SU506613A1 - Способ получени биомассы - Google Patents

Description

культур а льную жидкость выдерживают при 25 -30°С и рН 2,7-3,5 в течение 2-3 ч без перемешивани  и аэрации. При этом происходит выделение неутилизированных углеводородов , которые непрерывно вывод т путем слива с отметки верхнего уровн  жидкости в отстойнике . Отбор культуральной жидкости дл  возврата на I ступень ферментации производ т с нижней отметки емкости, достига  таким образом непрерывного облагораживани  отработанной культуральной жидкости и ее рециркул ции на I ступень ферментации. Вторую ступень ферментации (дозревание) провод т при перемешивании и аэрации без доиолнительной подачи питательной среды, в том числе углеводородов, в услови х более высокой концентрации биомассы при рН предночтительно в интервале 2,7-5,5 дл  дрожжей и 6,5-7,2 дл  бактерий, в течение 1-2 ч, при температуре, равной оптимальной дл  культивировани  конкретного штамма микроорганизма; однако дл  термотолерантиых культур предпочтительно снижение температуры ферментации на 2-6°С. После дозревани  культуральную среду нагревают в течение 5-15 мин до 62-68°С, например , в теплообменнике или плазмолизаторе , после чего жидкую фазу отдел ют от микроорганизмов любым известным способОМ и возвращают ее на первую ступень ферментации в качестве биостимул тора. Отделенную биомассу подвергают плазмолизу при 90°С в течение 60 мин и затем высушивают. Использование предлагаемого способа позвол ет вести процесс при максимальной чистоте культивируемого штамма микроорганизма-продуцента в нестерильных услови х ферментации даже в жаркий период года при отсутствии бактериальной инфекции или на личии ее в количестве не более 10 клеток i 1 мл культуральной жидкости и сохранить нормальное морфолого-физиологическое состо ние продуцента, что обеспечивает новышение продуктивности процесса. Способ позвол ет длительно вести процесс непрерывного культивировани  пр.и полном возврате на ферментацию отработанной культуральной жидкости без ее дополнительной стерилизации, максимально сократить объем производственных сточных вод и затраты на их очистку, стабильно получать высококачественный готовый продукт (кормовые с содержанием сырого протеина до 60%). Предлагаемый способ по сн етс  примерами его выполнени . Пример 1. Выраш,ивани€ дрожжей Candida tropicalis на минеральной среде с очищенными жидкими парафинами нефти (объемна  концентраци  1%) провод т непрерывным способом в ферментере объемом 28 м с аэрацией и перемешиванием при 37-38°С и рЫ 2,8-3,0. Из аппарата первой ступени каждый час отбирают насосо.М 0,8 м культуральной жидкости с биомассой (6-8 г/л абсолютно сухих дрожжей) и подают в промежуточную емкость, где ее выдерл ивают 2 часа. Затем биомассу выдел ют на сепараторе ДСГ-35 по принципу ступенчато-круговой сепарации дл  отделени  80% отработанной культуральной жидкости. Отработанную культуральную жидкость подают в промелсуточную емкость (отстойник). Объем жидкости в отстойнике поддерживают 1,3 м. Каждый час из нижней части отстойника отбирают 0,64 м и подают на ферментацию в аппарат первой ступени, а в отстойни.к подают 0,64 м свежей культуральной жидкости . Таким образом, врем  выдерживани  культуральной жидкости составл ет 2 ч. Сгущенную дрожжевую суспензию подают в аппарат второй ступени на дозревание при рН 5,0 и 32-34°С в течение часа. Далее дрожжевую суспензию нагревают в теплообменнике в течение 10 минут до 65°С, после чего отдел ют на сепараторе ДСГ-35 жидкую фазу. Из 1,3 м- дрожжевой суспензии получают 1,1 м жидкой фазы и 0,2 м дрожжевого концентрата с содержанием 21% сухих веществ. Биостимул тор направл ют на первую ступень ферментации. Дрожжевую суспензию подвергают плазмолизу При 90°С в течение 60 мин и высущивают на распылительной сушилке. Готовый продукт содержит 59% сырого протеина, 0,8% липидов , 0,05% углеводородов, витамина В 8,2 .мг/кг, витамина В2 64,7 мг/кг. Пример 2. Выращивание дрожжей С. guilliermondii осушествл ют непрерывно в течение 32 суток по описанному в примере 1 режиму при рП 3,0-3,2 на первой ступени 41ер.ментации и при дозревании без замены культуры и без ее подсева с посто нным возвратом на ферментацию 80% отработанной культуральной жидкости. Культура дрожжей в течение всего опыта находитс  в хорошем состо нии: клетки однородные с гомогенной протоплазмой и розной гладкой оболочкой; почкующихс  клеток 40-42%, мертвых до 1%. Бактериальпа  и грибна  инфекци  отсутствуют . За все врем  опыта выход дрожжей от парафина составл ет 92% при содержании белка (сырого протеина) 57%, липидов 1,3%, золы 8%, углеводородов до 0,1%. Пример 3 (-контрольный). Непрерывное культивирование С. guilliermondii осуществл ют по известной технологической схеме ферментации: дозревание при рП 4,0- 4,2 - отделение дрожжей от культуральной жидкости - возврат последней на ферментацию- промывка водой--теплова  обработка и сушка дрожжей. При возврате на фер.ментацию 80% отработанной культуральной жидкости в течение 7 дней выход абсолютно сухих дрожжей от заданного парафина падает с 95 до 78%, содержание сырого протеина уменьшаетс  с 51 до 43%. Бактериальна  инфекци  составл ет 3-5 клеток в 1 мл. И только при замене

отработанной культуральной жидкости водой улучшаетс  морфолого-физиологическое состо ние клеток дрожжей, увеличиваетс  концентраци  дрожжей в ферментере, новышаетс  выход дрожж ей от парафина до 90% и содержание белка в дрожжах до 50%.

Claims (5)

1. Снособ получени  биомассы, включающий выращивание микроорганизмов, например дрожжей, на питательной среде, содержащей в качестве источника углерода парафиновые углеводороды, стимз ч торы роста, необходимые дл  роста минеральные соли, отбор культуральной среды, разделение ее на фракции: твердую --- дрожжи и жидкую, возврат жидкой фракции на начальную стадию выращивани , дозревание дрожжей, дополнительное разделение дрожжей на жидкую и твердую дрожжевую фракции и высушивание дрожжей, отличающийс  тем, что, с

целью увеличени  выхода биомассы при одновременном улучшении ее качества, культуральную среду перед разделением ее на фракции и полученную после разделени 

жидкую фракцию выдерживают при кислом значении рН, а после дозревани  дрожжевую суспензию нагревают.

2. Способ по п. 1, отличающийс  тем, что, значение рН, при котором осуществл ют

выдерживание культуральной среды и жидкой фракции, поддерживают равным 2,7-3,5. о. Способ но п. 1, отличающийс  тем, что нагревание дрожжевой суспензии ведут до 62-68°С в течение 5-15 минут.

4. Способ по п. 1, отличающийс  тем,

что выращивают дрожжи, например, видов

Candida guilliermondii, Candida tropicalis при

рН среды 2,7-3,5.

5. Способ по п. 1, отличающийс  тем,

что дозревание дрожжевой суспензии провод т при рН, преимущественно равным 2,7-5,5.

Ферментаци  {lcmL/пенб)

ВыдермиВание отобранной мильтцральной ср ,1

.i,

I Разделениесуспензии

ИyJJьmypaльнa  uднocn tr

Е

Bbidepmu&aHue (2-3 часа)

cpedi

ХСгущенна  о ио/vac с а, i

ферментаци  - дозревание (Ж cmi/nSHb)

Нагрев f5-15 нин. до )

I

{Разделение ct/спензии

Пидна  фаза (биостинул тор)