UA117608C2 - Спосіб лікування еозинофільного захворювання у пацієнта шляхом застосування біспецифічного анти-il-13/il-17 антитіла - Google Patents

Спосіб лікування еозинофільного захворювання у пацієнта шляхом застосування біспецифічного анти-il-13/il-17 антитіла Download PDF

Info

Publication number
UA117608C2
UA117608C2 UAA201608853A UAA201608853A UA117608C2 UA 117608 C2 UA117608 C2 UA 117608C2 UA A201608853 A UAA201608853 A UA A201608853A UA A201608853 A UAA201608853 A UA A201608853A UA 117608 C2 UA117608 C2 UA 117608C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
sequence
antibody
amino acid
acid sequence
zeo
Prior art date
Application number
UAA201608853A
Other languages
English (en)
Inventor
Лоурен Ву
Джозеф Р. АРРОН
Майкл Діллон
Девід Ф. Чой
Сью Сон
Крістоф Спісс
Уітні Шац
Original Assignee
Дженентек, Інк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дженентек, Інк. filed Critical Дженентек, Інк.
Publication of UA117608C2 publication Critical patent/UA117608C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6845—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a cytokine, e.g. growth factors, VEGF, TNF, a lymphokine or an interferon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Abstract

Винахід належить до способу лікування еозинофільного захворювання у пацієнта шляхом введення біспецифічного анти-ІL-13/ІL-17 антитіла, мультиспецифічного анти-ІL-13/ІL-17 антитіла, виділеної нуклеїнової кислоти, способу одержання такого антитіла, клітини-хазяїна, імунокон'югата та фармацевтичної композиції, що включають таке антитіло.

Description

ПЕРЕХРЕСНЕ ПОСИЛАННЯ НА СПОРІДНЕНІ ЗАЯВКИ
ІО001) Дана заявка є спорідненою та відповідно до 35 Ш.5.С. 119 претендує на пріоритет попередніх заявок на патент США 61/942823, поданої 21 лютого 2014 р., і 61/983945, поданої 24 квітня 2014 року. Вміст кожної з даних попередніх заявок повністю включений в даній заявці для посилання.
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
ІЇ0002| Заявка, розглянута в даний момент, містить перелік послідовностей, який був поданий за допомогою ЕЕ5-Меб і повністю включений в даній заявці для посилання. Зазначена копія у форматі АЗСІЇ, створена 19 лютого 2015 р., має ім'я Р»70О7К1-УМО Б. і розмір 226329 байтів.
ОБЛАСТЬ ТЕХНІКИ
І0003| Даний винахід відноситься до біспецифічних анти-1Ї -13/І -17 антитіл, композицій, що включають дані біспецифічні антитіла, а також способів їх застосування.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
І0004| Астма є комплексним захворюванням з все більш зростаючим поширенням по усьому світу. Крім інших симптомів повідомляється про еозинофільне запалення в дихальних шляхах пацієнтів з астмою. Патофізіологія даного захворювання характеризується мінливим ускладненням дихання, запаленням дихальних шляхів, гіперсекрецією слизу і субепітеліаальним фіброзом. У клінічномв плані у пацієнтів можуть бути присутні кашель, хрипи і задишка.
Незважаючи на те, що багато пацієнтів зазнають підходящого лікування із застосуванням доступних на даний час видів лікування, деякі пацієнти з астмою мають стійке захворювання незважаючи на застосування сучасних видів лікування.
І0005| В рамках ряду досліджень розглядався ІЇ/-13, а також його рецептори, в плані патогенезу астми і алергії (див., наприклад, УМіЇ5-Кагр, 2004, Іттипої. Немху. 202, 175-190;
Вгіднініпо еї аї., 2010, Сііп. Ехр. АПегду 40, 42-49; РіпкеІтап еї аї., 2010, У Іттипої! 184, 1663- 1674; Маєз єї а!., 2012, Ат. У). Везріг. СеїЇ Мої. Вісі. 47, 261-270; 5івїіпКе апа Вогізн, 2001, Вегзріїг.
Вез. 2, 66-70). 1-13 зв'язується із двома рецепторами, один з яких являє собою гетеродимер ЇЇ - 4 рецептора альфа (1/-4Ка) і І/-13 рецептор альфа-1 (1/-13Ка1), а інший являє собою одноланцюговий рецептор, що складається з 1-13 рецептора альфа-2 (І -13Каг).
Зо Поліморфізми генів 1І--13 і ІІ -4Ка пов'язані з астмою і алергією, включаючи такі властивості, як визначені рівні ІДЕ, перевагу атопії і важкість астматичного захворювання. Крім того, експресія
І/-13 ї його рецепторів є підвищеною при астмі і інших алергійних захворюваннях. Більше того, нейтралізація або брак ІЇ/-13 і його рецепторів знижує важкість захворювання в рамках доклінічних моделей астми.
ІЇ0006| На ринку або в процесі розробки присутній ряд лікарських засобів для лікування астми. Однією з численних мішеней в рамках лікування астми є ІЇ/-13. І/-13 являє собою плейотропний цитокін ТН2, що продукується активованими Т-клітинами, МКТ-клітинами, базофілами, еозинофілами і гладкими клітинами, який бере активну участь у патогенезі астми в рамках доклінічних моделей. Раніше були описані антагоністи І--13, включаючи анти-1Ї-13 антитіла. Див., наприклад, публікацію міжнародної патентної заявки УМО 2005/062967. Дані антитіла також були розроблені в якості лікарських засобів для людей. Нещодавно деякі дослідження продемонстрували клінічну активність моноклональних антитіл проти 1-13 в рамках лікування астми (див., наприклад, Соїтеп еї аї., 2011, М. Епоі. У. Мед. 365, 1088-1098;
Саймгеаи еї аї., 2011, Ат. У). Везріг. Ст. Саге Мед. 183, 1007-1014; Іпдгат апа Кгай, 2012, 9.
АПегду Сіїп. Іттипої. 130, 829-42; Мерр, 2011, Маї Віоїєснпої 29, 860-863). Серед них був присутній лебрикізумаб, що представляє собою гуманізоване Ід04 антитіло, що нейтралізує активність 1-13, який поліпшував функцію легенів в астматиків, що мають симптоми захворювання незважаючи на лікування в більшості випадків інгальованих кортикостероїдами і або бета 2-агоністом адренергетичних рецепторів (Соггеп еї аїІ., 2011, М. Епо! У. Мей. 365, 1088-1098).
ІЇ0007| Зростаюча кількість ознак свідчить про те, що астма являє собою гетерогенне захворювання, яке може залучати декілька шляхів. Наприклад, було виявлено, що експресія ІІ - 17А ї ІС-17Р є асоційованою з важкою астмою. Крім того, як І-17А, так їі І/-17Е були ідентифіковані як діючі фактори прогресування і патологізації різних запальних і аутоїмунних захворювань у людини і в рамках моделей захворювань людини в мишей. Зокрема, 1--17А і І - 17Е були ідентифіковані в якості основних ефекторних цитокінів, які індукують запальні реакції і у такий спосіб беруть участь в ряді аутозапальних захворювань. 0008) І--17А (спочатку називаний СТІ А-8, іноді називаний у даній області ІІ -17) являє собою первинний/головний член сімейства цитокінів ІЇ-17. Крім 1Ї/-17А, члени сімейства 60 цитокінів ІЇ-17 у даний час включають білки 1І--1 78, ІІ -176, 1 -170, І -17Е (також називані 1І--25) і
І/-17Р, всі з яких мають ту саму консервативну С-термінальну ділянку і різні М-термінальні сегменти. 0009) І--17А і 1--17Е являють собою два найбільш тісно зв'язані члени даного сімейства як в плані послідовності, так і біологічних властивостей. ІІ -17Е має 55 95 ідентичності послідовності відносно І-17А на амінокислотному рівні. Як ІЇ/-17А, так ї І/-17Р, секретуються у вигляді зв'язаних дисульфідним зв'язком гомодимерів або у вигляді гетеродимера, чий сигнал, переданий через гетеродимерний рецептор, складався з ІЇ/-17КА і І/-17КС. Рецептор 1-17 експресується на різних підмножинах Т-клітин (таких як ТП17 СО4-«Т-клітини).
ЇО010| Незважаючи на припущення про те, що І/-17 може відігравати роль в сенсі виникнення астми, окремий вплив гомодимера 1І--17А, гомодимера 1--17Е або гетеродимерів ЇЇ-- 17А/Е на гіперчутливість дихальних шляхів залишається невідомим. МекКіпіеу еї аї., 2008, 3.
Ітітипої., 181:4089. Клінічні випробування терапевтичних антитіл на основі антагоністів, які спрямовані проти шляху ІЇ-17 для лікування астми, призвели до негативних результатів.
Наприклад, Кігеїеп еї а. повідомляє про те, що терапевтичне анти-1ІЇ-17А антитіло не змогло продемонструвати лікувальний ефект у здорових добровольців з індукованим озоном нейтрофільним лейкоцитозом дихальних шляхів, що представляють собою модель нейтрофільного запалення дихальних шляхів для тестування безпеки і ефективності протизапальних ліків на ранньому етапі розробки. Кігєїеп єї а. 2013, Ецтореап ВРезрігаюгу
Уошцтаї, 41239, Зспеегеп5 єї аї., 2013, Сіїпісаї 5 Ехрегітепіа! АПегду 44:38-46. Крім того, результати нещодавніх клінічних випробувань показали, що терапевтичне анти-1ІЇ-17В8А антитіло людини бродалумаб не продукувало лікувальний ефект у суб'єктів з астмою в ступені від помірного до важкого в рамках випадкового подвійного сліпого контрольованого плацебо дослідження. Див. Ви55е еї аї., 2013, Ат. у). Кезріг. Ст. Саге Меа. 188:1294-1302. У нещодавній клінічній оглядовій статті розглядалося те саме дослідження бродалумабу і було зазначено, що навіть субфенотипування за рахунок присутності нейтрофілів або еозинофілів в крові не забезпечувало поліпшену ідентифікацію групи учасників із чутливістю. Рай еї аї., У. АПегду Сіїп.
Іттипоіоду, 2014, 135:299. П/-17КА не тільки являє собою компонент рецептора 1І-17АА, гетеродимера ЕЕ ї АЕ, але також компонент рецептора 1-25, який відіграє важливу роль при
ТНІ запаленні і індукує експресію 1-13. Див. Татасбстні єї аї. 2006, ІпіІ. Агопімез АїПегду апа Ітипої. 140 (додаток 1):59. Таким чином, невідомо, чи може блокада шляхів ІІ-17А і Е призводити до ефективного лікування астми. 0011 У УМО 2013/102042 описано декілька антитіл з подвійним варіабельним доменом (МО) проти 11-13 ї 1/-17А їі охарактеризована афінність і пов'язані з нейтралізацією іп міго властивості анти-ІЇ.-13/ЛІ-17 ОМО антитіл. В УМО 2013/102042 пропонується застосування біспецифічних ОМО антитіл для лікування численної кількості захворювань, наприклад інфекційних захворювань, аутоїмунних захворювань, астми, ревматоїдного артриту, системної червоної вовчанки, розсіяного склерозу, сепсису, неврологічних захворювань, пошкоджень спинного мозку і онкологічних захворювань. Проте, не були продемонстровані доклінічні результати або клінічна ефективність на основі застосування будь-якого одного з анти- ІІ -13З/ЛІ - 17 МО антитіл або шляхом підтвердження концепції використання в якості мішеней як 1-13, так і 1--17 при даних захворюваннях.
Ї0012| Таким чином, пацієнти з астмою в ступені від помірного до важкого все ще потребують альтернативних способів лікування. Таким чином, існує потреба в поліпшених терапевтичних способах лікування астми і в удосконалених методах розуміння того, як слід лікувати пацієнтів з астмою. 0013) Інше запальне захворювання дихальних шляхів являє собою ідіопатичний фіброз легенів (ІФЛ), який являє собою рестриктивне захворювання легенів, що характеризується прогресуючим інтерстиціальним фіброзом легеневої паренхіми, що вражає приблизно 100000 пацієнтів у Сполучених Штатах (Каднпи еї аІ., Ат У Кезріг Стї Саге Меа 174:810-816 (2006)).
Зазначений інтерстиціальний фіброз, пов'язаний з ІФЛ, призводить до прогресуючого зниження функції легенів, що призводить до смерті внаслідок дихальної недостатності у більшості пацієнтів. Медіана виживаності з моменту постановки діагнозу складає 2-3 роки (Каднпи еї аї.,
Ат У Везріг Стії Саге Мей 183:788-824 (2011)). Етіологія і ключові молекулярні і патофізіологічні фактори ІФЛ невідомі. Єдиний вид лікування, що забезпечує пролонговану виживаність у пацієнтів з ІФЛ, являє собою трансплантацію легенів (Трарбиї еї аї!., АппаїЇ5 ої іптетаї! теадісіпе 151:767-774 (2009)). Однак трансплантація легенів пов'язана зі значною смертністю. Також, не всі пацієнти з ІФЛ є підходящими кандидатами для трансплантації, при цьому має місце відносна нестача підходящих донорських легенів. Незважаючи на численні спроби, на сьогоднішній день жодні ліки не були визначені в якості таких, що забезпечують значну бо пролонгацію виживаності в рамках випадкового контрольованого плацебо інтервенційного випробування на пацієнтах з ІФЛ, незважаючи на те, що деякі види втручання, як виявилося, сповільнюють швидкість зниження функції легенів у деяких пацієнтів (Кадни еї аї., Ат .) Кезріг
Стіїї Саге Мей 183:788-824 (2011); Віснеїді еї аІ., Те Мем Епаіапа 9. ої Мей. 365:1079-1087 (2011)).
І0014| Пацієнти з ІФЛ як і раніше потребують альтернативних способів лікування. Таким чином, існує потреба в поліпшених терапевтичних способах лікування ІФЛ їі в удосконалених методах розуміння того, як слід лікувати пацієнтів з ІФЛ.
ІЇ0015| Всі наведені в даній заявці посилання, включаючи патентні заявки і публікації, повністю включені в даній заявці для посилання в будь-яких цілях.
СУТНІСТЬ ВИНАХОДУ
ІЇ0016| В одному аспекті винахід відноситься до способів лікування із застосуванням мультиспецифічних анти-1ІЇ-13/ЛІ/-17 антитіл, зокрема біспецифічних антитіл, які зв'язують і інгібують 1-13 і 1--17АА, АБ і ЕЕ, і мультиспецифічних анти-ІЇ -13/І -17 антитіл. Описаний в даній заявці винахід частково заснований на відкритті поліпшеної терапії для астми із застосуванням біспецифічних анти-ІЇ-13/І/-17 антитіл. У певних варіантах здійснення астма являє собою еозинофільну астму. У певних варіантах здійснення біспецифічне анти-1Ї-13/ЛІ/-17 антитіло зберігає формат повнорозмірного антитіла дикого типу, але відрізняється від моноспецифічного бівалентного антитіла дикого типу в сенсі того, що дане біспецифічне антитіло являє собою моновалентний партнер зі зв'язування щодо кожної мішені. У той самий час дане біспецифічне антитіло зберігає аналогічну афінність і ефективність щодо кожної мішені в порівнянні з кожним вихідним моноспецифічним бівалентним антитілом. У певних варіантах здійснення винахід також відноситься до несподіваного відкриття того, що одержання даного біспецифічного анти-
І/-13/-17 антитіла є складним, як далі в даній заявці описано.
ІЇ0017| В одному аспекті винаходу описані в даній заявці антитіла передбачені для застосування в якості лікарського засобу. У деяких варіантах здійснення описані в даній заявці антитіла передбачені для застосування при одержанні лікарського засобу для лікування еозинофільного захворювання, опосередковуваного ІЇ-13 захворювання, опосередковуваного
І/-17 захворювання, і/або респіраторного захворювання. У деяких варіантах здійснення описані в даній заявці антитіла передбачені для застосування при лікуванні еозинофільного
Зо захворювання, опосередковуваного 1Ї-13 захворювання, опосередковуваного /- 11-17 захворювання, і/або респіраторного захворювання. У деяких варіантах здійснення передбачене застосування описаних в даній заявці антитіл при виробництві лікарського засобу для лікування еозинофільного захворювання, опосередковуваного ІЇ-13 захворювання, опосередковуваного
І/-17 захворювання, і/або респіраторного захворювання. У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування еозинофільного захворювання, опосередковуваного 1-13 захворювання, опосередковуваного 1-17 захворювання, і/або респіраторного захворювання в суб'єкта, що включають введення суб'єкту ефективної кількості описаного в даній заявці антитіла. У деяких варіантах здійснення описані в даній заявці антитіла передбачені для застосування при лікуванні еозинофільного захворювання і нейтрофільного захворювання. У певних варіантах здійснення описані в даній заявці антитіла передбачені для застосування при лікуванні еозинофільної астми, нейтрофільної астми, еозинофільної і нейтрофільної астми, змішаної астми і/або змішаної гранулоцитарної астми. У певних варіантах здійснення передбачені способи лікування еозинофільного захворювання і нейтрофільного захворювання, що включають введення суб'єкту, який має в цьому потребу, ефективної кількості описаного в даній заявці антитіла У певних варіантах здійснення передбачені способи лікування еозинофільної астми, нейтрофільної астми, еозинофільної і нейтрофільної астми, змішаної астми і/або змішаної гранулоцитарної астми, що включають введення суб'єкту, який має в цьому потребу, ефективної кількості описаного в даній заявці антитіла. 0018) У певних варіантах здійснення пацієнт, що страждає еозинофільним запаленням або захворюванням, може мати підвищений рівень одного або декількох еозинофільних сигнатурних генів. У певних варіантах здійснення пацієнт є позитивним за еозинофільним запаленням (ЕЇпІР), що демонструє підвищені рівні сироваткового періостину і/або підвищені рівні одного або декількох з СЗЕ1 (колонієстимулюючий фактор 1, Епіге7 ІЮ 1435), МЕІ!52 (Меї5 гомеобокс 2,
Епіге ІО 4212), ІСАЇ 512 (лектин, галактозид-зв'язуючий, розчинний, 12, Епіге? ІЮ 85329), ІБО1 (індоламін-2,3-діоксигеназа 1, Епіге7 ІЮ 3620), ТНВ5А (тромбоспондин 4, Епіге; ІЮ 7060), ОЇ! ІС2 (фактор транскрипції олігодендроцитів 2, Епігей І! 10215), АГОХ15 (арахідонат-15- ліпоксигеназа, Епіге ІО 246), 5ІСІ ЕС8 (зв'язуючий сіалові кислоти Ід-подібний лектин 8, Епіге7
ІЮО 27181), СС1І23 (хемокін (С-С мотив) ліганд 23, Епіге7 ІЮ 6368), РУКОХО2 (домен 2 піридиннуклеотид-дисульфід-оксидоредуктази, Епіге7 ІЮ 84795), НЗОЗВ7 (гідрокси-дельта-5- 60 стероїд дегідрогеназа, З бета- і стероїд дельта-ізомераза 7, Епіге7 ІЮ 80270), 5ОКО
(сорбітолдегідрогеназа, Епіге ІО 6652), А5В2 (анкіриновий повтор і 5ХОС5-боксмісткий 2, Епіге/
ІЮ 51676), САСМОб (кальцієвий канал, вольтаж-залежний, гамма-суб'одиниця 6, Епіге; ІЮ 59285), ОРМ44 (б білок-спарений рецептор 44, Епіге ІЮ 11251), МСАТЗ (манозил (бета- 1,4-)- глікобілок бета-1,4-М-ацетилглюкозамінтрансфераза, Епіге7 ІЮ 4248), 5І С47А1 (транспортер сімейства 47 компонентів розчину, член 1, Епіге7 ІО 55244), ЗМРОЗ (сфінгомієлінфосфодіестераза 3, нейтральна мембрана, Епігез ІЮ 55512), ССЗ (хемокін (С-С мотив) рецептор З, Епіге7 ІО 1232), СІ С (кристалічний білок Шарко-Лейдена, Епіге ІО 1178),
СУРАН12 (цитохром Р450, сімейство 4, субсімейство Е, поліпептид 12, Епіге ІЮ 66002), і АВТВ2 (анкіриновий повтор і ВТВ (РОЇ) домен-місткий 2, Епіге7 ІЮ 25841) у порівнянні з контролем.
Альтернативно або додатково, пацієнт може демонструвати підвищені рівні одного або декількох з нейтрофільних сигнатурних генів, таких як СХСКІ1, СХОСК2, нейтрофільна еластаза, або СЕАСАМб. Відповідно, у певних варіантах здійснення передбачені в даній заявці способи також включають етап вимірювання рівнів сироваткового періостину і/або одного або декількох еозинофільних сигнатурних генів або одного або декількох нейтрофільних сигнатурних генів у пацієнта. У певних варіантах здійснення передбачені в даній заявці способи також включають етап вимірювання рівнів сироваткового періостину у пацієнта. У певних варіантах здійснення рівень сироваткового періостину являє собою Загальний Періостин. У певних варіантах здійснення передбачені в даній заявці способи також включають етап вимірювання рівнів еозинофілів в крові у пацієнта. У певних варіантах здійснення передбачені в даній заявці способи також включають етап вимірювання рівнів нейтрофілів в крові у пацієнта.
ІЇ0019| У деяких подібних варіантах здійснення спосіб також включає введення суб'єкту інгібітора шляху ТН2. У деяких варіантах здійснення інгібітор шляху ТНАІ2 інгібує, щонайменше, одну мішень, вибрану з ІТК, ВТК, 1-9, /-5, 11-13, 1-4, ОХ401, Т5І Р, ІІ -25, 1-33, ЧЕ, 1-9 рецептора, І--5 рецептора, 1-4 рецептора альфа, 1-13 рецептор альфа-1 (І/-13кКа1), ІС-13 рецептор альфа-2 (І, -13Каг2), ОХ40, Т5І Р-В, 1 -7К альфа, ІІ. -1788, 512, ССВЗ, ССВ4, СВТНаг,
Ес епсилон КІ, Ес епсилон КП/СО23, РіІар, Зук-кінази; ССК4, ТІ КУ, ССЗ, ІІ 5, ІІ З, ї ЗМ-СЗЕ. У деяких варіантах здійснення спосіб також включає введення суб'єкту інгібітора шляху ТНІ17. У деяких варіантах здійснення інгібітор шляху ТНІ17 інгібує, щонайменше, одну мішень, вибрану з
І/-18, 1-6, гомодимера 1--17А, гомодимера 1І-17Е, гомодимера 1--17АБЕ, ІІ -22, 1-21, ТОарБ-В, І -
Зо 23, 1-26, 1-18 рецептора, 1-6 рецептора, 1-17 рецептора, 1 -17ВА, ІІ. -178С, І -2281, ІІ1082,
І/-21 рецептора, ТОБЕ-В рецептора, І/-26 рецептора і І/-23 рецептора (1/-12КБ1, І/23К). У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування астми в ступені від помірного до важкого. У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування ідіопатичного фіброзу легенів. У певних варіантах здійснення передбачені способи лікування атопічного дерматиту. У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування суб'єкта з високим рівнем сироваткового періостину. У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування астми, що супроводжується високим рівнем періостину.
ІЇ0020| У будь-якому з описаних в даній заявці варіантів здійснення еозинофільне захворювання може бути вибране з астми (включаючи аспіринчутливу астму), атопічної астми, атопічного дерматиту, алергійного риніту (включаючи сезонний алергійний риніт), неалергічного риніту, астми, важкої астми, хронічної еозинофільної пневмонії, алергійного бронхолегеневого аспергілезу, глютеїнової хвороби, синдрому Черджа-Строса (вузелковий періартериїт плюс атопія), синдрому еозинофільної міалгії, гіпереозинофільного синдрому, набряклих реакцій, включаючи епізодичний ангіоневротичний набряк, гельмінтних інфекцій, онхоцеркального дерматиту і асоційованих з еозинофілами шлунково-кишкових розладів, еозинофільного езофагіту, еозинофільного гастриту, еозинофільного гастроентериту, еозинофільного ентериту і еозинофільного коліту, назального мікрополіпозу і поліпозу, непереносимості аспірину, астми і обструктивного синдрому апное під час сну, хронічної астми, хвороби Крона, склеродермії і ендоміокардіального фіброзу, раку (наприклад, мультиформної гліобластоми), неходжкінської лімфоми (НХЛ), атопічного дерматиту, алергійного риніту, астми, фіброзу, запального захворювання кишківника, фіброзу легені (включаючи ідіопатичний фіброз легені (ІФЛ) і вторинного щодо склерозу фіброзу легені), ХОХЛ і фіброзу печінки. У деяких варіантах здійснення опосередковуване 1-13 захворювання вибране з атопічного дерматиту, алергійного риніту, астми, фіброзу, запального захворювання кишківника, хвороби Крона, респіраторного захворювання, запальних захворювань легенів, фіброзу легені, ідіопатичного фіброзу легені (ІФЛ), хронічної обструктивної хвороби легенів (ХОХЛ), фіброзу печінки, раку, гліобластоми і неходжкінської лімфоми. У деяких варіантах здійснення нейтрофільне захворювання або опосередковуване 1-17 захворювання може бути вибране з атопічного дерматиту, алергійного риніту, астми, фіброзу, запального захворювання кишківника, хвороби Крона, запальних бо захворювань легенів, фіброзу легені, ідіопатичного фіброзу легені (ІФЛ), хронічної обструктивної хвороби легенів (ХОХЛ), фіброзу печінки, респіраторного захворювання, раку, гліобластоми і неходжкінської лімфоми. У будь-якому з описаних в даній заявці варіантів здійснення респіраторне захворювання може бути вибране з астми, алергійної астми, неалергічної астми, бронхіту, хронічного бронхіту, хронічної обструктивної хвороби легенів (ХОХЛ), емфіземи, викликаної палінням емфіземи, запалення дихальних шляхів, муковісцидозу, фіброзу легені, алергійного риніту і бронхоектазії. 00211 У деяких варіантах здійснення передбачене описане в даній заявці мультиспецифічне антитіло для застосування при лікуванні астми або респіраторного захворювання. У деяких варіантах здійснення астма являє собою астму від помірного до важкого ступеня. У певних варіантах здійснення астма являє собою астму, що супроводжується високим рівнем Тп2. У певних варіантах здійснення астма являє собою астму, викликану ТП2. У деяких інших варіантах здійснення астма являє собою еозинофільну астму. У певних варіантах здійснення астма являє собою алергійну астму. У деяких варіантах здійснення суб'єкт був визначений в якості позитивного за еозинофільним запаленням (ЕІР). У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має підвищені рівні, щонайменше, одного з еозинофільних сигнатурних генів у порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У певних варіантах здійснення астма являє собою астму, що супроводжується високим рівнем періостину. У певних варіантах здійснення астма являє собою астму, що супроводжується високим рівнем еозинофілів. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має високий рівень сироваткового періостину. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має вік вісімнадцять років або більше. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має підвищений рівень сироваткового періостину в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має рівень сироваткового періостину 20 нг/мг або більше. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має рівень сироваткового періостину 25 нг/мг або більше. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має рівень сироваткового періостину 50 нг/мг або більше. У певних варіантах здійснення контроль або контрольний рівень сироваткового періостину складає 20 нг/мл, 25 нг/мл або 50 нг/мл. У певних варіантах здійснення рівень сироваткового періостину являє собою Загальний Періостин. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має підвищені рівні еозинофілів
Зо в крові в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має підвищені рівні еозинофілів у мокротинні в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має щонайменше, 150/мкл, щонайменше, 200/мкл, щонайменше, 250/мкл, щонайменше, 300/мкл або, щонайменше, 400/мкл. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має підвищену експресію або рівні, щонайменше, одного, щонайменше, двох, щонайменше, трьох, щонайменше, чотирьох або всіх з наступних генів: СХСІ1, 8, СХСІ2, СХСІЗ і С5ЕЗ3, у порівнянні з контрольним суб'єктом. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має високий рівень сироваткового періостину і підвищену експресію або рівні, щонайменше, одного, щонайменше, двох, щонайменше, трьох, щонайменше, чотирьох або всіх з наступних генів: СХСІ1, ІІ 8,
СХСІ2, СХСІЗ ії СЕЗ, у порівнянні з контрольним суб'єктом. У певних варіантах здійснення суб'єкт має високий рівень сироваткового періостину і високий рівень сироваткового або плазмового СХСІ1. У певних варіантах здійснення суб'єкт має високий рівень сироваткового періостину і високий рівень сироваткового або плазмового ІІ 8. У певних варіантах здійснення суб'єкт має високий рівень сироваткового періостину і високий рівень сироваткового або плазмового СХСІ2. У певних варіантах здійснення суб'єкт має високий рівень сироваткового періостину і високий рівень сироваткового або плазмового СХСІ3. У певних варіантах здійснення суб'єкт має високий рівень сироваткового періостину і високий рівень сироваткового або плазмового С5ЕЗ3. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має підвищений рівень сироваткового періостину і/або еозинофілів в крові і/або нейтрофілів в крові у порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У деяких варіантах здійснення здійснюють вимірювання або визначення Загального Періостину. У деяких варіантах здійснення підвищений рівень сироваткового періостину відповідає, щонайменше, 20 нг/мл, щонайменше, 25 нг/мл, щонайменше, 30 нг/мл, щонайменше, 40 нг/мл або, щонайменше, 50 нг/мл Загального
Періостину. У певних варіантах здійснення Загальний Періостин вимірюють або визначають за допомогою будь-яких способів, відомих у даній області, наприклад ЕГІ5А. У деяких варіантах здійснення Загальний Періостин визначають за допомогою описаного в даній заявці аналізу Е4 або ЕІесзузф). (0022) У деяких варіантах здійснення астма не контролюється кортикостероїдом. У деяких варіантах здійснення кортикостероїд являє собою інгальований кортикостероїд. У деяких бо варіантах здійснення інгальований кортикостероїд вибраний з дипропіонату беклометазону
(наприклад, Омаг?т), будесоніду (наприклад, РиїЇтісогіФф), будесоніду/дигідрату формотеролу фумарату (наприклад, Зутрбісогі), флунізоліду (наприклад, АегорідФ), пропіонату флутиказону (наприклад, РіомепіФ), ГІопазеФ)), пропіонату флутиказону і салметеролу (наприклад, АамаїгФ),, і ацетоніду триамцинолону (наприклад, А7тасогіФ)). У деяких варіантах здійснення суб'єкт також зазнає лікування другим контролюючим засобом. У деяких варіантах здійснення другий контролюючий засіб являє собою бронходилататор тривалої дії (АВО). У деяких варіантах здійснення ГАВО вибраний з бета-2 агоніста тривалої дії (АВА), антагоніста рецептора лейкотриєнів (ТКА), мускаринового антагоніста тривалої дії (ГАМА), теофіліну або пероральних кортикостероїдів (0С5). У деяких варіантах здійснення ГАВО вибраний з будесоніду/дигідрату формотеролу фумарату (наприклад, ЗутбрісопФе)), пропіонату флутиказону і салметеролу (наприклад, АамаїгФ)), тартрату арформотеролу (наприклад, Вгомапат), фумарату формотеролу (наприклад, Еогадік, РегіогітізК), і ксинафоату салметеролу (наприклад,
ЗегемепіФ). У певних варіантах здійснення спосіб лікування астми включає введення пацієнту описаного в даній заявці мультиспецифічного анти-1ІЇ-13/І/-17 антитіла і також включає введення пацієнту кортикостероїду. 0023) В одному аспекті винаходу передбачені мультиспецифічні антитіла, при цьому дані антитіла включають першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла включає перший МНЛ// фрагмент, який специфічно зв'язує ІІ -17, а друга половина молекули антитіла включає другий МН/Л/. фрагмент, який специфічно зв'язує ІЇ/-13. У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла не зв'язує ІЇ/-13, а друга половина молекули антитіла не зв'язує ІЇ/-17. У деяких варіантах здійснення зазначене в даній заявці мультиспецифічне антитіло зв'язується з І -17АА і 1С-17АР, інгібує індуковану ІП/-17АА їі ІЇ/-17АЕ активність, і/або інгібує індуковану 1-13 активність. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло також зв'язується з ІІ - 17ЕБ. У певних варіантах здійснення зазначене в даній заявці мультиспецифічне антитіло зв'язується з ІЇ/-17АА ії ІС-17АРК, інгібує індуковану І/-17АА і І--17АЕ активність, і інгібує індуковану 1-13 активність. У певних приватних варіантах здійснення зазначене в даній заявці мультиспецифічне антитіло зв'язується з ІЇ-17АА, ІІ -17АЕ, і 1-17 РЕ, інгібує індуковану 1І--17АА,
І--17АБК, їі 1--17ЕЕ активність, і інгібує індуковану ІЇ-13 активність. У певних даних варіантах
Зо здійснення біспецифічне анти-ІЇ-13/Л/-17АА, АБ і ЕЕ антитіло переважним чином блокує активність, що спільно індукується ІЇ/-17А і Е цитокінами, на відміну від активності, що індукується 1І--17А і 1 -17Е окремо. У деяких варіантах здійснення індукована ІІ -17АА активність являє собою індуковану ІІ -17АА генну експресію і/або проліферацію клітин іп мімо або іп міго. У деяких варіантах здійснення індукована ІЇ/-17АЕ активність являє собою індуковану 1/-17АЕ генну експресію і/або проліферацію клітин іп мімо або іп міго. У деяких варіантах здійснення індукована 1-13 активність являє собою індуковану 1-13 генну експресію і/або проліферацію клітин іп мімо або іп міго. У деяких варіантах здійснення зазначене в даній заявці мультиспецифічне антитіло зв'язується з І/-17АА, ІЇ/-17АЕ, і І/-17ЕБ. У деяких варіантах здійснення зазначене в даній заявці мультиспецифічне антитіло також інгібує індуковану ІЇ-- 17ЕЕ активність. У деяких варіантах здійснення індукована ІЇ-17ЕЕ активність являє собою індуковану І--17ЕЕ генну експресію і/або проліферацію клітин іп мімо або іп міго. У деяких варіантах здійснення зазначене в даній заявці мультиспецифічне антитіло не інгібує зв'язування
І/-13 з І-13Ка1. (0024) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому перший МН/Л/І. фрагмент включає (а) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 42 або 5ЕО ІЮ МО: 44, НМК-І3, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮО МО: 47,
НМУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮ МО: 41, 43, 80, 81, і 114; або (Б) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 54, НМК-І3, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 57, і НМАК-Н2, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО ІЮ МО: 53; або (с) НМЕК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО І МО: 63, НМВ-І 3, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮО МО: 66, і НМАК-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 62. 0025) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому перший МН/Л/І. фрагмент включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 40, НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮО МО: 41, 43, 80, 81, і 114, ї НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮО МО: 44; або (б) НУВ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 51, НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 52 або 5ЕО ІО МО: 53, і НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 54; або (с) НМЕК-НІ, що включає амінокислотну 60 послідовність 5ЕО ІЮО МО: 61, НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 62,
і НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЖЕО ІЮ МО: 63. (0026) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому перший МН/Л/І. фрагмент включає (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 45, НУВ-1І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 46, і НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 47; або (5) НМК-/1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 55, НУМВ-12, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 56, і
НУВ-І3, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІО МО: 57; або (с) НМЕ-І1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 64, НМК-12, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 65, і НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 66.
І0027| У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому перший МН/Л/І. фрагмент включає (а) НМАК-НІ1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 40, НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮО МО: 41, 43, 80, 81, і 114, НМВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮ МО: 44, НМЕА-
Ї1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 45, НМК-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 46, і НМК-І З, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮО МО: 47; або (Б) НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 51, НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 52 або 5БО ІЮ МО: 53, НУМВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 54, НМК-11, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 55, НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 56, і НМЕ-ІЗ, що включає амінокислотну послідовність 5БЕО ІЮ МО: 57; або (с) НУВ-НІ, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 61, НМЕК-Н2, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО І МО: 62, НМВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 63, НМВ-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 64, НМК-12, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 65, і НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 66. 0028) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, що включає першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла включає перший МН/Л/І. фрагмент, який специфічно зв'язує ІС -17, а друга половина молекули антитіла включає другий МНЛ/Г. фрагмент, який специфічно зв'язує ЇЇ - 13, при цьому перший МН/// фрагмент включає НМК-НІ, що включає амінокислотну
Ко) послідовність ЗЕО ІЮ МО: 40, НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО
ІО МО: 41, 43, 80, 81, і 114, НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 560 ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮ МО: 44, НМК-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 45, НМА-12, що включає амінокислотну послідовність БЕСО ІО МО: 46, ії НМК-І3, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮО МО: 47. У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла не зв'язує ІЇ/-13, а друга половина молекули антитіла не зв'язує ІЇ/-17. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло являє собою біспецифічне анти-ІЇ -1 ЗЛІ - 17 антитіло, яке являє собою моновалентний елемент, що зв'язується з ІІ-13, і моновалентний елемент, що зв'язується з ІЇ-17. У певних варіантах здійснення біспецифічне анти-1Ї -1 ЗЛІ -17 антитіло являє собою моновалентний елемент, що зв'язується з ІЇ-13, ії моновалентний елемент, що зв'язується з ІІ-17АА, АБ, і ЕЕ. 0029) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому перший МН/Л// фрагмент включає (а) () послідовність МН, що має щонайменше, 95 95, щонайменше 96 95, щонайменше 97 95, щонайменше 98 95, або, щонайменше 99 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з «ЕО ІЮ МО: 37, 39, 82, 83, і 115; або (ії) послідовність МІ, що має щонайменше, 95 96, щонайменше 96 95, щонайменше 97 95, щонайменше 9895, або щонайменше 99 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ФЕО ІЮ МО: 38; або (ії) послідовність МН як в (ї) і послідовність МІ як в (ії); або (Б) () послідовність МН, що має щонайменше, 9595, щонайменше 9695, щонайменше 97 965, щонайменше 98 95, або, щонайменше, 99 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної
БО послідовності ЗЕО ІЮО МО: 48 або 50; або (ії) послідовність Мі, що має щонайменше, 95 95, щонайменше, 9695, щонайменше, 9795, щонайменше, 9895, або, щонайменше, 99 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕБЕО І МО: 49; або ((іїї) послідовність МН як в (ї) і послідовність МІ як в (її); або (с) (ї) послідовність МН, що має щонайменше, 9595, щонайменше, 9695, щонайменше, 9795, щонайменше, 9895, або, щонайменше, 99 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності БЕО ІЮ МО: 58; або (ії) послідовність Мі, що має щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 95, щонайменше, 97956, щонайменше, 98595, або, щонайменше, 9995 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІО МО: 59 або 60; або (ії) послідовність МН як в (Її і послідовність МІ. як в (ії). бо І0030| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший МН//.
фрагмент, що включає послідовність МН, що має щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 95, щонайменше, 97 95, щонайменше, 98 95, або, щонайменше, 99 95 ідентичність послідовності щодо послідовності, вибраної з БЕО ІЮ МО: 37, 39, 48, 50, 58, 82, 83, і 115. У деяких варіантах здійснення перший МН/МІ. фрагмент включає послідовність МІ, що має щонайменше, 95 95, щонайменше, 9695, щонайменше, 9795, щонайменше, 9895, або, щонайменше, 99 95 ідентичність послідовності щодо послідовності, вибраної з БЕО ІЮ МО: 38, 49, 59, і 60. У деяких варіантах здійснення перший УНЛ/І. фрагмент включає (а) послідовність УН, вибрану з ЗЕО ІЮ
МО: 37, 39, 82, 83, і 115, і послідовність МІ ЗЕО ІЮ МО: 38; або (б) послідовність МН 5ЕО ІО МО: 48 або 50, і послідовність МІ 5ЕО ІО МО: 49; (с) послідовність МН 5ЕО ІЮО МО: 58 і послідовність
МІ. ЗЕО ІЮ МО: 59 або 60; або (4) послідовність МН 5ЕО ІЮ МО: 39 і послідовність МІ. 5ЕО ІЮ МО: 38.
І00О31) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому другий МН//І. фрагмент включає (а) НМЕК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 17, НМА-І3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 20, ії НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16; або (Б) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 33, НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: З6, і
НМВ8-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 32. У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому другий МН/Л/Л. фрагмент включає (а) НМЕК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 15, НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16, ії НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17; або (Б) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 31, НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність ХЕ ІЮ МО: 32, і НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 33. У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому другий МН//Л/ фрагмент включає (а) НМАК-І1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 18, НМК-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 19, ії НМК-І З, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮО МО: 20; або (6) НМА-11, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 34, НМЕ-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 35, і НМК-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮО МО: 36. У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при
Зо цьому другий МНЛ/ фрагмент включає (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 15, НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16, НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17, НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 18, НМК-12, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 19, Її
НУВ-І3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 20; або (Б) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 31, НМЕК-Н2, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО І МО: 32, НУМВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 33, НМВ-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 34, НМК-1І2, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 35, ії НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 36. 0032) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому мультиспецифічне антитіло включає першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла включає перший МН//. фрагмент, який специфічно зв'язує 1-17, а друга половина молекули антитіла включає другий
МН/Л/. фрагмент, який специфічно зв'язує І/-13, при цьому другий МН/Л// фрагмент включає
НМВ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 15, НУМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 16, НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО І МО: 17, НМВ-І/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 18, НМВ-12, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 19, ї НМК-ІЗ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮО МО: 20. У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла не зв'язує ІІ -13, а друга половина молекули антитіла не зв'язує 1-17. 00331 У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому другий МН//Л. фрагмент включає (а) (І) послідовність МН, що має щонайменше, 95 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 560 ІЮ МО: 11 або 13; або (ії) послідовність Мі, що має щонайменше, 9595, щонайменше, 9695, щонайменше, 97 95, щонайменше, 98 95, або, щонайменше, 99 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ФЕО ІЮ МО: 12 або 14; або послідовність УН як в (ї) і послідовність МІ. як в (ії); або (Б) () послідовність МН, що має щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 96, щонайменше, 97 95, щонайменше, 98 95, або, щонайменше, 99 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ХЕО ІЮ МО: 30; (ії) послідовність МІ, що має щонайменше, 95 95, щонайменше, 9695, щонайменше, 9795, щонайменше 9895, або, щонайменше, 09995 ідентичність 60 послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 29; або послідовність УН як в (Її) і послідовність МІ як в (ії). У деяких варіантах здійснення другий МН/Л// фрагмент включає послідовність МН ЗЕО ІО МО: 11, 13, або 30. У деяких варіантах здійснення другий. МН/Л/І. фрагмент включає послідовність МІ 5ЕО ІЮО МО: 12, 14, або 29. У деяких варіантах здійснення другий МН// фрагмент включає послідовність МН ЗЕО ІЮ МО: 11 або 13, і послідовність МІ. 5ЕО ІЮ МО: 12 або 14; послідовність МН 5ЕО ІЮ МО: 13 і послідовність МІ. 5ЕО ІЮ МО: 14; або послідовність МН 5ЕО ІЮ МО: 30 і послідовність МІ 5ЕО ІЮО МО: 29. 0034) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, при цьому дане антитіло конкурує за зв'язування ІІ -17 з антитілом, що включають послідовність МН 5ЕО
ІО МО: 39 і послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 38; або з антитілом, що включають послідовність МН
ЗЕО ІЮ МО: 50 і послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 49; або з антитілом, що включають послідовність
МН 5ЕО ІЮО МО: 58 і послідовність МІ 5ЕО ІО МО: 60. У деяких варіантах здійснення дане антитіло конкурує за зв'язування з гомодимером 1І--17А і/або гетеродимером 1І--17АК. У деяких варіантах здійснення дане антитіло конкурує за зв'язування з гомодимером І/-17Е. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло конкурує за зв'язування з ІІ/-13 з антитілом, що включають послідовність МН 5ЕО ІО МО: 11 і послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 12; або з антитілом, що включають послідовність МН 5ЕО ІЮ МО: 13 і послідовність М ЗЕО ІЮ МО: 14; або з антитілом, що включають послідовність МН ЗЕО ІЮО МО: 30 ї послідовність МІ 5ЕО ІО МО: 29. У деяких варіантах здійснення антитіло зв'язує епітоп в діапазоні амінокислот 77-89 5ЕО І
МО: 1 або в діапазоні амінокислот 82-89 5ЕО ІО МО: 1. 00351 У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, що включає першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла включає перший МН/Л/І. фрагмент, який специфічно зв'язує ІС -17, а друга половина молекули антитіла включає другий МНЛ/Г. фрагмент, який специфічно зв'язує ІІ - 13, при цьому перший МН/// фрагмент включає НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 40, НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО
ІО МО: 41, 43, 80, 81, і 114, НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5Е0О ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮ МО: 44, НМК-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 45, НМЕА-12, що включає амінокислотну послідовність БЕС ІО МО: 46, ії НМК-І3, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 47, і при цьому другий МН//. фрагмент включає НМЕК-НІ, що включає
Ко) амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 15, НМЕК-Н2, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 16, НУМВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17, НМВ-І1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 18, НМК-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 19, ії НМК-І З, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮО МО: 20.
У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла не зв'язує 1-13, а друга половина молекули антитіла не зв'язує ІЇ--1 7. 0036) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, що включає першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла включає перший МН/Л/І. фрагмент, який специфічно зв'язує 1-17, а друга половина молекули антитіла включає другий МНЛ/Г. фрагмент, який специфічно зв'язує ЇЇ - 13, при цьому перший МН//Л. фрагмент включає НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 40, НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО
ІЮО МО: 43, НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 44, НМК-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 45, НМК-1І2, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 46, і НМК-І З, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮО МО: 47, і при цьому другий МН//І. фрагмент включає НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 15, НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16, НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17, НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 18, НМК-12, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 19, Її
НМУВ-І3, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 20. У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла не зв'язує 1-13, а друга половина молекули антитіла не зв'язує 1-17.
І0037| У деяких варіантах здійснення передбачене біспецифічне анти-ІІ 13/І -17 антитіло, що включає першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла включає перший МН/М фрагмент, а друга половина молекули антитіла включає другий МН/Л// фрагмент, при цьому перший МН// фрагмент включає НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 40, НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮО МО: 43, НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 44, НМК-1І1, що включає амінокислотну послідовність 5Е0 ІЮ МО: 45,
НМУВ-1І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 46, і НМК-ІЗ, що включає 60 амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 47, і при цьому другий МНЛ/ фрагмент включає НМК-
НІ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО ІО МО: 15, НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 16, НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО І МО: 17, НМВ-І/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 18, НМВ-12, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 19, і НМК-ІЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 20. У певних варіантах здійснення біспецифічне анти-їЇЇ -1 ЗЛІ -17 антитіло включає другий МН/Л. фрагмент, який включає СОК лебрикізумабу. У деяких варіантах здійснення біспецифічне анти-ІЇ-13/Л1/-17 антитіло підвищує ефективність лебрикізумабу при лікуванні суб'єкта з астмою в ступені від помірного до важкого. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має підвищений рівень загального або сироваткового періостину іабо підвищені рівні еозинофілів в крові і/або підвищені рівні нейтрофілів у порівнянні з контрольним рівнем. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має підвищений рівень РЕМО у порівнянні з контрольним рівнем. У певних варіантах здійснення контрольний рівень являє собою середній рівень у тій самій групі пацієнтів. У деяких варіантах здійснення біспецифічне анти-І--13/І -17 антитіло підвищує ефективність лебрикізумабу при лікуванні астми в ступені від помірного до важкого, що супроводжується високим рівнем періостину. У деяких варіантах здійснення астма не контролюється кортикостероїдом. У деяких варіантах здійснення кортикостероїд являє собою інгальований кортикостероїд. У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла не зв'язує 1-13, а друга половина молекули антитіла не зв'язує ІІ - 17. 0038) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, що включає першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла включає перший МН/Л/І. фрагмент, який специфічно зв'язує ІС -17, а друга половина молекули антитіла включає другий МНЛ/. фрагмент, який специфічно зв'язує ІІ - 13, при цьому перший МНЛ/І. фрагмент включає послідовність МН ЗЕО ІЮ МО: 39 і послідовність
МІ 5ЕО ІО МО: 38, а другий МН//Л. фрагмент включає послідовність МН ЗЕО ІЮО МО: 13 і послідовність М ЗЕО ІЮО МО: 14. У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла не зв'язує ІІ--13, а друга половина молекули антитіла не зв'язує ІІ -17.
І0039| У деяких варіантах здійснення передбачене біспецифічне анти-|І 13/І-17 антитіло, що включає першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла, при цьому
Зо перша половина молекули антитіла включає перший МН// фрагмент, а друга половина молекули антитіла включає другий МН// фрагмент, при цьому перший МН/// фрагмент включає послідовність МН ЗЕО ІЮ МО: 39 і послідовність МІ 5ЕО ІЮО МО: 38, а другий МН/М/І. фрагмент включає послідовність МН 5ЕО ІО МО: 13 і послідовність МІ 5ЕО ІЮО МО: 14. У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла не зв'язує ІЇ/-13, а друга половина молекули антитіла не зв'язує 1І--17.
ЇО040| У будь-якому з описаних в даній заявці варіантів здійснення мультиспецифічне антитіло може являти собою ІдсС антитіло. У будь-якому з описаних в даній заявці варіантів здійснення мультиспецифічне антитіло може являти собою Ідс1 або Ідс4 антитіло. У будь- якому з описаних в даній заявці варіантів здійснення мультиспецифічне антитіло може являти собою Ідса4 антитіло.
ІЇ0041| У будь-якому з описаних в даній заявці варіантів здійснення мультиспецифічне антитіло може включати першу константну ділянку важкого ланцюга і другу константну ділянку важкого ланцюга, при цьому перша константна ділянка важкого ланцюга включає мутацію у вигляді "виступу" ("Кпоб тшаййоп"), а друга константна ділянка важкого ланцюга включає мутацію у вигляді "западини" ("поїе"). У деяких варіантах здійснення перша константна ділянка важкого ланцюга є злитою із частиною варіабельної ділянки важкого ланцюга МНЛ/І. фрагмента, який зв'язує ІІ -17. У деяких варіантах здійснення друга константна ділянка важкого ланцюга є злитою із частиною варіабельної ділянки важкого ланцюга МН//Л., який зв'язує І/-13. У деяких варіантах здійснення перша константна ділянка важкого ланцюга є злитою із частиною варіабельної ділянки важкого ланцюга МН/Л/. фрагмента, який зв'язує ІІ -13. У деяких варіантах здійснення друга константна ділянка важкого ланцюга є злитою із частиною варіабельної ділянки важкого ланцюга МН/Л/ фрагмента, який зв'язує 1-17. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою Ідс1 антитіло, при цьому мутація у вигляді "виступу" включає мутацію
ТЗ66МУ. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою Ідс1 антитіло, при цьому мутація у вигляді "западини" включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або, щонайменше, три мутації, вибрані з 73665, І З68А і 407. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою 954 антитіло, при цьому мутація у вигляді "виступу" включає мутацію Т366УУ. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою /д(с4 антитіло, при цьому мутація у вигляді "западини" включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або, щонайменше, три мутації, 60 вибрані з 73665, І 368А, і 407. У деяких варіантах здійснення антитіло включає першу константну ділянку важкого ланцюга, що включає послідовність ЗЕО ІО МО: 67, і другу константну ділянку важкого ланцюга, що включає послідовність ЗЕСО ІЮ МО: 68. У деяких варіантах здійснення антитіло включає першу константну ділянку важкого ланцюга, що включає послідовність ЗЕО ІЮ МО: 69, і другу константну ділянку важкого ланцюга, що включає послідовність ЗЕО ІЮ МО: 70. 0042) У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, що включає першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла специфічно зв'язує ІЇ/-17, а друга половина молекули антитіла специфічно зв'язує ІЇ/-13, при цьому антитіло включає перший важкий ланцюг, що включає послідовність ЗЕО І МО: 72 або 5ЕО ІЮ МО: 117, перший легкий ланцюг, що включає послідовність «ЕО ІЮО МО: 73, другий важкий ланцюг, що включає послідовність зЗЕО ІЮ МО: 21 або 5ЕО І МО: 116, і другий легкий ланцюг, що включає послідовність ЗЕО ІЮ МО: 22. У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла не зв'язує ІЇ/-13, а друга половина молекули антитіла не зв'язує 1І--17. 0043) МН ії важкий ланцюг можуть включати М-термінальний глутамін, при цьому важкий ланцюг може також включати С-термінальний лізин. Як відомо в даній області, М-термінальні глутамінові залишки можуть утворювати піроглутамат, а С-термінальні лізинові залишки можуть бути вилучені при виробничих процесах. Таким чином, у певних варіантах здійснення М- термінальний глутамін може бути необов'язково вилучений. Крім того, даний винахід охоплює важкі ланцюги як з наявністю, так і з відсутністю С-термінальних лізинових залишків. 0044) У деяких варіантах здійснення передбачена виділена нуклеїнова кислота, яка кодує будь-яке з описаних в даній заявці мультиспецифічних антитіл або виділених антитіл. У деяких варіантах здійснення передбачена виділена нуклеїнова кислота, яка кодує перший МН/Л/Ї. фрагмент будь-якого з описаних в даній заявці мультиспецифічних антитіл. У деяких варіантах здійснення передбачена виділена нуклеїнова кислота, яка кодує другий МНЛ/І. фрагмент будь- якого з описаних в даній заявці мультиспецифічних антитіл. У деяких варіантах здійснення передбачена клітина-хазяїн, яка включає виділену нуклеїнову кислоту (кислоти). У деяких варіантах здійснення дана клітина-хазяїн являє собою прокаріотичну клітину або еукаріотичну клітину. У деяких варіантах здійснення дана клітина- хазяїн являє собою клітину Е. соїї або
Зо СНО. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший МН//І. фрагмент і другий МН/Л/ фрагмент, при цьому перший МН//. фрагмент включає послідовність
МН 5ЕО ІО МО: 39 і послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 38, а другий МН//. фрагмент включає послідовність МН 5ЕО ІЮО МО: 13 ії послідовність М ЗЕО ІЮ МО: 14. У деяких варіантах здійснення передбачений спосіб одержання антитіла, що включає культивування клітини- хазяїна при умовах, що підходять для одержання даного антитіла. У певних варіантах здійснення дана клітина-хазяїн являє собою клітину Е. соїї. У деяких варіантах здійснення дана клітина-хазяїн являє собою клітину Е. соїї, а мультиспецифічне антитіло є аглікозильованим. У певних варіантах здійснення даний спосіб також включає виділення половини молекули антитіла або мультиспецифічного антитіла. 00451 У деяких варіантах здійснення передбачена виділена нуклеїнова кислота, що включає (а) послідовність, що має щонайменше, 9095, щонайменше, 9195, щонайменше, 92 965, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 95, щонайменше, 97 965, щонайменше, 98 95, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності ЗЕО
ІО МО: 107 або 103 або 118; (Б) послідовність, що має щонайменше, 90 95, щонайменше, 91 95, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 956, щонайменше, 97 95, щонайменше, 98 9565, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності зЗЕО ІЮ МО: 108 або 104; або (с) послідовність (а) і послідовність (Б). У деяких варіантах здійснення передбачена виділена нуклеїнова кислота, що включає (а) послідовність, що має щонайменше, 9095, щонайменше, 9195, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 95, щонайменше, 97 965, щонайменше, 98 95, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності ЗЕО
ІО МО: 105 або 99 або 119; (р) послідовність, що має щонайменше, 90 95, щонайменше, 91 95, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 956, щонайменше, 97 95, щонайменше, 98 9565, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності ЗЕО ІЮ МО: 106 або 100; або (с) послідовність (а) і послідовність (Б). У деяких варіантах здійснення передбачена клітина-хазяїн, що включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність що має щонайменше, 9095, щонайменше, 91 95, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 956, щонайменше, 97 95, щонайменше, 98 9565, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності 60 щодо послідовності ЗЕО ІЮ МО: 107 або 103 або 108, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність, що має щонайменше, 9095, щонайменше, 9195, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 95, щонайменше, 97 965, щонайменше, 98 95, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності ЗЕО
ІО МО: 108 або 104, при цьому перша нуклеїнова кислота і друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти. У деяких варіантах здійснення передбачена клітина-хазяїн, що включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність, що має щонайменше, 9095, щонайменше, 9195, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 95, щонайменше, 97 965, щонайменше, 98 95, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності ЗЕО
ІЮ МО: 105 або 99 або 119, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність, що має щонайменше, 90 95, щонайменше, 91 95, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 9495, щонайменше, 9595, щонайменше, 9695, щонайменше, 9795, щонайменше, 98 95, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності ЗЕО ІЮ МО: 106 або 100, при цьому перша нуклеїнова кислота і друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти. У деяких варіантах здійснення дана клітина-хазяїн являє собою прокаріотичну клітину або еукаріотичну клітину. У деяких варіантах здійснення прокаріотична клітина являє собою клітину Е. соїї, а еукаріотична клітина являє собою СНО клітину. У деяких варіантах здійснення передбачений спосіб одержання половини молекули антитіла або мультиспецифічного антитіла, що включає культивування клітини- хазяїна при умовах, що підходять для одержання даної половини молекули антитіла або мультиспецифічного антитіла. У деяких варіантах здійснення даний спосіб також включає виділення половини молекули антитіла або мультиспецифічного антитіла. 0046) У деяких варіантах здійснення передбачений спосіб одержання мультиспецифічного антитіла, що включає (ї) культивування першої клітини-хазяїна, що включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність що має щонайменше, 9095, щонайменше, 91 95, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 956, щонайменше, 97 95, щонайменше, 98 9565, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності ЗЕО ІЮ МО: 105 або 99, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність, що має щонайменше, 9095, щонайменше, 9195, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 95, щонайменше, 97 965, щонайменше, 98 95, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності ЗЕО
ІО МО: 106 або 100, для одержання першої половини молекули антитіла, і (її) культивування другої клітини-хазяїна, що включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність, що має щонайменше, 9095, щонайменше, 9195, щонайменше, 9295, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95 95, щонайменше, 96 95, щонайменше, 97 95, щонайменше, 98 965, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності зЗЕО ІЮ МО: 107 або 103 або 118, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність що має щонайменше, 90 95, щонайменше, 91 95, щонайменше, 92 95, щонайменше, 93 95, щонайменше, 94 95, щонайменше, 95965, щонайменше, 96 96, щонайменше, 97 956, щонайменше, 98 95, щонайменше, 99 95, або 100 95 ідентичності щодо послідовності ЗЕО ІЮ МО: 108 або 104, при цьому перша нуклеїнова кислота і друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти, для одержання другої половини молекули антитіла. У деяких варіантах здійснення передбачений спосіб одержання мультиспецифічного антитіла, що включає (ії) культивування першої клітини-хазяїна, що включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність ЗЕО ІЮО МО: 105, 99,119 або 101, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність ЗЕО ІЮ МО: 106, 100 або 102, для одержання першої половини молекули антитіла, і (і) культивування другої клітини-хазяїна, що включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність зЗЕО ІЮО МО: 107 або 103 або 118, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність зЗЕО ІЮ МО: 108 або 104, при цьому перша нуклеїнова кислота і друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти, для одержання другої половини молекули антитіла. У деяких варіантах здійснення передбачений спосіб одержання мультиспецифічного антитіла, що включає (ї) культивування першої клітини-хазяїна, що включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність ФЗЕО
ІО МО: 105 або 99 або 119, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність 560 ІЮ МО: 106 або 100, для одержання першої половини молекули антитіла, і (її) культивування другої клітини-хазяїна, що включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність 5ЕО ІЮ МО: 107 або 103 або 118, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 108 або 104, при цьому перша нуклеїнова кислота і друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти, для одержання другої половини 60 молекули антитіла. У деяких варіантах здійснення даний спосіб також включає виділення першої половини молекули антитіла і виділення другої половини молекули антитіла. У деяких варіантах здійснення спосіб включає утворення суміші, що включає першу половину молекули антитіла і другу половину молекули антитіла при умовах, що підходять для одержання мультиспецифічного антитіла. У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло, отримане за допомогою описаних в даній заявці способів. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший МН/// фрагмент і другий. МН/М/. фрагмент, при цьому перший МН// фрагмент включає послідовність МН 5ЕО ІЮО МО: 39 і послідовність МІ ЗЕО ІО МО: 38, а другий МН// фрагмент включає послідовність МН ЗЕО ІЮ
МО: 13 і послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 14. У певних варіантах здійснення та сама або різні молекули нуклеїнової кислоти можуть являти собою один або декілька векторів, зокрема векторів експресії.
І0047| У деяких варіантах здійснення передбачений імунокон'югат, при цьому імунокон'югат включає будь-яке з описаних в даній заявці мультиспецифічних антитіл або виділених антитіл і цитотоксичний агент. 0048) У деяких варіантах здійснення передбачені фармацевтичні склади, що включають будь-яке з описаних в даній заявці мультиспецифічних антитіл або виділених антитіл і фармацевтично прийнятний носій.
ОПИС ФІГУР
І0049| На Фіг.1А-С показане парне порівняння рівнів (А) нейтрофілів і еозинофілів, (В) еозинофілів і І -17Аж клітин, і (С) І/-17Еж і І/-17Аж клітин в отриманій за допомогою біопсії бронхіальній тканині, як описано в Прикладі 1.
І0О50| На Фіг.2А-В показана експресія (А) ІГ-17А ї (В) 1-17 у порівнюваних зразках нейтрофілів, які отримані за допомогою біопсії, відносно недетектуємого рівня (нижче мінімального порога кількісного аналізу; «11 00)) і детектуємого рівня (вище або на рівні мінімального порога кількісного аналізу, 2І І ОС), як описано в Прикладі 2.
ІЇ0О51| На Фіг.3 показана двостороння ієрархічна кластеризація певної пов'язаної з нейтрофілами генної експресії в рамках аналізу із застосуванням мікрочипів на групі зразків бронхіальної тканини, як описано в Прикладі 2, які були отримані за допомогою біопсії в
Об'єднаному Королівстві. Незафарбовані окружності відповідають астматикам, які не приймали
Зо кортикостероїди. Зафарбовані окружності позначають астматиків, які приймали кортикостероїди (інгальовані кортикостероїди (ІС5) або пероральні кортикостероїди (ОС5)). (0052) На Фіг.4А-В показані (А) рівні СХСІ 1 у здорових контролів і астматиків з астмою в ступені від помірного до важкого в рамках аналізу ВОВСАТ, і (В) рівні СХСІ1Т у плазмі у пацієнтів з астмою з рівнями сироваткового періостину нижче 50 нг/мл або рівними або перевищуючими 50 нг/мл, як описано в Прикладі 3. Рівні СХСІЇ1 вище 160 пг/мл (пунктирна лінія) зазвичай супроводжуються підвищеними рівнями сироваткового періостину (р-0,02 при вимірюванні за допомогою точного тесту Фішера).
І0053) На Фіг.5 показані рівні сироваткового періостину в рамках учасників дослідження з
Об'єднаного Королівства з недетектуємою («І І 003) або детектуємою (21 00) ІІ -17А експресією в рамках порівнюваних зразків, як описано в Прикладі 3. Сироватковий періостин є підвищеним у суб'єктів з детектуємим рівнем мРНК 1--17А в рамках бронхіальної біопсії (Р-0,03, критерій
Крускала-Уоліса).
І0054| На ФігбА-ЮО показані (А, С) рівні еозинофілів і (В, 0) рівні нейтрофілів у бронхоальвеолярному лаважі (ВАЇ; А, В) і крові (С, Ю) у мишей-моделей астми, пов'язаної з домашніми пиловими кліщами, з наступним введенням анти-іЇ-13 антитіла, суміші анти-ЇЇ - 17АА/АЕ антитіла і анти-ІЇ.-17ЕЕ антитіла, або суміші всіх трьох антитіл, як описано в Прикладі 4. "р-0,05, "р-0,005.
І0055) На Фіг.7А-О показаний (А) 505-РАСЕ аналіз половини молекули анти-1Ї-13 антитіл з "виступ" і половини молекули анти-1Ї-17 антитіла з "западиною", (В) 5ЕС аналіз біспецифічного антитіла, (С) 505 РАСЕ аналіз біспецифічного антитіла при невідновних (доріжка а) і відновних (доріжка с) умовах, і (0), ГС-ЕБІИТОЕ аналіз Е(ар)2 фрагментів біспецифічного антитіла, як описано в Прикладі 6.
І0О56) На Фіг.8А-В показане залежне від дозування інгібування (А) індукованої 1-13 ї (В) індукованої І. -13 К1300 проліферації ТЕ-1 клітин за допомогою лебрикізумабу і біспецифічного анти-І -13/І -17 антитіла, як описано в Прикладі 8.
І0О57| На Фіг.9А-С показане залежне від дозування інгібування (А) опосередкованої ІІ--17А і (В) опосередкованої І/-17АЕ, ії (С) опосередкованої ІЇ/-17ЄЕ експресії 5-С5Е в нормальних фібробластах крайньої плоті людини анти-ІЇ!-17 антитілом і біспецифічних анти-1Ї-1З/ЛІ -17 антитілом, як описано в Прикладі 8. бо 0058) На Фіг.10А-В показане залежне від дозування інгібування як (А) індукованої 1-13 експресії ССІ 26, так і (В) індукованої ІЇ-17А експресії СХСІ 1 біспецифічних анти-1Ї-13/1І -17 антитілом, як описано в Прикладі 9.
Ї0059| На Фіг.11 показана концентрація в сироватці біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла в мишей після однократного внутрішньовенного введення, як описано в Прикладі 10.
І00О60І На Фіг.12 показана концентрація біспецифічного анти-ЇЇ -13/І -17 антитіла в сироватці в окремих мавп циномолгус після одиночної внутрішньовенної дози, як описано в Прикладі 11.
І0О6Є1| На Ффіг.13 показані рівні гомодимери 1І-17А після введення біспецифічного анти-1ІЇ - 13/І-17 антитіла мавпам циномолгус, як описано в Прикладі 11. 0062) На Фіг.14А-С показані (А) рівні ТАКС в плазмі, (В) рівні С-С5Е у сироватці, і (С) рівні
СХСІ11 у сироватці в мишей-моделей астми, пов'язаної з домашніми пиловими кліщами, після введення анти-1Ї -13 антитіла, біспецифічного анти-ЇЇ -1 З/ІІ -17 антитіла або анти -ІЇ -17 антитіла, як описано в Прикладі 13.
І0063| На Фіг.15А-О показані графіки, на яких зміна БЕМ1' у відсотках для груп, що одержували плацебо і лебрикізумаб в рамках клінічних досліджень, нанесені для чотирьох груп, визначених на основі базисної кількості еозинофілів і нейтрофілів (А: еозинофіли-низьк. і нейтрофіли-високий.; В: еозинофіли-низьк. і нейтрофіли-низьк.; С: еозинофіли-висок. і нейтрофіли-високий.; і ОЮ: еозинофіли-висок. і нейтрофіли-низьк.), як описано в Прикладі 5.
Кількість суб'єктів, що приймали участь у даних аналізах, зазначена на кожному відповідному графіку.
ДОКЛАДНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
І0064| Якщо не зазначено інше, технічні та наукові терміни, що використані в даному документі, мають ті самі значення, які зазвичай розуміються рядовим фахівцем в області, до якої відноситься даний винахід. В Зіпдієтп еї аї!., Сісбйопагу ої Місгоріоїоду апа МоїІесціаг Віоїоду 2-е вид., У. УМіеу 5 5оп5 (Мем ХогК, М.У. 1994), і Магс!, Адмапсей Огдапіс Спетівзігу Кеасійопвь,
Меспапізт5 апа бігисіиге 4-е вид., хУопп Уміеу 5 Зоп5 (Мем ХогК, М.У. 1992) наданий загальний посібник з багатьох термінів, що використані в даній заявці, для фахівця в даній області.
ДЕЯКІ ВИЗНАЧЕННЯ
(0065) Нижченаведені визначення застосовуються з метою інтерпретації даного опису, при цьому у відповідних випадках терміни, що використовуються в однині, також включають їх
Зо множину, і навпаки. У випадку, якщо одне з наведених нижче визначень вступає в протиріччя з будь-яким документом, який включений у даний опис в якості посилання, зазначене визначення має пріоритет. (0066) Відповідно до використовуваних у даному описі та прикладеній формулі винаходу значень, іменники в однині включають їх форми в множині, якщо з контексту явно не випливає інше. Так, наприклад, термін "білок" або "антитіло" включає численну кількість білків або антитіл, відповідно; термін "клітина" включає суміші клітин і їм подібні.
І0067| Термін "біологічний зразок" згідно з використаним в даній заявці значенням включає, без обмеження, кров, сироватку, плазму, мокротиння, бронхоальвеолярний лаваж, біопсійні зразки тканини (наприклад, зразки тканини легенів) і назальні зразки, включаючи назальні мазки або назальні поліпи. 0068) Аналіз РЕМО являє собою аналіз, в рамках якого вимірюють рівні РЕМО (парціальний оксид азоту у видихуваному повітрі). Такі рівні можуть бути визначені за допомогою, наприклад, портативного переносного обладнання, МІОХ МІМО "М (Аегосгіпе, ЗоІпа, Змедеп), відповідно до посібників, що опубліковані Американським торакальним суспільством (Атегісап Тпогасіс зЗосієїу, АТЗ) в 2005 р. РЕЕМО може бути позначений іншим аналогічним чином, наприклад, гемо або РЕМО, при цьому потрібно розуміти, що всі подібні варіанти мають те саме значення.
Ї0069| Астма являє собою складне захворювання, що характеризується мінливими і рецидивуючими симптомами, оборотним (наприклад, в результаті дії бронхолітичного засобу) порушенням дихання і бронхіальною гіперчутливістю, яка необов'язково може бути пов'язана з лежачим в її основі запаленням. Приклади астми включають аспіринчутливу астму/загострення астми, атопічну астму, важку астму, легку астму, астму від помірного до важкого ступеня, кортикостероїднезалежну астму, хронічну астму, кортикостероїдрезистентну астму, кортикостероїд-стійку астму, вперше діагностовану, і, що не зазнавала лікування астму, астму внаслідок паління, не контрольовану кортикостероїдами астму і інші види астми, що описані в ./
АйМПегоду Сіїп Іттипої (2010) 126(5):926-938. 0070 Термін "еозинофільне захворювання" означає захворювання, пов'язане з надлишковою кількістю еозинофілів, при якому можуть проявлятися місцеві або системні атипові симптоми внаслідок рівнів або активності еозинофілів. У певних варіантах здійснення надлишковий рівень еозинофілів в крові складає, щонайменше, 200/мкл, щонайменше, 250/мкл, 60 щонайменше, З00/мкл або, щонайменше, 400/мкл. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має підвищений рівень еозинофілів в крові в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має базисну кількість еозинофілів в крові, що складає, щонайменше, 150/мкл, щонайменше, 200/мкл, щонайменше, 250/мкл, щонайменше, З0Об0/мкл або, щонайменше, 400/мкл.
Захворювання, пов'язані з надлишковими кількістю або активністю еозинофілів, включають, без обмеження, астму (в тому числі аспіринчутливу астму), атопічну астму, атопічний дерматит, алергійний риніт (включаючи сезонні алергійні риніти), неалергічний риніт, астму, важку астму, хронічну еозинофільну пневмонію, алергійний бронхолегеневий аспергильоз, глютеїнову хворобу, синдрому Черджа-Строса (вузелюювий періартериїт плюс атопія), синдром еозинофільної міалгії, гіпереозинофільний синдром, набрякові реакції, включаючи епізодичний ангіоневротичний набряк, гельмінтні інфекції, при яких еозинофіли можуть відігравати захисну роль, онхоцеркальний дерматит і асоційовані з еозинофілами шлунково-кишкові розлади, включаючи, без обмеження, еозинофільний езофагіт, еозинофільний гастрит, еозинофільний гастроентерит, еозинофільний ентерит і еозинофільний коліт, назальний мікрополіпоз і поліпоз, непереносимість аспірину, астму і обструктивний синдром апное під час сну. Секреторні продукти еозинофілів також були асоційовані зі стимулюванням ангіогенеза і утворенням сполучної тканини в пухлинах, а також з фіброзними відповідями, спостережуваними при таких станах як хронічна астма, хвороба Крона, склеродермія і ендоміокардиальний фіброз (Мипіїх А,
І емі-Зспанег Р. АПегду 2004; 59:268-75, Адатко еї аї. АПегду 2005; 60: 13-22, Оідноїї, еї а). АПегду 2005; 60: 693-6). Інші приклади включають рак (наприклад, гліобластому (таку як поліморфна гліобластома), неходжкінську лімфому (НХЛ)), атопічний дерматит, алергійний риніт, астму, фіброз, запальну хворобу кишківника, фіброз легені (включаючи ідіопатичний фіброз легені (ІФЛ) і вторинний відносно склерозу фіброз легені), ХОХЛ, фіброз печінки. У певних варіантах здійснення пацієнт ідентифікований в якості позитивного за еозинофільним запаленням пацієнта (ЕІР), який демонструє підвищені рівні періостину і/або підвищені рівні одного або декількох генів, вибраних з С5Е1, МЕЇ52, І СА 512, ІБО1, ТНВ54, О1ІС2, АГОХ15, ІСІ ЕС,
ССІ23, РУВОХО2, НЗОЗВ7, ОВО, АЗВ2, САСМОб, СРА44, МОАТЗ, 5І С47А1, 5МРОЗ, ССВЗ,
СІ С, СУРАЕ12 і АВТВ2, у порівнянні з контролем.
ІЇ0071| Термін "нейтрофільне захворювання" означає захворювання, пов'язане з
Зо надлишковою кількістю нейтрофілів. У деяких варіантах здійснення при нейтрофільному захворюванні можуть проявлятися місцеві або системні атипові симптоми внаслідок рівнів або активності нейтрофілів. У певних варіантах здійснення надлишковий рівень нейтрофілів в крові складає, щонайменше, З000/мкл, З3500/мкл, 4000/мкл або 4500/мкл. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має підвищений рівень нейтрофілів в крові в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У певних варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має базисну кількість нейтрофілів в крові, що складає, щонайменше,
З000/мкл, 3500/мкл, 4000/мкл або 4500/мкл. Захворювання, пов'язані з надлишковою кількістю нейтрофілів або їх активністю включають, без обмеження, атопічний дерматит, алергійний риніт, астму, фіброз, запальне захворювання кишківника, хворобу Крона, запальні захворювання легенів, фіброз легені, ідіопатичний фіброз легені (ІФЛ), хронічну обструктивну хворобу легенів (ХОХЛ), фіброз печінки, респіраторне захворювання, рак, гліобластому і неходжкінську лімфому. У будь-якому з описаних в даній заявці варіантів здійснення респіраторне захворювання може бути вибране з астми, алергійної астми, неалергічної астми, бронхіту, хронічного бронхіту, хронічної обструктивної хвороби легенів (ХОХЛ), емфіземи, викликаної палінням емфіземи, запалення дихальних шляхів, муковісцидозу, фіброзу легені, алергійного риніту і бронхоектазії. У деяких варіантах здійснення суб'єкт був визначений таким, що має базисний рівень, нейтрофілів в крові, що перевищує середній базисний рівень нейтрофілів в крові в групи пацієнтів. У деяких варіантах здійснення суб'єкт із підвищеними рівнями нейтрофілів має базисний рівень нейтрофілів в крові, що перевищує середній базисний рівень нейтрофілів в крові в групі пацієнтів з астмою в ступені від помірного до важкого.
І0072| Розлад, опосередковуваний 1-13, являє собою розлад, що пов'язаний з надлишковими рівнями або активністю ІЇ-13, при якій атипові симптоми, обумовлені рівнями або активністю ІЇ-13, можуть проявлятися в організмі локально і/або системно. Приклади опосередковуваних ІЇ/-13 захворювань включають різні види раку (наприклад, неходжкінську лімфому, гліобластому), атопічний дерматит, алергійний риніт, астму, фіброз, запальне захворювання кишківника, хворобу Крона, запальні захворювання легенів (включаючи фіброз легені, такий як ІФЛ), ХОХЛ і фіброз печінки. 0073) Розлад, опосередковуваний 1-17, являє собою розлад, пов'язаний з надлишковими рівнями або активністю ІІ--17, при якій атипові симптоми, обумовлені рівнями або активністю ЇЇ - бо 17, можуть проявлятися в організмі локально і/або системно. Приклади опосередковуваних ІІ -
17 захворювань включають: атопічний дерматит, алергійний риніт, астму, фіброз, запальне захворювання кишківника, хворобу Крона, запальні захворювання легенів, фіброз легені, ідіопатичний фіброз легені (ІФЛ), хронічну обструктивну хворобу легенів (ХОХЛ), фіброз печінки, респіраторне захворювання, рак, гліобластому і неходжкінську лімфому. У будь-якому з описаних в даній заявці варіантів здійснення респіраторне захворювання може бути вибране з астми, алергійної астми, неалергічної астми, бронхіту, хронічного бронхіту, хронічної обструктивної хвороби легенів (ХОХЛ), емфіземи, викликаної палінням емфіземи, запалення дихальних шляхів, муковісцидозу, фіброзу легені, алергійного риніту і бронхоектазії.
І0074| Астма-подібний симптом включає симптом, вибраний із групи, що складається із задишки, кашлю (зміни продукції мокротиння і/або якості мокротиння і/або частоти кашлю), дихання, що свистить, напруження в грудній клітині, бронхостенозу і нічних пробуджень, приписуваних одному з перерахованих вище симптомів, або комбінації даних симптомів (дипірег еї а! (2000) Ат. У. Везріг. Стії. Саге Мед., 162(4), 1330-1334).
І0075| Термін "респіраторне захворювання" включає, без обмеження, астму (наприклад, алергійну і неалергічну астму (наприклад, астму, обумовлену інфекцією, наприклад респіраторно-синцитіальним вірусом (РСВ), наприклад, у маленьких дітей)); бронхіт (наприклад, хронічний бронхіт); хронічну обструктивну хворобу легенів (ХОХЛ) (таку як емфізема (наприклад, індукована палінням сигарет емфізема); стани, що включають запалення дихальних шляхів, еозинофілію, фіброз і надлишкову продукцію мокротиння, наприклад кістозний фіброз, фіброз легені і алергійний риніт. Приклади захворювань, які можуть характеризуватися запаленням дихальних шляхів, надлишковою секрецією в дихальних шляхах і обструкцією дихальних шляхів, включають астму, хронічний бронхіт, бронхоектаз і кістозний фіброз. 0076) Загострення (що зазвичай називані приступами астми або гострою астмою) являють собою випадки нових або прогресуючих ознак, що включають задишку, кашель (зміни продукції мокротиння і/або якості мокротиння і/або частоти кашлю), подих, що свистить, напруження в грудній клітині, нічні пробудження, приписувані одному з перерахованих вище симптомів, або комбінацію даних симптомів. Загострення часто характеризуються зменшенням кількості видихуваного повітря (РЕЕ або РЕМ'І). Однак варіабельність РЕЕ зазвичай не збільшується в
Зо процесі загострення, хоча може і збільшуватися, призводячи до лікування загострення, або вона може збільшуватися в процесі загострення. Важкість загострень варіюється від легкого до загрозливого життю, при цьому його ступінь може бути визначений на основі симптомів і функції легенів. Згідно з використаним в даній заявці значенням важкі загострення астми включають загострення, які призводять до будь-якого одного або комбінації наступних наслідків: госпіталізації з метою лікування астми, застосування високих доз кортикостероїдів (наприклад, збільшення загальної добової дози в чотири рази або застосування загальної добової дози, що перевищує або дорівнює 500 мікрограм пропіонату флутиказону (ПФ) або еквівалентної дози, що використовується протягом трьох днів підряд або більше), або перорального/парентерального застосування кортикостероїдів. 00771 Інгібітор шляху ТН2 або "інгібітор ТН2" являє собою засіб, який інгібує шлях ТН2.
Приклади інгібітора шляху ТН2 включають інгібітори активності будь-якої однієї з мішеней, вибраних із групи, що складається з: ІТК, ВТК, 1-9 (наприклад, МЕОБІ-528), ІІ -5 (наприклад, меполізумаб, САЗ Мо. 196078-29-2; ресилізумаб), 1-13 (наприклад, ІМА-026, ІМА-638 (також називаний анрукінзумабом, ІММ Мо. 910649-32-0; ОАХ-576; уловлювач ІІ -А/ЛІ -13), тралокінумаб (також називаний САТ-354, САб Мо. 1044515-88-9у; АЕВ-001, АВТ-308 (також називаний гуманізованим 13С5.5 антитілом), І/-4 (наприклад, АЕК-001, уловлювач ІІ -4/ЛІ-13), ОХ40І,
Т5І Р, І -25, І -33 ії ІДЕ (наприклад, ХОГАЇК, ОСЕ-031; МЕОІ-4212); і рецептори, такі як: рецептор 1-9, рецептор І/-5 (наприклад, МЕОІ-563 (бенралізумаб, САЗ Мо. 1044511-01-4), рецептор альфа 1-4 (наприклад, АМО-317, АІН-645), рецептор альфа-1 1-13 (наприклад, К- 1671) і рецептор альфа-2 ІІ/-13, 0ОХ40, Т5І Р-В, І1/-7 В-Альфа (корецептор Т51 Р), І/-1788 (рецептор ІІ -25), 5Т2 (рецептор І, -33), ССКЗ, ССК4, СЕТН?2 (наприклад, АМО-853, АР768, АР- 761, МІМб6095, АСТ129968), Ес-епсилон-ВІ, Ес-епсилон-КП/СО23 (рецептори ЧЕ), Ріар (наприклад, С5К2190915), зук-кіназу (К-343, РЕЗ526299); СОВА (АМа-761), ТІ Н9 (ОАХ-935), або являє собою мультицитокіновий інгібітор ССКЗ, ІІ 5, ІЗ, ЗМ-С5Е (наприклад, ТРІ АЗМВ).
Приклади інгібіторів вищезгаданих мішеней описані, наприклад, в УМО2008/086395;
МО2006/085938; патенті США 7615213; патенті США 7501121; УуУО2006/085938; УМО 2007/080174; патенті США 7807788; УМО2005007699; УМО2007036745; УуО2009/009775;
УМО2007/082068;. УМО2010/073119;. УММО2007/045477;. МО2008/134724; заявці на патент США 2009/0047277; і ММО2008/127271. 60 00781 "Інгібітор шляху ТНІ17" або "інгібітор ТНІ17" являє собою засіб, який інгібує шлях ТНІ17.
Приклади інгібітора шляху ТНІ17 включають інгібітори активності будь-якої однієї з мішеней, вибраних з 1/-1рф, І--6 (наприклад, тоцилізумаб), 1-17А (наприклад, секукінумаб, іксекізумаб,
АВТ-122), 1І-17Р, гетеродимер І-17АР, 1-178, 1-17, 111-170, 11-22, І/-21, ТОаБ-В, 1-23, рецептор 1-18, рецептор 1-6, І -17КА (наприклад, бродалумаб), І -178С, 1, -1788, ІІ -22Н81,
І/1ОК2, рецептор 1-21, рецептор ТОБЕ-ВД і рецептор 1-23 (1. -12ЕБ1, І.23Е). Приклади інгібіторів вищезгаданих мішеней описані, наприклад, у патенті США 780715; патенті США 7838638; патенті США 8580265; заявці на патент США 20140314743; у патенті США 8519107; патенті
США 7833527; ММО2014044758; заявці на патент США 20130005659; і ММО2011023685.
І0079| Термін "мала молекула" відноситься до органічної молекули з молекулярною масою від 50 Дальтон до 2500 Дальтон.
І0О80)| Термін "антитіло" використовується в самому широкому змісті і зокрема охоплює, наприклад, моноклональні антитіла, поліклональні антитіла, антитіла з полієепітопною специфічністю, одноланцюгові антитіла, поліспецифічні антитіла і фрагменти антитіл, включаючи антигензв'язуючі фрагменти. Такі антитіла можуть бути химерними, гуманізованими, що відносяться до людини і синтетичними. Такі антитіла і способи їх одержання більш докладно описані нижче. (00811) Термін "половина молекули антитіла", або "гемімер", згідно з використаним в даній заявці значенням означає моновалентний антигензв'язуючий поліпептид. У певних варіантах здійснення половина молекули антитіла, або гемімер, включає УНЛ/І. фрагмент і необов'язково, щонайменше, частину константного домену імуноглобуліну. У певних варіантах здійснення половина молекули антитіла, або гемімер, включає один важкий ланцюг імуноглобуліну, пов'язаний з одним легким ланцюгом імуноглобуліну, або його антигензв'язуючу частину. У певних варіантах здійснення половина молекули антитіла, або гемімер, є моноспецифічним, тобто зв'язується з одним антигеном або епітопом. У певних варіантах здійснення половина молекули антитіла зв'язується з ІЇ/-13 і не зв'язується з ІЇ/-17. У певних інших варіантах здійснення половина молекули антитіла зв'язується з 1-17 ії не зв'язується з ІІ -13. Фахівцю в даній області відразу стане очевидно, що половина молекули антитіла може мати антигензв'язуючий домен, що складається з одного варіабельного домену, наприклад отриманого від верблюдових.
Зо (0082) Термін "МН/Л// фрагмент" означає антигензв'язуючу ділянку антитіла, яка включає, щонайменше, один НМК УН і, щонайменше, один НУК У. У певних варіантах здійснення МН/Л/. фрагмент включає, щонайменше, один, щонайменше, два, або всі три НМЕ МН і, щонайменше, один, щонайменше, два або всі три НМК МІ. У певних варіантах здійснення МН/М. фрагмент також включає, щонайменше, частину каркасної ділянки (ЕК). У деяких варіантах здійснення
МНЛ/Г. фрагмент включає три НУК МН і три НУК М. У деяких подібних варіантах здійснення
МНЛ/Ї. фрагмент включає, щонайменше, один, щонайменше, два або, щонайменше, три або всі чотири ЕК УН і, щонайменше, один, щонайменше, два, щонайменше, три або всі чотири ЕК МІ. (0083) Термін "мультиспецифічне антитіло" використовується в найбільш широкому значенні і зокрема охоплює антитіло, що включає антигензв'язуючий домен, які має поліепітопну специфічність (тобто здатний специфічно зв'язуватися із двома або більшою кількістю різних епітопів на одній біологічній молекулі або здатний специфічно зв'язуватися з епітопами на двох або більшій кількості різних біологічних молекул). У деяких варіантах здійснення антигензв'язуючий домен мультиспецифічного антитіла (такого як біспецифічне антитіло) включає два МН/М/ фрагмента, при цьому перший МНЛ/Ї фрагмент специфічно зв'язується з першим епітопом, а другий МН/М/ фрагмент специфічно зв'язується із другим епітопом, при цьому кожний МН/Л// фрагмент включає варіабельний домен важкого ланцюга (МН) і варіабельний домен легкого ланцюга (МІ). Такі поліспецифічні антитіла включають, але без обмеження, повнорозмірні антитіла, антитіла, що мають два або більше Мі і МН доменів, фрагменти антитіл, такі як Раб, Ем, азЕм, 5сЕм, діатіла, біспецифічні діатіла і триатіла, фрагменти антитіл, зв'язані ковалентним або нековалентним зв'язком. МН//Л фрагмент, який також включає, щонайменше, частину константної ділянки важкого ланцюга і/або, щонайменше, частину константної ділянки легкого ланцюга, також може називатися "гемімером" або "половиною молекули антитіла". У деяких варіантах здійснення половина молекули антитіла включає, щонайменше, частину однієї варіабельної ділянки важкого ланцюга і, щонайменше, частину однієї варіабельної ділянки легкого ланцюга. У деяких подібних варіантах здійснення біспецифічне антитіло, яке включає дві половини молекули антитіла і зв'язується із двома антигенами, включає першу половину молекули антитіла, яка зв'язується з першим антигеном або першим епітопом, але не із другим антигеном або другим епітопом, і другу половину молекули антитіла, яка зв'язується із другим антигеном або другим епітопом, але не з першим бо антигеном або першим епітопом. Згідно з деякими варіантами здійснення мультиспецифічне антитіло являє собою |дс антитіло, яке зв'язується з кожним антигеном або епітопом з афінністю від 5 мкМ до 0,001 пМ, від З мкМ до 0,001 пМ, від 1 мкМ до 0,001 пМ, від 0,5 мкМ до 0,001 пМ, або від 0,1 мкМ до 0,001 пМ. У деяких варіантах здійснення гемімер включає частину варіабельної ділянки важкого ланцюга, яка є достатньою для забезпечення утворення внутрішньомолекулярних дисульфідних зв'язків із другим гемімером. У деяких варіантах здійснення гемімер включає мутацію у вигляді "виступу" або мутацію у вигляді "западини", наприклад для забезпечення гетеродимеризації із другим гемімером або половиною молекули антитіла, яка включає комплементарну мутацію у вигляді "западини" або мутацію у вигляді "виступу". Мутації у вигляді "виступу" і мутації у вигляді "западини" описані нижче.
І0084| "Біспецифічне антитіло" являє собою мультиспецифічне антитіло, що включає антигензв'язуючий домен, який здатний специфічно зв'язуватися із двома різними епітопами на одній біологічній молекулі або способі специфічно зв'язуватися з епітопами на двох різних біологічних молекулах. Біспецифічне антитіло також може називатися в даній заявці таким, що має "подвійну специфічність" або "з подвійною специфічністю". Якщо не зазначене інше, порядок, в якому антигени, зв'язані біспецифічним антитілом, наведені в назві біспецифічного антитіла, є довільним. Таким чином, у деяких варіантах здійснення терміни "біспецифічне анти-
І/-13/ЛІ/-17 антитіло" і "біспецифічне анти-1ІЇ-17//-13 антитіло" можуть застосовуватися взаємозамінним чином. У деяких варіантах здійснення біспецифічне антитіло включає дві половини молекули антитіла, при цьому кожна половина молекули антитіла включає одну варіабельну ділянку важкого ланцюга і необов'язково, щонайменше, частину константної ділянки важкого ланцюга, і одну варіабельну ділянку легкого ланцюга і необов'язково, щонайменше, частину константної ділянки легкого ланцюга. У певних варіантах здійснення біспецифічне антитіло включає дві половини молекули антитіла, при цьому кожна половина молекули антитіла включає одну варіабельну ділянку важкого ланцюга і одну варіабельну ділянку легкого ланцюга і не включає більше однієї варіабельної ділянки важкого ланцюга і не включає більше однієї варіабельної ділянки легкого ланцюга. У деяких варіантах здійснення біспецифічне антитіло включає дві половини молекули антитіла, при цьому кожна половина молекули антитіла включає одну варіабельну ділянку важкого ланцюга і одну варіабельну ділянку легкого ланцюга, і при цьому перша половина молекули антитіла зв'язується з першим
Зо антигеном і не зв'язується із другим антигеном, а друга половина молекули антитіла зв'язується із другим антигеном і не зв'язується з першим антигеном. (0085) Згідно з використаним в даній заявці значенням, термін "Кпоб-іпію-поїе" ("виступ у западину") або "КиН" означає технологію для спарювання двох поліпептидів іп міго або іп мімо шляхом введення випинання (виступу) в один поліпептид і порожнини (западини) в інший поліпептид в області контакту, де вони взаємодіють. Наприклад, КпН вводили в область контакту при зв'язуванні Ес:Ес, в області контакту СІ:СНІ або в області контакту МНЛ/І. антитіл (див., наприклад, заявку на патент США 2011/0287009, заявку на патент США 2007/0178552,
УМО 96/027011, МО 98/050431 і пи еї аї., 1997, Ргоївїп бсіепсе 6:781-788). У деяких варіантах здійснення КпН опосередковують спарювання двох різних важких ланцюгів при виробництві мультиспецифічних антитіл. Наприклад, мультиспецифічні антитіла з КпН в їх Ес ділянках можуть також включати окремі варіабельні домени, пов'язані з кожною Ес ділянкою, або також включати різні варіабельні домени важких ланцюгів, які зв'язуються з тими самими або іншими варіабельними доменами легких ланцюгів. Технологія КпН також може застосовуватися для зв'язування двох різних рецепторних позаклітинних доменів або будь-яких інших поліпептидних послідовностей, які включають різні послідовності розпізнавання мішені (наприклад, включаючи афітіла, пептитіла і інші продукти злиття Ес). 0086) Згідно з використаним в даній заявці значенням, термін "мутація у вигляді "виступу" означає мутацію, в рамках якої вводиться "випинання" ("виступ") в поліпептид в область контакту, в рамках якого поліпептид взаємодіє з іншим поліпептидом. У деяких варіантах здійснення інший поліпептид має мутацію у вигляді "западини" (див., наприклад, патент США 5731168, патент США 5807706, патент США 5821333, патент США 7695936, патент США 8216805, кожний з яких повністю наведений в даній заявці для посилання).
І0087| Згідно з використаним в даній заявці значенням, термін "мутація у вигляді "западини" означає мутацію, в рамках якої вводиться "порожнина" ("западина") в поліпептид в область контакту, в рамках якого поліпептид взаємодіє з іншим поліпептидом. У деяких варіантах здійснення інший поліпептид має мутацію у вигляді "виступу" (див., наприклад, патент США 5731168, патент США 5807706, патент США 5821333, патент США 7695936, патент США 8216805, кожний з яких повністю наведений в даній заявці для посилання). (0088) Антитіло "інгібує" активність, викликану або пов'язану з антигеном, таку як індукована бо І/-17- і/або ІІ -13 активність, якщо активність знижується в порівнянні з активністю, обумовленою при відсутності даного антитіла. У певних варіантах здійснення антитіло інгібує активність антигена, щонайменше, на 10 95 у присутності антитіла в порівнянні з активністю при відсутності даного антитіла. У деяких варіантах здійснення антитіло інгібує активність, щонайменше, на 20 96, щонайменше, на 30 956, щонайменше, на 40 956, щонайменше, на 50 95, щонайменше, на 60 96, щонайменше, на 70 95, щонайменше, на 80 96 або, щонайменше, на 90 95 або 100 95.
Вважають, що антитіло "нейтралізує" антиген або пов'язану з ним активність, коли активність знижується, щонайменше, на 50 95 у присутності даного антитіла в порівнянні з активністю при відсутності даного антитіла. У деяких варіантах здійснення антитіло, що забезпечує нейтралізацію, інгібує активність, щонайменше, на 60 95, щонайменше, на 70 956, щонайменше, на 80 95 або, щонайменше, на 90 95 або 100 95. У певних варіантах здійснення індукована 1-17 іабо 1-13 активність являє собою проліферацію клітин іп мйго або іп мімо. У певних інших варіантах здійснення індукована 1-17 і/або 1-13 активність являє собою опосередковані 1-17 мабо 1-13 запальні реакції або імунологічні захворювання. В інших варіантах здійснення індукована 1-17 і/або 1/-13 активність являє собою опосередковану 1/-17 і/або 11-13 інфільтрацію запальних клітин.
І0089| Термін "терапевтичний засіб" означає будь-який засіб, що застосовується для лікування захворювання. Терапевтичний засіб може являти собою, наприклад, поліпептид(и) (наприклад, антитіло, імуноадгезин або пептитіло), аптамер або малу молекулу, яка може зв'язуватися з білюом, або молекулу нуклеїнової кислоти, яка може зв'язуватися з молекулою нуклеїнової кислоти, що кодує мішень (наприклад, міРНК), і так далі.
ІЇ0090| Термін "контролюючий засіб" або "пригнічюючий засіб" означає будь-який терапевтичний засіб, що застосовується для пригнічення астматичного запалення. Приклади контролюючих засобів включають кортикостероїди, антагоністи рецепторів лейкотриєнів (наприклад, інгібуючі синтез або активність лейкотриєнів, такі як монтелукаст, зилейтон, пранлукаст, зафірлукаст), І АВА, композиції на основі комбінації кортикостероїд/! АВА, теофілін (включаючи амінофілін), кромолін-натрій, недокроміл-натрій, омалізумаб, ГАМА, МАВА (наприклад, біфункціональний мускариновий антагоніст - бета-2 агоніст), інгібітори білка, що активує 5-ліпоксигеназу (ЕГАР), і інгібітор ферменту РОЕ-4 (наприклад, рофлуміласт). Термін "другий контролюючий засіб", як правило, означає контролюючий засіб, який відрізняється від
Зо першого контролюючого засобу.
ІЇ0091| Термін "зниження дози кортикостероїду" або "С5" означає зменшення частоти введення і/або кількості кортикостероїду, або припинення приймання кортикостероїду, що використовується для лікування захворювання у пацієнта, який приймає кортикостероїди для лікування захворювання, внаслідок введення іншого терапевтичного засобу. Термін "засіб С5" означає терапевтичний засіб, який може викликати С5 у пацієнта, який приймає кортикостероїд. (00921) Термін "кортикостероїд" включає, без обмеження, флутиказон (включаючи пропіонат флутиказону (ПФ)), беклометазон, будезонід, циклезонід, мометазон, флунізолід, бетаметазон і триамцинолон. Термін "інгальований кортикостероїд" означає кортикостероїд, який є підходящим для доставки за допомогою інгаляції. Приклади інгальованих кортикостероїдів являють собою флутиказон, дипропіонат беклометазону, будезонід, фуроат мометазону, циклезонід, флунізолід, ацетонід триамцинолону і будь-який інший кортикостероїд, який доступний на даний час або який стане доступним у майбутньому. Приклади кортикостероїдів, які можуть бути введені шляхом інгаляції і об'єднані з бета-2 агоністом тривалої дії, включають, без обмеження: будезонід/формотерол і флутиказон/сальметерол.
ІЇ0093| Приклади комбінації лікарських засобів кортикостероїд/ АВА включають фуроат флутиказону/трифенатат вілантеролу і індакатерол/мометазон.
І0094| Термін "САВА" означає бета-2 агоніст тривалої дії, який включає, наприклад, сальметерол, формотерол, бамбутерол, альбутерол, індакатерол, арформотерол (і кленбутерол.
І0095| Термін "ГАМА" означає мускариновий антагоніст тривалої дії, який включає тіотропій.
І0096| Приклади комбінацій І АВА/Л АМА включають, без обмеження: олодатерол тіотропій (Воепгіпдег ІпдеІНеїіпт'5) і індакатерол глікопіроній (Момагії5).
І0097| Термін "ЗАВА" означає бета-2 агоністи короткотривалої дії, які включають, без обмеження, сальбутамол, левосальбутамол, фенотерол, тербуталін, пірбутерол, прокатерол, бітолтерол, римітерол, карбутерол, тулобутерол і репротерол. (0098) Антагоністи рецепторів лейкотриєнів (які іноді називаються ІеиКаз|) (ТКА) являють собою засоби, здатні інгібувати лейкотриєни. Приклади інгібіторів лейкотриєнів включають монтелукаст, зилейтон, пранлукаст і зафірлукаст.
І0099| Термін "РГЕМ1" означає об'єм видихуваного повітря в першу секунду форсованого бо видиху. Він є заходом обструкції дихальних шляхів. Концентрація, що спонукає метахолін,
необхідна для індукування 20 956 зменшення РЕМ1 (РС20), являє собою кількісний показник гіперчутливості дихальних шляхів. ЕЕМ1І може бути позначений іншим способом, наприклад
ЕЕМ'Т, при цьому слід розуміти, що всі подібні варіанти мають те саме значення.
І00100) Термін "відносна зміна ЕЕМ1" - (ЕЕМІ1 на 12 тижні лікування - РЕМ1 перед початком лікування) / РЕМ1. (00101) Термін "РЕЕ" означає максимальну швидкість видиху, яка відповідає максимальному потоку повітря, що досягається при максимальному форсованому видиху після повного дихання. Вона являє собою параметр, який може застосовуватися для вимірювання функції дихальних шляхів. 00102 Згідно з використаним в даній заявці значенням, термін "ЕМС" означає "форсовану життєву ємність", тобто стандартний аналіз, в рамках якого вимірюють зміну об'єму повітря в легенях між повним вдихом і максимальним видихом у порівнянні із залишковим об'ємом (на відміну від об'єму повітря, видихуваного за одну секунду в рамках РЕМ1). Вона є мірою функціональної ємності легенів. У пацієнтів з рестриктивними захворюваннями легенів, такими як інтерстиціальна хвороба легені, включаючи ІФЛ, гіперчутливий пневмоніт, доброякісний гранулематоз і системний склероз, ЕМС є зниженою, звичайно внаслідок рубцювання легеневої паренхіми. 00103) Термін "легка астма" означає стан, при якому симптоми і загострення проявляються у пацієнта менше, ніж два рази на тиждень, нічні симптоми проявляються менше, ніж два рази на місяць, а в проміжках між загостреннями симптоми відсутні. Легка астма, що перемежовується, часто зазнає лікування наступними засобами: інгальованих бронходилататорами (інгальованих бета-2 агоністами короткочасної дії); униканням відомих провокуючих факторів; щорічною протигрипозною вакцинацією; пневмококовою вакцинацією кожні 6-10 років, і, у деяких випадках, застосуванням інгальованого бета-2 агоніста, кромоліну, або недокромілу перед впливом ідентифікованих провокуючих факторів. Якщо у пацієнта присутня підвищена потреба в бета-2 агоністі короткочасної дії (наприклад, якщо пацієнт приймає бета-2 агоніст короткочасної дії більше трьох-чотирьох раз за 1 день при гострих приступах або використовує більше одного контейнера на місяць при прояві симптомів), пацієнту може знадобитися застосування наступної стадії лікування.
Зо І00104| Термін "помірна астма", як правило, означає астму, при якій пацієнт зазнає загострення більше, ніж два рази на тиждень, при цьому загострення впливають на сон і активність; у пацієнта спостерігаються нічні пробудження внаслідок астми більше, ніж два рази на місяць; у пацієнта спостерігаються симптоми хронічної астми, що вимагають застосування інгальованого бета-2 агоніста короткочасної дії щодня або через день; базовий рівень РЕЕ або
ЕЕМ'І у пацієнта до початку лікування складає від 60 до 80 відсотків від очікуваного значення, а варіабельність РЕБЕ складає від 20 до 30 відсотків. 00105) Термін "важка астма", як правило, означає астму, при якій у пацієнта практично безупинно спостерігаються симптоми, часті загострення, часті нічні пробудження внаслідок астми, обмежена активність, базові рівні РЕЕ або РЕМІ склаадють менше 60 відсотків від очікуваного значення, а варіабельність РЕБЕ складає від 20 до 30 відсотків.
І00106| Приклади відновлюючих лікарських засобів включають альбутерол, вентолін і інші.
І00107| Термін "стійкий" відноситься до захворювання, що демонструє легке або відсутнє клінічно значиме поліпшення після лікування терапевтичним засобом. Наприклад, до астми, яка вимагає лікування високою дозою ІС5 (такою як збільшена вчетверо загальна добова доза кортикостероїду або загальна добова доза ПФ (або еквівалента), що перевищує або дорівнює 500 мікрограм) протягом, щонайменше, трьох або більше послідовних днів або системного введення кортикостероїду протягом двотижневого випробування, щоб визначити, чи залишається астма неконтрольованою, а також відсутність поліпшення РЕМІ часто вважається ознакою важкої стійкої астми.
ІЇ00108| Передбачений в даній заявці терапевтичний засіб може бути введений за допомогою будь-яких підходящих способів, включаючи парентеральне, підшкірне, внутрішньочеревинне, внутрішньолегеневе і інтраназальне введення. Парентеральне введення включає внутрішньом'язове, внутрішньовенне, внутрішньоартеріальне, внутрішньочеревинне або підшкірне введення. У деяких варіантах здійснення терапевтичний засіб вводять шляхом інгаляції. Згідно з деякими варіантами здійснення лікарський засіб вводять шляхом ін'єкцій, наприклад внутрішньовенних або підшкірних ін'єкцій У деяких варіантах здійснення терапевтичний засіб вводять за допомогою шприца (наприклад, попередньо наповненого або ненаповненого) або автоін'єктора. 00109) Для запобігання або лікування захворювання підходяще дозування терапевтичного бо засобу може залежати від типу лікування захворювання, важкості та перебігу захворювання незалежно від того, чи вводять терапевтичний засіб із профілактичною або терапевтичною метою попереднього лікування, клінічної історії пацієнта та чутливості до терапевтичного засобу, а також від рішення лікаря. Терапевтичний засіб може бути введений пацієнту підходящим чином однократно або в декілька приймань. Одержання, дозування і введення композиції на основі терапевтичного засобу здійснюють за допомогою способів, що відповідають успішній медичній практиці. Фактори, що враховуються в даному контексті, включають конкретне захворювання, що підлягає лікуванню, вид конкретного ссавця, який зазнає лікування, клінічний стан пацієнта, причину захворювання, ділянку доставки засобу, спосіб введення, схему введення і інші фактори, відомі лікарям. 00110) "Чутливість пацієнта" або "чутливість" (в тому числі граматичні варіанти даного терміна) може бути проаналізована за допомогою будь-якого кінцевого параметра, що свідчить про поліпшення стану пацієнта, включаючи, без обмеження, (1) інгібування деякою мірою розвитку захворювання, що включає вповільнення і повне припинення; (2) зменшення числа приступів і/або симптомів захворювання; (3) зменшення розміру пошкодження; (4) інгібування (тобто зменшення, вповільнення або повне припинення) пов'язаної із хворобою інфільтрації клітин у сусідні периферичні органі і/або тканини; (5) інгібування (тобто зменшення, вповільнення або повне припинення) поширення захворювання; (б) зменшення аутоімунної відповіді, яка необов'язково може призвести до регресії або усунення пов'язаного із хворобою пошкодження; (7) полегшення деякою мірою одного або декількох симптомів, пов'язаних із захворюванням; (8) збільшення тривалості періодів відсутності прояву захворювання після лікування; і/або (9) зменшення смертності в певний період часу після лікування. 00111) Термін "афінність" означає інтенсивність сумарних загальних нековалентних взаємодій між окремою ділянкою зв'язування молекули (наприклад, антитіла) і її партнером зі зв'язування (наприклад, антигеном). Якщо не зазначене інше, згідно з використаним в даній заявці значенням, термін "афінність зв'язування" означає власну афінність зв'язування, яка відповідає взаємодії 1:1 між членами пари, що зв'язується (наприклад, антитілом і антигеном).
Афінність молекули Х відносно її партнера У, як правило, може бути виражена у вигляді константи дисоціації (Ка). Афінність може бути виміряна за допомогою традиційних методів, відомих у даній області, в тому числі тих, які описані тут. в даній заявці описані конкретні ілюстративні здійснення, що і приводяться в якості прикладу, варіанти, для вимірювання афінності зв'язування. 00112) Термін "афінно зрілий" означає антитіло, що містить одну або декілька змін в одній або декількох гіперваріабельних ділянках (НМК) щодо вихідного антитіла, яке не має дані зміни, при цьому дані зміни призводять до підвищення афінності антитіла щодо антигена.
Ї00113| Терміни "анти-І./-17 антитіло" і "антитіло, яке зв'язується з 1-17" згідно з використаним в даній заявці значенням означають антитіло, яке здатне зв'язувати гомодимер
І--17А, гомодимер 1--17Е, і/або гетеродимер 1-17АЕ з достатньої афінністю, у такий спосіб що дане антитіло може застосовуватися в якості діагностичного і/або терапевтичного засобу, спрямованого проти І//-17. У деяких варіантах здійснення ступінь зв'язування анти-Ї -17 антитіла з неспорідненим, що не є І/-17 білком складає менше ніж близько 10 95 ступеня зв'язування антитіла з ІІ -17 при вимірюванні, наприклад, за допомогою радіоіїмуноаналізу (РІА).
У певних варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується 3 ІЇ/-17, має значення константи дисоціації (Ка) «1 мкМ, «100 нМ, «10 НМ, «1 НМ, «0,1 нМ, «0,01 нМ або «0,001 нМ (наприклад, 10-8 М або менше, наприклад, від 10-8 М до 10-13 М, наприклад від 10-9 М до 10-13 М). У певних варіантах здійснення анти-1Ї-17 антитіло зв'язується з епітопом 1-17, який є незмінним серед 1-17 різних біологічних видів. У деяких варіантах здійснення анти-1іІ-17 антитіло являє собою мультиспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло. 00114) У деяких варіантах здійснення анти-ІІ 17 антитіло здатне зв'язувати гомодимер ЇЇ - 17А. У деяких варіантах здійснення анти-1ІІЇ 17 антитіло здатне зв'язувати гомодимер 1--17А і гетеродимер І/-17АБ. У деяких варіантах здійснення анти-ІЇ17 антитіло здатне зв'язувати гомодимер 1-17А, гомодимер 1--17Е, і гетеродимер І/-17АР. У деяких варіантах здійснення анти-ІЇ-17 антитіло, яке здатне зв'язувати гомодимер 1--17А, гомодимер 1--17Е, і гетеродимер
І--17АЕ, також може бути позначене як 1І--17А і Е антитіло, або крос-реактивне 1І--17А і 11-17Е антитіло, або І--17А/Е крос-реактивне антитіло. У певних подібних варіантах здійснення 1І--17А і
Е крос-реактивне антитіло зв'язується з ідентичними або аналогічними епітопами на ІІ -17А, ІІ - 17 і/або гетеродимері І/-17АБ. У певних варіантах здійснення ІЇ-17А і Е крос-реактивне антитіло зв'язується з ідентичними або аналогічними епітопами на 1/-17А, ІЇ/-17Е і/або гетеродимері 1-17АЕ з достатньої афінністю. У певних переважних варіантах здійснення 1 -17А і Е крос-реактивне антитіло або біспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло зв'язується з ІЇ-17А, ЇЇ - бо 17Б ї1С-17АЕ з високою афінністю. Описані структури 1 -17А і 1 -17Р. Див. Нутомі/їг еї аї., 2001,
Етбо У, 20(19):5332-41, Еу єї аІ., 2009, Маїштге Іттипоіоду 10(12):1245-1252 і Ци еї аї., 2013,
Маїште Соттипісайоп5 БОЇ: 10.1038/ псотт»в2880. З даних структур можуть бути отримані аналогічні або ідентичні епітопи, що включають амінокислотні залишки, які присутні в районі поверхні ІІ -17А і 11-17. 00115) Терміни "анти-І/-13 антитіло" і "антитіло, яке зв'язує ІЇ-13" означають антитіло, яке здатне зв'язувати ІЇ/-13 з достатньою афінністю, у такий спосіб що дане антитіло може застосовуватися в якості діагностичного і/або терапевтичного засобу, спрямованого проти ІІ -13.
У деяких варіантах здійснення ступінь зв'язування анти-1Ї -13 антитіла з неспорідненим, що не є
І/-13 білком складає менше ніж близько 1095 ступеня зв'язування антитіла з І/-13 при вимірюванні, наприклад, за допомогою радіоіїмуноаналізу (РІА). У певних варіантах здійснення антитіло, яке зв'язується з ІІ -13, має значення константи дисоціації (Ка) «1 мкМ, «100 нМ, «10
НМ, «1 НМ, х0,1 НМ, «0,01 нМ або «0,001 нМ (наприклад, 10-8 М або менше, наприклад, від 10-8
М до 10-13 М, наприклад від 10-9 М до 10-13 М). У певних варіантах здійснення анти-1Ї-13 антитіло зв'язується з епітопом ІІ-13, який є незмінним серед 1-13 різних біологічних видів. У деяких варіантах здійснення анти-1ІЇ-13 антитіло являє собою мультиспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло. 00116) Термін "антитіло", шо використовується в даному описі в самому широкому сенсі, охоплює різні типи антитіл, що включають, без обмеження, моноклональні антитіла, поліклональні антитіла, мультиспецифічні антитіла (наприклад, біспецифічні антитіла) і фрагменти антитіл, за умови, що вони мають необхідну антигензв'язуючу активність.
І00117| Термін "фрагмент антитіла" означає молекулу, відмінну від інтактного антитіла, яка містить частину інтактного антитіла, здатну зв'язуватися з тим самим антигеном, що і інтактне антитіло. Приклади фрагментів антитіл включають, без обмеження, Ем, Раб, Раб, Рар'-5Н,
К(арв)2; діатіла; лінійні антитіла; молекули одноланцюгових антитіл (наприклад, 5сЕм); і поліспецифічні антитіла, отримані із фрагментів антитіл. 00118) Для ідентифікації антитіла, яке конкурує з контрольним антитілом за зв'язування з антигеном-мішенню, можуть застосовуватися конкурентні аналізи. У певних варіантах здійснення таке конкуруюче антитіло зв'язується з тим самим епітопом (наприклад, лінійним або конформаційним епітопом), з яким зв'язується контрольне антитіло. Докладний опис прикладів способів картирування епітопа, з яким зв'язується антитіло, наведений, наприклад, в Моїітіб (1996) "Ерйоре Марріпд Ргоїосої5, " в Меїйоа5 іп МоїІесшіаг Віоіоду т.66 (Нитапа Ргез5, Тоїоула,
МУ). 00119) Термін "антитіло, яке зв'язується з тим самим епітопом", що і контрольне антитіло, означає антитіло, яке блокує зв'язування контрольного антитіла з його антигеном в рамках конкурентного аналізу на 50 95 або більше, і навпаки, контрольне антитіло блокує зв'язування антитіла з його антигеном в рамках конкурентного аналізу на 5095 або більше (іноді позначається як "перехресне блокування"). Приклад конкурентного аналізу наведений у даному описі. Підходящі аналізи для проведення конкурентного аналізу і картирування епітопів включають, без обмеження, аналізи на основі перехресного блокування, конкурентні аналізи
ЕПЗА або ВіАсоге, ЯМР і рентгенівську кристалографію. 00120) Термін "акцепторна каркасна ділянка людини" в рамках даного опису являє собою каркасну ділянку, що включає амінокислотну послідовність каркасної ділянки варіабельного домену легкого ланцюга (МІ) або каркасної ділянки варіабельного домену важкого ланцюга (МН), отримана з каркасної ділянки імуноглобуліну людини або консенсусної каркасної ділянки людини, як зазначено нижче. Акцепторна каркасна ділянка людини, "отримана з" каркасної ділянки імуноглобуліну людини або консенсусної каркасної ділянки людини, може включати їх інтактну амінокислотну послідовність або містити зміни в такій амінокислотній послідовності. У деяких варіантах здійснення кількість амінокислотних змін складає 10 або менше, 9 або менше, 8 або менше, 7 або менше, 6 або менше, 5 або менше, 4 або менше, 3 або менше, або 2 або менше. У деяких варіантах здійснення акцепторна каркасна ділянка МІ людини ідентична послідовності каркасної ділянки МІ імуноглобуліну людини або послідовності консенсусної каркасної ділянки людини. 001211) Термін "химерне" антитіло означає антитіло, у якому одна частина важкого і/або легкого ланцюга отримана з певного джерела або з певних біологічних видів, а інша частина важкого і/або легкого ланцюга отримана з іншого джерела або з інших біологічних видів. 00122) Термін "клас" антитіла означає тип константного домену або константної ділянки важкого ланцюга. Існує п'ять основних класів антитіл: ІА, дО, ІДЧЕ, до і ІдМ, при цьому деякі з них можуть бути також розділені на підкласи (ізотипи), наприклад Ідс1, Ідс2, Іде, Ідс4, ІДдДА1 і
ІЯА2. Константні домени важкого ланцюга, які відповідають різним класам імуноглобулінів, 60 називають а, б, є, у і М, відповідно.
І00123| Термін "цитотоксичний засіб" згідно з використаним в даній заявці значенням означає речовину, яка інгібує або запобігає прояву клітинної функції і/або викликає загибель або руйнування клітини. Цитотоксичні засоби включають, без обмеження, радіоактивні ізотопи (наприклад, А211, І131, 1125, М90, Ке186, Ке188, Зт153, Ві212, РЗ2, РЬ212 їі радіоактивні ізотопи Гц); хіміотерапевтичні засоби або ліки (наприклад, метотрексат, адріаміцин, алкалоїди барвінка (вінкристин, вінбластин, етопозид), доксорубіцин, мелфалан, мітоміцин С, хлорамбуцил, даунорубіцин або інші інтеркалюючі засоби); інгібітори росту; ферменти і їх фрагменти, такі як нуклеолітичні ферменти; антибіотики; токсини, такі як низькомолекулярні токсини або ферментативно активні токсини бактеріального, грибкового, рослинного або тваринного походження, в тому числі їх фрагменти і/або варіанти; і різні описані нижче протипухлинні або протиракові засоби.
І00124| Термін "ефекторні функції" означає біологічну активність, властиву Ес-ділянці антитіла, яка варіюється залежно від ізотипу антитіла. Приклади ефекторних функцій антитіл включають: зв'язування Сід і комплемент-залежну цитотоксичність (СОС); зв'язування з рецептором Ес; антитіло-залежну клітково-опосередковану цитотоксичність (АОСС); фагоцитоз; понижувальну регуляцію рецепторів клітинної поверхні (наприклад, В-клітинного рецептора); і активацію В-клітин. 00125) Термін "ефективна кількість" засобу, такого як фармацевтична композиція, означає кількість, яка при застосуванні в підходящих дозуваннях і протягом необхідних періодів часу є ефективною для досягнення необхідного терапевтичного або профілактичного результату. (00126) Термін " Ес-ділянка" використовується в даній заявці для позначення С-термінальної ділянки важкого ланцюга імуноглобуліну, яка містить, щонайменше, частину константної ділянки. Даний термін включає Ес-ділянки з нативними послідовностями і варіанти Ес-ділянок. У деяких варіантах здійснення Ес-ділянка важкого ланцюга (дО людини розташована від Суз226 або від Рго230 до карбоксильного кінця важкого ланцюга. Однак Ес-ділянка може необов'язково містити С-термінальний лізин (Гуз447). Якщо не зазначене інше, амінокислотні залишки в Ес- ділянці або константній області пронумеровані відповідно до системи нумерації ЄМ, яка також називається індексом Є, як описано в КаБбаї єї аїІ., Зедоепсе5 ої Ргоївїіп5 ої Іттипоі|одісаї
Іпієтеві, 5-е вид. Рибіїс Неанй 5егмісе, Майопаї Іпзійшез ої Неайй, ВеїШезаа, МО, 1991.
Зо І00127| Термін "каркасна ділянка" або "РК" означає залишки варіабельного домену, відмінні від залишків гіперваріабельної ділянки (НУК). ЕК варіабельного домену в цілому складається з чотирьох ЕК доменів: ЕК1, ЕК2, ЕКЗ і ЕК4. Відповідно, послідовності НМК і ЕК в цілому присутні в наступній послідовності в МН (або МІ): ЕК1-НІ (1 1)-ЕН2-Н2 (І 2)-ЕВЗ-НЗІ(І 3)-ЕВАУ. (00128) Терміни "повнорозмірне антитіло", "інтактне антитіло" і "цілісне антитіло" згідно з використаним в даній заявці значенням застосовуються взаємозамінним чином і означають антитіло, що має по суті таку саму структуру, що і нативне антитіло, або що містить важкі ланцюги, до складу яких входить Ес-ділянка, як визначено тут.
І00129| Терміни " клітина-хазяїн", "лінія клітин-хазяїв" і "культура клітин-хазяїв" використовуються взаємозамінним чином і означають клітини, у які була введена екзогенна нуклеїнова кислота, включаючи потомство таких клітин. Клітини-хазяї включають "трансформанти" і ""рансформовані клітини", які включають первинно трансформовані клітини і отримане з них потомство, незалежно від числа пасажів. Потомство може відрізнятися від батьківської клітини за вмістом нуклеїнових кислот у результаті мутацій. В об'єм винаходу входить мутантне потомство, отримане шляхом скринінгу або відбору, яке має таку саму функцію або біологічну активність, що і початково трансформована клітина.
І00130| "Антитіло людини" являє собою антитіло, яке має амінокислотну послідовність, відповідну до послідовності антитіла, яке продукується людиною або клітиною людини, або отримане із джерела, що не є людиною, у якій використовуються репертуари антитіл людини або інші послідовності, що кодують антитіла людини. Дане визначення антитіла людини зокрема не включає гуманізоване антитіло, що включає антигензв'язуючі залишки, що не мають відношення до людини.
ІЇ00131| "Консенсусна каркасна ділянка людини" являє собою каркасну ділянку, яка відповідає амінокислотним залишкам, що найбільш часто зустрічається у наборі послідовностей каркасних ділянок МІ. або МН імуноглобулінів людини. Як правило, набір послідовностей МІ. або
МН імуноглобулінів людини відноситься до підгрупи послідовностей варіабельних доменів. У цілому, підгрупа послідовностей являє собою підгрупу, що відповідає описаній в КаБбаї еї аї.,
Зедиеєпсев ої Ргоївїн5 ої Іттипоіодіса! Іпієгеві, 5-е вид., МІН Рибіїсайоп 91-3242, Вештезаа МО (1991), т. 1-3. В одному варіанті здійснення підгрупа Мі. являє собою підгрупу каппа І відповідно до Кабаї єї аЇ., вище. У деяких варіантах здійснення підгрупа МН являє собою підгрупу ПЇ 60 відповідно до КарБбаї еї а!., вище.
00132) Термін "гуманізоване" антитіло означає химерне антитіло, що включає амінокислотні залишки НМК людини і амінокислотні залишки ЕК людииу. У певних варіантах здійснення гуманізоване антитіло буде включати по суті всі з, щонайменше, одного і, як правило, двох варіабельних доменів, у яких всі або по суті всі НУК (наприклад, СОК) відповідають антитілу виду, що не є людиною, і всі або по суті всі ЕК відповідають антитілу людини. Гуманізоване антитіло необов'язкове може включати, щонайменше, частину константної ділянки антитіла, отриманого з антитіла людини. Термін "гуманізована форма" антитіла, такого як антитіло джерела, що не є людиною, означає антитіло, отримане в результаті гуманізації. 00133) Термін "гіперваріабельна ділянка" або "НМЕ" згідно з використаним в даній заявці значенням означає кожну з ділянок варіабельного домену антитіла, які є гіперваріабельними в плані послідовності ("ділянки, що визначають комплементарність" або "СОР") і/або утворюють структурно визначені петлі (гіперваріабельні петлі") і/або містять контактуючі з антигеном залишки ("антигенні контакти"). В цілому, антитіла включають шість НМЕ: три в МН (НІ, Н2, НЗ) і три в МІ (11, 12, 13). Приклади НУК включають тут: (а) гіперваріабельні петлі, розташовані в районі амінокислотних залишків 26-32 (11), 50-52 (12), 91-96 (13), 26-32 (НІ), 53-55 (Н2) і 96-101 (НЗ) (Споїніа апа І! евК, у). Мої. Віої. 196:901-917 (1987)); (5) СОК, розташовані в районі амінокислотних залишків 24-34 (І 1), 50-56 (І 2), 89-97 (І 3), 31-
ЗБЬ (НІ), 50-65 (Н2) і 95-102 (НЗ) (Кабаї єї а!., Зедиепсез ої Ргоївїнв5 ої Іттипоіодісаї! Іпіегеві, 5-е вид. Рибіїс Неакй Зегмісе, Мабопаї Іпзійшез ої Неацйп, Ве(пезаа, МО (1991)); (с) антигенні контакти, розташовані в районі амінокислотних залишків 2 70-36 (І 1), 46-55 (І 2), 89-96 (13), 30-35Б6 (НІ), 47-58 (Н2) і 93-101 (НЗ) (МассСаїїшт еї аїЇ. У. Мої. Вісі. 262: 732-745 (1996)); і (а) комбінації (а), (Б) і/або (с), включаючи амінокислотні залишки НМУ 46-56 (12), 47-56 (І 2), 48-56 (І 2), 49-56 (І 2), 26-35 (НІ), 26-35Б (НІ), 49-65 (Н2г), 93-102 (НЗ) і 94-102 (НЗ).
ІЇ00134| Якщо не зазначене інше, залишки НМК і інші залишки у варіабельному домені (наприклад, ЕК залишки) пронумеровані в даній заявці за Карбаї еї аї., вище.
ІЇ00135| "Імунокон'югат" являє собою антитіло, кон'юговане з однією або декількома гетерологічними молекулами, що включають, без обмеження, цитотоксичний засіб.
Зо 00136) "Суб'єкт" являє собою ссавця. Ссавці включають, без обмеження, свійських тварин (таких як корови, вівці, кішки, собаки і коні), приматів (таких як люди і відмінні від людини примати, наприклад, мавпи), кроликів і гризунів (таких як миші і пацюки). У деяких варіантах здійснення суб'єкт являє собою людину.
І00137| "Виділене" антитіло являє собою антитіло, відділене від компонентів його природнього середовища. У деяких варіантах здійснення антитіло очищують до ступеня, що перевищує 9595 або 9995, який визначають, наприклад, за допомогою електрофорезу (наприклад, 505-РАСЕ, ізоелектричного фокусування (ІЕЕ), капілярного електрофорезу) або хроматографії (такої як іонообмінна ВЕРХ або ВЕРХ на оберненій фазі). Огляд способів аналізу чистоти антитіл див., наприклад, в Ріаїтап еї аї., У. Спготайодг. В 848:79-87 (2007). (00138) Термін "виділена" нуклеїнова кислота означає молекулу нуклеїнової кислоти, яка була відділена від компонентів її природнього середовища. Виділена нуклеїнова кислота включає молекулу нуклеїнової кислоти, що міститься в клітинах, які зазвичай містять таку молекулу нуклеїнової кислоти, однак зазначена молекула нуклеїнової кислоти присутня поза хромосомою або в ділянці хромосоми, яка відрізняється від природнього місцезнаходження даної молекули в хромосомі. (00139) Термін "виділена нуклеїнова кислота, що кодує анти-1ІЇ-17 антитіло" означає одну або декілька молекул нуклеїнової кислоти, що кодують важкі і легкі ланцюги антитіл (або їх фрагменти), включаючи таку молекулу (молекули) нуклеїнової кислоти, що перебувають в одному векторі або в різних векторах, і таку молекулу (молекули) нуклеїнової кислоти, що присутня в одному або в декількох ділянках клітини-хазяїна. (00140) Термін "виділена нуклеїнова кислота, що кодує анти-1ІЇ-13 антитіло" означає одну або декілька молекул нуклеїнової кислоти, що кодують важкі і легкі ланцюги антитіл (або їх фрагменти), включаючи таку молекулу (молекули) нуклеїнової кислоти, що перебувають в одному векторі або в різних векторах, і таку молекулу (молекули) нуклеїнової кислоти, що присутні в одному або в декількох ділянках клітини-хазяїна. (00141) Термін "моноклональне антитіло" згідно з використаним в даній заявці значенням означає антитіло, що отримане з популяції по суті гомогенних антитіл, тобто окремі антитіла, що складають популяцію, є ідентичними і/або зв'язують той самий епітоп, за винятком можливих варіантів антитіл, наприклад, що містять мутації, що зустрічаються в природі, або, що бо утворюються в процесі одержання препарату на основі моноклональних антитіл, причому такі варіанти зазвичай присутні в мінорних кількостях. На відміну від препаратів на основі поліклональних антитіл, які зазвичай включають різні антитіла, спрямовані проти різних детермінант (епітопів), всі моноклональні антитіла із препарату на основі моноклональних антитіл спрямовані проти однієї детермінанти антигена. Таким чином, визначення "моноклональний" означає, що антитіло отримане з по суті гомогенної популяції антитіл і не повинне розглядатися в якості потребуючого одержання антитіла з будь-яким конкретним способом. Наприклад, моноклональні антитіла можуть бути отримані за допомогою різних способів, включаючи, без обмеження, гібридомний спосіб, способи рекомбінантних ДНК, способи на основі фагового дисплея і способи, в рамках яких використовуються трансгенні тварини, що містять всі або частину локусів імуноглобулінів людини, при цьому дані способи і інші приклади способів одержання моноклональних антитіл описані тут. У деяких варіантах здійснення моноклональне антитіло являє собою мультиспецифічне (таке як біспецифічне) антитіло.
Ї00142| Термін "голе антитіло" означає антитіло, яке не кон'юговане з гетерологічним фрагментом (таким як цитотоксичний фрагмент) або радіоіїзотопною міткою. Голе антитіло може входити в склад фармацевтичної композиції.
ІЇ00143| Термін "нативні антитіла" означає молекули, що зустрічаються в природі, імуноглобулінів, що мають різні структури. Наприклад, нативні антитіла ЇДб являють собою гетеротетрамерні глікопротеїни з молекулярною масою близько 150000 дальтон, що складаються із двох ідентичних легких ланцюгів і двох ідентичних важких ланцюгів, з'єднані дисульфідними зв'язками. Від М- до С-кінця кожний важкий ланцюг має варіабельну ділянку (МН), що також називається варіабельним важким доменом або варіабельним доменом важкого ланцюга, і далі трьома константними доменами (СНІ, СН2 ї СНЗ). Аналогічно, від М- до С-кінця кожний легкий ланцюг має варіабельну ділянку (МІ), що також називається варіабельним легким доменом або варіабельним доменом легкого ланцюга, і далі константним легким (СІ) доменом. Залежно від амінокислотної послідовності константного домену легкий ланцюг антитіла можна віднести до одного із двох типів, що називаються каппа (к) і лямбда (Х). (00144) Термін "вкладиш в упаковку" означає інструкції, які зазвичай вкладають у комерційні упаковки терапевтичних продуктів і які містять інформацію з показань, застосування, дозування,
Зо введення, поєднань терапії, протипоказань і/або попередження, що стосується застосування таких терапевтичних продуктів. Термін "вкладиш в упаковку" означає інструкції, які зазвичай вкладають у комерційні упаковки діагностичних продуктів і які містять інформацію з передбачуваного застосування, принципів тестування, одержання і обробки реагентів, збору і одержання зразків, калібрування аналізу, процедури і проведення аналізу і точності представлення даних, таких як чутливість і специфічність аналізу.
І00145| Термін "частковий (95) ступінь ідентичності амінокислотної послідовності" щодо зазначеної поліпептидної послідовності означає частку амінокислотних залишків у кандидатній послідовності, які ідентичні до амінокислотних залишків у зазначеній поліпептидній послідовності після вирівнювання послідовностей і внесення проміжків, якщо це необхідно, для досягнення максимального ступеня ідентичності послідовностей без враування будь-яких консервативних заміщень в якості частини ступеня ідентичності послідовностей. Вирівнювання для цілей визначення часткового ступеня ідентичності амінокислотних послідовностей може бути здійснене різними способами, відомими фахівцям в даній області, наприклад, із застосуванням широко доступного програмного забезпечення, такого як програми ВІ АТ,
ВІ А5Т-2, АГІСМ або Меодаїїдп (ОМАЗТАК). Фахівці в даній області можуть визначити параметри, що підходять для вирівнювання послідовностей, включаючи будь-які алгоритми, необхідні для досягнення максимального вирівнювання порівнюваних послідовностей по всій довжині. Однак для цілей даного опису значення 95 ідентичності амінокислотних послідовностей отримані із застосуванням комп'ютерної програми для порівняння послідовностей АЇЇС2М-2. Комп'ютерна програма для порівняння послідовностей АГ Ї-М-2 була розроблена Сепепіесії, Іпс., при цьому її вихідний код і документація користувача були подані в Бюро авторського права США (Ш.5.
Соругідпі Ойісе), УмМазпіпдаїоп 0.С., 20559, і зареєстровані під реєстраційним номером
ТХОИ510087. Програма АГІСМ-2 перебуває у вільному доступі від бСепепіесі, Іпс., 5ошій Зап
Егапсізсо, Саїйогпіа, або вона може бути скомпільована з вихідного коду. Програма АГІСМ-2 повинна бути скомпільована для використання на операційній системі ОМІХ, включаючи ОМІХ 4.00. Всі параметри порівняння послідовностей встановлюються програмою АГІСМ-2 ї не варіюються. (00146 Якщо АГІСМ-2 застосовують для порівняння амінокислотних послідовностей, 90 ідентичності деякої амінокислотної послідовності А і, або відносно, деякої амінокислотної 60 послідовності В (або, інакше кажучи, конкретна амінокислотна послідовність А має або характеризується певним 95 ідентичності амінокислотної послідовності відносно або щодо конкретної амінокислотної послідовності В) розраховують у такий спосіб: 100 х Х/У де Х являє собою кількість амінокислотних залишків, розрахованих як ідентичні збіги, визначені за допомогою програми для вирівнювання АГІСМ-2, при вирівнюванні А і В із застосуванням даної програми, і де У являє собою загальну кількість амінокислотних залишків у
В. Слід розуміти, що якщо довжина амінокислотної послідовності А не дорівнює довжині амінокислотної послідовності В, 95 ідентичності по амінокислотній послідовності А до В не буде дорівнювати 95 ідентичності по амінокислотній послідовності В до А. Якщо не зазначене інше, всі використовувані в даній заявці значення 95 ідентичності по амінокислотній послідовності отримані відповідно до опису в попередньому абзаці із застосуванням комп'ютерної програми
АПИаМ-2.
І00147| Термін "фармацевтична композиція" означає препарат, який перебуває у вигляді форми, яка забезпечує ефективну біологічну активність активного інгредієнта, що міститься в ній, і не містить додаткових компонентів, що мають неприйнятну токсичність для суб'єкта, якому вводять композицію.
І00148| Термін "фармацевтично прийнятний носій" означає інгредієнт фармацевтичної композиції, відмінний від активного інгредієнта, який є нетоксичним для суб'єкта.
Фармацевтично прийнятний носій включає, без обмеження, буфер, наповнювач, стабілізатор або консервант. (001491) Термін "ІС-17" згідно з використаним в даній заявці значенням означає гомодимер ІІ - 17А, гомодимер 1-17, і/або гетеродимер 1/-17АЕ, якщо не зазначене інше. Термін 1--174А, ЇЇ - 17АА, гомодимер 1І--17АА, і гомодимер 1І--17А застосовуються взаємозамінним чином, якщо не зазначене інше. Терміни 1-17, 1 -17ЕЕ, гомодимер 1-17ЕРЕ, і гомодимер І--17Е застосовуються взаємозамінним чином, якщо не зазначене інше. Терміни І/-17АЕ, гетеродимер 1І-17АБКЕ, і гетеродимер 1І--17А/Е застосовуються взаємозамінним чином, якщо не зазначене інше. Термін
І/-17 означає будь-який нативний 1І-17А, І/-17Е і/або гетеродимер 1І/-17АЕ від будь-якого джерела, що представляє собою хребетну тварину, включаючи ссавців, таких як примати (наприклад, люди) і гризуни (наприклад, миші і пацюки), якщо не зазначене інше. Даний термін
Зо включає "повнорозмірний" непроцесований 1-17, а також будь-яку форму 1-17, яка є результатом процесингу в клітині. Даний термін також охоплює варіанти, що зустрічаються в природі, І--17, наприклад варіанти на основі сплайсинга або алельні варіанти. Амінокислотні послідовності прикладів ІІ -17А людини показані в 5ЕО ІЮ МО: 7 і 8. Амінокислотні послідовності прикладів І--17Є людини показані в 5ЕО ІЮ МО: 9 ії 10. У певних варіантах здійснення послідовності І/-17 включає екзогенний, тобто ненативний сигнальний пептид. У певних варіантах здійснення білки 1-17 являють собою зрілі білки без сигнального пептиду. 001501 Згідно з використаним в даній заявці значенням, термін "ІІ/-13" означає будь-який нативний 1-13 від будь-якого джерела, що представляє собою хребетну тварину, включаючи ссавців, таких як примати (наприклад, люди) і гризуни (наприклад, миші і пацюки), якщо не зазначене інше. Даний термін включає "повнорозмірний" непроцесований ІІ -13, а також будь- яку форму 1-13, яка є результатом процесингу в клітині. Даний термін також охоплює варіанти, що зустрічаються в природі, І/-13, наприклад варіанти на основі сплайсинга або алельні варіанти. Амінокислотні послідовності прикладів ІЇ/-13 людини показані в -:БОІЮО МО: 1 і2 їі містяться в базі даних Зм/і55-Ргої під каталожним номером Р35225.22. Амінокислотна послідовність прикладу у вигляді І--13 мавпи циномолгус показана в 5ЕО ІЮО МО: 4. У певних варіантах здійснення послідовності І/-13 включає екзогенний, тобто ненативний сигнальний пептид. У певних варіантах здійснення білки ІЇ-13 являють собою зрілі білки без сигнального пептиду.
ЇО0151| У даному описі термін "лікування" (а також його граматичні варіанти, такі як "лікувати" або "лікування") означає клінічне втручання з метою зміни природнього перебігу стану суб'єкта, що підлягає лікуванню, яке може бути проведене для профілактики або в процесі перебігу клінічної патології. Бажані ефекти лікування включають, без обмеження, запобігання появи або рецидиву захворювання, полегшення симптомів, зниження симптомів, зменшення будь-яких прямих або непрямих патологічних наслідків захворювання, запобігання появи метастаз, зменшення швидкості розвитку захворювання, поліпшення або полегшення хворобливого стану, ремісію або поліпшений прогноз. У деяких варіантах здійснення антитіла застосовують для відтермінування розвитку захворювання або для вповільнення прогресування захворювання. 00152) Термін "варіабельна ділянка", або "варіабельний домен", означає домен важкого або бо легкого ланцюга антитіла, який бере участь у зв'язуванні антитіла з антигеном. Варіабельні домени важкого ланцюга і легкого ланцюга (МН і МІ, відповідно) нативного антитіла, як правило, мають схожі структури, при цьому кожний домен включає чотири консервативні каркасні ділянки (ЕК) і три гіперваріабельні ділянки (НУК). (Див., наприклад, Кіпаї еї аїЇ. Кибу Іттипоїіоду, 6б-е вид., М.Н. Егеетап апа Со., стор. 91 (2007).) Один МН або Мі. домен може бути достатнім для додання антигензв'язуючої специфічності. Більше того, антитіла, здатні зв'язуватися з конкретним антигеном, можуть бути виділені із застосуванням домену МН або Мі. антитіла, яке зв'язує антиген, для скринінгу бібліотеки комплементарних МІ. або МН доменів, відповідно. Див., наприклад, Ропоїапо еї аї., У. Іттипої. 150:880-887 (1993); СіаїКвоп еї аї!., Майте 352:624-628 (1991). 00153) Термін "вектор" згідно з використаним в даній заявці значенням означає молекулу нуклеїнової кислоти, здатну забезпечувати репродукцію іншої нуклеїнової кислоти, яка пов'язана з нею. Даний термін включає вектор у вигляді самореплікуючої структури нуклеїновой кислоти, а також вектор, вбудований у геном клітини-хазяїна, у яку вона введена. Певні вектори здатні керувати експресією нуклеїнових кислот, з якими вони перебувають у функціональному зв'язку. Такі вектори в даному описі називають "вектори експресії".
КОМПОЗИЦІЇ ТА СПОСОБИ
00154) У певних варіантах здійснення передбачені біспецифічні антитіла, які зв'язуються з
І/-17 ї ІС-13. Дані антитіла можуть застосовуватися, наприклад, для діагностики або лікування еозинофільних захворювань, включаючи респіраторні захворювання (такі як астма і ІФЛ), нейтрофільних захворювань, опосередкованих І/-17 захворювань і опосередкованих 1-13 захворювань. Див., наприклад, заявку на патент США 2012/0141492, патент США 8715669 або заявку М/О2009/136286 (повністю наведені в даній заявці для посилання). 00155) Як описано тут, серед групи пацієнтів з астмою з високим рівнем еозинофілів може бути ідентифікована підгрупа з високим рівнем нейтрофілів і низьким рівнем нейтрофілів. Анти-
І-13 антагоніст лебрикізумаб демонстрував високу ефективність лікування при вимірюванні на основі ДЕЕМ'І 95 у підгрупи з високим рівнем еозинофілів і низьким рівнем нейтрофілів, у той час як лебрикізумаб є менш ефективним у підгрупі з високим рівнем еозинофілів і високим рівнем нейтрофілів. Див. Фіг15С ії ОО. Таким чином, замість відмітної, окремої групи, що супроводжується високим рівнем нейтрофілів астма може співіснувати з еозинофільною
Зо астмою, що додатково підтверджує переваги описаного в даній заявці біспецифічного анти-ІЇ - 13/І-17 антитіла і його застосування для лікування астми в ступені від помірного до важкого.
Відповідно, у певних варіантах здійснення винахід відноситься до способів лікування астми, зокрема астми в ступені від помірного до важкого в суб'єкта, що має потребу в цьому, що включають введення суб'єкту описаного в даній заявці мультиспецифічного антитіла, при цьому мультиспецифічне антитіло демонструє підвищену ефективність у суб'єкта в порівнянні з лебрикізумабом. У деяких варіантах здійснення астма являє собою еозинофільну астму, що супроводжується високим рівнем Тп2 астму, опосередковану Тп2 астму або, що супроводжується високим рівнем ІЇ/-13 астму. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має підвищений рівень еозинофілів в крові і/або підвищений рівень нейтрофілів в крові в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У певних варіантах здійснення суб'єкт має рівень еозинофілів в крові, що складає, щонайменше, 150 або, щонайменше, 300 еозинофілів/мкл крові. У певних варіантах здійснення суб'єкт має рівень нейтрофілів в крові, що відповідає, щонайменше, середньому рівню нейтрофілів в крові в групи пацієнтів. У певних варіантах здійснення суб'єкт має рівень, щонайменше, 3800 нейтрофілів/мкл крові.
Приклади анти-1Ї -17 антитіл 00156) У деяких варіантах здійснення передбачені виділені антитіла, які зв'язують 1-17. У деяких варіантах здійснення передбачене виділене 1-17 антитіло або крос-реактивні анти-1Ї - 17А ї Е антитіла, при цьому дані антитіла зв'язують гомодимер 1--17А, гомодимер 1-17Е, і необов'язково гетеродимер ІЇ/-17АЕ. У деяких варіантах здійснення виділене 1-17 або крос- реактивні анти-ІЇ-17А і Е антитіла зв'язуються з гомодимером 1-17А, гомодимером 1--17Е і гетеродимером ІІ -17АЕ.
Антитіла 15Е6 і 15Е6ЕК
І00157| У деяких варіантах здійснення анти-1Ї -17 антитіло включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НМЕК, вибраних з (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 40; (Б) НМЕ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з
ЗЕБЕО ІЮО МО: 41, 43, 80, 81 ії 114; (с) НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 42 або 5ЕО ІО МО: 44; (й) НМК-1І1, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 45; (є) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 46; і (І) НМК-І3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 47. 60 00158) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше,
одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ І МО: 40; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІО МО: 41, 43, 80, 81 ії 114; ї (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮ МО: 44. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮ
МО: 44. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 42 або 5БО ІО МО: 44, і НМЕ-І3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 47. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮ МО: 44, НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 47, і НМАК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 41, 43, 80, 81 і 114. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а)
НМВ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 40; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 41, 43, 80, 81 і 114; ї (су НМЕК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮО МО: 44.
Ї00159| У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ І МО: 40; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮО МО: 41; і (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮ МО: 42. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 40; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 52Е0 ІЮ МО: 43; і (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність зБЕО ІО МО: 44. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМЕК-НІ, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 40; (5) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 80; і (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність «ЕС ІЮО МО: 44. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 40; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 81; і (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 44. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІЮ МО: 40; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 114; їі (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ
МО: 44. 00160) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМА-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО:45; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:46; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:47. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 45; (в) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 4б; і (с) НМА-І 3, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 47.
І00161| В іншому варіанті здійснення антитіло включає (а) МН домен, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (ї) НМА-НІ1, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО:40, (ії) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮО МО: 41, 43, 80 ії 81, ї (ії) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮ МО: 44; і (Б) МІ домен, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК М, вибрані з (ї) НМК-11, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 45, (ії) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 46, і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5хЕО ІЮО МО: 47. 00162) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 40; (5) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 41, 43, 80, 81 і 114; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 42 або 5ЕО ІЮ МО: 44; (4) НМЕК-І1, що включає амінокислотну
БО послідовність «ЕО ІЮ МО: 45; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 46; і () НМА-І3, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 47. 00163) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІЮ МО: 40; (р) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 43; (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 44; (84) НМА-І/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 45; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 46; їі () НМК-ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮ МО: 47. 00164) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІЮ МО: 40; (5) НМК-Н2, що включає амінокислотну 60 послідовність 5ЕО ІЮ МО: 80; (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО:
44; (84) НМА-І/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 45; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 46; ї () НМК-ІЇЗ, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІО МО: 47. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 40; (в) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 81; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 44; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 45; (є) НУМВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 46; ії () НМЕК-І3, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 47. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО
ІО МО: 40; (р) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 114; (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 44; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 45; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 4б; і () НМА-І3, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 47. 00165) У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮ
МО: 80, Х може являти собою будь-яку амінокислоту, крім М. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають ЗЕО ІЮО МО: 80, Х може бути вибраний з 0, А, 0, Н, р, К, 5 і К. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮ МО: 80, Х може бути вибраний з с, А, 0, О їі 5. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮ МО: 80, Х може бути вибраний з 0, 5 і 0). У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають ЗЕО ІО МО: 81, Х може являти собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Т. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають ЗЕО ІЮ МО: 81, Х може бути вибраний з А, с, Р, М ї М. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮ МО: 81, Х може бути вибраний з А, С і М. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають
ЗЕО ІО МО: 114, Х може бути вибраний з 0, 5 або О).. У деяких варіантах здійснення МУУ5 мотив
ЗЕО ІЮ МО: 43 замінений на МР5.
Ї00166| У деяких варіантах здійснення анти-І/!-17 антитіло включає послідовність варіабельного домену важкого ланцюга (МН), що має щонайменше, 90 95, 91 9, 92 9, 93 9, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної
Ко) послідовності, вибраної з 5ЕО ІЮО МО: 37, 39, 82, 83 і 115. У певних варіантах здійснення послідовність МН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 95, 93 Уо, 94 У, 95 95, 96 Фо, 97 90, 98 Фо або 99 95 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції в порівнянні з вихідною послідовністю, однак анти-ІЇ!-17 антитіло, що включає таку послідовність, зберігає здатність зв'язувати ІЇ/-17. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в ХЕО ІЮО МО: 37 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в 5ЕО ІО МО: 39 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в ЗЕО ІЮ МО: 82 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в х»ЕО ІЮ МО: 83 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в 5ЕО ІЮО МО: 115 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМК (тобто в ЕК). Необов'язково, анти-1ІІ-17 антитіло включає послідовність
МН в 5ЕО ІО МО: 37, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності.
Необов'язково, анти-1ІЇ-17 антитіло включає послідовність МН в З5ЕО ІЮ МО: 39, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. Необов'язково, анти-ІЇ -17 антитіло включає послідовність МН в 5ЕО ІО МО: 82, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. Необов'язково, анти-іІ -17 антитіло включає послідовність МН в 5ЗЕО ІЮ МО: 83, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. Необов'язково, анти-Ї1Ї -1 7 антитіло включає послідовність МН в 5ЕО ІЮ МО: 115, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У певному варіанті здійснення варіабельний домен важкого ланцюга включає один, два або три НМЕ, вибраних з: (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІО МО: 40; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з
ЗЕО ІЮО МО: 41, 43, 80, 81 ї 114; ї (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ
МО: 42 або 5ЕО ІО МО: 44. У певних варіантах здійснення послідовність МН включає послідовність НУК, що має щонайменше, 60 95, 64 Фо, 65 о, 68 У, 70 Уо, 75 Чо, 80 Уо, 82 Ус, 85 9о, 8895, 9095, 92965, 93905, 9495, 10090 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з БЕО ІЮ МО: 40, 41, 42, 43, 44, 80, 81 їі 114, при цьому антитіло зберігає здатність зв'язувати 1/-17. У певних варіантах здійснення послідовність МН включає послідовність НМК-Н2, що має щонайменше, 94 95 ідентичність послідовності відносно ЗЕО ІЮ 60 МО:43. У певних варіантах здійснення послідовність МН включає НУМК-Н2, що має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:43, яка не є глікозильованою. У певних варіантах здійснення послідовність МН включає НУБ-Н2, що має амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 80, 81 або 114. 00167) У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-17 антитіло, при цьому дане антитіло включає варіабельний домен легкого ланцюга (МІ), що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності БЕО ІЮ МО: 38. У певних варіантах здійснення послідовність МІ, що має щонайменше, 90 96, 91 95, 92 95, 9395, 9495, 9595, 96905, 97 У, 98 90 або 9995 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції в порівнянні з вихідною послідовністю, однак анти-ІЇ -17 антитіло, що включає таку послідовність, зберігає здатність зв'язувати ІЇ/-17. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в х»ЕО ІЮ МО: 38 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУК (тобто в
ЕК). Необов'язково, анти-ІЇ -17 антитіло включає послідовність МІ в 5ЕО ІО МО: 38, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У певному варіанті здійснення МІ. включає один, два або три НУК, вибраних з (а) НМК-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:45; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:46; і (с) НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО ІО МО 47. В певних варіантах здійснення послідовність МІ. включає послідовність НМК, що має щонайменше, 60 95, 64 95, 65 о, 68 о, 70 90, 75 90, 80 Уо, 82 У, 85 Уо, 88 9о, 90 У, 92 905, 93 9о, 94 Фо, 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕО І МО: 45, 46 і 47, при цьому антитіло зберігає здатність зв'язувати ІІ--17. 00168) У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-17 антитіло, при цьому дане антитіло включає такий самий МН, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, і такий самий МІ, що ії у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовності МН і Мі в 5ЕО ІЮ МО:37 і 5ЕО ІЮ МО:38, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовності МН і Мі в ЗЕО ІЮО МО:39 і 5ЕО ІЮО МО:38, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. У деяких варіантах здійснення антитіло
Ко) включає послідовності МН і Мі в 5ЕО ІЮ МО:82 і 5ЕБЕО ІЮ МО:38, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовності МН і Мі в 5ЕО ІЮ МО:83 ї 5ЕО ІЮО МО:38, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовності МН і Мі в 5ЕО ІЮ МО:115 і 5Е6ЕО ІО МО:38, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. 00169) У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮ
МО: 82, Х може являти собою будь-яку амінокислоту, крім М. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають ЗЕО ІЮО МО: 82, Х може бути вибраний з 0, А, 0, Н, р, К їі К. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮ МО: 82, Х може бути вибраний з с, А і 0). У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають ЗЕО ІЮ МО: 83, Х може являти собою будь-яку амінокислоту, крім З або Т. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають ЗЕО ІЮО МО: 83, Х може являти собою А, б, Р або М. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮО МО: 115, Х може являти собою 0, 5 або 0. 00170) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке конкурує за зв'язування з
І/-17 з анти-І-17 антитілом, що включають послідовність МН ЗЕО ІО МО: 39 і послідовність МІ.
ЗЕО ІЮ МО: 38. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується 3 тим самим епітопом, що і описане в даній заявці анти-ЇЇ -17 антитіло. Наприклад, у певних варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується з тим самим епітопом, що ії анти-ЇЇ-17
БО антитіло, що включає послідовність МН 5ЕО ІО МО: 39 і послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 38.
ІЇ00171| У деяких варіантах здійснення анти-1ІЇ-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення являє собою моноклональне антитіло, включаючи химерне, гуманізоване антитіло або антитіло людини. У деяких варіантах здійснення анти-1Ї -17 антитіло являє собою фрагмент антитіла, наприклад Ем, Раб, Раб", зсЕм, діатіло або фрагмент К(аб)2. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою повнорозмірне антитіло, наприклад інтактне антитіло Їд1 або Ідс4 або, що відноситься до іншого класу або ізотипу, як визначено тут.
І00172| У деяких варіантах здійснення анти-ІЇ!-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення може мати будь-яку з ознак, самостійно або в комбінації, які описані в Розділах 1-7 нижче. бо Антитіла 30012 і 30012ВЕ
00173) У деяких варіантах здійснення анти-1Ї -17 антитіло включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НМЕК, вибраних з (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 51; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 52 або ЗЕО ІЮО МО: 53; (с) НМЕК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 54; (а)
НМВ-І/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕБО ІО МО: 55; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 56; їі () НМК-ІЇ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 57. 00174) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 51; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО ІЮО МО: 53; і (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 54. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність «ЕС ІЮО МО: 54. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 54, і НМК-І З, що включає амінокислотну послідовність «ЕС ІЮО МО: 57. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 54, НМК-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 57, і НМАК-Н2, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 52 або 5ЕО ІО МО: 53. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 51; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО ІО МО: 53; і (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 54. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІЮ МО: 51; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮО МО: 52; і (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮ МО: 54. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 51; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5260 ІЮ МО: 53; і (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 54. 00175) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМЕ-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС ОО МО:55; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну
Ко) послідовність ЗЕО ІЮ МО:56; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:57. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НУВ-11, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 55; (в) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 56; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 57.
І00176| У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) домен МН, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (ї) НМА-НІ1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 51, (і) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО ІЮО МО: 53, ї (ії) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 54; і (Б) домен Мі, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК М, вибрані з (ї) НМК-11, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 55, (ії) НМА-12, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 56, і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність зхЕО ІЮО МО: 57.
І00177| У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 51; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО ІО МО: 53; (с) НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 54; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 55; (є) НМВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 56; і (5 НМК-І3, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІЮ МО: 57. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО
БО ІО МО: 51; (5) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮО МО: 53; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІО МО: 54; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 55; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 56; і () НМК-1І 3, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮО МО: 57.
Ї00178| У деяких варіантах здійснення анти-І/!-17 антитіло включає послідовність варіабельного домену важкого ланцюга (МН), що має щонайменше, 90 95, 91 9, 92 9, 93 9, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 48 або 5ЕО ІЮ МО: 50. У певних варіантах здійснення послідовність
МН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 94 95, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції в 60 порівнянні з вихідною послідовністю, однак анти-ІІ -17 антитіло, що включає таку послідовність,
зберігає здатність зв'язувати ІЇ/-17. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в хЕО ІЮ МО: 48 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в 5ЕО ІЮ МО: 50 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМК (тобто в ЕК). Необов'язково, анти-1Ї -17 антитіло включає послідовність
МН в 5ЕО ІЮО МО: 48, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності.
Необов'язково, анти-1ІЇ-17 антитіло включає послідовність МН в 5ЕО ІО МО: 50, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У певному варіанті здійснення МН включає один, два або три НМЕ, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО
ІО МО: 51, (б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО І МО: 53, і (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮО МО: 54. У певних варіантах здійснення послідовність МН включає послідовність НМК, що має щонайменше, 60 95, 64 95, 65 то, 68 то, 70 Зо, 75 90, 80 то, 82 то, 85 то, 88 то, 90 то, 92 то, 93 то, 94 то, 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕО ІЮО МО: 51, 52, 53 і 54, при цьому антитіло зберігає здатність зв'язувати ІІ -17. 00179) У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-17 антитіло, при цьому дане антитіло включає варіабельний домен легкого ланцюга (МІ), що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5ЕО ІЮ МО: 49. У деяких варіантах здійснення послідовність МІ, що має щонайменше, 90 96, 91 95, 92 95, 9395, 9495, 9595, 96905, 97 У, 98 90 або 9995 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції в порівнянні з вихідною послідовністю, однак анти-ІІ -17 антитіло, що включає таку послідовність, зберігає здатність зв'язувати ІЇ/-17. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в х»ЕО ІЮ МО: 49 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУК (тобто в
ЕК). Необов'язково, анти-ІЇ -17 антитіло включає послідовність МІ в 5ЕО ІЮО МО: 49, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У певному варіанті здійснення МІ включає один, два або три НУК, вибраних з (а) НМК-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:55; (Б) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:56; і (с) НМЕ-І 3, що
Ко) включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО ІО МО:57. У певних варіантах здійснення послідовність МІ. включає послідовність НМК, що має щонайменше, 60 95, 64 95, 65 о, 68 о, 70 90, 75 90, 80 Уо, 82 У, 85 Уо, 88 9о, 90 У, 92 905, 93 9о, 94 Фо, 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕО ІО МО: 55, 56 і 57, при цьому антитіло зберігає здатність зв'язувати ІІ--17. 00180) У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-17 антитіло, при цьому дане антитіло включає такий самий МН, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, і такий самий МІ, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовності МН і МІ в 5ЕО ІЮ МО:48 ії БЕО ІЮ МО:49, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовності МН і Мі в ЗЕО ІЮО МО:50 і 5ЕО ІЮО МО:49, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. 00181) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке конкурує за зв'язування з
І/-17 з анти-І-17 антитілом, що включають послідовність МН ЗЕО ІЮО МО: 50 і послідовність МІ.
ЗЕО ІЮ МО: 49. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується 3 тим самим епітопом, що і описане в даній заявці анти-1ІЇ-17 антитіло. Наприклад, у певних варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується з тим самим епітопом, що ії анти-ЇЇ-17 антитіло, що включає послідовність МН 5ЕО ІО МО: 50 і послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 49.
І00182| У деяких варіантах здійснення анти-1ІЇ-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення являє собою моноклональне антитіло, включаючи химерне, гуманізоване антитіло або антитіло людини. У деяких варіантах здійснення анти-1Ї -17 антитіло являє собою фрагмент антитіла, наприклад Ем, Раб, Раб", зсЕм, діатіло або фрагмент Е(аб)2. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою повнорозмірне антитіло, наприклад інтактне антитіло Їдс1 або Ідс4 або, що має відношення до іншого класу або ізотипу, як визначено в даному описі.
ІЇ00183| У деяких варіантах здійснення анти-ІЇ!-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення може мати будь-яку з ознак, самостійно або в комбінації, як і описано в Розділах 1-7 нижче.
Антитіла 39Е12 і 3З9Е12А 00184) У деяких варіантах здійснення анти-1ЇЇ -17 антитіло включає, щонайменше, один, два, бо три, чотири, п'ять або шість НМЕ, вибраних з (а) НМЕК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 61; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 62; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕС ОО МО: 63; (4) НМА-І1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІО МО: 64; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 65; і (Її НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 66. 00185) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ І МО: 61; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮО МО: 62; і (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮ МО: 63. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 63. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 63, і НМК-ІЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 66. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 63, НМК-ІЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 66, і НМАК-Н2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 62. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 61; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність зХЕО ІО МО: 62; і (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 63. 00186) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМА-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС ОО МО:64; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:65; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:66. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 64; (в) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 65; і (с) НМА-І 3, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 66.
І00187| У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) домен МН, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (ї) НМА-НІ1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 61, (і) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 62, і (ії) НМАЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність,
Ко) вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 63; і (Б) домен МІ, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (ї) НМЕ-І1, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО І МО: 64, (ії) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 65, і (с) НМЕ-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 66. 00188) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІЮ МО: 61; (5) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 62; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 63; (4) НУВ-І71, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 64; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 65; і () НМК-ІЇЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 66.
ЇО0189| У деяких варіантах здійснення анти-І/!-17 антитіло включає послідовність варіабельного домену важкого ланцюга (МН), що має щонайменше, 90 95, 91 9, 92 9, 93 9, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 58. У певних варіантах здійснення послідовність МН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 95, 93 Зо, 94 90, 95 95, 96 95, 97 У, 98 95 або 99 95 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції у порівнянні з вихідною послідовністю, однак анти-іІЇ-17 антитіло, що включає таку послідовність, зберігає здатність зв'язувати ІЇ-17. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в
ЗЕБЕО ІЮ МО: 58 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМЕК (тобто в
БО ЕК). Необов'язково, анти-1ІЇ -17 антитіло включає послідовність МН в 5ЕО ІЮ МО: 58, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У певному варіанті здійснення МН включає один, два або три НМЕ, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО
ІО МО: 61, (р) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 62, і (с) НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 63. У певних варіантах здійснення послідовність МН включає послідовність НУК, що має щонайменше, 60 95, 64 95, 65 о, 68 о, 70 90, 75 90, 80 Уо, 82 У, 85 Уо, 88 9о, 90 У, 92 905, 93 9о, 94 Фо, 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕО І МО: 61, 62 і 63, при цьому антитіло зберігає здатність зв'язувати ІІ--17. 00190) У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-17 антитіло, при цьому дане бо антитіло включає варіабельний домен легкого ланцюга (М), що має щонайменше, 90 95, 91 95,
92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5ЕО ІЮ МО: 59 або ЗЕО ІОЮ МО: 60. У деяких варіантах здійснення послідовність МІ, що має щонайменше, 90 Фо, 91 Фо, 92 95, 93 Уо, 94 ую, 95 Фо, 96 95, 97 90, 98 Фо або 99 95 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції в порівнянні з вихідною послідовністю, однак анти-ІЇ!-17 антитіло, що включає таку послідовність, зберігає здатність зв'язувати ІЇ/-17. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в ХЕО ІЮО МО: 59 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в 5ЕО І МО: 60 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУЄ. (тобто в ЕК). Необов'язково, анти-іІЇ -17 антитіло включає послідовність МІ ЗЕО ІЮО МО: 59, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності.
Необов'язково, анти-ІЇ!-17 антитіло включає послідовність МІ 5ЕО ІЮО МО: 60, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У певному варіанті здійснення МІ включає один, два або три НУК, вибраних з (а) НМЕ-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:64; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:65; і (с) НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО ІО МО 66. У певних варіантах здійснення послідовність МІ. включає послідовність НМК, що має щонайменше, 60 95, 64 95, 65 о, 68 о, 70 90, 75 90, 80 Уо, 82 У, 85 Уо, 88 9о, 90 У, 92 905, 93 9о, 94 Фо, 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕО ІЮО МО: 64, 65 і 66, при цьому антитіло зберігає здатність зв'язувати ІІ -17. 00191) У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-17 антитіло, при цьому дане антитіло включає такий самий МН, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, і такий самий МІ, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовності МН і МІ в 5ЕО ІЮ МО:58 ії БЕО ІЮ МО:59, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовності МН і МІ в ЗЕО ІЮ МО:58 і БЕО ІЮ МО:60, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. 00192) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке конкурує за зв'язування з
І/-17 з анти-І-17 антитілом, що включають послідовність МН ЗЕО ІЮ МО: 58 і послідовність МІ.
ЗЕО ІЮ МО: 60. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується 3 тим самим епітопом, що і описане в даній заявці анти-ЇЇ -17 антитіло. Наприклад, у певних варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується з тим самим епітопом, що і анти-ЇЇ-17 антитіло, що включає послідовність МН 5ЕО ІО МО: 58 і послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 60.
ІЇ00193| У деяких варіантах здійснення анти-1ІЇ-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення являє собою моноклональне антитіло, включаючи химерне, гуманізоване антитіло або антитіло людини. У деяких варіантах здійснення анти-1Ї -17 антитіло являє собою фрагмент антитіла, наприклад Ем, Раб, Раб, зсЕм, діатіло або фрагмент ЕК(ар)2. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою повнорозмірне антитіло, наприклад інтактне антитіло Їдс1 або Ідс4 або, що має відношення до іншого класу або ізотипу, як визначено в даному описі.
ІЇ00194| У деяких варіантах здійснення анти-І/!-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення може мати будь-яку з ознак, самостійно або в комбінації, які описані в Розділах 1-7 нижче.
Приклади анти-1Ї -13 антитіл 00195) У деяких варіантах здійснення передбачені виділені антитіла, які зв'язують ІІ -13. У деяких варіантах здійснення анти-1ІЇ-13 антитіло включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НМК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ
МО: 15; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 16; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 17; (4) НМК-І/1,що включає амінокислотну
БО послідовність «ЕО ІЮ МО: 18; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 19; ї (35 НМК-ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 20. Див., наприклад, патент США 8088618 і УМО2005/062967 (повністю наведені в даному описі для посилання). 00196) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 15; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 16; і (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮ МО: 17. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 17. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17, і НМК-ІЗ, що включає амінокислотну 60 послідовність ЗЕО ІЮО МО: 20. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМЕК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17, НМК-ІЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 20, ії НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 16. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 16; ї (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17. 00197) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМА-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС ОО МО:18; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО:19; ії (с) НМК-ІЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:20. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМК-1І1, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 18; (в) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 19; і (с) НМА-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 20.
І00198| У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) домен МН, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (ї) НМА-НІ1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 15, (ії) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16, і (ії) НМЕК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з
ЗЕО ІЮ МО: 17; і (Б) домен МІ, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МІ, вибрані з (ї) НУВ-І1, що включає амінокислотну послідовність ХЕ ІЮ
МО: 18, (її) НМВ-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 19, і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 20. 00199) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16; (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 17; (4) НМВ8-І/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 18; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 19; ї () НМК-ІЇЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 20.
І00200| У будь-якому із зазначених вище варіантів здійснення анти-ІЇ-13 антитіло є гуманізованим. У деяких варіантах здійснення анти-ІІ -13 антитіло включає ті самі НУК, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, а також включає акцепторна каркасна ділянка
Зо людини, наприклад каркасна ділянка імуноглобуліну людини або консенсусна каркасна ділянка людини. У деяких варіантах здійснення анти-1ІЇ-13 антитіло включає ті самі НМК, що і у будь- якому з описаних вище варіантів здійснення, а також включає УН, що включає послідовності
ЕКТ, ЕК2, ЕКЗ і/або ЕК4 з 5ЕО ІО МО: 13. У деяких варіантах здійснення анти-1І-13 антитіло включає ті самі НУК, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, а також включає
МІ, що включає послідовності ЕК1, ЕК2, ЕКЗ і/або ЕМК4 з 5ЕО ІЮО МО: 14. У деяких варіантах здійснення анти-ІЇ-13 антитіло включає ті самі НМК, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, а також включає УН, що включає послідовності ЕК1, ЕК2, ЕКЗ і/або ЕКА з
ЗЕО ІЮО МО: 11. У деяких варіантах здійснення анти-1ІІ-13 антитіло включає ті самі НУК, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, а також включає Мі, що включає послідовності ЕК1, ЕБ2, ЕКЗ і/або ЕКА з 5ЕО ІЮО МО: 12.
І00201| У деяких варіантах здійснення зв'язування анти-І/!-13 антитіла з 1-13 інгібує внутрішньоклітинну передачу сигналу 1-13, опосередковувану І/-13Ка1//-4Ка. У деяких подібних варіантах здійснення анти-ЇЇ-13 антитіло не інгібує зв'язування 1-13 з І/-13Ка1. У деяких подібних варіантах здійснення анти-1Ї-13 антитіло інгібує зв'язування 1-13 з ІІ -4Ка. У деяких варіантах здійснення анти-ЇЇ-13 антитіло являє собою лебрикізумаб. Див. ОНесп еї аї., 2013, у. Мої. Віої. 425:1330-1339. У деяких варіантах здійснення анти-ІЇ-13 антитіло містить заміщення МАГ. у легкому ланцюзі (5ЕО ІЮ МО:14) і заміщення СО1Е у важкому ланцюзі (5ЕО ІЮ
МО:13).
І00202| У деяких варіантах здійснення анти-І/!-13 антитіло включає послідовність варіабельного домену важкого ланцюга (МН), що має щонайменше, 90 95, 91 9, 92 9, 93 9, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 13. У певних варіантах здійснення послідовність МН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 95, 93 Зо, 94 90, 95 95, 96 95, 97 У, 98 95 або 99 95 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції в порівнянні з вихідною послідовністю, однак анти-ІЇ-13 антитіло, що включає таку послідовність, зберігає здатність зв'язувати ІЇ-13. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в
ЗБО ІЮО МО: 13 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМЕК (тобто в
ЕК). Необов'язково, анти-ІЇ -13 антитіло включає послідовність МН в 5ЕО ІЮ МО: 13, включаючи 60 посттрансляційні модифікації даної послідовності. Необов'язково, анти-ІЇ -13 антитіло включає послідовність МН в 5ЕО ІО МО: 11, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У деяких варіантах здійснення УН включає один, два або три НУК, вибраних з: (а) НМВА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 15, (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 16, ї (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17. 00203) У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-13 антитіло, при цьому дане антитіло включає варіабельний домен легкого ланцюга (У), що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ХЕО ІЮ МО: 14. У певних варіантах здійснення послідовність МІ, що має щонайменше, 90 96, 91 95, 92 95, 9395, 9495, 9595, 96905, 97 У, 98 90 або 9995 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції в порівнянні з вихідною послідовністю, однак анти-ІІ -13 антитіло, що включає таку послідовність, зберігає здатність зв'язувати ІЇ/-13. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в х»ЕО ІЮ МО: 14 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМК (тобто в
ЕК). У деяких варіантах здійснення анти-1І-13 антитіло включає послідовність Мі в ЗЕО ІЮ МО: 14, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У деяких варіантах здійснення анти-І,-13 антитіло включає послідовність М в ЗЕО ІО МО: 12, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У деяких варіантах здійснення МІ включає один, два або три
НМЕ, вибраних з (а) НМК-1І1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:18; (5) НМЕ-
Ї2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕБЕСО ІО МО:19; і (с) НМК-І3, що включає амінокислотну послідовність зХЕО ІЮ МО:20. (00204) У певних варіантах здійснення послідовність МН включає послідовність НУК, що має щонайменше, 60 зо, 64 то, 65 то, 68 то, 70 Зо, 75 ою, 80 то, 82 то, 85 то, 88 то, 90 то, 92 то, 93 то, 94 95, 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕО ІЮ
МО: 15, 16 і 17, при цьому антитіло зберігає здатність зв'язувати ІЇ-13. У певних варіантах здійснення послідовність МІ включає послідовність НМК, що має щонайменше, 60 95, 64 965, 65 то, 68 то, 70 Зо, 75 90, 80 то, 82 то, 85 то, 88 то, 90 то, 92 то, 93 то, 94 то, 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з БЕО ІЮ МО: 18, 19 і 20, при цьому
Зо антитіло зберігає здатність зв'язувати ІІ -13. 00205) У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-13 антитіло, при цьому дане антитіло включає такий самий МН, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, і такий самий МІ, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовність МН в 5ЕО І МО: 13 або 5ЕО ІО МО: 11 і послідовність МІ в 5ЕО ІО МО: 14 або 5ЕО ІО МО: 12, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей. 00206) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке конкурує за зв'язування з
І/-13 з анти-ІЇ-13 антитілом, що включають послідовність МН ЗЕО ІЮО МО: 13 і послідовність МІ.
ЗЕО ІЮ МО: 14. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується 3 тим самим епітопом, що і описане в даній заявці анти-1ІЇ-13 антитіло. Див., наприклад, Ш5сй, М. еї а!., 2ігисішга! Вавів ої 5ідпаїїпу Віоскаде Бу Апії-ІІ-13 Апіїроаду І ергікігитаб, 9. Мої. Віої. (2013), ах.доїі.огд/10.1016/).ітр.2013.01.024. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується з тим самим епітопом, що і описане в даній заявці анти-1І -13 антитіло. Наприклад, у певних варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується з тим самим епітопом, що і анти-ІЇ-13 антитіло, що включає послідовність МН ЗЕО ІО МО: 13 і послідовність МІ ЗЕО ІЮ МО: 14. У певних варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується з епітопом у ділянці від 77 до 89 амінокислоти 1-13 (ЗЕО ІЮО МО: 1), які являють собою УСААГЕЗІ ІМУЗО (ЗЕО ІЮ МО: 6). У певних варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується з епітопом у ділянці від 82 до 89 амінокислоти ІІ -13 (ЗЕО ІЮ МО: 1), які являють собою ЕБІ ІМУ5О (ЗЕО ІО МО: 5).
І00207| Інший приклад анти-ІЇ/-13 антитіла являє собою 11Н4 і його гуманізовані версії, включаючи пи11Н4мб. Ми11Н4 включає варіабельні ділянки важкого і легкого ланцюга, що включають амінокислотні послідовності зХЕО ІЮО МО: 26 і 25, відповідно. Гуманізоване пи11Н4мб антитіло включає варіабельну ділянку важкого ланцюга і варіабельну ділянку легкого ланцюга, що включають амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 30 ї 29, відповідно. Гуманізоване пи11Намб антитіло включає важкий ланцюг і легкий ланцюг амінокислотні послідовності, що включають, 5ЕО ІЮО МО: 28 і 27, відповідно. 00208) У деяких варіантах здійснення анти-1Ї -13 антитіло включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НМЕК, вибраних з (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 60 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 33; (4) НМА-І1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІО МО: 34; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 35; і (Її НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 36. 00209) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮО МО: 32; і (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮ МО: 33. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 33. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮО МО: 33, ії НМК-ІЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 36. У деяких варіантах здійснення антитіло включає НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 33, НМК-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 36, ії НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 32. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 32; і (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 33. 00210) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМА-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС ОО МО:34; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:35; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:36. У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 34; (р) НУВ-12, що включає амінокислотну послідовність ЖЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 36.
І00211| У деяких варіантах здійснення антитіло включає (а) домен МН, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУЄ МН, вибрані з (ї) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 31, (ії) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 32, і (ії) НМАЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІО МО: 33; і (В) домен МІ, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (ї) НМЕ-І1, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО І МО: 34, (ії) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 35, і (с) НУВ-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36. (00212) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке включає (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 32; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 33; (4) НУВ-/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 34; (е) НМЕ-12, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 35; ії () НМК-ІЇЗ, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮ МО: 36.
І00213| У будь-якому із зазначених вище варіантів здійснення анти-ІЇ-13 антитіло є гуманізованим. У деяких варіантах здійснення анти-1І -13 антитіло включає ті самі НУК, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, а також включає акцепторну каркасну ділянку людини, наприклад каркасну ділянку імуноглобуліну людини або консенсусну каркасну ділянку людини. У деяких варіантах здійснення анти-1ІЇ-13 антитіло включає ті самі НМК, що і у будь- якому з описаних вище варіантів здійснення, а також включає УН, що включає послідовності
ЕКТ, ЕК2, ЕКЗ і/або ЕК4 з 5ЕО ІО МО: 30. У деяких варіантах здійснення анти-ІІ-13 антитіло включає ті самі НМК, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, а також включає
МІ,, що включає послідовності ЕК1, ЕК2, ЕКЗ і/або ЕКА4А з 5ЕО ІО МО: 29.
І00214| У деяких варіантах здійснення анти-І/!-13 антитіло включає послідовність варіабельного домену важкого ланцюга (МН), що має щонайменше, 90 95, 91 9, 92 9, 93 9, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 30. У певних варіантах здійснення послідовність МН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 95, 93 Зо, 94 90, 95 95, 96 95, 97 У, 98 95 або 99 95 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції в порівнянні з вихідною послідовністю, проте анти-іІЇ-13 антитіло, що включає таку послідовність, зберігає здатність зв'язувати ІЇ-13. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в
ЗЕБЕО ІЮ МО: 30 піддані всього від 17 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМЕК (тобто в
ЕК). Необов'язково, анти-ІЇ -13 антитіло включає послідовність МН в 5ЕО ІЮ МО: 30, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У певному варіанті здійснення МН включає один, два або три НМЕ, вибраних з: (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО 60 ІО МО: 31, (р) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 32, і (с) НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 33. 00215) У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-13 антитіло, при цьому дане антитіло включає варіабельний домен легкого ланцюга (МІ), що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ХЕО ІЮ МО: 29. У певних варіантах здійснення послідовність МІ, що має щонайменше, 90 96, 91 95, 92 95, 9395, 9495, 9595, 96905, 97 У, 98 90 або 9995 ідентичність, містить заміщення (наприклад, консервативні заміщення), інсерції або делеції в порівнянні з вихідною послідовністю, однак анти-ІІ -13 антитіло, що включає таку послідовність, зберігає здатність зв'язувати ІЇ-13. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в х»ЕО ІЮ МО: 29 піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМЕК (тобто в
ЕК). Необов'язково, анти-іІЇ-13 антитіло включає послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 29, включаючи посттрансляційні модифікації даної послідовності. У певному варіанті здійснення МІ включає один, два або три НУК, вибраних з (а) НМК-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:З34; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:35; і (с) НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:36. 00216) У певних варіантах здійснення послідовність МН включає послідовність НУК, що має щонайменше, 60 зо, 64 то, 65 то, 68 то, 70 Зо, 75 ою, 80 то, 82 то, 85 то, 88 то, 90 то, 92 то, 93 то, 94 95, 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕО ІЮ
МО: 31, 32 ї 33, при цьому антитіло зберігає здатність зв'язувати ІЇ-13. У певних варіантах здійснення послідовність МІ включає послідовність НМК, що має щонайменше, 60 95, 64 965, 65 то, 68 то, 70 Зо, 75 90, 80 то, 82 то, 85 то, 88 то, 90 то, 92 то, 93 то, 94 то, 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з БЕО ІЮ МО: 34, 35 і 36, при цьому антитіло зберігає здатність зв'язувати ІІ -13.
І00217| У деяких варіантах здійснення передбачене анти-1ІЇ-13 антитіло, при цьому дане антитіло включає такий самий МН, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення, і такий самий МІ, що і у будь-якому з описаних вище варіантів здійснення. У деяких варіантах здійснення антитіло включає послідовності МН і Мі в 5ЕО ІЮ МО:30 ії БЕО ІЮ МО:29, відповідно, включаючи посттрансляційні модифікації даних послідовностей.
Зо 00218) У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке конкурує за зв'язування з
І/-13 з анти-ІЇ-13 антитілом, що включають послідовність МН ЗЕО ІО МО: 30 і послідовність МІ.
ЗЕО ІЮ МО: 29. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується 3 тим самим епітопом, що і описане в даній заявці анти-1ІЇ-13 антитіло. Див., наприклад, Ш5сй, М. еї а!., 5іШмисіцга! Вавів ої Зідпаіїпа ВіосКаде ру Апії-І,-13 Апіїбоду ІГерпіКігитаб, 9. Мої. Віо!. (2013), ах.дої.огд/10.1016/).)1тр.2013.01.053. У деяких варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується з тим самим епітопом, що і описане в даній заявці анти-1І -13 антитіло. Наприклад, у певних варіантах здійснення передбачене антитіло, яке зв'язується з тим самим епітопом, що і анти-ІЇ-13 антитіло, що включає послідовність МН ЗЕО ІО МО: 30 і послідовність МІ ЗЕО ІЮ МО: 29.
І00219| У деяких варіантах здійснення анти-1ІЇ-13 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення являє собою моноклональне антитіло, включаючи химерне, гуманізоване антитіло або антитіло людини. У деяких варіантах здійснення анти-1Ї -13 антитіло являє собою фрагмент антитіла, наприклад Ем, Раб, Раб, зсЕм, діатіло або фрагмент ЕК(ар)2. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою повнорозмірне антитіло, наприклад інтактне антитіло (901 або Ід054 або, що має відношення до іншого класу або ізотипу, як визначено в даному описі.
І00220| У деяких варіантах здійснення анти-І/!-13 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення може мати будь-яку з ознак, самостійно або в комбінації, які описані в Розділах 1-7 нижче.
Приклади біспецифічних анти-1ІЇ -1 З/І -17 антитіл
І00221| У деяких варіантах здійснення передбачене мультиспецифічне антитіло (таке як біспецифічне антитіло), що включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ЇЇ - 17 ії ІС-13. У деяких варіантах здійснення антигензв'язуючий домен специфічно не зв'язується з іншими мішенями. Мультиспецифічне антитіло, яке зв'язує 1-17 ії І--13, включає перший набір варіабельних ділянок (МН і МІ; також називаних МНЛ/ фрагментом) відповідно до будь-яких з описаних в даному описі варіантів здійснення анти-1Ї-17 антитіл, і другий набір варіабельних ділянок (МН і Мі; також називаних МНЛ// фрагментом) відповідно до будь-яких з описаних в даній заявці варіантів здійснення анти-І/!-13 антитіл. У деяких варіантах здійснення біспецифічне анти-ІЇ-13//-17 антитіло включає () першу половину молекули антитіла, що бо включає перший УНЛ/Г. фрагмент і, щонайменше, частину константної ділянки важкого ланцюга,
і лабо, щонайменше, частину константної ділянки легкого ланцюга, і (її) другу половину молекули антитіла, що включає другий МН//І. фрагмент і, щонайменше, частину константної ділянки важкого ланцюга й/або, щонайменше, частину константної ділянки легкого ланцюга. У деяких варіантах здійснення перша половина молекули антитіла зв'язує 1-17, але не зв'язується з ІІ - 13, а друга половина молекули антитіла зв'язує ІІ -13, але не зв'язується з ІЇ/-17. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло зберігає свій природній формат і не є антитілом з подвійним варіабельним доменом (0ОМО). Див., наприклад, РСТ публікацію 2013/102042. В патенті М/О2013/102042 описаний антигензв'язуючий білок, що має подвійну специфічність, що зв'язує 1-13 їі 1/-17А, який є бівалентним партнером зі зв'язування ІІ -13 і бівалентним партнером зі зв'язування 1 -17А, який може вносити вклад в авідність зв'язування з кожною мішенню. У деяких варіантах здійснення винаходу біспецифічне анти-1Ї -1 З/І -1 7 антитіло являє собою моновалентний партнер зі зв'язування ІІ -13 і моновалентний партнер зі зв'язування І/-17АА, АБ і ЕЕ. Як описується в даній заявці, також було виявлено, що біспецифічне антитіло, у якому кожна половина молекули антитіла являє собою моновалентний партнер зі зв'язування 1-13 ії 11-17 (1, -17АА, АЕ, ЕР), відповідно, зберігає порівнянну здатність зв'язування і його ефективність у порівнянні з кожним з вихідних бівалентних моноспецифічних антитіл. Як описано далі нижче, у деяких варіантах здійснення біспецифічне анти-ЇЇ 1 ЗЛІ -17 антитіло включає перший МН/Л/. фрагмент і другий МН/Л/І. фрагмент, при цьому перший МН/Л/. фрагмент зв'язується з 1-17 і включає НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЗЕО
ІО МО: 40, НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 43, НМА-
НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 44, НМУВ-І1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 45, НМК-12, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 46, і НМЕ-І3, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІО МО: 47, і при цьому другий МНЛ/ фрагмент включає НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 15, НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 16, НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 17, НМК-11, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 18, НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 19, ії НМА-І 3, що включає амінокислотну послідовність 560 ІЮ МО: 20, і при цьому біспецифічне анти-1Ї -1 З/І -17 антитіло зв'язує і інгібує 1-13 і І. -17АА, АБ і ЕР.
Зо Мультиспецифічні антитіла, що включають 15Е6 або 15Е6ЕК
ІЇ00222| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає МН (варіабельну ділянку важкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІО МО: 37, 39, 82, 83 і 115. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І--13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає МІ. (варіабельну ділянку легкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО І МО: 38.
І00223| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л// фрагмент, що включає УН, що включає амінокислотну послідовність
ЗБЕО ІО МО: 37, і Мі, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 38. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І--13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 39, ії МІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 38. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ії 11-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/. фрагмент, що включає УН, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІО МО: 82, і МІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 38. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/М/. фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 83, і МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 38. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І--17 ії ІС-13, при цьому антитіло включає перший МН//І. фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 115, ії МІ, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО І МО: 38.
І00224| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ї 1-13, при цьому антитіло бо включає перший УНЛ/І. фрагмент, який конкурує за зв'язування 1-17 з антитілом, що включає
МН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 37, і МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 38.
І00225| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МН//Л. фрагмент, що включає МН (варіабельний домен важкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність 5620 ІЮО МО: 13 або 5ЕО ІЮО МО: 11. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ії І--13, при цьому антитіло включає другий МН/Л// фрагмент, що включає МІ. (варіабельний домен легкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 14 або ЗЕО ІО МО: 12. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність БЕО
ІО МО: 13 або 5ЕО ІО МО: 11, і МІ, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮО МО: 14 або
ЗБО ІЮ МО: 12. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, який конкурує за зв'язування ІІ -13 з антитілом, що включає
МН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 13, і МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 14. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/І. фрагмент, який зв'язує епітоп І/-13, що складається з від 82 до 89 амінокислоти 5ЕО ІЮ МО: 1. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/І. фрагмент, який зв'язує епітоп ІЇ/-13, що складається з від 77 до 89 амінокислоти ЗЕО ІЮ МО: 1.
ІЇ00226| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МН//Л. фрагмент, що включає МН (варіабельний домен важкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 30. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
Зо І/-17 ї І--13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, що включає МІ. (варіабельний домен легкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗХЕО ІЮО МО: 29. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1І-17 і 1-13, при цьому антитіло включає другий МН//. фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 30, ії МІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 29. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ії 11-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/І. фрагмент, який конкурує за зв'язування ІІ -13 з антитілом, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 30, і МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 29.
І00227| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л// фрагмент, що включає перший МН, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІО МО: 37, 39, 82, 83 і 115, і перший МІ, що включає амінокислотну послідовність 56 ІЮ МО: 38; і включає другий МН/М/ фрагмент, що включає другий МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 13 або 5ЕО ІО МО: 11, і другий
МІ,, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 14 або 5ЕО ІО МО: 12.
І00228| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л// фрагмент, що включає перший МН, що включає амінокислотну
БО послідовність, вибрану з 5ЕО ІО МО: 37, 39, 82, 83 і 115, і перший МІ, що включає амінокислотну послідовність 562 ІЮ МО: 38; і включає другий МН/М/ фрагмент, що включає другий УН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕС ІЮО МО: 30, і другий МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 29.
І00229| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МН/МІ. фрагмент, що включає МН, що має щонайменше, 90 95, 91 Фо, 92 965, 93965, 9495, 9595, 966, 97 95, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕБЕО ІЮО МО: 37, 39, 82, 83 ії 115, і Мі, що має щонайменше, 9096, 9195, 9295, 9396, 9495, 9595, 969, 97 96, 9895, 99 95 або 100 95 60 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІО МО: 38. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМЕК (тобто в ЕК).
ІЇ00230| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І фрагмент, що включає МН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 95, 93 Фо, 94 Фо, 95 95, 96 95, 97 95, 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності БЕО ІЮ МО: 13, і МІ, що має щонайменше, 90 Фо, 91 Уо, 92 90, 93 95, 94 95, 95 9о, 9б зо, 9796, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5ЕО ІО МО: 14. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/ фрагмент, що включає УН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5ЕО ІО МО: 30, і МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 ФУ, 92 9о, 93 о, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІО МО: 29. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від ї до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУВ (тобто у ЕК).
Ї00231| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає перший МН, що має щонайменше, 90 95, 91 9о, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕО ІЮО МО: 37, 39, 82, 83 і 115, і М, що має щонайменше, 9096, 9195, 9295, 9396, 9495, 9595, 969, 97 96, 9895, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності «ЕС ІЮО МО: 38; і другий МН//. фрагмент, що включає другий МН, що має щонайменше, 90 Фо, 91 У, 92 95, 93 95, 94 95, 95 95,
Об, 9796, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 13, і другий МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 Фо, 92 9», 93 Уо, 94 Ор,
Ко) 9595, 96 96, 97 90, 98 965, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 14. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від ї до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУК (тобто у ЕК).
І00232| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає перший МН, що має щонайменше, 90 95, 91 9о, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності, вибраної з 5ЕО ІЮО МО: 37, 39, 82, 83 і 115, і М, що має щонайменше, 9096, 9195, 9295, 9396, 9495, 9595, 969, 97 96, 9895, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності зХЕО ІЮ МО: 38; і другий МН/МІ. фрагмент, що включає другий МН, що має щонайменше, 90 Фо, 91 У, 92 95, 93 95, 94 95, 95 95, 9б зо, 9796, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 30, і другий МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 Фо, 92 9», 93 Уо, 94 Ор, 9595, 96 96, 97 90, 98 965, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 29. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУК (тобто у ЕК).
Ї00233| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 40; (Б)
НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 41, 43, 80, 81 і 114; (с)
НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІО МО: 44; (4) НМЕ-
ЇЇ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО ІО МО: 45; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 46; ії () НМК-ІЇ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 47.
Ї00234| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає бо антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/ фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 15; (Б)
НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 16; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО 10 МО: 17; (4) НМК-Ї1, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 18; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 19; ї (ЖД НМК-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 20. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І--13, при цьому антитіло включає другий МН/М/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33; (4) НУВ-/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 34; (є) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 35; ії () НМК-ІЇЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36.
Ї00235| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 40; (Б)
НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 41, 43, 80, 81 і 114; (с)
НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІО МО: 44; (4) НМЕ-
ЇЇ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО ІО МО: 45; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 46; ії () НМК-ІЇ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮО МО: 47; і другий МН//І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НМЕК, вибраних з (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 16; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ОО МО: 17; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІО МО: 18; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 159; і (Її НМК-І3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 20.
Зо Ї00236| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 40; (Б)
НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІО МО: 41, 43, 80, 81 і 114; (с)
НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІО МО: 44; (4) НМЕ-
ЇЇ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО ІО МО: 45; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 46; ії () НМК-ІЇ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮО МО: 47; і другий МН//І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НМЕК, вибраних з (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5260 ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕСО ОО МО: 33; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІО МО: 34; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 35; і (Її НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 36.
Ї00237| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БХЕО
ІО МО: 40; (р) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 41, 43,
БО 80, 81 ї 114; ї (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІЮ
МО: 44.
Ї00238| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ
МО: 15; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 16; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО 10 МО: 17. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І--17 ї І--13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/Л. фрагмент, що включає, щонайменше, 60 одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33.
Ї00239| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БХЕО
ІО МО: 40; (р) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 41, 43, 80, 81 ї 114; ї (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІО
МО: 44; і другий МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ
МО: 15; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 16; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 17. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І--17 ї 1С-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ І МО: 40; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІО МО: 41, 43, 80, 81 ії 114; ї (с) НМВА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 42 або 5ЕО ІО МО: 44; і другий МНЛ/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМЕ. МН, вибрані з (а)
НМВ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 31; (Б) НУМВА-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕБЕО 10 МО: 32; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 33.
І00240| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО
ІО МО: 45; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 46; і (с) НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 47.
Зо ІЇ00241| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК. МІ,, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ
МО: 18; (5) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 19; і (с) НМА-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 20. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І--17 ї І--13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/Л. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМА-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 34; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮО МО: 35; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 36.
І00242| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО
ІО МО: 45; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 46; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність БЕСО ІЮО МО: 47; ії другий МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМК-І11, що включає амінокислотну послідовність ХЕ ІЮ МО: 18; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну
БО послідовність БХЕО ІЮ МО: 19; і (с) НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5хЕО ІЮО МО: 20. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1І-17 і 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМ. МІ, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 45; (Б) НМА-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 46; ї (с) НМК-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 47; і другий МН// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМА Мі, вибрані з (а) НМК-ІЇ71, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 34; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5хЕО ІЮО МО: (510) 36.
І00243| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший УНЛ/І. фрагмент, що включає три послідовності НУЄ. МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 40; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІО МО: 41, 43, 80, 81 ії 114; ї (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 42 або 5ЕО ІО МО: 44; і три послідовності НМА МІ, вибрані з (а) НМК-І/1, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 45; (є) НМЕА-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 46; ї () НМК-ІЇЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 47.
І(00244| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/. фрагмент, що включає три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16; (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 17; ії три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМЕК-І11, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 18; (б) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 159; і (с) НМЕ-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 20.
І00245| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/ фрагмент, що включає три послідовності НУК МН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 31; (б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33; і три послідовності НМЕ. М'І,, вибрані з (а) НМЕ-11, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 34; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМА-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36.
І00246| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший УНЛ/І. фрагмент, що включає три послідовності НУЄ. МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 40; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну
Ко) послідовність, вибрану з 5ЕО ІО МО: 41, 43, 80, 81 і 114; ї (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 42 або 5ЕО ІО МО: 44; і три послідовності НМА МІ, вибрані з (а) НМК-І/1, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 45; (є) НМЕА-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 46; їі () НМК-ІЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність вибрану з 5ЕО ІО МО: 47; і другий МН//Л фрагмент, що включає три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ
МО: 15; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16; (с) НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17; і три послідовності НУК МІ, вибрані з (а)
НМВ-І/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮО МО: 18; (Б) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІЮО МО: 19; і (с) НМК-ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 20.
І00247| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший УНЛ/І. фрагмент, що включає три послідовності НУЄ. МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 40; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІО МО: 41, 43, 80, 81 ії 114; ї (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 42 або 5ЕО ІО МО: 44; і три послідовності НМА МІ, вибрані з (а) НМК-І/1, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 45; (є) НМЕА-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 46; ї () НМК-ІЇЗ, що включає амінокислотну послідовність вибрану з 5ЕО ІО МО: 47; і другий МН//Л фрагмент, що включає три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ
МО: 31; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 32; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 33; і три послідовності НУК МІ, вибрані з (а)
НМВ-І/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕБО ІЮО МО: 34; (Б) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 35; і (с) НМК-Ї3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36. (00248) У різних варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший МН/МІ фрагмент, який зв'язує ІІ -17, при цьому перший гемімер включає мутацію типу "виступ" у константній ділянці важкого ланцюга, і другий гемімер, що включає другий МН/Л/ фрагмент, який зв'язує ІІ -13, при цьому другий гемімер включає мутацію типу бо "западина" у константній ділянці важкого ланцюга. У різних варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший МН/Л/ фрагмент, який зв'язує 1-17, при цьому перший гемімер включає мутацію типу "западина" у константній ділянці важкого ланцюга, і другий гемімер, що включає другий МНЛ/І. фрагмент, який зв'язує ЇЇ - 13, при цьому другий гемімер включає мутацію типу "виступ" у константній ділянці важкого ланцюга. У деяких варіантах здійснення константна ділянка важкого ланцюга, що включає мутацію типу "западина", має послідовність, показану в ЗЕО ІЮ МО: 68 (9401) або 5ЕО ІО МО: 70 (424). У деяких варіантах здійснення константна ділянка важкого ланцюга, що включає мутацію типу "виступ", має послідовність, показану в ЗЕО ІЮ МО: 67 (1901) або 5ЕО ІО МО: 69 (19054). У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший важкий ланцюг, що має амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІЮО МО: 71, 72, 84 і 85, і перший легкий ланцюг, що має послідовність ЗЕО ІЮ МО: 73, і другий гемімер, що включає другий важкий ланцюг, що має послідовність ЗЕО ІЮ МО: 21 або 23, і другий легкий ланцюг, що має послідовність ЗЕО ІЮ МО: 22 або 24. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший важкий ланцюг, що має амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІЮО МО: 71, 72, 84 і 85, і перший легкий ланцюг, що має послідовність ЕС ІО МО: 73, і другий гемімер, що включає другий важкий ланцюг, що має послідовність зЕО ІЮ МО: 21, і другий легкий ланцюг, що має послідовність 5ЕО ІЮО МО: 22. (00249) У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮ
МО: 80, 82 або 84, Х може являти собою будь-яку амінокислоту, крім М. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮ МО: 80, 82 або 84, Х може бути вибраний з А, б, 0, Н, 0, К і К. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають ЗЕО ІЮО МО: 80, 82 або 84, Х може бути вибраний з А, с і 0). У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮО МО: 81, 83 або 85, Х може являти собою будь-яку амінокислоту, крім 5 або Т. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮ МО: 81, 83 або 85, Х може являти собою А, б, Р або М. У будь-яких описаних в даній заявці варіантах здійснення, що включають 5ЕО ІЮО МО: 114 або 115,
Х може являти собою 0, 5 або 0.
ІЇ00250| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-1ІЇ-13/І/-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення являє собою моноклональне антитіло, включаючи химерне, гуманізоване антитіло або антитіло людини. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-1ІЇ-13//-17 антитіло являє собою фрагмент антитіла, наприклад Ем, Раб, Раб", зсЕм, діатіло або фрагмент Е(ар)2. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою повнорозмірне антитіло, наприклад інтактне антитіло Іде1 або Ідс4 або, що має відношення до іншого класу або ізотипу, як визначено в даному описі.
ІЇ00251| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-1Ї-13/І/-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення може мати будь-яку з ознак, самостійно або в комбінації, які описані в Розділах 1-7 нижче.
Мультиспецифічні антитіла, що включають 30012 або 30012ВЕ
І00252| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/ фрагмент, що включає МН (варіабельний домен важкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність, вибрану з ЗЕО ІЮ МО: 48 і 50. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/Л. фрагмент, що включає мі. (варіабельний домен легкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 49.
Ї00253| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л// фрагмент, що включає УН, що включає амінокислотну послідовність
ЗБЕО ІЮО МО: 48, і М, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 49. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І--13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 50, ії МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 49.
І00254| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МН// фрагмент, який конкурує за зв'язування 1Ї/-17 з антитілом, що включають УН, що включають амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 50, і МІ, що включають амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 49.
Ї00255| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає бо антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МН/М. фрагмент, що включає МН (варіабельний домен важкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 13 або 5ЕО ІЮ МО: 11. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І--13, при цьому антитіло включає другий МН/Л// фрагмент, що включає МІ. (варіабельний домен легкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 14 або ЗЕО ІО МО: 12. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність ХЕО
ІО МО: 13 або 5ЕО ІО МО: 11, і МІ, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮО МО: 14 або
ЗБО ІЮ МО: 12. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, який конкурує за зв'язування ІІ -13 з антитілом, що включає
МН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 13, і МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 14. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і 1-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/І. фрагмент, який зв'язує епітоп ІІ -13, що складається з від 82 до 89 амінокислоти 5ЕО ІЮ МО: 1. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/І. фрагмент, який зв'язує епітоп ІІ -13, що складається з від 77 до 89 амінокислоти 5ЕО ІЮ МО: 1.
Ї00256| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л. фрагмент, що включає МН (варіабельний домен важкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 30. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І/-17 ї ІС-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, що включає МГ. (варіабельний домен легкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗХЕО ІЮО МО: 29. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1І-17 і 1-13, при цьому антитіло включає другий МН//. фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 30, ії МІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 29. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ії 11-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/І. фрагмент, який конкурує за зв'язування ІІ -13 з антитілом, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 30, і Мі, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 29.
Ї00257| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л// фрагмент, що включає перший МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 48 або 5ЕБЕО ІЮО МО: 50 і перший МІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 49; і включає другий МНЛ// фрагмент, що включає другий МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 13 або 5ЕБЕО ІЮО МО: 11, і другий МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 14 або 5ЕО ІЮ МО: 12.
Ї00258| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1Ї/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/// фрагмент, що включає перший МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 48 або 5ЕБЕО ІЮО МО: 50 і перший МІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 49; і включає другий МНЛ// фрагмент, що включає другий МН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 30, ї другий МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 29.
Ї00259| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/МІ. фрагмент, що включає МН, що має щонайменше, 90 95, 91 Фо, 92 965, 93965, 9495, 9595, 966, 97 95, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 48 або 5ЕБЕО ІО МО: 50, і перший Мі, що має щонайменше, 9096, 9195, 9295, 9396, 9495, 9595, 969, 97 96, 9895, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІО МО: 49. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМЕК (тобто у ЕК). бо І00260| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І фрагмент, що включає МН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 95, 93 Фо, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності БЕО ІЮ МО: 13, і МІ, що має щонайменше, 90 Фо, 91 Уо, 92 90, 93 95, 94 95, 95 9о, 9б зо, 9796, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5ЕО ІО МО: 14. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/ фрагмент, що включає УН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5ЕО ІО МО: 30, і МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 ФУ, 92 9о, 93 о, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 29. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від ї до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУК (тобто у ЕВ).
Ї00261| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає перший МН, що має щонайменше, 90 95, 91 9о, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 48 або 5ЕБО ІО МО: 50, і перший МІ, що має щонайменше, 9096, 9195, 9295, 9396, 9495, 9595, 969, 97 96, 9895, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності «ЕС ІЮ МО: 49; і другий МН/Л/. фрагмент, що включає другий МН, що має щонайменше, 90 Фо, 91 У, 92 95, 93 95, 94 95, 95 95, 9б зо, 9796, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 13, і другий МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 Фо, 92 9», 93 Уо, 94 Ор, 9595, 96 96, 97 90, 98 965, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 14. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від ї до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУК
Зо (тобто у ЕК).
І00262| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає перший МН, що має щонайменше, 90 95, 91 9о, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 48 або 5ЕБО ІО МО: 50, і перший МІ, що має щонайменше, 9096, 9195, 9295, 9396, 9495, 9595, 969, 97 96, 9895, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності «ЕС ІЮ МО: 49; ії другий МН/Л/І. фрагмент, що включає другий МН, що має щонайменше, 90 Фо, 91 У, 92 95, 93 95, 94 95, 95 95, 9б зо, 9796, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 30, і другий МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 Фо, 92 9», 93 Уо, 94 Ор, 9595, 96 96, 97 90, 98 965, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 29. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від ї до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУК (тобто у ЕК).
Ї00263| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 51; (Б)
НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 52 або 5ЕО ІЮО МО: 53; (с) НМЕА-
НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕСО ОО МО: 54; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 55; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮО МО: 56; і (ї) НУВ-І3, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 57.
І00264| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/ фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 15; (Б)
НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16; (с) НМК-НЗ, що включає 60 амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 17; (4) НМК-Ї1, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 18; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 19; ї (ЖД НМК-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність «ЕЕ ІЮ МО: 20. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І--13, при цьому антитіло включає другий МН/М/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33; (4) НУВ-/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 34; (е) НМЕ-12, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 35; ії () НМК-ІЇЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36.
І00265| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 51; (Б)
НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО ІЮ МО: 53; (с) НМК-
НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕСО ОО МО: 54; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 55; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 56; і (Її НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 57; і другий МНЛ/ фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість
НМЕ, вибраних з (а) НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 15; (5) НМА-
Нг2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕБЕО ІЮ МО: 16; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО 10 МО: 17; (4) НМК-Ї1, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 18; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 19; ї (у) НМА-І3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 20.
І00266б| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 51; (Б)
НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО ІО МО: 53; (с) НМА-
НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕСО ОО МО: 54; (4) НМВ-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 55; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 56; і (Її НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 57; і другий МН/Л/ фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість
НМЕ, вибраних з (а) НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 31; (5) НМА-
Нг2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБО ІЮ МО: 32; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 33; (4) НМВ-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 34; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 35; і () НМК-І3, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 36.
І00267| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО
ІО МО: 51; (б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО І МО: 53; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 54.
І00268| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО: 15; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 16; (с) НМА-НЗ, що
БО включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 17. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І--17 ї І--13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/Л. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33.
Ї00269| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі бо три послідовності НУК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БХЕО
ІО МО: 51; (б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 52 або ЗЕО ІО МО: 53; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 54; і другий. МН/Л/. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУ МН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 17. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з І/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МН//Л. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮО МО: 51; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5260 ІЮ МО: 52 або 5БЕО ІЮ МО: 53; (с) НМЕК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 560 ІЮ МО: 54; і другий МН//Ї фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ
МО: 31; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 32; (с) НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 33.
І00270| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність Ф»ЕО
ІО МО: 55; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮО МО: 56; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 57.
ІЇ00271| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК. МІ,, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ
МО: 18; (5) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 159; ї (с) НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 20. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І--17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/Л. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМА-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 34; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5хЕО ІЮО МО: 36.
І00272| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО
ІО МО: 55; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮО МО: 56; і (с) НМВ-І 3, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 57; і другий МН//. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМК-І11, що включає амінокислотну послідовність ХЕ ІЮ МО: 18; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 159; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5хЕО ІЮО МО: 20. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1І-17 і 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМЕК. МІ, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність «ЕС ІЮ МО: 55; (Б) НМА-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 56; і (с) НМК-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 57; і другий МН// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМА Мі, вибрані з (а) НМК-ІЇ71, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 34; (р) НМВ-І2, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність зхЕО ІЮО МО: 36.
Ї00273| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ/І. фрагмент, що включає три послідовності НМЕК МН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 51; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 52 або 5ЗЕО ІЮ МО: 53; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 54; і три послідовності НМК МІ, вибрані з (4) НМЕ-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 55; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну 60 послідовність 5ХЕО ІЮО МО: 56; і (ї) НУВ-І3, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО:
І00274| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/. фрагмент, що включає три послідовності НМЕ. МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16; (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 17; і три послідовності НУК МГ.,, вибрані з (а) НМК-1І1, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 18; (б) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 159; і (с) НМЕ-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 20.
Ї00275| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/. фрагмент, що включає три послідовності НМЕ. МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМЕА-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33; і три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМЕ-11, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 34; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМЕ-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36.
І00276| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ/І. фрагмент, що включає три послідовності НМЕК МН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 51; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО ІЮ МО: 53; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 54; і три послідовності НМК МІ, вибрані з (4) НМЕ-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 55; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 56; і (3 НМУВ-І 3, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з
ЗЕО ІО МО: 57; і другий МН//. фрагмент, що включає три послідовності НУК УН, вибрані з (а)
НМВ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 15; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 16; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 17; і три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМЕ-І1, що включає
Зо амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 18; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 159; ї (с) НМЕ-І 3, що включає амінокислотну послідовність 5хЕО ІЮО МО: 20.
І00277| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ/І. фрагмент, що включає три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 51; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 52 або 5ЕО ІО МО: 53; (с) НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 54; і три послідовності НУК МІ, вибрані з (4) НМЕ-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 55; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 56; і (3 НМЕ-1І 3, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з
ЗЕО ІО МО: 57; і другий МН/Л/ фрагмент, що включає три послідовності НУК УН, вибрані з (а)
НМВ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЕС ІО МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕБЕО 10 МО: 32; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 33; і три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМЕ-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 34; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність зхЕО ІЮО МО:
Зб. 00278) У різних варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший МН/МІ фрагмент, який зв'язує ІІ -17, при цьому перший гемімер включає мутацію типу "виступ" у константній ділянці важкого ланцюга, і другий гемімер, що включає другий МН/Л/ фрагмент, який зв'язує ІІ -13, при цьому другий гемімер включає мутацію типу "западина" у константній ділянці важкого ланцюга. У різних варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший МН//І. фрагмент, який зв'язує 1-17, при цьому перший гемімер включає мутацію типу "западина" у константній ділянці важкого ланцюга, і другий гемімер, що включає другий МНЛ/І. фрагмент, який зв'язує ІЇ-- 13, при цьому другий гемімер включає мутацію типу "виступ" у константній ділянці важкого ланцюга. У деяких варіантах здійснення константна ділянка важкого ланцюга, що включає мутацію типу "западина", має послідовність, показану в ЗЕО ІЮ МО: 68 (9401) або 5ЕО ІО МО: 70 (дс4). У деяких варіантах здійснення константна ділянка важкого ланцюга, що включає мутацію 60 типу "виступ", має послідовність, показану в 5ЕО ІЮО МО: 67 (901) або 5ЕО ІО МО: 69 (1954). У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший важкий ланцюг, що має послідовність ЗЕО ІЮ МО: 74 або 75, і перший легкий ланцюг, що має послідовність 5ЕО ІО МО: 76, і другий гемімер, що включає другий важкий ланцюг, що має послідовність зЗЕО ІЮ МО: 21 або 23, і другий легкий ланцюг, що має послідовність БЕО ІЮ
МО: 22 або 24. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший важкий ланцюг, що має послідовність ЗЕ ІЮ МО: 74 або 75, |і перший легкий ланцюг, що має послідовність 5ЕСО ІО МО: 76, і другий гемімер, що включає другий важкий ланцюг, що має послідовність 562) ІЮ МО: 21, і другий легкий ланцюг, що має послідовність ЗЕО ІЮ МО: 22.
І00279| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-1ІЇ-13/І/-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення являє собою моноклональне антитіло, включаючи химерне, гуманізоване антитіло або антитіло людини. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-1ІЇ-13//-17 антитіло являє собою фрагмент антитіла, наприклад Ем, Раб, Раб", 5сЕм, діатіло або фрагмент Е(ар)2. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою повнорозмірне антитіло, наприклад інтактне антитіло Їдс1 або Ідс4 або, що має відношення до іншого класу або ізотипу, як визначено в даному описі.
І00280| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-1Ї-13/І/-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення може мати будь-яку з ознак, самостійно або в комбінації, які описані в Розділах 1-7 нижче.
Мультиспецифічні антитіла, що включають 39Е12 або З9Е12А
Ї00281| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/ фрагмент, що включає МН (варіабельний домен важкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 58. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І -17 ї ІС-13, при цьому антитіло включає перший МН/// фрагмент, що включає Мі. (варіабельний домен легкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність, вибрану з
ЗЕО ІЮ МО: 59 і 60.
І00282| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає
Зо антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає УН, що включає амінокислотну послідовність
ЗБЕО ІО МО: 58, і Мі, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 59. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І--13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 60, ії МІ, що включає амінокислотну послідовність зХЕО ІЮ МО: 59.
ІЇ00283| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/Г. фрагмент, який конкурує за зв'язування 1-17 з антитілом, що включає
МН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 58, і МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 60.
І00284| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л. фрагмент, що включає МН (варіабельний домен важкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 13 або 5ЕО ІО МО: 11. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ії І--13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/ фрагмент, що включає Мі. (варіабельний домен легкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 14 або ЗЕО ІО МО: 12. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність БЕО
ІО МО: 13 або 5ЕО ІО МО: 11, і МІ, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮО МО: 14 або
ЗБО ІЮ МО: 12. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, який конкурує за зв'язування 1-13 з антитілом, що включає
МН, що включає амінокислотну послідовність ЕЕ ІЮ МО: 13, ії МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 14. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/. фрагмент, який зв'язує епітоп ІІ -13, що складається з від 82 до бо 89 амінокислоти 5ЕО ІЮ МО: 1. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/І. фрагмент, який зв'язує епітоп ІІ -13, що складається з від 77 до 89 амінокислоти ЗЕО ІЮ МО: 1.
ІЇ00285| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МН/М. фрагмент, що включає МН (варіабельний домен важкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 30. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І/-17 ї ІС-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/. фрагмент, що включає М. (варіабельний домен легкого ланцюга), що включає амінокислотну послідовність ЗХЕО ІЮО МО: 29. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1І-17 і 1-13, при цьому антитіло включає другий МН//. фрагмент, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 30, ії МІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 29. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і 1-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/І. фрагмент, який конкурує за зв'язування ІІ -13 з антитілом, що включає МН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 30, і Мі, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 29.
І00286| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л// фрагмент, що включає перший МН, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 58, і перший МІ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 59 або ЗЕО ІО МО: 60; і включає другий МН//Л. фрагмент, що включає другий УН, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 13 або 5ЕО ІЮ МО: 11, і другий МІ, що включає амінокислотну послідовність зХЕО ІЮ МО: 14 або 5ЕО ІО МО: 12.
І00287| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л// фрагмент, що включає перший МН, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 58, і перший МІ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:
Зо 59 або ЗЕО ІО МО: 60; і включає другий МН// фрагмент, що включає другий УН, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 30, і другий МІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 29.
Ї00288| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/МІ. фрагмент, що включає МН, що має щонайменше, 90 95, 91 Фо, 92 965, 93965, 9495, 9595, 966, 97 95, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності БЕО ІЮО МО: 58, і перший МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5ЕО ІЮ МО: 59 або 5ЕО ІЮО МО: 60. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМК (тобто у ЕК).
Ї00289| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І фрагмент, що включає МН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 95, 93 Фо, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності БЕО ІЮ МО: 13, і МІ, що має щонайменше, 90 Фо, 91 Уо, 92 90, 93 95, 94 95, 95 9о, 9б зо, 9796, 9895, 9995 або 10095 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5ЕО ІЮО МО: 14. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і 1-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/ фрагмент, що включає УН, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5ЕО ІО МО: 30, і МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 ФУ, 92 9о, 93 о, 94 95, 95 ФУ, 96 9, 97 У», 98 У, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 29. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від ї до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НУК (тобто у ЕК).
Ї00290| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає бо антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає перший МН, що має щонайменше, 90 95, 91 9б, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності БЕО ІЮО МО: 58, і перший МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності зХЕО ІЮ МО: 59 або 5ЕО ІЮ МО: 60; і другий МНЛ/І. фрагмент, що включає другий УН, що має щонайменше, 90 95, 91 У, 92 Фо, 93 Фо, 94 Уо, 95 Ус, 96 95, 97 Фо, 98 о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності зФЕО ІЮ МО: 13, і другий МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 90, 92 Уо, 93 о, 94 Фо, 95 95, 96 Фо, 97 ую, 98 У, 99 Фо або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5620 ІЮ МО: 14. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМК (тобто у ЕК).
Ї00291| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає перший МН, що має щонайменше, 90 95, 91 9о, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності БЕО ІЮО МО: 58, і перший МІ, що має щонайменше, 90 95, 91 95, 92 96, 93 90, 94 96, 95 90, 96 9, 97 90, 98 9о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності зХЕО ІЮ МО: 59 або 5ЕО ІО МО: 60; і другий МНЛ//. фрагмент, що включає другий УН, що має щонайменше, 90 95, 91 У, 92 Фо, 93 Фо, 94 Уо, 95 Ус, 96 95, 97 Фо, 98 о, 99 95 або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності зЕО ІЮ МО: 30, їі другий МІ, що має щонайменше, 90 Фо, 91 90, 92 Уо, 93 о, 94 Фо, 95 95, 96 Фо, 97 ую, 98 У, 99 Фо або 100 95 ідентичність послідовності щодо амінокислотної послідовності 5620 ІЮ МО: 29. У певних варіантах здійснення заміщенню, інсерції і/або делеції в описаних вище послідовностях піддані всього від 1 до 10 амінокислот. У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції зустрічаються в ділянках, що перебувають поза НМК (тобто у ЕК).
І00292| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або
Зо шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 61; (р)
НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 62; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 63; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 64; (є) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 65; і () НМА-1І3, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 66.
Ї00293| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/ фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 15; (Б)
НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕБЕО 10 МО: 17; (4) НМК-Ї1, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 18; (е) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 19; ї (ЖД НМК-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність «ЕЕ ІЮ МО: 20. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І--13, при цьому антитіло включає другий МН/М/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33; (4) НУВ-/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 34; (е) НУМВ-І12, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 35; ії () НМК-ІЇЗ, що включає амінокислотну
БО послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36.
І00294| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 61; (Б)
НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 62; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 63; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 64; (е) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 65; і (3 НМК-ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 66; і другий МН//. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з бо (а) НМВА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМАК-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 16; (с) НМВ-НЗ3, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 17; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 18; (є) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 19; ї () НМЕК-І3, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 20.
Ї00295| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/І. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 61; (Б)
НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮ МО: 62; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 63; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 64; (е) НМК-12, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 65; і () НМК-ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕСО ІЮО МО: 66; і другий МН/Л/. фрагмент, що включає, щонайменше, один, два, три, чотири, п'ять або шість НУК, вибраних з (а) НМВА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМАК-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕБЕО 10 МО: 32; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 33; (4) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 34; (є) НУМВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 35; ії () НМЕК-І3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36.
Ї00296| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БХЕО
ІО МО: 61; (5) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 62; (с) НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 63.
ІЇ00297| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ
МО: 15; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16; (с) НМЕ-НЗ, що
Ко) включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 17. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І--17 ї І--13, при цьому антитіло включає другий МН/Л// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮО МО: 32; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 33.
Ї00298| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БХЕО
ІО МО: 61; (5) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 62; (с) НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕ ІЮ МО: 63; і другий МН/М. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16; (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 17. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1І-17 і 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л//. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУ МН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 61; (Б) НМЕ-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 62; (с) НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 63; і другий МН// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМА МН, вибрані з (а) НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМК-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33.
Ї00299| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО 60 ІО МО: 64; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 65; і (с) НМА-І 3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 66.
ЇОО30О0| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/І. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК. МІ,, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ
МО: 18; (5) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 159; ї (с) НМЕ-І З, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 20. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з
І--17 ї І--13, при цьому антитіло включає другий МН/Л/Л. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НУК МІ, вибрані з (а) НМА-І1, що включає амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 34; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМА-І 3, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО:
Зб.
ЇОО30О1| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 і І/-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ// фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО
ІО МО: 64; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 65; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність БЕСО ІЮ МО: 66; і другий МН//Л фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМК-І11, що включає амінокислотну послідовність ХЕ ІЮ МО: 18; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність БХЕО ІЮ МО: 159; і (с) НМК-І 3, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 20. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1І-17 і 1-13, при цьому антитіло включає перший МН/Л/. фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМА. МІ, вибрані з (а) НМК-І1, що включає амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО: 64; (Б) НМА-І2, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮО МО: 65; і (с) НМК-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 66; і другий МН//Л фрагмент, що включає, щонайменше, одну, щонайменше, дві або всі три послідовності НМА Мі, вибрані з (а) НМК-ІЇ71, що включає
Зо амінокислотну послідовність ЕС 10 МО: 34; (Б) НМК-І2, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМВ-І З, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО:
Зб.
Ї00302| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший МНЛ/І. фрагмент, що включає три послідовності НМК УН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 61; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 62; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 63; і три послідовності НУК МГ.,, вибрані з (4) НМК-1І1, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 64; (є) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 65; і (5 НМЕК-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 66.
ЇОО30О3| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/. фрагмент, що включає три послідовності НМЕ. МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМЕА-Н2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16; (с) НМАК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 17; і три послідовності НМК МІ, вибрані з (а) НМЕК-1І1, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 18; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 159; і (с) НМЕ-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 20.
Ї00304| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з 1-17 і І/-13, при цьому антитіло включає другий МНЛ/. фрагмент, що включає три послідовності НМЕ. МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НУВ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33; і три послідовності НМЕ. М'І,, вибрані з (а) НМЕ-11, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 34; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМЕ-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36.
ЇОО30О5| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший УНЛ/І. фрагмент, що включає три послідовності НМЕ. МН, вибрані з (а) НМЕ-НІ, 60 що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 61; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 62; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 63; і три послідовності НМК МІ, вибрані з (4) НМК-1І1, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 64; (є) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 65; і (5 НМЕК-
ЇЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕС ІЮО МО: 66; і другий МН/Л// фрагмент, що включає три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМЕК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 15; (Б) НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 16; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕС ІЮО МО: 17; і три послідовності
НМА МІ, вибрані з (а) НМЕ-11, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 18; (в) НМА-
Ї2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕБСО ІО МО: 19; ї (с) НМК-ІЗ, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 20.
ЇОО30О6| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає антигензв'язуючий домен, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17 ї 1-13, при цьому антитіло включає перший УНЛ/І. фрагмент, що включає три послідовності НУЄ. МН, вибрані з (а) НМА-НІ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 61; (Б) НУВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 62; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 63; і три послідовності НМК МІ, вибрані з (4) НМЕ-І1, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІО МО: 64; (є) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 65; і (Ю НМЕ-
ЇЗ, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕБО І МО: 66; і другий МН/Л/. фрагмент, що включає три послідовності НМК МН, вибрані з (а) НМАК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 31; (Б) НМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність хЕО ІЮ МО: 32; (с) НМА-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 33; і три послідовності НМЕ. М'І,, вибрані з (а) НМЕ-11, що включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮ МО: 34; (р) НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 35; і (с) НМА-
ЇЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 36.
І00307| У різних варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший МН/МІ фрагмент, який зв'язує ІІ -17, при цьому перший гемімер включає мутацію типу "виступ" у константній ділянці важкого ланцюга, і другий гемімер, що включає другий МН/Л/ фрагмент, який зв'язує ІІ -13, при цьому другий гемімер включає мутацію типу "западина" у константній ділянці важкого ланцюга. У різних варіантах здійснення
Зо мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший МН//І. фрагмент, який зв'язує 1-17, при цьому перший гемімер включає мутацію типу "западина" у константній ділянці важкого ланцюга, і другий гемімер, що включає другий МНЛ/І. фрагмент, який зв'язує ІІ - 13, при цьому другий гемімер включає мутацію типу "виступ" у константній ділянці важкого ланцюга. У деяких варіантах здійснення константна ділянка важкого ланцюга, що включає мутацію типу "западина", має послідовність, показану в ЗЕО ІЮ МО: 68 (401) або 5ЗЕО ІО МО: 70 (Ід04). У деяких варіантах здійснення константна ділянка важкого ланцюга, що включає мутацію типу "виступ", має послідовність, показану в ЗЕО ІЮ МО: 67 (1901) або 5ЕО ІО МО: 69 (19054). У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший важкий ланцюг, що має послідовність 5ЕО ІЮ МО: 77, і перший легкий ланцюг, що має послідовність зЗЕО ІЮ МО: 78 або 79, і другий гемімер, що включає другий важкий ланцюг, що має послідовність зЗЕО ІЮ МО: 21 або 23, і другий легкий ланцюг, що має послідовність БЕО ІЮ
МО: 22 або 24. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне антитіло включає перший гемімер, що включає перший важкий ланцюг, що має послідовність 56 ІЮ МО: 77, і перший легкий ланцюг, що має послідовність 5ЕО ІЮО МО: 78 або 79, і другий гемімер, що включає другий важкий ланцюг, що має послідовність 5ЕО ІО МО: 21, і другий легкий ланцюг, що має послідовність ЗЕО ІЮ МО: 22.
Ї00308| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-ІЇ-13/І/-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення являє собою моноклональне антитіло, включаючи химерне, гуманізоване антитіло або антитіло людини. У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-ІЇ-13/1/-17 антитіло являє собою фрагмент антитіла, наприклад Ем, Раб, Раб", зсЕм, діатіло або фрагмент Е(ар)2. У деяких варіантах здійснення антитіло являє собою повнорозмірне антитіло, наприклад інтактне антитіло Їдс1 або Ідс4 або, що має відношення до іншого класу або ізотипу, як визначено в даному описі.
Ї00309| У деяких варіантах здійснення мультиспецифічне анти-1Ї-13/І/-17 антитіло відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення може мати будь-яку з ознак, самостійно або в комбінації, які описані в Розділах 1-7 нижче. 1. Афінність антитіл
І00310| У певних варіантах здійснення зазначене в даній заявці антитіло має значення константи дисоціації (Ка) щодо антигена х 1 мкМ, х 100 НМ, То НМ, 1 НМ, 01 НМ, «0,01 нм 60 або х 0,001 нМ (наприклад 10-8 М або менше, наприклад від 10-8 М до 10-13 М, наприклад від
10-9 М до 10-13 М).
І00311| У деяких варіантах здійснення Ка вимірюють за допомогою аналізу зв'язування антигена, міченого радіоактивним ізотопом (КІА). У деяких варіантах здійснення КІіІА здійснюють із застосуванням ЕРар версії антитіла, що представляє інтерес, і його антигена. Наприклад, афінність зв'язування Бар з антигеном у розчині вимірюють шляхом зрівноважування Раб з мінімальною концентрацією (125І)-міченого антигена в присутності ряду титрувальних концентрацій неміченого антигена з наступним уловлюванням зв'язаного антигена на планшеті, який покритий антитілом проти Раб (див., наприклад, Спеп еї аї., ). Мої. ВіоїЇ. 293:865-881 (1999)). Щоб визначити умови аналізу, багатоямкові планшети МІСКОТІТЕКФ (Тпепто зЗсіепійіс) покривають протягом ночі уловлювальним антитілом проти Раб (Сарреї І арх) в концентрації 5 мкг/мл в 50 мМ розчині карбонату натрію (рН 9,6) і потім блокують 2 95 (мас/об) розчином бичачого сироваткового альбуміну в РВ5 протягом двох-п'яти годин при кімнатній температурі (приблизно 23 "С). У планшеті, що не містить адсорбенту (Мипс 25269620), 100 пМ або 26 пмМ
П125ІЦ-антигена змішують із серійними розведеннями Раб, який представляє інтерес (наприклад, відповідно до оцінки антитіла проти МЕСЕ, Рар-12, описаного в Ргевіа еї аЇ., Сапсег Кев. 57:4593-4599 (1997)). Потім Раб, який представляє інтерес інкубують протягом ночі; однак інкубацію можна продовжувати протягом більш тривалого періоду (наприклад, протягом приблизно 65 годин), щоб гарантувати досягнення рівноваги. Потім суміші переносять у планшет для вловлювання і інкубують при кімнатній температурі (наприклад, протягом однієї години). Після інкубації розчин видаляють і планшет промивають вісім раз 0,1 95 розчином полісорбату 20 (ТМ/ЕЕМ-208) в РВ5. Після просушки планшетів додають 150 мкл/ямку сцинтилятора (МІСКОЗСІМТ-20 ТМ; РаскКага) і рахують на гамма-лічильнику ТОРСОШМТ ТМ (Раскага) протягом десяти хвилин. Концентрації кожного Бар, що забезпечують зв'язування складає 2095 або менше від максимального, вибирають для застосування в аналізі конкурентного зв'язування. 003121 Згідно з деякими варіантами здійснення Ка вимірюють із застосуванням аналізу на основі поверхневого плазмонного резонансу ВІАСОКЕФ. Наприклад, аналіз із застосуванням
ВІАСОКЕФ-2000 або ВІАСОКЕ Ф-3000 (ВІАсоге, Іпс., Різсаїамжау, МУ) проводять при 25 С з використанням чипів СМ5 з іммобілізованим антигеном при «10 одиницях відповіді (КО). У
Зо деяких варіантах здійснення біосенсорні чипи з карбоксиметильованого декстрану (СМ5,
ВІАСОРКЕ, Іпс.) активують гідрохлоридом М-етил-М'-(З-диметиламінопропіл)карбодіїміду (ЕРС) і
М-гідроксисукцинімідом (МН) згідно з інструкціями постачальника. Антиген розбавляють 10 мМ ацетатом натрію, рН 4,8, до 5 мкг/мл (ї0,2 мкМ) перед ін'єкцією зі швидкістю потоку 5 мкл/хвилину для досягнення приблизно 10 одиниць відповіді (КО) зв'язаного білка. Після антигена вводять 1 М етаноламін, щоб блокувати групи, що не прореагували. Для вимірювань кінетичних показників дворазові послідовні розведення Раб (від 0,78 нМ до 500 нМ) впорскують в РВ5 з 0,05 95 розчином поверхнево-активної речовини полісорбат 20 (ТМ/ЕЕМ-2ОТМ) (РВЗТ) при температурі 25"С і швидкості потоку приблизно 25 мкл/хв. Швидкості асоціації (Коп) і швидкості дисоціації (Кої) вираховують із застосуванням простої моделі зв'язування Лангмюра один до одного (ВІАСОКЕ Ф Емаїцайоп Зоймаге мегзіоп 3.2) за допомогою одночасного припасування сенсограми асоціації і дисоціації. Рівноважну константу дисоціації (КО) розраховували у вигляді співвідношення Копй/коп. Див., наприклад, Спеп еї аї., У. Мої. Віої. 293:865-881 (1999). Якщо швидкість асоціації перевищує 106 М-1/06-1 на основі зазначеного вище аналізу поверхневого плазмонного резонансу, то швидкість асоціації можна визначити способом на основі гасіння флуоресценції, який дозволяє вимірювати збільшення або зменшення інтенсивності флуоресцентного випромінювання (довжина хвилі збудження - 295
НМ; довжина хвилі випущення - 340 нМ, смуга пропускання 16 нМ) при 25 "С у присутності 20
НМ комплексу антиген-антитіло (форма Раб) в РВ5, рН 7,2, і підвищуваних концентрацій антигена, визначених за допомогою спектрометра, такого як спектрофотометр зупиненого потоку (Амім Іпзігитепів) або спектрофотометр 5І М-АМІМСО ТМ серії 8000 (Теппозресігопіс) з кюветою, що перемішується. 2. Фрагменти антитіл 00313) У певних варіантах здійснення пропоноване в даному описі антитіло являє собою фрагмент антитіла. Фрагменти антитіл включають, без обмеження, фрагменти Раб, Рар', Баб'-
ЗН, К(аб)2, ГРм і зсЕм, а також інші фрагменти, описані нижче. Огляд певних фрагментів антитіл див. в Ниазоп еї аїЇ. Маї. Меа. 9: 129-134 (2003). Огляд фрагментів 5сСЕм див., наприклад, в
Рінскіййп, в Те РІагтасоіоду ої Мопосіопа! Апііродіе5, т. 113, Козепригд апа Мооге едв., (Зргіпдеї-Мепад, Мем Могк), стор. 269-315 (1994); також див. МО 93/16185; і патенти США 5571894 і 5587458. Опис фрагментів Рабр і Е(ар)2, що включають залишки які зв'язують епітоп бо реутилізаційного рецептора, і що мають підвищений період напівжиття іп мімо, див. у патенті
США 5869046. 00314) Діатіла являють собою фрагменти антитіл, що містять дві антигензв'язуючі ділянки, і можуть бути бівалентними або біспецифічними. Див., наприклад, європейський патент 404097;
МО 1993/01161; Ниазоп еї аї., Маї. Мед. 9:129-134 (2003); і Ноїїїподег еї а!., Ргос. Маї). Асад. 5сі.
ИБА 90: 6444-6448 (1993). В Нидзоп еї аї., Маї. Меа. 9:129-134 (2003) також описані триатіла і тетратіла.
І00315| Однодоменні антитіла являють собою фрагменти антитіл, що включають увесь варіабельний домен важкого ланцюга антитіла, або його частину, або весь варіабельний домен легкого ланцюга антитіла, або його частину. У певних варіантах здійснення однодоменне антитіло являє собою однодоменне антитіло людини (Юотапіїє, Іпс., УМакйат, МА; див., наприклад, патент США 6248516 В1).
І00316| Фрагменти антитіл можна одержати різними способами, що включають, без обмеження, протеолітичне розщеплення інтактного антитіла, а також продукування рекомбінантними клітинами-хазяїнами (такими як Е. соїї або фаг), як описано в даному описі. 3. Химерні та гуманізовані антитіла 00317) У певних варіантах здійснення антитіло, що пропонується в даному описі, являє собою химерне антитіло. Певні химерні антитіла описані, наприклад, у патенті США 4816567; і в
Могтізоп єї аї., Ргос. Май). Асад. сі. ОБА, 81:6851-6855 (1984)). В одному прикладі химерне антитіло включає варіабельну ділянку, що не має відношення до людини (наприклад, варіабельну ділянку, отриману від миші, пацюка, хом'яка, кролика або відмінного від людини примата, такого як мавпа) і константну ділянку людини. В іншому прикладі химерне антитіло являє собою антитіло "переключеного класу", отримане в результаті зміни класу або підкласу вихідного антитіла. Термін "химерні антитіла" включає антигензв'язуючі фрагменти таких антитіл. 00318) У певних варіантах здійснення химерне антитіло являє собою гуманізоване антитіло.
Як правило антитіло, яке не відноситься до людини гуманізують, щоб зменшити імуногенність для людини і зберегти при цьому специфічність і спорідненість вихідного антитіла, яке не відноситься до людини. Як правило, гуманізоване антитіло включає один або декілька варіабельних доменів, у яких НУК, наприклад, СОК (або їх фрагменти), отримані з антитіла, яке не відноситься до людини, а ЕК (або їх фрагменти) отримані з послідовностей антител людини.
Гуманізоване антитіло також необов'язкове включає, щонайменше, частину константної ділянки людини. У деяких варіантах здійснення деякі залишки ЕК у гуманізованому антитілі замінені відповідними залишками з антитіла, яке не відноситься до людини (наприклад, антитіла, з якого отримані залишки НМК), наприклад для відновлення або збільшення специфічності або афінності антитіла. 00319) Гуманізовані антитіла і способи їх одержання розглядаються, наприклад, в АІтадго апа Егапвзоп, Егопі. Віовсі. 13:1619-1633 (2008), і також описані, наприклад, в Кіесптапп еї аї.,
Маїште 332:323-329 (1988); Ойцеєп еї аїЇ., Ргос. Маг! Асад. сі. ОБА 86:10029-10033 (1989); патентах США 5821337, 7527791, 6982321 і 7087409; Казптітгі еї аіЇ., Метод» 36:25-34 (2005) (описаний переніс ділянки (5ОК), яка визначає специфічність; Радіап, Мої. Іттипої. 28:489-498 (1991) (описане "повторне покривання"); БаІгАсдца еї аї., Меїйоаз 36:43-60 (2005) (описане "гасування ЕЕ"); і в О5роигп еї аї., Мешоа5 36:61-68 (2005) і КіїткКа еї а!., Вг. У. Сапсег, 83:252- 260 (2000) (описаний підхід до тасування ЕК на основі "направленого відбору"). 003201) Каркасні ділянки людини, які можуть застосовуватися для гуманізації, включають, без обмеження: каркасні ділянки, вибрані із застосуванням способу "найкращої відповідності" (див., наприклад, Зіт5 еї аїЇ. У. Іттипої. 151:2296 (1993)); каркасні ділянки, отримані з консенсусних послідовностей антитіл людини певної підгрупи варіабельних ділянок легкого і важкого ланцюга (див., наприклад Сагіег еї аїЇ. Ргос. Май. Асад. 5сі. ОБА, 89:4285 (1992); і Ргезіа еї аї. У. Іттипої., 151:2623 (1993)); зрілих каркасних ділянок людини (підданих соматичної мутації) або зародкових каркасних ділянок людини (див..., наприклад, АІтадго апа Егапзв5оп,
Егопі. Віовсі. 13:1619-1633 (2008)); і каркасних ділянок, отриманих зі скринінгових бібліотек ЕК (див., наприклад, Васа еї аї., 9. Віої. Спет. 272:10678-10684 (1997) і Козок еї аї., 9. ВіоЇ. Спет. 271:22611-22618 (1996)). 4. Антитіла людини 00321) У певних варіантах здійснення пропоноване в даній заявці антитіло, являє собою антитіло людини. Антитіла людини можуть бути отримані за допомогою різних способів, відомих у даній області. Антитіла людини в цілому описані в мап ОіїЇК апа мап де М/іпКкеї, Сигг. Оріп.
Рпаптасої. 5: 368-74 (2001) і Гопрего, Сигт. Оріп. Іттипої. 20:450-459 (2008).
І00322| Антитіла людини можуть бути отримані шляхом введення імуногена трансгенній 60 тварині, модифікованій з метою надання їй здатності продукувати інтактні антитіла людини або інтактні антитіла, що містять варіабельні ділянки людини, у відповідь на введення антигена. Такі тварини зазвичай містять всі або частину локусів імуноглобулінів людини, які замінюють ендогенні локуси імуноглобулінів, або які присутні поза хромосомами або інтегруються випадковим чином у хромосоми тварини. У таких трансгенних мишей ендогенні локуси імуноглобулінів зазвичай інактивують. Огляд способів одержання антитіл людини в трансгенних тваринах див. в І опрего, Маї. Віоїтеси. 23:1117-1125 (2005). Див. також, наприклад, патенти США 6075181 і 6150584, що описують технологію ХЕМОМОИЗЕТМ; патент США 5770429, що описує технологію НиМарФ; патент США 7041870, що описує технологію К-М МОЗЕФ, і публікацію патентної заявки США 2007/0061900 технологію, що описує, МеІосімМоизеФф). Варіабельні ділянки людини з інтактних антитіл, отриманих із застосуванням таких тварин, можуть бути також модифіковані, наприклад, шляхом об'єднання з іншою константною ділянкою людини.
ІЇ00323| Антитіла людини також можуть бути отримані із застосуванням гібридомних способів. Були описані лінії клітин мієломи людини і гетеромієломи миші-людини для продукування моноклональних антитіл людини. (Див., наприклад, Коброг У. Іттипої., 133: 3001 (1984); Вгодеигк єї аї., Мопосіопа! Апіроду Ргодисіоп Тесппіднез апа Арріїсайоп5 стор. 51-63 (Магсе! ОекККег, Іпс., Мем/ МогК, 1987); і Воетег еї аї., У. Іттипої., 147: 86 (1991).) Антитіла людини, отримані за допомогою гібридомної технології В-клітин людини, також описані в Гі еї а!., Ргос. Майї. Асад. Зсі. ОСОБА, 103:3557-3562 (2006). Додаткові способи включають способи, описані, наприклад, у патенті США 7189826 (що описує одержання моноклональних антитіл ДМ людини з гібридомних клітинних ліній) і Мі, Хіапдаї Міапуїхне, 26(4):265-268 (2006) (що описує гібридоми типу людина - людина). Технологія гібридом людини (технологія Тгіота) також описана в Моїїтег5 апа Вгапаїеїп, Нізіоіоду апа Ніхіоравйоїоду, 20(3):927-937 (2005) і МоПтегв5 апа ВгапаїІеіїй, МеїШосдвз апа Ріпаіпо5 іп ЕхрегітепіаіІ апа Сіїпісаї Рнаптасоіоаду, 27(3):185-91 (2005).
І00324| Антитіла людини також можуть бути отримані шляхом виділення послідовностей варіабельного домену клону Ем, вибраних з отриманих від людини бібліотек фагових дисплеїв.
Такі послідовності варіабельного домену можуть бути потім об'єднані з необхідним константним доменом людини. Способи вибору антитіл людини з бібліотек антитіл описані нижче. 5. Антитіла, отримані з бібліотек
Зо Ї00325| Описані в даній заявці антитіла можуть бути виділені шляхом скринінгу комбінаторних бібліотек на антитіла, що мають необхідну активність або активності. Наприклад, у даній області відомий ряд способів одержання бібліотек фагових дисплеїв і скринінгу таких бібліотек на антитіла, що мають необхідні характеристики зв'язування. Дані способи розглядаються, наприклад, в Ноодепроот еї аї. в Меїносдз іп МоїІесшіаг Віоіоду 178:1-37 (О'Вгіеп еї а!.,, ед., Нитап Ргез5, Тоїома, МУ, 2001) і також описані, наприклад, в МссапПегпу еї аї., Маїиге 348:552-554; Сіасквоп еї аї., Маїшге 352: 624-628 (1991); МагїКз еї аї., У. Мої. ВіоІ. 222: 581-597 (1992); Магк5 апа Вгадригу, в Меїпод5 іп МоїІесшаг Віооду 248:161-175 (10, ед., Нитап Ргев5,
Тома, МУ, 2003); Зідни еї аї., У. Мої. Віо!. 3938(2): 299-310 (2004); І ее еї аї., у. Мої. Вісі. 340(5): 1073-1093 (2004); Реіоизе, Ргос. Маї!. Асад. 5сі. ОБА 101(34): 12467-12472 (2004); і І ее еї аї., У.
Іттипої. Меїйоавз 284(1-2): 119-132(2004).
І00326| В рамках певних способів на основі фагових дисплеїв репертуари генів МН і МІ. окремо клонують за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) і об'єднують випадковим чином у фагових бібліотеках, які потім можуть бути піддані скринінгу на антигензв'язуючі фаги, як описано в У/іпієг еї аїЇ., Апп. Кем. Іттипої., 12: 433-455 (1994). Як правило, фаг демонструє фрагменти антитіл або у вигляді одноланцюгових фрагментів Ем (5сЕм), або у вигляді фрагментів Раб. Бібліотеки, отримані з імунізованих джерел, містять антитіла, що мають високу афінність щодо імуногена без необхідності конструювання гібридом. Альтернативно можна клонувати наївний репертуар (наприклад, що відноситься до людини) з одержанням одного джерела антитіла проти широкого ряду власних і чужорідних антигенів без будь-якої імунізації, як описано сгініне еї аІ., ЕМВО ., 12:725-734 (1993). Нарешті, наївні бібліотеки також можуть бути отримані синтетично шляхом клонування сегментів М-гена, які не зазнали реаранжування зі стовбурних клітин, з використанням праймерів ПЛР, що містять статистичну послідовність, для кодування високоваріабельних ділянок СОМЗ і проведення реаранжування іп міго, як описано Ноодепроот і Уміптег, .). Мої. Віо!., 227:381-388 (1992). Патентні публікації, що описують фагові бібліотеки антитіл людини, включають, наприклад: патент США 5750373 і публікації патентів США 2005/0079574, 2005/0119455, 2005/0266000, 2007/0117126, 2007/0160598, 2007/0237764, 2007/0292936 і 2009/0002360.
І00327| Антитіла або фрагменти антитіл, виділені з бібліотек антитіл людини, у даному документі відносять до антитіл людини або фрагментів антитіл людини. бо 6. Мультиспецифічні антитіла
00328) У деяких варіантах здійснення пропоноване в даній заявці антитіло являє собою мультиспецифічне антитіло, наприклад біспецифічне антитіло. Мультиспецифічні антитіла являють собою моноклональні антитіла, які мають специфічність зв'язування у відношенні, щонайменше, двох ділянок зв'язування. У деяких втіленнях одна ділянка відповідає за специфічне зв'язування з 1-17, а інша - І/-13. У певних варіантах здійснення одна ділянка відповідає за специфічне зв'язування з гомодимером 1Г-17А, гомодимером 1І-17Е, і гетеродимером 1І--17АБЕ, а інша - ІІ -13. Біспецифічні антитіла також можуть застосовуватися для спрямування цитотоксичних агентів до клітин. Біспецифічні антитіла можуть бути отримані у вигляді повнорозмірних антитіл або фрагментів антитіл.
ІЇ00329| Способи одержання мультиспецифічних антитіл включають, без обмеження, рекомбінантну спільну експресію двох пар важкий ланцюг-легкий ланцюг імуноглобуліну, що мають різні специфічності (див. Міїсїеїп апа СиепПо, Майшге 305: 537 (1983)), МО 93/08829 і
ТгаипескКег еї аІ., ЕМВО .). 10: 3655 (1991)), і технологію "виступ-в-западину" (див., наприклад, патент США 5731168, публікацію патенту США 2011/0287009). Мультиспецифічні антитіла також можуть бути отримані за допомогою створення ефектів електростатичного наведення для одержання гетеродимерних молекул Ес антитіл (МО 2009/089004А1); перехресного зшивання двох або більше антитіл або фрагментів (див., наприклад, патент США 4676980 і Вгеппап еї аї.,
Зсіепсе, 229: 81 (1985)); застосування лейцинових блискавок або подвійних спіралей для одержання біспецифічних антитіл (див., наприклад, КовіеІпу еї аї., У. Іттипої., 148(5):1547-1553 (1992) ї МО2011/034605); застосування розщеплюваного фурином зв'язку між СІ. доменом і МН доменом в одному МН/МІ фрагменті (див., наприклад, М/О2013/119966 і УМО2013/055958); застосування технології одержання "діатіл" для одержання фрагментів біспецифічних антитіл (див., наприклад, Ноїіпдег еї аї., Ргос. Маї!. Асай. зсі. ОБА, 90:6444-6448 (1993)); застосування перетинання доменів імуноглобуліну для одержання біспецифічних антитіл (див., наприклад,
МО2009/080251); і застосування одноланцюгових Ем (5Ем) димерів (див., наприклад, Сгибег еї аї., У. Іттипої., 152:5368 (1994)); і одержання триспецифічних антитіл, як описано, наприклад, в
Тий еї аї. у. Іттипої. 147: 60 (1991). 00330) Сконструйовані антитіла із трьома або більшою кількістю антигензв'язуючих ділянок, включаючи "антитіла Осіорив" (антитіла-"восьминоги"), також входять в об'єм даного винаходу (див., наприклад, заявку на патент США 2006/0025576А1). (00331) Антитіло або фрагмент також включає в даній заявці "РАБ подвійної дії" або "ОАЕ", що включають антигензв'язуючу ділянку, яка зв'язується, наприклад, з 1ІЇ/-17, а також іншим, відмінним від нього антигеном, таким як І/Ї/-13 (див., наприклад, заявку на патент США 2008/0069820). Формат біспецифічних антитіл САЕ усуває проблему неправильного зв'язування ланцюгів, яка часто зустрічається в біспецифічних антитілах, і також забезпечує збереження природнього формату антитіл.
Технологія "виступ у западину"
І00332| Застосування технології "виступ у западину" в якості способу продукування мультиспецифічних антитіл описане, наприклад, у патенті США 5731168, М/02009/089004, заявці на патент США 2009/0182127, заявці на патент США 2011/0287009, Магміп апа 2пи, Асіа
Ріаптасої. 5іп. (2005) 26(6):649-658, і в Копіветтапп (2005) Асіа Рпаптасої. 5іп., 26:1-9. Короткий необмежуючий опис наведений нижче. 00333) Термін "виступ" означає, щонайменше, один бічний амінокислотний ланцюг, який виступає від контактної поверхні першого поліпептиду і, таким чином, позиціонується в компенсаторній западині на протилежній контактній поверхні (тобто контактній поверхні другого поліпептиду), забезпечуючи стабілізацію гетеромультимера і, таким чином, сприяє утворенню, наприклад, гетеромультимерів замість гомомультимерів. Виступ може бути розташований на вихідній контактній поверхні або може бути введений синтетичним чином (наприклад, шляхом зміни нуклеїнової кислоти, що кодує контактну поверхню). У деяких варіантах здійснення нуклеїнова кислота, що кодує контактну поверхню першого поліпептиду, змінена для кодування виступу. Для досягнення цього нуклеїнова кислота, що кодує, щонайменше, один "вихідний" амінокислотний залишок на контактній поверхні першого поліпептиду, заміщується нуклеїновою кислотою, що кодує, щонайменше, один "внесений" амінокислотний залишок, який має більший об'єм бічних ланцюгів, ніж вихідний амінокислотний залишок. Очевидно, що може бути присутнім більше одного вихідного і відповідного йому внесеного залишку. Об'єми бічних ланцюгів різних амінокислотних залишків показані, наприклад, у Таблиці 1 заявки на патент
США 2011/0287009 або Таблиці 1 патенту США 7642228.
І00334| У деяких варіантах здійснення внесені для утворення виступу залишки являють собою амінокислотні залишки, що зустрічаються в природних умовах, вибрані з аргініну (К), бо фенілаланіну (Р), тирозину (У) і триптофану (УМ). У деяких варіантах здійснення внесений бо залишок являє собою триптофан або тирозин. У деяких варіантах здійснення вихідний залишок для утворення виступу має малий об'єм бічних ланцюгів, такий як аланін, аспарагін, аспарагінова кислота, гліцин, серин, треонін або валін. Див., наприклад, патент США 7642228. 00335) Термін "западина" означає, щонайменше, один амінокислотний бічний ланцюг, який заглиблений у контактну поверхню другого поліпептиду і, таким чином, вміщає відповідний виступ на протилежній контактній поверхні першого поліпептиду. Западина може бути розташована на вихідній контактній поверхні або може бути введена синтетичним чином (наприклад, шляхом зміни нуклеїнової кислоти, що кодує контактну поверхню). У деяких варіантах здійснення нуклеїнова кислота, що кодує контактну поверхню другого поліпептиду, змінена для кодування западини. Для досягнення цього нуклеїнова кислота, що кодує, щонайменше, один "вихідний" амінокислотний залишок на контактній поверхні другого поліпептиду, заміщується ДНК, що кодує, щонайменше, один "внесений" амінокислотний залишок, який має менший об'єм бічних ланцюгів, ніж вихідний амінокислотний залишок.
Очевидно, що може бути присутнім більше одного вихідного і відповідного йому внесеного залишку. У деяких варіантах здійснення внесені для утворення западини залишки являють собою амінокислотні залишки, що зустрічаються в природних умовах, вибрані з аланіну (А), серину (5), треоніну (Т) і валіну (М). У деяких варіантах здійснення внесений залишок являє собою серин, аланін або треонін. У деяких варіантах здійснення вихідний залишок для утворення западини має більший об'єм бічних ланцюгів, такий як тирозин, аргінін, фенілаланін або триптофан.
І00336| Виступ зазнає "позиціонування" у западині, що означає, що просторове розташування виступу і западини на контактній поверхні першого поліпептиду і другого поліпептиду, відповідно, а також розміри виступу і западини такі, що виступ може бути розташований у западині без значного порушення нормального зв'язку між першим і другим поліпептидом на їхній контактній поверхні. Оскільки виступи, такі як Туг, Рпє ії Ттр зазвичай не розташовуються перпендикулярно щодо осі контактної поверхні і мають переважні види конфігурації, вирівнювання виступу щодо відповідної йому западини в деяких випадках може бути засноване на моделюванні пари виступ/западина на основі тривимірної структури, такої, яку одержують за допомогою рентгенівської кристалографії або ядерного магнітного резонансу
Зо (ЯМР). Це може бути здійснене із застосуванням способів, які широко використовуються в даній області.
І00337| У деяких варіантах здійснення мутація типу "виступ" у константній ділянці дет являє собою ТЗ366МУ. У деяких варіантах здійснення мутація типу "западина" у константній ділянці Ідсе1 включає одну або декілька мутацій, вибраних з 73665, 1 368А і У407М. У деяких варіантах здійснення мутація типу "западина" у константній ділянці Ід51 включає 13665, І З68А і 407. В
ЗЕО ІЮ МО: 67 показаний приклад константної ділянки Їдс1 з мутацією типу "виступ", а в ЗЕО ІЮ
МО: 68 показаний приклад константної ділянки Іде1 з мутацією типу "западина".
І00338| У деяких варіантах здійснення мутація типу "виступ" у константній ділянці Ід являє собою Т366УУ. У деяких варіантах здійснення мутація типу "западина" у константній ділянці Ід4 включає одну або декілька мутацій, вибраних з 73665, І З368А і 407. У деяких варіантах здійснення мутація типу "западина" у константній ділянці Ід(34 включає 73665, І З68А і
У407У. В 5ЕО ІЮ МО: 69 показаний приклад константної ділянки Ідс4 з мутацією типу "виступ", а в 5ЕО ІО МО: 70 показаний приклад константної ділянки Ідс4 з мутацією типу "западина".
Див., наприклад, патент США 7642228. 1. Варіанти антитіл
Ї00339| У певних варіантах здійснення винахід охоплює варіанти амінокислотних послідовностей антитіл, пропонованих в даному описі. Наприклад, може бути бажаним поліпшення афінності зв'язування і/або інших біологічних властивостей антитіла. Варіанти амінокислотних послідовностей антитіла можуть бути отримані шляхом введення підходящих модифікацій у нуклеотидну послідовність, що кодує антитіло, або шляхом пептидного синтезу.
Такі модифікації включають, наприклад, делеції і/або інсерції або заміщення залишків в амінокислотних послідовностях антитіла. Для одержання кінцевого конструкта може здійснюватися будь-яка комбінація делецій, інсерцій і заміщень за умови, що кінцевий конструкт має необхідні характеристики, такі як здатність зв'язувати антиген.
Варіанти, отримані в результаті заміщень, інсерцій та делецій 00340) У певних варіантах здійснення передбачені варіанти антитіл, що містять одне або декілька амінокислотних заміщень. Ділянки, що представляють інтерес із погляду замісного мутагенезу, включають НУК і ЕК. Консервативні заміщення показані в Таблиці 1 під заголовком "Консервативні заміщення". Більш конкретні заміщення наведені в Таблиці 1 під заголовком 60 "Приклади заміщень" і, більш докладно описані нижче, з врахуванням класів бічних амінокислотних ланцюгів. Амінокислотні заміщення можуть бути введені в антитіло, яке представляє інтерес, після чого отримані продукти піддають скринінгу на необхідну активність, наприклад збереження/поліпшення ступеня зв'язування антигена, зниження імуногенності або покращені АОСС або СОС.
Таблиця 1
Ше() 77711111 0(бешмМа;МекАа;Рпе;Норлейцин./// (Пе цец(Ю 77771111 |НорлейциноМе; Ма; МесАївіРйе.їдЗ/ Ме 77777777
І00341| Амінокислоти можуть бути згруповані згідно з основними властивостями бічних ланцюгів: (1) гідрофобні: Норлейцин, Меї, Аа, Маї, І єи, Пе; (2) нейтральні гідрофільні: Суб, Зег, ТАг, Азп, Сп; (3) кислотні: Ар, СМ; (4) основні: Ні, Г ув, Ага; (5) залишки, які впливають на орієнтацію ланцюга: су, Рго; (6) ароматичні: Тгр, Туг, Ріє. (00342) Неконсервативні заміщення являють собою заміну члена одного із зазначених класів членом іншого класу. 00343) Замісний варіант одного типу включає заміщення одного або декількох залишків гіперваріабельної ділянки вихідного антитіла (наприклад, гуманізованого або антитіла людини).
Як правило, отриманий варіант (варіанти), вибрані для подальшого дослідження, характеризуються змінами (наприклад, поліпшенням) певних біологічних властивостей (таких як підвищена афінність, знижена імуногенність) у порівнянні з вихідним антитілом і/або практично зберігають незмінними певні біологічні властивості вихідного антитіла. Приклад замісного варіанта являє собою афінно зріле антитіло, яке може бути отримане зручним чином, наприклад із застосуванням способів афінного дозрівання на основі фагових дисплеїв, таких які описані в даній заявці. Коротко, один або декілька залишків НУК мутують, при цьому варіанти антитіл представляють на поверхні фагів і піддають скринінгу на певну біологічну активність (наприклад, афінність зв'язування). (00344) Зміни (наприклад, заміщення) в НМЕ можуть бути здійснені, наприклад, з метою поліпшення афінності антитіла. Такі зміни можуть бути здійснені в "гарячих точках" НУК, тобто в залишках, кодованих кодонами, які зазнають мутацій з високою частотою в процесі соматичного дозрівання (див., наприклад, Споу/апигу, Меїйпоаз Мої. ВіоїЇ. 207:179-196 (2008)), і/або БО (а- са), з тестуванням отриманого варіанта МН або Мі на афінність зв'язування. Афінне дозрівання, здійснюване шляхом модифікації і повторного відбору із вторинних бібліотек, було описане, наприклад, в Ноодепроот еї аї. іп Меїйод5 іп МоїІесшіаг Віоіоду 178:1-37 (О'Вгівп вї аї., ей., Нитап Ргевз5, Тоїоула, МУ, (2001).). У деяких варіантах афінного дозрівання в гени варіабельних ділянок, вибраних для дозрівання, вводять різноманітність за допомогою одного з ряду способів (що включають ПЛР із внесенням помилок, перетасування ланцюгів або олігонуклеотид-направлений мутагенез). Потім створюють вторинну бібліотеку. Потім бібліотеку піддають скринінгу з метою ідентифікації варіантів антитіл, що мають необхідну афінність.
Інший спосіб введення різноманітності включає НУК-направлені підходи, в рамках яких декілька залишків НУК (наприклад, 4-6 залишків одночасно) зазнають рандомізації. Залишки НМК, що беруть участь у зв'язуванні антигена, можуть бути конкретно ідентифіковані за допомогою, наприклад, скануючого аланіном мутагенезу або моделювання. При цьому мішенями часто є
СОоВв-НЗ їі СОК-І 3. 00345) У певних варіантах здійснення заміщення, інсерції або делеції можуть зустрічатися в одному або декількох НУК, за умови, що такі зміни практично не знижують здатність антитіла зв'язувати антиген. Наприклад, в НМК можуть бути здійснені консервативні зміни (такі як консервативні заміщення, як описано в даній заявці), які практично не знижують афінність зв'язування. Такі зміни можуть перебувати поза "гарячими точками" НМК або 5ОК. У певних варіантах здійснення амінокислотні заміщення можуть бути введені для зміни або усунення однієї або декількох посттрансляційних модифікацій молекули імуноглобуліну або для підвищення виходу при одержанні антитіла. У певних варіантах здійснення описаних вище послідовностей варіантів МН і Мі, кожний НМК або залишається незмінним, або містить не більше однієї, двох або трьох амінокислотних заміщень. (00346) Спосіб, який може застосовуватися для ідентифікації залишків або ділянок антитіла, які можуть бути мішенями для мутагенезу, називається "скануючий аланіном мутагенез", описаний Сиппіпопат апа УмеїЇІ5 (1989) 5сіепсе, 244:1081-1085. У даному способі ідентифікують залишок або групу залишків-мішеней (наприклад, заряджені залишки, такі як агоу, ар, Пів, уз і діи) і замінюють їхніми нейтральними або негативно зарядженими амінокислотами (наприклад, аланіном або поліаланіном), щоб визначити наявність впливу на взаємодію антитіла з антигеном. В амінокислотні положення, що характеризуються функціональною чутливістю до вихідних заміщень, можуть бути введені інші заміщення. Альтернативно, або додатково, точки контакту антитіла з антигеном ідентифікують із застосуванням кристалічної структури комплексу антиген-антитіло. Такі контактні залишки або сусідні з ними залишки можуть бути мішенями або усуватися в якості кандидатів для заміщення. Варіанти можуть бути піддані скринінгу, щоб визначити, чи мають вони необхідні властивості.
І00347| Інсерції в амінокислотні послідовності включають аміно- і/або карбоксикінцеві продукти злиття, які можуть мати довжину від одного залишка до поліпептидів, що містять сто або більше залишків, а також інсерції в середину послідовності одного або декількох амінокислотних залишків. Приклади кінцевих інсерцій включають антитіло з М-термінальним метіонільним залишком. Інші інсерційні варіанти молекули антитіла включають продукт злиття за М- або С-кінцем з ферментом (наприклад, АОЕРТ) або поліпептидом, який збільшує період напівжиття антитіла в сироватці.
Варіанти, отримані в результаті глікозилювання 00348) У певних варіантах здійснення антитіло, що пропонується в даному описі, змінюють із метою збільшення або зменшення ступеня його глікозилювання. Додавання до антитіла сайтів глікозилювання або їх виключення може бути легко здійснене шляхом зміни амінокислотної послідовності, так що створюється або виключається один або декілька сайтів глікозилювання.
І00349| Якщо антитіло містить Ес-ділянку, можна змінити приєднаний до неї вуглевод.
Нативні антитіла, що продукується клітинами ссавців, як правило, включають розгалужений, біантенарний олігосахарид, зазвичайн приєднаний М-зв'язком до Аб5п297 домену СН2 Ес- ділянки. Див., наприклад, Умгід!ї еї аІ. ТІВТЕСН 15:26-32 (1997). Олігосахарид може включати різні вуглеводи, такі як манозу, М-ацетилглюкозамін (СІСМАс), галактозу і сіалову кислоту, а також фукозу, приєднану до (СІСМАс ов "стовбурній" частині біантенарної структури олігосахариду. У деяких варіантах здійснення модифікації олігосахариду, що входить у склад антитіла за даним винаходом, можуть бути здійснені з метою створення варіантів антитіл, що мають певні поліпшені властивості. 00350) У деяких варіантах здійснення передбачені варіанти антитіл, що містять вуглеводну структуру, у якій відсутня фукоза, приєднана (безпосередньо або побічно) до Ес-ділянки.
Наприклад, кількість фукози в такому антитілі може складати від 1 95 до 80 905, від 1 9о до 65 95, від 595 до 6595 або від 2095 до 4095. Кількість фукози може бути визначена шляхом розрахунків співвідношення середньої кількості фукози в ланцюзі цукру, приєднаного до Азп297, до суми всіх глікоструктур, приєднаних до Азп297 (наприклад, комплексних структур, гібридних структур і структур з високим вмістом манози) при вимірюванні за допомогою мас-спектрометрії 60 МА! 0І-ТОРЕ, як описано, наприклад, в УМО 2008/077546. А5п297 означає аспарагіновий залишок,
розташований приблизно в положенні 297 Ес-ділянки (Ен-нумерація залишків Ес-ділянки); проте
А5п297 також може перебувати на відстані приблизно-3 амінокислот вище або нижче положення 297, тобто між положеннями 294 і 300, внаслідок мінорних варіацій послідовності антитіл. Такі варіанти, отримані на основі фукозилювання, можуть поліпшувати функцію АЮОСС.
Див., наприклад, патентні публікації США 2003/0157108 (Ргезіа, І.); 2004/0093621 (Куоула Накко
Кодуо Со., ЦЯ). Приклади публікацій, що описують "дефукозильовані" або "фукоза-дефіцитні" варіанти антитіл, включають: заявку на патент США 2003/0157108; УМО 2000/61739; УМО 2001/29246; заявку на патент США 2003/0115614; заявку на патент США 2002/0164328; заявку на патент США 2004/0093621; заявку на патент США 2004/0132140; заявку на патент США 2004/0110704; заявку на патент США 2004/0110282; заявку на патент США 2004/0109865; УМО 2003/085119; М/о 2003/084570; УМО 2005/035586; УМО 2005/035778; М/О2005/053742;
МО2002/031140; ОкКалакі еї аї. 9. Мої. Віої. 33671 239-1249 (2004); Матапе-ОНпикі еї аї. Віоїесн.
Віоеподо. 87: 614 (2004). Приклади клітинних ліній, здатних продукувати дефукозильовані антитіла, включають клітини СНО І ес13, дефіцитні за фукозилюванням білків (Рірка еї аї. Агсп.
Віоспет. Віорпуз. 249:533-545 (1986); заявка на патент США 2003/0157108 А1, Ргезіа, І..; і УМО 2004/056312 А1, Ада!тз5 еї а!., особливо приклад 11), і лінії нокаутних клітин, такі як ген альфа- 1,6-фукозилтрансферази, ЕОТ8, нокаутні клітини СНО (див., наприклад, Уатапе-ОНпикі еї аї.
Віотеси. Віоепуд. 87:614 (2004); Капада, У. еї аї., Віоїесппо!ї. Віоєпа., 94(4):680-688 (2006); і
МО2003/085107).
І00351| Також передбачені варіанти антитіл з бісектними олігосахаридуми, наприклад, у яких розгалуження біантенарного олігосахариду, приєднаного до Ро-ділянки антитіла, здійснюється за сІСМАс. Такі варіанти антитіл можуть характеризуватися зниженим фукозилюванням і/або поліпшеною функцією АОСС. Приклади таких варіантів антитіл описані, наприклад, в МО 2003/011878 (еап-Маїгеї єї аІ.); патенті США 6602684 (тапа еї аї.) і заявці на патент США 2005/0123546 (Отапа еї а). Також передбачені варіанти антитіл, що містять, щонайменше, один галактозний залишок в олігосахариді, приєднаний до Ес-ділянки. Такі варіанти антитіл можуть мати поліпшену функцію СОС. Такі варіанти антитіл описані, наприклад, в УМО 1997/30087 (Раїе! єї а); УМО 1998/58964 (Каїсм, 5.); і УМО 1999/22764 (Раїси, 5.).
Варіанти, отримані в результаті модифікації Ес-ділянки
Зо І00352| У певних варіантах здійснення одна або декілька амінокислотних модифікацій можуть бути введені в Ес-ділянку передбаченого в даній заявці антитіла з одержанням варіанта на основі модифікації Ес-ділянки. Варіант на основі модифікації Ес-ділянки може включати послідовність Ес-ділянки людини (наприклад, Ес-ділянки Ідс1, Ідс2, ІдОЗ або Ідс4 людини), що включає амінокислотну модифікацію (наприклад, заміщення) в одному або декількох амінокислотних положеннях.
І00353| У деяких варіантах здійснення константна ділянка антитіла, така як константна ділянка важкого ланцюга, включає мутацію типу "виступ" і/або мутацію типу "западина" для забезпечення утворення мультиспецифічного антитіла. Необмежуючі приклади мутацій типу "виступ" і мутацій типу "западина", а також технології "виступ у западину" у цілому описані, наприклад, у патенті США 5731168, МЛО2009/089004, заявці на патент США 2009/0182127, заявці на патент США 2011/0287009, Магміп апа 7пи, Асіа Ріаптасої. іп. (2005) 26(6):649-658, і в Копіепптапп (2005) Асіа Ріаптасої. біп., 26:1-9. Певні необмежуючі приклади мутацій типу "виступ" і мутацій типу "западина" описані нижче. 00354) У певних варіантах здійснення передбачений варіант антитіла, який має деякі, але не всі ефекторні функції що роблять його бажаним кандидатом для застосувань, у яких важливе значення має період напівжиття антитіла іп мімо, хоча окремі ефекторні функції (такі як комплемент і АЮСС) не є необхідними або є шкідливими. Щоб підтвердити зменшення/виснаження активності СОС і/або АОСС, можуть бути проведені аналізи цитотоксичності іп міїго і/або іп мімо. Наприклад, можуть бути проведені аналізи зв'язування з Ес- рецептором (БСК), щоб переконатися, що антитіло не має здатність зв'язувати Есук (отже, імовірно, не має АОСС активності), але зберігає здатність зв'язувати ЕсКп. Первинні клітини для здійснення АЮОСС, МК-клітини, експресують тільки ЕсуКІІ, у той час як моноцити експресують
ЕсуКІ, ЕсукіІ і сук. Експресія ЕСЕ на гематопоетичних клітинах показана в Таблиці З на стор.464 в Камеїсі апа Кіпеї, Аппи. Веум. Іттипої 9:457-92 (1991). Необмежуючі приклади іп міго аналізів для визначення активності АОСС молекули, що представляє інтерес, описані в патенті
США 5500362 (див., наприклад, НеїЇ5ігоп, І. еї а). Ргос. Маг! Асай. 5сі. ОБА 83:7059-7063 (1986)) і Неї І5ігоп, І. еї аї!., Ргос. Маг! Асад. зсі. ОБА 82:1499-1502 (1985); 5821337 (див. Вгиддетапп, М. ек аі., у. Ехр. Мей. 166:1351-1361 (1987) Альтернативно, можуть застосовуватися нерадіоактивні способи проведення аналізів (див., наприклад, нерадіоактивний аналіз бо цитотоксичності методом проточної цитометрії АСТІ "м (СеПТесппоподу, Іпс. Мошипіаїп Міем/, СА) і нерадіоактивний аналіз цитотоксичності Суїсїох 968 (Рготеда, Мадізоп, УМІ)). В якості ефекторних клітин у таких аналізах можуть застосовуватися мононуклеарні клітини периферичної крові (РВМСО) їі натуральні кілерні (МК) клітини. Альтернативно, або додатково, активність АОСС молекули, що представляє інтерес, може бути визначена іп мімо, наприклад, в рамках моделі на тварині, такої як описана в Сіупез еї аї. Ргос. Маг! Асай. 5сі. ОБА 95:652-656 (1998). Також можуть бути проведені аналізи зв'язування С14д, щоб підтвердити, що антитіло не здатне зв'язувати С1і4 і, таким чином, не має СОС активності. Див., наприклад, аналіз зв'язування Сід і СЗс в рамках ЕГІЗБА в М/О 2006/029879 і УМО 2005/100402. Для аналізу активації комплементу може бути проведений аналіз СОС (див., наприклад, Са7лапо-Запіого єї а|., У. Іттипої. Меїподзв 202:163 (1996); Стада, М.5. еї аї., Віоса 101:1045-1052 (2003); і Стадд,
М.5. апа М.). Сієппіє, Вісоа 103:2738-2743 (2004)). Визначення зв'язування ЕБоКп і іп мімо кліренсу/періоду напівжиття може бути також здійснене за допомогою способів, відомих у даній області (див., наприклад, Реїкома, 5.В. еї аї., Іл. Іттипої. 18(12): 1759-1769 (2006)). 00355) Антитіла зі зниженою ефекторною функцією включають антитіла із заміщенням однієї або декількох із залишків Ес-ділянки 238, 265, 269, 270, 297, 327 і 329 (патент США Мо 6737056). Такі Рс-мутанти включають Ес-мутанти із заміщеннями у двох або більшій кількості амінокислотних положенях 265, 269, 270, 297 і 327, включаючи так званий Ес-мутант "САМА" із заміщенням залишків у положеннях 265 (0) і 297 (М) на аланін (патент США 7332581). 00356) Описані певні варіанти антитіл з поліпшеним або зниженим зв'язуванням ЕсК. (Див., наприклад, патент США 6737056; УМО 2004/056312, і ЗПівїдз еї аї., 9. Віої. Спет. 9(2): 6591-6604 (2001).)
І00357| У певних варіантах здійснення варіант антитіла включає Ес-ділянку з одним або декількома амінокислотними заміщеннями, що призводять до поліпшення АОСС, наприклад заміщеннями в положеннях 298, 333 і/або 334 Ес-ділянки (Еи-нумерація залишків).
І00358| У деяких варіантах здійснення в Ес-ділянці здійснюють зміни, які призводять до зміни (тобто до поліпшення або погіршення) зв'язування Сід і/або комплемент-залежної цитотоксичності (СОС), наприклад як описано в патенті США 6194551, УМО 99/51642 і Ідизодіє еї а. 9У. Іттипої. 164:4178-4184 (2000). (003591) Антитіла зі збільшеним часом напівжиття і поліпшеним зв'язуванням з неонатальним
Зо Ес-рецептором (ЕБсКп), який відповідає за переніс материнських ДО плоду (Спцуег еї аї., 5.
Ітпітипої. 117:587 (1976) і Кіт еї аї., 9. Іттипої. 24:249 (1994)), описані в заявці на патент США 2005/0014934А1 (Ніпіоп еї а/.). Дані антитіла включають Ес-ділянку з одним або декількома заміщеннями, що призводять до поліпшення зв'язування Ес-ділянки з РсКп. Такі Ес-варіанти включають варіанти із заміщеннями в одному або декількох залишках Ес-ділянки: 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 або 434, наприклад заміщення залишку 434 Ес-ділянки (патент США 7371826). 00360) Див. також Юипсап 8 Уміптег, Майшге 322:738-40 (1988); патент США 5648260; патент
США 5624821; і МО 94/29351 приклади, що описують інші, варіантів Ес-ділянки. (00361) В інших варіантах здійснення константна ділянка антитіла включає більше однієї з описаних в даній заявці мутацій (наприклад, мутацію типу "виступ" і/або мутацію типу "западина" і/або мутацію, яка підвищує стабільність і/або мутацію, яка знижує АОСС, і так далі).
Варіанти антитіл, отримані шляхом введення цистеїну
І00362| У певних варіантах здійснення може бути бажаним одержання антитіл, модифікованих шляхом введення цистеїну, наприклад "ШіоМАБб", у якому один або декілька залишків антитіла заміщені цистеїновими залишками. У конкретних втіленнях залишки, що заміщуються, розташовані в доступних ділянках антитіла. Шляхом заміщення зазначених залишків цистеїном у доступних ділянках антитіла з'являються реакційноздатні тіольні групи, можуть використовуватися для кон'югування антитіла з іншими фрагментами, такими як фрагменти лікарських засобів або фрагменти лінкер- лікарський засіб, з одержанням імунокон'югату, як описано в даній заявці. У певних варіантах здійснення будь-який один або декілька з наступних залишків можуть бути заміщені цистеїном: М205 (нумерація за Кабраї) легкого ланцюга; А118 (нумерація ЕЮ) важкого ланцюга; і 5400 (нумерація Е3) Ес-ділянки важкого ланцюга. Модифіковані цистеїном антитіла можуть бути отримані способом, описаним, наприклад, у патенті США 7521541.
Похідні антитіл 00363) У певних варіантах здійснення пропоноване антитіло також може бути модифіковане шляхом введення небілкових фрагментів, відомих у даній області і легко доступних. Фрагменти, що є підходящими для дериватизації антитіла, включають, без обмеження, водорозчинні полімери. Необмежуючі приклади водорозчинних полімерів включають, без обмеження, бо поліетиленгліколь (ПЕГ),, співполімери етиленгліколю/пропіленгліколю,
карбоксиметилцелюлозу, декстран, полівініловий спирт, полівінілпіролідон, полі-1,3-діоксолан, полі-1,3,6-триоксан, співполімер етилену/малеїнового ангідриду, поліамінокислоти (або гомополімери або статистичні співполімери) і декстран або полі (н- вінілпіролідон)поліетиленгліколь, гомополімери пропіленгліколю, співполімери поліпропіленоксиду/етиленоксиду, поліоксіетильовані поліоли (наприклад, гліцерин), полівініловий спирт і їх суміші. Пропіональдегід поліетиленгліколю може мати переваги при промисловому виробництві внаслідок його стабільності у воді. Полімер може мати будь-яку молекулярну масу і може бути розгалуженим або нерозгалуженим. Число полімерів, приєднаних до антитіла, може варіюватися, при цьому у випадку приєднання більше ніж одного полімеру вони можуть являти собою однакові або різні молекули. Як правило, кількість і/або тип полімерів, застосовуваних для дериватизації, може бути визначені з урахуванням факторів, що включають, без обмеження, конкретні властивості або функції антитіла, що підлягають поліпшенню, незалежно від того, чи буде похідна антитіла використовуватися в терапії за певних умов, і так далі.
І00364| У деяких варіантах здійснення передбачені кон'югати антитіла з небілюовим фрагментом, який можна вибірково нагрівати під дією опромінення. У деяких варіантах здійснення небілковий фрагмент являє собою вуглецеву нанотрубку (Кат еї аї., Ргос. Маї). Асад. зЗсі. ОБА 102:11600-11605 (2005)). Може застосовуватися опромінення будь-якої довжини хвилі, включаючи, без обмеження, довжини хвиль, які не приносять шкоди вихідним клітинам, але нагрівають небілковий фрагмент до температури, при якій клітини, що перебувають по сусідству з небілковим фрагментом, гинуть.
Рекомбінантні способи та композиції 00365) Антитіла можуть бути отримані за допомогою рекомбінантних способів і композицій, наприклад, описаних у патенті США 4816567. У деяких варіантах здійснення передбачена описана в даній заявці виділена нуклеїнова кислота, що кодує анти-ІЇ-17 антитіло. У деяких варіантах здійснення передбачена описана в даній заявці виділена нуклеїнова кислота, що кодує анти-1ІЇ-13 антитіло. У деяких варіантах здійснення передбачена описана в даній заявці виділена нуклеїнова кислота, що кодує біспецифічне анти-1ІІ-13/І -17 антитіло. Такі нуклеїнові кислоти можуть кодувати амінокислотну послідовність, що включає мі, і/або амінокислотну
Зо послідовність, що включає УН антитіла (наприклад, легкий і/або важкий ланцюги антитіла). У деяких варіантах здійснення передбачено один або декілька векторів (таких як вектори експресії), що включають таку нуклеїнову кислоту. У деяких варіантах здійснення передбачена клітина-хазяїн, що включає таку нуклеїнову кислоту. В одному з даних варіантів здійснення клітина-хазяїн включає (наприклад, була трансформована за допомогою): (1) вектора, що включає нуклеїнову кислоту, яка кодує амінокислотну послідовність, що включає Мі. антитіла, і амінокислотну послідовність, що включає МН антитіла, або (2) першого вектора, що включає нуклеїнову кислоту, яка кодує амінокислотну послідовність, що включає Мі. антитіла, і другого вектора, що включає нуклеїнову кислоту, яка кодує амінокислотну послідовність, що включає
МН антитіла.
І00366| У деяких варіантах здійснення клітина-хазяїн являє собою еукаріотичну клітину, наприклад клітину яєчника китайського хом'ячка (СНО) або лімфоїдну клітину (наприклад, МО,
М50, Зр20 клітину). У деяких варіантах здійснення передбачений спосіб одержання антитіла, при цьому даний спосіб включає культивування клітини-хазяїна, що включає нуклеїнову кислоту, що кодує антитіло, як описано вище, в умовах, що підходять для експресії антитіла, і, необов'язково, виділення антитіла з клітини-хазяїна (або середовища культивування клітини- хазяїна).
І00367| У деяких варіантах здійснення передбачений спосіб одержання мультиспецифічного антитіла, при цьому даний спосіб включає культивування клітини-хазяїна, що включає нуклеїнову кислоту, що кодує мультиспецифічне антитіло в умовах, що підходять для експресії антитіла, і, необов'язково, виділення мультиспецифічного антитіла із клітини-хазяїна (або середовища культивування клітини-хазяїна). У деяких варіантах здійснення передбачений спосіб одержання мультиспецифічного антитіла, при цьому даний спосіб включає культивування першої клітини-хазяїна, що включає нуклеїнову кислоту, що кодує перший МН/Л/. фрагмент мультиспецифічного антитіла (включаючи константну ділянку, при її наявності, що іноді називається "гемімером" або "половиною молекули антитіла") в умовах, що підходять для експресії першого МНЛ/. фрагмента, і, необов'язково, виділення першого МНЛ/І. фрагмента із клітини-хазяїна (або середовища культивуванняклітини-хазяїна), і культивування другої клітини- хазяїна, що включає нуклеїнову кислоту, що кодує другий МН// фрагмент мультиспецифічного антитіла (включаючи константну ділянку, при її наявності) в умовах, що підходять для експресії 60 другого МН/М фрагмента, і, необов'язково, виділення другого МН/Л// фрагмента із клітини-
хазяїна (або середовища культивування клітини-хазяїна). У деяких варіантах здійснення спосіб також включає складання мультиспецифічного антитіла з виділеного першого МН/Л/. фрагмента і виділеного другого МН/Л// фрагмента. Таке складання може включати, у деяких варіантах здійснення, окисно-відновний етап для утворення внутрішньомолекулярних дисульфідів між двома МНЛ/ фрагментами (або гемімерами або половинами молекули антитіла). Необмежуючі приклади способів одержання мультиспецифічних антитіл описані, наприклад, у заявці на патент США 2011/0287009, заявці на патент США 2007/0196363, заявці на патент США 2007/0178552, патенті США 5731168, УМО 96/027011, УМО 98/050431, МО 2013/055958, МО 2011/133886, і в пи еї аї., 1997, Ргоївіп Зсіепсе 6:781-788. Необмежуючий приклад способу також описаний у розділі Приклади нижче.
І00368| Для рекомбінантного одержання анти-1І/-17 антитіла, анти-ІЇ-13 антитіла, або біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла нуклеїнову кислоту, що кодує антитіло, наприклад, як описано вище, виділяють і інсертирують в один або декілька векторів для подальшого клонування і/або експресії в клітині-хазяїні. Таку нуклеїнову кислоту можна легко виділити і секвенувати за допомогою традиційних способів (наприклад, із застосуванням олігонуклеотидних зондів, здатних специфічно зв'язуватися з генами, що кодують важкий і легкий ланцюги антитіла). 003691 Клітини-хазяїни, що підходять для клонування або експресії векторів, що кодують антитіло, включають описані в даній заявці прокаріотичні або еукаріотичні клітини. Наприклад, антитіла можуть бути отримані в бактеріях, зокрема, якщо глікозилювання і ефекторна функція
Ес не є необхідними. Експресія фрагментів антитіл і поліпептидів у бактеріях описана, наприклад, у патентах США 5648237, 5789199 і 5840523. (Див. також Спаппоп, Меїї2оа5 іп
МоїІесшіаг Віоіоду, Т. 248 (В.К.С. Го, ед., Нитапа Ргев55, Тоїоула, МУ, 2003), стор. 245-254, де описана експресія фрагментів антитіл в Е. соїї.) Після експресії антитіло може бути виділене з маси бактеріальної клітинної пасти в розчинну фракцію і потім очищене. 003701 Крім прокаріотів в якості хазяїв, що підходять для клонування або експресії векторів, що кодують антитіло, можуть застосовуватися еукаріотичні мікроорганізми, такі як гіфоміцети або дріжджі, включаючи штами грибків і дріжджів з "гуманізованими" шляхами глікозилювання, які дозволяють одержувати антитіло з характером глікозилювання, який частково або повністю властивий людині. Див. Сегпого55, Маї. Віоїесп. 22:1409-1414 (2004) і її еї аї., Маї. Віоїеср. 24:210-215 (2006). 00371) Клітини-хазяїни, що підходять для експресії глікозильованого антитіла, також можуть бути отримані з багатоклітинних організмів (безхребетних і хребетних). Приклади клітин безхребетних включають клітини рослин і комах. Ідентифіковані численні бакуловірусні штами, які можуть застосовуватися в комбінації із клітинами комах, зокрема, для трансфекції клітин зЗродоріега Ігидірегаа.
І00372| В якості хазяїв також можуть застосовуватися культури рослинних клітин. Див., наприклад, патенти США 5959177, 6040498, 6420548, 7125978 і 6417429 (що описують технологію РІ АМТІВОВІЕЗТМ, що дозволяє одержувати антитіла в трансгенних рослинах). 00373) В якості хазяїв також можуть застосовуватися клітини хребетних. Наприклад, можуть застосовуватися клітинні лінії ссавців, адаптовані для росту в суспензії. Інші приклади підходящих ліній клітин-хазяїв ссавців включають лінію клітин нирки мавпи СМ1, трансформованих 540 (СО5-7); лінію клітин нирки ембріона людини (клітини 293 або 293, описану, наприклад, в Ссгапйат еї аї., У. еп Мігої. 36:59 (1977)); клітини нирки дитинчати хом'яка (ВНК); клітини миші Зегіоїї (клітини ТМА4, описані, наприклад, в Майег, Віо!. Кергод. 23:243-251 (1980))); клітини нирки мавпи (СМ1); клітини нирки африканської зеленої мавпи (МЕКО-76); клітини карциноми шийки матки людини (НЕГА); клітини нирки собаки (МОСК); клітини печінки пацюка рийаю (ВК ЗА); клітини легені людини (М/138); клітини печінки людини (Нер 02); клітини пухлини молочної залози миші (ММТ 060562); клітини ТКІ, описані, наприклад, в Маїпег еї аї., АппаЇ5 М.У. Асад. 5сі. 383:44-68 (1982); клітини МКС 5; і клітини Е54. Інші підходящі лінії клітин-хазяїв, що мають відношення до ссавців включають клітини яєчника китайського хом'яка (СНО), в тому числі клітини ОНЕК-СНО (Шпаць еї аї., Ргос. Маї!. Асай. 5сі. О5А 77:4216 (1980)); і лінії клітин мієломи, такі як МО, М5О ії Бр2/0. Огляд деяких ліній клітин-хазяїв, що мають відношення до ссавців, що підходять для одержання антитіл, див., наприклад, в Малакі і Ми,
Меїпод5 іп МоїІесшаг Віоіоду, Т. 248 (В.К.С. Іо, ед., Нитапа Ргев55, Тоїсула, МУ), стор. 255-268 (2003).
Приклади аналізів
Аналізи зв'язування та інші аналізи 00374) У деяких варіантах здійснення описане в даній заявці антитіло тестують на його 60 антигензв'язуючу активність, наприклад за допомогою відомих способів, таких як ЕГІЗА,
вестерн-блоттинг і ін.
І00375| У деяких варіантах здійснення можуть застосовуватися конкурентні аналізи для ідентифікації антитіла, яке конкурує з описаним в даній заявці анти- ІЇ- 17 антитілом за зв'язування з ІЇ- 17. У деяких варіантах здійснення конкурентні аналізи можуть застосовуватися для ідентифікації антитіла, яке конкурує з описаним в даній заявці біспецифічним анти-1ІЇ - 13/анти-ІІ/-17 антитілом за зв'язування з 1-17 і/або ІЇ-13. У деяких варіантах здійснення 1-17 являє собою 1ІІ-17А. У деяких варіантах здійснення 1-17 являє собою гетеродимер 1І--17АК. У деяких варіантах здійснення ІЇ-17 являє собою ІЇ/-17Р. У певних варіантах здійснення таке конкуруюче антитіло зв'язується 3 тим самим епітопом (наприклад, лінійним або конформаційним епітопом), з яким зв'язується антитіло, яке включає амінокислотну послідовність МН, що включає 5ЕО ІЮ МО: 39, і амінокислотну послідовність МІ, що включає
ЗЕО ІЮ МО: 38, для зв'язування ІІ -17. У певних варіантах здійснення таке конкуруюче антитіло зв'язується з тим самим епітопом (наприклад, лінійним або конформаційним епітопом), з яким зв'язується антитіло, яке включає амінокислотну послідовність МН, що включає 5ЕО ІЮ МО: 13, і амінокислотну послідовність МІ, що включає ЗЕО ІЮ МО: 14, для зв'язування ІІ -13. У певних варіантах здійснення таке конкуруюче антитіло зв'язується з тим самим епітопом (наприклад, лінійним або конформаційним епітопом), з яким зв'язується антитіло, яке включає амінокислотну послідовність МН, що включає ЗЕО ІО МО: 30, і амінокислотну послідовність МІ, що включає 5ЕБО ІО МО: 29, для зв'язування ІЇ/-13. У певних варіантах здійснення таке конкуруюче антитіло являє собою біспецифічне антитіло, яке зв'язується з тим самим епітопом (наприклад, лінійним або конформаційним епітопом), з яким зв'язується антитіло, яке включає амінокислотну послідовність МН, що включає ЗЕО ІО МО: 39, і амінокислотну послідовність МІ, що включає 5ЕО ІЮО МО: 38, для зв'язування //-17, і зв'язується з тим самим епітопом (наприклад, лінійним або конформаційним епітопом), з яким зв'язується антитіло, яке включає амінокислотну послідовність МН, що включає ЗЕО ІО МО: 13, і амінокислотну послідовність МІ, що включає 5ЕБО ІЮО МО: 14, для зв'язування ІЇ/-13. У певних варіантах здійснення таке конкуруюче антитіло зв'язується, щонайменше, з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або більшою кількістю або всіма амінокислотними залишками епітопів. У певних варіантах здійснення таке конкуруюче біспецифічне антитіло знижує ступінь зв'язування біспецифічного антитіла, що включає
Ко) амінокислотну послідовність МН, що включає ЗЕО ІО МО: 39, і амінокислотну послідовність МІ, що включає ЗЕО ІЮ МО: 38, і, що включає амінокислотну послідовність МН, що включає ЗЕО ІЮ
МО: 13, ії амінокислотну послідовність МІ, що включає 5ЕО ІЮ МО: 14, з 1-13 і/або 1-17 на 10 95, 20 96, 30 90, 40 9, 50 Зо, 60 95, 70 95, 80 95, 90 95 або 100 95. Докладний опис прикладів способів картирування епітопа, з яким зв'язується антитіло, наведений в Моїті5 (1996) "ЕЕрйоре Марріпд
Ргоїосо!5", в Меїтоаз іп МоїІесшаг ВіоІоду т. 66 (Нитапа Ргез5, Тоїоула, МУ). 00376) У рамках прикладу конкурентного аналізу іммобілізований ІІ -17 інкубують у розчині, що включає перше мічене антитіло, яке зв'язує І/-17 (наприклад, антитіло, яке включає амінокислотну послідовність МН, що включає ЗЕО ІО МО: 39, і амінокислотну послідовність МІ, що включає ЗЕО ІО МО: 38, (або відповідні СОК, що включають амінокислотну послідовності, що включають ЗЕО ІЮО МО: 40, 43, 44, 45, Аб, 47) і друге немічене антитіло, яке піддають тестуванню на її здатність конкурувати з першим антитілом за зв'язування 1І -17. Друге антитіло може бути присутнім у гібридомному супернатанті. В якості контролю іммобілізований ІІ--17 інкубують у розчині, що включає перше мічене антитіло, але не друге немічене антитіло. Після інкубаці за умов, що дозволяють зв'язування перших антитіл з ІЇ-17, надлишок антитіла, що незв'язався видаляють і вимірюють кількість мітки, зв'язаної з іммобілізованим 1-17. Якщо кількість мітки, зв'язаної з іммобілізованим І--17, суттєво знижується в тестованому зразку в порівнянні з контрольним зразком, то це вказує на те, що друге антитіло конкурує з першим антитілом за зв'язування з ІЇ/-17. Див. Нагом/ апа Гапе (1988) Апіїбодіє5: А І арогаїогу Мапиаї гл.14 (Соїа 5ргіпд Нагбог І арогафогу, Соїй 5ргіпд Нагбог, МУ).
І00377| В іншому прикладі конкурентного аналізу іммобілізований ІІ -13 інкубують у розчині, що включає перше мічене антитіло, яке зв'язує ІЇ/-13 (наприклад, антитіло, яке включає амінокислотну послідовність МН, що включає ЗЕО ІО МО: 13, і амінокислотну послідовність МІ, що включає 5ЕО ІЮО МО: 14 (або відповідні СОКІі, що включають амінокислотні послідовност, що включають ЗЕО ІО МО: 15, 16, 17, 18, 19, 20), або антитіло, яке включає амінокислотну послідовність МН, що включає 5ЕО ІЮ МО: 30, і амінокислотну послідовність МІ, що включає
ЗЕО ІЮ МО: 29 (або відповідні СОК, що включають амінокислотні послідовності, що включають
ЗБЕО ІО МО: 31, 32, 33, 34, 45, 36), і друге немічене антитіло, яке тестують на його здатність конкурувати з першим антитілом за зв'язування з ІІ-13. Друге антитіло може бути присутнім у гібридомному супернатанті. В якості контролю іммобілізований 1-13 інкубують у розчині, що бо включає перше мічене антитіло, але не друге немічене антитіло. Після інкубації в умовах, що дозволяють зв'язування першого антитіла з 1/-13, надлишок антитіла, що незв'язався видаляють і вимірюють кількість мітки, зв'язаної з іммобілізованим 1-13. Якщо кількість мітки, зв'язаної з іммобілізованим 1-13, суттєво знижується в тестованому зразку в порівнянні з контрольним зразком, то це вказує на те, що друге антитіло конкурує з першим антитілом за зв'язування з 1-13.
Аналізи активності
І00378| У деяких варіантах здійснення передбачені аналізи для ідентифікації анти-1Ї -1 7 антитіл і біспецифічних анти-1Ї-13/1/-17 антитіл, що мають біологічну активність. Біологічна активність може включати, наприклад, інгібування зв'язування ІІ-17АА, ЇЇ -17АБК, і/або 1І/-17ЕЕ з
І/17Ка і/або Ес; інгібування 1-17 АА-, ІІ -17АН-, і/або І -17ЕР-індукованої клітинної проліферації; інгібування І--17АА-, ІІ -17АЕ-, і/або І/-17ЕР-індукованої експресії 5-С5БЕ; інгібування 1-17 АА-,
І/-17АБ-, і/або І-17ЕР-індукованої експресії СХСІ 1, СХСІ2 або СХСІ 3; інгібування І--17 АА-, ЇЇ - 17АРБ-, і/або І. -17ЕР-індукованої експресії ІІ -6 або ІІ-8; інгібування ІІ -17АА-, ІІ -17АЕР-, і/або І/- 17ЕР-індукованої експресії МЕ-кВ, активність в плані інгібування астми; і активність в плані інгібування ідіопатичного фіброзу легені (ІФЛ); інгібування ІІ -17АА-, ІЇ-17АР-, і/або 1/-17ЕЕ- індукованого накопичення нейтрофілів. У деяких варіант здійсненн біологічна активність включає, наприклад, інгібування зв'язування 1-13 з рецептором 1-13 (наприклад, гетеродимерним рецептором, що включає ІІ/-4Ка і І/-13Каї), інгібування 1ІГ-13-індукованого фосфорилювання ЗТАТб, інгібування ІІ -13-індукованої експресії ССІ26, інгібування 1 -13- індукованої клітинної проліферації, інгібування ІІ -13-індукованої зміни класу В клітин на ІЧЕ, інгібування І/-13-індукованого продукування слизу, активність в плані інгібування астми, активність в плане інгібування ІФЛ, і інгібування ІІ -13-індукованого накопичення еозинофілів. У деяких варіантах здійснення біологічна активність включає, наприклад, інгібування 1І/-13- індукованого фосфорилювання ЗТАТб, інгібування ІІ/-1З3-індукованої клітинної проліферації, інгібування ІГ-13-індукованої зміни класу В клітин на ІдЧЕ, інгібування 1 -13-індукованого продукування слизу, активність в плані інгібування астми, активність в плані інгібування ІФЛ, в кожному випадку без інгібування зв'язування 1/-13 з рецептором 1-13 (наприклад, гетеродимерним рецептором, що включає ІІ -4Ка і ІЇ/-13Ка1). Також передбачені антитіла, що мають таку біологічну активність іп мімо і/або іп міго. Необмежуючі приклади аналізів для тестування на такі види біологічної активності описані в даній заявці і/або відомі з рівня техніки.
Імунокон'югати
ІЇ00379| У деяких варіантах здійснення передбачені імунокон'югати, що включають біспецифічне анти-іІІЇ-13/1/-17 антитіло, кон'юговане з одним або декількома цитотоксичними агентами. Необмежуючі приклади таких цитотоксичних агентів включають хіміотерапевтичні агенти або лікарські засоби, інгібітори росту, токсини (наприклад, білкові токсини, ферментативно активні токсини бактеріального, грибкового, рослинного або тваринного походження, або їх фрагменти) або радіоактивні ізотопи.
ІЇ00380| У деяких варіантах здійснення імунокон'югат являє собою кон'югат антитіло- лікарський засіб (АОС), у якому антитіло кон'юговане з одним або декількома лікарськими засобами, включаючи, без обмеження, майтанзиноїд (див., наприклад, патенти США 5208020, 5416064 і європейський патент 0 425 235 ВІ); ауристатин, такий як лікарські групи ОЕ і ОЕ на основі монометилауристатину (ММАЕ і ММАРЕ) (див., наприклад, патенти США 5635483 і 5780588, і 7498298); доластатин; каліхеаміцин або її похідні (див., наприклад, патенти США 5712374, 5714586, 5739116, 5767285, 5770701, 5770710, 5773001 і 5877296; Ніптап еї аї.,
Сапсег Рез. 53:3336-3342 (1993); і І оде еї аЇ., Сапсег Ке5. 58:2925-2928 (1998)); антрациклін, такий як дауноміцин або доксорубіцин (див., наприклад, Кгаїх еї аї., Ситепі Мед. Спет. 13:477- 523 (2006); Уейтеу єї аї., Віоогдапіс 5 Мед. Спет. І ейег5 16:358-362 (2006); Тогдом еї аї!., Віосопі.
Спет. 16:717-721 (2005); Маду еї а!., Ргос. Маї!. Асад. 5сі. ОБА 97:829-834 (2000); биром/снік єї аІ.,, Віоогд. 5 Мед. Спнет. І енег5 12:1529-1532 (2002); Кіпд єї аї., У. Мед. Спет. 45:4336-4343 (2002); і патент США 6630579); метотрексат; віндезин; таксан, такий як доцетаксел, паклітаксел, ларотаксел, тесетаксел і ортатаксел; трихотецен і СС1065.
І00ОЗ381) У деяких варіант здійсненн імунокон'югат включає описане в даній заявці антитіло, кон'юговане з ферментативно активним токсином або його фрагментом, включаючи, без обмеження, А-ланцюг дифтерійного токсина, незв'язуючі активні фрагменти дифтерийного токсина, А-ланцюг екзотоксина (з Рзендотопах аегидіпоза), А-ланцюг рицину, А-ланцюг абрину,
А-панцюг модекцину, альфа-сарцин, білки АїЇІецйгйев5 Тогаїй, білки аїйапійіп, білки РПпушюїаса атегісапа (РАРІ, РАРІЇ ї РАР-5), інгібітор тотогаїса спагапійа, курцин, кротин, інгібітор зараопагіа ойісіпаїйї5, гелонін, мітогелін, рестриктоцин, феноміцин, еноміцин і трикотецени. 00382) У деяких варіантах здійснення імунокон'югат включає описуване в в даній заявці бо антитіло, кон'юговане з радіоактивним атомом для утворення радіокон'югату. Для одержання радіоактивних кон'югатів може застосовуватися ряд радіоактивних ізотопів. Приклади включають Аї211, 1131, 1125, 90, Ке186, Ке188, Зт153, Ві212, РЗ32, РЬ212 і радіоактивні ізотопи
Ги. При застосуванні радіокон'югату для детектування він може включати радіоактивний атом для сцинтиграфічних досліджень, наприклад їс99т або І123, або спін-мітку для ядерного магнітного резонансу (ЯМР) (також відомого як відображення магнітного резонансу, ВМР), таку як йод-123, йод-131, індій-111, фтор-19, вуглець-13, азот-15, кисень-17, гадоліній, марганець або залізо. 00383) Кон'югати антитіла і цитостатичного агента можуть бути отримані за допомогою різних зв'язувальних білки біфункціональних агентів, таких як, М-сукцинімідил-3-(2- піридилтіо)пропіонат (ЗРОР), сукцинімідил-4-(М-малеіїмідометил) циклогексан-1-карбоксилат (ЗМСС), імінотіолан (ІТ), біфункціональні похідні імідоефірів (такі як диметилдіадипімідат НС), активні складні ефіри (такі як дисукцинімідилсуберат), альдегіди (такі як глутаральдегід), біс- азидосполуки (такі як біс-(п-азидобензоїл) гександіамін), біс-діазонієві похідні (такі як біс-(п- діазонійбензоїл)-етилендіамін), діїзоціанати (такі як толуол-2,6-діїзоціанат) і біс-активні фтормісткі сполуки (такі як 1,5-дифтор-2,4-динітробензол). Наприклад, імунотоксин рицин може бути отриманий як описано в публікації Мкена еї аї. Зсіепсе, 238:1098 (1987). Мічена вуглецем- 14 1-ізотіоціанатобензил-З3-метилдіетилентриамінпентаоцтова кислота (МХ-ОТРА) являє собою приклад хелатоутворюючого агента для кон'югування радіонукліда з антитілом. Див., наприклад, УУО94/11026. Лінкер може являти собою "розщеплюваний лінкер", що забезпечує вивільнення цитотоксичного лікарського засобу в клітині. Наприклад, можуть застосовуватися кислотолабільний лінкер, чутливий до дії пептидаз лінкер, фотолабільний лінкер, диметильний лінкер або дисульфідмісткий лінкер (Спагі еї аІ., Сапсег Кезеагсй 52:127-131 (1992); патент США 5208020).
ІЇ00384| Описані в даній заявці імунокон'югати або АЮС у явній формі включають, без обмеження, кон'югати, отримані з застосуванням перехесно-зшивальних реагентів включаючи, без обмеження, ВМР5, ЕМС5, ЗМВ5, НВМУ5, І С-5МОС, МВ5, МРВН, 5ВАР, 5ІА, БІАВ, МОСС,
ЗМРВ, ЗМРН, сульфо-ЕМСОС5, сульфо-2МВ5, сульфо-КМО5, сульфо-МВ5, сульфо-5ІАВ, сульфо-5МОСС і сульфо-ЗМРВ, а також 5М5В (сукцинімідил-(4-вінілсульфон)бензоат), які є комерційно доступними (наприклад, від Ріегсе Віотесппо!іоду, Іпс., Коскога, ІС., О.5.А).
Способи і композиції для діагностування та детектування
Ї00385| У певних варіантах здійснення будь-яке з передбачених в даній заявці біспецифічних анти-1іЇ -13/І -17 антитіл може застосовуватися для детектування наявності ІІ -1 7 імабо 1-13 у біологічному зразку. Термін "детектування" відповідно до даного опису охоплює кількісне або якісне детектування. У певних варіантах здійснення біологічний зразок включає клітину або тканину, таку як сироватка, плазма, назальні мазки, рідина бронхоальвеолярного лаважа і мокротиння. 00386) У деяких варіантах здійснення передбачене біспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло для застосування в рамках способу діагностування або детектування. В іншому аспекті передбачений спосіб детектування наявності 1-17 і/або І/-13 у біологічному зразку. У певних варіантах здійснення спосіб включає приведення в контакт біологічного зразка з біспецифічних анти-І -13/І -17 антитілом, як описано в даній заявці, в умовах, що забезпечують зв'язування біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла з ІІ -17 і/або ІІ -13, і детектування утворення комплексу між біспецифічним анти-ІЇ -13/І -17 антитілом і І -17 і/або ІГ-13. Такий спосіб може являти собою іп міго або іп мімо спосіб. У деяких варіантах здійснення біспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло застосовують для відбору суб'єктів, що підходять для лікування із застосуванням біспецифічного анти-ІЇ -13/І -17 антитіла, або будь-якого іншого інгібітора шляху ТН2, наприклад якщо 1-17 і/або І--13 являє собою біомаркер для відбору пацієнтів.
І00387| В даній заявці наведені приклади захворювань, які можуть бути діагностовані за допомогою біспецифічного анти-1Ї -13З/І -17 антитіла.
ІЇ00388| У певних варіантах здійснення передбачені мічені біспецифічні анти-1Ї-1 ЗЛІ -17 антитіла. Мітки включають, без обмеження, мітки або фрагменти, які можна детектувати безпосередньо (такі як флуоресцентні, хромофорні, електронощільні, хемілюмінесцентні і радіоактивні мітки), а також фрагменти, такі як ферменти або ліганди, які можна детектувати побічно, наприклад, як результат ферментативної реакції або молекулярної взаємодії.
Приклади міток включають, без обмеження, радіоактивні ізотопи З2Р, 14С, 125І, ЗН і 1311, флуорофори, такі як рідкісноземельні хелати або флуоресцеїн і її похідні, родамін і її похідні, дансіл, умбеліферон, люциферази, наприклад люциферазу світляка і бактеріальну люоциферазу (патент США 4737456), люциферин, 2,3-дигідрофталазиндіони, пероксидазу хріну (НЕР), лужну фосфатазу, р-галактозидазу, глюкоамілазу, лізоцим, сахарид оксидази, наприклад, 60 глюкозооксидазу, галактозооксидазу і глюкоза-6-фосфатдегідрогеназу, гетероциклічні оксидази,
такі як уриказа і ксантиноксидаза, пов'язана з ферментом, який використовує перекис водню для окиснення попередника барвника, таким як НЕР, лактопероксидазу, або мікропероксидазу, біотин/авідин, спінові мітки, бактеріофагові мітки, стабільні вільні радикали і їм подібні.
Фармацевтичні композиції
І00389| Фармацевтичні композиції на основі описаного в даній заявці біспецифічного анти- ІІ - 13/ЛІ/-17 антитіла одержують шляхом змішування такого антитіла, що має необхідний ступінь чистоти, з одним або декількома необов'язковими фармацевтично прийнятними носіями (Ветіпдіюп'є Рнаптасешіса! Зсієпсев 16-е вид., О50ї, А. Еа. (1980)), у вигляді ліофілізованих складів або водяних розчинів. Фармацевтично прийнятні носії в цілому є нетоксичними для реципієнтів при використовуваних дозуваннях і концентраціях і включають, без обмеження: буфери, такі як фосфатний, цитратний, або на основі інших органічних кислот; антиоксиданти, включаючи аскорбінову кислоту і метіонін; консерванти (такі як хлорид октадецилдиметилбензиламонію; хлорид гексаметонію; хлорид бензалконію; хлорид бензетонію; фенол, бутиловий або бензиловий спирт; алкілларабени, такі як метилв- або пропілпарабен; катехол; резорцинол; циклогексанол; З-пентанол і м-крезол); низькомолекулярні (менше, ніж близько 10 амінокислотних залишків) поліпептиди; білки, такі як сироватковий альбумін, желатин або імуноглобуліни; гідрофільні полімери, такі як полівінілпіролідон; амінокислоти, такі як гліцин, глутамін, аспарагін, гістидин, аргінін або лізин; моносахариди, дисахариди і інші вуглеводи, включаючи глюкозу, манозу або декстрини; хелатуючі агенти, такі як ЕДТА; цукри, такі як сахароза, манітол, трегалоза або сорбітол; солеутворюючі протиїони, такі як натрій; металокомплекси (наприклад, комплекси 2п-білок); і/або неіонні поверхнево- активні речовини, такі як поліетиленгліколь (ПЕГ). Приклади фармацевтично прийнятних носіїв відповідно з також включають в даній заявці засоби, що забезпечують внутрішньотканинний розподіл ліків, такі як розчинні нейтрально-активні глікобілюки, що містять гіалуронидазу (ЗНАЗЕСР), наприклад, розчинні глікобілюи РН-20 людини, що містять гіалуронидазу, такі як
ГНиРН2гО (НМ ЕМЕХФ, Вахіег Іпіегпайопа!, Іпс.). Певні приклади 5НАБЕОР і способи їх застосування, включаючи гНиРН2гО, описані в патентній публікації США 2005/0260186 і 2006/0104968. У деяких варіантах здійснення 5НА5ЗЕСР поєднують із однією або декількома додатковими глікозаміногліканазами, такими як хондроїітинази.
Зо І00390| Приклади ліофілізованих композицій антитіл описані в патенті США 6267958. Водні композиції антитіл включають композиції, описані в патенті США 6171586 і УУО2006/044908, причому останні композиції включають гістидин-ацетатний буфер.
І00391| Запропонована в даній заявці композиція також може містити декілька активних інгредієнтів, якщо це необхідно для конкретного показання для лікування, що переважно мають доповнюючі один одного активності, які не виявляють несприятливого впливу один на одного.
Наприклад, може бути бажаним також одержати контролюючий засіб і/або інгібітор шляху ТН2 з біспецифічних анти-1Ї -13/ІІ -17 антитілом. Такі активні інгредієнти підходящим чином присутні в комбінації в кількостях, що є ефективними для передбачуваної мети. (003921) Активні інгредієнти також можуть бути укладені в отримані мікрокапсули, отримані, наприклад, за допомогою способів на основі коацервації або міжповерхневої полімеризації, наприклад гідроксиметилцелюлозні або желатинові мікрокапсули і поліметилметакрилатні мікрокапсули, відповідно, у колоїдній системі доставки лікарського засобу (наприклад, ліпосоми, альбумінові мікросфери, мікроемульсії, наночастинки і нанокапсули) або в макроемульсії. Такі способи описані в Кетіпдіоп'є Рпагтасеціїса! 5сіепсез 16-е вид., О50Ї, А. Ей. (1980). 00393) Можуть бути отримані препарати з вповільненим вивільненням. Підходящі приклади препаратів з вповільненим вивільненням включають напівпроникні матриці із твердих гідрофобних полімерів, що містять антитіло, причому такі матриці перебувають у вигляді оформлених виробів, наприклад плівок або мікрокапсул. (00394) Композиції, призначені для введення іп мімо, зазвичай є стерильними. Стерильність може бути легко досягнута, наприклад, шляхом фільтрації через стерильні фільтраційні мембрани.
Терапевтичні способи і композиції 00395) Будь-яке з передбачених в даній заявці біспецифічних анти-1ІЇ -1 З/І -17 антитіл може застосовуватися в рамках терапевтичних способів.
Ї00396| У певних варіантах здійснення винахід відноситься до способів лікування еозинофільного і нейтрофільного запалення або розладу у пацієнта, який має потребу в такому лікуванні. Еозинофільне запалення пов'язане з рядом захворювань, як алергійних, так і неалергійних (Сопішдиг (2006) ІттипоїЇ. Іпмевбї. 35(1):29-45). Запалення являє собою репаративну відповідь живих тканин на пошкодження. Ознакою запальних реакцій є бо накопичення лейкоцитів в ушкодженій тканині, обумовлене продукцією в такій тканині певних хімічних речовин. Накопичення еозинофільних лейкоцитів пов'язане із широким рядом станів, що включають алергійні порушення, гельмінтні інфекції і неопластичні захворювання (Киаіасл еї а! (2002) ІпПЯаттаїцйоп 26:111-1193. Еозинофільні лейкоцити, що являють собою компонент імунної системи, є захисними елементами поверхонь слизуватої оболонки. Вони відповідають не тільки на антигени, але і на паразити, хімічні речовини і травми. Було виявлено, що кількості еозинофілів і нейтрофілів у тканинах позитивним чином корелюють з рівнями сироваткового періостину. Див., наприклад, заявку на патент США 2012/0156194. Пацієнти з еозинофільним запаленням можуть бути ідентифіковані, в рамках деяких варіантів здійснення, шляхом вимірювання загальних рівнів періостину в сироватці, наприклад як описано в заявці на патент
США 2012/0156194.
І00397| Як показано в даній заявці, ІЇ/-17 і нейтрофільне запалення позитивним чином корелюють з 1-13 і еозинофільним запаленням при важкій неконтрольованій астмі. Рівні 1--17 у легенях також пов'язані з рівнями нейтрофілів у тканинах при астмі в ступені від помірного до важкого в суб'єктів, що приймають інгальовані кортикостероїди. Також, рівні І--17 корелюють із рівнями сироваткового періостину. (00398) Раніше Виз5е еї аІ. повідомляли, що блокада шляхів ІІ-17А і І/-17Е за допомогою анти-ІЇ-17Ка антитіла не забезпечувала продукування лікувального ефекту в суб'єктів з астмою.
Виз5е вї аї., 2013, Ат. У. Кезріг. Стії. Саге Мей. 188:1294. Автор відзначив, що тільки в підгрупі з високою бронходиляторною оборотністю спостерігалася зміна при заповненні АСО (контрольного опитувача для хворих астмою) з номінальним рівнем значимості, у той час як значимість результатів аналізу підгрупи з високою оборотністю залишається невідомою.
ІЇ00399| З іншого боку, даний винахід відноситься до способів лікування астми або респіраторного захворювання, що включають введення суб'єкту, який має в цьому потребу, біспецифічного анти-1ІЇ-13/І/-17 антитіла, при цьому суб'єкт був визначений таким, що має підвищену кількість еозинофілів або підвищені рівні сироваткового періостину в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. Періостин являє собою біомаркер ТП2, при цьому пацієнти з підвищеними рівнями періостину ймовірно будуть мати схильність до наявності опосередковуваних 1-13 захворювань і ймовірно будуть являти собою групу пацієнтів з високим рівнем 1І--13. Як описано в даній заявці, терапевтичний ефект лебрикізумабу, терапевтичного
Зо анти-І./-13 антитіла, у групі пацієнтів з високим рівнем періостину є гетерогенним. Група пацієнтів з високим рівнем еозинофілів (високим рівнем періостину) може бути далі розділена на підгрупи з високим рівнем нейтрофілів і низьким рівнем нейтрофілів, при цьому лебрикізумаб був більш ефективним для підгрупи з високим рівнем еозинофілів і низьким рівнем нейтрофілів і менш ефективним для підгрупи з високим рівнем еозинофілів і високим рівнем нейтрофілів. 004001 Відповідно, у деяких варіантах здійснення винахід відноситься до способів лікування астми або респіраторного захворювання в суб'єкта, що включає введення суб'єкту ефективної кількості описаного в даній заявці біспецифічного анти-ІЇ 13/І -17 антитіла. У деяких варіантах здійснення астма являє собою астму від помірного до важкого ступеня. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має високий рівень сироваткового періостину. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має підвищений рівень сироваткового періостину в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У деяких варіантах здійснення суб'єкта також необов'язково має підвищені рівні, щонайменше, одного з СХСІ 1, 18, СХСІ12, СХСІ З і С5ЕЗ. У деяких варіантах здійснення суб'єкт має підвищений рівень сироваткового періостину і підвищені рівні СХСІ 1 у порівнянні з контролем або контрольним рівнем. 00401) У деяких варіантах здійснення передбачене біспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло для застосування в рамках способу лікування еозинофільного захворювання, нейтрофільного захворювання, опосередкованого ІЇ/-13 захворювання, опосередкованого 1-17 захворювання іабо респіраторного захворювання в суб'єкта. У деяких варіантах здійснення спосіб включає введення суб'єкту ефективної кількості описаного в даній заявці антитіла. 00402) У деяких подібних варіантах здійснення спосіб також включає введення суб'єкту інгібітора шляху ТН2. У деяких варіантах здійснення інгібітор шляху ТНАІ2 інгібує, щонайменше, одну мішень, вибрану з ІТК, ВТК, 1-9, /-5, 11-13, 1-4, ОХ401, Т5І Р, ІІ -25, 1-33, ЧЕ, 1-9 рецептора, І--5 рецептора, 1-4 рецептора альфа, 1-13 рецептор альфа-1 (І/-13кКа1), ІС-13 рецептор альфа-2 (І, -13Каг2), ОХ40, Т5І Р-В, 1 -7К альфа, ІІ. -1788, 512, ССВЗ, ССВ4, СВТНаг,
Ес епсилон КІ, Ес епсилон КП/СО23, РіІар, Зук-кінази; ССК4, ТІ КУ, ССЗ, ІІ 5, ІІ З, ї ЗМ-СЗЕ. У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування астми в ступені від помірного до важкого. У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування ідіопатичного фіброзу легенів. У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування суб'єкта з високим або підвищеним рівнем сироваткового періостину в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. бо У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування астми, що супроводжується високим рівнем періостину. Способи визначення рівнів сироваткового періостину описані, наприклад, у заявці на патент США 2012/0156194.
Ї00403| У деяких варіантах здійснення передбачені способи лікування астми або респіраторного захворювання в суб'єкта, при цьому астма або респіраторний розлад не контролюється кортикостероїдом. Необмежуючі приклади кортикостероїдів включають інгальовані кортикостероїди, такі як дипропіонат беклометазону (наприклад, Омагт)), будесонід (наприклад, Риїтісогіф), будесонід/дигідрат формотеролу фумарату (наприклад, бутрісогіФ), флунізолід (наприклад, АегорійФ), пропіонат флутиказону (наприклад, БРіІомепіФ, РІопазеф), пропіонат флутиказону і салметеролу (наприклад, Адймаїг8), і ацетонід триамцинолону (наприклад, АлтасогіфФ). У деяких варіантах здійснення пацієнт також одержує другий контролюючий засіб. У деяких варіантах здійснення другий контролюючий засіб може являти собою бронходилататор тривалої дії ((АВО). Необмежуючі приклади бронходилататорів тривалої дії включають бета-2 агоніст тривалої дії (І. АВА), антагоніст рецептора лейкотриєнів (І ТВА), мускариновий антагоніст тривалої дії (ГАМА), теофілін або пероральні кортикостероїди (005). Необмежуючі приклади ГАВО включають будесонід/дигідрат формотеролу фумарату (наприклад, ЗутбісогіФ), пропіонат флутиказону і салметерол (наприклад, АдмаїігФ), тартрат арформотеролу (наприклад, Вгомапа?), фумарат формотеролу (наприклад, ЕогайіФ,
РепогтівК), і ксинафоат салметеролу (наприклад, Зегемепіф)). У певних варіантах здійснення спосіб також включає введення пацієнтові кортикостероїду. (00404) У певних варіантах здійснення передбачене біспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло для застосування в якості лікарського засобу. У певних варіантах здійснення передбачене біспецифічне анти-1ІЇ-13//-17 антитіло для застосування при лікуванні астми, ІФЛлЛ, респіраторного захворювання, еозинофільного захворювання, нейтрофільного захворювання, опосередкованого І/-13 захворювання або опосередкованого ІЇ/-17 захворювання. У певних варіантах здійснення передбачене біспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло для застосування в рамках способу лікування. У певних варіантах здійснення передбачене біспецифічне анти-ЇЇ - 13/ЛІ/-17 антитіло для застосування в рамках способу лікування суб'єкта, що має астму, респіраторне захворювання, еозинофільне захворювання, нейтрофільне захворювання, опосередковане ІЇ/-13 захворювання або опосередковане ІЇ-17 захворювання, що включає
Зо введення суб'єкту ефективної кількості біспецифічного анти-ІЇ-13//-17 антитіла. В одному подібному варіанті здійснення спосіб також включає введення суб'єкту ефективної кількості, щонайменше, одного додаткового терапевтичного агента, наприклад такого, як описаний нижче. 00405) Суб'єкт або "пацієнт" відповідно до будь-яких з описаних вище варіантів здійснення переважно являє собою людину. У певних варіантах здійснення суб'єкт або пацієнт потребує лікування астми або респіраторного захворювання або має високий ризик розвитку астми або респіраторного захворювання. У певних варіантах здійснення пацієнт із астмою демонструє високі рівні експресії періостину. У певних варіантах здійснення пацієнт із астмою демонструє підвищені рівні періостину в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. 00406) У певних варіантах здійснення пацієнт страждає від астми в ступені від помірного до важкого.
І00407| У певних варіантах здійснення пацієнт, що страждає еозинофільним запаленням або захворюванням, може демонструвати підвищений рівень одного або декількох з еозинофільних сигнатурних генів, як описано в заявці 61/894831, поданої 23 жовтня 2013 року, і в
РСТ/О514/61759, поданої 22 жовтня 2014, що має назву "Способи діагностування і лікування еозинофільних захворювань", яка повністю наведена в даній заявці для посилання. У певних варіантах здійснення пацієнт ідентифікований в якості позитивного за еозинофільним запаленням пацієнта (ЕІР), який демонструє підвищені рівні періостину і/або підвищені рівні одного або декількох генів, вибраних з МЕЇ!52, ІСАЇ 512, ІБО1, ТНВ54, 01 Іс2, АГОХ15,
ЗІБ ЕС8, ССІ23, РУИВОХО2, Н5ЗОЗВУ, ОВО, А5В2, САСМОб, СРА44, МОАТЗ, 5І С47А1,
ЗМРОЗ, ССКЗ, СІ С, СУРАНЕ12 і АВТВа2, у порівнянні з контрольним пацієнтом. Див. заявку на патент США 2012/0156194, яка повністю включена в даній заявці для посилання. Альтернативно або додатково, пацієнт може демонструвати підвищені рівні одного або декількох з нейтрофільних сигнатурних генів, таких як СХСКІ, СХСМ2, нейтрофільна еластаза, або
СЕАСАМБб. (00408) Серед неінвазивних біомаркерів опосередкованого ТН-2/еозинофільного субфенотипу астми присутні сироватковий періостин, парціальний оксид азоту у видихуваному повітрі (ГеМО) і кількість еозинофілів у периферичній крові. Див. Агоп еї аї. (2013) Адм
Рпагтасої 66: 1-49. У певних варіантах здійснення пацієнти, що страждають від еозинофільної астми, демонструють високий рівень або підвищений рівень загального періостину в сироватці бо або плазмі в порівнянні з контролем або контрольним рівнем. У певних варіантах здійснення термін "ЕІР пацієнт" означає пацієнта, який був підданий тестуванню на рівень періостину в сироватці і плазмі, при цьому рівень періостину в сироватці або плазмі рівний або перевищує медіанний або середній рівень періостину в сироватці або плазмі в групі пацієнтів (також може бути позначений як високий рівень періостину). У певних варіантах здійснення пацієнт, який був підданий тестуванню на рівень періостину в сироватці або плазмі із застосуванням, наприклад,
ЕГІ5А або сендвіч-імуноаналізу, як описано в даній заявці, має рівні Загального Періостину 20 нг/мл або вище (тобто є позитивним за еозинофілами). У певних варіантах здійснення пацієнт має рівні Загального Періостину 50 нг/мл або вище. Відповідно до певних варіантів здійснення рівні Загального Періостину в ЕІР пацієнта можуть бути вибрані із групи, що складається з 21 нг/мл або вище, 22 нг/мл або вище, 23 нг/мл або вище, 24 нг/мл або вище, 25 нг/мл або вище, 26 нг/мл або вище, 27 нг/мл або вище, 28 нг/мл або вище, 29 нг/мл або вище, 30 нг/мл або вище, 31 нг/мл або вище, 32 нг/мл або вище, 33 нг/мл або вище, 34 нг/мл або вище, 35 нг/мл або вище, 36 нг/мл або вище, 37 нг/мл або вище, 38 нг/мл або вище, 39 нг/мл або вище, 40 нг/мл або вище, 41 нг/мл або вище, 42 нг/мл або вище, 43 нг/мл або вище, 44 нг/мл або вище, 45 нг/мл або вище, 46 нг/мл або вище, 47 нг/мл або вище, 48 нг/мл або вище, 49 нг/мл або вище, 50 нг/мл або вище, 51 нг/мл або вище, 52 нг/мл або вище, 53 нг/мл або вище, 54 нг/мл або вище, 55 нг/мл або вище, 56 нг/мл або вище, 57 нг/мл або вище, 58 нг/мл або вище, 59 нг/мл або вище, 60 нг/мл або вище, 61 нг/мл або вище, 62 нг/мл або вище, 63 нг/мл або вище, 64 нг/мл або вище, 65 нг/мл або вище, 66 нг/мл або вище, 67 нг/мл або вище, 68 нг/мл або вище, 69 нг/мл або вище і 70 нг/мл або вище в сироватці або плазмі. Слід розуміти, що статус
ЕІР являє собою стан пацієнта і не залежить від типу аналізу, використовуваного для визначення статусу. Таким чином, для визначення статусу, пов'язаного з еозинофільним запаленням, а також вимірювання рівнів Загального Періостину можуть застосовуватися або можуть бути розроблені інші діагностичні аналізи еозинофільного запалення, включаючи інші аналізи періостину, такі як аналіз ЕГІ5А і аналіз періостину ЕІесзузФ), описаний у заявці на патент США 2012/0156194. Див. також іа еї а!., 2012, 9. АМПегду Сіїп. Іттипої. 130:647-654 і заявку на патент США 2012/0156194, які повністю наведені в даній заявці для посилання.
Приклади способів аналізу на рівні Загального Періостину показані нижче. 004091 У прикладі 4 заявки на патент США 2012/0156194 (повністю наведені в даній заявці
Зо для посилання) описаний аналіз ЕГІЗА для захоплення періостину (аналіз Е4), що є дуже чутливим (чутливість 1,88 нг/мл). Антитіла розпізнають ізоформи періостину 1-4 з афінністю на
НМ рівні.
ІЇ00410| Аналіз Е4:80 мкл очищеного препарату моноклонального антитіла, 2504 (покриваюче антитіло, ЗЕО ІЮ МО: 121 (МН) і 122 (МУ), що експресується гібридомою або клітинною лінією СНО) розбавляють забуференим фосфатом фізіологічним розчином до кінцевої концентрації 2 мкг/мл. Титраційні мікропланшети покривають протягом ночі при 2-87 покриваючим антитілом, 100 мкл на ямку. Планшети промивають три рази 400 мкл буфера для промивання (РВБЗ/О0,05 95 твін (полісорбат 20) на ямку на один цикл буфера для промивання при кімнатній температурі. У планшети додають 200 мкл блокувального буфера на ямку. Покритий планшет інкубують при кімнатній температурі і струшуванні протягом 1,5 годин.
І00411| Одержують стандартну криву для гпиРегіозіїй (стандартний вихідний розчин гпиРегіовіїй - ізоформа 1 шпиРегіовзіїпй, КО 5уз(ет5 Ж3548-Е2, 5,25 нг/мл у розріджувачі для аналізу (РВБ/0,5 95 бичачого сироваткового альбуміну (БСА)/0,05 95 полісорбат 20/0,05 95
РгоСіїп300, рН 7,4). Розріджувач для одержання стандартної кривої - РВБ/0,5 96БСА/0,05 95 полісорбат 20, 0,05 95 РгосСіїп3ЗО0, рН 7,4. Наприклад:
Станд. конц. Процедура (пг/мл) роцедур во ері ння не ЯНА НЕ НЕ розріджувача для стандартної кривої 1101010 розріджувачдлястандартноїкривої.д /-://::/:/ССС:(/3!)8./:С:("(СУІУД
І00412| Підготовка Контролів і зразків. Три контролі: контроль перевірочної проби постачальника (повнорозмірний гпиРегіовіїп, ізоформа 1, КО БЗузіет5 Ж3548-Е2), контроль нормальної матриці (пул нормальної сироватки людини, Віогесіатаціоп, Іпс.), контроль насиченої матриці (пул нормальної сироватки людини плюс 100 нг/мл перевірочної проби гпиРегіозііп). Наприклад,
Ї00413| 10 мкл контролю (або зразка) сироватки ж- 1,99 мл розріджувача для зразка/контролю - 1:200 300 мкл 1:200 розведення «т 300 мкл розріджувача для зразка/контролю - 1:400 300 мкл 1:400 розведення т 300 мкл розріджувача для зразка/контролю - 1:800 300 мкл 1:800 розведення жї 300 мкл розріджувача для зразка/контролю - 1:1600 Кожне розведення використовують однократно
І00414| Конструюють контролі матриць із застосуванням пулу нормальної сироватки людини. Об'єднану сироватку людини, що не містить перевірочний зразок застосовують в якості нормального контролю. Насичений контроль одержують шляхом додавання 100 нг/мл
ГПЧРОБТМ до об'єднаної сироватки, як описано вище. Середнє значення, стандартне відхилення (50) і9Уо коефіцієнта дисперсії (СМ, виражений у відсотках) розраховують для чотирьох розведень для кожного контролю на кожному планшеті. СМ являє собою кількісне значення дисперсії повторюваних вимірювань щодо середнього значення повторів. 905 сСу-100(50/середнє значення). Зазначені середні концентрації розраховують для всіх планшетів, щоб визначити міжпланшетну точність. Потім отриману контрольну таблицю використовують для визначення критерію проходження/невдачі нормального і насиченого контролів, приймаючи припустиму дисперсію для кожного контролю ж20 95 від середньої концентрації. 00415) Планшет промивають три рази, використовуючи кожний раз 400 мкл на ямку буфера для промивання (РВЗ/0,05 95 полісорбат 20). У планшет додають розведені стандарти (з подвійними повторами), контролі (всі чотири розведення) і зразки (всі чотири розведення) в об'ємі 100 мкл на ямку. Покритий планшет інкубують при кімнатній температурі і струшуванні протягом 2 годин. 80 мкл вихідного розчину | детекційного МАВ (біотинильоване мишаче антитіло проти періостину людини, МА 2389 (МН: 5ЕО ІО МО:123, МІ: 5ЕО ІО МО:124, 7,5 мкг/мл у розріджувачі для аналізу) розбавляють до 12 мл розріджувачем для аналізу - 50 нг/мл.
Планшет промивають чотири рази 400 мкл буфера для промивання розраховуючи на одну ямку на один повтор. У планшет додають розведене детекційне МАБ в об'ємі 100 мкл на ямку.
Зо Покритий планшет інкубують при кімнатній температурі і струшуванні протягом однієї години. 80 мкл вихідного розчину | стрептавідин-НКР (АМОЕХ стрептавідин-НАР, СЕ Неєайнсаге
ЯКРМА401, приблизно 1 мг/мл), розведеного в співвідношенні 1:80 розріджувачем для аналізу, розбавляють до 12 мл розріджувачем для аналізу - 1:12К. Планшет промивають чотири рази 400 мкл буфера для промивання розраховуючи на одну ямку на один повтор. У планшет додають розведений стрептавідин-НЕР в об'ємі 100 мкл на ямку. Покритий планшет інкубують при кімнатній температурі протягом 45 хв при струшуванні. Двохстадійні ТМВ реагенти
К'єркегора і Перрі (КРІ) доводять до кімнатної температури; не поєднують. Планшет промивають чотири рази 400 мкл буфера для промивання розраховуючи на одну ямку на один повтор. Змішують рівні об'єми компонентів субстрату ТМВ КРІ і додають їх у планшет в об'ємі 100 мкл на ямку. Планшет інкубують протягом 20 хвилин при кімнатній температурі і при струшуванні. У планшет додають 1 М фосфорну кислоту в об'ємі 100 мкл на ямку. Планшет зчитують при довжині хвилі зчитування 450 нм і довжині хвилі порівняння 650 нм. 00416) Аналіз періостину із застосуванням антитіл проти ізоформи 1 (не Загального
Періостину) проводили на різних зразках пацієнтів з астмою, використовуючи аналогічний формат уловлювання антитіла. Попередні результати показують, що ізоформа 1 періостину не є таким самим надійним маркером ТН 2-опосередкованого запалення, як загальний періостин.
І00417| Альтернативно, кількісне детектування Загального Періостину проводять (із застосуванням аналізатора Коспе сорах еб01 ЕГЕС5УБФО (Коспе Оіадповіїс5 трон) (аналіз періостину ЕГЕС5ЗУ5Ф). Див. Приклад 7 із заявки на патент США 2012/0156194, яка повністю наведена в даній заявці для посилання. Тест проводять у сендвіч-форматі, де аналізований періостин перебуває між двома моноклональними антитілами, що зв'язуються із двома різними епітопами періостину. Одне антитіло є біотинильованим і здатне утворювати імунний комплекс із покритими стрептавідином магнітними гранулами. Друге антитіло несе комплексоутворюючий катіон рутенію в якості сигнального фрагмента, що забезпечує потенціалозалежне електрохемілюмінесцентне детектування утвореного імунного комплексу. Приклади застосовуваних реагентів наведені нижче: - Гранули (М): Покриті стрептавідином магнітні мікрочастинки 0,72 мг/мл; консервант. - Реагент 1 (К1): Антитіло проти періостинубіотин:
Дане очищене моноклональне антитіло миші, відповідне до покриваючого антитіла 2504, бо використовуваному в прикладі 4 заявки на патент США 2012/0156194, застосовується в біотинильованій формі 21,0 мг/л; трис-буфер »100 ммоль/л, рН 7,0; консервант. - Реагент 2 (К2): Антитіло проти періостину-Кщ(рру):
Дане очищене моноклональне антитіло миші проти періостину відповідає детекційному антитілу 2389, використовуваному в прикладі 4 заявки на патент США 2012/0156194, і застосовується в міченій формі (позначене комплексом (трис(2,2'-біпіридил)рутеній(І). -- (Кибру))) 21,0 мг/л; трис-буфер »100 ммоль/л, рн 7,0; консервант. (00418) Імунологічний аналіз може бути проведений із застосуванням двох інкубацій. Під час першої інкубації, проведеної протягом приблизно 9 хвилин, періостин в 20 мкл зразка і біотинильоване моноклональне антитіло проти періостину (К1) утворюють комплекс. На другій стадії інкубації, також проведеної протягом 9 хвилин, у флакон, у якому проводили першу інкубацію, додають рутенильоване моноклональне антитіло проти періостину (22) і покриті стрептавідином мікрочастинки (М), при цьому в результаті взаємодії біотину і стрептавідину утворюється 3-ч-ленний сендвіч-комплекс, пов'язаний із твердою фазою (мікрочастинки).
І00419| Реакційну суміш переносять у вимірювальну кювету, де мікрочастинки під дією магнітного поля притягуються до поверхні платинового електрода. Незв'язані речовини відмивають і клітини промивають РгосеїЇ, реагентом, що містять трипропіламін. Потім подача напруги на електрод індукує хемілюмінесцентну емісію, яку вимірюють за допомогою фотопомножувача. (00420) Результати розраховують із застосуванням специфічної для приладу каліброваної кривої, отриманої шляхом калібрування за двома точками, і контрольної кривої, отриманої з використанням штрих-коду реагенту. Калібратор 1 не містить аналізованої речовини, тоді як калібратор 2 містить 50 нг/мл рекомбінантного періостину людини в забуференній основі. Щоб перевірити калібрування, використовують два контролі, що містять приблизно 30 і 80 нг/мл періостину.
І00421| Термін "Загальний Періостин" згідно з використаним в даній заявці значенням означає, щонайменше, ізоформи періостину 1, 2, З ї 4. У даній області відомо, що ізоформи періостину 1, 2, З і 4 людини включають наступні амінокислотні послідовності: МР 006466 (5ЕО
ІО МО:109); МР. 001129406 (5ЕО ІЮО МО:110), МР. 001129407 (5ЕО ІЮ МО:111) і МР. 001129408 (ЗЕО ІО МО:112), відповідно, згідно з базою даних МСВІ, а ізоформа 5 була секвенована
Зо частково. Ізоформа 5 включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО:113. В одному варіанті здійснення ізоформи періостину являють собою періостини людини. В іншому варіанті здійснення термін "Загальний Періостин" охоплює ізоформу 5 періостину людини на додаток до ізоформам 1-4. В іншому варіанті здійснення Загальний Періостин являє собою Загальний
Сироватковий Періостин або Загальний Періостин у Плазмі (тобто Загальний Періостин, присутній у зразку сироватки, отриманому із цільної крові, або в зразку плазми, отриманому із цільної крові, відповідно, при цьому цільна кров отримана від пацієнта). У певних варіантах здійснення Загальний Періостин визначають за допомогою аналізу Е4 або аналізу ЕЇ'ЕС5У5Ф). (00422) У деяких варіантах здійснення винахід відноситься до застосування біспецифічного анти-І- -13/І -17 антитіла при виробництві або одержанні лікарського засобу. В одному варіанті здійснення лікарський засіб призначений для лікування астми, респіраторного захворювання, еозинофільного захворювання, опосередкованого 1-13 захворювання або опосередкованого ЇЇ - 17 захворювання. В іншому варіанті здійснення лікарський засіб призначений для застосування в рамках способу лікування астми, ІФЛ, респіраторного захворювання, еозинофільного захворювання, нейтрофільного захворювання, опосередкованого І/-13 захворювання або опосередкованого 1/-17 захворювання, що включає введення суб'єкту, що має астму, респіраторне захворювання, еозинофільне захворювання, опосередковане 1-13 захворювання або опосередковане 1Ї/-17 захворювання, ефективної кількості лікарського засобу. В одному подібному варіанті здійснення спосіб також включає введення суб'єкту ефективної кількості, щонайменше, одного додаткового терапевтичного агента, наприклад такого, як описаний нижче.
ІЇ00423| У деяких варіантах здійснення передбачені фармацевтичні композиції, що включають будь-яке з описаних в даній заявці біспецифічних анти-1Ї -13/І -17 антитіл, наприклад для застосування в рамках будь-якого з описаних вище терапевтичних способів. У деяких варіантах здійснення фармацевтична композиція включає будь-яке з описаних в даній заявці біспецифічних анти-ІІ-13/І -17 антитіл і фармацевтично прийнятний носій. У деяких варіантах здійснення фармацевтична композиція включає будь-яке з описаних в даній заявці біспецифічних анти-ЇЇІ -13/І -17 антитіл і, щонайменше, один додатковий терапевтичний агент, наприклад такий, як описаний нижче.
І00424| Описані в даній заявці антитіла можуть застосовуватися або самостійно, або в комбінації з іншими агентами в рамках терапії. Наприклад, описане в даній заявці антитіло може 60 бути введене разом з, щонайменше, одним додатковим терапевтичним агентом. У певних варіантах здійснення додатковий терапевтичний агент являє собою інгібітор ТН2 і/або інгібітор
ТНІ7. У певних варіантах здійснення додатковий терапевтичний агент являє собою засіб для контролю астматичного запалення, такий як кортикостероїд, антагоніст рецептора лейкотриєнів,
Г|/АВА, композицію на основі комбінації кортикостероїд/ АВА, теофілін, кромолін-натрій, недокроміл-натрій, омалізумаб, (ГАМА, МАВА (наприклад, біфункціональний мускариновий антагоніст - бета-2 агоніст), інгібітори білка, що активує 5-ліпоксигеназу (РГАР) або інгібітор ферменту РОБЕ-4.
І00425| Такі описані вище способи комбінованого лікування включають комбіноване введення (коли два або більше терапевтичних засоби включені в одну композицію або різні композиції) і окреме введення, при якому введення біспецифічного анти-1Ї-13/І-17 антитіла може здійснюватися до, одночасно і/або після введення додаткового терапевтичного агента або агентів. У деяких варіантах введення біспецифічного анти-1іЇ-13/І-17 антитіла і введення додаткового терапевтичного агента здійснюється протягом приблизно одного місяця або протягом приблизно одного, двох або трьох тижнів, або протягом приблизно одного, двох, трьох, чотирьох, п'яти або шести днів один за одним. (00426) У деяких варіантах здійснення біспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло застосовують при лікуванні раку, такого як гліобластома або неходжкінська лімфома. У деяких варіантах здійснення описані в даній заявці антитіла або імунокон'югати також можуть застосовуватися в комбінації із променевою терапією.
І00427| Біспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло (і будь-який додатковий терапевтичний агент) може бути введений будь-яким підходящим способом, включаючи парентеральне, внутрішньолегеневе і інтраназальне введення і, якщо це необхідно для місцевого лікування, внутрішносередкове введення. Парентеральне введення включає внутрішньом'язове, внутрішньовенне, внутрішньоартеріальне, внутрішньочеревинне або підшкірне введення.
Введення може здійснюватися будь-яким підходящим способом, наприклад за допомогою ін'єкцій, таких як внутрішньовенні або підшкірні ін'єкції, частково залежно від того, чи є введення короткочасним або постійним. Винахід охоплює різні схеми введення, включаючи, без обмеження, однократне або багаторазове введення протягом різних періодів часу, болюсне введення і імпульсну інфузію.
Зо (00428) Біспецифічне анти-1Ї -13/І.-17 антитіло слід формулювати, дозувати і вводити таким чином, який відповідає сумлінній медичній практиці. Фактори, що враховуються в даному контексті, включають конкретне захворювання, що підлягає лікуванню, вид конкретного ссавця, що підлягає лікуванню, клінічний стан пацієнта, причину захворювання, ділянку доставки засобу, спосіб введення, схему введення і інші фактори, відомі лікарям. Антитіло необов'язково може входити в склад композиції разом з одним або декількома агентами, використовуваними в даний час для профілактики або лікування зазначеного захворювання. Ефективна кількість таких інших засобів залежить від кількості антитіла, що присутні в композиції, типу розладу або лікування, і інших описаних вище факторів. Як правило, їх застосовують у дозах, зазначених в даному описі, і за допомогою описаних в даній заявці способів введення, або в кількості, що складає приблизно від 1 до 99 95 від зазначених в даній заявці доз, або в будь-якому дозуванні і за допомогою будь-якого способу, підібраних емпірично/клінічно. (004291 Для профілактики або лікування захворювання підходяще дозування біспецифічного анти-1ІЇ-13/І/-17 антитіла (використовуваного самостійно або в комбінації з одним або декількома іншими додатковими терапевтичними агентами) залежить від типу захворювання, що підлягає лікуванню, типу антитіла, важкості і перебігу захворювання, мети (профілактичного або терапевтичного) введення антитіла терапії, що передує, клінічній історії пацієнта, чутливості до антитіла і приписання лікаря. Антитіло може бути введене пацієнтові однократно або в деілька прийомів. Фахівець у даній області може визначити підходяще дозування антитіла залежно від типу і важкості захворювання. Необмежуючий приклад визначення дозування анти-ІЇ-13 антитіл описаний, наприклад, в РСТтТ публікації МО 2012/083132. Загальний посібник з визначення дозування антитіл можна знайти, наприклад, в
Ваї еї аї., Сііпіса! РнаптасокКіпеїйсв, 51: 119-135 (2012) і Оепод еї аї!., Ехрегі Оріп. Огид Меїар.
Тохісої. 8(2):141-160 (2012). Результати терапії на основі застосування антитіл можна легко відслідковувати за допомогою традиційних способів і аналізів. 004301 Слід розуміти, що будь-які вищеописані композиції або терапевтичні способи можуть бути здійснені із застосуванням імунокон'югат замість або в якості доповнення до біспецифічного анти-ІЇ -13З/І -17 антитіла.
Промислові вироби 00431) У деяких варіантах здійснення винахід відноситься до промислового виробу, що бо містить матеріали, які можуть застосовуватися для лікування, профілактики і/або діагностування описаних вище захворювань. Промисловий виріб включає контейнер і етикетку, або вкладиш в упакування, що перебуває на контейнері або приєднаний до контейнера.
Підходящі контейнери включають, наприклад, пляшки, флакони, шприци, пакети для в/в ін'єкцій і так далі. Контейнери можуть складатися з різних матеріалів, таких як скло або пластик.
Контейнер містить композицію саму по собі або в комбінації з іншою композицією, ефективною для лікування, профілактики і/або діагностики стану, крім того, він може містити стерильний вхідний отвір (наприклад, контейнер може являти собою мішок для внутрішньовенного розчину або флакон, що має пробку, яку можна проткнути голкою для підшкірних ін'єкцій). Щонайменше, один активний агент у композиції являє собою біспецифічне анти-ЇЇ -13/І -17 антитіло. Етикетка або вкладиш в упаковці вказує на те, що композицію слід застосовувати для лікування певного стану. Більше того, промисловий виріб може включати (а) перший контейнер з композицією, що міститься в ньому, при цьому композиція включає біспецифічне анти-1Ї -13/І -17 антитіло; і (Б) другий контейнер з композицією, що міститься в ньому, при цьому композиція також включає цитотоксичний або інший терапевтичний агент. У деяких варіантах здійснення промисловий виріб також може включати вкладиш в упаковці що вказує, що композиції можуть застосовуватися для лікування конкретного стану. Альтернативно, або додатково, промисловий виріб може також включати другий (або третій) контейнер, що включає фармацевтично прийнятний буфер, такий як бактеріостатичну воду для ін'єкцій (ВУМЕЇ), забуференний фосфатом фізіологічний розчин, розчин Рінгера і розчин декстрози. Він може також включати інші речовини, бажані з комерційної і користувацької точки зору, включаючи інші буфери, розріджувачі, фільтри, голки і шприци. (00432) Всі описані в даній заявці варіанти здійснення можуть бути об'єднані один з одним, якщо з контексту явно не випливає інше.
І00433| Слід розуміти, що будь-які описані вище промислові вироби можуть включати імунокон'югат замість або в якості доповнення до біспецифічного анти-ІЇ -1 З/І -17 антитіла.
ПРИКЛАДИ
(00434) Далі наведені приклади способів і композицій за даним винаходом. Слід розуміти, що на практиці можуть бути реалізовані різні інші варіанти здійснення з врахуванням загального опису, який наведений вище.
Зо ПРИКЛАД 1 - І-17АЕ ї нейтрофільне запалення присутні одночасно та корелюють з 1-13 й еозинофільним запаленням при важкій неконтрольованій астмі
І00435| Дослідження ВОВСАТ являє собою багатоцентрове оглядове дослідження, розроблене для опису зв'язків між ознаками запалення дихальних шляхів і неінвазивними біомаркерами в групі пацієнтів з астмою. Група учасників ВОВСАТ була раніше описана відносно рівня періостину в крові в якості індикатора еозинофілії дихальних шляхів. Див. Ла еї а!І., 2012, 9. АПегду Сіїп Іттипої, 130: 647-654. Учасників дослідження набирали з 18 центрів у
Канаді, США ії Європі. Інституційні спостережні комісії в кожному місці проведення дослідження схвалювали протокол, при цьому всім суб'єкти надавали письмову інформовану згоду на участь. 00436) Дві ендобронхіальні біопсії розраховуючи на одного пацієнта поміщали у формалін і вбудовували в окремий парафіновий блок для подальшого виготовлення зрізів і фарбування, як описано раніше. Див., наприклад, Нашбег еї аї., 2003, У. АПегду Сііп. Іттипоіоду 112:58-63; А!-
Ватії, 2009, У. АПегду Сіїп Іттипої, 123: 1185-1187; Ргеїопіаїпе еї аї., 2009, 9. Іттипої!., 183: 5094-5103; І езме еї а!., 2006, у. АПегоду Сіїп Іттипої, 117: 590-596; ЗПіКоїга еї а!., 2012, 9. АМПегду
Сіїй Іттипої, 129: 104-111. Клітини (еозинофіли, нейтрофіли або позитивно пофарбовані клітини на цитокіни, як зазначено) підраховували і виражали у вигляді абсолютної кількості на мма біопсійній тканині.
Ї00437| В рамках всіх аналізів розподілу рівнів гранулоцитів і позитивно пофарбованих клітин в рамках імуногістохімічного (ІГХ) аналізу в різних ділянках легені описували із застосуванням описових статистичних показників підходящим чином. Кореляції між позитивно пофарбованими клітинами зазначені у вигляді коефіцієнтів рангової кореляції Спірмена.
Ї00438| В рамках попередніх звітів застосовувався імуногістохімічний (ІГХ) аналіз для аналізу рівнів вихідних ТН17 цитокінів ІІ -17А і ІІ -17Е у бронхіальній біопсійній тканині, отриманої від суб'єктів, що страждають астмою у важкому ступені, у порівнянні зі здоровими контролями іабо суб'єктами, що страждають астмою в легкому ступені. Див., наприклад, Ооє еї аї., 2010,
Спеві, 138: 1140-1147; АІ-Ватії, 2009, У. АйПегду Сіїп Іттипої, 123: 1185-1187. ІГХ аналіз для даних цитокінів проводили на біопсійних зразках, отриманих в рамках дослідження ВОВСАТ, і аналізували на розподіл і зв'язок між цитокінами і гранулоцитами в порівнюваній біопсійній тканині. Див. Фіг.1. Кожне вимірювання було детектованим серед діапазону значень в рамках бо групи учасників дослідження. Значимі позитивні кореляції спостерігали між кількістю нейтрофілів і еозинофілів у тканині (Фіг. ТА, г5-0,68, Р-4,2 х 10-9; див. Аттоп еї аї, 2014, Еиг
Кезріг У, 43:627). Автори упевнені, що в рамках даної заявки вперше показано, що в ендобронхіальних біопсійних зразках кількість еозинофілів і кількість клітин, пофарбованих щодо 1І-17А, корелює (фіг. 18, г5-0,39, Р-3,2 х 10-3). Також показано, що в ендобронхіальних біопсійних зразках кількість клітин, пофарбованих у відношенні 17А і І -Е, корелює (Фіг. 1С, г3-0,56, Р-9,0 х 10-6). Раніше було показано, що рівень еозинофілів у дихальних шляхах позитивно корелює з рівнем сироваткового періостину, кількістю еозинофілів в крові і рівнем оксиду азоту у видихуваному повітрі (ЄеМО). Див. УУО2009/124090 і а еї аї, 2012, 9. АПегоду Сіїп
Ітітипої, 130:647-54. У цілому, представлені в даній заявці дослідження ясно показують, що в біопсійних зразках тканини легені людини кількість еозинофілів у тканині позитивно корелювало з кількістю ІІ 17Ач-- клітин, а кількість ІЇ17А- клітин позитивно корелювало з кількістю ІІ 17Р-- клітин.
ПРИКЛАД 2 - Рівень 1І--17АЕ у легенях асоційований з кількістю еозинофілів у тканинах при астмі в ступені від помірного до важкого та прийманні інгальованих кортикостероїдів (ІС5)
ІЇ00439| Для проведення аналізу в Об'єднаному Королівстві набирали хворих астмою і проводили клінічні аналізи в Університеті Лестера (Опімегейу ої І еісезїег) і Королівському
Університеті Белфаста (Оцееп5 Опімегейу ої ВеМазі), як було описано раніше. Див. ЗпіКоїга еї а!., 2012, У. АПегау Сіїп Іттипої, 129: 104-111. (00440) Дві ендобронхіальні біопсії розраховуючи на одного пацієнта поміщали у формалін і вбудовували в окремий парафіновий блок для подальшого виготовлення зрізів і фарбування, як описано раніше. Див., наприклад, Наибег еї аї!., 2003, У. АПегду Сііп. Іттипоіоду 112:58-63; АЇ!-
Ватії, 2009, У. АПегду Сіїп Іттипої, 123: 1185-1187; Ргеїопіаїпе еї аї., 2009, 9. Іттипої!., 183: 5094-5103; І езме еї а!., 2006, у. АПегоду Сіїп Іттипої, 117: 590-596; ЗПіКоїга еї а!., 2012, 9. АМПегду
Сіїй Іттипої, 129: 104-111. Клітини (еозинофіли, нейтрофіли або позитивно пофарбовані клітини на цитокіни, як зазначено) підраховували і виражали у вигляді абсолютної кількості на мма2 біопсійній тканині. (00441) Первинні нормальні клітини бронхіального епітелію людини (МНВЕ) одержували в
Гопла (ММаІКегеміе, МО). Планшети Тгапзуе!їк» з діаметром ямок 6,5 мМ і щільністю пор 0,4 мкМ, отримані від компанії Согпіпу І Ме 5сіепсез (Согпіпд, МУ), покривали колагеном із застосуванням
Зо 100 мкг/мл РигесСої, отриманим від Адмапсеа Віотаїгіх (Зап Сівдо, СА). МНВЕ висіювали в ямки і інкубували в споживному для росту клітин середовищі бронхіального епітелію без вмісту сироватки (ВЕСМ, ГІ оп7а) протягом 96 годин або до конфлюенції. Потім апікальне середовище видаляли і живили клітини базолатеральним чином із застосуванням повного живильного середовища РпештасСшийтм-дІ| Меадійт на основі контакту повітря і рідини (5іет сеї) і піддавали диференціюванню протягом 21 доби. (00442) Здобували і проводили аналізи генної експресії ТадМап (Арріїед Віозувзіетв5, Бовіег
Спйу, Саїїйї) відповідно до інструкцій виробника для 1ІІ/-17А (ій: Не99999082 Іп1) ї 1/-17Е (ід:
НеЗО0369400 ті!). Відносні рівні експресії визначали за допомогою способу 2(-ДАСТ), як описано в Арріїй Віозузіет5 Швег ВиПейп Мо. 2 (Р/М 4303859). Рівні експресії нижче Порога
Квантифікації (00)) являли собою рівні, чиї значення СТ (порога циклу) генів-мішеней перевищували або були рівні меншому значенню з: 1) 40 або 2) середнього значення СТ уявного КТ (підданого зворотній транскрипції) негативного контролю.
І00443| РНК ампліфікували (МеззадеАтр ПІ, АтБбіоп, Ає!йв5ііп, ТХ) для двохкольорових мікрочипів для аналізу генної експресії 4 х 44К повного генома людини Адіїепі (Запіа Сіага, СА) і проводили аналіз відповідно до інструкцій виробника, як описано в Зпікоїга еї аї!., 2012, 9. АМПегду
Сііпй Іттипої, 129: 104-111. 00444) Для всіх аналізів розподілу рівнів гранулоцитів і позитивно пофарбованих клітин в рамках імуногістохімічного (ІГХ) аналізу в різних ділянках легені описували із застосуванням описових статистичних показників підходящим чином. 00445) Для аналізу впливу 1І-17А в іп міго системі, що відноситься до дихальних шляхів,
МНВЕ клітини вирощували на поверхні контакту повітря-рідина (АЇ!), що забезпечує диференціювання клітин бронхіального епітелію на псевдобагатошаровий війчастий епітелій.
МНВЕ клітини, що культивуються в АГ, стимулювали 1ІЇ/-17А (10 нг/мл) ії ТМЕРа (10 нг/мл) протягом 24 годин перед виділенням РНК. Проводили аналізи генної експресії із застосуванням мікрочипів, при цьому було виявлено, що серед диференційно експресованих генів стимулювання І/-17А-ТМЕа забезпечує апрегуляцію певних генів, асоційованих з нейтрофілами. Див. Таблицю 2.
Таблиця 2
Табівє 2: Мешгорпії-аззосіаїей депе ехргезвіоп іп І -17Аї-ТМЕа зітшагейа МНВЕ сеїї5 значення хемокін (С-Х-С мотив) ліганд 1 (стимулююча
СЕЗ кодує гранулоцитний колонієстимулюючий фактор, цитокін, що приймає участь у диференціюванні нейтрофілів з гемопоетичних прекурсорів. СХСІ 1, 2, З і 8 кодують хемокіни, які зв'язуються з СХСКІ і СХСМ2, які являють собою рецептори, експресовані на диференційованих нейтрофілах, забезпечуючи міграцію нейтрофілів.
І00446| Експресію мРНК 1І-17А і І/-17Р у бронхіальних біопсійних тканинах від групи учасників з Об'єднаного Королівства визначали за допомогою кПЛР. Рівні експресії для більшості проаналізованих зразків не були детектованими: 72 95 (44 з 61) і 75 95 (46 з 61) були «
Нижнього Порога Квантифікації (ОО). Автори зрівняли доступні співпадаючі кількості нейтрофілів у тканинах, визначені за допомогою ІГХ (50 з 61 випадків) у зразках з недетектованої («ЇЇ ОС)) у порівнянні з детектованою (» ГГ ОС) експресією 1І--17А і 11-17Р, їі спостерігали мінімально значиме підвищення. Див. Фіг2А (ІІ -17А; Р-0,08) ї Фіг2В (1 -17Е;
Р-0,087). У групі учасників дослідження з Об'єднаного Королівства існувала кореляція між кількістю нейтрофілів у тканинах, визначених за допомогою ІГХ, і експресією 1 -17А ії 1(-17Е, визначеною за допомогою кПЛР, тобто зразки ІГХ, що демонструють детектовані кількості нейтрофілів, також демонстрували високу експресію І/-17А або І/-17Є при визначенні за допомогою КПЛР.
І00447| Генну експресію певних індукованих 1ІЇ/-17 асоційованих з нейтрофілами генів (СХСЇІ 1/2/3, І/8, С5ЕЗ) аналізували за допомогою двонаправленої ієрархічної кластеризації даних за бронхіальною біопсією, отриманих за допомогою мікрочипів. Див. Фіг. З. Було виявлено, що гени були піддані взаємній кореляції в зразках окремих пацієнтів; таким чином, є можливим ідентифікувати суб'єктів, які експресують відносно підвищені рівні всіх зазначених генів. Усі суб'єкти з найбільш високою координатною експресією зазначених генів мали астму від помірного до важкого ступеня і приймали інгальовані кортикостероїди (ІС5). Також, зазначений набір генів корелював з кількістю нейтрофілів у тканинах в учасників дослідження з
Об'єднаного Королівства (коефіцієнт Спірмена р - 0,3902; р-0,0117). Дані результати показують, що підвищена кількість нейтрофілів, підвищена експресія 1--17А і 11 -17Е, і підвищена експресія асоційованих з нейтрофілами генів спостерігалися в підмножини пацієнтів, що
Зо приймали ІС5.
ПРИКЛАД З - біомаркери 1І--17АЕ асоційовані з високим рівнем сироваткового періостину (00448) Дослідження ВОВСАТ і дослідження, проведене в Об'єднаному Королівстві, описані у Прикладах 1 і 2, відповідно. (00449) Здобували і проводили аналізи генної експресії ТадМап (Арріїед Віозувзіетв5, Бовіег
Спйу, Саїїйї) відповідно до інструкцій виробника для ІІ -17А (ій: Не99999082 Іп1) ї 1/-17Е (ід:
НеЗО0369400 ті!). Відносні рівні експресії визначали за допомогою способу 2(-ДАСТ), як описано в Арріїй Віозузіет5 Швег ВиПейп Мо. 2 (Р/М 4303859). Рівні експресії нижче Порога
Квантифікації (00) являли собою рівні, чиї значення СТ генів-мішеней перевищували або дорівнювали меншому значенню з: 1) 40 або 2) середнього значення СТ уявного КТ негативного контролю.
І00450| РНК ампліфікували (МеззадеАтр І, АтБбіоп, А!йв5ііп, ТХ) для двохкольорових мікрочипів для аналізу генної експресії 4 х 44К повного генома людини Адіїепі (Запіа Сіага, СА) і проводили аналіз відповідно до інструкцій виробника, як описано в ЗпіКоїга еї аї., 2012, 9. АПегду
Сііпй Іттипої, 129: 104-111.
І00451| Вимірювання рівня сироваткового періостину проводили як було описано раніше.
Див., наприклад, іа еї а!., 2012, 9. АПегду Сіїп Іттипої, 130: 647-654.
І00452| Набір для кількісного імуносорбентного сендвіч-аналізу з ферментною міткою (ЕГІЗА) був призначений для вимірювання значень концентрацій СХСІ 1/5КоОа у зразках плазми людини (набір для проведення ЕГІЗА Опапіїкіпе компанії КУО БЗузіет5 для імуноаналізу
СХОСІ1/6КО альфа людини, каталожний номер ЯЮСКО0). Коротко, моноклональне антитіло, специфічне відносно СХСІ 1 людини, наносили на 96-ямковий мікропланшет. Стандарти, якісні контролі і зразки підготовлювали і додавали в ямки, що містять розріджувач для проведення аналізу. Після інкубування при кімнатній температурі планшети промивали для видалення будь- яких надлишків незв'язаних реагентів і додавали підходящим чином розведений детекційний реагент, поліклональне антитіло проти СХСІ1 людини, кон'юЮговане з пероксидазою хріну (НЕР). Після інкубування при кімнатній температурі і промивання планшетів додавали субстратний розчин, що містить 3,35,5'--етраметилбензидин (ТМВ) для одержання кольору.
Ферментативну реакцію зупиняли додаванням сірчаної кислоти, при цьому інтенсивність проявлення кольору вимірювали при 450 нм з контрольною довжиною хвилі 650 нм. Визначали, що чутливість даного аналізу в плазмі людини складала 30 пг/мл. 00453) Для всіх аналізів розподілу рівнів гранулоцитів і позитивно пофарбованих клітин в рамках імуногістохімічного (ІГХ) аналізу в різних ділянках легені описували із застосуванням описових статистичних показників підходящим чином.
Ї00454| Для визначення того, чи були рівні білків, кодованих індукованими 1-17 транскриптами, детектованими при підвищених рівнях у периферичній крові автори проаналізували рівні СХСІ 1 в крові хворих астмою в ступені від помірного до важкого (М-65) і здорових контрольних суб'єктів (М-22) із групи учасників дослідження ВОВСАТ. У здорових контролів рівень СХСІ1 у плазмі був нижче нижнього порога квантифікації (О0)) в 10/22 суб'єктів (45 95), у той час як у хворих астмою рівень СХСІ1 в крові був нижче ОО в 16/65 суб'єктів (25 95). Серед суб'єктів з детектованими рівнями СХСІ 1 у плазмі, рівні у хворих астмою були значно вище, ніж у здорових контролів. Див. Фіг. 4А. Серед суб'єктів з астмою з детектованими рівнями СХСІ 1 у плазмі, існувала тенденція, що полягає в тому, що суб'єкти із сильно підвищеними рівнями СХСІ 1 (» 160 пг/мл) також мали підвищені рівні сироваткового періостину (» 50 нг/мл). Див. Фіг. 48. Результати показують, що з категоричної точки зору хворі важкою астмою з підвищеними рівнями СХСІ1 у плазмі мали схильність до наявності підвищених рівнів сироваткового періостину (р-0,02 за результатами точного тесту Фішера). (00455) Вимірювання сироваткового періостину в групі хворих астмою учасників дослідження
Зо з Об'єднаного Королівства порівнювали з рівнем експресії І -17А у відповідних біопсійних зразках бронхіальної тканини. Суб'єкти з детектованими рівнями мРНК 1--17А мали підвищені рівні сироваткового періостину в порівнянні з тими, чиї рівні мРНК 1І/-17А були нижче 00 (Р-0,03). Див. Ффіг.5.
ПРИКЛАД 4 - Незалежна й адитивна активність анти-іЇ!-13 й анти-ІЇ-17 антитіл у мишей- моделей астми, пов'язаної з домашніми пиловими кліщами
І00456| Модель астми, пов'язаної з домашніми пиловими кліщами, індукували в С57ВІ 6 мишей віком 8-9 тижнів (Чдаскзоп І арогаїогу, Засгатепіо, СА) за допомогою трьох щотижневих інтраназальних введень екстракту домашніх пилових кліщів (ОЇ екстракт, ЮНА 14218, Стеег І ар5
Іпс.) при 100 мкг/50 мкл РВ5. Для проведення обробки антитілом контрольне Ідс1 антитіло (600 мкг контрольного антитіла/мишал/н'єкція), анти-ІЇ-13 (901 антитіло (антитіло Сепепіесп 262А5-1, 200 мкг антитіла/миша/н'єкція), і/або анти-ІІ!-17АА/АЕ ІдДС1 антитіло (антитіло Сепепіесп 16Н4.4Е3) у комбінації з анти-ІЇ -17ЕЕ ІдсС1 антитілом (антитіло Сепепіесп 28Е12) вводили при дозуванні 200 мкг антитілалмиша (всього 600 мкг антитіл/миша/н'єкція) за допомогою внутрішньочеревинних ін'єкцій З рази на тиждень протягом 2-тижневого сенсибілізаційного періоду. Через 24 години після останнього введення збирали кров і рідину бронхоальвеолярного лаважа (ВАГЕ) для підрахунку кількості загальних і диференціальних лейкоцитів. Повний аналіз кількості в крові проводили із застосуванням автоматичного гематологічного аналізатора Зузтех ХТ-20001М. Кількість загальних і диференціальних клітин в
ВАГ Е визначали за допомогою проточної цитометрії (РасзСаїїрег3) і ручного підрахунку 200 пофарбованих за Райтом клітин під мікроскопом, відповідно. Підраховані кількості клітин наносили на графік і проводили статистичні аналізи із застосуванням програмного забезпечення Ргізхт (сгарпрайд боїймаге, Зап Оіедо, СА).
І00457| Як показано на Фіг. 6, підраховані кількості еозинофілів (А) і нейтрофілів (В) в ВАГ. показали, що обробка анти-ІЇ-13 антитілом призвела до зниження кількості еозинофілів, але відсутності зміни кількості нейтрофілів, у той час як обробка анти-ІЇ-17 антитілом (комбінована обробка анти-ІІ -17АА/АЕ і І--17ЕЕ антитілами) призвела до зниження кількості нейтрофілів, але відсутності зміни кількості еозинофілів. Комбінаційна обробка анти- 1 -13 і анти-ІЇ -17 антитілами призвела до зниження кількості як еозинофілів, так і нейтрофілів, що узгоджувалося з окремими ефектами 1-13 ї І/-17 антитіл. Дані зниження були статистично значимими при порівнянні з бо контролем. У периферичній крові обробка анти-ІЇ!-13 антитілом призвела до підвищення кількості еозинофілів (Фіг. 6С), у той час як обробка анти-І/!-17 антитілом призвела до статистично значимого зниження кількості нейтрофілів (Фіг. 60) без зміни кількості еозинофілів.
Дані результати показують, що 1-13 ї І-17АА/АР/ЕЕ мають незалежний вплив на еозинофіли і нейтрофіли і що комбінована нейтралізація 1-13 і І. -17АА/АР/РЕ інгібує більш широкий ряд біологічних активностей, ніж нейтралізація І/-13 або ІЇ/-17АА/АР/РЕ окремо. На Фіг.б "7 - статистично значимі показники.
ПРИКЛАД 5 - Дані клінічних випробувань показують неоднорідність у плані астми, що супроводжується високим рівнем еозинофілів, і реакції на лікування лебрикізумабом
І00458| Зазначені результати відповідають даним, проаналізованим на основі зразків, отриманих в рамках клінічних випробувань. Раніше було показано, що гуманізоване анти-іІ -13 антитіло лебрикізумаб ефективно поліпшував РЕМ'І у пацієнтів з астмою в ступені від помірного до важкого, яка не контролювалася за допомогою терапії на основі інгальованих кортикостероїдів, особливо в таких пацієнтів з підвищеними рівнями сироваткового періостину.
Див. Сотеп еї аї., 2011, М. Епоі. У. Мей. 365:1088-98, де високий рівень періостину визначений як рівень сироваткового періостину, що перевищує середній рівень сироваткового періостину в групі пацієнтів. Як описано в даній заявці, далі було виявлено, що незважаючи на те, що рівень періостину підвищувався в рамках реакції на лікування, реакція на лебрикізумаб в групі пацієнтів з високим рівнем періостину не була однорідною.
І00459| Автори проаналізували біомаркери Тп2, включаючи сироватковий періостин, кількість еозинофілів в крові і БеМО на базисному рівні в комбінації з базисним рівнем нейтрофілів в крові, які зазнають підвищення в рамках поліпшення функції легенів (ЕЕМ1) при інгібуванні І--13 у суб'єктів, що страждають астмою в ступені від помірного до важкого, в рамках дослідження лебрикізумаба 2 фази, МІСМ. МІССМ являло собою випадкове подвійне сліпе контрольоване плацебо дослідження лебрикізумаба (анти-1І -13) у дорослих, які мали астму, яка не зазнала достатнього контролю, незважаючи на застосування терапії на основі інгальованих кортикостероїдів (Сотеп еї аїЇ.,, 2011, М. ЕпоІЇ. У. Мей. 365:1088-98). Розглянуті суб'єкти відносилися до призначеної для лікування групи (ІТТ). (004601 На Фіг.15 показані результати у вигляді зміни РЕМ'1 у відсотках у підданих лікуванню лебрикізумабом пацієнтів, розділених на основі кількості еозинофілів і кількості нейтрофілів.
Зо Кількість еозинофілів в крові аналізували в якості частини Загальної кількості клітин в крові (СВС) на автоматичних гематологічних аналізаторах у центральних лабораторіях. Кількість нейтрофілів в крові аналізували в якості частини Загальної кількості клітин в крові (СВС) на автоматичних гематологічних аналізаторах. Група з високим рівнем еозинофілів являє собою пацієнтів з базисною кількістю еозинофілів, рівним або перевищуючим середню кількість еозинофілів у тій самій групі пацієнтів "(у цьому випадку - 210/мл), а група з низьким рівнем еозинофілів являє собою пацієнтів з базисною кількістю еозинофілів, що не перевищують середню кількість еозинофілів. Група з високим рівнем нейтрофілів являє собою пацієнтів з базисною кількістю нейтрофілів рівним або перевищуючим середню кількість нейтрофілів у тій самій групі пацієнтів "у цьому випадку - 3890/мл), а група з низьким рівнем нейтрофілів являє собою пацієнтів з базисною кількістю нейтрофілів не перевищуючим середню кількість нейтрофілів. (00461) Як показано на Ффіг.15, лебрикізумаб був більш ефективним у пацієнтів з високою базисною кількістю еозинофілів, ніж у пацієнтів з низькою кількістю еозинофілів. Порівняйте Фіг. 150 з А ії В. У групі з високим рівнем еозинофілів пацієнти з низькою кількістю нейтрофілів демонстрували значне поліпшення в плані зміни рівня РЕМ'І у відсотках завдяки лебрикізумабу (Фіг. 15 0); однак пацієнти з високим рівнем еозинофілів і високою базисною кількістю нейтрофілів демонстрували знижену ефективність лебрикізумаба при порівнянні з пацієнтами із групи з високим рівнем еозинофілів, які мали низький базисний рівень нейтрофілів. Порівняйте
Фіг. 15 С з 0. Аналогічні результати спостерігалися у пацієнтів, розділених на основі базисних рівнів періостину і ГеМО (дані не показані). (00462) Результати на Фіг.15 разом з Фіг.1В ії С свідчать про те, що анти-1Ї-13 антитіло, наприклад лебрикізумаб, у комбінації з нейтрофільним антагоністом, наприклад анти-!1Ї -1 7 антитілом, може також приносити користь пацієнтам з астмою в ступені від помірного до важкого і/або також підвищувати ефективність лебрикізумаба. Далі описане одержання біспецифічного анти-1ІІ -13/анти-1Ї -17 антитіла.
ПРИКЛАД 6 - Одержання біспецифічного анти-1ІЇ -1 З/І -17 ІДС4 антитіла (00463) Автори раніше описали технологію одержання біспецифічних Ідс1 антитіл людини із двома різними легкими ланцюгами в Е. соїї (Ми еї аї., 2011, 5сі Тгапзі Меа 3, 84га44). Даний спосіб включає застосування технології "виступ у западину" (Кіадуау сеї а!., 1996, Ргоївїп Епод. 9, 60 617-621; Аїмеї! єї аї., 1997, У Мої Віої! 270, 26-35) для забезпечення гетеродимеризації важких ланцюгів імуноглобуліну. Для забезпечення можливості застосування двох різних легких ланцюгів без небажаного зв'язування легких ланцюгів автори культивували кожен з них в якості гемімера в окремих клітинах Е. соЇїї. Автори застосовували даний підхід для одержання біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла шляхом субклонування вихідних анти-1ІЇ -17 і анти-ІЇ -13 антитіл у вектори, що забезпечують експресію анти-ІЇ!-17 у вигляді западини Ід054 людини, а анти-І--13 - у вигляді виступу ІД4 людини. Послідовність константної ділянки важкого ланцюга виступу ІдДо4 показана в 5ЕО ІЮ МО: 69, а послідовність константної ділянки важкого ланцюга западини Ідое4 показана в ЗЕО ІЮ МО: 70. (00464) В якості основи СОК біспецифічного анти-1ІЇ-13 антитіла автори використовували лебрикізумаб, який був раніше отриманий і описаний. Див, наприклад, публікацію РСТ УМО 2005/062967 А2. Лебрикізумаб зв'язує розчинний ІІ -13 людини з Ка, яка на основі визначення за допомогою програмного забезпечення компанії Віасоге є нижче, ніж поріг детектування 10 пМ.
Зв'язування лебрикізумаба з І/-13 не інгібує зв'язування цитокіна з ІЇ/-13Ко1, але блокує наступне утворення гетеродимерного сигналу, що забезпечує передачу, комплексу 1-4Ка Лі-- 13кКа1 (пес, М. еї аї., 2013, 9. Мої. Віо!., ах.дої.огд/10.1016/).|тЬ.2013.01.024; Соїтеп еї аї., 2011,
М. Епаді. у. Мей. 365, 1088-1098). В рамках біспецифічного антитіла анти-1Ї -13 антитіло має дві відмінності в плані ЕР. ділянки в порівнянні з лебрикізумабом. О1Е на важкому ланцюзі і МАїЇ. на легкому ланцюзі. Див. ЗЕО ІЮО МО: 13 ї 14, відповідно. Зазначені дві зміни були об'єднані в рамках однієї половини молекули анти-1Ї-13 антитіла, при цьому було виявлено, що отримана половина молекули антитіла має підвищений вихід і підвищену здатність зсідатися в порівнянні з половиною молекули анти-1Ї-13 антитіла дикого типу.
І00465| Для експресії антитіла застосовували штам 6484 Е. соїї. Вирощену протягом ночі культуру культивували при 30 "С у середовищі ІВ (100 мкг/мл карбеніциліну), розведеному 1:100 до 5 мл середовища СКАР (100 мкг/мл карбеніциліну) (бБіттопз еї аї., 2002, 9. Іттипої.
Меїпоав, 263: 133-147) і культивували протягом 24 годин при 30 2. 00466) Для аналізу 50О5-РАСЕ у невідновних умовах 200 мкл середовища для експресії
СКАР піддавали гранулюванню і ресуспендували в 100 мкл МЕ-лізисного буфера (88 мкл реагента РорСийиге (Момадеп), 10 мкл 100 мМ йодацетаміду, 2 мкл реагента Іухопазе (ЕМО
Віозсієпсе5 Зразки інкубували протягом 15 хвилин при кімнатній температурі, потім
Зо центрифугували при 9300 КСЕ (відносне прискорення центрифуги) протягом 5 хвилин для гранулювання нерозчинних компонентів. 50 мкл супернатанта трансфікували в нову пробірку і змішували з 50 мкл 2х 05 буфера для зразків. Потім зразки піддавали нагріванню протягом 5 хвилин при 95 С і наносили 5 мкл на гелі МИРАСЕ 4-12 95 Вів-ТГгіз/МЕ5 (Іпмігодеп). Гелі переносили за допомогою іВіої (Іпмігодеп) на нітроцелюлозну мембрану, піддавали імуноблоттингу із застосуванням антитіла (НІ) проти людини (КосКіапі), кон'югованими з
ІКоуевООСсМУ, і робили знімки за допомогою формувача зображень ГіІСОК Одуззеу.
І00467| На Фіг. 7А показаний 505-РАСЕ аналіз половин молекул антитіл з виступом і западиною. Були також отримані і протестовані на експресію кодон-оптимізовані версії важких і легких ланцюгів для половини молекули антитіла ІЇ/-17. Послідовності вихідних кодованих послідовностей і кодон-оптимізованих кодованих послідовностей показані на 5ЕО ІЮ МО: 99- 102. СОК половини молекули анти-1ІІ 17 антитіла показані в БЕО ІЮО МО: 40, 43, 44, 45, 4Аб і 47.
Див. заявку на патент США 2012/0141492 або патент США 8715669. У кожній культурі переважна смуга являла собою половини молекул антитіл. Вихідні кодовані послідовності відбирали для масштабування процесу одержання антитіл.
І00468| Для масштабування до ферментерів об'ємом 10 л вихідні початкові культури (500 мл) культивували до стаціонарної фази і застосовували для інокуляції ферментатний об'ємом 10 л (Зіттопз еї аї., 2002, у). Іттипої. Меїйодв, 263: 133-147). Підживлювані культури об'ємом 10 л культивували і збирали цільні бульйони через рідину в мікроканалах. Лізіовані клітини потім обробляли протягом ночі при 4 "С кінцевою концентрацією 0,895 РЕЇ (06/06). Кожну суміш послідовно центрифугували при 15000 х д протягом 20 хвилин і далі фільтрували через 0,22 мкм фільтр. Кожну половину молекули антитіла потім захоплювали на 250 мкл колонці
МарзОкКЕ 5ЕГЕСТ (СЕ Неапйсаге Іїе Зсіепсе5). Колонку врівноважували 10 колонковими об'ємами (СМ) каліброваного буфера, що складається з 50 мМ ТЕЗ рН 8,0, 150 мМ Масі, і далі промивали двома різними промивними буферами, перший складався з 50 мМ ТР. рН 8,0, 150
ММ масі, 0,05 95 Тип Х-100, 0,05 956 Тип Х-114, другий складався з 25 мМ цитрату натрію рн 6,0. Кожну групу елюювали в 0,15 М ацетаті натрію рН 2,7, потім титрували до рН 5,0 із застосуванням 1:10 1М Аргініну/Сукцинату рН 8,7. 00469) Ідентичність кожної половини молекули антитіла підтверджували за допомогою аналізу на основі іонізації в електроспреї - рідинній хроматографії із часом прольоту (ІС- бо ЕБІ/ТОК). Чистоту аналізували за допомогою 505 РАСЕ гелю трис-гліцин 4-20 90. Агрегатні рівні визначали за допомогою 5ЕС (ексклюзійної хроматографії). (00470) При проведенні початкового аналізу автори виявили, що половина молекули анти-1Ї - 17 антитіла утворювала осад при рН вище 7. Половину молекули антитіла захоплювали і потім елюювали на колонку з білком А при низькому рН і доводили рН елюату до 8,5 для здійснення складання біспецифічного антитіла в рамках окисно-відновної реакції. Близько 20 95 елюату половини молекули анти-ЇЇ-17 антитіла було загублено внаслідок осадження після зміни рн.
Зниження доступної кількості половини молекули анти-ІЇ-17 антитіла для зв'язування з половиною молекули анти-ІЇ-13 антитіла призводило до дисбалансу в плані співвідношення даних двох половин молекул антитіл і зниженому виходу біспецифічного анти-1Ї -13/анти-1Ї -1 7 антитіла. Після складання біспецифічне антитіло очищували за допомогою катіонообмінної хроматографії. Проте, на відміну від інших біспецифічних антитіл, деяка кількість біспецифічного анти-ІЇ-13/ЛІ/-17 антитіла незворотно зв'язувалася з катіонообмінною смолою
ЗРНР. У результаті зазначених вище факторів відсоткова частка отриманого біспецифічного антитіла була незвичайно низкою і складала близько 10 95.
І00471| Були протестовані декілька умов на предмет поліпшення розчинності і стабільності половини молекули анти-1Ї-17 антитіла до і протягом процесу складання, наприклад шляхом додавання до елюємої половині молекули антитіла різних концентрацій аргініну, а саме 100 мм, 250 мМ, 350 мМ і 500 мМ, додавання 4 95 полівінілпіролідону (ПВП), і/або підвищення рн від 8,5 до 10 у вигляді окремих інкрементів по 0,5 одиниць рН. Було виявлено, що висока концентрація аргініну (0,5 М) при рН близько 9 значно підвищує розчинність половини молекули анти-1Ї -17 антитіла і знижує індуковане рН осадження до менше ніж 1 95. Концентрація аргініну 500 мМ при рН 8,5 також призводила до гарних результатів. Також було виявлено, що відсоткова частка отриманого біспецифічного антитіла може бути збільшена шляхом об'єднання половини молекули анти-1ІЇ-13 антитіла з половиною молекули анти-1Ї-17 антитіла перед зміною рН для дисульфідного окиснення шляхом додавання 0,5 аргініну при рН 8,5. Крім того, автори замінили катіонообмінну колонку колонкою для гідрофобної взаємодії, оскільки біспецифічне анти-ЇЇ - 13/І/-17 антитіло не зв'язувалося необоротним чином з колонкою для гідрофобної взаємодії.
При здійсненні вдосконалених процесів відсоткова частка отриманого біспецифічного антитіла підвищувалася з 10 95 до 65 95.
Зо (00472) В одному прикладі експерименту половину молекули анти-1І--17 антитіла з'єднували з анти-ІЇ-13 у співвідношенні 1:1 і потім титрували до 0,5 М аргініну/сукцинату при рН 8,7, після чого додавали свіжоодержаний відновний агент, відновлений І! -глутатіон (З5Н), для досягнення молярного співвідношення 1:200. Суміш залишали при кімнатній температурі на три дні. Після окисно-відновної реакції зібране біспецифічне антитіло очищували на 45 мл колонці для гідрофобної хроматографії РгоРас 10 (Тпепто Зсіепіййс) із застосуванням градієнта 30 СУ (загальних об'ємів стовпчика). Рухомий буфер являв собою 25 мМ фосфат калію, 1 М сульфат амонію рН 6,5, а буфер для елюювання являв собою 25 мМ фосфат калію рН 6,5, 25 95 ізопропанол. 30 мл фракції збирали і відокремлювали пікові фракції за допомогою 505 РАСЕ трис-гліцин 4-20 95 для аналізу чистоти і відповідним чином поєднували в пул. Потім пул концентрували до 10 мг/мл і діалізовували в РВ5. Концентрований пул біспецифічного антитіла також очищували для видалення ендотоксинів за допомогою колонкової хроматографії.
Несподіваним чином знову спостерігали агрегати при проведенні процесу очищення. Для зменшення кількості агрегатів у білююовий пул додавали ТІйоп Х-114 в якості перевірочного зразка до кінцевої концентрації 0,1 95 (06/06). Пул ретельно розмішували і інкубували на льоді протягом 5 хвилин і далі піддавали нагріванню при 37 "С протягом 15 хвилин. Суміш послідовно центрифугували протягом 10 хвилин при 25 "С при 3000 х 9, аспірували водний шар, і піддавали гель-фільтрації для видалення залишкового Тгйоп Х-114. Додавання Тгйоп Х-114 забезпечувало видалення всіх детектованих агрегатів.
І00473| Чистоту аналізували із застосуванням 505 РАСЕ гелю Трис-Гліцин 4-20 905 і визначали агрегатні рівні за допомогою 5ЕС. Ідентичність зібраних біспецифічних антитіл підтверджували за допомогою ІС-ЕБІ/ТОЕ в їх інтактній і відновленій формі. Оскільки теоретичні маси гомодимера і гетеродимера відрізняються на декілька Дальтонів один від одного, біспецифічні антитіла також аналізували після видалення Ес за допомогою ферменту
Еабгісагог. Інтактне антитіло піддавали дії 1 одиниці Рабгісаг на 1 мкг білка при рН 6,5 і інкубували при 37 "С протягом 4 годин. Ідентичність ЕК(аб)2 підтверджували за допомогою І С-
ЕБІ/ТОБЕ.
І00474| На Фіг. 7В показаний 5ЕС аналіз, що дозволив виявити один переважний вид. На
Фіг. 7С показаний 505 РАСЕ аналіз біспецифічного антитіла при (доріжка а), невідновних і (доріжка с) відновних умовах. Доріжка Б показує маркери молекулярної маси. На Фіг. 70 бо показаний І С-ЕБІ/ТОЕ аналіз фрагментів ЕК(ар)2 і теоретичні молекулярні маси гомодимера І--
17, гомодимера 1-13 і Е(аб)2 біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла.
ПРИКЛАД 7 - афінність зв'язування цитокінів біспецифічного анти-1ЇЇ -1 З/І -17 антитіла (00475) Афінності зв'язування біспецифічного анти-1ІЇ -17/анти-ІЇ -13 антитіла проти цитокінів
І--13 людини і мавпи циномолгус вимірювали за допомогою інструмента ВіІАсоге м-1200. Анти-
І--13 антитіло захоплювали антитілом Ес миші проти людини (СЕ Неайпсаге, саїж ВК-1008-39), нанесеним на біосенсорні чипи СМ5, для досягнення приблизно 500 одиниць відповіді (КО).
Чотирьохкратні серійні розведення (від 50 НМ до 49 пМ) І/-13 людини, І--13К1300 людини (загального варіанта І--13, асоційованого з алергією і астмою, див. Міадісй еї аї., 2005, у. Сііп
Іпмеві., 115:747-754) і 1-13 мавпи циномолгус ін'єціювали в НВЗ-Р буфер (СЕ Неайсаге) при 25 об зі швидкістю потоку 30 мкл/хв. Значення швидкості асоціації (Коп) і дисоціації (Ко) підраховували із застосуванням простої моделі зв'язування Ленгмюра 1:1 (ВіАсоге 1200
Емаїнайоп Зоймаге мегвіоп 2.0). Рівноважну константу дисоціації (КО) розраховували у вигляді співвідношення Коїї / Коп. Результати представлені в Таблиці 3.
Таблиця З
Значення швидкості асоціації та дисоціації біспецифічного анти-1Ї -1 З/І -17 антитіла, отримані за допомогою програмного забезпечення компанії Віасоге (00476) Афінність зв'язування біспецифічного анти-1Ї-17/анти-І/-13 антитіла щодо різних цитокінів І--17 вимірювали за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (ППР) із застосуванням інструмента ВіАсоге"м-Т200. Біспецифічне анти-1Ї-17/анти-І/-13 антитіло захоплювали антитілом Ес миші проти людини (СЕ Неаїйїсаге, саїж ВК-1008-39), нанесеним на біосенсорні чипи СМ5, для досягнення приблизно 500 одиниць відповіді (КО). Для вимірювання кінетичних показників п'ятикратні серійні розведення (від 20 нМ до 32 пМ) І--17АА людини (КО зузіетв5, каталожний номер 317-ІЇ 8-050), гетеродимера І--17АЕ людини, 1І-17ЕЕ людини (КО
Зузіет5, каталожний номер 1335-ІЇ-025/СЕ), І/-17АА мавпи циномолгус, ІЇ-17АЕ мавпи циномолгус і І--17ЕЕ мавпи циномолгус ін'єдкювали в НВ5-Р буфер (СЕ Неаїїйсаге) при 25 2С зі швидкістю потоку 30 мкл/хв. Значення швидкості асоціації (Коп) і дисоціації (Кої) підраховували із застосуванням простої моделі зв'язування Ленгмюра 1:1 (ВІАсоге Т200 ЕмаїЇшцайоп Зоїймаге мегвіоп 2.0). Рівноважну константу дисоціації (КО) розраховували у вигляді співвідношення Коїй /
Коп. Результати представлені в Таблиці 4.
Таблиця 4
Значення швидкості асоціації та дисоціації біспецифічного анти-1Ї -1З/І -17 антитіла, отримані за допомогою програмного забезпечення компанії Віасоге
Коо)
ПРИКЛАД 8 - Інгібування індукованої цитокінами проліферації за допомогою біспецифічного анти-І -13/І -17 антитіла
І00477| Вплив біспецифічного анти-1Ї -1З/І -17 антитіла на опосередковану ЇЇ -13 активність у клітинах ТЕ-1 досліджували в такий спосіб. ТЕ-1 клітини людини (еритролейкемічні клітини, КО
БЗузіет5, Міппеароїїх, ММ) культивували у зволоженому інкубаторі при 37 "С з 595 СО02 у живильному середовищі ЕРМІ 1640, що містить 10 95 інактивованої нагріванням ембріональної коров'ячої сироватки (ЕВ5) (каталожний номер 5НЗО0071.03, НусСіопе ГІ арогайгіє5, Іпс., Годап,
ТУ; і 1Х пеніцилін: стрептоміцин'глутамін (каталожний номер 10378-016, Сіірсо Іпийгодеп Согр.,
Сагізрайд, СА) і 2 нг/мл гПпеМ-С5Е (каталожний номер 215-2М, ВО Бузіетв, Міппеароїї5, ММ).
Аналітичне середовище являє собою живильне середовище без 2 нг/мл гпПОМ-С5Р. Цитокіни додавали в аналітичне середовище, як зазначено, при наступних кінцевих концентраціях: 10 нг/мл І--13 людини і 10 нг/мл 1-13 людини К1300. (00478) Антитіла піддавали серійному 3,3-кратному розведенню в аналітичному середовищі, що містить цитокіни людини в 96-ямковому планшеті для культури тканини (каталожний номер 353072, Раісоп ВО, Ргапкіїп І аке5, МУ). Планшети інкубували протягом 20 хвилин при 37 "С. ТЕ-1 клітини двічі промивали в аналітичному середовищі і ресуспендували при кінцевому об'ємі 2,5 х 105 клітин/мл, у кожну ямку додавали 50 мкл ТЕ-1 клітин. Загальний об'єм розраховуючи на одну ямку складав 100 мкл. Планшети інкубували протягом 4 днів у зволоженому інкубаторі при 37 "б 3 5956 002 перед додаванням 1 мкКі ЗН-тимідину в розрахунку на одну ямку. Після додаткових 4 годин інкубування ступінь проліферації вимірювали за допомогою введення ЗН- тимідину. Асоційовану із клітинами радіоактивність піддавали кількісному визначенню за допомогою сцинтиляційного вимірювання. Результати виражені у вигляді середнього значення повторюваних зразків. Одержання графіків і статистичний аналіз були здійснені із застосуванням Каїеідастгарй (Зупегду Зоймаге, Кеадіпо, РА).
І00479| Результати даного експерименту показані на Фіг. 8. Біспецифічне анти-1Ї -13/1І -17 антитіло інгібувало індуковану ІЇІ-13 (Фіг. 8А) і індуковану ІЇ/-13 К1300 (Фіг. 88) проліферацію
ТЕ-1 клітин залежно від дозування, при цьому ефективність була порівнянна з лебрикізумабом.
У Таблиці 5 показані результати ІС90О для кожного антитіла і кожного цитокіна.
Таблиця 5
Значення ІС90 для лебрикізумабу і біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла ше 33000 (мкг/мл) (мкг/мл) (Біспецифічне анти-П-13/ЛІ-17антитлої | (015 2 Ї 06 г К Ж уев
І00480| Вплив біспецифічного анти-іІІЇ-13/І -17 антитіла на індуковану 1-17 проліферацію нормальних фібробластних клітин крайньої плоті людини досліджували в такий спосіб.
Заморожену аліквоту нормальних фібробластів крайньої плоті людини (МНЕР) одержували від компанії Ге Тесппоїодіез (каталожний номер С-004-5С, | Ше Тесппоїодіеє5, Сагізрай, СА) і культивували в середовищі 106 (каталожний номер М106500, І їе Тесппоїіодіє5, Сагізрай, СА) з добавкою для культивування в середовищі з низьким вмістом сироватки (5055; каталожний номер 500310, І бе Тесппоїіодіє5, Сагізрайд, СА). Рекомбінантні І--17АА і 1-17 ЕЕ одержували від компанії КО Бузієтзв (1-17 АА: 317-ІІ 8-050 і 1-17: 1335-11 -025/СЕ) і відтворювали в 4 мн НС
Зо відповідно до інструкції виробника. Рекомбінантний 1 -17АЕ людини одержували і очищували в місці проведення дослідження.
І00481| За день до проведення аналізу аліквоти МНЕЕ розморожували і висіювали в кількості 0,125 х 106 клітин/ямку в 100 мкл середовища 106 з додаванням І 505 в 96-ямкових планшетах із пласким дном для культивування тканини і інкубували протягом ночі при 37 "С для приєднання. Ранком, коли проводили аналіз, середовище заміщували свіжим середовищем у кількості 100 мкл/ямку і піддавали клітини додатковому інкубуванню протягом 2ж годин для врівноважування. (00482) Антитіла розбавляли 1:3 серійно починаючи від 50 мкл/мл в якості найбільш високої концентрації. Одержували 10х робочої вихідної кількості при 500 мкг/мл і проводили серійне розведення в середовищі для культивування тканини. Цитокіни також одержували у вигляді 10х робочої вихідної кількості в середовищі для культивування тканини. ІЇ-17АА розводили до 16 нг/мл до кінцевої концентрації 1,6 нг/мл, І -17АЕ - до 1,25 мкг/мл до кінцевої концентрації 125 нг/мл, а ІС-17ЕЕ - до 15 мкг/мл до кінцевої концентрації 1,5 мкг/мл. Додавали робочі вихідні кількості антитіл і цитокінів, кожне в об'ємі 10 мкл/100 мкл/ямку, і інкубували протягом 24 годин.
Супернатанти збирали і трансфікували у свіжі 9б-ямкові планшети із пласким дном і заморожували при -80 "С до проведення аналізу.
І00483| Проводили 5-С5Е ЕЇІЗА із застосуванням комерційного набору, придбаного в компанії КО 5Буз(ет5 (Міппеароїї5х, ММ, каталожний номер ЮУ214) відповідно до інструкцій виробника. Дані аналізували із застосуванням програмного забезпечення Ехсеї! (Місго5ой,
Кейтопа, УМА) і Ргізт (сгарпрайд Зопмаге, Зап Оіедо, СА) для підрахунку значень ІС50 і ІС90. (00484) Результати даного експерименту показані на Фіг. 9. І -17АА (1,6 нг/мл, еквівалентно 0,05 нм), 1І--17АЕ (125 нг/мл, еквівалентно 4 нМ) і ІС-17ЕЕ (1,5 мкг/мл, еквівалентно 50 нМ)
індукують цитокін-залежну експресію 5-С5Е в МНЕБЕ клітинах (див. незафарбовані квадрати на
Фіг. 9А, В і С, відповідно). Контрольне антитіло ІдДо4 не виявляло впливу на експресію 5-С5Е, у той час як вихідний анти-ІЇ-17 антитіло і біспецифічне анти -ІЇ-13/І-17 антитіло інгібували експресію -С5БЕ, індуковану всіма трьома ізоформами 1-17, залежно від дозування. У Таблиці 6 показані значення ІС90 для інгібування індукованої ІІ -17 експресії 5-С5Е із застосуванням біспецифічного анти-ІЇ -13З/І -17 антитіла.
Таблиця 6
Значення ІС90 для біспецифічного анти-ЇЇ -13/І -17 антитіла
ДЮ жене | ожетнюе (молярне (молярне (мкг/мл) НО Ша співвідношення) співвідношення)
Гетеродимер 1І--17АЕ їі гомодимер 1/-17Е потребують високих концентрацій цитокінів для індукування стійкої реакції. ІС90О інгібування даної реакції досягається при молярному співвідношенні антитіло: цитокін «2 і «1 для І-17АБЕ і 1-17Е, відповідно.
ПРИКЛАД 9 - Нейтралізація як ІІ -13, так і 1-17, за допомогою біспецифічного анти -ІЇ -13/І - 17 антитіла (00485) Активність біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла у плані нейтралізації як ІІ -13, так і 1С-17 в рамках одного аналізу аналізували на ВЕА5Б-2В клітинах. Рівні мРНК ССІ126 застосовували для аналізу реакції на І/-13, при цьому секрецію СХСІ1 вимірювали за допомогою ЕГІЗА для аналізу реакції на 1І--17.
І00486| Бронхіальні епітеліальні клітини людини ВЕА5Б-2В одержували від АТСС (каталожний номер АТСС СІ -9609, Мапазза5, МА) і культивували в оброблених колагеном флаконах для культивування тканини у повністю доповненому середовищі ВЕСМ (каталожний номер АТСС СКІ-9609, Мапазза5, МА). Рекомбінатні І-13 людини одержували в місці проведення дослідження, а рекомбінантні ІІ -17АА людини (каталожний номер І--17АА: 317-ІІ В- 050) ї ТМЕРа (каталожний номер 210-ТА-005/СЕ) одержували від компанії КУО Зузіет5 (Міппеароїї5, ММ).
І00487| Заморожені аліквоти ВЕА5Б-2В клітин розморожували і висіювали в кількості 104 клітин'ямку в оброблені колагеном 9б-ямкові планшети з пласким дном у повному ВЕСМ середовищі та залишали для росту протягом 2-3 днів до досягнення конфлюенції. Потім середовище заміщували свіжим ВЕСМ середовищем без гідрокортизону і культивували протягом додаткових 2-3 днів для видалення стероїдів. У день проведення аналізу середовище
Зо заміщували свіжим ВЕСМ середовищем у кількості 100 мкл/ямку без гідрокортизону і врівноважували протягом декількох годин при 37 90. (00488) Розведення антитіл проводили як описано вище для аналізу 1ІЇ/-17 фібробластних клітин. Для цитокінів готували 10х робочу вихідну кількість 1-13 (100 нг/мл), І--17АА (16 нг/мл) і
ТМЕа (1 нг/мл) і додавали в ямки до кінцевих концентрацій 10 нг/мл, 1,6 нг/мл і 0,1 нг/мл, відповідно, і культивували при 37 "С. Через двадцять чотири години супернатанти збирали і заморожували при -80 "С, при цьому інше середовище в ямках аспірували і промивали ямки, що містять приєднані клітини, холодним РВ5 без РНКази один раз, потім сушили й обробляли для синтезу КДНК із застосуванням набору Сеї5-о-СОМА І (каталожний номер АМ1723, Ме
Тесппоіодієв, Сагізрайд, СА) відповідно до протоколу виробника.
І00489| Праймери і зонд Тадтап для ССІ 26 людини одержували в компанії І їе Тесппоіодіев (каталожний номер 4331182; Аззау ІЮ: НеьО0171146 т1), ті з них, які були призначені для внутрішнього контрольного КЕРІ 19, розробляли й одержували в місці проведення дослідження (прямий праймер 5- ДЯС п4О3А ТО ТСА ТОасі ААС А-3 (ЗЕО І МО: 96); зворотній праймер 5'- ста ато да Сда сла СтТТ-3 (5ЕО І МО: 97); і зонд 5- ТС АСА ДОС ТаА дпа САС АСА дОоас-3 (5БО ІЮ МО: 98)). кКПЛР реакцію Тадтап проводили при 20 мкл об/реакція із застосуванням ТадМап Опімегзаї! РСК Мазхіег Міх (Універсальної вихідної суміші для ПЛР
Тадмап) (каталожний номер 4304437, І їе Тесппоодіе5, Сагізрай, СА), а ПЛР реакції проводили із застосуванням системи для ПЛР у реальному часі Арріїей Віозузіет5 7500. Значення відносної кількості (КО) підраховували у вигляді співвідношення нормалізованих значень дельти порога циклу (4СТ) експериментального значення і стану без стимулювання, яке розглядали в якості базисної реакції. КО значення наносили на графік для порівняння з Іод(АБІ у програмному забезпеченні Ргізт для підрахунку значень ІС90.
І00490| Супернатанти ВЕА5-2В культури аналізували на СХСІ1 за допомогою ЕГІЗА із застосуванням набору, придбаного в компанії КУО Зувзіет5 (каталожний номер 0275) відповідно до інструкцій виробника. Дані аналізували із застосуванням програмного забезпечення Ехсеї і Ргізт для підрахунку ІС5О і ІС90. Концентрацію СХСІ 1 наносили на графік для порівняння з ІсдІАБІ у програмному забезпеченні Ргіхт для підрахунку значень ІС90.
І00491| Результати даного експерименту показані на Фіг. 10. Біспецифічне анти-1Ї -13/1І -17 антитіло інгібувало як експресію ССІ 26 (Фіг. 10А), так і експресію СХСІ 1 (Фіг. 108), залежно від дозування, що свідчить про те, що біспецифічне антитіло може нейтралізовувати як ІЇ--13, так і
І/-17 в рамках одного аналізу. Значення ІС90О були підраховані за допомогою нелінійної регресії та показані в Таблиці 7.
Таблиця 7
Значення ІС90 для біспецифічного анти-ЇЇ -13/І -17 антитіла о денитилтьня 331 (мкг/мл) (мкг/мл)
Значення ІСОО для експресії СС1І26 (0,04 мкг/мл) аналогічне до значення ІС90О для біспецифічного антитіло в рамках описаного вище аналізу ІІ -13 (див. Таблицю 5), у той час як значення ІСОО для експресії СХСІ1 (0,19 мкг/мл) аналогічне до значення ІС90 для біспецифічного антитіла в рамках описаного вище клітинного аналізу 1-17 (див. Таблицю 6).
ПРИКЛАД 10 - Фармакокінетичні показники біспецифічного анти -ІІ-13/І -17 антитіла після введення мишам (00492| Аналізували фармакокінетичні показники біспецифічного анти-1Ї-13/І-17 антитіла після однократного внутрішньовенного (в/в) введення С57ВІ/56М мишам. Дев'яти самкам
С57ВІ/6ЄМ мишей з масою тіла в діапазоні 20,4-22,19 г однократно вводили болюсну в/в дозу 10 мг/кг біспецифічного анти-ІЇ-13/І -17 антитіла через хвостову вену. У наступні моменти часу після введення зібрали кров від п-З3 мишей/момент часу і обробляли до одержання сироватки: 5 хвилин; 2, 8 і 24 годин; 3, 7, 10, 14 ї 21 днів. Концентрацію біспецифічного анти-ЇЇ -1 ЗЛІ -17 антитіла в кожному зразку сироватки визначали за допомогою ЕГІЗА, як описано нижче. Групові профілі концентрації біспецифічного анти-ІЇ-13//-17 антитіла в сироватці відносно часу використовували для оцінки фармакокінетичних показників із застосуванням Ріоепіх УміпМопіїп мб (Рпагзідн; Моипіаіїп Міему, СА) на основі МРО підходу (паїме рооїей даїа арргоасі, спільне
Зо припасування об'єднаних даних окремих суб'єктів з одночасним ігноруванням індивідуальних відмінностей) і аналізу без врахування компартментів (МСА). Були визначені наступні фармакокінетичні параметри: - Стах: Максимальна спостережувана концентрація в сироватці - АОСіаві: Площа під кривою Концентрація в сироватці/Час з 0 дня до останнього моменту часу з обумовленій концентрацією біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла в сироватці - СІ: Кліренс
ІЇ00493| Концентрацію біспецифічного анти-1ІЇ-13//-17 антитіла в призначеному для визначення фармакокінетичних показників зразку сироватки кожної миші визначали за допомогою сендвіч-аналізу ЕГІЗА до людини. В рамках даного аналізу антитіла вівці проти ДО людини (НІ) (каталожний номер АОШООЗСОБЗО1, Віпаїпуд 5йе; Віппіпудпат, ОК) ії антитіла кози проти ІдС людини (Не!) (каталожний номер А8О-319Р-12, Веїпу!; Мопідотегу, ТХ) застосовували в якості антитіл для вловлювання і детектування, відповідно. В якості стандарту для введення тваринам застосовували те саме біспецифічне анти-ЇЇ -13/І -17 антитіло. Аналіз
ЕГІЗБА ІдбС людини допускав до 1095 матрикса сироватки миші С57ВІ/5 з аналітичним діапазоном 0,39 - 25 нг/мл. Визначали, що мінімальна концентрація, що піддається кількісному визначенню складала 0,039 мкг/мл у нерозведеній сироватці миші (що відповідало мінімальному ступеню розведення зразка в розмірі 1/100).
І00494| Результати даного експерименту показані на Фіг. 11. Оскільки для визначення фармакокінетичних показників застосовували підхід на основі об'єднання даних, на Фіг. 11 показаний тільки одиночний фармакокінетический параметр. Після однократного в/в введення
С57ВІ/6М мишам анти-1ІЇ-13//-17 антитіло демонструвало швидке зниження концентрації в сироватці протягом перших 24 годин після введення з наступним поступовим зниженням протягом наступних 20 днів. Стах складала 211 мкг/мл, а площа під кривою Концентрація в сироватці/Час (АОсСіа5з) складала 1610 днів х мкг/мл. Кліренс (СІ) складав 6,2 мл/день/кг.
ПРИКЛАД 11 - Фармакокінетичні показники в мавп циномолгус (00495) Аналізували фармакокінетичні показники біспецифічного анти-ЇЇ-13/І-17 антитіла після однократного внутрішньовенного (в/в) введення мавпам циномолгус. П'ятнадцять самців мавп циномолгус із масою тіла в діапазоні 2,8-3,7 кг розділяли на З групи (п-:5/група). Всім тваринам у кожній групі однократно вводили в/в дозу індиферентної контрольної речовини (Група 1), або З або 30 мг/кг біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла (Групи 2 і 3, відповідно). У наступні моменти часу після введення збирали кров і обробляли до одержання сироватки: перед введенням; через 15 хвилин; 1, 2, 4, 8 і 24 годин; 3, 7, 10, 14 ії 21 днів. Концентрацію біспецифічного анти-1Ї -13/І -17 антитіла в кожному зразку сироватки визначали за допомогою
ЕГІБА, як описано нижче. Сироватку також аналізували на наявність анти-терапевтичних антитіл (АТА), як описано нижче. Профілі концентрації біспецифічного анти-ЇЇ -13/І -17 антитіла в сироватці відносно часу для окремих тварин застосовували для аналізу фармакокінетичних показників з використанням РПоепіх М/пМопіїпй мб (РПпагзідні; Моипіаійп Міему, СА), при цьому відзначали індивідуальні і групові середні значення фармакокінетичних показників. Були визначені наступні фармакокінетичні параметри: - Стах: Максимальна спостережувана концентрація в сироватці - АОСіазі: Площа під кривою Концентрація в сироватці/Час з 0 дня до останнього моменту часу з обумовленою концентрацією біспецифічного анти-1ІЇІ -13/І -17 антитіла в сироватці - СІ: Кліренс - М55: Об'єм розподілу в спокійному стані
І00496| Концентрацію біспецифічного анти-ІЇ-13/ЛІ/-17 антитіла в зразках сироватки індивідуальних мавп циномолгус аналізували за допомогою сендвіч-ЕГ ІЗА ІдсС людини, як описано вище для фармакокінетичних показників у мишей. Аналіз ЕГІЗА дО людини допускав до 595 матрикса сироватки мавпи циномолгус із аналітичним діапазоном 0,39 - 25 нг/мл.
Визначали, що мінімальна концентрація, що піддається кількісному визначенню складала 0,039 мкг/мл у нерозведеній сироватці мавпи циномолгус (що відповідало мінімальному ступеню розведення зразка в розмірі 1/100).
І00497| Антитерапевтичні антитіла (АТА) у зразках сироватки мавп циномолгус детектували
Зо із застосуванням гомогенного непрямого аналізу ЕГІ5А, в рамках якого АТА дозволяли утворювати містки з біотинильованим біспецифічним анти-ІЇ-13//-17 антитілом і міченим дигоксигеніном (010) біспецифічним анти-1Ї-13/І-17 антитілом. Біспецифічне біотин-анти-ЇЇ - 13/І-17 антитіло і біспецифічне ОіІб-анти -ІІ-13/І -17 антитіло одержували в місці проведення дослідження із застосуванням сульфо-МН5-І с-біотину Е2-ІпК (каталожний номер 21327, Ріегсе;
Коспевіег, МУ) і гемисукциніміду З-аміно-деоксидигоксигеніну, складного сукцинімідильного ефіру (каталожний номер А2952, Іпмігодеп; Сагізрай, СА) відповідно, згідно з протоколами виробника. Зразки спочатку інкубували з біспецифічним біотин-анти-їЇ -13/ЛІ-17 антитілом і біспецифічним ОБіІсС-анти-ЇЇ -13/І -17 антитілом при 4 "С протягом ночі. Потім імунні комплекси біспецифічне анти-ІЇ-13/Л/-17 антитіло-АТА захоплювали на 384-ямкових планшетах Мипс
Махізогр, попередньо покритих 2 мкг/мл нейтравідину (Тпепто Зсіепіййс; Косктога, І і детектували із застосуванням міченого пероксидазою хріну (НКР) анти-ОІС антитіла миші (Часкбоп о Іттипогезеагсй; УМебі обгоме, РА). Після інкубування з 3, 30, 5, 5(- тетраметилбензидином в якості субстрату (ТМВЕ- 1000, Мо55; Разадепа, МО), одержували значення абсорбції (оптичної щільності, ОО) кожної ямки зі зразком. Зразки з ОО, що дорівнювали або перевищували граничне значення для даного аналізу (визначене нижче), вважали АТА-позитивними. Аналіз допускав до 2 96 сироваткового матрикса і був здатний забезпечити детектування 0,6 мкг/мл АТА у нерозведеній сироватці з наявністю 50 мкг/мл біспецифічного анти-ІЇ -13З/І -17 антитіла.
І00498| Для визначення граничного значення для даного аналізу для групи з 32, що не зазнавала дії лікарського засобу зразків сироватки мавп циномолгус (Віогесіатацйоп; Ууезіригу,
МУ) одержували окреме значення 00. Крім того, на основі того самого аналітичного планшета одержували ОО негативного контролю (об'єднаних зразків сироватки мавп циномолгус, які не зазнали дії лікарського засобу, Віогесіатацйоп). Кожну тварину піддавали нормалізації шляхом поділу індивідуального ОО на ОО негативного контролю для одержання індивідуальних співвідношень ОО, потім визначали середнє значення даних співвідношень. Значення граничного критерію розраховували у вигляді даного значення плюс його стандартного відхилення х 1,65. Проводили три окремі експерименти і визначали, що після усереднення результатів значення граничного критерію для даного аналізу складало 1,9. При аналізі зразків граничне значення для кожного планшета в рамках даного аналізу визначали шляхом множення бо даного граничного критерію на середнє значення ОЮ0 негативного контролю, отриманого на основі того самого планшета. Граничне значення, підраховане для даного аналізу, давало розрахункове співвідношення негативних і позитивних результатів, що дорівнює приблизно 5 95.
І00499| Результати даного експерименту показані на Фіг. 12 і в Таблиці 8. У Таблиці 8 показане дозування, що вводиться кожній тварині, показано на Фіг. 12.
Таблиця 8
Фармакокінетичні значення для мавп циномолгус, яким вводили біспецифічне анти- ІІ -1 ЗЛІ -17 антитіло
Тварина/Група Стах (мкг/мл) пос ми СІ. (мл/день/кг) Мзгв (мл/кг) 00500) Було виявлено, що концентрації біспецифічного анти-ІЇЇ -13/І -17 антитіла в сироватці у тварин, що зазнали лікування контрольною індиферентною речовиною (Група 1), була нижче, ніж що включається у звіт (Ге55 Тпап Керопабіе; ГТК), таким чином, аналіз фармакокінетичних показників для даних тварин не проводили.
І00501|) Середнє групове значення Стах складало 89,9:-107 і 1050-4102 мкг/мл для Групи 2 і
З, відповідно. Групове середнє значення АОсСіавзі складало 4992107 і 55002571 мкг/мл"дні для
Групи 2 і З, відповідно. Спостерігали, що значення як Стах, так ії АОСіа5і підвищуються пропорційно дозуванню. Групове середнє значення кліренсу (СІ) складало 6,12-1,33 і 5,5020,567 мл/день/кг для Групи 2 ії 3, відповідно. Групове середнє значення М55 складало 43,1-12,1 і 23,426,51 для Групи 2 і 3, відповідно. 00502) З 10 тварин, що зазнають лікування біспецифічним анти-1Ї -13/І -17 антитілом, за результатами тестування вісім виявилися позитивними за анти-терапевтичними антитілами (3/5 тварин в групі 2 і 5/5 тварин в групі 3).
ПРИКЛАД 12 - Зв'язування мішені І--17АА у мавп циномолгус
І00503| Дослідження фармакокінетичних показників у мавп циномолгус описане вище у
Прикладі 11. Був розроблений аналіз ЕГІЗА для кількісного дослідження загального І--17АА у сироватці мавп циномолгус для демонстрації зв'язування мішені. Антитіла, що є специфічними відносно ІІ-17АА, застосовували для захоплення і детектування, при цьому отримані в місці проведення дослідження рекомбінантні ІЇ-17АА мавп циномолгус застосовували для підготовки стандартів і контролів для даного аналізу. Сироватку збирали в день -7 і день 0 для одержання базисних значень, при цьому в дні 1, 3, 8, 11, 15, 22, 29 і 36 після введення визначали рівні загального І--17АА у даних зразках.
(00504) Результати представлені на Фіг. 13. Вільний І--17АА у сироватці має дуже короткий час напівжиття, що є типовим для цитокіну і не перевищуючим граничні значення детектування в рамках даного аналізу на базисному рівні. При зв'язуванні сироваткового І-17АА антитілом йому стане притаманний більш тривалий час напівжиття даного антитіла, при цьому він стане детектованим. В рамках дослідження фармакокінетичних показників у мавп циномолгус рівні ІІ-- 17АА були недетектованими на базисному рівні, при цьому спостерігалося стійке підвищення рівнів П/-17АА після введення біспецифічного анти-1ІЇ-13//-17 антитіла, що підтверджує зв'язування ІІ -17АА. Даний ефект спостерігався із застосуванням обох дозувань і залежав від дозування. Ступені реакції корелювали з описаними вище фармакокінетичними результатами.
ПРИКЛАД 13 - Ефективність анти-1Ї -17, анти-ІЇ -13 й анти-ІЇ -13/анти-ІЇ-17 антитіл у мишей- моделей астми, пов'язаної з домашніми пиловими кліщами
Ї00505| Мишей-моделей астми, пов'язаної з домашніми пиловими кліщами (НОМ), одержували по суті так само, як описано вище у Прикладі 4. Рівні біомаркерів визначали в сироватці та плазмі із застосуванням наступних аналізів відповідно до протоколу виробника:
ТАНС (НО, МОС170), СХСЇІ 1 (МіпПіроте, МСМТОМАИ-7ОК) і 5-С5БЕ (Міїїроте, МСМТОМАС-7ОК).
ІЇ00506| Було показано, що рівні ТАКС у сироватці знижуються після лікування лебрикізумабом в рамках досліджень 2 фази. Див., наприклад, Соїтеп еї аї., 2011, Мем/ Епдіапа
У. Медісіпе 365:1088-98 і заявку на патент США 2012/0156194. Як показано на Фіг. 14А, в рамках
НОМ моделі рівня ТАКС у плазмі мали схильність до зниження після лікування анти-1Ї-13 антитілом або анти-1Ї-13/анти-ІЇ-17 антитілом, але не анти-ІЇ-17 антитілом, що підтверджує наявність модулювання, специфічного в плані шляху 1-13. Аналогічним чином, як показано на
Фіг. 148 і 9С, біомаркери шляху ІЇ/-17, 2-С5Е і СХСІ 1 були значно знижені в сироватці після лікування анти-ІЇ!-17 антитілом і анти-ІІЇ-13/-ІЇ/-17 антитілом. На Фіг.14 "р«0,05, ""р«0,005 і птр-0,0005.
І00507| Незважаючи на те, що описаний вище винахід був описаний у деяких подробицях у вигляді ілюстрування і прикладу для цілей ясності розуміння, опис і приклади не повинні розглядатися в якості обмежуючих об'єм даного винаходу. Опис всієї зазначеної в даній заявці патентної і наукової літератури повністю включений в якості посилання.
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1145 ДЖЕНЕНТЕК, ІНК. ТА ЯН. «120: БІСЛЕЦИФІУНІ ДНТИ-Т-13/11-17 АНТИТІЛА Ї ЇХ ЗАСТОСУВАННЯ «13а5 РБУВ?К1-К0 «14ах «1415 «150х 61/383,945 «151» 2014-84-24 «і5а» 517/945,823 «і5ї» 2014-02-21. «155: 124 «174» Раїептіп версія 3.5 212» 1 «211» 132 «212: РВТ «2135 Нолю 5арієпе «ва» 1
Ме Аїа еп оіви ієцй ТВе Те оМаї Те Аза іва Тєе су5 Ге б1у біу і 5 18 15
Рне лів бегорго б1у бро Мві Рго Роб обек ТБ ОАїа еп Ав Зі Тен 28 25 за їїе б10 біб Сей ома1і деп Т1е Таб біл Аби зів Гу Алба Ре Сей Суз ча 45
Авп о піу беєе Мей Узі Тгробег о їіе деп Геу ТВе Аза сту Меб Туг сСув
Ба 55 «а
Аїа дів іви о бім бек оГей Ті АзлоМаї бер Біу Сух бек Атїа І1в 510 «3 7 75 ва у Тео пій АкроМеб Се) бес біу бе Сух« Бео Мі губ Маії бег Аїа 85 за 95 біу бів Ре бек обес Ге Ні Маі дев Ар Те у5 те 51 Маї Аіїа 120 185 Ів біб Ре мМаї гуз Азр ен і ец іемз Ні іец о іуз Гуз ів Рв вс Бін 115 1260 125 б1У Аг РНВ. АБ їза «2103 2 «іх 114 «212У РНТ «213» Кото зарзігп5 «ой» 7 бе о Рго бБіу рр Уві Бео Бро его Те діз зчец ден бій рем Ті б 1 5 16 15 біб їеноМаї йзпоТ1е Твге Зі еп обіп Туз діа Бго їеи бух бба б1у га КІ за
Зес о Меї Уаі Теробее Х18 дп Їг2ец ТнНг Ада біту Меї Ту Су дДіз А1з ча 45 ем біц бе іє) І16 Депо Уаї бегобіу Суз бег Аза Ті 010 уз Те 5 біп АбЕ Мек їв бек обіу Ре Суб Рго Ні бу5 Уаі бег дів бі 1п 55 79 75 а
Ре 5еб бер оіївен Нів уах АкродБроТиб зує Ї1е бі» Уаї Аза біп Рпе 85 зе 95 чаї уз Ар іец іч зей Ні Мем о їуз 1у5 бе РНе Агро ої б1у Аге о 185 мо
Не Ази «2195 3 «211» 122 «2125 РЕТ «213» Ното зарігп5
«вах З
Мем тТиге о Сух Сей с1у біж Ре Аза беєе Бео (3у Рго Ма1і Рго Рго 5есє 1 5 16 І5
Тве Аїя без Абе бін оїви Гі бій біз без маї Аа гіе Тве бій Абп 28 25 за сів іу5 Аза Рго фей Суб Аєп о б1їу ес Меї Маї Теробеб Те Азп Тей 35 зо 45
Тве іа азу Межї Туг Суз Аїв іа сен о біц бек оїе Те Абп о Уаї беб 55 ба с1у Суз бек Аїа Т1е Сім Бу5 ТАБ Обіл Агро Меб Гей без Сту Ре сух 65 78 75 ва
Рго ніх Бузх Маї бег Азя О1у біп РБе Чег о бево їв Ні Маї Аге дер 85 зе 95
ТвР цув Те бі Уаї Аїз Із Ре Маї ух Азроїем іїеч Гей Ні Ген 186 185 та уз 1уз ге Ре Арх біб біу біп Рбе Азп 120 «21954 «2115 132 «2125 БТ «2133 Масзев таєсісніарів «вра» 4
Меї Аїа ви бе іє Тгб оМев Маії ТЗе Аза іва Те осСуз їеу бі С1у 1 5 16 ї5
РНе Дів бег о Рго беє бро уаї бро Рго беб Тео АтТа гепоіу5 біц 1 28 25 за
Тіе біс б)й іви Уві деп їТе Тйгобіп Аа спів Туз А1я Рео без Сух 30 45
Ап обіу бек оМеї Маї Тер обегої1в Ап оїеи Те Аза оту Ма) Тув Суз 5 55 во дів вів ей п1Ш бегогїен ІТе деп Уві его 01у Суз ер АТа ІТ1в БЦ 55 78 їх на бує ТнгобіБ Ася Меї Се) д5п о бБіу Ре Су» Рго Мі5 Бу5 М3і бер дів че З
Фу бід Ре бег Зег ген Ас Уаі Агро Ар оТВгрогГуя іє СТ) Уа! Аді аа лах ме
Біб Ре уаї бух Азр о іеу їечз Маї Ні їей Гу5 Гуз цєо Ре Аг бБ1й пах 128 125 біУу бід Рна о Аеп їза «2102 5 «2115 8 «2125 РВТ «213У Бото зарієепь «пах 5 бій бег без її Ап Уаї бег С1у 1 Б «7125 5 2115 17 «2192 РКТ «2135 Ното 5врієепе «аа» 5
Туг Су Ата АЧа ін бій бер оіец Ті 5 Уаї бБег пу в. 5 16 «оз 7 «2115 155 «212» РВТ «213» Кото зарігп5 «4005 7 мес Тве го ІМ фме Тк обес о сец Маї 5ег бе) цей ів Бей Гео 5ег 1 5 19 15 мезо біз Аза Тіе мМа1ї бу Аза біу Тіве Те гів го Агро оАеп рго бі
28 75 за
Суб Бго дп бегосіц дер Бу АБи Ре Бго Аг Тиг Ма! Мет Уаї Аби ла 45
Кен а5о Т1е Ні5 АзпоАгсв Або ТЬе вбеп Те Ази Рго іуз Др бегс бесе 58 55 ва
Азр Туб Туго деп одер зве Таеобзее Рео Тер Аби Сем НХя Абв Ази 1 85 7 75 ва дар го бій Аг Туб Рго бЗегоуУаї Те Тер са3З0 А1а туз Сув Агроні 85 зо 95
Кеч біу Суз 116 Азп Аза Авробіу деп Уді Азр о Туго Ні Меж дДвп дев 186 185 з18 уаї го Ге іп біп сіб Т1е Се Узі сєу Аг Аве Бу Бго Рго Ні 315 1209 125
Су« Рго Ап бек РБе Агноїез Бі їух Тіе бей узі беб маі 51у Суз 136 135 146
Тис осСуз Маї Таб Рго Т1е Маї чі Ні Маї Аза 135 158 155 «185 8 «2115 137 «2125 РНТ «213У Ножю 5аріепь «ЩЕ Я сіу тїе Те 118 Рго дру Ав Рго б3у Сух Бко деп обек 610 Авро Гуз 1 5 185 15
Ап оРве Рго Абе Те Маї Ме аз Ап обец Ап оТ1є Ні Деп Ав Ап го 35 З
Тиг о А5п Твгодеп Рео уз Ав озебо5ек А5роТуг Туб Я8п АББ 5еб Те 35 зла 45 баб рго Тер Аз гей ні Дре деп бін Авбр Рго бій Абе Туб го беє
БА 55 са чаї їіє Тгробіз Ата Гуз Суз Абе Ні си 5І1Уу Су Т1е Акп дія Азр 78 75 во біу Ап оУаї Ар о Туг мів Меб вепобев Ма) Рго Ті зіп біб ох те 85 ще З5 їец Уді сен АгЕ Ага бі бго ро Ніє Су Рго А5зпобеєк Ре АгЕ Гей 182 185 10 бій іу5 116 іецоУаі бек Уаї біу Су5 Тис Су Маї Те о Бро І1є Уаї і 120 125
Ні нія Ма) Аїа 136 «х18а5 3 «211» 163 «2172» ВТ «135 Номе зарієнх «рах З
Мес Тс Мя1 буа Те Сей НІ б1у Ре Азія Меї о Маї гук Тугб Гео Тео 1 5 їв 15 ем бег І1є сен б5іу Ген АТа Рбе їец бег бій дід Аза Аїа Агро 1 уз 2 25 39 11 ргРо бує уаї б3у ні Те о РНе Ре біп уз Бго бі бер Сук РКО за ав 35
Бго узі Рео о3у бу бегб Мет іуз цс) Азрої3е б1у Кзв 1318 Ази біс зе 5 Ба деп обівй Або ущі бес Меб бегодсв Ап Т316 с3й бек Агро бек Те Зег 78 75 58 го ТгроАБі; Тут Таб оУуаї Тве о ТеРродер о Бго Аз Агв Тує го 5еб 510 85 за а5 маї Уаї б3п Аза 1 су Аг Ап оїен о біу Суб Ріє Абп АЇа був пі 182 185 В
Еж5 «10 А5р Ще ее Межт АБ Зек Ма) Ре фе бій бай ССЗ Таб тео 115 122 125
Уаї чаї Аве Аги фу Ків біп о б1їу Суз бег Маї бепорМне ої Сей Ці 130 135 ї48 ув Маї іецоуаї Тиг оМаї б1у сСуз Те Суб Уаї Тигорко Мві 112 Ні 145 1589 155 168
НІ5 маї бів «218» 18 «2112 133 «2123: РТ «2135 Нолю 5арієпе «дай» 18
Агв о іуз Те бго ух Маї Оу Ні Те вбпе Ре ми 1у5 Рео біз бегб і 5 18 15
Су Рро Рго Маз Рго біу 01у бес Мет уз геб о А5роГ1е 01у Тіє тів 28 25 за
Аз» обі А5а біп Аг Уаї бе Меї бек Агро д5п 118 біб бек Агробег 35 4 45
Твеб о бег вро Тер Ап о Туг ТвбоМаії Те Тер АзроРго Азп о Аби Туг Вро ще ва
Зег обі Маї Ууаії бів Аїа іп оСуз Агро Авпоівеб біу Суб Т1в АБп дів «5 7а 75 ва бів біу бух ПІ А5рот1е бе Ме Аз Зеб Маї Рго тів бій бу Ці 85 за 95
ТрпеоівноУаї Уаї Аге Аг губ Нів біп Сіу Су5 его Мві бег Ре біп 120 185 КЗ іен бій ух Маії іви Мві ТігоУаї бту бух Те Суз Уві Те Рго Уаї 115 126 175
Іів нів Нів уаї біп 138 «2105 11 «211 118 «212» РВТ «213» Штучне Послідовність хв «221: джерела «2233 /приміткає"Опис Штучної Послідовності: Синтетичний полічеатид" «40о» 11 біп уаі Тгоівгч Абе обі бег Біу Бго Аїа ів о маї їу5 Рго Те бій 1 5 16 15
Те ої Тг бен Таб о Су5 Таб оМаі бек обіу Рве бБегоїей 5Зег діа Туг 20 25 за
Бве о уаї д5п о Трроїів Дефо бій Рго бго біу ух АтТа їв СІ Тгр о Геи 35 за 45
Аза Мет Те Тер о б1у Азробіу туз ТЗе Уа) Тує Абпобег АІЗ Бен ув 58 55 ва
Ззег Аг обео Те ЇЗе зве оБуз Дер оТвб бБебобув Аа бій Ма) уаї ей 55 78 75 ва
ТигоМеї Таб од" Мет Азрорео Маї дер Тве Аза Те Тубє Тує Су віа 85 З 95
Чіу Ар обіу Тут оТук Рго Туг дія Меї Ар Або Тер о біу біл о біУу бек 1800 185 а
Бей уаї Твге мві бе бе
«тах» 12 «2115 117 «212» БКТ «213: Штучна Послідовність «220х «и2ї5 джерело «225» гприміткає"Опис штучної Поєлідовності: синтетичний паазлеттид" «авоз 12
Азр фТ1іє Ма1ї Ме Те бій бек ?бго А5робеб зе; бее Уа! бек ги с1у 1 5 18 15 біз Аг о Аїя Тс 112 Депо Суб Аги дів Зег бух беб Уаі дер бес Тує 2а 25 з0 біу деп беє Рпє Ме із Тер оТуб біп о біп бу5 го біу 5Ій бро Рео 35 за 45
Був гей без ї19 Туєоїец АтТа бегодзп Геу бід беє біу Уаї Рго А5р
Б 55 2-8
Абр Бе бек обіу 5ег о б1у бЗеб біу Те Ар вве Таб оїєо Твб о Тїе бек та т на
Зе» їв 10 АтТа бі АзромМаї із Меі Тує Ту Су Іа бій Аби Дер 85 зе. 95 піч дврорго Ар оТне вне оту бі сту Те бух Уві біб їте Гуз аге зав 185 це «х1а» 13 х»1ї5 118 «2125 БЕТ «2153 Штучна Послідовність «22205 «кві» джерело «723» /примілках"Опис Штучної Послідовності: Синтетичний пеамнтгяд" «4085 13 бій маї Те оіез йев б1ц бес біу Рго дїд їеч Уаї їуя Бго ТВг о біп 1 Б 19 15
Япбобев Таб во Таб Су Тебе Уаї ев о біу РБе бебоїє) беб Аіа Тує 2а 35 за зе» Маї Або Тер оЇзе Агро осіп обро Рео О1у Гуз Аза гей біш Тгероїеу 35 48 45
Аза меж Г1е трробіу дер сту Гуз ІТе Мзі Тур дей бек Ата Геи Гуз 5 БА
Звб вед Бей Те Ті бек орув ДароТвае чего фуз Ап ові Уяі Мах Мем 55 78 75 їа
Те Мет Те Авп Мет АзроБеро Маї А5р о Тве Аза Твб оТує Ту Су А18 85 зе 95 біу др біу Туб Тує Рго Туб Аіїа Меї Азр А5и Тер обіу біп о біу 5ег зав 195 16 іец Мах Те ма) беб бег «219» 14 «2135 112 «7125 РЕТ «213» Штучна Послідовність «220: «2215 джерело «23 уприміткає"Опис феучної послідовноктї: Симтетичний поліпеттид" хана» 14
Азр Т1е Уві бе) Те сій беб обро АзробЗебр огец бек Уві бек Геи С1у 1 5 18 15 біз АР Аза Те Т1е Азп Су» гри Аза Бек оБуз беб Узі АБробеє Тук га 35 за у А5и бег Ріе Ме Кіз Тер отТук бій 51 Зуз Бео бі Мі го рго за 45
Гуз ем їеци Т1іе Ту Ген Ата бегоАзп без 3) бебооху Уаї Рго Авр а 55 ва
Ага Бе бего обі бег біу бег біу Те Ар о ре Тигоїец ТВе о Іїе 5ег 78 75 за бев івен бій Азїа зі А5зр о Мві іа Уваї Тук Туг Суз ія бІп деп деп 85 ча з5 аз А5рорго Агш Те Бпе (3у С1у б1у Твгб зум МУаї б32м 138 Гуз дер 158 125 лояае к«71а» 15 «8112 5 «2133. РАТ «213» Штучна Послідовність «72ах «22х» джерело «2255 /примітка-"Опис Штучної Послідовності: Синтетичний пептид" «деа» 15
Аів Туг бек уаї Ази и 5 «2105 15 «11» 16 «2195» РЕТ «713х Штучна Послідовність «2202 2213 джерело «223У /приміткає"йпиє Вучної послідовності: Сявтетичний пептид" хара» 16
Мет Хіе Тер пі Азросіу вуз Сів Уаії Ту Ап о бегоАта Кен був Бек 1 5 16 ї5 «е1а5 У «1ї» ії «217» ВТ «213» Штучна Послідовність «2205 «221» джерело «223» гпримітках "Опис Штучної ПпПеслідовності: Симтетичний пептид" «аа» 17
Азродіу Тує туго Рго Тує Ача Мет Ар Ази 1 5 12 «210 їЯ «211» 15 «2152 ТКТ «2135 Штучна Послідовністк «220» «721» джерело «2252» /примілкан"Опис штучної Поспідовності: Синтетичний пептид" «а0оз 18
АгЕ Аівз бек о1уз бБеє Уві А5робег Тує БІу Або бег Ре Меї Ні5 3 5 16 15 «2193 13 «21157 «212» РЕ «713» Штучна Послідовність «228» 52215. джерела «223» /приміткаеє"Ппиє Штучної Послідовностії Синтетичний пептид" «да» 15
Мем дів 5еге Ап ів 610 5егс 1 5 «а» 2а «хіх З х212» БЕТ «2132 Штучна Послідовність «22ох «221» джерело «223» гпримітках"Опис Штучної Послідовності: симтетичний пептид" «403» 30 біп бій Абп Ав бім ро вра АСЕ ТВ 1 5 «21085 1
«21їх 445 52155 БКТ «213» Штучна Послідовність «га» «221» джерелі «2235 гприміткає"Зпис Штучної Послідовності: Симтетичний тполіпецтид" «4002 51 бій Уаі Тргоцез аев о Сіц бесобіу Рго дів зве Уві їуз Бго ТВб біп 1 5 10 15
Тпгобев ТБ Бей Твг су ТВгоМаї пев о біу Бе бек оїєо бег Аза тує 2 25 зав бег Маі АбпоТер Ізїе Аеробіпобго Рго БІу гує Аа ївеоп бій Трротеу 35 за 45
Аїа Мет ІТе Трробіу Ар бІ1у їу5 ІТте Ммаі Туг Ап бек АтТа Гей уз 50 55 БА веб Ар ви Тк о І1е бегогує Дар Таке бек бух Ап піп маії Маї бе 7а 75 на
Ти: Меї Тр деп Мек Ахробеко Ма! АброТНб Аза Те Тує Тугб Суз дів зе 25
Сіу Ар оту Туг Тує Рго Туг Аїа Меї Абр Ап Тер обіу бі біу 5ег а 185 118 ів Маї Тб уаї бег обер А18З бег ТП Був П3у Бго 5Зег уві Рне Рро 115 128 125
Ген Ата Рго Суз бе дрвобве Те о5еб 51) беє Те Аха Аза гей о1у 130 135 140 бує сем уУаї іуз А5ротТук Ре Рго ба бго Маї Те Ма| бек Тгр о Дяйп 145 158 155 1650
Зег сіу Ата бе Те оЗес б3іу Маі Ні ТНе Ре Рго діа Ма) ва 51 155 176 175
Зег беб ПКУ Гей Туєб Бей гез Зебс баб уві Маї Таб оуві Рро беб беб 182 185 ї1з38
Чеб осо соіу Те бух Таб оТує Таб обух АБ Маї вер Ні Сух бго бек 195 228 255
Ап ОТиб уз Маі АБрогує Акроуаї бій бер о гу5 Тук біу Рго Рго Суб 216 215 279
Ргса Рро бух Рго Аза Бго 5ії Ре ів біу біу го 5єг Мзі не Ген 275 230 225 248
Впе рго Рго іуз Рей Гу АБроТаг іо Меб 11е Зве Аве Тк оРБго б 25и 255
Уаї Тиг Сух Маї уві Маї Абвр Уаї бен бій 30 Д5роРго 016 Уві бІй 288 255 278
Рне Аза Тер о Туг Узі Азросіу Маії бі Маї Ні А5по дів Бу5 Тр оїуБ 275 ва 285
Рго Аге біб 510 бій Бе Абп о бег ТИб Тугб АгЕ Уві Уаїі бБег Уві Теги 230 95 БІ:
Твеоуаї Бей Ні аїп о А5роТрр Мен ода Сіу Буз 410 Туг о гуз Сує ГЦуя за5 зів 315 128 чзі Зее Або Куз б3у Ген бро Зв беб о (16 525 Гу Те 118 Зоб о ту5 375 з3е 335
Аїа їує Пп1у біп о бго Або бій Рго біпоуа1і Тує Тнгоїєо Рео Рго Бе за 345 з5а бів вів біб МекоТагє уз Ап обіп Маї бБегобей Тер оСуб Ге мі Гу зей 3655
Сіу Ррє Туг Рго беб А5р Те Аїа Мві бі Тер біз беб Аза 01у біп 370 375 зав
Рга віч Ап Аза ТуЄ уз ТВгеоТве Бго Бо Уаї |з А5зро5ег дер Б1у 385 330 5 488 зер РНе Ре ївем Тук зес Абе оЇви Те оМа1і Або ув Беб Абро Тер О1п ча: мо 315 сів біу д5п Маї РНе бег Суб бЗег уві Меї Мі5 бій Аїд Тен Нія Аби 428 425 аза
Ні Туг Те бій іу5 Зег грец обеб ген о беб гГво біу їу5
Ах 446. 445 «2105 22 «2115 218 «17» РА «713» Штучна Послідовність х2202 «281 джерело «223» /приміткає"Знис Штучної Послідовностії Сантетичний поліпептид" «ой» 23 дер Ї1їе Маії бец Тнге обіп бБегобро Д5розес сец о бегб Уві Бегоїви біу 1 5 16 15 віч Аве Аза Те Т1є Азп Су РЕ Аза баг обу бегоуз1і А5робев Тує 20 35 за с1у А5побег о Рпе меж Кіз ТероТуб біл б1п 1ує Реро біу 1 Бго Рго 35 зла 45
Муз цер о бец Ті Тугб овен АтТа беб о д5п гей си бе осіу Маї Рго Авр а
АгЕ РНе бек біу Бе бІу бег бі Те Ар Ре Тег оіїец ТВр ої11ів беє 55 78 75 ве бек іє 51п АІа бін Ар Уаї Аїа мМаї Ту Тук Сув бій бій Аби Азп 5 зе 5 біз азр о Рео Ас Твге Ре оту Бі біу Те оіуз Маї 510 І1е уз йрЕ о 185 це
Тпе Уаї дїа Аза Бго бек о Уаї Бе Іїе Бе Рго бро бег о Абр біши бій 115 150 125 са іїув бек біу Тае Аїіз бег уві Маї Суб Мей Гей Ап Ап ре Ту 138 135 11460
Рго Агро біз діа зу Уаї біп Тер іуз Маї Або деп Аза бцец бій 5ег 145 158 155 160 сіу дво чає бпіп обі) Зеє Ма) Тіб біш біп др обеб о їу5 дб5робее Тве 385 178 175
Ту баг ме бБее обеєб Те фей Те єв бБеб оКув Аїа дзроТує бій Гу 180 185 138
Ні іу5 Ма) тує дія Суб бо Уаї Те Ні 531 біу сво бек бек бро 135 зве 295 чаї Тнг обу бек Ре Ап Агро біу бін Сук 218 215 «210х 23 «11» 445 «717» РТ «713» нучна Послідовність «229» «2213 джерело «фах приміткає" бпис Вручної Послідовнеєтії Симтетичний поліпептид" ка» зх біп чаї Тег оіеа Агре біб бБег Біу Бго Аза о іец Мазі їу5 Бео Те б 1 5 16 15
Тиб їв Те фецсТвг Суз Те оуві бек о біУ Ре бег о їец бер дія тує 2а 25 за беб уаї Абзп Тер Тіе Аев о біп бго Рго Б01у дуб іа їв бій Тер 1 є зла 45
Аів Мет Ге Тбробіу Азросіу ув 112 Маї Туб Азп бек ДІз ісц 1у5 55 во
Чев Асногеб Таб Т3е бе оруз АзроТие Берг оїув5 деп бій Уаз Уа! їв) 5 78 75 ва
Те Ме о Твае Ап Меї дер Рго Уаї Ар Те Аза Те Туг Ту Сує АТа 85 че з5 с1у Ар біу Туг Тут бго Тук Дія Меї Ар Авп Тер о біу б1й біу беб 190 185 119 їеи мМаї Твгомаі бебє бек Аза беб Тиб оГуз бім рез бев о уаії Рпе бго 122 125 іїеч Аіа Вро Суз 5ег оАгв о 5ег Те бер обі) беб Те Аза ДІз ген б1у ї13а ї35 11
Су іа Маї ув А5роТує Бе оРго біб Бро Уаї Таб Маї 5зеб Тер Аби 145 156 155 168 без бім діз іс) Те бек біу Уаї Ні Тае Рпе без Аза Маї ви бій 165 173 175 баг бас біу Ме Ту его Без Хегобав Уді Уаі Твгомаї бро баб обеє 156 185 139 чевоівеи бір Туз Те оТує Таб обуз А5оп Уаї вер НІВ Гуз Бго 5ег
І195 2аг 285 деп Тис уз Маї А5роїу5 Аг Уаї Сі зЗеб Гу Тугб ату Риб Рго Суз 216 215 о
Бго Рго Суз Рго Аза бго ої ве ібн б1у біу Рго бес Ма1ї Не еу 225 230 235 з48
Ре го го фу Ргре Гуз Бр Таб оігци Меб їі бек Авф ТБ Вго б 245 258 255 маї Тис Сух о уаії ма1 Маї Аврор маї бев б)пй са Азробро о15 май
250 285 278
Ре Ап о Тгротуг Уа дер с1у Уаї бій маї нів деп Аза ув Таб Гуз 275 28о з85
Рео Ав бід бій бій Рпе Доп о беб Те о Тує Аве Уві Уві бегоМаї Кен 9 295 зад
Тие о узї ке нів біп Азр Тер (ей Ази Ту був бін Тує ух Суз ух за5 ще зі» 320 маї бЗег йб5п уз с1у Гео рго бегочеє 116 ч3Зй Гу5 Те їі1е бес (ух 325 зЗ3о 335
Аіа бух СТу піп Рго Аге бі Реє біп Маї Туб Таб о їеу Рро Рго беб зо З45 358 сп бі біз Меб Те Гу Аа біп Узі Зег без Тер о Сує Геу Уаї Гу 355 зво КІ біу Рпе Туг Бго бег дер 116 віз Уа) бій Тероб1і0 Зеб Або бу бій 378 375 зве
Рго щі Абп о Аєп Ту їу5 ТйгоТвг Рго Рго Уаї ів Ар Хег о Авробіу 385 за 395 зав бег Бпе Рпе Сей Туб бек Аве Тен Тис уз) Азрогу бек Авд Тгробіп 4за5 аа 415 біз піу Ап оуаї Ре бер Сує бБег Уві Меї Ні Сі Аїв іез Ні Ап аго 435 азВ
Ні Тус Трб б1п оіуз чеб Бей бегоїєю Бер о іечз біу гу 435 чав ад «214» 24 «21125 218 «2122 РЕТ «213У Штучна Послідовність «а»
«іх джерело «22В» /примічкат" опис Штучної Поспудовностіс Синтетичний поліпептид" «ваз 24
Азро іі Маї Ме Таб С)й бек обо Або обеб ме» чего Уаї звгоїеги б51у 1 5 16 15 біб АгБ Аїз Тс о Гів Авп Суб Ар оАза бЗег огу5 бегоУа1і Ар обег Туг а 25 за сіу Ахо бек Впе Меї ні Тер оТує бій бій Бу5 Рео дім бій рРгео Бро 4 35
Ку5 їги іец їде Тує Гени Аїа ес Ап оїен біз беб біу Уаї Ро д5р 5о 5 ва
АгЕ Ре бег о б1у бек 01у Бегобіу Таб оА5робве ТНе ів Те Те 5ег 55 7а 78 за бар оівч біп Аза бо АзроМзі Діа Маї Тук Ту Суз біп 51 дев еп 25 за Б бій А5роРго Агро Те о бпе Сіу біу біу ТИР іуя Уаї бій ї1е Гуз Абе тва 135 ле
Тае Уаї Аза А1з рго бек оУаї Бе їїе бпе Рго Рго бер Авробін бій 115 150 125 іеч іув бек біу Тпе Аїз бегоулі Маї Суб Мей Се Ап АБИ бе Тує 138 135 140
Бго АгЕ БІ: Аїд гук уаї біп Тер о гуз Маїі АзроАсп Аа ви біп 5ег 158 155 162 5іу Аза бве піп сій беб Маї Те о біїш Сій Азробек о їуз Дер беб Те 355 178 175
Тур бБег обви бек о бБеб Твг о бед Тйгоіїви обегбобуб5 Аза Ар оТує ІН ух 182 185 130
Ні цу Маї Тут Аза Суз бі Мазі Те Ніз біп о біу Бей бер берв рео 195 298 205
Ууаї Тиб уз бе реа Ай Асрросіу біз су 210 215 «718» 25 «211» 106 «2125 РТ «2133 Штучна Лослідовність «га» х?иї» джерепо «223» /примітка-"Опис Штучної Послідовності: Синтетичний поліпептидту «дво» 25
Авроііїє Уаї їси Таб біл бер о Рро Аіа бвгоіви А1а Узі 5еб Ге 51у 1 5 16 15 бій АгЕ АЇїз Тнго1іе бег о Су5 Аг одіз его біп Зеє Уа1! бек Тае 5ег а 25 за бес Туг бек тує Меї доп Тер Тує біп бій Таб бео щіу 51 Реб Бео з 48 25
Куб сей беб Те Гуз Тує Аїз Зее Депо оїен біз беб 6ІУ 112 Рго Дія 58
Аге Ре бег б1іу 5егоб1іу 5егобім Те А5робНе ТНг ої Авп о Їхе НІВ 85 та 78 зо
Бго Уаї біб біц б1ім Азр о Тнпго дія Те Ту Туг Сув бій нів беб Трр 85 че З сти Т1іє Рго Тує Тебе овбве біу С1іу бту Тре тва та5 «210» 26 «211» 153 «2125 РЕТ «213з Штучна Послідовність «228»
«іх джерело «22В» /примічкат" опис Штучної Поспудовностіс Синтетичний поліпептид" «ваз 25 біп о Маї Тб оЗен Муз бій 5вбобіу Рео ої ле меш блп бра бек вій 1 5 16 15
Тпг о ієм бебі) Те оСуб бег Ра бес б1іу Ра беб оце Беб Таб бег а 25 за вьрв оМек біу Уаї аїу Тер 11е дев бій го бег о с1у їу5 бІу бен бін 4 35
Тероіеи Аїв о Нія Тіє Тер Тер оАзроАзр о Маї 15 дев Тує Азй Рго ДІВ. 5о а Бе цем Пух бег Агро оїсу ТНк Т1е бБегоїуз АвроТвг бер обег о Зевє біп Уаї 55 7а 78 за
Ре мен обуз Хі Аза бег о МЗІ Дер Те Аза Азр о Таг Аїз о ТвВРбОТує Туб за ЗБ
Суз Аїв Аге 118 біу Те Ап оТус біу Туг Авзробіу гівно Рае Азр Тугб тва 135 ле
Тер б1у їй с(1у Так оТвгб овес Твг? о Уаії зеб 5ег 115 150 «185 27 «х1іх 714 х212» БЕ «2132 Штучна Послідовність «22ох «221» джерело «223» /примітках"Опис Штучної Послідовності: симтетичний поліпептид" «4085 27
Азрот1іє Мві Меб Те с)й бек біб Ар обер зей вза Ма! бек оїги с1у 1 5 16 35 см; АгЕ АЇїз Тнг о Тіє АвпоСуз Агд Аза Зег осів бер Ма) бек Те зЗег
28 25 за бегоТує беє Туєс Ме Ав Тер Туб бій 01п іш Бро біу піп Вго го за 45
Ку мем оіви Ше ух Тук АтТа бек деп Гей спМіа беб о сіу Маії Рго дер
БЕ 55 еа
Аг оРНе бегбооїу Бе біу бебобіу Ти АброРБе Те зви Твг 11 бек 7а 75 за бег ієц біз Аа бій Ар о уаї Аїа Маї Туб Туг Сує біп Нів бег Тер 55 зо 95 біз Хіе Рго Тугб Таб РБе сіу Біб біу Те Буз маї біз 112 ув йрЕ 126 185 ІВ
Тие Маї Аїа АтТа Рео бЯее Уаї ав Гі РНе Рео Рео бее Азросб1й б1п 315 122 325
Мем їу5 бек с1у Тнг АтТа бег оУаї Уаї Сух бец іс Аба Ап Ре Тує 130 135 148 го Авв ази Аїа іуз мзі біп ТгРроїух Уаії АзроА5п Аїз іс) іп бе 4145 150 155 166 с1у А5побег 51п бін бек Уяі Таб обі б1п Авробее цуя А5робес Тпг їст 178 175
Тує бе Бей о бес бер Тк без Тпг огбеи Зеб» Гу Атя Дер о Тує о бхи Гу 188 1855 135
Ні їу5 Уаї Туг Аза Суз бі Маї Те Ні біп біу геч бер бер Рро 195 728 205
Ууаї Тиг уз бег РНе Ап Аге б1у бій Су із 215 «»18» 78 х2115 453
«212х РТ «215» Шучна Послідовність «205 «221» джерело «223У /примітукає"дпиє В учноє Послідовностії Синтетичний поліпептид" «аа» я біо Узі біз зе) узі біб беб С1у Рго А1З фец Маі ру Рео Таб ФІ 1 5 19 15
Тиб без Те бе Те о Суз Те Ре бве бім вве беб оїво беє Таб беб 2а 35 за
Азр Мей бБіу маї біу Тер Ті Абробія Рро Рго біу цуз Аїа їви Бі) 35 да 45
Тгроієи Аза ніх Іії2 Тер оТер Ар о Азромаї ух Аве о Туг Авп о Рго дів ва
Меч озцує бек ойгрв ви ТпроТіє бебе о гуз АвроТВе бев о їуз АБпобів Уаї 55 78 75 та
Уаї ей Тре Меб Тре о Авп Ме Ар бго Маі АвзроТбг Аза Те о Тує Туб 85 зе 5
Су діа дгр о ї12е с(1у Тиг деп оТує біу Туєб А5роА13 їси Ре Авр Тує аа та5 мае
Тер о піу біп біу Таб Гей уві Те Удлі бегє бек АТа ес Тпгогух 1У 115 128 325
Бго бег уві Ра рсо Ген Аза бго 5ег обер іу5 зер Тк бек о біу біу 132 їх5 ї48
Те Аа АТа іви с1у су ес УМаї 1у5 Азр о Тує Ре Рго 510 Рео Удї 145 ї5и 155 168
Тиг оМаї заго Тер А5п озев О1у А1в їв ТК бек біу Уві нів ТНеОорне 155 170 5
Рга Аів Уаї бе бій о5есб обегобіу бен оТук о беб |в 5ес 5ег Узі Маї о 185 ав
Те Узі Рго бегобве зе РГви біу Те обіп ТВгоТуг Їте Суз Аза Маї 135 220 285 деп ОНія фу Рко бег деп ТОИгоїує Уаї Ар гу Гуз Ма1і СІ0 Рго 1 у5 216 215 228
Бетб о сує Аврогуз Таб оні5 ТвбосСуз о Вго Рео Су Рго Аза Рро бін Гей 225 230 8135 246
ЕГєш біу біу Рго бве Уаї Бае івец РБе Рго Рго | ме Вро ув АзроТвге 2А5 258 255
Мем Меж Гі бе Абе ТВгорРго біз Уаї Те Суб ма! Уві Маї Абр Уаї 250 2655 278 бег Ні біб Ар Рго б1ї Маї Гу Ре Ап о Тер оТуг Уа) д5робію Уві 475 28а 285 бій муаї Ні Асп Аїа Гу Тк оїу5 Рго Дря біз бій біп Тук Ап 5ег 290 295 зав
Тае тус агвомаї Уві бек Маї Кен Тве Уа) гео Ні бів Др Тер бен за5 зів 315 326
А5позіу бу бім Тут ух Суб (у Маї бек Авп і ув Аза Гей бБго Дія 325 зза 335
Вго Ї1е 010 був Те Те беб уз Аїз уз бі біп Ро Абе ти Рго ща 345 56 бів Уаї Ту Те Ген Рго Рго беб Абк бі а3и Меб Те Гу Ава б за зва 365
Уаї бек лез Те бух бен узі (ух біу РНе Тут бгро бек одер о 11е Аа зта 375 зо
Уаї бін Тер 510 бер Абп бу біп о бго 3 Аза Авп о Туб був Таб Твг
385 зав 335 дав
Бго Бго узі бе) АБр о швк дер Сіу бек Ре ре сен Тув бек Гуз Гей 45 ав 415
Те Маї яр оїуз бес Аби Тер біб біп бСіу Ази Уві РБе о беє Су беб 420 425 в
Уа1 Мет Ні біз діа Ген Ні Ази Ні Тує Те біп бух зве ви бер 435 з48 445 ем бег Рго б1іу ух 59 «У1а» 25 «115 МІ «2122 РЕТ «2153 Штучна Послідповність «іга «айї» джерело «273» /примітках"Описо Штучнаої Послідовності: Синтетичний псліпвитид" «авозх 25
Азротіє Маї Ме Те б)п о ЄСве Бго А5робее зви Аза Уаї Зеб гео у 1 5 16 15 сій Аге дів Тпг 118 Депо Суз АгЕ Дів Зег бій бе о Ма) бек Те 5ег 2а 25 зо
Заг оТуг бек тує Мей Азп ТгероТує бій біп бух го біу Бій го Рро 35 ав 35
Гуз їв мез Те бух Тук Аза бр Ази Ге 5із бег пХу Уві го Ар
Б 58 Ба
Аге Ре бек ч1іу бес бІу бег бБіу Те А5ровве Те оїец ТЕ о їзе чЗег 55 78 75 58 зер оіву біб одтТа бій Азрома!ї дів Ма Тут Тут Суз бі нії 5еб Тер за а5 бі Хі Рго тук оте Ре б1у бів біу Те фу Ма! ато їв гук 198 135 ТВ ка» за «2115 123 «212» ЕТ «2132 Штучна Послідовність «2202 х221х джерело «23» г/приміткає" Опис Штучної Послідовності: Синтетичний поліпептид" «4002 за біо уві 5Іп їецоУаї Сі1ц бебс о біу Рго Аа їец Уді вуз Бго Тагобіп 1 5 19 15
Те бе о Тве бе ТБге сСу5 ТВе Ре бве біу Рае о бегоїєб бег Теве бе го 25 за
Ар Мет біу маї бу Тер Гі Аг бів Рео Рго с1у їу5 Іа Бе бін 4а 45
Терієц Аїа ів Ії ТероТер А5роАб5ромаї Гу Абе Тук А5п Вго діа
Ба
Меч Зцує бег оАрЕ Гео ТВг о Т11є бБебо гук дар Таб о бЗегоїуб5 дп бій Уаї 55 7а 75 58
Уаї сео Те Ме Тиб Ап Меб Азрорго Маї АвроТвг Аза Тве Туб Тук 85 зе 25
Суб Аїа дго 112 б5іу Тк деп о Туб б1у Туг Ар одія іво Реве Авр Тує а 185 це
Трросіу біз сту Ти Се) мзі Твг о Маї Бек бек 315 128 «пох 31 «211» 12 «7125 РИТ «913» Штучна Послідовність
«2ах «221» джерела 4795» /примітка-"Опис Штучної Послідовності: Синтетичний пептид" «два» 31 біу Рнв бек оїви беє Твг о бЗеб дкр Мет бсіу Маї с1іу і 5 16 «2105 32 х211х 17 «2175 РВТ «2135 Штучна Послідовність «2282 «221: джерело «2235 /приміткає"Онис Штучної Послідовностії Сяктетичний пептид" «ар» ЗІ
Аїа Ні Г1е Тер Тер Ар о АвроУаї уз Аго Тус Депо Рго АтТа Гец уз 1 5 16 15
Баг «218: 33 «2135 15 «7125 РТ «213» Штучна Послідовність «7205 «2312. джерело «2у3з /приміткат"пбтис фуучної послідовності: Гинтетичний нептид" кара» За
Аза АгЕ І1е ЗІіу Те АБп о Тубс біу Тубєб Азр Аза без РНе Авр Тугє в 5 18 15 «21аз ЗА к21ї» 15 2152 РКТ. «213» Штучна Лослідовність «га» «221» джерело «223» гаримітках"Опис Штучної Послідовностії Синтетичний пептид"
«ра» ла
АгЕ А1а бег опцій бегоМаї бе оТЬгобес Зеб Тур бе Туб Мет Ап 1 5 15 15 «2105 35 «21157 «2125 КТ «2133 Штучна Послідовність «ага» «и23» джерело «2235 /примітках"Опис Штучної Поблідовності: Синтетичний пептид" «00: 35
Ту» Аів баб о Аеп ем Ці бе 1 5 х2132 ЗЕ «21135 З «212 РВТ «2135 Штучна Послідовність «?уВх «221» джерело «2932 /приміткає"йпик Штучної Послідовностії Синтетичний пептид" «вва». зб біо0 Нія бек отТер ази 11є Ре Тує Тег 1 5 «105. 37 «211» 123 «7212» ВЕТ х2132 Штучна Послідовність «220: «ех джерело «223» іприміткає"Опис Штучнаї Послідовності: Синтетичний поліпептид" «аа: 37
О10 Маї бій безпо уві бій бе о біу бі1у б1у сез Маїі біп Бго с01у АгЕ 1 5 12 35 бегоівеноасроїву бер оСсуз Ата с Аїа бве біу Ре ТігоРБе дор вер Тугбс 2а 25 за діа Межт Ні Тер уа1і Аг біб дів Бо біу ух б1у їєм 516 ТгроУаї 35 4о 45
Бер 51у Тіе Азп о Тер Ази Бер о біу біу Бе о3у Туг Аза А5р бер Мді 55 о
Гуз 51у Аге Ре Тк їТв бебодев АзроА5п Аіїв уз йвп бек овги Тук «5 7а 75 во
Мец пів меж дхп о бегоїео Аги о Аїза ПЗ Аяр о тае А1З іє Тує Тув Сух я зе 5
Аїд АрЕ Абр о Меї біу Сіу Ре обіу біб Ре Тук Тер А5п Ре біб Те 1680 195 в
Тер б1у Ага 5іУу ТНе ген Уаї Таб Уві ес 5ег ті 128 «1» за «2115 188 «2122 РЕТ «213х Штучна Послідовність «222» «хаї» джерело «ай» /ариміткає"дпис Штучної Послідсвності: Синтетичний поліпептид" «а0ох ЗВ сід їі Уві Ме Таб бій 5ег о Рго діа Те Гей беговбей зег бро 01у 1 5 їв 15 б30 АгЕ АЇЗ Тгогеб бек о Суз Аге АТа 5ег бів бег Ма) АвЕ бебоТуг 2а 25 за іван йіа Тер Тук аїлобіп бує Рго біу біп Аіа Рго АсЕ Ге ів їв
За 45 35
Туг АзроАїв бегодо Агродія Таб осіб 16 Рео Аза Аср о бпе бек біу о баг бБіу веб біу Таг одзро Ве Те оїен Тк о ї1е 5еб о беє іс) бів рео 655 7а 7 В сій А5р Ре АтТа Маї Тує Тубо бух бів біп Аве ЧебсоаАви Теробго Рро 85 зв з5
Аіа Те Ре пу Яїу 01у Тнгоїуз Уаї Сі І1в гу та 155 «212» 39 «»1ї5 123 217» КТ «2132 Штучна Послідовність «2255 «221» джервло «223» /приміткан"бОпис Штучзної Послідсвності: Синтетичний поліпептид" «4раз 33 сій Ууаї бів ївея Ууаї С)й бе біу Су 1іу зез уаї бій Рго су АгЕ 1 5 12 15
Зев без Асв о іви бегб осСуз Аза Аїз бве біу Ре Теє Ре Ар АвроТує 2а 25 за
Аіа меж ні Тер оуаі Аг б1іп Дів Рго бІу Гуз бу ей би ТероМаї 35 ча 45 беб б1у Тіє Абп Тер бек обес о біу б1у Ті б1у Тує Аа Азробеє Уаї 50 55 Ба
Ту Біу Акр Ре Тис 112 бег Аг Ар Ап Аза уз А5побего бен Туб
Ба 7В 75 на
Гей бів Меб Аєпобеє Гей Агро діа бів Ар о ТргоАТа гей Тує Туг Су зо 25
Аїа Аге др ті о1у 61м Ре сту бі Ре Туг Тер дея Ре оту 1 ей ма 735 пе
Тер іу Ага о біу Тс Ге Мві Те УаїЇ бек бек 315 128
«и1ах- да «2115 5 «2125 РТ «2135 Штучна Послідовність «па» «722ї» джерепо «223 Лприміткає"Онис Штучної послідовності: синтетичний пептид" «звах за
Ав Туг дза Меї НІ5 і 5 «219: 31 «211» 17 «7175 РАТ «213» Штучна Послідовністі» «2202 к22їх джерела х?г23» гприміткає"Ппиє Втучної Послідовностії Симтетичний нептид" «вах 41 біу Тіе д5ап Трродев бек о біу біу ТзЗе біу Туб Дія АБроБек Уаї Гуз 1 5 10 15 5іуУ «2-оз 42 «211» 14 «212х РВТ «7513» Штучна Послідовність 72 «2213 джерело «223» /приміткає"Онис Штучної Послідовності: Синтетичний пептид" «Ва» АХ дер мех зу фу гне б1у о1Ь о Рвйе Тує Тер Азп РНе сту ев 1 5 18 «212» 43 «2115 17
«212х РТ
«215» Шучна Послідовність
«220
«221» джерело
«223» /приміткає"дпис учної послідовності бив етичний пептид"
«аа» Ах біу Т12е Азп о ТеРробеєе бек О1у Б1у їїе б1іу Туб Аїа АвробБеє Уаї Гуз
1 5 195 15 сіу
«210з 434
«211» 14
«212» РАТ
«213» Штучна Послідовність
«2205
«221 джерело
«223» /примуіткає "Опис фтучної Лослідовності: Синтетичний пептид"
кара» 44 дзр 112 б1у БІ Ре су 010 Ббе Тусб Тер Аза Ре біу ви
1 5 18
«жита» 45
«211» 11
«125 РКТ
«2135 Штучінв Послідовність
«вга»
«Т21ї» джерело хаач» /примітках'Чпис Штучної Послідовності: Синтетичний пептид"
«авоз 45 др о Аів бЗвег біп Беб Маї Абвобеє Туго їв Аїа
1 5 19
2185 4Є
«2113 7
«212» РНТ
«213» Штучна Послідовність
«2285»
«221» джерело «223» примітках "Опис Штучної Посплідовності: Синтетичний пептид" «оох 5
Азр о Аїв баг Авп Аг Аза Те 1 5 «210: 47 «21113: 12 «212х РВТ «213» Штучна Послудовність х228» 2217 джерела «223 /приміткає"Плиє Штучної Послідовностії Синтетичний пептид" «вва» А бів Біб Агро бее Ази Тер оРро Рго діа Те 1 Б 18 «г1аз 48 «21ї» 126 «2125 РиТ «213» В учна Послідовність «220: «221» джерело «2235 Тприміткає"Ппис Штучної Послідовності: Симтетичний ноліпелтид" «вро» 48 біпоузі бів без ма1ї сій бе біу Аза б1ц Маі Гуз гу Рро с1у д1з 3 5 10 15 бег Маї ух Ууаії бек су5 ух йіа баб біу Туг Тнг оре ТВробес Тук 2а 25 За дерої1є Або о ТтТероуУві Асробіп А1а Твб о бБіу біб бтіу без біз Тер Меє ча а5 су Тер оМеї Ап ого Аєр бес біу У) Т1е Агш Туг Ада біп ув пе да бів 5іу Ася Ууаї Тис Меб ТигодРеЕ деп ТК о беб Т1е бек о Твг дів Тує б 7а 75 ча
Ме бій бец Ап бек оіец Агеопеє бій А5роТвг А1я Мазі Тує Тук о бух 85 З 5 вів Ага б)б Тер Ре 01у біз Тез Рго зек Туб Тубо Ре Туг бег щу 100 ІЯ5 на
Мег А5р уві Тер біу сій б1у Тве ТвбоМаї Те Уаї бвео чек
ІБ 120 125 «218» 45 «2115 197 «2123х РТ «2135 Штучна Послідовність хк?292х «721» джерепа «2232 уприміткає" Опис Штучної Послідовності: Синтатичний поліпептид" «пеа» 43 біз Їів Уаї їви Тебе біл обер Рро Аза Те оіви бегоієй бер о Рео Ту ї 5 18 5 сш Аг Аза Те о Беч о бег о Суз АКБ ОА1в бек обі бег Ма) Зве обоє Тугб 28 25 за
Меч діа стер тує бій біб Муз го бі б)іп Аза Рго Ак Мем бен Т1е 35 за 45
Туг Алр Аїа бег АзпоАгЕ Аз Те обіу Т1е Бго Аїз Абв Ро бег 1у
БА 55 ГУ бе біу бег бІіу Таб о Азр о Бе Тигоїсо Тйгб 116 беє бек о реу бій Рго 79 75 ва бін йвр о Рве Ага мазі ТУє Туг Суб ЄМма бій Агробеб Аби Тер орго бро 85 за з5
Те оРНе біу Рго біу Тр оруз Маї дер їіє6є Куз 180 185
«г1ах 58 «21Х» 126 х27172 РВТ «813: Штучна Послідовність «ага «221» джерело «225» /приміткат"Опис штучної Послідовності: Синтетичний поліпептид" «авоз 5а бій Маі біб меч ома1ї бій Зебобіу дів біз Маї Сух цу5 бро «аїу ДІВ 1 5 16 35 бег Уаї уз Маі баб Суб груз Аїа бер біу Туг Тк Орів Те бес Тук 7 25 26 дер їі Аап Тер оуаі Аге бі вів Те біу біп с1у іє 530 Тра Мек 43 25 сСі1у Тер оіез деп о Ргео Азробебобіу Мі Ті Абе Туг о Ата Ста вуз ВНе
БІ 55 Бо біб біу дер омаі ТНг о Меє Тс Абд А5ротТве бев 1156 Зерб Те Аза Тугб 55 78 75 зе
Ме бін беи беб бе" 20 АРе о беє бій Авр о ТВе АТа Уві Туб Тугє Сув за ЗБ
Аіа Аг 5105 ТгроРбе б1у бий іво Рго 5ег Тур Тує Бе Тук бег б1у тва 185. ле
Ме дер оуаї Терозіу сія б1у Таг Те Уві Те Маї 5еб Бек 115 152 125 «21а» 51 «115. 5 х2175» КТ «2135 Штучна Послідовність «225 «221» джерело «223» /примітках"Опис Штучної послідовності: Симтетичний пептид"
«вах 51
Зеє Туг Авро те Ап 1 5 «21805 52 «2135 17 «212» БКТ «213» Штучна Послідовність «2203 «2215 джерело «223У /приміткає"Дпис Штучної послідовності: Синтетичний пептид" «щоах Би
ТгроМеє й5порго Дер бек біу Уаї 112 Агро Туг Аза бій бує Рае Сіл 1 5 16 15 віх х21а5 53 «21ї1х 17 «7125 РиТ «2135» Штучна Послідовність «2282 «221з джерело «223» /примітка-"Ппис Штучної Послідовностії Синтетичний ввптид" «40» БІ
Тероієс дп Бра Абробек біу Уаї Т1е Аге Туг Аза сій Гуя Ре бій 1 5 10 15 віу «2125 54 «2115 17 «2125» РАТ «213» Шучна Послідовність «2205 «2212 джерело каа3х /прижіткає"Опис Вітучної Послідовностії Симтетичний пептид"
«мах сім Тер Ре (і саїш зе) Рео беє Ту Ту Ре Тук бек бу Меж Ар 1 Б 16 15 чз1 «2105 55 «2113 11 «212 РВТ «213» Штучна Послідовність «2285 «221» джерело «223» /приміткає"Опис Штучної Послідовностії Синтетичний пептид" «апа» 55
Аг йіа бек (білобег Ма! бегобеє Туб Гбеу діа 1 5 16 «2125 55 «711» 7 «212» РЕТ «213» Штучна Послідовність «229» «2215 джерело «223» /примітках Опис Штучнаї Поєлідовності: Синтетичний пептид" кдбах ЗЕ
Азр Аїш б5еєб деп АвЕ Ата Та 1 5 кх2185 57 «211: З «2125 РЕТ «213» Штучна Послідовність «22» х?лії» джерепо «2232 /примітках"Онис Штучної послідовності: Синтетичний пептид" «дова» 57 біп сів двв бек Ази Теробго Рро Те 1 5
«2185 БЯ 34211» 127 «215: АТ «213» Штучна Послідовність «22ах «221» джерела «2232 ;приміткає" Опис Штучної Послідовності: Синтетичний поліпептид" «доаз 58 сів Хаї бій оіїгу Маї бій бегоб5іу Аза сій Узі уз іу5 Рро б1у 5ег
З 5 16 ї5
Зегомаї уз ві беєг обу Гуз Ата 5ег 51у 5І1у Те оївуи бер обер Тугб 283 25 за діа Ре бек Тер маї Аге біб Аїа Бго біу (ФМ б1у їєб 62 Тер Меї 35 495 45. біу чіу Те тї1е Рео Бе Ре обі Тве Те Аво Туг дів бій Гуз Ре ва біп о біу Ася Маі Ті1в ї1е Таб Аза А5р обі бек Те деп ТВк АтаоТуг 65 78 75 ва
Ме бін Бей бек сб1іу ее) Абе бе бій дер ТБ о Аїа ві Тує Тук Суд 85 5 З5
Аіїв АбноАвроАгЕ АвроТує Туєб Ф1у їв Б1У бБебоРго Ребе о Тує Туб Тує 186 185 а біу Меї А5ромаі Тер сіу біпобіу Тйе Те Маі тик Уа) бек бес 115 136 125 «й1а» 53 к71ї5 167 «2182 РЕТ. «213» Штучна Послідовність «вах «и2їУ джерело «2523» ;приміткає"Опис. Штучної Послідовності: Синтетичний поліпептид"
«ща» БО біш Ї1їе Маї іга Те біл бег БРго Азробве 014 беб Маші Те рого ув 1 5 16 15 бій пух Маї Ти Т3Є Твагс Суб Дерев оАіа бег бів бес Гі 51у бре обеєе га 25 за їец Ні5 Тгроїше бів бів о гу5 го Азробіп бегоБро груз ви ги 116 за 45 мя Туг Аїа беб сип бер Ре бегс біу Ууаї Ро бек Агро Рпе беб о біу
Б 55 а бег біу бзекобтТу Тие Азр Бе отТнгоїен Те ІЗе Абпобебс Геп біз дів 65 79 75 да аз А5р Аїа АТа бів Туг Ту Су Ні біп бег бЗеб бак ре Вго Тер 85 зо 95
Те вне бу біп бу Тне уз Маї бім тів Туз зва 185 «мо» ба «211» 187 «21725 РТ «213» Штучна Лослідовність «2203 «22і1з джерело «23» /приміткає"Опис Вітучної Послідовності: Симтетичций поліпептид" «400: БО біи Т12 зі без Те бій бас обро Азр о РНе біз его Уа! Так Рго Гу 1 5 12 15 віз їуз Маї Таб І1те Тиб Суб ге Ата чеб (31 бек 1312 Б1уУ бегб о бев а 25 за їец ні Тер оТут біп бій Бу5 Рра Дбробій бек о Рго Бу Бео Єв ої1в 35 да 45
Су Туг Аїа бек бій 5Зегр Ра бЗеб обіу Маї Рго 5ег о Аке бр беб б1у во
Че біу беб Бім Тае АроБНе Тагоїен Тебе ЇІ1е деп о беб Гео бій ДІВ 5 78 75 ва біз Азор АТа Аза Тс Туг Туг Су» Ні бій Чеб о бе о бегоїеб Рго Тер я5 за 95
ТвгоРНне біу біп о сб1у Твг Був Маі Біб 116 фу 180 185 «210з в1 «2115 5 «2125 РАТ «213» Штучна Послідовність 228» «221» джерело «223з /приміткає"Пппиє ШтУучної Послідовності: Сунтетичний пептид" «дой» 51
Зеєб Туг Аза Ве бег і 5 «іа» 52 «2115 17 «21725 КТ «2133 Штучна послідовність «220 «223У джерело «223» /приміткає" лис Штучної Ппослідонності: Симтетичний пептид" «да» Б
Фі Ті ІТе рго Рбе Бе б3у Тве ТИйб Ап о Тугб Атїа біпоГуз Ве бій 1 5 19 15 5іу «210» 83 «и1ї» 18 «2125 БКТ
«213х Штучна Послідовність х72ах «221: джерело «2233 /приміткає" ис Штучною Послідовностії Смнтетичний пептид" «вра» Б
Дер Аг йзроТує Тус б1у іви бі бек о бто Рае Тує Туг Туг о біу Меї 1 5 18 15 др о Мді «-21дз ва «2115 «212» РЕТ «213» Штучна Послідовність 228» «221» джерело «223з /приміткає"Пппиє ШтУучної Послідовності: Сунтетичний пептид" «аа» є
АгЕ віз чего піл обесб 116 ОДу беє баб ге Не і 5 18 «2125 655 «27115 7 «21725 КТ «2133 Штучна Послідовність «220 «223У джерело «223» /приміткає" лис Штучної Ппослідонності: Симтетичний пептид" «08» Б
Туг Аї8 бер бій о Зеє Бе о беб 1 5 «210» «2115 З «215: РТ «213» Штучна Послідовність «иййх «221» джерела
«223х /приміткає"Опис Штучної Послідовноїті: Синтетичний пептид" «800: Б
НІі5 бій беєб беєб бек оГви Вро ТероТне 1 5 «»1а» 27 «21їх з30 «2123 РТ «2135 Штучна Послідовність «52» «221» джерела «З» гприміткачє"Опис Штучної послідовності: Синтетичний поліпептид" «да» 657 діа бег Тік о 1уз біу го бероуаі Ре Ро Гей Аза Рго бег обер Гу р. 5 16 35
Че Тк бек біу біу Тік Аза Аїа івец сім Сюиб5 Мей Уа! Гук А5ротугб 283 25 за
Ре Рго й Вго Ма1 Те Маї беб Тер Аза бее бі Аза Геб Тве бег 495 45 біу Уві Ні Тпг о РБе рго дів Маії івц біп бебоЗег о пзу Гец Тук беб ще 55 Ба
Бей бег бе мі Ма1 ТП Маї Рго 5ег бе бегроцец Ту Тіт о біп Те 78 75 во
Тує Хі Суз д5п о Маї Ап Ні Гу5 Бго бек Аза ТНгоіу5 Маі Дер Туз 85 зо з5 іуз Маї біцз Рго гу зе Суз А5рогуб5 Тео Нія Те о Суз Бго бро Суб їре та5 о
Рго діа Рго піш уе; се оту Біу бро чес Маї РНе сяц Рів Рго Рго 115 126 125 їжа Бго бух Ар Тіг оГео Меб Ї12 беб АРБ Те Рго оз Маі Те осСув 135 135 142 маї Маї Уаї Ар ма1ї бек нНіє бін Ар бго 14 Уаї їуз Ріе Ап Тер 145 158 ї55 160
Туг Маї Авр о1у Уаї бій Узі Ніж Абп Аіа фу Тс огу5 го АГЕ 51 365 178 175 піп бій Туг деп бек Те о Тус Асе Маї Маї бег Уві іви ТВг Уа! їв 188 85 то
Ні пів аротброіец Ап о бІУ Муз б3н о Тук губ Су їуз Маії 5Ег деп 1ч5 288 295 у Аія Ген Рго Аза Рго Т1е біз їу5 Те Тіе бегоїу5 А1а був 1у а 235 220 піп ого Ага 51) ре бій Уаї Ту Те Ге рго Рео бак Абд ти б 225 238 235 240
Ме ТВб бух дп осіп Маї бегоКбен Тер Сух івиа Ма! їу5 БІ Рее Тує 245 за 255 бо зЗее Або ої1е Аза мах (11 тТеробів баб деп біу бів бро 13 дей 266 255 279
АзпоТує уз Твг Те Бео Бко Уаї ї2ц А5р бер дер обіу зек Рае БНе 275 28о 785
Кеч Тувє бек фуз Гео Твгромзі Ар оїув бек АгЕ Тер біл Бій бі деп зав 235 зо
УВІ Ре бегб був бБег уаї Меї Ні5 610 Аїя Меч Ніж дви Ні Туб Те 305 16 315 320 бів буз 5ег ій бебосен о бес Рго (у ух 325 33а «714» я «й1ї5 Зб х2122 ВТ
«213х Штучна Послідовність х72ах «221: джерело «2233 /приміткає" ис Штучною Послідовностії Смнтетичний поліпептид" «ра» ся
Аіїв бег Те оїуз а1у рРго бегоМаї Бе Бго іви А1іа Рго бег бер уз 1 5 18 15
Зее о ТНгобЗає біу біу Твгб Аїз Дів ів б1у Су Се мМаї ух дво Тує 20 25 за
Ре Рго Бі рр Уві Тв оУаї БЗеб Тер А5п о бег біу Аїа Меи Таб бег 35 зла 45 бі Маї НІ Те Ре Рго Аїз Мзі ен обіп бебвобеє бі Гео Тув беб
Б 55 а во Зег бек уаї Маї Тйе мМаї бго бер о Зекє бек Ген ОХу ТВе бій ТНе 55 79 75 ва
Туг Їі1іе Суз А5п Уві Депо Ні Муз бго 5Зег Ахи ТНгоїує Маї А5р 1 у5 85 зо з5
Гує Маї біз Рео Бу5 5егс Суб Дероїує Те Ні Твг о Суз бро Рго су 106 185 то
Бго дів Рго З1м івм ген 01у біу Ргз б5еб о Маї Рпе вен Ба Бго бро 120 125 рух вто Мух Ар о Тйг ої) Ме Хіе чбее Аго тар орко ато Маї Таб був 126 135 не
Уаї Маї Маї Абр Маї зе Ні сіц Ар Рро біз Мах бух ВНе ди Тер 145 158 155 168
Тус ах Азр зІу Ма1 бі Уаї Ні Ап Азїз їу5 ТНг ої Вго Ав бій 165 1793 175 січ біб Тук й5п бег ТК о Туг де Уаї уаї бек уаї їез Трг мах Ген
188 185 з36
Ні біпод5р отТрРрогеч Ав бзу Су би Туб о їу Су рук Уаї беб оди та5 220 285
Ку Аїа ви Бко діа Веб Те бін оїух Таб гів бебоїу5 Ада бує 0іу 21 215 229 бій рго Абк о біч Рго бій Маї Ту Те зе Ребо Рео Беб Аброаій 51 т25 230 235 48
Меї Тигобуз АБпозій Уаї бег іем обер Сух Дів Маї іу5 01у Рве Туг
ТАЗ 258 255
Ре беб аарої1іе Аза мазі 510 Тер обій бЧеб Аа сту дів Рго б деп в 55 279
АзеоТує губ Тв ТвВе ббо Вро Маї іє) Ар обеє Авробіу 5ег Ре РНе 275 ва 285 ем Жах его гук іс Тік о Уаї Азроїув5 зес Ар оТрробівй іп біу Ап 290 295 зав
Уа1ї Ре бек Су бе мазі Меб Ні бі діа Бей Ні АЗп Ні Тув ТНе
За5 18 15 За
Сіп о гуз 5ег це) бер рем бессбго б1у Гу5 325 33В к218» БО «211: 327 «21225 РЕТ «213» Штучна Послідовність «22» х?лії» джерепо «2232 /примітках"Онис Штучної послідовності: Синтетичний поліпептяд" «доа» ва дів бег Те уз 61у Рго бог Уві ВБНе Бкго Мем Аза Рго Суз беб Авбр 1 5 16 ї15
Зеб Таб бек пі бес Те АТа віз ів біу Сухє іє) Уа) 195 Ар тує 2а 35 за
Вие Рго одо Рез Уаї Таб мМаї Зеб Тер АБ бе б1у діа Сец о Тиб ее за 45 біу Уаї Ні Тис о РНе Рго Аїа Уаї ій біп о бес беб біу Гей Тугк о5зег ва іч бегобее уаї Ууаї Тис Уві РРО бер бек бе бе бім Твге фу Тве 55 7а 75 та
Ту ТигоСуз деп Уаї А5р НІВ уз Рго бер два ТНе зу Ууаї А5рої уз в зв 935
Агв Уаї піц бегогуз Туг О1у Кео Бго Сух Рго Рро Суз Рго Аїа Бро зай 155 не бід Рпє без біу б3у Бго 5ЗебоМаї Бе зеи РБе Рго Рго Бу5 го їу5 115 129 125
Авр Тиг без оМеє Іів бек АгБ Тс ого бід Мазі ТвгосСу5 Маї Уві Маї 130 135 їв йвроуаї бавобіп аіш Азрорро бін оУаї бій Рве А5лоТероТее Маї бер 145 158 155 і168
Фіу Маї Біб чаї Ні Ап Аза (уз Те озу Рео йверобіц сЦробіп РНЄ ї65 178 175
Авпобег о ТвВе Туб Аг Маії Уаї бег Уа) ей Твге о Уаі 163 Нів біп о дБр 18а 7855 їз
Терен Ап біу Гу ій Туг Гуз був цу Уаї бег А5погу5 бі Тен 195 зва 205
ВБо чес бегбо Т1ів бін ув ТБ оТ1єе бЗебоцуз Дів Гу б1у СТп Рго Абе 2810 315 ЗВ січ Рго біпоуаії Тує ТвгоБеу Рраовго Бе біп обі 520 Меє Те 1 у5 225 238 235 АВ деп опій Мі беб оце Тер о Суз Ге Мзї уз біу Ре Тут Бгро беб дер
ЗАВ 258 255 її діа мМаї 010 Тер біб бегодап бі Сіп бго 610 Абп деп Тук Гуз за 265 278
Те Тре орго Рго Уаї Сей А5розег о Абр біу бетє РБе Рпе Гео Туг 5ег 275 288 285
Аге іс Тис оМаі ДероГ ув бе о АгЕ Тер сіп біб бі Аза Уа) Рве бек 230 95 зав
Се бес уаї Меї Ні5 10 дів без Ні айва Ні Тує Тс 51п о фув Зег за5 Зв 15 Б
Бей бесоіец бек івем б3іу Бу 325 киїа» 78 х2115 327 «2155 РеТ «213» Штучна Послідовність «770 хКаї» джерепо «223» /примутказ" Опис Штучної Послідовності: Синтятичний поліпептид" «аа» 7а дів бег Те уз б3у бро его Мві Бе ко іви Аза реко Суз беб Дреу ї 5 18 ї5
Чебв Тис обеє 015 беб ТБ Аза Аза їз біу Су5 бен Уаї руз А5р о Тує 2а 25 за
Ве Рео спа Вес уМа1ї Тебе Маї беб Тер оАжа беб с1у Аїя рез Те бее
Зк 40 5 сЧіу Маї Ні Те Ре Бго дія Маї їз біп бебобег бзу Бей Туб бер 58 5 іен бег беб Уаї Ма1ї ТР оМаї Бео чего очзег чер Гео 01у Те гує Те 65 7а т що
Туг ТнгоСуб Ап уУаї АД5р нів уз Рго Збр А5поТвг Гуз Мзі дер ої ув 85 за 5
Аве Маї Із бег оіув Ту біу Рго РгОо сСуз рРео Рго був бро Аїа Ро з188 135 ме біз вав Бей біу азу ребо бегоуаї Бе зецд Рвеоббо Рго фу ре був 115 128 125
Др оТвиб без Ме ЇМе Зеб о АброТве Рро Біз Уві Тйг бух Ма) Маї Маі 13а 135 1460 дер узі бег біп біз дер Рго бім Узі бій Ре деп ТероТук Ма? Ар 145 158 155 і68 біу Маї біб уаї Ні Ап о Аїв ув Те о ГСує Рго Абе бі б бій Рене 3655 176 175
Азпозег Тс о Туб Ася УМаї Уаї 5ек оМаї їеу Те Майї бе Ні с1п А5р 1858 185 396
Тгроіен Ап (фу їу5 210 Туг о1уз Суз іу5 Маї бегоАбзп о іув О1у 1 ви 1ч5 288 295
Бго зас обеє 11е БІ1Ш уз Те Ті 5егогуз Аза у біу сій Рго ДК 1 215 228 ази го 1 Мзі Туб Тв Бей бго Рго 5еє зів б1з біб Ме Таб Гуз 225 236 235 240
Депо біб Мазі бегоіви бер Сув Діаз Маї уз 031у Бе Туг РРо баб дер 235 250 255
Ї12 Аїа Маі Бін Тер 610 бес Азп біу 5іп Рго бі» Аза Азп оТуб Гуз 285 276
Тео тве Ро вБго Узі Ме) Абр обеє Ар обіу б5еб бе Ре гей уві бе и 258 285
Агроїеой Трб Маї Авроух Зв одее Теробібв 53 біу Авп Уа) пе бек аа 285 зб бух его мазі Меє нів біб Аїа їем Ні А5п Ні ТУує Те о бІп Гуз бег 05 зів 315 3285 ей беє сво бегоіво б1у Ту 325 «2103 71 «тх11» 50 «717» РТ «213» Штучна Послідовність «2205 «221» джерело «223» /приміткае"йпис Штучної Послідовногті: Синтетичний попіпептид'" «ана» л бій маї 51йп без уві бій бек обіу біу бі без Маі біп о Бко 01у АгЕ 1 5 19 15
Бег оїенойев Гео бе Суз Дів діа беб о біу Рве ТагоРйе АбБроАво тує за а: за
Аїв Меї Ні Тер Маї Абр са Аза Ргб Б1уУ був біу Бей ба Теромаї за 45 бег С1у І1е Депо Тер оАБп бег біу б1у 118 б31у Тук Аза Ар бег Уаї 5О 55 ва ух біу дев Ре Таб 118 бер одри дер дьп Аза уз АБИ бЗег о рец Туг 72 7 88 ем бій Ме Ав бе Ген АСВ о А1а біб АвротТве Аза зем Ту Тує Сух
ВЕ за 35 діа йгв Азр Ме зіу б1у Ре біу бли пе Туб Тер Аа Ре боту Сей
180 185 з
Тгр біу дгеозіу Те бен о Уаї Таб мМаї Зер обеб дія бек Тв офуз 0Щ1у
Б 120 175
Рео бег Уа) Бе бо їе) Ала Рео Сух Чееб Аквобеб Те бек бін бе 138 35 1149
Тие Аз Азвоїем бу См Бей Уві їу5 АзроТує Ре Рго бід бо Ма 135 156 155 169
Тс оуУаі бег Тр оАхй бег біу діа іеи Тс бег об1іу Ма1 Нів Таб ве ї55 1793 175
Рг Аїа уаї ви сій зер бере біу сен оТуб 5вг оГеу бебг о 5Зегб Уаї Увї 18о їв 139
Тие Уаї Рго беб бек оЯее о Гви о б1іу Твб гу Тве Туг Те Суз Ази Маї 3185 2аа 205
АероНіє Гуз Бго бего Ап Тр оГу5 Уаї А5росуз Арк Уві ЗБ Беб Гуз 210 215 228
Тут сіу рео Бго Су5 Рго Бра Суб Бго Віа го біш Ре еп біб 1у рус 230 235 448
Вго Зег Мазі Рпе гей Бце Бго бро уз Рго збух дер Те Беи Меї Це з5В 255 беб йгя Тг обко ази Маї Те осСуз Уві Уві Уаї Азр о Мві бегобіп БЦ 258 255 278
Ар овгРо біз Уаї біб бле дп ТероТує Маі Абр біу Маї бір Маї Ні 275 ва 255
АзпоАТа фу Тс огук БО АгЕ бі бій біп Рпе деп б5ег Так Туг Аге, 230 195 БУ
Маї Уаї чЗеєе Маї (ва Трг о Мві Тен Ні бій Азро Тер оїєб Депп Бім Туз за5 ЗІ 315 зе біз Тут уз Суз іу5 Маі бегоАєп о іує Сіу івц о бко бег бек І1в БЦ 325 338 335
Кук Тнг Ті бегоїу5 діз Гує б1у бій РКО Аг би Рго бій Маії тує мо 345 З
ТНе бе Рго рРго бек С1ій бій бій Меб ТБгб бує Дєп біп Уаії бег їв 355 зо ЗБ
Зег Пує Аза маї Су бі рРре Тує Рго чЧеб д5рогТте Аїа маї ба тер 370 375 зве біз бес АбпобтТу біб о бго б1ш Аба Ав ТукоГує Тис Те бго Рро Уві 385 330 595 дав іє Ар бес Дер о біу Бак оРБе Ре іги Мві бе о Акрдоїви Тіп Уаї Ар 485 аю 15
Кук Бег дви Тер ази біо б1у дяп Уаї Бпе бебосСу5 бег мні Меж нів 420 425 аз сій Аїв без Ні дзпоніВ Тубє Те біля Гуз бве Сей беб Гей бег Тео 435 ве 445 сіу їу5 450 «х1а» 72 хй1ї5 АБО «2122 РЕТ х213» Штучна Послідовність «ВУ «Її» джерело х223» /приміткає"Опис Штучної Послідовності: Сидтєтичний пеліпептид" «400: 72 сій Маї біб оїечз Уві біб бек обіу бі б1у іви Уаї пп бро (ту Де 1 5 18 15 бегоіц Агвоїви бег Суз Аїз біз баб бБіу Ре Тиг Ре АБроАероТує -а 25 за діа Мет Ні ТрроУаі Ас біп Аїа Рез зі бу бБіж зе бій Тер маї зла 45
Бег біу Т16 Ази Теробег бегобіу бі Ті 031у Ту Ата Дар о беб Уаї
БО 55 ва
Гуз аіу Агш Рпе Тиг Тіе 5ег Ак; Акр о деп Ада муз Ази Зебовва тує 78 75 ща
Без біїп Меб А5п обеє Сем Аве діа бій Азр о ТВге Аза їец о Тук Тубв Су 55 за 5
Аза АгЕ ер її оту 01 Ре бім б3іш Впе Ту Тер Азп оре біу Ген мо 185 не
Тер о а1у Аг бБІіу Те Гео Маї Твгомаї бБебобег іа беє Тае гу «1уУ 115 120 125
Рго бег Уа)! Бне Рго іеб Аіа Рго Суб5 ес АгЕ беб ТНг бек бій Зег 130 135 140
Те 815 Афа еп б31у Суз ви Уві їу5 двр оТук Рпе рго 1) Рго ха! 145 158 155 їсй
Те Уа! бег Тер оАва бек 01у Аїа їси Тс обер б1у Уаї ні Тебе Рне 165 128 175
Рго Аїа Маї іец о аїй бек бег Бім їви Туб 5вбоїво бег беє чаї МУаї їве 185 Кк
Тне оМаї Рго беб о беє чЗев о Бви б1у ТіК оїу5 Те Тує Те Суз Азп Маї 1935 225 285
Ар Ні Гуз Рро б5егодеп Тс оЇу5 Уаї А5робуз Дей оМаї бІн бБеє Гуз 210 215 78
Туб біу Рго Рго Суз Бго Рго Су Бго Аза Рго бій Ре гео бі б1у
225 230 235 248
Рго бек узі Рпе сей вве ро бго іуз Рго іу дер тре рец Мет Т1е зА5 250 255 5еє Ав Те бро аїо Мі Те Суз Уах Чаї Ма) Азр мі беє біп бі ва 265 279
Азробро біз Уаї біз Бе дп ТероТуб Мді Авробіу Уа1 бій Узі нів 275 289 285
Ап діа уз Тигоїух РРО АсЕ біш біш біп рве депобеє Тіт Тугс Агр 290 395 зав чаї Маї бек маї еп Те Мзі мезо Ні біп АвроТер ої дп обім Гу лав з 15 з2е сій Туб о іу5 Су іуз Маї бер оАзп о їу5 Бі іейз Рео бее бе» Тів 010 325 зза 335
Суб Тиг о Г1і2е б5егбоїу5 АтТа ту бїу бів бБго Аероб1о Рго біп Уаї Тує за 3а5 з58
Те гав рео Бго беб о біп Бій біз Ме тик Буз А5побіп Мзі ев Ген 355 зБ5я 365 беє Су5 Аїв о маі су Сі1у Ве Туб о бго бер дб ї1е 8та Уаї бій Тер 372 з75 зве біс бегоАзи щ1у аіп о рго 010 деп одза Туб уз Те Те Рго Рго Уаї 85 зз8 395 лоб і24 Авр бек Авр білу бес бе РНе їв Маі бек Асд без Те Маї дер
А16 ді5 уз бег о Агяи Тер бів біб ту АзпоуУві бне бег Сук баг Уаії Меї Ні
ЧІВ 455 аза
Бім Аїа ви Мі Азломів Туп о ТВе біп о гуз ве іє 5Зєгоїеб бер Гей 435 «ай 445 біу гу «21а5 73 «211» 215 «217» КТ «2132 Штучна Послідовність хейах «221» джерело «2735 /примітках"Опис Штучної Послідсовності: Синтетичний поліпептид" «двох 73 цій тТтє Мазі зем Те 0313 беб обро Аївз Те о івеб о беб о гву ев Рго Фу 1 5 1Р 15 біс АгЕ Аїа Тагоїез бек осСув АгЕ о Аїа зег зів бер УзВ о Абж о Бес Туг 2а 25 за іеа діа Теротує біп бій вує рро біу біп Аза го Агр оГец ібн ТІ 35 ча 35
Тугє А5р діз бегоАбп Ав Ата Тагобіу Т1в Рсо АтТа Асв Бе бев біу т ва бЗег Біу бегбобіу ТНк Абзр о Ре ТБгоівн Таб 112 5еє бер рен бів Євро 85 7а 75 58 сід Ар РН о Аїа Уаї Туєс Туб Су бій бій Абе 5егодзип Тер обро рго 5 за ах
Аза Тие о Рпе о біу 5іу ЄТу Те о1їу5 Маї 610 116 Суб Або Тк Уа! Аїта ща 185 ме
Аіїа Рго бек Уаі Ре Г1е Ре Рро Рео бек о Азр 010 біп Гео губ беб мл 178 125 сіу Те Аїв о бегоУуваї Уаї Су Сей іс А5п Або оРве о Туб бро АгЕ 010 132 135 145
Аів оіуб5 Уві біп Тер Гуз Мзі Дер ода Аїа Мей бій бек 51у Депо беє 145 1589 355 168
Чіп би беєб о уаї Те бій біпоАзроЗеє Гуз двробес Те ТуБ беб 1) ї65 і178 375 зве обеб Те оїви Тс оїео бегоіуз АтТа АзроТує 010 їу5 Ні Гуз Уаї 186 785 їз
Туг Аів Суз біз Уві Тиг Ні біл біу їец бек его Рго Уді Тне ту 195 аа 205 бег Ре д5п о Агио біу Сім Суї 210 215 «21а» 74 «211» 43 «2122 РЕТ «2135 Штучна Посліповність «230» «221» джерело «223» /приміткає"Опис Штучної Побспідовності: Синтетичний поліпептид" «вах 74 бій Уві біпоіейоуаї бій о бег обіу діа БІц Уаі їу5 іу5 рго Зіу діа ї 5 16 15
Зегоуаї Гуз Мві бегоСуз руз Аїа его біу Тук Тк оРНе Тк о5ве Ту 2 25 за
Ар тів ап Тер Маї Аг біб біа Те Сіу б1п б1іу їз 519 Тер Меї, з5 аа 5 сіу ТрроМеб деп Рео А5розеск о біу Маії 116 Аге Туг Ата піп вуз РНе о 5 Ба бів біу гр ма1ї Те Ме Те Абе о А5й Те бе гів бяб ТР Аза Туг 65 70. 75 а
Ме бін ви й5пи 5ес ов Агв беб бін Ар Те Аза Ма1і Тугс Тув Суз 85 За зе діа Агв зи Тер Ре біу іш їен о Бго бе тує Тук Рне Туг бер Сбіу зав 195 ме
МебЄ Ар Уаї Тер озу біло бІ1у Те Те Уві Те Уаї 5ес бе дів бег 315 178 125
Те оїуз БІ1у Рго бек оуаї Бавобго ів Дів Ребб Суз бевбоАбробеє ТА 132 135 ї48
Зеб біш беє Те дія А1я Без бі бух сеча Маї Гуз Аеротув Рене Рго і45 158 155 165 сіц Бго Маї ТигоУаї бек Тер АБпобвее бсіу Аза зей Те бег біу МУаі 155 170 175
Мі5 Ти Ре Рго діа Уаї Гей бій бек бер б1у рей Ту 5ег ви 5ег тва 185 198 бЗеєб Маї Уаї Те Ма1ї Рео бегобеєс бер оГву са3у Таб оїу5 Те Тує ТЬе 195 288 295
Суз Аби оМаї Дер о НІВ Гуз Бго ее Ап Те бує Маї дерогух АРЕ Уві ій 215 229 бій бег бу Туг 5іу Бго Бко Суз Рго бго Суб Рев Аза Рео бі БНе 225 238 235 240
Кеч біу піу Рро беб Мазі Ре тен РБе Бео Рго (уз го Гуз АвротТве 245 а5а 255 іецй Мет Ті бегодгр Те Бко бій Ма)ї Те Су Маї Уа) Уаї Абр Ма! 260 255 270 бек біп бій Азрорго біб Маї біп РБе АзпоТгроТуб Уа1|1 АвробОту Уві 275 258 285 біз Уді Нів Ап Аза уз Тигоїуз Вго АР бій бій біз Ре Депо обег тав 235 зоо
Таб о Туг Абе Уа) Ма1ї бек Маї Мен Те аз бей Ні с1п АброТер Гей
За5 Зв 15 пав
Ай са1у куб ої Туб із Суз Гуз Ма) бБеє Деб бух БіуУ беи бро 5ег 325 ззе 335 бег Тів Зій (у5 ТНе ів бег Гуз Аза гу б3у бій Рео Ак бій го заа заб5 350 сіп Уаі Тук Тк огей бго Ро бЗегобій Си пи Ме Тс губ деп іп 355 зва з55 уаї бек їєз бег Сук Аза аї уз Ту Ре Ту оРко без Ар 112 АїВ зт7а 3275 зва
Уаї 10 Тер бегодби О1у біп Бго біш да Ази Тує о Гув Тве о таг 385 зав 335 зав
Вго Рго Уа! їеи Ар озег о дб5робіу бек Ре Рбе (ем Уві бег дДгр ої ен яв 415
Тг Узі А5роїуз бес дед Твробіп бій біу Аза Уві Ре бег Су5 5ег ща 225 аз чаї Меж Ні 01 Аза Це) Мі деп оНія Тує ТБ о б1іп о іу5 бег рен бе 435 ща 445
Гей зегоіво Ту гу з5а «105 9 «2113 453 «212 РВТ «2135 Штучна ПосліДОВНІСТЬ «ай» «221» джерепа «2235 Діриміткає" бнис Штучної Послідовностії Синтетичний лоліпептид" «ой» 75 сів Маї б3)п оівеи маї оїй бегобіу Аза бій Уаї уз 1у5 рРро бі Віа
1 5 19 15 бег Узі бу ві бег Суб руб Аїа Зек Сіу Тук Тиб Ре ТВе обес Ту 2 25 30
Дер їі Аза Тер ма1ї Агроб1п віа Те біу б1й о1у їє9 516 Тер Меї зе 48 35
О1іу Тгрієз Ап о ргео Ахробве б1іу Маї 112 Абя Туг Аза 03 Бу Роє за 5 Ба бСіп о біу дгр о Маї Тс о Мес Те Аг д5роТис бегс 116 бег Те Ата Тує 65 78 75 то
Меб біз рей обеє БегоГео Абе о бЗег бін дер ТПгб Аза Узі Туб Тубв суб за 5
Аза АгЕ 51 Трр РНе СІу 10 ій рго его Тує Тує РНе Тук бег біу за 1а5 Ме
Мет Азр оуаї Тер оаіу 1 бу Те Те уаї ТБ мМаї 5ег бер Аха бег 115 128 125
Ти» осу5 бу Ро беве мах бі бро ї2б АтТа Рео Су бее Арробаеє Те і13а 135 ї45
Зег бін бег Те Дія Ата Бей бі Суз Геу Ма1і уз Авротує Рве бро 145 158 155 169 бід вго уаї Те Уаї Зег Трродеп беє біу Аза Сей Те обер обі Уві 155 178 ї75
Ні15 Тис Рре Рг Аза Уаї рей біп о бебс бер о1у Сен Тук бви рей 5ег їв 185 192 5ев Уаї Уа) Те узі Рго беб о беб бе о бец с3Зу Те о 1у5 Те Туб Те зчк 288 205
Сух Ап оМаї дер Ні Гуз Бро есе деп ТНе Гує Маї АзроБух АБ Маї ла 215 220 бін обегобує туго са1у Рго Рго Суз бго Бго Суз Рро Атя Рго Зїм Ре 225 239 235 246 са біб 01у Рго бе Мазі Ве ісч Бве Бго Рго Гуз Рго Гуз дер о ТНе 245 250 25В
Кей Мет 112 бег о дгр ТБ Рго бій ма) Те Сує Маї Уаї Ууаії Азр Уаї 258 255 276
Беє бів бій Азрорго 010 Маї бів Бе Аа Тгротуб Узі д5робху Уаї 75 288 285 бій Маї Ні Ап Аха ух Те у Вро Арно Б36 ОЗ бій ББе Ази 5еб за 235 зво
Таг оТуг дго Ма1ї Уа) бек Маї іем Те Мзі ї8ца нів біп дер Тгр ей 05 зів 315 320
АБап осіу Ку біш Туг цуз Суб ІТув Маї Бак деп Гуз Я1у Гей Рро 5еб 225 аз 335
Чем Т1є біб суз Тве Те бев о 1їу5 дія іу5 б1у бій Реро Агя 01 бго за за з біб Уаї Тує Таб оїва Рео Рго Бегобійп Сі 030 Меє Те їу5 Ап сій за: зба 365
Ууаї зЗегоівецс бегоСув А1а Маї Гуз біу Рне Тут Рго бег Азр Гі Дів за 575 зо уУуаї біс Тер 510 5ег деп сту бій рго бі А5подДеп Туг о гбуб Таб Тег 85 за 385 зо
Рго Бео МаЗї бе А5р бер Азро обі бев о Вре Ре Се Узі б5еб Абе Ген 305 16 415
Тигомаії А5роіїуя бек Авш Тер о біп біб 51у Азп о Уаї Ре ев оСуз 5ег 428 325 436
Маї Меї Ні (Фш дія Те) Ні депо Ні тус Те о с1п зуб бер рей бее 435 448 445
Цей бебоїбло оту ув я5а «2105 75 «к213з 214 «212 РВТ «213» Штучна Послідовність «2285 «221» джерело «223» /приміткає"Опис Штучної Послідовностії Синтетичний поліпептид «апа» 7 біс ХТіе уаї бе Те біл бегорго Аза Таб ів беб о їєб бек о рго біу 1 5 16 15 сіб Аг Афа Тпгоіви Зес Су Дррр о Аїа бек о біп бего ува) бебобеб Тує за
Гей Аїз Тероїує бій бій Гуз Бго біу бій Аїв бро Або Гей гей Т1єЄ за 5
Ту аАхройха бек Ази Ар Аза те біу Т1іе РКО Аїа Акр оре бебе б1у
Ба 55 ва
Зек о зіу Бегє біу Тпб Ар овае Тиб оце ТИР бе бегобеб Сей сі рго 7а 75 да сш Ар о Рпе Аа ма1і Тук о Туб о Суз бу б31п АгЕ бес о Абп Тер Рго Ро 85 зо 95
Те она піу Бго а1у Те оїуз5 маї Дер ТЗ Бу5 Аге Те Узі Аза Аза 182 185 тв бко бен ма1ї Рпе Хіе Бе бо бго 5еб Ар обіз бій Бен ух бек Ф1У 115 120 125
Тиг діз беє маї мані Суб рем осей А5п Ап обпе Туб рес Абд бій А1а
139 135 140 уз Узі шій ТрРО оф Уаї дер д5подіз іеу бів беє біу деп обев СІЙ 145 158 ї55 зве біз бем Уа) Те сі б1пй АвроБеє ух АВробее ТВб Туб бек бен бег 3655 178 75 ес ТНК без Тр без озеро їуз А1З АероТує бін ГСух Ні уж ма! тує 180 185 139
Аіїа Суз біз Маі Те Біб біп о біу геи Зер о бег Бео Уа1 Те Гуз бек 205 285
Ре Азо АСВ Я1у 0 су 210 «2123 77 «2115 454 «2125 РЕТ «213» Штучна Послідовність 52205 «221» джерело «2235 примітках "Опис ручної послідовності: Синтетичний поліпеттид" «а» 7У біп узі біп без уаі біп беб С1у Аїз біш Мві Гувоїуя Рео О1у бЗег з 5 19 15 бег Уаі Куз Маї бег Суз Бу Діа бек біу 03у ТВгоївеу 5еробоб тує га 25 за
Аза Ре бек Тер оМаї дер сп діа Ро 1у Б1в біу бем бі Тер Меє 35 ча 45 сзу біу І1е 118 Рго Рів Ре біу Те Твге Аза туго Аза біп ух Ре за 55 ва біп сіу дв Ууаії ї31є Її ТВгодів Авробій бебо Таб Азп о ТВг діа Туг 7а 75 ве
МеК пів рей бе сту ее) Аби беб бій Авротае Аз Узі Тує Туб Сух 85 5 зЗ5
Аіз Аг Ар оАги АвроТує Тукобіу їв б1у бБеє Рео Рве Туг Тук Тук 196 185 ла
О1у Меж др мані Тгробіу біп б1у Те Твб Ма) ТнбоУлі беб бег д1а 125 155
Бве Таб бух біу Рго Бер Маі Рв о Рго ву Аза рео Суб бер Аг Бег ї138 35 110
Те 5еєе Біб беб Те Аза Аза ів біу су5 іез Уаї гуз Ар оТує Ве 145 158 155 іби
Рго біш Бго Маі ТНг Уві Бебс о Тер А5п о зес о з1у Дія івз Те Бесв біу 165 173 175
Уві ні Ті рве Рго Аїз МЗі їез біп Бер бек бІіу їеи Ту бер Тен іще 185 і139 бек его Мазі Мзі Те о Уаї Бго бе о5еє Бер їз бІу Те о гуз Таб Туг 135 20 2а5
ЖТреоСує Ах маї Ар омі5 зу Рго бек Азп Те ув Ма1 Ар Гу Аг 216 215 РУ
Узі 15 бек о Му5 Туг біу Бго Рго Суб Веб о Рго Суз Рго Атв о рРго бін
Ех 250 255 ЗАВ
Рпе іє біМ бІіу Реро бек Уаї Ре їй Ре орга Ррооїув Рео уз Ар 245 258 255
Твпгоївен оМеж ї12 бек о АгЕ Те Рео бій уаї ТвессСуз Ма1 Мві МВі Ар 250 265 278 чаї бек бій? 01ч Абробго (10 Маї бів РБе Або Тер оТуб Маї Дер 1у 275 28 ре:
Уа1ї Бі Маї Ні А5поАіз уз Тигоїуз Бео Аг бі бій бій на деп га 2535 300 дев Таб оТує Арно Уві Уаї бегомМаї їв Те оМзі без Нік Зп Азр тер 205 38 315 328
Мес дво пі1іу уз ої Туб був був уз Узі 5ер оди їу5 бім рен го 325 338 5
Зен бег Сів біс бує Тс Бі 5Зегбоїує Аіа муз біу бмп бго АрЕ 51 зо 345 359
Вго бій узі Тує Те Ген Рго бро 5ес сіп біз бім Меб Те Гуз Аза 355 з65о 365 бів Уаї бек бе бе Суз ЇВ Уві су СІіу вве Ту Рго бег дер Т18
Зв 375 во
Аза уві біз Тер б3ін обер Аа с1у біп Рго біз деп деп Ту рух ТВг 385 за 395 заг
Те Бго Рго Уві цей дер бев А5робіу ес РБе Не їн о Маї бег Аср 425 о 415
Кеб тнгоМаї Азрогуз бег АгЕ Трробів бій б3у Азп Уаї РБе бер су зо 435 азб
Зебоуаї Меї Ні біз АТа ви Мі5 А5п Міз Тує Те обіп о рму5 5еб 1 еи 435 о 445
Бе іввь бе» оіву аїу гу апа «2183 78 «2115 314 «217» РЕТ «213» Штучна Послідонність 52205 «221» джерела «2233 уприміткає" пис Штучної Послідовностії. Синтетичний поліпегтид"
«ща» 78 біш Ї1їе Маї іга Те біл бег БРго Азробве 014 беб Маші Те рого ув 1 5 16 15 біс їув Уаї Тйг о Їле Таг Суб вро Аза бек біб бег ї1зе 5І1у бер обеє а 25 За
Гей мі5 ТеротТує бів Сів Буз бро Азр обі беб бро фуз ви ги Біє 35 за 45 іме Туг діа беб сти бер ре беєс біу Уа) Рго беє Агж Ре беб о біу 55 ба его біу бЗег о біу Тис А5роРйе Тпгоївн Тк 132 А5п бего гей біз діа 655 78 75 та
А5р о Аїв АТа Аїа Туг Туб Су Ні біп о беб о беб баб ре) Бго Тер 85 зо 95
Те вве пу біп о с1у Таб був Маї бін о Тів ух Аби Те Маі Аза Аха 100 185 тв
Бго зЗес оМа| Рпе Із1е Бве Бго Рго бер дер біз біп о бец Сух бек о б1у 115 122 125
Тис АТ бес Уві Ма1 був Ге іейз Ап Аблп Ре Тує Рго Акя 01 Аїа 130 135 148
Ки5 Уаї біп Тер Гуз Маві АзроАєрп Аза бен біп о бег бу Аби беб бів 145 150 155 1658 сій бек ма) Ті бан б) Авробег ої1у5 АБИ оБеє Тйг о Тує зегогей бек 1ї165 178 175 бев Тиг Гей ТВгоцео бек орув йіз Азр Туб бій Суб Ні руя Маї Туг 188 155 138 дів Суб ім уаі Те Ні біп біу цен баг бек бго Узі Те Був бег 195 78 235
Рпе Ахо Акр (у а1ш суб кг1а» 73 «211» 214 «2125 РЕТ «2132 Штучна Посліквовність «2205 «221 джерело «иа3» г/приміткає" бйпис Штучної послідовності: Синтетичний поахлеттяд" «4002 7 бій Т1є Уві їем Те о б1й бес о бго дзр о РНе біз бек Уві ТБ обго Гуз 1 5 10 15 біз мух Маї Те Тте Таб Су» Агш Аза чек (Ма беб 116 бІ1у беєб Чет 2а 25 За їец Мі Тер тує бів біп Бу5 Рго Абробіп бек Рбго їу5 Сец Бен Це 55 4а 45
Куб Туг АІз бегобіп бек Ре Зег о біу Ма1ї Рго бе Абд Ріе бек с1у
БА
Зеє біу бек о бпІТу Те о д5р Ре ТНе оїей Те Т3е А5п бег їеп бін діа 55 7а 75 58 сій Азр о АЇв Аїа Тиб Тує Тує Су Ні іп бБеб бегобее Сеа бро Тер 85 зе 25
Те бе богу біп біу Ти рух Уаїз бій 116 ув ден Тс Уаз Аїа Аїа а 185 це бго баб оуаї Ре Те пе Рго Рро беб дер бій біп о іез Гу5 бер біу 115 128 125
Те Аза бер уві чаї Сже Бей Гей Ази Ази РНе Туб Рео Абв ази А1а 130 135 146 їує Уа йій Тер осу5 Мді Ар Ап Аїів Се сій 5еб б1у Делобеє 3
345 150 155 1658 би бег Узі тп біз бій АвроЧеб їу5 А5робеєк о ТИг Тук бек о Геу 5ег ї6б5 173 175 бев Те бец Те оісешй бБего гу іа вер Туг 1) Туз Ні Гу5 Маї Туєе 180 185 138
Аза Суз Біз Маї Те нів піп с1у їси бер бек Рео Ма) Те Гуз бек 155 гай 265
Ре Азо дер су іш Суб 210 «18» ва «211» 17 «212» ЕТ «213» Штучна Послідовність кгга» «221У джерело «223» /ариміткає"Опис Штучної послідовності: Симтетичний пептид" «гйох «2215 МО0 ВЕ5 «2225 ї13у,..53) «9223» Будь-яка зміно кислота крім Ази «або: ВО су тіє Хва Теробеє чего б1у С1у 112 Б1Уу Ту Аза йарозеє Ма! уз 1 5 12 15 щу «2125 81 «2115 17 «212» БКЕТ 572132 Штучна Послідовність «га» «821 джервло «283» /примітках"Опис Штучної Послідовності: Синтетичний пептид"
«2213 МОЮ ВЕ5 «22» (53..153 «223 Бидь-яка аміно кислота крім бегб або Те «Нк 81 біу Їїе А5п Тер Ха бер бз1у Бім ТТе п1у Туг А1їз Азр о бЗег Уа) Тук 1 5 16 15 сіу «218: 52 «2115 125 «т1йх РАТ «713» Штеична Лослідовність «228» «2215 джерела «2232» /приміткаеє"Дпис Штучної Послідовності: Синтетичний поліпептид" «2282» «2212 МОБ ВЕ «223х (521..1523 «2235 Буде-яка аміно киспота хрім Аби «40а» 82 біз маї їй ву мі 010 бБег біу біу Сіу іви Узі біпорРо бі Аг 1 5 16 15
Зегоівц АгЕ Мен бБеб Суз Аіз Діз баб о біу Рпе ТвгоРве Ар одер тує 28 25 3а
Аза Меї Ні Трр Уві ав біп Аза бго бі Су біу ем осіб Тер Уаї 35 за 45 бер Піу ІТїе Хаа Тгр зег о 5ег 5іу бім їїє п01у Тук Аза Абзр о бес Уві а
Гуз «1у Аве Ре Тае 13е беб Абе Авр А5п Аїв уз А5и ЗебоБбец Тук 5 79 75 ва
Сец бів мет АБ обес Гео Агро бів бів дер ТВб А1а івеш Туг Туб Суб 85 ІЗ З
Аза АсК оАзр о ї1їе біу С1у Бе обі бів Ре Тує Тер Ави бів осіу їв) 188 та лак
Жер о біу дгр о п1у Те ія Маї Тег оУві беб бег 115 128 «212» 83 «»1ї5 123 217» КТ «2132 Штучна Послідовність «2255 «221» джервло «223» /приміткан"бОпис Штучзної Послідсвності: Синтетичний поліпептид" «2285 х2215 МОВ ВЕ «авйУ (54) ,(54) х223» Будь-яка аміно кислота крім беє або Таг «дбоз 83 спіши маї бій їез Ма1ї С1ц бе осіу біу б1іу сецзч чаї біп о рго а1у АгрЕ 1 5 18 15 бЗеб бен о йсроїви беб осСуз Аза Аїа бе біу БНе ТНе Рне Дер Авр о Тує 2а 15 зв дід Мет Ні Тер уві Аге біп дів Ребо о біу у біу їеп б10 Трромві 35 да 45 бег бі І1е А5п о ТероХаа бег о біу б1у Т1е 01у Туг Аза Дер бег Уаї за
Му Біу АгЕ Ре ТНг о ї1є бег деш Азр дп Аза Гуз А5побег іеноТує
Б 7а 75 ча
Гей біл Ме деп обеб їез Ав А1а біз Авр ТВг Аза гео Туб Туб Суз 85 зе 25 дід Агв Ар ої16 біу б1у рве бі біб Бе Тує Тер Азп пе біу Тен т10о 185 КВ
Тер обіу Аг ПІіу Тйбо ен Маї Те Мі Бек бег 115 129 «21855 А «211з 459 «212 РВТ «2135 Штучна ПосліДОВНУСТЬ «220» «24ї» джерепи «2233 /приміткае" Опис фтучної МПослідовностії Синтетичний поліпептид" «ий» «24» Мор КЕ х223» (521.52 «2253. Будь-яка аміно куслота крім А5л «чааз 84 біс Уа) біп о івуи Узі 010 бог біу бі біу Гви Узі біп о рро бі Аг ну 5 16 їБ
Зег іс АгЕ ієнобебє о Суз Ата АТа бек 51у Ре ТПг Ве Ар о Ар о Тугб 7 25 за
Аїіа Мет Ні Тер узі Агнобіп Аза бго біу Гуз б1у зу 9316 Тгр о Уаї 35 за 45 бег щіу Ї16 Хаа Тер о 5ег бог о біу біу їі біу Туг Аїз Ар бог Маї
Ба 55 во ув біу Аги Ріпа Те Т1е о беб Ага АзроАзп біз Гуз Азп бек огей Ту 78 75 за їен бів Меї А5побеє се Аг іа бій Ар Те Аїя іє Тує Туб Сув 85 Зо 95
Аіз Абе о АБр її пху біу Ре щ5іу сії РНе Тує Тер Азпобве зіу Те 160 185 о
Тер общіу Асвобіу Таб ого Мазі Те Уві бек обеб Аза 5ес Тпг о ує Б1уУ 178 125
Бго зегоМаї Рпе Рго Гей АзТасбро Суб 5ег Агв чего ТВг о зег бій бе 130 135 148
Те Аїа дів їво сб1у Суб ес о мМаї ух Ар оТує Ре Рго бІ6 Рго Уаї 145 158 155 160
ТР оЖаї бек Тер Азо Зес с1у дів бен Те бек о біу Уа! Ні Те БНе 165 176 175
Тго дія Уві іїемобіп бег о бер біу ї2ц Туг бер Ген бек обегв Уа! Уві 188 185 196
Те Уаї Рго бек озер б5егорез біу Те Гуз Тег о Туб Те Су веп Уах 195 зва 225
Ар оМНі5 Гує Рго бек А5п о ТВгоГух Маї дер ух АвроУаї 01) беб Туз тів 515 220
Туг біу Рго Рга Сує ко ВБго Су5 Рго Діва Рго бій ре гвуи 01у б1у 225 23а 255 249
Рго беб Уа) Бе іс Рве Ре Ре їув Бгто уз АзротТне Меб Ме ї1е 245 зо 255
Зек Авн оті Рго бів мМаї ТВеоСуз Маі Мяії Маї дер Уві 5ег сій 519 260 255 279
Азр бго біз Мві біп Бе А5п Тер о Тує Мазі д5робіу Уа! сій Уаї Ні 275 2859 285 доп Аза уз Те Гуз Рго АР 51 бін бі Вве А5п о бег ТВгоТує Дер ча 235 зао
Уа мМаї бегбомаї пен Тве о маї Се НІ бій АвроТер бен Аби сіу Гуз зах 316 315 зго бі Туг уз Суз ув Маї бегоАєпоїу5 С1у еп обр баг Бк Те б
325 зза 335 уз Тиг Гіє бек оїув Іа бує Біу 13 Рго АкЕ бін Рео біп Уаї Тук 348 заУ 256
Тиб бе о Вро Бко бег обі 515 бін Мет Те ух Азпобіп Ма1ї бевс Ген за зБа 355 чеб обу Азв Маї Був С1у Бе Ту о рео беб о Аер ЇІ3Зе Аза Уаї а1й Тер 372 375 зве бій бегод5а с(1у чіп Рео біб деп Ап тує бух Те Те реб Рго Маї 85 зав 335 4395
Геч Агро обек Ар б1у бег о РНе Рне їеноУаї бек Ас їеу ТВг Ма) Авр 405 Ав 415
Гуз 5ек Ага Тгробів б)1М біу Д5п уві ВНе бер оСуз бек Уаї Меї Ні ч28 425 аз бів Аїа івиа Ні Ази нів Туб Те бій Гу бегосео Зєгб бе беє Гей 435 440 45 біу губ 350 «219: 85 «2111 453 «2125 РТ «213» Штучна Послідовність «220» «8212 джерело «225: /приміткає"Плис Штучної Послідовностії Синтетичний поліпептид" «22 «2215 МОЮ КЕ «2233 (541.54) «223» Будь-яка аміно кислота крім бек або ТЬг «ий» 85 баз Узі біп іви ма1і о10 бек обіу біу біу ви Маї бів Рео біу Аев
1 5 їв 15 бек іє АгЕ іенобег Суб Ада Аіїа 5ег С1у Риє Тиг Ре дер дер Туг 28 25 зо
Аіа Мет НІ Тер ма! Аг 515 йіа Рго біу Гух 01у іє 519 Тер Маї
За Ав 35 чес біу (16 Авп Тер о Хаа бев С1у Ту 11е о3у Туг Аза Азробек Маї за 5 Ба
Ку біу дгр Ве Те (16 бегоАге Ар Ап А) Ту Абпобек Гей Туг 65 7а 75 58
Геч бій Мет Абп о бего1їеч АгЕ бів бін дер ТК Аїз зе Туг Тугб Сув 85 за 5
Аза АгЕ Ази тів біу біу Ре б1у Сі Ре Тук Тер оАва Ре бу ее 5/5; 1а5 ме
Тер б1у дев сФ1у Тв се Мяї Те уаї Чеб обее АТЗ ес ТвРогух біу 115 120 125 рго бегоУа)! Рпе Рго їеи дів Рго Сує Бег Агро оЗег Те 5Зег бід 5еб ї13за 135 140
Таг АТа дів Сеп о сіу Суб реву уаї уз А5р о Тук Ре Реб бій Рго Уаї 145 158 155 168
Те Уаї бве Тер Ап обег о о1у біа бен Те бек біу Маі нів Те пев 165 Ме ї75
Бго дів Маї івем бів зеєб ев біу їєб Тур бек Ген бегб бес Маї Маї ї1ве 185 130
Те Уа! Рго его 5ег оБек рез біу Тс оіїух Тве Туб ТК Суз Ап чаї 735 288 785
Авронія уз Рго Бег Азп ТОгоГуз Уаї Ар Гуз Абе Маї 510 Бак Гуз 218 515 220
Тук бї1у Рго Бра Суз Рез Рго Су» Рго Аза Рго бід Рье Ге біу Сіу 325 230 235 340
Рго бег Уаі Рпе іє бе рро Ррооїуї Бро Гу5 Азротвс се) МеХ 11в 245 25 255 чек АгЕ Те Рго біз уаї Таб оСух Мі Маї Маї Ар Уаї зегб сб1пй 5 258 255 27
А5р ово пЗа Ма)! «зп Рая Або Тер Тув Уа) Азросіу Ма1ї 516 Мах Бі 275 280 285
Акп о Аів бує Тпгоїуз Бго де бін бі біп Рпе А5п обес Тас Туг Ар аа 2535 зо чаї Уаї бЗеб мві ен ТБ уаї сей Ні5 біп АзроТер о їву дхп сту Туз 05 ща ЗІБ 320 січ Туг бух Суз Гуз Маї бегодеп о їу Сбіу бвиа Рго беб беб Те бі 325 з3а За5
Ку тТне Тіе бегобуз А)їз Гуз біу бів Рко Аве Си Рго бій ма) Тує з4ао 345 358
Тигоієей Рго Рго бебобіва бій бій Меї ТвВс губ деп біп Уа)з бег і ей 355 зве 365
Бен Суз Аїа уаї уз 01у РрБе Тує БРго бек Азр Т1іе Аїа Уві бін Тер 5; 375 зве сій беє Або боту бій Бго Ява ДепоДев Тук дує ТВг Те бро бро Уві 385 зав 395 дав
Гбеш Ар обег АБробіу Бак Рпе Ре ів Мазі бегодед о їви ТіК Уаї Авр дах по 415 ух Баг АкЕ Тер обіп бід біУ деп о Уаї Бе беб Суз бБег Узі Меж нів 428 425 48 біз діа рей Ні Ази нів Тує Те бій ух беб сей бебобей беб о бей 435 448 3445 сіу їу5 з5а «2102 ВЕ «2115 В56 «12 РТ «2135 Ножо саріепь «ва» ве ме біу А1з Аз дгш о бев о рго Рго 5ес Аїз Узі бро біу Реб Геи Гей 1 5 19 15 сі без без обец івео їе) без біу Ма. бец АТа Рго бім 5І1У Аза бег га 25 за
Гей Аг їебоіен од5р нії АбвоА1а ісц Маі Суз бегобіп бро (1у во 35 за 45
Ап Суб ТВгс Маі уз деп бег ТВг о Суз Геч АБроДеробег Тер Се Ні 5О 55 а
Рго Ав йо оїеи Тс бро ер обег Вго Гуз дер Сем біп 119 бій Сен 55 70 75 а
Ні Ре Аів Ні Те обів піп біу Ар іез Рне Рро Уаї Аза Ні ТіЄ за 95 піс Тер Те йвеш бій ТНг оАвройіїа бев ї1і8 ву Туб оіеб 316 біу АТа 138 105 118 біц їз Зек о Ууаї бен бій Бей деп Те дьп біз Асдоївеч Сух Маї ДеРЕ 115 129 125
Рпе бі Рис ісп бер рух рей Аге Мі Мі Ні5 Аг АрЕ Тер Агро Рве 130 135 148
Те Ре обее Ні Ре Маі Ма1ї бер Бго Ар о с1п б1и Туб 510 Маї Тве 145 їз 155 168
Маї Ні Ні5 фей о рго Гу Рго їТе Рго А5рос3у Дер Рго Аєп Ні бій ї855 178 175 бер оіув Ап Ре іє Маї Рро дер Су бій Ні5 Аза Ага Меї Гу Уді 15о 185 ав
Те ТНе Рго Су Меї чер бебробіу зероїей Тер Ар оВБео Аза Тіє ТАг 135 292 285
Маї бів Те ів ст: А1я Ні біпоіви АкроМаї беє Ре Тпб Гез Тер 210 215 й
Акпосіз бе Таб о Ні Туб іп їіе сен ов Те бег Ре бго Ні Мет 2725 230 235 зв
Аа Ні бе обу Рпе ба Ні Мет мі5 Ні ліве Рео Ажа Рро Аге 245 250 255
Рез бін б3о ве Ні біл Абе обеб Ази Маї ТБ осей Тве Меб дов ЕЙ зе 265 278
Кео о цуз 01у був Суз Агро Ні вій Маї біп Те біп Рго РБе РНе бег 275 288 285 бек Суз Гез о двп дер Су ви сАгрЕ Мі Бек йіз Тік Уа! бек Су5 Рго 230 295 зва біз Меї Рго др о ТВге бро сіб Рео Тіе Ркео Ар о Тує Меї Рро зе Тер за5 зв 315 28
Мазі Те Тер оРне Те Те с1уУ Тіз бегб (і6 Меч Сем Уг) Ф1у Зоб омаі 325 зза 335
Тїе ів без 118 Уві Суз Меб Таг Тер Аброїго дія біу Рео біу бЗег 348 з45 358 біц суб Тук бек Азр Ар о Тиг оТу5 Ту Тиг о Авробіу ів Рго дів іа за зЗБА 355
Азроїев г3Зе го РКО Рг рез Гуз Бга Аго ух Ма! Тероїде Те Тує зв 375 зва
Зек А1з Ар о Ні Рео бе Тубомаї АброМаї Маї Сей бух бе дів вій 385 зав 395 зав
Бпе ієм їец Тпгодія Суб ОїТу Таг бій мазі Аїз без АзроГец ївеи Б 4а5 ав 15 біз бів Аза Т1іе бе бі) Аїва бОіу Уві Меї Тіг Тер Узі б1у Аг бій 420 425 38
Ку5 бів Бі Меї Маії бій бебодзи Зек губ І1е Ї1е Уаї ви Суз 5еб 435 за да
АгЕ обі1у Тс о Авба о Аія губ Тер біп Аїіз еп о ігц 51у Або бі Аїа го 450 455 468
Узі АРи Мей Абе оСув Азр Ні біу зуз бо мМаї біу Азр Гец рне Тег 455 470 475 488
Аза Аїа Меб деп Меб 16 рей бго АвробНе їу5 Ар Ро Ата Су5 Рпе 485 498 495 біу Тг оТує маї мі Суз Туг Рпе бек сій Маї бек Су Дар бі дер 5ав 505 5ІВ
Узі вРго Аврозеи Рпе біу діз діз Бго АР Тут бро без Меї Ар Агр 515 528 525
Рпе бій бій Маі Тубє Бе Агв Т1е біп А5роїес бій Ме Рае біп бго 530 Бі Ай 5іУ АгроМежї Ні АгГЕ Маї 51у Бін іви бек обй1іу А5р оАзп о Туг ен Аве зав 558 -з 55656
Зеворго оіу Біу Ага бій Бей Абе Аїв Аа іви А5роАср бпе АгЕ Дер
Ба 578 575
Тер опів Уаї Абе Суб Бго АброТрр ВБНе бі Су5 бій Аз бе Тув беє во щ85 БВ
Аза Азр Авробіп бер Аза Бро Зегоїєц Азр біз бій Ууаї Ве біш 510 585 Бог ба
Рго їейоівцоВго Ро б1іу Твгобім ТЗе Уа) ух Або дів Рго Гей Ууаї -щ-е 515 хв
АгЕ іч рРго біу бег бій Аза Суз ген АЗа ТЗе А5роРго Гей Мі Б1у уже 5ЗО 65 5ІВ
Фо бій 5іу 51у Аїва Ата уаї Аза їу5 іч біб Бео Ні Сец біп бго 545 55 555
Агк пі самі го Аа Рго іп Ре іен Ні ТВе Гей Уві беб Аза Аза сво бЕБ 678 біз 415 біу Аїа івеи Маї Аза дів Ма! бі Рео б1іу Рго Гез дів Дер 675 ЗВ 555 біу дів Аїа Маі АгЕ Гей Аза іеи дів бі біз біу бій Аїа Суз5 го бо 65 тва
Меч зеч б1у беб о РБго б1у дів біу аг дай о беб Маї бе) Рпе веб Бр 785 т71в 715 728
Уаї Азрорго біз дер оче бро івеа біу бек обБеб Те оРра Мет дія 5ек 725 730 735
Вго Ар без Сей Рго Сі дер Уаїз Агро сі Ні Сен біз бІУ Бе Меї 74а 745 750 ен бяг Мешд Рае 010 бій бер зе) бек Су бій Аза ШО ОБЦ бію Суб 755 75 755 зЗекоАге о Рео Аза Меї Маї Бей Таб Азрорею Нів Те орео Туг аз 1 та 775 780 бі б1п дев бій бер Маї бтпобегоА5р бій січ Туб Гів бевк АгробЗег
785 780 735 ев бек Бго сій рроа рРго бій біу їеи Те Сі Меє бін біз бій бій Ці ва5 ВІВ 55 бБіч біз бій др о Ррго б1у 1у5 Рго Аїва Сей о бго Гей бегоРго бін дер 525 ВІВ іец біц бегозенм дер Яве Гей біп Абе бі бен сен Ре Акрр об1 їв 835 542 нах біпогбуз Ап бегозіу Тер о АвроТіг Меї С1іу беб біз бак біц оту бго о 855 86 бве лів вх «2193 87 «2115 833 «212У РТ «213» Ношо зарієпь «4002 87
АгЕ ієм Мез А5ро НІ Ав Аза сей Маї Суз бер обл Рео ту Ге Авп 1 5 18 15
Сук Тиг Ма) іїу5 А5п о бег Тре Су їенподяр А5робеє Терої3е Нів Бро 2а 25 зв
АгЕ Ап ово) Тпб оРго Зегобегобго уз Дер іез о біп Гле сій бео Мі за а5
Рпе Аза Ні Твгобіп бій зу А5роіеи Бе го маї Діа Нія Те с а
Теротне беж обіп Твге Ар дів сбег Тівоїеу Туб бе бі б51у дів бін 55 7а 75 ще
Гей Зег о Маї ем бій Ге д5а Тае ДБ5л обі Агиоїени бує мМаї дб РБе 85 Бі 25 біз РНе сем обеє іу5 Гей Аг Ніє Ні Ні Ага Абе Тер Аре Рне Те 196 185 18
Ре 5есе нів Ре Хаї Уаї Авробго Азробіп біз Туєб біз Уа) Таб Маї 128 125
Вів Ні іви Бго уз Рго Тіе Рго йзр о біу Азр о Рго Дзп о Нів біп о бег 130 135 140
Су Ази РНе їем Уаї бго АБ о Суз біб нів Аїа Ася Меї Гуз маї ТВ 145 158 155 169
Те оРго Суз МеЄ бег бев біту бегоїеи Тер 45рорео деп т1е Твб мат ї65 178 175
Січ Те без біц Аза мі Бій 1еу бсв о Уа1 бев Бе Твг ге Теродей 180 185 їз сіц бас Те Нія Ту п3й Тів (еу їн Тр, обБеє Рпе Рео ні Меї «1 185 зад 205
Абп Ні бегосСуз Ра бід Ні Меї ні ні 112 Ре Аза Рго Агвобго 212 215 иа біз Біш Ре Ні біп Абе бегодеп Уді Те обей Твгоієч Аре асп ей 225 238 35 248
Ку5 бі Суб Суз Ас ні біп мМаї бій ів біб Рео рве Вів беб о 5ек 245 258 2555 бує цем Аа Ахробух зе Аге Нів беб Аїа Те Маї бек був Рго го 265 278
Ме рго Авротк Рго бі бро 112 Рео АвроТує Меб Бго Геу Тер Уві 275 зва 285
Тус Тер рве Т12 Тиб об3)у Т1іе бек Ті Ге) бе) Уаї біу бБег Уаї 112 23а зч5 Біг ес оїею Т1фе о уУаії бух Мес Тне Тер дгр о Сеч Аза піу бро о34у Бебі зах зів 315 зів уз Туг бег Авр Дер ТІК Був Тук Те Азр бір Гец Рео Аїа діа др 325 зза 235
Кен Ті Бко Бео Рго дез Гуз Рго вбгрЕ бух уаї Тер Ге їїе Тугб бесе о з45 358
Аза Азр Ні Ребо цем Тує Уаї Дер оМа1ї Маі Меч Муз Бе Аза бій РБе 355 зва ЗБ
Мем бен Тве Аза Суз бІм Ті бій УЗ) Аза Гей Ар оїез бен бід (и 370 375 зва біп Аза 13е беб бій Аза біусуаі Меж Те Ткроуаї зу Ар бій Гуз
З85 390 335 дев сіп бій Меї мві бій бек Ап бек о іїу5 Ті 112 МУаї без Сух бег АгЕ
В ах бІ1у Тис о Аго Аа ух Тер о бІ10 віз ви без с3у Абе оту Аїя Рго Уах 429 425 аза
АгЕ іївч Аг Суб А5ромі п1у ув Рео Маї біу А5р гей пе Пр діа 435 440 445
Аза Меє А5и Ме І1в ен Рго Ар Рбе іу5 Аг Рео Аза Сув Ре б1у з5о 455 ава
Треб оТуг Уаї маї Су5 Туг Рре бег бін Маї бек Суз Азр о бІу дер Маї 465 ав 475 45
Рго Азроіву Ре п1у Аза АзаобБго АгЕ Туг Рго Ген Меї Ар оАгЕ РНе 485 зза 335 б бів ма) Туб Ре дгя їТЇе біп А5робей с3Зи Меб вне бій Рго біу зав 505 518
АгЕ Мет Ні Абе Ма1ї б1у біз Тен обек о біу А5р Ап о Туг Ге Агро бес ни 528 525
Рго біу б1у Агд б1поіен Аге о Аїа Аїа іец Ар одДке Ре Аг Авр Тер 53 535 зай бій Уаї АгЕ Су Рго А5роТер Ре біб Суб пози А5п їв Тує бЗев Д1а 545 550 55 вБа
Азр Азр біпоАер Аза Бро бе ів А5робБі) біз Уаї Ріж СТ) бій Ро
БОБ 578 575 іецч івн о рго Бро оЇїу ТВгоЗІУ їїе Узі іу5 АгРЕ А! Рго Гей Уві АгЕ ве 5 БІВ сій рго біу его обів Аза Суз5 Гео Аїв 16 Абр Рео бец Маї біу 0 595 вай 55 біш бі біт Ата Аїа Уаї Ата Гу5 їеци БІ бро нів оівцу біп Рго Аге є-о 815 яв біу ів рРго АТа Рго біп Рга ізо Ні Тк Бей уаї гео діз Дів 1 525 538 135 ав
Фі біу дів о зєм Уаї Аза Аїа Маї біз бро бу Рео їви Аза Азрос1у ва5 еза 55 діа Аїа Ма) Агро іч Аза зви діа б1у бій б1у 19 Атя суз Рго Гей оо 65 ва еп сіу бак о Рго б1у АТа б1у Дер Депо обеє Уаї Гей Ре Гей бро Маі 675 5 585
Ар обго із йбробеє Бео рви Сіу Бек Зеб ТВгрорео Мет АТа бе бго о-За 695 7 йароцен о беа бго 610 А5роМаї Аев обмінів ів бій оту Кен Мет Сем 75 В 715 728
Зег іа Ре Бім бій бве Бей Зеб бу5 б1п Аза біп бІу біу Су Зес 725 738 735
Аги Рго Аза Меї Узі Ме) Те одер бойні Те обо Тук Дроби 7ле 745 75 біп Абнобіз беб Уві бій веб одер обіп о1Уу Ту Х3в Бве АбБроб5еб бег 755 тва 7655
Бго біп Рго Ро біз б)у рен ТВг бій Меє оз 63ч сіб б1ц бій БЦ 770 775 788 січ бів Ар обго аїу Гуз Ргро діа іви Бгто ви бегорко бій дер Мен 75 738 795 15) сій 5ебоїсь Аг о бее ген біпоАсНобіп іеу 1їеб Ре дер бій Ге бій ва5 зів 815 іїу5 Азпобзег сб1у Тер Ар о Те Мей біу зес зі бер біз біу рРго 5ег
ВІЙ 825 вза ків «218: 55 «2135 731 «2125 РиТ «213» Ношто зарігаз кдбах Ва
Ме обго Ма1і Рга Тер Бе рей іео 5еє із біз Цен 6іу Аг беб бго 1 5 19 15
Маі уаї рей бег оіївегц 010 Аге о іез Ууаі Сіу Рго сбіп Дер діа Те нів 2а 25 за
Сух бер о Рго Уаї Бег оіеи сій РрРо Тер о біу Абробій піч Дер Бе Аве за 45 уаї біп Рис іїсі діа сіп біп бегоіви 5ес ісп діа Рро Уаії Тае 418
Ба дів Те Аза Ас ТВг діа бен обее біу Гей бес о біу Ат Дер бі РЕ 65 7а т ча
Ага бін Ота Або а1у Агбд о О1у Гуз беє Тер Маї Су ївц Бек ген б1у 85 за З5 біу Баг Ту Ап ТАБ о біШ Рго 5іп оту уз Я3у Гей бег Суз Абе Тени 106 155 т
Тер А5р бег дьр Ті ем Су5 Се Рго б51МУ Або ї1е Уаї Рго Аїа Рго 129 125 сіу Бго Ууаї Се Аза РРО ТВ ОВів Бен біп Таб ост їсо Узі цен йде ї138 135 132
Суз бій куб БІіч Те АхроСузх АБроцєн Суб Меч Ас о Маї Аза Узі Ні 145 159 155 ібя іеш Аїа маі нів біу нів Тер обім б30 го З3)п дер бів бій Туз Ре 155 170 175 сім сіу Аїа Аза дер бек 01 Мві бін бід Рго Агро оАб5п АїВ беб їв 150 185 за
Стп А15 біп о хаі Маї ви бек обве біл Аза Тує Рео ТВе Аза Асе Су 135 200 зе чаї іей Бей (іш Уві біл Маї Рео Ата Аїа іви маї біп РБе о біу бій 218 215 220
ЗегоМаї оту бег Уві Маї Тук Ар Суб Рне біз Ата Аїта Гей с1у 5ег 225 236 235 за бі) уві дгрої1е Теробвб Ту о Таг обій го Абе Туб бін Бу бій Гей яд 258 255 деп онів Те біп біп іо бро дер бух йрв о с3у Св щі М3і Тер ойеп 860 365 779 бек ї12 Рго бегоСує Тер Аїа іви Рго Тгрозеч деп Уаі бек Аза др 75 280 зна біу Ахр дп Ма) Ні є) маії Мен Ап Уаї беб бій ото біяй Ні БНе зав 235 зав с1у їгй бер оїемоТує ТеРродаи сій Ма, біз б3іу Ргео Ргбо ух бго Абе за5 238 15 зго
Теронія уз Ап офей Те біу го біп Ті Т1е Твбогло Ап оНІВ Тег 325 3за 5
Авиоіен о уаї Бго Суб Ге) Суб ї1іе біб Уаї Тер бро їєу 010 Ре дер зло 345. 35 дег маї Аг Ти й5а Х)в Суб го РБе Агро біз дер оРго Ар о Ата Мі 355 зе ЗЕ бів ойза іви Тгробій Аза АТа Абе оїеви біп бви Тез Те Меб біп бег 378 375 389
Терівн ви дер Аза бро Су бегоіян Рго діа бій Аза Дія ви сСуз зх зав 395 дов
Тер АгЕ Аїз рго сіу бі ер о бго Су5 сій Рро Ге Маії Рео Рго Гей 45 на 415 его Тер о пїц й5п Ма! Твгб Ма! бер обу Маї іви б1и Ре Рго Ген бен д2о 425 аз
Гуз біу Мі Рео ай ей Суз Маї біпя Маі Авп о бег бек бі Гуз во заг 445 бій іен бій Фіш Сух Мей Тер о Аїа АД5робЗеє Гей біу Ро Кез Гу Авр 450 455 два
АБроМаї Сец ів ів бій ТВгб др біу Бго 03п о Азр о А5поДря бег Тен ав 478 475 484
Су5 Аіа без 510 Рго зеб 01у Суз Тбр оЗер о зіес Реро бве о їу5 Аїія Зег 485 зв 335
Те Аг Аза А1Та Аге ого З1у біб Тук цем о їви біп Ар бе біп о беє 5ао 55 БІВ
С1у бій Су5 зем бів ви Тер Азр о А5роАзроїез біу Аїа Гей Тер Дів 515 522 525
Сує Рго Меж Ар уз Туг тів Нія ух Агро ТгроАів із Уві Тер їв 530 535 ій
Кіз Сує Мецоівеи Ре А1з Аїа о діз сен бек обео Ті ісчобец фен Гуз 5а5 550 555 ББа
Еу5 Ар Ні Аза ме С1у Тер о івго Агро їз о їец |у біп Азроуа! Аве
У 575 бегопіу діа діа Аіз Агн Оу АРЕ Аха Аза ів їео ї1ео Туб бев Аїа ве 85 зай
Ар Ахробек пту Рпе С1ш дгв Їеч Маї б1у Аза еп Аза 5егодія ву 595 вай 505
Суб біп без Рео іаип Аси Уаї А1із Маї А5робез Трробве Авд Аг є1о 615 БІВ
Мас беє діа біп с1у Рго Уві вів Тер Бйе Ні Аа с1й др Асв бій 525 530 635 вав
Те ої; бів бїї оху біу Маї узі Ма1ї ба Меб Ре беб бго сіу Дів 55 550 555 маї діз без Суз 5ег б) Тер се бі Ар б3іу Уві бек сту Рго б1у
Би 655 Був дів нів біу Рго Ні Ар Аїв Ра АбЕ Аза бек сей беє сСуз Уві їеб 675 5ВА 685 бко Азр Ре без 030 С)у Ас Аза Рео БІ1у бе оТуб Уа) Ту Аїв Су вза ва 786
Рпе А5р дер ів іш віб5 рго дер Аза уві го дія тен Ре АгеотТне
7а5 7 715 ач
Ууаї го Уві Ре Те Сен Вго дев бій іеу Ро Дер о Рве грец сту А1а 725 73 735
Мем пі» (ій Бко Агро Азія Рго дев обев біу Аероге) сій 54) аАге Аїа 748 745 75 аій бій Ма| беб Ага Аїа Бей бій Ро Аза Мей двробБеє Тує бе Ні 755 758 765
Бго Рго б1іу Твгобго АТа Рго біу гро біу Мзі б1у Реб 01у Аза біу 770 775 78
Рез біу Аза Я1у А5роа1у Тег 75 738 «210 83 «2115 771 «2125 РЕТ «213» Нело заріги5 «або: З
Гей бій Агд іїемоМаї С1іу Бро біл Азр Дія Те Ніз Суз его Рро Маї 1 5 16 15
Зег ів 014 бро Ткроб1у АБробін бі Аго Гей Арно Уві біб Ре Ге 2а 25 з8 дів сів бій бегоіво зер оісц Аіа Бго Маії Ті АТта АІз Твг дів Дер 35 ча 35
Ти Аза со беєс біу сец бе: біу дів А5р о біу АРЕ АвЕ С бій АгеЕ
Ба 28 біу АгЕ О1у буз бег о ТгроМаї був іви зегоівй 01у БІ1у Бебобіу деп 65 78 75 ча
Тнгоб1б Рго бій бу Гуз б1у ге зве Су АгЕ Ге Тер А5робег дер 85 за 5
116 193 Су гей Рго бІіу А5рої1із Уді Бко Аїа Рго біу Бго Уві ей 196 185 ТВ
Аіа бео Те Ні зем бів ТВебосій іс Ма1 Зез дер бух бій Гуз 122 125
Твб оАвроСух Ар іє Суз рем дер Уві Аїа Ма1ї Мі їсш Аїа Маї Ні це 135 140 сбіу нів Тер Бім біб бго сі) АБробіз 010 фу Ре бту б1у дів А1а 145 158 155 169
Азробег 5Ііу мзі біз бії Вро Агв Ап Аїз бегоген бій Ата біп Уаї ї65 178 175
Уа1і їв о бее Ріє біп Діз Тугорбо Те Аза де Су5 Уа1і Гез о їву бін 188 185 їв
Узі бій Маї Рео Аха Аїа беи Уаї біб РНе біту бій Беб Маї біу Бек 185 зад 285 уаї Уаї Тує АвросСмх Ре бій Аїа діз ісп б1М бегобпімн Уаі АгроЇї1є 212 715 Уч
Тер обас Тук Тс о біп бго Аг о Туг бі їу5 бій Гей Азпоніз Пе обі1й 225 238 35 248 співу рРео АвробСув Абв о б1у ви біз Мазі Тер деп беб ів РБго 5егб 245 258 2555 бує Тер Ат ів) бро Тер рез деп уУаї Зес Аіз Дер о а1у Авр о Авп Уаї го 265 278
Ні ів Уві їси А5п омМаї бесобіц біз бІп Ніє Ре пзу гу бебоїеу 275 зва 285
Тус Тгр Аби іп оуа1ї біп о біу Рго Рго уз го Деми Тер Ні Гуз АБ 23а 295 БІБ ес о тве біу Бко сотий іе Те Таб бен оджа НІ Те А5ромен ад Бео за5 зв 15 зго
Суз іец Су5 112 бів Маї Тер бго їги 53 рго Дер сек Уаї Агро Тіг 325 ззо 335 йаб Хі Сух Бро РБе Аге оз АероРго АБ Аза Ні от Аеп бен Тер хо 45 З5В аз А1в Ат Ар ем ба Бей Ївеа Те уез бів бег Теробви Гео Ар 355 зва ЗЕ5 діа го Суз 5егоіїей Рео Ата біш Аза Аїз Гец Сує Тер о АбЕ Аза бго 379 375 зве бі б1у Ажрорго сСуз Бій Рго Мез маї Бео Бго Се) беб ТеробіН дяп їв 330 335 дай
Ууаі1 Тс о Мві бер іму» Маї ви бій РБе Рго іез їй їуз С1у Ні Рро 485 «16 315
Авпоіємн Суз Маі бій Уаї АвпобБег бе бід Сух Гез о біп рви біп б 28 425 4за
Сує сабо Тер о Ата Азрозег о гец обі Бго їви Буз А5р о Азр узі ен Цен аа 345 ес біо Те Агш о біУ Бго біп Азро Ап дев баг Ген буз Ата Гей б аа 455 доо
Рго бег біу Суз ТВе о бег іео Бро чего іу5 Аза беб Те АгРЕ Аїа АТа 455 дув 475 ре
Аг їз біу бім Ту Сей Бей бій дДБроїви біб бег пху бій Сує Те 485 дов 4з5 біб їси ТероАбр АвроАвр ово с1іу Аїа ісп Теродіа Сув о Бро Меї А5р
Бий 5а5 516 їжа Туг Ге Ні су5 Дги Тер діа їіви Уаї Тер іє Аїз Суб ГІец Твеи зі зав 525
Рпе із дія Ата ієц бер офни ї1іе івй іецп оівцогу5 іуз дер о Нія АТа 530 535 ія
Ку 51уУ Тер Тем Аг о Сес Гец Гук бій Авр о Уаї Ага озеб 51у Аза Аїа 5АБ 550 55 Бе
Аза АгЕ 5ІМ Аг Аїа АТа ви ів ісп Тує бег Атїа дер Ар о бес біу 5655 Уа 575
Рпе піц Ар іеи ма1 619 Аза Мен Аза чеб Аза гео суз ОД Гей Бго 5ва 85 ав
Гез Аг Маї Аїа Узі А5р о Бец Теробег Агк Абе бій їейпобес дів бій 595 вай 5БО5 пі Бго Мві АТа Тер обвпе Ні Аїа 01 Аг Аге бій ТР оре бій б 5о 615 БІВ оіу піу уаї ма1 Ма1ї сез без Рре бев о Бро 03у Аза Мі Азя рен оСув 525 53 535 вав
Зег зі Тгрозез бів Ар о піу Уа! беб б1у Рео б1у Аза Ні Ф1у Рго 545 550 555
Ні Ар дїз Ре Аг Аза бесоіеи ес Суз Мві Тез Рео Ар Рбе ей
Ба 655 576 бів біу Аве Аза Бго 21У бег Туєб Уаї Сіу Аза Суз Рпе АзроАгсе Ген 575 5ВВ 685 іеш ні5 Рго Авр Аза Уаї Бко Аїіз їв Ре Аг Те Уа) бро ма! РНє вза 5 796
Тв іє Рго бегосбій ев Рго двробвйе ей піт діа іо біп біп бго 785 7Ів 715 729
АгЕ діа рРго Ага бег біу РЕ 1ей біп бій Аге Аза 613 5Іівп Маї 5ег 725 т73е 735
Аг Аіа гей йбіп РКО А)я рез одер обаев Ту Ре снів рРго Рео бху ТНе 7ле 745 75
Бо лів рго оіу Абе о сіу Маїосбіу рРео біу Аза біу Рео сіу діз с51у 755 тва 755 дер б1у тТве 770 «»1аз за «2115 427 «2125 КТ «215 Нойо зарівне «доах за
Меб бін Тер о Рео Аза Аре о Гоз Сувобіу Меи Тер Ата гео фе фен Суз
З 5 16 15
Аіїа зіу бБіу біу Біу С1у біу б1іу біу Аїв Аїа Ро Те Сі Твб віп 7В 25 за
Рго Бго Уаї Таб оди Це) бег о Уайї беб Уві (3 Депо їси Суб ТПве Уаїх 35 48 45
ЇІ1е Тер оТве Тер А5п о Ргро РрасбіЗ бі діа 5ев его Ази Суз бер оон а 55 бо
Тер оТуг Ра бек Ніж Ре бу дзр іу5 біп Або ув о їу5 її6 Аза бро 65 78 75 зо біз Те АсроАбсво5ес 112 5160 Уаї Бго іец Ап сі Абе її Суб Гей 85 КІЗ з5 біз Узі біу бегобіп сСух бебоїНг Авп бі бек бі Бу5 Бра бего115 150 185 зв ем уаї 010 1їу5 Сук 112 бегоБго Рго бій о1у дер Рго Бі бес А1а 128 125
Уві Те бій ів біп Суз 116 ТрроНі5 Ап іви 5еб Тує Меб уз Сув 136 ї35 140 бег Тгр Єви о Бго чіу Дгн о АбпотТНг бег го А5роТйг АвпоТує Те Тен 145 158 ї55 166
Тур Туг Тер НІВ Абе о5ег о Геч біц о їуї ТІе Ні бій Суб 510 деп отів 165 175 175
Впе АгсЕ 510 БІ бій Тує Бе біу Суз 5ег Ре Ар о іївеи ТВг о Буз Маї 158 1785 198 ух Ав бе беє Ре 0105 610 Ніз беб Уа) (3й Ті Место ма1ї ме Дер 1ч5 288 295
Аби Аїв біу уз Іїе Туз Рго бег Ре деп І3е Уаї Рго без Твробеє а 215 220
Ага Уаї (уз Рго дер око Ро Ні ЇТе Гуз Ап Гей бак Бе Ні Ап 225 238 235 240 йзроАво ви Тук Ма1ї бій Тер бін Аяо Бгто 03 Ап Рве ї1є 5ег Абе 245 Іо 255
Су сво Ре Ту ох Мах С1и Ма! Ап Ап обеє бій Те осі Таб Щі5 260 755 279
А5поузаі Ре туго уді сій 630 Аїа ух Сух бій Акп о рРре бій Ре б 275 286 285 агЕ Ав Маії піц АБи ТпгоЗер Суб Ре Мек Уаії Рго біу Уві Ген рро 2аа 295 зао
Азр о Тигб оцез Ап Те Уах авеЕ Ті АсЕ Маі був Те Аа Гуз Гей Су з 16 зі5 322
Тутг бій Ар АБроїу5 сей Тер БегоАб5ап Теробеє біп бі Ме о беєв ЗТ1е 325 338 335 біу їу5 ув Ага Ап оЗес Тиб оїеу Туб ів Тве о Меї бен Гео ї1і16є Маї що зА5 359
Рго Ууах Г3Зе маз Аїа б1у АТа Ще Т3в Ма) Сей осей зїеб Туб бен ух з зва 365
Агроїво му Я Тле 31е бе бро рео тів рРеб А5робго СІу уз Пе за 375 зно
Бпе уз о1іц Мебє РМе БІ1у Авробіп А5п о АзроАзроТвг цец нів ТгроГуз 385 зав 385 ав ух Туг дяр Кіе Ту бі Куб бій Те Су б3и 010 тТпг дер бек Уаї 95 416 дів
Уаї це Іі Бім беп і еи вуз уз Аїз Бег бів 428 425 к218» 51 «2115 406 «212 РТ «213» Ножо «арієпь «0й» З біу б1у 01у 01у Діз Ата Рго ТВг єї Те бів Рро Рео Маї Те Аби 1 5 16 15
Іва баб Ууа1і бе Уаї С дв ій був Тк омаї Тіе Тер Тве Тер дей 20 35 за
Вго бго 515 5ІуУ Від бек о беб оАза Суз Бер гей Тер оТук Ве бег Мі15 35 да 45
Ре сіу Азр іу5 зп Азрогує Туз Т16 Аїа Рго 014 ТР Аг Абе Зеє «а ї1е сіб Маї Рго гейш А5и ба Др Тів Су5 ес біп маї біу бег віп 65 70 75 ва
Суз бег Тис оАбп бід бБевє 0310 уз бго ес Т1е Гей Уаї бій Гуз Су 85 зо 55 їі бБеє Бго Бго 410 б1у Ар Рео біш Чее Аза Маї Тег 016 Тен бій о 195 о
Сує Ї1е Тер Мі5 Азпоїєб бБег Ту Меї Гуз Суз бегоТер Іво Рго б1у 115 126 125
АгЕ Аза Те о 5ег Рго АзроТВе допоТув Те Мем Туб Тує Тер Нів Ар 128 135 1140 чего ів Із зуб Її нів біп Суз біб Абп ї1е Ре АеБв осі) са1у сій 145 158 155 160
Тує вва бїу Суз бе Ріс Аерозез Те Гуз Уаї (уз Азр бер Бег Бі 385 178 175 сій бій Ні бБеб Маї Сп Т1о Меб Маі Зуб Авройбп Аза сіу губ 116 180 185 130 іу5 Бго бег рпае Авп о Т1е Уа! Рго їец Тве 5ег др Ма1ї Гує Рго Ар 135 зве 295
Бе Вго НІ Т1е іує А5п без бек оРБв Ніє деп А5р А5р ей Тут Маї 218 215 229 іп отгробіз Авп Рей бій А5п Рв Ті Беб АгЕ Суз Беца Ве Туг 61 225 зв 235 240 чаї бів маї А5п Ап Бег о біб ТЬгобій Те ні5 дзп Маі Ре Тув Уаї 245 250 255 сіп 1 АТа зує Су СІ А5п бро бін Рне біб Абе о А5а мМаї біз АБп 260 255 270
Тиб бег о Су5 Рне Меї Уаї Рго біу Уа) ес рго Дер ТР овен Аво о Тве 275 -5о 385
Уві Ага Тіє Аге Уаї Гуз Тбгоден о їух семи Суз Туб 10 45р оАер о Гуз з9а 235 за
Гей Тгробег о АєпоТер ес біп бі Ме бег і16є біу уз Гу5 АгЕ АЗл 305 ме ЗІБ зга
Зеє Тс обей отук Т1е Таб Меб бен оївни Ті маї Рго уві ї1е чаї Аа 325 38 З35 сіу ліз Те ЯТїе Маії Се Бви Се Туб без Му асо іви рух Те Пе зав за5 з5а
Тіє Рпе рго бро Ті Ре Авробго біу уз 11 РНя їм Бій Меї Рве 355 зво 35 сіу Аве біп деп АЗр Ар о Тре Мен о Нія Тер обу туз Туб де п1е тує 378 375 33 сій їуз Біа ТПб іме 0310 бій Твс о АЗробеє Маї Уаї їви 1 бій деп 385 та з95 зав
Мем бує Гуз Аї3 бек б1п дах «2105 з «211» ІБ «2122 КТ «2132. Моло запієпа «два» 32
Мек о сіу Тер іеиоСуб5 бЗег бої 16) оївь віє Рго Уаї бег Су5 ен Маї 1 5 16 їв
Геш га бій Уві дів бек обев біу Ап Меє бух Маї ви біп бій Рго 2 25 за
Твпб Сує уаї б5ег Ар Туг Ме бБег Т18 Зев ТНе о Су5 619 Тер гу Мет 5 45 дк осіу Рго Таб А5п оСуз зер оТНе біб зви Аг Геч без Туєс бів Тен
Кі 55 ва
Ууаї Ре їсцп ісп щег бій Аїа Ні Таг Су» Ті Рро біз Ава Аза С1у 65 70 75 хо біу Аїа б1у Суз Маї Суз Ні зем іви Меї Азр Азр о Ма1 Мві бег д1а 85 за З5 дер Аз Тує Тс іє Дер рем стер о Ата Сіу (14 1лоїєез Ге Тер | у5 зав 195 ме біу бег РНе 1уз Рго 5ег біз Ні Маїф уз Рго Абб Аза рго бі деп 115 120 125
Ген ТНгома1ї Ніз Тк о Азп Маї зве А5роТг о їве їем оїви ТВ Тер 5еє 130 135 148
Ап оБго Туг Бго Рго дер о Авп Тує їв о Тує дей Мі5 є) Тпге о Тує Аїа 145 158 155 166
Уаг Аа Тіе Тер беб Сі А5п Аб5роБго Аза Ар о РБе Агро 118 Тугб деп 165 170 175 чаї Тиг Ту бе бій ко бе оіеи Агро 112 Аза бід бек ТВе ей Гуз тва 185 198 беб біу Гіе бее Ту Агн Аза Два Уаї Ав Аза Тер Аза ОД Су Тує 195 288 295 д5и Тис Ті тТеробеє 0) Терозеє Вгсо бек Те оГуя Теронів дея бе ї1а 215 229
Туг АгЕ біз Рго Ре бід біп Ніз ісп без їсч б)у Ма) зек Уа! бег 225 38 235 240
Су Хі Чаї Ті веб Аїз Уві Суз сен обец Суз Туг Узі 5Зер Пе тее 245 а5а 255 іуз Ріє Куб Муз бін Тер Тер Ар бін Т1е Ребодямй Рго АТа АкроЗег 268 255 га
Ага ісм Мз1і Аїа 118 ТТе Те біб А5р Аза бів біу зак біа Тер БЦ 275 8 285 ух Асш бее Абе біу бій бід Рго діа уз Суз Рго Ні Тер Кук дей 798 25 зад
Сук їев о твг фу сей оте) Рро Суз БВе їеи са Ні дбзи Мес ух аг за5 Зв 15 228 дзр о аї0 Аврорго НІВ іх Аза Діаз су біз Мек о Рго Рпе сіа еіу 5есг 325 ззеа 335 бзіу іу5 5ег АЇа ТероСув Рго Уаї бій Ті бегогув Ті Уаї Гей Тер а зах 50
Рео бін обве 112 бег оуаї Уві дрш бух Маї 10 їео Ре 510 Аза Бво за ЗБА 355
Уа1 б1и Су 019 біз бін стій сій Ма) біз біз бій Муз Ту бек РНе 370 375 зва
Сує дів зег бро 01) 5еєб Бег АгроАзр АБИ Ве біл 10 бІіу Аг Ці з85 зав 335 зо бі Ті Уаї АТа Ас ісп ТВгобіз бевогец Ре ее Азро Гей Ген біу 485 18 зі5 10 бій А5ап обі бії1уУ Ре Суб Сі бій А5р о Меб бі біб бек Суз ей ч78 425 аз
Мец Рго Рго бек сзу бек Тигобег Аїа нія Меї Рго Тер доро біб Бве аз аа да5
Вго ЗегоАїа піу Рго Гуз бій діа Рго Рго Теробіу їуз сТй Зід Рро ч5а а55 460 їем Ні5 ем бій Рго Зек Рго Рго Аза бег о Рго ТНе бій беб Рго Азр 455 478 75 зо двпоіен о ТВе Суз Те обі Те орго ви Уві 132 Аа біу Абзп Рго Аіа ад5 АЧа 495
Ту АгЕ его Ре беб Ази бебоїви 5Зеб біп беє Рго Су» го АгЕ 51 за» 518 ісца о йіу Во АБроРго Гео без діз АсроМніб іей бі) бі Мазі 316 Рро 515 5УВ 525 бій Меї Рго бує Маї бро бі ів Зєб біз Рео Те Те мМаї Рго біп 532 5535 ав
Рго бів о Вбго біш Твге Тер бів бій ТЗе цей АгЕ Абродзп о Маї Гей б 5аБ 558 555 568.
Ні 51у Аза Атїа Аза дів Рео Маі бак о АіЗа Рго Тео бе 51у Тук віп 555 БУВ БІБ би бе мзві Ні Аза Маї бти біп обіу б1у ТВРобій віа бег Аза Уві 5 59 чаї біу Беца біу Рго Рго о51у бін Ата Сіу Туб Гуз Ата Рре беб бесе
БВ 585 іч їез Атїа бег бек Аза Ма) беб Рг біз збу Суз біу РНе біу діа вій 515 520 его его б1іу БІ біз біу Ту оїу5 Рго Ре бій Авроїец її Бго б1у 625 за 535 5аВ
Су Бго б3у дер оРго Аїз Рго Маї Бго Уаї Рго сей Рйе Тре Ре бі1у 545 т-а 555
Кей Ар Аби обім Рго бро АсеЕ оЗеборгбо бій беб о бег НІЖ Сей го 5ек 650 ве5 570 бег бЗег Рго бій Ні ен бу сем бій Бко 01у біб їує Уаї бій Абр 675 вва ваз
Мас рго Бу Рго Рго Се) го бій біб біп Аза ТабБоАзр бро рев Маї вв 55 тао
Азр бак обо Оїу бек су Г1е Уа! Туг беб Аза Кбем Те оСуз Ніз ей та5 ле 715 72
Сує Шіу Ніз Сей 5 біп Суз НІВ бБІіу піп с3а двровіу БІУ біп Тег
725 73а 735
Бго узі Меї Аїа баг рго Суб Суз П1у Суз Суб Суф біу Ар Агр 5ег 748 745 758 5еє Рео Бео Те Те бро Кез Аве біа Бео Азробго беє Рро б1у 1у те 7Б5А 755
Узі го їз ої віа чес о бец оСуз Рго Аїа бекоген діа бро беб б51у та 775 750 їЇїе бег піц їух баб оГу5 бег бегобеєв Зег Ре Ні рРго Аїта Рго біу 785 тав 785 Зо
Авп о Азїа піп бегобеб бер сіл Те Бео був Те Маї Азп о бвпе Уа) беє оо 16 ві5
Уаї 5іу Рго Те Тує Мет Абе уаї 5ег
Ів 825 «2185 51 «25112 ЩО «213 РТ «2135 МНохо оярієпа «ара» за
Мек їує Ма! іву чіп 51 Рго їБг Суб Уаі ве др о Туг Меж Зев ї16 1 5 16 15 ен ТНгоСуз біз ТгроСу5 Меї дДепобіу ро Ті о Азп Суб Зеб Тнг ов 20 25 за
Гей Ага беч без Тур біп бви Уаї Рйе геч гео беб обід АтТа Ні5 ТВ 35 за 45
Су ї16 Бго б1ш А5под5п о б1у 51у ха біу Су5 Уаї Суз Ні5 іен 1ен
ЗБ а
Меї АзроАБр о Маї Уві Зег діа А5роАбо Тує Тб о Сен А5роео Тер Дія - 79 75 ва сіу Бій біп о!єеу іє Тер овуз біу баб Ве іуб5 Рго бек 510 Нія Маї 85 за З
Гуз йо Або АТа Рео б1іу Аа Їец Тебе Ма1 нів Те о Азп уаї б5еб Ар 108 таУ ме
Же іек обецоівги Те Тер обес оАва Бго Ту Бго Рро Ар Ап Тувб Тен 115 128 125
Тур Аби Ні їем Тіг Туєс Аз Узі Дей Ті6 Теробег біз АБИ Дерорро 130 135 140
Аіа А5р Ре Аг оЇЗе Тув Ап о уаї ТИб Туєб че; бін Бро бек ви дер 3435 156 55 150 іі Аів Аїа бек ТВгоіеб і уз бегсобіу ї1е бее Тук Агд дів 4гр Уві 385 178 175
Аг оА1З Тер Ата о б3зв См» Туб Ай ТнНе Те Тер бе? пймі Тер бек Ро 150 185 188 бе Тиг буз ТеронНіх Ап обев Туб йгр бі бро Не бій біп Ні Ге 135 200 05
Ів ів оп1у Уаї бег Мазі бег осув Ті Уаі Ті Гей Аіз Уві Суб Тен 218 25 220
Кей Су Ти Заї Бве їтТе Те їуз Ге їм мув б) ТероТеродзросі1л 225 330 235 249.
ТІїе Рго Ап обро Дія Агро обес дов оіеи узі Аїз 18 Тія Х1е біп дер 245 258 255
Аіз сів біу бегобіп Тер зі ух Абе бек Агя біу біп обі Рго А18 2650 265 279 уз Суз Рго нів Тер оМуз Аза оСуз іо ТВг ої демо оївен Вро Суз Рре 275 288 285 мес бів НУ Ахи Мет цу Аге Авробідь Ар око Ні 1у5 Аїя Аза Гу за 235 зоб біи Меє Рго Рпе сіп біу бег о біу їу5з Бек Аїв Тктробуя Рео Уаї БЦ 05. ме З 329 їі бег бух Те Ма)! (ез Тер оРго бін бев Т1в о бегб Уві Уа) АсвоСуз 325 з3еа 335
Ммаї бій це Ріе біз Аза Бко Уа! біб Су біз біз бім б бій Уа! за 345 зе біб бій б3ій фу чіу бек Ре Суб Аза бЗес Рго 010 беб Бек Агро Дер 355 зба 365
Ар оре бій бі б1у Асе 51 51у Тіе Маї Аза Абсв їец Твгс бін бев за 375 зво
Кей Ре фе Абросен Сей пу с сі) Абп о біу біу Ре Су б1п с1л 385 зай За зае
АвроМет п3у сш ес осСуб Без КГем бго бро бее о б1ім єс ТР обес Аза 4а5 418 415
Мі Меаж Рго ТероА5р бій бе рго баб АТа біу Ро іу5 01 дів рро ча 425 азо
Рго Тгробіу суз біз бій Рео сем Ні ієу бі) Рео баб рео Рго Аїа а35 448 Яд бе Вго Те біп о беє Рго А5родеп бен о Тве Сух ТНг обі) ТвВе Рео бен ке 455 з5о маї іі Аїв Б1іІу Або о Бго АТа Туг Агрфобег Ре бегоАви бегб реп зес зв зв 75 зво бів обег Бго Суз Рго дгя бій Тез біу бго Ахрорго яз Сен Ата Агбр, 485 0 455
Ні їен бій бі) уаї біз Рго біз Мет Бро Су5 маї Рго Зіп ен бев паб ІВ бім Бгто Таб Тс ома1ї Рго О1п Рго бій бго 431 Те Тер бів біп 116 515 52 5И5
Гей Агв АгЕ АвпоУаї Сей бій Ні біу Аїа Аза Аза Аза го Мі 5ег ва 535 540
Аза бго ТВг обеє біу Тур біп біц Ре мзі Ні Аїа Уа1 СТ) біп Су 545 5ва 555 560 5іу Твгобіп Аза 5ег о А1а Маі Уві біу іей с1у Бро Рго 51у бін Аїа 565 578 55 біу Туб суУу5 АтТа Рае его бее ей со Аїа БебобБег Аза Маї бек о рКо зна 585 5ВО біш уз Суз 51 Ре СІУ Ата бего бек біу біз Бін базу Тук Гуз бго 535 Баг 685 не бій дер ів 131е Рго 51у Су Рго біу й5р Рго діа Рго Маї Рро сів 515 529 чаї бро фев ра Тае Бве с01у ів АзроАгв бій Рео Бео Ак бек бро 525 є30 635 вав біп бег бег Ні іец бро бег Бебобеє бго бід Ніб5 ів БІ Бей С) 50 555 го 5іу бій бу5 Ма1ї бій д5роМеє Рго зуб Рго Бро без бро зів 510 бо 55 579 іп Азїа ТВгеоАвроргео Ген Маї Азр о 5еб гео бБіу бЗег біу ї1ю Уа! Туг 575 во Ба5 бЗегс Аїа Бей отТае осСух міз Без Суб Єху Ніж івй гу сів сСуз НІ біу
Бад 535 тав біп пі АвробБіу блу бій Таб обго Маі Ме Аїа бЗегбоБго Сух Суз 51у 7а5 7 715 728
Су« бух Сух (у АзроАги бегобес Боб обео ТВ Так оРго зе) Асводіа 725 73е 735
Ві Аврорго Беб Рго Сіу сту Маї Ре зви б3б Аза бе фе Суб Рро 748 7А5 750
Аза Бек їез Аїа Рго Бек о біу Т1е 5ек бі) фу бегоїує бек обеб 5ег 755 БО те беє Ре Ні Бко Аза Рго 51у деп Аа біп беб обеб о бес б1я Те Бво
У7В 75 тка
Гуз Тіє Ма1і Ап Рие Маї бе» Уаї біу Во Те Туб Меї Авроуаї 5ег 785 тав 735 вай «25105 ча «2113 132 «212: РТ «2135 Масаса тавзсісціагів «дой» з4 б1у Хі Аза 112 Ро Абе Або обеє біу Сух Бго ДЗ обеб 510 Дер Гуз і 5 18 15
Аби оРНе Рго Абе Таб Узі Меб ма! Абпоїец Язоп Ге Ні5 Ап Ас Дей 28 25 за
Таб обег Тс Абп Роб Гуз Або беб о б5ес А5роТує Тує Авп Аве о бес Таб ла 45 бег Рго Тер оА5п о іец мі5 Аг овеп бін Ар о Рго 1) Агро Тугб Реб бек
Ба 5У са
Маї їіе ТгробБіз Ата Гуз Су Дер Ніє їеи біу Суз Маї Гуз дів Дер 78 75 ва с1у А5оп о Мзі А5р о Тув Ні МебоА5поЗес Узі Бго гів сіб біп бій 11 55 зо 5 іва Маії ви Аге Абе б10 Рго АпероНія Суб Рго А5по5ег рре Агро ен 186 185 Тв біз іух І1е іги Уа1 бег о Маї біу Суб Те Суз Ма1і Тігб о рРго Іїв Уваї 115 1260 125 іє нів Уаї Аїта їза «219: 95 «211 133 «212У РНТ «213» Масаса Тазсісцівгів «ой
АгЕ іуз ІІїе рр зує Маї Сіу Ні5 ТиИб Ре Рне бій ув Рго біш бег 1 5 16 15
Сук Рео Вес уаі Рго 510 5ІУу бегсо Мет туз іей АзроТвге БІ1Уу Із 118 га Кг За
Ази ій Ап о оїп Абе мах) беб Меї Зег АБ Або ї1е бій зеб Абе Бек ча 45
Те его Рго Теродей Тук Те Ууаї Те Тер Ар о бео АбБа Абе Тус бго 5 баг цін Уаї чаї 010 А1їз бій Сув ув Ні Кей біу Суз 112 Деп Аа 55 та 75 ща сіп обім зуб Біз аБроХіж беб Меї А5ап Зеб Уаї Рео о їхХе біп бі 85 зе 95
Чи бен ма) фе дДее Арно губ Ні бій бі Сух беб Уві бек Рав о 185 но еш січ фу Уаї іеци маї Те Уві бі Суб Тк оСуз Ма1ї Те бро Уві 115 ї278 125 уаї Ніз НІ Мазі бій 132 «210» Б
«21їх 13 5215 ДНК «213» Штучна Послідовність «га» ка» джерело «223» упримітках"Опис Штучної послідовності: Синтетичний праймер" «аа 95 ансЕЕаєссї саідяваса 19 «185 57 хй1ї» 18 «214 ДНК «213» Штучна Послідовність «Ева» х?иї» джерело «283» упримілках" Опис штучної Послідовностіс: Синтетичний праймер" «араз «ТЕБЕ Ссанок аквавсії 185 «218» 58 «2112. 24 «212» ДНК «2135 Штучна Послідовність «аа» 57221» джерело «9233 уприміткає"Ониє Штучної Послідовності: Синтетичний зонд" «400» ЗВ
Тссасаанст Бааввсавас ззне 24 «21025 53 «2113» 1353 «212» ДНК «213» Штучна Послідовність «2202 «221» джерела «22Ух /приміткає"бпис ШтУучної Послідовностії Пинмтетичний полінуклеотид" «аа» ча кзавідсзвс Ттруссивиес сСкнвевакас ТТрріасарс стрЕсяНикє сотравасіс са теструвеав сстстЕватЄ свсстктрак ваїтатвсса ТЕсСвстдинт ссррдеєварсї. 120 ссЗББЕЕаЗЕЕ шСсСтнВанів БЕТСТСаБЕЇ зіїзаєсвна ясантвитяв сатавествї 18о всшивсссобси сТрааврессор аїїсассаіс їссянанаса асвссазваа стссствсаК 240 стдІаавтра асавістісан зЕссваккає асрассттві зсїзствсЕс завадататс 309
БЕЕСЕЕРІТсЕ веЕЕЗЕСКСТа сткваасттс веістссери шссвтрЕсає сстрресзсї зва
ВЕстсстсан о сссссассва роБсссвусв вЕсСсссссєс квроассств стссснсвис мяз астістваві ссасавсвяс ссівшЕссно ствЕТсаанв асгвстїссс скВваєсоветя. 80 асевтВісЕЇ рреаасссяави сессствасс зрсвевсвтво всасскісст еЕствіссїа За савжсстсан настстаєте ссісавсавс ніннсваски квессістав савсттЕкис вва зссаашаєст асасетесва сЕСЕЕассас задсссавса асассзанеЄ драсазасно сб кІтрартісса загасииксс сссатиссса ссатроссаврв сассєвяКу сстереерврра 728 ссатсавсст хсссЕКтлсс сссаааассс ззинасаскс стсатватитс ссврассссс 78
БаБЕССОСЕК ЕСЕТЕБЕТЕЕС БЕВСЕСЕВвс садяиваваєс ссезеЕвтсса ЕСЕсавстве зад сасетвватр БСЕТЕБаЕНІ шсаясаатївос варасававс сЕСЕКНаЮКА ягкарілсоваєс зе авсасвїзсс яіЕсдкссав свтсстсасс вісстисасс авнасіявст баасеєсввя зей ваЕсасвавт яказрввісто свасвазЕВе сСтТсссЕсесї ссаїсваняя аассаєстсс 1025 япаавссоваар врсактсссн яквнссагав вірїасаєсс ТЕсссссясс стакрарвар зова агївассзаяав зссаджЕтсав сєтвавствс ЕСТЕСсвави коктстассс садсвасвіс зі вВссЕсЕшаКе деваварсза їрссрсавссЕ дакайсваєт зсавевссас дсстсссвід 1250 ствдастссв асЕвстсстІ стТссТсвСК арсарвстаа ссвтЕВасва ввЕСаВБТВЕ 3260 сардарерсз втЕссссстс аскстссвто збрсазсрарс стістисасва ссастасаса і32а сагзадансс тсіссстріс їсірЕЕєава їва їіз53 «210» 108 «211» БВ «212: ДНК «213» Штучна Послідовність «иййх «221» джерела
«223х /приміткає"Опис Штучної Послідовноїті: Синтетичний пелінуклеотид" «4008: 109 разаїтнінї грасасавіс їссарсгтасс сівЕссссвЕ стіссарррра зарарссвос ва сесжсстнса явЕссадіса взвірссзвз врстастуктавє сстврвіассвя всзраваєсх 1285 ввссаввсіс ссавесіссї свістаєвав рсатссзага єЕнсСсявсівЕ свісссарся 152 авребісенів всвисСсрисє тврЕрБасавас Тісвсвсссв ссаїсарсаб ссгтававосє зав раанвессте савйїтаєта стрісавсве сЕсСврсваст весстссврес састбесвис за
БвадвЕасса ЗБЕБТЕЕВЕаї свввсвваст відс ЕСЯС саїстівсс савссттессв зва ссаїстіватр зрозесєкав аїствдаась врестгсстрстЕ сессії ваатаастсс ча
ТзЕссссвТн звессаваді асартруазе кірка сзасе ссстссваєс рритавсесс Аа «аЕванавів іїсасавадсв врЕасзеисзве Басовсассї асавссісве сзисаєсств Бад асастіварсв звЕсвКасса сварвавасас азаріствся сстдсваавт сасссатсво оо виссінвисЕ свосссвтсаєс азарарсєїс засвнЕеває автївіїтаа бан «218» 181 «2113 1353 «215: ДНК «21Ух Штучна Послідовність «2225 «221» джерело «2232 /прамітках"Опис Штучної послідовності: синтетичний полінуклесотид" «авах 181 евзанбєсакс ствЕїтдавар сррівЕТЕЕХ стрЕтьсавс сіреїсвсар ссєрсвс 5 авствувсар саансинктХ Евсссжрвак ваттаєрсосаз ЄБсЗсСвяНЕ свісаврса 120 ссЕБЕТаззе вістревате врітлавсвЕї зіїзаєтена шсарсретвЕ Таїїввіївї іа всапасєвисе ттаааврісв ЕТ Тассаєї зЕссрувака аїевссазава Сапссотебає 248 сквсавеїва атарістїр«к гКЕсававваї: ассвсастрі зібзттвсис асвкретатх за
ЕБТВБЕТСТр рсравскста тткфааттіїї ррістосрн Ес срисає сстветтасс зва врЕсавсвисв сстссассва рорсссвжси вЕстжссссс Тевсассстр сбссстрсяи 42 асллоїваві ссасавсвЕс сстниветесо стрвієвзавр вствстіссс севассврІВ 480
ВсеВівВЕсВІ. вразстсаве сиссстваєс арсевевтвс асвссттссс яЕСТВЕССТа зао савтсстсзв рзстстаскє сстсавсавс рірртезств сЕссскскав савсттреес вай ассзанассї всасецесва сртрраїсво звнсссвЕсва асаєсаароії ррасазасне БВ кітвавісса зататреїсс сссятвссса ссаєвсссар свсствакс сесеревера та ссатсавтст тссбретссс сссааавссс ззррзсовстс ссакнактстс ссврассссї тва рарнісзсКо всвтеваві ррасрірарс сзниаанаєсс ссваввісєса рієсавсіни най
Касвівватв вСЕТЕЕВЕНІ нсвсаатевсої зарасазавс сеЕсЕЕканяя исавілсоває Зоо авсасетзсс рсЕсЕЕЕсяв сктсстсасс вісстесвсс веЕнастввст єзасвесазо зей ваЕТасваВЕЕ всааветстс савсвазрвс «(сссвесст ссатсраваа зассаїстсс їв заавссавгав ввсарссссв зиввссасав вівдтасассс Трсссссвіс ссавваррав з388о асврассгавра зссзЕЕссан сетравствс встрїсвзазр нсбЕстассс садсдасаєс з15а
ВССЕТЕЕЗНІЇ вЕравансва ТррврсавссЕ язизасзаої асаввассає вісісссвів зга «тршастссв асЕдстостТї стбссссвЕЄ авсарвстаа ссетввасваЗ явисавеТВВ 3260 савваввера аївїсжЕстс аснстссвте аїрсаєравр сістрсасва ссастасаса 1320 сагавеансс Іїстссствтс їствЕдіааз їва із кв1а» 182 «9112 «712 ДНК «2135 Штучив Послідовність «га» «Рйїх джерело кйач» примітках "Опис Штучної Послідовності: Синтетичний полінуклеотид" «два» 1872 евзазЕсветс твасссарар їссррсзасс стіравсства віссвврсра зсвересасс ва ствавсівріс вівізавссвз шавЕсніїсвЕ врстагстівв саївЕЄзсісв всвравасся 129
БЕЕсаевсас свсвестЕся наїїтаїваї всазесвзаєс Ебвсзассяє тагіссевса 182 сВЕЕсСЗисв ятавсявтає їррсассвві бЕтассства ссаїтїарсар ссбривасск 248
Бавзвастств савієтаєтв ГсЕссвисаю сетавсваєт єрЕссассвис васстттри зва веибЕвсаєса заєїївазає базавсозасбс штрествсає сафїстрвістє сассєсссяв збо ссатїсіватр врсаєттівєва абсстриваст всіїстеЕТТв ТЕСЕСсСТЕст вавізасіїс зга
Тзіссссвів зрросававі асарірнаве нінеасвзвся ссстссватх врурїазастос два сзривиВиТе їсасавався ррзсзрозвЕ дасарсвссь асавсстсад сансаєсств Бад асвстравса зарсавасів сЕвравасас заарістасе сстЕсвавнї своссвісав под
БЕССТееЕСЕ сЕсСссвЕісає йаававстїс засзеневзе авівїїаа ав «218». 193 «21ї» ї358 «2155 ДНК «21335 Штучив Послідовність «вдо» «ййі» джерело «223» /примітках"Опис Штучної Песлідовності: Синтетичний полінуклеотид" «а0оз 103 рзантієвссс тТвЕсЕсваваю срроссазрес стрисввнаво саассосарає сстввссссе Ба зсствсаєси жсавсвистії сарсстраво шсстасавсв ТеЗасіревзї ссЕсСтавсса 120 ссаввсазев ссссвЕВИСН шсСтТвЕсСсСатв аїстерросЕ ясинсвоватє сеЕтртасаас 1хо авсвсс«стка вравссросї вассаїсавс ванкасасса всаараасса вЕбЕЕтЕссЕ 244 звссаєЄваєса асатевассс аебрвасасс вссасстаст астесрссев свасввстає з0о тасссатаср ссабрравсва сткревссав ввсзвсстро Єрасситкає савсвстісс зво ассазврисс сзісввісля ссссстрЕса сествобосо всартаєсттх кваріссася да всЕНСсСТЕВ ЕСТЕССТВВІ саарваство ТЕСсссвавсо седівасеЕє ресвсвЕВасє зна ксавдевсвссс Трассавсни сЕтесасасс їтсссрроїв їссстясавує стсаврвасіс зда тастїсссісвз всвисвіввї васівтївЕссс гствесвЕсЄ сСврррсассва васстасвсяє вай їрсавсвтвЕвК вссасаарсо сарсавсвасс заретвваса аасесрієра рїссаваєсає ба
Ексссссат рсессассатн сссавсвоо варітсстро вЕнЕассаєс авксїлесте, т2а яжссссссавз звсссаанра састстсаїв агстсссрив сссстраввт сасвтвсвгв тва всдиссвасе твадссарва зрассссрвр штссавскса асіввіасвї рраїписнік 40 каввтвсата аїросавняс зввиссвове варвавсарї хсазсвисвс ятассовтеко, зво вгсавсвісс їсассвїссї дсассаврає тррсїваась єсазЕванся сяартясвав зве
БІсСтссваса звЕнсстсост ВТсСстссатс єзеизаавсся кстссававс сазавевсвЕ їа29 ссссрянане сасавеївта сассстпссс ссассссаве зарраваївас сзвравсся з1е8а вксансствІ еБІвсстТЕвТ саавиВсККо тассссавсв асзусвссис шуавтярвав 3138 авсааїррес арссрсвиаа сзастасазе ассзсростс сситЕстяна стесрасрес і12х9а
ЖесжЕстссс хстасавсав вставссвтр касвакаєса вртевсавра приказ 1268 тссісатеист ссЕткаєвсв СявЕвосстя сСасаассастї асвсасанов шавсстотос 3320 сТВЕстствв ріаавеза 31338 «ма» 184 «211» 657 «2712» ДЕК х713» Штучна Послідовність «2205 «2215 джерело «Е23У примітках Опис Вітучної Песлідовності: Симтетичний волінуклеотид «роз 104 ваїайїсвсис ТЕВсСссадав сесавасавс сівїссЕсиа ксстЕВисвВа єгеСЕссВос 25 зЕсавствсс ясЕссарсаз завсвКвЕас австасевса асаесіїсвЄ ясассЄвеває 125 сактадваавс сарвссавсс ясссаавіїв стваїстасс ТЕнссвЕсяа сіівраравс 182
БЕсЕЇБссав вссистксаю сявсавсявс зЕсЕНСВосСЕ асстсассст дассавтсвес їй
ТсСЕсСЕЕсаке ссвавевтвї ерссвтдбяс таствссадс аравсвасва ввасссавсвс зва ассхксявІВ БСЕнТассав веЕсвЕЕаватс ааасвааств ТЕВБСТВСяСо ВІСТВКСТС збо агсттїсссвс сзсткасна дсавіїваава сстрезастс СТЕК втЕсствстЕ 428 засавсєєсс зіссссвіда рессвавеса садідкааня тТрраїазвсвс сстссзаїся зна яЕсаесіссс авеававсвї свсвеажсах Басавсвавв асаксвостстя савссісадвес а авсассстіра срссЕявсва зЕсавастає раразасаса заніскасяс стесеваріс воа асссаісвЕн всстеВрстс россвЕісаса звваввстїса асаррреава ВТБ а8 БУ к21а» 185
«71їх 36595 «2125 ДНК х713» Штучна Послідовність «же» «221У джерело «223» упримітках"Опис Штучної послідовності: Синтетичний пелінуклеотид" «авроз 105 вазЕЇНСВЕС ТЕВТвЯавіс ТВЕБЕЕЗЕВС ффЕвнізсанс сірвсарвіс сстієвнасіс БА
КсстЕсСвсав сстстієвВате сзостЄєвЕаЄ вастатесса ТрсзстввЕЄ ссЕвсванся 150 ссарврваарвв востЕЕаБІН вЕІсісавяї аїтааїтрва всзкбннінЕ сябаврестаї. 18е
БСЕБВСІСТВ ТЕВарЕнссв атісассвїс їссврадасєва асвссаавва СТСССТЕТас тав сТЕсСвавзсва агадісірає зесіравЕВас асниссттят зїїзстірсЕс запврасаєс зх
ЕКРЕВВІСрР БрБавТТТТа ссрдевастко вевістстврЕ БссвІвЕсСас сопе саст зо вІстсстса зе «ва» 186 «211» МА «212» ДЕК «2132. Штучна Послідовність «ї2а» «921» джерело «223» /приміткає "Опис Штучної послідовності: Синтетичний полінуклготид" «йоо» 106 сазассЕску твасасаріс їссарссвос стнЕсссКеК стссаррева зайпзиссасс ва срстсствса веессавісв взисрссана австасттав сстевтасся всараваєст 120
БЕССЗЕЕСТС ссавЕсВест саїтстатеЕзї шсзіссзаса шЕнесаствв гагсссарсс ї18а анибїсвзисн ясавчевеїс їрврасакас СЕсвскскса ссатсаввсяв сстаивреск 248 ваанатттв савіїтаїїз стіріслисав свіавсваст ввсстссрис «асСсксвЕє зо
КЕзвЕЕвассвз арЕСссанат Сава 324 «ма» 187 «7115 354 «91725 ДНК 2132 Вітучна Послідовність
5291» джерепо «223з /приміткає"Ониє Шуучної Послідовності: Синтетичний полінуклестид" «ай» 197 каавттассс трсрсванан сенсссавсо стротваарсо савсссаваєс секвассств, во асствсассв їсзисЕнстЕ садссїварс рсстзсзесе срастидат ссрссаросв 178 ссзирсввЕ ссстеававів ротрресатр зЕсснежЕсе асвесварат срЕрівсвас 158 авсвссоства аванссвосї нассатсаво заввасасса шсавевасст нехевхвстВ, 240 ассаївассз зсабЄкЕассс акідвасасс рссзсствсї асексвсосяв свасевстзс зав тзсссаївся ссастврасаа стврЕвссвеЕ вЕсСВЕсстВе Твассвівав сакс з5аА «2195 188 х2115 333 «2153 ДНК «2135 Штучна Послідовність «тИЙйх «Раї» джерепй «223» /приміуткає"Опис Штучноїх послідовності: Синтетичний полінуклеотид" «дее» 198
ЕЗтасєсвтЕс Квасссарар сссврасзво стрістЕква дестреЕвсив всвЕснесасе бо аксавствос всрссавова звесетевас арстасррсоа зсавстссвс ясастартає 120 садсаразвс свввссавсє асссаавсід сівеїсївсс сриссавсва соірезЕВЕс ї1ва весЕЄШссар ассвсттсар сресввсЕВС арсвЕсассе асттсвоссї ввссаєсарс 245 хСтстеЕсаве ССБЗБЕЗТВХ вЕСсвівтас тастрссавс аразсвасна веасссасро зво асстісЕЕТв всЕВсассва вЕТвЕадаїс заз 333 «»1а» 189 х751ї5 16 «2122 РТ. «21332 НОошо зарієпь «ой» 193
МеЄ ія Рго Ре ей бро Ме РНе беє о цеи Бей Сей греч Ге) Тіє Уаї 1 5 16 ї15 дей Бго Тіе д5п дія Ап оАвп о Нія Ту Авробу5 Т1є є Аїва Ніж бег та а За
Аг; їі Агнопіу дб Ар осіп біу Рбо Абп о маї Су Аза івеи бій біб за 45 їїе івги Щіу Тргогув губ Гу5 Туп Ре бег ТВг о Сув імя деп ТероТує 5
Кук Мує бек Т1е Су5 01 б1п Туз ТС Тве Уаї ей Тує 510 Сує Сме 55 7а 75 в бБго с1у Тує Ме дев Меї сій с1у Меї іуз бБ1у був Рго Аза Уа! 80 55 за 5
Рго їі й5р Ні мі Тук С1у Твг гей б)у 136 маї б1у АТа таб таб ав 195 па
Твг бів АгЕ Тук бег Азр Аїз бегоїує Бецд Агя Сбіш бітш Т16е біб Бу 115 і12а 125 уз Є1у бег Ре Тег о Тук о Рбе Аза Рго бег Ап біб Аза Тер Азр Авп 130 125 148
Мец йхр бек дхр Т1е Агро Аги бі цей обіц беб А5ло Уві Доп оУаї БІ 1485 158 155 160
Гей пе Абп о Аїа ви Мі Зег Ні Меї Ті1і6 Або Гуз Або Меї без Тне ії65 178 375 їу5 Ар Гец фу» Аза бі Меє Тіе Т1е го беб Меб Туг Ап Ап (ей 188 7185 190 біу іен вве Ї1е А5по мі Туг Рго Ап о сіу Уаї Уві Те Мві)і Два Су 1955 зва 285
Аза АгЕ 116 І12е Ні Сіу д5пи біп І1є діа Те А5п о блу аз Маї Мі гід 215 228 мзі хів Абр Або Маії Гей Тв? обів 112 біу Тіб бек Г1Зе біл дер рве 225 230 235 2АВ
Те бій Аїз Біч дьр ар оБГви зебо5ек» Ре Ася Аза Аза Азїа Тіє Те
ЗАК 25 255
Зег о йяр ТТе іви «1 А1а без бі агрв Азр о 01у Мів Ре Твгоїео) Рее 250 265 278
Дід Ргро Те Авпобії Аза ба обі) їує їв Ргео Ася бІіу Уаї Геа 016 275 ї5а 285
АгеЕ Ті1і2 Меб 5ІУ Аврогух Маї Аза бек 10 815 Сей Мек обу Тує НІіЗ 230 295 зав їі ів аа Таб їв бій Су бего бій бек Ті Меї бі Б1у вів Маї зВ5 ЗВ 5 28 бе ід Те мем обі піу дп таб Тіє біш ї1е біу бух А5росіу Ар 525 зза 335 бе Ї16 Те Уві Депо бІу ї1е Гуз Меж Маії А5пог ув іме Авр о їТ1е уаї за 345 50
Ти? Аг Ап біу маї ї1е Ні ів ї1їв йер о біп Узі іеч 112 рго Ахр 355 з5В8 355 чес Атїв обу бів хаї Хі бій Ге дів Бім зу біп б3ів Тве Тве Рпе за 375 зна
Твб о азроїец о Маї Дія бій ри бім їена о Аїа 5еб Дій ї6у Аве Рго а8р з85 зав 335 зва біу біб Тук Таб ген Гео Аїа го Мі Абп Або Аза Рве зве Ар оДер ло5 10 415
Та іец бек МебЄ дор бій Ягве Сец оїец суз без Ї1а іви б3)п Азп НІ 429 425 416
Тіе мен бух уаії фу Маї оту Мен дхп бім їви Туб Азп озїу біп о Хіїе
435 зай 445 ен бій Тигої12е біу біУ Був біп о їви Аго Маі Ре Маї Тут Агро Твге а5о 455 два
Аіїа Маї Суз 116 бій А5п о бег оСуз Мет бі ух 01у бєє у5 біп о б1у 455 а79 475 дк
Аве Ази бі АТа Ї1е Ні Ге Бе Абе озіч Ї1е Ї3Ме Гуз бго Аза 1 485 зза аз ув бег о їей нів сб10 Гу бец Кук Піп Ар обу Агро Рпє бБеє Тае ве чав 505 5ів іеч бЗег без іївеи 010 Аза Аїя дероївної у 03и ей іч Твг бів Рео 515 528 525 с1у Ар Тр оте без бів Уаї Бго Тйб Абп Абродіа Ре ух біу Меї 530 55 Ав
Те бег п3а піч Сух 515 Т1е Ген Тхе Абе о АзроГу5 Доп Атя фен сій 545 558 555 зво
Ав оіів тів ей оТує Мі ів Те Рго біу Уаї Рпе ї1е б1у гук 1у 578 575
Рпе бій Рго б5Ііу Ма) Те еп о ї1іе еп оіїу5 Тве о Тви бій бі ев Гуз 5ВА 585 596
Тіе вне ей о іуз са) Мві Або обер оТве Гец о гви Ма! Аблп біо Ген ту а Баа БО
Звгогуз 015 бЗебоАвр о Т1ве Меї Таб ТНгоАеп біу Маї ї1е ні Маї Маї в12 515 Бгв
Дар оМух вип їео Тур Рго АТа АвроТйе бго маї Ф1іу Автор бів ен 625 38 535 баб ва Бін Тіе ем А5п Гуз без Т18е їу5 Тує Ге б1іп Т1е Гуз Рне Маії «45 о 555
ДГ Сіу зеб Те Ре уз 016 ї1і6 Бго Уві ТНе Маї Туг Те Те Гуз ав 665 57
Тів їіа Те Гуз Уаі Ма) 1) Бго бує Ї16 уз Маї її 51 біу баг 675 БВ 85
Кей бій Рго Ще ІЇїе Гуз Табобін біу Рго Те Ген Те бух Уаї Гуз зе 6595 ва
Ті бів 0Ту би Рго 610 РНе дев цен 316 уз сти бу БІ Тае Т1в таз т71в 715 728
Ти» обі Ма) Жіе Ні Сіу са обро Дів (16 Бу Гу Ту Те уз 116 725 730 735 тзе д5роб1у маі Рго Ма) б ї1їе Те Сі) зуб да тр АвРК бі б 74а 745 У5а
АгЕ Ї18 Те тб б3у го с Ї18 фу Тук ТВг Абе 116 бер Те Б1у 755 758 755 біу біу біб Те бін біб Те Гей іуе іу5 без бен бій Сій би Маї 770 тик 788
Тео іїух Маї Тс оіїу5 РНа 11е біз біу С1іу Азробіу МНіз во Рве ості 785 73в та5 зоб
Авр бій біб Я1е їу5 Агро Гей іви біп Б1у АброТВгоРБко Уа) дер огуз на; й 515 їв біп о діз Ап фу Гу Маї біп біу 5ес АгЕ Ар Аск Ге Ага бій вга 825 зб 5іу Агя бек б чат «2193 113 «2115 773 «2175 РиТ
«213х Ношо зартїієеп5 ча» 116
Меї 112 Рго Рпеоцец Рго Меї Рбе 5ег ієц ієц Ген о івц Гей Іїе Уаї 1 5 те 15 деп оБго І1е йзп Аза Ап о Аб5п о Нія Тув Азроїу5 Г1є6 іє9 Аза Ні бег за 25 за
АгРЕ 112 Аг БІ1у Аг Ахроб1п с1у Рго Авп о уаії Сух Аза Гец (тп сіл 35 за 45
Ті ібн б1у Тр оіїу5 убору Туп о бве зег ТНг осСуз їу5 деп Тер о Тує
Ба ух їув бек ї1е Суз б1у бій 1у5 Те Те Уаї Сей Туб Зі Су Суб 655 7а 75 та
Бго біу Туг Меб АгБ Мес 010 біу Меї іуз 51у Суз Рео АтТа Уа) 1
Б зо 95
Рго Хів дер Ніз Узі Тує РУ Те іви біу 1312 маї шіу діа Тае Тае заг 185 тів
Тие сів Аги Туб вт Азродіа Хег губ зви АбЕ бій біб 118 біш у 315 129 125 у б1у бег ВНе ТнгоТукє РНе Аїа Бго зек А5п 010 Аа Тер Авр Ап 130 135 148 іец Ахр бек дер ї1е Асв о Агробіу цен обіц бек Ап маїф деп Уаї 610 іде 158 155 168 іецйоівгий допо АТа меч Кі баб Ні Меї Т1е Дей ме Авж МеЖ Гей Тег ї65 179 175
Ку Ар оГви іуз Азпобіу Ме 16 ЇТе Бро беб Меб Тує Доп депо уеи 18е 155 ізв
Ф1іу їец Ре Те Ав о Кі Туб го Абп о Б1у Маї Маї Те Уа) деп Су 195 2оаа 255 діа Ага І1е І12 Міз бім Абп о біп І1е Аза ТБе о д5п о сіу Уві Уві Ні 210 215 Рая
Ма1 їТіє Ар о Абд Уаї Се Таб обів Тзе о біу Те о беб ї1е 5І1й дар БА 275 230 235 248
Те обі Аїа Бін бер А5роБви Зебозеб Ре Аг Аза та Аза Тіє Те
ЗА 258 255
Зеє Азр о ТТе ів сії А1я Без бі Агв Ар осзу Ні Ре тре орез Ре 280 255 270 дід Рго Тг о Аєп бій Аз1з Ре біз губ оїву Ро Абе 01у ма) во бі 75 258 285
Аге ІТіє Меб 5І1у бер Гуз уаї Аїа екс 51 Аїа Гей Мет уз Тує НІ 230 295 зва їїіе пемоАва Те іє) біл бу бепб бід бек Тіе Меб сту Оу Аза Маї зах зів 315 128 вне із Те меш бі: б)у дп Те тів біб Т1їе б1у Сух дзрос1у дер 325 з3зе 335 бек Т12е Тис Уві Авпоб1у Те 1у5 Меї Маї Ап о Гуз о їух Азр Те Уаї за 335 56
Тргойво Ап оа1у Маї Т1с нів мез ТЗ Авр бій Маї із 11е Рго вер зч5 зБа 385 зе» Аїз у5 Ода Маї )е сій (ви Аїв Б1у Зув бій бій тТве Тае Ре за 375 зо
Тог Авр о бец о Маі Аїд бій рез біу іви А1З беб діа іно Абд Рго Авр 385 зе 355 ав біу 519 Тут Тйг ів їеу дів Рго Маї Авп Абп Аза Ре б5ег Дер Ар
ОБ чо 15
Тйг без бек Мет д5роб1й Аби Мен оіви їух Бей о тіє 16 Ол Авп нія га 425 ав
Тіе о їей кує Маї Зуз Мах сРу се) Ал обі) без Туг Авп біу віп Пе 435 з4а 445
Кене бір Таб Бе о біу 61У Куз біп іецй Аг Узі На Уаї Тут Агро ТЕг 450 455 аБа
Віа Маї Сух Кіе ати Аби бегосув Мет бій уз «1у бегозу5 бій біу а а79 475 ав
Агв Азпобзіу Ата Тіє Кіз Т1е Рів Абе о БІіч І1е ї16 туз бео Атв Б ань азе 335
Гу Бег Гей Ні сіб губ іец 1їу5 біп о азроїуз Аг оре Зевб Таб ве
Бай 595 5ів ей бер о беи гец бій Аїз дів дероївен гу бій Сем іеу ТВгобія рео 515 5ІВ 525
Сіу А5р То Те овен Бе Маї Рго ТИб А5п йо АтТа Ре гу біу Мек 53 5 54
Же обег ба 0) гСу5 010 116 Тен Т1е Ав АБрогуб АзпоАЇТа Ген бій 545 55 585 Бо дк іі Ті зе Туб Мі5 Без Тне о Бго біу Уаї Ре ї3е 51у гує 51у 5а5 570 575
Рпе бій Рго 5Іу Ма1 Те Абп о ї1іє Цей 1у5 Твге Те обіп сіу 5еб Гу5 58 585 59 ї1і8 Рив Бей о буз б1и Маї деп одер Те Гей ів Маї Азп 510 івен Гуз ве Іо 65 зЗзероіїуз біз бегодь5р тів Меї Таб Тк о А5побіу Маї їЗе нів маї Маї іа 515 525
Авроіув Сем оївеуи Ту бго ДІЗз Дер о ТНе Бко Уаії біу АвпоАзробіп їн 525 53и 15 вав бен бій І1а їемойеп Гуз Бец 11 їу5 Тує 16 бівп КЗе Гуз Ре Мі
Ба; вза 5 дев обіу бек Тс Ре Гуз біб їіе Бго Узі Те Узі Тугоїуз Рго їїе чев 555 вв 112 1уб ку Тує Тиб о їу5 Ге 112 Дер біу уаї Рго мМаї БЦ Гі ТНгЕ 675 вва 585 сій іїуз 510 Тб йсв б)0 бій АсБ 119 116 Тег обіу Рео бід Їїв Гуз е3о 655 788
Тут Твге о Аев о ї1є зег Тр зі Бім біу іш Те бі) 5320 Тбе ген туз 7а5 718 715 728 уз їв ев ооїп бін бів Майї Тве о іїуб Маі Те Сувх Рпе 112 сіш «1у 725 73а 735
Є1іу А5р б1у Ні ів; Ббе бій дер бій б31ц 131е гук Або бен бе біл 748 745 755 біУу Ар Тк о Рго Маї Агро оБуб іс бі АтТа А5поГу5 уз Мві бів 01у 7 75а 755 зее Ак АгроАев Без оАбв па біу Абе бебх бій та 775 «21325 111 «85115 781 «212: РВТ «213Уу Чощо 5аріепь «кара» 111
Мем Хіїе Бго бпе іч Ргбо МекоБве ес оїец іви без зо Бей хв Мах 1 8 18 ї5
Азпобго Ге Абп Аза ази Ап онНів Туб АЗрогує Т1є Гей Аїа Ніб 5ег 29 25 за
Аги Хі Ак (у Аги А5робій біу га Аа Маї суз дів рей обуп бій їх 4в а5
Тіе о їеч о оіу Ж Муз Гу Буз туго Ре Бей Тб Сув мк АБИ Теротує
ЗА 55 58 ух іуз бер ї1е Су біу біп Гує Те Тс Маї сеу Тме 616 Суз Суз 65 7 75 ва
Ргео біу Ту Мет Абе Меї біз О1у Мет бух б3іу Суз Рго дія Маї Мен 85 За ЗБ
Вго 1їе АброНія Ха1ї Туб б1у Твб осец бБіу 116 Уаї біу Аза Тае ТВб 1ва 125 ле
Твгобій до Тує бек Авр АТа Бег оїуз Ге Агро біб біз ЇТе бій біу 115 126 195 іме біу бек Бе Таб Туг Ре діа Бго бе Азп б1й Аз Тер одер деп їз 135 т4о
Ген Азр бек оАєр їїе Акд АгЕ біу і2ги 51з Берг Ап Уві АБп Уа! 01 125 158 І55 і60 ес оуен дип діа ей міб5 ес Ні Меї її Да ув Абе Ме Геи Тве 165 17 175 їує Агро ієн туз Ап обіу Меб і12 ї15 Бео бек Меб Туг АбБп дев 16 150 185 139
Оіу іє Рпе 113 Аби Біб Тут бго д5п о б1у Мві Уві ТНбоУуаї Аза Суб 195 202 зах
Аїа Аг» Ії ІТТе НІ5 б1у Абп о бів І1е Аїа Тве дп оспіу Маі Уві Нів 2316 215 йо
Узі їі АБр Абе Маї Гей Те бій їв бІту Тк бе Г1е бій дДерорне 225 230 225 за
Ііє 5іч Аїа бій А5р Ар без бог бек Рре Аге Аза Аза дів Тіє Те 245 256 255 зЗзег о Авр Ії їем біз Аїа Гей біу АгЕ Азробіу Ні Рве Те гц РНе 258 255 270 діа Рго Те Ап б1и АЇїя Ре бій оїух Сен о Бго Авросіу Маії Бей Бі 275 на 285
АгЕ Ті Мет о1у Ар іу5 Мзісдіз бек бій Аза ее Меб Гу Туг Ків зай 285 зад ї12 гей о А5п о їВгоїен біп о Су5 Зебобіц Бер їіє Мек біу б1іу Аза Уві зо5 пе 315 320
Рпа бів Те бе 1) б1у Абп оте Тів бій Т1е б1у Су5 Абробіу дер 325 330 355 бег ліє ТР оуаї Ап о б1у ТІ Гух Меї Маії Авпогуз уз д5роТГіє Уві за 3А5 358
Тигб оАд5п Азп бі Ма1і 118 Ні5 ей Іїе А5р бій Маі сен їїе Бго д5р 355 зво 365 беє віза уз бі ома1 Т16є 510 без вза С1у Бу бій бів Те Тае ББе 7 375 зво
Те А5ромез о маї Азха б)п Бей б1іу їз АЇа Бег о Аза цей дер обго дер
З85 зе 395 4аа б1у біо Тубє Таб обез ген Ада бро Маї А5п о Абп АТа Ре бек Азр Ар ча а 415
ТР омен бек Мет Азр біл АР Ме овям оСув Гви ТТ іс 52 Ава нів го 425 43в
Ме іївй бух уаї бук Маї (Ту (ви Аби б1) Мен Туб два сту віп Пе 435 448 445
Кеш Єїи Тае 112 о1у 61 Куз біпоїеи Абе мзі Ре Уа) Ту АгроТвг
355 зва
Аза уві Су 118. 05); Аеп бе Суб Меї Сі фуб біу бек огув біп С1у 455 478 75 аво
АгЕ Ап б1у Аза їі мі5 І1е Ріреобгсв бій 11е Г1є їу5 Рго Аїа бін 285 492 495 іу5 его іец нів бхн ому Бей 1їу5 біл АБрозбух Асдо рве Зее Таб Реє ва 525 5 ен бег Гей ів 410 Аа дДта А5роіви Гу оЗй Іво ів ТВеобіп бро 515 зб 55 біу бер Тер Тпг іш Рпе маі Рго Те яп Азр Аза Рпе уз біу Мет 53а 535 540
Тиг о5ег 515 51 іруя 010 Т1е іеи їтТе Дср о Аврої уз АБ АтТа ви бій за 55 55» зво дво оХів Т1іє івеиоТує ні5 рез Те Бео біу маї бе гів 51у Був Б1у 55 57 55
Те біс Рео 01у Маї Те Аза 112 се зу Те Твагобіп б1у беб ух еВ. 585 ще їі Ре бец бух 010 Маї АвпоАзр Тс Тез бец Уві Абп обі Ген Гу 535 ва 505
Зае о гук біб бег А5р їі Меб Трг Те деп б3іу уаї Гіе нів Маї Маї
БІВ 5І5 529
Азр о іу5 без бен о Туб Бго Аїа АзроТе Рго Удаі бі Аеп о Азробіп Гео ка 535 5495
Кеч бін Тфе іви Ази Куб без Це ух Тук Пів бій Т1є фу5 Рве Уаї 245 Ба 555
АгЕ 1уУ баг о тйг оре Гуз (3 о Ріе Рго Маї Твб Маї Туб дев Рго ТНе бо а 57 іем Трг о Буб Уаї уз 112 сію бБіу бій Бго 010 Ре Агд Ген Т1в 1у5 575 сне 685 біз аіу бо ТР ІЛЄє Таг біз Маї тів Ніз б1у бій бго 112 ГПіе губ вай БаБ то
Гуз Туе ТНгоїуз Ї1е їТв Азробіу Мві Рго Уаі бім ІїЗ6 Те б1й уз 705 71 75 7289 біз тТагб дев Пій 3 Абе 116 Їїе Те о біу Бко 910 11е уз Тує Тебе 725 73о 735
АгЕ 1іє бек о Таг о біу Сіу 01у біц Твб Бі біб ТБг гей гу Бук те 740 745 758 іеш бій б1ц Дер о Те Бео Уаї Абе їу5 Гео бій бід Авзп гу Гуз Уві 7Т55 тео 765 бів біу бекойее АгБ Аг Кен дев Сім С1у АкБобег ій 776 775 780 «2185 117 «2115 751 «21725 РТ «213» Ношпо зарієн» «або 17
Ме ф1іє Рео Ра цен обго Меб бно 5Зебоцеу Без Сем Бей сбеа Г1Є Маї 1 5 16 15
Ап оБго І1е деп дія АБп депо Ні Туг Ар оГу5 тів о іво АТа Ніз 5ег га 25 30
АгЕ їі дев 01у Аге Азросій бім Бго деп мМа1ї Суз Аїз Гей бій бій за ав 45
Ті ій біу Те обуя Туз Гуз Тує Рне бЗеб Те був бух Ап Тер оТуб ча 55 БВ
Ку Гуз баг ї1е Суб СІ1У бІп Гу Тс Тас омві без тує СХ Сув Суз
79. 75 ва
Бго піу Тує Меб Аг Межї бій біу Меї іу5 бі Суб рРео Ата Уаї Сей 85 зе 95
Рго Хіе джр Ні ма! Жук Ту Те бен обіу Ті уві б1у Аїя Таб Те за 15 в
Тне бів Аг Тут о Бег Ахродія бек о ї1убє зем Абе бі бі ів сій 51у 115 1295 125
Ку Бім бек Рне Те оТує Рне Аіїа Рго бег о Азп 019 Аа Тер Ар Ап 130 135 148 івч Авзо бек Ахрої1е Абе древо біб зей бій баб дп Ма деп Уаї бів їд5 158 155 168
Гей їв Ап АТа ів нія бебо мі Меї їі дзпоіуз дер Меї ги ТНе 165 170 175 ув др ей їуз Ап б1у Маї їТ1їе Т1е бро бебоМебЄ Туг Ап Абп СГ еи 188 155 іза бі сез ре ї16 АзпонНів Туг РРО деп б1іу мМаї Маї Тис М3зі Депо Суб 195 ай 225
Аіа АгЕ І11с 116 Ні Сіу Ап обіп Ті діа Твго дей біу уаї Ууаї Мі 210 215 228
Маї ї1е Ар Ак мі Ген Тег бів Т1е Сіу ТНе бер 11 бій Азр Ра 225 238 235 246 112 сіб Ата біз А5р А5р Бей беб беб РНе Абе Аїз Аза Аза Пів Те 245 250 255 бБег Азр Т16 (ей бій Аза ее Сіу Аг А5рос1у нія ВНе Такої ви Не 25й 255 278
Діва Рго Те Ап осі Аза Ре бін іу5 ей Бго Ар о с1іу Мві Гец бін 7 ка 285
Аг їі мек ПІу Ар оїуз Маї Дів бер бій Аза Гео Меї гу Тубв Ні 290 295 зай
Їів їв Аза Таб оіео біл Суб беб бін вк Ї3е Ме олу б1уУ дів Маії
За5 зв 15 БУ вне бій Те зем бін біу Аа Те Тіє біз т11е біу Суз Азр (ту д5р 3и5 з3В 335
Зеє Хіе Тве мМаї Ази б1у 13е Туз Меї Уа) АзпоГу5 їуз Ар Іхе Уаї 340 за5 з5а
Те АБп Ап о біу маї ї1е Ніє Мец Тів дер біб о уаї їец 112 Рго Дер 355 зба 365 чем Аіїа уз БІЙ Маї Ті сій іеи дів Бім був бій біп Твае Тае вне 379 375 зва
Тпеб Ар огво ма1 Аза біл оїез бім Бен Аза беб Ав їз Аря Рго Ар
З85 зв 395 498 сіу вів Ту тТго гей ге діа Рго Ма)| Азп о йбо Аїа Ре Зег д5р др 485 Ат 4315
Тигоїєй бег о Меб Авросіп Асб Гей їсц Гуз без Т1е беа бів Азп о Нів зга 425 430
Ті зцечзобуз аї уз Мазі БІіУ Мен о дязп біш ей Туб Азп Б1Уу бів Тв 435 448 3435 іен бі ТР обТе б3у біу Гуз біпоїео Аби чаї Ре Уа) Ту деЕ теє ч5а ач5 460
Аїа ма! Суз Її 51) Авпобяє Су Меї СМ іу5 біу Зак ру біп Сіу 455 Ата а75 а
ДгЕ Ап о піу Ата ї31еє із Гі Ре Агк бій ї1е ЇТ1е Буз Рго діа 510 455 490 435
Ку бегобец Ні5 с1и уз без Муз Бій Аяробу5 Аг РБе бег Так ЕНе «аа 5а5 518
Гей бЗес беб зенобін АЗа АТа дер ув суб біз Мем оїви Те обід Рео 515 522 525 сзу АзроТероТнг без Ре Маї го Те Азп АзроАТа РНе Гуз бту Меї 530 535 аа
Те обег піц бі фу5 010 112 Тен Ге Акф А5ро1у5 Ап ДІВ Ген іп 545 5509 555 5БА
Азпоїіе 16 Мей Тук нія Бей Те Рго біу Маі Рне ї2е СІу Туз с1у
БОБ 578 575
Ре сів рро сп1у Маї Тиє Абп Тіе гей огух Те Те аіп О1у беб 1у5 «во 585 за
Їі2 рн ви оїуз бі Маї дп одер о Те оїец їей Маї А5и б ву уз 595 вав БО5 бегоіуз пі) бег Ар о ї1е Мей Таб Те Аби 51у Уаі ів Нів Уаї Уаї
Ід 515 БІЙ йероїуз бен обви Туб Рго Аїа дер Те Бго маї біу Ап о А5робЗіп бен ва 3 635 вав
Геш 56іс Іїе 1їем дей уз Гец 11 іу5 Тує 11е бій їте Гу5 РнНе Маї 545 558 55
Аге о Ппіу бег Те вне Гу біб Тіе Рео Уві Те о маі Тує о рує Рго І1е вва 655 Та
Щі ув Бу Туг Тигб Гуз Пе Т1е Дер о сіу Маї Рго узі іш Ті ТНе 675 58 655 сп о іу5 біб Тае йгв біц б10 Агсе о 11є 11е Тр обіу Бро сій І1є Гуз 63 695 788
Тугб Твг Ага ї16 беєс Таб осіу бі бі бій Те бій бі Тс оівц 1у5 та 718 715 778
Гуз і2ги ісц віп біз А5р о Таб обгро Маї Аби зуб Гей біп Аза Аза їуз 75 73 735 їжа Уаї біп о (1у бег о Агн о Агв дедоївц Агроб1ий с1у Ас беб біп 7ав 745 75 «21йах 113 «211» 595 «217» РАТ «2132 Ножо зарієп5 «4003 113
Меї о зЗ1е рео Ра бен ббо Меє бпе Зебозбец фев бен ей гей Ті Мазі 1 5 16 ї5 деп орго Г1е Ахподія Авподеа Ні Ту Азроіу5 ів іви Ата Ні 5ег 2а 25 36
АгЕ їі15 Агвобіу Аге А5р о бія б1у Бсо Аа Уаї Суб Ата ве бів бів ав 35
Те ігр обіу Те пує Гу Гуз Ту Ве бек ТінЗСуя уз Ази Тер Тує 5 Кк В
Муз їуб5 бег ЇІ12 Сух б1у біпоТу5 Те Те ма1ї без Тувє 616 См5 Суб 55 т7й 75 Кз,
Бе Зіу Тує Мей Агв Меї ст) 51у Меї уз О1у Суз Рго А1в Узі ей 85 за 5
Рго ї12е Ар оніх Уві Тук біу Тік оїги С1у 112 Уві біу АїТа Таб Те тав 125 пе
Те біо аАгвотТує беб А5роАза бег гук бец Агросі 10 ї1е бін біу 28 125 уз сіу Бер Ріе Те Тує бпе діз Рго Бех Аза бін Ата Тер Ар АБИ ї13а 135 1405
Мем Аяр яви Ар 112 Агн Абе обіу їеи бід беб А5л уві депо Уві бі 145 158 155 1656 ей оїеч Або Аза цес Ні ве оніз Мебї Ті Аббосуз Абе Мет Бей Те 165 178 3175 ух Ар іец фу деп бІу Мет їЇіє Їїе Бго бер Меб Туб АБп о Азп ої ей 188. 185 195 сіу мен Ре Кіе Азпоні5 Туг о Рго деп обіу Маї уаї Таб ві Дей Суч 195 298 205
Аза Аби Іі За Ні б3)іу Ап обіп 116 Аза Те деп біу Уаї Маї Мі 212 215 225
Уаї Т18 А5р Аг Узі сен Те біп Т1е б1іу ТВг обер фія бій Азр Бве 225 з3а 235 246 ї1е біз Ата бій А5р Ар Ге) бег бес Ре Аге Аїз Аза Аз Ті Тег 2435 250 БЕ
Бек Авр Ті іч біз Ата їви біу АгевоА5р обіу Ні Ре Твг оре РНе 258 25 276
Аїа Его Те АБ" зі Аза Ре біз губ Гец о бго Ден обіу Ма Гей БМ 275 288 285 дгЕ іі Ме б1у А5зроГуз Ма! Діз бек бі Аа Гей Меї ух Туг Ні зва 235 зо
Т3е іє А5и Твгоїеча бій Суб бегобій 5Зес Ті1е МебЄ біу Сіу Аза Уаї 325 ще зІ5 320
Ре бін Тгоіви сій б1у Ав ТВгс ї1ве бій ї1е б1у Суз Абзр о біу Ар 325 зло За5
Зев Зіє ТЕ о Хаї Абап о С1у Тів Су Меб Маї Аба Їм бух АБро11е Маї 340 345 за
Те Ава Ав о біу Ммаї 11с Ні Ів. Іза Авр біп Уа! їеч 1162 Рго дер 55 зба 3655
Зег о Аїв уз бБіп Маї 11е б31й ів дія Б1у зує бій бій ТЬе Таб Ре зта 375 зве
Тпе йзроіей Мазі дів б) рез біу ї2еий Аза бар одія їз Абе Рго вер з85 зав за5 зав сіу вій Туг Тігоїем ее Дів Рро Маї деп деп Аза Ре бер Ар Дер 225 а16 415
Те ово бек о Меб Ар б)п АсЕ о Їги їз бму5 Меч Т1е ви с)п А5а НІ 428 аг азо
Їзе ібн бух маї Гуз Маії бІТу Мем ойзп біц іви Туб Азп обі біб їїе 435 зав 445 йец він Те Т1е балу біу Бу5 біпоівн Аеж уаї Рпе маї Туєс АгЕ о тТНе
Ба 455 збо
Аза уві Суз 11 бін Ап беб о Суз Мет 510 ів б1у бебоіуз біп с01у 465 476 475 зво дев Аве О1у АТа ї11е мі5 Т1е Рре бебБ бій 112 Г31е су5 Рго Аза 1 43455 аа 495 ув бегоівен НІШ бін Гуз Бец о їу5 бів Авр гує Аве о РвБе бегс Те Ре во 55 518 їес 5егоіец їено біз АтТа Ата А5роієц Гуз біз Ген оба Так біп бро 515 50 525 біу Аве Тер Тк ів є маі Рео ТВе дай АроАТа Ре Гуз біу Мет 535 540
Ти» бес од ій Гуз С Ті їв (б Абе Авзро! у Ап оАТа гео б1п 545 550 555 5ЕЙ
Ап ої1е 16 їей Тує мів рец Так оРго Сім Мві Нео тів Су уз б1у
55 57а 575
Ре бій Рго біу ма1 Те деп о ї1е сей ух Тве ТвК бій бі бег Гуз 5ВО 585 вай
Ті Бе Гей іу5 сі) Маії Або дер Пе без іей Уаї Азп обі Ген Гуз 595 ва 6во5 чевоіу5 біб бек дер оТ)е Ме Те Те Азп обу Маї Кзе нів Уа! Маї 515 520 дар ух ей йви Тус Рго Аза одер Те Ббго Маї 01 А5поАвер біп (ей 625 38 535 во
Кеч віч Те гей Азпогу5 Беу б3)е вує Тук Т3е біп Гі Ку5 Ре Мах 645 є5а 555
Аге б1у бег ТР ОРНе Гу 010 Т1е Рго Маїі Тр оУаї Ту бек Вго С
БЕ 555 ТВ
Ті ЗЦує Ту Те Аг Т1є бБег оте біу бі с1у 1 те 010 біб те
ІК 588 685
Гей туз бує 1ешоіви бій бїй за ща «2185 114 «2115 17 «2125 РНТ «213У Штучна Послідовність «224» «и?2ї» джерепа «2235 /приміткає"пчниє Штучної Послідовності: Синтетичний пептид" «ай» «281» ВАРТАНТ «2223 131.13) «2232 /звмінає"Бес" або "бій" сива» «7221» піс театоге
«йййх (13,.(17) «223 /примітказ"Варізнтні залишки, наведені у послідовності, не мають переваги відносно тих, хто в анотації до зварізнув позицій" «дпоах 114 біу Ті Ар Тер беє зег о біу біу Тіве б1у Ту Ата А5ро5ег МУаї губ і 5 16 15 о1у 2185 115 «211» 123 «215: РВТ «2135 Штучна Послідевність «770» «241» джерело «223» /прамуткам" Опис Штучної Послідовності: Синтетичний поліпептид" «их «221» ВАВТАНТ «223» (55)..152) «2232 /замінає"Бее" або "ба" «82Оах «221» тік Твакога «2722» (1)..(123) «33» /примітках"Варівзнтні заляшхи, маведені у послідовності, ме мають переваги відносно тих, хто з анотації до варівнта позицій" «402» 115 біз Уаї піп оіви Уаї 210 5ег обі бі Сі Кей Уа) біпорро біу ре ії 5 15 15 зе» оїео Або омем беє Су Аза Діаз 5еб 01у Ре Тпг Ре Ахродзротує 28 25 за
Аза Меї Ні Тер оуві Авд о біп о Аїа Рго бір їуз Бім ік біц Тгр Увї 48 45
Зег сіу Т1іЄє АброТерозес бог обі біу Тіе 03у Тує АДіз А5робеє Маї 5а 55 ба
Кук піу Агв вае Тис 116 бего дев джр дп Аза уз доп Бе без Тує їз 7 75 ща ей сій Мес о Ава Беє Се дбродія біз А5ротне Аза зви Тує Тує сух 85 зе 5
Аза Агро Ар ої12 біу біу Ве Су біш Ре Туг Тер Ав Ре біу Бей тва 195 ль
Тер обіу дев о Сб1іу Тис оїео Маї Тве Уді бек о бве пе 128 «г1аз 116 «ії» 4 «2175 РТ «213» Втучна Послідовність «2203 «221» джерело «223» /приміткае"йпис Штучної Послідовногті: Синтетичний попіпептид'" «4502 116 бій маї Тйгбобез АгеЕ бій бек обіу Рго діа сецз Маі гу Рко Те бій 1 5 18 15
Те бен о Твйеб бе ТВе осСуз ТВ? омаі бе біу Рве бег оіє0 бег Аза тус за а: за
Зев Уві АбпотТер Хе Аср о сбіва бога Вгбо 531у уз Аза цей 1 Тер оїеу за 45
Аїз Меї І1е Тер о б5іу дер б1у Су5 І1їе Маї Туг дДкп Зек АтТа Гей у
Ба 55 5
Зегв Аби Мей Те їле бер овфує дер отве Бег обу АБп бій зі Ма1ї ев 72 75 ва
Тие Мей Те Ав Меї Ажробко Уа? АзроТНе Ата Те оТув Тує Суз А1а 85 зв 25 с1у дзр бзу тує Тук бро Туг о Аїа Меї Ар Ази Теросіу біп о бху бек
180 185 з
Бер узі Тис Мзі беє бек Ата бе Те оіуз біу бро бек Уаї Рае Рго
ТРУ 120 125
Мем Аїа рго-Сух бегоАри обес Ті бев бій Зеб ТВб дія Ада без біу 138 135 140
Сух їви Маї муз А5роТує бпе о Рго біб Рро Уаї Таб Ма1ї 5зеб Тер Дей 145 150 155 160 бег Бім Аїз бе) Те бек боз1у мМаї Ні5 Тпе Рпе бео Аа Уаї бе біл ї6Б5 1793 175 бег бег б3)у ївеи Тугс бер фе) беб бве уаї Маї Тб Мві Рго бе обеє 188 185 139 дЧевоївй біу тб оіув Те Туб ТагоСує АбпоМаї АкроНів Туз го ес 185 220 205 дви Твгобуз Ммаі Азросуб5 Аг Уаї Єїи зег Суз Тут б1іу Рео Рго Суз 210 215 228 го Бго Суз ВБго АТа Рго біз Бе івн о біу а3у бро бег мз)і Ра Ген 725 230 215 248
Вне бго Рго Гуз Бебогуз АБроТйс іго Меб 11е бес дер о ТВе Бго бу зап 258 255 маї Те Су5 Маї Узі Маі дер Уаї беб бій (За Дер оБго бів Чаї СІЙ 258 265 276
Рне Ав Тер отТує уаї Азр обі Уві бін Маі Ні Азп о Аіз Гуз Тео ув 175 789. 285
Бго АгЕ 513 51 бій бів А5п обег Тс Тугс АгЕ Маі Уа! бег Уа! ей 230 295 БІ5І
Тег оМаї ви Ні сій Дер Тер Ген йзп біу Гуз 1 Тугоїу5 бує Гуз за5 ЗІЙ 315 В маї бег й5п ух біу Ів Рго 5егобеє Ті 14 Гуз Твб о жтТе бес Гуз 325 330 35
Аів о їув біу біп Рго Аге біш Бра біп о Маі Ту Тг іє бро рРго беє 6 ла: 35 біп ші) біб Ме Тебе Гуз Аа біп Маї бБеб озез Теробув о Гву Уа! уз 355 зо ет 5іу Ре Тує Бро бер дер І1т1е іа Уаї Сі Тер о 410 бег деп біу іп зо 375 зво
Бго біб АБлоАєп Тут Гуз Таб Те орео Рго Уаї Геч А5розеєс дврод1у 385 зза 395 дав
Бег бре Ре се оТує бек о йбе Ге ТИг Мазі А5рогуб бек АбЕ Тер обіл дах чів 415 віз біу а5п Маі Риє 5ег Сус бег Уві Ме Ні5 бі Ат ів Нія Дей
У 425 аз
Ні5 ТУуб Те біп був зеб Бей 5ег ої) бек без біу 435 аа «2105117 «2115 443 «212У РЕТ «213У Штучна Послідовність «2295 «221» джерело «2235 /приміткає"Опис Штучної Послідовності: Синтетичний поліпептид «два» 117 біз Маї піп іви Маї 510 бегобБім біу Сбіу іви Маї біп Рго бім Аг 1 5 16 їБ
Зегоівес АгЕ бен обеб о Сух Аза Дія Зег біу Ре Те Рве А5р др тус 28 25 за дід Мет Ні Тер Уаї дге 51 бів Бго біу уз біу їєч 510 Тер о МУваії 25 аз 35 чего біу 1162 Ап Тер бегобес біу біу Т1е б1у Туб Аза Азр о беб Маї що Б ва
Гу П1іу Асв о Рае Те 11 беговед Ар о Ахп Аза уз АзпобБес рГен Тугб б Уа 75 че гц бій Мет оАєп о Зегоїєз Абводіз бін Авр Тео Аїа ієц Тую Туб Сув за 5
Аїа Аге Азрої1їе біу Сіу вве біу бі РНе Тугб Теродеп Бве біу їв ва 125 ме
Тер бБіу все біу Тег оїе) Уві Те Уа) чего бе Ата бе Те огує 01У 315 128 125 бго бес о Ма| Рпе Рео Гей діа Рго Су5 бер Агд о бЗего Те 5еб бід бек і1за 135 149
Тибг Аа дІз бесї бі Су5 (во Уаї суб Абр Тує Ре о Рго сть Рго Уаї 145 158 155 169
ТнгоУаї бек о ТтТероАзп обер б1У Дія рен оте о бег 01у Мві нів Те о вНе 365 176 375
Бго дів уя1і Мем бій чЧеб Чек С1у їз Тує беб Сен бе? о5еве Уа! Ма! ів 185 188
Те уаї Рго бегобеєб бек рем біу Тйге Гуз Твге Туб Тк Сух Азп о уаї 135 280 2и5 дьронів ру Рго беб Ап ТАгоГуз Уаї Ар Гуз Аге Маї БД) бег гу тів 215 22
Туг б1у рРго Рго Сук Бко Бго Суз Рго Аїд Рез бі Ре бе сту «1 225 зх 235 2
Вго бег Ма) Визв се РНе Рео Рео іух ба фу А5роїне Ген МеЖ З1е
245 258 255 бег Агв о ТигоРго зіц Ма) Те Сух Маї Ма1ї Ма)! Дкрома| бек біп ФЦИ 25а 255 275 доро Бго бід Уаії бій РБе Доп Тер о Тув Маї Азроб1іу Мазі Зі Май Мія 275 258 285
Азп о А1з уз Те бух бро АеЕ Обі 010 51 РНе дп беє Те Тує Абе 230 25 зва чаї Жах зек Ма1ї Се Те Маї Ме НУ біп дероТероїез Авп о буу (ух 05 з18 315 320 біз Туг бух Суз іуз Маї бер деп бує біу ей обго бегобег Ті Бін 325 330 335
Ку тег (іє бер оїух АТа Гуз 1у біля Рго АгРЕ біч Рео бій Уаї Туг 348 345 50
ТпгобевоБго Бго бегоб1л ої Бі Мет те бух А5посіп Ма1ї беб Ге 355 з5б8 3655
Заг оСуз Аза Уаї іуб5 Сіу Ре Тугб Рго бек Абр Т1е Аза ма) 51) Тер з37а 375 зве 3 бег Ап Чім зіп о Рео б3и Ап Ази Туб уз Те отне Рео Рго Увї 285 за 335 406 іа бар бек Ар йп1у Бег Ре Ре їви Уві бег Аге їєз ТВгоУаї Агр 325 41 415 іу5 ес Аг Теробів Сі сту Азп о Маі Ре бегоСуз бек Уаї Меї Ні чив ау аза біб Аїа ва Ні Ази Мі Тує Тпгобхпй їух баб ово бебє Гез бев бен 435 ме 445 біу
218» 116 «211: 1352 «212х ДНК «2135 Штучна Послідовність «248» «722ї» джерепо «223 Лприміткає"Онис Штучної послідовності: синтетичний полінуклестид" «дай» 118 ваантсассс ТБсСеЕсваває севсссвЕСс сівЕТЕЗадс савсссаявс ссствассств ве асстровсср ТсвисевсеХ саксстваре всостазсарср Єразстндкає ссвссарсса 129 ссашвсавЕв ссстшКахтв вствБссаїтв зістриннси асижсааваї. свт всвас 1858 авсЕссства ававссвосі взссвісавсо задвасасса всазезассв вЕсЕВТвсТЕ 245 асаївасса асагвЕкассс якгняасаєсі вссасстасї зсбвснсосяе скасввстає з0о
Хасссаізсе ссасдкасаа стявБЕЕссав шЕСсВЕсссвЕ свассвівав савсестісс зей ассавирисс сатсевістї сссссбЕЕся сестдсебссс всвдівсттс Срарбссаса 420
СВЕСсОСТврР БСТЕсСсТвВО сазвинастас їтссссваас сЕвТЕзсЕнК вссрідраає ава
ЖсавЕсвссс ТЕВссавроди сетеЕсасасс ттсссорстр Єсстакавтс стсавеастс за
Тастссстіса дсавсвіввї расівбвссс Єсіадсавсї їрерсассва вассівсасе еВа їсаасятвЕ аїсасависс свисвасаєсо аавеївЕаса взасесвссвВ ясосаватат бо
ЕБтсссссає рсссзссаїн сссавсеасот равтїсствре шЕннассатс аджстяссте та жЕсСссессва васссварева свсістсаєе вЕстсссвра ссоссїравеї сасрєнснів 75
ЕсЖЕсВНаси ТБавссавревз здассссеан вІссавіїтса астеЕвтзсвї дрЕатЕВсиТЕ зад карвірсата аїрссазцас ааврссвсве рарварсарї їсазсвисає екКассвтрвто зве вісарсвссс тІсассовіссї рдсоассавеас їквсідаасе всаадраріа савеїксвад зба вСстссвага завидсеїссс вісстссаєс шарааазсса Тсфіссваанс сазаревсад 1825 соссвававс сасавеївїв сасостяссо ссаїсссаре зЕнзЕЗіаєЄ сяадавссар, за8о вІСсавсствс ЕЕТЕСсТвЕІ сзаавевЕстіс їассссвеЕсеЕ ВСаТСресБК ЕБаБЕТЕЕєЗЕ 148 авсаасЄрдеЕнс авссеяварза сзастасаав аксасвсстс ссрірвствев стссрасрис 1250 жсстесттсс тстасарсад естввссЕсеЕ дасаававса єстєвсареа вервааеНЕс 1260
ЗТстсВівБсС ссБЕбвЕатЕса сваБЕстстТе сасвассаєї зсасасадва яавссістсс 3322 сЕЕЖСЕсЕЕН ЕЕ 1347 «2185 119 211» 1347 «2125 ДНК «2133 Штучна Послідовність «вва» «221» джерело х7232 лпримітка-"Опис Штучної послідовності: Синтетичний полінуклеотид" «абз 113 взанїксакс Тевтеварїс феррревавнс срЕкасавс ствесавеєс ссбваивстс ва хсствтЕсар ссТстТББатІ свосессває ваїтаївссяа ТЕСаствЕЕс ссврсварст 129 ссаррезарр россрЕЗИКВ вЕТстсаве: аїїзаєсвраз шсантвркев сабарвстве 158 решНВОТсСТК тТразеввсосв аїісзссаїс їссвнаваєа асвесаараа стссстра 2485 сЕрсзавева асавісівар звсівареас асвесствЕкК агбасідбвс зарвратаєс зва
ЕБЕБЕВЕССе РЕБЕЗЕСКЄССа ствраасттс рВЕстстрвЕ вссвтрясає сстреєсасї зва вістсстсСан ссіссаєсаа врвсссабси вЕсЕТссссс тввсассстр стссснеянЕ 420
ЗсЕЕсСтраві ссасавсеввс сстрвЕствс стрвісваєв астасіїссс сваассввтв 480 асевтетсех резасссяюи свсествасс арсресвївс всассстссс яЕствесстЗ во свежсстсви нвсксрастсо сстсавсавс нінжікастяи тесссістав сао Ба зссавваєст асасетесав сеїрЕассас дарсссавса асассвареї Ерасаватес БО
Етварісса загзсввксс ссесатиссса ссатрсссзо свсствавксу сстереврвра та сгаїсавтст тоствттсосс сссаааассс ззриасвогсо їсатватстс серрассссї 78 взЕнєсасЕу шСЕТеБіввї врасвсвавс савривавасєс ссварвїсса рессгавстри вав касвівватр всЕтнЕВШИХ нсовтаажвос зарасазарс сЕсЕнНанна ясавттсаас зва авсасетасс вівснЕєсав свісстсасс вісстрсвос аррасєтвевст: ваасевсазе зви езЕсвсавкї ясааввістїс сзасазарис сесссвтсст ссаїсрараа загсассбсс 1020 вазвссеаар рвсавссссн вивиссвсар ртівтасавссс трвсссссасс ссавраврав зво авскассвара ассаввіїсван сствавстис встевтсавар всттстассс свесвасате 310 кссвіреЗеї реЕшарарсва сеЕнсавссв сзвзасазвсс асаанасстає ясстессвЕе 1208 стЕсвстссв ВсВВскест ствестерЕг вЕсявЕссва ссвтврасза варсасЕтнЕ 1258 савхавивва азТЕТСТТСТС зСвсСссвів аївсатвави сістЕСясСая ссастасаса 13229 саваававсс фсскссбнкс КТК 3347 «21ах 120 «211» 1347 2175 ДК «213» Штучна Послідовність «2203 «221» джерело «йа3» гпримітка-"Описо Штучної Послідовності: Синтетичний полінуклеотид" «Од» 128 вазвіїсзис сЕКСсСказав сяВТБЕТЕБЕІ сСТБЕССсанс стдЕТсВКав сстЕсЕТсТЕ ей анствЕсясав гсаавсветтї їзссЕссЕас настатвсса Трозіїсрасі Єсвісаврса 120 ссЕЕнТазар ВістеБазін вЕссавсЕнЕ аттааттвва єсзЕсвЕСЕЕ СаствАТТаї 152 дсаватавсе ГСвазиисся сттассаїї зросвсрвса зінссадаза Карсстрвізс аа сСТЕсаЕВІКа зіавісїврсвЕ їрсаразЕає зссесастіяї зііаттевгвс асетЕВЗіВК зва вЕСЕБІТКОТЕ БСЕЗаєтствВ СсвеВассії яБІСТВБСБЕЕ БІСЕЇТЕНСВС сстввЕТасс збо кітавсавсв ссткссассяа дяшсссатсв вісттсссосс Євисассотв стессвсавї га астжстЕВЕЄ ссасарсевс сстірЕБСТВсС сІдЕСсвави вастастїссс сравссентія «на зсЕшКЕТсВІ шВаастсаве срссоссрассо арсввсятяс асасстїссс дрствЕсста ло сарбссісар вастіствсїс сстсадсарс рірвтрасто ЖЕСсСКсСЄаК савстїрррс бога ассвавяссї зсасрінсва свірраїсас вансссзиса асаєсвареї рвасавасно БВ
ЕССЕавієса затагЕвісс сссаєдсссяа сгаїсдсссає сасствансс сссвЕшвнЕа 725 ссбаксавтсї тестЕЕІссс ссосвавесос зарвасастс їсз(нвістс соввассссї 780
ЕВЕБТСаСЕЇ ЕСЕСЕВТвЕї шБасЕТЕВЕС свреЕзаввсс ссраврісса ЕТТсСавсівЕ вав
Іасетвраїв ясеїеваврні ссвіватеЕсс вадасавакс срсерезрев дсвестсвас зва звсасевсаск шівтеЕвісад сЕССсСтсасс вІсствЕсаєс арезстевсї взаасввсадв зво яаріавсзарі рсааеЕвЇсіс сазвсааавис сісссріссї ссязісваква зассатсісс зага зазвссввар врсаясссосв арарссасає вінїасассс тТрсссссаїс ссаревеЕнає ївБа збдассвава ассавеїсав сствввссвс дствісааав ЕСТЇстіЗзссс свесЕВсСаВе 1140
ССБТ рварі рЕракгавсвв сревсаясся раргасвасії асазрассас ясстсссрід 12062
СТЕваСіСсСя ВСЕВСТССТ СТТССТСЕЕЄ вЕсзеестав ссвівраєсва вавсанвїнеЕ 1258 «аЕБавЕЕБа атЕТсСттстс ВівсіссвсЕ аідсаївавв сіствдсасва ссасстасаса 1325 сакваравсо їсіссствіс СсткяКХ 3347 «21а» 191 «2115 127 «2175 РТ «213» Втучна Послідовність «2203 «221» джерело «223» /приміткае"Дпис Штучної Послідовногті: Синтетичний попіпептид'" «4Н0» 121 біпоуаї Ні без бів бій бек обіу дів бі їез Аіа ух Рко 01у дів 1 5 12 15 5еєб уаї Ні Меї бег осСуз уз Аза бе б1У Туб Те Ре Те о Тае Тує а 5 за
ТероМмеє ні Тер Маї ух са дк Рго біу бів» біу Бей ба ТеРровіє 35 за 45 су Туг 116 Абп о Рго Аза Те о біу Туг Аза А5ротує Ав бів Гуз рве
Ба
Ко о йарб був Аїа Те Гео Те АзїаоАяроСув бер обеб бег Таб оАза Тук 55 7а їх 8
Мет сій дез бБеєб беє рей ТВ бек біз Абробеє Те оУуа1ї Ту бе су но зе 5
Аїз АгЕ Абе Аг Те бІу Те обегоТує пе АзроТубє Тер ОІУу біп С1у
180 185 за
Те оТигобез те Уаі Бек обес ТвВбеоїу5 ТвВе Тео обро Рео бек о Уаї
І5 120 175 «218» 137 «21ї5 185 «2152 РЕТ «2133 Штучна Послідовність «ЕВ «221» джерело «223» /прикміткає"Опис Штучної Послідовності: синтетичний поліпептид" «4003 127 сі ТнНг Маї бен обеб СТй 5еб око Дів 116 ев о бег Аза зве Рро с1уУ 1 5 16 15 біш йу5 мазі ТпгоМеЄ Те Суб Агв Аїз Зер обер бег Уді Ті Тує Мет 2а 755 20
Ніє Тер оТує біп о біп Гуз Рг біу бек бек орго суб Рго Тер 116 Рів да 5
Аза ТТН бяє Авп о іен діа бее о сіу Маі Рго Аза Аев Ре зве о1у Зег 5 55 50 біу бег бір Тае о бегоТук о бебоївеи Те Ті беб дри Ма1 СІ Аза бі 78 78 чо
Ар оАів Ата Таб Ту Туб Суз віп бій Тер Те обБес Азп бро Бен о Тве 85 за а5
Ве біу АїЗз о1у Тео ув 188 «2105 122: «2115 127 «2153 БРАТ «213» Штучна Послідовність «иййх «221» джерела
«223х уприміткає"Опис Штучної послідовності: Симтетичний псліцептид" «або: 123
Сіп Маї іп зїечз бів бій бер біу дів біз іеез Аза Абробро с1у А1їз 1 5 12 15
Зеб Маї Буз їви бегоСуз Гуз іа бер Піу Туб бе о Рне Те Ніх Туг а 25. зо
Тер мех бій Тер уві уз ста сдрр о Вго БІіу біб біу іецз 510 ТгроТі1в 35 ча 45
Сіу А1а 11с тує Рро С1у Ар обіу Азр Тве бгЕ Тує Те бій Асе Гей 50 55 5
Кук Бі Буз Аїа Тигосео Тве Аза бер о Гух бебобеб бєег Те Аза Тує 55 то. 75 на
Мег сіб ся беєобеє Гей діа зе? біз дер бегоАіїа Уві Тує Туг Суб 85 за з5
Аза АГЕ От: БІ біз 6Іу Азпозег Аза Меб Ар оТує Теробіу піп с1у зав 195 18
ТвР бег Уаї Те У бегобеб діа уз Те Те о Рго Рго 5ег Уаї 115 128 125 «м10х 124 «211» 183 «217» РеТ х713» Штучна Послідовність «8202 «221 джередо «223У /приміткає"Дпис Штучної послідовності: Синтетичний поліпептид" «що» 124 дер Т1е ма! Меє ТНг сій бегобіп о їу5 бе Меб бек Тр Бек Уаї С1у 1 5 19 15
АзноАри Уаї бее уаї Тиг о Суз Гуз іа бек біп Азп о Уа1 51у бер беєе -а 35 за
Ууаї діа Тер Ріпа бів СІ вуз Рго бїу бій бер рей фу Те бе 116 35 за 45
Тує бег аїа бее Тув Аг Авпобеє бі Ма1ї Бо АзроАбн Ре Те б1у а
Зег щ5іу бек піу Те Ар о Рпе Тигоїєб Те І1е ТБг о АБ Ма) сія Зегб 5 7а 75 ва сіш АБ5робецй Твсе АвроТук Ре бух беи бів Тусбс б1у ТНг о Тук Рго Туг 55 зе З5
ТвгоРНе б1у б1у п1у Твг Аге 120

Claims (7)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Спосіб лікування еозинофільного захворювання у пацієнта, який включає введення пацієнту ефективної кількості анти-1І-13/І -17 антитіла, що включає першу половину молекули антитіла та другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла включає перший МН/Л. фрагмент, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17, а друга половина молекули антитіла включає другий МНЛ// фрагмент, який специфічно зв'язується з 1-13, при цьому перший МНЛ/. фрагмент включає НМЕ-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 40, НУМВ-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮ МО: 43, НМЕ-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 44, НМВ-І1, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 45, НМК-12, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 46, і НМА-ІЗ3, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 47, і при цьому другий МН/Л/. фрагмент включає НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 15, НМА-Н2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІО МО: 16, НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 17, НМК-1.1, що включає амінокислотну послідовність 5Е0 ІЮ МО: 18, НМУВ-1І2, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 19, ії НМК-ІЗ, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 20.
2. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що перший МНЛ/І. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 95 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ХЕО ІЮ МО: 39, і послідовність МІ, що має щонайменше 9595 ідентичність послідовності відносно послідовності зЕО ІЮ МО: 38, а другий МН/Л/Л. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 9595 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО І МО: 13, і послідовність МІ, що має щонайменше 95 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІО МО: 14.
З. Спосіб за п. 1 або п. 2, який відрізняється тим, що перший МН/Л// фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 98 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗБО ІО МО: 39, і послідовність М, що має щонайменше 98 95 ідентичність послідовності відносно послідовності 5ЕО ІЮ МО: 38, а другий МН//. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 98 95 ідентичність послідовності відносно послідовності 5ЕМО ІЮ МО: 13, і послідовність МІ, що має щонайменше 98 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІО МО: 14.
4. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що перший МН/Л/І. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 99 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕ ІО МО: 39, і послідовність МІ, що має щонайменше 99 95 ідентичність послідовності відносно послідовності зЕО ІЮ МО: 38, а другий МН/Л. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 99 595 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІЮО МО: 13, і послідовність МІ, що має щонайменше 99 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІЮ МО: 14.
5. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що перший МН/Л/. фрагмент включає послідовність МН 5ЕО ІЮ МО: 39 і послідовність МІ 5ЕО ІЮ МО: 38, а другий МНЛ/. фрагмент включає послідовність МН 5ЕО ІЮ МО: 13 і послідовність МІ 5ЕО ІЮО МО: 14.
6. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що антитіло являє собою Іо антитіло.
7. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що антитіло являє собою ІДО1 або Ідс4 антитіло.
8. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що антитіло являє собою ІЧО4 антитіло.
9. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що перша половина молекули антитіла включає перший важкий ланцюг, що включає послідовність зЕО ІЮ МО: 72, і перший легкий ланцюг, що включає послідовність ЗЕ ІЮО МО: 73, при цьому друга половина молекули антитіла включає другий важкий ланцюг, що включає послідовність зЕО ІЮО МО: 21, і другий легкий ланцюг, що включає послідовність 5ЕО ІЮ МО: 22.
10. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що еозинофільне захворювання являє собою астму.
11. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що еозинофільне захворювання являє собою астму від помірного до важкого ступеня.
12. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що астма не контролюється кортикостероїдом.
13. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який включає також введення пацієнту кортикостероїду.
14. Спосіб за п. 13, який відрізняється тим, що кортикостероїд являє собою інгальований кортикостероїд.
15. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що пацієнт визначений як такий, що має рівень сироваткового періостину 20 нг/мл або вище.
16. Спосіб за будь-яким попереднім пунктом, який відрізняється тим, що пацієнт визначений як такий, що має рівень сироваткового періостину 50 нг/мл або вище.
17. Спосіб за п. 15 або п. 16, який відрізняється тим, що рівень сироваткового періостину визначений за допомогою ЕГІЗА.
18. Спосіб за будь-яким із пп. 15-17, який відрізняється тим, що рівень сироваткового періостину визначають за допомогою аналізу Е4 або аналізу ЕЇЕС5У5Ф)
19. Спосіб за будь-яким із пп. 15-18, який відрізняється тим, що сироватковий періостин являє собою Загальний Періостин.
20. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що пацієнт визначений як такий, що має кількість еозинофілів в крові щонайменше 150/мкл.
21. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що пацієнт визначений як такий, що має кількість еозинофілів в крові щонайменше 200/мкл.
22. Спосіб за будь-яким із попередніх пунктів, який відрізняється тим, що пацієнт визначений як такий, що має кількість еозинофілів в крові щонайменше З00/мкл.
23. Мультиспецифічне антитіло, яке включає першу половину молекули антитіла та другу половину молекули антитіла, при цьому перша половина молекули антитіла включає перший МН/Л/Л. фрагмент, який специфічно зв'язується з ІЇ/-17, а друга половина молекули антитіла включає другий МНЛ/І. фрагмент, який специфічно зв'язується з ІІ -13, при цьому перший МН/ЛЛ/. фрагмент включає НМК-НІ, що включає амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 40, НМАК-Н2, що включає амінокислотну послідовність, вибрану з 5ЕО ІЮО МО: 43, НМЕК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО: 44, НМК-І 1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 45, НУВ-І2, що включає амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 46, і НМЕ-ІЗ, що включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 47, ії при цьому другий МН// фрагмент включає НМЕА-НІ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 15, НМЕА-Н2, що включає амінокислотну послідовність «ЕО ІЮ МО: 16, НМК-НЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 17, НМВ-І/1, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 18, НМВ-12, що включає амінокислотну послідовність ЗЕ ІЮО МО: 19, ї НМК-ІЗ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 20.
24. Мультиспецифічне антитіло за п. 23, яке відрізняється тим, що перший МН/М. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 95 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІЮО МО: 39, і послідовність МІ, що має щонайменше 95 95 ідентичність послідовності відносно послідовності 5ЕО ІО МО: 38, а другий МН/Л// фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 95 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗБО ІО МО: 13, і послідовність М, що має щонайменше 95 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІЮ МО: 14.
25. Мультиспецифічне антитіло за п. 23 або п. 24, яке відрізняється тим, що перший МН/Л/І. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 98 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕ ІО МО: 39, і послідовність МІ, що має щонайменше 98 95 ідентичність послідовності відносно послідовності зЕО ІЮ МО: 38, а другий МН/Л. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 98 595 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІЮО МО: 13, і послідовність МІ, що має щонайменше 98 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІЮ МО: 14.
26. Мультиспецифічне антитіло за будь-яким із пп. 23-25, яке відрізняється тим, що перший МНЛ/. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 99595 ідентичність послідовності відносно послідовності «ЕО ІЮО МО: 39, і послідовність МІ, що має щонайменше 99 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІО МО: 38, а другий МН//. фрагмент включає послідовність МН, що має щонайменше 99 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕ ІО МО: 13, і послідовність МІ, що має щонайменше 99 95 ідентичність послідовності відносно послідовності ЗЕО ІЮ МО: 14.
27. Мультиспецифічне антитіло за будь-яким із пп. 23-26, яке відрізняється тим, що перший МНЛ/. фрагмент включає послідовність МН 5ЕО ІЮ МО: 39 і послідовність МІ 5ЕО ІЮО МО: 38, а другий МН//. фрагмент включає послідовність МН ЗЕО ІЮ МО: 13 і послідовність МІ ЗЕО ІЮО МО:
14.
28. Мультиспецифічне антитіло за будь-яким із пп. 23-27, яке відрізняється тим, що антитіло являє собою дос антитіло.
29. Мультиспецифічне антитіло за будь-яким із пп. 23-28, яке відрізняється тим, що антитіло являє собою Ідс1 або Ідса4і антитіло.
30. Мультиспецифічне антитіло за будь-яким із пп. 23-29, яке відрізняється тим, що антитіло являє собою Ідс4 антитіло.
31. Мультиспецифічне антитіло за будь-яким із пп. 23-30, яке відрізняється тим, що перша половина молекули антитіла включає перший важкий ланцюг, що включає послідовність ЗЕО ІЮ МО: 72, і перший легкий ланцюг, що включає послідовність 5Е0О ІЮО МО: 73, при цьому друга половина молекули антитіла включає другий важкий ланцюг, що включає послідовність ЗЕО ІЮ МО: 21, ї другий легкий ланцюг, що включає послідовність зЗЕО ІЮО МО: 22.
32. Виділена нуклеїнова кислота, яка кодує: (а) мультиспецифічне антитіло за будь-яким із пп. 23-31; (Б) перший МНЛ/. фрагмент мультиспецифічного антитіла за будь-яким із пп. 23-31; або (с) другий МНЛ/. фрагмент мультиспецифічного антитіла за будь-яким із пп. 23-31.
33. Клітина-хазяїн, яка включає нуклеїнову кислоту за п. 32.
34. Клітина-хазяїн за п. 33, яка відрізняється тим, що вона являє собою прокаріотичну клітину, переважно клітину Е. со).
35. Клітина-хазяїн за п. 33, яка відрізняється тим, що вона являє собою еукаріотичну клітину, переважно клітину СНО.
36. Клітина-хазяїн за п. 33 або п. 34, яка відрізняється тим, що вона являє собою клітину Б.
сої.
37. Спосіб одержання антитіла, який включає культивування клітини-хазяїна за будь-яким із пп. 33-36 в умовах, що є достатніми для одержання антитіла.
38. Спосіб за п. 37, який включає також етап виділення антитіла.
39. Виділена нуклеїнова кислота, яка включає: а) послідовність БЕО ІЮ МО: 107; р) послідовність ЗЕО ІЮ МО: 108; або с) послідовність (а) та послідовність (Б).
40. Виділена нуклеїнова кислота, яка включає: а) послідовність БЕО ІЮО МО: 105; р) послідовність зЗЕО ІЮ МО: 106; або с) послідовність (а) та послідовність (Б).
41. Виділена нуклеїнова кислота, яка включає: а) послідовність хЕО ІЮ МО: 103; р) послідовність ЗЕО ІЮ МО: 104; або с) послідовність (а) та послідовність (Б).
42. Виділена нуклеїнова кислота, яка включає: а) послідовність БЕО ІЮ МО: 99 або 101; р) послідовність ЗЕО ІЮ МО: 100 або 102; або с) послідовність (а) та послідовність (б).
43. Клітина-хазяїн, яка включає нуклеїнову кислоту за п. 39 або п. 41.
44. Клітина-хазяїн, яка включає нуклеїнову кислоту за п. 40 або п. 42.
45. Клітина-хазяїн, яка включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність БЕО ІЮ МО: 107 або 103, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність ХЕ ІЮО МО: 108 або 104, при цьому перша нуклеїнова кислота та друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти.
46. Клітина-хазяїн, яка включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність БЕО ІЮ МО: 105, 99 або 101, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 106, 100 або 102, при цьому перша нуклеїнова кислота та друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти.
47. Клітина-хазяїн за будь-яким із пп. 43-46, яка відрізняється тим, що вона являє собою прокаріотичну клітину.
48. Клітина-хазяїн за будь-яким із пп. 43-46, яка відрізняється тим, що вона являє собою еукаріотичну клітину, переважно клітину СНО.
49. Клітина-хазяїн за п. 47, яка відрізняється тим, що вона являє собою клітину Б. сої.
50. Спосіб одержання половини молекули антитіла або мультиспецифічного антитіла, який включає культивування клітини-хазяїна за будь-яким із пп. 43-49 в умовах, що є достатніми для одержання половини молекули антитіла або мультиспецифічного антитіла.
51. Спосіб за п. 50, який включає також виділення половини молекули антитіла або мультиспецифічного антитіла.
52. Спосіб одержання мультиспецифічного антитіла, який включає (ї) культивування клітини- хазяїна, яка включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність БЕО ІЮ МО: 99, 101 або 105, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність 5ЕО ІЮ МО: 106, 100 або 102, при цьому перша нуклеїнова кислота та друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти, в умовах, що є достатніми для одержання першої половини молекули антитіла, і (і) культивування другої клітини-хазяїна, яка включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність зЕО ІЮО МО: 107 або 103, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність ЗЕО ІЮ МО: 108 або 104, при цьому перша нуклеїнова кислота та друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти, в умовах, що є достатніми для одержання другої половини молекули антитіла.
53. Спосіб за п. 52, який включає виділення першої половини молекули антитіла та виділення другої половини молекули антитіла.
54. Спосіб за п. 52 або п. 53, який включає утворення суміші, що включає першу половину молекули антитіла та другу половину молекули антитіла, в умовах, що є достатніми для одержання мультиспецифічного антитіла.
55. Спосіб за п. 54, який включає також етап виділення мультиспецифічного антитіла.
56. Спосіб одержання мультиспецифічного антитіла, який включає (а) культивування клітини- хазяїна, яка включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність БЕО ІЮО МО: 105, 99 або 101, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність 5ЕО ІЮ МО: 106, 100 або 102, при цьому перша нуклеїнова кислота та друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти, в умовах, що є достатніми для одержання першої половини молекули антитіла, і (б) культивування другої клітини-хазяїна, яка включає першу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність зЕО ІЮО МО: 107 або 103, і другу нуклеїнову кислоту, що включає послідовність ЗЕО ІЮ МО: 108 або 104, при цьому перша нуклеїнова кислота та друга нуклеїнова кислота включені в одну молекулу нуклеїнової кислоти або різні молекули нуклеїнової кислоти, в умовах, що є достатніми для одержання другої Зо половини молекули антитіла; (с) виділення першої половини молекули антитіла та виділення другої половини молекули антитіла; і (4) утворення суміші, що включає першу половину молекули антитіла та другу половину молекули антитіла, в умовах, що є достатніми для одержання мультиспецифічного антитіла.
57. Спосіб за п. 56, який включає також етап виділення мультиспецифічного антитіла.
58. Мультиспецифічне антитіло, отримане згідно зі способами за будь-яким із пп. 37-38 і пп. 50-
57.
59. Імунокон'югат, який включає антитіло за будь-яким із пп. 23-31 і 58 і цитотоксичний агент.
60. Фармацевтична композиція, яка включає антитіло за будь-яким із пп. 23-31 і 58 і фармацевтично прийнятний носій. «7 140 гя З
Ж . з про 1204 --С ж з 5-8 100 й м Зав ОО с.
- 8. т Ж 7: ДЮ 8045 « о | іш «7 М: ї- 20 же. ко» я мо т5 х 0.28 т пе Па в г, ІА по 86 80 50 во 100 120149 Еозинофіли у біопсії (мм)
б 1404 Кз | . о 20ч . - 1004 Б во. и я - по ж у - ж щі іє 8 Зб, е Ж ше Ше 5 70 2 ж те во й й ШОодте жут ге 0,39: г: б Бо їба 00450 дт Ц.17Ая клітини в тканині (М/мме) - ? 2 З ! І ж до 1004 . т і й ж а г. жо оддя ля . " а І | г я т 5 2 5 | г ть зи ме 20 и .
І. К 5 в і щі я я род т 0,58 Фіг 1с о 5О 100 150 й Ц.Т7Ах клітини в тканині (Мляме)
«008 ЕЗ ту. щі с чу НИ я ш Б з і х е ! Я ИН с - С сі 2 У що ж е пк і 8. ів Є 5 ! яв Жов 5 8 | з (З БХИЖаи 0 щча:ЗО Мета КЛ НЛУА Р«:0087 т г З ху | г т | 5 І: ж - б с ШІ ге е в з е Шк що 5 оо 5 й ФоОо3е І я 2 ОО, о Ф і що іо Ме Ма «Ле ЛУ --3 нт рен пи ше ше нен ее 0»: шо Б "зб оуроодосооровоюювогттьсьзвввоссссвооюв»ювтьессьс»овює АСТМА Низький Високий о Без стероїдів Рівень гхспресії НУТУ У тнтнтнтннння
ФІГ. З
80 я - БОЮ 5 : - 400 4 нин шин щ З ФО 3004 7 . Е ! г -- З як я чят й а во 200 4 шк лк са й У ; Ф | ; г З І Хе З Й - 100-3 -- я пакод - зви ум ня 2 804 : е 4 | «Ф 9 во шк «й 5О З а | бат я й с я З су З ОЇ З Б ну Тоня х й р. 0,05 5 5 ; | СУУнсохоп) 4 З -- 2 : 4 -- й - - 2 - - Контроль БОБсСАТ Щит5 М-8
ФІГ. 4А о 5 а 500 4 2 е щ- 300 4 п - же Зп Я Е З ж -ї Я -- Ко | х 5 04 2 « З 5) рення нн о ДІВ р и ння ння нет яння тт ян ння як пня чек пеня тетя ня Ко З 5 З з т-о З З а - 100- . ; я. знай сії й З з аю вд й й З ч зе є ОО во г ее і 4 5О 4 | у «й сер юри 7 щи ; - ж - з Сироватковий Сюроватковий першюєтин перюєтин «50 нуми Ех БО НИМИ Щх25 щ-23
ФІГ. 48 е Ребоз хо 00 е ря 2 540 с! е шо | сн У т В Е- в їв отнну я в ж Зо 5? Ф 1 ре г шини гак са - О 20 ше ь й І т г ро зі со Ме25 Мет КПНР статус Н17А Еозинофіпи х вим - ! ї-
З. | Якч х | ре - в 1 ть Ш в і | сх ШИ Ж сив ше Ши ши НН НЕ ші п Й 5 В -Е ЩІ В в-во Г-3 2. щ-Е ЩІ З Я | ррессссюсюкя с Ку В В Е ГУ позі У- 4 що і | Ша Контроль -15 ай- 0001-13. Наївні ТАЖ зщ-
ФІГ. А шо Нейтрофіли в чи за з якчю -е Е й, ел НОМ ня т брів а ЕЕ 0 и В в «У А ие Ай ще вові А ши я ва и Контроль «НАХ Н- сії-13 Наївні ТАЖ яд -
ФІГ. 68 КЕ
Еозинофіли Нейтрофіли п Я о - К- т р ш ся ЖЕ од 5 Ж вв В В щОе - В КЗ ОХ г 2 - | 5 В з. т : 5. в Б в х ши и чи ЗИ а 82 | 5 Шок. А Ян Фор до г о 5 Я Ой м ни 1 ой У гкижжжжку їх 5 ой - З в й А що о й - і Ж и КХантропь сД-ТЗ аНй- «0-13 Наізні Контосць 32-13 с» ай-АТІ Наївн АЖ о за що ТАЖ а
ФІГ. С 7 ФІГ. 80 що
; . г ЖЕ СЕ ЕН дв ря 1 й БОБ Е Є 5 5 6 5 5 пООЖ х іх Го, у. о З сон нннння Ми (З т Е ОО аг о. ШО ШОЕ п ВК днини Винна нини нн по ут ОККО У У ооо с екон мил длжонне 00 75 ДВ 3. що В Но М ЗУ кна я ВО В ння до ода пива : ВЕК да М ПЕсНО ОД пе та во пхох, тк і5о І
125.
10. а Н Н і Х п нин інв еп 2 2 4 5 В 10 12 14 Хвилини
«й ЗТ704. 07 з - т 14 - отв ши г о Щі в ли ИН Пиши п Я-- НК пе ПА ПО ДВ п о ПОДА У зво авопо топ000 Кількість / Маса після деконвопюції (а.9.м.) хКя іч короо ШО «--су--- Біспец. анти-й-1 31-17 Е 2 Фо б. лаулюдиниу дикого тилу - г злих х Фо фон то 0000 рен - Е Гх | | ій х КЕ і ше 5 і зопов- т ННЯ; ї Ж і М х ! 3 - пи і Кк допо ц го - у те й х п х ще х й ц 100604 Ф В ванни пдв дня чу ж одос1 ооо во п 1 т На ех п 8 д Антитіло (мкг/мл з аю -- Лебрикізумаб З - - Біспен, аятя-- 1-17 звпой а - 2 плив людини р я хя Т -к Е ; ба тя оо Ж зодоо що г з гу Е ! АВ щ є й х 2 рядою- і 3 : Кі - З і ІН: Ж ЕМИЮ- і На Е чвО0о і с З ев ї і жо чаоо Ф Ж- 8-22 22522 кла -. й Я з са С в БО До ги ки ем шинки мні віку: вими виголе 109 заз броор ово 001 о 1 10 о Антитіпо імкг/млі
ФІГ. 8 ; !
зда 177 Юра Контроль ОЗ Бозі? ща со Бихіднеанти-й «17 янтитло 0-17; Без антитіла ш Бюпецифбічне знти-Й -12ЛІ-17 антитіло го я ку ж: я - ре | "и ПИ ши. дк як х | п ше дн 1 з У ; шк я 20053 За ше: Вр вовча -й - -2 о 2 ! ЮА мг/м ог, ЗА ЮЗчіАВІ, мг/мл кА Контроль без 7 1,04 ро бихіднеанти-й 17 антитіло 0293-17; Без антитіла ! я Біспецифічне знти-П Я ЗЛА РТ антитіло д т що 83 -впая. в 4 | не ля ре ! й І.К ря яр жопа тпбСЦ- й 8 НА ! і й ! І 55 ба ІЗ са | й ода / со я їх їх «І о свт 9,04 ; ; с -5 -4 -2 0 2 З аг ов Іза АВІі, ній х зба роЯ Контроль | О Без 17 І с Вихідне янти-Н-і7/ антитіла 0-17, Без антитіла В - Бепецифічне анти-3-1241-17 антитло - 4 В Ж - ОО Й ! ЛУгркя у а "а Не ше ги | ка 5 | Кв Соя А дна В і В у о Вча-я -5 -4 -й В; й 4
ФІГ. 90 ісогАві), ям що 400 й Її - ФУ ; ї т З Х ї лан СО ода й шо ХО ІВ СУ 4дв : ф 100 й Ге В е М Врек арк в-ва -ТО0. у : -6 а -й -Й й Е фі Г. 10А ЮДіАБІі, мкумп й т Е 2 8 І ше нива ке г п х З я 1 5 зв й Є г-Я 2 В -3 -6 -й -й й 2 й юдіАБі, мкплмл Концентрації анти-Н ЯМИ. 17 вититіпа в свроватці піспя однократного вів введення 10 мкг у 57 М мищей Е 1 Ж 7 шк Га й ся п З Й Со ро ш : - сад В 4 х « й 4 "нні жинна лини нні лини пн зни нн ї денне "пишне ше Її І нвінни: КТ ж о 5 10 15 то 25
ФІГ. 11 Час (Дні)
Концентрації авти-Н 13ЛІ.17 антитіла в сироватці у мавп циномолгує в поря ДОД Ш--о Я да -к БО 1000с чен 9004 ЕЕ р - --- - ( - ДО05 Мк - 5 Ше; шення ЗО е Вр ---к-- 3002 Є ТОо0н, та ше не ння я ЗДО - ня ай, ц і ж у птн зда З хх в в 4 У че У "нн: з УА А ой ие ге ее: ЧИ 7 МЕ 10-х ака І шо З - КО Бех З У МЛ , «а ; і с те Ста ; - ї зх х МІ "ть г Ах У чита у У г во в не щ- З З ж х Е 4 я - У ь х ! ча шо 0 но 16 ТВ га 25 30 35 40
ФІГ. 12 Час (Дні) и с у В В НН -- 552039 00-00 реву й а А - - -вБЕгОа33 О-25--О430053 я йхі лі их ссосособібесююююх СУК ТРУ 0онтоеидю лю СУЯ г: й 1--ЗвБодо5 --я - - 5ЯЗ005 -щш- ; А М Ф ит 5 , х ко їх ие, У Ії - 2 с Ух 9, чад і Ко. жк ж х що а ми ач х Ж : Ж - УОЗ. У ру чий х ке х 5 їх я ; Я і В щі ї Б і и Ж й ту Мк - : Ка т ч Ж З А х у ' м, ж
5. Я н; І х ій М х КЕ о и я у , х га 50004 г М Ч у, Ох вк ДЯ ЯК і і: У вий в и х В. м се ЧУ Ша М с о 5 10 15 20 25 зо 35 40 т-6 51:55: ЧасДни
ФІГ. 13 що 4004 ТАК у плазмі Ге е в а шо З0О04 с Ф ви 4 жа що ємо в а Фе В зді й 7» за Фе аа Й « ап ро з с Зм виді. саН-13 ай-17 6-13 наївні
ФІГ. 14А аналіз НОМ Біосмаркери НН -17 БОобО вин в'єнироватні ш 4000 -Е Б жжж є - ЗО ка в га п
5. 20004 З 5 я 2 Б лов зи рова, і з ши по хкжй е виді а -135 НА ОБ-З наївні
ФІГ. 148 аналі НОМ Біомаркери НН. -17 яо- СхСії в сироватці МУ - 3» Е м ж ЖЖ ж ж ра о: лиці Га Ф 2004 99 в Го в за Ф г в п С , Еш; ШК НН ня ни ан НА в чоУх з виді. ай-13 2-7 ев-13 наївні
ФІГ. 14С аналіз НОМ
UAA201608853A 2014-02-21 2015-02-23 Спосіб лікування еозинофільного захворювання у пацієнта шляхом застосування біспецифічного анти-il-13/il-17 антитіла UA117608C2 (uk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201461942823P 2014-02-21 2014-02-21
US201461983945P 2014-04-24 2014-04-24
PCT/US2015/017168 WO2015127405A2 (en) 2014-02-21 2015-02-23 Anti-il-13/il-17 bispecific antibodies and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA117608C2 true UA117608C2 (uk) 2018-08-27

Family

ID=52630502

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201608853A UA117608C2 (uk) 2014-02-21 2015-02-23 Спосіб лікування еозинофільного захворювання у пацієнта шляхом застосування біспецифічного анти-il-13/il-17 антитіла

Country Status (19)

Country Link
US (1) US20170334985A1 (uk)
EP (1) EP3107574A2 (uk)
JP (1) JP2017507939A (uk)
KR (1) KR20160124165A (uk)
CN (1) CN106029693A (uk)
AU (1) AU2015218631A1 (uk)
BR (1) BR112016018980A2 (uk)
CA (1) CA2937556A1 (uk)
CL (1) CL2016002088A1 (uk)
CR (1) CR20160379A (uk)
EA (1) EA201691473A1 (uk)
IL (1) IL247002A0 (uk)
MX (1) MX2016010729A (uk)
PE (1) PE20161171A1 (uk)
PH (1) PH12016501547A1 (uk)
SG (1) SG11201606870XA (uk)
TW (1) TW201615663A (uk)
UA (1) UA117608C2 (uk)
WO (1) WO2015127405A2 (uk)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102070761B1 (ko) * 2008-03-31 2020-01-29 제넨테크, 인크. 천식을 치료 및 진단하기 위한 조성물 및 방법
KR20170075793A (ko) 2014-11-05 2017-07-03 제넨테크, 인크. 박테리아 내 2쇄 단백질을 생산하는 방법
SI3215525T1 (sl) 2014-11-05 2020-11-30 Genentech, Inc. Postopki produkcije dvoverižnih proteinov v bakterijah
CA2995385A1 (en) * 2015-08-20 2017-02-23 Genentech, Inc. Purification of fkpa and uses thereof for producing recombinant polypeptides
KR20200128415A (ko) * 2018-02-27 2020-11-12 이퀼리엄 아이엔씨 중증 천식 치료를 위한 항 cd6 항체
US20210009677A1 (en) * 2018-03-23 2021-01-14 Csl Limited Method of treating asthma
JP2021131228A (ja) * 2018-04-27 2021-09-09 国立大学法人 東京大学 難治性喘息の予防又は治療剤をスクリーニングする方法、及び難治性喘息の予防又は治療剤
GB201919061D0 (en) 2019-12-20 2020-02-05 Ucb Biopharma Sprl Multi-specific antibody
GB201919062D0 (en) * 2019-12-20 2020-02-05 Ucb Biopharma Sprl Antibody
CA3191403A1 (en) * 2020-10-13 2022-04-21 Edward Hsia Bispecific molecules and methods of treatment using the same
TW202400658A (zh) * 2022-04-26 2024-01-01 瑞士商諾華公司 靶向ｉｌ—１３和ｉｌ—１８的多特異性抗體

Family Cites Families (131)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US780715A (en) 1904-05-20 1905-01-24 John Formes Scuttle.
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4737456A (en) 1985-05-09 1988-04-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Reducing interference in ligand-receptor binding assays
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
EP0307434B2 (en) 1987-03-18 1998-07-29 Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. Altered antibodies
US5770701A (en) 1987-10-30 1998-06-23 American Cyanamid Company Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents
US5606040A (en) 1987-10-30 1997-02-25 American Cyanamid Company Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group
AU634186B2 (en) 1988-11-11 1993-02-18 Medical Research Council Single domain ligands, receptors comprising said ligands, methods for their production, and use of said ligands and receptors
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
CA2026147C (en) 1989-10-25 2006-02-07 Ravi J. Chari Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
EP0564531B1 (en) 1990-12-03 1998-03-25 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins with altered binding properties
US5571894A (en) 1991-02-05 1996-11-05 Ciba-Geigy Corporation Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor
LU91067I2 (fr) 1991-06-14 2004-04-02 Genentech Inc Trastuzumab et ses variantes et dérivés immuno chimiques y compris les immotoxines
GB9114948D0 (en) 1991-07-11 1991-08-28 Pfizer Ltd Process for preparing sertraline intermediates
US7018809B1 (en) 1991-09-19 2006-03-28 Genentech, Inc. Expression of functional antibody fragments
US5587458A (en) 1991-10-07 1996-12-24 Aronex Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
ATE503496T1 (de) 1992-02-06 2011-04-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Biosynthetisches bindeprotein für tumormarker
ES2091684T3 (es) 1992-11-13 1996-11-01 Idec Pharma Corp Aplicacion terapeutica de anticuerpos quimericos y radiomarcados contra el antigeno de diferenciacion restringida de los linfocitos b humanos para el tratamiento del linfoma de las celulas b.
US5635483A (en) 1992-12-03 1997-06-03 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides
US5780588A (en) 1993-01-26 1998-07-14 Arizona Board Of Regents Elucidation and synthesis of selected pentapeptides
AU691811B2 (en) 1993-06-16 1998-05-28 Celltech Therapeutics Limited Antibodies
US5773001A (en) 1994-06-03 1998-06-30 American Cyanamid Company Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5712374A (en) 1995-06-07 1998-01-27 American Cyanamid Company Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US5714586A (en) 1995-06-07 1998-02-03 American Cyanamid Company Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
GB9603256D0 (en) 1996-02-16 1996-04-17 Wellcome Found Antibodies
US20020062010A1 (en) 1997-05-02 2002-05-23 Genentech, Inc. Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
IL132560A0 (en) 1997-05-02 2001-03-19 Genentech Inc A method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
EP0994903B1 (en) 1997-06-24 2005-05-25 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
WO1999022764A1 (en) 1997-10-31 1999-05-14 Genentech, Inc. Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
BR9813365A (pt) 1997-12-05 2004-06-15 Scripps Research Inst Método para produção e humanização de um anticorpo monoclonal de rato
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
PT1068241E (pt) 1998-04-02 2007-11-19 Genentech Inc Variantes de anticorpos e respectivos fragmentos
DK1071700T3 (da) 1998-04-20 2010-06-07 Glycart Biotechnology Ag Glykosylerings-modifikation af antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellulær cytotoksicitet
EP2364997A3 (en) 1999-01-15 2012-07-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
ES2420835T3 (es) 1999-04-09 2013-08-27 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Procedimiento para controlar la actividad de las moléculas inmunofuncionales
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
ES2248127T3 (es) 1999-10-04 2006-03-16 Medicago Inc. Metodo para regular la transcripcion de genes foraneos en presencia de nigtrogeno.
EP1229125A4 (en) 1999-10-19 2005-06-01 Kyowa Hakko Kogyo Kk PROCESS FOR PRODUCING A POLYPEPTIDE
IL149809A0 (en) 1999-12-15 2002-11-10 Genentech Inc Shotgun scanning, a combinatorial method for mapping functional protein epitopes
ATE344801T1 (de) 1999-12-29 2006-11-15 Immunogen Inc Doxorubicin- und daunorubicin-enthaltende, zytotoxische mittel und deren therapeutische anwendung
LT2857516T (lt) 2000-04-11 2017-09-11 Genentech, Inc. Multivalentiniai antikūnai ir jų panaudojimas
BR0114475A (pt) 2000-10-06 2003-12-23 Kyowa Hakko Kogyo Kk Célula para a produção de composição de anticorpo
US7064191B2 (en) 2000-10-06 2006-06-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for purifying antibody
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
IL155977A0 (en) 2000-11-30 2003-12-23 Medarex Inc Transgenic transchromosomal rodents for making human antibodies
NZ592087A (en) 2001-08-03 2012-11-30 Roche Glycart Ag Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity
JP2005532253A (ja) 2001-10-25 2005-10-27 ジェネンテック・インコーポレーテッド 糖タンパク質組成物
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
EP1500698B1 (en) 2002-04-09 2011-03-30 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Cell with depression or deletion of the activity of protein participating in gdp-fucose transport
AU2003236015A1 (en) 2002-04-09 2003-10-20 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Process for producing antibody composition
EP1498485A4 (en) 2002-04-09 2006-09-06 Kyowa Hakko Kogyo Kk CELLS WITH MODIFIED GENOM
US20040259150A1 (en) 2002-04-09 2004-12-23 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Method of enhancing of binding activity of antibody composition to Fcgamma receptor IIIa
JPWO2003084569A1 (ja) 2002-04-09 2005-08-11 協和醗酵工業株式会社 抗体組成物含有医薬
AU2003236019A1 (en) 2002-04-09 2003-10-20 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Drug containing antibody composition appropriate for patient suffering from Fc Gamma RIIIa polymorphism
AU2003239966B9 (en) 2002-06-03 2010-08-26 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US7361740B2 (en) 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
JP4351674B2 (ja) 2002-12-16 2009-10-28 ジェネンテック・インコーポレーテッド 免疫グロブリン変異体とその使用法およびその使用
EP1585767A2 (en) 2003-01-16 2005-10-19 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US7871607B2 (en) 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
KR20110094361A (ko) 2003-04-11 2011-08-23 메디뮨 엘엘씨 재조합 ｉｌ­９ 항체 및 그의 용도
GB0407315D0 (en) 2003-07-15 2004-05-05 Cambridge Antibody Tech Human antibody molecules
AU2004279742A1 (en) 2003-10-08 2005-04-21 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Fused protein composition
JPWO2005035778A1 (ja) 2003-10-09 2006-12-21 協和醗酵工業株式会社 α１，６−フコシルトランスフェラーゼの機能を抑制するＲＮＡを用いた抗体組成物の製造法
WO2005044859A2 (en) 2003-11-05 2005-05-19 Glycart Biotechnology Ag Cd20 antibodies with increased fc receptor binding affinity and effector function
BR122018071808B8 (pt) 2003-11-06 2020-06-30 Seattle Genetics Inc conjugado
WO2005053742A1 (ja) 2003-12-04 2005-06-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 抗体組成物を含有する医薬
SG10201404273QA (en) 2003-12-23 2014-10-30 Genentech Inc Novel anti-il 13 antibodies and uses thereof
AU2005230848B9 (en) 2004-03-31 2011-06-02 Genentech, Inc. Humanized anti-TGF-beta antibodies
US7785903B2 (en) 2004-04-09 2010-08-31 Genentech, Inc. Variable domain library and uses
EP2067789A1 (en) 2004-04-13 2009-06-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-P selectin antibodies
US7501121B2 (en) 2004-06-17 2009-03-10 Wyeth IL-13 binding agents
US20070048785A1 (en) 2004-06-09 2007-03-01 Lin Laura L Anti-IL-13 antibodies and complexes
AR049390A1 (es) 2004-06-09 2006-07-26 Wyeth Corp Anticuerpos contra la interleuquina-13 humana y usos de los mismos
TWI307630B (en) 2004-07-01 2009-03-21 Glaxo Group Ltd Immunoglobulins
TWI309240B (en) 2004-09-17 2009-05-01 Hoffmann La Roche Anti-ox40l antibodies
RU2412947C2 (ru) 2004-09-23 2011-02-27 Дженентек, Инк. Антитела, сконструированные на основе цистеинов, и их конъюгаты
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
PL1942939T5 (pl) 2005-09-30 2021-10-11 Medimmune Limited Kompozycja przeciwciała interleukiny-13
NZ567124A (en) 2005-10-21 2011-08-26 Novartis Ag Human antibodies against Interleukin-13 and therapeutic uses to treat asthma
ES2577292T3 (es) 2005-11-07 2016-07-14 Genentech, Inc. Polipéptidos de unión con secuencias hipervariables de VH/VL diversificadas y consenso
EP1973951A2 (en) 2005-12-02 2008-10-01 Genentech, Inc. Binding polypeptides with restricted diversity sequences
SI1963368T1 (sl) 2005-12-13 2012-11-30 Lilly Co Eli Anti il protitelesa
AU2007204879A1 (en) 2006-01-11 2007-07-19 Aerovance, Inc. Methods and compositions for treating asthma in human and non human primates
GB0600488D0 (en) 2006-01-11 2006-02-22 Glaxo Group Ltd Immunoglobulins
WO2007134050A2 (en) 2006-05-09 2007-11-22 Genentech, Inc. Binding polypeptides with optimized scaffolds
US20090182127A1 (en) 2006-06-22 2009-07-16 Novo Nordisk A/S Production of Bispecific Antibodies
EP2059533B1 (en) 2006-08-30 2012-11-14 Genentech, Inc. Multispecific antibodies
CA2914170C (en) 2006-09-08 2018-10-30 Abbvie Bahamas Ltd. Interleukin-13 binding proteins
US7767206B2 (en) 2006-10-02 2010-08-03 Amgen Inc. Neutralizing determinants of IL-17 Receptor A and antibodies that bind thereto
US20080226635A1 (en) 2006-12-22 2008-09-18 Hans Koll Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof
CA2674608A1 (en) 2007-01-09 2008-07-17 Wyeth Anti-il-13 antibody formulations and uses thereof
JP2010526088A (ja) 2007-04-30 2010-07-29 グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 抗ｉｌ−５抗体を投与するための方法
CN100592373C (zh) 2007-05-25 2010-02-24 群康科技(深圳)有限公司 液晶显示面板驱动装置及其驱动方法
JP2010533204A (ja) 2007-07-11 2010-10-21 アエロヴァンス インコーポレイティッド 薬学的ポリペプチドの乾燥粉末エアロゾル製剤およびその調製方法
EP2050764A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-22 sanofi-aventis Novel polyvalent bispecific antibody format and uses thereof
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
CA2709847C (en) 2008-01-07 2018-07-10 Amgen Inc. Method for making antibody fc-heterodimeric molecules using electrostatic steering effects
KR102070761B1 (ko) 2008-03-31 2020-01-29 제넨테크, 인크. 천식을 치료 및 진단하기 위한 조성물 및 방법
MX2010012090A (es) 2008-05-05 2011-04-11 Novimmune Sa Anticuerpos anti-il 17 a/il-17f de reactividad cruzada y metodos de uso de los mismos.
FR2944448B1 (fr) 2008-12-23 2012-01-13 Adocia Composition pharmaceutique stable comprenant au moins un anticorps monodonal et au moins un polysacharide amphiphile comprenant des substituants derives d'alcools hydrofobes ou d'amines hydrophobes.
NZ598351A (en) 2009-08-27 2014-08-29 Covagen Ag Il-17 binding compounds and medical uses thereof
SG179196A1 (en) 2009-09-16 2012-04-27 Genentech Inc Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof
KR101836217B1 (ko) 2009-10-30 2018-03-08 얀센 바이오테크 인코포레이티드 Ｉｌ-１７ａ 길항제
CA2796633C (en) 2010-04-23 2020-10-27 Genentech, Inc. Production of heteromultimeric proteins
AR084342A1 (es) 2010-12-16 2013-05-08 Genentech Inc Diagnostico y tratamientos relacionados con la inhibicion de th2
AU2012206431B2 (en) 2011-01-14 2015-04-30 UCB Biopharma SRL Antibody molecules which bind IL-17A and IL-17F
UA117218C2 (uk) 2011-05-05 2018-07-10 Мерк Патент Гмбх Поліпептид, спрямований проти il-17a, il-17f та/або il17-a/f
PL2766397T3 (pl) 2011-10-11 2018-10-31 F.Hoffmann-La Roche Ag Ulepszone składanie przeciwciał bispecyficznych
CN104159920A (zh) * 2011-12-30 2014-11-19 艾伯维公司 针对il-13和/或il-17的双重可变结构域免疫球蛋白
KR20140127854A (ko) 2012-02-10 2014-11-04 제넨테크, 인크. 단일-쇄 항체 및 다른 이종다량체
EP2711016A1 (en) 2012-09-21 2014-03-26 Covagen AG Novel IL-17A binding molecules and medical uses thereof
WO2014165771A2 (en) * 2013-04-05 2014-10-09 Genentech, Inc. Anti-il-4 antibodies and bispecific antibodies and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
PH12016501547A1 (en) 2016-10-03
CN106029693A (zh) 2016-10-12
WO2015127405A2 (en) 2015-08-27
BR112016018980A2 (pt) 2017-10-10
PE20161171A1 (es) 2016-11-08
JP2017507939A (ja) 2017-03-23
AU2015218631A1 (en) 2016-08-11
US20170334985A1 (en) 2017-11-23
SG11201606870XA (en) 2016-09-29
EA201691473A1 (ru) 2016-12-30
CR20160379A (es) 2016-10-07
WO2015127405A3 (en) 2015-10-15
MX2016010729A (es) 2016-10-26
KR20160124165A (ko) 2016-10-26
EP3107574A2 (en) 2016-12-28
IL247002A0 (en) 2016-09-29
CL2016002088A1 (es) 2017-03-24
TW201615663A (zh) 2016-05-01
CA2937556A1 (en) 2015-08-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA117608C2 (uk) Спосіб лікування еозинофільного захворювання у пацієнта шляхом застосування біспецифічного анти-il-13/il-17 антитіла
JP6872069B2 (ja) ＦｃＲＨ５に対するヒト化親和性成熟抗体及び使用方法
JP6719490B2 (ja) 抗ｉｌ−３６ｒ抗体
TWI653242B (zh) 抗-ｉｌ-２３抗體
CN110214154A (zh) 抗cd47抗体及其用途
TWI747850B (zh) 抗HtrA1抗體及其使用方法
JP6081911B2 (ja) Ｓ１００ａ４抗体およびその治療上の使用
UA120753C2 (uk) Біспецифічне антитіло до сd3 та cd20
UA114077C2 (xx) Нейтралізуюче антитіло проти ccl20
MX2014008157A (es) Anticuerpos anti-lrp5 y metodos de uso.
CN111225925B (zh) 抗hla-dq2.5抗体
UA123774C2 (uk) Антитіла проти c5 та способи застосування
UA120357C2 (uk) Виділене біспецифічне антитіло, що специфічно зв'язується з klb і fgfr1 та спосіб його застосування
CN104011078A (zh) 抗聚泛素抗体及使用方法
UA126574C2 (uk) Антитіло проти триптази, його композиція та застосування
JP2013539962A (ja) 抗ニューロピリン抗体及び使用方法
CN112512571A (zh) 抗il-27抗体及其用途
TW202227481A (zh) 中和抗sars-cov-2抗體
TWI743469B (zh) 抗ｇｉｔｒ抗體及其用途
CN105814078A (zh) Nsp4抑制剂及其使用方法
JP2021512613A (ja) 二重特異性抗原結合分子及びその使用方法