RU2096461C1 - Штамм дрожжей yarrowia lipolytica - продуцент лимонной кислоты и способ получения лимонной кислоты - Google Patents
Штамм дрожжей yarrowia lipolytica - продуцент лимонной кислоты и способ получения лимонной кислоты Download PDFInfo
- Publication number
- RU2096461C1 RU2096461C1 RU93039858/13A RU93039858A RU2096461C1 RU 2096461 C1 RU2096461 C1 RU 2096461C1 RU 93039858/13 A RU93039858/13 A RU 93039858/13A RU 93039858 A RU93039858 A RU 93039858A RU 2096461 C1 RU2096461 C1 RU 2096461C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- citric acid
- ethanol
- concentration
- yeast
- medium
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Использование: биотехнология. Сущность изобретения: новый штамм дрожжей - продуцент лимонной кислоты и способ ее получения. Предлагаются штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКМ Y - 2785 D - процент лимонной кислоты и способ получения лимонной кислоты, включающий культивирование дрожжей Yarrowia lipolytica на питательной среде, содержащей этанол в качестве единственного источника углерода и ионы цинка и железа в качестве микроэлементов, при дефиците источника азота в условиях аэрации, характеризующийся тем, что культивируют штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКМ Y - 2785 D на питательной среде, при этом подавая этанол непрерывно, этанол поддерживают в питательной среде в количестве 0,1 - 30,0 г/л, а при дискретной его подаче поддерживают концентрацию этанола на следующих уровнях: 2,0 - 2,5 г/л в начале процесса, 1,0 - 2,0 г/л во время роста биомассы, 2,0 - 5,0 г/л на стадии биосинтеза лимонной кислоты. Концентрация лимонной кислоты в культуральной среде до 130 г/л и выход кислоты от этанола до 90 - 100 вес.%. 2 с. и 7 з.п. ф-лы, 5 табл.
Description
Изобретение относятся к биотехнологии и микробиологической промышленности, а именно к штамму дрожжей Yarrowia lipolytica продуценту лимонной кислоты и способу получения лимонной кислоты. Лимонная кислота широко используется в фармацевтической и пищевой промышленности для получения детергентов и для многих других целей.
Современное производство лимонной кислоты основывается на использовании мутантов гриба Aspergillus niger, в качестве сырья в основном используется меласса (свекловичная или тросниковая).
Однако меласса, будучи побочным продуктом производства сахара, обычно содержит около 50% ферментируемого сахара, который может быть превращен в лимонную кислоту; другие 50% это вода (20%) и органические и неорганическое вещества, которые не могут быть превращены в лимонную кислоту. Таким образом, максимальный выход лимонной кислоты на использованной мелассе не может превышать 30 40% обычно для получения 1 т лимонной кислоты требуется 2,5 - 3,5 т мелассы.
Более того, меласса не может быть использована в производстве лимонной кислоты без предварительной, по крайней мере частичной очистки.
Другой недостаток заключается в том, что технология получения сахара постоянно совершенствуется, содержание сахара в мелассе соответственно уменьшается, и ее качество ухудшается, а количество неиспользованных веществ возрастает. И поэтому представляется, что глюкоза и глюкозный сироп могут быть использованы в качестве альтернативных сырьевых материалов.
Следующий недостаток этого метода то, что мутанты гриба Aspergillus niger имеют тенденцию терять свою активность со временем, даже во время производства.
Больше того, как хорошо известно, производство лимонной кислоты методом глубинного культивирования с использованием A. niger один из наиболее технически сложных микробиологических процессов.
В последние годы дрожжи рассматривались в качестве перспективных продуцентов различных веществ, включая органические кислоты.
Обычно используют дрожжи рода Candida, а именно C. fibrae, C. subtropicalis, C. guilliermondii, C. lipolytica, C. oleaophila и C. zeylanoides.
Эти дрожжи, способные утилизировать различные источники углерода, растут на простой среде и легко растут в ферментерах при методе глубинного культивирования.
В различных патентах сообщается об использовании специально селекционированных мутантных штаммов дрожжей для получения лимонной кислоты; часто используют дрожжи Yarrowia lipolytica. Ранее эти дрожжи обозначались как вид Candida lipolytica или Saccharomycopsis lipolytica. Фактически, наименования Candida lipolytica, Saccharomycopsis lipolytica и Yarrowia lipolytika являются синонимами.
Известно, что при культивировании диких штаммов на среде с различными источниками углерода накапливается лимонная кислота со значительной примесью изолимонной кислоты. Так на среде с н-алканами синтезируются примерно равные количества лимонной и изолимонной кислот [1, 2]
Таким образом, соотношение продуцируемых кислот, в первую очередь, определяется природой штамма и используемым источником углерода.
Таким образом, соотношение продуцируемых кислот, в первую очередь, определяется природой штамма и используемым источником углерода.
Известно, что штаммы Yarrowia lipolytica продуцируют лимонную кислоту при их культивировании на среде, содержащей различные соединения глюкозу, н-алканы [3, 4, 5] ацетат, глицерин, этанол в качестве источников углерода.
Патент ГДР [6] сообщает о возможности продуцирования лимонной кислоты дрожжами Saccharomycopsis lipolytica 181 ZIMET 43720 в среде, содержащей вышеуказанные соединения; однако никаких примеров или конкретных данных, касающихся осуществления, выхода и т.п. процесса с этанолом в качестве единственного источника углерода, не дано.
Финогенова Т.В. и др. [7] обнаружили, что дикий штамм Candida lipolytica 704 и его мутант N1 способны продуцировать лимонную кислоту при росте на среде с этанолом и дефиците источника азота.
Согласно этой работе способ получения лимонной кислоты включает культивирование дрожжей Candida lipolytica при интенсивной аэрации, с ростом продуцента, лимитированным источником азота (аммоний сульфат) в питательной среде, содержащей этанол, минеральные соли, дрожжевой автолизат и микроэлементы; поддерживают pH 6,0 7,0.
Концентрация лимонной кислоты с использованием мутантного штамма Candida lipolytica N1 в описанном методе 4,7 г/л; выход относительно добавленного субстрата 25 30% (вес/вес).
Мутантный штамм Candida lipolytica N1, известный как продуцент лимонной кислоты из парафина, при росте на среде, содержащей этанол в качестве единственного источника углерода, продуцирует лимонную и изолимонную кислоты в концентрации 4,7 и 0,5 г/л, соответственно [8, 9] Суммарная продукция кислот 1,9 г на г биомассы.
Финогенова и др. [10] выращивая природный штамм дрожжей Candida lipolytica 704 продуцент трео-D (+)-изолимонной кислоты в 10-литровом ферментере, исследовали влияние условий культивирования на синтез изолимонной кислоты. Авторы показали, что данный штамм продуцируют при росте на этаноле преимущественно изолимонную кислоту, лимонная кислота накапливается в качестве побочного продукта. В данной работе ферментацию осуществляли при тех значениях pH среды (4,5; 6,0 и 7,0), в последнем случае образования кислот не происходило. Не было синтеза кислот также при концентрации кислорода в среде 30% от насыщения или ниже.
В начале культивирования среда содержала 15 г этанола на 1 л среды, а в период синтеза кислот 6,5 15,5 г на 1 л среды, при этом накапливалось 66 г/л изолимонной кислоты и 33 г/л лимонной кислоты (соотношение изолимонная кислота: лимонная кислота равно 2:1), выход лимонной кислоты 30% от потребленного этанола.
Таким образом, использование штаммов Candida lipolytica N1 и Candida lipolytica 704 не позволяет получать высокие концентрации и выходы лимонной кислоты на среде с этанолом. Кроме того, в случае использования в качестве продуцента дрожжей Candida lipolytica 704 в среде накапливается наряду с лимонной кислотой большое количество изолимонной кислоты, превышающее содержание первой. В связи с этим не представляется возможным выделение лимонной кислоты из ферментационной жидкости. Поэтому соответствующие промышленные процессы не осуществимы.
Задачей, не решение которой направлены предлагаемые объекты изобретения, является получение штамма-продуцента лимонной кислоты и разработка эффективного способа получения лимонной кислоты.
Технический результат, который может быть получен при использовании предлагаемых штамма-продуцента и способа получения лимонной кислоты, заключается в повышении концентрации лимонной кислоты в культуральной среде и выхода лимонной кислоты от субстрата.
Сущность объекта изобретения специально селекционированный штамм дрожжей Yarrowia lipolytica НММ 217 (ВКМ Y-2785 D) продуцент лимонной кислоты. Штамм необходим для осуществления способа получения лимонной кислоты.
Сущность другого объекта изобретения способа получения лимонной кислоты заключается в том, что культивируют штамм Yarrowia lipolytica ВКМ Y-2785 D при аэробных условиях на питательной среде, содержащей этанол в качестве единственного источника углерода, ионы Zn и Fe, при дефиците источника азота, при этом при непрерывной или дискретной подаче этанола его концентрацию в питательной среде поддерживают в пределах 0,1 30,0 г/л, причем преимущественно поддерживают концентрацию этанола в начале процесса 2,0 2,5 г/л; на стадии роста биомассы 1,0 2,0 г/л и 2,0 5,0 г/л на стадии биосинтеза лимонной кислоты.
Штамм Yarrowia lipolytica НММ 217 депонирован во Всесоюзной (теперь Всероссийской) коллекции микроорганизмов при Институте биохимии и физиологии микроорганизмов Российской Академии наук, 142292, г. Пущино, Московская область, проспект Науки 5, под номером ВКМ y-2785 D 10 июля 1992 года, в соответствии с Будапештским договором о международной регистрации депонирования микроорганизмов для целей патентной процедуры.
Было найдено, что этот штамм способен расти на среде, содержащей этанол в качестве единственного источника углерода, и что он не только хорошо растет на среде с этанолом, но также активно синтезирует лимонную кислоту на этом субстрате.
В последующем описании и пунктах формулы ссылка сделана на лимонную кислоту, однако следует понимать, что при ферментации в соответствии с реальным значением pH получают соли лимонной кислоты. При этом все сообщенные параметры (концентрации, выходы и так далее) относятся к лимонной кислоте. В качестве сырья могут быть использованы любые типы этанола, полученные химическим синтезом или ферментацией.
Содержание этанола в среде в области от 0,1 до 30,0 г/л, предпочтительно от 1,0 до 5,0 г/л.
Процесс ведут при непрерывной или периодической подаче этанола в среду.
Наименьшая величина времени процесса, а также наивысшее содержание лимонной кислоты в культуральной жидкости могут быть достигнуты поддержанием следующих концентраций этанола: в начале процесса 2,0 2,5 г/л; на стадии роста биомассы 1,0 2,0 г/л и 2,0 5,0 г/л на стадии биосинтеза лимонной кислоты.
Действие исходной концентрации этанола в среде не продолжительность лаг-фазы и время начала биосинтеза лимонной кислоты могут быть определены из табл. 2.
Ферментационная среда содержит следы следующих неорганических элементов: KI, B, Zn2+, Cu2+, Mn2+, Mo6+, Fe2+.
Концентрация Zn2+ в среде не менее 0,1 мг/л, предпочтительно 0,3 5,0 мг/л, наиболее предпочтительно 0,3 2,0 мг/л.
Концентрация Fe2+ в среде не менее 0,05 мг/л, преимущественно 0,1 1,0 мг/л.
В течение ферментации поддерживают pH среды в области от 3,2 до 8,0, преимущественно между 3,5 и 7,0, добавляя подходящее неорганическое основание, такое как гидроксид натрия, или гидроксид калия, или карбонат натрия, или карбонат калия и т.п.
Действие pH среды, концентрации цинка и железа на продукцию лимонной кислоты дрожжами Yarrowia lipolytica показано соответственно в табл. 3, 4, 5.
Ферментацию проводят в условиях перемешивания и аэрации, при которых концентрацию кислорода в среде поддерживают в диапазоне от 15 до 100% насыщения, предпочтительно от 50 до 80% насыщения.
В процессе культивирования поддерживают температуру 23 35oC, преимущественно 26 30oC.
Способ позволяет достигать концентрации лимонной кислоты 80 130 г/л и выхода 80 100% (вес/вес) от количества потребленного этанола.
Штамм Yarrowia lipolytica НММ 217 (ВКМ Y-2785 D) получен обработкой нитрозометилмочевиной штамма Yarrowia (Candida) lipolytica 704 и последующей селекцией на агаризованных и жидких средах с этанолом.
Предлагаемый штамм может быть охарактеризован следующим образом.
Характеристика штамма.
Культурально-морфологические признаки.
Трехсуточная культура в жидкой глюкозо-пептонной среде представлена овальными, удлиненно-овальными, округлыми клетками размером 4,6 6,0 x 4,5 - 12,5 мкм. Небольшие округлые клетки 2,0 2,5 x 3,0 3,5 мкм встречаются также. Почкование полярное или латеральное. Клетки единичные или в цепочках, включающих 3 4 клетки.
Штрих на глюкозо-пептонном агаре непрерывный, плоский, блестящий, кремово-белого цвета, пастообразный, края ровные.
Колонии на сусло-агаре (возраст 4 недели) кремового цвета, пастообразные, слегка приподнятые в центре, слегка шероховатые, тусклые, с фестончатым краем.
На 2 сут. роста на жидкой глюкозо-пептонной среде образуются тонкая пленка, кольцо на стенках, тяжелый осадок на дне пробирки.
На стекле, картофельном агаре на 5 сут. культура образует псевдомицелий типа Candida и Mycocandida.
Спор не образует.
Физиологические и биохимические признаки.
Строгий аэроб. Сахара не сбраживает.
Ассимилирует: глюкозу, D-галактозу (медленно), L-сорбозу, D-рибозу, этанол, глицерин, эритрит, адонит, D-маннит, сорбит и молочную, янтарную, лимонную, глюконовую кислоты.
Не ассимилирует: сахарозу, мальтозу, лактозу, целлобиозу, трегалозу, мелибиозу, раффинозу, мелицитозу, инулин, крахмал, D-ксилозу, L- и D-арабинозу, раммозу, дульцит, инозит, D-глюкозамин и глюкуроновую, 2-кетоглюконовую, 5-кетоглюконовую кислоты.
Не ассимилирует нитраты.
Не растет в безвитаминной среде, требует тиамин, не требует биотин. Не растет на среде с 50% глюкозы.
Оптимальное pH 5,5 6,0.
Не растет при 37oC. Максимальная температура роста 35oC.
Разжижает желатин. Растет на алканах. Гидролизует мочевину.
Продуцирует лимонную кислоту на глюкозе, глицерине, этаноле, ацетате, алканах, жирах.
Эти свойства идентичны тем, что описаны в определителе Kreger van Riy "The Yeast. A taxonomic study". 1984, для дрожжей вида Yarrowia lipolytica.
Следует отметить, что штамм Yarrowia lipolytica НММ 217, предложенный в изобретении, отличается от Candida lipolytica N1 следующими признаками (табл. 1).
Таким образом, как указано выше, штамм, предлагаемый в данном изобретении, способен расти и продуцировать лимонную кислоту в широком диапазоне pH (3,2 8,0).
Изобретение далее иллюстрируются следующими примерами, которые не ограничивают объем и сущность притязаний, связанных с ними.
Пример 1.
Штамм дрожжей Yarrowia lipolytica НММ 217 поддерживают на косяках сусло-агара с пересевом один раз в два месяца при температуре 28oC. После 3 сут. роста клетки с двух косяков переносят в колбу объемом 750 мл, содержащую 100 мл среды следующего состава, г/л:(NH4)2SO2 2,0, MgSO4x7H2O 0,7, Ca(NO3)2 0,4, NaCl 0,5, K2HPO4 0,1, KH2PO4 1,0, дрожжевой экстракт 0,3, этанол 5,0, микроэлементы, мг/л: KI 0,1, B 0,01, Mn2+ 0,01, Cu2+ 0,01, Mo6+ 0,01, Fe2+ 0,05, Zn2+ 0,3. Дрожжи выращивают на качалке (200 об/мин) при 28oC в течение 24 ч.
Через 24 ч проводят второй пересев на среде того же состава, этанол вносят периодически (0,5% исходно и по 0,5% по мере его потребления). Через 26 ч от начала культивирования pH среды поддерживают при 5,0 6,0 раствором 10% NaOH.
46-часовую культуру используют для инокулирования ферментера (10% от объема среды в ферментере) и проведения основной ферментации. Ферментацию проводят в 10-литровом ферментере АНКУМ-2М (Специального конструкторского бюро биологического приборостроения Российской академии наук).
Состав среды для ферментации, г/л: (NH4)2SO4 3,0, MgSO4x7H2О 1,4, NaCl 0,5, Ca(NO3)2 0,8, K2HPO4 2,0, K2HPO4 0,2, ферментолизат 0,3, этанол 170 (вносят по мере потребления), микроэлементы, мг/л: KI 0,2, B 0,02, Mn2+ 0,02, Cu2+ 0,02, Mo6+ 0,02, Zn2+ 0,3, Fe2+ 0,6, вода бидистиллированная, объем среды 6 л.
Этанол вносят в среду следующим образом: перед засевом культуры 2,7 г/л (16 г на 6 л среды), затем после его потребления в фазе роста и размножения продуцента поддерживают этанол на уровне 1,3 г/л (с 17 до 24 ч), 2,0 г/л (с 24 до 36 ч), в период активного кислотообразования 5,0 г/л (с 36 до 95 ч), затем (с 95 до 118 ч) снижают до 2,0 г/л.
В процессе ферментации температуру поддерживают 28oC, pH 4,5 доводят раствором 20% NaOH, концентрация кислорода 60% от насыщения.
Через 5 сут. культивирования концентрация лимонной кислоты 130 г/л, изолимонной кислоты 9,5 г/л, выход лимонной кислоты 90% от внесенного этанола.
Лимонную кислоту определяют двумя методами: химическим путем окисления KMnO4 (Жаболовская Н.А. и др. Хлебопекарная и кондитерская промышленность, 5: 22 24, 1968) и энзиматическим (Methods of enzymatic food analysis. Boehringer Mannheim, 1984, р. 13 14).
Изолимонную кислоту определяют энзиматическим методом (Methods of enzymatic food analesis. Boehringer Mannheim, 1984, р. 31 32).
Пример 2.
Ферментацию проводят, как в примере 1, за исключением того, что этанол вносят непрерывно, поддерживая концентрацию 2,0 г/л в течение всего процесса, концентрация Zn2+ в среде 0,5 мг/л, а pH в течение ферментации поддерживают на уровне 6,0.
Через 5 сут. ферметации концентрация лимонной кислоты 103 г/л, концентрация изолимонной кислоты 9,9 г/л, выход лимонной кислоты 83% от внесенного этанола.
Пример 3.
Ферментацию проводят, как в примере 1, за исключением того, что вместо ферментолизата используют дрожжевой экстракт (0,5 г/л), концентрация Zn2+ 0,5 мг/л, в течение ферментации pH поддерживают 6,0.
Через 5 сут. культивирования концентрация лимонной кислоты 102 г/л, концентрация изолимонной кислоты 7,0 г/л, выход лимонной кислоты 92% от внесенного этанола.
Пример 4.
Ферментацию проводят, как в примере 3, за исключением того, что pH во время ферментации поддерживают 3,7.
Через 5 сут. культивирования концентрация лимонной кислоты 107 г/л, концентрация изолимонной кислоты 5,6 г/л, выход лимонной кислоты 85% от внесенного этанола.
Влияние условий культивирования на выход лимонной кислоты показано в последующих табл. 2 5.
Предлагаемые в данном изобретении штамм-продуцент лимонной кислоты и способ получения лимонной кислоты позволяют значительно повысить концентрацию лимонной кислоты в жидкой культуральной среде до 130 г/л и выход кислоты от этанола до 90 100% (вес/вес) от массы этанола.
Другие преимущества предлагаемого способа:
1) основное сырье этанол (полученный химическим путем или ферментацией), который практически полностью переходит в конечный продукт;
2) продуцентом являются нетоксичные и непатогенные дрожжи Yarrowia lipolytica, которые хорошо растут на этаноле, давая высокую концентрацию и высокий выход конечного продукта от этанола;
3) при использовании этанола в качестве сырья и дрожжей как продуцента ферментационная жидкость является очень чистой, и процесс выделения - упрощенным;
4) изолимонная кислота, которая является основным сопродуктом ферментационного процесса, составляет менее 10% от лимонной кислоты.
1) основное сырье этанол (полученный химическим путем или ферментацией), который практически полностью переходит в конечный продукт;
2) продуцентом являются нетоксичные и непатогенные дрожжи Yarrowia lipolytica, которые хорошо растут на этаноле, давая высокую концентрацию и высокий выход конечного продукта от этанола;
3) при использовании этанола в качестве сырья и дрожжей как продуцента ферментационная жидкость является очень чистой, и процесс выделения - упрощенным;
4) изолимонная кислота, которая является основным сопродуктом ферментационного процесса, составляет менее 10% от лимонной кислоты.
Claims (8)
1. Штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКМ Y-2785-D продуцент лимонной кислоты.
2. Способ получения лимонной кислоты, включающий культивирование дрожжей Yarrowia lipolytica на питательной среде, содержащей этанол в качестве единственного источника углерода, ионы цинка и железа в качестве микроэлементов, при дефиците источника азота в условиях аэрации, отличающийся тем, что культивируют штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКМ Y-2785-D, при непрерывной или дискретной подаче этанола его концентрацию в питательной среде поддерживают в пределах 0,1 30,0 г/л, при поддержании концентрации этанола в начале процесса 2,0 2,5 г/л, на стадии роста биомассы 1,0 2,0 г/л и 2,0 5,0 г/л на стадии биосинтеза лимонной кислоты.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что процесс ведут при концентрации ионов цинка и железа в указанной среде не менее 0,1 и 0,05 мг/л соответственно.
4. Способ по пп. 2 и 3, отличающийся тем, что процесс ведут при концентрации ионов цинка в указанной среде в диапазоне 0,3 2,0 мг/л и ионов железа в диапазоне 0,1 1,0 мг/л.
5. Способ по пп. 2 4, отличающийся тем, что штамм дрожжей культивируют при значениях pH 3,2 8,0, предпочтительно 3,5 7,0.
6. Способ по пп. 2 5, отличающийся тем, что указанный штамм дрожжей культивируют при содержании кислорода в среде при величине насыщения 15 - 100%
7. Способ по пп. 2 6, отличающийся тем, что содержание кислорода в среде поддерживают равным 50 80% насыщения.
7. Способ по пп. 2 6, отличающийся тем, что содержание кислорода в среде поддерживают равным 50 80% насыщения.
8. Способ по пп. 2 7, отличающийся тем, что указанный штамм дрожжей культивируют при 23 35oС.
9. Способ по пп. 2 8, отличающийся тем, что указанный штамм дрожжей культивируют преимущественно при 26 30oС.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
ITM192A001984 | 1992-08-12 | ||
ITMI921984A IT1256043B (it) | 1992-08-12 | 1992-08-12 | Ceppo mutante di yarrowia lipolytica e procedimento per la produzione di acido citrico |
ITMI92A001984 | 1992-08-12 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU93039858A RU93039858A (ru) | 1997-04-10 |
RU2096461C1 true RU2096461C1 (ru) | 1997-11-20 |
Family
ID=11363870
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU93039858/13A RU2096461C1 (ru) | 1992-08-12 | 1993-08-04 | Штамм дрожжей yarrowia lipolytica - продуцент лимонной кислоты и способ получения лимонной кислоты |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
IT (1) | IT1256043B (ru) |
RU (1) | RU2096461C1 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2006055322A2 (en) | 2004-11-04 | 2006-05-26 | E.I. Dupont De Nemours And Company | High arachidonic acid producing strains of yarrowia lipolytica |
US7259255B2 (en) | 2003-06-25 | 2007-08-21 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase and phosphoglycerate mutase promoters for gene expression in oleaginous yeast |
EP2392664A2 (en) | 2003-05-07 | 2011-12-07 | E. I. du Pont de Nemours and Company | Production of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts |
CN114107081A (zh) * | 2021-11-30 | 2022-03-01 | 南京工业大学 | 一种利用甲醇生物转化的重组解脂耶氏酵母基因工程菌及其构建方法和应用 |
-
1992
- 1992-08-12 IT ITMI921984A patent/IT1256043B/it active IP Right Grant
-
1993
- 1993-08-04 RU RU93039858/13A patent/RU2096461C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
1. Феногенова Т.В. и др. Микробиология, 1973, 42, N 5, с. 790. 2. Лозинов А.Б. и др. Микробиология, 1974, 43, N 5, с. 786. 3. US, патент, 4278764, кл. C 12 P 7/42, 1981. 4. GB, патент, 1182983, кл. C 12 D 1/04, 1970. 5. GB, патент, 1297243, кл. C 2 C, 1972. 6. DD, патент, 232309, кл. C 12 P 7/48, 1986. 7. Финогенова Т.В. и др. Прикл. биохимия и микробиология, 1979, т.15, вып.6, с. 811. 8. Finogenova et al. Ulth Jntern. Spec. Sympoc. on Yeast, s.UI, p.12. Montpellier, France, 1978. 9. Финогенова Т.В., Глазунова Л.М. Микробиология, 1982, 51, вып. 1, с. 27. 10. Finogenova et al. Appl. Microbiol. Biotechnol. 1991, v. 36, p. 231 - 235. * |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2392664A2 (en) | 2003-05-07 | 2011-12-07 | E. I. du Pont de Nemours and Company | Production of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts |
EP2392665A2 (en) | 2003-05-07 | 2011-12-07 | E. I. du Pont de Nemours and Company | Production of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts |
EP2402448A2 (en) | 2003-05-07 | 2012-01-04 | E. I. du Pont de Nemours and Company | Production of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts |
US7259255B2 (en) | 2003-06-25 | 2007-08-21 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase and phosphoglycerate mutase promoters for gene expression in oleaginous yeast |
WO2006055322A2 (en) | 2004-11-04 | 2006-05-26 | E.I. Dupont De Nemours And Company | High arachidonic acid producing strains of yarrowia lipolytica |
EP2458000A1 (en) | 2004-11-04 | 2012-05-30 | E. I. du Pont de Nemours and Company | High arachidonic acid producing strains of yarrowia lipolytica |
EP2649887A2 (en) | 2004-11-04 | 2013-10-16 | E. I. du Pont de Nemours and Company | High eicosapentaenoic acid producing strains of Yarrowia lipolytica |
CN114107081A (zh) * | 2021-11-30 | 2022-03-01 | 南京工业大学 | 一种利用甲醇生物转化的重组解脂耶氏酵母基因工程菌及其构建方法和应用 |
CN114107081B (zh) * | 2021-11-30 | 2023-05-05 | 南京工业大学 | 一种利用甲醇生物转化的重组解脂耶氏酵母基因工程菌及其构建方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ITMI921984A0 (it) | 1992-08-12 |
IT1256043B (it) | 1995-11-21 |
ITMI921984A1 (it) | 1994-02-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR900007936B1 (ko) | 오레오베이시디움속의 신규 미생물 및 그 취득방법과 이 균주를 사용한 에리쓰리톨의 제조방법 | |
US20100086979A1 (en) | Production of omega-3 fatty acids in microflora of thraustochytriales using modified media | |
RU2096461C1 (ru) | Штамм дрожжей yarrowia lipolytica - продуцент лимонной кислоты и способ получения лимонной кислоты | |
US5998181A (en) | Fermentation process for preparing xylitol using Candida tropicalis | |
JP4132253B2 (ja) | アンモニア耐性l(+)−乳酸産生能菌およびl(+)−乳酸の生産方法 | |
KR100271137B1 (ko) | 신규 미생물 트리코스포로노이데스 마디다 디에스911 및 이 균주를 이용한 에리스리톨의 제조방법 | |
US5939311A (en) | Mutant trichosporonoides and a process for producing erythritol using the said microorganism | |
KR100416637B1 (ko) | 만니톨 생성균주 캔디다 매그노리아 및 이를 이용한만니톨의 발효 제조방법 | |
DK171744B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af pyrodruesyre | |
RU2186846C2 (ru) | Штамм дрожжей saccharomyces cerevisiae, используемый для сбраживания мелассного сусла в производстве этилового спирта и хлебопекарных дрожжей | |
RU2077573C1 (ru) | Штамм дрожжей hansenula species - продуцент кормовой биомассы | |
JP2845385B2 (ja) | 新規変異株及びそれを用いるグリセリンの製造方法 | |
US4229543A (en) | Process for culturing methanol-utilizing yeasts | |
US20060270004A1 (en) | Fermentation processes with low concentrations of carbon-and nitrogen-containing nutrients | |
RU2103350C1 (ru) | Штамм дрожжей rhodotorula glutinis - продуцент каротиноидов | |
KR100317902B1 (ko) | 글루탐산을 생산하는 미생물 및 이를 이용한 글루탐산의제조방법 | |
KR100248870B1 (ko) | 돌연변이주 캔디다 트로피칼리스 에스디비-101 및 이에 의한자일리톨의 제조 방법 | |
RU2103346C1 (ru) | Штамм гриба aspergillus niger - продуцент лимонной кислоты | |
JP2009148212A (ja) | マンニトールの発酵製造方法及びその実施に用いる微生物 | |
KR100299544B1 (ko) | 피키아속신균주에의한에리쓰리톨의제조방법 | |
JP3600803B2 (ja) | マンニトール生成菌株カンジダ・マグノリア及びこれを使用したマンニトールの発酵製造方法 | |
KR100434518B1 (ko) | 신균주 슈도지마 츄쿠밴시스에 의한 에리스리톨의 발효제조방법 | |
RU2098485C1 (ru) | Способ направленного биосинтеза лимонной кислоты | |
SU1585331A1 (ru) | Штамм гриба MUcoR LUSIтаNIсUS - продуцент липидов с повышенным содержанием @ -линоленовой кислоты | |
JPS5817589B2 (ja) | コウボノセイゾウホウ |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20050805 |