SU800185A1

SU800185A1 - Способ получени глюкоамилазы

Info

Publication number: SU800185A1
Application number: SU792745896A
Authority: SU
Inventors: Елизавета Алексеевна Двадцатова; Наталья Николаевна Воронцова; Любовь Семеновна Обложко; Эльвира Ивановна Бурцева; Галина Ивановна Комарова; Виктор Львович Яровенко; Борис Алексеевич Устинников; Генутис Феликсович Булавас; Тереса Владимировна Василевскене; Мария Антоновна Костецкая; Владислава Владимировна Димитрова; Валентина Сергеевна Рачкаускене
Original assignee: Всесоюзный Научно-Исследователь-Ский Институт Продуктов Брожения
Priority date: 1979-03-24
Filing date: 1979-03-24
Publication date: 1981-01-30

Description

t

Изобретение .относитс к микробиологической промьалленности, а именно к спосо&ам получени ферментного препарата глюкоз лазы, используемой при ферментативном раси5еплении крахмала S спиртовой и крахмалопаточной промышленности.

Известен способ получени глюкоалдалазы , предусматривающий выращивание посевного материала, приготовление питательной среды путем гидролиз кукурузной муки солодом или бактериальноЯ ct амилазой, разделение полученного гидролизата на два потока, один из которых используют на стадии ферментации, а другой разбавл ют до содержани сухих веществ 6-7% и используют дл выращивани посевного материала, культивирование грибов Aspergillus awamori 466 на питательной среде, содержащей гидролизат кукурузной муки .

Недостатком известного способа вл етс длительность процесса получени фермента (280-320 ч).

Цель изобретени - ускорение процесса .

Указанна цель достигаетс тем, что выращивание посевного материала осуществл ют на питательной среде.

одержащей кр.ахмал, азотнокислый агний, однозамещенный фосфорнокисый калий, хлористый калий, серноислое железо и солодовые ростки,

в течение 22-24 ч при температуре 28-30°С,гидролиз кукурузной муки ведут в течение 30-40 мин при 5860°С , при этом в питательную среду обавл ют диаммоний1 осфат .

диаммонийфосфат добавл ют в две стадии: на первой стадии - в количестве 0,2-0,4% к объему среды после гидролиза кукурузной муки, а на второй - 0,1-0,2% через 20-24 ч после

начала культивировани .

Предлагаемый способ состоит в следующем .

Посевной материал культуры AspergJHus awamori 466 готов т на жидкой

питательной среде, содержащей картофельный крахмал, азотнокислый натрий , фосфорнокислый калий, сернокислый магний, хлористый калий, сернокислое железо и солодовые ростки.

Выращивание осуществл ют в течение 20-24 ч при 28-30°С.

Claims

Подготовленную жидкую посевную культуру передают на стадию культивировани в инокул тор. Дл культивировани посевной культуры в инокул торе и далее дл ферментации в про изводственных услови х жидкую питательную среду готов т следующим образом . Кукурузную муку смешивают с. водой в соотношении 1:3, разваривают при 148-154°С под давлением 0,3-0,4 мПа в течение 15-20 мин,охлаждают до 60° и осахаривают солодовым молоком или бактериальной о -амилазой в течение 30-40 мин при 58-60°С до образовани эритродекстринов. От полученного сус ла, концентраци сухих веществ в котором составл ет 18-20%, делают об.ъе среды и разбавл ют его водой до концентрации сухих веществ 6-7% а в оставшуюс среду добавл ют диаммонийфосфат в количестве 0,3% к объему ср ды. Обе полученные среды подкисл ют серной кислотой до рН 4,8, стерилизуют острым паром при давлении 0,10 ,12 мПа в течение 30-40 мин, охлаждают и направл ют соответственно на стадию культивировани посевного материала и на стадию ферментации. Продолжительность культивировани посевного материала в инокул торе со ставл ет 22-24 ч при 28-30°С, непрерывном перемешивании и аэрации ст рильным воздухйм, подаваемым в количестве 16 м на 1 мсрады в час. Фер ментацию осуществл ют на высококонцентрированном сусле при 35°С, непре рывном перемешивании и аэрации стерильным воздухом (30-40 м на 1 м среды в час). Через 20-24 ч от начала процесса ферментации в среду BBOJд т оставшуюс часть диаммонийфосфат ( 0,15%) дл ускорени биосинтеза глю коамилазы. Продолжительность ферментации - 72-108 ч. Готова культура имеет активность не менее 170 ед/мл, При м ё р. Посевной материал Aspergit us awamori 466 выраи1,ивают на питательной среде следующего состава ,%: Крахмал картофельный 6 NaNO-.,0,91 КН2РО,0,1 ,05 MgS040,05 FeS040,01 Солодовые ростки3,0 Остальное Выращивание осуществл ют в течение 24 ч при 30°С. Дл культивировани производственной стащии посевного материала и ферментации готов т производственную питательную среду. Дл .этого кукурузную муку смешивают с водой при 45°С в соотношении 1:3 полученную массу разваривают при 14в°С, давлении 0,4 мПа в течение 15 мин. Разваренную массу охлаждают до 60°С,, затем осахаривают солодовым молоком в течение 30 мин до крас но-бурой окраски водной пробы,что указывает на образование эритродекст ринов. Часть сусла разбавл ют водой до концентрации сухих веществ 6%, подкисл ют серной КИСЛОТОЙ до рН 4,8, стерилизуют острым паром при 121°С, в течение 30-40 мин охламодают до 30°С и используют в качестве питательной среды дл получени посевного материала в инокул торе. В высококонцентрированное сусло ввод т 0,3% к объему диаммонийфосфата , подкисл ют среду серной кислотой до рН 4,8 стерилизуют при 121°С, в течение 30-40 мин, охлаждают до 35°С и направл ют на ферментацию. Ферментацию провод т при 35°С,давлении 0,03 мПа и аэрации стерильным воздухом в количестве 30-40 м на 1 м среды в час при непрерывном перемешивании турбинной мешалкой с 150170 об/мин. Через 24 ч после начала ферментации дл ускорени биосинтеза глюкоамилазы в среду вновь ввод т диаммонийфосфат в количестве 0,15%. Продолжительность ферментации составл ет 184 ч, а активность полученной глюкоамилазы - 183 ед/мл. Предлагаемый способ позвол ет на несколько суток сократить процесс культивировани продуцента глюкоамилазы с сохранением высокого уровн активности фермента. Формула изобретени 1.Способ получени глюкоамилазы, предусматривающий выращивание посевного материала, приготовление питательной среды путем гидролиза кукурузной муки солодом или бактериальной о -амилазой, разделение полученного гидролизата на два потока, один из которых используют на стадии ферментации , а другой разбавл ют до содержани сухих веществ 6-7% и используют дл выращивани посевного материала, и культивирование грибов Aspergilfus awamori 466 на питательной среде, содержащей гидролизат кукурузной муки, отличающийс тем, что, с целью ускорени процесса, выращивание посевного материала осуществл ют на питательной среде, содержащей крахмал, азотнокислый магний, однозамещенный фосфорнокислый калий, хлористый калий, сернокислое железо и солодовые ростки, в течение 22-24 ч при температуре 28-30°С, гидролиз кукурузной муки ведут в течение 30-40 г/шн при 5860°С , при этом в питательную среду добавл ют диаммонийфосфат.
2.Способ по п. 1, отличающийс тем, что диаммонийфосфат добавл ют в две стадии, на первой из которых в питательную среду в коли58001856

честве 0,2-0,4% после гидролиза ку-Источники информации,

курузной муки, а на второй стадии -прин тые во внимание при экспертизе 0,1-0,2% к объему среды через 20-1, Патент США № 3988204,

24 ч после начала культивировани .кл, 195-15, опублик. 197,