SU621724A1 - Способ получени липазы - Google Patents

Description

выращивают в колбах объемом 3 л. Среду дл  посевного материала готов т на водопроводной воде.

Состав питателглюй среды, 7о:

Соева  мука2,5

Сахароза0,25

К2НРО40,2

(NH4)2SO40,5

MgSO40,1

СаСОз0,5

Оливковое масло0,05-0,5

В трехлитровые колбы помещают по 500 мл указанной среды и внос т суспензию культуры гриба, приготовленную смывом со скошенного сусла-агара стерильной водой. Колбы с посевом помещают иа круговые качалки (220 об/мин) и инкубирз-ют при 28°С в течение 48 ч. Затем содержимое колб перенос т через посевной люк в 100литровые ферментеры, содержащие 30 л среды того же состава. Ферментацию провод т при 28± 1°С, рН 6,5-7,0 с перемешиванием при 360 об/мин и подачей воздуха на барботаж 1-1,5 объема на объем среды в минуту.

Наилучший выход липазы достигаетс  при внесении инокул та в количестве 3- 4% от объема среды.

После кзльтивировани  гриба в ферментере в течение 24-48 ч, по достижении активности культуральной жидкости 600 мкМ олеиновой кислоты на 1 мл за 1 ч провод т слив культуральной жидкости и ее обработку по известной схеме выслаиванием сернокислым аммонием с последующим диализом в проточной воде по схеме с противотоком и дальнейшей лиофилизацией на сублимационной сушке.

Липазна  активность продуцируемого фермента не менее 600 мкМ олеиновой кислоты на 1 мл за 1 ч после 24-48 ч культивировани  в ферментере.

Использование высокопродуктивного 24- 48-часового продуцента липазы гриба Oosрога fragrans Berkh на полусинтетической среде, содержащей в качестве источника углерода соевую муку и сахарозу, позвол ет повысить удельный выход ферментного препарата липазы с единицы объема питательной среды по сравнению с бактериальными продуцентами липаз, а также получить более широкий диапазон ее действи : рН от 6 до 9 и температура от 25 до 45°С.

Липаза с таким температурным диапазоном и интервалом по pll представл ет большой интерес дл  медицины и животноводства . В медицине она может быть использована как лечебный препарат при парушении функции поджелудочной железы. В животноводстве она найти применение при откорме молодн ка крупного рогатого скота на ранней стадии, когда у животных активность поджелудочной железы еще недостаточна. В обоих случа х нужна липаза широкого диапазона действи , так как рН среды в л елудочно-кишечном тракте мен етс  от кислых рН до щелочных. Этим услови м работы соответствует предлагаема  липаза.

Кроме того, препараты с липазой данного диапазона могут быть использованы в кожевенной промышленности дл  обработки кож совместно с протеазными препаратами , а также в других област х народного хоз йства, особенно там, где по технологическим регламентам требуетс  широкий диапазон рН и температур.

Claims (3)

1.Способ получени  липазы, предусматривающий культивирование ее продуцента на питательной среде, содержащей источннкн углерода, азота, фосфора и миперальтле соли, с последующим выделением фермента из культуральной жидкости и его очисткой, отличающийс  тем, что, с целью повышени  активности фермента и увеличени  диапазона его действи  при рН от 6 до 9 и температуры от 25 до 45°С, в качестве продуцента используют гриб вида Oospora fragrans Berkh.

2.Способ по п. 1, отличающийс  тем, что из вида Oospora fragrans Berkh используют щтамм BKMF-2024.

3.Способ по п. 1, отличающийс  тем, что в качестве источника углерода используют соевую муку и сахарозу.

Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1. Патент Японии № 1938833, кл. 36 (2) С, опублик. 1975.