОС); зв'язування з Ес-рецептором; антитілозалежну клітиноопосредковану цитотоксичність (АЮСС); фагоцитоз; супресію рецепторів на клітинній поверхні (наприклад, В-клітинних рецепторів); і активацію В-клітин. «Ефективна кількість» агента, наприклад, фармацевтичного складу, стосується кількості, яка ефективна в необхідних дозах і протягом необхідних періодів часу, для досягнення бажаного терапевтичного або профілактичного результату.
Термін «ЕРс-область» використовується в даному документі для позначення С-кінцевої області важкого ланцюга імуноглобуліну, який містить щонайменше ділянку константної області.
Термін включає нативні послідовності Ес-областей і варіанти Ес-областей. В одному з варіантів здійснення Есо-область важкого ланцюга до людини простягається від Суз226 або від Рго230 до карбоксильного кінця важкого ланцюга. Однак С-кінцевий лізин (І уз447) Есо-області може бути присутнім або ні. Якщо в даному документі спеціально не зазначено інше, амінокислотні бо залишки або Ес-області константної області пронумеровані відповідно до системи нумерації Є),
яка також називається індексом БО, яка описана в Кабаї єї аї., Зедиепсе5 ої Ргоїеїп5 ої
Іттипоіодіса! Іпієгеві, Бій Еа. Рибіїс Неанйй 5егуісе, Маїйопаї! Іпвійшев ої Неайй, ВеШезаа, МО, 1991. «Каркасна область» або «ЕК» стосується залишків варіабельного домену, крім залишків гіперваріабельної ділянки (НУК). ЕК варіабельного домену, як правило, складається з чотирьох
ЕВ-доменів: ЕК1, ЕК2, ЕКЗ і ЕК4. Відповідно, послідовності НУК і ЕЕ зазвичай знаходяться в наступному порядку в МН (або М): ЕК1-НІ(11)-ЕН2-Н2(І2)-ЕВНЗ-НЗІ(І 3)-ЕНАУ.
Терміни «повнорозмірне антитіло», «інтактне антитіло» і «ціле антитіло» використовуються в даному описі взаємозамінно для позначення антитіла, яке має структуру, по суті схожу зі структурою природного антитіла, або такого, яке має важкі ланцюги, які містять Ес-область, визначену в даному описі.
Терміни «клітина-хазяїн», «лінія клітин-хазяїнів» і «культура клітин-хазяїнів» використовуються взаємозамінно і стосуються клітин, у які була введена екзогенна нуклеїнова кислота, включаючи потомство таких клітин. Клітини-хазяїни включають «трансформанти» і «трансформовані клітини», які включають початково трансформовану клітину й отримане від неї потомство незалежно від числа пасажів. Потомство може не бути повністю ідентичним по нуклеотидному вмісту батьківській клітині, а може містити мутації. Сюди включено мутантне потомство, яке має функцію або біологічну активність, на яку скринується або відбирається початково трансформована клітина. «Антитіло людини» являє собою антитіло, яке має амінокислотну послідовність, яка відповідає амінокислотній послідовності антитіла, яке продукується людиною або клітиною людини, або отриманого з тваринного джерела, у якому використовується репертуар антитіл людини або інші послідовності, які кодують антитіла людини. Це визначення антитіла людини прямо виключає гуманізоване антитіло, яке містить антигензв'язувальні залишки з антитіла тварини. «Консенсусна каркасна область людини» являє собою каркасну область, яка являє собою амінокислотні залишки, які найчастіше зустрічаються, у вибірці послідовностей каркасних областей МІ або МН імуноглобулінів людини. Зазвичай вибірка послідовностей МІ або УНН імуноглобулінів людини походить з підгрупи послідовностей варіабельних доменів. Як правило,
Зо ця підгрупа послідовностей є підгрупою, зазначеною в Кабаї еї аї!., Зедиепсев5 ої Ргоївїп5 ої
Ітітипо!іодіса! Іпіегеві, Би Еайіоп, МІН Рибіїсайоп 91-3242, Ве(Шезаа МО (1991), мої!в. 1-3. В одному варіанті здійснення підгрупою для МІ. є підгрупа каппа | за Кабатом та ін., див. вище. В одному з варіантів здійснення підгрупою для УН є підгрупа ІІІ за Кабатом та ін., див. вище. «Гуманізоване антитіло» стосується химерного антитіла, яке містить амінокислотні залишки з НУК тварин і амінокислотні залишки з ЕК людини. У деяких варіантах здійснення гуманізоване антитіло буде містити по суті усі з щонайменше одного і, як правило, двох варіабельних доменів, в яких усі або по суті всі НМК (наприклад, СОК) відповідають НУК антитіла тварини, і всі або по суті всі ЕК відповідають ЕК антитіла людини. Необов'язково, гуманізоване антитіло може містити щонайменше ділянку константної області антитіла, яке належить антитілу людини. «Гуманізована форма» антитіла, наприклад, антитіла тварини, стосується антитіла, яке пройшло процедуру гуманізації.
Використовуваний у даному описі термін «гіперваріабельна ділянка» або «НМЕ» стосується кожної з ділянок варіабельного домену антитіла, які є гіперваріабельними по послідовності («області, які визначають комплементарність» або «СОК») і/або утворюють структурно обумовлені петлі («гіперваріабельні петлі») і/або містять контактуючі з антигеном залишки («антигенні контакти»). Зазвичай антитіла містять шість НМЕ: три в МН (НІ, Н2, НЗ) і три в МІ. (1, 12, 3). Приклади НУК у даному документі включають: (а) гіперваріабельні петлі, які знаходяться між амінокислотними залишками 26-32 (І 1), 50-52 (12), 91-96 (13), 26-32 (НІ), 53-55 (Н2) і 96-101 (НЗ) (Споїніа апа І е5К, 9. Мої. Віої!. 196: 901-917 (1987); (5) СОК, які знаходяться між амінокислотними залишками 24-34 (І 1), 50-56 (І 2), 89-97 (І 3), 31-35 (НІ), 50-65 (Н2) і 95-102 (НЗ) (Кабаї єї а!., Зедиепсевз ої Ргоївіпв ої Іттипоодісаї! Іпіегеві,
БП Ей. Рибіїс Неайй 5егмісе, Маїйопаї Іпзійшез ої Неапй, Веїйпезаа, МО (1991); (с) антигенні контакти, які знаходяться між амінокислотними залишками 27с-36 (11), 46-55 (12), 89-96 (І 3), 30-35Б (НІ), 47-58 (Н2) і 93-101 (НЗ) (МассСаїшт еї аї. у). Мої. Віої. 262: 732-745 (1996)); і (4) комбінації (а), (Б) і/або (с), які включають амінокислотні залишки НУК 46-56 (12), 47-56 (12), 48-56 (І 2), 49-56 (12), 26-35 (НІ), 26-356 (НІ), 49-65 (Нг), 93-102 (НЗ) і 94-102 (НЗ).
Якщо не зазначено інше, залишки НУК й інші залишки у варіабельному домені (наприклад, 60 залишки ЕЕ) пронумеровані в даному описі відповідно до Кабат й ін., див. вище.
«Імунокон'югат» являє собою антитіло, кон'юговане з однією або декількома гетерологічними молекулами, які включають, але не обмежуються цим, цитотоксичний агент. «Індивідуумом» або «суб'єктом» є ссавець. Ссавці включають, але не обмежуються ними, одомашнених тварин (наприклад, корів, овець, кішок, собак і коней), приматів (наприклад, людей і приматів, які не є людьми, таких як мавпи), кроликів і гризунів (наприклад, мишей і щурів). У деяких варіантах здійснення індивідуумом є людина. «Виділене» антитіло являє собою антитіло, яке було відділене від компонента свого природного оточення. У деяких варіантах здійснення антитіло очищене більше ніж до 95 95 або 99 95 чистоти, визначеної, наприклад, електрофоретично (наприклад, електрофорезом у ДСН-
ПААГ, ізоелектрофокусуванням (ІЕЕ), капілярним електрофорезом) або хроматографічно (наприклад, іонообмінною ВЕРХ або зворотнофазовою ВЕРХ). Огляд способів оцінки чистоти антитіл див., наприклад, у Ріаїтап еї аї., У. Спготаїйодг. В 848: 79-87 (2007). «Виділена» нуклеїнова кислота стосується молекули нуклеїнової кислоти, яка була відділена від компонента свого природного оточення. Виділена нуклеїнова кислота включає молекулу нуклеїнової кислоти, яка міститься в клітинах, які зазвичай містять молекулу нуклеїнової кислоти, але молекула нуклеїнової кислоти присутня позахромосомно або присутня у хромосомі в положенні, яке відрізняється від її природного положення на хромосомі. «Виділена нуклеїнова кислота, яка кодує анти-Заддей антитіло» стосується однієї або декількох молекул нуклеїнових кислот, які кодують важкі й легкі ланцюги (або їхні фрагменти) антитіла, включаючи такі нуклеотидні молекули в одному векторі або окремих векторах, і такі нуклеотидні молекули, які присутні в одному або декількох місцях у хазяїні.
Використаний у даному описі термін «моноклональне антитіло» стосується антитіла, отриманого з популяції по суті гомогенних антитіл, тобто окремі антитіла, яке входять до складу популяції, є ідентичними і/або зв'язуються з одним і тим епітопом, за винятком можливих варіантів антитіл, наприклад, які містять природні мутації або такі, які виникають під час одержання препарату моноклональних антитіл, при цьому такі варіанти, як правило, присутні в незначних кількостях. На відміну від препаратів поліклональних антитіл, які зазвичай включають різні антитіла, спрямовані проти різних детермінант (епітопів), кожне моноклональне антитіло препарату моноклональних антитіл спрямоване проти однієї антигенної детермінанти. Таким
Зо чином, визначення «моноклональне» вказує на те, що властивістю антитіла є те, що його одержують із по суті гомогенної популяції антитіл, і його не слід розглядати як вимога одержання антитіла яким-небудь конкретним способом. Наприклад, моноклональні антитіла, застосовані відповідно до даного винаходу, можна одержати за допомогою методів, які включають, але не обмежуються ними, гібридомну технологію, способи створення рекомбінантних ДНК, способи фагового дисплею і способи, у яких використовуються трансгенні тварини, які містять усі локуси імуноглобулінів людини або їх частина, при цьому такі способи й інші, які наводяться як приклад способи одержання моноклональних антитіл описуються в даному описі. «Голе антитіло» стосується антитіла, яке не кон'юговане з гетерологічною складовою (наприклад, цитотоксичною складовою) або радіоактивною міткою. «Голе» антитіло може бути присутнім у фармацевтичному складі. «Природні антитіла» стосуються природних молекул імуноглобулінів з різною структурою.
Наприклад, природні антитіла класу дб являють собою гетеротетрамерні глікопротеїни приблизно 150000 дальтон, які складаються з двох ідентичних легких ланцюгів і двох ідентичних важких ланцюгів, які з'єднані дисульфідним зв'язком. Від М-кінця до С-кінця, кожен важкий ланцюг містить варіабельну область (МН), також названу варіабельним доменом важкого ланцюга, за яким випливають три константних домену (СНІ, СН2 і СНЗ). Аналогічно, від М-кінця до С-кінця, кожен легкий ланцюг містить варіабельну область (МІ), також названу варіабельним доменом легкого ланцюга, за яким випливає константний домен легкого ланцюга (СІ). Легкий ланцюг антитіла можна віднести до одного з двох типів, названих каппа (к) і лямбда (А), виходячи з амінокислотної послідовності її константного домену.
Термін «листівка- вкладиш» використовується для вказівки інструкцій, які зазвичай включаються у торгові упакування терапевтичних продуктів, які містять інформацію про показання, застосування, дозування, введення, комбіновану терапію, протипоказаннях і/або застереженнях, які стосуються використання таких терапевтичних продуктів. «Відсоток ( 95) ідентичності амінокислотної послідовності» стосовно еталонної поліпептидної послідовності визначається як відсоток амінокислотних залишків у послідовності, яка цікавить, які ідентичні амінокислотним залишкам в еталонній поліпептидній послідовності після вирівнювання послідовностей і введення розривів, якщо необхідно, для одержання 60 максимального відсотка ідентичності послідовностей, і без урахування будь-яких консервативних замін як частини ідентичності послідовностей. Вирівнювання для цілей визначення відсотка ідентичності амінокислотних послідовностей можна досягти різними способами, які відомі в даній галузі техніки, наприклад, використовуючи загальнодоступне комп'ютерне програмне забезпечення, таке як програмне забезпечення ВІ АЗТ, ВАГ 5Т-2, АСОМ або Медаїдп (ОМА5БТАК). Кваліфіковані в даній галузі фахівці можуть визначити відповідні параметри для вирівнювання послідовностей, включаючи будь-які алгоритми, необхідні для досягнення максимального вирівнювання по всій довжині послідовностей, які порівнюються.
Однак для цілей даного винаходу значення 95 ідентичності амінокислотних послідовностей одержують з використанням комп'ютерної програми для порівняння послідовностей АГІСМ-2.
Комп'ютерна програма для порівняння послідовностей АГ ІСМ-2 була створена Сепепіесі, Іпс., і початковий текст програми був поданий разом з документацією користувача у Відомство з охорони авторських прав США, УмМазпіпдіоп 0О.С., 20559, де він був зареєстрований під Мо
ТХи510087 реєстрації авторського права в США. Програма АГІСМ-2 знаходиться у вільному доступі від Сепепієесі, Іпс., Зошій Зап Егапсізсо, Саїїйогпіа, або її можна компілювати, виходячи з початкового тексту програми. Програму АСІОМ-2 варто компілювати при використанні на операційній системі ШМІХ, включаючи Оідйа! МІХ Мм4.0О0. Усі параметри порівняння послідовностей установлюються програмою АГІСМ-2 і не змінюються.
У ситуаціях, коли для порівнянь амінокислотних послідовностей використовується АГІСМ-2, до ідентичності даної амінокислотної послідовності А і даної амінокислотної послідовності В (що можна альтернативно перефразувати, як дана амінокислотна послідовність А, яка має або містить деякий 95 ідентичності амінокислотної послідовності В) розраховують у такий спосіб: 1О0Охчастки Х/У, де Х являє собою число амінокислотних залишків, оцінених як ідентичні збіги програмою
АЦПСМ-2 при вирівнюванні цією програмою послідовностей А і В, і де У являє собою загальне число амінокислотних залишків у В. Зрозуміло, що якщо довжина амінокислотної послідовності
А не дорівнює довжині амінокислотної послідовності В, 9о ідентичності амінокислотної послідовності А і послідовності В не буде дорівнює 95 ідентичності амінокислотної послідовності
В ї послідовності А. Якщо спеціально не зазначено інше, то всі значення 95 ідентичності амінокислотних послідовностей, використані в даному описі, одержують, як описано в
Зо попередньому параграфі з використанням комп'ютерної програми АСІСМ-2.
Термін «фармацевтичний склад» стосується препарату, який знаходиться в такій формі, яка дозволяє біологічній активності діючого інгредієнта, який міститься в ньому, виявляти себе, і який не містить додаткові компоненти, які є неприйнятно токсичними для суб'єкта, якому будуть вводити склад. «Фармацевтично прийнятний носій» стосується інгредієнта у фармацевтичному складі, крім діючого інгредієнта, який є нетоксичним для суб'єкта. Фармацевтично прийнятний носій включає, але не обмежується ними, буфер, наповнювач, допоміжну речовину або консервант.
Термін «даддед» або «дад», використаний у даному описі, стосується будь-якого нативного
Уаддей з будь-якої хребетної тварини, включаючи ссавців, таких як примати (наприклад, людина) і гризуни (наприклад, миші і пацюки), якщо не зазначено інше. Термін охоплює «повнорозмірний» непроцесований даддей, а також будь-яку форму Чаддейд, яка виникає в результаті процесингу в клітині. Термін також охоплює природні варіанти Удаддейд, наприклад, сплайсингові варіанти або алельні варіанти. Амінокислотні послідовності типових людського і мишачого Уаддеа 1 і даддед2 показані на фіг. 1 і 2 (5ЕО ІЮ МО: 1-4), відповідно.
Використаний у даному описі термін «лікування» (і його граматичні варіанти «лікувати» або «впливати») стосується клінічного втручання в спробі змінити природний перебіг хвороби індивідуума, який піддається лікуванню, і може проводитися або для профілактики, або при наявності клінічної патології. Бажані ефекти лікування включають попередження або виникнення рецидиву захворювання, пом'якшення симптомів, скорочення будь-яких прямих або непрямих патологічних наслідків захворювання, попередження метастазування, зниження швидкості розвитку захворювання, поліпшення або послаблення хворобливого стану і ремісію або поліпшення прогнозу. У деяких варіантах здійснення даного винаходу для затримки розвитку захворювання або порушення використовуються антитіла за даним винаходом.
Термін «варіабельна область» або «варіабельний домен» стосується домену важкого або легкого ланцюга антитіла, який бере участь у зв'язуванні антитіла з антигеном. Варіабельні домени важкого ланцюга і легкого ланцюга (МН і МІ, відповідно) природного антитіла зазвичай мають схожі структури, при цьому кожен домен містить чотири консервативні каркасні області (ЕК) і три гіперваріабельні ділянки (НУК). (Див., наприклад, Кіпаї єї аІ. Киру Іттипо!оду, 6" ед.,
М.Н. Егеетап апа Со., раде 91 (2007). Один МН- або Мі-домен може бути достатній для бо додання специфічності зв'язування з антигеном. Крім того, антитіла, які зв'язуються з конкретним антигеном, можна виділити, використовуючи МН- або Мі-домен антитіла, яке зв'язується з антигеном, для скринінгу бібліотеки комплементарних МіІ/- або МН-доменів, відповідно. Див., наприклад, Рогпоїапо еї аї., У. Іттипої. 150: 880-887 (1993); Сіакзоп еї аї.,
Маїцге 352: 624-628 (1991).
Використаний у даному описі термін «вектор» стосується молекули нуклеїнової кислоти, здатної переносити іншу нуклеїнову кислоту, з якою вона зв'язана. Термін включає вектор у вигляді структури нуклеїнової кислоти, яка саморециплікується, а також вектор, включений у геном клітини-хазяїна, у яку він введений. Деякі вектори здатні до керування експресією нуклеїнових кислот, з якими вони функціонально зв'язані. Такі вектори називають у даному описі «експресійними векторами».
І. КОМПОЗИЦІЇ І СПОСОБИ
В одному з аспектів даний винахід грунтується, частково, на ідентифікації анти-даддеа антитіл і їх фрагментів. У деяких варіантах здійснення запропоновані антитіла, які зв'язуються з щонайменше одним даддейд. Антитіла за винаходом можуть бути використані, наприклад, для діагностики або лікування раку. Відповідно, даний винахід стосується способів, композицій, наборів і промислових виробів, пов'язаних з анти-Заддей антитілами.
А. Приклади Анти-)аддей1 антитіл
В одному аспекті даний винахід стосується виділених антитіл, які зв'язуються з даддеа1.
У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з дхаддей1! людини і миші. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з дхаддед1 людини, миші і яванської макаки. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддеа!, але не зв'язується з даддед2. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддеа1 людини, але не зв'язується з дХаддед2 людини. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддейд1 людини і миші, але не зв'язується з дхдаддед2 людини або миші. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з Удхаддеа1 людини, миші і яванської макаки, але не зв'язується з даддед2 людини, миші, щура і яванської макаки. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддей1, але не зв'язується даддед2 або 0111. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з Чдаддей! людини, але не зв'язується з дхаддед2 людини або 0/1 людини. У деяких варіантах здійснення винаходу
Зо антитіло зв'язується з даддед! людини і миші, але не зв'язується з даддеа2 людини або миші або з 0/1 людини або миші. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з
Уаддеді людини, миші і яванської макаки, але не зв'язується з даддед2 людини, миші або яванського макака або 01 людини, миші або яванської макаки. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддей1, але не зв'язується з дхдадде4а2, 01 або 01 | 4. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з Уаддей! людини, але не зв'язується
У9аддед2 людини, 0/1 людини або 0БІ//4 людини. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з Удхаддед1 людини і миші, але не зв'язується з даддед2 людини або миші, рі людини або миші або 0/4 людини або миші. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддейд1 людини, миші і яванської макаки, але не зв'язується з Чдхаддеа2 людини, миші або яванської макаки, або з БІ 1 людини, миші або яванської макаки, або з О/ І 4 людини, миші або яванської макаки.
У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується з даддей1 людини з афінністю (Ка) 2 нМ або вищою (тобто нижче 2 нМ). У деяких варіантах здійснення антитіло зв'язується з
Уаддед1і людини з афінністю (Ка) 1,5 нМ або вищою, або 1 нМ або вищою, або 0,9 нМ або вищою, 0,8 нМ або вищою, або 0,7 нМ або вищою (тобто нижче 1,5 нМ, нижче 1 нМ, нижче 0,9
НМ, нижче 0,8 нМ або нижче 0,7 нМ). У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язується даддеа!1 миші з афінністю (Ка) 2 нМ або вищою (тобто нижче 2 нМ). У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язує мишачий даддеа!1 з афінністю (Ка) 1,5 нМ або вищою, або 1 нМ або вищою, або 0,9 нМ або вищою, 0,8 нМ або вищою, 0,7 нМ або вищою, або
БО 0,6 нМ або вищою, або 0,5 нМ або вищою (тобто нижче 1,5 нМ, нижче 1 нМ, нижче 0,9 нМ, нижче 0,8 нМ, нижче 0,7 нМ, нижче 0,6 нМ або нижче 0,5 нМ).
У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язує нативний, згорнутий даддес1, але не зв'язує денатурований даддед1. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язує
У9аддедй1! у твердофазному імуноферментному аналізі (ЕГІЗА), але не зв'язує Щдаддей1 на
Вестерн-блоті. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіло зв'язує згорнутий Уаддейд1 у твердофазному імуноферментному аналізі (ЕГІ5ЗА), але не зв'язує денатурований Уаддей1 на
Вестерн-блоті. У деяких варіантах здійснення антитіло зв'язує згорнутий ЦУаддеа1 у фізіологічних умовах, але не зв'язує денатурований даддеа1. «Нативний, згорнутий» Уаддей1 стосується
Уаддед!, який пройшов процедуру згортання білка у фізіологічних умовах і залишається в згорнутому стані. У деяких варіантах здійснення Удхаддед1 залишається в згорнутому стані в розчині.
У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується анти-Заддеа1 антитіла, яке містить щонайменше один, два, три, чотири, п'ять або шість НМК, вибраних з: (а) НМЕА-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 28 або 36; (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЕС
ІОЮО МО: 55 або 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5; (4) НМЕА-11, яка містить амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 38; (є) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 39; ії (І) НМК-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 16 або 40. У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується анти-Уаддей1 антитіла, яке містить щонайменше один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 35 або 78; (Б) НМУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕ ОО МО: 36; (с) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 55, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; (4) НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 38; (є) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 39; ії (І) НМК-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 40. У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується анти-Заддеай1 антитіла, яке містить щонайменше один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮО МО: 28; (с) НМЕА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; (4) НМА-І1, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 38; (є) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 39; і () НМК-1І3, яка містить амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 16. У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується анти-Уаддейд1! антитіла, яке містить щонайменше один, два, три, чотири, п'ять або шість НМК вибраних з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ХЕ
ІО МО: 36; (с) НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; (4) НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; (є)
НМУВ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 39; і () НМК-13, яка містить
Ко) амінокислотну послідовність зХЕО ІЮ МО: 16. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь- яку амінокислоту, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення Х вибраний з А,О, Е, б, І.К, І, М О.К, ТІМ. У деяких варіантах здійснення Х являє собою Т.
У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується анти-Заддеа1 антитіла, яке містить щонайменше один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність «ЕС ІЮО МО: 36; (с) НМЕА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 37; (а) НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність зХЕО ІЮ МО: 38; (є) НУВ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕ ІО МО: 39; і () НМК-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність БХЕО ІО МО: 40. У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується анти-
Уаддеді антитіла, яке містить щонайменше один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК вибраних з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 35 або 78; (Б)
НМУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 28; (с) НМЕК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 64; (4) НМВ-І1, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 38; (є) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 39; і () НМК-1І3, яка містить амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 16. У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується анти-Уаддейд1! антитіла, яке містить щонайменше один, два, три, чотири, п'ять або шість НМЕК, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ХЕ
БО ІО МО: 36; (с) НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 64; (4) НМЕ-1 1, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ІЮО МО: 38; (є) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 39; ії (І) НМК-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16.
В одному аспекті даний винахід стосується антитіла, яке містить щонайменше одну, щонайменше, дві або всі три послідовності МН НМ, вибрані з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 28 або 36; і (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність БЕ
ІО МО: 55 або 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. В одному варіанті здійснення антитіло містить НМЕ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 55 або 59, де Х бо являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. В іншому варіанті здійснення антитіло містить НМК-
НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 55 або 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5, і НМЕ-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність ЗБЕО ІЮ МО: 16 або 40.
В іншому варіанті здійснення винаходу антитіло включає НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮО МО: 55 або 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5, НМРА-Ї З, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 16 або 40, і НМК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 28 або 36. У додатковому варіанті здійснення антитіло включає: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 35 або 78; (в) НМА-
Н2, яка містить амінокислотну послідовність 560 ІЮ МО: 28 або 36; і (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 55 або 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення винаходу Х вибраний зА,О, Е, б, І, К, І, М, О, КЕ, Т і М. У деяких варіантах здійснення Х являє собою Т.
В одному аспекті даний винахід стосується антитіла, яке містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МН НМК, вибрані з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЖЕО ІЮ МО: 36; і (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 55, де Х представляє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. В одному варіанті здійснення антитіло містить НМЕА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 55, де Х є будь- якою амінокислотою, крім 5. В іншому варіанті здійснення антитіло містить НМЕ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 55, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5, і НМКА-Ї З, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕ ІО МО: 40. У ще одному варіанті здійснення антитіло містить НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність зХЕО ІО МО: 55, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5, НМЕ-І-3, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ
МО: 40, ії НМА-На2, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 36. у ще одному варіанті здійснення антитіло містить: (а) НМА-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕА-На, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 36; і (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮО МО: 55, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення винаходу Х вибраний зА,О, Е, б, І, К, І, М, О, КЕ, Т ії М. У деяких варіантах здійснення Х являє собою Т. У додатковому варіанті здійснення антитіло включає: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЖЕО ІЮ МО: 36; і (с) НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 52Е0 ІЮ МО: 37.
В одному аспекті даний винахід стосується антитіла, яке містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МАН НМ, вибрані з: (а) НМК-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 28; і (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 52Е0 ІЮ МО: 59, де Х представляє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. В одному варіанті здійснення антитіло включає НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 59, де Х є будь- якою амінокислотою, крім 5. В іншому варіанті здійснення антитіло включає НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5, ії НМЕА-І-3, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 16. У ще одному варіанті здійснення антитіло включає НМАК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність зБЕО ІЮ МО: 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5, НМР-І3, яка містить амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮ МО: 16, ї НМА-На2, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 28.
У ще одному варіанті здійснення антитіло включає: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО
БО ІО МО: 28; і (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 59, де Х є будь- якою амінокислотою, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення винаходу Х вибранийзА,О,Е, б,І,К, 1, М О.К, Ті М. У деяких варіантах здійснення Х являє собою Т. У додатковому варіанті здійснення антитіло включає: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 35 або 78; (в) НМК-
Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 28; і (с) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 64.
В одному аспекті даний винахід стосується антитіла, яке містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МАН НМ, вибрані з: (а) НМК-НІ, яка містить 60 амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЖЕО ІЮ МО: 36; і (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 59, де Х представляє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. В одному варіанті здійснення антитіло включає НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 59, де Х є будь- якою амінокислотою, крім 5. В іншому варіанті здійснення антитіло включає НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5, ії НМЕА-І-3, яка містить амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 16. У ще одному варіанті здійснення антитіло включає НМАК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність зБЕО ІЮ МО: 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5, НМР-І3, яка містить амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮ МО: 16, ї НМА-На2, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 36.
У ще одному варіанті здійснення антитіло включає: (а) НМК-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ХЕ
ІО МО: 36; і (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 59, де Х є будь- якою амінокислотою, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення винаходу Х вибранийзА,О,Е, С, К.І, М О.К, Ті М. У деяких варіантах здійснення Х являє собою Т. В іншому варіанті здійснення антитіло включає: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 35 або 78; (Б) НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕС ІЮО МО: 36; і (с) НМЕ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 64.
В іншому аспекті даний винахід стосується антитіла, яке містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МІ НМК, вибрані з: (а) НМЕК-І1, яка містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 38; (Б) НМУВ-І2, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 39; ії (с) НМА-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 16 або 40. В одному варіанті здійснення антитіло містить (а) НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 38; (р) НУВ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 39; і (с) НМА-І3, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16 або 40. В одному варіанті здійснення антитіло містить (а) НМЕК-11, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО
ІО МО: 38; (б) НУВ-12, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 359; і (с) НМЕ-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 16. В одному варіанті здійснення антитіло включає: (а) НМК-11, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 38; (Б) НУВ-12, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 39; ії (с) НМК-І3, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 40.
В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МН НУК, вибрані з (ї) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 35 або 78, (ії) НМК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 28 або 36, і (ії) НМЕ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІО МО: 55 або 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5; і (5) Мі-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МІ.
НМЕ, вибрані з (ї) НМА-11, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 38, (ії) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 39, ї (с) НМК-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІО МО: 16 або 40. В іншому аспекті антитіло за даним винаходом містить: (а)
МН-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МН НМК, вибрані з (ї) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 35 або 78, (її) НМА-
Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕ ІО МО: 36, і (ії) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮО МО: 55, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; і (5) Мі-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МІ.
НМЕ, вибрані з (ї) НМА-11, яка містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 38, (ії) НМЕ-12, яка містить амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 39, і (с) НМА-І-3, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 40. В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН- домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МН НУК, вибрані з (ї) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 35 або 78, (її) НМА-
Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 28, і (ії) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮО МО: 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; і (5) Мі-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МІ.
НМЕ, вибрані з (ї) НМА-11, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 38, (ії) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 39, ї (с) НМК-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 16. В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН- домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МН НУК, вибрані з (ї) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5хЕО ІЮ МО: 35 або 78, (ії) НМАК- 60 Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕ ІО МО: 36, і (ії) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮО МО: 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; і (5) Мі-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МІ.
НМЕ, вибрані з (ї) НМА-11, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 38, (ії) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 39, ї (с) НМК-1І 3, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. у деяких варіантах здійснення винаходу Х вибранийз А, О,Е, б, І.К, М О.К, Ті М.
В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить (ї) НМЕА-
НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 35 або 78, (ії) НМА-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 28 або 36, і (ії) НМЕ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮ МО: 55 або 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5; і (5) М-домен, який містить (ї) НМА-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38, (її) НМА-12, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 39, і (с) НМАК-І3З, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16 або 40. в іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить () НММК-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 35 або 78, (ії) НУМВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО
ІО МО: 36, і (ії) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІО МО: 55, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; і (Б) Мі-домен, який містить (ї) НМА-11, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ОО МО: 38, (і) НМК-І2, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 39, ї (с) НМА-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 40. В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить (ї) НМА-
НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 35 або 78, (ії) НМА-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 28, і (ії) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з зЗЕО ІЮ МО: 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; і (р) МІ -домен, який містить (ї) НМА-11, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 38, (ії) НМЕК-12, яка містить амінокислотну послідовність з БЕО ІО МО: 39, і (с) НМЕ:- ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 16. В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН- домен, який містить (ї) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78, (її) НМВА-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 36, і (ії) НМА-НЗ, яка містить
Ко) амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; і (5) М-домен, який містить (ї) НМА-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38, (її) НМА-12, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 39, і (с) НМК-І3З, яка містить амінокислотну послідовність зХЕО ІЮ МО: 16. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь- яку амінокислоту, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення Х вибранийзА,О,Е, с, І.К, І, М, ОО, БК, Ті М.
В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МН НУК, вибрані з (ї) НМА-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕСО ІЮ МО: 35 або 78, (ії) НУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 36, і (ії) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІЮО МО: 37; і (Б) Мі-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МІ НМК, вибрані з (ї) НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 38, (і) НМК-І2, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 39, ї (с) НМА-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 40. В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МН НУК, вибрані з (ї) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 35 або 78, (ії) НМК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 28, і (ії) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІЮО МО: 64; і (Б) Мі-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МІ НМ, вибрані з (|) НМРЕ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 38, (і) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 39, ї (с) НМА-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 16.
В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МН НУК, вибрані з (ї) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 35 або 78, (ії) НМК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 36, і (ії) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІЮО МО: 64; і (Б) Мі-домен, який містить щонайменше одну, щонайменше дві або всі три послідовності МІ НМ, вибрані з (|) НМРЕ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 38, (і) НМК-І2, яка містить амінокислотну 60 послідовність ХЕО ІЮО МО: 39, ї (с) НМА-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5260 ІЮ МО:
16. В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить (ії) НМА-
НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 35 або 78, (ії) НМА-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ІЮО МО: 36, і (ії) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮО МО: 37; і (Б) Мі -домен, який містить (ї) НМК-1І1, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 38, (і) НМК-І2, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 39, і (с) НМА-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 40. В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить (ї) НМА-
НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 35 або 78, (ії) НМА-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 28, і (ії) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮО МО: 64; і (Б) Мі -домен, який містить (ї) НМК-1І1, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 38, (і) НМК-І2, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 39, ї (с) НМА-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 16. В іншому аспекті антитіло за даним винаходом включає: (а) МН-домен, який містить (ії) НМА-
НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 35 або 78, (ії) НУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 36, і (ії) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮО МО: 64; і (Б) Мі -домен, який містить (ї) НМК-1І1, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 38, (і) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 39, ї (с) НМА-ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 16.
У деяких варіантах здійснення анти-Уаддей1 антитіло включає: (а) МН-домен, який містить (Її)
НМВ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 35 або 78, (ії) НМА-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 71, де Х1 вибраний з Р і С, Х2 вибранийзрімМ, і х3 вибраний з Т і 5, і (ії) НМАК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮ МО: 72, де Х1 є будь-якою амінокислотою, крім 5, і Х2 є ММ або І; і (Б) Мі -домен, який містить (ї) НМА-
ЇЇ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 38, (і) НМК-12, яка містить амінокислотну послідовність з 5ЕБО І МО: 39, і (с) НМК- ІЗ, яка містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 74, де Х1 є 5 або У, Х2 є Р або А, і Х3З є Р або Т. У деяких варіантах здійснення Х1! у ЗЕО ІЮ МО: 72 являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення даного винаходу Х1 у 5ЕО ІО МО: 72 вибранийзА,О, ЕЕ, С, І, К, І, М, О, В,
Ко) Т і М. У деяких варіантах здійснення Х1 у 5ЕО ІЮ МО: 72 є Т.
В одному варіанті здійснення анти-Уаддед! антитіло містить НМК, як у будь-якому із зазначених вище варіантів здійснення, і додатково містить у собі акцепторну каркасну область людини, наприклад, каркасну область імуноглобуліну людини або консенсусну каркасну область людини. В іншому варіанті здійснення анти-дУдаддеа1 антитіло містить у собі НМУЕ, як у будь- якому із зазначених вище варіантів здійснення, і додатково містить у собі МН, який містить щонайменше одну, дві, три або чотири ЕК, вибрані з ЕК1, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 47; ЕК2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 48; ЕКЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 49; і ЕК4, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 50. В іншому варіанті здійснення анти-Уаддейд1 антитіло включає НМК, як у будь-якому із зазначених вище варіантів здійснення, і додатково містить у собі Мі, який містить щонайменше одну, дві, три, або чотири ЕЕ, вибрані з ЕК, яка містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 43; ЕК2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 44; ЕКЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 45; і ЕК4, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 46.
В іншому аспекті анти-Уаддеді! антитіло включає послідовність варіабельного домену важкого ланцюга (УН), яка має щонайменше 90 95, 91 95, 92 9о, 93 90, 94 95, 95 90, 96 95, 97 95, 98 уо, 99 95 або 100 95 ідентичності по послідовності з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 54, 58 або 62, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. У деяких таких варіантах здійснення послідовність МН містить НМАК-НЗ з 5ЕБЕО ІЮ МО: 55 або 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. У деяких варіантах здійснення МН містить один, два або три НМЕ, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 35 або 78, (Б)
НМУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ОО МО: 55 або 59, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5, і (с) НМЕ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність зХЕО ІЮ МО: 37 або 64. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення Х вибраний з А, ОЮО, Е, б, І, ДО, Ї,, М, О, ЕК, Т і М. У деяких варіантах здійснення Х являє собою Т. В іншому аспекті анти-Уаддед1 антитіло містить послідовність варіабельного домену важкого ланцюга (УН), яка має щонайменше 90 9б5, 91 905, 92 905, 93 905, 94 90, 95 905, 96 905, 97 905, 98 95, 99 95 або 100 95 ідентичності по послідовності з амінокислотною послідовністю ЗЕО 60 ІО МО: 33, 65, або 66. У деяких таких варіантах здійснення, послідовність МН містить НМК-НЗ з
ЗЕО ІО МО: 37 або 64. У деяких варіантах здійснення МН містить один, два або три НМК, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 35 або 78, (Б)
НМУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 28 або 36, і (с) НМА-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 37 або 64. У деяких варіантах здійснення послідовність УН, яка має щонайменше 90 95, 91 95, 92 95, 93 905, 94 95, 95 90, 96 905, 97 95, 98 90 або 99 95 ідентичності, містить заміни (наприклад, консервативні заміни), інсерції або делеції щодо еталонної послідовності, але анти-)аддей! антитіло, яке містить цю послідовність, зберігає здатність зв'язувати щонайменше один даддед1. У деяких варіантах здійснення заміни, інсерції або делеції знаходяться в областях поза НМК (тобто, у ЕК). У деяких варіантах здійснення анти-Уаддейд1 антитіло містить послідовність варіабельного домену важкого ланцюга (МН), який має щонайменше 90 965, 91 95, 92 95, 93 90, 94 905, 95 905, 96 95, 97 95, 98 95, 99 95 або 100
Фо ідентичності по послідовності з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮО МО: 33. У деяких таких варіантах здійснення послідовність МН містить НМК-НЗ з 5ЕО ІЮ МО: 37. У деяких варіантах здійснення даного винаходу МН включає один, два або три НУК, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО 10 МО: 35 або 78, (5) НМК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕ 10 МО: 36, і (с) НМК-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 37. У деяких варіантах здійснення анти-Уаддейд1 антитіло містить послідовність МН у ЗЕО ІЮ МО: 33, 65, або 66, включаючи посттрансляційні модифікації цієї послідовності. У деяких варіантах здійснення анти-)аддеай1 антитіло містить послідовність МН у
ЗЕО ІЮ МО: 33, включаючи посттрансляційні модифікації цієї послідовності. У деяких варіантах здійснення анти-Заддеай! антитіло містить послідовність МН у 5ЕО ІО МО: 65, включаючи посттрансляційні модифікації цієї послідовності. У деяких варіантах здійснення анти-Чаддеа1 антитіло містить послідовність МН у 5ЕО ІЮО МО: 66, включаючи посттрансляційні модифікації цієї послідовності.
В іншому аспекті запропоноване анти-Уаддей1 антитіло, де антитіло містить варіабельний домен легкого ланцюга (МІ), яка має щонайменше 90 95, 91 95, 92 95, 93 905, 94 905, 95 905, 96 95, 97 оо, 98 90, 99 90 або 100 95 ідентичності по послідовності з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮ
МО: 10, 26 або 34. У деяких варіантах здійснення послідовність Мі, яка має щонайменше 90 95, 91 95,92 95, 93 90, 94 95, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичності, містить заміни
Зо (наприклад, консервативні заміни), інсерції або делеції щодо еталонної послідовності, але анти-
Уаддейд1 антитіло, яке містить цю послідовність, зберігає здатність зв'язуватися з даддей1. У деяких варіантах здійснення, у цілому від 1 до 10 амінокислот заміщені, вставлені і/або вилучені в ЗЕБЕО ІЮО МО: 10, 26 або 34. У деяких варіантах здійснення заміни, інсерції або делеції знаходяться в областях поза НУК (тобто, у ЕК). У деяких варіантах здійснення МІ. містить один, два або три НУК, вибраних з (а) НМК-1 1, яка містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 38; (в) НУНВ-1І 2, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 359; і (с) НМК-1І З, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 16 або 40. У деяких варіантах здійснення винаходу анти-УЗаддеда!1 антитіло містить послідовність МІ у ЗЕО ІЮО МО: 10, 26 або 34, включаючи посттрансляційні модифікації цієї послідовності. У деяких варіантах здійснення анти-Чаддесй!1 антитіло містить послідовність МІ у 5ЕО ІО МО: 34, включаючи пост-трансляційні модифікації цієї послідовності. У деяких варіантах здійснення винаходу анти-Заддеа1 антитіло містить послідовність МІ. у БЕО ІО МО: 10, включаючи посттрансляційні модифікації цієї послідовності. У деяких варіантах здійснення винаходу анти-Уаддей1 антитіло містить послідовність МІ. у ЗЕО ІЮ
МО: 26, включаючи посттрансляційні модифікації цієї послідовності.
В іншому аспекті запропоноване анти-)аддеа!1 антитіло, де антитіло містить МН за кожним із варіантів здійснення, наведених вище, і МІ. за кожним із варіантів здійснення, наведених вище.
В одному варіанті здійснення антитіло містить послідовності МН і МІ у 5ЕО ІЮ МО: 54, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; і в ЗЕО ІО МО: 34, відповідно, включаючи пост-трансляційні модифікації цих послідовностей. В одному варіанті здійснення антитіло містить послідовності
БО МНІіМм. у 5ЕО ІО МО: 58, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5; і 5ЕО ІЮ МО: 10, відповідно, включаючи пост-трансляційні модифікації цих послідовностей. В одному варіанті здійснення антитіло містить послідовності МН і МІ у 5ЕО ІО МО: 62, де Х є будь-якою амінокислотою, крім
З; і ЗЕО ІО МО: 26, відповідно, включаючи пост-трансляційні модифікації цих послідовностей. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення Х вибранийзА,О,Е, б, І, К, І, М, СО, ЕК, Т і М. У деяких варіантах здійснення Х являє собою Т.
В іншому аспекті запропоноване анти-Уаддей1 антитіло, де антитіло містить МН за кожним із варіантів здійснення, наведених вище, і МІ. за кожним із варіантів здійснення, наведених вище.
В одному варіанті здійснення антитіло містить послідовності МН і МІ у ЗЕО ІЮО МО: 33 і 5ЕО ІЮ 60 МО: 34, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації цих послідовностей. В одному варіанті здійснення антитіло містить послідовності МН і Мі у 5ЕО ІЮ МО: 65 і 5ЕО ІЮ МО: 10, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації цих послідовностей. В одному варіанті здійснення антитіло містить послідовності МН і МІ. у БЕО ІЮ МО: 66 і 5БЕО ІЮ МО: 26, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації цих послідовностей.
У деяких варіантах здійснення анти-даддей1 антитіло включає важкий ланцюг, який містить послідовність 560 ІЮ МО: 57, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5, і легкий ланцюг, який містить послідовність ЗЕО ІЮ МО: 53. У деяких варіантах здійснення анти-Заддей1 антитіло включає важкий ланцюг, який містить послідовність 5ЕБЕО ІО МО: 67, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5, і легкий ланцюг, який містить послідовність «ЕС ІЮО МО: 75. У деяких варіантах здійснення анти-Заддеа1 антитіло включає важкий ланцюг, який містить послідовність
ЗЕБЕО ІО МО: 68, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5, і легкий ланцюг, який містить послідовність 5ЕО І МО: 76. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту крім 5. У деяких варіантах здійснення Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н. У деяких варіантах здійснення винаходу Х вибранийзА,О,Е, б,І,К, 1, М, О.К, Ті М. У деяких варіантах здійснення Х являє собою Т. У деяких варіантах здійснення анти-Чаддеа 1 антитіло включає важкий ланцюг, який містить послідовність БЕО ІО МО: 51, і легкий ланцюг, який містить послідовність ЗЕСО І МО: 53. У деяких варіантах здійснення, анти-Чаддеа1 антитіло включає важкий ланцюг, який містить послідовність ЗЕО ІО МО: 52, і легкий ланцюг, який містить послідовність зЕО ІЮ МО: 53. У деяких варіантах здійснення анти-Заддеа1 антитіло включає важкий ланцюг, який містить послідовність ЗЕО ІЮ МО: 69, і легкий ланцюг, який містить послідовність ЗЕО ІЮ МО: 75. У деяких варіантах здійснення анти-Заддей1 антитіло містить важкий ланцюг, який містить послідовність ЗЕО ІО МО: 70, і легкий ланцюг, який містить послідовність ЗЕО ІЮ МО: 76.
У додатковому аспекті даний винахід стосується антитіла, яке зв'язується з тим же епітопом, що й анти-Заддед1 антитіло, запропоноване в даному документі. Наприклад, у деяких варіантах здійснення запропоноване антитіло, яке зв'язується з тим же епітопом, що й анти-Чаддеса1 антитіло, яке містить послідовність МН з 5ЕО ІО МО: 33, і послідовність МІ з БЕО ІЮ МО: 34.
У додатковому аспекті даний винахід стосується антитіла, яке конкурує за зв'язування з кожним із антитіл, запропонованих у даному документі.
У додатковому аспекті даного винаходу анти-Уаддейд1 антитіло за будь-яким із зазначених вище варіантів здійснення являє собою моноклональне антитіло, включаючи химерне, гуманізоване або людське антитіло. В одному варіанті здійснення винаходу анти-Уаддеа1 антитіло являє собою фрагмент антитіла, наприклад, Ем, Раб, Раб", зсЕм, діантитіло або Е(аб')»- фрагмент. В іншому варіанті здійснення винаходу антитіло являє собою повнорозмірне антитіло, наприклад, інтактне людське антитіло дС1 або інший клас або ізотип антитіл, описаний у даному документі.
У додатковому аспекті, анти-Уаддейд1 антитіло за будь-яким із зазначених вище варіантів здійснення може включати кожну з ознак, окремо або в комбінації, описаних у розділах 1-7 нижче: 1. Афінність антитіл
У деяких варіантах здійснення антитіло за даним винаходом має константу дисоціації (Ка) «1 МКМ, «100 НМ, «10 НМ, «1 НМ, «0,1 НМ, «0,01 нМ або «0,001 нМ (наприклад, 108 М або менше, наприклад, від 102 М до 10-73 М, наприклад, від 1079 М до 1073 М).
В одному з варіантів здійснення Ка вимірюють за допомогою аналізу зв'язування радіоактивноміченого антигену (КІА). В одному варіанті здійснення КІА виконують з РЕар- варіантом антитіла, яке цікавить, і його антигеном. Наприклад, афінність зв'язування Еаб з антигеном у розчині вимірюють шляхом урівноважування Бар з використанням мінімальної концентрації (125І)-міченого антигену в присутності титраційного ряду неміченого антигену, потім захоплення зв'язаного антигену на планшеті, покритим анти-Рар антитілом (див., наприклад,
СНнеп еї аї., (1999) У. Мої. ВіоІ. 293: 865-881). Для визначення умов аналізу мультиямкові планшети МІСКОТІТЕКФ (Тпегто зЗсієпіййс) покривають протягом ночі 5 мкг/мл анти-Рар захоплювального антитіла (Сарреї І арх) у 50 мМ карбонаті натрію (рН 9,6) і далі блокують 2 905 (мас./об'єм) бичачого сироваткового альбуміну в РВЗ протягом двох-п'яти годин при кімнатній температурі (приблизно 23 "С). У несорбуючому планшеті (Мипс кат.Мо 269620) 100 пМ або 26 пмМ ГЦ-антигену змішують із серійними розведеннями ар, який цікавить (наприклад, відповідно до оцінки анти-МЕСЕ антитіла, Рар-12, у Ргевзіа еї аї., (1997) Сапсег Ке5. 57: 4593- 4599). Рар, який цікавить, потім інкубують протягом ночі, однак інкубація може продовжуватися протягом більш тривалого періоду (наприклад, приблизно 65 годин), щоб гарантувати досягнення рівноваги. Після цього суміші переносять у планшет, який захоплює, для інкубації бо при кімнатній температурі (наприклад, протягом однієї години). Розчин потім видаляють, і планшет промивають вісім разів 0,1 96-м полісорбатом 20 (ТМ/ЕЕМ-20Ф) у РВ5. Після висихання планшетів додають 150 мкл/ямку сцинтиляційної рідини (МІСКОБСІМТ-207М, РабскКага), і планшети аналізують за допомогою гамма-лічильника ТОРСОШМТ м (РасКага) протягом десяти хвилин. Для використання в аналізах конкурентного зв'язування вибирають концентрацію кожного Бар, що забезпечує зв'язування, менше або дорівнює 20 95 від максимального зв'язування.
Відповідно до іншого варіанту здійснення Ка визначають за допомогою аналізів з використанням поверхневого плазмонного резонансу, використовуючи ВіАсогеФ-2000 або
ВІАсогеФ-3000 (ВІіАсоге, Іпс., Різсаїамжау, МУ) при 25 "С с використанням чипів СМ5 з іммобілізованим антигеном при «10 одиниць відповіді (КО). В одному варіанті здійснення біосенсорні чіпи з карбоксиметилованого декстрану (СМ5, ВіАсоге, Іпс.) активують за допомогою // М-етил-М'-(З-диметиламінопропілукарбодіміду гідрохлориду (ЕОС) і мМ- гідроксисукциниміду (МН) відповідно до інструкцій постачальника. Антиген розводять з використанням 10 мМ ацетату натрію, рН 4,8, до 5 мкг/мл (70,2 мкМ) перед введенням при швидкості потоку 5 мкл/хв для одержання приблизно 10 одиниць відповіді (КО) зв'язаного білка.
Після введення антигену вводять 1 М етаноламін для блокування груп, які не прореагували.
Для кінетичних вимірювань вводять дворазові серійні розведення Раб (0,78-500 нМ) у РВ5 з 0,05 95-ю поверхнево-активною речовиною, полісорбатом 20 (Тмееп-20"м) (РВЗТ) при 25 "С при швидкості потоку, яка складає приблизно 25 мкл/хвилину. Швидкості асоціації (Коп) і швидкості дисоціації (Коб) обчислюють з використанням ленгмюрівської моделі простого зв'язування у співвідношенні 1:11 (ВІАСОКЕФ Емаїнайоп Боймаге мегбіоп 3.2) шляхом одночасного припасування сенсограм асоціації і дисоціації. Константу дисоціації при рівновазі (Ка) розраховують як співвідношення Копк/Коп. Див., наприклад, Спеп У. еї аї., У. Мої. Віої. 293: 865-881 (1999). Якщо швидкість асоціації перевищує 105 М' с" при вищевказаному аналізі з використанням поверхневого плазмонного резонансу, то швидкість асоціації можна визначити за допомогою методу гасіння флуоресценції, за допомогою якого визначається збільшення або зменшення інтенсивності флуоресценції, яка випускається, (збудження -295 нм; випромінювання -340 нМ; ширина смуги 16 нМ) при 25 "С для 20 нМ антитіла до антигену (Рар- форми) у РВ5, р 7,2, у присутності концентрацій антигену, які збільшуються, які вимірюють у
Зо спектрометрі, такому як спектрофотометр, оснащений зупиненим потоком (Аміп Іпзігитепів), або спектрофотометр 5ІМ-АМІМСО м 8000-серії (ГПпептозресігопіс), який має кювету з перемішуванням. 2. Фрагменти антитіл
У деяких варіантах здійснення антитіло за даним винаходом є фрагментом антитіла.
Фрагменти антитіл включають, але не обмежуються ними, Раб-, Раб'-, Раб'-5Н, Е(ар')»-, ГУ- і 5сЕм-фрагменти, й інші фрагменти, описані нижче. Для огляду деяких фрагментів антитіл див.
Нидвзоп еї а. Маї. Мей. 9: 129-134 (2003). Для огляду 5сЕм-фрагментів див., наприклад,
РінсКкійип, у Те РПпаптасоїоду ої Мопосіопа! Апіїбодіє5, мо!. 113, Нозепригуд апа Мооге еєд5., (5ргіпдег/-Мепад, Мем Могк), рр. 269-315 (1994); див. також УМО 93/16185 і патенти США МоМо 5571894 і 5587458. Обговорення Рабр- і Е(аб')»-фрагментів, які містять залишки епітопа, який зв'язується з рецептором порятунку, і характеризується збільшеним часом напівжиття іп мімо, див. патент США Мо 5869046.
Діантитіла являють собою фрагменти антитіл із двома антигензв'язувальними сайтами, які можуть бути двовалентними або біспецифічними. Див., наприклад, ЕР 404097; МО 1993/01161;
Ниазоп еї аї., Маї. Мед. 9: 129-134 (2003); і НоїШподег еї аї., Ргос. Май. Асад. 5сі. ОБА 90: 6444- 6448 (1993). Триантитіла і тетраантитіла також описані в Ниазоп еї аї., Маї. Мей. 9: 129-134 (2003).
Однодоменні антитіла являють собою фрагменти антитіл, які містять повний варіабельний домен важкого ланцюга антитіла або його ділянку, або повний варіабельний домен легкого ланцюга антитіла або його ділянку. У деяких варіантах здійснення однодоменним антитілом є людське однодоменне антитіло (Юотапіїй5, Іпс., УМайктат, МА; див., наприклад, патент США Мо 6248516 81).
Фрагменти антитіл можна створити за допомогою різних методів, які включають, але не обмежених ними, протеолітичне розщеплення інтактного антитіла, а також продукція рекомбінантними клітинами-хазяїнами (наприклад, Е. соїї або фагами), як описано в даному документі. 3. Химерні і гуманізовані антитіла
У деяких варіантах здійснення антитіло за даним винаходом є химерним антитілом. Деякі химерні антитіла описані, наприклад, у патенті США Мо 4816567 і в Моїттізоп еї а!., Ргос. Маї!). 60 Асад. Осі. БА, 81: 6851-6855 (1984)). В одному з прикладів химерне антитіло містить варіабельну область тварини (наприклад, варіабельну область, отриману від миші, щура, хом'яка, кролика або примата, який не є людиною, такого як мавпа) і людську константну область. У додатковому прикладі химерне антитіло являє собою антитіло з «переключенням класу», у випадку якого клас або ізотип був змінений порівняно з таким у батьківського антитіла.
Химерні антитіла включають їхній антигензв'язувальні фрагменти.
У деяких варіантах здійснення химерним антитілом є гуманізоване антитіло. Як правило, антитіло тварини піддають процедурі гуманізації для зниження імуногенності в людини, при збереженні специфічності й афінності батьківського антитіла тварини. Як правило, гуманізоване антитіло містить один або декілька варіабельних доменів, у яких НМК, наприклад, СОБК, (або їхні ділянки) мають своє походження з антитіла тварини, а ЕК (або їхні ділянки) мають своє походження з послідовностей антитіл людини. Необов'язково, гуманізоване антитіло буде також містити щонайменше ділянку константної області антитіла людини. У деяких варіантах здійснення деякі залишки в ЕК у гуманізованому антитілі замінені відповідними залишками з антитіла тварини (наприклад, антитіла, з якого взяті залишки НУК), наприклад, для відновлення або збільшення специфічності або афінності антитіла.
Огляд гуманізованих антитіл і способів їхнього одержання наведений, наприклад, у АІтадго апа Егапебоп, Егопі. Віобсі. 13: 1619-1633 (2008) і, крім того, вони описані, наприклад, у
Віеєсптапп есеї аї., Майшге 332: 323-329 (1988); Ойееп еї аї., Ргос. Маї. Асайд. 5сі. ОБА 86: 10029- 10033 (1989); патентах США МоМо 5821337, 7527791, 6982321 і 7087409; Казптіїгі еї а!І., Метод 36: 25-34 (2005) (де описується пересадження визначальної специфічність області (ЗОК));
Радіап, Мої. Іттипої. 28: 489-498 (1991) (де описується «зміна поверхні»); Баг Асдца еї аї.,
Меїтоаз 36: 43-60 (2005) (де описується «перетасування ЕК»); і О5роцт еї аї!., Меїйоа» 36: 61- 68 (2005) і КіїтКа еї аї!., Вг. 9). Сапсег, 83: 252-260 (2000) (де описується підхід «спрямованого відбору» для перетасування ЕК).
Людські каркасні області, які можуть використовуватися для гуманізації, включають, але не обмежуються ними, каркасні області, вибрані з використанням методу «найкращої відповідності» (див., наприклад, біт5 еї аїЇ. 9. Іттипої. 151: 2296 (1993)); каркасні області, отримані на основі консенсусної послідовності для антитіл людини з конкретної підгрупи варіабельних областей легкого або важкого ланцюга (див., наприклад, Сагіег еї аїЇ. Ргос. Маї!).
Зо Асайд. 5сі. ОБА, 89: 4285 (1992); і Ргезіа еї аї. У. Іттипої., 151: 2623 (1993)); каркасні області зрілих (соматично мутованих) імуноглобулінів людини або каркасні області імуноглобулінів зародків лінії людини (див., наприклад, АПтадго апа Егапе5оп, Егопі. Віозсі. 13: 1619-1633 (2008)); і каркасні області, отримані в результаті скринінгу бібліотек ЕК (див., наприклад, Васа єї а!., у. Віої. Спет. 272: 10678-10684 (1997) і Козок еї аї., 9. ВіоІ. Спет. 271: 22611-22618 (1996)). 4. Антитіла людини
У деяких варіантах здійснення антитіло за даним винаходом є антитілом людини. Антитіла людини можна одержати, використовуючи різні методи, відомі в даній галузі техніки. Антитіла людини описані загалом у мап ріїк апа мап де УуіпКкеї, Сит. Оріп. Рнаптасої. 5: 368-74 (2001) і
Гопрего, Сит. Оріп. Іттипої. 20: 450-459 (2008).
Антитіла людини можна одержати введенням імуногену трансгенній тварині, яка була модифікована для продукції інтактних антитіл людини або інтактних антитіл з варіабельними областями людини у відповідь на антигенний вплив. Такі тварини, як правило, містять усі імуноглобулінові локуси людини або їх частину, які заміщають ендогенні імуноглобулінові локуси, або які присутні екстрахромосомно або випадковим чином вбудовані у хромосоми тварини. У таких трансгенних мишей ендогенні імуноглобулінові локуси зазвичай інактивовані.
Огляду способів одержання антитіл людини з трансгенних тварин див. І опрего, Маї. Віотесі. 23: 1117-1125 (2005). Див. також, наприклад, патенти США МоМо 6075181 і 6150584, у яких описується технологія ХЕМОМОИ5БЕ "М: патент США Мо 5770429, у якому описується технологія
НИМАВФ); патент США Мо 7041870, у якому описується технологія К-М МОШБ5ЕФ, і публікацію заявки на патент США Ме 5 2007/0061900, у якій описується технологія МЕГОСІМОИОЗЕФ.
Варіабельні області людини з інтактних антитіл, створених за допомогою таких тварин, можна далі модифікувати, наприклад, за допомогою об'єднання з іншою константною областю людини.
Антитіла людини можна також одержувати способами на основі гібридом. Описано лінії клітин мієломи людини і гетеромієломи миші-людини для одержання моноклональних антитіл людини. (Див., наприклад, Корог .). Іттипої., 133: 3001 (1984); Вгодеиг еї аї., Мопосіопаї
Апііроду Ргодисіїп Тесппіднез5 апа Арріїсайопв5, рр. 51-63 (Магсеї! ОеккКег, Іпс., Мем МогК, 1987); і
Воегппег еї аї., 9. Іттипої., 147: 86 (1991).) Антитіла людини, створені за допомогою гібридомної технології з використанням В-клітин людини, також описані в Гі еї аїЇ., Ргос. Маї!. Асай. сі. О5А, 103: 3557-3562 (2006). Додаткові способи включають ті, які описані, наприклад, у патенті США бо Мо 7189826 (де описане одержання моноклональних антитіл людини класу ДМ з ліній гібридомних клітин) і в Мі, Хіапдаії Міапуїхие, 26(4): 265-268 (2006) (де описуються гібридоми людина-людина). Технологія гібридом людини (технологія Тгіота) також описана в Моїтег5 апа
Вгапаїєїп, Нівіоіоду апа Нісюраййпо!оду, 20(3): 927-937 (2005) і МоПтег5 апа Вгапаїєїп, Меї(йоаз апа Ріпаїподз іп Ехрегітепіа! апа Сіїпіса! Рнапптасоіоду, 27(3): 185-91 (2005).
Антитіла людини можна також створити за допомогою виділення послідовностей Ем-клонів варіабельних доменів, які відбираються з бібліотек фагового дисплея антитіл людини. Такі послідовності варіабельних доменів потім можна об'єднати з бажаним константним доменом людини. Методи відбору антитіл людини з бібліотек антитіл описані нижче. 5. Одержані з бібліотек антитіла
Антитіла за даним винаходом можна виділити за допомогою скринінгу комбінаторних бібліотек на антитіла з бажаною активністю або видами активності. Наприклад, у даній галузі техніки відомий ряд способів створення бібліотек фагового дисплея і скринінгу таких бібліотек на антитіла, яке володіють бажаними характеристиками зв'язування. Такі способи розглядаються, наприклад, у Ноодепроот еї аї. у Меїпоаз іп МоїІесшіаг Віоіоду 178: 1-37 (О'"Вгіеп еї аї., ед., Нитап Ргез5, Тоїомжа, МУ, 2001) і додатково описані, наприклад, у МеСайепу еї аї.,
Маїшцге 348: 552-554; Сіаскзоп евї а!., Маште 352: 624-628 (1991); Магкз ві аї., у). Мої. Вісі. 222: 581- 597 (1992); Магк5 апа Вгадригу, у Меїйоаз іп Моїесшіаг Віоіюду 248: 161-175 (10, еєд., Нитап
Ргезв, Тоїоуа, МУ, 2003); Бідпи еї аї., У. Мої. Вісі. 3938(2): 299-310 (2004); І ее еї аї., У. Мої. Віої. 340(5): 1073-1093 (2004); РейПоизе, Ргос. Маї). Асад. 5сі. ОБА 101(34)3: 12467-12472 (2004); і І ее еї аї., У. Іттипої. Меїйпоав5 284 (1-2): 119-132 (2004).
У деяких способах фагового дисплея набори генів УН і МІ клонують окремо за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) і рекомбінують випадковим чином у фагові бібліотеки, які потім можна скринувати на антигензв'язувальний фаг, як описано в УУіпіеєг еї аї.,, Апп. Кем.
Іттипої!., 12: 433-455 (1994). Фаги, як правило, представляють на своїй поверхні фрагменти антитіл, у вигляді або одноланцюжкових Ру- (5СЕм) фрагментів, або Гар-фрагментів. Бібліотеки на основі імунізованих джерел забезпечують високоафінні антитіла до імуногену без необхідності створення гібридом. В альтернативному варіанті можна клонувати набір генів з неімунізованого джерела (наприклад, людини) для забезпечення одного джерела антитіл до широкого спектра антигенів, які не є аутоантигенами, а також аутоантигенів, без якої-небудь
Зо імунізації, як описано в сійних еї аіІ.,, ЕМВО ., 12: 725-734 (1993). Нарешті, бібліотеки на основі неіїмунізованих джерел можна також одержувати синтетично за допомогою клонування сегментів М-генів зі стовбурних клітин, які не пройшли перестановку, і використання ПЛР- праймерів з випадковою послідовністю для кодування високоваріабельних СОКЗ-областей і завершення перестановки іп міго, як описано в Ноодепроот апа М/іпіег, У). Мої. Віої!., 227: 381- 388 (1992). Патенти і публікації заявок на патенти, у яких описуються бібліотеки антитіл людини у фагах, включають, наприклад, патент США Мо 5750373 і публікації заявок на патенти МоМо 2005/0079574, 2005/0119455, 2005/0266000, 2007/0117126, 2007/0160598, 2007/0237764, 2007/0292936 і 2009/0002360.
Антитіла або фрагменти антитіл, виділені з бібліотек антитіл людини, вважаються в даному описі антитілами людини або фрагментами антитіл людини. 6. Поліспецифічні антитіла
У деяких варіантах здійснення антитіло за даним винаходом є поліспецифічним антитілом, наприклад, біспецифічним антитілом. Поліспецифічні антитіла являють собою моноклональні антитіла, які володіють специфічностями зв'язування з щонайменше двома різними сайтами. У деяких варіантах здійснення однієї зі специфічностей зв'язування є зв'язування з даддесй1, а іншої - зв'язування з будь-яким іншим антигеном. У деяких варіантах здійснення біспецифічні антитіла можуть зв'язуватися з двома різними епітопами даддеа1. Біспецифічні антитіла можуть також використовуватися для концентрації цитотоксичних агентів у клітинах, які експресують
Уаддед1. Біспецифічні антитіла можна одержати у вигляді повнорозмірних антитіл або фрагментів антитіл.
Методики одержання поліспецифічних антитіл включають, але не обмежуються ними, рекомбінантну спільну експресію пар важкий ланцюг-легкий ланцюг двох імуноглобулінів, які мають різну специфічність (див. Міїєїеіїп апа Сицеїйо, Маїшге 305:537 (1983)), УМО 93/08829 і
ТгаипескКег еї аІ.,, ЕМВО У. 10:3655 (1991)) й інженерію «виступи-в-западини» (див., наприклад, патент США Мо 5731168). Поліспецифічні антитіла можна також одержати за допомогою інженерії ефектів електростатичного наведення для одержання Ес-гетеродимірних молекул антитіл (МУМО 2009/089004 Ат); зшивання двох або декількох антитіл або фрагментів (див., наприклад, патент США Мо 4676980 і Вгеппап еї аї., Зсіепсе, 229:81 (1985)); використання лейцинових блискавок для одержання біспецифічних антитіл (див., наприклад, Ковіє!пу еї аї., у. 60 Ітітипої., 148(5):1547-1553 (1992)); використання технології одержання «діантитіл» для створення фрагментів біспецифічних антитіл (див., наприклад, Ноїїпдег еї аї., Ргос. Маї!. Асад.
Зсі. ОБА, 90:6444-6448 (1993)); і використання димерів одноланцюжкових Ем (5Ем) (див., наприклад, Огибег еї аї., У. Іттипої., 152:5368 (1994)); і одержання триспецифіних антитіл, як описано, наприклад, у Тий еї аї. У. Іттипої. 147:60 (1991).
У даний опис також включені сконструйовані антитіла з трьома або великим числом функціональних антигензв'язувальних сайтів, включаючи «антитіла-восьминоги» (див., наприклад, 5 2006/0025576 А1).
Антитіло або фрагмент у даному описі також включає «Рар подвійної дії» або «ОАЕ», який містить антигензв'язувальний сайт, який зв'язується з Удаддеа/1, а також з іншим антигеном (див., наприклад, ОЗ 2008/0069820). 7. Варіанти антитіл
У деяких варіантах здійснення передбачені варіанти амінокислотних послідовностей, запропонованих у даному описі антитіл. Наприклад, може бути бажано збільшити афінність зв'язування і/або інші біологічні властивості антитіла. Варіанти амінокислотної послідовності антитіла можна одержати за допомогою введення відповідних модифікацій у нуклеотидну послідовність, яка кодує антитіло, або за допомогою пептидного синтезу. Такі модифікації включають, наприклад, делеції, і/або інсерції, і/або заміни залишків в амінокислотних послідовностях антитіла. Для одержання кінцевої конструкції можна створити будь-яку комбінацію з делеції, інсерції й заміни за умови, що кінцева конструкція має бажані характеристики, наприклад, зв'язуванням з антигеном. а) Варіанти з замінами, інсерціями й делеціями
У деяких варіантах здійснення винахід стосується варіантів антитіл, які містять одну або кілька амінокислотних замін. Сайти для мутагенезу, які цікавлять найбільше, з заміною включають НМК і ЕК. Консервативні заміни наведені в таблиці 1 під заголовком «переважні заміни». Більш істотні зміни наведені в таблиці 1 під заголовком «типові заміни» і додатково описані нижче з посиланням на класи бічних ланцюгів амінокислот. Амінокислотні заміни можна ввести в антитіло, яке представляє інтерес, а продукти піддати скринінгу на бажану активність, наприклад, збереження/збільшення зв'язування з антигеном, зменшення імуногенності або посилення АЮСС або СОС.
Коо)
Таблиця 1 е() 111111 |бешоМарМесАюв;Рпе Норлейцин.//-////// Ле СС цец(Ю 11 |Норлейчин;оПе; Ма; МесАв;РНє.їД/ ЄС
Амінокислоти можна розділити на групи відповідно до спільних властивостей їхніх бічних ланцюгів: 1) гідрофобні: норлейцин, Меї, Аа, маї, Г ем, Пе; 2) нейтральні гідрофільні: Су, Зег, ТАг, Азп, Сп;
З) кислі: А5р, См;
4) основні: Ні, Гув, Агу; 5) залишки, які впливають на орієнтацію ланцюга: су, Рго; 6) ароматичні: Тгр, Туг, Ріє.
Неконсервативні заміни спричинять за собою заміну члена одного з цих класів на інший клас.
Один тип варіанта із замінами включає заміну одного або декількох залишків гіперваріабельних ділянок батьківського антитіла (наприклад, гуманізованого антитіла або антитіла людини). Звичайно, одержаний у результаті варіант (варіанти), який відбирається для подальшого дослідження, буде мати зміни (наприклад, поліпшення) деяких біологічних властивостей (наприклад, збільшення афінності, зменшення імуногенності) щодо батьківського антитіла, і/або в нього в значній мірі будуть зберігатися деякі біологічні властивості батьківського антитіла. Типовим варіантом із замінами є антитіло з дозрілою афінністю, яке можна зручно одержати, наприклад, з використанням методів дозрівання афінності на основі фагового дисплея, таких як описані в даному описі. Коротко, мутують один або кілька залишків у
НУЕ, і варіанти антитіл представляють на поверхні фагів і скринують на конкретну біологічну активність (наприклад, афінність зв'язування).
Зміни (наприклад, заміни) можна ввести в НМК, наприклад, для збільшення афінності антитіла. Такі зміни можна ввести в «гарячі точки» НМК, тобто залишки, кодовані кодонами, які піддаються мутації з високою частотою під час процесу соматичного дозрівання (див., наприклад, Споухапигу, Меїйод5 Мої. Віої. 207: 179-196 (2008)), ілабо залишки, які контактують з антигеном, перевіряють при цьому отриманий у результаті варіант МН або Мі на афінність зв'язування. Дозрівання афінності шляхом конструювання вторинних бібліотек і повторного відбору з них було описано, наприклад, у Ноодепроот еї аї. у Меїйовд5 іп МоїІесціаг Віоіоду 178: 1-37 (О'Вгіеєп еї аїІ., ед., Нитап Рге55, Тоїома, МУ, (2001)) У деяких варіантах здійснення дозрівання афінності в гени варіабельних областей, вибрані для дозрівання, вносять різноманітність за допомогою кожного з ряду способів (наприклад, ПЛР із внесенням помилок, перетасування ланцюгів або мутагенезу з використанням олігонуклеотидів). Потім створюють вторинну бібліотеку. Потім бібліотеку скринують для ідентифікації будь-яких варіантів антитіла з бажаною афінністю. Інший спосіб внесення різноманітності включає спрямовані на НМК підходи,
Зо у яких рандомізують кілька залишків НУК (наприклад, 4-6 залишків за один раз). Залишки НМК, залученні у зв'язування антигену, можна, зокрема, ідентифікувати, наприклад, використовуючи аланіно-скануючий мутагенез або моделювання. Особливо, СОК-НЗ і СОБ-І З часто стають мішенями.
У деяких варіантах здійснення заміни, інсерції або делеції можуть зустрічатися в одному або декількох НМК за умови, що такі зміни істотно не зменшують здатність антитіла до зв'язування антигену. Наприклад, консервативні зміни (наприклад, консервативні заміни, наведені в даному описі), які істотно не зменшують афінність зв'язування, можуть бути внесені в НМК. Такі зміни можуть знаходитися поза «гарячими точками» НМК. У деяких варіантах здійснення варіантів послідовностей МН і Мі, наведених вище, кожен НУК або залишається незміненим, або містить не більш однієї, двох або трьох амінокислотних замін.
Придатний спосіб ідентифікації залишків або областей антитіла, які можуть бути намічені для мутагенезу, називають «аланін-скануючим мутагенезом», описаним Сиппіпудйат і УмеїЇб (Зсієпсе, 244: 1081-1085 (1989)). У цьому способі залишок або групу цільових залишків (наприклад, заряджені залишки, такі як аг, азр, пі5, уз ії адм) ідентифікують і заміщають нейтральною або негативно зарядженою амінокислотою (наприклад, аланіном або поліаланіном) для визначення того, чи виявляється вплив на взаємодію антитіла з антигеном.
Додаткові заміни можуть бути введені в положення амінокислот, які демонструють функціональну чутливість до первісних замін. В альтернативному варіанті або додатково може використовуватися кристалічна структура комплексу антиген-антитіло для ідентифікації точок контакту між антитілом і антигеном. Такі точки контакту і сусідніх залишків можуть бути намічені або виключені як кандидати на заміну. Варіанти можна піддати скринінгу для визначення того, чи мають вони бажані властивості.
Вставки (інсерції) в амінокислотну послідовність, довжина яких знаходиться в діапазоні від одного залишку до поліпептидів, які містять сотню або більшу кількість залишків, включають злиття з аміно-кінцем і/або карбоксильним кінцем, а також вставки всередині послідовності одного або безлічі амінокислотних залишків. Приклади кінцевих вставок включають антитіло з
М-кінцевим метіонильним залишком. Інші інсерціонні варіанти молекули антитіла включають злиття М- або С-кінця антитіла з ферментом (наприклад, для АОЕРТ) або поліпептидом, що збільшує час напівжиття антитіла в сироватці. бо р) Варіанти глікозилювання
У деяких варіантах здійснення антитіло за даним винаходом змінюють для збільшення або зменшення ступеня глікозилування антитіла. Додавання до антитіла сайтів глікозилювання або їх виключення легко здійснюють шляхом зміни амінокислотної послідовності, так що створюється або виключається один або декілька сайтів глікозилювання.
Якщо антитіло містить Есо-область, вуглевод, який приєднується до нього, може бути змінений. Природні антитіла, продуковані клітинами ссавців, зазвичай містять розгалужений, вилкоподібний олігосахарид, який, як правило, приєднаний за допомогою М-глікозидного зв'язку до А5п297 СН2-домену Ес-області. Див., наприклад, Умгідні еї аіІ. ТІВТЕСН 15: 26-32 (1997).
Олігосахарид може включати різні вуглеводи, наприклад, манозу, М-ацетилглюкозамін (СІСМАс), галактозу і сіалову кислоту, а також фукозу, приєднану до СІсМАс у «стовбурі» вилкоподібної олігосахаридної структури. У деяких варіантах здійснення модифікації олігосахариду в антитілі за даним винаходом можуть здійснюватися з метою створення варіантів антитіла з деякими поліпшеними властивостями.
В одному варіанті здійснення запропоновані варіанти антитіл з вуглеводною структурою, у якій бракує фукози, приєднаної (безпосередньо або опосредковано) до Ес-області. Наприклад, кількість фукози в такому антитілі може складати 1-80 95, 1-65 95, 5-65 95, 20-40 95. Кількість фукози визначають шляхом розрахунку середньої кількості фукози в цукровому ланцюзі, приєднаного до Азп297, відносно суми всіх глікоструктур, приєднаних до Азп 297 (наприклад, складних, гібридних структур і структур з високою кількістю манози), обумовлених за допомогою
МА! 0І-ТОЕ мас-спектрометрії, наприклад, як описано в УМО 2008/077546. А5зп297 стосується залишку аспарагіну, який знаходиться приблизно в положенні 297 у Ес-області (за ЕО- нумерацією залишків Ес-області); однак А5п297 може також знаходиться приблизно на -3 амінокислоти до або після положення 297, тобто між положеннями 294 і 300, внаслідок незначних варіацій послідовностей антитіл. Такі варіанти фукозилювання можуть характеризуватися поліпшеною АЮСС-функцією. Див., наприклад, публікації заявок на патенти
США МоМо 5 2003/0157108 (Ргевіа, І 3; 005 2004/0093621 (Куоша Накко Кодуо Со., ЦЯ). У деяких варіантах здійснення константна область ІдС1, яка містить мутацію М2975 або М297А, по суті не має ефекторної функції. Приклади публікацій, які стосуються «дефукозованих» або «з нестачею фукози» варіантів антитіл, включають: 5 2003/0157108; УМО 2000/61739; УМО
Зо 2001/29246; ОБ 2003/0115614; ОБ 2002/0164328; ОБ 2004/0093621; 005 2004/0132140; 5 2004/0110704; 05 2004/0110282; 005 2004/0109865; МО 2003/085119; МО 2003/084570; МО 2005/035586; МО 2005/035778; МО2005/053742; МО2002/031140; ОКа?лакі еї аї. У. Мої. Віої. 336: 1239-1249 (2004); Матапе-ОпПпикі єї аї. Віоїесп. Віоепд. 87: 614 (2004). Приклади ліній клітин, здатних продукувати дефукозовані антитіла, включають клітини Гес13 СНО, нездатні до фукозилювання білків (КіркКа еї аї. Агсп. Віоспет. Віорпуз. 249: 533-545 (1986); заявка на патент
США Мо 05 2003/0157108 А, Ргезіа, І; ії УМО 2004/056312 А1, Адатз еї аї., особливо в прикладі 11), ї нокаутні клітинні лінії, такі як клітини СНО з нокаутним геном альфа-1,6- фукозилтрансферази, РОТ8 (див., наприклад, Уатапе-ОНпикі єї аї., Віоїесн. Віоепд. 87: 614 (2004); Капаа, У. єї а!., Віоїесппої. Віоеєпд., 94(4): 680-688 (2006); ії УМО 2003/085107).
Крім того, запропоновані варіанти антитіл із тризубчатими олігосахаридами, наприклад, у яких СІСМАс присутній у точці розгалуження вилкоподібного олігосахариду, приєднаного до Ес- області антитіла. Такі варіанти антитіл можуть мати знижене фукозилювання і/або поліпшену
Арсс-функцію. Приклади таких варіантів антитіл описані, наприклад, у УМО 2003/011878 (еап-
Маїгеї еї аІ.); патенті США Мо 6602684 (Штпапа еї аІ.) ї 05 2005/0123546 (Штапа еї а!.). Також запропоновані варіанти антитіл щонайменше з одним залишком галактози в олігосахариді, приєднаному до Ес-області. Такі варіанти антитіл можуть мати поліпшену СОС-функцію. Такі варіанти антитіл описані, наприклад, у М/О 1997/30087 (Раїеї еї аІ.); УУО 1998/58964 (Каїий, 5.) і
МО 1999/22764 (Ва|и, 5.). с) Варіанти Ес-області
У деяких варіантах здійснення одна або декілька модифікацій амінокислот можуть бути введені у Ес-область антитіла за даним винаходом, створюючи тим самим варіант Ес-області.
Варіант Ро-області може містити послідовність Ес-області людини (наприклад, Ес-області до,
І9с2, 403 або Ідс4 людини), яка містить амінокислотну модифікацію (наприклад, заміну) в одній або декількох амінокислотних позиціях.
У деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачається варіант антитіла, яке має декілька, але не всі ефекторні функції, що робить його бажаним кандидатом у таких варіантах застосування, коли важливий час напівжиття антитіла іп ммо, а деякі ефекторні функції (такі як активація комплементу і АОСС) є непотрібними або шкідливими. Можна провести іп міїго і/або іп мімо аналізи цитотоксичності для підтвердження зниження/виснаження СОС- і/або АОСС- бо активності. Наприклад, можна провести аналізи зв'язування з рецептором Ес (ЕсСК) для гарантії того, що антитіло не зв'язує Есук (отже, у нього, ймовірно, відсутня АЮСС -активність), але зберігає здатність зв'язувати ЕсКп. Основні АЮСС клітини, які опосередковують, МК-клітини, експресують тільки ЕсСУКІЇ, тоді як моноцити експресують ЕсуКІ, ЕсуКІІ ії ЕсуКП. Експресія Ес у гематопоетичних клітинах підсумована в таблиці З на сторінці 464 Камеїсі апа Кіпеї, Аппи. Кем.
Іттипої. 9: 477-492 (1991). Необмежуючі приклади іп міїго аналізів для оцінки АОСС -активності молекули, яка цікавить, описані в патенті США Мо 5500362 (див., наприклад, НеїЇбігот, 1. еї аї.
Ргос. Маї. Асад. бсі. ОБА 83: 7059-7063 (1986)) і Неїбігот, І еї аї., Ргос. Маї. Асай. 5сі. ОБА 82: 1499-1502 (1985); Мо 5821337 (див. Вгиддетапп, М. еї аї., У. Ехр. Мед. 166: 1351-1361 (1987)). В альтернативному варіанті можна використовувати нерадіоактивні методи аналізу (див., наприклад, нерадіоактивний аналіз цитотоксичності АСТІМ для проточної цитометрії (СеПтесппооду, Іпс. Мошипіаіїп Міему, СА); і нерадіоактивний аналіз цитотоксичності СуїюТох 969 (Рготеда, Майдіхоп, М/). Придатні для таких аналізів ефекторні клітини включають мононуклеарні клітини периферичної крові (РВМОС) і природні кілери (МК). В альтернативному варіанті або додатково, АЮСС-активність молекули, яка цікавить, можна оцінити іп мімо, наприклад, у тваринній моделі, такій як модель, описана в Сіупез еї аї., Ргос. Маї. Асай. 5сі. ОБА 95: 652-656 (1998)). Можна також провести аналізи зв'язування С14 для підтвердження того, що антитіло не здатне зв'язувати С14 і, отже, не має СОС-активності. Див., наприклад, ЕГІЗА для оцінки зв'язування Сід і СЗс у МО 2006/029879 і УМО 2005/100402. Для оцінки активації комплементу можна провести аналіз СОС (див., наприклад, Са;77апо-бапіого 6ї аї., у. Іттипої.
Меїнподз 202: 163 (1996); Стада, М.5. єї а!., Віоса 101: 1045-1052 (2003); і Стадд, М.5. апа М.).
Сієппіє, Віоса 103: 2738-2743 (2004)). Визначення зв'язування з ЕсКп і іп мімо кліренсу/періоду напіввиведення можна також провести з використанням способів, відомих у даній галузі (див., наприклад, Реїкома, 5.В. еї аї., Іпї. Іттипої. 18(12): 1759-1769 (2006)).
Антитіла зі зниженою ефекторною функцією включають антитіла з заміною одного або декількох залишків у позиціях 238, 265, 269, 270, 297, 327 і 329 Ес-області (патент США Мо 6737056). Такі Ес-мутанти включають с-мутанти з замінами в двох або декількох амінокислотних позиціях 265, 269, 270, 297 і 327, включаючи так званий Ес-мутант «САМА» із заміною залишку 265 і 297 на аланін (патент США Мо 7332581).
Описано деякі варіанти антитіл зі збільшеним або зменшеним зв'язуванням з ЕсСК (див.,
Зо наприклад, патент США Мо 6737056; УМО 2004/056312 і ЗПієїд5 еї аї., 9. Віої. Спет. 9(2): 6591- 6604 (2001)).
У деяких варіантах здійснення варіант антитіла містить Ес-область з однією або декількома амінокислотними замінами, які збільшують АЮСС, наприклад, із замінами в позиціях 298, 333 і/або 334 Рсо-області (ЕОо-нумерація залишків).
У деяких варіантах здійснення проводять зміни в Ес-області, які призводять до зміни (тобто або до збільшення, або до зменшення) зв'язування Сід і/або комплементзалежної цитотоксичності (СОС), наприклад, як описано в патенті США Мо 6194551, М/О 99/51642 і в
Ідизодіє єї аї. У. Іттипої. 164: 4178-4184 (2000).
Антитіла зі збільшеним часом напівжиття і збільшеним зв'язуванням з неонатальним Ес- рецептором (ЕсКп), який відповідальний за перенесення материнських Ідс плоду (сиуег еї аї.,
У. Іттипої. 117: 587 (1976) і Кіт еї аї., 9. Іттипої. 24: 249 (1994)), описані в 5 2005/0014934 А1 (Ніпюоп еї аїІ.). Ці антитіла містять Ес-область з однією або декількома замінами в ній, які збільшують зв'язування Есо-області з РсКп. Такі варіанти Ес-області включають Ес-області з замінами в одному або декількох залишках Ес-області, обираних з 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 і 434, наприклад, із заміною залишку 434 у Ес-області (патент США Мо 7371826).
Див. також Юипсап 5 Уміпіег, Майиге 322:738-740 (1988); патент США Мо 5648260; патент США
Мо 5624821 і УМО 94/29351, які стосуються інших прикладів варіантів Ес-області. а) Варіанти антитіл з генно-інженерним цистеїном
У деяких варіантах здійснення може бути бажаним створення антитіл з генно-інженерним цистеїном, наприклад, «тіомат», у яких один або більше кілька амінокислотних залишків в антитілі замінені залишками цистеїну. У конкретних варіантах здійснення заміщені залишки зустрічаються у відкритих для доступу місцях антитіла. У результаті заміщення цих залишків цистеїном реакційно здатні тіольні групи розташовуються в такий спосіб у доступних місцях антитіла і можуть використовуватися для кон'югації антитіла з іншими молекулами, такими як лікарські агенти або лінкери лікарських агентів, для створення імунокон'югата, як описується нижче в даному документі. У деяких варіантах здійснення цистеїном може бути замінений будь- який один або декілька з наступних залишків: М205 (нумерація за Кабатом) легкого ланцюга;
А118 (ЕО-нумерація) важкого ланцюга і 5400 (ЕО-нумерація) у Ес-області важкого ланцюга.
Антитіла з генно-інженерним цистеїном можна створити, як описано, наприклад, у патенті США
Мо 7521541. е) Похідні антитіл
У деяких варіантах здійснення антитіло за даним винаходом можна додатково модифікувати так, щоб воно містило додаткові небілюові молекули, які відомі в даній галузі техніки і легкодоступні. Молекули, які підходять для дериватизації антитіла, включають, але не обмежуються ними, водорозчинні полімери. Необмежувальні приклади водорозчинних полімерів включають, але не обмежуються ними, поліеєтиленгліколь (РЕС), кополімери етиленгліколю і пропіленгліколю, карбоксиметилцелюлозу, декстран, полівініловий спирт, полівінілпіролідон, полі-1,3-діоксолан, полі-1,3,6-триоксан, кополімер етилену і малеїнового ангідриду, поліамінокислоти (або гомополімери, або довільні кополімери) і декстран, або полі(н- вінілпіролідон)поліетиленгліколь, гомополімери пропропіленгліколю, кополімери проліпропіленоксиду й етиленоксиду, поліоксіетиловані багатоатомні спирти (наприклад, гліцерин), полівініловий спирт і їх суміші. Поліетиленглікольпропіональдегід може мати переваги при виробництві внаслідок його стабільності у воді. Полімер може мати будь-яку молекулярну масу і може бути розгалуженим або нерозгалуженим. Число полімерів, які приєднуються до антитіла, може варіювати, і при приєднанні більше одного полімеру, вони можуть являти собою однакові або різні молекули. Як правило, число і/або тип використаних для дериватизації полімерів можна визначити, приймаючи до уваги, наприклад, але не обмежуючи ними: конкретні властивості або функції антитіла, які необхідно поліпшити; чи буде похідне антитіла використовуватися для лікування за певних умов і т. п.
В іншому варіанті здійснення запропоновані кон'югати антитіла і небілкової молекули, які можна вибірково нагріти при впливі радіації. В одному з варіантів здійснення небілковою молекулою є вуглецева нанотрубка (Кат еї аї., Ргос. Май. Асай. 5сі. ОБА 102: 11600-11605 (2005)). Випромінювання може бути будь-якої довжини хвилі і включає, але ними не обмежуються, довжини хвиль, які не наносять шкоди звичайним клітинам, але які нагрівають небілкову молекулу до температури, при якій знищуються клітини, які знаходяться близько до антитіла з небілюовою молекулою.
В. Рекомбінантні способи і композиції
Зо Антитіла можна одержувати, використовуючи рекомбінантні способи і композиції, наприклад, як описано в патенті США Мо 4816567. В одному з варіантів здійснення запропонована виділена нуклеїнова кислота, яка кодує анти-Уаддей! антитіло, описане в даному документі. Така нуклеїнова кислота може кодувати амінокислотну послідовність, яка містить МІ, і/або амінокислотну послідовність, яка містить УН антитіла (наприклад, легкий і/або важкий ланцюги антитіла). У додатковому варіанті здійснення запропонований один або кілька векторів (наприклад, експресійних векторів), які містять таку нуклеїнову кислоту. У додатковому варіанті здійснення запропонована клітина-хазяїн, яка містить таку нуклеїнову кислоту. В одному варіанті здійснення клітина-хазяїн містить (наприклад, трансформована ними): (1) вектор, який містить нуклеїнову кислоту, яка кодує амінокислотну послідовність, яка містить МІ. антитіла, і амінокислотну послідовність, яка містить МН антитіла, або (2) перший вектор, який містить нуклеїнову кислоту, яка кодує амінокислотну послідовність, яка містить Мі. антитіла, і другий вектор, який містить нуклеїнову кислоту, яка кодує амінокислотну послідовність, яка містить МН антитіла. В одному варіанті здійснення клітина-хазяїн є еукаріотичною, наприклад, клітиною яєчника китайського хом'ячка (СНО) або лімфоїдною клітиною (наприклад, клітиною
Уо, М5О, Зр20). В одному варіанті здійснення запропонований спосіб виготовлення анти-
Уаддеді антитіла, яке передбачає культивування клітини-хазяїна, яка містить нуклеїнову кислоту, яка кодує антитіло, запропоноване вище, в умовах, які підходять для експресії антитіла, і, необов'язково, виділення антитіла з клітини-хазяїна (або середовища для культивування клітини-хазяїна).
Для рекомбінантного одержання анти-Уаддед! антитіла нуклеїнову кислоту, яка кодує антитіло, наприклад, описану вище, виділяють і вбудовують в один або кілька векторів для подальшого клонування і/або експресії в клітині-хазяїні. Таку нуклеїнову кислоту можна без зусиль виділити і секвенувати, використовуючи звичайні процедури (наприклад, використовуючи олігонуклеотидні зонди, які здатні специфічного зв'язуватися з генами, які кодують важкий і легкий ланцюги антитіла).
Клітини-хазяїни, які підходять для клонування або експресії антитіла векторів, які кодують, включають прокаріотичні або еукаріотичні клітини, описані в даному документі. Наприклад, антитіла можна одержувати в бактеріях, зокрема, коли не вимагаються глікозилювання і ефекторна функція Ес. Для експресії фрагментів антитіл і поліпептидів у бактеріях див., 60 наприклад, патенти США МоМо 5648237, 5789199 і 5840523. (Див. також Спапоп, Меїтоаз іп
Зо
Моїесшіаг Віоіоду, Мої. 248 (В.К.С. Го, ед., Нитапа Ргевз5, Тоїоула, МУ, 2003), рр. 245-254, де описується експресія фрагментів антитіл у Е. соїї). Після експресії антитіло можна виділити з маси бактеріальних клітин у розчинній фракції і можна додатково очистити.
Крім прокаріот, хазяїнами, які придатні для клонування або експресії векторів, які кодують антитіла, є еукаріотичні мікроорганізми, такі як нитчасті гриби або дріжджі, які включають штами грибів і дріжджів, шляхи глікозилювання яким були «гуманізовані», призводячи до одержання антитіла з частково або повністю людським профілем глікозилювання. Див. Сегпдго55, Маї.
Віотесн. 22: 1409-1414 (2004) і Ії еїаї., Маї. Віотесп. 24: 210-215 (2006).
Придатні для експресії глікозильованого антитіла клітини-хазяїни також отримані з багатоклітинних організмів (безхребетних і хребетних). Приклади клітин безхребетних включають клітини рослин і комах. Були ідентифіковані численні штами бакуловірусів, які можуть використовуватися разом із клітинами комах, зокрема, для трансфекції клітин зЗродоріега Ігидірегаа.
Культури клітин рослин також можуть використовуватися як хазяїни. Див., наприклад, патенти США МоМо 5959177, 6040498, 6420548, 7125978 і 6417429 (де описується технологія
РІГ АМТІВООІЕ5 м для одержання антитіл у трансгенних рослинах).
Клітини хребетних можуть також використовуватися як хазяїни. Наприклад, можуть використовуватися лінії клітин ссавців, які адаптовані до росту в суспензії. Іншими прикладами використаних ліній клітин-хазяїнів ссавців є лінія СМТ нирки мавпи, трансформований 540 (СО05-7); лінія клітин ембріональної нирки людини (293 або клітини 293, описані в Сгапат еї аї.,
У. Зеп МігоїЇ. 36:59 (1977)); клітини нирки дитинчати хом'ячка (ВНК); клітини пухлини Сертоли миші (клітини ТМА4, описані, наприклад, у Маїпег, Віої. Нергоа. 23: 243-251 (1980)); клітини нирки мавпи (СМ); клітини нирки африканської зеленої мавпи (МЕКО-76); клітини карциноми шийки матки людини (НЕГА); клітини нирки собаки (МОСК); клітини печінки сірого щура (ВКІ. ЗА); клітини легень людини (М/138); клітини печінки людини (Нер 02); пухлина молочної залози миші (ММТ 060562); клітини ТКІ, описані, наприклад, у МаїНег еї аї., Аппа!5 М.У. Асай. зсі. 383: 44-68 (1982); клітини МКС 5 і клітини Е54. Інші застосовані лінії клітин-хазяїнів ссавців включають клітини яєчника китайського хом'ячка (СНО), включаючи клітини ОНЕК-СНО (паб еї аї., Ргос. май. Асад. Зсі. ОБА 77: 4216 (1980)); і лінії клітин мієломи, такі як МО, М5О ії 5р2/0. Огляд деяких ліній клітин-хазяїнів ссавців, які підходять для отримання антитіл, див., наприклад, у Уагакі апа
Ми, Меїпод3з іп МоїІесціаг Віоіоду, Мої. 248 (В.К.С. І о, ед., Нитапа Ргезв, Тоїома, МУ), рр. 255-268 (2003).
С. Методи аналізу
Анти-Уаддед1і антитіла, запропоновані в даному документі, можуть бути ідентифіковані, скриновані або охарактеризовані за своїми фізико-хімічними властивостями і/або біологічній активності за допомогою різних методів аналізу, відомих у даній галузі техніки. 1. Методи аналізу зв'язування й інших методів аналізу
В одному аспекті антитіло за винаходом досліджують на активність зв'язування антигену, наприклад, за допомогою відомих способів, таких як ЕГ І5А, Вестерн-блотінг і т. д.
В іншому аспекті, конкурентні методи аналізу можуть використовуватися для ідентифікації антитіла, яке конкурує з антитілом А, А1, А-2 або АТ (5101Т) за зв'язування з даддед1 людини або миші. У деяких варіантах здійснення таке конкуруюче антитіло зв'язується з тим же епітопом (наприклад, лінійним або конформаціонним епітопом), з яким зв'язуються А, А1, А-2 або А1 (51017).
Докладні приклади способів картування епітопу, з яким зв'язується антитіло, наведені в
Могтіх5 (1996) "Ерйоре Марріпд Ргоїосої5", у Меїпод5 іп МоїІесціаг Віоіоду мої. 66 (Нитапа Ргез5,
Тоюуа, М).
В ілюстративному конкурентному аналізі, іммобілізований аддеа1 інкубують у розчині, який містить перше мічене антитіло, яке зв'язується з даддейд1 (наприклад, А, АТ, А-2 або А1 (51017Т)), ії друге немічене антитіло, яке досліджують на його здатність конкурувати з першим антитілом за зв'язування з Чдаддеай!. Друге антитіло може бути присутнім у супернатанті гібридоми. Як контроль іммобілізований даддей!1 інкубують з розчином, який містить перше мічене антитіло, але без другого неміченого антитіла. Після інкубації в умовах, які дозволяють зв'язування першого антитіла з Чдаддед1і, видаляють надлишок незв'язаного антитіла, і вимірюють кількість мітки, зв'язаної з іммобілізованим даддед1. Якщо кількість мітки, яка відповідає іммобілізованому даддеа1, істотно знижується в досліджуваному зразку порівняно з контрольним зразком, то це вказує на те, що друге антитіло конкурує з першим антитілом за зв'язування з даддеа1. Див. Нагіож апа ІГапе (1988) Апііродієв: А І арогаїогу Мапиаї! сп.14 (Соїа
Зргіпд Нарог І арогайїогу, Соїа 5ргіпд Наїбог, МУ). 60 2. Методи аналізу активності
В одному аспекті запропоновані методи аналізу для ідентифікації анти-Уаддед1 антитіл, які володіють біологічною активністю. Біологічна активність може містити в собі, наприклад, інгібування Уаддейа1-індукованого Моїсп1-сигнального шляху. У деяких інших варіантах здійснення антитіло за винаходом тестують на його здатність інгібувати експресію гена- репортера, який відповідає на даддеа1-індукований Моїсп1-сигнальний шлях. Необмежуючі приклади методів аналізу наведені в прикладах. У деяких варіантах здійснення антитіло за винаходом досліджують на таку біологічну активність. Також запропоновані антитіла, які мають таку біологічну активність іп мімо і/або іп міїго.
О. Імунокон'югати
Винахід також пропонує імунокон'югати, які містять анти-Уаддей антитіло, кон'юговане з одним або декількома цитотоксичними агентами, такими як хіміотерапевтичні агенти або лікарські сполуки, інгібітори росту, токсини (наприклад, білкові токсини, ферментативно активні токсини бактеріального, грибкового, рослинного або тваринного походження, або їхні фрагменти) або радіоактивні ізотопи.
В одному варіанті здійснення імунокон'югат являє собою кон'югат антитіла з лікарським засобом (АБС), де антитіло приєднане до одного або декількох лікарськиї засобів, які включають, без обмеження, майтанзіноїд (див. патенти США МоМо 5208020, 5416064 і
Європейський патент ЕР 0425235 В1); аурістатин, такий як монометилаурістатинові лікарські засоби ОЕ і ОБ (ММАЕ і ММАРЕ) (див. патенти США МоМо 5635483 і 5780588 і 7498298); доластатин; каліхеаміцин або його похідні (див. патенти США МоМо 5712374, 5714586, 5739116, 5767285, 5770701, 5770710, 5773001 і 5877296; Ніптап еї аї., Сапсег Ке5. 53:3336-3342 (1993); і
Годе сеї аї., Сапсег Невз. 58:2925-2928 (1998)); антрациклін, такий як дауноміцин або доксорубіцин (див. Кгаїх еї а!., Сштепі Мед. Спет. 13:477-523 (2006); Уентеєу єї аї!., Віоогдапіс 8
Мед. Спет. І ецйегз 16:358-362 (2006); Тогдом вї а!., Віосоп). Снет. 16:717-721 (2005); Мааду евї аї.,
Ргос. Маї. Асад. бсі. ОБА 97:829-834 (2000); Биром/снікК єї аї!., Віоогу. 5 Мей. Спет. І еЦегв 12:1529-1532 (2002); Кіпо еї аї., У. Мед. Спет. 45:4336-4343 (2002); і патент США Мо 6630579); метотрексат; віндезин; таксан, такий як доцетаксел, паклітаксел, ларотаксел, тесетаксел і ортотаксел; трихотецен і СС1065.
В іншому варіанті здійснення імунокон'югат містить описане в даному документі антитіло,
Зо кон'юговане з ферментативно активним токсином або його фрагментом, включаючи, без обмеження, А-ланцюг дифтерійного токсину, який незв'язують активні фрагменти дифтерійного токсину, А-ланцюг екзотоксину (Рхендотопавх аегидіпоза), А-ланцюг рицину, А-ланцюг абріну, А- ланцюг модекцину, альфа-сарцин, білки АїЇІепйгіез Тогаїї, диантинові білки (із гвоздики), білки з
Рпуїіаса атегісапа (РАРІ, РАРІЇ і РАР-5), інгібітор з Мотогаїса спагапііа, курцин, кротин, інгібітор з бЗараопагіа ойісіпаїйх, гелонін, мітогелін, рестриктоцин, феноміцин, еноміцин і трикотецени.
В іншому варіанті здійснення імунокон'югат містить описане в даному документі антитіло, кон'юговане з радіоактивним атомом з одержанням радіоактивного кон'югату. Для одержання радіоактивних кон'югатів можна використовувати ряд радіоактивних ізотопів. Їхні приклади включають А, 1191, 125, у, Ве"86 Де"88, 5п!»53, Ві212, рег, рре": і радіоактивні ізотопи І 0. Якщо радіоактивний кон'югат використовують для детекції, він може містити радіоактивний атом, який застосовується в сцинтиграфічних дослідженнях, наприклад, їс99т або 1123, або спінову мітку, яка застосовується для візуалізації шляхом ядерного магнітного резонансу (ЯМР) (також відомої як магнітно-резонансна томографія, МРТ), таку як, знову ж, йод-123, йод-131, індій-111, фтор-19, вуглець-13, азот-15, кисень-17, гадоліній, марганець або залізо.
Кон'югати антитіла з цитотоксичним агентом можна одержати з використанням ряду біфункціональних білок-зв'язувальних агентів, таких як М-сукцинімідил-3-(2- піридилдитіо)пропіонат (5РОР), сукцинімідил-4-(М-малеімідометил)циклогексан-1-карбоксилат (ЗМСОСС), імінотіолан (ІТ), біфункціональні похідні складних імідоефірів (такі як диметиладипімідат НС), активовані складні ефіри (такі як дисукцинімідилсуберат), альдегіди (такі як глутаральдегід), біс-азидосполуки (такі як біс(п-азидобензоїл)гександіамін), похідні біс- діазонію (такі як біс-(п-діазонійбензоїл)етилендіамін), діїзоціанати (такі як толуол 2,6-діїзоціанат) і бісактивні сполуки фтору (такі як 1,5-дифтор-2,4-динітробензол). Наприклад, імунотоксин рицин можна одержати способом, описаним МіїеНа еї аї.,, Зсіепсе 238:1098 (1987). Мічена вуглецем-14 1-ізотіоціанатобензил-3-метилдиетилен триамінпентаоцтова кислота (МХ-ОТРА) являє приклад хелатуючого засобу, використаного для приєднання радіонукліда до антитіла.
Див. УМО 94/11026. Лінкер може являти собою «лінкер, який розщеплюється», що полегшує вивільнення цитотоксичного агента в клітині Наприклад, можна використовувати кислоточутливий лінкер, пептидазочутливий лінкер, фотолабільний лінкер, диметильний лінкер або дисульфід-вмісний лінкер (Спагі еї аІ., Сапсег Ке5. 52:127-131 (1992); патент США Мо
Описані в даному документі імунокон'югати або АОС у явній формі мають на увазі, без обмеження, кон'югати, отримані з використанням реагентів, які перехресно-зшивають, включаючи, без обмеження, ВМР5, ЕМОС5, ЗМВ5, НВМУ5, І С-5МОС, МВ5, МРВН, 5ВАР, ІА,
ЗІАВ, 5МСС, ЗМРВ, ЗМРН, сульфо-ЕМС5, сульфо-ЗМВ5, сульфо-КМИ5, сульфо-МВ5, сульфо-БІАВ, сульфо-ЗМСС і сульфо-ЗМРВ, а також 5М5В (сукцинімідил-(4- вінілсульфон)бензоат), які є комерційно доступними (наприклад, від Ріегсе Віоїесппоіоду, Іпс.,
Воскога, І., 0.5.А).
Е. Способи і композиції для діагностики і детекції
У деяких варіантах здійснення кожне з анти-Уаддед1 антитіл, запропонованих у даному документі, корисно для детекції присутності дхаддед1 у біологічному зразку. Термін «детекція», використаний у даному документі, містить у собі кількісне або якісне виявлення. У деяких варіантах здійснення біологічний зразок містить клітину або тканину, таку як пухлинна тканина.
В одному варіанті здійснення запропоноване анти-Уаддейд! антитіло для застосування в способі або діагностики детекції. У ще одному аспекті запропонований спосіб виявлення присутності Уаддеа!1 у біологічному зразку. У деяких варіантах здійснення спосіб включає забезпечення контакту біологічного зразка з анти-Уаддед1і антитілом, яке описане в даному документі, в умовах, які дозволяють зв'язування анти-Уаддей1 антитіла з Удаддеа1, і детекцію утворення комплексу між анти-Уаддейд1 антитілом і даддеа 1. Такий спосіб може бути іп міго або іп мімо способом. В одному варіанті здійснення анти-Уаддей 1 антитіло використовується для відбору суб'єктів, які підходять для лікування з використанням анти-)аддеай! антитіла, наприклад, де даддей1 є біомаркером для відбору пацієнтів.
Приклади захворювань, які можуть бути діагностовані з використанням антитіла за винаходом, включають рак, наприклад, рак молочної залози, рак легень, рак головного мозку, рак шийки матки, рак товстої кишки, рак печінки, рак жовчних проток, рак підшлункової залози, рак шкіри, В-клітинні злоякісні новоутворення і Т-клітинні злоякісні новоутворення.
У деяких варіантах здійснення запропоновані мічені анти-Уадде4й1 антитіла. Мітки включають, але не обмежуються ними, мітки або молекули, які виявляються прямо (наприклад,
Зо флуоресцентні, хромофорні, електроннощільні, хемілюмінесцентні й радіоактивні мітки), а також залишки, такі як ферменти або ліганди, які виявляються непрямим чином, наприклад, за допомогою ферментативної реакції або молекулярної взаємодії. Ілюстративні мітки включають, але не обмежуються ними, радіоіїзотопи З2Р, 140, 125І, ЗН і 1911, флуорофори, такі як рідкоземельні хелати або флуоресцеїн і його похідні, родамін і його похідні, дансил, умбеліферон, люциферази, наприклад, люциферазу світляка і бактеріальну люциферазу (патент США Мо 4737456), люциферин, 2,3-дигідрофталазиндіони, пероксидазу хріну (НЕР), лужну фосфатазу,
В-галактозидази, глюкоамілази, лізоцим, сахаридоксидази, наприклад, глюкозоксидаза, галактозоксидаза і глюкозо-6-фосфатдегідрогеназа, гетероциклічні оксидази, такі як уриказа і ксантиноксидаза, з'єднані з ферментом, який використовує пероксид водню для окислювання попередника барвника, таким як НЕР, лактопероксидаза або мікропероксидаза, біотин/авідин, спінові мітки, бактеріофагові мітки, стабільні вільні радикали і т. п.
Е. Фармацевтичні склади
Фармацевтичні склади, які містять анти-Уаддед!і антитіло, описане в даному документі, одержують шляхом змішування такого антитіла, яке має бажаний ступінь чистоти, з одним або декількома необов'язковими фармацевтично прийнятними носіями (Кепіпдіоп'є Рнаптасеціісаї!
Зсіепсе5 161 ейййоп, О5о0І, А. Ей. (1980)) у вигляді ліофілізованих препаратів або водних розчинів. Фармацевтично прийнятні носії зазвичай є нетоксичними для реципієнтів у використаних дозах і концентраціях і включають, без обмеження: буфери, наприклад, на основі фосфорної, лимонної й інших органічних кислот; антиоксиданти, включаючи аскорбінову кислоту і метіонін; консерванти (такі як октадецилдиметилбензиламонію хлорид; гексаметонію хлорид; бензалконію хлорид; бензетонію хлорид; фенол, бутил або бензиловий спирт; алкілпарабени, такі як метил- або пропілпарабен; катехол; резорцинол; циклогексанол; 3- пентанол; і м-крезол); низькомолекулярні (менше ніж приблизно 10 залишків) поліпептиди; білки, такі як сироватковий альбумін, желатин або імуноглобуліни; гідрофільні полімери, такі як полівінілпіролідон; амінокислоти, такі як гліцин, глутамін, аспарагін, гістидин, аргінін або лізин; моносахариди, дисахариди й інші вуглеводи, які включають глюкозу, манозу або декстрини; хелатуючі агенти, такі як ЕЮОТА; цукру, такі як сахароза, маніт, трегалоза або сорбіт; солеутворювальні протиіїони, такі як натрій; комплекси металів (наприклад, 2п-білкові комплекси); і/або неіїонні поверхнево-активні речовини, такі як поліетиленгліколь (РЕб). 60 Приклади фармацевтично прийнятних носіїв відповідно до даного винаходу додатково включають агенти, які забезпечують внутрішньотканинний розподіл ліків, такі як розчинні нейтрально-активні гіалуронідазні глікобілюи (5НАБЕСР), наприклад, людські розчинні гіалуронідазні глікобілки РІН-20, такі як ГНиИРН2гО (НМ ЕМЕХФ, Вахіег Іпіегпайопаї, Іпс.). Деякі приклади 5НА5БЕОР і способи їхнього застосування, включаючи гНиРН2О, описані в патентних публікаціях США МоМо 2005/0260186 і 2006/0104968. В одному аспекті ЗНАБЕСР поєднують з однією або декількома іншими глюкозаміногліканазами, такими як хондроїтинази.
Приклади ліофілізованих складів антитіл описані в патенті США Мо 6267958. Водні склади антитіл включають склади, описані в патенті США Мо 6171586 і УУО2006/044908, причому останні склади містять гістидин-ацетатний буфер.
Склад за даним винаходом також може містити кілька діючих інгредієнтів, якщо це необхідно для конкретного показання для лікування, переважно, щоб активність таких інгредієнтів доповнювала один одного і не чинила несприятливого впливу один на одного. Наприклад, може бути бажано додаткове введення цитотоксичного агента, наприклад, хіміотерапевтичного агента. Такі діючі інгредієнти, переважно, присутні у комбінації в кількостях, які ефективні для заданої мети.
Діючі інгредієнти можна помістити в мікрокапсули, отримані, наприклад, методами коацервації або за допомогою міжфазної полімеризації, наприклад, гідроксиметилцелюлозні або желатинові мікрокапсули і полі-(метилметакрилатні) мікрокапсули, відповідно, у колоїдні системи доставки лікарських засобів (такі як ліпосоми, альбумінові мікросфери, мікроемульсії, наночастинки і нанокапсули) або в макроемульсії. Такі методи розкриті в Кетіпаїоп'б
Ріпаптасецііса! бсіепсез 161й єдійоп, Озої, А. Ес. (1980).
Можна одержати препарати з уповільненим вивільненням. Подібні приклади препаратів з уповільненим вивільненням включають напівпроникні матриці з твердих гідрофобних полімерів, які містять антитіло, причому зазначені матриці можуть являти собою формовані вироби, такі як плівки або мікрокапсули.
Склади, призначені для введення іп мімо, зазвичай є стерильними. Стерильності можна легко досягти, наприклад, шляхом фільтрації через стерильні фільтраційні мембрани. б. Терапевтичні способи і композиції
Кожне з анти-Уаддейд1 антитіл, запропонованих у даному винаході, може бути використане в терапевтичних способах.
В одному аспекті запропоноване анти-Уаддей!1 антитіло для використання як лікарський засіб. В інших аспектах запропоноване анти-)аддей1 антитіло для використання в лікуванні захворювання або розладу, пов'язаного з порушеним Моїсп-сигнальним шляхом, наприклад, раку. У деяких варіантах здійснення запропоновано анти-)аддей1 антитіло для використання в способі лікування. У деяких варіантах здійснення даний винахід відноситься анти-Чаддес1 антитіла для використання в способі лікування індивідуума, який має рак, що включає введення індивідууму ефективної кількості анти-Уаддед1 антитіла. В одному такому варіанті здійснення винаходу спосіб додатково включає введення індивідууму ефективної кількості щонайменше одного додаткового терапевтичного агента, наприклад, як описано нижче. В одному такому варіанті здійснення винаходу спосіб додатково включає введення індивідууму ефективної кількості щонайменше одного додаткового терапевтичного агента, наприклад, як описано нижче.
У додаткових варіантах здійснення винахід стосується анти-Уаддед! антитіла для використання в інгібуванні росту раку легень. У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується анти-Заддед1 антитіла для використання в способі зниження росту раку легень в індивідуума, який включає введення індивідууму ефективної кількості анти-Уаддед1 антитіла для зниження росту раку легень. У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується анти-
Уаддеді антитіла для використання в способі зниження росту раку молочної залози в індивідуума, який включає введення індивідууму ефективної кількості анти-Уаддед1 антитіла для зниження росту раку молочної залози. «Індивідуум» відповідно до кожного з вищевказаних варіантів здійснення, переважно, являє собою людину.
У деяких варіантах здійснення запропоновано анти-Уаддей1 антитіло для лікування алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях) і/або надлишком слизу. Інші алергійні захворювання, які можна лікувати з використанням анти-Уаддей1 антитіл, запропонованих у даному документі, включають, але не обмежуються ними, алергійний риніт, атопічний дерматит, харчову гіперчутливість і кропивницю; імуноопосрекодовані захворювання шкіри, включаючи булзні захворювання шкіри, мультиформну еритему і контактний дерматит; аутоїмунні захворювання включаючи псоріаз, ревматоїдний артрит, ювенільний хронічний артрит; запальні захворювання бо кишечнику (наприклад, неспецифічний виразковий коліт, хвороба Крона); ідіопатичну інтерстиціальну пневмонію, захворювання, пов'язані з метаплазією келихоподібних клітин (такі як астма, ХОХЛ, кістозний фіброз і стравохід Барретта), легеневі захворювання, такі як кістозний фіброз, глютен-чутлива ентеропатія і хвороба Уїппла; імунологічні захворювання легень, такі як еозинофільна пневмонія, ідіопатичний легеневий фіброз і алергійний пневмоніт; хронічну обструктивну хворобу легень, РСВ-інфекції, увеїт, склеродермію, остеопороз і лімфому
Ходжкіна.
У додатковому аспекті даний винахід стосується використання анти-Уаддей1 антитіла у виробництві або виготовленні лікарського препарату. В одному варіанті здійснення лікарський препарат призначений для лікування захворювання або розладу, пов'язаного з порушеним
Моїсп-сигнальним шляхом. В одному варіанті здійснення лікарський препарат призначений для лікування раку. У додатковому варіанті здійснення лікарський препарат призначений для використання в способі лікування раку, який включає введення індивідууму, який має рак, ефективної кількості лікарського препарату. В одному такому варіанті здійснення винаходу спосіб додатково включає введення індивідууму ефективної кількості щонайменше одного додаткового терапевтичного агента, наприклад, описаного нижче. «Індивідуум» відповідно до кожного з вищевказаних варіантів здійснення, може бути людиною.
У додатковому аспекті даний винахід стосується способу лікування захворювання або розладу, пов'язаного з порушеним Моїсп-сигнальним шляхом. В одному варіанті здійснення спосіб містить у собі введення суб'єкту, який має таке захворювання або розлад, ефективної кількості анти-Уаддед1 антитіла. В одному варіанті здійснення спосіб містить у собі введення суб'єкту, який має рак, ефективної кількості анти-Уаддед1 антитіла. В одному такому варіанті здійснення винаходу спосіб додатково включає введення індивідууму ефективної кількості щонайменше одного додаткового терапевтичного агента, як описано нижче. В одному такому варіанті здійснення винаходу спосіб додатково включає введення індивідууму ефективної кількості щонайменше одного додаткового терапевтичного агента, як описано нижче. «Індивідуум» відповідно до кожного з вищевказаних варіантів здійснення, може бути людиною.
У додатковому аспекті даний винахід стосується способу інгібування росту ракових клітин в індивідуума. В одному варіанті здійснення спосіб включає введення індивідууму ефективної кількості анти-Уаддед! антитіла, щоб інгібувати ріст ракових клітин. В одному варіанті здійснення «індивідуумом» є людина.
У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується способів лікування в індивідуума алергії астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (наприклад, у легенях) і/або надлишком слизу в індивідуума. У деяких варіантах здійснення даний винахід стосується способів лікування алергійного риніту, атопічного дерматиту, харчової гіперчутливості і кропивниці; імуноопосредкованих захворювань шкіри, включаючи бульозні захворювання шкіри, мультиформну еритему і контактний дерматит; аутоїмунних захворювань, включаючи псоріаз, ревматоїдний артрит, ювенільний хронічний артрит; запальних захворювань кишечнику (наприклад, неспецифічного виразкового коліту, хвороби Крона); ідіопатичної інтерстиціальної пневмонії, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин (таких, як астма, ХОХЛ, кістозний фіброз і стравохід Барретта), легеневих захворювань, таких як кістозний фіброз, глютен-чутлива ентеропатія і хвороба
Уїппла; імунологічних захворювань легень, таких як еозинофільна пневмонія, ідіопатичний легеневий фіброз і алергійний пневмоніт; хронічної обструктивної хвороби легень, РСВ-інфекції, увеїту, склеродермії, остеопорозу і/або лімфоми Ходжкіна. У деяких варіантах здійснення спосіб включає введення індивідууму ефективної кількості анти-Уаддей1 антитіла, РСОВ наведеного в даному описі. У деяких варіантах здійснення «індивідуумом» є людина.
У додатковому аспекті даний винахід стосується фармацевтичних складів, які містять кожне з анти-Уаддед1 антитіл, наведених у даному описі, наприклад, для застосування в кожному з зазначених вище терапевтичних способах. В одному варіанті здійснення фармацевтичний склад містить кожне з анти-Уаддейд1 антитіл, наведених у даному описі, і фармацевтично прийнятний носій. В іншому варіанті здійснення фармацевтичний склад містить кожне з анти-
Уаддед1 антитіл, наведених у даному описі, і щонайменше один додатковий терапевтичний агент, наприклад, як описано нижче.
Антитіла за винаходом можуть бути використані в терапії або окремо, або в комбінації з іншими агентами. Наприклад, антитіло за винаходом може бути введене спільно щонайменше з одним додатковим терапевтичним агентом. У деяких варіантах здійснення додатковий терапевтичний агент являє собою цитотоксичний агент. У деяких варіантах здійснення додатковий терапевтичний агент являє собою антитіло.
Такі комбіновані терапевтичні методи, зазначені вище, охоплюють комбіноване введення 60 (де два або кілька терапевтичних агентів включені в один склад або в окремі склади) і окреме введення, у випадку якого введення антитіла за винаходом може відбуватися до, одночасно іМабо після введення додаткового терапевтичного агента або агентів. В одному варіанті здійснення введення анти-Заддед1 антитіла і введення додаткового терапевтичного агента відбувається в межах приблизно одного місяця, або в межах одного, двох або трьох тижнів, або в межах приблизно одного, двох, трьох, чотирьох, п'яти або шести днів між ними. Антитіла за винаходом можуть бути також використані у поєднанні з променевою терапією.
Антитіло за винаходом (і будь-який додатковий терапевтичний агент) можна вводити будь- якими придатними засобами, включаючи парентеральне, внутрішньолегеневе і назальне, і, якщо це бажано для місцевого лікування, внутрішньоосередкове введення. Парентеральні інфузії включають внутрішньом'язове, внутрішньовенне, внутрішньоартеріальне, внутрішноочеревинне або підшкірне введення. Введення може здійснюватися будь-яким придатним шляхом, наприклад, за допомогою ін'єкцій, таких як внутрішньовенні або підшкірні ін'єкції, почасти залежно від того, чи буде введення коротким або хронічним. У даному винаході передбачені різні схеми введення, включаючи, але не обмежуючись цим, одне або кілька введень з різними інтервалами, болюсне введення й імпульсну інфузію.
Антитіла за даним винаходом повинні включатися у фармацевтичний склад, дозуватися і вводитися відповідно до хорошої медичної практики. Фактори, які враховуються в даному контексті, включають конкретний вид захворювання, який підлягає лікуванню, конкретний вид ссавця, який підлягає лікуванню, клінічний стан окремого пацієнта, причину захворювання, місце доставки агента, спосіб введення, схему введення й інші фактори, відомі лікарям, які практикують. Антитіло, необов'язково, може входити у фармацевтичний склад разом з одним або декількома агентами, використаними в даний час для профілактики або лікування зазначеного захворювання. Ефективна кількість таких інших агентів залежить від кількості антитіла, яке присутнє у композиції, типу захворювання або лікування й інших факторів, обговорених вище. Вони зазвичай використовуються в дозуваннях і зі способами введення, які описані в даному документі, або в кількості, яка становить приблизно від 1 до 99 95 від описаних у даному документі дозувань, або в будь-якому дозуванні і з будь-яким способом введення, підібраним емпірично/клінічно.
Для профілактики або лікування захворювання придатне дозування антитіла за даним винаходом (використаного окремо або в комбінації з одним або декількома іншими додатковими терапевтичними агентами) залежить від типу захворювання, яке підлягає лікуванню, типу антитіла, ваги і плину захворювання, мети (профілактичної або терапевтичної) введення антитіла, яке передує терапії, клінічної історії пацієнта і відповіді на антитіла, а також від рішення лікаря, який лікує. Антитіло можна вводити пацієнту однократно або в кілька прийомів.
Залежно від типу і важкості захворювання, як вихідної придатної дози пацієнту можна вводити приблизно від 1 мкг/кг до 15 мг/кг (наприклад, 0,1-10 мг/кг) антитіла, наприклад, в один або кілька прийомів, або шляхом безупинної інфузії. Типова добова доза може варіювати приблизно від 1 мкг/кг до 100 мг/кг або більше, залежно від зазначених вище факторів. У випадку багаторазового введення протягом декількох днів або більшого часу, залежно від стану лікування, як правило, проводять до досягнення бажаного ступеня придушення симптомів захворювання. Типова доза антитіла знаходиться в діапазоні приблизно від 0,05 до 10 мг/кг.
Таким чином, пацієнту можна вводити одну або кілька доз, які складають приблизно 0,5 мг/кг, 2,0 мг/кг, 4,0 мг/кг або 10 мг/кг (або їхнє будь-яке сполучення). Такі дози можна вводити через визначені інтервали часу, наприклад, щотижня або кожні три тижні (наприклад, так, щоб пацієнт одержував приблизно від двох до двадцяти, або, наприклад, приблизно шість доз антитіла).
Можуть вводитися початкова більш висока навантажувальна доза, за якої випливає одна або трохи більше низьких доз. Зразкова схема введення містить у собі введення початкової навантажувальної дози близько 4 мг/кг, з наступною щотижневою дозою, яка підтримується, близько 2 мг/кг антитіла. Однак можна використовувати й інші схеми введення. Результати даної терапії можна легко відслідковувати за допомогою традиційних методів і аналізів.
Очевидно, що будь-який з зазначених вище складів або терапевтичних способів може бути здійснений з використанням імунокон'югата за винаходом замість або в додаток до анти-
Уаддеа1 антитіла.
Н. Промислові вироби
В іншому аспекті винаходу запропоновані промислові вироби, які включають речовини, корисні для лікування, профілактики і/або діагностики захворювань, описаних вище. Даний промисловий виріб містить у собі контейнер і етикетку або листівку-вкладиш на контейнері або асоційовані з ним. Придатні контейнери містять у собі, наприклад, сулії, флакони, шприци, мішки для в/в розчинів і т. п. Дані контейнери можуть бути виготовлені з різних матеріалів, таких 60 як скло або пластик. У даний контейнер поміщена композиція, яка сама по собі або в сполученні з іншою композицією, є ефективною для лікування, профілактики або діагностики даного стану, і може мати стерильний вхідний отвір (наприклад, даний контейнер може бути мішком для внутрішньовенного розчину або флаконом, який має пробку, яка проколюється за допомогою голки для підшкірної ін'єкції). Щонайменше один діючий агент у даній композиції являє собою антитіло за даним винаходом. На етикетці або листівці-вкладиші зазначено, що дана композиція призначена для використання при лікуванні вибраного стану. Більш того, промисловий виріб може містити: (а) перший контейнер з композицією, яка міститься в ньому, де дана композиція містить антитіло за винаходом; і (б) другий контейнер з композицією, яка міститься в ньому, де дана композиція містить додатковий цитотоксичний або інший терапевтичний агент.
Промисловий виріб у цьому варіанті здійснення винаходу може додатково містити листівка- вкладиш, у якій зазначено, що композиції можна використовувати при лікуванні визначеного стану. В альтернативному або додатковому варіанті промисловий виріб може додатково містити в собі другий (або третій) контейнер, який містить у собі фармацевтично прийнятний буфер, такий як бактеріостатична вода для ін'єкцій (ВМУРІ), фосфатно-сольовий буферний розчин, розчин Рінгера і розчин ЮО-глюкози. Також він може містити в собі інші матеріали й речовини, необхідні з комерційної і споживчої точки зору, включаючи інші буфери, розріджувачі, фільтри, голки і шприци.
Очевидно, що кожен з вищевказаних промислових виробів можуть включати імунокон'югат за винаходом замість або на додаток до анти-даддей1 антитіла.
І. ПРИКЛАДИ
Нижче наведені приклади способів і композицій за винаходом. Зрозуміло, що на практиці можуть бути здійснені різні інші варіанти здійснення з урахуванням загального опису, наведеного вище.
Приклад 1. Одержання анти-Уаддеа антитіл. а. Сортування і скринінг бібліотека для ідентифікації анти-даддейд1 антитіл
Фагові бібліотеки антитіл людини зі створеною синтетично розмаїтістю у вибраних областях, які визначають комплементарність, яка імітує природну розмаїтість репертуару дО людини, були використані для відсіювання Бар-фрагментів, які представляються на поверхні частинок бактеріофага М13. Як антиген для проведення сортування бібліотеки використовували даді1-
Зо 0О5І-ЕСЕ1-4 людини (ЗЕО ІЮО МО: 6) або дад2-051-ЕСІЕ1-4 людини (ЗЕО ІЮ МО: 8). 96-ямкові планшети для імунологічних досліджень Мипс МахібЗогр покривали протягом ночі при 4 "С антигеном-мішенню (10 мкг/мл) і блокували протягом 1 години при кімнатній температурі буфером РВ5Т, який блокує фаги, (фосфатно-сольовим буферним розчином (РВ5) з 1 95-м (мас./0б.) бичачим сироватковим альбуміном (ВБА) і 0,05 95-м (06./06.) Тмееп-20). Фагові бібліотеки МН-областей антитіл (див., наприклад, ее еї аї., 9. Іттипої. Меїй. 284:119-132 (2004)) ії МН/ЛІ -областей (див. Гіапд еї аїІ., УМВБ. 366: 815-829 (2007)) додавали до покритих антигенами планшетів окремо й інкубували протягом ночі при кімнатній температурі. Наступного дня покриті антигеном планшети промивали десять разів з використанням РВТ (РВЗ з 0,05 95-м
Тмееп-20), а фаги, які зв'язалися, елюювали з використанням 50 мМ НСІ їі 500 мМ Масі протягом 30 хв і нейтралізували рівним об'ємом 1М Ттіз-буфера (рН 7,5). Виділені фаги ампліфікували в клітинах Е.соїї ХІ-1 Вісе. У наступних раундах відбору час інкубації фагових антитіл на покритих антигеном планшетах скорочували до 2-3 годин і поступово збільшували твердість промивання планшетів.
Після 4 раундів відсівання спостерігалося значне збагачення. З кожної МН- ії МН/М - бібліотеки були вибрані по 96 клонів, щоб визначити, чи специфічно вони зв'язуються з Уаддей1 або даддед2 людини. Варіабельні області цих клонів були ПЛР-секвеновані для ідентифікації клонів з унікальними послідовностями. Афінність фагових антитіл ранжували з використанням одноточкового конкурентного ЕГІЗА. Значення ІСзо для фагових антитіл додатково визначали за допомогою конкурентного ЕГІЗА. Унікальні фагові антитіла, які специфічно зв'язуються з людським Уаддейд1 (але не даддеа2), Ухаддеа2 (але не даддеа1) або з обома даддеа!1 і дхаддеа2 були відібрані і переформатовані в повнорозмірні дос для оцінки в клітинних аналізах клітин іп міїго.
Клони, які цікавлять, були переформатовані в ЇД) шляхом клонування Мі- і Мн-областей окремих клонів у вектор рКК для експресії в клітинах ссавців (РКК. РОЗ.НитапкКарра), який містить константний домен каппа-ланцюга людини, і експресійний вектор (РКК. РО4.Нитапнс), який кодує повнорозмірний константний домен ІдО1 людини, відповідно (Зпієїа5 еї аї.,. Віої!
Спет 2000; 276: 6591-6604). Потім антитіла транзиентно експресували в клітинах СНО ссавців, і очищали з використанням колонки з білком А. р. Конструювання бібліотек для збільшення афінності клонів, отриманих з Мн- або Мнмі- (510) бібліотек
Фагміда ро703, отримана з фагміди ро350-265 (І ее еї аї., У. Мої. Віої 340, 1073-1093 (2004), яка містить стоп-кодон (ТАА) у всіх положеннях СОК-І З і яка представляє моновалентні Раб на поверхні бактеріофага М13) служила як бібліотечна матриця для перенесення варіабельних доменів важких ланцюгів (Мн) клонів, які цікавлять, з МН-бібліотеки для дозрівання афінності.
Для дозрівання афінності були використані як тверда, так і м'яка стратегія рандомізації. Для твердої рандомізації бібліотеку одноланцюжкових легких ланцюгів з вибраними позиціями трьох
СОК легкого ланцюга рандомізували, використовуючи амінокислоти, підібрані для імітації природних антитіл людини, а підібрана вирожденість ДНК відповідала описаній в І ее еї аї. (9.
МОЇ. Віо! 340, 1073-1093 (2004)). Для досягнення м'яких умов рандомізації, які вводять мутації у вибрані позиції з частотою приблизно 50 95, мутантну ДНК синтезували із сумішами основ у співвідношенні 70-10-10-10 на користь нуклеотидів дикого типу (СаППор еї аї., доигпаї ої Меаісіпа!
Спетівігу 37:1233-1251 (1994)). Для м'якої рандомізації мішенями були залишки в позиціях 91- 96 з СОК-І 3, 30-33, 35 з СОМК-НІ, 50, 52, 53-54 і 56 з СОК-Н2, 95-98 з СОН-НЗ; і для рандомізації були відібрані три різні комбінації петель СОК, НІ/ 3, Н2/ 3, апа НЗ/ 3.
Для клонів, отриманих з Мнмі-бібліотеки, фагміди, які містять 4 стоп-кодони (ТАА) у кожній
СОК ії які представляють моновалентний Раб на поверхні бактеріофага М13, були отримані в індивідуальному порядку і служили як матриця для мутагенезу за КипКе! для конструювання бібліотеки для дозрівання афінності Для клонів, отриманих з МнМмі-бібліотеки, використовувалася тільки м'яка стратегія рандомізації, а різноманітність СОК-І З було створено в наївній бібліотеці Для досягнення м'яких умов рандомізації мішенями були залишки в позиціях 28-31 з СОМК-І 1, 50, 53-55 з СОК-І2, 91-96 з СОК-І 3, 30-35 з СОК-НІ, 50-56 з СОНК-НЕО, 95-100 з СОБ-НЗ; і для рандомізації були відібрані чотири різні комбінації петель НІЛ 3", Н2/Л 37", а також НЗ/І 37 ї І 1/.2/. 37 (де 7" позначає позицію стоп-кодонів у матриці). с. Стратегія сортування фагів для досягнення посилення афінності
Для відбору антитіл з поліпшеною афінністю, антигени Чдаді або дад2 були спочатку біотиновані при обмеженій кількості реагенту. Проводили один раунд сортингу фагових бібліотек на планшетах і п'ять раундів сортингу в розчині зі збільшенням твердості. Для першого раунду сортингу на планшетах, 10 мкг/мл антигену спочатку наносили на планшети Махізогр і попередньо блокували з використанням буфера, який блокує, (1 95 ВЗА і 0,05 95 Тмееп-20 у
Зо РВ5). З Об/мл фагів у блокувальному буфері інкубували з антигеном на планшетах протягом З годин. Ямки десять разів промивали РВЗ-0,05 95 Гуееп-20. Зв'язаний фаг елюювали в 150 мкл на ямку 50 мМ НСІ/500 мМ КС протягом 30 хвилин і потім нейтралізували 50 мкл на ямку 1М
Трис, рН 8, титрували і розмножували для наступного раунду. У наступних раундах відсівання фагових бібліотек проводили в розчині, коли фагову бібліотеку інкубували з 100 нм біотинованим білком-мішенню (концентрація грунтується на значенні ІСхоо для батьківського клону фага) у 100 мкл буфера, який містить 1 95-й Зирегріоск (Ріегсе ВіоїесппоіЇоду) і 0,05 905
Тмееп-20, протягом 2 годин при кімнатній температурі. Суміш додатково розбавляли в 10 разів за допомогою 1 95-го З,ирегбіоск і по 100 мкл на ямку наносили на покриті нейтравідином ямки (10 мкг/мл) на 30 хвилин при кімнатній температурі й обережному струшуванні. Щоб визначити фонове зв'язування, на планшетах, покритих нейтравідином залишали контрольні ямки, які містять фаги. Зв'язані фаги потім промивали, елюювали і розмножували, як описано для першого раунду. Проводили ще п'ять раундів сортингу в розчині паралельно з підвищенням твердості селекції. З яких перша пара раундів була призначена для відбору за швидкістю асоціації за допомогою зниження концентрації біотинованого білка-мішені з 00 НМ до 0,1 нМ, а останні два раунди були призначені для селекції за швидкістю дисоціації за допомогою додавання надлишкової кількості небіотинованого білка-мішені (від 300 до 1000-кратного перевищення), щоб відсіяти слабкі єднальні агенти при кімнатній температурі. а. ЕГІЗА для високопродуктивного скринінгу афінності (одноточковий конкурентний аналіз)
Колонії відбирали в шостому раунді скринінгу. Колонії вирощували протягом ночі при 37 "С у 150 мкл/ямку в середовищі 2УТ з додаванням 50 мкг/мл карбеніціліну і 1х10'є/мл М1ІЗ3КО?7 у 96- ямковому планшеті (РаЇсоп). З того ж планшета як контроль відбирали колонію Хі -1, інфіковану батьківським фагом. 96-ямкові планшети Мипс Махізогр покривали 100 мкл/ямку дад1і або дад2 (по 0,5 мкг/мл) у РВЗ при 4 "С протягом ночі. Планшети блокували 150 мкл 1 95-го ВЗА і 0,05 9рб- го Тжееп-20 у РВ5 протягом 1 год. 35 мкл фагового супернатанту розбавляли до 75 мкл у буфері для ЕГІ5ЗА (твердофазного імуноферментного аналізу) (який містить РВЗ з 0,5 96-м ВБА, 0,05 95-м Тмееп-20) з або додаванням без додавання 5 нМ даді або дад2 й інкубували протягом 1 год при кімнатній температурі в Е-планшеті (МОМС). 95 мкл суміші переносили паралельно в покриті білком- мішенню планшети. Планшет обережно струшували протягом 15 хвилин і промивали десять 60 разів з використанням РВ5-0,05 95 Пмуееп-20. Зв'язування кількісно оцінювали, додаючи кон'юговане з пероксидазою хрону (НЕР) анти-М1З-антитіло в буфері для ЕГІЗА (1:2500) й інкубували протягом 30 хвилин при кімнатній температурі. Планшети промивали РВ5-0,05 95
Тмжееп-20 десять разів. Потім у ямки додавали по 100 мкл/ямку субстрат пероксидази й інкубували протягом 5 хвилин при кімнатній температурі. Реакцію зупиняли додаванням у кожну ямку по 100 мкл 0,1 М фосфорної кислоти НзРОх) й інкубували протягом 5 хвилин при кімнатній температурі. ОО (оптичну густину) для жовтого забарвлення в кожній ямці визначали, використовуючи стандартний планшетний спектрофотометр для ЕГІЗА, при 450 нМ. Порівняно зі зниженням ОЮаївонм ( 95) у ямці з батьківським фагом (100 95). Клони, для яких спостерігали зниження ОЮлвонм ( 90) менше 50 95, відбирали для аналізу послідовностей. Унікальні клони відбирали для виділення фагів, щоб визначити афінність зв'язування (ІСзо фага) проти Удад1і або
Уад2 шляхом порівняння з відповідними батьківськими клонами. Потім клони з найбільш поліпшеною афінністю, були переформатовані у дсС1 людини для одержання антитіл і подальшого аналізу кінетики зв'язування за допомогою ВіАсоге й інших аналізів іп міго або іп мімо.
Подальші раунди скринінгу виявили антитіла, специфічні тільки до одного члена із сімейства білків Ухаддейд, що було визначено за допомогою ЕГ І5А. Антитіло А зв'язувало даддейд1 людини і мишії1, але не даддеа2 (фіг. 8; послідовність варіабельної області важкого ланцюга показана в
ЗЕО І МО: 9, послідовність варіабельної області легкого ланцюга показана в ЗЕО ІЮ МО: 10).
Навпроти, антитіло В (батьківське антитіло антитіла В-3) зв'язувало людський і мишачий
Уаддед2, але не даддейа1 (фіг. 8). С-1 зв'язується як з даддеа!1, так ії з дхаддед2, і служило як контроль. Послідовності варіадбельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга для антитіла С-1 показані на фіг. 4.
Приклад 2. Афінність зв'язування антитіл і картування епітопів.
Афінність зв'язування анти-)адде4д! фагових антитіл була виміряна за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (ЗКР) з використанням інструмента ВіАсогетм-3000.
Фагові анти-Удаддед1/2 ІдС людини були захоплені на сенсорному чіпі СМ5, покритому мишачими антитілами проти людських ДС, щоб одержати приблизно 150 одиниць відповіді (КО). Для кінетичних вимірювань вводили дворазові серійні розведення дад1/2 05 ЕСЕ1-4 людини або миші (1,95 нМ - 250 нМ) у буфері РВТ (РВ5 з 0,05 95-м Тм'ееп-20) при 25 С зі
Зо швидкістю потоку 30 мл/хвилину. Швидкості асоціації (Кол) і швидкості дисоціації (Кон) розраховували з використанням ленгмюрівської моделі простого зв'язування в співвідношенні 171 (ВІАСОВЕФ Емаїцайоп Зойуаге мегбіоп 3.2). Константу дисоціації при рівновазі (Ка) розраховували як співвідношення Кон/Коп.
У таблиці 2 наведені константи зв'язування для зв'язування антитіл А, А-1, А-2, В і В-3 з очищеним людським ЗЧаддей!, людським даддед2 і мишачим даддед2. Батьківське антитіло специфічно зв'язується з даддей1 людини і миші. Аффінно зрілі антитіла А-1 і А-2 зв'язуються з людським і мишачим ЧУаддей! з високою афінністю. Антитіла А, А-1 і А-2 не зв'язуються з людським або мишачим даддед2. Навпаки, антитіла В і В-3 не зв'язуються з людським або мишачим Уаддеа1. В-3 специфічно зв'язується з даддед2 людини і миші.
Таблиця 2
Зведена таблиця за даними Віасоге
Коп Кок Коп Кок Коп Кок оме ою мі ме | аю | км | ое| оо ем
А | 23Е04 |2ЛЕ-03|94Е-08 Немаєзв'язуваннядоб5 мМ! /-:
А-1| 8,304 |59Е-05|І 7ЛЕЛОЇ ЇЇ Г1111171С111111ї1
А-2| 2,305 |7ЛЕ-О5| 30ЕЛОЇ 7777/1711 1111С11111 в Немає зв'язування до 0,5 мкМІ 2,5Е-06б | 2,6Е-0О3 | 1,0Е-09 | 2,5Е-06 | 2,6Е-О3 | 1,0Е-09 вЗЇ 17717711 1758Е05 | 1,75Е-04 | ЗОЄТО
Послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга для антитіла А показані в БЕО ІЮ МО: 9 і 10, відповідно. Послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга для антитіла А-1 показані в БЕО ІЮ МО: 17 і 18, відповідно. Послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга для антитіла А-2 показані в ЗЕО ІЮ
МО: 25 ії 26, відповідно. Послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга для антитіла В-3, показані в 5ЕБО ІО МО: 41 і 42, відповідно. Послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга для антитіла В, показані на фіг. 4.
Приклад 3. Анти-даддеа антагоністичні антитіла інгібують даддеа1-індукований сигнальний шлях іп міїго.
Для того, щоб визначити, чи можуть анти-Уаддей антитіла діяти як антагоністи Чдаддеа- індукованого Моїсп-сигнального шляху, проводили експерименти за спільним культивуванням, по суті як описано УМи еї аїЇ., Маїшге 464, 1052-1057 (15-го квітня, 2010). Клітини МІН-ЗТЗ, сконструйовані для експресії Ухаддей1 як ліганд Моїсй, культивували разом із клітинами МІН-ЗТЗ, які стабільно експресують МоїсНП, і які були транзієнтно трансфіковані для експресії репортера, який відповідає на Моїсй, з люциферазою світляка, ТР-1 (12Х С51), і репортера, який конститутивно експресується, з люциферазою з Кепійа (рКІ-СМУ, Рготеда). Сильний сигнал
Моїсп-репортера (люциферази світляка) спостерігався у спільній культурі (фіг. 12, індукований 91 позитивний контроль). Експресія репортера знижувалася до фонового рівня, коли інгібітор у- секретази додавали до спільної культури, що доводить МоїЇсп-залежну експресію репортерного конструкта. Дані не показані.
Додавання зростаючої кількості (0,016-50 мкг/мл) анти-дУаддей антитіла А-2 (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 25 і 26, відповідно) або
В-3 (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з 5ЕО ІЮО МО: 41 і 42 відповідно) призводило до дозозалежного інгібування експресії репортера (фіг. 9).
Сигнальний шлях індукували даддеаї! (фіг. 9А, темно-сірі стовпчики) або даддеа2 (фіг. 9В, світло-сірі стовпчики) й інгібування визначали, як описано вище. Контролі включали культури, які не були стимульовані лігандом і не були оброблені антитілом (фіг. 9А і В, необроблені), які не були стимульовані лігандом (фіг. 9А і В, без стимуляції), були оброблені 5-10 мкг/мл ізотипним контрольним антитілом (фіг. 9А і В, ад) були стимульовані лігандом, але не оброблені антитілом (фіг. 9А і В, стим./без АТ), були оброблені 5 мкМ інгібітором гамма- секретази, САРТ, або носієм для ОАРТ, ОМ50О.
Антитіло А-2 інгібувало індуковану Ухаддед1 передачу сигналу, але не індуковану даддеа?2 передачу сигналу, залежно від дози (фіг. 9А). ІСво для А-2 складала між 2 і 10 мкг/мл для інгібування даддеа1, у той час як слабке або взагалі ніяке інгібування даддед2 спостерігалося навіть при найвищій концентрації 50 мкг/мл. Результати показують, що антитіло А-2 являє собою селективний антагоніст даддеа!, тобто антитіло А-2 інгібує даддед1-опосередковану
Зо передачу сигналу, але не даддеа2-опосередковану передачу сигналу. Навпроти, антитіло В-3 дуже інгібувало даддед2-індуковану передачу сигналу при найнижчій випробуваній концентрації, але не інгібувало індукованому Уаддед! передачу сигналу при найвищій дослідженій концентрації, доводячи таким чином, що В-3 є дхаддейа1-селективним антагоністом (фіг. 98).
Приклад 4. Вплив анти-Уаддеа антитіла на вагу тіла.
Як було описано вище, інгібітори гамма-секретази й інші інгібітори Моїсп-рецепторів викликають втрату ваги і метаплазію келихоподібних клітин кишечнику, що небажано для клінічного застосування. Для того, щоб визначити, як описані в даному документі антитіла впливають на вагу тіла і стан кишечнику, мишам два рази на тиждень вводили анти-Чаддесй!1 антитіло А-2 (5-20 трК (мг антитіла на кг ваги тіла миші), послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з БЕО ІЮО МО: 25, і 26, відповідно), анти-Уаддед2 антитіло В-3 (5-20 трК, послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з 5ЕО ІЮ
МО: 41 ї 42, відповідно), антитіла А-2 і В-3 спільно (по 5 трК кожне), антитіло анти-даддеа1/2, яке зв'язується з даддей9! і даддеа2 (С-1; 5-10 трК, послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга показані на фіг. 4), або контрольне ізотипне анти-дюо антитіло (20 трК). Контрольне ізотипне антитіло також використовували, щоб довести загальну концентрацію антитіла в кожному дозуванні до 20 трК. Загальну вагу тіла кожної миші визначали перед першим введенням антитіл і контролювали до 12-го дня дослідження.
Середню зміну ваги тіла показано на фіг. 10 у вигляді відсотка від вихідної ваги тіла. Подвійне інгібування даддейд1!і і даддед2 з використанням анти-)аддей 1/2 антитіла С-1 або комбінації
Уаддеа1-специфічного антитіла А-2 і даддеа2-специфічного антитіла В-3 призводило до швидкої і значної втрати ваги (фіг. 10А). До 4-го дня деякі миші, які одержували анти-аддей1/2 антитіло
С-1, втратили більше 5 95 від своєї ваги тіла, і втрата ваги прогресувала до майже 8-10 95 ваги тіла на 7-й день (фіг. 10А). Миші, які одержували А-2 і В-3, також швидко втрачали вагу, у деяких випадках до 1 7 9о на 11-й день (фіг. 10А). На відміну від цього, жодне з Удаддеа1- специфічних або даддед2-специфічних антитіл поодинці не викликало втрату ваги за час дослідження при кожному з дозувань 5 або 20 іпркК (фіг. 10А). Дія комбінації анти-Уаддеай1 і анти-
У9аддед2 антитіл призвела до зниження споживання їжі (фіг. 108), що корелювало зі зниженням ваги тіла, яка спостерігається, (фіг. 10А) і дозволило припустити, що зниження споживання їжі цілком або частково може пояснити відповідне зниження ваги тіла.
Приклад 5. Анти-дУаддейд1 антагоністичні антитіла інгібують ріст клітин раку легень людини іп мімо.
Бестимусним голим мишам від Нагіап підшкірно пересаджували клітини Саїи-6 лінії недрібноклітинного раку легень людини. Після того, як об'єм пухлини досягав приблизно 200 кубічних мм, мишам вводили внутрішньоочеревинно (ІР) два рази на тиждень (у дні 0, 4, 7, 11, 14 ї 18) по 20 трКк анти-д90 контрольного ізотипного антитіла (п-10) або анти-Уаддед1 антитіла
А-2 (п-10; послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга ЗЕО ІЮО МО: 25 і 26, відповідно). Об'єм пухлини в кожної миші вимірювали штангенциркулем протягом ще 19 днів. Загальну вагу тіла кожної миші контролювали протягом дослідження.
Пухлини в мишей, які одержували анти-Уаддед1 антитіло, значно зменшувалися в об'ємі щодо об'єму пухлин у контрольній групі (фіг. 11А). Ефект анти-Удаддед1 антитіла може бути виявлений уже на 7-й день після введення антитіла (фіг. 11А). На 18-й день середній об'єм пухлини в мишей, які одержували анти-Уаддей1 антитіло, досягав приблизно 500 мм", тоді як середній об'єм пухлини в контрольних тварин досягав приблизно 750 мм на 18-й день. Не спостерігалося ніяких істотних змін ваги тіла між лікувальною і контрольною групою (фіг. 118).
Приклад 6. Анти-Заддеа1 і анти-)аддеда2 антитіла інгібують ріст клітин раку молочної залози людини іп мімо.
Мишам СВ-17 5СІО.б9 пересаджували в жирову подушку молочної залози клітини МОА-МО- 468, лінії базального раку молочної залози людини. Після того, як об'єм пухлини досягав приблизно 200 мм3 мишам вводили ІР по 30 трК анти-дО0 контрольного ізотипного антитіла (ізотипу 901 людини), контрольного ізотипного антитіла до антигену з амброзії (мишачого ізотипу ІдсС2а), анти-УЧаддед! антитіла А-2 (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з 5ЕО ІО МО: 25 і 26, відповідно) у каркасі ЇД9С1 людини, анти-
Уаддейд1 антитіла А-2 у каркасі мишачого Ідсг2а або анти-даддед2 антитіла В-3 (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з 5ЕО ІЮО МО: 41 і 42, відповідно) у каркасі Ї(ДС1 людини у дні 0, 4, 7, 12, 15, 18, 22, 25, 29, 32, 36, 43, 50 і 57. Об'єм пухлини (вісь у) вимірювали штангенциркулем протягом 60 днів після першої ін'єкції. Об'єм пухлини для кожної групи (п-9 на групу) відкладали на графіку, використовуючи модель лінійних змішаних ефектів (фіг. 12А). Об'єми пухлини для кожної миші в кожній групі зазначені на фіг. 128.
Зо Приклад 7: анти-Уаддейд1 антитіла розщеплюються у важкому ланцюзі
Антитіла А (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з БЕО
ІО МО: 9 і 10, відповідно), А-1 (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з 5ЗЕО ІЮО МО: 17 і 18, відповідно) і А-2 (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 25 і 26, відповідно) були проаналізовані за допомогою електрофорезу в ДСН-ПААГ і спектрометрії-мас-спектрометрії на цілісність важких і легких ланцюгів. Для аналізу електрофорезом у ДСН-ПААГ кожен зразок антитіл змішували в рівних об'ємах з 2х Тріс-гліциновим 5ЗЮО5-буфером для зразків (Момех, кат. Мо І/С2676) під час відсутності й у присутності 10 мм ОТТ. Зразки нагрівали при 95 "С протягом 5 хвилин, і 2 мкг кожного зразка наносили на 1 мм гель Момех 4-20 95 505-РАСЕ (Момех, кат. Мо ЕСб6О025). На гель також наносили по 10 мкл стандарів молекулярних мас, Магк 12 (Іпмігодеп, кат. Мо 100006637). Електрофорез проводили в їх Тріс-гліциновому ДСН-буфері для фореза (Іпийгодеп, кат. Мо І! Сб2675-5) при постійній напрузі 2508, до досягнення трекінговим барвником кінця гелю. Потім гель забарвлювали барвником Кумасі (Ехредеоп ІпзіапіВіне, кат. Мо ІЗВІЇ).
Для мас-спектрометричного аналізу, кожне антитіло розводили до кінцевої концентрації 1 мг/мл у РВ5. Значення Рн антитіла підвищували до 8,0, додаючи 1:10 об'єму 1,0М Ттгі5-буфера,
Рн 8,0. Для відновлення антитіла в розчин додавали ОТТ до кінцевої концентрації 10 мм. Потім зразок нагрівали при температурі 37 "С протягом 15 хвилин. Потім зразки наносили на колонку
РІАР-5 1000 ангстрем, 8 мкм, 2,1х50 мм (Аосдіепі, РІ 1912-1802), нагріту до 80 "С, з використанням ВЕРХ-системи Адіепі 1200 з наступною іонізацією електророзпиленням у системі ТОЕ І С/М5, Адіепі 6210.
Результати цих аналізів показані на фіг. 13. Електрофорез у ДСН-ПААГ (фіг. 13А) показав, що частина важкого ланцюга (НС) розщеплюється в кожному з антитіл. Смуги, які відповідають інтактному НС і легкому ланцюгу (І.С), а також карбокси-кінцевим і амінокінцевим розщепленим фрагментам НС, позначені праворуч від гелю. Репрезентативний мас-спектрометричний аналіз антитіла А-1 показаний на фіг. 13В. Цей аналіз показав, що сайт розщеплення НС знаходиться між амінокислотами 100 ї 5101 (послідовна нумерація, яка відповідає 596 і 597 нумерації за
Кабатом) у СОМКЗ, як схематично відзначено в амінокислотній послідовності НС на фіг. 13С стрілкою, яка вказує місце розщеплення. Аналогічні аналізи показали, що розщеплення НС відбувається у всіх досліджених препаратах цих антитіл (включаючи подальшу експресію в двох різних типах клітин, СНО і 293), і що розщеплення відбувається незалежно від типу Ес-області антитіла (людського ЇДО1 або мишачого Ідсга).
Електрофорез анти-Ууаддейа! у ДСН-ПААГ проводили власне кажучи, як описано вище.
Замість забарвлення Кумасі антитіла переносили на РМОЕ-мембрану (Іпмігодеп, кат. Мо
ІГС2002) з використанням ХсСеїї Віої Моадшіе (Іпмігодеп, кат. Ме ЕІ90О51) при постійному потоці 0,35 А. Мембрану забарвлювали Кумасі блакитним Б-250. Зразки на мембрані піддавали М- кінцевому аналізу послідовності з використанням Арріїей Віозузіет5 Ргосізе Зедцепсег 494 відповідно до принципу секвенування, описаному в МіаїІ, 1973, Мей. Еплутої. 27: 942-1010.
Результати секвенування наведені на фіг. 14. Цей спосіб підтвердив, що сайт розщеплення відповідав прогнозованому за результатами мас-спектрометрії, який знаходиться між амінокислотами (100 і 5101 (послідовна нумерація, яка відповідає (396 і 597 у нумерації за
Кабатом) у послідовності НС.
Розщеплення важкого ланцюга анти-д)аддєд1 антитіл А, А-1 їі А-2 було несподіваним. Аналіз амінокислотної послідовності, пов'язаної з ділянкою розщеплення, не виявив ніяких відомих сайтів розщеплення протеазами. Механізм розщеплення залишається нез'ясованим і не очевидний з послідовностей антитіл.
Приклад 8. Мутація 5101 у важкому ланцюзі зменшує розщеплення важкого ланцюга анти-
Удаддеай1 антитіла скільки спостережуване розщеплення, анти-Уаддейд11 антитіл було несподіваним, а механізм неясним, не було відомо, чи можуть зміни в послідовності антитіла запобігти розщепленню, зберігаючи при цьому афінність і ефективність антитіла. Крім того, не було відомо, яку позиціюйії) у послідовності антитіла необхідно змінити, щоб запобігти розщепленню. Для того, щоб визначити, чи можна запобігти розщепленню антитіла шляхом зміни послідовності важкого ланцюга, були здійснені ряд амінокислотних замін у позиції 5101 важкого ланцюга (послідовна нумерація послідовності варіабельної області важкого ланцюга ЗЕО ІЮ МО: 17, яка відповідає 597 у нумерації за Кабатом). Антитіла були проекспресовані в клітинах ссавців і очищені відповідно до стандартних процедур. Розщеплення аналізували електрофорезом у ДСН-ПААГ, як описано в прикладі 7. Результати показані на фіг. 15. Амінокислотні заміни в позиції 5101 значно знижували або усували розщеплення НС, хоча деяке розщеплення виявлялося при
Зо мутації 5101Н (фіг. 15, доріжка 5). Ці результати були підтверджені за допомогою мас- спектрометрії, проведеної як описано в прикладі 7.
Для того, щоб визначити вплив змін на зв'язування з очищеним фрагментом позаклітинного домену білка дад1, афінність зв'язування мутантних антитіл А-1 була виміряна з використанням
ВІАсоге. У таблиці З наведені короткі відомості про фрагментацію й афінність зв'язування з
Уаддей1 для кожного з мутантних антитіл А-1.
Таблиця З
Фрагментація й афінність зв'язування з Удаддеа1 мутантних антитіл А-1 01 Наявність фрагментації НС Зв'язування з дад1 (ВіАсоге)
Варіанти мАТ Мас-спектр ДСН-ПААГ Ка (1/Мес) | Ка (1/с) ів)
А-1
А-1
А-1
А-1
А-1
А-1
А-1
А-1 етилен вет рєєо ссштлоо0, ето Кк ' ' '
А-1 ве 111144 вех вен тео
А-1 бю зевноє тео ветеов
А-1 сбтювюю 00010000 ово вався веявов
А-1 сбтювют 00000000 онов веовоя ввеов
А-1 мМ с СТО о
А-1 стювюм 00001000 ровно |ввовоя ввявов
Як показано в таблиці 3, зміна амінокислотного залишку в позиції 101 знижує розщеплення до невизначеного рівня, за винятком 5101Н. Крім того, оскільки механізм розщеплення був невідомий, також була досліджена зміна в позиції 100, З100А. Мутант С100А усе ще піддавався розщепленню. Див. таблицю 3. Дивно, але при тому, що ці мутації були проведені в НМЕ-НЗ, мутантні за 5101 антитіла зберігали здатність зв'язувати даддеа1.
Приклад 9: вплив температури їі циклів заморожування-відтавання на розщеплення важкого ланцюга анти-Уаддейд1 антитіла
Для того, щоб оцінити, чи підсилюється розщеплення анти-)аддеа!1 антитіл при інкубації при підвищеній температурі, різні незалежні препарати анти-Уаддей1 антитіл А-1 (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 17 і 18, відповідно) і А- 2 (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з 5ЕО ІЮО МО: 25 і 26, відповідно), а також контрольне ізотипне антитіло (не анти-Заддеа!1), інкубували протягом 10 хв при 70 або 95 "С. Ступінь розщеплення оцінювали за допомогою стандартного електрофорезу в ДСН-ПААГ і забарвлення білка. Результати показані на фіг. 16. Кожний із препаратів анти-Уаддед1 антитіла розщеплювався при 70 "С, тоді як контрольне антитіло не розщеплювалося (фіг. 16А). Як показано в таблиці (фіг. 168), ступінь розщеплення анти-
Уаддеа!1 антитіл вірогідно або відтворено не змінювалася при інкубації при 95 "С відносно 70 "С.
Для того, щоб оцінити, чи призводять до розщеплення цикли заморожування-відтавання, препарати анти-Уаддед1 антитіл, антитіла А-1 (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 17 і 18, відповідно) піддавали безлічі циклів заморожування при -80 "С з наступним відтаванням. 2 мкг кожного зразка потім аналізували електрофорезом у ДСН-ПААГ при умовах, які не відновлюються (-0ОТТ) або відновлюються (ОТ), (як зазначено) і забарвленням білка. Пофарбований гель візуалізували за допомогою інструмента Віогай СеІрос Еазу Ітадег, і денситометричний аналіз проводили з використанням програмного забезпечення Віогай Ітаде І ар. Результати цього експерименту показані на фіг. 17. Е/1 стосується вихідного зразка, а числа, які збільшуються, вказують на кількість додаткових раундів циклів заморожування-відтавання. Для кожного циклу антитіло А-1 заморожували при -80 "С, а потім розморожували при кімнатній температурі. Аліквоту відбирали
Зо для електрофорезу в ДСН-ПААГ. Заморожування/відтавання повторювали ще два рази для в цілому З циклів заморожування/відтавання, причому аліквоти відбиралися після кожної стадії відтавання. У таблиці (фіг. 178) зазначений відсоток розщеплення в кожних умовах.
Експеримент показав, що додаткові раунди заморожування-відтавання впливали на ступінь розщеплення.
Приклад 10: активність А-1 і А-1 (51017), яка блокує Уаддеай1, іп мйго
Іп міго аналіз дад1 індукованої активності Моїсп-репортера шляхом спільного культивування проводили для вимірювання активності А-1, яка блокує дад1, (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 17 ії 18, відповідно) і А-1 (51017) (послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з ЗЕО ІЮО МО: 33 і 34, відповідно). Клітини Ш87МО, які експресують високий рівень Моїсп2, спільно трансфікували репортером, який відповідає на Моїсй, з люциферазою світляка (ЕР), ТР-1 (12Х С5І), і репортером, який конститутивно експресується, з люциферазою з Кепійа (рЕІГ-СМУ, Рготеда) для контролю ефективності трансфекції. Див. УМи еї аї.,, 2010, Маїшге 464: 1052-1057. Анти-
Уаддейд1 антитіла А-1 або А-1 (51017Т), контрольне ізотипне антитіло, 5 мкМ САРТ (СаіІріоспет) або контрольний носій ОМ5О додавали до клітин, які експресують ліганд, (клітини МІН-ЗТЗ, стабільно трансфіковані Уаді людини або контролем без ліганда) через б годин після трансфекції. Люциферазну активність вимірювали через 20 годин спільного культивування (Рготеда, набір Юцаї Сію І исітегазе). Як правило, кожну умову аналізували в чотирьох повторах, і значення виражали у вигляді відносних люциферазних одиниць (сигнал від люциферази світляка, поділений на сигнал від люциферази з КепіїЇа) і наносили на графік як відсоток від
Уад1-індукованої активності щодо контролю з антитілами проти антигену з амброзії.
Результати цього експерименту показані на фіг. 18. Світіння люциферази світляка і з Кепійа (фіг. 188 ї С, відповідно) вимірювали відповідно до дози стандартними способами, і співвідношення світіння люциферази світляка і люциферази з Кепіа наносили на графік у вигляді нормалізованого вимірювання ад1-індукованої активності Моїсй (фіг. 18А). Результати показують, що обидва антитіла, А-1 і А-1 (51017), інгібують дад1-індукований Моїсп-сигнальний шлях дозозалежним чином. Див. фіг. 18А і В. Таким чином, А-1 (51017) зберігає анти-Уаддеа1 активність батьківського антитіла, яке блокує, А-1.
Приклад 11: активність А-1 і А-1 (51017), яка блокує даддеа 1, іп мімо
Для оцінки активності анти-Заддейд1 антитіл, яка блокує Удаддеа, іп мімо, присутність клітин
Клара і війчастих клітин у бронхіолярному епітелії легих мишей вимірювали після введення мишам контрольних або анти-)аддей1 антитіл. Восьмитижневим самицям мишей ВАГ В/с дикого типу (по три миші в кожній групі) вводили антитіла в день 0 (нульовий) у такий спосіб (усі групи включали анти-Уаддед2 антитіло (В-3) для сенсибілізації бронхіолярного епітелію, щоб чітко виявити виміряні ефекти анти-Заддей1 активності): 1. Контроль 1Х - контроль ізотипу (15 мг антитіла на кг ваги тіла миші) ї анти-Уад2 В-3 (15 мг/кг; послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 41 і 42 відповідно) 2. А-1 1Х - анти-дад1 А-1 (15 мг/кг, послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з БЕО ІЮ МО: 17 і 18, відповідно) ж анти-Уад2 В-3 (15 мг/кг) 3. А-1 5Х - анти-Уаді А-1 (7,5 мг/кг) т анти-дад2 В-3 (15 мг/кг) 4. А-1 25Х - анти-дад1 А-1 (3,75 мг/кг) т анти-дад2 В-3 (15мг/кг) 5. А-1-5101Т 2Х - анти-Уаді А-1(5101Т) (30 мг/кг; послідовності варіабельних областей важкого ланцюга і легкого ланцюга з БЕО ІЮ МО: 33 і 34, відповідно) т анти-Чад2 В-3 (15 мг/кг) 6. А-1-51011 1Х - анти-Уада1 А-1(5101Т) (15мг/кг) т анти-Уад2 В-3 (15 мг/кг)
Зо 7. А-1-51011 5Х - анти-даді А-1(51017) (7,5 мг/кг) ї- анти-Уад2 В-3 (15мг/кг) 8. А-1-5101Т 25Х - анти-Уаді А-1(51017) (3,75 мг/кг) т анти-Уад2 В-3 (15мг/кг).
На 5-й день легені збирали, накачували, фіксували й забарвлювали для імунофлуоресценції (ІБР) у такий спосіб. Легені накачували з використанням 4 90-го РЕА у РВ5. Усю легеню переносили в 10 95-й нейтральний забуференізований формалін (МВЕ) і фіксували протягом ночі при кімнатній температурі. Фіксовані легені переносили в 70 95-й етанол не менше ніж на 24 години. Легені занурювали у парафін і робили зрізи по 5 мкм. Імунофлуоресцентне забарвлення війчастих клітин і клітин Клара проводили в такий спосіб. Слайди депарафінізували, і антигени виявляли шляхом кип'ятіння слайдів у цитратному буфері (ОаКко, кат. Мо 51700) у скороварці протягом 15 хвилин при температурі 125 "С. Слайди швидко промивали в 2Х РВБ5Б, і потім пермеабілізували 0,2 95-м Тпйоп-Х100 у РВ5 протягом 45 або хвилин З рази по 15 хвилин. Зрізи блокували в 5 95 ЕВ5/2 95 ВБА протягом 1 години. Зрізи потім інкубували з козячими антитілами проти СС10 (1:1000) і мишачим антитілом проти ацетильованого альфа-тубуліну (1:200) у блокувальному буфері протягом 2-3 годин або протягом ночі. Зрізи промивали РВЗ З рази по 15 хвилин. Зрізи інкубували з вторинними антитілами протягом 1 год (вторинні антитіла від
Іпмігодеп АїІеха РіІшог розводили у співвідношенні 1:1000), а потім двічі промивали РВ5 по 15 хвилин. Ядра забарвлювали БАРІ (0,5 мкг/мл) протягом 15 хвилин. Слайди потім промивали
РВЗ5 двічі по 15 хвилин і монтували під покривним склом.
Результати цього експерименту показані на фіг. 19. Блокування сигнальних шляхів Уаддеа і
Уаддед2 призводить до збільшення числа війчастих клітин (на який вказує імунофлуоресцентне виявлення альфа-тубуліну в червоному каналі) і зниження числа клітин Клара (на який вказує імунофлуоресцентне виявлення СС10 у зеленому каналі) у мишачому бронхіолярному епітелії.
Одночасне блокування даддеа!1 і даддед2 призводить до майже повної втрати клітин Клара, так що в результаті епітелій складається в основному з війчастих клітин (пофарбованих червоним кольором, див. «А-1, 1Х» ії «А-1-5101Т, 2Х» на фіг. 19). Обидва антитіла, А-1 ї АТ (51017), інгібували даддед1 індукований сигнальний шлях Моїсй іп мімо залежно від дози. Таким чином,
А-1 (51017) зберігає анти-Уаддед1 блокувальну активність батьківського антитіла А-1 іп мімо.
Приклад 12: анти-Уаддед1 антитіла А-1 і А-1 (5101) інгібують ріст печінкових ракових пухлин іп мімо
Ракову пухлину печінки людини, ГІМЖ78 (Сепепадезідп, Китай), вирощували у вигляді бо підшкірного ксенотрансплантата в лінії ВАЇ В-з безтимусних імунодефіцитних мишей. Коли пухлини виростали до розміру 150-200 мм3, мишей розділяли на сім груп лікування по десять мишей у кожній групі, яким вводили один раз у тиждень (за винятком групи 5, де введення здійснювали один раз у три тижні) у зазначеній дозі (мг антитіла на кг ваги тіла миші) зазначені антитіла (антитіло А-1 (51017), яке має послідовності важкого ланцюга і легкого ланцюга з БЕО
ІО МО: 51 і 53, відповідно, «А-1-ОАМО (безефекторне)», яке має послідовності важкого і легкого ланцюга з БЕО ІО МО: 52 і 53, відповідно, і антитіло А-1, яке має послідовності важкого ланцюга і легкого ланцюга з БЕО ІЮ МО: 81 і 53, відповідно). Див. фіг. 208. Об'єм пухлин оцінювали за результатами вимірювань штангенциркулем (довжинахширинахвисота)/г).
На фіг. 20А показаний І МЕ-графік (лінійних змішаних ефектів) об'єму пухлини в кожній групі лікування по ходу дослідження. На фіг. 208 об'єднана статистика росту, характеристики груп і схеми лікування. Анти-даддейд1 антитіла А-1 ї АТ (5101Т) значно інгібували ріст раку печінки іп мімо; множинні РК (часткові відповіді) спостерігалися для кожного з анти-Уаддей1 антитіл.
Аналогічним чином, у жодній із груп, які одержували анти-Уаддей1 антитіла, не спостерігалося подвоєння об'єму пухлини протягом 44 днів дослідження, у той час як у контрольної групи час до подвоєння пухлини (ТТР 2Х) склав 18,5 днів. Див. фіг. 208. Відсоток інгібування росту пухлини ( 956 ТОЇ, де «нижнє» і «верхнє» значення стосуються мінімального і максимального вимірювань 95 ТОЇ, відповідно, для окремих тварин у кожній групі) у вигляді функції площі під кривою в день (АОсС/день), порівняно з контрольною групою, залежав від дози анти-Уаддеа1 А- 1-5101Т відповідно до інгібування росту пухлини, який відбиває ступінь інгібування даддеа!1.
Аналогічним чином, інгібування росту пухлини було схожим при використанні А-1 або А-1 (51017). Можна порівняти, наприклад, групи З і 7, фіг. 208. Інгібування росту пухлини не залежало від ефекторної функції антитіла, тому що М2970с-мутантна форма А-1 за важким ланцюгом, у якого відсутні ефекторні функції, придушувала ріст пухлини настільки ж ефективно, як А-1. Можна порівняти групи 6 і 7, фіг. 208.
На фіг. 21А показаний І МЕ-графік (лінійних змішаних ефектів) ваги тіла мишей у динаміку для мишей, показаних на фіг. 20. На фіг. 20В показані різні параметри ваги тіла для груп лікування, включаючи 95 зміну ваги тіла в останній день дослідження ( 95 ВТ в останній день), максимальна зміна (у 95) ваги тіла (макс. 95 ВТ), день, коли відбулася максимальна зміна ваги тіла (день макс. 956 ВТ) ї (АОС/день (нижнє, верхнє значення)). Графіки ваги тіла для груп
Зо лікування, включаючи контрольну групу, були статистично нерозрізнені, що вказує на те, що лікування анти-)аддейд1 антитілами добре переносилося.
Приклад 13: блокування Уаддей!1 інгібує метаплазію келихоподібних клітин іп мімо
Після 35-денного періоду сенсибілізації овальбуміном, який вводиться внутрішньоочеревинно, мишам аерозольно вводили овальбумін протягом 7 днів, після чого їх забивали й аналізували число келихоподібних клітин. Миші одержували контрольне антитіло, анти-дУаддей1 антитіло А-2 (з Ес з мишачого Ідсга), анти-Уаддед2 антитіло В-3 (з Ес з мишачого
Ідс2а) або комбінацію анти-Уаддейд1 і анти-Уаддед2 антитіл через 24 години і 96 годин після першого аерозольного введення алергену.
На фіг. 23А показане забарвлення перйодною кислотою - реактивом Шиффа легеневих дихальних шляхів у мишей, які одержували анти-Заддейд1, анти-Уаддеа2, комбінацію анти-
Уаддед1і і анти-Уаддед2 або контрольне антитіло. На фіг. 238 показане визначення числа келихоподібних клітин у дихальних шляхах груп, які одержували різне лікування. Велика кількість келихоподібних клітин спостерігається в контрольній і анти-Уаддед2 групах. Декілька келихоподібних клітин були присутні в групі анти-Уаддеай1 і келихоподібні клітини практично не детектувались у групі анти-дУаддейд1 ж анти-Уаддед2. На фіг. 23С наведений показник запалення, оцінений шляхом НаЕ-забарвлення (гематоксиліном/еозином). Обробка даддед-1 або - 2 антитілами, які блокують, не впливає на запалення в легенях.
Уаддеа1-індукований Моїсп-сигнальний шлях зміщає диференціювання клітин у дихальних шляхах з диференціювання у війчасті клітини на диференціювання в секреторні клітини (включаючи келихоподібні клітини). Сигнальний шлях даддед! має важливе значення для підтримки секреторного диференціювання клітин, й інгібування даддеа1-сигнального шляху попереджає метаплазію келихоподібних клітин. Автори даного винаходу також показали, що перетворення клітин Клара у війчасті є прямим і не пов'язане з розподілом клітин (дані не показані). З клітин Клара в легенях утворяться келихоподібні клітини. Це трансдиференціювання одного типу клітин в іншій зустрічається в легенях дорослих людей і відрізняється від вибору шляху клітинного диференціювання, яке включає розподіл клітин- попередників, наприклад, після пошкодження або в процесі розвитку. Метаплазія келихоподібних клітин або надлишок слизу є ознакою ряду захворювань дихальних шляхів, таких як астма, кістозний фіброз, ХОХЛ і стравохід Барретта. Ці результати інгібування даддеа- 60 сигнального шляху забезпечують основу для застосування в терапії, включаючи використання інгібіторів Ухаддейд1 або даддед2 для попередження або інверсії метаплазії келихоподібних клітин і для лікування станів, які характеризуються надлишком слизу, як при захворюваннях дихальних шляхів (наприклад, при астмі, ХОХЛ, кістозному фіброзі) і стравоході Барретта.
Приклад 14: специфічність зв'язування анти-аддеай1 і анти-Уаддед2 антитіл
Антитіла А-2 (фіг. 24, ліва панель) і С-1 (фіг. 24, права панель) були протестовані на зв'язування з рекомбінантним очищеним Моїсп-лігандами - даддеа!1 людини (пОдад-1), ЧУаддеаг2 людини (пПдад-2), мишачий даддеа2 (туад-2), Оена-їїке 1 людини (ПО І1), мишачий Оека-їіїке 1 (п0Ї 11) і Оека-йКе 4 людини (п01І14), з використанням стандартного твердофазного імуноферментного аналізу (ЕГІБА). 1 мкг/мл Моїсп-ліганда (як зазначено) у РВ5, рН 7,4, наносили на планшети для ЕГІЗА (Мипс Махізогр) при 40 "С протягом ночі. Планшети блокували казеїном у РВЗ (Ріегсе) протягом однієї години при кімнатній температурі. Послідовні
З-кратні розведення ІдсС-антитіл (як зазначено) у буфері РВЗТ (РВТ-буфер (РВ5ш0,05 95 (об./06.) Тжшееп-20) з 0,5 95 (мас./об.) В5А) додавали в планшети й інкубували протягом однієї години при кімнатній температурі. Потім планшети промивали РВ5Т, і зв'язані антитіла детектували за допомогою кон'югованих з пероксидазою козячих ІдсС-антитіл, специфічних до
Бар людини (Зідта). Використовували ТМВ-субстрат (3,3',5,5'-тетраметилбензидін), і поглинання при 630 НМ визначали з використанням стандартного планшетного спектрофотометра для ЕГІ5А. Поглинання наносили на графік щодо концентрації дв, використовуючи Каїеіїдастари (Зупегду Зоймаге). На фіг. 24 показані результати, де Авзо зу віссю у представляє ступінь зв'язування.
Антитіло А-2 зв'язувало людський і мишачий даддеа/1, але не зв'язувало людський даддед2, мишачий даддед2, людський 01, мишачий 01, людський 01 4 або мишачий ОП 4 (фіг. 24, ліва панель). Антитіло С-1 зв'язувало людський і мишачий даддей1, людський і мишачий 0 1, людський і мишачий даддед2, але не зв'язувало людський або мишачий 01 1 4 (фіг. 24, права панель).
Афінності зв'язування і константи швидкості для антитіл були виміряні за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (ЗРК) з використанням інструмента ВіІАсогети-Т200.
Антитіла ЇДс1 людини були захоплені на сенсорному чіпі СМ5, покритим мишачими антитілами проти людських ІДС, до досягнення приблизно 150 одиниць відповіді (КЮ). Для вимірювання
Зо кінетики або афінності чотириразові серійні розведення людського даддеа!, мишачого даддеа, людського ЧУаддей2, мишачого ЧУдаддей2, людського 011, мишачого 0111, людського ОГІ 4, мишачого 0 Г 4 і щурячого даддеа1 впорскували в буфері НВ5З-Т (0,01 М НЕРЕЗ, рН 7,4, 0,15 М масі, 0,05 95 об./о0б. Бипасіапі Р2О, СЕ Неаксаге) при 25 "С зі швидкістю потоку 30 мл/хв.
Фрагментами ліганда були фрагменти Ю5І-ЕСІЕ1-4, за винятком щурячого даддеа!1, який був придбаний в КУ Бузіет5. Для кінетичного аналізу, швидкості асоціації (Кол) і швидкості дисоціації (Кож розраховували з використанням ленгмюрівської моделі простого зв'язування один до одного (ВіАсоге Т200 ЕмаїЇцайоп бБоїтмаге мегвіоп 2.0). Рівноважну константу дисоціації (Ка) розраховували як співвідношення Кон/Коп. Для аналізу афінності Ка розраховували з використанням моделі стаціонарної афінності (ВіІАсоге Т200 ЕмаІнайоп бЗоймаге мегзіоп 2.0).
У таблиці З наведені константи зв'язування для антитіл А-2, В-3, С-1, А-1 і А-15101Т, які зв'язуються з очищеними людським Заддей1, мишачим Уаддей1, людським даддед2, мишачим
Уаддед2, людським 0/1, мишачим 0/1, людським 014, мишачим 0114 і/або щурячим
Удаддей1. НВ - не виявлено, НТ - не тестовано. Антитіла А-2, А-1 і А-1-51017Т.М5 (антитіло А-1- 25101 з мутацією М29705) специфічно зв'язується з даддейд1 людини і миші з високою афінністю.
Антитіла А-1 ії А-1-5101Т.М0 також зв'язуються з щурячим ЧУаддей! з високою афінністю.
Антитіло В-3 специфічно зв'язується з людським і мишачим УЧадде4й2 з високою афінністю.
Антитіло С-1 специфічно зв'язується з даддеай!1 і Хдаддед2 людини і миші. Антитіла В-3 ії С-1, але не антитіло А-2, показали деяке зв'язування з людським і мишачим 011. Жодне з протестованих антитіл не зв'язувалося з людським або мишачим Оі І 4.
Таблиця З
Константи зв'язування для анти-Заддеа антитіл нших шили сх пиши о олоресю тю Гайко ков. петлею юю
Продовження Таблиці З
Константи зв'язування для анти-Уаддеа антитіл
ГАЇ АОТТМаССССССсС 1111110 Кеаи(/Меє) | Кок(ис) | Ке(М) | Коа(1/Месє) | Кои(/с) | Ка(М)
Приклад 15: фармакокінетика анти-Уаддеа1 антитіла А-1-51017Т
Фармакокінетичний профіль анти-Уаддеді антитіла А-1-51011 після однократної внутрішньовенної ін'єкції в дозуванні 1, 10 ї 100 мг/кг оцінювали в самиць безтимусних мишей
Ваї!Б/с (Снапез Вімег І абогайтієв, НоїІйвієї, СА). Миші мали вік 5-8 тижнів і важили близько 17,3- 21,8 г. Збирали зразки сироватки, і концентрації антитіл аналізували за допомогою твердофазного імуноферментного аналізу (ЕГІЗА) на специфічність зв'язування. Планшети для
ІФА для оцінки специфічності зв'язування покривали позаклітинним доменом ЗАс1-гістидин, і виявлення проводили з використанням козячих антитіл проти Ес людини. Чутливість аналізу була нижче стандартного значення 6,25 нг/мл. Фармакокінетичні параметри оцінювали з використанням некомпартментної моделі з використанням Ріоепіхтм УУіпМопіїптФ (м.6.3;
РПпагзідні Согрогайоп; Мошипіаійп Міем, СА). Весь фармакокінетичний аналіз був заснований на вихідному пулі даних від індивідуальних тварин.
Більше, ніж пропорційне дозування, збільшення впливу спостерігалося після внутрішньовенного введення анти-)аддей1 антитіла А-1-51011 у діапазоні дозувань від 1 до 100 мг/кг, що вказує на механізм мішень-опосередкованого кліренсу антитіла (фіг. 25 і таблиця 4).
Величини кліренсу знаходяться в діапазоні від приблизно 13 до 75 мл/день/кг.
Таблиця 4
Фармакокінетичні властивості анти-Уаддей1 антитіла А-1-51017Т
Хоча даний винахід був детально описаний як ілюстрація і приклад з метою ясності розуміння, опис і приклади не повинні бути витлумачені як обмежуючий обсяг даного винаходу.
Розкриття всієї патентної і наукової літератури, яка цитується, у даному документі, прямо включене у всій своїй повноті шляхом посилання.
Таблиця 1 Уад1і людини МАБЗРАТНОН5З САРІ БІГ АГ ІСАЇ ВАКМСО АЗООБКЕЇ Б.
ЗМОоМУМаєГОо мамМмоСасАВМ РЕСАКСТАОЕ СОТУМЕКМСІ К
ЕМО5АУМТАСО РОЗЕРаЗИаЗТР МІССМТЕМІК АЗС, МОВМНІ
МІГРЕБЕАМ/РА УТ МЕАМО 554ОТМОРОБ ПЕКАЗНІСМ
ІМРЗВОУМОТІ. КОМТОЯаМАНЕЕ МОІВУТорОМ УУаБасмМкЕс
АРАООЕРИНУ АСРОМОаМКТО МЕСУМУМОРЕСМ ВАІСНОСС5Р кназскіРИр сСАСОМамоа уСОокСІРНРа сСМнаТаі(смМмЕРМ/
ОСІ СЕТМУУСсО ОЇ СОКОІ МС аноРСІ Мас то5МТаРОКУ
ОС5СРЕСУБОа РМСОЕІАЕНАС І 5ОРСНМНИа5 СКЕТОІ СБЕС
ЕС5РОМТаРТ СЗТМІОЮСЗР ММСоЗНООЗТСО БІ УМавгкКоМУс
РРОМУТОаКТтТСО ГОАМЕСЕАКР СУМАКЗСКМІ ІАЗУМСОСІ Р
СУУМОСОМСОІМ ІМОСІ СОСОМ ОАБСВОІ Ма МАСІСРРИМА
СОНСЕВОІОЕ САБМРСІ Масї НСОМЕІЇМАРО СІ СРєРТОЕБИМ
ГСсОГОІОМСЕ РМРСОМИалОС УМАВАЗОМЕСК СРЕОМЕСКМС
ЗНІ КОНСЕАТТ РСЕМІОЗСТМ АМАЗМОТРЕС УВМІЗЗМУССО
РНОКСКЗОВа аСКЕТСОоСМКа ЕТатуУСНЕМІ МОСЕЗМРСВМ аа7атсІіраумМме уксСІСБОСМЕ САМСЕТМІМО С5БОМРОНЮМИаС тТовОгУМОогМ СоОСкКМахмкак тонЗНОЗОСО ЕАТСОММОСТО
УреЕарАЕКСМ СРИаСУєаТТОо МІААВМ5ЗЗСОЇ Р МРСНМОС ТОМУ
ММаєЕБЗЕТСМО КЕСМ/ЕСРІСА ОМТМОСЗРНР СУМЗИТСУра
РОММУМАСЕСАР СЕАСРОСВІМ ІМЕСО5ОРОСА ЕСАТОСМОБЇМ
СУАСМСРРИЕН БСАКСОЕМУЗа ВАРСІТМа5МІ РОСАКМОВБОС
МТСОСІ МОВІ АСЗКУМСОИРА РОСІЇ НКаН5ЗЕ СРБЗИаюОБСІРІ
ГОБОСЕМНРО ТаМОаєЕСАБ5З ГОРУКТКСТ5 ОБУМООМСАМ
ТЕТЕМКЕММ 5РЇ ТТЕНІС 5ЕЇ МІ МІК МУЗАЄЕМ5ІМІ АСЕРБРБЗАММ
ЕІНМАІЗАЕВ ІВНОРИМРІКЕ ІТОКІОІ М5 КАРОаМЗИПТА АМАЕМАМОВА
Р ЕКЖМАТОРІМ РІЇ ЗМІ ТМА МСС МТАЕМ УСІ ВКАВКРОАа
ЗНТІТНЗАБЕОМ ТТМІМУВЕОІ М ОІКМРІЕКНОИ АМТУРІКОМЕ
МКМЗКМЗКІВ ТНМЗЕМЕЕЄВО МОКНООКАВЕ АКОРАМТІ МО
ВЕЕКРРМатТР ТКНРММТМКО ОМАОГЕЗАОБЗ І МАМЕМІМ 2 Уад1і миші МАЗРАТА!САР САРІ БІ ГАЇ ІСАЇ ВАКМСО АЗООБКЕЇ Б.
ЗМОоМУМаєгОо мамМмоСааМАМ РЕСАКСТАОЕ СОТУЕКМСІ К
ЕМО5АУМТАСО РОЗЕРаЗИаЗТР МІССМТЕМІК АЗС, МОВМНІ
МГРЕБЕАМ/РА ЗБУТ МЕАМО 554ОТІОРОБ ПЕКАЗНІЗОМ
ІМРЗВОМОТІ КОМТОИаї!АНЕЕ МОТІВУТОВОН УМаРасмМмкЕс
АРАООЕРИНУ АСВОМОаМКТО МЕСМУМОаРОСМ КАІСНОССВР кназскі Ра сСАСОМамоаі хСОоксСІРНРа СУНаТтТоОМЕРМ
ОСІ СЕТМУСсСОЯ СО СсОоКО МС атноОРСІ Ма ТоЗМТаРОКУ
ОСБСРЕСУБО РМСОБІАЕНАС І 5ОРСНМНОЗ СКЕТЗБОБЕС
ЕСБЗРОМТОаРТ С5ТМІЮОС5Р ММСОЗНОСТСО ПІ УМагкосмМс
РРОМ/ТаКТтСО ГОАМЕСЕАКР СУМАВЗСКМІ ІАУМСОСІ Р
СУУМаИаомесрІМ ІМОСІ СОСОМ ОВАБСВОІ УМО МАСІСРРЕМА
СОНСЕВОІОЕ САБМРОЇ МасНСОМЕІМАБО СІ СРТагМ
ГСсОГОІ0МСЕ РМРСОМИаАОС УМААБОМЕСК СРЕОУЕСКМС
ЗНІ КОНСАТТ ТСЕМІОЗСТМ АМАБМОТРЕС МАМІЗЗМУСО
РНОКоКБОБаа аКкЕТсОоСМКа єТатисСНЕМІ МОСЕЗМРОКМ сатсІрамММ5 УкСІСВраТмЕ сСАНСЕММІМО СБОМРОНУСО товогУМОогМ СОСКМамкак тонзНоОБОСО ЕАТСММОСТо
МОЕМОТЕКСМ СРОСМБатТТтОо МАНМЗЗСОЇ Р МРСНМАС ТОМ
УМарзЕТсМо КЕСМЕаРІСТ ОМТМОС5РНР СУМЗИТтОСУра
ОМУМУУВАСЕСАР СЕАСРОСВІМ ІМЕСОЗЗРОА ГСАТСМОБЇМ
СМОСІСРРОН 5БСАКСНЕМБИа НЗСІТМОа МІ ГОПАК ОБОС
МТСОСІ МАМ АСЗКУМУСОИРА РСВІ НКЗНМЕ СРБСИОЗСІРМ
ГОРОСЕМАРО ТаМаєсСньоьз І ОРУКТКСТЗ ОБУМООМСАМ
ІТЕТЕМКЕММ 5РСС-ТТЕНІС 5БЕЇ АМІ МІК МУБАЄМБІМІ АСЕРБІ БАММ
БІНМАІЗАЕО ІНОВСИМРУКЕ ІТОКІТОЇ М КАрОаМЗБА АМАЕМАМОВА
РІ. ЖМАТОРІМ РІЇ ЗБМІСТМА ММССІ МТАЄМ МУСУВКАВКРБ
ЗНІТНЗАРЕОМ ТТМММАЕОЇІ М ОЇКМРІЕКНОЯ АМТУРІКОМЕ
МКМЗКМКІВ ТНЯЗЕМЕЕВО МОКНООКМАЕ АКОРМУМТІ МО
ВЕЕКАРБИТР ТКНРМУУТМКО ОМА ЕБАОЗ І МАМЕМІМ
З Уад2 людини |МААОСВавВіР АВС АСМ/ МОАДАВРМОИУЕ ЕГО ЗАГАММ
Має заАСо раравттнАса асанорЕСОТУ МАМСІ КЕМОА
КМТРТаРСЗУ СНОАТРМІ ас МЗЕМІ РРАСА АСОВАВАНАН аароорРОЇМ МІРРОРГАМ/РА БЕТИМЕАМ/О МОМОТТРМЕЕ
ПЛЕВАМЗНАС МІМРЕОАМУКЬ ІГНЕЗИнмАНІ. ЕГОІАУАСОЕ
МУУЗАТСМКЕ САРАМОРГРОаН УТСПРОМаМКкА СМОСУУМИаКЕС
КЕАУСКОССМ ГІ. НнасастуРа ЕСАСЗУСУМОС ВЕСОЕСМУРУР аСУНазсмМЕР МОСМСЕТМУа СП СОКОІ ММ СаЗННРОСТМОИа
СТСІМАЕРОО МАСТОРОСУ5 САМСЕКАЕНА СТЗМРСАМОС
ЗСНЕМРБЗаРЕ СНСРБОМУЗаР ТСАЇ ОІ0ЕСА БМРСААСИСТО
МрОМрагЕсІ СРЕОМУМаАТСО ОЇ ЮАМЕСЕСК РОСІЇ МАЄЗСКМ
ПасмУсосІ РОМУКОИІМСНІ М/МОСНООСО НОИ,ТОКО ММ вМОСУСРєАСЕ СЯВАНСЕГЕНО ЕСАББРОНЗО СІ СЕП АСК
НСНСРОСЕЗа РІ СЕМОМОЇ С ЕРБЕРСАМСОАВ СУМІ єСОМУС
АСРОВРОИаКМ СЗМРВЕРСРО САСВМІрИаСО БрАСРОМРОТ
ААБСУСИЯРНОа АСУБОРОСМЕ ЗСІСОБагєТа ТУСНЕМІСОС
ГаОРСАМаСстТ СІОЕМОАЕНС ЕСРБОМ/ЕСБЇ СОТМРМОСІ Р
ОРОНЗНаВвсМ І ММОгЕМСАС ОБСУУКОаКкКТтоН 5ВЕРОСОАХТ
СсемМмаатоУр5 аОТЕА!АСАСРР СМУ/КОаЗТСАМА КМЗЗСОЇ РМРО
УумастоУсвБа АБЕЗСІСНОС МЕСАТСТНМТ МОСМРІ РСУМ
СаІСМрамММ ЕАВСЕСАРОБА СРОСВІМІОЕ СОБЗРСАМИаА
ТОМОБІМОУА С5СРРаВАСР ВСОЄМІСРИВ БСМУЗАИТРЕР нНазБУМмМЕОосСМ САС рОаАНО СЗКУМСОМКР СП АСОРЕАЇГ.
ЗАОСРІ ОВНС ГЕКАРСОСІ В РРСЕАМСЕСО АЕБЕРРЗТРОЇ.
РАЗанНігОММо АВТ НЕМНО НУРОСТТМаА ІСІ РА
ТААМАНОНВІЇ М''СОВАЗЗО АБАМЕМАМ5Е ЗРАНОЇ РОБ
ПОСААНА!ЇМ ААІТОНОИМОьЗ І ГАМТЕМКМ ЕТУМТОССОЗ5Т
СГ ГМРМІ СОА ЕЗМІЛМІ АСУМ І СММУМУТАКАА КЕВЕНЗНІ РА
ЕЕБАММОМАР І МРІВМРІЕЄА РОСНКОМІ МО СКМЕТРРРАН
АРЕАГРОРАС НААМАЕОЕЕО ЕІ ЯВИ єЕОБ І ЕАЕКРІ ЗНК
ЕТКОРЕВ5РОЕа АВРАНУАБОРК МОМВАМАБІМ ЕАНУАСКЕ
4 Уад2 миші МААНСУОВІ Р АВ МІ С МОАТАРМОМЕ ЕГОЇ ЗАСАММ
Має заАСо раравттнАа асСаВвоЕСОТУ МАМСІ КЕМОА
КМТРТаРСБЗУ СУСАТРМІ СО МЕМ РРАСА АСОВАВАНЗН
ТасноорРСІМ МІРРЕОБАМ/РА ЕТ МЕАМ/О УМОМОТТРОЕЕ
ПЛЕВАМЗНАС МІМРЕОАМУКЬ ІГНЕЗИнмАНІ. ЕГОІАУАСОЕ
МУУЗАТСМКЕ САРАМОРГРОаН УТСПРОМаМКкА СМОСУУМИаКЕС
КЕАУСКОССМ ГІ. НнИа1сстуРа ЕСАСЗУСМО КЕСОЕСМРУР аСУнНазсмМЕР МУНСОСЕТМУУсС СП СОКОЇ ММ СаЗННРОУМИа
СТСІМАЕРОСО МІ САСРОСМІ СКМСЕВАЕНА САБМРСАМОС
ЗСНЕМРБЗаРЕ СНСРБОМУЗаР ТСАЇ ОІ0ЕСА БМРСААСИСТО
МрОМрагЕсІ СРЕОМУМаАТСО ОЇ ЮАМЕСЕСК РОСІЇ МАЄЗСКМ
ПасмУсСосї РОМКОСІМСОЇ МІМОСНОИДЮОСО НОИТОКОІ ММ вУОСУСРєАСЕ СЯВАНСЕГЕМО КСАБЗРОННО СІСЕПВІ МОСС
АСНОСРНАЇ ЗО І НСЕМОМО С ЕРБРСІ МЕАВ СУМ єСрМУС
АСРЕОРСОаКМ С5МРАОТСРО САСАМІВОСОЯ РЕАДОЗААНИОМ
АРЗОІССЯРНОа НСБ РОСМЕ 5СІСОВагєТта ТУСНЕМІООЮОС
МаоРСАМаат СсІТЕМОЗЕВНС ГСРБЗОМ Ба! СОІМРМОСІ Р оРОНЗНаВвсСМ І ММОгЕМСАС ОБСУМУКОаКкКТтоН ЗАЕРОСПАМХТ
СсзмМаатоУрь аОтТЕАСАСРР СУУКОаЗТСТІА КМЗ5ЗСМРМРО мчмастоУаза рзгєСІСНОС МЕСАТСТНМТ МОСМРІ РСУМ
СаІСМрамММ ЕАВСЕСАРОБА СРОСВІМІОЕ СОБЗРСАМИаА
ТОМОБІМЕУА С5СРРОаВНБОР ВСОЄММІЄТА РСМ/ЗНОам5ЕР назаУумМЕорсмМ ЗосвОСІ ранно с5кММУсСОамМкР СІ ЗаОРБОР
ЗАОСРРОСОС ОЕКАМООСІО РРСЕММ/СЕСТ АЕЕРІ РРОТР
СОРАБЗНІ ОМ МСАВІ ТІ ВЕМ АВРОМРОСТТМ САІСЗаїтвАЇ.
РАТААААНОЯ ПО СОВА БСАЗАМЕМАМ 5ЕЗРАНОЇ РО
ЗЗПОЗТАНА ІМААІЇТОВИмМ ЗБ АМТЕМ КМЕТУУМОС5
За МРМІС 5МЕЗМІ УМ АС МУМІСУУМ ТАК АВКЕНЕВЗНІ.
РАОЕЗТММОМУ АРІ МРІАМРІ ЕВНРССЗОГ СТ СИНКО МОСС
КМЕТРРРАВА СЕАЇ РОРАСН САССОСЕОЕБОЕ ЕІ ЗНИАрИарЗР
ЕАЕКРІЗНКЕ ТКОРБОВІ СА РАСМ/АРЕРКМ ОМААУНОЗТКО МАВАСВЕ
Мишачий дад1- | АГ СЯЗОРЕГЕ І ЗМОМУМає ГоМмамМмосСацМ ваМРасвКотТА рІ-єаг1-4 РЕСОТУРКМО І КЕМОЗАМТА СОРСВРОаЗИЗ ТРМСМТЕМ (мишачий Дад1- Ії КАБНамМОАМ ВІМСРЕБЕАМ РАЗУТИ МЕА М/ОЗЗМОТІОЮР антиген) ОБІЕКАЗНЬО СМІМРЗАОУО ТІ КОМТИаїтАН РГЕМОІНУТСО рНУУОаРаТсмМк есСАРАООГРа НУАСрОМаМК ТОСМЕСМУМаРО
СМКАІСНОСО 5РКНОЗСКІ Р ЧЮСАСОМСУО І МСОКСІРН
РЕаСУНатсМЕ РМОСІ СЕТМУУ БОЇ СОКОМ МСатТНоОРСІ М вато5МТаРО КМОС5СРЕСМУ БОРМСЕЇІАЕН АСІ БОРСНМА еЗСКЕТОає ЕСЕС5РОМТа РТОЗТМІООЕ СІ МРАСЗОН ННННН
Людський дад1-| ОРЕГ ЕІ ЗМО МУМаєгомамМм сбасАВМРОО АКСТАРЕСОТ рІ-єаг1-4 УРКМСГКЕМО ЗАМТАааРСВ гОБИаЗТРМІС ОМТЕМІ КАЗАНА (людський СМОАМАЇМІ Р ЕЗЕАМ/РАЗМТ ГГ МЕАМОБЗМ ОТМОРОБІЕ
Уаді-антиген). | КАБН5СМІМР ЗВОУОТІ КОМ ТОМАНЕРЕМОЇ НУТСрОУУМХО гасМкЕсСАРА ОСРРаНМАСО ОМЕМКТОМЕС МИМО РЕСМВААЇ споасСзРКНОа СК арсСОо Мамо МСоКк СІРНРИСУНИ
ІСМЕРТМОСІ С ЕТМУУСОСОЇ СО КО МУСаТтно РОС МаатосвмМ тТаРОКМОС5ОС РЕСБУБОРМСЕ ІАЕНАСІ БОР СНМНОЗСКЕТ
ЗІ СРЕСЕСВР СУуУТаРТОБТМ ро 7 Мишачий дадаг- | АС ЯЗМОМРЕ ГО ЗАГ АМУМ СЕП ЗаАСсо аправтТтвАсОо рІ-єаг1-4 СаврЕСОТУМ ВМС КЕМОАК МТРТаРСВЗМУС МАТРМІ СХОМ (мишачий Дад- | «ЗЕМ РРАСАА СОВНАВАНЗАТ СОНОЮРИЇ ММ ІРРЕОГАМ/РАЗ антиген) ЕТИМЕАМ/ОМ ОМОТТРОЕЕЇ ГПЕВМУМЗНАСМ ІМРЕОВУУКБІ.
НЕЗОНМАНІГ ЕЕ ГОЇВМАСОЕМ МУЗАТСОМКЕС АВРАМОГРИаНУ тТеромамкАС МООМУМОаКЕСК ЕАУСКОС,СМІ. І НааСстТУРОЕ
САСБУСМОСОК ЕСОЕСУРУРОа СМНОЗСМЕРМ НСОСЕТМУУ ОС гл соКкоі Мис а5ННРОУМИаИас ТСІМАЕРООМ І САСРОИМІ С
КМСЕВАЕНАС АБМРСАМОСЯ СНЕМРБОРЕС НСРБОМ/МОРТ
САЇ ОІ0ЕЕРа ГМРАСЗИнННН ННН
Людський Щдад2-| АВРМОМРЕЕГО І ЗА АМУМОЕ ГІ 5СаСАССрар авттваасасСа 0О5І-ЕСЕ1-4 НОЕСОТУМУВМ СІ КЕМОАКМТ РТАРСВМОаНнаИ АТРМІ СМ (людський МІ РРАСАДОО ВАВАВАНАСИ ОБРІЇ ММІР ЕОБГАМ/РАБЕТ
Уадг2-антиген). ППМЕАМ/ОМ ОМ ОТТРМЕЄКІ ЕВМЗ5НАСМІМ РЕОСРМУУК5І НЕ
ЗОНМАНІ ЕГО ІВУВСОЕМУМ БАТОМКЕСАР ВМОєРОЯаНМТо рОМамМкАСМО СМУМОаКЕСКЕА УСКОССМІ НН СаСТУРОЕСВА
С5УСМООаВЕС СЕСУРУРаСМУ НаЗСМЕРМОС МСЕТМУМ СО.
СсОоКОІ ММСа5 ННРСТМИаСТО ІМАЕРСОМАС ТСРОСУБИаВМ
СЕКАЕНАСТО МРСАМИС5СН ЕМРОСЕБГЕСНО РООСМ5ОаРТСА
ІОІ0ЕЕРаЇ М РНДаБСИНННННи Н
Варіабельна ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА область РОаКагЕММОаМм ІТРОСамМтТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТОКМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАМУУУСАВАС БМ/гАММСОСТ І МТУ55 ланцюга антитіла А
Варіабельна ІОМТО5РББ5 І БАБМОаОВМТ ІТСВАБОЮМ5 ТАМАМУМООКР область легкого ОКАРКІ ІМ5 АБЕРЇ У5ОаМРО ВЕЗОа5Оа5аИТтО ЕТІ ТІ ОР ланцюга ЕОЕБАТУМСОО 5БМУТТРРТЕСО ааТКМЕїК антитіла А 11 Гіперваріа- сСЕтТЕЗММаїн бельна ділянка 1 важкого ланцюга антитіла А
НМУВв-НІ антитіла А антитіла А 14 Гіперваріа- ВАБОВУЗТАМА бельна ділянка 1 легкого ланцюга антитіла А
НМВ-11 антитіла А антитіла А 17 Варіабельна ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА область РОаКагЕММОаМм ІТРОСамМтТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТОКМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАМУУУСАНАС 5І ЕАММ/СОСТ І УТУ55 ланцюга антитіла А-1 18 Варіабельна ІОМТО5РББ5 І БАБМОаОВМТ ІТСВАБОЮМ5 ТАМАМУМООКР область легкого ОКАРКІ ІМ5 АБЕРЇ У5ОаМРО ВЕЗОа5Оа5аИТтО ЕТІ ТІ ОР ланцюга ЕОЕБАТУМСОО МУТТАТТЕРСО ааТКМЕІК антитіла А-1 антитіла А-1 антитіла А-1 антитіла А-1 антитіла А-1 антитіла А-1 антитіла А-1
Варіабельна ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА область РОаКагЕМУМУсаМм 1теамасУуомМ АОБУКОаВЕТІ БАОТО5КМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАМУУУСАВАС БМ/гАММУСОСсТ І МТУ55 ланцюга антитіла А-2 26 Варіабельна ІОМТО5РББ5 І БАБМОаОВМТ ІТСВАБОЮМ5 ТАМАМУМООКР область легкого ОКАРКІ ІМ5 АБЕРЇ У5ОаМРО ВЕЗОа5Оа5аИТтО ЕТІ ТІ ОР ланцюга ЕОЕБАТУМСОО 5БМУТТРРТЕСО ааТКМЕїК антитіла А-2 антитіла А-2 антитіла А-2 антитіла А-2 антитіла А-2 антитіла А-2 антитіла А-2
ЗЗ Варіабельна ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА область РОаКагЕММОаМм ІТРОСамМтТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТОКМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАМУУУСАНАС ТІ ЕАММУСОСТ І МТУ ланцюга антитіла А-1 5101Т 34 Варіабельна ІОМТО5РББ5 І БАБМОаОВМТ ІТСВАБОЮМ5 ТАМАМУМООКР область легкого ОКАРКІ ІМ5 АБЕРЇ У5ОаМРО ВЕЗОа5Оа5аИТтО ЕТІ ТІ ОР ланцюга ЕОЕБАТУМСОО МУТТАТТЕРСО ааТКМЕІК антитіла А-1 5101Т нНУВв-НІ1 СЕТЕБММаИїН антитіла А-1 5101Т 36 нУВ-Н2 МІТРОСОМТОМАОБУКОа антитіла А-1 5101Т 37 нНУв-НЗ АСТІ ЕАУ антитіла А- 1(51017Т 38 нНУВв-І1 ВАБОВМУ5ТАМА антитіла А- 1(51017Т 39 нУВв-І2 ЗАБЕРЕ 5 антитіла А-1 5101Т
НУВв-І З ООУУТТАТТ антитіла А-1 5101Т 41 Варіабельна ЕМОЇ МЕБИаСІС І МОРОСБІ ВІ. ЗСААЗБОаєТЕТ БМОІНМУМУВОА область РОаКаї ЕМУУСИ ІБРАВИОТОМ АМЗУКОаВЕТІ БАОТО5КМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАУУУСАА!МО МОМАгЕМазамМ римаОстІ МТ 55 ланцюга антитіла В-3
42 Варіабельна ІОМТО5РББ5 І БАБМОаОВМТ ІТСВАБОЮМ5 ТАМАМУМООКР область легкого ОКАРКІ ІМ5 АБЕРЇ У5ОаМРО ВЕЗОаБОаБаИто ЕТІ ТІЗ5І ОР ланцюга ЕОРБАТУУСОО 5ЕТАРРТЕРСО СТКМЕЇК антитіла В-3 43 Каркасна РІОМТО5РББ І ЗАЗУСОВМТ ІТС область 1 легкого ланцюга (І С-
ЕК) антитіл А,
А-1, А-2, А-1 5101), В-3 44 І 0С-еЕ2 антитіл | МУМООКР СКАРКІ М
А, А-1, А-2, А-1 5101), В-3
І 0С-еКЗ антитіл | СМР5 НЕЗОаБавзато ТІ ТІЗБІ ОР ЕОБАТУУС
А, А-1, А-2, А-1 5101), В-3 46 І С-ЕБ4 антитіл | ЕФО СТКМЕЇК
А, А-1, А-2, А-1 5101), В-3 47 Каркасна ЕМО МЕЗО І МОРОСБІ ВІ САД область 1 важкого ланцюга (НСо-
ЕК) антитіл А,
А-1, А-2, А-1 5101), В-3 48 НО-ЕЕ2 антитіл ММВОА РОКИ! ЕМУМа
А, А-1, А-2, А-1 5101), В-3 49 НО-ЕЕЗ антитілІ ВЕТІ БАОТОКМТАМ І ОММ5І ВАЕО ТАМУМСАВ
А, А-1, А-2, А-1 5101), В-3
НО-ЕРВ4 антитілі СОС І МТУ55
А, А-1, А-2, А-1 5101), В-3 51 ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБаєтТев МУаІНМУМУНОА ланцюг РОаКагЕММОаМм ІТРОСамМтТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТОКМТАУ антитіла А-1 ГОММ5І ВАЕО ТАМУМСАВАС ТІ ЕАММ/СОСТ І МТМ55АВТК (51011) СРБОМЕРІ АРБ5 5К5Т5ааИТАА ОСІ МКОМЕР ЕРУТУБУМ5О
АЇ Т5ОМНТЕР АМІ 05501 5 І 55БММТУРББ 5 аТОТМІСМ
ММНКРОЬМТКМ ОККМЕРКБСО КТНТСРРОРА РЕ Г ССРОМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МММОМЗНЕОР ЕМКЕММ МУР С
МЕМНМАКТКР ВЕЕОУМЗТМА ММБМІ ТМ НО ОМ/І МОКЕМКС
КУ5МКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРАЕРОММТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТСІ УКа ЕМРООІЇІАМЕМ ЕБМООРЕМММУ КТТРРМІ 050
СОР МК МОКЗАМОССОМ МЕЗСЗ5УМНЕА І НМНУТОКОБІ. 5І Рак 52 ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА ланцюг РОаКагЕММОаМм ІТРОСамМтТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТОКМТАУ антитіла А- ГОММ5І ВАЕО ТАМУМСАВАС ТІ ЕАММ/СОСТ І МТМ55АВТК 1(5101Т) з СРБОМЕРІ АРБ5 5К5Т5ааИТАА ОСІ МКОМЕР ЕРУТУБУМ5О мутацією АЇ Т5ОМНТЕР АМІ 05501 5 І 55БММТУРББ 5 аТОТМІСМ
Мм297а ММНКРОЬМТКМ ОККМЕРКБСО КТНТСРРОРА РЕ са РБМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МММОМ5НЕОР ЕМКЕММ МУР С
МЕМНМАКТКР ВЕЕОМОаЗТМУА ММ5МІ ТМ НО ОМ/ЛІ МОКЕМКС
КУ5МКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРАЕРОММТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТСІ УКа ЕМРООІЇІАМЕМ ЕБМООРЕМММУ КТТРРМІ 050
СОР МК МОКЗАМОССОМ МЕЗСЗ5УМНЕА І НМНУТОКОБІ. 5І Рак
53 Легкий ланцюг | ОІЮМТО5РОБ І БАБМОарАМТ ІТСВАБОВМ5 ТАМАМУУОСОКР антитіла А-1 СКАРКИ ІМ5 АБРІ 5ИаМРО НЕЗОБОаБИто ЕТ ТІ ОР (5101); легкий | ЕВЕАТУМСОО МУТТАТТРаО аТКМУєІКАТМ ААРБМРІЕРР ланцюг ЗОЕОЇ КИТА 5БМУМСІ І ММЕМ РЕЕАКМОМУКМ ОМА! ОБИаМ5О антитіла А-1 ЕБМТЕООБКО 5ТУ5І 55Т1І ТТ | ЗКАОМЕКНК МУАСЕУМТНОС
І 55РУТКОЕМ НСЕС 54 Варіабельна ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА область РОК ЕММОаМ ІТРОССУТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТО5КМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАМУУУСАНАС ХІ ЕАММ/СОСТ І ТУ ланцюга Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. антитіла А-1 ох
НУВ-НЗ АСХІ ЕАУ антитіла А-1 Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. ох 56 ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА ланцюг РОК ЕММОаМ ІТРОССУТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТО5КМТАУ антитіла А-1 ГОММ5І ВАЕО ТАМУУУСАНАС ХІ ЕАММ/СОСТ І МТ У55АЗТК (5тО1Х) СРБОМЕРІ АРБ5 5К5Т5ааИТАА ОСІ МКОМЕР ЕРУТУБУМ5О
АЇ Т5ОМНТЕР АМІ 05501 5 І 55БММТУРББ 5 аТОТМІСМ
ММНКРОМТКМ ОККМЕРКООСО КТНТСРРОСРА РЕ СОРБОМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МММОМ5НЕОР ЕМКЕММ МУР С
МЕМНМАКТКР ВЕЕОУМЗТМА ММБМІ ТМ НО ОМ/І МОКЕМКС
КУ5МКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРАЕРОММТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТСІ УКа ЕМРООІЇІАМЕМ ЕБМООРЕМММУ КТТРРМІ 050
СЕР МК МОК5АМОСОаМ МЕЗС5УМНЕА І НМНУТОКОІ 5І 5РОаК
Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. 57 ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА ланцюг РОКИ ЕММОаМ ІТРОаСУТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТО5КМТАУ антитіла А-1 ГОММ5І ВАЕО ТАМУУУСАНАС ХІ ЕАММ/ ПОСТ І МТ У55АЗТК (5101Х) з СРБОМЕРІ АРБ5 5К5Т5ааИТАА ОСІ МКОМЕР ЕРУТУБУМ5О мутацією АЇ Т5ОМНТЕР АМІ 05501 5 І 55БММТУРББ 5 аТОТМІСМ
Мм297а ММНКРОМТКМ ОККМЕРКООСО КТНТСРРОСРА РЕ СОРБОМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МУММОМ5НЕОР ЕМКЕММУ МУ ОСС
МЕМНМАКТКР ВЕЕОМавтУА УМБМІ ТМІ НО СУМІ МЕОКЕМКОС
КУ5МКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРАЕРОММТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТСІ УКа ЕМРООІЇІАМЕМ ЕБМООРЕМММУ КТТРРМІ 050
СЕР МК МОК5АМОСОаМ МЕЗС5УМНЕА І НМНУТОКОІ 5І 5РОаК
Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. 58 Варіабельна ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА область РОК ЕММОаМ ІТРОССУТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТО5КМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАУУУСАВАС ХМ ГАМУ сОСТ І МТУ55 ланцюга Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. антитіла А ох 59 НУВ-НЗ АСХМЕАУ антитілаА Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. (5101Х); НУВ-
НЗ антитіла А- 2(-5101х 62 Варіабельна ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА область РОаКагєЕМмМмам тамМмасУвомМ АаОБУКОаВЕТІ 5БАОТ5КМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАУУУСАВАС ХМ ГАМУ сОСТ І МТУ55 ланцюга Х є будь-якою амінокислотою, крім 5. антитіла А-2 ох
63 ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА ланцюг РОаКагЕММОаМм ІТРОСамМтТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТОКМТАУ антитіла А-13 | ГОММ5І ВАЕО ТАМУУСАВАС 5І ЕАММУ/СОСТ І МТУ55АЗТК мутацією СРБОМЕРІАРБ5 5КОТ5ИаСТАА І СІ МКОМЕР ЕРУТУБМУ Ма
Мм297а АЇ Т5аМНТЕР АМІ О5501 5 І 55ММТМРББ Б аТОТМІСМ
ММНКРОЬМТКМ ОККМЕРКБСО КТНТСРРОРА РЕ Г ССРОМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МММОМ5НЕОР ЕМКЕММ МУР С
МЕМНМАКТКР ВЕЕОМОаЗТМУА ММ5МІ ТМ НО ОМ/ЛІ МОКЕМКС
КУ5МКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРАЕРОММТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТСІ УКа ЕМРООІЇІАМЕМ ЕБМООРЕМММУ КТТРРМІ 050
СЕР МК Т МОКБАМОССМ МЕЗСОМУМНЕА І НМНУТОКОІ. 5І ЗРК 64 нНУв-НЗ АСТМУЕАУ антитіла А (51017); НУВ-
НЗ антитіла А-2 5101Т 65 Варіабельна ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА область РОаКагЕММОаМм ІТРОСамМтТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТОКМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАУУУСАВАС ТМ ГАМ сот І МТМ55 ланцюга антитіла
А(5101Т
Варіабельна ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА область РОаКагЕМУМУсаМм 1теамасУуомМ АОБУКОаВЕТІ БАОТО5КМТАУ важкого ГОММ5І ВАЕО ТАУУУСАВАС ТМ ГАМ сот І МТМ55 ланцюга антитіла А-2 5101Т 67 ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА ланцюг РОаКагЕММОаМм ІТРОСамМтТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТОКМТАУ антитіла А ГОММ5І ВАЕО ТАУУМСАВАС ХМ ГАМ СОСТ І МТУ55АЗТК (5101Х) з СРБОМЕРІАРБ5 5КОТ5ИаСТАА І СІ МКОМЕР ЕРУТУБМУ Ма мутацією АЇ Т5аМНТЕР АМІ О55021 5 І 55ММТМРББ Б аТОТМІСМ
Мм297а ММНКРОЬМТКМ ОККМЕРКБСО КТНТСРРОРА РЕ Г ССРОМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МММОМ5НЕОР ЕМКЕММ МУР С
МЕМНМАКТКР ВЕЕОМОаЗТМУА ММ5МІ ТМ НО ОМ/ЛІ МОКЕМКС
КУ5МКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРАЕРОММТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТСІ УКа ЕМРООІЇІАМЕМ ЕБМООРЕМММУ КТТРРМІ 050
СБЕРМ5КІТ МОКБАМОССИМ МЕЗСОМУМНЕА І НМНУТОКОІ. 5І 5РОК
Х є будь-якою амінокислотою, крім 5.
ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА ланцюг РОаКагЕМУМУсаМм 1теамасУуомМ АОБУКОаВЕТІ БАОТО5КМТАУ антитіла А-2 ГОММ5І ВАЕО ТАУУМСАВАС ХМ ГАМ СОСТ І МТУ55АЗТК (5101Х) з СРБОМЕРІ АРБ5 БКОТЗИааТАА ГГ аСІ МКОМЕР ЕРУТУБМУ Ма мутацією АЇ Т5аМНТЕР АМІ О55021 5 І 55ММТМРББ Б аТОТМІСМ
Мм297а ММНКРОЬМТКМ ОККМЕРКБСО КТНТСРРОРА РЕ Г ССРОМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МММОМ5НЕОР ЕМКЕММ МУР С
МЕМНМАКТКР ВЕЕОМОаЗТМУА ММ5МІ ТМ НО ОМ/ЛІ МОКЕМКС
КУ5МКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРАЕРОММТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТСІ УКа ЕМРООІЇІАМЕМ ЕБМООРЕМММУ КТТРРМІ 050
СБЕРМ5КІТ МОКБАМОССИМ МЕЗСОМУМНЕА І НМНУТОКОІ 5І 5РОК
Х є будь-якою амінокислотою, крім 5.
ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА ланцюг РОаКаїгЕММСОМм ІТРОСамМтТОМ АОБУКОаВЕТІ БАОТЗКМТАУ антитіла А ГОММ5І ВАЕО ТАУУМСАНАС ТМ ГАМ СОС І МТМ55АЗТК (5101) з СРБОМЕРІАРБ5 5КОТ5ИаСТАА І СІ МКОМЕР ЕРУТУБМУ Ма мутацією АЇ Т5аМНТЕР АМІ О55021 5 І 55ММТМРББ Б аТОТМІСМ
Мм297а ММНКРОЬМТКМ ОККМЕРКБСО КТНТСРРОРА РЕ Г ССРОМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МММОМЗНЕОР ЕМКЕММ МУ С
МЕМНМАКТКР ВЕЕОМавтУА УМБМІ ТМ НО СУМІ МЕОКЕМКОС
КУЗМКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРВЕРОМУМУТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТС УКОа ЕМРБОІАМЕМ ЕБМСОРЕММУ КТТРРМІ 050
СОР МК МОКЗАМОССОМ МЕЗСЗ5УМНЕА І НМНУТОКОБІ. 5І Рак 70 Ідс1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІС І МОРИСБІ ВІ 5СААБОаЕТЕВ МУСІНМУУВОА ланцюг РОаКагєЕМмМмам тамМмасУвомМ АаОБУКОаВЕТІ 5БАОТ5КМТАУ антитіла А-2 ГОММ5І ВАЕО ТАМУУСАНАСЄ ТМ ЕАУМ СОС І МТМ55АБТК (51011) з СРБОМЕРІ АРБ5 5К5Т5ааИТАА ОСІ МКОМЕР ЕРУТУБУМ5О мутацією АЇ Т5ОМНТЕР АМІ 05501 5 І 55БММТУРББ 5 аТОТМІСМ
М2970 ММНКРОМТКМ ОККМЕРКООСО КТНТСРРОСРА РЕ СОРБОМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МММОМ5НЕОР ЕМКЕМУ УУ ОСС
МЕМНМАКТКР ВЕЕОМавтУА УМБМІ ТМІ НО СУМІ МЕОКЕМКОС
КУЗМКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРВЕРОМУМУТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТС УКОа ЕМРБОІАМЕМ ЕБМСОРЕММУ КТТРРМІ 050
СОР МК МОКЗАМОССОМ МЕЗСЗ5УМНЕА І НМНУТОКОБІ. 5І Рак
Ммп(Х1ухгасхя(х3руАовУКа нУВ-Н2 ХіІєРабос;хХ2 є або М; Х3З є Т або 5 нНУВв-НЗ ХтІє5або тТ;Х2 є М/ або І.
НУВ-НЗ (101Х) | Х1 є будь-якою амінокислотою, крім 5; Х2 є УМ або І.
НУВ-НЗ (101Т) )Х1 є М або І.
НУВ-Ї З Хіє5Забом;Х2 єРаброд;хзЗ єв або т 75 Легкий ланцюг | ОІЮМТО5РОБ І БАБМОарАМТ ІТСВАБОВМ5 ТАМАМУУОСОКР антитіла А СКАРКИ ІМ5 АБРІ 5ИаМРО НЕЗОБОаБИто ЕТ ТІ ОР
ЕОРБАТУУСОО 5БУТТРРТРОО СТКМЕБІКАТМ ААРБМУРІЕРР
ЗРЕОЇ КБатТА БМУСІ ЇЇ ММЕМ РЕВЕАКМОМКМ ОМА! О5амМмБо
ЕБМТЕООБКО 5ТУ5І 55Т1І Т | ЗКАОМЕКНК ММАСЕУМТНОС
І 55РУТКОЕМ НСЕС 76 Легкий ланцюг | ОІЮМТО5РОБ І БАБМОарАМТ ІТСВАБОВМ5 ТАМАМУУОСОКР антитіла А-2 СКАРКИ ІМ5 АБРІ 5ИаМРО НЕЗОБОаБИто ЕТ ТІ ОР
ЕОРБАТУУСОО 5БУТТРРТРОО СТКМЕБІКАТМ ААРБМУРІЕРР
ЗРЕОЇ КЗатА БМУСІ ЇЇ ММЕМ РВЕАКМОМ/КМ ОМА О5аМ5О
ЕБМТЕООБКО 5ТУ5І 55Т1І Т | ЗКАОМЕКНК ММАСЕУМТНОС
І 55РУТКОЕМ НСЕС 78 Альтернатив- |ММаИІН ний НМЕ-НІ1 антитіл А, А-1,
А-1 (51017),
А-2 79 Ідс1-важкий ЕМОЇ МЕБОСІЄ І МОРИСБІ ВІ 5СААБОЄТЕ5 ММОІНМУУВОА ланцюг РОКИ ЕММОаМ ІТРОСОаМТОМ АОБУКОВЕТІ БАОТО5КМТАУ антитіла А ГОММ5І ВАЕО ТАМУУСАНАСЄ ТМ ЕАУМ СОС І МТМ55АБТК (51011) СРБОМЕРІ АРБ5 5К5Т5ааИТАА ОСІ МКОМЕР ЕРУТУБУМ5О
АЇ Т5ОМНТЕР АМІ 05501 5 І 55БММТУРББ 5 аТОТМІСМ
ММНКРОМТКМ ОККМЕРКООСО КТНТСРРОСРА РЕ СОРБОМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МУМОМ5НЕОР ЕМКЕММУ УС
МЕМНМАКТКР ВЕЕОУМОТУВ МУБМІ ТМ НО ОМ МОКЕУКС
КУЗМКАЇ РАР ІЕКТІЗКАКОа ОРВЕРОМУМУТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМ5І ТС УКОа ЕМРБОІАМЕМ ЕБМСОРЕММУ КТТРРМІ 050
СОР МК МОКЗАМОССОМ МЕЗСЗ5УМНЕА І НМНУТОКОБІ. 5І Рак
ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕЗСОСІО І МОРОСБІ ВІ ЗСААБИєТЕВ МУСІНМУМАОА ланцюг РОКаГгЕММОамМ ІТоеМмасУуБОоМ АрБУКаИавВЕТтІ БАОТЗКМТАУ антитіла А-2 ГОММ5І ВАЕО ТАМУУСАВАС ТМ/РАУМИ,ОСТ І МТУББЗАБТК (51011) СРБЗМЕРГАРБЗ 5КЗТБИааТАА ГГ ОСІ МКОМЕР ЕРУТУБММЗО
А Т5ОМНТЕР АМІ О5БИЇ 5 БЗММТМРБЗБ БІ ЕТОТМІСМ
ММНКРЗМТКМ ОККМЕРКЗСО КТНТОРРОРА РЕГІ саРБМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МУМОМЗ5НЕОР ЕМКЕМУ УС
МЕМНМАКТКР РЕЕОММЗТУА ММБМІ ТМ НО СУМІ МЕКЕМКС
КУЗМКАГРАР ІЕКТІЗКАКО ОРВЕРОМУТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМБІ ТС Ка ЕМРЗОІАМЕМ/ ЕЗМООРЕМММ КТТРРМІ ОБО
ОБЕРІГ МКІТ МОКБАУМОО,М МЕЗСЗУМНЕА І НМНУТОКБІ. І ЗРак 81 ІдДа1-важкий ЕМОЇ МЕЗСОСІО І МОРОЗІ ВІ ЗСААБИЕТЕЗ ММИаінНМУМВОА ланцюг РОКОГЕММСОМ ІТРОССУТОМ АОБУКОаВЕТІ БАЮТЗКМТАУ антитіла А-1 ГОММ5І ВАГОЮ ТАМУМСАВАС 5І ЕАММУСОСТ І МТУЗЗАЗТК
СРБЗМЕРГАРБЗ 5КЗТБИааТАА ГГ ОСІ МКОМЕР ЕРУТУБММЗО
А Т5ОМНТЕР АМІ О5БИЇ 5 БЗММТМРБЗБ БІ ЕТОТМІСМ
ММНКРЗМТКМ ОККМЕРКЗСО КТНТОРРОРА РЕГІ саРБМЕ
ГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО МУМУМОУМ5НЕОР ЕМКЕМУУУЮС
МЕМНМАКТКР РЕЕОММЗТУА ММБМІ ТМ НО СУМІ МЕКЕМКС
КУЗМКАГРАР ІЕКТІЗКАКО ОРВЕРОМУТІ. РРОВЕЕМТКМ
ОМБІ ТС Ка ЕМРЗОІАМЕМ/ ЕЗМООРЕМММ КТТРРМІ ОБО
ОБЕРІГ МКІТ МОКБАУМОО,М МЕЗСЗУМНЕА І НМНУТОКБІ. І ЗРак
ПЕБЕНІК ПОСЛІЛДОВНОСТЕВ
«МОБ обЕНЕМТЕСН, ІН. «ЖЕВЕ, СПРИ В, що Удао
НАМ, Ве б.
СНІНМ, Ура В «20» ВНМУ АСОКОЇ АНТИТІЛА ТА СПОСОБИ ЗАСТОСУВАННЯ «РН МЕ» І ТАКІ цу» зіва «Ох встовіви ав «і8їз 20355035 «іо» ук ви, ЦО «іі» віяння «Це «і» вакеаліхв зага 3.5 «а «В РІВ хеій» БІіДИК «213» Мово хавівво клеї їнБі азнаки «Ай» заз людини «НЕ Її мат аго баг орто агу ТИГР ОЗБО бі АгЯ БеРОБіу Аг Кго бе) ак їв ії ї 18 15 мае цев Ай рез рев осСує Аїд сен о дго АВ бує ві бух СТУ АТЯ 5ег 30 «У сій вВЄ бід Шви біз Хі рей баб мех бій абп уві ахй віх 1 3 о 45 ів. сій Аза бу Аз Суз сує 5ТУ Фу АВ АРЯ АЄВ го О1уУ АБО Аг що 53 5 ву бух ТВ АгО аЗо бів суб АХВ ТВ ОТУК РВЕ ру УТ Сж5 вві бух ва 75 "а ЩО
Фів тугб обі? баг о аго Уді ТВгОАТа Фіу піу рго суб дет ВН Фіу баг 85 Зо КЕ сі ак ТЕ го Уа! Зв 515 БІУ Ап ТАг О РВЕ Ай фев бух АВ баг 106 185 що мг іх Ах ар оАгО Ай АТО Кі УАї ее Бгто бе Зак Бе АВ тв 1 ХО 155 і
КрРо аг бат тук ТНг без во Уа! біб Аз ТТГ А Зак бвг Аа Азе
ВЕ ле " тож. т
ЕЕ Кв мо
ТВе УЗ бій кго Ач бег (ів Х18 51) їуб5 818 бег НіЗ баг б1у ех 145 ї50 155 ТО їі Аж» Рге Зег о Ааго біп їгтр сія ТНК вом куб шій ажа ТВРгобім ув! 155 17 175
Аів ніч Бе сін Тук Ффіа 31 Ага Уа) ТК оСух АВ дер отує Тут тТуг 155 1855 КО
ПЕ внз Фі уз Аза вуз Рйе Сух Агу Кг Агу АБроахо вве ве ЧУ
Її 2 2 мів тук 8ів Сух вер бів деп 5іу Аби Дуб ТВе см» меж біо Фту ттр ів зі во веж біу вра бір Сує А«п ака АТ їіе сСух ас ій б) суч Зег го 225 23 235 230
ЗШ ххх КЗ с
Ух ніє БІ Боб осух ім ши Бго ЩіУу хв Сук ага Сух віп отеК ЗУ 258 т55 тка бій і вен тук сСух Аза вух Суз зі Бго ніж веб сіу бух хз! еВ хо ле дво 5 та нів «іу 16 Сук дей 51 Рг Нд сій сук іоеа Су біц тТвгодяпо тер 375 ян 283 «іж піу Бій іви Суб до муз йо іви вва туг су Щ3у ЗВГ Щі (ів
ВВ 255 щю тго Суз ів; дп сі біу ТВ о сСує Бек дб їй щіу го Ар ру тек
З05 З 315 26
Пій суб 5? Суб РГО Бів сію тує вс б)у Ре оажхв о сСує б) Ле АЇВ 325 захо 55 сін міз АТа Суз вен о 5ег Ар орга Суб міх Аха аку біу бек був вух 33 345 159
Фін тТве оБег рен бу РМе сів сСух Зіз Сух бЗег вто біу тТРротВг О3у 355 за) їх
Бгто ТВг обу» хеєб ТК ОАБА Щіо АБО Ар Сух БЕК Рг Ахп Аза Су ЗВГ 3 175 ЗВО ніч біу цію те оСує іп ази ву УВІ! ди біу пе вуз Сук Уві Сех
ЗВ У За5 щюЮ
Бгто рго Фі Тер їй ТУ фу ТВг осух бів гез Ах АЇя дя бів су
Б 516 15 53ів АТЗ Бух Рг су» Уа! Ап АТа фу Заг осух гу ай ви їв від 2о дих ЗО
Заг Туг тТуг Ку Аж Сузх ів вго біу Тер омеж «у Бі дей Су А5р
Б нео щі її дей 318 дей дао су ігц фу бій Суб бів Аз АЖр АВ бак Сук що а СТ
Ага АБ і УВІ Ажи Біу Туг ага Сую їі бух Рко Рко б1у тк діа
За5 аг 475 БВ сіу аз нів суз піз Аго азв хів аАЗросі; су бій заг аж вро Сух 455 490 зх іїей дбав сію (іу ні Сує шів АБО Я їв Ах" Ага БНО бів Сух Беу о сух го Тне о біу Ве баг обіу ши сви бух бій ее абр о їів дер Тук 515 За 525
СУБ Фіш го Аз Бгто Суб СІВ АЯп о Ф1у Аїд бів сСух Тук Ави Ага АТ 530 535 580
Зег дер Туг Ре Су вує су РКО ОЇ Ар тут 616 Ф1у Куб Ап Сух 545 550 555 щі его ніх івц вуз АбФр ніх Сух дго ТВ отТвг овго Суб ОН Узі ХІТ АБО 5 55 вк о Су5 ТНК о Уді із мет Аіз аг Ачй Ав отТВе РКО бів біУу маї АКО
ЗВО ЗВ КВ;
Тук Їів Шег бег Аа УВІ Суз б5іу Вуз» ніх БіхЖ вух Сух бух зар дів 53 500 щі
Бек о біу 0О1у муз Ра тТВг осСУуб АЗВ о Су Ах Куз бі Не тТАг обі ТВг що щі 5ІО
Тут бух ніх біч да із аби абр суб сіє чего АБ БРО СУВ АР АХА вкЗ «о ЩЕ о
ПіЖ Біу ТТ СУХ 116 ар бу уз) Би 5 тує Бух Сух Ї1е Суб Бег 5а5 50 55
АзроаТУ Тер осій Ту АЇа їук Су бі) ув Аз ЇВ аФй Азр обу Зав веб во що ів аа Рго Суб нів Аве шіу Біу ТВ" осСув ага Ар оБец УВІ АБ АХ 5 БО 585 вне Ту Суз Ар су Куб Аап о щіУ тр ому Ф1уУ уз ТКК Суб нів бер чо ща Не ага Ар обак бів сСуз АБО бій аіз їВе о Сує дей а5а ЗУ Ту ТК о сСув як 7 5 еВ бо
Ту ар біз З1уУ дво аїв ре вує Суб Меї Сух вго біу б1у Ттв бів 725 730 755
Піу тТвт тТве Суб два ж) ліз вто дз Зак Зак Су Би о вго аз вто чо 745 "ою су МІЖ Аа Фіу ПТУ ТВ Суз ущі Уаї Аяй бір бів дек вве тк су
ТУх що 755 чаї сув вуз оз ЗУ тТеробів Оу Рго Хі Суз Аа бів дей ТР Ахп ха 5 У захв осух Баг рго нія рр Суб Ту а5п бег біу ТНК осСув чаї дер оту 785 а Ух БУ
АХО Аза тк; оТуг Аго СУух Бім Суз АЇ8 БгОо О1у Ре 818 О1у го Ахр 805 що 515 сук Аг же дей жів або дів сСує бій бЗег ек бо Сух Аа вай су о Бех 530
Аїа твг сух мазі Ахр сів хів дай Біу тук ага Суз ма) Суб РКО Бго
К35 я-оО ща
ФУ Ві Бек 01У ТЯ Куз Суб БІ іш Уі Бек 0іу Ага вто сСув ІТ 555 855 Бе
ТВге меж бБіу бек оуаї 31 вго а5в сіє А вуз Ттр о АЗе Ар о Ахв СуВ кеВ а Ух Вко ака ТНе Сує бів сСув бен ах су го їі вій Сух бек окув УР тер
БЕ що 535 уз Оу ге дей вго Сує сечо веч нів суб щіу Між Звк бів Сух ех ча вах що хак пік сів хек осСуз Хів Рго її. ївач АБ а5роБій Сух вйе маї НІ ща ей 325
Рга су» ТНг опіу чаї біу 5ів Суб ага Заг обер г оіва бів вто Уві та 535 За
Муз ТВг уз Суз ТК о бег Ахробег Туг тує Бів а5р Аза бух АЇВ дав ах З 55 я)
Їїе ТВговБае уйг Ре дей му бій Меж Мей Зає вго Зіу беи те ТЕ 265 врЕе 75 «іш нів її сСу« Бек біб це Ага Ап рей айва ХТе рев вує дви ма!
ЗО 85 я век ат ОТ тук хаг Ї16 Тук хів Аза сСує ії ко бек о рРго баг АВ 395 їово О5 ахп ода бій ті нія маі дія тів зег ліз зів азр 118 Ага дор 1 1015 зга ар ші АБИ Рго Ків іув5 із ІТЕЄ ТБГ о Ахроїу5 ІТ ІЇв АВ ів 1025 зп 1035 чаї бек іїу5 Агц Ар осі Азп о Зак о5ег їв) тів дів ата ма! Аїа ї1но 1045 3о50 дім Уві го маї бі» Агу АгО БКО їец Ру АБПОАГО ОТПК дв Рпе іх но зо5х іви жаї Рго їеноієсб бек обзак уві ге тБгохаі Аа тгротів Суб 10795 Ми оо
Сув бен о хаі тпгодід ве туго тгросувБ іє Аго 1уз ВКФ АК Р Уя іх о ах вго шіу Зег нів тпгонів зако дід его сій АБроАБА ТК ОТг дп їіню з1о5 їв а5ав Маї Ага бі біпоівеч Азп о бій ї1ів уз дп РгОо ІТе біц рф ув зх 1120 125 нія ші Аїд дп отйг чаї его 116 5 Аве отуг пі одяй вух дщй 11:о з155 і15п зак їжв мет яег гуя Ії агу отак онів Ап загобім уві бів сів 1155 1150 1155 хо ав Мет дЕрогуя нія сій Біп гув аіа Аго ре АТа вух сій їії55 1155 їв вго Аїа туго тпвгоге) ді Ах Ага сім січ іуз го овго Ахп обі 1175 зіяо 1385
Тиговго тТвгогу5 НІВ РгО АБ Тгротпг деп ої хв бів Авор Ава Аг 115 1135 125 дар обеч бій Бек діа вів баг о гри Ап Аг Мет осів отуб тів Уві 1205 1210 1215 «2» 2 «2131 318 «гід» щілОоК «гії» Мпихе зв. «ее «грі» інші ознаки креЗм мишачий даді «м 2
Мет агу яег яго аАго твгоаго Зіу Агу о вго Бу АгОо РКО ів Баг ої ге) і 5 10 35 ігц ів АТа фер оре) Суз Аїа іви Аго Ат рує Узі Суб зіу Аїа хег 2 ї5 в3в: пі іп Вче біб сец сів І1ї8 ген о бег Мет бів Аа ха! дяп віх б1ц іви піп дача сіу Ап осСуяє Суз бБіу бік ма! АКд Ази вка сіу хр Аго за Й 55 Ії Бо іу« Суз ТИ АгОо дробів Су5 АБО ОТГ ОтУК вве груз тУаї Суз івн ог ух 85 го КЗ ко цій тук зів зак дб уві! твВголіз Біу біу вго сСуУух зеб РБе сі Бег 85 о 5 тіж его тк вго маї т1іе біу 5іу дя отнйг о РБе азп ген іує АЇа баг
С, чо85 ча вга сБіу А5а Ар одгд дви Аго жів Ха і8еи Ро Рйе бек РБе о АтТа тро 315 120 125 вго АгФфржег тує ТБ огеноіец уді бі ВІВ тТго АБробег бег Ахп А5о їз її з так оті пів го Аза баг о тів тів Бій і5 Ав 5вг Ні баг осі меж 145 ї5 ї155 5 т1і12е А5п о вго чек Ага сів ткробій твгоїец руб сів дя) твгосТуУ Іїв 305 175 173 ів ніз Ре біб тує сів хІїв ага Уаї тнгосСух Ар оАБа нія тк отук 150 1855 ню сі ве біб був дп гу вБа СУЯ АгГО РгОо Ага Ахв АЮ Ре ва о біх 155 Од 25 нів туг лід Сех АБО осів ап оіу АЗпогуз тйг о сСух Мет сів бу тго гій тії в мет піу ко авр о сСух АП іує аіа тів сСуз аку сій біу Суя бек рРго 28 ев 235 «50 іу Ні біу зек о сСуз із іви Рго піу Аза був Ага сСувз сіп тує піу 235 259 25х тртрозіп ві ви тує Суз Азрогубз Суз тіе Рго ніх Рга сіу Суз Уді
БО 255 то ніз зіу тТВг оСух ап бін вго тгвозів Сез бец Су бі таг ода тго то «8 -5 спі шбіу бів їец Сух дер ін ах оівц да туго сух сім твг нів бій
230 29х З вко Суз ев о дхв о Аго Біу ТВг оСух его азпотвВг с1У Бго дяроі уз тур зо05 зо зі5 КУН сіп Су бег сух вго її сіу ту Бек обіх вго ав Сув бів хів АТ 325 330 385 бій ні аа Сух іец дет дер о вго Суз Ніз дя Аго Бі бег Су і у5
ЗА 345 вхо сім тк озаг бак обі Ре бів Су бін Су беє рго сіу тгротве в1у 355 ЗБ 05
РгГОо тВгоСух его ТБ АБ І18 дер дяр Сув аг оРКО Ай Ах Суз баг
ЕІ 55 з53 ні СТУ СТу тв оСух сій аАБроіву маф деп сіу Бе ув о сув чаї су
ЗБ 9 З55 БЕК вго его Бій тгв отак іу гу тВгосує сіп іви А5р о АТа ази сін Суб 4055 З іх ій Ат зує рго Суб Уді Аки вів аг озег сСух Ух АБ ївц тіє дів о 425 й Й 5
Заготук туг Сух дер Сух іви о вго біу тгромМат бік бів Ахап Суб да 335 430 445
Іі дяМ Ії АБ АБр о Сух ів вБіу віп Суб віп Ап до Аа Зег Су 450 ах зо
Ага Азроівн о маі Аа бі туг Ага сСух хів Сух Рго Рго бЇУ тут дів 455 47 5 Зо -іу Ар нія Су бін ака дер Іі ар осі сСух Аїд зер дяЕп о вго Су 455 90 ав іен аБп сіу сіу ніх Сух віп дяп бій тіе АБ о АгОо РН бій Су гей
БІ зо5 5Іі0 був РгОо тв СОІУ ве зегобБіу дхпоіви Суб5 біб рено ар о Іїв А5ротуг зі5 БУ 525
Су Бій вго А5ва овга Су бій ап о сіу АТа сій сСух тує деп о Аго дів зій 235 За зег ар тує РБе Суз 1уз Суз вго бі) др туго бів бі ів Аза Су зо 555 БУМ зег ніх гец о гух дер онНіх сСух дга о твготвг о тар осСув вів уді Ії зЕД зба зуб ак;
бек Сує тйг Уві діа Мет дід зег о Ачяи дхр тйг орга бів бі Уві Ага 280 585 50 тує тІте ек зег о дяй чаї Сже біу рго нія сту єух сув іуз ЕК бів зак ОО 55 его зіу піу уз пе пйг оСуз ло Су ал вух шіш Ве тапкг сіу так ій ві5 по
Тук ув нів вії а5п тів Аки а5р оС зіц заг Ав вго Суз зуб АБ чех 530 35 щ-о оіу соту тйг оСух тів Азровіу маї ази 5аготук гу Се І18 Суз Заг що БУ 555 хр осіу тт осіц сіУу дід нії Суз зі) Ахп о аяп хів АЗа Азр Су аг б 65 вто чіп дя вго був нів тук біт біу твг оСуУух аго авріви хзаї Ащи Ав
Вл5 ВО ях рие тжк су Аво Су гу АБИ біу тгроіжв біу гу тВг осмжа нія яег вод 35 това ага Ав бек о біп Сех Ар ові дів тБгосСув ап Аяв бі бі тв оСея о 230 715 2 туг АБВ сіб Уві Бр отак о вБе їув суб мет Сув РгО сіу єїу тер оаій ах 30 яа5 пі тйк отр осСуз ах отів ід заго АБл Зег его сСух ів Ро Ахп рРго а 745 є
Су Ніз А5побіу Біу твгоСже Уа: Уаф Аа віх АБроЗаг Ре твгосСу газ БО тах та - т- : Н щ Так ота ями йооєтчтто тім тт те - чаї Су Бух оф сіу тгтровій є1у вко тів бує Те бів АБа о тВК Аа тп їх та 850 Суз бег Рго ніх Бго сСузх туго дзи бек о біу ТАК оСже Уві азросіу то 90 795 ОС дер ази ТТГ о тУК да Суз біб Суя Аіа Бго сію Ре АТа шіу го ая» 505 від тів
Суб Аг тів Авпот1іфіє аби біс Сух сій чего зак ово Су діа рве віф
Ва 525 МО дів так Су жа) др Біб ІЇв дб5и шіу туго бів був тів суб Рго Рг
ІЗ що 45 зі нів зек біу дід ух Сух Ні бі Узі Зег о біу ага бек о Схз тів 850 віх що
ТЬг меж сту ага Ууді тів оі2ец АБ» сіу аа ух тгр о ахр Ар АБросСух щ05 нт 5У5 вка вп отвнгосСух шій Сух ген овяп біу Ага ма! Аів Сух дес рух ді тго 855 БУ 55
Сже сі Рг ага РгОо Су Аго ів НІ іу5 бег нів йхп Біб Сух вго жк За5 шо звгобіу бів зак осуз 11 вєго Ууді і2ги АЗОВ Аза бій сСуз РБе ма! Аго щі з2о Чех
Рго сСуз ТБ о Сіу Уаї Сі бів Суз аг ес его бзег бе бів рго чаї іш ТАГОоруз Су тк оБег дерожег о туг туго б!ів Ар о дяп Суз Аа дей ах 5 955 За т1іе тнговВнче так о РБе деп гу біц Меї Меї его вго бі ген отвготвг зЗа5 ЗуУй З75 сій нів Ії Суб5 заг оБіб іви Агар АбБп о їец Аза тів ге рух А5п май зво ЗЕ за пшег діа бід тТук б5єг тів тег жТа Аїз СуУу5 СІЙ РгО Баг ово хеє Аа
За о 005 зп дп бів тів ніз Ууді Аза їі 5агоАТа Бін АЗВ тів Аг дер ннжо їО15 302 вза оіу АБИ вро Ууді гу бі ІТ ТНБ оАВв фу тів лів а5вівен 12 МА зп
Ууаї Бек іш аг азхр ошіу дя оЗего заг ої) тІіе Аїз діа уві Аїд 140 1045 1050 сій ві Ага ма! сій АгО АгО вгОа гер оіуз Аби АгО ТК о АЗВ Ре 1055 1058 ісвх іви ма! Рга гей оіен обег 5ег Уві іви твгоУзі Аїа тго Узі сСух ца їду запо уз їм оуаї твгодіа Бе тут тгроСув Уа! Агоріуя АгОд Аг і 10855 зов з рга Бек о Бвг Ні тйг о нія бак АТа БгОо біб А5родяв ТО тТВг АВ
І ох зло дахп ма! АгО Бін іп оівй деп бів тів іх Ап РгОо лів зіц і 55 2о 1125 нНі5 су Аїа АБИ ТТГ оУді Рго тів Еф АБротуг ІЧ АБЛ БУ АБИ ті 1135 її
Бек їуз Мет зег губ тІіе ага тМг о ніз АБИ зегосїіц ві січ сів ії 1150 1155 яр дяр мет др іш Ні сій віп іже Уді Ага Ре Ав і св ї1цБю 1155 іт
Вго уві тут Тнт їв оУді йхов Ага сів бій їубБ Аїя бго бек Бі 1175 зі5о з1185
ТВговго отр оруз нія во дей тТгО тТВгодяло іч сій АВ дяп АК ії 155 1290 авріеи ощіц зег аіа бій Зег о бец дви ака мет бій туго І18г Уді 1255 12 1235 «аб» З каїї» ї235 «212» Білак «еїЗ» Но хартІєпе «а2ї» іні однаки «283» дже людкни ся З
Мет Ага Аїд бів біж ак осі» ага іви рго Аго Аг ієцівєнівц ів і 5 10 15 івец Ата єец тгроуа! віп Аїд діа заго РКО мет сту туг вве іш і ец 20 25 30 сіпоіви бек АЇв іо ага дя уві аяпооіу бів ім оівц хег сі Аа зх 30 45 ув Суз аз о сіу Аза біб Ага таготБг ака віза РУ біб Суз бі нів 50 52 б вро Суз ар отйгК тує маі Ага тд! Су5 бен оіув бій тує вій діа то Ко ва їуч уві так ово тк осіу вва сСух баг отук біу ніз віЖ АТа твг РКО я5 зо 95 чаї іем спіу сіу за Зак рне туго ім РКО Рго Аіа Бі дід діа сіу 00 105 іо зв агоп віз ага дів ага дід Ага азів о1у Бі дев бів дер овгОо сіу 115 їі? 135 іви уві Уді тів го РО бій вне Аїя тго РГО дк 5ег РВЕ ТВг ої ву 135 140
Ії хаі ої Аа тгроахр о тгроаАвр ас АБО тТВгОтйг о РГО АБ бів сін
155 І50 152 160 іви реч Іїв піц агуд таї бБег нів Азв обі Мет тів АВ РКО бів АЗд ї55 175 і75
АгО тору ек їен нія Бе хвг обпіє нія Уві аїа ніх ів сів ей 185 і85 її тів тів Ага Уві Аг сСуз аа Осій ап отУуг тус жеб Аїд твгобуз Аяп їж ОК ах іух вНа Суз Ага РКО ага Ап АЮ Ре РНе бі Ні туго тВгб оСже Азоа «ій 215 а тів тк обі; Ах ім віз Сус Мет Аза пішж тКгроМмет вБіу груз пін сСув 225 280 235 Ме іуз бів АТа уві Суз гу сіб сію Сух ай ви ви нія шіу яїу сСув а5 50 255 тТвгоУаї Рго іш бїц Су» Аг осуз хекотуг бїу тгвобів бі Ака ра
Б 265 ка був Ар бів сСсув Уві рга тує вга сію Су уві ні ші заг суз маї
МК 280 гК5 -із вто тгвобів Сує Аа Су СІМ ТТ Аза тКрошіш шіу ів ої ев осСув юю ВО хо
АзЗроЕУуя Ар Евц АБ тТуг буз біу хек Ніз Ні Рга Сже ТВ оАЗа сіу 395 310 315 КУ ді тк осСже тів Аа Ав сів го аЗОошій тус ага сСух ТВг ск го
ЕЕ 330 335 ехо біу туго бек біу ага Ап сСух сіц Ух від іш нія АЇВ уз Таг зад лав 35 чего азп рго Суз лід Ап біу діу 5ег о сув Ні сів Уа! Рко бвгосіу 852 ЗБ 3055 вив сій Суз Ніз Суб го б5аегобіу тт баг о біу Рго о тВгоСуз Аа і ев 37 375 зна ехо Ії Ав бін Сує Аіа чек о Азп вго СуУух від під віж Бі твгосСув зя5 зо за 96
Уаї азр осів Уа! а5росіу явйе біз був ї1ів Суз вто бів бів їв Уа
За5 10 4ї сі АТа тагосСуз від іву дхр о Аїв ах бі Су Бін су уз РКО Су5 аг 425 330 ім: азпоаіа рРйе о 5ек осСух іш Ап оїез тіе сві сфу туго тук уз АБУ «35 Зао 445
СУБ ІТ Рго біу тероітв бі І1в о Аяп Су Ні Іф АБ Маї АБИ АБО а 455 зва
Суз га спі іп о Си5 віп ніз іу біхЖ твагосСуз ух яв о їец ма! деп а55 70 475 но і ту бій Суб5 Уа? Суз РгОо Ага Бі вмМе сі сіу ага нів Суб 61
ЗЕ5 390 455 івм ШІ: агО ар іш сух Аїа бЗег баг орго Сух ніз бегобіє Біу їв 535 510
Суз бій азр о вец Аіа ахробіу впе ніх Су5 нів Суб вго біп сію рН зі БУ. зах бак бі Рго ви сив бін Заї А5р Уа! Авврорев сСуз вій вро Зек Рго 530 535 зо сув Ага АБл СТУ АТа АгЯ Су5 туго АБИ іїей бій Ту агротуг тук суб заз 5 з5а Ба віз Суб о вго йброар Ре і біу їу5 дБлосСув5 Зег о уві Его ага бін
Зп БЕЗ
Рго Сув вго сіу сіу АТї Су Ага хмафї тів Ахросіу бух біу Зег Ахо
З 585 5 діа бі Рго бІіу Мет Рго бБіу твгоАід АтТа бег о біу чаї Суя СУ рРго меж о 55 ніх сіу Ага сСуз Ууаї его сій Рго о бвіу біу а5п Ре бек сСуз ІТ Сух вів 515 620
Ази ошек біу Рне отак віх ТВготук сСуз Ні віц а5а тів ар аяр Сух
Ве 530 535 Бо) іга біу піп рго Єм5 ага дп о бпіу біжЖж так оСуз тів ар бін Уді Ар 545 850 855 діа вна дка Сує Ре сСух Бго бБего бі терозії Оіу січ бе Сух дев
ВО що вла аг одБт ВЕ ем Ах зх ів РГО Ар ого бух Ні 5ег АгО щіУ Аг
Твг аз Бго ахйп о ахросСух ів РКО Аяр овго Сух нія 5ег дк шіу го 5/5 БНО БЕХ
Суз туго азр бец о мві ап ар Ре туг сСуз аів сСуз дер дав осі тго іуз БІУ ух ТВ См Ні зег о дга січ рве осів сСуз ар Аа тує так 75 ті ті 72 сСуз бевгоава піх біу Вб оСуз туго АзроБег біу АвротвВе Бе Ага сСув 785 730 735 віза сСуз вта о РГО біу Трої з спіу ваг отйг сСуз АТВ Уві Аїд уз вал
Та 755 я 5
БвгоЖегоСує гівно вБго Ап оРго Суз маї Азпошіу фу твгоСуз маї бі1у 235 ВО 5
Зегопіу Афа бе бе заг оСу« Ііе уз АгО азр зі тгв осі: Ту ага 20 т75 й Й ТВ ши тТвгосСу5 ТК ОнНія дей о ТМг о АБпП АБО Суб АБпПОРГО Єв вгОо Су туго деп 85 ЕН 75 802 еіу сію тіе суб Уді дя ві Ууді аБВ тр овБе ага Суб біс Суз дів вх я віз рго сту вне АтТя біу Рго Азр Сув Ага тіе Авп тів Азр Бій Суз віп ше 5 85 ак дак овго Су Аїа туго шіу дія тпгосСув маї Ав бів тів Ап і1у 835 вай ах тжг Ака Су его суб Бкго вго віУу ага АЇВ зі РГО АКо Су біп сім
КЗ 5 БО чаї тре сіу Рпе сі Ак БЕК сСує пгрожек ага сту ТВ оБго вве рго 8Б5 870 875 зяб ніх Бі ек обеб тктроза! бі Азор був Азпожег о сСуз ага Су іву зр аз 0 ка оіу Ага АгЯ АЗОоСух 5егоіув Уа! пгросСуз СІУ тгроіув вБго Сувз ген що Зо з10 іви Аїа сі віп Рго бій Аіз ін о зЗег Аїв бій сСух вго івн о сіу сій щі зго 25 ага Суз ви біб іжз дід рго біу сіп буз бен Ага вго РгО Суз б3и «30 а35 сені аіз тквосіх зв Суз сіу Аїа бБіш сій Ро РГО бе ТК ОРРО Суз реву
За5 50 955 зва
РГО Ага бег сіу Ні ів аБр дя аАЗпОСу5 Аїд Аг ів тнг ої ви НІВ ох КО а
Рпе азп Ага Ар нія Уді Рго віп сім твготйк омаї віу дід тів Су5 ща заг вБіу тів Ага Бек іви Рго дія таг о АгдД Аїа Уаі АТа АгО Азв Ага
З55 зо 055 ім ви ха! івБоівц Сея ап о аАгЯ Аїда дат обек обі АТа дак Ав 105 іга "ві бін о жаі Аїа жд! Зег ре озег Рго Аїя Аго Ар о фен Рго дер ї025 оо 1035 бек бек їец їі біп о біу Ав Аїа ні дів тів Уші Ав Аїв Іїе 1245 їо50
ТЕ оБій аг обіу ап хег олег фецівц ів Аа ат тб оЄЇїВ уд 10935 10650 155 іув Уві біз тк оУВ! Ууді тако сіу бі 5ег его тиг офу ів ії ек їі 10975 1050
Уаі вго ча! їівн оСуз бвіу Аїд Бе о бег Ууді іви тгро їв Аїва су о85 ійоо їлах чаї жаї їец Су ма) тгО то о тТВгоАгоа фу Ага Ага фу 51 Ага їі і1щ5 о о АгУ аг ака івев орРгОо Ага бів бів 5ег дід депо дяп вів тер іх 1120 13125 дід вго фен ап рго тів ага АБО вго 118 сій Агар РГО б1у Ту
Т12о і1155 з148
Ні бу5 дер ма)! іец туг бій Су іув ап ре тйго вго вро вго 1145 ї150 1155 ага Ага Аіа Азв бін дів івем о вго біу Рг Ата сіє ніз дів Аїа 1150 1125 11783 чаї ака бів азр ії біз аз біц аріїв біу Ага біу бів бів 31575 і150 1155 ав оЯег о їгем сін аіз бін ів РВе їв баг Ні гіух рРНе ТНК уз ї1358 ї1з5 12 аа овго Бі Ага Бек овго сік Аг о Бго діва ні тро Аїд бек сіу з205 іга 1215
РКО Бу5 ма! дзр асп АгО Аїв Уві Аго Зеготіє дп Біб Аа Аго їз го 1225 1238 тук Аїва сіу іже бів 123 чаї» 4 «еїіїх 1247 «ві» Білок «гїЖХ» Маои)ще зо.
а кя ха2ВІ» зн ознаки «ва» мишачий Із8це «хх 4
Мет ага Аів лга зі тро овіу агфрієен рго АгдД Аг ієц ієц івц ген ії з за їх ів чаї ів сСух Уві біп Аїд тпгоага вго Меї біу туг Ре бій і ви 25 я за сій ви 5ег Аїа їеб Ага Ап ома! Ап обіу біб рев їв бек шіу Аза 35 40 45
Суз Суб Аярозіє Ар ос1у Ага твг о тВг о аАго АїВ о шіу біу Се біу Ага 50 даровіц сСух дав тйготУуК Ма! ака маї Су Беца біб туго Бій діа рок т 75 БО іу5 Уві таговго тк обі го Су5 Бек отук сту тук бі Аїа тВг РКО 55 я 55
Уві без ім вію Ап Зег Ре туго іен рго РГО діа сі Аїа Ав оіу ню 105 о
Азр аго атТа Ага Аів Аг 5ег о дка твгоЄтТу СТУ нів бій Ар го б1у т1ї5 125 125 іш УВІ Уві тів Бга Бме сів РБа аіз тгр о вго Ага 5ег РВе твгог ен ї13а 3135 іч хтів мМаї бів Аїв тер оАБротКв о йхо ав Ар тк тВг о РБге АВ ОСТ бів 145 ї5О 155 що іем Еви ІТ2е бі Ага Уаї 5его нії діа сіу Мет тів АХИ РРО ІН Або 185 ї75 їх
Аг отгроїуз зак оівец ніх РБе его біт нів уз! Аїд міх ет ст г ез їі іх5 ЗО іп тів агє Уві Ага Суб Ар бій деп туг туб бего дів тагосСух деп із: г, Мав іух вБа Су Акд о Бго дга Ав о дяр вне вБе обу НіЗ туго твг Су АБО гій 215 аа біпотегобіє а5а їух дід Суз Мет йхр біу тго Мет сіу гу Є Суб 225 З 235 240 іУуз шІЧ АТа ув! Сжшжа вуз вів ошіу Су азпоген рев ніз іму віу сух га 255 5 тн оУуаі вго сі бі Сух Ага оСуя Зег туго соіу тгв бів біт ув вне
ЕІ Ва вх
Су АБрооіц Сух Уді Рго туго рго біу бух ма! Ніз Біж зегосСувз чаї 275 280 2855 сім вго ткроніх Сух АБросСуя СТШ тб Аза тка бі бі їев ово сув
РАЗ 235 за еп гу АЗВ ген Ажи туго Сув бБіу зеконіз нів вко СУх шві АБ сію зп 8305 315 325 яжіу тнгоСуз ті деп Аїд сії рго аАБр Осій Ту Бен Сше Аїа Суб РгО
Ва 350 135 дп ові тук гав сі Гуз аяп Суз шій АгарАїв шІіц ніх Аа суч АТа зай Зав 50 зак одяп вго Сух АТа АБИ Сі сі бег оСу5 Ні бін уаї го бегобію ї55 БО За5
РВЕ сів Су нія су РКО 5егобіу ткровек осі вко твгосСух лід ів
ЕВ 375 зво зр оІїв а5ро віч Сея діа Баг о Ахп о ргОо Суб Аїв від бі сіу тик осСув зЗа5 ЕВ 355 А
Уві АкроБів Уаі Ар о біу Бпе бів Суб тів Сух Рго іч сій ткроуві 535 аа чі сію Атїа тек Суб сіб гез АБроАТЯ АЗПОСіВ Суб бів сів іуб5 вс був «ко 425 Я іви А5п Аза Не зер о сСух уз аби іви ті сту Сіу Тег отег о сСув АБО 435 а4о 445
Сув бец РКО сіу теру бі 112 А5п Суб бів тів Ап тіє дей АБЮ 450 а:х5 «Ба
Суз ніз щіюж вій Сух сій ніз сіу сіу тТвКоСух Ек Аа їец о уді аа 455 470 495 що еіу тук бів Сує Ууді Суб рго ага віу Ре бі щіу ага ніх Сея сіц 85 а 495 іви бій тук а5в о їух Сух А)Їа его Бег Рго Сух Ага Аг бі о1у її
У В у су у За х мюЮ За 5 су бін Ав бен уаї др о біу РП Ага Суз Ні Су5 вгО Аге сіу і ви 5ї5 520 25 зак ім ви ніх Сух сіб Уві зр омеї Аз ге сСух бів Рго б5егоРГО
За 35 ки сСтуз ем АБИ сіу А1їа ака Сув туго азп о їей бі бір АБротуг тує Су з4а5 550 555 550
Авіа сувз вго біб дя» вве сіу сіу ух АвпоСуя бек о тді Бго АгД одяр зво зв ЗИ тТигоСуз его сіу сіу аїа Сх Аго УВІ ІтІіе Ар осі суз біу Бе сін зво з85 5 лів ші 5ег ага Аїа Аа бБіу чаї аїа вго 5ек сі ті Суз СТУ рРгГО за БО 55
Ні жіу ні су маї 5егоіец Рго пі сіу А5В о БНе зег сСуз ІТ Су5
Ії вів ов дяр его шіу вБе тк оєїу тВготук сСув нії бів АБп ІТ Ар АБр су віз зо БІ5 НО
Мет оіу біп РгОо Суз Аго Ап осіу сім твгоСуз тів АЗробБію маі Ар в45 65О б55 чег впе аго Суз РБе Сує Рго бакобіу тгрозін сі іч ів Смя Азо б -О5 57
Іі Аза рГгО Ап о Ар о Сух івц Вго АБ овго Сух Ні бек Аго БІіУ Ага бу2 рез 55 ув тут АБр гемо уві а5п Ах Р туго був діа ух Авр о Аяр Ту тгр су Ту МеВ гемо маї дп А В РНа туг був Аїд бух АБр о Аяр сту в
У Б Уа іу5 оіу ше ТНК оСув ніх Щег агар сін РБе сів Суз азродія тук о твг
ГЕН 710 їі зай був ак Ап сі сіу ТВг об туго ав Бек обїу АБВ ТНК Рле арго сСух
У2 й Уа 7355
Е-Я Я Ж
Аза сСу5 Рго рго Бі тгтрогух шіу его твгосСух твготів Аіз зу Ап «40 748 5 зек зак су чаі РгО ази оРгО Су5 Уді Аа оБію ві пе осСу5 чаї сім 2хЗ5 ща 755 аг віх АБробеє РКе бек Суб хів Суз Агд Ар АХ тгросії сіу га каз ТА Є
Тк осСуз твгонів дя» ТВг Ав АБО Су Аа вго ба) орго сСув туго дам
Ттяи5 ад 75 ко сіу щіу хіє Сух мві Ав біт Маї Ап тгровНе ака Сух Сіш Суя Аа 85 ВО 815
РО біу вне Аїз Зі вго ар осуз ага тів Ап хів ахроБіц Су шій
Ва 2 хо бек бег рго Суз Аїда тут сіє АТа ТК Су маі Аярозію» ІТ ляп сію 535 вав 435 тТжг о АгОо Су бе Су Рго Рго пі ага Бегозіу Рго ага Су іп бів 850 55 ЖЕ туаї ма! тІїе вМе твг АгО РГО ув тер его Аг сту мет бак РНе рго ва5 й 875 яво ні Біу ек заг тв Мет січ азо Суб АхВ зегоСух АгУ Сух і ву АВ
ЕЕТсЯ 55 КУ сіу ніх агоа Ав оСує б5ег ої уз Маї ткроСуУух шіу тгроіжя Рга Сув ге че Зах ее іен зек бі бів вго 5ег дер го бЗег діва бій Сжв вро вго віу бій
З1І5 пов 25 сіп о сСуз сбіп бін із дія ма! бі віп о сСух гец сій Рга о Рга сСув Бін
За ч35 а «ва тго ві бів сСуз тпг о Аіа іш сім РКО Бец вко вБгОо бак отнкК о вРго заз З50 255 ЗО був віп вго АК хес хег Нія іви Ав Аа Ахп о Суз АВ Агдоіви Тиг ау Ву іви ага вБе Ахп Ага Ахвобвіп Маї вко бій ші тйготВкК Уа! біу дів зна Зв 950 тів сСуз 5аекосіу тів Ага АТа івгц о вго Аїд Тг о АКФф о АЇа діа Аїд ні
Зя5 190 1005
АБО аго фе івнієм ів іви бух а5р Ага АТа Зегбо 5ек шіж Аїд зро 1015 іт
Зег аїа ві сії Уді дід Мет обег РВЕ Зег рРго Аїд Ага Авріви 025 1535 і935
Вго аяр баг баг оівц тів бі» оЗек о тйг Аїд ні лів тів Уві Аза. то 1545 іо50 із Іїе твк осів акоп біу Ахп о чЗег беб іви івцоіви Аз уді ТВг 1055 1050 ї085 бів заії у уд! бін тик чаї маї Меї біу біу ак бек тйг обі ів вен о Ууді вБго мі ївгу Су5 звгоУВі вне заг омаї ів тер їшц 1085 в ї5 із Суз омві Уа! хІЇв Суз маф га отгО НГ ОАгО їуЗ АГО АКа 1 у5 і з105 1130 ій Ага бій аго Бек Ага іє РГО Аго АБВ Бін о бЗеб таг Ап деп 1315 зі 1175 щіп тро іа Рго ів Аза вго жів АгдоАБи Вга о Іїв бі Аго РгО їії3а 3135 з5-а сіу біу бег сію іве обі ппго біб су нів уз двро тів гео отуг ї11435 ЗІ 1155 ціп суз ув ахп ве тйговгОо РГО Бго Ага Ага Аза шіУ Сі АТа 1150 1155 ї17а іви вго біУ го Аїа бі Нія бі1мж АТа бі біб 10 а5Б осів сів ї175 ї150 1155 ваза Бін бій ів Бек Ага сіу АБО БІУ АВ заг оРКО біб Аза си 1150 3155 їі із рМе тів 5ак ні ге ве ТК 195 дв вгОо Зек о Сух ек ге 1205 1210 ї2ї5 с-іу ака вго Аіз Су5 тгроаїВ РКО біу рРга гу хаі Азр Ах АгО ї127а ї275 ї230 дід маї Агй Ваг тк оїув дБро Уаї Ага Ага Аза с1у Ага бін 1535 зга ї245 «се» 5 «її» ЗВ5 «аїг» Білок «8132 штучна послідовність как» «ев3» її мишачий Заді-пзі-ЕсРі-4 (мешмачеим зваї-антеген) «ОО» 5 дів авровен сім зек сій вве сій іп обі) тів бе) зб мет сіб Аз ї З Зо ії5 чар деп сію ОР іен бів дп обі дямй Су Су бРУ біт маї агд о дем
Ко й5 за
РГО сТу Аза Аго вуз Сух ТЕГ о АгГО АБО бін Суб дзротвг о туг вБе г у5 35 30 45
Уа! Схз рен тух сій тег біп зЗегодго маї таг о Аїв бі біу вка Суб 50 ЗЕ бо чаег РБе сіу Бег обі зв о тпг РгОо жаі Ії фу бБіж АБ тйпг опе дел
ГБН то з ЕЕ івги руб5 АТВ зегоаго БІіУ АБпоазр оаАго Аа АгОо тів Уві іву вра рве ще 5 аг Ре Аа тго о РгОо Ага Зег о тує ТБ огГецз бен ма? бій: Аїд тер або щю їдь т зег овВег АВ Ар ОТГ Іі біп Рго Азр о Заг тів тів біц їу5 Аїа 5ег 115 о 25 ніз зег о ціу Мет ї1іе д5а рРго бег аг шій тросів тВгоїев гуз шій 1305 їх5 10 дев твгосіу хів АТа ні вне із туго сій х11е Ага Узі тг су абр 145 В 135 їі аа нів тук туго сі РБе біу Сув ап огуз Ра сСуз ага Рго Ага АЙ 155 1575 175 ахр Ре вне сту нія тк Аів був Аярозій ап СУ Ав ів твгоЄух ї5 155 30 мет зій сіу ткр мет біу вго Абр суб АБл вух АРа тів Ку5 агд Осій їФ5 КО ах
Бі був бак о рго туз нія біу зег Сух груз геї Рго сіу а5росСух Ага 21 23 ра суз віп туго ші тгросів біт їез туго сСух азрорух Суха тів Рго ні го Зо 25 зай вго віх Су Уві ніз Біу тйгосСу5 аб січ вРгО тгооБів Суб ів Се5 245 250 255 іч тег оАБВ тгробіуУ сіу іп іеч сСух АБО) Ух дярівц ахи туг сСув біу тк онія бій вка Суч іец да Акад ошвіу твгосСух бег о ахи твгошіу ра «ВО ей вга Аза фує туго вій бух яег о Сух Рго бів біб тую жеє сіу вкгоа Аяп
ОО 795 З сСув Бін тів АТа біц нія Аїд Суб іви Баг АВ РГО Се НІВ А5п АГгО 305 БУХ 315 323 бЗіу Зег о суз ух сін тВгобег бег ошію Ре шій Суз бін Суб ЗвгоРгО
За З3а 335 сі тгБотйаг біу вго твгосСух явг Твг Аа ІЇв дер др сій вве сі зо 345 КВ іївч Уві вго Ага біу зег сіу нів нія ніз нів нів ні 335 ЗБ зах «І» 5 «еіїх 343
«іа» БілоЖ «їд» штучна посяз1довність юки «23» скнтетична послідовність: людським запі-о5-ЕСБІ1-4 (людський зіаді-антигеніи «Б в тів РІВ бів їв обі тів ів заго мет лій деп ожві Ап шіу шівіви і 5 ще 15 сіп АБ сі аблп Су Су сіу сіу А1а АгоОраАза Рге о сїіу Ар Ага ув их 23 за хв тагоАга дяв обіц Су аеро тБг тує Ра гу ві СБ івц г у5 сім 35 40 У туг віп 5ег яка уві тВг віз сіу б1у рго Су бек Ре бі бек бі зо 55 щи тек так овго Ууаі 112 біу біу ди тТБК о РНе дол їец іт АТа его АКО я 5 5 пі ап Ар Ага Ахп Аго Ії узі їіви вго ВНе его вве Аїд тгровго
Е до ах га чего тус твгоєецоівб Уа! сі Аа тТгроАБробег ек дви дрОТг
Нею їо05 я
УВаі сій рго Ар ощшеє її ї1іє біц їує АБ бек нів Зак обі меє тів ї15 120 125
Авп оБго зеє агб сіп тгРросів тб оіец о буз сій Аза твКобіу Уді Аа 136 135 їію нів рве бів тукобіп тів ага Уа? ТК осуз дк АБО тує тут туг віт 345 тю 155 ї5О вве сіу Ссух Ап ог уз вве Суя Ага РГО АгГО Ахр о Ахв РВе Ре біу нів їб5 173 175 тТук ага сСуз дяр осів дяпошіу дяп ів тис осСух мМеї ін шіу тгромек і185 155 ї150 сі вго оіц Сух Ап о АКе АТа Ії Суя агооіп офу сСжшя бек рго ру ї95 20о 205 ні 5іу зек сх гу ген о сіу ар обу АКорсСух бій тег бу тгробій
Іо ті у піж іеу тує Су Аза фу Су тіе Рго Ні Рго бі Суз уді ні бі з 233 235 4 тів о сув дляв сів вго теробівп сув ем осСух шіб ТВ лев тер осіу сію 258 жо бій іву дув Ар оєух Ахр овен дБ туго Су5 зіх тагоніз віп Бк о сСух го 255 ки іец дб ові оту тйпгосСув Зег ап твг осі его Ахроіжв туго Біп сСух 255 Ви и его Сух РГгО січ сіу туго Бек сіу вто азп осСуз бів Ії Аїд ів ніх 25 255 зо дів Суб гей хак ар о РгоОо Су НІ5 аБЗ Ага біу зак сСув і ж5 Бі так 305 Во ЗІ 320 хвгогец біу вче о біч Сех бів Су зЗвговго біу тра паб обіу ббко тар
ЗІ5 ЕН 333 сСуз бек тв АЗп тів азр одер ве «ЕМ «тії» ЗЕ «дід» БІВОХ «РіЗ» штучна послідовність «ЕЕ «РІЗ» жинтетична послідовність: щишачий 3зац2-О51-ЕБЕЇ-4 (муУшачиМ дзад-внтвгені «Цех 18 Азроіви бір Звг мет біу тук впе бін їец бій іву 5ег дід їі ву 3 З 10 15 ага Азпожаі Аа сіу ші іекоівен его вБіу Аїа Сух Суя дар овіу АЗо
КЗ 25 за с1у ага тйг тнК Ага АТа біу біт Су шіу Ага Ар о щію сСув авротаг 35 40 45 тут Уа! Ако Уві Суз івц і він туг сій іа ув жаї ТВгоРКО ТК
ЗО 55 БИ зіу вго Сув 5ек туго шіу тук о сіу дів твговго Узі фен о сіу б5іу Азй а 7 75 що хаковВба туго їец вго го Аіш с1іу Аз АТа шім Аа Аг АТа Ага АТа 85 ар 5 дгп бег о ага тп сту сіу ні сій д5Ю Ро біу без ув! уд! тів рго 100 105 о вне зів рйе від тер РКО Аго деко Ра ТК озген тів хаї бів АТа то 320 125 лавр о тгр о аАвро Ав Аа о твг тб Рго аАЗрошій бін івчоією тів бі Ага 130 155 140 уві век нів Аїд Біу меє тіФг аби РгОо ІЧ Ар о АГО тро Був Бегони 335 і5 155 ІВ
НІ РБе бег оту нів ді дів Ніз ів Бім оіви сій 118 Аго Уві Аго
Ів5 ЩЕ ї/5 був аз бій Аа тує туг зе о аїа ТпГ осуб5 ап оф у РВЕ Сує дга вго 1 їз 855
Ага дАяподяЮ РБе РБе сіу нія тук твкК осСуз Аяр сій тує сі АБИ Ух 195 2цо ТО
Аів8 буз Меї АВ сіу тро оМет сію ух піц Суб бух 51 Аа Маї сСув ки 215 Ко іжз зіп зіж Сух Ап огец ів нів біу біу сСжве тТпгоУді вго еіу ім га5 230 245 30
Суб АгоарСуз бег о тук біж теровівй біу вуз вне сСух АБО сін Суз Уді ва 25 255 вго туго РГО іш Сух ді нія сі1у бек оСуз Уаі біб вРго теронія сСух 5 Р вв оСуз ОЇ: твгоАЗа тргрозіх шіу ій івц Сух Азроі уз АВ ген Аза
ВІВ га Ко туг бух бБіж Бек ні ні Рго Су5 Уді АБпобіу Біу пгоСує тів деп 29 295 Б іа Бій Рго аЗр бій туго зіву Єуз аів Суз го дзросіу туго іен біт зав зів зіх зо іуб5 Азп Суб Бі Ага Аїа іш ніз Аза су5 Аїд Бег о ахп о ргОо су дів ї25 330 зах дви сіу Ту бег Єша нів зії Уа! Вкго его осі РБе о сіц Сже Ніз сСуз 340 345 з
Рго век сіє тгр Ап сі го таб оСу5 дід бен Ар от1ів Ахр о бїв він 3533 БО 65
Рпе бвіу ви уві Рго Акад сі 5агоб!у нів нія ніх ніх нів ні 375 375 За «із 5 ке» ЗБЕ каіїг» БІЛОВ Й . «213» штучна послідовність «2 й І І «23» синтетична послідовність: людський даде-О5-ЕСБ1-4 Спюдський задг-антигені аід Ага РКО Мет біб тут Рів біб зви сім бен бег діа іей Аго Ап 3 5 10 їх чаї ап Оті бів гецоівеу Баг обіу Аіа Кує Си Ач» Біу Ав біу Ага 20 25 ща тк ОтТВг Ага Аїд біу Біу Суб бБіУу Ні азб бів Сух авротвк о тук Ма! 35 45 5 ага омаї Су вен о гух Біц туго бів Аіа вує маії ТБгоРКО ТК оБІіу ГО зо Зо бо
Сух бек тук Біу нія бі Аїа тпг о Рго ма?ї єец оРу бі ап его Ре 2 т я туг фев вго вга Аїа сіу Аїа від біу ачр АгО Аа Ака дів Аг АТа 55 З ЗУ
Ага Аїв ові піу Аза обіп деровго біу гемо хуаі УВІ тів рго вве сій 35 5 то ве Аїа тк оРгГО Акд Баг РВе тигоів) тів Уві біб Аа тгроАхр о тгр 12:20 125 а5р Аз АБа ОтТаК тагоРБго аа бів бій бецофен тів 5іц Ага Уді ек 130 іїї5 їла нНіз Аїа сіу Меї ті деп о РГО Біб АВ АгГОФф ТВ іуз щег іец нів вве 345 150 155 ї16би хег сі нів Уві Аїа нів ів Бім іез бів тів Аг Уа) Ага уз вер її 175 175 сім Аза о туг тже о бег аіа твг осСуз АБа Бу ВНе Сух АК РГО АгО о АЕп
ЗБ їх5 130
Аа Бе вйе сту нія туг ТВ Су АБО бій тус оту Ап гу АТа суб 195 ОО 5 мат Ар аім тгрметї біу іш сіц Суб гу шіц Ата уді сСуз гу іп о їх га сіу Суз дп їем о їеюв ні біу біу Суз тпгоУві вго сіє сів Сж5 АгО 285 еВ | 235 240 уз жег тук бі тгросіп сіу аго ве Суз Ар обію Сех уві го туг 30 255 во зі Суя уді ніз сіу бек сСуз маф шій Бго тгроБій Су Ахи Суз го тах во сім твгоябза тгровіш сіу ен оіву Су а5рогуз дяроівц Аза туго суз 275 во 285 йіу зах нів ніз вга був ТВг АБ біу біу ті осСух тів Азп о аіз 1
За ок юю рт АБО зів ту Ага сСув ВГ оС рт азровіє тук бвє сі АгО АБ
Зо5 310 315 120 уз ій уз АТа сіц ніз Аїа Суз тик обегб ап орга Сух АТВ вп сію 325 3130 х35 с-іу Бег оСузх нів Бін чаї вго зегосіу Ре біц Сух Нія Суз го Бек зай зах 830 сіу тгробеє шіх Рго тт оСуз йіа ів ахр тів АБрозів бів ве бу 355 збо З85 івм уві Рго аго бзіу вт сіу ніз нія нів нія нія нів
ЕМ Зя5 зо «ій а «Ії» 16 «212» вБіІНЛОХ «2іЗ3е вУучна послідояність «22» І о . й й «223» шкнтетична послідовність: нарізбельна область важкого ланишюга антитіла й «а З сій ма! бій іа уді сі зегобіу сіу ту гец Уві біп РКО віх сіу ії 5 КО 15
Звкоїен ака беру зег о Се дід аїа заг осіу Бе отак рве Зек деп ТуК 2 25 30 бі хтів нів тгрожаі ага бів дів рго біу губ біу гей осіб тгр ові ле за 30 45 іїзіу ткрохтів трг о вБго Адхообіу бі тук о твг дор Туг Аіа дзроЗег ув!
ЗО я 3 іув БІ ака Бе тВгоІЇв бек діва а5О ТВг чего і ух Ап отв Аїд тує бо то 5 ще ін бій Мет АБ Заг оієц дго а1іа 210 Азр о ТВгб Аїда ма тег туго суб кА 5 хів ага аіа бік зак о трровне аіа туго тгробіу сій зі такої вес уді 100 105 на тТВг УРЕ Заг озег 115 «ій 10 «Ії» Б «Рій вІЯЛОЖ кгіЗх штучна послідовність «ЕВАКх «223» синтетична послідовність: варіабельна область легкого ланнята антитіла й «Не Її а5ротіе бБіп Мет твгоБій бе вго 5ег о бег їв Баг Аїа загоуді сіу 1 2 їв 15 др ого ді тНгоІїе тнк Суб ака лід вегобій А5р о Ууді 5ег тк аАїа о ї5 ва чаї АТа тера туго бБіп сіп губ Рг сіу уз Ата го зу іен і ви її
Б 4 туг век Аїд его РВе гц туго бег сіу маї Рго заг оадго ве о хес обі 0 З 5 5 его зі вег о Б'іу тк Ах вве тйгоіец ту тів его зекоі ву бій го ме Ух що
ОЗіц де) вве Аїа так отуг тек Суз бій сій 5вгботує тв отвг о Рга его о чо зх
ТЕ вне зіу бій сі гої мар він хтів ву 100 105 «Вій» ії «311» Ло «21ї» вілак «Її» штучна послідовність «228» скнтЕтична послідовність: гіпервар'абельна ділинка і важкого ланцюга антитіла й інНУувВАНІІ чмю» її
ОЗіу вне таг о РБе зег одхп тр обіу їІіш КІ ії БІ 10 «ві 12 «гіїх 17 «21йв Білок «ії» втучна послідовність «Ве «Вед» синтетуична послідавність: НУК-Но антитіла 4 «ак тер Ії тк овго АБ о сіу біу туго тиг до тую Аїд АвроБзег маї у ї 5 М: ї5 шіу «ке» 13 яезі» й «ФР БІЛОК
«23ї» штучна послідовність «РО «228» сюнтетична послідовність: НУК-НЗ антитіла й «ща ІЗ дід біу бек тро Рів Аїд туг ії 5 «ек М «її Ії хаї2» вБІВОК Й Й «213» Зтучна послідовність «ЕвиКх «раї» синтетична послідовність: гіперваврідбельна ділянка Зі леского ланцюга антитіла А (НУК-РЇ «Ме А его аіа акобіп дер ха! бек о твг дів Уві від ії 5 я «ВО» 15 «ЕЯїЇ» я «ЕЖЯ» ВНідок , «3» штучна поеслідавність ке «ВЕЗ3У синтетична послідовність: НУВ-І 2 антитіда д «Ой» 15
Зег дід бек ва їви туго як ії 5 «ек» ТБ «її В «Рій» БІЛОК «2» штучна послідовність «Р й . Й «Феї» синтетична послідовність: НУК- З антитіла й «Не 18 сій вів бевг о тук тк отнтг о вго рого отвг 1 5 «ОО» її «віх 36 «2312» Білок хеїЗ»У штучна пешлідовність «ЕВ й «283» Синтетична послідовність: варіабельна область важкого ланцюга антитіла в-ї ем 15 зій уві 5івоіву Уді бів бекосіу Б1у бБу бео жаї дій Ркго зі с1у ії З 13 15 ак їен Ага їео Бег сСух Аїа із Заг сіу Ре так вве зего дви тує за сік хів ніх тго Уві Ага біп йіа вго зі вух бік ев біч ткрочаї 35 35 45 сік тт оті тк оРга даяробіу біу туго таг ази оту Аіа азрозег уд 55 що уз БіУ Аго РНе так ої11ї8 зем аа Азо тТагобегогуз ав о твг оАТа тук 3 те 75 що іец бів Мег Азпожегогвен Ага Аз бін АБа тк о АТа ма! туго тук о Сух 5 о з 13 Аг ЇВ оі1У жЖегоген вве Аді тук тгоошіу бів с1у твгоген жд! зо ЗО В
Твг оУв! Заг бек її «Є» 16 «їі» 107 «ій» БІЛОК . , «ІЗ» штучна послідовність яр Й «ва3» синтетична послідовність: варіавбельна область легкого ланцюга антитіла -І «НИ ІВ дж роті біп мет так обій зегорго Бег о зегоїен Бег дід вег о уді 1у ї з 16 ї5 дзп агар маї тк оІїа тк оСуз ака дів бекошій а5в о мді Бен тк діа
Кк аа ва чаї Ата тев тує віп сіп гу5 Рго зіу їуб5 Аза Его іуч ів і вно ї1в до 45
Туг 5ег АтТа ек Ре іви ту бек о сіу маї вго бвбодго вве хво біу зо Кі а зег зіу бег біу тк о дяр вБеа тфгоіїецу тготів 5вгоб5ег га сів вго о їв що піц АБО вВе Аїа твкготуг ту бує сій бзій тук туго те тб АТа тик 5 У ча
ТВгоРНе Біт бій шіу тйг імя Уаї бій тт є у5 мо 105 «Вій» ї9 «211 0 «ій» ВвІЛОК «іх» штучна послідовність ли
ТЕКА
«Рі» синтетична послпідояність: НУЖ-Ні антитіла А-Ї «ну» їз сіу вйе тс о РБе бег Аяи тег обіу І1е нів ії 5 я; «810» 20 «211 17 «гір БіяЗи «2Іі3х штучна послідовність «вух «723» синтетична послідовність: НУВ-НО антитіпв д-З «ас» 20 тТгтроІЇв тк оРго Аяросіу бі тує тиг о Ахо тує АТа Ар обег маї зу 1 5 10 15 іх «ОМ йї кі 7 «еї2» БІЛОК І й «гІї3» щтучна послідовність «ВЕК й «гаЗ3» синтетична послідовність: НУБ-НІ днтмитіпа й-1 «ще ді
Азїа шіу заг ген Бе Аїд тут ії З «0 28 «їі ТЕ каїй» відок «її» штучна поспідовність «ев» «шиї» синтТЕТНЧчНнНа посліІДОоВяНісСсть: НУК-ЇЯ антитіпа А-ї ких 3?
Ага Аїв дес зіп аа Ма) бек отвгоА1їва Уаї АТа ії 5 Іб «2» 23 «2131 У «гі? БІЛОК й . «3» штучна послідовність «во» «вл» синтетична послідовність: НУув-і? антитіла й-Ї ех 23 ек АтТа зек ВНе іен Туг 5ег 1 5 «Ну» й «вії» З «Іа» БІВОК «213» шщтучна послідовність
«ах «га3» синтетична послідовність: нув- З антитіла А-1 «ее Я сіп шій тже тує тв тВкКоАтіа таб те 1 т «Ії» 25 «еїї» 315 «айс» Вілок «еї3» штузна послідовність «его» «гі3» синтетична посптдошність: вазріабельна Область важкого ланцюга антитіла й-Е «а0о» 25 із Уві біпогвев уд! ЄЇв 5егосіж біу біу реч ха! бів вка сіу біу ії З зо 15
Зег ви Ага оіви Бек оСує АТа дів бЗег шіу РБа тб вБе 5егоаБа тук 23 З сі рів нія тгрохаї дгоа сій дів о РгГО сіж груз о1у ів бів тер очаї! 33 аа 5 сіж тгротів тв ші йхп о сіу аіу тугк 5вг Ав туг АТа ар о Зег та? що іж5 біу ага РА ТБг оті баг Аїда Азр о тагобег уз Аза о твг о Аів тує -З та 75 8 ів сіп Мет Ахв бекоівн ого Аа сій АЗо тВгодів ді туг туб сСуя 55 зо 5 авіа АгО АТа сСіу его ткеробне Аїя тує тго?овтфу бій єї ТВгоіецч маї 1 Кок 130 тТиг омаї бБег чег де
Зх «Ах й «Я ВЕ «Ії» вілла й «Ж» зтучна послідовність «ад» «823» синтетична послідовність: варідбельна область легкого ланцюга антитіла д-2 «ще б «вро Іїв шіп Меї твб осів бегорго зегобег о гву Бек АТа бег ма! біх 1 5 10 15 ар Ага Уві тагоїІ1їе твгобуз Аг дід зег сій дер оуді баг тар аа 20 25 за
Уаї АРВ тгвотук іп біб Ух вто бі уз дід Рг їуз іп ієен ІЇе
35 БЮ Я туг двг АТа бек Ре іви туго бвгоб1іу Уві Бко заг оага ББе бег сію зи ЗЕ бо
Зеє сіу ек о біу та ОА РБе тиг оіец твгб от) Бег 5ек їву Бій го та 72 що іїзім АБ Рлю аа тв о туг туго Се бів біп о жекК тег Тв о тВг РО вгО 8 що 5
Тс овна євку бів біу тпгоіжз ма? січ тів ву ща 5 «ОО» гу «9 З «8Зйе віл «233» штучна послідовність «ВТО «ЕЕ3» синтетична паслідовність: НУВ-НІ антитіла А-2 «ВО» г о5іу вва тик орав бат о ащи туго сіу тІ1в ніх і з Ще «Ен и «231» 15 «ЕЖа» вБідок «її» штучна послідовність «В» «В28А» синтетична послідовність: нНук-не антитіла 4-2 «ВМ» Ка тта тів так обіУ Ап ові Бі тук зер аз; тує дія аз овзаек чаї і мк і 5 5 15 5іУ «шк Я «рії» 7 «а» відожЖ «83» штеУучна послідовність «В» «223» синтетична послідовність: НУК-НЗ антитіла А-2 «ОКУ В аіа сію бек тен ре Аїд туг ї 5 еВ: За «Азії» З «а» відожЖ «2ї3» штучна послідовність свв «вї» синтетична послідовність: НУК-ІЗ антитіла 8-2
«аю ага Ата Звгобів АБр оба! бЗег тнго дів Уві Аїд ї о іп хижі» ЗІ «вії» 7 «ей БЗлОоК «еіїз штучна послідовність кггОх «ейй» синтетична послідовністьі нУн-Рі 2 антитіла А-2 «Мих лі чвг дів бек вре ів ту щег ї 5 «ее «її» З «Віл» віЛОК «213» штучна послідовність «ее «ВАХ синтетична послідовність: НУК- З антитіла А-2 «Во» 32 я-ів бі хек Тук тТБт о твг орга Вго тТвг ї І 5 «Фа» 43 «гії» Зх гіг» БілОоК Й Й «2І13» штучна дпосяідовність «220» й й Й Й «ра» синтетична послідовність: варіабельна область важкого ланнюга антитіла
А-ІБІВіт «ЩО Зх цін жар віп їен мні сів Зег сію шіу бі івц омаі бій овго БіЖ оі1у 3 5 за 15 заг іви акд о їев о леб Суз Афд Аа зегобіу РБе ТК о РВЕ чего оАщи Тугб га ря КІ; -іу хКа нія тгроуві Ага бій від вко біу ух іє бе сій ткрокді 35 40 45 сі тероІтІів тк оРКгОо ар осіу віу тує тнг одер тує Аїд дяр о чет ха в 55 що іу« ту Ага РНе тк отїв хег Аїв АзротнНг баг огух Аа тйК оАТа туг то ха ка іви шій Мет аЗп Бек оїеб Ага дів бій а5р о тйг о АБа жмаї тук тут суб 85 за З «із АгО АїВ біу тБг ів РВЕ Аїа туго тгвосіу зіп ЄТу твгоїво уд!
НЕ 105 ІЗ тТаг оУВі дек Баг 45 «еВ» За «аїїх 107 «2Ітйх вЗлОК «213» штучна послідовність «вах «223» синтетична послідовність: варідбельна область легкого ланцюга антитіла.
А-ЗГевдті «Ой» За
Азо тів зів Ме тв обій зег о РгГОо 5вгобег грец зер аїа заг уві 0іу 1 5 12 15 аз оаго жа? тТагоІТа о твгосув АгГо Аів его сій дяроуУуві бек таро аіа 24 25 їр чаї Ата тгротук бій шій зуб рго пі їк5 Аа го фує івціву ІЗв
ЕН 40 45 тут ваг Аїа аг вне іїен тує зак обіу уві рРГО бек дгЯ ве оЗег о сіу за 15 во
Зег ові бек сіу тік ода ве тпгоіїец тбголів бек чего бен бій вко то тв ко сій дяр Рйе АЇа тпк тує туго сСув бів сій тук отже тБготвг Аа тк за а5
ТЕГ Оовав осі бій со1у твг ог ув УВК Бі ІЇшв вух
ЩЕ 105 «2305 35 «гії» «Рай БілоЖ «гі3: штузна послідовність «дах «2Е3» синтетична послідовність: НУВБ-НІі антитіла А-їЗСПІтТІ «мех 15 сі вБе так о вБе его деп о туг ші жів НІ5 ї в її «А» Зб «її» 17 «еій» вілок «її» штучна кослідовність «вед х «283» синтетична послідовнієтьт НУВ-НА азтвтіда А-ЗГ ІТ «або» зв теротте те о Рго Азроєіїу іу туг тВгоАхЮ тує Аїа Аз баг оуаї гу ії З зо 15
-іу «ЇЇ 37 ха Й «вій» відоЖ «233» шщтузна послідовність «ех Й й «223» синтетична послідонність: НУБШ-НІА антитіла А-1Г «піт «ан жи зіва БУ твг о гєц Бе АТа тук ї З «В» ЗК «ВІ ЗІ «За» Білак «813» штучна послідовність «ау» «823» синтетична послідовність: НУК-ї антитіла А-ЗГ8301тІ «Оле З ага віз хек бій авромаї Заг отпт Аз уд! Аїд ії 5 їй «їй» З «Ії 7 «212 вІДОоК «еї3» штузна послідовність «22дх «РІ832 синтетична послідонність: НеКв-2 антвтіла А-ЗГ ЛІТ «Ннх З его дів 5ег ре іву тук о чевг ї З «Жах 4 «Вії» В «В» Білох «Ії» штучна послідовність «я Же «ВЕХ» синтетична послідовність: БУук- 3 антитіла А-3(5і01тІ «аб» 40 сів бБіп тує туго тйпготВг дія тб оте 1 5 «21 8 «гії» 123 «2Іїйх вІлЛОК «2Іі3» штучна послідовність «веВх «вах шинтетична послідовність: варідбельна область важкого ланцюга антитіла. в-ї
«кю і еіц чаї бій гєец маї бін хек озіу Біу віу рен оуві сій Бго сіу 3 1 З їй 15 звегоіви Ага Бец зак обуз ід Аів о Зеб о ші Ре тв о вББе твгоЗег тукг о Ка за
АвБротіе нів тгромаї дга сій ліз РгО бі рух бі вец бів тКрома! 35 в ях -іу СОІУ хіе Заг о РгоОо дід ахр бі дер тагоАБва о туг АЇа деп о зеготді 50 55 що іж5 біу ага РА ТБг оті баг Аїда Азр о тагобег уз Аза о твг о Аів тує 3 7 75 ЕВ ігн сіп мет дей бек оїви асо Аіа сій ах тВг дів УВІ тут М уч й що З
Аїа ага аАзп о азо о тТук йзв маі Ага РБе Уві 5іу бек сію Меї АВ отук цю їх о тгтрозіх бів сіу тпгогїен ма? таб Уві жег аг
З 120 «В» Я «ет» Я «від» вілок «813» штучна послідовність «еВ» «ва» синтетична послідовність: нарідбйельна сбласєть легкого ланишюга антитіла 2-3 «хи авюроттіе віп Меї тг бів чек рго Бег Зак оівц бег дія бег о уді ві ї З о 15
Азов оагад маї тв тів твке оСух Ага аАїа во бів Азромаії 5еготвг дів 20 25 5
Уві Аїд тга о туг віп віп ух вго біу їу5 діа РГО іуБ ін і ац ІВ 35 аа 45 туг чег Аїд Звг Ре ген отуг его с1у Ууді го дек Ага Ме Зегошіу о 55 50 ак біу ек Зі так ар о РМе тйгогем тк оІжІЇв ек зак оіву шій рга
ЕХ; 5 во сі Аза вне Аїд тйг оте тук суб бій сіп бег Ре твг о АТа вго Рго їх Зо 5 тт овне шіу бів бі тВгоіузх уді Сім тів ух цю 105
«ВМ» 43 «Вї1- 23 «Віл» БІЛАК «її» штучна послідовність «Й» «223» синтетична поспідояність: кавкасна область і легкого ланцюга ГРІ-РНІ) антиття й, в-ї, А-, АЗС, 8-3 «Оз» 43 дер Іів сій мет тВкосій 5егоРго явгозаек рен хек дів бегоузі біу ії х 10 іх
АБ оаКд чаї ТЕГ жів тагосях кох «2» 44 «21їх 15 «вій» вІЛОК «813» штучна послідовність «ВВ» «В24» синтетична послідовність: ЕС-БЯ? антитіл А, Аа-3, й-2, А-ЗКБ5ІОїТТІ, В-3 «ВО аа тро туго зів бів їуз его сі 5 дів РГО ух їв тен Ії тує ї 5 я; 15 «28105 45 «31» 32 «їй» БІЛОК . Й «ІЗ» штучна послідовність кейО» к Ц з п с «вв3х синтетична послідовність: С-Бва днтмтій й, А-ї1, а-2, А-1С 5 Ті, В-3 «Я» 45 оЗіу чаї рт бег Аг о РНЕ Зет ші ек бі Бакробіу ТБЕ о Ахр РВЕ ТНК і З їв 15 іви тТвг оті Заг оБег гей бій РКО 5ій Ахо РБе лід тВготуг тук Су що «20» 46 «ві» З «12» віВОоК «її» штучна послідовність ке» «КЗ» синтетична послідовність: С-РВЯ днтитійп А, й-1, А-2, А-1(Г530їтТ, 8-3 «Ох Зв впе піу Бій ші тагофуз ма! бій І) і у ії 5 10 «Ух 47 «ІЗ» 25 «2ї2г БІЛОК й Й «вії» штучна послідовність
«ВЕ хата» сентатизна послідовність: каркасна область 1 важкого ланцюга «нНС-ЕВІ) антитівз А, А-ї, й-5,. 8-05 тТР, 8-3 «Ве 4у зін жав зів бен ма) Бін бек сіу біу біу ец о уді біп вго Бі піу 3 а З 35 ек івц агд іїев чего сСув Аїа А1їв Баг о а «рій: 48 «21їз А «Рід» БІЛОК «Рії» вюручна послідовність «220 «?2Ї» синтетична послідовність: ВС-БК2 антитія да, 8-1, а-йї, А-1Г5і0іт, в-1 «аю ав тктрожаї Аго вів Аїд Рвго сіу ув єїу вм осів тгроуаї єі1у і 5 за й «ЕВ «ім ЗИ «аій» БІНОК «гії» штучна послідояність «ве» «рЕВМ» жКинтетична послідавність: НО-РКЗ3 антетів а, 4-ії, 8-3, А-М ат), к-3 «а» 49 ага вВе тнгоІїв зЗег Аїа Ар тн Зегоїуз азп о тнкК о АТа тег ої ви бів ії 5 5 15
Мет ха беє їво Ага аа ші о йяр о твпг лів маї тує туго сСже АТа го 85 Зо «Ем ЗО «ії ТР ч«вігУ БІВОЖ хАїЗ»У штучна послідовність «ЕЕ» «83» синтетична послідовність: НС-БВЯА антитіл й, А-ї, А-?, А-ЗГеЗ01тІ, В-3 «аг 50 тгв Бі зів осі твгоією таї тв маї Хекобес ії 5 10 «210» 51 «231» ав «23» БІЛОК «ІЗ» штучна послідсвність «еВ» «вва» свитетичзна послідовність: тдбі- важкий ланцюг антитіла 8-15 «аОіює Зі сім чаї бій їв Уаії бій бегобіу біу віу фев Уві шій Рга сіу ші і 5 їі ії5
Зег івц дгд оіїви заго су Аїа А1ід Зекобіу Бе тб о РБе о бег Ап Туг 2 28 за зі жів нів тгтпомаі дк біб лід вго боіу уз зі ген сів тгроУді 35 0 45 б5іу тгротів тк оБго ахробіу шіжЖ тТуг тАг о АБр о тукг Ааїа дер 5ег оуві 5 86 іт Бту Акад о вМе тйгоІїе хег Аза ар тк Бегогух деп тв оАїд туг що 7о 8 що іїви Бів меє д5по5зег о їец дго ії Бій АБО г оАТа уаї тує туг Суб 5 ро 5 дів Аг АтТа сіу так оіец вБе А1а тут тгробБіу оТпй Бі тВе оігц маї зо 05 зло
ТВг оУаї Зекодег дід баг таг рух яіу Рга чего уді РБа о вго зіву Аїа 115 і2а 125 ргз Заг вак обу чего отпг обег сі біу ТБгоАів Ав грец сіу сув і ви
І30 ї1х5 3 чаї ух йщр туго вБе вкго бін вго маї тагоУві его тов о Адяп о 5ег о біу зах ї5а 155 165 дів іецч тк зак обіу мві нії тпгоРБВ вгОо АТа УВІ во Бій хег о зег ї65 З 1-5 сіу ге тує жакоїен обег его уді Уді тТічк о маії Рго звгоЗег зег ої ву їх ї85 90 сіу таг бій тб отук тів Сез Аяп о маї АБИ Нів руч Рко бек АБИ ОТ 195 зоб Ох іу5 ха! АБ вух ух Ууді іш рго іубБ Зег суб АБ У ТВКОНів ТВ з16 215 220 їуз Рго Рго бух Рго Аа Рго 5ій іви тез сі фу Рго хек ма! РБе ах «Зо 235 245 іви вне РгОо его іу5 Рко руб Ар тТпг оїви Мет тів Звгбодка тпгорРгОо йо а КЗ
Зій маї тв осСув ді Уві Уа! ахо Удар хек нія 5 АБО его бів Уві а зва тто іт5 Рпе Ап тгротуг чаї дер віх Уаф зії маї іх Аза АТа рух тк ат ох тк
ТЯ5 ЕІ Во іуш вКго Ага Бін іш бій туго дей хакотвг о тук зга ма) чаї бек оУді 220 25 за іви тпгоУаї іви ніх віп аа ткрівн дл шпім їв сіц туго фу Суб 305 зп зЗї5 зго зує ув! Зак А5п ої уз Аїда іви РгОо дів рго о Ії8 вів і ф5 оТКК тів Бе 345 330 335 із Аїв їух ші бів го Агд о біш вго бів уд) тує твроіву вго вго
Без заз ї50 ег ага іч Зі мет тнгоів5 Аби біп Уаії дек офец так осСує івеи ма! 355 зо 355 іув біу РБе туг Бго бЗег авр о тіє Аза уаї вії тгр осів Заг оавп су зт заз за бЗіп Рго бів Авподяп туго імя те отикК о рго Рго Уаї іец о дяр баг АБО 285 390 за5 до бЗіу звг РЕ РЕ їву туго баг огуз вп отВгохаії з5В губ 5ЕГ АгОо ттр 05 10 315 віп віп зіу Авп Уа РМ бег о був зако уді меї нії січ дід їв: НІі5 зва 25 330 дав Ні тус ТК Обій гу5 Баг оіец жегоїву беб вго Бім іх 435 зда 445 «г» я? «21і» 4465 хаї2» БІЛОК І Й «ІЗ» штучна послідовність «евох Й «гаЗ3У синтетична послідовність: тубзі-важкимМм ланцюг янтіктіпа А-1(5ННТІ з вутацією Мои «Не ЗИ бЗіц уві зЗіп фен ожаї 5зін баг сСіу 5іу пі гей чаї бій го ві щу
З з 16 15 5егогем Ага ів Зв оСуз АЛа Аа бек обтТу вна так рве зег Ап отує о 25 ї5 сік хів нія тро оМаї Ага іп діа вко Бі гу ші рев обїи тгроча!
У Я сіу тер оІТе тпроБго Авробіу біу тує тайг о Авротук АЗа Ар обег чаї 5О 53 5 іж5 Біу Ага Ра твкКоїі8 его АЇХ дер тяг бек оту А5а оТвпгОАіВ тук 85 7а т5 що іви біп Меї АБ зекгоівец дк Аід сій ар таг АТа хаї тує туг КСуз 55 ща 5 дів ага АТа сію гору вве дід тут тгробіу бів бі твКоіви маї 155 а твгозмаї бБег хек АТа бе тТБгоїує сСіу рго бек уві рпе Рго івеи ліз 15 25 125
Рг хагобек фу дес тагобек с1іу сіу твгб оаів Аїд гвец о сіу був і ви і54 ї35 їла чаї ух дя тує вве рез біч вго маї твгоУаї зего тро о Аявй бек осіую 145 РО 155 150 аіа іви тк обек сім заї Нія Тег опе о рРго вів Узі ген осів бегобво 15 15 их сіу фен туг хвгоїен баг о бегоУуді Уаф тк оУві Рго 5ег о бек хег ої ен ї85о і855 Іза сію так обій тк туго їі Су Ап Уві дяк нія гу РО Зек дай тн 155 2ОЮ 2а5 іуз чаї АврогУу5 уз уд! шію Рго іу« Заг бух Аврорув таг Ні таке 1 ТІ гей пу Вга вго бух Бкго дія Рго сім ген гей шік біу Бра его хуаіЗ вне гЕ5 250 255 ай іенп вНа вго рга гу во і жа АЗО Тйгоїец мет тів яв Ага тк овга заз 256 85 ж ах ша чій маї твг о сСуз Ууді мні маї Аз уві Бегонія б1Ш Ах РКО сі хді «Б зва ки іуз вне Авп тко оту ма? дяр бі уві зі) Уві ніх ди АТа гу ТНК ау го 2855 уз рТв Аго ші бів сій 3 вЗіу его тик тує вто чаї Уа! зег маї
За Б за іец твгоУуді Бенц ні зіп ар отого оївен ази сіє іє сін туго ру Сух
ЗБ зю 315 120 іуя уві бек а5п гу Аія іен вго дів Рго тів бів вух твгоІів Чет 125 з35 255 325 335 3:5 іуз лів ув віх сій вго Ага сім рт сіпоУуді тТук тв оіву рРго вга 380 45 830 вк ага о осів Мет тт оїуз дяп осів Ууді бек оівц так оСжз ви уді
352 ЗБЕ за5 ів біу вне тук Рга Чет ар Ііш А1В УЩаі сів тКроБін 5ег АБИ біу 370 375 50 іп о вго ІЧ Аяй Аа тугі уз ТВГОТНе РО Рго уві ев азрозег АяВ
ЗЕ: зза 335 Зо біу его РЧа рБв іїву тТуг хег о гуз ген отвгоуаі Аевіт 5егоАга тгр ча5 зла 4315 віп шіп зі Авп о Уаї РйЕе бегоСув бек уві меї нія сі Ав і ев НІ ага 425 430 деп онів тук тВаг Осій уз баг оівц бЗекої ву 5ековго сіу їх 335 а40 485 «І» За «ЕЛ 14 «кеїй» відок . Й «віз» штучна послідовність «Ох «83 сСичтетична послідовність: легкий ланцюг антитіла А-31Г 5301); легкий лпанцюг антитіла А-ї «ех 53
Ази отіе щів Мет тк озій ет вго дек баг оіву 5ек Аїа его тді сі1у ії з 10 15
Ази ага чаї тп о ІТе тйгоСуя ага аЗіа бег дій Ар ома) Беготвг Аїа о Ше БІ чаї Ата тер отук бів сій зуб Ргоа сіу їуз Аа го фу ім ої ви тів 15 АВ а туг бек Аїд БЕК РВВ ги туго Зег осі уві ргоа жек дгд вне жег о біу
Зв во зеко»іу бБег зі тВК дер яйе тТВгоїем тс тів Бек хек оївц сів вга б: 7о ТБ що бід азр Ре Аа тв туго туго сСув біп стій туго тує тб отнг Аї о тНе жа 5 з5
ТВгоРНе бів сіп сімю твг ої Уаї бін ІТае ув Ага отвг ма! Аїд А1а 00 305 що вга ек уаї Рйе Ії БМе РКО РГО зак оАБр оЗіЮ сів гвц о їу5 бак обіу 115 125 125 твгоаїа ес омаї Маї Су5 ів іец дяй дев рйе тує вга Ак ші: дід 130 135 її іт ма! сїй тгріув уді АБр дп АТа гец осів Бег біу Ап Баг осів ї4х Іо 155 їв сін заг о маі тВг обі бій абБр хек оіу5 Аброзаг твг тує зако огецн Баг їі55 1у6 175 ек отнг ог) п івц о 5екоїув А1д АБО туго бБіц іуз Ні і оба ту 150 355 та дія сСу5 бів ма! тВгоніх віп біу ів бек обек его уді ТВГоїуз Заг
ІЗ МЕ 25 ре ап одга віє Бін сСух «Іо й Й й «юю ва «21» ЩЕ «ій» Білок й . кеЇЗ3х штучна послідовність ке Й , с. . «28Зх синтетична послідовність: варіабельна область важкого ланцюга антитіла
А-СНІХ «вах «вії» інш ознаки «авг (МН. НН й й Й «Р23Ух Хва маже явлютм собою будь-яку дМінокислоту, Киї щег «дк За б5іц Уві бБіп о гїек уаі бін Звгобіу зіу сту бе) о Уаї біп ко зі с1жх ії З 19 15 5егіем Ага їец Б5ег сСух АЇа дід хек о біу ва тс ве 5ег доп тує а 25 Зо сіу хтів ні тгроУВі ака шій дід вго зі У біж ви біб тгромаї
АВ Я5 сіу тгрохїв тк оРгое дер овіу біу туго тяг оАза тує із Ар о Беє маї 0 5 Ба уз сі Ага РВЕ тВгоїів 5ег АЗіВ Ахо таг хек оіуз ап о тлг Аїд туг 3 те 75 що іец бів Мег Азпожегоген Ага АВ бін АБО тк о АТа мві туго тук Сук ї5 чо ах «13 ако дів віх Хавоієн вВе дід туго тро ші зів біу тгоївен о уді 190 105 Її
Тигомаї его вер її «аю за «І я, «еІ2» БІВОК
«вІі3У штучна плоаслідовність «ЕД» «ТЗ» синтетична послідовність: НУВБ-НІ антитіла А-З(ЗІОТХІ «ЕЕ «21» інші ознаки «вві 33..3 «РІЗ» ХхХва може являти собою будь-яку аютнокислоту, київ аг с ха «іа сту хав фен вне дія тує і 5 «20» ЗБ «231» «АБ «212» вІіЛОК «вії» штучна послідовність кеЕОх кара» сантетизна послідовність: тІдб5і важкий ланцюг антитіла 8-15 іх «ЕД» «рію інші ознаки «хара КМН)..СКН й І й «КТЗ» Хва може являти собою будь-яку амінокислоту, крім щег «ак У бін Уаї віп бен ма? Бі Зег сіу єіу сту во Уаї біп рго віх сіу і 5 15 і: ек ів заго вен дет сСуз Аі АїЇд зак осіу вНе так вав заг ди тут
Кз: 25 ва сіу тт ніх тгроуді Агорзійп аіа РГОо зЗіу Бу СІУ раз бін тгроуді еВ Я
Ф1у тгроІїв тк оРго Азродіу біу тут тагоаАвротуг А1ів азрохег маї 0 В Ба іу5 Ту Агд о РВе тВг ІТ бЗег А1В Ахо тТвг хг фу аб твВг АТ туг
Бх та 75 8О іецп біп мет дяй заг оіву Ага Аів Бін або тик дія мні туго туго сСух 85 що ЗЕ «іа аку дів віу хХаа іву Ре А1їв тУук тгрошіу бів с1у твгоген уві зоб 1535 їо
Тигомаї бек хек АЇш бег твгоїу5 еіу вго бег уві Рае РгОо їви Аїа їіїїх 125 15
Бго Бег бег уз его тнпт хегоБіу бі тпг о АТа Аїд гав біу суз ївн 139 135 148
Уаї іувз Азп тук РВе Рго дію Рго Уві тйгомді ес тер ода его єіу 145 з58 155 ї5а аів ївец тйгобЗаг сі» Ууді Ні тик о рве РКО Аїд мі ївев обіп Зег о Бег 155 ї7о 355
Зіу їец туг бег іец бЗег бег Ма! уаї ТВгохУаї Рго бЗеб хек Заг оі гц іо 185 195
Бі тагозіп таб тує Ії Суз дп Узі аз ОНІЗ руб Рго Ззегодяй ТВпг їз: по 205 ів маї АБЮв оїув і ді вію Рг іжя ЗакоСух АВ фу тВгоОнія так 210 215 чи су вго РКО Су Рго Аїа вго Бій івцоіви бБіу сі Рго Зегома1ї рве га 230 235 250 іїви рРаЕе вга вго і ух РО їУ5 дв Тпг ов Мет тів заг одга тВЕ орто ак гу аз
Зі жар тйгоСуз Узі ді Уді АБроуді его нів біч ав овго Бін Уді го 265 ки іт РНе дп отгв отук уаї Ар осіу ма! Оти Уаї нія 45 Аїд гу Тпг тт5 «и Б їуз рго агд біз сій бій туго АБп Бек о твг тує АгЯд Уа! ма! бегохві 299 295 300 іви тагожаі їву ні бій дер тгроіви дзпобіу гу вів тегорух Суб 305 М ЗІ зго іт маї бег д5поіух Аїа іо рго лід Вго хІЇв СРіц о іуб5 тВготіє заг 325 3 335 їу5 Аїд іу біу сід ро ак вій вго білої туг ТВ ої ев вка Рго зай 345 350 зег дго вії б0іш Меї тигоруз Аа вів Уві хек о рен отв Суз ген уві 355 зви ЗБЕ іуУу5 бі ВМ тує Бга Баг азе Ііе дів Уві біб тгв сій зег дя сту 3709 37 зва іп вто ЗіШ АБ Аа туго Рух ТС ОТП о вго Рго Ууді ів др Зак Ахо 385 зво Зх ЩО с-іу Бег Рбе не рен туг его гу ів тйгоУді АБроіух Заг АКЯ тго а5 410 315 стіп вів бі А5п о Ууді РБе его бух 5ег о уді Мет Кі Біб Аїд і вц ні 420 435 48а ап нія туг твг о сіп їуб его іви Баг обем зак Рго сіу гу
«з 30 345 «ФА ву «21їх 445 «їі» БІЛОК «21415 штучна послідовність «вай» синтетична послідовність: ІПбСЇ- важким ланцюг антитіла А-З(І5І0Я1Х З мутанією МІЗУЄ кейі» інші однаки «Рай» КО. НМ «223» хХав може являти собою будь-яку вмінснхислоту, крім 5ег каш Би
Зіна! бів бен охаї вів чет шіу Б5іУ Сіу веб уаі сів вго біу сіу 1 5 10 1:
Зег ви Ага іец ек Су АТа дів бек сіу Бе так оРБе зегоаха тут 20 23 зо 5іЖ Ії нів трі Ага сіп Аза Рго СтТЖ уз біб іви вію тов о уді 35 Бе 45 сі тк оІтїе тк оРГО Авр обі біу туго таг оАзротуг діа аА5розег ха 5 ЩО ів Біу Аг ве о твКої1е 5вегоАі АБротаг бек гу Ах о тВг Ота тук а 75 ВО із біп Мет дяпозекоіви Аго Аза сім дер отйг АТа маї тук тує суб
Ех чт за аАіа ака Аа біу Хад гівно ББе дів туг тгровіу бів сбіуУу тагогеб уві
ЩІ ЗУ 1
ТВгГ уд! век бек Аїд Бек отБг ож біу ргоа век уві Бе рго ген Аа іїх 128 125 вро бек заг рув бек ТВг Заг обіу сіу тйгоАїа Аїд фев Сію суз зїен 135 ї75 140 чаї УЗ АЗр о туК РВв вБго Бі) Рго Уа? ТК охді ес тгроахп аг о біу 135 і55 155 БО я потВгозЗагодіє мді ніз те вне вго Аа мі ів; сій зво дах дів овен твг оЗек обі маії ніз твБговНе рго Аа уві ев бій Зег хе) 155 170 195 біу ей Тук бег іву б5егохдет маї Уа! тТВгоУді РГО баг хевго бек і гу їі850 ї55 ії бБіу тнговів таб тує тів Сх Аа Уді Аазпонів ув Рго БЕг о дя ТТГ 1 таку 5 іїуб5 Уві АБ гу уз маї піц РгО губ его Сух АБО Ру тпг нів тве о 27і5 Ка
Сез Рго Вго Суз Бра АТа без бі івмогеоз біу шім Бго бегоуаі ве 225 230 235 за іецз рРйе вго вгОо і го іу5 до ТНК оїа) мет ІТе хег АК твВг орга 245 250 53 сій маї ТВгоСух уаї Уді Маї Азроуд! бек нія ть АВ вро бів ха? 25О 285 то іуч Ре заяв тгротук ма! Аврошіу чаї Ти чаї Ні Ап о АЇв г уя ТНК
Я 28 5 іїу5 вго Ага обБіч Біш бій туг біу звк о твг туго Агд о Уді Уві его уд! 2 2955 ЗО івц твгоУаї ген ніх біп АБО о тгроівц Аа сіу їуб бін туго фу Су зі0 3І5 320 із ма! шаг дя ів віз ів рго діа его тт ші ух тпгОхЇвВ Зак 325 335 За іжз Аза гу Зіу Бі Рго ага єї рго сіп Уа! тує тйгоїви Рго рго
Бе За їхОо вег ага Біц біц мет тс оїу5 ап сій уві Бегобеч тпкосСув без ма! 355 35 55 зу шіу Бе туг Рго Звк Ар оІЇВ дія Уа зів тгробіц его Ахп о 1у
ЗУ 355 За
Зіповко зів дай Аа тує іув ТПГОТйК Ргто РгОо Уаї ен др хек ах 365 90 385 І 409 сСіу ваг овВа РЯе заз туго жхегоїух5 іемотайг уд) АБзрогуз 5вгоАга та за 10 415 сіповів біу Ав Уа! ЕБе зег Суб Зваб хаї мет ніх сі) Атїа ве нів а 425 з30 ап ОНія туго так озіп їу5 жегоїіеу бег ів Заг о рго сі зуб 435 449 5 «аж: 58 «Ві» 315 «2іх» БІЛОК й . «-еїї» штучна поспідовність «РК «Ей» синтетична поспідояність: варіабельна область важкого ланцюга антитіла лізі «КО»
«ЕРі» інші ознаки «дя» КМНЗ.. СИ) В , й «823» Хава може внляти собою будь-яку амінокислоту, крім хег «ВНи БА піц жар озіп івц о маі зіц зеє зі віу шіу ге) уді бій вго пі сіу ії З Ії ії ії зег ієец дго грец зек Суб аа лід Баг обі бе тк о РБе заго АВИ тУг 20 25 за -іу хте ніх тгр о Ууді Ак обіп Аа РКО біу гу піу зв Бі: тгрома! 35 40 45 сі тв Ії так ОРКО АБровіу пі ту тик одяр тук дів др хег уві
З 35 5 іже Ру аАко впе так отіе хек аїа ар тік Бек ух деп отвг АЇд тук та яа о івм біп мет Аа Бек оіви ака Аіа бій Ар отак АТа уві тук туго Се 5 за а5 іа Ага аіз сіу хад тгроРБе лід туго ткрозі бій Єїу так іви Уді що 05 вж твгомаф зер Зег її5 «Б» жа «ії у сеїй» БІЛОК . . «213» штучна послідовність «Евюх «З» синтетична послідовність: НУК-НІ антитіла АКеїіх); НУК-НІ антитіла
А-РІБІІХІ «Ей «Е2їЇ» інш ознаки «Ва (3.3 карії» Хаа може виляти сою будь-яку знінакисляту, крім хак «а 5 ліз сіу хав тгв вне дів тук
З в: се яд «МО» що спа «ФО» ві «М: 1 шо «ФО» в; «Ві» 16
«Е12У БІВОХ «вії» штучна послідовність «ДОК» хвга» сентатизна послідовність: варіабельна область важкого лачнюєа антитіла а-гиЗЦИхУ «ет «Е8ї» інші ознаки «ом (3013... МН) Й І й «223» Хва може являти собою будь-яку амінокислоту, крів яву «І аг зін Уві шій їец ма) біз бек обі біу Біу ви ха дій вго зіуУу сію 3 З 10 15 ек івецч заго ївб Бег Су Аїд А1їа его бБіу Ре тк о ББе 5вг оди ту
КЗ 25 за сеіу тів нія тгроУаї аку бій аЗіа РгоО шіу Ежя СОІУ іє бів теромаї 35 40 45 сіу тгротіє тнг обі ап осіу зіу тує зак о з5в тує дів Ахр аг ма! зо ва Бо іуз 5іу Агд РНе тнг Ії 5ег аів аАЗо о твг Зак офу5 дяй ТВг оАТа тег
Готи 7 75 5О ін бій Меї ав пдег іє Ага А1іа біз Аза тн Аїд Уві тек тук сСуя 85 ар 55 дів Ага Аїд сік хХаа ткр оре дід тжг тра сі зів обі тВгоген уді що 155 о
ТНгоЖаї беє ак «аю 3 «т1ї» аб «Фі» БІЛОК «213» штучна послідовність «Ей» «ех» синтетична послідовність: тові важкМи ланцюг антктіла А-Ї З мутантєю ме е «І: п
Зічц жаї зіп без ма? біц зеб о сіу іму Оіу ву маї бій вго Бі віх 3 З 10 15 ек івецч заго ївб Бег Су Аїд А1їа его обБіу Ре тк о ББе 5вг оди ту за сіу Та ні тгроуді Ага озіп аіа вго сіу вуз бі ів шт тгроуді 4 ча сіу тгроІтІїв тк оРкго АБрозіф Біу туго так оАявВ туго АТ ар охег уд! зо ва Б іух йщіу Ага РБе тпгоІїв хаг о Аїв аАБротнг 5егогузх Аа тВгоаіа тук 55 та 28 що ігц о зій Мет абп зак оїен АКЯ Аїв о Бій Зо отак оАіа ха туго тк о сСув як ща З5
Аіїа Ага АТа сіх Бек іїен ве діз туг трі біп шЇу ТВгоіец ма! ню 385 о
Твгожаї дек бек Аїа его твг ої б3іу Рг ек ма! Ре Рго і ви Аа 115 і12а 125 рго зег Заг фу бе твгобЗег сію біу ТАгоАЇд Ав івеносіу Сув і ви їі130 1:15 15
Уаї бух АБротуг РБа о вго бів РГО маї тТВГ омві его тер оАяп заг об1у 145 ї50 155 160 ід івц твг зак осі Уді ніх таб оРБа вго дії Уві їву Бій зву же з85 та ї75 еіу ви туго зекгоівб бБег охег о маї Ууді тс оМмаії Рго зегобаг звгої ву і їх 130 сі тк обій тВг туго тів Сух Аа УдДЕ до нія ух го заг аа ТК 135 що о іїув ві АВ Ру іув Уа! Бій РгГОо руб заг Су Аа і ТМКоНів ТБг 218 215 їй
Суб вгОо о вго бує Рго дід РгОо сіц іви геч бір 15 РгОо его уді РБе 225 є ВО Зх гай ів рйе вго Рго іух БгОо іув а5О тБгоїви Мет Ії зак Ак отвК о Рга 245 аз 53 8із чаї те оСух Уа! Уді маії Азр Уа: Законів біб АВ вБко бів Ма!
В ВЕ вхо іч вне дп тгвВ о туг Уді АВровіу Ууді зій маі ніх дв дів ж тИг г ВЕ іїув РвгОо ага січ бій віп туго шіу бек отнг туго Аго ді Уа! баг оуді 230 аа МЕ ів тнгомаї гец нів віп др отгроіви Ал Зі ву Біц туго гу Су
З55 за зх зго іує жар зак Ап ів АЇа івци о Рго Афа РгОо тів біб ї5 тк отів Зеє ї25 З30 335 іуз Аа туз пі біп вго ага сім РКО вів Уві тук о твкогви вко вга о з45 З бвг Аг бів от Меї твгоіух дев біп уві Зегофен твг оСуз ге Уа? 355 35 зо їу5 шіу ве туго вко 5ек аБр тів дів уві бів тго біїч ек ап сіу 379 375 зв сів вго сій Ап Аза туго зу ТВг о тБг орто Рго Уві їев аАвробег АЗд 385 390 за5 дО сіу бек вНе вів іец о туг аг оіує івм отак Уві а5О ої ув явг Акад тв 405 410 415 сів біп біу дяп Уві Ре хего бух его заї Мет ніх бів АТїа іввонія 420 ще хо аБпПОНіз тТук ТЕ шій гу ет оівз бег ово бек о Рга сіу г у5 450 45 «Вій» ша «І «аїї»в БІЛОК «Вії» штучна послідовність «ее «ВХ» синтетична послідовність: НУЯ-НО антитіла дізідіт); нУБ-НІ антктіла д-гі8301т) «00» Б дів Оу тагОотгроРБе Аїд туг ї 5 кезОх 85 «еії» їїб «гі» вІЛОК «213х тучна послідовність «Вед «223» синтетична послідовність: варіайельна область нажкого ланцюга антитіпа
АТ
«НН: 55
Зіна? зів ген Уві бій Баг обіу зіу Сіу еп а! Бій вго Бі іх ї 5 за їх его ем дкд ї2ен обег о сух ліз аів хек о біу Ре тйгОвВбе 5ег о Аяп отуг 2 25 та сі тів кіз тгроуві Аго бБіп аіа вго біу Ух ші ген сій тер уд! з5 35 45 сіу тгротів так овБго дар овіу діж тує тТагоАяротук Аїд Ар оЗег ха?
В 5 іч шіу вка РНЄ тр отів чего дід аЗотнкК аг у дев тв А. з іух іу вга РНе твгоїї8 хег дія АБротйг Зег бух дев ТВг о АТа туї т 8 ВО ісп зіп мет а5п хек оіви Аг дів іч АБр от АТа мві тук туго Сех 85 20 95 дів Ага Аїд бі твготгв вве дії тк тро обі 5ів бсіу тк оїек Уді за 105 Іо тик оуді зек век іїїх «2305 6 «їі» 115 «Ва» вІЛОК «Ж» штучна послідавність «ик «Ева» синтетична послідовність: варіарельна бобласть важкого ланцюга антитіла д-різННтІ «Ой» БЕ зЗіш Уаф ів геч хаї бін зек зіу Біу сту іву маї бій Бго бі у і З іб іх зек іви АгО Бен зег субв Аїа дів заг осіу вНе о таг вва заго дай тУг «о 85 З зі тів віх тгроуді ага віп дід го Бу уз Зі ра: ЄїТЕ тгр Ууді ее 45 с іх тв оІТв тнгоБіу а5а віх зіу туго бек о Авротук Аія Аврохег Уді зи 55 бо їз біу ага вМпе тк оті заго дій аБротпг о бег гух дхв отв дід туг ісп зіп мет а5п зак оіви Ага дів іч АБротК АТа мві тук туго Сех йо чо ат «із Ага дів віу твЕ тер вве дів тег отгровіє бів сі тег огец уд! іа 105 Іо
Тигомаі бек заг їїх «20» ву «ії» аа «Вій» БІВОК «ей» штучна послідовність ке «КЗ» сентетизна послідовність: т1951-важкии ланцюг антитіла АКВОЇХ) з мутацією ке «гі» інші ознаки «гв2х (В).. СНИ) Й «гЕ3»У Хва маже являти собою будь-яку амінокислоту, крім зак км Би сін Уа? бів гецоУаї Бін чего шіу Бі сі ев о уві сід Рг бі сіу ї з 19 ї5
Зег ом Ага ву озегосСже АТа Аів о бег сіу Ра тВгб бе баг оаАБа отуг сіу тхіе ні ткроха! Аго сій Аіво Рг сію уз бі ви вію ткрома! 15 85 4 сіу тк оті так оРгГОо двробіу Бім тук твгоАБротуг АТ АБО Зег уд! 5Е що іж5 Бі Ага РПае твг оті заг олія де» ТАКО уз Ах отнт о АіВ тує ща та Т5 8 іез біп Меї дя бек їн Ага АТа сі) ар твг аїв Уаії Туг туго сСує хе що З5
Аїа ага АТа сім Хав тгровне дія туго тго оту біпобіїу тагоіен ма! іс ЩІ о тТВг Ома! ЗегоЗек дів зЗес тнт ої уз бі вго бек Уві ббе Рг іє дів 115 ї20 125 вго БЕК Заг огух зак отв чего сіу Бі тат оАів Віа їецо зі Сже ви їз 135 і4а
Маї уз АБВ тТуг Ре го Бін РКО ма! твгожаї Загкоткв дм Зак одіж 155 У ї5к ї«0
Аів ген тяг обег біу уаї нів тБговйе рго Аїд ма? фен сій Звгобеб їі55 і79 175 сіу ви туг бек оіву Зевс его Уві Ууді тягові вБго Зег ЗвгозЗег ої ви їіщі їх т9о сіу тк обів тк отуєб Іч11і8 Сух азп о Уді деп Ні Гуз га Звгодявп тиг і55 2 205 іж5 ма! дав гу зіуБ уді бі) рго іуз Заг сув а55 їух тВгОНіВ ТИиг 210 2ї5 28 су его вЕго Сух РгОо діа Рго сів) іей гви бі біб Бго 5ег о Уві Ре 225 «В 235 МК іви Ре его рго і Рго зу бр тиК оіву Меї тів Зег ага твг Рго т4х 250 225 піц жа! так осув Уві Уві уд)! Аброша! Бегонія сів дер РКО вів уд!
КЗ КО ів вве АБ тТге тує жа! Авробіу Уа! бів уві нів да А1а і тик дв ВО 2855 іу вго Ага бів біц ві» туго бі его тВготук зга уд) Уа: бек худі 250 2955 щі іви твгохаі ів Ні бій зр о тгроієц А5п ші ув о біч туго гу Су 3о5 330 | з15 Зй іуз маї бег дп ів Аа іву рРго АТа вго тів сій оіувз тб оті хаг 325 335 3335 іУуз Ав іуУуч Шім бів вго дко зін Рго зіп ма? тує ТАК оіец овго го
БАЗ заз 35а ваг ага сій біц мет тпгоі ж деп сій хар ек оівц о тйк пуб ви за! 355 БО їа5 іїуя Сіу Ре туго Бго 5вег Ар І1іе Аіз ві щі тов о сбіц зегоахп сію 7 зу за іп вго ів а5п Ай тугі жя ТйБготне Вга вко Уві ви Ар бек Ар зи5 ВІ 5 Яд -іу жвг Ре вБйе їн тує бег іуз їез тТВгоУші АяВ ія его ага тго
ЗІ 315 стіп бів Ту Ап маї Ре его бух чегомаї Меї ніз зів авіа іви нів ага 425 435 деп оНнія тТуЄ ТНК опій рух 5егоівецй звгоїво) бек бро дім і ух 835 дай 4435 «ВО» Ба «Ії» аб хаїаУ БІЛОК й . «233» зтучна ослідояність «ЕВ . Й . Й . Й «Ві» синтетична послідовність: Ідсі-важким ланцюг антитілв А-21501Х) з мутацією Мох свв «раї» іні ознак «г» СІРКО «223» Ха може являти собою будь-яку амінокислоту, крім зег «що ца зій уві бів озер уді бів ек обі бі БіУ еп Уві бій Рго взіу бі
Е 5 В 15 щег гез Аг гео обег Сух Ааїа дія бегобзіу Ре тТВс РН баб о дяп тук 24 25 3 сіу тів ніх ткрохаї агфошів дія рго біу ву Сіу ев обіч ткромаї ї5 І 45 сіу тгроІїв твгоЗіу а5а зі Біу туго Зек дяр тук Аа ар оег уві зо За 5 іу5 БІіу Ага РБе тпг тів Зевс аід зо твс чек рух АБЙй тТВК о АЇа ту
Ох та З о іец бів мет дяк зак ов АК оаід Бі АБО отак Аді Уві тук туго Сех 85 ща з: аіа АкО Аїа біу Хаа тер РА Аїа тжготгросіу сів біу твгоїви Уві 105 во
Тиг Уві бек зек о АТа Бег твкоїу5 біу вго бег оуді Бе ко ієб АТа їїх 120 125 вго ваг бек гу Ваг о твг охак обі біу тик о АТа Аїд ів біу сух і ву 130 135 їла
Уа? фу Авротук вБе Рго зій РгО Уа! тТнчкомаї 5ек тгр ап его вію 345 ї5а 155 їБ5О діа ген тик обег сіу Уа! Ні тк Ре РКО Аїд чі іву сій Звгозехг 15: їй 175 пі ем туг вБег о гвц звгоБеє уаі уві твгб о Уаї вга 5ег хек Баг оі ву і8О 185 тб піу тйгобійп твготує тів Су5 ав Узі АБлЛонів гу РгОо ЗК АБИ ОТГ їіз5 о о іує жві Аєріув іущ ча! бін Рго ів ак оСух Ав ув твгонів тВг 215 рах суб Рго РГОо Су Бгто Аїа вго піц ієц і вий еіу сіу вБго Зеє маї рве из За 285 2855 івм вне вго Бго іувз Бго і е5 Ар о ТК ЕМ Меї тІТе жЗек дго твпг ого зав 255 а пім маї тп сСух маї Ууді ма! а5р Уді чек нів бі двровгоа піц ма! 250 25 Ей іу5 Ре азпотгротук ува! ар ошіу Уві Бім ота! Ні АБа Аа зуб тБг із во Тк5 іувє Рго агд бів біз шій тук о біж его твготує Ага Уві ма! дег о Уді 290 255 ЗКУ іви тВгоУаї газ ніх бій дер о тгроіви АЗпосіу хв бі тег оіуз су
Зо05 Зі зі5 325 іуз маї чек А5В іуч Аіа івн рРгГО Ав вго тІТв Біб зфув твготів бек 325 335 335 зїуя від ів сту ші вго Ак бів го біп Уаі тук тТВс ов) Рго вКо 340 345 в 5зевг ака сів біц Мет тпгоіує демо біб уві закорац тс оСув гіец уд! 355 ЗО зв5 рух с1у не тук Рко Зег ахр о І1іе Аза Уві зів то Біц зегоазпобіу з 375 зва сів вго О1Ч дя» аа тег ої ТВгОТНг о вго Рго Уві гео Ар обег 5 ї85 ЕІ 355 що спіу зак ве ве оїац тег охегоїує іем о тайг ові АБрогуз явгодкв отого ал Зї5 сів бів Ту аб» Уа! Ре чего сує ес таї ме: Ніз бів Аіа іву НІ зва 425 45
Азп о нія Туг ТВйг шій бує бегоієЇ бек оіви его вБго сіу ув 435 40 345 «ве Ва «21ї» 445 «їі» ВІіДОК «11» штучна послідовність «280 | й «223» скнтетична послідояність: Ідсі-важеме ланцке антитіла лізібіт) з мутвцією
МмІзте «або» ва сі маї бів ву Уа? бій чего ові Біу Біу ген Уві сів вро піу вію ї 5 10 15 зегоіви ду бецй звкоСу5 ліз дів Зег зіу ве тВг обме ваг оаяй тук віЖ Іі нів ткроУаї Ага сіп Аіа РгОо сі уз бі гц Біб тероуді 35 ча 45
Зі тКр тів тк оРКО Ар сії біу тук твгоАбр о тук АТа АБЮ бЗегоуді за зи ВО ів біу Адгд о вле твгоїіє Бвег о АЇа АБО тВго5ек руб Аа тТпг Аїд тує 55 та 75 80 іви сіп мес дей зак оіви ака дів сім А5В таг о аід Уа тує тУК сСуєх а ча я
Аїа ага АТа спіу тв тгробне дія тує тер обту бів сі ТВг ої ву ха? їх їп5 тр тТпгГ о чаї Зег бек Аїда Баг отпг руб біу вго Зег Уві Бе Рго ів дів ї20 125
Бгто заг Явг рух 5ег тпгоБег о віу сім тк зів АтТа ге) бі Суб ів 136 1:25 ідо
Уа! їуз Азр тує впе вБго бію го Уві твгома! Зег тв Аза Заг осіу 345 хо 155 їв віз сез тк обБетг сіб уді ніх тик Ре Рго дів Узі єец сій Бегозах їв 175 175 5іу гео тує зак оіеци зег бек о уді Маї твгоУуві га бевгоЗвг зег ої ву і850 185 Ії сіу твгоБів таготУуг Ії суб Ам о УВі Азп Ні іуб5 РГО Бегодеп ОТГ їз5 гм 205 іуз« Уаї АБО їуз гу Узі зії РгО і ув бек осСух вер ув тк оніз тк 216 215 й
Суз вго Бго Суз го Аа Рго бій іевч гєц бі Біу Бго зЗегоуді Пе аг 230 КБ аа іецй вне РгОо РгОо ух РО г б5 АБО ТВГОобец мет ІТ 52к АгО ТВгОоРга аж г 5 зЗіц жаї тк оСуз маії ма! уд! А» уУуді зег ні бін або о Бго Бін: Уа! везе «5 вто і вна ах отго туго Уді дер обі Уві бій Уві ні Ап віз руб ТК
В ко 285 іт рго Ага зі» Бі бій туго бі Зег о твготує ага чаї Уді хег о Уді 290 295 зо іем так ча? ївь ніх біп йвротго івч ам бі зїу5 зії туго гу сСув що ЕВ 315 зга іу5 хар Баг АЗп гу Аїд гецу вго із РгОо тів Біц вух твг о ІТВв чех 325 336 315 іу5 АТа ув ву сіп вго агфрсзій рго Зіп ма? Туг тТБР ої ву РКО ягОо 34 зах о зЗек Аго Зіб бів мМеї тпгоруз Ази іп чаї бек оївц таг оСуз ів Уві з5х зо за5 іуз БІу РБе тук РгОо бЗет дхр ІЇв Аїа чаї біз тгрозів зег дп сту
ЕН. 375 80 стіп РКО Біц АБ АяВ тт Оу ТБГ оТНг о РГО Рго хЗі ву зр охетг Ахо зо зо 135 305 йіу зах РНе вне гец туго Баг іух їецч о твгоха! д5ріух заг ага то
405 з16 415 сіп віп сіу АЯв Уді вве хег о Сує зек чаї Мет ні бід лід ів нта я 425 азо дви нів туг тег обіп губ бегоіву Зег оїви бег рко бі ух ах 4435 «45 «Ах 0 «21іх 846 «2ї2х вІілаК , й «їх штучна послідовність «А «а2Ж» скнтетична послідовність: тІдеі-важкиий яанцюг антитіла А-2КБІОЖТУ з мутацією Ч2ЗИС «В В зії хаї іп ген Уві їй Звгосіу с1іу оту гец ха! бів Рго віє о1у ї 5 10 15 зЗег їіви Ага єв баб ост Аїд АТа зеговіу вбе тк овБве бег о лава тук
БО сСіу хіе ніз тгроуді ака овіпй дід РгоОо зіу гу5 Бі їв Біч тгромаі
Зо 5 сіу теротів тк обі ап о сіу бі туго дег да тує Аїд Ахрозвк уві сіу теротів тв о5іФ Ахп осі бі тує дег Ахв тує дід АхроЗвг ха
За 55 ре їу5 ші Ага о Рре тТВготіє Заг Аїв8 АБО тНг оЗег гу деп отпг о Аіа тує ща 70 75 ва ів Бій Меї дп о 5ег їв Акад АїВ зій АБО тТВК оАів Уді тут М Су 85 зо В
Аів ага АТа зів таб о теровйв АТа тук о тгр сту дів бі тнгоїєю чаї ще 05 ї3о тТВг Ома? сег зак діа Бес тпгоїу5 піу вго бег уді Ре вБго ів дів 115 125 125
РКО дак обег ух баб отвс его ві піу ть ОАТа Аїд їв) бі Суб і ву 130 і35 1
Уві уз Ав тує Ре вго сій Бко Уа твгомаї бек тер Аа Бе шіу 145 і50 155 їБО дід їви так овег сїу Ууді нія тБговбе вго дід УЗ! їец б)ій баг Бех їБ55 їуУп 175 сі гемо Тук бег ей 5ек Звгомаї ма! тс Уаї РгО 5вг бек бегог ву ї8О 185 жо сіу твгосівай тчк тує Іїв Суз Азп о уаї Ахп НІ уз Бга дег одяй ТК
155 Ре 2а5 іуз чаї 45рвіух іув ма! бій го ух хег Суя Азпоїуз тйгоБія ТВг 210 іх 2
Су вто РКО Су РО АТа вго ів іец окем обі сію вКо 5егоУві вре 225 2 235 ее іецн рРБае вКОо РТВ ге ГО і ув АБО ТБг о Бенц Мет тів 5Зег АгЯ тпгОРГО за 250 255 я-ін жа! ТНК оСуз маі ха! Уа) Ава маї бегонія зів азворго ів Уді 258 255 ТО іуз РБа дБ тгротує жа! аА5росіу Уа! бін узі нів дяп Аїд іїу5 ТВгГ 275 280 285 із РГО Ага сі зіз сій туго овіу бег тнг о туг ага а? Уаї ет ма! що ах Вк ім тк о Уві івц о міз бій Ар тгороіец ваза бір ух шіб Тук ої ух сСуз зо зо ЗІ5 2 іуя УІ бек АЗп фу Аїа іви то Аз вКОо хІЇв сф: ії ТАК Ії Ег зе з50 335 ів вів вуз Біу сій вго ага сій вго біпожві тук твої) ва РгГО з4а 245 350 ек аго сію бін мет тпг ої у АБ шій Уві Заг офівм твг оСуз іви ді 355 50 За5 іїуз ОТу БНе Тук Рго звг Ар Іі АЗв Уві об тгр бін бег адхп о біу 370 175 зва сіп вго біч АБВ Ап отжК рух ТВКОТВг о Бго Рг Ууді їв др очег до їх во 5 щоб сіу Баг вйв вне гам тк хг оїу5 іец тнгомаї азвоіуз его ага тгр 405 410 415 іп осів зі Ап о мві Бпйе Заг оСух хек оуві Мет нів біц дід іви НІ ага 425 аза ахпоНіз туг таг бій їуз Заг івц хег бен зах Рго Є1у ух 485 ве З45 ки» І «вії» 37 «ей БЗлОоК «еіїз штучна послідовність кггОх кегйе синтетична посліІДОВНІСТЬ: КОоНСенсую НУВ-НІ
«а «гі» їнші ознаки «Ай» ї4р..8 «22Х» Хад є Рго дба Біу «вх «гії» інші ознаки хиказ 15.53 «теЗ» Хав є Ази або ап «ВІКУ «гі» інші ознаки «дах КУ. «283» Ххва «к тпговОЗз чег «ВИ хх Уї тев оті тійг хда Хад о зіу біу ту Хаз Ап отук дід Аврожаег таї гуд і з 15 і: 51у «еВ 2 «еЩїї» й «ій» БІЛОК . , «ІЗ» штучна послідовність я «23» скнтетична посяідовність: ковсенсує НУВ-НІ СНУ «КУ «гі» інші ознаки «ВУ ї3М..133 «283» ХхХва « будь-якою амінокислотою, крім о Заг «В ВІКУ «ві» їні ознака «дай ї143..143 «22Х» Хад є тгр або г ец «Не г дід Біу Хна Ха РИБ Аїд туг ії 5 «еВ» Я кеїіх 7 «Фіг» вБІВОВ «ІЗ» штучна послідовність «аЕОх «23» скнтетична посяідовність: ковсенсує НУВ-НІ СМТ «В ВІКУ «ві» їні ознака «дай ї143..143 «283» Ххва «к тгроаов і ви «Не У дід Біу тТпг Хав РІВ Аїд туг ії 5 хай й «її 9 «кій» БІЛОК «Іі» штучна послідовність иа «РеЗ» синтетична послідовність: консенсує НУЯ-Е З «Рец «регі» іні ознака «Рай» СВУ. «223» Хав є Звг аба тує «Кох «22ї» інші ознаки «Реп» СЕУ. кхЕРі» Хад ж Рга або діз «ВЕ «рію інші ознаки кара ТР... «вЕа» Хав в Бга айо тис «аю й іп сіп хХав тег о тБготпг охХва Хад Те і 5 ч«еійе УЗ «вії» 214 «ВІ» БІЛОК «Рії» вюручна послідовність «22ох І «228» синтетична послідовність: легкий ланцюг антитіла д «Об» яв з хів бій Меї тк обіп его орто зеговег Бен жег Аїд зе оуді біу ії 5 їй 15 ахр ага ча! тб тів тйгоСуз Ага Аа зег осів дев оуяі звготвг Аза 2 28 30 «ді Аїа тро тує сій іп іш вБго Біу уз дів Рг вух їву еп тів 35 0 45 тук заг Аів бек Бе іви Тук хек осіу Уві рко бек ага вве бегосію за 55 бо хвгобіу чек зі ТВг о ар овНе тБгоієцй тваготів бек Баг оїец піп рго що 7О 78 ЩІ сій д5о вва дід тйготжт туго був сів зів беб туго Тпр отТвК вго рго
ЩО З5
ТНгоРче сту бів біу тБгої з Уаї сім тів гу аг тпкоУді Аїа дів іо ць 115 ргз Заг ома1ї ра тіє вйпе о РгОо вБго заг одзровів бів ген оіїуз зак осію 115 1205 125
Те АтТа бек а! хафї Сух їв іен аб два вВе туго вго Ага озін Аїа 130 155 іа іт ма! сій тгріув Уві дер азп оліа ву бій заг озі ап охетг о Бів 345 хо 155 їв бЗім заг ма)! тб осів біп дер озек їуб Ар бек о таг Туг бак оїен зЗег 155 ї70 355 цес тат оівци тВгоєец баг оїе5 ЗВ о АЗО тує зів гу Ні ув Ууді ту їко 155 195 аіа сСуз зії Уа! тБгонів бій 5іу іву бег зер орга маї тТВгогу чех 19535 ЩЕ 25 вне Азп ага сі бін Сех 210 «2302 76 «31 214 «Т3й» Білак «ІЗ» штучна послідсвність «еВ» «ви» синтетична послідовність: легкий ланцюг антитіла А- «Ом В
Азр тів сіп меї тйгосїп Зег о Бго бЗвб о зекофїен о бег А)ія Заг оуді у 3 5 ї5 іх ахв аку маї тк оті тпг оСже Ага о Аів бег шій Ав оуві зеготвг Аїв о З за чаї ата тгов отже сій шій губ вто шіу ух від кго гу їву ів о ІЇа 35 40 45 ттг Ваг Аіа жхак РНЕ ісец туго его біу уді Рго ег Ага Ра хетг о іу 50 5 бо чего біу бег ші тйг о АзровБе пагоівгц тйг о тів бего5ек ген сій го 70 73 БО сім хор Ве Аїа тйг отут туго був біповів беб тує ТАК отвг о вко во 85 чо зх
ТВГоРНе ві біп о сіу тпг оз маї вів тів вуз Ага тБгоУуаї Аїї Аза мою 105 зів ргз Заг ома1ї рйе ті вне РгОо Бго заго одзб обі бів ген оіїуз зак осію 115 12 125
ТВг о АїТа ЗвгоУаї ма Сув ен ів дяп о дзп о вНе Тук о Рго Аго Бін Аїв 1305 155 ї15в іт Маї бій тгроііув чаї дер аА5поаїа іви бій бек вію Ап охег о бів
150 155 за зЗіц жест о маї тр сій біп А5рожегоїуз АБО его тйг тує БВгоїен хек і155 ТУ 175
Бек отнгогао тт оївец бек ої уз А1В Ахв туго зів іу5 ніх ів Уді тук 150 385 іа дів Сж5 сіц Уа! твгонія віп обіу рей вег обеб его ді тБгоїуз5 зер їз Вк 25 вне ап Ага пік Бін сСух
Іо «еВ ях кіїх 7 хатах БІВОК хі» штучна послідовність «еВх «283» синтетична послідовність: консенсус нув-нНі «ЕВ, «вет: інші ознака «авйв 53).. І «223 хХаа є 5Ег оаба те «ВР «221» інші ознаки «ай» ї8..8 «22ї» Хаа є тгр або 1 ен «юю ту дід Біу Хна Ха РИБ Аїд туг ії 5 ке у «е1і15 «гі? БІЛОК «бі1ЗхУ штучна поспідсвність «вах «283» синтетична послідовність: альтернатияна нУуВ-Ні внтитіл а, А-ї, а-ІСТЬ, А- а «нт й
Авпотуг сі тів нів ї 5 «ВЗ» тв «Різ 445 «12 вІіВОК «813» штучна послідовність ка» «ТЕЗ» севтетична послідовність: тдоі-важкнй ланцюг антитіла ВІііО1т) «Нюх УВ сім а! сів гей Уві біц веб біу шіу Зіу грец уві віп вго сту біу ії З 10 15 зег фен Ага гео бек су аїа Аза Беє Ру Ре ТБ Ре баг лап о тук 20 25 за сОіу тіе нії тгор УЗ! Акад осіп дів Рг Зі гу Біу гец бі ткромаї
Е 40 45 (іш те Те о твг о вго дв сіУу іє тує твг дев тує дід дв Заг чаї сік терті тТБб ого А5росіу зі туго твг др отує Аїд дхробег чаї за 55 о ів біу Адгд о вле твгоїіє Бвег о АЇа АБО тТагобек їу Ап о твпг дів тує та 5 вк іви біп Меї дюпозег іви або А1їа 510 АЗо тв Аїд хаі туго туго Су 85 За 55 ків агоа Аїд зі тв отгровне Аіа тек о тго ОБУ віп о Біу Тит ої веб ді іх іп5 І що тТвгожаї Бегозек Аїд ваг отпгогуз біу вго хаб о уді вна рго івен дів 115 о 12х
Вга жк Ваг обух зак отвг чего шіу Бі твгоАів Аїд Еви Бім Суз ви зи із 10
Уаї уз дяр тує Бе Рго сій вБго Уді твгомаї бек тро одяп бек сію 145 ї55 155 160 дів ец так обЗекобіу маі нів тБгоБНе Рго Аа Уаї ен бій его Зекє їБ55 170 175 с-іу Бей туг зар оїєен заг Заг оУдЕ ма! тагожЖві вго зег о бет хег ог ей 18 185 ІЗ оіу тнгобій тб тує тів Сух д5п уд! аб нів іїуз Бра бвг аби ТНК
Б 206 ох іуз хаї Зв бух уз уді сій вго іу5 заг осСув Аа Овух ТТГ ОВів тиг
Ка зіїх 22
Сузх вго вт Сух го дія го дів їеноїец зі біу Бго БегоУді ве 225 за 235 250 іви вве РгГОо ВгОо ія Бго їув АБр отТИг ої2еу Меї ті 5ег Ага тнг орг 230 255 сі) Уві твгоСуз маї маії Маї Азроуа! бек ніх шібю АВ Рг бів Уді 265 аз ие іув вйе ази тов отук омаі ар обі Уаї зів Уві нія дп о АТа в ТИК ра 2860 ВЕ іуз вго дгЯа бін сіб Бій туго одзп Зег о твг о тук Ага ма) чаї бек о уді ай 255 за івиотнгомаї гад нія бій аа ткроівн Аз ші ув біц ту гу Суб 305 315 ЗУ за зує уді ек Азп ог уз Аїда ів РКО 13 РгО Ів біб ру тВготів Баг 325 335 3335 іУуз Аїв ух шім бів Бго Аг о біц Рго бБів Хв! тує тпгроівец вго го
А заз 315а зег ага січ бі Ммеї тнгоіУ5 деп сій Уаї дегогву тпгосСув і ви За? 355 35 355
Гуз шіу Ре туг вго бег аБрЮ тів АТа уаї Бій: тгросів бег АБп вію зУй з75 зи іп Рго бів Ап дя туго імя ТК отак о Бга вко аї іви др бек Азр 385 хо ве я б5іу БвВг Ре Ре іви Туг бЗвгог ух ів тагоха! АБВ фу 5ег АгЯ го за 315 4315 віп бій бі АБ" Уді ме Заг оСузх его маї Мет нів біб віз ів нів «20 425 430 деп онів туг ТНК віп іух век оївц баг огву ек овго 53)у з ув 335 ача 445 кеОх 5 «21і» 846 «212 БІЛОК «бі1ЗхУ штучна поспідсвність «во «283» синтетична послідовність: ІхІдебі-нажкин ланнюг внтйтіла А-ЗТ5 НТ «ен»: дО ій Уа! сіп ів Ууді сід бегобіу 51 бі бец уаї зів Рго сіу Бі 1 5 ц 15 его їіец ага ів бЗег Сух Аїз А13 его біу врБае о тВгоОРКе бег одер о туг
КУ й Во сік хів ніх тго Уві Ага біп іа вго зі вух бік ев біч ткрочаї
Зх чо 5 зЗіу тгротів тв осі Ахп о сіу б3іу туго его АзротТуг Аїд дор Зег маї 0 5 що іу5 бі дгд Ре твготїів 5ег дів Ах тВг о жег гу АБп тТагОдій тег 3 те 75 що іец бів Мег Азпожегогвен Ага Аз бін Аза тк о АТа ма туго тук о Сух 85 За 5 дів АгО Аїд о біу тиб тгровБе лід туго отго біт іп бРу тнк ої ви Уді ню 105 ІВ
Твгожаї дек бек Аїа его твг ої б3іу Рг ек ма! Ре Рго і ви Аа 115 і12а 125 вто чего жхак огуд бек твгоЗаг обі сіу ТАК оаід аів іен сіу Сув гей 130 і3х їі та ів Ар отук рве РКО зі рго Ууді тгомаі бек тгр о дхп о зеговзіу 145 ї50 ї55 тв іа іви тб озеговіх Уді ніх твгоРБе его АТ Удї їв ій Звекозег 155 їй ї75 сі ви тує ет оів бЗег хат Ууаї Уді тпгомаії Рго зегозаг Зегоі ву і150 155 тай еіу тпг осів таготує тів Су аБа ма! Аалонів фуд РгО Заг АБ ТНК 155 ВО г іт5 Уві Ар оіув іх ха! Бін Рго ру его Сух двроі у тТВгОНів ТБе о 215 ВО
Су5 вго о вго бух Рго дід ро сій ів гецп сі сію Рго его уді вве 225 230 235 Й т40 івц вйе вто РГО зуб РГО іух АЗО ТПГоїви мет її ек дк тВгоОвго 245 За 53 вій чаї тб о сСуз маї Уді Маі Азо о Ууді Зех нія 01 дер РКО сім маї іні міхи я7о іуб вна АБ тгоотує Уа! Ар ові маї піс жаї Ні деп о Аїа іу5 ТБг
ВХ во го іУ5 РКО Ага Бін біц обіп туго ава Зако твгс о тук аго Уді Жаі Бег оуді га 295 00 іец тБтоУаї рен оніз біЇп Ар о тгроіви Ав СіІУ вуз ЄЇн туго руб Су за5 Зо 315 зав іт ма! Бег Аби іуч Аїа ін рго дія его хТе бів їук твгоІЇїВв дек 325 їз її іч АіВ гуз Зіу віп Рго АгяЯ віч РКО зіп маі тує твКгоїви вго вго зай за 350 зег Ага Бін сій Меї твгоїух Аза біп Уа? бЗагобец твгосСув і еч маї 355 ЗО за5 зуб йшіу Бе тТуг Рго Звг Ар ОІЇв дія уді 5іи тгр оБіц 5ег дп піу
373 375 за ів Вко сій Ав оаза туго зу ТВ ТНК оРгО Бго Уа? рев Азрохег а5р 85 90 за5 а сік бек ре вів їец туг Бек гу ем тк Ууді аБр гу бог АгО тер за5 а 4ї5 іп віп бір Азпожаї Ре дет сСув бек охаї Меї нія сіц аїа ген ні 428 425 «30
Азпоніз тук тйб сів уз его іє хегоіву 5егорга сіу їу5 а 445 да «а В «їі» а «віл» вілак «21415 штучна послідовність «В30» «Її» синтетична послідОоянНіСть: 1051 важкий ланцюг антитіла А-1 «а» БЕ зів уві сів їв» Уа сій зегобіу сіу шіу геб Уа! зіп бкоа су біу ії х 10 15
Зег ів АгЯ бен зек Су Аїа дів Зек бі РМ таг о вБе Баг о ав отуК що 2х 3 біу тів нія тгпоха? дго сій Аів Рг біУ Був бу ївц Біб тер ха! 35 4а 35 біу тгротів таб овго Ар осіу біу тук твг одер о тук діа Ар обеє худі за 55 що уз біу Ага Рів тат отів звг Аза аеро таг бе їуз Ахв отнг дів тук а т що іп біп Мет ай еко агбд АЗа сім дер отйаг аїд уаії тут туго Куз й о зх аіз ака ві оту заекоген ве дів тук тгр зі бій осіу тгогев ма! цк 35 Іо
Твг Уа? Заг Єв Аїд его тБт о гуз біу Рго Жекг ма! РБе Рго іец А1В
ТБ 125 125:
Рго жег бзег рух -вк тйг обег о шіу бБіу ТВ Аїа АТа ївеч о сіу Сус і вм 135 1315 І маї ке Ар о тук Ре Бго бін Рго Ууаії такоУВв!і хек тер азп о Зего о1іу 135 155 155 353 дів реп твг БЕК обіу маі ніз твБговНе Рг АБа Узі ен біп его зек їх 175 ї75 оіу ген тує бек оівец бег лег о жаї Уві тВгоув)і го ще чег аг ої ву 1850 ї185 155 сіу твг осів таб тує ї118 Суб АзпоУВі АЗпоні ух го баг Ази Тиг із ВО ОБ іув ма! Ар Був уз Маї ші го їуз зег о сСуз дярофув ТК нів так 210 215 гай
Су Рго Рга Су Рка Аза вка сій івц ої ви со1у СТУ го бог уві! Рпе 225 23а 235 240 іей РЕ РГО РГО гу РГО іуз аБ5рБ ОТГ фей мет ті18 Зеб АРФотБг вгО 4 5 255 зійш маї тик оксуз ма! чаї Уа! хр маї Зек нії Біб Ахрорго Зі ді
Ба 2655 вгуй іух РЕ Адзп отгО отже Уві АБ ОсСіу Уа ей Уві Ні дялоАїд ру тик
Кі: 280 285 ів Рг дк Ззіц січ сій туго аба Зеготвг тк дга Уві маі зег чаї а 5 БІ; іви так омаї ів) нів біп яхр тгр ів Аза штіу губ Біц тук гм Суб 305 з1з 315 его іух ма! зег дхлп Еф Аїа івец РГО іа РГО ІТ ЗІш ух тйготів заг 325 3535 3:35 іт АТВ уз цім бій Рго ак сім вгОо зіп таї туго тк ге) го Рго з30 3435 з5о ек Ага біц біц Мет тВгоіуя азп сій ві бек оїви твкК оСує ви Уві 355 зво з85 іч СІМ Ре тує РКО бег азв Ії АТа Уві біц тгпосіц дет Авп сію 373 ЗУ З шіп о РГО щі дя Ай туго груз ТпгОтТаг о РГТО РТО ді ве дхр баг АВ з85 95 Зч5 ОК сіу его РН Ра гц тук чек оіу« іви о твг Уві АЗШорух Че АгФфОТКА 05 СЗНЗН 415 сій сім сіу дзп мМа1! РБе 5ек Суз ЗвгоУуді Мет Кіз сій діа ів ніх га 425 455 деп оніз тук тнровій руб5 Зак оїеу зак оїву беговго Бім РУБ 435 440 45 «ЕвБе Ва «вії» 5
«ії? БІВОХ хаїзЗ» штучна послідовність «а ТЕх «Ф25У сюнтетична послідовність: коротка лінкерна послідовність «інж. 857 дів АЗОВ ви бік Бег 3 З «2302 ВЗ «ії» в «вій» БІЛОК «213» штучна послідовність «аю «ТЕЗ» скнтетичнав послідовність: сабт розщеплення тромбтном «Ой» 83 івм уві рРгоа АгЯ Біу яег і а «Рій 84 «Е1ї» 199 «гі2У Білок «Різ» втучна послідовність «РЕВЕ» и, «22» синтетичниВ поліпептид «еще: Ба зів жаї зів ївен ма)? бі) бЗек о біу щіу віу беу маї іп вго біу сіш 3 З 10 15 ек івецч заго ївб Бег оСуз Аїд А1їа его обБіу Ре тк о вБе тВг оди ер
КЗ 25 за лавр тів нія тгроуаї Ако бій аЗіа РгоО шпіу Ежя СОІУ іє бів теромаї 49 4 сіу зі хІіе тк овга аїа дврозіу туг тнк вв туго а!з Ахр Баг ма!
Ба зїуз СОІУ АгО РВЕ Твг оІ112е бек Аїд Ар о тАгожек рух азпотвг діа тує а 7 75 що ін бій Меї ав пдег іє Ага А1іа біз Аза тн Аїд Уві тек тук сСуя 85 0 зЗ5 ків Ак век тук зграй дп Бек вго біу ак біу Рйе дБротук то 00 105 юю сіу сів сіу тк огївен уві тВгоУді 5вг БЕК 115 320 «ом 85 «ваї» 422 «гі2У Білок
«233» штучна поспідовність св сРв3» ринтетичнив прліпвпитид «В» 5 ій Уві сів без уаї піц бегобіу с1іу фу ге Узі біп Рго біт сію ії 5 ЯК 15 вк оігн о Аго рей озек Су дів дід бегопіу вав о тес ве отвг одяй зак о 25 за
Авротів НІ тгроаї аг шій азів Рго зЗРу ув ЗІ єв бій тгромаї 35 5 45 сіу Біу хе ТК овБга АТа дер зіу туго тпг ар тує аїд ахроаг ма! зо 55 Б іуз сію дгЯ ре о твг тів бек Аїд Аяр о твг ожекоіїув адап о твгодід тут 3 а ї5 що іви сій Меї Аза дегоієд ага АівВ бів Ав тн АТа уві тує тук Су | ту 95 ліз Ак век тук тгр Бег б5ег Зег рго сіу ек да вБе ар туго тр зба 105 їй сік вів сту тНкоїен мві тв ома! яв Бар 115 125 «0» Б кеі» 128 «ау БІНОК «ї3»У штучна послідовність «ЕВКУ «ТЕЗ» синтетичний поліпаптийд ее 56 ін уві зів без жаї 5і) бек обі біу сту во Уаі бій вко бі сіу і З ІК і5 ек гбем Агоа фе) бес Суз АТа Аза Зек о бтБу РБе таг о вББе тБгоЗег Аза «о 85 З тТук Мет ек тгр оУуді ага віп дід го Бу уз Зі реа: ЄїТЕ тгр Ууді
Й 5 ши 45 вет таг оті ткгротук біп зем біу твготну Аба тує дід Ар оБаг ма! зо 5 о іУуз БіУу Аго вБе так тів бЗег дія азротагоЗакоїу5 ай твВг о АТа о тук ісп зіп мет а5п хек оіви Аг дів іч АБр от АТа мві тук туго Сех 5 Й ту 35
Аів Ага бег же Рга терозег обі біш шіу Ре ооту Мет Аза о уді тер їо0 105 зо сіу зів біу тпгоївц уді ТБ очаї бек чек 125 «Лю Ву «вії» 122 «еїйв БінОоК «гії» штучна послідояність «Рец «реВМ»х шинтетичняий поліпептид «А» Я зів маї зів ген Уві біз бЗег обі біу біу ву о Ууді бів вго зіу бід 1 5 ї2 15 -вк іван о АКо ївро5егоСує дід діа 5ег ші Ра тВг о РБе ТАК дет Ап
КЗ 25 зв туг Мат аг тктроуаі ак сів дів рго ші ув о бту ївец бін тро ма! 30 45
Вес отаг о тхтфе тгротук біп зегосіу тТвготве Ав о тТуг АТа Аврозегома! в в 5 іїув5 ОІУ Аго Рае Твг її бег Аза дяр так обвс огуз ап те А1в тук 65 то 75 80 івги бій Меї а5а бер ів) Аг аів Сі) Ап отВгоАід уд! тег туго суб 8: ща З5 хів Ага АБОВ зако РКа тгроРгОо Зег іже біу вве біу мет др оуді тгр їо0 05 зо сіу зів біу тпгоївц уді ТБ очаї бек чек 15 125 кої ВХ «вії» 323 «гій» БІЛОК «Іі» штучна послідовність
Бас «РІЗ» жинтетичнив поліпептид, «а» В сій мак бій їву ді бід жегозіу біу сіу їеножві зів Рга сіу шіу ії 5 зо 15 чегоїен Аго ів 5ег о Сух Аїв а1іа бегошіу РВЕ ТВ Не тВгохег туг то 25 за
Авротхтів ніх тгротаї ака сів діа Рго Бі гу СОІУ іво Біб трромаї ї5 зо 45 чіу Біу т1те ви вБго А1іа дер віу зо ТК Аза тус дія Аха бег маї 50 Кі 5 іуУу5 БіУу Акц вна тк тів еп дія хо тпу Бак оїу5 дя тВгодіа тжг 55 о їв жо ім сіп мет АБ зек оіву акад дів січ А5ротнкК АТа уаї туго туг сСув ве й що С ц5 5 Я аа Агу ав Аза тує Ар о Уві Ага Зак уві шіу зекобіу Меї Ар тує іш 105 що та обі зів обі ТБ оге) Уві Кг омаї бег о яек 1ї5 го «0» а «її» 25 «832» БІіДОоК «Ж» штучна послідовність ек «ва» синтетичний поапіпептид «Ом Ба зЗін ові зів бен жі Зін Зек спіу бі СОІУ ву чаї сій го Бі сію і З 10 іх 5ег їем Аго ген лег був АТа А1в 5зек о біу РБе так оРБе твгобег отут га 25 за аезпотіа ніз тга жаї дез бій Аід вго оту ух шіУ вен осїю тер о Уві 35 БОЮ ах бук Фати руки - є кх У ЗУ сч вик -к с т чіу бБіуУу хІТа хек Рг дія дер Бі або отйгоазоотуг дів дп хат уді зи З5 бо іуз Біу Аго Бе тгоїіе 5ег Аза АБИ о таг обег о гух Ахи тВгодіа тук то І у о ім сіп мет Ап озег їв агФф Ав бів Азр оте АТа маі туго туго Су 5 чо ЗЕ «із Ага Ап аз отук ахроУа! Аго тйгКоУаф сіє зекосіу мет Ахротуг з3 5 5 ттвосіу жів біу твгоївн Уві тБгомаї бегб хе їїх їхо0 «230» 50 «21і» 123 «але» відоЖ «ей» штучна послідовність «го . І «ка» сентетизнии папіпеттид
«АК ВО сів Маі бій їв» маї сій хвгобіу сі Бі Рец УВІ зіп вко сіу 5іу ії 5 я: 15 ект фен Агуд є) Бек оСуз А1Їв Аа явг ші Ре те вве о тйпгобег тук що 2х БІ азротІїе ніз теп охаї Ага сій Аів РгО сту уз б6іу ву вів ткв Ма! 35 біу біу тів беє о вго дід Азросіу ахр о твВгодер о тук діа Аяий баг худі зо з5 ща ут шШіу Аг Рйе тк їі бог дів дхр о твгозег вує Ап отйг дій тує й то т ВО іп біп Мет ап Бекогіеь агбд АЗа сім дер отйаг аїд Уа тут тУг Куз 85 За 5 дів Ага АБИ Ар о тук АвроМаї Ага чего таї сту Зв обіу Мет дер тук
КК ї05 | по тгровіу бів сім твгоївеи маї твгоУді заг одакг 115 25 «в В «21 123 «212 вілок й . ееїл» штучна послідовність «в . Й «В2Я» синтетичний поліпептид сі) Уві бів ву маї сій бегобіу сіу Біу бен ожаї зів Ро іх о1у ї 5 106 15 щег реп аг іву 5Зек Сея Азіва ді хек бі рБе тк РН тиг ожег о тук о 25 во
АЗОВ отіе нії ткроУуаї ага сій дів Рто сім груз біу ви їй тгроча! 35 чо 45 біу шіу тів сег гго дія Азрошік вхо тВгоАяор туг Аїда Ап бек ха! 0 5 що іуя шШіу Ага Рйє тв їі бег дів ахротвгоег вуя Авп о тйг Аа тук
З та т 8 їез біп Меї дяйп бек оіви Агд Аза сі) Або тає лід хаї туго туго суз ща ЗУ дів ага Ази ачи туК АБроМаї Аго вне узі сту жек зі Мет дер тук ще 105 10 тТгрозіу бій сіу твгоїец мні ТБ оУді чего бек 115 ї2е «аж: В «Вії» 327 «2іх» БІЛОК й . «ей» штучна послідовність «РК «в» синтетичний повіпептийх «Ве З сів ді бів вв оУуВі сій жвгобіх сію бБіу ви жа! бів вго ші 5іу ї 5 18 її ек тей Агуу їша Баг осв Аїва АТа Зегосіу Ре хек очзаї уз Ко Мет тут мет тйготгрожа!ї до сій дів рго сію ув бі сви вів тКроуді! за за 45
Зевкотнготів тгротук бій девг осіу ТигКотТВгодяр о тук АТа Ар обег Уа!
За 55 ко зу шіу АгО Ре тбк її бег дів АБИ о тТВгозек вув АБА тТпгодіа ту та 78 5 із біпомет дей 5Звгоїви Ага діа сім аяр тс вів аї тут туУг бух 85 за За
Аів ага бвг ек о Рго тТгробег обі сім бБіу Ре бім Меї Азрома! тод ще 35 15 сі віп біу твгоіву та! твгомаї б5егожег 115 ї25 «Ох 3 «Зіїх і22 «вії» вІіЛОК «Вії» штучна послідовність «кг «23» синтетичний поліпенптий «Во» 83 зів маї сів їев уві бій заг обіу сіу біу гео ма! бів го віу бі ї 5 10 15 зеу і2ай дга еп звгоСе5 дід дід Бег сі ре тВг обме тів Зак де зо 25 за тут ма! Зег о тгроаї Ага сій дів Рго сію гув біУ їецозін тКрома! о 45
ЗеготйК тів тгротук бій Заг осіу ТНГ отТВгодявр тує АТа АхробЗек ма! зо 55 во іув СІЖ Агд о вйе те о Іїв бек о АТа дер тако обес рух ав оТвг Аа туг й та 5 505 іви сІіп Меї Ав лег оією асо Аза сій Або тВс Аїв Уві тег о туг сСуя 85 зо 55 із Ага ек Зак вка ткробек піу Є1ш біу вБе 5іу Мет а5р омаї тго ії що ло сіж спів біу твВгоєен уві тБгозаї 5Зег жхег їі 1205 «аю ЗА «її» 122 «Еї2» БІЛОК «ВІЗ» штучна послідовність «ЕЕ» «йк3» синтетичним поліпептид «ЩО за ліц Уві шій іен ма! йшію бек сі шіу бі івц хаї біп Бко піч Біу 1 5 10 ї5 так іви акд ів ояве Суз дій аіва его біу ве тпг Ома! тнгорЕВ ге 2 За тег Меї бек тгроуді Ага осів аіз РГО шіу гу О1у їв Біб трромаї
ЕТ 45 чего так оІфе ткротук бій Зегобіу ТБгб отйг оАявВ тує АТ Аа чего ма! за з5 БО іух піу Ак ве тк оті хег дів А отнК заг огух Аяп так о АТа тур
Ба 7а 75 во іеи сІіп Меї Ак 5егоіву Ак Аза зі аАзв о таК АТя Уді туго туго сСух 85 зи Зх віз Ага его Бек о Рко тегрозек сію зів бфу Рпе сіб Мет ер Уаї тгр іа їх їв сіу біпобіу тагогец уві так о уді Баг Зак їз 12:05 «2» 85 «23ї» 322 «Вії» БІЛОЮ «її» штучна послідовність «ЕД» «3» синтатечнимМм папівептид «Яке ах пім мак віп івци о маї бій ес біу біу шШіу сво о уді сів вга сії Є1у 1 5 10 ї5 заг бен аго ев бе Сух Афін Аа яегобіу Ре тк охаї тиг о вго Меї 2 5 Ех; тег Мет его тгр Уві Аг віп АТа о вко біу Ух шіж ев обім тктроха! 35 45 45 сту З У ще тунік у т фр їх У ож ОР. ії оче гаї зег таг оті тв отук бій его біу тВготаг АвЗротук Та Аврозег ма! а 55 щи іух сіу дга РБе тпготїів чего дів АЗпотапг Бекоєу5 дв тйг о АТа туг 55 го 78 що іви 5ійп Мет Азп озегоїен ака АЇв Бій аа тк Аза маї туго тук сСув
Фо 25 діа ага Бек бекє го тгроБаг сі бій сім Ре бі мет а5роУві тгр
КО ох І сіу біп осі тк оген мі твгоевьЬ жекоБаг 115 ї28 «іо» зе «в» 307 «232» відо «ії» щтучна поспідоавність как х кеВ» синтетичний падлтіпептих «а» 5 ар отіе бій Меї тБгобій хег рго Зеб заг їн зег дід Баг оУді зіу ї 5 10 15
АБр аго уві так оті твс о Сух Ага Аїда зегоєів Авроуаії заг ТВ ОАЗА. о В Зо
Ууді аід тга отуг БІВ віп і у вго вБіУ гУ5 Аїд РГО їт5 і6ц ів ІВ ча 45 туг зег дід Бег РБе їви туго зекг зі Уві Рго зЗвкКодга Рпа бвг опію 5 55 а
Зег о біу вс пі таб о Авр Яйв о тйпгоїем таг ІтІТе ве бЗег о гва вій рого гав 75 ВО сів Ази вБе Аіа такотес туго суб бій обвів его тую твготпг о вКко рга
Кк ча 5 тс овве сіу сів біж твбоіуз Ууді сім тів гух «ДО» 95 «іх У «іх вТлОк й . «Вії» штучна послідовність
«екОх . . «Еїх синтетичний подіпептил км и
АБа ожіє бів Мет таб оБій чет вго бек баг гви дог дія Баг оУді Фіу ї 5 юю 15
Аза ага ма! тв тів тк оСух Ага АЇа дегошвіп Ав уві Бек отвг лів 2 ша КІВ чаї Аїа тгр тує біп сіп 1уб5 Рго сіу губ Аа вго іув івец і во Ії1Б 25 З тр туго бек Аїд Бак о РБвоівеи туго бег сіу чаї вга хек о дгда Рпе хегобБіу 5 п его біу хег сбіу тВвг одер РБа твг орви таг оте ек бек оіем дів рРгО во тв та що сін о Аьо» вВпе о аіа таб отує тут Суб Біп бів Закотує тів БагоРгоО хек
ЕК чт зе
ТВ овнНе Бір оїй щіу тпкгоі я маї бін ІЇїв г ув цю 305 «ЗО» ОВ «аїр е ЩР «аїї»в БІЛОК «Вії» штучна послідовність «ее «ВРХ» синтетичний поліпептид «кВ» ЗВ дер тів сів мет так осів его Рг его озаг рай Бак Афда бегоуді віу ї 5 юю 15 дар Агп уві тк отів твгоСуз Ага А1а бек о біп Зевс тів бвгобег тук т га за іви дів тгв отУг БІВ віп і у Рго 5іу губ Аїд вгорі іївев ів ІЇВ зо аз туг піу Аїд бег 5вг о дго Аїа зегозіу Уа Рго зак оадго пе 5ег ощіу за За що заг ошіу хегоєту ТВг др о РВа тБгоїви твголфа его бег іїєц віп Рго гав УЗ що сі аА5ип вВае Аїда таг тує туго суч сій бів туг тую заг бвгоРго ан
Кк Зо З5
Тіговне сіу бів Бі тВгбоіуз Уа? біз тІїв зує
Ії 1055
«Ні» За «Ії» 307 «232» Відок «2Іі3» штучна послідовність «вед «вай» синтетичнив попіпенвтид ка» за
АО тів бій Меї тпкобіп зес го баг озес во бек о АТа зекома) Ту і І їй іх ев Ага ма! твг оті тВг Су заго дід беє зів Бег о тів зак Баг отег 24 за 30 ів АТа тгротуг сів зіп іже го цію гу дід РО із ви зіеноІїВ
Туг бі Аїва чЗек о Бег Ак АЇа Звгобіу ма? рго зег Або Бе его вію зо 55 во хак віу ек зі тВгоАБр вне твгоіву ТНК отів зек заг оїец вій рго 5 Б їх во жі: (Я У М пока рик жук ЩІ т хх с ев де. щї яій д5р вве Аїд твг оту тує Су біп о біп тТуг гей звер озЗеє вро тіє 85 й й ща ак
ТКгОовйе бі бів біуУу твгог ев чаї бій Іф г ув м 155 «али ню «Зії» 105 «Еійв ВвІЛОК «13» штучна послідовність сер «?83» синтетичним поліпептид «м: ОД дво) отіе біп Меї тйг бій хек РгО Зег Зак орецн зег дія Зег уві цію і 5 10 15 дво» да Мві тагоїів твгосух ага Аїда ек обів авзроуаї Зек тнг дів 2 25 ЗО
Уаї Ав тгротуг бів бій рух рго біу уз Аїа Рго і ув ген іви тів її 45 45 туг ет А1ів Бег Ре ів тує ву Бі бі Рго бег Ага не его осіу 53 їх: вег сіу Зак обіу тпг до РВЕ тТйгоїец тТвг тів бек озвегб ви бій РКО
Б та 75 85 зінч азр ве дій тв туго тук Се бів бій чес отук ТВ тВе оврго го ях о 55
ТНг вла сфіу Бій осіу твгоіжз чаї віч тів ої ув її 15 «ЕЕ НМ «Ей» НК «РВй» БІЛОК «233» штучна поспідовність «2 «вай» синтетичниВ поліпептид «АК СЕ дви тів 5ів Ммеї тс бій бек оБго его бек оївц бек АТа 5вгохаі1ї сіу 1 5 о 15
Авроага Уві ТНК отів тпгоСуз ага АТа ек бів Авромаї Зегк тнг А1В 20 25 30
Уді мів теротук вів біп іх ргоа сі губ АТа вго ів твер іви тів 35 80 45 туг Заг АтТа звг бе іви тк Зекоєїу жар овго бег ак ВВЕ Зег оту зо ва БО баг обіх бек о біу тс од) ВВе тБгоіїво твагоІТе его баб їви бів рга
РЗ; 25 о вій Аза РЯе іа твготуг туго су5 вів віп ек тук тк о5ег дід Рго 5 що 95
Тиг Овна бі біо Біу тпгоїує уд! 513 хтів їух 1 155 «ЩО» лог «Ві» 307 «і2У БІЛОК , хеїЗ»У штучна пешлідовність «ЕВ й «аВ3У синтетичним поліпептид
Ази отіе хів ШМеї тВг обіп бек Бго Заг бЄвг оїво бег Аза хегочаЗ сіу і 5 то 15 дворога жаї тнг оті твгосСуб5 аго авіа бвкобів Аза ма? бЗег о твг Аа 5 за чаї віз тгротук вів сій гу рго Сію рух АТа РГО їуб5 фен ігц тів вс Я туг бек АТа хек Рів іви Туг бек о сіу маї Рге сег Аго РВЕ хегозіх 25 Б
Заг сіу бек біу тиг Ар РБе тигоївеу тТвг тів бегобеб їву Бій Рго
55 В 75 во сій АБИ вНе Аїд таб тує туго Суб бій іп бег о ткротвК о АТа вго всо
У що 95 тб овме Біу БІВ зі твоїх Уві бін тів гу цю 05 «Вібе щ «Аве Ор «2ї2х вІілаК , й «їх штучна послідовність «А «23» синтетичний поліпенптий «ОК ОЗ азроІїв сів Мет тв сій загоБго хек баг огец его Аа бек уді о1у ї 5 з ї5 дар аАгп уві тк ої1в твВгобув Аг дів бек о сій дз» Уві бег о таг аа зо | в і 30 чаї Аїд теротук вів Біб ух вго Біу ух АТа Рго уз ген івем тіє з чо 85 тут Бек дій ет впе о їен туг заг обіу Уві рга бек дгЯ вне о Зег о сіу - 25 во
Зегошіу бек ОЇїу тагодяв ве тпгоіец твготів бек чего бен бій вго ща то 5 8 спів Аа о впе АТа твб тує туго сСух зіп о біп бек о Бме ТВг Аїд вго Реш 55 За а5
ТК ОвБе сік сів бію твгоїУубБ ВЕР сій тів ух їі їх «іо ї05 «гії» ії8уУ «аї2з віДОК й й «із» штучна послідовність кгЕОх о . «23» синтетичний пліпептий «них Її дяй жіє бів Бет твК біб ет о вко бек бвгоган бек дів Баг ові шіу ї в 10 15
Аза ага чаї тв ІТ тк оСух ага дія Явго озій беб тІї8 бек обегб туг 2 5 їр їз АТа тгр отукг біп сій їуз Рго сіу гу5 Аїа го іує гГвціву ІЗ що 45 туг сіу Аїа ек Баг ака дід зак обі хУаї рРга бег Аг РВЕ Заг ошіу за в БО чего ші бевт пім тйг Ар о вБе тик оіви тБготів бвб Бегоївв бій вго
Б У 75 5О він АБО вл АТа те туго тук о Суз іп біп тує бек обегє чего Рг і ви 90 У тик Овна сіє віп сіу тнгогув Ууаі сів їі г ух за 125 свій 305 «21ї» 305 «212» вілок «213» штучна послідовність «Кох «ФАЗ» смнтетичниВ поліпептид «аю 405 дар тів біп Мет тнг бій его бго бег чего їв бег Аїа Зегожді віу і Б їй Ко ах Ага маі тВг оті тгоСь5 Ага Аів ек зів Бег о Іхїв зЗегобег туг 24 аа 33 іен АТа тгротує сій сіп г вго бі Бу Аїд РГО ів ву ен ІЇв 35 тк ті Аїд зак обег ака дія его шіу Ууді вко зак дкш ве хек сію
ЗО я о зЗвкобту его сію ТВг о двровВБе твсоіво тйгоІЇв Зек о бвкоїви вій рго 5 ТО й ка сім ар вйе Аїа тйг тує тек Суб сіп дій тк ніх Бег о баг вВго і в5 85 щі з5
ТНг Овна сіу бій бі твгог з чаї біз тів т ув що 155 «ОМ їпб «вії» 0 «гій» БІЛОК «Іі» штучна послідовність
Бас «РІЗ» жинтетичнив поліпептид,
І» ох
Ер ОІТе бій Меї твгобіп хек орг Звгобак оїец зег Аїа Заг омаі зіу і 5 10 15 во) аг Уві таб отів тт осуз агу Аїа егобійп его ті 5Зеабохет тур ік; ку Зо т 25 ЗО іви Ата то отук бів сіп гу Рг бі іш Аіа РГО зуб івет івц тів 49 45 тут сЗіу Афа ек аг ака діз хак обі Удар вго бег о адкд вве его шіу зо ва Бо
Зв б5іу бек опту ТНК Ар о РВе тик ів тТВготів бегоЗес ге бій го ах т яз ва бін аАБо вне Аіа тк туго туг Су вій Зій тує его бег хек Рез і ву 85 0 з5 тик оРБа ші зів сіу тпгогув уді біз тів їух що 155 «2» 107 сії 07 «Рій» БІЛОК «213» штучна послідовність «екю «ВЗ» синтетичний поліпептид «ню 0 ер жів бій Меї тйг обіп бегорго 5ег о 5ег офен сег Аїв бес омаі сіу і 5 ї0 їх ахр ага ча! ТВ б ті тйг оСуз Ага Аія беб сів Заг о Іїв хегоЗег туг 2 28 50 іенп Аїа тго туго сій іп із Бго Біу уз дід РТВ іх івв ївц ІЇВ 35 0 45
Тук Бі Аїда зек Заг ако дія бЗеє віу ма? рРго зЗек АгЕ РБе зек одіж за БУ 50 зак ту ек зі тВг ар РВЕ ТБгоіво тйгоІЇв зего5агоїецч о сіп рго
ЯЗ то 74 що тій Ад5о Рйе Аїда таг отут тук Су вій іп туго зег заг баг го зе 85 І ЗІ З5
ТНЄ вна Ру бів сі твгог з чаї біз тів ї ув 1 135 «аск 6 «дії» 445 «еїйв БінОоК «гії» штучна послідояність вес «РІЗ» Синтетичнив поліпептид, «а» ОВ зін Уві зіп ген маі бін бек сіу шіу сі ви Узі біповго бі оіх і 5 10 15 зег рен аг ін обЗек Су дія Аіа ек обіу Ве тк о РВе ЯегодяЙй Туг й 5 КІ; сіу тів Ні тгр Уві! Агд бів АТа ко біу уз шім іев сім ткроба! 5 45 сіу тгротіа так обі Ап біу сіу тук заг о Азротук дід АвроБег ді іуя Бі гад ре твК тів хег дів деп о твгоак гу дев ТНК оаіа туК
БУ то а що іви шів Меї Ази о шек ген ага дів біц азор таг Аза маї туго тує Суб
З що 25
Та Ага Аїд сі Бег тер вва ліз туго тгробзіу віп сту такої ви ха! 00 105 Іо
Тег омаї дес его АТа Явг тнгофу« сіу Рго бвгоУуд! Рйе бго івш Аа 115 120 125 вто вак бек ух баг отв его осіу піу п АТа Аївіво сіу Суб г ву і55 135 їі чаї ух Ав Тук вав Бго ві рго Уаї тгохаі зег тер Ахп его віх ї45 150 155 ІБ ж га зе - хека віз ш тн уУ ду Аїд хз 1 т с я ду віза ем так обеє вію чаї нія таб орРБе рго Аїд Ма! іву бій бек оче: і55 470 175 сі гемо Тук бег ей 5ек звгоуаї ма! тс Уаї РгОо 5вг бек бегог ву 150 155 Іза сіу твгосіва тчк тує Іїв Суз Ах Уаї Ахп НІ уз Рга дег одяй ТК іп5 Я Ох із Уві АБО гу ів ма! 5іц ргО ув зак осСув Ар оїув ТВгОНіВ ТПг т 715 у
Суз всо вБго Су вро АТа вго сїч гм оїво бтТу Бі вго бегоуві Рре 225 238 235 ай іви Ре вга Рго ів га ух др пВгоїем оМеї тіє щесг о дгд тагоРКо газ 250 283 сій ді так осСух Уві Уа! ді др ха бегонізх бій дар вго сії маї 255 КК іу5 вВа АВ тгротуг ма! Ар сі маф біц хаї нія абап Аїд фу ТБгГ гу8 28 КО із рРга ага зів бів бій туго аа его такс отуг ак Уві ді веб Уді
2 255 зо іви твгомаї ву нія сіп Азротгроіви д5п оіу губ озів туг ог уз су 305 ж Зх 320 руз ма! 5ег АБП гу Аїд ех РГО Аїа РГО І18 біш о фїуб твг оті 5ег
Зах зве 355
Гуз Аїд іу5 БІіУу бів БРко заго вій рРго біз ма! туго ТНК ів РКО вгО
За ЕД 35о
Зег Ага січ оіц Меї твгоі уз дп оБіп маф Зег овбен твк Суб гец ма! за85 365 зав
Ту 5іу Ре тук го 5ег аБр тІЗіе Аа хар озів ттросїц заегодзп сію
ЗО 375 380 віп овгОо Зіц А5п аа тТук губ ТС ОТГ о РГО РКО УВаї ген о АБр Жак АхО 385 ї9ц Зах БЕ: сіу зЗвг о Рбе ВМе їен о туг его ої ух ів) тагКоХаї АБа фу Зег о АгЯ то
Зах 10 415 іп віп сіх зп оУді Ре заг оСух Зв мар Мет ніз зів аід іеи нів «го 425 за
АЕпонія туг тВг обіп іуб5 вегоіїви Баг рем Заг овго сіу 435 а4о дах «Ну ї05 «2Ііх ІЗ «212» БІЛОК «РІЗ» впучна поспідовність «Вг3х Синтетучнив поліпептид «Кл» оз
Хвгоіїен РБе дів тує о сіу жіп біу Тгоїво уд! тВгохді ї 5 щ «В» 11 «арії» БВ хатах БІВОК «Фіз» штумна послідовність «ВІКУ «РІЗУ Синтетичний поліпептид «ще
Мет сзіу ттробзек суб тів Іївіви РЕ гей ма? АТа тк оАіз твг дію і З їв 15 дія туго дід зії Ууді сіп ів Уаф ові) бЗегобіу біт 5іу івиу ма! пій за
З їх З вто Біу сіу зак ів Аг оією бегоСу5 дів Ата ек осів вйа тВК рив з5 35 45
Зекг Азп отуг сіу тів ніз тк» уві Аг бів Атїа рго сіф іуз Ту і ви
За 5 щи біз тгроаї сту ткротіє твг ого а5восіхж піу тук тс дя) туг дід 53 т їз ща азо 5ег Уа! ух Є1Уу дго вБе тьг тів аг Аїд Або тВгоБЕг ої ув Ам
З ча БІ тТгоАТа тук гец бій Меї АБпозег іви АгО АТа бів дар о тпг о АТїаяа уд! що 135 зо
ТУг туг Сух АЇв Ага АТа бі вк ім вве АтТа тує тгр обі бій віх 115 ї120 125
ТЕгоїей уві тик о Ууді Бег ег діа 5ег так о гух 5ІуУ Рго баг омаї тук 130 135 1
РГО іви АТа Рго уд Сув зіу аз тег о таг о стіу бек 5ек уді ТБг ої ви 145 о 155 то бі Суз ев омві гу біу туг бе Рго сім вго Уві тс ве тйготкр і55 і170 ї75 азп ошег сі его рес б5ег дег сіу баї нНіб тйговйе вго Аїд Узі і вм 150 155 ню сіп его аАБрВ рен туг так оіви Бег о Зек о Бег уаії тб оуді тпг бек Баг 195 ж ОБ
ТЕьготгаробко ек обі Яег тів твкКоСузх аяв Уві Аза ніз вго Аїа бег
ЩО 215 р век отвгогу5 уаї Ар гу іу5 Ії Сім вго Акд шім вга о твгоІЇв ув 05 хо 235 тай
Вгоа Суз рта рго Суз ім Сує РКО дід вго дай Бен їви ві бі вко 85 25 25 свгоУуді ве тів Ра вБго РгоОо ів тів гУ5 АЮ УВІ ви мес Іїв 5Ег
БО 255 РУ іви его вта тт Уа ТАК Су уатї Ма! Уві дю УВІ Баг ін др аво ка «Ва 5 вго АвпоУВі шій тів ес тгрорБа уді дя АВп Уаі вів мві нія тик
ОО 25 ЦО
Аів бій твВгошів таб оніз Аг бій дер туго Авп о ек твгофва дк чаї зі0 315 У
Уді хаг дід Бец вга тів бів ні сії дбЮ тго Мет ек бі г ві 330 цик шо -кт- шко вив гу5 Сув гу ді дм о дяп і Уу5 а5В о іеи РКО Аїд вго ІЇв Бій ага з4а зах о тик Іра бек зуб Рг ух Бі Бег Узі Ага аїа вго біп Уді туг Ууді ї5зх Зо з85 іви рго Рго Бго БІВ сіц біб Мет тнгофуз уз зів ма! тТВгоїви твг зе 38 380
Суз Меї чаї тБг о др РБе Мет вго січ Ар отів тус ма? бін о теротпк
Зк зо ха5 зас
АБ оА5П ЄСТУ ух ТВК о Зіц іец дей тук гу а5В твгобіц вго Ууді ів зах «за «15 ах заг Азо віу Заг туг РБе мет туго бег оїуз їе5 Ага узі ів і ж
Яр 425 330 іув дя тгрожа!ї Біч ага адап оБеб туг Бек обСух зак уді Уді Ні він 35 440 445 с іу фен ніх да Ні Ні тТВКОотТвгб гу бек овБве о зекг дгод тв овго піш зо 455 З із Мет су тгрозек Су Ії хтів іви впе о рец жі дів твКодід таг ака зо ПУ зва
Зі ар нів чег дротів бій Мет твг обі» Заговуто Бек зако огеи Баг 45: за «85 ід заг оуді віу дер Акд Узі тик їі твгосСуз дгЯ діа закобів Ар хи 0х зій чаї век тнк аів Ууді дід тгротуг сіп Біб о єух его бі іжзх дід рго
Зіх о 5І5 їуз бен оієц тів Туг б5ег дія бЗег Не ів Туг бек вію Уді го Бек 530 335 За дга впав о зет сіє зег сіх зак озіу тиг одер вве твгоїеу таб тів Баг
Зах зво 55 БО
Зег о гец бів вго бі) Ахо РБе АЗів тагоОтуУуг туг Су бій бїп туго туг 51 АФ 55 тТвготвгоАіа тб отвЕоРнав о біу сій віу твгоруз маї сін тів і хУ5 Ага зна 585 ЗУ
Аа АБ АЇа АТа бго тпгоУді ек тів Рее вго рга беє зегобів сій
Зах БО 5 іем таг бек опту сіу Аїа Зег за! уві Су5 Бйвоівц дяй дп ВБе туг вів віз Б)
Рг ух АБ оІЇв дБ Уді ге5 тгроіу5 тів а5р о БІіу зе бів ака бів
ЗО 235 вла ахп сіу ма! їец дей баг тгротиг о Азо бій АБр Заг ів дер Зег о тНг щІ5 зо 55 тук Бег мет зах Бег тик ої Тагоіву тТговгух АбВ обі тк осів Ага ва вва вто
Ні дяп бек тук твгосСкх бів Аїа тБгоніз гу ТВгозЗаг твгохак рго бЕ5 БЕ 85
Ііе ма! ух ек РМЕ АБпП о АгГО аАЗп ОсТМ су вза вах «Вії З «еїїх їх «гї2У БІЛОК й . «еїіЗ» ви учна послідояність «Ек» «РЕЗ: Синтетуичнив поліпвптид «опе З зін Уві біп ен ма) бі бек обіу шіу віу ви хаі дій вго зіу

Claims (54)

3 5 10 35 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Виділене антитіло, яке зв'язується з Уаддейд! людини, де антитіло містить НУВ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕСО ІЮО МО: 35 або 78; НУМВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 28 або 36; НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 55 або 59, де Х являє собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Н; НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; НМВ-І 2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 39; і НМВ-Ї З, яка містить амінокислотну послідовність ФЕО ІО МО: 16 або 40.
2. Виділене антитіло за п. 1, де антитіло містить: а) НМВ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕСО ІЮО МО: 78; НМЕК-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 36; НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 55; НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; НМЕ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 39; ії НМК-І3, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 40; або Б) НУВ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 78; НМУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 36; НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 59; НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; НМЕ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 39; ії НМК-І3, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 16; або с) НМВ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 78; НУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 28; НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 59; НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; НМВ-І2, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 39; ії НМК-І3, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16.
3. Виділене антитіло за п. 1 або 2, де антитіло містить: а) послідовність МН, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІО МО: 54, і послідовність МІ, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІО МО: 34; або р) послідовність УН, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 58, і послідовність Мі, яка має щонайменше 9 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮО МО: 10; або с) послідовність УН, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІО МО: 62, і послідовність МІ, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІЮО МО: 26.
4. Виділене антитіло, яке зв'язується з даддейд1 людини, яке містить: а) послідовність МН з 5ЕО ІО МО: 54, де Х є будь-якою амінокислотою, крім З або Н, Її послідовність МІ. з БЕО ІЮ МО: 34; або Б) послідовність МН з 5ЕО І МО: 58, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5 або Н, і послідовність МІ. з БЕО ІЮ МО: 10; або с) послідовність МН з 5ЕО ІЮ МО: 62, де Х є будь-якою амінокислотою, крім 5 або Н, і послідовність МІ. з БЕО ІЮО МО: 26.
5. Виділене антитіло за п. 4, де антитіло містить послідовність МН з 5ЕО ІЮО МО: 54 і послідовність МІ. з БЕО ІЮО МО: 34.
6. Виділене антитіло за п. 5, де важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 56 і легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 53.
7. Виділене антитіло за п. 5, де важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 57 і легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 53.
8. Виділене антитіло за будь-яким із попередніх пп., де Х вибирають зА, ОЮО, Е, б, І.К, І, М, О, К,
ТІХ.
9. Виділене антитіло за будь-яким із попередніх пунктів, де Х є Т.
10. Виділене антитіло, яке зв'язується з дхаддейд1 людини, яке містить: а) НМВ-НІЇ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 78; НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність ЕС ІЮ МО: 36; НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 37; НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; НМЕ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 39; ії НМК-І3, яка містить амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮО МО: 40; або Б) НУВ-НІ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 78; НМЕ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 36; НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 64; НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 38; НМЕ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО І0О МО: 39; ії НМВ-І3, яка містить амінокислотну Ко) послідовність ЗЕО ІЮО МО: 16; або с) НМА-НІ, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 78; НМУВ-Н2, яка містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 28; НУВ-НЗ, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 64; НМВ-11, яка містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38; НМВ-12, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 39; ії НМК-І3, яка містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16.
11. Виділене антитіло за п. 10, де антитіло містить: а) послідовність МН з 5ЕО ІЮО МО: 33 і послідовність МІ з ЗЕО ІЮО МО: 34; або р) послідовність МН з БЕО ІЮ МО: 65 і послідовність МІ. з БЕО ІО МО: 10; або с) послідовність МН з ЗЕО ІО МО: 66 і послідовність МІ з ЗЕО ІЮ МО: 26.
12. Виділене антитіло за п. 11, де антитіло містить послідовність МН з 5ЕО ІЮО МО: 33 і послідовність МІ. з БЕО ІЮО МО: 34.
13. Антитіло за будь-яким із попередніх пп., яке являє собою повнорозмірне антитіло Ідс1.
14. Антитіло за п. 13, де в антитіла по суті відсутня ефекторна функція.
15. Антитіло за п. 13, де важкий ланцюг містить мутацію М2970 або М297А.
16. Виділене антитіло за п. 12, де важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 51 і легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 53.
17. Виділене антитіло за п. 12, де важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 52 і легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 53.
18. Антитіло за п. 11, де антитіло містить: а) важкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 69, і легкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 75; або р) важкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 70, і легкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 76; або с) важкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 79, і легкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 75; або а) важкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 80, і легкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 76.
19. Антитіло за будь-яким із попередніх пп., де антитіло являє собою антагоніст даддеа1- опосередкованого сигнального шляху. 60
20. Антитіло за будь-яким із попередніх пп., де антитіло не зв'язує Ухаддед2 людини.
21. Антитіло за будь-яким із попередніх пп., де антитіло не зв'язує 0 4 людини.
22. Антитіло за будь-яким із попередніх пп., де антитіло не зв'язує ОЇ 1 людини.
23. Антитіло за будь-яким із попередніх пп., де антитіло не зв'язує мишачий даддед2, мишачий рі і/або мишачий ОГ І 1.
24. Антитіло за будь-яким із попередніх пп., де антитіло зменшує ріст пухлини в мишачій ксенотрансплантатній моделі, не викликаючи втрати ваги.
25. Антитіло за п. 24, де мишача ксенотрансплантатна модель є моделлю ксенотрансплантата раку печінки.
26. Антитіло за п. 24 або п. 25, де ріст пухлини знижується щонайменше на 50, щонайменше на 60, щонайменше на 70, щонайменше на 80 або щонайменше на 90 95 АОС/день (ТО19б5).
27. Виділена нуклеїнова кислота, яка кодує антитіло за будь-яким одним з попередніх пп.
28. Клітина-хазяїн, яка містить виділену нуклеїнову кислоту за п. 27.
29. Спосіб одержання антитіла, який включає культивування клітини-хазяїна за п. 28 таким чином, що продукується антитіло.
30. Імунокон'югат, який містить антитіло за будь-яким із пп. 1-26 і цитотоксичний агент.
31. Фармацевтична композиція, яка містить антитіло за будь-яким із пп. 1-26 і фармацевтично прийнятний носій.
32. Антитіло за будь-яким із пп. 1-26 або імунокон'югат за п. 30 для застосування як лікарського препарату.
33. Антитіло за будь-яким із пп. 1-26 або імунокон'югат за п. 30 для застосування при лікуванні раку.
34. Антитіло за п. 33, де рак вибраний з раку молочної залози, раку легень, раку головного мозку, раку шийки матки, раку товстої кишки, раку печінки, раку жовчної протоки, раку підшлункової залози, раку шкіри, В-клітинних злоякісних новоутворень і Т-клітинних злоякісних новоутворень.
35. Антитіло за будь-яким із пп. 1-26 для застосування в лікуванні захворювання, вибраного з алергії астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин, наприклад у легенях, і надлишком слизу, що включає введення суб'єкту з раком ефективної кількості антитіла за будь-яким із пп. 1-33 або імунокон'югата за п. 30. Зо
36. Антитіло за п. 35 для застосування в лікуванні захворювання, пов'язаного з метаплазією келихоподібних клітин.
37. Антитіло за п. 3б для застосування в лікуванні астми, хронічної обструктивної хвороби легень (ХОХЛ), кістозного фіброзу і стравоходу Барретта.
38. Антитіло за будь-яким із пп. 1-26 або імунокон'югат за п. 30 для зменшення росту ракових клітин.
39. Застосування антитіла за будь-яким із пп. 1-26 або імунокон'югата за п. 30 у виробництві лікарського препарату.
40. Застосування за п. 39, де лікарський препарат призначений для лікування раку.
41. Застосування за п. 39, де лікарський препарат призначений для зниження росту ракових клітин.
42. Застосування за п. 39, де лікарський препарат призначений для лікування алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин, наприклад, у легенях, і/або надлишком слизу.
43. Застосування за п. 42, де лікарський препарат призначений для лікування захворювання, пов'язаного з метаплазією келихоподібних клітин.
44. Застосування за п. 43, де лікарський препарат призначений для лікування астми, кістозного фіброзу, хронічної обструктивної хвороби легень або стравоходу Барретта.
45. Спосіб лікування раку, який включає введення суб'єкту з раком ефективної кількості антитіла за будь-яким із пп. 1-26 або імунокон'югата за п. 30.
46. Спосіб за п. 45, де рак вибраний з раку молочної залози, раку легень, раку головного мозку, раку шийки матки, раку товстої кишки, раку печінки, раку жовчної протоки, раку підшлункової залози, раку шкіри, В-клітинних злоякісних новоутворень і Т-клітинних злоякісних новоутворень.
47. Спосіб лікування захворювання, вибраного з алергії, астми, аутоїмунного захворювання, захворювань, пов'язаних з метаплазією келихоподібних клітин, наприклад у легенях, і надлишком слизу, який включає введення суб'єкту з раком ефективної кількості антитіла за будь-яким із пп. 1-26 або імунокон'югата за п. 30.
48. Спосіб за п. 47, де захворювання пов'язане з метаплазією келихоподібних клітин.
49. Спосіб за п. 48, де захворювання вибирають з астми, хронічної обструктивної хвороби легень (ХОХЛ), кістозного фіброзу і стравоходу Барретта. 60
50. Виділене антитіло за будь-яким із пп. 1-26, кон'юговане з міткою.
51. Виділене антитіло за п. 50, де мітка являє собою позитронний емітер.
52. Виділене антитіло за п. 51, де позитронним емітером є 8972т.
53. Спосіб виявлення Чаддед! людини у біологічному зразку, який включає забезпечення контакту біологічного зразка з антитілом за будь-яким із пп. 1-26 і 50-52 при умовах, які дозволяють зв'язування антитіла з природним даддей1 людини, і детекцію утворення комплексу між антитілом і природним аддед1 людини у біологічному зразку.
54. Спосіб за п. 53, де біологічний зразок вибирають з раку молочної залози, раку легень, раку головного мозку, раку шийки матки, раку товстої кишки, раку печінки, раку жовчної протоки, раку підшлункової залози, раку шкіри, В-клітинних злоякісних новоутворень і Т-клітинних злоякісних новоутворень Чаді люднни (ЗБОЮ МО) МАЗРЕТЕОВВавРОВЬСЬКИСАСВАКУСОАВООЕВІВІЬОСМОМУМНОДІЮОМОМССОСВАХ РОПВКСТВОБСОТІЕКУСІКЕОВВУТАССРОБКОВСОТРУХТОСМТЕМНЬКАВВОМОВНАХ УБРЕВЕАМРЕБУТСЬТУКАНОВЕМОТУОРОБІТЕКАВНЕОМІМНРАВОМОТЬКОМТОУАНЕВ ХОТНУТСРОХХУСРОСМЕРСВККОрЕКаНХУАСПОМОМЕТСМЕСНМСРЕСМЕАТСВОССВЕ КНавскрРООСВСОУЧМОССУСЄРТКСІРНРОСУНОІСМЕРНОСЬСЕТМНМИОСОСОКрЬНУЄ СРТНОРСІНССТСВНТОРОКУОСВСРЕСУВСРИСКІАЕНАСЬВОРСНМВСВСКЕТВКОКЕС ЕСВРЕОУТОРТСВТМІПОСЯРММСЕНООТСОрРІСУМОРКОУСВРОВТОКТСОСОАМЕСЕАКЕ СсУМАКЕСКНЬІВБУХСОСЬРОММООМСВІВІМОСЬСОСОМОВВСВОСУВСУВСІСВВОЖА СОНСЕВОІВЕСАЕМРСІМССНСОМЕІМВКОСЬСРТСЕВОМСОБОТОУСЕРИРСОМОВОС УМНКАБРУЕСКСРЕВУВСКИСЕНСКОВСВТТРСЕУТООСТУАМАВНОТРЕСУВУЇВВНУСО вНОКСКБОВОсСКЕТСОСВКОовТстТІСсНеМІВОСЕВМРСКМНОСТСІОСУМВУКСІСВОСНЕ паАХСЕТМІМНОСВОМРСНЕССТСВрІУМНОКУСОСсКЕМСЯКОоКТСиВНОВОСОКАТСВКОЕС тТОЕСПАЕКСМСРОСМВСТТОМІАННОВСІРМРСНКССТОСУУМСЕВЕТСУСКЕСМЕСРІСА ОМТМОСаРНРСУМВОТСУрарМиуВСсВСАВОЕАОРОСВІМІМЕСОВБРСАКОАТСУрВІВ СУКСУСРРСНВСАКСОБУВСВРСІТМСЕЗІРОСАКМОПОСМРСОСіМСВІДСяКУЧСОВЕ РОСБОНКСНЕАВСРЕСОНСІРІПОРОСЕНРОТОУСЕСВЕЕВБОРУКТЕСТВОВУХОРНСЯМ ІТЕТЕНКЕММОРОЇСТТЕНІСЗВОВМЕМІІКИУЗАБУВІХТАСЕРОРВАВМНЕТНУВІВАКО ІВООСМРІКЕІТОКІТІОБОВКНОСМОВІІААУАЕУНУВАРІКМВТОКТУРІЬВВУВТУД ЧІССЬУТАКУНСЬВКАВКРСЯВТНЗАВЕОВЕТНМУККОСМОТКМРІВКНСАМТУРІКРЖЕ МЕМоКМаКІНТНИЧЕУВЕПОМОКНООКАВКАКОРАУТЬУПВЕВЕРРНСТРІКНРМНИТНКО переве ОяЬНЕМЕХТУ чЧаді миші (ЗБОЮ МО) МУБРЕТНІВРСКРЬБІЬАТЬСАІВАКУСОАВООКЕТ ВІСВНОМУМСЕСОМОМСОСОЧНИ БОрВКЕСТАОБСОТУРКУСІКИХОБВУТАООРОБРОБОБТВУХООМТЕМНЬКАВВОМОВМКТ УБРЕБЕАНРВЕБУТЬІУКАМНОВЕМОТІОРОБІТВКАВИБОМІВРЕВОМОТЬКОКТСТАНКЕ ХОХКУТСПОНУУОСЕССМКЕСВККОрОККснуУасСпОМОШКТоМЕСНМСРОСнКаІСНОССЯР квавскиьворовосоханосьхсокостенрОСУНОТОЦЕРНОСТСВТВНСООЬСОКОСМХЄ бтТкОоРСЬМАСТОВЕТОРОКХУОСЕСРЕЄХВСРМСВІДЕНаАСЬСОВСНМВОВСКЕТОВСКЕС ЕСЕРОЙТОРТОЗЕМІРОСЕРМКСЗНОСТСООСУМСЕКСУСВРОМТКТООБОАМЕСЕАКР СУМАВЕСЕНОХТАБУУСОСІ РОКМООМСВІМІ МІК ООСОМОАОСВОБУМОХВСІСРРОТА СПЕСЕВОІРЕСАВМНРСЬКИСНСОМЕІМВЕОСТСеТОр ВОМ СО Ото ХСсЕРНвСОМОовОС ТМКАБПУЕСКСРЕрУКОКМОВНІКОНСВТТтТСвУТОВСТУАНАВМОТРЕСВУІВВМОСО РИСКСКБОБОСКЕТОрСНКОКТСТУСНЕМІМОСЕБМРОКМОСТСІОСУМЕХКСІСВОСКЕ САБСЕНМІНОСБОВЕСНУССТОВРЕУМОЕУСрСКМсиКОК Тс ВОСВЕАТСММСС В тПЕУОрТЕКСМОРОСНЕОТТСВІАВНЕВСТВЕМРСНМОСОТОУУМОрВКТСУСКВОМЕОРІСТ ОКТМрСВРЕРСУМЕОТОТРОрМНІВСВСАРСКАСРОСКІНІМЕСОВВРСАКОВТСТНВІВ СХОСІСВРОНЕСАКСНЕУВСВВСІТМСВУІБОСВЕМОПОСКУСОСЬКСКУАСВЕУМСОРВ РОБЬНКЕНМЕСРЕСОВСІВУТІООСЕУВРОТСУСЕСВЕОБІСРУКТЕСТЕРОУУОВНСАМ ІТЕТЕНКЕМНМЯРСІТТЕНІСВЕЬВМІМІ КМУВАКУВІХІАСЕРЕСЬВАННЕІНУВІВАКО ІВООСМНРУКЕІТОКІТВІУВКВООМИВСІЗДВУАЕЧНУСВИРІКНИТОРІЧУРІЬНВУТТУВ МСССІЛТАРХНСУВКВЯКРОБНТНБАРБЕОМТТИМНУВЕОСМОІЕМРІБВКНОЬКТУРІКИОХЕ нЕчаКМакІЖЕНИВВУКЄЕРОМОКНОСКУКРАКОВУХТЕУрКЕНКАРОСТРТКНРМИТНКО во ЕЗАОВІНЕМЕТІУ
Фіг. і
Чад? людини. (ЗБОЮ МОЗ) МЕдОоСяСНвАВ 0 АТНУОАЛАВВМСУЕВБОБВАБНКУМСЮОБаИАССрООСНТТВАЄ ССанРЕСОГУУВУСЬКЕХОАКУТРТСРСЕУСНСАТРУ СОНЕТ БРРАСАЛСрЕАВАНАВ АСОрРООРОБУУТРЕОЕАЧеВОЕТЬХИвАКОМОМОТТеМЕВеОТвВУуВНАСМІМРЕОКИКО ШиЕБОНУАНЬВООЇКУВСОЕМНХХВАКСМКЕСКРАНОКЕСНЕТСВОХСМКАСМООсНМОКВО КЕАМУСКОВСМЬОпоостУвоВсВсвНОоВЕсСоЕсСУвУвасУНавсУувРИОСМСЕЕТНК воасикромЕІсавннестНастсЇМАЕРОХ КИТИ ОХ ОВНС БАБНАСТВМЕСАНОС БСНЕУВЗОоКЕСВСеБОонОоЗиТСАБОТОИСАВМРСАвСсЯ Олю Урав ССО; оооАМИСЕаКРСЬМАКБСКМоТОВХ СОСОК ВИ СскОоСаНнОос со УМ зУхасУусевскесянесвоЕнрЕсАееиснВОоВЬсСЕріАЮСЕНСЕСРОЗЕБОРЕЬСВУВУЮСС ЕРБРОВМСАНСУМСВООУУСАСРООКОЗККСЕУКНЕрСЕВОАСКУ ГОБСОовОВареМес ААВСУССЕНСсССоУВаРОСМЕВСТСОВБЕТОТСНЕМТВОСТСОРСВНСОТСТОУОАКВС ЕСРБОМЕОВССТКМРІНЮТЬРОРСВОКОАСУОЬУМНОЕУСАСПОСИКОКТСНаАЕРОСВАХТ ЕМО ТСУОБаОТЕКСАСЕРОНКСВТСАМАКНВВОБРИВСУНОСТСУСВОАБЕВСІСНІМО МЕСЕТСТНМТНОСМРОРСУМООІСТУЮЗУККЕКСЕСАРОКАСЕИСКІНТОБСОВВРОСВУСА тсУрЕГІНСУВСВСеесВАсеВсСОоБУІсСЕСсВВСиВВОТРЕРНОВВИУВОСМВОСВСЬооВНе СБКУЖОСНКРССЬАСОВЕАСОАОСРЬСОВСТЕКАРОСОСЬКРРСВАМНСЕССАЕЕРРЕТРСЇ, РВЯСНЬОММСАВІТІНРИВОНУРОСТТУСАТСВСТВАБІВАТВАТАВОВІТАЛЛСОВАВЕО АБАУЕУАУБЕВРАВОЛЬРОББВЬІОСААНАІУААТІТОВСНВВСОСБАУТЕУКУЮТУТОСОСТ ЧТ ОСА АКТОРА КВВКЕКЕКОВСРКЕЕБАНМОМАРІМВТВМЕТЕВ. РООНКОУБХОСЕНЕТРЕРЕВАВЕАСРОРАСНААУВАВЕВОВО СКОоВКОВІ ВАК ЕТКОРОКЕРСВРАНКАВСЕВКУЮМКАСАВІМЕААХАОКЕ аа миті (ЗБОЮ МОЯ) МААВСИОВОРЕВСІЬУВСУОАТАРМИСТЕЕВрОЇЗАТВМУЮСЕТЬВСВССоСОСКтТТВАС ССОВОЕСОТУУВУСЬКЕХОВКУТРТОРСЗУОУСАТРУТСОМВЕУБРЕРАСААСОВАКАВЕК ЖТСОВОЮРСГТУТВЕОКАКРЕВЕТЬІУКАНОМИМОКТРОВБЬСІВЕВУВНАСМІМНРЕОВИКА СНЕВСНУАНЬВІОХВУВСВЕНУХБАТСМКЕСВЕВМОКЕсНЕторОУОМКАСМОсНМОКЕС КЕАУСКООСМІІВООСТУРСЕСВСВУСЧОСКЕСРЕСУВУРОСУНОВСУЮВИНСОСЕТНИО сІБСОКрІМХСОЗНУРСУМООТСІМНАЕВООТЬСАСРОСУТЗКМНСЕВАВНАСАВИВСАНОЯ ВСНЕУРЕСТВСНОСРВСИБИРТСАБОТОВСАЗМРСАВОСТОУВОЧУЮСКЕСТСРЕОНУСАТС ОБОАМЕСЕСКРСТМАКЕСКМІіІсОУуСоСсьРОВКОІМСОТМІМОСНООСОНОСТСКОВУВ СХУОСУСРЕСКССВНСЕБЕХОКСАБИРСВВОСІСЕОССУОСЕВСВСРЕСЬВСЬНОВУрНОЮС ЕРЕРСІЬМНСАВСУМОЕООУУСАСРЕПТООКНСВУРАРТОРООАСВУТЮССОРЕЛОВКАВОУ АРВСІСОРНОНСУВЬРООМЕВСІСОІВСЕТОТУСНВМІПОСМОСРСВМОСТОТОВУТВЕАС ЕСРВОЧНВОСВЬСОТМРМОСІРОРСЕБВОКСХОСУМОКУПАСрОСНКОКТСНВВВЕКОСОА УТ СБМОСТСУОБОрТЕВСАСРРОМКОВТСТІАКИВЕСУВМРСУМССТСУОВСОБЕВСІСВОСЯ МЕОКТСТЕНТМОСМРЕОРСУМОСІСУ ру МНК АСЕСАВСКАСРОСКІМНІСЕСОББЕСЬХ СА, ТСУПЕБІМОУВСВСЕРСКЕСРЕСОБУЧІЕТКРОВЧВКЗМЕКРИСТІВИМЕЮСИВСИСЬОСНКО СВКУЙССКЕРСІДВСОРБОРБАОСРРОООСОБКАЧСОСТОВРСЕКИСЕСТАЖЕРЬРЕЕТР СОРЕАВНІОМИСАВЬТЬВЕККООУРСИТТТТСАТСЕОІВАВРАТНАЛАНОВОГІЛЛСЮКАВ БОАБАУВУАМЕКВРАКОЬРОЕВІСІОБТАНАІМААІТОВИМВВІІТАУТЕУКУЮТУУМИСВ БТШСІИТРУССВУКБУБНОАСУУІСУННТАКВВКЕВЕВЕВБРВОЕВТИКОЗАРЬМРІКНРІ ЕКРООВССЬСТООНКВІБХОСКМЕТВВРЕКАСЕАБВОРАСВОЛОСЕОВЕ ОВЕС ЕВ ЕАЕККІБНКЕТКРРЕСВІЬСЕРАСНАРСРКУПННАУВЕТКОУВНАСКЕ
Фіг. 2 Послідовність експресованого білка, мішначого лаві ЮБІ-ЕСВК1-4 (мишачого зарі-антигену) авьавОоКЕрЕХОЗМОМУМОВЬОКИНОСОСУКИРОВиКСТВрЕСОТКЕКУКОКВУМЕКУТАВСКС БЕСЗСЕТРУІОСМТЯМОКАБНОМОВМВІЧПВЕВКАНВВХТІЦУБАМОВВМОТІОРОВІТЕКАЄ нЕсмІМШеЕВВОМОТЬКОМТОоТАНКВУОІКстСрОВУОовОосСиКксВеВОиОКтанУАСООМИНКЕС МЕСЧМОгОСМКАХСВОССКРЕНОБСКОЕСЮСВКО У ОМОсЬКСоАСЕВНРОСУНСТСМЕРНОСЬС БТВМОСОССОКОМУСОТНОРСІННСТСВИТОВОКУОССРЕСХЕОРМСКІЛЕНАСЬКОВСНМИ свокЕТаВСсгЕСЕСВРОСЯТСРТСЯТМІОПЕКОГУВвКОВОННнИинНни БЕКОН МО. 5
Фіг. ЗА
Послідовність експресованого білка, людського Заві-Ю5І-БОСЕІ-4 (людського І8е1-антигену! ОБЖЬЕЛЕЬЕМОМУМСВІОМОМОСОВЕМРОПЕКСТВОВСОТУРКУСЬКЕУОВВУТВОВРСВЕ ЗВО БЕВОТСООМТЕНОКАВКОМОВИТЧСРЕВЕАНЕВвХТОУВАМОВОКОКУуСРОВІТЕКАВНаСМХ ВЕЗКОКОТІКОМТОУАНКЕУОІВУКСрОУХСКОСМИКЕСЕРЕОПЕВСНУАСОПОВСМКТОМЕСНИ оРБСМВАЇХСКОСсССВЕКНОСВСВоОросВеОохскОоЗУсОКсСІВНРОСУНОУТСНЕРКОСЬСЕ ТНИХ сисркрьМуУсотТнОорСЬМОостТсВМтевОоКкусСсвОвЕСУВОтМСсВІАЛВНАСТВОВСНМКОВСКА У БІШЕЕСЕВСаРОБ1ТОВТСВтМІООо ЗЕ Ю МО 8 Фіг зв Послідовність експресевзного білка, мишачого /882-051-ЕСЕ1-4 (мніНаЧОГО Іде2-антнЕену) СРСБУОХОАТВУ СОВИХ РЕВСААООВАВАВЕВТОЖНОПРОПУУ РОКАМИ ТЬІУКАМ ПВлОМПрЕТРОЕВІЛІВНМОНАСМІМРЕВНМИЕЬНЕВОСНУАНІ ВОТВУВСПЕМУХВАТСМЕЕСКЕ ВчОКЕБНЕ ТОКАР ОММОКЕСКВАУККОСИМОМОВСТУ ОКСАНО ККСОКОСУ рРувосУузавоУуврРИВЮСЬТМИ о сокКррМуСсвиЕнеСсувокСтвВАнВраХхБСАовоСХо кисСЕКАЕНАСАВНРОВНОСПОСОВЕУРОСВВСВОРЕОВМВІРІСА ІЕЕ ООУРКОВОсНИННИВ ІЗ МО. т З
Фіг. ЗЄС Послідевність експресованого білка, людського Лав23-П5БІ-ЕСР1-4 (людського І8е2-антигену! АВЕМОУКЕМОБВАЦБКВУМСВЬОВОАССрОректУВАСОСОНОВСВКУу сьо ОВ СЕХСНОАТРТУССНВЕУБЕАЄВАСВВАНАНАЯВССРОПРСІУУІРРОКАИРНВЕ КО УВА ВМО ТТРЕЕЕБОХЕКУВААИМІМиБОВКЕБОНЕВОВУАНЬЕСО ТА ВСОЕВХУВАХСИКРОСКвЕКВ пВРЕсСНУТСООХОМКАСМООММОКВОКЕАУСКОССМЬСКОпСТтУвОовоВоВОНОВЕСОЕСУВУ РОСУНОБСУЕРНКОСВСЕВТММСОІОСОКОСУСОБЕНРОТНСОТСІВАВРООХВСТСРОСУ ВОВКИ СЕКАБНАСТЕМЕСАМОСОСНЕУРВОКВСНСРОСНЕСЕТСАТОтОЕКЕОЬьУКВОБаНннИиНИия (ЗЕСЮ МО. 8) к -
Фіг. 30 Кава: 2 3 55 5 7 8 813 М О1203 Мі 029300 МОМ ОМ 2228 253935 32 3335 35 ЗК 31 3833 В Далее жинй іа СО НЕ іСпочна - СОКНТІ зкаюмосво бо у от Е обох: ось кт БІ КІН У во а зва мога С-ї во б Б У 5 5 5 5 6 х 5 Ух б 3 5 5 8 п ХА 83 В 7? хі він хх а зваюмога В Кк ху а 5 У В 55 56555658 БА 585: АЗ3І5 ху ха знаюхо:а? 04 ко т 4 5 у 885 25 Кк х 0 т с, 55 Ь А 5 2 А А 85 В т Р В У ХВ У ХА зкаюмого А ХУ ов :хо 56555855: 35357 РЕХХІБІВЕВУ звашкогт? АТ ЕТ ОКХ ВЕ Ов йо с А Х 815 Ж ТР ЕХ ХІІ ХА вкогзно тя А в току КСО; хо НІ 7 БЕБІ ВІН У; А зкоюво г В 0 5У КІС нісв и: ні 2953 Зкоюо: 3 М 5» 0 КУ Ес оо 83532 БВ: 2 вті кри ух А ЕФ: В 8 У б Ух Во У Ра по а ак 51 У ВА ВЕС МО: ВМ 5 У 06 5 8 55 56525555 53105755 5 Бр У о ВЕС Мо:8я ШЙ Ку б ь У В 55 50 У) ов хо кни зваюмога 0 Кубу: 52 5555 ІННУ ВІТ» ВО зва мо:8 Ох т а 5 У 885 с 5 0» хв 8 БА и 8 А ЗІ т У ВБР У хо ве в С М МЕ М З ЗИ З В В З В ЗИ В С З А КД В В ЕЛ ВЕ НЯ кан; пове бпивнио» о ввиБИивИВ кована мМинвМя і Каре. СОМ НЕ Область кантакту КН И зкашко м б о впховвуУс от ЕТіЕт? св 75х5 І зкашкога С в п х 5 М В У сів 3 їв... 5385533 хХ сік): 51 зашкно ж 0 впхоьзикуріІн?,. 553535» хб5і885155275Х3 7 зо П.Я ово обох 5 З Кк й У 5 т Кк я 0. 0 5 01 т З у 8 й 35 У бій РІ 5 АВТ кт ЖОВТКУ й А вовків... вух вх хіх ав хх та зді: А вих»: 8545373 5Б5У 5355 А зом А Р» о 3 п 5 Кк ху ЗР Її 5 по, щоб об їх 5 З? З в Б 8 бік кт: 5 А 5 Б Ж КВ вЕСюмосвя В Р 55 5 ХУ 85 І 8... АВ а х5У 61 КЕТІ ВА У а замов В 9 5 хх 05 ЕЕ 5 У 50 Її 85 т... 3 пп 0 5 а хх 5х ХР Р ТІ АВ ІБ А вваюмас в В в 5 Хо 5 5 5У РІ 5... 355575: 357 Хі РТ: 5АВ 5 5 зваюмо:т ВО зх Хо АВК І В... 555 7 Ах т хів тТ1І5 8753 звашфмо:8у 028 в пох б 5 в У кр? її Кт... а 355 75 у 8 389 х сів вт 1 :А 55 зпашносєз ОЗ т п хо З Урі... 35558539 хів І55975х5 зва шко Я п б х 5 В Б й У РУ І КОТ... 4 5 б т 7 в У 5 35 5 ХХ сів Р її 5 5 5 т 5 хх та зи шно ев 05 в ох ку ІК... ас т тору хх бір тав акта нн и В ОО ОО ЛО ЛО ЛВ ЛВ ЛВ ЛВ ЛВ ЛВ ОД ОО ЛВ ЛВ ЛВ В В В
Фіг. ЯА-І
Кабай ви Зав) ас а с 538425 БО 8885 56858845: 53355 35 233 95863135 В і МУЗИ НЕ св ; аа еВ ов щі. ОД м трів ІМ сот Ї що ді- СО НІ МІН Ну 1516 Ре й в сиг - ри неза м: с тоди ньхх дн НЕ ів г Бо ХУБЕТАхтсХ ств контакту їй Я в) нини се -СОК 3 іо. Е Ах г З хх т ра ВІННІ ННЯ док ЕЗаЕВІЗтТсЯ кВ У: 83 ни ЕЕ: " НН: З 18 5 55 А-Ї х 7к53855 АУтТЕсАЕ 2850557 -8 5 5 9555 ут кх заквтаАттує рів: вк Е 575 - 5 тий 5 а т ьЬУ У: А-а ПИБИБИНИНИНе т ЕВ У кос: 5 ЗЕДЮМ В шен НН ЕІ ЯК - ЕР: 111830 УА В Мос в во ниНниНнншНни питні віко: 511 5 ВЕСНО МО В5 Р хі чксІїажЕВтАТІ "АВ ан шин НН БЕ 8Е т НН НН НЕ юю ня гати сті 211 "вк ве но вв о хх 1355555 "хвВір 55 ях - я А ТІ т 51 МИБя Оп МО. ВН ЕБТаАУТІ ВЕБ ЗІВТ кої жк 205 БУ ща 8 ЯБІНИНННННИНННЯ газів Рі: Ворог, уккга ту 278 п582а--- 1 па КУ ЕВ 8 ре ДиННиНиННННННИ НІ ПВ ВЕН ї 5 ВЕОЮКО; р-з у зяшнвхк твУТУСАВ Зувя 55511713 80077 "Б 8 ВЕ «17 з х5555Х хіквтаху СА ВЕН ВУ БУ УВІ т т: в НЕ НК ЕОШМОс 25 0-4 з ПиНІАННННнНяНН НН т ЕЕ ЗЕ 7 25 Тов СЕхЕВІ терті? євовс, А ВШ їй в вх ЕС МО. ВВ 24558 а хх ик 4 хх 95 "5 : а НН НН ЯНА ЧННКННННН» хз: «ЕХ вЕОЮМО; 88 045 У У п гу й ох 25 б ше у г М "ах . «88
М. нн НН хв 5 Р ююкюся спи и Як вк М вх в ва ск що пн ан МНЕ "т увенсїстх ЕЕ Емо: в петннетнннятнянияннння 7 3вк55х БЕ мохом аа м 5 8 З Є пененттннннннннтнннння Кн. ше чі є 5 55 т тав: ЗЕСЮМОо: 82 птн ет... те при ЕЕ ШИ ЗЕО МО. пре ва ПИ 45 «8: БЕ 583 пішттттнтннння 5 УВЕ оюмох . екю "В я БЕ . 4
Фіг. 4А-2 пня і БЕОНМО: 35 Кава: 455 - нн мав Кр ее: ЗИННСЯ Бім ху деЕлю кож павгг Ве мо: я ов НІ АВ Я пп юВ Зо в Мо: 8? сз і тадятаікз Вл ков по вВлК ВО м: Ве жі їй г З 5 8 5 5 сьо ї Додай звемо. б РІВ КІ вазу Сова. Се щЕК омо- з Мо 1143555 з Ії 575 зУуприкх а- УК пееентннтя зЕа Комо 1 ВИННА вами А ИНА зало коні ско КІМ 8 Ал Тв іх 81955: 2. конт. ЗОБІ ці ЯМИ: СА у що х я 5 м мч, ї х із г - й " « г ся г НІНА Не ши зоюво: з В ШІ НН шо НЕ МЕНЕ НН За МО. п 51931558 55 3555855: ЕЕ к 57 ши ННЯ ННННННННН Не 155 НН «У сБІ5 ТВ дя с. : 7 55 їх: Е1355258551: З ме ши т Ах У ТТ 71 ї ІНИННННННННН НЕ ІБР ВБР ВІ. БЕФ КІ МИ: ЗХ ГА ШИНИ іп: 85Е185 5; ЗЕоюМо: 05 ВНЗ БЕН ЕН зкаютмо ке З ПЕВ НВ введемо хи Я БЕ ЕНН ба ІНН иНиНнН 5511551, ані ЗБК 7у257: ЕІ Ши ши НА НН 18955 а ху їх 5 171 ха п Кам вки НН НН ВЕН 1 М 42 45 55 5 45 х ЗХ я ЕР 555 НІХ «тав щит ном ВТЕРТИ СІРЕ 7 ччанищн ст 3 5 яю зах дя У ВЗ ОК У ЗВ ЕНН «51 МЕТ б 2813551: М515 два шк що В Н ЕТ й 54 55 551 КЕ 55 5 їх А хіх маю в С Бстинюв БОТ- вовни ше заюшко ви с ЕРА сь окантактю й вва помот мот ж от зване. а ту Тра; З БНЙ Щ те ЕЕ ша 5 Ех У У І 5 с зваюжию ра 582858 вк АХ: Іра вЕО МО щи ЕНН Емо До НН ННІ 5875255 паюжн в А НІНІ НИНІ важно в лей ІНШЕ ННІ НИНІ зване о Б й ук ких хі 5 5 ЕВ І 5 Б Б НЕ НН т та т о лоб 1 хх 2 Ха ЕСЕ Кох шин че НОЙ ДБ ЗЕОПЮМОС З 1 х к м ІНАНН НННННН НИ 11155: ВІН ВН НН І ІК НН щашю: ме їмо ПНАНЕ ННІ АНІ зают ще Б ПНННА АН АНІ звана хе ВУ ПОН ВІН НАВАН, змога р НН Ко НЕ ННВ ВБР ННИНЕ ТЕ вок а ІНН НИНІ ПИШНА НИНІ НН ННІ ИНННННННННННИ ЕЕ: т вт Її 5 155 38552125 БіРІЇЇ17 нин 252823: : вії: 5:555
Фіг. 48-1 НЕ ЖЕНЕ
Кабайб і: 82 83848585 878889 909192 9333 9595 97 98 99 100101 202 103 104 105 16 15 Кабваг- СОКІ З. Споїна-СОКіЗ ОСаласть контакту СІК 13 С ж БЕАТУТсСсО058У 981 ху В їх 8Б0ОІЮМО. 96 С-ї ЕЕ З РА т її сі0 057 185 РБ ТЕ ост хх 5 В І ХХ ЗЕОЮМО: 97 В ЕВЕАТІТСО9ІУ55Ь ТЕ З 008 ХХ М ЕЕ І ЖК 5БЕОІЮМО.: 95 0-4 ЕЕ В рАІТсСІ00т555РІТІР об 9 в ІК 5ЗЕОШМО: 99 А БО Е АТ І СІ 05 РР ТІВ о а 07 хх ЕЕ І Х 9БОІЮМО.: 10 АЛ БО ЕБЕАЕТ ТТ СсСІ0ОО0тх тА ТЕ Об т х 5 Б І ХХ ЗЕОІЮМО 18 А-2 БЕ ВЕАТІТСО95У 788 ТЕ Зб т КК 7 Б І: ХХ Б5Е0ІЮМО. 56 В ЕВ ЕЕ АТ У У Сі 0 5 т 788 ТІК о 007 У ЕІ Кк ЗБОЮ МО 100 В ЕЕ 2 КЕ АТ їс10057 75581007 КУ Б 1 Ж 5ЕОШЮМО. ЛО В- Б ОЗ ЕВ ТУТ сі0 0558 ТЕ аб тк У ЕЕ І ЖК 5БЕОІЮМО; 102 БАЗ Ж ОО БАТУТІ 5 ЖАРТІВ опт т 1 хх Б5БЕОІЮМО: 103 0-2 ЕВ ЕАТУ У сІОО0т8 5585 ТІК 506 ху жк І ХХ Б5ЕОІЮМО: 104 ОЗ 5 о Бат5с100уУ8 558 ТІК 9 5 1 хх ЗЕЙІЮМО. 105 п-4 ОО ЕАТУТСІ0О00т555 8: ТЕ 007 ХУ ЕЕ І ХХ ЗЕОЮМО. 1065 0-5 ЕОРАТТТСІ007555Р8РБ То 5 У Б 1 ХХ ЗЕОІЮМО 107
Фіг. 485-2 Послідовності НУВ-НІ Номерза Кабатом (каає БО Ір антитіла 00861271 55555151 ТЕ А, в-1, Аг, ! 35 і А-ТіЩ101 се ЕІ тітід хх ' чІвбіхі ні ітакож 11.19.5771 ! Послідовності НУК-НО тя рр Й ' чіт т| РІ вісісі1х т ох аАівів Мікс й А-ІВІСИКІ і і і ї ! (також 12, 20)
Фіг. ЗА Послідовності НУК-НІ шишки в антитіла БІК В з ріс Ох 101102 віці в ЖК А хо
Фіг. ЗВ
Послідовност. НУВ-КІ Я Номера Кабатом | НЕО ОтО МО ! пп рт нитку прп тити туди при туту ру пек кино Ме антитіла ІЯ 25 вим М а п п В і в. А-ні, Ай, і Н Н і Н і ! ! ЗЕ і іх рА ря фа ро У Ж Ж Я т Ід : й і веіівмит АТ оо) бакожечя 23.30) Послідовност: НУВК-О Номерза Кабатом дув ш антитіла ЗО | Бе ба | БІ 56 й, кі, В-2 І | І | : ж я А В ІРЕ Ех |і д-і-ВісІт : | | іо (такожео15, 2331 Па ВКА ЗК ПАННА; ЗК ЗК КАК, ДАК Послідовност. НУВ-1 З Номера Кабатом, зЗЕбоТа Мо інн о; нини пет пн ме мо чани мен дв "шручннннншш чений й, Я їй І ТУ ех і Ки | М і М м р | Х 1і1б'також' 32) хонсанимМмо М | м НЯ м МЕН Р/А ! вит | т ще Коди пгт тт тт о сс с 2 2 2 2 2 о 2 2 2 2 2 2 о 2 «по о о о о о о о М 2 2 2 2 5 2 2 2 2 2 2 2 о о о о о о о п о тт тт о
Фіг. 6 Нослідовності каркасних областей варізбельного ломену легкого ланцюга антитіл А. А-11 4-2 ЩО-ЕНВІ сАвр бе бів Мей тн бів бе Ро Заг Магі ву Зет Аа Баг Мві Оіж Ар Ага уві Твг Пе Ту був? (8ЕО Ю МОЗ) ШОВ Тур тує біп Сіп ув Рто Су Гуз Ав Рез ув іо ем Це Тут? (5БО ЮО МО:44) ЦЕ Зб уві Ро Зег Аго во Зег Су Зег Су Звг СНУ Те Авр Ре Тнг І ву ТНе Ве Зег Заг ем ій Ро З Авр Ре Дів Ті Туг ТугСувбя (БЕО Ю МО:45) ісжщя бюресіу бів Су ТАгі уз ма Ор Ме ув АеіОЯ (560 Ю МОЯ) Послідовності каркасних облястей варіабельного домену важкого ланцюга антнтіл А. А-1 І А-З НОВІ Со Уа ті веб уарсв бег Су (му Сі і ен маг ів Рго Сву (МУ Жегієц Агоі ви Баг Суб Ав Аа бе? (ЗБОЮ МО) НОЕНа Збгрр ма Ага ій дія Ро Су Був Оу Бен ів Ттр ув Су (БО ОО МОХАВ) но бат Рне їх Це бех дів Ар Тр Бегі ув Ап ТАг АВ тугі ер Сі Меї Аво Бегі ву Аг Аа БЕ Авр Тк Ада Мві Тут Туг був Мал (5ЕО Ю МО:49) НОВА тер Оу ів лу Твеі вм Уві Тк Маг Загбе!? (ЗО Ю МО:БО)
Фіг. 7 Шиші ЗЕ - 40--ж50553 ше ши ж т МОНУ БАКА і - о БО ФО дя рн фен рн «ЕЕ Ко 5 В Як Не 55: 06 КЕ 5, ох ЗШ о ОН 04-55 5 ШЕ С ЩІ 02 щ о А М й 5 й І В І і А в 0-1 5 Фіг. 8
25.0094 ГА-г МЕНЕ пеня Я ів ШЕ з ЗАМ іх вар: т т НН я ка Е | ши ша ! т 100004 т А --- ННІ ІЗ в | в я І ї : ІЕЕ КЗ КК Е ї : ; В -- -КО СІ З ї 5000 | ще | | КІВІ а доо-і ке яко ШІ 00004 ні В х ; х я ж сбв ОО) - - с-оЕї ка що що я Еш ше ше ши ши ШЕ ШЕ ШЕ ШЕ Ще Е В В є в й 5 й Б Б Б 5 ре ВО КоєВ 2) є сз с п Б 3 ла ЛЗ тощо що СЕ 5 5 о є в а а ЕЕ щ- в
Фі. ЗА Е о вООЮ Е щ й С і То і. ко 0000 | ----- Е ; і ши ІЗ 30000. . З І З с єв Кй ГТ З ЖЕ і х о 20000 | й і Ши Пининни опо ОЗ ск я асо еем І й сх З ци у АК пов и ЕД З о -' ще є ха КЕ Ж и же не ен НК НН НН шо жо ОО ОБО ЩО ЩО 5 ЩО сх в ГБ в. п ж З ш же -Е 5 ож оо В двоє чваа В : Ж дос З Б ОБЖ Б я 5 5 ше шк Ши НН НИ ЕН т
Фіг. ЗВО З 5 ат ! - дні ! Ж і ца . т і щ- Н х ля ля ах вх ж ях ми й ОО х. ж Н ще 5 ше ж Н З м ! 7 І ще 154 ---іхохипний контроль, 20 швітєм-- 10 тре анти і -15- РИ ; , ; : нин пн прута зторк анти тя Об ток анти г рик трк анти? т яке тру ант ! фрез опа 5 рек вюжного антя-/1 1-13 Ї а 2 4 в В 19 12 Дні
Фіг. ЮА
Середнє споживання їжі ШЕ о А Ї Ж КИ, пе вх о ва дн о. п пн Е ж о. Пити щеЕ ВВ: У шо й о и ще що НИ ж з МОЯ п пов ОО ся о МО МИ. Анти-40 Анти-іафі-Ао я Анти-іад2-8-3
Фіг. 108 за 3 : ; : ! Потнцне контрольне антнтліло т-- їі вої І А НИ і ЩІ і Н ! А І і б ! і ж ! щі Ж водЯня й их Ї Е у; ОНИ шо Се пн нн зи нор і нини дин пн Я є. ! : Код ! Щі я Ст зни нен нин син м пін пн их Е | пр. ! і їде і | ! І 7 | ; ЩІ і і І | і і : І і НЕ ! ' | ! ЩІ о Її 7 : у у о 5 10 15 р ДА
Фіг. П1А-1
Ізотицне коптрольне антитіло Дити -івд 0 5 це 15 20 р; і : 1 і ! : тя поли ши и І ї й ! І Н Н ; й ! ! Н І т ! , о ! і І І г ши в п и ви нн пня і Ш і ! М | ! ща і хи в | | ри Й АКА ША ! о Іри | | Мн й Ми Н ! ра ж Пк й і | КИ о ї КИ Ши сн х и Її і | Н 1 ДП х ЛІТ И ! | ШОУ Е ги ія ! ! | Бий й дина Збочсе ттугу ва ай ЕЯтЕяНя ТЕЖЕККе туя ев, Я із да ннжнй : НИ ШИ а х л/, ши : ри ки и. І БИ і ; М, | М Я/ і Н З ж ій р : Ск. ! СТУ й при нин пн м нн ли (уми ж пкхкминк ект кньнниі ШИ ГІВ г | у, й Й Н. СІ | ДЯ ій й; й | ! І, ж І й І ! Ж | заовннн Ду оВНиВавені КУСІНІ сплайня я 7 й й | ! ; | З вуздами, язаджуванняхка 181 -- нин нин ше -- фи жи Конзразьне припасування (Ср у | ' с Це Тнднвізувнльні тварина у | і У пре інднвінуйльні вибулі ти Збільшуваний дб єм (Зх. 356) і І і | ТУТ Межа визначення (32 мм 1284 т - ! р-н й 5 10 15 я Дні Фк 1 ТА-З ниви Пити попів Т и ; пф фттннннннння етннттжнттттнттттнтттнннтя фени І - і і Ізотипне контрольне авта сх й- - Й ї І ї рн 7 5 пет фен нина Б шани т Б і дет х, і - я Е т | дет - | Античівдї ВО рр жа СИ ен снн нин В ння - х | Н І З ! НУ В ОО КА А я ПО ни я ; ше ІЙ 4 ! -0 и ! нини нн о 5 та 15 о Дві
Фіг. 115-1
Ізотнине контрольне античіло Анти-)ац 0 5 10 15 Ко) о ЗТ. З А ТЛ 8 Х А «-«А«Щ-Є « А «А « ЮК « А Я 5 АС Є С --- - - - - « - - « «« 204 т ! ! | я Е і і ! і | ! 10 Інд і а їі » я- со! 4 д й рий І ник І ОА Аню ШИ НН сан А В шу Й нот де а ; | р А : А й - ! а р в а А ЩЕ ЩО да в и ж В у В ЩЕ рима: НО ДИ ШИ сс «Й ЩО брані роти з роті | | Ор ШЕ і | : і Я -е щ | ! | ! ЩЕ | і І г | | І ! і | ! | ЩО -Б , ; пр тт Н Н І і Що Щ І І І і ши ша шии ши ! | | ннннн А ЗТОВИЗНАЗеВІ КУОІЧВІ соплайния ЗХ -1304- пф вузлими, згладжуванняхна і чен Кочтрольне припасування пр снен--8ІВдивідуальні тварини І | Р гена індввілуальна вийулі карети шини пи я я Збіпивуваннй об'єм ох, 355) Гру Межа визначення 32 мм) а З о 15 20
Фіг. 118-2 1405 Анти-96 (під) --, 1205 Антв-амброзн(тідбоа) ; што 3000 уо х ої с до шо Воо йо р З м ВЕ т 2 В-3(вдо М Анти-Заде 8-3 (ВІДС) Ки Кв; 500 х ак д 5 ка нич Мей щі Я їн ур є я Анти-іаді А-2 (підт) зо каато сад Анти-іво А-2 (тідбга) тео 200-3, ня о 0 10 20 зо 30 50 во Внутрішньоочеревинне введенвя: 0,4, 7, 12,15, 18, 22, 25. 29, 32, 36, 43, 50, 57 день Кубізні сплайми зх автовизначеними 2 вузлами Фіг БА
Сх єм пухлин у індивідуальних тварнії 0 10 20 30 40 80 50 ЩІ ШИ І ше виш ко т нини нини ни шини ве шшщ у і і ри ни а ІНН НО ШОН 1500 шк п - ниглуднини ше Н Н и Н | ' і АНТ їі ни 1 7 ЩІ НИ шити 900 сур пря М НИ Р Н (й ПИ / м: АН ва 1» щи - 500 ву но ж МН Ккак не ж Ва з ства й М 3 А зт ї й т сови кв | ж ска в як как. ж 0 пенею по пк пон пиво жа не вони зки нм око зника В Я тт пшшшш В і і ГОМ МНН МОО МАННЯ у І - 6 З нин 2000 я ШИН І І і І шк З | ! | ! НН ; І тоутіндивідкальний об'єм пухлини НИ НЕ ; сляю- Індивідуальне вийування да НЕМА ЗИНННА МНННІ ЗАНЕ М МНЕ --- ши шани зляня ІНДИВІХО) що і т Н ї ! т м, 15 закінчення дослідження і Ї ;5 Я ; и манки ММ Е підігнана крива Аяовріте «й | й, ! 1000 мен Накладена апроксимована Гр ї о. контрольна крива (носій) Кк У | Я /к с; Й М о вихідний об'єм пухлини і р ли жи ВВ Бод р Шрайк: аа Хе ек тео ВКеНИ з тдннй ус чн ДИ сть в Кит, 010 20 3040 0 60 День
Фіг. 128 у Антимло А Аг А а но а я с З ПО в о о ОН в В С ЕКО ВО а ОК о о. ЛЕ є о Пе в о с «-Інтакіте МАТ
: С. ПУ в В я п НИ ОН Я їй НН в В М ОНИ пп скіннофрннен ВС КО ПЕКИ ОККО КОХ КН КК ян М КіВИ. фрзгмень НС Н : ХХ ПОН Ж КН ХХ МОНО
Фіг. 13А
«ЖЕ скавування (4,016-4,793.хв, 25 сканувань) фраєментанія 250.0 В ВСРОЄ К 042413й Розгорнуте бзотопне ши я хни розшнрсннях 12,01 : | ! : : | і : : Н Н Н і 1 Н Н Н і В ми и | і ! : : ! 14982532 ! Нік пасли пп он зни снн нні іінннх тні зни нні: пров нн: «Зник нннн в наннни І ' | ! | : і | ! че : і Н Н і Н | її Я п нини ин в в п п вн в п в в І Н ! Н : й Н Н 7 Н на : і ' І й : Ї ї ЕІ : Я : : Н і Н Й і АД А ! : : Я ! Н : : Ка Н Н Н : Н ; Н 1 м ї : ! у : і С-кінцевий Н ! Мт 1 ' : : ""фрагмен НС Ї Фа ПОМ НИ ПИ ПИВ ПОН ПОДАННЯ З БАН ПОН р : : : ; : ! ! ! 1 од о пи тем ннн НИ ні нн нн пон нн нн в нн зи в нн: Пов ин ї: ! Н Її ї Й Н Н Н под нн ренні нні рон ост стрттнннннотнніінн В рдрідеодртфиттнттнннін я сет фон ОН і ! і; й : ! Гавде Вт. ! 844 Н Н : 331852 Н аа. Ж 515732 НН бе пн пн по нн кн по в пн нн нн нн нав як не шк о чи нини нин 4 Н й і Н : : Не х і й. ПП 15000 25000 25ОЮ ЗО з5ОдО поз з500о Бод БМЮЮ Кількість ібюнів воріяняно з мастю після деконволючи сом)
-. 48 Фі ЗВ пт вУОМУЮВОЗЗО БУДРОЗЗЬВІ БОВАНОБТЕБ ЧУСІЦНУКОА Бокоткото тивно ВВИ во Н «т ТІТІ тм -пк-- гл папа вороцінщ -ок р ІДИЗУХОДЕТІ БАОРТВЕНТАХ БОДИВЬНАКИ ТАХЕХХСАНВЕ БИКА ічтенБАБІК їх І Мило КОЮ шРУЗЕРІАРЕ БКЕТВОЯТАА 1ОСЬУКОТЕРОБРУТУЗННМЗО АМТБОМНТЕВ ВУБОоВВОовУВ їв : 11 бЕБУУТУРВЕВ БЕСТОСТУЗИМ УМИКРЕМІКУ ОКЕУЕРКБСЮ КРИ ТСРРОРА РБІЛДОСРЕУЖ а -ї Ро БЕБРрИРрИОХЬ» МІВНТВЕУТС УЮ ВНКЕОК БУЖЕУМНУУТЯ УБУНВаАКЕКР ВЕБДОЮУМЕТУВ 290 ! зп УчачотуОВОо реуМЗкКвУКс реУЗНцкаОБЕаР ІБНтТІБКако ОБвЕвБОбУХ: вРЕВКЕМУКИО зо їо3Б5Р сУВІСТЬоКа ЕУРБрІУВУОВИУ КАМОЛОШИМУ КтТтТрОСІНО ОоБЕКЬ»ЧІБКОЕ ЧОИБВНИЕС 17 1 45 УЕВСЕУМНЕА ТАННУУСКЕТ. Бара з4ї5 Зе0ЩІО МО. 13 Й Пе . - і ІЧ М Фіг. 13Є - Автитіза и Бо-каркає) А АДТТАД ДвивисьФфік БВ ТРЕКУ) іпшеі івішсті ітд сві ра ші НЄ нн ОВК МЕ В ОО ОО МОЯ ро КК ЗХ НН В Я І М НН В Не її ОБО ве ОО ОО ОО ОО 00 Б Б ПО ННКЯ ПИЛИ А и ши с ПИПОНИЛИННННННН нн МК пи ПО В В КОНЯ ПОХО ОО КО ОЯ ОКО в З В Ж ИН МОЯ ПО ОО В ВО ОО ОБО ОО ех НН пи М даднеьвіи 4 ОО Ох Днансь ная В В
Фт. І1ЗА
Результати секвенування І Шекаитрніві 15 | 24 | 35 ва ЇЇ та зола низ яаня ззАБ мив Би іден и Т 7 Ніюклідюв.ї В | 1-1 АСУ вівізіті |У тТіУ ї пягтіоляві "о фос4513477р 70 1олевіо377 0206 023110.281|923110462 509 зка Мне: 13 рі.РиКіг675 РО МОНЕСІТБРІУАТАТОВУЛЕУОЮУКНОСВЕУОРОСЕ НІ ЗСААВОЕТЕВНУСТИХуВОВРОКОСЕУУЄМІТЕВОСУТОХА 8 БНІОКОЮЖРІВАВТВКМТАТІОМН І НУЕОТАУУУСЬНАЗВКАУНИОСТЬУТУВВАНТЕОРВУУВЬАРУСОЮКРОВВУТЬ 1аблннкнаитіния ТбР ОСЬсКОУЕЕЕРУТЬТИНВОВІЯБСУВТЕРАУВОВРІОХТЬВВЕУТУТЕЗТИРВОВІТСНУАВРОАВЕТКУПЕКТЕРКОРТІК 241 БСВРОКОРАРНЬІООРЕУЕЛЕВЕКІКОІМІББЯРІУРСТТУВУВКПрРОУОФЕНЕЧИМУВУВтгАСТОТНВЕОУЧВТЬВУ 351 хЕАБВІОНОВИМВВОКЕЕКОСИЧНМОКОЇ ВАРІБНТІЗКРКОВУВаРОУУУЄСРЕРЕВЕМТККОУТЬ ТОМУ ТОЕМРЕВІ ХЕ апі кХоКТЕБЦЕКИТЕРУТ ОВОВОВТКМУВКОВУВКККУУЕВНЕ ПОВНОЮ ННННТРКВЕВНТРОКВОМЕСТІ КІСТА ТАТ 48х ОХУВБОТОНТОВРОВСЯАБУСИВУТГТСНАБОПОВТАМАЙТООКРОКАРКСОХУВАБВЕСУНОСРЕВЕВОВОВОСТОБТІТІВ 55і ВІОБЕБЕАТТУОСООУЖТТМРТЕООСТКІКІКВАрААРТСНІКРРЕЗЕОСТЕООЗаАВУУСРЬНИКУрКВІНТКНИКІВСВЕКО 531 меллактОорЕКов ту иаЕтт ті ТиреВуЕВНиВетоВАТНЕТЯТЕРІУКВЕНАНЕС 5ЕО Ю МО; 110 х інн нс нон о нний
Фіг. 148 шо й Щ БРезулютати секвецузання Я по ШИ У В РИ ВИНУ М и ПУ М У В уче уч и У Никиврїв чо р шої | З | 425 1 54 і Б 1 326 | ЗУ 1 9В ХВ РЦЗ З 32133 БА Шослдьн! Є М 0: 1 М в! в ва вм ав днях і олова пам вла вуе|в о пахв бла ав» оз осв вав о, 5 ІЕЕ ВО ЕНН НОЯ ЗНАННЯ ЗБ НН УДИНщх ЧНОННщ ДИКЕ ЗОН Водн ЗД питна алачнннино ві впнатете ї МПИДОЛТЕРЕУАТАКОВУАВУ СЕУ ОО ВІКСЬВІОЮ ВНУКИ ВОРОГОМ В, ї БПІВУКОВЕБІВаБКЖВИМУАУТОММНВиАВІГАУХКСАКАВОКАУМСОСКвМ КИ ВАВ УРА АГ ТІААИТ, її зсхужауквкрУтутиМа ни ОУН тТЕРАУТОВОрІТІВаВУТУРЕВТИВОдІтТОКУ НЕ ОоВтТКУРККІБЕВИВЕТК. АК вОФРОКСВаРНІКОСРЕУКІКРРЕХКОУМУНЬКВРІСВОМУУОУВКНПЮВОХОТ ЕР УВНИ ВУВАТИ ТНК УМЕТККУ З21 УБАЖКІСНОСИМІОКВРКСКуММКОХТАВІКНТІВКРКОВУВАРВОСТУЮрОВЕКЕТ и УТ ТОМУ ТрУнувОг ни їсі1 ВУСкКтТКрМуУКИТЕЕУЄОБООВТКМУВКеКУКиХМИоВНМеу СВУ ВМННКЕК ДКВС СИВВСТТЮВЕХАТАТ 85 шУНКВІОМТОдеЕВСКВВОСрКУТІТСВиВОМИаТАМАНХО КВН АРКІСІБАВЕСТВИУРОВКВсВа ВВ 5БІ НЕОРЕОВЕТАКУЖСОСХУТРАЖРЕСО ККУ ВІК ВАРААКТУ ВІКИ НОВО ХОВЕННКХрКОТМУКИКІВОВеВО да1 НнохіТвООВКратІВиВЕ СТЕ ЕТЕдВНе КС КАСКИ ЕК ХУЙВЕНИНЕС зва шеМОгтю манна и нн и и нн А ня ї нн ни шир. С Н на З 4 5 5 7 В З 10 її 12 з 14 ІППеИИ ШКО пн ПИШИ и КВК по МИПИИН І НИКИ КО ВЕК о Ме Е ПЕК З КК КОКО ОК ОО ЩЕ МО СЕ о ОК с ХХ Б а ПЕВОНЕ п : В ооо.
Б . с ОО о. З І ОВО КОН КК В М У ОО ЕОМ ВЕ ОО Б о ОВ ПЕ о У с 000000. Слімевий КК ЕХ МО МКК МВА ОМ Я Фрзгмевт НС о. ОХ а ОХ Я х о с. І КО ОА г с о. ЕЕ - о о КОМ ОО ОН З ОА МИХ ОН СО хх ж о. зклхі - Б о с ще І ЕК ХВ У о в о» о о |і о о . --М-хінцевий . . і 0. ї Ффрагмені НС ТО АЛ ІЗНН ДИКИЙ ТНН) 8. АсТ(Ві0І Дим ти 8 Ач АБУ М А ЗННЕ М ОА ВНИМ
4. АЗВНИО м. АЗКИО ВО АЛ ЕНН 12 АЛ ЕЕ
В.О АЛОВБИ! КОРМ 7 АЛЕ ОА ТУ Кот отудттттттттнт птттттчтнттт тттттчнтттнтнтттнтнтннтттнттнттнтт Я
Фр. 13
А дз А деле А У. . г ке з ВНе (ргер іргер 1) звінтіту реері ргер? що що: З її ц і ее що я ШИН ОХ ЕК о КО ОО В и С У пе З о ССС Б І п Я -6о її її о В В Я ПИШЕ ОО о. а о ССС Ех Б У СК ВО о о п-є ВЕ ЩЕ ОВО я пес кінцевий по о и ЗО фрагмент НО ЩЕ ОО ше І БУХ КЗ а ХВ ЕЕ 5 ще ОХ ПОП МКК ОО ТОК КОКО ТИМИ - ПЕК МКНКК МОЖ Я ЗХ М ЗК КОХ їх КЕ ОК МК М ЗХ іч , ванна а а а а а р
Фи. 16А -птт «от тот ото Волт ол з заЗ38 З З З З - 9 їй Ж - ю с ее . Відновлені ПІК с СЕ ОО ОКХ ОО НЯ Ї М КК ооо еНКНВКВВВ ЗО ОО а Пе о. Ох ОО х о М о. . т кнцевни осо с ОВ М фрагмент І Фіг. 17А Ї їх. Вміст С-кінцевого ГП бен ! Ї Є-ківщевого Я 01 мо | па НЕЗЗНИ Й і пише ' ве ові Ми І шати іо ! пи и АОС ляд ої ма фев, Я Фі: 68
ГО т виеж с врникяого іфраєкента НО т 148 ня 18 Чаг 7В шк Контури Гитрувавня внти Івді Зівнй стовичик ох А-Ї, ізняна ТОВ ИК сх ДОВІКУ 1. правий сговпчнктА 1-5 т ноавни севачзик т пЗаБиВехі ХЕ іврит ти 1 І ш 170 у пив о о пи п о в пи В В и «отиті В : Що ОБ й Б Ко їй о - борт Код пов СУ они МС Я ов НИ с вав - Н НЯ Н С ро де дОй ш ді БО Кой Н й У кед. о Я яв 2 -- 55-74 4 4 Й З Безу НИ і с і У я й ОБ Я пня ши ШОК й й ши шо ЕК, що ше І І а с з ПИ ВЕ Я ху пе їх а -т В Бора р г 2 д ру д - шим ше ж Я З НН з ш З З ї- їв їв о же: і ш у КЗ Ві пили ще т Ф й пи -Я Ше; і Її й: Н в. і : і в ши: чи ою З ! і Конгро і авти-о о І: Чне КА Контролі Титрування анти-Заві (лівий стовпчик х А-1, (лівий стовичик з планет 1. правий стовпчики --51017) зравнй стовичак с плавне 2) ШО 0ОбО тет х і роко Бо ; Е ! В со з ІЙ і і : Ге З у й ; о ро З г ї. ва С о а і і А й і БА Ж вобдюч Дт Дн 2 ги : ШЕ ; І щи що Ж зх є й 1 шо 40000 де г р В г ї 5 5 я З щи щш . З 5 білять Я ш-я З Б -йЯ 13 ши ши шо. В : о-що і і ! | г що. кі У ВІ вв 58 в 88 8 ЕМ ми ше нн ЕН ! і - реж НИ ИН НЕ «НИ що; і В я | І ! ник м МИ щі оо щі Мі ! Й ї ро не в ши | | | В ві ние: і і І ! ре ши ие ! | | | І же ; Контролі ! анти-іво! і 5 Фіг 158
Контроні ни и й лівий стовпчни єпоарєюї, Титрувавня авт Гарі (лівнй стовлчню той, правий стовнчнксх вианннисх 2) правий стовпчики А- а НН Є і і ! --о ле - ОО ВОЮ дер - рн по син шин шк: нин 2 екю КА с 1 що 5 І - Щ- я що шшшишннші винні нини нин : ШЕШИ ШИ щЕщ щі Щи ЩЕ Боже 1-3 -
: . | ШЕ НІ Ез в до в : : а : : і. їй : 5 : сс 5 МА о і ї | ше ие зе М и З о п и п п с о: В Пе ВИН, КЗ | Я 5 хі | шини ши ши ше ше що ши ни нен НС НИ Я | ! ! ши ши ши М -В т ї И Н Н И «5 Го Н Го ро ' і і ! ! 8. ще | ще ! нини ше | в роя оті | Н І Н ( 1 ' Конт Ї анти-Уаці й Фіг 180 щ-- ще - ох Й ши ни Еш БЕ шорт 55 Й чн Шоят. Я Біл ше ШИ ШК і оно НВ Ки ЕН Кп Код ду пд то ПК ітд нкотякннктеной й : Фі.19
1535-3645: Зав ШЕМНІЯ В; День 44 Пг'єм пухляни «є (довжива"тиринатвисота й» Наклалдемня відпов об'єму пухлини Уо терту Мн ! | ! | : их ' ! : рт І ! Ши нн нн нн нн пня Ж І | і ма і ! че ! . оди : | Н К І ; Я : Її А раї І шия ! : дит ! п 25 рення я Зо п. нини нн я пи Я мо; ! Не : і ! ве жнй а ша ОК АНЯ ще ' ат Н І ПК не дет Мднннв ше - иовани я нен : яп | НИ роя маш чини 7 : ние пен п не с тато тр ла Жи РУ АВ пон пн поки пи НО то З НІВ. День Фіг, 20А І Доза КО АМС/день, ! ! ї ! Й о івост | КТ свижиооі г і Н і Назна групи ! ! " пТТвох вн Назва бру!ї І ЇМИКО) день) верхи) І нин и о пи а інн 1 Аа аморозія контроль киусну з 1 і БО 100,0 1 185 Ві по Вавілов о ОНИ ВОВНИ ВИН Кий МН 2 Мн АЗК Ще 1318 8513293) 00 пемнлннн 0 шин мн в п п В ПИ и В В З дні ААМОЩИТ НН ОТО 103 (80. 129) Псснсявної 71 рен 00000761 НЯТБ У; паж В ДО АД ОВ ВДВ СВ СД ан ПИВ пк, комі АЗІЮ однн раз насгри лежно ; 16 Об ер фекля 5. пи аа о п п о ов то аа пом а о ау М УК Фй ромова мини і: ниви А АеСОся ефокторної функцій ща ГВЯ м) їжа лк) 5 нм м ау ми иа а а а о о о в о и вав ЗИ р у о дггос то нам Ввю твоя 7 ки-ви А 10 ї ТІ ЯІБІЧИ, ТАНЕ бдсмаковомя й ДОД МО ДАК КН ПДАА Н
Фіг. 208
133644: Зав ЧТ; Ден Ж Об'ємухлини сх (довжина вира висота у "Накладення відповідне вазі тіла кни нин нин нн нин і ! Я і не : ! Й ! ї ж | і | Я КЕН А : - 4 Шин я свт і - Анни Ки клина о у М плини пн кніни ки ОЗ дея пн у ин щ сн я НИ ВИ | і в : ! ! Б а- сини нини пн пін нн Е | ! і | : і Я і | : ЕЕ «бу пев нин нин пон ин щі ше ! ! | ; ! : ! і В й ! Я ! ! ! і заз . Й ін ЩЕ й КІВ) ЗО 40 День Чит ЯТА. ше Щ | СНІ я; ЇДень! АКЛС/день, ГИ Мазва групи (Доза ось, З Макс. імакоо (нижнє. ПЕН І і ВТ ілодто ! Н мА) день 1 й ІВ Ії верхве) І; ши і ошминанся поши дров ом Чорним щи мон пивом зрада 11 Аниеамбромя (контроль ізотопу 000748 ВЯ Я 2 повз і Ана АЛОТИТ І 13 74 в т? ва») З Анні АУКМТ тв ав ваз Я і5сов ТЯ днів АВ з5овавро ві зей ов Ко 5 Амуіау АЛВ Толя риз ма трнотижнії 30 ц вл вазі 4 І 3,8 ! ко пом в ооо ан опи ов, ов вав мов пари поовн поор оно зно пом маннанни ОВ іти ад А САМОЇ без ефекзторної функці 0541 745 Бе 52,38) у каиай ві та лася кі і НИ іа БОМ А ВИК Я ВИС МИС ПК фіг. 218
ТПеослідовноєт СТВ за визначенням Кабата відкреслені Взрівбезьна йласть легкого завнюга СОМ Л-Облоконтакту Нумерація за Кабатом сон А В 000 м 1754557 8 81:21:25 31 1:15 01113519 55 21 22 22 с2 275 27 Р 55 50 2 25 33 207 305 253 І АЗІЮ в Ал Бо тт ко ЕХ ГО бом Одлковтокту ; ГЕОБІО ВО г кож вдккт Нумерація за Кайтою 1 ід Кава 0433 55 0 48 0 БО 5) бро: ЯЗ ВОЗІ МОМ М, В 52 83 БА КУ фе БР ДОР ТО ТРСМ ТР СЮ ТОТА ТР ОСТВ Те ВО: 8) 8) В Алімить ква: 18 БЕВЗ УТРО? кое пра СВ СОБтковниу СОКЕМІ З СЛОВ с ухдечриціїх ча Каті ГОСВКЕТ. Каси 1 Нумерація за Кабатомо0 0000 шт Ва ЩО Ви Ж? Б Я І 81 5 85 55 ЗБ ОВ М ЕСЕ І НМ м БІ АОЯіВЦИТ т її ХХ ср тк в лих та р в у З їх БЕОЮМО м
Фіг. 22А ут от - зет цк ми Варіабельна область важкого ланцюга Н СВАЕНІ-Обл.котнакту Нумерннів за Кабатом , цажнокяу пд 457 яп я 18 М 12 11 М 1 15 2 ую 23 УТА ФІ 2 ІЗ ФО СТ ХВОЇ МОМ ОХ МОМОТ УТ Ма 0412 АаіВНитр Кох ТВ п У б вості ас варлхусівкуУОт Ї СОКЯ2-роьконкакту ра секс о
Н . т. ІЗ п Ах є Н Нумерація за Кайном 00000000 МАЕ АК 4543 435 збо їт 48 43 55 Б) МО52А 53 бе Ж КОЛ? АК ОХ ЙО ВІ ВХ БІ б Ах вом ОК КУ га 23 72 МОТЕ 15 ТЕ ТІ ТВОЯ ЙО БІ Бук» АЗавНИиИтТ хх сої ж Ж ох по лот 8 пол оф у т б у ко 5 З М я 05 т 5153 5 цях хх х ! 3 я т ОМВО ЗИ ДИ В В В СН НО НИ В З З С У ОО СрКНІОдлконакту робимо Слоття, Нумерація за Кабатом що Яке В: мрровІс ВлоВА ВХ б ХР 55 3 бо хі Зк 82 34 85 ЗБ 2? З 55 ФРІ 2 а БЕ ВР МВВ ІВ 1323 АіВІАТІ меж и и м о м м р і п м и М М п М о ЗЕ ЕС т її вк поч На ОХ АЖ ВТ АТ У т сг Ана т хх Я 55 їх хх 5 БКОодКкОВ Фіг ав ЕІ МО пі АТМ БО мох чн п а я Ок Х Контроль Й ТВ ; З 3 лада Вуж го АВТ К, а Ше БО да ка еВ С сне А АК Й ЗУ де АКА ІД ре и А Оу Я Ух КК тд ЕК те т ПІЖУК АЮ Ю Б кумі а ж 5 ШИ я щи Он р в КН а СОКИ ЖИ КЕ Нк еВ Ж к Пам - ї КЕ БУ лох КК ер ВОНИ У ла Який й Же : Б Кук БЕК ПОДА ПА Де Я Б ВХ шо до В Ве Ошь х ває Сх хх Мини ИЙ ве у. БІ бле ЕК ав ши и М А КОЖУХ, РО ол З В КЕ З С У. МЕДИКИ КІ В пек КМ НО у о сан не Б Б ОО ТУЖВВ Ох ОО кої, МАМЖМО ен ТК В В 5 ОДНА ши Ж и КОКО С АК Р М ЖК ж ВК тем ОК АК Же Я Ж по у «й те В, ВЕСТИ ВА КЗ и ви ши З ее Ха. 0 ву КК, в ви Зп В В в А Є: З и ЗІ М сажа ля жк пи но ДА А нн тм а и ит по. но мч МИХ КН ву у но І Кк А я течі Я ДУ ОКХ З г ис ух ожЯ т р ше у І ЧАСИ в оіади, ок Мен и смів назад ЖК ов що жи ух Ж Ку; ВИКИ ї х ве: Пп У нм й шо Мо з нн се ОНИ а СКК ю МЖК кт ек Я же І о «Ж ду М хм. НЕ КВУ, п; аа пока С Х й огдк в в Ви ре ше клю ЮА ух их, ч а Я ван клак А ка ой Є зом ВЕН, Кі ! п Ко ее и Ж ІК ХК я з, и ТИХЕ ТИХ ЗЛУ, Її п. й ечАКа ц Не їж ПАНИ корек що у бабок БОР в СИ ЗИ УЖ кі ОА ЛОТУ ВХ ТЕХ Км Ж ОЕМ ХУ ККУ МЕ З ни Воно ТКУ ПІЖХУИ ОМ ве ЗИ ДТХ На о ТЕ Ой ЕД ПИЙ нн ВН ой Ме х и о и і МНН АН ЗВ ЩО ж ко ЖК с ОХ У М кни о ИВАВ, М 8 : -е її ї- Її (її. БИ с их УК и МНН М НИ кот й ВИНИ НН НЕ Я УК КК КК. по НВ а кОане В кА и Мои М Ов в косе Пн ЗД Й РА ОО В МНН АВМ КМ Х. пе Ех зе ке М м В В М З М З зх ик зи.
Фіг. 23А
UAA201609358A 2014-02-12 2015-02-11 Анти-jagged1 антитіло та способи його застосування UA121464C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201461939110P 2014-02-12 2014-02-12
PCT/US2015/015456 WO2015123325A1 (en) 2014-02-12 2015-02-11 Anti-jagged1 antibodies and methods of use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA121464C2 true UA121464C2 (uk) 2020-06-10

Family

ID=52574459

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201609358A UA121464C2 (uk) 2014-02-12 2015-02-11 Анти-jagged1 антитіло та способи його застосування

Country Status (33)

Country Link
US (4) US9518121B2 (uk)
EP (3) EP3105253B1 (uk)
JP (1) JP6571115B2 (uk)
KR (2) KR102030891B1 (uk)
CN (2) CN106068277B (uk)
AR (1) AR099465A1 (uk)
AU (3) AU2015217271B2 (uk)
BR (1) BR112016017986A2 (uk)
CA (2) CA3045124A1 (uk)
CL (1) CL2016002004A1 (uk)
CR (1) CR20160362A (uk)
DK (1) DK3105253T3 (uk)
EA (1) EA201691610A8 (uk)
ES (1) ES2685424T3 (uk)
HR (1) HRP20181359T1 (uk)
HU (1) HUE039940T2 (uk)
IL (1) IL246736B (uk)
LT (1) LT3105253T (uk)
MA (1) MA39248B1 (uk)
MX (1) MX2016010433A (uk)
MY (1) MY176855A (uk)
PE (1) PE20161335A1 (uk)
PH (2) PH12016501435A1 (uk)
PL (1) PL3105253T3 (uk)
PT (1) PT3105253T (uk)
RS (1) RS57608B1 (uk)
SG (2) SG11201606607UA (uk)
SI (1) SI3105253T1 (uk)
TR (1) TR201810635T4 (uk)
TW (2) TWI631135B (uk)
UA (1) UA121464C2 (uk)
WO (1) WO2015123325A1 (uk)
ZA (1) ZA201800315B (uk)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7776314B2 (en) 2002-06-17 2010-08-17 Grunenthal Gmbh Abuse-proofed dosage system
JP2012533585A (ja) 2009-07-22 2012-12-27 グリュネンタール・ゲゼルシャフト・ミト・ベシュレンクテル・ハフツング 酸化感受性オピオイドのための不正使用防止剤形
US20130028972A1 (en) 2011-07-29 2013-01-31 Grunenthal Gmbh Tamper-resistant tablet providing immediate drug release
MX2014004074A (es) 2011-10-05 2014-06-05 Genentech Inc Metodo de tratamiento de condiciones del higado utilizando antagonistas de notch2.
BR112014019988A8 (pt) 2012-02-28 2017-07-11 Gruenenthal Gmbh Forma de dosagem resistente a socamento compreendendo um composto farmacologicamente ativo e um polímero aniônico
MX357675B (es) 2012-08-13 2018-07-18 Genentech Inc Anticuerpos anti-jagged y métodos de uso.
BR112015020290A2 (pt) 2013-03-15 2017-10-10 Genentech Inc métodos para tratar um câncer, para prevenir câncer, para inibir proliferação, para tratar terapeuticamente um mamífero, para tratar uma disfunção, para reduzir níveis de proteína spp1, para tratar terapeuticamente um câncer, para tratar um indivíduo e para inibir proliferação celular, artigo, anticorpos e usos
CA2931553C (en) 2013-11-26 2022-01-18 Grunenthal Gmbh Preparation of a powdery pharmaceutical composition by means of cryo-milling
CR20160362A (es) 2014-02-12 2016-09-20 Genentech Inc Anticuerpos anti-jagged1 y metodos de uso
AU2015266117A1 (en) 2014-05-26 2016-11-24 Grunenthal Gmbh Multiparticles safeguarded against ethanolic dose-dumping
US10596200B2 (en) 2014-08-22 2020-03-24 Procella Therapeutics Ab Use of LIFR or FGFR3 as a cell surface marker for isolating human cardiac ventricular progenitor cells
JP6738808B2 (ja) * 2014-08-22 2020-08-12 プロセラ セラピューティクス アーベー ヒト心室前駆体細胞を単離するための細胞表面マーカーとしてのＪａｇｇｅｄ１／Ｆｒｉｚｚｌｅｄ４の使用
MX2017013637A (es) 2015-04-24 2018-03-08 Gruenenthal Gmbh Forma de dosificacion resistente a alteraciones con liberacion inmediata y resistencia contra la extraccion por solventes.
DK3417073T3 (da) 2016-02-19 2023-10-30 Procella Therapeutics Ab Genetiske markører til transplantation af humane, hjerteventrikulære progenitorceller
US11026996B2 (en) * 2016-05-25 2021-06-08 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Human Notch1 based fusion proteins as decoy inhibitors of jagged-notch signaling and DLL-notch signaling
US10508263B2 (en) 2016-11-29 2019-12-17 Procella Therapeutics Ab Methods for isolating human cardiac ventricular progenitor cells
JOP20190259A1 (ar) 2017-05-31 2019-10-31 Amgen Inc بروتينات ربط مولد ضد مضادة لـ jagged1
AU2018318231A1 (en) * 2017-08-18 2020-02-13 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of the notch signaling pathway for treatment of respiratory disorders
US11186820B2 (en) 2017-08-23 2021-11-30 Procella Therapeutics Ab Use of Neuropilin-1 (NRP1) as a cell surface marker for isolating human cardiac ventricular progenitor cells
WO2019152599A1 (en) * 2018-01-31 2019-08-08 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Nucleic acid monoclonal antibodies targeting pcsk9 and methods of use
CN112129946A (zh) * 2020-08-16 2020-12-25 陆修委 无糖链型惰性蛋白封闭剂的制备方法及应用

Family Cites Families (124)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4737456A (en) 1985-05-09 1988-04-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Reducing interference in ligand-receptor binding assays
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
US5606040A (en) 1987-10-30 1997-02-25 American Cyanamid Company Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group
US5770701A (en) 1987-10-30 1998-06-23 American Cyanamid Company Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents
AU634186B2 (en) 1988-11-11 1993-02-18 Medical Research Council Single domain ligands, receptors comprising said ligands, methods for their production, and use of said ligands and receptors
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
CA2026147C (en) 1989-10-25 2006-02-07 Ravi J. Chari Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
EP0564531B1 (en) 1990-12-03 1998-03-25 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins with altered binding properties
US5571894A (en) 1991-02-05 1996-11-05 Ciba-Geigy Corporation Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor
JP4124480B2 (ja) 1991-06-14 2008-07-23 ジェネンテック・インコーポレーテッド 免疫グロブリン変異体
GB9114948D0 (en) 1991-07-11 1991-08-28 Pfizer Ltd Process for preparing sertraline intermediates
WO1993006217A1 (en) 1991-09-19 1993-04-01 Genentech, Inc. EXPRESSION IN E. COLI OF ANTIBODY FRAGMENTS HAVING AT LEAST A CYSTEINE PRESENT AS A FREE THIOL, USE FOR THE PRODUCTION OF BIFUNCTIONAL F(ab')2 ANTIBODIES
US5587458A (en) 1991-10-07 1996-12-24 Aronex Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
US6004924A (en) 1991-12-11 1999-12-21 Imperial Cancer Research Technology, Ltd. Protein sequences of serrate gene products
DE69334255D1 (de) 1992-02-06 2009-02-12 Novartis Vaccines & Diagnostic Marker für Krebs und biosynthetisches Bindeprotein dafür
EP0752248B1 (en) 1992-11-13 2000-09-27 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US5635483A (en) 1992-12-03 1997-06-03 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides
US5780588A (en) 1993-01-26 1998-07-14 Arizona Board Of Regents Elucidation and synthesis of selected pentapeptides
EP0714409A1 (en) 1993-06-16 1996-06-05 Celltech Therapeutics Limited Antibodies
US5773001A (en) 1994-06-03 1998-06-30 American Cyanamid Company Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5712374A (en) 1995-06-07 1998-01-27 American Cyanamid Company Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US5714586A (en) 1995-06-07 1998-02-03 American Cyanamid Company Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
GB9603256D0 (en) 1996-02-16 1996-04-17 Wellcome Found Antibodies
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
CA2293829C (en) 1997-06-24 2011-06-14 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
AU759779B2 (en) 1997-10-31 2003-05-01 Genentech Inc. Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
BR9813365A (pt) 1997-12-05 2004-06-15 Scripps Research Inst Método para produção e humanização de um anticorpo monoclonal de rato
DK1068241T3 (da) 1998-04-02 2008-02-04 Genentech Inc Antistofvarianter og fragmenter deraf
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
PT1071700E (pt) 1998-04-20 2010-04-23 Glycart Biotechnology Ag Modificação por glicosilação de anticorpos para melhorar a citotoxicidade celular dependente de anticorpos
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
ES2694002T3 (es) 1999-01-15 2018-12-17 Genentech, Inc. Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante
PT1914244E (pt) 1999-04-09 2013-07-26 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Processo para regular a actividade de moléculas funcionais sob o ponto de vista imunológico
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
WO2001025454A2 (en) 1999-10-04 2001-04-12 Medicago Inc. Method for regulating transcription of foreign genes in the presence of nitrogen
JP4668498B2 (ja) 1999-10-19 2011-04-13 協和発酵キリン株式会社 ポリペプチドの製造方法
CA2393869A1 (en) 1999-12-15 2001-06-21 Genetech,Inc. Shotgun scanning, a combinatorial method for mapping functional protein epitopes
WO2001049698A1 (en) 1999-12-29 2001-07-12 Immunogen, Inc. Cytotoxic agents comprising modified doxorubicins and daunorubicins and their therapeutic use
NZ521540A (en) 2000-04-11 2004-09-24 Genentech Inc Multivalent antibodies and uses therefor
US6984522B2 (en) 2000-08-03 2006-01-10 Regents Of The University Of Michigan Isolation and use of solid tumor stem cells
CA2785941C (en) 2000-10-06 2017-01-10 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Antibody composition-producing cell
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US7064191B2 (en) 2000-10-06 2006-06-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for purifying antibody
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
ATE378403T1 (de) 2000-11-30 2007-11-15 Medarex Inc Transchromosomale transgen-nagetiere zur herstellung von humänen antikörpern
CN1555411A (zh) 2001-08-03 2004-12-15 ���迨�����＼���ɷݹ�˾ 抗体-依赖性细胞毒性增大的抗体糖基化变体
EP1443961B1 (en) 2001-10-25 2009-05-06 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
JP4628679B2 (ja) 2002-04-09 2011-02-09 協和発酵キリン株式会社 Ｇｄｐ−フコースの輸送に関与する蛋白質の活性が低下または欠失した細胞
JPWO2003085107A1 (ja) 2002-04-09 2005-08-11 協和醗酵工業株式会社 ゲノムが改変された細胞
AU2003236018A1 (en) 2002-04-09 2003-10-20 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. METHOD OF ENHANCING ACTIVITY OF ANTIBODY COMPOSITION OF BINDING TO FcGamma RECEPTOR IIIa
CA2481925A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Therapeutic agent for patients having human fc.gamma.riiia
EP1498490A4 (en) 2002-04-09 2006-11-29 Kyowa Hakko Kogyo Kk PROCESS FOR PREPARING ANTIBODY COMPOSITION
US7691568B2 (en) 2002-04-09 2010-04-06 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Antibody composition-containing medicament
JP4753578B2 (ja) 2002-06-03 2011-08-24 ジェネンテック， インコーポレイテッド 合成抗体ファージライブラリー
US20040101847A1 (en) 2002-11-22 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of Notch2 expression
US20050191302A1 (en) 2002-08-29 2005-09-01 University Of Southampton Treatment for liver disease
US7361740B2 (en) 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
EP1572744B1 (en) 2002-12-16 2010-06-09 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants and uses thereof
WO2004065416A2 (en) 2003-01-16 2004-08-05 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US7871607B2 (en) 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
WO2005035586A1 (ja) 2003-10-08 2005-04-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 融合蛋白質組成物
EP1705251A4 (en) 2003-10-09 2009-10-28 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd PROCESS FOR PRODUCING ANTIBODY COMPOSITION BY RNA INHIBITION OF FUNCTION OF $ G (A) 1,6-FUCOSYLTRANSFERASE
RS55723B1 (sr) 2003-11-05 2017-07-31 Roche Glycart Ag Molekuli koji se vezuju za antigen sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom
BR122018071968B8 (pt) 2003-11-06 2021-07-27 Seattle Genetics Inc conjugado de anticorpo-droga, composição farmacêutica, artigo de manufatura e uso de um conjugado de anticorpo-droga
BRPI0416934A (pt) 2003-11-26 2007-01-16 Health Research Inc método para reduzir a gravidade dos distúrbios das células plasmáticas ou para o tratamento dos distúrbios das células plamáticas, método para reduzir a dose de um agente citotóxico, e, método para reduzir a produção de il-6 ou de vegf pelos fibroblastos que se acham em contato com as células plasmáticas cancerosas
WO2005053742A1 (ja) 2003-12-04 2005-06-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 抗体組成物を含有する医薬
RU2386638C2 (ru) 2004-03-31 2010-04-20 Дженентек, Инк. Гуманизированные анти-тфр-бета-антитела
US7785903B2 (en) 2004-04-09 2010-08-31 Genentech, Inc. Variable domain library and uses
CA2885854C (en) 2004-04-13 2017-02-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-p-selectin antibodies
TWI380996B (zh) 2004-09-17 2013-01-01 Hoffmann La Roche 抗ｏｘ４０ｌ抗體
NZ580115A (en) 2004-09-23 2010-10-29 Genentech Inc Cysteine engineered antibody light chains and conjugates
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
EP2305716B1 (en) * 2004-11-30 2014-10-22 Celldex Therapeutics, Inc. Antibodies directed to gpnmb and uses thereof
AT502055B1 (de) 2005-06-21 2007-11-15 Univ Wien Med Anti tumor medikament
WO2007056441A2 (en) 2005-11-07 2007-05-18 Genentech, Inc. Binding polypeptides with diversified and consensus vh/vl hypervariable sequences
WO2007058987A1 (en) * 2005-11-10 2007-05-24 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying compounds that inhibit notch cleavage
WO2007064919A2 (en) 2005-12-02 2007-06-07 Genentech, Inc. Binding polypeptides with restricted diversity sequences
ES2526204T3 (es) * 2006-01-05 2015-01-08 Genentech, Inc. Anticuerpos anti-EphB4 y métodos para usar los mismos
AU2007249408A1 (en) 2006-05-09 2007-11-22 Genentech, Inc. Binding polypeptides with optimized scaffolds
WO2008057144A2 (en) 2006-05-15 2008-05-15 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Functional negative regulatory domain sequences from human notch1 and 2 and isolated lnr domains from human notch1
US10118970B2 (en) 2006-08-30 2018-11-06 Genentech, Inc. Multispecific antibodies
US20080226635A1 (en) 2006-12-22 2008-09-18 Hans Koll Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof
WO2008086043A2 (en) * 2007-01-10 2008-07-17 Wyeth Methods and compositions for assessment and treatment of asthma
US20100119474A1 (en) * 2007-03-06 2010-05-13 Cornell University Chronic obstructive pulmonary disease susceptibility and related compositions and methods
US8802103B2 (en) 2007-05-15 2014-08-12 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for diagnosing and treating cancer
CN100592373C (zh) 2007-05-25 2010-02-24 群康科技(深圳)有限公司 液晶显示面板驱动装置及其驱动方法
PE20090321A1 (es) 2007-06-04 2009-04-20 Genentech Inc Anticuerpos anti-notch1 nrr, metodo de preparacion y composicion farmaceutica
WO2009089004A1 (en) 2008-01-07 2009-07-16 Amgen Inc. Method for making antibody fc-heterodimeric molecules using electrostatic steering effects
WO2009124931A2 (en) * 2008-04-07 2009-10-15 Ablynx Nv Amino acid sequences directed against the notch pathways and uses thereof
CN104402998A (zh) 2008-07-08 2015-03-11 昂考梅德药品有限公司 分离的抗体
CA2735900A1 (en) 2008-09-19 2010-03-25 Medimmune, Llc Antibodies directed to dll4 and uses thereof
CA2736429A1 (en) 2008-10-01 2010-04-08 Genentech, Inc. Anti-notch2 antibodies and methods of use
EP2385955B1 (en) * 2009-01-12 2020-08-12 CytomX Therapeutics, Inc. Modified antibody compositions, methods of making and using thereof
WO2011041336A2 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using notch antagonists
WO2011063237A2 (en) 2009-11-19 2011-05-26 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Jagged-binding agents and uses thereof
WO2012106529A1 (en) 2011-02-02 2012-08-09 The Trustees Of Princeton University Jagged1 as a marker and therapeutic target for breast cancer bone metastasis
MX2014004074A (es) 2011-10-05 2014-06-05 Genentech Inc Metodo de tratamiento de condiciones del higado utilizando antagonistas de notch2.
CN104661677A (zh) * 2012-06-22 2015-05-27 西托姆克斯治疗公司 抗Jagged 1/Jagged 2交叉反应抗体、可活化的抗Jagged抗体及其使用方法
MX357675B (es) * 2012-08-13 2018-07-18 Genentech Inc Anticuerpos anti-jagged y métodos de uso.
GB201300706D0 (en) * 2013-01-15 2013-02-27 Cancer Rec Tech Ltd Antibody
WO2014141064A1 (en) 2013-03-13 2014-09-18 Novartis Ag Notch2 binding molecules for treating respiratory diseases
BR112015020290A2 (pt) 2013-03-15 2017-10-10 Genentech Inc métodos para tratar um câncer, para prevenir câncer, para inibir proliferação, para tratar terapeuticamente um mamífero, para tratar uma disfunção, para reduzir níveis de proteína spp1, para tratar terapeuticamente um câncer, para tratar um indivíduo e para inibir proliferação celular, artigo, anticorpos e usos
CR20160362A (es) 2014-02-12 2016-09-20 Genentech Inc Anticuerpos anti-jagged1 y metodos de uso
CA2952315A1 (en) 2014-07-11 2016-01-14 Genentech, Inc. Notch pathway inhibition
JOP20190259A1 (ar) * 2017-05-31 2019-10-31 Amgen Inc بروتينات ربط مولد ضد مضادة لـ jagged1

Also Published As

Publication number Publication date
KR20190114046A (ko) 2019-10-08
AU2020203547A1 (en) 2020-06-18
CN106068277B (zh) 2021-08-24
HRP20181359T1 (hr) 2018-10-19
AR099465A1 (es) 2016-07-27
ZA201800315B (en) 2020-05-27
US9518121B2 (en) 2016-12-13
EA201691610A1 (ru) 2016-11-30
TW201613963A (en) 2016-04-16
MA39248B1 (fr) 2018-10-31
EA201691610A8 (ru) 2018-05-31
LT3105253T (lt) 2018-09-10
KR20160118348A (ko) 2016-10-11
PT3105253T (pt) 2018-10-04
EP3105253B1 (en) 2018-06-27
EP3428190A1 (en) 2019-01-16
TW201902515A (zh) 2019-01-16
US20180371098A1 (en) 2018-12-27
TR201810635T4 (tr) 2018-08-27
MX2016010433A (es) 2016-09-22
SI3105253T1 (sl) 2018-10-30
US20150252117A1 (en) 2015-09-10
CA3045124A1 (en) 2015-08-20
HUE039940T2 (hu) 2019-02-28
WO2015123325A1 (en) 2015-08-20
ES2685424T3 (es) 2018-10-09
US20170137531A1 (en) 2017-05-18
RS57608B1 (sr) 2018-11-30
DK3105253T3 (en) 2018-09-03
CA2936565A1 (en) 2015-08-20
IL246736A0 (en) 2016-08-31
PL3105253T3 (pl) 2018-12-31
CN106068277A (zh) 2016-11-02
AU2015217271B2 (en) 2018-10-25
SG10201808259TA (en) 2018-10-30
US11926674B2 (en) 2024-03-12
CL2016002004A1 (es) 2017-01-20
EP3105253A1 (en) 2016-12-21
PH12020550781A1 (en) 2021-08-02
TWI631135B (zh) 2018-08-01
CN111499741A (zh) 2020-08-07
MY176855A (en) 2020-08-24
AU2018229549A1 (en) 2018-10-04
BR112016017986A2 (pt) 2017-10-10
CA2936565C (en) 2020-08-11
PH12016501435A1 (en) 2017-02-06
JP6571115B2 (ja) 2019-09-04
CR20160362A (es) 2016-09-20
AU2015217271A1 (en) 2016-08-11
SG11201606607UA (en) 2016-09-29
US10858440B2 (en) 2020-12-08
JP2017512067A (ja) 2017-05-18
EP3825332A1 (en) 2021-05-26
IL246736B (en) 2020-09-30
PE20161335A1 (es) 2016-12-07
KR102030891B1 (ko) 2019-10-11
US10011661B2 (en) 2018-07-03
US20210206871A1 (en) 2021-07-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA121464C2 (uk) Анти-jagged1 антитіло та способи його застосування
CN111372606B (zh) 增强atp释放作用
US10889651B2 (en) Anti-Ly6E antibodies and methods of use
US20190276544A1 (en) Affinity matured anti-ccr4 humanized monoclonal antibodies and methods of use
UA123774C2 (uk) Антитіла проти c5 та способи застосування
CN107743495A (zh) 抗ceacam6抗体及其用途
CN104011078B (zh) 抗聚泛素抗体及使用方法
UA123826C2 (uk) Антитіла до pd1 та способи їх застосування
UA120753C2 (uk) Біспецифічне антитіло до сd3 та cd20
UA115641C2 (uk) Виділене антитіло, яке зв'язує мезотелін, та імунокон'югат, що його містить
UA120357C2 (uk) Виділене біспецифічне антитіло, що специфічно зв'язується з klb і fgfr1 та спосіб його застосування
CN107849132A (zh) 人源化的和亲和力成熟的针对FcRH5的抗体和使用方法
UA126561C2 (uk) Застосування антитіла проти с5
UA127961C2 (uk) Антитіло до латентного міостатину
CN110267678A (zh) 抗mic抗体和使用方法
UA120247C2 (uk) Антитіло до ceacam5 і його застосування
CN108350505A (zh) 用于测定icos表达的基因标志
TWI658052B (zh) 抗－ｒｓｐｏ抗體及使用方法
AU2012341450A1 (en) Anti-human TROP-2 antibody having antitumor activity in vivo
SG185583A1 (en) Anti-human trop-2 antibody having antitumor activity in vivo
KR20170086540A (ko) T 세포 면역 하위세트를 검출하기 위한 검정 및 그의 사용 방법
UA127731C2 (uk) Антитіло до імуноглобуліновидного транскрипту-7 (ilt7)
UA117608C2 (uk) Спосіб лікування еозинофільного захворювання у пацієнта шляхом застосування біспецифічного анти-il-13/il-17 антитіла
CN104520328A (zh) 抗锯齿蛋白抗体及使用方法
DK2905335T3 (en) Anti-human dlk-1 antibody with anti-tumor activity in vivo