SU753895A1 - Питательна среда дл выращивани продуцента молокосвертывающего фермента - Google Patents

Description

дукщего состава (вес. %): крахмал осахаренный О,5-1,5,аммоний фосфорнокислый однозамещенный 0,2-0,7, кукурузный экстракт 0,3-1,2, молочна . сыворотка 0,4-1,5 и минеральные соли калий фосфорнокислый одно- и днузамещенные 0,06 и 0,04 соответственно, кальций хлористый 0,05-0,5, магний сернокислый 0,03-0,1, цинк сернокислый 0,001-0,001, железо сернокислое 0,00001-0,0005 ИНа среде указанного состава продолжительность культивировани  продуцента молокосвертьшающих ферментов оказалось возможным сократить с 8-9 суток до 5,5-6,5 сут. без снижени  молокосвертывающей активности.

Недостатком прототипа - вл етс  наличие в технологии подготовки питательной среды стадии осахаривани  крахмала, применение дл  осахаривани  амилолитических ферментов из расчета 5 ед. .активности на 1 г крахмала , длительность культивировани , составл юща  5,5-6,5 сут, получение готовой культуральной жидкости, трудно поддающейс  дальнейшей обработке при выделении из нее ферментЕ-юго препарата, а также сравнительно легка  подверженность питательной среды и культуры контаминации постороннеймикрофлорой .

Целью изобретени   вл етс  сокращение продолжительности выращивани , снижение себестоимости препарата фермента и повышение гарантии микробиологической чистоты процесса.

Поставленна  цель достигаетс  тем что среда содержит в качестве источника углерода муку кукурузную, а в качестве источника азота - натрий .азотнокислый и дрожжи, причем компоненты питательной среды вз ты в следующем соотношении (вес. %): мука кукурузна  0,9-1,6 натрий азотнокислый0 ,1-0,3 дрожжиО,1-0,4 калий фосфорно .кислый однозамещенный . О,01-0, 03 калий фосфорнокислый двузамещенный0 ,02-0,06 кальций хлористцй 0,05-0,5 магний сернокисльГй0 ,03-0,1 вода остальное выпускают гидролизные заводы и другие виды дрожжей. Из состава среды исключаетс  цинк сернокислый и железо сернокислое.

Выращивание на такой среде продуцента молокосвертывашщих ферменто . позвол ет сократить врем  культивировани  на сутки, т.е. вместо 5,56 ,5 сут до 4,.5-5,5 сут без снижени  молокосвертывающей активности культуральной жидкости и получать культуральную жидкость (глубинную культуру ) , легко поддающуюс  фильтрации, вакуумноцентрированию и выделению из концентрата осадка препарата рыхлой структуры, лишенной темных пигментов Кроме того, выбранное сочетание азотистого питани  с кукурузной мукой позвол ет сократить лагфазу развити  культуры за счет первоначального потреблени  неорганического азота (натрий азотнокис.лый) , после чего наступает период использовани  органического азота дрожжей, что очень важно, так как такое сочетание компонентов приводит к стабильному снижению рН в процессе роста культуры Тгриба до 2,5-3,1 в конце периода выращивани .

Этот фактор очень важен в отношении ослаблени  развити  посторонних микроорганизмов, проникновение которых иногда наблюдаетс  при столь длительном процессе выращивани  и, следовательно , повышает микробиологическую чистоту производства. Стоимость кукурузной муки ниже стоимости крахмала более чем в 2 раза (157 и 420 руб. за тонну соответственно). Кукурузна  мука к тому же более доступна и однородна по -составу по сранению с крахмалом. Использование в качестве источника азота натри  азотнокислого с дрожжами позвол ет получать почти бесцветную (слабо-золотистую ) культуральную жидкость, лишенную темных пигментов,- что в дальнейшем позвол ет исключить из технологи стадию освобо эдени  пигментов из културальной жидкости или ферментного препарата.

Примеры, иллюстрирующие использование рекомендуемой питательной сред дл  выращивани  продуцента молокосветывающего фермента Russula decoloran Пример 1. Б ферментере емкостью 0,25 м 3.

Среда, содержание в %:

1Д мука кукурузна 

0,15

натрий азотнокислый

0,25

дрОжжи калий фосфорнокислый однозамещенный 0,04 калий фосфорнокислый двузамещенный 0,06 кальций хлористый . 0,05 магний сернокислый 0,05 вода -до 100

Среду стерилизуют, охлаждают, затем внос т посевной материал из расчета 4% от объема засеваемой среды и выращивают с соблюдением разработанных условий. Максимальный уровень молокосвертывающей активности в культуральной жидкости (400 ед/мл) наблюдают через 107 ч роста, при этом рН культуральной жидкости, составил 2,6.

Claims (2)

1. Пример 2. В ферментере:, емкостью 2 м. Среда, содержание в %: мука кукурузна  1,1 натрий азотнокислый 0,1 дрожжи0,3 калий фосфорнокислый однозамещенный 0,04 калий фосфорнокислйй двуэамещенный0,06 кальций хлористый . 0,05 магний сернокислый 0,05 водадо 100 Среду стерилизуют через систему УНС, охлаждают, засевают посевным материалом из расчета 4,4% от объема засеваемой питательной среды и выращивают прин тым на заводе способом. Максимальна  мойокосвертывающа . активность в культуральной жидкости (360 ед/мл) наблюдаетс  через 124 ч, при этом рН культуральной жидкости был равен 2,8. Таким образом, предлагаема  питательна  среда позвол ет сократить длительность выращиваНи  продуцента молокосвертывающих ферментов Russula .decoldrans с 5,5-6,5 до 4,5-5,5 суто С заменой раствора осахаренного крах мала кукурузной мукой, а введение в среду таких источников неорганическо го -и органического азота как натрий азотнокислый и дрожжи позвол ет сократить лагфазу продуцента, получать глубинную культуру, легко поддающуюс  дальнейшей переработке, культуральна  жидкость почти бесцветна , а следовательно, не требует очистки ее от пигментов. На таком сочетании источников углеводов и азота при выращивании продуцента наблюдаетс  стабильное снижение рН глубинной культуры в кислую сторону, что предотвра щает развитие посторонних микроорганизмов , проникновение которых не исключаетс  при таком длительном процессе выращивани . Ориентировочный экономический эффект только за счет снижени  длитель ности выращивани  и за счет замены осахаренного крахмала кукурузной мукой из расчета на 1.товарную тонну препарата с молокосвертывающей активностью ДООООО ед/г составл ет около 10 тыс. рублей. , Формула изобретени  Питательна  среда дл - выращивани  продуцента молокосвертывающего (J)ep мента Russula decolorans, содержаща  источники углерода и азота, калий фосфорнокислый однозамещенный, калий фосфорнокислый двузамещенный, хлористый кальций, магний сернокислый и воду, отличающа с  тем, что, с целью сокращени  продолжительности выращивани , снижени  себестоимости препарата фермента и повышени  гарантии микробиологической чистоты процесса выращивани , среда содержит в качестве источника углерода муку кукурузную, а в качестве источника азота - натрий азотнокислый и . дрожжи, причем компоненты питательной среды вз ты в следующем соотношении (вес. %): мука кукурузна  0,9-1,6 натрий азотнокислый 0,1-0,3 дрожжи О,1-0,4 калий фосфорнокислый однозамещенный 0,01-0,08 калий фосфорнокислый двузамещенный 0,02-0,06 кальций хлористый 0,05-0,5 магний сернокислый . 0,03-0,1 водаостальное Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1.Авторское свидетельство СССР 522230, кл, С 12 D 13/10, 1974.J
2. 2.Авторское свидетельство СССР № 595997, кл. С 12 Д 13/10, 1976 ( прототип).