SU911765A1 - Способ культивировани энтомопатогенных бактерий - Google Patents

Способ культивировани энтомопатогенных бактерий Download PDF

Info

Publication number
SU911765A1
SU911765A1 SU802921395A SU2921395A SU911765A1 SU 911765 A1 SU911765 A1 SU 911765A1 SU 802921395 A SU802921395 A SU 802921395A SU 2921395 A SU2921395 A SU 2921395A SU 911765 A1 SU911765 A1 SU 911765A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
aeration
bacteria
hydrol
hydrolyzate
rev
Prior art date
Application number
SU802921395A
Other languages
English (en)
Inventor
В.И. Огарков
К.П. Гапонов
А.С. Белых
Р.Х. Сагиров
Ю.Л. Игнатов
В.Ю. Ракитин
В.Н. Давыдов
Т.А. Нугманова
Н.В. Чекотина
Н.В. Прокофьева
Original Assignee
Всесоюзный научно-исследовательский проектно-конструкторский институт прикладной биохимии
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Всесоюзный научно-исследовательский проектно-конструкторский институт прикладной биохимии filed Critical Всесоюзный научно-исследовательский проектно-конструкторский институт прикладной биохимии
Priority to SU802921395A priority Critical patent/SU911765A1/ru
Application granted granted Critical
Publication of SU911765A1 publication Critical patent/SU911765A1/ru

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ включающий высев бактерий на среду, содержащую кормовые дрожжи, кукурузную муку, гидрол, гидролизат хлопкового шрота и а&рацию в дробном режиме, отличающийс  тем, что, с целью увеличени  спор, культивирование осуществл ют на среде, содержащей, вес.%: Дрожжи кормовые 2,0-4,0 Мука кукурузна  1,2-2,4 . Гидрол.0,5-1,5 Гидролизат хлопкового шрота 3,0-14,0, Вода. Остальное а аэрацию до полного спорообразоваV ) С . ни  поддерживают на уровне 0,33 1 ,40 об/об мин и затем снижают до 0,15-0,5 об/об мин. ч ч со

Description

Изобретение относитс  к области технической микробиологии и может быть использовано дл  получени  энт мопатогенньпс препаратов,  вл ющихс  .средствами защиты растений. Известен способ культивировани  бактерийвида Вас, thuringiensis в лабораторных услови х на дрожжеполи сахаридной среде, содержащей 3% кор мовых дрожжей (БВК) и 1,5% кукуруз- ной муки при посто нном режиме аэра ции L1 3. Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к предложенному  вл етс  способ культивировани  энтомопатоге ных бактерий на среде следующего, состава, %: кормовые дрожжи 3,0-4,5 кукурузна  мука 1,2-2,5; гидрол 2,0 4,0 и гидролизат хлопкового шрота 3,4-6,8 с содержанием аминного азот 300-400 мг% С2. Недостатком указан ных способов  вл етс  относительно низкий выход споровой биомассы энтомопатогенньк бактерий. Целью изобретени   вл етс  увели чение титра cnoij микроорганизмов. Это достигаетс  за счет сокращени  в составе среды количества гидрола и гидролизата хлопкового шрота при соответственном изменении режима аэрации, заключающемс  снижении уровн  аэрации в процессе культивир . вани . В соответствии с предлагаемым способом энтомопатогенные бактерии вьфащивают на среде следующего сост .ава, вес.%: Дрожжи кормовые. 2,0-4,6 Мука кукурузна  1,2-2,4 Гидрол . -0,571,5 Гидролизат хлопкового шрота 3,0-14 ВодаОстальное. При этом уровень аэрации с начала процесса до момента полного спор образовани  составл ет 0,33 1 ,4 об/об мин, а с момента йолного спорообразовани  до момента освобож дени  спор у 10% бактерий 0,15 0 ,5 об/об мин, после чего аэрацию прекращают. Существо способа заключаетс  в следующем. . Предварительно готов т питательную среду. Дл  этого дрожжи и муку смешивают с водопроводной водой в количестве 60% от необходимой дл  приготовлени  соответственного объе 2 ма среды. Суспензию перемешивают, нагревают до и вьщерживают при этой температуре 20 мин, далее добавл ют ферментативный гидролизат хлопкового шрота, оставшуюс  воду и охлаждают до 40-45 0. Довод т рН до 7,6+0,1 20%-ным раствором NaOH. Среду стерилизуют при температуре в течение 30 мин. Отдельно готов т стерильньш гидрол. Срерилизацию гидрола провод т при 120С в течение 25 мин. Стерильный гидрол добавл ют в среду непосредственно перед посевом культуры.. Ферментативный гидролизат готов т следующим образом. Водопроводную воду нагревают до температуры 53+2С загружают 2% от вз той воды хлопкового шротаJ добавлением раствора едкого натра устанавливают рН суспензии 8,0+0,2. После чего добавл ют фермент протосубтилин ГЗХ (с активностью не менее 100 ед. по модифицированному методу Ансона) в, количестве 0,8-1% от навески шрота. Процесс гидролиза провод т в течение 4 ч при посто нном перемешивании, поддержании температуры и ,рН в указанных вьш1е пределах . По окончании пиролиза суспензию нагревают до , вьщерживают при этой температуре 20 мин, после, чего мешалку отключают, прсле отстаивани  гидролизата в течение 20 мин провод т его Декантацию и с помощью вакуума перевод т в другой реактор. Готовьй гидролизат содержит около 40 мг% аминного азота. Подготовленную описанным выше способс м питательную среду зас.евают штаммом энтомопатогенных бактерий. Культивирование осуществл ют в течение 32-35 ч при дробном режиме аэрации . С начала продесса и до момента полного спорообразовани  обеспечивают максимальный режим аэрации, составл ющий 0,33-: 1,4 об/об мин в зависимости от объема ферментера. Момен-том полного спорообразовани  счита-. етс  такое состо ние культуры, при котором не менее чем у 95% клеток сформировались зрелые споры, определ емые методом пр мого микроскопировани . Затем интенсивность аэрации сокращаетс  до уровн  0,150 ,5 об/об мин и поддерживаетс  на таком уровне до момента, при .котором не менее чем у 10% клеток освобождаютс  споры. После этого аэрированне среды полиостью прекращаетс  и полученна  культуральна  жидкость направл етс  на переработку. Пример 1. Готов т 7 л среды следующего состава,.вес.%: Дрожжи кормовые Мука кукурузна  Гидрол Гидролизат хлопкового шрота ВодаОстальное Культивирование провод т в лабора торном ферментере объемом 10 л. Посе среды осуществл ют суспензией спор бактерий Bacillus thoringiensis var. galleriae шт. 69/6 в количестве 30 МП с концентрацией спор 10 спор/м Непосредственно после посева обеспечивают интенсивность аэрации 1 об/об мин, поддецжива  ее на этом уровне до 22 ч роста. В этот момент 95% клеток содержит сформировавшиес  споры После чего интенсивность аэрации снижают до 0,3 об/об мин и, куль ивирование продолжают еще 10 ч После 32 ч аэрации у 12% клеток спор выход т из культуральной жидкости и этот момент аэраци  полностью прекра щаетс  Культуральную жидкость выдер живают еще в течение 5 ч на холоде до полного освобождени  спор от клеточных оболочек. Титр спор составл е 9,00 110 спор/мл. Пример 2. Культуру Bac.thuringiensis v, Hendrolimus шт.87-продуцент дендробациплина выращивают в ферментере объемом 630 л на среде этого же состава, что ив примере 1. В течение 23 ч аэрацию поддерживают на уровне 1,4 об/об мин. На двадцать третий час 99% клеток содержит сфор мировавшиес  споры и в этот момент интенсивность аэрации снижена до 0,5 об/об мин. В таком режиме.культивирование продолжаетс  до момента, выхода спор у 15% клеток, что имеет место на двадцать дев тьй час куль .тивировани . После этого аэрацию полностью прекращают, в рубашку ферментера подают холодную воду и выдерживают Культуральную жидкость в течение 5 ч до 98% выхода спор из клеток. Титр спор со.ставл ет 10,08МО спрр/мл. Пример 3. Культуру Вас. thuringiensis v. dendroliraas шт. 49/8продуцент дендробациллина выращивают в ферментере емкостью 63 м на-среде того же состава, что в примере 1. В течение 22 ч интенсивность аэрации составл ет 0,33 об/об мин. На пвапи ть втооой час 95% клеток сопеожит :формировавшиес  споры и в этот момент интенсивность аэо иии уменьшена до 0,17 об/об мин. В этом режиме культи ирование продолжаетс  до момента выхода спор у 10% клеток, что имеет место на тридцать второй час культивировани . После этого аэрацию полностью прекращают, Культуральную жидкость охлаждают до 20 С и вьщерживают еще- 3ч. Титр спор составл ет 9,4-10 спор/мл. Таким образом, предложенный способ культивировани  бактерий вида Вас. thuriengiensis может быть использован дл  получени  энтомопатоген ных препаратов на основе различных вариантов этого микроорганизма как в лабораторных, так и в промышленных услови х. Предложенный способ обеспечивает повьшение выхода спор по сравнению с промьштенно-освоенным способом более чем в 3 раза.

Claims (1)

  1. СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ,’ включающий высев1 бактерий на среду, содержащую кормовые дрожжи, кукурузную муку, гидрол, гидролизат хлопкового шрота и аэрацию в дробном режиме, отличающийся тем, что, с целью увеличения тантра спор, культивирование осуществляют на среде, содержащей, вес.%:
    Дрожжи кормовые 2,0-4,0 Мука кукурузная 1,2-2,4 Гидрол, 0,5-1,5 Гидролизат хлопко- вого шрота 3,0-14,0 , Вода Остальное
    а аэрацию до полного спорообразова,ния поддерживают на уровне 0,33 1,40 об/об мин и затем снижают до .0,15-0,5 об/об мин.
    ω с ^ч ч^ с©
    Од сл
SU802921395A 1980-05-13 1980-05-13 Способ культивировани энтомопатогенных бактерий SU911765A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU802921395A SU911765A1 (ru) 1980-05-13 1980-05-13 Способ культивировани энтомопатогенных бактерий

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU802921395A SU911765A1 (ru) 1980-05-13 1980-05-13 Способ культивировани энтомопатогенных бактерий

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU911765A1 true SU911765A1 (ru) 1984-10-15

Family

ID=20894492

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU802921395A SU911765A1 (ru) 1980-05-13 1980-05-13 Способ культивировани энтомопатогенных бактерий

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU911765A1 (ru)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
1. M.ft Файбич и др. Вли ние различных источников углерода, содер, жащих полисахариды, на рост -и раз- множение Bacillus thuringiensis в .средах дл производства энтомопатогенных микробиологических препаратов И., Микробиологи , 1973, № 9: 2. Авторское свидетельство СССР па за вке № 2777387/30-15, кл. С 12 К 1/06, 1979 (прототип). *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Le Mense et al. Production of mold amylases in submerged culture
KR890001827B1 (ko) α-아밀라제의제법
US3979261A (en) Production of glucose isomerase by bacillus coagulans
Harrison et al. Studies on Reactions Relating to Carbohydrates and Polysaccharides: XXXIII. The Synthesis of Polysaccharides by Bacteria and Enzymes
SU911765A1 (ru) Способ культивировани энтомопатогенных бактерий
US5273891A (en) Process for the production of microbial cellulose
US3594284A (en) Lysostaphin fermentation with accelerated time cycle
EP0323717B1 (en) Process for the production of microbial cellulose
US4588690A (en) Preparation of the enzyme β-glucanase by fermentation of fungi
EP0200565A2 (en) Method for production of peroxidase
US3686072A (en) L-asparaginase from erwinia
Potter et al. The fermentation of pectin and pectic acid by Bacillus polymyxa
Kekos et al. Some nutritional factors affecting α-amylase production by Calvatia gigantea
SU908092A1 (ru) Способ получени рибофлавина
US3843445A (en) Asparaginase production
RU2149188C1 (ru) Способ получения молочной кислоты
EP0258038A2 (en) Use of cellulase preparations in the cultivation and use of cellulose-producing micro-organisms
SU415294A1 (ru) Способ получения литических ферментов
SU840099A1 (ru) Способ осахаривани крахмалистогоСыРь пРи пРОизВОдСТВЕ СпиРТА
SU749891A1 (ru) Способ получени щелочной протеазы
SU644827A1 (ru) Способ получени фосфолипазы
RU2053293C1 (ru) Способ получения биомассы бацилл
SU1263711A1 (ru) Питательна среда дл выделени и отбора бактерий-продуцентов протеазы
SU1386657A1 (ru) Питательна среда дл культивировани кампилобактерий
SU1004472A1 (ru) Способ приготовлени питательной среды дл культивировани продуцентов глюкоамилазы