RU2085212C1 - Способ изготовления единого бруцеллезного антигена для ра, рск и рдск - Google Patents
Способ изготовления единого бруцеллезного антигена для ра, рск и рдск Download PDFInfo
- Publication number
- RU2085212C1 RU2085212C1 RU96116722A RU96116722A RU2085212C1 RU 2085212 C1 RU2085212 C1 RU 2085212C1 RU 96116722 A RU96116722 A RU 96116722A RU 96116722 A RU96116722 A RU 96116722A RU 2085212 C1 RU2085212 C1 RU 2085212C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nutrient medium
- carried out
- antigen
- cultivation
- yeast extract
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Использование: биотехнология, промышленное производство единого бруцеллезного антигена. Сущность изобретения: способ изготовления единого бруцеллезного антигена включает культивирование штамма 19 в глубинных условиях в жидкой питательной среде, содержащей перевар Хоттингера, глицерин, глюкозу, NaCl, дрожжевой экстракт и воду. Концентрирование и очистку выросшей бакмассы проводят на ультрафильтрационной установке при помощи аппаратов разделительных с использованием 0,5% фенолизированного физраствора, а инактивацию антигена - в биореакторе при температуре 80oC 60 минут. При этом длительность процесса сокращается с 72 до 24 ч. Способ изготовления единого бруцеллезного антигена позволяет повысить качество и снизить себестоимость конечного продукта. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при промышленном производстве единого бруцеллезного антигена для РА, РСК и РДСК.
Известен способ получения антигена бруцеллезного с использованием технологии культивирования на плотной питательной среде в четвертях.
Однако существующий способ изготовления обладает рядом недостатков:
культивирование ведется на дорогостоящей, сложной в изготовлении плотной питательной среде;
время культивирования до 72 ч;
необходимость использования большого количества стеклянной посуды;
потребность в большом количестве площадей и оборудования;
опасность возможного контакта персонала с возбудителем бруцелл.
культивирование ведется на дорогостоящей, сложной в изготовлении плотной питательной среде;
время культивирования до 72 ч;
необходимость использования большого количества стеклянной посуды;
потребность в большом количестве площадей и оборудования;
опасность возможного контакта персонала с возбудителем бруцелл.
Длительность и многооперационность процесса делает изготовление бруцеллезного антигена трудоемким и конечный продукт из-за высокой себестоимости является неконкурентноспособным.
Целью изобретения является повышение качества, снижение себестоимости и исключение возможности контакта обслуживающего персонала с бруцеллезной культурой.
Цель достигается изменением технологии изготовления антигена, а именно: культивирование проводится на жидкой питательной среде в биореакторах с дальнейшей очисткой и концентрированием культуры на ультрафильтрационных колонках. При этом уменьшается количество операций и исключается возможный контакт обслуживающего персонала с бруцеллезной культурой. Время изготовления антигена сокращается до 24 ч.
Способ осуществляется в биореакторе следующим образом.
Культивирование проводят в биореакторе на жидкой питательной среде следующего состава,
Перевар Хоттингера 25
Глицерин 1
Глюкоза 1
NaC 0,5
Дрожжевой экстракт сухой 0,5
или нативный 15 20
Вода водопроводная до 100
В готовой питательной среде содержится аминного азота 145 160 мг% pH 6,8 7,1.
Перевар Хоттингера 25
Глицерин 1
Глюкоза 1
NaC 0,5
Дрожжевой экстракт сухой 0,5
или нативный 15 20
Вода водопроводная до 100
В готовой питательной среде содержится аминного азота 145 160 мг% pH 6,8 7,1.
Жидкая питательная среда стерилизуется фильтрацией через фильтр пластины типа СФ. Глубинное культивирование в биореакторе осуществляется по следующему полученному нами в результате экспериментов алгоритму управления:
температура культивирования 37±0,5oC;
концентрация водородных ионов (pH) в пределах 6,8 7,2;
уровень парциального давления растворенного в культуральной жидкости кислорода на фазе приспособления 20 25 pO2 нас;
фаза логарифмического роста 40 45 pO2 нас
стационарная фаза 30 35 pO2 нас.
температура культивирования 37±0,5oC;
концентрация водородных ионов (pH) в пределах 6,8 7,2;
уровень парциального давления растворенного в культуральной жидкости кислорода на фазе приспособления 20 25 pO2 нас;
фаза логарифмического роста 40 45 pO2 нас
стационарная фаза 30 35 pO2 нас.
Поддержание технологических параметров осуществляется следующими управляющими воздействиями:
температура термостатной водой;
pH подачей титрантов;
кислорода подачей воздуха на аэрацию и изменением скорости вращения мешалки.
температура термостатной водой;
pH подачей титрантов;
кислорода подачей воздуха на аэрацию и изменением скорости вращения мешалки.
Выращенную на жидкой питательной среде в биореакторе культуру Brucella abortus шт. 19 далее концентрируют в 6 7 раз при помощи ультрафильтрационных колонок. К концентрату в биореакторе добавляют 0,5% фенолизированный физраствор с pH 7,0 7,2 до половины первоначального объема с целью отделения микробных клеток от остатков питательной среды. После перемешивания культуры ее концентрируют вторично в 3 4 раза до концентрации 180 200 млрд/см3, затем инактивируют в биореакторе при 80±1oC в течение 60 мин при постоянном перемешивании и сливают в стерильные 16 л баллоны, которые выдерживают в холодильнике при температуре 2 6oC не менее 10 сут. Разведение концентрированной суспензии проводят стерильным 0,5% фенолизированным физраствором.
Активность антигена в РА устанавливают по национальной бруцеллезной агглютинирующей сыворотке против Бруцелла абортус, содержащей в 1 мл 1000 МЕ антител.
Активность антигена в РСК устанавливается при его титровании по квадратной схеме с национальной стандартной бруцеллезной агглютинирующей сывороткой.
Сравнительные данные по используемому и предлагаемому способам изготовления единого бруцеллезного антигена приведены в таблице.
Преимуществом предлагаемого способа является повышение качества, снижение себестоимости, исключение контакта обслуживающего персонала с бруцеллезной культурой за счет использования глубинного культивирования в биореакторах на жидкой питательной среде с последующей очисткой и концентрированием на ультрафильтрационных колонках.
Claims (2)
1. Способ изготовления единого бруцеллезного антигена для РА, РСК и РДСК, включающий культивирование штамма Brucella abortus 19, отделение и концентрирование выросших бактериальных клеток с последующим их инактивированием и суспендированием в фенолизированном физиологическом растворе, отличающийся тем, что культивирование проводят в глубинных условиях в жидкой питательной среде, а отделение и концентрирование на ультрафильтрационных колонках.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что культивирование проводят на питательной среде состава, об.
Перевар Хоттингера 25
Глицерин 1
Глюкоза 1
NaCl 0,5
Дрожжевой экстракт сухой 0,5
или дрожжевой экстракт нативный 15 20
Вода водопроводная До 100а
Глицерин 1
Глюкоза 1
NaCl 0,5
Дрожжевой экстракт сухой 0,5
или дрожжевой экстракт нативный 15 20
Вода водопроводная До 100а
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU96116722A RU2085212C1 (ru) | 1996-08-15 | 1996-08-15 | Способ изготовления единого бруцеллезного антигена для ра, рск и рдск |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU96116722A RU2085212C1 (ru) | 1996-08-15 | 1996-08-15 | Способ изготовления единого бруцеллезного антигена для ра, рск и рдск |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2085212C1 true RU2085212C1 (ru) | 1997-07-27 |
RU96116722A RU96116722A (ru) | 1999-06-20 |
Family
ID=20184613
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU96116722A RU2085212C1 (ru) | 1996-08-15 | 1996-08-15 | Способ изготовления единого бруцеллезного антигена для ра, рск и рдск |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2085212C1 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2484481C1 (ru) * | 2011-09-30 | 2013-06-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ получения эритроцитарного антигена для реакции непрямой гемагглютинации при бруцеллезе |
RU2486916C2 (ru) * | 2011-08-05 | 2013-07-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ получения бруцеллезного l-антигена |
RU2533811C1 (ru) * | 2013-05-06 | 2014-11-20 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ получения бруцеллезного l-антигена |
RU2593712C2 (ru) * | 2014-09-30 | 2016-08-10 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЦЕНТРАТА КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК БРУЦЕЛЛ ИЗ ШТАММА Brucella abortus 19 ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БРУЦЕЛЛЕЗНЫХ АНТИГЕНОВ, БРУЦЕЛЛЕЗНЫЕ АНТИГЕНЫ (ТРИ ВАРИАНТА), СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БРУЦЕЛЛЕЗНОЙ ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ СЫВОРОТКИ И ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ (ТРИ ВАРИАНТА) |
-
1996
- 1996-08-15 RU RU96116722A patent/RU2085212C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Касьянов А.Н., Сапегина Е.П. Получение единого бруцеллезного антигена для РА, РСК и РДСК. - Ветеринария, 1973, N 10, с. 50 - 52. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2486916C2 (ru) * | 2011-08-05 | 2013-07-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ получения бруцеллезного l-антигена |
RU2484481C1 (ru) * | 2011-09-30 | 2013-06-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ получения эритроцитарного антигена для реакции непрямой гемагглютинации при бруцеллезе |
RU2533811C1 (ru) * | 2013-05-06 | 2014-11-20 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ получения бруцеллезного l-антигена |
RU2593712C2 (ru) * | 2014-09-30 | 2016-08-10 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЦЕНТРАТА КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК БРУЦЕЛЛ ИЗ ШТАММА Brucella abortus 19 ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БРУЦЕЛЛЕЗНЫХ АНТИГЕНОВ, БРУЦЕЛЛЕЗНЫЕ АНТИГЕНЫ (ТРИ ВАРИАНТА), СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БРУЦЕЛЛЕЗНОЙ ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ СЫВОРОТКИ И ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ (ТРИ ВАРИАНТА) |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109153966A (zh) | 生产丙烯酰胺的生物技术方法及相关新菌株 | |
CN104830712B (zh) | 一种产高纯度2‑酮基‑d‑葡萄糖酸的粘质沙雷氏菌株 | |
SU695565A3 (ru) | Способ получени клавулановой кислоты и ее солей | |
CN110791462B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌及其在发酵生产腺苷中的应用 | |
CN110438059A (zh) | 一种水污染治理的优势微生物菌剂及其制备方法 | |
RU2085212C1 (ru) | Способ изготовления единого бруцеллезного антигена для ра, рск и рдск | |
CN103937856A (zh) | 一种提高井冈霉素产量的发酵方法 | |
CN114591878B (zh) | 一种制备海水养殖尾水处理菌剂的工艺及尾水处理方法 | |
Walker et al. | The Language of Biotechnology: A Dictionary of Terms. | |
RU2553562C1 (ru) | Способ получения культуральной жидкости, содержащей ксантан | |
CN113528374A (zh) | 一种溶胞菌株、污泥减量处理剂及其应用 | |
SU671738A3 (ru) | Способ получени биомассы микроорганизмов | |
SU591154A3 (ru) | Способ получени белка | |
JPS60172316A (ja) | 凝集剤 | |
CN107502598A (zh) | 一种固定化葡萄糖氧化酶的制备方法 | |
Karube et al. | Bacteriolysis by immobilized enzymes | |
Sundaran et al. | Process optimization for enhanced production of diphtheria toxin by submerged cultivation | |
RU2038381C1 (ru) | Способ культивирования продуцента гидролитических ферментов для осахаривания крахмалсодержащего сырья | |
US20070092961A1 (en) | Process to cultivate Brevundimonas diminuta for filtration validation | |
RU2707118C1 (ru) | Способ повышения продуктивности бактерий escherichia coli | |
RU1549227C (ru) | Способ получения комплекса литических ферментов | |
RU2102472C1 (ru) | Способ получения биомассы чумного микроба | |
RU2160718C1 (ru) | Способ очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов | |
JPH0255038B2 (ru) | ||
SU767196A1 (ru) | Способ выращивани продуцентов литических ферментов |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150816 |