RU2257412C1 - Штамм haemophilus influenzae b mech №1 - продуцент капсульного полисахарида - полирибозилрибитолфосфата - Google Patents
Штамм haemophilus influenzae b mech №1 - продуцент капсульного полисахарида - полирибозилрибитолфосфата Download PDFInfo
- Publication number
- RU2257412C1 RU2257412C1 RU2004109822/13A RU2004109822A RU2257412C1 RU 2257412 C1 RU2257412 C1 RU 2257412C1 RU 2004109822/13 A RU2004109822/13 A RU 2004109822/13A RU 2004109822 A RU2004109822 A RU 2004109822A RU 2257412 C1 RU2257412 C1 RU 2257412C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- mech
- haemophilus influenzae
- producer
- synthetic
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и медицине. Штамм выделен от больного менингитом ребенка и депонирован в коллекции ГИСК им. Л.А.Тарасевича под №267. Штамм продуцирует капсульный полисахарид - полирибозилрибитолфосфат на синтетической и полусинтетической питательных средах.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и медицине.
Задачей предлагаемого изобретения является получение капсульного полисахарида полирибозилрибитолфосфат на синтетической и полусинтетической питательных средах.
Для решения указанной задачи предлагается штамм Haemophilus influenzae b Mech №1, депонированный Коллекцией Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича под номером 267. Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 является клиническим изолятом, полученным от больного менингитом ребенка.
Культурально-морфологические и другие свойства штамма. Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 растет на полноценных питательных средах с добавлением факторов роста - сыворотки крови или НАД и гемина; по Грамму окрашивается отрицательно. В мазках проявляется типичный для данного вида плеоморфизм.
Рост на твердых питательных средах. Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 растет на шоколадном агаре (среде Левинталя), сердечно-мозговом агаре с добавлением НАД и гемина; образует мелкие, прозрачные как капли росы колонии с голубой опалесценцией в косопроходящем свете. Оптимальная температура роста 37°С.
Рост на жидких питательных средах. Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 при росте на сердечно-мозговом бульоне с добавлением НАД и гемина вызывает равномерное помутнение среды.
Биохимическая активность штамма. Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 дает положительную реакцию на каталазу, оксидазу, фосфатазу, не образует сероводорода, сбраживает глюкозу, галактозу, мальтозу, рибозу и ксилозу с образованием кислоты, восстанавливает нитраты до нитритов. Нуждается в факторах роста - НАД и гемине.
Отношение штамма к видовым диагностическим сывороткам. Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 вызывает агглютинацию серотиповой сыворотки.
Антигенные свойства штамма. Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 продуцирует специфический для данного серотипа капсульный полисахарид - полирибозилрибитолфосфат.
Активность (продуктивность) штамма, а также другие производственные показатели штамма. Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 способен продуцировать капсульный полисахарид при росте на полусинтетической (на основе аминопептида) и синтетической питательных средах. Количество капсульного полисахарида в среде культивирования спустя 6-8 часов после достижения культурой стационарной фазы роста по результатам ракетного иммуноэлектрофореза (РИЭФ) составляет 100 мкг/мл. Для определения активнеости капсульного полисахарида, выделенного в среду культивирования, оценивают по результатам РИЭФ культурального супернатанта и очищенного полисахарида в качестве референс-препарата с использованием гиперимунных кроличьих сывороток против Haemophilus influenzae тип b.
Условия и состав сред для хранения. Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 хранят в высушенном состоянии, высушивают в сахарозо-желатиновом стабилизаторе. Хранят в ампулах под вакуумом при температуре 4-6°С.
Условия и состав сред для размножения штамма. Для культивирования штамма используют шоколадный агар или сердечно-мозговой агар (Difco) с добавлением 4 мг/л НАД и 10 мг/л гемина. Культивируют при 37°С в течение 18-22 ч.
Условия и состав сред для получения капсульного полисахарида. Для получения капсульного полисахарида штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 культивируют на полусинтетической питательной среде на основе аминопептида или на синтетической питательной среде. Выращивание осуществляют при 37°С в условиях принудительной аэрации. После достижения культурой стационарной фазы роста инкубацию продолжают 6-8 часов.
Пример. Культуру инкубировали в течение 18 ч. На сердечно-мозговом бульоне (Difco) с добавлением 4 мг/л НАД и 10 мг/л среды гемина (ICN). Затем инокулировали в жидкую синтетическую питательную среду и жидкую полусинтетическую питательную среду на основе аминопептида, а также высеяли на сердечно-мозговой агар (Difco) с добавлением НАД и гемина. Начальная концентрация клеток в жидких средах составляла 108 клеток.
На сердечно-мозговом агаре культуру выращивали в термостате при 37°С в течение 18 ч. На твердой питательной среде культура образует мелкие слизистые, блестящие колонии с голубой опалесценцией в косопроходящем свете. Культура окрашивалась по Грамму отрицательно и имела типичную для данного микроорганизма морфологию. В реакцию агглютинации с серотиповой сывороткой против Haemophilus influenzae тип b культура давала положительную реакцию
Культивирование на жидких питательных средах проводили при 37°С на шуттеле при 200 об/мин. После достижения культурой стационарной фазы роста инкубацию продолжали в течение 6 часов. Затем в культуру добавили 0,1% формалина. Клетки отделили центрифугированием при 5000 об/мин в течение 15 мин. В супернатанте определили количество капсульного полисахарида методом ракетного иммуноэлектрофореза с очищенным капсульным полисахаридом в качестве референс-препарата и гипериммунной кроличьей сывороткой против Haemophilus influenzae тип b. Количество капсульного полисахарида составляло 100 мкг/мл и 50 мкг/мл культурального супернатанта при культивировании на синтетической и полусинтетической питательных средах соответственно.
Claims (1)
- Штамм Haemophilus influenzae b Mech №1 (коллекция ГИСК им. Л.А.Тарасевича №267), используемый в качестве продуцента капсульного полисахарида - полирибозилрибитолфосфата.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004109822/13A RU2257412C1 (ru) | 2004-04-01 | 2004-04-01 | Штамм haemophilus influenzae b mech №1 - продуцент капсульного полисахарида - полирибозилрибитолфосфата |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004109822/13A RU2257412C1 (ru) | 2004-04-01 | 2004-04-01 | Штамм haemophilus influenzae b mech №1 - продуцент капсульного полисахарида - полирибозилрибитолфосфата |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2257412C1 true RU2257412C1 (ru) | 2005-07-27 |
Family
ID=35843559
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004109822/13A RU2257412C1 (ru) | 2004-04-01 | 2004-04-01 | Штамм haemophilus influenzae b mech №1 - продуцент капсульного полисахарида - полирибозилрибитолфосфата |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2257412C1 (ru) |
-
2004
- 2004-04-01 RU RU2004109822/13A patent/RU2257412C1/ru active IP Right Revival
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| SCHNEERSON R., BARRENA O. et al, Preparation, characterisation and immunogenecity of Haemophilus influenzae type b polysaccharide-protein conjugates. The J. of experimental medicine. - 1980, v.152, p.361-374. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ299290B6 (cs) | Zpusob výroby beta-laktamové slouceniny, zpusob prípravy a/nebo zlepšení vláknitého mikrobiálního kmene a použití chemicky definovaného fermentacníhomédia | |
| KR19990013007A (ko) | 형질전환된 대장균 ｓｓ373(ｋｃｔｃ 8818ｐ)과 이를 이용한숙신산의 생산방법 | |
| Liu et al. | Commensalistic interaction between Lactobacillus acidophilus and Propionibacterium shermanii | |
| RU2381270C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Clostridium acetobutylicum - ПРОДУЦЕНТ БУТАНОЛА, АЦЕТОНА И ЭТАНОЛА | |
| Phaff | Industrial microorganisms | |
| RU2257412C1 (ru) | Штамм haemophilus influenzae b mech №1 - продуцент капсульного полисахарида - полирибозилрибитолфосфата | |
| Dienes | Some new observations on L forms of bacteria | |
| JPH0822237B2 (ja) | トレハロースの製造方法 | |
| US3994781A (en) | Process for the production of protein | |
| Schuster et al. | A synthetic medium for continuous culture of the S‐layer carrying Bacillus stearothermophilus PV 72 and studies on the influence of growth conditions on cell wall properties | |
| RU2670054C1 (ru) | Штамм бактерий Bifidobacterium bifidum ICIS-310 - продуцент ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ | |
| RU2059716C1 (ru) | Штамм streptococcus lactis - продуцент бактериоцина низина | |
| RU2726653C2 (ru) | Штамм бактерий Lactobacillus salivarius - продуцент ингибитора цитокинов интерлейкина-6 и интерлейкина-17 | |
| JP2001517429A (ja) | 繊毛虫（原生動物）の連続大量培養を用いた生物由来の貴重物質を生産する発酵法 | |
| CN116083307B (zh) | 一种生产酯酶和酯类化合物的格氏乳球菌及其应用 | |
| RU2465316C1 (ru) | Штамм бактерий haemophilus influenzae в №326, стабильный продуцент капсульного полисахарида | |
| JP3653766B2 (ja) | εーポリーＬーリジンの製造法 | |
| SU759055A3 (ru) | Способ получени биомассы | |
| SU644833A1 (ru) | Штамм 85-продуцент -аспарагиновой кислоты | |
| SU1705338A1 (ru) | Штамм дрожжей CaNDIDa ReQUINII - продуцент алкогольдегидрогеназы | |
| SU1788965A3 (en) | Strain of bacteria klebsiella pneumonia usable for lipopolysaccharide preparation | |
| SU1705347A1 (ru) | Штамм бактерий ЕSснеRIснIа coLI, предназначенный дл получени 2Ъ-дезоксиаденозина | |
| RU2087535C1 (ru) | Штамм актиномицета streptomyces avermitilis - продуцент авермектинов | |
| RU2624014C1 (ru) | Штамм haemophilus influenzae spb тип в - высокоактивный продуцент капсульного полисахарида полирибозилрибитолфосфата | |
| SU1366528A1 (ru) | Штамм бактерий ЕSснеRIснIа coLI-продуцент липополисахарида, обладающего митогенной активностью |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150402 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20160420 |