SU415294A1

SU415294A1 - Способ получения литических ферментов

Info

Publication number: SU415294A1
Application number: SU1793898A
Authority: SU
Original assignee: О. В. Кислухина, В. Ю. Авиженис , К. А. чун; Всесоюзный научно исследовательский институт биосинтеза белковых веществ
Priority date: 1972-06-06
Filing date: 1972-06-06
Publication date: 1974-02-15

Description

1

Изобретение относитс к области микробиологической промышленности и может быть использовано при производстве препаратов литических фе1р1ментс1В из культур ба1кте|р1ий группы сенной и картофельной палочек, например Bacillus subtilis 402, выращенных глубинным способом.

Известен способ получени литических ферментов -путем выращивани микроорганизмов например. Bacillus subtilis 402, на водной питательной среде, содержащей источники углерода, азота, стимул торы роста и минеральные соли, с последующим выделением ферментов из культуральной жидкости.

С целью повышени активности литических ферментов и снижени себестоимости продукта по предлагаемому способу в качестве источников азота и углерода в среду ввод т осахаренмый чменный солод, в количестве 2,3-2,7% от общего объема среды.

Дробленый чменный солод сусп©нди1руют в воде в концентрации около 5%, подогревают суспензию до 70+2°С, выдерживают при этой температуре и посто нном перемешивании в течение 1 час, а затам повышают темлературу суспензии до 80+2°С и продолжают процесс до перехода крахмала в неокрашиваемые йодом декстрины. При высокой активности амилазы в солоде процесс осахаривани может закончитьс менее чем за 1 час при 70°С;

при этом выдерживать суспензию при 80°С не нужно. По окончании осахаривани раствор кип т т в течение 10-15 лин, затем стерилизуют 30-35 мин при 135+2°С. Отдельно приготавлнвают раствор солей, в который внос т сухие пивные дрожжи. Объем этого раствора определ ют исход из конечного объема среды , объема суспензии солода и количества конденсата, образующегос прп стерилизации.

Раствор солей (с пивными дрожжами) стерилизуют 30-35 мин при 135+2°С. Простерилизованные компоненты среды соедин ют в ферментере, охлаждают до 40+1°С, устанавливают в среде рН 6,90+0,2 с помощью концентрированных растворов аммиака и ортофосфорной кислоты, а затем засевают ср-еду культурой бактерии из группы сенной и картофельной палочек, например Bacillus subtilis 402. Посевной материал выращивают при

374:1°С в течение 484;3 час на пшеничных отруб х, увлажненных 1,5 вес. ч. воды и простврилиэо1ва«ных в течение 50-60 мин ори давлении 1+0,1 ати. Дл засева 1 м пптательной среды достаточно культуры, выращенной на 30+10 г пшеничных отрубей (по воздуппю-сухому весу). Ферментацию ведут в течение 12-16 час при 37+1°С, посто нном перемешивании и количестве продуваемого воздуха 0,5niO,05 объемов в 1 мин. Активноеть литических ферментов в фильтрате

культуры по окончании ферментации составл ет 22000-29000 ед. ЛА1мл.

Пример. 20 г дробленого чменного солода помещают в реактор, содержащий 400 л холодной водопроводной воды. Взвесь нагревают до 70°С П1р:И иосто нНОМ шеремешиванни . Процесс осах ар икани солода ри 70°С. длитс 30 мин. Затем суспензию солода нагревают до кипени , кип т т в течение 10 мин, охлаждают и перекачивают с помощью насоса в ферментер емкостью 1500 лив нем простерилизовывают в течение 30 мин при 135°С. Во второй реактор, содержащий 260 л холодной водопроводной воды, внос т 3,2 кг/МП4/2НР04, 0,48 кг КС1, 0,08 кг MgSO4-7n2O, 0,088 кг СаСЬ и 0,4 кг сухих пивных дрожжей. Раствор перемешивают в течение 15 мин, а затем перекачивают в сателлит ферментера и простерилизовывают в течение 30 мин при 135°С, после чего стерильную жидкость передают под давлением в ферментер. Среду охлаждают до 40°С; рН среды составл ет 6,9, объем - около 800 л. Среду засевают водной суспензией культуры Bacillus subtilis 402, выращенной в течение 48 час при 37°С на 20 г пшеничных отрубей.

увлажненных 30 лл водопроводной воды и простерилизованных в течение 1 час при давлении 1 ати. Ферментацию ведут в течение 13 час при 37+1°С, посто нном перемешиваНИИ в количестве продуваемого воздуха 23-26 . По окончании ферментации активность литического фермента составл ет 25700 ед. ЛА/лл.

Предметизобретени

Claims

1. Способ получени литических ферментов путем выращивани микроорганизмов, например Bacillus subtilis 402, на водной питательной среде, содержащей источники углерода , азота, стимул торы роста и минеральые соли, с последующим выделением ферментов из культуральной жидкости, отличающийс тем, что, с целью повышени активности литичеоких ферментов и снижени себестоимости продукта, в качестве источников азота и углерода в среду ввод т осахаренный чменный солод.

2. Способ по п. 1, отличающийс тем, что чменный солод ввод т в среду в количестве 2,3-2,7% от общего объема среды.