SU1159951A1 - Питательна среда дл выращивани @ @ @ -38-продуцента ЭЗКО- @ - @ -ацетилглюкозаминидазы - Google Patents

Abstract

ПИТАТ ЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ BAblLLUS SUBTILIS G-38 ПЮДУЦЕНТА ЭКЗО- N-АЦЕТИЛГЛЮКОЗАМИНИДАЗЫ , включающа  источник углерода , источник азота и минеральные соли в виде магни  сернокислого и марганца сернокислого и воду, отличающа с  тем, что, с целью повышени  ЭКЗО- 0-Ы-ацетилглюкозаминидазной активности и увеличени  выхода готового продукта, она в качестве источника углерода содержит осахаренный крахмал и гидролизат дрожжей, источника aaota - хлористый аммоний, дополнительно ввод т тиамин пирофосфат и минеральные , соли в виде натри  фосфорнокислого, кали  фосфорнокислого однозамещенного при следующем соотношении компонентов, г/л: Осахаренный крахмал70,0-80,0 Гидролизат дрожжей20,0-25,0 Натрий фосфорнокислый14,0-16,0 Калий фосфорнокислый однозамещенный однозамещенный2,7-2,9 Хлористый аммоний3,5-3,7 сл Магний сернокислый0,062-0,065 Марганец сернокислый0,008-0,009 Тиамин пирофосфат0,05-0, ВодаДо 1 л

Description

СП

со со СП Изобретение относитс  к микробиологичес кой промышленности, в частности к получению питательных сред дл  выращивани  продуцентов ЭКЗО- -N-ацетилглюкозаминидазы . Целью изобретени   вл етс  повышение ЭКЗО- р N-ацетилглюкозаминййазной активнос ти и увеличение выхода готового продукта. Дл  приготовлени  питательной среды в качестве источника глюкоф используют крахмал, который осахаривйот при помощи бактериальной л -амилазы до образовани  эритродекстранов (красное окрашение с йодом ). После этого довод т рН до 4,7 с помощью ортофосфорной кислот, пощшмаю температуру до 60 С и добавл ют глюкоами зу из расчета 4 ед. активности на 1 г крах мала. Осахарение провод т 6 ч. В конечном итоге образуетс  около 0,92 г глюкозы из 1 г сухих веществ суспензии крахмала. Другие компоненты питательной среды раствор ют в воде,. объедин ют с осахаренны крахмалом, общий объем довод т до 1000 м Устанавливают рН 6,5 с помощью 20%-ной NaOH. Среду разливают по 100 мл в колбы емкостью 750 мл и стерилизуют 30 М1ш при . Пример 1. Выращивание продуцент ЭКЗО-р -N-ацетилглюкозаминидазы в колбах. Дл  выращивани  Bacillussubtil is G-38 готов т питательную среду следующего соста Осахарённый крахмал70,0 Гидролизат дрожжей20,0 Натрий фосфорнокислый14,0 Калий фосфорнокислый однозамещенный2,7 Аммо1шй хлористый3,5 Магний сернокислый0,062 Марганец сернокислый0,008 Тиамин пирофосфат0,05 Вода До 1 л Питательную среду разливают по 100 мл в колбы емкостью по 750 мл и стерилизуют при 30 мин. Питательную среду с рН 6,5 засевают Bacillus Subtil is G-38, выращенным на ломтиках картофел . Выращивание продуцента провод т на качалках (180 качаний/мин ) при 37 °С 8-12 ч. На 8-12 часу роста продуцента в культуральной жидкости определ ют ЭКЗО- - N- ацетилглюкозаминидазную активность, котора  составл ет 27 мед/мл. Активность определ ют калориметрическим методом , по интенсивности окраски образовавшегос  п-нитрофенила при знзиматическом .расщепленщ синтетического субстрата п-нитрофенил- -Ы-ацетилглюкозамиршд. Пример 2. Выращивание Bacillus subtil is G-38 провод т аналогично примеру 1, но на среде следующего состава, г/л: Осахарённый крахмал80,0 Гидролизат дрожжей25,0 Натрий фосфорнокислый16,0. Калий фосфорнокислый однозамещенный2 ,9 Аммоний хлористый 3,7 Магний сернокислый 0,0065 Марганец сернокислый0,009 Тиамин пирофосфат 0,07 Вода До 1 л ЭКЗО-р - N-ацетилглюкозаминидазна  активнОч;ть составл ет 27 мед/мл. Пример 3. Выращивание Bacillus subtil is G-38 провод т в бродильных установках типа Биолофит, которые по своим технологическим параметрам и услови м биосинтеза соответствуют производственным ферментам. Среда аналогична примеру 1, которую стерилизуют при ИбС 30 мин, Затем питательную среду с рН 6,5-6,7 охлаждают .до 37с и засевают продуцентом. Выращивание провод т при 37 С, аэрации 4-5 л, размешивании 300-400 об/мин. Максимальную активность определ ют на 8-12 часу роста прод)щента, котора  составл ет 27. 27 мед /мл.

Claims (3)

1. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ BACILLUS SUBTIL1S G-38 ПРОДУЦЕНТА ЭКЗО- β-Ν-АЦЕТИЛГЛЮКОЗАМИНИДАЗЫ, включающая источник углерода, источник азота и минеральные соли в виде магния сернокислого и марганца сернокислого и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения ЭКЗО- β-Ν-аце тилглюкозаминидазной активности и увеличения выхода готового продукта, она в качестве источника углерода содержит осахаренный крахмал и гидролизат дрожжей, источника азота — хлористый аммоний, дополнительно вводят тиамин пирофосфат и минеральные ·. соли в виде натрия фосфорнокислого, калия фосфорнокислого однозамещенного при следующем соотношении компонентов, г/л:‘

   Осахаренный крахмал

   Гидролизат дрожжей

   Натрий фосфорнокислый Калий фосфорнокислый однозамещенный однозамещенный

   Хлористый аммоний Магний сернокислый Марганец сернокислый Тиамин пирофосфат Вода

   70,0-80,0

   20,0-25,0

   14,0-16,0
2. 2,7-2,9
3. 3,5-3,7 0,062—0,065 0,008-0,009 0,05-0,07 До 1 л >