SU759055A3 - Способ получени биомассы - Google Patents

Description

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ

Изобретение относитс  к микробиологической прО «Л1ленности, а именно к способам получени  биомассы, включает культивирование дрожжей на пита тельной среде, содержащей в качестве источника углерода метанол. Известен способ получени  биомассы , включаквдий культивирование дрожжей рода -Candida на метаноле 1. Недостатком известного способа  вл етс  невысокое содержание белка в биомассе. Дл  повышени  содержани  бeлka в биомассе используют из рода Candid штамм Candida Sp. SPM 180сс, при зтом культивирование ведут при темпе ратуре 20-35°С и рН среды 2,5-6,5. Способ выполн ют следующим образом .. Штамм Candida Sp. SPK ISOcc кул тивируют на питательной среде, содер жащей в качестве источника углерода метанол, а также источники азота, фосфора, кали , железа и кальци , а так .е биостимул торы - дрожжевой экстракт, биотин. Культивирование штамма провод т при энергичном перемешивании с температурой среды от 20 до 35С, пред почтительно в пределах 30-33 С. рН среды поддерживают в пределах 2,56 ,5, предпочтительно в пределах 4-4,5. Среду аэрируют газовой смесью, содержащей кислород, предпочтительно воздухом. Полученную в процессе культивировани  биомассу отфильтровывают, промывают водой и сушат при подогреве . Биомасса может быть использована в качестве белкового компонента пищевых продуктов или кормов дл  животных. Из бмомассы могут быть выделены облагороженные продукты: белок, аминокислоты, а также нуклеиновые кислоты. вьщелен в непр ерывном про цессе культивировани  на специально обогащенной питательной среде. Штаьвл Candrda Sp. SPM 180 ее культивируют периодическим и непрерывном способе. В жидкой питательной среде штамм образует пучки удлиненной форг« (псевдомицелий), которые вьшадагот в осадок. В твердой среде штамм образует гладкие гл нцевые колонии, либо

непрозрачные складчатые колонии. Споры не образует.

Физиологическа  характеристика штамма Candida Sp. SPM 180 ее:

.Использование источников углерода

О-глюкоза+

D-галактоза

Сахароза

Мальтоза-

Трегалоза

Лактоза

Рост

О-глюкоза

0-галактоза

Р-сорбоза

Сахароз.а

Мальтоза

Целлобиоза

Трегалоза

лактоза

Мелибиоза

Раффиноза

Мелецитоза

Инулин Крахмал

о-ксилоза

+ +

В-арабиноза

D-арабиноза

+ (Слабо)

D-рибоза

В-рамноза

Этанол

Глицерин

Эритритол

Рибитол

Галактикол

D-маннитол

+ +

D-глюцитол

Молочна  кислота

Янтарна  кислота

Лимонна  кислота

Инозит

Нитраты

Отсутствие витаминов

при 37

+ (Слабо).

Способ иллюстрируетс  следующими римерами.

Пример. В конические колбы мкостью 500 мл внос т 50 мл питательой среды следующего состава:

2,0 г/л

2,0 г/л

НгО

(Н) S04 5,0 г/л О,2 мг/л

MgSO47Н2О 2,0 мг/л

FeSOj-7Н 0 2,0 мг/л

СаСЦ 2,0 мг/л

ZnSO/.

Дрожжевой

экстракт 2,0 мг/л

Биотин 200 мг/л

Микроэлементы 1 мл/л .

Раствор микроэлементов имеет слеукидий состав:

СиЗОд- SHjO200 мг/л

НуВО)500 мг/л

МпЗОд-Н.О500 мг/л

К1 10 мг/л

CoClj 6Н О10 мг/л

МоО,

(концентрированна )

Среду довод т до рН 5,0. Среду в колбе стерилизуют при температуре 116 С в течение 20 мин. В две колбы добавл ют 0,75 мл (1,9% по объему) метанола, и засеивают штаммом Candid Sp. SPM 180 ее. Колбы инкубируют в течение 72 ч на вращаквдемс  перемешивающем устройстве при скорости вращени  220 об/мин с разбегом по диаметру 3,5 см. Температура контролируетс  термостатированием и составл ет 32,5°С.

К содержимому других колб, в которых имеетс  та же среда, добавл ют: 1% (об/об) метанола, 2% (об/об) этанола и 2% (вес/об) глюкозы.

Эти колбы засеивают 5 мл культуры описанной выше. Спуст  24 ч после начала инкубировани ,в каждую колбу дополнительно добавл ют 1% метанола (об/об). Через 48ч инкубации определ ют содержание биомассы в колбах и содержание беэтка в биомессе.

Полученные результаты приведены в таблице.

Содержание белка определ етс  биуретовым методом.

Claims (1)

1. Пример2. В ферментер с эффективным объемом 8 л ввод т питательную среду, указанную в примере 1 и засеивают штамм Candida Sp. SPM 180 ее в виде суспензии. В ферментер , температура которого поддерживаетс  на уровне 32,5°С, добавл ют метанол с таким расчетом, чтобы его остаточна  концентраци  в среде не превБНиала 1 об.%. После процесса накоплени  культуры начинают непрерывно вводить стерильную питательную среду в феЕментер. Содержание метанола в ней составл ет 29,6 г/л. Одновременно производ т отбор дрожжевой суспензии из ферментера. Скорость разбавлени  среды постепенно увеличивают до 0,166 час. При работе в таком режиме отход щий поток содержит 10,28 г/л сухой биомассы и 146 ч на миллион остаточного метанола . Выход полезного продукта составл ет 35%, продуктивно ,ть 1,72 г/л в час. Получаема  биомасса содержит 55,6% белка (определено с помощью биуретовой реакции). примерз. К ферментеру, опи ному в примере 2, подключают отстой ник. Часть дрожжевой суспензии отвод т в отстойник, где биомасса отстаиваетс , и ее регул рно возвращают в ферментер, в ферментер также свежую питательную среду содержащую 24 г метанола. Скорость разбавлени  была 0,267 час-. Дрожжева  суспензи , выводима  из ферме тера, содержит 7,80 г/л биомассы и 120 ч на миллион остаточного метанола . &ЖОД полезного продукта составл ет 32,5%. Продуктивность по (биомассе была 2,08 г/л в час. биомасса содержит 53,0% белка (определено с помощью биуретовой реакции ) . Формула изобретени  Способ получени  биомассы,предусматривающий кулвдгиБирование дрожжей рода Candida на питательной среде, содержащей метанол в качестве источника углерода, источник азота и минеральные соли и биостимул торы в услови х аэреации среды., отличающийс  тем, что , с целью повышени  выхода белки в биомассе, из рода Candida используют штамм Candida Sp. SPM 180 ее, при этом культивирование ведут при температуре 20-35«С и рН среды 2,5-6,5. Источники ннфоЕ 1ации, прин тые во внимание при экспертизе 1. Патент Англии 1435865, кл. с 6 F, опублик. 1976.