SU345198A1 - Способ приготовления питательной среды для продуцентов пектолитических ферментов - Google Patents

Description

Изобретенне относитс  к области микробиологического синтеза ферментов и касаетс  снособа приготовлени  питательной среды дл  глубинного культивировани  микроорганизмов - продуцентов пектолитических ферментов и может быть использовано дл  глубинного культивировани  плесневых грибов, нанрнмер Asp. niger, Asp. awamori, Asp. foetidus.

Известен способ приготовлени  питательной среды дл  глубинного культивнровани  нродуцентов нектнназы нутем смешивани  нектинсодержащего сырь , например свекловичного жома, с водой, нагревани  полученной смеси, выдерживани  и охлаждени  ее, отделени  водного экстракта от твердой фазы и введени  в экстракт минеральных солей - источника фосфорного и азотного питани .

Дл  обеснечени  интенсификации нроцесса культивироваии  продуцентов и повышени  активности продуцируемых ферментов по предлагаемому способу экстракт перед смешиванием с сол ми подвергают гидролизу нектолитическими ферментами, нанример пектиназой . При этом нагреванне пектинсодержащего сырь  осуществл ют до 125-130°С, а продолжительность выдерживани  равна 2 час. Количество вводимых пектолитических ферментов равно 0,2-5,0 ед/мл экстракта. Охлаждение смеси пектинсодержашего сырь 

с водой осуществл ют до 40-55°С, а значенне рН устанавливают 3,25-4,75.

Предлагаемый способ приготовлени  питательной среды дл  глубинного культивировани  продуцентов нектиназы, например плесневого гриба Asp. awamori 16, заключаетс  в следующем.

Берут 3%-ную суснензню свекловичного жома и гидролизуют при 125-130°С при носто нном перемешивании в течение 1-2 час. В полученном экстракте определ ют кислотность и в случае необходимости корегируют ортофосфорной кислотой до рН 3,25-4,75 и охлаждают до 40-55 С н добавл ют водный раствор фермента нектиназы нз расчета от 0,2 до 5,0 сд/мл экстракта. Ферментатнвный гидролиз нровод т в течение 60-120 мин при посто нном неремешиванни и поддержании темнературы в интервале от 40 до 55°С.

К подготовленному таким образом экстракту свекловичного жома добавл ют выт жку из еолодовых ростков, автолизат мицели  и необходимые солн. Приготовленную питательную среду хорошо перемешивают н регулируют величину активной кислотности от 3,25 до 5,5-в зависимости от того, какой состав ферментного комплекса необходимо получить. Питательную среду с установленным рН стерилизуют в установке непрерывной стерилизации и направл ют в стерильный ферментатор .

Культивирование продуцентов пектиназы на полученной питательной среде ведут известным способом.

Пример. Свекловичный жом в количестве 3 кг заливают 100 л водопроводной воды и нагревают в течение 2 час при температуре 125-130°С и посто нном перемешивании мешалкой . Затем суспензию охлаждают до 45°С и экстракт отдел ют от твердой фазы. Добавлением ортофосфорной кислоты довод т рН до 4,0 и добавл ют ферментный раствор пектиназы в количестве по 5 ед/мл экстракта. Ферментативный гидролиз провод т в течение 2 час при температуре 45°С и рН субстрата 4,0. По истечении вышеуказанного времени к экстракту добавл ют выт жку из солодовых ростков 10%, автолизат мицели  (40) и минеральные соли.

Приготовленную питательную среду стерилизуют на установке непрерывного действи  и подают в стерильный ферментатор. На этой среде культивируют продуцент пектиназы. Дл  этого производ т посев водной суспензии спор плесневого гриба Asp. awamori 16, вырашенны .ч известным способом в количестве 50 г на 1 м питательной среды, с содержапием спор 1-2X10° на 1 г питательпой среды . Добавл ют пеногаситель марки А-50 в количестве 0,1% от объема питательной среды. Культивирование провод т в услови .х аэрации при подаче 1 м стерильного воздуха на 1 м питательной среды в 1 мин давлении 0,6 ати и скорости вращени  мешалки 300 об/мин. Врем  культивировани  52 час.

Культуральную жидкость отдел ют от биомассы на барабанном вакуум-фильтре. Пектолитическа  активность полученной культуральной жидкости составл ет 282 ед/мл.

Предмет изобретени 

Claims (5)

1.Способ приготовлени  питательной среды дл  продуцентов пектолитических ферментов

путем получени  водного экстракта смешиванием пектиисодержашего сырь , например свекловичного жома, с водой, нагревани  полученной смеси, выдерживани  и охлаждени 

ее, удалени  твердой фазы из экстракта с последуюш ,им смешиванием его с минеральными сол ми, отличающийс  тем, что, с целью интенсификации процесса культивировани  продуцентов и повышени  активности продуцируемых ферментов, экстракт перед смешиванием с сол ми подвергают гидролизу пектолитическими ферментами, например пектиназой .

2.Способ по п. 1, отличающийс  тем, что пектолитические ферменты дл  гидролиза ввод т в количестве, равном 0,2-5,0 вд/мл экстракта.

3.Способ по пп. 1 и 2, отличающийс  тем, что нагревапие пектиисодержашего сырь 

осуществл ют до 125-130°С, а выдерживапие - в течение 2 час.

4.Способ по пп. 1-3, отличающийс  тем, что oxлaждe иe смеси пектинсодержап1,его сырь  с водой осуществл ют до 45-55°С.

5. Способ по пп. 1-4, отличающийс  тем, что рН экстракта устанавливают 3,25-4,75.